特開 2023-177240 ３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオン化合物、およびその調製方法と応用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023177240

(43)【公開日】2023-12-13

(54)【発明の名称】３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオン化合物、およびその調製方法と応用

(51)【国際特許分類】

   C07D 403/14 20060101AFI20231206BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20231206BHJP

   A61K 31/53 20060101ALI20231206BHJP

【ＦＩ】

C07D403/14 CSP

A61P31/14

A61K31/53

【審査請求】有

【請求項の数】5

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2023055565

(22)【出願日】2023-03-30

(31)【優先権主張番号】202210618258.2

(32)【優先日】2022-06-01

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(71)【出願人】

【識別番号】522281350

【氏名又は名称】シャンシー・パンロン・ファーマシューティカル・カンパニー・リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＳＨＡＡＮＸＩ ＰＡＮＬＯＮＧ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＣＯ．， ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】ＮＯ． ２８０１， ＢＡＬＩＵ ２ＮＤ ＲＯＡＤ， ＭＯＤＥＲＮ ＴＥＸＴＩＬＥ ＩＮＤＵＳＴＲＩＡＬ ＰＡＲＫ， ＢＡＱＩＡＯ ＤＩＳＴＲＩＣＴ， ＸＩ’ＡＮ， ７１００２５ ＳＨＡＡＮＸＩ， ＣＨＩＮＡ

(74)【代理人】

【識別番号】110001818

【氏名又は名称】弁理士法人Ｒ＆Ｃ

(72)【発明者】

【氏名】チェンユアン・リャン

(72)【発明者】

【氏名】リャン・シン

(72)【発明者】

【氏名】レイ・ティエン

(72)【発明者】

【氏名】ジンイー・リー

(72)【発明者】

【氏名】シャオリン・シエ

(72)【発明者】

【氏名】ドゥジュー・ジャン

(72)【発明者】

【氏名】カンシオン・ウー

(72)【発明者】

【氏名】シャオジュン・ジャン

(72)【発明者】

【氏名】シウディン・ヤン

(72)【発明者】

【氏名】スンディエン・リウ

(72)【発明者】

【氏名】イーティン・リウ

(72)【発明者】

【氏名】ジャオ・マー

(72)【発明者】

【氏名】シュイファ・ジョウ

【テーマコード（参考）】

4C063

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C063AA03

4C063BB09

4C063CC43

4C063DD22

4C063EE01

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086BC64

4C086GA07

4C086GA13

4C086GA14

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZB33

(57)【要約】      （修正有）

【課題】抗コロナウイルス薬を提供する。
【解決手段】式Ｉの化合物、その薬学的に許容される塩、またはその互変異性体が開示される。

（式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は、水素、メチル基など；Ｒ_５は水素またはハロゲンであり；かつ、Ｒ_６は水素、Ｃ１～Ｃ４アルカンまたはＣ１～Ｃ４シクロアルカンである。）
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉの化合物、その薬学的に許容される塩、またはその互変異性体。

【化1】

（式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は、水素、メチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、メトキシ基、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ハロゲン、フェニルおよび芳香族複素環からなる群から独立して選択され；Ｒ_５は水素またはハロゲンであり；かつ、Ｒ_６は水素、Ｃ１～Ｃ４アルカンまたはＣ１～Ｃ４シクロアルカンである。）

【請求項2】

前記化合物が、

【化2】

からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

前記薬学的に許容される塩が、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、グルタミン酸、およびアスパラギン酸からなる群から選択されるうちの１つを含む、請求項１に記載の化合物。

【請求項4】

請求項１に記載の化合物を含む、抗コロナウイルス医薬製剤。

【請求項5】

前記コロナウイルスが、新型コロナウイルスＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、請求項４に記載の抗コロナウイルス医薬製剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本願は、２０２２年６月１日に出願された中国特許出願第２０２２１０６１８２５８.２号の優先権を主張し、この出願は、本明細書に完全に記載されているかのように、あらゆる目的のために参照により組み込まれる。

【0002】

本発明は、医薬化学の技術分野に属し、特に３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオン化合物、およびその調製方法と応用に関する。

【背景技術】

【0003】

ＣＯＶＩＤ－１９（新型コロナウイルス肺炎）は、感染力が強く、病原性も高いが、その変異株であるデルタ株とオミクロン株はより強い感染力を有する。絶え間なく生じる変異株は、世界の疫病状況をより複雑にしている。新型コロナウイルスは、人間の健康、社会の安定、および経済の発展に深刻な脅威をもたらしている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0004】

３ＣＬ^ｐｒｏ（３Ｃ様プロテアーゼ、主要プロテアーゼＭ^ｐｒｏとしても知られている）は、コロナウイルスの重要な非構造タンパク質として、マイクロＲＮＡウイルスの３Ｃプロテアーゼと同様の切断部位特異性を有し、子孫ウイルスの複製と転写に極めて重要な役割を果たす。３ＣＬ^ｐｒｏは３つのドメインを有する。ドメインＩおよびドメインＩＩは主にβシート構造から構成され、ドメインＩＩＩは主にαヘリックス構造から構成される。活性部位は、ドメインＩとＩＩとの間に形成される溝に位置している。ドメインＩＩＩは二量体形成に関与している。ドメインＩＩＩと比較して、異なるコロナウイルスのドメインＩとドメインＩＩの配列保存性は高く、これは活性部位が最初の２つのドメインに位置していることと一致する。３ＣＬ^ｐｒｏは、保存的システインおよびヒスチジンを触媒アミノ酸として用い、システインが求核攻撃基でヒスチジンが塩基性基である触媒二重鎖、を形成している。コロナウイルス３ＣＬ^ｐｒｏは、ウイルス複製に必須であり、高度に保存されているため、理想的な抗コロナウイルス薬の標的となる。

