特開 2023-184569 ドライアイ疾患及び瞼板腺炎の治療のための組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023184569

(43)【公開日】2023-12-28

(54)【発明の名称】ドライアイ疾患及び瞼板腺炎の治療のための組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/202 20060101AFI20231221BHJP

   A61K 31/232 20060101ALI20231221BHJP

   A61K 35/60 20060101ALI20231221BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20231221BHJP

   A61P 27/04 20060101ALI20231221BHJP

   A23L 33/115 20160101ALI20231221BHJP

【ＦＩ】

A61K31/202

A61K31/232

A61K35/60

A61P27/02

A61P27/04

A23L33/115

【審査請求】有

【請求項の数】1

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2023177540

(22)【出願日】2023-10-13

(62)【分割の表示】P 2020570713の分割

【原出願日】2019-06-19

(31)【優先権主張番号】20180849

(32)【優先日】2018-06-19

(33)【優先権主張国・地域又は機関】NO

(71)【出願人】

【識別番号】517393743

【氏名又は名称】エーパックス ノルウェー アクスイェ セルスカプ

(74)【代理人】

【識別番号】100099759

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 篤

(74)【代理人】

【識別番号】100123582

【弁理士】

【氏名又は名称】三橋 真二

(74)【代理人】

【識別番号】100117019

【弁理士】

【氏名又は名称】渡辺 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100141977

【弁理士】

【氏名又は名称】中島 勝

(74)【代理人】

【識別番号】100150810

【弁理士】

【氏名又は名称】武居 良太郎

(72)【発明者】

【氏名】ハーラル ブレイビク

(72)【発明者】

【氏名】ハーラル スベンセン

(72)【発明者】

【氏名】イーレン メレテ スクヨースタ ストークネス

(57)【要約】

【課題】本出願は眼障害、特にドライアイ疾患（ＤＥＤ）及び瞼板腺炎の治療における組成物の提供を目的とする。
【解決手段】その組成物は超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む。さらに本発明は対象のＤＥＤ及び瞼板腺炎の治療方法を提供し、天然オイル由来の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む組成物を対象へ投与することを含んでいる。使用のための組成物は経口及び局所適用に適当である。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ドライアイ疾患（ＤＥＤ）及び瞼板腺炎の治療における使用のための天然オイル由来の少なくとも１質量％の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む組成物。

【請求項2】

前記天然オイルが魚油、イカ油、オキアミ油、カイアシ油、及び藻類油の群より選択される、請求項１に請求される使用のための請求項１の組成物。

【請求項3】

前記組成物が少なくとも５質量％の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、請求項１に記載の使用のための請求項１又は２の組成物。

【請求項4】

前記組成物が少なくとも１０質量％、例えば少なくとも２０質量％の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、請求項１に記載の使用のための請求項１～３のいずれか一項の組成物。

【請求項5】

前記脂肪酸は遊離脂肪酸、脂肪酸塩、モノ－、ジ－、トリグリセリド、エチルエステル、ろうエステル、（Ｏ－アセチル化）－ω－ヒドロキシ脂肪酸（ＯＡＨＦＡ）、コレステリルエステル、セラミド、リン脂質又はスフィンゴミエリンの単体又は組み合わせの任意の形態である。

【請求項6】

前記脂肪酸が遊離脂肪酸、脂肪酸塩、エチルエステル、グリセリド又はろうエステルの形態である、請求項１に記載の使用のための請求項１～５のいずれか一項の組成物。

【請求項7】

前記組成物がさらに少なくとも１質量％の一以上のＶＬＣＭＵＦＡｓを含む、請求項１に記載の使用のための、請求項１～６のいずれか一項の組成物。

【請求項8】

前記組成物が少なくとも５質量％の一以上のＣ２０～Ｃ２２の多価不飽和脂肪酸を含む、請求項１に記載の使用のための、請求項１～７のいずれか一項の組成物。

【請求項9】

前記組成物が少なくとも２５質量％のＣ２０～Ｃ２２の長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、請求項１に記載の使用のための、請求項１～８のいずれか一項の組成物。

【請求項10】

前記組成物が少なくとも５質量％のオメガ－３系ＤＰＡを含む、請求項１に記載の使用のための、請求項１～９のいずれか一項の組成物。

【請求項11】

前記組成物がエチルエステルの形態の超長鎖多価不飽和脂肪酸及び／又はＣ２０～Ｃ２２の長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、請求項１に記載の使用のための、請求項１～１０のいずれか一項の組成物。

【請求項12】

前記組成物がトリグリセリドの形態の超長鎖多価不飽和脂肪酸及び／又はＣ２０～Ｃ２２の長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、請求項１に記載の使用のための、請求項１～１０のいずれか一項の組成物。

【請求項13】

前記組成物がろうエステルの形態の超長鎖多価不飽和脂肪酸及び／又はＣ２０～Ｃ２２の長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、請求項１に記載の使用のための、請求項１～１０のいずれか一項の組成物。

【請求項14】

前記使用がドライアイ（ＤＥＤ）及び眼瞼腺炎の症状の軽減のためである、請求項１～１３のいずれか一項の組成物。

【請求項15】

前記使用が以下の任意の一以上のためである、請求項１～１３のいずれか一項の組成物：眼又は眼組織の対症療法及び治療；薬物療法の副作用としてのドライアイの症状の治療；健康な目を維持するためかつヒトが加齢する又は環境条件、薬物療法若しくは健康関連因子を理由にドライアイ疾患にさらされるにつれて発症するドライアイ疾患及び不快感を防止するためのサプリメント；加齢、更年期及び他のホルモン変化、様々な疾病、例えば狼瘡、関節リウマチ、強皮症又はシェーグレン症候群のような自己免疫疾患、アレルギー、糖尿病、乾燥した環境、コンタクトレンズの使用、長いコンピュータ及びテレビの視聴時間に関連するドライアイの不快感の治療及び軽減。

【請求項16】

前記使用がさらに加齢黄斑変性（ＡＭＤ）、シュタルガルト病、網膜症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、糖尿病性網膜症、網膜静脈閉塞症、鎌状赤血球網膜症、放射線網膜症、虹彩炎、又は結膜炎の群からの一以上の疾病の治療を含む方法である、請求項１～１３のいずれか一項の組成物。

【請求項17】

前記組成物が経口摂取のための調製物における成分として利用される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の使用のための、請求項１～１３のいずれか一項の組成物。

【請求項18】

前記組成物が点眼調製物、噴霧剤、軟膏、クリーム、軟膏、ローション、ゲル又は眼内のミニタブレットにおける成分として利用される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の使用のための、請求項１～１３のいずれか一項の組成物。

【請求項19】

前記組成物が少なくとも５質量％の天然オイル由来の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、組成物を含む眼製剤。

【請求項20】

前記製剤が点眼、噴霧剤、軟膏、クリーム、軟膏、ローション、ゲル又は眼内のミニタブレットの形態である、請求項１９において請求された製剤。

【請求項21】

対象のＤＥＤ又は瞼板腺炎の治療のための方法であって、少なくとも５質量％の天然オイル由来のＶＬＣＰＵＦＡｓを含む組成物をその対象へ投与することを含む方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は眼障害の治療、特にドライアイ疾患（ＤＥＤ）及び瞼板腺炎の症状の軽減のための組成物に関し、ここでその組成物は超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む。さらに、本発明は対象のＤＥＤ及び瞼板腺炎の治療のための方法を提供し、その対象への天然オイル由来の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む組成物の投与を含んでいる。使用のためのその組成物は、経口及び局所適用の用途である。

【背景技術】

【0002】

長鎖多価不飽和脂肪酸（ＬＣＰＵＦＡｓ）、及び特に長鎖オメガ３系脂肪酸（ＬＣｎ３）の中で、Ｃ２０～Ｃ２２の鎖長の脂肪酸は文献において最も関心を受けている。（エイコサペンタエン酸について）その頭字語であるＥＰＡ及び（ドコサヘキサエン酸について）ＤＨＡは魚油及び他の原料からの役立つオメガ３系の酸を説明するおなじみの名前になった。また、植物原料からのα－リノール酸（ＡＬＡ）の豊富な製品は商用利用可能である。この関連で、脂質は式Ｘ：ＹｎＺによって記載されることが知られており、式中Ｘはアルキル鎖の炭素原子数、そしてＹはその鎖の二重鎖の数；そしてここで「ｎＺ」は、メチル末端基からの第一の二重結合への炭素原子の数である。天然において、その二重鎖は全てｃｉｓ型である。多価不飽和脂肪酸において、それぞれの二重結合は、一つのメチレン（－ＣＨ₂）基によって次の二重結合から離れている。この命名法を用いて、ＥＰＡは２０：５ｎ３、ＤＨＡは２２：６ｎ３、そしてＡＬＡはＣ１８：３ｎ３である。また、さらに魚油のようなオメガ３系脂肪酸の天然の原料は、Ｃ２０～Ｃ２２よりもより短い及びより長い脂肪酸を含む。本明細書で用いられるように、超長鎖脂肪酸（又はＶＬＣＦＡｓ）は２２炭素原子より長い鎖長を有する脂肪酸（又はＦＡｓ）を意味することを意図している；超長鎖多価不飽和脂肪酸（又はＶＬＣＰＵＦＡｓ）という用語は、２２炭素原子より長い鎖長を有する多価不飽和脂肪酸（又はＰＵＦＡｓ）を意味することを意図している；超鎖一不飽和脂肪酸（又はＶＬＣＭＵＦＡｓ）という用語は、２２炭素原子より長い鎖長を有する一不飽和脂肪酸（又はＭＵＦＡｓ）を意味することを意図している；一方で、２２炭素原子より長い鎖長を有するＶＬＣｎ３は多価不飽和のオメガ３系脂肪酸を意味することを意図し、ＶＬＣｎ３はＶＬＣＰＵＦＡのサブグループを示すことが理解されている。さらに、本明細書で用いられるように、超長鎖不飽和脂肪酸（又はＶＬＣＵＳＦＡｓ）という用語は、２２炭素原子より長い鎖長を有する、一価又は多価の、不飽和脂肪酸を意味することを意図している。超長鎖飽和脂肪酸（ＶＬＣＳＦＡｓ）という用語は、２２炭素原子より長い鎖長を有する、飽和脂肪酸を意味することを意図する。

