特開 2022-95876 関節病態の治療

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2022095876

(43)【公開日】2022-06-28

(54)【発明の名称】関節病態の治療

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/495 20060101AFI20220621BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20220621BHJP

   A61K 47/22 20060101ALI20220621BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20220621BHJP

   A61K 47/14 20060101ALI20220621BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20220621BHJP

   A61P 25/04 20060101ALI20220621BHJP

【ＦＩ】

A61K31/495

A61K9/08

A61K47/22

A61K47/12

A61K47/14

A61P19/02

A61P25/04

【審査請求】有

【請求項の数】7

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2022066206

(22)【出願日】2022-04-13

(62)【分割の表示】P 2020107654の分割

【原出願日】2020-06-23

(31)【優先権主張番号】62/038,682

(32)【優先日】2014-08-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(71)【出願人】

【識別番号】514022280

【氏名又は名称】アンピオ ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100156144

【弁理士】

【氏名又は名称】落合 康

(72)【発明者】

【氏名】デイビッド・バー－オー

(57)【要約】      （修正有）

【課題】関節病態を治療する方法を提供する。
【解決手段】アスパラギン酸およびアラニンのアミノ酸側鎖を有するジケトピペラジン（ＤＡ－ＤＫＰ）を含む医薬組成物の複数回投与レジメンを投与することを含む。また、ヒト血清アルブミンの低分子量画分の複数回投与を用いて変形性関節症を治療する方法を提供する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

変性関節疾患の治療における使用のためのアスパルチル－アラニルジケトピペラジン（ＤＡ－ＤＫＰ）を含む医薬組成物であって、
前記医薬組成物は、それを必要とする動物に、有効量を複数回投与レジメンで投与するためのものであり、
前記医薬組成物は、Ｎ－アセチル－トリプトファン（ＮＡＴ）、カプリル酸、カプリレートまたはそれらの組合せをさらに含み、
前記複数回投与レジメンは少なくとも３回の投与を含み、
各投与用量が４ｍＬであり；
前記投与が関節内注射によるものであり、
投与により、投与から２０週目の動物におけるＷＯＭＡＣ Ａスコアが減少する、
医薬組成物。

【請求項2】

前記変性関節疾患が変形性関節症である、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

前記動物が、投与前にケルグレン－ローレンスグレード４疼痛スコアを有する、請求項１または２に記載の医薬組成物。

【請求項4】

関節内注射によって投与される前記医薬組成物が約５０μＭ～約３５０μＭのＤＡ－ＤＫＰの濃度を有する組成物である、請求項１～３のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記ＤＡ－ＤＫＰが、ヒト血清アルブミン組成物の溶液からアルブミンを除去することによって調製された組成物中にあり、前記除去する工程が、前記ヒト血清アルブミン組成物を、アルブミンを保持する分子量カットオフを有する限外濾過膜に通すことを含み、かつ、得られた濾液がＤＡ－ＤＫＰを含んでおり、前記限外濾過膜が５０ｋＤａ未満、４０ｋＤａ未満、３０ｋＤａ未満、２０ｋＤａ未満、１０ｋＤａ未満、５ｋＤａ未満または３ｋＤａ未満の分子量カットオフを有する、請求項１～４のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項6】

前記複数回投与レジメンが４回、６回、８回または１０回の投与を含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項7】

前記ＷＯＭＡＣ Ａスコアの減少が少なくとも５０％である、請求項１～６のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、関節病態を治療する方法に関する。同方法は、アスパラギン酸およびアラニンのアミノ酸側鎖を有するジケトピペラジン（ＤＡ－ＤＫＰ）を含む医薬組成物の有効量を投与することを含む。本発明はまた、ＤＡ－ＤＫＰを含む医薬製品の使用を提供する。

【背景技術】

【0002】

変形性関節症は、米国において２５００万～３５００万人に影響を与える関節炎の最も一般的な形態である。変形性関節症の慢性疼痛および障害は、最初は関節軟骨および骨での炎症反応によって引き起こされ、時間とともに徐々に悪化する。膝の症候性変形性関節症は６０歳以上の人の１０～１３％で発生する。膝の変形性関節症だけで、６５歳以上の人での任意の他の医学的状態ではより大きな、移動性の喪失（歩行または階段上昇の支援が必要であるなど）の危険性が高まる。

【0003】

膝の変形性関節症の現行の薬物治療は、鎮痛薬、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ：ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ）および関節内ステロイド注射に限定され、これらの全ては、有害作用によりかなりの制約がある。これらの医学的な治療にもかかわらず、慢性膝変形性関節症は、関節全置換を必要とする進行性障害を引き起こす場合が多い。老年人口および肥満人口による膝の変形性関節症の有病率の増加は、より包括的な外科的治療の必要性を遅らせるとともに潜在的に排除する、安全かつ有効な局部膝治療の臨床上の必要性の増大を示唆している。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0004】

本発明の一実施形態は、治療を必要とする動物に、ＤＡ－ＤＫＰを含む医薬組成物の有効量を複数回投与レジメンで投与することによって関節病態を治療する方法である。この関節病態は、変性関節疾患などの関節疾患、例えば、変形性関節症であり得る。また、この関節病態は、外傷性損傷、術後損傷または反復運動損傷などの関節損傷であり得る。さらに、この関節病態は炎症であり得る。

【0005】

前記方法では、前記組成物は、局部（ｌｏｃａｌ）投与、局所（ｔｏｐｉｃａｌ）投与、または関節内注射などの注射によって投与され得る。関節内注射によって投与される場合、前記組成物は、約５０μＭ～約３５０μＭのＤＡ－ＤＫＰの濃度を有し得る。

