▶ マヨ ファウンデーション フォー メディカル エデュケーション アンド リサーチの特許一覧
特開2022-65061パクリタキセル－アルブミン－結合剤組成物並びに該組成物の使用及び製造方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022065061
(43)【公開日】2022-04-26
(54)【発明の名称】パクリタキセル－アルブミン－結合剤組成物並びに該組成物の使用及び製造方法
(51)【国際特許分類】
A61K 31/235 20060101AFI20220419BHJP
A61K 31/337 20060101ALI20220419BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20220419BHJP
A61K 47/64 20170101ALI20220419BHJP
A61K 47/68 20170101ALI20220419BHJP
A61K 9/14 20060101ALI20220419BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220419BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20220419BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20220419BHJP
B82Y 5/00 20110101ALN20220419BHJP
B82Y 40/00 20110101ALN20220419BHJP
【ＦＩ】
A61K31/235
A61K31/337
A61K45/00
A61K47/64
A61K47/68
A61K9/14
A61P43/00 121
A61P35/00
A61P35/02
B82Y5/00
B82Y40/00
【審査請求】有
【請求項の数】18
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2022019316
(22)【出願日】2022-02-10
(62)【分割の表示】P 2019512649の分割
【原出願日】2017-09-06
(31)【優先権主張番号】62/384,119
(32)【優先日】2016-09-06
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】511281899
【氏名又は名称】マヨ ファウンデーション フォー メディカル エデュケーション アンド リサーチ
【氏名又は名称原語表記】ＭＡＹＯ ＦＯＵＮＤＡＴＩＯＮ ＦＯＲ ＭＥＤＩＣＡＬ ＥＤＵＣＡＴＩＯＮ ＡＮＤ ＲＥＳＥＡＲＣＨ
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】スヴェトミール エヌ． マルコヴィッチ
(72)【発明者】
【氏名】ウェンディ ケイ． ネヴァラ
(57)【要約】
【課題】結合剤、担体タンパク質及びある量のパクリタキセル誘導体、及び任意的に治療剤を含むナノ粒子組成物を提供すること。
【解決手段】本明細書では、担体タンパク質及びある量のパクリタキセル、及び任意的に結合剤及び／又は治療剤を含むナノ粒子組成物であって、パクリタキセルが治療効果をもたらすよりも少ない量で存在するナノ粒子組成物も開示する。本明細書では、（ａ）担体タンパク質、（ｂ）パクリタキセルよりも毒性が低いパクリタキセル誘導体、及び任意的に（ｃ）結合剤及び／又は（ｄ）治療剤を含むナノ粒子も開示する。本明細書では、さらに、これらの、特に癌治療薬としての、使用及び製造方法も開示する。
【選択図】図１
【解決手段】本明細書では、担体タンパク質及びある量のパクリタキセル、及び任意的に結合剤及び／又は治療剤を含むナノ粒子組成物であって、パクリタキセルが治療効果をもたらすよりも少ない量で存在するナノ粒子組成物も開示する。本明細書では、（ａ）担体タンパク質、（ｂ）パクリタキセルよりも毒性が低いパクリタキセル誘導体、及び任意的に（ｃ）結合剤及び／又は（ｄ）治療剤を含むナノ粒子も開示する。本明細書では、さらに、これらの、特に癌治療薬としての、使用及び製造方法も開示する。
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、結合剤及び担体タンパク質の新規組成物並びに該組成物の、特に癌治療薬と
しての、使用及び製造方法に関する。
しての、使用及び製造方法に関する。
【背景技術】
【0002】
化学療法は、黒色腫を始めとする多くの種類の癌に対する全身療法のよりどころである
。大半の化学療法薬は腫瘍細胞に対してわずかな選択性しかなく、健全な増殖細胞に対す
る毒性が高いことがあり（Ａｌｌｅｎ ＴＭ． （２００２） Ｃａｎｃｅｒ ２：７５
０－７６３）、用量の減量さらには治療の中断さえ必要とされることがある。理論的には
、化学療法の毒性の問題を克服するとともに薬効を改善する一つの方法は、標的薬を腫瘍
に引きつけるために、癌細胞で選択的に発現（又は過剰発現）されるタンパク質に特異的
な抗体を用いて化学療法薬を腫瘍にターゲティングし、もって化学療法薬の生体分布を変
化させて、腫瘍に届く薬の量を増やし、健全な組織への影響を減らすことである。しかし
、３０年間に及ぶ研究にもかかわらず、治療に関連して特異的ターゲティングが成功した
例はほとんどない。
。大半の化学療法薬は腫瘍細胞に対してわずかな選択性しかなく、健全な増殖細胞に対す
る毒性が高いことがあり（Ａｌｌｅｎ ＴＭ． （２００２） Ｃａｎｃｅｒ ２：７５
０－７６３）、用量の減量さらには治療の中断さえ必要とされることがある。理論的には
、化学療法の毒性の問題を克服するとともに薬効を改善する一つの方法は、標的薬を腫瘍
に引きつけるために、癌細胞で選択的に発現（又は過剰発現）されるタンパク質に特異的
な抗体を用いて化学療法薬を腫瘍にターゲティングし、もって化学療法薬の生体分布を変
化させて、腫瘍に届く薬の量を増やし、健全な組織への影響を減らすことである。しかし
、３０年間に及ぶ研究にもかかわらず、治療に関連して特異的ターゲティングが成功した
例はほとんどない。
【0003】
従来の抗体依存性化学療法（ＡＤＣ）は、毒性薬物をターゲティング抗体に合成プロテ
アーゼ切断性リンカーを介して結合させて設計される。このようなＡＤＣ療法の有効性は
、標的細胞が抗体に結合する能力、リンカーが切断される能力及び毒性薬物が標的細胞に
取り込まれる能力に依存する。Ｓｃｈｒａｍａ， Ｄ． ｅｔ ａｌ． （２００６）
Ｎａｔｕｒｅ ｒｅｖｉｅｗｓ． Ｄｒｕｇ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ５：１４７－１５９
参照。
アーゼ切断性リンカーを介して結合させて設計される。このようなＡＤＣ療法の有効性は
、標的細胞が抗体に結合する能力、リンカーが切断される能力及び毒性薬物が標的細胞に
取り込まれる能力に依存する。Ｓｃｈｒａｍａ， Ｄ． ｅｔ ａｌ． （２００６）
Ｎａｔｕｒｅ ｒｅｖｉｅｗｓ． Ｄｒｕｇ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ５：１４７－１５９
参照。
【0004】
抗体標的化学療法（antibody-targeted chemotherapy）は、ターゲティング能と、多様
な細胞障害性薬物と、潜在的に低減した毒性を伴う治療能力の向上との組合せをもたらす
ので、従来の療法よりも優れていると期待されていた。広範な研究にもかかわらず、臨床
的に有効な抗体標的化学療法は未だ判然としない。大きなネックとなっているのは、抗体
と化学療法薬の間のリンカーの不安定性、抗体に結合したときの化学療法薬の腫瘍毒性の
低下、並びにコンジュゲートが腫瘍細胞に結合及び侵入できないことである。さらに、こ
れらの治療法では抗体－薬物コンジュゲートのサイズを制御できなかった。
な細胞障害性薬物と、潜在的に低減した毒性を伴う治療能力の向上との組合せをもたらす
ので、従来の療法よりも優れていると期待されていた。広範な研究にもかかわらず、臨床
的に有効な抗体標的化学療法は未だ判然としない。大きなネックとなっているのは、抗体
と化学療法薬の間のリンカーの不安定性、抗体に結合したときの化学療法薬の腫瘍毒性の
低下、並びにコンジュゲートが腫瘍細胞に結合及び侵入できないことである。さらに、こ
れらの治療法では抗体－薬物コンジュゲートのサイズを制御できなかった。
【0005】
従来の治療薬よりも信頼性があって改善された抗腫瘍活性をもたらすべく、標的薬物送
達のための細胞傷害性効果を保持する抗体癌治療薬が当技術分野で依然として必要とされ
ている。
達のための細胞傷害性効果を保持する抗体癌治療薬が当技術分野で依然として必要とされ
ている。
【発明の概要】
【0006】
本明細書では、（ａ）担体タンパク質、（ｂ）任意的に結合剤、及び（ｃ）治療効果を
もたらす量よりも少ない量で存在するパクリタキセル、及び任意的に（ｄ）治療剤（ｃ）
を含むナノ粒子について開示する。本発明の幾つかの態様は、例えばアブラキサン（登録
商標）のようなアルブミン結合ナノ粒子におけるパクリタキセルの量に比べて、パクリタ
キセルの量を低減することによって、アルブミンのような担体タンパク質と抗体のような
結合剤との複合体の形成が促進され、安定なナノ粒子をもたらすという思想に部分的に基
づく。本明細書では、これらのナノ粒子を、「低毒性ナノ粒子」（ＲＴＰ）又はＲＴＰ複
合体と呼ぶこともある。
もたらす量よりも少ない量で存在するパクリタキセル、及び任意的に（ｄ）治療剤（ｃ）
を含むナノ粒子について開示する。本発明の幾つかの態様は、例えばアブラキサン（登録
商標）のようなアルブミン結合ナノ粒子におけるパクリタキセルの量に比べて、パクリタ
キセルの量を低減することによって、アルブミンのような担体タンパク質と抗体のような
結合剤との複合体の形成が促進され、安定なナノ粒子をもたらすという思想に部分的に基
づく。本明細書では、これらのナノ粒子を、「低毒性ナノ粒子」（ＲＴＰ）又はＲＴＰ複
合体と呼ぶこともある。
【0007】
本明細書では、（ａ）担体タンパク質、（ｂ）パクリタキセルよりも毒性が低いパクリ
タキセル誘導体、及び任意的に（ｃ）結合剤及び／又は（ｄ）治療剤を含むナノ粒子又は
複合体も開示される。
タキセル誘導体、及び任意的に（ｃ）結合剤及び／又は（ｄ）治療剤を含むナノ粒子又は
複合体も開示される。
【0008】
本明細書では、さらに、ナノ粒子組成物並びにナノ粒子の製造及び使用方法について記
載する。
載する。
【0009】
一態様では、アルブミンと、パクリタキセルよりも毒性が低いパクリタキセル誘導体と
を含むナノ粒子が提供される。一実施形態では、パクリタキセル誘導体は、パクリタキセ
ルのメーヤワイン（Meerwein）生成物である。好ましい実施形態では、パクリタキセル誘
導体は、２０－アセトキシ－４－デアセチル－５－エピ－２０，Ｏ－セコタキソールであ
る。一実施形態では、パクリタキセル誘導体は、バッカチンＩＩＩ（（２β，５α，７α
，１０α，１３β）－４，１０－ジアセトキシ－１，７，１３－トリヒドロキシ－９－オ
キソ－５，２０－エポキシタキサ－１１－エン－２－イルベンゾエート）である。一実施
形態では、ナノ粒子は、アルブミンとパクリタキセル誘導体との間の非共有結合によって
一体化される。一実施形態では、アルブミンとパクリタキセル誘導体は、約１０：１未満
の相対重量比を有する。一実施形態では、ナノ粒子はパクリタキセルを含まない。
を含むナノ粒子が提供される。一実施形態では、パクリタキセル誘導体は、パクリタキセ
ルのメーヤワイン（Meerwein）生成物である。好ましい実施形態では、パクリタキセル誘
導体は、２０－アセトキシ－４－デアセチル－５－エピ－２０，Ｏ－セコタキソールであ
る。一実施形態では、パクリタキセル誘導体は、バッカチンＩＩＩ（（２β，５α，７α
，１０α，１３β）－４，１０－ジアセトキシ－１，７，１３－トリヒドロキシ－９－オ
キソ－５，２０－エポキシタキサ－１１－エン－２－イルベンゾエート）である。一実施
形態では、ナノ粒子は、アルブミンとパクリタキセル誘導体との間の非共有結合によって
一体化される。一実施形態では、アルブミンとパクリタキセル誘導体は、約１０：１未満
の相対重量比を有する。一実施形態では、ナノ粒子はパクリタキセルを含まない。
【0010】
一実施形態では、アルブミン及びパクリタキセル誘導体、さらに抗原結合性ドメインを
有する結合剤（例えば抗体）を含むナノ粒子複合体が提供される。一実施形態では、ある
量の結合剤（例えば抗体）がナノ粒子複合体の外側表面に配置される。幾つかの実施形態
では、結合剤は、ナノ粒子の表面の全体又は一部に存在する実質的に単層の結合剤である
。一実施形態では、結合剤は、非共有結合によって担体タンパク質に結合している。好ま
しくは、結合剤は抗体である。
有する結合剤（例えば抗体）を含むナノ粒子複合体が提供される。一実施形態では、ある
量の結合剤（例えば抗体）がナノ粒子複合体の外側表面に配置される。幾つかの実施形態
では、結合剤は、ナノ粒子の表面の全体又は一部に存在する実質的に単層の結合剤である
。一実施形態では、結合剤は、非共有結合によって担体タンパク質に結合している。好ま
しくは、結合剤は抗体である。
【0011】
一実施形態では、ナノ粒子複合体はさらに治療剤を含む。一実施形態では、治療剤は、アビラテロン、ベンダムスチン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カバジタキセル、シスプラチン、クロラムブシル、ダサチニブ、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エルロチニブ、エトポシド、エベロリムス、ゲフィチニブ、イダルビシン、イマチニブ、ヒドロキシウレア、ラパチニブ、リュープロレリン、メルファラン、メトトレキサート、ミトキサントロン、ネダプラチン、ニロチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パゾパニブ、ペメトレキセド、ピコプラチン、ロミデプシン、サトラプラチン、ソラフェニブ、ベムラフェニブ、スニチニブ、テニポシド、トリプラチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンクリスチン又はシクロホスファミドである。一実施形態では、治療剤は表２に記載された薬剤である。
【0012】
一態様では、本明細書に記載のナノ粒子又はナノ粒子複合体を含むナノ粒子組成物が提
供される。
供される。
【0013】
一態様では、担体タンパク質（例えばアルブミン）及びパクリタキセルを含むナノ粒子
であって、パクリタキセルが、治療効果をもたらす量よりも少ない量で存在する、ナノ粒
子が提供される。一実施形態では、ナノ粒子は、担体タンパク質とパクリタキセルとの間
の非共有結合によって一体化される。一態様では、ナノ粒子複合体は、担体タンパク質（
例えばアルブミン）とパクリタキセルを、約１０：１を超える担体タンパク質／パクリタ
キセルの相対重量比で組合せることによって製造される。
であって、パクリタキセルが、治療効果をもたらす量よりも少ない量で存在する、ナノ粒
子が提供される。一実施形態では、ナノ粒子は、担体タンパク質とパクリタキセルとの間
の非共有結合によって一体化される。一態様では、ナノ粒子複合体は、担体タンパク質（
例えばアルブミン）とパクリタキセルを、約１０：１を超える担体タンパク質／パクリタ
キセルの相対重量比で組合せることによって製造される。
【0014】
一実施形態では、ナノ粒子（ナノ粒子複合体）又はナノ粒子組成物中に存在するパクリ
タキセルの量は、タンパク質担体（例えばアルブミン）及びパクリタキセルを含むナノ粒
子複合体に安定性をもたらすことができる最小量以上である。一実施形態では、ナノ粒子
又はナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は、タンパク質担体（例えばアルブ
ミン）に対するパクリタキセルの親和性をもたらすことができる最小量以上である。一実
施形態では、ナノ粒子又はナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は、パクリタ
キセルとタンパク質担体（例えばアルブミン）との複合体形成を促進することができる最
小量以上である。
タキセルの量は、タンパク質担体（例えばアルブミン）及びパクリタキセルを含むナノ粒
子複合体に安定性をもたらすことができる最小量以上である。一実施形態では、ナノ粒子
又はナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は、タンパク質担体（例えばアルブ
ミン）に対するパクリタキセルの親和性をもたらすことができる最小量以上である。一実
施形態では、ナノ粒子又はナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は、パクリタ
キセルとタンパク質担体（例えばアルブミン）との複合体形成を促進することができる最
小量以上である。
【0015】
ナノ粒子又はナノ粒子組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの比は、好ましくはア
ブラキサン（登録商標）における比よりも小さい。アブラキサン（登録商標）は、約９０
０ｍｇのアルブミンに対して１００ｍｇのパクリタキセルを含有する。一実施形態では、
ナノ粒子組成物中の担体タンパク質（例えばアルブミン）とパクリタキセルとの重量比は
約９：１超である。一実施形態では、重量比は約１０：１超、１１：１超、１２：１超、
１３：１超、１４：１超、１５：１超、約１６：１超、約１７：１超、約１８：１超、約
１９：１超、約２０：１超、約２１：１超、約２２：１超、約２３：１超、約２４：１超
、約２５：１超、約２６：１超、約２７：１超、約２８：１超、約２９：１超又は約３０
：１超である。一実施形態では、ナノ粒子複合体中の担体タンパク質とパクリタキセルと
の重量比は約９：１超である。一実施形態では、重量比は約１０：１超、１１：１超、１
２：１超、１３：１超、１４：１超、１５：１超、約１６：１超、約１７：１超、約１８
：１超、約１９：１超、約２０：１超、約２１：１超、約２２：１超、約２３：１超、約
２４：１超、約２５：１超、約２６：１超、約２７：１超、約２８：１超、約２９：１超
又は約３０：１超である。
ブラキサン（登録商標）における比よりも小さい。アブラキサン（登録商標）は、約９０
０ｍｇのアルブミンに対して１００ｍｇのパクリタキセルを含有する。一実施形態では、
ナノ粒子組成物中の担体タンパク質（例えばアルブミン）とパクリタキセルとの重量比は
約９：１超である。一実施形態では、重量比は約１０：１超、１１：１超、１２：１超、
１３：１超、１４：１超、１５：１超、約１６：１超、約１７：１超、約１８：１超、約
１９：１超、約２０：１超、約２１：１超、約２２：１超、約２３：１超、約２４：１超
、約２５：１超、約２６：１超、約２７：１超、約２８：１超、約２９：１超又は約３０
：１超である。一実施形態では、ナノ粒子複合体中の担体タンパク質とパクリタキセルと
の重量比は約９：１超である。一実施形態では、重量比は約１０：１超、１１：１超、１
２：１超、１３：１超、１４：１超、１５：１超、約１６：１超、約１７：１超、約１８
：１超、約１９：１超、約２０：１超、約２１：１超、約２２：１超、約２３：１超、約
２４：１超、約２５：１超、約２６：１超、約２７：１超、約２８：１超、約２９：１超
又は約３０：１超である。
【0016】
一実施形態では、パクリタキセルの量は、タンパク質担体（例えばアルブミン）、パク
リタキセル、及び任意的に１種以上の治療剤を含むナノ粒子複合体に安定性をもたらすこ
とができる最小量以上である。一実施形態では、パクリタキセルの量は、タンパク質担体
に対する１種以上の治療剤の親和性をもたらすことができる最小量以上である。一実施形
態では、パクリタキセルの量は、１種以上の治療剤とタンパク質担体との複合体形成を促
進することができる最小量以上である。
リタキセル、及び任意的に１種以上の治療剤を含むナノ粒子複合体に安定性をもたらすこ
とができる最小量以上である。一実施形態では、パクリタキセルの量は、タンパク質担体
に対する１種以上の治療剤の親和性をもたらすことができる最小量以上である。一実施形
態では、パクリタキセルの量は、１種以上の治療剤とタンパク質担体との複合体形成を促
進することができる最小量以上である。
【0017】
これらの実施形態のいずれにおいても、パクリタキセルの量は、パクリタキセルの治療
量未満とすることができる。換言すると、その量は、治療効果をもたらすために規定又は
想定される量（例えば癌を効果的に治療するための化学療法量など）よりも少なくてもよ
い。
量未満とすることができる。換言すると、その量は、治療効果をもたらすために規定又は
想定される量（例えば癌を効果的に治療するための化学療法量など）よりも少なくてもよ
い。
【0018】
一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は約５ｍｇ／ｍＬ未
満である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は約４．５
４ｍｇ／ｍＬ未満、約４．１６ｍｇ／ｍＬ未満、約３．５７ｍｇ／ｍＬ未満、約３．３３
ｍｇ／ｍＬ未満、約３．１２ｍｇ／ｍＬ未満、約２．９４ｍｇ／ｍＬ未満、約２．７８ｍ
ｇ／ｍＬ未満、約２．６３ｍｇ／ｍＬ未満、約２．５ｍｇ／ｍＬ未満、約２．３８ｍｇ／
ｍＬ未満、約２．２７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．１７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．０８ｍｇ／ｍ
Ｌ未満、約２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．９２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．８５ｍｇ／ｍＬ未満、
約１．７８ｍｇ／ｍＬ未満、約１．７２ｍｇ／ｍＬ未満又は約１．６７ｍｇ／ｍＬ未満で
ある。
満である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は約４．５
４ｍｇ／ｍＬ未満、約４．１６ｍｇ／ｍＬ未満、約３．５７ｍｇ／ｍＬ未満、約３．３３
ｍｇ／ｍＬ未満、約３．１２ｍｇ／ｍＬ未満、約２．９４ｍｇ／ｍＬ未満、約２．７８ｍ
ｇ／ｍＬ未満、約２．６３ｍｇ／ｍＬ未満、約２．５ｍｇ／ｍＬ未満、約２．３８ｍｇ／
ｍＬ未満、約２．２７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．１７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．０８ｍｇ／ｍ
Ｌ未満、約２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．９２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．８５ｍｇ／ｍＬ未満、
約１．７８ｍｇ／ｍＬ未満、約１．７２ｍｇ／ｍＬ未満又は約１．６７ｍｇ／ｍＬ未満で
ある。
【0019】
理論に縛られるものではないが、担体タンパク質への結合、例えば担体タンパク質との
結合剤の複合体形成は、結合剤のアルブミン結合性モチーフ及び／又は担体タンパク質の
抗体結合性モチーフを介して起こると考えられる。一実施形態では、結合剤はアルブミン
結合性モチーフを含む。一実施形態では、担体タンパク質は抗体結合性モチーフを含む。
抗体結合性モチーフの非限定的な例は、２０１７年８月４日出願のＰＣＴ出願ＰＣＴ／Ｕ
Ｓ２０１７／０４５６４３号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の
内容の一部をなす。幾つかの実施形態では、結合剤は、非治療用及び非内在性ヒト抗体、
融合タンパク質（例えば抗体Ｆｃドメインと標的抗原に結合するペプチドとの融合体）、
又はアプタマーである。
結合剤の複合体形成は、結合剤のアルブミン結合性モチーフ及び／又は担体タンパク質の
抗体結合性モチーフを介して起こると考えられる。一実施形態では、結合剤はアルブミン
結合性モチーフを含む。一実施形態では、担体タンパク質は抗体結合性モチーフを含む。
抗体結合性モチーフの非限定的な例は、２０１７年８月４日出願のＰＣＴ出願ＰＣＴ／Ｕ
Ｓ２０１７／０４５６４３号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の
内容の一部をなす。幾つかの実施形態では、結合剤は、非治療用及び非内在性ヒト抗体、
融合タンパク質（例えば抗体Ｆｃドメインと標的抗原に結合するペプチドとの融合体）、
又はアプタマーである。
【0020】