【0003】

ＥＰＡ及びＤＨＡの豊富な海洋のオメガ３系濃縮物を産生するために、慣習的な産業上の工程がデザインされ、Ｃ２２脂肪酸よりも短い鎖の脂肪酸及びより長い分子の両方を取り除くことによって、Ｃ２０～Ｃ２２の分画を濃縮する。そのような工程の例は、分子的な／ショートパス蒸留、尿素分画、抽出及びクロマトグラフ工程であり、それらの全てが利用されうり、海洋の脂肪酸及び他の原料由来の同様の材料のＣ２０～２２分画を濃縮する。これらの工程のレビューはＢｒｅｉｖｉｋ Ｈ（２００７）Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓ．Ｉｎ：Ｂｒｅｉｖｉｋ Ｈ（ｅｄ）Ｌｏｎｇ－Ｃｈａｉｎ Ｏｍｅｇａ－３ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｏｉｌｓ．Ｔｈｅ Ｏｉｌｙ Ｐｒｅｓｓ，ＰＪ Ｂａｒｎｅｓ＆Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｂｒｉｄｇｗａｔｅｒ，ＵＫ，ｐｐ１１１－１４０に提供される。

【0004】

オメガ３系酸はとても酸化しやすい。オリゴマー／ポリマーの酸化産物のついての上限を課している薬局方及び自主基準に従うために、ＤＨＡの鎖長を超える鎖長を有する成分を、例えば、蒸留、抽出及び同様の工程によって、取り除くことが共通している。さらに、そのようなより大きい分子量の海洋オイルの成分は、コレステロールを含むそのようなオイルの典型的に所望されない不けん化の構成要素及びポリ臭化ジフェニルエーテルのような有機的な汚染物質と関連している。

【0005】

オメガ３系脂肪酸、並びに特にＬＣＰＵＦＡｓのＥＰＡ及びＤＨＡは広範な有益な健康への影響を有することが知られており、従って、異なる使用について知られている。また、眼障害及び疾患の治療においてこれらの脂肪酸を使用することが知られている。

【0006】

乾性角結膜炎（ＫＣＳ）として知られている、ドライアイ疾患（ＤＥＤ）は、クォリティオブライフを減少する目の不快感及び視覚障害によって特徴づけられる一般的な慢性状態である。Ｄｒｙ Ｅｙｅ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ａｎｄ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ（ＤＲＥＡＭ） Ｓｔｕｄｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｇｒｏｕｐ（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｐｒｉｌ １３ ２０１８，ＤＯＩ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１７０９６９１）に最近記載されたように、多くの臨床医はオメガ３系脂肪酸の使用をＤＥＤの症状を軽減させるために推奨している。しかしながら、大型のＤＲＥＡＭ ＳｔｕｄｙではＤＥＤを有する患者の間で、１２カ月間（トリグリセリド型の２０００ｍｇのＥＰＡ及び１０００ｍｇのＤＨＡとして３０００ｍｇのｎ３脂肪酸の１日当たりの摂取による）オメガ３濃縮物としてサプリメントを受けるそれらの患者は、プラセボを受けた患者よりもより良い結果を有意に有しないと結論付けた。

【0007】

この研究とは対照的に、他の研究では魚油からのＤＥＤへの肯定的な影響を示している。例えば、ＤＲＥＡＭ Ｓｔｕｄｙ ｒｅｐｏｒｔ，Ｄｅｉｎｅｍａ ｅｔ ａｌ．（Ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅ，ｄｏｕｂｌｅ－ｍａｓｋｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ ｏｆ ｔｗｏ ｆｏｒｍｓ ｏｆ ｏｍｅｇａ－３ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｄｒｙ ｅｙｅ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ ２０１７；１２４：４３－５２）において参考文献で挙げられる文献では、オメガ３系の原料として濃縮されていない魚油及びオキアミ油を用いることによってＤＥＤへの有意な肯定的な影響を証明した。

【0008】

このＤＲＥＡＭ研究では、抗炎症活性を有し、実質的な副作用との関わりがないので、多数の臨床医がオメガ３系脂肪酸の栄養補助食品を推奨したことを述べている。

【0009】

そのドライアイ疾患（ＤＥＤ）は往々にして、瞼板腺炎とも称される、マイボーム腺機能不全（ＭＧＤ）に関連している。そのマイボーム腺は、それぞれの目の上眼瞼の周辺部分に約３０腺及び下眼瞼の周辺部分に約２５腺、眼瞼内に配置されている。これらの腺は（マイバム）油を分泌し、他の行為の間に、眼を閉じた場合に密封を作り出すことによって、そして涙膜と相互作用することによって、眼を保護し、均等にそれらを拡げることにより涙液を増強し、一貫した視力の質を維持し、そして涙膜を覆うことによって、それによって涙液の蒸発速度を下げる。

【0010】

ＭＧＤは変化した涙膜組成物、眼表面疾患、眼及び眼瞼の不快感、及び蒸発性ドライアイに繋がりうる（Ｃｈｈａｄａｖａ Ｐ，Ｇｏｌｄｈａｒｄｔ Ｒ ａｎｄ Ｇａｌｏｒ Ａ（２０１７）ｍｅｉｂｏｍｉａｎ Ｇｌａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｇｌａｎｄ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｙ Ｅｙｅ Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｏｐｈｔａｌｏｍｏｌｏｇｙ １２４（１１）Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ，Ｓ２０～Ｓ２６）。環境的なストレスがそうであるように、加齢はＭＤＧにおける既知のリスクファクターであり、加齢及び環境的なストレスの両方は、眼瞼幹細胞の欠乏に繋がることを示唆する。ホルモンはマイボーム腺上皮細胞（ｍｅｉｂｏｃｙｔｅｓ）に影響する：ＭＤＧは抗アンドロゲン剤を投与しているヒト（良性前立腺過形成、前立腺がん）、完全なアンドロゲン不感性症候群、シェーグレン症候群を有する個人を含むアンドロゲン欠乏状態において記載されている。１３－ｃｉｓ－レチノイン酸（Ａｃｃｙｔａｎｅ，Ｈｏｆｆｍａｎｎ－Ｌａ Ｒｏｃｈｅ）による薬物療法は、マイバム分泌不全に関連し、ＤＥＤ症状を導く。局所的なエピネフリン及び局所的な緑内障薬物療法（例えば、局所的なβ阻害薬、プロスタグランジン類似体、炭酸脱水酵素阻害薬）を含む、局所的な薬物療法はマイボーム腺への負の変化に関連している。Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓのような常在細菌は眼瞼の組成物に負の影響を有しうる。コンタクトレンズの使用はマイボーム腺の機能の減少に関連する。また、マイボーム腺は誕生から減少されうる。Ｃｈｈａｄａｖａ ｅｔ．ａｌは有極性の液体への性質の変化及びマイボーム腺分泌物の飽和脂肪酸含量の減少及びＤＥＤを有する患者の眼表面の炎症の減少及び涙液中の炎症性脂質メディエーター特性の減少と関連するように、オメガ３系脂肪酸の経口摂取を指摘する。亜麻仁油、魚油及びオリーブ油はオメガ３系脂肪酸の潜在的に豊富な食べ物として言及され；また、ＤＨＡによる補給は都合が良いことを示すと考えられると言及されている。

【0011】

Ｍａｃｓａｉ（ＭＳ Ｍａｃｓａｉ（２００８）Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｏｍｅｇａ－３ ｄｉｅｔａｒｙ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ ｂｌｅｐｈａｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｍｅｉｂｏｍｉａｎ ｇｌａｎｄ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ（ａｎ ＡＯＳ ｔｈｅｓｉｓ）Ｔｒａｎｓ Ａｍ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｓｏｃ．２００８；１０６：３３６－３５６）によるレビューは、オメガ６系とオメガ３系脂肪酸との比が体の全体の炎症状態に影響を与えることにおいて重要であることを述べている。オメガ３系ＦＡｓは、抗炎症性のプロスタグランジン合成へ向けたプロスタグランジンの代謝を調節する。眼瞼炎のように、ＭＧＤ及びドライアイは炎症性疾患であると考えられ、全身炎症状態の減少は眼瞼炎、ＭＧＤ及びドライアイに関連した不快感を軽減しうる。オメガ６系及びオメガ３系ＦＡｓの炎症性及び抗炎症性の効果を説明するための付随的な図において、著者は最大Ｃ２０の鎖長を有するオメガ６系の酸（アラキドン酸）及び最大Ｃ２２の鎖長を有するオメガ３系の酸（ＤＨＡ）の効果を示す。追加の仮説のように、その著者は多量のオメガ３系ＦＡｓによって補給することは、マイボーム腺におけるＦＡ組成物を変化する可能性があり、そしてこの変化が涙液安定性に有利でありうり、炎症がマイボーム腺管を塞ぐことを防止しうることを述べる。また、ＭＧＤを軽減すること及びドライアイに関連した不快感におけるオメガ３系ＦＡｓの効果に関するＭａｃｓａｉの仮説はより最近の公開公報内に言及されている。