【0006】

前記方法では、前記組成物は、Ｎ－アセチル－トリプトファン（ＮＡＴ：Ｎ－ａｃｅｔｙｌ－ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ）、カプリル酸、カプリレートまたはそれらの組合せをさらに含むことができる。この実施形態では、前記組成物は、約４ｍＭ～約２０ｍＭの、ＮＡＴ、カプリル酸、カプリレートまたはそれらの組合せの濃度を有し得る。さらなる実施形態では、前記ＤＡ－ＤＫＰは、ヒト血清アルブミン組成物の溶液からアルブミンを除去することによって（限外濾過、ショ糖勾配遠心分離、クロマトグラフィー、塩析沈殿、および超音波処理から選択される分離方法によってヒト血清アルブミン組成物を処理することによるなど）調製された組成物中にあり得る。特定の実施形態では、前記除去工程は、ヒト血清アルブミン組成物を、アルブミンを保持する分子量カットオフを有する限外濾過膜に通すことを含むことができ、ここで、例えば、５０ｋＤａ未満、４０ｋＤａ未満、３０ｋＤａ未満、２０ｋＤａ未満、１０ｋＤａ未満、５ｋＤａ未満または３ｋＤａ未満の分子量カットオフを有する限外濾過膜の使用によって得られた濾液はＤＡ－ＤＫＰを含む。

【0007】

さらなる実施形態では、前記医薬組成物は、鎮痛薬、抗炎症薬、およびそれらの組合せから選択される第２の薬物をさらに含むことができる。
前記方法では、前記複数回投与レジメンでの投与回数は、２～１０回の間、２～８回の間、２～６回の間、２～４回の間または３回であり得る。さらに、投与間の時間は、２日～６週間の間、２日～５週間の間、２日～４週間の間、２日～３週間の間、１週間～３週間の間、または２週間であり得る。

【0008】

好ましい実施形態では、本発明は、罹患関節中への関節内注射を介して、第１の用量、第２の用量、および第３の用量を投与することによって、変形性関節症を治療する方法である。この実施形態では、前記第１の用量、前記第２の用量、および前記第３の用量のそれぞれは、ヒト血清アルブミンの＜５０００ＭＷ画分の４ｍＬを含み、さらに、前記第２の用量は前記第１の用量の２週間後に投与され、前記第３の用量は前記第２の用量の２週間後に投与される。

【図面の簡単な説明】

【0009】

【図1】実施例２に記載の治療に対するＷＯＭＡＣ Ａ疼痛スコアの平均変化率を示す。

【発明を実施するための形態】

【0010】

本発明は、ＤＡ－ＤＫＰを含む組成物を複数回投与レジメンで投与することによって関節病態を治療する方法を提供する。その治療は、アスパルチル－アラニルジケトピペラジン（ＤＡ－ＤＫＰ：ａｓｐａｒｔｙｌ－ａｌａｎｙｌ ｄｉｋｅｔｏｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ）を含む医薬組成物の有効量を、それを必要とする個体に投与することを含む。ＤＡ－ＤＫＰは、転写レベルでの複数の炎症誘発性サイトカイン、ケモカインおよびシグナル伝達分子の阻害、Ｔ細胞および単球の遊走および接着の阻害、Ｇタンパク質共役受容体レベルでの活性、アクチン依存性細胞骨格事象に対する活性、血管透過性の低下ならびに血小板活性化因子によって誘導される炎症の抑制を含む、複数の抗炎症効果および免疫調節効果を有する。以下により詳細に記載するように、関節病態に対するＤＡ－ＤＫＰの効果は予想外に長く持続することが見出されており、一部の研究では、ステロイドの使用と比較して時間が増加することが見出された。

【0011】

本発明はまた、ＤＡ－ＤＫＰ組成物を含む医薬製品を提供する。この製品のＤＡ－ＤＫＰは、ヒト血清アルブミンの溶液からアルブミンを除去することによって調製することができる。

【0012】

本明細書で使用される場合、「関節病態（ｊｏｉｎｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）」という用語は、関節の任意の疾患、病気、または損傷を意味する。関節病態の例としては、限定されるものではないが、急性疾患、慢性疾患、難治性疾患、進行性疾患（変性疾患を含む）、外傷性損傷、反復運動損傷、毒性損傷、術後の状態、および構造的な損傷があるまたはない炎症が挙げられる。

【0013】

変性関節疾患は、関節を覆う関節軟骨の漸進的な劣化である。変性関節疾患（変形性関節症）は荷重関節の非感染性の進行性障害である。正常な関節軟骨は、滑らかで、白く、半透明である。これは、コラーゲン、タンパク質多糖類、および水からできたスポンジ様マトリックスに埋め込まれた軟骨細胞からなる。早期原発性関節炎では、軟骨は黄色く不透明になり、表面が軟化し、粗くなった局部的な領域を有する。変性が進行するにつれて、軟性領域は亀裂を生じて摩滅し、軟骨の下の骨が露出する。骨は、その後、リモデリングし密度が増加し始める一方で、残りの軟骨は擦り減り始める。最終的には、軟骨に覆われた骨棘（新しい骨の棘突起）が関節の端で形成される。機械的摩滅が増加するにつれて、軟骨は修復を必要とする。軟骨細胞は、スポンジ様マトリックスを十分に産生することができないため、損傷した軟骨はそれ自体を修復することができない。軟骨には、治癒を促進するための血液供給がない。変性関節疾患の多くは、機械的な不安定性または関節内の加齢変化の結果である。これには老年期変性関節炎が含まれ、若年者では、例えば、前十字靱帯断裂、膝蓋骨脱臼、または離断性骨軟骨炎からの損傷、挫傷、異常な関節構造（すなわち、股関節形成異常）、または機械的摩滅の結果であり得る。変性関節疾患は、限定されるものではないが、膝、股関節、肩、手および脊椎を含む身体の任意の関節において生じ得る。

【0014】

関節病態に対する従来の薬物療法としては、アセトアミノフェン、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）、麻薬、およびコルチコステロイドが挙げられる。
「治療する」とは、本明細書において、病態の症状、持続時間または重篤度を（全体的または部分的に）減少させることを意味するために使用される。

【0015】

本発明のＤＡ－ＤＫＰを含む医薬組成物は、治療を必要とする動物に投与される。好ましくは、この動物は、ウサギ、ヤギ、イヌ、ネコ、ウマまたはヒトなどの哺乳類である。有効な投与量は、疾患または病態の重篤度、投与経路、治療期間、動物に投与される任意の他の薬物の種類、動物の年齢、大きさおよび種、ならびに医学および獣医学の分野で知られている同様の因子によって変動し得る。

【0016】

ＤＡ－ＤＫＰを含む本発明の組成物は、局部（ｌｏｃａｌｌｙ）、非経口（例えば、注射、関節内注射、静脈内、脊髄内、腹膜内、皮下、または筋肉内）、経皮、および局所を含む任意の好適な投与経路による療法のために動物患者に投与され得る。好ましい投与経路は関節内注射である。

