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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022075755
(43)【公開日】2022-05-18
(54)【発明の名称】ウイルス感染を治療するための方法および組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 31/7048 20060101AFI20220511BHJP
A61P 31/12 20060101ALI20220511BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20220511BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220511BHJP
A61K 31/19 20060101ALI20220511BHJP
A61K 36/24 20060101ALI20220511BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20220511BHJP
【ＦＩ】
A61K31/7048
A61P31/12
A61P31/14
A61P43/00 121
A61K31/19
A61K36/24
A61K9/08
A61P43/00 123
【審査請求】有
【請求項の数】16
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2022033642
(22)【出願日】2022-03-04
(62)【分割の表示】P 2021000190の分割
【原出願日】2018-07-16
(31)【優先権主張番号】62/698,365
(32)【優先日】2018-07-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】PCT/US2017/051553
(32)【優先日】2017-09-14
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】508025518
【氏名又は名称】フェニックス・バイオテクノロジー・インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100094569
【弁理士】
【氏名又は名称】田中 伸一郎
(74)【代理人】
【識別番号】100103610
【弁理士】
【氏名又は名称】▲吉▼田 和彦
(74)【代理人】
【識別番号】100109070
【弁理士】
【氏名又は名称】須田 洋之
(74)【代理人】
【識別番号】100119013
【弁理士】
【氏名又は名称】山崎 一夫
(74)【代理人】
【識別番号】100123777
【弁理士】
【氏名又は名称】市川 さつき
(74)【代理人】
【識別番号】100111796
【弁理士】
【氏名又は名称】服部 博信
(72)【発明者】
【氏名】ニューマン ロバート エイ
(72)【発明者】
【氏名】アディントン オーティス シー
(57)【要約】
【課題】フィロウイルス科、フラビウイルス科、またはトガビリアデ科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染などのウイルス感染を治療する方法が提供される。
【解決手段】少なくとも１つの強心配糖体を有する組成物が、ウイルス感染を治療するために使用される。組成物は、少なくとも１つのトリテルペンをさらに含み得る。
【選択図】図１３Ｂ
【解決手段】少なくとも１つの強心配糖体を有する組成物が、ウイルス感染を治療するために使用される。組成物は、少なくとも１つのトリテルペンをさらに含み得る。
【選択図】図１３Ｂ
【特許請求の範囲】
【請求項1】
フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染の治療をそれを必要とする対象において治療する方法であって、ａ）オレアンドリンもしくはジゴキシンから選択される強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項2】
フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染に罹るリスクのある対象を治療する予防方法であって、前記対象が前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に慢性的に投与し、それによって前記対象が前記ウイルス感染に罹ることを予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、ａ）オレアンドリンもしくはジゴキシンから選択される強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む、予防方法。
【請求項3】
フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染の治療をそれを必要とする対象において治療する方法であって、
前記対象が、フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
ａ）強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を前記対象に投与することと、
前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
前記対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
前記対象の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、方法。
前記対象が、フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
ａ）強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を前記対象に投与することと、
前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
前記対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
前記対象の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、方法。
【請求項4】
前記強心配糖体が、オレアンドリンである、請求項１に記載の方法。
【請求項5】
前記複数のトリテルペンが、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）からなる群から選択される少なくとも２つのトリテルペンである、請求項１に記載の方法。
【請求項6】
前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項7】
前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項8】
前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項9】
前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項10】
前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項11】
前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項12】
前記ウイルス感染が、フィロウイルス感染、エボラウイルス感染、およびマールブルグウイルス感染からなる群から選択される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項13】
前記ウイルス感染が、フラビウイルス感染、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、オムスク出血熱、およびポワッサンウイルス感染からなる群から選択される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項14】
前記ウイルス感染が、アルパハウイルス感染、ベネズエラウマ脳炎ウイルス感染、西部ウマ脳炎ウイルス感染、チクングニアウイルス感染、および東部ウマ脳炎ウイルスからなる群から選択される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項15】
前記ウイルス感染が、ヘニパウイルス感染、ヘンドラウイルス感染、およびニパウイルス感染からなる群から選択される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項16】
前記対象の血液または血漿中のウイルス力価が、前記治療の結果として低減されるかまたは増加しない、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項17】
１回以上の用量が、毎日、毎週、または毎月の頻度で投与される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項18】
前記投与が、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、口腔投与、またはそれらの組み合わせである、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項19】
前記１つ以上の強心配糖体が、純粋な形態で、または前記強心配糖体を含む抽出物の一部として存在する、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項20】
前記抗ウイルス組成物が、水溶性（または水混和性）共溶媒、水不溶性（水非混和性）共溶媒、抗酸化剤、および界面活性剤からなる群から選択される少なくとも１つの薬学的賦形剤をさらに含む、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項21】
前記少なくとも１つの水混和性溶媒、少なくとも１つの抗酸化剤、および少なくとも１つの可溶化剤が存在する、請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
対象におけるフィロウイルス感染またはフラビウイルス感染の治療のための医薬品の製造における、本明細書に記載される１つ以上の抗ウイルス組成物の使用。
【請求項23】
ウイルス感染の治療における、本明細書に記載される１つ以上の抗ウイルス組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、哺乳動物におけるフラビウイルス感染、トガウイルス感染、またはフィロウイルス感染を治療するための抗ウイルス組成物およびその使用に関する。いくつかの実施形態は、出血性ウイルス感染の治療に関する。
【背景技術】
【0002】
Ｎｅｒｉｕｍ種のメンバーであるＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒは、亜熱帯アジア、米国南西部、および地中海に広く分布する観賞植物である。その医学的および毒物学的特性は、長い間認識されてきた。例えば、痔疾、潰瘍、ハンセン病、ヘビ咬傷、癌、腫瘍、神経障害、細胞増殖性疾患の治療での使用が提案されている。
【0003】
Ｎｅｒｉｕｍ種の植物からの構成成分の抽出は、伝統的に、沸騰水、冷水、または有機溶媒を使用して実施されている。
【0004】
市販のＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）（ＯｚｅｌのＵＳ５，１３５，７４５）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物の濃縮形態または粉末形態を含む。Ｍｕｌｌｅｒら（Ｐｈａｒｍａｚｉｅ．（１９９１）Ｓｅｐｔ．４６（９），６５７－６６３）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの水抽出物の分析に関する結果を開示している。それらは、存在する多糖類が主にガラクツロン酸であることを報告している。他の糖類には、ラムノース、アラビノース、およびガラクトースが含まれる。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物内の多糖類含有量および多糖類の個々の糖組成物もまた、Ｎｅｗｍａｎら（Ｊ．Ｈｅｒｂａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，（２００１）ｖｏｌ１，ｐｐ．１－１６）によって報告されている。Ｓｅｌｖａｒａｊらの米国特許第５，８６９，０６０号は、Ｎｅｒｉｕｍ種の抽出物および生成の方法に関する。抽出物を調製するために、植物材料を水に入れて沸騰させる。次いで、粗抽出物を植物から分離し、濾過によって滅菌する。次いで、得られた抽出物は、凍結乾燥され、粉末を生成することができる。米国特許第６，５６５，８９７号（米国登録前第２００２０１１４８５２号およびＳｅｌｖａｒａｊらのＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０００／０１６７９３号）は、実質的に減菌の抽出物の調製のための熱水抽出プロセスを開示している。
【0005】
Ｅｒｄｅｍｏｇｌｕら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００３）Ｎｏｖ．８９（１），１２３－１２９）は、抗侵害受容作用および抗炎症作用に基づいて、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒを含む植物の水性抽出物およびエタノール抽出物の比較結果を開示している。
【0006】
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの有機溶媒抽出物もまた、Ａｄｏｍｅら（Ａｆｒ．Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉ．（２００３）Ａｕｇ．３（２），７７－８６；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、ｅｌ－Ｓｈａｚｌｙら（Ｊ．Ｅｇｙｐｔ Ｓｏｃ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．（１９９６），Ａｕｇ．２６（２），４６１－４７３；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｂｅｇｕｍら（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９９）Ｆｅｂ．５０（３），４３５－４３８；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｚｉａら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｌｐｈａｒｍａｃｏｌ．（１９９５）Ｎｏｖ．４９（１），３３－３９；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、およびＶｌａｓｅｎｋｏら（Ｆａｒｍａｔｓｉｉａ．（１９７２）Ｓｅｐｔ．－Ｏｃｔ．２１（５），４６－４７；ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）によって開示される。
【0007】
Ｎｅｒｉｕｍ種の超臨界流体抽出物が既知であり（ＵＳ８３９４４３４、ＵＳ８１８７６４４、ＵＳ７４０２３２５）、神経障害（ＵＳ８４８１０８６、ＵＳ９２２０７７８、ＵＳ９３５８２９３、ＵＳ２０１６／０２４３１４３Ａ１）および細胞増殖性障害（ＵＳ８３６７３６３）を治療することにおいて有効性が示されている。
【0008】
トリテルペンは、幅広い様々な治療活性を有することが知られている。既知のトリテルペンのいくつかには、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、バルドキソロン、マスリン酸などが含まれる。トリテルペンの治療活性は、トリテルペンの組み合わせとしてではなく、主に個別に評価されている。
【0009】
オレアノール酸は、バルドキソロンなどの化合物に代表されるトリテルペノイドのクラスに属し、それは、転写因子Ｎｒｆ２の活性化が抗酸化転写応答要素（ＡＲＥ）を含む下流の抗酸化遺伝子のプログラムの転写増加につながる自然細胞相２解毒経路の強力な活性化因子であることが示されている。バルドキソロン自体は、炎症状態の臨床試験で広く調査されているが、しかしながら、高められた濃度のバルドキソロンを含むある特定のトリテルペノイドの既知の細胞毒性に関連している可能性がある有害事象のため、慢性腎臓疾患の第３相臨床試験は終了した。
【0010】
他の治療成分と組み合わせてトリテルペンを含む組成物は、植物抽出物として見出される。Ｆｕｍｉｋｏら（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ（２００２），２５（１１），１４８５－１４８７）は、トリパノソーマ症を治療するためのＲｏｓｍａｒｉｍｕｓ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．のメタノール抽出物の評価を開示している。Ａｄｄｉｎｇｔｏｎら（ＵＳ８４８１０８６、ＵＳ９２２０７７８、ＵＳ９３５８２９３、ＵＳ２０１６／０２４３１４３Ａ１）は、神経学的状態の治療のためのオレアンドリンおよびトリテルペンを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの超臨界流体抽出物（ＳＣＦ；ＰＢＩ－０５２０４）を開示している。Ａｄｄｉｎｇｔｏｎら（ＵＳ９０１１９３７、ＵＳ２０１５／０２８３１９１Ａ１）は、神経学的状態の治療のためのオレアンドリンおよびトリテルペンを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのＳＣＦ抽出物のトリテルペン含有画分（ＰＢＩ－０４７１１）を開示している。Ｊａｇｅｒら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２００９），１４，２０１６－２０３１）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含む様々な植物抽出物を開示している。Ｍｉｓｈｒａら（ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ２０１６ ２５；１１（７）：ｅ０１５９４３０．Ｅｐｕｂ ２０１６ Ｊｕｌ ２５）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＢｅｔｕｌａ ｕｔｉｌｉｓ樹皮の抽出物を開示している。Ｗａｎｇら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１６），２１，１３９）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＡｌｓｔｏｎｉａ ｓｃｈｏｌａｒｉｓの抽出物を開示している。Ｌ．ｅ Ｓｉｌｖａら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１２），１７，１２１９７）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｒｉｏｐｅ ｂｌａｎｃｈｅｔｔｉの抽出物を開示している。Ｒｕｉら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．（２０１２），１３，７６４８－７６６２）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｕｃａｐｌｙｐｔｕｓ ｇｌｏｂｕｌｕｓの抽出物を開示している。Ａｙａｔｏｌｌａｈｉら（Ｉｒａｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（２０１１），１０（２），２８７－２９４）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｕｐｈｏｒｂｉａ ｍｉｃｒｏｓｃｉａｄｉａの抽出物を開示している。Ｗｕら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１１），１６，１－１５）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＬｉｇｕｓｔｒｕｍ種の抽出物を開示している。Ｌｅｅら（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ（２０１０），３３（２），３３０）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＦｏｒｓｙｔｈｉａ ｖｉｒｉｄｉｓｓｉｍａの抽出物を開示している。
【0011】
オレアノール酸（ＯまたはＯＡ）、ウルソール酸（ＵまたはＵＡ）、およびベツリン酸（ＢまたはＢＡ）は、ＰＢＩ－０５２０４（ＰＢＩ－２３；Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの超臨界流体抽出物）およびＰＢＩ－０４７１１（ＰＢＩ－０５２０４のトリテルペン含有画分０～４）に見出される３つの主要なトリテルペン構成成分である。発明者ら（本発明者のうちの２名）は、同様の濃度で脳スライス酸素グルコース欠乏（ＯＧＤ）モデルアッセイにおいてそれらの神経保護活性を比較することによる有効性に向けたトリテルペンの寄与について、以前に報告した（Ｖａｎ ＫａｎｅｇａｎらのＮａｔｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ（Ｍａｙ ２０１６），６：２５６２６．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｒｅｐ２５６２６）。ＰＢＩ－０５２０４（ＰＢＩ）およびＰＢＩ－０４７１１（画分０～４）は、神経保護活性を提供することを見出した。
【0012】
Ｎｅｒｉｕｍ種の抽出物は、強心配糖体、グリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類などの多数の異なるクラスの化合物を含むことが知られている。特定の化合物には、オレアンドリン；ネリタロシド；オドロシド；オレアノール酸；ウルソール酸；ベツリン酸；オレアンドリゲニン（ｏｌｅａｎｄｒｉｇｅｎｉｎ）；オレアシドＡ；ベツリン（ウルス－１２－エン－３－β，２８－ジオール）；２８－ノルウルス－１２－エン－３－β－オール；ウルス－１２－エン－３β－オール；３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－オイック酸；３β，２０α－ジヒドロキシウルス－２１－エン－３８－オイック酸；３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－３８－オイック酸；３β，１３β－ジヒドロキシウルス－１１－エン－２８－オイック酸；３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド；３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－オイック酸；およびその他の構成成分が挙げられる。
【0013】