【0012】

ＵＳ９，３８１，１８２ Ｂ２（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．）では、抗炎症薬として作用するオメガ３系の酸の増加を促進し、同時にオメガ６系の酸の量を減少するために、ＤＥＤ及びＭＧＤに苦しむ患者においていわゆるオメガ３インデックスを高めることを教示している。Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．は、再エステル化したトリグリセリドの形態におけるオメガ３系の脂肪酸の補給を利用し、オメガ３系の酸の十分な量を提供する。当業者は、このサプリメントの記載が、ＤＲＥＡＭ Ｓｔｕｄｙにおいて利用された材料と同様の方法において魚油より濃縮されるオメガ３系の酸を意味することに気付くだろう。ＤＲＥＡＭ Ｓｔｕｄｙにおいて利用されたオメガ３系の酸の量とかなり似ているが、Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．は、ＥＰＡ（１６００～２５００ｍｇ）及びＤＨＡ（５００～９００ｍｇ）の有効量を含む、２０００～３０００ｍｇの間の１日あたりのオメガ３系の脂肪酸の使用を教示している。Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．はいわゆるＨＳ－オメガ３インデックスを言及する。そのＨＳ－オメガ３インデックス試験では、乾燥血液スポットにおけるオメガ３脂肪酸のＥＰＡ及びＤＨＡの濃度を測定する。ＨＳ－オメガ３インデックスに基づいたＳｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．，によって開示されている表及び他の情報はオメガ３系の酸のＥＰＡ及びＤＨＡ、Ｃ２０及びＣ２２の鎖長を有するそれぞれのオメガ３系の酸の含量に関する。

【0013】

ごく最近の刊行物では、脂肪酸の状態及び臨床的に健康の結果を探索する適当な方法を評価する（Ｈａｒｒｉｓ ＷＳ（２０１８）Ｔｈｅ Ｏｍｅｇａ－６：Ｏｍｅｇａ－３ ｒａｔｉｏ：ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ａｐｐｒａｉｓａｌ ａｎｄ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｓｕｃｃｅｓｓｏｒ，Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ，Ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｓ ａｎｄ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄｓ １３２：３４－４０）。その要約では、「エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ及びＤＨＡ）の欠失－西洋食における主要な欠乏症に焦点を当てたより新しい測定基準を推奨している。そのオメガ３インデックス（赤血球細胞ＥＰＡ＋ＤＨＡ）はこれに関して多くの推奨を有する。」としている。そのオメガ３インデックス、すなわち、ＥＰＡ及びＤＨＡの測定は、２０１６年の調査において世界中にオメガ３のステータスを示し、そしてその国の国民健康調査のためにカナダ保健省によって選択された。ヒトにおける血中のＦＡ状態を出版した単一の最も大きいデータセットは、オメガ３インデックスを利用して、米国において約１６０，０００人を含んだ。そのオメガ３インデックスは、世界中での複数の観察コホート研究及び介入研究において用いられた。冠状動脈性心臓病による心臓突然死、急性冠症候群、全死因死亡及び認知機能の障害、うつ病、攻撃的行動及び双極性疾患のような他の健康状態において、より低いリスクと関連している。オメガ３インデックスは米国において臨床医学において幅広い使用をもたらした第一のオメガ３ステータスの試験だった。その結論では、「２００４年に生まれた測定基準のオメガ３インデックスは、本物のリスクファクターの多くの基準を満たし、２１世紀における選択マーカーでありうる」と述べた。

【0014】

上記の参照は、科学界がＣ２０～Ｃ２２のオメガ３系の酸、特にＥＰＡ及びＤＨＡの濃度がオメガ３系脂肪酸の組み合わされる有益な効果における尺度を示すことを認めることを例示する。

【0015】

上記の参照より、我々はＣ２０～Ｃ２２のオメガ３系の脂肪酸（ＥＰＡ及びＤＨＡ）の摂取が臨床医によって推奨されること及び患者によって広く用いられＤＥＤの症状を軽減することを理解し、加えて、ヒトの体において全ての健常人のオメガ３系の酸の影響を示すために評価されるＥＰＡとＤＨＡとを加算した。引用されているＤＥＤへのＥＰＡ及びＤＨＡの想定される正の効果における理由は、これらの脂肪酸の抗炎症活性のためであり；これらの脂肪酸は実質的な副作用と関連せず；これらの多価不飽和脂肪酸は、より良く流れるより低い粘度のマイバムをもたらし；ＤＥＤに苦しむ患者のいわゆるオメガ３インデックスの上昇によってオメガ３系の酸であるＥＰＡ及びＤＨＡの増加を促進し、オメガ６系の酸の量を（相対的に）減らすためである。しかしながら、非常に残念なことに、上記で引用したように、大型のＤＲＥＡＭ研究では、１２カ月間オメガ３系の酸のＥＰＡ及びＤＨＡの濃縮物を投与された者は、プラセボを投与された患者よりも有意なより良い結果を得られなかったことを結論付けた。

【0016】

上記に基づき、新規及び代替方法並びにＤＥＤ及び瞼板腺炎の患者を治療における組成物、特に疾病と関連するそれらの症状を軽減することについて需要がある。

【発明の概要】

【0017】

それゆえ、本発明の対象はドライアイ及び瞼板腺炎及びそれと関連する状態の治療に有用である組成物を提供することである。本発明は眼障害の治療における使用のための組成物を提供し、ここでその組成物は超長鎖多価不飽和脂肪酸（ＶＬＣＰＵＦＡ）を含む。第一の側面において、本発明はドライアイ疾患（ＤＥＤ）及び瞼板腺炎の治療における天然オイル由来の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む組成物を提供する。本発明の組成物は超長鎖不飽和脂肪酸（ＶＬＣＵＳＦＡｓ）の豊富な量を含む。特に、その組成物は超長鎖一不飽和脂肪酸（ＶＬＣＭＵＦＡｓ）及び超長鎖多価不飽和脂肪酸（ＶＬＣＰＵＦＡｓ）の両方の豊富な量を含む。

【0018】

同等の側面において、本発明は対象のＤＥＤ及び瞼板腺炎の治療のための方法を提供すし、天然オイル由来のＶＬＣＰＵＦＡｓを含む組成物を対象へ投与することを含む。その方法は、ＶＬＣＰＵＦＡを含む組成物の治療有効量を対象へ投与することを含む。

【図面の簡単な説明】

【0019】

【図1】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図2】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図3】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図4】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図5】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図6】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図7】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図8】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図9】図１から９は異なる試験食を摂食したマウス由来のマイバム組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【0020】

【図10】図１０から１７は異なる試験食を摂食したマウス由来の眼（眼球）組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図11】図１０から１７は異なる試験食を摂食したマウス由来の眼（眼球）組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図12】図１０から１７は異なる試験食を摂食したマウス由来の眼（眼球）組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図13】図１０から１７は異なる試験食を摂食したマウス由来の眼（眼球）組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図14】図１０から１７は異なる試験食を摂食したマウス由来の眼（眼球）組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図15】図１０から１７は異なる試験食を摂食したマウス由来の眼（眼球）組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図16】図１０から１７は異なる試験食を摂食したマウス由来の眼（眼球）組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【図17】図１０から１７は異なる試験食を摂食したマウス由来の眼（眼球）組織内の異なる脂肪酸の含量を提供する。

【発明を実施するための形態】

【0021】

オメガ３系脂肪酸を含む、生物学的に活性のＰＵＦＡＳは、ＥＰＡ及びＤＨＡのような長鎖脂肪酸に制限されない。Ｂｒｅｉｖｉｋ ａｎｄ Ｓｖｅｎｓｅｎ ｉｎ ＷＯ２０１６／１８２４５２では、天然オイルから、超長鎖多価不飽和脂肪酸（ＶＬＣＰＵＦＡｓ）の組成物、特に超長鎖オメガ３系脂肪酸（ＶＬＣｎ３ｓ）、及び、そのようなＶＬＣｎ３ｓを高い濃度で含む組成物を製造する方法を開示している。Ｂｒｅｉｖｉｋ及びＳｅｖｅｎｓｅｎはさらに、魚油のような天然オイル内にごく少量のＶＬＣｎ３ｓがあることを開示し、そしてこれらの及び他の超長鎖脂肪酸が、伝統的な海洋性オメガ３濃縮物の産生時に実質的に取り除かれる理由を説明しており、ここでその目的はＣ２０～Ｃ２２の鎖長を有するオメガ３系脂肪酸をより濃縮することである。

【0022】

ＤＥＤの治療のためのオメガ３系脂肪酸の補給の最近公表されたメタアナリシス、Ｇｒａｎｎａｃｃａｒｅ ｅｔ ａｌ．（２０１９）Ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｏｍｅｇａ－３ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｄｒｙ Ｅｙｅ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ａ ｍｅｔａ－ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ，Ｃｏｒｎｅａ ３８（５）５６５～５７３、の考察部分のはじめに、著者は、ＤＥＤの徴候及び症状への摂餌量及びオメガ３系脂肪酸の補給の両方の影響が未だに疑わしいと述べている。しかしながら、３３６３人の患者を含む１７のランダム化した臨床研究を含むそれらの研究に基づき、著者らはオメガ３系脂肪酸の補給は、ＤＥＤを有する患者におけるドライアイ症状、涙膜の安定性及び涙液の産生を改善することを結論付けている。一方で、著者らは、全てのそれらの結果因子について、実質的な不均質が観察され、その結果が研究を通じて一貫していないことを伴うとコメントしている。考察部分において、我々はこの不均質に関する以下を含む多数の意見を見つける：「我々はメタ回帰分析及びサブグループ分析を実施したが、説明できない不均質が残存した。この不一致は報告された概算における我々の自信及びそれらの一般化可能性を制限する」、「我々は、その効率及びその投与量及び治療期間の間の任意の関係を定義できなかった」、「群の間の角膜の蛍光染色における差異は感度分析後に安定してなかった」、「それゆえ、この結果は注意して解釈されるべきである」。本出願の優先日後に公表された、Ｇｉａｎｎａｃｃａｒｅ ｅｔ ａｌ．ではそれらの研究において、本発明の発明者によって開示されたものを気付いていなかったことが明らかになった。

