特開2023-15053生物学的流体から免疫阻害剤を除去するためのシステム及び方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023015053
(43)【公開日】2023-01-31
(54)【発明の名称】生物学的流体から免疫阻害剤を除去するためのシステム及び方法
(51)【国際特許分類】
A61M 1/36 20060101AFI20230124BHJP
【ＦＩ】
A61M1/36 165
【審査請求】有
【請求項の数】20
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2022163897
(22)【出願日】2022-10-12
(62)【分割の表示】P 2021572881の分割
【原出願日】2019-11-19
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＥＦＬＯＮ
(71)【出願人】
【識別番号】521486239
【氏名又は名称】イミューニコム， インコーポレイテッド
【氏名又は名称原語表記】ＩＭＭＵＮＩＣＯＭ， ＩＮＣ．
(74)【代理人】
【識別番号】100107456
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 成人
(74)【代理人】
【識別番号】100162352
【弁理士】
【氏名又は名称】酒巻 順一郎
(74)【代理人】
【識別番号】100123995
【弁理士】
【氏名又は名称】野田 雅一
(72)【発明者】
【氏名】ジョセフス， スティーブン フランシス
(72)【発明者】
【氏名】オング， マシュー
(72)【発明者】
【氏名】ジャフリ， アミル
(72)【発明者】
【氏名】シーガル， ロバート
(72)【発明者】
【氏名】プリンス， スティーブン マイケル
(57)【要約】 （修正有）
【課題】がん患者の体液からの可溶性ＴＮＦ受容体等の免疫阻害剤の除去するためのシステム及び方法を提供する。
【解決手段】本システム及び方法は、がん患者の体液からの可溶性ＴＮＦ受容体等の免疫阻害剤の除去のために有用である。いくつかの実施形態では、可溶性ＴＮＦ受容体は、血漿から８０％以上の効率で選択的に除去される。いくつかの実施形態では、システムは一本鎖ＴＮＦアルファの固定化捕捉リガンドを含む。本システム及び方法は、様々ながんの種類、ステージ、及び重症度の処置のために有用である。
【選択図】図４
【解決手段】本システム及び方法は、がん患者の体液からの可溶性ＴＮＦ受容体等の免疫阻害剤の除去のために有用である。いくつかの実施形態では、可溶性ＴＮＦ受容体は、血漿から８０％以上の効率で選択的に除去される。いくつかの実施形態では、システムは一本鎖ＴＮＦアルファの固定化捕捉リガンドを含む。本システム及び方法は、様々ながんの種類、ステージ、及び重症度の処置のために有用である。
【選択図】図４
【特許請求の範囲】
【請求項1】
患者の血漿から可溶性腫瘍壊死因子受容体（ｓＴＮＦ－Ｒ）を体外で除去するためのカラムであって、
前記血漿が通過するように構成された区画と、
前記区画内に配置された捕捉支持体と、を含み、
前記捕捉支持体が、少なくとも１０％の捕捉効率及び１６７０ｎｇ/分未満の溶出速度を有する、カラム。
前記血漿が通過するように構成された区画と、
前記区画内に配置された捕捉支持体と、を含み、
前記捕捉支持体が、少なくとも１０％の捕捉効率及び１６７０ｎｇ/分未満の溶出速度を有する、カラム。
【請求項2】
前記捕捉効率が少なくとも５０％である、請求項１に記載のカラム。
【請求項3】
前記捕捉効率が少なくとも８０％である、請求項２に記載のカラム。
【請求項4】
前記捕捉効率が少なくとも９０％である、請求項３に記載のカラム。
【請求項5】
前記捕捉効率が少なくとも９５％である、請求項４に記載のカラム。
【請求項6】
前記溶出速度が５０ｎｇ／分未満である、請求項１に記載のカラム。
【請求項7】
前記溶出速度が１０ｎｇ／分未満である、請求項６に記載のカラム。
【請求項8】
前記捕捉支持体が体積を有し、
前記溶出速度が、捕捉支持体１ｍｌあたり１５０ｎｇ／分未満である、請求項１に記載のカラム。
前記溶出速度が、捕捉支持体１ｍｌあたり１５０ｎｇ／分未満である、請求項１に記載のカラム。
【請求項9】
前記溶出速度が、捕捉支持体１ｍｌあたり５０ｎｇ／分未満である、請求項８に記載のカラム。
【請求項10】
前記溶出速度が、捕捉支持体１ｍｌあたり１０ｎｇ／分未満である、請求項９に記載のカラム。
【請求項11】
前記捕捉剤が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の一部を含む、請求項１に記載のカラム。
【請求項12】
前記捕捉剤が、一本鎖ＴＮＦ（ｓｃＴＮＦ）を含む、請求項１１に記載のカラム。
【請求項13】
前記ｓｃＴＮＦが、還元的アミノ化によって、アフィニティクロマトグラフィー支持体材料、中空繊維膜、シート膜、膜カセット及びビーズのうちの１種に共有結合で連結される、請求項１２に記載のカラム。
【請求項14】
前記一本鎖ＴＮＦが、少なくとも３つのＴＮＦモノマー又はそれらの部分を含む、請求項１２に記載のカラム。
【請求項15】
前記ｓＴＮＦ－ＲがＴＮＦ－Ｒ１を含む、請求項１に記載のカラム。
【請求項16】
前記ｓＴＮＦ－ＲがＴＮＦ－Ｒ２を含む、請求項１に記載のカラム。
【請求項17】
前記捕捉効率及び溶出速度が、前記カラムを通る前記血漿の流れの３０秒間にわたる平均である、請求項１に記載のカラム。
【請求項18】
前記カラムが、前記カラムを通る前記血漿の流れの最初の５分間に前記捕捉効率及び溶出速度を示す、請求項１に記載のカラム。
【請求項19】
前記捕捉効率及び溶出速度が、前記カラムを通る前記血漿の流れの２時間にわたる平均である、請求項１に記載のカラム。
【請求項20】
前記カラムが、前記カラムを通る前記血漿の流れの間の任意の時間において、前記捕捉効率及び溶出速度を示す、請求項１に記載のカラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
［１．分野］
[01]本開示は、血漿から免疫阻害剤を除去するためのシステム及び方法に関する。
[01]本開示は、血漿から免疫阻害剤を除去するためのシステム及び方法に関する。
【0002】
［２．緒言］
[02]がんを死滅させるための免疫系の活用は、１世紀以上にわたって腫瘍学者及びがん研究者の関心の的であった。患者の腫瘍が免疫刺激性細菌感染の後で寛解に入るという観察（例えばＣｏｌｅｙ，Ｗ．Ｂ．（１９９１）Ｃｌｉｎ Ｏｒｔｈｏｐ Ｒｅｌａｔ Ｒｅｓ，３～１１頁；Ｈｕｇｈｅｓ，Ｗ．Ｔ．及びＳｍｉｔｈ，Ｄ．Ｒ．（１９７３）Ｃａｎｃｅｒ ３１，１００８～１０１４頁；Ｙａｔｅｓ，Ｊ．Ｗ．及びＨｏｌｌａｎｄ，Ｊ．Ｆ．（１９７３）Ｃａｎｃｅｒ ３２，１４９０～１４９８頁；Ｍｕｌｌｅｒ，Ｈ．Ｅ．（１９７４）（筆者の翻訳），Ｐａｔｈｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ（Ｂａｓｅｌ）４０，２９７～３０４頁を参照）、並びにがんの免疫細胞浸潤と生存率との相関（例えばＬｉｐｐｏｎｅｎ，Ｐ．Ｋ．ら（１９９２）Ｅｕｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ２９Ａ，６９～７５頁；Ｍａ，Ｄ．及びＧｕ，Ｍ．Ｊ．（１９９１）Ｊ Ｔｏｎｇｊｉ Ｍｅｄ Ｕｎｉｖ １１，２３５～２３９頁；Ｐａｓｔｒｎａｋ，Ａ．及びＪａｎｓａ，Ｐ．（１９８９）Ａｃｔａ Ｕｎｉｖ Ｐａｌａｃｋｉ Ｏｌｏｍｕｃ Ｆａｃ Ｍｅｄ １２４，７～７１頁；Ｄｉ Ｇｉｏｒｇｉｏら（１９９２）Ｉｎｔ Ｓｕｒｇ ７７，２５６～２６０頁）；Ｄｉ Ｇｉｏｒｇｉｏ，Ａ．ら（１９９２）Ｉｎｔ Ｓｕｒｇ ７７，２５６～２６０頁を参照）は、新生組織形成を免疫学的に制御できる可能性を示唆している。しかし、がん免疫療法の分野における研究者が、患者の予後において顕著な改善を主張できるようになったのは、わずか最近の１０年間である。この分野における主要な成果は、Ｔ細胞活性化の負のレギュレーター又はチェックポイントを抑制する抗体の開発であった。これらの抗体は、「免疫チェックポイント阻害剤」と名付けられる薬物のクラスに属する。ＦＤＡによって承認された最初のものであるイピリムマブは、細胞傷害性Ｔ細胞関連プロテイン４（ＣＴＬＡ－４）を標的とする拮抗性抗体であり、２０１０年に転移黒色腫患者の全生存期間を改善した。関連する研究は、イピリムマブ及びグリコプロテイン１００（ｇｐ１００、黒色腫細胞タンパク質としても知られている）（患者４０３名）、イピリムマブ単独（１３７名）、又はｇｐ１００単独（１３６名）を受けるように割り付けられた切除不能のステージＩＩＩ又はＩＶの黒色腫を有するＨＬＡ－Ａ＊０２０１陽性患者全６７６名を評価した。メジアン全生存期間は、ｇｐ１００単独を受けた患者の６．４か月と比較して、イピリムマブ及びｇｐ１００を受けた患者で１０．０か月であった（死亡のハザード比０．６８、Ｐ＜０．００１）。イピリムマブ単独でのメジアン全生存期間は１０．１か月であった（ｇｐ１００単独と比較した死亡のハザード比０．６６、Ｐ＝０．００３）。イピリムマブ群の間では全生存期間の差は検出されなかった（イピリムマブ及びｇｐ１００とのハザード比１．０４、Ｐ＝０．７６）（例えばＨｏｄｉ，Ｆ．Ｓ．ら（２０１０）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６３，７１１～７２３頁を参照）。抗ＣＴＬＡ－４療法の成功に続いて、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ－１）又はそのリガンドＰＤ－Ｌ１を標的とする抗体は、多種のがんにおける全生存期間の改善に有効であることが証明された（例えばＨａｍｉｄ，Ｏ．ら（２０１３）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６９，１３４～１４４頁；Ｈｅｒｂｓｔ，Ｒ．Ｓ．ら（２０１４）Ｎａｔｕｒｅ ５１５，５６３～５６７頁；Ｐｏｗｌｅｓ，Ｔ．ら（２０１４）Ｎａｔｕｒｅ ５１５，５５８～５６２頁；Ｔｏｐａｌｉａｎ，Ｓ．Ｌ．ら（２０１４）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ３２，１０２０～１０３０頁；Ｒｉｂａｓ，Ａ．及びＷｏｌｃｈｏｋ，Ｊ．Ｄ．（２０１８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３５９，１３５０～１３５５頁を参照）。例えば１つの研究では、２９６名の患者が抗ＰＤ－１リガンド抗体処置を受けた。奏功が評価できた２３６名の患者の中で、非小細胞肺がん、黒色腫、又は腎細胞がんの患者において客観的奏功（完全又は部分奏功）が観察された。集積奏功率（全用量）は、非小細胞肺がんの患者で１８％（患者７６名中１４名）、黒色腫の患者で２８％（患者９４名中２６名）、腎細胞がんの患者で２７％（患者３３名中９名）であった。奏功は持続的であり、１年以上のフォローアップを行った患者では３１名中２０名において奏功が１年以上持続した（Ｔｏｐａｌｉａｎ，Ｓ．Ｌ．ら（２０１２）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６６，２４４３～２４５４頁を参照）。これらの研究の勇気づけられる結果は、がん研究の分野からの興味を刺激し、代替の免疫チェックポイント分子の標的化へのさらなる検討を鼓舞した。
[02]がんを死滅させるための免疫系の活用は、１世紀以上にわたって腫瘍学者及びがん研究者の関心の的であった。患者の腫瘍が免疫刺激性細菌感染の後で寛解に入るという観察（例えばＣｏｌｅｙ，Ｗ．Ｂ．（１９９１）Ｃｌｉｎ Ｏｒｔｈｏｐ Ｒｅｌａｔ Ｒｅｓ，３～１１頁；Ｈｕｇｈｅｓ，Ｗ．Ｔ．及びＳｍｉｔｈ，Ｄ．Ｒ．（１９７３）Ｃａｎｃｅｒ ３１，１００８～１０１４頁；Ｙａｔｅｓ，Ｊ．Ｗ．及びＨｏｌｌａｎｄ，Ｊ．Ｆ．（１９７３）Ｃａｎｃｅｒ ３２，１４９０～１４９８頁；Ｍｕｌｌｅｒ，Ｈ．Ｅ．（１９７４）（筆者の翻訳），Ｐａｔｈｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ（Ｂａｓｅｌ）４０，２９７～３０４頁を参照）、並びにがんの免疫細胞浸潤と生存率との相関（例えばＬｉｐｐｏｎｅｎ，Ｐ．Ｋ．ら（１９９２）Ｅｕｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ２９Ａ，６９～７５頁；Ｍａ，Ｄ．及びＧｕ，Ｍ．Ｊ．（１９９１）Ｊ Ｔｏｎｇｊｉ Ｍｅｄ Ｕｎｉｖ １１，２３５～２３９頁；Ｐａｓｔｒｎａｋ，Ａ．及びＪａｎｓａ，Ｐ．（１９８９）Ａｃｔａ Ｕｎｉｖ Ｐａｌａｃｋｉ Ｏｌｏｍｕｃ Ｆａｃ Ｍｅｄ １２４，７～７１頁；Ｄｉ Ｇｉｏｒｇｉｏら（１９９２）Ｉｎｔ Ｓｕｒｇ ７７，２５６～２６０頁）；Ｄｉ Ｇｉｏｒｇｉｏ，Ａ．ら（１９９２）Ｉｎｔ Ｓｕｒｇ ７７，２５６～２６０頁を参照）は、新生組織形成を免疫学的に制御できる可能性を示唆している。しかし、がん免疫療法の分野における研究者が、患者の予後において顕著な改善を主張できるようになったのは、わずか最近の１０年間である。この分野における主要な成果は、Ｔ細胞活性化の負のレギュレーター又はチェックポイントを抑制する抗体の開発であった。これらの抗体は、「免疫チェックポイント阻害剤」と名付けられる薬物のクラスに属する。ＦＤＡによって承認された最初のものであるイピリムマブは、細胞傷害性Ｔ細胞関連プロテイン４（ＣＴＬＡ－４）を標的とする拮抗性抗体であり、２０１０年に転移黒色腫患者の全生存期間を改善した。関連する研究は、イピリムマブ及びグリコプロテイン１００（ｇｐ１００、黒色腫細胞タンパク質としても知られている）（患者４０３名）、イピリムマブ単独（１３７名）、又はｇｐ１００単独（１３６名）を受けるように割り付けられた切除不能のステージＩＩＩ又はＩＶの黒色腫を有するＨＬＡ－Ａ＊０２０１陽性患者全６７６名を評価した。メジアン全生存期間は、ｇｐ１００単独を受けた患者の６．４か月と比較して、イピリムマブ及びｇｐ１００を受けた患者で１０．０か月であった（死亡のハザード比０．６８、Ｐ＜０．００１）。イピリムマブ単独でのメジアン全生存期間は１０．１か月であった（ｇｐ１００単独と比較した死亡のハザード比０．６６、Ｐ＝０．００３）。イピリムマブ群の間では全生存期間の差は検出されなかった（イピリムマブ及びｇｐ１００とのハザード比１．０４、Ｐ＝０．７６）（例えばＨｏｄｉ，Ｆ．Ｓ．ら（２０１０）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６３，７１１～７２３頁を参照）。抗ＣＴＬＡ－４療法の成功に続いて、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ－１）又はそのリガンドＰＤ－Ｌ１を標的とする抗体は、多種のがんにおける全生存期間の改善に有効であることが証明された（例えばＨａｍｉｄ，Ｏ．ら（２０１３）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６９，１３４～１４４頁；Ｈｅｒｂｓｔ，Ｒ．Ｓ．ら（２０１４）Ｎａｔｕｒｅ ５１５，５６３～５６７頁；Ｐｏｗｌｅｓ，Ｔ．ら（２０１４）Ｎａｔｕｒｅ ５１５，５５８～５６２頁；Ｔｏｐａｌｉａｎ，Ｓ．Ｌ．ら（２０１４）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ３２，１０２０～１０３０頁；Ｒｉｂａｓ，Ａ．及びＷｏｌｃｈｏｋ，Ｊ．Ｄ．（２０１８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３５９，１３５０～１３５５頁を参照）。例えば１つの研究では、２９６名の患者が抗ＰＤ－１リガンド抗体処置を受けた。奏功が評価できた２３６名の患者の中で、非小細胞肺がん、黒色腫、又は腎細胞がんの患者において客観的奏功（完全又は部分奏功）が観察された。集積奏功率（全用量）は、非小細胞肺がんの患者で１８％（患者７６名中１４名）、黒色腫の患者で２８％（患者９４名中２６名）、腎細胞がんの患者で２７％（患者３３名中９名）であった。奏功は持続的であり、１年以上のフォローアップを行った患者では３１名中２０名において奏功が１年以上持続した（Ｔｏｐａｌｉａｎ，Ｓ．Ｌ．ら（２０１２）Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６６，２４４３～２４５４頁を参照）。これらの研究の勇気づけられる結果は、がん研究の分野からの興味を刺激し、代替の免疫チェックポイント分子の標的化へのさらなる検討を鼓舞した。
【0003】
[03]チェックポイントの封鎖はがん治療におけるブレークスルーを表しているが、大多数のがん患者はこれらの処置に反応せず、いくつかの腫瘍の型は本質的に耐性があるようである。処置は進行中の免疫応答を強化するように設計されており、浸潤性Ｔ細胞を有しない腫瘍を含めて初期免疫活性化を欠く症例では非効率である。したがって、免疫細胞の動員を増強する治療戦略の開発は、免疫チェックポイントの封鎖に応答する患者の割合を増大させると考えられる。チェックポイント阻害剤の限界には、使用する抗体への患者の全身の曝露、並びに一貫して応答を誘起できないことが含まれる。
【0004】
[04]ＴＮＦα（腫瘍壊死因子－アルファ、又は本明細書で相互交換可能にＴＮＦと称する）は、抗がん活性を促進し、その名称が暗示するように抗腫瘍剤として初期に特徴付けられた強力なサイトカインである（例えばＣａｒｓｗｅｌｌ，Ｅ．Ａ．ら（１９７５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ７２，３６６６～３６７０頁を参照）。続いて、ＴＮＦは腫瘍の微小環境の中でその文脈上の活性に応じて腫瘍促進と腫瘍抑制の両方の効果を有することが示された（例えばＷａｎｇ，Ｘ．及びＬｉｎ，Ｙ．（２００８）Ａｃｔａ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｉｎ ２９，１２７５～１２８８頁を参照）。腫瘍の微小環境の中で、低レベルのＴＮＦの発現は血管新生、血管の透過性、及び転移の可能性に寄与する一方、高レベル及び腫瘍への治療用送達の間では、ＴＮＦはアポトーシスによる血管の一体性の破壊、直接的な腫瘍の殺滅、及び抗腫瘍免疫応答の誘起を含む抗腫瘍効果を示した（例えばＢｅｒｂｅｒｏｇｌｕ，Ｕ．ら（２００４）Ｉｎｔ Ｊ Ｂｉｏｌ Ｍａｒｋｅｒｓ １９，１３０～１３４頁；Ｍｉｃｈａｌａｋｉ，Ｖ．ら（２００４）Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ９０，２３１２～２３１６頁；Ｔａｌｍａｄｇｅ，Ｊ．Ｅ．ら（１９８７）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ４７，２５６３～２５７０頁を参照）。臨床的状況における増大したＴＮＦの有利な効果が報告されている。例えば、６１名の非小細胞肺がんの患者におけるＴＮＦ発現の研究は、より好ましい臨床転帰と直接相関する症例の４５．９％でＴＮＦの発現を実証した（例えばＢｏｌｄｒｉｎｉ，Ｌ．ら Ｇ．（２０００）Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ８３，４８０～４８６頁を参照）。ＴＮＦの投与は、分離四肢投与について承認されており、肝がんの分離肝手技において臨床的有益性が示されている。
【0005】
[05]ｓＴＮＦ－Ｒ（ＴＮＦの可溶性受容体）は抗がん免疫応答を阻害し、ＴＮＦの毒性の制御に寄与している。ＴＮＦの抗腫瘍効果の天然の制御又は減衰は、血漿中に存在し、ＴＮＦに結合／ＴＮＦを中和する、放出された可溶性ＴＮＦ受容体を含む阻害性分子の存在に帰せられる（例えばＸａｎｔｈｏｕｌｅａ，Ｓ．ら（２００４）Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２００，３６７～３７６頁；Ａｄｅｒｋａ，Ｄ．ら（１９９８）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １０１，６５０～６５９頁；Ａｄｅｒｋａ，Ｄ．ら（１９９１）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５１，５６０２～５６０７頁；Ｓｅｌｉｎｓｋｙ，Ｃ．Ｌ．ら（１９９８）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ９４，８８～９３頁；Ｓｅｌｉｎｓｋｙ，Ｃ．Ｌ．及びＨｏｗｅｌｌ，Ｍ．Ｄ．（２０００）Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００，８１～８７頁を参照）。これらの可溶性阻害剤のがん促進活性は、プラズマフェレーシスを受けている患者で起こったがんの退縮の初期の観察の後で発見された（例えばＩｓｒａｅｌ，Ｌ．ら（１９７６）Ｌａｎｃｅｔ ２，６４２～６４３頁；Ｉｓｒａｅｌ，Ｌ．ら（１９７７）Ｃａｎｃｅｒ ４０，３１４６～３１５４頁を参照）。連続的な研究により、この観察はｓＴＮＦ－Ｒの除去に帰せられることが示された。ｃＤＮＡの分子クローニング及び組換えタンパク質の研究により、それらの抗ＴＮＦ活性及び腫瘍促進機能が確認された（例えばＳｃｈａｌｌ，Ｔ．Ｊ．ら（１９９０）Ｃｅｌｌ ６１，３６１～３７０頁；Ｅｎｇｅｌｍａｎｎ，Ｈ．ら（１９９０）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６５，１５３１～１５３６頁を参照）。
