特開 2022-74913 イムノクロマト検査キット

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2022074913

(43)【公開日】2022-05-18

(54)【発明の名称】イムノクロマト検査キット

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/543 20060101AFI20220511BHJP

【ＦＩ】

G01N33/543 521

【審査請求】未請求

【請求項の数】9

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2020185344

(22)【出願日】2020-11-05

(71)【出願人】

【識別番号】504300181

【氏名又は名称】国立大学法人浜松医科大学

(71)【出願人】

【識別番号】000102692

【氏名又は名称】ＮＴＮ株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110001195

【氏名又は名称】特許業務法人深見特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】針山 孝彦

(72)【発明者】

【氏名】河崎 秀陽

(72)【発明者】

【氏名】大庭 博明

(57)【要約】      （修正有）

【課題】従来のイムノクロマト検査キットと比べて、製造コストが削減されたイムノクロマト検査キットを提供する。
【解決手段】イムノクロマト検査キットは、検体が滴下される検体滴下部と、検体中の検出対象物と結合する性質を有する標識抗体が付着しているコンジュゲート部と、検出対象物と結合する性質を有する捕捉抗体が付着している複数の検出部３とを備える。検体滴下部、コンジュゲート部、および複数の検出部３は、多孔質部材上に形成されている。各検出部３は、多孔質部材に形成されている。担体には、複数の凹部が形成されている。各検出部３は、１つの凹部の底面を含む。
【選択図】図２

【特許請求の範囲】

【請求項1】

検体が滴下される検体滴下部と、
前記検体中の検出対象物と結合する性質を有する標識抗体が付着しているコンジュゲート部と、
前記検出対象物と結合する性質を有する捕捉抗体が付着している少なくとも１つの検出部とを備え、
前記検体滴下部、前記コンジュゲート部、および前記少なくとも１つの検出部は、多孔質部材上に形成されており、
前記多孔質部材には、少なくとも１つの凹部が形成されており、
前記少なくとも１つの検出部は、前記少なくとも１つの凹部の底面を含む、イムノクロマト検査キット。

【請求項2】

前記少なくとも１つの検出部の平面外形状は、ドット状であり、
前記少なくとも１つの検出部の幅は、１ｍｍ未満である、請求項１に記載のイムノクロマト検査キット。

【請求項3】

前記少なくとも１つの検出部の幅は、１００μｍ以下である、請求項１または２に記載のイムノクロマト検査キット。

【請求項4】

前記少なくとも１つの検出部は、複数の検出部であり、
前記少なくとも１つの凹部は、複数の凹部であり、
前記複数の検出部の各々は、前記複数の凹部のうちの１つの前記凹部の底面を含む、請求項１～３のいずれか１項に記載のイムノクロマト検査キット。

【請求項5】

前記複数の検出部は、１次元的または２次元的に配列されている、請求項４に記載のイムノクロマト検査キット。

【請求項6】

前記複数の検出部のうち隣り合う２つの前記検出部間の最短距離は、１ｍｍ未満である、請求項４または５に記載のイムノクロマト検査キット。

【請求項7】

前記複数の検出部は、第１種の前記検出対象物と結合する性質を有する第１捕捉抗体が固定されている第１検出部と、第２種の前記検出対象物と結合する性質を有する第２捕捉抗体が固定されている第２検出部とを有する、請求項４～６のいずれか１項に記載のイムノクロマト検査キット。

【請求項8】

前記検体滴下部、前記コンジュゲート部、および前記少なくとも１つの検出部は、単一の前記多孔質部材上に形成されている、請求項１～７のいずれか１項に記載のイムノクロマト検査キット。

【請求項9】

前記検体滴下部、前記コンジュゲート部、および前記少なくとも１つの検出部は、複数の前記多孔質部材上に形成されている、請求項１～７のいずれか１項に記載のイムノクロマト検査キット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、イムノクロマト検査キットに関する。

【背景技術】

【0002】

イムノクロマトグラフィーは、現在、インフルエンザウイルスを中心に様々な疾患の診断補助として社会実装されている。その原理は抗原抗体反応を利用しており、その簡便さ・有効性ゆえに広く医療現場で使用されている。

【0003】

従来のイムノクロマトグラフィーでは、イムノクロマト検査キット（展開支持体、またはクロマトグラフ媒体とも呼ばれる）の検出部における発色の有無が目視観察される。具体的には、標識抗体と結合した検出対象物が検出部に固定された捕捉抗体に捕捉されて検出部上に十分に集積した場合に、標識抗体に由来する発色が目視にて確認される。

【0004】

国際公開第２０１０／０６１７７２号（特許文献１）には、検出部が、目視判定可能な数ｍｍ以上の大きさで形成されたイムノクロマト検査キットが開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】国際公開第２０１０／０６１７７２号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

上記のような従来のイムノクロマト検査キットでは、標識抗体に由来する発色が目視にて確認されるため、誤判定することのないよう十分な面積を設ける必要があり、その結果検出部の面積が数ｍｍ^２以上となっている。このため、ある程度以上の多数の捕捉抗体を検出部に固定させて抗原を捕捉しなければならず、高価な捕捉抗体の使用量を削減することは難しく、低コスト化が困難であった。

【0007】

また、検出部を微小化した場合、たとえば、顕微鏡などで検出部を拡大して標識抗体を確認する必要があるが、顕微鏡での微小な検出部の位置合わせは困難である。この対策として、キット上に目印を設け、そこから所定の距離に検出部を設ける方法が考えられる。しかしながら、この場合、マークを設ける設備が検出部を形成する設備とは別に必要になり、また工程も増えるために製造タクトを削減できず、低コスト化を図ることは難しい。

【0008】

本発明の主たる目的は、従来のイムノクロマト検査キットと比べて、捕捉抗体の使用量を抑制でき、低コストなイムノクロマト検査キットを提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明に係るイムノクロマト検査キットは、検体が滴下される検体滴下部と、検体中の検出対象物と結合する性質を有する標識抗体が付着しているコンジュゲート部と、検出対象物と結合する性質を有する捕捉抗体が付着している少なくとも１つの検出部とを備える。検体滴下部、コンジュゲート部、および少なくとも１つの検出部は、多孔質部材上に形成されている。多孔質部材には、少なくとも１つの凹部が形成されている。少なくとも１つの検出部は、前記少なくとも１つの凹部の底面を含む。

【0010】

上記イムノクロマト検査キットにおいて、少なくとも１つの検出部の平面外形状は、ドット状であってもよい。少なくとも１つの検出部の幅は、１ｍｍ未満であってもよい。

【0011】

上記イムノクロマト検査キットにおいて、少なくとも１つの検出部の幅は、１００μｍ以下であってもよい。

【0012】

上記イムノクロマト検査キットにおいて、少なくとも１つの検出部は、複数の検出部であり、少なくとも１つの凹部は、複数の凹部であってもよい。複数の検出部の各々は、複数の凹部のうちの１つの凹部の底面を含む。

【0013】

上記イムノクロマト検査キットにおいて、複数の検出部は、１次元的または２次元的に配列されていてもよい。

【0014】

上記イムノクロマト検査キットにおいて、複数の検出部のうち隣り合う２つの検出部間の最短距離は、１ｍｍ未満であってもよい。

【0015】

上記イムノクロマト検査キットにおいて、複数の検出部は、第１種の検出対象物と結合する性質を有する第１捕捉抗体が固定されている第１検出部と、第２種の検出対象物と結合する性質を有する第２捕捉抗体が固定されている第２検出部とを有していてもよい。

