特開2023-168549口腔内病原性細菌の生育抑制剤、口腔用組成物及び促進剤
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023168549
(43)【公開日】2023-11-24
(54)【発明の名称】口腔内病原性細菌の生育抑制剤、口腔用組成物及び促進剤
(51)【国際特許分類】
A23L 33/135 20160101AFI20231116BHJP
A23G 3/34 20060101ALI20231116BHJP
A23G 4/12 20060101ALI20231116BHJP
A61K 31/7016 20060101ALI20231116BHJP
A61K 31/702 20060101ALI20231116BHJP
A61K 31/715 20060101ALI20231116BHJP
A61P 1/02 20060101ALI20231116BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20231116BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20231116BHJP
A61K 8/60 20060101ALI20231116BHJP
A61K 8/73 20060101ALI20231116BHJP
A61K 8/99 20170101ALI20231116BHJP
A61Q 11/00 20060101ALI20231116BHJP
A61Q 11/02 20060101ALI20231116BHJP
A61K 9/70 20060101ALI20231116BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20231116BHJP
A61K 9/00 20060101ALI20231116BHJP
A61K 9/14 20060101ALI20231116BHJP
A61K 9/68 20060101ALI20231116BHJP
A61K 9/12 20060101ALI20231116BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20231116BHJP
A61K 47/36 20060101ALI20231116BHJP
A61K 47/02 20060101ALI20231116BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20231116BHJP
A61K 47/42 20170101ALI20231116BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20231116BHJP
A61K 47/20 20060101ALI20231116BHJP
A61K 47/38 20060101ALI20231116BHJP
A61K 47/22 20060101ALI20231116BHJP
【ＦＩ】
A23L33/135
A23G3/34 101
A23G4/12
A61K31/7016
A61K31/702
A61K31/715
A61P1/02
A61P31/04
A61P43/00 121
A61K8/60
A61K8/73
A61K8/99
A61Q11/00
A61Q11/02
A61K9/70
A61K9/20
A61K9/00
A61K9/14
A61K9/68
A61K9/12
A61K47/26
A61K47/36
A61K47/02
A61K47/10
A61K47/42
A61K47/12
A61K47/20
A61K47/38
A61K47/22
【審査請求】有
【請求項の数】8
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2023172862
(22)【出願日】2023-10-04
(62)【分割の表示】P 2019193946の分割
【原出願日】2019-10-25
(71)【出願人】
【識別番号】000006769
【氏名又は名称】ライオン株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】110002240
【氏名又は名称】弁理士法人英明国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】城 隆太郎
(72)【発明者】
【氏名】瀧本 悠菜
(57)【要約】
【課題】口腔内の病原性細菌の生育を抑制する口腔内病原性細菌の生育抑制剤、口腔内疾患の予防又は改善効果に優れる口腔用組成物、病原性細菌の生育抑制効果又はストレプトコッカス ペロリス等の生育を促進する促進剤を提供する。
【解決手段】（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
【選択図】なし
【解決手段】（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
【請求項2】
口腔内のストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を促進させ、口腔内病原性細菌に対する生育を抑制することを特徴とする、請求項１記載の口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
【請求項3】
口腔内病原性細菌が、ポルフィロモナス ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、プレボテラ インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）又はフゾバクテリウム ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）である請求項１又は２記載の口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
【請求項4】
（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する、歯磨剤、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、シート剤、口腔内徐放剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、義歯ケア剤、舌ケア剤及び口中清涼剤から選ばれる口腔用組成物。
【請求項5】
（Ｂ）ミルクオリゴ糖を含有する口腔用組成物。
【請求項6】
（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースを含有する口腔用組成物。
【請求項7】
歯磨剤、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、シート剤、口腔内徐放剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、義歯ケア剤、舌ケア剤、口中清涼剤、チューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フィルム、トローチ及び粉末飲料から選ばれる、請求項５又は６記載の口腔用組成物。
【請求項8】
歯周病又は口臭の予防又は改善用である請求項４～７のいずれか１項記載の口腔用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、口腔内病原性細菌の生育を抑制し、歯周病や口臭の予防又は抑制用として好適な口腔用組成物、ならびに病原性細菌の生育抑制効果又はストレプトコッカス ペロリス等の生育を促進する促進剤に関する。
【背景技術】
【0002】
