特開 2023-27623 栄養補給欲促進剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023027623

(43)【公開日】2023-03-02

(54)【発明の名称】栄養補給欲促進剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/01 20060101AFI20230222BHJP

   A23L 33/18 20160101ALI20230222BHJP

   A61P 1/14 20060101ALI20230222BHJP

【ＦＩ】

A61K38/01

A23L33/18

A61P1/14

【審査請求】有

【請求項の数】5

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2021132852

(22)【出願日】2021-08-17

(71)【出願人】

【識別番号】391029336

【氏名又は名称】長田産業株式会社

(71)【出願人】

【識別番号】597065329

【氏名又は名称】学校法人 龍谷大学

(74)【代理人】

【識別番号】110000338

【氏名又は名称】弁理士法人 ＨＡＲＡＫＥＮＺＯ ＷＯＲＬＤ ＰＡＴＥＮＴ ＆ ＴＲＡＤＥＭＡＲＫ

(72)【発明者】

【氏名】石原 健吾

(72)【発明者】

【氏名】小根田 洋史

【テーマコード（参考）】

4B018

4C084

【Ｆターム（参考）】

4B018MD20

4B018MD49

4B018ME02

4B018MF12

4C084AA02

4C084BA03

4C084BA43

4C084CA14

4C084DC50

4C084MA52

4C084NA14

4C084ZA66

4C084ZA69

(57)【要約】

【課題】小麦から分離回収したグルテンの新規用途の開発。
【解決手段】本発明の栄養補給欲促進剤は、小麦グルテン加水分解物由来のペプチドを有効成分として含有する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

小麦グルテン加水分解物由来のペプチドを有効成分として含有する栄養補給欲促進剤。

【請求項2】

前記ペプチドが小麦グルテン加水分解物の水溶性成分のうちの高親水性画分由来のペプチドである、請求項１に記載の栄養補給欲促進剤。

【請求項3】

前記栄養補給欲促進剤が食欲促進剤である、請求項１又は２に記載の栄養補給欲促進剤。

【請求項4】

前記栄養が糖質である、請求項１～３のいずれか１項に記載の栄養補給欲促進剤。

【請求項5】

経口投与用である、請求項１～４のいずれか１項に記載の栄養補給欲促進剤。

【請求項6】

高負荷運動者用、患者用、又は、高齢者用である、請求項１～５のいずれか１項に記載の栄養補給欲促進剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、栄養補給欲促進剤に関する。

【背景技術】

【0002】

小麦には澱粉及びグルテン等が含まれており、澱粉及びグルテンをそれぞれ分離回収して利用することができる。

【0003】

例えば、特許文献１には、小麦グルテン又は小麦グルテン加水分解物を含む摂食抑制剤が記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特開２０１３－８２６５８号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

しかしながら、特許文献１の他に、グルテンの更なる用途開発が望まれている。

【0006】

本発明は、小麦から分離回収したグルテンの新規用途を開発することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明者らは、上述の課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、意外にも、小麦から分離回収したグルテンを加水分解して得られたペプチドが栄養補給欲促進作用を有することを見出して、本発明を完成するに至った。

【0008】

上記の課題を解決するために、本発明は、以下に示す態様を含む。
＜１＞小麦グルテン加水分解物由来のペプチドを有効成分として含有する栄養補給欲促進剤。
＜２＞前記ペプチドが小麦グルテン加水分解物の水溶性成分のうちの高親水性画分由来のペプチドである、＜１＞の栄養補給欲促進剤。
＜３＞前記栄養補給欲促進剤が食欲促進剤である、＜１＞又は＜２＞の栄養補給欲促進剤。
＜４＞前記栄養が糖質である、＜１＞～＜３＞のいずれか１つの栄養補給欲促進剤。
＜５＞経口投与用である、＜１＞～＜４＞のいずれか１つの栄養補給欲促進剤。
＜６＞高負荷運動者用、患者用、又は、高齢者用である、＜１＞～＜５＞のいずれか１つの栄養補給欲促進剤。

【発明の効果】

【0009】

本発明の一態様によれば、小麦から分離回収したグルテンの新規用途を提供できる。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1】小麦グルテンのアミノ酸組成の一例を示す図である。