【課題を解決するための手段】

【0005】

（発明の概要）
１つの実施形態において、本願は、式Ｉの化合物、その薬学的に許容される塩、そのジアステレオマーまたはその互変異性体を開示する。

【0006】

【化1】

【0007】

Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は、水素、メチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、メトキシ基、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ハロゲン、フェニルおよび芳香族複素環からなる群から独立して選択され；Ｒ_５は水素またはハロゲンであり；かつ、Ｒ_６は水素、Ｃ１～Ｃ４アルカンまたはＣ１～Ｃ４シクロアルカンである。

【0008】

別の実施形態では、前記化合物は、

【化2】

からなる群から選択される。

【0009】

別の実施形態では、前記薬学的に許容される塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、グルタミン酸、およびアスパラギン酸からなる群から選択されるうちの１つを含む。

【0010】

別の実施形態において、本願は、本願の化合物を含む抗コロナウイルス医薬製剤、を開示する。

【0011】

別の実施形態において、前記コロナウイルスは、新型コロナウイルスＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

【0012】

従来技術と比較して、本発明は、以下の有益な効果を有する。

【0013】

３ＣＬ^ｐｒｏ阻害活性試験の結果により、本発明の化合物が３ＣＬ^ｐｒｏ阻害作用に強い効果を有することが、示される。具体的には、３ＣＬ^ｐｒｏに対する化合物１、化合物７、化合物１２、化合物１５、化合物１６、化合物１７、化合物１８、化合物２２および化合物２３のＩＣ_５０値はいずれも２００ｎＭ未満であり、なかでも新型コロナウイルス薬Ｓ－２１６７２２およびＰＦ－０７３２１３３２と比較して、化合物１が最も優れた阻害活性（ＩＣ_５０＜１００ｎＭ）を有し；３ＣＬ^ｐｒｏ細胞毒性試験の結果、Ａ５４９細胞、ＨｅｐＧ２細胞、およびＨＥＫ２９３細胞に対する化合物１の阻害率は、どの濃度でもＰＦ－０７３２１３３２およびＳ－２１７６２２の阻害率よりも低く、この２つの陽性薬剤より毒性が低く、抗コロナウイルス薬として開発および応用が可能である。

【0014】

本発明は、３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオン化合物の調製方法を提供する。当該方法は、反応装置の要求が低く環境汚染が少ない比較的温和な条件で、実行され得、同時に、原子効率（ａｔｏｍ ｅｃｏｎｏｍｙ）が高く、工業生産に適している。

【発明を実施するための形態】

【0015】

（詳細な説明）
当業者が本発明の解決策をよりよく理解できるようにするために、本発明の実施形態における技術的解決策を、本発明の実施形態における添付図面を参照して、以下に明確にかつ完全に説明する。明らかに、記載された実施形態は、本発明の一部の実施形態に過ぎず、実施形態の全てではない。本発明の実施形態に基づき、創造的な努力なしに当業者によって得られる他のすべての実施形態は、本発明の保護範囲に入る。

【0016】

なお、本発明の説明および特許請求の範囲並びに上記図面における「第１」、「第２」などの用語は、類似のものを区別するために用いられ、必ずしも特定の順序または配列を説明するために用いられないことに留意されたい。このように使用されるデータは、本明細書に記載される本発明の実施形態が本明細書に図示または記載される以外の順序で実施され得るように、適切な状況下で交換され得ることを理解されたい。さらに、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、ならびにそれらの任意の変形は、非排他的な包含をカバーすることを意図しており、例えば、一連のステップまたはユニットを含むプロセス、方法、システム、生成物またはデバイスは、必ずしも明示的に列挙したものに限られない。むしろ、それらのステップまたはユニットには、明示的に列挙されていない、またはこれらのプロセス、方法、生成物もしくはデバイス固有の、他のステップもしくはユニットが含まれ得る。

【0017】

以下、添付の図面と併せて、本発明をさらに詳細に説明する。

【0018】

本願は、式Ｉの化合物、その薬学的に許容される塩、そのジアステレオマー、またはその互変異性体を開示する。

【0019】

【化3】

【0020】

Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は、水素、メチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、メトキシ基、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ハロゲン、フェニルおよび芳香族複素環からなる群から独立して選択され；Ｒ_５は水素またはハロゲンであり；かつ、Ｒ_６は水素、Ｃ１～Ｃ４アルカンまたはＣ１～Ｃ４シクロアルカンである。

【0021】

用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素を意味する。

【0022】

前記薬学的に許容される塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、レモン酸（ｌｅｍｏｎ ａｃｉｄ）、リンゴ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、グルタミン酸、またはアスパラギン酸の塩であり得る。

【0023】

本発明の３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオン化合物の調製方法は、以下の通りである。

【0024】

（１）３－ｔｅｒｔ－ブチル－６－（エチルチオ）－１，３，５－トリアジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（出発物質）をブロモベンジル化合物でアルキル化して、化合物ａ１～化合物ａ２４を得る。

【0025】

【化4】

【0026】

３－ｔｅｒｔ－ブチル－６－（エチルチオ）－１，３，５－トリアジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオンとブロモベンジル化合物とのモル比は、１：１である。化合物ａ１～化合物ａ２４の合成プロセスで使用する溶媒は、アセトニトリルである。反応は、炭酸カリウムを用いて加熱還流条件下で行う。ブロモベンジル化合物は、以下の通りである。

【0027】

【0028】

（２）ステップ（１）で得られた化合物ａ１～化合物ａ２４からｔｅｒｔ－ブチル基を除去して、対応する化合物ｂ１～化合物ｂ２４を得た後、３－ブロモプロピンと反応させて、対応する化合物ｃ１～化合物ｃ２４を得る。

【0029】

本願の化合物の調製方法は、以下の通りである。

【0030】

【化5】

【0031】

化合物ｂ１～化合物ｂ２４の合成プロセスで使用する溶媒はトリフルオロ酢酸、化合物ｂ１～化合物ｂ２４と３－ブロモプロピンとのモル比は１：１．２、化合物ｃ１～化合物ｃ２４の合成プロセスで使用する溶媒は、アセトニトリルであり、反応は加熱還流条件で炭酸カリウムと共に行う。

