特開 2023-169632 心不全予防用食品および心不全予防用医薬組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023169632

(43)【公開日】2023-11-30

(54)【発明の名称】心不全予防用食品および心不全予防用医薬組成物

(51)【国際特許分類】

   A23L 33/185 20160101AFI20231122BHJP

   A61K 38/56 20060101ALI20231122BHJP

   A61P 9/04 20060101ALI20231122BHJP

   A23L 33/105 20160101ALI20231122BHJP

【ＦＩ】

A23L33/185

A61K38/56

A61P9/04

A23L33/105

【審査請求】未請求

【請求項の数】2

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2022080867

(22)【出願日】2022-05-17

(71)【出願人】

【識別番号】504139662

【氏名又は名称】国立大学法人東海国立大学機構

(74)【代理人】

【識別番号】100167689

【弁理士】

【氏名又は名称】松本 征二

(72)【発明者】

【氏名】古川 希

【テーマコード（参考）】

4B018

4C084

【Ｆターム（参考）】

4B018MD20

4B018MD58

4B018ME04

4B018ME14

4C084AA02

4C084BA44

4C084CA15

4C084DC50

4C084MA52

4C084NA14

4C084ZA361

4C084ZA371

(57)【要約】      （修正有）

【課題】従来とは異なる機序で作用する物質を含む、心不全予防用食品および心不全予防用医薬組成物を提供する。
【解決手段】β－コングリシニンを有効成分として含む、心不全予防用食品または心不全予防用医薬組成物。
【選択図】図３

【特許請求の範囲】

【請求項1】

β－コングリシニンを有効成分として含む、心不全予防用食品。

【請求項2】

β－コングリシニンを有効成分として含む、心不全予防用医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願の開示は、心不全予防用食品および心不全予防用医薬組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

心臓は、全身に血液を送り出すポンプとして機能している。この血液を送り出す機能が低下した状態が心不全である。心不全は、送り出される血液が不足するため、全身に様々な症状を引き起こす。症状の具体例としては、動悸や息切れ、呼吸困難、むくみ等が知られている。

【0003】

心不全を発症した場合は、外科的治療または薬物治療が行われるが、発症を予防することも重要である。特許文献１には、Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｐｒｏ又はＩｌｅ Ｐｒｏ Ｐｒｏを有効成分として投与することで、アンジオテンシン変換酵素阻害によっては抑制されない心臓壁肥厚を抑制する、心不全の予防方法が記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特許第５２９２６３２号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

上記特許文献１は、特定の構造を有するトリペプチドを用いることを特徴としている。しかしながら、機能性食品や医薬組成物の分野では、奏する効果について個人差があることから、同じ用途（疾患）であっても、異なる機序で作用する物質を探求することが望まれている。

【0006】

本出願における開示は、上記問題点を解決するためになされたものである。本発明者らは鋭意研究を行ったところ、β－コングリシニンが心不全の進展抑制効果を有することを新たに見出した。

【0007】

すなわち、本出願の開示の目的は、β－コングリシニンを有効成分として含む、心不全予防用食品および心不全予防用医薬組成物を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本出願の開示は、以下に示す、心不全予防用食品および心不全予防用医薬組成物に関する。

【0009】

（１）β－コングリシニンを有効成分として含む、心不全予防用食品。
（２）β－コングリシニンを有効成分として含む、心不全予防用医薬組成物。

【発明の効果】

【0010】

本出願で開示する心不全予防用食品および心不全予防用医薬組成物を用いることで、心不全が進展することを抑制できる。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】図１は、心不全の代償機構である求心性肥大の概略を示す図である。

【図2】図２は、実施例で用いた心不全マウス作製の概略を示す図である。

【図3】図３は、実施例１および比較例１～３のＥＦ、ＦＳ、ＬＶ ＭＡＳＳ、ＬＶＥＤｄの変化を示すグラフである。

【図4】図４は、実施例１および比較例１～３のＨＷ／ＴＬを示すグラフである。

【図5】図５は、実施例１および比較例１～３のマッソン・トリクローム染色および線維化定量グラフである。

【図6】図６は、実施例２および比較例４～５のＥＦ、ＦＳ、ＬＶ ＭＡＳＳ、ＬＶＥＤｄの変化を示すグラフである。

【図7】図７は、実施例２および比較例４～５のＨＷ／ＴＬを示すグラフ、実施例２および比較例４～５のマッソン・トリクローム染色および線維化定量グラフである。

【発明を実施するための形態】

【0012】

以下に、本出願で開示する心不全予防用食品および心不全予防用医薬組成物について詳しく説明する。

【0013】

（心不全予防用食品の実施形態）
先ず、心不全予防用食品の実施形態について説明する。心不全予防用食品は、β－コングリシニンを有効成分として含むことを特徴としている。β－コングリシニンは、大豆に含まれるタンパク質で血中脂質低下等の効果があることが知られている（例えば、特開２０１０－９４０３５号公報参照）。しかしながら、β－コングリシニンが、心不全の予防効果を奏することは、本発明者らが新たに見出した作用機序である。

