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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022178579
(43)【公開日】2022-12-02
(54)【発明の名称】化合物又はその塩、及び蛍光プローブ
(51)【国際特許分類】
C07F 5/02 20060101AFI20221125BHJP
C09B 23/01 20060101ALI20221125BHJP
C09K 11/06 20060101ALI20221125BHJP
G01N 21/64 20060101ALI20221125BHJP
G01N 21/78 20060101ALI20221125BHJP
【ＦＩ】
C07F5/02 D CSP
C09B23/01
C07F5/02 F
C09K11/06
C09K11/06 660
G01N21/64 Z
G01N21/78 C
【審査請求】未請求
【請求項の数】4
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2021085478
(22)【出願日】2021-05-20
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り （１）２０２０年日本化学会九州支部秋期研究発表会 予稿集、発行日：令和２年１１月２７日 （２）２０２０年日本化学会九州支部秋期研究発表会、開催日：令和２年１１月２８日
(71)【出願人】
【識別番号】504205521
【氏名又は名称】国立大学法人 長崎大学
(74)【代理人】
【識別番号】100165179
【弁理士】
【氏名又は名称】田▲崎▼ 聡
(74)【代理人】
【識別番号】100175824
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 淳一
(74)【代理人】
【識別番号】100152272
【弁理士】
【氏名又は名称】川越 雄一郎
(74)【代理人】
【識別番号】100181722
【弁理士】
【氏名又は名称】春田 洋孝
(72)【発明者】
【氏名】真木 俊英
【テーマコード（参考）】
2G043
2G054
4H048
【Ｆターム（参考）】
2G043AA01
2G043CA03
2G043EA01
2G043JA01
2G054AA02
2G054CA03
2G054EA03
2G054GA04
4H048AA01
4H048AA03
4H048AB92
(57)【要約】
【課題】ｐＨの変化に応じて蛍光波長シフトが生じる低分子の化合物の提供。
【解決手段】式（１）で表される化合物又はその塩。Ｒ１は、式（２ａ）、（２ｂ）又は（２ｃ）で表される基を示し、Ｒ２及びＲ４は、それぞれ独立に置換又は無置換のアリール基を示し、Ｒ３及びＲ５は、それぞれ独立に置換若しくは無置換の鎖式炭化水素基、又は置換若しくは無置換のスチリル基を示し、Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立にフッ素原子又は－Ｏ－Ｒで表される基を示し、Ｒはアルコール残基又は糖残基を示す。
［化１］
【選択図】なし
【解決手段】式（１）で表される化合物又はその塩。Ｒ１は、式（２ａ）、（２ｂ）又は（２ｃ）で表される基を示し、Ｒ２及びＲ４は、それぞれ独立に置換又は無置換のアリール基を示し、Ｒ３及びＲ５は、それぞれ独立に置換若しくは無置換の鎖式炭化水素基、又は置換若しくは無置換のスチリル基を示し、Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立にフッ素原子又は－Ｏ－Ｒで表される基を示し、Ｒはアルコール残基又は糖残基を示す。
［化１］
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記式（１）で表される化合物又はその塩。
ただし、Ｒ１は、下記式（２ａ）、（２ｂ）又は（２ｃ）で表される基を示し、
Ｒ２及びＲ４は、それぞれ独立に置換又は無置換のアリール基を示し、
Ｒ３及びＲ５は、それぞれ独立に置換若しくは無置換の鎖式炭化水素基、又は置換若しくは無置換のスチリル基を示し、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立にフッ素原子又は－Ｏ－Ｒで表される基を示し、Ｒはアルコール残基又は糖残基を示す。
ただし、Ｒ６～Ｒ９は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ６とＲ７又はＲ７とＲ８が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１０～Ｒ１３は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１０とＲ１１又はＲ１１とＲ１２が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１４～Ｒ１７は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１４とＲ１５が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、Ｒ１６とＲ１７が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環を形成していてもよい。
【化1】
Ｒ２及びＲ４は、それぞれ独立に置換又は無置換のアリール基を示し、
Ｒ３及びＲ５は、それぞれ独立に置換若しくは無置換の鎖式炭化水素基、又は置換若しくは無置換のスチリル基を示し、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立にフッ素原子又は－Ｏ－Ｒで表される基を示し、Ｒはアルコール残基又は糖残基を示す。
【化2】
Ｒ１０～Ｒ１３は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１０とＲ１１又はＲ１１とＲ１２が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１４～Ｒ１７は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１４とＲ１５が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、Ｒ１６とＲ１７が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環を形成していてもよい。
【請求項2】
前記式（１）中のＲ２及びＲ４が、それぞれ独立に置換若しくは無置換のフェニル基を示す、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項3】
前記式（１）中のＲ１が、アルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－キノリル基を示す、請求項１又は２に記載の化合物又はその塩。
【請求項4】
請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を含む、蛍光プローブ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、化合物又はその塩、及び蛍光プローブに関する。
【背景技術】
【0002】
イメージング等、空間分解能が求められる測定には、分布による濃淡の影響を避けるために、レシオメトリック測定が望まれる。レシオメトリック測定では、例えば、ｐＨ等の変化により蛍光波長シフトが生じる蛍光色素を用い、２波長の蛍光強度を測定し、それらの蛍光強度の比からｐＨ等を求める。
【0003】
蛍光波長シフトが生じる蛍光色素としては、高分子タイプの蛍光色素が知られている。
しかし、高分子タイプの蛍光色素は、空間分解能が充分ではない。そこで、蛍光波長シフトが生じる低分子タイプの蛍光色素が望まれる。
しかし、高分子タイプの蛍光色素は、空間分解能が充分ではない。そこで、蛍光波長シフトが生じる低分子タイプの蛍光色素が望まれる。
【0004】
低分子タイプの蛍光色素の一つとして、ボロンジピロメテン（ＢＯＤＩＰＹ）を母核構造とするＢＯＤＩＰＹ色素が知られている。ＢＯＤＩＰＹ色素は、安定で高い蛍光量子収率を有する。ｐＨ等に応じて蛍光をＯＮ－ＯＦＦする置換基をＢＯＤＩＰＹのメソ位（８位）に導入することで、数多くの有用なセンサーが開発されている。
【0005】
特許文献１には、ＢＯＤＩＰＹのメソ位に、アミノ基（アルキル基が置換していてもよい）が置換したフェニル基を導入した化合物が記載されている。
特許文献２には、ＢＯＤＩＰＹのメソ位に、Ｎ－アルキルピリジニウム基を導入した化合物が記載されている。
特許文献２には、ＢＯＤＩＰＹのメソ位に、Ｎ－アルキルピリジニウム基を導入した化合物が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0006】
【特許文献1】国際公開第２００８／０５９９１０号
【特許文献2】中国特許出願公開第１０２９９３７６３号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
しかし、特許文献１～２に記載の化合物は、ｐＨに応じて蛍光強度は変化するが、蛍光波長シフトを生じさせることが困難であり、レシオメトリック測定ができなかった。
本発明は、ｐＨの変化に応じて蛍光波長シフトが生じる低分子の化合物又はその塩、及びこれを用いた蛍光プローブを提供することを目的とする。
本発明は、ｐＨの変化に応じて蛍光波長シフトが生じる低分子の化合物又はその塩、及びこれを用いた蛍光プローブを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明者は、鋭意検討の結果、ＢＯＤＩＰＹのメソ位にピリジン構造を導入するとともに、１位及び７位に芳香族構造を導入し、ＢＯＤＩＰＹを唯一の発色団とするテトラド型分子を構築することにより、上記課題を解決できることを見出した。
【0009】
本発明は、以下の態様を有する。
［１］下記式（１）で表される化合物又はその塩。
［１］下記式（１）で表される化合物又はその塩。
【0010】
【化1】
【0011】
ただし、Ｒ１は、下記式（２ａ）、（２ｂ）又は（２ｃ）で表される基を示し、
Ｒ２及びＲ４は、それぞれ独立に置換又は無置換のアリール基を示し、
Ｒ３及びＲ５は、それぞれ独立に置換若しくは無置換の鎖式炭化水素基、又は置換若しくは無置換のスチリル基を示し、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立にフッ素原子又は－Ｏ－Ｒで表される基を示し、Ｒはアルコール残基又は糖残基を示す。
Ｒ２及びＲ４は、それぞれ独立に置換又は無置換のアリール基を示し、
Ｒ３及びＲ５は、それぞれ独立に置換若しくは無置換の鎖式炭化水素基、又は置換若しくは無置換のスチリル基を示し、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立にフッ素原子又は－Ｏ－Ｒで表される基を示し、Ｒはアルコール残基又は糖残基を示す。
【0012】
【化2】
【0013】
ただし、Ｒ６～Ｒ９は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ６とＲ７又はＲ７とＲ８が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１０～Ｒ１３は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１０とＲ１１又はＲ１１とＲ１２が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１４～Ｒ１７は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１４とＲ１５が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環を形成していてもよく、Ｒ１６とＲ１７が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよい。
［２］前記式（１）中のＲ２及びＲ４が、それぞれ独立に置換若しくは無置換のフェニル基を示す、前記［１］の化合物又はその塩。
［３］前記式（１）中のＲ１が、アルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－キノリル基を示す、前記［１］又は［２］の化合物又はその塩。
［４］前記［１］～［３］のいずれかの化合物又はその塩を含む、蛍光プローブ。
Ｒ１０～Ｒ１３は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１０とＲ１１又はＲ１１とＲ１２が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１４～Ｒ１７は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１４とＲ１５が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環を形成していてもよく、Ｒ１６とＲ１７が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよい。
［２］前記式（１）中のＲ２及びＲ４が、それぞれ独立に置換若しくは無置換のフェニル基を示す、前記［１］の化合物又はその塩。
［３］前記式（１）中のＲ１が、アルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－キノリル基を示す、前記［１］又は［２］の化合物又はその塩。
［４］前記［１］～［３］のいずれかの化合物又はその塩を含む、蛍光プローブ。
【発明の効果】
【0014】
本発明によれば、ｐＨの変化に応じて蛍光波長シフトが生じる低分子の化合物又はその塩、及びこれを用いた蛍光プローブを提供できる。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【図1】実施例１の化合物（２ｑｕＢＯＤ）のｐＨ変化によるＵＶ吸収スペクトル変化の評価結果。