一実施形態では、結合剤は抗原結合性ドメインを含む。一実施形態では、抗原はＣＤ３
、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ５２、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ
１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ－４、ＲＡＮＫ－Ｌ、ＧＤ－２、Ｌｙ６Ｅ、ＨＥＲ３、ＥＧＦ
Ｒ、ＤＡＦ、ＥＲＢＢ－３受容体、ＣＳＦ－１Ｒ、ＨＥＲ２、ＳＴＥＡＰ１、ＣＤ３、Ｃ
ＥＡ、ＣＤ４０、ＯＸ４０、Ａｎｇ２－ＶＥＧＦ又はＶＥＧＦである。
、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３８、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ５２、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ
１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ－４、ＲＡＮＫ－Ｌ、ＧＤ－２、Ｌｙ６Ｅ、ＨＥＲ３、ＥＧＦ
Ｒ、ＤＡＦ、ＥＲＢＢ－３受容体、ＣＳＦ－１Ｒ、ＨＥＲ２、ＳＴＥＡＰ１、ＣＤ３、Ｃ
ＥＡ、ＣＤ４０、ＯＸ４０、Ａｎｇ２－ＶＥＧＦ又はＶＥＧＦである。
【0021】
一実施形態では、結合剤は、トラスツズマブエムタンシン、アレムツズマブ、アテゾリ
ズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、デノスマブ、ジヌツキシマブ、イピリムマブ、ニ
ボルマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、パニツムマブ、ペムブロリズマブ、ペルツ
ズマブ、リツキシマブ、ラムシルマブ、アベルマブ又はデュルバルマブ、ピディリズマブ
、ＢＭＳ ９３６５５９、ＯＫＴ３及びトラスツズマブから選択される抗体である。
ズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、デノスマブ、ジヌツキシマブ、イピリムマブ、ニ
ボルマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、パニツムマブ、ペムブロリズマブ、ペルツ
ズマブ、リツキシマブ、ラムシルマブ、アベルマブ又はデュルバルマブ、ピディリズマブ
、ＢＭＳ ９３６５５９、ＯＫＴ３及びトラスツズマブから選択される抗体である。
【0022】
本発明はさらに、凍結乾燥ナノ粒子及びナノ粒子組成物、並びに調製したてのナノ粒子
の性質と実質的に差がないか或いは同じである凍結乾燥ナノ粒子及び組成物を包含する。
特に、凍結乾燥組成物は、水溶液中に再懸濁したときに、粒子サイズ、粒子サイズ分布、
癌細胞に対する毒性、結合剤親和性及び結合剤特異性に関して、新鮮な組成物と同様又は
同一である。驚くべきことに、凍結乾燥ナノ粒子は、それらの粒子中に２種類の異なるタ
ンパク質成分が存在しているにもかかわらず、再懸濁後に、作りたてのナノ粒子の特性を
保持している。一実施形態では、凍結乾燥組成物は室温で少なくとも約３ヶ月、４ヶ月、
５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１２ヶ月又はそれ以上
安定である。一実施形態では、凍結乾燥組成物は室温で少なくとも３ヶ月間安定である。
一実施形態では、再構成ナノ粒子は治療剤の活性を保持し、かつインビボで標的に結合す
ることができる。
の性質と実質的に差がないか或いは同じである凍結乾燥ナノ粒子及び組成物を包含する。
特に、凍結乾燥組成物は、水溶液中に再懸濁したときに、粒子サイズ、粒子サイズ分布、
癌細胞に対する毒性、結合剤親和性及び結合剤特異性に関して、新鮮な組成物と同様又は
同一である。驚くべきことに、凍結乾燥ナノ粒子は、それらの粒子中に２種類の異なるタ
ンパク質成分が存在しているにもかかわらず、再懸濁後に、作りたてのナノ粒子の特性を
保持している。一実施形態では、凍結乾燥組成物は室温で少なくとも約３ヶ月、４ヶ月、
５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１２ヶ月又はそれ以上
安定である。一実施形態では、凍結乾燥組成物は室温で少なくとも３ヶ月間安定である。
一実施形態では、再構成ナノ粒子は治療剤の活性を保持し、かつインビボで標的に結合す
ることができる。
【0023】
幾つかの実施形態では、１種以上の治療剤がナノ粒子の内部に位置する。別の実施形態
では、１種以上の治療剤がナノ粒子の外側表面に配置される。さらに別の実施形態では、
１種以上の治療剤がナノ粒子の内側及びナノ粒子の外側表面に配置される。
では、１種以上の治療剤がナノ粒子の外側表面に配置される。さらに別の実施形態では、
１種以上の治療剤がナノ粒子の内側及びナノ粒子の外側表面に配置される。
【0024】
幾つかの実施形態では、ナノ粒子は２種類以上の治療剤を含む。例えば、タキサン及び
白金薬、例えばパクリタキセル及びシスプラチンなどである。
白金薬、例えばパクリタキセル及びシスプラチンなどである。
【0025】
幾つかの実施形態では、ナノ粒子は、パクリタキセル以外の１種以上の追加の治療剤をさらに含む。幾つかの実施形態では、１種以上の治療剤は、アビラテロン、ベンダムスチン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カバジタキセル、シスプラチン、クロラムブシル、ダサチニブ、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エルロチニブ、エトポシド、エベロリムス、ゲフィチニブ、イダルビシン、イマチニブ、ヒドロキシウレア、ラパチニブ、リュープロレリン、メルファラン、メトトレキサート、ミトキサントロン、ネダプラチン、ニロチニブ、オキサリプラチン、パゾパニブ、ペメトレキセド、ピコプラチン、ロミデプシン、サトラプラチン、ソラフェニブ、ベムラフェニブ、スニチニブ、テニポシド、トリプラチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンクリスチン又はシクロホスファミドである。
【0026】
幾つかの実施形態では、結合剤、担体タンパク質、及び／又は存在する場合には治療剤
は、非共有結合によって結合している。
は、非共有結合によって結合している。
【0027】
幾つかの実施形態では、担体タンパク質は、ゼラチン、エラスチン、グリアジン、レグ
ミン、ゼイン、大豆タンパク質、乳タンパク質及び乳清タンパク質からなる群から選択さ
れる。好ましい実施形態では、担体タンパク質はアルブミン、例えばヒト血清アルブミン
である。
ミン、ゼイン、大豆タンパク質、乳タンパク質及び乳清タンパク質からなる群から選択さ
れる。好ましい実施形態では、担体タンパク質はアルブミン、例えばヒト血清アルブミン
である。
【0028】
幾つかの実施形態では、本組成物は静脈内送達用に製剤化される。別の実施形態では、
本組成物は腫瘍への直接注射又は灌流用に製剤化される。
本組成物は腫瘍への直接注射又は灌流用に製剤化される。
【0029】
幾つかの実施形態では、ナノ粒子は、約１×１０－１１Ｍ～約１×１０－９Ｍの解離定
数を有する。
数を有する。
【0030】
一実施形態では、ナノ粒子組成物の製造方法であって、担体タンパク質、パクリタキセ
ル及び１種以上の治療剤を、所望のナノ粒子が形成する条件及び成分比で接触させること
を含む方法を提供する。
ル及び１種以上の治療剤を、所望のナノ粒子が形成する条件及び成分比で接触させること
を含む方法を提供する。
【0031】
幾つかの態様では、アルブミン－パクリタキセル誘導体又はアルブミン－パクリタキセ
ルナノ粒子を形成する方法であって、高圧下で溶液中でアルブミンをパクリタキセル誘導
体又はパクリタキセルとホモジナイズして、アルブミン－パクリタキセル誘導体又はアル
ブミン－パクリタキセルナノ粒子を生成させる方法を含む方法が提供される。
ルナノ粒子を形成する方法であって、高圧下で溶液中でアルブミンをパクリタキセル誘導
体又はパクリタキセルとホモジナイズして、アルブミン－パクリタキセル誘導体又はアル
ブミン－パクリタキセルナノ粒子を生成させる方法を含む方法が提供される。
【0032】
幾つかの態様では、ナノ粒子組成物の製造方法であって、担体タンパク質、パクリタキ
セル及び／又は治療剤を、ｐＨ５．０～７．５及び約５℃～約６０℃、約２３℃～約６０
℃又は約５５℃～約６０℃の温度の溶液中で、結合剤と、所望のナノ粒子が形成する条件
及び成分比で接触させることを含む方法が提供される。一実施形態では、ナノ粒子は５５
℃～６０℃及びｐＨ７．０で製造される。別の態様では、ナノ粒子組成物の製造方法であ
って、（ａ）担体タンパク質、パクリタキセル及び治療剤を接触させてコアを形成するス
テップと、（ｂ）任意的に、コアを、約５℃～約６０℃、約２３℃～約６０℃又は約５５
℃～約６０℃の温度でｐＨ約５．０～約７．５の溶液中で、抗体と、所望のナノ粒子が形
成する条件及び成分比で接触させることを含む方法が提供される。
セル及び／又は治療剤を、ｐＨ５．０～７．５及び約５℃～約６０℃、約２３℃～約６０
℃又は約５５℃～約６０℃の温度の溶液中で、結合剤と、所望のナノ粒子が形成する条件
及び成分比で接触させることを含む方法が提供される。一実施形態では、ナノ粒子は５５
℃～６０℃及びｐＨ７．０で製造される。別の態様では、ナノ粒子組成物の製造方法であ
って、（ａ）担体タンパク質、パクリタキセル及び治療剤を接触させてコアを形成するス
テップと、（ｂ）任意的に、コアを、約５℃～約６０℃、約２３℃～約６０℃又は約５５
℃～約６０℃の温度でｐＨ約５．０～約７．５の溶液中で、抗体と、所望のナノ粒子が形
成する条件及び成分比で接触させることを含む方法が提供される。
【0033】
幾つかの態様では、ある量の治療剤（例えばパクリタキセルではない治療剤）も担体タ
ンパク質に添加することができる。
ンパク質に添加することができる。
【0034】
別の実施形態では、ナノ粒子は上述の通り製造され、次いで凍結乾燥される。
【0035】
別の態様では、癌細胞を治療するための方法であって、癌細胞を治療するため、該細胞を本明細書に開示した有効量のナノ粒子組成物と接触させることを含む方法が提供される。
別の態様では、癌細胞を治療するための、本明細書に記載のナノ粒子複合体、又は本明細書に記載のナノ粒子組成物が提供される。
別の態様では、癌細胞を治療するための、本明細書に記載のナノ粒子複合体、又は本明細書に記載のナノ粒子組成物が提供される。
【0036】
一実施形態では、癌細胞の集団において癌細胞を死滅させる方法であって、当該方法が、上記細胞を有効量のナノ粒子組成物と接触させることを含んでおり、上記組成物が癌細胞を死滅させるのに十分な期間上記細胞と接触した状態に維持され、上記ナノ粒子組成物がナノ粒子複合体を含んでおり、ナノ粒子の各々がアルブミン及びパクリタキセルを含んでおり、パクリタキセルが、治療効果をもたらす量よりも少ない量で存在する、方法が提供される。
別の態様では、癌細胞の集団において癌細胞を死滅させるための、本明細書に記載のナノ粒子複合体、又は本明細書に記載のナノ粒子組成物が提供される。
別の態様では、癌細胞の集団において癌細胞を死滅させるための、本明細書に記載のナノ粒子複合体、又は本明細書に記載のナノ粒子組成物が提供される。
【0037】
一実施形態では、癌の治療を必要とする患者の癌を治療する方法であって、当該方法が、ナノ粒子複合体を含むナノ粒子組成物を患者に投与することを含んでおり、上記ナノ粒子の各々がアルブミン及びパクリタキセルを含んでおり、パクリタキセルが、治療効果をもたらす量よりも少ない量で存在する、方法が提供される。
別の態様では、癌の治療を必要とする患者の癌を治療するための、本明細書に記載のナノ粒子複合体、又は本明細書に記載のナノ粒子組成物が提供される。
別の態様では、癌の治療を必要とする患者の癌を治療するための、本明細書に記載のナノ粒子複合体、又は本明細書に記載のナノ粒子組成物が提供される。
【0038】
別の態様では、腫瘍の治療を必要とする患者の腫瘍を治療するための方法であって、腫瘍を治療するため、細胞を本明細書に開示した有効量のナノ粒子組成物と接触させることを含む方法が提供される。
別の態様では、腫瘍の治療を必要とする患者の腫瘍を治療するため、本明細書に記載のナノ粒子複合体、又は本明細書に記載のナノ粒子組成物が提供される。
幾つかの実施形態では、腫瘍の大きさが縮小する。別の実施形態では、ナノ粒子組成物は静脈内投与される。さらに別の実施形態では、ナノ粒子組成物は腫瘍への直接注射又は灌流によって投与される。
別の態様では、腫瘍の治療を必要とする患者の腫瘍を治療するため、本明細書に記載のナノ粒子複合体、又は本明細書に記載のナノ粒子組成物が提供される。
幾つかの実施形態では、腫瘍の大きさが縮小する。別の実施形態では、ナノ粒子組成物は静脈内投与される。さらに別の実施形態では、ナノ粒子組成物は腫瘍への直接注射又は灌流によって投与される。
【0039】
幾つかの実施形態では、本明細書で提供される方法は、ａ）ナノ粒子組成物を３週間に
わたって週１回投与するステップ、ｂ）ナノ粒子組成物の投与を１週間中止するステップ
、及びｃ）腫瘍を治療するため必要に応じてステップａ）及びｂ）を繰り返すステップを
含む。
わたって週１回投与するステップ、ｂ）ナノ粒子組成物の投与を１週間中止するステップ
、及びｃ）腫瘍を治療するため必要に応じてステップａ）及びｂ）を繰り返すステップを
含む。
【0040】
幾つかの実施形態では、治療有効量は、約７５ｍｇ／ｍ２～約１７５ｍｇ／ｍ２の担体
タンパク質（すなわち、患者１ｍ２当たりの担体タンパク質ミリグラム数）を含む。別の
実施形態では、パクリタキセルは、約７５ｍｇ／ｍ２未満の量、例えば５ｍｇ／ｍ２～７
５ｍｇ／ｍ２の量である。別の実施形態では、パクリタキセルは治療有効量よりも少ない
量のものである。幾つかの実施形態では、治療剤は治療有効量のものである。幾つかの実
施形態では、治療有効量は約３０ｍｇ／ｍ２～約７０ｍｇ／ｍ２の結合剤を含む。さらに
別の実施形態では、治療有効量は約３０ｍｇ／ｍ２～約７０ｍｇ／ｍ２のベバシズマブを
含む。
タンパク質（すなわち、患者１ｍ２当たりの担体タンパク質ミリグラム数）を含む。別の
実施形態では、パクリタキセルは、約７５ｍｇ／ｍ２未満の量、例えば５ｍｇ／ｍ２～７
５ｍｇ／ｍ２の量である。別の実施形態では、パクリタキセルは治療有効量よりも少ない
量のものである。幾つかの実施形態では、治療剤は治療有効量のものである。幾つかの実
施形態では、治療有効量は約３０ｍｇ／ｍ２～約７０ｍｇ／ｍ２の結合剤を含む。さらに
別の実施形態では、治療有効量は約３０ｍｇ／ｍ２～約７０ｍｇ／ｍ２のベバシズマブを
含む。
【0041】
本発明の一実施形態は、抗体（例えば腫瘍表面の抗原又は腫瘍から抗原に特異的に結合
する抗体）と表面複合体形成する化学療法薬及び担体タンパク質を含むナノ粒子中の化学
療法薬を投与することによって化学療法薬の腫瘍取り込みの期間を増加させる方法を包含
する。
する抗体）と表面複合体形成する化学療法薬及び担体タンパク質を含むナノ粒子中の化学
療法薬を投与することによって化学療法薬の腫瘍取り込みの期間を増加させる方法を包含
する。
【図面の簡単な説明】
【0042】
以下の図面は、本発明の代表的なものにすぎず、限定を意図するものではない。一貫性
のために、アブラキサン（登録商標）及びベバシズマブを使用した本発明のナノ粒子には
、「ＡＢ」という頭字語を用い、ＡＢ１６０のようなＡＢの後の数字は、これらのナノ粒
子の平均粒子サイズ（ナノメートル）を示すためのものである。同様に、結合剤がリツキ
シマブである場合、頭字語は「ＡＲ」であり、その後の数字は同じ意味をもつ。
のために、アブラキサン（登録商標）及びベバシズマブを使用した本発明のナノ粒子には
、「ＡＢ」という頭字語を用い、ＡＢ１６０のようなＡＢの後の数字は、これらのナノ粒
子の平均粒子サイズ（ナノメートル）を示すためのものである。同様に、結合剤がリツキ
シマブである場合、頭字語は「ＡＲ」であり、その後の数字は同じ意味をもつ。
【図2A】図２Ａ～図２Ｅは、非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）単独（図２Ａ）、或いは４ｍｇ／ｍＬ（図２Ｂ）、６ｍｇ／ｍＬ（図２Ｃ）、８ｍｇ／ｍＬ（図２Ｄ）又は１０ｍｇ／ｍＬ（図２Ｅ）のベバシズマブと共に３０分間インキュベートしたナノ粒子の直径を示す。直径は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術を用いて１：３００希釈で測定した。
【図2B】図２Ａ～図２Ｅは、非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）単独（図２Ａ）、或いは４ｍｇ／ｍＬ（図２Ｂ）、６ｍｇ／ｍＬ（図２Ｃ）、８ｍｇ／ｍＬ（図２Ｄ）又は１０ｍｇ／ｍＬ（図２Ｅ）のベバシズマブと共に３０分間インキュベートしたナノ粒子の直径を示す。直径は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術を用いて１：３００希釈で測定した。
【図2C】図２Ａ～図２Ｅは、非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）単独（図２Ａ）、或いは４ｍｇ／ｍＬ（図２Ｂ）、６ｍｇ／ｍＬ（図２Ｃ）、８ｍｇ／ｍＬ（図２Ｄ）又は１０ｍｇ／ｍＬ（図２Ｅ）のベバシズマブと共に３０分間インキュベートしたナノ粒子の直径を示す。直径は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術を用いて１：３００希釈で測定した。
【図2D】図２Ａ～図２Ｅは、非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）単独（図２Ａ）、或いは４ｍｇ／ｍＬ（図２Ｂ）、６ｍｇ／ｍＬ（図２Ｃ）、８ｍｇ／ｍＬ（図２Ｄ）又は１０ｍｇ／ｍＬ（図２Ｅ）のベバシズマブと共に３０分間インキュベートしたナノ粒子の直径を示す。直径は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術を用いて１：３００希釈で測定した。
【図2E】図２Ａ～図２Ｅは、非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）単独（図２Ａ）、或いは４ｍｇ／ｍＬ（図２Ｂ）、６ｍｇ／ｍＬ（図２Ｃ）、８ｍｇ／ｍＬ（図２Ｄ）又は１０ｍｇ／ｍＬ（図２Ｅ）のベバシズマブと共に３０分間インキュベートしたナノ粒子の直径を示す。直径は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術を用いて１：３００希釈で測定した。
【図3A】図３Ａ及び図３Ｂは、ベバシズマブ（図３Ａ）又はリツキシマブ（図３Ｂ）のＮＴＰに対する結合親和性（Ｋｄ）を示す。Ｋｄはバイオレイヤー干渉法（Bio LayerInterferometry：ＢＬＩ）を用いて測定した。
【図3B】図３Ａ及び図３Ｂは、ベバシズマブ（図３Ａ）又はリツキシマブ（図３Ｂ）のＮＴＰに対する結合親和性（Ｋｄ）を示す。Ｋｄはバイオレイヤー干渉法（Bio Layer Interferometry：ＢＬＩ）を用いて測定した。
【図5A】図５Ａ～図５Ｅは、アイソタイプ対照（図５Ａ）、抗ＣＤ２０抗体（図５Ｂ）、アブラキサン（登録商標）（図５Ｃ）、ＡＲ１６０（図５Ｄ）、ＮＴＰ（図５Ｅ）、リツキシマブ結合ＮＴＰ（ＮＴＲｉｔ；図５Ｆ）又はリツキシマブ単独（図５Ｇ）によるＣＤ２０陽性Ｄａｕｄｉ細胞の結合阻害を示す。
【図5B】図５Ａ～図５Ｅは、アイソタイプ対照（図５Ａ）、抗ＣＤ２０抗体（図５Ｂ）、アブラキサン（登録商標）（図５Ｃ）、ＡＲ１６０（図５Ｄ）、ＮＴＰ（図５Ｅ）、リツキシマブ結合ＮＴＰ（ＮＴＲｉｔ；図５Ｆ）又はリツキシマブ単独（図５Ｇ）によるＣＤ２０陽性Ｄａｕｄｉ細胞の結合阻害を示す。
【図5C】図５Ａ～図５Ｅは、アイソタイプ対照（図５Ａ）、抗ＣＤ２０抗体（図５Ｂ）、アブラキサン（登録商標）（図５Ｃ）、ＡＲ１６０（図５Ｄ）、ＮＴＰ（図５Ｅ）、リツキシマブ結合ＮＴＰ（ＮＴＲｉｔ；図５Ｆ）又はリツキシマブ単独（図５Ｇ）によるＣＤ２０陽性Ｄａｕｄｉ細胞の結合阻害を示す。
【図5D】図５Ａ～図５Ｅは、アイソタイプ対照（図５Ａ）、抗ＣＤ２０抗体（図５Ｂ）、アブラキサン（登録商標）（図５Ｃ）、ＡＲ１６０（図５Ｄ）、ＮＴＰ（図５Ｅ）、リツキシマブ結合ＮＴＰ（ＮＴＲｉｔ；図５Ｆ）又はリツキシマブ単独（図５Ｇ）によるＣＤ２０陽性Ｄａｕｄｉ細胞の結合阻害を示す。
【図5E】図５Ａ～図５Ｅは、アイソタイプ対照（図５Ａ）、抗ＣＤ２０抗体（図５Ｂ）、アブラキサン（登録商標）（図５Ｃ）、ＡＲ１６０（図５Ｄ）、ＮＴＰ（図５Ｅ）、リツキシマブ結合ＮＴＰ（ＮＴＲｉｔ；図５Ｆ）又はリツキシマブ単独（図５Ｇ）によるＣＤ２０陽性Ｄａｕｄｉ細胞の結合阻害を示す。
【発明を実施するための形態】
【0043】
発明の詳細な説明を読了すれば、本発明を様々な代替的実施形態及び代替的用途で如何
に実施すればよいか当業者には明らかになろう。ただし、本明細書には本発明の様々な実
施形態がすべて記載されているわけではない。本明細書に記載された実施形態は例示のた
めのものであり、限定のためのものではない。したがって、様々な代替実施形態に関する
発明の詳細な説明は、本発明の技術的範囲を以下に開示されたものに限定するものと解釈
すべきではない。
に実施すればよいか当業者には明らかになろう。ただし、本明細書には本発明の様々な実
施形態がすべて記載されているわけではない。本明細書に記載された実施形態は例示のた
めのものであり、限定のためのものではない。したがって、様々な代替実施形態に関する
発明の詳細な説明は、本発明の技術的範囲を以下に開示されたものに限定するものと解釈
すべきではない。
【0044】
本発明を開示するに当たり、以下に記載される態様は特定の組成物、かかる組成物の製
造方法又はその使用方法に限定されるものではなく、それらは当然ながら変更し得ること
を理解されたい。本明細書で用いる用語は専ら特定の態様を説明することを目的としたも
のであり、限定的なものではないことも理解すべきである。
造方法又はその使用方法に限定されるものではなく、それらは当然ながら変更し得ること
を理解されたい。本明細書で用いる用語は専ら特定の態様を説明することを目的としたも
のであり、限定的なものではないことも理解すべきである。
【0045】
本発明の詳細な説明は、専ら読者の便宜のために様々な欄に分けられているが、いずれ
かの欄に記載された開示内容は他の欄の開示内容と組合せることができる。本明細書では
、読者の便宜のために表題又は副題を用いることがあるが、それらは本発明の技術的範囲
に影響を及ぼすことを意図するものではない。
かの欄に記載された開示内容は他の欄の開示内容と組合せることができる。本明細書では
、読者の便宜のために表題又は副題を用いることがあるが、それらは本発明の技術的範囲
に影響を及ぼすことを意図するものではない。
【0046】
定義
別途定義しない限り、本明細書で用いる技術用語及び科学用語はすべて、本発明が属す
る技術分野の当業者が通常理解する通りの意味を有する。本明細書及び添付の特許請求の
範囲で用いる幾つかの用語については、以下の意味を有するものと定義される。
別途定義しない限り、本明細書で用いる技術用語及び科学用語はすべて、本発明が属す
る技術分野の当業者が通常理解する通りの意味を有する。本明細書及び添付の特許請求の
範囲で用いる幾つかの用語については、以下の意味を有するものと定義される。
【0047】
本明細書で用いる用語は、特定の実施形態を説明することを目的としたものであり、本
発明を限定することを意図するものではない。本明細書では単数形で記載されたものであ
っても、文脈から別途明らかでない限り、複数形の場合も含む。
発明を限定することを意図するものではない。本明細書では単数形で記載されたものであ
っても、文脈から別途明らかでない限り、複数形の場合も含む。
【0048】
「任意的に」とは、その用語に続いて記載された事象又は状況が起きても起きなくても
よいことを意味しており、かかる記載はその事象又は状況が起こる場合と起こらない場合
とを包含する。
よいことを意味しており、かかる記載はその事象又は状況が起こる場合と起こらない場合
とを包含する。
【0049】
「約」という用語が、範囲を含めて、温度、時間、量、濃度その他の数値の前に用いら
れている場合、±１０％、±５％、±１％、又はそれらの間の部分範囲又は中間値で変動
し得る近似値を示す。好ましくは、用量に関して用いられる「約」という用語は、用量が
±１０％変動し得ることを意味する。例えば、「約４００～約８００個の結合剤」とは、
ナノ粒子の外側表面が３６０～８８０個の粒子の結合剤を含んでいることを示す。
