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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022042503
(43)【公開日】2022-03-14
(54)【発明の名称】培養容器及び培養細胞の製造方法
(51)【国際特許分類】
C12M 3/00 20060101AFI20220307BHJP
C12N 5/07 20100101ALI20220307BHJP
【ＦＩ】
C12M3/00 Z
C12N5/07
【審査請求】未請求
【請求項の数】7
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2021142527
(22)【出願日】2021-09-01
(31)【優先権主張番号】P 2020147513
(32)【優先日】2020-09-02
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(71)【出願人】
【識別番号】000158208
【氏名又は名称】ＡＧＣテクノグラス株式会社
(72)【発明者】
【氏名】本杉 聡子
【テーマコード（参考）】
4B029
4B065
【Ｆターム（参考）】
4B029AA08
4B029BB11
4B029GA03
4B029GB10
4B065AA90X
4B065CA60
(57)【要約】
【課題】複数個を積み上げて使用する際の培養細胞の予期せぬ動きを抑制できる培養容器、及び前記培養容器を用いた培養細胞の製造方法を提供することを目的とする。
【解決手段】培養面１８を有し、複数個を積み上げて使用する培養容器１において、培養容器１の上面２２ａに、積み上げられた同型の培養容器１の面方向の動きを規制する突起２６を設け、上面２２ａにおける突起２６の内側の領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ～Ｄとしたとき、支柱を用いて測定される点Ａ～Ｄの高さＨＡ～ＨＤ（ｍｍ）が、０≦ＨＭ／Ｌ×１０００００≦２００（ただし、ＨＭは対角線ＡＣの中点と対角線ＢＤの中点の高さの差であり、Ｌは前記矩形の対角線の長さ（ｍｍ）である。）を満たす。
【選択図】図２
【解決手段】培養面１８を有し、複数個を積み上げて使用する培養容器１において、培養容器１の上面２２ａに、積み上げられた同型の培養容器１の面方向の動きを規制する突起２６を設け、上面２２ａにおける突起２６の内側の領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ～Ｄとしたとき、支柱を用いて測定される点Ａ～Ｄの高さＨＡ～ＨＤ（ｍｍ）が、０≦ＨＭ／Ｌ×１０００００≦２００（ただし、ＨＭは対角線ＡＣの中点と対角線ＢＤの中点の高さの差であり、Ｌは前記矩形の対角線の長さ（ｍｍ）である。）を満たす。
【選択図】図２
【特許請求の範囲】
【請求項1】
培養面を有し、複数個を積み上げて使用する培養容器であって、
前記培養容器の上面には、積み上げられた同型の培養容器が前記上面の面方向に動くことを規制する突起が前記上面の外縁に沿って設けられ、
前記培養容器の上面の平面視形状と相似形状で、かつその周縁が前記突起の上面の内縁に一致する領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとしたとき、
高さが３５ｍｍで、かつ高さ方向に垂直な平坦な上端面を有する支柱上に、前記培養容器を前記培養容器の上面が上を向くように置いた状態で測定される、前記点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄのそれぞれの前記支柱の下端からの高さＨＡ（ｍｍ）、ＨＢ（ｍｍ）、ＨＣ（ｍｍ）、ＨＤ（ｍｍ）が、下式１及び下式２を満たす、培養容器。
０≦ＨＭ／Ｌ×１０００００≦２００ ・・・式１
ＨＭ＝｜（ＨＡ＋ＨＣ）／２－（ＨＢ＋ＨＤ）／２｜ ・・・式２
（ただし、前記式中、Ｌは前記矩形の対角線の長さ（ｍｍ）である。）
前記培養容器の上面には、積み上げられた同型の培養容器が前記上面の面方向に動くことを規制する突起が前記上面の外縁に沿って設けられ、
前記培養容器の上面の平面視形状と相似形状で、かつその周縁が前記突起の上面の内縁に一致する領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとしたとき、
高さが３５ｍｍで、かつ高さ方向に垂直な平坦な上端面を有する支柱上に、前記培養容器を前記培養容器の上面が上を向くように置いた状態で測定される、前記点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄのそれぞれの前記支柱の下端からの高さＨＡ（ｍｍ）、ＨＢ（ｍｍ）、ＨＣ（ｍｍ）、ＨＤ（ｍｍ）が、下式１及び下式２を満たす、培養容器。
０≦ＨＭ／Ｌ×１０００００≦２００ ・・・式１
ＨＭ＝｜（ＨＡ＋ＨＣ）／２－（ＨＢ＋ＨＤ）／２｜ ・・・式２
（ただし、前記式中、Ｌは前記矩形の対角線の長さ（ｍｍ）である。）
【請求項2】
前記培養容器の上面の平面視形状が正円であり、正円の前記領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする、請求項１に記載の培養容器。
【請求項3】
前記培養容器の上面の平面視形状が矩形であり、矩形の前記領域の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする、請求項１に記載の培養容器。
【請求項4】
前記培養面に、細胞接着抑制剤を塗布してなる低接着コート膜が形成されている、請求項１～３のいずれか一項に記載の培養容器。
【請求項5】
前記培養容器の材質が、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、アクリル樹脂、ポリカーボネート樹脂及びシリコーン樹脂から選ばれる少なくとも１種の樹脂である、請求項１～４のいずれか一項に記載の培養容器。
【請求項6】
前記培養面に複数の微細ウェルが形成されている、請求項１～５のいずれか一項に記載の培養容器。
【請求項7】
請求項１～６のいずれか一項に記載の培養容器のみを複数個使用し、細胞培養、及び細胞培養後の運搬のいずれか一方又は両方を、前記培養容器の複数個を積み上げた状態で行う、培養細胞の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、培養容器及び培養細胞の製造方法に関する。