【図2】小麦グルテン加水分解ペプチドの製造工程の一例を示す図である。

【図3】小麦グルテン加水分解ペプチドの分析結果を示す図である。

【図4】小麦グルテン加水分解ペプチドのＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を示す図である。

【図5】小麦グルテン加水分解ペプチドのアレルゲン試験の結果を示す図である。

【図6】小麦グルテン加水分解ペプチドのカラム分画品の栄養補給欲調節の評価結果を示す図である。

【図7】小麦グルテン加水分解ペプチドのカラム分画品の分析結果を示す図である。

【図8】小麦グルテン加水分解ペプチドの活性炭処理物の分析結果を示す図である。

【図9】小麦グルテン加水分解ペプチド溶液をマウスに投与後のリック数の変化を示す図である。

【図10】活性炭添加量が０倍である小麦グルテン加水分解ペプチド溶液をマウスに投与後のリック数の変化を示す図である。

【図11】活性炭添加量が０．４倍である小麦グルテン加水分解ペプチド溶液をマウスに投与後のリック数の変化を示す図である。

【図12】活性炭添加量が１．０倍である小麦グルテン加水分解ペプチド溶液をマウスに投与後のリック数の変化を示す図である。

【図13】小麦グルテン加水分解ペプチドの製造工程の一例を示す図である。

【図14】実施例２の小麦グルテン加水分解ペプチド溶液をマウスに投与後のリック数の変化を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0011】

〔栄養補給欲促進剤〕
本発明の栄養補給欲促進剤は、小麦グルテン加水分解物由来のペプチドを有効成分として含有する。小麦グルテン加水分解物由来のペプチドは以下、「グルテン分解ペプチド」と略記する場合がある。栄養補給欲の例として、食欲等が挙げられる。

【0012】

（グルテン分解ペプチド）
グルテンは、小麦に含まれるタンパク質であり、グルテニンとグリアジンが会合している。

【0013】

図１には、小麦グルテンのグリアジンのアミノ酸配列の一例を示す。また、小麦グルテンのグリアジン及びグルテニンの一例に含まれるグルタミン（Ｑ）の割合を示す。小麦グルテンのグリアジン及びグルテニンを構成するアミノ酸組成の約３０～４０％がグルタミン（Ｑ）である。

【0014】

栄養補給欲促進剤に含まれるグルテン分解ペプチドは、１種類であってもよいし、２種類以上のグルテン分解ペプチドの混合物であってもよい。

【0015】

栄養補給欲促進作用を増強させる点等で、グルテン分解ペプチドはグルタミンリッチなペプチドであることが好ましい。本明細書において、グルタミンリッチなペプチドとは、当該ペプチドを構成するアミノ酸残基の総数に対する、グルタミン残基の割合が１０％以上１００％の範囲内であり、好ましくは３０％以上１００％以下であるペプチドのことである。

【0016】

グルテン分解ペプチドの分子量は、例えば、３００Ｄａ以上１５ＫＤａ以下であってもよく、３００Ｄａ以上１０ｋＤａ以下であることが好ましい。

【0017】

グルテン分解ペプチドを得るために、市販のグルテンをプロテアーゼ（加水分解酵素）によって加水分解させてもよい。また、小麦から澱粉を回収することによって得られたグルテンを加水分解させてもよい。グルテン分解ペプチドを得るための工程の一例を図２に示す。

【0018】

プロテアーゼの例として、酸性プロテアーゼ、中性プロテアーゼ及びアルカリ性プロテアーゼ等が挙げられる。本発明の効果を十分に発揮できる点で、中性プロテアーゼを用いることが好ましい。また、プロテアーゼの例として、微生物由来プロテアーゼ、植物由来プロテアーゼ及び哺乳類由来プロテアーゼ等が挙げられる。加水分解条件（例えば、ｐＨ、反応時間及び反応温度、等）は、プロテアーゼの種類、基質濃度及び酵素濃度等によって適宜選択することができる。

【0019】

プロテアーゼとして中性プロテアーゼを使用する場合、ドウ形成による加水分解抑制が引き起こされないように、中性（ｐＨ７．０）の水に少量のグルテンとプロテアーゼをまず投入することが好ましい。そして、残りのグルテンを徐々に投入して、加水分解処理を行うことが好ましい。