れている場合、±１０％、±５％、±１％、又はそれらの間の部分範囲又は中間値で変動
し得る近似値を示す。好ましくは、用量に関して用いられる「約」という用語は、用量が
±１０％変動し得ることを意味する。例えば、「約４００～約８００個の結合剤」とは、
ナノ粒子の外側表面が３６０～８８０個の粒子の結合剤を含んでいることを示す。
【0050】
「含む」とは、組成物及び方法が記載された要素を含んでいるが、その他の要素を除外
するものではないことを意味する。「から本質的になる」とは、組成物及び方法の定義に
用いられる場合、記載された目的に関して組合せに本質的重要性をもつ他の要素を除外す
ることを意味する。したがって、本明細書で定義された要素から本質的になる組成物は、
特許請求の範囲に記載された発明の基本的かつ新規な特徴に実質的な影響を与えない他の
材料又はステップを除外するものではない。「からなる」とは、痕跡量を超える他の成分
及び実質的な方法ステップを除外することを意味する。これらの移行句の各々によって定
義される実施形態は、本発明の技術的範囲に属する。
するものではないことを意味する。「から本質的になる」とは、組成物及び方法の定義に
用いられる場合、記載された目的に関して組合せに本質的重要性をもつ他の要素を除外す
ることを意味する。したがって、本明細書で定義された要素から本質的になる組成物は、
特許請求の範囲に記載された発明の基本的かつ新規な特徴に実質的な影響を与えない他の
材料又はステップを除外するものではない。「からなる」とは、痕跡量を超える他の成分
及び実質的な方法ステップを除外することを意味する。これらの移行句の各々によって定
義される実施形態は、本発明の技術的範囲に属する。
【0051】
本明細書で用いる「ナノ粒子」という用語は、少なくとも１つの寸法が５μｍ未満であ
る粒子をいう。静脈内投与のような好ましい実施形態では、ナノ粒子は１μｍ未満である
。直接投与の場合、ナノ粒子はもっと大きい。大きな粒子であっても明示的に本発明の想
定内である。
る粒子をいう。静脈内投与のような好ましい実施形態では、ナノ粒子は１μｍ未満である
。直接投与の場合、ナノ粒子はもっと大きい。大きな粒子であっても明示的に本発明の想
定内である。
【0052】
粒子の集団において、個々の粒子のサイズは平均の周りで分布している。したがって、
母集団の粒子サイズは平均値で表すことができるし、パーセンタイルで表すこともできる
。Ｄ５０は、粒子の５０％がその粒子サイズ未満に属する粒子サイズである。粒子の１０
％はＤ１０値よりも小さく、粒子の９０％はＤ９０よりも小さい。明らかでない場合、「
平均」サイズはＤ５０に等しい。例えば、ＡＢ１６０及びＡＲ１６０は、１６０ｎｍの平
均サイズを有するナノ粒子をいう。
母集団の粒子サイズは平均値で表すことができるし、パーセンタイルで表すこともできる
。Ｄ５０は、粒子の５０％がその粒子サイズ未満に属する粒子サイズである。粒子の１０
％はＤ１０値よりも小さく、粒子の９０％はＤ９０よりも小さい。明らかでない場合、「
平均」サイズはＤ５０に等しい。例えば、ＡＢ１６０及びＡＲ１６０は、１６０ｎｍの平
均サイズを有するナノ粒子をいう。
【0053】
「ナノ粒子」という用語は、小さな単位ナノ粒子の離散多量体も包含し得る。従って、
１６０ｎｍのナノ粒子について、多量体は、約３２０ｎｍ、約４８０ｎｍ、６４０ｎｍ、
８００ｎｍ、９６０ｎｍ、１１２０ｎｍなどであろう。
１６０ｎｍのナノ粒子について、多量体は、約３２０ｎｍ、約４８０ｎｍ、６４０ｎｍ、
８００ｎｍ、９６０ｎｍ、１１２０ｎｍなどであろう。
【0054】
本明細書で用いる「担体タンパク質」という用語は、結合剤及び／又は治療剤を運搬す
る機能を担うタンパク質をいう。本開示の結合剤は、担体タンパク質に可逆的に結合でき
る。担体タンパク質の具体例については、以下でさらに詳しく説明する。
る機能を担うタンパク質をいう。本開示の結合剤は、担体タンパク質に可逆的に結合でき
る。担体タンパク質の具体例については、以下でさらに詳しく説明する。
【0055】
本明細書で用いる「コア」という用語は、ナノ粒子の中心部分又は内側部分をいい、担
体タンパク質、担体タンパク質と治療剤又は他の薬剤若しくは薬剤の組合せからなること
ができる。幾つかの実施形態では、結合剤のアルブミン結合性モチーフがコアと会合し得
る。
体タンパク質、担体タンパク質と治療剤又は他の薬剤若しくは薬剤の組合せからなること
ができる。幾つかの実施形態では、結合剤のアルブミン結合性モチーフがコアと会合し得
る。
【0056】
本明細書で用いる「治療剤」という用語は、治療に有用な薬物、例えば、病状、生理学
的状態、症状又は病因の治療、寛解又は軽減のための薬物或いはそれらの評価又は診断の
ための薬物を意味する。治療剤は、化学療法薬とすることができ、例えば有糸分裂阻害薬
、トポイソメラーゼ阻害薬、ステロイド、抗腫瘍抗生物質、代謝拮抗薬、アルキル化薬、
酵素、プロテアソーム阻害薬又はこれらの組合せとし得る。
的状態、症状又は病因の治療、寛解又は軽減のための薬物或いはそれらの評価又は診断の
ための薬物を意味する。治療剤は、化学療法薬とすることができ、例えば有糸分裂阻害薬
、トポイソメラーゼ阻害薬、ステロイド、抗腫瘍抗生物質、代謝拮抗薬、アルキル化薬、
酵素、プロテアソーム阻害薬又はこれらの組合せとし得る。
【0057】
本明細書で用いる「結合剤」、「に特異的な結合剤」又は「に特異的に結合する結合剤
」という用語は、標的抗原に結合し、かつ無関係の化合物には有意に結合しない薬剤をい
う。開示された方法で有効に使用できる結合剤の具体例としては、限定されるものではな
いが、レクチン、タンパク質、及びモノクローナル抗体（ヒト化モノクローナル抗体など
）、キメラ抗体もしくはポリクローナル抗体又はそれらの抗原結合性断片のような抗体、
並びにアプタマー、融合タンパク質、アルブミン結合性モチーフを有する又はアルブミン
結合性モチーフに融合した及びアプタマーが挙げられる。一実施形態では、結合剤は外来
性抗体である。外来性抗体は、哺乳動物（例えばヒト）においてその哺乳動物の免疫系に
よって天然には産生されない抗体である。
」という用語は、標的抗原に結合し、かつ無関係の化合物には有意に結合しない薬剤をい
う。開示された方法で有効に使用できる結合剤の具体例としては、限定されるものではな
いが、レクチン、タンパク質、及びモノクローナル抗体（ヒト化モノクローナル抗体など
）、キメラ抗体もしくはポリクローナル抗体又はそれらの抗原結合性断片のような抗体、
並びにアプタマー、融合タンパク質、アルブミン結合性モチーフを有する又はアルブミン
結合性モチーフに融合した及びアプタマーが挙げられる。一実施形態では、結合剤は外来
性抗体である。外来性抗体は、哺乳動物（例えばヒト）においてその哺乳動物の免疫系に
よって天然には産生されない抗体である。
【0058】
本明細書で用いる「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子及び免疫グロブリン分子
の免疫学的に活性な部分（すなわち、抗原に免疫特異的に結合する抗原結合部位を含む分
子）をいう。この用語は、２本の免疫グロブリン重鎖と２本の免疫グロブリン軽鎖からな
る抗体、並びに全長抗体及びその一部分を含む様々な形態も指し、例えば、免疫グロブリ
ン分子、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲ移植抗体、ヒト化抗体、Ｆａｂ、Ｆａ
ｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ジスルフィド結合Ｆｖ、ｓｃＦｖ、シングルドメイン抗体
（ｄＡｂ）、ｄｉａｂｏｄｙ、多特異性抗体、二重特異性抗体、抗イディオタイプ抗体、
二特異性抗体、これらの機能的に活性なエピトープ結合断片、二機能性ハイブリッド抗体
（例えばＬａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ
． １７， １０５ （１９８７））及び単鎖（例えばＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，
Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ．， ８５， ５８７９－
５８８３ （１９８８）及びＢｉｒｄ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２， ４
２３－４２６ （１９８８）、これらの開示内容は援用によって本明細書の内容の一部を
なす。）が挙げられる。（全般には、Ｈｏｏｄ ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
， Ｂｅｎｊａｍｉｎ， Ｎ．Ｙ．， ２ＮＤ ｅｄ． （１９８４）；Ｈａｒｌｏｗ
ａｎｄ Ｌａｎｅ， Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ． Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａ
ｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ （１９８８）；
Ｈｕｎｋａｐｉｌｌｅｒ ａｎｄ Ｈｏｏｄ， Ｎａｔｕｒｅ， ３２３， １５－１６
（１９８６）を参照されたい。これらの開示内容は援用によって本明細書の内容の一部
をなす。）。抗体はどのような種類（例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ又はＩｇＤ
）のものであってもよい。好ましくは、抗体はＩｇＧである。抗体は、ヒト以外のもの（
例えばマウス、ヤギその他の動物由来のもの）、完全にヒトのもの、ヒト化されたもの又
はキメラであってもよい。１種以上の抗体は、本明細書に開示した抗体のバイオシミラー
を包含する。本明細書で用いるバイオシミラーとは、開発企業によって販売されている基
準製品と品質、安全性及び有効性が同等であるとみなされるバイオ医薬品をいう（米国公
衆衛生サービス法（４２Ｕ．Ｓ．Ｃ． ２６２（ｉ））のＳｅｃｔｉｏｎ ３５１（ｉ）
）。
の免疫学的に活性な部分（すなわち、抗原に免疫特異的に結合する抗原結合部位を含む分
子）をいう。この用語は、２本の免疫グロブリン重鎖と２本の免疫グロブリン軽鎖からな
る抗体、並びに全長抗体及びその一部分を含む様々な形態も指し、例えば、免疫グロブリ
ン分子、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ＣＤＲ移植抗体、ヒト化抗体、Ｆａｂ、Ｆａ
ｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ジスルフィド結合Ｆｖ、ｓｃＦｖ、シングルドメイン抗体
（ｄＡｂ）、ｄｉａｂｏｄｙ、多特異性抗体、二重特異性抗体、抗イディオタイプ抗体、
二特異性抗体、これらの機能的に活性なエピトープ結合断片、二機能性ハイブリッド抗体
（例えばＬａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ
． １７， １０５ （１９８７））及び単鎖（例えばＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，
Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ．， ８５， ５８７９－
５８８３ （１９８８）及びＢｉｒｄ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２， ４
２３－４２６ （１９８８）、これらの開示内容は援用によって本明細書の内容の一部を
なす。）が挙げられる。（全般には、Ｈｏｏｄ ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
， Ｂｅｎｊａｍｉｎ， Ｎ．Ｙ．， ２ＮＤ ｅｄ． （１９８４）；Ｈａｒｌｏｗ
ａｎｄ Ｌａｎｅ， Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ． Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａ
ｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ （１９８８）；
Ｈｕｎｋａｐｉｌｌｅｒ ａｎｄ Ｈｏｏｄ， Ｎａｔｕｒｅ， ３２３， １５－１６
（１９８６）を参照されたい。これらの開示内容は援用によって本明細書の内容の一部
をなす。）。抗体はどのような種類（例えばＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ又はＩｇＤ
）のものであってもよい。好ましくは、抗体はＩｇＧである。抗体は、ヒト以外のもの（
例えばマウス、ヤギその他の動物由来のもの）、完全にヒトのもの、ヒト化されたもの又
はキメラであってもよい。１種以上の抗体は、本明細書に開示した抗体のバイオシミラー
を包含する。本明細書で用いるバイオシミラーとは、開発企業によって販売されている基
準製品と品質、安全性及び有効性が同等であるとみなされるバイオ医薬品をいう（米国公
衆衛生サービス法（４２Ｕ．Ｓ．Ｃ． ２６２（ｉ））のＳｅｃｔｉｏｎ ３５１（ｉ）
）。
【0059】
「Ｋｄ」とも呼ばれる「解離定数」という用語は、特定の物質が個々の構成成分（例え
ばタンパク質担体、抗体及び治療剤）に分かれる程度を表す量をいう。
ばタンパク質担体、抗体及び治療剤）に分かれる程度を表す量をいう。
【0060】
本明細書で用いる「凍結乾燥」などの用語は、乾燥すべき材料（例えばナノ粒子）をま
ず凍結してから、真空環境中での昇華によって氷又は凍結溶媒を除去するプロセスをいう
。保存時の凍結乾燥品の安定性を高めるため、予備凍結乾燥製剤に添加物を任意的に配合
してもよい。幾つかの実施形態では、治療剤として使用する前に、凍結乾燥成分（担体タ
ンパク質、パクリタキセル、及び任意的に抗体及び／又は治療剤）からナノ粒子を形成す
ることができる。別の実施形態では、安定ナノ粒子の形成を促進するため担体タンパク質
及びパクリタキセル、任意的に結合剤（例えば抗体）及び／又は治療剤を最初に組合せ、
次いで凍結乾燥する。凍結乾燥試料はさらに追加の添加物を含んでもよい。
ず凍結してから、真空環境中での昇華によって氷又は凍結溶媒を除去するプロセスをいう
。保存時の凍結乾燥品の安定性を高めるため、予備凍結乾燥製剤に添加物を任意的に配合
してもよい。幾つかの実施形態では、治療剤として使用する前に、凍結乾燥成分（担体タ
ンパク質、パクリタキセル、及び任意的に抗体及び／又は治療剤）からナノ粒子を形成す
ることができる。別の実施形態では、安定ナノ粒子の形成を促進するため担体タンパク質
及びパクリタキセル、任意的に結合剤（例えば抗体）及び／又は治療剤を最初に組合せ、
次いで凍結乾燥する。凍結乾燥試料はさらに追加の添加物を含んでもよい。
【0061】
「賦形剤（bulkingagent）」という用語は、凍結乾燥品の構造をもたらす薬剤を包含
する。賦形剤に用いられる一般的な例としては、マンニトール、グリシン、ラクトース及
びスクロースが挙げられる。薬学的に優れたケーキをもたらすことに加えて、賦形剤は、
コラプス温度を変化させ、凍結融解保護をもたらし、長期保存中のタンパク質安定性を高
めることに関して有用な品質も付与し得る。これらの賦形剤は等張化剤としても作用し得
る。幾つかの実施形態では、本明細書に記載の凍結乾燥組成物は賦形剤を含む。幾つかの
実施形態では、本明細書に記載の凍結乾燥組成物は賦形剤を含まない。
する。賦形剤に用いられる一般的な例としては、マンニトール、グリシン、ラクトース及
びスクロースが挙げられる。薬学的に優れたケーキをもたらすことに加えて、賦形剤は、
コラプス温度を変化させ、凍結融解保護をもたらし、長期保存中のタンパク質安定性を高
めることに関して有用な品質も付与し得る。これらの賦形剤は等張化剤としても作用し得
る。幾つかの実施形態では、本明細書に記載の凍結乾燥組成物は賦形剤を含む。幾つかの
実施形態では、本明細書に記載の凍結乾燥組成物は賦形剤を含まない。
【0062】
「緩衝剤」という用語は、凍結乾燥前に溶液のｐＨを許容範囲内に維持する薬剤を包含
し、コハク酸塩（ナトリウム又はカリウム）、ヒスチジン、リン酸塩（ナトリウム又はカ
リウム）、Ｔｒｉｓ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）、ジエタノールアミン
、クエン酸塩（ナトリウム）などを挙げることができる。本発明の緩衝液は約５．５～約
６．５の範囲のｐＨを有し、好ましくは約６．０のｐＨを有する。ｐＨをこの範囲に制御
する緩衝剤の例としては、コハク酸塩（コハク酸ナトリウムなど）、グルコン酸塩、ヒス
チジン、クエン酸塩その他の有機酸緩衝剤が挙げられる。
し、コハク酸塩（ナトリウム又はカリウム）、ヒスチジン、リン酸塩（ナトリウム又はカ
リウム）、Ｔｒｉｓ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）、ジエタノールアミン
、クエン酸塩（ナトリウム）などを挙げることができる。本発明の緩衝液は約５．５～約
６．５の範囲のｐＨを有し、好ましくは約６．０のｐＨを有する。ｐＨをこの範囲に制御
する緩衝剤の例としては、コハク酸塩（コハク酸ナトリウムなど）、グルコン酸塩、ヒス
チジン、クエン酸塩その他の有機酸緩衝剤が挙げられる。
【0063】
「凍結保護剤（cryoprotectant）」という用語は、一般に、凍結によるストレスに対す
る安定性を、おそらくはタンパク質表面から優先的に排除されることによって、タンパク
質にもたらす薬剤を包含する。これらは、一次乾燥及び二次乾燥中並びに長期製品貯蔵中
の保護ももたらし得る。具体例は、デキストラン及びポリエチレングリコールのようなポ
リマー；スクロース、グルコース、トレハロース、ラクトースのような糖類；ポリソルベ
ートのような界面活性剤；並びにグリシン、アルギニン、セリンのようなアミノ酸である
。
る安定性を、おそらくはタンパク質表面から優先的に排除されることによって、タンパク
質にもたらす薬剤を包含する。これらは、一次乾燥及び二次乾燥中並びに長期製品貯蔵中
の保護ももたらし得る。具体例は、デキストラン及びポリエチレングリコールのようなポ
リマー；スクロース、グルコース、トレハロース、ラクトースのような糖類；ポリソルベ
ートのような界面活性剤；並びにグリシン、アルギニン、セリンのようなアミノ酸である
。
【0064】
「凍結乾燥保護剤（lyoprotectant）」という用語は、乾燥又は「脱水」プロセス（一
次及び二次乾燥サイクル）中に、おそらくは非晶質ガラス状マトリックスをもたらすこと
並びに乾燥プロセス中に除去される水分子の代わりに水素結合を介してタンパク質と結合
することによって、タンパク質に安定性をもたらす薬剤を包含する。これは、タンパク質
の高次構造を維持し、凍結乾燥サイクル中のタンパク質の分解を最小限に抑え、長期製品
の改善に役立つ。具体例としては、スクロース及びトレハロースのようなポリオール又は
糖類が挙げられる。
次及び二次乾燥サイクル）中に、おそらくは非晶質ガラス状マトリックスをもたらすこと
並びに乾燥プロセス中に除去される水分子の代わりに水素結合を介してタンパク質と結合
することによって、タンパク質に安定性をもたらす薬剤を包含する。これは、タンパク質
の高次構造を維持し、凍結乾燥サイクル中のタンパク質の分解を最小限に抑え、長期製品
の改善に役立つ。具体例としては、スクロース及びトレハロースのようなポリオール又は
糖類が挙げられる。
【0065】
「医薬製剤」という用語は、活性成分を有効にすることができる形態の標品であって、
製剤が投与される対象に対して毒性である追加成分を含まない標品をいう。
製剤が投与される対象に対して毒性である追加成分を含まない標品をいう。
【0066】
「薬学的に許容される」添加物（ビヒクル、添加剤）は、用いられる有効成分の有効量
を与えるために対象哺乳動物に適切に投与できるものである。
を与えるために対象哺乳動物に適切に投与できるものである。
【0067】
「再構成時間」は、凍結乾燥製剤を溶液中で再水和するのに要する時間である。
【0068】
「安定」な製剤は、それに含まれるタンパク質が、保存中にその物理的安定性及び／又
は化学的安定性及び／又は生物学的活性を本質的に保持するものである。例えば、タンパ
ク質の安定性を測定するための様々な分析技術が当技術分野で利用でき、Ｐｅｐｔｉｄｅ
ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ， ２４７－３０１， Ｖｉｎ
ｃｅｎｔ Ｌｅｅ Ｅｄ．， Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．， Ｎｅｗ Ｙ
ｏｒｋ， Ｎ．Ｙ．， Ｐｕｂｓ． （１９９１）及びＪｏｎｅｓ， Ａ． Ａｄｖ．
Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ． １０：２９－９０ （１９９３）に概説されて
いる。安定性は、所定の温度で所定の期間測定することができる。
は化学的安定性及び／又は生物学的活性を本質的に保持するものである。例えば、タンパ
ク質の安定性を測定するための様々な分析技術が当技術分野で利用でき、Ｐｅｐｔｉｄｅ
ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ， ２４７－３０１， Ｖｉｎ
ｃｅｎｔ Ｌｅｅ Ｅｄ．， Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．， Ｎｅｗ Ｙ
ｏｒｋ， Ｎ．Ｙ．， Ｐｕｂｓ． （１９９１）及びＪｏｎｅｓ， Ａ． Ａｄｖ．
Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ． １０：２９－９０ （１９９３）に概説されて
いる。安定性は、所定の温度で所定の期間測定することができる。
【0069】
本明細書で用いる「エピトープ」という用語は、結合剤（例えば抗体）によって認識さ
れる抗原の部分をいう。エピトープとしては、タンパク質（例えば抗体）又はリガンドと
の特異的相互作用を可能にする短いアミノ酸配列又はペプチド（任意的にグリコシル化そ
の他の修飾されたもの）が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、エピトープは
、結合剤の抗原結合部位が結合する分子の部分とし得る。
れる抗原の部分をいう。エピトープとしては、タンパク質（例えば抗体）又はリガンドと
の特異的相互作用を可能にする短いアミノ酸配列又はペプチド（任意的にグリコシル化そ
の他の修飾されたもの）が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、エピトープは
、結合剤の抗原結合部位が結合する分子の部分とし得る。
【0070】
「治療」という用語は、ヒト患者のような対象における病気又は疾患（例えば癌）の治
療を包含し、（ｉ）病気又は疾患の抑制、すなわち病気又は疾患の進行の停止、（ｉｉ）
病気又は疾患の緩和、すなわち病気又は疾患の後退、（ｉｉｉ）病気又は疾患の増悪の遅
延、及び／又は（ｉｖ）病気又は疾患の１以上の症状の抑制、緩和又は増悪遅延を包含す
る。幾つかの実施形態では、「治療」は癌細胞を死滅させることをいう。
療を包含し、（ｉ）病気又は疾患の抑制、すなわち病気又は疾患の進行の停止、（ｉｉ）
病気又は疾患の緩和、すなわち病気又は疾患の後退、（ｉｉｉ）病気又は疾患の増悪の遅
延、及び／又は（ｉｖ）病気又は疾患の１以上の症状の抑制、緩和又は増悪遅延を包含す
る。幾つかの実施形態では、「治療」は癌細胞を死滅させることをいう。
【0071】
癌治療に関して「死滅させる」という用語は、その癌細胞又は癌細胞集団の少なくとも
一部の死を直接又は間接的にもたらす任意の種類の操作を包含する。
一部の死を直接又は間接的にもたらす任意の種類の操作を包含する。
【0072】
「アプタマー」という用語は、ポリペプチドのような標的分子に結合することができる
核酸分子をいう。例えば、本発明のアプタマーは、例えばＣＤ２０、ＣＤ３８、ＣＤ５２
、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、Ｌｙ６Ｅ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３／ＥＧＦＲ ＤＡ
Ｆ、ＥＲＢＢ－３受容体、ＣＳＦ－１Ｒ、ＳＴＥＡＰ１、ＣＤ３、ＣＥＡ、ＣＤ４０、Ｏ
Ｘ４０、Ａｎｇ２－ＶＥＧＦ及びＶＥＧＦに特異的に結合できる。ある結合特異性を有す
る抗体の作製及びアプタマーの治療的使用は当技術分野で十分に確立されている。例えば
、米国特許第５４７５０９６号、同第５２７０１６３号、同第５５８２９８１号、同第５
８４０８６７号、同第６０１１０２０号、同第６０５１６９８号、同第６１４７２０４号
、同第６１８０３４８号及び同第６６９９８４３号、並びに加齢黄斑変性の治療に関する
