(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023106355
(43)【公開日】2023-08-01
(54)【発明の名称】プロドラッグおよびその使用
(51)【国際特許分類】
C07K 14/00 20060101AFI20230725BHJP
C07K 5/06 20060101ALI20230725BHJP
A61K 38/26 20060101ALI20230725BHJP
A61K 31/192 20060101ALI20230725BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20230725BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230725BHJP
【ＦＩ】
C07K14/00
C07K5/06 ZNA
A61K38/26
A61K31/192
A61P3/10
A61P43/00 121
【審査請求】未請求
【請求項の数】15
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2023007479
(22)【出願日】2023-01-20
(31)【優先権主張番号】63/301,311
(32)【優先日】2022-01-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】22154309
(32)【優先日】2022-01-31
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．プルロニック
２．ＧＩＢＣＯ
(71)【出願人】
【識別番号】509091848
【氏名又は名称】ノヴォ ノルディスク アー／エス
(74)【代理人】
【識別番号】100108453
【弁理士】
【氏名又は名称】村山 靖彦
(74)【代理人】
【識別番号】100110364
【弁理士】
【氏名又は名称】実広 信哉
(74)【代理人】
【識別番号】100133400
【弁理士】
【氏名又は名称】阿部 達彦
(72)【発明者】
【氏名】パトリック・ジェイムズ・ナー
(72)【発明者】
【氏名】ブライアン・パトリック・ファイナン
【テーマコード（参考）】
4C084
4C206
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C084AA02
4C084AA07
4C084BA01
4C084BA08
4C084BA09
4C084BA19
4C084BA23
4C084BA36
4C084CA59
4C084DB35
4C084MA02
4C084MA35
4C084MA52
4C084NA12
4C084NA14
4C084NA15
4C084ZA701
4C084ZA702
4C084ZC331
4C084ZC332
4C084ZC351
4C084ZC352
4C084ZC751
4C206AA02
4C206GA07
4C206GA36
4C206KA01
4C206MA02
4C206MA55
4C206MA72
4C206NA11
4C206ZA66
4C206ZC75
4H045AA10
4H045AA30
4H045BA11
4H045BA19
4H045BA41
4H045EA20
4H045FA10
(57)【要約】
【課題】本発明が解決しようとする課題は、より長時間作用するＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬を提供することである。
【解決手段】本発明は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のプロドラッグ化合物であって、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬がアミド結合を介したジペプチドのＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬への連結によって修飾されている、プロドラッグ化合物に関する。
【選択図】なし
【解決手段】本発明は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のプロドラッグ化合物であって、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬がアミド結合を介したジペプチドのＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬への連結によって修飾されている、プロドラッグ化合物に関する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式Ｉの化合物であって、
Ｂ－Ｚ（式Ｉ）
（式中、Ｂがジペプチドまたはその誘導体であり、
ＺがＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬またはその誘導体である）
前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＸ６ＴＳＤＹＳＸ１２Ｘ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７Ｘ２８ＧＸ３０Ｘ３１Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９（配列番号１）
（式中、Ｘ２がＡｉｂまたはＡであり、
Ｘ６がＦまたはＶであり、
Ｘ１２がＩまたはＹであり、
Ｘ１３がＹ、Ａ、Ｌ、Ｉ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＱ、Ｒ、Ｅ、Ｈ、またはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥ、Ｑ、またはＮであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ２８がＡまたはＲであり、
Ｘ３０がＧまたは不在であり、
Ｘ３１がＰまたは不在であり、
Ｘ３２がＥ、Ｓ、または不在であり、
Ｘ３３がＳ、Ｋ、または不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）であり、
前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基がペプチド結合を介してＢに連結している、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
Ｂ－Ｚ（式Ｉ）
（式中、Ｂがジペプチドまたはその誘導体であり、
ＺがＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬またはその誘導体である）
前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＸ６ＴＳＤＹＳＸ１２Ｘ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７Ｘ２８ＧＸ３０Ｘ３１Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９（配列番号１）
（式中、Ｘ２がＡｉｂまたはＡであり、
Ｘ６がＦまたはＶであり、
Ｘ１２がＩまたはＹであり、
Ｘ１３がＹ、Ａ、Ｌ、Ｉ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＱ、Ｒ、Ｅ、Ｈ、またはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥ、Ｑ、またはＮであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ２８がＡまたはＲであり、
Ｘ３０がＧまたは不在であり、
Ｘ３１がＰまたは不在であり、
Ｘ３２がＥ、Ｓ、または不在であり、
Ｘ３３がＳ、Ｋ、または不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）であり、
前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基がペプチド結合を介してＢに連結している、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項2】
前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＸ１６ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号３）
（式中、Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＸ１６ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号３）
（式中、Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項3】
Ｘ１６がＥであり、Ｘ３３がＫである、請求項１または２に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項4】
Ｘ１６がＫであり、Ｘ３３がＳである、請求項１または２に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項5】
前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬が置換基ｚを含み、前記置換基ｚが１６位または３３位のリジン（Ｋ）を介して前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項6】
前記置換基ｚが、Ｃｈｅｍ．７、Ｃｈｅｍ．８、Ｃｈｅｍ．１０、およびＣｈｅｍ．１１から成る群から選択される、請求項５に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項7】
前記ジペプチドＢが、式ＩＩ：
Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）
（式中、Ｘが、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸であり、
Ｙが、Ｙのアルファ－カルボン酸基と前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基との間に形成されたペプチド結合を介してＺに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である）である、請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）
（式中、Ｘが、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸であり、
Ｙが、Ｙのアルファ－カルボン酸基と前記ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基との間に形成されたペプチド結合を介してＺに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である）である、請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項8】
Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－（２－アミノエチル）グリシン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項9】
Ｘが、リジン、４－アミノフェニルアラニン、Ｄ－リジン、アラニン、グリシン、プロリン、Ｄ－バリン、ホモプロリン、Ｄ－プロリン、Ｄ－ホモプロリン、Ｄ－アラニン、およびアゼチジン－２－カルボン酸から成る群から選択される、請求項７または８に記載の化合物。
【請求項10】
Ｙが、サルコシンまたはＮ－（２－アミノエチル）グリシンである、請求項７～９のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項11】
Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、およびグリシンから成る群から選択される、請求項７～１０のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項12】
前記ジペプチドが置換基ｂを担持し、任意選択で、前記置換基ｂが、Ｃｈｅｍ．１６、Ｃｈｅｍ．１７、Ｃｈｅｍ．１８、Ｃｈｅｍ．１９、Ｃｈｅｍ．２０、Ｃｈｅｍ．２１、およびＣｈｅｍ．２２から成る群から選択される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
【請求項13】
前記化合物が以下から成る群から選択される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の化合物。
化合物番号１
化合物番号２
化合物番号３
化合物番号４
化合物番号５
化合物番号６
化合物番号７
化合物番号８
化合物番号９
化合物番号１０
化合物番号１１
化合物番号１２
化合物番号１３
化合物番号１４
化合物番号１５
化合物番号１６
化合物番号１７
および化合物番号１８
。
化合物番号１
【化1】
【化2】
【化3】
【化4】
【化5】
【化6】
【化7】
【化8】
【化9】
【化10】
【化11】
【化12】
【化13】
【化14】
【化15】
【化16】
【化17】
【化18】
【請求項14】
医薬として使用するための、請求項１～１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項15】
２型糖尿病の予防および／または治療に使用するための、請求項１～１３のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ヒトへの経口投与に好適な長期化作用プロファイルを有するグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体とグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド（ＧＩＰ）受容体の共作動薬である化合物の２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）ベースのプロドラッグ、およびその治療的使用に関する。
【0002】
配列表の参照による組み込み
本出願は、電子形式の配列表とともに提出される。配列表の内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、電子形式の配列表とともに提出される。配列表の内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0003】
多くの治療的に活性な薬剤は、吸収率が悪く、初回通過代謝に対する感受性が低いため、経口投与後のバイオアベイラビリティが低い（例えば、［非特許文献１］）。
【0004】
プロドラッグは、それ自体はほぼ不活性であるが、活性分子実体に変換されると予想される治療薬である（例えば、［非特許文献２］）。投与部位から排除され、高度に定義された濃度で血漿中で平衡化された後に、プロドラッグの化学的性質により、薬剤作用の開始および持続時間を正確に制御する機会が提供される。現在の臨床使用におけるプロドラッグの多くが、活性薬剤に変換されるために酵素触媒を必要とする。酵素触媒によるプロドラッグアプローチは、しばしば、胃腸吸収後に血流中に放出される必要のある薬剤に使用される。一般的なプロドラッグアプローチは、エステラーゼ触媒加水分解によって活性薬剤に容易に変換される薬剤のエステル誘導体の使用である（例えば、［非特許文献３］）。主に酵素的な切断の欠点は、患者間の変動である。酵素レベルは個人間で著しく異なり、酵素的切断によるプロドラッグ活性化の生物学的変動をもたらす場合がある。酵素レベルは投与部位に応じて変動する場合もある。例えば、皮下注射の場合、身体のある特定の領域が他の領域よりも断定可能な治療効果をもたらすことが知られている。この予測不可能な効果を減少させるために、非酵素的切断または分子内触媒が特に興味深いものである（例えば、［非特許文献４］）。
【0005】
ＤＫＰベースのプロドラッグ技術は、２つのアルファ－アミノ酸から成る部分が環化して６員環を形成し、それと同時に活性薬剤を放出する化学変換に基づく。ＤＫＰベースのプロドラッグ技術は、以前にも説明されている。例えば、［特許文献１］、［特許文献２］、［特許文献３］、および［特許文献４］は、アミド結合を介して、例えば、グルカゴンスーパーファミリーペプチドまたは他の公知の薬剤に連結した様々なペプチド系プロドラッグについて説明している。［特許文献５］および［特許文献６］は、延長された半減期を有するグルカゴンスーパーファミリーペプチドとインスリンのペプチドベースのプロドラッグについて説明している。
【0006】
例えば、ＧＬＰ－１作用とＧＩＰ作用を１つの調製物中で組み合わせることによる、ＧＬＰ－１受容体とＧＩＰ受容体の二重活性化が、２型糖尿病（Ｔ２Ｄ）および肥満を有するマウスにおいて、市販されているＧＬＰ－１作動薬リラグルチドと比較して著しく良好な血糖値の低下、インスリン分泌の増加、および体重の減少を伴う治療原理につながることが説明されている（例えば、［非特許文献５］）。天然ＧＬＰ－１およびＧＩＰは、共注入後にヒトにおいて相加的に相互作用し、ＧＬＰ－１のみと比較してインスリン分泌刺激効果を有意に増加させることが証明されている（［非特許文献６］）。
【0007】
ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬およびそれらの医学的使用の可能性は、［特許文献７］、［特許文献８］、［特許文献９］、［特許文献１０］、［特許文献１１］、［特許文献１２］、［特許文献１３］、［特許文献１４］、［特許文献１５］、［特許文献１６］、［特許文献１７］、および［特許文献１８］などのいくつかの特許出願に記載されている。ＧＬＰ－１誘導体の経口送達を開示する特許出願は、例えば、［特許文献１９］、［特許文献２０］、［特許文献２１］、および［特許文献２２］に記載されている。
【0008】
しかしながら、経口投与に好適なＧＩＰ受容体およびＧＬＰ－１受容体において作動薬活性を有する化合物が依然として所望されている。ＧＩＰ受容体およびＧＬＰ－１受容体の両方で延長された作用持続時間を有する化合物により、かかる化合物のより頻度の低い投薬が可能になることが望ましい。したがって、より長時間作用するＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬がＴ２Ｄなどの疾患の治療においてそれらの潜在能力を十分に発揮する必要がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0009】
【特許文献1】国際公開第２０１０／０７１８０７号
【特許文献2】国際公開第２０１００８０６０５号
【特許文献3】国際公開第２０１１／１６３０１２号
【特許文献4】国際公開第２０１１／１６２９６８号
【特許文献5】国際公開第２０１４／１５２４６０号
【特許文献6】国際公開第２０１６／０４９１７４号
【特許文献7】国際公開第２０１０／０１１４３９号
【特許文献8】国際公開第２０１３／１６４４８３号
【特許文献9】国際公開第２０１４／１９２２８４号
【特許文献10】国際公開第２０１５／０６７７１５号
【特許文献11】国際公開第２０１５／０２２４２０号
【特許文献12】国際公開第２０１５／０８６７２８号
【特許文献13】国際公開第２０１５／０８６７２９号
【特許文献14】国際公開第２０１６／１１１９７１号
【特許文献15】国際公開第２０２０／０２３３８６号
【特許文献16】米国特許第９７４５３６０号
【特許文献17】米国特許公開第２０１４／１６２９４５号
【特許文献18】米国特許公開第２０１４／０３５７５５２号
【特許文献19】国際公開第２０１１／０８０１０３号
【特許文献20】国際公開第２０１２／０８０４７１号
【特許文献21】国際公開第２０１３／１８９９８８号
【特許文献22】国際公開第２０１９／１４９８８０号
【非特許文献】
【0010】
【非特許文献1】Ｓａｌａｍａ Ｎ．Ｎ．，Ｆａｓａｎｏ Ａ．，Ｔｈａｋａｒ Ｍ．，Ｅｄｄｉｎｇｔｏｎ Ｎ．Ｄ．，Ｔｈｅ ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ΔＧ ｏｎ ｔｈｅ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｌｏｗ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２００５，３１２，１９９－２０５
【非特許文献2】Ｔｅｓｔａ Ｂ．，Ｍａｙｅｒ Ｊ．Ｍ，Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ ａｎｄ Ｐｒｏｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，２００３，ｐａｇｅ ４
【非特許文献3】Ｙｕ Ｌ．Ｘ．，Ｓｔｒａｕｇｈｎ Ａ．Ｂ．，Ｆａｕｓｔｉｏｎ Ｐ．Ｊ．，Ｙａｎｇ Ｙ．，Ｐａｒｅｋｈ Ａ．，Ｃｉａｖａｒｅｌｌａ Ａ．Ｂ．，Ａｓａｆｕ－Ａｄｊａｙｅ Ｅ．，Ｍｅｈｔａ Ｍ．Ｕ．，Ｃｏｎｎｅｒ Ｄ．Ｐ．，Ｌｅｓｋｏ Ｌ．Ｊ．，Ｈｕｓｓａｉｎ Ａ．Ｓ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｆｏｏｄ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｒａｐｉｄｌｙ ｄｉｓｓｏｌｖｉｎｇ ｉｍｍｅｄｉａｔｅ－ｒｅｌｅａｓｅ ｓｏｌｉｄ ｏｒａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｈｉｇｈｌｙ ｓｏｌｕｂｌｅ ｄｒｕｇｓ．Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２００４，１，３５７－３６２
【非特許文献4】Ｔｅｓｔａ Ｂ．，Ｍａｙｅｒ Ｊ．Ｍ，Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ ａｎｄ Ｐｒｏｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，２００３，ｐａｇｅ ５
【非特許文献5】Ｖ Ａ Ｇａｕｌｔ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｓｃｉ（Ｌｏｎｄ），１２１，１０７－１１７，２０１１
【非特許文献6】Ｍ Ａ Ｎａｕｃｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，７６，９１２－９１７，１９９３
【発明の概要】
【0011】
ペプチドベースの薬剤は、作用持続時間が比較的短く、かつ治療指標が可変的である、非常に有効な薬剤である。プロドラッグ技術を採用して、薬剤を特定の投薬レジメン、例えば、週１回の投薬に好適なものにする様式で、薬剤の特性を最適化することができる。プロドラッグは、酵素的または非酵素的化学プロセスによって変換され、それにより、インビボでの生物学的に活性な薬剤分子（本明細書では活性薬剤と呼ばれる）の緩徐な放出がもたらされる。
【0012】
本開示は、望ましい特性、例えば、週１回の経口投与に望ましい特性を有するＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬プロドラッグを対象とする。本明細書に記載のプロドラッグは、作用の開始を遅延させ、活性薬剤、すなわち、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬の半減期を延長するように設計されている。作用の開始の遅延は、プロドラッグを活性化する前にその組織的分布を可能にするという点で有利である。したがって、プロドラッグの投与により、投与時のピーク活性によって引き起こされる合併症が排除され、活性薬剤の治療指数が増加する可能性がある。インタクトなプロドラッグは、活性薬剤と比較して有意な程度まで生物学的活性を発揮しない。活性薬剤がプロドラッグの変換時に放出されると、活性薬剤から生物学的活性が生じる。放出された活性薬剤と比較したプロドラッグの生物学的活性の低下は、付随する副作用および過剰投与のリスクを伴うことなく比較的大量のプロドラッグの投与を可能にするため、有利である。
【0013】
本発明は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬プロドラッグに関する。加えて、またはあるいは、本発明は、インビボで延長された終末相半減期を有するＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬プロドラッグに関する。
【0014】
第１の態様では、本発明は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のプロドラッグである化合物に関する。いくつかの実施形態では、本化合物は、式Ｉ：Ｂ－Ｚ（式中、ＺがＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬（活性薬剤）であり、Ｂがジペプチド（「ジペプチドＢ」）である）を含み、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基がペプチド結合を介してＢに連結している。いくつかの実施形態では、ジペプチドＢは、哺乳類血清アルブミンなどの哺乳類血漿タンパク質と非共有結合相互作用を形成することができる置換基などの共有結合部分を含む。いくつかの実施形態では、ジペプチドＢは、活性薬剤（すなわち、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬）を放出する分子内反応を介して活性薬剤Ｚから切断され、副産物として２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）を形成することができる。いくつかの実施形態では、分子内反応は、生理学的条件下で生じる。加えて、またはあるいは、いくつかの実施形態では、分子内反応は、酵素活性の不在下で生じる。
【0015】
第２の態様では、本発明は、本明細書に記載の化合物を含む医薬組成物に関する。
【0016】
第３の態様では、本発明は、医薬として使用するための、本明細書に記載の化合物または本明細書に記載の化合物を含む医薬組成物に関する。
【0017】
一機能的態様では、本発明は、週１回の投薬に好適な変換半減期を有するプロドラッグ（例えば、本明細書に記載の化合物）を提供する。加えて、またはあるいは、本発明は、週１回の投薬に好適な観察された終末相半減期を有するプロドラッグを提供する。加えて、またはあるいは、本発明は、驚くほど高い経口バイオアベイラビリティを有するプロドラッグを提供する。
【0018】
さらなる態様は、本明細書に記載の化合物の医学的使用に関する。加えて、またはあるいは、本発明は、２型糖尿病の予防および／または治療のための本明細書に記載の化合物の使用に関する。加えて、またはあるいは、本発明は、肥満の予防および／または治療のための本明細書に記載の化合物の使用に関する。加えて、またはあるいは、本発明は、肝疾患の予防および／または治療のための本明細書に記載の化合物の使用に関する。
【0019】
本発明のさらなる態様は、本明細書に記載の化合物を、それを必要とする患者に投与することによって、疾患を治療する方法に関する。いくつかの実施形態では、糖尿病は、２型糖尿病である。いくつかの実施形態では、疾患は、過体重である。いくつかの実施形態では、疾患は、肥満である。
【0020】
本発明は、例示的な実施形態の開示から明らかになるさらなる問題も解決し得る。
【発明を実施するための形態】
【0021】
以下において、ギリシャ文字は、それらの記号または対応する名称で表されてもよく、例えば、αがアルファであり、βがベータであり、εがイプシロンであり、γがガンマであり、ωがオメガであるといった具合である。また、μのギリシャ文字は「ｕ」で表されてもよく、例えば、μｌがｕｌであり、μＭがｕＭである。化学図面中の記号
は、隣接する部分への結合点を示す。以下では、本明細書に別段の指示がない限り、単数形で提示される用語は複数の状況も含み、例えば、「化合物」について言及する場合、それが当該化合物の広範な定義内に含まれる全ての個々の変形物を包含することを理解されたい。本明細書で使用される場合、「ａ」は「１つ以上」を意味する。本発明は、望ましい特性、例えば、週１回の経口投薬に望ましい特性を有するＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のプロドラッグなどのＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のプロドラッグである化合物に関する。本化合物は、生理学的条件下で、制御された様式で活性ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬（活性薬剤）に変換される。
【化1】
【0022】
第１の態様では、本発明は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のプロドラッグである化合物に関し、当該化合物は、式Ｉ：Ｂ－Ｚ（式中、Ｚが、プロドラッグの変換時にＢから放出されるＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬（活性薬剤）である）を含む。第２の態様では、本発明は、本明細書に記載の化合物を含む医薬組成物に関する。さらなる態様は、本明細書に記載の化合物の医学的使用に関する。加えて、またはあるいは、本発明は、２型糖尿病の予防および／または治療のための本明細書に記載の化合物の使用に関する。加えて、またはあるいは、本発明は、肥満の予防および／または治療のための本明細書に記載の化合物の使用に関する。加えて、またはあるいは、本発明は、肝疾患の予防および／または治療のための本明細書に記載の化合物の使用に関する。
【0023】
一般的な定義
「化合物」という用語は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のプロドラッグに関する。本発明の化合物は「化合物」と呼ばれ得、「化合物」という用語は、本明細書の薬学的に関連した形態、すなわち、その薬学的に許容可能な塩、アミド、またはエステルを包含することようにも意図されている。
「化合物」という用語は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のプロドラッグに関する。本発明の化合物は「化合物」と呼ばれ得、「化合物」という用語は、本明細書の薬学的に関連した形態、すなわち、その薬学的に許容可能な塩、アミド、またはエステルを包含することようにも意図されている。
【0024】
本明細書で使用される場合、「ポリペプチド」または「ポリペプチド配列」という用語は、アミド結合（例えば、ペプチド結合）を介して相互に連結した一連の２つ以上のアミノ酸を指す。ポリペプチドという用語は、「ペプチド」という用語および「タンパク質」という用語と互換的に使用される。
【0025】
「誘導体」という用語は、概して、化学修飾されたポリペプチド（例えば、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬）またはジペプチドを指し、ここで、１つ以上の置換基が、例えば、Ｌｙｓのε－アミノ基への結合を介して、ポリペプチドまたはジペプチドのアミノ酸配列に共有結合している。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、誘導体（例えば、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬誘導体および／またはジペプチド誘導体）を含み、これは、長期化特性を有する１つ以上の置換基がポリペプチドまたはジペプチドのアミノ酸配列に共有結合するように改変されている。
【0026】
「ジペプチド誘導体」という用語は、ジペプチドが少なくとも１つの置換基（例えば、本明細書に記載の置換基ｂ）を担持するように化学修飾されていることを意味する。いくつかの実施形態では、これは、２つ以上の置換基を担持してもよい。
【0027】
「ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬誘導体」という用語は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬が置換基を担持するように化学修飾されていることを意味する。例えば、かかるＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬誘導体は、例えば、Ｌｙｓのε－アミノ基への結合を介して、ポリペプチドのアミノ酸配列に共有結合している１つ以上の置換基を含んでもよい。
【0028】
「脂肪酸にコンジュゲートされたアミノ酸」という用語は、脂肪酸への共有結合によって、または好ましくはリンカーを介して脂肪酸にコンジュゲートするように化学修飾された官能基を有する任意のタンパク質原性アミノ酸または非タンパク質原性アミノ酸を指す。かかる官能基の例には、アミノ（例えば、Ｌｙｓ）、チオール（例えば、Ｃｙｓ）、およびカルボキシル（例えば、ＧｌｕまたはＡｓｐ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、コンジュゲートされたアミノ酸は、Ｌｙｓである。脂肪酸を、官能基を有する当該タンパク質原性アミノ酸または非タンパク質原性アミノ酸にコンジュゲートする場合、ジカルボン酸（例えば、ＣＯ２Ｈ－（ＣＨ２）－ＣＯ２Ｈ（式中、ｎが１０～２２である））などの脂肪酸前駆体が使用され得る。
【0029】
「脂肪酸」という用語は、脂肪族または環状炭化水素鎖を有する任意選択で置換されるカルボン酸を指し、ここで、脂肪族鎖が飽和または不飽和である。いくつかの実施形態では、脂肪酸は、Ｃ１６－Ｃ２２飽和カルボン酸などのＣ１２－Ｃ２４飽和カルボン酸である。いくつかの実施形態では、脂肪酸は、追加の官能基を含む。
【0030】
「親油性部分」という用語は、本明細書で使用される場合、合計で６個超３０個未満の炭素原子、好ましくは８個超２０個未満の炭素原子を有する脂肪族および／または環状炭化水素部分を含む部分を指す。いくつかの実施形態では、親油性部分は、少なくとも８個の連続した－ＣＨ２基を含む炭素鎖を含む。いくつかの実施形態では、親油性部分は、少なくとも１０個の連続した－ＣＨ２－基、例えば、少なくとも１２個の連続した－ＣＨ２－基、少なくとも１４個の連続した－ＣＨ２－基、少なくとも１６個の連続した－ＣＨ２－基、または少なくとも１８個の連続した－ＣＨ２－基を含む。いくつかの実施形態では、親油性部分は、６～３０個の任意の数の連続した－ＣＨ２－基（例えば、６、７、８、９個など）を含むことができる。
【0031】
「遠位カルボン酸」という用語は、親油性部分との関連で本明細書で使用される場合、隣接する部分への親油性部分の結合点に対して親油性部分の最も遠い（末端）点に結合しているカルボン酸を指し、例えば、本明細書に記載の化合物では、遠位カルボン酸を有する親油性部分（例えば、Ｃｈｅｍ．１）は長期化部分であり、このカルボン酸は、隣接するリンカー要素への親油性部分の結合点に対して親油性部分の最も遠い（末端）点に結合している（例えば、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、またはＣｈｅｍ．５）。遠位カルボン酸を有する親油性部分の非限定的な例は、Ｃｈｅｍ．１である。
