特開 2022-17502 肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物、方法および医薬組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2022017502

(43)【公開日】2022-01-25

(54)【発明の名称】肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物、方法および医薬組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/282 20060101AFI20220118BHJP

   A61K 36/79 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 9/16 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 9/20 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 9/48 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 31/194 20060101ALI20220118BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20220118BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20220118BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20220118BHJP

   A61P 39/00 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20220118BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 36/886 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20220118BHJP

   A61K 31/352 20060101ALI20220118BHJP

【ＦＩ】

A61K36/282

A61K36/79

A61K9/14

A61K9/16

A61K9/20

A61K9/48

A61K31/194

A61P1/16

A61P3/04

A61P3/06

A61P39/00

A61K45/00

A61P35/00

A61K36/886

A61K9/08

A61K31/352

【審査請求】有

【請求項の数】38

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2021180864

(22)【出願日】2021-11-05

(62)【分割の表示】P 2020032768の分割

【原出願日】2016-07-12

(31)【優先権主張番号】62/192,711

(32)【優先日】2015-07-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】15/208,075

(32)【優先日】2016-07-12

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(71)【出願人】

【識別番号】504000568

【氏名又は名称】ユニゲン・インコーポレーテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110001173

【氏名又は名称】特許業務法人川口國際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】チイ・ジア

(72)【発明者】

【氏名】メスフィン・イマム

(72)【発明者】

【氏名】ピン・ジャオ

(72)【発明者】

【氏名】メイ・フェン・ホン

(72)【発明者】

【氏名】ブレアナ・ムーア

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C086

4C088

4C206

【Ｆターム（参考）】

4C076AA11

4C076AA14

4C076AA29

4C076AA31

4C076AA36

4C076AA54

4C076AA56

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4C076CC16

4C076CC21

4C076CC40

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4C084MA35

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4C206AA01

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4C206KA18

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4C206MA72

4C206NA14

4C206ZA70

4C206ZA75

4C206ZC33

4C206ZC37

(57)【要約】      （修正有）

【課題】肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物および方法を提供する。
【解決手段】植物抽出物の混合物を含み、この植物抽出物が、少なくとも１種のアルテミシア抽出物、少なくとも１種のアロエゲル粉末および少なくとも１種のシザンドラ抽出物を含む、肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物および方法が開示される。植物抽出物の混合物を含み、この植物抽出物が、少なくとも１種のポリマーまたはバイオポリマーを豊富に含む少なくとも１種のアルテミシア抽出物、少なくとも１種のクロモンを豊富に含む少なくとも１種のアロエゲル粉末および少なくとも１種のリグナンおよび有機酸を豊富に含む少なくとも１種のシザンドラ抽出物を含む、肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物および方法が開示される。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

植物抽出物の混合物を含み、この植物抽出物が、少なくとも１種のアルテミシア抽出物、少なくとも１種のアロエゲル粉末および少なくとも１種のシザンドラ抽出物を含む、肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物。

【請求項2】

少なくとも１種のポリマーまたはバイオポリマーを豊富に含むアルテミシア抽出物、少なくとも１種のクロモンを豊富に含むアロエゲル粉末および少なくとも１種のリグナンおよび有機酸を豊富に含むシザンドラ抽出物に由来する植物抽出物の混合物を含む、肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物。

【請求項3】

アルテミシア抽出物とシザンドラ抽出物が、４：１から１：４の重量比でブレンドされる、請求項１に記載の組成物。

【請求項4】

アロエゲル粉末が、アルテミシア抽出物とシザンドラ抽出物の混合物と約５％から約５０％の重量百分率でさらにブレンドされる、請求項１に記載の組成物。

【請求項5】

アルテミシア、シザンドラおよびアロエ葉ゲル粉末の混合物が８：４：３の比率である、請求項１に記載の組成物。

【請求項6】

アルテミシア抽出物が、分子量が５００より大きいバイオポリマーを０．０１％から９９．９％含む、請求項２に記載の組成物。

【請求項7】

アルテミシア抽出物が、アルテミシア・アブシティウム（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｂｓｉｎｔｈｉｕｍ）、アルテミシア・アブロタニウム Ｌ．（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｂｒｏｔａｎｕｍ Ｌ．）、アルテミシア・アフラ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｆｒａ）、アルテミシア・アヌア Ｌ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｎｕａ Ｌ）、アルテミシア・アーボレーゼンス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ）、アルテミシア・アジアチカ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｓｉａｔｉｃａ）、アルテミシア・カンペストリス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）、アルテミシア・デザーティ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｄｅｓｅｒｔｉ）、アルテミシア・イワヨモギ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｉｗａｙｏｍｏｇｉ）、アルテミシア・ルドビシアーナ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｌｕｄｏｖｉｃｉａｎａ）、アルテミシア・ブルガリス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、アルテミシア・オランドディカ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｏｅｌａｎｄｉｃａ）、アルテミシア・プリンシプス・パンプ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｐｒｉｎｃｅｐｓ Ｐａｍｐ）、アルテミシア・サクラウム（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓａｃｒｏｒｕｍ）、アルテミシア・スコパリア（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓｃｏｐａｒｉａ）、アルテミシア・ステラリアナ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓｔｅｌｌｅｒｉａｎａ）、アルテミシア・フリジダ・ウィルド（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｆｒｉｇｉｄａ Ｗｉｌｌｄ）、アルテミシア・アンテオイデス・マセフ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｅｔｈｏｉｄｅｓ Ｍａｔｔｆ．）、アルテミシア・アンティフォリア・ウェーバー（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｅｔｈｉｆｏｌｉａ Ｗｅｂｅｒ．）、アルテミシア・フォリエ・ナカイ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｆａｕｒｉｅｒ Ｎａｋａｉ）、オリガヌム・ブルガレ（Ｏｒｉｇａｎｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ、）シポノスタジア・チネンシス（Ｓｉｐｈｅｎｏｓｔｅｇｉａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、またはこれらの任意の組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項8】

アルテミシア抽出物が、アルテミシア・アブシティウム（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｂｓｉｎｔｈｉｕｍ）、アルテミシア・アブロタニウム Ｌ．（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｂｒｏｔａｎｕｍ Ｌ．）、アルテミシア・アフラ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｆｒａ）、アルテミシア・アヌア Ｌ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｎｕａ Ｌ）、アルテミシア・アーボレーゼンス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ）、アルテミシア・アジアチカ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｓｉａｔｉｃａ）、アルテミシア・カンペストリス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）、アルテミシア・デザーティ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｄｅｓｅｒｔｉ）、アルテミシア・イワヨモギ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｉｗａｙｏｍｏｇｉ）、アルテミシア・ルドビシアーナ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｌｕｄｏｖｉｃｉａｎａ）、アルテミシア・ブルガリス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、アルテミシア・オランドディカ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｏｅｌａｎｄｉｃａ）、アルテミシア・プリンシプス・パンプ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｐｒｉｎｃｅｐｓ Ｐａｍｐ）、アルテミシア・サクラウム（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓａｃｒｏｒｕｍ）、アルテミシア・スコパリア（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓｃｏｐａｒｉａ）、アルテミシア・ステラリアナ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓｔｅｌｌｅｒｉａｎａ）、アルテミシア・フリジダ・ウィルド（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｆｒｉｇｉｄａ Ｗｉｌｌｄ）、アルテミシア・アンテオイデス・マセフ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｅｔｈｏｉｄｅｓ Ｍａｔｔｆ．）、アルテミシア・アンティフォリア・ウェーバー（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｅｔｈｉｆｏｌｉａ Ｗｅｂｅｒ．）、アルテミシア・フォリエ・ナカイ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｆａｕｒｉｅｒ Ｎａｋａｉ）、オリガヌム・ブルガレ（Ｏｒｉｇａｎｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、シポノスタジア・チネンシス（Ｓｉｐｈｅｎｏｓｔｅｇｉａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、またはこれらの任意の組み合わせから選択される、請求項１に記載の組成物。

【請求項9】

１種以上のバイオポリマーが、水、メタノール、エタノール、アルコール、水混合溶媒またはこれらの組み合わせを用いてアルテミシア植物から抽出される、請求項２に記載の組成物。

【請求項10】

アロエゲル粉末が、アロエ・アルボレッセンス（Ａｌｏｅ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ）、アロエ・バーバデンシス（Ａｌｏｅ ｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓ）、アロエ・クレモノフィラ（Ａｌｏｅ ｃｒｅｍｎｏｐｈｉｌａ）、アロエ・フェロックス（Ａｌｏｅ ｆｅｒｏｘ）、アロエ・サポナリア（Ａｌｏｅ ｓａｐｏｎａｒｉａ）、アロエ（Ａｌｏｅ ｖｅｒａ）、アロエベラ・ヴァン・キネンシス（Ａｌｏｅ ｖｅｒａ ｖａｒ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）またはこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項11】

少なくとも１種のクロモン組成物が、約０．０１％から約１００％の１種以上のクロモンを含む、請求項２に記載の組成物。

【請求項12】

少なくとも１種のクロモンが、アロエシン、アロエシノール、アロエレシンＡ、アロエレシンＢ、アロエレシンＣ、アロエレシンＤ、アロエレシンＥまたはこれらの任意の組み合わせから選択される、請求項２に記載の組成物。

【請求項13】

クロモン組成物が、約１％から約４％のアロエシンを含み、組成物が本質的にアントロキノンを含まず、アロエゲルが、Ａｌｏｅ ｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓまたはＡｌｏｅ ｖｅｒａから選択される植物から単離され、少なくとも１種のクロモンが、Ａｌｏｅ ｖｅｒａまたはＡｌｏｅ ｆｅｒｏｘ、またはこれらの任意の組み合わせから単離される、請求項２に記載の組成物。

【請求項14】

シザンドラが、チョウセンゴミシ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、シザンドラ・エロンゲイ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｅｌｏｎｇａｔｅ）、シザンドラ・グラブラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｇｌａｂｒａ）、シザンドラ・グラウケスケンス（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｇｌａｕｃｅｓｃｅｎｓ）、シザンドラ・ヘンリー（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｈｅｎｒｙｉ）、シザンドラ・インカーネイト（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｉｎｃａｒｎａｔｅ）、シザンドラ・ランシフォリア（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｌａｎｃｉｆｏｌｉａ）、シザンドラ・ネグレクタ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｎｅｇｌｅｃｔａ）、シザンドラ・ニグラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｎｉｇｒａ）、シザンドラ・プロピンクファ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｐｒｏｐｉｎｑｕａ）、シザンドラ・プベスケンス（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ）、シザンドラ・レパンダ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｒｅｐａｎｄａ）、シザンドラ・ルブリフロラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｒｕｂｒｉｆｌｏｒａ）、シザンドラ・ルブリフォリア（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｒｕｂｒｉｆｏｌｉａ）、シザンドラ・チネンシス（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、シザンドラ・スファエランドラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｓｐｈａｅｒａｎｄｒａ）、シザンドラ・スフェエナンセラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｓｐｈｅｎａｎｔｈｅｒａ）、シザンドラ・トメテリア（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｔｏｍｅｎｔｅｌｌａ）、シザンドラ・ツバーキュレイト（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｔｕｂｅｒｃｕｌａｔａ）、シザンドラ・ベスティタ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｖｅｓｔｉｔａ）、シザンドラ・ビリジス（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｖｉｒｉｄｉｓ）、シザンドラ・ウイルソニアナ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｗｉｌｓｏｎｉａｎａ）、またはこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項15】

シサンドレン抽出物から単離される少なくとも１種のリグナンが、シサンドリン（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ）、デオキシシザンドリン（Ｄｅｏｘｙｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、γ－シザンドリン（ｇａｎｍａ－Ｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、偽γ－シザンドリン（Ｐｓｅｕｄｏ－ｇａｎｍａ－ｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、ウウェイジスＢ（Ｗｕｗｅｉｚｉｓｕ Ｂ）、ウウェイジスＣ（Ｗｕｗｅｉｚｉｓｕ Ｃ）、イソシザンドリン（Ｉｓｏｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、プレゴミシン（Ｐｒｅｇｏｍｉｓｉｎ）、エオシザンドリン（ｅｏｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、シザンドロール（Ｓｃｈｉｚａｎｄｒｏｌ）、シザンドロールＡ（Ｓｃｈｉｚａｎｄｒｏｌ Ａ）、シザンドロールＢ（Ｓｃｈｉｚａｎｄｒｏｌ Ｂ）、シサンテリンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ（Ｓｃｈｉｓａｎｔｈｅｒｉｎ Ａ， Ｂ， Ｃ， Ｄ， Ｅ）、ルブシサンテリン（Ｒｕｂｓｃｈｉｓａｎｔｈｅｒｉｎ）、シサンヘノールアセテート（Ｓｃｈｉｓａｎｈｅｎｏｌ ａｃｅｔｄｔｅ）、シサンヘノールＢ（Ｓｃｈｉｓａｎｈｅｎｏｌ Ｂ）、シサンヘノール（Ｓｃｈｉｓａｎｈｅｎｏｌ）、ゴミシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｊ、Ｎ、Ｏ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｕ（Ｇｏｍｉｓｉｎ Ａ， Ｂ， Ｃ， Ｄ， Ｅ， Ｆ， Ｇ， Ｈ， Ｊ， Ｎ， Ｏ， Ｒ， Ｓ， Ｔ， Ｕ，）、エピゴミシンＯ（Ｅｐｉｇｏｍｉｓｉｎ Ｏ）、アンゲロイルゴミシンＨ、Ｏ、Ｑ、Ｔ（Ａｎｇｅｌｏｙｌｇｏｍｉｓｉｎ）Ｈ、Ｏ、Ｑ、Ｔ、イグロイルゴミシン（ｉｇｌｏｙｌｇｏｍｉｓｉｎ）Ｈ、Ｐ、アンゲロイイソゴミシンＯ（Ａｎｇｅｌｏｙｉｓｏｇｏｍｉｓｉｎ Ｏ）、ベンゾイル－ゴミシンＨ、Ｏ、Ｐ、Ｑ、（Ｂｅｎｚｏｙｌ－ ｇｏｍｉｓｉｎ Ｈ， Ｏ， Ｐ， Ｑ，）ベンゾイル－イソゴミシン（Ｂｅｎｚｏｙｌ－ ｉｓｏｇｏｍｉｓｉｎ）、またはこれらの組み合わせである、請求項２に記載の組成物。

【請求項16】

少なくとも１種の有機酸が、シザンドラ抽出物から単離され、リンゴ酸、クエン酸、シキミ酸またはこれらの組み合わせを含む、請求項２に記載の組成物。

【請求項17】

植物抽出物が、茎、茎皮、幹、幹樹皮、小枝、塊茎、根、根皮、若芽、種子、根茎、花および他の生殖器官、葉、その他の空中部分、またはこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの植物部分に由来する、請求項１に記載の組成物。

【請求項18】

植物抽出物が、茎、茎皮、幹、幹樹皮、小枝、塊茎、根、根皮、若芽、種子、根茎、花および他の生殖器官、葉、その他の空中部分、またはこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの植物部分に由来する、請求項２に記載の組成物。

【請求項19】

組成物が、少なくとも１種の肝臓保護剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項20】

組成物が、少なくとも１種の肝臓保護剤をさらに含む、請求項２に記載の組成物。

【請求項21】

少なくとも１種の肝臓保護剤が、オオアザミ（ｍｉｌｋ ｔｈｉｓｔｌｅ）、ウコン（ｃｕｒｃｕｍａ）、ミシマサイコ（ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ）、リコリス（ｌｉｃｏｒｉｃｅ）、サルビア（ｓａｌｖｉａ）、クワ（ｍｏｒｕｓ）、ケンポナシ（ｈｏｖｅｎｉａ）、キンミズヒキ（ａｇｒｉｍｏｎｙ）、ハリグワ（ｃｕｄｒａｎｉａ）、ライセウム（ｌｙｃｅｕｍ）、ミカン（ｃｉｔｒｕｓ）、サクラ（ｐｒｕｎｕｓ）、イエローウメ（ｙｅｌｌｏｗ ｍｕｍｅ）、韓国海苔（Ｋｏｒｅａ ｇｉｍ）、タンポポ（ｄａｎｄｅｌｉｏｎ）、ブドウ（ｖｉｔｉｓ）、ブドウ種子（ｇｒａｐｅ ｓｅｅｄ）、キイチゴ（ｒｕｂｕｓ）、ツバキ（ｃａｍｅｌｌｉａ）、緑茶（ｇｒｅｅｎ ｔｅａ）、オキアミ油（ｋｒｉｌｉ ｏｉｌ）、酵母（ｙｅａｓｔ）、大豆（ｓｏｙ ｂｅａｎ）の植物粉末または植物抽出物；単離され濃縮されたシリマリン（ｓｉｌｙｍａｒｉｎｓ）、フラボノイド（ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ）、リン脂質、チオ類、ピクノジェノール、ゼラチン、大豆レシチン、膵酵素；天然または合成のＮ－アセチル－システイン、タウリン、リボフラビン、ナイアシン、ピリドキシン、葉酸、カロテン、ビタミンＡ、ビタミンＢ２、Ｂ６、Ｂ１６、ビタミンＣ、ビタミンＥ、グルタチオン、分枝鎖アミノ酸、セレン、銅、亜鉛、マンガン、コエンザイムＱ１０、Ｌ－アルギニン、Ｌ－グルタミン、ホスファチジルコリン、またはこれらの組み合わせを含む、請求項１９に記載の組成物。