【0020】

一例では、中性プロテアーゼは、グルテンの総重量に対して０．１重量％以上で５重量％以下の範囲内で用いる。用いられる中性プロテアーゼの量は、グルテンの総重量に対して、好ましくは０．２重量％以上、より好ましくは０．３重量％以上であり、その上限は、好ましくは２重量％以下、より好ましくは１重量％以下又は０．７重量％以下である。中性の水に投入される少量のグルテンの量は特に限定はされないが、一例では、グルテンの総重量の１％以上で１０％以下の範囲内である。少量のグルテンの量は、グルテンの総重量の２％以上であることが好ましい場合があり、３％以上であることがより好ましい場合があり、その上限は７％以下であることが好ましい場合があり、５％以下であることがより好ましい場合がある。

【0021】

グルテンを加水分解して得られたグルテン分解ペプチドは、好ましくは水溶性成分からなるものである。水溶性成分からなるグルテン分解ペプチドは、例えば、グルテンを加水分解した後に、水不溶性成分をろ過等で取り除くことによって得られる。グルテン分解ペプチドは、さらに、逆相クロマトグラフィー及びイオン交換クロマトグラフィー等のクロマトグラフィー又は活性炭等によって精製してもよい。クロマトグラフィーを用いて精製する場合、溶離液はメタノール及びエタノール等の低級アルコールと水との混合溶液を用いればよい。栄養補給欲促進作用を増強させる点等で、グルテン分解ペプチドは、グルテン加水分解物の水溶性成分のうちの高親水性画分由来のペプチド（高親水性を有するペプチド）であることが好ましい。本明細書において、「高親水性画分」とは、グルテン加水分解物の水溶性成分を、Sep-Pak C18カートリッジ（Waters社製）に供したときに、１０質量％以下のメタノールを含有するメタノールと水との混合溶液で溶出する画分を指す。

【0022】

本発明の栄養補給欲促進剤におけるグルテン分解ペプチドの含有量は、後述する栄養補給欲促進剤の形態により異なるが、乾燥質量を基準として、１～１００質量％であってもよく、２～９９質量％であってもよく、５～９５質量％であってもよく、１０～９０質量％であってもよい。

【0023】

本発明の栄養補給欲促進剤は、穀物である小麦を原料としているので、安全性が高い。また、実施例に示すように、グルテンを加水分解することによってアレルギー源であるグリアジンが消失しているので、アレルギーの観点からも安全である。

【0024】

（栄養補給欲促進剤のその他の成分及び剤形）
本発明の栄養補給欲促進剤は、グルテン分解ペプチド以外の他の成分をさらに含んでいてもよい。当該他の成分は特に限定されないが、例えば、薬学的に許容される担体、潤滑剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧調整用の塩類、緩衝剤、着色剤、香味料、甘味料、抗酸化剤、及び粘度調整剤等が挙げられる。また、必要に応じて、公知の栄養補給欲促進剤を、本発明の栄養補給欲促進剤の一構成として加えて複合剤を構成してもよい。

【0025】

上記薬学的に許容される担体は、特に限定されないが、担体であって、栄養補給欲促進作用を阻害せず、かつ、投与対象となるヒト又は動物に対して実質的な悪影響を及ぼさないという性質を備えることが好ましい。

【0026】

上記担体としては、この分野で既報のものを広く使用でき、具体的には、例えば、水、各種塩溶液、アルコール、植物油、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、パラフィン、脂肪酸モノグリセリド、脂肪酸ジグリセリド、ヒドロキシメチルセルロース、及びポリビニルピロリドン等が挙げられるが、特にこれらに限定されない。担体の種類は、栄養補給欲促進剤の剤形、及び投与方法等に応じて、適宜選択すればよい。

【0027】

栄養補給欲促進剤の剤形も特に限定されず、例えば、錠剤、丸剤、散剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤等の経口剤；坐剤等の経腸製剤；点滴剤；注射剤；等が挙げられ、好ましくは注射剤又は経口投与用の剤形である。例えば、携帯性及び投与の容易さ等の観点では、錠剤及び液剤等の経口投与の剤形が好ましい。