【0006】
[06]低用量のＴＮＦでは、正常濃度のｓＴＮＦ－Ｒ阻害剤は投与された少量のＴＮＦに結合してこれを不活化することができる。しかし、増大した量の投薬又は正常レベルより高いレベルへのより高いＴＮＦ産生の刺激は、毒性の影響なしに治療効果のある抗腫瘍濃度に達するＴＮＦの能力に対抗するｓＴＮＦ－Ｒの放出を誘起する可能性がある。したがって、抗がん効果を達成するためにＴＮＦ阻害を克服する能力は、最大耐量（ＭＴＤ）に極めて近い量のＴＮＦの投与を必要とする。この理由により、全身ＴＮＦ療法は、おそらく有効であろうが、多くのヒト臨床試験で毒性を示している。この不都合なリスク／ベネフィットの考慮のため、ＴＮＦを用いる全身療法は主として放棄されてきた。しかし、ＴＮＦへの全身曝露をブロックする分離四肢手技は、化学療法剤と組み合わせて実施されてきた（例えばＤｅｒｏｏｓｅ，Ｊ．Ｐ．ら（２０１２）Ａｎｎ Ｓｕｒｇ Ｏｎｃｏｌ １９，６２７～６３５頁；Ｖｅｒｈｏｅｆ，Ｃ．ら（２００７）Ｃｕｒｒ Ｔｒｅａｔ Ｏｐｔｉｏｎｓ Ｏｎｃｏｌ ８，４１７～４２７頁を参照）。
【0007】
[07]腫瘍によって産生される免疫「ブロッキングファクター」を体外で除去する医療デバイスを用いる試みがある。残念ながら今までのところ、これらのデバイスには、ａ）他の生物材料の非特異的結合、ｂ）デバイスから患者の循環系への免疫吸着性材料の「溶出」、及びｃ）標的タンパク質の循環系からの非効果的な除去、等の多くの限界がある。本発明は、従来のシステムのこれらの及びその他の限界を克服する。
【0008】
［概要］
[08]以下は、本手法のいくつかの態様の非網羅的なリストである。本手法のいくつかの態様及びその他の態様を、以下の開示に記載する。
[08]以下は、本手法のいくつかの態様の非網羅的なリストである。本手法のいくつかの態様及びその他の態様を、以下の開示に記載する。
【0009】
[09]したがって、本開示の１つ又は複数の態様は、体液の少なくとも１つの標的成分を除去するためのシステムに関する。システムは、患者から体液を受容するように構成された入り口、及び入り口に連結されて入り口から体液を受容するように構成された隔離チャンバーを備える。隔離チャンバーは、体液の少なくとも１つの標的成分に結合して、捕捉支持体と体液との接触に応答して隔離チャンバー中で少なくとも１つの標的成分を捕捉するように構成された捕捉支持体を備える。捕捉支持体は、少なくとも１つの標的成分に結合して体液中の少なくとも１つの標的成分の量を低減させるように構成されている。隔離チャンバーは、入り口とは分離された隔離チャンバーへのアクセスを提供するように構成された第１及び第２のアクセスポートを備える。第１及び第２のアクセスポートは、隔離チャンバーへの及び／又は隔離チャンバーからの捕捉支持体の挿入及び／又は除去を容易にするように構成されている。システムは、低減された量の少なくとも１つの標的成分を有する体液の一部又は全部の任意選択による患者に戻す再導入のために、低減された量の少なくとも１つの標的成分を有する体液を隔離チャンバーから通過させるように構成された出口、並びに隔離チャンバー中の捕捉支持体を入り口及び出口から分離するように構成された１つ又は複数のフィルターを備える。１つ又は複数のフィルターは、捕捉支持体を隔離チャンバー内に保持するように構成されている。
【0010】
[10]一実施形態では、（ａ）少なくとも１つの標的成分に結合する捕捉支持体の捕捉効率は、血漿流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、任意選択で（ｂ）少なくとも１つの標的成分への捕捉支持体の結合親和性は少なくとも約１０－７ＫＤであり、及び／又は（ｃ）出口を通過する捕捉支持体の溶出速度は約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満である。
【0011】
[11]一実施形態では、（ｂ）少なくとも１つの標的成分への捕捉支持体の結合親和性は１０－７ＫＤ以上であり、任意選択で（ａ）少なくとも１つの標的成分に結合する捕捉支持体の捕捉効率は、流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、及び／又は（ｃ）出口を通過する捕捉支持体の溶出速度は約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満である。
【0012】
[12]一実施形態では、（ｃ）出口を通過する捕捉支持体の溶出速度は約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満であり、任意選択で（ａ）少なくとも１つの標的成分に結合する捕捉支持体の捕捉効率は、流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、及び／又は（ｂ）少なくとも１つの標的成分への捕捉支持体の結合親和性は１０－７ＫＤ以上である。
【0013】
[13]一実施形態では、体液は、血漿を含む。
【0014】
[14]一実施形態では、少なくとも１つの標的成分は、タンパク質、複合体、アセンブリー、又は細胞を含む。
【0015】
[15]一実施形態では、少なくとも１つの標的成分は、患者における抗がん免疫応答を阻害するように機能する１つ又は複数の血漿成分を含む。
【0016】
[16]一実施形態では、少なくとも１つの標的成分は、１つ又は複数の免疫阻害剤を含む。
【0017】
[17]一実施形態では、少なくとも１つの標的成分は、可溶性ＴＮＦ－α受容体を含む。
【0018】
[18]一実施形態では、少なくとも１つの標的成分は、ｓＴＮＦ－Ｒ１受容体及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２受容体を含む。
【0019】
[19]一実施形態では、捕捉支持体は、アフィニティクロマトグラフィー支持体材料を含む。他の実施形態では、捕捉支持体は、中空繊維膜、シート若しくはロール化シートの膜、膜カセット、及び／又はビーズを含む。
【0020】
[20]一実施形態では、捕捉支持体は、アフィニティクロマトグラフィー支持体材料を含み、アフィニティクロマトグラフィー支持体材料は、セファロース、アガロース、又はアクリルアミドを含む。
【0021】
[21]一実施形態では、捕捉支持体は、セラミック材料を含むがこれに限定されない多孔質又は非多孔質のマトリックス材料を含む。
【0022】
[22]一実施形態では、捕捉支持体は、体液の２つ以上の標的成分と結合するように構成されている。
【0023】
[23]一実施形態では、捕捉支持体は、抗体、抗体断片、結合ペプチド、アプタマー、又はアビマーが固定された固体支持体を含む。
【0024】
[24]一実施形態では、抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、及びこれらの組合せからなる群から選択される。
【0025】
[25]一実施形態では、捕捉支持体は、ＴＮＦα、ＴＮＦαのマルチマー、一本鎖ＴＮＦα、ＴＮＦαの断片、ＴＮＦαの断片のマルチマー、又はこれらの組合せを含む。
【0026】
[26]一実施形態では、ＴＮＦαのマルチマーは、その中の１つ又は複数のモノマーがアミノ末端からカルボキシ末端への連結の中にあるＴＮＦαモノマーを含む。
【0027】
[27]ある特定の実施形態では、ＴＮＦαのマルチマーは、モノマーの間のスペーサーを含まなくてもよく、含んでもよい。
【0028】
[28]ある特定の実施形態では、スペーサーは、１つ又は複数のアミノ酸残基を含む。
【0029】
[29]一実施形態では、スペーサーは、１つ又は複数のグリシン、セリン、及び／又はアラニンアミノ酸を含む。
【0030】
[30]一実施形態では、捕捉支持体は、ｓｃ－ＴＮＦαリガンド、任意選択で配列番号１、配列番号２、又は配列番号３の全配列又は部分配列を含む。
【0031】
[31]一実施形態では、捕捉支持体は、ＴＮＦαリガンドのトリマー形を含む。
【0032】
[32]一実施形態では、ｓｃＴＮＦαリガンドのトリマー形は、スペーサーアミノ酸を有し若しくは有しない配列番号２又は配列番号３の配列を含む。
【0033】
[33]一実施形態では、捕捉支持体は、ビーズに結合したリガンドを含む。
【0034】
[34]一実施形態では、リガンドは、所与のビーズの上の所与の密度及び配向を有する。密度及び／又は配向は、リガンドと体液の少なくとも１つの標的成分との結合を増強するように構成されている。
【0035】
[35]一実施形態では、ビーズの大きさ、数、密度、及び／又は濃度は、ビーズを通過する体液の層流を容易にしてリガンドと体液の少なくとも１つの標的成分との結合を増強するように構成されている。
【0036】
[36]一実施形態では、ビーズは、結合特異性を増強するためにエタノールアミン中でクエンチされている。
【0037】
[37]一実施形態では、体液は、全血である。
【0038】
[38]一実施形態では、入り口、隔離チャンバー、及び出口は、体外閉回路カラムを形成している。
【0039】
[39]一実施形態では、体外閉回路カラムは、操作中に無菌のままであるように構成されている。
【0040】
[40]一実施形態では、システムは、体外閉回路カラムを損なうことなしに、捕捉された少なくとも１つの標的成分の全部又は一部のサンプリング又は除去を容易にするように構成された標的成分出口ポートを備える。
【0041】
[41]一実施形態では、システムは、体外閉回路カラムを損なうことなしに、隔離チャンバーへの溶出剤の導入を容易にするように構成された溶出剤ポートを備える。
【0042】
[42]一実施形態では、溶出剤ポートは、再使用のためにシステムを準備するように構成された調整剤を受容するようにさらに構成されている。
【0043】
[43]一実施形態では、システムは、入り口、隔離チャンバー、及び出口を通して再調整剤を駆動するように構成されたポンプをさらに備える。
【0044】
[44]一実施形態では、ポンプは、シリンジポンプ、ペリスタポンプ、ピストンポンプ、ダイヤフラムポンプ、又はこれらの組合せを含む。
【0045】
[45]一実施形態では、１つ又は複数のフィルターは、約３ミクロン～約１００ミクロンの平均孔径を有する。
【0046】
[46]一実施形態では、システムは、同じ機能を有する捕捉支持体を備える１つ又は複数の追加の隔離チャンバーをさらに備える。
【0047】
[47]一実施形態では、１つ又は複数の追加の隔離チャンバーは、隔離チャンバーと組み合わされて、複数の異なる標的成分と結合するように構成された多段階分離回路を形成する。
【0048】
[48]一実施形態では、患者は、ヒト又は獣医学の対象である。獣医学の対象は、イヌ、ネコ等の家庭内動物、ウマ、ブタ、ウシ等の農場若しくは牧場の動物、及び／又はその他の動物を含み得る。
【0049】
[49]別の実施形態によれば、上記の実施形態のいずれかのシステムによって体液の少なくとも１つ又は複数の標的成分を除去する方法が提供される。本方法は、入り口を通して隔離チャンバーに患者からの体液を導くステップ、体液の少なくとも１つの標的成分を結合して隔離チャンバー中の少なくとも１つの標的成分を捕捉して、体液中の少なくとも１つの標的成分の量を低減させるステップ、及び任意選択で患者に戻す再導入のために低減された量の少なくとも１つの標的成分を有する体液の一部又は全部を隔離チャンバーから出口を通して通過させるステップを含む。
【0050】
[50]一実施形態では、本方法は、患者に戻して再導入された体液中の少なくとも１つの標的成分の低減された量を測定するステップをさらに含む。
【0051】
[51]一実施形態では、測定するステップは、液体クロマトグラフィー－質量スペクトル（ＬＣ－ＭＳ）、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）、抵抗測定、発光測定、化学発光、電界発光、電界化学発光、クロマトグラフィーモニタリング、陽電子発光トモグラフィー（ＰＥＴ）、Ｘ線コンピュータトモグラフィー（ＣＴ）、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、超音波、ガンマカメラ、単一光子発光コンピュータトモグラフィー（ＳＰＥＣＴ）、ＥＬＩＳＡ、表面プラスモン共鳴（ＳＰＲ）、及び／又は二層干渉分光法（ＢＬＩ）のうちの１つ又は複数を含む。
【0052】
[52]一実施形態では、本方法は、患者に戻して再導入された体液中の捕捉支持体の溶出速度を測定するステップをさらに含む。
【0053】
[53]いくつかの実施形態では、本方法は、ヒト、獣医学、家庭／コンパニオン動物、牧場／農場動物、及び／又はその他の用途のためである。
【0054】
[54]本明細書で開示したシステム又は方法のこれらの及びその他の目的物、特色、及び特徴、並びに操作の方法及び構造の関連する要素の機能、並びに部品及び製造の経済の組合せは、その全てが本明細書の一部を形成する以下の記述及び添付した特許請求の範囲を、付随する図面を参照して考慮することによって、より明確になる。ここで種々の図において同様の参照番号は対応する部品を指定している。しかし、図面は説明及び記述の目的のためのみであって、本発明の限定の定義としては意図していないことは明示的に理解すべきである。明細書及び特許請求の範囲で使用する場合、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」の単数形は、文脈が明らかに他を指示しない限り、複数の参照物を含む。
【0055】
[55]上述の態様及び本手法のその他の態様は、以下の図面に鑑みて本出願を読めばより良く理解される。図面で同様の番号は類似又は同一の要素を示す。
【図面の簡単な説明】
【0056】
【図1】１つ又は複数の実施形態による本システムの例示的実施形態を説明する図である。
【図2】１つ又は複数の実施形態による本システムのより詳細な外観を提供する図である。
【図3】１つ又は複数の実施形態による本システムの対応する断面図を説明する図である。
【図4】１つ又は複数の実施形態による、体液（本例では血漿）の標的成分に結合し、隔離チャンバー中の標的成分を捕捉する、本システムのハウジングの隔離チャンバー内の捕捉支持体（例えば、本例ではリガンドがコートされたビーズ）を説明する図である。
【図6】１つ又は複数の実施形態による、例示的な再生機構を説明する図である。
【図7】１つ又は複数の実施形態による、入り口から出口への液流に対して直列又は並列に構成することができる２つ以上の内部隔離チャンバーをシステムが備える、例示的な実施形態を説明する図である。
【図8】１つ又は複数の実施形態による、単一のプラズマフェレーシスフロー回路の中の直列及び／又は並列の構成で多数のシステムを利用することができる例示的な使用方法を説明する図である。
【図9】１つ又は複数の実施形態による、単一のハウジングの中でそれぞれが独立的に制御できる流量バルブを有する多数の隔離チャンバーを説明する図である。
【図10】１つ又は複数の実施形態による、本システムによって血液、血漿、及び／又はその他の体液の標的成分を除去する方法を説明する図である。
【図11】１つ又は複数の実施形態による、手技時間の関数としての患者の血液プールからのｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２の低減並びにカラムの捕捉効率を含む代表的なシステム性能の特徴を説明する図である。
【0057】
［例示的実施形態の詳細な説明］
[67]本発明は種々の改変及び代替の形態を受け入れることができるが、その特定の実施形態は図面において例として示され、本明細書において詳細に記述される。図面はスケール通りではないことがある。しかし図面及びその詳細な説明は開示した特定の形態に本発明を限定することを意図しておらず、その逆であり、添付した特許請求の範囲によって定義される本発明の精神及び範囲の中に含まれる全ての改変、等価物、及び代替物を包含するべきであることを意図していると理解されたい。
[67]本発明は種々の改変及び代替の形態を受け入れることができるが、その特定の実施形態は図面において例として示され、本明細書において詳細に記述される。図面はスケール通りではないことがある。しかし図面及びその詳細な説明は開示した特定の形態に本発明を限定することを意図しておらず、その逆であり、添付した特許請求の範囲によって定義される本発明の精神及び範囲の中に含まれる全ての改変、等価物、及び代替物を包含するべきであることを意図していると理解されたい。
【0058】
[68]本明細書に記載した問題を軽減するため、本発明者らは、解決策を発明するとともに、ある場合には重要なことに、本分野において他の者には見過ごされてきた（又は予期されていなかった）問題を認識しなければならなかった。まさに、本発明者らは、産業傾向が本発明者らの予測通りに継続するならば、現在発生中であって将来もっと明確になるであろうこれらの問題を認識することの困難さを強調したい。さらに、その多くが同時に起こる諸問題に対処するので、いくつかの実施形態は課題に特定され、全ての実施形態が本明細書に記載した従来のシステムにおけるあらゆる問題に対処するわけでも、本明細書に記載したあらゆる利益を提供するわけでもないことを理解されたい。その上で、これらの問題の種々の置換を解決する改善を、以下に記述する。
【0059】
[69]本システム及び方法は、がん患者の免疫調節に有用であり、自己免疫性及び炎症性障害を含むがそれらに限らないその他の疾患の比較的有用な免疫調節を提供し得る。いくつかの実施形態では、免疫吸着手段を用いる患者の血液からの免疫抑制因子の体外除去が提供される。いくつかの実施形態では、本システム及び方法は、がん患者からの可溶性腫瘍壊死因子受容体（ｓＴＮＦ－Ｒ）の効率的な除去を提供する。ＴＮＦは、がんに対する身体の天然の免疫応答の一部として腫瘍の成長及び抑制を調節する内因性サイトカインである。しかし多くのがんでは、ＴＮＦの抗腫瘍効果は、可溶性ＴＮＦ受容体（ｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２、例えばＧａｔａｎａｇａ，Ｔ．ら（１９９０）Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ Ｒｅｓ ９，２２５～２２９頁；Ｇａｔａｎａｇａ，Ｔ．ら（１９９０）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ８７，８７８１～８７８４頁；Ｓｃｈａｌｌ，Ｔ．Ｊ．ら（１９９０）Ｃｅｌｌ ６１，３６１～３７０頁；Ｂｅｒｂｅｒｏｇｌｕ，Ｕ．ら（２００４）Ｉｎｔ Ｊ Ｂｉｏｌ Ｍａｒｋｅｒｓ １９，１３０～１３４頁を参照）として知られている循環中の阻害性分子の存在によってブロックされている。内因性ＴＮＦの治療的抗腫瘍効果をブロックするこれらの受容体は、がんにおいて増大し、疾患のステージと相関することが示されてきた（例えばＡｄｅｒｋａ，Ｄ．ら（１９９１）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５１，５６０２～５６０７頁を参照）。ｓＴＮＦ－Ｒはまた、乳がん、悪性黒色腫、結腸直腸がん、及び骨肉腫の予後インジケーターであり、患者の生存と負に相関する（例えばＬａｎｇｋｏｐｆ，Ｆ．及びＡｔｚｐｏｄｉｅｎ，Ｊ．（１９９４）Ｌａｎｃｅｔ ３４４，５７～５８頁；Ｖｉａｃ，Ｊ．ら（１９９６）Ｅｕｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ３２Ａ，４４７～４４９頁を参照）。プラズマフェレーシス、即ちイムノフェレーシス（Ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｒｅｓｉｓ）（商標）として知られているプロセスによって患者の血液からｓＴＮＦ－Ｒを選択的に除去することは、内因性ＴＮＦの抗腫瘍効果の実体を表すことによって患者の天然の抗腫瘍免疫応答を増強し、それにより腫瘍負荷の低減を容易にし、患者の生存を改善することができる。