【背景技術】
【0002】
生命現象を解明する基礎研究、創薬研究等においては、培養細胞が広く利用されている。特に３次元培養で得られる細胞が凝集した３次元細胞塊（スフェロイド）は、生体内と同様に立体的な構造を有しているため、２次元培養で得た細胞に比べて試験精度が向上することが期待されている。３次元培養としては、例えば、マイクロプレートの各ウェルの底面や、ディッシュの底面等に孔径１００～１，０００μｍの微細ウェル（マイクロウェル）が多数形成された培養容器（微細加工容器）を用いた培養方法が知られている（特許文献１）。微細加工容器に細胞を播くと、各微細ウェルの中で細胞が会合し、細胞塊が形成される。
【0003】
培養時や運搬時に揺れによって細胞塊が微細ウェルから飛び出すと、細胞塊同士が重なり、プレートリーダー、セルイメージャー等による測定や観察が困難になる。特許文献２には、植物細胞を効率良く培養するために、複数個の培養容器を積み上げて培養することが提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】特許第６４００５７５号公報
【特許文献2】特開２０１１－７８３８６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
培養時や運搬時に複数個の培養容器を積み上げると、揺れを充分に抑制することは困難である。特に微細ウェルから細胞塊が飛び出すことを充分に抑制するには、培養容器を積み重ねた状態での揺れを最小限に留めることが重要である。
【0006】
本発明は、複数個を積み上げた状態の揺れが低減され、培養細胞の予期せぬ動きを抑制できる培養容器、及び前記培養容器を用いた培養細胞の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0007】
本発明は、以下の構成を有する。
［１］培養面を有し、複数個を積み上げて使用する培養容器であって、
前記培養容器の上面には、積み上げられた同型の培養容器が前記上面の面方向に動くことを規制する突起が前記上面の外縁に沿って設けられ、
前記培養容器の上面の平面視形状と相似形状で、かつその周縁が前記突起の上面の内縁に一致する領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとしたとき、
高さが３５ｍｍで、かつ高さ方向に垂直な平坦な上端面を有する支柱上に、前記培養容器を前記培養容器の上面が上を向くように置いた状態で測定される、前記点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄのそれぞれの前記支柱の下端からの高さＨＡ（ｍｍ）、ＨＢ（ｍｍ）、ＨＣ（ｍｍ）、ＨＤ（ｍｍ）が、下式１及び下式２を満たす、培養容器。
０≦ＨＭ／Ｌ×１０００００≦２００ ・・・式１
ＨＭ＝｜（ＨＡ＋ＨＣ）／２－（ＨＢ＋ＨＤ）／２｜ ・・・式２
（ただし、前記式中、Ｌは前記矩形の対角線の長さ（ｍｍ）である。）
［２］前記培養容器の上面の平面視形状が正円であり、正円の前記領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする、［１］に記載の培養容器。
［３］前記培養容器の上面の平面視形状が矩形であり、矩形の前記領域の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする、［１］に記載の培養容器。
［４］前記培養面に、細胞接着抑制剤を塗布してなる低接着コート膜が形成されている、［１］～［３］のいずれかに記載の培養容器。
［５］前記培養容器の材質が、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、アクリル樹脂、ポリカーボネート樹脂及びシリコーン樹脂から選ばれる少なくとも１種の樹脂である、［１］～［４］のいずれかに記載の培養容器。
［６］前記培養面に複数の微細ウェルが形成されている、［１］～［５］のいずれかに記載の培養容器。
［７］［１］～［６］のいずれかに記載の培養容器のみを複数個使用し、細胞培養、及び細胞培養後の運搬のいずれか一方又は両方を、前記培養容器の複数個を積み上げた状態で行う、培養細胞の製造方法。
［１］培養面を有し、複数個を積み上げて使用する培養容器であって、
前記培養容器の上面には、積み上げられた同型の培養容器が前記上面の面方向に動くことを規制する突起が前記上面の外縁に沿って設けられ、
前記培養容器の上面の平面視形状と相似形状で、かつその周縁が前記突起の上面の内縁に一致する領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとしたとき、
高さが３５ｍｍで、かつ高さ方向に垂直な平坦な上端面を有する支柱上に、前記培養容器を前記培養容器の上面が上を向くように置いた状態で測定される、前記点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄのそれぞれの前記支柱の下端からの高さＨＡ（ｍｍ）、ＨＢ（ｍｍ）、ＨＣ（ｍｍ）、ＨＤ（ｍｍ）が、下式１及び下式２を満たす、培養容器。
０≦ＨＭ／Ｌ×１０００００≦２００ ・・・式１
ＨＭ＝｜（ＨＡ＋ＨＣ）／２－（ＨＢ＋ＨＤ）／２｜ ・・・式２
（ただし、前記式中、Ｌは前記矩形の対角線の長さ（ｍｍ）である。）
［２］前記培養容器の上面の平面視形状が正円であり、正円の前記領域内で面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする、［１］に記載の培養容器。
［３］前記培養容器の上面の平面視形状が矩形であり、矩形の前記領域の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする、［１］に記載の培養容器。
［４］前記培養面に、細胞接着抑制剤を塗布してなる低接着コート膜が形成されている、［１］～［３］のいずれかに記載の培養容器。
［５］前記培養容器の材質が、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、アクリル樹脂、ポリカーボネート樹脂及びシリコーン樹脂から選ばれる少なくとも１種の樹脂である、［１］～［４］のいずれかに記載の培養容器。
［６］前記培養面に複数の微細ウェルが形成されている、［１］～［５］のいずれかに記載の培養容器。
［７］［１］～［６］のいずれかに記載の培養容器のみを複数個使用し、細胞培養、及び細胞培養後の運搬のいずれか一方又は両方を、前記培養容器の複数個を積み上げた状態で行う、培養細胞の製造方法。