【0028】

本発明の栄養補給欲促進剤は、特定保健用食品及び栄養機能食品等の保健機能食品；栄養補助食品及び健康補助食品等のサプリメント；飼料；ペットフード；等の食品としても使用することができる。

【0029】

（投与対象）
投与対象は、ヒト又は動物であり、より具体的には、ヒトを含む哺乳類からなる群より選択される何れかである。中でも、哺乳類に対して特に好適に本発明の栄養補給欲促進剤が適用される投与対象となる哺乳類の種類は特に限定されないが、マウス、ラット、ウサギ、モルモット及びヒトを除く霊長類等の実験動物；イヌ及びネコ等の愛玩動物（ペット）；ブタ、ウシ、ヤギ、ヒツジ及びウマ等の家畜；ヒト；が挙げられ、好ましくは家畜又はヒトであり、特に好ましくはヒトである。

【0030】

また、本発明の栄養補給欲促進剤の投与対象の例として、食欲等の栄養補給欲不振が発生し易い高負荷運動者、高齢者及び患者等である。高負荷運動者の例として、ランニング、自転車競技、水泳、トライアスロン、サッカー、テニス、バスケットボール、バドミントン等のスポーツをする運動者が挙げられる。

【0031】

（栄養補給欲促進剤の投与方法・用量）
本発明の栄養補給欲促進剤の投与方法は特に限定されず、経口投与、静脈内又は動脈内への血管内投与、腸内投与といった手法によって全身投与されてもよく、経皮投与、舌下投与といった手法によって局所投与されてもよい。好ましい一つの投与態様では、投与の容易さ等の観点で優れるため、経口投与される。

【0032】

上記栄養補給欲促進剤の投与量は、投与対象となる上記ヒト又は動物の年齢、性別、体重、症状、投与経路、投与回数、及び投与期間等に応じて適宜設定すればよい。また、必要であれば、栄養補給欲促進剤を用いたインビボアッセイを事前に行い、過度の実験を要することなく上記投与量を決定することができる。

【0033】

本発明の栄養補給欲促進剤は栄養補給前に投与されてもよいし、栄養補給中に投与されてもよい。

【0034】

本発明の栄養補給欲促進剤を摂取することによって、栄養（栄養成分）を補給したいという欲求を促進させることができる。当該栄養として、単糖類、二糖類、多糖類等の炭水化物（糖質）；アミノ酸；タンパク質；脂肪酸；脂質；水分；ミネラル；ビタミン；食物繊維；等が挙げられる。本発明の栄養補給欲促進剤の摂取によって、１種類又は２種類以上の栄養の補給欲を促進させることができる。実施例に示すように、本発明の栄養補給欲促進剤は糖（特に、スクロース）の補給欲促進に効果を奏する。また、本発明の栄養補給欲促進剤は、糖とタンパク質と脂質との組み合わせの補給欲の促進に効果を奏する。

【0035】

本発明の栄養補給欲促進剤は、食欲促進剤としても機能する。食欲促進剤として使用する場合は食前に投与されてもよい、食間に投与されてもよい。

【0036】

以下に実施例を示し、本発明の実施の形態についてさらに詳しく説明する。もちろん、本発明の以下の実施例に限定されるものではなく、細部については様々な態様が可能であることはいうまでもない。さらに、本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、それぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された文献の全てが参考として援用される。

【実施例0037】

以下の実施例中、特に記載がない限り、％は質量％を表す。

【0038】

〔実施例１〕小麦グルテン加水分解ペプチドの調製
小麦グルテン（長田産業製、商品名：フメリットＡ２）を基質として、図２に記載の製造工程にしたがって、水溶性成分からなる小麦グルテン分解ペプチド（以下、「ＷＧＨ－２」と略記する場合がある）を調製した。プロテアーゼとして、B.subtilis由来中性金属プロテアーゼ（ＨＢＩ製、商品名：オリエンターゼ９０Ｎ）を使用した。