【図2】実施例１の化合物（２ｑｕＢＯＤ）のｐＨ変化による蛍光スペクトル変化の評価結果。
【図3】実施例１の化合物（２ｑｕＢＯＤ）のｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価結果。
【図4】実施例２の化合物（２ｐｙＢＯＤ）のｐＨ変化によるＵＶ吸収スペクトル変化の評価結果。
【図5】実施例２の化合物（２ｐｙＢＯＤ）のｐＨ変化による蛍光スペクトル変化の評価結果。
【図6】実施例２の化合物（２ｐｙＢＯＤ）のｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価結果。
【図7】実施例２の化合物（２ｐｙＢＯＤ）のｐＨの繰り返しの切り替えの評価結果。
【図8】実施例２の化合物（２ｐｙＢＯＤ）のトリフルオロ酢酸濃度変化による蛍光スペクトル変化の評価結果。
【図9】実施例２の化合物（２ｐｙＢＯＤ）のトリフルオロ酢酸濃度変化による蛍光強度比変化の評価結果。
【図10】実施例３の化合物（６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ）のｐＨ変化による蛍光スペクトル変化の評価結果。
【図11】実施例３の化合物（６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ）のｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価結果。
【図12】実施例３の化合物（６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ）のｐＨの繰り返しの切り替えの評価結果。
【図13】実施例３の化合物（６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ）のトリフルオロ酢酸濃度変化による蛍光スペクトル変化の評価結果。
【図14】実施例３の化合物（６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ）のトリフルオロ酢酸濃度変化による蛍光強度比変化の評価結果。
【図15】実施例４の化合物（４ｐｙＢＯＤ）のｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価結果。
【図16】２ｐｙＢＯＤ及びプロトン化された２ｐｙＢＯＤの基底状態のフロンティア軌道。
【図17】プロトン化された２ｐｙＢＯＤ及びプロトン化された比較例１の化合物（化合物５）のエネルギープロファイル。
【発明を実施するための形態】
【0016】
本発明の一態様に係る化合物は、下記式（１）で表される。
以下、式（１）で表される化合物を「化合物（１）」とも記す。他の式で表される化合物も同様に記す。
以下、式（１）で表される化合物を「化合物（１）」とも記す。他の式で表される化合物も同様に記す。
【0017】
【化3】
【0018】
ただし、Ｒ１は、下記式（２ａ）、（２ｂ）又は（２ｃ）で表される基を示し、
Ｒ２及びＲ４は、それぞれ独立に置換又は無置換のアリール基を示し、
Ｒ３及びＲ５は、それぞれ独立に置換若しくは無置換の鎖式炭化水素基、又は置換若しくは無置換のスチリル基を示し、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立にフッ素原子又は－Ｏ－Ｒで表される基（以下、単に「ＯＲ」とも記す。）を示し、Ｒはアルコール残基又は糖残基を示す。
Ｒ２及びＲ４は、それぞれ独立に置換又は無置換のアリール基を示し、
Ｒ３及びＲ５は、それぞれ独立に置換若しくは無置換の鎖式炭化水素基、又は置換若しくは無置換のスチリル基を示し、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立にフッ素原子又は－Ｏ－Ｒで表される基（以下、単に「ＯＲ」とも記す。）を示し、Ｒはアルコール残基又は糖残基を示す。
【0019】
【化4】
【0020】
ただし、Ｒ６～Ｒ９は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ６とＲ７又はＲ７とＲ８が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１０～Ｒ１３は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１０とＲ１１又はＲ１１とＲ１２が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１４～Ｒ１７は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１４とＲ１５が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、Ｒ１６とＲ１７が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよい。
式（２ａ）、（２ｂ）及び（２ｃ）中、波線を付した一重線は結合手を示す。
Ｒ１０～Ｒ１３は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１０とＲ１１又はＲ１１とＲ１２が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、
Ｒ１４～Ｒ１７は、それぞれ独立に水素原子、又は置換若しくは無置換のアルキル基を示し、Ｒ１４とＲ１５が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよく、Ｒ１６とＲ１７が一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに環構造を形成していてもよい。
式（２ａ）、（２ｂ）及び（２ｃ）中、波線を付した一重線は結合手を示す。
【0021】
Ｒ６～Ｒ１７における無置換のアルキル基は、直鎖状でも分岐状でもよい。無置換のアルキル基の炭素数は、例えば１～３である。
置換のアルキル基における置換基としては、例えば、アルコキシ基が挙げられる。アルコキシ基の炭素数は、例えば１～３である。置換のアルキル基が有する置換基は１つでも２つ以上でもよい。
置換又は無置換のアルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、２－プロピル基が挙げられる。
置換のアルキル基における置換基としては、例えば、アルコキシ基が挙げられる。アルコキシ基の炭素数は、例えば１～３である。置換のアルキル基が有する置換基は１つでも２つ以上でもよい。
置換又は無置換のアルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、２－プロピル基が挙げられる。
【0022】
Ｒ６とＲ７又はＲ７とＲ８、Ｒ１０とＲ１１又はＲ１１とＲ１２、Ｒ１４とＲ１５、Ｒ１６とＲ１７それぞれが一緒になって、それらが結合した炭素原子とともに形成する環構造としては、例えば、ベンゼン環、ナフタレン環が挙げられる。これらの中でも、含水溶媒への溶解性の点から、ベンゼン環が好ましい。
環構造は置換基を有していてもよい。置換基としては、例えば、置換又は無置換のアルキル基、アルコキシ基が挙げられる。置換又は無置換のアルキル基としては、前記と同様のものが挙げられる。
環構造は置換基を有していてもよい。置換基としては、例えば、置換又は無置換のアルキル基、アルコキシ基が挙げられる。置換又は無置換のアルキル基としては、前記と同様のものが挙げられる。
【0023】
式（２ａ）で表される基（以下、「基（２ａ）」とも記す。）の具体例としては、２－ピリジル基、６－メチル－２－ピリジル基、３－メチル－２－ピリジル基等の置換又は無置換の２－ピリジル基；２－キノリル基、３－メチル－２－キノリル等の置換又は無置換の２－キノリル基；２－イソキノリル基、３－メチル－２－イソキノリル等の置換又は無置換の２－イソキノリル基；２－（１，１０－フェナントロニル）基等が挙げられる。
なお、置換の２－ピリジル基は、炭素原子に結合した水素原子の少なくとも一部が置換基で置換された２－ピリジル基である。２－ピリジル基以外の基の場合も同様である。
なお、置換の２－ピリジル基は、炭素原子に結合した水素原子の少なくとも一部が置換基で置換された２－ピリジル基である。２－ピリジル基以外の基の場合も同様である。
【0024】
置換の２－ピリジル基、置換の２－キノリル基、置換の２－イソキノリル基はそれぞれ、置換基として無置換のアルキル基を有するもの（アルキル置換２－ピリジル基、アルキル置換２－キノリル基、アルキル置換２－イソキノリル基）が好ましい。
アルキル置換２－ピリジル基、アルキル置換２－キノリル基、アルキル置換２－イソキノリル基それぞれが有するアルキル基の数は、例えば１～３個であり、１個が好ましい。
アルキル置換２－ピリジル基、アルキル置換２－キノリル基、アルキル置換２－イソキノリル基それぞれが有するアルキル基の数は、例えば１～３個であり、１個が好ましい。
【0025】
式（２ｂ）で表される基（以下、「基（２ｂ）」とも記す。）の具体例としては、３－ピリジル基、４―メチル－３－ピリジル基等のアルキル置換又は無置換の３－ピリジル基；３－キノリル基、２－メチル－３－キノリル等のアルキル置換又は無置換の３－キノリル基；３－イソキノリル基、２－メチル－３－イソキノリル等のアルキル置換又は無置換の３－イソキノリル基；３－（１，１０－フェナントロニル）基等が挙げられる。
【0026】
置換の３－ピリジル基、置換の３－キノリル基、置換の３－イソキノリル基はそれぞれ、置換基として無置換のアルキル基を有するもの（アルキル置換３－ピリジル基、アルキル置換３－キノリル基、アルキル置換３－イソキノリル基）が好ましい。
アルキル置換３－ピリジル基、アルキル置換３－キノリル基、アルキル置換３－イソキノリル基それぞれが有するアルキル基の数は、例えば１～３個であり、１個が好ましい。
アルキル置換３－ピリジル基、アルキル置換３－キノリル基、アルキル置換３－イソキノリル基それぞれが有するアルキル基の数は、例えば１～３個であり、１個が好ましい。
【0027】
式（２ｃ）で表される基（以下、「基（２ｃ）」とも記す。）の具体例としては、４－ピリジル基、３，５－ジメチル－４－ピリジル基、２，５－ジメチル－４－ピリジル基等のアルキル置換又は無置換の４－ピリジル基；４－キノリル基、３－メチル－４－キノリル基等のアルキル置換又は無置換の４－キノリル基；４－（１，１０－フェナントロニル）基等が挙げられる。
【0028】
置換の４－ピリジル基、置換の４－キノリル基はそれぞれ、置換基として無置換のアルキル基を有するもの（アルキル置換４－ピリジル基、アルキル置換４－キノリル基）が好ましい。
アルキル置換４－ピリジル基、アルキル置換４－キノリル基それぞれが有するアルキル基の数は、例えば１～３個であり、１～２個が好ましい。
アルキル置換４－ピリジル基、アルキル置換４－キノリル基それぞれが有するアルキル基の数は、例えば１～３個であり、１～２個が好ましい。
【0029】
好ましい一態様において、Ｒ１は、アルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－キノリル基である。Ｒ１がアルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の２－、３－若しくは４－キノリル基であれば、含水溶媒系における蛍光量子収率に優れる傾向がある。
【0030】
他の好ましい一態様において、Ｒ１は、基（２ａ）又は基（２ｃ）である。Ｒ１が基（２ａ）又は基（２ｃ）であれば、Ｒ１が基（２ｂ）である場合に比べて、ｐＨの変化に対する蛍光波長の変化が大きい傾向がある。
本態様において、基（２ａ）は、アルキル置換若しくは無置換の２－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の２－キノリル基が好ましい。基（２ｃ）は、アルキル置換若しくは無置換の４－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の４－キノリル基が好ましい。
本態様において、基（２ａ）は、アルキル置換若しくは無置換の２－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の２－キノリル基が好ましい。基（２ｃ）は、アルキル置換若しくは無置換の４－ピリジル基、又はアルキル置換若しくは無置換の４－キノリル基が好ましい。
【0031】
Ｒ２及びＲ４において、無置換のアリール基は、単環式でも多環式でもよい。無置換のアリール基の炭素数は、例えば６～１４である。
置換のアリール基における置換基としては、例えば、置換又は無置換のアルキル基、－ＮＲ２１Ｒ２２で表される基、－Ｎ＋Ｒ２３Ｒ２４Ｒ２５で表される基、－（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨで表される基（以下、「ポリエチレングリコール基」とも記す。）、スルホン基等が挙げられる。Ｒ２１及びＲ２２はそれぞれ独立に水素原子又は置換若しくは無置換のアルキル基を示す。Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５はそれぞれ独立に置換又は無置換のアルキル基を示す。置換又は無置換のアルキル基としては、前記と同様のものが挙げられる。ｎは２以上の整数を示す。ｎの上限は、例えば２４である。置換のアリール基が有する置換基は１つでも２つ以上でもよい。
置換又は無置換のアリール基の具体例としては、フェニル基、ナフチル基、トリメチルアンモニウム置換フェニル基、ポリエチレングリコール置換フェニル基が挙げられる。
Ｒ２及びＲ４は、含水溶媒系への溶解性の点から、置換又は無置換のフェニル基であることが好ましい。
置換のアリール基における置換基としては、例えば、置換又は無置換のアルキル基、－ＮＲ２１Ｒ２２で表される基、－Ｎ＋Ｒ２３Ｒ２４Ｒ２５で表される基、－（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨで表される基（以下、「ポリエチレングリコール基」とも記す。）、スルホン基等が挙げられる。Ｒ２１及びＲ２２はそれぞれ独立に水素原子又は置換若しくは無置換のアルキル基を示す。Ｒ２３、Ｒ２４及びＲ２５はそれぞれ独立に置換又は無置換のアルキル基を示す。置換又は無置換のアルキル基としては、前記と同様のものが挙げられる。ｎは２以上の整数を示す。ｎの上限は、例えば２４である。置換のアリール基が有する置換基は１つでも２つ以上でもよい。
