知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
▶ アイクリス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフトの特許一覧
特開2022-167901パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）、および少なくとも一つの追加の抗ウイルス薬を使用したＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染者の併用療法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022167901
(43)【公開日】2022-11-04
(54)【発明の名称】パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）、および少なくとも一つの追加の抗ウイルス薬を使用したＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染者の併用療法
(51)【国際特許分類】
A61K 35/76 20150101AFI20221027BHJP
A61P 31/20 20060101ALI20221027BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20221027BHJP
A61K 31/522 20060101ALI20221027BHJP
A61K 31/513 20060101ALI20221027BHJP
A61K 31/675 20060101ALI20221027BHJP
A61K 31/7072 20060101ALI20221027BHJP
A61K 9/06 20060101ALI20221027BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20221027BHJP
A61K 9/107 20060101ALI20221027BHJP
A61K 9/14 20060101ALI20221027BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20221027BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20221027BHJP
A61K 9/12 20060101ALI20221027BHJP
C12N 15/39 20060101ALI20221027BHJP
C12N 15/85 20060101ALI20221027BHJP
C07K 14/065 20060101ALI20221027BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20221027BHJP
C12N 7/04 20060101ALI20221027BHJP
【ＦＩ】
A61K35/76
A61P31/20
A61P43/00 121
A61K31/522
A61K31/513
A61K31/675
A61K31/7072
A61K9/06
A61K9/08
A61K9/107
A61K9/14
A61K9/20
A61K9/48
A61K9/12
C12N15/39 ZNA
C12N15/85 Z
C07K14/065
C12N5/10
C12N7/04
【審査請求】有
【請求項の数】16
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2022123132
(22)【出願日】2022-08-02
(62)【分割の表示】P 2020513816の分割
【原出願日】2018-09-07
(31)【優先権主張番号】17189890.1
(32)【優先日】2017-09-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】17196684.9
(32)【優先日】2017-10-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(71)【出願人】
【識別番号】514134147
【氏名又は名称】アイクリス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100150810
【弁理士】
【氏名又は名称】武居 良太郎
(72)【発明者】
【氏名】ダニエラ パウルゼン
(72)【発明者】
【氏名】アンドレアス ウルバン
(72)【発明者】
【氏名】イビロンケ アディ
(72)【発明者】
【氏名】タマラ プファフ
(72)【発明者】
【氏名】シュテファン メネ
(72)【発明者】
【氏名】ビレム スロート
(57)【要約】
【課題】ＨＢＶ感染者の新規併用療法の提供。
【解決手段】本発明は、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）および少なくとも１つの追加の抗ウイルス薬、たとえばヌクレオシド阻害剤、たとえばエンテカビルを使用した、ＨＢＶ感染者の新規併用療法に関する。本発明による方法および組み合わせ製品（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ）は、慢性的ＨＢＶ感染患者への機能的治癒の誘発のために安全かつ好適である。
【選択図】図３
【解決手段】本発明は、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）および少なくとも１つの追加の抗ウイルス薬、たとえばヌクレオシド阻害剤、たとえばエンテカビルを使用した、ＨＢＶ感染者の新規併用療法に関する。本発明による方法および組み合わせ製品（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ）は、慢性的ＨＢＶ感染患者への機能的治癒の誘発のために安全かつ好適である。
【選択図】図３
【特許請求の範囲】
【請求項1】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、以下を含む群から選択される、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む組成物：
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオン、および／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯ、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、もしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞。
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオン、および／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯ、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、もしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞。
【請求項2】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、以下を含む群から選択される、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む組成物であって、ここで異なる抗ウイルス薬は抗ＨＢＶ抗ウイルス薬である、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む、請求項１に記載の組成物：
－ＰＰＶＯ、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、もしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞。
－ＰＰＶＯ、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、もしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞。
【請求項3】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む組成物であって、ここでＰＰＶＯは組換えウイルス核酸もしくはその少なくとも一つの活性断片であって、ならびに／またはここでＰＰＶＯは組換え生産されたビリオンおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片である、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項4】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む組成物であって、ここで前記ＰＰＶＯはＮＺ２、ＮＺ７、ＮＺ１０、Ｄ１７０１、ＯＶ／２０、ＯＶ／７、ＯＶ／Ｃ２、ＯＶ／ｍｉ－９０、ＯＶ－Ｔｏｒｉｎｏ、ＳＡ００、Ｂｏ２９、ｏｒｆ１１、Ｇｒｅｅｋ ｏｒｆ系統１５５、および／またはＧｒｅｅｋ ｏｒｆ系統１７６、または分類上関連するパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ｏｒｆ系統である、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項5】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここで前記抗ウイルス薬は、有効成分としてのヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、治療的ワクチン接種、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストおよびトル様受容体（ＴＬＲ）アンタゴニスト、エピジェネティック修飾剤、侵入阻害剤または調節剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤、特にインターフェロンおよび他のサイトカイン、ならびに／またはチェックポイント阻害剤、特にＰＤ－１を含む薬物の群から選択される、ＰＰＶＯを含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項6】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここで有効成分としてヌクレオチド／ヌクレオシドアナログを含む薬物の群は、テノホビル、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（ＴＤＦ)、テノホビルアラフェナミド（ＴＡＦ）、エンテカビル、ラミブジン、テルビブジン、アデフォビル、エムトリシタビン、および／またはクレブジンを含む、ＰＰＶＯを含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項7】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここでＰＰＶＯおよび少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、個別投与（ｓｅｐａｒａｔｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）／逐次的投与（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のために処方され、またはここで請求項１～６のいずれか一項で定義されたＰＰＶＯおよび少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、同時投与（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）／同時投与（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のために処方される、ＰＰＶＯを含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項8】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここでＰＰＶＯおよび少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、個別投与（ｓｅｐａｒａｔｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）／逐次的投与（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のために処方され、またはここで請求項１～７のいずれか一項で定義されたＰＰＶＯおよび少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、同時投与（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）／同時投与（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のために処方される、ＰＰＶＯを含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項9】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここでＰＰＶＯおよび少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、以下を含む群から選択される単剤単位（ｓｉｎｇｌｅ ｄｒｕｇ ｕｎｉｔ）、または組み合わせ製品（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ）として提供される、ＰＰＶＯを含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の組成物：
錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、ならびに／またはスプレー。
錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、ならびに／またはスプレー。
