特開 2023-123469 Ｂ型肝炎ウイルス感染のためのＲＮＡｉ薬

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023123469

(43)【公開日】2023-09-05

(54)【発明の名称】Ｂ型肝炎ウイルス感染のためのＲＮＡｉ薬

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/7105 20060101AFI20230829BHJP

   A61K 31/513 20060101ALI20230829BHJP

   A61K 31/522 20060101ALI20230829BHJP

   A61K 31/675 20060101ALI20230829BHJP

   A61K 38/21 20060101ALI20230829BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20230829BHJP

   A61K 47/54 20170101ALI20230829BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20230829BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20230829BHJP

   A61P 31/20 20060101ALI20230829BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230829BHJP

   C12N 15/113 20100101ALI20230829BHJP

   C07D 411/04 20060101ALN20230829BHJP

   C07D 473/18 20060101ALN20230829BHJP

   C12N 7/00 20060101ALN20230829BHJP

【ＦＩ】

A61K31/7105 ZNA

A61K31/513

A61K31/522

A61K31/675

A61K38/21

A61K45/00

A61K47/54

A61K48/00

A61P1/16

A61P31/20

A61P43/00 121

C12N15/113 100Z

C07D411/04

C07D473/18

C12N7/00

【審査請求】有

【請求項の数】1

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2023090659

(22)【出願日】2023-06-01

(62)【分割の表示】P 2022015856の分割

【原出願日】2017-08-04

(31)【優先権主張番号】62/370,754

(32)【優先日】2016-08-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/534,733

(32)【優先日】2017-07-20

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/540,639

(32)【優先日】2017-08-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(71)【出願人】

【識別番号】512219840

【氏名又は名称】アローヘッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100092783

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 浩

(74)【代理人】

【識別番号】100095360

【弁理士】

【氏名又は名称】片山 英二

(74)【代理人】

【識別番号】100093676

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 純子

(74)【代理人】

【識別番号】100120134

【弁理士】

【氏名又は名称】大森 規雄

(72)【発明者】

【氏名】リ，ジェン

(72)【発明者】

【氏名】ヂュー，ルイ

(72)【発明者】

【氏名】ウッドデル，クリスティーン アイ．

(72)【発明者】

【氏名】ギヴン，ブルース ディー．

(72)【発明者】

【氏名】ペイ，タオ

(72)【発明者】

【氏名】ルイス，デイヴィッド エル．

(72)【発明者】

【氏名】アルメイダ，ローレン ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】ロゼマ，デイヴィッド ビー．

(72)【発明者】

【氏名】ウェイクフィールド，ダレン エイチ．

(57)【要約】      （修正有）

【課題】Ｂ型肝炎ウイルスの遺伝子発現を阻害するための組成物及び方法を提供する。
【解決手段】Ｂ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するためのＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）薬が記述される。本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、例えば、コンジュゲートされた標的化リガンドを使用することによって、肝細胞などの細胞に対して標的化され得る。所望により１つ又は複数の追加の治療薬を備えた、１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む医薬組成物が、更に記述される。記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を、感染した肝臓にインビボで送達することにより、ＨＢＶ遺伝子発現の阻害と、ＨＢＶ感染に関係する疾患及び状態の治療とが提供される。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

アンチセンス鎖及びセンス鎖を含むＢ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するためのＲ
ＮＡｉ薬であって、前記アンチセンス鎖は、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチ
センス鎖配列に対して少なくとも約８５％の同一性を有する配列を含む、ＲＮＡｉ薬。

【請求項2】

前記アンチセンス鎖が、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス配列の少な
くとも１６個の連続ヌクレオチドを含む、請求項１に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項3】

前記アンチセンス鎖が、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス鎖配列の位
置２～１８（５’→３’）のヌクレオチドを含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項4】

前記ＲＮＡｉ薬の前記センス鎖の少なくとも１つのヌクレオチド、及び／又は、前記ア
ンチセンス鎖の少なくとも１つのヌクレオチドが、修飾ヌクレオチドである、及び／又は
修飾ヌクレオシド間連結を有する、請求項１又は２に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項5】

前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖が、それぞれ１７～３０ヌクレオチド長である、
請求項１～４のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項6】

前記センス鎖が、表２又は表４に提供されるいずれかのセンス鎖配列の少なくとも１６
個の連続ヌクレオチドを含み、かつ前記センス鎖が、前記アンチセンス鎖に対して前記１
６個の連続ヌクレオチドにわたって少なくとも約８５％の相補性の領域を有する、請求項
１～５のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項7】

前記ＲＮＡｉ薬の前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖の両方における全て又は実質的
に全てのヌクレオチドが、修飾ヌクレオチドである、請求項１～６のいずれかに記載のＲ
ＮＡｉ薬。

【請求項8】

前記アンチセンス鎖が、表３に提供されるいずれかの修飾配列のヌクレオチド配列を含
む、請求項１に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項9】

前記センス鎖が、表４に提供されるいずれかの修飾センス配列のヌクレオチド配列を含
む、請求項１又は８に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項10】

請求項１～９のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬を含む、ＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するた
めの組成物であって、前記ＲＮＡｉ薬が標的化リガンドにコンジュゲートされている、組
成物。

【請求項11】

前記標的化リガンドがＮ－アセチル－ガラクトサミンを含む、請求項１０に記載の組成
物。

【請求項12】

前記標的化リガンドが（ＮＡＧ１３）、（ＮＡＧ１３）ｓ、（ＮＡＧ１８）、（ＮＡＧ
１８）ｓ、（ＮＡＧ２４）、（ＮＡＧ２４）ｓ、（ＮＡＧ２５）、（ＮＡＧ２５）ｓ、（
ＮＡＧ２６）、（ＮＡＧ２６）ｓ、（ＮＡＧ２７）、（ＮＡＧ２７）ｓ、（ＮＡＧ２８）
、（ＮＡＧ２８）ｓ、（ＮＡＧ２９）、（ＮＡＧ２９）ｓ、（ＮＡＧ３０）、（ＮＡＧ３
０）ｓ、（ＮＡＧ３１）、（ＮＡＧ３１）ｓ、（ＮＡＧ３２）、（ＮＡＧ３２）ｓ、（Ｎ
ＡＧ３３）、（ＮＡＧ３３）ｓ、（ＮＡＧ３４）、（ＮＡＧ３４）ｓ、（ＮＡＧ３５）、
（ＮＡＧ３５）ｓ、（ＮＡＧ３６）、（ＮＡＧ３６）ｓ、（ＮＡＧ３７）、（ＮＡＧ３７
）ｓ、（ＮＡＧ３８）、（ＮＡＧ３８）ｓ、（ＮＡＧ３９）、又は（ＮＡＧ３９）ｓであ
る、請求項１１に記載の組成物。

【請求項13】

前記標的化リガンドが、前記ＲＮＡｉ薬の前記センス鎖にコンジュゲートされている、
請求項１０～１２のいずれかに記載の組成物。

【請求項14】

前記組成物が、製薬的に許容される賦形剤を更に含む、請求項１０～１３のいずれかに
記載の組成物。

【請求項15】

前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０
１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６
９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７
４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００
１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００
６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７
６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１
４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１
９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２
５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３
０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３
５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４
０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７
１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７
６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８
１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８
７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９
３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９
８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７
３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７
８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７
３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８
２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６
３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７
０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７
５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４
８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５のデュプレックス構造を有す
る、請求項１０～１４のいずれかに記載の組成物。

【請求項16】

前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４８７
２；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８２；又はＡＤ０５０７０のデュプレ
ックス構造を有する、請求項１５に記載の組成物。

【請求項17】

前記組成物が、Ｂ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するためのセンス鎖及びアンチセ
ンス鎖を含む第２のＲＮＡｉ薬を更に含む、請求項１０～１６のいずれかに記載の組成物
。

【請求項18】

前記第２のＲＮＡｉ薬が、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス鎖配列に
対して少なくとも約８５％の同一性を有するアンチセンス配列を含む、請求項１７に記載
の組成物。

【請求項19】

前記第２のＲＮＡｉ薬の前記アンチセンス鎖が、表２又は表３に提供されるいずれかの
アンチセンス配列の少なくとも１６個の連続ヌクレオチドを含む、請求項１８に記載の組
成物。

【請求項20】

前記第２のＲＮＡｉ薬の前記アンチセンス鎖が、表２又は表３に提供されるいずれかの
アンチセンス鎖配列の位置２～１８（５’→３’）のヌクレオチドを含む、請求項１９に
記載の組成物。

【請求項21】

前記第１のＲＮＡｉ薬が、ＨＢＶ遺伝子のＳオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）
を標的とし、かつ、前記第２のＲＮＡｉ薬が、ＨＢＶ遺伝子のＸオープンリーディングフ
レーム（ＯＲＦ）を標的とする、請求項１７～２０のいずれかに記載の組成物。

【請求項22】

前記第１のＲＮＡｉ薬がＨＢＶ遺伝子のＸ ＯＲＦを標的とし、かつ、前記第２のＲＮ
Ａｉ薬が、ＨＢＶ遺伝子のＳ ＯＲＦを標的とする、請求項１７～２０のいずれかに記載
の組成物。

【請求項23】

前記第１のＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０４００１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０
４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０
４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２５；ＡＤ０
４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３０；ＡＤ０
４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３５；ＡＤ０
４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４０；ＡＤ０
４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５８１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０
４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０
４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０
４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０
４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０
４７７５；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７３；ＡＤ０
４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４９６２；及びＡＤ０５１６４から
なる群から選択され、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；
ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；
ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；
ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；
ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４１７６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；
ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；
ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４５７０；
ＡＤ０４５７１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；
ＡＤ０４５７６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；
ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７８；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８８１；
ＡＤ０４８８２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６３；
ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７０；
ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７５；
ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４８；
ＡＤ０５１４９；及びＡＤ０５１６５からなる群から選択される、請求項１７～２１のい
ずれかに記載の組成物。

【請求項24】

前記第１のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４８７２であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬がＡＤ０５
０７０である、請求項１７～２１又は２３のいずれかに記載の組成物。

【請求項25】

前記第１のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４８７２であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４
９８２である、請求項１７～２１又は２３のいずれかに記載の組成物。

【請求項26】

前記第１のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４８７２であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４
７７６である、請求項１７～２１又は２３のいずれかに記載の組成物。

【請求項27】

前記第１のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４５８５であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４
５８０である、請求項１７～２１のいずれかに記載の組成物。

【請求項28】

１つ又は複数の追加の治療を更に含む、請求項１０～２７のいずれかに記載の組成物。

【請求項29】

前記追加の治療が、ラミブジン、テノホビル、テノホビルアラフェナミド、テノホビル
ジソプロキシル、又はエンテカビルである、請求項２８に記載の組成物。

【請求項30】

前記追加の治療がインターフェロンである、請求項２８に記載の組成物。

【請求項31】

対象におけるＢ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するための方法であって、請求項１
～９のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項32】

対象におけるＢ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するための方法であって、請求項１
０～３０のいずれかに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項33】

前記対象が、ＨＢＶ感染を有するか又は有するリスクがある、請求項３１又は３２に記
載の方法。

【請求項34】

対象におけるＨＢＶ感染及び／又はＨＢＶ感染に関連する疾患、障害、又は状態を治療
するための方法であって、請求項１～９のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬の有効量を対象に
投与することを含む、方法。

【請求項35】

対象におけるＨＢＶ感染及び／又はＨＢＶ感染に関連する疾患、障害、又は状態を治療
するための方法であって、請求項１０～３０のいずれかに記載の組成物の有効量を対象に
投与することを含む、方法。

【請求項36】

前記組成物が、Ｂ型肝炎ウイルス遺伝子の前記発現を阻害するための２つのＲＮＡｉ薬
の有効量を含む、請求項３２、３３、又は３５に記載の方法。

【請求項37】

前記組成物の前記有効量が、対象におけるＨＢｓＡｇのレベルを、前記組成物の投与前
の前記対象のＨＢｓＡｇ発現レベルに比べて、少なくとも約４０％低下させるのに十分で
ある、請求項３２、３３、３５、又は３６のいずれかに記載の方法。

【請求項38】

前記組成物の前記有効量が、対象におけるＨＢｅＡｇのレベルを、前記組成物の投与前
の前記対象のＨＢｅＡｇ発現レベルに比べて、少なくとも約４０％低下させるのに十分で
ある、請求項３２、３３、３５、又は３６のいずれかに記載の方法。

【請求項39】

前記組成物の前記有効量が、対象における血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、前記組成物の
投与前の前記対象の血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルに比べて、少なくとも約４０％低下させる
のに十分である、請求項３２、３３、３５、又は３６のいずれかに記載の方法。

【請求項40】

ＨＢＶ感染に関連する前記疾患、障害、又は状態が、慢性肝疾患若しくは障害、肝臓炎
症、線維化状態、増殖性疾患、肝細胞癌、Ｄ型肝炎ウイルス感染、又は急性ＨＢＶ感染で
ある、請求項３４又は３５に記載の方法。

【請求項41】

前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約１：１の比で投与される、請求項
３２、３３、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０のいずれかに記載の方法。

【請求項42】

前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約２：１の比で投与される、請求項
３２、３３、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０のいずれかに記載の方法。

【請求項43】

前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約３：１の比で投与される、請求項
３２、３３、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０のいずれかに記載の方法。

【請求項44】

前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約４：１の比で投与される、請求項
３２、３３、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０のいずれかに記載の方法。

【請求項45】

前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約５：１の比で投与される、請求項
３２、３３、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０のいずれかに記載の方法。

【請求項46】

前記第１のＲＮＡｉ薬の前記有効量が約０．５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの間であり
、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬の前記有効量が約０．５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの間で
ある、請求項３２、３３、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０のいずれかに記載の
方法。

【請求項47】

前記ＲＮＡｉ薬の前記有効量が、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの間である、請
求項３１に記載の方法。

【請求項48】

ＨＢＶ感染の治療のための、請求項１～９のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬の使用。

【請求項49】

ＨＢＶ感染の治療のための、請求項１０～３０のいずれかに記載の組成物の使用。

【請求項50】

ＨＢＶ感染の治療のために医薬品を製造するための、請求項１０～３０のいずれかに記
載の組成物の使用。

【請求項51】

アンチセンス鎖及びセンス鎖を含むＢ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するためのＲ
ＮＡｉ薬であって、前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５０
０；ＡＤ０３５０１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６
８；ＡＤ０３９６９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７
３；ＡＤ０３９７４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７
８；ＡＤ０４００１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００
５；ＡＤ０４００６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１
０；ＡＤ０４１７６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１
３；ＡＤ０４４１４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１
８；ＡＤ０４４１９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２
３；ＡＤ０４４２５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２
９；ＡＤ０４４３０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３
４；ＡＤ０４４３５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３
９；ＡＤ０４４４０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７
０；ＡＤ０４５７１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７
５；ＡＤ０４５７６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８
０；ＡＤ０４５８１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８
６；ＡＤ０４５８７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９
２；ＡＤ０４５９３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９
７；ＡＤ０４５９８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７
２；ＡＤ０４７７３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７
７；ＡＤ０４７７８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７
２；ＡＤ０４８７３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８
１；ＡＤ０４８８２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６
２；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６
９；ＡＤ０５０７０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７
４；ＡＤ０５０７５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４
７；ＡＤ０５１４８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５からなる群
からのデュプレックス構造におけるそれぞれのセンス鎖又はアンチセンス鎖に同一又は実
質的に同一なセンス鎖又はアンチセンス鎖を含むデュプレックス構造を有する、ＲＮＡｉ
薬。

【請求項52】

前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０
１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６
９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７
４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００
１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００
６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７
６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１
４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１
９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２
５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３
０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３
５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４
０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７
１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７
６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８
１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８
７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９
３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９
８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７
３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７
８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７
３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８
２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６
３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７
０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７
５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４
８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５からなる群からのデュプレッ
クス構造におけるそれぞれのセンスに同一又は実質的に同一なセンス鎖を含むデュプレッ
クス構造を有する、請求項５１に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項53】

前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０
１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６
９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７
４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００
１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００
６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７
６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１
４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１
９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２
５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３
０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３
５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４
０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７
１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７
６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８
１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８
７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９
３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９
８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７
３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７
８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７
３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８
２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６
３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７
０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７
５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４
８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５からなる群からのデュプレッ
クス構造におけるそれぞれのアンチセンス鎖に同一又は実質的に同一なアンチセンス鎖を
含むデュプレックス構造を有する、請求項５２に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項54】

前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０
１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６
９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７
４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００
１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００
６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７
６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１
４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１
９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２
５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３
０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３
５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４
０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７
１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７
６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８
１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８
７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９
３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９
８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７
３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７
８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７
３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８
２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６
３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７
０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７
５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４
８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５からなる群からのデュプレッ
クス構造におけるそれぞれのセンス鎖及びアンチセンス鎖に両方とも同一又は実質的に同
一なセンス鎖及びアンチセンス鎖を含むデュプレックス構造を有する、請求項５３に記載
のＲＮＡｉ薬。

【請求項55】

前記実質的に同一であることが、正確に同一であるか、少なくとも、又は約８５％、８
６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９
６％、９７％、９８％、又は９９％である、請求項５１～５４に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項56】

前記実質的に同一であることが、少なくとも、又は約８５％、８６％、８７％、８８％
、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％
、又は９９％である、請求項５１～５４のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項57】

前記実質的に同一であることが、約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％
、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％であ
る、請求項５１～５４のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項58】

前記実質的に同一であることが、少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９
％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は
９９％である、請求項５１～５４のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項59】

請求項５１～５８のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬を含む組成物。

【請求項60】

請求項５１～５８のいずれかに記載の、少なくとも２つのＲＮＡｉ薬を含む組成物。

【請求項61】

前記ＲＮＡｉ薬が少なくとも１つのオーバーハングを含む、請求項１～９又は５１～５
８のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項62】

前記ＲＮＡｉ薬が前記アンチセンス鎖の３’末端にオーバーハングを含む、請求項６１
に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項63】

前記ＲＮＡｉ薬が、前記アンチセンス鎖の３’末端及び前記センス鎖の３’末端にオー
バーハングを含む、請求項６２に記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項64】

前記ＲＮＡｉ薬が１つ又は２つの平滑末端を含む、請求項１～９又は５１～５８のいず
れかに記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項65】

前記ＲＮＡｉ薬が１つ又は２つのフレイド末端を含む、請求項１～９又は５１～５８の
いずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【請求項66】

前記センス鎖が少なくとも１つの逆向き塩基脱落ヌクレオシドを含む、請求項１～９、
５１～５８、又は６１～６５のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（関連出願の相互参照）
本出願は、米国仮特許出願第６２／５４０，６３９号（２０１７年８月３日）、同第６
２／５３４，７３３号（２０１７年７月２０日）、及び同第６２／３７０，７５４号（２
０１６年８月４日）に対して優先権を主張し、これらそれぞれの内容全体が、参照により
本明細書に組み込まれる。

【0002】

（発明の分野）
本明細書で開示されるのは、Ｂ型肝炎ウイルスの遺伝子発現を阻害するためのＲＮＡ干
渉（ＲＮＡｉ）薬、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む組成物、及びその使用方法である。

【背景技術】

【0003】

Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）は、厳密な肝臓指向性の二本鎖ＤＮＡを含むウイルスであ
る。ＤＮＡは遺伝物質であるが、その複製周期には、プレゲノムＲＮＡをＤＮＡにコピー
する逆転写工程が含まれる。Ｂ型肝炎ウイルスは、ヘパドナウイルスの１つのメンバーと
して分類され、ヘパドナウイルス科のファミリーに属する。Ｂ型肝炎ウイルスを有する成
人の一次感染は、臓器炎症症状、発熱、黄疸、及び血液中の肝臓トランスアミナーゼの増
加を伴う急性肝炎を引き起こす。ウイルス感染を克服することができない患者は、長年に
わたって慢性疾患が進行し、肝硬変や肝臓癌に至るリスクが高まる。Ｂ型肝炎ウイルス感
染した母親から新生児への周産期感染も、慢性肝炎につながる。

【0004】

肝細胞により取り込まれると、そのヌクレオカプシドが核に移動し、ＤＮＡが放出され
る。ここでＤＮＡ鎖合成が完了し、隙間が補修されて、３．２ｋｂの共有結合閉環状（ｃ
ｃｃ）スーパーコイルＤＮＡを生じる。このｃｃｃＤＮＡは、５つの主要なウイルスｍＲ
ＮＡ（これらは長さ３．５、３．５、２．４、２．１、及び０．７ｋｂである）の転写の
テンプレートとして作用する。全てのｍＲＮＡは５’末端がキャップされ、３’末端がポ
リアデニル化されている。５つのｍＲＮＡ全ての間には、３’末端に配列重複がある。

【0005】

１つの３．５ｋｂのｍＲＮＡは、コアタンパク質及びポリメラーゼ生成のテンプレート
として作用する。また、同じ転写物がプレゲノム複製中間体として作用し、これによりウ
イルスのポリメラーゼがＤＮＡへの逆転写を開始することができる。コアタンパク質は、
ヌクレオカプシド形成のために必要となる。他の３．５ｋｂのｍＲＮＡは、分泌可能なｅ
抗原（ＨＢｅＡｇ）のプレコアをコードする。複製阻害剤が存在しない場合、血液中のｅ
抗原の存在量は、肝臓におけるＢ型肝炎ウイルス複製と相関関係があり、疾患進行をモニ
ターする重要な診断マーカーとなる。

【0006】

２．４ｋｂ及び２．１ｋｂのｍＲＮＡは、ウイルスの大型、中型、及び小型の表面抗原
の発現のための、オープンリーディングフレーム（「ＯＲＦ」）のプレＳ１、プレＳ２及
びＳを擁している。Ｓ抗原は、感染性の、完全粒子と関連している。また、感染した患者
の血液は、ゲノムＤＮＡ又はポリメラーゼを含まない、Ｓ抗原単独に由来する非感染性粒
子も含む。これらの粒子の機能は完全には解明されていない。血液中の検出可能なＳ抗原
の完全かつ持続的な枯渇は、Ｂ型肝炎ウイルスのクリアランスに対する信頼性のある指標
と考えられる。

【0007】

０．７ｋｂのｍＲＮＡは、Ｘタンパク質をコードする。この遺伝子産物は、ウイルス遺
伝子の効率的な転写のために重要であり、宿主遺伝子発現に対する転写活性化因子として
も作用する。後者の活性は、肝臓癌の発達中の肝細胞形質転換に関して重要であると見ら
れる。

【0008】

６か月以上にわたって血液中に検出可能なＳ抗原、ｅ抗原、及び／又はウイルスＤＮＡ
がある患者は、慢性的に感染していると見なされる。逆転写酵素活性の阻害剤としてのヌ
クレオシド類似体は典型的に、多くの患者に対して第１の治療オプションである。ラミブ
ジン、テノホビル、及び／又はエンテカビルの投与は、肝機能の改善と、典型的に最も重
要な利点と考えられる肝臓炎症の低減を伴って、時には検出不能なレベルまでＢ型肝炎ウ
イルス複製を抑制することが示されている。しかし、治療終了後に完全かつ持続的な寛解
を達成する患者はわずかである。更に、Ｂ型肝炎ウイルスは、治療の持続期間が長くなる
につれて、薬剤耐性を生じる。これは特に、Ｂ型肝炎及びヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ
）に重感染した患者にとっては困難である。両方のウイルスがヌクレオシドアナログ薬（
nucleoside analogue drug）に感受性であり、耐性を同時に生じる可能性がある。

【0009】

第２の治療オプションは、インターフェロンαの投与である。ここで、患者は、６か月
間にわたって高用量のインターフェロンαが投与される。アジア遺伝子型Ｂは、奏功率が
非常に低い。Ｄ型肝炎ウイルス（ＨＤＶ）又はヒト免疫不全ウイルスとの重感染は、イン
ターフェロンα療法を完全に無効化することが示されている。激しい肝障害及び重い線維
化状態がある患者は、インターフェロンα療法には不適格となる。

【0010】

特定のＢ型肝炎ウイルス特異的ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）薬は、ＨＢＶ遺伝子発現の発現
を阻害することがこれまでに示されている。例えば、米国特許出願公開第２０１３／００
０５７９３号（Ｃｈｉｎ ｅｔ ａｌ．）（この全体が参照により本明細書に組み込まれ
る）は、Ｂ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するための、特定の二本鎖リボ核酸（ｄｓ
ＲＮＡ）分子を開示している。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0011】

Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）遺伝子の発現を選択的かつ効率的に阻害することができる
、新しいＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）特異的ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）薬（本明細書におい
てのＲＮＡｉ薬、ＲＮＡｉトリガ、又はトリガとも記載される）が必要とされている。ま
た、ＨＢＶ感染の治療及びＨＢＶに関連する疾患の予防のために、新しいＨＢＶ特異的Ｒ
ＮＡｉ薬を組み合わせることが必要とされている。

【0012】

本明細書に記載されるのは、ＨＢＶ遺伝子の発現を選択的かつ効率的に減少させること
ができるＨＢＶ遺伝子特異的ＲＮＡｉ薬である。記述されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢ
Ｖ感染の症状及び関連疾患の治療処置及び／又は予防のための方法に使用することができ
、これには、慢性肝疾患／障害、炎症、線維化状態、増殖性疾患（肝細胞癌などの癌を含
む）、Ｄ型肝炎ウイルス（ＨＤＶ）感染、及び急性ＨＢＶ感染が挙げられるがこれらに限
定されない。いくつかの実施形態において、このＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、慢性ＨＢＶ感染
及び／又はＨＤＶ感染に関連する症状及び疾患の治療処置及び／又は予防のための方法に
使用することができる。このような方法は、本明細書に記載の１つ又は複数のＨＢＶ Ｒ
ＮＡｉ薬を、対象（例えばヒト又は動物の対象）に投与することを含む。

【0013】

また、本明細書中に記載されるのは、ＨＢＶ遺伝子の発現を選択的かつ効率的に減少さ
せることができる、１つ又は複数の開示されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む組成物である。
この１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む組成物は、ＨＢＶ感染に関連する症状及び
疾患の治療及び／又は予防のために、対象（例えばヒト又は動物の対象）に投与すること
ができる。

【0014】

本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、少なくとも１つのセンス鎖及び１つのア
ンチセンス鎖を含む。センス鎖とアンチセンス鎖とは、部分的に、実質的に、又は完全に
、互いに対して相補的であり得る。本明細書に記載のＲＮＡｉ薬のセンス鎖とアンチセン
ス鎖の長さは、それぞれ１６～３０ヌクレオチド長であり得る。いくつかの実施形態にお
いて、センス鎖及びアンチセンス鎖は独立に１７～２６ヌクレオチド長である。いくつか
の実施形態において、センス鎖及びアンチセンス鎖は独立に１９～２６ヌクレオチド長で
ある。いくつかの実施形態において、センス鎖及びアンチセンス鎖は独立に２１～２６ヌ
クレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖及びアンチセンス鎖は独立
に２１～２４ヌクレオチド長である。センス鎖及びアンチセンス鎖は、同じ長さ又は異な
る長さのいずれでもあり得る。本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、既知のＨＢ
Ｖ血清型の大部分にわたって保存されている、ＨＢＶゲノム中の配列に少なくとも部分的
に相補的であるような、アンチセンス鎖配列を含むように設計されている。本明細書に記
載のＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶを発現する細胞に送達されると、ｉｎ ｖｉｖｏ又はｉｎ ｖ
ｉｔｒｏで、１つ又は複数のＨＢＶ遺伝子の発現を阻害する。

【0015】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、第１の配列を含むセンス鎖（パッセンジャー鎖とも呼ばれる）
と、第２の配列を含むアンチセンス鎖（ガイド鎖とも呼ばれる）とを含む。本明細書に記
載されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖は、ＨＢＶ ｍＲＮＡにおける少なくとも１６個
の連続ヌクレオチドのヌクレオチド配列に対して少なくとも約８５％の同一性を有する、
コアストレッチを含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ｍＲＮＡにおける配列に
対して少なくとも約８５％の同一性を有する、センス鎖コアヌクレオチドストレッチは、
１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、又は２３ヌクレオチド長である。ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖は、ＨＢＶ ｍＲＮＡ及び対応するセンス鎖における配列に
対して、少なくとも１６個の連続ヌクレオチドのコアストレッチにわたって、少なくとも
約８５％の相補性を有するヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢ
Ｖ ｍＲＮＡ又は対応するセンス鎖の配列に対して少なくとも約８５％の相補性を有する
アンチセンス鎖コアヌクレオチド配列は、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、
又は２３ヌクレオチド長である。

【0016】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬に用いることができるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセ
ンス鎖の例が、表３及び４に提供される。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬デュプレックスの例が、表
５に提供される。本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセンス
鎖からなる、又はこれらに含まれる、１９ヌクレオチドのコアストレッチ配列の例が、表
２に提供される。

【0017】

いくつかの実施形態において、１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、当該技術分野で
周知の任意のオリゴヌクレオチド送達技術を使用して、標的細胞又は組織に送達される。
核酸送達方法には、リポソーム内カプセル封入によるもの、イオントフォレシスによるも
の、又は、他のビヒクル（例えばヒドロゲル、シクロデキストリン、生分解性ナノカプセ
ル、及び生体接着性微小球）、タンパク質性ベクター、若しくはＤｙｎａｍｉｃ Ｐｏｌ
ｙｃｏｎｊｕｇａｔｅ（ＤＰＣ）に組み込むことによるものが挙げられるが、これらに限
定されない（例えば、国際公開第２０００／０５３７２２号、同第２００８／００２２３
０９号、同第２０１１／１０４１６９号、及び同第２０１２／０８３１８５号を参照、こ
れらそれぞれが参照により本明細書に組み込まれる）。いくつかの実施形態において、Ｈ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＲＮＡｉ薬を標的化基に共有結合させることにより標的細胞又は組
織に送達される。いくつかの実施形態において、この標的化基は、アシアロ糖タンパク質
受容体（ＡＳＧＰｒ）リガンドなどの細胞受容体リガンドを含み得る。いくつかの実施形
態において、ＡＳＧＰｒリガンドは、ガラクトース誘導体クラスターを含むか又はこれか
らなる。いくつかの実施形態において、ガラクトース誘導体クラスターは、Ｎ－アセチル
－ガラクトサミン三量体又はＮ－アセチル－ガラクトサミン四量体を含む。いくつかの実
施形態において、ガラクトース誘導体クラスターは、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン三量
体又はＮ－アセチル－ガラクトサミン四量体である。

【0018】

標的化基は、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖又はアンチセンス鎖の３’又は５’末端に
連結し得る。いくつかの実施形態において、標的化基はセンス鎖の３’又は５’末端に連
結される。いくつかの実施形態において、標的化基はセンス鎖の５’末端に連結される。
いくつかの実施形態において、標的化基はリンカーを介してＲＮＡｉ薬に連結される。