【請求項22】

少なくとも１種の肝臓保護剤が、オオアザミ（ｍｉｌｋ ｔｈｉｓｔｌｅ）、ウコン（ｃｕｒｃｕｍａ）、ミシマサイコ（ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ）、リコリス（ｌｉｃｏｒｉｃｅ）、サルビア（ｓａｌｖｉａ）、クワ（ｍｏｒｕｓ）、ケンポナシ（ｈｏｖｅｎｉａ）、キンミズヒキ（ａｇｒｉｍｏｎｙ）、ハリグワ（ｃｕｄｒａｎｉａ）、ライセウム（ｌｙｃｅｕｍ）、ミカン（ｃｉｔｒｕｓ）、サクラ（ｐｒｕｎｕｓ）、イエローウメ（ｙｅｌｌｏｗ ｍｕｍｅ）、韓国海苔（Ｋｏｒｅａ ｇｉｍ）、タンポポ（ｄａｎｄｅｌｉｏｎ）、ブドウ（ｖｉｔｉｓ）、ブドウ種子（ｇｒａｐｅ ｓｅｅｄ）、キイチゴ（ｒｕｂｕｓ）、ツバキ（ｃａｍｅｌｌｉａ）、緑茶（ｇｒｅｅｎ ｔｅａ）、オキアミ油（ｋｒｉｌｉ ｏｉｌ）、酵母（ｙｅａｓｔ）、大豆（ｓｏｙ ｂｅａｎ）の植物粉末または植物抽出物；単離され濃縮されたシリマリン（ｓｉｌｙｍａｒｉｎｓ）、フラボノイド（ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ）、リン脂質、チオ類、ピクノジェノール、ゼラチン、大豆レシチン、膵酵素；天然または合成のＮ－アセチル－システイン、タウリン、リボフラビン、ナイアシン、ピリドキシン、葉酸、カロテン、ビタミンＡ、ビタミンＢ２、Ｂ６、Ｂ１６、ビタミンＣ、ビタミンＥ、グルタチオン、分枝鎖アミノ酸、セレン、銅、亜鉛、マンガン、コエンザイムＱ１０、Ｌ－アルギニン、Ｌ－グルタミン、ホスファチジルコリン、またはこれらの組み合わせを含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項23】

組成物が、医薬として許容されるか、または栄養補助食品として許容される担体、希釈剤または賦形剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項24】

組成物が、医薬として許容されるか、または栄養補助食品として許容される担体、希釈剤または賦形剤をさらに含む、請求項２に記載の組成物。

【請求項25】

組成物が、植物抽出物の混合物の約０．５重量パーセント（ｗｔ％）から約９０ｗｔ％の活性成分を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項26】

組成物が、植物抽出物の混合物の約０．５重量パーセント（ｗｔ％）から約９０ｗｔ％の活性成分を含む、請求項２に記載の組成物。

【請求項27】

組成物が、錠剤、硬質カプセル、軟質ゲルカプセル、粉末、顆粒、液体、チンキ剤、小袋、そのまま飲める液剤またはトローチ剤として配合されている、請求項２５に記載の組成物。

【請求項28】

組成物が、錠剤、硬質カプセル、軟質ゲルカプセル、粉末、顆粒、液体、チンキ剤、小袋、そのまま飲める液剤またはトローチ剤として配合されている、請求項２６に記載の組成物。

【請求項29】

組成物が、動物の体重１ｋｇ当たり０．０１から５００ｍｇの用量で投与される、請求項１に記載の組成物。

【請求項30】

組成物が、動物の体重１ｋｇ当たり０．０１から５００ｍｇの用量で投与される、請求項２に記載の組成物。

【請求項31】

医薬組成物であって、哺乳動物の肝機能を維持し、肝細胞の損傷を最小化し、健康な肝臓を促進し、肝臓の酸化防止の完全性を保護し、毒素を中和し、肝臓の健康に影響を及ぼすフリーラジカルの作用を減少させ、反応性酸素種を捕捉し、酸化ストレスを減らし、毒性代謝物の生成を防ぎ、肝臓の解毒能力および／または機能を改善し、肝臓を洗浄し、肝臓の構造を回復し、肝臓において肝細胞を毒素から保護し、肝臓の血流および循環を助け、肝機能を補助し、肝臓を強化し、鎮静し、肝臓を沈静化し、正常化し、肝臓の痛みを緩和し、有害な化学物質および有機体を追い出し、肝臓の代謝過程を補助し、肝臓の不快感を緩和し、脂肪肝を緩和し、肝臓の解毒能力を改善し、肝臓の酵素を低減し、天然酸化剤を与え、ＳＯＤを増加させ、ＧＳＨを増加させ、肝細胞の過酸化を低減し、脂肪酸の蓄積を低減し、健康な抗炎症過程を維持し、肝臓の免疫機能を改善し、肝細胞の再生を促進し、肝臓再生機能を改善し、胆汁放出を刺激し、健康な胆汁の流れを促進し、肝臓を若返らせ、栄養過多、働き過ぎ、飲み過ぎ、加齢などから肝臓を保護するためのものであり、医薬組成物が、請求項１に記載の組成物を有効成分として含有する、医薬組成物。

【請求項32】

医薬組成物であって、哺乳動物の肝機能を維持し、肝細胞の損傷を最小化し、健康な肝臓を促進し、肝臓の酸化防止の完全性を保護し、毒素を中和し、肝臓の健康に影響を及ぼすフリーラジカルの作用を減少させ、反応性酸素種を捕捉し、酸化ストレスを減らし、毒性代謝物の生成を防ぎ、肝臓の解毒能力および／または機能を改善し、肝臓を洗浄し、肝臓の構造を回復し、肝臓において肝細胞を毒素から保護し、肝臓の血流および循環を助け、肝機能を補助し、肝臓を強化し、鎮静し、肝臓を沈静化し、正常化し、肝臓の痛みを緩和し、有害な化学物質および有機体を追い出し、肝臓の代謝過程を補助し、肝臓の不快感を緩和し、脂肪肝を緩和し、肝臓の解毒能力を改善し、肝臓の酵素を低減し、天然酸化剤を与え、ＳＯＤを増加させ、ＧＳＨを増加させ、肝細胞の過酸化を低減し、脂肪酸の蓄積を低減し、健康な抗炎症過程を維持し、肝臓の免疫機能を改善し、肝細胞の再生を促進し、肝臓再生機能を改善し、胆汁放出を刺激し、健康な胆汁の流れを促進し、肝臓を若返らせ、栄養過多、働き過ぎ、飲み過ぎ、加齢などから肝臓を保護するためのものであり、医薬組成物が、請求項２に記載の組成物を有効成分として含有する、医薬組成物。

【請求項33】

肝障害または肝疾患が、ウイルス性肝炎、アルコール性肝炎、自己免疫性肝炎、アルコール性肝疾患、脂肪肝疾患、脂肪症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪肝疾患、薬物誘発性肝疾患、肝硬変、線維症、肝不全、薬物誘発性肝不全、メタボリックシンドローム、肝細胞癌、胆管癌、原発性胆汁性肝硬変、毛細胆管、ジルベール症候群、黄疸、または他の肝毒性に関連する徴候であり、一般的に、患者に対して受け入れられる毒性または任意の他の肝臓に関連する徴候を伴うもの、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項３１に記載の医薬組成物。

【請求項34】

肝障害または肝疾患が、ウイルス性肝炎、アルコール性肝炎、自己免疫性肝炎、アルコール性肝疾患、脂肪肝疾患、脂肪症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪肝疾患、薬物誘発性肝疾患、肝硬変、線維症、肝不全、薬物誘発性肝不全、メタボリックシンドローム、肝細胞癌、胆管癌、原発性胆汁性肝硬変、毛細胆管、ジルベール症候群、黄疸、または他の肝毒性に関連する徴候であり、一般的に、患者に対して受け入れられる毒性または任意の他の肝臓に関連する徴候を伴うもの、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項３２に記載の医薬組成物。

【請求項35】

請求項１に記載の組成物を有効量投与することを含む、哺乳動物の肝機能を維持し、肝細胞の損傷を最小化し、健康な肝臓を促進し、肝臓の酸化防止の完全性を保護し、毒素を中和し、肝臓の健康に影響を及ぼすフリーラジカルの作用を減少させ、反応性酸素種を捕捉し、酸化ストレスを減らし、毒性代謝物の生成を防ぎ、肝臓の解毒能力および／または機能を改善し、肝臓を洗浄し、肝臓の構造を回復し、肝臓において肝細胞を毒素から保護し、肝臓の血流および循環を助け、肝機能を補助し、肝臓を強化し、鎮静し、肝臓を沈静化し、正常化し、肝臓の痛みを緩和し、有害な化学物質および有機体を追い出し、肝臓の代謝過程を補助し、肝臓の不快感を緩和し、脂肪肝を緩和し、肝臓の解毒能力を改善し、肝臓の酵素を低減し、天然酸化剤を与え、ＳＯＤを増加させ、ＧＳＨを増加させ、肝細胞の過酸化を低減し、脂肪酸の蓄積を低減し、健康な抗炎症過程を維持し、肝臓の免疫機能を改善し、肝細胞の再生を促進し、肝臓再生機能を改善し、胆汁放出を刺激し、健康な胆汁の流れを促進し、肝臓を若返らせ、栄養過多、働き過ぎ、飲み過ぎ、加齢などから肝臓を保護するための方法。

【請求項36】

請求項２に記載の組成物を有効量投与することを含む、哺乳動物の肝機能を維持し、肝細胞の損傷を最小化し、健康な肝臓を促進し、肝臓の酸化防止の完全性を保護し、毒素を中和し、肝臓の健康に影響を及ぼすフリーラジカルの作用を減少させ、反応性酸素種を捕捉し、酸化ストレスを減らし、毒性代謝物の生成を防ぎ、肝臓の解毒能力および／または機能を改善し、肝臓を洗浄し、肝臓の構造を回復し、肝臓において肝細胞を毒素から保護し、肝臓の血流および循環を助け、肝機能を補助し、肝臓を強化し、鎮静し、肝臓を沈静化し、正常化し、肝臓の痛みを緩和し、有害な化学物質および有機体を追い出し、肝臓の代謝過程を補助し、肝臓の不快感を緩和し、脂肪肝を緩和し、肝臓の解毒能力を改善し、肝臓の酵素を低減し、天然酸化剤を与え、ＳＯＤを増加させ、ＧＳＨを増加させ、肝細胞の過酸化を低減し、脂肪酸の蓄積を低減し、健康な抗炎症過程を維持し、肝臓の免疫機能を改善し、肝細胞の再生を促進し、肝臓再生機能を改善し、胆汁放出を刺激し、健康な胆汁の流れを促進し、肝臓を若返らせ、栄養過多、働き過ぎ、飲み過ぎ、加齢などから肝臓を保護するための方法。

【請求項37】

肝障害または肝疾患が、ウイルス性肝炎、アルコール性肝炎、自己免疫性肝炎、アルコール性肝疾患、脂肪肝疾患、脂肪症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪肝疾患、薬物誘発性肝疾患、肝硬変、線維症、肝不全、薬物誘発性肝不全、メタボリックシンドローム、肝細胞癌、胆管癌、原発性胆汁性肝硬変、毛細胆管、ジルベール症候群、黄疸、または他の肝毒性に関連する徴候であり、一般的に、患者に対して受け入れられる毒性または任意の他の肝臓に関連する徴候を伴うもの、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項３５に記載の方法。

【請求項38】

肝障害または肝疾患が、ウイルス性肝炎、アルコール性肝炎、自己免疫性肝炎、アルコール性肝疾患、脂肪肝疾患、脂肪症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪肝疾患、薬物誘発性肝疾患、肝硬変、線維症、肝不全、薬物誘発性肝不全、メタボリックシンドローム、肝細胞癌、胆管癌、原発性胆汁性肝硬変、毛細胆管、ジルベール症候群、黄疸、または他の肝毒性に関連する徴候であり、一般的に、患者に対して受け入れられる毒性または任意の他の肝臓に関連する徴候を伴うもの、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項３６に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本米国特許出願は、「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｌｉｖｅｒ Ｈｅａｌｔｈ（肝臓の健康のための組成物および方法）」と題する２０１５年７月１５日に出願された米国仮特許出願第６２１９２７１１号、および「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ，ａｎｄ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｄ Ｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇ ｔｈｅ Ｈｅａｌｔｈ ｏｆ ｔｈｅ Ｌｉｖｅｒ（肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物、方法および医薬組成物）」と題する２０１６年７月１２日に出願された米国特許出願（Ｕｔｉｌｉｔｙ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）第１５２０８０７５号に対する優先権を主張し、これらは所有者が共通し、全体的に本明細書に参考として組み込まれる。

【0002】

本主題の分野は、肝臓の健康管理に有用な化合物および開示された化合物の立体異性体、医薬として許容される塩または栄養補助食品として許容される塩、互変異性体、グリコシドおよびプロドラッグを含む組成物、肝臓の健康を改善し、維持する組成物および関連する方法である。

【背景技術】

【0003】

肝臓は、さまざまな内因性および外因性の有害物質の代謝および解毒において中心的な役割を果たす重要な臓器である。５００を超える化学反応が肝臓で起こると考えられている。さまざまな生体異物や外来化学物質が肝毒性を引き起こすことが知られているが、特に、アセトアミノフェン（ｎ－アセチル－ｐ－アミノフェノールまたはＡＰＡＰ）と四塩化炭素（ＣＣｌ_４）は、同様の作用機序を有し、ヒト型の肝臓毒性を模倣する動物モデルを開発するために一般的に利用されている。血清ホモジネートまたは肝臓ホモジネートに由来するバイオマーカーの部位は、肝臓の健康状態をレビューしおよび／または分析するために使用されており、正常範囲から外れた変化は、臓器に対する傷害の徴候と考えられる。これらのバイオマーカーの中で、最もよく用いられるのは、ＡＬＴ（アラニンアミノトランスフェラーゼ）、ＡＳＴ（アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ）、ＭＤＡ（マロンジアルデヒド）、ＧＳＨ（グルタチオン）、ＳＯＤ（スーパーオキシドジスムターゼ）、ｃ－Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）、ＧＳＨ－Ｐｘ（グルタチオンペルオキシダーゼ）、ＣＡＴ（カタラーゼ）およびＴＮＦ－アルファ（腫瘍壊死因子－α）である。ＡＳＴ、ＡＬＴ、総ビリルビン、コンジュゲートビリルビンおよび非コンジュゲートビリルビン、胆汁酸、総タンパク質、アルブミン、グロブリンおよびアルカリホスファターゼなどの肝パネルは、肝臓の健康のための標準的なスクリーニング方法として使用されてきた。ＡＬＴおよびＡＳＴは肝臓障害に対して非特異的であると認識されているが、ＡＬＴは肝臓に対して相対的特異性を示している。例えば、ＡＳＴは、肝臓（９０００：１）対筋肉（５２００：１）の由来比を有する。これに対し、ＡＬＴは、肝臓（７６００：１）対筋肉（７５０：１）の由来比を有する。総ＡＳＴおよびＡＬＴの半減期は、それぞれ１７±５時間および４７±１０時間である。ＡＬＴは、室温で３日間、冷蔵庫で３週間、全血中で２４時間安定である。しかし、ＡＬＴは、凍結と解凍の繰り返しにより急速に劣化する。血清ＡＬＴは、我々の研究における植物抽出物の効力スクリーニングに用いられた。

【0004】

ＡＰＡＰは、治療量で非常に安全で効果的な鎮痛薬であり、解熱薬である。ＡＰＡＰは、米国において急性肝不全の最多原因である。ＡＰＡＰにより誘発される肝毒性は、臨床的に関連性が高く、よく研究されており、ｉｎ ｖｉｖｏで単回投与により迅速に誘発させることができ、植物療法の潜在的な肝臓保護効果を評価する際の従来型モデルとなっている。

【0005】

ＡＰＡＰにより誘発される細胞死は、細胞の生存機能を停止させる１回の悲劇的事象によって引き起こされるのではなく、反応性代謝物形成およびミトコンドリア機能不全の開始から始まる一連の事象を誘発し、これがＪＮＫ経路によって増幅され、最終的に、ミトコンドリアの機能消失と、重大なＤＮＡ分解が起こり、細胞壊死を引き起こす。

【0006】

ＡＰＡＰの毒性は、非常に複雑な作用機序の経路で起こる。既に確立されているように、ＡＰＡＰにより誘発される細胞死の細胞内シグナル伝達機構は、投与量のごく一部が、Ｐ４５０酵素によってＣｙｐ ２ｅ１および１ａ２（Ｚａｈｅｒら、１９９８）からｎ－アセチル－ｐ－ベンゾキノンイミン（ＮＡＰＱＩ）へと代謝されることによって開始される。通常の条件下では、この反応性の高い代謝物はＧＳＨによって無毒化されるが、広範な肝ＧＳＨ枯渇を引き起こし（Ｍｉｔｃｈｅｌｌら、１９７）、このことは、過剰服用時に重要となる。同時に、量が増加したＮＡＰＱＩがタンパク質のスルフヒドリル基と反応し、細胞タンパク質の共有結合による付加を引き起こす（Ｊｏｌｌｏｗら、１９７３）。興味深いことに、研究は、細胞内の全タンパク質結合がミトコンドリア内の付加物ほど重要ではないことを示している（ＴｉｒｍｅｎｓｔｅｉｎおよびＮｅｌｓｏｎ、１９８９；Ｑｉｕら、２００１）。ミトコンドリアのタンパク質結合は、ミトコンドリア酸化ストレスの引き金となり（Ｊａｅｓｃｈｋｅ、１９９０）、これにより、アポトーシスシグナル調節キナーゼ１（Ｎａｋａｇａｗａら、２００８）およびｃ－Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）（Ｈａｎａｗａら、２００８）の活性化、ミトコンドリアＪＮＫ転座によるミトコンドリア酸化ストレスの増幅とペルオキシ亜硝酸形成（Ｓａｉｔｏら、２０１０ａ）が生じる。広範な酸化ストレスは、最終的に、膜電位の崩壊を伴うミトコンドリアにおける膜透過性遷移（ＭＰＴ）孔の開口の引き金となり（Ｋｏｎら、２００４；Ｍａｓｕｂｕｃｈｉら、２００５；Ｒａｍａｃｈａｎｄｒａｎら、２０１１ａ；ＬｏｇｕｉｄｉｃｅおよびＢｏｅｌｓｔｅｒｌｉ、２０１１）、その後、ミトコンドリアからのエンドヌクレアーゼＧおよびアポトーシス誘発因子（ＡＩＦ）といった膜間タンパク質の放出が続く（Ｋｏｎら、２００４；Ｂａｊｔら、２００８）。エンドヌクレアーゼＧおよびＡＩＦの両方が核に移行し、ＤＮＡ断片化を引き起こし（Ｃｏｖｅｒら、２００５；Ｂａｊｔら、２００６、２０１１）、最終的に細胞死が起こる。ＡＴＰ枯渇および核分解を伴うミトコンドリア膜電位の崩壊は、細胞壊死につながる重要な事象である。従って、肝臓保護のための治療的介入を設計する際にこれらの機構を遮断することができる複数の干渉点が存在する。