【請求項10】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここで前記個人は、急性ＨＢＶ感染、慢性ＨＢＶ感染を有する患者、検出可能なＨＢｓＡｇを有する患者、検出可能なＨＢＶ ＲＮＡを有する患者、検出可能なＨＢＶ ＤＮＡを有する患者、検出可能なｃｃｃＤＮＡを有する患者、肝炎患者、脂肪肝患者、肝線維症患者、肝硬変患者、肝がん患者、肝細胞がん患者、急性または無症候性または慢性感染患者、抗ウイルス治療を受けた患者、請求項１～９のいずれの一項に記載の抗ウイルス薬による抗ウイルス治療にも反応しない患者、または少なくとも一つの抗ウイルス薬に対する耐性を獲得した患者、および／またはデルタウイルス、レトロウイルス科、ヘルペスウイルス科、ポックスウイルス科、パルボウイルス科、アデノウイルス科、ピコルナウイルス科、ヘパドナウイルス科、フラビウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、パポバウイルス科、ポリオーマウイルス科、ラブドウイルス科、コロナウイルス科、ブニヤウイルス科、アレナウイルス科、レオウイルス科、およびトガウイルス科を含む群から選択される少なくとも一つの追加の病原性ウイルスと同時感染している患者の群から選択される、ＰＰＶＯを含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項11】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここでＰＰＶＯの用量は、１×１０6～１×１０10ウイルス粒子の範囲であり、前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬の用量は、製造元の指示に従って選択される、ＰＰＶＯを含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項12】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここでＰＰＶＯおよび前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、７２週間以内、好ましくは６０週間以内、より好ましくは４８週間以内、３６週間以内、２４週間以内、１２週間以内、６週間以内、４週間以内、２週間以内、または１週間以内、投与される、ＰＰＶＯを含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項13】
前記ＰＰＶＯは不活化されている、請求項１～１２のいずれか一項に記載のＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、請求項１～１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項14】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここで前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬はエンテカビルである、ＰＰＶＯを含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項15】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここで前記組成物および少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬で治療された前記患者は、ＨＢｓＡｇおよび／もしくはＨＢｅＡｇ陽性であり、ここでＨＢｓＡｇおよび／もしくはＨＢｅＡｇ負荷は低下する、または請求項１～１４のいずれか一項で定義されている治療の過程でＨＢｓＡｇおよび／もしくはＨＢｅＡｇの減少が起こる、ＰＰＶＯを含む、請求項１～１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項16】
ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここで前記組成物は静脈内、筋肉内、経口、非経口、局所、皮内、および／または皮下投与のために製剤化される、ＰＰＶＯを含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項17】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬による、それを必要とするＨＢＶ感染患者の治療方法であって、ここで前記ＰＰＶＯは以下を含む群から選択される、治療方法：
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオンおよび／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクターもしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞。
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオンおよび／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクターもしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞。
【請求項18】
請求項１７に記載の治療方法であって、ここで前記ＰＰＶＯは組換えウイルス核酸もしくはその少なくとも一つの活性断片である、ならびに／またはここで前記ＰＰＶＯは組換え生産されたビリオンおよび／もしくはその活性断片である、治療方法。
【請求項19】
請求項１７または１８に記載の方法であって、ここで前記異なる抗ウイルス薬は、有効成分としてのヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、治療的ワクチン接種、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストおよびトル様受容体（ＴＬＲ）アンタゴニスト、エピジェネティック修飾剤、侵入阻害剤または調節剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤、特にインターフェロンおよび他のサイトカイン、ならびに／またはチェックポイント阻害剤、特にＰＤ－１を含む薬物の群から選択される、方法。
【請求項20】
請求項１７～１９のいずれか一項に記載の方法であって、ここで有効成分としてヌクレオチド／ヌクレオシドアナログを含む薬物の群は、テノホビル、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（ＴＤＦ)、テノホビルアラフェナミド（ＴＡＦ）、エンテカビル、ラミブジン、テルビブジン、アデフォビル、エムトリシタビン、および／またはクレブジンを含む、方法。
【請求項21】
請求項１７～２０のいずれか一項に記載の方法であって、ここで前記抗ウイルス薬はエンテカビルである、方法。
【請求項22】
請求項１７～２１のいずれか一項に記載の方法であって、ここでＰＰＶＯおよび前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、個別に（ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ）／逐次的に（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙ）投与される、方法。
【請求項23】
請求項１７～２１のいずれか一項に記載の方法であって、ここでＰＰＶＯおよび前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、同時に（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔｌｙ）／同時に（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ）投与される、方法。
【請求項24】
請求項１７～２３のいずれか一項に記載の方法であって、ここでＰＰＶＯおよび前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、以下を含む群から選択される単剤単位（ｓｉｎｇｌｅ ｄｒｕｇ ｕｎｉｔ）、または組み合わせ製品（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ）で提供される、方法：
錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、および／またはスプレー。
錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、および／またはスプレー。
【請求項25】
請求項１７～２４のいずれか一項に記載の方法であって、ここでＰＰＶＯおよび前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、静脈内、筋肉内、経口、非経口、局所、皮内、および／または皮下投与のために製剤化される、方法。
【請求項26】
請求項１７～２５のいずれか一項に記載の方法であって、ここで前記個人は、急性ＨＢＶ感染、慢性ＨＢＶ感染を有する患者、検出可能なＨＢｓＡｇを有する患者、検出可能なＨＢＶ ＲＮＡを有する患者、検出可能なＨＢＶ ＤＮＡを有する患者、検出可能なｃｃｃＤＮＡを有する患者、肝炎患者、脂肪肝患者、肝線維症患者、肝硬変患者、肝がん患者、肝細胞がん患者、無症候性または急性または慢性感染患者、抗ウイルス治療を受けた患者、請求項１～２５のいずれの一項に記載の抗ウイルス薬による抗ウイルス治療にも反応しない患者、または少なくとも一つの抗ウイルス薬に対する耐性を獲得した患者、および／またはデルタウイルス、レトロウイルス科、ヘルペスウイルス科、ポックスウイルス科、パルボウイルス科、アデノウイルス科、ピコルナウイルス科、ヘパドナウイルス科、フラビウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、パポバウイルス科、ポリオーマウイルス科、ラブドウイルス科、コロナウイルス科、ブニヤウイルス科、アレナウイルス科、レオウイルス科、およびトガウイルス科を含む群から選択される少なくとも一つの追加の病原性ウイルスと同時感染している患者の群から選択される、方法。
【請求項27】
請求項１７～２６のいずれか一項に記載の方法であって、ここでＰＰＶＯの用量は、１×１０6～１×１０10ウイルス粒子の範囲であり、および／または前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬の用量は、製造元の指示に従って選択される、方法。
【請求項28】
請求項１７～２７のいずれか一項に記載の方法であって、ここでＰＰＶＯおよび前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、７２週間以内、好ましくは６０週間以内、より好ましくは４８週間以内、３６週間以内、２４週間以内、１２週間以内、６週間以内、４週間以内、２週間以内、または１週間以内、投与される、方法。
【請求項29】
それを必要とするＨＢＶ感染患者におけるＨＢＶウイルス負荷を低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の請求項１～２８のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法。
【請求項30】
それを必要とするＨＢＶ感染患者におけるＨＢｓＡｇ負荷を低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の請求項１～２９のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法。
【請求項31】
それを必要とするＨＢＶ感染患者における肝障害、肝硬変、および／または肝線維症を低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の請求項１～３０のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法。
【請求項32】
それを必要とするＨＢＶ感染患者において肝組織再生を誘発するための方法であって、有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～３１のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法。
【請求項33】
ＨＢＶ感染患者の治療に関する副作用を低減する方法であって、前記副作用は、有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～３２のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、インターフェロン、および／またはヌクレオチド／ヌクレオシドアナログによる治療によって引き起こされ、特に発熱、組織炎症、精神障害（ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅ）、および／または血液学的障害を含む群から選択される副作用の低減の方法。
【請求項34】
ＨＢＶ感染患者におけるＨＢｅＡｇ負荷を低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の請求項１～３３のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法。
【請求項35】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～３４のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、それを必要とするＨＢＶ感染患者における免疫応答の回復および／または再活性化のための方法。
【請求項36】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～３５のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるＨＢＶ ＤＮＡを低減し、ＨＢＶ ＤＮＡを除去し、および／またはＨＢＶ ＤＮＡをサイレンシングする方法。
【請求項37】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～３６のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるｃｃｃＤＮＡのデノボ形成を防止する方法。
【請求項38】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～３７のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるＨＢＶタンパク質の発現を阻害または低減する方法。
【請求項39】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～３８のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるＨＢＶの複製を抑制する方法。
【請求項40】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～３９のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるＨＢＶを根絶する方法。
【請求項41】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～４０のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるＨＢＶ感染に対する免疫寛容を破壊する方法。
【請求項42】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～４１のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるＨＢｓＡｇおよび／またはＨＢｅＡｇに対する寛容を破壊する方法。