ウイルス性出血熱（ＶＨＦ）は、アレナウイルス科、ブニヤウイルス科、フィロウイルス科、フラビウイルス科、およびパラミクソウイルス科の５つの異なるウイルス科によって引き起こされ得る。フィロウイルス、例えば、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）およびマールブルグウイルス（ＭＡＲＶ）は、人間に知られている最も病原性の高いウイルスであり、致死率が最大９０％のウイルス性出血熱の発生の原因物質である。各ビリオンは、一本鎖マイナスセンスＲＮＡの１つの分子を含む。支持療法または対症療法以外に、ＥＢＯＶ（エボバルウイルス）およびＭＡＲＶ（マールブルグウイルス）感染、すなわちフィロウイルス感染の治療に利用可能な市販の治療効果のある薬物および予防薬は存在しない。５つの種のエボラウイルスが特定されている：タイフォレスト（以前のコートジボワール）、スーダン、ザイール、レストン、およびブンディブギョ。
【0014】
フラビウイルスは、陽性の一本鎖エンベロープＲＮＡウイルスである。それらは、節足動物、主にダニおよび蚊に見出され、世界中で広範囲の罹患率および死亡率を引き起こす。蚊が媒介するウイルスのいくつかには、黄熱病、デング熱、日本腎炎、西ナイルウイルス、およびジカウイルスが含まれる。ダニ媒介性ウイルス感染には、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、オムスク出血熱が含まれる。出血性感染ではないが、ポワッサンウイルスはフラビウイルスである。
【0015】
オレアンドリンは、抗ＨＩＶ活性を示したが、多くのウイルスに対して評価されていない。トリテルペンのオレアノール酸、ベツリン酸、およびウルソール酸は、異なるレベルの抗ウイルス活性を示すことが報告されているが、多くのウイルスに対して評価されていない。ベツリン酸は、ＨＳＶ－１株１Ｃ、インフルエンザＡ Ｈ７Ｎ１、ＥＣＨＯ ６、およびＨＩＶ－１に対するいくつかの抗ウイルス活性を示している。オレアノール酸は、ＨＩＶ－１、ＨＥＰ Ｃ、およびＨＣＶ Ｈ株ＮＳ５Ｂに対していくつかの抗ウイルス活性を示している。ウルソール酸は、ＨＩＶ－１、ＨＥＰ Ｃ、ＨＣＶ Ｈ株ＮＳ５Ｂ、ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２、ＡＤＶ－３、ＡＤＶ－８、ＡＤＶ－１１、ＨＥＰ Ｂ、ＥＮＴＶ ＣＶＢ１、およびＥＮＴＶ ＥＶ７１に対していくつかの抗ウイルス活性を示している。オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸の抗ウイルス活性は、特定のウイルスに対する有効性に関しては予測不可能である。オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、および／またはベツリン酸が抗ウイルス活性をほとんどまたはまったく有さないウイルスが存在し、それはオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、および／またはベツリン酸が特定の属のウイルスに対して抗ウイルス活性を示すかどうかを先験的に予測できないことを意味する。
【0016】
Ｂａｒｒｏｗｓら（Ｃｅｌｌ Ｈｏｓｔ Ｍｉｃｒｏｂｅ（２０１６），２０，２５９－２７０の“Ａ ｓｃｒｅｅｎ ｏｆ ＦＤＡ－ａｐｐｒｏｖｅｄ ｄｒｕｇｓ ｆｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｚｉｋａｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）は、ジゴキシンがジカウイルスに対する抗ウイルス活性を示すが、用量が高すぎて毒性がある可能性が高いことを報告している。Ｃｈｅｕｎｇら（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．（２０１４）１１１，９３－９９の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌａｎａｔｏｓｉｄｅ Ｃ ａｇａｉｎｓｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）は、ラナトシドＣがデングウイルスに対する抗ウイルス活性を示すことを報告している。
【0017】
強心配糖体は、いくつかのウイルスに対していくつかの抗ウイルス活性を示すことが示されているが、特定の化合物は、異なるウイルスに対して非常に異なるレベルの抗ウイルス活性を示し、それは、いくつかは非常に乏しい抗ウイルス活性を示し、いくつかは同じウイルスに対して高められたときにより良好な抗ウイルス活性を示すことを意味する。
【0018】
特定のウイルス感染に対して治療的に活性なオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、またはそれらの任意の組み合わせを含む改善された薬学的組成物の必要性が残っている。
【発明の概要】
【0019】
本発明は、哺乳動物対象のウイルス感染を治療するための薬学的組成物および方法を提供する。本発明はまた、哺乳動物対象におけるウイルス感染、例えば、ウイルス性出血熱（ＶＨＦ）感染を治療するための薬学的組成物および方法を提供する。本発明はまた、薬学的組成物の投与により哺乳動物のウイルス感染を治療する方法を提供する。本発明者らは、ヒトおよび動物におけるウイルス感染の治療におけるそれらの使用を正当化するのに十分な抗ウイルス活性を示す抗ウイルス組成物を調製することに成功した。本発明者らは、特定の投与計画を用いる対応する治療方法を開発した。
【0020】
いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、以下のウイルス科のいずれかによって引き起こされる：アレナウイルス、ブニヤウイルス、フィロウイルス、フラビウイルス、パラミクソウイルス、またはトガウイルス。
【0021】
本発明のいくつかの実施形態は、フィロウイルス感染、フラビウイルス感染、ヘニパウイルス感染、アルファウイルス感染、またはトガウイルス感染を治療するための組成物および方法を対象とする。治療され得るウイルス感染には、少なくとも、エボラウイルス、マールブルグウイルス、アルファウイルス、フラビウイルス、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ベネズエラウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＶＥＥ）ウイルス、チクングニアウイルス、西部ウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＷＥＥ）ウイルス、東部ウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＥＥＥ）ウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ病、オムスク出血熱、ヘンドラウイルス、ニパウイルス、およびそれらの種が挙げられる。
【0022】
本発明のいくつかの実施形態は、フィロウイルス科、フラビウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスからのウイルス感染を治療するための組成物および方法を対象とする。
【0023】
本発明のいくつかの実施形態は、ヘニパウイルス属、エボラウイルス属、フラビウイルス属、マールブルグウイルス属、またはアルファウイルス属のウイルスからのウイルス感染を治療するための組成物および方法を対象とする。
【0024】
いくつかの実施形態では、本発明は、ａ）特定の強心配糖体（複数可）、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）特定の強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む（から本質的になる）抗ウイルス組成物を提供する。
【0025】
本発明の一態様は、抗ウイルス組成物の対象への慢性投与により対象のウイルス感染を治療する方法を提供する。対象は、治療有効量（治療関連用量）の組成物を対象に慢性投与し、それにより、ウイルス感染に関連する症状の緩和またはウイルス感染の改善を提供することによって治療される。対象への組成物の投与は、感染直後、または感染後１日から５日以内の任意の時間、またはウイルス感染の確定診断後の最も早い時間に開始することができる。
【0026】
したがって、本発明はまた、哺乳動物のウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、哺乳動物に１つ以上の治療有効用量の抗ウイルス組成物を投与することを含む。１回以上の用量は、毎日、毎週、または毎月の頻度で投与される。１日あたり１回以上の用量が投与され得る。
【0027】
本発明はまた、治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、
対象がウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を対象に投与することと、
抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
対象の臨床応答および／または治療応答が初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、用量を漸増または漸減させることと、を含む。
対象がウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を対象に投与することと、
抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
対象の臨床応答および／または治療応答が初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、用量を漸増または漸減させることと、を含む。
【0028】
抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続される。患者が、ウイルス感染に関連する特定の症状の低減または緩和などの所望の臨床的エンドポイント（複数可）に達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。臨床応答および／または治療応答の妥当性の判定は、ウイルス感染に精通した臨床医によって行われ得る。
【0029】
本発明の方法の個々のステップは、別々の施設で、または同じ施設内で行うことができる。
【0030】
抗ウイルス組成物は、慢性的に、すなわち、毎日、１日おき、２日おき、３日おき、４日おき、５日おき、６日おき、毎週、１週おき、２週おき、３週おき、毎月、隔月、半月毎、１ヶ月おき、２ヶ月おき、四半期毎、四半期おき、季節毎、三半期毎、季節毎、半年毎、および／または毎年などの繰り返しの頻度で投与され得る。１週間以上、１か月以上、１四半期以上、および／または１年以上の治療期間。有効用量の強心配糖体が１日に１回以上投与される。
【0031】
いくつかの実施形態では、対象に、１日あたり１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇの強心配糖体を投与する。いくつかの実施形態では、用量は、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、または１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇの強心配糖体を含む。強心配糖体の１日用量は、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、または０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇの強心配糖体／日の範囲であり得る。ＳＣＦ抽出物中に存在するオレアンドリンの推奨される１日用量は、一般に１日２回約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇ、または１日２回もしくは約１２時間毎に約０．９～５ｍｉｃｒｏｇである。用量は、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇ／日であり得る。最大耐容用量は、約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日、または約３０ｍｉｃｒｏｇ／日のオレアンドリンを含むｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物であり得、最小有効用量は、約０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、または約５ｍｉｃｒｏｇ／日であり得る。強心配糖体およびトリテルペンを含む好適な用量は、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日であり得る。
【0032】
抗ウイルス組成物は全身投与することができる。全身投与の様式には、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、または口腔が含まれる。組成物はまた、注射を介してまたは静脈内に投与することができる。
【0033】
抗ウイルス組成物中に存在する場合、強心配糖体は、オレアンドリンが好ましいが、オドロシド、ネリタロシド、またはオレアンドリゲニンもまた含むことができる。いくつかの実施形態では、組成物は、ａ）１つ以上のトリテルペ、ｂ）１つ以上のステロイド、ｃ）１つ以上のトリテルペン誘導体、ｄ）１つ以上のステロイド誘導体、またはｅ）それらの組み合わせをさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、強心配糖体、およびａ）２つもしくは３つのトリテルペン、ｂ）２つもしくは３つのトリテルペン誘導体、ｃ）２つもしくは３つのトリテルペン塩、またはｄ）それらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、トリテルペンは、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、およびそれらの塩または誘導体からなる群から選択される。
【0034】
本発明のいくつかの実施形態は、薬学的組成物が少なくとも１つの薬学的賦形剤および抗ウイルス組成物を含むものを含む。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、ａ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも１つのトリテルペン、ｂ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも２つのトリテルペン、ｃ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも３つのトリテルペン、ｄ）少なくとも２つのトリテルペンおよび強心配糖体を除く、ｅ）少なくとも３つのトリテルペンおよび強心配糖体を除く；またはｆ）少なくとも１つの強心配糖体、例えば、オレアンドリンを含む。本明細書で使用される場合、特に明記しない限り、トリテルペンおよび強心配糖体の一般用語はまた、その塩および誘導体も包含する。
【0035】
強心配糖体は、純粋な形態で、または１つ以上の強心配糖体を含む抽出物の一部として薬学的組成物中に存在し得る。トリテルペン（複数可）は、純粋な形態で、またはトリテルペン（複数可）を含む抽出物の一部として薬学的組成物中に存在し得る。いくつかの実施形態では、強心配糖体は、薬学的組成物中、主要な治療成分として存在し、抗ウイルス活性に主に関与する構成成分を意味する。いくつかの実施形態では、トリテルペン（複数可）は、薬学的組成物中、腫瘍な治療成分（複数可）として存在し、抗ウイルス活性に主に関与する構成成分（複数可）を意味する。
【0036】
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物を含む抽出物は、植物材料の抽出により得られる。抽出物は、植物材料の熱水抽出物、冷水抽出物、超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物、有機溶媒抽出物、またはそれらの組み合わせを含むことができる。いくつかの実施形態では、植物材料は、Ｎｅｒｉｕｍ種またはＴｈｅｖｅｔｉａ種の植物塊である。特定の種には、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒまたはＴｈｅｖｅｔｉａ ｎｅｒｉｆｏｌｉａが含まれる。いくつかの実施形態では、抽出物は、抽出物が対象に投与されたとき、強心配糖体の治療有効性に寄与する、抽出中に強心配糖体とともに得られる少なくとも１つの他の薬理学的に活性な薬剤を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の他の非強心配糖体の治療上有効な薬剤、すなわち、強心配糖体ではない１つ以上の薬剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の抗ウイルス化合物（複数可）をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、薬理学的に活性な多糖類を除外する。
【0037】
いくつかの実施形態では、抽出物は、１つ以上の強心配糖体および１つ以上の強心配糖体前駆体（カルデノリド、カルダジエノリド、およびカルダトリエノリドなど、それらの全てが強心配糖体のアグリコン構成物質、例えば、ジギトキシン、アセチルジギトキシン、ジギトキシゲニン、ジゴキシン、アセチルジゴキシン、ジゴキシゲニン、メジゴキシン、ストロファンチン、シマリン、ウアベイン、またはストロファンチジンである）を含む。抽出物は、強心配糖体前駆体として、強心配糖体の１つ以上のグリコン構成物質（グルコシド、フルクトシド、および／またはグルクロニドなど）をさらに含み得る。したがって、抗ウイルス組成物は、１つ以上の強心配糖体、ならびに１つ以上のアグリコン構成物質、および１つ以上のグリコン構成物質からなる群から選択される２つ以上の強心配糖体前駆体を含み得る。
【0038】
いくつかの実施形態では、オレアンドリン（ＯＬ）、オレアノール酸（ＯＡ）、ウルソール酸（ＵＡ）、およびベツリン酸（ＢＡ）を含む組成物は、オレアンドリン含有量に基づく同等の用量を比較すると、純粋なオレアンドリンよりも有効である。
【0039】
いくつかの実施形態では、総トリテルペン含有量（ＯＡ＋ＵＡ＋ＢＡ）対オレアンドリンのモル比は、約１５：１～約５：１、または約１２：１～約８：１、または約１００：１～約１５：１、または約１００：１～約５０：１、または約１００：１～約７５：１、または約１００：１～約８０：１、または約１００：１～約９０：１、または約１０：１の範囲である。
【0040】
いくつかの実施形態では、個々のトリテルペン対オレアンドリンのモル比は、以下の範囲である：２～８（ＯＡ）：２～８（ＵＡ）：０．１～１（ＢＡ）：０．５～１．５（ＯＬ）；または３～６（ＯＡ）：３～６（ＵＡ）：０．３～８（ＢＡ）：０．７～１．２（ＯＬ）；または４～５（ＯＡ）：４～５（ＵＡ）：０．４～０．７（ＢＡ）：０．９～１．１（ＯＬ）；または４．６（ＯＡ）：４．４（ＵＡ）：０．６（ＢＡ）：１（ＯＬ）。
【0041】
いくつかの実施形態では、他の治療薬は、抽出物の調製中に得られる多糖ではなく、それは酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンではないことを意味する。いくつかの実施形態では、抽出物は、別の治療薬を除外および／または抽出物の調製中に得られる酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンを除外する。
【0042】
本発明はまた、対象におけるウイルス感染の治療のための医薬品の製造における強心配糖体の使用を提供する。いくつかの実施形態では、そのような医薬品の製造は、本発明の１つ以上の抗ウイルス化合物を提供することと、薬学的剤形の抗ウイルス化合物（複数可）の用量を含むことと、薬学的剤形をパッケージすることとを含む。いくつかの実施形態では、製造は、ＰＣＴ国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ０６／２９０６１に記載されるように行うことができる。製造はまた、パッケージされた剤形を売主（小売業者、卸売業者、および／または流通業者）に送ること、ウイルス感染を有する対象にパッケージされた剤形を販売またはそうでなければ提供すること、使用、投与計画、投与、内容物、および剤形の毒性プロファイルに関する指示を提供するラベルおよび添付文書を医薬品とともに含むことなどの１つ以上の追加のステップを含む。いくつかの実施形態では、ウイルス感染の治療は、対象がウイルス感染を有することを判定することと、投与計画に従って対象への薬学的剤形の投与を指示することと、１つ以上の薬学的剤形を対象に投与することとを含み、１つ以上の薬学的剤形は、投与計画に従って投与される。
【0043】
薬学的組成物は、水溶性（混和性）共溶媒、水不溶性（不混和性）共溶媒、界面活性剤、抗酸化剤、キレート剤、および吸収促進剤からなる群から選択される少なくとも１つの材料の組み合わせをさらに含み得る。
【0044】
可溶化剤は、少なくとも単一の界面活性剤であるが、それはまた、ａ）界面活性剤および水混和性溶媒；ｂ）界面活性剤および水不混和性溶媒；ｃ）界面活性剤、抗酸化剤；ｄ）界面活性剤、抗酸化剤、および水混和性溶媒；ｅ）界面活性剤、抗酸化剤、および水不混和性溶媒；ｆ）界面活性剤、水混和性溶媒、および水不混和性溶媒；またはｇ）界面活性剤、抗酸化剤、水混和性溶媒、および水不混和性溶媒の組み合わせなどの材料の組み合わせであり得る。
【0045】
薬学的組成物は、ａ）少なくとも１つの液体担体、ｂ）少なくとも１つの乳化剤、ｃ）少なくとも１つの可溶化剤、ｄ）少なくとも１つの分散剤、ｅ）少なくとも１つの他の賦形剤、またはｆ）それらの組み合わせを任意にさらに含む。
【0046】
いくつかの実施形態では、水混和性溶媒は、低分子量（６０００未満）のＰＥＧ、グリコール、またはアルコールである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ペグ化界面活性剤であり、ポリ（エチレングリコール）官能基を含む界面活性剤を意味する。
【0047】
本発明は、本明細書に開示された本発明の態様、実施形態、および下位実施形態の全ての組み合わせを含む。
以下の図は、本明細書の一部を形成し、特許請求される発明の例示的な実施形態を説明する。当業者は、これらの図および本明細書の説明に照らして、過度の実験なしで本発明を実施することができるであろう。
以下の図は、本明細書の一部を形成し、特許請求される発明の例示的な実施形態を説明する。当業者は、これらの図および本明細書の説明に照らして、過度の実験なしで本発明を実施することができるであろう。
【図面の簡単な説明】
【0048】
【図1】エボラウイルスに対する様々な組成物のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。
【図2】エボラウイルスに対する様々な組成物のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。
【図3】マールブルグウイルスに対する様々な組成物のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。
【図4】マールブルグウイルスに対する様々な組成物のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。
【図5】Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるジカウイルス（ＳＩＫＶ株ＰＲＶＡＢＣ５９）に対するオレアンドリンのインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。
