特開 2023-137082 測定装置および分析方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023137082

(43)【公開日】2023-09-29

(54)【発明の名称】測定装置および分析方法

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/48 20060101AFI20230922BHJP

   G01N 33/483 20060101ALI20230922BHJP

   G01N 33/49 20060101ALN20230922BHJP

【ＦＩ】

G01N33/48 M

G01N33/483 C

G01N33/49 K

G01N33/49 A

【審査請求】未請求

【請求項の数】21

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2022043093

(22)【出願日】2022-03-17

(71)【出願人】

【識別番号】390014960

【氏名又は名称】シスメックス株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100103034

【弁理士】

【氏名又は名称】野河 信久

(74)【代理人】

【識別番号】100159385

【弁理士】

【氏名又は名称】甲斐 伸二

(74)【代理人】

【識別番号】100163407

【弁理士】

【氏名又は名称】金子 裕輔

(74)【代理人】

【識別番号】100166936

【弁理士】

【氏名又は名称】稲本 潔

(74)【代理人】

【識別番号】100174883

【弁理士】

【氏名又は名称】冨田 雅己

(74)【代理人】

【識別番号】100189429

【弁理士】

【氏名又は名称】保田 英樹

(74)【代理人】

【識別番号】100213849

【弁理士】

【氏名又は名称】澄川 広司

(72)【発明者】

【氏名】水上 利洋

(72)【発明者】

【氏名】木村 考伸

(72)【発明者】

【氏名】濱田 雄一

(72)【発明者】

【氏名】鳥家 雄二

(72)【発明者】

【氏名】中西 利志

(72)【発明者】

【氏名】長井 孝明

(72)【発明者】

【氏名】久世 雅人

(72)【発明者】

【氏名】田中 宏典

【テーマコード（参考）】

2G045

【Ｆターム（参考）】

2G045AA01

2G045BB24

2G045CA01

2G045FA11

2G045FB12

(57)【要約】

【課題】測定のスループットが向上する測定装置を提供する。
【解決手段】検体に含まれる細胞を分析するための測定装置であって、少なくとも一つの試薬容器から供給される試薬に含まれる第一および第二の蛍光色素によって前記細胞が染色された測定試料を調製するためのチャンバと、前記試薬容器と前記チャンバとの間に設けられた送液管を介して、前記試薬容器から前記チャンバに前記試薬を送液するための送液部と、フローセルに流れる前記測定試料への光の照射に応じて、前記第一および第二の蛍光色素で染色された前記細胞から放出された第一波長の蛍光と第二波長の蛍光に各々対応する第一および第二の信号を取得する検出部と、前記第一および第二の信号に基づいて、前記細胞を分析する分析部と、を含む測定装置。
【選択図】図２

【特許請求の範囲】

【請求項1】

検体に含まれる細胞を分析するための測定装置であって、
少なくとも一つの試薬容器から供給される試薬に含まれる第一および第二の蛍光色素によって前記細胞が染色された測定試料を調製するためのチャンバと、
前記試薬容器と前記チャンバとの間に設けられた送液管を介して、前記試薬容器から前記チャンバに前記試薬を送液するための送液部と、
フローセルに流れる前記測定試料への光の照射に応じて、前記第一および第二の蛍光色素で染色された前記細胞から放出された第一波長の蛍光と第二波長の蛍光に各々対応する第一および第二の信号を取得する検出部と、
前記第一および第二の信号に基づいて、前記細胞を分析する分析部と、
を含む測定装置。

【請求項2】

前記送液部は、前記試薬容器内に配置される第一端と前記チャンバに接続される第二端を備える前記送液管を介して、前記試薬を前記試薬容器から前記チャンバに送液する請求項１に記載の測定装置。

【請求項3】

前記送液管の前記第一端は、前記試薬容器内の所定位置に固定されている請求項２に記載の測定装置。

【請求項4】

前記送液管の前記第一端は、複数の検体に各々対応する複数の前記測定試料が調製される間、前記所定位置に固定されている請求項３に記載の測定装置。

【請求項5】

前記試薬容器に対して前記送液管の前記第一端を挿入し、前記第一端を前記試薬容器内の所定位置に配置するための機構を含む、
ことを特徴とする請求項２乃至４の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項6】

前記送液部は、前記送液管を介して前記試薬容器内の試薬を前記チャンバへ一定量送液するための定量部をさらに有する請求項１乃至５の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項7】

前記試薬容器は、２０ｍＬ以上１００ｍＬ以下の前記試薬を収容する請求項１乃至６の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項8】

前記試薬容器に収容された前記試薬の保存期間は、前記測定装置が設置される環境の温度において、６０日以上９０日以内である請求項１乃至７の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項9】

前記試薬容器に収容された前記試薬の保存期間は、１５℃から３０℃の温度において、６０日以上９０日以内である請求項８に記載の測定装置。

【請求項10】

前記試薬容器は、前記試薬を収容する袋状の試薬収容部を有する、請求項１乃至９の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項11】

前記試薬容器は、２００ｍＬ以上５００ｍＬ以下の前記試薬を収容する請求項１０に記載の測定装置。

【請求項12】

前記試薬容器に収容された前記試薬の保存期間は、前記測定装置が設置される環境の温度において、７５日以上１年以内である請求項１０又は１１に記載の測定装置。

【請求項13】

前記試薬容器に収容された前記試薬の保存期間は、１５℃から３０℃の温度において、７５日以上１年以内である請求項１２に記載の測定装置。

【請求項14】

前記第一の蛍光色素を構成する第一化合物および前記第二の蛍光色素を構成する第二化合物によって前記細胞が染色される請求項１乃至１３の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項15】

前記試薬は抗体を含まない請求項１乃至１４の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項16】

前記測定試料は、前記第一および第二の蛍光色素が細胞の膜を透過可能となる損傷を前記膜に与える溶血剤と混合された前記検体中の前記細胞を前記第一および第二の蛍光色素で染色することで調整される請求項１乃至１５の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項17】

前記分析部は、前記第一の信号を用いた前記細胞の分類と、前記第二の信号を用いた前記細胞の分類とに基づき、前記細胞を分析する請求項１乃至１６の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項18】

前記分析部は、前記第一および第二の信号と、前記測定試料への光の照射に応じて生じた散乱光に対応する第三の信号とを人工知能アルゴリズムによって分析する請求項１乃至１７の何れか１項に記載の測定装置。

【請求項19】

前記分析部は、前記人工知能アルゴリズムによる行列演算を、並列処理プロセッサによる並列処理で実行する請求項１８に記載の測定装置。

【請求項20】

前記人工知能アルゴリズムは、深層学習アルゴリズムである請求項１８又は１９に記載の測定装置。

【請求項21】

検体に含まれる細胞を分析する分析方法であって、
試薬を収容する試薬容器と、前記検体と前記試薬を混合して測定試料を調製するためのチャンバとの間に設けられた送液管を介して、前記試薬容器から前記チャンバに前記試薬を送液し、
少なくとも一つの前記試薬容器から供給される前記試薬に含まれる第一および第二の蛍光色素によって前記細胞が染色された前記測定試料を調製し、
フローセルに流れる前記測定試料に光を照射し、
前記光の照射に応じて、前記第一および第二の蛍光色素で染色された前記細胞から放出された第一波長の蛍光と第二波長の蛍光に各々対応する第一および第二の蛍光信号を取得し、
前記第一および第二の蛍光信号に基づいて、前記細胞を分析する、
分析方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、測定装置および分析方法に関する。

【背景技術】

【0002】

非特許文献１は、蛍光の波長帯域が異なる複数の蛍光色素から発せられた信号を分析するフローサイトメータを開示している。非特許文献１に開示のフローサイトメータによる測定では、波長帯域の異なる複数の蛍光色素によって試料を染色する試薬（非特許文献２参照）が用いられる。各々の蛍光色素は抗体に付加されており、各抗体が検体中の測定対象物に結合することで検体を染色する。フローサイトメータは、分注プローブおよびこの分注プローブを移動させる機構を用いて試薬容器から抗体試薬を吸引し、測定対象物を有する検体が収容された反応容器内に抗体試薬を吐出する。フローサイトメータは、反応容器内で抗体試薬と混合されて染色された測定対象物を測定する。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0003】

【非特許文献1】AQUIOS Tetra System Guide https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/techdocs?docname=B26364AB.pdf

【非特許文献2】AQUIOS Tetra-1 Panel and AQUIOS Tetra-2+ Panelhttps://www.beckman.jp/techdocs/B25337AG/wsr-161331

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0004】

非特許文献１に開示されたフローサイトメータは、測定試料の調製のため、試薬を試薬容器からノズルで吸引し、試薬を吸引したノズルを反応容器の配置場所に移動させ、反応容器に試薬を吐出させる。この場合、試薬の吸引・吐出のためのプロセスを要するため、測定試料の調製に時間を要する（非特許文献１には、測定スループットは時間あたり２５検体と記載されている）。

【0005】

本発明は、高い処理能力で複数の蛍光色素を用いた測定を実現可能な測定装置および分析方法を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明の測定装置は、検体に含まれる細胞を分析するための測定装置であって、少なくとも一つの試薬容器から供給される試薬に含まれる第一および第二の蛍光色素によって前記細胞が染色された測定試料を調製するためのチャンバと、前記試薬容器と前記チャンバとの間に設けられた送液管を介して、前記試薬容器から前記チャンバに前記試薬を送液するための送液部と、フローセルに流れる前記測定試料への光の照射に応じて、前記第一および第二の蛍光色素で染色された前記細胞から放出された第一波長の蛍光と第二波長の蛍光に各々対応する第一および第二の信号を取得する検出部と、前記第一および第二の信号に基づいて、前記細胞を分析する分析部と、を含む測定装置である。
本発明の分析方法は、検体に含まれる細胞を分析する分析方法であって、試薬を収容する試薬容器と、前記検体と前記試薬を混合して測定試料を調製するためのチャンバとの間に設けられた送液管を介して、前記試薬容器から前記チャンバに前記試薬を送液し、少なくとも一つの前記試薬容器から供給される前記試薬に含まれる第一および第二の蛍光色素によって前記細胞が染色された前記測定試料を調製し、フローセルに流れる前記測定試料に光を照射し、前記光の照射に応じて、前記第一および第二の蛍光色素で染色された前記細胞から放出された第一波長の蛍光と第二波長の蛍光に各々対応する第一および第二の蛍光信号を取得し、前記第一および第二の蛍光信号に基づいて、前記細胞を分析する、分析方法である。

【発明の効果】

【0007】

本発明によれば、高い処理能力で複数の蛍光色素を用いた測定を実現可能な分析装置を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【0008】

【図1】本発明の第１実施形態に係る分析システムを示す斜視図である。

【図2】本発明の第１実施形態の測定ユニットの構成を示す模式図である。

【図3】本発明の第１実施形態の分析システムによる測定試料調製処理の手順を示すフローチャートである。

【図4】本発明の第２実施形態の分析システムの測定ユニットの構成を示すブロック図である。

【図5】本発明の第２実施形態における検体吸引部、試料調製部および検出部を含む流体回路を示す図である。

【図6】本発明の第２実施形態における第１試料調製部の他の一例を示す模式図である。

【図7】本発明の第２実施形態におけるＦＣＭ検出部の光学系の一例を示す構成説明図である。

【図8】本発明の第２実施形態におけるＦＣＭ検出部の光学系の他の例を示す構成説明図である。

【図9】異なる２つの蛍光色素から発せされた蛍光が互いに漏れ込んでいる例を示す図である。

【図10】本発明の第２実施形態における分析ユニットの構成の一例を示すブロック図である。

【図11】本発明の第２実施形態における分析システムの他の構成例を示す斜視図である。

【図12】本発明の第２実施形態における測定ユニットの他の一例の構成を示すブロック図である。

【図13】本発明の第２実施形態における測定ユニットのカバーを開放した状態を示す図である。

【図14】本発明の第２実施形態における測定ユニットの試薬容器ホルダを示した斜視図である。

【図15】図１４に示した試薬容器ホルダを示した正面図である。

【図16】図１４に示した試薬容器ホルダの試薬容器保持部を説明するための模式図である。

【図17】図１４に示した試薬容器保持部に試薬容器が載置された状態を示した模式図である。

【図18】図１４に示した試薬容器保持部に試薬容器が載置された状態を示した模式図である。

【図19】図１４に示した試薬容器ホルダの内部構成を模式的に示した縦断面図である。

【図20】図１９に示した試薬容器ホルダの縦断面図において試薬容器のセット状態を説明するための図である。

【図21】図２０に示した試薬容器ホルダの縦断面図においてカバーを下降させた状態を説明するための図である。

【図22】本発明の第２実施形態による大型の試薬容器を示した斜視図である。

【図23】本発明の第２実施形態による大型の試薬容器を示した上面図である。

【図24】本発明の第２実施形態による大型の試薬容器を示した縦断面図である。

【図25】本発明の第２実施形態による小型の試薬容器を示した斜視図である。

【図26】本発明の第２実施形態による小型の試薬容器を示した上面図である。

【図27】本発明の第２実施形態による小型の試薬容器を示した縦断面図である。

【図28】（Ａ）は、本発明の他の実施形態による試薬容器２００が測定ユニット４００に設置された状態を示した図である。（Ｂ）は、本発明の他の実施形態による試薬容器２００に上方から吸引管２５２が挿入された状態を示した図である。

【図29】本発明の他の実施形態による試薬容器２００が試薬収容部１０とフレーム２０とを備えることを示した図である。

【図30】試薬収容部１０が中空の袋状に形成され、フレーム２０が開口部２１、取付部材２２及び移動規制部２３を備えることを示す図である。

【図31】移動規制部２３の上面図である。

【図32】試薬吸引部２５０がそれぞれ１つの試薬容器２００を保持可能な複数の試薬容器ホルダを含むことを示す図である。

【図33】収容部２６０が、試薬容器２００の試薬収容部１０が挿入される第１挿入部２６１と、試薬容器２００の移動規制部２３が挿入される第２挿入部２６２とを含むことを示す図である。

【図34】試薬容器２００がセットされた収容部２６０を示す図である。

【図35】試薬容器ホルダ２５０ａの縦断面図である。

【図36】本発明の第４実施形態による分析方法を説明する概念図である。

【図37】第４実施形態の分析方法において用いられる波形データを説明するための模式図である。

【図38】第４実施形態の分析方法におけるＡ／Ｄ変換部によるデジタル信号への変換を模式的に示す図である。

【図39】第４実施形態の分析方法におけるサンプリングによって得られる波形データを模式的に示す図である。

【図40】第４実施形態の分析方法における検体中の成分の種別を判定するための深層学習アルゴリズムを訓練するために使用される訓練データの生成方法の一例を示す模式図である。

【図41】第４実施形態の分析方法におけるラベル値の例を示す図である。

【図42】第４実施形態の分析方法における検体中の成分の波形データを分析する方法の例を示す模式図である。

【図43】図１２に示した試料調製部とは構成が異なる他の試料調製部の構成例を示すブロック図である。

【図44】本分析方法の第１の動作例を示すフローチャートである。

【図45】本分析方法の第２の動作例を示すフローチャートである。

【図46】本分析方法の第３の動作例を示すフローチャートである。

【図47】第５実施形態の構成例を示すブロック図である。

【図48】並列処理プロセッサの構成例を示す模式図である。

【図49】プロセッサ上で動作する解析ソフトウェアの制御に基づいて、並列処理プロセッサで実行される演算処理の概要を示す第１の図である。

【図50】図４９に引き続く第２の図である。

【図51】図５０に引き続く第３の図である。

【図52】第１蛍光色素および第２蛍光色素を用いて白血球を亜集団に分類する工程を示すフローチャートである。

【図53】第６実施形態の工程を示すフローチャートである。

【図54】第７実施形態の工程を示すフローチャートである。

【図55】第８実施形態の工程を示すフローチャートである。

【図56(a)】参考例１における好塩基球分離前検体を測定したときの側方散乱－赤蛍光スキャッタグラムである。

【図56(b)】参考例１において好塩基球分離後検体を測定したときの側方散乱－赤蛍光スキャッタグラムである。

【図56(c)】参考例１において好塩基球分離前検体を測定したときの側方散乱－青紫蛍光スキャッタグラムである。

【図56(d)】参考例１において好塩基球分離後検体を測定したときの側方散乱－青紫蛍光スキャッタグラムである。

【図57(a)】参考例２において採血後４時間の検体を測定したときの側方散乱－青紫蛍光スキャッタグラムである。

【図57(b)】参考例２において採血後４８時間の検体を測定したときの側方散乱－青紫蛍光スキャッタグラムである。

【図57(c)】参考例２において採血後７２時間の検体を測定したときの側方散乱－青紫蛍光スキャッタグラムである。

【図58(a)】参考例２において図５７(a)のスキャッタグラムでゲーティングした細胞をプロットした側方散乱－赤蛍光スキャッタグラムである。

【図58(b)】参考例２において図５７(b)のスキャッタグラムでゲーティングした細胞をプロットした側方散乱－赤蛍光スキャッタグラムである。

【図58(c)】参考例２において図５７(c)のスキャッタグラムでゲーティングした細胞をプロットした側方散乱－赤蛍光スキャッタグラムである。

【図59(a)】実施例１の側方散乱－青紫蛍光スキャッタグラムである。

【図59(b)】実施例１の側方散乱－赤蛍光スキャッタグラムである。

【図60(a)】実施例２の青紫蛍光ヒストグラムである。

【図60(b)】実施例２の側方散乱－青紫蛍光スキャッタグラムである。

【図60(c)】実施例２の側方散乱－赤蛍光スキャッタグラムである。

【図61】採血後の時間経過による好塩基球数の変化を示すグラフである。

【図62】実施例２および比較例１における側方散乱－赤蛍光スキャッタグラムである。

【発明を実施するための形態】

【0009】

以下、図面を用いて本発明をさらに詳述する。なお、以下の説明は、すべての点で例示であって、本発明を限定するものと解されるべきではない。

【0010】

（第１実施形態）
図１は本発明の第１実施形態に係る分析システムを示す斜視図である。図１に示すように、第１実施形態に係る分析システム４０００は、測定装置（以下、測定ユニットという）４００と、分析装置（以下、分析ユニットという）３００Ｘとを個別に備える。本実施形態において、分析ユニット３００Ｘは、例えば、測定対象となる検体を分析するためのソフトウェアが組み込まれたＰＣ（パーソナルコンピュータ）である。

【0011】

測定ユニット４００は、検体を測定するためのユニットであり、フローサイトメータを含んでいる。測定ユニット４００では、検体と試薬を混合し、測定試料を調製する。測定試料の調製には、複数波長に各々対応する複数の蛍光色素を含む試薬が用いられる。測定試料中の複数の細胞の各々は、複数の蛍光色素で染色される。この分析システムによる検体に含まれる細胞の分析では、複数の蛍光色素によって染色可能な細胞を分析する。つまり、本実施形態での測定試料の調製は、一つの細胞に対して複数の蛍光色素を染色することを意図しており、測定対象となる細胞としては、例えば、リンパ球、単球、好酸球、好中球、好塩基球などである。

【0012】

調製された測定試料がフローサイトメータで測定される。光が照射された測定試料中の細胞から複数の蛍光色素の各々に対応する光学的信号や前方散乱光、側方散乱光に係る複数の信号が取得される。取得された光学的信号の各々がＡ／Ｄ変換されて、デジタルデータが取得される。分析ユニット３００Ｘは、測定ユニット４００で取得されたデジタルデータを分析する。分析ユニット３００Ｘでは、少なくとも側方散乱光および複数波長の蛍光に各々対応する複数のデジタルデータを用いて、検体中の細胞の分類および計数の少なくとも一つを実行する。分析ユニット３００Ｘは、測定ユニット４００の動作制御も実行する。

【0013】

図２は本発明の第１実施形態の測定ユニットの構成を示す模式図である。図１と図２に示すように、測定ユニット４００は、チャンバ４２０および送液機構４３０を有する試料調製部４４０と、検体吸引機構４５０と、細胞から発せられた信号を取得する検出部としてのフローサイトメータ検出部（ＦＣＭ検出部）４６０とを備える。

【0014】

検体吸引部４５０は、検体容器Ｔ内の検体を吸引する機構であり、検体吸引ノズル４５１を有する。検体吸引ノズル４５１は、蓋によって封止された検体容器を貫通可能である。検体吸引機構４５０は、検体吸引ノズル４５１を検体容器に挿入するために、検体吸引ノズル４５１を移動可能であり、検体吸引ノズル４５１をチャンバ４２０の上方位置へ移動させるようＸＹ方向に移動可能である。検体吸引機構４５０は、検体吸引ノズル４５１によって検体を吸引し吐出するための定量部４５２（例えば、シリンジポンプ）を有する。

【0015】

送液機構４３０は、送液管４３１と、送液管４３１を介して試薬１２を試薬容器２００からチャンバ４２０に注入するための送液部４３２とを備える。送液機構４３０は、後述の試薬容器ホルダ６０（図１３～図１５参照）に装着された試薬容器２００とチャンバ４２０との間に設けられる送液管４３１を介して、装着された試薬容器２００からチャンバ４２０に試薬を送液する機構である。試薬容器ホルダ６０には、第一の蛍光色素および第二の蛍光色素の何れも含む試薬１２が収容された試薬容器２００が装着される。送液機構４３０は、試薬容器２００からチャンバ４２０に試薬を送液する。第一の蛍光色素を構成する第一化合物および第二の蛍光色素を構成する第二化合物によって細胞が染色される。

【0016】

試薬容器２００内には、送液管４３１の一端を構成する吸引管６４が挿入される。送液管４３１の他端は、チャンバ４２０に接続されている。吸引管６４は、試薬容器ホルダ６０に装着された試薬容器２００が有する封止フィルム（シール部材ともいう）を貫通しうるように、先端が鋭利に形成されてもよい。

【0017】

送液機構４３０の送液部４３２は、試薬容器２００から送液管４３１に試薬１２を引き込むための陰圧と、引き込んだ試薬をチャンバ４２０に供給するための陽圧を生成する定量部としてのポンプ４３３を備える。ポンプ４３３は、例えば、シリンジポンプやダイアフラムポンプでありえる。送液機構４３０は、複数のバルブＶ１、Ｖ２を備えてもよい。例えばシリンジポンプ又はダイアフラムポンプで構成される定量部４３３が試薬容器から試薬を吸引する際、バルブＶ１が開かれ、バルブＶ２は閉じられる。定量具４３３が陰圧を生成することで、バルブＶ１、バルブＶ２、定量部４３３の間の流路に試薬が充填される。充填された試薬をチャンバ４２０に供給するときは、バルブＶ１が閉じられ、バルブＶ２が開かれ、定量部４３３が陽圧を生成する。これにより、試薬容器２００中の試薬がチャンバ４２０に供給される。

【0018】

チャンバ４２０は、試薬と検体が混合され、測定試料が作成される容器である。チャンバ４２０は、第一および第二の蛍光色素の何れをも含む１つの試薬１２を検体と混合し、第一および第二の蛍光色素によって細胞が染色された測定試料を調製する。測定ユニット４００において、チャンバ４２０は一つまたは複数備えられる。チャンバ４２０は廃液チャンバ３６とバルブ３７を介して接続されている。ＦＣＭ検出部４６０による測定が完了した後、チャンバ４２０に残った測定試料は廃液チャンバ３６に廃棄される。また、チャンバ４２０は、次の測定試料が調製される前に、図示しない洗浄機構によって洗浄され、洗浄後の液は廃液チャンバに廃棄される。

【0019】

測定ユニット４００において、試薬容器ホルダ６０は一つまたは複数備えられる。試薬容器ホルダ６０には、光によって励起されて第一波長の蛍光を放出する第一の蛍光色素および光によって励起されて第二波長の蛍光を放出する第二の蛍光色素の何れをも含む試薬を収容する試薬容器２００が装着される。図２に示した例では、第一蛍光色素と第二蛍光色素とを含有する試薬が一つの試薬容器２００に収容されている。

【0020】

試薬容器２００は、試薬が収容される容器である。試薬容器２００は、送液機構４３０の送液管４３１の第一端に接続されたピアサ（吸引管）６４が挿入される開口を有している。試薬容器２００は、試薬容器ホルダ６０に装着される前の状態では、例えば、開口は封止フィルムで覆われている。試薬容器ホルダ６０に装着された試薬容器２００の開口に、ピアサ６４が挿入される。挿入されたピアサ６４は、試薬容器２００内の所定位置に固定される。試薬容器２００に挿入されたピアサ６４は、例えば、試薬容器２００が試薬容器ホルダ６０に装着されている間は、上述の所定位置に固定されている。また、少なくとも、複数の異なる検体の測定が実行される間（即ち、異なる複数の測定試料が調製される間）は、上述の所定位置に固定される。

【0021】

ＦＣＭ検出部４６０は、第一および第二の蛍光色素で染色された細胞から発せされた第一および第二波長の蛍光に各々対応する第一および第二の信号を取得する。ＦＣＭ検出部４６０では、フローセル内を流れる測定試料に光を照射する。ＦＣＭ検出部４６０は、例えば、各波長に各々対応する複数の光源を備えてもよく、あるいは、単一波長の光を照射し、単一波長の光から励起された複数の蛍光色素からの蛍光を検出するように構成されてもよい。光が測定試料に照射されることにより、第一蛍光色素および第二蛍光色素に各々対応する光学的信号が検出される。各光学的信号はＡ／Ｄ変換され、デジタルデータが取得される。取得されたデジタルデータは、分析ユニット３００Ｘ（図１参照）で分析される。

【0022】

第１実施形態において、試薬容器２００とチャンバ４２０との間には送液管４３１が設けられており、送液部４３２が試薬容器４１０内の試薬を送液管４３１を介してチャンバ４２０に送る。よって、第１実施形態において、試薬を試薬容器からノズルで吸引し、試薬を吸引したノズルをチャンバの配置場所に移動させ、チャンバに試薬を吐出するプロセス（例えば、非特許文献１参照）は不要である。

【0023】

分析ユニット３００Ｘ（図１参照）は、第一および第二の蛍光色素で染色された細胞から発せされた第一および第二波長の蛍光に各々対応する第一および第二の信号のそれぞれに基づいて、細胞の分類および計数の少なくとも一つを行う。

【0024】

図３は第１実施形態の分析システムによる測定試料調製処理の手順を示すフローチャートである。図１、図２及び図３を参照しながら分析システム４０００による測定試料調製処理について説明する。分析システム４０００による測定試料調製処理では、まず、測定ユニット４００において、検体をチャンバ４２０に分注する（ステップＳ１）。次に、試薬容器４１０とチャンバ４２０とをつなぐ送液管４３１を介して、試薬をチャンバ４２０に注入する（ステップＳ２）。次に、チャンバ４２０内において、検体と、第一及び第二の蛍光色素を含む試薬とを混合し、測定試料を調製する（ステップＳ３）。次に、チャンバ４２０内で調製した測定試料をＦＣＭ検出部４６０に送液し光を照射して、側方散乱光および第一及び第二の蛍光色素に各々対応する光学的信号を取得する（ステップＳ４）。次に、取得した光学的信号から生成されたデータを分析ユニット３００Ｘによって分析する（ステップＳ５）。そして、分析ユニット３００Ｘが分析結果を提供する（ステップＳ６）。

【0025】

第１の実施形態によれば、第１及び第２の蛍光色素と検体とを反応させるための第１及び第２蛍光色素のチャンバ４２０への供給を、送液管４３１を通じて行うことができる。送液管４３１は、第１及び第２蛍光色素を含む試薬１２のみをチャンバ４２０に供給する専用の流路である。送液管４３１の内部は常に試薬１２によって満たされた状態を維持することができるため、定量部（ポンプ）４３３による定量が迅速に行える点で、処理スピードが高められる。さらに、送液管４３１は、試薬１２を供給するための専用の流路であるため、異なる試薬どうしのコンタミネーションを防止する必要がなく、洗浄が不要である。洗浄が不要であることも処理スピード向上に貢献する。

