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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023033235
(43)【公開日】2023-03-09
(54)【発明の名称】種子発芽促進剤
(51)【国際特許分類】
A01N 37/36 20060101AFI20230302BHJP
A01P 21/00 20060101ALI20230302BHJP
A01N 25/00 20060101ALI20230302BHJP
A01N 37/04 20060101ALI20230302BHJP
A01N 37/44 20060101ALI20230302BHJP
A01N 37/42 20060101ALI20230302BHJP
A01N 63/20 20200101ALI20230302BHJP
A01N 25/02 20060101ALI20230302BHJP
A01G 7/06 20060101ALI20230302BHJP
【ＦＩ】
A01N37/36
A01P21/00
A01N25/00 102
A01N37/04
A01N37/44
A01N37/42
A01N63/20
A01N25/02
A01G7/06 A
【審査請求】未請求
【請求項の数】6
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2022134569
(22)【出願日】2022-08-26
(31)【優先権主張番号】P 2021139427
(32)【優先日】2021-08-27
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(71)【出願人】
【識別番号】391009877
【氏名又は名称】雪印種苗株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】100162396
【弁理士】
【氏名又は名称】山田 泰之
(74)【代理人】
【識別番号】100122954
【弁理士】
【氏名又は名称】長谷部 善太郎
(72)【発明者】
【氏名】小鑓 亮介
(72)【発明者】
【氏名】佐久間 太
(72)【発明者】
【氏名】副島 洋
【テーマコード（参考）】
2B022
4H011
【Ｆターム（参考）】
2B022EA01
4H011AB03
4H011BB06
4H011BB21
4H011DA13
4H011DD03
(57)【要約】
【課題】新規な植物成長調整剤を提供すること。
【解決手段】
化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を有効成分として含有する、種子の発芽促進剤及び／又は播種する種子処理用の発芽促進剤。
【化１】
（但し化学式１の（Ａ）は、二重結合したＯまたはＯＨ、（Ｒ）はＯＨ、ＯＣＨ３、ＯＣ２Ｈ５、ＮＨ２のいずれかを表す）
【化２】
（但し化学式２の（Ｒ１）はＯＨ又はＯＣＨ３、（Ｒ２）はＯＨ又はＯＣＨ３、（Ｒ３）はＨ、ＯＨ、ＮＨ２のいずれかを表す）
【選択図】なし
【解決手段】
化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を有効成分として含有する、種子の発芽促進剤及び／又は播種する種子処理用の発芽促進剤。
【化１】
【化２】
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を有効成分として含有する、最適発芽温度以下の低温条件で播種された種子の発芽促進剤及び／又は最適温度条件以下の低温環境で播種する種子処理用の発芽促進剤。
（但し化学式１の（Ａ）は、二重結合したＯまたはＯＨ、（Ｒ）はＯＨ、ＯＣＨ３、ＯＣ２Ｈ５、ＮＨ２のいずれかを表す）
（但し化学式２の（Ｒ１）はＯＨ又はＯＣＨ３、（Ｒ２）はＯＨ又はＯＣＨ３、（Ｒ３）はＨ、ＯＨ、ＮＨ２のいずれかを表す）
【化1】
【化2】
【請求項2】
化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物の含有量が０．００１～１０質量％である、請求項１に記載の発芽促進剤。
【請求項3】
化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される化合物を含む乳酸菌の培養液又は乳酸菌の培養液の希釈物からなる請求項１または２に記載の発芽促進剤。
【請求項4】
乳酸、乳酸エチル、乳酸アミド、ピルビン酸、ピルビン酸メチル、こはく酸、こはく酸ジメチル、リンゴ酸、アスパラギン酸、クエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を有効成分とする請求項１に記載の発芽促進剤。