【0016】

上記イムノクロマト検査キットにおいて、検体滴下部、コンジュゲート部、および少なくとも１つの検出部は、単一の多孔質部材上に形成されていてもよい。

【0017】

上記イムノクロマト検査キットにおいて、検体滴下部、コンジュゲート部、および少なくとも１つの検出部は、複数の多孔質部材上に形成されていてもよい。

【発明の効果】

【0018】

本発明によれば、従来のイムノクロマト検査キットと比べて、捕捉抗体の使用量を抑制でき、低コストなイムノクロマト検査キットを提供できる。

【図面の簡単な説明】

【0019】

【図1】実施の形態１に係るイムノクロマト検査キットの斜視図である。

【図2】図１に示されるイムノクロマト検査キットの検出部の部分拡大平面図である。

【図3】検出部の幅を説明するための部分拡大図である。

【図4】図２中の矢印ＩＶ－ＩＶから視た部分拡大断面図である。

【図5】実施の形態１に係るイムノクロマト検査キットの製造方法のフローチャートである。

【図6】実施の形態１に係るイムノクロマト検査キットの製造方法に用いられる塗布装置の斜視図である。

【図7】図６に示される塗布装置の塗布ユニットの正面図である。

【図8】図６に示される塗布装置の塗布ユニットの側面図である。

【図9】図６に示される塗布装置の塗布ユニットの動作を説明する正面図である。

【図10】図６に示される塗布装置の塗布ユニットの動作を説明する正面図である。

【図11】図２に示される検出部の変形例を示す部分拡大平面図である。

【図12】図２に示される検出部の他の変形例を示す部分拡大平面図である。

【図13】実施の形態２に係るイムノクロマト検査キットの検出部の部分拡大平面図である。

【図14】図１３に示される検出部の変形例を示す部分拡大平面図である。

【図15】図１３に示される検出部の他の変形例を示す部分拡大平面図である。

【図16】図１３に示される検出部のさらに他の変形例を示す部分拡大平面図である。

【図17】実施の形態３に係るイムノクロマト検査キットの斜視図である。

【図18】実施の形態４に係るイムノクロマト検査キットの斜視図である。

【図19】実施例１の検出部３を電子顕微鏡を用いて観察して得られた電子顕微鏡画像である。

【図20】実施例２の検出部３を電子顕微鏡を用いて観察して得られた電子顕微鏡画像である。

【図21】実施例２において、補助液が滴下される前の検出部３を電子顕微鏡を用いて観察して得られた電子顕微鏡画像である。

【図22】実施例２において、補助液が滴下された後の検出部３を電子顕微鏡を用いて観察して得られた電子顕微鏡画像である。

【発明を実施するための形態】

【0020】

以下、図面を参照して、本発明の一例としての実施の形態について説明する。なお、以下の図面においては、同一又は相当する部分に同一の参照番号を付し、その説明は繰り返さないものとする。

【0021】

（実施の形態１）
＜イムノクロマト検査キット＞
図１～図２に示されるように、実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００は、検体滴下部１、コンジュゲート部２、複数の検出部３を含む検出領域ｔ、コントロール部４を含むコントロール領域ｃ、および吸収部５を主に備える。図１および図２に示されるように、検体滴下部１、コンジュゲート部２、検出領域ｔ、コントロール領域ｃ、および吸収部５は、展開方向Ｄに沿って上記記載順に並んで配置されている。

【0022】

検体滴下部１は、検体が滴下される部分である。検体滴下部１は、例えばグラスファイバーパッド、セルロースファイバーパッド、およびポリエステルパッドなどの多孔質部材により形成されている。

【0023】

コンジュゲート部２は、検体中の検出対象物と結合する性質を有する標識抗体が固定されている部分である。標識抗体は、検出対象物の第１部分（第１エピトープ）を特異的に認識してこれと結合する抗体と標識物質との結合体である。抗体は、検出対象物に応じて任意に選択され得る。標識物質は、従来のイムノクロマトグラフィーに用いられる標識物質から任意に選択され得る。標識物質は、例えば、金属ナノ粒子（金属微粒子）、ラテックス微粒子、有機高分子微粒子、無機微粒子、および発色剤を包含したリポソームなどの発色微粒子からなる群から選択される少なくとも１つを含む。標識物質は、例えば、金属ナノ粒子として、金ナノ粒子、白金ナノ粒子、白金－金ナノ粒子、銀ナノ粒子などの貴金属ナノ粒子、チタンナノ粒子、鉄ナノ粒子、ニッケルナノ粒子、およびカドミウムナノ粒子からなる群から選択される少なくとも１つを含む。上記金属ナノ粒子は、粒径が１ｎｍ以上１００ｎｍ以下のコロイド状の金属ナノ粒子であってもよい。コンジュゲート部２は、例えば、標識抗体を含む懸濁液をグラスファイバーパッド、セルロースファイバーパッド、およびポリエステルパッドなどの多孔質部材に塗布した後、これを乾燥することにより、調整されている。

【0024】

検出領域ｔは、展開方向Ｄにおいて、コンジュゲート部２に対して検体滴下部１とは反対側に配置されている。検出領域ｔは、多孔質部材から成る担体６に形成されている。検出領域ｔは、複数の検出部３を含む。各検出部３は、コンジュゲート部２を介して検体滴下部１と接続されている。各検出部３は、展開方向Ｄにおいて、コンジュゲート部２に対して検体滴下部１とは反対側に配置されている。各検出部３は、検出対象物と結合する性質を有する捕捉抗体が固定されている部分である。捕捉抗体は、検出対象物のうち上記第１部分とは異なる第２部分（第２エピトープ）を特異的に認識してこれと結合する抗体である。異なる観点から言えば、捕捉抗体は、標識物質と結合している検査対象物と結合する性質を有する。捕捉抗体は、検出対象物に応じて任意に選択され得る。

【0025】

図２に示されるように、各検出部３の平面外形状は、ドット状である。各検出部３のドット幅は、目視により観察可能な最小の大きさ、または目視により観察不可能であって顕微鏡により観察可能な大きさである。各検出部３のドット幅は、例えば１ｍｍ未満である。好ましくは、各検出部３のドット幅は、標識抗体に結合する１μｍ以下の大きさの標識物質を直接観察可能な電子顕微鏡などの視野と同等である。各検出部３のドット幅は、例えば１００μｍ以下である。

【0026】

なお、検出部３の幅は、以下のようにして測定される。まず、十分な検出対象物を含む検体を検体滴下部１に滴下してイムノクロマト検査キット１００上で抗原抗体反応を発現させる。次に、後述する検査方法に従って検出部３の電子顕微鏡画像を取得する。なお、本実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００のように、検出部３が凹部７の底面７Ａを含む場合には、底面７Ａに焦点を合わせた上で取得された上記電子顕微鏡画像が用いられる。次に、該画像中において標識抗体が観察された領域の外形を検出部３の外形として特定する。次に、検出部３の外形の幅を測定する。図３に示されるように、標識抗体が観察された領域の外形線が内外に波打っている場合、画像処理によって上記外形線の外接円ＣＣの直径Ｄ１と、上記外形線の内接円ＩＣの直径Ｄ２とを算出し、直径Ｄ１と直径Ｄ２の中間値を検出部３の外形の幅と定義する。

【0027】

図２に示される各検出部３は、展開方向Ｄと交差（例えば直交）する方向に互いに間隔を空けて配置されている。各検出部３は、展開方向Ｄと交差（例えば直交）する方向に１次元的に配列されている。隣り合う２つの検出部３間の距離は、例えば１ｍｍ未満である。

【0028】

各検出部３の平面外形状は、ドット状である限りにおいて特に制限されないが、例えば円形状である。なお、各検出部３の平面外形状は、楕円形状、正方形状、または長方形状などであってもよい。