【図6】Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるジカウイルス（ＳＩＫＶ株ＰＲＶＡＢＣ５９）に対するジゴキシンのインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。
【図7】Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるエボラウイルスに対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。
【図8】Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルスに対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。
【図9】様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）の存在下でのＶｅｒｏ Ｅ６細胞のインビトロ細胞生存率を要約する図表を示す。
【図11A】組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１１Ａは感染後２時間である。
【図11B】組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１１Ｂは感染後２４時間である。
【図12A】組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、オレアンドリンに曝露されたウイルス感染したＶｅｒｏ Ｅ６細胞による感染性子孫の生成を阻害する能力を要約する図表を示し、図１２Ａはエボラウイルスである。
【図12B】組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、オレアンドリンに曝露されたウイルス感染したＶｅｒｏ Ｅ６細胞による感染性子孫の生成を阻害する能力を要約する図表を示し、図１２Ｂはマールブルグウイルスである。
【発明を実施するための形態】
【0049】
本発明は、有効量の抗ウイルス組成物（または抗ウイルス組成物および少なくとも１つの薬学的賦形剤を含む薬学的組成物）の対象への慢性投与により、対象のウイルス感染を治療する方法を提供する。薬学的組成物は、対象に最適な投与計画に従って投与され、用量および投与計画の好適性は、ウイルス感染の従来の臨床慣行および臨床治療エンドポイントに従って臨床的に決定される。
【0050】
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、哺乳動物、例えば、ネコ、イヌ、マウス、モルモット、ウマ、ウシ、ヒツジ、およびヒトなどの温血動物を意味すると解釈される。
【0051】
本明細書で使用される場合、ウイルス感染のリスクのある対象は、ａ）蚊、特にＡｅｄｅｓ種（Ａｅｄｅｓ ｅｇｙｐｔｉ、Ａｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）の蚊が生息する範囲内の地理的地域に住んでいる対象、ｂ）ウイルス感染を有する人または人々と一緒にまたはその近くに住んでいる対象、ｃ）ウイルス感染を有する人と性的関係を有する対象、ｄ）ダニ、特にＩｘｏｄｅｓ種（Ｉｘｏｄｅｓ ｍａｒｘ、Ｉｘｏｄｅｓ ｓｃａｐｕｌａｒｉｓ、またはＩｘｏｄｅｓ ｃｏｏｋｅ種）のダニが生息する範囲内の地理的地域に住んでいる対象、ｅ）オオコウモリが生息する範囲内の地理的地域に住んでいる対象、ｆ）熱帯地方に住んでいる対象、ｇ）アフリカに住んでいる対象、ｈ）ウイルス感染を有する他の対象の体液と接触している対象、ｉ）子供、またはｊ）弱まった免疫系を有する対象である。いくつかの実施形態では、対象は、女性、妊娠することができる女性、または妊娠中の女性である。
【0052】
本発明に従って治療される対象は、治療応答を示すであろう。「治療応答」とは、ウイルス感染に罹患している対象が、強心配糖体による治療の結果として、以下の臨床的利益：対象の血液もしくは血漿中の活性ウイルス力価の低減、対象の血液もしくは血漿からの活性ウイルスの根絶、感染の改善、感染に関連する症状の発生の低減、感染の部分的もしくは完全な寛解、または感染の進行までの時間の増加の少なくとも１つを享受することを意味する。治療応答は、完全または部分的な治療応答であり得る。
【0053】
本明細書で使用される場合、「進行までの時間」は、ウイルス感染が診断（または治療）されてから感染が悪化し始めるまでの期間、長さ、または持続時間である。それは、感染のさらなる進行なしで感染のレベルが維持される期間であり、感染が再び進行し始めると、期間は終了する。疾患の進行は、治療の開始前または開始時に感染に罹患している対象を「病期分類」することにより決定される。例えば、対象の健康は、治療の開始前または開始時に決定される。次いで、対象は。強心配糖体により治療され、ウイルス力価は、定期的に監視される。後のいくつかの時点で、感染の症状が悪化し、したがって感染の進行および「進行までの時間」の終了をマークし得る。感染が進行しなかった間の期間、または感染のレベルもしくは重症度が悪化しなかった間の期間が、「進行までの時間」である。
【0054】
投与計画には、投与スケジュールに従って投与される１つ以上の強心配糖体の治療関連用量（または有効用量）が含まれる。したがって、治療関連用量は、抗ウイルス組成物による治療に対するウイルス感染の治療応答が観察され、かつ対象に、過剰量の望ましくないまたは有害な副作用なしで抗ウイルス組成物を投与することができる治療用量である。治療関連用量は、患者にいくつかの副作用を引き起こし得るが、対象にとって致命的ではない。それは、抗ウイルス組成物を投与されている対象に対する臨床的利益のレベルが、抗ウイルス組成物またはその構成成分（複数可）の投与により対象によって経験される有害な副作用のレベルを超える用量である。治療関連用量は、様々な確立された薬理学、薬力学、および薬物動態学の原則に従って、対象により異なるであろう。しかしながら、治療関連用量（例えば、オレアンドリンに対する）は、典型的には、２５マイクログラム、１００マイクログラム、２５０マイクログラム、５００マイクログラム、または７５０マイクログラムの強心配糖体／日を超えないか、またはそれは用量あたり２５～７５０マイクログラムの強心配糖体の範囲にあり得る。対象において標的治療結果を提供するために必要な抗ウイルス組成物の実際の量は、薬局の基本原則に従って対象毎に異なり得ることは、当該技術分野で既知である。
【0055】
治療関連用量は、ウイルス感染の治療に通常使用される任意の投与計画に従って投与することができる。治療関連用量は、１日１回、２回、３回、またはそれ以上投与することができる。それは、１日おき、３日おき、４日おき、５日おき、半週毎、毎週、隔週、３週間おき、４週間おき、毎月、隔月、半月毎、３ヶ月おき、４ヶ月おき、半年毎、毎年、または上記のいずれかの組み合わせに従って投与され、好適な投与スケジュールに到達する。例えば、治療関連用量は、１週間以上にわたって１日１回以上投与することができる。
【0056】
実施例１５は、その両方ともがフィロウイルスであるエボラウイルス（図１および２）およびマールブルグウイルス（図３および４）感染の治療のためのオレアンドリン（唯一の活性として）、Ａｎｖｉｒｚｅｌ、およびＰＢＩ－０５２０４（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物）を含む組成物の有効性を評価するために使用されるインビトロアッセイの詳細な説明を提供する。
【0057】
実験は、組成物を４０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬで細胞に添加し、次いで、ウイルスを添加して１時間インキュベートすることにより準備した。ウイルスの細胞への添加の際、組成物の最終濃度は、２０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬである。異なる量のオレアンドリンを含む組成物は、それらが含むオレアンドリンの濃度に応じて調節し、モル濃度に変換することができる。図１～４は、抽出物のオレアンドリン含有量に基づいた有効性を示す。ＯＬ自体が有効である。ＯＬ、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのＳＣＦ抽出物であるＰＢＩ－０５２０４は、ＯＬ自体よりも実質的に有効である。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物であるＡｎｖｉｒｚｅｌは、ＯＬ自体よりも有効である。両方の抽出物は、ナノモル範囲で有効性を明確に示す。ＰＢＩ－０５２０４抽出物のオレアンドリンの割合（１．７４％）は、Ａｎｖｉｒｚｅｌの割合（０．４５９％、４．５９ｍｉｃｒｏｇ／ｍｇ）よりも高い。ＰＢＩ－０５２０４の最も高い用量では、ＥＢＯＶおよびＭＡＲＶ感染を完全に阻害したが、ａｎｖｉｒｚｅｌで２０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬを超える用量では毒性が観察されるため、Ａｎｖｉｒｚｅｌは完全な阻害を示さなかった。データは、ＰＢＩ－０５２０４のエボラウイルスおよびマールブルグウイルスに対する最も高い抗ウイルス活性を示す。ＰＢＩ－０５２０４のトリテルペンの組み合わせは、オレアンドリンの抗ウイルス活性が増加させた。
【0058】
実施例６は、ジカウイルス（フラビウイルス）感染の治療のための強心配糖体の有効性を評価するために使用されるインビトロアッセイの詳細な説明を提供する。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリン（図５）またはジゴキシン（図６）の存在下で、０．２のＭＯＩでジカウイルス（ＺＩＫＶ株ＰＲＶＡＢＣ５９）を感染させた。細胞を、ウイルスおよび強心配糖体とともに１時間インキュベートした後、接種物および非吸収強心配糖体（存在する場合）を除去した。細胞を、新鮮な培地に浸し、４８時間インキュベートした後、それらをホルマリンで固定し、ＺＩＫＶ感染を染色した。データは、両方の強心配糖体のジカウイルスに対する抗ウイルス活性を示すが、しかしながら、オレアンドリンは、ジゴキシンよりも高い（ほぼ８倍高い）抗ウイルス活性を示した。
【0059】
実施例１４は、ジカウイルスおよびデングウイルスに対する試験組成物の抗ウイルス活性を評価するために使用されるアッセイの詳細な説明を提供する。データは、オレアンドリンが、ジカウイルスおよびデング熱ウイルスに対する有効性を示すことを示す。
【0060】
図７は、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるエボラウイルス（ＥＢＯＶ）に対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表である。図８は、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルス（ＭＡＲＶ）に対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。図９は、様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）の存在下でのＶｅｒｏ Ｅ６細胞のインビトロ細胞生存率を要約する図表を示す。図７～８では、ウイルス感染前に宿主細胞を組成物に曝露した。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリン、ジゴキシン、またはオレアンドリン含有植物抽出物であるＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶ／Ｋｉｋ（図７、ＭＯＩ＝１）またはＭＡＲＶ／Ｃｉ６７（図８、ＭＯＩ＝１）を感染させた。１時間後、接種物および化合物を除去し、新鮮な培地を細胞に添加した。４８時間後、細胞を固定して免疫染色し、ＥＢＯＶまたはＭＡＲＶに感染した細胞を検出した。感染した細胞を、Ｏｐｅｒｅｔｔａを使用して数えた。
【0061】
抗ウイルス活性に関して、偽陽性が観察されないことを確実にするために、組成物の存在下での細胞生存率を試験した。図９のデータについては、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を上記の化合物で処理した。ＡＴＰレベルは、細胞生存率の測定としてＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏによって測定された。オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４は、細胞生存率を低減しないことが判定され、これは、本明細書の他の図で詳述される抗ウイルス活性が、個々の化合物の細胞毒性によって引き起こされる偽陽性によるものではないことを意味する。
【0062】
したがって、本発明は、哺乳動物または宿主細胞のウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、当該ウイルス感染の罹患前に哺乳動物または宿主細胞に抗ウイルス組成物を投与し、それにより当該哺乳動物または宿主細胞のウイルス感染時に、抗ウイルス組成物が、ウイルス力価を低減し、ウイルス感染を改善、低減、または排除することを含む。
【0063】
本発明の抗ウイルス組成物および方法はまた、抗ウイルス組成物の投与前に発生したウイルス感染の治療にも有用である。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、ＥＢＯＶ（図１０Ａ、１０Ｂ）またはＭＡＲＶ（図１１Ａ、１１Ｂ）を感染させた。感染後２時間（図１０Ａ、１１Ａ）または感染後２４時間（図１０Ｂ、１１Ｂ）で、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４を１時間細胞に添加し、次いで廃棄し、細胞を培養培地に戻した。
【0064】
図１０Ａおよび１０Ｂは、組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるエボラウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１０Ａは感染後２時間、図１０Ｂは感染後２４時間である。抗ウイルス組成物が、ウイルス感染後２時間以内（または最大１２時間以内）に投与されると、抗ウイルス組成物は、有効な治療を提供し、ＥＢＯＶウイルス力価を低減する。２４時間後でも、ウイルス組成物は有効であるが、しかしながら、最初のウイルス感染が増加した後の時間が経過するにつれて、その有効性はより低くなる。同じ評価をＭＡＲＶで行った。図１１Ａおよび１１Ｂは、組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１１Ａは感染後２時間、図１１Ｂは感染後２４時間である。抗ウイルス組成物が、ウイルス感染後２時間以内（または最大１２時間以内）に投与されると、抗ウイルス組成物は、有効な治療を提供し、ＭＡＲＶウイルス力価を低減する。２４時間後でも、ウイルス組成物は有効であるが、しかしながら、最初のウイルス感染が増加した後の時間が経過するにつれて、その有効性はより低くなる。
【0065】
本明細書の組成物の抗ウイルス活性が、例えば、感染後２４時間以内にウイルス感染細胞の単一世代で低減されることを考慮し、抗ウイルス組成物がウイルス増殖を阻害することができるかどうかを評価し、それは感染性子孫の生成を阻害することを意味する。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶまたはＭＡＲＶを感染させ、４８時間インキュベートした。感染した細胞培養物の上清を、新鮮なＶｅｒｏ Ｅ６細胞に継代し、１時間インキュベートし、次いで廃棄した。継代した上清を含む細胞を、４８時間インキュベートした。ＥＢＯＶ（Ｂ）またはＭＡＲＶ（Ｃ）に感染した細胞は、本明細書に記載されるように評価された。対照感染率は、ＥＢＯＶについては６６％、ＭＡＲＶについては６７％であった。本発明の抗ウイルス組成物は、感染性子孫の生成を阻害した。
【0066】
したがって、本発明の抗ウイルス組成物は、ａ）ウイルスへの暴露後のウイルス感染を阻害するために、ウイルス感染の前に予防的に投与することができるか、ｂ）ウイルス複製および感染性子孫の生成を阻害もしくは低減するために、ウイルス感染後に投与することができるか、またはｃ）ａ）およびｂ）の組み合わせである。
【0067】
トガウイルスのアルファウイルスに対する抗ウイルス組成物の抗ウイルス活性は、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞においてＶＥＥウイルスおよびＷＥＥウイルスを使用して評価された。図１３Ａおよび１３Ｂは、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス（図１３Ａ）および西部ウマ脳脊髄炎ウイルス（図１３Ｂ）に対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、示された化合物の存在下または非存在下で１８時間、ベネズエラウマ脳炎ウイルス（図１３Ａ、ＭＯＩ＝０．０１）または西部ウマ脳炎ウイルス（図１３Ｂ、ＭＯＩ＝０．１）を感染させた。感染した細胞を、以前のように検出し、Ｏｐｅｒｅｔｔａで数えた。本発明の抗ウイルス組成物は、有効であることが見出された。
【0068】
したがって、本発明は、対象または宿主細胞において、フィロウイルス科のウイルス、フラビウイルス科のウイルス、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、有効量の抗ウイルス組成物を投与し、それによりウイルスを抗ウイルス組成物に曝露することおよび当該ウイルス感染を治療することを含む。
【0069】
本明細書の組成物の抗ウイルス活性は、ライノウイルス感染に対して評価された。ライノウイルスは、ピコルナウイルス科およびエンテロウイルス属である。それは、エンベロープを有さず、（＋）極性のｓｓ－ＲＮＡウイルスである。オレアンドリンは、本明細書で用いられる濃度およびアッセイにおいてライノウイルスに対して不活性であることが見出された。
【0070】
ＰＢＩ－０５２０４（本明細書、およびその開示全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１２年５月２９日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ８１８７６４４Ｂ２、２００８年７月２２日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ７４０２３２５Ｂ２、２０１３年３月１２日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎらのＵＳ８３９４４３４Ｂ２に記載される）は、主要な薬理学的に活性な構成成分として強心配糖体（オレアンドリン、ＯＬ）およびトリテルペン（オレアノール酸（ＯＡ）、ウルソール酸（ＵＡ）、およびベツリン酸（ＢＡ））を含む。ＯＬ対総トリテルペンのモル比は、約１：（１０～９６）である。ＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約７．８：７．４：１である。ＰＢＩ－０５２０４のＯＡ、ＵＡ、およびＢＡの組み合わせは、ＯＬ等モル基準で比較した場合、オレアンドリンの抗ウイルス活性を増加させる。ＰＢＩ－０４７１１は、ＰＢＩ－０５２０４の画分であるが、それは強心配糖体（ＯＬ）を含まない。ＰＢＩ－０４７１１のＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約３：２．２：１である。ＰＢＩ－０４７１１はまた、抗ウイルス活性も保有する。したがって、ＯＬ、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含む抗ウイルス組成物は、ＯＬの等モル含有量に基づいて、唯一の活性成分としてＯＬを含む組成物よりも有効である。いくつかの実施形態では、個々のトリテルペン対オレアンドリンのモル比は、以下の範囲である：２～８（ＯＡ）：２～８（ＵＡ）：０．１～１（ＢＡ）：０．５～１．５（ＯＬ）；または３～６（ＯＡ）：３～６（ＵＡ）：０．３～８（ＢＡ）：０．７～１．２（ＯＬ）；または４～５（ＯＡ）：４～５（ＵＡ）：０．４～０．７（ＢＡ）：０．９～１．１（ＯＬ）；または４．６（ＯＡ）：４．４（ＵＡ）：０．６（ＢＡ）：１（ＯＬ）。
【0071】
唯一の抗ウイルス剤としてオレアンドリンを含む抗ウイルス組成物は、本発明の範囲内にある。
【0072】
抗ウイルス剤としてオレアンドリンおよび複数のトリテルペンを含む抗ウイルス組成物は、本発明の範囲内にある。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。化合物のモル比は、本明細書に記載される通りである。
【0073】
主要な活性成分として複数のトリテルペンを含む（ステロイド、強心配糖体、および薬理学的に活性な成分を除くことを意味する）抗ウイルス組成物はまた、本発明の範囲内にある。上記のように、ＰＢＩ－０４７１１は。ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを主要な活性成分として含み、それは抗ウイルス活性を示す。いくつかの実施形態では、トリテルペンベースの抗ウイルス組成物は、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含み、それらの各々は独立して、その遊離酸形態、塩形態、重水素化形態、および誘導体形態から各発生時に選択される。
【0074】
ＰＢＩ－０１０１１は、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含む改善されたトリテルペンベースの抗ウイルス組成物であり、ＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約９～１２：最大約２：最大約２、または約１０：約１：約１、または約９～１２：約０．１～２：約０．１～２、または約９～１１：約０．５～１．５：約０．５～１．５、または約９．５～１０．５：約０．７５～１．２５：約０．７５～１．２５、または約９．５～１０．５：約０．８～１．２：約０．８～１．２、または約９．７５～１０．５：約０．９～１．１：約０．９～１．１である。
【0075】
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＵＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）およびウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＵＡを超える大モル過剰で存在する。
【0076】
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＢＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＢＡを超える大モル過剰で存在する。
【0077】
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＵＡ対ＢＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＵＡおよびＢＡの両方を超える大モル過剰で存在する。
【0078】
いくつかの実施形態では、トリテルペンベースの抗ウイルス組成物は、強心配糖体を除外する。
【0079】