置換又は無置換のアリール基の具体例としては、フェニル基、ナフチル基、トリメチルアンモニウム置換フェニル基、ポリエチレングリコール置換フェニル基が挙げられる。
Ｒ２及びＲ４は、含水溶媒系への溶解性の点から、置換又は無置換のフェニル基であることが好ましい。
【0032】
Ｒ３及びＲ５において、無置換の鎖式炭化水素基は、直鎖状でも分岐状でもよく、飽和でも不飽和でもよい。無置換の鎖式炭化水素基としては、例えば無置換のアルキル基、無置換のアルケニル基、無置換のアルキニル基が挙げられる。無置換のアルキル基の炭素数は、例えば１～１２である。無置換のアルケニル基、無置換のアルキニル基それぞれの炭素数は、例えば２～１２である。
置換の鎖式炭化水素基における置換基としては、例えば、アルコキシ基が挙げられる。アルコキシ基の炭素数は、例えば１～３である。置換の鎖式炭化水素基が有する置換基は１つでも２つ以上でもよい。
置換又は無置換の鎖式炭化水素基の具体例としては、メチル基、エチル基、ビニル基、エチニル基が挙げられる。
置換のスチリル基における置換基としては、例えば、置換又は無置換のアルキル基、ジアルキルアミノ基（ジメチルアミノ基等）が挙げられる。置換のスチリル基が有する置換基は１つでも２つ以上でもよい。
Ｒ３及びＲ５は、蛍光量子収率の点から、それぞれ独立にメチル基又はスチリル基であることが好ましく、メチル基であることが特に好ましい。
置換の鎖式炭化水素基における置換基としては、例えば、アルコキシ基が挙げられる。アルコキシ基の炭素数は、例えば１～３である。置換の鎖式炭化水素基が有する置換基は１つでも２つ以上でもよい。
置換又は無置換の鎖式炭化水素基の具体例としては、メチル基、エチル基、ビニル基、エチニル基が挙げられる。
置換のスチリル基における置換基としては、例えば、置換又は無置換のアルキル基、ジアルキルアミノ基（ジメチルアミノ基等）が挙げられる。置換のスチリル基が有する置換基は１つでも２つ以上でもよい。
Ｒ３及びＲ５は、蛍光量子収率の点から、それぞれ独立にメチル基又はスチリル基であることが好ましく、メチル基であることが特に好ましい。
【0033】
Ｘ１及びＸ２において、ＯＲのＲはアルコール残基又は糖残基を示す。
アルコール残基は、アルコールから１つの水酸基を除いた基である。アルコールは１価アルコールでも多価アルコールでもよい。アルコールは、直鎖状でも分岐状でもよい。アルコールの炭素数は、例えば１～１２である。
糖残基は、糖から１つの水酸基を除いた基である。糖の炭素数は、例えば５～１８である。
アルコール又は糖の具体例としては、メタノール、エタノール、２－プロパノール、エチレングリコール、グリセロール、グルコース、ラクトース等が挙げられる。
Ｘ１及びＸ２は、化学的安定性の点では、フッ素原子が好ましい。
Ｘ１及びＸ２は、水溶性増大、生物代謝促進の点では、ＯＲが好ましい。
アルコール残基は、アルコールから１つの水酸基を除いた基である。アルコールは１価アルコールでも多価アルコールでもよい。アルコールは、直鎖状でも分岐状でもよい。アルコールの炭素数は、例えば１～１２である。
糖残基は、糖から１つの水酸基を除いた基である。糖の炭素数は、例えば５～１８である。
アルコール又は糖の具体例としては、メタノール、エタノール、２－プロパノール、エチレングリコール、グリセロール、グルコース、ラクトース等が挙げられる。
Ｘ１及びＸ２は、化学的安定性の点では、フッ素原子が好ましい。
Ｘ１及びＸ２は、水溶性増大、生物代謝促進の点では、ＯＲが好ましい。
【0034】
以下に、化合物（１）の具体例（Ｒ１～Ｒ５、Ｘ１及びＸ２の組み合わせ例）を示す。以下において、Ｆはフッ素原子を示す。
化合物（１－１ａ）：Ｒ１＝２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－１ｂ）：Ｒ１＝２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１ｃ）：Ｒ１＝２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－２ａ）：Ｒ１＝３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－２ｂ）：Ｒ１＝３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－２ｃ）：Ｒ１＝３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－３ａ）：Ｒ１＝４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－３ｂ）：Ｒ１＝４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－３ｃ）：Ｒ１＝４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－４ａ）：Ｒ１＝６－メチル－２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－４ｂ）：Ｒ１＝６－メチル－２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－４ｃ）：Ｒ１＝６－メチル－２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－５ａ）：Ｒ１＝６－メチル－３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－５ｂ）：Ｒ１＝６－メチル－３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－５ｃ）：Ｒ１＝６－メチル－３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－６ａ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－６ｂ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－６ｃ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－７ａ）：Ｒ１＝２－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－７ｂ）：Ｒ１＝２－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－７ｃ）：Ｒ１＝２－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－８ａ）：Ｒ１＝３－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－８ｂ）：Ｒ１＝３－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－８ｃ）：Ｒ１＝３－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－９ａ）：Ｒ１＝４－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－９ｂ）：Ｒ１＝４－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－９ｃ）：Ｒ１＝４－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１０ａ）：Ｒ１＝３，５－ジメチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝スチリル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝スチリル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－１０ｂ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１０ｃ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１１ａ）：Ｒ１＝３，５－ジメチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－１１ｂ）：Ｒ１＝３，５－ジメチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１１ｃ）：Ｒ１＝３，５－ジメチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１ａ）：Ｒ１＝２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－１ｂ）：Ｒ１＝２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１ｃ）：Ｒ１＝２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－２ａ）：Ｒ１＝３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－２ｂ）：Ｒ１＝３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－２ｃ）：Ｒ１＝３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－３ａ）：Ｒ１＝４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－３ｂ）：Ｒ１＝４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－３ｃ）：Ｒ１＝４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－４ａ）：Ｒ１＝６－メチル－２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－４ｂ）：Ｒ１＝６－メチル－２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－４ｃ）：Ｒ１＝６－メチル－２－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－５ａ）：Ｒ１＝６－メチル－３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－５ｂ）：Ｒ１＝６－メチル－３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－５ｃ）：Ｒ１＝６－メチル－３－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－６ａ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－６ｂ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－６ｃ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－７ａ）：Ｒ１＝２－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－７ｂ）：Ｒ１＝２－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－７ｃ）：Ｒ１＝２－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－８ａ）：Ｒ１＝３－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－８ｂ）：Ｒ１＝３－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－８ｃ）：Ｒ１＝３－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－９ａ）：Ｒ１＝４－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－９ｂ）：Ｒ１＝４－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－９ｃ）：Ｒ１＝４－キノリル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１０ａ）：Ｒ１＝３，５－ジメチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝スチリル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝スチリル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－１０ｂ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１０ｃ）：Ｒ１＝６－メチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１１ａ）：Ｒ１＝３，５－ジメチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝Ｆ。
化合物（１－１１ｂ）：Ｒ１＝３，５－ジメチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝Ｆ、Ｘ２＝ＯＲ。
化合物（１－１１ｃ）：Ｒ１＝３，５－ジメチル－４－ピリジル基、Ｒ２＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ３＝メチル基、Ｒ４＝２－トリメチルアンモニウム置換フェニル基、Ｒ５＝メチル基、Ｘ１＝ＯＲ、Ｘ２＝ＯＲ。
【0035】