【0032】

（３）ステップ（２）で得られた化合物ｃ１～化合物ｃ２４は、６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－アミンまたは２－メチル－５－アミノ－２Ｈ－インダゾールと反応し、対応する化合物ｄ１～化合物ｄ２４を得る。

【0033】

【化6】

【0034】

化合物ｃ１～化合物ｃ２４と、６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－アミンまたは２－メチル－５－アミノ－２Ｈ－インダゾールとのモル比は１：１．３である。化合物ｃ１～化合物ｃ２４を調製するプロセスで使用する触媒は酢酸であり、使用する溶媒はｔｅｒｔ－ブタノールである。

【0035】

（４）ステップ（３）で得られた化合物ｄ１～化合物ｄ１５をアジドトリメチルシランと反応させて、３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオン１～１５（式Ｉにおいて、Ｒ_６はＨである。）を得る；あるいは、
ステップ（３）で調製した化合物ｄ１６～ｄ２０をアジドトリメチルシランと反応させて対応する化合物ｅ１６～化合物ｅ２０を得、これをさらにトリフルオロメタンスルホン酸メチルまたはトリフルオロメタンスルホン酸エチルと反応させて３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオン１６～２０（式Ｉにおいて、Ｒ_６はＣ１～Ｃ２アルカンである）を得る；あるいは、
ステップ（３）で得られた化合物ｄ２１～化合物ｄ２４をアジドアルカン化合物と反応させて、３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオン２１～２４（式Ｉにおいて、Ｒ_６は、Ｃ３～Ｃ４アルカンまたはシクロアルカンである）を得る。

【0036】

【化7】

【0037】

化合物ｄ１～化合物ｄ２０とアジドトリメチルシランとのモル比は１：１．５であり、トリフルオロメタンスルホン酸メチルまたはトリフルオロメタンスルホン酸エチルと化合物ｅ１６～化合物ｅ２０とのモル比は１：１．２であり、化合物ｄ２１～化合物ｄ２４とアジドアルカン化合物とのモル比は１：１．２である。化合物１～化合物１５の合成プロセスで使用する溶媒は、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドおよびメタノールであり、使用する触媒はヨウ化第一銅である。化合物１６～化合物２０の合成プロセスで使用する溶媒は１，４－ジオキサンであり、使用する触媒はビス－ジベンジリデンアセトンパラジウム、２－（ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィン）－３，６－ジメトキシ－２’－４’－６’トリ－１－プロピル－１，１’－ビスフェノールおよびリン酸カリウムである。化合物２１～化合物２４の合成に用いる溶媒は、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフランおよび水であり、用いる触媒は、硫酸銅五水和物およびアスコルビン酸ナトリウムである。

【実施例0038】

上記化合物の合成例を以下に示す。

【0039】

１．化合物１～化合物２４の調製

【0040】

実施例１
化合物１：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（２，４，５－トリフルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２,４－ジオンの調製

【0041】

（１）化合物ａ１の調製

【化8】

【0042】

３－ｔｅｒｔ－ブチル－６－（エチルチオ）－１，３，５－トリアジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１１４．７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、２，４，５－トリアジンフルオロベンジルブロミド（１１２．５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（８２．９ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を反応器に入れ、アセトニトリル１０ｍＬに溶解し、加熱還流し、時間撹拌し、ＴＬＣでモニターした。反応終了後、反応混合物を減圧下で濃縮し、溶媒を除去した。得られた固体残渣を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機相を回収し、カラムクロマトグラフィー（移動相として石油エーテル：酢酸エチル（Ｖ：Ｖ）＝３：１）で分離精製し、乾燥して１６８．９ｍｇの化合物ａ１（収率９０．４７％）を得た。^１ＨＮＭＲスペクトルで化合物ａ１の構造を確認した。

【0043】

（２）化合物ｃ１の調製

【化9】

【0044】

ステップ１：化合物ｂ１の合成
得られた化合物ａ１（３７３．４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を反応器に入れ、５ｍＬのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を加え、室温で一晩撹拌した後、トルエンと共沸濃縮して溶媒を除去し、乾燥して２９８．６ｍｇの化合物ｂ１（収率９４．１０％）を得た。

【0045】

ステップ２：化合物ｃ１の合成
化合物ｂ１(３１７．３ｍｇ、１ｍｍｏｌ)、３－ブロモプロピン（０．１ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１６５．９ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を反応器に入れ、１０ｍＬのアセトニトリルに溶解し、加熱還流し、撹拌した。反応を５時間行い、ＴＬＣでモニターをした。反応終了後、得られた反応溶液を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、酢酸エチルで抽出し、有機相を回収し、カラムクロマトグラフィー（移動相として石油エーテル：酢酸エチル（Ｖ：Ｖ）＝１：１）により精製した。乾燥後、２７９．９ｍｇの化合物ｃ１（収率７８．７８％）を得た。^１ＨＮＭＲスペクトルで化合物ｃ１の構造を確認した。

【0046】

（３）化合物ｄ１の調製

【化10】

【0047】

化合物ｃ１（１７７．７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）と６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－アミン（１１８．１ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）と酢酸（５７０μＬ、１０ｍｍｏｌ）を反応器に入れ、５ｍＬのｔｅｒｔ－ブタノールを加え、反応物を１００℃で４時間撹拌し、ＴＬＣでモニターした。反応終了後、反応混合物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（移動相としてシクロヘキサン：酢酸エチル（Ｖ：Ｖ）＝１０：１）で分離精製し、乾燥して１２５．６ｍｇの化合物ｄ１（収率５２．９０％）を得た。^１ＨＮＭＲスペクトルで化合物ｄ１の構造を確認した。