【0039】

〔評価例１〕ＷＧＨ－２の成分分析
ＷＧＨ－２の成分分析を、一般財団法人日本食品分析センターに依頼して行った。分析結果を図３に示す。図３に示すように、ＷＧＨ－２に含まれるタンパク質量が７７．５％であり、そのうち４４％がグルタミン（Ｑ）及びグルタミン酸（Ｅ）であった。分析法の性質上、グルタミンとグルタミン酸は区別できない。しかしながら、図１より、親タンパク質である小麦グルテンのアミノ酸組成から、ＷＧＨ－２の実質大部分がグルタミン（Ｑ）であると考えられる。

【0040】

〔評価例２〕ＷＧＨ－２のＳＤＳ－ＰＡＧＥによる評価
ＷＧＨ－２のＳＤＳ－ＰＡＧＥによる評価結果を図４に示す。ＷＧＨ－２のレーンでは、グルテンが検出されなかったことから、グルテンはＳＤＳ－ＰＡＧＥでは検出できないレベルまでに分解されていることが分かった。

【0041】

〔評価例３〕ＷＧＨ－２のアレルゲン試験
食物アレルゲン件検出キットである、アレルゲンアイ（登録商標）イムノクロマトシングルステップ（登録商標）（プリマハム製）を使用して、ＷＧＨ－２の小麦（グリアジン）に対するアレルゲン試験を行った。結果を図５に示す。

【0042】

グルテンでは小麦（グリアジン）に対して陽性であった一方、ＷＧＨ－２は陰性であった（検出限界：２ｐｐｍ）。評価例３の結果から、ＷＧＨ－２に対してグルテンフリーである旨の表示が可能であることが分かった。例えば、欧州及び米国等では、グルテン濃度が２０ｐｐｍ以下である場合、グルテンフリーである旨の表示が可能である。

【0043】

〔評価例４〕ＷＧＨ－３のカラム分画品の栄養補給欲調節効果試験
ＷＧＨ－２の１０ｋＤａ膜透過画分（低分子画分）を凍結乾燥させて、ＷＧＨ－３を得た。Sep-Pak Vac 35 cc (10 g) C18 カートリッジ（Waters社製）に、４０ｍｇ／ｍＬのＷＧＨ－３溶液を１０ｍＬ／カートリッジになるように添加し、０～５０％のＭｅＯＨ水溶液１００ｍＬで溶出させた。溶出液を凍結乾燥し、凍結乾燥物をマウスに１ｇ／１０ｍＬ／ｋｇ（体重）の投与用量でゾンデにより胃内投与を行った。ケージに設置した水溶液（２％スクロース含有水溶液）入りボトルを舐める（リック）回数を電気的に計測して、栄養補給欲の指標とした。

【0044】

また、凍結乾燥物について以下の条件でＨＰＬＣ分析を行った。１００％の溶離液Ａを開始から５分間送液した。そして、開始５分から２５分間で５０％溶離液Ａ／５０％溶離液Ｂとなるように、溶離液の組成を直線的に変化するように送液した。
＜条件＞
カラム：TSKgel ODS-80TM（4.6 mm (ID)×15 cm）（東ソー社製）
溶離液Ａ：水（Milli Q water）
溶離液Ｂ：ＭｅＯＨ
流速：１．２ｍＬ／分
温度：４０℃

【0045】

評価結果を図６に示す。図６中、例えば、「ＷＧＨ ０－１０％」は、０～１０％のＭｅＯＨ溶出画分の結果を示す。図６に示すように、Sep-Pak C18カートリッジによる分画において、０～１０％のＭｅＯＨ溶出画分（高親水性画分）では、リック回数が増えて栄養補給欲促進傾向にあることが分かった。０％～１０％のＭｅＯＨ溶出画分はＨＰＬＣ分析において０～１５分に溶出した。一方、１０％超～５０％のＭｅＯＨ溶出画分（低親水性画分）では、リック回数が減って栄養補給欲抑制傾向にあることが分かった。１０～５０％のＭｅＯＨ溶出画分はＨＰＬＣ分析において１５～３５分に溶出した。