【0026】

第１実施形態による利点は、例えば非特許文献１との比較において、さらに明らかとなる。例えば、非特許文献１に記載のフローサイトメータでは、反応容器として、９６穴プレートが用いられる。９６穴プレートは消耗品であり、使用後はフローサイトメータから取り出されて廃棄される。従って、非特許文献１に記載のフローサイトメータは、試薬容器と反応容器とを送液管で接続し、試薬の吸引・吐出のためのプロセスを除くことはできない構成である。

【0027】

また、非特許文献１に記載のフローサイトメータによる測定には、血液検体中の細胞における４つのマーカー（ＣＤ４５、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８）に対応する４種類の蛍光色素を含有する試薬（非特許文献２：ＡＱＵＩＯＳ Ｔｅｔｒａ－１ Ｐａｎｅｌ）が用いられる。これらの蛍光色素の各々は、上記の各マーカーに対応する抗体に付されている。つまり、非特許文献２の試薬は、抗体－抗原反応によって、血液検体中の細胞を染色する。このような試薬の場合、反応に時間を要するため、１検体の測定に時間がかかる。具体的には、非特許文献１には、測定試料の調製を含めて、１検体の測定に約２０分要すると記載されている。非特許文献１の技術は、１検体あたりの測定時間（特に、抗体－抗原反応に要する時間）が長くなるため、消耗品の９６穴プレートの複数のウェルで、複数の検体の測定試料の調製を並行して実行して検体当たりの延べ処理時間を短縮している。言い換えると、単位時間当たりの処理能力（スループット）を向上させている。これに対して、第１実施形態では、試薬１２として、化合物自体が細胞の細胞質、核酸、ＤＮＡを染色する第１及び第２の蛍光色素を含む試薬が用いられる。このような蛍光色素は、抗体試薬に比べて染色のための反応が早く、例えば１検体の測定試料の調製に要する時間は１分未満である。したがって、第１実施形態によれば、複数の蛍光標識を用いた測定を高い処理能力で実現することが可能な分析装置を提供することができる。
（第２実施形態）

【0028】

第２実施形態の分析システム４０００は、血液検体中の細胞の計数および分析の少なくとも一つを実行する多項目自動血球分析装置である。図４は、第２実施形態の分析システム４０００（図１参照）の測定ユニット４００の構成を示すブロック図である。測定ユニット４００は、試料調製部４４０、装置機構部４５５、検体吸引機構４５０、ＦＣＭ検出部４６０、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１、ＨＧＢ検出部４６２および測定ユニット制御部４８０を備える。ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１は、血液と希釈液によって調製された測定試料をアパーチャに導入し、細胞がアパーチャを通過する際に生じる電気抵抗の変化を検出することにより赤血球（ＲＢＣ）および血小板（ＰＬＴ）を計数する電気抵抗式検出部である。ＨＧＢ検出部４６２は、ＳＬＳヘモグロビン法にり血液中のヘモグロビン濃度を計測する。ＨＧＢ検出部４６２は、血液とＳＬＳ溶血剤とより調製される測定試料に、ＳＬＳヘモグロビンの吸収波長である波長５５５ｎｍの光を照射し吸光度を測定することにより、血液中のヘモグロビン濃度を測定する。以下、ＦＣＭ検出部４６０、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１およびＨＧＢ検出部４６２を、「検出部４６０～４６２」と総称することがある。

【0029】

検体吸引機構４５０は、検体容器から検体を吸引し、吸引した検体を試料調製部４４０のチャンバに吐出する。試料調製部４４０は、検体と試薬を混合するためのチャンバと、試薬容器が設置される試薬容器ホルダ６０とを含む。試料調製部４４０は、試薬容器ホルダ６０に設置された試薬容器から、後述する送液管を介してチャンバに試薬を送液する。チャンバ内で検体と試薬が混合されることで、測定試料が調製される。

【0030】

装置機構部４５５は、測定ユニット４００の各部を動かすモータやアクチュエータを含む。装置機構部４５５は、例えば、後述の採血管Ｔ（図５参照）を上下方向に移動させる機構を含む。

【0031】

測定ユニット制御部４８０は、ＦＣＭ検出部４６０から出力されるアナログ信号を処理するアナログ処理部４８１と、アナログ処理部４８１から出力されるアナログ信号をデジタル信号に変換するＡ／Ｄ変換部４８１ａと、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１から出力されるアナログ信号を処理するアナログ処理部４８２と、アナログ処理部４８２から出力されるアナログ信号をデジタル信号に変換するＡ／Ｄ変換部４８２ａと、ＨＧＢ検出部４６２から出力されるアナログ信号を処理するアナログ処理部４８３と、アナログ処理部４８３から出力されるアナログ信号をデジタル信号に変換するＡ／Ｄ変換部４８３ａと、各Ａ／Ｄ変換部４８１ａ、４８２ａ、４８３ａと電気的に接続されたＩＦ部（インターフェース部）４８４とを備える。さらに、測定ユニット制御部４８０は、試料調製部４４０、装置機構部４５５、検体吸引機構４５０、ＦＣＭ検出部４６０、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１およびＨＧＢ検出部４６２と電気的に接続されたインターフェース（ＩＦ）部４８８と、各ＩＦ部４８４、４８８と電気的に接続されたバス４８５と、バス４８５と分析ユニット３０２Ｘとを電気的に接続するＩＦ部４８９とを備える。

【0032】

図５は、検体吸引機構４５０、試料調製部４４０および検出部４６０～４６２を含む流体回路を示す。図４に示す試料調製部４４０は、ＦＣＭ検出部４６０による光学測定のための第１測定試料を調製するための第１試料調製部４４０Ａと、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部による電気的抵抗式測定のための第２測定試料及びＨＧＢ検出部４６２によるヘモグロビン測定のための第３測定試料を調製するための第２試料調製部４４０Ｂを備える（図５参照）。

【0033】

第１試料調製部４４０Ａは、第１チャンバ４２０を有する。第１チャンバ４２０は、試薬容器Ｒ１、Ｒ２に接続されている。試薬容器Ｒ１は、赤血球を収縮させる溶血剤を収容する。試薬容器２００は、蛍光色素を含有する白血球染色試薬を収容する。試薬容器Ｒ２は、希釈液を収容する。試薬容器Ｒ２については後述する。

【0034】

試薬容器２００に収容される白血球染色試薬は、第１蛍光色素と第２蛍光色素を含有する。第１蛍光色素と第２蛍光色素については後述する。

【0035】

第２試料調製部４００Ｂは、第２チャンバ５５を有する。第２チャンバ５５は、試薬容器Ｒ２と、試薬容器Ｒ３に接続されている。試薬容器Ｒ２は、第１試料調製部４４０Ａと共通して設けられている。試薬容器Ｒ３は、赤血球を溶血させるとともにＳＬＳヘモグロビン法による測定のための試料を調製するためのＳＬＳ溶血剤を収容する。

【0036】

白血球染色試薬を収容する試薬容器２００は、試薬容器ホルダ６０に保持される。試薬容器ホルダ６０には、試薬容器２００内の核酸染色用試薬を吸引するための吸引管６４と、吸引管６４を昇降させる吸引管昇降機構６５と、が設けられている。吸引管６４の先端は、試薬容器２００のシール材を貫通（穿刺）可能である。吸引管昇降機構６５には、カバー６３が接続されている。吸引管昇降機構６５が下降し、吸引管６４が試薬容器２００のシール材を貫通（穿刺）している状態で、カバー６３も下降し、カバー６３が試薬容器２００を覆う。吸引管昇降機構６５が上昇すると、カバー６３も上昇し、試薬容器２００が外部から取り外し可能になる。

【0037】

吸引管６４と第１チャンバ４２０の間には、送液機構４３０が設けられている。送液機構４３０は、送液管４３１と、定量ブロック４３２とを備える。送液管４３１は、その一端が吸引管６４によって構成され、他端が第１チャンバ４２０に接続されている。定量ブロック４３２は、定量部３０と、電磁バルブＶ１、Ｖ２とを備える。定量部３０としては、シリンジポンプが用いられる。なお、シリンジポンプに代えて、例えばダイヤフラムポンプも使用可能である。電磁バルブＶ１、Ｖ２は、流路を開閉する。試薬容器２００内の白血球染色試薬をチャンバ４２０に送液する場合、電磁バルブＶ１が開き、電磁バルブＶ２が閉じた状態で、定量部３０が送液管４３１に陰圧を与える。これにより、吸引管６４の先端から送液管４３１に白血球染色試薬が吸引され、電磁バルブＶ１、Ｖ２、及び定量部３０の間の流路に一定量の白血球染色試薬が充填される。次に、電磁バルブＶ１が閉じ、電磁バルブＶ２が開いた状態で、定量部３０が送液管４３１に陽圧を与える。これにより、電磁バルブＶ１、Ｖ２、及び定量部３０の間の流路に充填された一定量の白血球染色試薬が押し出され、送液管４３１を通じてチャンバ４２０に白血球染色試薬が供給される。

【0038】

溶血剤を収容する試薬容器Ｒ１と第１チャンバ４２０の間の流路には、定量部２２と、電磁バルブＶ３、Ｖ４と、が設けられている。定量部２２としては、シリンジポンプが用いられる。なお、シリンジポンプに代えて、例えばダイヤフラムポンプも使用可能である。電磁バルブＶ３、Ｖ４は、流路を開閉する。定量部２２及び電磁バルブＶ３、Ｖ４は、先述の電磁バルブＶ１、Ｖ２及び定量部３０と同様にして、試薬容器Ｒ１内の溶血剤を、第１チャンバ４２０に、定量的に送り込む。

【0039】

希釈液を収容する試薬容器Ｒ２と第１チャンバ４２０の間の流路には、定量部３３と、電磁バルブＶ５、Ｖ６と、が設けられている。定量部３３としては、シリンジポンプが用いられる。なお、シリンジポンプに代えて、例えばダイヤフラムポンプも使用可能である。電磁バルブＶ５、Ｖ６は、流路を開閉する。定量部３３及び電磁バルブＶ５、Ｖ６は、試薬容器Ｒ２内の希釈液を、第１チャンバ４２０に、定量的に送り込む。

【0040】

第１チャンバ４２０には、不要になった溶液を収容する廃液チャンバ３６が接続される。第１チャンバ４２０と廃液チャンバ３６の間には、流路を開閉する電磁バルブＶ７が設けられる。

【0041】

第１チャンバ４２０は、第１チャンバ４２０内の液体を攪拌するために、第１チャンバ４２０内にエアを供給するポンプ５６Ａに接続されている。

【0042】

希釈液を収容する試薬容器Ｒ２と第２チャンバ５５の間の流路には、定量部３８と、電磁バルブＶ８、Ｖ９と、が設けられている。定量部３８としては、シリンジポンプが用いられる。なお、シリンジポンプに代えて、例えばダイヤフラムポンプも使用可能である。電磁バルブＶ８、Ｖ９は、流路を開閉する。定量部３８及び電磁バルブＶ８、Ｖ９は、試薬容器Ｒ２内の希釈液を、第２チャンバ５５に、定量的に送り込む。第２チャンバ５５には、不要になった溶液を収容する廃液チャンバ４１が接続される。第２チャンバ５５と廃液チャンバ４１の間には、流路を、第２チャンバ５５から廃液チャンバ４１に通ずる流路と、第２チャンバ５５からＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１及びＨＧＢ検出部４６２に通ずる流路との間で切り替える電磁バルブＶ１０が設けられる。電磁バルブＶ１３については後述する。

【0043】

ＳＬＳ溶血剤を収容する試薬容器Ｒ３と第２チャンバ５５の間の流路には、定量部３９と、電磁バルブＶ１１、Ｖ１２と、が設けられている。定量部３９としては、シリンジポンプが用いられる。なお、シリンジポンプに代えて、例えばダイヤフラムポンプも使用可能である。電磁バルブＶ１１、Ｖ１２は、流路を開閉する。定量部３９及び電磁バルブＶ１１、Ｖ１２は、試薬容器Ｒ３内のＳＬＳ溶血剤を、第２チャンバ５５に、定量的に送り込む。

【0044】

第２チャンバ５５は、第２チャンバ５５内の液体を攪拌するために、第２チャンバ５５内にエアを供給するポンプ５６Ｂに接続されている。

【0045】

検体吸引機構４５０は、吸引管２０及び定量部２１を有する。吸引管２０は先端が鋭利に形成されている。検体吸引機構４５０が採血管１００を下降することで、吸引管２０が採血管１００を塞ぐ蓋１００ａを穿刺し、内部に挿入される。吸引管２０が採血管１００の内部に挿入された状態で定量部２１が陰圧を生成することにより、採血管１００に収容された血液試料が吸引管２０内に吸引される。検体吸引機構４５０は、吸引管２０を上方に移動させて採血管１００から吸引管２０を抜き出し、吸引管２０を第１チャンバ４２０の上方へ水平移動させる。検体吸引機構４５０は、第１チャンバ４２０に対して吸引管２０を下降させ、定量部２１が陽圧を生成することにより、吸引された血液試料を第１チャンバ４２０に吐出する。検体吸引機構４５０は、吸引管２０を上方に移動させて第２チャンバ５５の上方へ水平移動させ、第１チャンバ４２０のときと同様にして、血液試料を第２チャンバ５５に吐出する。

【0046】

第１チャンバ４２０は、ＦＣＭ検出部４６０（図４参照）に接続されている。第１チャンバ４２０に吐出された血液試料は、上述の試薬容器２００に収容された白血球染色試薬および試薬容器Ｒ１に収容された溶血剤と混合され、測定試料が調製される。より詳しくは、赤血球が溶血剤によって溶血され、かつ白血球が第１蛍光色素および第２蛍光色素によって染色された測定試料が調製される。このような測定試料は、例えば次のようにして調製される。まず、第１チャンバ４２０に溶血剤が供給され、次に第１チャンバ４２０に血液試料が吐出される。第１チャンバ４２０にエアが供給され、混合物が撹拌される。これにより、溶血剤によって赤血球が溶血される。次に、第１チャンバ４２０に白血球染色試薬が供給される。第１チャンバ４２０にエアが供給され、混合物が撹拌される。第１チャンバ４２０内で反応が進められ、蛍光色素による染色が行われる。反応時間は、例えば１分未満であり、より好ましくは５０秒未満であり、より好ましくは４５秒未満である。これにより、血液に含まれる白血球が第１蛍光色素および第２蛍光色素によって染色された測定試料が得られる。ＦＣＭ検出部４６０は図示しないポンプに接続されており、ポンプの駆動により第１チャンバ４２０内の測定試料がＦＣＭ検出部４６０に供給される。ＦＣＭ検出部４６０は、第１蛍光色素に対応する蛍光および第２蛍光色素に対応する蛍光を含む複数の光信号を白血球から取得する。

【0047】

第２チャンバ５５は、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１と、ＨＧＢ検出部４６２に接続されている。電磁バルブＶ１３は、第２チャンバ５５からの測定試料のＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６への送液と、ＨＧＢ検出部４６２への送液とを切り替える。ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１と、ＨＧＢ検出部４６２は、図示しないポンプに接続されており、ポンプの駆動により第２チャンバ５５内の測定試料が、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１と、ＨＧＢ検出部４６２のそれぞれに供給される。第２チャンバ５５は、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出のための測定試料と、ＨＧＢ検出のための測定試料の両方の調製に用いられる。このような試料の調製手順の一例を説明する。まず、試薬容器Ｒ２から第２チャンバ５５へ希釈液が供給される。次に、第２チャンバ５５に血液試料が吐出される。これにより、血液が希釈された測定試料が得られる。これがＲＢＣ／ＰＬＴ検出のための測定試料となる。第２チャンバ５５の測定試料の一部がＲＢＣ／ＰＬＴ検出部４６１へ送液され、電気抵抗式検出が行われる。次に、第２チャンバ５５に残っている測定試料に、試薬容器Ｒ３からＳＬＳ溶血剤が供給される。これにより、赤血球が溶血するとともに、ヘモグロビンがＳＬＳヘモグロビンに転化された測定試料が得られる。この測定試料が、ＨＧＢ検出部４６２へ送液される。なお、図５の例では、ＲＢＣ／ＰＬＴ検出のための測定試料と、ＨＧＢ検出のための測定試料を共通の第２チャンバ５５で調製しているが、それぞれ別々のチャンバで調製してもよい。

【0048】

このような構成を有する分析システム４０００（図１参照）は、赤血球数（ＲＢＣ）、白血球数（ＷＢＣ）、血小板数（ＰＬＴ）、ヘモグロビン濃度（ＨＧＢ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）、平均赤血球容積（ＭＣＶ）、平均赤血球血色素量（ＭＣＨ）、及び平均赤血球血色素濃度（ＭＣＨＣ）の少なくとも８つのパラメータからなるＣＢＣ（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｂｌｏｏｄ Ｃｏｕｎｔ）項目を測定可能に構成されてもよい。さらに、分析システム４０００は、ＣＢＣ項目に加えて、白血球を複数の亜集団に分類するＤＩＦＦ項目を測定可能に構成されてもよい。

【0049】

＜試料調製部に関する変形例＞
図６は、第１試料調製部４４０Ａの他の一例を示す模式図である。なお、図６において、図５中の要素と同様の要素は図示を省略している。上記の図５に示す例では、第１蛍光色素と第２蛍光色素を含む試薬を１つの試薬容器２００内に収容し、１つの試薬容器２００内の試薬を１つの送液機構４３０によってチャンバ４２０内に送液するように構成された第１試料調製部４４０Ａを例示した。図６に示す変形例の第１試料調製部４４０Ａでは、第１蛍光色素を含む試薬と第２蛍光色素を含む試薬とをそれぞれ個別の試薬容器２００Ａ、２００Ｂに収容し、各試薬容器２００Ａ、２００Ｂ 内の試薬をそれぞれ個別の第１および第２の送液機構４３０ａ、４３０ｂによってチャンバ４２０内に送液するように構成されている。

【0050】

図６の第１試料調製部４４０Ａにおいては、試薬容器ホルダに装着された第１および第２の蛍光色素の何れか一方を含む２つの試薬を検体と混合し、第１および第２の蛍光色素によって細胞が染色された測定試料を調製する１以上のチャンバ４２０が備えられる。第１の蛍光色素を含む試薬が収容された第１の試薬容器２００Ａは、試薬容器ホルダ４４２の第１のホルダ部に装着され、第２の蛍光色素を含む試薬が収容された第２の試薬容器２００Ｂは、試薬容器ホルダ４４２の第２のホルダ部に装着される。

【0051】

第１の送液機構４３０ａは、第１試薬容器２００Ａの試薬をチャンバ５４に送液するために設けられている。第１送液機構４３０ａの構成は図３を参照して説明したとおりである。第２の送液機構４３０ｂは、第２試薬容器２００Ｂの試薬をチャンバ５４に送液するために設けられている。第２送液機構４３０ｂの構成は、第１送液機構と同様である。２つの送液機構４３０ａ、４３０ｂの送液管４３１は、流路の途中で合流し、チャンバ４２０に接続されている。なお、図６の例では、２つの送液管が合流している例を示しているが、２つの送液管が個別にチャンバ４２０に接続されてもよい。

【0052】

図６の構成では、第１の蛍光色素を含む試薬と、第２の蛍光色素を含む試薬が、それぞれ異なる試薬容器２００Ａ、２００Ｂに収容され、異なる２つの送液機構によってチャンバ４２０に供給されて、検体と混合される。この構成によっても、検体に含まれる血球成分を２つの蛍光色素によって染色する系を構築することができる。

【0053】

図７はＦＣＭ検出部４６０の光学系の一例を示す構成説明図である。図７に示すように、ＦＣＭ検出部４６０は、互いに波長が異なる第１光源４１１１ａ、第２光源４１１１ｂと、フローセル４１１３と、ダイクロイックミラー４１１８ａ、４１１８ｂ、４１１８ｃと、側方散乱光受光素子４１２１ａ、４１２１ｂと、前方散乱光受光素子４１１６と、側方蛍光受光素子４１２２ａ、４１２２ｂとを備える。図７の例では、光源が、第１の蛍光色素を励起させるための第１光源４１１１ａおよび第２の蛍光色素を励起させるための第２光源４１１１ｂから構成されている。

【0054】

ＦＣＭ検出部４６０は、第１光源４１１１ａによる側方散乱光および側方蛍光に各々対応する複数の信号で構成される前記第１の信号と、第２光源４１１１ｂによる前方散乱光、側方散乱光および側方蛍光に各々対応する複数の信号で構成される前記第２の信号と、を取得する。上述のとおり、ＦＣＭ検出部４６０は、第１試料調製部４４０Ａの第１チャンバ４２０に接続されている（図５参照）。第１チャンバ４２０において調製した測定試料が、ＦＣＭ検出部４６０のフローセル（シースフローセル）４１１３に流される。図７の例では、紙面に対して垂直方向に測定試料が流される。フローセル４１１３に測定試料が流れている状態で、第１光源４１１１ａおよび第２光源４１１１ｂがフローセル４１１３に光を照射する。より詳しくは、第１光源４１１１ａから発せられた光がダイクロイックミラー４１１８ａによって反射されてフローセル４１１３に照射される。第２光源４１１１ｂから発せられた光がダイクロイックミラー４１１８ａを透過して、フローセル４１１３に照射される。

【0055】

ＦＣＭ検出部４６０の第１光源４１１１ａおよび第２光源４１１１ｂは特に限定されず、蛍光色素の励起に好適な波長の光源が選択される。第１光源４１１１ａは、例えば、第１波長の光を照射可能であり、第２光源４１１１ｂは、第１波長よりも長い波長である第２波長の光を照射可能である。例えば、第１波長は３１５～４９０ｎｍであり、好ましくは４００～４５０ｎｍであり、より好ましくは４００～４１０ｎｍである。第２波長は６１０～７５０ｎｍであり、好ましくは６２０～７００ｎｍであり、より好ましくは６３３～６４３ｎｍである。そのような第１および第２光源４１１１ａ、４１１１ｂとしては、例えば、半導体レーザ光源、アルゴンレーザ光源、ヘリウム－ネオンレーザ等の気体レーザ光源、水銀アークランプなどが使用可能である。特に、半導体レーザ光源は、気体レーザ光源に比べて安価であるため好適である。上述のように、第１光源４１１１ａおよび第２光源４１１１ｂについて、照射する光の波長帯域が離れたものを選択することで、各光源に各々対応する蛍光色素からの蛍光の波長帯域の重なりが小さい色素を選択しやすくなる。蛍光色素から発せられる蛍光の波長帯域の重なりが大きい場合、後述する漏れ込みに対応する必要があるが、蛍光の波長帯域の重なりが小さい（もしくは重なりがない）蛍光色素が選択できることで、漏れ込みへの対応が不要となる。

【0056】

前方散乱光受光素子４１１６は、第２光源４１１１ｂから照射された光に基づいて細胞から発せられる前方散乱光を受光するように配置されている。前方散乱光受光素子４１１６は、例えば、第２光源４１１１ｂから照射された光に対応する前方散乱光のみを受光するように構成されている。前方散乱光受光素子４１１６は、例えばフォトダイオードである。この例では、受光素子４１１６は第２光源４１１１ｂから照射された第２波長の前方散乱光を受光するが、代替的に、第１光源４１１１ａから照射された第１波長の前方散乱光を受光してもよい。

【0057】

側方散乱光受光素子４１２１ａは、第１光源４１１１ａからの光に対応する側方散乱光を受光するように配置されている。第１光源４１１１ａから照射された光に対応する側方散乱光（第１側方散乱光）は、ダイクロイックミラー４１１８ｂによって反射され、側方散乱光受光素子４１２１ａによって受光される。側方散乱光受光素子４１２１ａは、例えばフォトダイオードである。

【0058】

側方散乱光受光素子４１２１ｂは、第２光源４１１１ｂからの光に対応する側方散乱光を受光するように配置されている。第２光源４１１１ｂから照射された光に対応する側方散乱光（第２側方散乱光）は、ダイクロイックミラー４１１８ｃによって反射され、側方散乱光受光素子４１２１ｂによって受光される。側方散乱光受光素子４１２１ｂは、例えばフォトダイオードである。

【0059】

側方蛍光受光素子４１２２ａは、第１光源４１１１ａからの光に対応する蛍光、すなわち第１光源４１１１ａからの第１波長の光によって第１蛍光色素が励起されて生じた光を受光するように配置されている。第１光源４１１１ａから照射された光に対応する側方蛍光（第１側方蛍光）は、ダイクロイックミラー４１１８ｂを透過して側方蛍光受光素子４１２２ａによって受光される。側方蛍光受光素子４１２２ａは、例えばアバランシェフォトダイオードである。

【0060】

側方蛍光受光素子４１２２ｂは、第２光源４１１１ｂからの光に対応する蛍光、すなわち第２光源４１１１ｂからの第２波長の光によって第２蛍光色素が励起されて生じた光を受光するように配置されている。第２光源４１１１ｂから照射された光に対応する側方蛍光（第２側方蛍光）は、ダイクロイックミラー４１１８ｃを透過して側方蛍光受光素子４１２２ｂによって受光される。側方蛍光受光素子４１２２ｂは、例えばアバランシェフォトダイオードである。なお、前方散乱光受光素子４１１６、側方散乱光受光素子４１２１ａ、４１２１ｂ、側方蛍光受光素子４１２２ａ、４１２２ｂとして光電子増倍管を用いてもよい。

【0061】

前方散乱光受光素子４１１６、側方散乱光受光素子４１２１ａ、４１２１ｂ、側方蛍光受光素子４１２２ａ、４１２２ｂは、それぞれ、受光強度に応じたパルスを含む波形状の電気信号（受光信号ともいう）を出力する。典型的には、受光信号の個々のパルスが一つの細胞（例えば白血球）に対応する。出力された受光信号は、それぞれ、アナログ処理部４８１に入力される。アナログ処理部４８１は、ＦＣＭ検出部４６０から入力されるアナログ信号に対してノイズ除去、平滑化等の処理を行い、処理後のアナログ信号をＡ／Ｄ変換部４８１ａに対して出力する。その他のアナログ処理部４８２、４８３（図４参照）はアナログ処理部４８１と同様に構成されている。

【0062】

Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、アナログ処理部４８１から出力されたアナログ信号をデジタル信号に変換する。Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、検体の測定開始から測定終了までのアナログ信号をデジタル信号に変換する。ある測定チャネルでの測定によって複数種類のアナログ信号（例えば、前方散乱光強度、第１側方散乱光強度、第１蛍光強度、第２側方散乱光強度、及び第２蛍光強度にそれぞれ対応するアナログ信号）が生成される場合、Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、それぞれのアナログ信号の測定開始から測定終了までをデジタル信号に変換する。Ａ／Ｄ変換部４８１ａには、例えば、５種類のアナログ信号（すなわち前方散乱光信号、第１側方散乱光信号、第１蛍光信号、第２側方散乱光信号及び第２蛍光信号）が入力される。Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、入力されたアナログ信号のそれぞれをデジタル信号に変換する。

【0063】

Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、例えば、所定のサンプリングレート（例えば、１０ナノ秒間隔で１０２４ポイントのサンプリング、８０ナノ秒間隔で１２８ポイントのサンプリング、又は１６０ナノ秒間隔で６４ポイントのサンプリング等）で、アナログ信号をサンプリングする。Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、例えば、フローセル４１１３を流れる個々の細胞に対応する５種類のアナログ信号に対してサンプリング処理を実行することで、各有形成分について前方散乱光信号の波形データ、第１側方散乱光信号の波形データ、第１蛍光信号の波形データ、第２側方散乱光信号の波形データ、および第２蛍光信号の波形データを生成する。Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、生成した波形データのそれぞれにインデックスを付与する。生成された波形データは、例えば、一つの検体に含まれるＮ個の細胞に各々対応する信号を有するデジタル信号になる。これによりＮ個の細胞から得られる５種類のアナログ信号（前方散乱光信号、第１、第２側方散乱光信号および第１、第２蛍光信号）に対応する５つのデジタル信号が生成される（図３９参照）。