【0048】

（４）化合物１の調製

【化11】

【0049】

化合物ｄ１（２．４ｇ、５ｍｍｏｌ）、アジドトリメチルシラン（８６４．１ｍｇ、７．５ｍｍｏｌ）およびヨウ化第一銅（４７．６ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド９０ｍＬとメタノール１０ｍＬとの混合物と共に、反応器に入れ、反応物を一晩加熱撹拌し、ＴＬＣでモニターした。反応終了後、室温まで冷却した。得られた反応液を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、酢酸エチルで抽出し、有機相を回収し、カラムクロマトグラフィー（移動相としてジクロロメタン：メタノール（Ｖ：Ｖ）＝１２：１）で分離精製し、乾燥させて、９９５．３ｍｇの化合物１（収率３８．４４％）を得た。

【0050】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.88-4.53 (m, 1H), 10.99 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.83-7.50 (m, 4H), 7.12 (s, 1H), 5.23 (d, J = 54.0 Hz, 2H), 4.99 (s, 2H), 4.16 (d, J = 31.9 Hz, 3H)。

【0051】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 154.87, 153.65, 151.31, 150.18, 148.58, 146.61, 145.89, 139.91, 137.12, 132.97, 127.63, 126.37, 124.56, 122.26, 121.66, 117.32, 111.72, 106.19, 55.38, 37.21, 31.15。

【0052】

実施例２
化合物２：（Ｅ）－３－（（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－ベンジル－６－（（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５）－イル）イミノ）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0053】

【化12】

【0054】

化合物２を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率４２．２３％）。

【0055】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.91-14.49 (m, 1H), 11.02 (s, 1H), 8.84 (s, 2H), 8.05 - 7.92 (m, 2H), 7.86-7.51(m, 4H), 7.10 (s, 1H), 5.25 (d, J = 53.2 Hz, 2H), 5.12 (s, 2H), 4.11 (d, J = 31.6 Hz, 3H)。

【0056】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 147.66, 146.32, 143.23, 140.09, 138.21, 136.11, 135.78, 129.85, 127.56, 122.56, 122.12, 112.25, 111.12, 107.56, 107.45, 106.01, 105.56, 35.12, 34.07。

【0057】

実施例３
化合物３：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２-メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（４－メチルベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0058】

【化13】

【0059】

化合物３を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率４２．７５％）。

【0060】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.85-14.39 (m, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.12-7.83 (m, 2H), 7.66-7.45(m, 4H), 7.05 (s, 1H), 5.11 (d, J = 53.9 Hz, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.16 (d, J = 31.2 Hz, 3H), 2.19 (s, 3H)。

【0061】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 153.97, 153.27, 149.29, 147.32, 146.62, 145.31, 144.72, 136.22, 133.57, 128.43, 125.67, 124.43, 123.76, 122.16, 115.42, 111.75, 107.45, 45.88, 41.11, 21.78。

【0062】

実施例４
化合物４：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（４－（ｔｅｒｔ－ブチル）ベンジル）－６－（６－クロロ－２－メチル）－イル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0063】

【化14】

【0064】

化合物４を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率３５．４６％）。

【0065】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.63-14.22 (m, 1H), 11.12 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.09 - 7.87 (m, 2H), 7.65-7.43(m, 4H), 7.01 (s, 1H), 5.09 (d, J = 53.8 Hz, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.06 (d, J = 31.6 Hz, 3H), 1.33 (s, 9H)。

【0066】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 152.56, 147.23, 146.92, 142.45, 139.85, 135.41, 134.02, 133.58, 130.56, 127.45, 126.46, 124.25, 122.26, 119.47, 117.74, 116.85, 116.36, 116.01, 111.72, 40.22, 35.47, 31.32。

【0067】

実施例５
化合物５：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（４－ニトロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0068】

【化15】

【0069】

化合物５を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率３２．１０％）。

【0070】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.94-14.53 (m, 1H), 11.06 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 7.95 - 7.83 (m, 2H), 7.53 - 7.21(m, 4H), 7.07 (s, 1H), 5.12 (d, J = 53.2 Hz, 2H), 4.92 (s, 2H), 4.21 (d, J = 31.1 Hz, 3H)。

【0071】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 153.97, 152.85, 151.51, 150.88, 148.78, 147.11, 145.49, 140.41, 138.32, 133.57, 128.17, 125.56, 122.16, 118.52, 114.72, 109.79, 50.18, 39.91, 36.25。

【0072】

実施例６
化合物６：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（４－メトキシベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0073】

【化16】

【0074】

化合物６を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率３２．０５％）。

【0075】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.74 - 14.32 (m, 1H), 10.89 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.03 - 7.62 (m, 2H), 7.32 - 7.13(m, 4H), 6.98 (s, 1H), 5.11 (d, J = 54.3Hz, 2H), 4.76 (s, 2H), 4.23 (d, J = 31.8 Hz, 3H), 3.81 (s,3H)。

【0076】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 155.47, 154.55, 153.71, 152.48, 149.58, 148.61, 146.12, 142.56, 139.98, 135.65, 129.23, 126.37, 123.73, 119.63, 116.85, 111.56, 54.23, 49.52, 41.02, 39.85。

【0077】

実施例７
化合物７：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（４－（トリフルオロメトキシ）ベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0078】

【化17】

【0079】

化合物７を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率２６．３６％）。

【0080】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.35-14.12 (m, 1H), 10.65 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.92 - 7.61 (m, 2H), 7.12-6.89(m, 4H), 6.73 (s, 1H), 4.96 (d, J = 53.9Hz, 2H), 4.61 (s, 2H), 4.02 (d, J = 31.2 Hz, 3H)。

【0081】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 156.01, 154.12, 152.45, 151.63, 149.46, 147.95, 145.48, 141.77, 138.45, 132.19, 129.45, 128.61, 125.63, 124.18, 118.17, 112.69, 111.93, 48.63, 40.14, 38.63。