【0032】
「治療指数」という用語は、薬剤が毒性になる血中濃度と薬剤が有効である濃度を比較する比率を表す。治療指標（ＴＩ）が大きいほど、薬剤は安全である。ＴＩが小さい（２つの濃度間の差が非常に小さい）場合、薬剤は慎重に投与されなければならず、薬剤を投与された人は薬剤毒性の兆候がないか注意深く監視されなければならない。
【0033】
アミノ酸
「アミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、任意のアミノ酸、すなわち、タンパク質原性アミノ酸および非タンパク質原性アミノ酸の両方を指す。「タンパク質原性アミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトにおける遺伝子コードによってコードされる２０個の標準アミノ酸を指す。「アミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、タンパク質原性アミノ酸とみなされない任意のアミノ酸を指す。非タンパク質原性アミノ酸は、タンパク質中に見られないか、または標準細胞機構によって産生されないかのいずれかである（例えば、それらは、翻訳後修飾に供されていない場合がある）。非タンパク質原性アミノ酸の非限定的な例は、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸または２－アミノイソ酪酸）、ノルロイシン、ノルバリン、ならびにタンパク質原性アミノ酸のＤ異性体である。
「アミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、任意のアミノ酸、すなわち、タンパク質原性アミノ酸および非タンパク質原性アミノ酸の両方を指す。「タンパク質原性アミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトにおける遺伝子コードによってコードされる２０個の標準アミノ酸を指す。「アミノ酸」という用語は、本明細書で使用される場合、タンパク質原性アミノ酸とみなされない任意のアミノ酸を指す。非タンパク質原性アミノ酸は、タンパク質中に見られないか、または標準細胞機構によって産生されないかのいずれかである（例えば、それらは、翻訳後修飾に供されていない場合がある）。非タンパク質原性アミノ酸の非限定的な例は、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸または２－アミノイソ酪酸）、ノルロイシン、ノルバリン、ならびにタンパク質原性アミノ酸のＤ異性体である。
【0034】
一般に、アミノ酸残基は、例えば、ポリペプチド配列との関連で、本明細書で使用される場合、それらの完全な名称、それらの１文字コード、および／またはそれらの３文字コードによって特定され得る。これらの３つの方法は、完全に同等であり、互換的に使用される。下文において、光学異性体が記載されていない本明細書に記載のペプチドの各アミノ酸は、（別段の指定がない限り）Ｌ異性体を意味すると理解されたい。本発明の化合物に組み込まれ得る非タンパク質原性アミノ酸の例が表１に列記される。
【表1-1】
【表1-2】
【表1-3】
【表1-4】
【0035】
プロドラッグ
「プロドラッグ」という用語は、本明細書で使用される場合、インビボでの酵素的または非酵素的化学プロセスによる化学変換を受けて、活性薬剤の放出をもたらす化合物を指す。「活性薬剤」という用語は、本明細書で使用される場合、プロドラッグの変換時にプロドラッグから放出される薬理学的に活性な化合物を指す。活性薬剤の非限定的な例は、本明細書に記載の親化合物１～５である。「変換」という用語は、プロドラッグとの関連で本明細書で使用される場合、プロドラッグが酵素的または非酵素的様式で変換されて、活性薬剤の放出をもたらすプロセスを指す。変換が起こる速度は、「変換半減期」によって定量化され得る。「変換半減期」は、変換の結果としてプロドラッグの濃度を半減させるのに必要な時間の長さである。「変換半減期」は、「プロドラッグから薬剤への変換半減期」または「プロドラッグから活性薬剤への変換半減期」とも呼ばれる場合がある。
「プロドラッグ」という用語は、本明細書で使用される場合、インビボでの酵素的または非酵素的化学プロセスによる化学変換を受けて、活性薬剤の放出をもたらす化合物を指す。「活性薬剤」という用語は、本明細書で使用される場合、プロドラッグの変換時にプロドラッグから放出される薬理学的に活性な化合物を指す。活性薬剤の非限定的な例は、本明細書に記載の親化合物１～５である。「変換」という用語は、プロドラッグとの関連で本明細書で使用される場合、プロドラッグが酵素的または非酵素的様式で変換されて、活性薬剤の放出をもたらすプロセスを指す。変換が起こる速度は、「変換半減期」によって定量化され得る。「変換半減期」は、変換の結果としてプロドラッグの濃度を半減させるのに必要な時間の長さである。「変換半減期」は、「プロドラッグから薬剤への変換半減期」または「プロドラッグから活性薬剤への変換半減期」とも呼ばれる場合がある。
【0036】
プロドラッグは、意図された薬理学的活性を有意な程度まで発揮せず、例えば、意図された薬理学的活性を対象とする治療レジメンと不適合なものにする程度まで発揮しない。活性薬剤が放出されると、活性薬剤からプロドラッグの意図される治療に関連する薬理学的活性が生じる。活性薬剤がプロドラッグから放出される場合、活性薬剤は、その「遊離形態」であるといわれる。プロドラッグは、末端ジペプチドベースのアミド伸長の分子内環化時に所望の変換を達成することができ、その際に、伸長が活性薬剤から切断されて、活性薬剤のその遊離形態での放出がもたらされる。かかる分子内環化は、例えば、２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）形成を介して、生理学的条件下で酵素非依存性プロセスとして起こり得る。ＤＫＰを形成する当該分子内環化を介して活性薬剤に変換されるプロドラッグでは、変換時に活性薬剤が放出される部分は、「ＤＫＰ部分」と呼ばれる。「ＤＫＰ部分」は、ジペプチド部分（例えば、ジペプチドまたはジペプチド誘導体）を含む。いくつかの実施形態では、プロドラッグは、ＤＫＰ部分のジペプチド部分と活性薬剤の脂肪族アミン基との間のペプチド結合などの一時的なアミド結合を有してもよい。いくつかの実施形態では、ＤＫＰ部分は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬骨格の１位のアミノ酸のアルファ－アミノ基を介して、すなわち、ＤＫＰ部分のカルボン酸基とＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬骨格の１位のＴｙｒのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介して、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している。いくつかの実施形態では、ＤＫＰ部分は、アシル化を介して、すなわち、ＤＫＰ部分のカルボン酸基とＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬骨格中のＴｙｒ１のアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介して、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬骨格中のＴｙｒ１のアミノ基に結合している。
【0037】
変換半減期は、ＤＫＰ部分の構造的性質に影響され得る。例えば、望ましい変換半減期は、本出願に例示されるジペプチドＢを使用することによって得られ得る。変換半減期は、ＤＫＰ部分が結合している活性薬剤のアミノ酸の構造的性質に影響され得る。いくつかの実施形態では、望ましい変換半減期は、本出願に例示される活性薬剤のＮ末端アミノ酸残基を使用することによって得られ得る。いくつかの実施形態では、ＤＫＰ部分は、活性薬剤に結合しているジペプチドベースの伸長である。いくつかの実施形態では、ＤＫＰ部分は、さらなる構造要素、例えば、ジペプチド（本明細書では「ジペプチド誘導体」とも呼ばれる）に共有結合した置換基を含む。プロドラッグの変換時および活性薬剤の放出時に、ＤＫＰは副産物として形成される。ＤＫＰは、不活性であってもよく、または薬理学的活性に関連してもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のプロドラッグの変換は、主に非酵素的様式で起こる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のプロドラッグの変換は、非酵素的様式でのみ起こる。
【0038】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、プロドラッグ、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミドである。いくつかの実施形態では、プロドラッグは、式Ｉ（式中、Ｂが、置換基ｂを任意選択で含むジペプチドであり、置換基ｂが、プロトラクターおよび任意選択でリンカーを含むか、またはそれらから成る）に従う化合物である。いくつかの実施形態では、Ｚは、置換基ｚを担持するＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬であり、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基は、ペプチド結合を介してＢに連結している。本発明のいくつかの実施形態では、Ｂは、ＤＫＰ部分である。
【0039】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、ＤＫＰ部分を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、ＤＫＰ部分および活性薬剤を含むプロドラッグを含む。いくつかの実施形態では、活性薬剤は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬（例えば、活性薬剤Ｚ）である。いくつかの実施形態では、ＤＫＰ部分は、任意選択で１つ以上の置換基を担持する、ジペプチド（例えば、ジペプチドＢ）を含む。
【0040】
本明細書ではＤＫＰ部分および活性薬剤としてＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬を含む「プロドラッグ」とも称される本明細書に記載の化合物に使用される命名法の例が以下に提供される。Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ。この化合物では、ＤＫＰ部分は、アミド結合を介して相互に連結したＬｙｓ残基およびＳａｒ残基を含む。（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル部分は、アミド結合を介してジペプチドのＬｙｓ残基のε－窒素原子に共有結合しており、２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル部分は、アミド結合を介してＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＬｙｓ残基のε－窒素原子に共有結合している。Ｓａｒ残基のカルボキシル基は、アミド結合を介してＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列のＮ末端アミノ基に共有結合している。本化合物の完全構造が以下に示される。
【化2】
【0041】
置換基
「置換基」という用語は、本明細書で使用される場合、ジペプチドまたはポリペプチド（例えば、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬）のアミノ酸に共有結合している部分を指す。いくつかの実施形態では、置換基ｚは、Ｌｙｓを介してＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している。いくつかの実施形態では、置換基ｂは、本発明の化合物中に存在するジペプチド部分（例えば、ジペプチドＢ）などのＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＤＫＰ部分のアミノ酸残基に結合しており、それ故に、ＤＫＰ部分の一部を形成する。置換基がポリペプチドまたはジペプチドに結合している場合、このポリペプチドまたはジペプチドは「置換」といわれる。置換基がポリペプチドまたはアミノ酸残基に共有結合している場合、このポリペプチドまたはアミノ酸は置換基を「担持する」といわれる。この置換基は、一連の個別に定義された部分を含み得、これらの部分は「置換要素」と呼ばれ得る。「置換基要素」の非限定的な例は、「プロトラクター」および「リンカー」である。
「置換基」という用語は、本明細書で使用される場合、ジペプチドまたはポリペプチド（例えば、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬）のアミノ酸に共有結合している部分を指す。いくつかの実施形態では、置換基ｚは、Ｌｙｓを介してＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している。いくつかの実施形態では、置換基ｂは、本発明の化合物中に存在するジペプチド部分（例えば、ジペプチドＢ）などのＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＤＫＰ部分のアミノ酸残基に結合しており、それ故に、ＤＫＰ部分の一部を形成する。置換基がポリペプチドまたはジペプチドに結合している場合、このポリペプチドまたはジペプチドは「置換」といわれる。置換基がポリペプチドまたはアミノ酸残基に共有結合している場合、このポリペプチドまたはアミノ酸は置換基を「担持する」といわれる。この置換基は、一連の個別に定義された部分を含み得、これらの部分は「置換要素」と呼ばれ得る。「置換基要素」の非限定的な例は、「プロトラクター」および「リンカー」である。
【0042】
置換基は、アルブミンと非共有結合相互作用を形成することができ、それにより、血流中での化合物の循環が促進され、それ故に、置換基を担持する化合物とアルブミンとの凝集体が化合物の遊離形態を放出するために緩徐にしか崩壊しないため、化合物が血流中に存在する時間を長期化する効果を有し得、それ故に、置換基が、全体として、「アルブミン結合部分」とも呼ばれ得、置換基が「長期化効果」を有するといわれ得る。置換基は、アルブミン結合、ひいては長期化に特に関連する部分を含み得、この部分は「プロトラクター」または「長期化部分」と呼ばれ得る。「プロトラクター」および「長期化部分」という用語は、本明細書で互換的に使用される。「プロトラクター」は、親油性部分（例えば、脂肪酸）であってもよい。「プロトラクター」は、脂肪酸（例えば、Ｃ１６－Ｃ２２カルボン酸）であってもよい。「プロトラクター」の非限定的な例が表２に示される。化学式Ｃｈｅｍ．１中、
は、共有結合を介したリンカーまたはポリペプチドへの結合点を表すために使用されている。
【化3】
【表2】
【0043】
置換基は、長期化部分とポリペプチドのアミノ酸残基への結合点との間の部分を含み得、この部分は「リンカー」と呼ばれ得る。リンカーは、いくつかの「リンカー要素」を含み得る。リンカー要素は、それらが分子の全体的特性を改善するように、例えば、それらが経口バイオアベイラビリティ、変換半減期、または長期化効果を改善し、それ故に、本化合物の経口投与時の全体的曝露プロファイルを改善するように選択され得る。
【0044】
リンカー要素の非限定的な例が表３に列記される。化学式Ｃｈｅｍ．２～５中、
は、プロトラクターまたはポリペプチドへの結合点を表すために使用されている。
【化4】
【表3】
【0045】
いくつかの実施形態では、置換基は、Ｌ－Ｐ（式ＩＩＩ）（式中、Ｐが遠位カルボン酸を有する親油性部分を含むか、またはそれから成り、Ｐが長期化特性を有する）である。いくつかの実施形態では、Ｐは、Ｃｈｅｍ．１である。いくつかの実施形態では、Ｐは、Ｃｈｅｍ．１であり、Ｌは、リンカー要素Ａ１～Ａ５を含むリンカーであり、
Ｌ－Ｐ（式ＩＩＩ）
式中、Ｐは、Ｃｈｅｍ．１であり、Ｌは、以下の式ＩＶ：
Ａ１－Ａ２－Ａ３－Ａ４－Ａ５（式ＩＶ）
（式中、Ａ１がジペプチドまたはＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸に共有結合しており、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、およびＣｈｅｍ．５から成る群から選択され、Ａ５がＰに共有結合しており、Ｃｈｅｍ．２であり、Ａ２、Ａ３、およびＡ４が各々個別に、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、およびＣｈｅｍ．５から成る群から選択されるか、または不在であるが、但し、Ａ２、Ａ３、Ａ４、およびＡ５が不在である場合、Ａ１もＰに共有結合することを条件とする）のものである。
Ｌ－Ｐ（式ＩＩＩ）
式中、Ｐは、Ｃｈｅｍ．１であり、Ｌは、以下の式ＩＶ：
Ａ１－Ａ２－Ａ３－Ａ４－Ａ５（式ＩＶ）
（式中、Ａ１がジペプチドまたはＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸に共有結合しており、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、およびＣｈｅｍ．５から成る群から選択され、Ａ５がＰに共有結合しており、Ｃｈｅｍ．２であり、Ａ２、Ａ３、およびＡ４が各々個別に、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、およびＣｈｅｍ．５から成る群から選択されるか、または不在であるが、但し、Ａ２、Ａ３、Ａ４、およびＡ５が不在である場合、Ａ１もＰに共有結合することを条件とする）のものである。
【0046】
親油性部分を含む置換基の非限定的な例が表４に列記される。いくつかの実施形態では、置換基は、表４から選択される。
【表4-1】
【表4-2】
【表4-3】
【0047】
置換基が、本明細書に記載の化合物のジペプチド部分（例えば、ジペプチドＢ）に結合している場合、置換基は、本明細書で「置換基ｂ」と称される。いくつかの実施形態では、置換基ｂは、Ｃｈｅｍ．１（式中、ｎが、１４、１６、または１８である）に従うプロトラクターおよび任意選択でリンカーを含み、ここで、リンカーは、１つ以上のγＧｌｕ（Ｃｈｅｍ．２）、および／または１つ以上のＡｄｏ（Ｃｈｅｍ．３）、および／または１つ以上のＧｌｙ（Ｃｈｅｍ．４）、および／または１つ以上のεＬｙｓ（Ｃｈｅｍ．５）を含む。いくつかの実施形態では、置換基ｂは、Ｃｈｅｍ．１６、Ｃｈｅｍ．１７、Ｃｈｅｍ．１８、Ｃｈｅｍ．１９、Ｃｈｅｍ．２０、Ｃｈｅｍ．２１、およびＣｈｅｍ．２２から成る群から選択される。
【0048】
置換基が、本明細書に記載の化合物（例えば、活性薬剤Ｚ）のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している場合、置換基は、本明細書で「置換基ｚ」と称される。いくつかの実施形態では、置換基ｚは、Ｃｈｅｍ．１（式中、ｎが、１４、１６、または１８である）に従うプロトラクターおよびリンカーを含むか、またはそれらから成り、ここで、リンカーは、１つ以上のγＧｌｕ（Ｃｈｅｍ．２）、および／または１つ以上のＡｄｏ（Ｃｈｅｍ．３）、および／または１つ以上のεＬｙｓ（Ｃｈｅｍ．５）を含むか、またはそれらから成る。いくつかの実施形態では、置換基ｚは、Ｃｈｅｍ．７、Ｃｈｅｍ．８、Ｃｈｅｍ．１０、およびＣｈｅｍ．１１から成る群から選択される。
【0049】
いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、置換基ｂおよび／または置換基ｚを含む。
【0050】
ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬
本明細書で使用される場合、「ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬」とは、ＧＬＰ－１受容体作動薬およびＧＩＰ受容体作動薬である化合物である。本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、ポリペプチドおよび任意選択で定義される置換基ｚを含むか、またはそれらから成る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、上述のように、任意選択でリンカーを介して、Ｃ１６－Ｃ２２脂肪酸にコンジュゲートされた共作動薬のアミノ酸残基によって得られた半減期の延長を呈する。
本明細書で使用される場合、「ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬」とは、ＧＬＰ－１受容体作動薬およびＧＩＰ受容体作動薬である化合物である。本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、ポリペプチドおよび任意選択で定義される置換基ｚを含むか、またはそれらから成る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、上述のように、任意選択でリンカーを介して、Ｃ１６－Ｃ２２脂肪酸にコンジュゲートされた共作動薬のアミノ酸残基によって得られた半減期の延長を呈する。
【0051】
いくつかの実施形態では、ペプチドのカルボキシ末端は、－ＣＯ２Ｈ基を保持する。いくつかの実施形態では、本化合物は、Ｃ末端にアミド基（Ｃ（＝Ｏ）－ＮＨ２）を任意選択で含んでもよく、これは、親化合物番号５で見られるような－ＯＨを－ＮＨ２で置換する修飾である。
【0052】
いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、
ＹＸ２ＥＧＴＸ６ＴＳＤＹＳＸ１２Ｘ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７Ｘ２８ＧＸ３０Ｘ３１Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９（配列番号１）
であり、Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、Ｘ２がＡｉｂまたはＡであり、
Ｘ６がＦまたはＶであり、
Ｘ１２がＩまたはＹであり、
Ｘ１３がＹ、Ａ、Ｌ、Ｉ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＱ、Ｒ、Ｅ、Ｈ、またはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥ、Ｑ、またはＮであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ２８がＡまたはＲであり、
Ｘ３０がＧまたは不在であり、
Ｘ３１がＰまたは不在であり、
Ｘ３２がＥ、Ｓ、または不在であり、
Ｘ３３がＳ、Ｋ、または不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
任意選択で、脂肪酸（例えば、Ｃ１６－Ｃ２２カルボン酸）などの親油性部分を含む置換基ｚが、１６位、２０位、または３３位のリジン（Ｋ）を介してＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している。
ＹＸ２ＥＧＴＸ６ＴＳＤＹＳＸ１２Ｘ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７Ｘ２８ＧＸ３０Ｘ３１Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９（配列番号１）
であり、Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、Ｘ２がＡｉｂまたはＡであり、
Ｘ６がＦまたはＶであり、
Ｘ１２がＩまたはＹであり、
Ｘ１３がＹ、Ａ、Ｌ、Ｉ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＱ、Ｒ、Ｅ、Ｈ、またはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥ、Ｑ、またはＮであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ２８がＡまたはＲであり、
Ｘ３０がＧまたは不在であり、
Ｘ３１がＰまたは不在であり、
Ｘ３２がＥ、Ｓ、または不在であり、
Ｘ３３がＳ、Ｋ、または不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
任意選択で、脂肪酸（例えば、Ｃ１６－Ｃ２２カルボン酸）などの親油性部分を含む置換基ｚが、１６位、２０位、または３３位のリジン（Ｋ）を介してＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している。
【0053】
いくつかの実施形態では、置換基ｚは、Ｃｈｅｍ．１（式中、ｎが、１４、１６、または１８である）に従うプロトラクターおよび任意選択でリンカーを含むか、またはそれらから成り、ここで、リンカーは、１つ以上のγＧｌｕ（Ｃｈｅｍ．２）、および／または１つ以上のＡｄｏ（Ｃｈｅｍ．３）、および／または１つ以上のＧｌｙ（Ｃｈｅｍ．４）、および／または１つ以上のεＬｙｓ（Ｃｈｅｍ．５）を含むか、またはそれらから成る。いくつかの実施形態では、置換基ｚは、Ｃｈｅｍ．７、Ｃｈｅｍ．８、Ｃｈｅｍ．１０、およびＣｈｅｍ．１１から成る群から選択される。
【0054】
ジペプチドＢ
いくつかの実施形態では、ジペプチドＢは、ＤＫＰ部分である。いくつかの実施形態では、ジペプチドＢは、Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）（式中、ＸおよびＹがアルファ－アミノ酸である）と呼ばれ得る。いくつかの実施形態では、ＸとＹとの間のアミド結合の立体配座は、求核攻撃のためにＸのアルファ－アミノ基をＹのアルファ－カルボニル基に好適に近接して配置することによってＤＫＰ形成を促進するためにｃｉｓであることが好ましい。いくつかの実施形態では、ジペプチドＢは、置換基ｂを担持する。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｎ－アルキル化アルファ－アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｙのアルファ－カルボン酸基と活性薬剤Ｚのアミンとの間に形成されたアミド結合を介してＢに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である。「Ｎ－アルキル化アルファ－アミノ酸」は、アミノ酸のアルファ－アミノ基におけるＣ１－Ｃ１２アルキルまたはＣ１－Ｃ６アルキルなどのアルキル基で置換される任意のアルファ－アミノ酸であり、ここで、当該アルキル基は直鎖状であっても環状であってもよく、非置換であっても、追加の官能基、例えば、アミノ基（Ｎ－（２－アミノエチル）グリシンで見られるものなど）で置換されてもよい。いくつかの実施形態では、アルキル基は、メチル、エチル、２－アミノエチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、ｎ－ヘキシルから成る群から選択される。いくつかの実施形態では、アルキル基は、メチル、エチル、２－アミノエチル、ｎ－プロピル、ｓｅｃ－ブチル、およびｎ－ヘキシルから選択される。いくつかの実施形態では、アルキル基は、メチルである。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｓａｒ、Ｎ－ｓｅｃＢｕ－Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ（４－ＯＨ）、Ｎ－Ｍｅ－Ｇｌｕ、Ｎ－Ｍｅ－Ｎｏｒ、Ｎ－Ｍｅ－ｈｏｍｏＡｌａ、Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ、Ｎ－Ｍｅ－Ｌｙｓ、Ａｅｇ、Ｎ－Ｈｅｘ－ｈｏｍｏＡｌａ、Ｎ－Ｐｒ－Ａｌａ、ｈｏｍｏＰｒｏ、Ｎ－Ｅｔ－Ｇｌｙ、Ｎ－Ｐｒ－Ｇｌｙ、およびＮ－Ｍｅ－Ｐｈｅから成る群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｙは、ＡｅｇまたはＳａｒである。
いくつかの実施形態では、ジペプチドＢは、ＤＫＰ部分である。いくつかの実施形態では、ジペプチドＢは、Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）（式中、ＸおよびＹがアルファ－アミノ酸である）と呼ばれ得る。いくつかの実施形態では、ＸとＹとの間のアミド結合の立体配座は、求核攻撃のためにＸのアルファ－アミノ基をＹのアルファ－カルボニル基に好適に近接して配置することによってＤＫＰ形成を促進するためにｃｉｓであることが好ましい。いくつかの実施形態では、ジペプチドＢは、置換基ｂを担持する。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｎ－アルキル化アルファ－アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｙのアルファ－カルボン酸基と活性薬剤Ｚのアミンとの間に形成されたアミド結合を介してＢに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である。「Ｎ－アルキル化アルファ－アミノ酸」は、アミノ酸のアルファ－アミノ基におけるＣ１－Ｃ１２アルキルまたはＣ１－Ｃ６アルキルなどのアルキル基で置換される任意のアルファ－アミノ酸であり、ここで、当該アルキル基は直鎖状であっても環状であってもよく、非置換であっても、追加の官能基、例えば、アミノ基（Ｎ－（２－アミノエチル）グリシンで見られるものなど）で置換されてもよい。いくつかの実施形態では、アルキル基は、メチル、エチル、２－アミノエチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、ｎ－ヘキシルから成る群から選択される。いくつかの実施形態では、アルキル基は、メチル、エチル、２－アミノエチル、ｎ－プロピル、ｓｅｃ－ブチル、およびｎ－ヘキシルから選択される。いくつかの実施形態では、アルキル基は、メチルである。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｓａｒ、Ｎ－ｓｅｃＢｕ－Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ（４－ＯＨ）、Ｎ－Ｍｅ－Ｇｌｕ、Ｎ－Ｍｅ－Ｎｏｒ、Ｎ－Ｍｅ－ｈｏｍｏＡｌａ、Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ、Ｎ－Ｍｅ－Ｌｙｓ、Ａｅｇ、Ｎ－Ｈｅｘ－ｈｏｍｏＡｌａ、Ｎ－Ｐｒ－Ａｌａ、ｈｏｍｏＰｒｏ、Ｎ－Ｅｔ－Ｇｌｙ、Ｎ－Ｐｒ－Ｇｌｙ、およびＮ－Ｍｅ－Ｐｈｅから成る群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｙは、ＡｅｇまたはＳａｒである。
【0055】
いくつかの実施形態では、Ｘは、任意のアルファ－アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘは、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘは、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ（４－ＮＨ２）、Ｄ－Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｄ－Ｖａｌ、ｈｏｍｏＰｒｏ、Ｄ－Ｐｒｏ、Ｄ－ｈｏｍｏＰｒｏ、Ｄ－Ａｌａ、およびＡｚｅから成る群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｘは、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｄ－Ｌｙｓ、およびＰｒｏから成る群から選択される。
【0056】
いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｓａｒ、Ｎ－ｓＢｕ－Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｐｒｏ（４－ＯＨ）、Ｎ－Ｍｅ－Ｇｌｕ、Ｎ－Ｍｅ－Ｎｏｒ、Ｎ－Ｍｅ－ｈｏｍｏＡｌａ、Ｎ－Ｍｅ－Ａｌａ、Ｎ－Ｍｅ－Ｌｙｓ、Ｎ－Ｈｅｘ－ｈｏｍｏＡｌａ、Ｎ－Ｐｒ－Ａｌａ、ｈｏｍｏＰｒｏ、Ｎ－Ｐｒ－Ｇｌｙ、Ｎ－Ｅｔ－Ｇｌｙ、およびＮ－Ｍｅ－Ｐｈｅから成る群から選択され、Ｘは、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ（４－ＮＨ２）、およびＤ－Ｌｙｓから成る群から選択される。加えて、またはあるいは、いくつかの実施形態では、Ｙは、ＳａｒおよびＡｅｇから選択され、Ｘは、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｄ－Ｌｙｓ、Ｐｒｏ、Ｄ－Ｖａｌ、ｈｏｍｏＰｒｏ、Ｄ－Ｐｒｏ、Ｄ－ｈｏｍｏＰｒｏ、Ｄ－Ａｌａ、およびＡｚｅから選択される。
【0057】
いくつかの実施形態では、置換基ｂを任意選択で含むジペプチドは、表５ａから選択される。
【0058】
いくつかの実施形態では、ジペプチド誘導体は、表５ｂから選択される。
【表5】
【表6-1】
【表6-2】
【表6-3】
【0059】
活性薬剤Ｚ
本明細書に記載の活性薬剤Ｚは、上に定義される置換基ｚを含むＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬であり、ここで、置換基ｚはアミノ酸残基を介してＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合されている。
本明細書に記載の活性薬剤Ｚは、上に定義される置換基ｚを含むＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬であり、ここで、置換基ｚはアミノ酸残基を介してＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合されている。
【0060】
機能特性
薬理学的に活性な化合物の治療的使用は、例えば、薬物動態特性がその化合物の投与後に所望の曝露に到達するのに好適ではないため、好適ではない薬物動態特性によって妨げられ得る。プロドラッグ技術を使用して、薬物動態特性を改善する、例えば、週１回の経口投薬に好適なものにすることができる。プロドラッグの投与後の活性薬剤の曝露レベルは、プロドラッグから薬剤への変換半減期に依存し、それ故に、好適な変換半減期を得ることにより、化合物が特定の投薬レジメン（例えば、週１回の投与）に好適なものになり得る。プロドラッグの投与後の活性薬剤の曝露レベルは、活性薬剤の観察された終末相半減期に依存し、それ故に、好適な終末相半減期を得ることにより、化合物が特定の投薬レジメン（例えば、週１回の投与）に好適なものになり得る。経口投与されるプロドラッグの好適性は、消化管での吸収後に全身循環に到達するそれらの能力に依存し、それ故に、好適な経口バイオアベイラビリティを得ることにより、化合物が経口投与（例えば、週１回の経口投与）に好適なものになり得る。