【0007】

モデルの病理学的過程の時系列を知ることにより、治療的介入のための指針が得られる。酸化ストレスおよび無菌性炎症は、ＡＰＡＰ毒性において重要な役割を果たすが、モデルの病態生理学は、ＡＰＡＰ毒性の後、０から２時間までの間の代謝活性化、最初の３０分以内のＧＳＨの枯渇、２から１２時間までの間の細胞死の細胞内機構、６から２４時間の時間枠での炎症応答、２４から７２時間の時間枠での再生を含む一連の事象によって特徴づけられる（Ｊａｅｓｃｈｋｅら、２０１２ａ）。

【0008】

上述のように、ＡＰＡＰの過剰服用は、ヒトにおいて、タンパク質付加物の形成（Ｄａｖｅｒｎら、２００６；Ｊａｍｅｓら、２００９）、細胞死を引き起こすミトコンドリア損傷および核ＤＮＡ断片化（ＭｃＧｉｌｌら、２０１２ａ）によって特徴づけられる重篤な肝臓毒性を引き起こすことがある。従って、肝臓保護のために植物抽出物を試験する場合に、類似の病態生理学的特徴を共有することができる動物モデルを利用することが望ましい。従って、マウスが好ましいモデルである。ｉｎ ｖｉｖｏ実験において、その損傷が、機構と用量依存性の両方においてヒトの病態生理に最もよく似ているからである。実際、マウスとヒトの間のＡＰＡＰ肝毒性の主な有意差は、ＡＬＴピークが曝露後６から１２時間に存在するマウスと比較して、ヒトにおいて曝露後２４から４８時間にＡＬＴピークを示すという、ヒトの方が毒性が遅れてやってくることであることが示唆されている（Ｌａｒｓｏｎ、２００７）。この差は、マウスとヒト２種間の吸収の違いのためであると部分的には説明することができる。対照的に、ラットは、天然産物の試験では一般的であるが、ほとんどのラット株はＡＰＡＰ毒性に対してほとんど感受性がないため、不十分なモデルである（Ｍｉｔｃｈｅｌｌら、１９７３；ＭｃＧｉｌｌら、２０１２ｂ）。１ｇ／ｋｇ以上の高用量であっても、ＡＰＡＰはほとんどの場合、関連する肝障害を引き起こさない（Ｊａｅｓｃｈｋｅら、２０１３）。また、ＧＳＨ枯渇とタンパク質付加物を測定することはできるものの、マウスと比較してラット肝臓ミトコンドリア中の付加物は少なく、十分なミトコンドリア機能不全およびその後の壊死細胞死を引き起こす増幅事象を開始させるには不十分なようである（ＭｃＧｉｌｌら、２０１２ｂ）。マウスとラット２種間のこれらの基本的な違いは、植物療法の評価中に反映されてきた。例えば、ラットの研究では、３ｇ／ｋｇのＡＰＡＰ投与量により、血漿ＡＬＴレベルがベースラインと比較して約３倍に上昇し、植物療法はこの中程度の肝臓損傷を３３％軽減した（Ａｊｉｔｈら、２００７）。このラットモデルにおける組織学的変化はごくわずかであり、検出するのは困難であった。一方、マウスの研究では、３００ｍｇ／ｋｇのＡＰＡＰ投与後のＡＬＴ上昇は、ベースラインの６０倍を超え、植物療法による低下は７５％であった（Ｗａｎら、２０１２）。ＡＰＡＰ毒性によって引き起こされる組織学的変化と、薬物の保護効果は、容易に観察された。

【0009】

使用法が制限されているハロゲン化アルカンＣＣｌ_４は、よく知られた肝臓毒であり、広範囲の実験動物において急性毒性肝障害を誘発するために広く使用されている。人々は、職場環境や、汚染された飲料水などの環境汚染からＣＣｌ_４に曝されている。それにも関わらず、この化学物質は、脂肪変性、線維症、肝細胞死および発癌性のような肝毒性作用の作用機序を解明するためのモデル化合物として今日も重要な役割を果たし続けている（Ｓｌａｔｅｒ １９８１；Ｒｅｎｎｅｒ Ｈ．１９８５；Ｒｅｙｎｏｌｄｓ １９６３）。この化学物質は、主にフリーラジカルの形成および脂質過酸化に関連する、化学的に誘発される古典的な肝臓毒性動物モデルの１つと考えられている。

【0010】

ＡＰＡＰと同様に、ＣＣｌ_４毒性は、主として（ＣＹＰ）２Ｅ１、ＣＹＰ２Ｂ１またはＣＹＰ２Ｂ２といったシトクロムＰ４５０によって開始し（ＮｅｌｓｏｎおよびＨａｒｒｉｓｏｎ、１９８７）、反応性代謝物であるトリクロロメチルフリーラジカル（ＣＣｌ_３－）を生成し、このラジカルが、脂質過酸化を開始させ、最終的に、反応性酸素種（ＲＯＳ）の過剰産生および肝細胞傷害を引き起こすことがある（Ｐｏｙｅｒら、１９８０；Ａｌｂａｎｏら、１９８２）。その過程で、これらのラジカルは、細胞分子（核酸、タンパク質および脂質）に結合し、脂質代謝などの重要な細胞の処理過程を妨害し、脂肪変性（脂肪症）およびこれらの高分子への直接的損傷といった結末を引き起こす可能性がある（Ｗｅｄｄｌｅら、１９７６）。これらのラジカルは、酸素と反応して、高反応性種であるトリクロロメチルペルオキシラジカルＣＣｌ_３ＯＯ－（反応性の高い種）を形成することもある。いったん生成されると、脂質化酸化の連鎖反応が開始し、多価不飽和脂肪酸、特に、リン脂質と関連する多価不飽和脂肪酸を攻撃し、破壊する。この反応は、ミトコンドリア、小胞体および原形質膜の透過性に影響を及ぼし、その結果細胞のカルシウム隔離および恒常性が失われ、その後の細胞損傷に大きく寄与し得る。この観点で、酸化防止剤およびラジカル捕捉剤は、脂質過酸化の連鎖反応を破壊することによって、ＣＣｌ_４により誘発される損傷から肝細胞を保護するために、また、ＣＣｌ_４毒性の機構を研究するために使用されてきた（Ｃｈｅｅｓｅｍａｎら、１９８７）。分子レベルで、ＣＣｌ_４は、細胞において、ＴＮＦ－α（Ｃｚａｊａら、１９９５）、一酸化窒素（ＮＯ）（Ｃｈａｍｕｌｉｔｒａｔら、１９９４，１９９５）および形質転換成長因子（ＴＧＦ）を活性化し（Ｌｕｃｋｅｙら、２００１）、細胞を主に破壊または線維化の方向に向かわせるように見える過程が進む。これらのことは、抗炎症活性を有する植物抽出物が、肝臓保護において潜在的な用途を有する可能性があることを示唆している。大量のＣＣｌ_４の急性投与は重篤な壊死を引き起こすが、低用量の慢性投与は肝線維症を誘発するために頻繁に使用される。

【0011】

酸化ストレスは、フリーラジカルの生成と、さまざまな還元性および捕捉性の内因性酸化防止剤による防御ネットワークとの相互作用によってフリーラジカルの有害な影響を打ち消すか、または中和する体内固有の能力との均衡が崩れることである。体内の酸化防止剤による防御システムによる適切な適応がない場合には、反応性酸化種の蓄積により、ストレスに敏感な細胞内シグナル伝達経路の活性化が起こり、ひいては、壊死を引き起こす細胞損傷を促進するだろう。酸化ストレスによる損傷は、システムとして体全体に影響を及ぼすが、アルコールなどの有害な毒素を除去して代謝させるための一次解毒が行われる肝臓など生命維持に関わる臓器が関与する場合には、その影響はさらに有害なものとなる。結果として、アルコールおよびその一次代謝物であるアセトアルデヒドが、肝臓の酸化防止剤による防御システムを変えてしまう反応性酸素種（ＲＯＳ）およびヒドロキシルラジカル（ＯＨ）を生成するため、肝臓は、アルコールにより誘発される損傷を受けやすい。脂肪肝、肝炎、線維症および肝硬変のような最も一般的な病理学的状態は、アルコールに繰り返し曝露した結果、アルコールに関連する肝障害で観察される。これらの結果は、細胞脂質、タンパク質およびＤＮＡの酸化を伴い、複数の実験動物で証明されている（ＷｕおよびＣｅｄｅｒｂａｕｍ、２００３）。ここでは、ＡＰＡＰなどの臨床的な意味合いを持つ最も頻繁に使用される動物モデルを使用し、古典的なＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルを用いた知見を確認した。肝毒性を誘発するために使用される化学物質に関わらず、ＡＰＡＰモデルとＣＣｌ_４モデルは、両方とも、タンパク質酸化、脂質過酸化およびＤＮＡ損傷を引き起こす過剰な中間代謝物によって生成される反応性酸素種によって誘発される酸化ストレスにおいて、重要な過程を共有する。

【0012】

この目的のために、肝臓を治療し、肝臓の健康を維持するように設計された組成物、医薬組成物および関連する方法を開発し、製造し、利用することが望ましい。理想的な化合物、医薬組成物および組成物は、（１）哺乳動物の肝細胞の損傷を治療または予防すること；（２）肝臓の健康を促進すること；（３）哺乳動物における解毒および酸化防止の肝臓酵素を保存すること；（４）哺乳動物において肝臓解毒能力を増加させること；（５）哺乳動物における肝疾患を治療または予防すること；（６）哺乳動物における肝臓の炎症を改変すること；（７）肝臓再生機能を改善することのうち、任意の１つ以上を含む治療を行うのに十分であろう。理想的な化合物および組成物は、少なくとも１種の植物抽出物から誘導されてもよく、または少なくとも１種の植物抽出物を含んでいてもよく、植物抽出物は、ある成分を豊富に含んでいてもよく、または豊富に含んでいなくてもよい。この開発の一環として、検討対象の化合物および組成物を試験するために、頻繁に用いられる受け入れ可能なモデルを利用することが理想的であろう。また、肝臓分解の機構における幾つかの点を遮断し、これらの結果を研究することによって、肝臓の健康のための治療的介入を確実に設計することが望ましいであろう。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0013】

植物抽出物の混合物を含み、この植物抽出物が、少なくとも１種のアルテミシア抽出物、少なくとも１種のアロエゲル粉末および少なくとも１種のシザンドラ抽出物を含む、肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物および方法が開示される。

【0014】

植物抽出物の混合物を含み、この植物抽出物が、少なくとも１種のポリマーまたはバイオポリマーを豊富に含む少なくとも１種のアルテミシア抽出物、少なくとも１種のクロモンを豊富に含む少なくとも１種のアロエゲル粉末および少なくとも１種のリグナンおよび有機酸を豊富に含む少なくとも１種のシザンドラ抽出物を含む、肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物および方法が開示される。

【課題を解決するための手段】

【0015】

哺乳動物の肝機能を維持し、肝細胞の損傷を最小化し、健康な肝臓を促進し、肝臓の酸化防止の完全性を保護し、毒素を中和し、肝臓の健康に影響を及ぼすフリーラジカルの作用を減少させ、反応性酸素種を捕捉し、酸化ストレスを減らし、毒性代謝物の生成を防ぎ、肝臓の解毒能力および／または機能を改善し、肝臓を洗浄し、肝臓の構造を回復し、肝臓において肝細胞を毒素から保護し、肝臓の血流および循環を助け、肝機能を補助し、肝臓を強化し、鎮静し、肝臓を沈静化し、正常化し、肝臓の痛みを緩和し、有害な化学物質および有機体を追い出し、肝臓の代謝過程を補助し、肝臓の不快感を緩和し、脂肪肝を緩和し、肝臓の解毒能力を改善し、肝臓の酵素を低減し、天然酸化剤を与え、ＳＯＤを増加させ、ＧＳＨを増加させ、肝細胞の過酸化を低減し、脂肪酸の蓄積を低減し、健康な抗炎症過程を維持し、肝臓の免疫機能を改善し、肝細胞の再生を促進し、肝臓再生機能を改善し、胆汁放出を刺激し、健康な胆汁の流れを促進し、肝臓を若返らせるなどのための医薬組成物および方法も開示され、ここで、医薬組成物は、検討対象の組成物を有効成分として含有する。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ ７０％エタノール抽出物のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。

【発明を実施するための形態】

【0017】

簡潔には、本開示は、開示される化合物の立体異性体、医薬として許容される塩または栄養補助食品として許容される塩、互変異性体、グリコシドおよびプロドラッグを含む、肝臓の健康管理に有用な化合物および組成物、ならびに肝臓の健康を改善する関連する方法に関する。

【0018】

検討対象の化合物および組成物は、少なくとも１種の植物抽出物から誘導されるか、または少なくとも１種の植物抽出物を含み、植物抽出物は、ある成分を豊富に含んでいてもよく、または豊富に含んでいなくてもよい。この開発の一部として、検討対象の化合物および組成物を試験するために、頻繁に用いられる受け入れ可能なモデルを利用した。これに加え、肝臓の健康の治療的介入は、肝臓分解の機構における幾つかの点を遮断し、これらの結果を研究することによって設計された。検討対象の化合物、医薬組成物および組成物は、（１）哺乳動物の肝細胞の損傷を治療または予防すること；（２）肝臓の健康を促進すること；（３）哺乳動物における解毒および酸化防止の肝臓酵素を保存すること；（４）哺乳動物において肝臓解毒能力を増加させること；（５）哺乳動物における肝疾患を治療または予防すること；（６）哺乳動物における肝臓の炎症を改変すること；（７）肝臓再生機能を改善することのうち、任意の１つ以上を含む治療を行うのに十分である。

【0019】

具体的には、植物抽出物の混合物を含み、この植物抽出物が、少なくとも１種のアルテミシア抽出物、少なくとも１種のアロエゲル粉末および少なくとも１種のシザンドラ抽出物を含む、肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物、化合物および方法が開示される。

【0020】

これに加え、植物抽出物の混合物を含み、この植物抽出物が、少なくとも１種のポリマーまたはバイオポリマーを豊富に含む少なくとも１種のアルテミシア抽出物、少なくとも１種のクロモンを豊富に含む少なくとも１種のアロエゲル粉末および少なくとも１種のリグナンおよび有機酸を豊富に含む少なくとも１種のシザンドラ抽出物を含む、肝臓の治療および肝臓の健康維持のための組成物、化合物および方法が開示される。

【0021】

哺乳動物の肝機能を維持し、肝細胞の損傷を最小化し、健康な肝臓を促進し、肝臓の酸化防止の完全性を保護し、毒素を中和し、肝臓の健康に影響を及ぼすフリーラジカルの作用を減少させ、反応性酸素種を捕捉し、酸化ストレスを減らし、毒性代謝物の生成を防ぎ、肝臓の解毒能力および／または機能を改善し、肝臓を洗浄し、肝臓の構造を回復し、肝臓において肝細胞を毒素から保護し、肝臓の血流および循環を助け、肝機能を補助し、肝臓を強化し、鎮静し、肝臓を沈静化し、正常化し、肝臓の痛みを緩和し、有害な化学物質および有機体を追い出し、肝臓の代謝過程を補助し、肝臓の不快感を緩和し、脂肪肝を緩和し、肝臓の解毒能力を改善し、肝臓の酵素を低減し、天然酸化剤を与え、ＳＯＤを増加させ、ＧＳＨを増加させ、肝細胞の過酸化を低減し、脂肪酸の蓄積を低減し、健康な抗炎症過程を維持し、肝臓の免疫機能を改善し、肝細胞の再生を促進し、肝臓再生機能を改善し、胆汁放出を刺激し、健康な胆汁の流れを促進し、肝臓を若返らせるなどのための医薬組成物および方法も開示され、ここで、医薬組成物は、検討対象の組成物を有効成分として含有する。

【0022】

酸化ストレスに繰り返し曝露することから肝臓を保護するための効力が高められた化合物および抽出物の独特なブレンドを発見するという概念は、アルコールにより誘発される肝障害、全身疲労および極度の疲労を念頭に置いて開発された。歴史的に、フェノール化合物を豊富に含む幾つかの植物は、一重項酸素およびフリーラジカルの捕捉剤として作用する生体系における酸化防止作用と関連しており、ハーブ医薬品に使用されることが報告されている。効力および安全性データが判明しているこのような植物材料を組み合わせることは、肝臓全体の健康に有利であると考えられる。このように、ＡＰＡＰモデルおよびＣＣｌ_４モデルを利用して、さまざまな植物抽出物をスクリーニングした。その結果、植物抽出物の中には、１つのモデルにおいてのみ血清ＡＬＴの減少を示すものがあったが、考慮すべきリード物質の基準は、両方のモデルにおいて効力を示すことであった。