【0029】

図４に示されるように、担体６の検出領域ｔには、複数の凹部７が形成されている。各凹部７は、担体６の上面に対して凹んでいる。各凹部７は、底面７Ａと、底面７Ａと担体６の上面とを接続する壁面７Ｂとを有しており、上面６Ａの開口部と底面７Ａはドット状である。図４に示される断面において、底面７Ａと壁面７Ｂとは、鈍角を成している。言い換えると、図４に示される各凹部７の断面形状は、対向する壁面７Ｂ間の間隔が底面７Ａに近づくにつれて狭くなるような、テーパー形状を有しているが、上面６Ａの開口径と底面７Ａの直径は同等であっても良い。各凹部７の底面７Ａの幅は、目視観察で確認できる最小の大きさ、たとえば１ｍｍ未満である。好ましくは、各凹部７の底面７Ａの幅は、標識抗体に結合する１μｍ以下の大きさの標識物質を直接観察な電子顕微鏡などの視野と同等であることが望ましい。たとえば、各底面７Ａのドット幅は、１００μｍ以下である。各底面７Ａの深さは、電子顕微鏡の焦点深度よりも深い。各底面７Ａの深さは、例えば１０μｍ以上である。

【0030】

各底面７Ａの平面外形状は、例えば円形状である。なお、各底面７Ａの平面外形状は、楕円形状、正方形状、または長方形状などであってもよい。

【0031】

各検出部３は、各凹部７の底面７Ａを含んでいる。各検出部３は、担体６の各凹部７に形成されている。各検出部３および各凹部７は、例えば担体６に同時に形成される。検出部３および凹部７を担体６に同時に形成する方法は、後述するイムノクロマト検査キットの製造方法にて詳細に説明する。

【0032】

コントロール領域ｃは、展開方向Ｄにおいて、検出領域ｔに対してコンジュゲート部２とは反対側に配置されている。コントロール領域Ｃは、コントロール部４を含む。コントロール部４は、標識抗体と結合するコントロール抗体が固定されている部分である。コントロール部４の平面外形状は、任意の形状であればよく、例えばライン状である。

【0033】

コントロール部４は、担体６に形成されている。コントロール部４は、展開方向Ｄにおいて、検出部３に対してコンジュゲート部２とは反対側に配置されている。

【0034】

なお、図１及び図２では、説明の便宜上、検出領域ｔ及びコントロール領域ｃの各範囲を破線で示している。実際のイムノクロマト検査キットでは、例えば上記破線は表されていない。

【0035】

吸収部５は、展開後の余剰な検体等を吸収する部分である。吸収部５は、例えばグラスファイバーパッド、セルロースファイバーパッド、およびポリエステルパッドなどの多孔質部材により形成されている。吸収部５は、展開方向Ｄにおいて、コントロール領域ｃに対して検出領域ｔとは反対側に配置されている。

【0036】

担体６の平面外形状は、長方形状である。担体６は、展開方向Ｄに沿っている長手方向と、展開方向Ｄと直交する短手方向とを有している。担体６を構成する材料は、任意の多孔質材料であればよいが、例えばニトロセルロース、およびポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）の少なくともいずれかを含む。つまり、実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００では、複数の検出部３およびコントロール部４が、検体滴下部１、コンジュゲート部２、および吸収部５を構成する多孔質部材とは別体の多孔質部材上に形成されている。検体滴下部１を構成する多孔質部材は、例えばコンジュゲート部２を構成する多孔質部材と接着されている。コンジュゲート部２および吸収部５を構成する各多孔質部材は、例えば担体６を構成する各多孔質部材と接着されている。

【0037】

なお、検体滴下部１、コンジュゲート部２、検出部３、コントロール部４、吸収部５、および担体６は、図示しない基材（バッキングシートとも呼ばれる）上に、粘着剤または粘着シートを用いて固定されていてもよい。担体６は、基材上に形成された薄膜であってもよい。

【0038】

＜イムノクロマト検査キットを用いた検査方法＞
イムノクロマト検査キットを用いた検査方法では、電子顕微鏡を用いてイムノクロマト検査キット上での抗原抗体反応後の検出部３を観察する。以下、イムノクロマト検査キット上での抗原抗体反応について説明する。

【0039】

まず検体滴下部１に検体が滴下される。滴下された検体は、毛細管現象により、展開方向Ｄに沿って流動する。検体中の検出対象物は、コンジュゲート部２において標識抗体と結合する。検出対象物と標識抗体との結合体は、毛細管現象により、検出対象物と結合していない標識抗体とともに、展開方向Ｄに沿って移動する。標識抗体と結合した検出対象物は、検出部３において捕捉抗体と結合する。これにより、検出部３には、検出対象物と結合した標識抗体が集積される。検出部３における標識抗体に結合した標識物質を、電子顕微鏡を用いて直接観察する。さらに、検出対象物と結合していない標識抗体は、コントロール部４においてコントロール抗体と結合する。これにより、コントロール部４には、検出対象物と結合していない標識抗体が捕捉される。コントロール部４における標識抗体に結合した標識物質を、電子顕微鏡を用いて直接観察する。展開方向Ｄにおいてコントロール部４よりも下流側に流れた余剰の検体は、吸収部５に吸収される。

【0040】

イムノクロマト検査キットを用いた検査方法は、例えば以下の手順で行われる。
まず、検体滴下部１に検体を滴下後、指定時間経過した後、補助液を滴下する。

【0041】

補助液は、電子顕微鏡による測定条件において、画像の鮮明性に寄与する帯電と熱の発生を防ぐ導電性、および／または、重合して皮膜を形成する性質、を有している。補助液は、必須成分として、グリセリン及びグリセリン代替物；ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５などのポリソルベート類、及び、ポリソルベート類代替物から選ばれる少なくとも１種の化合物を含み、任意成分として、単糖類、二糖類、塩類、及び、緩衝液から選ばれる少なくとも１種の化合物を含む。

【0042】

次に、検出部３が電子顕微鏡を用いて観察される。具体的には、まず、担体６が電子顕微鏡のチャンバー内にセットされる。次に、担体６の上面を観察しながら、検出部３を探索する。イムノクロマト検査キット１００では、電子顕微鏡の顕微鏡画像（明視野画像）において、担体６の上面と底面７Ａとの間の距離に起因した焦点ずれが観察される。そこで、焦点ずれの有無を確認することにより顕微鏡画像中において凹部７を探索できるため、当該画像中において検出部３を容易に探索できる。その後、当該画像の焦点を底面７Ａに合わせることで、当該画像の焦点を検出部３に合わせることができる。次に、電子顕微鏡画像を撮影し、当該画像中の標識物質の数を測定する。電子顕微鏡画像中において、標識物質の輪郭は明確に識別され得るため、画像中の標識物質の数は計測され得る。計測された標識物質の数が予め定められた判定基準を超えていれば、検体中に検出対象物が存在する（すなわち「陽性」）と判定する。

【0043】

上記観察および測定は、例えば複数の検出部３に対して同様に行われる。この場合、各検出部３の同視野中の標識物質の数の、たとえば平均値、最大値、最小値などが算出され、これら算出された値の内のいずれか一つを評価値とし、その評価値が予め定められた判定基準を超えていれば、「陽性」と判定する。

【0044】

＜イムノクロマト検査キットの製造方法＞
次に、イムノクロマト検査キット１００の製造方法の一例について説明する。図５に示されるように、イムノクロマト検査キット１００の製造方法は、担体６を準備する工程（Ｓ１）と、準備された担体６に複数の検出部３を形成する工程（Ｓ２）とを備える。

