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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023117427
(43)【公開日】2023-08-24
(54)【発明の名称】皮膚外用剤
(51)【国際特許分類】
A61K 8/64 20060101AFI20230817BHJP
A61Q 19/00 20060101ALI20230817BHJP
A61P 17/16 20060101ALI20230817BHJP
A61K 38/16 20060101ALI20230817BHJP
A61P 17/02 20060101ALI20230817BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230817BHJP
A61P 17/14 20060101ALI20230817BHJP
A61Q 7/00 20060101ALI20230817BHJP
【ＦＩ】
A61K8/64
A61Q19/00
A61P17/16
A61K38/16
A61P17/02
A61P43/00 107
A61P17/14
A61Q7/00
【審査請求】未請求
【請求項の数】2
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2022020003
(22)【出願日】2022-02-11
(71)【出願人】
【識別番号】508001073
【氏名又は名称】株式会社シーエスラボ
(71)【出願人】
【識別番号】522057283
【氏名又は名称】株式会社コスメリカ
(74)【代理人】
【識別番号】100136560
【弁理士】
【氏名又は名称】森 俊晴
(72)【発明者】
【氏名】大澤 志好
(72)【発明者】
【氏名】小林 三伸
【テーマコード（参考）】
4C083
4C084
【Ｆターム（参考）】
4C083AA032
4C083AA122
4C083AB032
4C083AC022
4C083AC072
4C083AC112
4C083AC122
4C083AC172
4C083AC422
4C083AC432
4C083AC442
4C083AC532
4C083AC712
4C083AD042
4C083AD072
4C083AD092
4C083AD212
4C083AD242
4C083AD332
4C083AD392
4C083AD411
4C083AD412
4C083AD432
4C083AD492
4C083AD532
4C083AD572
4C083CC02
4C083DD23
4C083DD27
4C083EE10
4C083EE12
4C083EE22
4C083FF01
4C084AA01
4C084AA02
4C084BA01
4C084BA08
4C084BA22
4C084BA23
4C084CA05
4C084CA53
4C084CA59
4C084MA63
4C084NA08
4C084NA14
4C084ZA891
4C084ZA892
4C084ZA921
4C084ZA922
4C084ZB221
4C084ZB222
(57)【要約】
【課題】皮膚刺激の抑制効果が向上した皮膚外用剤を提供する。
【解決手段】合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することを特徴とする皮膚外用剤である。また、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３の配合量が、０．０００１質量％～１０質量％であることが、好ましい。
【選択図】図１
【解決手段】合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することを特徴とする皮膚外用剤である。また、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３の配合量が、０．０００１質量％～１０質量％であることが、好ましい。
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項2】
前記合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３の配合量が、０．０００１質量％～１０質量％である皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、皮膚外用剤に関し、特に、皮膚刺激の抑制効果が向上した皮膚外用剤である。
【背景技術】
【0002】
皮膚外用剤にとって保湿効果は重要である。そのため、従来から種々の保湿剤について研究・開発されてきた。中でも、コラーゲンは、水溶性で水への溶解がよく、皮膚外用剤への配合のしやすさから多用されていた。しかしながら、コラーゲンは、保湿効果はあるものの、まだまだ改良の余地があるため、さらなる保湿剤の開発が行われている。
【0003】
例えば、特許文献１には、Ｌ－チロシン、Ｌ－ドーパ、Ｌ－ドーパキノン、Ｌ－リジンの４種類の化合物と、グリシン、Ｌ－アラニン、Ｌ－ロイシン、Ｌ－バリンの４種の化合物から選ばれる１種の共重合体であるポリペプチドが、開示されている。
【0004】
また、特許文献２には、魚の孵化液から医薬または化粧品組成物を調製する方法であって、ａ）魚卵を最小体積の水中に懸濁させるステップと、ｂ）好ましくは、孵化が前記胚の８０％超について６時間以内に完了するように、前記卵の同期した迅速な孵化を誘発するステップと、ｃ）場合によって前記孵化した卵を濾過して、孵化液を得るステップと、ｄ）ｂ）またはｃ）の前記孵化液を濾過して組成物を得るステップであって、前記孵化液を濾過する前記ステップが、（ｉ）少なくとも５μｍの孔サイズを有するフィルターを用いて前記孵化液をろ過し、かつ前記ろ液を集めるステップと、（ｉｉ）ステップ（ｉ）からの前記ろ液をイオン交換クロマトグラフィーにかけるス テップとを少なくとも含み、（１）前記ろ液をイオン交換カラム上、好ましくは、ＤＥＡＥ（ジエチルアミノエ チル）カラム上にロードし、（２）前記カラムを好適な緩衝液、好ましくはｐＨ７～９の緩衝洗浄液で洗浄し、（３）ロイコレクチンポリペプチドを前記カラムから、第１溶出緩衝液または溶媒を用いて溶出させ、好ましくは、前記第１溶出緩衝液は、５０～１００ｍＭの濃度の塩をさらに含む前記緩衝洗浄液を含み、（４）前記残存ポリペプチドを前記カラムから、第２溶出緩衝液または溶媒を用いて溶出させ、好ましくは、前記第２溶出緩衝液は５００ｍＭ～２Ｍの濃度で塩を含む前記緩衝洗浄液を含み、（５）ステップ（４）からの前記溶出液を集めることを含み、ｅ）ステップ（５）からの前記溶出液中の前記水を薬剤的または美容上許容される緩衝液と交換するステップと、ｆ）ステップ（ｅ）から得られた前記溶液を、０．１５～０．３０μｍの孔サイズを有 するフィルターを用いてろ過し、かつ前記濾液を集めるステップと、ｇ）前記医薬または化粧品組成物をステップ（ｆ）からの前記濾液から調製するステップとを少なくとも含む、方法が記載され、ポリペプチドまたはその一部を含む魚の孵化液から得た、または得ることができる化粧品組成物が、開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【特許文献1】特開２００９－７３７８１号公報
