(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023114293
(43)【公開日】2023-08-17
(54)【発明の名称】活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 8/92 20060101AFI20230809BHJP
A61K 8/06 20060101ALI20230809BHJP
A61Q 17/04 20060101ALI20230809BHJP
A61Q 19/00 20060101ALI20230809BHJP
A61K 36/82 20060101ALI20230809BHJP
A61K 36/13 20060101ALI20230809BHJP
A61K 36/54 20060101ALI20230809BHJP
A61P 39/06 20060101ALI20230809BHJP
A61P 17/18 20060101ALI20230809BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20230809BHJP
A61K 9/107 20060101ALI20230809BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20230809BHJP
A61K 47/24 20060101ALI20230809BHJP
A23D 7/00 20060101ALI20230809BHJP
A23L 33/115 20160101ALI20230809BHJP
A23D 9/00 20060101ALN20230809BHJP
A61K 131/00 20060101ALN20230809BHJP
A61K 127/00 20060101ALN20230809BHJP
A61K 135/00 20060101ALN20230809BHJP
A61K 129/00 20060101ALN20230809BHJP
【ＦＩ】
A61K8/92
A61K8/06
A61Q17/04
A61Q19/00
A61K36/82
A61K36/13
A61K36/54
A61P39/06
A61P17/18
A61P35/00
A61K9/107
A61K47/10
A61K47/24
A23D7/00
A23L33/115
A23D9/00
A61K131:00
A61K127:00
A61K135:00
A61K129:00
【審査請求】未請求
【請求項の数】14
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2022016581
(22)【出願日】2022-02-04
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り １．掲載アドレス （ａ）ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｐｓｔｊ．ｏｒｇ／３６／ｔｉｍｅｔａｂｌｅ＿ｐｒｏｇｒａｍ （ｂ）ｈｔｔｐｓ：／／ａｐｓｔｊ３６－ｏｎｌｉｎｅ ２．掲載日 （ａ）令和３年５月７日、（ｂ）令和３年５月１１日 ３．公開者 桑原菜摘、袴田雅俊、三宅健司、山下里恵、山田幸平、佐藤秀行、尾上誠良 ［刊行物等］ １．掲載アドレス ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｐｓｔｊ．ｊｐ／ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ／ ２．掲載日 令和３年６月１５日 ３．公開者 桑原菜摘、袴田雅俊、三宅健司、山下里恵、山田幸平、佐藤秀行、尾上誠良 ［刊行物等］ １．集会名、開催場所 公益社団法人日本薬剤学会第３６年会 オンライン開催 ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｐｓｔｊ．ｏｒｇ／３６／ ２．開催日 令和３年５月１５日 ３．公開者 桑原菜摘、袴田雅俊、三宅健司、山下里恵、山田幸平、佐藤秀行、尾上誠良
(71)【出願人】
【識別番号】507219686
【氏名又は名称】静岡県公立大学法人
(71)【出願人】
【識別番号】590002389
【氏名又は名称】静岡県
(74)【代理人】
【識別番号】100091487
【弁理士】
【氏名又は名称】中村 行孝
(74)【代理人】
【識別番号】100120031
【弁理士】
【氏名又は名称】宮嶋 学
(74)【代理人】
【識別番号】100120617
【弁理士】
【氏名又は名称】浅野 真理
(74)【代理人】
【識別番号】100126099
【弁理士】
【氏名又は名称】反町 洋
(72)【発明者】
【氏名】尾上 誠良
(72)【発明者】
【氏名】山下 里恵
(72)【発明者】
【氏名】渡瀬 隆也
(72)【発明者】
【氏名】袴田 雅俊
【テーマコード（参考）】
4B018
4B026
4C076
4C083
4C088
【Ｆターム（参考）】
4B018LB10
4B018MD08
4B018MD10
4B018MD15
4B018ME14
4B018MF02
4B026DC05
4B026DG20
4B026DK01
4B026DK03
4B026DK04
4B026DK05
4B026DK10
4B026DL02
4B026DX04
4C076AA17
4C076BB31
4C076CC18
4C076CC21
4C076CC27
4C076DD02F
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4C076DD16F
4C076DD37
4C076DD38
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4C076FF60
4C083AA121
4C083AA122
4C083AC071
4C083AC101
4C083AC111
4C083AC121
4C083AC122
4C083AD571
4C083AD572
4C083BB05
4C083BB06
4C083BB07
4C083BB47
4C083CC19
4C083DD33
4C083EE12
4C083EE17
4C083FF05
4C088AB01
4C088AB33
4C088AB45
4C088AC04
4C088AC05
4C088AC06
4C088BA08
4C088BA37
4C088MA22
4C088MA63
4C088NA14
4C088ZA89
4C088ZB26
4C088ZC21
(57)【要約】 （修正有）
【課題】新規な活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物を提供する。
【解決手段】本発明は、茶の実油カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含む、活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物を提供する。
【選択図】なし
【解決手段】本発明は、茶の実油カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含む、活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物を提供する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含んでなる、活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物。
【請求項2】
前記活性酸素種が一重項酸素およびスーパーオキシドから選択される少なくも一種である、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
光毒性抑制または低減のための、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項4】
光遮断または吸収のための、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項5】
エマルション組成物である、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項6】
界面活性剤およびアルコールをさらに含んでなる、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項7】
水をさらに含んでなる、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項8】
前記界面活性剤が、リン脂質、エステル型界面活性剤、エーテル型界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤および両性界面活性剤からなる群から選択される少なくとも一種である、請求項６または７に記載の組成物。
【請求項9】
前記界面活性剤が、大豆レシチン、卵黄レシチンおよびこれらの酵素処理物からなる群から選択される少なくとも一種である、請求項６～８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項10】
前記アルコールが、一価アルコール、二価アルコールおよび三価アルコールから選択される少なくとも一つのものである、請求項６～９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項11】
前記アルコールが、エタノール、プロパノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよびグリセリンからなる群から選択される少なくとも一種である、請求項６～１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項12】
前記組成物が外用剤である、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項13】
茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、アルコール、ならびに水を含んでなる、エマルション組成物。
【請求項14】
茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、アルコール、ならびに水を含んでなるエマルション組成物の製造方法であって、
茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、ならびにアルコールを混合し混合物を得る工程、および、
前記混合物と水とを混合する工程
を含んでなる、製造方法。
茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、ならびにアルコールを混合し混合物を得る工程、および、
前記混合物と水とを混合する工程