【0023】

驚くべきことに、症状の軽減及びＤＥＤの治療のための、Ｃ２０～Ｃ２２のオメガ３系酸（ＥＰＡ＋ＤＨＡ）に焦点を当てることは、せいぜいＤＥＤに苦しむ患者に限られる利益しかもたらさず、そして症状を軽減するためのより効率的な利益及びこの一般的でコストのかかる疾病の治療は、ＶＬＣｎ３ｓを含むＶＬＣＦＡｓを含む組成物の投与よって得られうることを本発明で発見した。さらに、経口及び局所適用に適当なＶＬＣＦＡｓを含む組成物は、ＤＥＤの治療における使用のために、開示されている。

【0024】

出願人が、Ｇｉａｎｎａｃｃａｒｅ ｅｔ ａｌ．，によるメタアナリシス内に含まれる公開された研究を調べたところ、植物油及び海洋性オメガ３濃縮物に基づく研究では、所望されるＣ２０～Ｃ２２のオメガ３系酸を濃縮するために、ＶＬＣＦＡｓが無い又は実質的に取り除かれていると推定される場合に、ＤＥＤに影響を与えない又は制限される正の影響を与えることを示す傾向があるが、一方で、濃縮されていない魚油及びオキアミ油に基づく研究ではＤＥＤ患者における明らかな正の結果をもたらす傾向であるように見える。この驚くべきオメガ３系脂肪酸の原料及び効果のつながりは、メタアナリシスの著者、そしてまた、メタ研究に含まれる個々の研究の著者を逃れている。

【0025】

本明細書で使用されるように、「治療すること」又は「治療」という用語は１）疾病を阻害すること；例えば、疾病、状態又は障害の予防を含む、疾病、状態又は障害の病状又は症候を経験する又は示している個人における疾病、状態又は障害を阻害すること（すなわち、予防的治療、さらなる病状及び／又は症候の発生を停止すること）、又は２）例えばＤＥＤの症状を軽減することによって、疾病の症状を軽減すること、又は３）疾病を回復させること；例えば、疾病、状態又は障害の病状又は症候を経験する又は示している個人の疾病、状態、障害を回復させること（すなわち、病状及び／又は症候を逆転させること）を意味する。特に、一の態様において、使用のための組成物は、ＶＬＣＦＡｓを含む組成物を含むマイバムを提供することによって、予防的な治療、例えば通常のマイバムの機能を保持すること、又はマイバムの機能を改善することのためである。

【0026】

本明細書で使用される「投与する」、「投与」、及び「投与すること」という用語は、（１）医療関係者によって、本開示に従う組成物を提供すること、与えること、投与すること、及び／又は処方すること、及び（２）ヒトの患者若しくはヒトが彼自身又は彼女自身によって、又はヒト以外の哺乳類によって、本開示の組成物を入れること、投与すること、適用すること又は消費することを意味する。

【0027】

マイバムの液体組成物は、実質的にヒトの体の任意の他の組織の液体の組成物から異なる。Ｂｕｔｏｖｉｔｃｈ（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｅｙｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（２０１７）１６３：２～１６）では、総脂質のそれらの割合と共に多数のヒトのマイバムの脂質成分を記載している：（Ｏ－アセチル化）－ω－ヒドロキシ脂肪酸（ＯＡＨＦＡ）（１～５％）、コレステリルエステル（３０～４０％）、セラミド（少量）、ＯＡＨＦＡのコレステリルエステル（３％）、ジアセチルジオール（定量されず）、遊離脂肪酸（最大１％）、リン脂質及びスフィンゴミエリン（最大０．１％）、グリセリド（１％、大部分がトリオレインとして）、ろうエステル（３０～４８％）。マイボーム腺より分泌される主要な極性脂質は、ＯＡＨＦＡｓであり、そしてこれらの脂肪酸は、マイボーム腺性の脂質の間で主要な界面活性剤として作用する（Ｍｉｌｌａｒ ｅｔ ａｌ．Ｍｅｉｂｏｍｉａｎ Ｇｌａｎｄｓ ａｎｄ Ｌｉｐｉｄ Ｌａｙｅｒ，ｕｐｄａｔｅ ｏｆ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅａｅｄｉａ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｙｅ，２０１０，Ｐａｇｅｓ １３～２０；Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｉｎｃ．２０１７）。ヒトにおける、マイボーム腺性のろうエステルのたいていの脂質はＣ１４～Ｃ２０の脂肪酸に基づいているが、また少なくともＣ３２の鎖長に到達するＶＬＣ脂肪酸も存在している。

【0028】

本発明は、ドライアイ疾患（ＤＥＤ）及び瞼板腺炎の治療のための、天然オイル由来の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む組成物を提供する。第一の態様において、その組成物は少なくとも１％、例えば、少なくとも２％若しくは３％、又はより好ましくは少なくとも５質量％のＶＬＣＰＵＦＡ、例えば少なくとも１０％、例えば少なくとも２０％、例えば少なくとも２５質量％のＶＬＣＰＵＦＡｓを含む。典型的に、そのような組成物は、１０％より多く、２０％より多く、３０％より多く、４０％より多く、５０％より多く、６０％より多く、又は７０質量％より多く超長鎖多価不飽和脂肪酸を、例えば最大で約８０％のＶＬＣＰＵＦＡｓを含みうる。また、その組成物は、ＶＬＣＰＵＦＡｓ／ＶＬＣｎ３ｓよりも他のＶＬＣＦＡｓ、例えば超長鎖一不飽和脂肪酸（ＶＬＣＭＵＦＡｓ）を含みうる。ある態様において、そのようなＶＬＣＭＵＦＡｓの包含が好ましい。一の態様において、使用のための組成物は、少なくとも０．５％で、例えば少なくとも１％で、例えば少なくとも２質量％のＶＬＣＭＵＦＡｓを含む。さらに好ましくは、その組成物は、ＶＬＣＭＵＦＡｓを少なくとも４質量％、例えば５％より多く、８％より多く、１５％より多く、２０％より多く、３０％より多く、４０％より多く、５０％より多く又は６０質量％よりさらに多く超長鎖一不飽和脂肪酸を含む。好ましくは、その組成物は異なるＶＬＣＵＳＦＡｓの混合物を含み、従って、一不飽和及び多価不飽和の両方の超長鎖脂肪酸を含む。一の態様において、ＶＬＣＵＳＦＡｓ含量は、すなわち、ＶＬＣＭＵＦＡｓ及びＶＬＣＰＵＦＡｓの併用の量は、少なくとも、５質量％の組成物である。組成物において存在しうるＶＬＣＭＵＦＡｓは、これらに限定されないが、以下の脂肪酸の群のいずれか一つより選択される：Ｃ２４：１（テトラコサン酸（ネルボン酸））、Ｃ２６：１（ヘキサコセン酸）、Ｃ２８：１（オクタコセン酸）、Ｃ３０：１及びＣ３２：１。さらに、ある態様において、その組成物は超長鎖飽和脂肪酸（ＶＬＣＳＦＡｓ）を含む。例えば、その組成物は１．０％より多く、例えば、２．０％より多いＶＬＣＳＦＡｓを含む。

【0029】

上記の考察又は、他の特定の生物学的な機構に限定することなく、我々は、ＤＥＤを治療するために、例えばＤＥＤの影響を軽減するために利用されうる天然原料より得たＶＬＣＰＵＦＡｓ及び他のＶＬＣＦＡｓを含む組成物を本明細書で開示する。本発明に従う組成物は、とりわけ、特許出願ＷＯ２０１６／１８２４５２に開示される天然オイル及びそれらに従う方法に基づき製造されうるが、その出願に開示される出発オイル及び方法に限定されない。