【0045】

担体６を準備する工程では、コントロール部４が上面に形成されている担体６、またはコントロール部４が上面に形成されていない担体６が準備される。

【0046】

複数の検出部３を形成する工程では、捕捉抗体を先端部に保持している塗布針２１（図１０参照）を用いて、捕捉抗体が担体６の上面にドット状に塗布される。塗布針２１の先端部の直径（以下、先端径とよぶ）は１ｍｍ未満である。本工程では、塗布針２１を用いて担体６に凹部７が形成されると同時に、捕捉抗体が凹部７の底面７Ａに塗布される。つまり、捕捉抗体を先端部に保持している塗布針２１は、担体６の上面に接触した後に担体６にさらに押し込まれる。本工程では、図６～図１０に示される塗布装置が使用される。塗布装置の構成については、後述する。

【0047】

このようにして、複数の検出部３を含む担体６が形成される。この担体６にコントロール部４が形成されている場合、当該担体６にコンジュゲート部２および吸収部５が接続され、さらにコンジュゲート部２に検体滴下部１が接続されることにより、イムノクロマト検査キット１００が製造される。上記担体６にコントロール部４が形成されていない場合、当該担体６にコントロール部４を形成する。その後、当該担体にコンジュゲート部２および吸収部５が接続され、さらにコンジュゲート部２に検体滴下部１が接続されることにより、イムノクロマト検査キット１００が製造される。イムノクロマト検査キット１００の製造方法では、検体滴下部１、コンジュゲート部２、コントロール部４、および吸収部５の各々は、従来のイムノクロマト検査キットでのそれらと同様に形成され得る。

【0048】

＜塗布装置の構成＞
次に、イムノクロマト検査キット１００の製造方法において、複数の検出部３を形成するために用いられる塗布装置の一例について説明する。

【0049】

図６に示されるように、実施の形態１に係る塗布装置は、Ｘ軸テーブル１１、Ｙ軸テーブル１２、Ｚ軸テーブル１３、塗布機構１４、観察光学系１５、ＣＣＤカメラ１６、および制御部を主に備える。Ｘ軸テーブル１１、Ｙ軸テーブル１２、Ｚ軸テーブル１３、塗布機構１４、観察光学系１５、およびＣＣＤカメラ１６は、例えば処理室の内部に配置されている。制御部は、操作パネル１７、モニタ１８、制御用コンピュータ１９を含む。操作パネル１７、モニタ１８、制御用コンピュータ１９は、例えば処理室の外部に配置されている。

【0050】

Ｙ軸テーブル１２は、Ｙ軸方向に移動可能であり、かつ担体６を搭載可能である。例えば、Ｙ軸方向に沿って延びるガイドレールが、処理室の底部に固定されている。ガイドレールに沿って移動可能なガイド部がＹ軸テーブル１２の下面と連結されている。Ｙ軸テーブル１２の上部表面は、担体６を搭載する搭載面となっている。Ｙ軸テーブル１２をＸ軸方向に跨ぐ構造体が、処理室の底部に固定されている。

【0051】

Ｘ軸テーブル１１は、Ｙ軸テーブル１２をＸ軸方向に跨ぐように設置された構造体上に配置されている。Ｘ軸テーブル１１には、Ｚ軸テーブル１３が接続された移動体がＸ軸方向に移動可能に設置されている。移動体は、たとえばボールねじを用いてＸ軸方向に移動可能となっている。なお、Ｘ軸テーブル１１は上記構造体を介して処理室の底面に固定されている。そのため、上述したＹ軸テーブル１２は、Ｘ軸テーブル１１に対してＹ軸方向に移動可能となっている。

【0052】

Ｘ軸テーブル１１に接続された移動体には、上述のようにＺ軸テーブル１３が設置されている。Ｚ軸テーブル１３には、観察光学系１５および塗布機構１４が接続されている。観察光学系１５は担体６上の塗布位置を観察するためのものである。ＣＣＤカメラは、観察した画像を電気信号に変換する。Ｚ軸テーブル１３は、これらの観察光学系１５および塗布機構１４をＺ軸方向に移動可能に保持している。

【0053】

操作パネル１７、モニタ１８、制御用コンピュータ１９は、Ｙ軸テーブル１２、Ｘ軸テーブル１１、Ｚ軸テーブル１３、観察光学系１５および塗布機構１４を制御するために用いられる。操作パネル１７は、制御用コンピュータ１９への指令を入力するために用いられる。モニタ１８は、上述したＣＣＤカメラ１６で変換された画像データや、制御用コンピュータ１９からの出力データを表示する。

【0054】

＜塗布機構１４の構成＞
次に、図６に示した塗布機構１４の詳細な構成について説明する。図７および図８に示されるように、塗布機構１４は、サーボモータ４１、架台４２、カム４３、軸受４４、カム連結板４５、可動部４６、塗布針ホルダ２０、当該塗布針ホルダ２０に保持された塗布針２１と、塗布材料容器２２とを主に含んでいる。サーボモータ４１は、図６に示したＺ軸方向に沿った方向に回転軸が延びるように設置されている。サーボモータ４１は、架台４２に保持されている。サーボモータ４１の回転軸にはカム４３が接続されている。カム４３は、サーボモータ４１の回転軸を中心として回転可能になっている。

【0055】

カム４３は、サーボモータ４１の回転軸に接続された中心部と、当該中心部の一方端部に接続されたフランジ部とを含む。フランジ部の上部表面（サーボモータ４１側の表面）はカム面となっている。このカム面は、中心部の外周に沿って円環状に形成されているとともに、フランジ部の底面からの距離が変動するようにスロープ状に形成されている。具体的には、カム面は、フランジ部の底面からの距離が最も長い上端フラット領域と、フランジ部の底面からの距離が最も短い下端フラット領域と、上端フラット領域と下端フラット領域との間を接続するスロープ領域とを含む。上端フラット領域は、回転軸に対する周方向において下端フラット領域と間隔を空けて配置されている。

【0056】

軸受４４は、カム４３のカム面に接するように配置されている外輪と、カム連結板４５と接続されている内輪とを有している。図７に示すように、軸受４４は、カム４３から見て特定の方向（サーボモータ４１の右側）に配置されている。軸受４４は、後述するバネ５０によって、カム４３のカム面に付勢されている。そのため、カム４３が回転するときに、軸受４４は、外輪の外周面がカム面に接触した状態に保持される。カム連結板４５は、軸受４４の内輪と接続された一方端部と、可動部４６に固定された他方端部とを有している。可動部４６には、塗布針ホルダ固定部４７および塗布針ホルダ収納部４８が接続されている。

【0057】

架台４２には、固定ピン５１が設置されている。可動部４６には固定ピン５２が設置されている。バネ５０の一端が固定ピン５１に接続されており、かつバネ５０の他端が固定ピン５２に接続されている。バネ５０により、可動部４６は塗布材料容器２２側に向けた引張り力を受けた状態になっている。また、このバネ５０による引張り力は、可動部４６およびカム連結板４５を介して軸受４４に作用する。このバネ５０の引張り力によって、軸受４４はカム４３のカム面に押圧された状態を維持している。

【0058】

可動部４６、塗布針ホルダ固定部４７、塗布針ホルダ収納部４８は、上記架台４２に設置されたリニアガイド４９に接続されている。リニアガイド４９は、Ｚ軸方向に延びるように配置されている。そのため、可動部４６、塗布針ホルダ固定部４７、塗布針ホルダ収納部４８はＺ軸方向に沿って移動可能になっている。

【0059】

塗布針ホルダ２０は、塗布針ホルダ収納部４８に収納されている。塗布針ホルダ２０は塗布針２１を含む。塗布針２１は、塗布針ホルダ２０の下面において塗布針ホルダ２０から突出するように配置されている。塗布針２１の延在方向は、重力方向（図６中のＺ軸方向）に沿っている。塗布針２１の先端部の形状は、例えば円錐台形状である。塗布針２１の中心軸に対する径方向における先端径は、１ｍｍ未満である。好ましくは、塗布針２１の先端径は、１００μｍ以下である。