口腔用疾患としては、う蝕、歯周病、口臭等が挙げられ、これらの疾患の予防又は改善が求められている。
ヒトの口腔内には様々な病原性を示す細菌が存在する。例えば、う蝕の原因菌であるストレプトコッカス ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ）、歯周病や口臭の原因菌であるポルフィロモナス ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、プレボテラ インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、フゾバクテリウム ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）等が挙げられる。
ヒトの口腔内には様々な病原性を示す細菌が存在する。例えば、う蝕の原因菌であるストレプトコッカス ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ）、歯周病や口臭の原因菌であるポルフィロモナス ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、プレボテラ インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、フゾバクテリウム ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）等が挙げられる。
【0003】
口腔内において上記病原性を示す細菌の生育を抑制することで、口腔疾患の予防又は改善することができ、これまで様々な技術が提案されてきたが、より効果の高い技術が求められていた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】特許第５９８２３７６号公報
【特許文献2】特許第６２３５１３８号公報
【特許文献3】特開２０１２－７７０５３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
本発明は上記事情に鑑みなされたもので、口腔内の病原性細菌の生育を抑制する口腔内病原性細菌の生育抑制剤、口腔内疾患の予防又は改善効果に優れる口腔用組成物、病原性細菌の生育抑制効果又はストレプトコッカス ペロリス等の生育を促進する促進剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討した結果、口腔内に存在する細菌であるストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）、これらの培養物が、口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有することを知見した。
さらに、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上が、それ自身は口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有していないものの、ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物に作用して、これらの有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を促進させること、例えば、上記ストレプトコッカス ペロリス等の生育を促進することにより、口腔内病原性細菌に対する顕著な生育抑制効果を有することを知見し、発明をなすに至ったものである。
さらに、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上が、それ自身は口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有していないものの、ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物に作用して、これらの有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を促進させること、例えば、上記ストレプトコッカス ペロリス等の生育を促進することにより、口腔内病原性細菌に対する顕著な生育抑制効果を有することを知見し、発明をなすに至ったものである。
【0007】
従って、本発明は下記発明を提供する。
１．（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
２．（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
３．口腔内のストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を促進させ、口腔内病原性細菌に対する生育を抑制することを特徴とする、２記載の口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
４．さらに、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する、２又は３記載の口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
５．口腔内病原性細菌が、ポルフィロモナス ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、プレボテラ インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）又はフゾバクテリウム ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）である１～４のいずれかに記載の口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
６．（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する口腔用組成物。
７．（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する、歯磨剤、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、シート剤、口腔内徐放剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、義歯ケア剤、舌ケア剤及び口中清涼剤から選ばれる口腔用組成物。
８．さらに、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する７記載の口腔用組成物。
９．歯周病又は口臭の予防又は改善用である６～８のいずれかに記載の口腔用組成物。
１０．（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を促進する、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する促進剤。
１１．ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）の生育を促進する、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する促進剤。
１．（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
２．（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
３．口腔内のストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を促進させ、口腔内病原性細菌に対する生育を抑制することを特徴とする、２記載の口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