【0082】

実施例８
化合物８：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（４－フルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0083】

【化18】

【0084】

化合物８を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率４０．４２％）。

【0085】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.93-14.52 (m, 1H), 10.94 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.12 - 7.88 (m, 2H), 7.43-7.25(m, 4H), 7.02 (s, 1H), 5.34 (d, J = 53.9 Hz, 2H), 4.85 (s, 2H), 4.09 (d, J = 31.8 Hz, 3H)。

【0086】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 159.57, 153.75, 152.67, 151.54, 147.69, 144.86, 142.45, 139.73, 136.83, 134.58, 127.32, 125.72, 122.85, 118.93, 115.15, 111.12, 47.38, 40.58, 38.92。

【0087】

実施例９
化合物９：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（４－クロロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0088】

【化19】

【0089】

化合物９を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率３８．４２％）。

【0090】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.65-14.30 (m, 1H), 10.81 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.09 - 7.56 (m, 2H), 7.23-7.09(m, 4H), 6.96 (s, 1H), 5.21 (d, J = 53.5 Hz, 2H), 4.77 (s, 2H), 3.92 (d, J = 31.5 Hz, 3H)。

【0091】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 153.68, 151.12, 150.45, 149.32, 147.45, 144.75, 142.18, 139.14, 136.25, 134.24, 127.47, 125.85, 122.36, 118.47, 115.41, 111.49, 47.78, 40.49, 38.14。

【0092】

実施例１０
化合物１０：（Ｅ）－３－（（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（４－ブロモフェニル）－６－（（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0093】

【化20】

【0094】

化合物１０を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率３９．７７％）。

【0095】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.77-14.42 (m, 1H), 11.01 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.17 - 7.68 (m, 2H), 7.32-7.12(m, 4H), 7.01 (s, 1H), 5.44 (d, J = 53.6 Hz, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.01 (d, J = 31.8 Hz, 3H)。

【0096】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 154.12, 153.98, 148.53, 142.23, 141.56, 139.42, 138.17, 137.45, 136.46, 130.58, 129.37, 127.41, 125.86, 122.16, 119.45, 113.98, 45.19, 40.86, 38.63。

【0097】

実施例１１
化合物１１：（Ｅ）－３－（（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（［１，１－ビフェニル］－４－イルメチル）－６－（（（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１，３，５－トリアジン－２,４－ジオンの調製

【0098】

【化21】

【0099】

化合物１１を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率２５．０１％）。

【0100】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.75-14.32 (m, 1H), 11.23 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 7.99 - 7.82 (m, 2H), 7.65-7.43(m, 6H), 7.40-7.31 (s, 4H), 5.13 (d, J = 53.9 Hz, 2H), 4.79 (s, 2H), 4.13 (d, J = 31.9 Hz, 3H)。

【0101】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 153.74, 152.02, 148.43, 145.45,143.89, 141.43, 138.51, 136.58, 132.68, 132.42, 131.71, 129.56, 128.26, 127.78, 126.72, 119.56, 115.85, 114.74, 112.85, 111.41, 48.36, 47.58, 41.68。

【0102】

実施例１２
化合物１２：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0103】

【化22】

【0104】

化合物１２を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率２７．５２％）。

【0105】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.89-14.56 (m, 1H), 11.10 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.19 - 7.92 (m, 2H), 7.52-7.36(m, 4H), 7.14 (s, 1H), 5.46 (d, J = 53.8 Hz, 2H), 4.92 (s, 2H), 4.13 (d, J = 31.7 Hz, 3H)。

【0106】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 155.12, 152.83, 148.58, 142.52, 141.76, 139.79, 137.85, 135.56, 131.03, 129.46, 128.73, 126.86, 125.87, 124.41, 123.38, 119.24, 113.16, 46.10, 41.78, 40.23。

【0107】

実施例１３
化合物１３：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（３，５－ジメチルベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0108】

【化23】

【0109】

化合物１３を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率２６．４４％）。

【0110】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.91-14.45 (m, 1H), 11.05 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.15- 7.89 (m, 2H), 7.74-7.56(m, 3H), 7.12 (s, 1H), 5.15 (d, J = 54.1 Hz, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.21 (d, J = 31.5 Hz, 3H), 2.21-2.19 (s, 6H)。

【0111】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 153.76, 151.23, 149.58, 145.59, 143.53, 141.81, 139.52, 135.45, 133.76, 129.57, 128.53, 123.89, 121.43, 120.83, 117.36, 115.81, 47.25, 45.43, 43.57, 25.69。

【0112】

実施例１４
化合物１４：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（３，５－ジメトキシベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0113】

【化24】

【0114】

化合物１４を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率２４．９３％）。

【0115】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.96-14.51 (m, 1H), 11.09 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.22- 7.72 (m, 2H), 7.63-7.51(m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.13 (d, J = 54.2 Hz, 2H), 4.89 (s, 2H), 4.11 (d, J = 31.4 Hz, 3H), 3.81 (s, 6H)。

【0116】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 161.45, 155.75, 152.41, 149.47, 145.15, 143.78, 141.47, 135.12, 132.49, 128.57, 126.47, 121.74, 119.38, 115.56, 109.53, 104.41, 54.13, 45.58, 43.76, 41.15。

【0117】

実施例１５
化合物１５：（Ｅ）－３－（１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－１－（３，５－ジフルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0118】

【化25】

【0119】

化合物１５を、異なる出発物質を使用して化合物１（実施例１）と同じ方法で、調製した（収率２６．７８％）。

【0120】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 14.86-14.47 (m, 1H), 10.95 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.78-7.21 (m, 5H), 7.15 (s, 1H), 5.65 (d, J = 54.2 Hz, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.11 (d, J = 31.7 Hz, 3H)。

【0121】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 159.47, 155.82, 154.73, 148.78, 146.45, 143.61, 141.83, 137.82, 132.41, 128.85, 126.49, 120.53, 118.88, 116.52, 109.62, 106.87, 52.98, 41.91, 39.15。