一般に、フィロウイルス感染、フラビウイルス感染、またはトガウイルス感染を有する対象は、以下のように治療される。対象は、当該対象が当該ウイルスに感染しているかどうかを判定するために評価される。抗ウイルス組成物の投与が指示される。抗ウイルス組成物の初期用量は、一定期間（治療期間）、処方された投与計画に従って対象に投与される。対象の臨床応答および治療応答のレベルは、定期的に判定される。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続される。患者が感染自体の停止、感染に関連する症状の低減、および／または感染の進行の低減などの所望の臨床的エンドポイント（複数可）に達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
【0080】
臨床医が、抗ウイルス組成物および１つ以上の他の治療薬の組み合わせによりウイルス感染を有する対象を治療する意図があり、対象が有するウイルス感染が、当該１つ以上の他の治療薬による治療に少なくとも部分的に治療的に応答することが知られている場合、本発明の方法は、治療関連用量の抗ウイルス組成物および治療関連用量の当該１つ以上の他の治療薬を、それを必要とする対象に投与することを含み、抗ウイルス組成物は、第１の投与計画に従って投与され、１つ以上の他の治療薬は、第２の投与計画に従って投与される。いくつかの実施形態では、第１および第２の投与計画は同じである。いくつかの実施形態では、第１および第２の投与計画は異なる。
【0081】
本発明の抗ウイルス組成物（複数可）は、一次抗ウイルス療法、補助抗ウイルス療法、または併用抗ウイルス療法として投与することができる。本発明の方法は、抗ウイルス組成物の少なくとも１つの他の既知の抗ウイルス組成物との別々の投与または同時投与を含み、本発明の抗ウイルス組成物は、既知の抗ウイルス組成物（化合物（複数可））またはウイルス感染に関連する症状を治療するための組成物の投与の前、その間、またはその後に投与され得ることを意味する。例えば、炎症、嘔吐、悪心、頭痛、発熱、下痢、悪心、蕁麻疹、結膜炎、倦怠感、筋肉痛、関節痛、発作、または麻痺を治療するために使用される薬剤は、本発明の抗ウイルス組成物とともに、またはそれとは別々に投与することができる。
【0082】
１つ以上の他の治療薬は、治療上有効であると臨床医が認識している用量および投与計画に従って、または治療有効以下であると臨床医が認識している用量で投与することができる。抗ウイルス組成物および１つ以上の他の治療薬の組み合わせの投与により提供される臨床的利益および／または治療効果は、相加的または相乗的であり得、そのようなレベルの利益または効果は、組み合わせの投与と個々の抗ウイルス組成物構成成分（複数可）および１つ以上の他の治療薬の投与との比較により決定されている。食品医薬品局、世界保健機関、欧州医薬品庁（Ｅ．Ｍ．Ｅ．Ａ．）、薬品・医薬品行政局（ＴＧＡ、オーストラリア）、全米保健機関（ＰＡＨＯ）、医薬品・医療機器安全局（Ｍｅｄｓａｆｅ、ニュージーランド）、または世界中の様々な保健省によって提案または説明されているような用量および投与計画に従って、１つ以上の他の治療薬を投与することができる。
【0083】
実施例５は、哺乳動物におけるジカウイルス感染の治療のための例示的な手順を提供する。実施例１２は、哺乳動物におけるフィロウイルス感染（エボラウイルス、マールブルグウイルス）の治療のための例示的な手順を提供する。実施例１３は、哺乳動物におけるフラビウイルス感染、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、オムスク出血熱、ポワッサンウイルス感染の治療のための例示的な手順を提供する。
【0084】
薬学的組成物中に存在する抗ウイルス化合物（複数可）（トリテルペン（複数可）、強心配糖体（複数可）など）は、それらの非修飾形態、塩形態、誘導体形態、またはそれらの組み合わせで存在し得る。本明細書で使用される場合、「誘導体」という用語は、ａ）第１の化学物質に構造的に関連し、それから理論的に誘導可能な化学物質；ｂ）同様の第１の化合物から形成される化合物、もしくは第１の化合物の１つの原子が別の原子または原子の群で置き換えられた場合、別の第１の化合物から生じると考えられ得る化合物；ｃ）親化合物から誘導もしくは取得され、親化合物の必須要素を含む化合物；またはｄ）１つ以上のステップで同様の構造の第１の化合物から生成され得る化学化合物を意味すると解釈される。例えば、誘導体は、その重水素化形態、酸化形態、脱水、不飽和、ポリマー複合体化、またはグリコシル化形態を含み得るか、あるいはエステル、アミド、ラクトン、同族体、エーテル、チオエーテル、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、スルフヒドリル、複素環式、複素式環縮合、重合、ペグ化、ベンジリデニル、トリアゾリル、ピペラジニル、またはそれらの重水素化形態を含み得る。
【0085】
本明細書で使用される場合、「オレアンドリン」という用語は、特に明記しない限り、オレアンドリンの全ての既知の形態を意味すると解釈される。オレアンドリンは、ラセミ体、光学的に純粋な形態、または光学的に濃縮された形態で存在し得る。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ植物材料は、例えば、テキサス州アタスコサのアルドリッジ・ナーサリーなどの商業的な植物供給業者から入手することができる。
【0086】
超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物は、ＵＳ７，４０２，３２５、ＵＳ８３９４４３４、ＵＳ８１８７６４４、またはＰＣＴ国際公開第ＷＰ２００７／０１６１７６Ａ２に詳述されるように調製することができ、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。抽出は、エタノールなどの改質剤（有機溶媒）の存在下または不在下で、超臨界二酸化炭素を使用して行うことができる。
【0087】
強心配糖体、特にオレアンドリンを含む他の抽出物は、様々な異なるプロセスによって調製することができる。抽出物は、熱水抽出物の調製のための手順を説明するＤｒ．Ｈｕｓｅｙｉｎ Ｚｉｙａ Ｏｚｅｌ（米国特許第５，１３５，７４５号）によって開発されたプロセスに従って抽出物を調製することができる。水性抽出物には、分子量が２ＫＤ～３０ＫＤで変化するいくつかの多糖類、オレアンドリンおよびオレアンドリゲニン、オドロシドおよびネリタロシドが含まれると報告されている。多糖類には、酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンが含まれると報告されている。Ｓｅｌｖａｒａｊらの米国特許第５，８６９，０６０号は、Ｎｅｒｉｕｍ種の熱水抽出物およびその生成方法、例えば、実施例２を開示している。次いで、得られた抽出物は、凍結乾燥され、粉末を生成することができる。米国特許第６，５６５，８９７号（米国登録前第２００２０１１４８５２号およびＳｅｌｖａｒａｊらのＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０００／０１６７９３号）は、実質的に減菌の抽出物の調製のための熱水抽出プロセスを開示している。Ｅｒｄｅｍｏｇｌｕら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００３）Ｎｏｖ．８９（１），１２３－１２９）は、抗侵害受容作用および抗炎症作用に基づいて、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒを含む植物の水性抽出物およびエタノール抽出物の比較結果を開示している。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの有機溶媒抽出物もまた、Ａｄｏｍｅら（Ａｆｒ．Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉ．（２００３）Ａｕｇ．３（２），７７－８６；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、ｅｌ－Ｓｈａｚｌｙら（Ｊ．Ｅｇｙｐｔ Ｓｏｃ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．（１９９６），Ａｕｇ．２６（２），４６１－４７３；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｂｅｇｕｍ ら（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９９）Ｆｅｂ．５０（３），４３５－４３８；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｚｉａら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｌｐｈａｒｍａｃｏｌ．（１９９５）Ｎｏｖ．４９（１），３３－３９；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、およびＶｌａｓｅｎｋｏら（Ｆａｒｍａｔｓｉｉａ．（１９７２）Ｓｅｐｔ．－Ｏｃｔ．２１（５），４６－４７；ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）によって開示される。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００４０２４７６６０号は、癌の治療における使用のためのオレアンドリンのタンパク質安定化リポソーム製剤の調製を開示している。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００５００２６８４９号は、シクロデキストリンを含むオレアンドリンの水溶性製剤を開示している。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００４００８２５２１号は、熱水抽出物からのオレアンドリンのタンパク質安定化ナノ粒子製剤の調製を開示している。
【0088】
抽出物はまた、それらの多糖類および炭水化物の含有量が異なる。熱水抽出物は、グルコースで調製された標準曲線に対して４０７．３グルコース当量単位の炭水化物を含むが、一方で、ＳＣＦ ＣＯ2抽出物の分析は、定量限界を下回る非常に低いレベルで見出された炭水化物レベルを見出した。しかしながら、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物中の炭水化物の量は、ＳＣＦ ＣＯ2抽出物のそれよりも少なくとも１００倍多かった。ＳＣＦ抽出物の多糖類含有量は、０％、＜０．５％、＜０．１％、＜０．０５％、または＜０．０１％重量であり得る。いくつかの実施形態では、ＳＣＦ抽出物は、植物塊の抽出中に得られた多糖類を除外する。
【0089】
ＳＣＦ ＣＯ2抽出物および熱水抽出物の部分的な組成物は、ＪＥＯＬ ＡｃｃｕＴＯＦ－ＤＡＲＴ質量分析計（ＪＥＯＬ ＵＳＡ、Ｐｅａｂｏｄｙ，ＭＡ，ＵＳＡ）で、ＤＡＲＴ ＴＯＦ－ＭＳ（飛行質量分析のリアルタイム時間の直接分析）によって決定した。
【0090】
Ｎｅｒｉｕｍ種またはＴｈｅｖｅｔｉａ種のＳＣＦ抽出物は、オレアンドリンおよびトリテルペンなどの薬理学的に活性な化合物の混合物である。ＳＣＦプロセスによって得られる抽出物は、周囲温度で実質的に水不溶性の、粘性の半固体である（溶媒を除去した後）。ＳＣＦ抽出物は、様々な異なる範囲の水溶性を有する多くの異なる構成成分を含む。超臨界流体プロセスからの抽出物は、重量で０．９重量％～２．５重量％のオレアンドリンまたは１．７重量％～２．１重量％のオレアンドリンまたは１．７重量％～２．０重量％のオレアンドリンの理論的範囲を含む。異なる量のオレアンドリンを含むＳＣＦ抽出物が得られている。一実施形態では、ＳＣＦ抽出物は、約２重量％のオレアンドリンを含む。ＳＣＦ抽出物は、熱水抽出物よりも３～１０倍高い濃度のオレアンドリンを含む。これは、ＨＰＬＣならびにＬＣ／ＭＳ／ＭＳ（タンデム質量分析）分析の両方によって確認された。
【0091】
ＳＣＦ抽出物は、オレアンドリンおよびトリテルペンオレアノール酸、ベツリン酸およびウルソール酸、ならびに任意に本明細書に記載される他の構成成分を含む。オレアンドリンおよびトリテルペンの含有量は、バッチにより異なり得るが、しかしながら、変動の程度は過度ではない。例えば、ＳＣＦ抽出物（ＰＢＩ－０５２０４）のバッチは、これら４つの構成成分について分析され、以下の各々のおおよその量を含むことが見出された。
ＷＲＴは、「に関する」を示す。
ＷＲＴは、「に関する」を示す。
【0092】
個々の構成成分の含有量は、示された値に対して±２５％、±２０％、±１５％、±１０％、または±５％異なり得る。したがって、ＳＣＦ抽出物中のオレアンドリンの含有量は、ＳＣＦ抽出物の１ｍｇあたり２０ｍｇ±５ｍｇ（２０ｍｇの±２５％である）の範囲になる。
【0093】
オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、およびそれらの誘導体はまた、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（ｗｗｗ．ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍ；Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）からも購入することができる。
【0094】
本明細書で使用される場合、個々に命名されたトリテルペンは、それらの天然（非修飾、遊離酸）形態、それらの塩形態、誘導体形態、プロドラッグ形態、またはそれらの組み合わせで、各発生時に選択される。トリテルペンの重水素化形態を含む組成物およびそれを用いる使用方法もまた、本発明の範囲内にある。
【0095】
オレアノール酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１４年１１月２０日に公開されたＲｏｎｇらのＵＳ２０１４／０３４３１０８Ａ１、２０１４年１１月２０日に公開されたＸｕらのＵＳ２０１４／０３４３０６４Ａ１、２０１４年６月２６日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１４／０１７９９２８Ａ１、２０１４年４月１０日に公開されたＢｅｎｄｅｒらのＵＳ２０１４／０１００２２７Ａ１、２０１４年３月２７日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００８８１８８Ａ１、２０１４年３月２７日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００８８１６３Ａ１、２０１４年３月６日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００６６４０８Ａ１、２０１３年１１月２８日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１３／０３１７００７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１２年９月２７日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１２／０２４５３７４、２０１２年９月２０日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１２／０２３８７６７Ａ１、２０１２年９月２０日に公開されたＳｈｏｄｅらのＵＳ２０１２／０２３７６２９Ａ１、２０１２年８月２３日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１２／０２１４８１４Ａ１、２０１２年６月２８日に公開されたＬｅｅらのＵＳ２０１２／０１６５２７９Ａ１、２０１１年１２月１日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２０１１／０２９４７５２Ａ１、２０１１年４月２１日に公開されたＭａｊｅｅｄらのＵＳ２０１１／００９１３９８Ａ１、２０１０年７月２９日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２０１０／０１８９８２４Ａ１、２０１０年２月２５日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１０／００４８９１１Ａ１、および２００６年４月６日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２００６／００７３２２２Ａ１に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0096】
ウルソール酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１５年８月６日に公開されたＹｏｏｎらのＵＳ２０１５／０２１８２０６Ａ１、２００４年１１月３０日に発行されたＦｒｉｔｓｃｈｅらのＵＳ６８２４８１１、２０１０年５月８日に発行されたＯｃｈｉａｉらのＵＳ７７１８６３５、２０１４年５月２０日に発行されたＬｉｎらのＵＳ８７２９０５５、および２０１５年９月１日に発行されたＹｏｏｎらのＵＳ９１２０８３９に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0097】
ベツリン酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１２年９月２０日に公開されたＳｈｏｄｅらのＵＳ２０１２／０２３７６２９Ａ１、２０１７年７月２０日に公開されたＲｅｇｕｅｉｒｏ－ＲｅｎらのＵＳ２０１７／０２０４１３３Ａ１、２０１７年４月６日に公開されたＮｉｔｚらのＵＳ２０１７／００９６４４６Ａ１、２０１５年１１月２６日に公開されたＰａｒｔｈａｓａｒａｄｈｉ ＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１５／０３３７００４Ａ１、２０１５年４月３０日に公開されたＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１５／０１１９３７３Ａ１、２０１４年１０月２日に公開されたＹａｎらのＵＳ２０１４／０２９６５４６Ａ１、２０１４年８月２８日に公開されたＳｗｉｄｏｒｓｋｉらのＵＳ２０１４／０２４３２９８Ａ１、２０１４年８月７日に公開されたＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１４／０２２１３２８Ａ１、２０１４年３月６日に公開されたＬｅｕｎｉｓらのＵＳ２０１４／００６６４１６Ａ１、２０１３年３月１４日に公開されたＤｕｒｓｔらのＵＳ２０１３／００６５８６８Ａ１、２０１３年１月３１日に公開されたＲｅｇｕｅｉｒｏ－ＲｅｎらのＵＳ２０１３／００２９９５４Ａ１、２０１２年１１月２９日に公開されたＺｈａｎｇらのＵＳ２０１２／０３０２５３０Ａ１、２０１２年８月２３日に公開されたＰｏｗｅｒらのＵＳ２０１２／０２１４７７５Ａ１、２０１２年４月２６日に公開されたＨｏｎｄａらのＵＳ２０１２／０１０１１４９Ａ１、２０１１年９月１５日に公開されたＢｕｌｌｏｃｋらのＵＳ２０１１／０２２４１８２、２０１１年１２月２２日に公開されたＨｅｍｐらのＵＳ２０１１／０３１３１９１Ａ１、２０１１年９月１５日に公開されたＰｉｃｈｅｔｔｅらのＵＳ２０１１／０２２４１５９Ａ１、２０１１年９月８日に公開されたＰａｒｔｈａｓａｒａｄｈｉ ＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１１／０２１８２０４、２００９年８月１３日に公開されたＳａｆｅらのＵＳ２００９／０２０３６６１Ａ１、２００９年５月２１日に公開されたＫｒａｓｕｔｓｋｙらのＵＳ２００９／０１３１７１４Ａ１、２００９年３月１９日に公開されたＫｒａｓｕｔｓｋｙらのＵＳ２００９／００７６２９０、２００９年３月１２日に公開されたＬｅｕｎｉｓらのＵＳ２００９／００６８２５７Ａ１、２００８年１１月２７日に公開されたＭｕｋｈｅｒｊｅｅらのＵＳ２００８／０２９３６８２、２００７年３月２９日に公開されたＰｅｚｚｕｔｏらのＵＳ２００７／００７２８３５Ａ１、２００６年１１月９日に公開されたＪａｎｓｅｎらのＵＳ２００６／０２５２７３３Ａ１、および２００６年１１月９日に公開されたＯ’ＮｅｉｌｌらのＵＳ２００６／０２５２７４Ａ１に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0098】
抗ウイルス組成物は、任意の好適な薬学的に許容される剤形に製剤化することができる。非経口、耳、眼、鼻、吸入、頬側、舌下、経腸、局所、口腔、経口、および注射可能な剤形が特に有用である。特定の剤形には、固体または液体の剤形が含まれる。例示的な好適な剤形には、錠剤、カプセル、丸剤、カプレット、トローチ、サシェ、溶液、懸濁液、分散液、バイアル、バッグ、ボトル、注射液、ｉ．ｖ．（静脈内）、ｉ．ｍ．（筋肉内）またはｉ．ｐ．（腹腔内）投与可能な液体および薬科学の当業者に既知である他のそのような剤形が含まれる。
【0099】