４．さらに、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する、２又は３記載の口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
５．口腔内病原性細菌が、ポルフィロモナス ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、プレボテラ インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）又はフゾバクテリウム ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）である１～４のいずれかに記載の口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤。
６．（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する口腔用組成物。
７．（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する、歯磨剤、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、シート剤、口腔内徐放剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、義歯ケア剤、舌ケア剤及び口中清涼剤から選ばれる口腔用組成物。
８．さらに、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する７記載の口腔用組成物。
９．歯周病又は口臭の予防又は改善用である６～８のいずれかに記載の口腔用組成物。
１０．（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を促進する、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する促進剤。
１１．ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）の生育を促進する、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する促進剤。
【発明の効果】
【0008】
本発明によれば、口腔内病原性細菌に対する優れた抑制効果を有する生育抑制剤、口腔疾患予防又は改善用として好適に使用し得る口腔用組成物、及び病原性細菌の生育抑制効果又はストレプトコッカス ペロリス等の生育を促進する促進剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【0009】
以下、本発明について詳細に説明する。
Ｉ．口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤
本発明の口腔内病原性細菌に対する第１の生育抑制剤（以下、「口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤」を単に「生育抑制剤」と表記する場合がある。）は、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤である。
Ｉ．口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤
本発明の口腔内病原性細菌に対する第１の生育抑制剤（以下、「口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤」を単に「生育抑制剤」と表記する場合がある。）は、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する、口腔内病原性細菌に対する生育抑制剤である。
【0010】
ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）は １９９８年にヒトの口腔内から単離された細菌である。また、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）は２０１１年にヒトの母乳から単離された細菌であり、両菌は非常に近縁な細菌である。
【0011】
（Ａ）成分は菌体そのものでもよく、培養物でもよい。培養物は特に限定されず、公知の方法を用いて培養した培養物が挙げられ、培養液、菌と培養液を含むもの、これらから培地成分を除去した培養上清、これらの乾燥物等が挙げられる。
【0012】
培養物としては、菌を糖含有又は不含の培地や栄養源を用いて培養の常法に従って任意の条件で培養した培養物そのものを使用することができる。さらに培養物から遠心分離やろ過等の分離手段によって集菌したものをそのまま、もしくは生理食塩水や滅菌水等で洗浄し使用することができる。さらに、菌を凍結乾燥やスプレードライ等で乾燥したものも使用することができる。
【0013】
培養上清としては、菌を培地を用いて培養の常法に従って任意の条件で培養し、培養物から遠心分離やろ過等の分離手段によって菌を除去したものを使用することができる。また、減圧濃縮、凍結乾燥、スプレードライ等の方法で濃縮又は乾燥させたものを使用することもできる。
【0014】
また、培養物又は培養上清を水酸化ナトリウム等のアルカリ剤を用いてｐＨを中性域（５．６～８．５（温度１０～３０℃））にしたものを使用することができる。中和することで、酸による歯牙を脱灰するう蝕のリスクが軽減される。
【0015】
本発明の口腔内病原性細菌に対する第２の生育抑制剤は、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有するものであり、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。後述する実施例の結果から明らかであるように、口腔内に存在するストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）は、口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有する。一方、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上は、それ自身は口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有していないものの、これらを口腔内で適用することにより、ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を飛躍的に促進させ、口腔内病原性細菌に対する顕著な生育抑制効果が得られる。以上のことから、（Ｂ）成分は、ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を促進する促進剤として好適である。また、（Ｂ）成分は、（Ａ）成分の生育促進効果を有することから、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上の生育を促進する促進剤としても好適である。
【0016】