【特許文献2】特表２０１６－５１０３１２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
しかしながら、従来のコラーゲン、特許文献１および特許文献２記載の技術は、Ｇ（グリシン）－Ｘ（未知またはその他のアミノ酸（４））－Ｙ（チロシン）の配列だけで構成されていないため、アレルギーを引き起し、皮膚刺激の原因となるおそれがあるという問題点があった。そのため、アレルギーを抑制し、皮膚刺激の抑制効果が高く、保湿力もある皮膚外用剤が求められていた。
【0007】
そこで、本発明の目的は、前記の従来技術の問題点を解決し、皮膚刺激の抑制効果が向上した皮膚外用剤を得ることである。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明者らは、前記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、特定のポリペプチドを配合することによって、前記目的を達成し得ることを見出し、本発明を完成するに至った。
【0009】
即ち、本発明の皮膚外用剤は、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することを特徴とするものである。
【0010】
また、本発明の皮膚外用剤は、前記合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３の配合量が、０．０００１質量％～１０質量％であることが、好ましい。
【発明の効果】
【0011】
本発明によると、皮膚刺激の抑制効果が向上した皮膚外用剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【0012】
【図1】経皮吸収試験の試験結果を示すグラフである。
【図2】細胞成長促進試験の試験結果を示すグラフである。
【図3】細胞増殖促進能試験の結果を示す図である。
【図4】創傷治癒促進能試験の結果を示す写真である。
【図5】創傷治癒促進能試験の結果を示すグラフである。
【図6】抗シワ試験の結果を示す写真である。
【図7】抗シワ試験の結果を示すグラフである。
【図8】髪の光沢向上試験の結果を示すグラフである。
【図9】ＳＲＤ５Ａ１（（５α還元酵素Ｉ型）の遺伝子発現の結果を示すグラフである。
【図10】ＳＲＤ５Ａ２（（５α還元酵素ＩＩ型）の遺伝子発現の結果を示すグラフである。
【図11】ＳＲＤ５Ａ３（（５α還元酵素ＩＩＩ型）の遺伝子発現の結果を示すグラフである。
【図12】７日間の毛髪成長効果試験の結果を示すグラフである。
【図13】７日間の毛髪成長効果試験の結果を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【0013】
以下、本発明の皮膚外用剤について具体的に説明する。
本発明の皮膚外用剤は、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することを特徴とするものである。合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３は、Ｇ（グリシン）－Ｘ（未知またはその他のアミノ酸（４））－Ｙ（チロシン）の配列だけで構成され、さらに一本鎖の構造で低分子量（５５ＫＤａ）であり、一方、従来の水溶性コラーゲンは、Ｇ（グリシン）－Ｘ（未知またはその他のアミノ酸（４））－Ｙ（チロシン）の配列だけで構成されておらず、しかも３重らせん構造で、得られる起源によって分子量が異なる。そのため、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することで、従来の水溶性コラーゲンと比較して、皮膚刺激の抑制効果およびアレルギー抑制効果が向上した皮膚外用剤を提供することができる。
本発明の皮膚外用剤は、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することを特徴とするものである。合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３は、Ｇ（グリシン）－Ｘ（未知またはその他のアミノ酸（４））－Ｙ（チロシン）の配列だけで構成され、さらに一本鎖の構造で低分子量（５５ＫＤａ）であり、一方、従来の水溶性コラーゲンは、Ｇ（グリシン）－Ｘ（未知またはその他のアミノ酸（４））－Ｙ（チロシン）の配列だけで構成されておらず、しかも３重らせん構造で、得られる起源によって分子量が異なる。そのため、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することで、従来の水溶性コラーゲンと比較して、皮膚刺激の抑制効果およびアレルギー抑制効果が向上した皮膚外用剤を提供することができる。
【0014】
本発明において、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３とは、日本語表示名称である。また、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３は、国際公開第２０１８／０１４４５２号記載の「パスツールピペットＰ.ｐａｓｔｏｒｉｓ（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）を菌種として使用して、最初に１次種培養を行い、菌濃度が２０±２ｇ／Ｌのとき２次種培養に転換し、菌濃度が１２０±１０ｇ／Ｌのとき２次種培養をグリセリン培養段階に切り替え、グリセリン培養段階でグリセリンの添加量は６０～７０ｇ／Ｌであり、溶存酸素が急激に上昇して、相対的に安定な状態に達した時点で、メタノール誘導フェーズに入り、１２０±８時間誘導した後、発酵を終了することを特徴とする、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ発現組換えタンパク質の発酵工法。さらに、前記ピペットＰ．パストリスのアクセッション番号がＣＧＭＣＣ第５０２１弧であることを特徴とする、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ発現組換えタンパク質の発酵工法、前記１次種培養は、菌種Ｐａｓｔｅｕｒピチアパストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）種培地に接種し、３０℃にて菌体湿重量が２０±２ｇ／Ｌに達するまで２４～３６時間振とう培養することを特徴とするＰｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ発現組換えタンパク質の発酵工法、前記２次種培養は、１次ウイルス液の両方を発酵培地に移した後、３０℃で培養し、アンモニア水でｐＨ値を５．