Ｍａｃｕｇｅｎ（登録商標）（Ｅｙｅｔｅｃｈ社（米国ニューヨーク））の治療効果を参
照されたい。
核酸分子をいう。例えば、本発明のアプタマーは、例えばＣＤ２０、ＣＤ３８、ＣＤ５２
、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、Ｌｙ６Ｅ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３／ＥＧＦＲ ＤＡ
Ｆ、ＥＲＢＢ－３受容体、ＣＳＦ－１Ｒ、ＳＴＥＡＰ１、ＣＤ３、ＣＥＡ、ＣＤ４０、Ｏ
Ｘ４０、Ａｎｇ２－ＶＥＧＦ及びＶＥＧＦに特異的に結合できる。ある結合特異性を有す
る抗体の作製及びアプタマーの治療的使用は当技術分野で十分に確立されている。例えば
、米国特許第５４７５０９６号、同第５２７０１６３号、同第５５８２９８１号、同第５
８４０８６７号、同第６０１１０２０号、同第６０５１６９８号、同第６１４７２０４号
、同第６１８０３４８号及び同第６６９９８４３号、並びに加齢黄斑変性の治療に関する
Ｍａｃｕｇｅｎ（登録商標）（Ｅｙｅｔｅｃｈ社（米国ニューヨーク））の治療効果を参
照されたい。
【0073】
本明細書で用いる「オリゴマー」又は「オリゴマー状」又は「オリゴマー化」という用
語は、２以上のモノマーからなるオリゴマーをいう。
語は、２以上のモノマーからなるオリゴマーをいう。
【0074】
融合タンパク質は、所望の構造－機能特性及び顕著な治療可能性をもつ分子を生成する
ためタンパク質又はその断片（例えば抗体の結晶化できる断片（Ｆｃ）ドメイン）を別の
生物活性剤（例えばタンパク質ドメイン、ペプチド又は核酸もしくはペプチドアプタマー
）と結合させた遺伝子組換えポリペプチドである。ガンマ免疫グロブリン（ＩｇＧ）アイ
ソタイプは、エフェクター機能の漸増及び血漿半減期の増加のような有益な特色のために
、Ｆｃ融合タンパク質を生成するための基礎として多用される。融合相手として使用でき
るアプタマー（ペプチド及び核酸の両方）の範囲を考慮すると、融合タンパク質は、数多
くの生物学的及び薬学的用途を有する。
ためタンパク質又はその断片（例えば抗体の結晶化できる断片（Ｆｃ）ドメイン）を別の
生物活性剤（例えばタンパク質ドメイン、ペプチド又は核酸もしくはペプチドアプタマー
）と結合させた遺伝子組換えポリペプチドである。ガンマ免疫グロブリン（ＩｇＧ）アイ
ソタイプは、エフェクター機能の漸増及び血漿半減期の増加のような有益な特色のために
、Ｆｃ融合タンパク質を生成するための基礎として多用される。融合相手として使用でき
るアプタマー（ペプチド及び核酸の両方）の範囲を考慮すると、融合タンパク質は、数多
くの生物学的及び薬学的用途を有する。
【0075】
「非毒性ナノ粒子」（ＮＴＰ）又は「ＮＴＰ複合体」という用語は、担体タンパク質（
例えばアルブミン）とパクリタキセルよりも毒性が低いパクリタキセル誘導体とを含むナ
ノ粒子をいう。任意的に、ＮＴＰ又はＮＴＰ複合体は、結合剤（例えば抗体）及び／又は
治療剤（例えば化学療法薬）を含む。
例えばアルブミン）とパクリタキセルよりも毒性が低いパクリタキセル誘導体とを含むナ
ノ粒子をいう。任意的に、ＮＴＰ又はＮＴＰ複合体は、結合剤（例えば抗体）及び／又は
治療剤（例えば化学療法薬）を含む。
【0076】
「パクリタキセルよりも毒性が低い」という記載は、パクリタキセルと比較して、癌細
胞及び正常細胞を含む細胞に対して低下した毒性（例えば細胞の死滅の低下）を示すパク
リタキセル誘導体をいう。例えば、パクリタキセルのメーヤワイン生成物（２０－アセト
キシ－４－デアセチル－５－エピ－２０，Ｏ－セコタキソール）は大幅に低下した毒性を
有するが、これはおそらくはパクリタキセルのＣ－４，Ｃ－５オキセタン環の切断による
ものと思われる。
胞及び正常細胞を含む細胞に対して低下した毒性（例えば細胞の死滅の低下）を示すパク
リタキセル誘導体をいう。例えば、パクリタキセルのメーヤワイン生成物（２０－アセト
キシ－４－デアセチル－５－エピ－２０，Ｏ－セコタキソール）は大幅に低下した毒性を
有するが、これはおそらくはパクリタキセルのＣ－４，Ｃ－５オキセタン環の切断による
ものと思われる。
【0077】
「低毒性ナノ粒子」（ＲＴＰ）又は「ＲＴＰ複合体」という用語は、担体タンパク質（
例えばアルブミン）と、アブラキサン（登録商標）（約９：１のアルブミン：パクリタキ
セル比）よりも少ない量のパクリタキセルとを含むナノ粒子をいう。任意的に、ＲＴＰ又
はＲＴＰ複合体は、結合剤（例えば抗体）及び／又は治療剤（例えば化学療法薬）を含む
。
例えばアルブミン）と、アブラキサン（登録商標）（約９：１のアルブミン：パクリタキ
セル比）よりも少ない量のパクリタキセルとを含むナノ粒子をいう。任意的に、ＲＴＰ又
はＲＴＰ複合体は、結合剤（例えば抗体）及び／又は治療剤（例えば化学療法薬）を含む
。
【0078】
さらに、本明細書で用いる幾つかの用語については、以下でさらに具体的に定義される
。
。
【0079】
概要
懸濁注射剤用アブラキサン（登録商標）（懸濁注射剤用パクリタキセル・タンパク質結
合粒子）は、平均粒子サイズ約１３０ｎｍのアルブミン結合型パクリタキセルである。パ
クリタキセルは、粒子内に非結晶性無定形状態で存在し得る。アブラキサン（登録商標）
は、例えば、点滴静注前に２０ｍＬの０．９％塩化ナトリウム注射液（米国薬局方）で再
構成するための凍結乾燥粉末として供給できる。使い捨てバイアルには、１００ｍｇのパ
クリタキセルと約９００ｍｇのヒトアルブミンが含まれる。再構成された懸濁液１ｍＬは
５ｍｇのパクリタキセルを含有する。
懸濁注射剤用アブラキサン（登録商標）（懸濁注射剤用パクリタキセル・タンパク質結
合粒子）は、平均粒子サイズ約１３０ｎｍのアルブミン結合型パクリタキセルである。パ
クリタキセルは、粒子内に非結晶性無定形状態で存在し得る。アブラキサン（登録商標）
は、例えば、点滴静注前に２０ｍＬの０．９％塩化ナトリウム注射液（米国薬局方）で再
構成するための凍結乾燥粉末として供給できる。使い捨てバイアルには、１００ｍｇのパ
クリタキセルと約９００ｍｇのヒトアルブミンが含まれる。再構成された懸濁液１ｍＬは
５ｍｇのパクリタキセルを含有する。
【0080】
アブラキサン（登録商標）ナノ粒子は、安定化されたアルブミン結合パクリタキセルで
ある。パクリタキセルとアルブミンとの会合は、例えば疎水性相互作用によるものでもよ
い。幾つかの例では、ナノ粒子は１３０ｎｍの平均サイズで安定である。例えばドセタキ
セル、ラパマイシンのような他の疎水性薬物も、同様に、アルブミンに結合することによ
って安定化ナノ粒子を形成できることが知られている。
ある。パクリタキセルとアルブミンとの会合は、例えば疎水性相互作用によるものでもよ
い。幾つかの例では、ナノ粒子は１３０ｎｍの平均サイズで安定である。例えばドセタキ
セル、ラパマイシンのような他の疎水性薬物も、同様に、アルブミンに結合することによ
って安定化ナノ粒子を形成できることが知られている。
【0081】
従来のＡＤＣを有効にするには、リンカーが体循環中は解離しないように十分に安定で
あるが腫瘍部位で十分に薬物放出できることが重要である。Ａｌｌｅｙ， Ｓ．Ｃ．，
ｅｔ ａｌ． （２００８） Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ Ｃｈｅｍ １９：７５９－７６５。
これが、有効な薬物コンジュゲートを開発する際の大きなネックとなっていることが判明
している（Ｊｕｌｉｅｎ， Ｄ．Ｃ．， ｅｔ ａｌ． （２０１１） ＭＡｂｓ ３：
４６７－４７８； Ａｌｌｅｙ， Ｓ．Ｃ．， ｅｔ ａｌ． （２００８） Ｂｉｏｃ
ｏｎｊｕｇ Ｃｈｅｍ １９：７５９－７６５）。そのため、ナノ免疫複合体の魅力は生
化学的リンカーを必要としないことである。
あるが腫瘍部位で十分に薬物放出できることが重要である。Ａｌｌｅｙ， Ｓ．Ｃ．，
ｅｔ ａｌ． （２００８） Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ Ｃｈｅｍ １９：７５９－７６５。
これが、有効な薬物コンジュゲートを開発する際の大きなネックとなっていることが判明
している（Ｊｕｌｉｅｎ， Ｄ．Ｃ．， ｅｔ ａｌ． （２０１１） ＭＡｂｓ ３：
４６７－４７８； Ａｌｌｅｙ， Ｓ．Ｃ．， ｅｔ ａｌ． （２００８） Ｂｉｏｃ
ｏｎｊｕｇ Ｃｈｅｍ １９：７５９－７６５）。そのため、ナノ免疫複合体の魅力は生
化学的リンカーを必要としないことである。
【0082】
現行のＡＤＣのもう一つの短所は、腫瘍への高い薬物浸透が、ヒト腫瘍において実質的
に証明されていないことである。マウスモデルにおける初期のＡＤＣ試験は、抗体による
腫瘍ターゲティングによって腫瘍内での有効成分の濃度が高まることを示唆していたが（
Ｄｅｇｕｃｈｉ， Ｔ． ｅｔ ａｌ． （１９８６） Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ４６：
３７５１－３７５５）、この結果はヒトの疾患の治療とは相関していない。ヒトの腫瘍
は、マウスの腫瘍よりも透過性がはるかに不均一であるからである。Ｊａｉｎ， Ｒ．Ｋ
． ｅｔ ａｌ． （２０１０） Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ７：６５３
－６６４。また、ナノ粒子のサイズも血管系から腫瘍への血管外漏出に重要である。ヒト
結腸腺癌異種移植モデルを用いたマウス研究では、血管孔は４００ｎｍ以下のリポソーム
に対して透過性であった。Ｙｕａｎ， Ｆ．， ｅｔ ａｌ． （１９９５） Ｃａｎｃ
ｅｒ Ｒｅｓ ５５： ３７５２－３７５６。腫瘍孔径及び透過性に関する別の研究は、
両特性が腫瘍の位置及び増殖状態に依存し、退行性腫瘍及び頭蓋腫瘍は２００ｎｍ未満の
粒子に対して透過性であることを実証している。Ｈｏｂｂｓ， Ｓ．Ｋ．， ｅｔ ａｌ
． （１９９８） Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９５：４６０７－
４６１２。本明細書に記載のナノ－免疫複合体は、インタクトな状態で２００ｎｍ未満で
ある大きな複合体が体循環中に、腫瘍組織を容易に透過できる小さな機能単位へと部分的
に解離されることによって、この問題を克服する。さらに、コンジュゲートが腫瘍部位に
到達すると、さらに小さな毒性ペイロードを放出することができるが、腫瘍細胞によって
取り込まれる必要があるのはこの毒性部分のみであり、コンジュゲート全体ではない。
に証明されていないことである。マウスモデルにおける初期のＡＤＣ試験は、抗体による
腫瘍ターゲティングによって腫瘍内での有効成分の濃度が高まることを示唆していたが（
Ｄｅｇｕｃｈｉ， Ｔ． ｅｔ ａｌ． （１９８６） Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ４６：
３７５１－３７５５）、この結果はヒトの疾患の治療とは相関していない。ヒトの腫瘍
は、マウスの腫瘍よりも透過性がはるかに不均一であるからである。Ｊａｉｎ， Ｒ．Ｋ
． ｅｔ ａｌ． （２０１０） Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ７：６５３
－６６４。また、ナノ粒子のサイズも血管系から腫瘍への血管外漏出に重要である。ヒト
結腸腺癌異種移植モデルを用いたマウス研究では、血管孔は４００ｎｍ以下のリポソーム
に対して透過性であった。Ｙｕａｎ， Ｆ．， ｅｔ ａｌ． （１９９５） Ｃａｎｃ
ｅｒ Ｒｅｓ ５５： ３７５２－３７５６。腫瘍孔径及び透過性に関する別の研究は、
両特性が腫瘍の位置及び増殖状態に依存し、退行性腫瘍及び頭蓋腫瘍は２００ｎｍ未満の
粒子に対して透過性であることを実証している。Ｈｏｂｂｓ， Ｓ．Ｋ．， ｅｔ ａｌ
． （１９９８） Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９５：４６０７－
４６１２。本明細書に記載のナノ－免疫複合体は、インタクトな状態で２００ｎｍ未満で
ある大きな複合体が体循環中に、腫瘍組織を容易に透過できる小さな機能単位へと部分的
に解離されることによって、この問題を克服する。さらに、コンジュゲートが腫瘍部位に
到達すると、さらに小さな毒性ペイロードを放出することができるが、腫瘍細胞によって
取り込まれる必要があるのはこの毒性部分のみであり、コンジュゲート全体ではない。
【0083】
治療剤（アブラキサン（登録商標））を含有する、抗体（すなわちアバスチン（登録商
標））でコートされたアルブミンナノ粒子の出現は、インビボで所定部位への２種以上の
治療剤の方向性送達の新たなパラダイムをもたらした。国際公開第２０１２／１５４８６
１号及び同第２０１４／０５５４１５号を参照されたい（それらの開示内容は援用によっ
て本明細書の内容の一部をなす。）。
標））でコートされたアルブミンナノ粒子の出現は、インビボで所定部位への２種以上の
治療剤の方向性送達の新たなパラダイムをもたらした。国際公開第２０１２／１５４８６
１号及び同第２０１４／０５５４１５号を参照されたい（それらの開示内容は援用によっ
て本明細書の内容の一部をなす。）。
【0084】
ただし、ある種の癌はアブラキサン（登録商標）－抗体複合体中のパクリタキセルによ
っては治療されないこと、及び／又はある種の癌には他の治療剤（例えば抗癌化学療法薬
）の方がより効果的であることも想定される。本明細書では、担体タンパク質（例えばア
ルブミン）と低減した量（例えばアブラキサン（登録商標）と比較して）のパクリタキセ
ルとを含む低毒性ナノ粒子（ＲＴＰ）、又は担体タンパク質（例えばアルブミン）とパク
リタキセルよりも毒性が低いパクリタキセル誘導体とを含む非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）に
ついて開示する。ナノ粒子は、治療剤及び／又は結合剤（例えば抗体）をさらに含んでい
てもよい。
っては治療されないこと、及び／又はある種の癌には他の治療剤（例えば抗癌化学療法薬
）の方がより効果的であることも想定される。本明細書では、担体タンパク質（例えばア
ルブミン）と低減した量（例えばアブラキサン（登録商標）と比較して）のパクリタキセ
ルとを含む低毒性ナノ粒子（ＲＴＰ）、又は担体タンパク質（例えばアルブミン）とパク
リタキセルよりも毒性が低いパクリタキセル誘導体とを含む非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）に
ついて開示する。ナノ粒子は、治療剤及び／又は結合剤（例えば抗体）をさらに含んでい
てもよい。
【0085】
ナノ粒子及びナノ粒子組成物
本開示から当業者には明らかであろうが、本開示は、担体タンパク質（例えばアルブミ
ン）とパクリタキセル誘導体（例えばパクリタキセルよりも毒性が低い誘導体）又は低減
した量（治療量及び／又はアブラキサン（登録商標）の量と比較して）のパクリタキセル
とを含むナノ粒子及びナノ粒子組成物に関する。幾つかの実施形態では、ナノ粒子は結合
剤及び／又は治療剤も含む。幾つかの実施形態では、ナノ粒子又はナノ粒子組成物は凍結
乾燥されている。
本開示から当業者には明らかであろうが、本開示は、担体タンパク質（例えばアルブミ
ン）とパクリタキセル誘導体（例えばパクリタキセルよりも毒性が低い誘導体）又は低減
した量（治療量及び／又はアブラキサン（登録商標）の量と比較して）のパクリタキセル
とを含むナノ粒子及びナノ粒子組成物に関する。幾つかの実施形態では、ナノ粒子は結合
剤及び／又は治療剤も含む。幾つかの実施形態では、ナノ粒子又はナノ粒子組成物は凍結
乾燥されている。
【0086】
本発明は、さらに、担体タンパク質、アブラキサン（登録商標）における存在量よりも
少ない量のパクリタキセル又はパクリタキセルよりも（例えば細胞に対して）毒性が低い
パクリタキセル誘導体、及び任意的に結合剤及び／又は治療剤を含むナノ粒子の形成に部
分的に基づく。理論に縛られるものではないが、かかるナノ粒子は、患者への毒性を最小
限に抑制しながら腫瘍に対する標的療法をもたらし、かつ従前パクリタキセルに感受性で
はない腫瘍及び／又は別の治療剤の方によく反応する腫瘍の治療に使用できると考えられ
る。
少ない量のパクリタキセル又はパクリタキセルよりも（例えば細胞に対して）毒性が低い
パクリタキセル誘導体、及び任意的に結合剤及び／又は治療剤を含むナノ粒子の形成に部
分的に基づく。理論に縛られるものではないが、かかるナノ粒子は、患者への毒性を最小
限に抑制しながら腫瘍に対する標的療法をもたらし、かつ従前パクリタキセルに感受性で
はない腫瘍及び／又は別の治療剤の方によく反応する腫瘍の治療に使用できると考えられ
る。
【0087】
幾つかの実施形態では、担体タンパク質は、アルブミン、ゼラチン、エラスチン（トポ
エラスチンを含む）又はエラスチン由来ポリペプチド（例えばα－エラスチン及びエラス
チン様ポリペプチド（ＥＬＰ））、グリアジン、レグミン、ゼイン、大豆タンパク質（例
えば分離大豆タンパク質（ＳＰＩ））、乳タンパク質（例えばβ－ラクトグロブリン（Ｂ
ＬＧ）及びカゼイン）又は乳清タンパク質（例えば乳清タンパク質濃縮物（ＷＰＣ）及び
乳清タンパク質分離物（ＷＰＩ））。好ましい実施形態では、担体タンパク質はアルブミ
ンである。好ましい実施形態では、アルブミンは卵白（オボアルブミン）、ウシ血清アル
ブミン（ＢＳＡ）などである。さらに一段と好ましい態様では、担体タンパク質はヒト血
清アルブミン（ＨＳＡ）である。幾つかの実施形態では、担体タンパク質は組換えタンパ
ク質（例えば組換えＨＳＡ）である。幾つかの実施形態では、担体タンパク質は、米国食
品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認された一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ；generall
y regarded assafe）添加物である。
エラスチンを含む）又はエラスチン由来ポリペプチド（例えばα－エラスチン及びエラス
チン様ポリペプチド（ＥＬＰ））、グリアジン、レグミン、ゼイン、大豆タンパク質（例
えば分離大豆タンパク質（ＳＰＩ））、乳タンパク質（例えばβ－ラクトグロブリン（Ｂ
ＬＧ）及びカゼイン）又は乳清タンパク質（例えば乳清タンパク質濃縮物（ＷＰＣ）及び
乳清タンパク質分離物（ＷＰＩ））。好ましい実施形態では、担体タンパク質はアルブミ
ンである。好ましい実施形態では、アルブミンは卵白（オボアルブミン）、ウシ血清アル
ブミン（ＢＳＡ）などである。さらに一段と好ましい態様では、担体タンパク質はヒト血
清アルブミン（ＨＳＡ）である。幾つかの実施形態では、担体タンパク質は組換えタンパ
ク質（例えば組換えＨＳＡ）である。幾つかの実施形態では、担体タンパク質は、米国食
品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認された一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ；generall
y regarded assafe）添加物である。
【0088】
幾つかの実施形態では、結合剤は、トラスツズマブエムタンシン、アレムツズマブ、ア
テゾリズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、デノスマブ、ジヌツキシマブ、イピリムマ
ブ、ニボルマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、パニツムマブ、ペムブロリズマブ、
ペルツズマブ、リツキシマブ、アベルマブ又はデュルバルマブ、ピディリズマブ、ＢＭＳ
９３６５５９及びトラスツズマブから選択される抗体である。幾つかの実施形態では、
抗体は表１に記載した抗体から選択される。幾つかの実施形態では、抗体はナノ粒子の表
面の全体又は一部に存在する実質的に単層の抗体である。
テゾリズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、デノスマブ、ジヌツキシマブ、イピリムマ
ブ、ニボルマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、パニツムマブ、ペムブロリズマブ、
ペルツズマブ、リツキシマブ、アベルマブ又はデュルバルマブ、ピディリズマブ、ＢＭＳ
９３６５５９及びトラスツズマブから選択される抗体である。幾つかの実施形態では、
抗体は表１に記載した抗体から選択される。幾つかの実施形態では、抗体はナノ粒子の表
面の全体又は一部に存在する実質的に単層の抗体である。
【0089】
表１は、抗体の非限定的なリストを示す。
【0090】
【表1】
【0091】
幾つかの実施形態では、１種以上の治療剤は、アビラテロン、ベンダムスチン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カバジタキセル、シスプラチン、クロラムブシル、ダサチニブ、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エルロチニブ、エトポシド、エベロリムス、ゲフィチニブ、イダルビシン、イマチニブ、ヒドロキシウレア、ラパチニブ、リュープロレリン、メルファラン、メトトレキサート、ミトキサントロン、ネダプラチン、ニロチニブ、オキサリプラチン、パゾパニブ、ペメトレキセド、ピコプラチン、ロミデプシン、サトラプラチン、ソラフェニブ、ベムラフェニブ、スニチニブ、テニポシド、トリプラチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンクリスチン及びシクロホスファミドから選択される。
【0092】
表２は、癌治療剤の非限定的なリストのリストを表す。一実施形態では、治療剤は表２
に記載された薬剤から選択される。
に記載された薬剤から選択される。
【0093】
【表2】
【0094】
なお、治療剤は、ナノ粒子の内側、外側表面又はその両方に位置し得る。ナノ粒子は、
２種以上の治療剤、例えば、２種類の治療剤、３種類の治療剤、４種類の治療剤、５種類
の治療剤又はそれ以上を含んでいてもよい。さらに、ナノ粒子は、ナノ粒子の内側及び外
側に同一又は異なる治療剤を含んでいてもよい。
２種以上の治療剤、例えば、２種類の治療剤、３種類の治療剤、４種類の治療剤、５種類
の治療剤又はそれ以上を含んでいてもよい。さらに、ナノ粒子は、ナノ粒子の内側及び外
側に同一又は異なる治療剤を含んでいてもよい。
【0095】
一態様では、ナノ粒子は、ナノ粒子の表面に非共有結合した１００個以上の結合剤を含
む。一態様では、ナノ粒子は、ナノ粒子の表面に非共有結合した少なくとも２００個、３
００個、４００個、５００個、６００個、７００個又は８００個の結合剤を含む。
む。一態様では、ナノ粒子は、ナノ粒子の表面に非共有結合した少なくとも２００個、３
００個、４００個、５００個、６００個、７００個又は８００個の結合剤を含む。
【0096】
一態様では、ナノ粒子は、ナノ粒子の表面に非共有した約１００～約１０００個の結合剤
を含む。一態様では、ナノ粒子は、ナノ粒子の表面に非共有した約２００～約１０００個
、約３００～約１０００個、約４００～約１０００個、約５００～約１０００個、約６０
０～約１０００個、約２００～約８００個、約３００～約８００個又は約４００～約８０
０個の結合剤を含む。想定される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分
範囲又は範囲を包含する。
を含む。一態様では、ナノ粒子は、ナノ粒子の表面に非共有した約２００～約１０００個
、約３００～約１０００個、約４００～約１０００個、約５００～約１０００個、約６０
０～約１０００個、約２００～約８００個、約３００～約８００個又は約４００～約８０
０個の結合剤を含む。想定される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分
範囲又は範囲を包含する。
【0097】
一態様では、ナノ粒子組成物中の平均粒子サイズは約１μｍ未満である。一態様では、
ナノ粒子組成物中の平均粒子サイズは約５０ｎｍ～約１μｍである。一態様では、ナノ粒
子組成物中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約９００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子
組成物中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約８００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組
成物中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約７００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成
物中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約６００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物
中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約５００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物中
の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約４００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物中の
平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約３００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物中の平
均粒子サイズは約６０ｎｍ～約２００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物中の平均
粒子サイズは約８０ｎｍから約９００ｎｍ、８００ｎｍ、７００ｎｍ、６００ｎｍ、５０
０ｎｍ、４００ｎｍ、３００ｎｍ又は２００ｎｍの間である。一態様では、ナノ粒子組成
物中の平均粒子サイズは約１００ｎｍから約９００ｎｍ、８００ｎｍ、７００ｎｍ、６０
０ｎｍ、５００ｎｍ、４００ｎｍ、３００ｎｍ又は２００ｎｍの間である。一態様では、
ナノ粒子組成物中の平均粒子サイズは約１２０ｎｍから約９００ｎｍ、８００ｎｍ、７０
０ｎｍ、６００ｎｍ、５００ｎｍ、４００ｎｍ、３００ｎｍ又は２００ｎｍの間である。
想定される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含す
る。
ナノ粒子組成物中の平均粒子サイズは約５０ｎｍ～約１μｍである。一態様では、ナノ粒
子組成物中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約９００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子
組成物中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約８００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組
成物中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約７００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成
物中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約６００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物
中の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約５００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物中
の平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約４００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物中の
平均粒子サイズは約６０ｎｍ～約３００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物中の平
均粒子サイズは約６０ｎｍ～約２００ｎｍである。一態様では、ナノ粒子組成物中の平均
粒子サイズは約８０ｎｍから約９００ｎｍ、８００ｎｍ、７００ｎｍ、６００ｎｍ、５０
０ｎｍ、４００ｎｍ、３００ｎｍ又は２００ｎｍの間である。一態様では、ナノ粒子組成
物中の平均粒子サイズは約１００ｎｍから約９００ｎｍ、８００ｎｍ、７００ｎｍ、６０
０ｎｍ、５００ｎｍ、４００ｎｍ、３００ｎｍ又は２００ｎｍの間である。一態様では、
ナノ粒子組成物中の平均粒子サイズは約１２０ｎｍから約９００ｎｍ、８００ｎｍ、７０
０ｎｍ、６００ｎｍ、５００ｎｍ、４００ｎｍ、３００ｎｍ又は２００ｎｍの間である。
想定される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含す
る。
【0098】
一態様では、ナノ粒子組成物は静脈内注射用に製剤化される。虚血性イベントを避ける
ために、静脈内注射用に製剤化されたナノ粒子組成物は、平均粒子サイズ約１μｍ未満の
ナノ粒子を含むべきである。
ために、静脈内注射用に製剤化されたナノ粒子組成物は、平均粒子サイズ約１μｍ未満の
ナノ粒子を含むべきである。
【0099】
一態様では、ナノ粒子組成物中の平均粒子サイズは約１μｍ超である。一態様では、ナ
ノ粒子組成物中の平均粒子サイズは約１μｍ～約５μｍ、約１μｍ～約４μｍ、約１μｍ
～約３μｍ、約１μｍ～約２μｍ又は約１μｍ～約１．５μｍである。想定される値は、
上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含する。
ノ粒子組成物中の平均粒子サイズは約１μｍ～約５μｍ、約１μｍ～約４μｍ、約１μｍ
～約３μｍ、約１μｍ～約２μｍ又は約１μｍ～約１．５μｍである。想定される値は、
上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含する。
【0100】
一態様では、ナノ粒子組成物は、腫瘍への直接注射用に製剤化される。直接注射は、腫
瘍部位又はその近傍への注射、腫瘍への灌流などを包含する。腫瘍への直接注射用に製剤
化する場合、ナノ粒子は任意の平均粒子サイズを含んでいてもよい。理論に縛られるもの
ではないが、大きな粒子（例えば５００ｎｍ超、１μｍ超など）は、腫瘍内に固定化され
る可能性が高く、そのため有益な効果をもたらすと考えられる。大きな粒子は腫瘍又は特
定の臓器に蓄積することがある。例えば、「ＴＨＥＲＡＳＰＨＥＲＥ（登録商標）」（肝
癌に臨床使用されている）と呼ばれる、肝臓の腫瘍への栄養肝動脈に注入される２０～６
０ミクロンのガラス粒子を参照されたい。従って、静脈内投与には、通例１μｍ未満の粒
子が使用される。１μｍ超の粒子は、通例、腫瘍内（「直接注射」）に直接又は腫瘍部位
に栄養動脈に投与される。
瘍部位又はその近傍への注射、腫瘍への灌流などを包含する。腫瘍への直接注射用に製剤
化する場合、ナノ粒子は任意の平均粒子サイズを含んでいてもよい。理論に縛られるもの
ではないが、大きな粒子（例えば５００ｎｍ超、１μｍ超など）は、腫瘍内に固定化され
る可能性が高く、そのため有益な効果をもたらすと考えられる。大きな粒子は腫瘍又は特
定の臓器に蓄積することがある。例えば、「ＴＨＥＲＡＳＰＨＥＲＥ（登録商標）」（肝
癌に臨床使用されている）と呼ばれる、肝臓の腫瘍への栄養肝動脈に注入される２０～６
０ミクロンのガラス粒子を参照されたい。従って、静脈内投与には、通例１μｍ未満の粒
子が使用される。１μｍ超の粒子は、通例、腫瘍内（「直接注射」）に直接又は腫瘍部位
に栄養動脈に投与される。
【0101】
一態様では、組成物中のナノ粒子の約０．０１％未満が、２００ｎｍ超、３００ｎｍ超
、４００ｎｍ超、５００ｎｍ超、６００ｎｍ超、７００ｎｍ超又は８００ｎｍ超の粒子サ
イズを有する。一態様では、組成物中のナノ粒子の約０．００１％未満が、２００ｎｍ超
、３００ｎｍ超、４００ｎｍ超、５００ｎｍ超、６００ｎｍ超、７００ｎｍ超又は８００
ｎｍ超の粒子サイズを有する。好ましい実施形態では、組成物中のナノ粒子の約０．０１
％未満が８００ｎｍ超の粒子サイズを有する。さらに好ましい実施形態では、組成物中の
粒子の約０．００１％未満が８００ｎｍ超の粒子サイズを有する。
、４００ｎｍ超、５００ｎｍ超、６００ｎｍ超、７００ｎｍ超又は８００ｎｍ超の粒子サ
イズを有する。一態様では、組成物中のナノ粒子の約０．００１％未満が、２００ｎｍ超
、３００ｎｍ超、４００ｎｍ超、５００ｎｍ超、６００ｎｍ超、７００ｎｍ超又は８００
ｎｍ超の粒子サイズを有する。好ましい実施形態では、組成物中のナノ粒子の約０．０１
％未満が８００ｎｍ超の粒子サイズを有する。さらに好ましい実施形態では、組成物中の
粒子の約０．００１％未満が８００ｎｍ超の粒子サイズを有する。
【0102】
好ましい態様では、本明細書に記載されたサイズ及びサイズ範囲は、再構成した凍結乾
燥ナノ粒子組成物の粒子サイズに関する。すなわち、凍結乾燥ナノ粒子を水溶液（例えば
水、その他の薬学的に許容される添加物、緩衝液など）に再懸濁した後の粒子サイズ又は
平均粒子サイズは本明細書に記載された範囲内にある。
燥ナノ粒子組成物の粒子サイズに関する。すなわち、凍結乾燥ナノ粒子を水溶液（例えば
水、その他の薬学的に許容される添加物、緩衝液など）に再懸濁した後の粒子サイズ又は
平均粒子サイズは本明細書に記載された範囲内にある。
【0103】
一態様では、ナノ粒子の少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５
％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％又は９９．９％は、再構成組成物中で
単一ナノ粒子として存在する。すなわち、ナノ粒子の約５０％未満、４０％未満、３０％
未満等々しか二量化又は多量体化（オリゴマー化）されない。
％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％又は９９．９％は、再構成組成物中で
単一ナノ粒子として存在する。すなわち、ナノ粒子の約５０％未満、４０％未満、３０％
未満等々しか二量化又は多量体化（オリゴマー化）されない。
【0104】
幾つかの実施形態では、組成物中のナノ粒子の二量化の割合は、個数基準で、２０％未
満、１０％未満、好ましくは５％未満である。
満、１０％未満、好ましくは５％未満である。
【0105】
幾つかの実施形態では、ナノ粒子のサイズは、パクリタキセル又はパクリタキセル誘導
体に対する担体タンパク質の量（例えば比率）及び／又は結合剤に対する担体タンパク質
－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子の量（例えば比率）を調整する
ことによって制御できる。ナノ粒子のサイズ及びサイズ分布も重要である。本発明のナノ
粒子は、それらのサイズに応じて異なる挙動を呈することがある。大きなサイズでは、凝
集塊が血管を塞ぎかねない。したがって、ナノ粒子の凝集は、組成物の性能及び安全性に
影響を与えかねない。一方、大きな粒子は、特定の条件下（例えば静脈内投与しない場合
）で高い治療効果を示すことがある。
体に対する担体タンパク質の量（例えば比率）及び／又は結合剤に対する担体タンパク質
－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子の量（例えば比率）を調整する
ことによって制御できる。ナノ粒子のサイズ及びサイズ分布も重要である。本発明のナノ
粒子は、それらのサイズに応じて異なる挙動を呈することがある。大きなサイズでは、凝
集塊が血管を塞ぎかねない。したがって、ナノ粒子の凝集は、組成物の性能及び安全性に
影響を与えかねない。一方、大きな粒子は、特定の条件下（例えば静脈内投与しない場合
）で高い治療効果を示すことがある。
【0106】
ナノ粒子は治療に用いられるので、さらに課題が課される。
【0107】
ナノ粒子中の成分の再配列は成分間の共有結合によって軽減し得るが、かかる共有結合
は、ナノ粒子を癌治療に使用する場合に課題を生じる。結合剤、担体タンパク質及び治療
剤は、典型的には、腫瘍内の異なる位置で異なる機構によって作用する。非共有結合によ
って、ナノ粒子の各成分が腫瘍で解離することができる。したがって、共有結合は凍結乾
燥には有利となり得るが、治療用途には不利となりかねない。
は、ナノ粒子を癌治療に使用する場合に課題を生じる。結合剤、担体タンパク質及び治療
剤は、典型的には、腫瘍内の異なる位置で異なる機構によって作用する。非共有結合によ
って、ナノ粒子の各成分が腫瘍で解離することができる。したがって、共有結合は凍結乾
燥には有利となり得るが、治療用途には不利となりかねない。
【0108】
ナノ粒子のサイズ及びサイズ分布も重要である。ナノ粒子は、それらのサイズに応じて
異なる挙動を呈することがある。大きなサイズでは、ナノ粒子又は粒子の凝集塊が血管を
塞ぎくおそれがあり、そのいずれも、組成物の性能及び安全性に影響を与えかねない。
異なる挙動を呈することがある。大きなサイズでは、ナノ粒子又は粒子の凝集塊が血管を
塞ぎくおそれがあり、そのいずれも、組成物の性能及び安全性に影響を与えかねない。
【0109】
パクリタキセル誘導体
本発明で用いられるパクリタキセル誘導体は、好ましくはパクリタキセルよりも毒性が
低い。すなわち、パクリタキセル誘導体は、パクリタキセルと比べて、細胞に対する毒性
が低い（例えば癌及び／又は正常細胞を死滅させず、細胞増殖も阻害しない）。パクリタ
キセル誘導体としては、パクリタキセルの任意の誘導体又は前駆体が挙げられる。例とし
て、２０－アセトキシ－４－デアセチル－５－エピ－２０，Ｏ－セコタキソール（パクリ
タキセルのメーヤワイン生成物）、又はバッカチンＩＩＩ（（２β，５α，７α，１０α
，１３β）－４，１０－ジアセトキシ－１，７，１３－トリヒドロキシ－９－オキソ－５
，２０－エポキシタキサ－１１－エン－２－イルベンゾエート）が挙げられるが、これら
に限定されない。
本発明で用いられるパクリタキセル誘導体は、好ましくはパクリタキセルよりも毒性が
低い。すなわち、パクリタキセル誘導体は、パクリタキセルと比べて、細胞に対する毒性
が低い（例えば癌及び／又は正常細胞を死滅させず、細胞増殖も阻害しない）。パクリタ
キセル誘導体としては、パクリタキセルの任意の誘導体又は前駆体が挙げられる。例とし
て、２０－アセトキシ－４－デアセチル－５－エピ－２０，Ｏ－セコタキソール（パクリ
タキセルのメーヤワイン生成物）、又はバッカチンＩＩＩ（（２β，５α，７α，１０α
，１３β）－４，１０－ジアセトキシ－１，７，１３－トリヒドロキシ－９－オキソ－５
，２０－エポキシタキサ－１１－エン－２－イルベンゾエート）が挙げられるが、これら
に限定されない。
【0110】
例えば、Ｃ－１３単純化パクリタキセル誘導体及び立体化学の異なる誘導体のほとんど
が、パクリタキセルに比べて低い活性を示すことが判明している。２’－ヒドロキシル基
及び３’－ベンズアミド基は生物活性に必須ではないが、微小管との強い結合及び細胞毒
性には重要である。２’－ヒドロキシル基でのエーテル形成、例えばアルキルエーテル（
例えばメチルエーテル）及びアルキルシリルエーテル（例えばｔｅｒｔ－ブチルジメチル
シリルエーテル）形成なども細胞毒性を低下させる。２’－ヒドロキシル基（例えば２’
－アセチルタキソール）のアシル化も活性の損失をもたらす。２’－ヒドロキシル基のハ
ロゲン（例えばフッ素）による置換も細胞毒性を大きく低下させることが判明している。
６α－ヒドロキシ－７－エピ－パクリタキセルの四酢酸鉛酸化は、Ｃ－ノル－パクリタキ
セル誘導体及びＣ－セコ－パクリタキセル誘導体をもたらす。６α－ヒドロキシ－７－エ
ピ－パクリタキセル誘導体の過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（ＴＰＡＰ）酸
化は、６－ホルミル－Ｃ－ノル－パクリタキセル誘導体をもたらす。６α－Ｏ－トリフル
オロメタンスルホニル－７－エピ－パクリタキセル誘導体とＤＭＡＰとの反応によって、
２０－Ｏ－アセチル－４－デアセチル－５，６－デヒドロ－６－ホルミル－Ｃ－ノル－パ
クリタキセル誘導体が得られる。Ｃ－ノル－パクリタキセル類似体はパクリタキセルより
も活性が低い。したがって、パクリタキセル誘導体は、これらの部位の１以上の任意の部
位における修飾を含んでいてもよいし、或いはこれらの方法の１以上によって生成される
ものを含んでいてもよい。例えば、Ｌｉａｎｇ ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
， ５３（１０）：３４４１－３４５６ （１９９７）、米国特許第５７５６３０１号及
び同第５９８１７７７号を参照されたい（それらの開示内容は援用によって本明細書の内
容の一部をなす。）。
が、パクリタキセルに比べて低い活性を示すことが判明している。２’－ヒドロキシル基
及び３’－ベンズアミド基は生物活性に必須ではないが、微小管との強い結合及び細胞毒
性には重要である。２’－ヒドロキシル基でのエーテル形成、例えばアルキルエーテル（
例えばメチルエーテル）及びアルキルシリルエーテル（例えばｔｅｒｔ－ブチルジメチル
シリルエーテル）形成なども細胞毒性を低下させる。２’－ヒドロキシル基（例えば２’
－アセチルタキソール）のアシル化も活性の損失をもたらす。２’－ヒドロキシル基のハ
ロゲン（例えばフッ素）による置換も細胞毒性を大きく低下させることが判明している。
６α－ヒドロキシ－７－エピ－パクリタキセルの四酢酸鉛酸化は、Ｃ－ノル－パクリタキ
セル誘導体及びＣ－セコ－パクリタキセル誘導体をもたらす。６α－ヒドロキシ－７－エ
ピ－パクリタキセル誘導体の過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（ＴＰＡＰ）酸
化は、６－ホルミル－Ｃ－ノル－パクリタキセル誘導体をもたらす。６α－Ｏ－トリフル
オロメタンスルホニル－７－エピ－パクリタキセル誘導体とＤＭＡＰとの反応によって、
２０－Ｏ－アセチル－４－デアセチル－５，６－デヒドロ－６－ホルミル－Ｃ－ノル－パ
クリタキセル誘導体が得られる。Ｃ－ノル－パクリタキセル類似体はパクリタキセルより
も活性が低い。したがって、パクリタキセル誘導体は、これらの部位の１以上の任意の部
位における修飾を含んでいてもよいし、或いはこれらの方法の１以上によって生成される
ものを含んでいてもよい。例えば、Ｌｉａｎｇ ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
， ５３（１０）：３４４１－３４５６ （１９９７）、米国特許第５７５６３０１号及
び同第５９８１７７７号を参照されたい（それらの開示内容は援用によって本明細書の内
容の一部をなす。）。
【0111】
ナノ粒子及びナノ粒子複合体の製造方法
幾つかの態様では、本発明は、本明細書に記載のナノ粒子組成物の製造方法に関する。
幾つかの実施形態では、本開示は、ナノ粒子組成物の製造方法であって、担体タンパク質
とパクリタキセル又はパクリタキセル誘導体とを、所望のナノ粒子が形成する条件及び成
分比で接触させることを含む方法に関する。幾つかの実施形態では、本方法はさらに、ナ
ノ粒子を、ナノ粒子複合体を形成する条件下で、結合剤及び／又は治療剤と接触させるこ
とに関する。
幾つかの態様では、本発明は、本明細書に記載のナノ粒子組成物の製造方法に関する。
幾つかの実施形態では、本開示は、ナノ粒子組成物の製造方法であって、担体タンパク質
とパクリタキセル又はパクリタキセル誘導体とを、所望のナノ粒子が形成する条件及び成
分比で接触させることを含む方法に関する。幾つかの実施形態では、本方法はさらに、ナ
ノ粒子を、ナノ粒子複合体を形成する条件下で、結合剤及び／又は治療剤と接触させるこ
とに関する。
【0112】
幾つかの実施形態では、ナノ粒子は、担体タンパク質とパクリタキセル又はパクリタキ
セル誘導体とを組合せ、高圧下でホモジナイズして安定なナノ粒子を形成することによっ
て製造される。アルブミンとタキサン（例えばパクリタキセル）をホモジナイズするため
の非限定的な方法は、例えば、実施例１、並びに米国特許第５９１６５９６号、同第６５
０６４０５号及び同第６５３７５７９号に記載されており、これらの各開示内容は援用に
よって本明細書の内容の一部をなす。
セル誘導体とを組合せ、高圧下でホモジナイズして安定なナノ粒子を形成することによっ
て製造される。アルブミンとタキサン（例えばパクリタキセル）をホモジナイズするため
の非限定的な方法は、例えば、実施例１、並びに米国特許第５９１６５９６号、同第６５
０６４０５号及び同第６５３７５７９号に記載されており、これらの各開示内容は援用に
よって本明細書の内容の一部をなす。
【0113】
一実施形態では、結合剤及び／又は治療剤を、例えば米国特許第９７５７４５３号及び
同第９４４６１４８号に記載されているように、ナノ粒子と複合体形成させる。
同第９４４６１４８号に記載されているように、ナノ粒子と複合体形成させる。
【0114】
幾つかの態様では、本明細書では、ナノ粒子複合体の製造方法であって、担体タンパク
質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子を、結合剤及び／又は治療剤
と、ｐＨ５．０～７．５及び約５℃～約６０℃、約２３℃～約６０℃又は約５５℃～約６
０℃の温度の溶液中で、所望のナノ粒子が形成する条件及び成分比で接触させることを含
む方法が提供される。一実施形態では、ナノ粒子は５５～６０℃及びｐＨ７．０で作られ
る。別の態様では、本明細書では、ナノ粒子複合体の製造方法であって、（ａ）担体タン
パク質とパクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）をホモジナイズしてナノ粒子コア
を形成するステップと、（ｂ）該コアを、約５℃～約６０℃、約２３℃～約６０℃又は約
５５℃～約６０℃の温度でｐＨ約５．０～約７．５の溶液中で、抗体と、所望のナノ粒子
複合体が形成する条件及び成分比で接触させることを含む方法が提供される。
質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子を、結合剤及び／又は治療剤
と、ｐＨ５．０～７．５及び約５℃～約６０℃、約２３℃～約６０℃又は約５５℃～約６
０℃の温度の溶液中で、所望のナノ粒子が形成する条件及び成分比で接触させることを含
む方法が提供される。一実施形態では、ナノ粒子は５５～６０℃及びｐＨ７．０で作られ
る。別の態様では、本明細書では、ナノ粒子複合体の製造方法であって、（ａ）担体タン
パク質とパクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）をホモジナイズしてナノ粒子コア
を形成するステップと、（ｂ）該コアを、約５℃～約６０℃、約２３℃～約６０℃又は約
５５℃～約６０℃の温度でｐＨ約５．０～約７．５の溶液中で、抗体と、所望のナノ粒子
複合体が形成する条件及び成分比で接触させることを含む方法が提供される。
【0115】
本発明の別の実施形態は、タンパク質担体と治療剤との複合体形成を促進することによ
ってナノ粒子組成物を製造する方法であって、当該方法は、担体タンパク質、本明細書に
記載された量のパクリタキセル、及び治療剤を、ｐＨ５．０以上及び温度約５℃～約６０
℃の溶液中で接触させて、ナノ粒子を生成させることを含む方法を包含する。さらに別の
実施形態では、本方法はタンパク質担体複合体を結合剤と接触させることをさらに含む。
ってナノ粒子組成物を製造する方法であって、当該方法は、担体タンパク質、本明細書に
記載された量のパクリタキセル、及び治療剤を、ｐＨ５．０以上及び温度約５℃～約６０
℃の溶液中で接触させて、ナノ粒子を生成させることを含む方法を包含する。さらに別の
実施形態では、本方法はタンパク質担体複合体を結合剤と接触させることをさらに含む。
【0116】
所望のナノ粒子の形成をもたらすため、成分（例えば担体タンパク質、抗体、パクリタ
キセル又はパクリタキセル誘導体、治療剤、これらの組合せ）の量を制御する。成分量を
希釈しすぎた組成物は、本明細書に記載されるナノ粒子を形成しないであろう。過度に濃
縮された溶液は、構造化されていない凝集物をもたらすであろう。
キセル又はパクリタキセル誘導体、治療剤、これらの組合せ）の量を制御する。成分量を
希釈しすぎた組成物は、本明細書に記載されるナノ粒子を形成しないであろう。過度に濃
縮された溶液は、構造化されていない凝集物をもたらすであろう。
【0117】
好ましい態様では、担体タンパク質と結合剤との重量比は１０：４である。幾つかの実
施形態では、担体タンパク質の量は約１ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬである。幾つか
の実施形態では、結合剤の量は約１ｍｇ／ｍＬ～約３０ｍｇ／ｍＬである。例えば、幾つ
かの実施形態では、担体タンパク質：結合剤：溶液の比は、１ｍＬの溶液（例えば生理食
塩水）中、約９ｍｇの担体タンパク質（例えばアルブミン）と４ｍｇの結合剤（例えばＢ
ＥＶ）である。
施形態では、担体タンパク質の量は約１ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬである。幾つか