ミルクオリゴ糖とは、遊離ラクトース単位を還元末端側にもち、Ｎ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース（Ｇａｌ）、フコース（Ｆｕｃ）、Ｎ－アセチルノイラミン酸（Ｎｅｕ５Ａｃ）が付加したものである。ミルクオリゴ糖の例として、２’－フコシルラクトース、３－フコシルラクトース、３’－シアリルラクトース、６’－シアリルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩ、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩＩ、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩＩＩ、ラクト－Ｎ－ジフコヘキサオースＩ、ラクト－Ｎ－ジフコヘキサオースＩＩ、ラクト－Ｎ－ヘキサオース、ラクト－Ｎ－ネオヘキサオース、６’－Ｎ－アセチルノイラミニルラクトース、３’－Ｎ－アセチルノイラミニルラクトース等が挙げられる。
【0017】
ラクツロースは、ガラクトースとフルクトースがβ－１，４－グリコシド結合した二糖であり、便秘改善等に用いられる。
【0018】
（Ｂ）成分としては、３’－シアリルラクトース、６’－シアリルラクトース、２’－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩ、ラクツロースが好ましく、３’－シアリルラクトース、６’－シアリルラクトース、２’－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、ラクト－Ｎ－フコペンタオースＩがより好ましい。
【0019】
ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）は口腔内に存在するが、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を、さらに剤中に配合することで、口腔内病原性細菌に対するより顕著な生育抑制効果が得られる。これらは１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。
【0020】
本発明の生育抑制剤は、有効成分として（Ａ）成分もしくは（Ｂ）成分を、又は（Ａ）成分と（Ｂ）成分とを併用し、これらの成分を有効成分として配合することで得ることができる。また、上記有効成分のみからなる生育抑制剤として使用できるが、必要に応じて、その他の口腔用として公知の任意成分をさらに含有してもよく、この場合、任意成分は本発明の効果を妨げない範囲で配合し得る。
この場合、生育抑制の有効成分である（Ａ）及び（Ｂ）成分を、生育抑制剤、口腔用組成物に応用する場合は、生育抑制効果の点から、（Ａ）及び（Ｂ）成分の配合量がそれぞれ後述の範囲が好ましい。以下、生育抑制剤、口腔用組成物のいずれの場合も組成物全体として記載する。
この場合、生育抑制の有効成分である（Ａ）及び（Ｂ）成分を、生育抑制剤、口腔用組成物に応用する場合は、生育抑制効果の点から、（Ａ）及び（Ｂ）成分の配合量がそれぞれ後述の範囲が好ましい。以下、生育抑制剤、口腔用組成物のいずれの場合も組成物全体として記載する。
【0021】
（Ａ）成分の配合量は、組成物全体の０．１％（質量％、以下同様）以上が好ましく、０．５％以上がより好ましい。上記範囲とすることで、生育抑制効果がより向上する。上限は特にないが、製剤の安定性等の点から、９０％以下が好ましく、５０％以下がより好ましく、３０％以下がさらに好ましい。
【0022】
（Ｂ）成分の配合量は、組成物全体の０．０１％以上が好ましく、０．１％以上がより好ましく、０．５％以上がさらに好ましい。上限は特に限定されないが、製剤安定性の点、服用性等の点から、組成物全体の５０％以下が好ましく、１０％以下がより好ましく、５％以下がさらに好ましい。上記範囲とすることで、生育抑制効果、ストレプトコッカス ペロリス又はストレプトコッカス ラクタリウスの生育促進効果がより向上する。
【0023】
（Ａ）成分と（Ｂ）成分とを併用する場合、（Ａ）成分と（Ｂ）成分との配合比率は、上記各成分の配合量から算出し得る範囲がよいが、下記範囲であると口腔内の生育抑制効果がさらに向上する。
（Ａ）成分と（Ｂ）成分との量比を示す（Ａ）／（Ｂ）は、質量比として０．００２～５，０００が好ましく、０．０１～１００がより好ましく、０．１～２０がさらに好ましい。
（Ａ）成分と（Ｂ）成分との量比を示す（Ａ）／（Ｂ）は、質量比として０．００２～５，０００が好ましく、０．０１～１００がより好ましく、０．１～２０がさらに好ましい。
【0024】
病原性細菌としては、歯周病や口臭の原因菌であるポルフィロモナス ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、プレボテラ インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、フゾバクテリウム ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）等が挙げられ、これらに対してより効果を発揮できる。
【0025】
口腔内病原性細菌に対する生育抑制は、病原性細菌に対してサンプル及びコントロール（水）で培養した場合の培養液の濁度で測定することができ、濁度が低いほど生育抑制効果が高いことを示す。サンプル添加の濁度をａ、コントロールの濁度をｂとしたときの下記式における、コントロールに対する濁度相対値Ｘを生育抑制効果の指標とする。Ｘが低いほど生育抑制効果が高いことを示す。具体的な例示の試験方法は実施例において説明する。
Ｘ＝（ａ／ｂ）×１００
Ｘの値は０～７０の範囲が好ましく、０～５０がより好ましく、０～２０がさらに好ましい。
Ｘ＝（ａ／ｂ）×１００
Ｘの値は０～７０の範囲が好ましく、０～５０がより好ましく、０～２０がさらに好ましい。
【0026】
ＩＩ．口腔用組成物
本発明の第１の口腔用組成物は、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する口腔用組成物である。
本発明の第１の口腔用組成物は、（Ａ）ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）、ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）及びこれらの培養物から選ばれる１種以上を含有する口腔用組成物である。
【0027】
本発明の第２の口腔用組成物は、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上を含有する口腔用組成物であり、さらに、上記（Ａ）成分を含有し、（Ａ）及び（Ｂ）成分を含有する口腔用組成物が好ましい。
【0028】
上述したように（Ａ）成分及び（Ｂ）成分は優れた口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有するため、歯周病又は口臭の予防又は改善用として好適である。好適な成分及び配合量は上述した通りである。
【0029】
本発明の口腔用組成物は、液状（液体、液状）、ペースト状、固体（固体、固形状）といった各種形状に調製でき、剤型は特に限定されない。
なお、本発明において、口腔用組成物とは、主として口腔内で使用することを目的にするものであり、使用後は口腔内から排出される口腔用製剤だけでなく、摂取可能な飲食品でもよい。例えば、歯磨剤（練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、粉歯磨等）、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、シート剤、口腔内徐放剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、舌ケア剤、口中清涼剤、義歯ケア剤等の一般的な口腔用製剤に調製できる。また、口腔内に含んで使用するチューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フイルム、トローチや、水に溶かして飲む粉末飲料等の飲食品に調製することもできる。調製法は、それぞれの常法を採用できる。なお、飲食品の形態は、いつでもどこでも使用可能な簡便性、携帯性の点から、チューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フイルムのいずれかが好ましい。第２の口腔用組成物の場合、歯磨剤、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、シート剤、口腔内徐放剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、義歯ケア剤、舌ケア剤及び口中清涼剤から選ばれる口腔用組成物であることが好ましい。