化合物（１）の分子量は、６００未満が好ましく、５００以下がより好ましい。分子量が６００未満であれば、イメージング等、空間分解能が求められる測定において、優れた空間分解能が得られ易い。
化合物（１）の分子量の下限は、上記式（１）を満たす範囲であれば特に制限はないが、例えば４５０である。
化合物（１）の分子量の下限は、上記式（１）を満たす範囲であれば特に制限はないが、例えば４５０である。
【0036】
化合物（１）は、例えば、化合物（３）と化合物（４）とを反応させ、得られた化合物（５）と化合物（６）とを塩化ホスホリル（ＰＯＣｌ３）の存在下で反応させ、得られた化合物（７）と三フッ化ホウ素エーテル錯体とを三級アミンの存在下で反応させる方法により製造できる。これにより、Ｘ１及びＸ２がフッ素原子である化合物（１）が得られる。
その後、必要に応じて、生成した化合物とアルコール又は糖（ＲＯＨ）とを反応させる。これにより、２個のフッ素原子いずれか一方又は両方がＯＲで置換され、Ｘ１及びＸ２の一方がフッ素原子で、他方がＯＲである化合物（１）、又はＸ１及びＸ２がＯＲである化合物が得られる。
その後、必要に応じて、生成した化合物とアルコール又は糖（ＲＯＨ）とを反応させる。これにより、２個のフッ素原子いずれか一方又は両方がＯＲで置換され、Ｘ１及びＸ２の一方がフッ素原子で、他方がＯＲである化合物（１）、又はＸ１及びＸ２がＯＲである化合物が得られる。
【0037】
【化5】
【0038】
Ｒ１～Ｒ５は前記と同義である。
化合物（３）、（４）、（６）はそれぞれ市販品を使用できる。公知の方法により合成したものを用いてもよい。
三フッ化ホウ素エーテル錯体としては、例えば三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（ＢＦ３・ＯＥｔ２）が挙げられる。ここで、Ｅｔはエチル基を示す。
三級アミンとしては、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。
化合物（３）、（４）、（６）はそれぞれ市販品を使用できる。公知の方法により合成したものを用いてもよい。
三フッ化ホウ素エーテル錯体としては、例えば三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（ＢＦ３・ＯＥｔ２）が挙げられる。ここで、Ｅｔはエチル基を示す。
三級アミンとしては、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。
【0039】
化合物（３）と化合物（４）との反応は、例えば、化合物（３）及び化合物（４）を溶媒に添加し、不活性雰囲気下（例えばＮ２雰囲気下）、１５～３０℃で１２～７２時間反応させる方法により実施できる。
溶媒としては、例えばジクロロメタン、クロロホルム、トルエンが挙げられる。
溶媒としては、例えばジクロロメタン、クロロホルム、トルエンが挙げられる。
【0040】
化合物（５）と化合物（６）との反応は、例えば、化合物（５）及び化合物（６）を、塩化ホスホリルを溶媒に溶解した溶液に添加し、１５～３０℃で１２～７２時間反応させる方法により実施できる。
塩化ホスホリルの使用量は、例えば、化合物（５）１００質量部に対して２００～３００質量部である。
反応後、必要に応じて、洗浄、抽出等を行ってもよい。
塩化ホスホリルの使用量は、例えば、化合物（５）１００質量部に対して２００～３００質量部である。
反応後、必要に応じて、洗浄、抽出等を行ってもよい。
【0041】
化合物（７）と三フッ化ホウ素エーテル錯体との反応は、例えば、化合物（７）を溶媒に溶解した溶液に、三級アミン、三フッ化ホウ素エーテル錯体を順次加え、１５～３０℃で１２～７２時間反応させる方法により実施できる。
反応後、必要に応じて、反応物の精製等を行ってもよい。
三級アミンとしては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。
三級アミンの使用量は、例えば、化合物（７）１００質量部に対して５００～１０００質量部である。
反応後、必要に応じて、精製等を行ってもよい。
反応後、必要に応じて、反応物の精製等を行ってもよい。
三級アミンとしては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンが挙げられる。
三級アミンの使用量は、例えば、化合物（７）１００質量部に対して５００～１０００質量部である。
反応後、必要に応じて、精製等を行ってもよい。
【0042】
Ｘ１及びＸ２がフッ素原子である化合物（１）と反応させるアルコール又は糖としては、ＯＲに対応するものが用いられる。
Ｘ１及びＸ２がフッ素原子である化合物（１）とアルコール又は糖とは、比較的温和な条件（例えば、常温・常圧下）で反応させることができる。
反応後、必要に応じて、精製等を行ってもよい。
Ｘ１及びＸ２がフッ素原子である化合物（１）とアルコール又は糖とは、比較的温和な条件（例えば、常温・常圧下）で反応させることができる。
反応後、必要に応じて、精製等を行ってもよい。
【0043】
ただし、化合物（１）の製造方法は上記の方法に限定されるものではなく、ＢＯＤＩＰＹ色素等の合成方法として公知の方法を参照して適宜変更を加えることができる。
【0044】
化合物（１）は、塩の形態としてもよい。
塩としては、例えば、トリフルオロ酢酸塩、ホウフッ化水素酸塩が挙げられる。
塩としては、例えば、トリフルオロ酢酸塩、ホウフッ化水素酸塩が挙げられる。
【0045】
以上説明した化合物（１）にあっては、上記構造を有することから、ｐＨの変化に応じて蛍光波長シフトが生じる。一例を挙げると、化合物（１）の溶液のｐＨを段階的に変化させ、各溶液に励起光を照射したときに、溶液のｐＨの変化に応じて、溶液からの蛍光の色調が変化する。他の例を挙げると、化合物（１）の溶液のｐＨを段階的に変化させ、各溶液に励起光を照射し、溶液からの蛍光スペクトルを測定し、互いに異なる２波長の蛍光強度の比を求めたときに、溶液のｐＨの変化に応じて、蛍光強度の比が変化する。
化合物（１）のＲ１中のピリジン環窒素は可逆的にプロトン化され、ｐＨが変化すると、ピリジン環窒素がプロトン化されていない化合物（１）と、ピリジン環窒素がプロトン化された化合物（１）との比率が変化する。具体的には、ｐＨが低く（高く）なると、プロトン化された化合物（１）の比率が高く（低く）なる。
ＢＰＤＩＰＹのメソ位置換基であるＲ１の構造が変化すると、蛍光の波長も変化する。ｐＨの変化に応じて、ピリジン環窒素がプロトン化されていない化合物（１）と、ピリジン環窒素がプロトン化された化合物（１）との比率が変化することで、蛍光波長シフトが生じ、全体としての色調や蛍光強度の比が変化すると考えられる。
化合物（１）のＲ１中のピリジン環窒素は可逆的にプロトン化され、ｐＨが変化すると、ピリジン環窒素がプロトン化されていない化合物（１）と、ピリジン環窒素がプロトン化された化合物（１）との比率が変化する。具体的には、ｐＨが低く（高く）なると、プロトン化された化合物（１）の比率が高く（低く）なる。
ＢＰＤＩＰＹのメソ位置換基であるＲ１の構造が変化すると、蛍光の波長も変化する。ｐＨの変化に応じて、ピリジン環窒素がプロトン化されていない化合物（１）と、ピリジン環窒素がプロトン化された化合物（１）との比率が変化することで、蛍光波長シフトが生じ、全体としての色調や蛍光強度の比が変化すると考えられる。
【0046】
前述の特許文献２には、ＢＯＤＩＰＹのメソ位（８位）にＮ－アルキルピリジニウム基を導入し、ＢＯＤＩＰＹの１位と７位にメチル基を導入した化合物が記載されている。１，７位にメチル基が導入されている場合、メソ位の置換基の回転が完全に阻害され、ＯＮ－ＯＦＦ型にしかできない。一方、１，７位のメチル基が存在しないと、蛍光がクエンチングする。
本態様においては、ＢＯＤＩＰＹのメソ位にピリジン構造を導入するとともに、１，７位に芳香族構造を導入し、ＢＯＤＩＰＹを唯一の発色団とするテトラド型分子を構築することにより、ＢＯＤＩＰＹとメソ位の置換基との共役の程度を制御して蛍光波長シフトを生じさせることができる。また、メソ位の置換基と１，７位の芳香族構造による疎水性パッキングにより、化合物（１）を溶解する溶媒との摩擦（無輻射失活を引き起こすと想定される）を回避して蛍光強度を維持できる。
本態様においては、ＢＯＤＩＰＹのメソ位にピリジン構造を導入するとともに、１，７位に芳香族構造を導入し、ＢＯＤＩＰＹを唯一の発色団とするテトラド型分子を構築することにより、ＢＯＤＩＰＹとメソ位の置換基との共役の程度を制御して蛍光波長シフトを生じさせることができる。また、メソ位の置換基と１，７位の芳香族構造による疎水性パッキングにより、化合物（１）を溶解する溶媒との摩擦（無輻射失活を引き起こすと想定される）を回避して蛍光強度を維持できる。
【0047】
ｐＨの変化に応じて蛍光波長シフトが生じることから、化合物（１）を蛍光プローブとして用いることで、ｐＨのレシオメトリック測定が可能となる。また、化合物（１）は低分子化合物であることから、空間分解能に優れ、イメージング等、空間分解能が求められる測定に有用である。例えば、化合物（１）は低分子化合物であることから細胞内への導入が可能であり、細胞内ｐＨのイメージングが可能である。化合物（１）やその塩を含む蛍光プローブの使用方法は、従来の蛍光プローブの使用方法と同様であってよい。
前記した色調や蛍光強度の比は、化合物（１）の酸解離定数ｐＫａ付近での変化が大きい。そのため、ｐＨ測定においては、測定対象のｐＨ範囲に適したｐＫａを持つ化合物（１）を用いることが望ましい。化合物（１）にあっては、Ｒ１の構造を選択することによって、化合物（１）のｐＫａを、例えば１．２～３．７の範囲で制御でき、様々な測定対象に適用できる。例えば胃酸のような強酸性の試料にも適用できる。
ｐＫａは、ｐＨ応答により得られたシグモイド曲線の変曲点により求められる。
前記した色調や蛍光強度の比は、化合物（１）の酸解離定数ｐＫａ付近での変化が大きい。そのため、ｐＨ測定においては、測定対象のｐＨ範囲に適したｐＫａを持つ化合物（１）を用いることが望ましい。化合物（１）にあっては、Ｒ１の構造を選択することによって、化合物（１）のｐＫａを、例えば１．２～３．７の範囲で制御でき、様々な測定対象に適用できる。例えば胃酸のような強酸性の試料にも適用できる。
ｐＫａは、ｐＨ応答により得られたシグモイド曲線の変曲点により求められる。
【実施例0048】
以下、実施例によって本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されない。
化合物の同定、評価に使用した機器を以下に示す。
蛍光スペクトル：島津製作所社製分光蛍光光度計「ＲＦ－１５００」。
絶対量子収率：浜松ホトニクス社製「Ｃ９９２０－０２Ｇ」。
ＵＶ吸収スペクトル：島津製作所社製紫外可視吸光光度計「ＵＶ－３１００ＰＣ」。
赤外吸収スペクトル（ＩＲ）：サーモフィッシャーサイエンティフィック社製「Ｎｉｃｏｌｅｔ Ｎｅｘｕｓ ６７０ＮＴ ＦＴ－ＩＲ」。
核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）：アジレント・テクノロジー社製「ＮＭＲ Ｓｙｓｔｅｍ ５００ＰＳ ＳＮ」。
高分解能質量分析（ＨＲＭＳ）：日本電子社製「ＪＭＳ－７００Ｎ」。
化合物の同定、評価に使用した機器を以下に示す。
蛍光スペクトル：島津製作所社製分光蛍光光度計「ＲＦ－１５００」。
絶対量子収率：浜松ホトニクス社製「Ｃ９９２０－０２Ｇ」。
ＵＶ吸収スペクトル：島津製作所社製紫外可視吸光光度計「ＵＶ－３１００ＰＣ」。
赤外吸収スペクトル（ＩＲ）：サーモフィッシャーサイエンティフィック社製「Ｎｉｃｏｌｅｔ Ｎｅｘｕｓ ６７０ＮＴ ＦＴ－ＩＲ」。
核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）：アジレント・テクノロジー社製「ＮＭＲ Ｓｙｓｔｅｍ ５００ＰＳ ＳＮ」。
高分解能質量分析（ＨＲＭＳ）：日本電子社製「ＪＭＳ－７００Ｎ」。
【0049】
（合成例１：２－メチル－４－フェニルピロールの合成）
ＮａＮＯ３水溶液５ｍＬ（ＮａＮＯ３換算で４０２ｍｇ、５．８３ｍｍｏｌ）を、０℃で、酢酸１０ｍＬにベンゾイル酢酸エチル１ｍＬ（５．８３ｍｍｏｌ）を溶解した溶液に加え、その混合物を室温で２時間撹拌した。続いて、得られた溶液を、酢酸４ｍＬに亜鉛７６２ｍｇ（１１．６５ｍｍｏｌ）及びアセト酢酸エチル０．７３６ｍＬ（５．８３ｍｍｏｌ）を混合した混合物に加え、１２０℃で一晩還流させた。次に、得られた反応物を水で洗浄し、酢酸エチルによる抽出を行った。抽出された有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製してジエチル ｌ ５－メチル－３－フェニル－１Ｈ－ピロール－２，４－ジカルボキシレート（１．１１ｇ、収率６３％）を得た。
次いで、ジエチル ｌ ５－メチル－３－フェニル－１Ｈ－ピロール－２，４－ジカルボキシレート７１４ｍｇ（２．３７ｍｍｏｌ）及びＫＯＨ６５２ｍｇ（１１．６２ｍｍｏｌ）をエチレングリコールと混合し、得られた混合物を１７０℃で３時間撹拌した。その後、水で洗浄し、ジクロロメタンによる抽出を行った。抽出された有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して２－メチル－４－フェニルピロール（２９７ｍｇ、収率８０％）を得た。
ＮａＮＯ３水溶液５ｍＬ（ＮａＮＯ３換算で４０２ｍｇ、５．８３ｍｍｏｌ）を、０℃で、酢酸１０ｍＬにベンゾイル酢酸エチル１ｍＬ（５．８３ｍｍｏｌ）を溶解した溶液に加え、その混合物を室温で２時間撹拌した。続いて、得られた溶液を、酢酸４ｍＬに亜鉛７６２ｍｇ（１１．６５ｍｍｏｌ）及びアセト酢酸エチル０．７３６ｍＬ（５．８３ｍｍｏｌ）を混合した混合物に加え、１２０℃で一晩還流させた。次に、得られた反応物を水で洗浄し、酢酸エチルによる抽出を行った。抽出された有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製してジエチル ｌ ５－メチル－３－フェニル－１Ｈ－ピロール－２，４－ジカルボキシレート（１．１１ｇ、収率６３％）を得た。