を含んでなる、製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物に関し、より詳しくは、茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含んでなる活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
光毒性反応は、光毒性誘発化合物が、例えば太陽光に含まれる紫外線（ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｌｉｇｈｔ：ＵＶ）の一種であるＵＶＡ／Ｂおよび可視光領域（ＵＶＢ，２９０－３２０ｎｍ；ＵＶＡ，３２０－４００ｎｍ；ＶＩＳ，４００－７００ｎｍ）等の光を吸収することが引き金となることが知られている。光励起された上記化合物はエネルギー的に不安定な状態であるため、蛍光、燐光、熱および光化学的反応を介してエネルギーの放出を行うことでエネルギー的に安定な状態へ戻ることが報告されている（非特許文献１）。皮膚または眼に分布した化合物が日光曝露により光励起された場合、生体内分子であるタンパク質、脂質およびＤＮＡ等との光化学的反応を介して、細胞・組織障害を引き起こすと考えられている。生体内にはＯ２も豊富に存在しているため、光励起された化合物とＯ２とが反応することにより産生する活性酸素種（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ：ＲＯＳ、以下、ＲＯＳともいう）は反応性が非常に高く、化合物の光毒性反応に寄与すると考えられている（非特許文献２）。そのため、活性酸素種産生を引き起こす光毒性誘発化合物は光線過敏症や皮膚がん等を誘発するリスクがあると報告されている（非特許文献３）。
【0003】
したがって、活性酸素種産生または光毒性を効果的に抑制しうることが求められているといえる。
【0004】
一方、茶の実油には食品素材としての利用の可能性が記載されている（特許文献１）。カヤ油には、化粧・美容用不織布に含まれる含油繊維の油分としての利用の可能性が記載されている（特許文献２）。ヤブニッケイ油には、キャンディを被覆する油脂としての利用の可能性が記載されている（特許文献３）。
【0005】
しかしながら、茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油と、活性酸素種産生または光毒性の抑制または低減作用との関係については何ら報告されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0006】
【非特許文献1】S. Onoue et al., Current Drug Safety, 2009, 4, pp.123-136
【非特許文献2】S. Onoue et al., Pharm Res., 2006, 23(1) pp.156-164
【非特許文献3】Juzeniene. A et al., Photochemical & Photobiological Sciences., 2007, 6(12) pp.1268-1274
【特許文献】
【0007】
【特許文献1】特開２０２０－１５２７４９号公報
【特許文献2】特開２０１０－１９５７３５号公報
【特許文献3】特開２００４－３２１１４０号公報
【発明の概要】
【0008】
本発明者らは、今般、茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油が活性酸素種産生を抑制または低減しうることを見出した。本発明は、かかる知見に基づくものである。
【0009】
したがって、本発明は、活性酸素種産生を抑制または低減するための技術的手段を提供する。
【0010】
本発明には、以下の発明が包含される。
［１］ 茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含んでなる、活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物。
［２］ 前記活性酸素種が一重項酸素およびスーパーオキシドから選択される少なくも一種である、［１］に記載の組成物。
［３］ 光毒性抑制または低減のための、［１］または［２］に記載の組成物。
［４］ 光遮断または吸収のための、［１］～［３］のいずれか一つに記載の組成物。
［５］ エマルション組成物である、［１］～［４］のいずれか一つに記載の組成物。
［６］ 界面活性剤およびアルコールをさらに含んでなる、［１］～［５］のいずれか一つに記載の組成物。
［７］ 水をさらに含んでなる、［１］～［６］のいずれか一つに記載の組成物。
［８］ 前記界面活性剤が、リン脂質、エステル型界面活性剤、エーテル型界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤および両性界面活性剤からなる群から選択される少なくとも一種である、［６］または［７］に記載の組成物。
［９］ 前記界面活性剤が、大豆レシチン、卵黄レシチン、およびこれらの酵素処理物からなる群から選択される少なくとも一種である、［６］～［８］のいずれか一つに記載の組成物。
［１０］ 前記アルコールが、一価アルコール、二価アルコールおよび三価アルコールから選択される少なくとも一つのものである、［６］～［９］のいずれか一つに記載の組成物。
［１１］ 前記アルコールが、エタノール、プロパノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよびグリセリンからなる群から選択される少なくとも一種である、［６］～［１０］のいずれか一つに記載の組成物。
［１２］ 前記組成物が外用剤である、［１］～［１１］のいずれか一つに記載の組成物。
［１３］ 茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、アルコール、ならびに水を含んでなる、エマルション組成物。
［１４］ 茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、アルコール、ならびに水を含んでなるエマルション組成物の製造方法であって、
茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、ならびにアルコールを混合し混合物を得る工程、および、
前記混合物と水とを混合する工程
を含んでなる、製造方法。
［１］ 茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含んでなる、活性酸素種産生の抑制または低減のための組成物。
［２］ 前記活性酸素種が一重項酸素およびスーパーオキシドから選択される少なくも一種である、［１］に記載の組成物。
［３］ 光毒性抑制または低減のための、［１］または［２］に記載の組成物。
［４］ 光遮断または吸収のための、［１］～［３］のいずれか一つに記載の組成物。
［５］ エマルション組成物である、［１］～［４］のいずれか一つに記載の組成物。
［６］ 界面活性剤およびアルコールをさらに含んでなる、［１］～［５］のいずれか一つに記載の組成物。
［７］ 水をさらに含んでなる、［１］～［６］のいずれか一つに記載の組成物。
［８］ 前記界面活性剤が、リン脂質、エステル型界面活性剤、エーテル型界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤および両性界面活性剤からなる群から選択される少なくとも一種である、［６］または［７］に記載の組成物。
［９］ 前記界面活性剤が、大豆レシチン、卵黄レシチン、およびこれらの酵素処理物からなる群から選択される少なくとも一種である、［６］～［８］のいずれか一つに記載の組成物。
［１０］ 前記アルコールが、一価アルコール、二価アルコールおよび三価アルコールから選択される少なくとも一つのものである、［６］～［９］のいずれか一つに記載の組成物。
［１１］ 前記アルコールが、エタノール、プロパノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよびグリセリンからなる群から選択される少なくとも一種である、［６］～［１０］のいずれか一つに記載の組成物。
［１２］ 前記組成物が外用剤である、［１］～［１１］のいずれか一つに記載の組成物。
［１３］ 茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、アルコール、ならびに水を含んでなる、エマルション組成物。
［１４］ 茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、アルコール、ならびに水を含んでなるエマルション組成物の製造方法であって、
茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油、界面活性剤、ならびにアルコールを混合し混合物を得る工程、および、
前記混合物と水とを混合する工程
を含んでなる、製造方法。
【0011】
本発明者らは、植物加工油が光毒性を抑制または低減しうることも見出した。したがって、本発明は、光毒性を抑制または低減するための技術的手段を提供する。
【0012】
本発明には、以下の発明が包含される。
［１５］ 茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含んでなる、光毒性抑制または低減のための組成物。
［１６］ 活性酸素種産生の抑制または低減のための、［１５］に記載の組成物。
［１７］ 前記活性酸素種が一重項酸素およびスーパーオキシドから選択される少なくも一種である、［１６］に記載の組成物。
［１８］ 光遮断または吸収のための、［１５］～［１７］のいずれか一つに記載の組成物。
［１９］ エマルション組成物である、［１５］～［１８］のいずれか一つに記載の組成物。
［２０］ 界面活性剤およびアルコールをさらに含んでなる、［１５］～［１９］のいずれか一つに記載の組成物。
［２１］ 水をさらに含んでなる、［１５］～［２０］のいずれか一つに記載の組成物。
［２２］ 前記界面活性剤が、リン脂質、エステル型界面活性剤、エーテル型界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤および両性界面活性剤からなる群から選択される少なくとも一種である、［２０］または［２１］に記載の組成物。
［２３］ 前記界面活性剤が、大豆レシチン、卵黄レシチン、およびこれらの酵素処理物からなる群から選択される少なくとも一種である、［２０］～［２２］のいずれか一つに記載の組成物。
［２４］ 前記アルコールが、一価アルコール、二価アルコールおよび三価アルコールから選択される少なくとも一つのものである、［２０］～［２３］のいずれか一つに記載の組成物。
［２５］ 前記アルコールが、エタノール、プロパノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよびグリセリンからなる群から選択される少なくとも一種である、［２０］～［２４］のいずれか一つに記載の組成物。