【発明の効果】
【0008】
本発明によれば、複数個を積み上げた状態の揺れが低減され、培養細胞の予期せぬ動きを抑制できる培養容器、及び前記培養容器を用いた培養細胞の製造方法を提供することを目的とする。
【図面の簡単な説明】
【0009】
【発明を実施するための形態】
【0010】
本明細書における用語の意味及び定義は以下である。
「～」で表される数値範囲は、～の前後の数値を下限値及び上限値とする数値範囲を意味する。
「微細ウェルの開口端」とは、微細ウェルを全周にわたって周回する最上部を結んだ境界線である。微細ウェルの周囲に平坦面がある場合、その平坦面と微細ウェルの落ち込みとの境界線が微細ウェルの開口端である。
「微細ウェルの開口形状」とは、開口端の平面視形状である。
「微細ウェルの開口の直径」とは、微細ウェルの開口端の平面視での直径であり、開口端の平面視形状が正円でない場合はその平面視形状に対する内接円の直径とする。
「微細ウェルの開口面積」とは、平面視で微細ウェルの開口端が占める領域の面積である。
「微細ウェルの深さ」は、微細ウェルを周回する最上部に上方から最も多く接する面を基準面としたときの、微細ウェルの最深部と基準面との距離である。微細ウェルの周囲が平坦面である場合、その平坦面は基準面と一致する。
「～」で表される数値範囲は、～の前後の数値を下限値及び上限値とする数値範囲を意味する。
「微細ウェルの開口端」とは、微細ウェルを全周にわたって周回する最上部を結んだ境界線である。微細ウェルの周囲に平坦面がある場合、その平坦面と微細ウェルの落ち込みとの境界線が微細ウェルの開口端である。
「微細ウェルの開口形状」とは、開口端の平面視形状である。
「微細ウェルの開口の直径」とは、微細ウェルの開口端の平面視での直径であり、開口端の平面視形状が正円でない場合はその平面視形状に対する内接円の直径とする。
「微細ウェルの開口面積」とは、平面視で微細ウェルの開口端が占める領域の面積である。
「微細ウェルの深さ」は、微細ウェルを周回する最上部に上方から最も多く接する面を基準面としたときの、微細ウェルの最深部と基準面との距離である。微細ウェルの周囲が平坦面である場合、その平坦面は基準面と一致する。
【0011】
以下、本発明の培養容器の実施形態の一例を示し、図面に基づいて説明する。なお、以下の説明において例示される図の寸法等は一例であって、本発明はそれらに必ずしも限定されるものではなく、その要旨を変更しない範囲で適宜変更して実施することが可能である。
【0012】
［第１実施形態］
図１及び図２に示すように、本実施形態の培養容器１は、容器本体１０と、蓋部２０とを備えるディッシュである。
容器本体１０は、円板状の底部１２と、底部１２の外縁部から全周にわたって垂直に立ち上がる周壁部１４と、底部１２の下面１２ｂに、その外縁に沿って全周にわたって下方に突出して設けられた円環状の環状突起１６と、を備えている。容器本体１０の底面、すなわち底部１２の上面１２ａは培養面１８になっている。図５に示すように、この例の容器本体１０の培養面１８には、複数の微細ウェル１９が形成されている。すなわち、培養容器１は複数の微細ウェル１９を有する微細加工容器である。
図１及び図２に示すように、本実施形態の培養容器１は、容器本体１０と、蓋部２０とを備えるディッシュである。
容器本体１０は、円板状の底部１２と、底部１２の外縁部から全周にわたって垂直に立ち上がる周壁部１４と、底部１２の下面１２ｂに、その外縁に沿って全周にわたって下方に突出して設けられた円環状の環状突起１６と、を備えている。容器本体１０の底面、すなわち底部１２の上面１２ａは培養面１８になっている。図５に示すように、この例の容器本体１０の培養面１８には、複数の微細ウェル１９が形成されている。すなわち、培養容器１は複数の微細ウェル１９を有する微細加工容器である。
【0013】
蓋部２０は、円板状の上面部２２と、上面部２２の外縁部から全周にわたって垂直に垂下された周壁部２４と、上面部２２の上面２２ａに、上面２２ａの外縁に沿って全周にわたって上方に突出して設けられた円環状の突起２６と、を備えている。
【0014】
培養容器１では、容器本体１０に蓋部２０を被せることで、容器本体１０の培養面１８の上方の開口を開閉自在に閉じることができる。容器本体１０に蓋部２０を被せた状態では、蓋部２０の周壁部２４が容器本体１０の周壁部１４の外側に位置する。
【0015】
図３に示すように、培養容器１は、容器本体１０に蓋部２０を被せた状態で、複数個を積み重ねることができる。同型の複数個の培養容器１を積み重ねた状態では、蓋部２０の上面２２ａ上に積み重ねられた培養容器１の容器本体１０の環状突起１６が、蓋部２０の突起２６の内側に嵌まる。これにより、蓋部２０の上面２２ａの面方向における、蓋部２０の上面２２ａ上に積み重ねられた培養容器１の動きが規制される。
【0016】
突起２６の長さ方向に垂直な断面形状は、この例では矩形であるが、蓋部２０の上面２２ａ上に積み重ねられた培養容器１の動きを規制できる範囲であれば、半円形等であってもよい。
蓋部２０の上面２２ａに設けられる突起２６は、蓋部２０の上面２２ａ上に積み重ねられた培養容器１の面方向の動きを規制できる範囲であれば、環状の連続した突起には限定されず、複数の突起が断続的に形成されていてもよい。
蓋部２０の上面２２ａに設けられる突起２６は、蓋部２０の上面２２ａ上に積み重ねられた培養容器１の面方向の動きを規制できる範囲であれば、環状の連続した突起には限定されず、複数の突起が断続的に形成されていてもよい。
【0017】
培養容器１は、以下に説明する測定方法によって測定される点Ａ～Ｄの４点の高さが特定の条件を満たす。
まず、図１に示すように、培養容器１の上面部２２の上面２２ａの平面視形状と相似形状で、かつその周縁が突起２６の上面２６ａの内縁２６ｂに一致する領域Ｅ内で、面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする。
まず、図１に示すように、培養容器１の上面部２２の上面２２ａの平面視形状と相似形状で、かつその周縁が突起２６の上面２６ａの内縁２６ｂに一致する領域Ｅ内で、面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする。
【0018】