【0060】
[70]図１は、本システムの例示的実施形態を説明する（項目１０）。図１において、システム１０はアフェレーシス装置１２に連結されていることが示されている。システム１０は、ｓＴＮＦ－Ｒ（例えば腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１Ａ（ＴＮＦＲＳＦ１Ａ及びＣＤ１２０ａ）としても知られている可溶性腫瘍壊死因子受容体１（ｓＴＮＦ－Ｒ１）、及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１Ｂ（ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ及びＣＤ１２０ｂ）としても知られている可溶性腫瘍壊死因子受容体２（ｓＴＮＦ－Ｒ２）を例示的標的成分としてがん患者１４の血液から選択的に除去するように構成されている。システム１０は、使用中の充填及び血漿の流れを容易にする種々のポートを有するハウジング１６の中に高選択性結合マトリックスを含む。患者１４から取り出された血液は処理されて血漿が得られ、血漿はプラズマフェレーシスの手技のためのアフェレーシス装置の血漿流路１８の中にシステム１０を設けることによって処理される。
【0061】
[71]市販のアフェレーシス装置１２の例には、例えばＴｅｒｕｍｏ ＢＣＴ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａ Ｓｙｓｔｅｍが含まれる。アフェレーシス装置のその他のメーカーには、それだけに限らないが、Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ、Ｈａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ、Ｂａｘｔｅｒ、Ｎｉｇａｌｅ、及びＡｓａｈｉが含まれる。次いでアフェレーシスはメーカーの説明書に従って実施され得る。
【0062】
[72]図１に示すように、アフェレーシス装置１２は、患者１４からの血液２０の静脈内取出し、及び次に（例えば遠心力、膜フィルター、及び／又はその他の部品を使用して）血液の血漿及び細胞分画への分離２２を容易にし得る。次いで血漿分画はシステム１０にポンプで送られ、ここで血漿は例えば（本明細書に記載した）ＴＮＦリガンドを用いてｓＴＮＦ－Ｒを捕捉する（本明細書に記載した結合マトリックスを含む）捕捉支持体を通過する。次いで血漿はポンプでシステム１０の外に戻され、処理された血漿の一部又は全部は患者１４の分離された細胞と合わされ、患者１４の循環系に戻して再導入２４される。
【0063】
[73]いくつかの実施形態では、処理された血漿は廃棄されて新鮮な血漿によって置き換えられる。例えば、血漿交換を同時に行ってもよく、交換血漿は阻害剤を除去するようにさらに処理される。例えば、血漿交換に続いて（例えば本明細書に記載した）イムノフェレーシスを行ってもよい。
【0064】
[74]本出願を通して血液、血漿、ｓＴＮＦ－Ｒ、及びＴＮＦリガンドを具体的に述べているが、本明細書に記載した成分及び／又は原理は、その他の体液、体液のその他の標的成分、及び／又はその他の捕捉若しくは結合の要素に適用できることに留意されたい。
【0065】
[75]図２は、システム１０のより詳細な外観を提供する。図３は、対応する断面図を示す。図２及び図３を参照して、システム１０は、ハウジング１６、入り口２００、並びに捕捉支持体２０４、アクセスポート２０６及び２０８、出口２１０、１つ又は複数のフィルター（例えば図３に示す２１２及び２１４）、エンドキャップ２５０及び２５２を備える隔離チャンバー２０２、及び／又はその他の部品を備える。図２及び図３に示すように、システム１０は、例えば体外閉回路カラムを形成し得る。
【0066】
[76]閉回路カラムは、操作中に無菌のままであるように構成され得る。いくつかの実施形態では、システム１０の部品は、粒子を除去するために組立て前に例えば７０％のイソプロピルアルコールで洗浄される。エンドキャップ２５０及び２５２にはフィルター２１２及び２１４を取り付け、バレル又は（例えば）チューブの末端に押し付けてハウジング１６を形成し得る。キャップ２５４及び２５６は入り口２００及び出口２１０にねじ込むか、及び／又はその他の方法で連結してもよい。この中間組立て品を包装し、例えばエチレンオキシド（ＥｔＯ）を用いて滅菌する。残留ＥｔＯは製造工程を続ける前に消散させる。ＥｔＯ滅菌した中間組立て品に、アクセスポート２０６及び２０８を通して捕捉支持体２０４を無菌的に充填し、次いでポート２０６及び２０８を（例えば）ポリカーボネートの（例えば）ルアー（例えば上述の）キャップでしっかりとキャップする。次いで組み立てたデバイスを個別に包装し、（例えば）１７．５～３０ｋＧｙの電子線照射で最終滅菌する。いくつかの実施形態では、利用できる他の滅菌手段には、ガンマ線照射、エチレンオキシド、過酸化水素、漂白、熱滅菌、蒸気滅菌、オゾン、並びに／又は捕捉支持体２０４の安定性及び／若しくはその他の因子に応じたその他の滅菌操作が含まれる。
【0067】
[77]ハウジング１６、入り口２００、出口２１０、及び／又はシステム１０のその他の部品は、アフェレーシス装置（例えば図１に示す装置１２）の（例えば血漿の）流路と連結するように構成してもよい。ハウジング１６、入り口２００、出口２１０、及び／又はシステム１０のその他の部品は、患者の血液が例えば細胞分画と血漿分画とに（例えば本明細書に記載したように）分離された後にある流路の一点で、アフェレーシス装置の流路と連結するように構成してもよい。ハウジング１６は、患者の体液を入り口２００と出口２１０との間に導く流体チャネル又は流路を形成してもよい。
【0068】
[78]ハウジング１６は、捕捉支持体２０４及び／又はシステム１０のその他の部品の構造支持を提供し得る。ハウジング１６は、円形の断面形状及び／又はその他の断面形状を有する長いチューブ状本体を形成し得る。ハウジング１６は、捕捉支持体２０４、１つ又は複数のフィルター２１２及び／若しくは２１４、並びに／又はその他の部品を備える隔離チャンバー２０２を収容し得る。いくつかの実施形態では、ハウジング１６及び／又はシステム１０のその他の部品は、射出成形及び／又はその他の操作によって製造し得る。
【0069】
[79]ハウジング１６はフィルター２１２及び２１４を収容し、それによりフィルター２１２及び２１４は入り口２００と出口２１０との間の流体の流れ方向に実質的に垂直である。フィルター２１２及び２１４は、隔離チャンバー２０２の中の捕捉支持体２０４を入り口２００及び出口２１０から分離するように構成してもよい。フィルター２１２、２１４は、捕捉支持体２０４を隔離チャンバー２０２の中に保持するように、及び／又はその他の機能を行うように、構成してもよい。
【0070】
[80]いくつかの実施形態では、フィルター２１２及び／又は２１４は、ハウジング１６を通過する流体の流れの方向に実質的に垂直に取り付けられた多孔質バリアを形成し得る。フィルター２１２は入り口２００に近接して、またフィルター２１４は出口２１０に近接して位置してもよく、それによりハウジング１６の中に隔離チャンバー２０２が形成される。フィルター２１２及び／又は２１４は、捕捉支持体２０４（例えば本明細書に記載した１つ又は複数のビーズ）の（全てまで及び全てを含む）一部がシステム１０を逃れて、例えば患者の循環系に流入することを防止するように構成してもよい。いくつかの実施形態では、フィルター２１２及び／又は２１４は、例えば多孔質フリットを含み得る。いくつかの実施形態では、フィルター２１２、２１４は、例えば約３ミクロン～約１００ミクロンの平均孔径、及び／又はその他の平均孔径を有し得る。いくつかの実施形態では、フィルター２１２及び２１４はハウジング１６の内径より大きな直径を有し、それによりフィルター２１２及び２１４はハウジング１６の中でぴったりとフィットし、体液がシステム１０を通して流動した際に移動しない。いくつかの実施形態では、フィルター２１２及び２１４は、フィルター２１２及び２１４をハウジング１６のリム（例えばハウジング１６によって形成されるチューブのいずれかの末端）に対して押し付けるエンドキャップ２５０及び２５２（以下に記載）からの圧力によって適所に保持されている。いくつかの実施形態では、フィルター２１２及び２１４は、接着剤、ワッシャー、ガスケット、ステッチ、オーバーモールド、超音波溶接、及び／又はその他の部品並びに／若しくはプロセスによってハウジング１６の中の適所に保持されている。いくつかの実施形態では、フィルター２１２及び２１４は、ポリエチレン及び／又はその他の材料から形成してもよい。
【0071】
[81]いくつかの実施形態では、ハウジング１６は、入り口２００及び出口２１０を形成し及び／又はこれらを備えるエンドキャップ２５０及び２５２をハウジング１６のいずれかの末端に備える。エンドキャップ２５０及び２５２はハウジング１６にねじ込まれ、及び／又はその他の方法で（例えばクリップ、クランプ、接着剤、超音波溶接、嵌合、その他によって）ハウジング１６に連結してもよい。いくつかの実施形態では、エンドキャップ２５０及び／又は２５２は、システム１０が実質的に気密であることを保証するようにハウジング１６に固定してもよい。換言すれば、システム１０は保存、輸送、及び使用の間の無菌性を保証するために、内部及び外部の圧力（空気と流体の両方）に耐えるように構成されている。いくつかの実施形態では、エンドキャップ２５０及び２５２は、それぞれ入り口２００及び出口２１０で終端している。いくつかの実施形態では、入り口２００及び／又は出口２１０はキャップ２５４、２５６を備え得る。いくつかの実施形態では、エンドキャップ２５０及び／又は２５２はポリプロピレン及び／又はその他の材料から形成してもよい。いくつかの実施形態では、キャップ２５４及び／又は２５６は、例えば高密度ポリエチレン及び／又はその他の材料から形成してもよい。
【0072】
[82]いくつかの実施形態では、ハウジング１６はプラスチック及び／又はその他の材料から形成してもよい。例えば、ハウジング１６は、ＥＣＴＦＥ（エチレン－クロロトリフルオロエチレンコポリマー、ｈａｌａｒＥＣＴＦＥ、ＥＴＦＥ（エチレン－テトラフルオロエチレン）、ｔｅｆｚｅｌエチレンテトラフルオロエチレン（ＥＴＦＥ）、ＦＥＰ（フッ素化エチレンポリプロピレン）、ＨＤＰＥ（高密度ポリエチレン）、ＬＤＰＥ（低密度ポリエチレン）、ＰＣ（ポリカーボネート）、Ｍａｋｒｏｌｏｎポリカーボネート、ＰＥＩ（ポリエーテルイミド）、ＰＥＴ（ポリエチレンテレフタレート）、ＰＥＴＧ（ポリエチレンテレフタレートコポリマー）、ＰＦＡ（ポリフルオロアルコキシ）、Ｔｅｆｌｏｎ ＰＦＡ、ＰＭＭＡ（ポリメチルメタクリレート）、ＰＭＰ（ポリメチルペンテン）、ポリプロピレン、ＰＰＣＯ（ポリプロピレンコポリマー）、ポリスチレン、ＰＳＦ（ポリスルホン）、ＰＴＦＥ（ポリテトラフルオロエチレン）、ＳＡＮ（スチレンアクリロニトリル）、ＴＦＥ（テトラフルオロエチレン）、Ｔｅｆｌｏｎ ＴＦＥ、ＴＭＸ（サーマノックス）、ＰＭＸ（パーマノックス）、及び／又はその他の材料のうち１つ又は複数から形成してもよい。いくつかの実施形態では、ハウジング１６は、金属材料（例えば鉄、鉄合金、鋼、ステンレススチール、アルミニウム、アルミニウム合金）、ガラス、及び／又はその他の材料から形成してもよい。
【0073】
[83]入り口２００は、患者（例えば図１に示す患者１４）から血液、血漿、及び／又はその他の体液を受容するように構成してもよい。出口２１０は、患者（例えば図１に示す患者１４）に戻して再導入するために低減された量の１つ又は複数の標的成分を有する血液、血漿、及び／又はその他の体液を隔離チャンバー２０２から通過させるように構成してもよい。いくつかの実施形態では、入り口２００及び／又は出口２１０は、ルアーフィッティング及び／又はその他の入り口若しくは出口の流体コネクタータイプ又は構成であってもよい。いくつかの実施形態では、入り口２００及び／又は出口２１０は、アフェレーシス装置のチューブセット、静脈内チューブ延長セット、流体チューブアダプター、フィルター、ストップコック、及び／又は閉ループ患者流体ラインアセンブリーにおいて一般に用いられるその他のエレメントに流体的に連結されるように構成される。いくつかの実施形態では、入り口２００及び／又は出口２１０は、患者からの血液、血漿、及び／又はその他の体液が約５ｍＬ／分～約３００ｍＬ／分、及び／又はその他の流速でシステム１０を流れるように構成してもよい。いくつかの実施形態では、流速は約１０ｍＬ／分～約１００ｍＬ／分であってもよい。いくつかの実施形態では、流速は約２５ｍＬ／分～約７５ｍＬ／分であってもよい。いくつかの実施形態では、流速は約３５ｍＬ／分～約７０ｍＬ／分であってもよい。いくつかの実施形態では、流速は約４０ｍＬ／分～約６０ｍＬ／分であってもよい。これらの例示的な流速は、本明細書に記載したシステムによって適応できる範囲内である。いくつかの手技については、５ｍＬ／分未満の流速では完了するために過度の時間を必要とすることがある。逆に、３００ｍＬ／分を超える流速では、アフェレーシス装置と併せて用いた場合にシステム１０の捕捉効率を制限することがある。しかし、３００ｍＬ／分の流速が可能であることが予測される。入り口２００及び／又は出口２１０は、そのような流速を容易にする特定の大きさの直径及び／又はその他の特徴を有し得る。
【0074】
[84]いくつかの実施形態では、入り口２００及び／又は出口２１０は、（例えば）約２００μｇまでのｓＴＮＦ－Ｒタンパク質を含むヒト血漿がシステム１０を通過して流れるように構成してもよい。この例は、患者のｓＴＮＦ－Ｒの期待される全血漿量に基づいている。ヒト血漿中におけるｓＴＮＦ－Ｒ（ｓＴＮＦ－Ｒ１とｓＴＮＦ－Ｒ２の組合せ）の濃度範囲はおよそ３～１０ｎｇ／ｍＬであり、例示的な患者の血漿体積は体重（Ｗ）１ｋｇあたり５０ｃｃの範囲であろう。ｓＴＮＦ－Ｒの全量は約（Ｗ（ｋｇ）×５０ｍＬ／ｋｇ×（３～１０ｎｇ／ｍＬ）／１０００ｎｇ／μｇ）である。即ち、（例えば）７０ｋｇの個体については、ｓＴＮＦ－Ｒの量は１０．５～３５μｇの範囲となる。いくつかの実施形態では、システム１０の捕捉能力の過剰量は、（例えば）約４５ｍＬ／分までの流速でシステム１０を流れる血漿についての過剰量のｓＴＮＦ－Ｒの実験室におけるベンチ試験に基づいて、十分な効率の余裕を創成できる。いくつかの実施形態では、入り口２００及び／又は出口２１０は、ポリプロピレン、ポリカーボネート、マクロロン（Ｍａｋｒｏｌｏｎ）（商標）、及び／又はその他の材料から形成してもよい。
【0075】
[85]隔離チャンバー２０２は、入り口２００に連結してもよい。隔離チャンバー２０２は、入り口２００から血液（例えば全血）、血漿、及び／又はその他の体液を受容するように構成してもよい。隔離チャンバー２０２は、捕捉支持体２０４、アクセスポート２０６、２０８、及び／又はその他の部品を備え得る。
【0076】
[86]捕捉支持体２０４は、血液、血漿、及び／又はその他の体液の少なくとも１つの標的成分と結合して、隔離チャンバー２０２の中で少なくとも１つの標的成分を捕捉するように構成してもよい。捕捉支持体２０４は、例えば（ビーズリガンド及び／又は本明細書に記載したその他の成分を含む）結合マトリックスであり、及び／又はそれを含み得る。捕捉は、捕捉支持体２０４と血液、血漿、及び／又はその他の体液との接触に応答して起こり得る。捕捉支持体２０４は、少なくとも１つの標的成分と結合して、血液、血漿、及び／又はその他の体液中の少なくとも１つの標的成分の量を低減するように構成してもよい。
【0077】
[87]いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分は、複合体、アセンブリー、又は細胞を含み得る。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分は、患者における抗がん免疫応答を阻害するように機能する血漿又は血清成分等の１つ又は複数の血液製剤を含み得る。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分は、１つ又は複数の免疫阻害剤を含み得る。例えば、少なくとも１つの標的成分は、可溶性ＴＮＦα受容体、ｓＴＮＦ－Ｒ１受容体、ｓＴＮＦ－Ｒ２受容体、ｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２の受容体、並びに／又はその他の受容体及び受容体の組合せを含み得る。
【0078】
[88]いくつかの実施形態では、捕捉部分は、血漿中の他の特定の分子と結合してこれを捕捉するように選択してもよい。これらの他の分子又は標的の例としては、それだけに限らないが、アセチルコリン受容体、アデノシン受容体、アドレノ受容体、ＧＡＢＡ受容体、アンギオテンシン受容体、カンナビノイド受容体、コレシストキニン受容体、ドーパミン受容体、グルカゴン受容体、グルココルチコイド受容体、グルタメート受容体、ヒスタミン受容体、ミネラロコルチコイド受容体、オルファクトリー受容体、オピオイド受容体、プリン作動性受容体、セクレチン受容体、セロトニン受容体、ソマトスタチン受容体、ステロイドホルモン受容体、カルシウム検知受容体、ホルモン受容体、エリスロポエチン受容体、及びナトリウム利尿ペプチド受容体、又はこれらのリガンドが挙げられる。他の例には、それだけに限らないが、Ｉ型インターロイキン受容体等のＩ型サイトカイン受容体、エリスロポエチン受容体、ＧＭ－ＣＳＦ受容体、Ｇ－ＣＳＦ受容体、成長ホルモン受容体、オンコスタチンＭ受容体、ミオスタチン受容体、白血病阻害因子受容体、ＩＩ型インターロイキン受容体等のＩＩ型サイトカイン受容体、インターフェロンα／β受容体、インターフェロンγ受容体、又はこれらのリガンド；インターロイキン－１受容体、ＣＳＦ１、ｃｋｉｔ受容体、インターロイキン－１８受容体、又はこれらのリガンド等の免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバー；ＣＤ２７、ＣＤ４０、及びリンフォトキシン受容体又はこれらのリガンド；ＣＣＲ１及びＣＸＣＲ４等のサーペンタインＣＣＲ及びＣＸＣＲの受容体、並びにインターロイキン８受容体又はこれらのリガンドを含むケモカイン受容体；ＴＧＦβ受容体１及びＴＧＦβ受容体２を含むＴＧＦβ受容体又はこれらのリガンド；ガレクチン；並びに／又はその他の構造が含まれる（Ｏｚａｋｉ及びＬｅｏｎａｒｄ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ ２７７：２９３５５～２９３５３頁，２００２を参照）。
【0079】
[89]いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、固体支持体及び／又はその他の部品を含み得る。固体支持体は、アフィニティクロマトグラフィー支持体材料、中空繊維膜、シート状膜、膜カセット、ロール化シート膜、及び／又はその他の材料であってもよい。捕捉支持体２０４がアフィニティクロマトグラフィー支持体材料を含む実施形態では、アフィニティクロマトグラフィー支持体材料は、糖、セファロース、アガロース等の炭水化物若しくは多糖、又はアクリルアミド等のポリマー、及び／又はその他の材料を含み得る。
【0080】
[90]いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、多孔質又は非多孔質マトリックス材料を含み得る。いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、血液、血漿、及び／又はその他の体液の２つ以上の標的成分に結合するように構成してもよい。
【0081】
[91]いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、支持体に結合した親和性薬剤（例えば本明細書に記載したリガンド）を含むがこれに限定されない異なる捕捉部分を含むアフィニティクロマトグラフィーマトリックスであってもよい。アフィニティクロマトグラフィーマトリックスは、親和性薬剤（例えばリガンド）と固体支持体との連結を容易にするため、代わりに臭化シアノゲン、トレシル、トリアジン、ビニルスルホン、アルデヒド、エポキシド、又は活性化されたカルボン酸等の、しかしこれらに限定されない連結基を含み得る。クロマトグラフィーマトリックスは、必要であれば固体支持体を化学的に活性化することによって、メチル－リジン親和性薬剤を連結基で固体支持体と連結し、親和性薬剤が固体支持体と共有結合するように固体支持体とメチル－リジン親和性薬剤とを接触させることによって調製してもよい。さらに、親和性薬剤がメチル化されたタンパク質及びペプチドとの結合のためによりアクセスしやすくなるように、リンカーを通じて親和性薬剤を固体支持体に連結してもよい。