０に調節および制御し、溶存酸素は２０～３０％に制御し、菌体湿重量が１２０±１０ｇ／Ｌに達するまで培養することを特徴とする、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ発現組換えタンパク質の発酵工法、前記グリセリンのインキュベーション工程は、２次シード培養液を、発酵培地に移した後、６０～７０ｇ／Ｌのグリセリンを添加し、３０℃で培養し、アンモニア水でｐＨ値を５．０に調節および制御し、通気量は３０ｍ３／ｈであり、撹拌速度は、３００～５００ｒｐｍであり、溶存酸素が急激に上昇するとき、１時間飢餓状態としてグリセリンを消尽させることを特徴とする、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ発現組換えタンパク質の発酵工法、前記メタノール誘導段階は、誘導工程温度を３０℃、ｐＨを５．０に制御し、メタノール補充材料と溶存酸素の連動を設定し、溶存酸素が２０％より高いときメタノール流加（ｆｅｄ－ｂａｔｃｈ）を開始し、溶存酸素が２０％より低いときメタノール流加を停止させ、１２０±８時間誘導した後、発酵を終了し、発酵ブロスを遠心分離し、遠心分離後の上澄み液を集めて濃縮し、限外濾過およびナノ濾過脱色、脱塩を順に実行することによって組換えヒトコラーゲンを得ることを特徴とする、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ発現組換えタンパク質の発酵工法。」で製造することができる。また、国際公開第２０１８／０１４４５３号記載の「ヒト起源コラーゲン製造レベルを再編する発酵工程を高め、その特徴は以下のステップを含むことである：メタノール資化酵母の歪の液を滅菌の発酵媒体中に接種し、発酵培養１４～１８時間後にメタノールを補足して誘導性発現を行い始め、同時に発酵媒体中をピルビン酸ナトリウムに添加し、そのうちピルビン酸ナトリウムの加入量は０．０１～１０ｇ／Ｌとする。さらに、前記のピルビン酸ナトリウムの加入量が０．１ｇ／Ｌ～１ｇ／Ｌであることを特徴とする発酵工程、前記メタノール資化酵母はメタノール資化酵母Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓとし、寄託番号はＣＧＭＣＣ Ｎｏ．５０２１とする、前記ピルビン酸ナトリウムの添加様式は添加とする、前記メタノール資化酵母発酵媒体の調合は８５％のＨ３ＰＯ４ ６．６～２６．７ｍＬ／Ｌとして、ＣａＳＯ４・２Ｈ２Ｏ ０．３～１．１７５ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４ ４．５～１８．２ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ３．７～１４．９ｇ／Ｌ、ＫＯＨ １．０～４．１３ｇ／Ｌ、グリセロール １０．０～４０．０ｇ／Ｌ、ＰＴＭ１溶液０．４３５～４．３５ｍＬ／Ｌ、発酵工程中に、メタノール資化酵母の歪の液の接種サイズは８～１２％とし、発酵温度は２８～３０℃とし、アンモニア水はｐＨを調節して５．０～５．２とし、溶解酸素は２０％より低くなく、メタノール誘導時間は９０～１２０時間とする。」で製造することができる。
【0015】
また、本発明の皮膚外用剤は、前記合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３の配合量が、固形分換算で０．０００１質量％～１０質量％であることが、好ましい。特に、フェイスマスクでは０．００５質量％～０．０１質量％、クリームでは０．０１質量％～０．０２質量％、化粧水では０．０２質量％～０．０３質量％、美容液やアイクリームでは０．０３質量％～０．０５質量％、しわ改善化粧料では０．１質量％～０．１５質量％、粉体化粧料では０．２質量％～０．５質量％であることが、より好ましい。
【0016】
本発明において、皮膚外用剤とは、人間の身体等に使用できるものであり、通常の化粧品の分類に属するものであり、医薬部外品、医薬品等の用途を排除するものではない。さらに、前記皮膚外用剤とは、基礎化粧品、メイクアップ化粧品、頭髪用化粧品等の用途を含むものである。
【0017】
さらに、本発明において、本発明の効果が損なわれない範囲で、適宜他の成分等を添加することもできる。質的、量的範囲で上記以外の任意の成分を配合することができ、皮膚外用剤に通常配合される成分、例えば、油性成分、多価アルコール、界面活性剤、高分子成分、保湿剤、抽出液成分、薬効成分、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、ｐＨ調整剤、安定化剤、香料等を配合することができる。
【0018】
本発明において、油性成分としては、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、流動パラフィン（ミネラルオイル）、重質流動イソパラフィン、軽質流動イソパラフィン、α－オレフィンオリゴマー、ポリイソブテン、水添ポリイソブテン、ポリブテン、スクワラン、オリーブ由来スクワラン、スクワレン、ワセリン、固型パラフィン等の炭化水素類、キャンデリラワックス、カルナウバワックス、ライスワックス、木ろう、みつろう、モンタンワックス、オゾケライト、セレシン、パラフィンワックス、マイクロクリスタリンワックス、ペトロラタム、フィッシャートロプシュワックス、ポリエチレンワックス、エチレン・プロピレンコポリマー等のワックス類、ヤシ油、パーム油、パーム核油、サフラワー油、オリーブ油、ヒマシ油、アボカド油、ゴマ油、茶油、月見草油、小麦胚芽油、マカデミアナッツ油、ヘーゼルナッツ油、ククイナッツ油、ローズヒップ油、メドウフォーム油、パーシック油、ティートリー油、ハッカ油、トウモロコシ油、ナタネ油、ヒマワリ油、小麦胚芽油、アマニ油、綿実油、大豆油、落花生油、コメヌカ油、カカオ脂、シア脂、水素添加ヤシ油、水素添加ヒマシ油、ホホバ油、水素添加ホホバ油等の植物油脂類、牛脂、乳脂、馬脂、卵黄油、ミンク油、タートル油等の動物性油脂類、鯨ロウ、ラノリン、オレンジラッフィー油等の動物性ロウ類、液状ラノリン、還元ラノリン、吸着精製ラノリン、酢酸ラノリン、酢酸液状ラノリン、ヒドロキシラノリン、ポリオキシエチレンラノリン、ラノリン脂肪酸、硬質ラノリン脂肪酸、ラノリンアルコール、酢酸ラノリンアルコール、酢酸（セチル・ラノリル）エステル等のラノリン類、レシチン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン等のスフィンゴリン脂質、ホスファチジン酸、リゾレシチン等のリン脂質類、水素添加大豆リン脂質、部分水素添加大豆リン脂質、水素添加卵黄リン脂質、部分水素添加卵黄リン脂質等のリン脂質誘導体類、コレステロール、ジヒドロコレステロール、ラノステロール、ジヒドロラノステロール、フィトステロール、コール酸等のステロール類、サポゲニン類、サポニン類、酢酸コレステリル、ノナン酸コレステリル、ステアリン酸コレステリル、イソステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、Ｎ－ラウロイル－Ｌ－グルタミン酸ジ（コレステリル／ベヘニル／オクチルドデシル）、Ｎ－ラウロイル－Ｌ－グルタミン酸ジ（コレステリル／オクチルドデシル）、Ｎ－ラウロイル－Ｌ－グルタミン酸ジ（フィトステリル／ベヘニル／オクチルドデシル）、Ｎ－ラウロイル－Ｌ－グルタミン酸ジ（フィトステリル／オクチルドデシル）、Ｎ－ラウロイルサルコシンイソプロピル等のアシルサルコシンアルキルエステル、１２－ヒドロキシステアリン酸コレステリル、マカデミアナッツ油脂肪酸コレステリル、マカデミアナッツ油脂肪酸フィトステリル、イソステアリン酸フィトステリル、軟質ラノリン脂肪酸コレステリル、硬質ラノリン脂肪酸コレステリル、長鎖分岐脂肪酸コレステリル、長鎖α－ヒドロキシ脂肪酸コレステリル等のステロールエステル類、リン脂質・コレステロール複合体、リン脂質・フィトステロール複合体等の脂質複合体、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸ヘキシルデシル、イソステアリン酸オクチルドデシル、パリミチン酸セチル、パルミチン酸オクチルドデシル、オクタン酸セチル、オクタン酸ヘキシルデシル、イソノナン酸イソトリデシル、イソノナン酸イソノニル、イソノナン酸オクチル、イソノナン酸イソトリデシル、ネオペンタン酸イソデシル、ネオペンタン酸イソトリデシル、ネオペンタン酸イソステアリル、ネオデカン酸オクチルドデシル、オレイン酸オレイル、オレイン酸オクチルドデシル、リシノレイン酸オクチルドデシル、ラノリン脂肪酸オクチルドデシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、エルカ酸オクチルドデシル、イソステアリン酸硬化ヒマシ油、オレイン酸エチル、アボカド油脂肪酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、パルミチン酸オクチル、イソステアリン酸イソプロピル、ラノリン脂肪酸イソプロピル、ラウリン酸メチルヘプチル、ミリスチン酸メチルヘプチル、パルミチン酸メチルヘプチル、イソステアリン酸メチルヘプチル、セバシン酸ジエチル、セバシン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジオクチル、アジピン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジブチルオクチル、アジピン酸ジイソブチル、コハク酸ジオクチル、クエン酸トリエチル等のモノアルコールカルボン酸エステル類、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、モノイソステアリン酸水添ヒマシ油、γ－エルカラクトン等のオキシ酸エステル類、トリオクタン酸グリセリル、トリオレイン酸グリセリル、トリイソステアリン酸グリセリル、ジイソステアリン酸グリセリル、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリル、トリ（カプリル酸／カプリン酸／ミリスチン酸／ステアリン酸）グリセリル、水添ロジントリグリセリド（水素添加エステルガム）、ロジントリグリセリド（エステルガム）、ベヘン酸エイコサン二酸グリセリル、トリオクタン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、ジオクタン酸ネオペンチルグリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジオクタン酸２－ブチル－２－エチル－１，３－プロパンジオール、ジオレイン酸プロピレングリコール、テトラオクタン酸ペンタエリスリチル、水素添加ロジンペンタエリスリチル、トリエチルヘキサン酸ジトリメチロールプロパン、（イソステアリン酸／セバシン酸）ジトリメチロールプロパン、トリエチルヘキサン酸ペンタエリスリチル、（ヒドロキシステアリン酸／ステアリン酸／ロジン酸）ジペンタエリスリチル、ジイソステアリン酸ジグリセリル、テトライソステアリン酸ポリグリセリル、ノナイソステアリン酸ポリグリセリル－１０、デカ（エルカ酸／イソステアリン酸／リシノレイン酸）ポリグリセリル－８、（ヘキシルデカン酸／セバシン酸）ジグリセリルオリゴエステル、ジステアリン酸グリコール（ジステアリン酸エチレングリコール）、ジネオペンタン酸３－メチル－１，５－ペンタンジオール、ジネオペンタン酸２，４－ジエチル－１，５－ペンタンジオール等の多価アルコール脂肪酸エステル類、ダイマージリノール酸ジイソプロピル、ダイマージリノール酸ジイソステアリル、ダイマージリノール酸ジ（イソステアリル／フィトステリル）、ダイマージリノール酸（フィトステリル／ベヘニル）、ダイマージリノール酸（フィトステリル／イソステアリル／セチル／ステアリル／ベヘニル）、ダイマージリノール酸ダイマージリノレイル、ジイソステアリン酸ダイマージリノレイル、ダイマージリノレイル水添ロジン縮合物、ダイマージリノール酸硬化ヒマシ油、ヒドロキシアルキルダイマージリノレイルエーテル等のダイマー酸若しくはダイマージオールの誘導体、セタノール、ミリスチルアルコール、オレイルアルコール、ラウリルアルコール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、アラキルアルコール、ベヘニルアルコール、ホホバアルコール、キミルアルコール、セラキルアルコール、バチルアルコール、ヘキシルデカノール、イソステアリルアルコール、２－オクチルドデカノール、ダイマージオール等の高級アルコール類、ベンジルアルコール等のアラルキルアルコール及び誘導体、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸、パルミトオレイン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレイン酸、エルカ酸、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸、イソヘキサデカン酸、アンテイソヘンイコサン酸、長鎖分岐脂肪酸、ダイマー酸、水素添加ダイマー酸等の高級脂肪酸類及びそのアルミニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、カリウム、ナトリウム塩等の金属石けん類、及びアミド等の含窒素誘導体類、ヤシ油脂肪酸モノエタノールアミド（コカミドＭＥＡ）、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド（コカミドＤＥＡ）、ラウリン酸モノエタノールアミド（ラウラミドＭＥＡ）、ラウリン酸ジエタノールアミド（ラウラミドＤＥＡ）、ラウリン酸モノイソプロパノールアミド（ラウラミドＭＩＰＡ）、パルミチン酸モノエタノールアミド（パルタミドＭＥＡ）、パルミチン酸ジエタノールアミド（パルタミドＤＥＡ）、ヤシ油脂肪酸メチルエタノールアミド（コカミドメチルＭＥＡ）等の脂肪酸アルカノールアミド類、ジメチコン（ジメチルポリシロキサン）、高重合ジメチコン（高重合ジメチルポリシロキサン）、シクロメチコン（環状ジメチルシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン）、フェニルトリメチコン、ジフェニルジメチコン、フェニルジメチコン、（アミノエチルアミノプロピルメチコン／ジメチコン）コポリマー、ジメチコノール、ジメチコノールクロスポリマー、シリコーン樹脂、シリコーンゴム、アミノプロピルジメチコン及びアモジメチコン等のアミノ変性シリコーン、カチオン変性シリコーン、ジメチコンコポリオール等のポリエーテル変性シリコーン、ポリグリセリン変性シリコーン、糖変性シリコーン、カルボン酸変性シリコーン、リン酸変性シリコーン、硫酸変性シリコーン、アルキル変性シリコーン、脂肪酸変性シリコーン、アルキルエーテル変性シリコーン、アミノ酸変性シリコーン、ペプチド変性シリコーン、フッ素変性シリコーン、カチオン変性及びポリエーテル変性シリコーン、アミノ変性及びポリエーテル変性シリコーン、アルキル変性及びポリエーテル変性シリコーン、アミドアルキル変性シリコーン、アミノグリコール変性シリコーン、アミノフェニル変性シリコーン、ポリシロキサン・オキシアルキレン共重合体等のシリコーン類、パーフルオロデカン、パーフルオロオクタン、パーフルオロポリエーテル等のフッ素系油剤類等を挙げることができる。