【請求項5】
請求項１、２、４のいずれかに記載の発芽促進剤を含有する溶液に、種子を浸漬又は前記溶液を塗布した後播種することを特徴とする低温による種子の発芽抑制及び／又は発芽遅延を予防する方法。
【請求項6】
請求項１、２、４のいずれかに記載の発芽促進剤の溶液に浸漬又は発芽促進剤の塗布処理を行った低温発芽処理種子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、低温下における種子の発芽を促進する作用を有する剤及び種子の処理方法に関する。
【背景技術】
【0002】
一部の種を除いて、種子植物の種子は、登熟を経て十分に成熟すると水分含量が少なくなり、種子内の代謝活性が著しく抑制される休眠状態にある。この休眠状態にある種子は、休眠を解除（打破）する必要がある。また、多くの種子は、低温条件下に一定期間置かれると、休眠が解除される（春化）。休眠解除に低温処理を必要とする種子では、低温条件に置かれると発芽抑制物質であるアブシジン酸が減少し、発芽促進物質であるジベレリン様物質が増加することが知られている。また、種皮や果実が硬く、透水性のない硬実種子は、種皮が腐食するなどして吸水性を獲得しなければ、休眠が解除されない。このような休眠を硬実休眠といい、実験的には濃硫酸などによる化学処理、あるいはヤスリ等による機械的な種皮の除去によって打破することができる。
なお、休眠が解除された種子、あるいは休眠性のない種子が発芽に不適な環境に置かれた場合、二次休眠に入り、その後発芽に好適な環境に置かれても発芽できなくなることがある。
なお、休眠が解除された種子、あるいは休眠性のない種子が発芽に不適な環境に置かれた場合、二次休眠に入り、その後発芽に好適な環境に置かれても発芽できなくなることがある。
【0003】
休眠が解除された種子が発芽するには、発芽に適した水分や温度、光などといった条件を満たした環境に種子が置かれる必要がある。
中でも温度は重要な条件の一つと考えられている。発芽可能な温度は、植物種、光条件、種子の成熟度などによって著しく異なる。発芽の最適温度は、一般に温帯の植物で２０～２５℃、熱帯の植物で３０～３５℃である。
一方で、発芽に適さない温度条件に、播種後の種子が置かれた場合、代謝が阻害されるなどして発芽が抑制されることが知られている。特に低温環境下では、代謝活性が低下して発芽に必要なエネルギー供給サイクルが正常に機能しないため、発芽が遅延する。このため、播種後の温度が低下することは、その後の発芽に重要な影響を与える。しかしこのエネルギー供給サイクルの正常化方法や機能低下を制御する方法は、いまだに開発されていない。
中でも温度は重要な条件の一つと考えられている。発芽可能な温度は、植物種、光条件、種子の成熟度などによって著しく異なる。発芽の最適温度は、一般に温帯の植物で２０～２５℃、熱帯の植物で３０～３５℃である。
一方で、発芽に適さない温度条件に、播種後の種子が置かれた場合、代謝が阻害されるなどして発芽が抑制されることが知られている。特に低温環境下では、代謝活性が低下して発芽に必要なエネルギー供給サイクルが正常に機能しないため、発芽が遅延する。このため、播種後の温度が低下することは、その後の発芽に重要な影響を与える。しかしこのエネルギー供給サイクルの正常化方法や機能低下を制御する方法は、いまだに開発されていない。
【0004】
一方、近年の農家戸数の減少、農業従事者の高齢化、経営規模の拡大あるいは春先の農作業の競合等を背景に、これまで育苗後に移植栽培されてきた作物を、直播栽培する割合が増えてきている。例えば、田植えに代えて直播による水稲栽培など、直播栽培法が普及してきた。しかし直播栽培は、移植栽培に比べて圃場での生育期間が長期化し、収量が少なくなる。このため直播栽培は、春先のできるだけ早い時期に播種し、長い生育期間を確保することが重要である。これは北海道など高緯度地域の農業では特に重要視されている。
例えばテンサイは、北海道十勝の芽室町における早期播種期に相当する４月中下旬の地下５ｃｍの日平均地温は６℃～１０℃であり、恒温器内の１０℃における発芽は、２５℃一定の条件と比べて約４日間遅延するといわれている（非特許文献１）。
また、トウモロコシの場合は、子実の登熟に必要な積算気温に到達しないことがある北海道の一部の「限界地帯」とよばれる地帯においては、「なるべく早生の品種を早期播種して初期生育を促し、登熟期間をできるだけ長くとることが必要（非特許文献２）」と考えられている。
例えばテンサイは、北海道十勝の芽室町における早期播種期に相当する４月中下旬の地下５ｃｍの日平均地温は６℃～１０℃であり、恒温器内の１０℃における発芽は、２５℃一定の条件と比べて約４日間遅延するといわれている（非特許文献１）。