【0023】

試験した合計３８種の植物材料から、シサンドラ、アルテミシアおよびＮ９３１だけが、両方のモデルにおいてその効力を実証された材料であった。Ｎ９３１は、１から４％のアロエシンと、９６から９９％の２００：１のＡｌｏｅ ｖｅｒａの落ちた内葉の粉末多糖類との独特な組み合わせを含む組成物である。本明細書に開示されるように、検討対象の組成物は、一般に、１種以上のバイオポリマーを豊富に含むアルテミシア抽出物、１種以上のクロモンを豊富に含むアロエゲル粉末および１種以上のリグナンおよび有機酸を豊富に含むシザンドラ抽出物に由来する植物抽出物の混合物を含む。

【0024】

これらの物質について観察された阻害の程度は、モデル間で等しくなかった。例えば、シザンドラ由来の抽出物は、ＡＰＡＰによる肝障害のより高い保護（５００ｍｇ／ｋｇの用量で４８．９％まで）を示すようであったが、同じ用量で、この抽出物は、ＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルにおいてわずか２２．８％の阻害しか示さなかった。一方、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓのようなアルテミシア抽出物は、ＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルにおいて、４００ｍｇ／ｋｇの用量で血清ＡＬＴレベルの４８．０％の低下を示した。対照的に、ＡＰＡＰにより誘発される肝損傷モデルで観察された阻害は、ビヒクル対照と比較した場合、この用量レベルでわずか２４．０％であった。各植物の別々のモデルで観察されたこれらの強い個々の性能を考慮すると、これらの植物抽出物を組み合わせて、両方のモデルにおいてより良い結果を得るという考えが強化された。Ｎ９３１は、両方のモデルにおいて中程度の肝臓保護活性を示した。上に開示されているように、多数の研究が、さまざまな程度の肝臓保護能力を有するシザンドラ、アルテミシアおよびＮ９３１の酸化防止剤活性を実証した。しかしながら、これらの研究は、シザンドラ、アルテミシアおよびＮ９３１の独特な組み合わせとして一般に理解されているＳＡＬを含め、検討され、開示される組成物を得るために、以前に特定の比率で組み合わされることがなかった。

【0025】

興味深い発見は、４００ｍｇ／ｋｇの用量で、シザンドラをＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓと４：１、２：１、１：１、１：２および１：４の比率でブレンドした場合、傷害に対するビヒクル対照と比較して、ＡＰＡＰモデルにおいて２：１（シザンドラがＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓの２倍）、ＣＣｌ_４モデルにおいて１：２（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓがシザンドラの２倍）のみが、血清ＡＬＴレベルをそれぞれ４８．０％および４０．６％低下させたことであった。これらは、両方のモデルにおいて、単一の比率で期待される効力を示すには不十分であり、このことは、組成物を完成させるのに第三成分を必要とすることを示唆している。Ｎ９３１は、両方のモデルにおいて中等度の阻害を示したので、その成分であると考えられた。これらの２つのリードブレンドにＮ９３１を添加すると、両方のモデルにおいて同様の大きさ、即ち、両方のモデルにおいてそれぞれ５２．５％および４６．３％の肝臓保護活性を示し、これは、組成物または化合物の第三成分の結果としての付加価値であると考えられた。これらの３種の植物材料を配合する利点を試験したとき、これらの３種の植物材料の組み合わせから、予想されない相乗効果が観察され、４００ｍｇ／ｋｇの用量で、所与の比率で各構成要素について観察される効果の単純な足し合わせに基づく予想される結果を超えていた。

【0026】

実際に、構成成分のいずれも、シザンドラ、アルテミシアおよびＮ９３１を含む検討対象の化合物または組成物について示された肝臓保護活性と同等の大きさの肝臓保護活性を示さなかった。さらに、ＡＳＴ、ＡＬＴ、胆汁酸、総タンパク質、総ビリルビン、結合ビリルビン、アルブミンおよび総タンパク質を含む肝パネルからのデータは、検討対象の組成物が、損傷を有する動物をビヒクルで治療したコントロール動物と比較して、肝臓保護活性を含むことを示した。肝ホモジネートからのデータとして、ＳＡＬを含む検討対象の組成物は、肝臓スーパーオキシドジスムターゼにおける活性の増加と関連して、枯渇した肝臓グルタチオンも補充した。４Ｓ：８Ａ：３Ｌの検討対象の独特の比率は、複数の動物モデルにおいて、幾つかの酸化ストレスに特異的なバイオマーカーの調節と関連して、肝臓保護活性を示した。

【0027】

本明細書に開示されるように、アルテミシア抽出物とシザンドラ抽出物は、４：１から１：４の重量比でブレンドすることができる。検討対象の幾つかの実施形態では、アロエゲル粉末は、アルテミシア抽出物とシザンドラ抽出物の混合物と約５％から約５０％の重量百分率でさらにブレンドすることができる。他の検討される実施形態では、アルテミシア、シザンドラおよびアロエ葉ゲル粉末の混合物は、それぞれ８：４：３の比で提供されてもよい。

【0028】

シザンドラ抽出物は、標的化合物または組成物の一部として利用することができる、検討対象の成分または構成成分である。シザンドラ抽出物は、チョウセンゴミシ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、シザンドラ・エロンゲイ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｅｌｏｎｇａｔｅ）、シザンドラ・グラブラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｇｌａｂｒａ）、シザンドラ・グラウケスケンス（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｇｌａｕｃｅｓｃｅｎｓ）、シザンドラ・ヘンリー（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｈｅｎｒｙｉ）、シザンドラ・インカーネイト（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｉｎｃａｒｎａｔｅ）、シザンドラ・ランシフォリア（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｌａｎｃｉｆｏｌｉａ）、シザンドラ・ネグレクタ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｎｅｇｌｅｃｔａ）、シザンドラ・ニグラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｎｉｇｒａ）、シザンドラ・プロピンクファ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｐｒｏｐｉｎｑｕａ）、シザンドラ・プベスケンス（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ）、シザンドラ・レパンダ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｒｅｐａｎｄａ）、シザンドラ・ルブリフロラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｒｕｂｒｉｆｌｏｒａ）、シザンドラ・ルブリフォリア（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｒｕｂｒｉｆｏｌｉａ）、シザンドラ・チネンシス（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、シザンドラ・スファエランドラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｓｐｈａｅｒａｎｄｒａ）、シザンドラ・スフェエナンセラ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｓｐｈｅｎａｎｔｈｅｒａ）、シザンドラ・トメテリア（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｔｏｍｅｎｔｅｌｌａ）、シザンドラ・ツバーキュレイト（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｔｕｂｅｒｃｕｌａｔａ）、シザンドラ・ベスティタ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｖｅｓｔｉｔａ）、シザンドラ・ビリジス（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｖｉｒｉｄｉｓ）、シザンドラ・ウイルソニアナ（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｗｉｌｓｏｎｉａｎａ）またはこれらの組み合わせを含む、任意の適切な供給源から得られてもよい。

【0029】

シザンドラ抽出物は、本明細書で検討されるように、１種以上のリグナンおよび有機酸を豊富に含んでいてもよい。シザンドラ抽出物から単離される検討対象のリグナンは、シサンドリン（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ）、デオキシシザンドリン（Ｄｅｏｘｙｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、γ－シザンドリン（ｇａｎｍａ－Ｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、偽γ－シザンドリン（Ｐｓｅｕｄｏ－ｇａｎｍａ－ｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、ウウェイジスＢ（Ｗｕｗｅｉｚｉｓｕ Ｂ）、ウウェイジスＣ（Ｗｕｗｅｉｚｉｓｕ Ｃ）、イソシザンドリン（Ｉｓｏｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、プレゴミシン（Ｐｒｅｇｏｍｉｓｉｎ）、エオシザンドリン（ｅｏｓｃｈｉｚａｎｄｒｉｎ）、シザンドロール（Ｓｃｈｉｚａｎｄｒｏｌ）、シザンドロールＡ（Ｓｃｈｉｚａｎｄｒｏｌ Ａ）、シザンドロールＢ（Ｓｃｈｉｚａｎｄｒｏｌ Ｂ）、シサンテリンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ（Ｓｃｈｉｓａｎｔｈｅｒｉｎ Ａ， Ｂ， Ｃ， Ｄ， Ｅ）、ルブシサンテリン（Ｒｕｂｓｃｈｉｓａｎｔｈｅｒｉｎ）、シサンヘノールアセテート（Ｓｃｈｉｓａｎｈｅｎｏｌ ａｃｅｔｄｔｅ）、シサンヘノールＢ（Ｓｃｈｉｓａｎｈｅｎｏｌ Ｂ）、シサンヘノール（Ｓｃｈｉｓａｎｈｅｎｏｌ）、ゴミシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｊ、Ｎ、Ｏ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｕ（Ｇｏｍｉｓｉｎ Ａ， Ｂ， Ｃ， Ｄ， Ｅ， Ｆ， Ｇ， Ｈ， Ｊ， Ｎ， Ｏ， Ｒ， Ｓ， Ｔ， Ｕ，）、エピゴミシンＯ（Ｅｐｉｇｏｍｉｓｉｎ Ｏ）、アンゲロイルゴミシンＨ、Ｏ、Ｑ、Ｔ（Ａｎｇｅｌｏｙｌｇｏｍｉｓｉｎ）Ｈ、Ｏ、Ｑ、Ｔ、イグロイルゴミシン（ｉｇｌｏｙｌｇｏｍｉｓｉｎ）Ｈ、Ｐ、アンゲロイイソゴミシンＯ（Ａｎｇｅｌｏｙｉｓｏｇｏｍｉｓｉｎ Ｏ）、ベンゾイル－ゴミシンＨ、Ｏ、Ｐ、Ｑ、（Ｂｅｎｚｏｙｌ－ ｇｏｍｉｓｉｎ Ｈ， Ｏ， Ｐ， Ｑ，）ベンゾイル－イソゴミシン（Ｂｅｎｚｏｙｌ－ ｉｓｏｇｏｍｉｓｉｎ）、またはこれらの組み合わせである。シザンドラ抽出物から単離される検討対象の有機酸には、リンゴ酸、クエン酸、シキミ酸またはそれらの組み合わせが挙げられる。

【0030】

アルテミシア抽出物は、標的化合物または組成物の一部として利用することができる、検討対象の成分または構成成分である。アルテミシア抽出物は、アルテミシア・アブシティウム（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｂｓｉｎｔｈｉｕｍ）、アルテミシア・アブロタニウム Ｌ．（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｂｒｏｔａｎｕｍ Ｌ．）、アルテミシア・アフラ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｆｒａ）、アルテミシア・アヌアＬ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｎｕａ Ｌ）、アルテミシア・アーボレーゼンス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ）、アルテミシア・アジアチカ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｓｉａｔｉｃａ）、アルテミシア・カンペストリス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）、アルテミシア・デザーティ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｄｅｓｅｒｔｉ）、アルテミシア・イワヨモギ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｉｗａｙｏｍｏｇｉ）、アルテミシア・ルドビシアーナ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｌｕｄｏｖｉｃｉａｎａ）、アルテミシア・ブルガリス（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、アルテミシア・オランドディカ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｏｅｌａｎｄｉｃａ）、アルテミシア・プリンシプス・パンプ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｐｒｉｎｃｅｐｓ Ｐａｍｐ）、アルテミシア・サクラウム（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓａｃｒｏｒｕｍ）、アルテミシア・スコパリア（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓｃｏｐａｒｉａ）、アルテミシア・ステラリアナ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓｔｅｌｌｅｒｉａｎａ）、アルテミシア・フリジダ・ウィルド（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｆｒｉｇｉｄａ Ｗｉｌｌｄ）、アルテミシア・アンテオイデス・マセフ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｅｔｈｏｉｄｅｓ Ｍａｔｔｆ．）、アルテミシア・アンティフォリア・ウェーバー（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｅｔｈｉｆｏｌｉａ Ｗｅｂｅｒ．）、アルテミシア・フォリエ・ナカイ（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｆａｕｒｉｅｒ Ｎａｋａｉ）、オリガヌム・ブルガレ（Ｏｒｉｇａｎｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、シポノスタジア・チネンシス（Ｓｉｐｈｅｎｏｓｔｅｇｉａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）またはこれらの任意の組み合わせを含む、任意の適切な供給源から得られてもよい。

【0031】

アルテミシア抽出物は、本明細書で検討されるように、１種以上のバイオポリマーを豊富に含んでいてもよい。アルテミシア抽出物から単離された、検討対象のポリマーおよびバイオポリマーは、水、メタノール、エタノール、アルコール、水混合溶媒またはそれらの組み合わせを含む任意の適切な溶媒で抽出される。検討される実施形態では、アルテミシア抽出物は、個々の分子量または分子量の中央値が約５００ｇ／ｍｏｌより大きいバイオポリマーを約０．０１％から約９９．９％含む。検討される実施形態では、アルテミシア抽出物は、個々の分子量または分子量の中央値が約７５０ｇ／ｍｏｌより大きいバイオポリマーを約０．０１％から約９９．９％含む。検討される実施形態では、アルテミシア抽出物は、個々の分子量または分子量の中央値が約１０００ｇ／ｍｏｌより大きいバイオポリマーを約０．０１％から約９９．９％含む。

【0032】

アロエゲル粉末は、別の検討対象の成分または構成成分であり、アロエ・アルボレッセンス（Ａｌｏｅ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ）、アロエ・バーバデンシス（Ａｌｏｅ ｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓ）、アロエ・クレモノフィラ（Ａｌｏｅ ｃｒｅｍｎｏｐｈｉｌａ）、アロエ・フェロックス（Ａｌｏｅ ｆｅｒｏｘ）、アロエ・サポナリア（Ａｌｏｅ ｓａｐｏｎａｒｉａ）、アロエ（Ａｌｏｅ ｖｅｒａ）、アロエベラ・ヴァン・キネンシス（Ａｌｏｅ ｖｅｒａ ｖａｒ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）またはこれらの組み合わせを含め、任意の適切な供給源によって提供されてもよい。

【0033】

アロエゲル粉末は、本明細書で検討されるように、１種以上のクロモンを豊富に含んでいてもよい。検討対象のクロモンは、アロエシン、アロエシノール、アロエレシンＡ、アロエレシンＢ、アロエレシンＣ、アロエレシンＤ、アロエレシンＥまたはこれらの任意の組み合わせを含むか、またはこれらから選択される。検討される実施形態では、少なくとも１種のクロモン組成物は、約０．０１％から約１００％の１種以上のクロモンを含んでいてもよい。幾つかの検討される実施形態では、クロモン組成物は、約１％から約４％のアロエシンを含み、この組成物は本質的にアントロキノンを含まず、アロエゲルが、Ａｌｏｅ ｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓまたはＡｌｏｅ ｖｅｒａから選択される植物から単離され、少なくとも１種のクロモンが、Ａｌｏｅ ｖｅｒａまたはＡｌｏｅ ｆｅｒｏｘ、またはこれらの任意の組み合わせから単離される。

【0034】

検討対象の化合物、医薬組成物および組成物は、少なくとも１種の肝臓保護剤を含んでいてもよく、または追加的に含んでいてもよく、またはこれらからなっていてもよい。幾つかの実施形態では、少なくとも１種の肝臓保護剤は、オオアザミ（ｍｉｌｋ ｔｈｉｓｔｌｅ）、ウコン（ｃｕｒｃｕｍａ）、ミシマサイコ（ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ）、リコリス（ｌｉｃｏｒｉｃｅ）、サルビア（ｓａｌｖｉａ）、クワ（ｍｏｒｕｓ）、ケンポナシ（ｈｏｖｅｎｉａ）、キンミズヒキ（ａｇｒｉｍｏｎｙ）、ハリグワ（ｃｕｄｒａｎｉａ）、ライセウム（ｌｙｃｅｕｍ）、ミカン（ｃｉｔｒｕｓ）、サクラ（ｐｒｕｎｕｓ）、イエローウメ（ｙｅｌｌｏｗ ｍｕｍｅ）、韓国海苔（Ｋｏｒｅａ ｇｉｍ）、タンポポ（ｄａｎｄｅｌｉｏｎ）、ブドウ（ｖｉｔｉｓ）、ブドウ種子（ｇｒａｐｅ ｓｅｅｄ）、キイチゴ（ｒｕｂｕｓ）、ツバキ（ｃａｍｅｌｌｉａ）、緑茶（ｇｒｅｅｎ ｔｅａ）、オキアミ油（ｋｒｉｌｉ ｏｉｌ）、酵母（ｙｅａｓｔ）、大豆（ｓｏｙ ｂｅａｎ）の植物粉末または植物抽出物；単離され濃縮されたシリマリン（ｓｉｌｙｍａｒｉｎｓ）、フラボノイド（ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ）、リン脂質、チオ類、ピクノジェノール、ゼラチン、大豆レシチン、膵酵素；天然または合成のＮ－アセチル－システイン、タウリン、リボフラビン、ナイアシン、ピリドキシン、葉酸、カロテン、ビタミンＡ、ビタミンＢ２、Ｂ６、Ｂ１６、ビタミンＣ、ビタミンＥ、グルタチオン、分枝鎖アミノ酸、セレン、銅、亜鉛、マンガン、コエンザイムＱ１０、Ｌ－アルギニン、Ｌ－グルタミン、ホスファチジルコリンなどおよび／またはこれらの組み合わせを含んでいてもよく、またはこれらからなっていてもよい。

【0035】

また、開示された化合物のｉｎ ｖｉｖｏ代謝産物も、本明細書で検討される。このような産物は、主に酵素法に起因して、例えば、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化などから生じてもよい。従って、検討対象の化合物は、検討対象の化合物または組成物を、その代謝物を産生するのに十分な期間、哺乳動物に投与することを含む方法によって産生される化合物である。このような産物は、典型的には、ラット、マウス、モルモット、イヌ、ネコ、ブタ、ヒツジ、ウマ、サルまたはヒトなどの動物に検出可能な用量で本開示の放射性標識された化合物を投与し、代謝が起こるのに十分な時間放置し、次いで、その変換産物を尿、血液または他の生体サンプルから単離することによって同定される。