【0019】
また、本発明において、水溶性多価アルコールとしては、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、グリセリン、１，３－ブチレングリコール、プロピレングリコール、３－メチル－１，３－ブタンジオール、１，３－プロパンジオール、２－メチル－１，３－プロパンジオール、トリメチロールプロパン、ペンタエリスリトール、ヘキシレングリコール、ジグリセリン、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリグリセリンおよびポリプロパンジオール等を挙げることができる。
【0020】
さらに、本発明において、界面活性剤としては、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、非イオン界面活性剤としては、モノ脂肪酸ポリグリセリル、ポリ脂肪酸ポリグリセリル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンプロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンステロール、ポリオキシエチレン水素添加ステロール、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ショ糖脂肪酸エステル等、両性界面活性成分としては、例えば、２－ウンデシルーＮ，Ｎ，Ｎ－（ヒドロキシエチルカルボキシメチル）－２－イミダゾリンナトリウム、２－ココイル－２－イミタゾリニウムヒドロキサイド－１－カルボキシエチロキシ２－ナトリウム塩等の、イミダゾリン系両性界面活性剤、２－ヘプタデシル－Ｎ－カルボキシメチル－Ｎ－ヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタイン、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン、アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等のベタイン系界面活性剤等、ポリエーテル変性シリコーンとしては、例えば、ＰＥＧ－１０ジメチコン、ラウリルＰＥＧ－９ポリジメチルシロキシエチルジメチコン、セチルＰＥＧ／ＰＰＧ－１０／１ジメチコン、（ジメチコン／（ＰＥＧ－１０／１５））クロスポリマー、（ジメチコン／（ＰＥＧ－１０／１５））クロスポリマー、（ＰＥＧ－１５／ラウリルジメチコン）クロスポリマー、（ＰＥＧ－１５／ラウリルジメチコン）クロスポリマー、（ＰＥＧ－１５／ラウリルジメチコン）クロスポリマー、（ＰＥＧ－１０／ラウリルジメチコン）クロスポリマー、（ラウリルジメチコン／ポリグリセリン－３）クロスポリマー、ＰＥＧ／ＰＰＧ－１９／１９ジメチコン、ラウリルＰＥＧ／ＰＰＧ－１８／１８メチコン、ラウリルＰＥＧ－１０トリス（トリメチルシロキシ）シリルエチルジメチコン、（セチルジグリセリルトリス（トリメチルシロキシ）シリルエチルジメチコン）、ＰＥＧ－１２ジメチコン／ＰＰＧ－２０クロスポリマー、ＰＰＧ－１２ジメチコン、ＰＥＧ／ＰＰＧ－２０／１５ジメチコン、ＰＥＧ／ＰＰＧ－２０／１５ジメチコン等を挙げることができる。
【0021】
さらにまた、本発明において、高分子成分としては、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、キサンタンガム、ジェランガム、アラビアゴム、トラガカントガム、ガラクタン、グアーガム、カラギーナン、ペクチン、寒天、クインスシード、デキストラン、プルラン、カゼイン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ゼラチンメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー等を挙げることができる。
【0022】
また、本発明において、保湿成分として、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、キシリトール、ソルビトール、マルチトール、コンドロイチン硫酸ナトリウム、エラスチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、シクロデキストリン、コラーゲン、胆汁酸塩等を挙げることができる。
【0023】
さらに、本発明において、抽出液成分として、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、カミツレエキス、パセリエキス、スイカズラエキス、コメエキス、コメヌカエキス、ホップエキス、オウバクエキス、ヨクイニンエキス、センブリエキス、メリロートエキス、バーチエキス、カンゾウエキス、シャクヤクエキス、サボンソウエキス、ヘチマエキス、トウガラシエキス、レモンエキス、ゲンチアナエキス、シソエキス、アロエエキス、ローズマリーエキス、セージエキス、タイムエキス、ユーカリエキス、茶エキス、海藻エキス、キューカンバーエキス、チョウジエキス、ニンジンエキス、マロニエエキス、ハマメリスエキス、クワエキス、チンピエキス、ピーカンナッツエキス、グレープフルーツエキス、シークワーサーエキス、パッションフルーツエキス、ビワエキス、ブドウエキス、ローズフルーツエキス、クララエキス、ペパーミントエキス等の各種抽出成分等を挙げることができる。
【0024】
さらにまた、本発明において、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、薬効成分として、例えば、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥなどのビタミン類およびそれらの誘導体、グリチルリチン酸及びの誘導体、グリチルレチン酸及びの誘導体、尿素などの各種塩、クレアチニン、ＣｏＱ１０、アスタキサンチン、ポリフェノール、セラミド等を挙げることができる。
【0025】