この例では、上面部２２の上面２２ａの平面視形状は正円であり、突起２６は蓋部２０の上面２２ａの外縁に沿って全周にわたって円環状に形成されているため、領域Ｅはその外周が突起２６の上面２６ａの内縁２６ｂに沿う正円の領域である。この領域Ｅ内において、面積が最大になる矩形、すなわち正方形の４つの頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする。４つの点Ａ～Ｄは、いずれも領域Ｅの外周、すなわち突起２６の上面２６ａの内縁２６ｂ上に位置する。領域Ｅの平面視形状が正円の場合、点Ａ～Ｄを決定する際の矩形（正方形）は、当該正円の中心を基準とする回転方向において、ＨＭが最大となる矩形（正方形）を設定し、支柱１００の下端１１２からの高さが最大となる点をＡとする。
【0019】
図４に示すように、高さが３５ｍｍで、かつ高さ方向に垂直な平坦な上端面１１０を有する支柱１００上に、培養容器１の蓋部２０を上面２２ａが上を向くように置く。なお、図４には、２つの支柱１００の上に培養容器１の蓋部２０を載置した状態を示しているが、支柱１００上に培養容器１を安定に載置した状態で測定できれば、支柱１００の数は２つでなくてもよい。
【0020】
このように、培養容器１の蓋部２０を支柱１００上に置いた状態で、突起２６の上面２６ａ上の４つの点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄについて、それぞれ支柱１００の下端１１２からの高さＨＡ（ｍｍ）、ＨＢ（ｍｍ）、ＨＣ（ｍｍ）、ＨＤ（ｍｍ）を測定する。
培養容器１は、このように測定される点Ａ～Ｄの高さＨＡ～ＨＤが下式１及び下式２を満たす。
培養容器１は、このように測定される点Ａ～Ｄの高さＨＡ～ＨＤが下式１及び下式２を満たす。
【0021】
０≦ＨＭ／Ｌ×１０００００≦２００ ・・・式１
ＨＭ＝｜（ＨＡ＋ＨＣ）／２－（ＨＢ＋ＨＤ）／２｜ ・・・式２
ただし、前記式中、Ｌは、点Ａ～Ｄを各頂点とする矩形の対角線の長さ（ｍｍ）である。
ＨＭ＝｜（ＨＡ＋ＨＣ）／２－（ＨＢ＋ＨＤ）／２｜ ・・・式２
ただし、前記式中、Ｌは、点Ａ～Ｄを各頂点とする矩形の対角線の長さ（ｍｍ）である。
【0022】
ＨＭは、点Ａと点Ｃの中点（対角線ＡＣの中点）の高さと、点Ｂと点Ｄの中点（対角線ＢＤの中点）の高さとの差を示している。Ｌは、対角線ＡＣの長さ（＝対角線ＢＤの長さ）である。
【0023】
ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値は、０～２００であり、０～１００が好ましく、０～５０がより好ましく、０～３０がさらに好ましく、０～２５が特に好ましく、０～２０が最も好ましい。ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値が前記範囲内であれば、培養容器１の上面２２ａの歪みが小さく、複数個の培養容器１を積み上げたときのがたつきが低減される。これにより、複数個の培養容器１を積み上げた状態での揺れが抑制される。そのため、培養面の各微細ウェルで細胞塊を培養する場合、微細ウェルから細胞塊が飛び出すことが抑制されるため、細胞塊の測定や観察が容易になる。
【0024】
容器本体１０の培養面１８には、サイズが均一な細胞塊が得られやすい点から、サイズが均一な複数の微細ウェル１９が形成されていることが好ましい。図１及び図５に示す例は、培養面１８における各微細ウェル１９の周囲に平坦面がない態様である。なお、培養面１８における各微細ウェル１９の周囲は平坦面になっていてもよい。
微細ウェル１９の開口形状は、特に限定されず、例えば、円形、楕円形、多角形、不規則な形状を例示できる。
微細ウェル１９の開口形状は、特に限定されず、例えば、円形、楕円形、多角形、不規則な形状を例示できる。
【0025】
微細ウェル１９の開口の平均直径ｄ（図５）は、１００～２５００μｍが好ましく、２００～２０００μｍがより好ましく、４００～１０００μｍがさらに好ましい。微細ウェル１９の開口の平均直径ｄが前記範囲の下限値以上であれば、充分なサイズの細胞塊が形成されやすい。微細ウェル１９の開口の平均直径ｄが前記範囲の上限値以下であれば、微細ウェル間の隙間が小さくなり、培養面に多くの微細ウェルを効率良く形成できるため、培養できる細胞塊の数が多くなる。なお、微細ウェルの開口の平均直径ｄは、任意の１０個の微細ウェルの直径を測定して平均した値である。微細ウェルの開口の直径の測定は、平面観察像を用いて実施できる。
【0026】
微細ウェル１９の開口面積は、０．００８ｍｍ２以上４．９ｍｍ２以下が好ましく、０．０３ｍｍ２以上３．１ｍｍ２以下がより好ましく、０．１３ｍｍ２以上０．８ｍｍ２以下がさらに好ましい。微細ウェル１９の開口面積が前記範囲の上限値以下であれば、微細ウェル１９から細胞がこぼれることを抑制しやすく、均一な大きさのスフェロイドを形成しやすい。
なお、微細ウェル１９の開口面積は、レーザ顕微鏡（キーエンス社製）等によって測定される。
なお、微細ウェル１９の開口面積は、レーザ顕微鏡（キーエンス社製）等によって測定される。
【0027】
微細ウェル１９の平均深さｈ（図５）は、５０～１２００μｍが好ましく、１００～１０００μｍがより好ましく、２００～６００μｍがさらに好ましい。微細ウェル１９の平均深さｈが前記範囲の下限値以上であれば、細胞塊が微細ウェルから飛び出しにくく、安定して保持されやすい。微細ウェル１９の平均深さｈが前記範囲の上限値以下であれば、培地を添加したときに微細ウェルに泡が発生し難く、また発生したとしても泡を除きやすい。なお、微細ウェルの平均深さｈは、任意の１０個の微細ウェルについて、微細ウェルの深さ（基準面と微細ウェルの最深部との距離）を測定して平均した値である。微細ウェルの深さの測定は、３次元測定器による測定や、シリコーンゴム等で微細ウェルを型取りしたものを測定することで実施できる。
【0028】
微細ウェル１９の配置パターンは、特に限定されず、規則的なパターンで形成してもよく、不規則に形成してもよく、規則的な部分と不規則な部分が混在していてもよい。規則的な配置パターンとしては、例えば、隙間なく並べた正方形の各頂点に微細ウェルを配置するパターン、隙間なく並べた正六角形の各頂点と中央に微細ウェルを配置するパターン、千鳥状のパターンを例示できる。
【0029】
培養面１８に形成される微細ウェル１９の数は、単位面積あたり、１０個／ｃｍ２以上が好ましく、１０～１００００個／ｃｍ２がより好ましく、１５～５０００個／ｃｍ２がさらに好ましく、２０～１５００個／ｃｍ２が特に好ましい。
【0030】
培養容器１の材質としては、樹脂またはガラスを例示できる。