【0017】

本発明の組成物は、約１０μＭ、約２０μＭ、約３０μＭ、約４０μＭ、約５０μＭ、約６０μＭ、約７０μＭ、約８０μＭ、約９０μＭ、約１００μＭ、約１１０μＭ、約１２０μＭ、約１３０μＭ、約１４０μＭ、約１５０μＭ、約１６０μＭ、約１７０μＭ、約１８０μＭ、約１９０μＭ、約２００μＭ、約２１０μＭ、約２２０μＭ、約２３０μＭ、約２４０μＭ、約２４０、約２５０μＭ、約２６０μＭ、約２７０μＭ、約２８０μＭ、約２９０μＭ、約３００μＭ、約３１０、約３２０μＭ、約３３０μＭ、約３４０μＭ、約３５０μＭ、約３６０μＭ、約３７０μＭ、約３８０μＭ、約３９０μＭ、または約４００μＭの下端点を有するＤＡ－ＤＫＰ濃度範囲を有する医薬溶液であり得る。本発明の組成物は、約６００μＭ、約５８０μＭ、約５７０μＭ、約５６０μＭ、約５５０μＭ、約５４０μＭ、約５３０μＭ、約５２０μＭ、約５１０μＭ、約５００μＭ、約４９０μＭ、約４８０μＭ、約４７０μＭ、約４６０μＭ、約４５０μＭ、約４４０μＭ、約４３０μＭ、約４２０μＭ、約４１０μＭ、約４００μＭ、約３９０μＭ、約３８０μＭ、約３７０μＭ、約３６０μＭ、約３５０、約３４０μＭ、約３３０μＭ、約３２０μＭ、約３１０μＭ、約３００μＭ、約２９０μＭ、約２８０、約２７０μＭ、約２６０μＭ、約２５０μＭ、約２４０μＭ、約２３０μＭ、約２２０μＭ、約２１０μＭ、または約２００μＭの上端点を有するＤＡ－ＤＫＰ濃度範囲を有する医薬溶液であり得る。

【0018】

関節病態を治療するための本発明の組成物におけるＤＡ－ＤＫＰの有効な量は、約１０μｇ、約１５μｇ、約２０μｇ、約２５μｇ、約３０μｇ、約３５μｇ、約４０μｇ、約４５μｇ、約５０μｇ、約５５μｇ、約６０μｇ、約６５μｇ、約７０μｇ、約７５μｇ、約８０μｇ、約８５μｇ、約９０μｇ、約９５μｇ、約１００μｇ、約１１０μｇ、約１２０μｇ、約１３０μｇ、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ、約２５０μｇ、約２６０μｇ、約２７０μｇ、約２８０μｇ、約２９０μｇ、約３００μｇ、約３１０μｇ、約３２０μｇ、約３３０μｇ、約３４０μｇ、約３５０μｇ、約３６０μｇ、約３７０μｇ、約３８０μｇ、約３９０μｇ、約４００μｇ、約４２５μｇ、約４５０μｇ、約４７５μｇまたは約５００μｇの下端点を有する範囲であり得る。加えて、関節病態を治療するための本発明の組成物におけるＤＡ－ＤＫＰの有効な量は、約５００μｇ、約４９０μｇ、約４８０μｇ、約４７０μｇ、約４６０μｇ、約４５０μｇ、約４４０μｇ、約４３０μｇ、約４２０μｇ、約４１０μｇ、約４００μｇ、約３９０μｇ、約３８０μｇ、約３７０μｇ、約３６０μｇ、約３５０μｇ、約３４０μｇ、約３３０μｇ、約３２０μｇ、約３１０μｇ、約３００μｇ、約２９０μｇ、約２８０μｇ、約２７０μｇ、約２６０μｇ、約２５０μｇ、約２４０μｇ、約２３０μｇ、約２２０μｇ、約２１０μｇ、約２００μｇ、約１９０μｇ、約１８０μｇ、約１７０μｇ、約１６０μｇ、約１５０μｇ、約１４０μｇ、約１３０μｇ、約１２０μｇ、約１１０μｇ、約１００μｇ、約９０μｇ、約８０μｇ、約７０μｇ、約６０μｇ、約５０μｇ、約４０μｇ、約３０μｇ、または約２０μｇの上端点を有する範囲であり得る。

【0019】

ＤＡ－ＤＫＰが投与される実施形態、ヒト血清アルブミンの低分子量画分、例えば、下に記載する、アンピオン（Ａｍｐｉｏｎ）（商標）によって例示される＜５０００ＭＷ画分などでは、患者に投与される投与量は、約１ｍＬ～約２０ｍＬの間、約１ｍＬ～約１５ｍＬの間、約１ｍＬ～約１０ｍＬの間、約１ｍＬ～約８ｍＬの間、約２ｍＬ～約６ｍＬの間、約３ｍＬ～約５ｍＬの間または約４ｍＬであり得る。

【0020】

本発明の化合物の局所または経皮投与のための投与剤形には、散剤、噴霧剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、液剤、パッチ剤および点眼剤が含まれる。前記有効成分は、無菌条件下で、医薬上許容される担体、および必要とされ得る任意のバッファー、または噴射剤と混合し得る。この軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤およびゲル剤は、前記有効成分に加えて、賦形剤、例えば、動物性および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカントガム、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはそれらの混合物などを含有し得る。散剤および噴霧剤は、前記有効成分に加えて、賦形剤、例えば、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末またはこれらの物質の混合物などを含むことができる。噴霧剤は、加えて、慣用の噴射剤、例えば、クロロフルオロ炭化水素などおよび揮発性非置換炭化水素、例えば、ブタンおよびプロパンなどを含むことができる。

【0021】

経皮パッチ剤は、体内への本発明の化合物の制御された送達を提供するというさらなる利点を有する。このような投与剤形は、１種以上の本発明の化合物を適切な媒体、例えば、弾性マトリックス材料などに溶解させるか、分散させるか、または組み入れることによって作製することができる。また、皮膚を超えて化合物の流入を増加させるために吸収促進剤も使用することができる。このような流入の速度は、速度制御膜を提供するかまたはポリマーマトリックスもしくはゲル中に化合物を分散させることによって制御することができる。