【0064】

Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、アナログ信号から波形データを生成することに加えて、アナログ信号のパルスから個々の細胞の形態的特徴を表す特徴パラメータ、例えば、ピーク値、パルス幅、パルス面積を計算する。

【0065】

図８は、ＦＣＭ検出部の光学系の他の例を示す構成説明図である。図８に示すように、ＦＣＭ検出部４６０ｘの光源は、第１の蛍光色素および第２の蛍光色素を励起させる一つの光源４１１１から構成されてもよい。この場合、ＦＣＭ検出部４６０ｘは、光源４１１１による前方散乱光、側方散乱光および側方蛍光に各々対応する複数の信号で構成される前記第１の信号と、光源４１１１による側方蛍光に対応する第２の信号と、を取得する。

【0066】

この場合、一つの光源４１１１から、例えば、所定波長の光がフローセル４１１３に対して照射される。フローセル４１１３を流れる測定試料に含まれる細胞は、上述の例と同様に、励起される蛍光色素から放出される蛍光の波長が異なる複数種類の蛍光色素で染色されている。この例の場合、複数種類の蛍光色素は、所定波長（例えば４８８ｎｍ）の光が照射されることによって励起される波長が異なる複数種類の蛍光色素が用いられる。励起される波長が異なる複数種類の蛍光色素は、例えば、各蛍光色素に一つの光源からの光が照射されたことにより励起されて放出する蛍光の色が異なることを意味する。

【0067】

図８に示すＦＣＭ検出部４６０ｘの光学系では、測定試料に含まれる細胞を複数の蛍光色素で染色し、一つの光源４１１１から光を細胞に照射して複数の蛍光色素から発せられたときの各蛍光を検出することができる。この場合、一つの光源４１１１から照射される光は単一波長を有するため、一つの光源４１１１から光を細胞に照射したとき、その光の単一波長に対応する一つの側方散乱光が発せられる。したがって、図８に示すＦＣＭ検出部４６０ｘの光学系では、ダイクロイックミラーについては一つのダイクロイックミラー４１１８が設けられ、その他の構成については図７で示した光学系と概ね同様である。

【0068】

蛍光色素の各々の蛍光は、それぞれ固有のスペクトルを有する。そのため、光学系（例えば、図７中のダイクロイックミラー４１１８、側方蛍光受光素子４１２２ａ、４１２２ｂ）によって単一波長域に分離した場合、一つの細胞中の標的の分子に結合した一つの蛍光色素以外の他の蛍光色素から発せられた蛍光が側方蛍光受光素子４１２２ａ、４１２２ｂのそれぞれに漏れ込むことがある。例えば、図９に示す例のように、単一波長の光を複数の蛍光色素に照射することで、各蛍光色素が励起される場合、各蛍光色素が励起されて放出する各蛍光の波長帯域の重なりが大きくなることがある。蛍光の波長帯域の重なりの例を示す図９のように、蛍光の波長帯域に重なりがある複数の蛍光色素が選択される場合、例えば、蛍光の漏れ込みに対する対応が実施される。

【0069】

図９は異なる２つの蛍光色素から発せされた蛍光が互いに漏れ込んでいる例を示す図である。図９に示す例では、蛍光色素Ｆ１と、蛍光色素Ｆ２の２つの色素から発せされた各蛍光が互いに漏れ込んでいる例を示す。図９に例示されたグラフの縦軸は蛍光高度を示し、横軸は波長を示す。蛍光色素Ｆ１から発せられた光は、図９の波長帯域（ａ）の光が一方の側方蛍光受光素子により検出される。また、蛍光色素Ｆ２から発せられた光は、図９の波長帯域（ｂ）の光が他方の側方蛍光受光素子により検出される。蛍光色素Ｆ１に対応する一方の側方蛍光受光素子によって検出される波長帯域（ａ）は、蛍光色素Ｆ２によって発せられる蛍光の波長帯域を含む。また、蛍光色素Ｆ２に対応する他方の側方蛍光受光素子によって検出される波長帯域（ｂ）は、蛍光色素Ｆ１によって発せられる蛍光の波長帯域を含む。そこで、波長帯域（ａ）の蛍光（蛍光色素Ｆ１に対応）のうち、蛍光色素Ｆ２に対応する部分を除く補正をすることにより、蛍光色素Ｆ１による蛍光の測定値をより正確に得ることができる。また、波長帯域（ｂ）の蛍光（蛍光色素Ｆ２に対応）のうち、蛍光色素Ｆ１に対応する部分を除く補正をすることにより、蛍光色素Ｆ２による蛍光の測定値をより正確に得ることができる。

【0070】

図９に示された蛍光の漏れ込みを補正するため、蛍光色素Ｆ１の陽性コントロールおよび蛍光色素Ｆ２の陽性コントロールが用いられる。蛍光色素Ｆ１の陽性コントロールには、例えば、蛍光色素Ｆ１が付加された粒子を含有するコントロール試薬を用いる。蛍光色素Ｆ２の陽性コントロールには、例えば、蛍光色素Ｆ２が付加された粒子を含有するコントロール試薬を用いる。

【0071】

図８に例示された光学系を備えた分析システムによる蛍光色素Ｆ１の陽性コントロールの測定は、検体の測定の前に次のように行われる。光源４１１１からの光（単一波長の光）が、フローセル４１１３を流れる陽性コントロール中の粒子に照射される。粒子に光が照射されることによって生じた蛍光が、各側方蛍光受光素子４１２２ａ、４１２２ｂによって検出される。例えば、側方蛍光受光素子４１２２ａは、蛍光色素Ｆ１から発せられる蛍光の検出に対応し、側方蛍光受光素子４１２２ｂは、蛍光色素Ｆ２から発生される蛍光の検出に対応する。この場合、蛍光色素Ｆ１の陽性コントロール中の粒子から発せされた蛍光のうち、側方蛍光受光素子４１２２ｂで検出された蛍光が漏れ込みとなる。例えば、蛍光色素Ｆ１の陽性コントロール中の粒子から発生された蛍光のうち、側方蛍光受光素子４１２２ａで検出された蛍光強度が“１００”であり、側方蛍光受光素子４１２２ｂで検出された蛍光強度が“５”であった場合、蛍光色素Ｆ１からの蛍光の５％が４１２２ｂに漏れ込んでいる。例えば、蛍光色素Ｆ２の陽性コントロール中の粒子から発せられた蛍光のうち、側方蛍光受光素子４１２２ａで検出された蛍光強度が“１０”であり、側方蛍光受光素子４１２２ｂで検出された蛍光強度が“１００”であった場合、蛍光色素Ｆ２からの蛍光の１０％が側方蛍光受光素子４１２２ａに漏れ込んでいる。この結果をまとめると、下記の表１のようになる。この表１を、以降、「コンペンセーションマトリックス」と呼ぶことがある。

【0072】

【表1】

【0073】

次に、各蛍光色素Ｆ１、Ｆ２で染色された細胞を含む測定試料から得られた測定値を、前記のコンペンセーションマトリックスを用いて補正する例を説明する。測定値の補正の例は、以下のようになる。
・側方蛍光受光素子４１２２ａによる蛍光色素Ｆ１の補正された蛍光強度＝側方蛍光受光素子４１２２ａで測定された蛍光強度 － （蛍光色素Ｆ２の陽性コントロールを側方蛍光受光素子４１２２ｂで測定したときの蛍光強度の５％）
・側方蛍光受光素子４１２２ｂによる蛍光色素Ｆ２の補正された蛍光強度＝側方蛍光受光素子４１２２ｂで測定された蛍光強度 － （蛍光色素Ｆ１の陽性コントロールを側方蛍光受光素子４１２２ａで測定したときの蛍光強度の１０％）

【0074】

前記の例では、蛍光色素Ｆ１の陽性コントロールの蛍光を側方蛍光受光素子４１２２ａで検出した場合の蛍光強度は“１００”であり、蛍光色素Ｆ２の陽性コントロールの蛍光を側方蛍光受光素子４１２２ｂで検出した場合の蛍光強度は“１００”である。よって、補正後の蛍光強度は、それぞれ、以下になる。
・側方蛍光受光素子４１２２ａによる蛍光色素Ｆ１の補正された蛍光強度＝側方蛍光受光素子４１２２ａで測定された蛍光強度１００ － １０
・側方蛍光受光素子４１２２ｂによる蛍光色素Ｆ２の補正された蛍光強度＝側方蛍光受光素子４１２２ｂで測定された蛍光強度１００ － ５

【0075】

図７及び図８に例示した光学系では、第１蛍光色素及び第２蛍光色素が励起されて生じる蛍光として、照射光の進行方向に対して側方（図７及び図８の例では進行方向に対して約９０°）に生じる蛍光（側方蛍光）を検出する例を示したが、この例には限られない。例えば、照射光の進行方向に対して前方に生じる蛍光を検出してもよいし、照射光の進行方向に対して直角ではない一定の角度、例えば２０～９０°に生じる蛍光を検出してもよい。

【0076】

図１０は、分析ユニット３００Ｘの構成の一例を示すブロック図である。図１０に示すように、分析ユニット３００Ｘは、インターフェース部３００６を介して測定ユニット４００と電気的に接続される。インターフェース部３００６は、例えば、ＵＳＢインターフェースである。分析ユニット３００Ｘは、プロセッサ３００１、メインメモリ３０１７、バス３００３、記憶部３００４、前記インターフェース部３００６、表示部３０１５および操作部３０１６を備える。分析ユニット３００Ｘは、例えば、パーソナルコンピュータ（図１の分析ユニット３００Ｘを参照）によって構成されており、記憶部３００４に格納されたプログラムを実行することで、分析システム４０００の測定ユニット４００を制御する。分析ユニット３００Ｘは、例えば、分析用のプログラムを実行し、測定ユニット４００で取得されたデータを分析する。分析ユニット３００Ｘは、分析結果を表示部３０１５に表示する。分析ユニット３００Ｘは、例えば図７を参照して説明した例では、測定ユニット４００がＦＣＭ検出部４６０によって個々の細胞から取得した前方散乱光強度、第１側方散乱光強度、第１蛍光強度、第２側方散乱光強度、及び第２蛍光強度のうちの少なくとも１つ、好ましくは複数、に対応する波形データを学習済みのＡＩアルゴリズムに入力することで細胞の分類を行ってもよい。あるいは、分析ユニット３００Ｘは、前方散乱光強度、第１側方散乱光強度、第１蛍光強度、第２側方散乱光強度、及び第２蛍光強度に基づく個々の細胞の特徴パラメータ（ピーク値、パルス幅、パルス面積）に基づいて、細胞の分類を行ってもよい。例えば、複数の特徴パラメータを用いて粒子を複数の種類に分類する方法としては、複数のパラメータを軸とする多次元の座標空間に粒子をプロットし、少なくともいくつかの粒子を複数の種類に対応する複数の集団に分類し、各集団の重心位置と粒子との距離に基づいて各集団に対する各粒子の帰属度を求め、帰属度に基づいて粒子を再分類することで複数の粒子を複数の種類に分類する方法が採用できる。このような分類方法は、たとえば米国特許第5,555,198号に記載されている。米国特許第5,555,198号は、本明細書に参照としてここに組み込まれる。あるいは、一つの測定試料に含まれる一部の細胞に対してはＡＩアルゴリズムに基づく分類を行い、他の細胞に対しては特徴パラメータに基づく分類を行ってもよい。

【0077】

プロセッサ３００１はＣＰＵ（Ｃｅｎｔｒａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｕｎｉｔ）であり、記憶部３００４からメインメモリ３０１７に展開されたプログラムを実行する。記憶部３００４は、例えば、ハードディスク、ＳＳＤ（Ｓｏｌｉｄ Ｓｔａｔｅ Ｄｒｉｖｅ）である。記憶部３００４には、例えば、測定ユニット４００を制御するためのプログラム、測定ユニット４００が取得したデータを分析するためのプログラムなどが記憶されている。表示部３０１５は、コンピュータスクリーンを備える。表示部３０１５はインターフェース部３００６とバス３００３を介してプロセッサ３００１に電気的に接続されている。表示部３０１５には、例えば、測定ユニット４００で取得されたデータの分析結果が表示される。

【0078】

操作部３０１６は、キーボード、マウスまたはタッチパネルを含むポインティングデバイスを備える。医師や検査技師等のユーザは、操作部３０１６を操作することで、分析システム４０００に測定オーダーを入力し、測定オーダーにしたがって測定指示を入力することができる。操作部３０１６は、ユーザから検査結果を表示する指示を受け付けることもできる。ユーザは、操作部３０１６を操作し、検査結果に関する様々な情報、例えば、グラフ、チャート、検体に付与されたフラグ情報を閲覧することができる。上述の測定ユニット４００は、インターフェース部３００６を介して分析ユニット３００Ｘに電気的に接続されている。

【0079】

図１１は、分析システム４０００の他の構成例を示す斜視図である。図１～図１０に示す構成例では測定ユニット４００と分析ユニット３００Ｘとが別体として設けられた分析システム４０００を例示したが、図１１に示すように分析システム４００１は測定ユニット４００内に分析部３００Ｘが設けられたものであってもよい。この構成によれば、分析システム４００１全体がコンパクトなものとなる。

【0080】

図１２は、測定ユニットの他の一例の構成を示すブロック図である。図２、図５及び図６の例では、ＦＣＭ検出部４６０によって測定可能な測定系（測定チャネルともいう）が一つである例を示した。図１２の構成例では、５つの測定チャネルが設けられている例を示している。

【0081】

第１試料調製部４４０Ａは、５つのチャンバ５４ａ～５４ｅを備える。チャンバ５４ａ～５４ｅは、それぞれ、ＤＩＦＦ、ＲＥＴ、ＷＰＣ、ＰＬＴ－Ｆ、ＷＮＲの測定チャネルにおいて用いられる。各チャンバ５４ａ～５４ｅには、各測定チャネルに対応する試薬である溶血剤を収容した溶血剤容器と染色液を収容した染色液容器がそれぞれ流路を介して送液可能とされている。一つのチャンバおよびチャンバに送液可能に設けられた溶血剤容器および染色液容器によって、一つの測定チャネルが構成されている。例えば、ＤＩＦＦ測定チャネルは、ＤＩＦＦ測定用試薬であるＤＩＦＦ溶血剤を収容した溶血剤容器およびＤＩＦＦ染色液を収容した染色液容器と、これらと流路を介して繋がったＤＩＦＦチャンバ５４ａとによって構成されている。他の測定チャネルも同様に構成されている。なお、ここでは一つの測定チャネルが、１種類の溶血剤と１種類の染色液の両方をチャンバに供給するように構成された場合を例示しているが、この構成に限定されるものではない。例えば、１種類の溶血剤と１種類の染色液の両方を、異なる複数のチャンバに供給するように複数の測定チャネルを構成してもよい。言い換えると、複数の測定チャネルによって一つの試薬（１種類の溶血剤と１種類の染色液）が共用されるようにしてもよく、例えば、五つの測定チャネルのうち、二つはＤＩＦＦの測定チャネルであってもよい。さらに、測定チャネルは一つでもよく、あるいは、例えば、ＤＩＦＦの測定チャネルのみが二つ設けられた構成でもよい。

【0082】

検体吸引機構４５０（図２、図４、図５参照）は、血液検体を収容した検体容器Ｔから血液検体を吸引し、装置機構部４５５（図４参照）による水平・上下移動によって、チャンバ５４ａ～５４ｅのうち、オーダーに対応する測定チャネルのチャンバに上方位置まで移動し、吸引した血液検体をチャンバ内に吐出する。試料調製部４４０は、血液検体が吐出されたチャンバに、対応する溶血剤と染色液を供給し、チャンバ内で血液検体と溶血剤と染色液を混合することで測定試料を調製する。調製された測定試料は、流路を介してチャンバからＦＣＭ検出部４６０に供給され、フローサイトメトリー法による細胞の測定が行われる。

【0083】

上述の測定チャネル（ＤＩＦＦ、ＲＥＴ、ＷＰＣ、ＰＬＴ－Ｆ、ＷＮＲ）は、測定オーダーに含まれる測定項目に対応している。例えば、ＤＩＦＦは白血球の分類に関する測定項目に対応する。ＲＥＴは網状赤血球（レチクロサイト）に関する測定項目に対応する。ＷＰＣは、異常白血球の測定に関する測定項目に対応する。ＰＬＴ－Ｆは血小板の光学測定に関する測定項目に対応する。ＷＮＲは白血球と有核赤血球に関する測定項目に対応する。上述の測定チャネル（ＤＩＦＦ、ＲＥＴ、ＷＰＣ、ＰＬＴ－Ｆ、ＷＮＲ）は、ＦＣＭ検出部４６０によって測定される。

【0084】

図１３は、測定ユニット４０のカバー４４２を開放した状態を示す図である。図１４は測定ユニット４００の試薬容器ホルダ６０を示した斜視図であり、図１５は図１４に示した試薬容器ホルダ６０を示した正面図である。分析システム４０００の測定ユニット４００（図１参照）の前面側には、開閉可能な前面カバー４４２が設けられている（図１３参照）。試薬容器ホルダ６０は、測定ユニット４００の前面上部に配置されており、図１３に示すように、カバー４４２を開放することにより、試薬容器ホルダ６０が露出し、ユーザによるアクセスが可能となる。つまり、ユーザが試薬容器ホルダ６０への試薬容器２００の設置と、試薬容器ホルダ６０からの試薬容器２００の取り出しが可能となる。

【0085】

図１４と図１５に示すように、試薬容器ホルダ６０は、五つのホルダ部６０ａ、６０ｂ、６０ｃ、６０ｄおよび６０ｅを含み、合計５つ（５種類）の試薬容器２００（または３００）を保持するように構成されている。試薬容器ホルダ６０に保持される試薬容器２００（または３００）は、ＦＣＭ検出部４６０によって複数の測定項目を測定するための、それぞれ異なる種類の試薬（染色液）を収容している。試薬容器の色は、例えば黒である。試薬容器は、試薬の種類に応じて大型（約１００ｍＬ）の試薬容器２００（図２２参照）と、小型（約２０ｍＬ）の試薬容器３００（図２５参照）とが用いられる。試薬容器の容量は前記に限定されず、例えば、２０ｍｌより少ない容量、１００ｍｌより少ない容量、１００ｍｌよりも多い容量でもよい。例えば、約１０ｍｌ、約４０ｍｌ、約８０ｍｌ、約３００ｍｌであってもよい。各ホルダ部６０ａ～６０ｅは、例えば、試薬容器２００または３００のいずれでも保持可能なように構成されている。したがって、五つのホルダ部６０ａ～６０ｅはそれぞれ同様の構成を有し、たとえば三つのホルダ部６０ａ～６０ｃには大型の試薬容器２００がセットされるとともに、二つのホルダ部６０ｄおよび６０ｅには小型の試薬容器３００がセットされうる。ホルダ部６０ａ～６０ｅは、それぞれ、シャーシ６１と、試薬容器保持部６２と、試薬容器保持部６２を開閉するためのカバー６３と、上述した吸引管６４と、吸引管昇降機構６５とを含んでいる。

【0086】

試薬容器保持部６２は、シャーシ６１の下部（図１４、図１５参照）に設けられている。試薬容器保持部６２は、図１５に示すように、高さがＨであり、図１６に示すように、幅Ｗ１１を有する第１受入部６２１と、第１受入部６２１と連続し、第１受入部６２１から所定角度θ２で拡がる中間受入部６２２と、中間受入部６２２と連続する第２受入部６２３とを含んでいる。第１受入部６２１は、図１６と図１７に示すように、試薬容器２００（３００）の後述する第１収容部２１０（３１０）を受け入れ可能であるとともに、ユーザの指の進入を禁止する幅（幅Ｗ１１）を有する。なお、指とは、例えば、平均的な太さを有する成人の指を意味し、例えば、幅Ｗ１１は１０ｍｍである。また、第２受入部６２３は、幅Ｗ１１よりも大きい幅Ｗ１２を有する。図１６と図１７に示すように、第１受入部６２１は試薬容器保持部６２の最も奥側（矢印Ｙ２方向側）に配置されている。試薬容器２００（３００）は、第１収容部２１０（３１０）の後述する進入部２１２（３１２）側から試薬容器保持部６２の奥側に向かって挿入される。したがって、試薬容器保持部６２は、試薬容器２００（３００）の進入部２１２（３１２）が最も奥側（矢印Ｙ２方向側）になるように挿入された状態で、試薬容器２００（３００）を保持するように構成されている。

【0087】

また、図１６～図１８に示すように、試薬容器保持部６２は、試薬容器２００（３００）の第１収容部２１０（３１０）の両側面２１４（３１４）をガイドして第１受入部６２１に案内する一対の案内部材６２７を含んでいる。案内部材６２７は、第１受入部６２１に試薬容器２００（３００）の第１収容部２１０（３１０）を案内する第１案内部６２７ａと、中間受入部６２２に対応する中間案内部６２７ｂと、第２受入部６２３に試薬容器２００（３００）の後述する第２収容部２２０（３２０）を案内する第２案内部６２７ｃとを有する。なお、案内部材６２７は、シャーシ６１の一部（両内側面）によって形成されている。前記の第１受入部６２１、中間受入部６２２および第２受入部６２３は、それぞれ対応する一対の第１案内部６２７ａの間の空間、一対の中間案内部６２７ｂの間の空間および一対の第２案内部６２７ｃの間の空間により形成されている。したがって、第１受入部６２１の幅Ｗ１１は一対の第１案内部６２７ａの間の幅と等しく、第２受入部６２３の幅Ｗ１２は一対の第２案内部６２７ｃの間の幅と等しい。

【0088】

一対の案内部材６２７は、試薬容器２００（３００）の第１収容部２１０（３１０）の両側面２１４（３１４）の高さＨ１（図２４と図２７参照）と略等しい高さＨ（図１４参照）を有し、試薬容器２００（３００）の第１収容部２１０（３１０）の両側面２１４（３１４）の下端から上端までにわたってそれぞれガイド可能に構成されている。さらに、一対の案内部材６２７は、第１収容部２１０（３１０）の外形形状を反映した形状を有し、試薬容器２００（３００）の第１収容部２１０（３１０）の両側面２１４（３１４）全体をガイド可能なように構成されている。また、中間案内部６２７ｂと第２案内部６２７ｃとは、大型の試薬容器２００の外形形状を反映した形状を有し、第２収容部２２０の先端側（第１収容部２１０側）半分の両側面をガイド可能なように構成されている。この大型の試薬容器２００の第２収容部２２０は、第１収容部２１０の幅Ｗ２１より大きな幅Ｗ２２を有し、第１案内部６２７ａは、第２収容部２２０の幅Ｗ２２より小さい幅Ｗ１１で設けられている。

【0089】

また、図１８に示すように、試薬容器保持部６２は、試薬容器２００（３００）を支持する支持部６２４と、支持部６２４を回動可能に支持する回動機構６２５とを含んでいる。支持部６２４は、試薬容器２００（３００）の前面（第１収容部２１０（３１０）の先端面、図１６と図１７参照）と当接する前側部６２４ａと、試薬容器２００（３００）の下面と当接する下側部６２４ｂとを一体的に有する板状部材である。すなわち、支持部６２４は、試薬容器２００（３００）の形状と対応する形状を有するように形成されている。回動機構６２５は、シャーシ６１の内側面に設けられた環状の軸受６２５ａに、支持部６２４に設けられた突起部６２４ｃが挿入されることにより、突起部６２４ｃ（軸受６２５ａ）の位置を回動中心として、支持部６２４を回動させることが可能なように構成されている。

【0090】

なお、シャーシ６１の内部には、支持部６２４の前側部６２４ａと当接することによって、回動する支持部６２４を係止する係止部６２６が設けられている。係止部６２６には磁石が設けられており、支持部６２４の前側部６２４ａと当接した状態で係止部６２６が前側部６２４ａ（支持部６２４）を保持するように構成されている。これにより、支持部６２４は、下側部６２４ｂが水平（試薬容器２００（３００）の下面が水平）となる載置位置Ｐ１（図１９参照）と、前側部６２４ａが垂直となるセット位置Ｑ１（図２０参照）とに移動するように構成されている。図２０に示すように、このセット位置Ｑ１に配置された状態で、試薬容器２００（３００）の後述する進入部２１２（３１２）（図１６と図１７参照）が、水平となる（吸引管６４に対して直交する）ように構成されている。

【0091】

カバー６３は、図１９に示すように、ホルダ部６０ａ～６０ｅ（シャーシ６１）の各々から手前側（矢印Ｙ１方向側）に突出するように配置され、吸引管昇降機構６５に取り付けられている。この吸引管昇降機構６５により、カバー６３は、試薬容器保持部６２を開放する上昇位置Ｐ２（図１９参照）と、試薬容器保持部６２を覆う（閉鎖する）下降位置Ｑ２（図２１参照）とに移動可能に構成されている。したがって、カバー６３は、上昇位置Ｐ２において試薬容器２００（３００）の出し入れを許容するとともに、下降位置Ｑ２において試薬容器２００（３００）の出し入れを禁止するように構成されている。

【0092】

また、図１５に示すように、カバー６３の所定位置には、開口からなる窓部６３１が設けられている。図２１に示すように、カバー６３が試薬容器保持部６２を覆う（閉鎖する）下降位置Ｑ２に位置した状態で、使用者がこの窓部６３１を介して、試薬容器２００（３００）に貼付されたラベル２５０（３５０、図２５参照）を視認することが可能なように構成されている。ラベル２５０（３５０）の窓部６３１を介して視認可能な位置には、試薬容器２００（３００）の種類（試薬の種類）を識別する標識が印刷されている。また、カバー６３には、試薬容器保持部６２にセットされる試薬容器２００（３００）の種類（試薬の種類）を識別する標識が印刷されたラベル６３２が貼付される。すなわち、五つのホルダ部６０ａ～６０ｅには、それぞれ定められた種類の試薬を収容する試薬容器２００（３００）がセットされるので、これに対応して、各ホルダ部６０ａ～６０ｅのカバー６３には、セットされるべき試薬の種類を識別するラベル６３２が貼付される。これにより、試薬容器保持部６２に試薬容器２００（３００）をセットした状態（カバー６３を下降位置Ｑ２に降ろした状態）で、カバー６３に付されたラベル６３２と、窓部６３１を介して視認されるラベル２５０（３５０）とから、正しい試薬が各ホルダ部６０ａ～６０ｅにセットされているかを確認することが可能なように構成されている。

【0093】

図１６と図２０に示すように、吸引管６４は、試薬容器保持部６２の第１受入部６２１の奥（矢印Ｙ２方向側）の上方位置に配置され、吸引管６４を保持する吸引管昇降機構６５により鉛直方向（Ｚ方向）に移動されるように構成されている。これにより、吸引管６４は、試薬容器保持部６２の奥側に挿入された試薬容器２００（３００）の進入部２１２（３１２）を介して第１収容部２１０（３１０）に進入し、試薬容器２００（３００）内部の試薬を吸引可能に構成されている。また、吸引管６４は、先端が試薬容器２００（３００）の進入部２１２（３１２）に形成された開口部２１２ａ（３１２ａ）（図１７と図１８参照）を封止するためのシール部材２１３（３１３）を貫通（穿刺）可能なように形成されている。また、図２、図５及び図６を参照して説明したように、吸引管６４は送液管４３１の一端を構成しており、吸引管６４の上端は、送液部４３０およびチャンバ４２０に至る流路（図１９～図２１では図示を省略）と接続されている。