【0060】

塗布針ホルダ２０の下方には塗布材料容器２２が配置されている。塗布材料容器２２の内部には、塗布材料７０を貯留する空間が形成されている。図９および図１０に示されるように、塗布材料容器２２の底部および上部には、上記空間と外部とを接続している第１孔および第２孔が形成されている。第１孔および第２孔の形状は、任意の形状であればよいが、例えば円形状である。第１孔および第２孔は、塗布針２１の延在方向において重なるように設けられている。塗布材料７０は、捕捉抗体を含む。

【0061】

塗布針ホルダ２０および塗布針２１は、塗布針ホルダ収納部４８のＺ軸方向への移動に伴い、塗布材料容器２２に対して上下動する。これにより、塗布針２１の先端部が塗布材料容器２２内に貯留されている塗布材料７０内に浸漬された第１状態と、塗布材料容器２２の底部に形成された孔を通り塗布材料容器２２の底面から下向きに突出した第２状態とが、切り替えられる。

【0062】

＜塗布装置の動作＞
次に、イムノクロマト検査キットの製造方法の複数の検出部３を形成する工程での、塗布装置の動作について説明する。まず、担体６がＹ軸テーブル１２上に搭載される。次に、塗布針２１の先端部が塗布材料容器２２内に貯留されている塗布材料７０内に浸漬された上記第１状態とされる。次に、Ｘ軸テーブル１１およびＹ軸テーブル１２を動作させて、第１に検出部３を形成すべき領域が塗布機構１４の直下に配置されるように、担体６をＸ軸方向およびＹ軸方向に位置決めする。次に、Ｚ軸テーブル１３を動作させて、塗布針が上記第２状態とされたときに塗布針２１の先端部が担体６の上面よりも下方に押し込まれるように、Ｚ軸テーブル１３および塗布機構１４をＺ軸方向に距離ｄだけ下降させる。

【0063】

次に、塗布機構１４のサーボモータ４１を動作させて、上記第１状態から上記第２状態に切り替える。具体的には、サーボモータ４１を動作させることにより当該サーボモータ４１の回転軸を回転させてカム４３を回転させる。この結果、カム４３のカム面は、Ｚ軸方向における高さが変化するため、該カム面に接触している軸受４４のＺ軸方向における位置もサーボモータ４１の駆動軸の回転に応じて変動する。軸受４４のＺ軸方向での位置変動に応じて、可動部４６、塗布針ホルダ固定部４７、塗布針ホルダ収納部４８、および塗布針ホルダ収納部４８に保持されている塗布針ホルダ２０もＺ軸方向に移動する。その結果、サーボモータ４１を動作させることにより、塗布針２１がＺ軸方向に移動して、図９に示される第１状態と図１０に示される第２状態とが切り替えられる。上記塗布機構１４では、サーボモータ４１の回転運動を塗布針２１のＺ軸方向における運動（上下運動）に変換することができるため、塗布針２１を迅速かつ正確にＺ軸方向において移動させることができる。

【0064】

図９に示される第１状態では、塗布針２１は、その可動域において最も上方に配置される。このとき、塗布針２１の先端部は、塗布材料容器２２内に保持されている塗布材料７０内に浸漬されている。第１状態では、軸受４４の外輪がカム４３のカム面の上端フラット領域に接している。

【0065】

図１０に示される第２状態では、塗布針２１はその可動域において最も下方に配置される。このとき、塗布針２１の先端部には、捕捉抗体を含む塗布材料が保持されている。具体的には、塗布針２１の先端部の端面および側面には、捕捉抗体を含む塗布材料が保持されている。塗布針２１の先端部は、塗布材料容器２２の底部に形成された孔を通り塗布材料容器２２の底面から下向きに突出し、かつ担体６の上面よりも下方に押し込まれる。

【0066】

このように、サーボモータ４１を動作させて上記第１状態から上記第２状態に切り替えることにより、担体６に凹部７が形成されると同時に、捕捉抗体が凹部７の底面７Ａに塗布される。次に、サーボモータ４１を動作させて上記第２状態から上記第１状態に切り替える。

【0067】

さらに、Ｘ軸テーブル１１およびＹ軸テーブル１２のみを動作させて第２に検出部３を形成すべき領域を塗布機構１４の直下に配置した後、Ｚ軸テーブル１３を距離ｄだけ下降させた後、塗布機構１４のサーボモータ４１を動作させて上記第１状態から上記第２状態に切り替える。また、さらに上記第２状態から上記第１状態に切り替えた後、Ｚ軸テーブル１３を距離ｄだけ上昇させる。

【0068】

上記動作を連続して繰り返すことで、複数の検出部３が担体６の上面に形成される。
＜作用効果＞
実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００の作用効果を、従来のイムノクロマト検査キット（以下、単に比較例１とよぶ）との対比において説明する。比較例１は、検出部が平坦な平面上に形成されており、かつ標識抗体に由来する検出部での発色が目視にて確認されるように設けられている。そのため、比較例１では、目視判定で誤判定することのないよう十分な検出部の面積（例えば数ｍｍ^２以上）が必要であり、検出部に固定される高価な捕捉抗体の使用量を削減することは困難であった。その結果、比較例１では、製造コストの削減は困難であった。

【0069】

また、比較例１のように平坦な平面上に形成された検出部を微小化した場合、たとえば、顕微鏡などで検出部を拡大して標識抗体を確認する必要があるが、顕微鏡での微小な検出部を探索し、位置合わせすることは困難である。この対策として、キット上に目印を設け、そこから所定の距離に検出部を設ける方法が考えられる。しかしながら、この場合、目印を設ける設備が検出部を形成する設備とは別に必要になり、また工程も増えるため製造タクトを削減できず、低コスト化を図ることは難しい。

【0070】

これに対し、イムノクロマト検査キット１００では、担体６に複数の凹部７が形成されており、各検出部３は１つの凹部７の底面７Ａを含む。そのため、検出部３上の標識物質を電子顕微鏡を用いて直接確認する際に、担体６の上面と底面７Ａとの間の距離に起因した焦点ずれが電子顕微鏡の顕微鏡画像で確認できるため、この焦点ずれを利用して電子顕微鏡の顕微鏡画像中において凹部７を探索できる。その結果、イムノクロマト検査キット１００では、比較例１と比べて、各検出部３が微小化され得る。例えば、イムノクロマト検査キット１００では、各検出部３のドット幅は塗布針２１の先端径を小径化することで１ｍｍ未満にすることが可能である。つまり、イムノクロマト検査キット１００では、各検出部３の面積が比較例１の各検出部の面積と比べて小さくすることが可能なため、各検出部３に固定される捕捉抗体の量が比較例１の各検出部に固定される捕捉抗体の量と比べて削減できる。その結果、イムノクロマト検査キット１００の製造コストは、比較例１の製造コストと比べて削減することが可能である。

【0071】

また、イムノクロマト検査キット１００では、比較例１とは異なり、検出部３を探索する際に用いる目印を別途設ける必要がなく、目印を設ける設備を検出部を形成する設備とは別に用意する必要がない。さらに、イムノクロマト検査キット１００では、凹部７が検出部３と同時に形成され得るため、比較例１に目印を設ける場合と比べて、製造タクトを削減できる。

【0072】

さらに、当該画像の焦点を底面７Ａに合わせることで、当該画像の焦点を検出部３に容易に合わせることができる。つまり、イムノクロマト検査キット１００では、各検出部３が１つの凹部７の底面７Ａを含まない場合と比べて、検出部３の探索に要する時間を短縮できる。