樹脂としては、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、アクリル樹脂、ポリカーボネート樹脂、シリコーン樹脂、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、高密度ポリエチレン、ポリエーテルサルファン、ＰＥＴ共重合体、パーマノックス（サーモフィッシャーサイエンティフィック商標）、シクロオレフィンポリマー樹脂及びサイトップ（ＡＧＣ商標）から選ばれる１種が好ましく、透明性が高く、薬剤吸着性が低いという点から、ポリスチレン樹脂が特に好ましい。培養容器１を構成する樹脂は、１種でもよく、２種以上でもよい。
ガラスとしては、石英ガラス、ホウケイ酸ガラス、リン酸ガラス、化学強化ガラス等を例示できる。培養容器１を構成するガラスは、１種でもよく、２種以上でもよい。
樹脂としては、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、アクリル樹脂、ポリカーボネート樹脂、シリコーン樹脂、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリ塩化ビニル、高密度ポリエチレン、ポリエーテルサルファン、ＰＥＴ共重合体、パーマノックス（サーモフィッシャーサイエンティフィック商標）、シクロオレフィンポリマー樹脂及びサイトップ（ＡＧＣ商標）から選ばれる１種が好ましく、透明性が高く、薬剤吸着性が低いという点から、ポリスチレン樹脂が特に好ましい。培養容器１を構成する樹脂は、１種でもよく、２種以上でもよい。
ガラスとしては、石英ガラス、ホウケイ酸ガラス、リン酸ガラス、化学強化ガラス等を例示できる。培養容器１を構成するガラスは、１種でもよく、２種以上でもよい。
【0031】
培養容器１の周壁部１４は透明でも不透明でもよい。周壁部１４を不透明とする場合、色調としては黒や白など、光を通しづらい色味がより好ましい。周壁部１４を不透明にすることによって、顕微鏡での観察時に光の反射による観察しづらさを軽減することができる。周壁部１４を不透明にする方法としては、特に限定されず、例えば、微粒子を添加する方法、顔料等の着色料を添加する方法等を用いることができる。黒の場合はカーボン等、白の場合は酸化チタン等を用いることができる。
【0032】
底部１２の平均厚みは、８０μｍ以上２０００μｍ以下が好ましい。培養容器１がガラスの場合、平均厚みは１００μｍ以上２５０μ以下がより好ましく、１３０μ以上２００μｍ以下がさらに好ましい。培養容器１が樹脂の場合、３００μｍ以上１８００μｍ以下がより好ましく、５００μｍ以上１５００μｍ以下がさらに好ましく、８１０μｍ以上１０００μｍ以下がより一層好ましい。培養容器１の平均厚みが前記範囲内であれば、微細ウェル１９形成による培養容器１の変形が低減でき、積み重ね時の歪みも軽減できる。
【0033】
培養容器１の製造方法は、特に限定されず、例えば、射出成形法によって成形できる。
微細ウェル１９を形成する方法としては、例えば、レーザ照射を例示できる。樹脂製の容器本体１０の底面である培養面１８にレーザ光が照射されると、培養面１８を構成する樹脂が溶解及び気化して、非常に滑らかな表面を持つ微細ウェル１９が形成される。微細ウェル１９の開口周辺には、溶解した樹脂が盛り上がって土手部が形成されてもよい。この場合、微細ウェルを周回する土手部の最上部が当該微細ウェルの開口端となる。
微細ウェル１９を形成する方法としては、例えば、レーザ照射を例示できる。樹脂製の容器本体１０の底面である培養面１８にレーザ光が照射されると、培養面１８を構成する樹脂が溶解及び気化して、非常に滑らかな表面を持つ微細ウェル１９が形成される。微細ウェル１９の開口周辺には、溶解した樹脂が盛り上がって土手部が形成されてもよい。この場合、微細ウェルを周回する土手部の最上部が当該微細ウェルの開口端となる。
【0034】
レーザ光源としては、特に限定されず、ＣＯ２レーザを例示できる。微細ウェル１９の配置及びサイズは、レーザ光の照射位置や出力、時間等の照射条件を調節することによって調節できる。
レーザ出力は、例えば、１～１００Ｗの範囲で固定し、レーザ照射時間は、例えば、０．１～１００μｓの範囲で固定してレーザ照射を行うことで、各微細ウェル１９のサイズを均一にできる。
レーザ出力は、例えば、１～１００Ｗの範囲で固定し、レーザ照射時間は、例えば、０．１～１００μｓの範囲で固定してレーザ照射を行うことで、各微細ウェル１９のサイズを均一にできる。
【0035】
培養面１８には、細胞の接着を抑制する低接着コート膜を形成してもよい。低接着コート膜が形成されることで、培養細胞を取り出しやすくなる。低接着コート膜は、例えば、細胞接着抑制剤を塗布することによって形成できる。細胞接着抑制剤としては、リン脂質ポリマー（２－メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン等）、ポリヒドロキシエチルメタアクリレート、フッ素含有化合物、ポリエチレングリコールを例示できる。細胞接着抑制剤としては、１種を単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
なお、培養容器１の容器本体１０全体又は培養面１８をシリコーン樹脂等の細胞接着抑制効果のある樹脂や、前記細胞接着抑制剤を配合した合成樹脂等で成形すれば、低接着コート膜を形成しなくても培養面１８に細胞が接着することを抑制できる。
なお、培養容器１の容器本体１０全体又は培養面１８をシリコーン樹脂等の細胞接着抑制効果のある樹脂や、前記細胞接着抑制剤を配合した合成樹脂等で成形すれば、低接着コート膜を形成しなくても培養面１８に細胞が接着することを抑制できる。
【0036】
培養面１８には、細胞を接着させやすくする易接着コート膜を形成してもよい。易接着コート膜を形成する材料としては、コラーゲン、ゼラチンを例示できる。易接着コート膜を形成する材料としては、１種を単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。なお、培養容器１の容器本体１０全体又は培養面１８を細胞接着効果のある樹脂や、細胞易接着コート剤を配合した合成樹脂等で成形してもよい。
また、コート剤以外でも、プラズマ処理、コロナ放電等の物理的処理を行い、細胞を接着しやすくしてもよい。
また、コート剤以外でも、プラズマ処理、コロナ放電等の物理的処理を行い、細胞を接着しやすくしてもよい。
【0037】
（培養細胞の製造方法）
以下、培養容器１を用いた培養細胞の製造方法について説明する。