なお、本発明において、口腔用組成物とは、主として口腔内で使用することを目的にするものであり、使用後は口腔内から排出される口腔用製剤だけでなく、摂取可能な飲食品でもよい。例えば、歯磨剤（練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、粉歯磨等）、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、シート剤、口腔内徐放剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、舌ケア剤、口中清涼剤、義歯ケア剤等の一般的な口腔用製剤に調製できる。また、口腔内に含んで使用するチューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フイルム、トローチや、水に溶かして飲む粉末飲料等の飲食品に調製することもできる。調製法は、それぞれの常法を採用できる。なお、飲食品の形態は、いつでもどこでも使用可能な簡便性、携帯性の点から、チューインガム、錠菓、キャンディ、グミ、可食フイルムのいずれかが好ましい。第２の口腔用組成物の場合、歯磨剤、洗口剤、塗布剤、マウススプレー、貼付剤、シート剤、口腔内徐放剤、咀嚼剤、口腔内溶解剤、口腔内崩壊剤、義歯ケア剤、舌ケア剤及び口中清涼剤から選ばれる口腔用組成物であることが好ましい。
【0030】
本発明の口腔用組成物は、上記成分に加えて、必要に応じて、その他の公知成分を任意に含んでもよい。任意の成分としては、例えば、界面活性剤、研磨剤、粘稠剤、粘結剤、着色剤、甘味料、防腐剤、香料、有効成分、更には、ｐＨ調整剤、光沢剤、流動化剤、除電剤、結合剤、酸味料、滑沢剤、保存料、崩壊剤、賦形剤、溶剤等が挙げられ、これらの配合量は、本発明の効果を損なわない範囲で適宜調整すればよく、常用量でもよい。
口腔用製剤、例えば歯磨剤、洗口剤では、界面活性剤、研磨剤、粘稠剤、粘結剤、着色剤、甘味料、防腐剤、香料、有効成分、ｐＨ調整剤等を配合できる。
飲食品、例えばチューインガム、錠菓、キャンディ、グミでは、ガムベース、着色剤、甘味料、香料、光沢剤、流動化剤、結合剤、酸味料、滑沢剤、保存料、崩壊剤、賦形剤等を配合できる。以下、剤及び口腔用組成物中の好適な配合量を示す。
口腔用製剤、例えば歯磨剤、洗口剤では、界面活性剤、研磨剤、粘稠剤、粘結剤、着色剤、甘味料、防腐剤、香料、有効成分、ｐＨ調整剤等を配合できる。
飲食品、例えばチューインガム、錠菓、キャンディ、グミでは、ガムベース、着色剤、甘味料、香料、光沢剤、流動化剤、結合剤、酸味料、滑沢剤、保存料、崩壊剤、賦形剤等を配合できる。以下、剤及び口腔用組成物中の好適な配合量を示す。
【0031】
界面活性剤は、口腔用として一般的なアニオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤を配合できる。アニオン性界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩、ノニオン性界面活性剤は、糖脂肪酸エステル、糖アルコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル又は高級アルコールエステルが挙げられる。カチオン性界面活性剤はアルキルアンモニウム塩、両性界面活性剤はベタイン系やイミダゾリン系が挙げられる。界面活性剤の配合量は、通常、０～１０％、特に０．０１～５％である。
【0032】
研磨剤は、シリカ系研磨剤、リン酸カルシウム系研磨剤、炭酸カルシウム系研磨剤が挙げられ、その配合量は、通常、練歯磨等の歯磨剤では２～５０％である。
【0033】
粘稠剤は、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、エリスリトール、マンニトール、ラクチトール、イソマルト等の糖アルコール、プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコールが挙げられ、その配合量は、通常、５～５０％である。
粘結剤は、有機粘結剤としてカルボキシメチルセルロースナトリウム等のセルロール誘導体、ガム類等、無機粘結剤としてゲル化性シリカ等が挙げられる。その配合量は、通常、０．５～１０％である。
粘結剤は、有機粘結剤としてカルボキシメチルセルロースナトリウム等のセルロール誘導体、ガム類等、無機粘結剤としてゲル化性シリカ等が挙げられる。その配合量は、通常、０．５～１０％である。
【0034】
粘結剤は、有機粘結剤としてカルボキシメチルセルロースナトリウム等のセルロール誘導体、ガム類等、無機粘結剤としてゲル化性シリカ等が挙げられる。その配合量は、通常、０．５～１０％である。
【0035】
着色剤は、赤色２号、青色１号等、甘味料はサッカリンナトリウム等が挙げられ、防腐剤は、パラオキシ安息香酸エステル等が挙げられる。
【0036】
香料は、ペパーミント油、スペアミント油、アニス油、ユーカリ油、ウィンターグリーン油、カシア油、クローブ油、タイム油、セージ油、レモン油、オレンジ油、ハッカ油、カルダモン油、コリアンダー油、マンダリン油、ライム油、ラベンダー油、ローズマリー油、ローレル油、カモミル油、キャラウェイ油、マジョラム油、ベイ油、レモングラス油、オリガナム油、パインニードル油、ネロリ油、ローズ油、ジャスミン油、グレープフルーツ油、スウィーティー油、柚油、イリスコンクリート、アブソリュートペパーミント、アブソリュートローズ、オレンジフラワー等の天然香料、及びこれら天然香料の加工処理（前溜部カット、後溜部カット、分留、液液抽出、エッセンス化、粉末香料化等）した香料、及び、メントール、カルボン、アネトール、シネオール、サリチル酸メチル、シンナミックアルデヒド、オイゲノール、３－ｌ－メントキシプロパン－１，２－ジオール、チモール、リナロール、リナリールアセテート、リモネン、メントン、メンチルアセテート、Ｎ－置換－パラメンタン－３－カルボキサミド、ピネン、オクチルアルデヒド、シトラール、プレゴン、カルビールアセテート、アニスアルデヒド、エチルアセテート、エチルブチレート、アリルシクロヘキサンプロピオネート、メチルアンスラニレート、エチルメチルフェニルグリシデート、バニリン、ウンデカラクトン、ヘキサナール、ブタノール、イソアミルアルコール、ヘキセノール、ジメチルサルファイド、シクロテン、フルフラール、トリメチルピラジン、エチルラクテート、エチルチオアセテート等の単品香料、更に、ストロベリーフレーバー、アップルフレーバー、バナナフレーバー、パイナップルフレーバー、グレープフレーバー、マンゴーフレーバー、バターフレーバー、ミルクフレーバー、フルーツミックスフレーバー、トロピカルフルーツフレーバー等の調合香料等が挙げられ、口腔用組成物に用いられる公知の香料素材を使用できる。
【0037】
これら香料の配合量は、通常、歯磨剤、洗口剤等の口腔用製剤では０．００００１～１％がよく、また、錠菓、グミ、チューインガム等の飲食品では０．００１～５０％がよい。上記香料素材を使用した賦香用香料は、０．１～１０％使用するのが好ましい。
【0038】