次いで、ジエチル ｌ ５－メチル－３－フェニル－１Ｈ－ピロール－２，４－ジカルボキシレート７１４ｍｇ（２．３７ｍｍｏｌ）及びＫＯＨ６５２ｍｇ（１１．６２ｍｍｏｌ）をエチレングリコールと混合し、得られた混合物を１７０℃で３時間撹拌した。その後、水で洗浄し、ジクロロメタンによる抽出を行った。抽出された有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して２－メチル－４－フェニルピロール（２９７ｍｇ、収率８０％）を得た。
【0050】
【化6】
【0051】
（実施例１）
＜２ｑｕＢＯＤの製造＞
式（１）中のＲ１が２－キノリル基、Ｒ２及びＲ４がフェニル基、Ｒ３及びＲ５がメチル基である化合物（以下、「２ｑｕＢＯＤ」とも記す。）（分子量４９９．３６）を以下の手順で製造した。
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩（２１０ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、続いて２－メチル－４－フェニルピロール（１４５ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を、Ｎ２雰囲気下、室温で一晩撹拌した。得られた粗ケトン（１６５ｍｇ）及び２－メチル－４－フェニルピロール（１４６ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を、０℃で、ＰＯＣｌ３（１．９５ｍｍｏｌ）を加えたジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解した。得られた混合物を３０℃で４８時間撹拌し、水で洗浄し、ジクロロメタンによる抽出を行った。抽出された有機相を乾燥し、精製せずに再びジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解した。この溶液に、トリエチルアミン（５ｍｍｏｌ）及び三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（７ｍｍｏｌ）を順番に加え、反応を一晩行った。得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、目的の化合物（６７ｍｇ、収率１４．５％）を得た。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．７０（６Ｈ，ｓ），６．２０（２Ｈ，ｓ），６．４４（６Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．６２（４Ｈ，ｍ），６．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３８（２Ｈ，ｍ），７．４７（１Ｈ，ｍ），７．５５（１Ｈ，ｍ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．８７，１２１．４８，１２３．９８，１２５．６７，１２６．６２，１２６．７４，１２６．８２，１２８．１８，１２８．７４，１２８．９８，１３１．２３，１３３．９９，１３５．００，１４６．１７，１４７．４１，１５０．９３，１５６．６３；ＩＲ（ＡＴＲ） ６９６．２，７５９．８，９７４．８，１０８０．９，１１１０．８，１１６４．８，１２０３．４，１４８７．８，１５４１．８ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３２Ｈ２４ＢＦ２Ｎ３［Ｍ］，４９９．２０３１，Ｆｏｕｎｄ ４９９．２０３１；融点２３６－２４１℃．
＜２ｑｕＢＯＤの製造＞
式（１）中のＲ１が２－キノリル基、Ｒ２及びＲ４がフェニル基、Ｒ３及びＲ５がメチル基である化合物（以下、「２ｑｕＢＯＤ」とも記す。）（分子量４９９．３６）を以下の手順で製造した。
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩（２１０ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、続いて２－メチル－４－フェニルピロール（１４５ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を、Ｎ２雰囲気下、室温で一晩撹拌した。得られた粗ケトン（１６５ｍｇ）及び２－メチル－４－フェニルピロール（１４６ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を、０℃で、ＰＯＣｌ３（１．９５ｍｍｏｌ）を加えたジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解した。得られた混合物を３０℃で４８時間撹拌し、水で洗浄し、ジクロロメタンによる抽出を行った。抽出された有機相を乾燥し、精製せずに再びジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解した。この溶液に、トリエチルアミン（５ｍｍｏｌ）及び三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（７ｍｍｏｌ）を順番に加え、反応を一晩行った。得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、目的の化合物（６７ｍｇ、収率１４．５％）を得た。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．７０（６Ｈ，ｓ），６．２０（２Ｈ，ｓ），６．４４（６Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．６２（４Ｈ，ｍ），６．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３８（２Ｈ，ｍ），７．４７（１Ｈ，ｍ），７．５５（１Ｈ，ｍ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．８７，１２１．４８，１２３．９８，１２５．６７，１２６．６２，１２６．７４，１２６．８２，１２８．１８，１２８．７４，１２８．９８，１３１．２３，１３３．９９，１３５．００，１４６．１７，１４７．４１，１５０．９３，１５６．６３；ＩＲ（ＡＴＲ） ６９６．２，７５９．８，９７４．８，１０８０．９，１１１０．８，１１６４．８，１２０３．４，１４８７．８，１５４１．８ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３２Ｈ２４ＢＦ２Ｎ３［Ｍ］，４９９．２０３１，Ｆｏｕｎｄ ４９９．２０３１；融点２３６－２４１℃．
【0052】
【化7】
【0053】
【化8】
【0054】
２ｑｕＢＯＤを溶媒に溶解し、励起波長λＡｂｓ、蛍光波長λｅｍ、モル吸光係数、蛍光量子収率φｆを求めた。結果を表１に示す。ＡＣＮはアセトニトリルを示す。
【0055】
【表1】
【0056】
＜ｐＨ変化によるＵＶ吸収スペクトル変化の評価＞
２ｑｕＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸でｐＨを３．６から０．２まで段階的に変化させた。
各溶液についてＵＶ吸収スペクトルを測定した。結果を図１に示す。
図１に示すように、ｐＨ３．６のときは波長５２０ｎｍ付近に吸収のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５２０ｎｍ付近の吸収が小さくなり、ピークが長波長側にシフトし、ｐＨ０．２のときは波長５２８ｎｍ付近にピークが見られた。
ｐＨ３．６付近では、プロトン化されていない２ｑｕＢＯＤが主に存在し、ｐＨ０．２付近では、プロトン化された２ｑｕＢＯＤ（２ｑｕＢＯＤ－Ｈ）が主に存在していたと考えられる。
２ｑｕＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸でｐＨを３．６から０．２まで段階的に変化させた。
各溶液についてＵＶ吸収スペクトルを測定した。結果を図１に示す。
図１に示すように、ｐＨ３．６のときは波長５２０ｎｍ付近に吸収のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５２０ｎｍ付近の吸収が小さくなり、ピークが長波長側にシフトし、ｐＨ０．２のときは波長５２８ｎｍ付近にピークが見られた。
ｐＨ３．６付近では、プロトン化されていない２ｑｕＢＯＤが主に存在し、ｐＨ０．２付近では、プロトン化された２ｑｕＢＯＤ（２ｑｕＢＯＤ－Ｈ）が主に存在していたと考えられる。
【0057】
＜ｐＨ変化による蛍光スペクトル変化の評価＞
２ｑｕＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸でｐＨを２．８から０．２まで段階的に変化させた。各溶液について蛍光スペクトルを測定した。結果を図２に示す。
図２に示すように、ｐＨ２．８のときは波長５４５ｎｍ付近に蛍光強度のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５４５ｎｍ付近の蛍光強度が小さくなり、ピークが長波長側にシフトした。ｐＨ０．２のときは波長５８２ｎｍ付近にピークが見られた。
また、各溶液の蛍光の色調は、ｐＨ２．８のときが緑色で、ｐＨが低下するにつれて黄緑色、黄色、薄い橙色と変化していき、ｐＨ０．２では濃い橙色となった。
２ｑｕＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸でｐＨを２．８から０．２まで段階的に変化させた。各溶液について蛍光スペクトルを測定した。結果を図２に示す。
図２に示すように、ｐＨ２．８のときは波長５４５ｎｍ付近に蛍光強度のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５４５ｎｍ付近の蛍光強度が小さくなり、ピークが長波長側にシフトした。ｐＨ０．２のときは波長５８２ｎｍ付近にピークが見られた。
また、各溶液の蛍光の色調は、ｐＨ２．８のときが緑色で、ｐＨが低下するにつれて黄緑色、黄色、薄い橙色と変化していき、ｐＨ０．２では濃い橙色となった。
【0058】
＜ｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価＞
２ｑｕＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸又は水酸化ナトリウムでｐＨを８から０．２まで段階的に変化させた。各溶液について蛍光スペクトルを測定し、波長５４５ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４５）に対する波長５８２ｎｍの蛍光強度（Ｆ５８２）の比（Ｆ５８２／Ｆ５４５）を求めた。結果を図３に示す。
図３に示すように、ｐＨの変化に応じて蛍光強度比（Ｆ５８２／Ｆ５４５）が変化した。また、その変曲点のｐＨは１．１であった。よって２ｑｕＢＯＤのｐＫａは１．１であった。
２ｑｕＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸又は水酸化ナトリウムでｐＨを８から０．２まで段階的に変化させた。各溶液について蛍光スペクトルを測定し、波長５４５ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４５）に対する波長５８２ｎｍの蛍光強度（Ｆ５８２）の比（Ｆ５８２／Ｆ５４５）を求めた。結果を図３に示す。
図３に示すように、ｐＨの変化に応じて蛍光強度比（Ｆ５８２／Ｆ５４５）が変化した。また、その変曲点のｐＨは１．１であった。よって２ｑｕＢＯＤのｐＫａは１．１であった。
【0059】
（実施例２）
＜２ｐｙＢＯＤの製造＞
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩の代わりにピリジン－２－カルボニルクロリド塩酸塩（１６４ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１と同様にして、式（１）中のＲ１が２－ピリジル基、Ｒ２及びＲ４がフェニル基、Ｒ３及びＲ５がメチル基である化合物（以下、「２ｐｙＢＯＤ」とも記す。）（分子量）を製造した。収率は２６％であった。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．６８（６Ｈ，ｓ），６．２０（２Ｈ，ｓ），６．５１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），６．６９（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），６．８２（９Ｈ，ｍ），７．７１（Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．８７，１２１．７７，１２３．２２，１２６．１５，１２７．２１，１２７．４４，１２８．３６，１３０．９７，１３３．９２，１３５．５２，１４１．０１，１４７．３８，１４７．９７，１５０．２１，１５６．４７；ＩＲ（ＫＢｒ） ６９８，７５４，９７３，１０８１，１１１１，１１６５，１２０６，１５００ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２８Ｈ２３ＢＦ２Ｎ３［Ｍ＋Ｈ］＋，４５０．１９５３，Ｆｏｕｎｄ ４５０．１９６３；Ｄｅｃｏｍｐｏｓｅｄ＞．
＜２ｐｙＢＯＤの製造＞
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩の代わりにピリジン－２－カルボニルクロリド塩酸塩（１６４ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１と同様にして、式（１）中のＲ１が２－ピリジル基、Ｒ２及びＲ４がフェニル基、Ｒ３及びＲ５がメチル基である化合物（以下、「２ｐｙＢＯＤ」とも記す。）（分子量）を製造した。収率は２６％であった。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．６８（６Ｈ，ｓ），６．２０（２Ｈ，ｓ），６．５１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），６．６９（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），６．８２（９Ｈ，ｍ），７．７１（Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．８７，１２１．７７，１２３．２２，１２６．１５，１２７．２１，１２７．４４，１２８．３６，１３０．９７，１３３．９２，１３５．５２，１４１．０１，１４７．３８，１４７．９７，１５０．２１，１５６．４７；ＩＲ（ＫＢｒ） ６９８，７５４，９７３，１０８１，１１１１，１１６５，１２０６，１５００ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２８Ｈ２３ＢＦ２Ｎ３［Ｍ＋Ｈ］＋，４５０．１９５３，Ｆｏｕｎｄ ４５０．１９６３；Ｄｅｃｏｍｐｏｓｅｄ＞．