【0046】

〔評価例５〕ＷＧＨ－２のカラム分画品の分析
小麦グルテン分解ペプチド中の低親水性成分の除去（栄養補給欲促進効果の増強）を目的とし、２０ｍｇ／ｍＬのＷＧＨ－２溶液を、Diaion HP20（SIGMA-ALDRICH社製、bed volume：125 mL）に連続的に供した。そして、溶出液を５０ｍＬずつ回収した。回収した溶出液のＨＰＬＣ分析の結果を図７に示す。ＨＰＬＣの分析条件は評価例４と同様である。また、ＷＧＨ－２については評価例４と同様の評価試験を行い、リック回数を計測して、栄養補給欲傾向を評価した。図７に記載した促進傾向および抑制傾向とは、ＷＧＨ－２について栄養補給欲傾向を評価した結果である。

【0047】

図７に示すように、ＨＰＬＣ分析の結果より、Diaion HP20（bed volume：125 mL）に対して、素通り画分（ＨＰＬＣ分析において０～５分に溶出）の回収であれば４５０ｍＬ（Ｆｒ．９）において、ペプチド量６．５ｇ（52 mg peptide/ml bed vol.)）が処理可能であることが分かった。また、栄養補給欲促進傾向画分（ＨＰＬＣ分析において０～１５分に溶出）の回収であれば７００ｍＬ（Ｆｒ．１４）において、ペプチド１１．５ｇ（92 mg peptide/ml bed vol.）が処理可能であることが分かった。

【0048】

〔評価例６〕ＷＧＨ－３の活性炭処理
小麦グルテン分解ペプチド中の低親水性成分の除去（栄養補給欲促進効果の増強）を目的とし、ＷＧＨ－３に対する固形分比で０倍、０．２倍、０．４倍、０．６倍、０．８倍又は１倍の活性炭処理を施した。活性炭として、ＦＰ－６（大阪ガスケミカル社製、白鷺ＷＰ－Ｚ）を使用した。活性炭処理後のＷＧＨ－３を評価例４と同じ分析条件でＨＰＬＣに供した。ＨＰＬＣの分析結果を図８に示す。

【0049】

図８に示すように、活性炭の添加量が多くなるにつれ、低親水性画分（栄養補給欲抑制成分）を大幅に除去したペプチド粉末を得ることができることが分かった。

【0050】

〔評価例７〕ＷＧＨ－２のリック数による栄養補給欲促進作用の検証
雄性５週齢Ｃ５７ＢＬ６マウス８匹を用いて、ケージに設置した２％スクロース水溶液入りボトルを舐める（リック）回数を電気的に計測して、栄養補給欲の指標とした。被験試料（ＷＧＨ－２）は、１又は３ｇ／１０ｍＬ／ｋｇ体重の投与用量でゾンデにより胃内投与を行った。コントロールとして生理食塩水を用いた。投与３０分後から４０分後までの１０分間、リック測定装置（メルクエスト社製）にて経時的に累積リック数を測定した。測定結果を図９に示す。

【0051】

図９のグラフの縦軸は累積リック数を示し、横軸は被験試料投与後３０分からの経過時間を示す。図９のグラフに示すように、生理食塩水（Saline）を投与した時に比べて、ＷＧＨ－２を投与することによってリック数が増加した。この結果から、ＷＧＨ－２溶液（３ｇ／１０ｍＬ／ｋｇ）には、リック数を増加させる成分が含まれている可能性が認められた。

【0052】

ＷＧＨ－２からリック数増加成分を得るために、ＷＧＨ－２のカラム分画品についても試験を行った。しかしながら、カラムを利用した分画では収量が少なく、少ない投与量（１ｇ／１０ｍＬ／ｋｇ）では、２２回の試験を行ったが安定した実験結果を得ることが困難であった。

【0053】

〔評価例８〕ＷＧＨ－３の活性炭処理物のリック数による栄養補給欲促進作用の検証
評価例６で得られたＷＧＨ－３の活性炭処理物中、活性炭添加量０倍（ＷＧＨ－３：活性炭＝１：０）、０．４倍（ＷＧＨ－３：活性炭＝１：０．４）及び１．０倍（ＷＧＨ－３：活性炭＝１：１）の処理物について、評価例７と同様に累積リック数を測定した。測定結果を図１０（活性炭添加量０倍）、図１１（活性炭添加量０．４倍）及び図１２（活性炭添加量１．０倍）に示す。