【0082】
[92]いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、抗体、抗体断片、結合ペプチド、アプタマー、アビマー、及び／又はその他の成分が固定された固体支持体を含み得る。いくつかの実施形態では、抗体はＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、若しくはＩｇＭのうち１つ又は複数、免疫グロブリンサブクラス、及びこれらの混合物、これらの組合せ、並びに／又はその他の抗体である。
【0083】
[93]いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、ＴＮＦα（上述のように、ＴＮＦ及びＴＮＦαは本明細書では相互交換可能に用いられる）、ＴＮＦのマルチマー、一本鎖（ｓｃ）ＴＮＦ、ＴＮＦの断片、ＴＮＦの断片のマルチマー、又はこれらの組合せ等のリガンドを含む親和性薬剤を含み得る。いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、１つ又は複数の固体支持体に結合したＴＮＦリガンドであり、及び／又はこれを含み得る。いくつかの実施形態では、結合は例えば共有結合連結及び／又はその他の結合であってもよい。
【0084】
[94]ＴＮＦの種類には、霊長類ＴＮＦ及びヒトＴＮＦ等の哺乳動物ＴＮＦが含まれる。例示的なヒトＴＮＦの配列には、
１．（ＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬ、配列番号１）［処理されたＴＮＦモノマー、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＱＹ７７１５０．１］；
２．トリマー形：
（ＭＣＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＡＳＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬ、配列番号２）；及び
３．トリマー形：
（ＧＳＡＳＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＳＧＧＧＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬ、配列番号３）
が含まれる。
１．（ＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬ、配列番号１）［処理されたＴＮＦモノマー、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＱＹ７７１５０．１］；
２．トリマー形：
（ＭＣＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＡＳＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬ、配列番号２）；及び
３．トリマー形：
（ＧＳＡＳＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＳＧＧＧＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬ、配列番号３）
が含まれる。
【0085】
[95]例示的なＴＮＦは、配列番号１の配列のモノマー、配列番号１の配列のダイマー、配列番号１の配列のトリマー、又は配列番号２若しくは配列番号３のトリマー形、又はこれらの部分配列を含み得る。配列番号２又は配列番号３を含むモノマーは、任意選択でＧＧＧＳ等のグリシン若しくはセリンのスペーサー配列、又は（ＧＧＧＳ）４等のスペーサーマルチマーによって共有結合連結されてもよい。アミノ酸、スペーサー配列、及びスペーサーマルチマーがダイマー形又はトリマー形に組み込まれてもよく、組み込まれなくてもよい。
【0086】
[96]ＴＮＦの天然又は非天然に生じるバリアントが含まれる。そのようなバリアントには、機能を獲得又は喪失したバリアントが含まれる。
【0087】
[97]ＴＮＦバリアントの非限定的な例には、参照ＴＮＦ配列の１つ又は複数のアミノ酸の置換（例えば１～３、３～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、２５～３０、３０～４０、４０～５０、５０～１００、又はそれ以上の残基）、付加（例えば１～３、３～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、２５～３０、３０～４０、４０～５０、５０～１００、又はそれ以上の残基の挿入）、及び欠失（例えば部分配列又は断片）が含まれる。いくつかの実施形態では、バリアントＴＮＦ配列は、未改変配列の機能又は活性、例えばｓＴＮＦ－Ｒ（例えばｓＴＮＦ－Ｒ１受容体及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２受容体）に結合する能力の少なくとも一部を保持している。
【0088】
[98]バリアントは、１つ又は複数の非保存的若しくは保存的なアミノ酸配列の相違若しくは改変、又はその両方を有し得る。「保存的置換」は、１つのアミノ酸の生物学的、化学的、又は構造的に類似の残基による置き換えである。「生物学的に類似」は、置換が生物活性を破壊しないことを意味する。「構造的に類似」は、アミノ酸がアラニン、グリシン、及びセリン等の類似した長さ、又は類似した大きさの側鎖を有することを意味する。化学的類似性は、残基が同じ電荷を有するか、いずれも親水性又は疎水性であることを意味する。特定の例には、１つの疎水性残基、例えばイソロイシン、バリン、ロイシン、又はメチオニンの別の残基への置換、又は１つの極性残基の別の残基への置換、例えばアルギニンのリジンへの、グルタミン酸のアスパラギン酸への、又はグルタミンのアスパラギンへの、セリンのスレオニンへの置換等が含まれる。保存的置換の特定の例には、イソロイシン、バリン、ロイシン、又はメチオニン等の疎水性残基の別の残基への置換、極性残基の別の残基への置換、例えばアルギニンのリジンへの、グルタミン酸のアスパラギン酸への、又はグルタミンのアスパラギンへの置換等が含まれる。例えば、保存的アミノ酸置換には、典型的には以下のグループ、即ちグリシン、アラニン；バリン、イソロイシン、ロイシン；アスパラギン酸、グルタミン酸；アスパラギン、グルタミン；セリン、スレオニン；リジン、アルギニン；及びフェニルアラニン、チロシンの中での置換が含まれる。「保存的置換」は、非置換の親アミノ酸の代わりに置換アミノ酸を用いることも含まれる。
【0089】
[99]そのようなバリアントには、例えばタンパク質又はポリペプチドが改変された又はさらなる特性を有するように、組換えＤＮＡ技術を用いて改変された、又は改変され得る、タンパク質又はポリペプチドが含まれる。バリアントは天然産生のタンパク質又はペプチド等の参照配列とは異なることがある。
【0090】
[100]アミノ酸配列レベルで、天然又は非天然に産生されるバリアントタンパク質は、参照タンパク質と少なくとも約７０％同一、より典型的には約８０％同一、さらにより典型的には約９０％若しくはそれ以上同一となるが、非保存領域では実質的な領域における非同一性（例えば７０％未満同一、例えば６０％、５０％又は４０％未満さえも同一）が許される。他の実施形態では、配列は参照配列と少なくとも６０％、７０％、７５％、又はそれ以上の同一性（例えば８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上の同一性）を有する。タンパク質又はポリペプチドにアミノ酸の変化を導入する手技は当業者には公知である（例えばＳａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（２００７）を参照）。
【0091】
[101]用語「同一性」及びその文法的変形は、２つ以上の参照実体が「整列された」配列にある場合に、両者が同一であることを意味する。即ち例として、２つのポリペプチド配列が同一である場合には、少なくとも参照領域又は参照部分の中では、両者は同一のアミノ酸配列を有する。同一性は配列の定義された区域（領域又はドメイン）にわたり得る。同一性の「区域」又は「領域」は、同一である２つ以上の参照実体を指す。即ち、２つのタンパク質配列が１つ又は複数の配列の区域又は領域にわたって同一である場合には、これらはその領域の中で同一性を共有している。「整列された」配列は、参照配列と比較して失われたアミノ酸（ギャップ）の補正をしばしば含む多数のタンパク質（アミノ酸）配列を指す。
【0092】
[102]同一性は全配列長又は配列の一部にわたって延在し得る。例えば、同一性パーセントを共有する配列の長さは、２、３、４、５又はそれ以上の隣接するアミノ酸、又はそれ以上、例えば６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０等の隣接するアミノ酸である。別の非限定的な例では、同一性を共有する配列の長さは２０以上の隣接するアミノ酸、又はそれ以上、例えば２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５等の隣接するアミノ酸である。さらなる非限定的な例では、同一性を共有する配列の長さは３５以上の隣接するアミノ酸、例えば３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４５、４７、４８、４９、５０等の隣接するアミノ酸である。さらに特定の非限定的な例では、同一性を共有する配列の長さは、５０以上のアミノ酸、例えば５０～５５、５５～６０、６０～６５、６５～７０、７０～７５、７５～８０、８０～８５、８５～９０、９０～９５、９５～１００、１００～１１０等の隣接するアミノ酸である。
【0093】
[103]２つの配列の間の同一性の程度は、コンピュータプログラム及び数学的アルゴリズムを用いて確認することができる。配列同一性パーセントを計算するそのようなアルゴリズムは一般に、比較する領域又は区域にわたる配列のギャップ又はミスマッチを説明している。例えば、ＢＬＡＳＴ（例えばＢＬＡＳＴ２．０）検索アルゴリズム（例えばＮＣＢＩを通して公衆利用可能なＡｌｔｓｃｈｕｌら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３頁（１９９０）を参照）は、以下の例示的な検索パラメーターを有している。ミスマッチ：－２、ギャップオープン：５、ギャップエクステンション：２。タンパク質又はポリペプチドの配列比較のため、ＢＬＡＳＴＰアルゴリズムが典型的にはＰＡＭ１００、ＰＡＭ２５０、ＢＬＯＳＵＭ６２、又はＢＬＯＳＵＭ５０等のスコアリングマトリックスと組み合わせて用いられる。ＦＡＳＴＡ（例えばＦＡＳＴＡ２及びＦＡＳＴＡ３）及びＳＳＥＡＲＣＨ配列比較プログラムも、同一性の程度を定量するために用いられる（Ｐｅａｒｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：２４４４頁（１９８８）；Ｐｅａｒｓｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．１３２：１８５頁（２０００）；及びＳｍｉｔｈら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１４７：１９５頁（１９８１））。Ｄｅｌａｕｎａｙ系トポロジカルマッピングを用いてタンパク質構造の類似性を定量するためのプログラムも開発されている（Ｂｏｓｔｉｃｋら、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ．３０４：３２０頁（２００３））。
【0094】
[104]ＴＮＦ等のリガンド及びタンパク質は、付加及び挿入、例えば異種のドメインを含む。付加（例えば異種のドメイン）は、任意の種類の分子の共有又は非共有の結合であり得る。典型的には、付加及び挿入（例えば異種のドメイン）は、相補的又は独特の機能又は活性を付与する。
【0095】
[105]付加又は挿入の非限定的な例としては、アミノ酸スペーサー、２つ以上のアミノ酸を含むスペーサー、及び２つ以上のアミノ酸を含むそのようなスペーサーのマルチマーがある。スペーサーのアミノ酸及びマルチマーとして機能するアミノ酸の非限定的な例には、グリシン、セリン、及びアラニンが含まれる。
【0096】
[106]付加及び挿入にはキメラ及び融合配列が含まれ、これはその配列に共有結合した天然（野生型）の参照配列の中に正常では存在しない１つ又は複数の分子を有するタンパク質配列である。用語「融合」又は「キメラ」、及びこれらの文法的変形は、その分子の部分又は一部が、それらが典型的には天然に共存しないので、その分子とは区別される（異種の）異なる実体を含むことを意味する。即ち、例えば融合又はキメラの１つの部分は、天然には共存せず構造的に区別される部分を含むか、又はそれからなる。
【0097】
[107]いくつかの実施形態では、ＴＮＦリガンドを（１つ又は複数の）固体支持体に共有結合で連結する方法には、アミン還元化学、臭化シアノゲン（ＣＮＢｒ）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル、カルボニルジイミダゾール、還元的アミノ化、２－フルオロ－１－メチルピリジニウム（ＦＭＰ）活性化、１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）媒介アミド結合形成、有機スルホニルクロリド、トシルクロリド及びトレシルクロリド、ジビニルスルホン、アズラクトン、塩化シアヌル（トリクロロ－ｓ－トリアジン）、スルフヒドリル反応性化学、ヨードアセチル及びブロモアセチル活性化、マレイミド、ピリジルジスルフィド、ジビニルスルホン、エポキシ若しくはビスオキシラン、ＴＮＦ－チオール、カルボニル反応性化学、ヒドラジド、還元的アミノ化、ヒドロキシル反応性化学、塩化シアヌル、活性水素反応性化学、ジアゾニウム、マンニッヒ縮合、光反応架橋、ＣＮＢｒ活性化及び過ヨウ素酸塩活性化を伴う固定化血清アルブミン、並びに／又はその他の方法が含まれる。
【0098】
[108]いくつかの実施形態では、結合は例えばイオン性結合、静電結合、ファンデルワールス結合、疎水性結合、及び／又はその他の結合であり得る。いくつかの実施形態では、静電結合は、ビオチンに結合した固定化アビジン、ストレプトアビジン及びモノマーアビジン、抗体抗原複合体、リガンド受容体複合体、並びに／又はその他の連結分子等の適合する分子を用いてＴＮＦリガンドと１つ又は複数の固体支持体との間に形成してもよい。
【0099】
[109]いくつかの実施形態では、固体支持体は、アガロース、セファロース、セルロース、多孔質ガラス、シリカ、アクリルアミド誘導体ポリアクリルアミドビーズ、トリスアクリル、セファクリル、ウルトロゲル（Ｕｌｔｒｏｇｅｌ）（登録商標）ＡｃＡクロマトグラフィー吸着剤（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、アズラクトンビーズ、メタクリレート誘導体、ＴＳＫゲル（ＴＳＫｇｅｌ）（登録商標）クロマトグラフィーゲル（Ｔｏｓｏｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、トヨパール（ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ）（登録商標）ＨＷポリマーゲル（Ｔｏｓｏｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＨＥＭＡ（２－ヒドロキシメタクリレート）、ポリ（２－ヒドロキシメタクリレート）、Ｅｕｐｅｒｇｉｔ、ポリスチレン及びその誘導体、Ｐｏｒｏｓ、ポリエーテルスルホン、多糖、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスルホン、ポリエステル、ポリビニリデンフルオリド、ポリプロピレン、ポリ（テトラフルオロエチレン－ｃｏ－ペルフルオロ（アルキルビニルエーテル））、ポリカーボネート、ポリエチレン、ガラス、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリ（アゾラクトン）、ポリスチレン、ポリラクチド、セラミック、ナイロン、金属、並びに／又はその他の材料等の材料から形成してもよい。いくつかの実施形態では、固体支持体は、プレート、膜、ビーズ、セラミック、及び／又はその他の部品によって形成してもよい。
【0100】
[110]いくつかの実施形態では、固体支持体は、例えばビーズであるか、又はビーズを含み得る。いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、ビーズに結合したリガンドを含む。上述のように、いくつかの実施形態では、リガンドはｓｃ（一本鎖）－ＴＮＦαリガンドであるか、又はこれを含み得る。いくつかの実施形態では、リガンドはｓｃ－ＴＮＦリガンドのダイマー形又はトリマー形であるか、又はこれらを含み得る。いくつかの実施形態では、リガンドは、例えば患者血漿からのｓＴＮＦ－Ｒに結合し、これを効率的に捕捉する一本鎖ポリペプチド（ｓｃ－ＴＮＦ）リガンド（モノマー、ダイマー、又はトリマー）等のＴＮＦリガンドであり、及び／又はこれを含み得る。
【0101】
[111]改変されたアミノ酸配列又はタンパク質の純度によるコンフォメーションの変化を有するリガンドは、結合親和性の増強又は低減等の実質的な変化の原因となると考えられる。配列内のそのような変異は、それぞれポリペプチドのｓＴＮＦ－Ｒへの結合効率を改善又は低下させる可能性がある。ＴＮＦ製剤中の不純物は、使用するタンパク質の全量に比例して連結されるＴＮＦの量を減少させることによって、連結に用いられるＴＮＦの量を低下させる可能性がある。これらのリガンドは、患者の生物材料のこの標的部分について高い標的親和性又は結合親和性を有し得る。そのような結合親和性はＫＤとして表される（ＫＤ値が低いと結合親和性が高くなることに留意されたい）。リガンドの代表的な標的親和性は、例えば約１０－６ＫＤより大きく、又は約１０－７ＫＤより大きく、又は約１０－８ＫＤより大きく、又は約１０－９ＫＤより大きく、又は約１０－１０ＫＤより大きく、又は約１０－１１ＫＤより大きく、又は約１０－１２ＫＤより大きく、又は約１０－１３ＫＤより大きいことがあり得る。ＴＮＦのｓＴＮＦ－Ｒ１に対する親和性は、例えばほぼ１０－１１ＫＤであってもよい。ＴＮＦのｓＴＮＦ－Ｒ２に対する親和性は、例えばほぼ１０－１０ＫＤであってもよい。
【0102】
[112]いくつかの実施形態では、ｓｃ－ＴＮＦリガンドはｓｃ－ＴＮＦα分子を含む。いくつかの実施形態では、ｓｃ－ＴＮＦリガンドはＴＮＦαモノマー、ＴＮＦαタンパク質の１つ若しくは複数の複合体、及び／又はその他の成分を含む。いくつかの実施形態では、複合体はダイマー、トリマー、マルチマー、ムテイン、及び／又はこれらの断片を含む。いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、複数のアガロースビーズにコンジュゲートしたｓｃ－ＴＮＦタンパク質リガンド（例えばこれは例えば図１～３に示すようにシステム１０を通過して循環する血漿中に存在するｓＴＮＦ－Ｒに選択的に結合する）を含み得る。
【0103】