【0094】

図１９と図２０に示すように、吸引管昇降機構６５は、吸引管２６とカバー６３とを保持するように構成されている。また、吸引管昇降機構６５は、シャーシ６１に設けられた溝部６１１および６１２に鉛直方向（Ｚ方向）移動可能に係合している。これにより、吸引管昇降機構６５は、カバー６３の開閉（昇降移動）に連動して吸引管２６を鉛直方向（Ｚ方向）に一体的に移動させるように構成されている。そして、図１９に示すように、カバー６３が上昇位置Ｐ２に配置された状態では、吸引管２６は試薬容器保持部６２の上方（試薬容器２００（３００）および第１受入部６２１の外部）の上昇位置Ｐ３に配置される。また、図２１に示すように、カバー６３が下降位置Ｑ２に配置された状態では、吸引管２６は試薬容器２００（３００）の進入部２１２（３１２）直下の内底部に近接する下降位置Ｑ３に配置されるように構成されている。

【0095】

試薬容器内に挿入された吸引管２６の先端は、送液管の第１端となる。吸引管２６の第１端は、試薬容器が装置に配置されている間、上述の下降位置Ｑ３に固定される。つまり、試薬容器内の試薬を用いて複数の検体の測定が実施される間、吸引管２６の第１端は、下降位置Ｑ３に固定される。

【0096】

図２２と図２５に示すように、大型（容量約１００ｍＬ）の試薬容器２００と、小型（容量約２０ｍＬ）の試薬容器３００とが、収容される試薬の種類に対応して用いられるように構成されている。試薬容器２００および３００は、それぞれ、上部に吸引管２６が進入可能な進入部２１２（３１２）が設けられた第１収容部２１０（３１０）と、第１収容部２１０（３１０）に連続する第２収容部２２０（３２０）とを一体的に含んでいる。第１収容部２１０（３１０）は、図１７と図１８に示すように、試薬容器２００（３００）が試薬容器保持部６２にセットされた状態で第１受入部６２１の内部に配置されるように構成されている。第２収容部２２０（３２０）は、図１７と図１８に示すように、試薬容器２００（３００）が試薬容器保持部６２にセットされた状態で第１受入部６２１の外部に配置されるように構成されている。また、図２３と図２６に示すように、それぞれの第１収容部２１０（３１０）内部には、第１試薬収容空間２１１（３１１）が設けられ、それぞれの第２収容部２２０（３２０）内部には、第１試薬収容空間２１１（３１１）に連続する第２試薬収容空間２２１（３２１）が設けられている。

【0097】

第１収容部２１０（３１０）は、長さＬ１１を有する部分であり、これらの形状は、試薬容器２００および３００で略共通する。試薬容器２００および３００は、第１収容部２１０および３１０の形状が略共通するため、同一形状を有するホルダ部６０ａ～６０ｅの試薬容器保持部６２（第１受入部６２１）に対してそれぞれセット可能となっている。

【0098】

具体的には、図１７と図１８に示すように、それぞれの第１収容部２１０（３１０）は、第１受入部６２１の幅Ｗ１１よりも僅かに小さい一定の幅Ｗ２１を有する。また、第１収容部２１０（３１０）には、それぞれ、前側（試薬容器保持部６２に第１収容部２１０（３１０）が挿入される方向、図１７と図１８の矢印Ｙ２方向）の端部に進入部２１２（３１２）が設けられている。したがって、試薬容器２００（３００）は、第１収容部２１０（３１０）の進入部２１２（３１２）側から試薬容器保持部６２の奥側に向かって挿入されるように構成されている。この進入部２１２（３１２）は、図２３と図２６に示すように、外部上面２００ｂ（３００ｂ）から上方に突出するように設けられている。突出した進入部２１２（３１２）には、図２２と図２５に示すように、第１収容部２１０（３１０）内部に連通する開口部２１２ａ（３１２ａ）が形成されている。また、進入部２１２（３１２）には、アルミ箔などからなるシール部材２１３（３１３）が開口部２１２ａ（３１２ａ）を塞ぐように設けられ、試薬容器２００（３００）が封止されるように構成されている。また、進入部２１２（３１２）の外径は第１収容部２１０（３１０）の幅Ｗ２１と等しく、進入部２１２（３１２）は、第１収容部２１０（３１０）の前側表面から連続的に（面一で）突出するように形成されている。

【0099】

また、図２３と図２６に示すように、試薬容器２００（３００）は、それぞれ内部底面２００ａ（３００ａ）が外部上面２００ｂ（３００ｂ）と非平行であり、かつ、内部底面２００ａ（３００ａ）と外部上面２００ｂ（３００ｂ）との距離が、進入部２１２（３１２）に近づくにつれて大きくなるように構成されている。第２実施形態では、内部底面２００ａ（３００ａ）が外部上面２００ｂ（３００ｂ）に対して角度θ１（約１０度）傾いた傾斜面となるように構成されている。なお、試薬容器２００（３００）の進入部２１２（３１２）の直下の底面部には外部上面２００ｂ（３００ｂ）と略平行な底部２００ｃ（３００ｃ）が存在し、傾斜面２００ｄ（３００ｄ）は底部２００ｃ（３００ｃ）の端部から開始している。これにより、試薬容器２００（３００）は、図２０に示すセット位置Ｑ１にセットされた状態で、進入部２１２（３１２）が最も上方に位置するとともに、進入部２１２（３１２）の直下の底部２００ｃ（３００ｃ）が最も下方に位置するように構成されている。

【0100】

また、試薬容器２００（３００）の外部上面２００ｂ（３００ｂ）には、それぞれ、上方（外部上面２００ｂ（３００ｂ）に対して垂直方向）に突出する突出部２３０（３３０）が設けられている。突出部２３０（３３０）は、それぞれ、試薬容器２００（３００）の長手方向に延びる長さＬ１の板状形状を有するとともに、進入部２１２（３１２）と略等しい突出量（突出高さ）となるように形成されている。突出部２３０（３３０）は、それぞれの第２収容部２２０（３２０）の後側（図１７と図１８の矢印Ｙ１方向側）端部近傍の位置に設けられ、使用者による試薬容器２００（３００）のセット作業または取り外し作業を容易に行うことが可能なように、取手部としての機能を有する。

【0101】

一方、第２収容部２２０（３２０）の形状は、試薬容器２００と試薬容器３００とで異なる。図２３に示すように、大型の試薬容器２００の第２収容部２２０は、第１収容部２１０に連続し、第１収容部２１０から離れるにつれて幅が大きくなる第１部２２２と、幅Ｗ２１よりも大きい一定の幅Ｗ２２を有する第２部２２３とを一体的に含んでいる。したがって、図２３に示すように、試薬容器２００において、第２収容部２２０の内部の第２試薬収容空間２２１は、第１部２２２と第２部２２３との両方にわたって連続して設けられた試薬収容空間である。

【0102】

図２３に示すように、第１部２２２は、第１収容部２１０の幅を角度θ２（約６０度）で拡げるようにして第２部２２３と連続しており、第１収容部２１０と第２部２２３とを接続している。また、第２部２２３が幅Ｗ２１よりも大きい幅Ｗ２２を有することにより、第２試薬収容空間２２１の容量を約１００ｍＬ分確保することが可能なように構成されている。

【0103】

なお、図１６と図１７に示すように、試薬容器保持部６２の中間受入部６２２と、中間受入部６２２と連続し幅Ｗ１２を有する第２受入部６２３とは、それぞれ、この第１部２２２および幅Ｗ２２を有する第２部２２３に対応する形状を有する。

【0104】

図２６に示すように、小型の試薬容器３００の第２収容部３２０は、一定で、かつ、第１収容部３１０の幅Ｗ２１と同一の幅Ｗ２１を有する。つまり、小型の試薬容器３００では、第１収容部３１０および第２収容部３２０が連続して直線状に延びるように形成されている。なお、この第２収容部３２０の長さＬ２２は、大型の試薬容器２００の第２収容部２２０の長さＬ２１よりも小さい。小型の試薬容器３００は、大型の試薬容器２００の第２収容部２２０よりも小さい幅Ｗ２１および長さＬ２２を有する第２収容部３２０を含むことにより、全体で約２０ｍＬの試薬容量を有するように構成されている。

【0105】

なお、上述のように、第１収容部３１０の長さＬ１１は、第１受入部６２１にセットされるために、試薬容器２００および３００で共通となっている。したがって、図１８に示すように、第１収容部３１０および第２収容部３２０が同一の幅Ｗ２１で連続する小型の試薬容器３００については、この第１受入部６２１に収容される領域が第１収容部３１０であり、第１受入部６２１外に配置される領域が第２収容部３２０である。

【0106】

また、小型の試薬容器３００は、大型の試薬容器２００と異なり、外部底面の傾斜面３００ｄに、試薬容器３００の長手方向に沿って直線状に延びる凹部３４０が設けられている。この凹部３４０によって、傾斜面３００ｄを水平面上に設置した場合に、凹部３４０の外周部分が水平面と接する接点となるため、小さい幅Ｗ２１を有する試薬容器３００でも安定して直立させることが可能である。

【0107】

また、図２２と図２５に示すように、各試薬容器２００（３００）には、それぞれ、収容する試薬の名称、試薬のロット番号、使用期限および識別用バーコードなどが印刷されたラベル２５０（３５０）が貼付されている。このラベル２５０（３５０）は、各試薬容器２００（３００）の後側表面と、少なくとも一方の横側面とにわたって貼付される。またラベル２５０（３５０）の一部（各試薬容器２００（３００）の後側表面に相当する部分）または全部には、収容する試薬の種類を示す色彩が付され、ラベル２５０（３５０）に表示された色によって試薬の種類を識別することが可能なように構成されている。このラベル２５０（３５０）と、試薬容器ホルダ６０のカバー６３に貼付されるラベル６３２（図１５参照）とのそれぞれの色が一致するか否かによって、試薬容器２００（３００）が正しいホルダ部６０ａ～６０ｅにセットされたか否かを確認することが可能である。

【0108】

試薬容器２００（３００）内の試薬は、分析システム４００２が設置される環境の温度で保存可能である。分析システム４００２が設置される環境温度は、例えば、２０℃～３５℃の範囲の温度である。例えば、環境温度において、試薬容器２００（３００）内の試薬は、試薬容器２００が装置に設置されて進入部２１２のシール部材２１３が開封されてから、装置内で数か月間（例えば、６０日間、９０日間、１２０日間）、性能が保証可能な状態で保存可能である。試薬容器２００（３００）に収容された試薬は、例えば、ＦＣＭ検出部４６０の光源から照射される複数波長の光に各々対応する複数の蛍光色素を含む。これらの蛍光色素は、色素を構成する化合物自体が細胞の細胞質、核酸、ＤＮＡを染色する。血液中の細胞を染色する方法として、例えば細胞の表面抗原（例えばＣＤ４やＣＤ２５）に特異的に結合する標識抗体を含む抗体試薬を用いた免疫染色が知られているが、そのような抗体試薬は、一定時間（例えば８時間）使用された後は冷蔵庫で冷却保管する必要がある。つまり、ユーザは、一定時間ごとに装置から抗体試薬を取り出して冷蔵庫に戻し、使用時には再び抗体試薬を装置にセットする必要がある。この点、本実施形態の試薬は、色素を構成する化合物（蛍光色素）自体が細胞を染色し、抗体を含まないため、冷蔵保管する必要がなく、装置の使用環境温度で保管が可能である。したがって、本実施形態では、性能が保証される期間であれば、試薬容器を一旦装置に設置したら、試薬を使い切るまで交換は不要であり、試薬の交換頻度が低く、使用者による作業コストが削減される。

【0109】

（第３実施形態）
本実施形態では、試薬容器２００は、測定ユニット４００への設置後、複数の蛍光色素を含有する試薬の品質劣化を抑制し、測定ユニット４００に取り付けたままの状態でより長期にわたって使用し続けることが可能なように構成されている。品質劣化を抑制するための主要な手段の１つは、試薬と空気との接触を抑止することである。空気との接触を抑止するために、試薬容器２００に送液管が挿入された状態において、試薬容器２００の開口が密閉される。試薬容器２００の開口が密閉されることで空気と試薬との接触が抑止された状態でも送液管によって試薬を送液可能にするため、試薬容器２００は、柔軟な袋状の試薬収容部を備える。

【0110】

試薬の保存期間は、例えば、試薬容器２００が測定ユニット４００に設置されてから７５日以上１年以内である。保存期間とは、測定ユニット４００による試薬を用いた測定精度を保証可能な期間の長さである。本実施形態では、例えば、試薬収容部１０の内部が密閉された状態で、７５日以上１年以内の期間に亘って、測定精度が維持される。試薬収容部１０の密閉により試薬の劣化を抑制できるので、より長期に亘って安定して試薬品質を維持できる。その結果、複数の蛍光色素を含有する試薬（試薬容器２００）の交換頻度を低減できるため、交換作業に関わるユーザの負担を低減できる。複数の蛍光色素は、各々異なる試薬容器２００に収容されてもよいし、一つの試薬容器２００に収容されてもよい。

【0111】

図２８および図２９を参照して、他の実施形態による試薬容器２００について説明する。試薬容器２００は、図２８（Ａ）に示すように測定ユニット４００に設置される。図２８（Ｂ）に示すように、試薬容器２００には、測定ユニット４００に対する所定操作に連動して上方から吸引管２５２が挿入される。吸引管２５２は、上述の送液管の第一端を構成する。図２８（Ｂ）に示すように、試薬容器２００は、測定ユニット４００に設けられた吸引管２５２が挿入された状態で繰り返し吸引される試薬１２を収容する。試薬容器２００は、試薬収容部１０と、フレーム２０とを備える。以下、上下方向をＺ方向とする。図２９に示すように、水平方向のうち、試薬容器２００の長手方向を第１方向Ａとし、試薬容器２００の短手方向を第２方向Ｂとする。

【0112】

試薬収容部１０は、試薬１２（図２９参照）を収容する。図２９に示すように、試薬収容部１０は、袋状の液体収容部材である。試薬収容部１０の容量は、例えば、２００ｍＬ以上５００ｍＬ以下、２０ｍＬ以上１００ｍＬ以下である。

【0113】

試薬収容部１０は、フィルム状の材料により袋状に形成されている。試薬収容部１０は、柔軟性を有し変形可能である。図３０に示すように、試薬収容部１０は、複数枚のシート状部材を重ね合わせて、重ね合わされたフィルム材の互いの外周縁を接合することにより中空の袋状に形成されている。折り重ねた１枚のフィルム材の外周部の内表面同士を接合することにより袋状に形成されてもよい。

【0114】

試薬収容部１０は、ガスバリア性および遮光性を有する積層構造フィルム材１１からなる。ガスバリア性とは、気体を透過させにくい性質である。本明細書では、ガスバリア性は、空気、特に酸素を透過させにくいことを指す。遮光性とは、光を透過させにくい性質である。これにより、試薬容器２００に収容された試薬１２が外部の空気により劣化すること、および、試薬容器２００に収容された試薬１２が日光などの外来光により劣化することを抑制できる。その結果、長期に亘って、試薬の劣化を効果的に抑制することができる。

【0115】

積層構造フィルム材１１は、少なくとも１層の基材層と、少なくとも１層のガスバリア層と、を含みうる。積層構造フィルム材１１は、ガスバリア層の外表面を保護する保護層をさらに含みうる。積層構造フィルム材１１は、遮光性材料からなる遮光層を有していても良い。ガスバリア性および遮光性の両方の性質を有する材料をガスバリア層に用いる場合、ガスバリア層と遮光層とは、同一の層でありうる。積層構造フィルム材の層数は、２以上であるが、３～９または１０以上であってもよく、特に限定されない。

【0116】

試薬収容部１０に用いられる積層構造フィルム材１１は、たとえば、下記の構成が挙げられる。（袋外側）／ナイロン（１５μｍ）／アルミ箔（９μｍ）／ポリエチレン（９μｍ）／（袋内側）。この構成では、試薬収容部１０は、ナイロンが保護層として機能し、アルミ箔がガスバリア層および遮光層として機能し、ポリエチレンが基材層である。試薬収容部１０は、ポリエチレンからなる基材層同士が熱溶着により接合される。この構成の積層構造フィルム材１１は、金属箔からなるガスバリア層を樹脂基材層に積層した構造の金属箔ラミネートフィルムである。

【0117】

積層構造フィルム材１１には、たとえば、樹脂系多層バリアフィルム、コーティング系フィルム、蒸着フィルム、有機無機複合フィルムなどを用いることもできる。樹脂系多層バリアフィルムは、樹脂材料のガスバリア層を積層した構造のフィルムである。ガスバリア性に優れた樹脂材料には、たとえばＰＶＤＣ（ポリ塩化ビニリデン）、ＰＶＡ（ポリビニルアルコール）、ＥＶＯＨ（エチレン－ビニルアルコール共重合体）などがある。コーティング系フィルムは、基材層にガスバリア性材料をコーティング（製膜）した構造のフィルムである。製膜されるガスバリア性材料は、ＰＶＤＣ、ＰＶＡ、ＥＶＯＨなどがある。蒸着フィルムは、基材層にガスバリア性材料を蒸着した構造のフィルムである。蒸着されるガスバリア性材料には、アルミニウムなどの金属、または、アルミナやシリカなどの無機酸化物がある。有機無機複合フィルムには、有機材料（樹脂材料）のガスバリア層と無機材料のガスバリア層とを別々に積層した構造の積層フィルムや、有機バインダー中に無機材料を分散させたガスバリア層を備えたフィルムなどがある。

【0118】

フレーム２０は、試薬収容部１０に取り付けられた開口２１ａを含む。フレーム２０は、測定ユニット４００に対する所定操作に連動して上方から吸引管２５２が挿入されたときに試薬収容部１０の内部が密閉されるように構成されている。

【0119】

図２８に示すように、試薬容器２００は、ユーザにより、測定ユニット４００の容器保持部２５１に所定の設置姿勢で設置され、保持される。試薬容器２００が容器保持部２５１のセット位置Ｐｓに設置された状態で、試薬容器２００の上方に配置された吸引管２５２が、上方から開口２１ａ内に挿入される。セット位置Ｐｓは、開口２１ａが吸引管２５２の直下に配置される位置である。フレーム２０は、吸引管２５２が挿入された状態で、開口２１ａが塞がれることによって、試薬収容部１０の内部が密閉されるように構成されている。

【0120】

これにより、試薬容器２００の設置前にユーザが試薬容器２００の開口２１ａ内に吸引管２５２を挿入する作業を行う必要がないので、試薬容器２００内への吸引管２５２の挿入を簡便に行える。また、吸引管２５２が挿入されたときに試薬収容部１０の内部が密閉されるので、密閉により試薬収容部１０内の試薬が外気と接触することを抑制できる。そのため、測定ユニット４００への設置後の試薬の劣化を抑制できる。また、たとえばフレーム２０の部分を把持したり測定ユニット４００に設置したりすることで、柔軟な袋状の試薬収容部１０を有していても、試薬容器２００の測定ユニット４００への取り付け作業を簡便に実施できる。

【0121】

変形しない硬質の試薬容器の場合、密閉状態で試薬の吸引を行うと、試薬の減少に伴って試薬容器の内部圧力が低下し、吸引圧力と平衡になって試薬を吸引できなくなるため、容器内部は大気開放しておく必要があり、試薬容器内の試薬が空気との接触により劣化する可能性がある。

【0122】

これに対して、本実施形態では、変形可能な袋状の試薬収容部１０を備えるので、試薬収容部１０自体が収縮変形することで内部圧力の低下を回避でき、その結果、密閉状態でも試薬１２の吸引を行うことができる。そこで、試薬容器１００は、開口２１ａへの空気の流入抑制により、試薬収容部１０の内部が密閉されるように構成されている。開口２１ａへの空気の流入抑制により、試薬収容部１０の内部の試薬１２が空気と接触することによる試薬１２の劣化を抑制できる。試薬の劣化を抑制できるので、試薬容器２００を測定ユニット４００に設置した状態で、より長期に亘って試薬容器２００内の試薬を使用し続けることができる。そのため、試薬収容部１０の容量を大きくし、１つの試薬容器２００からより多くの回数の試薬吸引を可能とすることによって、測定ユニット４００の運用に伴う試薬容器２００の交換頻度を低減できる。使用者にとっては、一定期間における試薬容器２００の交換作業の実行回数を低減できるという利点がある。

【0123】

また、ユーザが手作業で吸引管２５２を挿入するのではなく、測定ユニット４００の動作によって吸引管２５２を開口２１ａ内に挿入する構成では、開口２１ａの位置決めと、開口２１ａの位置ずれ防止とが、吸引管２５２により試薬収容部１０を傷つけることなく試薬収容部１０を確実に密閉するために重要となる。本実施形態の試薬容器２００は、測定ユニット４００に設置する際に、開口２１ａの位置決めと、開口２１ａの位置ずれ防止とを確実に行うためのフレーム構造を備えている。

【0124】

図２９に示すように、フレーム２０は、開口２１ａを有する開口部２１と、測定ユニット４００の一部と当接して開口２１ａの移動を規制するように構成された移動規制部２３と、を含む。

【0125】

移動規制部２３が測定ユニット４００の一部と当接することによって、開口２１ａが移動することを抑制できる。これにより、吸引管２５２を挿入する際の吸引管２５２と開口２１ａとの位置ずれを抑制できる。また、吸引管２５２が開口２１ａから試薬収容部１０の内部に挿入された状態で、吸引管２５２と開口２１ａとの位置ずれを抑制できるので、試薬収容部１０の内部の密閉状態を効果的に維持できる。

【0126】

開口部２１は、開口２１ａが形成された筒状部分である。開口２１ａは、下端が試薬収容部１０の内部につながり、上端が試薬収容部１０の外部につながる。開口部２１は、試薬収容部１０の上部に設けられている。

【0127】

開口部２１は、吸引管２５２に設けられた封止体２５２ａ（図２８参照）と当接して開口２１ａを密閉する封止面２１ｂを有する。これにより、封止体２５２ａと封止面２１ｂとの当接によって、容易かつ効果的に試薬収容部１０を密閉できる。

【0128】

封止面２１ｂは、開口部２１の上端面、開口部２１の内周面、開口部２１の外周面、のいずれかでありうる。図２９の例では、封止面２１ｂは、開口２１ａを取り囲む開口部２１の環状の上端面（すなわち、開口２１ａの縁部）であり、吸引管２５２に設けられた封止体２５２ａ（図２８（Ｂ）参照）と上下に当接する。

【0129】

なお、開口部２１には、たとえば、着脱可能なキャップが装着されうる。試薬容器２００は、キャップによって開口２１ａが封止された状態で使用者に提供され、キャップを取り外して測定ユニット４００に設置されうる。

【0130】

また、たとえば、開口部２１の上面に、穿刺可能なシールフィルムが開口２１ａを覆うように溶着されうる。試薬容器２００は、シールフィルムによって開口２１ａが封止された状態で使用者に提供され、測定ユニット４００に設置された後、吸引管２５２によってシールフィルムが穿刺されることにより開封されうる。

【0131】

図３０に示すように、開口部２１は、試薬収容部１０に取り付けられた取付部材２２に形成されている。開口部２１は、取付部材２２の上面から上方に突出するように取付部材２２に一体形成されている。

【0132】

取付部材２２の外周部が、試薬収容部１０の内周部に溶着されている。取付部材２２は、試薬収容部１０の上端部において、試薬収容部１０を構成する２枚の積層構造フィルム材１１の外周縁に挟まれるように設けられ、２枚の積層構造フィルム材１１の内面とそれぞれ溶着されている。取付部材２２の外周部と試薬収容部１０との間は、溶着により密閉されている。これにより、柔軟な袋状の試薬収容部１０に、移動規制部２３と結合するための剛性を有する取付部材２２を容易に設けることができ、かつ、取付部材２２と試薬収容部１０との間の封止を容易に実現できる。

【0133】

取付部材２２は、開口部２１から水平方向に間隔を開けて配置された被支持部２２ａを有する。取付部材２２は、細長の六角形状を有し、取付部材２２の長手方向の一方端部に開口部２１が配置され、他方端部に被支持部２２ａが配置されている。被支持部２２ａは、取付部材２２の上面から上方に突出するように取付部材２２に一体形成された突起である。被支持部２２ａは、Ａ方向から見て、Ｔ字形状を有し、根元部が上部よりも細い。

【0134】

ここで、開口部２１は、水平方向における試薬収容部１０の端部付近に配置されている。試薬１２（図２８参照）を収容することによって試薬収容部１０が膨らんだ状態であっても、取付部材２２の開口部２１は、試薬収容部１０の内面と比較的近い位置にある。そのため、吸引管２５２が開口部２１の中心軸線に対して傾いて挿入されると、吸引管２５２の先端が試薬収容部１０の内面と接触する可能性が生じる。

【0135】

そこで、開口部２１は、開口２１ａの下端から試薬収容部１０の内部へ向けて下方に突出する吸引管案内部２１ｃを有する。吸引管案内部２１ｃは、取付部材２２に一体形成されており、筒状の開口部２１の下端部を、部分的に下方に延長した形状を有する。吸引管案内部２１ｃは、開口２１ａ内に挿入される吸引管２５２と試薬収容部１０の内面とを区画するように壁状に形成されている。これにより、吸引管２５２が開口２１ａの中心軸線に対して傾斜して試薬収容部１０の内部に挿入された場合でも、吸引管２５２の先端と試薬収容部１０の内面との接触を抑制するように吸引管２５２の先端を案内できる。

【0136】

図２９に戻り、移動規制部２３は、測定ユニット４００の吸引管２５２に対する開口２１ａの位置決めを行う機能を有する。また、移動規制部２３は、開口２１ａの位置ずれ防止を行う機能を有する。

【0137】

移動規制部２３は、開口部２１から水平方向に突出するように開口部２１に固定されている。これにより、移動規制部２３と開口２１ａとの相対位置を固定できる。さらに、移動規制部２３の開口部２１から水平方向に突出する部分によって、測定ユニット４００の一部と当接して移動を規制する構成を、簡単に実現できるとともに、当接により開口２１ａの位置ずれを防止するために必要な接触面積を容易に得ることができる。

【0138】

図３０に示すように、移動規制部２３は、概略で平板状形状を有する。移動規制部２３は、水平面内の第１方向Ａに沿って延びる形状を有している。移動規制部２３は、第１方向Ａに延びる一対の長辺と、第２方向Ｂに延びる一対の短辺とを含む長方形状を有する。後述するように、試薬容器２００は、開口部２１が配置されている移動規制部２３の一端２３ａ側を先頭にして測定ユニット４００の容器保持部２５１の内部へ第１方向Ａに沿って挿入されることにより、容器保持部２５１に設置される。移動規制部２３は、移動規制部２３の第１方向Ａの一端２３ａと中央部との間で開口部２１に固定されている。つまり、開口部２１は、移動規制部２３の一端２３ａと他端２３ｂとのうち、一端２３ａ側に近い位置に配置されている。これにより、移動規制部２３の他端２３ｂ側を把持して、第１方向Ａへ試薬容器２００を移動させることで、一端２３ａ側の開口部２１に形成された開口２１ａを、吸引管２５２の直下位置へ配置できる。この場合、開口部２１が移動規制部２３の他端２３ｂから離れるので、試薬容器２００の取り付け時にユーザの手指が吸引管２５２と接触することを抑制できる。

【0139】

移動規制部２３は、測定ユニット４００の一部と水平方向に当接することにより、開口２１ａの水平方向の移動を規制するように構成されている。これにより、移動規制部２３によって、開口２１ａと吸引管２５２との水平方向の位置関係がずれることを抑制できる。移動規制部２３は、移動規制部２３に形成された穴の内面、移動規制部２３に形成された切り欠きの内面、および移動規制部２３の側面、のいずれかからなる水平当接面２４を含む。これにより、簡単な構成で、開口２１ａの水平方向の移動を規制するための水平当接面２４を移動規制部２３に設けることができる。