【0030】

一の態様において、そのＶＬＣＵＰＦＡｓは魚油、イカ油、オキアミ油、カイアシ油及び藻類油の群より選択される天然オイルより生じる。以下により詳細に開示されるように、さらに本発明に従う、組成物における天然原料はカイアシのＣａｌａｎｕｓ ｆｉｎｍａｒｃｈｉｃｕｓ及び他のＣａｌａｎｕｓ属並びにオキアミのＥｕｐｈａｕｓｉａ Ｃｒｙｕｓｔａｌｌｏｒｐｈｉａｓ、そしてそれらの脂質クラスの中で高い相対量のろうエステルを含む他の海洋種である。一の態様において、組成物の、ＶＬＣＰＵＦＡｓを含むＶＬＣＦＡｓは、天然原料より単離されたオイルと比較して未修飾である。それゆえ、一の態様において、ＶＬＣＰＵＦＡｓの鎖長は未修飾であり、そして好ましくは、その天然のＶＬＣＰＵＦＡｓは、投与前に行われる任意の伸長工程なしで、その組成物内に含まれる。さらに、その組成物は、ＶＬＣＰＵＦＡｓを分泌する又は産生する任意の液体産生細胞を含まない。むしろ、その組成物は、ある量のＶＬＣＦＡｓ、例えば、ＶＬＣＰＵＦＡｓ及び随意にＶＬＣＭＵＦＡｓを含み、ここでそのＶＬＣＦＡｓは、商用使用のためのスケールアップ及び生産のための適当な方法を用いて、天然原料より単離され、濃縮される。調製のための一の適当な方法は、ＷＯ２０１６／１８２４５２において開示される。脂肪酸は一般的に不安定であり、そして使用のためのその脂肪酸は穏やかな条件（例えば低温及び低圧）が用いられ分解及び異性化を避ける、例えば天然の全てｃｉｓの脂肪酸がｔｒａｎｓ脂肪酸又は複合化した脂肪酸に修正されることを避ける方法によって調製される。いくつかの天然オイルは、カイアシ類のような、Ｃａｌａｎｕｓ ｆｉｎｍａｒｃｈｉｃｕｓ及び他のＣａｌａｎｕｓ属からのオイルを含み、同様に、オキアミのＥｕｐｈａｕｓｉａ ｃｒｙｓｔａｌｌｏｒｐｈｉａｓは多くの天然含量のろうエステルを有する。これにより、本発明に従って、ろうエステル組成物の製造に十分に適合するこれらの種由来のオイルを作製できた。これらのオイルからの豊富なろうエステル組成物の単離に続いて、分子サイズ及び／又は不飽和度に基づく付随的な画分化が、率先して脂肪酸誘導体の適当な濃縮物の単離を有することなく、本発明に従う、ろうエステル組成物を導き、続いてこれらの脂肪酸を脂肪アルコールによってエステル化し、ろうエステルを入手する。今まで、上述のような天然オイルがＤＥＤの治療に利用されていることは開示されておらず、そしてまた、Ｃａｌａｎｕｓ ｆｉｎｍａｒｃｈｉｃｕｓ及びＥｕｐｈａｕｓｉａ Ｃｒｙｕｓｔａｌｌｏｒｐｈｉａｓのようなカイアシ及びオキアミ種から、ろうエステルの公開された化学組成物がこれらのオイルのＶＬＣＦＡ含量の情報を開示しなかったことを指摘することは重要でありうる。

【0031】

本出願人は対象へ投与されるＶＬＣＦＡｓがマイバムに取り込まれること、正の健康への効果を提供することを発見した。さらに具体的に、その投与されるＶＬＣＦＡｓはそのマイバム、又は眼の他の関連した特定の組織へと移送され、ＶＬＣＦＡｓの存在を正常に有するそのような組織に取り込まれる。従って、本発明はＤＥＤ又は瞼板腺炎の治療における使用のためのＶＬＣＦＡｓを含む組成物を提供し、そしてその使用は特定の組織内のＶＬＣＦＡｓの濃度の増加を提供し、続いて、疾病を回復又はこの症状を軽減する取り込みが行われる。特定の組織は、例えば、網膜を含む眼球、又はマイバムの組織内であり、そして好ましくは眼瞼内のマイボーム腺を含むマイバムである。眼球の組織内において、目の表面に近い組織内の、すなわち、瞼板及び涙管を含む、涙液に接触しそうな組織において、取り込みは最も関連している。特に、その治療は、ＶＬＣＦＡｓを有する組織を提供することによる正常の組織機能を維持するためでありうり、ここで、その投与したＶＬＣＦＡｓは、通常ＶＬＣＦＡｓが存在しうると知られている組織内で良い機能を維持することに役立ちうる。例えば、異なる組織へのＶＬＣＦＡｓの添加は直接的に、細胞膜の流動性の修正又は改善に寄与する。以下の実施例１では、マウスにおける飼養研究を含み、そしてこれは経口的に投与される超長鎖脂肪酸がマイボーム腺に取り込まれることを示した。ＶＬＣＰＵＦＡｓを含む食餌を与えたマウス由来の眼組織は、コントロール、ＶＬＣＰＵＦＡｓの存在しない食餌の給餌よりも、マイボーム腺内のＶＬＣＰＵＦＡｓのより高い濃度を有した。これらの結果に基づき、オメガ３系脂肪酸がＤＥＤを有する患者のドライアイの症状、涙膜安定性及び涙液産生を改善するという知識と組み合わせて、本出願人は超長鎖脂肪酸がドライアイ疾患及び瞼板腺炎の治療に有用であることを推論した。以下の実施例２では、マウスにおける飼養研究を含み、そしてこれは経口的に投与される超長鎖脂肪酸が眼全体の組織に取り込まれることを示した。それゆえ、本出願人は給餌を通じて補給されるＶＬＣＦＡｓが眼組織に取り込まれること、そしてそこで合成されるだけではないことを示した。その投与したＶＬＣＦＡｓは眼球表面に近い組織で特に取り込まれ、それゆえＤＥＤ及び瞼板腺炎の治療に寄与しうる。

【0032】

ＶＬＣＰＵＦＡｓに加えて、その組成物はさらに他の脂肪酸、例えばさらなる長鎖多価脂肪酸、及び／又はＶＬＣＭＵＦＡｓのようなさらなるＶＬＣＦＡｓを含みうる。一の態様において、使用のための組成物は、一以上のＬＣＰＵＦＡ、例えば一以上のＣ２０～Ｃ２２のＰＵＦＡｓを少なくとも５質量％含む。ある態様において、本発明のそのような組成物は少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、又は少なくとも７０質量％の少なくとも一つのＬＣＰＵＦＡ、例えば一以上のＣ２０～Ｃ２２の長鎖のＰＵＦＡｓを含む。一の態様において、そのＬＣＰＵＦＡｓは少なくとも一つのＥＰＡ、ＤＨＡ及びオメガ３系ＤＰＡ（ａｌｌ－ｃｉｓ－７、１０、１３、１６、１９－ドコサヘキサエン酸）を含む。さらに、他の態様において、本発明の組成物は少なくとも５％、少なくとも８％、又は少なくとも１０質量％のＤＰＡを含む（２２：５ｎ３）。本発明のある態様において、組成物のＥＰＡ：ＤＨＡの質量比は約１：１５から約１０：１、約１：１０から約８：１、約１：８から約６：１、約１：５から約５：１、約１：４から約４：１、約１：３から約３：１、又は約１：２から約２：１に及ぶ。好ましくは、その組成物内にＥＰＡより多くのＤＨＡの存在があり、そして少なくとも一の態様において、その組成物のＥＰＡ：ＤＨＡの質量比は約１：３から約１：１２に及ぶ。一の態様において、使用のための組成物は組成物の、５～３０質量％のＶＬＣＰＵＦＡｓ及び５０～９０％ＬＣＰＵＦＡｓを含む。

【0033】

組成物のそのＶＬＣＰＵＦＡｓ、及び任意の他のＶＬＣＦＡｓは２２炭素原子数より長い鎖長を有する；一の態様において、その組成物は２４炭素数以上の鎖長を有する少なくとも一つのＶＬＣＰＵＦＡを含む。好ましくは、その組成物は、ＶＬＣＦＡｓのような異なるものの混合物を含む。これに関して、そのＶＬＣＦｓは２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０又は４２炭素数の鎖長を有しうる。好ましくは、ＶＬＣＦＡｓの組成物は少なくとも二つのＶＬＣ脂肪酸の混合物を含み、そして具体的に２４、２６、２８及び３０の炭素数の鎖長を有する。特定の態様において、その組成物は、これらに限定されないが、２４：５ｎ３、２４：６ｎ３、２８：８ｎ３の脂肪酸の任意の一つから選択されるＶＬＣＰＵＦＡｓを含む。一の態様において、その組成物は少なくとも４％、例えば少なくとも５％、例えば約４～１０％の２８：８ｎ３脂肪酸を含む。一の態様において、使用のための組成物は５～１５％のＥＰＡ、５～１５％のＤＰＡ、３５～５５％のＤＨＡ及び少なくとも５質量％のＶＬＣＰＵＦＡｓを含み、そしてさらに好ましくはその組成物のＶＬＣＰＵＦＡｓは２８：８ｎ３脂肪酸を含む。好ましくは、その組成物はさらにＶＬＣＭＵＦＡｓ、例えば少なくとも０．５重量％のＶＬＣＭＵＦＡｓを含む。

【0034】

前記組成物の脂肪酸、ＶＬＣＰＵＦＡｓ及びその組成物の他の脂肪酸の両方は、遊離脂肪酸、脂肪酸塩、モノ－、ジ－、トリグリセリド、エチルエステル、ろうエステル、ＯＡＨＦＡｓ、コレステリルエステル、セラミド、リン脂質又はスフィンゴミエリンの単体又は組み合わせの形態でありうる。また、その脂肪酸は消化管に吸収されうる、又は局所適用によってマイボーム腺によって吸収されうる任意の形態でありうり、又は、ここでその脂肪酸は少なくとも部分的にそのマイバムの脂質に置換することで潤滑するように作用する。好ましくは、その脂肪酸は遊離脂肪酸、脂肪酸塩、エチルエステル、グリセリド又はろうエステルの形態である。局所適用において、そのＶＬＣＰＵＦＡｓ／ＶＬＣＦＡｓ組成物を含む調製物を送達することは、その脂肪酸が遊離脂肪酸、脂肪酸塩、グリセリド（モノ－、ジ－、又はトリグリセリド単体又は組み合わせ）として、ＯＨＡＦＡｓ、コレステリルエステル、セラミド、リン脂質、スフィンゴミエリン又はろうエステルの形態であり、そしてさらにより好ましい態様において、そのＶＬＣＰＵＦＡｓ／ＶＬＣＦＡｓはろうエステルの形態である。一の態様において、その組成物の局所適用において、これは塩を含み、そして従って組成物の少なくともいくつかの脂肪酸、例えば少なくともいくつかのＶＬＣＰＵＦＡｓは、脂肪酸塩の形態でありうる。また、投与されたＶＬＣＦＡｓは、内因性の生物学的な機構がＶＬＣＦＡｓを別の形態、例えば（Ｏ－アシル）ω－ヒドロキシＦＡｓ（ＯＡＨＦＡｓ）を含むω－ヒドロキシ脂肪酸、又はコレステリルエステル、セラミド、遊離脂肪酸、リン脂質、スフィンゴミエリン及びろうエステルに移行しうるように、ｉｎ ｖｉｖｏの形態を変化しうる。