[113]いくつかの実施形態では、ｓｃ－ＴＮＦ（及び／又はその他のリガンド）の生成は、遺伝子操作及びタンパク質発現の種々の手段を通じて実施してもよい（例えばＭｕｌｌｅｒ，Ｒ．ら（１９８６）ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ １９７，９９～１０４頁；Ｍｏｒｉ，Ｔ．ら（１９９４）Ｇｅｎｅ １４４，２８９～２９３頁；Ｈｏｒｗｉｔｚ，Ａ．Ｈ．ら（１９９６）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ Ｐｕｒｉｆ ８，２８～４０頁；Ｌｉ，Ｈ．ら（２０１９）Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ３５，２７頁；Ａｓｈｍａｎ，Ｋ．ら（１９８９）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ ２，３８７～３９１頁；Ｓｕ，Ｘ．ら（１９９２）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １３，７５６～７６２頁；Ｌｉ，Ｃ．Ｂ．ら（１９９２）Ｓｃｉ Ｃｈｉｎａ Ｂ ３５，３１９～３２８頁；Ｇｕｏ，Ｄ．ら（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ２０７，９２７～９３２頁；Ｘｉａｎｇ，Ｊ．ら（１９９７）Ｊ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ５３，３～１２頁；Ｔａｎｇ，Ｐ．ら（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３５，８２１６～８２２５頁を参照）。
【0104】
[114]リガンドは、所与の支持体（例えばビーズ等）の上で所与の密度及び配向を有し得る。リガンドは、例えばアミン又はチオール部分を通じてビーズ（及び／又はその他の支持体）に共有結合で連結することができる。密度及び配向は、リガンドと体液の標的成分との間の結合を増強するように構成してもよい。いくつかの実施形態では、リガンドは結合のアクセス可能性のためにアミノ（Ｎ）又はカルボキシル（Ｃ）末端において支持マトリックス（例えば所与のビーズ）から外へ延在するように構成してもよい。いくつかの実施形態では、結合に干渉する可能性のある立体障害を低減する手段として、通過する体液の中にリガンドを延在させるために、（例えば）ビーズ表面とリガンドとの間にリンカーを設けてもよい。
【0105】
[115]密度は、支持体１ｍｇあたりのリガンドのｍｇとして表すことができる。いくつかの実施形態では、リガンドは５４ＫＤのタンパク質であってもよい。例としてであって限定なく、支持体は例えば少なくとも約０．１ｍｇ（１．８×１０－６ミリモル）リガンド／ｍｇ支持体（例えばビーズ）、少なくとも約１ｍｇ（１８×１０－６ミリモル）リガンド／ｍｇ支持体（例えばビーズ）、少なくとも約５ｍｇリガンド／ｍｇ支持体（例えばビーズ）、少なくとも約７ｍｇ（１．３×１０－４ミリモル）リガンド／ｍｇ支持体（例えばビーズ）、少なくとも約１０ｍｇリガンド／ｍｇ支持体（例えばビーズ）、少なくとも約１５ｍｇリガンド／ｍｇ支持体（例えばビーズ）、又は少なくとも約２０ｍｇリガンド／ｍｇ支持体（例えばビーズ）、又はそれ以上のリガンド密度を有し得る。
【0106】
[116]（例えばハウジング１６の形状及び大きさと組み合わせた）ビーズ等の支持体の大きさ、数、密度、及び／又は濃度は、リガンドと体液中の標的成分との結合を増強するために、ビーズを通過する血液、血漿、及び／又はその他の体液の層流を容易にするように構成してもよい。ビーズの大きさを増大させることは、比例して、より高い流速に適応し得る。連結したリガンドの密度の増大は捕捉容量を増大させ得る一方、標的分子の効果的な結合に干渉する可能性のある立体障害に寄与し得る濃縮を避けることができる。支持体（例えばビーズ）の大きさ、数、密度、配向、及び／又は濃度は、例えば捕捉速度と臨床実用的な手技時間との間のトレードオフを効果的にバランスさせるシステム１０を通過する血漿の流速を容易にし得る。例えば、システム１０の１つの実施形態を含むプラズマフェレーシス手技には、患者血漿からのｓＴＮＦ－Ｒ１／Ｒ２の特定の標的濃度の低減を達成するために、隔離チャンバー２０２を通過して患者血漿体積の２倍を循環させる必要があり得る。一方、第１の実施形態の２倍の捕捉速度効率を有する代替の実施形態では、同程度のｓＴＮＦ－Ｒ１／Ｒ２濃度の低減を達成して、それにより臨床手技時間をほぼ２分の１に低減するために、その隔離チャンバーを通過して患者血漿体積の１倍を循環させることのみが必要である。いくつかの実施形態では、ビーズは、市販のアガロース又はポリアクリルアミド組成物等の１つ又は複数の異なるビーズ材料を含み得る。
【0107】
[117]いくつかの実施形態では、ビーズ及び／又はその他の固体支持体は、それらがフィルター２１２及び２１４（本明細書のフィルター孔径に関する考察を参照）を通過することを防止する大きさを有してもよい。いくつかの実施形態では、ビーズは、結合特異性を増強するために、エタノールアミン又はエチレンジアミンで（ＴＮＦの連結の後で残った結合部位がその占有において飽和している場合）クエンチしてもよい。エタノールアミンは例えばその生体親和性プロファイルのためにクエンチ剤として用いられる。いくつかの実施形態では、制御を改善し回収を最大化するために（又はその他の理由で）、ビーズをイムロン、ポリスチレン、又はポリエチレン等の薬剤で前処理してもよく、及び／又はビーズを市販の架橋剤で前処理してもよい。架橋剤は、１つ又は複数の循環免疫複合体を捕捉する分子の固相への結合を容易にするために用いられる任意の化学物質であってもよい。市販の架橋剤の非限定的な例としては、例えばポリ－Ｌ－リジン、グルタルアルデヒド、及び／又は臭化シアノゲンがある。
【0108】
[118]いくつかの実施形態では、ビーズは、（例えば本明細書に記載した）共有又は非共有で結合した親和性分子を含み得る結合マトリックスを形成し得る。いくつかの実施形態では、ビーズは例えば直径２０～１，０００μｍの範囲であってもよい。いくつかの実施形態では、ビーズは例えば直径２５～５００μｍの範囲であってもよい。いくつかの実施形態では、ビーズは例えば直径２５～２００μｍの範囲であってもよい。いくつかの実施形態では、ビーズは例えば直径４０～１８０μｍの範囲であってもよい。いくつかの実施形態では、ビーズは例えば直径５０～１７０μｍの範囲であってもよい。いくつかの実施形態では、ビーズは例えば直径６５～１６０μｍの範囲であってもよい。いくつかの実施形態では、ビーズは例えば直径７５～１５０μｍの範囲であってもよい。
【0109】
[119]ビーズは、生体親和性であって、種々のリガンドが（例えば上述のように）共有結合で連結されるか、又は静電的に結合する材料から形成してもよい。リガンドの結合は、アミン還元化学、臭化シアノゲン（ＣＮＢｒ）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル、カルボニルジイミダゾール、還元的アミノ化、ＦＭＰ活性化、ＥＤＣ媒介アミド結合形成、有機スルホニルクロリド、トシルクロリド及びトレシルクロリド、ジビニルスルホン、アズラクトン、塩化シアヌル（トリクロロ－ｓ－トリアジン）、スルフヒドリル反応性化学、ヨードアセチル及びブロモアセチル活性化法、マレイミド、ピリジルジスルフィド、ジビニルスルホン、エポキシ若しくはビスオキシラン、ＴＮＦ－チオール、カルボニル反応性化学、ヒドラジド、還元的アミノ化、ヒドロキシル反応性化学、塩化シアヌル、活性水素反応性化学、ジアゾニウム、マンニッヒ縮合、光反応架橋、並びに／又はその他の操作等の共有結合法を用いて実施してもよい。連結は、ＣＮＢｒ活性化又は過ヨウ素酸塩活性化を伴う固定化血清アルブミンを用いて行うこともできる。いくつかの実施形態では、結合はａ）ビオチンに結合した固定化アビジン、ストレプトアビジン及びモノマーアビジン、ｂ）抗体抗原複合体、及び／又はｃ）リガンド－受容体複合体等の非共有相互作用を用いて実施してもよい。
【0110】
[120]いくつかの実施形態では、標的成分に結合する捕捉支持体２０４の、［１－（出口２１０におけるｓＴＮＦ－Ｒの血漿中濃度／入り口２００におけるｓＴＮＦ－Ｒの血漿中濃度）］×１００と等価で、パーセンテージとして表される捕捉効率は、ｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２の少なくとも１０％以上であってもよい。いくつかの実施形態では、捕捉効率は少なくとも５０％以上であってもよい。いくつかの実施形態では、捕捉効率は少なくとも８０％以上であってもよい。いくつかの実施形態では、捕捉効率は少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上であってもよい。
【0111】
[121]より多くの標的薬剤がカラム（システム１０）内に集積して捕捉されるとともにシステムの捕捉マトリックス中の利用可能な結合部位が減少するので、捕捉効率値は時間に基づく成分を考慮に入れ得る（例えば処置の最初の５、１０、１５、３０、４５、６０、９０、１２０分、又はそれより長時間にわたる捕捉効率）。いくつかの非限定的な例として、いくつかの実施形態では、例えば流れている生物試料の中のｓＴＮＦ－Ｒタンパク質（ｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２）の少なくとも８０％以上が、約３０分以内に隔離チャンバー２０２の中でＴＮＦリガンドに結合するようになり得る。いくつかの実施形態では、流れている生物試料の中のｓＴＮＦ－Ｒタンパク質（ｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２）の少なくとも９０％以上が、約３０分以内に隔離チャンバー２０２の中でＴＮＦリガンドに結合するようになり得る。いくつかの実施形態では、流れている生物試料の中のｓＴＮＦ－Ｒタンパク質（ｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２）の少なくとも９５％以上が、約３０分以内に隔離チャンバー２０２の中でＴＮＦリガンドに結合するようになり得る。いくつかの実施形態では、流れている生物試料の中のｓＴＮＦ－Ｒタンパク質（ｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２）の少なくとも９６％以上が、約３０分以内に隔離チャンバー２０２の中でＴＮＦリガンドに結合するようになり得る。いくつかの実施形態では、流れている生物試料の中のｓＴＮＦ－Ｒタンパク質（ｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２）の少なくとも９７％以上が、約３０分以内に隔離チャンバー２０２の中でＴＮＦリガンドに結合するようになり得る。いくつかの実施形態では、流れている生物試料の中のｓＴＮＦ－Ｒタンパク質（ｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２）の少なくとも９８％以上が、約３０分以内に隔離チャンバー２０２の中でＴＮＦリガンドに結合するようになり得る。いくつかの実施形態では、流れている生物試料の中のｓＴＮＦ－Ｒタンパク質（ｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２）の少なくとも９９％以上が、約３０分以内に隔離チャンバー２０２の中でＴＮＦリガンドに結合するようになり得る。
【0112】
[122]いずれの理論にも縛られることを望まないが、本明細書に記載した捕捉効率値は、上述の（例えば極めて高い標的親和性を有する）ｓｃ－ＴＮＦリガンドの使用、トリマー形のｓｃ－ＴＮＦリガンドの使用、リガンドの純度、ビーズ上のリガンドの密度、ビーズ上のリガンドの結合配向、ビーズの大きさ、システム１０の中のビーズの数、密度、及び濃度、捕捉効率と臨床手技時間とをバランスさせるシステム１０を通過する流速、ビーズを通過する層流が得られるハウジング１６の物理的大きさ及び構造、リガンドをビーズに連結するために用いる（例えば化学的及び／又は静電的）プロセス、滅菌手法及び放射線量、並びに／又はその他の因子に起因し得る。換言すれば（再びいずれの理論にも縛られることを望まないが）、例えばカラム（システム１０）の効率が高い１つの理由は、リガンドの高い結合効率と併せて、ビーズマトリックス上の捕捉リガンドの量が多いことによるであろう。
【0113】
[123]いくつかの実施形態では、標的成分に対する捕捉支持体２０４の高い結合特異性及び／又は親和性は、捕捉リガンドの唯一の既知の相互作用が血漿中のｓＴＮＦ－Ｒ１及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２に限られているためであろう。この結合特異性は、上述のｓｃ－ＴＮＦリガンドの使用、トリマー形のｓｃ－ＴＮＦリガンド、ビーズ（の例えば化学組成）及び／又は特定のビーズマトリックスを形成するために用いる材料、ビーズをクエンチするための（例えば非特異結合を低減するために用いる）エタノールアミンの使用、標的タンパク質結合と非特異的結合との最適化、フィルター２１２及び２１４に用いる孔径、並びに／又はその他の因子に起因し得る。
【0114】
[124]いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－５ＫＤ又はそれ以上である。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－６ＫＤである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－７ＫＤである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－８ＫＤである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－９ＫＤである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－１０ＫＤである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－１１ＫＤである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－１２ＫＤである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－１３ＫＤである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの標的成分に対する捕捉支持体の結合親和性は、少なくとも約１０－１４ＫＤである。
【0115】
[125]いくつかの実施形態では、システム１０は、１日最大耐量（ＭＴＤ）限界の１０００分の１未満のＴＮＦ溶出速度を有するように構成してもよい（例えばＧｏｏｓｓｅｎｓ，Ｖ．ら（１９９５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２，８１１５～８１１９頁を参照）。いくつかの実施形態では、システム１０は、ＭＴＤ用量限界の１００００分の１未満の溶出速度を有するように構成してもよい。いくつかの実施形態では、システム１０は、１日限界ＭＴＤの５００分の１未満の溶出速度を有するように構成してもよい。いくつかの実施形態では、システム１０は、１日限界ＭＴＤの１００分の１未満の溶出速度を有するように構成してもよい。これにより、患者の循環系への捕捉支持体２０４（例えば本明細書に記載したリガンド）の一部の逃散（即ち、溶出）に起因する臨床的影響及び／又は副反応によって偏ることのない、１つ又は複数の標的成分の成功した効率的で特異的な捕捉を含むシステム１０の臨床的有効性が保証され得る。
【0116】
[126]溶出速度は、生産後にシステム１０の隔離チャンバー２０２の中に含まれる捕捉支持体２０４の全体積に対する、システム１０から逃散した捕捉支持体２０４の（例えばｎｇ／ｍＬ／分の単位での）パーセントとして定義され得る。例えばいくつかの実施形態では、システム１０は約１５０ｎｇ／ｍＬ／分未満の溶出速度を有し得る。いくつかの実施形態では、システム１０は約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満の溶出速度を有し得る。いくつかの実施形態では、システム１０は約８０ｎｇ／ｍＬ／分未満の溶出速度を有し得る。いくつかの実施形態では、システム１０は約５０ｎｇ／ｍＬ／分未満の溶出速度を有し得る。いくつかの実施形態では、システム１０は約４０ｎｇ／ｍＬ／分未満の溶出速度を有し得る。いくつかの実施形態では、システム１０は約３０ｎｇ／ｍＬ／分未満の溶出速度を有し得る。いくつかの実施形態では、システム１０は約２０ｎｇ／ｍＬ／分未満の溶出速度を有し得る。いくつかの実施形態では、システム１０は約１０ｎｇ／ｍＬ／分未満の溶出速度を有し得る。
【0117】
[127]溶出速度は、ｓｃ－ＴＮＦリガンドとビーズとの間の（例えば化学的及び／又は静電的）結合の強さ及び一体性、特定のリガンドとの還元的アミノ化化学の使用、トリマー形のｓｃ－ＴＮＦリガンドの使用、ビーズにリガンドを連結するために用いる（例えば化学的及び／又は静電的）プロセス、患者の処置のためにシステム１０を準備するための臨床的前処理アプローチ（例えば使用前の洗い流しの体積及び流速）、捕捉効率と臨床的手技時間とをバランスさせるシステム１０を通過する臨床実用的な流速、製造中のハウジング１６の清浄化、生産において利用する滅菌手法及び放射線量、並びに／又はその他の因子に起因し得る。いくつかの実施形態では、システム１０の臨床的前処理準備（例えば使用前の洗い流しの体積及び流速）は、約１００ｍＬ／分の流速の１リッターの正常食塩水による洗い流しを含む。
【0118】
[128]非限定的な例として、図４及び図５は、体液（本実施例では（ｓＴＮＦ－Ｒ１ ４０２及びｓＴＮＦ－Ｒ２ ４０３を含む）血漿４０４）中の標的成分４０２（ｓＴＮＦ－Ｒ１）及び／又は第２の標的成分４０３ ｓＴＮＦ－Ｒ２（これらは単に例であり、より多くの標的成分が可能である）に結合して隔離チャンバー２０２の中で標的成分４０２及び４０３を捕捉する、ハウジング１６の隔離チャンバー２０２の中の捕捉支持体２０４（例えば本実施例ではビーズ４００）を図示している。図５は、図４に示すビーズ４００（例えば捕捉支持体の一部）の拡大図である。図５は、入り口２００から出口２１０（図１～３）へシステム１０（図１～３）を通過する体液（例えば血漿４０４）の方向５００を示す。いくつかの実施形態では、システム１０は対称であってもよく、装置のいずれかの端部が上向き流の入り口又は下向き流の出口として働くように用いることを臨床使用者が選択できるように双方向であってもよい。
【0119】
[129]図４及び図５に示すように、捕捉支持体２０４と体液（血漿４０４）との間に接触がある場合に、捕捉が生じる。具体的には、捕捉は、血漿４０４中のｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２分子４０２、４０３と、ビーズ４００に結合した（連結された）リガンド（例えば上述のｓｃ－ＴＮＦリガンド）４１０との間の近接した及び／又は直接の接触に応答して生じる。リガンド４１０とビーズ４００との間の結合４１２も示している。捕捉支持体２０４（例えばビーズ４００とリガンド４１０の組合せ）は、１つ又は複数の標的成分４０２、４０３（ｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２分子）に結合して体液（例えば血漿４０４）中の１つ又は複数の標的成分４０２、４０３の量を低減するように構成してもよい。
【0120】
[130]いくつかの実施形態では、処理されたｓＴＮＦ－Ｒ欠乏血漿が出口２１０（図２及び図３）を通過すれば、処理されたｓＴＮＦ－Ｒ欠乏試料の一部又は全部は（例えば図１に示すアフェレーシス装置を介して）患者に再注入され得る。ｓＴＮＦ－Ｒが除去されれば、患者血液中の複合体化していないｓＴＮＦ－Ｒの貯蔵が低減し、（１つ又は複数の）腫瘍部位における抗がん効果を促進するＴＮＦの利用可能性の増大に向けた濃度平衡のシフトがもたらされる。
【0121】
[131]本明細書に記載したように、システム１０（図１～３）は、免疫抑制の状態に伴う免疫抑制因子を選択的に除去するように構成してもよい。いくつかの実施形態では、免疫抑制因子は可溶性ＴＮＦ受容体１及び可溶性ＴＮＦ受容体２（ｓＴＮＦ－Ｒ）である。患者の血液、血漿、及び／又はその他の体液からｓＴＮＦ－Ｒを除去することは、内因性ＴＮＦの利用可能性の増大をもたらし、これは（１つ又は複数の）腫瘍部位における抗がん効果を促進する。
【0122】
[132]図２及び図３に戻って、アクセスポート２０６、２０８は、隔離チャンバー２０２へのアクセスを提供するように構成してもよい。このアクセスは、入り口２００、出口２１０、及び／又はその他のアクセスポイントを介するアクセスから分離され得る。アクセスポート２０６及び２０８は、隔離チャンバー２０２への、又はそれからの、捕捉支持体２０４の挿入及び／又は取出しを容易にするように構成してもよい。これは、例えばシステム１０の製造時、及び／又はその他の時に実施してもよい。