【0140】

水平当接面２４は、移動規制部２３の第１方向Ａの一端２３ａに形成された側面（つまり、先端面）からなる第１面２４ａを含む。これにより、試薬容器２００を測定ユニット４００に取り付ける際に、移動規制部２３の一端２３ａが容器保持部２５１の内面に突き当たるまで試薬容器２００を第１方向Ａに進めるだけで、第１方向Ａにおける開口２１ａの位置合わせと移動規制との両方を簡単に実現できる。

【0141】

水平当接面２４は、移動規制部２３の第１方向Ａに沿って延びる側面からなる第２面２４ｂ、２４ｃを含む。第２面２４ｂ、２４ｃは、平面視で移動規制部２３の長辺を構成する一対の側面であり、移動規制部２３の第２方向Ｂの一方側と他方側とに設けられている。これにより、移動規制部２３の側面によって、第２方向Ｂにおける開口２１ａの位置合わせと移動規制との両方を簡単に実現できる。

【0142】

図３１に示すように、移動規制部２３は、側面に形成された切り欠き２３ｃを有している。水平当接面２４は、切り欠き２３ｃの内面からなる第３面２４ｄを含む。第３面２４ｄは、切り欠き２３ｃ内に進入する測定ユニット４００の一部と当接する。これにより、切り欠き２３ｃ内の第３面２４ｄと測定ユニット４００の一部とが当接することで、移動規制部２３と測定ユニット４００とを係合させることができる。係合により、開口２１ａの位置がずれることを効果的に抑制できる。また、試薬容器２００を測定ユニット４００に取り付ける際に、移動規制部２３が測定ユニット４００の一部に係合して動かなくなるので、試薬容器２００が適正位置に設置されたことをユーザが視認しなくても感触で知覚できる。

【0143】

移動規制部２３は、移動規制部２３を上面に形成された穴２３ｄを有している。水平当接面２４は、穴２３ｄの内面からなる第４面２４ｅを含む。第４面２４ｅは、穴２３ｄの内部に進入する測定ユニット４００の一部（例えば、後述する進入部材２８１、図３５参照）と当接する。これにより、移動規制部２３に形成された穴２３ｄに測定ユニット４００の一部が進入することで、移動規制部２３と測定ユニット４００とを係合させることができる。係合により、開口２１ａの位置がずれることを効果的に抑制できる。図３１では、穴２３ｄは、２つ設けられている。２つの穴２３ｄは、第２方向Ｂに沿って並んでいる。穴２３ｄは１つだけでもよい。

【0144】

移動規制部２３は、開口２１ａを測定ユニット４００の吸引管２５２の下方に配置する際の移動を案内する案内部２３ｅを有する。案内部２３ｅは、水平面内の第１方向Ａに沿って延びる。案内部２３ｅは、測定ユニット４００の一部と接触した状態で摺動することで、移動規制部２３の移動方向を第１方向Ａに合わせる。これにより、試薬容器２００を測定ユニット４００の容器保持部２５１に設置する際に、容易かつ正確に、吸引管２５２を挿入可能な適正な位置へ開口２１ａを配置できる。

【0145】

移動規制部２３は、測定ユニット４００の一部と上下方向（Ｚ方向）に当接することにより、開口２１ａの上下方向の移動を規制するように構成されている。これにより、変形しやすい袋状の試薬収容部１０を備えた試薬容器２００であっても、吸引管２５２を試薬収容部１０の内部に挿入する際、および、吸引管２５２を試薬収容部１０の内部から引き抜く際に、開口２１ａが上下方向に移動することを抑制できる。

【0146】

図３１に示したように、移動規制部２３は、移動規制部２３の第１方向Ａの他端２３ｂに、移動規制部２３を把持するための把持部２５を有する。これにより、移動規制部２３の他端２３ｂ側を容易に把持できる。また、袋状の試薬収容部１０は変形しやすく把持しにくいため、移動規制部２３に把持部２５を設けることによって、試薬容器２００の持ち運びが容易になる。

【0147】

図３０に示すように、移動規制部２３は、開口部２１に固定された固定部２６と、開口部２１から離れた位置で試薬収容部１０の上部を支持する支持部２７とを含む。これにより、試薬容器２００を持ち運ぶ際、移動規制部２３を手で把持した場合に、固定部２６と支持部２７との複数箇所で、試薬収容部１０を移動規制部２３から吊り下げるように支持できる。試薬収容部１０の重量が移動規制部２３の複数箇所に分散して作用するため、試薬収容部１０の容量を大きくしても安定して支えることができる。また、ユーザにとっては、変形しやすい袋状の部分を把持しなくてよいので、試薬容器２００の取り扱いが容易になる。

【0148】

図２９に示すように、移動規制部２３は、試薬の情報を記録した情報記録媒体２８を含む。情報記録媒体２８は、ＲＦＩＤ（ｒａｄｉｏ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒ）タグである。これにより、試薬容器２００を測定ユニット４００に取り付けた時に、測定ユニット４００が情報記録媒体２８から試薬の情報を読み取ることができる。変形しやすい袋状の試薬収容部１０に情報記録媒体２８を設ける場合には、情報記録媒体２８を付与しにくかったり、情報記録媒体２８が読み取りにくくなったりする可能性があるが、移動規制部２３に情報記録媒体２８を設けることで、情報記録媒体２８を容易に設けることができ、良好に読み取りを行える。

【0149】

図３２に示すように、試薬吸引部２５０は、それぞれ１つの試薬容器２００（又は小型の試薬容器３００）を保持可能な複数の試薬容器ホルダを含む。試薬吸引部２５０は、たとえば、合計５つの試薬容器ホルダを含むが、図３２では、便宜的に３つの試薬容器ホルダ２５０ａ、２５０ｂおよび２５０ｃのみを示している。複数の試薬容器ホルダ２５０ａ～２５０ｃは、横方向に並んで設けられている。

【0150】

試薬容器ホルダ２５０ａ～２５０ｃは、それぞれ、下部シャーシ２５５ａおよび上部シャーシ２５５ｂと、容器保持部２５１と、吸引管２５２と、操作部２５３と、移動機構２５４（図３５参照）と、を備える。以下では、試薬容器ホルダ２５０ａ～２５０ｃを代表して、試薬容器ホルダ２５０ａの構造について説明する。容器保持部２５１は、下部シャーシ２５５ａに設けられている。容器保持部２５１は、試薬容器ホルダ２５０ａの最下部に位置する。容器保持部２５１は、試薬を収容する袋状の試薬収容部１０と開口２１ａを含むフレーム２０とを含む試薬容器２００を保持するように構成されている。

【0151】

容器保持部２５１は、試薬容器２００を内側に収容可能で、水平方向に入口が形成された箱状形状または筒状形状の収容部２６０を有する。収容部２６０は、Ｙ１方向端部に開口した入口を有し、入口からＹ２方向に向けて延びるように設けられている。

【0152】

図３３に示すように、収容部２６０は、試薬容器２００の試薬収容部１０が挿入される第１挿入部２６１と、第１挿入部２６１の上方に配置され試薬容器２００の移動規制部２３が挿入される第２挿入部２６２と、を含む。

【0153】

第１挿入部２６１は、試薬収容部１０の両側面と幅方向（Ｘ方向）に対向する一対の側面部２６１ａと、試薬収容部１０の下面と上下方向（Ｚ方向）に対向する底面部２６１ｂとによって区画された空間である。第１挿入部２６１の上部と、第２挿入部２６２との間は、接続通路２６３によって繋がっている。

【0154】

接続通路２６３は、試薬容器２００のうちの、移動規制部２３と試薬収容部１０との接続部分（取付部材２２が配置されている部分）をＹ方向に通過させるための空間である。

【0155】

第２挿入部２６２は、収容部２６０の入口から吸引管２５２の直下のセット位置Ｐｓへ向けて延びるとともに、移動規制部２３と当接することにより試薬容器２００をセット位置Ｐｓ（図３４参照）へ案内するように構成されている。これにより、移動規制部２３を用いて、収容部２６０の入口からセット位置Ｐｓまで試薬容器２００を案内することができる。その結果、変形しやすい試薬収容部１０を備えた試薬容器２００であっても、ユーザが試薬容器２００を収容部２６０の入口から挿入するだけの簡単な動作で、セット位置Ｐｓまで精度よく案内できる。第２挿入部２６２は、例えば、凸状の断面形状を有する。すなわち、第２挿入部２６２は、平板状の移動規制部２３が挿入される幅広の下部と、移動規制部２３の上側に突出する開口部２１が挿入される幅狭の上部とによって、凸状の断面形状を有する。

【0156】

試薬吸引部２５０は、当接部２７０を備える。当接部２７０は、容器保持部２５１に配置された試薬容器２００のフレーム２０に設けられた移動規制部２３と当接して開口２１ａの移動を規制する。これにより、当接部２７０が移動規制部２３と当接することによって、吸引管２５２を挿入する際の吸引管２５２と開口２１ａとの位置ずれを抑制できる。また、吸引管２５２が開口２１ａから試薬収容部１０の内部に挿入された状態で、吸引管２５２と開口２１ａとの位置ずれを抑制できるので、試薬収容部１０の内部の密閉状態を効果的に維持できる。

【0157】

当接部２７０は、容器保持部２５１に配置された試薬容器２００のフレーム２０に設けられた移動規制部２３と当接して開口２１ａの移動を規制する。当接部２７０が移動規制部２３と当接することによって、吸引管２５２を挿入する際の吸引管２５２と開口２１ａとの位置ずれを抑制できる。また、吸引管２５２が開口２１ａから試薬収容部１０の内部に挿入された状態で、吸引管２５２と開口２１ａとの位置ずれを抑制できるので、試薬収容部１０の内部の密閉状態を効果的に維持できる。

【0158】

当接部２７０は、試薬容器２００の開口２１ａに固定された移動規制部２３と当接することにより、開口２１ａの移動を規制するように構成されている。これにより、移動規制部２３と開口２１ａとの相対位置を固定されるので、当接部２７０を移動規制部２３と当接させることにより、確実かつ正確に開口２１ａの位置決めおよび移動規制を行える。

【0159】

当接部２７０の少なくとも一部は、収容部２６０に設けられている。これにより、入口から収容部２６０の内部へ試薬容器２００を挿入することで、当接部２７０と移動規制部２３とを当接させ、収容部２６０内における開口２１ａの移動を規制できる。

【0160】

当接部２７０は、第２挿入部２６２に配置されている。これにより、試薬容器２００のうちの移動規制部２３に対応させた第２挿入部２６２に当接部２７０を設けることで、変形しやすい試薬収容部１０を備えた試薬容器２００であっても、予め設定した相対位置関係で当接部２７０と移動規制部２３とを当接させることができる。その結果、開口２１ａの位置決めおよび移動規制を正確に行うことができる。

【0161】

当接部２７０は、移動規制部２３に形成された穴、移動規制部２３に形成された切り欠き、および移動規制部２３の側面のいずれかと当接するように構成されている。これにより、簡単な構成で、当接部２７０を移動規制部２３に当接させて開口２１ａの水平方向の移動を効果的に規制できる。

【0162】

吸引管２５２が下方移動するとき、進入部材２８１も吸引管２５２とともに下方移動して、移動規制部２３の穴２３ｄの内部に進入する。進入部材２８１が穴２３ｄに進入することで、移動規制部２３の移動が抑止される。

【0163】

当接部２７０は、移動規制部２３と上下方向に当接することにより、開口２１ａの上下方向の移動を規制するように構成されている。これにより、変形しやすい袋状の試薬収容部１０を備えた試薬容器２００であっても、吸引管２５２を試薬収容部１０の内部に挿入する際、および、吸引管２５２を試薬収容部１０の内部から引き抜く際に、開口２１ａが上下方向に移動することを抑制できる。

【0164】

図３５に示すように、吸引管２５２は、容器保持部２５１の収容部２６０の最奥部（Ｙ２方向側端部）の上方位置に、先端を下向きにして配置されている。吸引管２５２は、移動機構２５４に保持され、移動機構２５４により上下方向（Ｚ方向）に移動されるように構成されている。これにより、吸引管２５２は、容器保持部２５１の奥側に挿入された試薬容器２００（２００）の開口２１ａを介して試薬収容部１０（１１０）の内部に進入し、試薬容器２００（２００）内部の試薬を吸引可能に構成されている。

【0165】

吸引管２５２は、吸引管２５２が開口２１ａに挿入されたときに開口２１ａと接触することにより開口２１ａを密閉する封止体２５２ａを有する。これにより、封止体２５２ａによって、容易かつ効果的に試薬収容部１０を密閉できる。

【0166】

封止体２５２ａは、吸引管２５２の外周を取り囲むように設けられ、開口２１ａの縁部（すなわち、開口部２１の封止面２１ｂ）と接触することにより弾性変形して開口２１ａを密閉するように構成されている。これにより、吸引管２５２を開口２１ａに挿入する際の下方移動を利用して、封止体２５２ａによって試薬収容部１０を確実に密閉することができる。

【0167】

封止体２５２ａは、弾性変形可能なゴム材料で構成されている。また、封止体２５２ａと、吸引管２５２を保持する吸引管保持部２５４ａとの間に、封止体２５２ａを開口２１ａに向けて付勢するための付勢部材２５２ｂが設けられている。付勢部材２５２ｂは、圧縮ばねからなる。

【0168】

移動機構２５４は、吸引管２５２を上昇位置Ｐ１と下降位置Ｐ２との間で上下方向（Ｚ方向）に移動可能に保持している。移動機構２５４は、吸引管保持部２５４ａと、リニアレール２５４ｂおよび固定スライダ２５４ｃから構成された直動機構と、を含む。吸引管保持部２５４ａには、吸引管２５２が取り付けられており、吸引管保持部２５４ａはＹ方向に延びる連結部２５４ｄを介してリニアレール２５４ｂの上端部に連結されている。リニアレール２５４ｂは、試薬容器ホルダ２５０ａの前面（Ｙ１方向側の側面）に配置され、Ｚ方向に延びる。固定スライダ２５４ｃは、下部シャーシ２５５ａに固定され、リニアレール２５４ｂをＺ方向に沿って移動可能に保持している。これにより、リニアレール２５４ｂが固定スライダ２５４ｃに対してＺ方向に移動する。リニアレール２５４ｂのＺ方向移動に伴って、吸引管２５２がリニアレール２５４ｂと一体的にＺ方向に移動する。

【0169】

このように、移動機構２５４は、吸引管２５２を上下方向に移動可能に支持し、操作部２５３に対する所定操作に連動して吸引管２５２を移動させることにより、容器保持部２５１に保持された試薬容器２００内への吸引管２５２の進入および試薬容器２００外への吸引管２５２の退避を行うように構成されている。これにより、吸引管２５２を上下に移動させるだけで、試薬容器２００内への吸引管２５２の進入および試薬容器２００外への吸引管２５２の退避を行うことができる。吸引管２５２の移動方向の自由度が少ないほど、正確で、かつ高い再現性で吸引管２５２を動作させることができるので、単純な上下移動によって、吸引管２５２が挿入されたときに試薬収容部１０を密閉する動作を、より精度よく実行できる。

【0170】

また、図３５に示すように、移動機構２５４は、吸引管２５２と操作部２５３とが連動して移動するように操作部２５３を保持している。操作部２５３は、試薬容器ホルダ２５０ａの前面（Ｙ１方向側の側面）に設けられ、操作部２５３の背面側（Ｙ２方向側）がリニアレール２５４ｂに取り付けられている。これにより、リニアレール２５４ｂ、吸引管２５２および操作部２５３が一体的にＺ方向に移動する。

【0171】

操作部２５３は、図３２に示すように、試薬容器ホルダ２５０ａ～２５０ｃ（下部シャーシ２５５ａ）の各々の前面（矢印Ｙ１方向側）に配置されている。操作部２５３は、試薬容器ホルダ２５０ａの容器保持部２５１の前面を開閉可能に覆うカバーとして構成されている。

【0172】

操作部２５３は、ユーザが手で把持して動かせるように構成されている。操作部２５３には、操作部２５３の前面から前方（Ｙ１方向）に突出する操作把持部２５３ａが形成されている。ユーザは、この操作把持部２５３ａを把持してＺ方向に動かすことにより、操作部２５３をＺ方向に移動させることができる。

【0173】

（第４実施形態）
第１および第２実施形態で説明した分析システム４０００、４００１において、分析ユニット（分析部）３００Ｘは、フローセルに流れる細胞から発せられる蛍光に対応する第１の信号の波形および第２の信号の波形を入力とし、分類されることになる各種細胞から発せられる蛍光に対応する信号の波形により学習済みのＡＩアルゴリズムを第１乃至第三の分析の少なくとも一部に用いて細胞の分類を行ってもよい。上述したように、第１の信号とは、第１光源による側方散乱光および側方蛍光に各々対応する複数の信号で構成される信号であり、第２の信号とは、第２光源による前方散乱光、側方散乱光および側方蛍光に各々対応する複数の信号で構成される信号である。また、第１の分析とは、第１の信号に基づく分析であり、第２の分析とは、第２の信号に基づく分析であり、第三の分析とは、第１の信号と第２の信号とに基づく分析である。

【0174】

本実施形態では、上述の複数波長の光を測定試料に照射可能なＦＣＭ検出部４６０を備える分析システム４０００（図７参照）において、測定ユニット４００によって取得されたデータがＡＩアルゴリズムにより分析される。複数波長の光が測定試料に照射されるので、測定ユニット４００は、各波長に対応する複数種類の光学的信号を検出する。検出された複数種類の光学的信号の各々がＡ／Ｄ変換されることで取得されたデータが、ＡＩアルゴリズムで分析される。ＡＩアルゴリズムによる分析は、分析ユニット３００Ｘで実行される（図１０参照）。ＡＩアルゴリズムは、例えば、分析ユニット３００Ｘの記憶部３００４に記憶されている。分析ユニット３０２Ｘのプロセッサ３００１が、ＡＩアルゴリズムに基づく分析を実行する。

【0175】

図３６に示された例のように、測定ユニット４０２によって取得されたデータ（以降、「波形データ」と呼ぶ場合がある）がＡＩアルゴリズム５０（または６０）に入力される。ＡＩアルゴリズムは、入力されたデータを処理することで、入力されたデータに対応する細胞の種類を分類する。単一波長の光を測定試料に照射する場合、測定試料中のある細胞に対いて得られるデータは、単一波長の光に対応したデータしか得られない。複数波長の光を測定試料に照射する場合、測定試料中のある細胞に対して得られるデータは、複数波長の光に各々対応した複数種類のデータが得られる。よって、複数波長の光を測定試料に照射する場合の方が、単一波長の光を測定試料に照射する場合に比べて、ＡＩアルゴリズムに入力されるデータの量が増える。ＡＩアルゴリズムに入力されるデータの量が増えることによって、ＡＩアルゴリズムによる細胞の分類精度が高まる。

【0176】

図３７～図４０に示す例を用いて訓練データ７５（図４０参照）の生成方法及び波形データの分析方法を説明する。以下では、図７の構成を有するＦＣＭ検出部４６０を用いた場合を例にとって説明する。

【0177】

＜波形データ＞
図３７は、本分析方法（第４実施形態）において用いられる波形データを説明するための模式図である。図３７に示すように、細胞（成分）Ｃを含む検体をフローセルＦＣに流し、フローセルＦＣを流れる細胞Ｃに第１波長の光Ｌ１及び第２波長の光Ｌ２を照射すると、光の進行方向に対して前方に前方散乱光（ＦＳＣ）が生じる。光の進行方向に対して側方に、第１波長の光に対応する第１側方散乱光（ＳＳＣ－１）と、第１波長の光によって励起された第１側方蛍光（ＳＦＬ－１）が生じる。また、光の進行方向に対して側方に、第２波長の光に対応する第２側方散乱光（ＳＳＣ－２）と、第２波長の光によって励起された第２側方蛍光（ＳＦＬ―２）が生じる。

【0178】

前方散乱光（ＦＳＣ）は、前方散乱光受光素子４１１６によって受光され、受光量に応じた信号が出力される。第１側方散乱光（ＳＳＣ―１）は、側方散乱光受光素子４１２１ａによって受光され、受光量に応じた信号が出力される。第１側方蛍光（ＳＦＬ－１）は、側方蛍光受光素子４１２２ａによって受光され、受光量に応じた信号が出力される。第２側方散乱光（ＳＳＣ―２）は、側方散乱光受光素子４１２１ｂによって受光され、受光量に応じた信号が出力される。第２側方蛍光（ＳＦＬ－２）は、側方蛍光受光素子４１２２ｂによって受光され、受光量に応じた信号が出力される。これにより、各受光素子から、時間経過に伴う信号の変化を表すアナログ信号が出力される。前方散乱光（ＦＳＣ―１）に対応するアナログ信号を「前方散乱光信号」、第１側方散乱光（ＳＳＣ―１）に対応するアナログ信号を「第１側方散乱光信号」、第１側方蛍光（ＳＦＬ―１）に対応するアナログ信号を「第１蛍光信号」、第２側方散乱光（ＳＳＣ―２）に対応するアナログ信号を「第２側方散乱光信号」、第２側方蛍光（ＳＦＬ―２）に対応するアナログ信号を「第２蛍光信号」という。各アナログ信号の１つのパルスが一つの成分（例えば１つの細胞）に対応する。

【0179】

アナログ信号は、アナログ処理部４８０を介してＡ／Ｄ変換部４８１ａ（図３７参照）に入力され、デジタル信号に変換される。図３８はＡ／Ｄ変換部によるデジタル信号への変換を模式的に示す図である。ここでは説明を簡略化するためアナログ信号をＡ／Ｄ変換部４８１ａに直接入力するような図としている。図３８に示すように、Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、各受光素子から入力されるアナログ信号のうち、前方散乱光信号のレベルが所定の閾値として設定されたレベルに至った時点を始点として、前方散乱光信号、第１側方散乱光信号、第１側方蛍光信号、第２側方散乱光信号及び第２側方蛍光信号のサンプリングを行う。Ａ／Ｄ変換部４８１ａは、所定のサンプリングレート（例えば、１０ナノ秒間隔で１０２４ポイントのサンプリング、８０ナノ秒間隔で１２８ポイントのサンプリング、又は１６０ナノ秒間隔で６４ポイントのサンプリング等）で、それぞれのアナログ信号をサンプリングする。

【0180】

図３９は、サンプリングによって得られる波形データを模式的に示す図である。サンプリングによって、一つの成分に対応する波形データとして、複数の時点におけるアナログ信号レベルをデジタルに示す値を要素とする行列データ（一次元の「配列データ」と呼ばれてもよい）が得られる。このようにしてＡ／Ｄ変換部４８１ａは、一つの成分に対応する前方散乱光のデジタル信号、第１側方散乱光のデジタル信号、第１側方蛍光のデジタル信号、第２側方散乱光のデジタル信号、及び第２側方蛍光のデジタル信号を生成する。Ａ／Ｄ変換は、デジタル信号化された細胞数が所定数に達するまで、または検体をフローセル４１１３に流し始めてから所定時間が経過するまで繰り返される。これにより、図３９に示すように、一つの検体に含まれるＮ個の成分（細胞Ｃ）の波形データで構成されるデジタル信号が得られる。各成分に対するサンプリングデータの集合（図３９の例ではｔ＝０ｎｓからｔ＝１０２４０ｎｓまで１０ナノ秒毎に１０２４個のデジタル値の集合）を波形データと呼んでもよく、一つの検体から得られた波形データの集合をデジタル信号と呼んでもよい。複数波長の光がフローセル４１１３に照射されることによって波形データが取得されているので、各波長に対応した複数の波形データが取得される。例えば、図３７に示す例では、第１波長（例えば、４０５ｎｍ）の光に対応した第１側方散乱光および第１側方蛍光に各々対応する波形データ、および、第２波長（例えば、６３８ｎｍ）の光に対応した前方散乱光、第２側方散乱光および第２側方蛍光に各々対応する波形データが取得される。第１波長の光に対応する側方蛍光は第１蛍光色素に基づいて取得され、第２波長の光に対応する側方蛍光は第２蛍光色素に基づいて取得される。

【0181】

Ａ／Ｄ変換部４８１ａによって生成された各々の波形データには、各々の成分を識別するためのインデックスが付与されてもよい。インデックスは、例えば、生成された波形データの順に１～Ｎの整数が付与され、同じ成分から得られた前方散乱光の波形データ、第１／第２側方散乱光の波形データ、第１／第２側方蛍光の波形データには、それぞれ、同一のインデックスが付与される。各波形データは一つの成分に対応するので、インデックスは測定された成分に対応する。同じ成分に対応する波形データに同一のインデックスが付与されることで、後述する深層学習アルゴリズムは、個々の成分に対応する前方散乱光の波形データと、第１／第２側方散乱光の波形データと、第１／第２蛍光の波形データを１セットとして解析し、成分の種別を分類できる。

【0182】

＜訓練データの生成＞
図４０は、検体中の成分の種別を判定するための深層学習アルゴリズムを訓練するために使用される訓練データの生成方法の一例を示す模式図である。図４０に示すように、訓練データ７５は、検体をフローサイトメータ（測定ユニット４００、図７参照）によって測定し、検体中の成分について得られた前方散乱光（ＦＳＣ）のアナログ信号７０ａ、第１側方散乱光（ＳＳＣ―１）のアナログ信号７０ｂ、第１側方蛍光（ＳＦＬ―１）のアナログ信号７０ｃ、第２側方散乱光（ＳＳＣ―２）のアナログ信号７０ｄ、第１側方蛍光（ＳＦＬ―２）のアナログ信号７０ｅに基づいて生成される波形データである。波形データの取得方法は、上述のとおりである。

【0183】

訓練データ７５は、例えば、フローサイトメータによって検体を測定し、その検体に含まれる成分を計算処理で分析した結果、特定の種別である可能性が高いと判断された成分の波形データを用いることができる。以下、血液検体を分析する血球計数装置としての分析システム４０００（図４参照）を用いる例で説明する。血液検体をフローサイトメータ（測定ユニット４００）で測定し、検体に含まれる個々の成分の前方散乱光、第１／第２側方散乱光、第１／第２側方蛍光の波形データを蓄積しておく。第１／第２側方散乱光強度（側方散乱光信号のパルスの高さ）と第１／第２側方蛍光強度（側方蛍光信号のパルス高さ）に基づいて、検体中の細胞を好中球、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球、幼若顆粒球、異常細胞の集団に分類する。分類された細胞種別に対応するラベル値をその細胞の波形データに付与することで、訓練データ７５が得られる。例えば、好中球の集団に含まれる細胞の側方散乱光強度および側方蛍光強度の最頻値、平均値または中央値を求め、それらの値に基づいて代表的な細胞を特定し、それらの細胞の波形データに好中球に対応するラベル値「１」を付与することで訓練データ７５を得ることができる。訓練データの生成方法はこれに限らず、例えばセルソータによって特定の細胞だけを回収しておき、その細胞をフローサイトメータによって測定し、得られた波形データに細胞のラベル値を付与することによって訓練データを得てもよい。

【0184】

各アナログ信号７０ａ～７０ｅは、フローサイトメータによって好中球が測定されたときの前方散乱光信号、第１／第２側方散乱光信号、第１／第２側方蛍光信号をそれぞれ示す。これらのアナログ信号が、上述したようにＡ／Ｄ変換されると、前方散乱光信号の波形データ７２ａ、第１側方散乱光信号の波形データ７２ｂ、第１側方蛍光信号の波形データ７２ｃ、第２側方散乱光信号の波形データ７２ｄ、第２側方蛍光信号の波形データ７２ｅが得られる。波形データ７２ａ～７２ｅそれぞれの内部で隣り合うセルは、サンプリングレートに対応する間隔、例えば１０ナノ秒間隔での信号レベルを格納している。各波形データ７２ａ～７２ｅは、データの元となった細胞の種別を表すラベル値７７と組み合わされて、各細胞に対応する５つの波形データ、言い換えれば５つの信号強度（前方散乱光の信号強度、第１／第２側方散乱光の信号強度、及び第１／第２側方蛍光の信号強度）のデータがセットとなるように訓練データ７５として深層学習アルゴリズム（ニューラルネットワーク５０）に入力される。図４０の例では訓練データ７５の元となった細胞が好中球であるため、各波形データ７２ａ～７２ｅに好中球であることを示すラベル値７７として「１」が付与され、訓練データ７５が生成される。図４１にラベル値７７の例を示す。訓練データ７５は、細胞種別毎に生成されるため、ラベル値は、細胞種別に応じて異なるラベル値７７が付与される。