【請求項43】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～４２のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるＨＢｓＡｇ特異抗体を誘発する方法。
【請求項44】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～４３のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者におけるＨＢｅＡｇ特異抗体を誘発する方法。
【請求項45】
有効量のＰＰＶＯおよび有効量の請求項１～４４のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、ＨＢＶ感染患者における脂肪肝の進行を遅らせ、または阻害する方法。
【請求項46】
請求項１７～４５のいずれか一項に記載の方法であって、ここでＰＰＶＯおよび前記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、７２週間以内、好ましくは６０週間以内、より好ましくは４８週間以内、３６週間以内、２４週間以内、１２週間以内、６週間以内、４週間以内、２週間以内、または１週間以内、投与される、方法。
【請求項47】
ＰＰＶＯ、好ましくは不活化されたＰＰＶＯを含む医薬組成物を含む第一の容器、および請求項１～４６のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を含む医薬組成物、またはＰＰＶＯ、好ましくは不活化されたＰＰＶＯを含む医薬組成物、および複合製剤の形態の請求項１～４６のいずれか一項で定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を含む第二の容器、および任意で使用説明書、再構成のための薬学的に許容される媒体、シリンジ、および／またはマイクロニードルを含む、医薬品キット製品。
【請求項48】
請求項４７に記載の医薬品キット製品であって、ここでＰＰＶＯ、好ましくは不活化されたＰＰＶＯを含む組成物、および少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を含む医薬組成物は、錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、および／またはスプレーとして製剤化される、医薬品キット製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）、および少なくとも一つの追加の抗ウイルス薬、たとえばヌクレオシド阻害剤、たとえばエンテカビルを使用した、ＨＢＳ感染者の新規な併用療法に関する。本発明による方法および組み合わせ製品（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ）は、慢性的にＨＢＶに感染した患者の機能的治癒の誘発のために安全かつ好適である。
【背景技術】
【0002】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）は、ヘパドナウイルスファミリー（ヘパドナウイルス科）の、エンベロープのある部分的に二重鎖のＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）ウイルスである。慢性ＨＢＶ感染症は、重大な世界的健康問題であり、全世界人口の５％以上（全世界で３億５千万人以上、米国では１２５万人以上）に影響を及ぼしている。
【0003】
ＨＢＶ予防ワクチンが利用可能であるにもかかわらず、慢性ＨＢＶ感染症の負荷は、最適化されていない治療オプションおよび開発途上国のほとんどの地域での新たな感染の持続率により、重大な、いまだ満たされていない医学的問題であり続けている。現在の治療法は治癒をもたらさず、薬剤の２つの種類（インターフェロンアルファおよびヌクレオシド／ヌクレオチドアナログ／ウイルスポリメラーゼの阻害剤）のみに制限されている。薬剤耐性、有効性の低下、および耐性の問題により、それらの効果が制限される。
【0004】
ＨＢＶの低い治癒率は、少なくとも部分的には、ウイルス産生の完全な抑制は単一の抗ウイルス薬では困難であるという事実、ならびに感染した肝細胞の核における共有結合閉鎖環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）の存在および持続性に起因する。しかしながら、ＨＢＶ ＤＮＡの持続的な抑制は、肝疾患の進行を妨げ、肝細胞がん（ＨＣＣ）を防ぐのに役立つ。
【0005】
ＨＢＶ感染症患者のための現在の治療法の目標は、血清ＨＢＶ ＤＮＡを低レベルまたは検出不可能なレベルまで低減すること、そして最終的には肝硬変およびＨＣＣの発症を低減または防止することである。
【0006】
現在、ＨＢＶにおける機能的治癒の最高率は、免疫調節剤インターフェロンアルファ（ＩＦＮアルファ）による治療後に生じる。しかし、４８～５２週間のＩＦＮアルファの治療でさえ、応答者率は、よくても約３～７％の持続性ＨＢｓＡｇ損失をもたらす。
【0007】
それにもかかわらず、定量的ＨＢｓＡｇ測定は、治療に対する反応性に関連付けられており、反応性を予測することが示されている：ヌクレオシドまたはヌクレオチド阻害剤による治療の終了時の低いＨＢｓＡｇ力価（およそまたは１００ＩＵ／ｍｌ未満）は、反応性または治療を終了した後の再燃の低いリスクに関連付けられていた。さらに、定量的ＨＢｓＡｇ測定はまた、ＩＦＮアルファ治療に対する反応性も予測することが示されている。
【0008】
その結果として、ＨＢｓＡｇの減少または損失は、機能的治癒の予測因子として用いられ、国際ＥＡＳＬ ＨＢＶ治療ガイドライン（２０１７年４月のＥＡＳＬ臨床診察ガイドライン）によって実行されている。
【0009】
発明の概要
本明細書では、それを必要とする対象におけるＨＢＶ感染の治療のための組み合わせ製品および方法が提供される。本発明の主題は、以下の実施形態において開示される。
本明細書では、それを必要とする対象におけるＨＢＶ感染の治療のための組み合わせ製品および方法が提供される。本発明の主題は、以下の実施形態において開示される。
【0010】
本発明の主題は、以下を含む群から選択される、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ）を含む組成物である：
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオン、および／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯ、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、もしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞であって、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のために少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための細胞。
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオン、および／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯ、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、もしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞であって、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のために少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための細胞。
【0011】
本明細書で使用されるように、最初に少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬（たとえば、エンテカビル、テノホビル等のヌクレオシド／ヌクレオチドアナログ）を使用するか、またはＰＰＶＯを最初に使用し、そしてその後に（二番目に）それを必要とする個人を少なくとも一つの追加の抗ウイルス薬と組み合わせたＰＰＶＯで治療し、そしてさらにその後に（三番目に）維持療法として、本明細書に開示されているＰＰＶＯを用いた治療を短期間（数日から数週間）、または数カ月、さらには数年にわたって無限に継続することが可能である。あるいは、少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を用いて治療を続けてもよい。さらに、本発明による併用療法は、たとえば少なくとも１回、２回、３回等、必要に応じて繰り返してもよい。さらに、併用療法は同時に開始する、および／または同時に終了してもよい。
【0012】
本発明の主題は、前述の実施形態によるＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、以下を含む群から選択される、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ）を含む組成物である：
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオン、および／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯ、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、もしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞、
ここで、異なる抗ウイルス薬は、抗ＨＢＶ抗ウイルス薬である。
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオン、および／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯ、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、もしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞、
ここで、異なる抗ウイルス薬は、抗ＨＢＶ抗ウイルス薬である。
【0013】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む組成物である。ここでＰＰＶＯは組換えウイルス核酸、またはその少なくとも一つの活性断片である、ならびに／またはここでＰＰＶＯは組換え生産されたビリオン、および／もしくはその少なくとも一つの活性断片である。
【0014】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、パラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）を含む組成物である。ここで、ＰＰＶＯは、ＮＺ２、ＮＺ７、ＮＺ１０、Ｄ１７０１、ＯＶ／２０、ＯＶ／７、ＯＶ／Ｃ２、ＯＶ／ｍｉ－９０、ＯＶ－Ｔｏｒｉｎｏ、ＳＡ００、Ｂｏ２９、ｏｒｆ１１、Ｇｒｅｅｋ ｏｒｆ系統１５５、および／またはＧｒｅｅｋ ｏｒｆ系統１７６、または分類上関連するパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ｏｒｆ系統を含むＰＰＶＯ系統の群から選択される。
【0015】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここで、上記抗ウイルス薬は、有効成分としてのヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、治療的ワクチン接種、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストおよびトル様受容体（ＴＬＲ）アンタゴニスト、エピジェネティック修飾剤、侵入阻害剤または調節剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤（インターフェロンおよび他のサイトカイン）、ならびに／またはチェックポイント阻害剤（たとえば、ＰＤ－１）を含む薬物の群から選択される。
【0016】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物であって、ここで、有効成分としてヌクレオチド／ヌクレオシドアナログを含む薬物の群は、テノホビル、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（ＴＤＦ)、テノホビルアラフェナミド（ＴＡＦ）、エンテカビル、ラミブジン、テルビブジン、アデホビル、エムトリシタビン、および／またはクレブジンを含む。
【0017】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、ＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、個別投与（ｓｅｐａｒａｔｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）／逐次的投与（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のために処方され、またはここで上記実施形態のいずれか一つで定義されたＰＰＶＯおよび少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、同時投与（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）／同時投与（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のために処方される。
【0018】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、ＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、個別投与（ｓｅｐａｒａｔｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）／逐次的投与（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のために処方され、またはここで上記実施形態のいずれか一つで定義されたＰＰＶＯおよび少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、同時投与（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）／同時投与（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のために処方される。
【0019】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、上記ＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、以下を含む群から選択される単剤単位（ｓｉｎｇｌｅ ｄｒｕｇ ｕｎｉｔ）、または組み合わせ製品（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ）として提供される：
錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、ならびに／またはスプレー。
錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、ならびに／またはスプレー。
【0020】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、上記個人は、急性ＨＢＶ感染症、慢性ＨＢＶ感染症を有する患者、検出可能なＨＢｓＡｇを有する患者、検出可能なＨＢＶ ＲＮＡを有する患者、検出可能なＨＢＶ ＤＮＡを有する患者、検出可能なｃｃｃＤＮＡを有する患者、肝炎患者、脂肪肝患者、肝線維症患者、肝硬変患者、肝がん患者、肝細胞がん患者、急性または無症候性または慢性感染症患者、抗ウイルス治療を受けた患者、上記実施形態のいずれによる抗ウイルス薬による抗ウイルス治療にも反応しない患者、または少なくとも一つの抗ウイルス薬に対する耐性を獲得した患者、および／またはデルタウイルス、レトロウイルス科、ヘルペスウイルス科、ポックスウイルス科、パルボウイルス科、アデノウイルス科、ピコルナウイルス科、ヘパドナウイルス科、フラビウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、パポバウイルス科、ポリオーマウイルス科、ラブドウイルス科、コロナウイルス科、ブニヤウイルス科、アレナウイルス科、レオウイルス科、およびトガウイルス科を含む群から選択される少なくとも一つの追加の病原性ウイルスと同時感染している患者の群から選択される。
【0021】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、ＰＰＶＯの用量は、１×１０6～１×１０10ウイルス粒子の範囲であり、上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬の用量は、製造元の指示に従って選択される。
【0022】
本発明の主題は、上記の実施形態に定義されている、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、ＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、７２週間未満、好ましくは６０週間未満、より好ましくは４８週間未満、３６週間未満、２４週間未満、１２週間未満、６週間未満、４週間未満、２週間未満、または１週間未満、投与される。
【0023】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、上記の実施形態のいずれか一つによる組成物であり、ここで上記ＰＰＶＯは不活化されている。
【0024】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、上記少なくとも一つの抗ウイルス薬は、エンテカビルである。
【0025】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、上記組成物および少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬で治療された上記患者は、ＨＢｓＡｇおよび／もしくはＨＢｅＡｇ陽性であり、ここでＨＢｓＡｇおよび／もしくはＨＢｅＡｇ負荷は低下する、または前述の実施形態のいずれか一つで定義されている治療の過程でＨＢｓＡｇおよび／もしくはＨＢｅＡｇの減少が起こる。
【0026】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる、ＨＢＶ感染症の個人の治療のための少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬と組み合わせて使用するための、ＰＰＶＯを含む組成物である。ここで、上記組成物は静脈内、筋肉内、経口、非経口、皮内、および／または皮下投与のために製剤化される。
【0027】
本発明の主題は、有効量のＰＰＶＯおよび有効量の少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬による、それを必要とするＨＢＶ感染症患者の治療方法であって、ここで上記ＰＰＶＯは以下を含む群から選択される：
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオンおよび／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクターもしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞。本発明の主題は、上記の実施形態による治療方法であって、ここで上記ＰＰＶＯは、組換えウイルス核酸もしくはその少なくとも一つの活性断片、ならびに／またはここで上記ＰＰＶＯは、組換え生産されたビリオンおよび／もしくはその活性断片である。
－必要に応じて不活化されたパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）ビリオンおよび／もしくはその活性断片、ならびに／または
－ＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクターもしくは合成核酸分子、ならびに／または
－ＰＰＶＯビリオンもしくはその断片、ならびに／またはＰＰＶＯおよび／もしくはその少なくとも一つの活性断片を発現する核酸ベクター、および／もしくは合成核酸分子を含む細胞。本発明の主題は、上記の実施形態による治療方法であって、ここで上記ＰＰＶＯは、組換えウイルス核酸もしくはその少なくとも一つの活性断片、ならびに／またはここで上記ＰＰＶＯは、組換え生産されたビリオンおよび／もしくはその活性断片である。
【0028】
本発明の主題は、上記の実施形態による方法であって、ここで上記異なる抗ウイルス薬は、有効成分としてのヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、治療的ワクチン接種、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストおよびトル様受容体（ＴＬＲ）アンタゴニスト、エピジェネティック修飾剤、侵入阻害剤または調節剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤（たとえば、インターフェロンおよび他のサイトカイン）、ならびに／またはチェックポイント阻害剤（たとえば、ＰＤ－１）を含む薬物の群から選択される。
【0029】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここで有効成分としてヌクレオチド／ヌクレオシドアナログを含む薬物の群は、テノホビル、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（ＴＤＦ)、テノホビルアラフェナミド（ＴＡＦ）、エンテカビル、ラミブジン、テルビブジン、アデホビル、エムトリシタビン、および／またはクレブジンを含む。
【0030】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここで上記抗ウイルス薬はエンテカビルである。
【0031】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここでＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、個別に（ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ）／逐次的に（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙ）投与される。
【0032】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここでＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、同時に（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔｌｙ）／同時に（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ）投与される。
【0033】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここでＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、以下を含む群から選択される個別の単一単位形態（ｓｉｎｇｌｅ ｕｎｉｔ ｆｏｒｍ）、または組み合わせ製品（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ）で提供される：錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、および／またはスプレー。
【0034】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここでＰＰＶＯおよび／または上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、静脈内、筋肉内、経口、非経口、局所、皮内、および／または皮下投与のために製剤化される。
【0035】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここで上記個人は、急性ＨＢＶ感染、慢性ＨＢＶ感染を有する患者、検出可能なＨＢｓＡｇを有する患者、検出可能なＨＢＶ ＲＮＡを有する患者、検出可能なＨＢＶ ＤＮＡを有する患者、検出可能なｃｃｃＤＮＡを有する患者、肝炎患者、脂肪肝患者、肝線維症患者、肝硬変患者、肝がん患者、肝細胞がん患者、無症候性または急性または慢性感染症患者、抗ウイルス治療を受けた患者、上記実施形態のいずれによる抗ウイルス薬による抗ウイルス治療にも反応しない患者、または少なくとも一つの抗ウイルス薬に対する耐性を獲得した患者、および／またはデルタウイルス、レトロウイルス科、ヘルペスウイルス科、ポックスウイルス科、パルボウイルス科、アデノウイルス科、ピコルナウイルス科、ヘパドナウイルス科、フラビウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、パポバウイルス科、ポリオーマウイルス科、ラブドウイルス科、コロナウイルス科、ブニヤウイルス科、アレナウイルス科、レオウイルス科、およびトガウイルス科を含む群から選択される少なくとも一つの追加の病原性ウイルスと同時感染している患者の群から選択される。
【0036】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここでＰＰＶＯの用量は、１×１０6～１×１０10ウイルス粒子の範囲であり、および／または上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬の用量は、製造元の指示に従って選択される。
【0037】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここで、ＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、７２週間未満、好ましくは６０週間未満、より好ましくは４８週間未満、３６週間未満、２４週間未満、１２週間未満、６週間未満、４週間未満、２週間未満、または１週間未満、投与される。
【0038】
本発明の主題は、それを必要とするＨＢＶ感染症患者におけるＨＢＶウイルス負荷を低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0039】
本発明の主題は、それを必要とするＨＢＶ感染症患者におけるＨＢｓＡｇ負荷を低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0040】
本発明の主題は、それを必要とするＨＢＶ感染症患者における肝障害、肝硬変、および／または肝線維症を低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0041】
本発明の主題は、それを必要とするＨＢＶ感染症患者において肝組織再生を誘発するための方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0042】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者の治療に関する副作用を低減する方法であって、ここで上記副作用は、有効量のＰＰＶＯおよび有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む、インターフェロン、および／またはヌクレオチド／ヌクレオシドアナログによる治療によって引き起こされ、具体的には副作用の低減は、発熱、組織炎症、精神障害（ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅ）、および／または血液学的障害を含む群から選択される。
【0043】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢｅＡｇ負荷を低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0044】
本発明の主題は、それを必要とするＨＢＶ感染症患者における免疫応答の回復および／または再活性化のための方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0045】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢＶ ＤＮＡを低減し、ＨＢＶ ＤＮＡを除去し、および／またはＨＢＶ ＤＮＡ、具体的にはｃｃｃＤＮＡをサイレンシングする方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0046】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるｃｃｃＤＮＡのｄｅ ｎｏｖｏ形成を防止する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0047】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢＶタンパク質の発現を阻害または低減する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0048】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢＶの複製を抑制する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0049】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢＶを根絶する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0050】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢＶ感染に対する免疫寛容を破壊する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0051】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢｓＡｇおよび／またはＨＢｅＡｇに対する寛容を破壊する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0052】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢｓＡｇ特異抗体を誘発する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0053】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者におけるＨＢｅＡｇ特異抗体を誘発する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0054】