【0123】
[133]いくつかの実施形態では、捕捉支持体２０４は、システム１０における使用の前に、保存のために保存緩衝溶液中に懸濁してもよい。いくつかの実施形態では、保存緩衝溶液は静菌性食塩水、静菌性リン酸塩、及び／又はその他の溶液を含む。いくつかの実施形態では、保存緩衝溶液は、０．９％のベンジルアルコールを含んでもよい静菌性リン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）であってもよい。捕捉支持体２０４は、引き続いてハウジング１６に無菌的に充填するための準備ができるまで、溶液中で２～８℃に冷蔵してもよい。いくつかの実施形態では、システム１０は、製造、出荷、及び／又は臨床使用の時の間で２～８℃に保存してもよい。
【0124】
[134]いくつかの実施形態では、保存緩衝溶液は、システム１０の臨床使用の直前に（例えば入り口２００及び出口２１０を介して）システム１０から洗い流される。いくつかの実施形態では、アクセスポート２０６、２０８は、キャップ及び／又はその他の部品を有するルアーフィッティングを備える。いくつかの実施形態では、アクセスポート２０６及び／又は２０８は、対応するキャップ及び／又はその他の部品を有する。対応するキャップは、ポリカーボネート及び／又はその他の材料から形成してもよい。
【0125】
[135]図６は、システム１０と連結するように構成された例示的な再生機構６００を図示する。いくつかの実施形態では、再生機構はシステム１０の付加的な部分及び／又は延長と考えてもよい。図６に示すように、機構６００は洗浄溶液６０２の供給源、再生溶液６０４の供給源、ポンプ６０６、廃棄ライン６０８、及び／又はその他の部品を備え得る。いくつかの実施形態では、洗浄溶液６０２及び再生溶液６０４は、ポンプ６０６によってシステム１０を通って廃棄ライン６０８に、交互にポンプ輸送してもよい。
【0126】
[136]いくつかの実施形態では、システム１０は、（例えばシステム１０によって形成された体外閉回路カラムを損なうことなしに）捕捉された標的成分の全部又は一部のサンプリング又は除去を容易にするように構成された標的成分出口ポートを備え得る。
【0127】
[137]いくつかの実施形態では、システム１０は、捕捉と解離のステップを入れ替えることによって再使用を容易にするように構成してもよい。さらなる捕捉の前に標的を解離することにより、カラムはほぼ元の仕様及び機能に再生され得る。この解離を達成するために、ビーズに結合したタンパク質とそのリガンドとの間の捕捉された複合体が破壊され、複合体の解離がもたらされる。そのような解離ステージは用途に依存し得るので、特定の解離条件は、循環するタンパク質の特定のサブタイプ又は捕捉された複合体化部分に依存し得る。高い塩濃度を惹起する親水性化剤又は低ｐＨのような薬剤は、効果的な解離剤となり得る。捕捉複合体を解離させるために、塩化ナトリウム（３００ｍＭ～１．５Ｍ）又はグアニジン塩酸塩（３～８Ｍ）等の親水性化剤の高い塩濃度が用いられる。いくつかの実施形態では、塩溶液は、ほぼ７．２のｐＨを有し、５００ｍＭのＮａＯＨ、２ｍＭのＥＤＴＡ、及び５０ｍＭのＴｒｉｓ緩衝液、又は５００ｍＭのＮａＯＨ、２ｍＭのＥＤＴＡ、及び５０ｍＭのリン酸ナトリウムを含み得る。或いは、捕捉された免疫複合体は低ｐＨ溶液で解離され得る。解離ステージに効果的なｐＨは、例えばほぼ２．８であってもよい。例示的なｐＨ範囲は１．５～２．５であってもよい。これは、ｐＨを調整したクエン酸塩又はグリシン溶液によって達成し得る。いくつかの実施形態では、ｐＨ範囲は２．０～２．５であってもよい。いくつかの実施形態では、ｐＨ範囲は約２．５～３．５であってもよい。しかし、ｐＨが低いと必要な解離時間が短くなることを理解されたい。例えば酢酸、クエン酸、及び塩酸等の酸を、ｐＨを低下させるために用いてもよい。塩濃度の上昇又はｐＨの低下に加えて、免疫複合体を解離するその他の方法も可能である。塩濃度の上昇又はｐＨの低下に加えて、解離条件は短時間で生じるように、またウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及び／又はその他の、リガンド若しくは受容体と競合する成分を含むように、構成してもよい。
【0128】
[138]いくつかの実施形態では、システム１０は、（例えばシステム１０によって形成された体外閉回路カラムを損なうことなしに）隔離チャンバーへの溶出剤の導入を容易にするように構成された溶出剤ポートを備え得る。溶出剤ポートは、再使用のためにシステム１０を準備するように構成された調整剤を受容するようにさらに構成してもよい。いくつかの実施形態では、（１つ又は複数の）溶出剤ポートはアクセスポート２０６及び／又は２０８の一方又は両方と同一であってもよい。
【0129】
[139]いくつかの実施形態では、ポンプ６０６は、入り口２００（図２）、隔離チャンバー２０２（図２）、及び出口２１０（図２）を通過して溶出／再生剤を駆動するように構成してもよい。ポンプ６０６には、シリンジポンプ、ペリスタポンプ、ピストンポンプ、ダイヤフラムポンプ、これらの組合せ、及び／又はその他のポンプが含まれ得る。
【0130】
[140]いくつかの実施形態では、システム１０は、図７に示すように、１つ又は複数の追加の隔離チャンバー２０２を備え得る。図７は、追加の隔離チャンバー２０２を有するシステム１０の２つの例示的実施形態７００及び７５０を図示する。例示的実施形態７００では、隔離チャンバー２０２Ａ及び２０２Ｂがハウジング１６内に直列に位置している。例示的実施形態７５０では、チャンバー２０２Ｃ、２０２Ｄ、及び２０２Ｅがハウジング１６内に並列に位置している。異なるチャンバー（例えば２０２Ａ及びＢ、並びに２０２Ｃ～Ｅ）は、フィルター２１２、２１４（及び／又はその他のフィルター）、分離膜７１０、及び／又はその他の部品によって、分離され得る。いくつかの実施形態では、分離膜７１０は、例えばフィルター２１２及び／又は２１４、及びその逆であってもよい。
【0131】
[141]これらの追加の隔離チャンバー２０２Ａ～Ｅは、上述の捕捉支持体２０４（図２）と類似及び／又は同一の捕捉支持体、又は異なる捕捉支持体を備え得る。追加の隔離チャンバー２０２（Ａ～Ｅ）及び捕捉支持体は、隔離チャンバー２０２及び捕捉支持体２０４と類似及び／又は同一に機能するように構成してもよい。いくつかの実施形態では、複数の異なる標的成分と結合するように構成された多段階分離回路を形成させるために、１つ又は複数の追加の隔離チャンバー（２０２Ａ～Ｅ）を組み合わせてもよい（例えば２０２Ａ及びＢ、並びに２０２Ｃ、Ｄ、及びＥ）。いくつかの実施形態では、多段階隔離チャンバーは直列構成（例えば実施形態７００）で構成してもよく、この場合にはシステム１０を通過して流れる体液（例えば血漿）の全体積が複数の隔離チャンバーのそれぞれを逐次的に（例えば２０２Ａ、次いで２０２Ｂ）通過する。いくつかの実施形態では、多段階隔離チャンバーは並列構成（例えば実施形態７５０）で構成してもよく、この場合にはシステム１０を流れる体液（例えば血漿）の体積は均等又は非均等の分画に分配され、それによりこれらの流体の分画された部分体積が複数の隔離チャンバーのそれぞれ（例えば２０２Ｃ、２０２Ｄ、及び２０２Ｅ）を通って並列に通過する。
【0132】
[142]図８は、複数のシステム（例えば複数のシステム１０）が処置手技の間、同時に単一のプラズマフェレーシス流れ回路８０２又は８５２の中に構成される追加の実施形態８００及び８５０を図示する。一実施形態（例えば８００）では、複数のシステム（１０）が直列に繋がれ、例えば血漿は１つのシステム（１０）を通って次に流れる。別の実施形態（例えば８５０）では、２つ以上のシステム（１０）が並列に構成され、プラズマフェレーシス流れ回路を流れる体液（例えば血漿）の体積は均等又は非均等の分画に分配され、それによりこれらの流体の分画された部分体積が複数のシステムのそれぞれを通って並列に通過し得る（例えば２つのシステム１０が実施形態８５０に示されているが、これは限定することを意図していない）。そのような並列システム構成を含む一実施形態では、プラズマフェレーシス流れ回路中の流体の全体積は、最初に並列のシステム隔離チャンバー（例えば上述の２０２）の１つ又は複数を通過するように指向され、次いで同じ処置手技の間の引き続く時間で、回路中の流体は異なるシステムを通過するように再指向されるか、又は流れ回路内に連結された並列のシステムの異なる組合せを通過するように再分割され得る。上述の構成のいずれにおいても、それぞれの個別のシステムは、体液中の同じ又は異なる標的薬剤を標的とする同じ又は異なる捕捉マトリックスを含み得る。
【0133】
[143]図９は、流体をシステム１０に導入するための入り口２００、それぞれがシステム１０の入り口２００から出口２１０（これらは例えばオスルアーポートによって形成してもよい）への独立した流路（９０３～９０９）を有し、それぞれが個別に隔離チャンバーを「オン」又は「オフ」できるそれ自体の流量制御バルブ９１０、９１２、９１４、９１６（例えばストップコック及び／又はその他の部品）を有する多数の隔離チャンバー９０２を備えるシステム１０の実施形態９００を図示する。この実施形態では、流体は任意の１つのチャンバー又は同時に多数のチャンバーの任意の組合せを通るように指向することができる。図９の下部に例示的な流路９５０を示す。一度に用いられる１つ又は複数のチャンバーを出る流体は、アフェレーシス装置に戻すためにシステム流体の出口２１０で再び合わせられる。この実施形態では、それぞれの隔離チャンバー９０２～９０８は、体液中の１つ又は複数の異なる標的部分を標的とするように構成された（例えば上述の捕捉支持体２０４に含まれる）１つ又は複数の異なる捕捉分子を含み得る。図１０に示すように、複数の隔離チャンバー９０２～９０８及びこれらの対応する流量制御バルブ９１０～９１６は、単一の統一された外部ハウジング（例えば上述の１６）の中に含まれていてもよい。
【0134】
[144]図１０は、システム１０（図１～３）によって血液、血漿、及び／又はその他の体液中の標的成分を除去する方法１０００を図示している。以下に提示する方法１０００の操作は説明的であることを意図している。いくつかの実施形態では、方法１０００は、記述していない１つ又は複数のさらなる操作によって、及び／又は考察した操作の１つ又は複数なしに、達成してもよい。さらに、方法１０００の操作が図１０に図示され以下に記載される順序は、限定することを意図していない。
【0135】
【0136】
[146]操作１００４では、血液、血漿、及び／又はその他の体液中の標的成分が、隔離チャンバー２０２（図２～３）において標的成分を捕捉して血液、血漿、及び／又はその他の体液中の標的成分の量を低減するように結合され得る。
【0137】
【0138】
[148]操作１００８では、体液中の低減された量の標的成分が患者に戻して再導入され、この量は定量的に測定しても測定しなくてもよい（例えば、操作１００８は任意選択であってもよい）。定量的測定が用いられるいくつかの実施形態では、測定には液体クロマトグラフィー－質量スペクトル（ＬＣ－ＭＳ）、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＨＰＬＣ）、抵抗測定、発光測定、化学発光、電界発光、電界化学発光、クロマトグラフィーモニタリング、陽電子発光トモグラフィー（ＰＥＴ）、Ｘ線コンピュータトモグラフィー（ＣＴ）、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、超音波、ガンマカメラ、単一光子発光コンピュータトモグラフィー（ＳＰＥＣＴ）、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、表面プラスモン共鳴（ＳＰＲ）測定、及び／又はその他の操作の実施のうちの１つ又は複数が含まれ得る。
【0139】
[149]操作１０１０では、患者に戻して再導入される体液中の捕捉支持体の溶出速度を測定し又は測定しなくてもよい（例えば、操作１０１０は任意選択であってもよい）。捕捉剤（例えばＴＮＦ）の濃度は、入り口２００及び出口２１０から、及び／又はそれらに取り付けられた流体コネクターから採取した流体試料から決定してもよい。測定された２つの濃度値の差を用いて、隔離チャンバーから逃散する捕捉剤の速度及び量を決定してもよい。いくつかの実施形態では、ある期間（例えば単一の処置手技の継続時間）にわたってシステムから患者の循環系に溶出する捕捉剤の全量を決定するために、ｍＬ／分で表す流速を利用してもよい。
【0140】
[150]最も実用的かつ好ましい実施であると現在のところ考えられるものに基づいて説明の目的のために本開示の（１つ又は複数の）システム又は（１つ又は複数の）方法を詳細に記述したが、そのような詳細は単にその目的のためであり、本開示は開示した実施に限定されず、逆に添付した特許請求の範囲の精神及び範囲の中にある改変及び等価の配置を包含することを意図していることを理解されたい。例えば、本開示は、任意の実施の１つ又は複数の特徴を、可能な程度に他の任意の実施の１つ又は複数の特徴と組み合わせることができることを理解されたい。
【0141】
[151]以下に添付した実施例は、本明細書に記載したシステム及び方法の種々の実施形態の成功した使用の種々の実証を提供する。
【0142】
実施例１－本システムの材料及びアセンブリー
[152]材料－本システムのこの実施形態において利用した固定化固体支持体マトリックス（捕捉支持体２０４）は、アガロース系ビーズ（即ち、強く架橋された支持レジン）であった。
[152]材料－本システムのこの実施形態において利用した固定化固体支持体マトリックス（捕捉支持体２０４）は、アガロース系ビーズ（即ち、強く架橋された支持レジン）であった。
【0143】
[153]化学－メタ過ヨウ素酸ナトリウムを用いて固体支持体マトリックス（捕捉支持体２０４）を活性化し、次いでこれを還元的アミノ化によって一本鎖ＴＮＦリガンドに連結した。固体支持体マトリックス１ｍＬあたり１ｍｇの量のＴＮＦを連結した。
【0144】
[154]アセンブリー－結合マトリックス（捕捉支持体２０４）は、アガロースビーズに共有結合で連結された一本鎖ＴＮＦ（ＳＣ－ＴＮＦ）タンパク質を含む。デバイスハウジングは、充填のための２つのサイドポートを有し、ベントなしのルアーキャップでキャップされたポリカーボネート管からなっている。エンドキャップはオスルアーポートを有し、管に固く結合されて、エンドキャップのルアーポートによってそれぞれの端部で終端する流体的にシールされた筐体を創成している。それぞれのエンドキャップ及び管の間の接合部におけるハウジングの内部には、ＴＮＦリガンドが連結されたビーズを保持するための平均孔径１５～５０μｍのフィルターフリットがあり、フィルターフリットの最小直径は（例えば上述の）フィルターの孔径より大きい。
【0145】
実施例２－本システム及び方法を利用するためのパラメーター
[155]１．必ずしも日常的な臨床応用ではない捕捉効率及び／又は溶出を決定するためにカラム前並びにカラム後の血漿濃度の測定を行う構成では、定期的な血漿サンプリングを可能にするために、３方向のストップコックバルブをカラムのエンドキャップの入り口及び出口に取り付ける。２．ストップコックが取り付けられたシステムを、アフェレーシス装置の血漿回路に接続する。３．以下のステップ４、６、及び１０を完了するために、アフェレーシス装置の使用説明書に従って、手技から独立した及び／又は手技に特異的な操作パラメーターを用いてアフェレーシスユニットを構成する。４．患者をアフェレーシス装置に接続する前に、１Ｌの正常食塩水でシステムを洗い流す。５．患者をアフェレーシス装置に接続する。６．患者を本システムで処置する。７．適用可能であれば、研究プロトコル及び／又は臨床処置手技計画に従って血液並びに血漿の試料を採取する。８．典型的なアフェレーシス処置実施指針に従って患者のバイタルサインを連続的にモニターする。９．処置の前、処置の間、及び処置の後に、有害事象について患者を連続的にモニターする。１０．処置後に正常食塩水でデバイスを洗い流し／洗浄し、保持していたエンドキャップでカラムを再キャップし、使用したデバイスの適正な保存及び／又は廃棄を確実にする。
[155]１．必ずしも日常的な臨床応用ではない捕捉効率及び／又は溶出を決定するためにカラム前並びにカラム後の血漿濃度の測定を行う構成では、定期的な血漿サンプリングを可能にするために、３方向のストップコックバルブをカラムのエンドキャップの入り口及び出口に取り付ける。２．ストップコックが取り付けられたシステムを、アフェレーシス装置の血漿回路に接続する。３．以下のステップ４、６、及び１０を完了するために、アフェレーシス装置の使用説明書に従って、手技から独立した及び／又は手技に特異的な操作パラメーターを用いてアフェレーシスユニットを構成する。４．患者をアフェレーシス装置に接続する前に、１Ｌの正常食塩水でシステムを洗い流す。５．患者をアフェレーシス装置に接続する。６．患者を本システムで処置する。７．適用可能であれば、研究プロトコル及び／又は臨床処置手技計画に従って血液並びに血漿の試料を採取する。８．典型的なアフェレーシス処置実施指針に従って患者のバイタルサインを連続的にモニターする。９．処置の前、処置の間、及び処置の後に、有害事象について患者を連続的にモニターする。１０．処置後に正常食塩水でデバイスを洗い流し／洗浄し、保持していたエンドキャップでカラムを再キャップし、使用したデバイスの適正な保存及び／又は廃棄を確実にする。
【0146】
[156]本発明のカラムは、システム１０等の血漿処理カラムに適合するように設計された、例えばＴｅｒｕｍｏ ＢＣＴ又はＳｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａ Ｓｙｓｔｅｍ等のアフェレーシス装置と併用することを意図している。そのようなシステムは、オペレーターによって構成された患者データ及びデバイスパラメーターに基づいて計算を自動化する。アフェレーシス装置がそのような計算を自動化しない場合には、以下の表で同定する式を用いてもよい。
【0147】
[157]
【表1】
【0148】
[158]
【表2】
【0149】
[159]
【表3】
【0150】
[160]意図した臨床性能－（例えばシステム１０）のイムノフェレーシスカラムは、遠心又は膜による分離手法を用い、患者血漿からｓＴＮＦ－Ｒを効率的に除去するための（例えばシステム１０等による）二次血漿処理を可能にする市販のアフェレーシス装置と成功裡に一体化するように設計されたデバイスである。本明細書で開示したシステムは、以下に記載する臨床性能の要求に合致する。特定した処理時間及び流速は、遠心分離手法を用いる現代のアフェレーシスシステムの能力の範囲内にあることが確認されている。
【0151】
[161]システム性能の規格－１．生物学的安全性：循環血液への長期の曝露を支持する体外デバイスとしての使用のために生物学的に安全であることを実証した。２．結合標的：ｓＴＮＦ－Ｒ（ｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２を含む）。３．結合効率：臨床的に妥当な流速での３０分の処置後に８０％を超える。４．結合容量：ｓＴＮＦ－Ｒ ２３０μｇを超える。５．流速（血漿）：６０ｍＬ／分以下。６．処理時間：ほぼ２時間。７．目標血漿交換体積：血漿体積の２倍。８．溶出速度（ＴＮＦα）：５０ｎｇ／分未満。９．有効期限：２～８℃で６か月を超える。１０．耐圧性：７７６ｍｍＨｇ。
【0152】
実施例３－ｉｎ ｖｉｔｒｏパラメーターに基づくシステム１０の有効性
[162]前臨床試験－ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験によって、システム１０は「意図した臨床性能」（前の節）で定義した性能及び安全性の規格に合致することが実証された。ＴＮＦを連結した結合マトリックスは、標準のｉｎ ｖｉｔｒｏ試験において、添加した緩衝溶液とヒト血漿の両方で９８％を超えるｓＴＮＦ－Ｒを効果的に捕捉した一方、計算されたｓｃ－ＴＮＦαの溶出速度を５０ｎｇ／分未満（２時間で最大６μｇと等価）に維持した。ＴＮＦαの１日あたり最大耐量（ＭＴＤ）がほぼ２００μｇであるので、これは許容できる安全限界を十分に下回る（例えばＧｏｏｓｓｅｎｓ，Ｖ．ら（１９９５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２，８１１５～８１１９頁を参照）。これらの性能及び安全性の尺度は、ビーズを電子線照射（１５～３０ｋＧｙ）によって滅菌した後も再現された。さらに、本実施例では、システム１０は３００ｍＬ／分未満、１０～４４ｍＬ／分、及び／又は４５～１００ｍＬ／分の持続した流量のために設計されている。ハウジング（例えば図２及び図３に示す１６）は７７６ｍｍＨｇを超える内圧に耐えることができ、これは一般に用いられるアフェレーシス装置についての典型的な背圧シャットオフ閾値を十分に上回る。