【0060】
【化9】
【0061】
２ｐｙＢＯＤを溶媒に溶解し、励起波長λＡｂｓ、蛍光波長λｅｍ、モル吸光係数、蛍光量子収率φｆを求めた。結果を表２に示す。
【0062】
【表2】
【0063】
＜ｐＨ変化によるＵＶ吸収スペクトル変化の評価＞
２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを４．０から０．９まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして、ｐＨ変化によるＵＶ吸収スペクトル変化を評価した。結果を図４に示す。
図４に示すように、ｐＨ４．０のときは波長５２０ｎｍ付近に吸収のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５２０ｎｍ付近の吸収が小さくなり、ピークが長波長側にシフトし、ｐＨ０．９のときは波長５３５ｎｍ付近にピークが見られた。
ｐＨ４．０付近では、プロトン化されていない２ｐｙＢＯＤが主に存在し、ｐＨ０．９付近では、プロトン化された２ｐｙＢＯＤ（２ｐｙＢＯＤ－Ｈ）が主に存在していたと考えられる。
２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを４．０から０．９まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして、ｐＨ変化によるＵＶ吸収スペクトル変化を評価した。結果を図４に示す。
図４に示すように、ｐＨ４．０のときは波長５２０ｎｍ付近に吸収のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５２０ｎｍ付近の吸収が小さくなり、ピークが長波長側にシフトし、ｐＨ０．９のときは波長５３５ｎｍ付近にピークが見られた。
ｐＨ４．０付近では、プロトン化されていない２ｐｙＢＯＤが主に存在し、ｐＨ０．９付近では、プロトン化された２ｐｙＢＯＤ（２ｐｙＢＯＤ－Ｈ）が主に存在していたと考えられる。
【0064】
＜ｐＨ変化による蛍光スペクトル変化の評価＞
２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを４．０から０．９まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして、ｐＨ変化による蛍光スペクトル変化を評価した。結果を図５に示す。
図５に示すように、ｐＨ４．０のときは波長５４１ｎｍ付近に蛍光強度のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５４１ｎｍ付近の蛍光強度が小さくなり、ピークが長波長側にシフトした。ｐＨ０．９のときは波長５６３ｎｍ付近にピークが見られた。
２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを４．０から０．９まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして、ｐＨ変化による蛍光スペクトル変化を評価した。結果を図５に示す。
図５に示すように、ｐＨ４．０のときは波長５４１ｎｍ付近に蛍光強度のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５４１ｎｍ付近の蛍光強度が小さくなり、ピークが長波長側にシフトした。ｐＨ０．９のときは波長５６３ｎｍ付近にピークが見られた。
【0065】
＜ｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価＞
２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを４．０から０．９まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定し、波長５４１ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４１）に対する波長５６３ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６３）の比（Ｆ５６３／Ｆ５４１）を求めた。結果を図６に示す。
図６に示すように、ｐＨの変化に応じて蛍光強度比（Ｆ５６３／Ｆ５４１）が変化した。また、その変曲点のｐＨは１．７であった。よって２ｐｙＢＯＤのｐＫａは１．７であった。
２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを４．０から０．９まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定し、波長５４１ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４１）に対する波長５６３ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６３）の比（Ｆ５６３／Ｆ５４１）を求めた。結果を図６に示す。
図６に示すように、ｐＨの変化に応じて蛍光強度比（Ｆ５６３／Ｆ５４１）が変化した。また、その変曲点のｐＨは１．７であった。よって２ｐｙＢＯＤのｐＫａは１．７であった。
【0066】
＜ｐＨの繰り返しの切り替えの評価＞
２ｐｙＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸又は水酸化ナトリウムでｐＨ８．３とｐＨ１．２との間でｐＨを繰り返し切り替えた。各溶液について、上記と同様にして蛍光スペクトルを測定し、蛍光強度比（Ｆ５６３／Ｆ５４１）を求めた。結果を図７に示す。
図７に示すように、ｐＨを繰り返し切り替えても、各ｐＨにおける蛍光強度比の値は同等であった。
２ｐｙＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸又は水酸化ナトリウムでｐＨ８．３とｐＨ１．２との間でｐＨを繰り返し切り替えた。各溶液について、上記と同様にして蛍光スペクトルを測定し、蛍光強度比（Ｆ５６３／Ｆ５４１）を求めた。結果を図７に示す。
図７に示すように、ｐＨを繰り返し切り替えても、各ｐＨにおける蛍光強度比の値は同等であった。
【0067】
＜トリフルオロ酢酸濃度の変化による蛍光スペクトル・蛍光強度比の変化の評価＞
２ｐｙＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるようにアセトニトリルに溶解し、トリフルオロ酢酸を添加し、トリフルオロ酢酸濃度が１０μＭ～４ｍＭの溶液を調製した。各溶液について蛍光スペクトルを測定し、波長５６３ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６３）に対する波長５４１ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４１）の比（Ｆ５４１／Ｆ５６３）を求めた。蛍光スペクトルを図８に、蛍光強度比（Ｆ５４１／Ｆ５６３）を図９に示す。
図８に示すように、トリフルオロ酢酸濃度が１０μＭのときは波長５４１ｎｍ付近に吸収のピークが見られた。トリフルオロ酢酸濃度が上昇（ｐＨが低下）するにつれて波長５４１ｎｍ付近の吸収が小さくなり、ピークが長波長側にシフトし、トリフルオロ酢酸濃度が４ｍＭのときは波長５６６ｎｍ付近にピークが見られた。
図９に示すように、トリフルオロ酢酸濃度が高くなるにつれて蛍光強度比（Ｆ５４１／Ｆ５６３）が大きくなっていた。特に、トリフルオロ酢酸濃度が５～７５０μＭの範囲内のときに、良好な相関が得られた。
２ｐｙＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるようにアセトニトリルに溶解し、トリフルオロ酢酸を添加し、トリフルオロ酢酸濃度が１０μＭ～４ｍＭの溶液を調製した。各溶液について蛍光スペクトルを測定し、波長５６３ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６３）に対する波長５４１ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４１）の比（Ｆ５４１／Ｆ５６３）を求めた。蛍光スペクトルを図８に、蛍光強度比（Ｆ５４１／Ｆ５６３）を図９に示す。
図８に示すように、トリフルオロ酢酸濃度が１０μＭのときは波長５４１ｎｍ付近に吸収のピークが見られた。トリフルオロ酢酸濃度が上昇（ｐＨが低下）するにつれて波長５４１ｎｍ付近の吸収が小さくなり、ピークが長波長側にシフトし、トリフルオロ酢酸濃度が４ｍＭのときは波長５６６ｎｍ付近にピークが見られた。
図９に示すように、トリフルオロ酢酸濃度が高くなるにつれて蛍光強度比（Ｆ５４１／Ｆ５６３）が大きくなっていた。特に、トリフルオロ酢酸濃度が５～７５０μＭの範囲内のときに、良好な相関が得られた。
【0068】
（実施例３）
＜６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤの製造＞
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩の代わりに６－メチルピリジン－２－カルボニルクロリド塩酸塩（１７７ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１と同様にして、式（１）中のＲ１が６－メチル－２－ピリジル基、Ｒ２及びＲ４がフェニル基、Ｒ３及びＲ５がメチル基である化合物（以下、「６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ」とも記す。）（分子量＝４６３．３３）を製造した。収率は４２．５％であった。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １．９８（３Ｈ，ｓ），２．６７（６Ｈ，ｓ），６．１９（２Ｈ，ｓ），６．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），６．６５（２Ｈ，ｍ），６．７２ （４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），６．８７（６Ｈ，ｍ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．８５，２３．５０，１１５．１７，１２１．６６，１２２．６５，１２４．５４，１２６．２２，１２７．００，１２８．２８，１３４．５７，１３５．６４，１４７．２９，１４９．４８，１５６．３４，１５６．８１；ＩＲ（ＡＴＲ） ６９５．２，７５３．１，９７０．０，１０６７．４，１１１１．８，１１６１．９，１２０２．４，１３６０．５，１４８７．８，１５４１．８ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２９Ｈ２４ＢＦ２Ｎ３［Ｍ］，４６３．２０３１，Ｆｏｕｎｄ ４６３．２０３１；融点２４８－２５３℃．
＜６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤの製造＞
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩の代わりに６－メチルピリジン－２－カルボニルクロリド塩酸塩（１７７ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１と同様にして、式（１）中のＲ１が６－メチル－２－ピリジル基、Ｒ２及びＲ４がフェニル基、Ｒ３及びＲ５がメチル基である化合物（以下、「６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ」とも記す。）（分子量＝４６３．３３）を製造した。収率は４２．５％であった。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １．９８（３Ｈ，ｓ），２．６７（６Ｈ，ｓ），６．１９（２Ｈ，ｓ），６．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），６．６５（２Ｈ，ｍ），６．７２ （４Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），６．８７（６Ｈ，ｍ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．８５，２３．５０，１１５．１７，１２１．６６，１２２．６５，１２４．５４，１２６．２２，１２７．００，１２８．２８，１３４．５７，１３５．６４，１４７．２９，１４９．４８，１５６．３４，１５６．８１；ＩＲ（ＡＴＲ） ６９５．２，７５３．１，９７０．０，１０６７．４，１１１１．８，１１６１．９，１２０２．４，１３６０．５，１４８７．８，１５４１．８ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２９Ｈ２４ＢＦ２Ｎ３［Ｍ］，４６３．２０３１，Ｆｏｕｎｄ ４６３．２０３１；融点２４８－２５３℃．
【0069】
【化10】
【0070】
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤを溶媒に溶解し、励起波長λＡｂｓ、蛍光波長λｅｍ、モル吸光係数、蛍光量子収率φｆを求めた。結果を表３に示す。
【0071】
【表3】
【0072】
＜ｐＨ変化による蛍光スペクトル変化の評価＞