抗ウイルス組成物を含む好適な剤形は、抗ウイルス組成物を本明細書に記載またはＰｉら（Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．（Ｍａｒ ２０１６），１３（８），１３５８－１３６６の“Ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｎａｎｏｃｒｙｓｔａｌｓ ｆｏｒ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ：ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｉｃｌｅ ｓｉｚｅ”）、Ｙａｎｇら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｎａｎｏｍｅｄ．（２０１３），８（１），２９１７－２９２６の“Ｓｅｌｆ－ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ：ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ”）、Ｌｉら（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．（２０１４），３７（６），９２６－９３７のＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｓｕｃｒｏｓｅ ｅｓｔｅｒ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｗｅｔ ｂａｌｌ ｍｉｌｌｉｎｇ ｗｉｔｈ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ”）、Ｚｈａｎｇら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．（Ｊｕｎｅ ２０１４），１０３（６），１７１１－１７１９の“Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅ ｔｈｒｏｕｇｈ ｌｉｐｉｄ ｎａｎｏｓｐｈｅｒｅｓ：ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ”）、Ｇｏｄｕｇｕら（ＰＬｏＳ Ｏｎｅ（Ｍａｒ ２０１４），９（３）：ｅ８９９１９の“Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｄｒｕｇｓ ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ ａｎｄ ｂｅｔｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ”）、Ｚｈａｏら（Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．（Ｓｅｐ ２０１４），２１（６），４６７－４７９の“Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｅｔｕｌｉｎ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｏｒ ｏｒａｌ ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉｃ ｄｒｕｇ ｂｙ ａｎｔｉｓｏｌｖｅｎｔ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ”）、Ｙａｎｇら（ＦｏｏｄＣｈｅｍ．（Ｍａｙ ２０１２），１３２（１），３１９－３２５の“Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｕｓｉｎｇ ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ａｎｔｉ－ｓｏｌｖｅｎｔ（ＳＡＳ）ｐｒｏｃｅｓｓ”）、Ｃａｏら（Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．（Ａｕｇ．２０１２），９（８），２１２７－２１３５の“Ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ－ｌｉｎｋｅｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｄｉｅｓｔｅｒ ｐｒｏｄｒｕｇｓ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｆｏｒ ＰＥＰＴ１－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ：ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ”）、Ｌｉら（Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（Ａｕｇ ２０１１），２８（８），２０２０－２０３３の“Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ，ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｓｕｃｒｏｓｅ ｅｓｔｅｒ－ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ ｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ”）、Ｔｏｎｇら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．（Ｆｅｂ ２０１１），４０４（１－２），１４８－１５８の“Ｓｐｒａｙ ｆｒｅｅｚｅ ｄｒｙｉｎｇ ｗｉｔｈ ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ ａｎｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃａｐｒａｔｅ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｉｔｙ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ，ａ ＢＣＳ Ｃｌａｓｓ ＩＶ ｃｏｍｐｏｕｎｄ”）、Ｘｉら（ＡＡＰＳ ＰｈａｒｍＳｃｉＴｅｃｈ（２００９），１０（１），１７２－１８２のＦｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｅｌｆ－ｎａｎｏｅｍｕｌｓｉｆｉｅｄ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ”）、Ｃｈｅｎら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（Ｆｅｂ ２００５），５７（２），２５９－２６４の“Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ：ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｉｎ－ｖｉｔｒｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ”）に記載される薬学的に許容される賦形剤と混合することによって調製することができ、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0100】
好適な剤形はまた、２０１２年５月２９日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ８１８７６４４Ｂ２、２００８年７月２２日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ７４０２３２５Ｂ２、２０１３年３月１２日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎらのＵＳ８３９４４３４Ｂ２に従って作製することができ、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。好適な剤形はまた、実施例１３～１５に記載されるように作製することができる。
【0101】
有効量のまたは治療関連量の抗ウイルス化合物（強心配糖体、トリテルペン、またはそれらの組み合わせ）が特に企図される。「有効量」という用語により、薬学的有効量が企図されることが理解される。薬学的有効量は、必要なまたは所望の治療応答に十分な活性成分の量または分量、言い換えれば、患者に投与されたときにかなりの生物学的応答を誘発するのに十分な量である。かなりの生物学的応答は、活性物質の単回または複数回用量の結果として発生し得る。用量は、１つ以上の剤形を含んでもよい。任意の患者の特定の用量レベルは、治療される適応症、適応症の重症度、患者の健康、年齢、性別、体重、食事、薬理学的応答、用いられる特定の剤形、および他のそのような要因を含む様々な要因に依存することが理解されよう。
【0102】
経口投与に所望の用量は最大５剤形であるが、単回用量としてわずか１および最大１０剤形を投与してもよい。例示的な投与形態は、用量あたり合計０．１～５００ｍｇ（１～１０の用量レベル）で、投与形態あたり約０．０１～１００ｍｇまたは０．０１～１００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含み得る。用量は、対象において特定の治療応答または臨床的利益を達成するために、事前に決定および／または調整され得る投与計画に従って投与される。
【0103】
強心配糖体は、２０～１００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、または１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリンの初期用量を対象に提供するのに十分な量で剤形に存在し得る。剤形は、オレアンドリン２０～１００ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇまたは０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリン、オレアンドリン抽出物またはオレアンドリンを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物を含み得る。
【0104】
抗ウイルス剤は、経口剤形に含まれ売る。剤形のいくつかの実施形態は、腸溶コーティングされておらず、０．５～１時間以下の期間内に抗ウイルス組成物のそれらの電荷を放出する。剤形のいくつかの実施形態は、腸溶コーティングされており、空腸、回腸、小腸、および／または大腸（結腸）からなどの胃の下流に抗ウイルス組成物のそれらの電荷を放出する。腸溶コーティングされた剤形は、経口投与後１～１０時間以内に抗ウイルス組成物を全身循環に放出する。
【0105】
抗ウイルス組成物は、急速放出、即時放出、制御放出、持続放出、持効性放出、長期放出、バースト放出、連続放出、遅延放出、もしくはパルス放出剤形、またはそれらの種類の放出のうちの２つ以上を示す剤形に含まれ得る。剤形からの抗ウイルス組成物の放出プロファイルは、ゼロ次、疑似ゼロ、一次、疑似一次、またはＳ字状放出プロファイルであり得る。抗ウイルス組成物が投与される対象におけるトリテルペンの血漿濃度プロファイルは、１つ以上の最大値を示し得る。
【0106】
ヒトの臨床データに基づいて、オレアンドリンの投与される用量の５０％～７５％が、経口的に生物学的に利用可能になると予想され、それ故に、剤形あたり１０～２０ｍｉｃｒｏｇ、２０～４０ｍｉｃｒｏｇ、３０～５０ｍｉｃｒｏｇ、４０～６０ｍｉｃｒｏｇ、５０～７５ｍｉｃｒｏｇ、７５～１００ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリンを提供する。５リットルの成人の平均血液量を考慮すると、予想されるオレアンドリン血漿濃度は、０．０５～２ｎｇ／ｍｌ、０．００５～１０ｎｇ／ｍＬ、０．００５～８ｎｇ／ｍＬ、０．０１～７ｎｇ／ｍＬ、０．０２～７ｎｇ／ｍＬ、０．０３～６ｎｇ／ｍＬ、０．０４～５ｎｇ／ｍＬ、または０．０５～２．５ｎｇ／ｍＬの範囲にあるであろう。ＳＣＦ抽出物中に存在するオレアンドリンの推奨される１日用量は、一般に１日２回約０．２ｍｉｃｒｏｇ～約４．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重である。オレアンドリンの用量は、約０．２ｍｉｃｒｏｇ～約１ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約０．５～約１．０ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約０．７５～約１．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約１．５～約２．５２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約２．５～約３．０ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約３．０～４．０ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、または約３．５～４．５ｍｉｃｒｏｇオレアンドリン／ｋｇ体重／日であり得る。オレアンドリンの最大耐容用量は、約３．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日～約４．０ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日であり得る。最小有効用量は、約０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、または約５ｍｉｃｒｏｇ／日であり得る。
【0107】
抗ウイルス組成物は、存在するトリテルペンおよびそれらが存在するモル比の組み合わせにより、低用量から高用量で投与することができる。ヒトへの治療有効用量は、体重１ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物である。そのような用量は、２４時間の期間で最大１０回投与することができる。他の好適な投与範囲を以下に指定する。
全ての値は近似値であり、指定された値の「約」を意味する。
全ての値は近似値であり、指定された値の「約」を意味する。
【0108】
本明細書の化合物は、本発明の組成物または製剤において１つ以上の機能を有し得ることに留意すべきである。例えば、化合物は、界面活性剤および水混和性溶媒の両方として、または界面活性剤および水不混和性溶媒の両方として役立ち得る。
【0109】
液体組成物は、１つ以上の薬学的に許容される液体担体を含み得る。液体担体は、水性、非水性、極性、非極性、および／または有機担体であり得る。液体担体には、例として、限定されることなく、水混和性溶媒、水不混和性溶媒、水、緩衝液、およびそれらの混合物が含まれる。
【0110】
本明細書で使用される場合、交換可能に使用される「水溶性溶媒」または「水混和性溶媒」という用語は、水との二相混合物を形成しないか、または水中で十分に可溶性であり、液相を分離せずに少なくとも５パーセントの溶媒を含む水性溶媒混合物を提供する有機液体を指す。溶媒は、ヒトまたは動物への投与に好適である。例示的な水溶性溶媒には、例としておよび限定することなく、ＰＥＧ（ポリ（エチレングリコール））、ＰＥＧ４００（約４００の近似分子量を有するポリ（エチレングリコール）、エタノール、アセトン、アルカノール、アルコール、エーテル、プロピレングリコール、グリセリン、トリアセチン、ポリ（プロピレングリコール）、ＰＶＰ（ポリ（ビニルピロリドン））、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、ピリジン、プロパノール、Ｎ－メチルアセトアミド、ブタノール、ソルフォール（ｓｏｌｕｐｈｏｒ）（２－ピロリドン）、ファルマソルブ（ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ）（Ｎ－メチル－２－ピロリドン）が含まれる。
【0111】
本明細書で使用される場合、その用語が交換可能に使用される「水不溶性溶媒」または「水不混和性溶媒」という用語は、水との二相混合物を形成するか、または水中の溶媒の濃度が５パーセントを超える場合に相分離を提供する有機液体を指す。溶媒は、ヒトまたは動物への投与に好適である。例示的な水不溶性溶媒には、例としておよび限定することなく、中／長鎖トリグリセリド、油、ヒマシ油、トウモロコシ油、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、オレイン酸、脂肪酸、オリーブ油、ソフチザン６４５（ジグリセリルカプリレート／カプレート／ステアレート／ヒドロキシイステアレートアジペート）、ミグリオール、キャプテックス（ｃａｐｔｅｘ）（Ｃａｐｔｅｘ３５０：グリセリルトリカプリレート／カプレート／ラウレートトリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５５：グリセリルトリカプリレート／カプレートトリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５５ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド）が含まれる。
【0112】
好適な溶媒は、“Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｈａｒｍｏｎｉｓａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｆｏｒ Ｈｕｍａｎ Ｕｓｅ（ＩＣＨ）ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｑ３Ｃ Ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ：Ｒｅｓｉｄｕａｌ Ｓｏｌｖｅｎｔｓ”（１９９７）に列挙されており、それはどの量の残留溶媒が、医薬品において安全であるとみなされるかを推奨している。例示的な溶媒は、クラス２またはクラス３の溶媒として列挙されている。クラス３の溶媒には、例えば、酢酸、アセトン、アニソール、１－ブタノール、２－ブタノール、酢酸ブチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、クメン、エタノール、エチルエーテル、酢酸エチル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、メチル－１－ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２－メチル－１－プロパノール、ペンタン、１－ペンタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、または酢酸プロピルが含まれる。
【0113】
本発明において水不混和性溶媒として使用され得る他の材料には、Ｃａｐｔｅｘ１００：プロピレングリコールジカプレート；Ｃａｐｔｅｘ２００：プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート；Ｃａｐｔｅｘ２００Ｐ：プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート；プロピレングリコールジカプリロカプレート；Ｃａｐｔｅｘ３００：グリセリルトリカプリレート／カプレート；Ｃａｐｔｅｘ３００ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５０：グリセリルトリカプリレート／カプレート／ラウレート；Ｃａｐｔｅｘ３５５：グリセリルトリカプリレート／カプレート；Ｃａｐｔｅｘ３５５ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ５００：トリアセチン；Ｃａｐｔｅｘ５００Ｐ：トリアセチン（医薬品グレード）；Ｃａｐｔｅｘ８００：プロピレングリコールジ（２－エチテキサノエート）；Ｃａｐｔｅｘ８１０Ｄ：グリセリルトリカプリレート／カプレート／リノレエート；Ｃａｐｔｅｘ１０００：グリセリルトリカプレート；ＣａｐｔｅｘＣＡ：中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ ＭＣＴ－１７０：中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｍｕｌ ＧＭＯ：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＧＭＯ－５０ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ：中鎖モノおよびジグリセリド；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ Ｃ８：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ Ｃ１０：グリセリルモノカプレート；Ｃａｐｍｕｌ ＰＧ－８：プロピレングリコールモノカプリレート；Ｃａｐｍｕｌ ＰＧ－１２：プロピレングリコールモノラウレート；Ｃａｐｒｏｌ １０Ｇ１０Ｏ：デカグリセロールデカオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ３ＧＯ：トリグリセロールモノオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ＥＴ：混合脂肪酸のポリグリセロールエステル；Ｃａｐｒｏｌ ＭＰＧＯ：ヘキサグリセロールジオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ＰＧＥ ８６０：デカグリセロールモノ－、ジオレートが挙げられる。
【0114】
本明細書で使用される場合、「界面活性剤」とは、極性または荷電親水性部分ならびに非極性疎水性（親油性）部分を含む化合物を指し、すなわち、界面活性剤は、両親媒性である。界面活性剤という用語は、化合物のうちの１つまたは混合物を指し得る。界面活性剤は、可溶化剤、乳化剤、または分散剤であり得る。界面活性剤は、親水性であるか、または疎水性であり得る。
【0115】
親水性界面活性剤は、薬学的組成物での使用に好適な任意の親水性界面活性剤であり得る。そのような界面活性剤は、アニオン性、カチオン性、双性イオン性または非イオン性であり得るが、非イオン性親水性界面活性剤が、現在好ましい。上に議論されるように、これらの非イオン性親水性界面活性剤は、一般に約１０を超えるＨＬＢ値を有する。親水性界面活性剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。
【0116】
同様に、疎水性界面活性剤は、薬学的組成物での使用に好適な任意の疎水性界面活性剤であり得る。一般に、好適な疎水性界面活性剤は、約１０未満のＨＬＢ値を有する。疎水性界面活性剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。
【0117】
追加の好適な可溶化剤の例には、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、ベンジルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタンジオールおよびその異性体、グリセロール、ペンタエリスリトール、ソルビトール、マンニトール、トランスクトール、ジメチルイソソルビド、ポリエチレングリコール、ポリプロピレン、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、シクロデキストリンおよびシクロデキストリン誘導体などのアルコールおよびポリオール；テトラヒドロフルフリルアルコールＰＥＧエーテル（ＢＡＳＦから商品名Ｔｅｔｒａｇｌｙｃｏｌで市販されている、グリコフロール）またはメトキシＰＥＧ（Ｕｎｉｏｎ Ｃａｒｂｉｄｅ）などの約２００～約６０００の平均分子量を有するポリエチレングリコールのエーテル；２－ピロリドン、２－ピペリドン、カプロラクタム、Ｎ－アルキルピロリドン、Ｎ－ヒドロキシアルキルピロリドン、Ｎ－アルキルピペリドン、Ｎ－アルキルカプロラクタム、ジメチルアセトアミド、およびポリビニピロリドンなどのアミド；プロピオン酸エチル、クエン酸トリブチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリエチル、オレイン酸エチル、カプリル酸エチル、酪酸エチル、トリアセチン、プロピレングリコールモノアセテート、プロピレングリコールジアセテート、カプロラクトンおよびその異性体、バレロラクトンおよびその異性体、ブチロラクトンおよび異性体などのエステル；ならびにジメチルアセトアミド、ジメチルイソソルビド（Ａｒｌａｓｏｌｖｅ ＤＭＩ（ＩＣＩ））、Ｎ－メチルピロリドン（Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ（ＩＳＰ））、モノオクタノイン、ジエチレングリコールノノエチルエーテル（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅから商品名Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌで入手可能）、および水などの当該技術分野で知られている他の可溶化剤が挙げられる。可溶化剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。
【0118】
示されている場合を除いて、本明細書で言及される化合物は、標準的な商業的供給源から容易に入手可能である。
【0119】
必要ではないが、組成物または製剤は、１つ以上のキレート剤、１つ以上の防腐剤、１つ以上の抗酸化剤、１つ以上の吸着剤、１つ以上の酸性化剤、１つ以上のアルカリ化剤、１つ以上の消泡剤、１つ以上の緩衝剤、１つ以上の着色剤、１つ以上の電解質、１つ以上の塩、１つ以上の安定化剤、１つ以上の張性改質剤、１つ以上の希釈剤、またはそれらの組み合わせをさらに含み得る。
【0120】