また、トウモロコシの場合は、子実の登熟に必要な積算気温に到達しないことがある北海道の一部の「限界地帯」とよばれる地帯においては、「なるべく早生の品種を早期播種して初期生育を促し、登熟期間をできるだけ長くとることが必要（非特許文献２）」と考えられている。
【0005】
しかし、北海道などの寒冷冷涼地域では、春先の突然の気温低下とそれに伴う地温の低下によって直播した種子の発芽が遅延し、作物生育期間が短縮され、その結果収量の低下に繋がる場合が多い。このため、播種後に発芽の最適温度以下の環境に置かれた種子の発芽を遅延させず、また発芽を促進することが、農業生産量を向上させるためには特に重要である。
【0006】
種子の発芽促進する技術は、多岐にわたっている。
植物ホルモンやそのアンタゴニストを発芽促進に用いる方法（特許文献１）、細菌性植物病害防除作用を有するミツアリア（Ｍｉｔｓｕａｒｉａ）属に属する菌株の生菌体又は培養物を用いる方法など微生物農薬を使用する方法（特許文献２）、腐植とフルボ酸を用いる方法（特許文献３）、麹類を含む処理剤に種子をあらかじめ接触させる方法（特許文献４）、バーミキュライト風化土壌を、無機酸水溶液に溶解させて得た多種の金属塩及び非金属塩を主成分とする酸性添加剤と肥料と種子を均質に配合して粘土団子とする方法（特許文献５）、にがり、又は水とにがりの混合液を、霧状の微細な粒子（水滴）にした状態で、種子と接触させる方法（特許文献６）、植物種子をエンテロバクター属に属する微生物の培養ろ液に浸漬する方法（特許文献７）、二酸化炭素を含有する水の電解水に浸漬する方法（特許文献８）など、様々な化合物や手法が提案されている。
しかし、播種後の最適発芽温度以下の低温環境によって生じる種子の発芽抑制を予防し、または、低温環境における発芽を促進するための製剤や種子の適切な処理方法は、見当たらない。
植物ホルモンやそのアンタゴニストを発芽促進に用いる方法（特許文献１）、細菌性植物病害防除作用を有するミツアリア（Ｍｉｔｓｕａｒｉａ）属に属する菌株の生菌体又は培養物を用いる方法など微生物農薬を使用する方法（特許文献２）、腐植とフルボ酸を用いる方法（特許文献３）、麹類を含む処理剤に種子をあらかじめ接触させる方法（特許文献４）、バーミキュライト風化土壌を、無機酸水溶液に溶解させて得た多種の金属塩及び非金属塩を主成分とする酸性添加剤と肥料と種子を均質に配合して粘土団子とする方法（特許文献５）、にがり、又は水とにがりの混合液を、霧状の微細な粒子（水滴）にした状態で、種子と接触させる方法（特許文献６）、植物種子をエンテロバクター属に属する微生物の培養ろ液に浸漬する方法（特許文献７）、二酸化炭素を含有する水の電解水に浸漬する方法（特許文献８）など、様々な化合物や手法が提案されている。
しかし、播種後の最適発芽温度以下の低温環境によって生じる種子の発芽抑制を予防し、または、低温環境における発芽を促進するための製剤や種子の適切な処理方法は、見当たらない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0007】
【特許文献1】特表２０２０－５０６９５２号公報
【特許文献2】国際公開第２０１８／１８６３１６号
【特許文献3】特許第６２３１１７３号公報
【特許文献4】特開２０１５－１２８１２号公報
【特許文献5】特開２００９－２４７３４０号公報
【特許文献6】特開２００６－２１７９０４号公報
【特許文献7】特開２００１－２３８５０６号公報
【特許文献8】特開平１０－２２９７０９号公報
【非特許文献】
【0008】
【非特許文献1】Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｕｇａｒ Ｂｅｅｔ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，５２，１７－２４（２０１１）
【非特許文献2】牧草と園芸、第５９巻、第２号、７～１３ページ（２０１１年）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0009】
本発明は、播種後の最適発芽温度以下の低温による発芽抑制や発芽遅延を予防して、直播種子の発芽率を向上するための製剤及び、低温による発芽抑制や発芽遅延を予防する方法、及び最適発芽温度以下の低温による発芽抑制防止処理がなされた種子を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【0010】
すなわち、本発明は、以下の構成からなる。
１．化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を有効成分として含有する、最適発芽温度以下の低温条件で播種された種子の発芽促進剤及び／又は最適温度条件以下の低温環境で播種する種子処理用の発芽促進剤。