同型の培養容器１のみを複数個使用し、細胞培養、及び細胞培養後の運搬のいずれか一方又は両方を、複数個の培養容器１を積み上げた状態で行う。本実施形態では、細胞培養時にのみ複数個の培養容器１を積み上げてもよく、運搬時にのみ複数個の培養容器１を積み上げてもよく、細胞培養時と運搬時の両方で複数個の培養容器１を積み上げてもよい。
以下、培養容器１を用いた培養細胞の製造方法について説明する。
同型の培養容器１のみを複数個使用し、細胞培養、及び細胞培養後の運搬のいずれか一方又は両方を、複数個の培養容器１を積み上げた状態で行う。本実施形態では、細胞培養時にのみ複数個の培養容器１を積み上げてもよく、運搬時にのみ複数個の培養容器１を積み上げてもよく、細胞培養時と運搬時の両方で複数個の培養容器１を積み上げてもよい。
【0038】
培養容器１の蓋部２０の上面２２ａに突起２６が設けられていることで、蓋部２０の上面２２ａ上に積み重ねられた培養容器１の面方向の動きが規制される。さらに、突起２６の上面２６ａの内縁２６ｂに沿う領域の４つの点Ａ～Ｄの高さＨＡ～ＨＤが前記式１及び前記式２を満たしているため、複数個の培養容器１を積み重ねた状態におけるがたつきが低減され、揺れにくくなる。これらのことから、培養細胞の予期せぬ動きを抑制できる。そのため、培養面に微細ウェルを形成した場合には、微細ウェルから細胞塊が飛び出すことが抑制され、細胞塊の測定や観察が容易になる。
【0039】
［第２実施形態］
図６及び図７に示すように、本実施形態の培養容器２は、容器本体３０と、蓋部４０とを備えるマイクロプレートである。
容器本体３０は、平面視形状が矩形の板状の底部３２と、底部３２の外縁部から全周にわたって垂直に立ち上がる周壁部３４と、底部３２の周壁部３４の内側から立ち上がり、各ウェル３５を形成する複数の円筒状の筒部３６と、底部３２の下面３２ｂに、その外縁に沿って全周にわたって下方に突出して設けられた環状突起３８と、を備えている。
図６及び図７に示すように、本実施形態の培養容器２は、容器本体３０と、蓋部４０とを備えるマイクロプレートである。
容器本体３０は、平面視形状が矩形の板状の底部３２と、底部３２の外縁部から全周にわたって垂直に立ち上がる周壁部３４と、底部３２の周壁部３４の内側から立ち上がり、各ウェル３５を形成する複数の円筒状の筒部３６と、底部３２の下面３２ｂに、その外縁に沿って全周にわたって下方に突出して設けられた環状突起３８と、を備えている。
【0040】
この例の培養容器２では、底部３２と筒部３６によって形成される各ウェル３５の底面が培養面３７になっている。複数のウェル３５は平面視で縦横にマトリックス状に配列されている。図１０に示すように、各ウェル３５の培養面３７には、複数の微細ウェル３９が形成されている。すなわち、培養容器２は複数の微細ウェル３９を有する微細加工容器である。
【0041】
蓋部４０は、平面視形状が矩形の上面部４２と、上面部４２の外縁部から垂直に垂下された周壁部４３と、上面部４２の上面４２ａの外縁に沿って全周にわたって上方に突出するように設けられた矩形の環状の突起４４と、を備えている。
【0042】
培養容器２におけるウェル３５の配置パターンは、特に限定されず、例えば、マトリックス状、千鳥状を例示できる。ウェル３５の平面視の開口形状は、円形には限定されず、例えば、矩形であってもよい。
培養容器２が有するウェル３５の数は、特に限定されず、例えば、１～１５３６個が挙げられる。
培養容器２が有するウェル３５の数は、特に限定されず、例えば、１～１５３６個が挙げられる。
【0043】
ウェル３５の平均深さは、６．０～１２．０ｍｍが好ましく、５．７～１０．８ｍｍがより好ましい。ウェル３５の平均深さが前記範囲の下限値以上であれば、内容物がこぼれにくい。ウェル３５の平均深さが前記範囲の上限値以下であれば、溶液の分注、排出が容易になる。
【0044】
図８に示すように、培養容器２は、複数個を積み重ねることができる。同型の複数個の培養容器２を積み重ねた状態では、上面部４２の上面４２ａに設けられた突起４４が、上面部４２の上面４２ａ上に積み重ねられた培養容器２の環状突起３８の内側に嵌まる。これにより、上面部４２の上面４２ａの面方向における、上面部４２の上面４２ａ上に積み重ねられた培養容器２の動きが規制される。
【0045】
突起４４の長さ方向に垂直な断面形状は、この例では矩形であるが、上面部４２の上面４２ａ上に積み重ねられた培養容器２の動きを規制できる範囲であれば、半円形等であってもよい。
上面部４２の上面４２ａに設けられる突起４４は、上面部４２の上面４２ａ上に積み重ねられた培養容器２の面方向の動きを規制できる範囲であれば、環状の連続した突起には限定されず、複数の突起が断続的に形成されていてもよい。
上面部４２の上面４２ａに設けられる突起４４は、上面部４２の上面４２ａ上に積み重ねられた培養容器２の面方向の動きを規制できる範囲であれば、環状の連続した突起には限定されず、複数の突起が断続的に形成されていてもよい。
【0046】
培養容器２は、以下に説明する測定方法によって測定される点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄの４点の高さが特定の条件を満たす。
まず、図６に示すように、培養容器２の上面部４２の上面４２ａの平面視形状と相似形状で、かつその周縁が突起４４の上面４４ａの内縁４４ｂに一致する領域Ｅ内で、面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする。
まず、図６に示すように、培養容器２の上面部４２の上面４２ａの平面視形状と相似形状で、かつその周縁が突起４４の上面４４ａの内縁４４ｂに一致する領域Ｅ内で、面積が最大になる矩形の各頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする。
【0047】
この例では、上面部４２の上面４２ａの平面視形状は矩形であり、突起４４は上面部４２の上面４２ａの外縁に沿って全周にわたって矩形の環状に形成されている。そのため、領域Ｅは、その外周が突起４４の上面４４ａの内縁４４ｂに沿う矩形の領域である。この領域Ｅ内において面積が最大になる矩形は領域Ｅと同一形状であり、突起４４の四隅に位置する４つの頂点を時計回りに点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄとする。
【0048】