【0019】

標的化基は、リンカーあり又はなしで、表２、３、及び４に開示されるいずれかのセン
ス鎖及び／又はアンチセンス鎖の５’又は３’末端に連結され得る。リンカーは、標的化
基あり又はなしで、表２、３、及び４に開示されるいずれかのセンス鎖及び／又はアンチ
センス鎖の５’又は３’末端に取り付けられ得る。

【0020】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるのは、表５に開示されるデュプレ
ックス配列を有する１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む組成物である。

【0021】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるのは、異なるヌクレオチド配列を
有する少なくとも２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の組み合わせ又はカクテルを含む組成物であ
る。いくつかの実施形態において、２つ以上の異なるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬が、それぞれ別
個かつ独立に標的化基に連結されている。いくつかの実施形態において、２つ以上の異な
るＨＢＶ ＲＮＡｉ薬が、それぞれ、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンからなる標的化基に
連結されている。いくつかの実施形態において、２つ以上のＲＮＡｉ薬が組成物に含まれ
る場合、このＲＮＡｉ薬のそれぞれが同じ標的化基に連結されている。いくつかの実施形
態において、２つ以上のＲＮＡｉ薬が組成物に含まれる場合、このＲＮＡｉ薬のそれぞれ
が、異なる標的化基（例えば異なる化学構造を有する標的化基）に連結されている。

【0022】

いくつかの実施形態において、標的化基は、追加のリンカーを使用することなしに、Ｈ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬に連結されている。いくつかの実施形態において、標的化基は、ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬への連結を促進するために予め存在するリンカーを有するよう設計される。
いくつかの実施形態において、２つ以上のＲＮＡｉ薬が組成物に含まれる場合、この２つ
以上のＲＮＡｉ薬は、同じリンカーを用いて標的化基に連結され得る。いくつかの実施形
態において、２つ以上のＲＮＡｉ薬が組成物に含まれる場合、この２つ以上のＲＮＡｉ薬
は、異なるリンカーを用いて標的化基に連結される。

【0023】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるのは、異なる配列を有する少なく
とも２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の組み合わせを含む組成物であり、この各ＨＢＶ ＲＮＡ
ｉ薬は、ＨＢＶ遺伝子の異なる位置又は異なる領域を標的とする。いくつかの実施形態に
おいて、本明細書に記載されるのは、少なくとも２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の組み合わせ
を含む組成物であり、この各ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、異なるＨＢＶ転写物を標的とするよ
う設計される（例えば、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む組成物で、第１のＨＢＶ ＲＮ
Ａｉ薬は、ＨＢＶ遺伝子のＳ ＯＲＦに位置するあるヌクレオチド配列に少なくとも部分
的に相補的なアンチセンス鎖を含み、一方、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶ遺伝子
のＸ ＯＲＦに位置するあるヌクレオチド配列に少なくとも部分的に相補的なアンチセン
ス鎖を含む）。本明細書で使用されるとき、Ｓ ＯＲＦに位置するヌクレオチド配列に少
なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖を含むＲＮＡｉ薬は、配列番号１のＨＢＶゲノ
ムの位置１～１３０７及び３１８５～３２２１の一部を標的とする。本明細書で使用され
るとき、Ｘ ＯＲＦに位置するヌクレオチド配列に少なくとも部分的に相補的なアンチセ
ンス鎖を含むＲＮＡｉ薬は、配列番号１のＨＢＶゲノムの位置１３０８～１９３０の一部
を標的とする。

【0024】

ＨＢＶ ｍＲＮＡは多シストロン性であることが知られており、これにより、複数のポ
リペプチドが翻訳され、それぞれのｍＲＮＡがＲＮＡ配列内で重複する。よって、ＨＢＶ
遺伝子を標的とする単一のＲＮＡｉ薬で、大半の又は全てのＨＢＶ転写物の阻害をもたら
すことが可能になる。ただし、理論に拘束されるものではないが、ＨＢＶ遺伝子の異なる
位置又は領域を標的とする２つ以上のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む組成物は（特に、２つ以
上のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬で、一方のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬がＳ ＯＲＦを標的とし、第２の
ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬がＸ ＯＲＦを標的とする場合）、単一のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のみを
含む組成物に比べて付加的な利点を提供する可能性があることが仮定され、この利点には
例えば、（ａ）全てのＨＢＶウイルス転写物が確実に標的となるようにすること（すなわ
ち、３．５ｋｂプレゲノムＲＮＡ、３．５ｋｂプレコアｍＲＮＡ、２．４ｋｂプレＳ１
ｍＲＮＡ、２．１ｋｂプレＳ２／Ｓ ｍＲＮＡ、０．７ｋｂ Ｘ ｍＲＮＡ、並びに、組
み込まれたＨＢＶ ＤＮＡから生成されるｍＲＮＡを発現する任意のＳ抗原）、（ｂ）よ
り大きな患者集団に潜在的に対処できるようにするため、遺伝子型の包括範囲を拡大する
よう作用すること、及び／又は、（ｃ）ｓｉＲＮＡ結合部位における突然変異によるウイ
ルス耐性を潜在的に低減すること、が挙げられる。

【0025】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるのは、ＨＢＶ ＲＮＡのＳ ＯＲ
Ｆを標的とする１つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（すなわち、Ｓ転写物（Ｓ、プレＳ１、及びプ
レＳ２）、プレゲノムＲＮＡ（コア及びポリメラーゼ）、並びにＨＢＶゲノムのプレコア
転写物（ＨＢｅＡｇ）を標的とするアンチセンス鎖を有するもの）と、ＨＢＶ ＲＮＡの
Ｘ ＯＲＦを標的とする１つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（すなわち、ＨＢＶゲノムのＸ転写物
、Ｓ転写物（Ｓ、プレＳ１、及びプレＳ２）、プレゲノムＲＮＡ（コア及びポリメラーゼ
）、並びにＨＢＶゲノムのプレコア転写物（ＨＢｅＡｇ）を標的とするアンチセンス鎖を
有するもの）との組み合わせを含む組成物である。いくつかの実施形態において、本明細
書に記載される組成物は、ＨＢＶ遺伝子のＳ ＯＲＦを標的とする配列を含む少なくとも
１つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬と、ＨＢＶ遺伝子のＸ ＯＲＦを標的とする配列を含む第２の
ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬とを含む。

【0026】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するための方法であり、この方
法は、表３のいずれかの配列の配列を含むアンチセンス鎖を有する１つ又は複数のＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬を投与することを含む。

【0027】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するための方法であり、この方
法は、表４のいずれかの配列の配列を含むセンス鎖を有する１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮ
Ａｉ薬を投与することを含む。

【0028】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するための方法であり、この方
法は、表３のいずれかの配列の配列を含むアンチセンス鎖と、そのアンチセンス鎖に対し
て少なくとも部分的に相補的な表４のいずれかの配列の配列を含むセンス鎖とを有する、
１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与することを含む。

【0029】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するための方法であり、この方
法は、表３のいずれかの配列の配列からなるアンチセンス鎖と、そのアンチセンス鎖に対
して少なくとも部分的に相補的な表４のいずれかの配列の配列からなるセンス鎖とを有す
る、１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与することを含む。

【0030】

本明細書に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するための方法で
あり、この方法は、表５のデュプレックス構造を有する１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ
薬を投与することを含む。

【0031】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨＢＶ感染によって生じる疾患若
しくは症状の予防の方法であり、この方法は、表３のいずれかの配列の配列を含むアンチ
センス鎖を有する１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与することを含む。

【0032】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨＢＶ感染によって生じる疾患若
しくは症状の予防の方法であり、この方法は、表４のいずれかの配列の配列を含むセンス
鎖を有する１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与することを含む。

【0033】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨＢＶ感染によって生じる疾患若
しくは症状の予防の方法であり、この方法は、表３のいずれかの配列の配列を含むアンチ
センス鎖と、そのアンチセンス鎖に対して少なくとも部分的に相補的な表４のいずれかの
配列の配列を含むセンス鎖とを有する、１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与するこ
とを含む。

【0034】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨＢＶ感染によって生じる疾患若
しくは症状の予防の方法であり、この方法は、表３のいずれかの配列の配列からなるアン
チセンス鎖と、そのアンチセンス鎖に対して少なくとも部分的に相補的な表４のいずれか
の配列の配列からなるセンス鎖とを有する、１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与す
ることを含む。

【0035】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨＢＶ感染によって生じる疾患若
しくは症状の予防の方法であり、この方法は、表５のデュプレックス構造を有する１つ又
は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与することを含む。

【0036】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するための方法であり、この方
法は、（ｉ）表２又は表３のいずれかの配列の配列を含むか又はこれらからなるアンチセ
ンス鎖を有するＨＢＶ ＲＮＡｉ薬と、（ｉｉ）表２又は表３のいずれかの配列の配列を
含むか又はこれらからなるアンチセンス鎖を有する第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬とを、投与
することを含む。

【0037】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨＢＶ感染によって生じる疾患若
しくは症状の予防の方法であり、この方法は、（ｉ）表２又は表３のいずれかの配列の配
列を含むか又はこれらからなるアンチセンス鎖を有するＨＢＶ ＲＮＡｉ薬と、（ｉｉ）
表２又は表３のいずれかの配列の配列を含むか又はこれらからなるアンチセンス鎖を有す
る第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬とを、投与することを含む。

【0038】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するための方法であり、この方
法は、（ｉ）第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬であって、表２又は表３のいずれかの配列の配列
を含むか又はこれらからなるアンチセンス鎖と、その第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチ
センス鎖に対して少なくとも部分的に相補的な表２又は表４のいずれかの配列の配列を含
むか又はこれらからなるセンス鎖とを有する、第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬と、（ｉｉ）第
２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬であって、表２又は表３のいずれかの配列の配列を含むか又はこ
れらからなるアンチセンス鎖と、その第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖に対し
て少なくとも部分的に相補的な表２又は表４のいずれかの配列の配列を含むか又はこれら
からなるセンス鎖とを有する、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬とを、投与することを含む。

【0039】

本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨＢＶ感染によって生じる疾患若
しくは症状の予防の方法であり、この方法は、（ｉ）第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬であって
、表２又は表３のいずれかの配列の配列を含むか又はこれらからなるアンチセンス鎖と、
その第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖に対して少なくとも部分的に相補的な表
２又は表４のいずれかの配列の配列を含むか又はこれらからなるセンス鎖とを有する、第
１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬と、（ｉｉ）第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬であって、表２又は表３
のいずれかの配列の配列を含むか又はこれらからなるアンチセンス鎖と、その第２のＨＢ
Ｖ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖に対して少なくとも部分的に相補的な表２又は表４のい
ずれかの配列の配列を含むか又はこれらからなるセンス鎖とを有する、第２のＨＢＶ Ｒ
ＮＡｉ薬とを、投与することを含む。

【0040】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は以下のもの
を含む：
ａ．配列（５’→３’）ＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣ（配列番号７）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び
、配列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵ（配列番号３４）から０
個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｂ．配列（５’→３’）ＵＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣ（配列番号８）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び
、配列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＡ（配列番号３５）から０
個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｃ．配列（５’→３’）ＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡ（配列番号１２）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵ（配列番号３９）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｄ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡ（配列番号１３）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡ（配列番号４０）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｅ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣ（配列番号１７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号４４）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｆ．配列（５’→３’）ＵＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣ（配列番号１８）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＡ（配列番号４５）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｇ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣ（配列番号２２）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配列番号４９）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｈ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣ（配列番号２３）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配列番号５０）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉ．配列（５’→３’）ＧＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＣ（配列番号５４）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｊ．配列（５’→３’）ＡＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２８）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＵ（配列番号５５）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｋ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２９）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号５６）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖。

【0041】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物はＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む。

【0042】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つ以上のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含
み、第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は：
ｉ）配列（５’→３’）ＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡ（配列番号１２）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵ（配列番号３９）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉ）配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡ（配列番号１３）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、
及び、配列（５’→３’）ＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡ（配列番号４０）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
のいずれかを含み、
第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は：
ｉ）配列（５’→３’）ＧＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＣ（配列番号５４）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉ）配列（５’→３’）ＡＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２８）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、
及び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＵ（配列番号５５）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉｉ）配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２９
）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖
、及び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号５６）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
のいずれかを含む。

【0043】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つ以上のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含
み、第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は：
ｉ）配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣ（配列番号１７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号４４）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉ）配列（５’→３’）ＵＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣ（配列番号１８）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、
及び、配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＡ（配列番号４５）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
のいずれかを含み、
第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は：
ｉ）配列（５’→３’）ＧＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＣ（配列番号５４）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉ）配列（５’→３’）ＡＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２８）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、
及び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＵ（配列番号５５）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉｉ）配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２９
）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖
、及び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号５６）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
のいずれかを含む。

【0044】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つ以上のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含
み、第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は：
ｉ）配列（５’→３’）ＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡ（配列番号１２）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵ（配列番号３９）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉ）配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡ（配列番号１３）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、
及び、配列（５’→３’）ＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡ（配列番号４０）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
のいずれかを含み、
第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶ ｍＲＮＡのＸ ＯＲＦの一部に少なくとも部分
的に相補的な配列を有するアンチセンス鎖を含む。

【0045】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つ以上のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含
み、第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は：
ｉ）配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣ（配列番号１７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号４４）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉ）配列（５’→３’）ＵＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣ（配列番号１８）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、
及び、配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＡ（配列番号４５）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
のいずれかを含み、
第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶ ｍＲＮＡのＸ ＯＲＦの一部に少なくとも部分
的に相補的な配列を有するアンチセンス鎖を含む。

【0046】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つ以上のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含
み、第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶ ｍＲＮＡのＳ ＯＲＦの一部に少なくとも部
分的に相補的な配列を有するアンチセンス鎖を含み、また第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は：
ｉ）配列（５’→３’）ＧＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及
び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＣ（配列番号５４）から
０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉ）配列（５’→３’）ＡＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２８）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、
及び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＵ（配列番号５５）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｉｉｉ）配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧ（配列番号２９
）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖
、及び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号５６）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
のいずれかを含む。

【0047】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は以下のもの
：
ａ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＧＣＣＵＵＡＵ（配
列番号１４９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むア
ンチセンス鎖、又は
ｂ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＧＣＣＵ（配列番号
１５０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセ
ンス鎖、又は
ｃ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＧＣ（配列番号１５
１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｄ．配列（５’→３’）ＵＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＵＵ（配列番号１５
２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｅ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＵＵ（配列番号１５
４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｆ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣＧ（配列番号１６
０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｇ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣ（配列番号１６
２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｈ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵＵ（配列番号
１６３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセ
ンス鎖、又は
ｉ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣＧＡ（配列番号１
７０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｊ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７
１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｋ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＵＵ（配列番号１
７２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｌ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵ（配列番号１
７３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｍ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＵＵ（配列番号１７
４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｎ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣＵＵ（配列番号１
７５）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｏ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＵＵ（配列番号１７
８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｐ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＵＵ（配列番号
１７９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセ
ンス鎖、又は
ｑ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣ（配列番号１
８０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｒ．配列（５’→３’）ＵＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１８
１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｓ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＵＵ（配列番号１８
２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｔ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵＵ（配列番号１
８３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｕ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵＣ（配列番号１
８４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｖ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＵＵ（配列番号１８
５）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｗ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵＵ（配列番号１
８６）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｘ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＵ（配列番号１８
７）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｙ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＧ（配列番号１８
８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｚ．配列（５’→３’）ＡＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣ（配列番号１８
９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ａａ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵ（配列番号１
９０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｂｂ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵ（配列番号１
９１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｃｃ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＧ（配列番号１
９２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｄｄ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＧ（配列番号１
９３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｅｅ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＧＧ（配列番号１
９４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、
を含み、このＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、各アンチセンス鎖に対して少なくとも部分的に相
補的なセンス鎖を更に含む。

【0048】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は以下のもの
：
ａ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＧＣＣＵＵＡＵ（配
列番号１４９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなる
アンチセンス鎖、又は
ｂ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＧＣＣＵ（配列番号
１５０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチ
センス鎖、又は
ｃ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＧＣ（配列番号１５
１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｄ．配列（５’→３’）ＵＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＵＵ（配列番号１５
２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｅ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＵＵ（配列番号１５
４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｆ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣＧ（配列番号１６
０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｇ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣ（配列番号１６
２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｈ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵＵ（配列番号
１６３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチ
センス鎖、又は
ｉ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣＧＡ（配列番号１
７０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｊ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７
１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｋ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＵＵ（配列番号１
７２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｌ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵ（配列番号１
７３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｍ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＵＵ（配列番号１７
４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｎ．配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣＵＵ（配列番号１
７５）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｏ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＵＵ（配列番号１７
８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｐ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＵＵ（配列番号
１７９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチ
センス鎖、又は
ｑ．配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣ（配列番号１
８０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｒ．配列（５’→３’）ＵＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１８
１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｓ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＵＵ（配列番号１８
２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｔ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵＵ（配列番号１
８３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｕ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵＣ（配列番号１
８４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｖ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＵＵ（配列番号１８
５）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｗ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵＵ（配列番号１
８６）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｘ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＵ（配列番号１８
７）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ｙ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＧ（配列番号１８
８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス
鎖、又は
ｚ．配列（５’→３’）ＡＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣ（配列番号１８
９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセン
ス鎖、又は
ａａ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵ（配列番号１
９０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｂｂ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＵ（配列番号１
９１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｃｃ．配列（５’→３’）ＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＧ（配列番号１
９２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、又は
ｄｄ．配列（５’→３’）ＵＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣＧ（配列番号１
９３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｅｅ．配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＧＧ（配列番号１
９４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列からなるアンチセ
ンス鎖、
を含み、このＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、各アンチセンス鎖に対して少なくとも部分的に相
補的なセンス鎖を更に含む。

【0049】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は以下のもの
：
ｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡ
ｆｇＧｆｃｃｓｕｓｕＡｕ（配列番号６１）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチ
ドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃ
ＡｆｇＧｆｃｓｃｓｕ（配列番号６２）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが
異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡ
ｆｃＡｆｇＧｆｃｃｓｕ（配列番号６３）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチド
が異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｉｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡｆ
ｃＡｆｇＧｆｓｃ（配列番号６４）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異な
る配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃ
Ａｆｇｕｓｕ（配列番号６８）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異なる配
列を含むアンチセンス鎖、又は
ｖｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓｃａａｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕａｃａｇ
ｃｓｃ（配列番号８５）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異なる配列を含
むアンチセンス鎖、又は
ｖｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓｕｇａｇＡｆｇＡｆａＧｆｕＣｆｃａｃｃ
ａｃｓｇ（配列番号９４）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異なる配列を
含むアンチセンス鎖、又は
ｖｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧｆｕＣｆｃ
ＡｆｃＣｆａＣｆｇｓａ（配列番号９８）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチド
が異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｉｘ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕｕｕａｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡ
ｆｇｃｓｃ（配列番号１０２）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異なる配
列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕｕｕａｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡｆ
ｇｃｕｓｕ（配列番号１０３）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異なる配
列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕｕｕａｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡ
ｆｇｃｃｓｕ（配列番号１０４）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異なる
配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕｕｕａｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃ
Ａｆｇｃｃｕｓｕ（配列番号１０５）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異
なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｉｉｉ．配列（５’→３’）ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆ
ｃＣｆｕＡｆｃＡｆｇｕｓｕ（配列番号１０７）から０個、１個、２個又は３個のヌクレ
オチドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｉｖ．配列（５’→３’）ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧｆｕ
ＣｆｃＡｆｃＣｆａＣｆｓｇ（配列番号１０８）から０個、１個、２個又は３個のヌクレ
オチドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡｆｃＣ
ｆａｕｓｕ（配列番号１０９）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異なる配
列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｖｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡｆｃ
Ｃｆａｃｓｇ（配列番号１１０）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異なる
配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｖｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡｆ
ｃＣｆａｃｓｕｓｕ（配列番号１１１）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが
異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｖｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡ
ｆｃＣｆａｃｓｇｓａ（配列番号１１２）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチド
が異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｉｘ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡｆｃ
Ｃｆａｃｕｓｕ（配列番号１２０）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異な
る配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘ．配列（５’→３’）ａｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧｆ
ｕＣｆｃｕｓｕ（配列番号１２５）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異な
る配列を含むアンチセンス鎖、
ｘｘｉ．配列（５’→３’）ａｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧ
ｆｕＣｆｃａｓｃ（配列番号１２６）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異
なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｉｉ．配列（５’→３’）ａｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａ
ＧｆｕＣｆｃａｃｕｓｕ（配列番号１２７）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチ
ドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｉｉｉ．配列（５’→３’）ａｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆ
ａＧｆｕＣｆｃａｃｓｃ（配列番号１２８）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチ
ドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｉｖ．配列（５’→３’）ｕｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａ
ＧｆｕＣｆｃｕｓｕ（配列番号１２９）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが
異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｖ．配列（５’→３’）ｕｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧ
ｆｕＣｆｃａｓｃ（配列番号１３０）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異
なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｖｉ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａ
ＣｆａＧｆｃｕｓｕ（配列番号１３１）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが
異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｖｉｉ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆ
ａＣｆａＧｆｃｃｕｓｕ（配列番号１３２）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチ
ドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｖｉｉｉ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵ
ｆａＣｆａＧｆｃｃｕｓｃ（配列番号１３３）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオ
チドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｉｘ．配列（５’→３’）ｕｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａ
ＣｆａＧｆｃｕｓｕ（配列番号１３４）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが
異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘ．配列（５’→３’）ｕｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａＣ
ｆａＧｆｃｃｕｓｕ（配列番号１３５）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが
異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉ．配列（５’→３’）ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆ
ｃＣｆｕＡｆｃＡｆｇｃｓｃ（配列番号１３６）から０個、１個、２個又は３個のヌクレ
オチドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆ
ｕＡｆｃＡｆｇｓｃｓｃ（配列番号１３７）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチ
ドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉｉｉ．配列（５’→３’）ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕ
ＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡｆｇｓｃｓｃ（配列番号１３８）から０個、１個、２個又は３個の
ヌクレオチドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆ
ｕＡｆｃＡｆｇｃｓｕ（配列番号１３９）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチド
が異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕ
ＡｆｃＡｆｇｃｓｇ（配列番号１４０）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが
異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｖｉ．配列（５’→３’）ａｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆ
ｕＡｆｃＡｆｇｃｓｃ（配列番号１４１）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチド
が異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｖｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆＵｆＡｆｕＧｆｃ
ＣｆｕＡｆｃＡｆｇｕｓｕ（配列番号１４２）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオ
チドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｖｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃ
ＣｆｕＡｆｃＡｆｇＣｆｓｃ（配列番号１４３）から０個、１個、２個又は３個のヌクレ
オチドが異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉｘ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａ
ＣｆａＧｆｃＣｆｓｕ（配列番号１４４）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチド
が異なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｌ．配列（５’→３’）ｕｓＣｆｓｃＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａＣｆａ
ＧｆｃＣｆｓｕ（配列番号１４５）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異な
る配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｌｉ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａＣｆ
ａＧｆｃｃｓｇ（配列番号１４６）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異な
る配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｌｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＣｆｓｃＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａＣ
ｆａＧｆｃｃｓｇ（配列番号１４７）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチドが異
なる配列を含むアンチセンス鎖、又は
ｘｌｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆ
ｕＡｆｃＡｆｇｇｓｇ（配列番号１４８）から０個、１個、２個又は３個のヌクレオチド
が異なる配列を含むアンチセンス鎖、
を含み、式中、ａ、ｇ、ｃ及びｕは２’－Ｏ－メチル（２’－ＯＭｅ）修飾ヌクレオチ
ド、Ａｆ、Ｃｆ、Ｇｆ、及びＵｆは２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、ｓはホスホロチオ
エートヌクレオシド間連結であり、残りのヌクレオチドモノマーはホスホジエステル結合
により連結され、ｃＰｒｐｕは５’－シクロプロピルホスホネート－２’－Ｏ－メチル修
飾ヌクレオチドであり、このＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、各アンチセンス鎖に対して少なくと
も部分的に相補的なセンス鎖を更に含む。

【0050】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は以下のもの
：
ｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡ
ｆｇＧｆｃｃｓｕｓｕＡｕ（配列番号６１）からなるアンチセンス鎖、又は
ｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃ
ＡｆｇＧｆｃｓｃｓｕ（配列番号６２）からなるアンチセンス鎖、又は
ｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡ
ｆｃＡｆｇＧｆｃｃｓｕ（配列番号６３）からなるアンチセンス鎖、又は
ｉｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡｆ
ｃＡｆｇＧｆｓｃ（配列番号６４）からなるアンチセンス鎖、又は
ｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃ
Ａｆｇｕｓｕ（配列番号６８）からなるアンチセンス鎖、又は
ｖｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓｃａａｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕａｃａｇ
ｃｓｃ（配列番号８５）からなるアンチセンス鎖、又は
ｖｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓｕｇａｇＡｆｇＡｆａＧｆｕＣｆｃａｃｃ
ａｃｓｇ（配列番号９４）からなるアンチセンス鎖、又は
ｖｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧｆｕＣｆｃ
ＡｆｃＣｆａＣｆｇｓａ（配列番号９８）からなるアンチセンス鎖、又は
ｉｘ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕｕｕａｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡ
ｆｇｃｓｃ（配列番号１０２）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕｕｕａｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡｆ
ｇｃｕｓｕ（配列番号１０３）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕｕｕａｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡ
ｆｇｃｃｓｕ（配列番号１０４）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕｕｕａｕＧｆｃＣｆｕＡｆｃ
Ａｆｇｃｃｕｓｕ（配列番号１０５）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｉｉｉ．配列（５’→３’）ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆ
ｃＣｆｕＡｆｃＡｆｇｕｓｕ（配列番号１０７）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｉｖ．配列（５’→３’）ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧｆｕ
ＣｆｃＡｆｃＣｆａＣｆｓｇ（配列番号１０８）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡｆｃＣ
ｆａｕｓｕ（配列番号１０９）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｖｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡｆｃ
Ｃｆａｃｓｇ（配列番号１１０）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｖｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡｆ
ｃＣｆａｃｓｕｓｕ（配列番号１１１）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｖｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡ
ｆｃＣｆａｃｓｇｓａ（配列番号１１２）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｉｘ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｇＡｆｇａｇａａＧｆｕＣｆｃＡｆｃ
Ｃｆａｃｕｓｕ（配列番号１２０）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘ．配列（５’→３’）ａｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧｆ
ｕＣｆｃｕｓｕ（配列番号１２５）からなるアンチセンス鎖、
ｘｘｉ．配列（５’→３’）ａｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧ
ｆｕＣｆｃａｓｃ（配列番号１２６）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｉｉ．配列（５’→３’）ａｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａ
ＧｆｕＣｆｃａｃｕｓｕ（配列番号１２７）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｉｉｉ．配列（５’→３’）ａｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆ
ａＧｆｕＣｆｃａｃｓｃ（配列番号１２８）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｉｖ．配列（５’→３’）ｕｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａ
ＧｆｕＣｆｃｕｓｕ（配列番号１２９）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｖ．配列（５’→３’）ｕｓＧｆｓａｓＡｆａＡｆｕＵｆｇＡｆｇＡｆｇＡｆａＧ
ｆｕＣｆｃａｓｃ（配列番号１３０）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｖｉ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａ
ＣｆａＧｆｃｕｓｕ（配列番号１３１）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｖｉｉ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆ
ａＣｆａＧｆｃｃｕｓｕ（配列番号１３２）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｖｉｉｉ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵ
ｆａＣｆａＧｆｃｃｕｓｃ（配列番号１３３）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｉｘ．配列（５’→３’）ｕｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａ
ＣｆａＧｆｃｕｓｕ（配列番号１３４）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘ．配列（５’→３’）ｕｓＣｆｓｃｓＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａＣ
ｆａＧｆｃｃｕｓｕ（配列番号１３５）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉ．配列（５’→３’）ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆ
ｃＣｆｕＡｆｃＡｆｇｃｓｃ（配列番号１３６）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆ
ｕＡｆｃＡｆｇｓｃｓｃ（配列番号１３７）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉｉｉ．配列（５’→３’）ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕ
ＧｆｃＣｆｕＡｆｃＡｆｇｓｃｓｃ（配列番号１３８）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆ
ｕＡｆｃＡｆｇｃｓｕ（配列番号１３９）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｖ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆｕ
ＡｆｃＡｆｇｃｓｇ（配列番号１４０）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｖｉ．配列（５’→３’）ａｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆ
ｕＡｆｃＡｆｇｃｓｃ（配列番号１４１）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｖｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆＵｆＡｆｕＧｆｃ
ＣｆｕＡｆｃＡｆｇｕｓｕ（配列番号１４２）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｖｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃ
ＣｆｕＡｆｃＡｆｇＣｆｓｃ（配列番号１４３）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｘｘｉｘ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａ
ＣｆａＧｆｃＣｆｓｕ（配列番号１４４）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｌ．配列（５’→３’）ｕｓＣｆｓｃＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａＣｆａ
ＧｆｃＣｆｓｕ（配列番号１４５）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｌｉ．配列（５’→３’）ａｓＣｆｓｃＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａＣｆ
ａＧｆｃｃｓｇ（配列番号１４６）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｌｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＣｆｓｃＡｆａＵｆｕＵｆａＵｆｇＣｆｃＵｆａＣ
ｆａＧｆｃｃｓｇ（配列番号１４７）からなるアンチセンス鎖、又は
ｘｌｉｉｉ．配列（５’→３’）ｕｓＡｆｓｃｓＣｆａＡｆｕＵｆｕＡｆｕＧｆｃＣｆ
ｕＡｆｃＡｆｇｇｓｇ（配列番号１４８）からなるアンチセンス鎖、
を含み、式中、ａ、ｇ、ｃ及びｕは２’－Ｏ－メチル（２’－ＯＭｅ）修飾ヌクレオチ
ド、Ａｆ、Ｃｆ、Ｇｆ、及びＵｆは２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、ｓはホスホロチオ
エートヌクレオシド間連結であり、残りのヌクレオチドモノマーはホスホジエステル結合
により連結され、ｃＰｒｐｕは５’－シクロプロピルホスホネート－２’－Ｏ－メチル修
飾ヌクレオチドであり、このＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、各アンチセンス鎖に対して少なくと
も部分的に相補的なセンス鎖を更に含む。