【0122】

実施例１６
化合物１６：（Ｅ）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－メチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（２，４，５－トリフルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0123】

（１）化合物ａ１６の調製
調製方法は、実施例１と同じである。

【0124】

（２）化合物ｃ１６の調製
調製方法は、実施例１と同じである。

【0125】

（３）化合物ｄ１６の調製
調製方法は、実施例１と同じである。

【0126】

（４）化合物ｅ１６の調製
調製方法は、実施例１における化合物１の調製と同じである。

【0127】

（５）化合物１６の調製

【化26】

【0128】

ビスジベンジリデンアセトンパラジウム（６．９ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）、２－（ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィン）－３，６－ジメトキシ－２’－４’－６’トリ－１－プロピル－１，１’－ビスフェニル（８．７ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、およびリン酸カリウム（９５．５ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を、１．５ｍＬの１，４－ジオキサンの入った反応器に入れ、１２０℃で５分間、撹拌および加熱し、その後室温に冷却した。トリフルオロメタンスルホン酸メチル（４９．２ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）およびステップ（４）で調製した化合物ｅ１６（１８６．４ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加え、次いで、反応混合物を７０℃で２４時間撹拌した。反応終了後、反応液を希釈し、ジクロロメタン溶液で抽出し、有機相を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（移動相としてジクロロメタン：メタノール（Ｖ：Ｖ）＝１２：１）で分離精製し、乾燥して３３．６ｍｇの化合物１６（収率２１．０３％）を得た。

【0129】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 11.95-10.12 (m, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.74-7.41 (m, 4H), 7.01 (s, 1H), 5.45 (d, J = 53.9 Hz, 2H), 4.85 (s, 2H), 4.22 (d, J = 31.7 Hz, 6H)。

【0130】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 156.78, 154.72, 153.51, 149.43, 148.85, 146.45, 145.89, 143.82, 141.71, 137.82, 134.53, 131.74, 125.71, 122.86, 121.46, 116.78, 112.16, 107.82, 55.18, 37.51, 35.05, 31.76。

【0131】

実施例１７
化合物１７:（Ｅ）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－エチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（２，４，５－トリフルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0132】

【化27】

【0133】

化合物１７を、異なる出発物質を使用して化合物１６（実施例１６）と同じ方法で、調製した（収率２３．５２％）。

【0134】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 11.78-10.23 (m, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.45-7.31 (m, 4H), 6.98 (s, 1H), 5.75 (d, J = 53.8 Hz, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.17 (d, J = 31.7 Hz, 5H), 2.23 (s, 3H)。

【0135】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 157.47, 154.56, 153.63, 149.12, 148.78, 146.86, 145.75, 143.46, 142.25, 137.74, 135.76, 131.58, 125.43, 122.86, 121.74, 117.73, 114.63, 109.39, 54.52, 35.23, 34.47, 31.25, 15.36。

【0136】

実施例１８
化合物１８：（Ｅ）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－エチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－（イル）メチル）－１－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0137】

【化28】

【0138】

化合物１８を、異なる出発物質を使用して化合物１６（実施例１６）と同じ方法で、調製した（収率２２．４１％）。

【0139】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 11.07-10.96 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.49-7.14 (m, 4H), 6.67 (s, 1H), 5.48 (d, J = 53.7 Hz, 2H), 4.27 (s, 2H), 4.11 (d, J = 31.5 Hz, 3H), 2.24 (s, 1H), 1.61 (s, 3H), 1.04 (s, 3H)。

【0140】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 159.13, 154.35, 153.25, 149.31, 148.35, 146.35, 145.64, 143.67, 142.15, 138.75, 136.58, 132.96, 127.24, 123.85, 121.46, 118.45, 114.42, 108.74, 54.96, 36.24, 33.57, 31.85, 28.75, 15.32。

【0141】

実施例１９
化合物１９：（Ｅ）－６－（２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－エチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（４－フルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0142】

【化29】

【0143】

化合物１９を、異なる出発物質を使用して化合物１６（実施例１６）と同じ方法で、調製した（収率２４．７０％）。

【0144】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 10.97-10.76 (m, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.56-7.24 (m, 5H), 6.34 (s, 1H), 5.67 (d, J = 53.6 Hz, 2H), 4.24 (s, 2H), 4.01 (d, J = 31.7 Hz, 3H), 2.12 (s, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.14 (s, 3H)。

【0145】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 159.32, 154.56, 153.76, 149.24, 148.75, 146.24, 145.42, 143.74, 142.57, 138.58, 136.97, 132.35, 127.24, 121.46, 118.75, 114.46, 108.35, 54.74, 36.35, 33.68, 31.46, 28.68, 15.57。

【0146】

実施例２０
化合物２０：（Ｅ）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－エチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル)メチル）－１－（４－フルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0147】

【化30】

【0148】

化合物２０を、異なる出発物質を使用して化合物１６（実施例１６）と同じ方法で、調製した（収率２３．７６％）。

【0149】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 10.89-10.66 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.45-7.14 (m, 4H), 6.64 (s, 1H), 5.23 (d, J = 53.7 Hz, 2H), 4.46 (s, 2H), 4.13 (d, J = 31.5 Hz, 3H), 2.23 (s, 1H), 1.26 (s, 3H), 1.09 (s, 3H)。

【0150】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 159.46, 154.85, 153.35, 149.86, 148.46, 146.35, 145.46, 143.35, 142.25, 138.47, 136.63, 132.85, 127.58, 121.85, 118.25, 114.86, 108.35, 54.85, 36.46, 33.75, 31.68, 28.86, 15.24。

【0151】

実施例２１
化合物２１：（Ｅ）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－シクロプロピル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（２，４，５－トリフルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0152】