本発明の主題は、ＨＢＶ感染症患者における脂肪肝の進行を遅らせ、または阻害する方法であって、有効量のＰＰＶＯ、および有効量の前述の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を投与することを含む方法である。
【0055】
本発明の主題は、上記の実施形態のいずれか一つによる方法であって、ここでＰＰＶＯおよび上記少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬は、７２週間未満、好ましくは６０週間未満、より好ましくは４８週間未満、３６週間未満、２４週間未満、１２週間未満、６週間未満、４週間未満、２週間未満、または１週間未満、投与される。
【0056】
本発明の主題は、ＰＰＶＯ、好ましくは不活化されたＰＰＶＯを含む医薬組成物を含む第一の容器、および上記の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を含む医薬組成物、またはＰＰＶＯ、好ましくは不活化されたＰＰＶＯを含む医薬組成物、および複合製剤の形態の上記の実施形態のいずれか一つで定義された少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を含む第二の容器、および任意で使用説明書、再構成のための薬学的に許容される媒体、シリンジ、および／またはマイクロニードル等を含む、医薬品キット製品である。
【0057】
本発明の主題は、上記の実施形態による医薬品キット製品であって、ここで組成物はＰＰＶＯ、好ましくは不活化されたＰＰＶＯを含む組成物を含み、そして少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬を含む医薬組成物は、錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、および／またはスプレー等として製剤化される。
【図面の簡単な説明】
【0058】
【図1】研究デザイン処理／組み合わせ（０～１２週）：ＡＩＣ６４９または「ＡＩＣ媒体」：静注治療（ｉ.ｖ. ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）、週２回１２週間ＥＴＶまたは「ＥＴＶ媒体」：１日１回投与、経口、１２週間維持（Ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ）：１３～２４週：ＡＩＣ６４９または「ＡＩＣ媒体」：筋注治療（ｉ.ｍ. ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）、週２回１２週間２５～３６週：ＡＩＣ６４９または「ＡＩＣ媒体」：筋注治療（ｉ.ｍ. ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）、週１回１２週間ＥＴＶ＝エンテカビル
【図2】ＡＩＣ６４９およびエンテカビルの組み合わせにより、慢性的ＷＨＶキャリアウッドチャックのウイルス血症レベルが相乗的に低下する。ＡＩＣ６４９、ＥＴＶ、またはＡＩＣ媒体、ＥＴＶ媒体を研究デザインに従って投与した。示された時点でウッドチャックから採血し、血清をＷＨＶ ＤＮＡ負荷の測定に供した。実験開始時、ｎ＝５／群（群１の死亡：週２１で１匹、群２の死亡：週１２、２６で１匹ずつ、群３の死亡：週４、１４、２１、２９で１匹ずつ、群４の死亡：なし）。水平の点線は、Ｔ０（６．３６×１０10 ウイルスｇｅ/ｍｌ）でのすべての群の平均ウイルスゲノム当量（ｇｅ／ｍｌ）を表す。週０の垂直の点線は、治療の開始または治療レジメンの変更（１２週および２４週）を示した。（Ａ）群１（媒体）、（Ｂ）群２（ＡＩＣ６４９のみ）、（Ｃ）群３（ＥＴＶのみ）、（Ｄ）群４（ＥＴＶ＋ＡＩＣ６４９）における、個々のウッドチャック（異なる記号で識別）の血清ＷＨＶ ＤＮＡ濃度。
【図3】ＡＩＣ６４９とエンテカビルの組み合わせにより、慢性ＷＨＶキャリアウッドチャックの抗原血症レベルが相乗的に低下する。ＡＩＣ６４９、ＥＴＶまたはＡＩＣ媒体、ＥＴＶ媒体を研究デザインに従って投与した。示された時点でウッドチャックから採血し、血清をＷＨｓＡｇ ＤＮＡ負荷の測定に供した。実験開始時、ｎ＝５／群（群１の死亡：週２１で１匹、群２の死亡：週１２、２６で１匹ずつ、群３の死亡：週４、１４、２１、２９で１匹ずつ、群４の死亡：なし）。水平の点線は、ＷＨｓＡｇの検出限界を示す。週０の垂直の点線は、治療の開始または治療レジメンの変更（１２週および２４週）を示した。（Ａ）群１（媒体）、（Ｂ）群２（ＡＩＣ６４９のみ）、（Ｃ）群３（ＥＴＶのみ）、（Ｄ）群４（ＥＴＶ＋ＡＩＣ６４９）における、個々のウッドチャック（異なる記号で識別）の血清ＷＨｓＡｇ濃度。
【図4】ＡＩＣ６４９治療のみが慢性ＷＨＶキャリアウッドチャックにおいて細胞性免疫を刺激する－ＥＴＶとの組み合わせでさらに顕著になる。ＡＩＣ６４９、ＥＴＶ、またはＡＩＣ媒体、ＥＴＶ媒体を研究デザインに従って投与した。示された時点でウッドチャックから採血し、ＰＢＭＣをＷＨｓＡｇペプチドで刺激した。値をＴ０で個々のベースラインに正規化し、ベースラインからの変化倍率として示す。実験開始時、ｎ＝５／群（群１の死亡：週２１で１匹、群２の死亡：週１２、２６で１匹ずつ、群３の死亡：週４、１４、２１、２９で１匹ずつ、群４の死亡：なし）。群ごとの幾何平均が与えられる。週０の垂直の点線は、治療の開始または治療レジメンの変更（１２週および２４週）を示した。（白色○）群１（媒体）、（灰色○）群２（ＡＩＣ６４９のみ）、（薄灰色◇）群３（ＥＴＶのみ）、（黒色▲）群４（ＥＴＶ＋ＡＩＣ６４９）。
【図5】ＡＩＣ６４９治療のみが慢性ＷＨＶキャリアウッドチャックにおいて抗ＷＨｓＡｇ抗体の発達を刺激する－ＥＴＶとの組み合わせでさらに顕著になる。ＡＩＣ６４９、ＥＴＶ、またはＡＩＣ媒体、ＥＴＶ媒体を研究デザインに従って投与した。示された時点でウッドチャックから採血し、血清中のＷＨｓ抗体レベルを定量化した。値をＴ０で個々のベースラインに正規化し、％で示す。実験開始時、ｎ＝５／群（群１の死亡：週２１で１匹、群２の死亡：週１２、２６で１匹ずつ、群３の死亡：週４、１４、２１、２９で１匹ずつ、群４の死亡：なし）。群ごとの幾何平均が与えられる。週０の垂直の点線は、治療の開始または治療レジメンの変更（１２週および２４週）を示した。（白色○）群１（媒体）、（灰色○）群２（ＡＩＣ６４９のみ）、（薄灰色◇）群３（ＥＴＶのみ）、（黒色▲）群４（ＥＴＶ＋ＡＩＣ６４９）。
【図6】ＡＩＣ６４９治療は慢性ＷＨＶキャリアウッドチャックのＧＧＴの増加を遅らせるように見える。ＥＴＶ、またはＡＩＣ媒体、ＥＴＶ媒体を研究デザインに従って投与した。示された時点でウッドチャックから採血し、血清中のＧＧＴレベルを定量化した。値をＴ０で個々のベースラインに正規化し、％で示す。実験開始時、ｎ＝５／群（群１の死亡：週２１で１匹、群２の死亡：週１２、２６で１匹ずつ、群３の死亡：週４、１４、２１、２９で１匹ずつ、群４の死亡：なし）。群ごとの幾何平均が与えられる。水平の点線は、ベースライン（１００％）を示す。週０の垂直の点線は、治療の開始または治療レジメンの変更（１２週および２４週）を示した。（白色○）群１（媒体）、（灰色○）群２（ＡＩＣ６４９のみ）、（薄灰色◇）群３（ＥＴＶのみ）、（黒色▲）群４（ＥＴＶ＋ＡＩＣ６４９）。
【図7】プラセボ治療ではなく、ＡＩＣ６４９治療が慢性ＷＨＶキャリアウッドチャックの肝臓においてＩＦＮ－γを誘発した。ＡＩＣ６４９、ＥＴＶ、またはＡＩＣ媒体、ＥＴＶ媒体を研究デザインに従って投与した。示された時点でウッドチャックから肝生検を採取し、サイトカイン転写レベルの測定に供した。値を週－１で個々のベースラインに正規化した。実験開始時、ｎ＝５／群（群１の死亡：週２１で１匹、群２の死亡：週１２、２６で１匹ずつ、群３の死亡：週４、１４、２１、２９で１匹ずつ、群４の死亡：なし）。結果は、時点ごとに少なくとも３つの値が利用可能な場合にのみプロットした。群２（ＥＴＶのみ）では、これは週－１の場合のみであったため、この群の曲線はない。結果を平均倍率変化＋／－ＳＥＭとして示す。週０の垂直の点線は、治療の開始または治療レジメンの変更（１２週および２４週）を示した。（白色○）群１（媒体）、（灰色○）群２（ＡＩＣ６４９のみ）、（薄灰色◇）群３（ＥＴＶのみ）、（黒色▲）群４（ＥＴＶ＋ＡＩＣ６４９）。
【0059】
結論
●ＡＩＣ６４９治療に関連する毒性学的関連性の所見はなかった。
●ＡＩＣ６４９による治療は肝臓中および血液中のＥＴＶにより、ウイルス核酸の抑制を亢進および延長し、ＡＩＣ６４９はＷＨＶ抗原に対する免疫応答を刺激するように見えた：抗ＷＨＶ抗体およびサイトカイン誘発と同様に、ＷＨＶ抗原に対する細胞性免疫応答が検出された。
●ＷＨｓＡｇに対する細胞性免疫応答は、循環しているＷＨｓＡｇの損失または減少と相関していた。
●ＡＩＣ６４９のみでは、循環しているＷＨＶ ＤＮＡレベルの一見してわずかな減少にもかかわらず、ＷＨｓＡｇの減少を誘発した。
●ＡＩＣ６４９治療により、肝ＷＨｃまたはＷＨｓ抗原の発現が持続的に失われ、ＥＴＶとの併用でより頻繁かつ顕著であったが、ＡＩＣ６４９治療なしでは発生しなかった。
●ウイルス学的パラメータ、たとえばＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇは、ＡＩＣ６４９およびＥＴＶの相乗的相互作用の可能性を示した。
●ＡＩＣ６４９治療に関連する毒性学的関連性の所見はなかった。
●ＡＩＣ６４９による治療は肝臓中および血液中のＥＴＶにより、ウイルス核酸の抑制を亢進および延長し、ＡＩＣ６４９はＷＨＶ抗原に対する免疫応答を刺激するように見えた：抗ＷＨＶ抗体およびサイトカイン誘発と同様に、ＷＨＶ抗原に対する細胞性免疫応答が検出された。
●ＷＨｓＡｇに対する細胞性免疫応答は、循環しているＷＨｓＡｇの損失または減少と相関していた。
●ＡＩＣ６４９のみでは、循環しているＷＨＶ ＤＮＡレベルの一見してわずかな減少にもかかわらず、ＷＨｓＡｇの減少を誘発した。
●ＡＩＣ６４９治療により、肝ＷＨｃまたはＷＨｓ抗原の発現が持続的に失われ、ＥＴＶとの併用でより頻繁かつ顕著であったが、ＡＩＣ６４９治療なしでは発生しなかった。
●ウイルス学的パラメータ、たとえばＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇは、ＡＩＣ６４９およびＥＴＶの相乗的相互作用の可能性を示した。
【0060】
観察されたＷＨｓＡｇの持続的損失、および細胞性免疫応答を伴う抗ＷＨｓＡｇ抗体の誘発は、ＡＩＣ６４９がＷＨＶに対してＷＨＶに対して生理学的に「協奏的な」、再構成された免疫応答を誘発するという仮説を支持する。ＥＴＶの組み合わせパートナーとしてのＡＩＣ６４９は、治療効果を劇的に向上させる。ＨＢＶ感染症患者において機能的治癒を誘発するＡＩＣ６４９の潜在力は、この前臨床研究によって驚くほどに支持されている。
【実施例0061】
実験
慢性Ｂ型肝炎のウッドチャック動物モデルでは、免疫調節剤ＡＩＣ６４９による８週間の筋肉内治療（ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）は、ウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＶ）ＤＮＡおよび表面抗原（ＷＨｓＡｇ）の減少を伴う、ユニークな二相性反応パターンを誘発することが示されている（Ｐａｕｌｓｅｎ ｅｔ ａｌ. （２０１５））。
慢性Ｂ型肝炎のウッドチャック動物モデルでは、免疫調節剤ＡＩＣ６４９による８週間の筋肉内治療（ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）は、ウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＶ）ＤＮＡおよび表面抗原（ＷＨｓＡｇ）の減少を伴う、ユニークな二相性反応パターンを誘発することが示されている（Ｐａｕｌｓｅｎ ｅｔ ａｌ. （２０１５））。
【0062】
本実施例では、ＡＩＣ６４９の抗ウイルス活性を、単独でまたはエンテカビル（ＥＴＶ）と組み合わせて、ならびに異なる投与経路および長い治療期間とともに、ウッドチャックで研究した。その目的は、ＡＩＣ６４９の安全性および潜在力をさらに研究し、慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染の機能的治癒を誘発することであった。
【0063】
ウッドチャックでは、ＡＩＣ６４９が３６週間にわたって静脈内投与され、その後、単独で、または直接作用型抗ウイルス薬ＥＴＶの最初の１２週間と組み合わせて投与された。ＡＩＣ６４９単剤治療、ＥＴＶ単剤治療、またはＡＩＣ６４９＋ＥＴＶ療法の有効性を、プラセボ対照群と比較した。
【0064】
ウイルス血症、抗原血症、免疫学的パラメタの治療誘発性変化、ならびにＷＨｓＡｇ抗体の血清転換の誘発を抗ウイルス効果の決定のために評価した。毎日の観察、体重および体温の変化、血液学および臨床化学の変化、ならびに部検および組織病理学を安全性の決定のために評価した。
【0065】
以前に観察されたＡＩＣ６４９の単剤治療によって誘発された二相性反応パターンを確認した。ＡＩＣ６４９のみでの治療は、ＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇの前治療レベルからの明確な減少をすでにもたらした。ＡＩＣ６４９＋ＥＴＶの組み合わせの群では、有意で、さらに強力かつ持続的な抗ウイルス効果が観察された： ＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇは数カ月間著しく抑制され、またはより適切に言えば検出不可能であった。細胞性免疫応答、ならびに抗ＷＨｓＡｇ抗体応答は、ＡＩＣ６４９を投与された２つの群で観察されたが、ＥＴＶ単剤投与群では観察されなかった。肝疾患マーカーの変化は群間で同等であったが、研究中の脂肪肝の進行は、ＡＩＣ６４９単独およびＡＩＣ６４９＋ＥＴＶの組み合わせの群ではより遅く見えた。観察されたＷＨｓＡｇの持続的な損失、および細胞性免疫応答を伴う抗ＷＨｓＡｇ抗体の誘発は、ＡＩＣ６４９が生理学的に「協奏的な」、再構成されたＷＨＶに対する免疫応答を誘発するという仮説を支持する。ＥＴＶの組み合わせパートナーとしてのＡＩＣ６４９は、治療効果を劇的に向上させる。ＨＢＶ感染症患者において機能的治癒を誘発するＡＩＣ６４９の潜在力は、この前臨床研究によって驚くほどに支持されている。
【0066】
実施例１
本研究では、ＡＩＣ６４９の抗ウイルス活性を単独で、またはエンテカビル（ＥＴＶ）と組み合わせて、ならびに異なる投与経路およびより長い治療期間とともに、慢性的にＷＨＶに感染したウッドチャックで研究した。その目的は、ＡＩＣ６４９の安全性および潜在力をさらに研究し、慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染の機能的治癒を誘発することであった。