【0185】

＜深層学習の概要＞
図４０を例として、ニューラルネットワークの訓練の概要を説明する。ニューラルネットワーク５０は、例えば、畳み込み層を有する畳み込みニューラルネットワークである。ニューラルネットワーク５０における入力層５０ａのノード数は、入力される訓練データ７５の波形データに含まれる配列の要素数に対応している。配列の要素数は、１つの成分に対応する前方散乱光、第１／第２側方散乱光、第１／第２側方蛍光の波形データ７２ａ～７２ｅの要素数の総和に等しい。図４０の例では、波形データ７２ａ～７２ｅのそれぞれが１０２４個の要素を含んでいる。よって、入力層５０ａのノード数は、１０２４×５＝５１２０個となる。各波形データ７２ａ～７２ｅは、ニューラルネットワーク５０の入力層５０ａに入力される。訓練データ７５の各波形データのラベル値７７は、ニューラルネットワークの出力層５０ｂに入力され、ニューラルネットワーク５０を訓練する。図４０の符号５０ｃは、中間層を示す。

【0186】

＜波形データの分析方法＞
図４２に、検体中の成分の波形データを分析する方法の例を示す。図４２に例示される波形データの分析方法では、分析対象の成分からフローサイトメータ（測定ユニット４００、図７参照）によって取得した前方散乱光のアナログ信号８０ａ、第１側方散乱光のアナログ信号８０ｂ、第１側方蛍光のアナログ信号８０ｃ、第２側方散乱光のアナログ信号８０ｄ、第２側方蛍光のアナログ信号８０ｅから、上述の方法によって得られる波形データからなる分析データ８５が生成される。複数波長の光がフローセル４１１３（図３７参照）に照射されることによって波形データが取得されているので、各波長に対応した複数の波形データが取得される。例えば、第１波長（例えば、４０５ｎｍ）の光に対応した第１側方散乱光および第１側方蛍光に各々対応する波形データ、および、第２波長（例えば、６３８ｎｍ）の光に対応した前方散乱光、第２側方散乱光および第２側方蛍光に各々対応する波形データが取得される。第１波長の光に対応する側方蛍光は第１蛍光色素に基づいて取得され、第２波長の光に対応する側方蛍光は第２蛍光色素に基づいて取得される。

【0187】

分析データ８５と訓練データ７５は、少なくとも取得条件を同じにすることが好ましい。取得条件とは、検体中の成分をフローサイトメータによって測定するための条件、例えば測定試料の調製条件、測定試料をフローセルに流すときの流速、フローセルに照射される光の強度、散乱光及び蛍光を受光する受光素子の増幅率（ゲイン）などを含む。取得条件は、さらに、アナログ信号をＡ／Ｄ変換するときのサンプリングレートも含む。

【0188】

分析対象の成分がフローセル４１１３を流れると、前方散乱光のアナログ信号８０ａ、第１側方散乱光のアナログ信号８０ｂ、第１側方蛍光のアナログ信号８０ｃ、第２側方散乱光のアナログ信号８０ｄ、第２側方蛍光のアナログ信号８０ｅが得られる。これらのアナログ信号８０ａ～８０ｅが上述したようにＡ／Ｄ変換されると、成分毎に、信号強度を取得した時点が同期され、前方散乱光信号の波形データ８２ａ、第１側方散乱光信号の波形データ８２ｂ、第１側方蛍光信号の波形データ８２ｃ、第２側方散乱光信号の波形データ８２ｄ、第２側方蛍光信号の波形データ８２ｅとなる。各波形データ８２ａ～８２ｅは、各成分の信号強度（前方散乱光の信号強度、第１／第２側方散乱光の信号強度、及び第１／第２側方蛍光の信号強度）のデータがセットとなるように組み合わされて、分析データ８５として深層学習アルゴリズム５１に入力される。図４２の例では、波形データ８２ａ、８２ｂ、８２ｃ、８２ｄ、８２ｅの５つの波形データで構成されたデータセットが入力される。

【0189】

分析データ８５を訓練済みの深層学習アルゴリズム５１を構成するニューラルネットワーク５１の入力層５１ａに入力すると、出力層５１ｂから、分析データ８５に対応する成分の種別に関する分類情報として分析結果８３が出力される。図４２の符号５１ｃは、中間層を示す。成分の種別に関する分類情報とは、例えば、各成分が複数の細胞種別の各々に属する確率である。さらに、この確率の中で、値が最も高い分類に、分析データ８５を取得した分析対象の成分が属すると判断し、その種別を表す識別子であるラベル値８２等が分析結果８３に含まれてもよい。分析結果８３は、ラベル値そのものの他、ラベル値を種別を示す情報（例えば文字列）に置き換えたデータであってもよい。図４２では、分析データ８５に基づいて、深層学習アルゴリズム５１が分析データ８５を取得した分析対象の成分が属する確率が最も高かったラベル値「１」を出力し、さらに、このラベル値に対応する「好中球」という文字データが分析結果８３として出力される例を示している。ラベル値の出力は、深層学習アルゴリズム５１が行ってもよいが、他のコンピュータプログラムが、深層学習アルゴリズム５１が算出した確率に基づいて、最も好ましいラベル値を出力してもよい。

【0190】

図４３は、図１２に示した試料調製部４４０とは構成が異なる他の試料調製部４４１の構成例を示す。なお、図４３において、図１２中の要素と同様の要素には同一の符号を付している。

【0191】

図４３の例では、深層学習アルゴリズム（ＡＩアルゴリズム）を用いた分析を実行することにより、試料調製部４４０の測定チャネルの構成が変更可能であることが示される。図４３の例では、白血球の計数、有核赤血球の計数、および、好塩基球の計数を行うための測定チャネル（ＷＮＲ）が、白血球の分類を行うための測定チャネル（ＷＤＦ）に置き換えられる。つまり、図４３の例では、ＷＮＲチャネルがＷＤＦチャネルに置き換えられることで、測定ユニット４００（図７参照）は複数のＷＤＦチャネルを備える構成となっている。この例の場合、ＷＮＲチャネルの測定項目である白血球の計数、有核赤血球の計数、および、好塩基球の計数は、ＷＤＦチャネルによる測定で得られた波形データをＡＩアルゴリズム５１で分析することで得られる。例えば、ＷＤＦチャネルによる測定で得られた波形データから、白血球、有核赤血球、好塩基球を分類できるように、ＡＩアルゴリズム５１を学習させることで、ＷＤＦチャネルの波形データから白血球、有核赤血球、好塩基球の分類が可能となる。例えば、ＷＤＦチャネルの測定で得られた波形データのうち、白血球、有核赤血球、好塩基球に該当するデータを訓練データとしてＡＩアルゴリズム５１に学習させることで、ＷＤＦチャネルで測定された波形データから白血球、有核赤血球、好塩基球を分類可能なＡＩアルゴリズム５１が生成される。図４３の構成例では、例えば、複数のＷＤＦチャネルにおいて、異なる検体に対する測定が並行して実行される。例えば、複数のＷＤＦチャネルの各々のチャンバにおいて、異なる検体の試料調製が並行して実行される。

【0192】

図４３に示すように、所定の測定チャネルの分析を、他の測定チャネルによるデータのＡＩ分析により代替することで、当該所定の測定チャネルを他の測定チャネルに置き換えることが可能となる。これにより、分析システム４００２（図７参照）に設けられた測定チャネルの総数を増やすことなく、増設したい測定チャネルの数を増やすことができる。図４３の例では、ＷＮＲチャネルをＷＤＦチャネルで置き換えることで、分析システム４００２に設けられた測定チャネルの総数を増やすことなく、ＷＤＦチャネルの数を増やすことが可能となる。ＷＤＦチャネルの数が増えることで、複数のＷＤＦチャネルのそれぞれで異なる検体を並列に測定することが可能となる。並列測定によって、ＷＤＦチャネルによる測定のスループットが向上する。図４３の例により、検体処理のスループットも向上できるという顕著な効果が得られる。

【0193】

ＡＩアルゴリズムを活用することである測定チャネルを他の測定チャネルに置き換えるという例について、置き換えられる対象の測定チャネルの測定項目（図１２の例では、ＷＮＲチャネルにおける有核赤血球・好塩基球）を他の測定チャネル（図１２の例では、ＷＤＦチャネル）で測定されたデータに基づいて分析することが求められる。他の測定チャネルで測定されたデータをＡＩアルゴリズムで分析することで、置き換えられる対象の測定チャネルの測定項目を分類できるようになる。本実施形態では、複数波長の光に各々対応する複数種類の光学的信号がＡＩアルゴリズムにより分析される。複数波長の光に各々対応するデータを用いて情報量を増やすことにより、ＡＩによる分析精度が向上する。分析精度の向上により、他の測定チャネル（例えば、ＷＤＦチャネル）のデータであっても置き換え対象の測定チャネルの測定項目（図１２の例では、ＷＮＲチャネルにおける有核赤血球・好塩基球）の分類が可能となる。

【0194】

図４３の例における分析方法（第１の例）では、例えば、ＷＤＦチャネルによる測定で得られた波形データのＡＩ分析によって、ＮＲＢＣ（有核赤血球）の分類・計数およびＢＡＳＯ（好塩基球）の分類・計数に加え、ＢＡＳＯ以外の白血球の分類（好酸球、好中球、リンパ球、単球）・計数も実行する。この例の場合、ＡＩアルゴリズム５１は、波形データにより、ＮＲＢＣ、ＢＡＳＯおよびＢＡＳＯ以外の白血球（好酸球、好中球、リンパ球、単球）の分類が可能なように学習されている。このようなＡＩアルゴリズム５１を用いることで、ＷＮＲチャネルをＷＤＦチャネルに置き換えることが可能となる。これらの分析は、分析ユニット３０２Ｘ（図７参照）によって次のように実行される。

【0195】

図４４は、本分析方法の動作例（第１の動作例）を示すフローチャートである。図４４に示すように、第１の動作例では、分析ユニット３０２Ｘ（図７参照）は、ＷＤＦチャネルで検出された光学的信号に対応するデータを取得する（ステップＳ０）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、本データをＡＩアルゴリズム５１で分析する（ステップＳ１）。分析ユニット３０２Ｘは、ＷＤＦチャネルによる測定で得られたデータをＡＩアルゴリズム５１で分析することで、単球、リンパ球、好中球、好酸球の分類に加え、ＷＤＦチャネルで分析されていた好塩基球と有核赤血球も分類する。次に、分析ユニット３０２Ｘは、ＷＤＦチャネルのデータの分析結果を提供する（ステップＳ２）。

【0196】

図４５に示す分析方法の他の例（第２の動作例）では、例えば、ＷＤＦチャネルによる測定で得られた波形データのＡＩ分析によって、ＮＲＢＣの分類・計数およびＢＡＳＯの分類・計数を行う。ＡＩアルゴリズム５１で、ＮＲＢＣにもＢＡＳＯにも分類されなかった細胞に対応する波形データは、スキャッタグラムによって分析され、好酸球、好中球、リンパ球および単球の分類・計数が実行される。この例の場合、ＡＩアルゴリズム５１は、例えば、波形データからＮＲＢＣ、ＢＡＳＯおよびそれ以外、という分類を行うように学習されている。この例のＡＩアルゴリズム５１によって、ＮＲＢＣおよびＢＡＳＯ以外に分類された細胞に対応する波形データが、スキャッタグラムによって分析される。例えば、ＮＲＢＣおよびＢＡＳＯ以外と分類された細胞に対応する波形データのピーク値が抽出され、側方蛍光信号に対応するピーク値と側方散乱光に対応するピーク値から生成される２次元グラフに基づいて、細胞種別が分類される。例えば、スキャッタグラムに基づき、細胞が好酸球、好中球、リンパ球、単球およびそれ以外のいずれであるかが分類される。スキャッタグラムに基づく分析で好酸球、好中球、リンパ球および単球以外に分類された細胞は、例えば、デブリ（”Ｄｅｂｒｉｓ”）に分類される。これらの分析は、分析ユニット３０２Ｘ（図７参照）によって次のように実行される。

【0197】

図４５は、本分析方法の動作例（第２の動作例）を示す別のフローチャートである。図４５に示すように、分析ユニット３０２Ｘは、ＷＤＦチャネルで検出された光学的信号に対応するデータを取得する（ステップＳ１０）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、本データをＡＩアルゴリズム５１で分析する（ステップＳ１１）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、ＮＲＢＣおよびＢＡＳＯ以外の細胞に対応するデータを特定する（ステップＳ１２）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、特定されたデータをスキャッタグラムで分析する（ステップＳ１３）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、ＷＤＦチャネルのデータの分析結果を提供する（ステップＳ１４）。

【0198】

図４６に示す分析方法のさらなる他の例（第３の例）では、例えば、ＷＤＦチャネルによる測定で得られた波形データのスキャッタグラム分析によって、リンパ球の分類・計数、単球の分類・計数、好酸球の分類・計数、および、好中球／好塩基球の分類・計数が実行される。好中球／好塩基球の分類・計数においては、例えば、好中球および好塩基球のいずれかに分類される細胞が計数される。リンパ球、単球、好酸球、好中球／好塩基球のいずれにも分類されなかった細胞、および、好中球および好塩基球のいずれかに分類された細胞に対応する波形データは、ＡＩアルゴリズム５１（図４２参照）で分析される。例えば、波形データは、ＡＩアルゴリズム５１により、ＮＲＢＣ、好塩基球（ＢＡＳＯ）およびそれ以外に分類される。例えば、スキャッタグラム分析で好中球および好塩基球のいずれかであると分類された細胞の計数結果から、ＡＩアルゴリズム６０によりＢＡＳＯと分類された細胞の計数が減算され、好中球の計数と好塩基球の計数のそれぞれが算出される。ＡＩ分析でＮＲＢＣおよびＢＡＳＯのいずれにも分類されなかった細胞は、例えば、デブリ（”Ｄｅｂｒｉｓ”）に分類される。これらの分析は、分析ユニット３０２Ｘ（図７参照）によって次のように実行される。

【0199】

図４６は、本分析方法の動作例（第３の動作例）を示すフローチャートである。図４６に示すように、分析ユニット３０２Ｘは、ＷＤＦチャネルで検出された光学的信号に対応するデータを取得する（ステップＳ２０）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、本データをスキャッタグラムで分析する（ステップＳ２１）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、（１）リンパ球、単球、好酸球、好中球／好塩基球のいずれにも分類されなかった細胞、（２）好中球／好塩基球に分類された細胞、に対応するデータを特定する（ステップＳ２２）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、特定されたデータをＡＩアルゴリズム６０で分析する（ステップＳ２３）。次に、分析ユニット３０２Ｘは、ＷＤＦチャネルのデータの分析結果を提供する（ステップＳ２４）。

【0200】

（第５実施形態）
第５実施形態は、ホストプロセッサと、並列処理プロセッサとを含む検体分析システム（第１～第４実施形態の分析システムを含む）において、前記ホストプロセッサによる制御に基づいて、検体中の成分の各々に関するデータを取得し、前記並列処理プロセッサで前記データに関する並列処理を実行し、前記並列処理の結果に基づき、前記成分の各々の種別に関する情報を生成する、ことを含む検体分析方法を開示する。

【0201】

本実施形態によれば、１検体あたり数百メガバイトから数ギガバイトに及ぶ膨大な容量のデータを分析する場合であっても、ホストプロセッサとは別に設けられた並列処理プロセッサによって、測定されたデータに関する処理を並列で実行できる。そのため、例えば膨大な容量のデータを深層学習アルゴリズムによって処理する場合であっても、検体分析システム内でデータの処理が完結する。例えば、深層学習アルゴリズムを格納した分析用サーバに、インターネットまたはイントラネットを介してデータを送信する必要がない。したがって、本実施形態によれば、検体分析システムから分析用サーバに大容量のデータを送信し、分析用サーバから返ってくる分析結果を取得する必要がなく、検体中の成分の分類精度を向上しながらも検体分析システムの処理能力を維持することができる。

【0202】

図４７は、本実施形態の構成例を示す。なお、図４７において、図１０中の要素と同様の要素には同一の符号を付している。図４７の分析ユニット３０３Ｘは、ＡＩアルゴリズムによる演算処理をマスタプロセッサに代わって処理可能な並列処理プロセッサを備える。ＡＩアルゴリズム（例えば、深層学習アルゴリズム）で実行される行列演算の処理に適した並列処理プロセッサを用いることで、ＡＩ分析に要するＴＡＴ（Ｔｕｒｎ Ａｒｏｕｎｄ Ｔｉｍｅ）が改善される。なお、以下の説明において、上述の実施形態と同様の構成・機能についての説明は省略される。

【0203】

図４７に示す分析ユニット３０２Ｘは、図１１に示したように測定ユニット４０１内に分析部３０１Ｘが設けられたような構成であってもよい。

【0204】

プロセッサ３００１は、並列処理プロセッサ３００２を用いて、深層学習アルゴリズム６０による波形データの分析処理を実行する。すなわち、プロセッサ３００１は、深層学習アルゴリズム６０にしたがって波形データの分析処理を実行するようにプログラムされている。深層学習アルゴリズム６０に基づいて検体中の成分に対応するデータを分析するための解析ソフトウェア３１００は、記憶部３００４に格納されていてもよい。この場合、プロセッサ３００１は、記憶部３００４に格納されている解析ソフトウェア３１００を実行することにより、深層学習アルゴリズム６０に基づくデータの分析処理を実行する。本実施形態では、例えば、ＡＩ分析はプロセッサ３００１と並列処理プロセッサ３００２によって実行され、計算処理分析は並列処理プロセッサ３００２を用いずにプロセッサ３００１によって実行される。プロセッサ３００１は、例えば、ＣＰＵ（Ｃｅｎｔｒａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｕｎｉｔ）である。プロセッサ３００１は、例えばインテル社製のＣｏｒｅ ｉ９、Ｃｏｒｅ ｉ７、Ｃｏｒｅ ｉ５、ＡＭＤ社製のＲｙｚｅｎ ９、Ｒｙｚｅｎ ７、Ｒｙｚｅｎ ５、Ｒｙｚｅｎ ３などを用いてもよい。

【0205】

プロセッサ３００１は、並列処理プロセッサ３００２を制御する。並列処理プロセッサ３００２は、プロセッサ３００１による制御に応じて、例えば行列演算に関する並列処理を実行する。つまり、プロセッサ３００１は、並列処理プロセッサ３００２のマスタプロセッサであり、並列処理プロセッサ３００２は、プロセッサ３００１のスレーブプロセッサである。プロセッサ３００１は、ホストプロセッサまたはメインプロセッサとも呼ばれる。

【0206】

並列処理プロセッサ３００２は、波形データの分析に関する処理の少なくとも一部である複数の演算処理を並列に実行する。並列処理プロセッサ３００２は、例えば、ＧＰＵ（Ｇｒａｐｈｉｃｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｕｎｉｔ）、ＦＰＧＡ（Ｆｉｅｌｄ Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ Ｇａｔｅ Ａｒｒａｙ）、ＡＳＩＣ（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ｃｉｒｃｕｉｔ）である。並列処理プロセッサ３００２がＦＰＧＡである場合、並列処理プロセッサ３００２は、例えば、訓練済みの深層学習アルゴリズム６０に関する演算処理が予めプログラムされていてもよい。並列処理プロセッサ３００２がＡＳＩＣである場合、並列処理プロセッサ３００２は、例えば、訓練済みの深層学習アルゴリズム６０に関する演算処理を実行するための回路が予め組み込まれていてもよいし、そのような組み込み回路に加えてプログラマブルなモジュールが内蔵されていてもよい。並列処理プロセッサ３００２は、例えば、ＮＶＩＤＩＡ社製のＧｅＦｏｒｃｅ，Ｑｕａｄｒｏ，ＴＩＴＡＮ，Ｊｅｔｓｏｎなどを用いてもよい。Ｊｅｔｓｏｎシリーズであれば、例えば、Ｊｅｔｓｏｎ Ｎａｎｏ、Ｊｅｔｓｏｎ Ｔｘ２、Ｊｅｔｓｏｎ Ｘａｖｉｅｒ、Ｊｅｔｓｏｎ ＡＧＸ Ｘａｖｉｅｒが用いられる。

【0207】

プロセッサ３００１は、例えば、測定ユニット４０２（図７参照）の制御に関する計算処理を実行する。プロセッサ３００１は、例えば、装置機構部４５５、試料調製部４４０、検体吸引機構４５０との間で送受信される制御信号に関する計算処理を実行する。プロセッサ３００１は、例えば、コンピュータ３１０Ｘとの間での情報の送受信に関する計算処理を実行する。コンピュータ３１０Ｘは、例えば、プロセッサ３００１の処理に基づいて分析ユニット３０３Ｘから送信された分析結果を表示する機能を有する。コンピュータ３１０Ｘは、例えば、分析ユニット３０３Ｘに、測定オーダーを送信する。測定オーダーは、例えば、コンピュータ３１０Ｘの入力デバイスを介してユーザによって入力される。測定オーダーは、例えば、ホストコンピュータからコンピュータ３１０Ｘに送信される。プロセッサ３００１は、例えば、記憶部３００４からのプログラムデータの読み出し、メインメモリ３０１７へのプログラムの展開、メインメモリ３０１７との間のデータの送受信に関する処理を実行する。プロセッサ３００１により実行される上述の各処理は、例えば、所定の順番に実行することが求められる。例えば、装置機構部４５５、試料調製部４４０、検体吸引機構４５０の制御に要する処理がＡ、Ｂ及びＣとすると、Ｂ、Ａ、Ｃの順で実行することが求められることがある。プロセッサ３００１はこのような順序に依存する連続的な処理を実行することが多いため、演算ユニット（「プロセッサコア」、「コア」等と呼ばれることがある）の数を増したとしても、必ずしも処理速度が高まるものではない。

【0208】

一方、並列処理プロセッサ３００２は、例えば、多量の要素を含む行列データの演算のように、定型的で多量な計算処理を実行する。本実施形態では、並列処理プロセッサ３００２は、深層学習アルゴリズム６０に従って波形データを分析する処理の少なくとも一部を並列化した並列処理を実行する。深層学習アルゴリズム６０には、例えば、多量の行列演算が含まれる。深層学習アルゴリズム６０には、例えば、少なくとも１００の行列演算が含まれることがあり、また、少なくとも１０００の行列演算が含まれることもある。並列処理プロセッサ３００２は、複数の演算ユニットを有し、これらの演算ユニットの各々が同時に行列演算を実行可能である。つまり、並列処理プロセッサ３００２は、並列処理として、複数の演算ユニットの各々による行列演算を並列に実行することができる。例えば、深層学習アルゴリズム６０に含まれる行列演算は、互いに順序依存が無い複数の演算処理に分割することができる。このように分割された演算処理は、複数の演算ユニットの各々で並列に実行可能となる。これらの演算ユニットは、「プロセッサコア」、「コア」等と呼ばれることがある。

【0209】

このような並列処理を実行することにより、測定ユニット４０２全体としての演算処理を高速化することが可能となる。深層学習アルゴリズム６０に含まれる行列演算のような処理は、例えば、「単一命令複数データ処理」（ＳＩＭＤ：Ｓｉｎｇｌｅ Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｄａｔａ）と呼ばれることがある。並列処理プロセッサ３００２は、例えばこのようなＳＩＭＤ演算に適している。このような並列処理プロセッサ３００２は、ベクトルプロセッサと呼ばれることがある。

【0210】

上述のように、プロセッサ３００１は、多様かつ複雑な処理を実行することに適している。一方、並列処理プロセッサ３００２は、定型化された多量の処理を並列に実行することに適している。定型化された多量の処理を並列に実行することにより、計算処理に要するＴＡＴ（Ｔｕｒｎ Ａｒｏｕｎｄ Ｔｉｍｅ）が短縮される。なお、並列処理プロセッサ３００２が実行する並列処理の対象は、行列演算に限られない。例えば、並列処理プロセッサ３００２が深層学習アルゴリズム５０に従って学習処理を実行するときは、学習処理に関する微分演算等が並列処理の対象となり得る。

【0211】

プロセッサ３００１の演算ユニットの数は、例えば、デュアルコア（コア数：２）、クアッドコア（コア数：４）、オクタコア（コア数：８）である。一方、並列処理プロセッサ３００２は、演算ユニットを、例えば、少なくとも１０個有し（コア数：１０）、１０の行列演算を並列に実行し得る。並列処理プロセッサ３００２は、例えば、演算ユニットを数十個有するものもある。また、並列処理プロセッサ３００２は、演算ユニットを、例えば、少なくとも１００個有し（コア数：１００）、１００の行列演算を並列に実行し得るものもある。また、並列処理プロセッサ３００２は、演算ユニットを、例えば、少なくとも１０００個有し（コア数：１０００）、１０００の行列演算を並列に実行し得るものもある。並列処理プロセッサ３００２は、例えば、演算ユニットを数千個有するものもある。

【0212】

図４８は、並列処理プロセッサ３００２の構成例を示す。並列処理プロセッサ３００２は、複数の演算ユニット３２００、及びＲＡＭ３２０１を含む。演算ユニット３２００の各々は、行列データの演算処理を並列に実行する。ＲＡＭ３２０１は、演算ユニット３２００が実行する演算処理に関するデータを記憶する。ＲＡＭ３２０１は、少なくとも１ギガバイトの容量を有するメモリである。ＲＡＭ３２０１は、２ギガバイト、４ギガバイト、６ギガバイト、８ギガバイト、又は１０ギガバイト以上の容量を有するメモリであってもよい。演算ユニット３２００は、ＲＡＭ３２０１からデータを取得し、演算処理を実行する。演算ユニット３２００は、「プロセッサコア」、「コア」等と呼ばれることがある。

【0213】

図４９、図５０および図５１は、プロセッサ３００１上で動作する解析ソフトウェア３１００の制御に基づいて、並列処理プロセッサ３００２で実行される演算処理の概要を示す。図４９は、演算処理を実行する並列処理プロセッサ３００２の構成例を示す。並列処理プロセッサ３００２は、複数の演算ユニット３２００、ＲＡＭ３２０１を有する。解析ソフトウェア３１００を実行するプロセッサ３００１は、並列処理プロセッサ３００２に命令し、波形データを深層学習アルゴリズム６０で分析する場合に要する少なくとも一部の演算処理を並列処理プロセッサ３００２に実行させる。プロセッサ３００１は、並列処理プロセッサ３００２に対して、深層学習アルゴリズム６０に基づく波形データの分析に関する演算処理の実行を命令する。ＦＣＭ検出部４６０（図４参照）で検出された信号に対応する波形データの全部又は少なくとも一部は、メインメモリ３０１７に記憶される。メインメモリ３０１７に記憶されたデータは、並列処理プロセッサ３００２のＲＡＭ３２０１に転送される。メインメモリ３０１７に記憶されたデータは、例えば、ＤＭＡ（Ｄｉｒｅｃｔ Ｍｅｍｏｒｙ Ａｃｃｅｓｓ）方式によりＲＡＭ３２０１に転送される。並列処理プロセッサ３００２の複数の演算ユニット３２００の各々は、ＲＡＭ３２０１に記憶されたデータに対する演算処理を並列に実行する。複数の演算ユニット３２００の各々は、必要なデータをＲＡＭ３２０１から取得して演算処理を実行する。演算結果に対応するデータは、並列処理プロセッサ３００２のＲＡＭ３２０１に記憶される。演算結果に対応するデータは、ＲＡＭ３２０１からメインメモリ３０１７に、例えばＤＭＡ方式で、転送される。