（１）化合物ａ２１の調製
調製方法は、実施例１と同じである。

【0153】

（２）化合物ｃ２１の調製
調製方法は、実施例１と同じである。

【0154】

（３）化合物ｄ２１の調製
調製方法は、実施例１と同じである。

【0155】

（４）化合物２１の調製

【化31】

【0156】

アジ化ナトリウム（５９８．１ｍｇ、９．２ｍｍｏｌ）およびブロモシクロプロパン（２４０μＬ、３ｍｍｏｌ）を反応器に入れ、乾燥ＤＭＦ５ｍＬに溶解し、反応混合物を６０℃で一晩撹拌し、ＴＬＣでモニターした。反応終了後、反応混合物を室温まで冷却し、ブラインおよびテトラヒドロフランで抽出し、テトラヒドロフラン層を回収し、５％塩化リチウム溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥して、アジドシクロプロパンを得た。

【0157】

化合物ｄ２１（１４２．４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、アジドシクロプロパン（２９．９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、硫酸銅五水和物（３０．０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびアスコルビン酸ナトリウム（２３．８ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を反応器に入れ、アルゴン保護下で、テトラヒドロフラン１０ｍＬと水１ｍＬとの混合溶液に溶解し、４５℃で一晩加熱撹拌しＴＬＣでモニターをした。反応終了後、得られた反応液を減圧下で濃縮して溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィー（移動相としてジクロロメタン：メタノール（Ｖ：Ｖ）＝１２：１）で分離精製し、乾燥して３５．２ｍｇの化合物２１（収率２１．０３％）を得た。

【0158】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 11.01-10.36 (m, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.56-7.25 (m, 4H), 7.12 (s, 1H), 5.38 (d, J = 53.7 Hz, 2H), 4.76 (s, 2H), 4.52 (d, J = 31.5 Hz, 3H), 2.56 (s, 1H), 1.21 (s, 2H), 0.86 (s, 2H)。

【0159】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 158.45, 155.86, 154.56, 149.86, 148.43, 146.76, 145.41, 143.78, 142.52, 138.47, 136.71, 132.78, 127.78, 123.52, 121.02, 118.57, 114.18, 108.75, 54.13, 36.85, 33.54, 31.17, 2.15。

【0160】

実施例２２
化合物２２：（Ｅ）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－イソプロピル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（２，４，５－トリフルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0161】

【化32】

【0162】

化合物２２を、異なる出発物質を使用して化合物２１（実施例２１）と同じ方法で、調製した（収率２１．３０％）。

【0163】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 11.21-10.76 (m, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.36-7.15 (m, 4H), 6.88 (s, 1H), 5.18 (d, J = 53.6 Hz, 2H), 4.36 (s, 2H), 4.01 (d, J = 31.7 Hz, 3H), 2.16 (s, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.06 (s, 3H)。

【0164】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 158.32, 154.86, 153.78, 149.12, 148.03, 146.54, 145.15, 143.36, 142.22, 138.67, 136.63, 132.53, 127.85, 123.32, 121.45, 118.80, 114.53, 108.67, 54.14, 36.56, 33.24, 31.09, 28.14。

【0165】

実施例２３
化合物２３：（Ｅ）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－イソブチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（２，４，５－トリフルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0166】

【化33】

【0167】

化合物２３を、異なる出発物質を使用して化合物２１（実施例２１）と同じ方法で、調製した（収率１９．２２％）。

【0168】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 10.34-10.32 (m, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.25-7.11 (m, 4H), 6.56 (s, 1H), 5.27 (d, J = 53.7 Hz, 2H), 4.25 (s, 2H), 4.04 (d, J = 31.2 Hz, 3H), 2.16 (s, 1H), 1.16 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 0.81 (s, 2H)。

【0169】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 159.26, 154.67, 153.36, 149.17, 148.58, 146.37, 145.57, 143.36, 142.36, 138.58, 136.25, 132.48, 127.24, 123.69, 121.36, 118.58, 114.68, 108.35, 54.66, 36.96, 33.24, 31.68, 28.46, 19.78。

【0170】

実施例２４
化合物２４：（Ｅ）－６－（６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－イル）イミノ）－３－（１－シクロブチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－５－イル）メチル）－１－（２，４，５－トリフルオロベンジル）－１，３，５－トリアジン－２，４－ジオンの調製

【0171】

【化34】

【0172】

化合物２４を、異なる出発物質を使用して化合物２１（実施例２１）と同じ方法で、調製した（収率１７．５６％）。

【0173】

¹H NMR (600 MHz, DMSO) δ 10.78-10.12 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.15-7.01 (m, 4H), 6.16 (s, 1H), 5.54 (d, J = 53.5 Hz, 2H), 4.42 (s, 2H), 4.11 (d, J = 31.4 Hz, 3H), 2.31 (s, 1H), 1.82 (s, 3H), 1.46 (s, 3H)。

【0174】

¹³C NMR (151 MHz, DMSO) δ 158.56, 154.12, 153.16, 149.67, 148.36, 146.37, 145.27, 143.19, 142.19, 138.53, 136.48, 132.49, 127.19, 123.95, 121.10, 118.56, 114.57, 108.47, 54.95, 36.26, 33.96, 31.35, 28.36, 15.64。

【0175】

２．生理活性アッセイ

【0176】

（１）３ＣＬ^ｐｒｏ阻害活性試験
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬ^ｐｒｏに対する化合物の阻害活性は、蛍光共鳴エネルギー移動を用いて測定した。