本発明の組成物はまた、固定油、落花生油、ゴマ油、綿実油、トウモロコシ油、およびオリーブ油などの油；オレイン酸、ステアリン酸、およびイソステアリン酸などの脂肪酸；ならびにオレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、脂肪酸グリセリド、およびアセチル化脂肪酸グリセリドなどの脂肪酸エステルを含み得る。組成物は、エタノール、イソプロパノール、ヘキサデシルアルコール、グリセロール、およびプロピレングリコールなどのアルコール；２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－メタノールなどのグリセロールケタール；ポリ（エチレングリコール）４５０などのエーテル；鉱油およびワセリンなどの石油系炭化水素；水；薬学的に好適な界面活性剤、懸濁化剤、もしくは乳化剤；またはそれらの混合物を含み得る。
【0121】
薬学的製剤の技術分野で使用される化合物は、一般に、様々な機能または目的に役立つことを理解されたい。したがって、本明細書で名付けられた化合物が一度だけ言及されるか、または本明細書で２つ以上の用語を定義するために使用される場合、その目的または機能は、その名付けられた目的（複数可）または機能（複数可）のみに限定されると解釈されるべきではない。
【0122】
製剤の１つ以上の構成成分は、その遊離塩基、遊離酸、または薬学的もしくは分析的に許容される塩形態で存在し得る。本明細書で使用される場合、「薬学的または分析的に許容される塩」は、イオン結合対を形成するために必要に応じて酸と化合物を反応させることにより修飾された化合物を指す。許容される塩の例には、例えば、非毒性の無機酸または有機酸から形成される従来の非毒性の塩が含まれる。好適な非毒性の塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルホン酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸、および当業者に知られている他のものなどの無機酸に由来するものが含まれる。アミノ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２－アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、および当業者に知られている他のものなどの有機酸から調製された塩。一方で、薬理学的に活性な成分が酸官能基を有する場合、薬学的に許容される塩基が添加され、薬学的に許容される塩を形成する。他の好適な塩の一覧は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ´ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７th．ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８５，ｐ．１４１８に見出され、その関連する開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0123】
「薬学的に許容される」という語句は、健全な医学的判断の範囲内で、人間および動物の組織との接触での使用に好適であり、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または任意の他の問題もしくは合併症なく、合理的な利益／リスク比に相応する、化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。
【0124】
剤形は、製薬業界で知られている任意の従来の手段によって作製することができる。液体剤形は、少なくとも１つの液体担体および抗ウイルス組成物を容器に提供することによって調製することができる。１つ以上の他の賦形剤を、液体剤形に含めることができる。固体剤形は、少なくとも１つの固体担体および抗ウイルス組成物を提供することによって調製することができる。１つ以上の他の賦形剤を、固体剤形に含めることができる。
【0125】
剤形は、従来のパッケージング機器および材料を使用してパッケージすることができる。それは、パック、ボトル、ビア、バッグ、シリンジ、封筒、パケット、ブリスターパック、箱、アンプル、またはその他のそのような容器に入れることができる。
【0126】
本発明の組成物は、任意の剤形に含まれ売る。特定の剤形には、固体または液体の剤形が含まれる。例示的な好適な剤形には、錠剤、カプセル、丸剤、カプレット、トローチ、サシェ、および薬科学の当業者に知られている他のそのような剤形が含まれる。
【0127】
上記の説明および以下の実施例を考慮して、当業者は、過度の実験をすることなく、請求された本発明を実施することができるであろう。上記は、本発明の実施形態の調製のためのある特定の手順を詳述する以下の実施例を参照してより理解されるであろう。これらの例になされる全ての参照は、説明を目的のためである。以下の実施例は、網羅的なものとみなされるべきではないが、本発明によって企図される多くの実施形態のうちのほんのいくつかのみの単なる例示とみなされるべきである。
【実施例0128】
実施例１
粉末化したキョウチクトウの葉の超臨界流体抽出
方法Ａ．二酸化炭素を使用。
キョウチクトウの葉の材料を、収穫、洗浄、および乾燥し、その後、キョウチクトウの葉の材料を、米国特許第５，２３６，１３２号、第５，５９８，９７９号、第６，５１７，０１５号、および第６，７１５，７０５号に記載されているものなどの粉砕および脱水装置に通すことにより、粉末化したキョウチクトウの葉を調製した。使用した出発材料の重量は、３．９４ｋｇであった。
粉末化したキョウチクトウの葉の超臨界流体抽出
方法Ａ．二酸化炭素を使用。
キョウチクトウの葉の材料を、収穫、洗浄、および乾燥し、その後、キョウチクトウの葉の材料を、米国特許第５，２３６，１３２号、第５，５９８，９７９号、第６，５１７，０１５号、および第６，７１５，７０５号に記載されているものなどの粉砕および脱水装置に通すことにより、粉末化したキョウチクトウの葉を調製した。使用した出発材料の重量は、３．９４ｋｇであった。
【0129】
出発材料を、抽出装置で３００ｂａｒ（３０ＭＰａ、４３５１ｐｓｉ）の圧力および５０℃（１２２°Ｆ）の温度で純ＣＯ2と混合した。合計１９７ｋｇのＣＯ2を使用して、５０：１の溶媒対原料の比率を得た。次いで、ＣＯ2および原料の混合物を分離装置に通し、分離装置で混合物の圧力および温度を変化させ、抽出物を二酸化炭素から分離した。
【0130】
抽出物（６５ｇ）を、良い香りを有する茶色がかった、粘着性の、粘性物質として得た。色は、クロロフィルおよび他の残留発色性化合物によって引き起こされた可能性が高い。正確な収率決定のために、チューブおよび分離器をアセトンですすぎ、アセトンを蒸発させて追加の抽出物９ｇを得た。総抽出量は、７４ｇであった。出発物質の重量に基づいて、抽出物の収率は、１．８８％であった。抽出物中のオレアンドリンの含有量を、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析法を使用して、５６０．１ｍｇ、または０．７６％の収率であると計算した。
【0131】
方法Ｂ．二酸化炭素およびエタノールの混合物を使用
キョウチクトウの葉の材料を、収穫、洗浄、および乾燥し、その後、キョウチクトウの葉の材料を、米国特許第５，２３６，１３２号、第５，５９８，９７９号、第６，５１７，０１５号、および第６，７１５，７０５号に記載されているものなどの粉砕および脱水装置に通すことにより、粉末化したキョウチクトウの葉を調製した。使用した出発材料の重量は、３．８５ｋｇであった。
キョウチクトウの葉の材料を、収穫、洗浄、および乾燥し、その後、キョウチクトウの葉の材料を、米国特許第５，２３６，１３２号、第５，５９８，９７９号、第６，５１７，０１５号、および第６，７１５，７０５号に記載されているものなどの粉砕および脱水装置に通すことにより、粉末化したキョウチクトウの葉を調製した。使用した出発材料の重量は、３．８５ｋｇであった。
【0132】
出発物質を、抽出装置で２８０ｂａｒ（２８ＭＰａ、４０６１ｐｓｉ）の圧力および５０℃（１２２°Ｆ）の温度で、改質剤として純ＣＯ2および５％エタノールと混合した。合計１６０ｋｇのＣＯ2および８ｋｇのエタノールを使用して、４３．６対１の溶媒対原料の比率を得た。次いで、ＣＯ2、エタノール、および原料の混合物を分離装置に通し、分離装置で混合物の圧力および温度を変化させ、抽出物を二酸化炭素から分離した。
【0133】
エタノールの除去後、抽出物（２０７ｇ）を、明らかにいくらかのクロロフィルを含む暗緑色の、粘着性の、粘性のある塊として得た。出発物質の重量に基づいて、抽出物の収率は、５．３８％であった。抽出物中のオレアンドリンの含有量を、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析法を使用して、１．８９ｇ、または０．９１％の収率であると計算した。
【0134】
実施例２
粉末化したキョウチクトウの葉の熱水抽出
（比較例）
温水抽出は、典型的には、キョウチクトウの葉からオレアンドリンおよび他の活性成分を抽出するために使用される。熱水抽出プロセスの例は、米国特許第５，１３５，７４５号および第５，８６９，０６０号に見出され得る。
粉末化したキョウチクトウの葉の熱水抽出
（比較例）
温水抽出は、典型的には、キョウチクトウの葉からオレアンドリンおよび他の活性成分を抽出するために使用される。熱水抽出プロセスの例は、米国特許第５，１３５，７４５号および第５，８６９，０６０号に見出され得る。
【0135】
５ｇの粉末化したキョウチクトウの葉を使用して、熱水抽出を実施した。１０容量の沸騰水（キョウチクトウ出発原料の重量）を、粉末化したキョウチクトウの葉に添加し、混合物を６時間一定に撹拌した。次いで、混合物を濾過し、葉の残留物を収集し、同じ条件下で再度抽出した。濾液を混合して凍結乾燥した。抽出物の外観は、茶色であった。乾燥した抽出物の重量は、約１．４４ｇであった。３４．２１ｍｇの抽出物材料を、水に溶解し、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析を使用してオレアンドリン含有量分析を行った。オレアンドリンの量を、３．６８ｍｇであると判定した。抽出物の量に基づいて、オレアンドリンの収率を、０．２６％であると計算した。
【0136】
実施例３
薬学的組成物の調製。
方法Ａ．クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。
薬学的組成物の調製。
方法Ａ．クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。
【0137】
賦形剤を瓶に分注し、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃ２４ＫＣ冷蔵インキュベーターシェーカーで、６０℃で２４時間振盪して、均一性を確実にした。次に、試料を引き抜き、可溶化について視覚的に検査した。２４時間後、全ての製剤について、賦形剤および抗ウイルス組成物の両方が完全に溶解した。
【0138】
方法Ｂ．ＧＭＯ／クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。
以下の成分を、示される量で提供した。
【0139】
方法Ａの手順に従った。
【0140】
方法Ｃ．ラブラゾルベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。
以下の成分を、示される量で提供した。
【0141】
方法Ａの手順に従った。
【0142】
方法Ｄ．ビタミンＥ－ＴＰＧＳベースのミセル形成システム
以下の成分を、示される量で提供した。
以下の成分を、示される量で提供した。
【0143】
方法Ａの手順に従った。
【0144】
方法Ｅ．多構成成分薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。
以下の成分を、示される量で提供した。
【0145】
方法Ａの手順に従った。
【0146】
方法Ｅ．多構成成分薬物送達システム
以下の成分を、カプセルに含まれることが示されている量で提供した。
以下の成分を、カプセルに含まれることが示されている量で提供した。
【0147】
方法Ａの手順に従った。
【0148】
実施例４
腸溶コーティングされたカプセルの調製
ステップＩ：液体充填カプセルの調製
硬ゼラチンカプセル（５０カウント、００サイズ）に、実施例３の液体組成物を充填した。これらのカプセルに、８００ｍｇの製剤を手で充填し、次いで、５０％エタノール／５０％水溶液で、手で密封した。次いで、カプセルを、以下の成分を示される量で含む２２％ゼラチン溶液で、手でバンディングした。
腸溶コーティングされたカプセルの調製
ステップＩ：液体充填カプセルの調製
硬ゼラチンカプセル（５０カウント、００サイズ）に、実施例３の液体組成物を充填した。これらのカプセルに、８００ｍｇの製剤を手で充填し、次いで、５０％エタノール／５０％水溶液で、手で密封した。次いで、カプセルを、以下の成分を示される量で含む２２％ゼラチン溶液で、手でバンディングした。
【0149】
ゼラチン溶液を完全に混合し、１～２時間膨潤させた。膨潤後、溶液をしっかりと覆い、５５℃のオーブンに入れて液化させた。ゼラチン溶液全体が液体になると、バンディングを行った。
【0150】
先の尖った丸い３／０アーティストブラシを使用して、ゼラチン溶液をカプセルに塗布した。シオノギ社から提供されているバンディングキットを使用した。バンディング後、カプセルを、周囲条件に１２時間保持し、バンドを硬化させた。
【0151】
ステップＩＩ：液体充填カプセルのコーティング
以下の表に列挙される成分からコーティング分散液を調製した。
以下の表に列挙される成分からコーティング分散液を調製した。
【0152】
ステップＩのバンディングしたカプセルを使用した場合、分散液を、２０．０ｍｇ／ｃｍ2のコーティングレベルまでカプセルに塗布した。以下の条件を使用して、カプセルをコーティングした。
＊スプレーノズルを、ノズルおよびスプレー経路の両方が吸気の流路の下になるように設定した。
＊スプレーノズルを、ノズルおよびスプレー経路の両方が吸気の流路の下になるように設定した。
【0153】
実施例５
対象におけるジカウイルス感染の治療
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
ジカウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のジカウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
対象におけるジカウイルス感染の治療
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
ジカウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のジカウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
【0154】
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
ジカウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。
ジカウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。
【0155】
実施例６
ジカウイルス感染に対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．純粋な化合物
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞（Ｖｅｒｏ Ｃ１００８細胞としても既知である、ＡＴＴＣ番号ＣＲＬ－１５８６；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／Ｐｒｏｄｕｃｔｓ／Ａｌｌ／ＣＲＬ－１５８６．ａｓｐｘ）に、強心配糖体の存在下で、０．２のＭＯＩ（感染多重度）でＺＩＫＶ（ジカウイルス株ＰＲＶＡＢＣ５９；ＡＴＣＣ ＶＲ－１８４３；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／Ｐｒｏｄｕｃｔｓ／Ａｌｌ／ＶＲ－１８４３．ａｓｐｘ）を感染させた。細胞を、ウイルスおよび化合物とともに１時間インキュベートした後、接種物および化合物を廃棄した。細胞に、新鮮な培地を与え、４８時間インキュベートした後、それらをホルマリンで固定し、ＺＩＫＶ感染を染色した。シンチグラフィーにより判定されたオレアンドリン（図１Ａ）およびジゴキシン（図１Ｂ）の代表的な感染率を示す。他の化合物は、同じ条件下で評価され、ジカウイルスに対して非常に異なるレベルの抗ウイルス活性を示した。
ジカウイルス感染に対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．純粋な化合物
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞（Ｖｅｒｏ Ｃ１００８細胞としても既知である、ＡＴＴＣ番号ＣＲＬ－１５８６；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／Ｐｒｏｄｕｃｔｓ／Ａｌｌ／ＣＲＬ－１５８６．ａｓｐｘ）に、強心配糖体の存在下で、０．２のＭＯＩ（感染多重度）でＺＩＫＶ（ジカウイルス株ＰＲＶＡＢＣ５９；ＡＴＣＣ ＶＲ－１８４３；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／Ｐｒｏｄｕｃｔｓ／Ａｌｌ／ＶＲ－１８４３．ａｓｐｘ）を感染させた。細胞を、ウイルスおよび化合物とともに１時間インキュベートした後、接種物および化合物を廃棄した。細胞に、新鮮な培地を与え、４８時間インキュベートした後、それらをホルマリンで固定し、ＺＩＫＶ感染を染色した。シンチグラフィーにより判定されたオレアンドリン（図１Ａ）およびジゴキシン（図１Ｂ）の代表的な感染率を示す。他の化合物は、同じ条件下で評価され、ジカウイルスに対して非常に異なるレベルの抗ウイルス活性を示した。
【0156】
方法Ｂ．抽出物形態の化合物
試験されている標的化合物を含む抽出物を、抽出物の量が抽出物中の標的化合物の量に正規化されることを除いて、方法Ａで詳述されるように評価する。例えば、２重量％のオレアンドリンを含む抽出物は、抽出物１ｍｇあたり２０ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリンが含む。したがって、評価のためのオレアンドリンの意図された量が２０ｍｉｃｒｏｇである場合、１ｍｇの抽出物をアッセイで使用する。
試験されている標的化合物を含む抽出物を、抽出物の量が抽出物中の標的化合物の量に正規化されることを除いて、方法Ａで詳述されるように評価する。例えば、２重量％のオレアンドリンを含む抽出物は、抽出物１ｍｇあたり２０ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリンが含む。したがって、評価のためのオレアンドリンの意図された量が２０ｍｉｃｒｏｇである場合、１ｍｇの抽出物をアッセイで使用する。
【0157】
実施例７
抗ウイルス組成物を含む錠剤の調製
３％サイロイド２４４ＦＰおよび９７％微結晶セルロース（ＭＣＣ）の初期錠剤化混合物を混合した。次いで、実施例３に従って調製された組成物の既存のバッチを、湿式造粒を介してサイロイド／ＭＣＣ混合物に組み込んだ。この混合物は、以下の表で「初期錠剤化混合物」と標識される。圧縮性を高めるために、追加のＭＣＣをさらに顆粒状で添加した。初期錠剤化混合物へのこの添加を、「さらなる顆粒状添加」と標識した。さらなる顆粒状添加から得られた混合物は、「最終錠剤化混合物」と同じ組成物であった。
抗ウイルス組成物を含む錠剤の調製
３％サイロイド２４４ＦＰおよび９７％微結晶セルロース（ＭＣＣ）の初期錠剤化混合物を混合した。次いで、実施例３に従って調製された組成物の既存のバッチを、湿式造粒を介してサイロイド／ＭＣＣ混合物に組み込んだ。この混合物は、以下の表で「初期錠剤化混合物」と標識される。圧縮性を高めるために、追加のＭＣＣをさらに顆粒状で添加した。初期錠剤化混合物へのこの添加を、「さらなる顆粒状添加」と標識した。さらなる顆粒状添加から得られた混合物は、「最終錠剤化混合物」と同じ組成物であった。
【0158】
サイロイド２４４ＦＰは、Ｇｒａｃｅ Ｄａｖｉｓｏｎによって製造されたコロイド状二酸化ケイ素である。コロイド状二酸化ケイ素は、吸着剤、流動促進剤、および錠剤崩壊剤などのいくつかの機能を提供するために一般的に使用される。サイロイド２４４ＦＰを、その重量の３倍の油を吸着するその能力およびその５．５ミクロンの粒子サイズのために選択した。
【0159】
実施例８
オレアンドリンを含む溶液のＨＰＬＣ分析
試料（オレアンドリン標準、ＳＣＦ抽出物、および熱水抽出物）を、以下の条件を用いてＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）で分析した：シンメトリーＣ１８カラム（５．０μｍ、１５０´４．６ｍｍ内径；Ｗａｔｅｒｓ）；ＭｅＯＨ：水の移動相＝５４：４６（ｖ／ｖ）および流量１．０ｍｌ／分。検出波長を、２１７ｎｍに設定した。試料を、オレアンドリンのおおよその目標濃度を達成するために、化合物または抽出物を一定量のＨＰＬＣ溶媒に溶解することによって調製した。オレアンドリンの保持時間は、内部標準を使用することによって判定することができる。オレアンドリンの濃度は、内部標準を使用してシグナル応答曲線を作成することによって判定／較正することができる。
オレアンドリンを含む溶液のＨＰＬＣ分析
試料（オレアンドリン標準、ＳＣＦ抽出物、および熱水抽出物）を、以下の条件を用いてＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）で分析した：シンメトリーＣ１８カラム（５．０μｍ、１５０´４．６ｍｍ内径；Ｗａｔｅｒｓ）；ＭｅＯＨ：水の移動相＝５４：４６（ｖ／ｖ）および流量１．０ｍｌ／分。検出波長を、２１７ｎｍに設定した。試料を、オレアンドリンのおおよその目標濃度を達成するために、化合物または抽出物を一定量のＨＰＬＣ溶媒に溶解することによって調製した。オレアンドリンの保持時間は、内部標準を使用することによって判定することができる。オレアンドリンの濃度は、内部標準を使用してシグナル応答曲線を作成することによって判定／較正することができる。
【0160】
実施例９
薬学的組成物の調製
本発明の薬学的組成物は、以下の方法のうちのいずれかで調製することができる。混合を、湿潤または乾燥条件下で行うことができる。薬学的組成物は、調製中に圧縮、乾燥、またはその両方を行うことができる。薬学的組成物は、剤形に分割することができる。
薬学的組成物の調製
本発明の薬学的組成物は、以下の方法のうちのいずれかで調製することができる。混合を、湿潤または乾燥条件下で行うことができる。薬学的組成物は、調製中に圧縮、乾燥、またはその両方を行うことができる。薬学的組成物は、剤形に分割することができる。
【0161】
方法Ａ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの抗ウイルス化合物と混合する。
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの抗ウイルス化合物と混合する。
【0162】
方法Ｂ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも２つの抗ウイルス化合物と混合する。
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも２つの抗ウイルス化合物と混合する。
【0163】
方法Ｃ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの強心配糖体と混合する。
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの強心配糖体と混合する。