薬理学的に活性な化合物の治療的使用は、例えば、薬物動態特性がその化合物の投与後に所望の曝露に到達するのに好適ではないため、好適ではない薬物動態特性によって妨げられ得る。プロドラッグ技術を使用して、薬物動態特性を改善する、例えば、週１回の経口投薬に好適なものにすることができる。プロドラッグの投与後の活性薬剤の曝露レベルは、プロドラッグから薬剤への変換半減期に依存し、それ故に、好適な変換半減期を得ることにより、化合物が特定の投薬レジメン（例えば、週１回の投与）に好適なものになり得る。プロドラッグの投与後の活性薬剤の曝露レベルは、活性薬剤の観察された終末相半減期に依存し、それ故に、好適な終末相半減期を得ることにより、化合物が特定の投薬レジメン（例えば、週１回の投与）に好適なものになり得る。経口投与されるプロドラッグの好適性は、消化管での吸収後に全身循環に到達するそれらの能力に依存し、それ故に、好適な経口バイオアベイラビリティを得ることにより、化合物が経口投与（例えば、週１回の経口投与）に好適なものになり得る。
【0061】
第１の機能的態様によれば、本明細書に記載の化合物は、活性薬剤と比較して、ヒトＧＬＰ－１受容体および／またはＧＩＰ受容体において任意の有意な程度まで意図される効力を発揮しない。加えて、またはあるいは、第２の機能的態様では、本明細書に記載のプロドラッグは、生理学的条件下で活性薬剤に変換される。加えて、またはあるいは、第３の機能的態様では、本明細書に記載のプロドラッグは、静脈内投与、皮下投与、および／または経口投与後の終末相半減期の延長などの改善された薬物動態特性を有する。
【0062】
機能的受容体活性化活性
第１の機能的態様によれば、本発明のプロドラッグは、活性薬剤と比較して、ヒトＧｌＰ－１受容体および／またはヒトＧＩＰ受容体を任意の有意な程度まで活性化しない。本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体作動薬の機能活性は、本明細書のインビトロ機能的効力を測定するための一般的な方法に記載されるようにインビトロで試験することができる。
第１の機能的態様によれば、本発明のプロドラッグは、活性薬剤と比較して、ヒトＧｌＰ－１受容体および／またはヒトＧＩＰ受容体を任意の有意な程度まで活性化しない。本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体作動薬の機能活性は、本明細書のインビトロ機能的効力を測定するための一般的な方法に記載されるようにインビトロで試験することができる。
【0063】
５０％効果濃度（ＥＣ５０）という用語は、概して、用量反応曲線を参照することにより、ベースラインと最大との中間の反応を誘発する濃度を指す。ＥＣ５０は、化合物の効力の尺度として使用され、その最大効果の５０％が観察される濃度を表す。
【0064】
したがって、化合物のインビトロ効力を本明細書に記載されるように決定することができ、ＥＣ５０を決定することができる。ＥＣ５０値がより低いほど、効力がより良好である。
【0065】
かかる化合物を特徴付けるために、各々の受容体の天然ホルモンに関連してインビトロ効力を考慮することがさらに関連し得る。
【0066】
インビトロ効力は、例えば、適切なＧＬＰ－１受容体および／またはＧＩＰ受容体を発現する膜を含む培地中で、および／または適切なＧＬＰ－１受容体および／またはＧＩＰ受容体を発現する全細胞を用いたアッセイで決定され得る。
【0067】
例えば、ヒトＧＬＰ－１および／またはＧＩＰ受容体の機能的応答は、受容体遺伝子アッセイで、例えば、ヒトＧＬＰ－１および／またはＧＩＰ受容体を発現し、かつプロモーターに結合したｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ）のＤＮＡおよびホタルルシフェラーゼ（ＣＲＥルシフェラーゼ）の遺伝子を含む安定にトランスフェクトされたＢＨＫ細胞株中で測定され得る。ＧＬＰ－１および／またはＧＩＰ受容体の活性化の結果としてｃＡＭＰが生成されると、次いで、ルシフェラーゼの発現がもたらされる。ルシフェラーゼは、ルシフェリンを添加することによって決定され得、これが酵素によってオキシルシフェリンに変換されて生物発光を生じ、これがインビトロ効力のレポーターとして測定される。かかるアッセイの一例が本明細書に記載の実施例５に記載される。本化合物がアルブミンに結合するように設計された１つ以上の置換基を含み得るため、受容体活性がアッセイ培地中のヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）の存在または不在に影響され得ることに留意することも重要である。ＨＳＡの不在下でのＥＣ５０と比較したＥＣ５０の増加によって示されるＨＳＡの存在下での本化合物の効力の減少は、本化合物とＨＳＡとの相互作用を示し、インビボでの長期化作用時間を予測する。
【0068】
一実施形態では、活性薬剤は、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体を活性化する強力なインビトロ効果を有する。
【0069】
一実施形態では、親化合物は、ＨＳＡなしで行われた場合、本明細書の実施例２に記載のＣＲＥルシフェラーゼレポーターアッセイにおいて２０ｐＭ未満のＥＣ５０でヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体をインビトロで活性化することができる。
【0070】
一実施形態では、親化合物は、１００ｐＭ以下、より好ましくは５０ｐＭ未満、または最も好ましくは２０ｐＭ未満のＥＣ５０に対応する実施例２の方法を使用して決定されるヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体でのインビトロ効力を有する。
【0071】
一実施形態では、ヒトＧＬＰ－１受容体アッセイおよびヒトＧＩＰ受容体アッセイにおけるＥＣ５０はいずれも、１～２０ｐＭなど、１～１５ｐＭなど、または１～１０ｐＭなどの１～２５ｐＭである。
【0072】
変換半減期
第２の機能的態様によれば、本発明のプロドラッグは、驚くほど良好な変換半減期を有する。
第２の機能的態様によれば、本発明のプロドラッグは、驚くほど良好な変換半減期を有する。
【0073】
プロドラッグから活性薬剤への変換が起こる速度は、変換半減期によって定量化され得る。「変換半減期」という用語は、本明細書で使用される場合、変換の結果としてプロドラッグの濃度を半減させるのに必要な時間の長さである。
【0074】
ヒトにおける週１回の経口投薬用のプロドラッグの望ましい変換半減期は、本明細書の「変換半減期を測定するための一般的な方法」に記載されるようにｐＨ７．４および３７℃で測定された場合、５０～４００時間など、７５～３００時間など、または１００～２００時間などの２４～５００時間であり得る。
【0075】
プロドラッグは、ＤＫＰ部分の分子内環化時に所望の変換を達成することができ、その際に、ＤＫＰ部分が活性薬剤から切断されて、活性活性薬剤の放出がもたらされる。かかる分子内環化は、例えば、２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）形成を介して、生理学的条件下で酵素非依存性プロセスとして起こり得る。ＤＫＰ形成を介して活性活性薬剤に変換されることができるプロドラッグでは、変換時に活性薬剤が放出される部分は、ＤＫＰ部分と呼ばれる。変換半減期は、とりわけ、ＤＫＰ部分の性質に依存し、それ故に、例えば、ＤＫＰ部分の分子設計を用いて、変換半減期を改善して（例えば、それを週１回の経口投与に好適なものにして）、プロドラッグの特性をある特定の投薬レジメン（例えば、週１回の経口投与）に好適なものにすることができる。
【0076】
いくつかの実施形態では、変換半減期は、１日１回投与に好適である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、週１回の投与に好適である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、２４時間超である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、５０時間超である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、７５時間超である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、１００時間超である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、５００時間未満である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、４００時間未満である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、３００時間未満である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、２００時間未満である。
【0077】
いくつかの実施形態では、変換半減期は、２４～５００時間である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、５０～４００時間である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、７５～３００時間である。いくつかの実施形態では、変換半減期は、１００～２００時間である。
【0078】
観察された終末相半減期
多くの薬剤は、最初に急な勾配をたどり、その後に浅い勾配をたどる二相性の血漿配置曲線を呈する。浅い勾配をたどる相は、「末端相」と呼ばれ得る。「終末相半減期」という用語は、本明細書で使用される場合、化合物の血漿濃度が終末相中に半減するのに必要な時間を指す。遊離形態で投与された場合の薬剤の終末相半減期は、プロドラッグとして投与された場合、遊離形態での薬剤の連続放出がインビボでのプロドラッグの変換時に起こるため、プロドラッグとして投与された場合の薬剤の半減期とは異なる。
多くの薬剤は、最初に急な勾配をたどり、その後に浅い勾配をたどる二相性の血漿配置曲線を呈する。浅い勾配をたどる相は、「末端相」と呼ばれ得る。「終末相半減期」という用語は、本明細書で使用される場合、化合物の血漿濃度が終末相中に半減するのに必要な時間を指す。遊離形態で投与された場合の薬剤の終末相半減期は、プロドラッグとして投与された場合、遊離形態での薬剤の連続放出がインビボでのプロドラッグの変換時に起こるため、プロドラッグとして投与された場合の薬剤の半減期とは異なる。
【0079】
プロドラッグとして投与される活性薬剤の血漿濃度は、とりわけ、血流からの活性薬剤の除去の結果、ならびに活性薬剤へのプロドラッグの段階的変換の結果である。プロドラッグの段階的変換により、活性薬剤の継続的な供給が確実になり、それ故に、薬剤が遊離形態で投与された場合と比較して所望の曝露レベルに必要な投与回数が減少する。血流への活性薬剤の継続的な供給は、観察された終末相半減期（すなわち、測定可能な終末相半減期）に反映され、プロドラッグとして投与された場合の活性薬剤の供給は、遊離形態で投与された場合の活性薬剤の供給よりも高い。
【0080】
本発明のプロドラッグまたは本発明のプロドラッグの活性薬剤の薬物動態特性は、インビボ薬物動態研究によって好適に決定され得る。かかる研究は、医薬化合物が体内でどのように吸収され、分布し、排出されるか、およびこれらの過程が体内の化合物の濃度にどのように影響するかを経時的に評価するために行われる。医薬品開発の発見段階および前臨床段階で、マウス、ラット、サル、イヌ、ミニブタ、またはブタなどの動物モデルを使用して、この特徴付けを行うことができる。これらのモデルのいずれも、本発明のプロドラッグの薬物動態特性を試験するために使用することができる。かかる研究では、動物に、典型的には、関連する製剤で、薬剤の単回投与により、静脈内投与されるか、皮下（ｓ．ｃ．）投与されるか、または経口（ｐ．ｏ．）投与されるかのいずれかが行われる。血液試料が投薬後の所定の時点で採取され、関連する定量アッセイを用いて薬剤の濃度について分析される。これらの測定値に基づいて、試験化合物の血漿濃度プロファイルがプロットされ、データのいわゆるノンコンパートメント薬物動態解析が行われる。大半の化合物について、血漿濃度プロファイルの終末部分は、片対数プロットで描かれたときに直線になり、薬剤が一定の分画速度で体内から除去されることを反映している。この速度（ラムダＺまたはλｚ）は、プロットの終末部分の勾配を差し引いたものに等しい。この速度からも終末相半減期がｔ１／２＝ｌｎ（２）／λｚとして計算され得る（例えば、Ｊｏｈａｎ Ｇａｂｒｉｅｌｓｓｏｎ ａｎｄ Ｄａｎｉｅｌ Ｗｅｉｎｅｒ：Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｃｏｎｃｅｐｔｓ ＆ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，３ｒｄ Ｅｄ．，Ｓｗｅｄｉｓｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，Ｓｔｏｃｋｈｏｌｍ（２０００）を参照されたい）。プロドラッグとして投与される活性薬剤を調査する場合、薬剤が緩徐に放出されるデポーとしてプロドラッグが作用するため、活性薬剤の終末相半減期は、プロドラッグの段階的変換から生じる活性薬剤の連続供給に影響される。したがって、プロドラッグとして投与される活性薬剤の終末相半減期の分析は、活性薬剤がその遊離形態で投与される場合と同じではなくなるため、最も好都合に「観察された終末相半減期」と呼ばれる。
【0081】
いくつかの実施形態では、本発明のプロドラッグの終末相半減期は、本明細書の「ミニブタにおける終末相半減期を測定するための一般的な方法」に記載されるように決定される。ヒトにおける週１回の経口投与に好適な観察された終末相半減期は、ミニブタで決定された場合、５０時間超、または好ましくは７０時間超、または最も好ましくは９０時間超であり得る。ヒトにおける週１回の経口投与に好適な観察された終末相半減期は、ミニブタで決定された場合、２５０時間未満、または好ましくは１８０時間未満であり得る。ヒトにおける週１回の経口投与に好適な観察された終末相半減期は、ミニブタで決定された場合、５０～２５０時間の範囲内、または好ましくは９０～１８０時間の範囲内であり得る。
【0082】
経口バイオアベイラビリティ
薬理学的に活性な化合物による経口治療は、バイオアベイラビリティが乏しいため、妨げられる場合がある。「バイオアベイラビリティ」という用語は、投与後に全身循環に到達する化合物の能力を指し、投与時に全身循環に到達する化合物投薬量の分率度（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ ｅｘｔｅｎｔ）として定量化され得る。経口投与用の薬剤の経口吸収性が高い（すなわち、経口投与後に消化管からの吸収性が高い）ことが望ましく、これは、高い吸収性が、薬剤の意図される全身濃度に到達するのに必要な投薬量を減少させ、それ故に、例えば、錠剤サイズを小さくし、製造コストを削減することができるためである。
薬理学的に活性な化合物による経口治療は、バイオアベイラビリティが乏しいため、妨げられる場合がある。「バイオアベイラビリティ」という用語は、投与後に全身循環に到達する化合物の能力を指し、投与時に全身循環に到達する化合物投薬量の分率度（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ ｅｘｔｅｎｔ）として定量化され得る。経口投与用の薬剤の経口吸収性が高い（すなわち、経口投与後に消化管からの吸収性が高い）ことが望ましく、これは、高い吸収性が、薬剤の意図される全身濃度に到達するのに必要な投薬量を減少させ、それ故に、例えば、錠剤サイズを小さくし、製造コストを削減することができるためである。
【0083】
「経口バイオアベイラビリティ」という用語は、本明細書で使用される場合、経口投与後に全身循環に到達する化合物の能力を指す。経口バイオアベイラビリティは、化合物が経口投与後に消化管に吸収される程度を反映する。言い換えれば、高い経口バイオアベイラビリティは、高い経口吸収性に関連する。薬剤の高い経口バイオアベイラビリティは、経口投与後の高い薬剤曝露に関連する。経口バイオアベイラビリティは、国際公開第２０１９／１４９８８０号に記載されるようにビーグル犬において吸収促進剤Ｎ－（８－［２－ヒドロキシベンゾイル］アミノ）カプリル酸ナトリウム（ＳＮＡＣ）との共製剤で測定され得る。
【0084】
経口バイオアベイラビリティは、本明細書のビーグル犬における経口バイオアベイラビリティを測定するための一般的な方法に記載されるように測定され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、高い経口バイオアベイラビリティを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、活性薬剤と同様の経口バイオアベイラビリティを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、活性薬剤に劣らない経口バイオアベイラビリティを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、活性薬剤と少なくとも同じ程度に高い経口バイオアベイラビリティを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、ヒトにおける週１回の経口投薬に好適な経口バイオアベイラビリティを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、ビーグル犬において決定され、かつＣｍａｘ／用量［ｋｇ／Ｌ］として測定される経口バイオアベイラビリティを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、ビーグル犬においてＣｍａｘ／用量［ｋｇ／Ｌ］として測定される経口バイオアベイラビリティを有し、ここで、Ｃｍａｘ／用量［ｋｇ／Ｌ］は、０．１０超、好ましくは０．１５超、最も好ましくは０．２０超である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、ビーグル犬において決定され、かつＡＵＣ／用量［ｋｇ・ｈｒ／Ｌ］として測定される経口バイオアベイラビリティを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、ビーグル犬において決定され、かつＡＵＣ／用量［ｋｇ・ｈｒ／Ｌ］として測定される経口バイオアベイラビリティを有し、ここで、ＡＵＣ／用量［ｋｇ・ｈｒ／Ｌ］は、２．０超、好ましくは５．０超、最も好ましくは１０．０超である。
【0085】
医薬組成物
本明細書に記載のプロドラッグまたはその薬学的に許容可能な塩と、任意選択で１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物は、当該技術分野で公知のように調製され得る。
本明細書に記載のプロドラッグまたはその薬学的に許容可能な塩と、任意選択で１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物は、当該技術分野で公知のように調製され得る。
【0086】
「賦形剤」という用語は、活性治療成分以外の任意の成分を広範に指す。賦形剤は、不活性（ｉｎｅｒｔ）物質、不活性（ｉａｃｔｉｖｅ）物質、および／または医学的に活性でない物質であり得る。賦形剤は、例えば、担体、ビヒクル、充填剤、結合剤、潤滑剤、滑剤、崩壊剤、流量制御剤、結晶化抑制剤、可溶化剤、安定剤、着色剤、香味剤、界面活性剤、乳化剤、もしくはそれらの組み合わせとして、および／または投与を改善するために、および／または活性物質の吸収を改善するために、様々な目的を果たし得る。使用される賦形剤の各々の量は、当該技術分野において慣習的な範囲内で変動し得る。経口剤形を製剤化するために使用され得る技法および賦形剤は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（例えば、第８版、Ｓｈｅｓｋｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｏｙａｌ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ（２０１７）、およびそれ以降のいずれかの版）、およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（例えば、第２２版、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ ａｎｄ Ａｌｌｅｎ，Ｅｄｓ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ （２０１３）、およびそれ以降のいずれかの版）に記載されている。
【0087】
本明細書に記載の化合物を含む医薬組成物は、いくつかの剤形、例えば、溶液、懸濁液、錠剤、およびカプセル剤であり得る。本発明のプロドラッグを含む医薬組成物は、それを必要とする患者に、局所部位（例えば、皮膚および粘膜部位）、吸収を迂回する部位（例えば、動脈内、静脈内、心臓内）、および吸収に関与する部位（例えば、皮膚内、皮膚下、筋肉内、経口、または腹部内）などのいくつかの部位で投与され得る。投与される用量は、０．１ｕｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの本発明の化合物を含み得る。
【0088】
いくつかの実施形態では、本医薬組成物は、固体製剤、例えば、凍結乾燥または噴霧乾燥組成物であり得、これらをそのまま使用してもよく、または医師もしくは患者が使用前に溶媒および／または希釈剤を添加して使用してもよい。一実施形態では、本医薬組成物は、錠剤の形態である。さらなる実施形態では、本医薬組成物は、例えば、国際公開第２０１２／０８０４７１号、国際公開第２０１３／１８９９８８号、または国際公開第２０１９／１４９８８０号に記載の製剤のうちのいずれか１つ以上を使用する、本発明のプロドラッグと、Ｎ－［８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ］カプリル酸ナトリウム（ＳＮＡＣ）などのＮ－［８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ］カプリル酸塩と、当該技術分野で公知の１つ以上のさらなる賦形剤とを含むか、またはそれらから成る固体製剤であり得る。一実施形態では、本医薬製剤は、本発明のプロドラッグと、ＳＮＡＣと、１つ以上のさらなる賦形剤とを含む錠剤である。
【0089】
あるいは、本医薬組成物は、水性製剤などの液体製剤である。注射に好適な液体組成物は、必要に応じて成分を溶解させて混合して、所望の最終生成物をもたらすことを伴う医薬産業の従来の技法を使用して調製することができる。したがって、ある手順に従って、本発明による化合物は、好適なｐＨの好適な緩衝液中に溶解される。本組成物は、例えば、滅菌濾過によって滅菌され得る。
【0090】
薬学的に許容可能な塩
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のプロドラッグは、薬学的に許容可能な塩の形態である。塩は、例えば、塩基と酸との間の化学反応、例えば、２ＮＨ３＋Ｈ２ＳＯ４→（ＮＨ４）２ＳＯ４によって形成される。塩は、塩基性塩であっても酸性塩であってもよく、またはどちらでもなくてもよい（すなわち、中性塩）。水中で、塩基性塩は水酸化物イオンを生成し、酸性塩はヒドロニウムイオンを生成する。本プロドラッグの塩は、それぞれ、アニオン基の間またはカチオン基の間にカチオンまたはアニオンを付加することによって形成され得る。これらの基は、本誘導体のペプチドおよび／または置換基に位置し得る。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のプロドラッグは、薬学的に許容可能な塩の形態である。塩は、例えば、塩基と酸との間の化学反応、例えば、２ＮＨ３＋Ｈ２ＳＯ４→（ＮＨ４）２ＳＯ４によって形成される。塩は、塩基性塩であっても酸性塩であってもよく、またはどちらでもなくてもよい（すなわち、中性塩）。水中で、塩基性塩は水酸化物イオンを生成し、酸性塩はヒドロニウムイオンを生成する。本プロドラッグの塩は、それぞれ、アニオン基の間またはカチオン基の間にカチオンまたはアニオンを付加することによって形成され得る。これらの基は、本誘導体のペプチドおよび／または置換基に位置し得る。
【0091】
アニオン基の非限定的な例には、存在する場合、置換基中の任意の遊離カルボン酸基、ならびにペプチド中の遊離カルボン酸基が挙げられる。ペプチドは、存在する場合、Ｃ末端に遊離カルボン酸基、ならびにアスパラギン酸およびグルタミン酸などのアミノ酸残基の任意の遊離カルボキシル基を含み得る。
【0092】
カチオン基の非限定的な例には、存在する場合、置換基中の任意の遊離アミノ基、ならびにペプチド中の遊離アミノ基が挙げられる。ペプチドは、存在する場合、Ｎ末端に遊離アミノ基、ならびにヒスチジン、アルギニン、およびリジンなどのアミノ酸残基の任意の遊離イミダゾール、グアニジン、またはアミノ基を含み得る。
【0093】
特定の実施形態では、本発明のプロドラッグは、薬学的に許容可能な塩の形態である。
【0094】
薬学的適応
本発明のさらなる態様は、医薬として使用するための本明細書に記載の化合物に関する。「治療」という用語は、本明細書で使用される場合、それを必要とする任意のヒト対象者の医学的処置を指す。治療は、予防的（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ）、予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）、緩和的、対症的、および／または治癒的であり得る。当該治療のタイミングおよび目的は、対象者の健康状態に従って、個体によって異なり得る。
本発明のさらなる態様は、医薬として使用するための本明細書に記載の化合物に関する。「治療」という用語は、本明細書で使用される場合、それを必要とする任意のヒト対象者の医学的処置を指す。治療は、予防的（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ）、予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）、緩和的、対症的、および／または治癒的であり得る。当該治療のタイミングおよび目的は、対象者の健康状態に従って、個体によって異なり得る。
【0095】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の医学的処置における使用のためのものである：
（ｉ）高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などの全ての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減、
（ｉｉ）２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン抵抗性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、
（ｉｉｉ）例えば、食物摂取量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、過体重または肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防、胃内容排出の遅延、身体的可動性の増加、ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の併存疾患の予防および／もしくは治療、
（ｉｖ）（薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持、すなわち、減量成功後の体重増加の予防。
（ｖ）肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療。
（ｉ）高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などの全ての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減、
（ｉｉ）２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン抵抗性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、
（ｉｉｉ）例えば、食物摂取量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、過体重または肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防、胃内容排出の遅延、身体的可動性の増加、ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の併存疾患の予防および／もしくは治療、
（ｉｖ）（薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持、すなわち、減量成功後の体重増加の予防。
（ｖ）肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療。
【0096】
いくつかの実施形態では、本化合物は、糖尿病および／または肥満を治療および／または予防するための方法に使用するためのものである。いくつかの実施形態では、本化合物は、糖尿病および／または肥満を治療するための方法に使用するためのものである。
【0097】
いくつかの実施形態では、本化合物は、２型糖尿病を治療および／または予防するための方法に使用するためのものである。いくつかの実施形態では、本化合物は、２型糖尿病を治療するための方法に使用するためのものである。いくつかの実施形態では、本化合物は、肥満を治療および／または予防するための方法に使用するためのものである。いくつかの実施形態では、本化合物は、肥満を治療するための方法に使用するためのものである。いくつかの実施形態では、本化合物は、体重を管理するための方法に使用するためのものである。いくつかの実施形態では、本化合物は、食欲を低下させるための方法に使用するためのものである。いくつかの実施形態では、本化合物は、食物摂取量を減少させるための方法に使用するためのものである。
【0098】
生成プロセス
本発明のプロドラッグ（またはその断片）は、例えば、ｔ－ＢｏｃもしくはＦｍｏｃ化学反応または他の十分に確立された技法を使用した古典的なペプチド合成、例えば、固相ペプチド合成によって生成されてもよく、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｗｕｔｓ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，１９９９、Ｆｌｏｒｅｎｃｉｏ Ｚａｒａｇｏｚａ Ｄｏｒｗａｌｄ，“Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｎ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ”，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ Ｖｅｒｌａｇ ＧｍｂＨ，２０００、および“Ｆｍｏｃ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｗ．Ｃ．Ｃｈａｎ ａｎｄ Ｐ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，２０００を参照されたい。
本発明のプロドラッグ（またはその断片）は、例えば、ｔ－ＢｏｃもしくはＦｍｏｃ化学反応または他の十分に確立された技法を使用した古典的なペプチド合成、例えば、固相ペプチド合成によって生成されてもよく、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｗｕｔｓ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，１９９９、Ｆｌｏｒｅｎｃｉｏ Ｚａｒａｇｏｚａ Ｄｏｒｗａｌｄ，“Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｎ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ”，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ Ｖｅｒｌａｇ ＧｍｂＨ，２０００、および“Ｆｍｏｃ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｗ．Ｃ．Ｃｈａｎ ａｎｄ Ｐ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，２０００を参照されたい。
【0099】
プロドラッグを調製する方法の特定の例は、実験パートに含まれる。
【0100】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物を調製するための方法は、固相ペプチド合成の工程を含む。ジペプチド部分および／または置換基は、固相ペプチド合成の一部として連続して構築されてもよく、または別個に生成されてペプチド合成後にペプチドの適切な官能基を介して結合してもよい。
【0101】
一実施形態では、本化合物は、置換基が２つのペプチド断片の一方に結合した後にそれらのペプチド断片がライゲーションされる二段階プロセスによって生成される。
【0102】
実施形態
本発明は、以下の非限定的な実施形態によってさらに説明される。
１．式Ｉの化合物であって、
Ｂ－Ｚ（式Ｉ）
（式中、Ｂがジペプチドであり、当該ジペプチドが任意選択で置換基ｂを含み、
Ｚが、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬であり、当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬が任意選択で置換基ｚを含む）
当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基がペプチド結合を介してＢに連結している、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＸ６ＴＳＤＹＳＸ１２Ｘ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７Ｘ２８ＧＸ３０Ｘ３１Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９（配列番号１）
（式中、Ｘ２がＡｉｂまたはＡであり、
Ｘ６がＦまたはＶであり、
Ｘ１２がＩまたはＹであり、
Ｘ１３がＹ、Ａ、Ｌ、Ｉ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＱ、Ｒ、Ｅ、Ｈ、またはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥ、Ｑ、またはＮであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ２８がＡまたはＲであり、
Ｘ３０がＧまたは不在であり、
Ｘ３１がＰまたは不在であり、
Ｘ３２がＥ、Ｓ、または不在であり、