【0051】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は以下のもの
：
ａ．配列（５’→３’）ＵＵＧＣＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡＵＴ（配列
番号２７５）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセン
ス鎖、又は
ｂ．配列（５’→３’）ＵＡＵＡＵＧＣＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配
列番号２７６）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセ
ンス鎖、又は
ｃ．配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡＵＵ（配列番号２７
８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｄ．配列（５’→３’）ＣＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵ（配列番号２８
５）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｅ．配列（５’→３’）ＣＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡ（配列番号２８
９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｆ．配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号２９２）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｇ．配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号２９
４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｈ．配列（５’→３’）ＵＣＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵ（配列番号３
００）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
又は
ｉ．配列（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０
２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｊ．配列（５’→３’）ＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡＵＵ（配列番号３
０３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
又は
ｋ．配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡＵＵ（配列番号
３０４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖
、又は
ｌ．配列（５’→３’）ＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号３０
６）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｍ．配列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号３
０７）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
又は
ｎ．配列（５’→３’）ＡＡＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号
３０８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖
、又は
ｏ．配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３１８）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｐ．配列（５’→３’）ＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３
１９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
又は
ｑ．配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＡ（配列番号３２０）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｒ．配列（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＡ（配列番号３２
１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｓ．配列（５’→３’）ＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配列番号３２２）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｔ．配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配列番号３２３
）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｕ．配列（５’→３’）ＧＡＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配列番号３
２４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
又は
ｖ．配列（５’→３’）ＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配列番号３２５）
から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｗ．配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配列番号３２６
）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又は
ｘ．配列（５’→３’）ＡＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号３２
７）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｙ．配列（５’→３’）ＣＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号３２
８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ｚ．配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＵ（配列番号３２
９）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、又
は
ａａ．配列（５’→３’）ＡＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配列番号３
３０）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセン
ス鎖、又は
ｂｂ．配列（５’→３’）ＡＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配列番号３
３１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
又は
ｃｃ．配列（５’→３’）ＣＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配列番号３
３２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
又は
ｄｄ．配列（５’→３’）ＣＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配列番号３
３３）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
又は
ｅｅ．配列（５’→３’）ＣＣＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号３
３４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖、
を含み、このＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、各アンチセンス鎖に対して少なくとも部分的に相
補的なアンチセンス鎖を更に含む。

【0052】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は以下のもの
：
ａ．核酸塩基配列（５’→３’）ＵＵＧＣＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡＵ
Ｔ（配列番号２７５）からなるセンス鎖、又は
ｂ．核酸塩基配列（５’→３’）ＵＡＵＡＵＧＣＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧ
ＵＡ（配列番号２７６）からなるセンス鎖、又は
ｃ．核酸塩基配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡＵＵ（配列
番号２７８）からなるセンス鎖、又は
ｄ．核酸塩基配列（５’→３’）ＣＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵ（配列
番号２８５）からなるセンス鎖、又は
ｅ．核酸塩基配列（５’→３’）ＣＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡ（配列
番号２８９）からなるセンス鎖、又は
ｆ．核酸塩基配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号
２９２）からなるセンス鎖、又は
ｇ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列
番号２９４）からなるセンス鎖、又は
ｈ．核酸塩基配列（５’→３’）ＵＣＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵ（配
列番号３００）からなるセンス鎖、又は
ｉ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列
番号３０２）からなるセンス鎖、又は
ｊ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡＵＵ（配
列番号３０３）からなるセンス鎖、又は
ｋ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡＵＵ（
配列番号３０４）からなるセンス鎖、又は
ｌ．核酸塩基配列（５’→３’）ＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列
番号３０６）からなるセンス鎖、又は
ｍ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配
列番号３０７）からなるセンス鎖、又は
ｎ．核酸塩基配列（５’→３’）ＡＡＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（
配列番号３０８）からなるセンス鎖、又は
ｏ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号
３１８）からなるセンス鎖、又は
ｐ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配
列番号３１９）からなるセンス鎖、又は
ｑ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＡ（配列番号
３２０）からなるセンス鎖、又は
ｒ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＡ（配列
番号３２１）からなるセンス鎖、又は
ｓ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配列番号
３２２）からなるセンス鎖、又は
ｔ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配列番
号３２３）からなるセンス鎖、又は
ｕ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＡＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配
列番号３２４）からなるセンス鎖、又は
ｖ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配列番号
３２５）からなるセンス鎖、又は
ｗ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配列番
号３２６）からなるセンス鎖、又は
ｘ．核酸塩基配列（５’→３’）ＡＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列
番号３２７）からなるセンス鎖、又は
ｙ．核酸塩基配列（５’→３’）ＣＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列
番号３２８）からなるセンス鎖、又は
ｚ．核酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＵ（配列
番号３２９）からなるセンス鎖、又は
ａａ．核酸塩基配列（５’→３’）ＡＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配
列番号３３０）を含むセンス鎖、又は
ｂｂ．核酸塩基配列（５’→３’）ＡＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配
列番号３３１）からなるセンス鎖、又は
ｃｃ．核酸塩基配列（５’→３’）ＣＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵ（配
列番号３３２）からなるセンス鎖、又は
ｄｄ．核酸塩基配列（５’→３’）ＣＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＡ（配
列番号３３３）からなるセンス鎖、又は
ｅｅ．核酸塩基配列（５’→３’）ＣＣＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配
列番号３３４）からなるセンス鎖、
を含み、このＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、各アンチセンス鎖に対して少なくとも部分的に相
補的なアンチセンス鎖を更に含む。

【0053】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ
ＣＡＣＵＵ（配列番号１７５）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣ
ＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号３０７）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる
核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）
ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＵＵ（配列番号１５４）から０個、１個、２個
又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３
’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号２９２）から０個、１個、２個
又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含む。

【0054】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、核酸塩基配列（５’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵ
ＣＣＡＣＣＡＣＵＵ（配列番号１７５）からなるアンチセンス鎖、及び、核酸塩基配列（
５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号３０７）からな
るセンス鎖を含み、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、核酸塩基配列（５’→３’）ＵＡＣＣ
ＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＵＵ（配列番号１５４）からなるアンチセンス鎖、及び
、核酸塩基配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号２９
２）からなるセンス鎖を含む。

【0055】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵ
ＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基
配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡ
ＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸
塩基配列を含むセンス鎖を含み、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡ
ＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＧ（配列番号１８８）から０個、１個、２個又は
３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）
ＣＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号３２８）から０個、１個、２個
又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含む。

【0056】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、核酸塩基配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧ
ＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）からなるアンチセンス鎖、及び、核酸塩基配列（５
’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）からなるセ
ンス鎖を含み、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、核酸塩基配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡ
ＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＧ（配列番号１８８）からなるアンチセンス鎖、及び、核
酸塩基配列（５’→３’）ＣＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号３２
８）からなるセンス鎖を含む。

【0057】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵ
ＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基
配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡ
ＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸
塩基配列を含むセンス鎖を含み、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡ
ＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣ（配列番号１６２）から０個、１個、２個又は
３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）
ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号２９４）から０個、１個、２個
又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含む。

【0058】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、核酸塩基配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧ
ＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）からなるアンチセンス鎖、及び、核酸塩基配列（５
’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）からなるセ
ンス鎖を含み、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、核酸塩基配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡ
ＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣ（配列番号１６２）からなるアンチセンス鎖、及び、核
酸塩基配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵＵＧＧＵＡ（配列番号２９
４）からなるセンス鎖を含む。

【0059】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵ
ＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基
配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡ
ＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸
塩基配列を含むセンス鎖を含み、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡ
ＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣ（配列番号１６２）から０個、１個、２個又は
３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）
ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号３０７）から０個、１個、２
個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含む。

【0060】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、核酸塩基配列（５’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧ
ＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）からなるアンチセンス鎖、及び、核酸塩基配列（５
’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）からなるセ
ンス鎖を含み、第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、核酸塩基配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡ
ＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡＧＣＣ（配列番号１６２）からなるアンチセンス鎖、及び、核
酸塩基配列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号３
０７）からなるセンス鎖を含む。

【0061】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
センス鎖内のヌクレオチドの全て又は実質的に全てが修飾されているか、並びに／あるい
は、第１及び／又は第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の、アンチセンス鎖のヌクレオチド全て又
は実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５
’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣＵＵ（配列番号１７５）から０個
、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配
列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号３０７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、こ
の第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡ
ＣＡＧＵＵ（配列番号１５４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵ
ＵＧＧＵＡ（配列番号２９２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むセンス鎖を含む。

【0062】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
センス鎖内のヌクレオチドの全て又は実質的に全てが修飾されているか、並びに／あるい
は、第１及び／又は第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の、アンチセンス鎖のヌクレオチド全て又
は実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５
’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、
１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列
（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０
個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、この第
２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡ
ＧＣＧ（配列番号１８８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配
列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＣＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵ
ＵＧＧＵＡ（配列番号３２８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むセンス鎖を含む。

【0063】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
センス鎖内のヌクレオチドの全て又は実質的に全てが修飾されているか、並びに／あるい
は、第１及び／又は第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の、アンチセンス鎖のヌクレオチド全て又
は実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５
’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、
１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列
（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０
個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、この第
２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡ
ＧＣＣ（配列番号１６２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配
列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵ
ＵＧＧＵＡ（配列番号２９４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むセンス鎖を含む。

【0064】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
センス鎖内のヌクレオチドの全て又は実質的に全てが修飾されているか、並びに／あるい
は、第１及び／又は第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の、アンチセンス鎖のヌクレオチド全て又
は実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５
’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、
１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列
（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０
個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、この第
２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡ
ＧＣＣ（配列番号１６２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配
列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣ
ＡＡＵＡＵＵ（配列番号３０７）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸
塩基配列を含むセンス鎖を含む。

【0065】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
センス鎖内のヌクレオチドの全て又は実質的に全てが修飾されているか、並びに／あるい
は、第１及び／又は第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の、アンチセンス鎖のヌクレオチド全て又
は実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５
’→３’）ＵＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣＣＡＣＵＵ（配列番号１７５）から０個
、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配
列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＡＵＵ（配列番号３０７）か
ら０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、こ
の第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡ
ＣＡＧＵＵ（配列番号１５４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵ
ＵＧＧＵＡ（配列番号２９２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むセンス鎖を含み、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬及び第２のＨＢＶ ＲＮＡ
ｉ薬のセンス鎖は、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンを含む標的化リガンドにコンジュゲー
トされる。

【0066】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
センス鎖内のヌクレオチドの全て又は実質的に全てが修飾されているか、並びに／あるい
は、第１及び／又は第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の、アンチセンス鎖のヌクレオチド全て又
は実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５
’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、
１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列
（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０
個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、この第
２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡ
ＧＣＧ（配列番号１８８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配
列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＣＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵ
ＵＧＧＵＡ（配列番号３２８）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むセンス鎖を含み、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬及び第２のＨＢＶ ＲＮＡ
ｉ薬のセンス鎖は、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンを含む標的化リガンドにコンジュゲー
トされる。

【0067】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
センス鎖内のヌクレオチドの全て又は実質的に全てが修飾されているか、並びに／あるい
は、第１及び／又は第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の、アンチセンス鎖のヌクレオチド全て又
は実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５
’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、
１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列
（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０
個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、この第
２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡ
ＧＣＣ（配列番号１６２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配
列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＧＧＣＵＧＵＡＧＧＣＡＵＡＡＡＵ
ＵＧＧＵＡ（配列番号２９４）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩
基配列を含むセンス鎖を含み、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬及び第２のＨＢＶ ＲＮＡ
ｉ薬のセンス鎖は、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンを含む標的化リガンドにコンジュゲー
トされる。

【0068】

いくつかの実施形態において、本発明に開示されるのは、細胞におけるＨＢＶ遺伝子の
発現を阻害するための組成物であり、この組成物は、２つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含み、
センス鎖内のヌクレオチドの全て又は実質的に全てが修飾されているか、並びに／あるい
は、第１及び／又は第２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の、アンチセンス鎖のヌクレオチド全て又
は実質的に全てが修飾ヌクレオチドであり、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５
’→３’）ＡＧＡＡＡＡＵＵＧＡＧＡＧＡＡＧＵＣＣＡＣ（配列番号１７１）から０個、
１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むアンチセンス鎖、及び、配列
（５’→３’）ＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣＡＡＵＵＵＵＣＵ（配列番号３０２）から０
個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配列を含むセンス鎖を含み、この第
２のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、配列（５’→３’）ＵＡＣＣＡＡＵＵＵＡＵＧＣＣＵＡＣＡ
ＧＣＣ（配列番号１６２）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸塩基配
列を含むアンチセンス鎖、及び、配列（５’→３’）ＧＵＧＧＵＧＧＡＣＵＵＣＵＣＵＣ
ＡＡＵＡＵＵ（配列番号３０７）から０個、１個、２個又は３個の核酸塩基が異なる核酸
塩基配列を含むセンス鎖を含み、この第１のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬及び第２のＨＢＶ ＲＮ
Ａｉ薬のセンス鎖は、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンを含む標的化リガンドにコンジュゲ
ートされる。

【0069】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨ
ＢＶ感染によって生じる疾患若しくは症状の予防の方法であり、この方法は、これらを必
要としている対象に、有効量のＡＤ０４８７２及び有効量のＡＤ０５０７０を投与するこ
とを含む。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０５０７０の比は、約２：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０５０７０の比は、約３：
１である。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０５０７０の比は、約１：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０５０７０の比は、約４：
１である。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０５０７０の比は、約５：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０５０７０の比は、約１：
２である。

【0070】

いくつかの実施形態において、約１ｍｇ／ｋｇ（ｍｐｋ）のＡＤ０４８７２と約１ｍｇ
／ｋｇのＡＤ０５０７０が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施
形態において、約１．５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０５０
７０が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約２
．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０５０７０が、これらを必
要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約３．０ｍｇ／ｋｇのＡ
Ｄ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０５０７０が、これらを必要としている対象に
投与される。いくつかの実施形態において、約３．２ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約０
．８ｍｇ／ｋｇのＡＤ０５０７０が、これらを必要としている対象に投与される。いくつ
かの実施形態において、約２．７ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．３ｍｇ／ｋｇのＡ
Ｄ０５０７０が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態におい
て、約４．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０５０７０が、こ
れらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約３．３ｍｇ／
ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．７ｍｇ／ｋｇのＡＤ０５０７０が、これらを必要としてい
る対象に投与される。いくつかの実施形態において、約０．０５～約５ｍｇ／ｋｇのＡＤ
０４８７２と、約０．０５～約５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０５０７０が、これらを必要としてい
る対象に投与される。いくつかの実施形態において、約ＡＤ０４８７２と約ＡＤ０５０７
０とが、別々に投与される（例えば、別の注射内）。いくつかの実施形態において、ＡＤ
０４８７２の各用量と、ＡＤ０５０７０の各用量が、一緒に投与される（例えば、同じ注
射内）。いくつかの実施形態において、ＡＤ０４８７２の各用量と、ＡＤ０５０７０の各
用量が、単一の医薬組成物に調製される。

【0071】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨ
ＢＶ感染によって生じる疾患若しくは症状の予防の方法であり、この方法は、これらを必
要としている対象に、有効量のＡＤ０４８７２及び有効量のＡＤ０４７７６を投与するこ
とを含む。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０４７７６の比は、約２：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０４７７６の比は、約３：
１である。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０４７７６の比は、約４：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０４７７６の比は、約１：
１である。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０４７７６の比は、約５：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０４７７６の比は、約１：
２である。

【0072】

いくつかの実施形態において、約１ｍｇ／ｋｇ（ｍｐｋ）のＡＤ０４８７２と約１ｍｇ
／ｋｇのＡＤ０４７７６が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施
形態において、約１．５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４７
７６が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約２
．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４７７６が、これらを必
要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約３．０ｍｇ／ｋｇのＡ
Ｄ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４７７６が、これらを必要としている対象に
投与される。いくつかの実施形態において、約３．２ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約０
．８ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４７７６が、これらを必要としている対象に投与される。いくつ
かの実施形態において、約２．７ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．３ｍｇ／ｋｇのＡ
Ｄ０４７７６が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態におい
て、約４．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４７７６が、こ
れらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約３．３ｍｇ／
ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．７ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４７７６が、これらを必要としてい
る対象に投与される。いくつかの実施形態において、約０．０５～約５ｍｇ／ｋｇのＡＤ
０４８７２と、約０．０５～約５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４７７６が、これらを必要としてい
る対象に投与される。いくつかの実施形態において、ＡＤ０４８７２とＡＤ０４７７６の
各用量が、別々に投与される（例えば、別の注射内）。いくつかの実施形態において、Ａ
Ｄ０４８７２とＡＤ０４７７６の各用量が、一緒に投与される（例えば、同じ注射内）。
いくつかの実施形態において、ＡＤ０４８７２とＡＤ０４７７６の各用量が、単一の医薬
組成物に調製される。

【0073】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨ
ＢＶ感染によって生じる疾患若しくは症状の予防の方法であり、この方法は、これらを必
要としている対象に、有効量のＡＤ０４８７２及び有効量のＡＤ０４９８２を投与するこ
とを含む。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０４９８２の比は、約２：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０４９８２の比は、約３：
１である。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０４９８２の比は、約４：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０４９８２の比は、約１：
１である。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４８７２対ＡＤ０４９８２の比は、約５：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４８７２対ＡＤ０４９８２の比は、約１：
２である。

【0074】

いくつかの実施形態において、約１ｍｇ／ｋｇ（ｍｐｋ）のＡＤ０４８７２と約１ｍｇ
／ｋｇのＡＤ０４９８２が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施
形態において、約１．５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４９
８２が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約２
．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４９８２が、これらを必
要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約３．０ｍｇ／ｋｇのＡ
Ｄ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４９８２が、これらを必要としている対象に
投与される。いくつかの実施形態において、約３．２ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約０
．８ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４９８２が、これらを必要としている対象に投与される。いくつ
かの実施形態において、約２．７ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．３ｍｇ／ｋｇのＡ
Ｄ０４９８２が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態におい
て、約４．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．０ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４９８２が、こ
れらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態において、約３．３ｍｇ／
ｋｇのＡＤ０４８７２と約１．７ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４９８２が、これらを必要としてい
る対象に投与される。いくつかの実施形態において、約０．０５～約５ｍｇ／ｋｇのＡＤ
０４８７２と、約０．０５～約５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４９８２が、これらを必要としてい
る対象に投与される。いくつかの実施形態において、ＡＤ０４８７２とＡＤ０４９８２の
各用量が、別々に投与される（例えば、別の注射内）。いくつかの実施形態において、Ａ
Ｄ０４８７２とＡＤ０４９８２の各用量が、一緒に投与される（例えば、同じ注射内）。
いくつかの実施形態において、ＡＤ０４８７２とＡＤ０４９８２の各用量が、単一の医薬
組成物に調製される。

【0075】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ感染の治療、又はＨ
ＢＶ感染によって生じる疾患若しくは症状の予防の方法であり、この方法は、これらを必
要としている対象に、有効量のＡＤ０４５８０及び有効量のＡＤ０４５８５を投与するこ
とを含む。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４５８０対ＡＤ０４５８５の比は、約２：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４５８０対ＡＤ０４５８５の比は、約３：
１である。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４５８０対ＡＤ０４５８５の比は、約４：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４５８０対ＡＤ０４５８５の比は、約５：
１である。いくつかの実施形態において、これらを必要としている対象に投与されるＡＤ
０４５８０対ＡＤ０４５８５の比は、約１：１である。いくつかの実施形態において、こ
れらを必要としている対象に投与されるＡＤ０４５８０対ＡＤ０４５８５の比は、約１：
２である。いくつかの実施形態において、約１ｍｇ／ｋｇ（ｍｐｋ）のＡＤ０４５８０と
約１ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４５８５が、これらを必要としている対象に投与される。いくつ
かの実施形態において、約１．５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４５８０と約１．５ｍｇ／ｋｇのＡ
Ｄ０４５８５が、これらを必要としている対象に投与される。いくつかの実施形態におい
て、約０．０５～約５ｍｇ／ｋｇのＡＤ０４５８０と、約０．０５～約５ｍｇ／ｋｇのＡ
Ｄ０４５８５が、これらを必要としている対象に投与される。

【0076】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下に示
す構造を有するナトリウム塩として示される（ＮＡＧ３７）ｓに連結したＡＤ０５０７０
からなるか又はこれを含む：

【0077】

【化1】

【0078】

【化2】

【0079】

【化3】

【0080】

【化4】

【0081】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下に示
す構造を有するナトリウム塩として示される（ＮＡＧ２５）ｓに連結したＡＤ０５０７０
からなるか又はこれを含む：

【0082】

【化5】

【0083】

【化6】

【0084】

【化7】

【0085】

【化8】

【0086】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下に示
す構造を有する遊離酸として示される（ＮＡＧ３７）ｓに連結したＡＤ０５０７０からな
るか又はこれを含む：

【0087】

【化9】

【0088】

【化10】

【0089】

【化11】

【0090】

【化12】

【0091】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下に示
す構造を有するナトリウム塩として示される（ＮＡＧ３１）ｓに連結したＡＤ０４５８０
からなるか又はこれを含む：

【0092】

【化13】

【0093】

【化14】

【0094】

【化15】

【0095】

【化16】

【0096】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下に示
す構造を有するナトリウム塩として示される（ＮＡＧ２５）ｓに連結したＡＤ０４５８５
からなるか又はこれを含む：

【0097】

【化17】

【0098】

【化18】

【0099】

【化19】

【0100】

【化20】

【0101】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下に示
す構造を有するナトリウム塩として示される（ＮＡＧ３７）ｓに連結したＡＤ０４８７２
からなるか又はこれを含む：

【0102】

【化21】

【0103】

【化22】

【0104】

【化23】

【0105】

【化24】

【0106】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下に示
す構造を有するナトリウム塩として示される（ＮＡＧ２５）ｓに連結したＡＤ０４８７２
からなるか又はこれを含む：

【0107】

【化25】

【0108】

【化26】

【0109】

【化27】

【0110】

【化28】

【0111】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下に示
す構造を有する遊離酸として示される（ＮＡＧ３７）ｓに連結したＡＤ０４８７２からな
るか又はこれを含む：

【0112】

【化29】

【0113】

【化30】

【0114】

【化31】

【0115】

【化32】

【0116】

いくつかの実施形態において、記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（複数可）は所望に
より、１つ又は複数の追加の（すなわち、第２、第３などの）治療と組み合わせられる。
第２の治療は、別のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬であり得る（例えば、ＨＢＶゲノムの別の配列を
標的とするＨＢＶ ＲＮＡｉ薬）。追加の治療は更に、小分子薬、抗体、抗体フラグメン
ト、及び／又はワクチンであり得る。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、１つ又は複数の追加の治療
を伴っても伴わなくても、１つ又は複数の賦形剤と組み合わせて、医薬組成物を形成する
ことができる。

【0117】

いくつかの実施形態において、記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（複数可）は所望に
より、１つ又は複数の追加の治療と組み合わせられ、この追加の治療はヌクレオシド阻害
剤又はヌクレオチド阻害剤である。いくつかの実施形態において、記載されているＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬（複数可）は所望により、１つ又は複数の追加の治療と組み合わせられ、こ
の追加の治療はエンテカビル、テノホビル、テノホビルアラフェナミド、テノホビルジソ
プロキシル、ラミブジン、又はその他の抗ウイルス治療である。いくつかの実施形態にお
いて、記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（複数可）は所望により、１つ又は複数の追加
の治療と組み合わせられ、この追加の治療はインターフェロンである。いくつかの実施形
態において、記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（複数可）は所望により、１つ又は複数
の追加の治療と組み合わせられ、この追加の治療はインターフェロンαである。いくつか
の実施形態において、記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（複数可）は所望により、１つ
又は複数の追加のＨＢＶ治療と組み合わせられ、この追加の治療はＨＢＶワクチンである
。

【0118】

いくつかの実施形態において、記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（複数可）は所望に
より、１つ又は複数の追加の治療と、単一の用量形態に組み合わせられる（すなわち、単
回注射に含まれるカクテル）。いくつかの実施形態において、記載されているＨＢＶ Ｒ
ＮＡｉ薬（複数可）は、１つ又は複数の所望による追加の治療とは別個に投与され得る。
いくつかの実施形態において、記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（複数可）は、皮下注
射経由で、これらを必要としている対象に投与され、かつ、１つ又は複数の所望による追
加の治療は経口投与され、これらは合わせて、ＨＢＶ感染に関連する疾患及び状態のため
の治療レジメンを提供する。いくつかの実施形態において、記載されているＨＢＶ ＲＮ
Ａｉ薬（複数可）は、皮下注射経由で、これらを必要としている対象に投与され、かつ、
１つ又は複数の所望による追加の治療は、別の皮下注射経由で投与される。

【0119】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるのは、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬をｉｎ
ｖｉｖｏで肝細胞に送達するための組成物であって、この組成物は、標的化基にコンジ
ュゲート又は連結されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む。いくつかの実施形態において、この
標的化基はアシアロ糖タンパク質受容体リガンドである。いくつかの実施形態において、
ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬をｉｎ ｖｉｖｏで肝細胞に送達するための組成物が記述され、この
組成物は、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン標的化リガンドに連結されたＨＢＶ ＲＮＡｉ
薬を含む。

【0120】

いくつかの実施形態において、記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の１つ又は複数が、
製薬的に許容される担体又は希釈剤中で哺乳類に投与される。いくつかの実施形態におい
て、この哺乳類はヒトである。

【0121】

Ｂ型肝炎ウイルスＲＮＡｉ薬（複数可）の使用は、ＨＢＶ感染に関連する疾患／障害の
治療的処置及び／又は予防的処置のための方法を提供する。記載されているＨＢＶ ＲＮ
Ａｉ薬は、ＲＮＡ干渉を媒介して、Ｂ型肝炎ウイルスの複製及び／又は病原に必要な１つ
又は複数の遺伝子の発現を阻害する。特に、例えば、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、細胞、組織
、又は哺乳類における、ウイルスポリメラーゼ、コアタンパク質、表面抗原、ｅ抗原、及
び／又はＸタンパク質を阻害し得る。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶ感染の治療に使用す
ることができる。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は更に、ＨＢＶ感染に関連する慢性肝疾患／障害、
炎症、線維化状態、及び増殖性疾患（癌など）の治療又は予防に使用することができる。
いくつかの実施形態において、この方法は更に、対象におけるＤ型肝炎ウイルス（ＨＤＶ
）の治療を含む。そのような方法は、ＨＢＶに感染しているヒト又は動物に対して、ＨＢ
Ｖ ＲＮＡｉ薬を投与することを含む。更に、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を肝細胞にｉｎ ｖｉ
ｖｏで送達するための組成物が記述される。

【0122】

１つ又は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む医薬組成物は、局所的又は全身的治療が望ま
しいかどうかに応じて、数多くの方法で投与することができる。投与は、静脈内投与、動
脈内投与、皮下投与、腹腔内投与、真皮下投与（例えば、インプラントされたデバイスを
介して）、及び実質内投与であり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態に
おいて、本明細書に記載の医薬組成物は、皮下注射によって投与される。

【0123】

記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬及び／又は組成物は、ＨＢＶ感染の治療処置、又は
、ＨＢＶ感染に起因する疾患若しくは状態の治療処置のための方法に使用することができ
る。このような方法には、本明細書に記載のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を、対象（例えばヒト又
は動物の対象）に投与することが挙げられる。

【0124】

本明細書で使用されるとき、用語「オリゴヌクレオチド」及び「ポリヌクレオチド」は
、連結されたヌクレオシドのポリマーを意味し、このそれぞれが独立に修飾又は非修飾で
あり得る。

【0125】

本明細書で使用されるとき、「ＲＮＡｉ薬」又は「ＲＮＡｉトリガ」は、配列特異的な
方法で標的メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）のｍＲＮＡ転写物の翻訳を遅延又は阻害す
ることができる、ＲＮＡ又はＲＮＡ様（例えば、化学修飾ＲＮＡ）オリゴヌクレオチド分
子を含む組成物を意味する。本明細書で使用されるとき、ＲＮＡｉ薬は、ＲＮＡ干渉メカ
ニズム（すなわち、哺乳類細胞のＲＮＡ干渉経路機構（ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体
、ＲＩＳＣ）との相互作用によりＲＮＡ干渉を引き起こす）を介して、あるいは任意の代
替的なメカニズム（複数可）又は経路（複数可）によって、作用し得る。ＲＮＡｉ薬とい
う語は、本明細書で使用されるとき、主にＲＮＡ干渉メカニズムを介して作用すると考え
られるが、本開示のＲＮＡｉ薬は、いかなる特定の経路又は作用メカニズムにも拘束され
るものではなく、またこれらに制限されるものではない。本明細書に開示されるＲＮＡｉ
薬はセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み、これには、短干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本
鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、短ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮ
Ａ）、及びダイサー基質が挙げられるがこれらに制限されない。本明細書に記載のＲＮＡ
ｉ薬のアンチセンス鎖は、標的となるｍＲＮＡに少なくとも部分的に相補的である。ＲＮ
Ａｉ薬は、修飾ヌクレオチド及び／又は１つ若しくは複数の非ホスホジエステル結合を含
み得る。

【0126】

本明細書で使用されるとき、所与の遺伝子の発現に関する用語「サイレンス」、「低減
」、「阻害」、「ダウンレギュレーション」又は「ノックダウン」とは、その遺伝子の発
現が、遺伝子から転写されたＲＮＡのレベル、あるいは、その遺伝子が転写される細胞、
細胞群、組織、臓器、又は対象において、ｍＲＮＡから翻訳されたポリペプチド、タンパ
ク質又はタンパク質サブユニットのレベルによって測定される際、その細胞、細胞群、組
織、臓器、又は対象が、本明細書に記載されるＲＮＡｉ薬などのオリゴマー化合物で治療
されたときに、そのように治療されていない第２の細胞、細胞群、組織、臓器、又は対象
に比べて、低減されていることを意味する。

【0127】

本明細書で使用されるとき、用語「配列」又は「ヌクレオチド配列」は、核酸塩基又は
ヌクレオチドの連続又は順序を意味し、標準命名法を用いて文字の連続で記述される。

【0128】

本明細書で使用されるとき、「ヌクレオチド塩基」又は「核酸塩基」は、複素環式ピリ
ミジン又はプリン化合物であり、これは全ての核酸の標準構成要素であり、ヌクレオチド
（アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、シトシン（Ｃ）、チミン（Ｔ）、及びウラシル（Ｕ
））を形成する塩基を含む。核酸塩基は更に修飾されてよく、これには、ユニバーサル塩
基、疎水性塩基、無差別塩基（promiscuous base）、サイズ拡大塩基、及びフッ素化塩基
が挙げられるがこれらに限定されない。