【0022】

非経口投与に好適な本発明の医薬組成物は、酸化防止剤、バッファー、処方物を意図されたレシピエントの血液と等張にするための溶質、または懸濁剤または増粘剤を含有し得る、１種以上の医薬上許容される滅菌等張水性または非水性溶液、分散液、懸濁液またはエマルション、または使用直前に滅菌注射用溶液もしくは分散液で再構成し得る滅菌粉末と組み合わせて、１種以上の本発明の化合物を含む。

【0023】

本発明の医薬組成物において使用できる好適な水性および非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール類（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、およびそれらの好適な混合物、植物油、例えば、オリーブ油など、ならびに注射用有機エステル、例えば、オレイン酸エチルなどが挙げられる。適切な流動性は、例えば、コーティング材料、例えば、レシチンなどの使用により、分散液の場合、必要な粒径の維持により、および界面活性剤の使用により、維持することができる。

【0024】

また、これらの組成物は、湿潤剤、乳化剤および分散剤などの補助剤を含有し得る。組成物中に等張剤、例えば、糖類、塩化ナトリウムなどを含むことが望ましい場合がある。加えて、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅らせる薬剤を含めることにより、注射用剤形の持続的吸収をもたらし得る。

【0025】

いくつかの場合において、薬物の効果を延長させるために、皮下または筋肉内注射からの薬物の吸収を緩徐化することが望ましい。このことは、水溶解性の低い結晶質または非晶質の材料の液体懸濁液を用いることにより達成し得る。それによって、薬物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、次に、その溶解速度は、結晶サイズおよび結晶の形態に依存し得る。あるいは、非経口投与される薬物の吸収遅延は、薬物を油性ビヒクルに溶解または懸濁させることによって達成される。

【0026】

注射用デポー形態は、ポリラクチド－ポリグリコリドなどの生体分解性ポリマー中に薬物のマイクロカプセル化マトリックスを形成することにより作製される。薬物とポリマーとの比率、および使用される特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出速度を制御することができる。他の生体分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用処方物はまた、体組織に適合するリポソームまたはマイクロエマルション中に薬物を封入することによっても調製される。注射用材料は、例えば、細菌保持フィルターによる濾過によって滅菌することができる。

【0027】

処方物は、単回または複数回投与用の密封容器、例えば、アンプルおよびバイアルで提供し得、使用直前に、液体担体、例えば、注射用水の添加のみを必要とする凍結乾燥状態で保存され得る。即席注射溶液および懸濁液は、上記のタイプの滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製し得る。

【0028】

本発明の医薬製品を含むキットもまた提供される。キットは、注射による投与のために処方されたＤＡ－ＤＫＰ組成物を含むことができる。ＤＡ－ＤＫＰは、本明細書において記載されるとおりに、例えば、ヒトアルブミン組成物の溶液からアルブミンを除去することにより、調製することができる。キットは、単回または複数回投与用の密封容器、例えば、アンプルおよびバイアルを含み得、使用直前に、液体担体、例えば、注射用水の添加のみを必要とする凍結乾燥状態で保存され得る。また、キットは、内容物が直接使用または注射用に準備されている状態で保存され得る。

【0029】

本発明の化合物は単独で投与することが可能であるが、化合物を医薬処方物（組成物）として投与することが好ましい。本発明の医薬組成物は、有効成分としての本発明の１または複数の化合物を、１種以上の医薬上許容される担体と、所望により、１種以上の他の化合物、薬物または他の材料と混合して含む。各担体は、処方物の他の成分と適合性があり、かつ、動物に有害ではないという意味で「許容される」ものでなければならない。医薬上許容される担体は当技術分野で周知である。選択された投与経路にかかわらず、本発明の化合物は、当業者に公知の従来の方法により医薬上許容される投与剤形に処方される。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓを参照。

【0030】

本発明の組成物は、Ｎ－アセチル－トリプトファン（ＮＡＴ）、カプリル酸、カプリレートまたはそれらの組合せをさらに含むことができる。好ましくは、この組成物は、ＮＡＴを含むことができる。ＮＡＴ、カプリル酸、カプリレートまたはそれらの組合せを有する本発明の組成物は、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、または約２０ｍＭの下端点を有する、ＮＡＴ、カプリル酸、カプリレートまたはそれらの組合せの濃度範囲を有する医薬組成物であり得る。加えて、ＮＡＴ、カプリル酸、カプリレートまたはそれらの組合せを有する本発明の組成物は、約４０ｍＭ、約３９ｍＭ、約３８ｍＭ、約３７ｍＭ、約３６ｍＭ、約３５ｍＭ、約３４ｍＭ、約３３ｍＭ、約３２ｍＭ、約３１ｍＭ、約３０ｍＭ、約２９ｍＭ、約２８ｍＭ、約２７ｍＭ、約２６ｍＭ、約２５ｍＭ、約２４ｍＭ、約２３ｍＭ、約２２、または約２１ｍＭの上端点を有する、ＮＡＴ、カプリル酸、カプリレートまたはそれらの組合せの濃度範囲を有する医薬組成物であり得る。好ましくは、その濃度範囲は約４ｍＭ～約２０ｍＭである。

【0031】

加えて、本発明の組成物はまた、鎮痛薬（リドカインまたはパラセタモール（ｐａｒａｃｅｔｏａｍｏｌ）など）、抗炎症薬（ベタメタゾン（ｂｅｔｈａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、アセトアミノフェン、イブプロフェン、ナプロキセンなど）、および／または他の好適な薬物などの第２の薬物を含み得る。

【0032】

ＤＡ－ＤＫＰなどのジケトピペラジン類を作製する方法は当技術分野で周知であり、これらの方法は、本発明のジケトピペラジン類を合成するために採用し得る。例えば、米国特許第４，６９４，０８１号明細書、同第５，８１７，７５１号明細書、同第５，９９０，１１２号明細書、同第５，９３２，５７９号明細書および同第６，５５５，５４３号明細書、米国特許出願公開第２００４／００２４１８０号明細書、国際公開第９６／００３９１号パンフレットおよび同第９７／４８６８５号パンフレット、ならびにＳｍｉｔｈ他、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ，８，２３６９－２３７４（１９９８）を参照されたい。これらの完全な開示は、引用することにより本明細書の一部とされる。