［２６］ 前記組成物が外用剤である、［１５］～［２５］のいずれか一つに記載の組成物。
［１５］ 茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含んでなる、光毒性抑制または低減のための組成物。
［１６］ 活性酸素種産生の抑制または低減のための、［１５］に記載の組成物。
［１７］ 前記活性酸素種が一重項酸素およびスーパーオキシドから選択される少なくも一種である、［１６］に記載の組成物。
［１８］ 光遮断または吸収のための、［１５］～［１７］のいずれか一つに記載の組成物。
［１９］ エマルション組成物である、［１５］～［１８］のいずれか一つに記載の組成物。
［２０］ 界面活性剤およびアルコールをさらに含んでなる、［１５］～［１９］のいずれか一つに記載の組成物。
［２１］ 水をさらに含んでなる、［１５］～［２０］のいずれか一つに記載の組成物。
［２２］ 前記界面活性剤が、リン脂質、エステル型界面活性剤、エーテル型界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤および両性界面活性剤からなる群から選択される少なくとも一種である、［２０］または［２１］に記載の組成物。
［２３］ 前記界面活性剤が、大豆レシチン、卵黄レシチン、およびこれらの酵素処理物からなる群から選択される少なくとも一種である、［２０］～［２２］のいずれか一つに記載の組成物。
［２４］ 前記アルコールが、一価アルコール、二価アルコールおよび三価アルコールから選択される少なくとも一つのものである、［２０］～［２３］のいずれか一つに記載の組成物。
［２５］ 前記アルコールが、エタノール、プロパノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよびグリセリンからなる群から選択される少なくとも一種である、［２０］～［２４］のいずれか一つに記載の組成物。
［２６］ 前記組成物が外用剤である、［１５］～［２５］のいずれか一つに記載の組成物。
【0013】
本発明によれば、活性酸素種の産生を抑制または低減することができる。また、本発明の組成物は、光毒性を抑制または低減することができる上で有利である。さらに、本発明によれば、植物加工油を含んでなるエマルション組成物は、光毒性をより抑制またはより低減することも可能である。また、本発明の組成物は、光を遮断または吸収することができる上で有利である。
【図面の簡単な説明】
【0014】
【図1】茶の実油含有ナノエマルション組成物（ＮＥ／ＴＳ）の形状の透過型電子顕微鏡による観察結果を示す。パネル１Ａは調製直後における、ＮＥ／ＴＳの形状の観察結果を示す。パネル１Ｂは調製２４時間後における、ＮＥ／ＴＳの形状の観察結果を示す。図中の白色バーは２００ｎｍを示す。
【図2】ＵＶ無照射またはＵＶ照射の、無処置群、ＴＳ非含有ＮＥ塗布群、ＴＳ塗布群、およびＮＥ／ＴＳ塗布群における、トリフルオペラジン二塩酸塩を経口投与した後の、ＵＶ照射前とＵＶ照射２４時間後の皮膚表面の色差（ΔＥ）を示すグラフである。
【発明の具体的説明】
【0015】
本発明の活性酸素種産生抑制または低減用の組成物は茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含んでなることを一つの特徴としている。茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種の植物加工油を含んでなる組成物を、本発明の組成物とも言う。
【0016】
植物加工油
本発明における植物加工油は、茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種である。植物加工油の製造方法は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、従来公知の製造方法で行うことができる。従来公知の製造方法としては、例えば、圧搾法、抽出法、圧抽法等が挙げられ、特にヤブニッケイ油では蒸留法も適用できる。また、抽出した油分をさらに精製処理に供してもよい。精製処理としては、脱ガム処理、脱酸処理、脱色処理、脱ろう処理、精密ろ過処理が挙げられる。これらの精製処理は、１種単独、または２種以上を組み合わせて行ってもよい。
本発明における植物加工油は、茶の実油、カヤの実油およびヤブニッケイ油からなる群から選択される少なくとも一種である。植物加工油の製造方法は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、従来公知の製造方法で行うことができる。従来公知の製造方法としては、例えば、圧搾法、抽出法、圧抽法等が挙げられ、特にヤブニッケイ油では蒸留法も適用できる。また、抽出した油分をさらに精製処理に供してもよい。精製処理としては、脱ガム処理、脱酸処理、脱色処理、脱ろう処理、精密ろ過処理が挙げられる。これらの精製処理は、１種単独、または２種以上を組み合わせて行ってもよい。
【0017】
茶の実油
本発明における茶の実は、ツバキ科ツバキ属の常緑樹であるチャノキ（Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、別名Ｔｈｅａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）の実であればよく、本発明の効果を妨げない限り特に限定されない。ここで、茶の実は、胚および胚乳が一体化した粒状の種子胚が薄皮に覆われ、更にこの薄皮の上に硬く厚い鬼皮が覆われた殻果状の種子である。
本発明における茶の実は、ツバキ科ツバキ属の常緑樹であるチャノキ（Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、別名Ｔｈｅａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）の実であればよく、本発明の効果を妨げない限り特に限定されない。ここで、茶の実は、胚および胚乳が一体化した粒状の種子胚が薄皮に覆われ、更にこの薄皮の上に硬く厚い鬼皮が覆われた殻果状の種子である。
【0018】
本発明における茶の実油とは、茶の実（種子）に含まれる油成分をいい、茶の種子胚に含まれている。
【0019】
本発明の茶の実油の製造方法は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、例えば、茶の実を圧縮することにより搾油することができる。ここで、圧縮では、茶の実を鬼皮と薄皮に覆われた状態で圧縮しても良いし、また、鬼皮と薄皮を除去してから種子胚を圧縮しても良く、茶の実油の収率の向上の観点から、鬼皮と薄皮を除去し、更に粉砕してから圧縮することが好ましい。上記圧縮には、例えば、直圧式電動搾油機ＫＴ２３－１６０ＥＬ（（株）サン精機）を用いて、最高圧力６９．３ＭＰａ、最高連続加圧時間８時間の条件で圧縮することが挙げられる。また、圧縮の前に、茶の実を乾燥させることが好ましい。
【0020】
本発明の組成物中の茶の実油の含有量は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、組成物における他の成分や、供給源の種類および性質に応じて当業者が適宜決定することができる。茶の実油の含有量は、例えば、組成物全体に対して、１０～５０質量％が挙げられ、好ましくは２０～４０質量％であり、乳化安定性の観点から、より好ましくは２０～３０質量％である。茶の実油は、例えばソックスレー抽出装置で油脂を分離後、その主な脂肪酸組成がオレイン酸１０、リノール酸６、パルミチン酸３の比率であれば油脂の全量が茶の実油であり、それ以外の場合はほかの油脂の混入や茶の実油が使用されていない可能性が高いと推定することができる。なお、茶の実油の脂肪酸組成の比率は、例えば、油脂の構成脂肪酸を三フッ化ホウ素－メタノール法により脂肪酸メチルエステルに変換し、これをガスクロマトグラフ法（ＧＣ法）により分析することで、簡便に測定することができる。
【0021】
カヤの実油
本発明におけるカヤの実は、イチイ科カヤ属の常緑針葉樹であるカヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ）の実であればよく、本発明の効果を妨げない限り特に限定されない。カヤとしては、カヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ）のほか、コツブガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｉｇａｅｎｓｉｓ）、ヒダリマキガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｍａｃｒｏｓｐｅｒｍａ）、ハダカガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｎｕｄａ）、マルミガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｓｐｈａｅｒｉｃａ）、チャボガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｒａｄｉｃａｎｓ）の変種、品種が含まれる。ここで、カヤの実は、胚および胚乳が一体化した粒状の種子胚が薄い内種皮に覆われ、更にこの薄い内種皮の上に硬く厚い外種皮が覆われた殻果状の種子である。
本発明におけるカヤの実は、イチイ科カヤ属の常緑針葉樹であるカヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ）の実であればよく、本発明の効果を妨げない限り特に限定されない。カヤとしては、カヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ）のほか、コツブガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｉｇａｅｎｓｉｓ）、ヒダリマキガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｍａｃｒｏｓｐｅｒｍａ）、ハダカガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｎｕｄａ）、マルミガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｓｐｈａｅｒｉｃａ）、チャボガヤ（Ｔｏｒｒｅｙａ ｎｕｃｉｆｅｒａ ｖａｒ． ｒａｄｉｃａｎｓ）の変種、品種が含まれる。ここで、カヤの実は、胚および胚乳が一体化した粒状の種子胚が薄い内種皮に覆われ、更にこの薄い内種皮の上に硬く厚い外種皮が覆われた殻果状の種子である。
【0022】
本発明におけるカヤの実油とは、カヤの実（種子）に含まれる油成分をいい、カヤの種子胚に多く含まれている。
【0023】