【0129】

本明細書で使用されるとき、別途記載のない限り、用語「相補的」とは、第１のヌクレ
オチド配列（例えば、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖又は標的ｍＲＮＡ）について第２のヌクレオ
チド配列（例えば、ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖又は単鎖アンチセンスオリゴヌクレオチ
ド）との関連で記述するのに使用されるとき、第１のヌクレオチド配列を含むオリゴヌク
レオチド又はポリヌクレオチドが、第２のヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド又
はポリヌクレオチドと、特定の条件下において、ハイブリダイズ（哺乳類生理学的条件下
（又は類似のｉｎ ｖｉｔｒｏ条件下）において塩基対水素結合を形成）して、デュプレ
ックス又は二重らせん構造を形成できることを意味する。相補的配列には、ワトソンクリ
ック塩基対又は非ワトソンクリック塩基対が含まれ、また、少なくとも上記のハイブリダ
イゼーション要件が充足される限りにおいて、天然ヌクレオチド若しくは修飾ヌクレオチ
ド又はヌクレオチド模倣体が含まれる。配列同一性又は相補性は、修飾に依存しない。例
えば、ａ及びＡｆはＵ（又はＴ）に対して相補的であり、同一性又は相補性を判定する目
的ではＡと同一である。

【0130】

本明細書で使用されるとき、「完璧に相補的」又は「完全に相補的」とは、第１のポリ
ヌクレオチドの連続配列中の塩基の全て（１００％）が、第２のポリヌクレオチドの連続
配列中の同じ数の塩基にハイブリダイズすることを意味する。連続配列は、第１又は第２
のヌクレオチド配列の全部又は一部を含み得る。

【0131】

本明細書で使用されるとき、「部分的に相補的」とは、ハイブリダイズした核酸塩基配
列の対において、第１のポリヌクレオチドの連続配列中の塩基の、全てではないが少なく
とも７０％が、第２のポリヌクレオチドの連続配列中の同じ数の塩基にハイブリダイズす
ることを意味する。

【0132】

本明細書で使用されるとき、「実質的に相補的」とは、ハイブリダイズした核酸塩基配
列の対において、第１のポリヌクレオチドの連続配列中の塩基の、全てではないが少なく
とも約８５％が、第２のポリヌクレオチドの連続配列中の同じ数の塩基にハイブリダイズ
することを意味する。用語「相補的」、「完全に相補的」、及び「実質的に相補的」は、
本明細書において、二本鎖ＲＮＡｉ薬のセンス鎖とアンチセンス鎖との間、ＲＮＡｉ薬の
アンチセンス鎖と標的ｍＲＮＡの配列との間、又は、単鎖アンチセンスオリゴヌクレオチ
ドと標的ｍＲＮＡの配列との間でマッチする塩基に関して使用され得る。

【0133】

本明細書で使用されるとき、用語「実質的に同一」又は「実質的に同一性」は、核酸配
列に適用される際、核酸配列が、参照配列と比較して、少なくとも約８５％以上、好まし
くは少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％の配列同一性を有する
配列を含むことを意味する。配列同一性の百分率は、比較ウィンドウにわたって２つの最
適に揃えられた配列を比較することによって決定される。この百分率は、同じ核酸塩基が
両方の配列に生じる位置の数を求めることにより、一致した位置の数を得て、一致した位
置の数をウィンドウ内の位置の総数で割り、その結果に１００を掛けて配列同一性の割合
（％）を得ることによって計算される。本明細書に開示される発明は、例えば表２、３、
及び４において本明細書に開示されるヌクレオチド配列と実質的に同一なヌクレオチド配
列を包含する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される配列は、例えば表１
、２、３及び４において本明細書に開示される配列と、正確に同一であるか、又は少なく
とも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９
４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である。

【0134】

本明細書で使用されるとき、用語「治療する」、「治療」、及び同様の語は、対象にお
ける疾患又は状態の１つ又は複数の症状の回数、重篤度、及び／又は頻度の軽減又は緩和
を提供するために行われる方法又は工程を意味する。

【0135】

本明細書で使用されるとき、オリゴマー化合物に関して「細胞に導入する」という語句
は、このオリゴマー化合物を細胞内に機能的に送達することを意味する。「機能的に送達
」という語句は、オリゴマー化合物が期待される生物学的活性（遺伝子発現の配列特異的
阻害）を有することを可能にする手段で、細胞内にそのオリゴマー化合物を送達すること
を意味する。

【0136】

別途記載のない限り、記号

【0137】

【化33】

の使用は、本明細書で使用されるとき、本明細書に記載される本発明の範囲に従ってそ
こに連結され得る任意の基（複数可）を意味する。

【0138】

本明細書で使用されるとき、用語「異性体」は、同一の分子式を有するが、それらの原
子の結合の性質又は配列が異なるか、又は空間における原子の配置が異なる、化合物を意
味する。空間におけるその原子の配置において異なる異性体を、「立体異性体」と呼ぶ。
互いの鏡像ではない立体異性体を、「ジアステレオマー」と呼び、重ね合わせられない鏡
像である立体異性体を、「エナンチオマー」又は時に光学異性体と呼ぶ。４つの非同一置
換基に結合した炭素原子は、「キラル中心」と呼ばれる。

【0139】

本明細書で使用されるとき、特定のコンフォメーションを有するものとして構造中で特
定されている場合を除き、非対称中心が存在し、よってエナンチオマー、ジアステレオマ
ー、又はその他の立体異性配置が生じるような各構造について、本明細書に開示される各
構造は、そのような可能な異性体全てを表わすことが意図され、これにはその光学的に純
粋な形態及びラセミ体が含まれる。例えば、本明細書に開示される構造は、ジアステレオ
マーの混合物、並びに単独の立体異性体を包含することが意図される。

【0140】

本出願の請求項に使用されるとき、「からなる」という語句は、請求項に特定されてい
ない要素、工程、又は成分を除外する。本出願の請求項に使用されるとき、「から本質的
になる」という語句は、特定される材料又は工程、並びに、請求される特許の基本的かつ
新しい特徴（複数可）に実質的に影響しないものに、特許請求の範囲を制限する。

【0141】

本明細書に開示される化合物及び組成物は、その化合物又は組成物が置かれている環境
に応じて、特定の原子（例えば、Ｎ、Ｏ、又はＳ原子）をプロトン化状態又は脱プロトン
化状態で有し得ることが、当業者には容易に理解され評価されるであろう。したがって、
本明細書で使用されるとき、本明細書に開示される構造は、特定の官能基（例えば、ＯＨ
、ＳＨ、又はＮＨ）がプロトン化又は脱プロトン化し得ることが想定される。本明細書の
開示は、当業者には容易に理解され得るように、環境（例えばｐＨ）に基づくプロトン化
の状態にかかわらず、開示された化合物及び組成物を包含することが意図される。

【0142】

特に定義されない限り、本明細書で用いる技術的及び科学的な用語は全て、当業者によ
って共通に解釈されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されているものと同様又
は同等の方法及び材料を本発明を実施又は試験するために使用することが可能であるが、
好適な方法及び材料を以下に記載する。本明細書において言及される出版物、特許出願、
特許、及びその他の参考文献は全て、その全体が参照により組み込まれるものとする。矛
盾がある場合には、定義を含め、本明細書が適用される。加えて、材料、方法、及び実施
例は、単に例示的なものであり、限定することを意図するものではない。

【0143】

本発明の他の特徴及び利点は、以下の「発明を実施するための形態」、並びに特許請求
の範囲から明らかとなるであろう。

【発明を実施するための形態】

【0144】

本明細書に記述されるのは、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）の発現を阻害するためのＲＮ
Ａｉ薬である（本明細書においてＨＢＶ ＲＮＡｉ薬又はＨＢＶ ＲＮＡｉトリガと呼ば
れる）。各ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、センス鎖及びアンチセンス鎖を含む。センス鎖とアン
チセンス鎖はそれぞれ、１６～３０ヌクレオチド長であり得る。いくつかの実施形態にお
いて、センス鎖及びアンチセンス鎖はそれぞれ、１７～２６ヌクレオチド長であり得る。
センス鎖及びアンチセンス鎖は、同じ長さ又は異なる長さのいずれでもあり得る。いくつ
かの実施形態において、センス鎖及びアンチセンス鎖はそれぞれ独立に１７～２６ヌクレ
オチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖及びアンチセンス鎖はそれぞれ
独立に１７～２１ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖及びア
ンチセンス鎖の両方が、それぞれ２１～２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態
において、センス鎖は約１９ヌクレオチド長、アンチセンス鎖は約２１ヌクレオチド長で
ある。いくつかの実施形態において、センス鎖は約２１ヌクレオチド長、アンチセンス鎖
は約２３ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖及びアンチセン
ス鎖の両方が、それぞれ２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、ＲＮ
Ａｉ薬のセンス鎖及びアンチセンス鎖はそれぞれ独立に１７、１８、１９、２０、２１、
２２、２３、２４、２５、又は２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において
、二本鎖ＲＮＡｉ薬は、約１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３又は２４ヌ
クレオチドのデュプレックス長を有する。センス鎖とアンチセンス鎖との間の、完全又は
実質的に相補性の領域は、典型的に１５～２５（例えば、１５、１６、１７、１８、１９
、２０、２１、２２、２３、２４、又は２５）ヌクレオチド長であり、これは、アンチセ
ンス鎖の５’末端位置又はその近くに生じる（例えば、この領域は、アンチセンス鎖の５
’末端から、完全又は実質的に相補的でない０、１、２、３、又は４個のヌクレオチドに
よって隔てられていてよい）。

【0145】

センス鎖及びアンチセンス鎖はそれぞれ、核酸塩基１６～２３個の長さであるコアスト
レッチ配列を含む。アンチセンス鎖コアストレッチ配列は、ＨＢＶ ｍＲＮＡ標的に存在
するヌクレオチド配列（時に例えば、標的配列と呼ばれる）に対して、１００％（完全に
）相補的又は少なくとも約８５％（実質的に）相補的である。センス鎖コアストレッチ配
列は、アンチセンス鎖のコアストレッチ配列に対して１００％（完全に）相補的又は少な
くとも約８５％（実質的に）相補的であり、よって、センス鎖コアストレッチ配列は、Ｈ
ＢＶ ｍＲＮＡ標的に存在するヌクレオチド配列（標的配列）に対して、完全に同一又は
少なくとも約８５％同一である。センス鎖コアストレッチ配列は、対応するアンチセンス
コア配列と同じ長さであってよく、又は異なる長さであってもよい。いくつかの実施形態
において、アンチセンス鎖コアストレッチ配列は、１６、１７、１８、１９、２０、２１
、２２、又は２３ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖コアス
トレッチ配列は、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、又は２３ヌクレオチド長
である。

【0146】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を形成するのに使用されるセンス鎖及びアンチセンス鎖ヌクレオチ
ド配列の実施例が、表３及び４に提供される。表３及び４のヌクレオチド配列を含むＲＮ
Ａｉ薬デュプレックスの実施例が、表５に提供される。

【0147】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセンス鎖がアニーリングしてデュプレックス
を形成する。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖とアンチセンス鎖とは、部分的に、実質的に
、又は完全に、互いに対して相補的であり得る。相補的デュプレックス領域において、セ
ンス鎖コアストレッチ配列は、アンチセンスコアストレッチ配列に対して、少なくとも約
８５％相補的、又は１００％相補的である。いくつかの実施形態において、センス鎖コア
ストレッチ配列は、アンチセンス鎖コアストレッチ配列の対応する１６、１７、１８、１
９、２０、又は２１個のヌクレオチド配列に対して、少なくとも約８５％又は１００％相
補的な、少なくとも１６個、少なくとも１７個、少なくとも１８個、少なくとも１９個、
少なくとも２０個、又は少なくとも２１個のヌクレオチドの配列を含む（すなわち、ＨＢ
Ｖ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセンスコアストレッチ配列は、少なくとも８５％の
塩基が対になった、又は１００％の塩基が対になった、少なくとも１６個、少なくとも１
７個、少なくとも１８個、少なくとも１９個、少なくとも２０個、又は少なくとも２１個
のヌクレオチド領域を有する）。

【0148】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセン
ス鎖は、表２又は表３のいずれかのアンチセンス鎖配列から、０、１、２、又は３個のヌ
クレオチドが異なる。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮ
Ａｉ薬のセンス鎖は、表２又は表４のいずれかのセンス鎖配列から、０、１、２、又は３
個のヌクレオチドが異なる。

【0149】

本明細書に記載されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセンス鎖の長さは、独
立に１６～３０ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖及びアン
チセンス鎖は独立に１７～２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、セ
ンス鎖及びアンチセンス鎖は１９～２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態にお
いて、記載されるＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセンス鎖は独立に１７、１８、１９、
２０、２１、２２、２３、２４、２５、又は２６ヌクレオチド長である。センス鎖及びア
ンチセンス鎖は、同じ長さ又は異なる長さのいずれでもあり得る。いくつかの実施形態に
おいて、センス鎖及びアンチセンス鎖はそれぞれ２６ヌクレオチド長である。いくつかの
実施形態において、センス鎖は２３ヌクレオチド長、アンチセンス鎖は２１ヌクレオチド
長である。いくつかの実施形態において、センス鎖は２２ヌクレオチド長、アンチセンス
鎖は２１ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖は２１ヌクレオ
チド長、アンチセンス鎖は２１ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、セ
ンス鎖は１９ヌクレオチド長、アンチセンス鎖は２１ヌクレオチド長である。

【0150】

センス鎖及び／又はアンチセンス鎖は、任意にかつ独立に、コア配列の３’末端、５’
末端、又は３’末端と５’末端の両方に、追加の１、２、３、４、５、又は６個のヌクレ
オチド（延長部）を含み得る。アンチセンス鎖の追加のヌクレオチドがある場合は、ＨＢ
Ｖ ｍＲＮＡの対応する配列に対して相補的であってもよく、また相補的でなくてもよい
。センス鎖の追加のヌクレオチドがある場合は、ＨＢＶ ｍＲＮＡの対応する配列に対し
て同一であってもよく、また同一でなくてもよい。アンチセンス鎖の追加のヌクレオチド
がある場合は、対応するセンス鎖の追加のヌクレオチドがある場合、これに対して相補的
であってもよく、また相補的でなくてもよい。

【0151】

本明細書で使用されるとき、延長部は、センス鎖コアストレッチ配列及び／又はアンチ
センス鎖コアストレッチ配列の５’及び／又は３’末端に、１、２、３、４、５、又は６
個のヌクレオチドを含む。センス鎖の延長部ヌクレオチドは、対応するアンチセンス鎖の
ヌクレオチド（コアストレッチ配列ヌクレオチド、又は延長部ヌクレオチドのいずれか）
に対して、相補的であってもよく、また相補的でなくてもよい。逆に、アンチセンス鎖の
延長部ヌクレオチドは、対応するセンス鎖のヌクレオチド（コアストレッチ配列ヌクレオ
チド、又は延長部ヌクレオチドのいずれか）に対して、相補的であってもよく、また相補
的でなくてもよい。いくつかの実施形態において、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセン
ス鎖の両方が、３’及び５’延長部を含む。いくつかの実施形態において、一方の鎖の１
つ又は複数の３’延長部ヌクレオチドは、他方の鎖の１つ又は複数の５’延長部ヌクレオ
チドと、塩基対となる。他の実施形態において、一方の鎖の１つ又は複数の３’延長部ヌ
クレオチドは、他方の鎖の１つ又は複数の５’延長部ヌクレオチドと、塩基対とはならな
い。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、３’延長部を有するアンチセ
ンス鎖と、５’延長部を有するセンス鎖とを有する。

【0152】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、１、２、３、４、５、又は６ヌ
クレオチド長の３’延長部を有するアンチセンス鎖を含む。他の実施形態において、ＨＢ
Ｖ ＲＮＡｉ薬は、１、２、又は３ヌクレオチド長の３’延長部を有するアンチセンス鎖
を含む。いくつかの実施形態において、１つ又は複数のアンチセンス鎖延長部ヌクレオチ
ドは、ウラシル又はチミジンヌクレオチド、又は、対応するＨＢＶ ｍＲＮＡ配列に対し
て相補的なヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、３’アンチセンス鎖延長
部は、ＡＵＡ、ＵＧＣＵＵ、ＣＵＧ、ＵＧ、ＵＧＣＣ、ＣＵＧＣＣ、ＣＧＵ、ＣＵＵ、Ｕ
ＧＣＣＵＡ、ＣＵＧＣＣＵ、ＵＧＣＣＵ、ＵＧＡＵＵ、ＧＣＣＵＡＵ、Ｔ、ＴＴ、Ｕ、Ｕ
Ｕ（それぞれ５’→３’で記載）を含むか又はこれらからなるが、これらに限定されない
。

【0153】

いくつかの実施形態において、アンチセンス鎖の３’末端は、追加の塩基脱落ヌクレオ
シド（Ａｂ）を含み得る。いくつかの実施形態において、Ａｂ又はＡｂＡｂが、アンチセ
ンス鎖の３’末端に追加され得る。

【0154】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、１、２、３、４、又は５ヌクレ
オチド長の５’延長部を有するアンチセンス鎖を含む。他の実施形態において、ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、１又は２ヌクレオチド長の５’延長部を有するアンチセンス鎖を含む。い
くつかの実施形態において、１つ又は複数のアンチセンス鎖延長部ヌクレオチドは、対応
するＨＢＶ ｍＲＮＡ配列に対して相補的なウラシル又はチミジンヌクレオチド又はヌク
レオチドを含む。いくつかの実施形態において、５’アンチセンス鎖延長部は、ＵＡ、Ｔ
Ｕ、Ｕ、Ｔ、ＵＵ、ＴＴ、ＣＵＣ（それぞれ５’→３’で記載）を含むか又はこれらから
なるが、これらに限定されない。アンチセンス鎖は、記述される５’アンチセンス鎖延長
部（存在する場合）と組み合わせて、上述の３’延長部のいずれかの者を有し得る。

【0155】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、１、２、３、４、又は５ヌクレ
オチド長の３’延長部を有するセンス鎖を含む。いくつかの実施形態において、１つ又は
複数のセンス鎖延長部ヌクレオチドは、アデノシン、ウラシル、又はチミジンヌクレオチ
ド、ＡＴジヌクレオチド、又はＨＢＶ ｍＲＮＡ配列のヌクレオチドに対応するヌクレオ
チドを含む。いくつかの実施形態において、３’センス鎖延長部は、Ｔ、ＵＴ、ＴＴ、Ｕ
Ｕ、ＵＵＴ、ＴＴＴ、又はＴＴＴＴ（それぞれ５’→３’で記載）を含むか又はこれらか
らなるが、これらに限定されない。

【0156】

いくつかの実施形態において、センス鎖の３’末端は、追加の塩基脱落ヌクレオシドを
含み得る。いくつかの実施形態において、ＵＵＡｂ、ＵＡｂ、又はＡｂが、センス鎖の３
’末端に追加され得る。いくつかの実施形態において、センス鎖の３’末端に追加された
１つ又は複数の塩基脱落ヌクレオシドが、逆向きになり得る（ｉｎｖＡｂ）。いくつかの
実施形態において、１つ又は複数の逆向き塩基脱落ヌクレオシドが、標的化リガンドと、
ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の核酸塩基配列との間に挿入され得る。いくつかの実施形態におい
て、１つ又は複数の逆向き塩基脱落ヌクレオシドを、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の末端（複数
可）位置又はその近くに含めることによって、ＲＮＡｉ薬の活性強化又は他の望ましい特
性が可能になり得る。

【0157】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、１、２、３、４、５，又は６ヌ
クレオチド長の５’延長部を有するセンス鎖を含む。いくつかの実施形態において、１つ
又は複数のセンス鎖延長部ヌクレオチドは、ウラシル又はアデノシンヌクレオチド、又は
ＨＢＶ ｍＲＮＡ配列のヌクレオチドに対応するヌクレオチドを含む。いくつかの実施形
態において、センス鎖５’延長部は、ＣＡ、ＡＵＡＧＧＣ、ＡＵＡＧＧ、ＡＵＡＧ、ＡＵ
Ａ、Ａ、ＡＡ、ＡＣ、ＧＣＡ、ＧＧＣＡ、ＧＧＣ、ＵＡＵＣＡ、ＵＡＵＣ、ＵＣＡ、ＵＡ
Ｕ、Ｕ、ＵＵ（それぞれ５’→３’で記載）であり得るが、これらに限定されない。セン
ス鎖は、３’延長部及び／又は５’延長部を有し得る。

【0158】

いくつかの実施形態において、センス鎖の５’末端は、追加の塩基脱落ヌクレオシド（
Ａｂ）又は複数の塩基脱落ヌクレオシド（ＡｂＡｂ）を含み得る。いくつかの実施形態に
おいて、センス鎖の５’末端に追加された１つ又は複数の塩基脱落ヌクレオシドが、逆向
きになり得る（ｉｎｖＡｂ）。いくつかの実施形態において、１つ又は複数の逆向き塩基
脱落ヌクレオシドが、標的化リガンドと、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の核酸塩基配列との間に
挿入され得る。いくつかの実施形態において、１つ又は複数の逆向き塩基脱落ヌクレオシ
ドを、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の末端（複数可）位置又はその近くに含めることによって、
ＲＮＡｉ薬の活性強化又は他の望ましい特性が可能になり得る。

【0159】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を形成するのに使用されるヌクレオチド配列の実施例が、表３及び
４に提供される。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖は
、表３の配列のいずれかのヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢ
Ｖ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖は、表３の配列のいずれかの１－１７、２－１５、２－
１７、１－１８、２－１８、１－１９、２－１９、１－２０、２－２０、１－２１、２－
２１、１－２２、２－２２、１－２３、２－２３、１－２４、２－２４、１－２５、２－
２５、１－２６、又は２－２６のヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において
、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖は、表４の配列のいずれかのヌクレオチド配列を含む。
いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖は、表４の配列のいずれか
の１－１８、１－１９、１－２０、１－２１、１－２２、１－２３、１－２４、１－２５
、１－２６、２－１９、２－２０、２－２１、２－２２、２－２３、２－２４、２－２５
、２－２６、３－２０、３－２１、３－２２、３－２３、３－２４、３－２５、３－２６
、４－２１、４－２２、４－２３、４－２４、４－２５、４－２６、５－２２、５－２３
、５－２４、５－２５、５－２６、６－２３、６－２４、６－２５、６－２６、７－２４
、７－２５、７－２５、８－２５、８－２６のヌクレオチド配列を含む。

【0160】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチ
センス鎖は、同じヌクレオチド数を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載
されるＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセンス鎖は、異なるヌクレオチド数を含む。いく
つかの実施形態において、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の５’末端及びアンチセンス鎖の３’末
端は、平滑末端を形成する。いくつかの実施形態において、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の３’
末端及びアンチセンス鎖の５’末端は、平滑末端を形成する。いくつかの実施形態におい
て、ＲＮＡｉ薬の両端は、平滑末端を形成する。いくつかの実施形態において、ＲＮＡｉ
薬のいずれの末端も平滑末端ではない。本明細書で使用されるとき、平滑末端とは、ＲＮ
Ａｉ薬の二本鎖の端で、２本のアニーリングされた鎖の末端ヌクレオチドが相補的である
（相補的塩基対を形成している）ことを意味する。いくつかの実施形態において、ＲＮＡ
ｉ薬のセンス鎖の５’末端及びアンチセンス鎖の３’末端は、フレイド末端（frayed end
）を形成する。いくつかの実施形態において、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の３’末端及びアン
チセンス鎖の５’末端は、フレイド末端を形成する。いくつかの実施形態において、ＲＮ
Ａｉ薬の両端は、フレイド末端を形成する。いくつかの実施形態において、ＲＮＡｉ薬の
いずれの端も、フレイド末端ではない。本明細書で使用されるとき、フレイド末端とは、
ＲＮＡｉ薬の二本鎖の端で、２本のアニーリングされた鎖の末端ヌクレオチドが対を形成
する（すなわちオーバーハングを形成しない）が、相補的ではない（すなわち、非相補的
対を形成する）ことを意味する。本明細書で使用されるとき、オーバーハングとは、二本
鎖ＲＮＡｉ薬の一方の鎖の末端にある、１つ又は複数の非対ヌクレオチドのストレッチで
ある。非対ヌクレオチドは、センス鎖上又はアンチセンス鎖上にあってよく、３’又は５
’オーバーハングのいずれかを形成する。いくつかの実施形態において、ＲＮＡｉ薬は、
平滑末端及びフレイド末端、平滑末端及び５’オーバーハング末端、平滑末端及び３’オ
ーバーハング末端、フレイド末端及び５’オーバーハング末端、フレイド末端及びａ３’
オーバーハング末端、２つの５’オーバーハング末端、２つの３’オーバーハング末端、
５’オーバーハング末端及び３’オーバーハング末端、２つのフレイド末端、又は２つの
平滑末端を含む。

【0161】

ヌクレオチド塩基（核酸塩基）は、複素環式ピリミジン又はプリン化合物であり、これ
は全ての核酸の構成要素であり、アデニン（Ａ）、グアニン（Ｇ）、シトシン（Ｃ）、チ
ミン（Ｔ）、及びウラシル（Ｕ）を含む。本明細書で使用されるとき、用語「ヌクレオチ
ド」は、修飾ヌクレオチド（例えば、ヌクレオチド模倣体、塩基脱落部位（Ａｂ）、又は
代理置換部分）を含み得る。修飾ヌクレオチドは、様々なポリヌクレオチド又はオリゴヌ
クレオチド構造体に使用されるとき、化合物の血清安定性を高めると同時に、細胞中でそ
の化合物の活性を維持することができ、更に、ポリヌクレオチド又はオリゴヌクレオチド
構造体の投与時に、ヒト体内でのインターフェロン活性を活性化する可能性を最小限に抑
えることができる。

【0162】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、塩、混合塩、又は遊離酸として
調製又は提供される。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬はナトリウム塩
として調製される。このような形態は、本明細書で開示される本発明の範囲内である。

【0163】

修飾ヌクレオチド
いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、１つ又は複数の修飾ヌクレオチ
ドを含む。本明細書で使用されるとき、「修飾ヌクレオチド」は、リボヌクレオチド（２
’－ヒドロキシルヌクレオチド）以外のヌクレオチドである。いくつかの実施形態におい
て、少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０
％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少な
くとも９９％、又は１００％）のヌクレオチドが、修飾ヌクレオチドである。本明細書で
使用されるとき、修飾ヌクレオチドには、デオキシリボヌクレオチド、ヌクレオチド模倣
体、塩基脱落ヌクレオチド（本明細書においてＡｂと表わされる）、２’－修飾ヌクレオ
チド、３’－３’連結（逆向き）ヌクレオチド（本明細書においてｉｎｖｄＮ、ｉｎｖＮ
、ｉｎｖｎ、ｉｎｖＡｂと表わされる）、非天然塩基含有ヌクレオチド、架橋ヌクレオチ
ド、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、２’，３’－ｓｅｃｏヌクレオチド模倣体（アンロックト
核酸塩基類似体、本明細書においてＮ_ＵＮＡ又はＮＵＮＡと表わされる）、ロックトヌク
レオチド（本明細書においてＮ_ＬＮＡ又はＮＬＮＡと表わされる）、３’－Ｏ－メトキシ
（２’ヌクレオシド間連結）ヌクレオチド（本明細書において３’－ＯＭｅｎと表わされ
る）、２’－Ｆ－アラビノヌクレオチド（本明細書においてＮｆＡＮＡ又はＮｆ_ＡＮＡと
表わされる）、５’－Ｍｅ、２’－フルオロヌクレオチド（本明細書において５Ｍｅ－Ｎ
ｆと表わされる）、モルホリノヌクレオチド、ビニルホスホネートデオキシリボヌクレオ
チド（本明細書においてｖｐｄＮと表わされる）、ビニルホスホネート含有ヌクレオチド
、及びシクロプロピルホスホネート含有ヌクレオチド（ｃＰｒｐＮ）が挙げられるがこれ
らに限定されない。２’－修飾ヌクレオチド（すなわち、糖五員環の２’位置にヒドロキ
シル基以外の基があるヌクレオチド）には、２’－Ｏ－メチルヌクレオチド（本明細書に
おいてヌクレオチド配列中で小文字の「ｎ」と表わされる）、２’－デオキシ－２’－フ
ルオロヌクレオチド（本明細書においてＮｆ、また２’－フルオロヌクレオチドと表わさ
れる）、２’－デオキシヌクレオチド（本明細書においてｄＮと表わされる）、２’－メ
トキシエチル（２’－Ｏ－２－メトキシルエチル）ヌクレオチド（本明細書においてＮＭ
又は２’－ＭＯＥと表わされる）、２’－アミノヌクレオチド、及び２’－アルキルヌク
レオチドが挙げられるがこれらに限定されない。所与の化合物中の全ての位置を均一に修
飾する必要はない。逆に、複数の修飾を、単一のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は更にはその単
一のヌクレオチド中に組み込むことができる。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチ
センス鎖は、当該技術分野で周知の方法により、合成及び／又は修飾することができる。
あるヌクレオチドでの修飾は、別のヌクレオチドでの修飾とは無関係である。

【0164】

修飾核酸塩基には、合成及び天然のヌクレオ塩基が含まれ、これには、５－置換ピリミ
ジン、６－アザピリミジン及びＮ－２、Ｎ－６及びＯ－６置換プリン、（例えば、２－ア
ミノプロピルアデニン、５－プロピニルウラシル、又は５－プロピニルシトシン）、５－
メチルシトシン（５－ｍｅ－Ｃ）、５－ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキ
サンチン、２－アミノアデニン、アデニン及びグアニンの６－アルキル（例えば、６－メ
チル、６－エチル、６－イソプロピル、又は６－ｎ－ブチル）誘導体、アデニン及びグア
ニンの２－アルキル（例えば、２－メチル、２－エチル、２－イソプロピル、又は２－ｎ
－ブチル）及びその他のアルキル誘導体、２－チオウラシル、２－チオチミン、２－チオ
シトシン、５－ハロウラシル、シトシン、５－プロピニルウラシル、５－プロピニルシト
シン、６－アゾウラシル、６－アゾシトシン、６－アゾチミン、５－ウラシル（プソイド
ウラシル）、４－チオウラシル、８－ハロ、８－アミノ、８－スルフヒドリル、８－チオ
アルキル、８－ヒドロキシル及び他の８－置換アデニン及びグアニン、５－ハロ（例えば
、５－ブロモ）、５－トリフルオロメチル、及び他の５－置換ウラシル及びシトシン、７
－メチルグアニン及び７－メチルアデニン、８－アザグアニン及び８－アザアデニン、７
－デアザグアニン、７－デアザアデニン、３－デアザグアニン、及び３－デアザアデニン
が挙げられる。