図９に示すように、高さが３５ｍｍで、かつ高さ方向に垂直な平坦な上端面１１０を有する支柱１００上に、培養容器２の蓋部４０を上面部４２の上面４２ａが上を向くように置く。なお、第１実施形態と同様に、点Ａ～Ｄの高さを安定して測定できれば、支柱１００の数は２つでなくてもよい。
【0049】
このように、培養容器２を支柱１００上に置いた状態で、培養容器２の蓋部２０の上面部４２の上面４２ａ上の４つの点Ａ、点Ｂ、点Ｃ、点Ｄについて、それぞれ支柱１００の下端１１２からの高さＨＡ（ｍｍ）、ＨＢ（ｍｍ）、ＨＣ（ｍｍ）、ＨＤ（ｍｍ）を測定する。
培養容器２は、このように測定される点Ａ～Ｄの高さＨＡ～ＨＤが前記式１及び前記式２を満たす。
培養容器２は、このように測定される点Ａ～Ｄの高さＨＡ～ＨＤが前記式１及び前記式２を満たす。
【0050】
培養容器２においても、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値が０～２００であることで、培養容器２の上面部４２の上面４２ａの歪みが小さく、複数個の培養容器２を積み上げたときのがたつきが低減される。これにより、複数個の培養容器２を積み上げた状態での揺れが抑制される。そのため、培養面の各微細ウェルで細胞塊を培養する場合、微細ウェルから細胞塊が飛び出すことが抑制されるため、細胞塊の測定や観察が容易になる。
ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値の好ましい範囲は、第１実施形態におけるＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値の好ましい範囲と同じである。
ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値の好ましい範囲は、第１実施形態におけるＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値の好ましい範囲と同じである。
【0051】
図１０に示すように、各ウェル３５の培養面３７には、サイズが均一な複数の微細ウェル３９が形成されていることが好ましい。培養面３７における各微細ウェル３９の周囲には、平坦面があってもよく、平坦面がなくてもよい。微細ウェル３９の開口形状、開口の平均直径ｄ（図１０）、開口面積、平均深さｈ（図１０）、配置パターン、数等の態様は、第１実施形態の微細ウェル１９と同じ態様を例示でき、好ましい態様も同じである。
【0052】
培養容器２の材質としては、培養容器１の材質として例示したものと同じ樹脂及びガラスを例示でき、なかでもポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、アクリル樹脂、ポリカーボネート樹脂及びシリコーン樹脂から選ばれる１種が好ましく、ポリスチレン樹脂が特に好ましい。また、培養容器１と同様に筒部３６を不透明としてもよい。
【0053】
底部３２の平均厚みは、８０μｍ以上２０００μｍ以下が好ましい。培養容器２がガラスの場合、平均厚みは１００μｍ以上２５０μ以下がより好ましく、１３０μ以上２００μｍ以下がさらに好ましい。培養容器２が樹脂の場合、３００μｍ以上１８００μｍ以下がより好ましく、５００μｍ以上１５００μｍ以下がさらに好ましく、８１０μｍ以上１０００μｍ以下がより一層好ましい。培養容器２の平均厚みが前記範囲内であれば、微細ウェル３９形成による培養容器２の変形が低減でき、積み重ね時の歪みも軽減できる。
【0054】
培養容器２の製造方法は、特に限定されず、例えば、射出成形法によって成形できる。
微細ウェル３９を形成する方法としては、微細ウェル１９を形成する方法と同じ方法を採用できる。培養面３７にも、細胞の接着を抑制する低接着コート膜や、細胞を接着させやすくする易接着コート膜を形成してもよい。
微細ウェル３９を形成する方法としては、微細ウェル１９を形成する方法と同じ方法を採用できる。培養面３７にも、細胞の接着を抑制する低接着コート膜や、細胞を接着させやすくする易接着コート膜を形成してもよい。
【0055】
（培養細胞の製造方法）
以下、培養容器２を用いた培養細胞の製造方法について説明する。
同型の培養容器２のみを複数個使用し、細胞培養、及び細胞培養後の運搬のいずれか一方又は両方を、複数個の培養容器２を積み上げた状態で行う。本実施形態では、細胞培養時にのみ複数個の培養容器２を積み上げてもよく、運搬時にのみ複数個の培養容器２を積み上げてもよく、細胞培養時と運搬時の両方で複数個の培養容器２を積み上げてもよい。
以下、培養容器２を用いた培養細胞の製造方法について説明する。
同型の培養容器２のみを複数個使用し、細胞培養、及び細胞培養後の運搬のいずれか一方又は両方を、複数個の培養容器２を積み上げた状態で行う。本実施形態では、細胞培養時にのみ複数個の培養容器２を積み上げてもよく、運搬時にのみ複数個の培養容器２を積み上げてもよく、細胞培養時と運搬時の両方で複数個の培養容器２を積み上げてもよい。
【0056】
培養容器２を使用する態様も培養容器１の場合と同様に、上面部４２の上面４２ａに設けられた突起４４によって、積み重ねられた培養容器２の面方向の動きが規制される。さらに、突起４４の上面４４ａの内縁４４ｂに沿う領域の４つの点Ａ～Ｄの高さＨＡ～ＨＤが前記式１及び前記式２を満たしているため、積み重ねた培養容器２のがたつきが低減され、揺れにくくなるため、培養細胞の予期せぬ動きを抑制できる。そのため、培養面に微細ウェルを形成した場合には、微細ウェルから細胞塊が飛び出すことが抑制され、細胞塊の測定や観察が容易になる。
【0057】
なお、本発明の培養容器は、上面上に複数個を積み重ねて使用する培養容器であればよく、培養容器１のようなディッシュや、培養容器２のようなマイクロプレートには限定されない。本発明の培養容器は、例えば、同型の培養容器を積み重ねられる上面を有するフラスコ状の培養容器であってもよい。その他、本発明の趣旨に逸脱しない範囲で、前記実施形態における構成要素を周知の構成要素に置き換えることは適宜可能であり、また、前記した変形例を適宜組み合わせてもよい。
【実施例0058】
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明は以下の記載によっては限定されない。
［積み重ねの安定性］
図１１及び図１２に示すように、同型の５個の培養容器（ディッシュ又はマイクロプレート）を積み重ね、最も上に位置する培養容器の点Ａ～Ｄの高さ（ＴＡ～ＴＤ）を測定し、それら測定値から標準偏差を算出し、積み重ねの安定性を以下の基準で評価した。
◎（優良）：標準偏差が０．１以下。