【0033】

例えば、ＤＡ－ＤＫＰなどのジケトピペラジン類は、まずジペプチド類を合成することによって調製することができる。ジペプチド類は、Ｌ－アミノ酸、Ｄ－アミノ酸またはＤ－アミノ酸およびＬ－アミノ酸の組合せを用いて、当技術分野で周知の方法によって合成することができる。好ましいのは固相ペプチド合成法である。当然、ジペプチド類はまた、ＤＭＩ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｌｔｄ．（カーディフ、ＵＫ）（カスタム合成）、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（セントルイス、ＭＯ）（主にカスタム合成）、Ｐｈｏｅｎｉｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（ベルモント、ＣＡ）（カスタム合成）、Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（カスタム合成）およびＡｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ（ルイヴィル、ＫＹ）を含む数多くの供給源から市販されている。

【0034】

ジペプチドを合成または購入したら、それを環化してジケトピペラジンを形成する。これは、様々な技術によって達成することができる。例えば、米国特許出願公開第２００４／００２４１８０号明細書には、ジペプチド類を環化する方法が記載されている。簡潔に述べると、蒸留により水を除去しながら有機溶媒中でジペプチドを加熱する。好ましくは、有機溶媒は、アセトニトリル、アリルアルコール、ベンゼン、ベンジルアルコール、ｎ－ブタノール、２－ブタノール、ｔ－ブタノール、酢酸ブチルエステル、四塩化炭素、クロロベンゼン、クロロホルム、シクロヘキサン、１，２－ジクロロエタン、ジエチルアセタール、ジメチルアセタール、酢酸エチルエステル、ヘプタン、メチルイソブチルケトン、３－ペンタノール、トルエンおよびキシレンなどの、水との低沸点共沸混合物である。温度は、環化が起こる反応速度および使用される共沸剤のタイプに依存する。この反応は、好ましくは、５０℃～２００℃で、より好ましくは、８０℃～１５０℃で実施される。環化が起こるｐＨ範囲は、当業者ならば容易に決定することができる。それは、有利には、２～９、好ましくは、３～７である。

【0035】

ジペプチドのアミノ酸の一方または両方が、その側鎖（例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸）上にカルボキシル基を有するかまたは有するように誘導体化された場合、そのジペプチドは、好ましくは、米国特許第６，５５５，５４３号明細書に記載されているとおりに環化される。簡潔に述べると、側鎖カルボキシルがまだ保護されているジペプチドを中性条件下で加熱する。典型的には、ジペプチドは、約８０℃～約１８０℃で、好ましくは、約１２０℃で加熱されることになる。溶媒は中性溶媒とする。例えば、溶媒はアルコール（ブタノール、メタノール、エタノール、および高級アルコールなどであるがフェノールではない）および共沸共溶媒（トルエン、ベンゼン、またはキシレンなど）を含み得る。好ましくは、アルコールはブタン－２－オールであり、共沸共溶媒はトルエンである。加熱は、反応が完了するまで続け、このような時間は経験的に決定することができる。典型的には、ジペプチドは約８～２４時間、好ましくは約１８時間還流することによって環化される。最後に、ジケトピペラジンから保護基を除去する。その際、最終化合物のキラリティーを維持するために、強酸（無機酸、例えば、硫酸または塩酸など）、強塩基（アルカリ性塩基、例えば、水酸化カリウムまたは水酸化ナトリウムなど）、および強力な還元剤（水素化アルミニウムリチウム）の使用を避ける必要がある。

【0036】

固相樹脂上で作製されたジペプチド類は、１段階で環化と樹脂からの解放ができる。例えば、米国特許第５，８１７，７５１号明細書を参照されたい。例えば、Ｎ－アルキル化ジペプチドが結合した樹脂を、酢酸（例えば、１％）またはトリエチルアミン（例えば、４％）の存在下でトルエンまたはトルエン／エタノール中に懸濁させる。典型的には、それらの環化時間を速めるためには塩基性の環化条件が好ましい。

【0037】

ジペプチド類の環化およびジケトピペラジン類の作製についての他の方法は当技術分野で公知であり、本発明の実施に有用なジケトピペラジン類の調製に使用することができる。例えば、上記の参照文献を参照。加えて、本発明における使用に好適な多くのジケトピペラジン類を、タンパク質およびペプチドから下記のとおりに作製することができる。さらに、本発明の実施における使用のためのジケトピペラジン類は、例えば、ＤＭＩ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｌｔｄ．（カーディフ、ＵＫ）（カスタム合成）から商業的に入手することができる。

【0038】

本発明のＤＡ－ＤＫＰ組成物および／または製品は、ＤＡ－ＤＫＰを含有する溶液から（ヒト血清アルブミンなどのアルブミンを含む市販の医薬組成物からを含む）、溶液中の一部または全てのアルブミンを除去する、限外濾過、サイズ排除クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー（例えば、所望のジケトピペラジンに対する１つまたは複数の抗体または末端切断型タンパク質もしくはペプチドに対する１つまたは複数の抗体が結合しているビーズのカラムを使用）、陰イオン交換または陽イオン交換）、ショ糖勾配遠心分離、クロマトグラフィー、塩析沈殿、または超音波処理などの周知の方法によって調製することができる。得られたＤＡ－ＤＫＰ含有組成物および／または製品は、上記のように、使用し、医薬組成物に組み込むことができる。

【0039】

限外濾過分離方法を用いて、ヒト血清アルブミン組成物を、アルブミンを保持する一方でＤＡ－ＤＫＰを得られる濾液または画分中へと通過させる分子量カットオフを有する限外濾過膜に通すことができる。この濾液は、約５０ｋＤＡ未満、約４０ｋＤａ未満、３０ｋＤａ未満、約２０ｋＤａ未満、約１０ｋＤａ未満、約５ｋＤａ未満、または約３ｋＤａ未満の分子量を有する成分を含み得る。好ましくは、この濾液は、約５Ｄａ未満の分子量を有する成分を含む（「＜５０００ＭＷ」とも呼ばれる）。この＜５０００ＭＷ画分または濾液は、アルブミンからジペプチドアスパルテート－アラニンが切断され、その後、ジケトピペラジンへと環化された後に形成されたＤＡ－ＤＫＰを含有する。