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを７．３から１．２まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして、ｐＨ変化による蛍光スペクトル変化を評価した。結果を図１０に示す。
図１０に示すように、ｐＨ７．３のときは波長５４０ｎｍ付近に蛍光強度のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５４０ｎｍ付近の蛍光強度が小さくなり、ピークが長波長側にシフトした。ｐＨ１．２のときは波長５６２ｎｍ付近にピークが見られた。
ｐＨ７．３付近では、プロトン化されていない６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤが主に存在し、ｐＨ１．２付近では、プロトン化された６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ（６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ－Ｈ）が主に存在していたと考えられる。
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを７．３から１．２まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして、ｐＨ変化による蛍光スペクトル変化を評価した。結果を図１０に示す。
図１０に示すように、ｐＨ７．３のときは波長５４０ｎｍ付近に蛍光強度のピークが見られた。ｐＨが低下するにつれて波長５４０ｎｍ付近の蛍光強度が小さくなり、ピークが長波長側にシフトした。ｐＨ１．２のときは波長５６２ｎｍ付近にピークが見られた。
ｐＨ７．３付近では、プロトン化されていない６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤが主に存在し、ｐＨ１．２付近では、プロトン化された６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ（６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤ－Ｈ）が主に存在していたと考えられる。
【0073】
＜ｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価＞
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを７．３から１．２まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定し、波長５４０ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４０）に対する波長５６２ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６２）の比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）を求めた。結果を図１１に示す。
図１１に示すように、ｐＨの変化に応じて蛍光強度比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）が変化した。また、その変曲点のｐＨは２．３であった。よって６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤのｐＫａは２．３であった。
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを７．３から１．２まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定し、波長５４０ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４０）に対する波長５６２ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６２）の比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）を求めた。結果を図１１に示す。
図１１に示すように、ｐＨの変化に応じて蛍光強度比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）が変化した。また、その変曲点のｐＨは２．３であった。よって６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤのｐＫａは２．３であった。
【0074】
＜ｐＨの繰り返しの切り替えの評価＞
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸又は水酸化ナトリウムでｐＨ８．５とｐＨ１．８との間でｐＨを繰り返し切り替えた。各溶液について、上記と同様にして蛍光スペクトルを測定し、蛍光強度比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）を求めた。結果を図１２に示す。
図１２に示すように、ｐＨを繰り返し切り替えても、各ｐＨにおける蛍光強度比の値は同等であった。
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるように５０質量％アセトニトリル水溶液に溶解し、塩酸又は水酸化ナトリウムでｐＨ８．５とｐＨ１．８との間でｐＨを繰り返し切り替えた。各溶液について、上記と同様にして蛍光スペクトルを測定し、蛍光強度比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）を求めた。結果を図１２に示す。
図１２に示すように、ｐＨを繰り返し切り替えても、各ｐＨにおける蛍光強度比の値は同等であった。
【0075】
＜トリフルオロ酢酸濃度の変化による蛍光スペクトル・蛍光強度比の変化の評価＞
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるようにアセトニトリルに溶解し、トリフルオロ酢酸を添加し、トリフルオロ酢酸濃度が５μＭ～１ｍＭの溶液を調製した。各溶液について蛍光スペクトルを測定し、波長５６４ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６４）に対する波長５４１ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４１）の比（Ｆ５４１／Ｆ５６４）を求めた。蛍光スペクトルを図１３に、蛍光強度比（Ｆ５４１／Ｆ５６４）を図１４に示す。
図１３に示すように、トリフルオロ酢酸濃度が５μＭのときは波長５４１ｎｍ付近に吸収のピークが見られた。トリフルオロ酢酸濃度が上昇（ｐＨが低下）するにつれて波長５４１ｎｍ付近の吸収が小さくなり、ピークが長波長側にシフトし、トリフルオロ酢酸濃度が１ｍＭのときは波長５６２ｎｍ付近にピークが見られた。
図１４に示すように、トリフルオロ酢酸濃度が高くなるにつれて蛍光強度比（Ｆ５４１／Ｆ５６４）が大きくなっていた。
６Ｍｅ２ｐｙＢＯＤを、最終的な濃度が５．０μＭとなるようにアセトニトリルに溶解し、トリフルオロ酢酸を添加し、トリフルオロ酢酸濃度が５μＭ～１ｍＭの溶液を調製した。各溶液について蛍光スペクトルを測定し、波長５６４ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６４）に対する波長５４１ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４１）の比（Ｆ５４１／Ｆ５６４）を求めた。蛍光スペクトルを図１３に、蛍光強度比（Ｆ５４１／Ｆ５６４）を図１４に示す。
図１３に示すように、トリフルオロ酢酸濃度が５μＭのときは波長５４１ｎｍ付近に吸収のピークが見られた。トリフルオロ酢酸濃度が上昇（ｐＨが低下）するにつれて波長５４１ｎｍ付近の吸収が小さくなり、ピークが長波長側にシフトし、トリフルオロ酢酸濃度が１ｍＭのときは波長５６２ｎｍ付近にピークが見られた。
図１４に示すように、トリフルオロ酢酸濃度が高くなるにつれて蛍光強度比（Ｆ５４１／Ｆ５６４）が大きくなっていた。
【0076】
（実施例４）
＜４ｐｙＢＯＤの製造＞
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩の代わりにピリジン－４－カルボニルクロリド塩酸塩（１６４ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１と同様にして、式（１）中のＲ１が４－ピリジル基、Ｒ２及びＲ４がフェニル基、Ｒ３及びＲ５がメチル基である化合物（以下、「４ｐｙＢＯＤ」とも記す。）（分子量＝４４９．３０）を製造した。収率は２４．１％であった。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．７０（６Ｈ，ｓ），６．２２（２Ｈ，ｓ），６．６６（６Ｈ，ｍ），６．８５（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），６．９７（２Ｈ，ｍ），７．６７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．８９，１２２．１８，１２６．２０，１２７．２１，１２７．３２，１２８．５１，１３４．８７，１４７．３６，１５６．７９；ＩＲ（ＫＢｒ） １０７５，１１１２，１１７１，１２０６，１５０２，１５５２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２８Ｈ２３ＢＦ２Ｎ３［Ｍ＋Ｈ］＋，４５０．１９５３，Ｆｏｕｎｄ ４５０．１９４８；融点２３６－２４１℃．
＜４ｐｙＢＯＤの製造＞
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩の代わりにピリジン－４－カルボニルクロリド塩酸塩（１６４ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１と同様にして、式（１）中のＲ１が４－ピリジル基、Ｒ２及びＲ４がフェニル基、Ｒ３及びＲ５がメチル基である化合物（以下、「４ｐｙＢＯＤ」とも記す。）（分子量＝４４９．３０）を製造した。収率は２４．１％であった。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．７０（６Ｈ，ｓ），６．２２（２Ｈ，ｓ），６．６６（６Ｈ，ｍ），６．８５（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），６．９７（２Ｈ，ｍ），７．６７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．８９，１２２．１８，１２６．２０，１２７．２１，１２７．３２，１２８．５１，１３４．８７，１４７．３６，１５６．７９；ＩＲ（ＫＢｒ） １０７５，１１１２，１１７１，１２０６，１５０２，１５５２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２８Ｈ２３ＢＦ２Ｎ３［Ｍ＋Ｈ］＋，４５０．１９５３，Ｆｏｕｎｄ ４５０．１９４８；融点２３６－２４１℃．
【0077】
【化11】
【0078】
４ｐｙＢＯＤを溶媒に溶解し、励起波長λＡｂｓ、蛍光波長λｅｍ、モル吸光係数、蛍光量子収率φｆを求めた。結果を表４に示す。
【0079】
【表4】
【0080】
＜ｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価＞
４ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを７．０から１．５まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定し、波長５４０ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４０）に対する波長５６２ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６２）の比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）を求めた。結果を図１５に示す。
図１５に示すように、ｐＨの変化に応じて蛍光強度比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）が変化した。また、その変曲点のｐＨは３．３であった。よって２ｐｙＢＯＤのｐＫａは３．３であった。
４ｐｙＢＯＤについて、ｐＨを７．０から１．５まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定し、波長５４０ｎｍの蛍光強度（Ｆ５４０）に対する波長５６２ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６２）の比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）を求めた。結果を図１５に示す。
図１５に示すように、ｐＨの変化に応じて蛍光強度比（Ｆ５６２／Ｆ５４０）が変化した。また、その変曲点のｐＨは３．３であった。よって２ｐｙＢＯＤのｐＫａは３．３であった。
【0081】
（比較例１）
＜化合物５の製造＞
下記式５で表される化合物（以下、「化合物５」とも記す。）（分子量３７２．２２）を以下の手順で製造した。
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩の代わりにジメチルホルムアミド（６７ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）及びＰＯＣｌ３（１．９５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１と同様にして、目的の化合物５（収率６．３％）を得た。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．６６（６Ｈ，ｓ），６．３９（２Ｈ，ｓ），７．２８（１Ｈ，ｓ），７．４１（１０Ｈ，ｍ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．９８，１１７．８４，１２５．８９，１２８．５０，１２８．６０，１２８．９７，１３２．７９，１３３．５４，１４５．４６，１５６．７２；ＩＲ（ＡＴＲ） ６９９．１，７６３．７，９７０．０，１０１８．２，１０６４．５，１１５５．２，１２０１．４，１４８６．８，１５１３．８，１５８５．２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ１９ＢＦ２Ｎ２［Ｍ］，３７２．１６０９，Ｆｏｕｎｄ ３７２．１６１０；融点１９９－２０４℃．