本発明のカヤの実油の製造方法は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、例えば、カヤの実を圧縮することにより搾油することができる。ここで、圧縮では、カヤの実を外種皮と内種皮に覆われた状態で圧縮しても良いし、また、外種皮と内種皮を除去してから種子胚を圧縮しても良く、カヤの実油の収率の向上の観点から、外種皮と内種皮を除去し、更に粉砕してから圧縮することが好ましい。上記圧縮には、例えば、直圧式電動搾油機ＫＴ２３－１６０ＥＬ（（株）サン精機）を用いて、最高圧力６９．３ＭＰａ、最高連続加圧時間８時間の条件で圧縮することが挙げられる。また、カヤの実を圧縮する前に、洗浄、乾燥、灰汁抜き、焙煎してもよい。
【0024】
本発明の組成物中のカヤの実油の含有量は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、組成物における他の成分や、供給源の種類および性質に応じて当業者が適宜決定することができる。カヤの実油の含有量は、例えば、組成物全体に対して、１０～５０質量％が挙げられ、好ましくは２０～４０質量％であり、乳化安定性の観点から、より好ましくは２０～３０質量％である。カヤの実油は、例えばソックスレー抽出装置で油脂を分離後、その主な脂肪酸組成がリノール酸１０、オレイン酸６、シアドン酸１～２の比率であれば油脂の全量がカヤの実油であり、それ以外の場合はほかの油脂の混入やカヤの実油が使用されていない可能性が高いと推定することができる。なお、カヤの実油の脂肪酸組成の比率は、例えば、油脂の構成脂肪酸を三フッ化ホウ素－メタノール法により脂肪酸メチルエステルに変換し、これをガスクロマトグラフ法（ＧＣ法）により分析することで、簡便に測定することができる。
【0025】
ヤブニッケイ油
本発明におけるヤブニッケイは、クスノキ科クスノキ属の常緑樹であるヤブニッケイ（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、別名 マツラニッケイ、クスタブ、クロダモ、英名 Ｊａｐａｎｅｓｅ ｗｉｌｄ Ｃｉｎｎａｍｏｎ）であればよく、本発明の効果を妨げない限り特に限定されない。
本発明におけるヤブニッケイは、クスノキ科クスノキ属の常緑樹であるヤブニッケイ（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、別名 マツラニッケイ、クスタブ、クロダモ、英名 Ｊａｐａｎｅｓｅ ｗｉｌｄ Ｃｉｎｎａｍｏｎ）であればよく、本発明の効果を妨げない限り特に限定されない。
【0026】
本発明におけるヤブニッケイ油は、ヤブニッケイの枝葉、樹皮等から圧搾、抽出、蒸留する等により得ることができる。
【0027】
本発明のヤブニッケイ油の製造方法は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、例えば、ヤブニッケイの生葉、枝、樹皮等を生のまま、もしくは乾燥してから水蒸気蒸留により抽出してもよい。ヤブニッケイ油の収率の向上の観点から、生葉、枝、樹皮等を粉砕してから蒸留することが好ましい。上記蒸留には、例えば、減圧から大気圧まで操作可能なアロマ減圧水蒸気蒸留装置（（株）本村製作所製）を用いて、温度６０℃以上、抽出時間１時間以上の条件で抽出することが挙げられる。
【0028】
本発明の組成物中のヤブニッケイ油の含有量は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されず、組成物における他の成分や、供給源の種類および性質に応じて当業者が適宜決定することができる。ヤブニッケイ油の含有量は、例えば、組成物全体に対して、１０～５０質量％が挙げられ、好ましくは２０～４０質量％であり、乳化安定性の観点から、より好ましくは２０～３０質量％である。本発明の組成物におけるヤブニッケイ油の含有量は、例えば、蒸留法により、一般的な精油定量の手順に従って測定することができる。このような測定は、市販の精油定量装置を用いることにより、簡便に行うことができる。ヤブニッケイ油は、例えば、精油定量装置で分離後、その主な成分組成がシメン３、シネオール２、カンファー１の比率であれば油の全量がヤブニッケイ油であり、それ以外の場合はほかの油の混入やヤブニッケイ油が使用されていない可能性が高いと推定することができる。なお、ヤブニッケイ油の成分組成の比率は、例えば、エタノール等の溶媒に希釈後、これをガスクロマトグラフ質量分析法（ＧＣ－ＭＳ法）により分析することで、簡便に測定することができる。
【0029】
本発明の組成物は、上記植物加工油と共に、所望により経口上許容可能または薬学的に許容可能な添加剤を配合した組成物として提供することができる。上記添加剤として、溶剤、溶解補助剤、溶解剤、滑沢剤、等張化剤、安定化剤、保存剤、防腐剤、界面活性剤、ゲル化剤、調整剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、賦形剤、増粘剤、着色剤、芳香剤、甘味料または香料等が挙げられる。
【0030】
本発明の組成物は、上記植物加工油および所望により経口上許容可能または薬学的に許容可能な添加剤を混合、溶解、分散、懸濁するなどの公知の手法により、調製することができる。また、本発明の組成物の調製においては、本発明の効果を妨げない限り、上記手法により調製された混合物、溶解物、分散物、懸濁物などに、均質化処理、殺菌処理や乾燥処理を施してもよい。
【0031】
また、本発明の組成物の形態は、本発明の効果を妨げない限り、特に制限されず、好ましくは、液状（油状、スラリー状を含む）、半固形状（ペースト状、ゲル状、ゼリー状を含む）または固形状が挙げられ、好ましくは液体状または半固体状である。
【0032】
本発明の組成物の剤形は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、注射剤、錠剤、カプセル剤、丸剤、粉剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、乳剤、液剤、吸入剤、エアロゾル剤、粉末吸入剤、坐剤、軟膏、クリーム剤、ローション、乳液、貼付剤、ゲル剤、点滴剤、点眼剤、点鼻剤等として提供することができる。
【0033】
本発明の組成物の摂取または投与方法としては、特に限定されないが、点滴、静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射、皮内注射等の注射、経口、経粘膜、経皮、鼻腔内、口腔内、腹腔内等による摂取または投与が挙げられる。
【0034】
本発明の組成物としては、食品もしくは飲料等の飲食品、食品添加物等の飲食品添加物、飼料、医薬品、医薬部外品、または化粧料が挙げられる。
【0035】
エマルション組成物
本発明の好ましい実施態様によれば、本発明の組成物はエマルション組成物（乳化組成物と称しても良い）である。本発明のエマルション組成物は、植物加工油を水中に微細かつ安定に分散させる観点から、植物加工油に加えて、界面活性剤およびアルコールを含有することが好ましく、水をさらに含有することがより好ましい。本発明のエマルション組成物において、界面活性剤およびアルコールを含有させることは、水中での乳化の観点、さらに、製造および保管時の安定性の向上、および／または、皮膚適用時の皮膚透過性の向上の観点からも有利である。したがって、上記エマルション組成物は、好ましくは水中油型エマルション組成物（水中油型乳化組成物と称しても良い）である。
本発明の好ましい実施態様によれば、本発明の組成物はエマルション組成物（乳化組成物と称しても良い）である。本発明のエマルション組成物は、植物加工油を水中に微細かつ安定に分散させる観点から、植物加工油に加えて、界面活性剤およびアルコールを含有することが好ましく、水をさらに含有することがより好ましい。本発明のエマルション組成物において、界面活性剤およびアルコールを含有させることは、水中での乳化の観点、さらに、製造および保管時の安定性の向上、および／または、皮膚適用時の皮膚透過性の向上の観点からも有利である。したがって、上記エマルション組成物は、好ましくは水中油型エマルション組成物（水中油型乳化組成物と称しても良い）である。
【0036】
界面活性剤
本発明において使用される界面活性剤としては、特に限定されるものではなく、医薬品、化粧品あるいは食品において使用され、または将来使用されるものが含まれる。
本発明において使用される界面活性剤としては、特に限定されるものではなく、医薬品、化粧品あるいは食品において使用され、または将来使用されるものが含まれる。
【0037】
界面活性剤としては、例えば、ＨＬＢ値が８～１８の界面活性剤が挙げられ、好ましくはＨＬＢ値が９～１２の界面活性剤である。具体的な界面活性剤としては、グリセロリン脂質等のリン脂質、エステル型界面活性剤、エーテル型界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤および両性界面活性剤等が挙げられる。上記グリセロリン脂質としては、例えば、大豆レシチン、卵黄レシチンおよびこれらの酵素処理物等のレシチン、リゾレシチン、ヒドロキシル化レシチン、ケファリン、リゾケファリンまたはプラスマローゲン等が挙げられる。上記エステル型界面活性剤としては、例えば、ショ糖ラウリン酸エステル等のショ糖脂肪酸エステル；ソルビタンカプリル酸モノエステル等のソルビタン脂肪酸エステル；カプリル酸グリセリル等のモノグリセリン脂肪酸エステル；モノステアリン酸ジグリセリル等のポリグリセリン脂肪酸エステル等が挙げられる。上記エーテル型界面活性剤としては、例えば、ポリエチレングリコールモノアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル等が挙げられる。上記陰イオン界面活性剤としては、例えば、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム等のＣ８～Ｃ２４の炭化水素基（好ましくはアルキル基）を有するスルホン酸塩；ラウリン酸ナトリウム等の脂肪酸塩等が挙げられる。上記陽イオン界面活性剤としては、例えば、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベヘニルトリメチルアンモニウム等の第４級アンモニウム塩；ステアリン酸ジエチルアミノエチルアミド乳酸塩、ジラウリルアミン塩酸塩、オレイルアミン乳酸塩等のアミン塩等が挙げられる。上記両性界面活性剤としては、例えば、ヤシ油脂肪酸アミドプロピルジメチルアミノ酢酸ベタイン、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン等のベタイン型両性界面活性剤；β－ラウリルアミノプロピオン酸ナトリウム等のアミノ酸型両性界面活性剤等が挙げられる。上記界面活性剤は、好ましくはリン脂質であり、より好ましくは大豆レシチン等のレシチンである。
【0038】
本発明のエマルション組成物における界面活性剤の含有量は、特に限定されないが、例えば、植物加工油、界面活性剤、およびアルコールの合計に対し、１～９０質量％、好ましくは１０～７０質量％、さらに好ましくは１０～５０質量％とすることができる。
【0039】
アルコール
本発明において使用されるアルコールとしては、特に限定されるものではなく、医薬品あるいは食品として使用され、または将来使用されるものが含まれる。