【0040】

本発明のＤＡ－ＤＫＰの生理学上許容される塩もまた、本発明の実施において使用され得る。生理学上許容される塩としては、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸など）、有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、安息香酸、サリチル酸、シュウ酸、アスコルビン酸など）または塩基（例えば、Ｎ，Ｎ－ジベンジルエチレンジアミン、Ｄ－グルコサミン、またはエチレンジアミンから誘導される医薬上許容される金属陽イオンまたは有機陽イオンの水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩など）から誘導される塩などの通常の非毒性塩が挙げられる。これらの塩は、従来の方法で、例えば、化合物の遊離塩基形態を酸で中和することにより、調製される。

【0041】

本発明は、それを必要とする動物に、ＤＡ－ＤＫＰを含む医薬組成物の有効量を複数回投与レジメンで投与することを含む関節病態を治療する方法を含む。驚くべきことに、本発明の医薬組成物を投与するための複数回投与レジメンの使用によって、単回投与レジメンと比較して、疼痛軽減の大幅な向上および機能の改善が達成され得ることが見出された。アンピオ ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド（Ａｍｐｉｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）に譲渡された、Ｂａｒ－Ｏｒ他の米国特許第８，９８０，８３４号明細書（「Ｂａｒ－Ｏｒ」）には、ヒト血清アルブミンの＜５０００ＭＷ画分（アンピオン（商標）とも呼ばれている）の注射による変形性関節症の治療が開示されている。Ｂａｒ－Ｏｒには複数回投与レジメンは開示されておらず、実際には、治療の効果が長続きすることから、６ヶ月までの期間にわたって単回投与で十分であることを示唆している。特定の理論に縛られることを意図するものではないが、複数回投与レジメンの効果の向上は、投与される活性組成物の量の単なる増加以上に達成されると考えられる。以下の実施例１に示すように、アンピオン（商標）４ｍＬから１０ｍＬへの単回投与の増加による利益は見られなかった。しかしながら、アンピオン（商標）の４ｍＬ用量を３回（合計１２ｍＬ）、２週間間隔で投与すると、実施例２に示すように、有意な利益が見られた。従って、投与される活性組成物の総量とは無関係の延長した複数回投与レジメンによる治療を関節が長期に受けることによって達成される少なくとも何らかの効果があると考えられている。

【0042】

複数回投与レジメンとは、時間間隔をおいた複数回投与で本発明の医薬組成物を患者へ投与することを意味する。複数回投与レジメンでの２つの重要な変数は、投与回数と投与間の時間である。本発明では、投与回数は、３回以上であり、２～１０回、２～８回、２～６回、２～４回、または３回であり得る。本発明では、任意の２回の投与間の時間は、２日～６週間、２日～５週間、２日～４週間、２日～３週間、１週間～２週間であり得、または約２週間であり得る。

【0043】

本発明は、治療の単回投与と比較して、関節病態、例えば、変形性関節症など（特に、膝関節）からの疼痛の大幅な改善を提供することができる。疼痛は、数値尺度で評価することができ、１つの好適な疼痛スケールはＷＯＭＡＣ Ａである。本発明は、ＷＯＭＡＣ Ａスコアまたは他の疼痛スケールを、ベースラインスコアよりも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％改善することができる。

【0044】

本発明のこの実施形態は、関節機能、特に、膝関節の機能の大幅な改善を提供することができる。関節の機能は、数値尺度で評価することができ、１つの好適なスケールはＷＯＭＡＣ Ｃである。本発明は、ＷＯＭＡＣ Ｃスコアまたは他の関節機能スケールを、ベースラインスコアよりも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％改善することができる。

【0045】

本明細書で使用される場合、「１つ（ａ）」または「１つ（ａｎ）」は、１以上を意味する。
本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」によって本明細書において特徴付けられる本発明の代替実施形態として「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」および「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」などの全てのより狭い用語をそれらの範囲内に含む。「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」の使用に関しては、このフレーズは、請求項の範囲を、指定された工程および材料、ならびに本明細書に開示される本発明の基本的かつ新規な特徴に重大な影響を与えないものに限定する。

【0046】

本発明のさらなる目的、利点および新規な特徴は、以下の限定されない実施例を考慮することにより当業者には明らかになるであろう。以下の実験結果は、例示のために提供し、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。

【実施例0047】

膝の変形性関節症（ＯＡＫ：ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｋｎｅｅ）による疼痛を有する成人において２つの用量のアンピオン（商標）の関節内（ＩＡ：ｉｎｔｒａ－ａｒｔｉｃｕｌａｒ）注射の有効性および安全性を評価するために、無作為化プラセボ対照二重盲検試験を行った。

【0048】

主目的
ＯＡＫに罹患している患者に投与した場合に、膝疼痛の改善におけるＩＡ注射の、プラセボ１０ｍＬに対するアンピオン（商標）１０ｍＬの有効性が、プラセボ４ｍＬに対するアンピオン（商標）４ｍＬの有効性よりも高いかどうかを評価することを目的とする。

【0049】

被験者
被験者は４０歳以上８５歳以下の男女の成人患者（包括的な）であった。適格患者は歩行可能であるが、スクリーニング時のＷＯＭＡＣ Ｉｎｄｅｘ ３．１、５段階のリッカート疼痛サブスケール（ｆｉｖｅ－ｐｏｉｎｔ Ｌｉｋｅｒｔ Ｐａｉｎ Ｓｕｂｓｃａｌｅ）での少なくとも１．５点の評点からも明らかなように、指標となる膝においてＯＡＫによる中等度から中程度の重度までの疼痛を受けていた。患者は、スクリーニング前の６ヶ月以内に得られた放射線学的証拠（ケルグレン－ローレンス（ＫＧ：Ｋｅｌｌｇｒｅｎ－Ｌａｗｒｅｎｃｅ）グレード２～４）によって裏づけられた、ＯＡＫの臨床診断を受けて６ヶ月以上にわたって症状があった指標膝を有していなければならなかった。患者はまた、スクリーニング前の４週間にＮＳＡＩＤの長期間投与を受けた場合でも、指標膝に中等度から中程度の重度のＯＡＫ疼痛を有する必要があった。患者は、有効性測定前の１２時間は鎮痛（アセトアミノフェンを含む）を受けることができなかった。