本研究では、ＡＩＣ６４９の抗ウイルス活性を単独で、またはエンテカビル（ＥＴＶ）と組み合わせて、ならびに異なる投与経路およびより長い治療期間とともに、慢性的にＷＨＶに感染したウッドチャックで研究した。その目的は、ＡＩＣ６４９の安全性および潜在力をさらに研究し、慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染の機能的治癒を誘発することであった。
【0067】
方法
ウッドチャックでは、３６週間にわたって、ＡＩＣ６４９が静注され、その後、単独で、または経口投与された直接作用型抗ウイルス薬ＥＴＶの最初の１２週間と組み合わせて筋注された。図１：研究デザインを参照のこと。
ウッドチャックでは、３６週間にわたって、ＡＩＣ６４９が静注され、その後、単独で、または経口投与された直接作用型抗ウイルス薬ＥＴＶの最初の１２週間と組み合わせて筋注された。図１：研究デザインを参照のこと。
【0068】
ＡＩＣ６４９の単剤治療、ＥＴＶの単剤治療、またはＡＩＣ６４９＋ＥＴＶの療法の有効性を、プラセボ対照群と比較した（Ｎ＝５動物／群）。ウイルス血症、抗原血症、免疫学的パラメタの治療誘発性変化、ならびにＷＨｓＡｇ抗体の血清転換の誘発を抗ウイルス効果の決定のために評価した。毎日の観察、体重および体温の変化、血液学および臨床化学の変化、ならびに部検および組織病理学を安全性の決定のために評価した。
【0069】
動物
本研究で用いた２０匹のウッドチャック（オス１０匹、メス１０匹）は、すべて飼育下で生まれ、ウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＶ）ＷＨＶ７－１１系統（Ｆｌｅｔｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ. （２０１５）： ＰＬＯＳＰａｔｈ， １１， ｅ１００５１０３）を含むｃＷＨＶ７Ｐ２ａ接種材料を生後３日目に接種した。ｃＷＨＶ７Ｐ２ａを接種した。ｃＷＨＶ７Ｐ２ａを接種した仔ウッドチャックを飼育し、約１５～１７カ月齢になるまで維持した。ウッドチャックをペアで、または個別に収容し、事前研究および研究の期間を通して食物および水に自由にアクセスさせた。すべてのウッドチャックに毎日５０ ｍｇ／ｋｇのフェンベンダゾール（パナクール）をジアルジアの起こりうる感染の治療のために、１０日間、経口投与した。ウッドチャックを生化学的および血液学的異常についてスクリーニングした。ウッドチャックをＷＨｓＡｇ、ＷＨｓＡｇ抗体（抗ＷＨｓ）、およびＷＨＶ ＤＮＡについても試験した。すべてのウッドチャックはＷＨＶによる新生仔の実験感染の過去３０年間の経験に基づいて開発された受け入れ基準（ａｃｃｅｐｔｅｄ ｃｒｉｔｅｒｉａ）に基づいて、樹立されたＷＨＶの慢性キャリアとして確認された（すなわち、生後９～１２カ月およびそれ以降において、ＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇ陽性であり、抗ＷＨｓ陰性であった）。超音波検査により、受けた２０匹中１６匹のウッドチャックにおいて低血清ガンマグルタミルトランスフェラーゼ（ＧＧＴ）活性を有するウッドチャックにおいて肝腫瘍がないことが確認された。他の３匹のウッドチャックはわずかから中程度に血清ＧＧＴ活性が上昇したが、最初の超音波検査では肝腫瘍を示さなかった。すべてのウッドチャックに動物識別番号（ＤＡＳＨｏｓｔ Ｓｏｆｔｗａｒｅ， Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｄａｔａ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ.）がプログラムされたマイクロチップ（尾部背側（ｄｏｒｓａｌ ｂａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｉｌ））を移植した。動物を手動で４つの治療群の１つに無作為割付し、性別、体重、前治療血清マーカー（ＷＨｓＡｇ、ＷＨＶ ＤＮＡレベル、抗ＷＨｓＡｇ抗体価）、全血球数（ＣＢＣｓ）、ＧＧＴおよびソルビドールデヒドロゲナーゼ（ＳＤＨ）の血清レベルによって階層化した。
本研究で用いた２０匹のウッドチャック（オス１０匹、メス１０匹）は、すべて飼育下で生まれ、ウッドチャック肝炎ウイルス（ＷＨＶ）ＷＨＶ７－１１系統（Ｆｌｅｔｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ. （２０１５）： ＰＬＯＳＰａｔｈ， １１， ｅ１００５１０３）を含むｃＷＨＶ７Ｐ２ａ接種材料を生後３日目に接種した。ｃＷＨＶ７Ｐ２ａを接種した。ｃＷＨＶ７Ｐ２ａを接種した仔ウッドチャックを飼育し、約１５～１７カ月齢になるまで維持した。ウッドチャックをペアで、または個別に収容し、事前研究および研究の期間を通して食物および水に自由にアクセスさせた。すべてのウッドチャックに毎日５０ ｍｇ／ｋｇのフェンベンダゾール（パナクール）をジアルジアの起こりうる感染の治療のために、１０日間、経口投与した。ウッドチャックを生化学的および血液学的異常についてスクリーニングした。ウッドチャックをＷＨｓＡｇ、ＷＨｓＡｇ抗体（抗ＷＨｓ）、およびＷＨＶ ＤＮＡについても試験した。すべてのウッドチャックはＷＨＶによる新生仔の実験感染の過去３０年間の経験に基づいて開発された受け入れ基準（ａｃｃｅｐｔｅｄ ｃｒｉｔｅｒｉａ）に基づいて、樹立されたＷＨＶの慢性キャリアとして確認された（すなわち、生後９～１２カ月およびそれ以降において、ＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇ陽性であり、抗ＷＨｓ陰性であった）。超音波検査により、受けた２０匹中１６匹のウッドチャックにおいて低血清ガンマグルタミルトランスフェラーゼ（ＧＧＴ）活性を有するウッドチャックにおいて肝腫瘍がないことが確認された。他の３匹のウッドチャックはわずかから中程度に血清ＧＧＴ活性が上昇したが、最初の超音波検査では肝腫瘍を示さなかった。すべてのウッドチャックに動物識別番号（ＤＡＳＨｏｓｔ Ｓｏｆｔｗａｒｅ， Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｄａｔａ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ.）がプログラムされたマイクロチップ（尾部背側（ｄｏｒｓａｌ ｂａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｉｌ））を移植した。動物を手動で４つの治療群の１つに無作為割付し、性別、体重、前治療血清マーカー（ＷＨｓＡｇ、ＷＨＶ ＤＮＡレベル、抗ＷＨｓＡｇ抗体価）、全血球数（ＣＢＣｓ）、ＧＧＴおよびソルビドールデヒドロゲナーゼ（ＳＤＨ）の血清レベルによって階層化した。
【0070】
【表1】
【0071】
動物処置手順
手順は、表１に記載されているスケジュールに従って実行された：
手順は、表１に記載されているスケジュールに従って実行された：
【0072】
【表2】
ａ） 肝生検分析に含まれるもの：ＷＨＶ ＤＮＡ ＲＩ、ＷＨＶ ｃｃｃＤＮＡ、ＷＨＶ ＲＮＡ（サザンおよびノーザンブロット）、組織学、ＷＨｃＡｇ、ＷＨｓＡｇ、抗ＷＨｓＡｇ－Ａｂ
ｂ） ＤＮＡおよび血清学に含まれるもの：ＷＨＶ ＤＮＡ（スロットブロットおよびＰＣＲ）、ＷＨｓＡｇ、抗ＷＨｓＡｇ－Ａｂ
ｃ） ＷＨｓＡｇ、ＷＨｃＡｇ、ＷＨＶｘＡｇ全体をカバーするペプチドによるＰＢＭＣの刺激後に決定されたＴ細胞応答
ｄ） 細胞分化マーカーおよびサイトカインの分析のために－８０℃で保存されたサンプル。
【0073】
●すべての動物について死亡率を毎日評価した。
●体重／体温および臨床症状を毎週評価した。
●前治療の期間、無作為割付（Ｔ０）から２４週まで毎週、および２５週から３６週まで隔週で血清学のために、血液サンプルを採取した。
●前治療中、Ｔ０、および４、８、１２、１６、２１、２４、３０、および３６週に血液学および臨床化学のために、血液サンプルを採取した。
●Ｔ０、および１２、２１、２４、３０、および３６週にａＰＴＴおよびＰＴの評価のために、血液サンプルを採取した。
●Ｔ０、および６、１２、２１、２４、３０、および３６週にＴ細胞応答の評価のために、血液サンプルを採取した。
●前治療中、および６、１２、２１、２４、３０、および３６週に細胞分化マーカーの評価およびサイトカインの測定のために、血液サンプルを採取した。治療期間中の採血は、「ＥＴＶ媒体」、「ＡＩＣ媒体」、ＥＴＶ、および／またはＡＩＣ６４９の投与後、約１６時間で行った。
●肝生検は、２週間の前治療期間中、および６、１２、１６、２４、および３６週で行った。
●体重／体温および臨床症状を毎週評価した。
●前治療の期間、無作為割付（Ｔ０）から２４週まで毎週、および２５週から３６週まで隔週で血清学のために、血液サンプルを採取した。
●前治療中、Ｔ０、および４、８、１２、１６、２１、２４、３０、および３６週に血液学および臨床化学のために、血液サンプルを採取した。
●Ｔ０、および１２、２１、２４、３０、および３６週にａＰＴＴおよびＰＴの評価のために、血液サンプルを採取した。
●Ｔ０、および６、１２、２１、２４、３０、および３６週にＴ細胞応答の評価のために、血液サンプルを採取した。
●前治療中、および６、１２、２１、２４、３０、および３６週に細胞分化マーカーの評価およびサイトカインの測定のために、血液サンプルを採取した。治療期間中の採血は、「ＥＴＶ媒体」、「ＡＩＣ媒体」、ＥＴＶ、および／またはＡＩＣ６４９の投与後、約１６時間で行った。
●肝生検は、２週間の前治療期間中、および６、１２、１６、２４、および３６週で行った。
【0074】
治療期間中の採血のタイミング
サイトカインおよび細胞マーカーの分析のための血液サンプルは、治療の約１６時間後に採取された。
サイトカインおよび細胞マーカーの分析のための血液サンプルは、治療の約１６時間後に採取された。
【0075】
同じ麻酔イベント（ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ ｅｖｅｎｔ）中に採血および静注投与を行うことができるように、血清学、ウイルス学、血液学（ａＰＴＴおよびＰＴを含む）または臨床化学、およびＴ細胞応答の分析のための血液サンプルを、経口投与（ＥＴＶ／ＥＴＶ媒体）後約０．５～１．０時間、静注投与前に採取した。ＡＩＣ６４９またはＡＩＣ媒体の静脈内注射の場合、ケタミン／キシラジンの筋肉内注射、１０：１混合物、２５～５０ ｍｇ／ｋｇケタミン／１．０～５．０ ｍｇ／ｋｇキシラジン、および／またはイソフルラン吸入（すなわち、ノーズコーンを介して、１～３％）を用いて動物を麻酔した。ＡＩＣ６４９またはＡＩＣ媒体の筋肉内注射は、麻酔なしで行った。
【0076】
臨床観察および研究室実験
【0077】
臨床観察徴候
【0078】
死亡率
すべての動物について死亡率を毎日評価した。
すべての動物について死亡率を毎日評価した。
【0079】
体温および体重
体温および体重の評価は、毎週一緒に行った。動物の識別番号および体温は、尾部背側（ｄｏｒｓａｌ ｂａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｉｌ）に移植したマイクロチップからハンドヘルドチップリーダーを用いて読み取った（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｄａｔａ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ.）。データは個々の値として報告され、平均±ＳＤとしてグループごとにまとめられた。
体温および体重の評価は、毎週一緒に行った。動物の識別番号および体温は、尾部背側（ｄｏｒｓａｌ ｂａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｉｌ）に移植したマイクロチップからハンドヘルドチップリーダーを用いて読み取った（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｄａｔａ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｉｎｃ.）。データは個々の値として報告され、平均±ＳＤとしてグループごとにまとめられた。
【0080】
血液学
凝固していない全血をＥＤＴＡチューブに収集した。サンプルを、分析のために研究室に同日配送するために、コールドパックで輸送した。翌日、ウッドチャックのためのプログラム設定を備えた自動セルカウンターシステム（ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いてサンプルを分析した(Ｂｅｌｌｅｚｚａ， Ｃ．Ａ．， ｅｔ ａｌ．， ２００２， Ｅｌｓｅｖｉｅｒ． ｐ． ３０９－３２８．)。
凝固していない全血をＥＤＴＡチューブに収集した。サンプルを、分析のために研究室に同日配送するために、コールドパックで輸送した。翌日、ウッドチャックのためのプログラム設定を備えた自動セルカウンターシステム（ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いてサンプルを分析した(Ｂｅｌｌｅｚｚａ， Ｃ．Ａ．， ｅｔ ａｌ．， ２００２， Ｅｌｓｅｖｉｅｒ． ｐ． ３０９－３２８．)。
【0081】
【表3】
【0082】
臨床化学
血清を収集して冷凍し、サンプル週にドライアイスで輸送した。サンプルを分析のために一度解凍した。ａＰＴＴおよびＰＴをクエン酸血漿で測定した。サンプルをウッドチャック用に確立された臨床化学アッセイを用いて、オートアナライザー（Ｈｉｔａｃｈｉ）を用いて解析した（Ｐｅｅｋ， Ｓ．Ｆ．， ｅｔ ａｌ．： Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００１． ３３（１）： ｐ． ２５４－６６）
血清を収集して冷凍し、サンプル週にドライアイスで輸送した。サンプルを分析のために一度解凍した。ａＰＴＴおよびＰＴをクエン酸血漿で測定した。サンプルをウッドチャック用に確立された臨床化学アッセイを用いて、オートアナライザー（Ｈｉｔａｃｈｉ）を用いて解析した（Ｐｅｅｋ， Ｓ．Ｆ．， ｅｔ ａｌ．： Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００１． ３３（１）： ｐ． ２５４－６６）
【0083】
【表4】
【0084】
病理組織学
犠牲にした動物（ｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ ａｎｉｍａｌ）の組織を１０％リン酸緩衝ホルマリンで固定し、組織病理学的評価に送った。
犠牲にした動物（ｔｅｒｍｉｎａｔｅｄ ａｎｉｍａｌ）の組織を１０％リン酸緩衝ホルマリンで固定し、組織病理学的評価に送った。
【0085】
収集され、剖検で固定された臓器および組織のサンプルを処理し、ワックスパラフィンで包埋し、約２～４マイクロメートルの呼び厚さに切断し、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。スライドを処理し、染色し、光学顕微鏡で観察した。
【0086】
評価された臓器
以下の臓器を組織学的評価のために収集した：