の実施形態では、結合剤の量は約１ｍｇ／ｍＬ～約３０ｍｇ／ｍＬである。例えば、幾つ
かの実施形態では、担体タンパク質：結合剤：溶液の比は、１ｍＬの溶液（例えば生理食
塩水）中、約９ｍｇの担体タンパク質（例えばアルブミン）と４ｍｇの結合剤（例えばＢ
ＥＶ）である。
【0118】
一実施形態では、ナノ粒子の形成に使用される溶液その他の液体媒体の量が特に重要で
ある。幾つかの実施形態では、溶液（例えば滅菌水、生理食塩水、リン酸緩衝食塩水）の
使用量は約０．５ｍＬの溶液～約２０ｍＬの溶液である。
ある。幾つかの実施形態では、溶液（例えば滅菌水、生理食塩水、リン酸緩衝食塩水）の
使用量は約０．５ｍＬの溶液～約２０ｍＬの溶液である。
【0119】
一態様では、ナノ粒子組成物のナノ粒子複合体は、担体タンパク質－パクリタキセル（
又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子及び１種以上の治療剤を結合剤と、約１０：１～約
１０：３０の担体タンパク質粒子又は担体タンパク質－治療剤粒子／結合剤比で接触させ
ることによって形成される。一実施形態では、上記比は約１０：２～約１０：２５である
。一実施形態では、上記比は約１０：２～約１：１である。好ましい実施形態では、上記
比は約１０：２～約１０：６である。特に好ましい実施形態では、上記比は約１０：４で
ある。想定される比は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を
包含する。
又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子及び１種以上の治療剤を結合剤と、約１０：１～約
１０：３０の担体タンパク質粒子又は担体タンパク質－治療剤粒子／結合剤比で接触させ
ることによって形成される。一実施形態では、上記比は約１０：２～約１０：２５である
。一実施形態では、上記比は約１０：２～約１：１である。好ましい実施形態では、上記
比は約１０：２～約１０：６である。特に好ましい実施形態では、上記比は約１０：４で
ある。想定される比は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を
包含する。
【0120】
一態様では、ナノ粒子組成物のナノ粒子は、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパ
クリタキセル誘導体）ナノ粒子と１種以上の治療剤を接触させることによって形成される
。一実施形態では、上記比は約１０：２～約１０：２５である。一実施形態では、上記比
は約１０：２～約１：１である。好ましい実施形態では、上記比は約１０：２～約１０：
６である。特に好ましい実施形態では、上記比は約１０：４である。想定される比は、上
下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含する。
クリタキセル誘導体）ナノ粒子と１種以上の治療剤を接触させることによって形成される
。一実施形態では、上記比は約１０：２～約１０：２５である。一実施形態では、上記比
は約１０：２～約１：１である。好ましい実施形態では、上記比は約１０：２～約１０：
６である。特に好ましい実施形態では、上記比は約１０：４である。想定される比は、上
下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含する。
【0121】
一実施形態では、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ
粒子は、ｐＨ約４～約８の溶液中で結合剤と接触させる。一実施形態では、担体タンパク
質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約４の溶液中で結合
剤と接触させる。一実施形態では、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセ
ル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約５の溶液中で結合剤と接触させる。一実施形態では、担体
タンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約６の溶液
中で結合剤と接触させる。一実施形態では、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパク
リタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約７の溶液中で結合剤と接触させる。一実施形態で
は、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約
８の溶液中で結合剤と接触させる。好ましい実施形態では、担体タンパク質－パクリタキ
セル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約５～約７の溶液中で結合剤と接触
させる。
粒子は、ｐＨ約４～約８の溶液中で結合剤と接触させる。一実施形態では、担体タンパク
質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約４の溶液中で結合
剤と接触させる。一実施形態では、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセ
ル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約５の溶液中で結合剤と接触させる。一実施形態では、担体
タンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約６の溶液
中で結合剤と接触させる。一実施形態では、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパク
リタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約７の溶液中で結合剤と接触させる。一実施形態で
は、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約
８の溶液中で結合剤と接触させる。好ましい実施形態では、担体タンパク質－パクリタキ
セル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子は、ｐＨ約５～約７の溶液中で結合剤と接触
させる。
【0122】
一実施形態では、担体タンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ
粒子を、約５℃～約６０℃の温度或いは上下限を含めて、この範囲内の任意の範囲、部分
範囲又は値の温度で、結合剤と共にインキュベートする。好ましい実施形態では、担体タ
ンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子を、約２３℃～約６０
℃の温度で結合剤と共にインキュベートする。
粒子を、約５℃～約６０℃の温度或いは上下限を含めて、この範囲内の任意の範囲、部分
範囲又は値の温度で、結合剤と共にインキュベートする。好ましい実施形態では、担体タ
ンパク質－パクリタキセル（又はパクリタキセル誘導体）ナノ粒子を、約２３℃～約６０
℃の温度で結合剤と共にインキュベートする。
【0123】
理論に縛られるものではないが、ナノ粒子複合体の安定性は、少なくとも部分的には、
ナノ粒子が形成される温度及び／又はｐＨ、並びに溶液中の各成分（すなわち、担体タン
パク質、結合剤、パクリタキセル又はパクリタキセル誘導体、及び治療剤）の濃度に依存
すると考えられる。一実施形態では、ナノ粒子のＫｄは約１×１０－１１Ｍ～約２×１０
－５Ｍである。一実施形態では、ナノ粒子のＫｄは約１×１０－１１Ｍ～約２×１０－８
Ｍである。
一実施形態では、ナノ粒子のＫｄは約１×１０－１１Ｍ～約７×１０－９Ｍである。好ま
しい実施形態では、ナノ粒子のＫｄは約１×１０－１１Ｍ～３×１０－８Ｍである。想定
される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含する。
ナノ粒子が形成される温度及び／又はｐＨ、並びに溶液中の各成分（すなわち、担体タン
パク質、結合剤、パクリタキセル又はパクリタキセル誘導体、及び治療剤）の濃度に依存
すると考えられる。一実施形態では、ナノ粒子のＫｄは約１×１０－１１Ｍ～約２×１０
－５Ｍである。一実施形態では、ナノ粒子のＫｄは約１×１０－１１Ｍ～約２×１０－８
Ｍである。
一実施形態では、ナノ粒子のＫｄは約１×１０－１１Ｍ～約７×１０－９Ｍである。好ま
しい実施形態では、ナノ粒子のＫｄは約１×１０－１１Ｍ～３×１０－８Ｍである。想定
される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含する。
【0124】
低毒性ナノ粒子の製造
担体タンパク質とパクリタキセルとの相対重量比は約９：１超である。一実施形態では
、担体タンパク質とパクリタキセルとの相対重量比は、約１０：１超、約１１：１超、約
１２：１超、約１３：１超、約１４：１超、約１５：１超、約１６：１超、約１７：１超
、約１８：１超、約１９：１超、約２０：１超、約２１：１超、約２２：１超、約２３：
１超、約２４：１超、約２５：１超、約２６：１超、約２７：１超、約２８：１超、約２
９：１超又は約３０：１超である。一実施形態では、上記重量比は１０：１～１００：１
、１０：１～５０：１、１０：１～４０：１、１０：１～３０：１、１０：１～２０：１
又は１０：１～１５：１である。一実施形態では、上記重量比は、１５：１～５０：１、
１５：１～５０：１、１５：１～４０：１、１５：１～３０：１又は１５：１～２０：１
である。重量比は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値又は部分範囲とし得る。
担体タンパク質とパクリタキセルとの相対重量比は約９：１超である。一実施形態では
、担体タンパク質とパクリタキセルとの相対重量比は、約１０：１超、約１１：１超、約
１２：１超、約１３：１超、約１４：１超、約１５：１超、約１６：１超、約１７：１超
、約１８：１超、約１９：１超、約２０：１超、約２１：１超、約２２：１超、約２３：
１超、約２４：１超、約２５：１超、約２６：１超、約２７：１超、約２８：１超、約２
９：１超又は約３０：１超である。一実施形態では、上記重量比は１０：１～１００：１
、１０：１～５０：１、１０：１～４０：１、１０：１～３０：１、１０：１～２０：１
又は１０：１～１５：１である。一実施形態では、上記重量比は、１５：１～５０：１、
１５：１～５０：１、１５：１～４０：１、１５：１～３０：１又は１５：１～２０：１
である。重量比は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値又は部分範囲とし得る。
【0125】
一実施形態では、パクリタキセルの量は、ナノ粒子に安定性をもたらすことができる最
小量に等しい。一実施形態では、パクリタキセルの量は、タンパク質担体に対する１種以
上の治療剤の親和性をもたらすことができる最小量以上である。一実施形態では、パクリ
タキセルの量は、１種以上の治療剤とタンパク質担体との複合体形成を促進することがで
きる最小量以上である。例えば、１ｍＬの溶液中で、約１ｍｇ未満のタキソールを、９ｍ
ｇの担体タンパク質（１０ｍｇの担体タンパク質治療剤）及び４ｍｇの結合剤（例えば抗
体、Ｆｃ融合分子又はアプタマー）に加えることができる。
小量に等しい。一実施形態では、パクリタキセルの量は、タンパク質担体に対する１種以
上の治療剤の親和性をもたらすことができる最小量以上である。一実施形態では、パクリ
タキセルの量は、１種以上の治療剤とタンパク質担体との複合体形成を促進することがで
きる最小量以上である。例えば、１ｍＬの溶液中で、約１ｍｇ未満のタキソールを、９ｍ
ｇの担体タンパク質（１０ｍｇの担体タンパク質治療剤）及び４ｍｇの結合剤（例えば抗
体、Ｆｃ融合分子又はアプタマー）に加えることができる。
【0126】
なお、典型的な静注用バッグを例えば約１リットルの溶液と共に使用する場合、１ｍＬ
で使用する場合と比較して１０００倍量の担体タンパク質／担体タンパク質－治療剤及び
抗体を使用する必要がある。そのため、本発明のナノ粒子は、標準的な静注用バッグ内で
は形成することはできない。さらに、各成分を本発明の治療量で標準的な静注用バッグに
加えても、それらの成分が自己集合してナノ粒子を形成することはない。
で使用する場合と比較して１０００倍量の担体タンパク質／担体タンパク質－治療剤及び
抗体を使用する必要がある。そのため、本発明のナノ粒子は、標準的な静注用バッグ内で
は形成することはできない。さらに、各成分を本発明の治療量で標準的な静注用バッグに
加えても、それらの成分が自己集合してナノ粒子を形成することはない。
【0127】
一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は約５ｍｇ／ｍＬ未
満である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は、約４．
５４ｍｇ／ｍＬ未満、約４．１６ｍｇ／ｍＬ未満、約３．５７ｍｇ／ｍＬ未満、約３．３
３ｍｇ／ｍＬ未満、約３．１２ｍｇ／ｍＬ未満、約２．９４ｍｇ／ｍＬ未満、約２．７８
ｍｇ／ｍＬ未満、約２．６３ｍｇ／ｍＬ未満、約２．５ｍｇ／ｍＬ未満、約２．３８ｍｇ
／ｍＬ未満、約２．２７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．１７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．０８ｍｇ／
ｍＬ未満、約２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．９２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．８５ｍｇ／ｍＬ未満
、約１．７８ｍｇ／ｍＬ未満、約１．７２ｍｇ／ｍＬ未満又は約１．６７ｍｇ／ｍＬ未満
である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は、ナノ粒子
に安定性をもたらすことができる最小量以上である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中
に存在するパクリタキセルの量は、タンパク質担体に対する１種以上の治療剤の親和性を
もたらすことができる最小量以上である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在する
パクリタキセルの量は、１種以上の治療剤とタンパク質担体との複合体形成を促進するこ
とができる最小量以上である。
満である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は、約４．
５４ｍｇ／ｍＬ未満、約４．１６ｍｇ／ｍＬ未満、約３．５７ｍｇ／ｍＬ未満、約３．３
３ｍｇ／ｍＬ未満、約３．１２ｍｇ／ｍＬ未満、約２．９４ｍｇ／ｍＬ未満、約２．７８
ｍｇ／ｍＬ未満、約２．６３ｍｇ／ｍＬ未満、約２．５ｍｇ／ｍＬ未満、約２．３８ｍｇ
／ｍＬ未満、約２．２７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．１７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．０８ｍｇ／
ｍＬ未満、約２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．９２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．８５ｍｇ／ｍＬ未満
、約１．７８ｍｇ／ｍＬ未満、約１．７２ｍｇ／ｍＬ未満又は約１．６７ｍｇ／ｍＬ未満
である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量は、ナノ粒子
に安定性をもたらすことができる最小量以上である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中
に存在するパクリタキセルの量は、タンパク質担体に対する１種以上の治療剤の親和性を
もたらすことができる最小量以上である。一実施形態では、ナノ粒子組成物中に存在する
パクリタキセルの量は、１種以上の治療剤とタンパク質担体との複合体形成を促進するこ
とができる最小量以上である。
【0128】
一実施形態では、本明細書に記載のナノ粒子組成物は結合剤を含まない。
【0129】
凍結乾燥
単一源からのタンパク質を含むタンパク質組成物は一般に凍結乾燥形態で貯蔵され、か
なりの貯蔵寿命を呈するが、かかる凍結乾燥組成物は、疎水性－疎水性相互作用で統合し
た２種類の異なるタンパク質の自己集合ナノ粒子を含まない。さらに、結合剤の結合性部
分の大部分がナノ粒子の表面に露出しているナノ粒子の構成は、普通は穏和と考えられる
条件による移動又は再構成を受けやすくなる。例えば、凍結乾燥中、タンパク質表面のイ
オン電荷が脱水されて、下層の電荷が露出される。露出した電荷によって、２つのタンパ
ク質間で電荷電荷相互作用が起こり、他のタンパク質に対する各タンパク質の結合親和性
が変わる可能性がある。さらに、溶媒（例えば水）の除去に伴って、ナノ粒子の濃度は著
しく増加する。このようなナノ粒子濃度の増加は、不可逆的なオリゴマー化を招きかねな
い。オリゴマー化は、モノマー形態と比較してオリゴマーの生物学的特性を低下させるタ
ンパク質の公知の特性であり、粒子のサイズが増大して１ミクロンを超えることもある。
単一源からのタンパク質を含むタンパク質組成物は一般に凍結乾燥形態で貯蔵され、か
なりの貯蔵寿命を呈するが、かかる凍結乾燥組成物は、疎水性－疎水性相互作用で統合し
た２種類の異なるタンパク質の自己集合ナノ粒子を含まない。さらに、結合剤の結合性部
分の大部分がナノ粒子の表面に露出しているナノ粒子の構成は、普通は穏和と考えられる
条件による移動又は再構成を受けやすくなる。例えば、凍結乾燥中、タンパク質表面のイ
オン電荷が脱水されて、下層の電荷が露出される。露出した電荷によって、２つのタンパ
ク質間で電荷電荷相互作用が起こり、他のタンパク質に対する各タンパク質の結合親和性
が変わる可能性がある。さらに、溶媒（例えば水）の除去に伴って、ナノ粒子の濃度は著
しく増加する。このようなナノ粒子濃度の増加は、不可逆的なオリゴマー化を招きかねな
い。オリゴマー化は、モノマー形態と比較してオリゴマーの生物学的特性を低下させるタ
ンパク質の公知の特性であり、粒子のサイズが増大して１ミクロンを超えることもある。
【0130】
一方、臨床及び／又は商業的使用には安定な形態のナノ粒子組成物が必要とされ、３ヶ
月以上の貯蔵寿命が必要とされ、６ヶ月又は９ヶ月を超える貯蔵寿命が好ましい。かかる
安定な組成物は、静脈内注射に容易に利用できるものでなければならず、ナノ粒子をイン
ビボで所定の部位に送るために静脈内注射の際に自己集合形態を保持していなければなら
ず、血流中に送達されたときの虚血性イベントを避けるために１μｍ未満の最大サイズを
有していなければならず、最後に注射に使用される水性組成物と適合性でなければならな
い。
月以上の貯蔵寿命が必要とされ、６ヶ月又は９ヶ月を超える貯蔵寿命が好ましい。かかる
安定な組成物は、静脈内注射に容易に利用できるものでなければならず、ナノ粒子をイン
ビボで所定の部位に送るために静脈内注射の際に自己集合形態を保持していなければなら
ず、血流中に送達されたときの虚血性イベントを避けるために１μｍ未満の最大サイズを
有していなければならず、最後に注射に使用される水性組成物と適合性でなければならな
い。
【0131】
凍結乾燥は、組成物から水を除去する。このプロセスでは、乾燥すべき材料をまず凍結
させ、次いで氷又は凍結させた溶媒を真空環境中での昇華によって除去する。凍結乾燥プ
ロセス中の安定性の向上及び／又は凍結乾燥品の保存中の安定性の改善のために、予備凍
結乾燥製剤に添加物を配合してもよい。Ｐｉｋａｌ， Ｍ． Ｂｉｏｐｈａｒｍ． ３（
９）２６－３０ （１９９０）及びＡｒａｋａｗａ ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍ． Ｒ
ｅｓ． ８（３）：２８５－２９１ （１９９１））。
させ、次いで氷又は凍結させた溶媒を真空環境中での昇華によって除去する。凍結乾燥プ
ロセス中の安定性の向上及び／又は凍結乾燥品の保存中の安定性の改善のために、予備凍
結乾燥製剤に添加物を配合してもよい。Ｐｉｋａｌ， Ｍ． Ｂｉｏｐｈａｒｍ． ３（
９）２６－３０ （１９９０）及びＡｒａｋａｗａ ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍ． Ｒ
ｅｓ． ８（３）：２８５－２９１ （１９９１））。
【0132】
タンパク質は凍結乾燥し得るが、凍結乾燥及び再構成のプロセスはタンパク質の特性に
影響しかねない。タンパク質は伝統的な有機及び無機薬物よりも大きく複雑である（すな
わち複雑な三次元構造に加えて多数の官能基を有する）ので、このようなタンパク質の製
剤は特殊な問題を提起する。タンパク質を生物学的活性な状態に保つためには、製剤は、
タンパク質のアミノ酸の少なくともコア配列の立体配座の完全性を損なわないように保た
なければならないと同時に、タンパク質の複数の官能基を分解から保護しなければならな
い。タンパク質の分解経路には、化学的不安定性（すなわち、新たな化学成分を生じる結
合形成又は開裂によるタンパク質の修飾を伴う任意のプロセス）又は物理的不安定性（す
なわち、タンパク質の高次構造の変化）が関与する可能性がある。化学的不安定性は、脱
アミド、ラセミ化、加水分解、酸化、β脱離又はジスルフィド交換に起因し得る。物理的
不安定性は、例えば変性、凝集、沈殿又は吸着に起因し得る。３つの最も一般的なタンパ
ク質分解経路はタンパク質凝集、脱アミド及び酸化である。Ｃｌｅｌａｎｄ， ｅｔ ａ
ｌ．， Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ
Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ １０（４）： ３０７－３７７ （１９９３）。
影響しかねない。タンパク質は伝統的な有機及び無機薬物よりも大きく複雑である（すな
わち複雑な三次元構造に加えて多数の官能基を有する）ので、このようなタンパク質の製
剤は特殊な問題を提起する。タンパク質を生物学的活性な状態に保つためには、製剤は、
タンパク質のアミノ酸の少なくともコア配列の立体配座の完全性を損なわないように保た
なければならないと同時に、タンパク質の複数の官能基を分解から保護しなければならな
い。タンパク質の分解経路には、化学的不安定性（すなわち、新たな化学成分を生じる結
合形成又は開裂によるタンパク質の修飾を伴う任意のプロセス）又は物理的不安定性（す
なわち、タンパク質の高次構造の変化）が関与する可能性がある。化学的不安定性は、脱
アミド、ラセミ化、加水分解、酸化、β脱離又はジスルフィド交換に起因し得る。物理的
不安定性は、例えば変性、凝集、沈殿又は吸着に起因し得る。３つの最も一般的なタンパ
ク質分解経路はタンパク質凝集、脱アミド及び酸化である。Ｃｌｅｌａｎｄ， ｅｔ ａ
ｌ．， Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ
Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ １０（４）： ３０７－３７７ （１９９３）。
【0133】
最後に、凍結保護剤及び凍結乾燥プロセスを補助する薬剤は治療に使用する際に安全で
忍容性でなければならない。
忍容性でなければならない。
【0134】
本発明の凍結乾燥組成物は、安定剤、緩衝剤などの存在下又は非存在下での、標準的な
凍結乾燥技術によって調製される。驚くべきことに、これらの条件はナノ粒子の比較的脆
弱な構造を変化させない。さらに、これらのナノ粒子は凍結乾燥時にそれらのサイズ分布
を保持し、さらに重要なことに、あたかも新たに調製したかのように実質的に同じ形態及
び比率でインビボ投与（例えば静脈内送達）のために再構成し得る。
凍結乾燥技術によって調製される。驚くべきことに、これらの条件はナノ粒子の比較的脆
弱な構造を変化させない。さらに、これらのナノ粒子は凍結乾燥時にそれらのサイズ分布
を保持し、さらに重要なことに、あたかも新たに調製したかのように実質的に同じ形態及
び比率でインビボ投与（例えば静脈内送達）のために再構成し得る。
【0135】
幾つかの実施形態では、ナノ粒子（例えばＲＴＰ又はＮＴＰ）は凍結乾燥される。幾つ
かの実施形態では、ナノ粒子複合体（例えば治療剤及び／又は結合剤を伴うＲＴＰ又はＮ