【0050】

治療
試験製品は、膝への１回のＩＡ注射として投与したアンピオン（商標）、４ｍＬまたは１０ｍＬであった。対照製品は、膝への１回のＩＡ注射として投与した生理食塩水プラセボ、４ｍＬまたは１０ｍＬであった。試験登録基準を満たした患者を、次の４つの試験群：アンピオン（商標）４ｍＬ、プラセボ４ｍＬ、アンピオン（商標）１０ｍＬ、およびプラセボ１０ｍＬに、１：１：１：１の比率で無作為に割り付けた。

【0051】

ＯＡＫ疼痛に対する治療の臨床効果を、６週間および１２週間の時点、場合によって、２０週間の時点での訪問時に、ならびに２週間、４週間、８週間、および１０週間の時点での電話連絡時にＷＯＭＡＣおよび患者の総合評価（ＰＧＡ：ｔｈｅ Ｐａｔｉｅｎｔ’ｓ Ｇｌｏｂａｌ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ）を用いて評価した。全試験期間は、０日目の前の最大４週間のスクリーニング期間を除いて、１２週間、場合によって、最大２０週間であった。

【0052】

主要有効性エンドポイント
この試験の主要有効性エンドポイントは、ベースライン（０日目）と１２週目との間での５段階リッカートスケールによるＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアの変化であった。

【0053】

副次有効性エンドポイント
この試験の副次有効性エンドポイントは以下であった：
・ベースラインと、２週、４週、６週、８週、および１０週目、場合によって、２０週目との間でのＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアの変化；
・ベースラインと、２週、４週、６週、８週、１０週、および１２週目との間でのＷＯＭＡＣ Ｂ硬直サブスコアの変化；
・ベースラインと、２週、４週、６週、８週、１０週、および１２週目、場合によって、２０週目との間でのＷＯＭＡＣ Ｃ身体機能サブスコアの変化；
・ベースラインと、６週、８週、１０週、および１２週目、場合によって、２０週目との間でのＰＧＡの変化；
・２週、４週、６週、８週、１０週、および１２週目でのＯＭＥＲＡＣＴ－ＯＡＲＳＩ基準に基づく応答状況；
・ベースラインと、２週、４週、６週、８週、１０週、および１２週目との間での質問１および２（運動時の疼痛）のＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコア平均の変化；
・ベースラインと、２週、４週、６週、８週、１０週、および１２週目との間での質問３～５（安静時の疼痛）のＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコア平均の変化；
・救援鎮痛の使用（アセトアミノフェン使用量）；および
・ＴＥＡＥの発生率および重篤度。

【0054】

安全性評価
安全性評価には、併用薬データの収集、身体診察、バイタルサイン測定、臨床検査測定、およびＴＥＡＥのモニタリングを含めた。

【0055】

人口学的特性および基本特性
試験対象母集団は、アンピオン（商標）での治療を受けることが予想される集団の代表であった。基本特性は、治療群を通じて類似していた：各群の患者の大多数は白人および女性であり、年齢中央値は約６２歳であった。

【0056】

有効性の結果
アンピオン（商標）を受けた被験者は、プラセボを受けた被験者と比較して、ベースラインからの疼痛のおよそ４２％の軽減を示す、ベースラインから１２週目までのＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアにおける有意に大きな減少（改善）を達成した（Ｐ＝０．００３８）。さらに、疼痛のこの改善は、より重篤なＯＡＫ疾患を有する患者においてより顕著であった；例えば、ＫＧグレード３および４の疾患を有する患者は、１２週目にプラセボと比較して、疼痛のより大きな改善があった。アンピオン（商標）を受けた患者はまた、プラセボを受けた患者と比較して、ベースラインから１２週目までの機能（ＷＯＭＡＣ Ｃ）における有意に大きな改善を達成した（Ｐ＝０．０４）。加えて、アンピオン（商標）を受けた患者はまた、プラセボを受けた患者と比較して、ベースラインから１２週目までの、ＰＧＡによって測定される全体的な生活の質（ＱＯＬ）の指標における有意に大きな改善を経験した（Ｐ＝０．０１）。膝への１回のみのアンピオン（商標）ＩＡ注射だけで、疼痛、機能、および全体的な生活の質の指標におけるこれらの臨床的および統計的に有意な改善が観察された。

【0057】

【表1】

【0058】

２０週目の訪問に参加した被験者の群全体において、ＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアにおけるベースラインからの平均変化に統計的有意差はなかった；しかしながら、ＫＬグレード４サブセットにおいて統計的に有意な改善があった（Ｐ＝０．０３６）。

【0059】

【表2】

【0060】

結論
この試験の結果は、ＯＡＫを有する患者の膝への１回のＩＡ注射後１２週間の時点での疼痛の軽減についてアンピオン（商標）の安全性および有効性を確立している。アンピオン（商標）の４ｍＬおよび１０ｍＬの両方の用量は、安全かつ有効であり、耐容性が良好である。アンピオン（商標）用量４ｍＬおよび１０ｍＬについての有効性に差がない場合、低い方の用量４ｍＬをさらなる試験で評価した。２０週間の時点での４ｍＬおよび１０ｍＬ組合せ治療群におけるＫＬグレード４の患者の平均ＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアの減少は約３４％であった。ＫＬグレード４に加えて患者を含む２０週目に評価した患者の群全体において、統計的に有意な変化はなかった。

【実施例0061】

膝の変形性関節症による疼痛を有する成人において２週間間隔で投与されたアンピオン（商標）（４ｍＬ）の３回の関節内注射の安全性および有効性を評価するために、前向き（ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ）第Ｉ／ＩＩ相試験を行った。

【0062】

主目的
第Ｉ相の主目的は、ベースラインから２０週目まで、膝のＯＡＫに罹患している患者において、２週間間隔で、３回のＩＡ注射として投与されたアンピオン（商標）４ｍＬの安全性を評価することであった。

【0063】

第ＩＩ相の主目的は、膝のＯＡＫに罹患している患者において膝痛の改善に、３回のＩＡ注射として投与された場合に、ベースラインから２０週目まで、アンピオン（商標）４ｍＬとプラセボ注射の安全性および有効性を評価することであった。