[162]前臨床試験－ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験によって、システム１０は「意図した臨床性能」（前の節）で定義した性能及び安全性の規格に合致することが実証された。ＴＮＦを連結した結合マトリックスは、標準のｉｎ ｖｉｔｒｏ試験において、添加した緩衝溶液とヒト血漿の両方で９８％を超えるｓＴＮＦ－Ｒを効果的に捕捉した一方、計算されたｓｃ－ＴＮＦαの溶出速度を５０ｎｇ／分未満（２時間で最大６μｇと等価）に維持した。ＴＮＦαの１日あたり最大耐量（ＭＴＤ）がほぼ２００μｇであるので、これは許容できる安全限界を十分に下回る（例えばＧｏｏｓｓｅｎｓ，Ｖ．ら（１９９５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２，８１１５～８１１９頁を参照）。これらの性能及び安全性の尺度は、ビーズを電子線照射（１５～３０ｋＧｙ）によって滅菌した後も再現された。さらに、本実施例では、システム１０は３００ｍＬ／分未満、１０～４４ｍＬ／分、及び／又は４５～１００ｍＬ／分の持続した流量のために設計されている。ハウジング（例えば図２及び図３に示す１６）は７７６ｍｍＨｇを超える内圧に耐えることができ、これは一般に用いられるアフェレーシス装置についての典型的な背圧シャットオフ閾値を十分に上回る。
【0153】
[163]結合マトリックス（例えば捕捉支持体２０４）の特徴解析－ＴＮＦリガンドの同定、純度、及び一体性－ｓＴＮＦ－Ｒを捕捉するための結合剤として、組換え一本鎖ＴＮＦαリガンド（ｓｃ－ＴＮＦαリガンド、３つのＴＮＦαモノマーを含む）を用いた。ＴＮＦαは、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって純度を、質量スペクトルによって一体性及び同定を、フローテスト結合アッセイによって機能性の強さを、評価することによって特徴解析した。ＨＰＬＣは、リン酸塩緩衝液を移動相とするカラムを用い、流速１ｍＬ／分で実施した。一体性は質量スペクトルによって測定し、それにより、計算された分子量約５４ｋＤを確認した。
【0154】
[164]ｓＴＮＦ－Ｒを添加した緩衝液中の結合マトリックスの結合効率－標準のフローテストのため、本発明の照射したカラムから２ｍＬの量のビーズ床を得て小さなカラムに移し、ｓＴＮＦ－Ｒ１又はｓＴＮＦ－Ｒ２を添加したリン酸塩緩衝液からの捕捉効率について試験した。ＴＮＦ－Ｒ１を添加した緩衝液（２０ｎｇ／ｍＬ）をカラムにそれぞれ１０ｍｌ／分、５ｍＬ／分、２．５ｍＬ／分、５ｍＬ／分、及び１０ｍＬ／分で通過させた。０．５分間隔で試料を採取し、ｓＴＮＦ－Ｒについてアッセイした。結果は、全ての試料について９８％を超える捕捉効率であった。ＴＮＦαについてのアッセイは、その放出が７ｎｇ／分未満であることを示した。
【0155】
[165]ｓＴＮＦ－Ｒを添加したヒト血漿における結合マトリックスの捕捉容量－システム１０の容量を試験するため、デバイスを通して４５ｍＬ／分の流速で１．８リッターの添加したヒト血漿を流すことによって、本発明のカラムを試験した。それぞれの運転で用いたヒト血漿には、高濃度の各受容体（ｓＴＮＦ－Ｒ１ ９．７４ｎｇ／ｍＬ及びｓＴＮＦ－Ｒ２ １２７．５ｎｇ／ｍＬ）を添加した。カラム後の血漿の試料を１０分ごとに採取し、市販の高精度ｓＴＮＦ－Ｒ１／ｓＴＮＦ－Ｒ２診断キットを用いてｓＴＮＦ－Ｒ濃度を分析した。カラムに保持されたｓＴＮＦ－Ｒの量を計算して、捕捉効率及び全容量を確認した。
【0156】
[166]ｓＴＮＦ－Ｒのカラム前及びカラム後の濃度を比較することによって、各時点における結合効率を計算した。結合マトリックスは、８５％を超えるｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２を捕捉した。結合効率は、ｓＴＮＦ－Ｒ１については最後まで９５％を超え、ｓＴＮＦ－Ｒ２についてはより低い効率が観察されたが、その捕捉は８５％を超えたままであった。ｓＴＮＦ－Ｒ２についての結合効率のわずかな直線的低下は、おそらく用いたＴＮＦαリガンドに対するこの可溶性受容体の結合親和性が低いことに起因する。
【0157】
[167]カラムに捕捉されたｓＴＮＦ－Ｒの全量は、ｓＴＮＦ－Ｒの処理前と処理後の濃度を比較することによって決定した。カラムは１５ｍＬ／分の運転で２３０μｇ、４５ｍＬ／分の運転で１４９．４μｇのｓＴＮＦ－Ｒを捕捉した。これらの値はいずれも、がん患者に典型的に存在するほぼ３０μｇのｓＴＮＦ－Ｒの量を上回っている。１５ｍｌ／分の運転で、カラム効率が低下し始める時点である８０分におけるＴＮＦ－Ｒの全捕捉量は９９．９μｇであった。これはまだがん患者に存在する典型的な量を十分に上回っている。
【0158】
[168]本発明のデバイスからのＴＮＦαの溶出－薬理学的に顕著な量を患者に注入する可能性を避けるため、システム１０はその使用の間にシステム１０からのＴＮＦαの意図しない放出（即ち、「溶出」）を防止するように構成されている。フローテストの実施の間に、ビーズからのＴＮＦの放出を決定した。リン酸塩緩衝食塩水にほぼ２０ｎｇ／ｍＬのｓＴＮＦ－Ｒ１を添加し、システム１０（図１～３）のカラムから得られた２ｍＬのビーズ床を通過させた。流速は、１０ｍＬ／分、５ｍＬ／分、２．５ｍｌ／分、５ｍＬ／分、及び１０ｍＬ／分で、それぞれの流速について３０秒間、逐次的に実施した。市販の高精度ＴＮＦ診断キットを用いて試料を分析した。ｎｇ／分単位でのＴＮＦの溶出速度は、試料中のＴＮＦの濃度（ｎｇ／ｍＬ）に流速（ｍＬ／分）を掛けることによって計算した。１０ｍＬ／分で採取した最終分画中の放出量は、ビーズ２ｍＬあたり０．６５ｎｇ／分、即ち０．３２５ｎｇ／分／ｍＬ（０．６５ｎｇ／分／２ｍＬ）であった。本実施例では、５０ｎｇ／分の規格内にあるビーズ床体積の上限は（５０ｎｇ／分）／（０．３２５ｎｇ／分／ｍＬ）、即ちビーズ１５４ｍＬである。
【0159】
[169]デバイスハウジングの一体性－上昇した内圧でシステム１０の一体性が維持されることを確認するため、本発明の空のハウジング（例えば１６）について試験を実施した。チューブ及びコネクターを用いて、システム１０のサイドポート（例えば２０６、２０８）をコンプレッサーに取り付けた。キャップをしたハウジングを水浴に浸漬して７７６ｍｍＨｇの圧を加え、気泡の発生について観察した。デバイスの故障（浸漬したデバイスから漏れてくる泡の存在）は観察されなかった。この試験圧力は、Ｏｐｔｉａユニットの最大圧力（５００ｍｍＨｇ）を超えている。
【0160】
実施例４－イヌモデルにおける有効性の実証
[170]天然に発生する固形悪性腫瘍又は黒色腫（ステージ４）を有するイヌからのシステム１０を用いるｓＴＮＦ－Ｒの体外除去の効果を、概念実証比較腫瘍学研究において評価した。研究には、ｓｃ－ＴＮＦαペプチド－ビーズマトリックスを有するシステム１０を用いた。システム１０は、システム１０を通過する二次血漿処理のために、Ｔｅｒｕｍｏ ＢＣＴ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａ Ａｐｈｅｒｅｓｉｓ Ｓｙｓｔｅｍと併用した。血管アクセスのために大部分のイヌでは二重管腔カテーテルを採用し、クエン酸塩デキストロース抗凝固（ＡＣＤＡ）液によって体外抗凝固を達成し、Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａのユーザー操作マニュアルが推奨するように、カルシウムグルコネートの注入によって逆行させた。全部で２０頭のイヌを処置した。患イヌは本研究の４～８週の処置フェーズの経過にわたって１２～２４回のアフェレーシス処置を受けた。本研究の間に３００回を超えるイムノフェレーシス処置を実施した。
[170]天然に発生する固形悪性腫瘍又は黒色腫（ステージ４）を有するイヌからのシステム１０を用いるｓＴＮＦ－Ｒの体外除去の効果を、概念実証比較腫瘍学研究において評価した。研究には、ｓｃ－ＴＮＦαペプチド－ビーズマトリックスを有するシステム１０を用いた。システム１０は、システム１０を通過する二次血漿処理のために、Ｔｅｒｕｍｏ ＢＣＴ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａ Ａｐｈｅｒｅｓｉｓ Ｓｙｓｔｅｍと併用した。血管アクセスのために大部分のイヌでは二重管腔カテーテルを採用し、クエン酸塩デキストロース抗凝固（ＡＣＤＡ）液によって体外抗凝固を達成し、Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａのユーザー操作マニュアルが推奨するように、カルシウムグルコネートの注入によって逆行させた。全部で２０頭のイヌを処置した。患イヌは本研究の４～８週の処置フェーズの経過にわたって１２～２４回のアフェレーシス処置を受けた。本研究の間に３００回を超えるイムノフェレーシス処置を実施した。
【0161】
[171]デバイスの性能－デバイスのｉｎ ｖｉｖｏでの安全性及び性能を確認するため、処置の間３０分ごとにカラム前及びカラム後の（それぞれデバイスの入り口及び出口のポートから採取した）血漿中のＴＮＦ及びｓＴＮＦ－Ｒを測定し、またそれぞれの処置の前、処置の間３０分ごと、及び処置の後３０分ごと（処置直後１．５時間の間）に全身（血液から）のＴＮＦ及びｓＴＮＦ－Ｒを測定した。
【0162】
[172]それぞれの処置の間、（システム１０の）カラム前及びカラム後の血漿の分析により、それぞれの個別の処置の経過にわたって、ｓＴＮＦ－Ｒは効率的かつ一貫して除去され、血液中のＴＮＦレベルの測定可能な増大はなかったことが示された。処置前及び処置後の血漿の分析により全体的に、全身ｓＴＮＦ－Ｒレベルのほぼ５０％の低減が示された。
【0163】
[173]デバイスの安全性及び臨床的有効性－デバイスの臨床的安全性及び有効性を評価するため、本研究を通して安全性、忍容性、及び腫瘍の進行に対する影響の測定を行った。
【0164】
[174]全体で２０頭のイヌにわたる３００回を超えて実施したイムノフェレーシス処置の経過の間、重篤な有害事象の報告はほとんどなく、特定のアフェレーシス手技に帰せられるか、又はシステム１０による処置若しくはｓＴＮＦ－Ｒの除去の結果としての有害事象はなかった。患イヌのＱｏＬデータを検討すると、処置に対する忍容性が最もよく説明される。ＱｏＬの変化は、患イヌ１頭あたり１２～２４回の処置を含む本研究の能動的処置フェーズを通して大部分のスコアについて「中立」と全体的にスコア付けされた。いくつかのスコアは悪化したが、大部分のスコアは処置の全経過を通して安定なパラメーター又は改善を示し、これは本研究におけるステージ４の患イヌ集団については好ましい転帰を表している。
【0165】
[175]本発明のデバイスによる処置は、腫瘍の進行に対して全体として有益な効果を有していた。大部分のイヌ（評価可能な１２／１７例）は処置の間のある時点で「安定な疾患」（ＳＤ）とスコア付けされ（データは示していない）、評価可能な１７頭のイヌのうち７頭は処置フェーズの終わりに好ましい処置関連効果を示し、一例は完全寛解（ＣＲ）を示した。
【0166】
[176]結論－イヌの全体的状態は研究中、腫瘍負荷における観察可能な安定化又は低減及び生活の質の改善を伴って全体的に改善された。さらに、臨床的に顕著な安全性の問題がないことは、従来の化学療法及び照射に伴う典型的かつ顕著な副作用なしに、臨床的に有意義な利益を提供する可能性を提示するので、一般的アフェレーシス手技の確立された相対的安全性と一致し、かつ説得力がある。このイヌコンパニオン動物研究は、ｓｃ－ＴＮＦペプチド－ビーズマトリックスを含む本発明のＡｐｈｅｒｅｓｉｓ Ｉｍｍｕｎｏａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｃｏｌｕｍｎを利用するｓＴＮＦ－Ｒの体外除去が、がんを有するイヌにおいて治療に有効であることを示し、そのようなデバイスの使用がヒト対象において採用できるという説得力のある臨床的証拠を提供した。
【0167】
実施例５－生体親和性
[177]Ｆｏｏｄ ＆ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）のＢｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｍａｔｒｉｘ及びＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ＩＳＯ １０９９３－１（２００９）に従ってシステム１０を生物学的安全性について評価した。システム１０は、接触時間が長い循環血液の体外導通デバイスと分類することができる。これは他の多くの市販の体外免疫吸着カラムに利用される同じ試験カテゴリーである。
[177]Ｆｏｏｄ ＆ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）のＢｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｍａｔｒｉｘ及びＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ＩＳＯ １０９９３－１（２００９）に従ってシステム１０を生物学的安全性について評価した。システム１０は、接触時間が長い循環血液の体外導通デバイスと分類することができる。これは他の多くの市販の体外免疫吸着カラムに利用される同じ試験カテゴリーである。
【0168】
[178]生体親和性試験は、２１ ＣＦＲ Ｐａｒｔ５８（Ｇｏｏｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｆｏｒ Ｎｏｎｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔｕｄｉｅｓ）に従って実施した。全ての試験は、認定済みの独立した検査機関によって、滅菌した最終デバイスについて行われた。実施した試験に基づいて、デバイスはＩＳＯ １０９９３－１（２０１２）コンセンサス標準「Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｄｉｃａｌ ｄｅｖｉｃｅｓ－Ｐａｒｔ １：Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｅｓｔｉｎｇ ｗｉｔｈｉｎ ａ ｒｉｓｋ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｐｒｏｃｅｓｓ」の中に含まれる推奨及び原理、並びに２０１６年６月１６日に発行されたＦＤＡの付属ガイダンス書類に適合する。
【0169】
実施例６－ヒト対象における安全性の実証
[179]システム１０の試験的な安全性及び性能のデータを収集するため、ヒトでは初めての特例使用の臨床研究を行った。デバイスは、コンパニオンイヌ比較腫瘍学研究（上述）において行ったように、システム１０を通過する二次血漿処理とともにＴｅｒｕｍｏ ＢＣＴ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａ Ｓｙｓｔｅｍと組み合わせて用いた。イヌでの研究からの経験に基づいて血管アクセスのために二重管腔カテーテルを採用した。体外抗凝固（ＡＣＤＡ溶液）及び（カルシウムグルコネートの注入による）逆行は、イヌの研究において採用したものと同様であり、Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａのユーザー操作マニュアルの推奨によった。
[179]システム１０の試験的な安全性及び性能のデータを収集するため、ヒトでは初めての特例使用の臨床研究を行った。デバイスは、コンパニオンイヌ比較腫瘍学研究（上述）において行ったように、システム１０を通過する二次血漿処理とともにＴｅｒｕｍｏ ＢＣＴ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａ Ｓｙｓｔｅｍと組み合わせて用いた。イヌでの研究からの経験に基づいて血管アクセスのために二重管腔カテーテルを採用した。体外抗凝固（ＡＣＤＡ溶液）及び（カルシウムグルコネートの注入による）逆行は、イヌの研究において採用したものと同様であり、Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａのユーザー操作マニュアルの推奨によった。
【0170】
[180]アフェレーシス手技性能－システム１０は、Ｔｅｒｕｍｏ ＢＣＴ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａのアフェレーシス装置とともに成功裡に利用された。実施したそれぞれの処置について、システム１０は体外血漿回路に適切に一体化することができた。二次血漿処理回路（例えばシステム１０に連結された回路）におけるデバイスに帰せられる妨害は報告されなかった。システム回路の一体性は一貫して維持され（例えば漏洩／流体損失は報告されなかった）、全ての処置は成功裡に完了することができた。この全体的なデータに基づいて、本発明のデバイスはＴｅｒｕｍｏ ＢＣＴ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｏｐｔｉａとともに用いるために適していると思われる。
【0171】
[181]安全性及び忍容性の結果－全部で１４名の患者を本研究に登録した。全ての患者は現在の処置が奏功しなかったがその他の点では安定した進行がんを有していた（ベースラインＥａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ（ＥＣＯＧ）スコア０～２）。各患者が受けた処置の範囲は一定ではない（例えば１人の患者は１６回までの処置を受けた）。全体で９３回の個別の処置が完了し、予期しなかったフェレーシスに関連する有害事象（ＡＥ）又は有害装置影響（ＡＤＥ）は報告されなかった。本研究から収集したデータに基づいて、本アプローチ及びシステム１０を用いるイムノフェレーシスは、一般に安全であり忍容性も十分であると思われる。
【0172】
[182]図１１は、手技時間の関数としてのヒト患者血液プールからのｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２の低減並びにカラムの捕捉効率を含む代表的なシステム１０（図１～３）の性能の特徴を図示している。図１１は、単一のヒト患者の処置からの典型的なシステム１０の性能結果の説明である。全血及び血漿の試料を、ベースライン（Ｔ＝０分）、３０分、６０分、９０分、及び処置の終了時（即ち血漿体積の２倍がシステムの循環を完了した時）（これは本実施例では手技の開始時刻の１７５分後に起こった）に採取した。それぞれの時点で、全血は患者の中央ラインカテーテルから採取し、血漿試料はシステム１０の入り口（例えば図２～３に示す２００）及び出口（例えば図２～３に示す２１０）から採取した。さらに、処置後３０分及び６０分で全血試料を採取した。試料中のｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２の濃度は、市販の高精度診断アッセイを用いて分析した。図１１は各時点における対応する入り口２００と出口２１０でのｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２の濃度を示し、これはシステム１０が処置の経過を通じて効率的にｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２を捕捉していたことを実証している。さらに、患者の全体の循環系（即ち、中央ライン全血測定）において観察されたｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２の濃度の着実な経時的低減、並びにこれに続く処置後３０分及び６０分におけるリバウンドレベルは、処置時間の間にｓＴＮＦ－Ｒ１及びｓＴＮＦ－Ｒ２の内因性レベルを低減するという臨床的目標が効果的に達成されたことを示している。
【0173】
[183]本発明は、以下の態様であってもよい。
［１］
体液の少なくとも１つの標的成分を除去するためのシステムであって、
患者から前記体液を受容するように構成された入り口、