【0073】

さらに、イムノクロマト検査キット１００によれば、検出部３を電子顕微鏡を用いて確認し、かつ電子顕微鏡画像中において検出部３に捕捉された標識抗体の数を計測することで、検体中の検出対象物を定量的に評価できる。

【0074】

上記イムノクロマト検査キット１００では、各検出部の幅を１００μｍ以下と微小な大きさにすることが可能である。このようなイムノクロマト検査キット１００では、各検出部３に固定される捕捉抗体の量が比較例１の各検出部に固定される捕捉抗体の量と比べて大幅に削減されるため、イムノクロマト検査キット１００の製造コストは比較例１の製造コストと比べて大幅に削減され得る。

【0075】

上記イムノクロマト検査キット１００は、複数の検出部３を備える。このようなイムノクロマト検査キット１００では、検出部３を１つのみ備えるイムノクロマト検査キットと比べて、複数の検出部３の標識物質を電子顕微鏡画像中において確認できるため、検査結果の信頼性が向上する。

【0076】

上記イムノクロマト検査キット１００において、複数の検出部３は、展開方向Ｄに対して１次元的に配列されている。このようなイムノクロマト検査キット１００では、複数の検出部３がランダムに配置されているイムノクロマト検査キットと比べて、検出対象物がすべての検出部３に効率よく流動して捕捉抗体と結合するため、安定した検査結果が得られる。

【0077】

上記イムノクロマト検査キット１００において、複数の検出部３のうち隣り合う２つの前記検出部間の最短距離は、１ｍｍ未満である。このようなイムノクロマト検査キット１００では、当該最短距離が１ｍｍ以上であるイムノクロマト検査キットと比べて、比較的小さい視野内にも複数の検出部３が観察され得るため、各検出部３が容易に探索され得る。

【0078】

実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００の製造方法の作用効果を、各検出部３をディスペンサを用いて形成する製法（以下、単に比較例２とよぶ）、および各検出部３をインクジェット方式により形成する製法（以下、単に比較例３とよぶ）との対比において説明する。

【0079】

比較例２，３では、微小な大きさで検出部３を形成するためには、ディスペンサまたはノズルの先端部の開口幅を小さくする必要がある。しかし、高粘度の塗布材料７０が用いられる場合、塗布材料７０を吐出することができず、目詰まりが発生する可能性がある。また、比較例３では、ピエゾ素子などを用いて瞬間的に容器内を高圧にして捕捉抗体を含む液体材料を吐出する方式では、吐出圧が高いために、該液体材料は担体６に着弾した時に拡がりやすく、検出部３の形状が安定しないなどの問題がある。

【0080】

これに対し、イムノクロマト検査キット１００の製造方法では、微小な検出部３を形成するためには、塗布針２１の先端径を小径化すればよいため、粘度によらず、比較例２、２のような目詰まりは発生しない。さらに上記製造方法では、担体６の上面に対する塗布針２１の先端部のＺ軸方向の位置を、Ｚ軸テーブル１３で精密に制御できるため、検出部３の大きさのばらつきを低減でき、イムノクロマト検査キット１００を安定的に製造できる。

【0081】

また、比較例２では、液滴を塗布するために、ドット幅が１ｍｍ未満の検出部３を安定的に形成すること、特にドット幅が１００μｍ未満の検出部３を安定的に形成すること、は困難である。

【0082】

これに対し、イムノクロマト検査キット１００の製造方法では、塗布針２１が用いられるため、各検出部３の平面外形状がドット状であり、かつ各検出部３の幅が１ｍｍ未満であるイムノクロマト検査キット１００を容易にかつ安定的に製造できる。

【0083】

さらに、イムノクロマト検査キット１００の製造方法では、塗布針２１を用いて担体６に凹部７が形成されると同時に、捕捉抗体が凹部７の底面７Ａに塗布されるため、１つの凹部７の底面７Ａを含む検出部３の形成と捕捉抗体の塗布を１回の動作で行える。このため、検出部３の形成に伴うタクトタイムの増加はなく、製造コストが増加することもない。

【0084】

＜変形例１＞
実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００は、以下のような変形例を採り得る。

【0085】

検出領域ｔは、少なくとも１つの検出部３を含んでいればよい。
イムノクロマト検査キット１００では、各検出部３が互いに同等の構成を備えているが、これに限られるものではない。イムノクロマト検査キット１００では、各検出部３に固定された捕捉抗体の濃度は一定であるが、各検出部３に固定された捕捉抗体の濃度は互いに異なっていてもよい。例えば、展開方向Ｄと直交する方向において、一方の側から他方の側に向かうにつれて、徐々に捕捉抗体の濃度が低下するように設けられていてもよい。また、捕捉抗体の濃度が互いに異なる複数の検出部３からなる１組のパターンが、並んで配置されていてもよい。このような複数の検出部３は、塗布材料容器２２に貯留された塗布材料中の捕捉抗体の濃度が互いに異なる複数の塗布機構１４を用いることにより、容易に形成され得る。

【0086】

また、各検出部３の平面外形状、各検出部３のドット幅、隣り合う２つの検出部３間の距離、各凹部７の底面７Ａの平面外形状、各底面７Ａの最大幅、および各底面７Ａの深さの少なくともいずれかが、異なっていてもよい。このような複数の検出部３は、複数種の塗布針２１を用いることによって、あるいは複数種の塗布条件を用いることによって、容易に形成され得る。

【0087】

イムノクロマト検査キット１００では、担体６の検出領域ｔに複数の凹部７が形成されており、かつ１つの検出部３が１つの凹部７の底面７Ａを含んでいるが、これに限られるものではない。

【0088】

各検出部３は、各凹部７の底面７Ａの全体と、壁面７Ｂの少なくとも一部とを含んでいてもよい。また、各検出部３は、各凹部７の底面７Ａおよび壁面７Ｂの全体を含んでいてもよい。また、各検出部３は、各凹部７の底面７Ａおよび壁面７Ｂの全体、ならびに担体６の上面のうち壁面７Ｂと連なる環状領域を含んでいてもよい。

【0089】

複数の検出部３は、図４に示される少なくとも１つの検出部３と、図１１に示される少なくとも１つの検出部３とを含んでいてもよい。図１１に示される複数の検出部３は、担体６の上面のみを含んでいる。このような検出部３は、上記製造方法において塗布針２１の先端または先端に付着した塗布材料７０が担体６の上面に接触した後、下方に押し込まれることなく上方に移動することにより、容易に形成され得る。

【0090】

図１２に示されるように、イムノクロマト検査キット１００では、複数の検出部３が展開方向Ｄに間隔を空けて配置されていてもよい。展開方向Ｄにおいて隣り合う２つの検出部３間の距離は、例えば展開方向Ｄと直交する方向において隣り合う２つの検出部３間の距離と等しい。

【0091】

イムノクロマト検査キット１００の製造方法では、複数の検出部３を形成するために１つの塗布針２１が用いられるが、複数の検出部３を形成するために複数の塗布針２１が用いられてもよい。言い換えると、塗布装置は、複数の塗布機構１４を備えていてもよい。

【0092】

また、塗布針２１による塗布材料７０の塗布工程における精度をより高めるために、塗布針２１のＺ軸方向への移動速度が、塗布針２１の位置に応じて変更されてもよい。例えば、上記第１状態から上記第２状態に切り替える際に、上記第２状態が実現される手前で塗布針２１の移動速度を低下させる。塗布針２１の移動速度の低下は、サーボモータ４１の回転速度を低下させることにより実現される。