ＴＰ）は凍結乾燥される。幾つかの実施形態では、水溶液で再構成すると、ある量の結合
剤がナノ粒子の表面に配置される。幾つかの実施形態では、ナノ粒子複合体は抗原に結合
することができる。幾つかの実施形態では、ナノ粒子複合体と会合した抗体は、抗原に結
合する能力を保持する。
かの実施形態では、ナノ粒子複合体（例えば治療剤及び／又は結合剤を伴うＲＴＰ又はＮ
ＴＰ）は凍結乾燥される。幾つかの実施形態では、水溶液で再構成すると、ある量の結合
剤がナノ粒子の表面に配置される。幾つかの実施形態では、ナノ粒子複合体は抗原に結合
することができる。幾つかの実施形態では、ナノ粒子複合体と会合した抗体は、抗原に結
合する能力を保持する。
【0136】
製剤
一態様では、ナノ粒子組成物は全身送達、例えば静脈内投与用に製剤化される。
一態様では、ナノ粒子組成物は全身送達、例えば静脈内投与用に製剤化される。
【0137】
一態様では、ナノ粒子組成物は、腫瘍への直接注射用に製剤化される。直接注射は、腫
瘍部位又はその近傍への注射、腫瘍への灌流などを包含する。ナノ粒子組成物は全身投与
されないので、ナノ粒子組成物は腫瘍への直接注射用に製剤化され、任意の平均粒子サイ
ズを含んでいてもよい。理論に縛られるものではないが、大きな粒子（例えば５００ｎｍ
超、１μｍ超など）は、腫瘍内に固定化される可能性が高く、そのため有益な効果が高ま
ると考えられる。
瘍部位又はその近傍への注射、腫瘍への灌流などを包含する。ナノ粒子組成物は全身投与
されないので、ナノ粒子組成物は腫瘍への直接注射用に製剤化され、任意の平均粒子サイ
ズを含んでいてもよい。理論に縛られるものではないが、大きな粒子（例えば５００ｎｍ
超、１μｍ超など）は、腫瘍内に固定化される可能性が高く、そのため有益な効果が高ま
ると考えられる。
【0138】
別の態様では、本明細書では、本明細書で提供される化合物と１種以上の薬学的に許容
される添加物とを含む組成物が提供される。
される添加物とを含む組成物が提供される。
【0139】
一般に、本明細書で提供される化合物は、許容される投与様式のいずれかによって患者
に投与するために製剤化することができる。様々な製剤及び薬物送達システムが当技術分
野で利用できる。例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ， Ａ．Ｒ．， ｅｄ． （１９９５） Ｒｅ
ｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， １８ｔｈ
ｅｄ．， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．参照。
に投与するために製剤化することができる。様々な製剤及び薬物送達システムが当技術分
野で利用できる。例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ， Ａ．Ｒ．， ｅｄ． （１９９５） Ｒｅ
ｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， １８ｔｈ
ｅｄ．， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．参照。
【0140】
一般に、本明細書で提供される化合物は、医薬組成物として、以下の経路：経口、全身
（例えば経皮、鼻腔内又は坐剤）又は非経口（例えば筋肉内、静脈内又は皮下）投与のい
ずれかによって投与される。
（例えば経皮、鼻腔内又は坐剤）又は非経口（例えば筋肉内、静脈内又は皮下）投与のい
ずれかによって投与される。
【0141】
組成物は、一般に、本発明の化合物と１種以上の薬学的に許容される添加物との組合せ
からなる。許容される添加物は非毒性であり、投与を助長し、本発明に係る化合物の治療
効果に悪影響を及ぼさない。かかる添加物は、固体、液体、半固体、或いはエアロゾル組
成物の場合には当業者が一般に入手し得る気体添加物とし得る。
からなる。許容される添加物は非毒性であり、投与を助長し、本発明に係る化合物の治療
効果に悪影響を及ぼさない。かかる添加物は、固体、液体、半固体、或いはエアロゾル組
成物の場合には当業者が一般に入手し得る気体添加物とし得る。
【0142】
固体医薬添加物としては、デンプン、セルロース、タルク、グルコース、ラクトース、
スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸マグネ
シウム、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、塩化ナトリウム、乾
燥スキムミルクなどが挙げられる。液体及び半固体添加物は、グリセロール、プロピレン
グリコール、水、エタノール、並びに石油、動物、植物又は合成起源のものを始めとする
各種の油、例えば落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油などから選択し得る。液体担体、特に
注射液用の液体担体としては、水、生理食塩水、水性デキストロース及びグリコール類が
挙げられる。他の適切な医薬添加物及びそれらの製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈ
ａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｅ． Ｗ． Ｍ
ａｒｔｉｎ （Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， １８ｔｈ ｅｄ．
， １９９０）に記載されている。
スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸マグネ
シウム、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、塩化ナトリウム、乾
燥スキムミルクなどが挙げられる。液体及び半固体添加物は、グリセロール、プロピレン
グリコール、水、エタノール、並びに石油、動物、植物又は合成起源のものを始めとする
各種の油、例えば落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油などから選択し得る。液体担体、特に
注射液用の液体担体としては、水、生理食塩水、水性デキストロース及びグリコール類が
挙げられる。他の適切な医薬添加物及びそれらの製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈ
ａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｅ． Ｗ． Ｍ
ａｒｔｉｎ （Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， １８ｔｈ ｅｄ．
， １９９０）に記載されている。
【0143】
本発明の組成物は、所望に応じて、活性成分を含有する１以上の単位用量剤形を含むパ
ック又はディスペンサー装置で提供し得る。かかるパック又は装置は、例えば、ブリスタ
ーパックのように金属若しくはプラスチック箔、又はバイアルのようにガラス及びゴム栓
を備えていてもよい。パック又はディスペンサー装置には、投与のための説明書を添付し
てもよい。また、本発明の化合物を適合性の医薬担体中に製剤化してなる組成物を調製し
、適切な容器に入れ、所定の状態の治療に関するラベルを貼付してもよい。
ック又はディスペンサー装置で提供し得る。かかるパック又は装置は、例えば、ブリスタ
ーパックのように金属若しくはプラスチック箔、又はバイアルのようにガラス及びゴム栓
を備えていてもよい。パック又はディスペンサー装置には、投与のための説明書を添付し
てもよい。また、本発明の化合物を適合性の医薬担体中に製剤化してなる組成物を調製し
、適切な容器に入れ、所定の状態の治療に関するラベルを貼付してもよい。
【0144】
治療方法
本明細書に記載のナノ粒子組成物は、哺乳動物の癌細胞及び／又は腫瘍の治療に有用で
ある。好ましい実施形態では、哺乳動物はヒト（すなわちヒトの患者）である。好ましく
は、凍結乾燥ナノ粒子組成物は投与前に再構成される（水性添加物中に懸濁される）。
本明細書に記載のナノ粒子組成物は、哺乳動物の癌細胞及び／又は腫瘍の治療に有用で
ある。好ましい実施形態では、哺乳動物はヒト（すなわちヒトの患者）である。好ましく
は、凍結乾燥ナノ粒子組成物は投与前に再構成される（水性添加物中に懸濁される）。
【0145】
一態様では、癌細胞を治療するための方法であって、癌細胞を治療するため、該細胞を
本明細書に記載のナノ粒子組成物の有効量と接触させることを含む方法が提供される。癌
細胞の治療としては、増殖の減少、細胞の死滅、細胞の転移の予防などが挙げられるが、
これらに限定されない。
本明細書に記載のナノ粒子組成物の有効量と接触させることを含む方法が提供される。癌
細胞の治療としては、増殖の減少、細胞の死滅、細胞の転移の予防などが挙げられるが、
これらに限定されない。
【0146】
一態様では、腫瘍の治療を必要とする患者の腫瘍を治療するための方法であって、腫瘍
を治療するため、本明細書に記載の治療有効量のナノ粒子組成物を患者に投与することを
含む方法が提供される。一実施形態では、ナノ粒子が、抗原結合性ドメインを含む結合剤
を含んでいる場合、本方法は、上記抗原を発現する癌を有する患者を選択することを含む
。一実施形態では、腫瘍の大きさが縮小される。一実施形態では、腫瘍の大きさは、治療
中及び／又は治療後の少なくとも一定期間増大（進行）しない。
を治療するため、本明細書に記載の治療有効量のナノ粒子組成物を患者に投与することを
含む方法が提供される。一実施形態では、ナノ粒子が、抗原結合性ドメインを含む結合剤
を含んでいる場合、本方法は、上記抗原を発現する癌を有する患者を選択することを含む
。一実施形態では、腫瘍の大きさが縮小される。一実施形態では、腫瘍の大きさは、治療
中及び／又は治療後の少なくとも一定期間増大（進行）しない。
【0147】
一実施形態では、ナノ粒子組成物は静脈内投与される。一実施形態では、ナノ粒子組成
物は腫瘍に直接投与される。一実施形態では、ナノ粒子組成物は腫瘍への直接注射又は灌
流によって投与される。
物は腫瘍に直接投与される。一実施形態では、ナノ粒子組成物は腫瘍への直接注射又は灌
流によって投与される。
【0148】
一実施形態では、本方法は以下のステップ：
ａ）ナノ粒子組成物を３週間にわたって週１回投与するステップ、
ｂ）ナノ粒子組成物の投与を１週間中止するステップ、及び
ｃ）腫瘍を治療するため必要に応じてステップａ）及びｂ）を繰り返すステップ
を含む。
ａ）ナノ粒子組成物を３週間にわたって週１回投与するステップ、
ｂ）ナノ粒子組成物の投与を１週間中止するステップ、及び
ｃ）腫瘍を治療するため必要に応じてステップａ）及びｂ）を繰り返すステップ
を含む。
【0149】
一実施形態では、本明細書に記載のナノ粒子の治療有効量は、約１ｍｇ／ｍ２～約２０
０ｍｇ／ｍ２の抗体、約２ｍｇ／ｍ２～約１５０ｍｇ／ｍ２、約５ｍｇ／ｍ２～約１００
ｍｇ／ｍ２、約１０ｍｇ／ｍ２～約８５ｍｇ／ｍ２、約１５ｍｇ／ｍ２～約７５ｍｇ／ｍ
２、約２０ｍｇ／ｍ２～約６５ｍｇ／ｍ２、約２５ｍｇ／ｍ２～約５５ｍｇ／ｍ２、約３
０ｍｇ／ｍ２～約４５ｍｇ／ｍ２又は約３５ｍｇ／ｍ２～約４０ｍｇ／ｍ２の抗体を含む
。別の実施形態では、治療有効量は約２０ｍｇ／ｍ２～約９０ｍｇ／ｍ２の抗体を含む。
一実施形態では、治療有効量は３０ｍｇ／ｍ２～約７０ｍｇ／ｍ２の抗体を含む。
０ｍｇ／ｍ２の抗体、約２ｍｇ／ｍ２～約１５０ｍｇ／ｍ２、約５ｍｇ／ｍ２～約１００
ｍｇ／ｍ２、約１０ｍｇ／ｍ２～約８５ｍｇ／ｍ２、約１５ｍｇ／ｍ２～約７５ｍｇ／ｍ
２、約２０ｍｇ／ｍ２～約６５ｍｇ／ｍ２、約２５ｍｇ／ｍ２～約５５ｍｇ／ｍ２、約３
０ｍｇ／ｍ２～約４５ｍｇ／ｍ２又は約３５ｍｇ／ｍ２～約４０ｍｇ／ｍ２の抗体を含む
。別の実施形態では、治療有効量は約２０ｍｇ／ｍ２～約９０ｍｇ／ｍ２の抗体を含む。
一実施形態では、治療有効量は３０ｍｇ／ｍ２～約７０ｍｇ／ｍ２の抗体を含む。
【0150】
一実施形態では、本明細書に記載のナノ粒子の治療有効量は、約５０ｍｇ／ｍ２～約２
００ｍｇ／ｍ２の担体タンパク質又は担体タンパク質及び治療剤を含む。一実施形態では
、本明細書に記載の治療有効量のナノ粒子組成物は結合剤を含まない。一実施形態では、
本明細書に記載の治療有効量のナノ粒子組成物は、治療有効量未満のパクリタキセルを含
む。好ましい実施形態では、治療有効量は約７５ｍｇ／ｍ２未満のパクリタキセルを含む
。想定される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含
する。
００ｍｇ／ｍ２の担体タンパク質又は担体タンパク質及び治療剤を含む。一実施形態では
、本明細書に記載の治療有効量のナノ粒子組成物は結合剤を含まない。一実施形態では、
本明細書に記載の治療有効量のナノ粒子組成物は、治療有効量未満のパクリタキセルを含
む。好ましい実施形態では、治療有効量は約７５ｍｇ／ｍ２未満のパクリタキセルを含む
。想定される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は範囲を包含
する。
【0151】
一実施形態では、治療有効量は、約２０ｍｇ／ｍ２～約９０ｍｇ／ｍ２の結合剤（例え
ば抗体、アプタマー又は融合タンパク質）を含む。好ましい実施形態では、治療有効量は
３０ｍｇ／ｍ２～約７０ｍｇ／ｍ２の結合剤（例えば抗体、アプタマー又は融合タンパク
質）を含む。想定される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は
範囲を包含する。
ば抗体、アプタマー又は融合タンパク質）を含む。好ましい実施形態では、治療有効量は
３０ｍｇ／ｍ２～約７０ｍｇ／ｍ２の結合剤（例えば抗体、アプタマー又は融合タンパク
質）を含む。想定される値は、上下限を含め、これらの範囲内の任意の値、部分範囲又は
範囲を包含する。
【0152】
本明細書に記載の組成物及び方法によって治療することができる癌又は腫瘍としては、
上述の表に示す癌、並びに胆道癌；膠芽腫及び髄芽腫を含む脳腫瘍；乳癌；子宮頸癌；絨
毛癌；大腸癌；子宮内膜癌；食道癌；胃癌；急性リンパ性白血病及び骨髄性白血病を含む
血液腫瘍；多発性骨髄腫；エイズ関連白血病及び成人Ｔ細胞白血病リンパ腫；ボーエン病
及びパジェット病を含む上皮内腫瘍；肝癌（肝細胞癌）；肺癌；ホジキン病及びリンパ球
性リンパ腫を含むリンパ腫；神経芽細胞腫；扁平上皮癌を含む口腔癌；上皮細胞、間質細
胞、生殖細胞及び間葉細胞から発生するものを含む卵巣癌；膵癌；前立腺癌；直腸癌；平
滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫及び骨肉腫を含む肉腫；黒色腫、カポジ肉腫
、基底細胞癌及び扁平上皮癌を含む皮膚癌；胚性腫瘍（セミノーマ、非セミノーマ［奇形
腫、絨毛癌］）、間質性腫瘍及び胚細胞性腫瘍を含む精巣癌；甲状腺癌（甲状腺腺癌及び
髄様癌を含む）；並びに腺癌及びウィルムス腫瘍を含む腎臓癌が挙げられるが、これらに
限定されない。重要な実施形態では、癌又は腫瘍として、乳癌、リンパ腫、多発性骨髄腫
及び黒色腫が挙げられる。
上述の表に示す癌、並びに胆道癌；膠芽腫及び髄芽腫を含む脳腫瘍；乳癌；子宮頸癌；絨
毛癌；大腸癌；子宮内膜癌；食道癌；胃癌；急性リンパ性白血病及び骨髄性白血病を含む
血液腫瘍；多発性骨髄腫；エイズ関連白血病及び成人Ｔ細胞白血病リンパ腫；ボーエン病
及びパジェット病を含む上皮内腫瘍；肝癌（肝細胞癌）；肺癌；ホジキン病及びリンパ球
性リンパ腫を含むリンパ腫；神経芽細胞腫；扁平上皮癌を含む口腔癌；上皮細胞、間質細
胞、生殖細胞及び間葉細胞から発生するものを含む卵巣癌；膵癌；前立腺癌；直腸癌；平
滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫及び骨肉腫を含む肉腫；黒色腫、カポジ肉腫
、基底細胞癌及び扁平上皮癌を含む皮膚癌；胚性腫瘍（セミノーマ、非セミノーマ［奇形
腫、絨毛癌］）、間質性腫瘍及び胚細胞性腫瘍を含む精巣癌；甲状腺癌（甲状腺腺癌及び
髄様癌を含む）；並びに腺癌及びウィルムス腫瘍を含む腎臓癌が挙げられるが、これらに
限定されない。重要な実施形態では、癌又は腫瘍として、乳癌、リンパ腫、多発性骨髄腫
及び黒色腫が挙げられる。
【0153】
一般に、本発明の化合物は、同様の効用に役立つ薬剤で許容されている投与モードのい
ずれかによって治療有効量で投与される。本発明の化合物、すなわちナノ粒子の実際の量
は、治療すべき疾患の重症度、対象の年齢及び相対的健康状態、使用される化合物の効力
、投与の経路及び形態、並びに当業者に周知の他の要因などの多数の要因に依存する。
ずれかによって治療有効量で投与される。本発明の化合物、すなわちナノ粒子の実際の量
は、治療すべき疾患の重症度、対象の年齢及び相対的健康状態、使用される化合物の効力
、投与の経路及び形態、並びに当業者に周知の他の要因などの多数の要因に依存する。
【0154】
かかる薬剤の有効量は、簡単な実験によって容易に決定することができ、最も効果的で
簡便な投与経路及び最も適切な製剤についても同様である。様々な製剤及び薬物送達シス
テムが当技術分野で利用できる。例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ， Ａ．Ｒ．， ｅｄ． （１
９９５） Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
， １８ｔｈ ｅｄ．， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．参照。
簡便な投与経路及び最も適切な製剤についても同様である。様々な製剤及び薬物送達シス
テムが当技術分野で利用できる。例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ， Ａ．Ｒ．， ｅｄ． （１
９９５） Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
， １８ｔｈ ｅｄ．， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．参照。
【0155】
薬剤（例えば本発明の化合物）の有効量又は治療有効量又は投与量とは、対象において
症状の改善又は生存期間の延長をもたらす薬剤又は化合物の量をいう。かかる分子の毒性
及び治療効果は、細胞培養物又は実験動物における標準的な薬学的手順によって求めるこ
とができ、例えばＬＤ５０（集団の５０％に致死的な用量）及びＥＤ５０（集団の５０％
で治療効果のある用量）によって求めることができる。治療効果に対する毒性の用量比が
治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表すことができる。高い治療指数を示す薬
剤が好ましい。
症状の改善又は生存期間の延長をもたらす薬剤又は化合物の量をいう。かかる分子の毒性
及び治療効果は、細胞培養物又は実験動物における標準的な薬学的手順によって求めるこ
とができ、例えばＬＤ５０（集団の５０％に致死的な用量）及びＥＤ５０（集団の５０％
で治療効果のある用量）によって求めることができる。治療効果に対する毒性の用量比が
治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表すことができる。高い治療指数を示す薬
剤が好ましい。
【0156】
有効量又は治療有効量は、研究者、獣医、医師その他の臨床医が求める組織、系、動物
又はヒトの生物学的又は医学的反応を惹起する化合物又は医薬組成物の量である。投与量
は、この範囲内において、用いられる剤形及び／又は利用される投与経路に応じて変動し
得る。正確な製剤、投与経路、投与量及び投与間隔は、対象の状態の詳細に鑑みて、当技
術分野で公知の方法に従って選択すべきである。
又はヒトの生物学的又は医学的反応を惹起する化合物又は医薬組成物の量である。投与量
は、この範囲内において、用いられる剤形及び／又は利用される投与経路に応じて変動し
得る。正確な製剤、投与経路、投与量及び投与間隔は、対象の状態の詳細に鑑みて、当技
術分野で公知の方法に従って選択すべきである。
【0157】
投与量及び投与間隔は、所望の効果を達成するのに十分な活性部分の血漿レベル、すな
わち最小有効濃度（ＭＥＣ）をもたらすため個々に調整し得る。ＭＥＣは化合物ごとに異
なるが、例えばインビトロデータ及び動物実験などから推定できる。ＭＥＣを達成するの
に必要な投与量は、個体の特性及び投与経路に依存するであろう。局所投与又は選択的取
込みの場合、薬物の有効局所濃度は血漿中濃度と関連しないことがある。
わち最小有効濃度（ＭＥＣ）をもたらすため個々に調整し得る。ＭＥＣは化合物ごとに異
なるが、例えばインビトロデータ及び動物実験などから推定できる。ＭＥＣを達成するの
に必要な投与量は、個体の特性及び投与経路に依存するであろう。局所投与又は選択的取
込みの場合、薬物の有効局所濃度は血漿中濃度と関連しないことがある。
【0158】
関連する実施形態では、治療は、ナノ粒子の投与前にターゲティング用の結合剤を投与
することを含む。一実施形態では、ターゲティング用結合剤は、ナノ粒子の投与の約６～
４８時間前又は１２～４８時間前に投与される。別の実施形態では、ターゲティング用結
合剤は、ナノ粒子の投与の６～１２時間前に投与される。さらに別の実施形態では、ター
ゲティング用結合剤は、ナノ粒子の投与の２～８時間前に投与される。さらに別の実施形
態では、ターゲティング用結合剤は、ナノ粒子の投与の１週間前に投与される。例えば、
ベバシズマブ又は他のＶＥＧＦ結合性抗体を含むナノ粒子複合体の投与の２４時間前に、
ある用量のＢＥＶが投与される。別の例では、リツキシマブ含有ナノ粒子複合体の投与前
にリツキシマブが事前投与される。ナノ粒子の前に投与される結合剤は、治療量以下、例
えば一般に治療量とみなされる量の１／２、１／１０又は１／２０などの量で投与できる
。例えば、ヒトでは、ＢＥＶの事前処置は、通常の投与量の１／１０量である１ｍｇ／ｋ
ｇのＢＥＶの投与を含んでいてもよく、その後のナノ粒子又はナノ粒子複合体が投与され
る。
することを含む。一実施形態では、ターゲティング用結合剤は、ナノ粒子の投与の約６～
４８時間前又は１２～４８時間前に投与される。別の実施形態では、ターゲティング用結
合剤は、ナノ粒子の投与の６～１２時間前に投与される。さらに別の実施形態では、ター
ゲティング用結合剤は、ナノ粒子の投与の２～８時間前に投与される。さらに別の実施形
態では、ターゲティング用結合剤は、ナノ粒子の投与の１週間前に投与される。例えば、
ベバシズマブ又は他のＶＥＧＦ結合性抗体を含むナノ粒子複合体の投与の２４時間前に、
ある用量のＢＥＶが投与される。別の例では、リツキシマブ含有ナノ粒子複合体の投与前
にリツキシマブが事前投与される。ナノ粒子の前に投与される結合剤は、治療量以下、例
えば一般に治療量とみなされる量の１／２、１／１０又は１／２０などの量で投与できる
。例えば、ヒトでは、ＢＥＶの事前処置は、通常の投与量の１／１０量である１ｍｇ／ｋ
ｇのＢＥＶの投与を含んでいてもよく、その後のナノ粒子又はナノ粒子複合体が投与され
る。
【実施例0159】
本開示を、コアとしてのアルブミン結合パクリタキセル又はパクリタキセル誘導体と、
抗体としてのベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））又はリツキシマブ（Ｒｉｔｕ
ｘａｎ（登録商標））とからなるナノ粒子を用いて例示する。
抗体としてのベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））又はリツキシマブ（Ｒｉｔｕ
ｘａｎ（登録商標））とからなるナノ粒子を用いて例示する。
【0160】
当業者には明らかであろうが、実施例のナノ粒子の製造及び使用に関する説明は専ら例
示を目的としたものであり、本開示はこうした例示に限定されるものではない。
示を目的としたものであり、本開示はこうした例示に限定されるものではない。
【0161】
本明細書で用いる略語は、通常の科学的意味を有する。別途記載しない限り、温度はす
べて℃である。本明細書において、以下に示す用語は、別途定義しない限り、以下の意味
を有する。
べて℃である。本明細書において、以下に示す用語は、別途定義しない限り、以下の意味
を有する。
【表3】
【0162】
実施例１：ナノ粒子の調製
Ｓａｍａｒａｎａｙａｋｅ ｅｔ ａｌ． ｉｎ “Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｔａｘｏｌｓ
． Ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔａｘｏｌ ｗｉｔｈ Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｉｌｉｃ Ｒ
ｅａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｐｒｅｐｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｒｅａｒｒａｎｇｅｄ
Ｔａｘｏｌ Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｗｉｔｈ Ｔｕｂｕｌｉｎ Ａｓｓｅｍｂｌｙ Ａ
ｃｔｉｖｉｔｙ” （Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９１， ５６， ５１１４－５
１１９）（その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。）に記載された反
応スキームに従って、パクリタキセルをメーヤワイン試薬と反応させて切断した。この反
応はＣ－４，Ｃ－５オキセタン環を切断して毒性を大きく阻害する。反応及び精製は、Ｏ
ｒｇａｎｉｘ社（米国マサチューセッツ州ウォーバン）によって行われた。この反応を図
１に示す。
Ｓａｍａｒａｎａｙａｋｅ ｅｔ ａｌ． ｉｎ “Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｔａｘｏｌｓ
． Ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔａｘｏｌ ｗｉｔｈ Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｉｌｉｃ Ｒ
ｅａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｐｒｅｐｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｒｅａｒｒａｎｇｅｄ
Ｔａｘｏｌ Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｗｉｔｈ Ｔｕｂｕｌｉｎ Ａｓｓｅｍｂｌｙ Ａ
ｃｔｉｖｉｔｙ” （Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９１， ５６， ５１１４－５
１１９）（その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。）に記載された反
応スキームに従って、パクリタキセルをメーヤワイン試薬と反応させて切断した。この反
応はＣ－４，Ｃ－５オキセタン環を切断して毒性を大きく阻害する。反応及び精製は、Ｏ
ｒｇａｎｉｘ社（米国マサチューセッツ州ウォーバン）によって行われた。この反応を図
１に示す。
【0163】
パクリタキセルのメーヤワイン生成物（２０－アセトキシ－４－デアセチル－５－エピ
－２０，Ｏ－セコタキソール）を次いで高圧下でアルブミンとホモジナイズして安定な非
毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）を形成した。アルブミン及びタキサン（例えばパクリタキセル）
をホモジナイズする方法は、例えば米国特許第５９１６５９６号、同第６５０６４０５号
及び同第６５３７５７９号に記載されており、これらの各開示内容は援用によって本明細
書の内容の一部をなす。
－２０，Ｏ－セコタキソール）を次いで高圧下でアルブミンとホモジナイズして安定な非
毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）を形成した。アルブミン及びタキサン（例えばパクリタキセル）
をホモジナイズする方法は、例えば米国特許第５９１６５９６号、同第６５０６４０５号
及び同第６５３７５７９号に記載されており、これらの各開示内容は援用によって本明細
書の内容の一部をなす。
【0164】
簡単に説明すると、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ；Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ社）を
滅菌水に１～１．５％ｗ／ｖで溶解した。別の容器内で、２０－アセトキシ－４－デアセ
チル－５－エピ－２０，Ｏ－セコタキソール（ＨＳＡに対して１０％ｗ／ｗ）をクロロホ
ルムに溶解して１０ｍｇ／ｍｌとした。クロロホルム溶液をアルブミン溶液に添加し、ハ
ンドヘルド型ホモジナイザーで５分間低ＲＰＭで混合した。溶液を２００００ｐｓｉでマ
イクロホモジナイズポンプに１５サイクル流した。溶液が危うい高温（５０℃超）に達す
るのを防ぐため、ポンプコイル経路及び回収チューブは氷浴に入れた。溶液をコールドト
ラップを備えたロータリーエバポレーターに移し、減圧下で４５分間運転してクロロホル
ムを蒸発させた。溶液を２００ｎｍ酢酸セルロースフィルターで濾過した。
滅菌水に１～１．５％ｗ／ｖで溶解した。別の容器内で、２０－アセトキシ－４－デアセ
チル－５－エピ－２０，Ｏ－セコタキソール（ＨＳＡに対して１０％ｗ／ｗ）をクロロホ
ルムに溶解して１０ｍｇ／ｍｌとした。クロロホルム溶液をアルブミン溶液に添加し、ハ
ンドヘルド型ホモジナイザーで５分間低ＲＰＭで混合した。溶液を２００００ｐｓｉでマ
イクロホモジナイズポンプに１５サイクル流した。溶液が危うい高温（５０℃超）に達す
るのを防ぐため、ポンプコイル経路及び回収チューブは氷浴に入れた。溶液をコールドト
ラップを備えたロータリーエバポレーターに移し、減圧下で４５分間運転してクロロホル
ムを蒸発させた。溶液を２００ｎｍ酢酸セルロースフィルターで濾過した。
【0165】
凍結乾燥ナノ粒子については、生成物を完全に凍結乾燥できるように、溶液を適切な容
量に分割して凍結乾燥フラスコに入れた。溶液を入れたフラスコを－８０℃に２～４時間
置いた。フラスコ内の凍結溶液を、－８５℃の凝縮器を備えた卓上型凍結乾燥機を用いて
＜２０ミリトルで凍結乾燥した。
量に分割して凍結乾燥フラスコに入れた。溶液を入れたフラスコを－８０℃に２～４時間
置いた。フラスコ内の凍結溶液を、－８５℃の凝縮器を備えた卓上型凍結乾燥機を用いて
＜２０ミリトルで凍結乾燥した。
【0166】
実施例２：インビトロでのＮＴＰとベバシズマブの結合
ＮＴＰとベバシズマブ（ＢＥＶ）が相互作用するか否かを決定するため、実施例１で形
成したＮＴＰのサイズを単独で並びに４ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、８ｍｇ／ｍＬ及び１
０ｍｇ／ｍＬのベバシズマブと共に３０分間インキュベートした後で、Ｍａｌｖｅｒｎ
Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術によって分析した。
ＮＴＰとベバシズマブ（ＢＥＶ）が相互作用するか否かを決定するため、実施例１で形
成したＮＴＰのサイズを単独で並びに４ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、８ｍｇ／ｍＬ及び１
０ｍｇ／ｍＬのベバシズマブと共に３０分間インキュベートした後で、Ｍａｌｖｅｒｎ
Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術によって分析した。
【0167】
ＢＥＶの濃度の増加に伴うナノ粒子の直径の増加（図２Ａ～２Ｅ）は、ＢＥＶによるＮ
ＥＰの非共有結合コーティングの増大を示唆している。直径は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎ
ｏｓｉｇｈｔ技術を用いて１：３００希釈で測定した。
ＥＰの非共有結合コーティングの増大を示唆している。直径は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎ
ｏｓｉｇｈｔ技術を用いて１：３００希釈で測定した。
【0168】
実施例３：非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）に対するベバシズマブ及びリツキシマブの結合の
親和性
ＮＴＰに対するベバシズマブ（図３Ａ）及びリツキシマブ（図３Ｂ）の結合親和性（Ｋ
ｄ）を、バイオレイヤー干渉法（Bio LayerInterferometry：ＢＬＩ）を用いて測定した
。これら２種類の抗体をアミンカップリングを用いてビオチン化し、次いで各々１００μ
ｇ／ｍＬのＢＬＩＴＺストレプトアビジンプローブに結合させた。様々な濃度のＮＴＰを
、１２０秒間の会合及び解離期間でプローブとの結合についてアッセイした。キネティク
ス解析は、ＢＬＩＴＺ評価ソフトウェアによって実施した。ナノ乃至ピコモル親和性は、
リツキシマブとＮＴＰ間及びベバシズマブとＮＴＰ間の強い結合を示す。
親和性
ＮＴＰに対するベバシズマブ（図３Ａ）及びリツキシマブ（図３Ｂ）の結合親和性（Ｋ
ｄ）を、バイオレイヤー干渉法（Bio LayerInterferometry：ＢＬＩ）を用いて測定した
。これら２種類の抗体をアミンカップリングを用いてビオチン化し、次いで各々１００μ
ｇ／ｍＬのＢＬＩＴＺストレプトアビジンプローブに結合させた。様々な濃度のＮＴＰを
、１２０秒間の会合及び解離期間でプローブとの結合についてアッセイした。キネティク
ス解析は、ＢＬＩＴＺ評価ソフトウェアによって実施した。ナノ乃至ピコモル親和性は、
リツキシマブとＮＴＰ間及びベバシズマブとＮＴＰ間の強い結合を示す。
【0169】
実施例４：ＰＢＳ及び血清中での非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）の安定性－アブラキサン（
登録商標）（ＡＢＸ）との比較
抗体を含むまないＮＴＰ及びアブラキサン（登録商標）（ＡＢＸ）溶液を、それぞれ、
ＰＢＳ中３０μｇ／ｍＬのパクリタキセルのメーヤワイン生成物及びパクリタキセルで調
製した。１ｍＬ当たりのナノ粒子の基準カウント数は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇ
ｈｔ技術を用いて得た。次いで、これら２種類の溶液についてある範囲の希釈を行って、
粒子濃度を測定した。
登録商標）（ＡＢＸ）との比較
抗体を含むまないＮＴＰ及びアブラキサン（登録商標）（ＡＢＸ）溶液を、それぞれ、
ＰＢＳ中３０μｇ／ｍＬのパクリタキセルのメーヤワイン生成物及びパクリタキセルで調
製した。１ｍＬ当たりのナノ粒子の基準カウント数は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇ
ｈｔ技術を用いて得た。次いで、これら２種類の溶液についてある範囲の希釈を行って、
粒子濃度を測定した。
【0170】
図４Ａは、生理食塩水中でのＡＢＸ及びＮＴＰの安定性を示す。アブラキサンナノ粒子
は、初期溶液の１：１．３３希釈付近で崩壊し始め、約１：２希釈で基準ＰＢＳレベルに
達した。ＮＴＰは希釈率と共に直線的に減少し、粒子が崩壊しないことを示唆している。
は、初期溶液の１：１．３３希釈付近で崩壊し始め、約１：２希釈で基準ＰＢＳレベルに
達した。ＮＴＰは希釈率と共に直線的に減少し、粒子が崩壊しないことを示唆している。
【0171】
図４Ｂは、血清中でのＡＢＸ及びＮＴＰの安定性を示す。ＮＴＰ及びＡＢＸ溶液は、そ
れぞれ、血清中２５０μｇ／ｍＬのパクリタキセルのメーヤワイン生成物及びパクリタキ
セルで調製した。Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術を用いてナノ粒子の初期濃度
を測定し、その後の測定値は初期濃度の百分率として示す。血清中１５分、３０分、４５
分及び６０分後の各溶液の濃度を測定した。
れぞれ、血清中２５０μｇ／ｍＬのパクリタキセルのメーヤワイン生成物及びパクリタキ
セルで調製した。Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏｓｉｇｈｔ技術を用いてナノ粒子の初期濃度
を測定し、その後の測定値は初期濃度の百分率として示す。血清中１５分、３０分、４５
分及び６０分後の各溶液の濃度を測定した。
【0172】
実施例５：ＮＴＰ－リツキシマブ複合体によるＤａｕｄｉ細胞ＣＤ２０結合阻害
ＡＢＸ、ＡＲ１６０、非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）及びリツキシマブ結合ＮＴＰを、上述
又は従前の通り調製した（例えば国際公開第２０１４／０５５４１５号（その開示内容は
援用によって本明細書の内容の一部をなす。）参照）。ナノ粒子及び未標識リツキシマブ
をＣＤ２０＋Ｄａｕｄｉリンパ腫細胞と室温で３０分間共インキュベートした。細胞を洗
浄し、続いてＰＥ抗ヒトＣＤ２０で染色した。アイソタイプ（図５Ａ）及び抗ＣＤ２０（
図５Ｂ）染色細胞をそれぞれ陰性対照及び陽性対照とした。
ＡＢＸ、ＡＲ１６０、非毒性ナノ粒子（ＮＴＰ）及びリツキシマブ結合ＮＴＰを、上述
又は従前の通り調製した（例えば国際公開第２０１４／０５５４１５号（その開示内容は
援用によって本明細書の内容の一部をなす。）参照）。ナノ粒子及び未標識リツキシマブ
をＣＤ２０＋Ｄａｕｄｉリンパ腫細胞と室温で３０分間共インキュベートした。細胞を洗
浄し、続いてＰＥ抗ヒトＣＤ２０で染色した。アイソタイプ（図５Ａ）及び抗ＣＤ２０（
図５Ｂ）染色細胞をそれぞれ陰性対照及び陽性対照とした。
【0173】
結果は、ＡＲ１６０（図５Ｄ）、リツキシマブ結合ＮＴ粒子（ＮＴＲｉｔ；図５Ｆ）及
びリツキシマブ（図５Ｇ）がその後のＰＥ抗ヒトＣＤ２０の結合を阻害するのに対して、
、ＡＢＸ（図５Ｃ）及びＮＴナノ粒子（図５Ｅ）単独は阻害しないことを示す。これは、
ＡＲ１６０及びリツキシマブ結合ＮＴ粒子中のリツキシマブがそのリガンド結合特性を保
持していることを示している。
びリツキシマブ（図５Ｇ）がその後のＰＥ抗ヒトＣＤ２０の結合を阻害するのに対して、
、ＡＢＸ（図５Ｃ）及びＮＴナノ粒子（図５Ｅ）単独は阻害しないことを示す。これは、
ＡＲ１６０及びリツキシマブ結合ＮＴ粒子中のリツキシマブがそのリガンド結合特性を保
持していることを示している。
【0174】
実施例６：パクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタキセルナノ粒子
アブラキサン（登録商標）に比べてパクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタ
キセルナノ粒子を形成させる。
アブラキサン（登録商標）に比べてパクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタ
キセルナノ粒子を形成させる。
【0175】
例えば、３０ｍｇ未満（例えば１ｍｇ～２５ｍｇ）のパクリタキセルを溶媒（例えば塩
化メチレン；又はクロロホルムとエタノール）中に溶解させる。この溶液を２７．０ｍＬ
のヒト血清アルブミン溶液（１％ｗ／ｖ）に加える。この混合物を低ＲＰＭで５分間ホモ
ジナイズして粗エマルジョンを形成し、次いで高圧ホモジナイザーに移す。乳化は、エマ
ルジョンを少なくとも５回リサイクルしながら、９０００～４００００ｐｓｉで行う。得
られた系をロータリーエバポレーターに移し、４０℃、減圧下（３０ｍｍＨｇ）で２０～
３０分間で塩化メチレンを急速に除去する。任意的に、分散液を０．２２ミクロンのフィ
ルターで濾過する。
化メチレン；又はクロロホルムとエタノール）中に溶解させる。この溶液を２７．０ｍＬ
のヒト血清アルブミン溶液（１％ｗ／ｖ）に加える。この混合物を低ＲＰＭで５分間ホモ
ジナイズして粗エマルジョンを形成し、次いで高圧ホモジナイザーに移す。乳化は、エマ
ルジョンを少なくとも５回リサイクルしながら、９０００～４００００ｐｓｉで行う。得
られた系をロータリーエバポレーターに移し、４０℃、減圧下（３０ｍｍＨｇ）で２０～
３０分間で塩化メチレンを急速に除去する。任意的に、分散液を０．２２ミクロンのフィ
ルターで濾過する。
【0176】
濾過したナノ粒子は凍結乾燥して保存できる。
【0177】
実施例７：パクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタキセル－治療剤ナノ粒子
アブラキサン（登録商標）に比べてパクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタ
キセル－治療剤ナノ粒子を形成させる。
アブラキサン（登録商標）に比べてパクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタ
キセル－治療剤ナノ粒子を形成させる。
【0178】
例えば、実施例６に記載の通り、アルブミン－パクリタキセルナノ粒子を形成する。治
療剤（例えばシスプラチン）をナノ粒子と、約１０：１（ナノ粒子：薬剤）比で、室温で
３０分間インキュベートする。ナノ粒子微粒子を除去した後の上清中の遊離の治療剤（例
えばシスプラチン）をＨＰＬＣで測定する。
療剤（例えばシスプラチン）をナノ粒子と、約１０：１（ナノ粒子：薬剤）比で、室温で
３０分間インキュベートする。ナノ粒子微粒子を除去した後の上清中の遊離の治療剤（例
えばシスプラチン）をＨＰＬＣで測定する。
【0179】
実施例８：パクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタキセル－抗体ナノ粒子
アブラキサン（登録商標）に比べてパクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタ
キセル－抗体ナノ粒子を形成させる。
アブラキサン（登録商標）に比べてパクリタキセル量の低減したアルブミン－パクリタ
キセル－抗体ナノ粒子を形成させる。
【0180】
例えば、実施例６に記載の通り、アルブミン－パクリタキセルナノ粒子を形成する。ナ
ノ粒子（１０ｍｇ）を抗体（例えばベバシズマブ）（４ｍｇ）と混合し、８４０μｌの０
．９％生理食塩水を添加して、ナノ粒子及び抗体の最終濃度をそれぞれ１０ｍｇ／ｍｌ及
び２ｍｇ／ｍｌとする。混合物を室温で３０分間インキュベートして粒子を形成させる。
ノ粒子（１０ｍｇ）を抗体（例えばベバシズマブ）（４ｍｇ）と混合し、８４０μｌの０
．９％生理食塩水を添加して、ナノ粒子及び抗体の最終濃度をそれぞれ１０ｍｇ／ｍｌ及
び２ｍｇ／ｍｌとする。混合物を室温で３０分間インキュベートして粒子を形成させる。
【0181】
抗体－アルブミン－パクリタキセル－治療剤ナノ粒子複合体を形成できる。任意的に、
抗体をアルブミン－パクリタキセル－治療剤ナノ粒子（実施例７から）とインキュベート
して、抗体－アルブミン－パクリタキセル－治療剤ナノ粒子複合体を形成させる。或いは
、抗体－アルブミン－パクリタキセル－ナノ粒子を治療剤とインキュベートして抗体－ア
ルブミン－パクリタキセル－治療剤ナノ粒子複合体を形成させてもよい。
抗体をアルブミン－パクリタキセル－治療剤ナノ粒子（実施例７から）とインキュベート
して、抗体－アルブミン－パクリタキセル－治療剤ナノ粒子複合体を形成させる。或いは
、抗体－アルブミン－パクリタキセル－ナノ粒子を治療剤とインキュベートして抗体－ア
ルブミン－パクリタキセル－治療剤ナノ粒子複合体を形成させてもよい。
【図1】
【図2A】
【図2B】
【図2C】
【図2D】
【図2E】
【図3A】
【図3B】
【図4A】
【図4B】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【図5D】
【図5E】
【図5F】
【図5G】
【手続補正書】
【提出日】2022-04-13
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
アルブミンおよびパクリタキセルを含むナノ粒子複合体であって、該パクリタキセルが、治療効果をもたらす量よりも少ない量で存在する、ナノ粒子複合体。
【請求項2】
前記ナノ粒子複合体における前記アルブミンと前記パクリタキセルが、約１０：１超、約１１：１超、約１２：１超、約１３：１超、約１４：１超、約１５：１超、約１６：１超、約１７：１超、約１８：１超、約１９：１超、約２０：１超、約２１：１超、約２２：１超、約２３：１超、約２４：１超、約２５：１超、約２６：１超、約２７：１超、約２８：１超、約２９：１超、約３０：１超、約３１：１超、約３２：１超、約３３：１超、約３４：１超、約３５：１超又は約４０：１超の相対重量比を有する、請求項１に記載のナノ粒子複合体。
【請求項3】
前記ナノ粒子組成物中に存在するパクリタキセルの量が、約４．５４ｍｇ／ｍＬ未満、約４．１６ｍｇ／ｍＬ未満、約３．５７ｍｇ／ｍＬ未満、約３．３３ｍｇ／ｍＬ未満、約３．１２ｍｇ／ｍＬ未満、約２．９４ｍｇ／ｍＬ未満、約２．７８ｍｇ／ｍＬ未満、約２．６３ｍｇ／ｍＬ未満、約２．５ｍｇ／ｍＬ未満、約２．３８ｍｇ／ｍＬ未満、約２．２７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．１７ｍｇ／ｍＬ未満、約２．０８ｍｇ／ｍＬ未満、約２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．９２ｍｇ／ｍＬ未満、約１．８５ｍｇ／ｍＬ未満、約１．７８ｍｇ／ｍＬ未満、約１．７２ｍｇ／ｍＬ未満又は約１．６７ｍｇ／ｍＬ未満である、請求項１に記載のナノ粒子複合体。
【請求項4】
前記ナノ粒子複合体と会合した抗体をさらに含む、請求項１～３のいずれか１項に記載のナノ粒子複合体。
【請求項5】
前記抗体が、トラスツズマブエムタンシン、アレムツズマブ、アテゾリズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、デノスマブ、ジヌツキシマブ、イピリムマブ、ニボルマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、パニツムマブ、ペムブロリズマブ、ペルツズマブ、リツキシマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ピディリズマブ、ＢＭＳ ９３６５５９、ＯＫＴ３及びトラスツズマブから選択される、請求項４に記載のナノ粒子複合体。
【請求項6】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項１～５のいずれか１項に記載のナノ粒子複合体。
【請求項7】
前記ヒト血清アルブミンが組換えヒト血清アルブミンである、請求項６に記載のナノ粒子複合体。
【請求項8】
前記パクリタキセルが、前記ナノ粒子に安定性をもたらすのに有効な量で存在する、請求項１～７のいずれか１項に記載のナノ粒子複合体。
【請求項9】
前記アルブミンと前記パクリタキセルとの間の非共有結合によって一体となっている、請求項１～８のいずれか１項に記載のナノ粒子複合体。
【請求項10】
さらに治療剤を含む、請求項１～９のいずれか１項に記載のナノ粒子複合体。
【請求項11】
前記治療剤が、アビラテロン、ベンダムスチン、ボルテゾミブ、カルボプラチン、カバジタキセル、シスプラチン、クロラムブシル、ダサチニブ、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エルロチニブ、エトポシド、エベロリムス、ゲフィチニブ、イダルビシン、イマチニブ、ヒドロキシウレア、ラパチニブ、リュープロレリン、メルファラン、メトトレキサート、ミトキサントロン、ネダプラチン、ニロチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パゾパニブ、ペメトレキセド、ピコプラチン、ロミデプシン、サトラプラチン、ソラフェニブ、ベムラフェニブ、スニチニブ、テニポシド、トリプラチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンクリスチン又はシクロホスファミドから選択される、請求項１０に記載のナノ粒子複合体。
【請求項12】
前記パクリタキセルが、前記アルブミンに対する少なくとも１種の治療剤の親和性をもたらすのに有効な量で存在する、請求項１０～１１のいずれか１項に記載のナノ粒子複合体。
【請求項13】
前記パクリタキセルが、少なくとも１種の治療剤および前記アルブミンの複合体の形成を促進するのに有効な量で存在する、請求項１０～１２のいずれか１項に記載のナノ粒子複合体。
【請求項14】
請求項１～１３のいずれか１項に記載のナノ粒子複合体を含むナノ粒子組成物。
【請求項15】
凍結乾燥されている、請求項１４に記載のナノ粒子組成物。
【請求項16】
癌の治療を必要とする患者における癌を治療するための、請求項１４または１５に記載のナノ粒子組成物であって、該ナノ粒子組成物が、癌を有する患者に投与されることを特徴とする、ナノ粒子組成物。
【請求項17】
アルブミン－パクリタキセルナノ粒子を形成する方法であって、該方法が、高圧下で溶液中でアルブミンをパクリタキセルとホモジナイズして、該アルブミン－パクリタキセルナノ粒子を生成させることを含み、アルブミンとパクリタキセルとの比が１０：１超である、方法。
【請求項18】
前記アルブミン－パクリタキセルナノ粒子を抗体と接触させることをさらに含む、請求項１７に記載の方法。