【0036】

本明細書で使用される場合、「安定な化合物」および「安定な構造」という句は、相互に置き換え可能に使用され、反応混合物から有用な程度の純度までの単離に耐え、配合して有効な治療薬剤とするのに耐えるほど十分に丈夫な化合物を示すために用いられる。

【0037】

本明細書で使用される場合、「哺乳動物」という用語は、ヒト、家畜動物（例えば、実験動物または家庭用ペット（例えば、ラット、マウス、モルモット、ネコ、イヌ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ウサギ、霊長類））、非家畜動物（例えば、野生動物など）を含む。

【0038】

本明細書で使用される場合、「任意要素の」または「場合により」という用語は、相互に置き換え可能に使用されてもよく、その後に記載される要素、構成要素、事象または状況が発生しても発生しなくてもよいことを意味し、その要素、構成要素、事象または状況が起こる場合と、その要素、構成要素、事象または状況が起こらない場合を含む。例えば、「場合により置換されたアリール」は、アリール基が置換されていてもされていなくてもよいことを意味する。言い換えれば、この記載は、置換アリール基および置換基をもたないアリール基の両方を含む。

【0039】

検討対象の化合物、医薬組成物および組成物は、少なくとも１種の医薬として許容される担体か、または栄養補助食品として許容される担体、希釈剤または賦形剤を含むか、追加的に含むか、またはこれらからなっていてもよい。本明細書で使用される場合、「医薬として許容される担体か、または栄養補助食品として許容される担体、希釈剤または賦形剤」という句は、ヒトまたは家畜に使用するために許容されるものとして米国食品医薬品局によって承認されている任意のアジュバント、担体、賦形剤、流動促進剤、甘味剤、希釈剤、防腐剤、色素／着色剤、風味増強剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定化剤、等張剤、溶媒、または乳化剤を含む。

【0040】

検討対象の化合物、医薬組成物および組成物は、少なくとも１種の医薬として許容される塩または栄養補助食品として許容される塩を含んでいてもよく、または追加的に含んでいてもよく、またはこれらからなっていてもよい。本明細書で使用される場合、「医薬として許容される塩または栄養補助食品として許容される塩」という句は、酸付加塩および塩基付加塩の両方を含む。

【0041】

本明細書で使用される場合、「医薬として許容されるか、または栄養補助食品として許容される酸付加塩」という句は、遊離塩基の生物学的有効性および特性を保持し、生物学的に、またはその他の点で望ましくないものではなく、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、酢酸、２，２－ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４－アセトアミド安息香酸、カンファー酸、カンファー－１０－スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、炭酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン－１，２－ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２－オキソ－グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレン－１，５－ジスルホン酸、ナフタレン－２－スルホン酸、１－ヒドロキシ－２－ナフトエ酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、プロピオン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、サリチル酸、４－アミノサリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、酒石酸、チオシアン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、ウンデシレン酸などの有機酸を用いて作られる酸付加塩を指す。

【0042】

本明細書で使用される場合、「医薬として許容されるか、または栄養補助食品として許容される塩基付加塩」という句は、遊離酸の生物学的有効性および特性を保持し、生物学的に、またはその他の点で望ましくないものではない塩基付加塩を指す。これらの塩は、遊離酸に無機塩基または有機塩基を添加することによって調製される。無機塩基から誘導される塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩などが含まれる。特定の実施形態では、無機塩は、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩またはマグネシウム塩である。有機塩基から誘導される塩には、一級、二級および三級のアミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミンおよび塩基性イオン交換樹脂、例えば、アンモニア、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、デアノール、２－ジメチルアミノエタノール、２－ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、ベネタミン、ベンザチン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ－エチルピペリジン、ポリアミン樹脂の塩などが含まれる。特に有用な有機塩基としては、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリンまたはカフェインが挙げられる。

【0043】

多くは、結晶化によって、検討対象の化合物の溶媒和物を生成するか、または検討対象の化合物の溶媒和物を含む。本明細書で使用される場合、「溶媒和物」という用語は、検討対象の化合物、医薬組成物または組成物の１つ以上の分子と、溶媒の１つ以上の分子とを含む凝集物を指す。溶媒は水であってもよく、この場合、溶媒和物は水和物であってもよい。または、溶媒は有機溶媒であってもよい。従って、検討対象の化合物、医薬組成物または組成物は、一水和物、二水和物、ヘミ水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物などおよび対応する溶媒和形態を含む水和物として存在してもよい。検討対象の化合物、医薬組成物または組成物は、真の溶媒和物であってもよいが、他の場合において、検討対象の化合物、医薬組成物または組成物は、単に偶発的に水を保持していてもよく、または水と幾つかの偶発的に付加する溶媒の混合物であってもよい。

【0044】

「医薬組成物」または「栄養補助食品組成物」は、検討対象の化合物、医薬組成物または組成物と、哺乳動物（例えば、ヒト）に対して生物学的に活性な化合物を送達するために当該技術分野で受け入れられている媒体との製剤を指す。例えば、検討対象の医薬化合物、医薬組成物または組成物は、独立した組成物として、または処方薬、店頭（ＯＴＣ）薬、植物薬、ハーブ医薬品、ホメオパシー薬、または政府機関によって審査され、承認された他の形態の医療製品の一成分として配合されるか、または使用されてもよい。例示的な検討対象の栄養補助食品組成物は、独立した組成物として、または食品、新規食品、機能性食品、飲料、バー、食品フレーバー、食品添加物、医療食品、栄養補助サプリメントまたはハーブ製品における栄養成分または生理活性成分として配合されるか、または使用されてもよい。当該技術分野で一般的に受け入れられている媒体には、医薬的として許容されるか、または栄養補助食品として許容される担体、希釈剤または賦形剤の全てが含まれる。

【0045】

本明細書中で使用される場合、「～を豊富に含む」という句は、抽出または他の調製の前に植物材料または他の供給源の重量中に見出される１種以上の活性化合物の量または活性と比較して、１種以上の活性化合物の量または活性が少なくとも約２倍から約１０００倍の植物抽出物または他の調製物を指す。特定の実施形態では、抽出または他の調製の前の植物材料または他の供給源の重量は、乾燥重量、湿った状態での重量、またはそれらの組み合わせであってもよい。

【0046】

本明細書で使用される場合、「主要活性成分」または「主要活性要素」は、少なくとも１つの生体活性を可能にする、植物抽出物または他の調製物中に見出されるか、または植物抽出物または他の調製物中に豊富に含まれる１種以上の活性な検討対象の化合物を指す。特定の実施形態では、豊富に含む抽出物の主要活性成分は、その抽出物中に豊富に含まれた１種以上の活性化合物であろう。一般に、１種以上の主要活性成分は、抽出物の他の成分と比較して、１つ以上の測定可能な生体活性または生体効果の大部分（即ち、５０％を超える。）を直接的または間接的に与えるだろう。特定の実施形態では、主要活性成分は、抽出物の中で重量パーセントでは少量成分である（例えば、抽出物に含まれる構成要素の約５０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、または１％より少ない。）が、それでも望ましい生体活性のほとんどを与えるものであってもよい。主要活性成分を含有する任意の検討対象の組成物は、豊富に含まれる組成物の医薬または栄養補助食品としての活性に寄与してもよく、または寄与しなくてもよいが、主要活性成分のレベルには寄与しない少量の活性成分も含有していてもよく、主要活性成分が存在しない状態では、少量の活性成分は有効ではなくてもよい。

【0047】

本明細書で使用される場合、「有効量」または「治療有効量」という句は、哺乳動物（例えば、ヒト）に投与されると、（１）哺乳動物の肝細胞の損傷を治療または予防すること；（２）肝臓の健康を促進すること；（３）哺乳動物における解毒および酸化防止の肝臓酵素を保存すること；（４）哺乳動物において肝臓解毒能力を増加させること；（５）哺乳動物における肝疾患を治療または予防すること；（６）哺乳動物における肝臓の炎症を改変すること；（７）肝臓再生機能を改善することのうち、任意の１つ以上を含む治療を行うのに十分な、検討対象の化合物、医薬組成物および組成物の量を指す。「治療有効量」を構成する、検討対象の化合物、医薬組成物または組成物の量は、化合物、治療される状態およびその重篤度、投与様式、治療期間、または治療される被験体の体重および年齢に依存して変わるが、当業者であれば、自身の知識およびこの開示を考慮して決定することができる。

【0048】

「サプリメント」は、本明細書で使用される場合、天然の状態または生物学的過程に関連する特定の状態、構造または機能を改善し、促進し、補助し、増加させ、調節し、管理し、制御し、維持し、最適化し、改変し、減らし、阻害するか、または予防する生成物、化合物および／または組成物を指す（即ち、疾患を診断し、治療し、緩和し、治癒し、または予防するためには用いられない。）。特定の実施形態では、サプリメントは、栄養補助サプリメントである。例えば、肝臓の健康に関連する状態に関し、栄養補助サプリメントは、哺乳動物の肝機能を維持し、肝細胞の損傷を最小化し、健康な肝臓を促進し、肝臓の酸化防止の完全性を保護し、毒素を中和し、肝臓の健康に影響を及ぼすフリーラジカルの作用を減少させ、反応性酸素種を捕捉し、酸化ストレスを減らし、毒性代謝物の生成を防ぎ、肝臓の解毒能力および／または機能を改善し、肝臓を洗浄し、肝臓の構造を回復し、肝臓において肝細胞を毒素から保護し、肝臓の血流および循環を助け、肝機能を補助し、肝臓を強化し、鎮静し、肝臓を沈静化し、正常化し、肝臓の痛みを緩和し、有害な化学物質および有機体を追い出し、肝臓の代謝過程を補助し、肝臓の不快感を緩和し、脂肪肝を緩和し、肝臓の解毒能力を改善し、肝臓の酵素を低減し、天然酸化剤を与え、ＳＯＤを増加させ、ＧＳＨを増加させ、肝細胞の過酸化を低減し、脂肪酸の蓄積を低減し、健康な抗炎症過程を維持し、肝臓の免疫機能を改善し、肝細胞の再生を促進し、肝臓再生機能を改善し、胆汁放出を刺激し、健康な胆汁の流れを促進し、肝臓を若返らせるなどのために使用される。特定の実施形態では、栄養補助サプリメントは、食事、食物またはその両方の特別なカテゴリーであり、薬物ではない。

【0049】

「治療する」または「治療」または「軽減する」という用語は、相互に置き換え可能に用いられてもよく、目的とする疾患または状態を有するか、または有する疑いがある哺乳動物（例えば、ヒト）における目的とする疾患または状態の治療としての処置または予防／防止的な処置のいずれかを指し、（ｉ）特に、このような哺乳動物が、その状態になりやすいと診断されているが、まだその状態を有するとは診断されていないときに、疾患または状態が哺乳動物において発生することを防ぐこと；（ｉｉ）疾患または状態を阻害すること、即ちその発症を阻止すること；（ｉｉｉ）疾患または状態を緩和すること、即ち疾患または状態を退行させること；または（ｉｖ）基礎となる疾患または状態に対処することなく、疾患または状態から生じる症状を緩和する（例えば、痛みを和らげ、炎症を軽減し、解毒能力を低下させる。）ことを含む。

【0050】

本明細書で使用される場合、「疾患」および「状態」という用語は、相互に置き換え可能に用いられてもよく、または特定の病状または状態が既知の原因物質を有していなくてもよく（病因がまだ解明されていない。）、従って、疾患として認識されていないが、望ましくない状態または症候群としてのみ認識されており、多かれ少なかれ特異的な一連の症状が医師によって特定されている点で異なっていてもよい。特定の実施形態では、検討対象の化合物、医薬組成物、組成物および方法は、例えば、肝炎、アルコール肝疾患、肝硬変または両方とも治療するために使用される。

【0051】

本明細書で使用される場合、「統計的有意性」とは、スチューデントｔ検定を用いて計算したｐ値が０．０５０以下であることを指し、測定される特定の事象または結果が偶然に生じたとは考えにくいことを示す。

【0052】

本明細書で使用される化学命名プロトコルおよび任意の構造図は、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ Ｖｅｒｓｉｏｎ ９．０７ソフトウェアプログラムまたはＣｈｅｍＤｒａｗ Ｕｌｔｒａ Ｖｅｒｓｉｏｎ １１．０ソフトウェア命名プログラム（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ）を使用する、Ｉ．Ｕ．Ｐ．Ａ．Ｃ．命名システムの改変された形態であり、本開示の化合物は、中心のコア構造（例えば、イミダゾピリジン構造）の誘導体として本明細書で命名される。本明細書において利用される複雑な化学名の場合、置換基は、それが結合する基の前に命名される。例えば、シクロプロピルエチルは、シクロプロピル置換基を有するエチル骨格を含む。

【0053】

特定の実施形態では、検討対象の化合物および組成物（例えば、医薬品、栄養補助食品）は、肝臓の健康を促進し、肝臓の健康を改善し、肝臓の健康を維持し、肝臓の健康を治療または管理し、肝臓の健康を補助し、肝臓のデトックス機能の正常かつ快適な範囲を補助し、肝臓のフリーラジカル排泄能力を改善し、化学物質、薬物、代謝物および生体毒素に由来する有害なフリーラジカルの損傷を減少させ、肝臓の健康に影響を及ぼす酵素を保存し、Ｂ／Ｃ型肝炎ウイルス感染、アルコール摂取、代謝障害、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、アルコール性肝疾患、肝性脳症、肝線維増殖性疾患（肝線維症）、低酸素／再酸素化中の肝細胞傷害、またはこれらの任意の組み合わせ、または本明細書に記載される任意の他の関連する徴候、一般的に、患者に対する許容される毒性を伴うものに起因する、慢性酸化ストレスによって引き起こされる肝臓の損傷から保護するのに十分な量で投与されてもよい。

【0054】

特定の他の実施形態では、検討対象の化合物および組成物（例えば、医薬品、栄養補助食品）は、ウイルス性肝炎、アルコール性肝炎、自己免疫性肝炎、アルコール性肝疾患、脂肪肝疾患、脂肪症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪肝疾患、薬物誘発性肝疾患、肝硬変、線維症、肝不全、薬物誘発性肝不全、メタボリックシンドローム、肝細胞癌、胆管癌、原発性胆汁性肝硬変、毛細胆管、ジルベール症候群、黄疸、または他の肝毒性に関連する徴候、またはこれらの組み合わせであり、一般的に、患者に対して受け入れられる毒性を伴うものを含む肝臓の障害または疾患を治療するのに十分な量で投与されてもよい。

【0055】

検討対象の化合物、薬学的組成物または組成物、またはこれらの医薬として許容される塩または栄養補助食品として許容される塩を、純粋な形態または適切な薬学的組成物または栄養補助組成物の状態で投与することは、同様の用途に役立つような薬剤の許容される投与形態のいずれかによって行われてもよい。検討対象の化合物を、適切な医薬として許容されるか、または栄養補助食品として許容される担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせることによって、検討対象の医薬組成物または栄養補助食品組成物を調製することができ、固体、半固体、液体または気体形態の調製物、例えば錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、液剤、坐剤、注射剤、吸入剤、ゲル、微小球およびエアロゾルへと製剤化されてもよい。このような医薬組成物または栄養補助食品組成物を投与する典型的な経路としては、経口、局所、経皮、吸入、非経口、舌下、頬側、直腸、膣または鼻腔内が挙げられる。

【0056】

「非経口」という用語は、本明細書で使用される場合、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内への注射または注入技術を含む。検討対象の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、組成物を患者に投与する際または投与直後に、そこに含有される活性成分が生物学的に利用可能となるように製剤化される。幾つかの実施形態では、検討対象の組成物および化合物は、投与後に持続放出され得るように設計されてもよく、または製剤化されてもよい。

【0057】

特定の実施形態では、検討対象の組成物は、１つ以上の投薬単位の形態で被験体または患者に投与され、例えば、錠剤が単一投薬単位であってもよく、エアロゾル形態の検討対象の化合物の容器が、複数の投薬単位を保持していてもよい。このような投薬形態を調製する実際の方法は、当業者には公知であるか、または明らかであろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ ａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０００）を参照。投与されるべき検討対象の組成物は、いずれにしても、本開示の教示に従って、目的とする疾患または状態を治療するために、治療有効量の検討対象の化合物、または医薬として許容される塩または栄養補助食品として許容される塩を含有するだろう。

【0058】

検討対象の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、固体または液体の形態であってもよい。一態様では、担体は粒子状であるため、組成物は例えば錠剤または粉末の形態である。担体は、液体であってもよく、組成物は、例えば吸入投与に有用な経口シロップ、注射液またはエアロゾルである。

【0059】

経口投与を意図する場合、医薬組成物または栄養補助食品組成物は、固体形態または液体形態のいずれかであり、半固体、半液体、懸濁物およびゲルの形態は、固体または液体のいずれかと本明細書で考えられる形態の中に含まれる。

【0060】

経口投与のための固体組成物として、医薬組成物または栄養補助食品組成物は、粉末、顆粒、圧縮錠剤、丸剤、カプセル、チューインガム、ウェーハ、バーなどの形態に製剤化することができる。このような固体組成物は、典型的には、１種以上の不活性希釈剤または食用担体を含む。これに加え、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、シクロデキストリン、微結晶性セルロース、トラガカントガムまたはゼラチンなどの結合剤；デンプン、ラクトースまたはデキストリンなどの賦形剤、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、Ｐｒｉｍｏｊｅｌ（Ｒ）、コーンスターチなどのような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｔｅｘ（Ｒ）のような滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素のような流動促進剤；スクロースまたはサッカリンのような甘味剤；ペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジフレーバーのような香味剤；着色剤のうち、１つ以上が存在していてもよい。