前記入り口に連結されて前記入り口から前記体液を受容するように構成された隔離チャンバーであり、
前記体液の前記少なくとも１つの標的成分に結合して、捕捉支持体と前記体液との接触に応答して前記隔離チャンバー中で前記少なくとも１つの標的成分を捕捉するように構成され、前記少なくとも１つの標的成分に結合して前記体液中の前記少なくとも１つの標的成分の量を低減させるように構成されている、捕捉支持体、及び
前記入り口とは分離された前記隔離チャンバーへのアクセスを提供するように構成され、前記隔離チャンバーへの及び／又は前記隔離チャンバーからの前記捕捉支持体の挿入及び／又は除去を容易にするように構成されている、第１及び第２のアクセスポート
を備える、隔離チャンバー、
低減された量の前記少なくとも１つの標的成分を有する前記体液の一部又は全部を前記患者に戻す任意選択による再導入のために、前記低減された量の前記少なくとも１つの標的成分を有する前記体液を前記隔離チャンバーから通過させるように構成された出口、並びに
前記隔離チャンバー中の前記捕捉支持体を前記入り口及び前記出口から分離するように構成され、前記捕捉支持体を前記隔離チャンバー内に保持するように構成されている、１つ又は複数のフィルター
を備える、システム。
［２］
（ａ）前記少なくとも１つの標的成分に結合する前記捕捉支持体の捕捉効率が、血漿流の流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、任意選択で
（ｂ）前記少なくとも１つの標的成分への前記捕捉支持体の結合親和性が少なくとも約１０－７ＫＤであり、及び／又は
（ｃ）前記出口を通過する前記捕捉支持体の溶出速度が約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満である、
［１］に記載のシステム。
［３］
（ｂ）前記少なくとも１つの標的成分への前記捕捉支持体の結合親和性が１０－７ＫＤ以上であり、任意選択で
（ａ）前記少なくとも１つの標的成分に結合する前記捕捉支持体の捕捉効率が、流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、及び／又は
（ｃ）前記出口を通過する前記捕捉支持体の溶出速度が約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満である、
［１］に記載のシステム。
［４］
（ｃ）前記出口を通過する前記捕捉支持体の溶出速度が約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満であり、任意選択で
（ａ）前記少なくとも１つの標的成分に結合する前記捕捉支持体の捕捉効率が、流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、及び／又は
（ｂ）前記少なくとも１つの標的成分への前記捕捉支持体の結合親和性が１０－７ＫＤ以上である、
［１］に記載のシステム。
［５］
前記体液が血漿を含む、［１］～［４］のいずれか一項に記載のシステム。
［６］
前記少なくとも１つの標的成分が、タンパク質、複合体、アセンブリー、又は細胞を含む、［１］～［５］のいずれか一項に記載のシステム。
［７］
前記少なくとも１つの標的成分が、前記患者における抗がん免疫応答を阻害するように機能する１つ又は複数の血漿成分を含む、［１］～［６］のいずれか一項に記載のシステム。
［８］
前記少なくとも１つの標的成分が、１つ又は複数の免疫阻害剤を含む、［１］～［７］のいずれか一項に記載のシステム。
［９］
前記少なくとも１つの標的成分が、可溶性ＴＮＦα受容体を含む、［１］～［８］のいずれか一項に記載のシステム。
［１０］
前記少なくとも１つの標的成分が、ｓＴＮＦ－Ｒ１受容体及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２受容体を含む、［１］～［９］のいずれか一項に記載のシステム。
［１１］
前記捕捉支持体が、アフィニティクロマトグラフィー支持体材料、中空繊維膜、シート膜、膜カセット、ビーズ、又はロール化シート膜を含む、［１］～［１０］のいずれか一項に記載のシステム。
［１２］
前記捕捉支持体が、前記アフィニティクロマトグラフィー支持体材料を含み、前記アフィニティクロマトグラフィー支持体材料が、セファロース、アガロース、又はアクリルアミドを含む、［１１］に記載のシステム。
［１３］
前記捕捉支持体が、多孔質又は非多孔質のマトリックス材料を含む、［１］～［１２］のいずれか一項に記載のシステム。
［１４］
前記捕捉支持体が、前記体液の２つ以上の標的成分と結合するように構成されている、［１］～［１３］のいずれか一項に記載のシステム。
［１５］
前記捕捉支持体が、抗体、抗体断片、結合ペプチド、アプタマー、又はアビマーが固定された固体支持体を含む、［１］～［１４］のいずれか一項に記載のシステム。
［１６］
前記抗体が、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、及びこれらの組合せからなる群から選択される、［１５］に記載のシステム。
［１７］
前記捕捉支持体が、ＴＮＦα、ＴＮＦαのマルチマー、一本鎖ＴＮＦα、ＴＮＦαの断片、ＴＮＦαの断片のマルチマー、又はこれらの組合せを含む、［１］～［１６］のいずれか一項に記載のシステム。
［１８］
前記捕捉支持体が、ｓｃ－ＴＮＦαリガンド、任意選択で配列番号１、配列番号２、又は配列番号３の配列又は部分配列を含む、［１］～［１７］のいずれか一項に記載のシステム。
［１９］
前記捕捉支持体が、ｓｃ－ＴＮＦαリガンドのトリマー形を含む、［１８］に記載のシステム。
［２０］
前記ｓｃ－ＴＮＦαリガンドの前記トリマー形が、配列番号２又は配列番号３の配列又は部分配列を含む、［１９］に記載のシステム。
［２１］
前記捕捉支持体が、ビーズに結合したリガンドを含む、［１］～［２０］のいずれか一項に記載のシステム。
［２２］
前記リガンドが、所与のビーズの上の所与の密度及び配向を有し、前記密度及び／又は配向が、前記リガンドと前記体液の前記少なくとも１つの標的成分との結合を増強するように構成されている、［２１］に記載のシステム。
［２３］
前記ビーズの大きさ、数、密度、及び／又は濃度が、前記ビーズを通過する前記体液の層流を容易にして、前記リガンドと前記体液の前記少なくとも１つの標的成分との結合を増強するように構成されている、［２１］又は［２２］に記載のシステム。
［２４］
前記ビーズが、結合特異性を増強するためにエタノールアミン中でクエンチされている、［２１］～［２３］のいずれか一項に記載のシステム。
［２５］
前記体液が、全血である、［１］～［２４］のいずれか一項に記載のシステム。
［２６］
前記入り口、前記隔離チャンバー、及び前記出口が、体外閉回路カラムを形成している、［１］～［２５］のいずれか一項に記載のシステム。
［２７］
前記体外閉回路カラムが、操作中に無菌のままであるように構成されている、［２６］に記載のシステム。
［２８］
前記体外閉回路カラムを損なうことなしに、前記捕捉された少なくとも１つの標的成分の全部又は一部のサンプリング又は除去を容易にするように構成された標的成分出口ポートをさらに備える、［２６］又は［２７］に記載のシステム。
［２９］
前記体外閉回路カラムを損なうことなしに、前記隔離チャンバーへの溶出剤の導入を容易にするように構成された溶出剤ポートをさらに備える、［２６］～［２８］のいずれか一項に記載のシステム。
［３０］
前記溶出剤ポートが、再使用のために前記システムを準備するように構成された調整剤を受容するようにさらに構成されている、［２９］に記載のシステム。
［３１］
前記入り口、前記隔離チャンバー、及び前記出口を通して再調整剤を駆動するように構成されたポンプをさらに備える、［１］～［３０］のいずれか一項に記載のシステム。
［３２］
前記ポンプが、シリンジポンプ、ペリスタポンプ、ピストンポンプ、ダイヤフラムポンプ、又はこれらの組合せを含む、［３１］に記載のシステム。
［３３］
前記１つ又は複数のフィルターが、３ミクロン～１００ミクロンの平均孔径を有する、［１］～［３２］のいずれか一項に記載のシステム。
［３４］
同じ機能を有する捕捉支持体を含む１つ又は複数の追加の隔離チャンバーをさらに備える、［１］～［３３］のいずれか一項に記載のシステム。
［３５］
前記１つ又は複数の追加の隔離チャンバーが、前記隔離チャンバーと組み合わされて、複数の異なる標的成分と結合するように構成された多段階分離回路を形成する、［３４］に記載のシステム。
［３６］
前記患者が、ヒト又は獣医学の対象である、［１］～［３５］のいずれか一項に記載のシステム。
［３７］
［１］～［３６］のいずれか一項に記載のシステムによって前記体液の前記少なくとも１つ又は複数の標的成分を除去する方法であって、
前記入り口を通して前記隔離チャンバーに前記患者からの前記体液を導くステップ、
前記体液の前記少なくとも１つの標的成分を結合して前記隔離チャンバー中の前記少なくとも１つの標的成分を捕捉して、前記体液中の前記少なくとも１つの標的成分の量を低減させるステップ、及び任意選択で
前記患者に戻す再導入のために前記低減された量の前記少なくとも１つの標的成分を有する前記体液の一部又は全部を前記隔離チャンバーから前記出口を通して通過させるステップを含む、
方法。
［３８］
前記患者に戻して再導入された前記体液中の前記少なくとも１つの標的成分の前記低減された量を測定するステップをさらに含む、［３７］に記載の方法。
［３９］
前記測定が、ＬＣ－ＭＳ、ＨＰＬＣ、ＵＨＰＬＣ、抵抗測定、発光測定、化学発光、電界発光、電界化学発光、クロマトグラフィーモニタリング、陽電子発光トモグラフィー（ＰＥＴ）、Ｘ線コンピュータトモグラフィー（ＣＴ）、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、超音波、ガンマカメラ、単一光子発光コンピュータトモグラフィー（ＳＰＥＣＴ）、ＥＬＩＳＡ、ＳＰＲ、又はＢＬＩのうちの１つ又は複数を含む、［３８］に記載の方法。
［４０］
前記患者に戻して再導入された前記体液中の前記捕捉支持体の溶出速度を測定するステップをさらに含む、［３７］～［３９］のいずれか一項に記載の方法。
［４１］
ヒト又は獣医学の用途のためである、［３７］～［４０］のいずれか一項に記載の方法。
［１］
体液の少なくとも１つの標的成分を除去するためのシステムであって、
患者から前記体液を受容するように構成された入り口、
前記入り口に連結されて前記入り口から前記体液を受容するように構成された隔離チャンバーであり、
前記体液の前記少なくとも１つの標的成分に結合して、捕捉支持体と前記体液との接触に応答して前記隔離チャンバー中で前記少なくとも１つの標的成分を捕捉するように構成され、前記少なくとも１つの標的成分に結合して前記体液中の前記少なくとも１つの標的成分の量を低減させるように構成されている、捕捉支持体、及び
前記入り口とは分離された前記隔離チャンバーへのアクセスを提供するように構成され、前記隔離チャンバーへの及び／又は前記隔離チャンバーからの前記捕捉支持体の挿入及び／又は除去を容易にするように構成されている、第１及び第２のアクセスポート
を備える、隔離チャンバー、
低減された量の前記少なくとも１つの標的成分を有する前記体液の一部又は全部を前記患者に戻す任意選択による再導入のために、前記低減された量の前記少なくとも１つの標的成分を有する前記体液を前記隔離チャンバーから通過させるように構成された出口、並びに
前記隔離チャンバー中の前記捕捉支持体を前記入り口及び前記出口から分離するように構成され、前記捕捉支持体を前記隔離チャンバー内に保持するように構成されている、１つ又は複数のフィルター
を備える、システム。
［２］
（ａ）前記少なくとも１つの標的成分に結合する前記捕捉支持体の捕捉効率が、血漿流の流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、任意選択で
（ｂ）前記少なくとも１つの標的成分への前記捕捉支持体の結合親和性が少なくとも約１０－７ＫＤであり、及び／又は
（ｃ）前記出口を通過する前記捕捉支持体の溶出速度が約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満である、
［１］に記載のシステム。
［３］
（ｂ）前記少なくとも１つの標的成分への前記捕捉支持体の結合親和性が１０－７ＫＤ以上であり、任意選択で
（ａ）前記少なくとも１つの標的成分に結合する前記捕捉支持体の捕捉効率が、流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、及び／又は
（ｃ）前記出口を通過する前記捕捉支持体の溶出速度が約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満である、
［１］に記載のシステム。
［４］
（ｃ）前記出口を通過する前記捕捉支持体の溶出速度が約１００ｎｇ／ｍＬ／分未満であり、任意選択で
（ａ）前記少なくとも１つの標的成分に結合する前記捕捉支持体の捕捉効率が、流速４５ｍＬ／分以下において８０％以上であり、及び／又は
（ｂ）前記少なくとも１つの標的成分への前記捕捉支持体の結合親和性が１０－７ＫＤ以上である、
［１］に記載のシステム。
［５］
前記体液が血漿を含む、［１］～［４］のいずれか一項に記載のシステム。
［６］
前記少なくとも１つの標的成分が、タンパク質、複合体、アセンブリー、又は細胞を含む、［１］～［５］のいずれか一項に記載のシステム。
［７］
前記少なくとも１つの標的成分が、前記患者における抗がん免疫応答を阻害するように機能する１つ又は複数の血漿成分を含む、［１］～［６］のいずれか一項に記載のシステム。
［８］
前記少なくとも１つの標的成分が、１つ又は複数の免疫阻害剤を含む、［１］～［７］のいずれか一項に記載のシステム。
［９］
前記少なくとも１つの標的成分が、可溶性ＴＮＦα受容体を含む、［１］～［８］のいずれか一項に記載のシステム。
［１０］
前記少なくとも１つの標的成分が、ｓＴＮＦ－Ｒ１受容体及び／又はｓＴＮＦ－Ｒ２受容体を含む、［１］～［９］のいずれか一項に記載のシステム。
［１１］
前記捕捉支持体が、アフィニティクロマトグラフィー支持体材料、中空繊維膜、シート膜、膜カセット、ビーズ、又はロール化シート膜を含む、［１］～［１０］のいずれか一項に記載のシステム。
［１２］
前記捕捉支持体が、前記アフィニティクロマトグラフィー支持体材料を含み、前記アフィニティクロマトグラフィー支持体材料が、セファロース、アガロース、又はアクリルアミドを含む、［１１］に記載のシステム。
［１３］
前記捕捉支持体が、多孔質又は非多孔質のマトリックス材料を含む、［１］～［１２］のいずれか一項に記載のシステム。
［１４］
前記捕捉支持体が、前記体液の２つ以上の標的成分と結合するように構成されている、［１］～［１３］のいずれか一項に記載のシステム。
［１５］
前記捕捉支持体が、抗体、抗体断片、結合ペプチド、アプタマー、又はアビマーが固定された固体支持体を含む、［１］～［１４］のいずれか一項に記載のシステム。
［１６］
前記抗体が、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、及びこれらの組合せからなる群から選択される、［１５］に記載のシステム。
［１７］
前記捕捉支持体が、ＴＮＦα、ＴＮＦαのマルチマー、一本鎖ＴＮＦα、ＴＮＦαの断片、ＴＮＦαの断片のマルチマー、又はこれらの組合せを含む、［１］～［１６］のいずれか一項に記載のシステム。
［１８］
前記捕捉支持体が、ｓｃ－ＴＮＦαリガンド、任意選択で配列番号１、配列番号２、又は配列番号３の配列又は部分配列を含む、［１］～［１７］のいずれか一項に記載のシステム。
［１９］
前記捕捉支持体が、ｓｃ－ＴＮＦαリガンドのトリマー形を含む、［１８］に記載のシステム。
［２０］
前記ｓｃ－ＴＮＦαリガンドの前記トリマー形が、配列番号２又は配列番号３の配列又は部分配列を含む、［１９］に記載のシステム。
［２１］
前記捕捉支持体が、ビーズに結合したリガンドを含む、［１］～［２０］のいずれか一項に記載のシステム。
［２２］
前記リガンドが、所与のビーズの上の所与の密度及び配向を有し、前記密度及び／又は配向が、前記リガンドと前記体液の前記少なくとも１つの標的成分との結合を増強するように構成されている、［２１］に記載のシステム。
［２３］
前記ビーズの大きさ、数、密度、及び／又は濃度が、前記ビーズを通過する前記体液の層流を容易にして、前記リガンドと前記体液の前記少なくとも１つの標的成分との結合を増強するように構成されている、［２１］又は［２２］に記載のシステム。
［２４］
前記ビーズが、結合特異性を増強するためにエタノールアミン中でクエンチされている、［２１］～［２３］のいずれか一項に記載のシステム。
［２５］
前記体液が、全血である、［１］～［２４］のいずれか一項に記載のシステム。
［２６］
前記入り口、前記隔離チャンバー、及び前記出口が、体外閉回路カラムを形成している、［１］～［２５］のいずれか一項に記載のシステム。
［２７］
前記体外閉回路カラムが、操作中に無菌のままであるように構成されている、［２６］に記載のシステム。
［２８］
前記体外閉回路カラムを損なうことなしに、前記捕捉された少なくとも１つの標的成分の全部又は一部のサンプリング又は除去を容易にするように構成された標的成分出口ポートをさらに備える、［２６］又は［２７］に記載のシステム。
［２９］
前記体外閉回路カラムを損なうことなしに、前記隔離チャンバーへの溶出剤の導入を容易にするように構成された溶出剤ポートをさらに備える、［２６］～［２８］のいずれか一項に記載のシステム。
［３０］
前記溶出剤ポートが、再使用のために前記システムを準備するように構成された調整剤を受容するようにさらに構成されている、［２９］に記載のシステム。
［３１］
前記入り口、前記隔離チャンバー、及び前記出口を通して再調整剤を駆動するように構成されたポンプをさらに備える、［１］～［３０］のいずれか一項に記載のシステム。
［３２］
前記ポンプが、シリンジポンプ、ペリスタポンプ、ピストンポンプ、ダイヤフラムポンプ、又はこれらの組合せを含む、［３１］に記載のシステム。
［３３］
前記１つ又は複数のフィルターが、３ミクロン～１００ミクロンの平均孔径を有する、［１］～［３２］のいずれか一項に記載のシステム。
［３４］
同じ機能を有する捕捉支持体を含む１つ又は複数の追加の隔離チャンバーをさらに備える、［１］～［３３］のいずれか一項に記載のシステム。
［３５］
前記１つ又は複数の追加の隔離チャンバーが、前記隔離チャンバーと組み合わされて、複数の異なる標的成分と結合するように構成された多段階分離回路を形成する、［３４］に記載のシステム。
［３６］
前記患者が、ヒト又は獣医学の対象である、［１］～［３５］のいずれか一項に記載のシステム。
［３７］
［１］～［３６］のいずれか一項に記載のシステムによって前記体液の前記少なくとも１つ又は複数の標的成分を除去する方法であって、
前記入り口を通して前記隔離チャンバーに前記患者からの前記体液を導くステップ、
前記体液の前記少なくとも１つの標的成分を結合して前記隔離チャンバー中の前記少なくとも１つの標的成分を捕捉して、前記体液中の前記少なくとも１つの標的成分の量を低減させるステップ、及び任意選択で
前記患者に戻す再導入のために前記低減された量の前記少なくとも１つの標的成分を有する前記体液の一部又は全部を前記隔離チャンバーから前記出口を通して通過させるステップを含む、
方法。
［３８］
前記患者に戻して再導入された前記体液中の前記少なくとも１つの標的成分の前記低減された量を測定するステップをさらに含む、［３７］に記載の方法。
［３９］
前記測定が、ＬＣ－ＭＳ、ＨＰＬＣ、ＵＨＰＬＣ、抵抗測定、発光測定、化学発光、電界発光、電界化学発光、クロマトグラフィーモニタリング、陽電子発光トモグラフィー（ＰＥＴ）、Ｘ線コンピュータトモグラフィー（ＣＴ）、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、超音波、ガンマカメラ、単一光子発光コンピュータトモグラフィー（ＳＰＥＣＴ）、ＥＬＩＳＡ、ＳＰＲ、又はＢＬＩのうちの１つ又は複数を含む、［３８］に記載の方法。
［４０］
前記患者に戻して再導入された前記体液中の前記捕捉支持体の溶出速度を測定するステップをさらに含む、［３７］～［３９］のいずれか一項に記載の方法。
［４１］
ヒト又は獣医学の用途のためである、［３７］～［４０］のいずれか一項に記載の方法。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【配列表】
【外国語明細書】