また、本発明において、紫外線吸収剤としては、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸モノグリセリンエステル、Ｎ，Ｎ－ジプロポキシパラアミノ安息香酸エチルエステル、Ｎ，Ｎ－ジエトキシパラアミノ安息香酸エチルエステル、Ｎ，Ｎ－ジメチルパラアミノ安息香酸エチルエステル、Ｎ，Ｎ－ジメチルパラアミノ安息香酸ブチルエステル、Ｎ，Ｎ－ジメチルパラアミノ安息香酸エチルエステル等の安息香酸系紫外線吸収剤、ホモメンチル－Ｎ－アセチルアントラニレート等のアントラニル酸系紫外線吸収剤、サリチル酸及びそのナトリウム塩、アミルサリシレート、メンチルサリシレート、ホモメンチルサリシレート、オクチルサリシレート、フェニルサリシレート、ベンジルサリシレート、ｐ－イソプロパノールフェニルサリシレート等のサリチル酸系紫外線吸収剤、オクチルシンナメート、エチル－４－イソプロピルシンナメート、メチル－２，５－ジイソプロピルシンナメート、エチル－２，４－ジイソプロピルシンナメート、メチル－２，４－ジイソプロピルシンナメート、プロピル－ｐ－メトキシシンナメート、イソプロピル－ｐ－メトキシシンナメート、イソアミル－ｐ－メトキシシンナメート、２－エチルヘキシルｐ－メトキシシンナメート（パラメトキシケイヒ酸オクチル）、２－エトキシエチル－ｐ－メトキシシンナメート（シノキサート）、シクロヘキシル-ｐ-メトキシシンナメート、エチル－α－シアノ－β－フェニルシンナメート、２－エチルヘキシルα－シアノ－β－フェニルシンナメート（オクトクリン）、グリセリルモノ－２－エチルヘキサノイル－ジパラメトキシシンナメート、フェルラ酸及びその誘導体等の桂皮酸系紫外線吸収剤、２，４－ジヒドロキシベンゾフェノン、２，２’－ジヒドロキシ－４－メトキシベンゾフェノン、２，２’－ジヒドロキシ－４，４’－ジメトキシベンゾフェノン、２，２’，４，４’－テトラヒドロキシベンゾフェノン、２－ヒドロキシ－４－メトキシベンゾフェノン（オキシベンゾン－３）、２－ヒドロキシ－４－メトキシ－４’－メチルベンゾフェノン、２－ヒドロキシ－４－メトキシベンゾフェノン－５－スルホン酸塩、４－フェニルベンゾフェノン、２－エチルヘキシル－４’－フェニル－ベンゾフェノン－２－カルボキシレート、２－ヒドロキシ－４－ｎ－オクトキシベンゾフェノン、４－ヒドロキシ－３－カルボキシベンゾフェノン等のベンゾフェノン系紫外線吸収剤、３－（４’－メチルベンジリデン）－ｄ，ｌ－カンファー、３－ベンジリデン－ｄ，ｌ－カンファー；２－フェニル－５－メチルベンゾキサゾール；２，２’－ヒドロキシ－５－メチルフェニルベンゾトリアゾール；２－（２’－ヒドロキシ－５’－ｔ－オクチルフェニル）ベンゾトリアゾール；２－（２’－ヒドロキシ－５’－メチルフェニルベンゾトリアゾール；ジベンザラジン；ジアニソイルメタン；５－（３，３－ジメチル－２－ノルボルニリデン）－３－ペンタン－２－オン；４－ｔ－ブチルメトキシジベンゾイルメタン等のジベンゾイルメタン誘導体、オクチルトリアゾン；ウロカニン酸及びウロカニン酸エチル等のウロカニン酸誘導体、２－（２'－ヒドロキシ－５'－メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、１－（３，４－ジメトキシフェニル）－４，４－ジメチル－１，３－ペンタンジオン、ジメトキシベンジリデンジオキソイミダゾリジンプロピオン酸２－エチルヘキシル等のヒダントイン誘導体、フェニルベンズイミダソゾールスルホン酸、テレフタリリデンジカンフルスルホン酸、ドロメトリゾールトリシロキサン、アントラニル酸メチル、ルチン及びその誘導体、オリザノール及びその誘導体等を挙げることができる。
【0026】
また、本発明において、紫外線散乱剤としては、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、酸化チタン、酸化亜鉛等を挙げることができ、前記酸化チタンや前記酸化亜鉛は、表面処理をされていてもよい。かかる表面処理としては、通常の化粧料の粉体に用いられる表面処理であれば限定されないが、例えば、ジメチコン処理、メチコン／ハイドロゲンジメチコン処理、ジメチコン／ハイドロゲンジメチコン処理、トリエトキシカプリリルシラン処理、ジメチコノール・アミノプロピルトリエトキシシラン処理、Ｎ-ステアロイル-Ｌ-グルタミン酸２Ｎａ・水酸化Ａｌ処理、パルミトイルプロリン、パルミトイルサルコシンＮａ・パルミトイルグルタミン酸Ｍｇ・パルミチン酸処理、セバシン酸イソステアリル・ステアロイルグルタミン酸２Ｎａ・水酸化Ａｌ処理、ジミリスチン酸Ａｌ処理、水添レシチン・トリミリスチン酸・水酸化Ａｌ処理、アルギン酸Ｎａ処理等を挙げることができる。
【0027】
また、本発明において、ｐＨ調整剤としては、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、例えば、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、乳酸、グリコール酸等のヒドロキシ酸類、グルタミン酸、アスパラギン酸等のアミノ酸類、マロン酸、コハク酸、アジピン酸等のジカルボン酸類、２－アミノ－２－メチル－１－プロパノール等を挙げることができる。
【0028】
また、本発明において、安定化剤としては、本発明の効果が得られれば、通常、皮膚外用剤に使用できるものを使用することができ、本発明の効果を得られるものであれば特に限定されないが、ヒドロキシエタンジホスホン酸、エデト酸及びその塩等の金属封鎖剤、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、ソルビン酸、亜硫酸ナトリウム、エリソルビン酸、Ｌ－システイン塩酸塩等の酸化防止剤、メチルパラベン、エチルパラベン、安息香酸、安息香酸塩、サリチル酸、サリチル酸塩、フェノキシエタノール、水溶性カチオン抗菌剤、エチルヘキシルグリセリン、ビサボロール、ポリ－ε－リシン等の防腐剤等を挙げることができる。
【0029】
また、本発明において、皮膚外用剤の製造方法としては、通常の皮膚外用剤の製造方法で製造することができ、油相成分と水相成分を加熱・混合して製造する方法を用いることができる。
【0030】
本発明の皮膚外用剤は、経皮吸収向上皮膚外用剤、細胞成長促進皮膚外用剤、細胞増殖促進皮膚外用剤、創傷治癒促進皮膚外用剤、抗シワ用皮膚外用剤、髪の光沢向上皮膚外用剤、脱毛抑制皮膚外用剤、毛髪成長皮膚外用剤でもある。
【0031】
以下、本発明について、実施例を用いてさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。また、以下、処方中の数値は質量％を示す。
【実施例0032】
（実験例１）
（皮膚刺激性試験）
ＯＥＣＤ ＴＧ４３９（試験管内皮膚刺激性：再構成ヒト表皮（ＲＨＥ） Ｔｅｓｔ Ｍｅｔｈｏｄ、２０１５）に基づいて、以下の方法で試験した。
（皮膚刺激性試験）
ＯＥＣＤ ＴＧ４３９（試験管内皮膚刺激性：再構成ヒト表皮（ＲＨＥ） Ｔｅｓｔ Ｍｅｔｈｏｄ、２０１５）に基づいて、以下の方法で試験した。
【0033】
（試験材料）
以下の材料を使用した。
（１）皮膚モデル：１２ウェル再構成ヒト表皮（ＲＨＥ ，Ｅｐｉｓｋｉｎ）、バッチ番号：１９ＥＲ２９１０２１Ｓ１
（２）培養条件：３７℃、ＣＯ２ ２５体積％、相対湿度９５％ＲＨ
（３）試薬および対照：
陽性対照（以下、「ＰＣ」と記す）：５質量％ ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）水溶液
陰性対照（以下、「ＮＣ」と記す）：超純水