【0061】

医薬組成物または栄養補助食品組成物がカプセル、例えばゼラチンカプセルの形態である場合、上述の種類の材料に加えて、ポリエチレングリコールまたは油のような液体担体を含有していてもよい。

【0062】

検討対象の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、液体、例えば、エリキシル、シロップ、ゲル、溶液、エマルションまたは懸濁物の形態であってもよい。液体は、２つの例として、経口投与または注射による送達のためのものであってもよい。経口投与が意図される場合、有用な組成物は、本発明の化合物に加えて、甘味料、防腐剤、色素／着色料および風味増強剤の１つ以上を含有する。注射によって投与されることが意図された組成物において、界面活性剤、防腐剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、バッファー、安定化剤および等張剤の１つ以上が含まれてもよい。

【0063】

検討対象の液体の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、それらが溶液、懸濁物または他の同様の形態であるかどうかに関わらず、以下のアジュバントの１つ以上を含んでいてもよい：滅菌希釈剤、例えば、注射用水、食塩水溶液、例えば、生理食塩水、リンガー溶液、等張性塩化ナトリウム、不揮発性油、例えば、溶媒または懸濁媒体として役立ち得る合成モノグリセリドまたはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンのような抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムのような酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩のようなバッファー、塩化ナトリウムまたはデキストロースのような張度調整剤。非経口製剤は、ガラス製またはプラスチック製のアンプル、使い捨て注射器または複数回投与バイアルに封入することができる。生理食塩水は、一般に有用なアジュバントである。注射用医薬品または栄養補助食品組成物は、無菌である。

【0064】

非経口投与または経口投与のいずれかを目的とする、検討対象の液体医薬組成物または栄養補助食品組成物は、適切な投与量が得られるような量の検討対象の化合物、医薬組成物または組成物を含有すべきである。

【0065】

検討対象の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、局所投与を意図していてもよく、その場合、担体は、溶液、エマルション、クリーム、ローション、軟膏、またはゲル基剤を適切に含んでいてもよい。基剤は、例えば、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、ミツロウ、鉱油、水およびアルコールのような希釈剤、乳化剤および安定剤のうちの１種以上を含んでいてもよい。増粘剤は、局所投与のための医薬組成物または栄養補助食品組成物中に存在していてもよい。経皮投与が意図される場合、組成物は、経皮パッチまたはイオントフォレシス装置を含んでいてもよい。

【0066】

検討対象の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、直腸内で融解し薬物を放出する、例えば坐剤の形態の直腸投与を意図していてもよい。直腸投与のための組成物は、適切な非刺激性賦形剤として油性基剤を含有してもよい。このような基剤としては、ラノリン、カカオバターおよびポリエチレングリコールが挙げられる。

【0067】

検討対象の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、固体または液体の投薬単位の物理的形態を改変するさまざまな材料を含んでいてもよい。例えば、組成物は、活性成分の周囲にコーティングシェルを形成する材料を含んでいてもよい。コーティングシェルを形成する材料は、典型的には不活性であり、例えば、糖、シェラックおよび他の腸溶性コーティング剤から選択することができる。または、活性成分をゼラチンカプセルに入れてもよい。

【0068】

検討対象の固体または液体の形態の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、検討対象の化合物に結合し、それによって化合物の送達を助ける薬剤を含んでいてもよい。この能力において作用し得る適切な薬剤には、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体、タンパク質またはリポソームが含まれる。

【0069】

検討対象の固体または液体の形態の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、例えばバイオアベイラビリティを改善するために粒径を小さくすることを含んでいてもよい。賦形剤の有無に関わらず、組成物中の粉末、顆粒、粒子、微小球などの大きさは、マクロ（例えば目に見える、または少なくとも１００μｍの大きさ）、マイクロ（例えば、約１００μｍから約１００ｎｍの大きさ）、ナノ（例えば、１００ｎｍ以下の大きさであってもよい。）であってもよく、大きさとバルク密度を改善するために、それらの間の任意の大きさまたはそれらの任意の組み合わせを含んでいてもよい。

【0070】

検討対象の医薬組成物または栄養補助組成物は、エアロゾルとして投与することができる投薬単位を含んでいてもよく、またはこのような投薬単位からなっていてもよい。エアロゾルとの用語は、コロイドの性質をもつものから、加圧パッケージからなる系までの範囲のさまざまな系を示すのに使用される。送達は、液化ガスまたは圧縮ガスによって、または活性成分を分配する適切なポンプシステムによって行われてもよい。本開示の化合物のエアロゾルは、活性成分を送達するために、単相系、二相系、または三相系で送達することができる。エアロゾルの送達には、一緒にキットを形成することができる必要な容器、アクチベータ、バルブ、サブコンテナなどが含まれる。当業者は、過度の実験をすることなく、最も適したエアロゾルを決定することができる。

【0071】

検討対象の医薬組成物または栄養補助食品組成物は、医薬分野または栄養補助食品分野で周知の方法論によって調製されてもよい。例えば、注射によって投与されることが意図される医薬組成物または栄養補助食品組成物は、検討対象の化合物と滅菌蒸留水とを、溶液を生成するように組み合わせることによって調製することができる。均質な溶液または懸濁物の生成を容易にするために、界面活性剤を添加してもよい。界面活性剤は、水性送達系における化合物の溶解または均一な懸濁を促進するために、検討対象の化合物と非共有結合的に相互作用する化合物である。

【0072】

検討対象の化合物、組成物および医薬組成物、またはその医薬として許容される塩または栄養補助食品として許容される塩は、治療有効量で投与され、治療有効量は、使用される特定の化合物の活性；化合物の代謝安定性および作用の長さ；患者の年齢、体重、全身の健康状態、性別および食事；投与の様式および時間；排泄率；薬物の組み合わせ；特定の障害または状態の重篤度；治療を受ける被験体を含むさまざまな因子に依存して変わるだろう。

【0073】

検討対象の化合物、組成物および医薬組成物、またはそれらの医薬として許容されるか、または栄養補助食品として許容される誘導体はまた、１種以上の他の治療薬の投与と同時、投与前または投与後に投与されてもよい。このような併用療法は、検討対象の化合物および１種以上のさらなる活性薬剤を含む単一の医薬製剤または栄養補助食品の投与製剤を投与すること、および検討対象の化合物およびそれぞれの活性薬剤をそれぞれ別個の医薬製剤または栄養補助食品製剤で投与することを含む。例えば、検討対象の化合物および別の活性薬剤は、錠剤またはカプセルのような単一の経口投与組成物中で一緒に患者に投与することができ、または各薬剤を別々の経口投与製剤で投与することができる。別個の投与製剤が使用される場合、検討対象の化合物および１種以上のさらなる活性薬剤は、本質的に同じ時期に、即ち同時に、または別々に時間差で、即ち逐次的に投与されてもよい。併用療法は、これら全ての投与計画を含むと理解される。

【0074】

本明細書では、示された式の置換基または変数の組み合わせは、そのような寄与が安定な化合物をもたらす場合にのみ許容されることが理解される。

【0075】

本明細書に記載の方法において、中間体化合物の官能基を適切な保護基で保護する必要があり得ることも、当業者には理解されるであろう。このような官能基には、ヒドロキシ、アミノ、メルカプトおよびカルボン酸が含まれる。ヒドロキシに適した保護基には、トリアルキルシリルまたはジアリールアルキルシリル（例えば、ｔ－ブチルジメチルシリル、ｔ－ブチルジフェニルシリルまたはトリメチルシリル）、テトラヒドロピラニル、ベンジルなどが含まれる。アミノ、アミジノおよびグアニジノに適した保護基には、ｔ－ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルなどが含まれる。メルカプトに適した保護基には、Ｃ（Ｏ）Ｒ”（Ｒ”は、アルキル、アリールまたはアリールアルキルである。）、ｐ－メトキシベンジル、トリチルなどが含まれる。カルボン酸に適した保護基には、アルキル、アリールまたはアリールアルキルエステルが含まれる。保護基は、当業者に知られており、本明細書に記載の標準的な技術に従って付加または除去することができる。保護基の使用は、Ｇｒｅｅｎ，Ｔ．Ｗ．およびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｚ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９９）、第３版、Ｗｉｌｅｙ編集に詳細に記載されており、その全体が参考として本明細書に組み込まれる。当業者には理解されるように、保護基は、Ｗａｎｇ樹脂、Ｒｉｎｋ樹脂または２－クロロトリチルクロライド樹脂などのポリマー樹脂であってもよい。

【0076】

検討対象の化合物のこのような保護された誘導体は、それ自体が薬理活性を有していなくてもよいが、哺乳動物に投与され、その後に体内で代謝され、薬理学的に活性な化合物を形成してもよいことも当業者には理解されるだろう。従って、このような誘導体は、「プロドラッグ」と記載されてもよい。検討対象の化合物の全てのプロドラッグは、本開示の範囲内に含まれる。

【0077】

さらに、遊離塩基または遊離酸の形態で存在する検討対象の化合物は、当業者に知られている方法によって適切な無機または有機の塩基または酸で処理することによって、その医薬として許容されるか、または栄養補助食品として許容される塩に変換することができる。検討対象の化合物の塩は、標準的な技術によってその遊離塩基または酸の形態に変換することができる。

【0078】

幾つかの実施形態では、検討対象の化合物、組成物および／または医薬組成物は、植物源、例えば実施例および本出願全体のどこかに含まれる植物から単離することができる。検討対象の抽出物および化合物を単離するのに適した植物の部位としては、葉、樹皮、幹、幹樹皮、茎、茎樹皮、小枝、塊茎、根、根皮、樹皮表面（例えば、周皮または樹皮、コルク組織、コルク形成層、コルク皮層、またはこれらの任意の組み合わせを含んでいてもよい。）、若芽、地下茎、種子、果実、雄しべ、雌しべ、がく、雄ずい、花弁、がく片、心皮（雌ずい）、花、またはこれらの組み合わせが挙げられる。検討対象の植物抽出物は、茎、茎皮、幹、幹樹皮、小枝、塊茎、根、根皮、若芽、種子、根茎、花および他の生殖器官、葉、他の空中部分またはそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの植物の部位から誘導される。関連する幾つかの実施形態では、検討対象の化合物は、植物供給源から単離され、列挙された置換基のいずれかを含むように合成的に修飾される。これに関して、植物から単離された検討対象の化合物の合成的な修飾は、当該分野で公知であり、当業者の知識の範囲内にある任意の数の技術を用いて達成することができる。

【実施例0079】

実施例１：動物
体重２５から３０ｇの７から８週齢のパーパスブレッドマウスをＣｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ウィルミントン、ＭＡ）から購入した。到着してから１週間、動物を環境に慣れさせた後に体重を計測し、それぞれの群に無作為に割り当てた。ＩＣＲマウス（５匹／ケージ）をポリプロピレンケージに入れ、尾部に数字を書き、個体を識別した。各ケージを、ワイヤーバーの蓋とフィルター付きトップ（アレンタウン、ＮＪ）で覆った。個々のそれぞれのケージは、プロジェクト番号、試験品、投与量レベル、群および動物数を示すケージカードで識別された。柔らかいトウモロコシ穂軸の寝藁Ｈａｒｌａｎ Ｔ７０８７を使用し、週に少なくとも２回交換した。動物に、淡水とげっ歯類飼料Ｔ２０１８番（Ｈａｒｌａｎ Ｔｅｋｌａｄ、３７０Ｗ、ケント、ＷＡ）を不断給餌し、１２時間の明暗サイクルで恒温室（２２．２℃）に入れた。全ての動物実験は、実験動物のケアおよび使用に関するガイドラインと合致する施設ガイドラインに従って実施した。

【0080】

実施例２：アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ）または四塩化炭素（ＣＣＬ４）により誘発される肝損傷動物モデル
バランスのとれた治療計画を作成し、予防および介入に取り組むために以下のように最適化した。ＡＰＡＰにより誘発される肝毒性モデルについて、ＡＰＡＰ（Ｌｏｔ番号ＭＫＢＱ８０２８Ｖ、Ｓｉｇｍａ製）を用量４００ｍｇ／ｋｇで、温かい生理食塩水（Ｇ－Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ製のＬｏｔ番号１３２９０８、Ｑｕａｌｉｔｙ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ製のＬｏｔ番号７２０７２９）（６０℃まで加熱し、周囲温度まで冷却した。）に溶解し、一晩絶食させたＩＣＲ／ＣＤ－１マウスに経口投与し、毒性を誘発させた。ＣＣｌ_４誘発肝毒性モデルについて、ＣＣｌ_４（Ｌｏｔ番号ＳＨＢＤ５３５１Ｖ、Ｓｉｇｍａ製）を用量２５μｇ／ｋｇでトウモロコシ油に溶解し、一晩絶食させたＩＣＲ／ＣＤ－１マウスに腹腔内投与し、毒性を誘発させた。両モデルについて、ＡＰＡＰまたはＣＣｌ_４投与の４８時間前、２４時間前、２時間前、投与して６時間後に、材料を投与した。合計で、マウスは、化学物質による誘発の前に３回の投薬を受け、化学物質による誘発の後に１回の投薬を受けた。１０％のＴｗｅｅｎ－２０（Ａｍｒｅｓｃｏ製のＬｏｔ番号０１３４Ｃ１４１）、１％ＣＭＣ（Ｓｐｅｃｔｒａ製のＬｏｔ番号ＮＨ０４５４）または１％ＭＣ（Ｌｏｔ番号ＳＬＢＫ４３５７Ｖ）を全ての材料の担体ビヒクルとして使用した。ＡＰＡＰまたはＣＣｌ_４を用いないコントロールマウスは、担体ビヒクルのみを投与された。血清ＡＬＴをＴ２４（Ｐｈｏｅｎｉｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、エバレット、ＷＡ）で測定した。

【0081】

実施例３：植物抽出物の調製
植物を収集し、それらの活性化合物の性質に基づいて異なる溶媒で調製し、マウスの肝毒性動物モデルでスクリーニングした。１６種の異なる部位を含む以下の表１の１９種の植物は、マウスのアセトアミノフェン誘発モデルまたはＣＣｌ_４誘発モデルのいずれかで、異なるレベルで血清ＡＬＴ阻害を示した。両モデルにおいて効力を有する植物のみが、さらなる研究のために選択される。

【0082】

オオアザミ抽出物は、Ｓｉｌｙｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ種子の８０％エタノール／２０％水抽出物として、抽出比４０から５０：１で製造された。粉砕した種子を８０％エタノール／２０％水で抽出し、次いでケーキを濾過により上澄みから分離した。高減圧下で溶媒を除去して、軟らかい抽出物を得て、これをマルトデキストリンと混合し、スプレードライヤーでさらに乾燥させた。オオアザミ抽出物は、総シリマリンが５０％以上、シリビニンが３０％以上の規格に適合するように標準化された。シリマリンは、フラボノリグナン類であるシリビニン、シリジアニンおよびシリクリスチンの混合物で構成される。シリビニンは、シリマリンの主要活性成分である。オオアザミ種子の標準化された抽出物は市販されている。

【0083】

先に開示したように、Ｎ９３１は、従来の方法によりブレンドされた、１から４％のアロエシンと、９６から９９％の２００：１のＡｌｏｅ ｖｅｒａ内葉ゲル粉末多糖類との独特な組み合わせを含む組成物である。Ａｌｏｅ ｖｅｒａ内葉ゲル粉末多糖類は、Ａｌｏｅｃｏｒｐによって凍結乾燥物の形態で供給された。Ａｌｏｅ ｂａｒｂａｄｅｎｓｉｓ植物の新鮮な洗浄した葉から皮を手で取り除き、次いで、アロエ汁を回収し、セルラーゼで処理して酵素を失活させた。酵素失活の間、活性炭を用いて色を除去した。脱色した濾液を、さらに凍結乾燥トラップに移し、Ａｌｏｅ ｖｅｒａ内葉のゲル粉末を得て、これを１から４％のアロエシンと混合し、Ｎ９３１を作製した。

【0084】

【表1】

【0085】

実施例４：ＡＰＡＰおよびＣＣＬ４により誘発される肝毒性モデルに対する植物抽出物の肝臓保護活性
肝臓保護および再生に関する歴史的使用法に基づいて収集された古来の採掘から得た植物材料を、７０％エタノールを用いて抽出し、ＡＰＡＰおよびＣＣｌ_４により誘発される肝毒性の両方において、その効力をスクリーニングした。材料を、表２から３に明記した用量で動物に経口投与した。大部分の植物抽出物は１つのモデルにおいて血清ＡＬＴの阻害を示したが、幾つかの植物は両方のモデルにおいて効力を示した。これらの中で、Ｓｃｈｉｚａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ、オオアザミおよびロエシンが、さらなる研究のために選択された。

【0086】

【表2】

【0087】

【表3】

【0088】

実施例５：ＡＰＡＰモデルにおける選択された植物抽出物の用量応答効果
上述の方法と同様に、ＡＰＡＰにより誘発される肝毒性モデルにおいて、トウグワ（ｍｏｒｕｓ）の葉（Ｅ１３７５）、トウグワの果実（Ｅ１３７４）、トウグワの茎（Ｅ１３７７）、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ（Ｒ０５９４）およびＳｃｈｉｚａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（２％）（Ｌ０４９８）を、１００、２００、３００ｍｇ／ｋｇの用量で試験した。１０％Ｔｗｅｅｎ ２０を全ての材料のための担体ビヒクルとして使用した。ＡＰＡＰを含まないコントロールマウスにはビヒクル（１０％Ｔｗｅｅｎ ２０）のみが与えられた。血清ＡＬＴは、Ｔ２４で決定された。以下の表４に示されるように、Ｓｃｈｉｚａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（２％）（Ｌ０４９８）およびＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ（Ｒ０５９４）といった２種の植物材料は、３００ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ３６．８％および３２．２％の血清ＡＬＴレベルの阻害を示した。これらの減少は、統計的に有意であった。Ｌ０４９８は、３００ｍｇ／ｋｇの用量で１００％の生存率を示したが、Ｒ０５９４は、９０％の生存率を有していた。最低用量（１００ｍｇ／ｋｇ）では、Ｌ０４９８は３０％の生存率しか示さなかった。一方、Ｒ０５９４は、この用量で７０％の生存率を示した。用量に関わらず、全てのトウグワ抽出物での生存率は４０と低かった。これらの高い死亡率は、血清ＡＬＴレベルの不確定な低下率をもたらした。従って、Ｓｃｈｉｚａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（２％）（Ｌ０４９８）およびＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ（Ｒ０５９４）は、約３００ｍｇ／ｋｇで最適な効力を有し、このモデルでの真の成功であるとみなすことができた。