【0165】

いくつかの実施形態において、ＲＮＡｉ薬の全て又は実質的に全てのヌクレオチドが修
飾ヌクレオチドである。本明細書で使用されるとき、実質的に全てのヌクレオチドが修飾
ヌクレオチドであるＲＮＡｉ薬は、リボヌクレオチドとなるセンス鎖及びアンチセンス鎖
の両方において、４個以下の（すなわち、０、１、２、３、又は４個の）ヌクレオチドを
有するＲＮＡｉ薬である。本明細書で使用されるとき、実質的に全てのヌクレオチドが修
飾ヌクレオチドであるセンス鎖は、リボヌクレオチドとなるセンス鎖において、２つ以下
の（すなわち、０、１、又は２個の）修飾ヌクレオチドを有するセンス鎖である。本明細
書で使用されるとき、実質的に全てのヌクレオチドが修飾ヌクレオチドであるアンチセン
ス鎖は、リボヌクレオチドとなるセンス鎖において、２つ以下の（すなわち、０、１、又
は２個の）修飾ヌクレオチドを有するアンチセンス鎖である。いくつかの実施形態におい
て、ＲＮＡｉ薬の１つ又は複数のヌクレオチドがリボヌクレオチドである。

【0166】

修飾ヌクレオシド間連結
いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の１つ又は複数のヌクレオチドは、
非標準的な連結又は骨格鎖により連結している（すなわち、修飾ヌクレオシド間連結又は
修飾骨格鎖）。いくつかの実施形態において、修飾ヌクレオシド間連結は、リン酸塩非含
有の共有結合ヌクレオシド間連結である。修飾ヌクレオシド間連結又は骨格鎖には、５’
－ホスホロチオエート基（本明細書において小文字の「ｓ」と表わされる）、キラルホス
ホロチオエート、チオホスフェート、ホスホロジチオエート、ホスホトリエステル、アミ
ノアルキル－ホスホトリエステル、アルキルホスホネート（例えば、メチルホスホネート
又は３’－アルキレンホスホネート）、キラルホスホネート、ホスフィネート、ホスホロ
アミダート（例えば、３’－アミノホスホロアミダート、アミノアルキルホスホロアミダ
ート、又はチオノホスホロアミダート）、チオノアルキル－ホスホネート、チオノアルキ
ルホスホトリエステル、モルホリノ連結、通常の３’－５’連結を有するボラノホスフェ
ート、ボラノホスフェートの２’－５’連結類似体、又は逆向きの極性を有するボラノホ
スフェート（隣接するヌクレオシド対単位が、３’－５’対５’－３’、又は２’－５’
対５’－２’）が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、修
飾ヌクレオシド間連結又は骨格鎖は、リン原子を有さない。リン原子を有さない修飾ヌク
レオシド間連結には、短鎖アルキル又はシクロアルキル糖間連結、混合ヘテロ原子及びア
ルキル又はシクロアルキル糖間連結、あるいは、１つ又は複数の短鎖ヘテロ原子又は複素
環式糖間連結が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、修飾
ヌクレオシド間骨格鎖には、シロキサン骨格鎖、スルフィド骨格鎖、スルホキシド骨格鎖
、スルホン骨格鎖、ホルムアセチル及びチオホルムアセチル骨格鎖、メチレンホルムアセ
チル及びチオホルムアセチル骨格鎖、アルケン含有骨格鎖、スルファメート骨格鎖、メチ
レンイミノ及びメチレンヒドラジノ骨格鎖、スルホネート及びスルホンアミド骨格鎖、ア
ミド骨格鎖、及びＮ、Ｏ、Ｓ、及びＣＨ_２成分を有するその他の骨格鎖が挙げられるがこ
れらに限定されない。

【0167】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖は、１、２、３、４、５
、又は６個のホスホロチオエート連結を含み得、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖は
１、２、３、４、５、又は６個のホスホロチオエート連結を含み得、又は、センス鎖及び
アンチセンス鎖の両方が独立に１、２、３、４、５、又は６個のホスホロチオエート連結
を含み得る。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖は、１、２、
３、又は４個のホスホロチオエート連結を含み得、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖
は１、２、３、又は４個のホスホロチオエート連結を含み得、又は、センス鎖及びアンチ
センス鎖の両方が独立に１、２、３、又は４個のホスホロチオエート連結を含み得る。

【0168】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖は、少なくとも２つのホ
スホロチオエートヌクレオシド間連結を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも
２つのホスホロチオエートヌクレオシド間連結は、センス鎖の３’末端から位置１～３の
ヌクレオチド間にある。いくつかの実施形態において少なくとも２つのホスホロチオエー
トヌクレオシド間連結は、センス鎖の５’末端から位置１～３、２～４、３～５、４～６
、４～５、又は６～８のヌクレオチド間にある。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖は、４つのホスホロチオエートヌクレオシド間連結を含む。
いくつかの実施形態において、この４つのホスホロチオエートヌクレオシド間連結は、セ
ンス鎖の５’末端から位置１～３のヌクレオチド間、及び、５’末端から位置１９～２１
、２０～２２、２１～２３、２２～２４、２３～２５、又は２４～２６のヌクレオチド間
にある。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、センス鎖に少なくとも２
つのホスホロチオエートヌクレオシド間連結と、アンチセンス鎖に３つ又は４つのホスホ
ロチオエートヌクレオシド間連結とを含む。

【0169】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、１つ又は複数の修飾ヌクレオチ
ド、及び１つ又は複数の修飾ヌクレオシド間連結を含む。いくつかの実施形態において、
２’－修飾ヌクレオシドは、修飾ヌクレオシド間連結と組み合わせられる。

【0170】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬
いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、下記の表
１に示すＨＢＶゲノムの位置にある又はその近くにあるＨＢＶ遺伝子を標的とする。いく
つかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖は
、表１に開示される標的ＨＢＶ １９－ｍｅｒ配列に対して完全に、実質的に、又は少な
くとも部分的に相補的なコアストレッチ配列を含む。

【0171】

【表1】

【0172】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、アンチセンス鎖（５’→３’）
の位置１９が、表１に開示される１９－ｍｅｒ標的配列の位置１と塩基対を形成すること
ができるアンチセンス鎖を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、
アンチセンス鎖（５’→３’）の位置１が、表１に開示される１９－ｍｅｒ標的配列の位
置１９と塩基対を形成することができるアンチセンス鎖を含む。

【0173】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、アンチセンス鎖（５’→３’）
の位置２が、表１に開示される１９－ｍｅｒ標的配列の位置１８と塩基対を形成すること
ができるアンチセンス鎖を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、
アンチセンス鎖（５’→３’）の位置２～１８が、表１に開示される１９－ｍｅｒ標的配
列の位置１８～２に位置する各相補的塩基それぞれと塩基対を形成することができるアン
チセンス鎖を含む。

【0174】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、以下の表２に示すコア１９－ｍ
ｅｒヌクレオチド配列を含む。

【0175】

【表2】

【0176】

表２のヌクレオチド配列を含むか又はこれらからなるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及
びアンチセンス鎖は、修飾ヌクレオチド又は非修飾ヌクレオチドであり得る。いくつかの
実施形態において、表２のヌクレオチド配列を含むか又はこれらからなるセンス鎖配列及
びアンチセンス鎖配列を有するＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、全て又は実質的に全て修飾ヌクレ
オチドである。

【0177】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセン
ス鎖は、表２のいずれかのアンチセンス鎖配列から、０、１、２、又は３個のヌクレオチ
ドが異なる。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の
センス鎖は、表２のいずれかのセンス鎖配列から、０、１、２、又は３個のヌクレオチド
が異なる。

【0178】

修飾ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬アンチセンス鎖配列、並びにその基盤となる非修飾配列が、表
３に提供される。修飾ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖、並びにその基盤となる非修飾配列
が、表４に提供される。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の形成において、表３及び４に列記されてい
る非修飾配列のそれぞれにおける各ヌクレオチドが、修飾ヌクレオチドであり得る。

【0179】

本明細書で使用されるとき（表３及び４を含む）、修飾ヌクレオチド、標的化基、及び
連結基を示すのに、下記の命名法が使用される。当業者には容易に理解され得るように、
配列により別途記載のない限り、オリゴヌクレオチド中に存在するとき、モノマーは５’
－３’－ホスホジエステル結合により相互に連結される。
Ａ＝アデノシン－３’－ホスフェート
Ｃ＝シチジン－３’－ホスフェート
Ｇ＝グアノシン－３’－ホスフェート
Ｕ＝ウリジン－３’－ホスフェート
ｎ＝任意の２’－ＯＭｅ修飾ヌクレオチド
ａ＝２’－Ｏ－メチルアデノシン－３’－ホスフェート
ａｓ＝２’－Ｏ－メチルアデノシン－３’－ホスホロチオエート
ｃ＝２’－Ｏ－メチルシチジン－３’－ホスフェート
ｃｓ＝２’－Ｏ－メチルシチジン－３’－ホスホロチオエート
ｇ＝２’－Ｏ－メチルグアノシン－３’－ホスフェート
ｇｓ＝２’－Ｏ－メチルグアノシン－３’－ホスホロチオエート
ｔ＝２’－Ｏ－メチル－５－メチルウリジン－３’－ホスフェート
ｔｓ＝２’－Ｏ－メチル－５－メチルウリジン－３’－ホスホロチオエート
ｕ＝２’－Ｏ－メチルウリジン－３’－ホスフェート
ｕｓ＝２’－Ｏ－メチルウリジン－３’－ホスホロチオエート
Ｎｆ＝任意の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド
Ａｆ＝２’－フルオロアデノシン－３’－ホスフェート
Ａｆｓ＝２’－フルオロアデノシン－３’－ホスホロチオエート
Ｃｆ＝２’－フルオロシチジン－３’－ホスフェート
Ｃｆｓ＝２’－フルオロシチジン－３’－ホスホロチオエート
Ｇｆ＝２’－フルオログアノシン－３’－ホスフェート
Ｇｆｓ＝２’－フルオログアノシン－３’－ホスホロチオエート
Ｔｆ＝２’－フルオロ－５’－メチルウリジン－３’－ホスフェート
Ｔｆｓ＝２’－フルオロ－５’－メチルウリジン－３’－ホスホロチオエート
Ｕｆ＝２’－フルオロウリジン－３’－ホスフェート
Ｕｆｓ＝２’－フルオロウリジン－３’－ホスホロチオエート
ｄＮ＝任意の２’－デオキシリボヌクレオチド
ｄＴ＝２’－デオキシチミジン－３’－ホスフェート
Ｎ_ＵＮＡ＝２’，３’－ｓｅｃｏヌクレオチド模倣体（アンロックト核酸塩基類似体）
Ｎ_ＬＮＡ＝ロックトヌクレオチド
Ｎｆ_ＡＮＡ＝２’－Ｆ－アラビノヌクレオチド
ＮＭ＝２’－メトキシエチルヌクレオチド
ＡＭ＝２’－メトキシエチルアデノシン－３’－ホスフェート
ＡＭｓ＝２’－メトキシエチルアデノシン－３’－ホスホロチオエート
ＴＭ＝２’－メトキシエチルチミジン－３’－ホスフェート
ＴＭｓ＝２’－メトキシエチルチミジン－３’－ホスホロチオエート
Ｒ＝リビトール
（ｉｎｖｄＮ）＝任意の逆向きデオキシリボヌクレオチド（３’－３’連結ヌクレオチ
ド）
（ｉｎｖＡｂ）＝逆向き（３’－３’連結）塩基脱落デオキシリボヌクレオチド、表６
参照
（ｉｎｖＡｂ）ｓ＝逆向き（３’－３’連結）塩基脱落デオキシリボヌクレオチド－５
’－ホスホロチオエート、表６参照
（ｉｎｖｎ）＝任意の逆向き２’－ＯＭｅヌクレオチド（３’－３’連結ヌクレオチド
）
ｓ＝ホスホロチオエート連結
ｖｐｄＮ＝ビニルホスホネートデオキシリボヌクレオチド
（５Ｍｅ－Ｎｆ）＝５’－Ｍｅ、２’－フルオロヌクレオチド
ｃＰｒｐ＝シクロプロピルホスホネート、表６参照
ｅｐＴｃＰｒ＝表６参照
ｅｐＴＭ＝表６参照

【0180】

当業者には、所与のオリゴヌクレオチド配列の３’末端にある末端ヌクレオチドは典型
的に、ｅｘ ｖｉｖｏでホスフェート部分の代わりに、所与のモノマーのそれぞれの３’
位置に、ヒドロキシル（－ＯＨ）基を有することが容易に理解されよう。よって例えば、
上記ＡＤ０５０７０の構造表示に示されているように、ＡＭ０６６０６－ＡＳのアンチセ
ンス鎖の３’末端にある「ｇ」修飾ヌクレオチドは、３’位置にあるヒドロキシル基を有
する。本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、及びＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の組成物の記
述には、本明細書で別途記載のない限り、当業者によるそのような理解が使用される。

【0181】

標的化基及び連結基には、（ＰＡＺ）、（ＮＡＧ１３）、（ＮＡＧ１３）ｓ、（ＮＡＧ
１８）、（ＮＡＧ１８）ｓ、（ＮＡＧ２４）、（ＮＡＧ２４）ｓ、（ＮＡＧ２５）、（Ｎ
ＡＧ２５）ｓ、（ＮＡＧ２６）、（ＮＡＧ２６）ｓ、（ＮＡＧ２７）、（ＮＡＧ２７）ｓ
、（ＮＡＧ２８）、（ＮＡＧ２８）ｓ、（ＮＡＧ２９）、（ＮＡＧ２９）ｓ、（ＮＡＧ３
０）、（ＮＡＧ３０）ｓ、（ＮＡＧ３１）、（ＮＡＧ３１）ｓ、（ＮＡＧ３２）、（ＮＡ
Ｇ３２）ｓ、（ＮＡＧ３３）、（ＮＡＧ３３）ｓ、（ＮＡＧ３４）、（ＮＡＧ３４）ｓ、
（ＮＡＧ３５）、（ＮＡＧ３５）ｓ、（ＮＡＧ３６）、（ＮＡＧ３６）ｓ、（ＮＡＧ３７
）、（ＮＡＧ３７）ｓ、（ＮＡＧ３８）、（ＮＡＧ３８）ｓ、（ＮＡＧ３９）、（ＮＡＧ
３９）ｓが挙げられ、これらの化学構造は表６に提供される。各センス鎖及び／又はアン
チセンス鎖は、上記の任意の標的化基又は連結基、並びに他の標的化基又は連結基を有し
得、これらは配列の５’及び／又は３’末端にコンジュゲートされる。

【0182】

【表3-1】

【0183】

【表3-2】

【0184】

【表3-3】

【0185】

【表4-1】

【0186】

【表4-2】

【0187】

【表4-3】

【0188】

本明細書に記載のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、センス鎖でアンチセンス鎖をアニーリングす
ることによって形成される。表４に記載される配列を含むセンス鎖は、表３に記載される
配列を含む任意のアンチセンス鎖に対し、この２つの配列が、連続する１６、１７、１８
、１９、２０、又は２１個のヌクレオチド配列にわたって少なくとも約８５％の相補性の
領域を有する限りにおいて、ハイブリダイズさせることができる。

【0189】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセン
ス鎖は、表３のいずれかのアンチセンス鎖配列から、０、１、２、又は３個のヌクレオチ
ドが異なる。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の
センス鎖は、表４のいずれかのセンス鎖配列から、０、１、２、又は３個のヌクレオチド
が異なる。

【0190】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖は、表３の配列の
いずれかのヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬
のアンチセンス鎖は、表３の配列のいずれかの１－１７、２－１７、１－１８、２－１８
、１－１９、２－１９、１－２０、２－２０、１－２１、２－２１、１－２２、２－２２
、１－２３、２－２３、１－２４、２－２４、１－２５、２－２５、１－２６、又は２－
２６（５’末端→３’末端）のヌクレオチド配列を含む。

【0191】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖は、表４の配列のいずれ
かのヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセン
ス鎖は、表４の配列のいずれかの１－１７、２－１７、３－１７、４－１７、１－１８、
２－１８、３－１８、４－１８、１－１９、２－１９、３－１９、４－１９、１－２０、
２－２０、３－２０、４－２０、１－２１、２－２１、３－２１、４－２１、１－２２、
２－２２、３－２２、４－２２、１－２３、２－２３、３－２３、４－２３、１－２４、
２－２４、３－２４、４－２４、１－２５、２－２５、３－２５、４－２５、１－２６、
２－２６、３－２６、又は４－２６（５’末端→３’末端）のヌクレオチド配列を含む。

【0192】

本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬について、アンチセンス鎖の位置１（５’末
端→３’末端）のヌクレオチドは、ＨＢＶ遺伝子に対して完全に相補的であってもよいし
、ＨＢＶ遺伝子に対して非相補的であってもよい。いくつかの実施形態において、アンチ
センス鎖の位置１（５’末端→３’末端）のヌクレオチドは、Ｕ、Ａ、又はｄＴである。
いくつかの実施形態において、アンチセンス鎖の位置１（５’末端→３’末端）のヌクレ
オチドは、センス鎖と、Ａ：Ｕ又はＵ：Ａ塩基対を形成する。

【0193】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のアンチセンス鎖は、表３のいずれ
かのアンチセンス鎖配列の、２－１８又は２－１９（５’末端→３’末端）のヌクレオチ
ド配列を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉのセンス鎖は、表４のセ
ンス鎖配列のいずれかの、１－１７又は１－１８（５’末端→３’末端）のヌクレオチド
配列を含む。

【0194】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、（ｉ）表３のいずれかのアンチ
センス鎖配列の、２－１８又は２－１９（５’末端→３’末端）のヌクレオチド配列を含
むアンチセンス鎖と、（ｉｉ）表４のセンス鎖配列のいずれかの、１－１７又は１－１８
（５’末端→３’末端）のヌクレオチド配列を含むセンス鎖とを含む。

【0195】

表４に記載される配列を含むセンス鎖は、表３に記載される配列を含む任意のアンチセ
ンス鎖に対し、この２つの配列が、連続する１６、１７、１８、１９、２０、又は２１個
のヌクレオチド配列にわたって少なくとも約８５％の相補性の領域を有する限りにおいて
、ハイブリダイズさせることができる。代表的な配列対が、表５に示すデュプレックスＩ
Ｄ番号に例示されている。

【0196】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、本明細書に示すデュプレックス
ＩＤ番号の任意のものを含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、本
明細書に示すいずれかのデュプレックスＩＤ番号からなる。いくつかの実施形態において
、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、本明細書に示すいずれかのデュプレックスＩＤ番号のセンス鎖
及び／又はアンチセンス鎖ヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢ
Ｖ ＲＮＡｉ薬は、本明細書に示すいずれかのデュプレックスＩＤ番号のセンス鎖及び／
又はアンチセンス鎖ヌクレオチド配列と、標的化基及び／又は連結基（この標的化基及び
／又は連結基は、センス鎖又はアンチセンス鎖に共有結合連結（すなわちコンジュゲート
）している）とを含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、本明細書
に示すいずれかのデュプレックスＩＤ番号のセンス鎖及びアンチセンス鎖の修飾ヌクレオ
チド配列を含む。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、本明細書に示す
いずれかのデュプレックスＩＤ番号のセンス鎖及び／又はアンチセンス鎖の修飾ヌクレオ
チド配列と、標的化基及び／又は連結基（この標的化基及び／又は連結基は、センス鎖又
はアンチセンス鎖に共有結合連結している）とを含む。

【0197】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、表５のいずれかのアンチセンス
鎖／センス鎖デュプレックスのヌクレオチド配列を有するアンチセンス鎖及びセンス鎖を
含み、更に、アシアロ糖タンパク質受容体リガンド標的化基を含む。

【0198】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、表５のいずれかのデュプレック
スのいずれかのアンチセンス鎖及び／又はセンス鎖ヌクレオチド配列のヌクレオチド配列
を有するアンチセンス鎖及びセンス鎖を含み、更に、（ＰＡＺ）、（ＮＡＧ１３）、（Ｎ
ＡＧ１３）ｓ、（ＮＡＧ１８）、（ＮＡＧ１８）ｓ、（ＮＡＧ２４）、（ＮＡＧ２４）ｓ
、（ＮＡＧ２５）、（ＮＡＧ２５）ｓ、（ＮＡＧ２６）、（ＮＡＧ２６）ｓ、（ＮＡＧ２
７）、（ＮＡＧ２７）ｓ、（ＮＡＧ２８）、（ＮＡＧ２８）ｓ、（ＮＡＧ２９）、（ＮＡ
Ｇ２９）ｓ、（ＮＡＧ３０）、（ＮＡＧ３０）ｓ、（ＮＡＧ３１）、（ＮＡＧ３１）ｓ、
（ＮＡＧ３２）、（ＮＡＧ３２）ｓ、（ＮＡＧ３３）、（ＮＡＧ３３）ｓ、（ＮＡＧ３４
）、（ＮＡＧ３４）ｓ、（ＮＡＧ３５）、（ＮＡＧ３５）ｓ、（ＮＡＧ３６）、（ＮＡＧ
３６）ｓ、（ＮＡＧ３７）、（ＮＡＧ３７）ｓからなる群から選択される標的化基を含む
。

【0199】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、表５のいずれかのデュプレック
スのアンチセンス鎖及びセンス鎖ヌクレオチド配列の修飾ヌクレオチド配列を有するアン
チセンス鎖及びセンス鎖を含む。

【0200】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、表５のいずれかのデュプレック
スのいずれかのアンチセンス鎖及び／又はセンス鎖ヌクレオチド配列の修飾ヌクレオチド
配列を有するアンチセンス鎖及びセンス鎖を含み、更に、アシアロ糖タンパク質受容体リ
ガンド標的化基を含む。

【0201】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、表５のいずれかのデュプレック
スを含む。

【0202】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、表５のいずれかのデュプレック
スからなる。

【0203】

【表5-1】

【0204】

【表5-2】

【0205】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、塩、混合塩、又は遊離酸として
調製又は提供される。本明細書に記載のＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶ遺伝子を発現する細胞に送
達されると、ｉｎ ｖｉｖｏで、１つ又は複数のＨＢＶ遺伝子の発現を阻害又はノックダ
ウンする。

【0206】

標的化基、連結基、及び送達ビヒクル
いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、１つ又は複数の非ヌクレオチド
基にコンジュゲートされており、これには標的化基、連結基、送達ポリマー、又は送達ビ
ヒクルが挙げられるがこれらに限定されない。この非ヌクレオチド基は、ＲＮＡｉ薬の標
的化、送達又は接合を増強することができる。表６には、標的化基及び連結基の例が提供
されている。非ヌクレオチド基は、センス鎖及び／又はアンチセンス鎖のいずれかの３’
及び／又は５’末端に共有結合連結され得る。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ Ｒ
ＮＡｉ薬は、センス鎖の３’及び／又は５’末端に連結された非ヌクレオチド基を含む。
いくつかの実施形態において、非ヌクレオチド基は、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の５
’末端に連結される。非ヌクレオチド基は、リンカー／連結基を介して、直接又は間接的
にＲＮＡｉ薬に連結され得る。いくつかの実施形態において、非ヌクレオチド基は、動揺
性、分割化能、又は反転可能な結合又はリンカーを介して、ＲＮＡｉ薬に連結される。

【0207】

いくつかの実施形態において、非ヌクレオチド基は、ＲＮＡｉ薬又はコンジュゲート（
これに非ヌクレオチド基が取り付けられて、細胞特異的若しくは組織特異的な分布と、コ
ンジュゲートの細胞特異的取り込みとを改善する）の薬物動態又は体内分布特性を向上さ
せる。いくつかの実施形態において、非ヌクレオチド基は、ＲＮＡｉ薬のエンドサイトー
シスを向上させる。

【0208】

標的化基又は標的化部分は、それが取り付けられたコンジュゲートの細胞特異的分布及
び細胞特異的取り込みを改善して、コンジュゲートの薬物動態又は体内分布特性を向上さ
せる。標的化基は、一価、二価、三価、四価、又はそれ以上の価数を有し得る。代表的な
標的化基には、細胞表面分子に親和性を有する化合物、細胞受容体リガンド、ハプテン、
抗体、モノクローナル抗体、抗体フラグメント、及び細胞表面分子に親和性を有する抗体
模倣体が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、標的化基は
、リンカー（例えば、ＰＥＧリンカー、又は１つ、２つ、若しくは３つの塩基脱落及び／
又はリビトール（塩基脱落リボース）基）を用いて、ＲＮＡｉ薬に連結される。いくつか
の実施形態において、標的化基はガラクトース誘導体クラスターを含む。

【0209】

本明細書に記載されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、５’末端に反応性基（例えばアミン基）
を有するよう合成され得る。この反応性基は、その後、当該技術分野で典型的な方法を使
用して、標的化部分を取り付けるのに使用することができる。

【0210】

いくつかの実施形態において、標的化基はアシアロ糖タンパク質受容体リガンドを含む
。いくつかの実施形態において、アシアロ糖タンパク質受容体リガンドは、１つ又は複数
のガラクトース誘導体を含むか又はこれらからなる。本明細書で使用されるとき、ガラク
トース誘導体という用語は、ガラクトースと、アシアロ糖タンパク質受容体に対する親和
性がガラクトース以上である親和性を有するガラクトース誘導体との、両方を含む。ガラ
クトース誘導体には、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－ホルミルガラクトサミン、Ｎ
－アセチル－ガラクトサミン、Ｎ－プロピオニル－ガラクトサミン、Ｎ－ｎ－ブタノイル
－ガラクトサミン、及びＮ－イソ－ブタノイルガラクトス－アミン（例えば、Ｉｏｂｓｔ
，Ｓ．Ｔ．ａｎｄ Ｄｒｉｃｋａｍｅｒ，Ｋ．Ｊ．Ｂ．Ｃ．１９９６、２７１、６６８６
を参照）が挙げられるがこれらに限定されない。肝臓に対するオリゴヌクレオチド及び他
の分子のｉｎ ｖｉｖｏ標的化に有用な、ガラクトース誘導体、及びガラクトース誘導体
のクラスターは、当該技術分野で周知である（例えば、Ｂａｅｎｚｉｇｅｒ ａｎｄ Ｆ
ｉｅｔｅ，１９８０，Ｃｅｌｌ，２２，６１１～６２０；Ｃｏｎｎｏｌｌｙ ｅｔ ａｌ
．，１９８２，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５７，９３９～９４５を参照）。ガラクト
ース誘導体は、肝細胞の表面上に発現されているアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰ
ｒ）に対する結合を介して、ｉｎ ｖｉｖｏで、肝細胞に対し分子を標的化するのに使用
されている。ＡＳＧＰｒリガンドがＡＳＧＰｒ（複数可）に結合することによって、肝細
胞に対する細胞特異的標的化と、分子の肝細胞へのエンドサイトーシスとが促進される。
ＡＳＧＰｒリガンドは、単量体（例えば、単一のガラクトース誘導体を有する）、又は多
量体（例えば、複数のガラクトース誘導体を有する）であり得る。ガラクトース誘導体又
はガラクトース誘導体クラスターは、当該技術分野で周知の方法を使用して、ＲＮＡｉポ
リヌクレオチドの３’又は５’末端に取り付けることができる。標的化基（例えばガラク
トース誘導体クラスター）の調製は、例えば、米国特許出願第１５／４５２，３２４号及
び同第１５／４５２，４２３号に記述されており、これらの両方の内容全体が本明細書に
組み込まれる。

【0211】

本明細書で使用されるとき、ガラクトース誘導体クラスターは、２～４つの末端ガラク
トース誘導体を有する分子を含む。末端ガラクトース誘導体は、そのＣ－１炭素を介して
分子に取り付けられる。いくつかの実施形態において、ガラクトース誘導体クラスターは
、ガラクトース誘導体三量体である（三分枝型ガラクトース誘導体、又は三価ガラクトー
ス誘導体とも呼ばれる）。いくつかの実施形態において、ガラクトース誘導体クラスター
はＮ－アセチル－ガラクトサミンを含む。いくつかの実施形態において、ガラクトース誘
導体クラスターは３つのＮ－アセチル－ガラクトサミンを含む。いくつかの実施形態にお
いて、ガラクトース誘導体クラスターは、ガラクトース誘導体四量体である（四分枝型ガ
ラクトース誘導体、又は四価ガラクトース誘導体とも呼ばれる）。いくつかの実施形態に
おいて、ガラクトース誘導体クラスターは４つのＮ－アセチル－ガラクトサミンを含む。

【0212】

本明細書で使用されるとき、ガラクトース誘導体三量体は、それぞれ中心分岐点に連結
された３つのガラクトース誘導体を含む。本明細書で使用されるとき、ガラクトース誘導
体四量体は、それぞれ中心分岐点に連結された４つのガラクトース誘導体を含む。ガラク
トース誘導体は、糖のＣ－１炭素を介して中心分岐点に取り付けられ得る。いくつかの実
施形態において、ガラクトース誘導体は、リンカー又はスペーサーを介して分岐点に連結
される。いくつかの実施形態において、リンカー又はスペーサーは、例えばＰＥＧ基など
の、可撓性の親水性スペーサーである（例えば、米国特許第５，８８５，９６８号；Ｂｉ
ｅｓｓｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５ Ｖｏｌ．３９ ｐ．１５３
８～１５４６を参照）。いくつかの実施形態において、ＰＥＧスペーサーはＰＥＧ_３スペ
ーサーである。この分岐点は、３つのガラクトース誘導体の取り付けが可能であり、更に
、ＲＮＡｉ薬に分岐点を取り付けることが可能であるような、任意の小分子であり得る。
分岐点基の例は、ジリジン又はジグルタミン酸塩である。分岐点のＲＮＡｉ薬への取り付
けは、リンカー又はスペーサーを介して行うことができる。いくつかの実施形態において
、リンカー又はスペーサーは、可撓性の親水性スペーサー（例えばＰＥＧスペーサーが挙
げられるがこれらに限定されない）を含む。いくつかの実施形態において、リンカーは、
剛性のリンカー（例えば環状基）を含む。いくつかの実施形態において、ガラクトース誘
導体は、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンを含むか又はこれからなる。いくつかの実施形態
において、ガラクトース誘導体クラスターは、ガラクトース誘導体四量体からなり、これ
は例えば、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン四量体であり得る。