被験物質（以下、「ＴＡ」と記す）：合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３（原液）
培地：特殊な培地および皮膚モデル用の試験培地
ＭＴＴ溶液：ＭＴＴ（３－［４，５―ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ―２－ｙｌ］―２，５－ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ）は、ＤＰＢＳ（ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水）バッファで３ｍｇ／ｍＬまで溶解した。次に、試験培地を使用して体積比１：９で最終濃度０．３ｍｇ／ｍＬまで希釈した。
酸性イソプロパノール（０．０４Ｍ）：０．１８ｍＬ １２Ｍ ＨＣｌの５０ｍＬ イソプロパノール。２～８℃で１カ月間、光から遮断した。
以下の材料を使用した。
（１）皮膚モデル：１２ウェル再構成ヒト表皮（ＲＨＥ ，Ｅｐｉｓｋｉｎ）、バッチ番号：１９ＥＲ２９１０２１Ｓ１
（２）培養条件：３７℃、ＣＯ２ ２５体積％、相対湿度９５％ＲＨ
（３）試薬および対照：
陽性対照（以下、「ＰＣ」と記す）：５質量％ ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）水溶液
陰性対照（以下、「ＮＣ」と記す）：超純水
被験物質（以下、「ＴＡ」と記す）：合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３（原液）
培地：特殊な培地および皮膚モデル用の試験培地
ＭＴＴ溶液：ＭＴＴ（３－［４，５―ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ―２－ｙｌ］―２，５－ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ）は、ＤＰＢＳ（ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水）バッファで３ｍｇ／ｍＬまで溶解した。次に、試験培地を使用して体積比１：９で最終濃度０．３ｍｇ／ｍＬまで希釈した。
酸性イソプロパノール（０．０４Ｍ）：０．１８ｍＬ １２Ｍ ＨＣｌの５０ｍＬ イソプロパノール。２～８℃で１カ月間、光から遮断した。
【0034】
（試験手順）
（１）準備：１２ウェル再構成ヒト表皮は、１２ウェルのプレートで２ｍＬの事前に温められた培地の新しいウェルへ移し、一夜孵卵器に保管した。
（２）ＭＴＴ反応：１２ウェルプレートで、１０μＬのＴＡを、２ｍＬ ＭＴＴ溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）に追加し、混合し、３時間、培養した。
（３）投与量：１０μＬ ＴＡ（ＮＣおよびＰＣを含む）を、１２ウェル再構成ヒト表皮の表面に均等に適用した。１５分間、室温に曝した後、ＴＡを、ＤＰＢＳで濯ぐことにより、１２ウェル再構成ヒト表皮から完全に除去した。２ｍＬの事前に温められた培地の新しいウェルへ移し、さらに４２時間、培養した。各グループは、３つ並行してセットした。
（４）ＭＴＴ試験：１２ウェル再構成ヒト表皮は、２ｍＬの事前に温められたＭＴＴ溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）の新しいウェルへ入れられ、３時間、孵卵器に保管した。その後、組織は、分離され、５００μＬの酸性イソプロパノールの２ｍＬチューブに移し、室温の暗室下で一夜保管した。ＯＤ値は、２００μＬ溶液を９６ウェルのプレートへ追加することにより、の波長で決定した。酸性イソプロパノールは、ブランク対照としてセットした。
（１）準備：１２ウェル再構成ヒト表皮は、１２ウェルのプレートで２ｍＬの事前に温められた培地の新しいウェルへ移し、一夜孵卵器に保管した。
（２）ＭＴＴ反応：１２ウェルプレートで、１０μＬのＴＡを、２ｍＬ ＭＴＴ溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）に追加し、混合し、３時間、培養した。
（３）投与量：１０μＬ ＴＡ（ＮＣおよびＰＣを含む）を、１２ウェル再構成ヒト表皮の表面に均等に適用した。１５分間、室温に曝した後、ＴＡを、ＤＰＢＳで濯ぐことにより、１２ウェル再構成ヒト表皮から完全に除去した。２ｍＬの事前に温められた培地の新しいウェルへ移し、さらに４２時間、培養した。各グループは、３つ並行してセットした。
（４）ＭＴＴ試験：１２ウェル再構成ヒト表皮は、２ｍＬの事前に温められたＭＴＴ溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）の新しいウェルへ入れられ、３時間、孵卵器に保管した。その後、組織は、分離され、５００μＬの酸性イソプロパノールの２ｍＬチューブに移し、室温の暗室下で一夜保管した。ＯＤ値は、２００μＬ溶液を９６ウェルのプレートへ追加することにより、の波長で決定した。酸性イソプロパノールは、ブランク対照としてセットした。
【0035】
（試験：分析）
酸性イソプロパノールは、ブランク対照としてセットし、ＮＣの生存率を１００％に設定した。次に、ＴＡおよびＰＣの細胞生存率を下記計算式で計算し、下記評価基準で評価し、結果を下記表１に示す。
計算式
細胞生存率（％）＝（ＯＤ値ＴＡ（またはＰＣ）－ＯＤ値Ｂｌａｎｋ）／（ＯＤ値ＮＣ－ＯＤ値Ｂｌａｎｋ）×１００
評価基準：
・平均細胞相対生存率（％） ＞５０，ＵＮ ＧＨＳ カテゴリなし
・平均細胞相対生存率（％） ≦５０，ＵＮ ＧＨＳ １／２
酸性イソプロパノールは、ブランク対照としてセットし、ＮＣの生存率を１００％に設定した。次に、ＴＡおよびＰＣの細胞生存率を下記計算式で計算し、下記評価基準で評価し、結果を下記表１に示す。
計算式
細胞生存率（％）＝（ＯＤ値ＴＡ（またはＰＣ）－ＯＤ値Ｂｌａｎｋ）／（ＯＤ値ＮＣ－ＯＤ値Ｂｌａｎｋ）×１００
評価基準：
・平均細胞相対生存率（％） ＞５０，ＵＮ ＧＨＳ カテゴリなし
・平均細胞相対生存率（％） ≦５０，ＵＮ ＧＨＳ １／２
【0036】
【表1】
【0037】
ＯＥＣＤ ＴＧ４３９－２０１５基準によると、実験例１の条件下で、試験サンプル「ＴＡ（合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３）」は、「テゴリなし」属し（ＵＮ ＧＨＳ分類）し、皮膚刺激性が低いことが確認できた。
【0038】
（実験例２）
（経皮吸収試験）
下記条件で経皮吸収試験を行い、結果を図１に示す。
（１）サンプル調整
１ｃｍ２のＳＣ（角層）片は、処理後にＳＣを損傷することなく分離できるようにしながら、接着性（製品の拡散中のＳＣの移動を回避するため）という利点を持つポリマー支持体上に堆積された。測定直前に合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を蒸留水で０．５質量％に希釈した。得られたＳＣ片の外側を約５ｍｇ／ｃｍ２で処理した。処理したＳＣの回折パターンの取得は、処理後１５分、１８０分、３８５分の時点で行った。未処理のコントロールサンプルも分析しました。