【0164】
方法Ｄ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも２つのトリテルペンと混合する。
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも２つのトリテルペンと混合する。
【0165】
方法Ｅ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの強心配糖体および本明細書に開示される少なくとも２つのトリテルペンと混合する。
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの強心配糖体および本明細書に開示される少なくとも２つのトリテルペンと混合する。
【0166】
方法Ｄ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも３つのトリテルペンと混合する。
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも３つのトリテルペンと混合する。
【0167】
実施例１０
トリテルペン混合物の調製
以下の組成物を、示されたおおよそのモル比で指定されたトリテルペンを混合することによって作製した。
トリテルペン混合物の調製
以下の組成物を、示されたおおよそのモル比で指定されたトリテルペンを混合することによって作製した。
【0168】
各組成物について、３つの異なるそれぞれの溶液を作製し、よって各溶液中のトリテルペンの総濃度は、約９μＭ、１８μＭ、または３６μＭであった。
【0169】
実施例１１
抗ウイルス組成物の調製
抗ウイルス組成物は、その個々のトリテルペン成分を混合して混合物を形成することによって調製することができる。許容される抗ウイルス活性を提供した上記で調製したトリテルペン混合物を、抗ウイルス組成物に製剤化した。
抗ウイルス組成物の調製
抗ウイルス組成物は、その個々のトリテルペン成分を混合して混合物を形成することによって調製することができる。許容される抗ウイルス活性を提供した上記で調製したトリテルペン混合物を、抗ウイルス組成物に製剤化した。
【0170】
オレアノール酸およびウルソール酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸およびウルソール酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
既知量のオレアノール酸およびウルソール酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
【0171】
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。
【0172】
オレアノール酸およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
既知量のオレアノール酸およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
【0173】
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。
【0174】
オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
既知量のオレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
【0175】
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。
【0176】
オレアドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアンドリンオレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
既知量のオレアンドリンオレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
【0177】
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。
【0178】
実施例１２
対象におけるフィロウイルス感染の治療
例示的なフィロウイルス感染には、エボラウイルスおよびマールブルグウイルスが含まれる。
対象におけるフィロウイルス感染の治療
例示的なフィロウイルス感染には、エボラウイルスおよびマールブルグウイルスが含まれる。
【0179】
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
フィロウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のフィロウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
フィロウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のフィロウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
【0180】
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
フィロウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。
フィロウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。
【0181】
実施例１３
対象におけるフラビウイルス感染の治療
例示的なフラビウイルス感染には、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ病、チクングニアウイルス、オムスク出血熱、ポワッサンウイルス感染が含まれる。
対象におけるフラビウイルス感染の治療
例示的なフラビウイルス感染には、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ病、チクングニアウイルス、オムスク出血熱、ポワッサンウイルス感染が含まれる。
【0182】
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
フラビウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のフラビウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
フラビウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のフラビウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
【0183】
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
フラビウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。
フラビウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。
【0184】
実施例１４
ジカウイルスおよびデングウイルスに対する抗ウイルス活性の評価
ＣＰＥベースの抗ウイルスアッセイを、ある範囲の濃度で、試験組成物の存在下または不在下で標的細胞を感染させることによって行った。標的細胞の感染は、細胞変性効果および細胞死をもたらす。この種類のアッセイでは、試験組成物の存在下でのＣＰＥの低減、および対応する細胞生存率の増加を、抗ウイルス活性の指標として使用する。ＣＰＥベースのアッセイについて、細胞生存率をニュートラルレッドの読み取り値で判定した。生細胞を、ニュートラルレッドをそれらのリソソームに組み込む。ニュートラルレッドの取り込みは、細胞質よりもそれらのリソソーム内のより低いｐＨを維持する生細胞の能力に依存しており、この活性プロセスは、ＡＴＰを必要とする。リソソーム内に入ると、ニュートラルレッド色素は荷電し、細胞内に保持される。ニュートラルレッド（０．０３３％）とともに３時間インキュベートした後、細胞外色素を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄し、細胞内ニュートラルレッドを５０％エタノール＋１％酢酸の溶液で可溶化した。４９０ｎｍでの各ウェルの吸光度（光学密度）を読み取ることによって、溶液中のニュートラルレッドの量を定量化した。
ジカウイルスおよびデングウイルスに対する抗ウイルス活性の評価
ＣＰＥベースの抗ウイルスアッセイを、ある範囲の濃度で、試験組成物の存在下または不在下で標的細胞を感染させることによって行った。標的細胞の感染は、細胞変性効果および細胞死をもたらす。この種類のアッセイでは、試験組成物の存在下でのＣＰＥの低減、および対応する細胞生存率の増加を、抗ウイルス活性の指標として使用する。ＣＰＥベースのアッセイについて、細胞生存率をニュートラルレッドの読み取り値で判定した。生細胞を、ニュートラルレッドをそれらのリソソームに組み込む。ニュートラルレッドの取り込みは、細胞質よりもそれらのリソソーム内のより低いｐＨを維持する生細胞の能力に依存しており、この活性プロセスは、ＡＴＰを必要とする。リソソーム内に入ると、ニュートラルレッド色素は荷電し、細胞内に保持される。ニュートラルレッド（０．０３３％）とともに３時間インキュベートした後、細胞外色素を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄し、細胞内ニュートラルレッドを５０％エタノール＋１％酢酸の溶液で可溶化した。４９０ｎｍでの各ウェルの吸光度（光学密度）を読み取ることによって、溶液中のニュートラルレッドの量を定量化した。
【0185】
付着細胞株を使用して、ウイルスのパネルに対する組成物の抗ウイルス活性を評価した。細部へのウイルスの添加前に、組成物を、標的細胞とともに３０分間事前にインキュベートした。組成物は、感染インキュベーション期間中、細胞培養培地に存在した。各感染アッセイについて、ウイルスの不在下での組成物の細胞毒性効果を判定するために、同じ濃度の組成物（複製）を使用して、生存率アッセイを並行して設定した。
【0186】
試験組成物の抗ウイルス活性を、試験条件下での細胞の感染レベル（免疫染色ベースのアッセイの場合）または生存率（ＣＰＥベースのアッセイの場合）を非感染細胞の感染レベルまたは生存率と比較することによって判定した。細胞毒性効果を、阻害剤の存在下での生存率を模擬処理細胞の生存率と比較することによって、非感染細胞で評価した。細胞毒性を、ＸＴＴ生存率アッセイによって判定し、これは、対応する感染アッセイの読み出しと同じ時点で実施した。
【0187】
試験組成物を、１００％メタノールに溶解した。試験される最高濃度として５０μＭで開始して、８倍希釈を行うことによって、８つの濃度の組成物を生成した（複製で）。組成物の最高試験濃度（５０μＭ）は、培養培地中のメタノールの最終濃度０．２５％（ｖ／ｖ％）をもたらした。メタノールビヒクルの一連の８倍希釈は、各アッセイのプレートに含まれ、濃度は各組成物の試験条件におけるメタノールの最終濃度を反映している。可能な場合、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、各アッセイについて組成物のＥＣ５０およびＣＣ５０を判定した。
【0188】
抗ウイルス活性は、ウイルス誘発性細胞変性効果（ＣＰＥ）に対する保護の程度によって評価した。異なる濃度の対照または組成物の存在下で、細胞をウイルスで攻撃した。ＣＰＥに対する保護の程度を、感染後６日（ＺＩＫＶ、ジカウイルス）または７日（ＤＥＮＶ、デングウイルス）後に、異なる試験条件で細胞生存率を定量化し、値を未処理の細胞およびビヒクルのみ（感染培地）で処理した細胞の値と比較することによって監視した。
【0189】
中和アッセイの品質管理を全てのプレートで行い、ｉ）バックグラウンドに対するシグナル（Ｓ／Ｂ）値、ｉｉ）既知の阻害剤による阻害、およびｉｉｉ）全てのデータポイントの変動係数（ＣＶ）により測定されるアッセイの変動を判定した。感染アッセイの全体的な変動は、３．４％～９．５％の範囲であり、生存率アッセイの全体的な変動は、１．４％～３．２％の範囲であり、全てのＣＶ値の平均として計算した。感染アッセイのシグナル対バックグラウンド（Ｓ／Ｂ）は、２．９～１１．０の範囲であったが、一方で、生存率アッセイのシグナル対バックグラウンド（Ｓ／Ｂ）は、６．５～２９．９の範囲であった。
【0190】
ニュートラルレッド読み取りによるＤＥＮＶ２誘発細胞変性効果（ＣＰＥ）の保護：ＤＥＮＶ２抗ウイルスアッセイでは、０８－１０３８１ Ｍｏｎｔｓｅｒｒａｔ株を使用した。ウイルスストックを、Ｃ６／３６昆虫細胞で生成した。Ｖｅｒｏ細胞（Ｃｅｒｃｏｐｉｔｈｅｃｕｓ ａｅｔｈｉｏｐｓに由来する上皮腎細胞）を、５％ＦＢＳを含むＭＥＭ（ＭＥＭ５）で維持した。感染および生存率の両方のアッセイのために、細胞を、９６ウェル透明平底プレートに１ウェルあたり１０，０００個の細胞で播種し、２４時間３７℃で、ＭＥＭ５で維持した。感染の日に、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むＭＥＭを使用して、試料をＵ底プレートに８倍に希釈した。試験物質の希釈液を、１．２５倍の最終濃度で調製し、４０μｌを標的細胞とともに３７℃で３０分間インキュベートした。試験材料の事前インキュベーション後、１％ＢＳＡを含むＭＥＭで調製した１０μｌのウイルス希釈液を各ウェルに添加し（１ウェルあたり５０μｌの最終体積）、プレートを、５％ＣＯ２の加湿インキュベーターで、３７℃で３時間インキュベートした。アッセイで使用されるウイルスの体積を、リバビリンおよびＤＥＮＶ２の既知の阻害剤である化合物Ａ３によって阻害される線形範囲のシグナルを生成するように以前に決定した。感染インキュベーションの後、細胞を、ＰＢＳ、次いで２％ＦＢＳを含むＭＥＭ（ＭＥＭ２）で洗浄し、未結合ウイルスを除去した。続いて、ＭＥＭ２で１倍の濃度で調製した阻害剤希釈液を含む５０μｌの培地を、各ウェルに添加した。プレートを、インキュベーター（５％ＣＯ２）で、３７℃で７日間インキュベートした。ウイルスを含まない対照（「模擬感染」）、培地のみでインキュベートした感染細胞、ビヒクルのみ（メタノール）でインキュベートした感染細胞、および細胞を含まないウェル（バックグラウンドを判定するため）を、アッセイプレートに含めた。５０μＭリバビリンおよび０．５μＭ化合物Ａ３を含む対照ウェルもまた、アッセイプレートに含めた。感染の７日後、細胞を、ニュートラルレッドで染色し、細胞生存率を監視した。試験材料を、感染培地で連続８倍希釈を使用して複製で評価した。対照は、ウイルスなしでインキュベートした細胞（「模擬感染」）、培地のみでインキュベートした感染細胞、またはリバビリン（０．５μＭ）もしくはＡ３（０．５μＭ）の存在下での感染細胞を含んだ。メタノールビヒクルのみを使用した完全な複製阻害曲線は、同じアッセイプレートに含まれた。
【0191】
ニュートラルレッド読み取りによるＺＩＫＶ誘導細胞変性効果（ＣＰＥ）の保護：ＺＩＫＶ抗ウイルスアッセイでは、ＰＬＣａｌ＿ＺＶ株を使用した。Ｖｅｒｏ細胞（Ｃｅｒｃｏｐｉｔｈｅｃｕｓ ａｅｔｈｉｏｐｓに由来する上皮腎細胞）を、５％ＦＢＳを含むＭＥＭ（ＭＥＭ５）で維持した。感染および生存率の両方のアッセイのために、細胞を、９６ウェル透明平底プレートに１ウェルあたり１０，０００個の細胞で播種し、２４時間３７℃で、ＭＥＭ５で維持した。感染の日に、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むＭＥＭを使用して、試料をＵ底プレートに８倍に希釈した。試験物質の希釈液を、１．２５倍の最終濃度で調製し、４０μｌを標的細胞とともに３７℃で３０分間インキュベートした。試験材料の事前インキュベーション後、１％ＢＳＡを含むＭＥＭで調製した１０μｌのウイルス希釈液を各ウェルに添加し（１ウェルあたり５０μｌの最終体積）、プレートを、５％ＣＯ２の加湿インキュベーターで、３７℃で３時間インキュベートした。感染インキュベーションの後、細胞を、ＰＢＳ、次いで２％ＦＢＳを含むＭＥＭ（ＭＥＭ２）で洗浄し、未結合ウイルスを除去した。続いて、ＭＥＭ２で１倍の濃度で調製した阻害剤希釈液を含む５０μｌの培地を、各ウェルに添加した。プレートを、インキュベーター（５％ＣＯ２）で、３７℃で６日間インキュベートした。ウイルスを含まない対照（「模擬感染」）、培地のみでインキュベートした感染細胞、ビヒクルのみ（メタノール）でインキュベートした感染細胞、および細胞を含まないウェル（バックグラウンドを判定するため）を、アッセイプレートに含めた。感染の６日後、細胞を、ニュートラルレッドで染色し、細胞生存率を監視した。試験材料を、感染培地で連続８倍希釈を使用して複製で評価した。対照は、ウイルスなしでインキュベートした細胞（「模擬感染」）、培地のみでインキュベートした感染細胞、またはＡ３（０．５μＭ）の存在下での感染細胞を含んだ。メタノールビヒクルのみを使用した完全な複製阻害曲線は、同じアッセイプレートに含まれた。
【0192】
ＣＰＥベースの生存率データの分析：ニュートラルレッドアッセイでは、４９０ｎｍでの吸光度を監視することによって、細胞生存率を判定した。細胞を含まないウェルで得られた平均シグナルを、全ての試料から差し引いた。次いで、全てのデータポイントを、同じアッセイプレート上の模擬（非感染）細胞の８つのウェルで観察された平均シグナルの割合として計算した。培地のみで処理された感染細胞は、非感染細胞で観察されたシグナルの平均４．２％（ＨＲＶの場合）、２６．９％（ＤＥＮＶの場合）、および５．１％（ＺＩＫＶの場合）の平均にシグナルを低減した。このアッセイのシグナル対バックグラウンド（Ｓ／Ｂ）は、２．９（ＤＥＮＶの場合）、および７．２（ＺＩＫＶの場合）であり、ビヒクルのみで処理した感染細胞の生存率と比較した「模擬感染」細胞の生存率として判定した。
【0193】
化合物誘発細胞毒性を評価するための生存率アッセイ（ＸＴＴ）：模擬感染細胞を、対応する感染アッセイで使用したものと同じ実験設定および阻害剤濃度を使用して、阻害剤希釈液（または培地のみ）とともにインキュベートした。インキュベーション温度およびインキュベーション期間の長さは、対応する感染アッセイの条件を反映した。細胞生存率を、ＸＴＴ法で評価した。ＸＴＴアッセイは、ミトコンドリアの活性を測定し、橙色のホルマザン色素を形成する黄色のテトラゾリウム塩（ＸＴＴ）の切断に基づく。反応は、活性なミトコンドリアを有する生細胞でのみ生じる。ホルマザン色素は、走査型マルチウェル分光光度計を使用して直接定量化される。細胞を含まないウェルから得られたバックグラウンドレベルを、全てのデータポイントから差し引いた。メタノールビヒクルのみの対照（各オレアンドリン試験ウェルの最終メタノールパーセントを反映する７つの濃度で）を、生存率アッセイプレートに含めた。生存率の程度は、４９０ｎｍでの吸光度を測定することによって監視した。
【0194】
細胞毒性データの分析：ＸＴＴアッセイでは、４９０ｎｍでの吸光度を監視することによって、細胞生存率を判定した。細胞を含まないウェルで得られた平均シグナルを、全ての試料から差し引いた。次いで、全てのデータポイントを、同じアッセイプレート上の模擬（非感染）細胞の８つのウェルで観察された平均シグナルの割合として計算した。このアッセイのシグナル対バックグラウンド（Ｓ／Ｂ）は、２９．９（ＩＶＡの場合）、８．７（ＨＲＶの場合）、６．５（ＤＥＮＶの場合）、および６．７（ＺＩＫＶの場合）であり、細胞を含まないウェルで観察されたシグナルと比較した「模擬感染」細胞の生存率として判定した。
【0195】
実施例１５
フィロウイルス（エボラウイルスおよびマールブルグウイルス）に対する抗ウイルス活性の評価
方法Ａ．
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリン、ジゴキシン、またはオレアンドリン含有植物抽出物であるＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶ／Ｋｉｋ（Ａ、ＭＯＩ＝１）またはＭＡＲＶ／Ｃｉ６７（Ｂ、ＭＯＩ＝１）を感染させた。１時間後、接種物および化合物を除去し、新鮮な培地を細胞に添加した。４８時間後、細胞を固定して免疫染色し、ＥＢＯＶまたはＭＡＲＶに感染した細胞を検出した。感染した細胞を、Ｏｐｅｒｅｔｔａを使用して数えた。Ｃ）Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を、上記の化合物で処理した。ＡＴＰレベルは、細胞生存率の測定としてＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏによって測定された。
フィロウイルス（エボラウイルスおよびマールブルグウイルス）に対する抗ウイルス活性の評価
方法Ａ．
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリン、ジゴキシン、またはオレアンドリン含有植物抽出物であるＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶ／Ｋｉｋ（Ａ、ＭＯＩ＝１）またはＭＡＲＶ／Ｃｉ６７（Ｂ、ＭＯＩ＝１）を感染させた。１時間後、接種物および化合物を除去し、新鮮な培地を細胞に添加した。４８時間後、細胞を固定して免疫染色し、ＥＢＯＶまたはＭＡＲＶに感染した細胞を検出した。感染した細胞を、Ｏｐｅｒｅｔｔａを使用して数えた。Ｃ）Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を、上記の化合物で処理した。ＡＴＰレベルは、細胞生存率の測定としてＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏによって測定された。
【0196】
方法Ｂ．
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、ＥＢＯＶ（Ａ、Ｂ）またはＭＡＲＶ（Ｃ、Ｄ）を感染させた。感染後２時間（Ａ、Ｃ）または感染後２４時間（Ｂ、Ｄ）で、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４を１時間細胞に添加し、次いで廃棄し、細胞を培養培地に戻した。感染後４８時間で、感染した細胞を図１のように分析した。
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、ＥＢＯＶ（Ａ、Ｂ）またはＭＡＲＶ（Ｃ、Ｄ）を感染させた。感染後２時間（Ａ、Ｃ）または感染後２４時間（Ｂ、Ｄ）で、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４を１時間細胞に添加し、次いで廃棄し、細胞を培養培地に戻した。感染後４８時間で、感染した細胞を図１のように分析した。
【0197】
方法Ｃ．
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶまたはＭＡＲＶを感染させ、４８時間インキュベートした。感染した細胞培養物の上清を、新鮮なＶｅｒｏ Ｅ６細胞に継代し、１時間インキュベートし、次いで廃棄した（Ａに示されるように）。継代した上清を含む細胞を、４８時間インキュベートした。ＥＢＯＶ（Ｂ）またはＭＡＲＶ（Ｃ）に感染した細胞を、以前に記載されるように検出した。対照感染率は、ＥＢＯＶについては６６％、ＭＡＲＶについては６７％であった。
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶまたはＭＡＲＶを感染させ、４８時間インキュベートした。感染した細胞培養物の上清を、新鮮なＶｅｒｏ Ｅ６細胞に継代し、１時間インキュベートし、次いで廃棄した（Ａに示されるように）。継代した上清を含む細胞を、４８時間インキュベートした。ＥＢＯＶ（Ｂ）またはＭＡＲＶ（Ｃ）に感染した細胞を、以前に記載されるように検出した。対照感染率は、ＥＢＯＶについては６６％、ＭＡＲＶについては６７％であった。