【0089】

【表4】

【0090】

実施例６：ＣＣｌ _４ モデルにおける選択された植物抽出物の用量応答効果
上述のように、ＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルについて、Ａｇｒｉｍｏｎｉａ ｅｕｐａｔｏｒｉａ（Ｅ１３９９）およびロエシン（ＱＭＡ２）を４００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇおよび２００ｍｇ／ｋｇの用量で、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ（Ｒ０５９４）およびＳｃｈｉｚａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（２％）（Ｌ０４９８）を４００ｍｇ／ｋｇおよび３００ｍｇ／ｋｇの用量で試験した。１０％Ｔｗｅｅｎ－２０を全ての材料のための担体ビヒクルとして使用した。ＣＣｌ_４を含まないコントロールマウスにはビヒクル（１０％Ｔｗｅｅｎ－２０）のみが与えられた。血清ＡＬＴは、Ｔ２４で決定された。

【0091】

以下の表５に示すように、血清ＡＬＴレベルの用量に相関する減少は、全ての抽出物についてほとんど観察された。４００ｍｇ／ｋｇのＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ（Ｒ０５９４）（４８．０％）で治療し、その後、３００ｍｇ／ｋｇの同じ植物材料（２９．９％）で治療したマウスで、血清ＡＬＴレベルの最大の減少が観察された。これらの減少は、統計的に有意であった。４００ｍｇ／ｋｇでは、Ａｇｒｉｍｏｎｉａおよびロエシンの両方とも、ＡＬＴレベルの非常によく似た減少を示し（即ち、２８％）、それぞれ０．０７および０．０４のＰ値を有していた。ビヒクル治療したＣＣｌ４コントロールを含む全ての群について、生存率は１００％であった。このバッチにおいて少なくとも、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ（Ｒ０５９４）は、試験した他のものよりも血清ＡＬＴレベルの阻害において優位性を示した。

【0092】

【表5】

【0093】

実施例７：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓの有機抽出物の調製
乾燥させ、粉砕したＡｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓの空中部分（２．５ｋｇ）を切断し、砕き、次いで、約１５倍の容積（３７．５Ｌ）の７０％エチルアルコール水溶液（ｖ／ｖ）で抽出した。抽出は８５℃で３時間行った。濾過後、ロータリーエバポレーターにより、４０℃、高減圧下でエタノール溶液を濃縮した。この抽出と濃縮の手順を、１０倍容積（２５Ｌ）の７０％エチルアルコール水溶液（ｖ／ｖ）を用いて２時間、２回繰り返した。濃縮した抽出溶液を、高減圧乾燥オーブンによって蒸発乾固させ、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ ７０％ＥｔＯＨ抽出物粉末（ロット番号ＲＮ３６７－３－６０Ｍ）４８０ｇを抽出収率１９．２％で得た。

【0094】

乾燥させ、粉砕したＡｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓハーブ（１８０．４ｇ）を、それぞれ１時間環流させることによって、７０％エタノール水溶液で３回抽出した。有機溶液を合わせ、高減圧下で蒸発させ、７０％エタノール抽出物（Ｒ５９４－７０ＥＥ）３７．７ｇを収率２０．９％で得た。同じ手順を用いて同様の結果を得たが、有機溶媒をメタノールまたはエタノールで置換し、メタノール抽出物（ＭＥ）またはエタノール抽出物（ＥＥ）、エタノール：Ｈ_２Ｏ（７：３）抽出物、エタノール：Ｈ_２Ｏ（１：１）抽出物、エタノール：Ｈ_２Ｏ（３：７）抽出物および水抽出物をそれぞれ得た。溶媒抽出工程を表６にまとめている。

【0095】

【表6】

【0096】

実施例８：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ抽出物のバイオアッセイ誘導分画法
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ７０％エタノール抽出物（ＲＮ４２５－７－７０ＥＥ、２０ｇ）を、ヘキサン（２００ｍＬ）と水（２５０ｍＬ）とに３回分配した。合わせたヘキサン溶液から溶媒を高減圧除去し、ヘキサン抽出物（ＨＥ）１．４３ｇを得た。水層を酢酸エチル（２００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた酢酸エチル層を真空中で乾燥させ、酢酸エチル抽出物（ＥＡ）２．２９ｇを得た。水層をさらにブタノール（２００ｍＬ）で３回抽出し、ブタノール抽出物（ＢＵ）３．７０ｇを得た。残りの水層を凍結乾燥し、水性抽出物（ＷＡ）１５．３ｇを得た。マウスのＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルにおいて、７０％ＥＥおよびＨＥ、ＥＡ、ＢＵおよびＷＡを試験した。ＨＥ、ＥＡ、ＢＵは不活性であったが、７０％ＥＥは４００ｍｇ／ｋｇで２５．２７％のＡＬＴ阻害を示し、ＷＡ画分はＰ≦０．０５で、３００ｍｇ／ｋｇレベルで３７．４９％の阻害を示した。

【0097】

活性画分ＷＡをＨＰ２０ＳＳクロマトグラフィーによりさらに分画した。ＷＡ（４．４ｇ）を２０％ＥｔＯＨ水溶液に溶解し、２０％ＥｔＯＨ水溶液を通してあらかじめ平衡状態にしておいた１本のＨＰ２０ＳＳ（Ｄｉａｉｏｎ、Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、日本、１６０ｇ）カラムに投入した。カラムを、８００ｍＬの２０％ＥｔＯＨ水溶液、６００ｍＬの４０％ＥｔＯＨ水溶液、４００ｍＬの６０％ＥｔＯＨ、２００ｍＬの８０％ＥｔＯＨで溶出させ、最後に、２００ｍＬのＥｔＯＨと２００ｍＬのアセトンで洗浄した。２つの主要な画分ＨＰ－０１（３．６７ｇ、８３．４％）およびＨＰ－０２（３０５．７ｍｇ、６．９５％）を収集し、ＣＣｌ４により誘発される肝毒性マウスモデルで試験した。ＨＰ－０１の主成分は、オリゴ糖および多糖類である。ＨＰ－０２は、主にポリフェノールを含む。ＨＰ－０１は、ＷＡと比較して同様のＡＬＴ阻害を示し、３００ｍｇ／ｋｇで３２．８６％の阻害を示した。ＨＰ－０２は、同じモデルで不活性であり、ポリフェノールがこの植物の活性に寄与していないことを示している。

【0098】

活性画分ＨＰ－０１をさらにＬＨ－２０オープンカラムで分画した。ＨＰ－０１（１．０６ｇ）を水に溶解し、水を用いてあらかじめ平衡状態にしておいた１本のＬＨ－２０カラムに投入し、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏによるグラジエント溶出を用い、４つの画分ＬＨ－０１（４３．４ｍｇ、４．２６％）、ＬＨ－０２（７９９．６ｍｇ、７８．５％）、クロロゲン酸（ＬＨ－０３、４５．４ｍｇ、４．５％）およびＬＨ－０４（２３．１ｍｇ、２．２７％）を得た。サンプル限界に起因して、ｉｎ ｖｉｖｏ試験では、主要画分ＬＨ－０２のみを試験した。ＬＨ－０２は、ＨＰ－０１の７８．５％であり、ＣＣｌ_４により誘発される動物モデルでは、３００ｍｇ／ｋｇレベルで効力を示さなかった。クロロゲン酸（Ｃ３８７８、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）は、ＨＰ－０１の構成要素であり、比率は約４．５％であるが、２００ｍｇ／ｋｇレベルで試験したとき、何ら阻害を示さなかった。本試験のｉｎ ｖｉｖｏデータは、クロロゲン酸とポリフェノール以外の水溶性成分がアルテミシア抽出物の肝臓保護活性の原因であることを明確に示した。活性多糖類の含有量は、ＷＡ画分の１０％未満である。この情報を表７にまとめている。

【0099】

【表7】

【0100】

実施例９：膜透析による活性ＨＰ－１サンプルの分画分離
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ由来の実施例８および表７に示される肝臓保護画分ＨＰ－０１を適切な容積の蒸留水に溶解し、蒸留水に対し、透析膜管でそれぞれ３時間ずつ３回透析した（カットオフＭＷ２０００）。保持した透析溶液と合わせた透析溶液の両方を凍結乾燥し、２つのサンプルＤＡ－１（ＭＷ＞２０００、１３．７９％）およびＤＡ－２（ＭＷ＜２０００、８４．５４％）を得た。ＤＡ－２を、上の透析と同じ手順に従って、分子量カットオフ５００でさらに透析した。ＤＡ－３（５００＜ＭＷ＜２０００、１６．７％）およびＤＡ－４（ＭＷ＜５００、７９．７％）を収集した。ＤＡ－１、ＤＡ－３およびＤＡ－４を、ＣＣｌ４により誘発されるマウスモデルで試験した。２０００を超える分子量を有するＤＡ－１は、ＤＡ－３およびＤＡ－４と比較して、統計的有意性を有する状態で、血清ＡＬＴレベルにおいて最も高い阻害を示した。５００未満の分子量のものは、このｉｎ ｖｉｖｏモデルでは効力を示さなかった。この情報を表８にまとめている。

【0101】

【表8】

【0102】

実施例１０：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ抽出物のＨＰＬＣ分析および定量
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ抽出物中のマーカー化合物であるクロロゲン酸（１、Ｃ３８７８、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）およびジカフェオイル酸（２－３）をＬＣＭＳ分析および文献報告に基づいて同定し、Ｈｉｔａｃｈｉ ＨＰＬＣシステムのＣ１８逆相カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｌｕｎａ Ｃ１８，１０μｍ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）を用い、ＵＶ波長３２０ｎｍで定量した。カラムを、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液とアセトニトリルの二成分勾配で、流速１ｍＬ／分で溶出した。化合物１から３をリファレンス化合物であるクロロゲン酸に基づいて定量した。異なる供給源から収集したＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓの７０％ＥＥにおけるクロロゲン酸含有量は、ピーク面積の計算に基づいて１．５から４．８％（ｗ／ｗ）の範囲で変化した。この情報を表９から１０にまとめている。

【0103】

【表9】

【0104】

【表10】

【0105】

実施例１１：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ抽出物におけるカテキン定量
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ抽出物の水画分（ＷＡ）中のカテキン類をＨＰＬＣ法により定量した。Ｃ１８逆相カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、ＵＳＡ、Ｌｕｎａ ５ｕｍ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）を備えたＨｉｔａｃｈｉ ＨＰＬＣ／ＰＤＡシステムを、流速１．０ｍＬ／分、カラム温度３５℃、２７５ｎｍのＵＶ波長でカテキンの検出および定量に使用した。全てのアルテミシアサンプルではＥｐｉｃａｔｅｃｈｉｎ（Ｅ１７５３、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）は検出されず、カテキン標準（Ｃ１２５１、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）に基づき、ごく低い含有量のカテキンが検出され、定量された。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ抽出物のＷＡ画分中のカテキン含有量は、０．０２から０．３２％の範囲であり、ｉｎ ｖｉｖｏ試験結果に基づくアルテミシア抽出物の肝臓保護特性とは無関係である。この情報を表１１から１２にまとめている。

【0106】

【表11】

【0107】

【表12】

【0108】

実施例１２：膜透析による多糖類の分離
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ由来のＨＰ－０１の未処理の多糖類を適切な容積の蒸留水に溶解し、蒸留水に対し、透析膜管でそれぞれ３時間ずつ３回透析した（カットオフＭＷ２０００）。保持した透析溶液と合わせた透析溶液の両方を凍結乾燥し、２つのサンプルＤＡ－１（ＭＷ＞２０００、１３．７９％）およびＤＡ－２（ＭＷ＜２０００、８４．５４％）を得た。両サンプルを、ＣＣｌ_４により誘発されるマウスモデルで試験した。

【0109】

実施例１３：ゲル浸透クロマトグラフィーによる多糖の分析および定量
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ抽出物の活性画分ＷＡも、多糖類の分子量分布を評価するための十分に確立された方法であるゲル浸透クロマトグラフィーによって分析した。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓの多糖類を、屈折率検出器を取り付けたＨｉｔａｃｈｉ ＨＰＬＣシステムによるＰｏｌｙＳｅｐ－ＳＥＣ－Ｐ５０００カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、ＯＯＨ－３１４５ＫＯカラム、３００ｍｍ×７．８ｍｍ）を用いて分析した。移動相は０．１Ｍ ＮａＣｌであり、流速０．７ｍＬ／分で２５分間であった。各サンプルについて、濃度１０ｍｇ／ｍＬで２０μＬを注入した。多糖類は、６つのデキストラン分子量標準（Ａｍｅｒｉｃａｎ ｐｏｌｙｍｅｒ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ）に基づき、＞２０００、２０００－１０００、１００－５００、５００－２００、２００－５０、５０－１０、１０ｋＤａに分けられた７つの範囲で定量した。異なる抽出物の水分画サンプルの分子量分布は、さまざまであった。肝臓（ｌｉｖｅ）保護活性は、大きな分子量分布と関係がある。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓサンプル間で、総多糖類含有量は類似しているが、重量分布は全く異なる。多糖類含有量が大きいほど、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓについて、より良い効果が観察された。分子量分布を表１３に示す。

【0110】

【表13】

【0111】

実施例１４：ＣＣｌ _４ モデルに対するＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ画分の肝臓保護活性
ヘキサン（ＨＥ）、酢酸エチル（ＥＡ）、ブタノール（ＢＵ）および水中のＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓ画分の肝臓保護活性を評価するために、ＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルを利用した。コントロールマウスには１０％Ｔｗｅｅｎ－２０のみを与えた。血清ＡＬＴは、Ｔ２４で決定された。アルテミシア画分を３００ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、一方、出発物質を４００ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。

【0112】

表１４に見られるように、アルテミシアの水画分を用いて３００ｍｇ／ｋｇの用量で治療したマウスでは、血清ＡＬＴの最も高い阻害が観察され、このことは、この画分に活性マーカーが存在する可能性を示している。しかし、これは、他の画分に他の活性マーカーが存在することを除外するものではない。元の材料（Ｒ６８４）は、４００ｍｇ／ｋｇの用量でその効力を維持した。このモデルでは、全ての群の生存率は１００％であった。

【0113】

【表14】

【0114】

実施例１５：Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ果実からの有機抽出物の調製
Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓの乾燥した果実合計２０ｇを２本の１００ｍｌステンレス鋼管に入れ、ＡＳＥ３００自動抽出器を用い、８０℃、圧力１５００ｐｓｉで、有機７０％ＥｔＯＨ水溶液を用いて２回抽出した。抽出溶液を自動的に濾過し、回収した。合わせた溶液をロータリーエバポレーターで蒸発乾固させ、未精製の７０％ＥｔＯＨ抽出物（９．６５ｇ、４９．５％）を得た。

【0115】

同じ手順を用いて同様の結果を得たが、有機溶媒をメタノールまたはエタノールで置換し、メタノール抽出物（ＭＥ）またはエタノール抽出物（ＥＥ）、エタノール：Ｈ_２Ｏ（７：３）抽出物、エタノール：Ｈ_２Ｏ（１：１）抽出物、エタノール：Ｈ_２Ｏ（３：７）抽出物および水抽出物をそれぞれ得た。

【0116】

Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ抽出物は、７０％エタノール／３０％水（ｖ／ｖ）によって乾燥果実を抽出して製造された。この抽出物をさらに処理し、シサンドリン、シザンテリンＡ、シサンドリンＡ（デオキシシサンドリン）およびシサンドリンＢを含む総シサンドリンが２％以上の粉末形態（ロット番号）での抽出物を得た。

【0117】

実施例１６：Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ抽出物のＨＰＬＣ分析および定量
シサンドリン（ロット番号１１０８５７、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ、中国）、シサンテリンＡ（ロット番号１１５２９－２００５０３、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ、中国）、シサンドリンＡ（デオキシシサンドリン、ロット番号１１０７６４－２００１０７、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ、中国）、シサンドリンＢ（ロット番号１１０７６５－２００５０８、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ、中国）の４種類の活性マーカー化合物を、Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ抽出物において同定し、Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓリファレンス標準物質（ロット番号１４０２１７、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ、中国）を用いて確認した。

【0118】

活性マーカー化合物を、リファレンス標準物質と比較することにより、ＵＶ波長２５０ｎｍを用い、Ｈｉｔａｃｈｉ ＨＰＬＣシステムのＣ１８逆相カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｌｕｎａ Ｃ１８、１０μｍ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）を用いたＨＰＬＣにより定量した。カラムを、流速１ｍＬ／分で、水およびアセトニトリルを用いて溶出させた。この実施例の勾配表を表１５に示す。個々のピークを同定し、積分した後、ＲＳＭに基づき、シサンドリン、シサンテリンＡ、シサンドリンＡおよびシサンドリンＢを含む４種類の化合物の合計含有量を計算し、その情報を表１６に示す。

【0119】

【表15】

【0120】

【表16】

【0121】

実施例１７：シサンドラ果実抽出物中の有機酸のＨＰＬＣ定量
異なる収集物から社内で生成した７０％ＥｔＯＨ抽出物中のリンゴ酸、シキミ酸およびクエン酸の存在が確認され、表１７に記載されている。有機酸は、Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＧＯＬＤ ａＱカラム（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用し、移動相として５０ｍＭリン酸二水素カリウム（Ｈ_３ＰＯ_４でｐＨを２．８に調整）を用い、定組成条件下、５℃で２０分間、流速０．７ｍｌ／分で、ＨＰＬＣにより定量分析した。有機酸は、２０５ｎｍのＵＶ検出器を用いて検出され、有機酸標準と比較することによって、保持時間に基づいて同定された。