【0035】

現在開示されている前記組成物は、少なくとも一つの非活性の医薬的な成分、すなわち賦形剤を含みうる。そのような賦形剤の選択は投与形態を含む、いくつかの因子に依存する。非活性成分は可溶化し、懸濁させ、増粘し、希釈し、乳化し、安定化し、保存し、保護し、着色し、香りづけし、並びに／又は使用において、安全、都合よく、及び／若しくは他の受容可能なものでありうるように、有効成分を適用可能及び有効な調製物に構成しうる。賦形剤の例は、これらに限定されないが、溶媒、担体、希釈剤、結合剤、充填剤、甘味料、芳香剤、ｐＨ調整剤、粘度調製剤、抗酸化剤、増量剤、保湿剤、崩壊剤、溶解遅延剤（ｓｏｌｕｔｉｏｎ－ｒｅｔａｒｄｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤、潤滑剤、着色剤、分散剤、乳化剤、界面活性剤及び保存剤を含む。賦形剤は、さらに一以上の役割又は機能を有しうり、又は一以上の群に分類されうる；分類は説明的であるのみであり、限定することを意図していない。ある態様において、例えば、その少なくとも一つの賦形剤は、コーンスターチ、ラクトース、グルコース、結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、クエン酸、酒石酸、水、エタノール、グリセロール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、セテアリルアルコール、カルボキシメチルセルロース、及び脂肪性物質、例えば固い脂肪又はその適当な混合物より選択されうる。眼の局所治療に適当な水性溶液は保存剤、界面活性剤、緩衝剤、塩、等張化剤、乳化剤及び水を含みうる。ある態様において、現在開示された組成物は、医薬的に許容可能な抗酸化剤、例えばトコフェロール、例えばアルファ・トコフェロール、ベータ・トコフェロール、ガンマ・トコフェロール、及びデルタ・トコフェロール、又はそれらの混合物、ＢＨＡ、例えば２－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシアニソール及び３－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシアニソール、又はその混合物、並びにＢＨＴ（３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシトルエン）、又はパルミチン酸アスコルビル又はその混合物を含む。随意に、眼内又は眼への局所的な適用において、抗酸化剤及び保存剤の使用は、好ましくは避けられうる。例えば、使用のためのその組成物は保存剤を含まない点眼剤を調剤することに適当な単回単位用量、又は多数回用の容器として充填した製剤において含まれうる。従って、ＶＬＣＦＡｓの組成物は例えば植物抽出物からの他の有効成分と組み合わされうる。正常の視力の維持に寄与しうる、ビタミンＡの原料である、ベータカロテンのような天然の抗酸化剤は、有用な成分でありうる。同様に、酸化ダメージから細胞の保護に寄与しうるビタミンＥ（好ましくは天然のＲＲＲ－トコフェロール又はｄ－トコフェロール）を含めると有用でありうる。ルテイン及びゼアキサンチンは含まれうるカルテノイドであり、それは人体では網膜及び水晶体の黄斑で濃縮しうる。

【0036】

さらなる側面において、本発明は、対象へ天然オイル由来のＶＬＣＵＰＵＦＡｓを含む、組成物を投与することを含む対象のＤＥＤ及び瞼板腺炎の治療のための方法を提供する。その方法は対象へ少なくとも１％のＶＬＣＰＵＦＡｓ、例えば少なくとも５％のＶＬＣＰＵＦＡｓを含む組成物の治療有効量を投与することを含む。

【0037】

使用のための前記組成物に向けられる第一の側面の文脈で記載された態様及び特徴は、また治療のための方法に向けられる本発明の他の側面にも適用する。

【0038】

個人が、これらの脂肪酸が個人の最適な健康を維持することに必要とされる特定の組織において、ＶＬＣＭＵＦＡ及びＶＬＣＰＵＦＡ酸を含む、ＶＬＣＦＡｓの内因的な合成能力を低下させる経験をしうることが既知である。しかしながら、我々の知る限り本出願までに、そのＶＬＣＦＡｓが実質的に除去されたＣ２０～Ｃ２２のオメガ３系脂肪酸の濃縮物が、ＤＥＤを軽減する有意な正の効果を示さない理由を説明すると考えられる方法において、一以上の伸長酵素機構の欠損がマイバムに、影響を与えうることは開示されなかった。一の態様において、使用のためのその方法又は組成物は眼の一以上の伸長酵素機構欠損を有する患者の治療用途、例えばＶＬＣＰＵＦＡｓの欠損した伸長酵素合成について補うことである。

【0039】

伸長酵素機構以外の内因的な生物学的な機構は、都合の良い、（Ｏ－アシル）－ω－ヒドロキシＦＡｓ（ＯＡＨＦＡｓ）、コレステリルエステル、セラミド、遊離脂肪酸、リン脂質、スフィンゴミエリン、及びろうエステルにＶＬＣＭＵＦＡｓ及びＶＬＣＦＡｓを含むＬＣＦＡｓを変換するために利用されうる。ＶＬＣＦＡｓを含む、本発明に従う組成物は、その脂肪酸がω－ヒドロキシ脂肪酸と別の形態であるが、これらのとても重要な脂肪酸を関連性のある組織、例えばマイバムに提供するために用いられうる。従って、本明細書で用いられるようにＶＬＣＦＡｓという用語は、ＶＬＣＦＡｓのｉｎ ｖｉｖｏでの変換をさらに含むと理解されるべきである。例として、その用語は、ω－ヒドロキシＶＬＣＦＡｓを含むｉｎ ｖｉｖｏで形成されるＶＬＣＦＡｓのヒドロキシ誘導体、そしてさらにω－ヒドロキシＶＬＣＦＡｓのｉｎ ｖｉｖｏでの変換を含む。

【0040】

本明細書で開示される使用のための組成物は、経口的に投与される又は眼及び眼瞼内又は周辺に局所的に適用されることを意図される。一の態様において、開示された組成物は局所適用のための調製物内の成分として含まれる。一の側面において、本発明は、開示された及び請求されたように組成物を含む眼製剤を提供する。従って、天然オイル由来の少なくとも１％、例えば少なくとも５質量％の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む組成物を含む眼製剤を提供する。第一の側面の文脈で記載された態様及び特徴は使用のための組成物に向けられ、また治療において使用のための製剤に向けられる本発明のこの他の側面に適用する。局所適用において、そのような眼製剤は、すなわち調製物は、例えば点眼剤、噴霧剤、軟膏、クリーム、軟膏、ローション、ゲル、眼内のミニタブレット等でありうる。眼又は眼組織へのそのような局所投与は、局所的にさらされる又はさらされうる眼の生体構造の任意の表面を含む。好ましくは、その組成物は角膜又は結膜に投与され、眼瞼辺縁の上部又は下部、マイボーム腺管、まつげ又は任意の眼又は眼瞼組織の領域へ投与される。そのような局所適用は例えば眼を閉じた場合に密封を作り出すこと、涙膜と相互作用することによって、均一にそれらを拡げることにより涙液を増強すること、及び一貫した視力の質を維持すること、そして涙膜を覆うことによって、それによって涙液の蒸発速度を下げること、そして眼及びマイボーム腺内又は周囲の炎症作用を軽減することにより誘導されうる。例えば、眼、眼瞼又は眼の周囲の皮膚への直接的な適用のための噴霧剤、点眼剤又はクリームの製剤のような眼製剤は、様々な成分及びＶＬＣＦｓの濃度からなりうる。噴霧剤又は点眼剤のような眼製剤におけるＶＬＣＦｓの典型的な濃度は、全体の局所製剤の０．１質量％から１％、又は最大２％のＶＬＣＰＵＦＡｓ及び随意に０．０１～１％のＶＬＣＭＵＦＡｓでありうる。他の成分は有効成分のヒアルロン酸ナトリウムでありうる。ヒアルロン酸は涙液の水への結合能力を補助し、損傷に対して細胞を保護する。精製水、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノオレート、くえん酸一水和物、トロメタモール、塩化カリウム、及び塩化ナトリウムは液体としての適用のためのエマルジョンを作製することにおいて及び皮膚を滑らかにすることにおいて関連する成分である。

【0041】

眼瞼又は眼周辺の皮膚への直接的な適用のためのクリーム製剤は様々な成分及びＶＬＣＦｓの濃度からなりうる。クリーム中の典型的なＶＬＣＦＡｓの濃度は総局所製剤の質量％で１％から２％、又は最大で５％、又はさらに最大で１０％のＶＬＣＰＵＦＡｓ及び随意に０．０１～５％のＶＬＣＭＵＦＡｓでありうる。他の成分は有効成分のヒアルロン酸ナトリウムでありうる。また、クリームエマルジョンを作製し皮膚を滑らかにし強化する典型的な他の成分は関連しているだろう。そのような成分の例は水、セテアリルアルコール、ジカプリリルエーテル、乳酸ナトリウム、ポリソルベート、パルミチン酸セチル、ステアリン酸ソルビタン、デヒドロ酢酸、安息香酸ナトリウム及びオイル及び植物原料からの抽出物である。