【0014】

上記のとおり、心臓の血液を送り出す機能が低下した状態のことを心不全という。ところで、心臓の血液を送り出す機能が低下する疾患として、心筋梗塞が知られている。心筋梗塞は、心筋（心臓を構成する筋肉）に血流を送る“冠動脈”の閉塞により血流が途絶えることで心筋が酸素不足の状態に陥り、その結果、心筋細胞が壊死した領域（梗塞領域）が動かなくなる疾患である。ところで、心臓に負荷がかかると、代償機構（ストレスに対応しようと心臓が変化して保護的に働こうとする力。以下、「リモデリング」と記載する。）が働くことが知られている。心不全も心筋梗塞もリモデリングが働くが、リモデリングの内容が異なる。より具体的には、心筋梗塞の場合、梗塞領域は動かなくなるため、代償機構として血液拍出のために全体的に心臓の容量を大きくしようとする（前負荷、血液が心臓に戻ってきた時の負荷）。そのため、遠心性肥大が起こる。一方、心不全は、血液を送り出すのに負荷がかかる（後負荷、血液を送り出そうとするときに負荷がかかる）。そのため、心不全の場合は心室の壁が厚くなる方向に代償機構が働くことから、求心性肥大が起こる（図１参照）。後述する実施例に記載のとおり、本出願では、β－コングリシニンの投与により、求心性肥大が起きることを抑制できるという効果を奏する。なお、本明細書において「心不全予防」とは、心機能の低下や心肥大を抑制することを意味する。したがって、「心不全予防」には、心不全を発症していない患者が将来的に心不全を発症するリスクを軽減することに加え、軽度の心不全を既に発症している患者が重篤化することを抑制（換言すると、心不全の治療）の概念が含まれる。

【0015】

心不全予防用食品は、β－コングリシニンを有効成分として含めば、その他の成分は特に制限はない。β－コングリシニンは、市販品を用いてもよいし、上記特開２０１０－９４０３５号公報等に記載の方法で製造したものを用いてもよい。心不全予防用食品は、心不全の予防といった効能を有する特定保健用食品等の機能性食品として提供することができる。このような効能を得るための摂取量は、食品、例えば機能性食品が、日常的、連続的又は断続的に長期間摂取することを鑑みると、ヒトの場合、限定されるものではないが、１日あたり、有効成分であるβ－コングリシニンの量が、１～２０ｇ程度摂取できるように、食品中に含まれることが好ましい。心不全予防用食品の摂取期間は特に制限はないが、予防との観点では、長期間摂取することが好ましい。限定されるものではないが、例えば、１週間以上、２週間以上、３週間以上、１カ月以上、３か月以上、６カ月以上、１年以上等が挙げられる。

【0016】

心不全予防用食品は、固形物、ゲル状物、液状物の何れの形態とすることができる。例えば、乳酸菌飲料等の発酵乳製品、各種加工飲食品、乾燥粉末、錠剤、カプセル剤、顆粒剤等が挙げられ、更には各種飲料、ヨーグルト、流動食、ゼリー、キャンディ、レトルト食品、錠菓、クッキー、カステラ、パン、ビスケット、チョコレート等とすることができる。また、心不全予防用食品は、糖類、タンパク質、脂質、ビタミン、ミネラル、フレーバー、炭水化物、甘味料、香料、色素、テクスチュア改善剤等又はこれらの混合物等の添加物を添加し、栄養的バランスや風味等を改善してもよい。

【0017】

（心不全予防用医薬組成物の実施形態）
次に、心不全予防用医薬組成物（以下、単に「医薬組成物」と記載することがある。）の実施形態について説明する。医薬組成物は、β－コングリシニンを有効成分として含むことを特徴としている。β－コングリシニンの作用機序は、心不全予防用食品と同じである。

【0018】

医薬組成物は、局所投与または全身投与することができる。投与形態は特に限定されず、経口投与および非経口投与の何れでもよい。また、医薬組成物は、有効成分であるβ－コングリシニンの他に、投与形態に応じて、薬理学的に許容しうる担体を含ませることができる。担体としては、例えば、賦形剤、崩壊剤若しくは崩壊補助剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、色素、希釈剤、基剤、溶解剤若しくは溶解補助剤、等張化剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、噴射剤、および粘着剤等が挙げられる。