【0213】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬をｉｎ ｖｉｖｏで肝細胞に送達す
るための医薬組成物が記述される。このような医薬組成物には、例えば、ガラクトース誘
導体クラスターにコンジュゲートされたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬が含まれ得る。いくつかの実
施形態において、ガラクトース誘導体クラスターは、ガラクトース誘導体三量体（これは
例えば、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン三量体であり得る）、又はガラクトース誘導体四
量体（これは例えば、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン四量体であり得る）からなる。

【0214】

標的化基には、（ＰＡＺ）、（ＮＡＧ１３）、（ＮＡＧ１３）ｓ、（ＮＡＧ１８）、（
ＮＡＧ１８）ｓ、（ＮＡＧ２４）、（ＮＡＧ２４）ｓ、（ＮＡＧ２５）、（ＮＡＧ２５）
ｓ、（ＮＡＧ２６）、（ＮＡＧ２６）ｓ、（ＮＡＧ２７），（ＮＡＧ２７）ｓ、（ＮＡＧ
２８），（ＮＡＧ２８）ｓ、（ＮＡＧ２９），（ＮＡＧ２９）ｓ、（ＮＡＧ３０），（Ｎ
ＡＧ３０）ｓ、（ＮＡＧ３１）、（ＮＡＧ３１）ｓ、（ＮＡＧ３２）、（ＮＡＧ３２）ｓ
、（ＮＡＧ３３）、（ＮＡＧ３３）ｓ、（ＮＡＧ３４）、（ＮＡＧ３４）ｓ、（ＮＡＧ３
５）、（ＮＡＧ３５）ｓ、（ＮＡＧ３６）、（ＮＡＧ３６）ｓ、（ＮＡＧ３７）、（ＮＡ
Ｇ３７）ｓ、（ＮＡＧ３８）、（ＮＡＧ３８）ｓ、（ＮＡＧ３９）、及び（ＮＡＧ３９）
ｓが挙げられるがこれらに限定されない。他の標的化基（ガラクトースクラスター標的化
リガンドを含む）は当該技術分野で周知である。

【0215】

いくつかの実施形態において、連結基がＲＮＡｉ薬にコンジュゲートされる。この連結
基は、標的化基又は送達ポリマー又は送達ビヒクルに対する薬物の共有結合連結を促進す
る。連結基は、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖又はアンチセンス鎖の３’又は５’末端に連結する
ことができる。いくつかの実施形態において、連結基はＲＮＡｉ薬のセンス鎖に連結する
。いくつかの実施形態において、連結基は、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の５’又は３’末端に
コンジュゲートされる。いくつかの実施形態において、連結基は、ＲＮＡｉ薬のセンス鎖
の５’末端にコンジュゲートされる。連結基の例としては、反応性基（例えば一次アミン
及びアルキン）、アルキル基、塩基脱落ヌクレオシド、リビトール（塩基脱落リボース）
、及び／又はＰＥＧ基が挙げられるがこれらに限定されない。

【0216】

リンカー又は連結基は、１つ又は複数の共有結合によって、対象の１つの化学基（ＲＮ
Ａｉ薬など）又はセグメントを、対象の別の化学基（例えば標的化基又は送達ポリマー）
又はセグメントに連結する、２つの原子間の接続である。動揺性連結は、動揺性結合を含
む。連結は、２つの結合原子間の距離を増大させるスペーサーを任意に含むことができる
。スペーサーは、この連結に可撓性及び／又は長さを更に付加することができる。スペー
サーには、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、アラ
ルケニル基、及びアラルキニル基が挙げられ得るがこれらに限定されない。このそれぞれ
が１つ又は複数のヘテロ原子、複素環、アミノ酸、ヌクレオチド、及び糖類を含み得る。
スペーサー基は当該技術分野で周知であり、上述のリストは本明細書の範囲を制限するこ
とを意味するものではない。

【0217】

表３及び４に記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のヌクレオチド配列は、修飾か非修飾
かを問わず、３’又は５’標的化基及び／又は連結基を含み得る。３’又は５’標的化基
及び／又は連結基を含む表３及び４に記載されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬いずれかの配列
のものが、代替的に、３’又は５’標的化基及び／又は連結基を含まなくてもよく、ある
いは、表３に示されるものを含むがこれらに限定されない別の３’又は５’標的化基及び
／又は連結基を含んでもよい。表５に記載されているいずれかのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬デュ
プレックスが、修飾か非修飾かを問わず、標的化基及び／又は連結基を更に含んでよく、
これには、表３に示されているものが含まれるがこれらに限定されず、更に、この標的化
基又は連結基は、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬デュプレックスのセンス鎖又はアンチセンス鎖のい
ずれかの３’又は５’末端に取り付けられ得る。

【0218】

表６には、標的化基及び連結基の例が提供されている。表４は、５’又は３’末端に連
結される標的化基又は連結基を有するＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖の、いくつかの実施
形態を提供する。

【0219】

【表6-1】

【0220】

【表6-2】

【0221】

【表6-3】

【0222】

【表6-4】

【0223】

【表6-5】

【0224】

【表6-6】

【0225】

【表6-7】

【0226】

【表6-8】

【0227】

【表6-9】

【0228】

【表6-10】

【0229】

【表6-11】

【0230】

【表6-12】

【0231】

【表6-13】

【0232】

表６における上記構造の各々において、上記構造及び本明細書に提供される記述の観点
で、当業者には理解されるように、ＮＡＧは、取り付けられるＮ－アセチル－ガラクトサ
ミン又は他のＡＳＧＰｒリガンドを含む。例えば、いくつかの実施形態において、表６に
提供される構造のＮＡＧは、次の構造で表される：

【0233】

【化34】

【0234】

各（ＮＡＧｘ）は、ホスフェート基を介して（例えば（ＮＡＧ２５）、（ＮＡＧ３０）
、及び（ＮＡＧ３１）のように）、又はホスホロチオエート基を介して（例えば（ＮＡＧ
２５）ｓ、（ＮＡＧ２９）ｓ、（ＮＡＧ３０）ｓ、（ＮＡＧ３１）ｓ、又は（ＮＡＧ３７
）ｓのように）、又は別の連結基を介して、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬に取り付けることができ
る。

【0235】

【化35】

【0236】

当該技術分野で周知の他の連結基を用いてもよい。

【0237】

送達ビヒクル
いくつかの実施形態において、細胞又は組織にＲＮＡｉ薬を送達するために、送達ビヒ
クルを使用することができる。送達ビヒクルは、細胞又は組織へのＲＮＡｉ薬の送達を改
善する化合物である。送達ビヒクルには、ポリマー（例えば、両親媒性ポリマー、膜活性
ポリマー）、ペプチド、メリチンペプチド、メリチン様ペプチド（ＭＬＰ）、脂質、可逆
性修飾ポリマー又はペプチド、又は可逆性修飾膜活性ポリアミンを挙げることができ、又
はこれらからなるが、これらに限定されない。

【0238】

いくつかの実施形態において、ＲＮＡｉ薬は、脂質、ナノ粒子、ポリマー、リポソーム
、ミセル、ＤＰＣ、又は当該技術分野で利用可能な他の送達システムと組み合わせること
ができる。ＲＮＡｉ薬は更に、標的化基、脂質（コレステロール及びコレステリル誘導体
を含むがこれらに限定されない）、ナノ粒子、ポリマー、リポソーム、ミセル、ＤＰＣ（
例えば国際公開第２０００／０５３７２２号、同第２００８／００２２３０９号、同第２
０１１／１０４１６９号、及び同第２０１２／０８３１８５号、同第２０１３／０３２８
２９号、同第２０１３／１５８１４１号を参照；これらはそれぞれ参照により本明細書に
組み込まれる）、又は当該技術分野で利用可能な他の送達システムに化学的にコンジュゲ
ートされ得る。

【0239】

医薬組成物及び製剤
本明細書で開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、医薬組成物又は製剤として調製され得る
。いくつかの実施形態において、医薬組成物には、少なくとも１つのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬
が含まれる。これらの医薬組成物は、標的細胞内、細胞群、組織、又は生体内の標的ｍＲ
ＮＡの発現を阻害するのに特に有用である。この医薬組成物は、標的ｍＲＮＡのレベルを
低下又は標的遺伝子の発現を阻害することにより助けが得られるであろう疾患又は障害を
有する対象を治療するために使用することができる。この医薬組成物は、標的ｍＲＮＡの
レベルを低下又は標的遺伝子の発現を阻害することにより助けが得られるであろう疾患又
は障害の発症リスクがある対象を治療するために使用することができる。一実施形態にお
いて、本方法は、本明細書に記載される、標的化リガンドに連結されたＨＢＶ ＲＮＡｉ
薬を、治療対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、１つ又は複数の製
薬的に許容される賦形剤（ビヒクル、担体、希釈剤、及び／又は送達ポリマーを含む）が
、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む医薬組成物に添加されて、ヒトへのｉｎ ｖｉｖｏ送達に適
した医薬製剤が形成される。

【0240】

本明細書で開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む医薬組成物及び方法は、本明細書に記
載されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の治療有効量を対象に投与することを含み、細胞、細胞群、
細胞群、組織又は対象における標的ｍＲＮＡのレベルを減少させることができ、これによ
り対象の標的ｍＲＮＡの発現を阻害することができる。

【0241】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む記載されている医薬組成物は
、ＨＢＶ感染に関係する臨床症状を治療又は管理するために使用される。いくつかの実施
形態において、治療的又は予防的に有効な量の１つ又は複数の医薬組成物が、このような
治療、予防又は管理を必要とする対象に投与される。いくつかの実施形態において、開示
されているいずれかのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の投与を使用して、対象における疾患の症状の
数、重篤度、及び／又は頻度を減少させることができる。

【0242】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む、記載された医薬組成物は、ＨＢＶ ｍＲＮＡの発現を減少
又は阻害することにより助けが得られるであろう疾患又は障害を有する対象における少な
くとも１つの症状を治療するために使用することができる。いくつかの実施形態において
、対象には、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む１つ又は複数の医薬組成物の治療有効量が投与さ
れ、これにより症状を治療する。他の実施形態において、対象に、予防的有効量の１つ又
は複数のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与することによって、少なくとも１つの症状を予防する
。

【0243】

投与経路は、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を身体に接触させる経路である。一般に、哺乳類の治
療のための薬物及び核酸の投与方法は、当該技術分野で周知であり、本明細書に記載され
る組成物の投与に適用することができる。本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、
特定の経路に適切に合わせた、調製の任意の好適な経路を介して投与することができる。
これにより、本明細書に記載される医薬組成物は、例えば、静脈内、筋肉内、皮内、皮下
、関節内、又は腹腔内などの注射により投与することができる。いくつかの実施形態にお
いて、本明細書に記載される医薬組成物は、皮下注射を介して投与される。

【0244】

本明細書に記載のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を含む医薬組成物は、当該技術分野で周知のオリ
ゴヌクレオチド送達技術を用いて、細胞、細胞群、腫瘍、組織、又は対象に送達すること
ができる。一般に、核酸分子を送達するための当該技術分野で知られる任意の好適な方法
（ｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｉｎ ｖｉｖｏ）が、本明細書に記載の組成物と共に使用するた
めに適合され得る。例えば、送達は、局所的投与（例えば直接注射、植え込み、局所投与
）、全身投与、皮下投与、静脈内、腹腔内、又は非経口的経路によるものであってよく、
これには、頭蓋内（例えば、心室内、実質内、及び髄腔内）、筋肉内、経皮的、気道（エ
アロゾル）、鼻、口腔、直腸、又は局所（頬側及び舌下を含む）投与が挙げられる。特定
の実施形態において、この組成物は皮下又は静脈内の注入又は注射によって投与される。

【0245】

したがって、いくつかの実施形態において、本明細書に記載の医薬組成物は、１つ又は
複数の製薬的に許容される賦形剤を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書に
記載の医薬組成物は、対象に投与するために製剤することができる。

【0246】

本明細書で使用されるとき、医薬組成物又は医薬品には、薬理学的有効量の少なくとも
１つの記載される治療用化合物と、１つ又は複数の製薬的に許容される賦形剤とが含まれ
る。製薬的に許容される賦形剤（賦形剤）とは、薬物送達システムに意図的に含まれる原
薬（ＡＰＩ、治療用製品、例えばＨＢＶ ＲＮＡｉ薬）以外の物質である。賦形剤は、意
図された用量で治療効果を発揮しないか、発揮することが意図されていないものである。
賦形剤は、ａ）製造中に薬物送達システムの処理を助けるよう、ｂ）ＡＰＩの安定性、生
物学的利用能、又は患者の受容性を保護、支援、又は強化するよう、ｃ）製品識別を補助
する、及び／又は、ｄ）保管時又は使用時の、全体的な安全性、有効性、ＡＰＩの送達の
他の属性を強化するよう、作用し得る。製薬的に許容される賦形剤は、不活性物質であっ
てよく、また不活性物質でなくてもよい。

【0247】

賦形剤としては、吸収促進剤、抗付着剤、抗泡剤、抗酸化剤、結合剤、緩衝剤、担体、
コーティング剤、着色剤、送達促進剤、送達ポリマー、デキストラン、デキストロース、
希釈剤、崩壊剤、乳化剤、増量剤、充填剤、香料剤、滑剤、保湿剤、潤滑剤、油類、ポリ
マー、防腐剤、生理食塩水、塩、溶媒、糖、懸濁剤、持続的放出マトリックス、甘味料、
増粘剤、張性剤、ビヒクル、撥水剤、及び湿潤剤が挙げられるがこれらに限定されない。

【0248】

注射による使用に適した医薬組成物には、滅菌水溶液（水溶性の場合）又は分散液、及
び滅菌注射溶液又は分散液の即時調製用の滅菌粉末が含まれる。静脈内投与用では、適当
な担体として、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ社、
ニュージャージー州パーシッパニー）、又はリン酸緩衝生理食塩水が挙げられる。組成物
は製造及び保存条件下で安定であるべきであり、細菌及び真菌類などの微生物の汚染作用
に対抗して保存されるべきである。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例え
ばグリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、及び
それらの適当な混合物を含んだ溶媒又は分散媒であってよい。例えばレシチンなどのコー
ティングの使用により、分散液の場合には必要な粒径の維持により、また、界面活性剤の
使用により、適正な流動性を保つことができる。多くの場合、組成物中に、例えば糖類、
マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、及び塩化ナトリウムなどの等張剤を
含むことが好ましい。組成物中に、例えばモノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンな
どの吸収を遅らせる物質を含有させることによって、注射用組成物の長期的な吸収をもた
らすことができる。

【0249】

滅菌注入用溶液は、必要量の活性化合物を、必要に応じて上記に列挙した成分の１つ又
は組み合わせと共に適切な溶媒に添加した後、濾過による滅菌を行うことにより調製する
ことができる。一般に分散液は、活性化合物を基本の分散媒及び上記に挙げた必要な他の
成分を含有する滅菌賦形剤に組み込むことにより調製される。滅菌注射溶液の調製用の滅
菌粉末の場合、調製の方法には、予め滅菌濾過されたその溶液から有効成分及び任意の更
なる所望の成分の粉末を生じる真空乾燥及び凍結乾燥が挙げられる。

【0250】

関節内投与に適した製剤は、例えば水性微結晶懸濁液の形態などの、微結晶形態であり
得る薬物の滅菌水性調製物の形態であり得る。リポソーム製剤又は生分解性ポリマー系も
、関節内及び眼内投与の両方のための薬剤を投与するのに使用することができる。

【0251】

活性化合物は、インプラント及びマイクロカプセル化送達システムを含む制御放出製剤
などの、化合物が身体から速やかに排出されるのを防ぐ担体と共に、調製することができ
る。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエ
ステル、及びポリ乳酸などの生分解性の生体適合性ポリマーを使用することができる。か
かる製剤の調製方法は当業者には明らかであろう。リポソーム懸濁液も、薬学的に許容さ
れる担体として使用することができる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１
１号に記載されるような当業者には周知の方法に従って調製することができる。

【0252】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、投与を容易とし、用量を均一とするために投与単位形態として
製剤化することができる。投与単位形態とは、治療対象のための単位投与量として適した
物理的に異なる単位を指し、各単位には、要求される医薬担体と関連して所望の治療効果
を生じるように計算された活性化合物の所定量が含まれる。本開示の投与単位形態に対す
る仕様は、活性化合物の固有の特性と、達成されるべき治療効果と、個々における治療の
ためにそのような活性化合物を配合する当分野で固有の制限、によって決定され、直接依
存する。

【0253】

医薬組成物は、医薬組成物において一般に見られる他の付加的成分を含むことができる
。このような付加的成分には、かゆみ止め、皮膚収斂剤、局所麻酔薬、又は抗炎症剤（例
えば、抗ヒスタミン薬、ジフェンヒドラミンなど）が挙げられるがこれらに限定されない
。また、本明細書で定義されるＲＮＡｉ薬を発現する又は含む細胞、組織又は単離された
器官を、「医薬組成物」として使用され得ることも想到される。本明細書で使用されると
き、「薬理学的有効量」、「治療有効量」又は単に「有効量」とは、薬理学的、治療的、
又は予防的結果を生じるＲＮＡｉ薬の量である。

【0254】

一般に、活性化合物の有効量は、約０．１～約１００ｍｇ／体重ｋｇ／日、例えば、約
１．０～約５０ｍｇ／体重ｋｇ／日の範囲にある。いくつかの実施形態において、活性化
合物の有効量は、１回の投与当たり約０．２５～約５ｍｇ／体重ｋｇの範囲にある。いく
つかの実施形態において、活性成分の有効量は、１回の投与当たり約０．５～約３ｍｇ／
体重ｋｇの範囲にある。投与量は、患者の全体的な健康状態、送達される化合物の相対的
な生物学的効力、薬物の製剤形態、製剤における賦形剤の存在及び種類、並びに投与経路
などの不確定要素に依存する可能性が高い。また、投与される初期投与量は、望ましい血
液レベル又は組織レベルを急速に達成するために上記の上限レベルを超えて増加させるこ
とができ、又は、初期投与量は最適量よりも少なくすることができることが、理解されよ
う。

【0255】

疾患の治療のため、又は疾患の治療のための医薬品又は組成物の形成のために、ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬を含む本明細書に記述される医薬組成物は、賦形剤又は第２の治療薬若しく
は治療（第２の又は他のＲＮＡｉ薬、小分子薬、抗体、抗体フラグメント、及び／又はワ
クチンが挙げられるがこれらに限定されない）と組み合わせることができる。

【0256】

記述されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、製薬的に許容される賦形剤又はアジュバントに添加
された場合、キット、容器、パック、又はディスペンサにパッケージ化することができる
。本明細書に記載の医薬組成物は、予め充填されたシリンジ又はバイアルにパッケージ化
されていてもよい。

【0257】

治療と発現阻害の方法
本明細書に開示されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、化合物を投与することにより助けが得ら
れるであろう疾患又は障害を有する対象（例えば、ヒト又は哺乳類）を治療するために使
用することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるＲＮＡｉ薬は
、ＨＢＶ ｍＲＮＡの発現を低減又は阻害することにより助けが得られるであろう疾患又
は障害を有する対象（例えば、ヒト）を治療するために使用することができる。対象には
、任意の１つ又は複数のＲＮＡｉ薬の治療有効量が投与される。対象は、ヒト、患者、又
はヒト患者であり得る。対象は、成人、青年、小児、乳児であり得る。ＨＢＶ ＲＮＡｉ
薬を含む記述される医薬組成物は、疾患の治療処置のための方法を提供するのに使用する
ことができる。このような方法は、本明細書に記載される医薬組成物をヒト又は動物に投
与することを含む。

【0258】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶに
感染した対象を治療するのに使用される。いくつかの実施形態において、記載されている
ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶ感染を有する対象における少なくとも１つの症状を治療す
るのに使用される。対象には、任意の１つ又は複数の記述されるＲＮＡｉ薬の治療有効量
が投与される。

【0259】

いくつかの実施形態において、対象は、ＨＢＶ感染及びＨＤＶ感染の両方を有する。い
くつかの実施形態において、本明細書に記載されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶとＨＤ
Ｖの両方に感染した対象を治療するのに使用される。いくつかの実施形態において、記載
されているＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、ＨＢＶ又はＨＤＶ感染を有する対象における少なくと
も１つの症状を治療するのに使用される。対象には、任意の１つ又は複数の記述されるＲ
ＮＡｉ薬の治療有効量が投与される。

【0260】

いくつかの実施形態において、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、対象がＨＢＶに感染している臨
床症状を治療又は管理するために使用される。対象には、本明細書に記載の１つ又は複数
のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬又はＨＢＶ ＲＮＡｉ薬含有組成物の治療的量又は有効量が投与さ
れる。いくつかの実施形態において、本方法は、本明細書に記載のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を
含む組成物を、治療対象に投与することを含む。

【0261】

いくつかの実施形態において、記述されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬が投与される対象におけ
るＨＢＶ遺伝子の遺伝子発現レベル及び／又はｍＲＮＡレベルは、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を
投与される前の対象、又はＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与されていない対象に比べて、少なく
とも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０
％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６
％、９７％、９８％、９９％、又は９９％超、低減される。対象における遺伝子発現レベ
ル及び／又はｍＲＮＡレベルは、対象の細胞、細胞群、及び／又は組織において低減され
得る。いくつかの実施形態において、記述されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬が投与される対象に
おけるＨＢＶ遺伝子の発現タンパク質レベルは、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与される前の対
象、又はＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与されていない対象に比べて、少なくとも約５％、１０
％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０
％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８
％、９９％、又は９９％超、低減される。対象内のタンパク質レベルは、対象の細胞、細
胞群、組織、血液、及び／又はその他の体液において低減され得る。例えば、いくつかの
実施形態において、記述されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬が投与される対象におけるＢ型肝炎表
面抗原（ＨＢｓＡｇ）の量又はレベルは、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与される前の対象、又
はＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与されていない対象に比べて、少なくとも約５％、１０％、１
５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６
５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９
９％、又は９９％超、低減される。いくつかの実施形態において、記述されるＨＢＶ Ｒ
ＮＡｉ薬が投与される対象におけるＢ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）の量又はレベルは、Ｈ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与される前の対象、又はＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与されていない対
象に比べて、少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４
０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９
０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は９９％超、低減される。いくつか
の実施形態において、記述されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬が投与される対象における血清ＨＢ
Ｖ ＤＮＡの量又はレベルは、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬を投与される前の対象、又はＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬を投与されていない対象に比べて、少なくとも約５％、１０％、１５％、２０
％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０
％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は
９９％超、低減される。血清ＨＢＶ ＤＮＡの存在、ＨＢＶ遺伝子発現、ＨＢＶ ｍＲＮ
Ａ、又はＨＢＶタンパク質の量若しくはレベルの低減は、当該技術分野で周知の方法によ
り評価され得る。ＨＢＶ ｍＲＮＡの量若しくはレベル、発現タンパク質の量若しくはレ
ベル、及び／又は血清ＨＢＶ ＤＮＡの量若しくはレベルにおける低減若しくは減少は、
本明細書において総称的に、ＨＢＶの低減若しくは減少、又は、ＨＢＶ発現の阻害若しく
は低減と呼ばれる。

【0262】

細胞及び組織と非ヒト生物
本明細書に記載のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の少なくとも１つを含む細胞、組織、及び非ヒト
生物が想到される。この細胞、組織、又は非ヒト生物は、細胞、組織、又は非ヒト生物に
対してＲＮＡｉ薬を送達することにより生成される。

【0263】

ここで、上述の実施形態及び項目が、以下の非限定的な実施例で例示される。

【実施例0264】

実施例１．ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の合成
以下の手順に従って、表５に示すＨＢＶ ＲＮＡｉ薬デュプレックスを合成した。
Ａ．合成。オリゴヌクレオチド合成に使用される固相上のホスホロアミダイト技術に基
づいて、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のセンス鎖及びアンチセンス鎖を合成した。規模に応じて、
ＭｅｒＭａｄｅ９６Ｅ（登録商標）（Ｂｉｏａｕｔｏｍａｔｉｏｎ）、ａ ＭｅｒＭａｄ
ｅ１２（登録商標）（Ｂｉｏａｕｔｏｍａｔｉｏｎ）、又はＯＰ Ｐｉｌｏｔ １００（
ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）が使用された。制御された多孔質ガラス（ＣＰＧ、５００
Å又は６００Å、Ｐｒｉｍｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ａｓｔｏｎ、ＰＡ、ＵＳＡから入手
）でできた固体支持体上で、合成を実施した。全てのＲＮＡ及び２’修飾ホスホロアミダ
イトは、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、Ｗ
Ｉ、ＵＳＡ）から購入した。具体的には、以下の２’－Ｏ－メチルホスホロアミダイトが
使用された：（５’－Ｏ－ジメトキシトリチル－Ｎ^６－（ベンゾイル）－２’－Ｏ－メチ
ル－アデノシン－３’－Ｏ－（２－シアノエチル－Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルアミノ）ホス
ホロアミダイト、５’－Ｏ－ジメトキシ－トリチル－Ｎ^４－（アセチル）－２’－Ｏ－メ
チル－シチジン－３’－Ｏ－（２－シアノエチル－Ｎ，Ｎ－ジイソプロピル－アミノ）ホ
スホロアミダイト、（５’－Ｏ－ジメトキシトリチル－Ｎ^２－（イソブチリル）－２’－
Ｏ－メチル－グアノシン－３’－Ｏ－（２－シアノエチル－Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルアミ
ノ）ホスホロアミダイト、及び５’－Ｏ－ジメトキシトリチル－２’－Ｏ－メチル－ウリ
ジン－３’－Ｏ－（２－シアノエチル－Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルアミノ）ホスホロアミダ
イト。２’－デオキシ－２’－フルオロ－ホスホロアミダイトは、２’－Ｏ－メチルアミ
ダイトと同じ保護基を有していた。塩基脱落（３’－Ｏ－ジメトキシトリチル－２’－デ
オキシリボース－５’－Ｏ－（２－シアノエチル－Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルアミノ）ホス
ホロアミダイトは、ＣｈｅｍＧｅｎｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ、ＵＳＡ）から購
入した。ホスホロアミダイトを含む標的化リガンドを、無水ジクロロメタン又は無水アセ
トニトリル（５０ｍＭ）に溶かし、一方、他の全てのアミダイトは無水アセトニトリル（
５０ｍＭ）に溶かし、分子ふるい（３Å）を加えた。５－ベンジルチオ－１Ｈ－テトラゾ
ール（ＢＴＴ、アセトニトリル中２５０ｍＭ）又は５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール
（ＥＴＴ、アセトニトリル中２５０ｍＭ）を、活性化剤溶液として使用した。結合時間は
１２分間（ＲＮＡ）、１５分間（標的化リガンド）、９０秒間（２’ＯＭｅ）、及び６０
秒間（２’Ｆ）であった。ホスホロチオエート連結を導入するために、３－フェニル１，
２，４－ジチアゾリン－５－オン（ＰＯＳ、ＰｏｌｙＯｒｇ，Ｉｎｃ．，Ｌｅｏｍｉｎｓ
ｔｅｒ，ＭＡ，ＵＳＡから入手）の無水アセトニトリル中１００ｍＭ溶液を用いた。
Ｂ．支持体結合オリゴマーの切断及び脱保護。固相合成を完了させた後、乾燥させた固
体支持体を、水中４０重量％メチルアミンと、２８％水酸化アンモニウム溶液（Ａｌｄｒ
ｉｃｈ）との体積１：１の溶液で、１．５時間３０℃で処理した。この溶液を蒸発させ、
固体残留物を水中で再構成した（下記参照）。
Ｃ．精製。ＴＳＫｇｅｌ ＳｕｐｅｒＱ－５ＰＷ １３μｍカラム及びＳｈｉｍａｄｚ
ｕ ＬＣ－８システムを用いて、アニオン交換ＨＰＬＣにより粗オリゴマーを精製した。
緩衝液Ａは、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ、５ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ９．０であり、２０％アセト
ニトリルを含有していた。緩衝液Ｂは、緩衝液Ａと同じものに、１．５Ｍ塩化ナトリウム
を加えたものであった。２６０ｎｍでＵＶトレースが記録された。適切な分画をプールし
てから、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５ ｆｉｎｅを詰めたＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ
ＸＫ ２６／４０カラムを用いて、サイズ排除ＨＰＬＣに通し、濾過ＤＩ水又は１００ｍ
Ｍ重炭酸アンモニウム（ｐＨ ６．７）及び２０％アセトニトリルをランニング緩衝液と
して用いた。
Ｄ．アニーリング。相補的鎖を、１×リン酸塩緩衝生理食塩水（Ｃｏｒｎｉｎｇ、Ｃｅ
ｌｌｇｒｏ）中の等モル量のＲＮＡ溶液（センス及びアンチセンス）を合わせて混合し、
ＲＮＡｉ薬を形成した。一部のＲＮＡｉ薬を凍結乾燥し、－１５～－２５℃で保管した。
１×リン酸塩緩衝生理食塩水中でＵＶ－Ｖｉｓスペクトロメーターを用いて溶液吸光度を
測定することによりデュプレックス濃度を求めた。次に、２６０ｎｍでの溶液吸光度に換
算係数及び希釈係数を掛けて、デュプレックス濃度を求めた。特に明記しない限り、換算
係数は全て０．０３７ｍｇ／（ｍＬ・ｃｍ）であった。いくつかの実験において、実験的
に求められた吸光係数から換算係数を計算した。

【0265】

実施例２．ｐＨＢＶモデルマウス。

【0266】

６～８週齢の雌のＮＯＤ．ＣＢ１７－Ｐｒｋｄｓｃｉｄ／ＮｃｒＣｒｌ（ＮＯＤ－ＳＣ
ＩＤ）マウスを一時的にｉｎ ｖｉｖｏでＭＣ－ＨＢＶ１．３によりトランスフェクトし
た。これは、流体力学的尾静脈注射（Ｙａｎｇ ＰＬ ｅｔ ａｌ．”Ｈｙｄｒｏｄｙｎ
ａｍｉｃ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｒａｌ ＤＮＡ：ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅ
ｌ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”
ＰＮＡＳ ＵＳＡ ２００２ Ｖｏｌ．９９：ｐ．１３８２５～１３８３０）により、
ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬又は対照の投与の３０～４５日前に投与された。ＭＣ－ＨＢＶ１．３
は、プラスミド誘導ミニサークルであり、これは、プラスミドｐＨＢＶ１．３及びＨＢＶ
１．３．３２トランスジェニックマウス（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｖ０１４６
０）におけるものと同じ末端重複ヒトＢ型肝炎ウイルス配列ＨＢＶ１．３を含む（Ｇｕｉ
ｄｏｔｔｉ ＬＧ ｅｔ ａｌ．，「Ｈｉｇｈ－ｌｅｖｅｌ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ
ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ，」Ｊ
Ｖｉｒｏｌ １９９５ Ｖｏｌ．６９，ｐ６１５８～６１６９）。５又は１０μｇのＭＣ
－ＨＢＶ１．３のリンゲル溶液を、動物の体重の１０％の合計体積、マウスの尾静脈に注
射して、慢性ＨＢＶ感染のｐＨＢＶモデルを形成した。前述のように、２７ゲージ針で５
～７秒間かけて溶液を注射した（Ｚｈａｎｇ Ｇ ｅｔ ａｌ．，「Ｈｉｇｈ ｌｅｖｅ
ｌｓ ｏｆ ｆｏｒｅｉｇｎ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｃ
ｙｔｅｓ ａｆｔｅｒ ｔａｉｌ ｖｅｉｎ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｋｅｄ
ｐｌａｓｍｉｄ ＤＮＡ．」Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ １９９９ Ｖｏｌ
．１０，ｐ１７３５～１７３７）。投与前（投与前１日目、－１日目、又は－２日目のい
ずれか）に、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）の血清中ＨＢｓＡｇ発現レベルをＥＬＩＳ
Ａにより測定し、マウスを平均ＨＢｓＡｇ発現レベルに従ってグループ分けした。