【0054】

図１０～１２に示すように、活性炭添加量１．０倍で処理したＷＧＨ－３の活性炭処理物において、コントロールと比べて有意にリック数の増加が認められた。したがって、活性炭処理によって、栄養補給欲促進作用が高まることが分かった。

【0055】

〔評価例９〕栄養補給欲促進効果の有無の検討
ＷＧＨ－２の１０ｋＤａ膜透過画分（低分子画分）であるＷＧＨ－３と、評価例６で得られたＷＧＨ－３の活性炭処理物（活性炭添加量１．０倍）について、栄養成分による栄養補給欲促進効果について検討した。ケージに設置したボトル中の溶液を表１に示す溶液に変更した以外は、評価例７と同様の手順で評価を行った。評価結果を表１に示す。

【0056】

【表1】

【0057】

表１中、「促進」は、コントロールとして生理食塩水を使用した時に比べてリック数が増え、栄養補給欲促進効果があったことを示す。「抑制」は、リック数がコントロールと比較して減り、栄養補給欲促進効果があったことを示す。「なし」は、リック数がコントロールと比較して変化がなく、栄養補給欲の促進効果又は抑制効果がなかったことを示す。「－」は評価を行っていないことを示す。

【0058】

表１に示すように、リック溶液に含まれる栄養成分の種類又は組み合わせによって、ＷＧＨ－３及びＷＧＨ－３の活性炭処理物は栄養補給欲促進効果を発揮することが分かった。

【0059】

〔実施例２〕小麦グルテン加水分解ペプチドの調製
小麦グルテン（長田産業製、商品名：フメリットＡ２）を基質として、図１３に記載の製造工程にしたがって、小麦グルテン分解ペプチド（以下、「ＷＧＨ－５」と略記する場合がある）を調製した。図１３に記載の製造工程は図２に記載の製造工程とは異なり、クエン酸を添加していない。プロテアーゼとして、B.subtilis由来中性金属プロテアーゼ（ＨＢＩ製、商品名：オリエンターゼ９０Ｎ）を使用した。

【0060】

〔評価例９〕ＷＧＨ－５のリック数による栄養補給欲促進作用の検証
雄性５週齢Ｃ５７ＢＬ６マウスを用いて、ケージに設置した２％スクロース水溶液入りボトルを舐める（リック）回数を電気的に計測して、栄養補給欲の指標とした。被験試料（ＷＧＨ－５）は、１又は３ｇ／１０ｍＬ／ｋｇ体重の投与用量でゾンデにより胃内投与を行った。コントロールとして生理食塩水を用いた。投与３０分後から４０分後までの１０分間、リック測定装置にて経時的に累積リック数を測定した。測定結果を図１４に示す。

【0061】

図１４のグラフの縦軸は累積リック数を示し、横軸は被験試料投与後３０分からの経過時間を示す。図１４のグラフに示すように、生理食塩水を投与した時に比べて、ＷＧＨ－５を投与することによってリック数が増加した。この結果から、ＷＧＨ－５溶液（３ｇ／１０ｍＬ／ｋｇ）には、リック数を増加させる成分が含まれている可能性が認められた。

【産業上の利用可能性】

【0062】

本発明は、高負荷運動者、患者及び高齢者等のための栄養補給欲促進剤として利用することができる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【手続補正書】

【提出日】2022-12-02

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【請求項1】

小麦グルテン加水分解物由来のペプチドを有効成分として含有し、
前記小麦グルテン加水分解物は、小麦グルテンの中性プロテアーゼ処理物由来であり、
前記ペプチドが小麦グルテン加水分解物の水溶性成分のうち、水又は０％超～１０％メタノール水溶液により抽出される画分由来のペプチドである、栄養補給欲促進剤。

【請求項2】

前記栄養補給欲促進剤が食欲促進剤である、請求項１に記載の栄養補給欲促進剤。

【請求項3】

前記栄養が糖質である、請求項１又は２に記載の栄養補給欲促進剤。

【請求項4】

経口投与用である、請求項１～３のいずれか１項に記載の栄養補給欲促進剤。

【請求項5】

高負荷運動者用、患者用、又は、高齢者用である、請求項１～４のいずれか１項に記載の栄養補給欲促進剤。