【0019】

医薬組成物の投与量は、患者の体重、年齢等に応じて変動するものであり、特に限定するものではない。投与量は、医師が適宜設定すればよい。

【0020】

以下に実施例を掲げ、本出願で開示する実施形態を具体的に説明するが、この実施例は単に実施形態の説明のためのものである。本出願で開示する発明の範囲を限定したり、あるいは制限することを表すものではない。

【実施例0021】

［心不全マウスの作製］
心不全マウスは、大動脈縮窄術（Ｔｒａｎｓｖｅｒｓｅ－ａｏｒｔｉｃ ｃｏｎｓｔｒｉｃｔｉｏｎ：ＴＡＣ）により作製した。図２を参照しながら、より具体的に説明する。９週齢のオスの野生型マウス（Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒＳｌｃ 日本エスエルシー株式会社より購入）をイソフルランで麻酔し、呼吸が浅くなったところで挿管した。挿管が出来たか否かは腹式呼吸とは別に、麻酔装置の動きに合わせた胸郭の動きを見て確認した。確認後、マスキングテープ等でマウスが動かないように両腕・両脚を固定し、胸部の皮膚を剥がし、その後皮下の組織を剥がした。周りの筋肉を少し切り、胸骨ぎりぎりのところで第２肋骨の上側～第３肋間の下側まで切断した。そこから、せっし（ピンセット）で胸部内が見えるように組織を押し広げ、胸腺の右葉と左葉を押し広げるとその下に大動脈弓がみえてくる。ここまで丁寧に脂肪組織・胸腺を剥離した。大動脈弓が見えたら、曲がりピンセットを大動脈弓の裏にかけた。大動脈弓にピンセットをかけたまま、７－０縫合糸を通した別のピンセットから糸を曲がりピンセットでつかみ、大動脈弓に通した。２７Ｇ針を横行大動脈の上に来るようにマウスと垂直方向にセットし、二回ほど結び（図２の矢印部分）、余分な糸を切った後閉胸作業を行った。筋肉を６－０縫合糸で縫って、次に皮膚を同様に６－０縫合糸で縫った。そして挿管を外し、マウスの呼吸が戻るか確認した。

【0022】

上記ＴＡＣにより作製したモデルマウスは、横行大動脈を縛ることで全身への血流が抑えられるが、血流を完全に止めないことから心筋の壊死・梗塞領域は生じず、求心性肥大を生じ、心不全の症状を忠実に再現できる。したがって、経口または非経口投与されたβ－コングリシニンは血液により横行大動脈を縛った先の心臓にも到達できるので、心不全に対する効果（心機能低下や心肥大の抑制）を正確に確認できる。このとき組織学的には、著明な心筋細胞肥大と心臓間質の線維化を伴う。なお、ＴＡＣの詳細は、“Ｋｏｉｔａｂａｓｈｉ Ｎ ｅｔ ａｌ：Ｐｉｖｏｔａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅ ＴＧＦ－β ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ｍｕｒｉｎｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｏｖｅｒｌｏａｄ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．２０１１ Ｊｕｎ；１２１（６）：２３０１－１２． ｄｏｉ：１０．１１７２／ＪＣＩ４４８２４．（以下、非特許文献１と記載することがある。）”に記載されている。非特許文献１に記載の内容は、参照により本明細書に含まれる。

【0023】

［餌および投与方法］
（１）β－コングリシニン配合餌
餌の全質量に対して、β－コングリシニンが約２０質量％配合されている固形餌を準備した。
（２）コントロール用餌
餌の全質量に対して、乳酸菌不使用Ｍｉｎｅｒａｌ Ａｃｉｄカゼインが約２０質量％配合されている固形餌を準備した。
なお、上記（１）および（２）に記載の餌は、β－コングリシニンおよびカゼインが上記配合割合となるように、リサーチダイエット社に作製依頼し入手した。
マウスは飼育ゲージで飼育し、餌は、一日当たり、マウス１匹に対し約４ｇを与え自由摂食させた。

【0024】

［腹腔投与試薬および投与方法］
β－コングリシニン（不二たん白質研究振興財団から入手）を生理食塩水に溶解し、１００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの割合で毎日腹腔に投与した。