【0064】

被験者
第Ｉ相および第ＩＩ相試験の両方において、被験者は、ＯＡＫ膝痛を有する４０歳以上８５歳以下の男女の成人患者（包括的な）であった。適格患者は歩行可能である必要があり、指標となる膝は、スクリーニング時に得られた放射線学的証拠（ＫＬグレード２～４）によって裏づけられたＯＡＫの臨床診断を受けて６ヶ月以上にわたって症状がある必要があった。患者は、指標膝に中等度から中程度の重度のＯＡＫ疼痛を有する必要があり（ＷＯＭＡＣ Ｉｎｄｅｘ ３．１ ５段階リッカート疼痛サブスケールで少なくとも１．５点の評点）、スクリーニング時に評価され、無作為化時に確認された。指標膝における中等度から中程度の重度のＯＡＫ疼痛は、ＮＳＡＩＤの長期間投与（スクリーニング前の４週間では変更しなかった）を行ったかまたは使用されている場合でも存在する必要があった。患者は、有効性測定前の１２時間は鎮痛を受けることができなかった。患者は、スクリーニング時に評価された、対側膝における１．５点未満のＷＯＭＡＣ ５段階リッカート疼痛サブスケールスコアを有することが推奨された。

【0065】

第Ｉ相では、合計７名の患者が登録され、ＫＬグレード２の患者の登録は２名以下の患者に制限された。７名の患者全てが４週目のフォローアップ評価を完了した後、医療モニターは安全性評価を行った。深刻な薬物関連のＡＥまたは予期しない薬物関連のＡＥが観察されなかった場合、第ＩＩ相で登録を開始した。安全性審査が保留されている間、７名の患者は５２週目まで第Ｉ相試験を継続した。

【0066】

第ＩＩ相では、およそ４０名の患者が登録され、２つの試験群にわたって１：１に無作為化された（１試験群当たり２０名の患者）。ＫＬグレード２の患者の登録は、第ＩＩ相における全登録の２５％、すなわち、合計８名の患者に制限され、２つの試験群にわたって、１：１に無作為化された。

【0067】

治療
第Ｉ相および第ＩＩ相の両方の試験製品はアンピオン（商標）であり、第ＩＩ相試験の対照製品は生理食塩水プラセボであった。

【0068】

第Ｉ相では、試験登録基準を満たした患者は、ベースライン（０日目）時点および２週および４週目に膝へのアンピオン（商標）４ｍＬの３回のＩＡ注射を受けた。第ＩＩ相では、試験登録基準を満たした患者をアンピオン（商標）４ｍＬ試験群またはプラセボ４ｍＬ試験群に１：１の比率で無作為に割り付けた。被験者は、ベースライン（０日目）時点および２週および４週目に試験薬（アンピオン（商標）またはプラセボ）の膝への３回のＩＡ注射を受けた。

【0069】

被験者は、６週、１２週、２０週、２４週、および５２週目のクリニック内訪問に参加した。各患者の最大試験期間は、４週間のスクリーニング期間を除いて、５２週間であった。

【0070】

エンドポイント
第Ｉ相ではＴＥＡＥおよびＳＡＥの発生率および重篤度を決定した。
第ＩＩ相の主要有効性エンドポイントは、ベースライン（０日目）から２０週目までの５段階リッカートスケールによるＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアの変化である。第ＩＩ相の副次エンドポイントは以下である：
・ベースライン（０日目）から２週、４週、６週、１２週、２４週、および５２週目までのＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアの変化；
・ベースライン（０日目）から２週、４週、６週、１２週、２０週、２４週、および５２週目までのＷＯＭＡＣ Ｃ身体機能サブスコアの変化；
・ベースライン（０日目）から２週、４週、６週、１２週、２０週、２４週、および５２週目までのＰＧＡの変化；
・２０週目を通じた救援鎮痛の使用（アセトアミノフェン使用量）；および
・ＴＥＡＥの発生率および重篤度。

【0071】

安全性評価
安全性評価には、全てのクリニック内訪問時および注射の２４時間後の電話連絡でのＴＥＡＥの記録；ベースライン時（０日目）および２週、４週、６週、１２週、２０週、２４週、および５２週目のクリニック内訪問時の身体診察およびバイタルサイン記録；ならびに標準的な実験室試験を含めた。

【0072】

投与（Ｅｘｐｏｓｕｒｅ）
第Ｉ相では、７名の被験者が登録され、アンピオン（商標）の３回全ての注射を受けた。第ＩＩ相では、４０名の被験者（アンピオン（商標）２０名、プラセボ２０名）が登録され、試験薬物の３回全ての注射を受けた。

【0073】

人口学的特性および基本特性
基本特性は治療群を通じて類似していた：各治療群の患者の大多数は白人および女性であり、年齢中央値は６２．５歳であり、ＫＬグレード３（５８％）またはグレード４（３８％）を示した。

【0074】

有効性の結果
アンピオン（商標）を受けた被験者は、プラセボを受けた被験者と比較して、ベースラインから２０週目までのＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアにおいて有意に大きな減少（改善）を達成した（Ｐ＝０．０２３１）。これは、図１に示すように、プラセボ治療群におけるおよそ４０％の減少と比較して、アンピオン（商標）治療群におけるベースラインからのおよそ６４％の平均疼痛の軽減を示す（Ｐ＝０．０３１３）。

【0075】

【表3】

【0076】

アンピオン（商標）を受けた患者は、プラセボを受けた患者と比較して、２週、４週、６週、１２週、または２４週目にベースラインからのＷＯＭＡＣ Ａ疼痛サブスコアにおいて有意差を示さなかった。

【0077】

結論
この試験の結果は、ＯＡＫを有する患者の膝への、２週間間隔で、３回のＩＡ注射後２０週間の時点での疼痛の軽減についてアンピオン（商標）の安全性および有効性を確立している。アンピオン（商標）の４ｍＬ用量は、安全かつ有効であり、耐容性が良好であった。

【0078】

本発明の様々な実施形態を詳細に説明してきたが、当業者にはこれらの実施形態の修飾および適応に想到することは明らかである。しかしながら、以下の例示的な請求項に記載されているように、このような修飾および適応が本発明の範囲内にあることは明白に理解されるべきである。