【0093】

このような制御を行なうことにより、塗布針２１が担体６に接触するときには塗布針２１の移動速度が十分小さくなっているので、塗布針２１の先端または先端に付着した塗布材料７０と担体６との接触時間を長くすることができる。このため、担体６に塗布する捕捉抗体の量が増加し濃度を高めることができるため、検出対象物との抗原抗体反応をより安定させることができる。

【0094】

イムノクロマト検査キット１００において、検体滴下部１およびコンジュゲート部２は、担体６とは別体とされた単一の多孔質部材上に形成されていてもよい。イムノクロマト検査キット１００において、コンジュゲート部２は担体６上に形成されており、検体滴下部１は担体６とは別体とされた多孔質部材上に形成されていてもよい。イムノクロマト検査キット１００において、吸収部５は、担体６上に形成されていてもよい。

【0095】

（実施の形態２）
実施の形態２に係るイムノクロマト検査キット１０１は、実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００と基本的に同様の構成を備えかつ同様の効果を奏するが、図１３に示されるように複数の検出部３が第１検出部３Ａおよび第２検出部３Ｂを含む点で、イムノクロマト検査キット１００とは異なる。

【0096】

第１検出部３Ａには、第１種の検出対象物と結合する性質を有する第１捕捉抗体が固定されている。第２検出部３Ｂには、第１種の検出対象物とは異なる第２種の検出対象物と結合する性質を有する第２捕捉抗体が固定されている。

【0097】

図１３に示されるように、複数の検出部３は、例えば複数の第１検出部３Ａおよび複数の第２検出部３Ｂを含む。複数の第１検出部３Ａは、展開方向Ｄと直交する方向に互いに間隔を空けて配置されている。複数の第１検出部３Ａは、例えば１次元的に配列されている。複数の第２検出部３Ｂは、展開方向Ｄと直交する方向に互いに間隔を空けて配置されている。複数の第２検出部３Ｂは、例えば１次元的に配列されている。

【0098】

複数の第１検出部３Ａおよび複数の第２検出部３Ｂは、展開方向Ｄと直交する方向に間隔を空けて配置されている。第１検出部３Ａと第２検出部３Ｂとの間の最短距離は、隣り合う２つの第１検出部３Ａ間の最短距離、および隣り合う２つの第２検出部３Ｂ間の最短距離よりも長い。複数の第１検出部３Ａおよび複数の第２検出部３Ｂは、例えば全体として１次元的に配列されている。

【0099】

第１検出部３Ａおよび第２検出部３Ｂの各々は、実施の形態１における各検出部３と同様の構成を備えている。第１検出部３Ａのドット幅は、例えば第２検出部３Ｂのドット幅と等しい。なお、第１検出部３Ａのドット幅は、例えば第２検出部３Ｂのドット幅よりも狭くてもよいし、広くてもよい。

【0100】

検出領域ｔは、複数の第１検出部３Ａが配列されている領域が第１検出領域ｔ１と、複数の第２検出部３Ｂが配列されている領域が第２検出領域ｔ２とに区分される。第１検出領域ｔ１および第２検出領域ｔ２は、展開方向Ｄと直交する方向に並んで配置されている。

【0101】

各第１検出部３Ａは、各凹部７の底面７Ａを含む。各第２検出部３Ｂは、各凹部７の底面７Ａを含む。

【0102】

実施の形態２に係るイムノクロマト検査キット１０１によれば、単一の検体から、２種類の検出対象物をイムノクロマトグラフィーにより検出できる。

【0103】

イムノクロマト検査キット１０１は、実施の形態１に係るイムノクロマト検査キットと同様に製造され得る。好ましくは、上記塗布装置は、担体６に第１捕捉抗体を塗布することにより第１検出部３Ａを形成するための第１塗布機構１４と、担体６に第２捕捉抗体を塗布することにより第２検出部３Ｂを形成するための第２塗布機構１４とを備える。第１塗布機構１４は、第１塗布針２１と、第１捕捉抗体を含む塗布材料が貯留されている第１塗布材料容器２２とを含む。第２塗布機構１４は、第２塗布針２１と、第２捕捉抗体を含む塗布材料が貯留されている第２塗布材料容器２２とを含む。

【0104】

イムノクロマト検査キット１０１の製造方法において、第１塗布針２１は、その先端部に第１捕捉抗体を保持している。第２塗布針２１は、その先端部に第２捕捉抗体を保持している。複数の検出部３を形成する工程では、第１塗布針２１を用いて第１捕捉抗体を担体６の第１領域に塗布することにより、第１検出部３Ａが形成される。さらに、第２塗布針２１を用いて第２捕捉抗体を担体６の第２領域に塗布することにより、第２検出部３Ｂが形成される。

【0105】

このような塗布装置を用いてイムノクロマト検査キット１０１を製造することで、１つの塗布機構１４のみを備える１台の塗布装置を用いてイムノクロマト検査キット１０１を製造する場合と比べて製造工数を低減でき、また、１つの塗布機構１４のみを備える複数台の塗布装置を用いてイムノクロマト検査キット１０１を製造する場合と比べて製造コストを低減できる。

【0106】

＜変形例２＞
実施の形態２に係るイムノクロマト検査キット１０１も、実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００と同様の変形例を採り得る。

【0107】

さらに、イムノクロマト検査キット１０１は、以下のような変形例を採り得る。
複数の第１検出部３Ａおよび複数の第２検出部３Ｂの各々は、交互に並んで配置されていてもよい。

【0108】

図１４～図１６に示されるように、複数の検出部３は、第１検出部３Ａおよび第２検出部３Ｂに加え、複数の第３検出部３Ｃをさらに含んでいてもよい。各第３検出部３Ｃには、第１種の検出対象物および第２種の検出対象物とは異なる第３種の検出対象物と結合する性質を有する第３捕捉抗体が固定されている。

【0109】

図１４に示されるように、複数の第１検出部３Ａ、複数の第２検出部３Ｂ、および複数の第３検出部３Ｃの各々は、例えば展開方向Ｄと直交する方向において１個ずつ交互に並んで配置されている。

【0110】

図１５に示されるように、複数の第１検出部３Ａ、複数の第２検出部３Ｂ、および複数の第３検出部３Ｃの各々は、例えば展開方向Ｄと直交する方向において複数個ずつ交互に並んで配置されている。この場合、隣り合う２つの第１検出部３Ａ間の距離および隣り合う２つの第２検出部３Ｂ間の距離は、例えば隣り合う第１検出部３Ａと第２検出部３Ｂ間の距離よりも短い。隣り合う２つの第２検出部３Ｂ間の距離および隣り合う２つの第３検出部３Ｃ間の距離は、例えば隣り合う第２検出部３Ｂと第３検出部３Ｃ間の距離よりも短い。

【0111】

図１６に示されるように、複数の第１検出部３Ａ、複数の第２検出部３Ｂ、および複数の第３検出部３Ｃの各々は、例えば展開方向Ｄにおいて１次元的に配列されている。さらに複数の第１検出部３Ａ、複数の第２検出部３Ｂ、および複数の第３検出部３Ｃの各々は、展開方向Ｄと直交する方向において１個ずつ交互に並んで配置されている。展開方向Ｄと直交する方向において隣り合う第１検出部３Ａと第２検出部３Ｂ間の距離は、例えば展開方向Ｄにおいて隣り合う２つの第１検出部３Ａ間の距離および隣り合う２つの第２検出部３Ｂ間の距離よりも長い。展開方向Ｄと直交する方向において隣り合う第２検出部３Ｂと第３検出部３Ｃ間の距離は、例えば展開方向Ｄにおいて隣り合う２つの第２検出部３Ｂ間の距離および隣り合う２つの第３検出部３Ｃ間の距離よりも長い。