本発明において使用されるアルコールとしては、特に限定されるものではなく、医薬品あるいは食品として使用され、または将来使用されるものが含まれる。
【0040】
アルコールとしては、エマルション組成物におけるエマルション粒子の粒子径、分散性等の観点から、一価アルコール、二価アルコールまたは三価アルコール等が挙げられる。具体的には、メタノール、エタノール、１－プロパノールもしくは２－プロパノールであるプロパノール、１－ブタノール、２－ブタノール、ベンジルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、およびグリセリン等が挙げられ、好ましくは一価アルコールまたは二価アルコールであり、より好ましくはエタノール、プロピレングリコールである。
【0041】
本発明のエマルション組成物におけるアルコールの含有量は、特に限定されないが、植物加工油、界面活性剤、およびアルコールの合計に対し、例えば、１～９０質量％、好ましくは１０～７０質量％、より好ましくは３０～７０質量％とすることができる。
【0042】
水
本発明において使用される水としては、特に限定されるものではなく、医薬品あるいは食品として使用され、または将来使用されるものが含まれる。かかる水としては、例えば、精製水、イオン交換水、蒸留水、超ろ過水、超純水（例えば、ミリＱ水）、注射用水、生理食塩水等が挙げられ、好ましくは精製水である。
本発明において使用される水としては、特に限定されるものではなく、医薬品あるいは食品として使用され、または将来使用されるものが含まれる。かかる水としては、例えば、精製水、イオン交換水、蒸留水、超ろ過水、超純水（例えば、ミリＱ水）、注射用水、生理食塩水等が挙げられ、好ましくは精製水である。
【0043】
本発明のエマルション組成物における水の含有量は、特に限定されないが、エマルション組成物全体に対し、例えば、９９．９～５０質量％、乳化安定性の観点から、好ましくは９９．５～７０質量％、より好ましくは９９～８０質量％とすることができる。
【0044】
また、本発明のエマルション組成物において、植物加工油、界面活性剤、およびアルコールの合計と水との質量比（植物加工油、界面活性剤、およびアルコールの合計：水）は、例えば、１：１００～１：１が挙げられ、乳化安定性の観点から、好ましくは１：８０～１：２であり、より好ましくは１：５０～１：５である。
【0045】
本発明のエマルション組成物中のエマルション粒子の平均粒子径は、特に限定されるものではないが、２５℃において、例えば１～１０，０００ｎｍ、好ましくは１０～２，０００ｎｍ、より好ましくは５０～６００ｎｍ、さらに好ましくは１００～４５０ｎｍである。なお、エマルション粒子の平均粒径が１,０００ｎｍ以下であるエマルション組成物をナノエマルション組成物とも言う。かかる平均粒子径は、動的光散乱法により測定され、具体的には、後述するＺｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）のような公知の装置を用いて測定することができる。
上記平均粒子径は、エマルション組成物の調製直後の平均粒子径であってもエマルション組成物の調製２４時間後の平均粒子径であってもよいが、エマルション組成物の調製２４時間後の平均粒子径であることが好ましく、エマルション組成物の調製２４時間後の平均粒子径とエマルション組成物の調製直後の平均粒子径とが同様であることがより好ましい。
ここで、エマルション粒子の平均粒子径は、当業者に理解できるように、組成物中の成分の種類、それらの配合比率、ｐＨ、温度等の条件に基づき、適宜調節することができる。
上記平均粒子径は、エマルション組成物の調製直後の平均粒子径であってもエマルション組成物の調製２４時間後の平均粒子径であってもよいが、エマルション組成物の調製２４時間後の平均粒子径であることが好ましく、エマルション組成物の調製２４時間後の平均粒子径とエマルション組成物の調製直後の平均粒子径とが同様であることがより好ましい。
ここで、エマルション粒子の平均粒子径は、当業者に理解できるように、組成物中の成分の種類、それらの配合比率、ｐＨ、温度等の条件に基づき、適宜調節することができる。
【0046】
本発明のエマルション組成物中のエマルション粒子のＰＤＩ（ｐｏｌｙｄｉｓｐｅｒｓｉｔｙ ｉｎｄｅｘ：多分散性指数）は、特に限定されるものではないが、２５℃において、例えば０．０１～５、好ましくは０．０５～１、より好ましくは０．１～０．５である。かかるＰＤＩは、動的光散乱法により測定され、具体的には、後述するＺｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）のような公知の装置を用いて測定することができる。
上記ＰＤＩは、エマルション組成物の調製直後のＰＤＩであってもエマルション組成物の調製２４時間後のＰＤＩであってもよいが、エマルション組成物の調製２４時間後のＰＤＩであることが好ましく、エマルション組成物の調製２４時間後のＰＤＩとエマルション組成物の調製直後のＰＤＩとが同様であることがより好ましい。
上記ＰＤＩは、エマルション組成物の調製直後のＰＤＩであってもエマルション組成物の調製２４時間後のＰＤＩであってもよいが、エマルション組成物の調製２４時間後のＰＤＩであることが好ましく、エマルション組成物の調製２４時間後のＰＤＩとエマルション組成物の調製直後のＰＤＩとが同様であることがより好ましい。
【0047】
また、本発明のエマルション組成物における植物加工油の含有量は、特に限定されないが、エマルション組成物全体に対し、植物加工油の含有量は、例えば、エマルション組成物全体に対して、０．１～３０質量％が挙げられ、好ましくは０．５～１０質量％である。
【0048】
本発明のエマルション組成物の製造方法としては、例えば、油層を調製する工程、好ましくは、所定量の植物加工油、界面活性剤、およびアルコールを混合する工程を含むことができる。上記混合には、ボルテックスミキサー、ホモミキサー等を用いることができる。さらに、上記混合により得られた混合物（以下、油層とも言う）を、撹拌下で水（以下、水層とも言う）と混合する工程を含んでいても良い。かかる撹拌には、超音波ホモジナイザー、真空乳化装置等を用いることができる。
【0049】
また、本発明のエマルション組成物の形態は、本発明の効果を妨げない限り、特に制限されず、好ましくは、液状（油状、スラリー状を含む）、半固形状（ペースト状、ゲル状、ゼリー状を含む）または固形状が挙げられ、好ましくは液体状または半固体状である。
【0050】
本発明のエマルション組成物の剤形は、本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、注射剤、錠剤、カプセル剤、丸剤、粉剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、液剤、吸入剤、エアロゾル剤、粉末吸入剤、坐剤、軟膏、クリーム剤、ローション、乳液、貼付剤、スプレー剤、ゲル剤、点滴剤、点眼剤、点鼻剤等として提供することができる。好ましくは、実施例に示す通り、本発明のエマルション組成物が皮膚に塗布された場合に光保護作用が増強されることから、外用剤（好ましくは、皮膚外用剤）としての剤形であることが好ましく、軟膏、クリーム剤、ローション、乳液、貼付剤、スプレー剤が挙げられる。
【0051】
本発明のエマルション組成物の摂取または投与方法としては、特に限定されないが、点滴、静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射、皮内注射等の注射、経口、経粘膜、経皮、鼻腔内、口腔内、腹腔内等による摂取または投与が挙げられ、好ましくは経皮投与である。
【0052】
本発明のエマルション組成物としては、食品もしくは飲料等の飲食品、食品添加物等の飲食品添加物、飼料、医薬品、医薬部外品、または化粧料が挙げられ、好ましくは、医薬品、医薬部外品、または化粧料である。
【0053】
本発明の植物加工油を含んでなる組成物は、活性酸素種の産生を抑制または低減することができる。したがって、本発明の好ましい態様によれば、本発明の植物加工油を含んでなる組成物は、活性酸素種の産生を抑制または低減のための組成物として提供される。ここで、活性酸素種としては、特に限定されないが、好ましくは、一重項酸素、スーパーオキシド、またはその組合せである。
【0054】
さらに、本発明の植物加工油を含んでなる組成物は、光毒性反応を抑制または低減することができ、光毒性抑制作用や光保護作用を奏することが可能である。したがって、本発明の好ましい別の態様によれば、本発明の組成物は、光毒性抑制または低減のための組成物として提供される。
【0055】
光毒性反応により、例えば、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作が誘発されうる。上記皮膚炎症は発赤や紅斑を主徴としており、皮膚の色調変化との関連性が認められているところ、本発明の植物加工油を含んでなる組成物は後述の実施例に示す皮膚表面の色差（ΔＥ）を低下する作用を有する。ここで、光毒性誘発化合物とは、太陽光に含まれるＵＶＡ、ＵＶＢおよび／または可視光領域の光等の吸収により光励起され、Ｏ２との反応により活性酸素種を産生し、光毒性反応に寄与する性質を有する化合物であれば、特に限定されない。具体的な光毒性誘発化合物としては、例えば、トリフルオペラジンやトリフルオペラジン二塩酸塩等のフェノチアジン誘導体、キノロン系抗生物質、テトラサイクリン系抗生物質、ベンゾフェノン誘導体が挙げられ、好ましくは、トリフルオペラジン二塩酸塩等のフェノチアジン誘導体、キノロン系抗生物質である。
したがって、本発明の好ましい別の態様によれば、本発明の組成物は、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作の改善用組成物として提供される。本明細書において、「改善」とは、確立された病態の改善という「治療」の意味を含むだけでなく、想定される悪化に対して事前に備え、疾患の発生を未然に防ぐ「予防」の意味も含む。
なお、上記組成物としては、皮膚透過性および／または皮膚滞留性の観点から、エマルション組成物が好ましい。
したがって、本発明の好ましい別の態様によれば、本発明の組成物は、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作の改善用組成物として提供される。本明細書において、「改善」とは、確立された病態の改善という「治療」の意味を含むだけでなく、想定される悪化に対して事前に備え、疾患の発生を未然に防ぐ「予防」の意味も含む。
なお、上記組成物としては、皮膚透過性および／または皮膚滞留性の観点から、エマルション組成物が好ましい。
【0056】
さらに、本発明の植物加工油を含んでなる組成物は、光を遮断または吸収することができる。したがって、本発明の好ましい別の態様によれば、本発明の組成物は、光を遮断または吸収のための組成物として提供される。ここで、上記光としては、特に限定されないが、好ましくは、ＵＶＡ、ＵＶＢおよび／または可視光領域の光である。
【0057】