【0214】

図５０は、並列処理プロセッサ３００２が実行する行列演算の概要を示す。波形データを深層学習アルゴリズム６０に従って分析するにあたり、行列の積の計算（行列演算）が実行される。並列処理プロセッサ３００２は、例えば、行列演算に関する複数の演算処理を並列に実行する。図５０の（ａ）は、行列の積の計算式を示す。（ａ）に示す計算式では、ｎ行ｎ列の行列ａとｎ行ｎ列の行列ｂとの積により、行列ｃを求める。図５０に例示されるように、計算式は、多階層のループ構文で記述される。図５０の（ｂ）は、並列処理プロセッサ３００２で並列に実行される演算処理の例を示す。図５０（ａ）に例示された計算式は、例えば、１階層目のループ用変数ｉと、２階層目のループ用変数ｊとの組合せ数であるｎ×ｎ個の演算処理に分割することができる。このように分割された演算処理の各々は、互いに依存しない演算処理であるため、並列に実行し得る。

【0215】

図５１は、図５０の（ｂ）に例示された複数の演算処理が、並列処理プロセッサ３００２で並列に実行されることを示す概念図である。図５１に示すように、複数の演算処理の各々は、並列処理プロセッサ３００２が備える複数の演算ユニット３２００のいずれかに割り当てられる。演算ユニット３２００の各々は、割り当てられた演算処理を、互いに並列に実行する。つまり、演算ユニット３２００の各々は、分割された演算処理を同時に実行する。

【0216】

図５１に例示された並列処理プロセッサ３００２による演算によって、例えば、波形データに対応する細胞が複数の細胞種別の各々に属する確率に関する情報が求められる。演算の結果に基づいて、解析ソフトウェア３１００を実行するプロセッサ３００１は、波形データに対応する細胞の細胞種に関する解析を行う。演算結果は、並列処理プロセッサ３００２のＲＡＭ３２０１に記憶され、ＲＡＭ３２０１からメインメモリ３０１７に転送される。プロセッサ３００１は、メインメモリ３０１７に記憶された演算結果に基づいて解析した結果を取得し、記憶部３００４に格納する。

【0217】

検体中の成分が複数の分類種別の各々に属する確率の演算は、並列処理プロセッサ３００２とは別のプロセッサが行ってもよい。例えば、並列処理プロセッサ３００２による演算結果がＲＡＭ３２０１からメインメモリ３０１７に転送され、プロセッサ３００１が、メインメモリ３０１７から読み出した演算結果に基づいて、各々の波形データに対応する成分が複数の分類種別の各々に属する確率に関する情報を演算してもよい。また、並列処理プロセッサ３００２による演算結果がＲＡＭ３２０１から分析ユニット３０３Ｘ（図４７参照）に転送され、分析ユニット３０３Ｘに搭載されたプロセッサが、各々の波形データに対応する成分が複数の分類種別の各々に属する確率に関する情報を演算してもよい。

【0218】

＜白血球の分類方法＞
１．第１蛍光色素及び第２蛍光色素
次に、第１蛍光色素及び第２蛍光色素の例について説明する。この例では、検体中の白血球を染色するために、第１蛍光色素及び第２蛍光色素の２種類の蛍光色素を用いる例を説明する。以下では、特に、採血から時間が経過した血液検体であっても、好塩基球を正確に計数することに適した第１蛍光色素および第２蛍光色素の組み合わせについて説明する。

【0219】

第２蛍光色素は、第１蛍光色素とは異なる波長域に極大吸収を有する蛍光色素である。すなわち、第２蛍光色素は、第１蛍光色素からの蛍光とは区別して検出可能な波長の蛍光を放出する蛍光色素である。第１蛍光色素及び第２蛍光色素はそれぞれ、白血球などの血液細胞の核酸に結合する性質を有する公知の蛍光色素から適宜選択できる。

【0220】

第１蛍光色素及び第２蛍光色素は、フローサイトメータが備える光源から照射される光によって励起される。光は、１つの光源から照射されてもよいし、２つの光源から照射されてもよい。１つの光源から光が照射される場合、当該光源から照射される光は、第１蛍光色素及び第２蛍光色素の両方を励起可能な光であってもよい。そのような光としては、複数の波長を含む光が好ましく、例えば白色光が挙げられる。あるいは、第１蛍光色素及び第２蛍光色素が、１つの波長の光で励起可能な程度に近い波長域に極大吸収を有する場合、光源から照射される光は当該１つの波長の光であってもよい。例えば、第１蛍光色素又は第２蛍光色素の一方が極大吸収を４００～５２０ｎｍの波長域に有し、他方が極大吸収を３００～４２０ｎｍの波長域に有する場合、４００～４２０ｎｍに中心波長を有する光、例えば４５５ｎｍの光により、両方の蛍光色素を励起できる。あるいは、例えば、第１蛍光色素および第２蛍光色素の極大吸収が６３０～６６０ｎｍの波長域内にあり、第１蛍光色素又は第２蛍光色素の一方が６６０～６７０ｎｍの波長域にピークを有する蛍光を発し、他方が６７０ｎｍより長波長域にピークを有する蛍光を発する場合、６３０～６５５ｎｍに中心波長を有する光、例えば６３３ｎｍの光により、両方の蛍光色素を励起でき、かつ、それぞれの蛍光色素から生じる光を区別して検出できる。

【0221】

２つの光源から光が照射される場合、照射される光は、第１蛍光色素を励起可能な第１波長の光、及び第２蛍光色素を励起可能な第２波長の光の２種の光であってもよい。第２波長は、第１波長とは異なる。波長は、蛍光色素の種類に応じて適宜決定できる。例えば、第１波長は３１５～４９０ｎｍであり、好ましくは４００～４５０ｎｍであり、より好ましくは４００～４１０ｎｍである。第２波長は６１０～７５０ｎｍであり、好ましくは６２０～７００ｎｍであり、より好ましくは６３３～６４３ｎｍである。

【0222】

２つの励起光を用いる場合、第１蛍光色素は、極大吸収を４００～４９０ｎｍの波長域に有し、当該波長域の光を吸収することにより励起されて蛍光を発する色素であって、血液細胞の核酸（特にＤＮＡ）に結合する性質を有する色素が好ましい。例えば、アクリジン骨格を有する蛍光色素、４’，６－ジアミジノ－２－フェニルインドール・ジヒドロクロリド（ＤＡＰＩ）、ヘキストシリーズのＨｏｅｃｈｓｔ３３４２、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３４５８０などが挙げられる。

【0223】

アクリジン骨格を有する蛍光色素としては、プロフラビン、９－アミノアクリジン、アクリジンオレンジ、アクリジンイエローＧ、アクリフラビン、ベーシックイエロー９、乳酸エタクリジン、ユークリシンＧＧ（Ｅｕｃｈｒｙｓｉｎｅ ＧＧＮＸ）、プロフラビンヘミ硫酸塩、３，６－ビス（ジメチルアミノ）アクリジン（Ｒｈｏｄｕｌｉｎｅ Ｏｒａｎｇｅｎ）、３，６－ジアミノ－２，７，１０－トリメチル－塩化アクリジニウムが挙げられる。それらの中でも、アクリジンイエローＧが好ましい。あるいは、第２蛍光色素は、市販されている蛍光色素を使用してもよい。

【0224】

２つの励起光を用いる場合、第２蛍光色素としては、極大吸収を６１０～７５０ｎｍの波長域に有し、当該波長域の光を吸収することにより励起されて蛍光を発する色素であって、血液細胞の核酸（特にＲＮＡ）に結合する性質を有する色素が好ましい。例えば、プロピジウムアイオダイド、エチジウムブロマイド、エチジウム－アクリジンヘテロダイマー、エチジウムジアジド、エチジウムホモダイマー－１、エチジウムホモダイマー－２、エチジウムモノアジド、トリメチレンビス［［３－［［４－［［（３－メチルベンゾチアゾール－３－イウム）－２－イル］メチレン］－１，４－ジヒドロキノリン］－１－イル］プロピル］ジメチルアミニウム］・テトラヨージド（ＴＯＴＯ－１）、４－［（３－メチルベンゾチアゾール－２（３Ｈ）－イリデン）メチル］－１－［３－（トリメチルアミニオ）プロピル］キノリニウム・ジヨージド（ＴＯ－ＰＲＯ－１）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル－Ｎ，Ｎ’－ビス［３－［４－［３－［（３－メチルベンゾチアゾール－３－イウム）－２－イル］－２－プロペニリデン］－１，４－ジヒドロキノリン－１－イル］プロピル］－１，３－プロパンジアミニウム・テトラヨージド（ＴＯＴＯ－３）又は２－［３－［［１－［３－（トリメチルアミニオ）プロピル］－１，４－ジヒドロキノリン］－４－イリデン］－１－プロペニル］－３－メチルベンゾチアゾール－３－イウム・ジヨージド（ＴＯＰＲＯ－３）、下記の式（Ｖ）で表される蛍光色素、及びそれらの組み合わせなどが挙げられる。

【0225】

【化1】

【0226】

式（Ｖ）中、Ｒ¹及びＲ⁴は、水素原子、メチル基、エチル基又は炭素数６～１８のアルキル基であって、いずれか一方が炭素数６～１８のアルキル基であるとき、他方が水素原子、メチル基又はエチル基である。Ｒ²及びＲ³は、互いに同一又は異なって、メチル基、エチル基、メトキシ基又はエトキシ基である。Ｚは、硫黄原子、酸素原子又はメチル基を有する炭素原子である。ｎは、０、１、２又は３である。Ｘ^-は、アニオンである。

【0227】

式（Ｖ）において、炭素数６～１８のアルキル基は、直鎖状又は分枝鎖状のいずれであってもよい。炭素数６～１８のアルキル基の中でも、炭素数が６、８又は１０のアルキル基が好ましい。

【0228】

式（Ｖ）において、Ｒ¹及びＲ⁴のベンジル基の置換基として、例えば炭素数１～２０のアルキル基、炭素数２～２０のアルケニル基又は炭素数２～２０のアルキニル基が挙げられる。それらの中でも、メチル基又はエチル基が特に好ましい。

【0229】

式（Ｖ）において、Ｒ²及びＲ³のアルケニル基として、例えば炭素数２～２０のアルケニル基が挙げられる。また、Ｒ²及びＲ³のアルコキシ基としては、炭素数１～２０のアルコキシ基が挙げられる。それらの中でも、特にメトキシ基又はエトキシ基が好ましい。

【0230】

式（Ｖ）において、アニオンＸ^-として、Ｆ^-、Ｃｌ^-、Ｂｒ^-及びＩ^-のようなハロゲンイオン、ＣＦ₃ＳＯ₃ ^-、ＢＦ₄ ^-、ＣｌＯ₄ ^-などが挙げられる。

【0231】

上記の式（Ｖ）で表される蛍光色素としては、下記の式で表される蛍光色素が好ましい。

【0232】

【化2】

【0233】

上記の第２蛍光色素を単独で含む市販の染色試薬を用いてもよい。例えば、フルオロセルＷＤＦ（シスメックス株式会社）、ストマトライザー４ＤＳ（シスメックス株式会社）が挙げられる。

【0234】

１つの励起光を用いる場合、好ましい第１蛍光色素と第２蛍光色素の組み合わせは異なってもよい。例えば、例えば６３３ｎｍの光を励起光として用いる場合、第１蛍光色素および第２蛍光色素の極大吸収が６３０～６６０ｎｍの波長域内にあり、第２蛍光色素が６６０～６７０ｎｍの波長域にピークを有する蛍光を発し、第１蛍光色素が６７０ｎｍより長波長域にピークを有する蛍光を発するような組み合わせが考えられる。そのような組み合わせとして、例えば、第１蛍光色素としてＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７またはＤＲＡＱ９（BioStatus社）、第２蛍光色素として上述の式Ｖで表される蛍光色素を用いることができる。

【0235】

第１蛍光色素及び第２蛍光色素は溶液にして用いられることが好ましい。溶媒は、上記の各蛍光色素を溶解できれば特に限定されない。例えば、水、有機溶媒、及びそれらの混合物が挙げられる。有機溶媒としては、水に混合可能な溶媒が好ましく、例えば炭素数１～６のアルコール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ポリエチレングリコール、ＤＭＳＯなどが挙げられる。

【0236】

図２及び図５を参照して説明したように、第１蛍光色素及び／又は第２蛍光色素は、一つの試薬容器２００に収容されてもよいし、代替的に、図６を参照して説明したように、異なる試薬容器２００Ａ、２００Ｂに別々に収容されてもよい。

【0237】

２．溶血試薬

【0238】

上述の第１蛍光色素および第２蛍光色素は、溶血試薬、特に好ましくは界面活性剤を含む溶血試薬と組み合わせて用いられる。当該界面活性剤により、検体中の赤血球を溶血させ、かつ、白血球の細胞膜に第１蛍光色素及び第２蛍光色素が透過できる程度の損傷を与えることができる。界面活性剤としては、例えばノニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤及びそれらの組み合わせが挙げられる。溶血試薬は、好ましくはノニオン性界面活性剤を含む。

【0239】

ノニオン性界面活性剤としては、例えば、下記の式（Ｉ）で表されるものが挙げられる。
Ｒ¹－Ｒ²－（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_n－Ｈ （Ｉ）
（式中、Ｒ¹は、炭素数８以上２５以下のアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基であり；Ｒ²は、酸素原子、－（ＣＯＯ）－又は下記の式（ＩＩ）：

【0240】

【化3】

であり；ｎは、２３以上２５以下又は３０である。）

【0241】

式（Ｉ）中、好ましくはｎが２３又は２５であり、より好ましくはｎが２３である。ｎが２３以上２５以下の場合、溶血試薬における式（Ｉ）で表されるノニオン界面活性剤の濃度は、１７００ｐｐｍ以上であり、好ましくは１７５０ｐｐｍ以上である。また、ｎが２３以上２５以下の場合、測定試料における式（Ｉ）で表されるノニオン界面活性剤の濃度は、２３００ｐｐｍ以下であり、好ましくは２２００ｐｐｍ以下である。

【0242】

ｎが３０である場合、溶血試薬における式（Ｉ）で表されるノニオン界面活性剤の濃度は、１９００ｐｐｍ以上であり、好ましくは２０００ｐｐｍ以上であり、より好ましくは２１００ｐｐｍ以上である。また、ｎが３０である場合、測定試料における式（Ｉ）で表されるノニオン界面活性剤の濃度は、２３００ｐｐｍ以下であり、好ましくは２２００ｐｐｍである。

【0243】

式（Ｉ）で表されるノニオン界面活性剤の具体例としては、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンステロール、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、及びそれらの組み合わせなどが挙げられる。それらの中でも、ポリオキシエチレンアルキルエーテルが好ましい。ポリオキシエチレンアルキルエーテルは、ポリオキシエチレン（２３）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（２５）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（３０）セチルエーテル及びそれらの群より選択される少なくとも１つであることが好ましい。より好ましくは、ポリオキシエチレン（２３）セチルエーテル、ポリオキシエチレン（２５）セチルエーテル及びそれらの組み合わせであり、さらに好ましくはポリオキシエチレン（２３）セチルエーテルである。溶血試薬に含まれるノニオン界面活性剤は１種類であってもよいし、２種類以上であってもよい。また、溶血試薬は、式（Ｉ）で表されるノニオン界面活性剤以外のノニオン界面活性剤をさらに含んでいてもよい。

【0244】

溶血試薬は、カチオン性界面活性剤をさらに含んでいてもよい。カチオン性界面活性剤としては、例えば第四級アンモニウム塩型界面活性剤、ピリジウム塩型界面活性剤及びそれらの組み合わせが挙げられる。第四級アンモニウム塩型界面活性剤としては、例えば、下記の式（ＩＩＩ）で表される、全炭素数が９～３０の界面活性剤が好ましい。溶血試薬に含まれるカチオン界面活性剤は１種類であってもよいし、２種類以上であってもよい。

【0245】

【化4】

【0246】

式（ＩＩＩ）中、Ｒ¹は、炭素数６～１８のアルキル基又はアルケニル基であり；Ｒ²及びＲ³は、互いに同一又は異なって、炭素数１～４のアルキル基又はアルケニル基であり；Ｒ⁴は、炭素数１～４のアルキル基又はアルケニル基又はベンジル基であり、Ｘ^-は、ハロゲンイオンである。

【0247】

式（ＩＩＩ）中、Ｒ¹は、炭素数が６、８、１０、１２及び１４のアルキル基又はアルケニル基であることがましく、特に直鎖のアルキル基であることが好ましい。より具体的なＲ¹としては、オクチル基、デシル基及びドデシル基が挙げられる。Ｒ²及びＲ³は、互いに同一又は異なって、メチル基、エチル基及びプロピル基であることが好ましい。Ｒ⁴は、メチル基、エチル基及びプロピル基であることが好ましい。

【0248】

ピリジウム塩型界面活性剤としては、例えば、式（ＩＶ）で表される界面活性剤が挙げられる。

【0249】

【化5】

【0250】

式（ＩＶ）中、Ｒ¹は、炭素数６～１８のアルキル基又はアルケニル基であり；Ｘ^-は、ハロゲンイオンである。

【0251】

式（ＩＶ）中、Ｒ¹は、炭素数が６、８、１０、１２及び１４のアルキル基又はアルケニル基であることがましく、特に直鎖のアルキル基であることが好ましい。より具体的なＲ¹としては、オクチル基、デシル基及びドデシル基が挙げられる。

【0252】

溶血試薬におけるカチオン界面活性剤の濃度は、界面活性剤の種類により適宜選択できる。カチオン界面活性剤の濃度は１０ｐｐｍ以上である。カチオン界面活性剤の濃度は、好ましくは４００ｐｐｍ以上、より好ましくは５００ｐｐｍ以上、さらに好ましくは６００ｐｐｍ以上である。また、カチオン界面活性剤濃度は１００００ｐｐｍ以下である。カチオン界面活性剤の濃度は、好ましくは１０００ｐｐｍ以下、より好ましくは８００ｐｐｍ以下、さらに好ましくは７００ｐｐｍ以下である。

【0253】

溶血試薬は、ｐＨを一定にするための緩衝物質が含まれていてもよい。例えば、無機酸塩類、有機酸塩類、グッドの緩衝剤、それらの組合せなどが挙げられる。無機酸塩類としては、例えば、リン酸塩、ホウ酸塩、それらの組合せなどが挙げられる。有機酸塩類としては、クエン酸塩、リンゴ酸塩、それらの組合せなどが挙げられる。グッドの緩衝剤としては、例えば、ＭＥＳ、Ｂｉｓ－Ｔｒｉｓ、ＡＤＡ、ＰＩＰＥＳ、Ｂｉｓ－Ｔｒｉｓ－Ｐｒｏｐａｎｅ、ＡＣＥＳ、ＭＯＰＳ、ＭＯＰＳＯ、ＢＥＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳ、ＨＥＰＰＳ、Ｔｒｉｃｉｎｅ、Ｔｒｉｓ、Ｂｉｃｉｎｅ、ＴＡＰＳ、それらの組合せなどが挙げられる。

【0254】

溶血試薬は、芳香族有機酸をさらに含んでいてもよい。本明細書中では、芳香族有機酸とは、分子中に少なくとも１つの芳香環を有する酸及びその塩を意味する。芳香族有機酸としては、例えば、芳香族カルボン酸、芳香族スルホン酸などが挙げられる。芳香族カルボン酸としては、例えば、フタル酸、安息香酸、サリチル酸、馬尿酸、それらの塩、それらの組み合わせなどが挙げられる。芳香族スルホン酸としては、例えば、ｐ－アミノベンゼンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、それらの塩、それらの組み合わせなどが挙げられる。溶血試薬に含まれる芳香族有機酸は１種類であってもよいし、２種類以上であってもよい。また、芳香族有機酸が緩衝作用を示す場合がある。緩衝作用を示す芳香族有機酸を用いる場合、緩衝剤の添加は任意であり、上述の緩衝剤と組み合わせてもよい。

【0255】

溶血試薬が芳香族有機酸を含む場合、芳香族有機酸の濃度は特に限定されないが、単球とリンパ球の分類能の観点から、２０ｍＭ以上が好ましく、より好ましくは２５ｍＭ以上である。また、溶血試薬に含まれる芳香族有機酸の濃度は５０ｍＭ以下が好ましく、より好ましくは４５ｍＭ以下である。

【0256】

溶血試薬は、液体試薬であることが好ましい。溶媒は、上記の界面活性剤などの各成分を溶解できれば特に限定されない。溶媒としては、例えば水、有機溶媒及びそれらの混合物が挙げられる。有機溶媒としては、水に混合可能な溶媒が好ましく、例えば炭素数１～６のアルコール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ポリエチレングリコール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などが挙げられる。

【0257】

溶血試薬のｐＨは特に限定されないが、ｐＨは５．５以上が好ましい。より好ましくは、５．７以上であり、さらに好ましくは５．９以上である。また、ｐＨは７．２以下が好ましい。より好ましくは６．９以下であり、さらに好ましくは６．６以下である。ｐＨの調整には、公知の塩基（水酸化ナトリウムなど）や酸（塩酸など）を用いることができる。

【0258】

溶血試薬において、浸透圧は特に限定されないが、赤血球の溶血効率の観点から１５０ｍＯｓｍ／ｋｇ以下が好ましく、１３０ｍＯｓｍ／ｋｇ以下がより好ましく、１１０ｍＯｓｍ／ｋｇ以下が最も好ましい。浸透圧の調整には適切な浸透圧調整剤を添加してもよい。浸透圧調整剤として、例えば、糖、アミノ酸、有機溶媒、塩化ナトリウム、それらの組み合わせなどが挙げられる。

【0259】

溶血試薬として、市販の血球測定用の溶血試薬を用いてもよい。例えば、ライザセルＷＤＦ（シスメックス株式会社）、ライザセルＷＤＦＩＩ（シスメックス株式会社）などが挙げられる。

【0260】

溶血試薬は、例えば試薬容器Ｒ１（図５参照）に収容され、上述した方法によってチャンバ４２０に送液されて血液検体と混合される。

【0261】

３．白血球分類方法
次に、本発明の第６実施形態として、上述した第１蛍光色素および第２蛍光色素を用いて白血球を亜集団に分類する方法について説明する。この方法は、例えば図５２のフローチャートに示される工程により実施される。以下、各工程について説明する。図５２は、白血球を亜集団に分類するための方法のフローチャートの一例であり、図５３は、図５２の方法を実現する好ましい一実施形態のフローチャートである。

【0262】

［ステップＳ０：測定試料を調製する工程］
この工程では、白血球を含む検体と、界面活性剤を含む溶血試薬と、第１蛍光色素と、第２蛍光色素とを混合することにより測定試料を調製する。溶血試薬、第１蛍光色素および第２蛍光色素としては、上述したものが好適に用いられる。

【0263】

検体は、白血球を含む又は血液細胞を含む可能性がある試料であればよく、全血に限られない。血液細胞は、白血球、赤血球及び血小板などの、全血中に含まれることが知られた細胞をいう。白血球を含む又は血液細胞を含む可能性がある試料としては、哺乳動物、好ましくはヒトから採取された体液試料である。検体としては、例えば全血、腹水、関節液、胸水、脳脊髄液、骨髄液、気管支肺胞洗浄液、腹腔洗浄液、尿、及びアフェレーシスなどで採取した試料などが挙げられる。

【0264】

上記の第１蛍光色素及び第２蛍光色素は、測定試料中の濃度（終濃度）がそれぞれ所定の範囲内の濃度となるように、検体及び溶血試薬と混合される。測定試料中の第１蛍光色素の好ましい終濃度の上限は１０００ｐｐｍ以下、好ましくは１００ｐｐｍ以下、より好ましくは１０ｐｐｍ以下である。測定試料中の第１蛍光色素の好ましい終濃度の下限は０．００１ｐｐｍ以上、好ましくは０．０１ｐｐｍ以上、より好ましくは０．１ｐｐｍ以上である。測定試料中の第２蛍光色素の好ましい終濃度の上限は１０００ｐｐｍ以下、好ましくは１００ｐｐｍ以下、より好ましくは１０ｐｐｍ以下である。測定試料中の第２蛍光色素の好ましい終濃度の下限は０．００１ｐｐｍ以上、好ましくは０．０１ｐｐｍ以上、より好ましくは０．１ｐｐｍ以上である。

【0265】

溶血試薬と染色試薬と検体の混合比は、例えば、体積比で表して、１０００：１以上：１以上が好ましい。より好ましくは、１０００：１０以上：１０以上であり、さらに好ましくは、１０００：１５以上：１５以上である。また、溶血試薬と染色試薬と検体の混合比は、例えば、体積比で表して、１０００：５０以下：５０以下であることが好ましい。より好ましくは、１０００：３０以下：３０以下であり、さらに好ましくは、１０００：２５以下：２５以下である。蛍光色素と検体との混合比は同一でもよいし、異なっていてもよい。

【0266】

［ステップＳ１：光学的情報を検出する工程］
この工程では、調製された測定試料中の粒子に光を照射し、第１蛍光色素からの蛍光に基づく第１蛍光情報と、第２蛍光色素からの蛍光に基づく第２蛍光情報と、散乱光情報とを含む光学的情報を検出する。光学的情報は、ＦＣＭ検出部４６０（図２参照）により検出されることが好ましい。「測定試料中の粒子」とは、ＦＣＭ検出部４６０により個々に測定され得る、測定試料に含まれる粒状物体をいう。具体的には、まず、測定試料をＦＣＭ検出部４６０のフローセル４１１３に導入し、当該測定試料中の一つ一つの粒子がフローセルを通過するときに当該粒子に光を照射する。そして、当該粒子から発せられる散乱光及び蛍光を測定して、光学的情報を検出する。測定試料中の粒子には、白血球などの細胞だけでなく、溶血した赤血球の残骸（赤血球ゴースト）、血小板の凝集物、脂質粒子などの非細胞の粒子も含まれ得る。

【0267】

検出される光学的情報は、散乱光情報及び蛍光情報である。この方法では２種類の蛍光色素を用いているので、それぞれの蛍光色素から放出される蛍光に対応した蛍光情報が検出される。すなわち、第１蛍光色素からの蛍光に基づく第１蛍光情報と、第２蛍光色素からの蛍光に基づく第２蛍光情報が検出される。１つの光源から光を照射する場合、散乱光情報として、当該光の照射により検出される散乱光情報が検出される。２つの光源からそれぞれ第１波長の光及び第２波長の光を照射する場合、散乱光情報として、第１波長の光の照射により検出される第１散乱光情報、及び、第２波長の光の照射により検出される第２散乱光情報が検出される。

【0268】

散乱光としては、前方散乱光（例えば、受光角度が０度から約２０度の散乱光）及び側方散乱光（例えば、受光角度が約２０度から約９０度の散乱光）が挙げられる。散乱光情報及び蛍光情報は、散乱光及び蛍光のピーク値（パルスのピークの高さ）、パルス面積、パルス幅、透過率、ストークスシフト、比率、経時変化、それらに相関する値などが挙げられる。前方散乱光情報は、細胞の大きさを反映する情報であれば特に限定されない。側方散乱光情報は、細胞構造の複雑性、顆粒特性、核構造、分葉度などの内部情報を反映する情報であれば特に限定されない。散乱光情報としては、前方散乱光ピーク値及び側方散乱光ピーク値が好ましく、側方散乱光ピーク高さがより好ましい。蛍光情報としては、蛍光ピーク高さが好ましい。

【0269】

第１散乱光情報としては、第１波長の光の照射により検出される側方散乱光ピーク値（以下、「第１側方散乱光強度」ともいう）が好ましい。第２散乱光情報としては、第２波長の光の照射により検出される側方散乱光ピーク値（以下、「第２側方散乱光強度」ともいう）が好ましい。第１蛍光情報としては、第１蛍光色素の蛍光ピーク値（以下、「第１蛍光強度」ともいう）が好ましい。第２蛍光情報としては、第２蛍光色素の蛍光ピーク値（以下、「第２蛍光強度」ともいう）が好ましい。