有効成分としては、口腔用組成物に通常配合される公知のものを配合できる。例えば、イソプロピルメチルフェノール等の非イオン性殺菌剤、塩化セチルピリジニウム等のカチオン性殺菌剤、トラネキサム酸、イプシロンアミノカプロン酸等の抗炎症剤、デキストラナーゼ等の酵素、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム等のフッ化物、水溶性リン酸化合物、銅化合物、硝酸カリウム、乳酸アルミニウム、各種ビタミン類、植物抽出物が挙げられる。なお、上記有効成分の配合量は、本発明の効果を妨げない範囲で設定できる。
【0039】
なお、本発明の（Ａ）成分もしくは（Ｂ）成分、又は（Ａ）成分及び（Ｂ）成分の併用により、口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果が得られ、これにより、非病原性細菌と病原性細菌の生育とのバランスが改善されることで、口腔内菌叢改善効果も期待できる。以上の点から、本発明では、口腔内の病原性細菌と共に非病原性細菌をも殺菌する非選択的殺菌剤の配合は制限することが好ましい。前記非選択的殺菌剤は、従来から広く口腔用製剤に使用されている殺菌剤に多く見られ、例えば塩化セチルピリジニウム等のカチオン性殺菌剤、イソプロピルメチルフェノール等の非イオン性殺菌剤が挙げられる。これら非選択的殺菌剤を配合する場合は、０．１％以下が好ましく、０．０５％以下がより好ましく、配合しないことがさらに好ましい。
【実施例0040】
以下、実施例及び比較例、処方例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。なお、下記例中の特に記載のない「％」は、いずれも質量百分率を示す。
【0041】
［実施例、比較例］
[Ｉ]病原性細菌に対する抗菌効果試験
下記方法で、病原性細菌に対する抗菌効果を評価した。
使用した主原料を下記に示す。
（Ａ）成分
ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）：以下、Ｓ．ｐｅｒｏｒｉｓと略記。）ＡＴＣＣ ７００７８０
ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）：以下、Ｓ．ｌａｃｔａｒｉｕｓと略記。）ＣＣＵＧ ６６４９０Ｔ
（Ｂ）成分
３’－シアリルラクトース：Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ社製
ラクスロース：富士フイルム和光純薬工業社製
（病原性細菌）
ポルフィロモナス ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ：以下、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓと略記。）ＡＴＣＣ３３２７７
[Ｉ]病原性細菌に対する抗菌効果試験
下記方法で、病原性細菌に対する抗菌効果を評価した。
使用した主原料を下記に示す。
（Ａ）成分
ストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）：以下、Ｓ．ｐｅｒｏｒｉｓと略記。）ＡＴＣＣ ７００７８０
ストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）：以下、Ｓ．ｌａｃｔａｒｉｕｓと略記。）ＣＣＵＧ ６６４９０Ｔ
（Ｂ）成分
３’－シアリルラクトース：Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ社製
ラクスロース：富士フイルム和光純薬工業社製
（病原性細菌）
ポルフィロモナス ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ：以下、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓと略記。）ＡＴＣＣ３３２７７
【0042】
[細菌のプレカルチャー]
上記各種細菌の凍結菌液を、馬脱繊血を含有するトッドへヴィットブロス（Ｔｏｄｄ Ｈｅｗｉｔｔ Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）寒天培地に白金耳にて植菌し、３７℃で７２時間嫌気培養（８０体積％窒素、１０体積％二酸化炭素、１０体積％水素）にて起菌した。続いて増殖したコロニーを５ｍｇ／Ｌのヘミン（Ｓｉｇｍａ社製）及び１ｍｇ／ＬのビタミンＫ（富士フイルム和光純薬工業社製）を含むトッドへヴィットブロス（Ｔｏｄｄ Ｈｅｗｉｔｔ Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）〔ＴＨＢＨＭ〕４ｍＬに懸濁し、３７℃２４時間嫌気培養した。さらに、この培養液を２０ｍＬのＴＨＢＨＭに１％接種し、３７℃２４時間嫌気培養した。
上記各種細菌の凍結菌液を、馬脱繊血を含有するトッドへヴィットブロス（Ｔｏｄｄ Ｈｅｗｉｔｔ Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）寒天培地に白金耳にて植菌し、３７℃で７２時間嫌気培養（８０体積％窒素、１０体積％二酸化炭素、１０体積％水素）にて起菌した。続いて増殖したコロニーを５ｍｇ／Ｌのヘミン（Ｓｉｇｍａ社製）及び１ｍｇ／ＬのビタミンＫ（富士フイルム和光純薬工業社製）を含むトッドへヴィットブロス（Ｔｏｄｄ Ｈｅｗｉｔｔ Ｂｒｏｔｈ、Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）〔ＴＨＢＨＭ〕４ｍＬに懸濁し、３７℃２４時間嫌気培養した。さらに、この培養液を２０ｍＬのＴＨＢＨＭに１％接種し、３７℃２４時間嫌気培養した。
【0043】
上記培養後の菌液を１１，０００ｒｐｍ ５ｍｉｎで遠心分離し、沈殿物をトッドへヴィットブロス培地を用いて、上記（Ａ）成分が各々濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）１．０になるように再懸濁し、菌液を調製した。その後、（Ｂ）成分を１％添加したトッドへヴィットブロス培地４０ｍＬに、調製した菌液を１％添加して３７℃２４時間嫌気培養した。
得られた培養液を１１，０００ｒｐｍ ５ｍｉｎで遠心し、上清を回収した。上清のｐＨをｐＨ７に調整した後、０．２２μフィルターでろ過して菌体を取り除いた。ろ過後の培養液を小試験管に３ｍＬずつ分注した（ｎ＝２）。濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）１．０に調整したＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ菌液を３０μＬずつ添加し、３７℃で２４時間嫌気培養後に濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）を測定した。
得られた培養液を１１，０００ｒｐｍ ５ｍｉｎで遠心し、上清を回収した。上清のｐＨをｐＨ７に調整した後、０．２２μフィルターでろ過して菌体を取り除いた。ろ過後の培養液を小試験管に３ｍＬずつ分注した（ｎ＝２）。濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）１．０に調整したＰ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ菌液を３０μＬずつ添加し、３７℃で２４時間嫌気培養後に濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）を測定した。
【0044】
[濁度相対値（病原性細菌に対する生育抑制効果）]
評価サンプル（（Ｂ）成分、又は（Ａ）及び（Ｂ）成分）添加の濁度をａ、コントロール（（Ａ）成分なし、（Ｂ）成分の代わりに蒸留水添加）の濁度をｂとしたときの下記式における、コントロールに対する評価サンプルの濁度相対値Ｘを生育抑制効果の指標とした。Ｘが低いほど病原性細菌に対する生育抑制効果が高いことを示す。結果をｎ＝２の平均値で示す。
Ｘ＝（ａ／ｂ）×１００