本発明の一つの実施態様によれば、本発明の組成物を適用する対象としては、例えば動物が挙げられ、好ましくは、哺乳類、鳥類、は虫類、両生類、魚類等であり、より好ましくは、ヒト、イヌ、ネコである。上記対象は健常者（健常動物）であっても患者（患者動物）であってもよい。
【0058】
本発明の別の態様によれば、対象の活性酸素種産生または光毒性を抑制または低減する方法であって、植物加工油の有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法が提供される。また、対象の、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作を改善する方法であって、植物加工油の有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法が提供される。また、対象において光を遮断または吸収する方法であって、植物加工油の有効量を、それを必要とする対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、方法が提供される。
【0059】
本発明のさらに別の態様によれば、植物加工油を有効量含んでなる組成物を対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、対象の活性酸素種産生または光毒性を抑制または低減する方法が提供される。また、植物加工油を有効量含んでなる組成物を対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、対象の、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作を改善する方法が提供される。また、植物加工油を有効量含んでなる組成物を対象に投与することまたは摂取させることを含んでなる、対象において光を遮断または吸収する方法が提供される。
【0060】
本発明のさらに別の態様によれば、上述の、活性酸素種産生または光毒性を抑制もしくは低減する方法、および光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作を改善する方法、および光を遮断または吸収する方法は、対象が健常者である場合、非治療的方法とされる。ここで、上述の非治療的とは、医療行為を含まない概念、すなわち人間を手術、治療または診断する方法を含まない概念、より具体的には医師または医師の指示を受けた者が人間に対して手術、治療または診断を実施する方法を含まない概念である。本発明の活性酸素種産生または光毒性を抑制または低減する方法、および光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作を改善する方法、および光を遮断または吸収する方法は、本発明の組成物について、本明細書に記載された内容に従って実施することができる。
【0061】
本発明の植物加工油の有効量および本発明の組成物の投与回数は、特に限定されず、植物加工油の種類、純度、対象の種類、性質、性別、年齢、症状等に応じて当業者によって、適宜決定される。経口摂取または経口投与の場合、かかる有効量の好適な範囲としては、例えば、０．０１～１０００ｍｇ／体重ｋｇ／日が挙げられ、好ましくは０．０５～１０００ｍｇ／体重ｋｇ／日、より好ましくは０．１～５００ｍｇ／体重ｋｇ／日である。また、経皮摂取または経皮投与の場合、かかる有効量の好適な範囲としては、成人一日当たり、例えば、０．０１～２０ｇが挙げられ、好ましくは０．０５～１０ｇである。投与回数は、例えば、１日に１～５回が挙げられ、好ましくは１日に１～３回である。
【0062】
また、本発明の別の態様によれば、活性酸素種産生または光毒性の抑制または低減のための組成物の製造における、植物加工油の使用が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作の改善のための組成物の製造における、植物加工油の使用が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、光を遮断または吸収するための組成物の製造における、植物加工油の使用が提供される。
【0063】
また、本発明の別の態様によれば、活性酸素種産生または光毒性の抑制または低減のための組成物としての、植物加工油の使用が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作の改善のための組成物としての、植物加工油の使用が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、光を遮断または吸収するための組成物としての、植物加工油の使用が提供される。本発明の好ましい態様によれば、上記使用は非治療的使用である。
【0064】
また、本発明の別の態様によれば、活性酸素種産生または光毒性の抑制または低減のための、植物加工油の使用が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作の改善のための、植物加工油の使用が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、光を遮断または吸収するための、植物加工油の使用が提供される。本発明の好ましい態様によれば、上記使用は非治療的使用である。
【0065】
また、本発明の別の態様によれば、活性酸素種産生または光毒性の抑制または低減のための、植物加工油が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、光毒性誘発化合物による皮膚炎症、皮膚がん、色素沈着、しわ形成または皮膚感作の改善のための、植物加工油が提供される。また、本発明の好ましい別の態様によれば、光を遮断または吸収するための植物加工油が提供される。
【0066】
上記の使用、植物加工油の態様はいずれも、本発明の組成物や方法に関する記載に準じて実施することができる。
【実施例0067】
以下、試験例、参考例により、本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術範囲は、これらの例示に限定されるものではない。なお、特に記載しない限り、本発明で用いられる全部のパーセンテージや比率は質量による。また、特に記載しない限り、本明細書に記載の単位や測定方法はJIS規格による。
【0068】
試験例、調製例で使用した物質は以下の通りである。
・イミダゾール：富士フィルム和光純薬株式会社
・ｐ－ニトロソジメチルアニリン（以下、ＲＮＯともいう）：シグマ アルドリッチ社
・キニン塩酸塩（以下、ＱＮともいう）：富士フィルム和光純薬株式会社
・ニトロブルーテトラゾリウムクロリド（ＮＢＴ））：富士フィルム和光純薬株式会社
・ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：富士フィルム和光純薬株式会社
・大豆レシチン（Ｌｅｃｉｔｈｉｎ，ｆｒｏｍ Ｓｏｙｂｅａｎ（レシチン， 大豆由来））：富士フィルム和光純薬株式会社
・プロピレングリコール：富士フィルム和光純薬株式会社
・トリフルオペラジン二塩酸塩：富士フィルム和光純薬株式会社
・Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０：富士フィルム和光純薬株式会社
・イミダゾール：富士フィルム和光純薬株式会社
・ｐ－ニトロソジメチルアニリン（以下、ＲＮＯともいう）：シグマ アルドリッチ社
・キニン塩酸塩（以下、ＱＮともいう）：富士フィルム和光純薬株式会社
・ニトロブルーテトラゾリウムクロリド（ＮＢＴ））：富士フィルム和光純薬株式会社
・ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：富士フィルム和光純薬株式会社
・大豆レシチン（Ｌｅｃｉｔｈｉｎ，ｆｒｏｍ Ｓｏｙｂｅａｎ（レシチン， 大豆由来））：富士フィルム和光純薬株式会社
・プロピレングリコール：富士フィルム和光純薬株式会社
・トリフルオペラジン二塩酸塩：富士フィルム和光純薬株式会社
・Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０：富士フィルム和光純薬株式会社
【0069】
試験例、調製例で使用した機器は以下の通りである。
・搾油機：直圧式電動搾油機ＫＴ２３－１６０ＥＬ（（株）サン精機製）
・アロマ減圧水蒸気蒸留装置：アロマ減圧水蒸気蒸留装置（（株）本村製作所製）
・耐光性試験機：アトラスサンセットＣＰＳ＋（アトラス マテリアル テクノロジーＬＣＣ製）
ここで、アトラスサンセットＣＰＳ＋は擬似太陽光の照射のためにキセノン（Ｘｅ）アークランプを備えていた。また、アトラスサンセットＣＰＳ＋では短波長のＵＶをカットし実際の太陽光を模すためのフィルターを用いてＣＩＥ８５／１９８９ ｄａｙｌｉｇｈｔ ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔに対応した疑似太陽光を照射した。照射強度は２５０Ｗ／ｍ２に設定した。アトラスサンセットＣＰＳ＋内の温度は２８°Ｃに保った。
・９６－ウェルマイクロプレート：ＡＧＣテクノガラス社製、品番３８８１－０９６；クリア、平底
・マイクロプレート分光計：ＳＡＦＩＲＥマイクロプレート分光計（ＴＥＣＡＮ社製）
・ボルテックスミキサー：ＶＯＲＴＥＸ ＧＥＮＩＵＳ ３（ＩＫＡ社製）
・超音波ホモジナイザー：ＵＬＴＲＡＳＯＮＩＣ ＨＯＭＯＧＥＮＩＺＥＲ Ｓｍｕｒｔ ＮＲ－５０Ｍ（マイクロテック・ニチオン社製）
・ナノ粒子径分析器：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ （Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）
・電子顕微鏡親水化処理装置：ＨＤＴ－４００（日本電子株式会社製）
・透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）：Ｈ－７６００（株式会社日立製作所製）
・ブラックライト：ＦＬ１５ＢＬ－Ｂ（ナショナル製）
・ＵＶメーター：ＵＶＡ ｄｅｔｅｃｔｏｒ Ｄｒ． Ｈｏｅｎｌｅ ＃００３７（Ｄｒ．Ｈｏｅｎｌｅ社製）
・色差計：ＮＦ３３３（日本電色工業社製）
・搾油機：直圧式電動搾油機ＫＴ２３－１６０ＥＬ（（株）サン精機製）
・アロマ減圧水蒸気蒸留装置：アロマ減圧水蒸気蒸留装置（（株）本村製作所製）
・耐光性試験機：アトラスサンセットＣＰＳ＋（アトラス マテリアル テクノロジーＬＣＣ製）
ここで、アトラスサンセットＣＰＳ＋は擬似太陽光の照射のためにキセノン（Ｘｅ）アークランプを備えていた。また、アトラスサンセットＣＰＳ＋では短波長のＵＶをカットし実際の太陽光を模すためのフィルターを用いてＣＩＥ８５／１９８９ ｄａｙｌｉｇｈｔ ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔに対応した疑似太陽光を照射した。照射強度は２５０Ｗ／ｍ２に設定した。アトラスサンセットＣＰＳ＋内の温度は２８°Ｃに保った。