【0270】

光学的情報の検出には、例えば、第１蛍光色素からの蛍光に基づく第１蛍光情報と、第２蛍光色素からの蛍光に基づく第２蛍光情報と、散乱光情報とを検出可能なＦＣＭを使用できる。このようなＦＣＭ検出部としては、例えば、図７、図８に示される光学系及び検出系を備えたＦＣＭが用いられる。

【0271】

［ステップＳ２：好塩基球を含む細胞集団を選別する工程］
この工程では、第１蛍光情報を含む光学的情報に基づいて、測定試料中の粒子から、好塩基球を含む細胞集団を選別する。この工程により、好塩基球の分画に影響を与える集団をあらかじめ取り除くことができると考えられる。上述のように、採取から時間が経過した検体では、好塩基球の分画に影響を与える集団が生じ得る。本発明者は、そのような集団と正常な好塩基球とでは、第１蛍光情報において区別可能な差があることを見出した。例えば、後述の参考例１の図５６(ｃ)に示されるように、正常な白血球の各亜集団は通常、第１蛍光強度（青紫色）及び第２側方散乱光強度（赤色）を二軸とするスキャッタグラムにおいて、ほぼ同程度の蛍光強度を有する。ここで、スキャッタグラム上のドットは、ＦＣＭで測定された個々の粒子を表す。なお、側方散乱光は第１側方散乱光（青紫色）であってもよい。一方、参考例２の図５７(ａ)～図５７(ｃ)に示されるように、採取から時間が経過した検体では、正常な白血球の亜集団よりも第１蛍光強度が低値の集団が現れている。この集団は、第２蛍光強度及び側方散乱光強度を二軸とするスキャッタグラム上で、正常な好塩基球が出現する領域にも認められるので、好塩基球の分画を妨げる。したがって、第１蛍光情報を含む光学的情報に基づいて、好塩基球を含む細胞集団を選別することで、測定した粒子から、好塩基球の分画に影響を与える集団を除くことが可能となる。第６実施形態では、好塩基球を含む細胞集団は、好塩基球を含む白血球の集団であることが好ましい。

【0272】

正常な白血球を溶血試薬及び第１蛍光色素により染色した場合、上記のとおり、当該白血球の各亜集団はほぼ同程度の第１蛍光強度を有する。したがって、第１蛍光情報により、好塩基球を含む細胞集団を選別することができる。具体的には、第１蛍光情報を含む光学的情報が第１蛍光強度であるとき、測定試料中の粒子から、第１蛍光強度が所定の閾値より大きい粒子の集団を選別する。この場合、好塩基球を含む細胞集団として、リンパ球、単球、好中球、好酸球及び好塩基球を含む細胞集団が選別されると考えられる。

【0273】

あるいは、図５３のフローチャートのステップＳ２－１及びＳ２－２に示すように、第１蛍光情報及び散乱光情報に基づくスキャッタグラム（第１スキャッタグラムともいう）を作成し、当該スキャッタグラムに基づいて、好塩基球を含む細胞集団を選別してもよい。散乱光情報は、第１散乱光情報であってもよい。例えば、第１蛍光情報を含む光学的情報が、第１蛍光強度及び側方散乱光強度であるとき、第１蛍光強度及び側方散乱光強度を二軸とするスキャッタグラムにおいて、第１蛍光強度が所定の閾値より大きい所定の領域に出現した粒子の集団を選別することができる。側方散乱光強度は、第１側方散乱光強度および第２側方散乱光強度のいずれを用いてもよい。例えば図５６(ｃ)のように、縦軸に第１蛍光強度をとり、横軸に第２側方散乱光強度をとったスキャッタグラムでは、白血球の各亜集団がほぼ横一列に分布する。すなわち、当該スキャッタグラムにおいて各亜集団が出現する領域も既知である。第１蛍光強度が所定の閾値より大きい所定の領域は、好塩基球を含む白血球の亜集団が出現する領域として予め設定できる。そのような領域は、例えば、リンパ球、単球、好中球、好酸球及び好塩基球の５種の亜集団が出現する領域、リンパ球、単球、好中球及び好塩基球の４種の亜集団が出現する領域、リンパ球、単球及び好塩基球の３種の亜集団が出現する領域であり得る。そのような領域に出現した粒子の集団をゲーティングによって選別することにより、好塩基球を含む白血球の細胞集団が選別されると考えられる。

【0274】

第１蛍光強度に対応する所定の閾値は特に限定されず、適宜決定できる。例えば、好塩基球を含むことが既知の血液や採取から時間の経過した血液を予め、上記の溶血試薬及び第１蛍光色素を用いてＦＣＭで測定し、白血球についての第１蛍光強度を取得し、得られた値を所定の閾値として用いてもよい。また、そのような測定に基づいて作成した第１スキャッタグラムから、白血球の各亜集団が出現する領域に関するデータを蓄積することにより、当該閾値及び好塩基球を含む細胞集団が出現する領域を予め設定してもよい。

【0275】

［ステップＳ３：細胞集団に含まれる白血球を亜集団に分類する工程］
この工程では、第２蛍光情報及び散乱光情報に基づいて、好塩基球を含む細胞集団に含まれる白血球を亜集団に分類する。散乱光情報は、第２散乱光情報であってもよい。上記の細胞集団を選別する工程により、好塩基球の分画に影響を与える集団が取り除かれているので、選別された細胞集団に含まれる白血球を、好塩基球を含む各亜集団に精度よく分類することができると考えられる。この工程では、例えば、図５３のフローチャートのＳ３－１、Ｓ３－２に示すように、第２蛍光情報及び散乱光情報に基づくスキャッタグラム（第２スキャッタグラムともいう）を作成し、当該スキャッタグラムに基づいて、好塩基球を含む細胞集団に含まれる白血球を亜集団に分類してもよい。散乱光情報は、第２散乱光情報であってもよい。具体的には、第２蛍光強度及び側方散乱光強度を二軸とするスキャッタグラムを作成する。側方散乱光強度は、第２側方散乱光強度であってもよい。選別した細胞集団が、好塩基球を含む白血球の集団、すなわちリンパ球、単球、好中球、好酸球及び好塩基球を含む細胞集団であるとき、当該スキャッタグラムにおいては、例えば図５６(ａ)のように、各亜集団が異なる領域に出現して５分類され得る。亜集団ごとに、細胞の大きさ、核酸の量、内部構造などが互いに異なるので、各亜集団について検出される第２蛍光強度及び側方散乱光強度が異なる結果、このように分類される。よって、選別した細胞集団を、リンパ球の集団、単球の集団、好中球の集団、好酸球の集団及び好塩基球の集団に分類できる。

【0276】

あるいは、選別した細胞集団が、リンパ球、単球、好中球及び好塩基球を含む細胞集団であるとき、第２蛍光強度及び側方散乱光強度を二軸とするスキャッタグラムにおいては、各亜集団が異なる領域に出現して４分類され得る。すなわち、選別した細胞集団を、リンパ球の集団、単球の集団、好中球の集団及び好塩基球の集団に分類できる。

【0277】

あるいは、選別した細胞集団が、リンパ球、単球及び好塩基球を含む細胞集団であるとき、第２蛍光強度及び側方散乱光強度を二軸とするスキャッタグラムにおいては、例えば実施例１の図５９(ｂ)のように、各亜集団が異なる領域に出現して３分類され得る。すなわち、選別した細胞集団を、リンパ球の集団、単球の集団及び好塩基球の集団に分類できる。

【0278】

［ステップＳ４：好塩基球の集団に分類された細胞を計数する工程］
この工程では、上記のようにして分類された白血球の亜集団のうち、好塩基球の集団に分類された細胞を計数する。上記の好塩基球を含む細胞集団を選別する工程において、好塩基球の分画に影響を与える集団は除かれているので、好塩基球の集団に分類された細胞には、好塩基球以外の細胞（例えば、劣化した好中球やリンパ球など）は実質的に含まれないと考えられる。よって、当該計数工程により、測定試料中の好塩基球をより正確に計数できる。計数は、上記の第２スキャッタグラムを適当な解析ソフトで解析することにより、好塩基球の集団に分類された細胞の数を取得することが好ましい。

【0279】

［第７実施形態］
第７実施形態の白血球を亜集団に分類する方法は、例えば図５４のフローチャートに示される工程により実施される。測定試料の調製（ステップＳ１０）及び光学的情報の検出（ステップＳ１１）については、第６実施形態と同様に行うことができる。第７実施形態では、光学的情報を検出する工程（ステップＳ１１）と、好塩基球を含む細胞集団を選別する工程（ステップＳ１４、Ｓ１５）との間に、第１蛍光情報に基づいて、測定試料中の粒子から、有核細胞を含む細胞集団を選別する工程を行う（ステップＳ１２、Ｓ１３）。第１蛍光情報は、好ましくは第１蛍光強度である。具体的には、測定試料中の粒子について、縦軸に粒子数をとり、横軸に第１蛍光強度をとったヒストグラムを作成する（ステップＳ１２）。第１蛍光色素は、上記のとおり細胞の核酸に結合する性質を有するので、粒子が有核細胞である場合、核酸を有さない粒子に比べて第１蛍光強度が高くなる。これを利用して、上記ヒストグラムにおいて、第１蛍光強度が所定の閾値以上又は所定の範囲内にある粒子を、有核細胞として選別する（ステップＳ１３）。このような選別により、測定試料中の粒子から、赤血球ゴーストなどの核を有さない粒子を除くことができる。ここでの所定の閾値及び所定の範囲の下限は、赤血球ゴーストのような第１蛍光強度がごく低値の粒子を除く程度の値でよい。第７実施形態では、有核細胞を含む細胞集団から、好塩基球を含む細胞集団を選別すればよい。好塩基球を含む細胞集団を選別する工程以降は、第６実施形態と同様に行うことができる。

【0280】

［第８実施形態］
第８実施形態の白血球を亜集団に分類する方法は、例えば図５５のフローチャートに示される工程により実施される。測定試料の調製（ステップＳ２０）及び光学的情報の検出（ステップＳ２１）については、第６実施形態と同様に行うことができる。有核細胞を含む細胞集団の選別（ステップＳ２２、Ｓ２３）については、第７実施形態と同様に行うことができる。有核細胞を含む細胞集団の選別を行うか否かは任意に決定できる。第８実施形態では、光学的情報を検出する工程（ステップＳ２１）と、好塩基球を含む細胞集団を選別する工程（ステップＳ２７、Ｓ２８）との間に、第２蛍光情報及び散乱光情報に基づいて、測定試料中の粒子又は有核細胞を含む細胞集団を、リンパ球の集団、単球の集団、好酸球の集団、及び、好中球と好塩基球の両方を含む集団の４つの亜集団に分類する工程を行う（ステップＳ２４、Ｓ２５）。この分類自体は、第６実施形態における、細胞集団に含まれる白血球を亜集団に分類する工程と同様にして行うことができる。具体的には、第２蛍光情報及び散乱光情報に基づいて第２スキャッタグラムを作成し（ステップＳ２４）、当該スキャッタグラムに基づいて、測定試料中の粒子又は有核細胞を含む細胞集団に含まれる白血球を亜集団に分類する（ステップＳ２５）。検体の採取から時間が経過している場合、当該検体中の白血球は分画が不良であり、特に好塩基球と好中球との分画が困難になる。測定した検体がそのような分画不良の検体であった場合、当該分類工程では、測定試料中の粒子又は有核細胞を含む細胞集団は、リンパ球の集団、単球の集団、好酸球の集団、及び、好中球と好塩基球の両方を含む集団の４つの亜集団に分類される。例えば、好中球と好塩基球の両方を含む集団に分類された粒子を計数する。もし、測定した検体が分画良好な検体であった場合は、当該分類工程では、測定試料中の粒子又は有核細胞を含む細胞集団は、リンパ球の集団、単球の集団、好酸球の集団、好中球の集団、及び好塩基球の集団の５つの亜集団に分類されてもよい（ステップＳ２６）。

【0281】

第８実施形態では、測定試料中の粒子又は有核細胞を含む細胞集団を４つの亜集団に分類した後、第６実施形態と同様に、好塩基球を含む細胞集団を選別する工程（ステップＳ２７、Ｓ２８）、細胞集団に含まれる白血球を亜集団に分類する工程（ステップＳ２９）、及び、好塩基球の集団に分類された細胞を計数する工程（ステップＳ３０）を行う。そして、４つの亜集団に分類する工程により得られた結果と、好塩基球の集団に分類された細胞を計数する工程により得られた結果とに基づいて、測定試料中の粒子を、リンパ球の集団、単球の集団、好酸球の集団、好中球の集団、及び好塩基球の集団の５つの亜集団に分類する工程（ステップＳ３１）をさらに行う。例えば、４つの亜集団に分類する工程（ステップＳ２５）により得られた好中球と好塩基球の両方を含む集団の粒子数から、好塩基球の集団に分類された細胞を計数する工程（ステップＳ３０）により得られた粒子数を差し引くことにより、好中球の集団に分類された粒子数を得ることができる。その結果、第８実施形態では、測定試料中の粒子を、リンパ球の集団、単球の集団、好酸球の集団、好中球の集団、及び好塩基球の集団の５つの亜集団に分類できる。なお、４つの亜集団に分類する工程の段階で、測定試料中の粒子を白血球の５つの亜集団に分類できた場合は、その分類結果と、第８実施形態で最終的に得られた分類結果とを比較することもできる。

【0282】

以下に、本発明による白血球分類方法を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

【実施例0283】

以下の例で用いた、白血球を含む検体、溶血試薬、染色色素、分析装置及び測定方法について説明する。

【0284】

［白血球を含む検体］
（全血検体）
健常ボランティアよりＥＤＴＡ－２Ｋ採血管にて採取した全血５ｍＬを用いた。採血後室温（２５±２℃）にて保管し、４時間後、２４時間後、４２時間後及び７２時間後に採血管より分取した検体を検体試料とした。

【0285】

（好塩基球分離前検体及び分離後検体）
好塩基球高値検検体（＞２％以上）１ｍＬを用意し、そのうちの０．５ｍＬを好塩基球分離前検体とした。残りをＨｅｔａＳｅｐ （ＳＣＴ ＳＴ－０７９０６）を用いて赤血球を除去し、白血球を回収した。その後、Ｂａｓｏｐｈｉｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ ＩＩ， ｈｕｍａｎ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ １３０－０９２－６６２）を用いて好塩基球細胞を回収し、これを好塩基球分離後検体とした。

【0286】

［溶血試薬］
ライザセルＷＤＦＩＩ（シスメックス株式会社）を用いた。

【0287】

［染色試薬］
（第１蛍光色素）
アクリジンイエローＧ（関東化学株式会社）を用いた。

【0288】

（第２蛍光色素）
第２蛍光色素として、米国特許6004816に記載の色素化合物Ａを用いた。米国特許6004816は本明細書に参照として組み込まれる。色素化合物Ａは、上記の式（Ｖ）において、Ｒ¹がメチル基であり、Ｒ²及びＲ³が水素原子であり、Ｒ⁴がｎ－オクチルであり、ｎが１であり、Ｚが硫黄原子であり、Ｘ^-がＣＦ₃ＳＯ₃ ^-である化合物であり、構造式は以下のとおりであった。

【0289】

【化6】

【0290】

米国特許6004816に記載されるように、色素化合物Ａは次の工程によって得ることができた。３－メチル－２－メチルベンゾチアゾリウムメタンサルフェート１当量と、Ｎ，Ｎ－ジフェニルホルムアミジン３当量を酢酸中で、９０℃の油浴上で１．５時間加熱撹拌した。反応液をヘキサンにあけ、赤色油状物をさらにヘキサンで懸濁洗浄し、酢酸を除いた。粗生成物を酢酸エチルーヘキサンで再結晶した（収率４８％）。これに１－オクチルレピジニウムトリフレート１当量とピリジンを加え、９０℃の油浴上で３時間加熱撹拌した。反応液を濃縮し、残った青色粗製物をフラッシュクロマトグラフィーにてメタノール－クロロホルムで精製して、濃暗青色粉末の色素化合物Ａを得た（収率６２％）。この濃暗青色粉末の色素化合物Ａの物性試験（ＴＬＣ、１Ｈ－ＮＭＲ、ＭＡＳＳ等）の結果は米国特許6004816に記載されている。色素化合物Ａの極大吸収スペクトルは６２９ｎｍであった。

【0291】

上記の色素化合物Ａ（２７．５ｍｇ）とアクリジンイエローＧ（２５ｍｇ）とを特級エチレングリコール（１Ｌ）に溶解して、染色試薬を調製した。

【0292】

［分析装置］
多項目自動血球分析装置ＸＮ－１０００（シスメックス株式会社）の改造機を作成した。ＸＮ－１０００は、赤色（６３３ｎｍ）の光を発する半導体レーザ光源と、赤色の前方散乱光の検出器と、赤色の側方散乱光の検出器と、赤色の光によって励起された蛍光（６６０ｎｍ以上の光）を受光する検出器を備えていた。ＸＮ―１０００について、青紫色（４０５ｎｍ）の光を発する半導体レーザ光源、青紫色の散乱光の検出器、及び青色の光によって励起された蛍光（４５０～６００ｎｍ）を検出する蛍光検出器の増設をする改造を行った。また、当該分析装置について、赤色及び青紫色の散乱光情報ならびに第１蛍光色素及び第２蛍光色素から生じる蛍光情報について検出される測定データを解析し、所望のスキャッタグラムを表示させるようにした。このようにして作製した分析装置にて測定を行った。

【0293】

［測定方法］
ＸＮ－１０００（シスメックス株式会社）用の染色試薬であるフルオロセルＷＤＦ（シスメックス株式会社）の替わりに、上述したように調製した第１蛍光色素及び第２蛍光色素を含む染色試薬を用いた点を除いて、ＸＮ－１０００に付属のマニュアルに従って測定試料の調製及び試料の測定を行った。データ解析は、ＦＣＳ再解析ソフト（Ｆｌｏｗｊｏ）により実施した。調製された測定試料は、溶血試薬として１０００μＬのライザセルＷＤＦＩＩと、１７μＬの全血と、２０μＬの染色試薬を含んでいた。このときの染色試薬の希釈倍率は５１．８５であり、測定試料中の第１蛍光色素及び第２蛍光色素の終濃度は、それぞれ０．５３ｐｐｍ、０．４８ｐｐｍであった。

【0294】

参考例１：好塩基球の出現位置
上記した好塩基球分離前検体と好塩基球分離後検体について、測定を行った。得られた光学情報について、横軸を第２波長（赤色波長）の側方散乱光強度、縦軸を第１波長（青紫蛍光）とするスキャッタグラム（第１スキャッタグラム）と、横軸を第２波長（赤色波長）の側方散乱光強度、縦軸を第２波長（赤蛍光）とするスキャッタグラム（第２スキャッタグラム）とを作成した。

【0295】

得られたスキャッタグラムを図５６(ａ)～５６(ｄ)に示す。好塩基球分離前検体についての第２スキャッタグラム（図５６(ａ)）では、白血球の５種類の集団は二軸方向に離れて分布しており、分画が良好であることが分かる。一方、好塩基球分離前検体についての第１スキャッタグラム（図５６(ｃ)）では白血球の５つの集団は横軸（側方散乱）方向には離れて分布しているが、縦軸（青紫蛍光）方向にはいずれもほぼ同等の蛍光強度の領域に出現していることが分かった。また、好塩基球分離後検体を測定した結果においても、好塩基球は、第２スキャッタグラム（図５６(ｂ)）ではリンパ球より蛍光強度が低値の領域に出現し、第１スキャッタグラム（図５６(ｄ)）ではリンパ球や単球と同等の蛍光強度位置に出現しており、全血検体での分画状況を確認することができた。

【0296】

参考例２：経時変化するクラスタの出現位置
採血後４時間、採血後４８時間、及び採血後７２時間が経過した全血検体について測定を行い、光学情報を検出した。その後、第１スキャッタグラムにおいて時間経過とともに増加してくる縦軸（青紫蛍光）の低値領域に含まれる集団を選別（ゲーティング）し、その集団を第２スキャッタグラム上にプロットした。

【0297】

第１スキャッタグラムの結果を図５７(ａ)～５７(ｄ)に、第２スキャッタグラムの結果を図５８(ａ)～５８(ｃ)に示す。図５８(ａ)～５８(ｃ)から、採血後の時間の経過とともに、好塩基球の出現領域に含まれる細胞数が増大していることが分かる。そして、この増大の原因が、第１スキャッタグラムにおいてゲーティングした（図５７(ａ)～５７(ｃ)において四角で囲った領域に出現した）細胞であることが分かった。すなわち、第２スキャッタグラムにおいて採血後の時間経過とともに、好中球が散乱光低値側にシフトし、好塩基球の出現領域に重なる好中球由来と考えられる集団は、第１スキャッタグラムにおいては、青紫蛍光が低値側に出現してくる集団であることが明らかになった。

【0298】

実施例１：好塩基球の計数１（１段階のゲーティング（青紫蛍光による有核細胞のゲーティングなし））
採血後４時間、採血後２４時間、採血後４８時間、及び採血後７２時間の全血検体について測定を行い、光学情報を検出した。その後、まず、第１スキャッタグラムを作成し青紫蛍光が所定値より大きい予め設定した領域（図５９(ａ)参照）に含まれる集団を選別した。この領域に出現する集団には、リンパ球、単球、及び好塩基球が含まれるが、採血後の時間経過とともに好塩基球の出現領域にシフトしてくる好中球由来の細胞は含まれない。この時の採血後２４時間の検体についての第１スキャッタグラムを図５９(ａ)に示す。

【0299】

その後、選別した集団に対して第２スキャッタグラムを作成した。この第２スキャッタグラムにおいて予め設定した好塩基球の出現領域に含まれる集団を計数した。この時の採血後２４時間の検体についての第２スキャッタグラムを図５９(ｂ)に示す。

【0300】

実施例２：好塩基球の計数２（２段階のゲーティング（青紫蛍光による有核細胞のゲーティングあり）第２実施形態に対応）及び比較例１
実施例１で取得した光学的情報を用いて以下の解析を行った。まず、得られた青紫蛍光が所定の閾値を超える細胞（有核細胞）を選別した。この時の採血２４時間後の検体についてのヒストグラムを図６０(ａ)に示す。これ以降については、実施例１と同様の解析を行い、好塩基球を計数した。第１スキャッタグラムと第２スキャッタグラムを図６０(ｂ)及び図６０(ｃ)に示す。

【0301】

一方、取得した光学情報のうち、赤色の側方散乱光強度と赤蛍光強度とで作成される第２スキャッタグラムに基づいて好塩基球を計数した（比較例１）。

【0302】

採血後の各経過時間の検体について、実施例２により得られた好塩基球の計数値と比較例１により得られた好塩基球の計数値を図６１に示す。図６１から分かるように、本発明の方法を採用することにより採血後の時間が経過した検体であっても好塩基球の計数値の上昇が比較例に比べて抑制されていた。

【0303】

また、採血後４時間経過した検体及び採血後４８時間経過した検体について、実施例２及び比較例１の方法で得られた第２スキャッタグラムを図６２に示す。スキャッタグラムでも明らかなように本発明の方法において好塩基球の増大が抑制されていることが分かる。

【0304】

実施例３：白血球の５分類
実施例１で取得した光学的情報に基づいて、白血球を５つの亜集団に分類した。光学情報のうち、赤色の側方散乱光強度と赤蛍光とを利用して第２スキャッタグラムを作成し、予め設定した、リンパ球の出現領域、単球の出現領域、好酸球の出現領域、及び好中球と好塩基球を合わせた出現領域のそれぞれに含まれる細胞を計数した。すなわち、この段階では白血球を４種類の集団に分類し計数した。

【0305】

以降は、実施例１と同様に、横軸を青紫色の側方散乱光、縦軸を青紫蛍光とする第１スキャッタグラムにおけるリンパ球、単球、及び好塩基球を含む集団の選別と、選択された集団に対して、横軸を赤色の側方散乱光強度、縦軸を赤蛍光とする第２スキャッタグラムでの好塩基球の計数を行った。ここで得られた好塩基球の計数を、先に求めていた４種類のうちの好中球と好塩基球を合わせた集団の計数から差し引くことにより好中球の集団を計数し、先の結果と併せて白血球の５種類の亜集団を計数した。

【0306】

このようにして得た採血後経過時間ごとの白血球５分類の計数を表２に示す。一方、取得した光学情報のうち、赤色の側方散乱光強度と赤蛍光とで作成される第２スキャッタグラムを作成し、予め設定した、リンパ球、単球、好酸球、好中球、及び好塩基球のそれぞれの出現領域に含まれる細胞を計数した（比較例２）。すなわち、最初に作成した第２スキャッタグラムによって白血球を５つの亜集団に分類した。得られた結果を表２に併せて示す。

【0307】

【表2】

【0308】

表２から明らかなように、本発明によれば、採血後の時間経過による好塩基球数の上昇が抑制されていることが分かる。また、１回の測定により同時に白血球の５分類も精度よく行えることが分かった。

【符号の説明】

【0309】

５４：チャンバ、 ６０，４４２：試薬容器ホルダ、 ６０ａ，６０ｂ，６０ｃ，６０ｄ，６０ｅ：ホルダ部、 ６２：試薬容器保持部、 ６４：ピアサ（吸引管）、 １００：採血管、 ２００，２００Ａ，２００Ｂ，３００：試薬容器、 ３００Ｘ，３０１Ｘ，３０２Ｘ，３０３Ｘ：分析装置（分析ユニット、分析部）、 ３１０Ｘ：コンピュータ、 ４００，４００Ｘ，４０１，４０２：測定装置（測定ユニット）、 ４１０，４１０ａ，４１０ｂ：試薬容器、 ４２０：チャンバ、 ４３０，４３０ａ，４３０ｂ：送液機構、 ４３１，４３１ａ，４３１ｂ：送液管、 ４３１ｘ，４３１ａｘ，４３１ｂｘ：第１端、 ４３１ｙ，４３１ａｙ，４３１ｂｙ：第２端、 ４３２，４３２ａ，４３２ｂ：送液部、 ４３３：ポンプ（定量部）、 ４４０，４４０Ａ，４４０Ｂ，４４０Ｘ，４４１：試料調製部、 ４５０：検体吸引機構、 ４５１：検体吸引ノズル、 ４５２：吸引吐出機構（ポンプ）、 ４６０， ４６０ｘ：ＦＣＭ検出部（検出部）、 ４１１１：光源、 ４１１１ａ：第１光源、 ４１１１ｂ：第２光源、 ４１１３：フローセル、 ４１１６：前方散乱光受光素子、 ４１１８，４１１８ａ，４１１８ｂ，４１１８ｃ：ダイクロイックミラー、 ４１２１ａ，４１２１ｂ：側方散乱光受光素子、 ４１２２ａ，４１２２ｂ：側方蛍光受光素子、 Ｃ：細胞（成分）、 Ｄ１：第１受光部、 Ｄ２：第２受光部、 Ｄ３：第３受光部、 Ｆ１，Ｆ２：蛍光色素、 ＦＣ：フローセル、 ＦＳＣ：前方散乱光、 ＳＦＬ：側方蛍光、 ＳＳＣ：側方散乱光

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】

【図34】

【図35】

【図36】

【図37】

【図38】

【図39】

【図40】

【図41】

【図42】

【図43】

【図44】

【図45】

【図46】

【図47】

【図48】

【図49】

【図50】

【図51】

【図52】

【図53】

【図54】

【図55】

【図56(a)】

【図56(b)】

【図56(c)】

【図56(d)】

【図57(a)】

【図57(b)】

【図57(c)】

【図58(a)】

【図58(b)】

【図58(c)】

【図59(a)】

【図59(b)】

【図60(a)】

【図60(b)】

【図60(c)】

【図61】

【図62】