【0042】

局所適用における本発明のある態様において、ＯＡＨＦＡｓ及びＯＡＨＦＡｓのコレステリルエステルは、単体又は他の界面活性剤及び／又は乳化剤と一緒のいずれかの、好ましい界面活性剤である。一の態様において、ＯＡＨＦＡｓの形態のＶＬＣＰＵＦＡｓは使用のための組成物に含まれる。その付随的な他の界面活性剤及び／又は乳化剤は選択され、安定的な形態、例えば使用前に振とうする必要がなくてもよいことを提供する。ある態様において、本開示のその組成物はポリソルベートの群、例えばポリソルベート８０、及びポリアクリル酸（例えばカルボマー）から選択される医薬的に許容可能な界面活性剤及び／又は乳化剤を含む。

【0043】

前記組成物は、眼障害の治療用途であり、そして、ドライアイ疾患（乾性角結膜炎）及びマイボーム腺機能障害を含む、眼障害又は状態に関する眼症状を軽減又は緩和する。さらなる態様において、本発明の組成物は眼又は眼組織の対症療法及び治療に用いられうる。また、本発明の背景で述べたように、いくつかの薬物療法はマイボーム腺に負の影響をもたらす。開示された組成物は、副作用としてドライアイ症状を有する薬物療法中の患者により用いられる場合に都合の良い効果を有する。さらに、その組成物は、ヒトが加齢する又は環境条件、薬物療法若しくは健康関連因子を理由に、ドライアイ疾患にさらされるにつれて、健康な眼を維持すること並びにドライアイ疾患及び不快感の発生を防ぐためのサプリメントとして提供されうる。そしてよりさらに、その組成物は加齢、更年期及び他のホルモン変化、様々な疾病例えば狼瘡、関節リウマチ、強皮症又はシェーグレン症候群のような自己免疫疾患、アレルギー、糖尿病、様々な薬物療法の副作用、乾燥した環境、コンタクトレンズの使用、長いコンピュータ及びテレビの視聴時間、に関連する不快感の治療及び軽減において用いられうる。開示された組成物は他の眼科学的な障害、例えば対象の血管新生に関連するそれら、ここで例えばその血管新生が角膜、網膜、脈絡膜、ブドウ膜、又は虹彩血管新生である治療に有用であることが、さらに推定される。ある態様において、その血管新生に関連する眼科学的な障害は年齢に関連した加齢黄斑変性（ＡＭＤ）、シュタルガルト病、網膜症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、糖尿病性網膜症、網膜静脈閉塞症、鎌状赤血球網膜症、放射線網膜症、虹彩炎、又は結膜炎である。

【0044】

開示される治療は、眼瞼洗浄、温罨法及び穏やかな眼瞼罨法（ｌｉｄ ｃｏｍｐｒｓｓｉｏｎ）及びマッサージのようなマイボーム腺の外用治療において推奨される工程と優先的に組み合わせられうる。

【0045】

経口使用について、本開示のその組成物は様々な形態、例えば経口投与形態、例えば、錠剤又はソフト若しくはハードカプセル剤、咀嚼カプセル若しくはビーズ、又は代わりに液体組成物として、製剤化されうる。天然オイルのＶＬＣＦＡ分画の濃縮物、すなわち、本発明の組成物の取り込みによって、非濃縮の形態において、魚油、オキアミ油、藻類油又はカイアシ油のような天然オイルを消費することによって患者はより高い正の効果及びより少ない量の薬物／サプリメントの恩恵を被る。同時に、患者は、カロリー摂取並びに潜在的な負の影響の脂肪酸並びにＤＥＤ及び瞼板腺炎の軽減及び／又は治癒を促進しない脂質構成物のないことによる恩恵を被るだろう。一の態様において、開示したその組成物は経口摂取のための調製物に含まれる。経口投与において、その組成物は、例えばカプセル、錠剤又は任意の他の薬物送達の形態で投与されうる。例えば、その組成物はゼラチンカプセルのようにカプセル化されうる。本開示のある態様において、そのカプセルは約０．４００ｇから約１．６００ｇに及ぶ含量を満たす。例えば、ある態様において、そのカプセルは約０．４００ｇから約１．３００ｇ、約０．６００ｇから約１．２００ｇ、約０．６００ｇから約０．８００ｇ、約０．８００ｇから約１．０００ｇ、約１．０００ｇから約１．２００ｇ、又はその間の任意の量に及ぶ含量を満たす。例えば、ある態様において、そのカプセルは約０．６００ｇ、約０．８００ｇ、約１．０００ｇ又は約１．２００ｇの含量を満たす。

【0046】

局所適用において、濃縮していない天然オイルは、視覚をぼやけさせ、皮膚を染色することをもたらすと考えられる非実用的な及び／又は禁止された多量を示し、一方で開示された濃度の活性脂肪酸構成物は同様の問題なしに利用されうる。眼に局所投与されるその用量及びＶＬＣＰＵＦＡ－組成物の濃度は、調製物の追加成分によって調節されると考えられ、そして調製物の形態に依存している。当業者は試験及び調節し最適な用量及び濃度を同定できるだろう。眼への局所投与のための調製物は少なくとも一日一回適用されうり、例えば、朝及びよるである。

【0047】

当業者により本明細書で提供される開示と一貫性のある追加の態様が想像されるだろうと理解される。

【実施例0048】

実施例１：マウスにおけるＶＬＣＰＵＦＡによる補給－マイボーム腺の脂肪酸組成物への影響

【0049】

二つの型の海洋性脂質濃縮物（Ｌｉｐｉｄｍｉｘ１及びＬｉｐｉｄｍｉｘ２）をマウスの飼養研究で試験した。Ｌｉｐｉｄｍｉｘ１及び２を標準のカタクチイワシの魚油より調製した。その加工されていない魚油を精製し、エチル化し、そしてエチル化したオイルを分画し、そして短行程蒸留及び尿素沈殿により限界まで濃縮し、そしてＬｉｐｉｄｍｉｘ１について、リチウム沈殿を実施し、所望される組成物を得た。その画分を最終的にグリセロールによる酵素反応によって再エステル化しトリグリセリドにした。

【0050】

Ｅｐａｘ Ｎｏｒｗａｙはマウスの餌のペレットに含まれる二つの異なるｌｉｐｉｄｍｉｘを調製した。そのｌｉｐｉｄｍｉｘの脂肪酸は、少量のモノ－及びジグリセリドを含むトリグリセリド（ＴＧ）の形態だった。

【0051】

Ｌｉｐｉｄｍｉｘ１及び２の脂肪酸組成物をスプリット／スプリットレス注入（スプリットレスは１分間）によって、Ｒｅｓｔｅｋ Ｒｘｉ－５ｍｓキャピラリーカラム（長さ３０ｍ、内径０．２５ｍｍ、及び膜厚０．２５μｍ）、水素炎イオン化型検出器及びＴｏｔａｌＣｈｒｏｍ Ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて、Ｓｃｉｏｎ ４３６－ＧＣで分析した。そのキャリアガスは水素であった。脂肪酸の量をＣ２３：０、ＥＰＡ及びＤＨＡ標準を用いて計算した。標準が利用できなかったので、ＤＨＡとしての同様のレスポンスファクターをＶＬＣＰＵＦＡｓに仮定した。

【0052】

Ｌｉｐｉｄｍｉｘ１及び２の脂肪酸組成物を表１に示した。

【表1】

【0053】

試験食：
試験食１：１０％脂肪（５％大豆油、５％ラード）、１７％タンパク質、５％繊維、６２％炭水化物、ミネラル類、ビタミン類。
試験食２：１０％脂肪（５％Ｌｉｐｉｄｍｉｘ１、５％ラード）、１７％タンパク質、５％繊維、６２％炭水化物、ミネラル類、ビタミン類。
試験食３：１０％脂肪（５％Ｌｉｐｉｄｍｉｘ２、５％ラード）、１７％タンパク質、５％繊維、６２％炭水化物、ミネラル類、ビタミン類。

【0054】

従って、前記試験食１は標準のマウス食である。試験食２はＶＬＣＰＵＦＡｓ及びＶＬＣＭＵＦＡｓを含む魚油濃縮物を含む。試験食３はＶＬＣＰＵＦＡｓ又はＶＬＣＭＵＦＡｓを有しない魚油濃縮物を含む。

【0055】

全ての試験食を解凍して給餌するまで－２０℃で貯蔵した。

【0056】

動物：
Ｃｈａｒｌｅｓ ＲｉｖｅｒからのＣ５７／ｂｌ６株由来のマウスを飼養研究に用いた。その体重は約２５ｇだった。その動物を室温で餌及び水を自由に摂取できるケージに収容した。

【0057】

マイボーム腺：
各試験食群より５匹のマウスを飼養研究開始後３３日で屠殺した。訓練された人材によってマイボーム腺をマウスの眼瞼より注意深く切開した。その試料を直ちにドライアイスで冷凍し、Ｅｐａｘ Ｎｏｒｗａｙへ輸送し脂肪酸分析をした。