・９６－ウェルマイクロプレート：ＡＧＣテクノガラス社製、品番３８８１－０９６；クリア、平底
・マイクロプレート分光計：ＳＡＦＩＲＥマイクロプレート分光計（ＴＥＣＡＮ社製）
・ボルテックスミキサー：ＶＯＲＴＥＸ ＧＥＮＩＵＳ ３（ＩＫＡ社製）
・超音波ホモジナイザー：ＵＬＴＲＡＳＯＮＩＣ ＨＯＭＯＧＥＮＩＺＥＲ Ｓｍｕｒｔ ＮＲ－５０Ｍ（マイクロテック・ニチオン社製）
・ナノ粒子径分析器：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ （Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）
・電子顕微鏡親水化処理装置：ＨＤＴ－４００（日本電子株式会社製）
・透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）：Ｈ－７６００（株式会社日立製作所製）
・ブラックライト：ＦＬ１５ＢＬ－Ｂ（ナショナル製）
・ＵＶメーター：ＵＶＡ ｄｅｔｅｃｔｏｒ Ｄｒ． Ｈｏｅｎｌｅ ＃００３７（Ｄｒ．Ｈｏｅｎｌｅ社製）
・色差計：ＮＦ３３３（日本電色工業社製）
【0070】
調製例１Ａ：茶の実油の調製方法
まず、収穫後の茶の実を乾燥した。その後、得られた茶の実乾燥物の鬼皮を除去した後、搾油機を用いて、最高圧力６９．３ＭＰａ、最高連続加圧時間８時間の条件で圧縮することで、茶の実油を得た。
まず、収穫後の茶の実を乾燥した。その後、得られた茶の実乾燥物の鬼皮を除去した後、搾油機を用いて、最高圧力６９．３ＭＰａ、最高連続加圧時間８時間の条件で圧縮することで、茶の実油を得た。
【0071】
試験例１－１：茶の実油の活性酸素種（ＲＯＳ）アッセイ
調製例１Ａで得られた茶の実油についてＲＯＳアッセイを行った。
ＲＯＳアッセイは被験物質が疑似太陽光照射下で産生する活性酸素種のうち一重項酸素（以下、ＳＯともいう）およびスーパーオキシドアニオン（以下、ＳＡともいう）を測定する試験法であり、被験物質の光反応性を評価する試験法である。ＳＯはイミダゾールをＳＯのアクセプタに用いて、ｐ－ニトロソジメチルアニリン（ＲＮＯ）水溶液の４４０ｎｍにおける吸光度変化からその評価を行った。具体的には、茶の実油（２００μＭ）、ＱＮ（５０μＭ）、ＲＮＯ（５０μＭ）およびイミダゾール（５０μＭ）を含む２０ｍＭ ＮａＰＢ（ｐＨ７．４）２００μＬを９６－ウェルマイクロプレートに分注し、析出物の有無を確認後、マイクロプレート分光計を用いて、４４０ｎｍの吸光値を測定した。その後、プレートを耐光性試験機に入れ石英の蓋を装着し、擬似太陽光を１時間照射した。照射後のプレートを振盪した後、４４０ｎｍの吸光値を再び測定した。
調製例１Ａで得られた茶の実油についてＲＯＳアッセイを行った。
ＲＯＳアッセイは被験物質が疑似太陽光照射下で産生する活性酸素種のうち一重項酸素（以下、ＳＯともいう）およびスーパーオキシドアニオン（以下、ＳＡともいう）を測定する試験法であり、被験物質の光反応性を評価する試験法である。ＳＯはイミダゾールをＳＯのアクセプタに用いて、ｐ－ニトロソジメチルアニリン（ＲＮＯ）水溶液の４４０ｎｍにおける吸光度変化からその評価を行った。具体的には、茶の実油（２００μＭ）、ＱＮ（５０μＭ）、ＲＮＯ（５０μＭ）およびイミダゾール（５０μＭ）を含む２０ｍＭ ＮａＰＢ（ｐＨ７．４）２００μＬを９６－ウェルマイクロプレートに分注し、析出物の有無を確認後、マイクロプレート分光計を用いて、４４０ｎｍの吸光値を測定した。その後、プレートを耐光性試験機に入れ石英の蓋を装着し、擬似太陽光を１時間照射した。照射後のプレートを振盪した後、４４０ｎｍの吸光値を再び測定した。
【0072】
ＳＡはニトロブルーテトラゾリウムクロリド（ＮＢＴ）の還元によって生成されるニトロブルージホルマザンを５６０ｎｍにおける吸光度変化より評価した。具体的には、茶の実油（２００μＭ）、ＱＮ（５０μＭ）およびＮＢＴ（５０ｍＭ）を含む２０ｍＭ ＮａＰＢ（ｐＨ７．４）２００μＬを９６－ウェルマイクロプレートに分注し、析出物の有無を確認後、ＳＡＦＩＲＥマイクロプレート分光計を用いて、５６０ｎｍの吸光値を測定した。その後、プレートを耐光性試験機に入れ石英の蓋を装着し、擬似太陽光を１時間照射した。照射後のプレートを振盪した後、５６０ｎｍの吸光値を再び測定した。
【0073】
抗酸化作用を評価するにあたり、陽性対照であるＱＮと茶の実油をともに被験物質として測定試料に添加することで茶の実油がＱＮによるＲＯＳ産生をどれほど抑制したか算出した。その結果、茶の実油においては、ＱＮによるＲＯＳ産生をＳＯでは８６％、ＳＡでは４６％まで抑制した。
【0074】
調製例１Ｂ：カヤの実油の調製方法
まず、収穫後のカヤの実を洗浄した後、乾燥した。乾燥したカヤの実を、搾油機を用いて、最高圧力６９．３ＭＰａ、最高連続加圧時間８時間の条件で圧縮することで、カヤの実油を得た。
まず、収穫後のカヤの実を洗浄した後、乾燥した。乾燥したカヤの実を、搾油機を用いて、最高圧力６９．３ＭＰａ、最高連続加圧時間８時間の条件で圧縮することで、カヤの実油を得た。
【0075】
試験例１－２：カヤの実油の活性酸素種（ＲＯＳ）アッセイ
調製例１Ａで得られた茶の実油の代わりに調製例１Ｂで得られたカヤの実油を用いたこと以外は、試験例１－１と同様にしてＲＯＳアッセイを行った。
その結果、カヤの実油においては、ＱＮによるＲＯＳ産生をＳＯでは９２％、ＳＡでは４１％まで抑制した。
調製例１Ａで得られた茶の実油の代わりに調製例１Ｂで得られたカヤの実油を用いたこと以外は、試験例１－１と同様にしてＲＯＳアッセイを行った。
その結果、カヤの実油においては、ＱＮによるＲＯＳ産生をＳＯでは９２％、ＳＡでは４１％まで抑制した。
【0076】
調製例１Ｃ：ヤブニッケイ油の調製方法
まず、収穫後のヤブニッケイの枝葉を、アロマ減圧水蒸気蒸留装置を用いておよそ９０～１００℃で１時間水蒸気蒸留して得た蒸留物の下層部の水相から、上層部の油相を分離採取することにより、ヤブニッケイ油を得た。
まず、収穫後のヤブニッケイの枝葉を、アロマ減圧水蒸気蒸留装置を用いておよそ９０～１００℃で１時間水蒸気蒸留して得た蒸留物の下層部の水相から、上層部の油相を分離採取することにより、ヤブニッケイ油を得た。
【0077】
試験例１－３：ヤブニッケイ油の活性酸素種（ＲＯＳ）アッセイ
調製例１Ａで得られた茶の実油の代わりに調製例１Ｃで得られたヤブニッケイ油を用いたこと以外は、試験例１－１と同様にしてＲＯＳアッセイを行った。
その結果、ヤブニッケイ油においては、ＱＮによるＲＯＳ産生をＳＯでは９７％、ＳＡでは９３％まで抑制した。
調製例１Ａで得られた茶の実油の代わりに調製例１Ｃで得られたヤブニッケイ油を用いたこと以外は、試験例１－１と同様にしてＲＯＳアッセイを行った。
その結果、ヤブニッケイ油においては、ＱＮによるＲＯＳ産生をＳＯでは９７％、ＳＡでは９３％まで抑制した。
【0078】
調製例２Ａ：茶の実油含有組成物の調製
調製例２Ａ－１：油層検討
茶の実油（以下、ＴＳともいう）、界面活性剤として大豆レシチンおよびアルコールとしてプロピレングリコールを使用し、その混合物をボルテックスミキサーにより１０分間ボルテックスにかけ、油層とした。その後、超音波ホモジナイザーでの撹拌下、過量となる精製水５０ｍＬに油層１．０ｍＬを滴下し乳化の有無を観察した。乳化の有無の観察としては、具体的には、健常な視力（視力１．０以上）を有するパネルが、照度１０００ルクスの光の下、得られたエマルション組成物と目との距離を垂直方向で２０ｃｍ離して行い、無色透明で沈殿物が認められない場合、乳化したものと判断した。
表１に結果を示す。表１中、乳化を示した組成を丸、調製２４時間後に相分離が見られず安定だった組成比を二重丸で示した。二重丸で示したうち、組成物中の茶の実油含量が最も高い組成比（茶の実油：３０質量％、大豆レシチン：４０質量％、プロピレングリコール：３０質量％）を最適化された油層組成比とした。
調製例２Ａ－１：油層検討
茶の実油（以下、ＴＳともいう）、界面活性剤として大豆レシチンおよびアルコールとしてプロピレングリコールを使用し、その混合物をボルテックスミキサーにより１０分間ボルテックスにかけ、油層とした。その後、超音波ホモジナイザーでの撹拌下、過量となる精製水５０ｍＬに油層１．０ｍＬを滴下し乳化の有無を観察した。乳化の有無の観察としては、具体的には、健常な視力（視力１．０以上）を有するパネルが、照度１０００ルクスの光の下、得られたエマルション組成物と目との距離を垂直方向で２０ｃｍ離して行い、無色透明で沈殿物が認められない場合、乳化したものと判断した。
表１に結果を示す。表１中、乳化を示した組成を丸、調製２４時間後に相分離が見られず安定だった組成比を二重丸で示した。二重丸で示したうち、組成物中の茶の実油含量が最も高い組成比（茶の実油：３０質量％、大豆レシチン：４０質量％、プロピレングリコール：３０質量％）を最適化された油層組成比とした。
【表1】
【0079】
調製例２Ａ－２：水層検討
動的光散乱法を用いて水の組成比を決定した。２５℃、超音波ホモジナイザーでの撹拌下で各量の精製水（５０、４０、３０、２０、１０、５、１ｍＬ）に、調製例２Ａ－１で得られた油層を滴下し、茶の実油含有ナノエマルション組成物（以下、ＮＥ／ＴＳともいう）を調製した。その後、ＮＥ／ＴＳを精製水中に分散させ希釈し（１００μｇ／ｍｌ）、測定試料とした。ナノ粒子径分析器を用いて、動的光散乱（ｄｙｎａｍｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ：ＤＬＳ）法により粒度分布を測定し、平均粒子径およびＰＤＩを算出した。調製２４時間後についても測定を行った。２４時間安定であり、ＴＳ含量が最も高いものを最適化された水の組成比とし、ＮＥ／ＴＳを調製した。
動的光散乱法を用いて水の組成比を決定した。２５℃、超音波ホモジナイザーでの撹拌下で各量の精製水（５０、４０、３０、２０、１０、５、１ｍＬ）に、調製例２Ａ－１で得られた油層を滴下し、茶の実油含有ナノエマルション組成物（以下、ＮＥ／ＴＳともいう）を調製した。その後、ＮＥ／ＴＳを精製水中に分散させ希釈し（１００μｇ／ｍｌ）、測定試料とした。ナノ粒子径分析器を用いて、動的光散乱（ｄｙｎａｍｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ：ＤＬＳ）法により粒度分布を測定し、平均粒子径およびＰＤＩを算出した。調製２４時間後についても測定を行った。２４時間安定であり、ＴＳ含量が最も高いものを最適化された水の組成比とし、ＮＥ／ＴＳを調製した。
【0080】
各組成比でのＮＥ／ＴＳ中に分散する油滴の平均粒子径およびＰＤＩを表２に示す。ＮＥ／ＴＳは組成比の違いに関わらず、ナノサイズの微粒子を形成した。調製直後では、各ＮＥ／ＴＳの平均粒子径はおよそ２００ｎｍと小さく、ＰＤＩはおよそ０．３０と均一な粒子を形成することを確認した。調製２４時間後では、組成比１：５０～１：５のＮＥ／ＴＳにおいて、平均粒子径およびＰＤＩは調製直後と同様の値を示し、均一で安定な微粒子であると推察される。一方、組成比１：１のＮＥ／ＴＳでは調製２４時間後に目視で相分離を確認した。これらの結果より、２４時間において充分な安定性を示し、ＴＳ含量が最も高い１：５を油層に対する水の比率として選択し、以降の試験（試験例２、３）を進めた。