○（良）：標準偏差が０．１超０．２以下。
×（不良）：標準偏差が０．２超。
［積み重ねの安定性］
図１１及び図１２に示すように、同型の５個の培養容器（ディッシュ又はマイクロプレート）を積み重ね、最も上に位置する培養容器の点Ａ～Ｄの高さ（ＴＡ～ＴＤ）を測定し、それら測定値から標準偏差を算出し、積み重ねの安定性を以下の基準で評価した。
◎（優良）：標準偏差が０．１以下。
○（良）：標準偏差が０．１超０．２以下。
×（不良）：標準偏差が０．２超。
【0059】
［例１］
図１及び図２で例示したような態様で、平面視形状が直径１００ｍｍの正円である４種の培養容器（ディッシュ－１～ディッシュ－４、及びディッシュ－６～ディッシュ－９）について、高さＨＡ～ＨＤを測定し、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値を算出した。結果を表１及び表２に示す。また、ディッシュ－１～ディッシュ－４については、同型の培養容器を積み重ねたときの、最も上に位置する培養容器の高さＴＡ～ＴＤを測定し、標準偏差を算出し、安定性を評価した。結果を表１に示す。
図１及び図２で例示したような態様で、平面視形状が直径１００ｍｍの正円である４種の培養容器（ディッシュ－１～ディッシュ－４、及びディッシュ－６～ディッシュ－９）について、高さＨＡ～ＨＤを測定し、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値を算出した。結果を表１及び表２に示す。また、ディッシュ－１～ディッシュ－４については、同型の培養容器を積み重ねたときの、最も上に位置する培養容器の高さＴＡ～ＴＤを測定し、標準偏差を算出し、安定性を評価した。結果を表１に示す。
【0060】
［例２］
図６及び図７に例示したような態様で、平面視形状が縦８５．３ｍｍ×横１２７．６ｍｍの矩形で６個（２×３）のウェルを有する４種の培養容器（マイクロプレート－１～マイクロプレート－４、及びマイクロプレート－９～マイクロプレート－１１）について、高さＨＡ～ＨＤを測定し、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値を算出した。結果を表１及び表２に示す。また、マイクロプレート－１～マイクロプレート－４については、同型の培養容器を積み重ねたときの、最も上に位置する培養容器の高さＴＡ～ＴＤを測定し、標準偏差を算出し、安定性を評価した。結果を表１に示す。
図６及び図７に例示したような態様で、平面視形状が縦８５．３ｍｍ×横１２７．６ｍｍの矩形で６個（２×３）のウェルを有する４種の培養容器（マイクロプレート－１～マイクロプレート－４、及びマイクロプレート－９～マイクロプレート－１１）について、高さＨＡ～ＨＤを測定し、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値を算出した。結果を表１及び表２に示す。また、マイクロプレート－１～マイクロプレート－４については、同型の培養容器を積み重ねたときの、最も上に位置する培養容器の高さＴＡ～ＴＤを測定し、標準偏差を算出し、安定性を評価した。結果を表１に示す。
【0061】
［例３］
図６及び図７に例示したような態様で、平面視形状が縦８５．３ｍｍ×横１２７．６ｍｍの矩形で９６個（８×１２）のウェルを有する４種の培養容器（マイクロプレート－５～マイクロプレート－８、及びマイクロプレート－１２～マイクロプレート－１４）について、高さＨＡ～ＨＤを測定し、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値を算出した。結果を表１及び表２に示す。また、マイクロプレート－５～マイクロプレート－７については、同型の培養容器を積み重ねたときの、最も上に位置する培養容器の高さＴＡ～ＴＤを測定し、標準偏差を算出し、安定性を評価した。結果を表１に示す。
図６及び図７に例示したような態様で、平面視形状が縦８５．３ｍｍ×横１２７．６ｍｍの矩形で９６個（８×１２）のウェルを有する４種の培養容器（マイクロプレート－５～マイクロプレート－８、及びマイクロプレート－１２～マイクロプレート－１４）について、高さＨＡ～ＨＤを測定し、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値を算出した。結果を表１及び表２に示す。また、マイクロプレート－５～マイクロプレート－７については、同型の培養容器を積み重ねたときの、最も上に位置する培養容器の高さＴＡ～ＴＤを測定し、標準偏差を算出し、安定性を評価した。結果を表１に示す。
【0062】
［例４］
図１及び図２で例示したような態様で、平面視形状が直径１５０ｍｍの正円である１種の培養容器（ディッシュ－５、ディッシュ－１０及びディッシュ－１１）について、高さＨＡ～ＨＤを測定し、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値を算出した。結果を表１及び表２に示す。また、ディッシュ－５については、同型の培養容器を積み重ねたときの、最も上に位置する培養容器の高さＴＡ～ＴＤを測定し、標準偏差を算出し、安定性を評価した。結果を表１に示す。
図１及び図２で例示したような態様で、平面視形状が直径１５０ｍｍの正円である１種の培養容器（ディッシュ－５、ディッシュ－１０及びディッシュ－１１）について、高さＨＡ～ＨＤを測定し、ＨＭ／Ｌ×１０００００で表される値を算出した。結果を表１及び表２に示す。また、ディッシュ－５については、同型の培養容器を積み重ねたときの、最も上に位置する培養容器の高さＴＡ～ＴＤを測定し、標準偏差を算出し、安定性を評価した。結果を表１に示す。
【0063】
【表1】
【0064】
【表2】
【0065】
以上の結果のうち、ディッシュ－８及びディッシュ－９については、ＨＭ／Ｌ×１０００００の値が２００を超え、蓋の歪みが大きく、積み重ねに不向きであることがいえる。
【符号の説明】
【0066】
１，２…培養容器、１０…容器本体、１２…底部、１４…周壁部、１８…培養面、１９…微細ウェル、２０…蓋部、２２…上面部、２２ａ…上面、２４…周壁部、２６…突起、２６ａ…上面、２６ｂ…内縁、３０…容器本体、３２…底部、３４…周壁部、３５…ウェル、３６…筒部、３７…培養面、３９…微細ウェル、４０…蓋部、４２…上面部、４２ａ…上面、４４…突起、４４ａ…上面、４４ｂ…内縁、１００…支柱、１１０…上端面、１１２…下端。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】