Ｘ３３がＳ、Ｋ、または不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）である、実施形態１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＸ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７ＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号２）
（式中、Ｘ１３がＬまたはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＲまたはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥまたはＱであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、実施形態１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＸ１６ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号３）
（式中、Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、実施形態１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５．Ｘ１６がＥであり、Ｘ３３がＫである、実施形態２～４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６．Ｘ１６がＫであり、Ｘ３３がＳである、実施形態２～４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列がＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号４）である、実施形態１～６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
８．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号４）、Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＫＧＡＰＰＰＳ（配列番号５）、およびＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＫＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号６）から成る群から選択される、実施形態１～７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
９．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列がＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＫＧＡＰＰＰＳ（配列番号５）またはＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＫＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号６）である、実施形態１～８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１０．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬が置換基ｚを含み、当該置換基ｚがリジン（Ｋ）を介して当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、実施形態１～９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１１．Ｘ１６および／またはＸ２０および／またはＸ３３がリジンである、実施形態２～１０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１２．Ｘ１６がリジンである、実施形態２、３、１１、または６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１３．Ｘ２０がリジンである、実施形態２、１１、または７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１４．Ｘ３３がリジンである、実施形態２、３、１１、または５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１５．当該置換基ｚが１６位、２０位、または３３位のリジン（Ｋ）を介して当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１６．ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬がＣ末端にアミド修飾を有する、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１７．３３位の当該リジンが、Ｃｈｅｍ．８、Ｃｈｅｍ．７、またはＣｈｅｍ．１０でのリジン側鎖のイプシロン－アミノ基へのコンジュゲーションにより化学修飾されている、実施形態５、８、または９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１８．１６位の当該リジンが、Ｃｈｅｍ．７でのリジン側鎖のイプシロン－アミノ基へのコンジュゲーションにより化学修飾されている、実施形態６、８、または９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１９．２０位の当該リジンが、Ｃｈｅｍ．１１でのリジン側鎖のイプシロン－アミノ基へのコンジュゲーションにより化学修飾されている、実施形態７または８に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２０．当該ジペプチドＢが、式ＩＩ：
Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）
（式中、Ｘが、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸であり、
Ｙが、Ｙのアルファ－カルボン酸基と当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基との間に形成されたペプチド結合を介してＺに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である）である、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２１．当該ジペプチドＢが、式ＩＩ：
Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）
（式中、Ｘが、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸であり、
Ｙが、Ｙのアルファ－カルボン酸基とＺのＮ末端アミノ基との間に形成されたペプチド結合を介してＺに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である）である、実施形態１～１６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２２．Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－（２－アミノエチル）グリシン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、実施形態２０または２１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２３．Ｘが、リジン、４－アミノフェニルアラニン、Ｄ－リジン、アラニン、グリシン、プロリン、Ｄ－バリン、ホモプロリン、Ｄ－プロリン、Ｄ－ホモプロリン、Ｄ－アラニン、およびアゼチジン－２－カルボン酸から成る群から選択される、実施形態２０～２２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２４．Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、実施形態２０～２３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２５．Ｙが、サルコシンまたはＮ－（２－アミノエチル）グリシンである、実施形態２０～２４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２６．Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、アラニン、ロイシン、グリシン、プロリン、およびアスパラギン酸から成る群から選択される、実施形態２０～２５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２７．Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、およびグリシンから成る群から選択される、実施形態２０～２６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２８．ジペプチドが、分子内環化を経て２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）を形成することができ、これにより、ＡとＺとの間のアミド結合が切断されるようになる、実施形態１～２７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２９．ジペプチドが、分子内環化を経て２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）を形成することができ、これにより、ＡとＺとの間のペプチド結合が切断されるようになる、実施形態１～２７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３０．当該ジペプチドが置換基ｂを含む、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３１．当該ジペプチドが置換基ｂを担持する、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３２．当該ジペプチドが置換基ｂを有する、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３３．置換基ｂが任意選択でアミド結合を介してＸに共有結合している、実施形態２１～３０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３４．置換基ｂが任意選択でアミド結合を介してＹに共有結合している、実施形態２１～３０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３５．当該置換基ｂがアルブミン結合部分である、実施形態１～３４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３６．当該置換基ｂがプロトラクターおよび任意選択でリンカーを含むか、またはそれらから成る、実施形態１～３５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３７．当該プロトラクターがＣ１６－Ｃ２２カルボン酸などの脂肪酸である、実施形態３６に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３８．当該プロトラクターがＣｈｅｍ．１である、実施形態３６または３７に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３９．当該置換基がリンカーを含み、任意選択で、当該リンカーがリンカー要素を含むか、またはそれから成る、実施形態１～３８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４０．当該リンカーが、式ＩＶ：
Ａ１－Ａ２－Ａ３－Ａ４－Ａ５（式ＩＶ）
（式中、Ａ１がアミド結合を介して当該ジペプチドのアミノ酸に共有結合しており、任意選択でアミド結合を介して当該プロトラクターにも共有結合しており、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、およびＣｈｅｍ．５から成る群から選択され、Ａ５がＣｈｅｍ．１に共有結合しており、Ｃｈｅｍ．２であるか、または不在であり、Ａ２、Ａ３、およびＡ４が各々個別に、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、およびＣｈｅｍ．５から成る群から選択されるか、または不在である）のものである、実施形態３８または３９に記載の化合物。
４１．置換基ｂが、Ｃｈｅｍ．１６、Ｃｈｅｍ．１７、Ｃｈｅｍ．１８、Ｃｈｅｍ．１９、Ｃｈｅｍ．２０、Ｃｈｅｍ．２１、およびＣｈｅｍ．２２から成る群から選択される、実施形態１～４０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４２．当該化合物が以下から成る群から選択される、実施形態１～４１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
化合物番号１
化合物番号２
化合物番号３
化合物番号４
化合物番号５
化合物番号６
化合物番号７
化合物番号８
化合物番号９
化合物番号１０
化合物番号１１
化合物番号１２
化合物番号１３
化合物番号１４
化合物番号１５
化合物番号１６
化合物番号１７
、および
化合物番号１８
。
４３．当該化合物が、化合物番号１、２、３、９、および１０から成る群から選択される、実施形態１～４２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４４．当該化合物が化合物番号１である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４５．当該化合物が化合物番号２である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４６．当該化合物が化合物番号３である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４７．当該化合物が化合物番号４である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４８．当該化合物が化合物番号５である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４９．当該化合物がプロドラッグであり、インビトロでいかなる有意な効力も発揮しない、実施形態１～４８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５０．当該化合物がプロドラッグであり、変換半減期を有する、実施形態１～４９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５１．当該変換半減期がｐＨ７．４および３７℃でインビトロで測定される、実施形態５０に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５２．当該変換半減期が本明細書の変換半減期を測定するための一般的な方法に記載されるように測定される、実施形態５０または５１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５３．当該変換半減期が１日１回投与に好適である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５４．当該変換半減期が週１回投与に好適である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５５．インビトロで測定された当該変換半減期が９０～４３００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５６．インビトロで測定された当該変換半減期が９０～４３００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５７．インビトロで測定された当該変換半減期が３００～１１００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５８．インビトロで測定された当該変換半減期が４５０～６５０時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５９．インビトロで測定された当該変換半減期が少なくとも１００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６０．インビトロで測定された当該変換半減期が少なくとも２００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６１．インビトロで測定された当該変換半減期が少なくとも３００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６２．当該化合物が終末相半減期を有する、実施形態１～６１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６３．当該化合物が終末相半減期を有し、当該終末相半減期が１日１回投与に好適である、実施形態１～６１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６４．当該化合物が終末相半減期を有し、当該終末相半減期が週１回投与に好適である、実施形態１～６１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６５．当該終末相半減期がミニブタで決定され、本明細書のミニブタにおける終末相半減期を測定するための一般的な方法に記載されるように測定される、実施形態６２～６４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６６．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、９０時間超である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６７．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、１１０時間超である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６８．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、２５０時間超である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６９．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、１８０時間超である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７０．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、８０～２４０時間である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７１．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、１１０～１９１時間である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７２．実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤と、を含む、医薬組成物。
７３．当該医薬組成物が液体製剤である、実施形態７２に記載の医薬組成物。
７４．当該医薬組成物が固体製剤である、実施形態７２に記載の医薬組成物。
７５．当該医薬組成物が経口投与用である、実施形態７２に記載の医薬組成物。
７６．錠剤の形態の場合の当該組成物、実施形態７４～７６のいずれか１つに記載の医薬組成物。
７７．少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤がＮ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸塩であり、例えば、Ｎ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸がＮ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸ナトリウム（ＳＮＡＣ）である、実施形態７４～７７のいずれか１つに記載の医薬組成物。
７８．ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤をさらに含む、実施形態７４～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物。
７９．実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物と、Ｎ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸塩と、潤滑剤と、任意選択で１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤と、を含む、錠剤。
８０．当該Ｎ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸塩がＮ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸ナトリウム（ＳＮＡＣ）である、実施形態７９に記載の錠剤。
８１．当該潤滑剤がステアリン酸マグネシウムである、実施形態７９または８０に記載の錠剤。
８２．医薬として使用するための、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤。
８３．２型糖尿病の治療に使用するための、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤。
８４．肥満の治療に使用するための、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤。
８５．肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、および／または脂肪肝などの肝疾患の治療に使用するための、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤。
８６．以下のための医薬の製造における、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤の使用：
ａ．肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、および／または脂肪肝などの肝疾患の予防および／または治療、
ｂ．肥満の予防および／または治療、および／または
ｃ．２型糖尿病の予防および／または治療。
８７．２型糖尿病の治療のための医薬の製造における、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤の使用。
８８．肥満のための医薬の製造における、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤の使用。
８９．２型糖尿病を予防および／または治療するための方法であって、それを必要とする対象者に、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤を投与する、方法。
９０．肥満を予防および／または治療するための方法であって、それを必要とする対象者に、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤を投与する、方法。
９１．肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、および／または脂肪肝などの肝疾患を予防および／または治療するための方法であって、それを必要とする対象者に、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤を投与する、方法。
本発明は、以下の非限定的な実施形態によってさらに説明される。
１．式Ｉの化合物であって、
Ｂ－Ｚ（式Ｉ）
（式中、Ｂがジペプチドであり、当該ジペプチドが任意選択で置換基ｂを含み、
Ｚが、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬であり、当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬が任意選択で置換基ｚを含む）
当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基がペプチド結合を介してＢに連結している、化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＸ６ＴＳＤＹＳＸ１２Ｘ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７Ｘ２８ＧＸ３０Ｘ３１Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９（配列番号１）
（式中、Ｘ２がＡｉｂまたはＡであり、
Ｘ６がＦまたはＶであり、
Ｘ１２がＩまたはＹであり、
Ｘ１３がＹ、Ａ、Ｌ、Ｉ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＱ、Ｒ、Ｅ、Ｈ、またはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥ、Ｑ、またはＮであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ２８がＡまたはＲであり、
Ｘ３０がＧまたは不在であり、
Ｘ３１がＰまたは不在であり、
Ｘ３２がＥ、Ｓ、または不在であり、
Ｘ３３がＳ、Ｋ、または不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）である、実施形態１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＸ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７ＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号２）
（式中、Ｘ１３がＬまたはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＲまたはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥまたはＱであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、実施形態１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＸ１６ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号３）
（式中、Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、実施形態１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５．Ｘ１６がＥであり、Ｘ３３がＫである、実施形態２～４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６．Ｘ１６がＫであり、Ｘ３３がＳである、実施形態２～４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列がＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号４）である、実施形態１～６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
８．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号４）、Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＫＧＡＰＰＰＳ（配列番号５）、およびＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＫＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号６）から成る群から選択される、実施形態１～７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
９．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列がＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＫＧＡＰＰＰＳ（配列番号５）またはＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＫＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号６）である、実施形態１～８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１０．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬が置換基ｚを含み、当該置換基ｚがリジン（Ｋ）を介して当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、実施形態１～９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１１．Ｘ１６および／またはＸ２０および／またはＸ３３がリジンである、実施形態２～１０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１２．Ｘ１６がリジンである、実施形態２、３、１１、または６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１３．Ｘ２０がリジンである、実施形態２、１１、または７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１４．Ｘ３３がリジンである、実施形態２、３、１１、または５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１５．当該置換基ｚが１６位、２０位、または３３位のリジン（Ｋ）を介して当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１６．ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬がＣ末端にアミド修飾を有する、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１７．３３位の当該リジンが、Ｃｈｅｍ．８、Ｃｈｅｍ．７、またはＣｈｅｍ．１０でのリジン側鎖のイプシロン－アミノ基へのコンジュゲーションにより化学修飾されている、実施形態５、８、または９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１８．１６位の当該リジンが、Ｃｈｅｍ．７でのリジン側鎖のイプシロン－アミノ基へのコンジュゲーションにより化学修飾されている、実施形態６、８、または９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１９．２０位の当該リジンが、Ｃｈｅｍ．１１でのリジン側鎖のイプシロン－アミノ基へのコンジュゲーションにより化学修飾されている、実施形態７または８に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２０．当該ジペプチドＢが、式ＩＩ：
Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）
（式中、Ｘが、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸であり、
Ｙが、Ｙのアルファ－カルボン酸基と当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のＮ末端アミノ基との間に形成されたペプチド結合を介してＺに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である）である、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２１．当該ジペプチドＢが、式ＩＩ：
Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）
（式中、Ｘが、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸であり、
Ｙが、Ｙのアルファ－カルボン酸基とＺのＮ末端アミノ基との間に形成されたペプチド結合を介してＺに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である）である、実施形態１～１６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２２．Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－（２－アミノエチル）グリシン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、実施形態２０または２１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２３．Ｘが、リジン、４－アミノフェニルアラニン、Ｄ－リジン、アラニン、グリシン、プロリン、Ｄ－バリン、ホモプロリン、Ｄ－プロリン、Ｄ－ホモプロリン、Ｄ－アラニン、およびアゼチジン－２－カルボン酸から成る群から選択される、実施形態２０～２２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２４．Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、実施形態２０～２３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２５．Ｙが、サルコシンまたはＮ－（２－アミノエチル）グリシンである、実施形態２０～２４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２６．Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、アラニン、ロイシン、グリシン、プロリン、およびアスパラギン酸から成る群から選択される、実施形態２０～２５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２７．Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、およびグリシンから成る群から選択される、実施形態２０～２６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２８．ジペプチドが、分子内環化を経て２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）を形成することができ、これにより、ＡとＺとの間のアミド結合が切断されるようになる、実施形態１～２７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２９．ジペプチドが、分子内環化を経て２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）を形成することができ、これにより、ＡとＺとの間のペプチド結合が切断されるようになる、実施形態１～２７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３０．当該ジペプチドが置換基ｂを含む、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３１．当該ジペプチドが置換基ｂを担持する、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３２．当該ジペプチドが置換基ｂを有する、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３３．置換基ｂが任意選択でアミド結合を介してＸに共有結合している、実施形態２１～３０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３４．置換基ｂが任意選択でアミド結合を介してＹに共有結合している、実施形態２１～３０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３５．当該置換基ｂがアルブミン結合部分である、実施形態１～３４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３６．当該置換基ｂがプロトラクターおよび任意選択でリンカーを含むか、またはそれらから成る、実施形態１～３５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３７．当該プロトラクターがＣ１６－Ｃ２２カルボン酸などの脂肪酸である、実施形態３６に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３８．当該プロトラクターがＣｈｅｍ．１である、実施形態３６または３７に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３９．当該置換基がリンカーを含み、任意選択で、当該リンカーがリンカー要素を含むか、またはそれから成る、実施形態１～３８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４０．当該リンカーが、式ＩＶ：
Ａ１－Ａ２－Ａ３－Ａ４－Ａ５（式ＩＶ）
（式中、Ａ１がアミド結合を介して当該ジペプチドのアミノ酸に共有結合しており、任意選択でアミド結合を介して当該プロトラクターにも共有結合しており、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、およびＣｈｅｍ．５から成る群から選択され、Ａ５がＣｈｅｍ．１に共有結合しており、Ｃｈｅｍ．２であるか、または不在であり、Ａ２、Ａ３、およびＡ４が各々個別に、Ｃｈｅｍ．２、Ｃｈｅｍ．３、Ｃｈｅｍ．４、およびＣｈｅｍ．５から成る群から選択されるか、または不在である）のものである、実施形態３８または３９に記載の化合物。
４１．置換基ｂが、Ｃｈｅｍ．１６、Ｃｈｅｍ．１７、Ｃｈｅｍ．１８、Ｃｈｅｍ．１９、Ｃｈｅｍ．２０、Ｃｈｅｍ．２１、およびＣｈｅｍ．２２から成る群から選択される、実施形態１～４０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４２．当該化合物が以下から成る群から選択される、実施形態１～４１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
化合物番号１
【化5】
【化6】
【化7】
【化8】
【化9】
【化10】
【化11】
【化12】
【化13】
【化14】
【化15】
【化16】
【化17】
【化18】
【化19】
【化20】
【化21】
化合物番号１８
【化22】
４３．当該化合物が、化合物番号１、２、３、９、および１０から成る群から選択される、実施形態１～４２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４４．当該化合物が化合物番号１である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４５．当該化合物が化合物番号２である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４６．当該化合物が化合物番号３である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４７．当該化合物が化合物番号４である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４８．当該化合物が化合物番号５である、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４９．当該化合物がプロドラッグであり、インビトロでいかなる有意な効力も発揮しない、実施形態１～４８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５０．当該化合物がプロドラッグであり、変換半減期を有する、実施形態１～４９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５１．当該変換半減期がｐＨ７．４および３７℃でインビトロで測定される、実施形態５０に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５２．当該変換半減期が本明細書の変換半減期を測定するための一般的な方法に記載されるように測定される、実施形態５０または５１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５３．当該変換半減期が１日１回投与に好適である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５４．当該変換半減期が週１回投与に好適である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５５．インビトロで測定された当該変換半減期が９０～４３００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５６．インビトロで測定された当該変換半減期が９０～４３００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５７．インビトロで測定された当該変換半減期が３００～１１００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５８．インビトロで測定された当該変換半減期が４５０～６５０時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５９．インビトロで測定された当該変換半減期が少なくとも１００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６０．インビトロで測定された当該変換半減期が少なくとも２００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６１．インビトロで測定された当該変換半減期が少なくとも３００時間である、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６２．当該化合物が終末相半減期を有する、実施形態１～６１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６３．当該化合物が終末相半減期を有し、当該終末相半減期が１日１回投与に好適である、実施形態１～６１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６４．当該化合物が終末相半減期を有し、当該終末相半減期が週１回投与に好適である、実施形態１～６１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６５．当該終末相半減期がミニブタで決定され、本明細書のミニブタにおける終末相半減期を測定するための一般的な方法に記載されるように測定される、実施形態６２～６４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６６．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、９０時間超である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６７．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、１１０時間超である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６８．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、２５０時間超である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６９．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、１８０時間超である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７０．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、８０～２４０時間である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７１．当該終末相半減期が、ミニブタで決定された場合、１１０～１９１時間である、実施形態６２～６５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７２．実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤と、を含む、医薬組成物。
７３．当該医薬組成物が液体製剤である、実施形態７２に記載の医薬組成物。
７４．当該医薬組成物が固体製剤である、実施形態７２に記載の医薬組成物。
７５．当該医薬組成物が経口投与用である、実施形態７２に記載の医薬組成物。
７６．錠剤の形態の場合の当該組成物、実施形態７４～７６のいずれか１つに記載の医薬組成物。
７７．少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤がＮ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸塩であり、例えば、Ｎ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸がＮ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸ナトリウム（ＳＮＡＣ）である、実施形態７４～７７のいずれか１つに記載の医薬組成物。
７８．ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤をさらに含む、実施形態７４～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物。
７９．実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物と、Ｎ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸塩と、潤滑剤と、任意選択で１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤と、を含む、錠剤。
８０．当該Ｎ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸塩がＮ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸ナトリウム（ＳＮＡＣ）である、実施形態７９に記載の錠剤。
８１．当該潤滑剤がステアリン酸マグネシウムである、実施形態７９または８０に記載の錠剤。
８２．医薬として使用するための、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤。
８３．２型糖尿病の治療に使用するための、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤。
８４．肥満の治療に使用するための、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤。
８５．肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、および／または脂肪肝などの肝疾患の治療に使用するための、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤。
８６．以下のための医薬の製造における、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤の使用：
ａ．肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、および／または脂肪肝などの肝疾患の予防および／または治療、
ｂ．肥満の予防および／または治療、および／または
ｃ．２型糖尿病の予防および／または治療。
８７．２型糖尿病の治療のための医薬の製造における、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤の使用。
８８．肥満のための医薬の製造における、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤の使用。
８９．２型糖尿病を予防および／または治療するための方法であって、それを必要とする対象者に、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤を投与する、方法。
９０．肥満を予防および／または治療するための方法であって、それを必要とする対象者に、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤を投与する、方法。
９１．肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、および／または脂肪肝などの肝疾患を予防および／または治療するための方法であって、それを必要とする対象者に、実施形態１～７１のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態７２～７８のいずれか１つに記載の医薬組成物、または実施形態７９～８１のいずれか１つに記載の錠剤を投与する、方法。
【0103】
本発明は、以下のさらなる非限定的な実施形態によってさらに説明される。
１．式Ｉの化合物であって、
Ｂ－Ｚ（式Ｉ）
（式中、ＺがＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬またはその誘導体であり、
Ｂが式ＩＩのジペプチドである）
Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）
（式中、Ｘが、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸であり、
Ｙが、Ｙのアルファ－カルボン酸基とＺのアミンとの間に形成されたアミド結合を介してＺに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である）化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２．Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－（２－アミノエチル）グリシン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、実施形態１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３．Ｘが、リジン、４－アミノフェニルアラニン、Ｄ－リジン、アラニン、グリシン、プロリン、Ｄ－バリン、ホモプロリン、Ｄ－プロリン、Ｄ－ホモプロリン、Ｄ－アラニン、およびアゼチジン－２－カルボン酸から成る群から選択される、実施形態１または２に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４．Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５．Ｙが、サルコシンまたはＮ－（２－アミノエチル）グリシンである、実施形態１～４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６．Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、アラニン、ロイシン、グリシン、プロリン、およびアスパラギン酸から成る群から選択される、実施形態１～５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７．Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、およびグリシンから成る群から選択される、実施形態１～６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
８．ジペプチドが、分子内環化を経て２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）を形成することができ、これにより、ＢとＺとの間のアミド結合が切断されるようになる、実施形態１～７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
９．当該ジペプチドが置換基ｂを含む、実施形態１～８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１０．当該ジペプチドが置換基ｂを有する、実施形態１～９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１１．置換基ｂが任意選択でアミド結合を介してＸに共有結合している、実施形態１～１０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１２．当該置換基ｂがプロトラクターおよび任意選択でリンカーを含むか、またはそれらから成る、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１３．当該プロトラクターがＣｈｅｍ．１である、実施形態１～１２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１４．当該置換基ｂが、Ｃｈｅｍ．１６、Ｃｈｅｍ．１７、Ｃｈｅｍ．１８、Ｃｈｅｍ．１９、Ｃｈｅｍ．２０、Ｃｈｅｍ．２１、およびＣｈｅｍ．２２から成る群から選択される、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１５．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＸ６ＴＳＤＹＳＸ１２Ｘ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７Ｘ２８ＧＸ３０Ｘ３１Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９（配列番号１）
（式中、Ｘ２がＡｉｂまたはＡであり、
Ｘ６がＦまたはＶであり、
Ｘ１２がＩまたはＹであり、
Ｘ１３がＹ、Ａ、Ｌ、Ｉ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＱ、Ｒ、Ｅ、Ｈ、またはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥ、Ｑ、またはＮであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ２８がＡまたはＲであり、
Ｘ３０がＧまたは不在であり、
Ｘ３１がＰまたは不在であり、
Ｘ３２がＥ、Ｓ、または不在であり、
Ｘ３３がＳ、Ｋ、または不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）である、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１６．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＸ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７ＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号２）
（式中、Ｘ１３がＬまたはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＲまたはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥまたはＱであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１７．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＸ１６ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号３）
（式中、Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、実施形態１～１６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１８．Ｘ１６がＥであり、Ｘ３３がＫである、実施形態１～１７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１９．Ｘ１６がＫであり、Ｘ３３がＳである、実施形態１～１８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２０．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号４）、Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＫＧＡＰＰＰＳ（配列番号５）、およびＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＫＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号６）から成る群から選択される、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２１．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬が置換基ｚを含み、当該置換基ｚがリジン（Ｋ）を介して当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、実施形態１～２０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２２．当該置換基ｚが１６位、２０位、または３３位のリジン（Ｋ）を介して当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２３．当該化合物が、化合物番号１、化合物番号２、化合物番号３、化合物番号４、化合物番号５、化合物番号６、化合物番号７、化合物番号８、化合物番号９、化合物番号１０、化合物番号１１、化合物番号１２、化合物番号１３、化合物番号１４、化合物番号１５、化合物番号１６、化合物番号１７、および化合物番号１８から成る群から選択される、実施形態１～２２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２４．当該化合物が、化合物番号１、２、３、９、および１０から成る群から選択される、実施形態１～２３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２５．実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤と、を含む、医薬組成物。
２６．当該医薬組成物が液体製剤である、実施形態２５に記載の医薬組成物。
２７．当該医薬組成物が固体製剤である、実施形態２５または２６に記載の医薬組成物。
２８．当該医薬組成物が経口投与用である、実施形態２５～２７のいずれか１つに記載の医薬組成物。
２９．当該医薬組成物が非経口投与用である、実施形態２５～２８のいずれか１つに記載の医薬組成物。
３０．当該医薬組成物が錠剤の形態である、実施形態２５～２９に記載の医薬組成物。
３１．医薬として使用するための、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物。
３２．２型糖尿病の予防および／または治療に使用するための、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物。
３３．肥満の予防および／または治療に使用するための、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物。
３４．肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、および／または脂肪肝などの肝疾患の予防および／または治療に使用するための、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物。
１．式Ｉの化合物であって、
Ｂ－Ｚ（式Ｉ）
（式中、ＺがＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬またはその誘導体であり、
Ｂが式ＩＩのジペプチドである）
Ｘ－Ｙ（式ＩＩ）
（式中、Ｘが、Ｘのアルファ－カルボン酸基とＹのアルファ－アミノ基との間に形成されたアミド結合を介してＹに連結した任意のアルファ－アミノ酸であり、
Ｙが、Ｙのアルファ－カルボン酸基とＺのアミンとの間に形成されたアミド結合を介してＺに連結したＮ－アルキル化アルファ－アミノ酸である）化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２．Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－（２－アミノエチル）グリシン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、実施形態１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
３．Ｘが、リジン、４－アミノフェニルアラニン、Ｄ－リジン、アラニン、グリシン、プロリン、Ｄ－バリン、ホモプロリン、Ｄ－プロリン、Ｄ－ホモプロリン、Ｄ－アラニン、およびアゼチジン－２－カルボン酸から成る群から選択される、実施形態１または２に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
４．Ｙが、サルコシン、Ｎ－ｓｅｃ－ブチルグリシン、プロリン、トランス－４－ヒドロキシプロリン、Ｎ－メチルグルタメート、Ｎ－メチルノルロイシン、Ｎ－メチルホモアラニン、Ｎ－メチルアラニン、Ｎ－メチルリジン、Ｎ－ヘキシルホモアラニン、Ｎ－プロピルアラニン、ホモプロリン、Ｎ－プロピルグリシン、Ｎ－エチルグリシン、およびＮ－メチルフェニルアラニンから成る群から選択される、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
５．Ｙが、サルコシンまたはＮ－（２－アミノエチル）グリシンである、実施形態１～４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
６．Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、アラニン、ロイシン、グリシン、プロリン、およびアスパラギン酸から成る群から選択される、実施形態１～５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
７．Ｘが、リジン、Ｄ－リジン、およびグリシンから成る群から選択される、実施形態１～６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
８．ジペプチドが、分子内環化を経て２，５－ジケトピペラジン（ＤＫＰ）を形成することができ、これにより、ＢとＺとの間のアミド結合が切断されるようになる、実施形態１～７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
９．当該ジペプチドが置換基ｂを含む、実施形態１～８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１０．当該ジペプチドが置換基ｂを有する、実施形態１～９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１１．置換基ｂが任意選択でアミド結合を介してＸに共有結合している、実施形態１～１０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１２．当該置換基ｂがプロトラクターおよび任意選択でリンカーを含むか、またはそれらから成る、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１３．当該プロトラクターがＣｈｅｍ．１である、実施形態１～１２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１４．当該置換基ｂが、Ｃｈｅｍ．１６、Ｃｈｅｍ．１７、Ｃｈｅｍ．１８、Ｃｈｅｍ．１９、Ｃｈｅｍ．２０、Ｃｈｅｍ．２１、およびＣｈｅｍ．２２から成る群から選択される、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１５．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＸ６ＴＳＤＹＳＸ１２Ｘ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７Ｘ２８ＧＸ３０Ｘ３１Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９（配列番号１）
（式中、Ｘ２がＡｉｂまたはＡであり、
Ｘ６がＦまたはＶであり、
Ｘ１２がＩまたはＹであり、
Ｘ１３がＹ、Ａ、Ｌ、Ｉ、またはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＱ、Ｒ、Ｅ、Ｈ、またはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥ、Ｑ、またはＮであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ２８がＡまたはＲであり、
Ｘ３０がＧまたは不在であり、
Ｘ３１がＰまたは不在であり、
Ｘ３２がＥ、Ｓ、または不在であり、
Ｘ３３がＳ、Ｋ、または不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）である、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１６．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＸ１３ＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＸ１９Ｘ２０Ｘ２１ＦＸ２３Ｘ２４ＷＬＸ２７ＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号２）
（式中、Ｘ１３がＬまたはＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ１７がＱまたはＩであり、
Ｘ１９がＡまたはＱであり、
Ｘ２０がＲまたはＫであり、
Ｘ２１がＡまたはＥであり、
Ｘ２３がＩまたはＶであり、
Ｘ２４がＥまたはＱであり、
Ｘ２７がＬまたはＩであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１７．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＸ１６ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＸ３３ＧＡＰＰＰＳ（配列番号３）
（式中、Ｘ１６がＫまたはＥであり、
Ｘ３３がＳまたはＫである）である、実施形態１～１６のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１８．Ｘ１６がＥであり、Ｘ３３がＫである、実施形態１～１７のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
１９．Ｘ１６がＫであり、Ｘ３３がＳである、実施形態１～１８のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２０．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のアミノ酸配列が、Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号４）、Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＫＧＡＰＰＰＳ（配列番号５）、およびＹ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＫＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号６）から成る群から選択される、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２１．当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬が置換基ｚを含み、当該置換基ｚがリジン（Ｋ）を介して当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、実施形態１～２０のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２２．当該置換基ｚが１６位、２０位、または３３位のリジン（Ｋ）を介して当該ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬に結合している、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２３．当該化合物が、化合物番号１、化合物番号２、化合物番号３、化合物番号４、化合物番号５、化合物番号６、化合物番号７、化合物番号８、化合物番号９、化合物番号１０、化合物番号１１、化合物番号１２、化合物番号１３、化合物番号１４、化合物番号１５、化合物番号１６、化合物番号１７、および化合物番号１８から成る群から選択される、実施形態１～２２のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２４．当該化合物が、化合物番号１、２、３、９、および１０から成る群から選択される、実施形態１～２３のいずれか１つに記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはアミド。