副腎、大動脈、骨（大腿骨）および関節、骨髄を伴う骨（胸骨）、骨髄の塗抹標本（メタノール中で固定し、メイ・グリュンワルド・ギムザ法で染色した）、脳、気管支（主幹部）、盲腸、結腸、十二指腸、精巣上体、眼、胆のう、心臓、回腸、注入部位（サンプルを、注入されたエリアから採取する）、空腸、腎臓および尿管、喉頭、肝臓、肺、リンパ節（下顎）、リンパ節（腸間膜）、乳腺、食道、視神経、卵巣および卵管、膵臓、副甲状腺、パイエル板、脳下垂体、前立腺、直腸、唾液腺（下顎、耳下腺、舌下腺）、坐骨神経、骨格筋、皮膚、脊髄（頸部、胸部、腰部）、脾臓、胃、精巣、胸腺、甲状腺、舌、気管、尿管、膀胱、子宮（子宮角＋子宮頸部）、膣、肉眼的病変。
以下の臓器を組織学的評価のために収集した：
副腎、大動脈、骨（大腿骨）および関節、骨髄を伴う骨（胸骨）、骨髄の塗抹標本（メタノール中で固定し、メイ・グリュンワルド・ギムザ法で染色した）、脳、気管支（主幹部）、盲腸、結腸、十二指腸、精巣上体、眼、胆のう、心臓、回腸、注入部位（サンプルを、注入されたエリアから採取する）、空腸、腎臓および尿管、喉頭、肝臓、肺、リンパ節（下顎）、リンパ節（腸間膜）、乳腺、食道、視神経、卵巣および卵管、膵臓、副甲状腺、パイエル板、脳下垂体、前立腺、直腸、唾液腺（下顎、耳下腺、舌下腺）、坐骨神経、骨格筋、皮膚、脊髄（頸部、胸部、腰部）、脾臓、胃、精巣、胸腺、甲状腺、舌、気管、尿管、膀胱、子宮（子宮角＋子宮頸部）、膣、肉眼的病変。
【0087】
有効性／ウイルス学的評価
【0088】
血清中のＷＨＶ抗原／抗体
【0089】
血清ＷＨＶ ＤＮＡ
血清中のＷＨＶ ＤＮＡのレベルをニトロセルロース膜上の標準化された３２Ｐ標識ＷＨＶ ＤＮＡ断片プローブとのスロットブロットハイブリダイゼーションを用いて、ゲノム等価物（ｇｅ’ｓ）として定量化した。アッセイの定量下限（ＬＬＯＱ）は、約１０7 ｇｅ／ｍＬ血清であった。スロットブロットＬＬＯＱの下記のサンプルもＬＬＯＱ 約５．０～７．０×１０２ＷＨＶ ｇｅ／ｍＬ血清を用いた定量的リアルタイムＰＣＲアッセイ（Ｍｅｎｎｅ， Ｓ．， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ， ２００８． ５２（１０）： ｐ． ３６１７－３２）を用いて評価した。
血清中のＷＨＶ ＤＮＡのレベルをニトロセルロース膜上の標準化された３２Ｐ標識ＷＨＶ ＤＮＡ断片プローブとのスロットブロットハイブリダイゼーションを用いて、ゲノム等価物（ｇｅ’ｓ）として定量化した。アッセイの定量下限（ＬＬＯＱ）は、約１０7 ｇｅ／ｍＬ血清であった。スロットブロットＬＬＯＱの下記のサンプルもＬＬＯＱ 約５．０～７．０×１０２ＷＨＶ ｇｅ／ｍＬ血清を用いた定量的リアルタイムＰＣＲアッセイ（Ｍｅｎｎｅ， Ｓ．， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ， ２００８． ５２（１０）： ｐ． ３６１７－３２）を用いて評価した。
【0090】
血清ＷＨｓＡｇ
血清中のＷＨｓＡｇレベルを、ＬＬＯＱ 約５ ｎｇ ＷＨｓＡｇ／ｍＬ 血清を用いた確立されたＥＬＩＳＡを用いて定量した（Ｃｏｔｅ， Ｐ．Ｊ．， ｅｔ ａｌ．， Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ， １９９３． ６（２）： ｐ．１６１－９）。
血清中のＷＨｓＡｇレベルを、ＬＬＯＱ 約５ ｎｇ ＷＨｓＡｇ／ｍＬ 血清を用いた確立されたＥＬＩＳＡを用いて定量した（Ｃｏｔｅ， Ｐ．Ｊ．， ｅｔ ａｌ．， Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ， １９９３． ６（２）： ｐ．１６１－９）。
【0091】
血清抗ＷＨｓ抗体
血清中の抗ＷＨ抗体レベルを、確立されたELISA技術を、用いて定量化した（Ｃｏｔｅ， Ｐ．Ｊ．， ｅｔ ａｌ．， Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ， １９９３． ６（２）： ｐ.１６１－９）。１：１００のサンプル希釈を用いたアッセイのＬＬＯＱは、約１００ ＳｔｄＵ／ｍＬ血清であった。サンプルを以下のように段階分けした：
●１００～２００ ＳｔｄＵ／ｍＬを微量レベルと見なした。
●２００～３００ ＳｔｄＵ／ｍＬを非常に低いレベルと見なした。
●３００～５００ ＳｔｄＵ／ｍＬを低レベルと見なした。
●５００～２０００ ＳｔｄＵ／ｍＬを中程度のレベルを見なした。
●＞２０００ ＳｔｄＵ／ｍＬを高レベルと見なした（たとえば、ＷＨｓＡｇアラムワクチンによる、ナイーブウッドチャックの３倍免疫化後に予想されるように）。
血清中の抗ＷＨ抗体レベルを、確立されたELISA技術を、用いて定量化した（Ｃｏｔｅ， Ｐ．Ｊ．， ｅｔ ａｌ．， Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ， １９９３． ６（２）： ｐ.１６１－９）。１：１００のサンプル希釈を用いたアッセイのＬＬＯＱは、約１００ ＳｔｄＵ／ｍＬ血清であった。サンプルを以下のように段階分けした：
●１００～２００ ＳｔｄＵ／ｍＬを微量レベルと見なした。
●２００～３００ ＳｔｄＵ／ｍＬを非常に低いレベルと見なした。
●３００～５００ ＳｔｄＵ／ｍＬを低レベルと見なした。
●５００～２０００ ＳｔｄＵ／ｍＬを中程度のレベルを見なした。
●＞２０００ ＳｔｄＵ／ｍＬを高レベルと見なした（たとえば、ＷＨｓＡｇアラムワクチンによる、ナイーブウッドチャックの３倍免疫化後に予想されるように）。
【0092】
未処理の慢性乾生動物では、循環しているＷＨｓＡｇがかなり過剰であり、未結合の抗ＷＨｓ Ａｂの検出を起こりにくくするため、このアッセイの結果の解釈には注意が必要である。したがって、抗ＷＨｓＡｇ検出の陰性結果は、未結合のＷＨｓ特異抗体の不足を示しており、ＷＨｓ特異抗体全体の不足を示しているわけではない。
【0093】
Ｔ細胞増殖反応
ＰＢＭＣを全血から分離し、ＤＭＯ（ネガティブコントロール）、リポ多糖（ＬＰＳ、ポジティブコントロール）、組換えヒトＩＬ－２（ポジティブコントロール）、またはそれぞれＷＨｃＡｇ、ＷＨｓＡｇ、もしくはＷＨｘＡｇ全体をカバーするペプチドのプールの存在下で５日間培養した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）アッセイを使用して、各テストウェル中の生細胞の数を、存在するＡＴＰの量、すなわち生細胞の数に比例する発光信号を用いて評価した。培養を５日後に評価し、特異抗原／刺激に対するＴ細胞応答の一つの指標として、ネガティブコントロールと比較して刺激指数（ＳＩ）を導出した。
ＳＩ ＝テスト発光／ネガティブコントロール発光
ＰＢＭＣを全血から分離し、ＤＭＯ（ネガティブコントロール）、リポ多糖（ＬＰＳ、ポジティブコントロール）、組換えヒトＩＬ－２（ポジティブコントロール）、またはそれぞれＷＨｃＡｇ、ＷＨｓＡｇ、もしくはＷＨｘＡｇ全体をカバーするペプチドのプールの存在下で５日間培養した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）アッセイを使用して、各テストウェル中の生細胞の数を、存在するＡＴＰの量、すなわち生細胞の数に比例する発光信号を用いて評価した。培養を５日後に評価し、特異抗原／刺激に対するＴ細胞応答の一つの指標として、ネガティブコントロールと比較して刺激指数（ＳＩ）を導出した。
ＳＩ ＝テスト発光／ネガティブコントロール発光
【0094】
サイトカインおよび細胞マーカー
治療に関連する免疫反応は、ＰＣＲを用いて、血液および肝臓におけるＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、インターロイキン６（ＩＬ－６）、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ５６、およびＣＤ７９Ｂ ＲＮＡ転写レベルの変化によって決定された。簡潔に言うと、全血を上記の時点でＰＡＸｇｅｎｅ血液チューブ（Ｑｉａｇｅｎ， Ｒｅｄｗｏｏｄ Ｃｉｔｙ， ＣＡ）に収集した。サンプルは、使用するまで－７０℃で保存した。さらに、ＲＮａｓｅ－Ｆｒｅｅ ＤＮａｓｅ （Ｑｉａｇｅｎ）を使用したオンカラムＤＮａｓｅ Ｉ消化を伴うＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ （Ｑｉａｇｅｎ）を用いて、上記のように収集した肝生検サンプルから総ＤＮＡをさらに分離した。
治療に関連する免疫反応は、ＰＣＲを用いて、血液および肝臓におけるＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、インターロイキン６（ＩＬ－６）、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ５６、およびＣＤ７９Ｂ ＲＮＡ転写レベルの変化によって決定された。簡潔に言うと、全血を上記の時点でＰＡＸｇｅｎｅ血液チューブ（Ｑｉａｇｅｎ， Ｒｅｄｗｏｏｄ Ｃｉｔｙ， ＣＡ）に収集した。サンプルは、使用するまで－７０℃で保存した。さらに、ＲＮａｓｅ－Ｆｒｅｅ ＤＮａｓｅ （Ｑｉａｇｅｎ）を使用したオンカラムＤＮａｓｅ Ｉ消化を伴うＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ （Ｑｉａｇｅｎ）を用いて、上記のように収集した肝生検サンプルから総ＤＮＡをさらに分離した。
【0095】
オリゴ（ｄＴ）を使用したＨｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｃＤＮＡ逆転写キット（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）によるｍＲＮＡの逆転写に続いて、相補的（ｃ）ＤＮＡサンプルを、ＴａｑＭａｎ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）およびウッドチャック特異的プライマーおよびプローブを使用して、７５００ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）で増幅した（表２）。ウッドチャック１８Ｓ ｒＲＮＡ発現を、標的遺伝子発現を正規化するために使用した。標的遺伝子の転写レベルを式２ΔCtを用いて、－１週（肝臓）またはＴ０（血液）における前治療レベルに対する変化倍率として計算した。
【0096】
【表5】
【0097】
肝生検
超音波ガイド下の肝臓パンチ生検を、超音波機器に取り付けたイメージングマニホールドに装着した１６ゲージの使い捨て生検針キットを使用して、麻酔された動物に対して行った。各サンプリングで、２～３コア、各１６ゲージ×１～２ｃｍを取得した。生検を行った後、長時間作用型ベンザチンペニシリンで動物を予防的に筋肉内注射処理した。
超音波ガイド下の肝臓パンチ生検を、超音波機器に取り付けたイメージングマニホールドに装着した１６ゲージの使い捨て生検針キットを使用して、麻酔された動物に対して行った。各サンプリングで、２～３コア、各１６ゲージ×１～２ｃｍを取得した。生検を行った後、長時間作用型ベンザチンペニシリンで動物を予防的に筋肉内注射処理した。
【0098】
ウイルス核酸
文献に記載されているように、肝生検をＷＨＶ ＤＮＡ ＲＩ、ＷＨＶ ｃｃｃＤＮＡ、およびＷＨＶ ＲＮＡ（サザンおよびノーザンブロットハイブリダイゼーション）について定量的に分析した（Ｍｅｎｎｅ， Ｓ．， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ， ２００８． ５２（１０）： ｐ．３６１７－３２．）。
文献に記載されているように、肝生検をＷＨＶ ＤＮＡ ＲＩ、ＷＨＶ ｃｃｃＤＮＡ、およびＷＨＶ ＲＮＡ（サザンおよびノーザンブロットハイブリダイゼーション）について定量的に分析した（Ｍｅｎｎｅ， Ｓ．， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ， ２００８． ５２（１０）： ｐ．３６１７－３２．）。
【0099】
疾患の進行
生検は、ウッドチャック肝切片用に開発された基準（Ｐｅｅｋ， Ｓ．Ｆ．， ｅｔ ａｌ．， Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００１． ３３（１）： ｐ．２５４－６６． Ｔｅｎｎａｎｔ， Ｂ．Ｃ．， ｅｔ ａｌ．． Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， １９９８． ２８（１）： ｐ．１７９－９１．）を使用して、ならびにヒト肝臓サンプルをスコアリングするためのＭＥＴＡＶＩＲスケールを使用して、肝疾患の進行（組織学）について評価した。さらに、Ｈ＆Ｅで染色したホルマリン固定パラフィン包埋切片を評価した。
生検は、ウッドチャック肝切片用に開発された基準（Ｐｅｅｋ， Ｓ．Ｆ．， ｅｔ ａｌ．， Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００１． ３３（１）： ｐ．２５４－６６． Ｔｅｎｎａｎｔ， Ｂ．Ｃ．， ｅｔ ａｌ．． Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， １９９８． ２８（１）： ｐ．１７９－９１．）を使用して、ならびにヒト肝臓サンプルをスコアリングするためのＭＥＴＡＶＩＲスケールを使用して、肝疾患の進行（組織学）について評価した。さらに、Ｈ＆Ｅで染色したホルマリン固定パラフィン包埋切片を評価した。
【0100】
免疫組織化学
ＷＨｃＡｇおよびＷＨｓＡｇの発現（免疫組織化学）を肝生検サンプルで評価した。文献に記載されているように、ホルマリン固定、パラフィン包埋切片を調製して染色し（Ｐｅｅｋ， Ｓ．Ｆ．， ｅｔ ａｌ．， Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００１． ３３（１）： ｐ．２５４－６６． Ｔｅｎｎａｎｔ， Ｂ．Ｃ．， ｅｔ ａｌ．． Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， １９９８． ２８（１）： ｐ．１７９－９１． Ｃｏｔｅ， Ｐ．Ｊ．， ｅｔ ａｌ． Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２０００． ３１（１）： ｐ．１９０－２００）、評価した。
ＷＨｃＡｇおよびＷＨｓＡｇの発現（免疫組織化学）を肝生検サンプルで評価した。文献に記載されているように、ホルマリン固定、パラフィン包埋切片を調製して染色し（Ｐｅｅｋ， Ｓ．Ｆ．， ｅｔ ａｌ．， Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００１． ３３（１）： ｐ．２５４－６６． Ｔｅｎｎａｎｔ， Ｂ．Ｃ．， ｅｔ ａｌ．． Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， １９９８． ２８（１）： ｐ．１７９－９１． Ｃｏｔｅ， Ｐ．Ｊ．， ｅｔ ａｌ． Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２０００． ３１（１）： ｐ．１９０－２００）、評価した。
【0101】
統計分析
群間の統計比較は、以下のパラメタに対して実行した：平均体重、体温、ウイルスの血清学的および肝臓のパラメタ、血液学パラメタ、臨床化学、ＰＢＭＣ増殖反応、および肝臓組織学および免疫組織化学スコア。
群間の統計比較は、以下のパラメタに対して実行した：平均体重、体温、ウイルスの血清学的および肝臓のパラメタ、血液学パラメタ、臨床化学、ＰＢＭＣ増殖反応、および肝臓組織学および免疫組織化学スコア。
【0102】
ＡＩＣ６４９＋ＥＴＶ（群４）で処理されたウッドチャックの結果は、等分散を備える、対応のないスチューデントのｔ検定を用いて、Ｔ０または前治療での値、また、「ＡＩＣ媒体」＋「ＥＴＶ媒体」（群１）、ＡＩＣ６４９＋「ＥＴＶ媒体」（群２）、および「ＡＩＣ媒体」＋ＥＴＶで処理されたウッドチャックの結果と比較した。