回折
ｌ‘ＥＳＲＦのｂｅａｍｌｉｎｅＩＤ１３
波長：０．９５３７Å
フルモード
ビームサイズ２．６（ｈ）×１．６（ｖ）ｍｍ２
サンプル-検出器の距離：１３２ｍｍ
検出器ＦＲＥＬＯＮ（ピクセル５０×５０μｍ２）
２μｍのステップサイズでの垂直スキャン（サンプルプレイスに垂直）
異なる位置でのサンプルごとの３回のスキャン
ポイントあたりの露出時間：０．１秒
温度：ｔ＝２２℃、湿度：ＨＲ ５３％
（経皮吸収試験）
下記条件で経皮吸収試験を行い、結果を図１に示す。
（１）サンプル調整
１ｃｍ２のＳＣ（角層）片は、処理後にＳＣを損傷することなく分離できるようにしながら、接着性（製品の拡散中のＳＣの移動を回避するため）という利点を持つポリマー支持体上に堆積された。測定直前に合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を蒸留水で０．５質量％に希釈した。得られたＳＣ片の外側を約５ｍｇ／ｃｍ２で処理した。処理したＳＣの回折パターンの取得は、処理後１５分、１８０分、３８５分の時点で行った。未処理のコントロールサンプルも分析しました。
回折
ｌ‘ＥＳＲＦのｂｅａｍｌｉｎｅＩＤ１３
波長：０．９５３７Å
フルモード
ビームサイズ２．６（ｈ）×１．６（ｖ）ｍｍ２
サンプル-検出器の距離：１３２ｍｍ
検出器ＦＲＥＬＯＮ（ピクセル５０×５０μｍ２）
２μｍのステップサイズでの垂直スキャン（サンプルプレイスに垂直）
異なる位置でのサンプルごとの３回のスキャン
ポイントあたりの露出時間：０．１秒
温度：ｔ＝２２℃、湿度：ＨＲ ５３％
【0039】
【0040】
【0041】
図２は、細胞成長促進試験の結果を示す図であり、図３は細胞増殖促進能試験の結果を示す図である。図２の縦軸は増殖率（％）、横軸は合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３の配合量（質量％）を示し、図３の縦軸は増殖率（％）、横軸はポリペプチド－１２３（以下、「合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３」を「ポリペプチド－１２３」と称すこともある）およびマリンコラーゲン（魚コラーゲン）の配合量（質量％）を示す。図２および図３の結果から、０．００１質量％～０．５質量％の範囲で、ヒト表皮細胞および繊維芽細胞の増殖を促進した。また、配合量が多いほど、増殖効果は大きく、効果とコストを考慮すると０．０１質量％が最も好ましかった。
【0042】
【0043】
図４は、創傷治癒促進能試験の結果を示す写真であり、図５は、創傷治癒促進能試験の結果を示すグラフである。図５の縦軸は傷の距離の減少率（％）を示し、横軸は時間（Ｈ）である。図４および図５から、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することで創傷治癒促進能が大きくなることがわかった。
【0044】
【0045】
図６は、抗シワ試験の結果を示す写真であり、図７は、抗シワ試験の結果を示すグラフである。図７の縦軸は抗シワ試験の改善率（％）を示し、横軸は時間（週：ｗ）である。図６および図７から、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することで抗シワ効果が大きくなることがわかった。
【0046】
【0047】
図８は、髪の光沢向上試験の結果を示すグラフである。図８の縦軸はＬ値を示し、横軸は各サンプルであり、図８は各サンプルへの浸漬前後の髪のＬ値を示す。図８中、「０．００１質量％」は「合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を０．００１質量％配合した水溶液」、「０．１質量％」は「合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を０．１質量％配合した水溶液」を示す。図８から、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を０．００１質量％有することで、髪の光沢向上効果が大きくなることがわかった。
【0048】
（実験例７）
（脱毛抑制効果試験）
脱毛に関するＳＲＤ５Ａ１（（５α還元酵素Ｉ型）、ＳＲＤ５Ａ２（（５α還元酵素ＩＩ型）、ＳＲＤ５Ａ３（（５α還元酵素ＩＩＩ型）の発現抑制効果を測定し、結果を図９～図１１に示す。
（脱毛抑制効果試験）
脱毛に関するＳＲＤ５Ａ１（（５α還元酵素Ｉ型）、ＳＲＤ５Ａ２（（５α還元酵素ＩＩ型）、ＳＲＤ５Ａ３（（５α還元酵素ＩＩＩ型）の発現抑制効果を測定し、結果を図９～図１１に示す。
【0049】
図９は、ＳＲＤ５Ａ１（（５α還元酵素Ｉ型）の遺伝子発現の結果を示すグラフであり、図１０は、ＳＲＤ５Ａ２（（５α還元酵素ＩＩ型）の遺伝子発現の結果を示すグラフであり、図１１は、ＳＲＤ５Ａ３（（５α還元酵素ＩＩＩ型）の遺伝子発現の結果を示すグラフである。図９～図１１の縦軸は各遺伝子の発現量を示し、横軸は合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３の配合量（質量％）を示す。図９～図１１から、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することで、脱毛抑制効果向上効果が大きくなることがわかった。
【0050】
【0051】
図１２は、７日間の毛髪成長効果試験の結果を示すグラフであり、図１３は、７日間の毛髪成長効果試験の結果を示す写真である。図１２の縦軸は髪の成長度合い（Ｈａｉｒ ｇｒｏｗｔｈ（ｆｏｌｄ ｃｈａｎｇｅ））を示し、横軸は合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３（Ｂｉｏｌｌａｇｅｎ）の配合量（質量％）、ＥＧＦ（上皮成長因子）およびコントロール（ｃｏｎｔｒｏｌ）を示す。また、図１３では、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３（Ｂｉｏｌｌａｇｅｎ）の配合量（質量％）の異なるサンプル、ＥＧＦ（上皮成長因子）およびコントロール（ｃｏｎｔｒｏｌ）を示し、「ＢＡＳＡＬ」は処理前の毛髪、「Ｄ７」は７日後の毛髪を示す。図１２および図１３から、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を有することで、毛髪成長効果が大きくなることがわかった。
【0052】
（実施例１～実施例８および比較例１）
下記表２および下記表３の処方に従って、実施例１～実施例８および比較例１の皮膚外用剤を作製した。なお、処方中の数値は質量％を示す。
下記表２および下記表３の処方に従って、実施例１～実施例８および比較例１の皮膚外用剤を作製した。なお、処方中の数値は質量％を示す。
【0053】
【表2】
【0054】
【表3】
【0055】
実施例１～実施例８の皮膚外用剤は、皮膚刺激を抑えることができた。一方、比較例１の皮膚外用剤は、合成ヒト遺伝子組換ポリペプチド－１２３を配合していないため皮膚刺激を抑えることができなかった。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