【0267】

分析：ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬投与前後の様々な時点で、血清ＨＢｓＡｇ、血清ＨＢｅＡｇ
、血清ＨＢＶ ＤＮＡ、又は肝臓ＨＢＶ ＲＮＡを測定することができる。ＨＢＶ発現レ
ベルは、投与前発現レベルと、リン酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」）を注射された対照マ
ウスとに対して正規化された。

【0268】

ｉ）血清採取：マウスを２～３％イソフルランで麻酔し、顎下領域から血清分離管（Ｓ
ａｒｓｔｅｄｔ ＡＧ ＆ Ｃｏ．、Ｎｕｍｂｒｅｃｈｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）に血液試料
を採取した。血液を周囲温度に２０分間置いて凝固させた。この管を８，０００×ｇで３
分間遠心分離し、血清を分離して、４℃で保管した。

【0269】

ｉｉ）血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベル：血清を採取し、脱脂粉乳５％を含
むＰＢＳで１０～８０００倍に希釈した。１０μｇ ＨＢｓＡｇ発現プラスミドｐＲｃ／
ＣＭＶ－ＨＢｓ（Ａｌｄｅｖｒｏｎ，Ｆａｒｇｏ，ＮＤ）でトランスフェクトしたＩＣＲ
マウス（Ｈａｒｌａｎ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ）の血清から、脱脂乳溶液で希釈
した二次ＨＢｓＡｇ標準を調製した。ＨＢｓＡｇレベルを、ＧＳ ＨＢｓＡｇ ＥＩＡ
３．０キット（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｒｅｄｍｏｎｄ
，ＷＡ）を用いて、メーカーによる記述に従って測定した。遺伝子組換えＨＢｓＡｇタン
パク質（ａｙｗサブタイプ、これもＰＢＳ中脱脂乳で希釈）を、一次標準として使用した
（Ａｌｄｅｖｒｏｎ）。

【0270】

ＭＣ－ＨＢＶ１．３における処置に関連しない低下を説明するために、各動物のＨＢｓ
Ａｇ発現は、ＰＢＳが注射されたマウス対照群に対して正規化された。最初に、ある時点
における各動物のＨＢｓＡｇレベルを、その動物の処置前発現レベルで割って、「処置前
に対して正規化された」発現の比率を求めた。次いで、個々の動物の「処置前に対して正
規化された」比を、正常なＰＢＳ対照群における全マウスの平均の「処置前に対して正規
化された」比で割ることにより、特定の時点での発現を対照群に対して正規化した。

【0271】

ｉｉｉ）血清Ｂ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）レベル：５％脱脂粉乳で４～２０倍に希釈
した血清を使用し、メーカー（ＤｉａＳｏｒｉｎ）の記述されているようにＨＢｅＡｇ酵
素結合免疫アッセイ（ＥＬＩＳＡ）でＨＢｅＡｇ分析を実施した。抗原の量を、アッセイ
の直線範囲で測定し、ＨＢｅＡｇタンパク質標準（Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ Ｉｎｄｕｓｔ
ｒｉｅｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ｃａｔａｌｏｇ ＃ ３０－ＡＨ１８，Ａｃｔ
ｏｎ，ＭＡ）に対して定量した。

【0272】

ＭＣ－ＨＢＶ１．３における処置に関連しない低下を説明するために、各動物のＨＢｅ
Ａｇ発現は、ＰＢＳが注射されたマウス対照群に対して正規化された。血清中のＨＢｅＡ
ｇを評価するために、ＨＢｅＡｇを、プールされた群又はサブ群の血清試料から分析する
。最初に、各プールされた群又はサブ群のＨＢｅＡｇレベルを、同じ群又はサブ群の処置
前発現レベルで割って、「処置前に対して正規化された」発現比を求めた。特定の時点で
の発現が、対照群に対して正規化された。これは、群又はサブ群の「処置前に対して正規
化された」比を、正常なＰＢＳ対照群の全試料の平均の「処置前に対して正規化された」
比で割ることにより得られた。

【0273】

ｉｖ）血清ＨＢＶ ＤＮＡレベル：群又はサブ群のマウスから得た等体積の血清を最終
体積１００μＬまでプールした。ＱＩＡａｍｐ ＭｉｎＥｌｕｔｅ Ｖｉｒｕｓ Ｓｐｉ
ｎ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ）を用い、メーカーの説明に従って
、ＤＮＡを血清試料から分離した。各試料に０．９％滅菌生理食塩水を添加して、最終体
積２００μＬとした。血清試料を、緩衝液及びプロテアーゼの入った管に加えた。少量の
ＤＮＡの単離を補助するため、担体ＲＮＡを添加した。１ｎｇのｐＨＣＲ／ＵｂＣ－ＳＥ
ＡＰプラスミドＤＮＡ（Ｗｏｏｄｄｅｌｌ ＣＩ，ｅｔ ａｌ．「Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ
ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｆｒｏｍ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｓｉＲＮＡ ｅｘ
ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｍｉｃｅ．」Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ（２００５）３３４，１１７～１２７）を
、回収対照として加えた。１５分間５６℃でインキュベートした後、エタノールで核酸を
溶解液から沈殿させ、溶液全体をカラムに通した。洗浄後、試料を５０μＬの緩衝液ＡＶ
Ｅに溶出させた。

【0274】

ｐＨＢＶマウスモデル血清から分離されたＤＮＡのＨＢＶゲノムのコピー数をｑＰＣＲ
により測定した。Ｓ遺伝子（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号Ｖ０１４６０の塩基３５３－７７７
）内のＨＢＶゲノムの短いセグメントをコードするプラスミドｐＳＥＡＰ－ＨＢＶ３５３
－７７７を使用して、６つの対数標準曲線を作成した。ｐＨＣＲ／ＵｂＣ－ＳＥＡＰの検
出に基づき、平均から２標準偏差下のＤＮＡの回収率を有する試料は省いた。ＴａｑＭａ
ｎ化学系プライマー及びｆｌｕｏｒ／ＺＥＮ／ＩＢＦＱ付きプローブを利用する。

【0275】

７５００ Ｆａｓｔ又はＳｔｅｐＯｎｅ Ｐｌｕｓ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲシス
テム（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）でｑＰＣＲアッセイを実施した。血清中の
ＨＢＶ ＤＮＡを評価するために、プールされた群の血清試料から、一重又は二重精製工
程でＤＮＡを単離した。ＨＢＶ ＤＮＡ及び回収対照プラスミドの定量を、３回実施され
たｑＰＣＲ反応により測定した。ＨＢＶ及びｐＨＣＲ／ＵｂＣ－ＳＥＡＰを定量するプロ
ーブを、各反応に含めた。

【0276】

実施例３．ｐＨＢＶモデルマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。１日目、各マウスに、リン
酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」）中に配合されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬２ｍｇ／ｋｇ（ｍｐ
ｋ）を含有する２００μＬの単回皮下注射、又は、対照として使用されるＨＢＶ ＲＮＡ
ｉ薬を含まないリン酸緩衝生理食塩水２００μＬの単回皮下注射を投与した。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。試験されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬には
、以下の表７に示すデュプレックス数を有するものが含まれた。注射を、首及び肩領域に
わたる緩んだ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）で行った。各群で３匹のマウ
スを試験した（ｎ＝３）。

【0277】

８日目、１５日目、２２日目、及び２９日目に血清を採取し、上述の実施例２に示す手
順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを測定した。実験のデータを以
下の表に示す：

【0278】

【表7】

【0279】

ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４１７８、ＡＤ０４５７９、ＡＤ０４５８０、ＡＤ０４５７０、ＡＤ
０４５７２、ＡＤ０４５７３、ＡＤ０４５７４、ＡＤ０４５７５、ＡＤ０４４１９、及び
ＡＤ０４５７８をそれぞれ、上述の表１及び２に示すように、ＨＢＶゲノムの位置１７８
１～１７８９のＸオープンリーディングフレームに対して少なくとも部分的に相補的なア
ンチセンス鎖配列を有するように設計した。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬はそれぞれ、測定された
全時点にわたって、ＰＢＳ対照に比べてＨＢｓＡｇの実質的な減少を示した。例えば、Ａ
Ｄ０４５８０は、処置前及びＰＢＳ対照に対して正規化されたとき、８日目でＳ抗原レベ
ルが９５％超の減少を示した（０．０４８±０．００７ ＨＢｓＡｇレベル）。

【0280】

加えて、血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、上述の実施例２に示す手順に従って、８、１５
、２２、２９、３６、４３及び５０日目に採取された血清試料のＰＢＳ、ＡＤ０４５７９
、及びＡＤ０４５８０群について測定した。各群からの血清をプールし、重複分離で血清
からＤＮＡを単離した。データを以下の表に示す：

【0281】

【表8】

【0282】

表８のデータは、調べたＲＮＡｉ薬の両方とも、ＰＢＳ群に比べてＨＢＶ ＤＮＡレベ
ルを実質的に低下させ、ＡＤ０４５８０は最下値で１ログのノックダウンよりもわずかに
上回る達成を示した（例えば、１５日目で０．０８６９±０．０１１７平均血清ＤＮＡレ
ベル）。

【0283】

実施例４．ｐＨＢＶモデルマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。１日目、各マウスに、リン
酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」）中に配合されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬２ｍｇ／ｋｇ（ｍｐ
ｋ）を含有する２００μＬの単回皮下投与、又は、対照として使用されるＨＢＶ ＲＮＡ
ｉ薬を含まないリン酸緩衝生理食塩水２００μＬの単回皮下投与を行った。各ＨＢＶ Ｒ
ＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセチ
ル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。投与されるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬には、
以下の表９に示されるものが含まれた。注射は、首及び肩領域にわたる緩んだ皮膚の、皮
膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験した（ｎ＝３）
。

【0284】

８日目、１５日目、２２日目、及び２９日目に血清を採取し、上述の実施例２に示す手
順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを測定した。実験のデータを以
下の表に示す：

【0285】

【表9】

【0286】

ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４０１０、ＡＤ０４５８１、ＡＤ０４５９１、ＡＤ０４４３４、ＡＤ
０４５８３、ＡＤ０４５８４、ＡＤ０４５８５、ＡＤ０４５８６、ＡＤ０４５８８、及び
ＡＤ０４４３８を、表１及び２に示すように、ＨＢＶゲノムの位置２５７～２７５のＳオ
ープンリーディングフレームに対して少なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を
有するように設計した。上記の表９に示すＨＢＶ ＲＮＡｉ薬はそれぞれ、測定された全
時点にわたって、ＰＢＳ対照と比較して、ＨＢｓＡｇの実質的な減少を示した。例えば、
ＡＤ０４５８５は８日目で約９０％のＨＢｓＡｇ減少、１５日目、で９５％の減少、２２
日目で９７％の減少、及び２９日目で９５％の減少を示した。

【0287】

加えて、血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、上述の実施例２に示す手順に従って、８、１５
、２２、２９、３６、４３及び５０日目に採取された血清試料のＰＢＳ及びＡＤ０４５８
５群について測定した。各群からの血清をプールし、重複分離で血清からＤＮＡを単離し
た。データを以下の表に示す：

【0288】

【表10】

【0289】

表１０に示すデータは、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４５８５が、ＰＢＳ群に比べて、Ｈ
ＢＶ ＤＮＡレベルの減少をもたらしたことを示している。

【0290】

実施例５．ｐＨＢＶモデルマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の用量応答及び組み合わ
せ。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表１１に
示すものを含む様々な群に分けられ、マウスには表１１に示す投与レジメンに従って２０
０μＬ皮下注射が行われた。

【0291】

【表11】

【0292】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表１１に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験し
た（ｎ＝３）。

【0293】

８日目、１５日目、２２日目、２９日目、３６日目、４３日目、５０日目、及び５７日
目に血清を採取し、上述の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓ
Ａｇ）レベルを測定した。実験のデータを以下の表に示す：

【0294】

【表12】

【0295】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４５８０及びＡＤ０４５８５はそれぞれ、測定された全時点
にわたって、ＨＢｓＡｇ ＰＢＳ対照と比較して、個々にＨＢｓＡｇの低下を示した。更
に、ＡＤ０４５８５及びＡＤ０４５８０の併用処置も、ＨＢＶゲノムの異なる領域を標的
とした上述の実施例に示されているように、測定された全時点にわたって、ＰＢＳ対照と
比較して、ＨＢｓＡｇの低下を示した。

【0296】

加えて、血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、上述の実施例２に示す手順に従って、８、１５
、２２、２９及び３６日目に採取された血清試料の表１１の群のそれぞれについて測定し
た。各群からの血清をプールし、重複反応で血清からＤＮＡを単離した。データを以下の
表に示す：

【0297】

【表13】

【0298】

表１３のデータは、試験されたＲＮＡｉ薬が、個別及び組み合わせの両方とも、ＰＢＳ
群に比べて、ＨＢＶ ＤＮＡレベルの減少をもたらしたことを示している。再投与又は投
与量の増加は、更なるＨＢＶ ＤＮＡの減少をもたらした。

【0299】

実施例６．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬：用量応答及び併用試験。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表１４に
示すように様々な群に分けられ、各マウスには、表１４に示す投与レジメンに従って、単
回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0300】

【表14】

【0301】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表１４に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験し
た（ｎ＝３）。

【0302】

投与前の－１日目、及び次いで８日目、１５日目、２２日目、２９日目、及び３６日目
に血清を採取し、上述の実施例２に示す手順に従って、血清ＨＢｓＡｇレベルを測定した
。実験のデータを以下の表１５に示す。平均ＨＢｓＡｇは、ＨＢｓＡｇの正規化された平
均値を反映している：

【0303】

【表15】

【0304】

試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、測定された全時点にわたって、ＰＢＳ対照に比べて
ＨＢｓＡｇの減少を示した。更に、ＡＤ０４８７２（表１及び２に示すように、ＨＢＶゲ
ノムの位置２６１～２７９のＳ ＯＲＦに対して少なくとも部分的に相補的なアンチセン
ス鎖配列を含む）と、ＡＤ０４９８１又はＡＤ０４９６３のいずれか（この両方とも、表
１及び２に示すように、ＨＢＶゲノムの位置１７８１～１７９９のＸ ＯＲＦに対して少
なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を含む）との併用処置は、実施例６の群Ｈ
、Ｉ、及びＪに示されており、これらは、２つのＲＮＡｉ薬（一方はＨＢＶゲノムのＳ
ＯＲＦを標的とし、他方はＨＢＶゲノムのＸ ＯＲＦを標的とするもの）の併用処置が、
同様に、測定された全時点にわたって、ＰＢＳ対照に比べてＨＢｓＡｇの減少を示した。

【0305】

加えて、血清Ｂ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）レベルもまた評価した。それぞれの群のマ
ウスから得た試料を最初にプールし、結果として得られた血清試料を一重項状態でアッセ
イを行った。実験のデータを以下の表に示す：

【0306】

【表16】

【0307】

表１６に示すように、ＡＤ０４８７２（ＨＢＶゲノムのＳ ＯＲＦを標的とする）と、
ＡＤ０４９８１又はＡＤ０４９６３（両方ともＨＢＶゲノムのＸ ＯＲＦを標的とする）
のいずれかとの組み合わせは、ＡＤ０４８７２単独投与に比べて、ＨＢｅＡｇレベルの更
なる減少を示した。

【0308】

実施例７．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬：追加用量応答及び併用試験。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表１７に
示すように様々な群に分けられ、各マウスには、表１７に示す投与レジメンに従って、単
回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0309】

【表17】

【0310】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表１７に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。－１日目及び８日目に、各群
で４匹のマウスを試験し（ｎ＝４）、次いで、各群で１匹のマウスを安楽死させ、組織学
的評価を行った。２２日目及び２９日目に、各群で３匹のマウスを試験した（ｎ＝３）。

【0311】

投与前の－１日目、及び次いで８日目、１５日目、２２日目、及び２９日目に血清を採
取し、上述の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベル
を測定した。実験のデータを以下の表１８に示す：

【0312】

【表18】

【0313】

試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、測定された全時点にわたって、ＰＢＳ対照に比べて
ＨＢｓＡｇの減少を示した。

【0314】

加えて、血清Ｂ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）レベルもまた評価した。それぞれの群のマ
ウスから得た試料を最初にプールし、結果として得られた血清試料を一重項状態でアッセ
イを行った。実験のデータを以下の表に示す：

【0315】

【表19】

【0316】

【表20】

【0317】

表１９－１は、ＨＢｅＡｇと対照とを比較したノックダウン倍率を反映する。これは、
対照（ＰＢＳ）群の正規化ＨＢｅＡｇレベル／それぞれのＲＮＡｉ薬（複数可）群の正規
化ＨＢｅＡｇレベル（すなわち、１．０００／ＨＢｅＡｇレベル）として計算される。表
１９－１に示すデータは、ＡＤ０４８７２（上述のように、ＨＢＶゲノムの位置２６１～
２７９のＳ ＯＲＦに対して少なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を含む）と
、ＡＤ０４９８２（ＨＢＶゲノムの位置１７８１～１７９９のＸ ＯＲＦに対して少なく
とも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を含む）との組み合わせは、個々のＲＮＡｉ薬
単独投与に比べて、ＨＢｅＡｇレベルの更なる減少を示した（例えば、表１９及び１９－
１の群Ｈ及びＩを参照）。更に、この実施例からのデータは、ＡＤ０４８７２とＡＤ０４
９８２との組み合わせが、ＡＤ０４８７２及びＡＤ０４９８２を個別に投与した場合のＨ
ＢｅＡｇの減少倍率（fold decrease）の合計よりも、更に大きなＨＢｅＡｇ減少倍率を
もたらしたことを示している。例えば、群Ｉ（３．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４８７２＋２．
０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４９８２の投与）は１５日目にＨＢｅＡｇの減少倍率が１７．０で
あり、これは、群Ｇ（３．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４８７２）の減少倍率４．６と、群Ｄ（
２．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４９８２）の減少倍率３．２との和よりも大きい。

【0318】

更に、血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、上述の実施例２に示す手順に従って、－１、８、
１５、２２、２９、及び３６日目に採取された血清試料の表１７の群のそれぞれについて
測定した。血清ＨＢＶ ＤＮＡが、各時点で各動物から単離された。データを以下の表に
示す：

【0319】

【表21】

【0320】

表２０のデータは、試験されたＲＮＡｉ薬が、個別及び組み合わせの両方とも、ＰＢＳ
群に比べて、ＨＢＶ ＤＮＡレベルの減少をもたらしたことを示しており、ＡＤ０４８７
２（Ｓ ＯＲＦを標的とする）とＡＤ０４９８２（Ｘ ＯＲＦを標的とする）との組み合
わせが、同量のＡＤ０４８７２単独と同程度に、血清ＨＢＶ ＤＮＡを低下させたことを
更に示している。

【0321】

実施例８．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬：更なる用量応答及び併用試験
。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表２１に
示すように様々な群に分けられ、各マウスには、表２１に示す投与レジメンに従って、単
回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0322】

【表22】

【0323】

加えて、マウスは下記のスケジュールに従って安楽死させる予定である：
・１１日目：群２Ａ、３Ａ、４Ａ、５Ａ、６Ａ、７Ａ及び８Ａのマウス２匹、及び群９
のマウス１匹を安楽死。
・１４日目：群２Ａ、３Ａ、４Ａ、５Ａ、６Ａ、７Ａ、及び８Ａのマウス２匹を安楽死
。
・２１日目：群２Ｂ、３Ｂ、４Ｂ、５Ｂ、６Ｂ、７Ｂ、及び８Ｂのマウス２匹を安楽死
。
・２８日目：群１、２Ｂ、３Ｂ、４Ｂ、５Ｂ、６Ｂ、７Ｂ、及び８Ｂのマウス２匹、及
び群１０及び１２の全てのマウス（４匹）を安楽死。

【0324】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表２１に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。上記の表１４に示すように、
各群の４匹のマウスを試験し（ｎ＝４）、ただし群１０、１１、１２及び１３については
３匹のマウスを試験した（ｎ＝３）。

【0325】

投与前の－１日目、及び次いで８日目、１４日目、２１日目、及び２８日目に血清を採
取し、上述の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベル
を測定した。実験のデータを以下の表に示す：

【0326】

【表23】

【0327】

試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、単独と組み合わせの両方において、測定された全時
点にわたって、ＰＢＳ対照に比べてＨＢｓＡｇの実質的な減少を示した。

【0328】

実施例９．ＲＮＡｉ薬の送達。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。１日目、各マウスに、リン
酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」）中に配合されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬１０ｍｇ／ｋｇ（ｍ
ｐｋ）を含有する２００μＬの単回皮下注射、又は、対照として使用されるＨＢＶ ＲＮ
Ａｉ薬を含まないリン酸緩衝生理食塩水２００μＬの単回皮下注射を投与した。試験され
るＨＢＶ ＲＮＡｉ薬には、以下の表２３に示すデュプレックス数を有するものが含まれ
た。これらはそれぞれ、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされた
Ｎ－アセチル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわ
たる緩んだ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウス
を試験した（ｎ＝３）。

【0329】

投与前、及び次いで８日目、１５日目、２２日目、及び２９日目に血清を採取し、上述
の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを測定した
。実験のデータを以下の表に示す：

【0330】

【表24】

【0331】

上記の表２３に示すＨＢＶ ＲＮＡｉ薬はそれぞれ、ＨＢＶゲノムの位置１７８１～１
７９９でＸ ＯＲＦに少なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を含んでいた。各
ＲＮＡｉ薬が、ＰＢＳ対照に比べて有意なノックダウンを示した。

【0332】

実施例１０．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬：更なる併用試験。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表２４に
示すように様々な群に分けられ、各マウスには、表２４に示す投与レジメンに従って、単
回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0333】

【表25】

【0334】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表２４に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験し
た（ｎ＝３）。

【0335】

血清を、投与の前、及び－１日目、８日目、１５日目、２２日目、２９日目、３６日目
、４３日目、５０日目、５７日目、及び６４日目に採取した。血清Ｂ型肝炎表面抗原（Ｈ
ＢｓＡｇ）レベルを、上述の実施例２に示す手順に従って、測定した。実験のデータを以
下に示す：

【0336】

【表26】

【0337】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４５８５及びＡＤ０４７７１を、表１及び２に示すように、
ＨＢＶゲノムの位置２５７～２７５のＳオープンリーディングフレームに対して少なくと
も部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を有するように設計した。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬Ａ
Ｄ０４５８０及びＡＤ０４７７６を、表１及び２に示すように、ＨＢＶゲノムの位置１７
８１～１７９９のＸオープンリーディングフレームに対して少なくとも部分的に相補的な
アンチセンス鎖配列を有するように設計した。試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、単独と
組み合わせの両方において、測定された全時点にわたって、ＰＢＳ対照に比べてＨＢｓＡ
ｇの減少を示した。それぞれの後続の用量が、ＨＢｓＡｇ低減の最下値を更に低下させた
。

【0338】

加えて、血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、上述の実施例２に示す手順に従って、－１、８
、１５、２２、２９、及び３６、４３及び５０日目に採取された血清試料の、表２４の群
Ｃ（３．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４５８５）、群Ｅ（３．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４５８０）
、及び群Ｇ（１．５ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４５８５＋１．５ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４５８０）
について測定した。血清ＨＢＶ ＤＮＡが、これらの時点のそれぞれで各動物から単離さ
れた。データを以下の表に示す：

【0339】

【表27】

【0340】

表２６のデータは、試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬が、個別及び組み合わせの両方とも
、ＰＢＳ群に比べて、ＨＢＶ ＤＮＡレベルの減少をもたらしたことを示している。

【0341】

実施例１１．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬：併用試験。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表２７に
示すように様々な群に分けられ、各マウスには、表２７に示す投与レジメンに従って、単
回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0342】

【表28】

【0343】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表２４に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験し
た（ｎ＝３）。

【0344】

投与前の－１日目、及び次いで８日目、１５日目、２２日目、２９日目、及び３６日目
に血清を採取し（ただし群Ｌ（ＡＤ０４８８２）及び群Ｍ（ＡＤ０４８８５）を除く）、
上述の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを測定
した。実験のデータを以下の表に示す：

【0345】

【表29】

【0346】

ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４９６２を、表１及び２に示すように、ＨＢＶゲノムの位置２５７～
２７５のＳオープンリーディングフレームに対して少なくとも部分的に相補的なアンチセ
ンス鎖配列を有するように設計した。ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４８７２を、表１及び２に示すよ
うに、ＨＢＶゲノムの位置２６１～２７９のＳオープンリーディングフレームに対して少
なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を有するように設計した。ＲＮＡｉ薬ＡＤ
０４９６３を、表１及び２に示すように、ＨＢＶゲノムの位置１７８１～１７９９のＸオ
ープンリーディングフレームに対して少なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を
有するように設計した。ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４８８２及びＡＤ０４８８５を、表１及び２に
示すように、ＨＢＶゲノムの位置１７８０～１７９８のＸオープンリーディングフレーム
に対して少なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を有するように設計した。上記
の表９に示すＨＢＶ ＲＮＡｉ薬はそれぞれ、測定された全時点にわたって、個別と組み
合わせの両方で、ＰＢＳ対照と比較して、ＨＢｓＡｇの減少を示した。再投与により、Ｈ
ＢｓＡｇの更なる低下が得られた。

【0347】

加えて、群Ｌ及びＭを除く全ての群について、血清Ｂ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）レベ
ルもまた評価した。それぞれの群のマウスから得た試料を最初にプールし、結果として得
られた血清試料を一重項状態でアッセイを行った。実験のデータを以下の表に示す：

【0348】

【表30】

【0349】

更に、血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、上述の実施例２に示す手順に従って、８、１５、
２２、及び２９日目に採取された血清試料の表２７の群のそれぞれについて測定した。血
清ＨＢＶ ＤＮＡが、各時点で各動物から単離された。データを以下の表に示す：

【0350】

【表31】

【0351】

表３０のデータは、試験されたＲＮＡｉ薬が、個別及び組み合わせの両方とも、ＰＢＳ
群に比べて、ＨＢＶ ＤＮＡレベルの減少をもたらしたことを示している。再投与により
、ＨＢＶ ＤＮＡの更なる低下が得られた。

【0352】

実施例１２．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表３１に
示すように様々な群に分けられ、各マウスには、表３１に示す投与レジメンに従って、単
回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0353】

【表32】

【0354】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表２４に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験し
た（ｎ＝３）。

【0355】

血清を、投与前、次いで８日目、１５日目、及び２２日目に採取した。群Ａ（ＰＢＳ）
、群Ｂ（２．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４８７１）、群Ｃ（２．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４８７
２）、群Ｄ（２．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４８７４）、群Ｅ（２．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４
８７５）、及び群Ｆ（２．０ｍｇ／ｋｇ ＡＤ０４８７６）は更に、２９日目、３６日目
、４３日目、及び５０日目に血清を採取した。血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベ
ルを、上述の実施例２に示す手順に従って、測定した。実験のデータを以下の表に示す：

【0356】

【表33】

【0357】

ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４８７１、ＡＤ０４８７２、ＡＤ０４８７４、ＡＤ０４８７
５、及びＡＤ０４８７６を、表１及び２に示すように、ＨＢＶゲノムの位置２６１～２７
９のＳオープンリーディングフレームに対して少なくとも部分的に相補的なアンチセンス
鎖配列を有するようにそれぞれ設計した。これらのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬のそれぞれが、Ｐ
ＢＳ対照に比べて実質的なＨＢｓＡｇ低下を示した。例えば、ＡＤ０４８７１（群Ｂ）、
ＡＤ０４８７２（群Ｃ）及びＡＤ０４８７４（群Ｄ）、及びＡＤ０４８７６（群Ｆ）ぞれ
ぞれの単回投与量２ｍｇ／ｋｇでは、対照に比べて、１５日目～４３日目に測定された各
時点において、ＨＢｓＡｇが９０％超の低下を示した。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４８８
１、ＡＤ０４８８３、ＡＤ０４８８４をそれぞれ、表１及び２に示すように、ＨＢＶゲノ
ムの位置１７８０～１７９８のＸオープンリーディングフレームに対して少なくとも部分
的に相補的なアンチセンス鎖配列を有するように設計した。

【0358】

実施例１３．Ｘ領域ノックアウトモデルマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の用量応答
及び組み合わせ。
ＨＢＶ ｍＲＮＡのＳ ＯＲＦに位置する領域に少なくとも部分的に相補的なアンチセ
ンス鎖配列を含むＲＮＡｉ薬と、ＨＢＶ ｍＲＮＡのＸ ＯＲＦに位置する領域に少なく
とも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を含む第２のＲＮＡｉ薬との組み合わせの影響
を評価する別の手段として、表１及び２に示すように位置１７８０及び１７８１を標的と
するＨＢＶ ＲＮＡｉ薬に対して、結合部位をノックアウトしたＨＢＶゲノムを含むプラ
スミドを生成した（以下、Ｘ領域ノックアウトマウスと呼ぶ）。このモデルは、これらの
ＲＮＡｉ薬の結合部位内で、ｐＨＢＶ１．３プラスミドの１０個の塩基を突然変異させる
ことによって生成された。ＨＢＶ ｍＲＮＡの残りの部分（Ｓ領域を含む）は機能的なま
まであった。よって、このＨＢＶマウスモデルにおいて、本明細書に開示されるＨＢＶゲ
ノムの位置１７８０及び１７８１を標的とするアンチセンス鎖を有するＨＢＶ ＲＮＡｉ
薬を含めると、発現のサイレンシングに関して無効となることが期待される。

【0359】

マウスは、以下の表３３に示すものを含む様々な群に分けられ、マウスには以下の表に
示す投与レジメンに従って２００μＬ皮下注射が行われた。

【0360】

【表34】

【0361】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表３３に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験し
た（ｎ＝３）。