２５．実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤と、を含む、医薬組成物。
２６．当該医薬組成物が液体製剤である、実施形態２５に記載の医薬組成物。
２７．当該医薬組成物が固体製剤である、実施形態２５または２６に記載の医薬組成物。
２８．当該医薬組成物が経口投与用である、実施形態２５～２７のいずれか１つに記載の医薬組成物。
２９．当該医薬組成物が非経口投与用である、実施形態２５～２８のいずれか１つに記載の医薬組成物。
３０．当該医薬組成物が錠剤の形態である、実施形態２５～２９に記載の医薬組成物。
３１．医薬として使用するための、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物。
３２．２型糖尿病の予防および／または治療に使用するための、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物。
３３．肥満の予防および／または治療に使用するための、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物。
３４．肝脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝炎症、および／または脂肪肝などの肝疾患の予防および／または治療に使用するための、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の化合物。
【実施例0104】
この実験パートは、略語のリストから始まり、化合物を調製するための一般的な方法の節および曝露プロファイルに関連する特性を測定するための方法の節が続く。本発明を例証するために、いくつかの具体的な実施例を各節に組み込んでいる。全ての実施例化合物を本明細書に記載の一般的な方法に従って調製した。必要に応じて、置換基の化学名を、Ａｃｃｅｌｒｙｓ Ｄｒａｗバージョン４．１ ＳＰ１ソフトウェアおよびＩＵＰＡＣ命名法を使用して作成した。
【0105】
略語
以下の略語は、アルファベット順に、以下で使用される。
Ａｄｏ：８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸
Ａｅｇ：Ｎ－（２－アミノエチル）グリシン
Ａｉｂ：α－アミノイソ酪酸
Ａｌｌｏｃ：アリルオキシカルボンキシル
ＡＰＩ：大気圧イオン化
ＡＵＣ：曲線下面積
ＢＨＫ：ベビーハムスター腎臓
Ｂｏｃ：ｔ－ブチルオキシカルボニル
Ｃｌ－ＨＯＢｔ：６－クロロ－１－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＫＰ：２，５－ジケトピペラジン
ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地
ＤＰＢＳ：ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸
ＥＬＩＳＡ：酵素結合免疫吸着アッセイ
ｅｑｕｉｖ：モル当量
ＦＢＳ：ウシ胎児血清
Ｆｍｏｃ：９－フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＧＩＰ：グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド
ＧＩＰＲ：グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド受容体
ＧＬＰ－１：グルカゴン様ペプチド１
ＧＬＰ－１Ｒ：グルカゴン様ペプチド１受容体
ｈ：時間
ＨＥＰＥＳ：４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＦＩＰ：１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロパノールまたはヘキサフルオロイソプロパノール
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＨＳＡ：ヒト血清アルブミン
ｉ．ｖ．：静脈内
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍＭ：ミリモル
ｍｍｏｌ：ミリモル
ｍｉｎ：分
Ｍｔｔ：４－メチルトリチル
ＮＭＰ：１－メチル－ピロリジン－２－オン
ＯｔＢｕ：ｔｅｒｔ－ブチルエステル
Ｏｘｙｍａ Ｐｕｒｅ（登録商標）：シアノ－ヒドロキシイミノ－酢酸エチルエステル
Ｐｂｆ：２，２，４，６，７－ペンタメチルジヒドロベンゾフラン－５－スルホニル
ＰＢＳ：リン酸緩衝生理食塩水
ＰＫ：薬物動態
ｐＭ：ピコモル
ｐ．ｏ．：経口
ｒｐｍ：１分当たりのラウンド数
Ｒｔ：保持時間
Ｓａｒ：サルコシン
ｓ．ｃ．：皮下
ＳＮＡＣ：Ｎ－［８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ］カプリル酸ナトリウム
ＳＰＰＳ：固相ペプチド合成
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ－ブチル
Ｔ２Ｄ：２型糖尿病
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
Ｔｒｔ：トリフェニルメチルまたはトリチル
ＵＰＬＣ：超高速液体クロマトグラフィー
以下の略語は、アルファベット順に、以下で使用される。
Ａｄｏ：８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸
Ａｅｇ：Ｎ－（２－アミノエチル）グリシン
Ａｉｂ：α－アミノイソ酪酸
Ａｌｌｏｃ：アリルオキシカルボンキシル
ＡＰＩ：大気圧イオン化
ＡＵＣ：曲線下面積
ＢＨＫ：ベビーハムスター腎臓
Ｂｏｃ：ｔ－ブチルオキシカルボニル
Ｃｌ－ＨＯＢｔ：６－クロロ－１－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＫＰ：２，５－ジケトピペラジン
ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地
ＤＰＢＳ：ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸
ＥＬＩＳＡ：酵素結合免疫吸着アッセイ
ｅｑｕｉｖ：モル当量
ＦＢＳ：ウシ胎児血清
Ｆｍｏｃ：９－フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＧＩＰ：グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド
ＧＩＰＲ：グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド受容体
ＧＬＰ－１：グルカゴン様ペプチド１
ＧＬＰ－１Ｒ：グルカゴン様ペプチド１受容体
ｈ：時間
ＨＥＰＥＳ：４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＦＩＰ：１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロパノールまたはヘキサフルオロイソプロパノール
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＨＳＡ：ヒト血清アルブミン
ｉ．ｖ．：静脈内
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍＭ：ミリモル
ｍｍｏｌ：ミリモル
ｍｉｎ：分
Ｍｔｔ：４－メチルトリチル
ＮＭＰ：１－メチル－ピロリジン－２－オン
ＯｔＢｕ：ｔｅｒｔ－ブチルエステル
Ｏｘｙｍａ Ｐｕｒｅ（登録商標）：シアノ－ヒドロキシイミノ－酢酸エチルエステル
Ｐｂｆ：２，２，４，６，７－ペンタメチルジヒドロベンゾフラン－５－スルホニル
ＰＢＳ：リン酸緩衝生理食塩水
ＰＫ：薬物動態
ｐＭ：ピコモル
ｐ．ｏ．：経口
ｒｐｍ：１分当たりのラウンド数
Ｒｔ：保持時間
Ｓａｒ：サルコシン
ｓ．ｃ．：皮下
ＳＮＡＣ：Ｎ－［８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ］カプリル酸ナトリウム
ＳＰＰＳ：固相ペプチド合成
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ－ブチル
Ｔ２Ｄ：２型糖尿病
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
Ｔｒｔ：トリフェニルメチルまたはトリチル
ＵＰＬＣ：超高速液体クロマトグラフィー
【0106】
本発明の化合物を調製するための一般的な方法
固相ペプチド合成法（ＳＰＰＳ法、アミノ酸の脱保護法、樹脂からのペプチドの切断法、およびその精製法を含む）、ならびに結果として得られたペプチドの検出法および特徴付け法（ＬＣＭＳ方法）を以下に記載する。
固相ペプチド合成法（ＳＰＰＳ法、アミノ酸の脱保護法、樹脂からのペプチドの切断法、およびその精製法を含む）、ならびに結果として得られたペプチドの検出法および特徴付け法（ＬＣＭＳ方法）を以下に記載する。
【0107】
Ｃ末端ペプチドアミドの調製に用いた樹脂は、Ｈ－Ｒｉｎｋ Ａｍｉｄｅ－ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ樹脂（例えば、０．５ｍｍｏｌ／ｇの負荷量）であった。Ｃ末端ペプチド酸の調製に用いた樹脂は、好適に保護されたＣ末端アミノ酸誘導体（例えば、ロード量０．５ｍｍｏｌ／ｇ）をプレロードしたＷａｎｇ－ポリスチレン樹脂であった。以下に記載の全ての操作を０．１～１．０ｍｍｏｌの合成スケール範囲内で行った。別段の指定がない限り、使用したＦｍｏｃ保護アミノ酸誘導体は、例えば、ＡＡＰＰＴＥＣ、Ａｎａｓｐｅｃ、Ｂａｃｈｅｍ、ＣｈｅｍＩｍｐｅｘ、Ｉｒｉｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｍｉｄｗｅｓｔ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｇｙｒｏｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、またはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍから供給される、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｍｅｔ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｍｔｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｉｂ－ＯＨなどの推奨標準品であった。他に何も指定がない場合、アミノ酸のタンパク質原性Ｌ型を使用する。各化合物のＮ末端アミノ酸のカップリングのために、アルファ－アミノ基をＢｏｃ保護した試薬を使用した。
【0108】
ＳＰＰＳを使用したジペプチドの結合の場合、Ａｌｌｏｃ－Ａｅｇ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ｄ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｂｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｅｇ（Ｎ３）－ＯＨ、およびＦｍｏｃ－Ｓａｒ－ＯＨなどであるが、これらに限定されない、好適に保護された構成ブロックを使用した。ＳＰＰＳを使用した置換基の結合の場合、Ｆｍｏｃ－８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（Ｆｍｏｃ－Ａｄｏ－ＯＨ）、Ｂｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ－ＯｔＢｕ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ、ヘキサデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、オクタデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、またはエイコサン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルなどであるが、これらに限定されない、好適に保護された構成ブロックを使用した。
【0109】
１．樹脂に結合した保護ペプチド骨格の合成：
方法：ＳＰＰＳ＿Ａ
ＳＰＰＳを、製造業者から支給されたプロトコルに若干の変更を加えて、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置でＦｍｏｃに基づく化学反応を使用して行った。混合を、時折の窒素バブリングによって達成した。段階的構築を、以下：１）ＤＭＦ中で樹脂を事前膨張させる工程、２）１％（ｖ／ｖ）ＴＦＡを含むまたは含まない２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＤＭＦ溶液を使用して２回の処理（各々１０分）でＦｍｏｃを脱保護する工程、３）ＤＭＦで洗浄してピペリジンを除去する工程、４）２，４，６－コリジンを含むまたは含まないＤＭＦ溶液として各々３～１２当量のＦｍｏｃ－アミノ酸、Ｏｘｙｍａ Ｐｕｒｅ（登録商標）、およびＤＩＣを添加し、その後、少なくとも３０分間混合することによってＦｍｏｃ－アミノ酸をカップリングする工程、４）ＤＭＦで洗浄して過剰試薬を除去する工程、５）構築完了時にＤＣＭで最終洗浄する工程を使用して行った。立体障害アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されないいくつかのアミノ酸を長時間の反応時間（例えば、４時間または一晩）でカップリングして、反応完了を確実にした。
方法：ＳＰＰＳ＿Ａ
ＳＰＰＳを、製造業者から支給されたプロトコルに若干の変更を加えて、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置でＦｍｏｃに基づく化学反応を使用して行った。混合を、時折の窒素バブリングによって達成した。段階的構築を、以下：１）ＤＭＦ中で樹脂を事前膨張させる工程、２）１％（ｖ／ｖ）ＴＦＡを含むまたは含まない２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＤＭＦ溶液を使用して２回の処理（各々１０分）でＦｍｏｃを脱保護する工程、３）ＤＭＦで洗浄してピペリジンを除去する工程、４）２，４，６－コリジンを含むまたは含まないＤＭＦ溶液として各々３～１２当量のＦｍｏｃ－アミノ酸、Ｏｘｙｍａ Ｐｕｒｅ（登録商標）、およびＤＩＣを添加し、その後、少なくとも３０分間混合することによってＦｍｏｃ－アミノ酸をカップリングする工程、４）ＤＭＦで洗浄して過剰試薬を除去する工程、５）構築完了時にＤＣＭで最終洗浄する工程を使用して行った。立体障害アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されないいくつかのアミノ酸を長時間の反応時間（例えば、４時間または一晩）でカップリングして、反応完了を確実にした。
【0110】
方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ
ＳＰＰＳを、製造業者から支給された一般的なＦｍｏｃプロトコルを使用して、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ４３１Ａ固相ペプチド合成装置でＦｍｏｃに基づく化学を使用して行った。混合を、ボルテックスおよび時折の窒素バブリングによって達成した。段階的構築を、以下の工程：１）１Ｍ ＮＭＰ溶液としてＣｌ－ＨＯＢｔ（１０当量）中に固体Ｆｍｏｃ－アミノ酸を溶解させ、その後、１Ｍ ＮＭＰ溶液としてＤＩＣ（１０当量）を添加し、その後、工程２～３と同時に混合することによってＦｍｏｃ－アミノ酸を活性化する工程、２）２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＮＭＰ溶液を使用して１回目の処理（３分）、その後、２回目の処理（１５分）でＦｍｏｃを脱保護する工程、３）ＮＭＰで洗浄してピペリジンを除去する工程、４）活性化Ｆｍｏｃ－アミノ酸溶液を樹脂に添加し、その後、少なくとも４５分間混合する工程、４）ＮＭＰで洗浄して過剰試薬を除去する工程、５）構築完了時にＤＣＭで最終洗浄する工程を使用して行った。立体障害アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されないいくつかのアミノ酸を長時間の反応時間（例えば、４時間）でカップリングし、および／または新鮮なカップリング試薬で繰り返し処理して、反応完了を確実にした。
ＳＰＰＳを、製造業者から支給された一般的なＦｍｏｃプロトコルを使用して、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ４３１Ａ固相ペプチド合成装置でＦｍｏｃに基づく化学を使用して行った。混合を、ボルテックスおよび時折の窒素バブリングによって達成した。段階的構築を、以下の工程：１）１Ｍ ＮＭＰ溶液としてＣｌ－ＨＯＢｔ（１０当量）中に固体Ｆｍｏｃ－アミノ酸を溶解させ、その後、１Ｍ ＮＭＰ溶液としてＤＩＣ（１０当量）を添加し、その後、工程２～３と同時に混合することによってＦｍｏｃ－アミノ酸を活性化する工程、２）２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＮＭＰ溶液を使用して１回目の処理（３分）、その後、２回目の処理（１５分）でＦｍｏｃを脱保護する工程、３）ＮＭＰで洗浄してピペリジンを除去する工程、４）活性化Ｆｍｏｃ－アミノ酸溶液を樹脂に添加し、その後、少なくとも４５分間混合する工程、４）ＮＭＰで洗浄して過剰試薬を除去する工程、５）構築完了時にＤＣＭで最終洗浄する工程を使用して行った。立体障害アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されないいくつかのアミノ酸を長時間の反応時間（例えば、４時間）でカップリングし、および／または新鮮なカップリング試薬で繰り返し処理して、反応完了を確実にした。
【0111】
２．樹脂結合保護ペプチド骨格へのジペプチドおよび置換基の結合
方法：ＤＳ＿Ａ
置換基を担持するＮ末端ＬｙｓまたはＤ－Ｌｙｓを含む化合物の場合、ＳＰＰＳを、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して継続して、ジペプチドＢのアミノ酸および置換基ｂの要素を結合させた。
方法：ＤＳ＿Ａ
置換基を担持するＮ末端ＬｙｓまたはＤ－Ｌｙｓを含む化合物の場合、ＳＰＰＳを、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して継続して、ジペプチドＢのアミノ酸および置換基ｂの要素を結合させた。
【0112】
方法：ＤＳ＿Ｂ
ジペプチドＢ内に置換基を担持するＡｅｇを含む化合物の場合、ＳＰＰＳを、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して継続して、Ｆｍｏｃ－Ａｅｇ（Ｎ３）－ＯＨおよびＮα－Ｂｏｃ－保護Ｎ末端アミノ酸を結合させた。樹脂結合ペプチドを、９：１ ＤＭＦ／水溶液として５～１０当量のトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィンで２～３時間処理することによって、アジド保護基をアミンに還元した。樹脂を排出し、９：１ ＤＭＦ／水およびＤＭＦで洗浄し、その後、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して置換基ｂの要素を結合させた。
ジペプチドＢ内に置換基を担持するＡｅｇを含む化合物の場合、ＳＰＰＳを、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して継続して、Ｆｍｏｃ－Ａｅｇ（Ｎ３）－ＯＨおよびＮα－Ｂｏｃ－保護Ｎ末端アミノ酸を結合させた。樹脂結合ペプチドを、９：１ ＤＭＦ／水溶液として５～１０当量のトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィンで２～３時間処理することによって、アジド保護基をアミンに還元した。樹脂を排出し、９：１ ＤＭＦ／水およびＤＭＦで洗浄し、その後、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して置換基ｂの要素を結合させた。
【0113】
方法：ＤＳ＿Ｃ
ジペプチドＢ内に置換基を担持するＡｅｇを含む化合物のＤＳ＿Ｂの代案として、ＳＰＰＳを、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して継続して、Ａｌｌｏｃ－Ａｅｇ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨおよび置換基ｂの要素を結合させた。ＤＭＦ溶液として１０当量のボランジメチルアミン複合体および２０当量のモルホリンを、アルゴン雰囲気下で５分間処理し、その後、ＤＭＦ溶液として０．１当量のパラジウム－テトラキス（トリフェニルホスフィン）を添加し、さらに３０分間処理することによって、Ａｌｌｏｃ保護基を除去した。樹脂を排出し、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ＭｅＯＨ、水、およびＤＭＦで洗浄した。その後、Ｎα－Ｂｏｃ－保護Ｎ末端アミノ酸を、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して結合させた。
ジペプチドＢ内に置換基を担持するＡｅｇを含む化合物のＤＳ＿Ｂの代案として、ＳＰＰＳを、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して継続して、Ａｌｌｏｃ－Ａｅｇ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨおよび置換基ｂの要素を結合させた。ＤＭＦ溶液として１０当量のボランジメチルアミン複合体および２０当量のモルホリンを、アルゴン雰囲気下で５分間処理し、その後、ＤＭＦ溶液として０．１当量のパラジウム－テトラキス（トリフェニルホスフィン）を添加し、さらに３０分間処理することによって、Ａｌｌｏｃ保護基を除去した。樹脂を排出し、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ＭｅＯＨ、水、およびＤＭＦで洗浄した。その後、Ｎα－Ｂｏｃ－保護Ｎ末端アミノ酸を、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して結合させた。
【0114】
方法：ＤＳ＿Ｄ
置換基ｚを結合させるために、樹脂を、各々４５分間の２回の処理の場合、３０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で洗浄するか、または５分間、５分間、１０分間、１０分間、１５分間、２０分間、および３０分間の処理の場合、８０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で洗浄することによって、置換基を担持するＬｙｓのＮε－Ｍｔｔ保護を除去した。樹脂を排出し、ＤＣＭ、ＤＭＦ、１０％ ＤＩＰＥＡ／ＤＣＭ、ＤＣＭ、およびＤＭＦで洗浄した。ＳＰＰＳを、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して継続して、置換基ｚの要素を結合させた。
置換基ｚを結合させるために、樹脂を、各々４５分間の２回の処理の場合、３０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で洗浄するか、または５分間、５分間、１０分間、１０分間、１５分間、２０分間、および３０分間の処理の場合、８０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で洗浄することによって、置換基を担持するＬｙｓのＮε－Ｍｔｔ保護を除去した。樹脂を排出し、ＤＣＭ、ＤＭＦ、１０％ ＤＩＰＥＡ／ＤＣＭ、ＤＣＭ、およびＤＭＦで洗浄した。ＳＰＰＳを、ＳＰＰＳ＿Ａと同じプロトコルを使用して継続して、置換基ｚの要素を結合させた。
【0115】
３．樹脂結合ペプチドの切断および精製：
方法：ＣＰ＿Ａ
側鎖合成完了後、ペプチジル樹脂をＤＣＭで洗浄し、乾燥させ、その後、９５：２．５：２．５（ｖ／ｖ／ｖ）ＴＦＡ／水／ＴＩＳまたは９２．５：５：２．５（ｖ／ｖ／ｖ）ＴＦＡ／水／ＴＩＳで２～３時間処理し、その後、ジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物を単離し（例えば、濾過または遠心分離によって）、ジエチルエーテルで洗浄し、好適な溶媒（例えば、２：１の水／ＭｅＣＮ）中に溶解させ、全ての不安定付加物が分解するまで放置した。精製を、Ｌｕｎａ Ｃ８（２）カラム（粒径１０μｍ、孔径１００Å、寸法２５０×２１．２ｍｍ）またはＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８カラム（粒径５μｍ、孔径１１０Å、寸法２５０×５０ｍｍ）を用いて逆相分取ＨＰＬＣによって行った。不純物の分離および生成物の溶出を、０．１％ＴＦＡ含有水溶液中のＭｅＣＮのグラジエントを増加させることによって達成した。関連する分画を分析ＬＣＭＳによって同一性および純度について調べた。純粋な所望のペプチドを含む分画をプールし、凍結乾燥させて、白色の固体としてペプチドＴＦＡ塩を得た。
方法：ＣＰ＿Ａ
側鎖合成完了後、ペプチジル樹脂をＤＣＭで洗浄し、乾燥させ、その後、９５：２．５：２．５（ｖ／ｖ／ｖ）ＴＦＡ／水／ＴＩＳまたは９２．５：５：２．５（ｖ／ｖ／ｖ）ＴＦＡ／水／ＴＩＳで２～３時間処理し、その後、ジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物を単離し（例えば、濾過または遠心分離によって）、ジエチルエーテルで洗浄し、好適な溶媒（例えば、２：１の水／ＭｅＣＮ）中に溶解させ、全ての不安定付加物が分解するまで放置した。精製を、Ｌｕｎａ Ｃ８（２）カラム（粒径１０μｍ、孔径１００Å、寸法２５０×２１．２ｍｍ）またはＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８カラム（粒径５μｍ、孔径１１０Å、寸法２５０×５０ｍｍ）を用いて逆相分取ＨＰＬＣによって行った。不純物の分離および生成物の溶出を、０．１％ＴＦＡ含有水溶液中のＭｅＣＮのグラジエントを増加させることによって達成した。関連する分画を分析ＬＣＭＳによって同一性および純度について調べた。純粋な所望のペプチドを含む分画をプールし、凍結乾燥させて、白色の固体としてペプチドＴＦＡ塩を得た。
【0116】
４．ＴＦＡからナトリウム塩への塩交換：
方法：ＳＸ＿Ａ
方法ＣＰ＿Ａから単離した凍結乾燥ペプチドを、適切な水性緩衝液（例えば、４：１の水／ＭｅＣＮ、０．２Ｍ酢酸ナトリウム）中に溶解させて５～２０ｍｇ／ｍＬにし、必要に応じて１Ｍ ＮａＯＨでｐＨ７～８に調整して、完全に溶解させた。ペプチドを含む緩衝液を、Ｓｅｐ－Ｐａｋ Ｃ１８カートリッジ（０．５～２ｇ）を使用して塩交換した。カートリッジを最初に４カラム体積のイソプロパノール、その後、４カラム体積のＭｅＣＮ、その後、８カラム体積の水で平衡化した。ペプチド溶液をカートリッジに適用し、通過画分を再適用して、ペプチドの完全保持を確実にした。カートリッジを４カラム体積の水、その後、ＮａＨＣＯ３、ＮａＯＡｃ、またはＮａ２ＨＰＯ４などを含むが、これらに限定されない１０カラム体積の緩衝液（例えば、ｐＨ７．５）で洗浄した。カラムを４カラム体積の水で洗浄し、ペプチドを５～１０カラム体積の５０～８０％ＭｅＣＮ水溶液で溶出した。ペプチドを含む溶離液を凍結乾燥させて、白色の固体としてペプチドナトリウム塩を得て、これをそのまま使用した。
方法：ＳＸ＿Ａ
方法ＣＰ＿Ａから単離した凍結乾燥ペプチドを、適切な水性緩衝液（例えば、４：１の水／ＭｅＣＮ、０．２Ｍ酢酸ナトリウム）中に溶解させて５～２０ｍｇ／ｍＬにし、必要に応じて１Ｍ ＮａＯＨでｐＨ７～８に調整して、完全に溶解させた。ペプチドを含む緩衝液を、Ｓｅｐ－Ｐａｋ Ｃ１８カートリッジ（０．５～２ｇ）を使用して塩交換した。カートリッジを最初に４カラム体積のイソプロパノール、その後、４カラム体積のＭｅＣＮ、その後、８カラム体積の水で平衡化した。ペプチド溶液をカートリッジに適用し、通過画分を再適用して、ペプチドの完全保持を確実にした。カートリッジを４カラム体積の水、その後、ＮａＨＣＯ３、ＮａＯＡｃ、またはＮａ２ＨＰＯ４などを含むが、これらに限定されない１０カラム体積の緩衝液（例えば、ｐＨ７．５）で洗浄した。カラムを４カラム体積の水で洗浄し、ペプチドを５～１０カラム体積の５０～８０％ＭｅＣＮ水溶液で溶出した。ペプチドを含む溶離液を凍結乾燥させて、白色の固体としてペプチドナトリウム塩を得て、これをそのまま使用した。
【0117】
一般的な検出法および特徴付け法
ＬＣＭＳ法：
方法：ＬＣＭＳ＿Ａ
分析を、適切な体積の試料を、３７Ｃで平衡化したＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ８カラム（粒径２．６μｍ、孔径１００Å、寸法４．６×７５ｍｍ）に注入することによって、Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ｓｅｒｉｅｓ ＨＰＬＣ／ＭＳ ｓｙｓｔｅｍを用いて行った。溶離液Ａは０．０５％ＴＦＡの水溶液であり、溶離液Ｂは０．０５％ＴＦＡの９：１ ＭｅＣＮ／水溶液であった。溶出を、１．０ｍＬ／分の流量で１０分にわたる２０－１００％溶離液Ｂの線形勾配で達成した。ＵＶ検出を２１４ｎｍに設定した。ＭＳイオン化を、５００～２０００ａｍｕの走査質量範囲を用いて、ＡＰＩ－ＥＳモードおよび正極性で実行した。各々のｍ／ｚの最も豊富な同位体が報告される。
ＬＣＭＳ法：
方法：ＬＣＭＳ＿Ａ
分析を、適切な体積の試料を、３７Ｃで平衡化したＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ８カラム（粒径２．６μｍ、孔径１００Å、寸法４．６×７５ｍｍ）に注入することによって、Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ｓｅｒｉｅｓ ＨＰＬＣ／ＭＳ ｓｙｓｔｅｍを用いて行った。溶離液Ａは０．０５％ＴＦＡの水溶液であり、溶離液Ｂは０．０５％ＴＦＡの９：１ ＭｅＣＮ／水溶液であった。溶出を、１．０ｍＬ／分の流量で１０分にわたる２０－１００％溶離液Ｂの線形勾配で達成した。ＵＶ検出を２１４ｎｍに設定した。ＭＳイオン化を、５００～２０００ａｍｕの走査質量範囲を用いて、ＡＰＩ－ＥＳモードおよび正極性で実行した。各々のｍ／ｚの最も豊富な同位体が報告される。
【0118】
方法：ＬＣＭＳ＿Ｂ
分析を、適切な体積の試料を、４０Ｃで平衡化したＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ１３０カラム（粒径１．７μｍ、孔径１３０Å、寸法２．１×１５０ｍｍ）に注入することによって、Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ／ＭＳ ｓｙｓｔｅｍを用いて行った。溶離液Ａは０．０５％ＴＦＡの水溶液であり、溶離液Ｂは０．０５％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液であった。溶出を、ＵＶ検出の場合、０．４ｍＬ／分の流量で１６分にわたる５－９５％溶離液Ｂの線形勾配で達成し、ＭＳ検出の場合、０．４５ｍＬ／分の流量で４分にわたる５－６０％溶離液Ｂの線形勾配で達成した。ＵＶ検出を２１４ｎｍに設定した。ＭＳイオン化を、１００～２０００ａｍｕの走査質量範囲を用いて、ＡＰＩ－ＥＳモードおよび正極性で実行した。各々のｍ／ｚの最も豊富な同位体が報告される。
分析を、適切な体積の試料を、４０Ｃで平衡化したＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ１３０カラム（粒径１．７μｍ、孔径１３０Å、寸法２．１×１５０ｍｍ）に注入することによって、Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ／ＭＳ ｓｙｓｔｅｍを用いて行った。溶離液Ａは０．０５％ＴＦＡの水溶液であり、溶離液Ｂは０．０５％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液であった。溶出を、ＵＶ検出の場合、０．４ｍＬ／分の流量で１６分にわたる５－９５％溶離液Ｂの線形勾配で達成し、ＭＳ検出の場合、０．４５ｍＬ／分の流量で４分にわたる５－６０％溶離液Ｂの線形勾配で達成した。ＵＶ検出を２１４ｎｍに設定した。ＭＳイオン化を、１００～２０００ａｍｕの走査質量範囲を用いて、ＡＰＩ－ＥＳモードおよび正極性で実行した。各々のｍ／ｚの最も豊富な同位体が報告される。
【0119】
実施例１：化合物の合成
化合物は、Ａｅｇ、Ａｉｂ、Ｄ－Ｌｙｓ、およびＳａｒを除いて一文字アミノ酸コードを使用して記載した以下のものである。各置換基を、それが結合している残基の後に括弧内に含める。
化合物は、Ａｅｇ、Ａｉｂ、Ｄ－Ｌｙｓ、およびＳａｒを除いて一文字アミノ酸コードを使用して記載した以下のものである。各置換基を、それが結合している残基の後に括弧内に含める。
【0120】
親化合物番号１
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
配列番号５、置換基：Ｌｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９０１．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６３４．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２２６．１
親化合物番号２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
配列番号５、置換基：Ｌｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．１０
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８６７．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６２３．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１７．６
親化合物番号３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
配列番号５、置換基：Ｌｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．７
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８９５．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６３２．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２２４．６
親化合物番号４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
配列番号６、置換基：Ｌｙｓ１６に結合したＣｈｅｍ．７
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８５３．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝５．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１８．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１４．２
親化合物番号５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｃ末端アミド修飾を有する配列番号４、置換基：Ｌｙｓ２０に結合したＣｈｅｍ．１１
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８１３．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０５．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０４．３
化合物番号１
（Ｄ－Ｌｙｓ）［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｄ－Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９８．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．８分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３３．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７５．３
化合物番号２
Ｇ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｇｌｙ、Ｙ＝Ａｅｇ、置換基ｂ：Ｙに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４５６．１Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８１９．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６４．８
化合物番号３
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９８．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３３．７、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７５．６
化合物番号４
Ａ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ａｌａ、Ｙ＝Ａｅｇ、置換基ｂ：Ｙに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４７０．１Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８２３．８、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６８．２
化合物番号５
Ｌ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｌｅｕ、Ｙ＝Ａｅｇ、置換基ｂ：Ｙに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５１２．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３８．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７８．９
化合物番号６
Ｐ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｐｒｏ、Ｙ＝Ａｅｇ、置換基ｂ：Ｙに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９６．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３２．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７４．６
化合物番号７
Ｄ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ａｓｐ、Ｙ＝Ａｅｇ、置換基ｂ：Ｙに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｃ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５１４．１Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝１０．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３８．８、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７９．３．
化合物番号８
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１８、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５６２７．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８７６．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１４０７．６
化合物番号９
Ｋ［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］アセチル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１９、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５５５．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８５２．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３８９．７
化合物番号１０
（Ｄ－Ｌｙｓ）［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｄ－Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．２１、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５７８８．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１９３０．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１４４７．８
化合物番号１１
（Ｄ－Ｌｙｓ）［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｄ－Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．２０、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５６２６．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８７６．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１４０７．２
化合物番号１２
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号２、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．１０
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４６４．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８２２．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６６．７
化合物番号１３
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号２、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１７、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．１０
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９２．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．８分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３１．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７３．７
化合物番号１４
Ｋ［（２Ｓ）－２，６－ビス［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号２、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．２２、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．１０
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５９８９．９Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１９９７．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１４９８．０
化合物番号１５
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号３、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１７、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．７
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５２０．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８４０．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３８０．９
化合物番号１６
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号４、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ１６に結合したＣｈｅｍ．７
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４５０．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８１７．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６３．１
化合物番号１７
Ｇ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号４、Ｘ＝Ｇｌｙ、Ｙ＝Ａｅｇ、置換基ｂ：Ｙに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ１６に結合したＣｈｅｍ．７
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｃ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４０８．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝９．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８０３．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３５３．０
化合物番号１８
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｚ：親化合物番号５、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｓａｒ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ２０に結合したＣｈｅｍ．１１
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４１０．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８０４．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３５３．５
非変換化合物番号１
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｖａｌ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号１、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｖａｌ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．８
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５２６．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８４２．８、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３８２．２
非変換化合物番号２
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｖａｌ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号２、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｖａｌ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ３３に結合したＣｈｅｍ．１０
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９２．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３１．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７３．９
非変換化合物番号３
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｖａｌ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
Ｚ：親化合物番号４、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｖａｌ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ１６に結合したＣｈｅｍ．７
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４７８．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８２６．７、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７０．３
非変換化合物番号４
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｖａｌ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｚ：親化合物番号５、Ｘ＝Ｌｙｓ、Ｙ＝Ｖａｌ、置換基ｂ：Ｘに結合したＣｈｅｍ．１６、置換基ｚ：ＺのＬｙｓ２０に結合したＣｈｅｍ．１１
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４３８．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８１３．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６０．２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化23】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９０１．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６３４．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２２６．１
親化合物番号２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化24】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８６７．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６２３．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１７．６
親化合物番号３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化25】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８９５．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６３２．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２２４．６
親化合物番号４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化26】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８５３．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝５．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１８．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１４．２
親化合物番号５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化27】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８１３．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０５．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０４．３
化合物番号１
（Ｄ－Ｌｙｓ）［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化28】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９８．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．８分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３３．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７５．３
化合物番号２
Ｇ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化29】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４５６．１Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８１９．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６４．８
化合物番号３
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化30】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９８．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３３．７、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７５．６
化合物番号４
Ａ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化31】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４７０．１Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８２３．８、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６８．２
化合物番号５
Ｌ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化32】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５１２．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３８．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７８．９
化合物番号６
Ｐ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化33】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９６．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３２．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７４．６
化合物番号７
Ｄ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化34】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｃ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５１４．１Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝１０．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３８．８、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７９．３．
化合物番号８
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化35】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５６２７．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８７６．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１４０７．６
化合物番号９
Ｋ［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］アセチル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化36】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５５５．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８５２．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３８９．７
化合物番号１０
（Ｄ－Ｌｙｓ）［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化37】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５７８８．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１９３０．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１４４７．８
化合物番号１１
（Ｄ－Ｌｙｓ）［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化38】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５６２６．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８７６．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１４０７．２
化合物番号１２
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化39】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４６４．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８２２．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６６．７
化合物番号１３
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化40】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９２．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．８分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３１．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７３．７
化合物番号１４
Ｋ［（２Ｓ）－２，６－ビス［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化41】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５９８９．９Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１９９７．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１４９８．０
化合物番号１５
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化42】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５２０．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８４０．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３８０．９
化合物番号１６
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化43】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４５０．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８１７．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６３．１
化合物番号１７
Ｇ－Ａｅｇ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化44】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｃ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４０８．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝９．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８０３．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３５３．０
化合物番号１８
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｓａｒ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化45】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４１０．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８０４．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３５３．５
非変換化合物番号１
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｖａｌ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化46】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５５２６．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８４２．８、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３８２．２
非変換化合物番号２
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｖａｌ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥＥＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化47】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４９２．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８３１．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７３．９
非変換化合物番号３
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｖａｌ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＬＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡＲＥＦＩＥＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＯＨ
【化48】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４７８．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８２６．７、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３７０．３
非変換化合物番号４
Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１５－カルボキシペンタデカノイルアミノ）ブタノイル］－Ｖａｌ－Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩ－Ａｉｂ－ＬＤＫＩＡＱＫ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＦＶＱＷＬＩＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化49】
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ａ、ＤＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５４３８．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１８１３．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１３６０．２
【0121】
変換半減期を測定するための一般的な方法
本発明のプロドラッグのプロドラッグから薬剤への変換半減期を調査するためにアッセイを行った。変換半減期を、３７℃でのインキュベーション時にｐＨ７．４で、インビトロで調査した。
本発明のプロドラッグのプロドラッグから薬剤への変換半減期を調査するためにアッセイを行った。変換半減期を、３７℃でのインキュベーション時にｐＨ７．４で、インビトロで調査した。