【0058】

試料調製：
０．０５１５７ｍｇ／ｍＬのＣ２３：０内部標準を含む１ｍＬの溶液を試験管に添加し、その溶液を窒素流下で蒸発させた。同じ試験管に続いてマイボーム腺を加え、そして組織の重量を書き留めた。メタノール中に０．５Ｍのナトリウム・メトキシドを含む３．５ｍＬの溶液を添加し、そしてその試験管を続いて１時間沸騰水浴内で加熱した。冷却後、５ｍＬのＢＣｌ₃を添加し、試験管を５分間沸騰水浴内で加熱した。冷却後試験管に０．６ｍＬのイソオクタンを添加し、５ｍＬの水中の飽和塩化ナトリウムによって洗浄した。そのイソオクタン相をマイクロバイアルに移し、ＧＣに直接注入した。

【0059】

マイボーム腺組織の脂肪酸分析
マイボーム腺組織を含む抽出物の脂肪酸分析をＡｇｉｌｅｎｔ ＣＰ Ｗａｘ ５２Ｂ（ＣＰ７７１３）カラムを用いてＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ，Ｃｌａｒｉｕｓ６８０／６００Ｔ ＧＣ－ＭＳで行った。三つの単イオンスキャン（６７、７９及び９１ｍ／ｚのＳＩＭ）からのピーク面積をＬＣ及びＶＬＣＰＵＤＡｓの定量化に用いた。（Ｃ２３：０に対して）ＤＨＡにおけるレスポンスファクターを既知の濃度のＤＨＡ及びＣ２３：０を有する標準溶液を用いることによって計算した。ＶＬＣＰＵＦＡｓにおいて利用可能な標準は無いので、ＤＨＡに関しては同様のレスポンスファクターを推定し、そしてＶＬＣＰＵＦＡにおけるｍｇ脂肪酸／ｇ組織を計算することに用いた。組織内のＶＬＣＭＵＦＡ Ｃ２４：１の含量を完全スキャンクロマトグラムより計算し、Ｃ２３：０に関する同様のレスポンスファクターを推定した。

【0060】

２２炭素数以上を有するＰＵＦＡｓの分析の結果を以下の表２に示す。各脂肪酸の結果をさらに図１～９において示し、ここで、
図１は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＤＨＡ（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。
図２は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＤＰＡ（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。
図３は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＣ２４：５（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。
図４は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＣ２４：６（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。
図５は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＣ２６：６（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。
図６は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＣ２６：７（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。
図７は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＣ２８：７（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。
図８は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＣ２８：８（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。
図９は試験食１、２又は３を与えたマウスからのマイボーム腺におけるＣ２４：１（ｍｇ／ｇ組織）の含量を提供する。

【表2】

【0061】

上記の結果は試験食１を与えられたマウスよりも試験食２及び３を与えられたマウスのマイボーム組織においてＤＰＡ及びＤＨＡの有意により高いレベルがあることを示す。これらの食餌はＤＰＡ及びＤＨＡの同様の量を含む。

【0062】

（ＶＬＣＰＵＦＡｓ及びＶＬＣＭＵＦＡｓを含む）試験食２を与えられたマウスからのマイボーム腺は、試験食１及び３を与えられたマウスからのマイボーム腺よりもＶＬＣＰＵＦＡｓの有意に高いレベルを示す。特にＶＬＣＰＵＦＡｓのＣ２６：６及びＣ２８：８において、これはとても明白である。図８はこれが、試験食１及び３におけるＣ２８：８においてシグナルを有さず、試験食２において明らかなピークを有することがとても明白であることを例示している。

【0063】

マウスにおける飼養研究は経口的に投与されるＶＬＣ脂肪酸がマイボーム腺により取り込まれることを示した。食餌内にＶＬＣＰＵＦＡを有するマウスからのこの眼組織は、コントロールよりもマイボーム腺内にＶＬＣＰＵＦＡｓのより高いレベルを有した。

【0064】

本実施例は、ＶＬＣＦＡｓの組成物がマイボーム腺組織により取り込まれ、ドライアイ疾患及び瞼板腺炎の治療のために用いられうる本発明を裏付ける。

【0065】

実施例２：マウスにおけるＶＬＣＰＵＦＡの補給－眼（眼球）の脂肪酸組成物への影響

【0066】

液体組成物：
実施例１で用いたように、同じ脂質混合物である、Ｌｉｐｉｄｍｉｘ１及び２、並びに同じ試験食の試験食１、２及び３を本実施例で用いた。

【0067】

動物：
Ｃｈａｒｌｅｓ ＲｉｖｅｒからのＣ５７／ｂｌ６株由来のマウスを飼養研究に用いた。その体重は約２５ｇだった。その動物を室温で餌及び水を自由に摂取できるケージに収容した。

【0068】

眼球の組織
試験食群２及び３からの試験食群１及び９の個体より８個体を飼養研究の開始後２９～３３日で屠殺した。熟練した人材により動物より網膜組織を含む全眼球を注意深く切開した。その試料を直ちにドライアイスで冷凍し、Ｎｏｆｉｍａ，Ｎｏｒｗａｙへ配送し、リン脂質（ＰＬ）の抽出及び分離した。調製した試料の脂肪酸分析はＥｐａｘ Ｎｏｒｗａｙで行われた。総脂質をＦｏｌｃｈ，Ｊ．Ｌｅｅｓ，Ｍ，Ｓｌｏａｎｅ Ｓｔａｎｌｅｙ ＧＨ．Ａ ｓｉｍｐｌｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｌｉｐｉｄｓ ｆｒｏｍ ａｎｉｍａｌ ｔｉｓｓｕｅ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．１９５７；２２６（１）：４９７－５０９．ＰＭＩＤ：１３４２８７８１による方法によってマウスの眼組織から抽出した。脂質を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いて分離した。そのリン脂質の画分を用いて脂肪酸分析した。

【0069】

全眼試料の脂肪酸分析：
脂肪酸分析をＡｇｉｌｅｎｔ ＣＰ Ｗａｘ５２Ｂ（ＣＰ７７１３）カラムを用いてＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ，Ｃｌａｒｉｕｓ６８０／ ６００Ｔ ＧＣ－ＭＳで行った。６７、７９及び９１ｍ／ｚの同時の単イオンスキャンよりクロマトグラムからのピーク領域をＬＣ及びＶＬＣＰＵＦＡ脂肪酸の定量化のために用いた。（Ｃ２３：０に対して）ＤＨＡにおけるレスポンスファクターを既知の濃度のＤＨＡ及びＣ２３：０を有する標準溶液を用いることによって計算した。ＶＬＣＰＵＦＡｓにおいて利用可能な標準は無いので、ＤＨＡに関しては同様のレスポンスファクターを推定し、そしてＶＬＣＰＵＦＡにおけるｍｇ脂肪酸／ｇ組織を計算することに用いた。

【0070】

全眼組織分析からの結果：
２２炭素数以上を有するＰＵＦＡｓの分析結果を以下の表３に示し、各脂肪酸における結果を図１０～１７に示し、ここで、
図１０は試験食１、２又は３を与えられたマウスからの眼（眼球）のＥＰＡ（ｍｇ／ｇ組織）含量。
図１１は試験食１、２又は３を与えられたマウスからの眼（眼球）のＤＨＡ（ｍｇ／ｇ組織）含量。
図１２は試験食１、２又は３を与えられたマウスからの眼（眼球）のＤＰＡｎ３（ｍｇ／ｇ組織）含量。
図１３は試験食１、２又は３を与えられたマウスからの眼（眼球）のＣ２４：５ｎ３（μｇ／ｇ組織）含量。
図１４は試験食１、２又は３を与えられたマウスからの眼（眼球）のＣ２４：６ｎ３（μｇ／ｇ組織）含量。
図１５は試験食１、２又は３を与えられたマウスからの眼（眼球）のＣ２６：５ｎ３（μｇ／ｇ組織）含量。
図１６は試験食１、２又は３を与えられたマウスからの眼（眼球）のＣ２６：６ｎ３（μｇ／ｇ組織）含量。
図１７は試験食１、２又は３を与えられたマウスからの眼（眼球）のＣ２８：８ｎ３（μｇ／ｇ組織）含量。

【表3】

【0071】

内部標準の重量は０．０９７４ｍｇである。

【0072】

眼球の組織分析の結果は、コントロール（試験食１）と比較して試験食２及び３を有する食餌を与えられたマウスの眼組織において有意により高いレベルのＥＰＡ、ＤＰＡ及びＤＨＡを示す。試験食２と３との間に有意な差は見られなかった。これらの食餌は同様の量のＥＰＡ、ＤＰＡ及びＤＨＡを含む。

【0073】

（ＶＬＣＰＵＦＡｓを含む）試験食２を与えられたマウスからの、網膜組織を含む、眼の眼球からのＰＬ－抽出物は試験食１及び３を与えられたマウスよりもより高いレベルを示す。特にＶＬＣＰＵＦＡｓのＣ２６：６及びＣ２８：８においてこれはとても明白である。

【0074】

結論：
超長鎖脂質成分は網膜及び網膜の機能において重要な役割を果たす。本実施例はＶＬＣＦＡｓが眼の組織によって取り込まれ、目の疾病の治療のために用いられうり、一般的に良い目の健康を維持する本発明を支持する。マウスの飼養研究は経口投与したＶＬＣ脂肪酸がマイバム及び眼球の組織に取り込まれたことを示した。ＶＬＣＰＵＦＡｓを含む食餌を与えられたマウスはマイバム及び眼の組織内にコントロールよりもより高いレベルのＶＬＣＰＵＦＡｓを有した。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【手続補正書】

【提出日】2023-11-13

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【請求項1】

ドライアイ疾患（ＤＥＤ）及び瞼板腺炎の治療における使用のための天然オイル由来の少なくとも１質量％の超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む組成物。

【外国語明細書】