評価サンプル（（Ｂ）成分、又は（Ａ）及び（Ｂ）成分）添加の濁度をａ、コントロール（（Ａ）成分なし、（Ｂ）成分の代わりに蒸留水添加）の濁度をｂとしたときの下記式における、コントロールに対する評価サンプルの濁度相対値Ｘを生育抑制効果の指標とした。Ｘが低いほど病原性細菌に対する生育抑制効果が高いことを示す。結果をｎ＝２の平均値で示す。
Ｘ＝（ａ／ｂ）×１００
【0045】
【表1】
【0046】
【表2】
【0047】
【表3】
【0048】
上記結果から明らかであるように、（Ａ）成分は、口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有する。一方、（Ｂ）ミルクオリゴ糖及びラクツロースから選ばれる１種以上は、それ自身は口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有していないものの、上記（Ａ）成分と併用することで、（Ａ）成分の有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を飛躍的に促進させる効果があり、（Ａ）成分と（Ｂ）成分とを併用することで、口腔内病原性細菌に対する顕著な生育抑制効果が得られた。
【0049】
より具体的に説明する。表１のコントロールと、表２，３の（Ｂ）成分が蒸留水（コントロール）の結果から明らかであるように、Ｓ．ｐｅｒｏｒｉｓ又はＳ．ｌａｃｔａｒｉｕｓは、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓに対する生育抑制効果を有する。
一方、表１のコントロールと、表１の（Ｂ）成分が３’－シアリルラクトース又はラクツロースの結果の結果から明らかであるように、（Ｂ）成分は、それ自身は口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有していないものの、表２，３の結果から明らかであるように、（Ｂ）成分をストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）が存在する口腔内に適用すること、又は（Ｂ）成分と口腔内以外の（Ａ）成分とを併用することで、口腔内のストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）もしくはストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）、又は配合した（Ａ）成分が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を飛躍的に促進させる効果が得られた。
一方、表１のコントロールと、表１の（Ｂ）成分が３’－シアリルラクトース又はラクツロースの結果の結果から明らかであるように、（Ｂ）成分は、それ自身は口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を有していないものの、表２，３の結果から明らかであるように、（Ｂ）成分をストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）又はストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）が存在する口腔内に適用すること、又は（Ｂ）成分と口腔内以外の（Ａ）成分とを併用することで、口腔内のストレプトコッカス ペロリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｒｏｒｉｓ）もしくはストレプトコッカス ラクタリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔａｒｉｕｓ）、又は配合した（Ａ）成分が有する口腔内病原性細菌に対する生育抑制効果を飛躍的に促進させる効果が得られた。
【0050】
３’－シアリルラクトースのトッドへヴィットブロス培地への添加量を以下の表４に示すように変更して評価を行った。上記１％の場合の結果を併記する。
【0051】
【表4】
【0052】
[ＩＩ]Ｓ．ｐｅｒｏｒｉｓの生育促進効果試験
下記方法で、Ｓ．ｐｅｒｏｒｉｓの生育促進効果を評価した。
評価サンプル（３’－シアリルラクトース又はラクツロース）又は蒸留水（コントロール）を添加したトッドへヴィットブロス培地２００μＬに、上記[Ｉ]記載のように濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）１．０になるように再懸濁したＳ．ｐｅｒｏｒｉｓ菌液を１％添加し、９６穴プレートを用いて３７℃で１８時間嫌気培養した。細菌の増殖量は、濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）で測定し、菌の生育度を評価した。表中の濃度はトッドへヴィットブロス培地中の濃度である。
評価サンプル添加の濁度を（Ｔｓ）、コントロール（蒸留水添加）の濁度を（Ｔｃ）としたときの下記式における、コントロールに対する評価サンプルの濁度相対値Ｙを生育促進効果の指標とした。すなわち、Ｙが１００より大きいと生育が促進されたことになる。
Ｙ＝Ｔｓ／Ｔｃ×１００
下記方法で、Ｓ．ｐｅｒｏｒｉｓの生育促進効果を評価した。
評価サンプル（３’－シアリルラクトース又はラクツロース）又は蒸留水（コントロール）を添加したトッドへヴィットブロス培地２００μＬに、上記[Ｉ]記載のように濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）１．０になるように再懸濁したＳ．ｐｅｒｏｒｉｓ菌液を１％添加し、９６穴プレートを用いて３７℃で１８時間嫌気培養した。細菌の増殖量は、濁度（Ｏ．Ｄ．５５０ｎｍ）で測定し、菌の生育度を評価した。表中の濃度はトッドへヴィットブロス培地中の濃度である。
評価サンプル添加の濁度を（Ｔｓ）、コントロール（蒸留水添加）の濁度を（Ｔｃ）としたときの下記式における、コントロールに対する評価サンプルの濁度相対値Ｙを生育促進効果の指標とした。すなわち、Ｙが１００より大きいと生育が促進されたことになる。
Ｙ＝Ｔｓ／Ｔｃ×１００
【0053】
【表5】
【0054】
【表6】
【0055】
以下に処方例を示す。なお、使用原料は上記と同様である。
（Ａ）成分については、各菌をトッドへヴィットブロス培地で３７℃２４時間嫌気培養した後、得られた培養液を１１，０００ｒｐｍ ５ｍｉｎで遠心分離した上清又は沈殿物を凍結乾燥した粉末を用いた。
［処方例１］チューインガム
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
キシリトール ４８．９
マルチトール ２０
ガムベース ２０
アラビアガム ９
香料 １
合計 １００％
（Ａ）成分については、各菌をトッドへヴィットブロス培地で３７℃２４時間嫌気培養した後、得られた培養液を１１，０００ｒｐｍ ５ｍｉｎで遠心分離した上清又は沈殿物を凍結乾燥した粉末を用いた。
［処方例１］チューインガム
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
キシリトール ４８．９
マルチトール ２０
ガムベース ２０
アラビアガム ９
香料 １
合計 １００％
【0056】
［処方例２］チューインガム（歯周病又は口臭の予防又は改善用）
（Ｂ）ラフィノース ０．１
キシリトール ４９．９
マルチトール ２０
ガムベース ２０
アラビアガム ９
香料 １
合計 １００％
（Ｂ）ラフィノース ０．１
キシリトール ４９．９
マルチトール ２０
ガムベース ２０
アラビアガム ９
香料 １
合計 １００％
【0057】
［処方例３］錠菓
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
ソルビトール ８０．９
キシリトール １０
ショ糖脂肪酸エステル ３
香料 ４．５