【0362】

５日目、８日目、１５日目、２２日目、及び２９日目に血清を採取し、上述の実施例２
に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを測定した。更に３６
日目及び４３日目に、群１～５について血清を採取した。実験のデータを以下の表３４に
示す：

【0363】

【表35】

【0364】

予想されたように、群６（３．０ｍｇ／ｋｇのＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４９６３の単
回投与量であり、ＨＢＶゲノムの位置１７８１～１７９９のＸオープンリーディングフレ
ームに対して少なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖を含む）は、ＨＢｓＡｇのノッ
クダウンをもたらすことができなかった。加えて、群２～５のそれぞれが、ＰＢＳ対照に
比べて実質的なＨＢｓＡｇのノックダウンをもたらし、群３及び群５の両方は、最下値（
２２日目）でＨＢｓＡｇの２ログ超の低下を示した。

【0365】

実施例１４．Ｘ領域ノックアウトモデルマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬の用量応答
及び組み合わせ。
上述の実施例１３に記載のＸ領域ノックアウトマウスモデルを使用した。マウスは、以
下の表３１に示すものを含む様々な群に分けられ、各マウスには、表３５に示す投与レジ
メンに従って、単回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0366】

【表36】

【0367】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表３５に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。表３５に示す各群で３匹のマ
ウスを試験した（ｎ＝３）。

【0368】

１日目（投与前）、８日目、１５日目、２２日目、及び２９日目に血清を採取し、上述
の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを測定した
。実験のデータを以下の表に示す：

【0369】

【表37】

【0370】

表３６は、単独で投与されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４８７２、並びに、ＡＤ０４８
７２（ＨＢＶゲノムの位置２６１～２７９のＳオープンリーディングに対して少なくとも
部分的に相補的なアンチセンス鎖を含む）とＡＤ０５０７０（ＨＢＶゲノムの位置１７８
１～１７９９のＸオープンリーディングフレームに対して少なくとも部分的に相補的なア
ンチセンス鎖を含む）との組み合わせが、測定された各時点にわたって、ＰＢＳ対照に比
べてＨＢｓＡｇの有意なノックダウンをもたらしたことを示している。このＸ領域ノック
アウトモデルにおける突然変異した標的部位に対するＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０５０７０
を０．７ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇ追加した場合、２ｍｇ／ｋｇ ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬Ａ
Ｄ０４８７２の活性を低下させなかった。

【0371】

加えて、上述の実施例２に示す手順に従って、８、１５、及び２２日目に採取された血
清試料で血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを測定した。各群からの血清をプールし、一重項状態
で血清からＤＮＡを単離した。データを以下の表に示す：

【0372】

【表38】

【0373】

このＸ領域ノックアウトモデルにおける突然変異した標的部位に対するＨＢＶ ＲＮＡ
ｉ薬ＡＤ０５０７０を０．７ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇ追加した場合、２ｍｇ／ｋｇ Ｈ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４８７２の活性を低下させなかった。

【0374】

実施例１５．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表３８に
示すものを含む様々な群に分けられ、各マウスには、表３８に示す投与レジメンに従って
、単回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0375】

【表39】

【0376】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表３８に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験し
た（ｎ＝３）。

【0377】

血清を、投与前の－１日目、次いで８日目、１５日目、２２日目、２９日目、３６日目
、４３日目、及び５０日目に採取した。血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを、
上述の実施例２に示す手順に従って、測定した。実験のデータを以下の表３９に示す。平
均ＨＢｓＡｇは、ＨＢｓＡｇの正規化された平均値を反映している：

【0378】

【表40】

【0379】

ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４７７６、ＡＤ０５０６９、ＡＤ０５０７０、ＡＤ０５０７１、ＡＤ
０５０７３、及びＡＤ０５０７４をそれぞれ、表１及び２に示すように、ＨＢＶゲノムの
位置１７８１～１７９９のＸオープンリーディングフレームに対して少なくとも部分的に
相補的なアンチセンス鎖配列を有するように設計した。ＲＮＡｉ薬ＡＤ０５０７５、ＡＤ
０５０７６、ＡＤ０５０７７、及びＡＤ０５０７８をそれぞれ、表１及び２に示すように
、ＨＢＶゲノムの位置１７８０～１７９８のＸオープンリーディングフレームに対して少
なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖配列を有するように設計した。

【0380】

表３９は、単独で投与されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬ＡＤ０４７７６、ＡＤ０５０６９、Ａ
Ｄ０５０７０、ＡＤ０５０７１、ＡＤ０５０７３、及びＡＤ０５０７４、又はそれらのＡ
Ｄ０４８７２（ＨＢＶゲノムの位置２６１～２７９のＳオープンリーディングに対して少
なくとも部分的に相補的なアンチセンス鎖を含む）との組み合わせが、測定された各時点
にわたって、ＰＢＳ対照に比べてＨＢｓＡｇの有意なノックダウンをもたらしたことを示
している。

【0381】

実施例１６．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬：用量応答及び併用試験。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表４０に
示すように様々な群に分けられ、各マウスには、表４０に示す投与レジメンに従って、単
回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0382】

【表41】

【0383】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表４０に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で６匹のマウスを試験し
た（ｎ＝６）。

【0384】

投与前、及び次いで８日目、１５日目、２２日目、及び２９日目に血清を採取し、上述
の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを測定した
。実験のデータを以下の表４１に示す：

【0385】

【表42】

【0386】

試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、個別と組み合わせの両方において、測定された全時
点にわたって、ＰＢＳ対照に比べてＨＢｓＡｇの減少を示した。ＨＢｓＡｇ発現は、２２
日目に再投与された全ての群で更に低下した。

【0387】

加えて、血清Ｂ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）レベルもまた評価した。８日目の測定につ
いては、各群の全６匹のマウスの血清試料がプールされ、結果として得られた試料を一重
項状態でアッセイを行った。－１日目、１５日目、２２日目、及び２９日目の測定につい
ては、各群の６匹のマウスが各群内で対にされ、それぞれの血清試料がプールされ、各群
につき３つのサブ群を形成した。各群の３つのサブ群それぞれの血清試料について、アッ
セイが行われた。実験のデータを以下の表４２に示す：

【0388】

【表43】

【0389】

試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、個別と組み合わせの両方において、測定された全時
点にわたって、生理食塩水対照に比べてＨＢｅＡｇの減少を示した。ＨＢｅＡｇ発現は、
２２日目に再投与された全ての群で更に低下した。

【0390】

更に、血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、上述の実施例２に示す手順に従って、－１、８、
１５、及び２２日目に採取された血清試料の表４０の群のそれぞれについて測定した。各
対のマウスの血清をプールし、単一分離で各血清プールからＤＮＡを単離した。データを
以下の表に示す：

【0391】

【表44】

【0392】

試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、個別と組み合わせの両方において、測定された全時
点にわたって、生理食塩水対照に比べて血清ＨＢＶ ＤＮＡを低下させているが、ただし
、群１１及び１２では、８日目で血清ＨＢＶ ＤＮＡの低下がなかったことが示された。

【0393】

実施例１７．ｐＨＢＶマウスにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬。
上述の実施例２に記載のｐＨＢＶマウスモデルを使用した。マウスは、以下の表４４に
示すように様々な群に分けられ、各マウスには、表４４に示す投与レジメンに従って、単
回２００μＬ皮下注射を投与した。

【0394】

【表45】

【0395】

各マウスに２００μＬの単回皮下投与が行われた。これには、表４４に示されるように
、リン酸緩衝生理食塩水中に配合された所定量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬、又は対照としてＨ
ＢＶ ＲＮＡｉ薬を含まない２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水が含まれた。各ＨＢＶ
ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセ
チル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んでいた。注射は、首及び肩領域にわたる緩ん
だ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射）に行った。各群で３匹のマウスを試験し
た（ｎ＝３）。

【0396】

投与前、及び次いで８日目、１４日目、２１日目、及び２９日目及び３６日目に血清を
採取し、上述の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベ
ルを測定した。実験のデータを以下の表４５に示す：

【0397】

【表46】

【0398】

試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬組み合わせは、測定された全時点にわたって、生理食塩
水対照に比べてＨＢｓＡｇの減少を示した。ＡＤ０４８７２を含む組み合わせは、ＡＤ０
４８７２の代わりにＡＤ０４５８５を用いた同等の組み合わせよりも、大きな低下を示し
た。

【0399】

加えて、上述の実施例２に示す手順に従って、８、１４、２１、及び２９日目に採取さ
れた血清試料で血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを測定した。血清ＨＢＶ ＤＮＡが、各時点で
各動物から単離された。データを以下の表４６に示す：

【0400】

【表47】

【0401】

試験されたＨＢＶ ＲＮＡｉ薬組み合わせは、測定された全時点にわたって、生理食塩
水対照に比べて血清ＨＢＶ ＤＮＡの減少を示した。ＡＤ０４８７２を含む組み合わせは
、ＡＤ０４８７２の代わりにＡＤ０４５８５を用いた同等の組み合わせよりも、大きな低
下を示した。これらの大きな低下は、２２日目及び２９日目に観察された。

【0402】

実施例１８．ＨＢＶ感染ヒト化マウスモデルにおけるＨＢＶ ＲＮＡｉ薬。
この試験では、雄のＦＲＧ（登録商標）（Ｃ５７ＢＬ／６バックグラウンド（Ｙｅｃｕ
ｒｉｓ）の遺伝子型Ｆａｈ－／－／Ｒａｇ２－／－／Ｉｌ２ｒｇ－／－三重ノックアウト
マウス）が１～２箇月齢のときに、ヒト肝細胞を移植した。ヒト肝細胞は、マウス肝細胞
の増殖を抑制するために、定期的なＮＴＢＣ処理を用いて約６箇月間肝臓に再増殖させた
。９箇月齢で、マウスに、４×１０^８個のゲノム／ｋｇ ＨＢＶ遺伝子型Ｃの静脈内接種
を行った。これがヒト肝細胞を感染させた。２～３箇月後、血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルが
プラトーに達し、ヒト肝細胞が最大限に感染したことが示された（マウス肝細胞はＨＢＶ
に感染できない）。ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬による処置の開始時にマウスは１歳であり、よっ
て寿命の終わりに近かった。

【0403】

処置前の血清試料を－１０日目及び－３日目に採取した。１日目に、各マウスに、１日
１回、水中に溶解させた０．０１ｍｇ／ｋｇのエンテカビルで、１日１回強制経口投与を
行い、ＨＢＶの複製を阻害した。マウスの安楽死の日まで、エンテカビルの１日１回の投
与を継続した。エンテカビル投与により、慢性的に感染したヒト患者の血清ＨＢＶ ＤＮ
Ａは低減するが、ＨＢｓＡｇは低減しないことが予想された。

【0404】

マウスを、下記の表４７に示すものを含む様々な群に分けた：

【0405】

【表48】

【0406】

各マウスには更に、リン酸緩衝生理食塩水に調剤された量のＨＢＶ ＲＮＡｉ薬（複数
可）を含む体重２０グラム当たり１００μＬの皮下投与、あるいは、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬
を含まない同量のリン酸緩衝生理食塩水を含む体重２０グラム当たり１００μＬの皮下投
与を、上記の表４７に示すスケジュールに従って、１日目及び２９日目（２９日目にまだ
生存している場合）に行った。各ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬は、表４及び５に示す、センス鎖の
５’末端にコンジュゲートされたＮ－アセチル－ガラクトサミン標的化リガンドを含んで
いた。注射は、首及び肩領域にわたる緩んだ皮膚の、皮膚と筋肉の間（すなわち皮下注射
）に行った。

【0407】

８日目、１５日目、２２日目、２９日目、３６日目、及び４０日目に血清を採取し、上
述の実施例２に示す手順に従って、血清Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）レベルを測定し
た。実験のデータを以下の表に示す：

【0408】

【表49】

【0409】

加えて、上述の実施例２に示す手順に従って、－１０、－３、８、１５、２２、２９、
３６、及び４０日目に採取された血清試料で血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを測定した。デー
タを以下の表４９に示す：

【0410】

【表50】

【0411】

予想されたように、エンテカビルの投与は、ＨＢＶ ＲＮＡｉ薬がない場合とある場合
の両方において、ウイルス複製を低減させた。

【0412】

他の実施形態
本発明はこの詳細な説明と関連して記載されてきたが、前述の説明は本発明の範囲を例
示したものであって、発明の範囲を限定することを意図したものではなく、発明の範囲は
添付の特許請求の範囲により定義されると理解される。他の態様、利点、及び変更は、以
下の特許請求の範囲内である。

【配列表】

2023123469000001.app

【手続補正書】

【提出日】2023-06-30

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【請求項1】

明細書に記載の発明。

【手続補正2】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０４１２

【補正方法】変更

【補正の内容】

【0412】

他の実施形態
本発明はこの詳細な説明と関連して記載されてきたが、前述の説明は本発明の範囲を例示したものであって、発明の範囲を限定することを意図したものではなく、発明の範囲は添付の特許請求の範囲により定義されると理解される。他の態様、利点、及び変更は、以下の特許請求の範囲内である。

以下の態様を包含し得る。
［１］ アンチセンス鎖及びセンス鎖を含むＢ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するためのＲＮＡｉ薬であって、前記アンチセンス鎖は、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス鎖配列に対して少なくとも約８５％の同一性を有する配列を含む、ＲＮＡｉ薬。
［２］ 前記アンチセンス鎖が、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス配列の少なくとも１６個の連続ヌクレオチドを含む、上記［１］に記載のＲＮＡｉ薬。
［３］ 前記アンチセンス鎖が、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス鎖配列の位置２～１８（５’→３’）のヌクレオチドを含む、上記［１］に記載の組成物。
［４］ 前記ＲＮＡｉ薬の前記センス鎖の少なくとも１つのヌクレオチド、及び／又は、前記アンチセンス鎖の少なくとも１つのヌクレオチドが、修飾ヌクレオチドである、及び／又は修飾ヌクレオシド間連結を有する、上記［１］又は［２］に記載のＲＮＡｉ薬。
［５］ 前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖が、それぞれ１７～３０ヌクレオチド長である、上記［１］～［４］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［６］ 前記センス鎖が、表２又は表４に提供されるいずれかのセンス鎖配列の少なくとも１６個の連続ヌクレオチドを含み、かつ前記センス鎖が、前記アンチセンス鎖に対して前記１６個の連続ヌクレオチドにわたって少なくとも約８５％の相補性の領域を有する、上記［１］～［５］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［７］ 前記ＲＮＡｉ薬の前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖の両方における全て又は実質的に全てのヌクレオチドが、修飾ヌクレオチドである、上記［１］～［６］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［８］ 前記アンチセンス鎖が、表３に提供されるいずれかの修飾配列のヌクレオチド配列を含む、上記［１］に記載のＲＮＡｉ薬。
［９］ 前記センス鎖が、表４に提供されるいずれかの修飾センス配列のヌクレオチド配列を含む、上記［１］又は［８］に記載のＲＮＡｉ薬。
［１０］ 上記［１］～［９］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬を含む、ＨＢＶ遺伝子の発現を阻害するための組成物であって、前記ＲＮＡｉ薬が標的化リガンドにコンジュゲートされている、組成物。
［１１］ 前記標的化リガンドがＮ－アセチル－ガラクトサミンを含む、上記［１０］に記載の組成物。
［１２］ 前記標的化リガンドが（ＮＡＧ１３）、（ＮＡＧ１３）ｓ、（ＮＡＧ１８）、（ＮＡＧ１８）ｓ、（ＮＡＧ２４）、（ＮＡＧ２４）ｓ、（ＮＡＧ２５）、（ＮＡＧ２５）ｓ、（ＮＡＧ２６）、（ＮＡＧ２６）ｓ、（ＮＡＧ２７）、（ＮＡＧ２７）ｓ、（ＮＡＧ２８）、（ＮＡＧ２８）ｓ、（ＮＡＧ２９）、（ＮＡＧ２９）ｓ、（ＮＡＧ３０）、（ＮＡＧ３０）ｓ、（ＮＡＧ３１）、（ＮＡＧ３１）ｓ、（ＮＡＧ３２）、（ＮＡＧ３２）ｓ、（ＮＡＧ３３）、（ＮＡＧ３３）ｓ、（ＮＡＧ３４）、（ＮＡＧ３４）ｓ、（ＮＡＧ３５）、（ＮＡＧ３５）ｓ、（ＮＡＧ３６）、（ＮＡＧ３６）ｓ、（ＮＡＧ３７）、（ＮＡＧ３７）ｓ、（ＮＡＧ３８）、（ＮＡＧ３８）ｓ、（ＮＡＧ３９）、又は（ＮＡＧ３９）ｓである、上記［１１］に記載の組成物。
［１３］ 前記標的化リガンドが、前記ＲＮＡｉ薬の前記センス鎖にコンジュゲートされている、上記［１０］～［１２］のいずれかに記載の組成物。
［１４］ 前記組成物が、製薬的に許容される賦形剤を更に含む、上記［１０］～［１３］のいずれかに記載の組成物。
［１５］ 前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５のデュプレックス構造を有する、上記［１０］～［１４］のいずれかに記載の組成物。
［１６］ 前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８２；又はＡＤ０５０７０のデュプレックス構造を有する、上記［１５］に記載の組成物。
［１７］ 前記組成物が、Ｂ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するためのセンス鎖及びアンチセンス鎖を含む第２のＲＮＡｉ薬を更に含む、上記［１０］～［１６］のいずれかに記載の組成物。
［１８］ 前記第２のＲＮＡｉ薬が、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス鎖配列に対して少なくとも約８５％の同一性を有するアンチセンス配列を含む、上記［１７］に記載の組成物。
［１９］ 前記第２のＲＮＡｉ薬の前記アンチセンス鎖が、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス配列の少なくとも１６個の連続ヌクレオチドを含む、上記［１８］に記載の組成物。
［２０］ 前記第２のＲＮＡｉ薬の前記アンチセンス鎖が、表２又は表３に提供されるいずれかのアンチセンス鎖配列の位置２～１８（５’→３’）のヌクレオチドを含む、上記［１９］に記載の組成物。
［２１］ 前記第１のＲＮＡｉ薬が、ＨＢＶ遺伝子のＳオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を標的とし、かつ、前記第２のＲＮＡｉ薬が、ＨＢＶ遺伝子のＸオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を標的とする、上記［１７］～［２０］のいずれかに記載の組成物。
［２２］ 前記第１のＲＮＡｉ薬がＨＢＶ遺伝子のＸ ＯＲＦを標的とし、かつ、前記第２のＲＮＡｉ薬が、ＨＢＶ遺伝子のＳ ＯＲＦを標的とする、上記［１７］～［２０］のいずれかに記載の組成物。
［２３］ 前記第１のＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０４００１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５８１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４９６２；及びＡＤ０５１６４からなる群から選択され、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４１７６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７８；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４８；ＡＤ０５１４９；及びＡＤ０５１６５からなる群から選択される、上記［１７］～２１］のいずれかに記載の組成物。
［２４］ 前記第１のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４８７２であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬がＡＤ０５０７０である、上記［１７］～［２１］又は［２３］のいずれかに記載の組成物。
［２５］ 前記第１のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４８７２であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４９８２である、上記［１７］～［２１］又は［２３］のいずれかに記載の組成物。
［２６］ 前記第１のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４８７２であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４７７６である、上記［１７］～［２１］又は［２３］のいずれかに記載の組成物。
［２７］ 前記第１のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４５８５であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬がＡＤ０４５８０である、上記［１７］～［２１］のいずれかに記載の組成物。
［２８］ １つ又は複数の追加の治療を更に含む、上記［１０］～［２７］のいずれかに記載の組成物。
［２９］ 前記追加の治療が、ラミブジン、テノホビル、テノホビルアラフェナミド、テノホビルジソプロキシル、又はエンテカビルである、上記［２８］に記載の組成物。
［３０］ 前記追加の治療がインターフェロンである、上記［２８］に記載の組成物。
［３１］ 対象におけるＢ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するための方法であって、上記［１］～［９］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬を前記対象に投与することを含む、方法。
［３２］ 対象におけるＢ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するための方法であって、上記［１０］～［３０］のいずれかに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
［３３］ 前記対象が、ＨＢＶ感染を有するか又は有するリスクがある、上記［３１］又は［３２］に記載の方法。
［３４］ 対象におけるＨＢＶ感染及び／又はＨＢＶ感染に関連する疾患、障害、又は状態を治療するための方法であって、上記［１］～［９］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬の有効量を対象に投与することを含む、方法。
［３５］ 対象におけるＨＢＶ感染及び／又はＨＢＶ感染に関連する疾患、障害、又は状態を治療するための方法であって、上記［１０］～［３０］のいずれかに記載の組成物の有効量を対象に投与することを含む、方法。
［３６］ 前記組成物が、Ｂ型肝炎ウイルス遺伝子の前記発現を阻害するための２つのＲＮＡｉ薬の有効量を含む、上記［３２］、［３３］、又は［３５］に記載の方法。
［３７］ 前記組成物の前記有効量が、対象におけるＨＢｓＡｇのレベルを、前記組成物の投与前の前記対象のＨＢｓＡｇ発現レベルに比べて、少なくとも約４０％低下させるのに十分である、上記［３２］、［３３］、［３５］、又は［３６］のいずれかに記載の方法。
［３８］ 前記組成物の前記有効量が、対象におけるＨＢｅＡｇのレベルを、前記組成物の投与前の前記対象のＨＢｅＡｇ発現レベルに比べて、少なくとも約４０％低下させるのに十分である、上記［３２］、［３３］、［３５］、又は［３６］のいずれかに記載の方法。
［３９］ 前記組成物の前記有効量が、対象における血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルを、前記組成物の投与前の前記対象の血清ＨＢＶ ＤＮＡレベルに比べて、少なくとも約４０％低下させるのに十分である、上記［３２］、［３３］、［３５］、又は［３６］のいずれかに記載の方法。
［４０］ ＨＢＶ感染に関連する前記疾患、障害、又は状態が、慢性肝疾患若しくは障害、肝臓炎症、線維化状態、増殖性疾患、肝細胞癌、Ｄ型肝炎ウイルス感染、又は急性ＨＢＶ感染である、上記［３４］又は［３５］に記載の方法。
［４１］ 前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約１：１の比で投与される、上記［３２］、［３３］、［３５］、［３６］、［３７］、［３８］、［３９］、又は４０］のいずれかに記載の方法。
［４２］ 前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約２：１の比で投与される、上記［３２］、［３３］、［３５］、［３６］、［３７］、［３８］、［３９］、又は［４０］のいずれかに記載の方法。
［４３］ 前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約３：１の比で投与される、上記［３２］、［３３］、［３５］、［３６］、［３７］、［３８］、［３９］、又は［４０］のいずれかに記載の方法。
［４４］ 前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約４：１の比で投与される、上記［３２］、［３３］、［３５］、［３６］、［３７］、［３８］、［３９］、又は［４０］のいずれかに記載の方法。
［４５］ 前記第１のＲＮＡｉ薬と前記第２のＲＮＡｉ薬とが約５：１の比で投与される、上記［３２］、［３３］、［３５］、［３６］、［３７］、［３８］、［３９］、又は［４０］のいずれかに記載の方法。
［４６］ 前記第１のＲＮＡｉ薬の前記有効量が約０．５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの間であり、かつ前記第２のＲＮＡｉ薬の前記有効量が約０．５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの間である、上記［３２］、［３３］、［３５］、［３６］、［３７］、［３８］、［３９］、又は［４０］のいずれかに記載の方法。
［４７］ 前記ＲＮＡｉ薬の前記有効量が、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの間である、上記［３１］に記載の方法。
［４８］ ＨＢＶ感染の治療のための、上記［１］～［９］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬の使用。
［４９］ ＨＢＶ感染の治療のための、上記［１０］～［３０］のいずれかに記載の組成物の使用。
［５０］ ＨＢＶ感染の治療のために医薬品を製造するための、上記［１０］～［３０］のいずれかに記載の組成物の使用。
［５１］ アンチセンス鎖及びセンス鎖を含むＢ型肝炎ウイルス遺伝子の発現を阻害するためのＲＮＡｉ薬であって、前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５からなる群からのデュプレックス構造におけるそれぞれのセンス鎖又はアンチセンス鎖に同一又は実質的に同一なセンス鎖又はアンチセンス鎖を含むデュプレックス構造を有する、ＲＮＡｉ薬。
［５２］ 前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５からなる群からのデュプレックス構造におけるそれぞれのセンスに同一又は実質的に同一なセンス鎖を含むデュプレックス構造を有する、上記［５１］に記載のＲＮＡｉ薬。
［５３］ 前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５からなる群からのデュプレックス構造におけるそれぞれのアンチセンス鎖に同一又は実質的に同一なアンチセンス鎖を含むデュプレックス構造を有する、上記［５２］に記載のＲＮＡｉ薬。
［５４］ 前記ＲＮＡｉ薬が、ＡＤ０３４９８；ＡＤ０３４９９；ＡＤ０３５００；ＡＤ０３５０１；ＡＤ０３７３８；ＡＤ０３７３９；ＡＤ０３９６７；ＡＤ０３９６８；ＡＤ０３９６９；ＡＤ０３９７０；ＡＤ０３９７１；ＡＤ０３９７２；ＡＤ０３９７３；ＡＤ０３９７４；ＡＤ０３９７５；ＡＤ０３９７６；ＡＤ０３９７７；ＡＤ０３９７８；ＡＤ０４００１；ＡＤ０４００２；ＡＤ０４００３；ＡＤ０４００４；ＡＤ０４００５；ＡＤ０４００６；ＡＤ０４００７；ＡＤ０４００８；ＡＤ０４００９；ＡＤ０４０１０；ＡＤ０４１７６；ＡＤ０４１７７；ＡＤ０４１７８；ＡＤ０４４１２；ＡＤ０４４１３；ＡＤ０４４１４；ＡＤ０４４１５；ＡＤ０４４１６；ＡＤ０４４１７；ＡＤ０４４１８；ＡＤ０４４１９；ＡＤ０４４２０；ＡＤ０４４２１；ＡＤ０４４２２；ＡＤ０４４２３；ＡＤ０４４２５；ＡＤ０４４２６；ＡＤ０４４２７；ＡＤ０４４２８；ＡＤ０４４２９；ＡＤ０４４３０；ＡＤ０４４３１；ＡＤ０４４３２；ＡＤ０４４３３；ＡＤ０４４３４；ＡＤ０４４３５；ＡＤ０４４３６；ＡＤ０４４３７；ＡＤ０４４３８；ＡＤ０４４３９；ＡＤ０４４４０；ＡＤ０４４４１；ＡＤ０４４４２；ＡＤ０４５１１；ＡＤ０４５７０；ＡＤ０４５７１；ＡＤ０４５７２；ＡＤ０４５７３；ＡＤ０４５７４；ＡＤ０４５７５；ＡＤ０４５７６；ＡＤ０４５７７；ＡＤ０４５７８；ＡＤ０４５７９；ＡＤ０４５８０；ＡＤ０４５８１；ＡＤ０４５８３；ＡＤ０４５８４；ＡＤ０４５８５；ＡＤ０４５８６；ＡＤ０４５８７；ＡＤ０４５８８；ＡＤ０４５９０；ＡＤ０４５９１；ＡＤ０４５９２；ＡＤ０４５９３；ＡＤ０４５９４；ＡＤ０４５９５；ＡＤ０４５９６；ＡＤ０４５９７；ＡＤ０４５９８；ＡＤ０４５９９；ＡＤ０４７３４；ＡＤ０４７７１；ＡＤ０４７７２；ＡＤ０４７７３；ＡＤ０４７７４；ＡＤ０４７７５；ＡＤ０４７７６；ＡＤ０４７７７；ＡＤ０４７７８；ＡＤ０４８２２；ＡＤ０４８２３；ＡＤ０４８７１；ＡＤ０４８７２；ＡＤ０４８７３；ＡＤ０４８７４；ＡＤ０４８７５；ＡＤ０４８７６；ＡＤ０４８８１；ＡＤ０４８８２；ＡＤ０４８８３；ＡＤ０４８８４；ＡＤ０４８８５；ＡＤ０４９６２；ＡＤ０４９６３；ＡＤ０４９８１；ＡＤ０４９８２；ＡＤ０４９８３；ＡＤ０５０６９；ＡＤ０５０７０；ＡＤ０５０７１；ＡＤ０５０７２；ＡＤ０５０７３；ＡＤ０５０７４；ＡＤ０５０７５；ＡＤ０５０７６；ＡＤ０５０７７；ＡＤ０５０７８；ＡＤ０５１４７；ＡＤ０５１４８；ＡＤ０５１４９；ＡＤ０５１６４；又はＡＤ０５１６５からなる群からのデュプレックス構造におけるそれぞれのセンス鎖及びアンチセンス鎖に両方とも同一又は実質的に同一なセンス鎖及びアンチセンス鎖を含むデュプレックス構造を有する、上記［５３］に記載のＲＮＡｉ薬。
［５５］ 前記実質的に同一であることが、正確に同一であるか、少なくとも、又は約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％である、上記［５１］～［５４］に記載のＲＮＡｉ薬。
［５６］ 前記実質的に同一であることが、少なくとも、又は約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％である、上記［５１］～［５４］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［５７］ 前記実質的に同一であることが、約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％である、上記［５１］～［５４］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［５８］ 前記実質的に同一であることが、少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％である、上記［５１］～［５４］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［５９］ 上記［５１］～［５８］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬を含む組成物。
［６０］ 上記［５１］～［５８］のいずれかに記載の、少なくとも２つのＲＮＡｉ薬を含む組成物。
［６１］ 前記ＲＮＡｉ薬が少なくとも１つのオーバーハングを含む、上記［１］～［９］又は［５１］～［５８］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［６２］ 前記ＲＮＡｉ薬が前記アンチセンス鎖の３’末端にオーバーハングを含む、上記［６１］に記載のＲＮＡｉ薬。
［６３］ 前記ＲＮＡｉ薬が、前記アンチセンス鎖の３’末端及び前記センス鎖の３’末端にオーバーハングを含む、上記［６２］に記載のＲＮＡｉ薬。
［６４］ 前記ＲＮＡｉ薬が１つ又は２つの平滑末端を含む、上記［１］～［９］又は［５１］～［５８］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［６５］ 前記ＲＮＡｉ薬が１つ又は２つのフレイド末端を含む、上記［１］～［９］又は［５１］～［５８］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。
［６６］ 前記センス鎖が少なくとも１つの逆向き塩基脱落ヌクレオシドを含む、上記［１］～［９］、［５１］～［５８］、又は［６１］～［６５］のいずれかに記載のＲＮＡｉ薬。

【外国語明細書】