【0122】

【表17】

【0123】

実施例１８：ＡＰＡＰモデルおよびＣＣｌ _４ モデルにおける肝臓保護のための異なる組み合わせのアルテミシア抽出物およびシサンドラ抽出物
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｅｓおよびＳｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓのようなリード植物を選択したら、ＡＰＡＰおよびＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルにおいて、肝臓保護におけるその効力を、４：１、２：１、１：１、１：２および１：４の異なる組み合わせ比率で評価した。２つの植物の組み合わせは、それぞれの植物の最初の文字、即ちＳｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓについては「Ｓ」を、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｅｓについては「Ａ」を用い、「ＳＡ」としてコード化された。以下の表１８に示されるように、全てのブレンドが何らかの種類の肝臓保護を示したが、血清ＡＬＴレベルで測定した場合に、マウスを、シザンドラとアルテミシアの比率２：１のブレンドで、合計容量４００ｍｇ／ｋｇで治療したとき、統計的に有意な最も高い保護である４８．０％の減少が観察された。同様に、ＣＣｌ_４モデルでは、血清ＡＬＴレベルで測定した場合に、マウスを、シザンドラとアルテミシアの比率１：２のブレンドで、合計容量４００ｍｇ／ｋｇで治療したとき、統計的に有意な最も高い肝臓保護である４０．６％の減少が観察された。両方のモデルにおいて、この特定の比率で生存率は１００％であった。

【0124】

【表18】

【0125】

実施例１９：組み合わせＳＡＬ組成物の調製
３２０ｇのＳｃｈｉｓａｎｄｒａ抽出物（ロット番号Ｅ１４５８）、２６３ｇのＡｒｔｅｍｉｓｉａ抽出物（ロット番号ＲＮ４２５－１３）、３７７ｇのＡｒｔｅｍｉｓｉａ抽出物（ロット番号ＲＮ４２５－１４）および２４０ｇのＮ９３１（Ｅ１４５９ ２％ アロエシン）をＲｉｂｂｏｎブレンダー（Ｈａｎｋｏｏｋ Ｐ．Ｍ．ＥＭＧ、韓国）を用いて３０ｒｐｍで１時間ブレンドすることによって、検討対象のＳＡＬ組み合わせ組成物（ロット番号ＲＮ４２５－１５０１）を製造し、シサンドラ：アルテミシア：Ｎ９３１＝４：８：３の重量比で、１．１７ｋｇのＳＡＬ組み合わせ（ロット番号ＲＮ４２５－１５０１）を得た。

【0126】

実施例２０：ＡＰＡＰ／ＣＣｌ _４ モデルにおけるＳｃｈｉｓａｎｄｒａ Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ＣａｐｉｌｌａｒｉｓおよびＮ９３１のブレンドの肝臓保護活性の評価
さらなる肝臓保護活性のために、第三リード成分（ロエシン）を添加してＳＡＬと命名することにより、２Ｓ：１Ａ（ＡＰＡＰモデル）および１Ｓ：２Ａ（ＣＣｌ_４モデル）でのＳｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓとＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｅｓのリードブレンド比のうちの２つを選択した。「Ｌ」は、ロエシンを表す。Ｎ９３１を２Ｓ：１Ａの組み合わせに対して１０、２０および３０重量％の比率で、１Ｓ：２Ａの組み合わせに対して１０、２０および２５重量％の比率で添加した。この組成物をＡＰＡＰ／ＣＣｌ_４により誘導される肝毒性モデルで試験した。マウスを、組成物ＳＡＬを用い、４００ｍｇ／ｋｇの用量で治療した。表１９に見られるように、異なる比の全ての組成物がある程度の肝臓保護を示したが、マウスを、ＳＡＬを用い、それぞれ１０６．７／２１３．３／８０の比率で、４００ｍｇ／ｋｇの用量で治療した場合、血清ＡＬＴで最大の減少（５１．９％、Ｐ＝０．０１）、従って、最大の保護が観察された。このモデルでは、この特定の比率で生存率は１００％であった。

【0127】

同様に、表１９に見られるように、異なる比の全ての組成物がある程度の肝臓保護を示したが、マウスを、ＳＡＬを用い、それぞれ１０６．７／２１３．３／８０の比率で、４００ｍｇ／ｋｇの用量で治療した場合、血清ＡＬＴで最大の減少（４２．３％、Ｐ＝０．０１）が観察された。このモデルでは、この特定の比率で生存率は１００％であった。

【0128】

【表19】

【0129】

複数の組成物が肝臓を保護する効力を示したが、組成物ＳＡＬについて最終的な４Ｓ：８Ａ：３Ｌ比を生ずる両方のモデルにおいて、２０重量％のロエシンを１Ｓ：２Ａ比で添加した場合に最高の保護が観察された。その結果、この比４Ｓ：８Ａ：３Ｌをリード組成物と考えた。

【0130】

実施例２１：ＡＰＡＰおよびＣＣｌ _４ により誘発される肝毒性モデルにおけるＳｃｈｉｓａｎｄｒａ Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ＣａｐｉｌｌａｒｉｓおよびＮ９３１を含む組成物の用量応答効果
有意な肝臓保護をもたらすであろう組成物ＳＡＬの最適用量を、ＡＰＡＰおよびＣＣｌ_４により誘発される両モデルで評価した。マウスに、１０％Ｔｗｅｅｎ－２０中に懸濁した４００ｍｇ／ｋｇ、３２５ｍｇ／ｋｇおよび２５０ｍｇ／ｋｇの用量で組成物ＳＡＬを経口投与した。ビヒクルコントロール群には担体溶液のみを与えた。表２０に見られるように、ＡＰＡＰ群では、組成物について血清ＡＬＴの用量に相関する阻害が観察された。それぞれ４００ｍｇ／ｋｇ、３２５ｍｇ／ｋｇおよび２５０ｍｇ／ｋｇの用量のＳＡＬを用いて治療したマウスについて、５２．５％（ｐ＝０．００１）、４８．５％（ｐ＝０．０１２）および３４．６％（ｐ＝０．０７９）の阻害が観察された。同様に、ＣＣｌ_４群では、組成物について血清ＡＬＴの用量に相関する阻害が観察された。それぞれ４００ｍｇ／ｋｇ、３２５ｍｇ／ｋｇおよび２５０ｍｇ／ｋｇの用量のＳＡＬを用いて治療したマウスについて、４６．３％（ｐ＝０．００３）、３９．５％（ｐ＝０．００７）および２９．９％（ｐ＝０．０３６）の阻害が観察された。両方のモデルにおいて、全ての群について生存率は１００％であった。組成物ＳＡＬは、２０％のＬを含む１Ｓ：２Ａで、２５０ｍｇ／ｋｇという低い用量レベルで、肝臓損傷において統計的に有意な（ＣＣＬ４）保護を与えた。

【0131】

ここで、試験した最高用量（４００ｍｇ／ｋｇ）で、４Ｓ：８Ａ：３Ｌにおいてみられるように、シサンドラ、アルテミシアおよびロエシンなどの個々の植物の効力を、同情ＳＡＬ中の各植物の比率に相当する用量で試験した。表２０に見られるように、７０から８０％の生存率での平均２０％の阻害が、これらの植物について所与の用量で観察された。

【0132】

【表20】

【0133】

実施例２２：組成物ＳＡＬの相乗効果の評価
Ｃｏｌｂｙの式（Ｃｏｌｂｙ、１９６７）を利用して、Ｓｃｈｉｚａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓおよびＮ９３１をＡＰＡＰモデルおよびＣＣＬ４モデルの両方で組み合わせる利点を評価した。以下の表２１からわかるように、観察された値は、両方のモデルにおいて予想される仮想値（Ａ＋Ｂ－Ｃ）よりも大きく、このことは、この三成分を特定の比率で配合してＳＡＬを得るときに相乗効果が存在することを示している。シザンドラ、アルテミシアおよびＮ９３１をブレンドする利点は、ＡＰＡＰおよびＣＣｌ_４に起因する肝臓損傷の相乗的保護によって確認された。

【0134】

【表21】

【0135】

実施例２３：３００ｍｇ／ｋｇの用量でのその個々の成分に対するＳＡＬ組成物の肝臓保護活性
ＡＰＡＰおよびＣＣｌ_４により誘発される両肝毒性モデルを使用し、組成物ＳＡＬの個々の成分に対する肝臓保護活性を３００ｍｇ／ｋｇの用量で、効力の尺度として減少した血清ＡＬＴレベルを用いて比較した。１０％Ｔｗｅｅｎ－２０を全ての材料のための担体ビヒクルとして使用した。コントロールマウスにはＴｗｅｅｎ－２０のみを与えた。血清ＡＬＴの他に、Ｔ．タンパク質、Ｔ．ビリルビン、アルブミン、ＡＳＴおよび胆汁酸などの肝パネルを、コントロール、ＡＰＡＰ／ＣＣｌ_４、ＳＡＬについてＴ２４で測定した。

【0136】

【表22】

【0137】

表２３および２４の効力の尺度としてのＡＳＴに見られるように、組成物（ＳＡＬ）は、ＡＰＡＰモデルにおけるビヒクル（即ち、６０．６％）よりも強化された肝臓損傷保護を示した。ＳＡＬ、Ｓ（シサンドラ）、Ａ（アルテミシア）およびＬ（Ｎ９３１）で処理したマウスでは、ビヒクル群と比較して、それぞれ、血清ＡＬＴの統計的に有意な４７．１％、４２．２％、４２．０％および１６．６％の減少が観察された。アルテミシアで治療したマウスで最も低い生存率（５０％）が観察された。

【0138】

ＡＰＡＰモデルを確認すると、組成物ＳＡＬは、効力の尺度として血清ＡＬＴを使用したＣＣｌ_４モデルにおける３００ｍｇ／ｋｇの用量での各個々の成分よりも大きな肝臓保護を示した。さらに、効力の尺度としてＡＳＴを使用すると、組成物（ＳＡＬ）は、ビヒクル（即ち、３２．５％）よりも高い損傷防御を示した。このモデルでは、全ての群の生存率は１００％であった。

【0139】

【表23】

【0140】

表２４に示すように、組成物ＳＡＬは、ビヒクルで治療されたＡＰＡＰ陽性マウスと比較すると、ＡＰＡＰモデルにおいて、胆汁酸、Ｔ．ビリルビンおよびＴ．タンパク質などの肝臓関連バイオマーカーの改善を示した。同様に、ビヒクル群と比較した場合、ＣＣｌ_４モデルにおいて組成物ＳＡＬで治療したマウスについて統計的に有意な胆汁酸クリアランスが観察された。

【0141】

【表24】

【0142】

実施例２４：ＡＰＡＰおよびＣＣＬ４により誘発される肝毒性モデルにおける組成物ＳＡＬの効力確認試験
組成物ＳＡＬの肝臓保護活性の優位性を証明するために、ＡＰＡＰおよびＣＣｌ_４により誘発される両肝毒性モデルを用いて確認研究を行った。マウスを、組成物ＳＡＬを用い、４００ｍｇ／ｋｇで経口投与した。１０％Ｔｗｅｅｎ－２０を全ての材料のための担体ビヒクルとして使用した。コントロールマウスにはＴｗｅｅｎ－２０のみを与えた。血清ＡＬＴの他に、Ｔ．タンパク質、総ビリルビン、直接および間接のビリルビン、アルブミン、グロブリン、ＡＳＴ、胆汁酸およびＡＬＰなどの肝パネルを、コントロール、ＡＰＡＰ／ＣＣｌ_４、ＳＡＬについてＴ２４で測定した。

【0143】

以下の表２５および２６に見られるように、組成物ＳＡＬで治療したマウスについて、血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、結合ビリルビンおよび胆汁酸における統計学的に有意な阻害が観察された。これらの阻害は、ビヒクル処置群から３４．０％、４４．５％、６０．０％および２６．７％の減少であった。同様に、組成物ＳＡＬは、ビヒクル治療マウスと比較して、血清ＡＬＴレベルの顕著な統計的に有意な減少（４４．０％減少）およびＡＳＴの強い減少傾向（３５．９％減少）を示した。全体的に、組成物ＳＡＬは、複数の頻繁に使用される動物モデルにおける肝臓損傷に対するより大きな保護を与え、これを表２７に示す。

【0144】

【表25】

【0145】

【表26】

【0146】

【表27】

【0147】

実施例２５：ＣＣｌ _４ 誘発性肝毒性モデルから採取した肝ホモジネート中の酸化ストレスバイオマーカーに対する組成物ＳＡＬの効果
ＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルを用いて肝臓を保護することにおける組成物ＳＡＬの効果を評価するために、追加の確認アッセイを実施した。マウスを、組成物ＳＡＬを用い、４００ｍｇ／ｋｇで経口投与した。１０％Ｔｗｅｅｎ ２０を担体ビヒクルとして使用した。コントロールマウスにはＴｗｅｅｎ ２０のみを与えた。肝組織を剖検直後に収集し、－８０℃に移すまでドライアイス中で保存した。その後、材料を、最終検体処理およびバイオマーカー分析のためにドライアイスに入れて契約研究室（Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、２００ Ｔｕｒｎｐｉｋｅ Ｒｄ、ＭＡ ０１７７２、ＵＳＡ）に運んだ。肝臓グルタチオン（ＧＳＨ）とスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）を評価した。

【0148】

グルタチオン（ＧＳＨ）は、脂質ヒドロペルオキシドの還元に相当する還元剤を提供することによって細胞をフリーラジカルによる損傷から保護するのに役立つ重要な細胞内トリペプチドチオールである。この工程の間に、酸化グルタチオン（ＧＳＳＧ）が反応生成物として生成する。ＧＳＨレベルは、細胞および組織におけるｉｎ ｖｉｖｏでの酸化剤および酸化ストレスレベルの指標となるバイオマーカーとして使用されている。この分析において、ＧＳＨのスルフヒドリル基は、ＤＴＮＢ（５，５’－ジチオ－ビス－２－ニトロ安息香酸）と反応し、黄色の５－チオ－２－ニトロ安息香酸（ＴＮＢ）生成物を生成する。生体サンプル中のＧＳＨの量は、４１０ｎｍでのＴＮＢの吸光度の測定を介して決定される。

【0149】

スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）は、スーパーオキシドアニオンから分子酸素および過酸化水素への不均化を触媒する金属酵素である。ＳＯＤは、ｉｎ ｖｉｖｏで最も重要な酸化防止酵素の１つであると考えられている。ＳＯＤアッセイは、テトラゾリウム塩を利用し、キサンチンオキシダーゼおよびキサンチンによって誘発されるスーパーオキシドラジカルの不均化を測定する比色アッセイであり、所与のサンプル中のＳＯＤの活性は、ＳＯＤ標準を用いて生成された標準曲線によって定量化される。ＳＯＤの１単位は、スーパーオキシドラジカルの５０％の不均化を示すのに必要な酵素の量として定義される。

【0150】

以下の表２８に見られるように、試験される各バイオマーカーのタンパク質レベル１グラム当たりで考えると、組成物ＳＡＬは、肝臓スーパーオキシドジスムターゼの増加と関連して、枯渇した肝臓グルタチオンを補充した。これらの知見は、以前に開示された肝パネルデータと併せて、組成物ＳＡＬが、ＣＣＬ４により誘発される肝臓損傷によって惹起される酸化ストレスからの肝臓保護活性を有することを強く示唆する。

【0151】

【表28】

【0152】

実施例２６：ＣＣｌ _４ により誘発される肝毒性モデルにおける特定の比率でのＡｓｔｒａｇａｌｕｓ Ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ、Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ＣｈｉｎｅｎｓｉｓおよびＡｒｔｅｍｉｓｉａ Ｃａｐｉｌｌａｒｉｓのブレンドの肝臓保護活性の評価
２種類のさらなるリード植物抽出物で構成される組み合わせの肝臓保護活性も、マウスのＣＣｌ_４により誘発される肝毒性モデルで評価した。Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓを、Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓまたはＡｒｔｅｍｉｓｉａ ｃａｐｉｌｌａｒｉｓと１：１、１：２、２：１、１：４および４：１の比で合わせた。表２９に示すように、アストラガルスをシサンドラとブレンドした場合、１つの比率のみ（即ち、１：４）、ビヒクルで治療した損傷マウスと比較して、血清ＡＬＴの統計的に有意ではない減少を示した（３４．１％）。対照的に、アストラガルスとアルテミシアを組み合わせた場合、より大きな肝臓保護が観察された。アストラガルス：アルテミシアの比率２：１および４：１について、血清ＡＬＴの統計的に有意な４６．３％および５７．７％の阻害がそれぞれ観察された。このモデルで試験した全ての比率について、生存率は１００％であった。

【0153】

【表29】

【0154】

従って、肝臓の健康を改善し、維持する関連する方法と共に、開示された化合物の立体異性体、医薬として許容される塩または栄養補助食品として許容される塩、互変異性体、グリコシドおよびプロドラッグを含む、肝臓の健康管理に有用な化合物および組成物の具体的な実施形態および方法が開示された。しかし、本明細書の発明の概念から逸脱することなく、既に説明した以外の多くの変更が可能であることは、当業者には明らかなはずである。従って、本発明の主題は、本明細書の開示の精神を除き、限定されるものではない。さらに、明細書および特許請求の範囲を解釈する際には、全ての用語は、文脈と一致する最も広い可能な様式で解釈されるべきである。特に、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、要素、構成要素または工程を非排他的な様式で参照するものと解釈されるべきであり、参照された要素、構成要素または工程が存在していてもよく、または利用してもよく、または、明示的に言及されていない他の要素、構成要素または工程と組み合わせてもよいことを示している。

【0155】

【表30】

【図1】