【0112】

図１４～図１６に示される変形例では、１組の第１検出部３Ａ、第２検出部３Ｂ、および第３検出部３Ｃにおいて、各検出部３の平面外形状、各検出部３のドット幅、隣り合う２つの検出部３間の距離、各凹部７の底面７Ａの平面外形状、各底面７Ａの最大幅、および各底面７Ａの深さの少なくともいずれかが、互いに異なっていてもよい。

【0113】

例えば、第２検出部３Ｂのドット幅は、第１検出部３Ａのドット幅より狭く、かつ第３検出部３Ｃのドット幅より広くてもよい。第２検出部３Ｂに含まれる底面７Ａの最大幅は、第１検出部３Ａに含まれる底面７Ａの最大幅より狭く、かつ第３検出部３Ｃに含まれる底面７Ａの最大幅より広くてもよい。

【0114】

第２検出部３Ｂの平面外形状が矩形状であって、第１検出部３Ａおよび第３検出部３Ｃの各検出部３の平面外形状が円形状であってもよい。

【0115】

第２検出部３Ｂに含まれる底面７Ａの深さは、第１検出部３Ａに含まれる底面７Ａの最大幅より浅く、かつ第３検出部３Ｃに含まれる底面７Ａの最大幅より深くてもよい。

【0116】

第１検出部３Ａと第２検出部３Ｂとの間の距離は、第２検出部３Ｂと第３検出部３Ｃとの間の距離、および第３検出部３Ｃと第１検出部３Ａとの間の距離より長くてもよい。

【0117】

このような第１検出部３Ａ、第２検出部３Ｂ、および第３検出部３Ｃは、複数種の塗布針２１を用いることによって、あるいは複数種の塗布条件を用いることによって、容易に形成され得る。

【0118】

このようにすれば、１つの視野内において、第１検出部３Ａ、第２検出部３Ｂ、および第３検出部３Ｃを容易に識別できる。

【0119】

（実施の形態３）
実施の形態３に係るイムノクロマト検査キット１０２は、実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００と基本的に同様の構成を備えかつ同様の効果を奏するが、検体滴下部１およびコンジュゲート部２が担体６に形成されている点で、イムノクロマト検査キット１００とは異なる。つまり、イムノクロマト検査キット１０２では、検体滴下部１、コンジュゲート部２、複数の検出部３、およびコントロール部４が、単一の多孔質部材（１つの担体６）の上面に形成されている。

【0120】

図１７に示されるイムノクロマト検査キット１０２では、吸収部５も、上記担体６に形成されている。

【0121】

検体滴下部１は、担体６において検体が滴下される領域であり、展開方向Ｄの一方の側に配置されている。コンジュゲート部２は、担体６の上面に標識抗体が塗布された領域であり、展開方向Ｄにおいて検体滴下部１と検出領域ｔとの間に配置されている。吸収部５は、担体６において余剰の検体が吸収される領域であり、コントロール領域Ｃに対して展開方向Ｄの他方の側に配置されている。

【0122】

イムノクロマト検査キット１０２によれば、イムノクロマト検査キット１００と比べて部品点数が削減されているため、イムノクロマト検査キット１０２の製造コストはイムノクロマト検査キット１００の製造コストと比べて削減され得る。

【0123】

＜変形例３＞
実施の形態３に係るイムノクロマト検査キット１０２も、実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００および実施の形態２に係るイムノクロマト検査キット１０１と同様の変形例を採り得る。

【0124】

（実施の形態４）
実施の形態４に係るイムノクロマト検査キット１０３は、実施の形態１に係るイムノクロマト検査キット１００と基本的に同様の構成を備えかつ同様の効果を奏するが、図１８に示されるように複数のイムノクロマト検査キット１００Ａ～１００Ｃが展開方向Ｄと直交する方向に連結された連結体として構成されている点で、イムノクロマト検査キット１００とは異なる。イムノクロマト検査キット１００Ａ～１００Ｃの各々の検出対象物は、互いに異なる。

【0125】

イムノクロマト検査キット１００Ａ～１００Ｃの各々は、任意の方法により互いに固定されていればよいが、例えば接着されている。

【0126】

実施の形態４に係るイムノクロマト検査キット１０３によれば、連結体として構成された１つのイムノクロマト検査キット１０３を用いて、３種類の検出対象物をイムノクロマトグラフィーにより検出できる。

【0127】

（実施例１）
本実施例では、イムノクロマト検査キット１００の検出部３の電子顕微鏡を用いて観察した結果について説明する。

【0128】

＜試料＞
担体６はニトロセルロースからなる多孔質部材とした。各検出部３は、先端部の形状が円錐台形状でありかつ先端径が５０μｍである塗布針２１を用いて、凹部７の底面７Ａを含むように形成された。

【0129】

＜観察方法＞
図１９は、上記試料の検出部３を顕微鏡を用いて観察することにより得られた顕微鏡画像である。

【0130】

図１９に示されるように、顕微鏡画像では凹部７に起因した焦点ずれにより、背景と検出部３との間に差異が生じるため、凹部７の底面７Ａを容易に探索でき、該底面７Ａを含む微小な検出部３を容易に探索できた。

【0131】

（実施例２）
本実施例では、イムノクロマト検査キット１００を用いてイムノクロマトグラフィーを行った結果について説明する。

【0132】

＜試料＞
検体滴下部１およびコンジュゲート部２は、グラスファイバーパッドとした。担体６はニトロセルロースからなる多孔質部材とした。各検出部３は、先端部の形状が円錐台形状でありかつ先端径が５０μｍである塗布針２１を用いて、凹部７の底面７Ａを含むように形成された。

【0133】

＜検査方法＞
検査方法は、上述したイムノクロマト検査キットの検査方法と同等とした。

【0134】

図２０は、上記試料の検出部３を電子顕微鏡を用いて観察することにより得られた電子顕微鏡画像である。

【0135】

図２０に示されるように、電子顕微鏡画像では凹部７に起因した明暗のコントラストが生じるため、凹部７の底面７Ａを容易に探索でき、該底面７Ａを含む微小な検出部３を容易に探索できた。

【0136】

また、図２１は、補助液が滴下される前の検出部３を観察した電子顕微鏡画像であり、図２２は、補助液が滴下された後の検出部３を観察した電子顕微鏡画像である。

【0137】

図２２に示される画像では、図２１に示される画像と比べて、像のエッジが明確であることが確認された。

【0138】

今回開示された実施の形態および実施例はすべての点で例示であって、制限的なものではないと考えられるべきである。本発明の範囲は上記した説明ではなく特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲と均等の意味、および範囲内でのすべての変更が含まれることが意図される。

【符号の説明】

【0139】

１ 検体滴下部、２ コンジュゲート部、３ 検出部、３Ａ 第１検出部、３Ｂ 第２検出部、３Ｃ 第３検出部、４ コントロール部、５ 吸収部、６ 担体、７ 凹部、７Ａ 底面、７Ｂ 壁面、１１ Ｘ軸テーブル、１２ Ｙ軸テーブル、１３ Ｚ軸テーブル、１４ 塗布機構、１５ 観察光学系、１６ カメラ、１７ 操作パネル、１８ モニタ、１９ 制御用コンピュータ、２０ 塗布針ホルダ、２１ 塗布針、２２ 塗布材料容器、４１ サーボモータ、４２ 架台、４３ カム、４４ 軸受、４５ カム連結板、４６ 可動部、４７ 塗布針ホルダ固定部、４８ 塗布針ホルダ収納部、４９ リニアガイド、５０ バネ、５１，５２ 固定ピン、７０ 塗布材料、１００，１００Ａ，１００Ｃ，１０１，１０２，１０３ イムノクロマト検査キット。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】