【0122】
製剤の調製およびサンプリング
試験化合物を、リン酸緩衝生理食塩水（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、２．０７ｍＭ ＫＣｌ、８．０５ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、１．９６ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、ｐＨ７．４）中で１００μＭの濃度に溶解させた。溶液のｐＨを溶解後に測定し、必要に応じてＮａＯＨ水溶液を用いてｐＨ７．４に調整した。溶液を０．２２μｍのシリンジフィルターに通して濾過し、その後、３７℃の水浴中でインキュベートした。ＬＣＭＳ分析のために、アリコートを定義された時点で、例えば、２４～７２時間毎に回収した。
試験化合物を、リン酸緩衝生理食塩水（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、２．０７ｍＭ ＫＣｌ、８．０５ｍＭ Ｎａ２ＨＰＯ４、１．９６ｍＭ ＫＨ２ＰＯ４、ｐＨ７．４）中で１００μＭの濃度に溶解させた。溶液のｐＨを溶解後に測定し、必要に応じてＮａＯＨ水溶液を用いてｐＨ７．４に調整した。溶液を０．２２μｍのシリンジフィルターに通して濾過し、その後、３７℃の水浴中でインキュベートした。ＬＣＭＳ分析のために、アリコートを定義された時点で、例えば、２４～７２時間毎に回収した。
【0123】
分析および計算
ＬＣＭＳ分析を、上記のＬＣＭＳ＿Ａに定義される手順を使用して行った。
プロドラッグ、活性薬剤、およびＤＫＰのＡＵＣを、２１４ｎｍでのＵＶ検出を使用して決定し、プロドラッグ＋活性薬剤＋ＤＫＰの総ＡＵＣに対するプロドラッグのＡＵＣの比率を計算した。この比率の負の自然対数を経時的にプロットし、その後、この関係の線形回帰を行った。変換半減期を、ＡＵＣ比が０．５であった時間としてこの線形回帰から計算した。
ＬＣＭＳ分析を、上記のＬＣＭＳ＿Ａに定義される手順を使用して行った。
プロドラッグ、活性薬剤、およびＤＫＰのＡＵＣを、２１４ｎｍでのＵＶ検出を使用して決定し、プロドラッグ＋活性薬剤＋ＤＫＰの総ＡＵＣに対するプロドラッグのＡＵＣの比率を計算した。この比率の負の自然対数を経時的にプロットし、その後、この関係の線形回帰を行った。変換半減期を、ＡＵＣ比が０．５であった時間としてこの線形回帰から計算した。
【0124】
実施例２
本発明の化合物のプロドラッグから薬剤への変換半減期を、変換半減期を測定するための一般的な方法に記載されるように測定した。結果を表６に提示する。本発明の化合物は、驚くほど長い変換半減期と関連しており、ＤＫＰ部分の化学構造をわずかに修飾することにより調整することができる。
本発明の化合物のプロドラッグから薬剤への変換半減期を、変換半減期を測定するための一般的な方法に記載されるように測定した。結果を表６に提示する。本発明の化合物は、驚くほど長い変換半減期と関連しており、ＤＫＰ部分の化学構造をわずかに修飾することにより調整することができる。
【表7】
【0125】
ミニブタにおける終末相半減期を測定するための一般的な方法
この方法の目的は、ミニブタへの静脈内投与後の本発明の誘導体のインビボでの半減期、すなわち、体内でのそれらの時間の延長、ひいてはそれらの作用時間の延長を決定することである。これを薬物動態（ＰＫ）研究で行い、問題の誘導体の終末相半減期を決定する。終末相半減期とは、概して、初期分布相の後に測定されるある特定の血漿濃度を半減するのにかかる期間を意味する。
この方法の目的は、ミニブタへの静脈内投与後の本発明の誘導体のインビボでの半減期、すなわち、体内でのそれらの時間の延長、ひいてはそれらの作用時間の延長を決定することである。これを薬物動態（ＰＫ）研究で行い、問題の誘導体の終末相半減期を決定する。終末相半減期とは、概して、初期分布相の後に測定されるある特定の血漿濃度を半減するのにかかる期間を意味する。
【0126】
研究
雌ＧｏｔｔｉｎｇｅｎミニブタをＥｌｌｅｇａａｒｄ Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ Ｍｉｎｉｐｉｇｓ（Ｄａｌｍｏｓｅ、Ｄｅｎｍａｒｋ）から入手し、およそ７～１４ヶ月齢であり、かつ体重およそ１６～３５ｋｇのミニブタを本研究で使用した。ミニブタを個別に収容し、ＳＤＳミニブタ食餌（Ｓｐｅｃｉａｌ Ｄｉｅｔｓ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｅｓｓｅｘ，ＵＫ）を制限された状態で１日１回与えた。
雌ＧｏｔｔｉｎｇｅｎミニブタをＥｌｌｅｇａａｒｄ Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ Ｍｉｎｉｐｉｇｓ（Ｄａｌｍｏｓｅ、Ｄｅｎｍａｒｋ）から入手し、およそ７～１４ヶ月齢であり、かつ体重およそ１６～３５ｋｇのミニブタを本研究で使用した。ミニブタを個別に収容し、ＳＤＳミニブタ食餌（Ｓｐｅｃｉａｌ Ｄｉｅｔｓ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｅｓｓｅｘ，ＵＫ）を制限された状態で１日１回与えた。
【0127】
３週間順応させた後、２つの永久中心静脈カテーテルを各ミニブタの大静脈尾に埋め込んだ。ミニブタを外科処置後１週間回復させ、その後、誘導体連続投与の間に好適なウォッシュアウト期間を伴う反復薬物動態研究に使用した。
【0128】
ミニブタを、投薬前およそ１８時間および投薬後０～４時間絶食させたが、全期間中、水に自由にアクセスさせた。
【0129】
実施例１の化合物のナトリウム塩を、本発明の化合物を調製するための一般的な方法の方法ＳＸ＿Ａを使用して調製した。結果として得られたナトリウム塩を、０．００７％ポリソルベート２０、５０ｍＭリン酸ナトリウム、７０ｍＭ塩化ナトリウムを含む緩衝液（ｐＨ７．４）中で、５０～３００ｎｍｏｌ／ｍＬの濃度に溶解させた。化合物の静脈注射（通常１～２０ｎｍｏｌ／ｋｇに対応する体積、例えば、０．０２～０．０５ｍＬ／ｋｇ）を一方のカテーテルを通して与え、血液試料を投与後２１日までの所定の時点で（好ましくは他方のカテーテルを通して）採取した。血液試料（例えば、０．８ｍＬ）を８ｍＭ ＥＤＴＡ緩衝液中に採取し、その後、４℃および１９４２ｇで１０分間遠心分離した。
【0130】
サンプリングおよび分析
血漿をドライアイス上のＭｉｃｒｏｎｉｃチューブ中にピペットで移し、ＥＬＩＳＡまたは類似の抗体ベースのアッセイまたはＬＣＭＳを使用して化合物の血漿濃度について分析するまで－２０℃で保持した。個々の血漿濃度－時間プロファイルを、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｖｅｒ．６．４．（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ Ｉｎｃ．、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ，ＵＳＡ）におけるノンコンパートメントモデルによって分析し、結果として得られた終末相半減期（調和平均）を決定した。
血漿をドライアイス上のＭｉｃｒｏｎｉｃチューブ中にピペットで移し、ＥＬＩＳＡまたは類似の抗体ベースのアッセイまたはＬＣＭＳを使用して化合物の血漿濃度について分析するまで－２０℃で保持した。個々の血漿濃度－時間プロファイルを、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｖｅｒ．６．４．（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ Ｉｎｃ．、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ，ＵＳＡ）におけるノンコンパートメントモデルによって分析し、結果として得られた終末相半減期（調和平均）を決定した。
【0131】
実施例３
本明細書のミニブタにおける終末相半減期を測定するための一般的な方法に記載されるように測定した終末相半減期および／または観察された終末相半減期を表７に示す。親化合物番号１、２、および４のそれらの遊離形態での投与は、驚くほど高い観察された終末相半減期と関連しており、この終末相半減期は、非変換ジペプチドおよび置換基（例えば、非変換化合物番号１）の添加によってさらに延長される。変換プロドラッグ（例えば、化合物番号１、３、９、および１０）の使用により、非変換対応物（例えば、非変換化合物番号１）よりも短い半減期がもたらされ、これは、変換が変換プロドラッグの除去に寄与するが、非変換化合物には寄与せず、変換と他の除去機構を区別することができないためである。これにより、プロドラッグの親化合物への変換がインビボで生じるという証拠が得られる。変換がプロドラッグの終末相半減期に寄与するため、プロドラッグの終末相半減期は対応する親化合物よりも速い場合も遅い場合もある。
本明細書のミニブタにおける終末相半減期を測定するための一般的な方法に記載されるように測定した終末相半減期および／または観察された終末相半減期を表７に示す。親化合物番号１、２、および４のそれらの遊離形態での投与は、驚くほど高い観察された終末相半減期と関連しており、この終末相半減期は、非変換ジペプチドおよび置換基（例えば、非変換化合物番号１）の添加によってさらに延長される。変換プロドラッグ（例えば、化合物番号１、３、９、および１０）の使用により、非変換対応物（例えば、非変換化合物番号１）よりも短い半減期がもたらされ、これは、変換が変換プロドラッグの除去に寄与するが、非変換化合物には寄与せず、変換と他の除去機構を区別することができないためである。これにより、プロドラッグの親化合物への変換がインビボで生じるという証拠が得られる。変換がプロドラッグの終末相半減期に寄与するため、プロドラッグの終末相半減期は対応する親化合物よりも速い場合も遅い場合もある。
【表8】
【0132】
ビーグル犬における経口バイオアベイラビリティを測定するための一般的な方法
この方法の目的は、ビーグル犬に経口投与した後の本発明の化合物のインビボでの終末相半減期および血漿曝露、すなわち、経時的に循環に到達する被験物質の終末相半減期および濃度を決定することである。これを薬物動態（ＰＫ）研究で行い、問題の化合物のこれらのパラメータを決定する。終末相半減期とは、概して、初期分布相の後に測定されるある特定の血漿濃度を半減するのにかかる期間を意味する。
この方法の目的は、ビーグル犬に経口投与した後の本発明の化合物のインビボでの終末相半減期および血漿曝露、すなわち、経時的に循環に到達する被験物質の終末相半減期および濃度を決定することである。これを薬物動態（ＰＫ）研究で行い、問題の化合物のこれらのパラメータを決定する。終末相半減期とは、概して、初期分布相の後に測定されるある特定の血漿濃度を半減するのにかかる期間を意味する。
【0133】
錠剤組成物の調製
実施例１から得た試験化合物およびＳＮＡＣ（Ｎ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸ナトリウム）を含む錠剤組成物を、例えば、国際公開第２０１９／１４９８８０号に記載されるように、被験物質をローラー圧縮ＳＮＡＣおよびステアリン酸マグネシウムと混合することによって、当業者に公知の方法に従って調製した。各錠剤は、７．７ｍｇのステアリン酸マグネシウム、２～４ｍｇの各試験化合物、および３００ｍｇのＳＮＡＣから成った。
実施例１から得た試験化合物およびＳＮＡＣ（Ｎ－（８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ）カプリル酸ナトリウム）を含む錠剤組成物を、例えば、国際公開第２０１９／１４９８８０号に記載されるように、被験物質をローラー圧縮ＳＮＡＣおよびステアリン酸マグネシウムと混合することによって、当業者に公知の方法に従って調製した。各錠剤は、７．７ｍｇのステアリン酸マグネシウム、２～４ｍｇの各試験化合物、および３００ｍｇのＳＮＡＣから成った。
【0134】
動物、投薬、およびサンプリング
試験期間中に１～７歳および体重９～１７ｋｇであった雄ビーグル犬を本研究に含めた。ビーグル犬に絶食状態で投薬した。ビーグル犬を囲い内に群別に収容し（１２時間明：１２時間暗）、Ｒｏｙａｌ Ｃａｎｉｎ Ｍｅｄｉｕｍ Ａｄｕｌｔ ｄｏｇ ｆｏｏｄ（Ｒｏｙａｌ Ｃａｎｉｎ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（中国支店）またはＢｒｏｇａａｒｄｅｎ Ａ／Ｓ（デンマーク））を個別かつ制限的に１日１回給餌した。ビーグル犬を、連続投与の間に好適なウォッシュアウト期間を伴う反復ＰＫ研究に使用した。最初のＰＫ研究の開始前に、適切な順応期間を与えた。ビーグル犬の全ての取り扱い、投薬、および採血を、訓練を受けた熟練したスタッフが行った。研究前に、ビーグル犬を一晩絶食させ、投薬後０～４時間絶食させた。投薬１時間前から投薬４時間後までビーグル犬の水へのアクセスを制限したが、それ以外、全期間を通して水に自由にアクセスさせた。
試験期間中に１～７歳および体重９～１７ｋｇであった雄ビーグル犬を本研究に含めた。ビーグル犬に絶食状態で投薬した。ビーグル犬を囲い内に群別に収容し（１２時間明：１２時間暗）、Ｒｏｙａｌ Ｃａｎｉｎ Ｍｅｄｉｕｍ Ａｄｕｌｔ ｄｏｇ ｆｏｏｄ（Ｒｏｙａｌ Ｃａｎｉｎ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（中国支店）またはＢｒｏｇａａｒｄｅｎ Ａ／Ｓ（デンマーク））を個別かつ制限的に１日１回給餌した。ビーグル犬を、連続投与の間に好適なウォッシュアウト期間を伴う反復ＰＫ研究に使用した。最初のＰＫ研究の開始前に、適切な順応期間を与えた。ビーグル犬の全ての取り扱い、投薬、および採血を、訓練を受けた熟練したスタッフが行った。研究前に、ビーグル犬を一晩絶食させ、投薬後０～４時間絶食させた。投薬１時間前から投薬４時間後までビーグル犬の水へのアクセスを制限したが、それ以外、全期間を通して水に自由にアクセスさせた。
【0135】
本組成物を単回経口投与により６～８匹の群のビーグル犬に投与した。本錠剤を以下の様式で投与した：錠剤投与の１０分前に、ビーグル犬に約３ｎｍｏｌ／ｋｇの配列番号７（ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴ）を皮下投与してもよく、その後、錠剤を咀嚼させないようにビーグル犬の口の奥に置いた。その後、口を閉じ、注射器またはチューブを用いて１０ｍＬの水道水を与えて、錠剤の嚥下を促進した。
【0136】
投薬前に１つの血液試料を採取し、投薬後に追加の試料を所定の時点で、例えば、最大６００時間にわたって採取して、被験物質の完全な血漿濃度－時間吸収プロファイルを十分に網羅した。採血時点毎に、およそ０．８ｍＬの全血を１．５ｍＬのＥＤＴＡコーティングチューブに採取し、チューブを穏やかに回転させて試料をＥＤＴＡと混合させた。血液試料をＥＤＴＡ緩衝液（８ｍＭ）中に採取し、その後、４℃および２０００ｇで１０分間遠心分離した。血漿をドライアイス上のＭｉｃｒｏｎｉｃチューブにピペットで移し、分析まで－２０℃以下で維持した。血液試料を、必要に応じて、例えば、最初の２時間では前肢の橈側皮静脈内のＶｅｎｆｌｏｎから採取し、その後、残りの時点では頸静脈から注射器で採取した。最初の数滴をベンフロンから排出させて、Ｖｅｎｆｌｏｎから試料中にヘパリン生理食塩水が入り込むのを回避した。
【0137】
全ての血液試料を安定化のためにＥＤＴＡを含む試験管に採取し、遠心分離まで氷上で維持した。血漿を遠心分離によって全血から分離し、血漿を分析まで－２０℃以下で貯蔵した。
【0138】
分析および計算
血漿を、当業者に公知のＬＣ－ＭＳ（液体クロマトグラフィー－質量分析）を使用して被験物質について分析した。システムは、１０弁インターフェースモジュールＴｕｒｂｏＦｌｏｗシステム、ＣＴＣ ＨＴＳ ＰＡＬオートサンプラー、Ａｃｃｅｌａ １２５０ポンプ、およびＨｏｔ Ｐｏｃｋｅｔカラムオーブンを装備したＴｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＱＥｘａｃｔｉｖｅ質量分析計、または弁インターフェースモジュールＴｕｒｂｏＦｌｏｗシステム、ＴｒｉＰｌｕｓ ＲＳＩオートサンプラー、Ｄｉｏｎｅｘ ＵｌｔｉＭａｔｅ ３０００ポンプ、Ｈｏｔ Ｐｏｃｋｅｔカラムオーブンを装備したＴｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＱＥｘａｃｔｉｖｅ Ｐｌｕｓ質量分析計のいずれかから成った。逆相ＨＰＬＣ分離を、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｏｎｙｘ Ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ Ｃ１８カラム（５０×２．０ｍｍ）（３０℃で流量０．８ｍＬ／分）、またはＡｇｉｌｅｎｔ Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ １２０ ＳＢ－Ｃ１８カラム（５０×２．１ｍｍ、２．７μｍ）（６０℃で流量０．４ｍＬ／分）のいずれかを使用して、１％ギ酸水溶液中１：１アセトニトリル／メタノール線形勾配を使用して達成した。質量分析計を、陽イオン化ＳＩＭモードまたは陽イオン化ＰＲＭモードのいずれかで操作した。
血漿を、当業者に公知のＬＣ－ＭＳ（液体クロマトグラフィー－質量分析）を使用して被験物質について分析した。システムは、１０弁インターフェースモジュールＴｕｒｂｏＦｌｏｗシステム、ＣＴＣ ＨＴＳ ＰＡＬオートサンプラー、Ａｃｃｅｌａ １２５０ポンプ、およびＨｏｔ Ｐｏｃｋｅｔカラムオーブンを装備したＴｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＱＥｘａｃｔｉｖｅ質量分析計、または弁インターフェースモジュールＴｕｒｂｏＦｌｏｗシステム、ＴｒｉＰｌｕｓ ＲＳＩオートサンプラー、Ｄｉｏｎｅｘ ＵｌｔｉＭａｔｅ ３０００ポンプ、Ｈｏｔ Ｐｏｃｋｅｔカラムオーブンを装備したＴｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＱＥｘａｃｔｉｖｅ Ｐｌｕｓ質量分析計のいずれかから成った。逆相ＨＰＬＣ分離を、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｏｎｙｘ Ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ Ｃ１８カラム（５０×２．０ｍｍ）（３０℃で流量０．８ｍＬ／分）、またはＡｇｉｌｅｎｔ Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ １２０ ＳＢ－Ｃ１８カラム（５０×２．１ｍｍ、２．７μｍ）（６０℃で流量０．４ｍＬ／分）のいずれかを使用して、１％ギ酸水溶液中１：１アセトニトリル／メタノール線形勾配を使用して達成した。質量分析計を、陽イオン化ＳＩＭモードまたは陽イオン化ＰＲＭモードのいずれかで操作した。
【0139】
個々のビーグル犬毎に、血漿濃度－時間プロファイルを、Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎバージョン６．４ソフトウェアまたはＰＫ分析用の他の関連ソフトウェアにおけるノンコンパートメントモデルによって分析し、結果として得られた終末相半減期（ｔ１／２）、用量当たりの最大血漿濃度（Ｃｍａｘ／Ｄ）、最大血漿濃度までの時間（ｔｍａｘ）、および用量当たりの最大限までの曲線下面積（ＡＵＣ／Ｄ）を決定した。薬物動態結果の要約統計量を、中央値（ｔｍａｘ）、ホルモニック平均（ｔ１／２）、または算術平均（Ｃｍａｘ、ＡＵＣ）として提示した。
【0140】
実施例４
本明細書のビーグル犬における経口バイオアベイラビリティを測定するための一般的な方法に記載されるように測定した薬物動態特性を表８に示す。経口投与後に化合物の濃度が血漿中で検出された（Ｃｍａｘ／Ｄ＝０超およびＡＵＣ／Ｄ＝０超）ため、試験した本発明の化合物は全て、このモデルにおいて経口バイオアベイラビリティを示す。試験した化合物は全て、実施例３で観察された驚くほど高い観察された終末相半減期とも関連している。
本明細書のビーグル犬における経口バイオアベイラビリティを測定するための一般的な方法に記載されるように測定した薬物動態特性を表８に示す。経口投与後に化合物の濃度が血漿中で検出された（Ｃｍａｘ／Ｄ＝０超およびＡＵＣ／Ｄ＝０超）ため、試験した本発明の化合物は全て、このモデルにおいて経口バイオアベイラビリティを示す。試験した化合物は全て、実施例３で観察された驚くほど高い観察された終末相半減期とも関連している。
【表9】
【0141】
インビトロ機能的効力を測定するための一般的な方法
この実施例の目的は、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体におけるインビトロでの本化合物の機能的活性または効力を試験することである。インビトロ機能的効力は、全細胞アッセイにおける標的受容体活性化の尺度である。実施例１の親化合物１～５の効力を以下に記載するように決定した。ヒトＧＬＰ－１（７－３７）（ＨＡＥＧＴ ＦＴＳＤＶ ＳＳＹＬＥ ＧＱＡＡＫ ＥＦＩＡＷ ＬＶＫＧＲ Ｇ、配列番号８）およびヒトＧＩＰ（ＹＡＥＧＴ ＦＩＳＤＹ ＳＩＡＭＤ ＫＩＨＱＱ ＤＦＶＮＷ ＬＬＡＱＫ ＧＫＫＮＤ ＷＫＨＮＩ ＴＱ、配列番号９）を比較のために参照化合物として適切なアッセイに含めた。
この実施例の目的は、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体におけるインビトロでの本化合物の機能的活性または効力を試験することである。インビトロ機能的効力は、全細胞アッセイにおける標的受容体活性化の尺度である。実施例１の親化合物１～５の効力を以下に記載するように決定した。ヒトＧＬＰ－１（７－３７）（ＨＡＥＧＴ ＦＴＳＤＶ ＳＳＹＬＥ ＧＱＡＡＫ ＥＦＩＡＷ ＬＶＫＧＲ Ｇ、配列番号８）およびヒトＧＩＰ（ＹＡＥＧＴ ＦＩＳＤＹ ＳＩＡＭＤ ＫＩＨＱＱ ＤＦＶＮＷ ＬＬＡＱＫ ＧＫＫＮＤ ＷＫＨＮＩ ＴＱ、配列番号９）を比較のために参照化合物として適切なアッセイに含めた。
【0142】
原理
インビトロ機能的効力を、個別の細胞株におけるレポーター遺伝子アッセイにおいて標的受容体の応答を測定することによって決定した。このアッセイは、以下のＧタンパク質共役受容体：ヒトＧＬＰ－１受容体またはヒトＧＩＰ受容体のうちの１つを発現し、かつ各々の細胞株がプロモーターに結合したｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ）のＤＮＡおよびホタルルシフェラーゼ（ＣＲＥルシフェラーゼ）の遺伝子を含む安定にトランスフェクトされたＢＨＫ細胞株で行った。それぞれの受容体が活性化されると、ｃＡＭＰが生成され、次いで、ルシフェラーゼタンパク質の発現がもたらされる。アッセイインキュベーションが完了した時点で、ルシフェラーゼ基質（ルシフェリン）を添加し、ルシフェリンのオキシルシフェリンへの酵素変換を引き起こし、生物発光を生じさせる。発光を本アッセイの読み取り値として測定する。
インビトロ機能的効力を、個別の細胞株におけるレポーター遺伝子アッセイにおいて標的受容体の応答を測定することによって決定した。このアッセイは、以下のＧタンパク質共役受容体：ヒトＧＬＰ－１受容体またはヒトＧＩＰ受容体のうちの１つを発現し、かつ各々の細胞株がプロモーターに結合したｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ）のＤＮＡおよびホタルルシフェラーゼ（ＣＲＥルシフェラーゼ）の遺伝子を含む安定にトランスフェクトされたＢＨＫ細胞株で行った。それぞれの受容体が活性化されると、ｃＡＭＰが生成され、次いで、ルシフェラーゼタンパク質の発現がもたらされる。アッセイインキュベーションが完了した時点で、ルシフェラーゼ基質（ルシフェリン）を添加し、ルシフェリンのオキシルシフェリンへの酵素変換を引き起こし、生物発光を生じさせる。発光を本アッセイの読み取り値として測定する。
【0143】
細胞培養および調製
これらのアッセイで使用した細胞株は、親細胞株としてＢＨＫＴＳ１３を有するＢＨＫ細胞であった。これらの細胞を、ＣＲＥルシフェラーゼ要素を含むクローンから得て、さらにそれぞれのヒト受容体をトランスフェクトすることによって確立して、関連細胞株：ＢＨＫ ＣＲＥ ｌｕｃ２Ｐ ｈＧＬＰ－１ＲまたはＢＨＫ ＣＲＥ ｌｕｃ２Ｐ ｈＧＩＰＲを得た。細胞を、細胞培養培地中、３７℃／５％ＣＯ２で培養した。これらをアリコートし、液体窒素中に保存した。これらの細胞を連続培養し、各アッセイの前日に播種した。
これらのアッセイで使用した細胞株は、親細胞株としてＢＨＫＴＳ１３を有するＢＨＫ細胞であった。これらの細胞を、ＣＲＥルシフェラーゼ要素を含むクローンから得て、さらにそれぞれのヒト受容体をトランスフェクトすることによって確立して、関連細胞株：ＢＨＫ ＣＲＥ ｌｕｃ２Ｐ ｈＧＬＰ－１ＲまたはＢＨＫ ＣＲＥ ｌｕｃ２Ｐ ｈＧＩＰＲを得た。細胞を、細胞培養培地中、３７℃／５％ＣＯ２で培養した。これらをアリコートし、液体窒素中に保存した。これらの細胞を連続培養し、各アッセイの前日に播種した。
【0144】
材料
以下の化学物質をアッセイで使用した：プルロニックＦ－６８ １０％（Ｇｉｂｃｏ ２４０４）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ、Ｓｉｇｍａ Ａ９５１１）、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ １６１４０－０７１）、ニワトリ卵白オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ Ａ５５０３）、フェノールレッドフリーＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ ２１０６３－０２９）、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ １２４３０－０５４）、１Ｍ Ｈｅｐｅｓ（Ｇｉｂｃｏ １５６３０）、Ｇｌｕｔａｍａｘ １００ｘ（Ｇｉｂｃｏ ３５０５０）、Ｇ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ １０１３１－０２７）、ハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ １０６８７－０１０）、およびｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ ｐｌｕｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ ６０１６７５７）。
以下の化学物質をアッセイで使用した：プルロニックＦ－６８ １０％（Ｇｉｂｃｏ ２４０４）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ、Ｓｉｇｍａ Ａ９５１１）、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ １６１４０－０７１）、ニワトリ卵白オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ Ａ５５０３）、フェノールレッドフリーＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ ２１０６３－０２９）、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ １２４３０－０５４）、１Ｍ Ｈｅｐｅｓ（Ｇｉｂｃｏ １５６３０）、Ｇｌｕｔａｍａｘ １００ｘ（Ｇｉｂｃｏ ３５０５０）、Ｇ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ １０１３１－０２７）、ハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ １０６８７－０１０）、およびｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ ｐｌｕｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ ６０１６７５７）。
【0145】
緩衝液
ＧＬＰ－１Ｒ細胞培養培地は、１０％ＦＢＳ、５００μｇ／ｍＬのＧ４１８、および３００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ培地から成った。ＧＩＰＲ細胞培養培地は、１０％ＦＢＳ、４００μｇ／ｍＬのＧ４１８、および３００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ培地から成った。アッセイ緩衝液は、最終アッセイ濃度の２倍のＨＳＡを添加した、フェノールレッドフリーＤＭＥＭ、１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、１ｘ Ｇｌｕｔａｍａｘ、１％オボアルブミン、および０．１％プルロニックＦ－６８から成った。アッセイ培地を、アッセイ緩衝液中、等体積の試験化合物と１：１で混合して、ＨＳＡの最終アッセイ濃度を得た。
ＧＬＰ－１Ｒ細胞培養培地は、１０％ＦＢＳ、５００μｇ／ｍＬのＧ４１８、および３００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ培地から成った。ＧＩＰＲ細胞培養培地は、１０％ＦＢＳ、４００μｇ／ｍＬのＧ４１８、および３００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ培地から成った。アッセイ緩衝液は、最終アッセイ濃度の２倍のＨＳＡを添加した、フェノールレッドフリーＤＭＥＭ、１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、１ｘ Ｇｌｕｔａｍａｘ、１％オボアルブミン、および０．１％プルロニックＦ－６８から成った。アッセイ培地を、アッセイ緩衝液中、等体積の試験化合物と１：１で混合して、ＨＳＡの最終アッセイ濃度を得た。
【0146】
手順
１）細胞を５０００細胞／ウェルでプレーティングし、アッセイプレート中で一晩インキュベートした。
２）細胞をＤＰＢＳで１回洗浄した。
３）１００～３００μＭの範囲の濃度の試験化合物のストックおよび参照化合物のストックをアッセイ緩衝液中で１：１５０に希釈した。その後、化合物を９６ディープウェル希釈プレートの列１で１：１０に希釈し、その後、その行に移して、３．５倍、１２点希釈曲線を作成した。
４）ＨＳＡを含むまたは含まないアッセイ培地（５０μｌアリコート）をアッセイプレートの各ウェルに添加した。
５）化合物またはブランクの５０μｌアリコートを、希釈プレートから、ＨＳＡを含むまたは含まないアッセイ緩衝液を含むアッセイプレートに移した。
６）アッセイプレートを、５％ＣＯ２のインキュベーター内で、３７℃で３時間インキュベートした。
７）細胞をＤＰＢＳで１回洗浄した。
８）ＤＰＢＳの１００μｌアリコートをアッセイプレートの各ウェルに添加した。
９）ｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ ｐｌｕｓ試薬（感光性）の１００μｌアリコートをアッセイプレートの各ウェルに添加した。
１０）各アッセイプレートをアルミホイルで覆って遮光し、室温で３０分間にわたって２５０ｒｐｍで振盪した。
１１）各アッセイプレートをマイクロタイタープレートリーダーで読み取った。
１）細胞を５０００細胞／ウェルでプレーティングし、アッセイプレート中で一晩インキュベートした。
２）細胞をＤＰＢＳで１回洗浄した。
３）１００～３００μＭの範囲の濃度の試験化合物のストックおよび参照化合物のストックをアッセイ緩衝液中で１：１５０に希釈した。その後、化合物を９６ディープウェル希釈プレートの列１で１：１０に希釈し、その後、その行に移して、３．５倍、１２点希釈曲線を作成した。
４）ＨＳＡを含むまたは含まないアッセイ培地（５０μｌアリコート）をアッセイプレートの各ウェルに添加した。
５）化合物またはブランクの５０μｌアリコートを、希釈プレートから、ＨＳＡを含むまたは含まないアッセイ緩衝液を含むアッセイプレートに移した。
６）アッセイプレートを、５％ＣＯ２のインキュベーター内で、３７℃で３時間インキュベートした。
７）細胞をＤＰＢＳで１回洗浄した。
８）ＤＰＢＳの１００μｌアリコートをアッセイプレートの各ウェルに添加した。
９）ｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ ｐｌｕｓ試薬（感光性）の１００μｌアリコートをアッセイプレートの各ウェルに添加した。
１０）各アッセイプレートをアルミホイルで覆って遮光し、室温で３０分間にわたって２５０ｒｐｍで振盪した。
１１）各アッセイプレートをマイクロタイタープレートリーダーで読み取った。
【0147】
計算および結果
マイクロタイタープレートリーダーからのデータを最初にＥｘｃｅｌで回帰分析して、ｘ軸（対数スケール濃度）を個々の試験化合物のストック濃度および本アッセイの希釈に基づいて計算した。その後、このデータをＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアに転送してグラフを作成し、統計分析を行った。このソフトウェアは非線形回帰を実行する（対数（作動薬）対応答）。このソフトウェアを用いて計算し、ｐＭ単位で報告したＥＣ５０を以下の表９に示す。１試料当たり最低２つの複製を測定した。報告値は複製の平均値である。本発明の化合物は、所与の条件下で、ヒトＧＬＰ－１Ｒ受容体およびヒトＧＩＰＲ受容体の強力な機能的活性化を呈する。
マイクロタイタープレートリーダーからのデータを最初にＥｘｃｅｌで回帰分析して、ｘ軸（対数スケール濃度）を個々の試験化合物のストック濃度および本アッセイの希釈に基づいて計算した。その後、このデータをＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアに転送してグラフを作成し、統計分析を行った。このソフトウェアは非線形回帰を実行する（対数（作動薬）対応答）。このソフトウェアを用いて計算し、ｐＭ単位で報告したＥＣ５０を以下の表９に示す。１試料当たり最低２つの複製を測定した。報告値は複製の平均値である。本発明の化合物は、所与の条件下で、ヒトＧＬＰ－１Ｒ受容体およびヒトＧＩＰＲ受容体の強力な機能的活性化を呈する。
【0148】
実施例５
本明細書のインビトロ機能的効力を測定するための一般的な方法に記載されるように測定したＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体の機能的効力を表９に示す。遊離形態で投与した親化合物１～５は、所与の条件下で、ヒトＧＬＰ－１受容体およびヒトＧＩＰ受容体の強力な機能的活性化を呈する。
ｎｄ＝未決定
本明細書のインビトロ機能的効力を測定するための一般的な方法に記載されるように測定したＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体の機能的効力を表９に示す。遊離形態で投与した親化合物１～５は、所与の条件下で、ヒトＧＬＰ－１受容体およびヒトＧＩＰ受容体の強力な機能的活性化を呈する。
【表10】
【0149】
本発明のある特定の特徴が本明細書に例証および記載されているが、ここで、多くの修正、代用、変更、および等価物が当業者に想到されるであろう。したがって、添付の特許請求の範囲が本発明の真の趣旨の範囲内に含まれる全ての修正および変更を包含するよう意図されていることを理解されたい。
【配列表】
【外国語明細書】