【0177】

様々な濃度（最終濃度１０００、５００、２５０、１２５、６２．５、３１．２５、１５．６３、７．８１、３．９０、１．９５ｎＭ、ＤＭＳＯ中）で調製した化合物溶液１０μＬとＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬ^ｐｒｏ（Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｂｉｙｕｎｔｉａｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、最終濃度：０．５μＭ、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ緩衝液（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１００ ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）で希釈））４０μＬとを混合し、黒色の９６ウェルプレートに加え、３７℃で１０分間インキュベートした。蛍光基質Ｄａｂｃｙｌ－ＫＴＳＡＶＬＱＳＧＦＲＫＭＥ－Ｅｄａｎｓ（Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｂｉｙｕｎｔｉａｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、最終濃度：２０μＭ）を５０μＬ加えて反応を開始し、１０分間インキュベートし、蛍光検出用の多機能マイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、Ｖａｒｉｏｓｋａｎ Ｆｌａｓｈ）により測定を行った（励起波長：３４０ｎｍ、発光波長：４９０ｎｍ）。蛍光値を記録し、試料の阻害率を算出した。酵素活性対照として、化合物を含まないＤＭＳＯを使用し、ブランク対照として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬ^ｐｒｏを含まないＴｒｉｓ－ＨＣｌバッファーを使用し、処理方法は同じであった。試料（化合物１～化合物９）のＩＣ_５０値を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを用いた非線形回帰分析により算出した。

【0178】

阻害率（％）＝（ＲＦＵ_{酵素活性対照}－ＲＦＵ_試料）／（ＲＦＵ＿_{酵素活性対照}－ＲＦＵ＿_{ブランク対照}）×１００％

【0179】

実験結果を表１および表２に示す（表１中、ＩＣ_５０の欄、Ａ：ＩＣ_５０＜１００ｎＭ、Ｂ：ＩＣ_５０＝２００～５００ｎＭ、Ｃ：５００～１０００ｎＭ、Ｄ：＞１０００ｎＭ）、実施例の化合物はいずれも３ＣＬ^ｐｒｏに対して阻害活性を有しており、なかでも化合物１、化合物７、化合物１２、化合物１５、化合物１６、化合物１７、化合物１８、化合物２２および化合物２３は、ＩＣ_５０値が１００ｎＭ未満と、３ＣＬ^ｐｒｏに対して強い阻害作用を有する。

【0180】

【表1】

【0181】

【表2】

【0182】

表１および表２のデータは、化合物１～２４はいずれも３ＣＬ^ｐｒｏに対して異なる程度の阻害を有することを示した。３ＣＬ^ｐｒｏに対する化合物１、化合物７、化合物１２、化合物１５、化合物１６、化合物１７、化合物１８、化合物２２および化合物２３のＩＣ_５０値は、すべて２００ｎＭ未満であり、コロナウイルス３ＣＬ^ｐｒｏに対する３－トリアゾリルメチル－１，３，５－トリアジン－２，４－ジケトンの阻害活性が示された。具体的には、３ＣＬ^ｐｒｏに対する化合物１、化合物１２、化合物１７のＩＣ_５０は、それぞれ９６．６０ｎＭ、１７７．８ｎＭ、１２３．２ｎＭであり、なかでも化合物１は最も優れた阻害活性（ＩＣ_５０＜１００ｎＭ）を有しており、抗コロナウイルス薬として開発および応用され得る。

【0183】

（２）３ＣＬ^ｐｒｏ細胞毒性試験
化合物１、化合物１２および化合物１７のｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞毒性は、ＭＴＴ法により評価した。ＨｅｐＧ２、ＨＥＫ２９３およびＡ５４９細胞を対数増殖期に採取し、トリプシンで消化し、細胞懸濁液を調製した。細胞密度を５×１０^４細胞数／ｍＬに調整し、滅菌済み９６ウェル細胞培養プレートに１ウェルあたり１８０μＬ接種し、５％ＣＯ_２インキュベーター内で、３７℃で２４時間インキュベートした。ウェルプレートの底に細胞が付着した後、濃度勾配をつけた薬液を各ウェルに２０μＬずつ加え、ブランク群（細胞なし、化合物なし）、対照群（化合物なし）を含む６つのデュプリケートウェルを並行して設定した。５％ＣＯ_２インキュベーター内で、３７℃で２４時間インキュベートした後、各ウェルに５ｇ／ＬのＭＴＴ溶液２０μＬを添加して４時間インキュベートした。インキュベート後、ウェル内の培養液を静かに吸引し、各ウェルに１００μＬのＤＭＳＯを添加し、シェーカー上で低速で１０分間振とうして結晶を完全に溶解し、細胞生存率を算出した。その結果を表３～５に示す。

【0184】

細胞生存率（％）＝（サンプル群ＯＤ値－ブランク群ＯＤ値）／（対照群ＯＤ値－ブランク群ＯＤ値）

【0185】

【表3】

【0186】

【表4】

【0187】

【表5】

【0188】

表３～表５は、Ａ５４９細胞、ＨＥＫ２９３細胞およびＨｅｐＧ２細胞に対するＰＦ－０７３２１３３２、S－２１７６２２、および代表的な化合物１、化合物１２および化合物１７の、それぞれ様々な濃度における阻害率を示す。かかるデータは、Ａ５４９細胞、ＨｅｐＧ２細胞およびＨＥＫ２９３細胞に対する化合物１の阻害率が、いずれの濃度においてもＰＦ－０７３２１３３２およびＳ－２１７６２２の阻害率より低いことを示す。試験した３種の細胞に対する４００ｎＭおよび２００ｎＭでの化合物１２および化合物１７については、毒性はＰＦ－０７３２１３３２およびＳ－２１７６２２よりもわずかに高かったが、Ａ５４９細胞、ＨＥＫ２９３およびＨｅｐＧ２細胞を１２．５ｎＭ以下で処理した場合、細胞生存率はＰＦ－０７３２１３３２およびＳ－２１７６２２よりも高かった。要約すると、化合物１は、３ＣＬプロテアーゼに対して良好な阻害活性と低毒性という特徴を有しており、さらに研究され得る。

【0189】

上記の内容は、本発明の技術的思想を説明するためのものであり、本発明の保護範囲を限定するものではない。本発明の技術的思想に基づいて提案された技術的解決策に基づいて行われるいかなる変更も、本発明の特許請求の範囲に含まれる。

【外国語明細書】