微粒二酸化ケイ素 ０．５
合計 １００．０％
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
ソルビトール ８０．９
キシリトール １０
ショ糖脂肪酸エステル ３
香料 ４．５
微粒二酸化ケイ素 ０．５
合計 １００．０％
【0058】
［処方例４］錠菓
（Ａ）S.peroris 培養沈殿物乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
ソルビトール ８０．９
キシリトール １０
ショ糖脂肪酸エステル ３
香料 ４．５
微粒二酸化ケイ素 ０．５
合計 １００．０％
（Ａ）S.peroris 培養沈殿物乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
ソルビトール ８０．９
キシリトール １０
ショ糖脂肪酸エステル ３
香料 ４．５
微粒二酸化ケイ素 ０．５
合計 １００．０％
【0059】
［処方例５］錠菓（歯周病又は口臭の予防又は改善用）
（Ｂ）３'-シアリルラクトース ０．１
ソルビトール ８１．９
キシリトール １０
ショ糖脂肪酸エステル ３
香料 ４．５
微粒二酸化ケイ素 ０．５
合計 １００．０％
（Ｂ）３'-シアリルラクトース ０．１
ソルビトール ８１．９
キシリトール １０
ショ糖脂肪酸エステル ３
香料 ４．５
微粒二酸化ケイ素 ０．５
合計 １００．０％
【0060】
［処方例６］グミ
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
砂糖 ４０
水飴 ３０
ブドウ糖液糖 １０
グリセリン ５
ゼラチン ５
香料 ０．２
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
砂糖 ４０
水飴 ３０
ブドウ糖液糖 １０
グリセリン ５
ゼラチン ５
香料 ０．２
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
【0061】
［処方例７］グミ（歯周病又は口臭の予防又は改善用）
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
砂糖 ４０
水飴 ３０
ブドウ糖液糖 １０
グリセリン ５
ゼラチン ５
香料 ０．２
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
砂糖 ４０
水飴 ３０
ブドウ糖液糖 １０
グリセリン ５
ゼラチン ５
香料 ０．２
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
【0062】
［処方例８］キャンディ
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３'－シアリルラクトース ０．１
砂糖 ５０
水飴 ３３
クエン酸 ２．０
香料 ０．２
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３'－シアリルラクトース ０．１
砂糖 ５０
水飴 ３３
クエン酸 ２．０
香料 ０．２
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
【0063】
［処方例９］キャンディ（歯周病又は口臭の予防又は改善用）
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
砂糖 ５０
水飴 ３３
クエン酸 ２
香料 ０．２
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
砂糖 ５０
水飴 ３３
クエン酸 ２
香料 ０．２
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
【0064】
［処方例１０］歯磨剤
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
無水ケイ酸 １０
ラウリル硫酸ナトリウム １
カルボキシメチルセルロースナトリウム １．５
サッカリンナトリウム ０．１
ソルビトール ２５
香料 １
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
無水ケイ酸 １０
ラウリル硫酸ナトリウム １
カルボキシメチルセルロースナトリウム １．５
サッカリンナトリウム ０．１
ソルビトール ２５
香料 １
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
【0065】
［処方例１１］歯磨剤
（Ａ）S.peroris 培養沈殿物乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
無水ケイ酸 １０
ラウリル硫酸ナトリウム １
カルボキシメチルセルロースナトリウム １．５
サッカリンナトリウム ０．１
ソルビトール ２５
香料 １
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ａ）S.peroris 培養沈殿物乾燥粉末 １
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
無水ケイ酸 １０
ラウリル硫酸ナトリウム １
カルボキシメチルセルロースナトリウム １．５
サッカリンナトリウム ０．１
ソルビトール ２５
香料 １
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
【0066】
［処方例１２］歯磨剤
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
無水ケイ酸 １０
ラウリル硫酸ナトリウム １
カルボキシメチルセルロースナトリウム １．５
サッカリンナトリウム ０．１
ソルビトール ２５
香料 １
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
無水ケイ酸 １０
ラウリル硫酸ナトリウム １
カルボキシメチルセルロースナトリウム １．５
サッカリンナトリウム ０．１
ソルビトール ２５
香料 １
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
【0067】
［処方例１３］洗口剤
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 ０．１
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
プロピレングリコール ５
グリセリン ５
クエン酸 ０．０３
クエン酸ナトリウム ０．２５
香料 ０．８
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ａ）S.peroris 培養上清乾燥粉末 ０．１
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
プロピレングリコール ５
グリセリン ５
クエン酸 ０．０３
クエン酸ナトリウム ０．２５
香料 ０．８
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
【0068】
［処方例１４］洗口剤
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
プロピレングリコール ５
グリセリン ５
クエン酸 ０．０３
クエン酸ナトリウム ０．２５
香料 ０．８
蒸留水 バランス
合計 １００．０％
（Ｂ）３’－シアリルラクトース ０．１
プロピレングリコール ５
グリセリン ５
クエン酸 ０．０３
クエン酸ナトリウム ０．２５
香料 ０．８
蒸留水 バランス
合計 １００．０％