【0103】
示されている場合、幾何平均では、血清ＷＨＶ ＤＮＡおよび血清ＷＨｓＡｇの対数変換データが計算され、算術平均され、スチューデントのｔ検定を用いて検定された。Ｐ値＜０．０５は、統計的に有意であると見なされた。
【0104】
結果
以前に観察されたＡＩＣ６４９の単剤治療によって誘発された二相性反応パターンを確認した（Ｐａｕｌｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（２０１５）：ＰＬＯＳＯｎｅ，１０，ｅ０１４４３８３）。ＡＩＣ６４９のみでの治療は、ＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇの前治療レベルからの明確な減少をすでにもたらした。ＡＩＣ６４９＋ＥＴＶの組み合わせの群では、有意で驚くほど、さらに強力かつ持続的な抗ウイルス効果が観察された： ＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇは対応動物（ｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｎｉｍａｌ）では数カ月間著しく抑制され、またはより適切に言えば検出不可能であった（図２および３）。細胞性免疫応答（図４）、ならびに抗ＷＨｓＡｇ抗体応答（図５）は、ＡＩＣ６４９を投与された２つの群で観察されたが、ＥＴＶ単剤投与群では観察されなかった。ほとんどの肝疾患マーカーの変化は群間で同等であったが、研究中の脂肪肝の進行およびＧＧＴの増加（図６）は、ＡＩＣ６４９単独およびＡＩＣ６４９＋ＥＴＶの組み合わせの群ではより遅く見えた。免疫学的パラメタの分析は、ＡＩＣ６４９処理が慢性ＷＨＶキャリアウッドチャックの肝臓においてサイトカインおよび細胞マーカーを誘発することを明らかにした（図７）。ＡＩＣ６４９治療は忍容性が良好であった。
以前に観察されたＡＩＣ６４９の単剤治療によって誘発された二相性反応パターンを確認した（Ｐａｕｌｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（２０１５）：ＰＬＯＳＯｎｅ，１０，ｅ０１４４３８３）。ＡＩＣ６４９のみでの治療は、ＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇの前治療レベルからの明確な減少をすでにもたらした。ＡＩＣ６４９＋ＥＴＶの組み合わせの群では、有意で驚くほど、さらに強力かつ持続的な抗ウイルス効果が観察された： ＷＨＶ ＤＮＡおよびＷＨｓＡｇは対応動物（ｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｎｉｍａｌ）では数カ月間著しく抑制され、またはより適切に言えば検出不可能であった（図２および３）。細胞性免疫応答（図４）、ならびに抗ＷＨｓＡｇ抗体応答（図５）は、ＡＩＣ６４９を投与された２つの群で観察されたが、ＥＴＶ単剤投与群では観察されなかった。ほとんどの肝疾患マーカーの変化は群間で同等であったが、研究中の脂肪肝の進行およびＧＧＴの増加（図６）は、ＡＩＣ６４９単独およびＡＩＣ６４９＋ＥＴＶの組み合わせの群ではより遅く見えた。免疫学的パラメタの分析は、ＡＩＣ６４９処理が慢性ＷＨＶキャリアウッドチャックの肝臓においてサイトカインおよび細胞マーカーを誘発することを明らかにした（図７）。ＡＩＣ６４９治療は忍容性が良好であった。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2022-08-31
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染症の個人の治療のために、抗ＨＢＶ抗ウイルス薬と組み合わせて使用するためのパラポックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ：ＰＰＶＯ）剤を含む組成物であって、
ここで前記ＰＰＶＯ剤が、ＰＰＶＯビリオン、その活性断片、ＰＰＶＯビリオンまたはその活性断片を発現することができる核酸、および前記ＰＰＶＯビリオン、その活性断片または前記核酸を含む細胞からなる群から選択され、
およびここで前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬が、ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストまたはアンタゴニスト、エピジェネティック修飾剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤、およびチェックポイント阻害剤からなる群から選択される、抗ＨＢＶ抗ウイルス薬と組み合わせて使用するためのパラボックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ）剤を含む組成物。
ここで前記ＰＰＶＯ剤が、ＰＰＶＯビリオン、その活性断片、ＰＰＶＯビリオンまたはその活性断片を発現することができる核酸、および前記ＰＰＶＯビリオン、その活性断片または前記核酸を含む細胞からなる群から選択され、
およびここで前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬が、ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストまたはアンタゴニスト、エピジェネティック修飾剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤、およびチェックポイント阻害剤からなる群から選択される、抗ＨＢＶ抗ウイルス薬と組み合わせて使用するためのパラボックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ）剤を含む組成物。
【請求項2】
前記ＰＰＶＯビリオンが不活化ＰＰＶＯビリオンである、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項3】
前記ＰＰＶＯまたはその活性断片を発現することができる核酸が、核酸ベクターまたは合成核酸分子である、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項4】
前記ＰＰＶＯが、ＮＺ２、ＮＺ７、ＮＺ１０、Ｄ１７０１、ＯＶ／２０、ＯＶ／７、ＯＶ／Ｃ２、ＯＶ／ｍｉ－９０、ＯＶ－Ｔｏｒｉｎｏ、ＳＡ００、Ｂｏ２９、ｏｒｆ１１、Ｇｒｅｅｋ ｏｒｆ系統１５５、Ｇｒｅｅｋ ｏｒｆ系統１７６および前述のいずれかに分類学上関連するパラボックスウイルス・オヴィス（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ）ｏｒｆ系統からなる群から選択される系統のものである、請求項１～３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項5】
前記ＰＰＶＯが、前記ＮＺ２系統のものである、請求項４に記載の使用のための組成物。
【請求項6】
前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬が、直接作用型抗ウイルス薬（Direct Acting Antiviral）（ＤＡＡ）である、請求項１～５のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項7】
前記ＤＡＡが、ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログである、請求項６に記載の使用のための組成物。
【請求項8】
前記ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログが、テノホビル、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（ＴＤＦ）、テノホビルアラフェナミド（ＴＡＦ）、エンテカビル、ラミブジン、テルビブジン、アデホビル、エムトリシタビン、およびクレブジンからなる群から選択される、請求項７に記載の使用のための組成物。
【請求項9】
前記ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログが、エンテカビルである、請求項８に記載の使用のための組成物。
【請求項10】
前記組成物が、前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項11】
前記組成物が、前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬を含まない、請求項１～９のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項12】
前記ＰＰＶＯ剤および抗ＨＢＶ抗ウイルス薬が、錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏(ointment)、軟膏（salve）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、およびスプレーからなる群から選択される単剤単位または組み合わせ製品として提供される、請求項１０または１１に記載の使用のための組成物。
【請求項13】
前記ＨＢＶ感染症の個人の治療が、前記個人において、
－ＨＢＶウイルス負荷を低減する
－ＨＢｓＡｇ負荷を低減する
－ＨＢｅＡｇ負荷を低減する
－肝障害、肝硬変、および／または肝線維症を低減する
－肝組織の再生を誘発する
－インターフェロンおよび／またはヌクレオチド／ヌクレオシドアナログによる治療によって引き起こされる副作用を低減する
－免疫応答を回復および／または再活性化する
－ＨＢＶ ＤＮＡ量を低減する、ＨＢＶ ＤＮＡを排除する、および／またはＨＢＶ ＤＮＡをサイレンシングする
－ｃｃｃＤＮＡのｄｅ ｎｏｖｏ形成を防止する
－ＨＢＶタンパク質発現を阻害または低減する
－ＨＢＶの複製を抑制する
－ＨＢＶを根絶する
－ＨＢＶ感染に対する免疫寛容を破壊する
－ＨＢｓＡｇおよび／またはＨＢｅＡｇに対する寛容を破壊する
－ＨＢｓＡｇ特異的抗体を誘発する
－ＨＢｅＡｇ特異的抗体を誘発する、または
－脂肪肝の進行を遅らせるか、または阻害する
ためのものである、請求項１～１２のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
－ＨＢＶウイルス負荷を低減する
－ＨＢｓＡｇ負荷を低減する
－ＨＢｅＡｇ負荷を低減する
－肝障害、肝硬変、および／または肝線維症を低減する
－肝組織の再生を誘発する
－インターフェロンおよび／またはヌクレオチド／ヌクレオシドアナログによる治療によって引き起こされる副作用を低減する
－免疫応答を回復および／または再活性化する
－ＨＢＶ ＤＮＡ量を低減する、ＨＢＶ ＤＮＡを排除する、および／またはＨＢＶ ＤＮＡをサイレンシングする
－ｃｃｃＤＮＡのｄｅ ｎｏｖｏ形成を防止する
－ＨＢＶタンパク質発現を阻害または低減する
－ＨＢＶの複製を抑制する
－ＨＢＶを根絶する
－ＨＢＶ感染に対する免疫寛容を破壊する
－ＨＢｓＡｇおよび／またはＨＢｅＡｇに対する寛容を破壊する
－ＨＢｓＡｇ特異的抗体を誘発する
－ＨＢｅＡｇ特異的抗体を誘発する、または
－脂肪肝の進行を遅らせるか、または阻害する
ためのものである、請求項１～１２のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項14】
ＰＰＶＯ剤を含む第一の容器、および少なくとも１つの抗ＨＢＶ抗ウイルス薬を含む第二の容器を含む、ＨＢＶ感染症の個人の治療のためのキット製品であって、
ここで、前記ＰＰＶＯ剤が、ＰＰＶＯビリオン、その活性断片、ＰＰＶＯビリオンまたはその活性断片を発現することができる核酸、およびＰＰＶＯビリオン、その活性断片または前記核酸を含む細胞からなる群から選択され、
およびここで前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬が、ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストまたはアンタゴニスト、エピジェネティック修飾剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤、およびチェックポイント阻害剤からなる群から選択される、前記キット製品。
ここで、前記ＰＰＶＯ剤が、ＰＰＶＯビリオン、その活性断片、ＰＰＶＯビリオンまたはその活性断片を発現することができる核酸、およびＰＰＶＯビリオン、その活性断片または前記核酸を含む細胞からなる群から選択され、
およびここで前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬が、ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストまたはアンタゴニスト、エピジェネティック修飾剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤、およびチェックポイント阻害剤からなる群から選択される、前記キット製品。
【請求項15】
ＰＰＶＯ剤および少なくとも一つの抗ＨＢＶ抗ウイルス薬を含む組成物を含む、ＨＢＶ感染症の個人の治療のためのキット製品であって、
ここで前記ＰＰＶＯ剤が、ＰＰＶＯビリオン、その活性断片、ＰＰＶＯビリオンまたはその活性断片を発現することができる核酸、およびＰＰＶＯビリオン、その活性断片または前記核酸を含む細胞からなる群から選択され、
およびここで前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬が、ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストまたはアンタゴニスト、エピジェネティック調節剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤、およびチェックポイント阻害剤からなる群から選択される、前記キット製品。
ここで前記ＰＰＶＯ剤が、ＰＰＶＯビリオン、その活性断片、ＰＰＶＯビリオンまたはその活性断片を発現することができる核酸、およびＰＰＶＯビリオン、その活性断片または前記核酸を含む細胞からなる群から選択され、
およびここで前記抗ＨＢＶ抗ウイルス薬が、ヌクレオチド／ヌクレオシドアナログ、キャプシド集合阻害剤または調節剤、キャプシド／コア阻害剤または調節剤、キャプシド形成阻害剤または調節剤、ＲＮＡｉ、トル様受容体（ＴＬＲ）アゴニストまたはアンタゴニスト、エピジェネティック調節剤、シクロフィリン阻害剤または調節剤、ＨＢｓＡｇ分泌阻害剤、ＨＢｓＡｇ阻害剤、ＨＢＶ侵入阻害剤または調節剤、ｃｃｃＤＮＡ阻害剤、免疫調節剤、およびチェックポイント阻害剤からなる群から選択される、前記キット製品。
【請求項16】
前記ＰＰＶＯ剤および少なくとも一つの異なる抗ウイルス薬が、錠剤、カプセル、ロゼンジ、特に耐酸性カプセル、ドロップ、パッチ、デポ投与形態、溶液、注射用溶液、輸液用溶液、希釈液、クリーム、軟膏(ointment)、軟膏（salve）、粉末、再構成用粉末、再構成および輸液用粉末、およびスプレー剤からなる群から選択される、請求項１４または１５に記載のキット製品。
【手続補正書】
【提出日】2022-09-07
【手続補正1】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
【外国語明細書】