【0198】
実施例１６
トガウイルス科ウイルスに対する抗ウイルス活性の評価
（アルファウイルス：ＶＥＥＶおよびＷＥＥＶ）
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、示された化合物の存在下または非存在下で１８時間、ベネズエラウマ脳炎ウイルス（Ａ、ＭＯＩ＝０．０１）または西部ウマ脳炎ウイルス（Ｂ、ＭＯＩ＝０．１）を感染させた。感染した細胞を、本明細書に記載されるように検出し、Ｏｐｅｒｅｔｔａで数えた。
トガウイルス科ウイルスに対する抗ウイルス活性の評価
（アルファウイルス：ＶＥＥＶおよびＷＥＥＶ）
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、示された化合物の存在下または非存在下で１８時間、ベネズエラウマ脳炎ウイルス（Ａ、ＭＯＩ＝０．０１）または西部ウマ脳炎ウイルス（Ｂ、ＭＯＩ＝０．１）を感染させた。感染した細胞を、本明細書に記載されるように検出し、Ｏｐｅｒｅｔｔａで数えた。
【0199】
実施例１７
対象におけるパラミクソウイルス感染の治療
例示的なパラミクソウイルス科ウイルス感染には、ヘニパウイルス属感染、ニパウイルス感染、またはヘンドラウイルス感染が含まれる。
対象におけるパラミクソウイルス感染の治療
例示的なパラミクソウイルス科ウイルス感染には、ヘニパウイルス属感染、ニパウイルス感染、またはヘンドラウイルス感染が含まれる。
【0200】
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
パラミクソウイルス科感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
パラミクソウイルス科感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
【0201】
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
パラミクソウイルス科感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。
パラミクソウイルス科感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。
【0202】
本明細書で使用される場合、「約」または「おおよそ」という用語は、指定された値の±１０％、±５％、±２．５％、または±１％を意味すると解釈される。本明細書で使用される場合、「実質的に」という用語は、「大部分」または「少なくとも大部分」または「５０％超」を意味すると解釈される。
【0203】
上記は、本発明の特定の実施形態の詳細な説明である。本発明の特定の実施形態を例示の目的で本明細書に説明してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な修正を行うことができることを理解されたい。したがって、本発明は、添付の特許請求の範囲による場合を除いて限定されない。本明細書で開示および特許請求される実施形態の全ては、本開示に照らして過度の実験なしで作成および実行することができる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10A】
【図10B】
【図11A】
【図11B】
【図12A】
【図12B】
【図13A】
【図13B】
【手続補正書】
【提出日】2022-03-22
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ウマ脳炎ウイルスによって引き起こされるウマのウイルス感染を治療するための抗ウイルス組成物であって、オレアンドリンと、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、ウルソール酸（その遊離酸または塩）及びベツリン酸（その遊離酸または塩）からなる群より選択される少なくとも2つのトリテルペンとの組み合わせを含む抗ウイルス組成物。
【請求項2】
ウマ脳炎ウイルスによって引き起こされるウイルス感染に罹るリスクのあるウマを予防的に治療するための抗ウイルス組成物であって、前記ウマが前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記ウマに慢性的に投与し、それによって前記ウマが前記ウイルス感染に罹らないようにするための抗ウイルス組成物であり、オレアンドリンと、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、ウルソール酸（その遊離酸または塩）及びベツリン酸（その遊離酸または塩）からなる群より選択される少なくとも2つのトリテルペンとの組み合わせを含む抗ウイルス組成物。
【請求項3】
前記ウマが、前記ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
前記抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を前記ウマに投与することと、
前記抗ウイルス組成物による治療に対するウマの臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
前記ウマの臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
前記ウマの臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記ウマの所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、方法のために用いられる請求項１に記載の抗ウイルス組成物。
前記抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を前記ウマに投与することと、
前記抗ウイルス組成物による治療に対するウマの臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
前記ウマの臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
前記ウマの臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記ウマの所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、方法のために用いられる請求項１に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項4】
前記抗ウイルス組成物が、ａ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、およびウルソール酸（その遊離酸または塩）；ｂ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、およびベツリン酸（その遊離酸または塩）；若しくはｃ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、ウルソール酸（その遊離酸または塩）、およびベツリン酸（その遊離酸または塩）を含む、請求項１に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項5】
１回以上の用量が、毎日、毎週、または毎月の頻度で投与される、請求項１に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項6】
前記投与が、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、口腔投与、またはそれらの組み合わせである、請求項１に記載の方法。
【請求項7】
前記抗ウイルス組成物が、ａ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、およびウルソール酸（その遊離酸または塩）；ｂ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸またはその塩）、およびベツリン酸（その遊離酸または塩）；若しくはｃ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸またはその塩）、ウルソール酸（その遊離酸または塩）、およびベツリン酸（その遊離酸または塩）を含む、請求項２に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項8】
前記抗ウイルス組成物が、ａ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、およびウルソール酸（その遊離酸または塩）；ｂ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、およびベツリン酸（その遊離酸または塩）；若しくはｃ）オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸または塩）、ウルソール酸（その遊離酸または塩）、およびベツリン酸（その遊離酸または塩）を含む、請求項３に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項9】
Ｎｅｒｉｕｍ種またはＴｈｅｖｅｔｉａ種の植物材料の抽出物を含む請求項１に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項10】
前記抽出物が、カルデノリド、カルダジエノリド、カルダトリエノリド、ジギトキシン、アセチルジギトキシン、ジギトキシゲニン、ジゴキシン、アセチルジゴキシン、ジゴキシゲニン、メジゴキシン、ストロファンチン、シマリン、ウアベイン、ストロファンチジン、グルコシド、フルクトシド、グルクロニド、またはそれらの組合せをさらに含む請求項９に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項11】
一次抗ウイルス療法、補助抗ウイルス療法、または併用抗ウイルス療法として投与される請求項１に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項12】
オレアンドリンが、純粋な形態で、またはオレアンドリンを含む抽出物の一部として存在する、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項13】
水溶性（または水混和性）共溶媒、水不溶性（水非混和性）共溶媒、抗酸化剤、および界面活性剤からなる群から選択される少なくとも１つの薬学的賦形剤をさらに含む請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項14】
前記少なくとも１つの水混和性溶媒、少なくとも１つの抗酸化剤、および少なくとも１つの可溶化剤が存在する、請求項１３に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項15】
ウマ脳炎ウイルス感染の治療に使用するための、オレアンドリンを含む、またはオレアンドリンおよび複数のトリテルペンの組み合わせを含む抗ウイルス組成物。
【請求項16】
オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む請求項１５に記載の抗ウイルス組成物。
【手続補正2】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0203】
上記は、本発明の特定の実施形態の詳細な説明である。本発明の特定の実施形態を例示の目的で本明細書に説明してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な修正を行うことができることを理解されたい。したがって、本発明は、添付の特許請求の範囲による場合を除いて限定されない。本明細書で開示および特許請求される実施形態の全ては、本開示に照らして過度の実験なしで作成および実行することができる。
次に、本発明のまた別の好ましい態様を示す。
１． フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染の治療をそれを必要とする対象において治療する方法であって、ａ）オレアンドリンもしくはジゴキシンから選択される強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
２． フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染に罹るリスクのある対象を治療する予防方法であって、前記対象が前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に慢性的に投与し、それによって前記対象が前記ウイルス感染に罹ることを予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、ａ）オレアンドリンもしくはジゴキシンから選択される強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む、予防方法。
３． フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染の治療をそれを必要とする対象において治療する方法であって、
前記対象が、フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
ａ）強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を前記対象に投与することと、
前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
前記対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
前記対象の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、方法。
４． 前記強心配糖体が、オレアンドリンである、上記１に記載の方法。
５． 前記複数のトリテルペンが、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）からなる群から選択される少なくとも２つのトリテルペンである、上記１に記載の方法。
６． 前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～５のいずれか一項に記載の方法。
７． 前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～５のいずれか一項に記載の方法。
８． 前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～５のいずれか一項に記載の方法。
９． 前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～３のいずれか一項に記載の方法。
１０． 前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～３のいずれか一項に記載の方法。
１１． 前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～３のいずれか一項に記載の方法。
１２． 前記ウイルス感染が、フィロウイルス感染、エボラウイルス感染、およびマールブルグウイルス感染からなる群から選択される、上記１～１１のいずれか一項に記載の方法。
１３． 前記ウイルス感染が、フラビウイルス感染、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、オムスク出血熱、およびポワッサンウイルス感染からなる群から選択される、上記１～１１のいずれか一項に記載の方法。
１４． 前記ウイルス感染が、アルパハウイルス感染、ベネズエラウマ脳炎ウイルス感染、西部ウマ脳炎ウイルス感染、チクングニアウイルス感染、および東部ウマ脳炎ウイルスからなる群から選択される、上記１～１１のいずれか一項に記載の方法。
１５． 前記ウイルス感染が、ヘニパウイルス感染、ヘンドラウイルス感染、およびニパウイルス感染からなる群から選択される、上記１～１１のいずれか一項に記載の方法。
１６． 前記対象の血液または血漿中のウイルス力価が、前記治療の結果として低減されるかまたは増加しない、上記１～１５のいずれか一項に記載の方法。
１７． １回以上の用量が、毎日、毎週、または毎月の頻度で投与される、上記１～１６のいずれか一項に記載の方法。
１８． 前記投与が、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、口腔投与、またはそれらの組み合わせである、上記１～１７のいずれか一項に記載の方法。
１９． 前記１つ以上の強心配糖体が、純粋な形態で、または前記強心配糖体を含む抽出物の一部として存在する、上記１～１８のいずれか一項に記載の方法。
２０． 前記抗ウイルス組成物が、水溶性（または水混和性）共溶媒、水不溶性（水非混和性）共溶媒、抗酸化剤、および界面活性剤からなる群から選択される少なくとも１つの薬学的賦形剤をさらに含む、上記１～１９のいずれか一項に記載の方法。
２１． 前記少なくとも１つの水混和性溶媒、少なくとも１つの抗酸化剤、および少なくとも１つの可溶化剤が存在する、上記２０に記載の方法。
２２． 対象におけるフィロウイルス感染またはフラビウイルス感染の治療のための医薬品の製造における、本明細書に記載される１つ以上の抗ウイルス組成物の使用。
２３． ウイルス感染の治療における、本明細書に記載される１つ以上の抗ウイルス組成物の使用。
次に、本発明のまた別の好ましい態様を示す。
１． フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染の治療をそれを必要とする対象において治療する方法であって、ａ）オレアンドリンもしくはジゴキシンから選択される強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
２． フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染に罹るリスクのある対象を治療する予防方法であって、前記対象が前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に慢性的に投与し、それによって前記対象が前記ウイルス感染に罹ることを予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、ａ）オレアンドリンもしくはジゴキシンから選択される強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む、予防方法。
３． フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染の治療をそれを必要とする対象において治療する方法であって、
前記対象が、フラビウイルス科、フィロウイルス科、パラミクソウイルス科、またはトガウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
ａ）強心配糖体、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を前記対象に投与することと、
前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
前記対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
前記対象の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、方法。
４． 前記強心配糖体が、オレアンドリンである、上記１に記載の方法。
５． 前記複数のトリテルペンが、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）からなる群から選択される少なくとも２つのトリテルペンである、上記１に記載の方法。
６． 前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～５のいずれか一項に記載の方法。
７． 前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～５のいずれか一項に記載の方法。
８． 前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～５のいずれか一項に記載の方法。
９． 前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～３のいずれか一項に記載の方法。
１０． 前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびウルソール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～３のいずれか一項に記載の方法。
１１． 前記抗ウイルス組成物が、オレアノール酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、プロドラッグ、または誘導体）を含む、上記１～３のいずれか一項に記載の方法。
１２． 前記ウイルス感染が、フィロウイルス感染、エボラウイルス感染、およびマールブルグウイルス感染からなる群から選択される、上記１～１１のいずれか一項に記載の方法。
１３． 前記ウイルス感染が、フラビウイルス感染、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、オムスク出血熱、およびポワッサンウイルス感染からなる群から選択される、上記１～１１のいずれか一項に記載の方法。
１４． 前記ウイルス感染が、アルパハウイルス感染、ベネズエラウマ脳炎ウイルス感染、西部ウマ脳炎ウイルス感染、チクングニアウイルス感染、および東部ウマ脳炎ウイルスからなる群から選択される、上記１～１１のいずれか一項に記載の方法。
１５． 前記ウイルス感染が、ヘニパウイルス感染、ヘンドラウイルス感染、およびニパウイルス感染からなる群から選択される、上記１～１１のいずれか一項に記載の方法。
１６． 前記対象の血液または血漿中のウイルス力価が、前記治療の結果として低減されるかまたは増加しない、上記１～１５のいずれか一項に記載の方法。
１７． １回以上の用量が、毎日、毎週、または毎月の頻度で投与される、上記１～１６のいずれか一項に記載の方法。
１８． 前記投与が、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、口腔投与、またはそれらの組み合わせである、上記１～１７のいずれか一項に記載の方法。
１９． 前記１つ以上の強心配糖体が、純粋な形態で、または前記強心配糖体を含む抽出物の一部として存在する、上記１～１８のいずれか一項に記載の方法。
２０． 前記抗ウイルス組成物が、水溶性（または水混和性）共溶媒、水不溶性（水非混和性）共溶媒、抗酸化剤、および界面活性剤からなる群から選択される少なくとも１つの薬学的賦形剤をさらに含む、上記１～１９のいずれか一項に記載の方法。
２１． 前記少なくとも１つの水混和性溶媒、少なくとも１つの抗酸化剤、および少なくとも１つの可溶化剤が存在する、上記２０に記載の方法。
２２． 対象におけるフィロウイルス感染またはフラビウイルス感染の治療のための医薬品の製造における、本明細書に記載される１つ以上の抗ウイルス組成物の使用。
２３． ウイルス感染の治療における、本明細書に記載される１つ以上の抗ウイルス組成物の使用。
【外国語明細書】