【0081】
【表2】
【0082】
調製例２Ｂ：カヤの実油含有組成物の調製
調製例１Ｂで得られたカヤの実油、界面活性剤として大豆レシチンおよびアルコールとしてプロピレングリコールを使用し、その混合物をボルテックスミキサーにより１０分間ボルテックスにかけ、油層とした。このときの組成は、カヤの実油：３０質量％、大豆レシチン：４０質量％、プロピレングリコール：３０質量％である。その後、超音波ホモジナイザーでの撹拌下、過量となる精製水５０ｍＬに油層１．０ｍＬを滴下し乳化の有無を観察した。なお、乳化の有無は調製例２Ａ－１と同様に行った。その結果、当該組成物は乳化を示し、動的光散乱（ｄｙｎａｍｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ：ＤＬＳ）法により粒度分布を測定したところ、平均粒子径は３４０ｎｍであり、ＰＤＩは０．３５であった。調製２４時間後についても測定を行ったところ、平均粒子径は３７０ｎｍであり、ＰＤＩは０．３３であった。
調製例１Ｂで得られたカヤの実油、界面活性剤として大豆レシチンおよびアルコールとしてプロピレングリコールを使用し、その混合物をボルテックスミキサーにより１０分間ボルテックスにかけ、油層とした。このときの組成は、カヤの実油：３０質量％、大豆レシチン：４０質量％、プロピレングリコール：３０質量％である。その後、超音波ホモジナイザーでの撹拌下、過量となる精製水５０ｍＬに油層１．０ｍＬを滴下し乳化の有無を観察した。なお、乳化の有無は調製例２Ａ－１と同様に行った。その結果、当該組成物は乳化を示し、動的光散乱（ｄｙｎａｍｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ：ＤＬＳ）法により粒度分布を測定したところ、平均粒子径は３４０ｎｍであり、ＰＤＩは０．３５であった。調製２４時間後についても測定を行ったところ、平均粒子径は３７０ｎｍであり、ＰＤＩは０．３３であった。
【0083】
調製例２Ｃ：ヤブニッケイ油含有組成物の調製
調製例１Ｃで得られたヤブニッケイ油、界面活性剤として大豆レシチンおよびアルコールとしてプロピレングリコールを使用し、その混合物をボルテックスミキサーにより１０分間ボルテックスにかけ、油層とした。このときの組成は、ヤブニッケイ油：３０質量％、大豆レシチン：４０質量％、プロピレングリコール：３０質量％である。その後、超音波ホモジナイザーでの撹拌下、過量となる精製水５０ｍＬに油層１．０ｍＬを滴下し乳化の有無を観察した。なお、乳化の有無は調製例２Ａ－１と同様に行った。その結果、当該組成物は乳化を示し、動的光散乱（ｄｙｎａｍｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ：ＤＬＳ）法により粒度分布を測定したところ、平均粒子径は２６０ｎｍであり、ＰＤＩは０．４１であった。調製２４時間後についても測定を行ったところ、平均粒子径は２９０ｎｍであり、ＰＤＩは０．４５であった。
調製例１Ｃで得られたヤブニッケイ油、界面活性剤として大豆レシチンおよびアルコールとしてプロピレングリコールを使用し、その混合物をボルテックスミキサーにより１０分間ボルテックスにかけ、油層とした。このときの組成は、ヤブニッケイ油：３０質量％、大豆レシチン：４０質量％、プロピレングリコール：３０質量％である。その後、超音波ホモジナイザーでの撹拌下、過量となる精製水５０ｍＬに油層１．０ｍＬを滴下し乳化の有無を観察した。なお、乳化の有無は調製例２Ａ－１と同様に行った。その結果、当該組成物は乳化を示し、動的光散乱（ｄｙｎａｍｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ：ＤＬＳ）法により粒度分布を測定したところ、平均粒子径は２６０ｎｍであり、ＰＤＩは０．４１であった。調製２４時間後についても測定を行ったところ、平均粒子径は２９０ｎｍであり、ＰＤＩは０．４５であった。
【0084】
試験例２：茶の実油含有組成物の形状観察
透過型電子顕微鏡を用いてＮＥ／ＴＳの形状観察を行った。電子顕微鏡親水化処理装置により親水化処理したフォルムバール膜貼付メッシュ（日新ＥＭ株式会社）に、ＮＥ／ＴＳを５μＬ添加し、３０分静置した後、１％タングステンリン酸溶液にて染色し、観察を行った。ＴＥＭは８０ｋＶの電圧下で作動させた。
透過型電子顕微鏡を用いてＮＥ／ＴＳの形状観察を行った。電子顕微鏡親水化処理装置により親水化処理したフォルムバール膜貼付メッシュ（日新ＥＭ株式会社）に、ＮＥ／ＴＳを５μＬ添加し、３０分静置した後、１％タングステンリン酸溶液にて染色し、観察を行った。ＴＥＭは８０ｋＶの電圧下で作動させた。
【0085】
調製直後および調製２４時間後における、ＮＥ／ＴＳの形状のＴＥＭによる観察結果を図１に示す。調製直後および調製２４時間後において直径約２００ｎｍの均一で球形な微粒子が観察された。調製例２Ａ－２、試験区２－６でのＤＬＳによる検討では、ＮＥ／ＴＳの平均粒子径は調製直後に２１９ｎｍ、調製２４時間後に２３０ｎｍを示しており、ＴＥＭによる観察で確認された粒子径と同様の粒子径であった。
【0086】
試験例３：茶の実油含有組成物を用いたｉｎ ｖｉｖｏ光毒性試験
実験動物としては、７～１２週令、体重約２１０～４００ｇのＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ系雄性ラット（日本エスエルシー株式会社）を用いた。ラットは室温２４±１℃、湿度５５±５％、および明暗サイクル１２時間で維持された動物飼育施設にて自由摂餌と飲水が可能な環境で飼育された。全ての動物実験は静岡県立大学実験動物倫理委員会のガイドラインに準じて実施した。
ｉｎ ｖｉｖｏ光毒性試験では、ＵＶ無照射・無処置群、ＵＶ照射・無処置群、ＵＶ照射・ＴＳ非含有ＮＥ塗布群、ＵＶ照射・ＴＳ塗布群、およびＵＶ照射・ＮＥ／ＴＳ塗布群の５群に分けて、各試験群４匹で試験を行った。ここで、ＵＶ照射・ＴＳ非含有ＮＥ塗布群で用いたＴＳを含有しないナノエマルション組成物は、ＮＥ／ＴＳ組成からＴＳのみを除いたサスペンションである。また、ＵＶ照射・ＴＳ塗布群で用いたＴＳは、希釈していないＴＳそのものである。
ＵＶ照射・ＴＳ非含有ＮＥ塗布群、ＵＶ照射・ＴＳ塗布群、ＵＶ照射・ＮＥ／ＴＳ塗布群では、それぞれ、ＴＳを含有しないナノエマルション、ＴＳ、および調製例２Ａ－２で得られたＮＥ／ＴＳをラット背部に塗布（１０μＬ／ｃｍ２）し、アルミホイルで覆いサージカルテープおよび自着生伸縮包帯でアルミホイルを固定した。同時に光毒性誘発化合物であるトリフルオペラジン二塩酸塩（ＴＦ）をＴｗｅｅｎ（登録商標）２０水溶液（０．０５ｗ／ｖ％）に溶解させ、経口投与（１００ｍｇ／ｋｇ）させた。ＵＶ無照射・無処置群およびＵＶ照射・無処置群では、塗布は行わないものの、ＴＦの経口投与は上記と同様に行った。
ＴＦ経口投与３時間後に固定を外し、皮膚を生理食塩水にて洗い流した後、ブラックライトを用いてＵＶＡとして約１．０ｍＷ／ｃｍ２の強度で照射量が１０Ｊ／ｃｍ２となるまで照射した。照射強度はＵＶＡの強度としてＵＶメーターを用いて確認した。
照射前および照射２４時間後に、色差計を用いて皮膚表面の色調を計測した。色差は色調を３次元の軸上に表現するＬ＊ａ＊ｂ＊ｓｙｓｔｅｍ（ＣＩＥ推奨）により記録した。輝度（Ｌ＊）は黒（Ｌ＊＝０）から白（Ｌ＊＝１００）までの間で明るさを表し、色相（ａ＊）は赤（ａ＊＝１００）および緑（ａ＊＝－１００）間のバランスを表し、彩度（ｂ＊）は黄色（ｂ＊＝１００）および青（ｂ＊＝－１００）間のバランスを表す。ＵＶ照射前後の皮膚表面の色差（ΔＥ）を以下の式より算出し、光毒性の指標とした。
各データは平均値で示し、各データの統計処理は、ａ ｏｎｅ－ｗａｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ（ＡＮＯＶＡ）を用いて分散分析を行った後、Ｔｕｋｅｙの多重比較検定によって統計学的処理を行った。
実験動物としては、７～１２週令、体重約２１０～４００ｇのＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ系雄性ラット（日本エスエルシー株式会社）を用いた。ラットは室温２４±１℃、湿度５５±５％、および明暗サイクル１２時間で維持された動物飼育施設にて自由摂餌と飲水が可能な環境で飼育された。全ての動物実験は静岡県立大学実験動物倫理委員会のガイドラインに準じて実施した。
ｉｎ ｖｉｖｏ光毒性試験では、ＵＶ無照射・無処置群、ＵＶ照射・無処置群、ＵＶ照射・ＴＳ非含有ＮＥ塗布群、ＵＶ照射・ＴＳ塗布群、およびＵＶ照射・ＮＥ／ＴＳ塗布群の５群に分けて、各試験群４匹で試験を行った。ここで、ＵＶ照射・ＴＳ非含有ＮＥ塗布群で用いたＴＳを含有しないナノエマルション組成物は、ＮＥ／ＴＳ組成からＴＳのみを除いたサスペンションである。また、ＵＶ照射・ＴＳ塗布群で用いたＴＳは、希釈していないＴＳそのものである。
ＵＶ照射・ＴＳ非含有ＮＥ塗布群、ＵＶ照射・ＴＳ塗布群、ＵＶ照射・ＮＥ／ＴＳ塗布群では、それぞれ、ＴＳを含有しないナノエマルション、ＴＳ、および調製例２Ａ－２で得られたＮＥ／ＴＳをラット背部に塗布（１０μＬ／ｃｍ２）し、アルミホイルで覆いサージカルテープおよび自着生伸縮包帯でアルミホイルを固定した。同時に光毒性誘発化合物であるトリフルオペラジン二塩酸塩（ＴＦ）をＴｗｅｅｎ（登録商標）２０水溶液（０．０５ｗ／ｖ％）に溶解させ、経口投与（１００ｍｇ／ｋｇ）させた。ＵＶ無照射・無処置群およびＵＶ照射・無処置群では、塗布は行わないものの、ＴＦの経口投与は上記と同様に行った。
ＴＦ経口投与３時間後に固定を外し、皮膚を生理食塩水にて洗い流した後、ブラックライトを用いてＵＶＡとして約１．０ｍＷ／ｃｍ２の強度で照射量が１０Ｊ／ｃｍ２となるまで照射した。照射強度はＵＶＡの強度としてＵＶメーターを用いて確認した。
照射前および照射２４時間後に、色差計を用いて皮膚表面の色調を計測した。色差は色調を３次元の軸上に表現するＬ＊ａ＊ｂ＊ｓｙｓｔｅｍ（ＣＩＥ推奨）により記録した。輝度（Ｌ＊）は黒（Ｌ＊＝０）から白（Ｌ＊＝１００）までの間で明るさを表し、色相（ａ＊）は赤（ａ＊＝１００）および緑（ａ＊＝－１００）間のバランスを表し、彩度（ｂ＊）は黄色（ｂ＊＝１００）および青（ｂ＊＝－１００）間のバランスを表す。ＵＶ照射前後の皮膚表面の色差（ΔＥ）を以下の式より算出し、光毒性の指標とした。
【数1】
【0087】
本試験における光毒性反応は発赤や紅斑を主徴としており、皮膚の色調変化との関連性が認められている。ＵＶ照射前および照射２４時間後における色調を測定しその変化（ΔＥ）を算出し皮膚炎症の指標とし、その結果を図２に示す。ＵＶ照射・ＴＳ非含有ＮＥ塗布群およびＵＶ照射・ＴＳ塗布群では、ＵＶ照射・無処置群と比して、ΔＥの亢進を抑制した。さらに、ＵＶ照射・ＮＥ／ＴＳ塗布群では、ＵＶ照射・無処置群と比して、ΔＥの亢進を有意に抑制した（＊：p<0.01 vs ＵＶ照射・無処置群）。したがって、ＮＥ／ＴＳによるＴＳの光保護作用増強が示唆された。
【図1】
【図2】