【0025】

［マウスの心エコー］
心機能を経時的に計測するために、心エコー検査を実施した。麻酔薬は心機能を抑制するため無麻酔で行った。
マウスに餌を与えた場合は、餌の摂食開始前、摂食開始後１週間目、２週間目に心エコーを測定すると共に、２週間目にＴＡＣ手術を実施した。術後、１週間目、２週間目、３週間目に心エコーを測定することで、心肥大の程度や心筋重量、および心機能について評価を行った。
マウスにβ－コングリシニンを腹腔投与した場合は、ＴＡＣ手術後３日目より投与を開始した。ＴＡＣのみの群ではコントロールとして生理食塩水を投与した。ＴＡＣ手術前、および手術後１週間目、２週間目に心エコーを測定することで心肥大の程度や心筋重量、および心機能について評価を行った。

【0026】

計測項目は、以下のとおりである。何れの項目も、心肥大および心機能を評価する公知の指標である。
・左室駆出率（Ｅｊｅｃｔｉｏｎ Ｆｒａｃｔｉｏｎ：ＥＦ）、
・左室内径短縮率（Ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ ｓｈｏｒｔｅｎｉｎｇ：ＦＳ）、
・左室心筋重量（ＬＶ ＭＡＳＳ）、
・Ｍ－ｍｏｄｅを用いて左室拡張末期径（ＬＶＥＤｄ）を計測、
・心重量計測（ＨＷ／ＴＬ）：ＴＡＣ手術３週間後にマウスをト殺して、心重量を計測し、脛骨長で補正することで心肥大の程度を評価。なお、体重で補正するとバラつきが大きくなるため、脛骨長で補正を行った。

【0027】

［マッソン・トリクローム染色による線維化定量］
上記非特許文献１のｐ２３１１左欄の“Ｔｉｓｓｕｅ ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ”に記載の手順にしたがって、ト殺したマウスの心筋組織のパラフィン切片についてマッソン・トリクローム染色し、線維化定量を行った。

【0028】

＜実施例１および比較例１～３＞
・β－コングリシニン配合餌を用いＴＡＣ手術を実施した群を実施例１（ＴＡＣ＋β－コングリシニン）、
・コントロール用餌を用いＴＡＣ手術を実施した群を比較例１（ＴＡＣ＋カゼイン）、
・β－コングリシニン配合餌を用いＴＡＣ手術を実施しなかった群を比較例２（Ｃｏｎｔｒｏｌ＋β－コングリシニン）、
・コントロール用餌を用いＴＡＣ手術を実施しなかった群を比較例３（Ｃｏｎｔｒｏｌ＋カゼイン）、
として、実験を行った。

【0029】

図３は、実施例１および比較例１～３のＥＦ、ＦＳ、ＬＶ ＭＡＳＳ、ＬＶＥＤｄの変化を示すグラフである。図４は、実施例１および比較例１～３のＨＷ／ＴＬを示すグラフである。図５は、実施例１および比較例１～３のマッソン・トリクローム染色および線維化定量グラフである。

【0030】

図３および図４から明らかなように、β－コングリシニンを有効成分として含む餌を摂食させることで、心不全手術による心機能低下に対し抑制傾向が見られた。また、図５から明らかなように、β－コングリシニンを有効成分として含む餌を摂食させることで、線維化に対し抑制傾向が見られた。

【0031】

＜実施例２および比較例４～５＞
・β－コングリシニンを腹腔投与しＴＡＣ手術を実施した群を実施例２（ＴＡＣ＋β－コングリシニン）、
・β－コングリシニンを腹腔投与せずにＴＡＣ手術を実施した群を比較例４（ＴＡＣ）、
・β－コングリシニンを腹腔投与せずに、ＴＡＣ手術も実施しなかった群を比較例５（Ｃｏｎｔｒｏｌ）、
として、実験を行った。

【0032】

図６は、実施例２および比較例４～５のＥＦ、ＦＳ、ＬＶ ＭＡＳＳ、ＬＶＥＤｄの変化を示すグラフである。図７は、実施例２および比較例４～５のＨＷ／ＴＬを示すグラフ、実施例２および比較例４～５のマッソン・トリクローム染色および線維化定量グラフである。

【0033】

図６から明らかなように、β－コングリシニンを腹腔に投与することで、心不全手術による心機能低下・悪化に対し抑制傾向が見られた。また、図７から明らかなように、β－コングリシニンを腹腔に投与することで、心不全による心肥大および線維化に対し抑制傾向が見られた。

【0034】

以上の結果より、β－コングリシニンを経口または非経口投与することで、心機能の低下や心肥大を抑制できることを確認した。

【産業上の利用可能性】

【0035】

本出願で開示する食品および医薬組成物により、心不全を予防できる。したがって、製薬産業や食品産業等に有用である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】