＜化合物５の製造＞
下記式５で表される化合物（以下、「化合物５」とも記す。）（分子量３７２．２２）を以下の手順で製造した。
キノリン－２－カルボニルクロリド塩酸塩の代わりにジメチルホルムアミド（６７ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）及びＰＯＣｌ３（１．９５ｍｍｏｌ）を用いた以外は実施例１と同様にして、目的の化合物５（収率６．３％）を得た。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．６６（６Ｈ，ｓ），６．３９（２Ｈ，ｓ），７．２８（１Ｈ，ｓ），７．４１（１０Ｈ，ｍ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．９８，１１７．８４，１２５．８９，１２８．５０，１２８．６０，１２８．９７，１３２．７９，１３３．５４，１４５．４６，１５６．７２；ＩＲ（ＡＴＲ） ６９９．１，７６３．７，９７０．０，１０１８．２，１０６４．５，１１５５．２，１２０１．４，１４８６．８，１５１３．８，１５８５．２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２３Ｈ１９ＢＦ２Ｎ２［Ｍ］，３７２．１６０９，Ｆｏｕｎｄ ３７２．１６１０；融点１９９－２０４℃．
【0082】
【化12】
【0083】
化合物５を溶媒に溶解し、励起波長λＡｂｓ、蛍光波長λｅｍ、モル吸光係数、蛍光量子収率φｆを求めた。結果を表５に示す。
【0084】
【表5】
【0085】
＜ｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価＞
化合物５について、ｐＨを７．０から１．３まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定したところ、波長のシフトはほとんど観察されなかった（ｐＨ７．０において波長５３８ｎｍ、ｐＨ１．３において波長５３９ｎｍ）。その結果、有効な蛍光強度比を測定できなかった。
化合物５について、ｐＨを７．０から１．３まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定したところ、波長のシフトはほとんど観察されなかった（ｐＨ７．０において波長５３８ｎｍ、ｐＨ１．３において波長５３９ｎｍ）。その結果、有効な蛍光強度比を測定できなかった。
【0086】
（比較例２）
２－ピリジンカルボキサアルデヒド（９９ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、続いて２－メチル－ピロール（１５０ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物にトリフルオロ酢酸（７．７μＬ、０．１ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２雰囲気下、室温で一晩撹拌した。得られた混合物を重曹水に注ぎ、ジクロロメタン５０ｍＬで３回抽出し、ジクロロメタン抽出液を硫酸マグネシウム２ｇで乾燥させた。硫酸マグネシウムを濾過で取り除いた濾液を、減圧下濃縮した。得られた残渣を、ジクロロメタン－水混合溶媒（ジクロロメタン：水＝１：１）１０ｍＬに溶解し、この溶液にジクロロジシアノベンゾキノン（ＤＤＱ）（２０９ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を加えて室温で３０分攪拌した。反応後、混合物を重曹水に注ぎ、ジクロロメタン５０ｍＬで３回抽出し、ジクロロメタン抽出液を硫酸マグネシウム２ｇで乾燥させた。硫酸マグネシウムを濾過で取り除いた濾液を、減圧下濃縮した。得られた残渣を、ジクロロメタン１０ｍＬに溶解させ、この溶液に、トリエチルアミン（１０ｍｍｏｌ）及び三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（７ｍｍｏｌ）を順番に加え、反応を一晩行った。得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、下記式６で表される化合物（以下、「化合物６」とも記す。）を製造した。収率は１７．４％であった。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．６５（６Ｈ，ｓ），６．２８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），６．７９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），７．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３３，５．０Ｈｚ），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．７Ｈｚ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．９５，１１９．８１，１２４．２５，１２６．０３，１３０．４５，１３４．２９，１３６．２６，１３９．２７，１４９．８８，１５２．９４，１５８．３２；ＩＲ（ＫＢｒ） ７２０，９８６，１００９，１０８０，１１５０，１２７５，１４９３，１５５２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１６Ｈ１５ＢＦ２Ｎ３［Ｍ＋Ｈ］＋，２９８．１３２７，Ｆｏｕｎｄ ２９８．１３３０；融点１４１－１４５℃．
２－ピリジンカルボキサアルデヒド（９９ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、続いて２－メチル－ピロール（１５０ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物にトリフルオロ酢酸（７．７μＬ、０．１ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２雰囲気下、室温で一晩撹拌した。得られた混合物を重曹水に注ぎ、ジクロロメタン５０ｍＬで３回抽出し、ジクロロメタン抽出液を硫酸マグネシウム２ｇで乾燥させた。硫酸マグネシウムを濾過で取り除いた濾液を、減圧下濃縮した。得られた残渣を、ジクロロメタン－水混合溶媒（ジクロロメタン：水＝１：１）１０ｍＬに溶解し、この溶液にジクロロジシアノベンゾキノン（ＤＤＱ）（２０９ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を加えて室温で３０分攪拌した。反応後、混合物を重曹水に注ぎ、ジクロロメタン５０ｍＬで３回抽出し、ジクロロメタン抽出液を硫酸マグネシウム２ｇで乾燥させた。硫酸マグネシウムを濾過で取り除いた濾液を、減圧下濃縮した。得られた残渣を、ジクロロメタン１０ｍＬに溶解させ、この溶液に、トリエチルアミン（１０ｍｍｏｌ）及び三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（７ｍｍｏｌ）を順番に加え、反応を一晩行った。得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、下記式６で表される化合物（以下、「化合物６」とも記す。）を製造した。収率は１７．４％であった。
得られた化合物の同定データを以下に示す。この結果から、得られた化合物が以下に示す構造を有することが確認された。
１Ｈ－ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） ２．６５（６Ｈ，ｓ），６．２８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ），６．７９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ），７．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３３，５．０Ｈｚ），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．８４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），８．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．７Ｈｚ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｒ．ｔ．） δ（ｐｐｍ） １４．９５，１１９．８１，１２４．２５，１２６．０３，１３０．４５，１３４．２９，１３６．２６，１３９．２７，１４９．８８，１５２．９４，１５８．３２；ＩＲ（ＫＢｒ） ７２０，９８６，１００９，１０８０，１１５０，１２７５，１４９３，１５５２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１６Ｈ１５ＢＦ２Ｎ３［Ｍ＋Ｈ］＋，２９８．１３２７，Ｆｏｕｎｄ ２９８．１３３０；融点１４１－１４５℃．
【0087】
【化13】
【0088】
化合物６を溶媒に溶解し、励起波長λＡｂｓ、蛍光波長λｅｍ、モル吸光係数、蛍光量子収率φｆを求めた。結果を表６に示す。
【0089】
【表6】
【0090】
＜ｐＨ変化による蛍光強度比変化の評価＞
化合物６について、ｐＨを７．０から１．０まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定したところ、ｐＨ２．０未満の酸性領域で波長５６３ｎｍの蛍光強度の著しい減衰が生じ、波長４３９ｎｍの蛍光強度（Ｆ４３９）に対する波長５６３ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６３）の比を有意な値として求めることは出来なかった。
化合物６について、ｐＨを７．０から１．０まで変化させたこと以外は実施例１と同様にして蛍光スペクトルを測定したところ、ｐＨ２．０未満の酸性領域で波長５６３ｎｍの蛍光強度の著しい減衰が生じ、波長４３９ｎｍの蛍光強度（Ｆ４３９）に対する波長５６３ｎｍの蛍光強度（Ｆ５６３）の比を有意な値として求めることは出来なかった。
【0091】
（分子軌道計算）
実施例１～４の化合物のＵＶ吸収スペクトル及び蛍光スペクトルでは、ｐＨの低下に伴い、ピークが２２～３８ｎｍ程度長波長側にシフトした。この場合、蛍光に関する分子軌道はプロトン化によって再編成する必要がある。
図１６に、アセトニトリル中の２ｐｙＢＯＤ及び２ｐｙＢＯＤ－Ｈについて、基底状態のフロンティア軌道を示す。ａｂ－ｉｎｉｔｉｏ計算は、Ｇａｕｓｓｉａｎ１６により、密度汎関数ＣＡＭ－Ｂ３ＬＹＰ、６－３１Ｇ（ｄ）基底系により行った。
図１６に示すように、メソ置換基とＢＯＤＩＰＹの間の二面角は、アセトニトリル中の基底状態で、２ｐｙＢＯＤで６７．４８°、２ｐｙＢＯＤ－Ｈで６６．２９°と計算された。これらの化合物のＨＯＭＯの形状は似ているが、２ｐｙＢＯＤ－ＨのＬＵＭＯは主にメソ置換基で拡張され、結果としてエネルギーが低下している。
実施例１～４の化合物のＵＶ吸収スペクトル及び蛍光スペクトルでは、ｐＨの低下に伴い、ピークが２２～３８ｎｍ程度長波長側にシフトした。この場合、蛍光に関する分子軌道はプロトン化によって再編成する必要がある。
図１６に、アセトニトリル中の２ｐｙＢＯＤ及び２ｐｙＢＯＤ－Ｈについて、基底状態のフロンティア軌道を示す。ａｂ－ｉｎｉｔｉｏ計算は、Ｇａｕｓｓｉａｎ１６により、密度汎関数ＣＡＭ－Ｂ３ＬＹＰ、６－３１Ｇ（ｄ）基底系により行った。
図１６に示すように、メソ置換基とＢＯＤＩＰＹの間の二面角は、アセトニトリル中の基底状態で、２ｐｙＢＯＤで６７．４８°、２ｐｙＢＯＤ－Ｈで６６．２９°と計算された。これらの化合物のＨＯＭＯの形状は似ているが、２ｐｙＢＯＤ－ＨのＬＵＭＯは主にメソ置換基で拡張され、結果としてエネルギーが低下している。
【0092】
図１７に、アセトニトリル中の２ｐｙＢＯＤ－Ｈ及びプロトン化された化合物５について、ＢＯＤＩＰＹとメソ置換基の間の二面角（４０～１４０°）に依存したエネルギープロファイルを示す。
図１７に示すように、２ｐｙＢＯＤ－Ｈの二面角（４０～１４０°）に依存したエネルギープロファイルは、プロトン化された化合物５の場合とは異なり、９０°で小さな障壁（７．３ｋＪ／ｍｏｌ）の存在を示した。これは、メソ置換基の回転とともに協調して回転する１，７－ジフェニル基によるものと考えられる。
図１７に示すように、２ｐｙＢＯＤ－Ｈの二面角（４０～１４０°）に依存したエネルギープロファイルは、プロトン化された化合物５の場合とは異なり、９０°で小さな障壁（７．３ｋＪ／ｍｏｌ）の存在を示した。これは、メソ置換基の回転とともに協調して回転する１，７－ジフェニル基によるものと考えられる。
【0093】
この計算結果は、上述の評価結果を説明できる。つまり、１，７－ジフェニル基は、メソ置換基とＢＯＤＩＰＹの二面角を６０～７０°で制御する。これにより、ＬＵＭＯとの部分的な結合が可能になり、一方でＨＯＭＯでは不可能になる。メソ置換基がプロトン化されると、ＬＵＭＯエネルギーが低下し、ＬＵＭＯがメソ置換基上に広がり、蛍光シフトを引き起こすと考えられる。
【産業上の利用可能性】
【0094】
本発明の化合物又はその塩は、低分子化合物でありながら、ｐＨの変化に応じて蛍光波長シフトが生じる。そのため、これを蛍光プローブとして用いることで、レシオメトリック測定が可能となる。また、イメージング等、空間分解能が求められる測定において優れた空間分解能が得られる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】