１．化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を有効成分として含有する、最適発芽温度以下の低温条件で播種された種子の発芽促進剤及び／又は最適温度条件以下の低温環境で播種する種子処理用の発芽促進剤。
【0011】
【化1】
【0012】
【化2】
【0013】
２．化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物の含有量が０．００１～１０質量％である、１．に記載の発芽促進剤。
３．化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を含む乳酸菌の培養液又は乳酸菌の培養液の希釈物からなる１．または２．に記載の発芽促進剤。
４．乳酸、乳酸エチル、乳酸アミド、ピルビン酸、ピルビン酸メチル、こはく酸、こはく酸ジメチル、リンゴ酸、アスパラギン酸、クエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を有効成分とする１．に記載の発芽促進剤。
５．１、２、４のいずれかに記載の発芽促進剤を含有する溶液に、種子を浸漬又は前記溶液を塗布した後播種することを特徴とする低温による種子の発芽抑制及び／又は発芽遅延を予防する方法。
６．１、２、４のいずれかに記載の発芽促進剤の溶液に浸漬又は発芽促進剤の塗布処理を行った低温発芽処理種子。
３．化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を含む乳酸菌の培養液又は乳酸菌の培養液の希釈物からなる１．または２．に記載の発芽促進剤。
４．乳酸、乳酸エチル、乳酸アミド、ピルビン酸、ピルビン酸メチル、こはく酸、こはく酸ジメチル、リンゴ酸、アスパラギン酸、クエン酸からなる群から選択される１以上の化合物を有効成分とする１．に記載の発芽促進剤。
５．１、２、４のいずれかに記載の発芽促進剤を含有する溶液に、種子を浸漬又は前記溶液を塗布した後播種することを特徴とする低温による種子の発芽抑制及び／又は発芽遅延を予防する方法。
６．１、２、４のいずれかに記載の発芽促進剤の溶液に浸漬又は発芽促進剤の塗布処理を行った低温発芽処理種子。
【発明の効果】
【0014】
本発明により、播種後の最適発芽温度以下の低温による発芽遅延や発芽率の低下などの抑制が可能な、播種された種子の発芽促進剤が提供される。また、播種後の最適発芽温度以下の低温による発芽率の低下や発芽遅延が抑制された種子が提供される。
また本発明の、発芽率の低下又は発芽遅延を防止する方法は、極めて簡便な処理操作で達成可能であり、専用の装置や施設が不要であるため、低コストの実施が可能になる。
また本発明の、発芽率の低下又は発芽遅延を防止する方法は、極めて簡便な処理操作で達成可能であり、専用の装置や施設が不要であるため、低コストの実施が可能になる。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【図1】発芽促進剤による発芽試験結果を示す図
【発明を実施するための形態】
【0016】
本発明者らは課題を解決するために鋭意研究したところ、特定の構造の低分子有機酸等を土壌散布することや種子をあらかじめ有機酸等の溶液に浸漬処理することが、播種後の発芽を抑制するような最適発芽温度以下の低温条件下でも、発芽率の低下や発芽を遅延させない作用を示すことを見出した。
本明細書でいう「最適発芽温度以下の低温条件」とは、種子により異なるが、概ね一日平均気温１０℃以下の日が、連続３～５日続く場合をいう。
また、「最適発芽温度以下の低温条件で播種された種子の発芽促進剤及び／又は最適温度条件以下の低温環境で播種する種子処理用の発芽促進剤」を本明細書においては「発芽促進剤」という。
本発明の発芽促進剤は、有効成分として、次の化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される化合物の１以上を含有する。
本明細書でいう「最適発芽温度以下の低温条件」とは、種子により異なるが、概ね一日平均気温１０℃以下の日が、連続３～５日続く場合をいう。
また、「最適発芽温度以下の低温条件で播種された種子の発芽促進剤及び／又は最適温度条件以下の低温環境で播種する種子処理用の発芽促進剤」を本明細書においては「発芽促進剤」という。
本発明の発芽促進剤は、有効成分として、次の化学式１又は化学式２で表される化合物及びクエン酸からなる群から選択される化合物の１以上を含有する。
【0017】
【化3】
【0018】
【化4】
【0019】
本発明の発芽促進剤は、上記の化学構造で表される化合物を１以上含有し、発芽促進剤当たり０．００１～１０質量％、好ましくは０．０１～５質量％含有する。
【0020】
化学式１の化合物として下記の表１、化学式２の化合物として下記の表２にそれぞれ記載する化合物を例示できる。
【0021】
【表1】
【0022】
【表2】
【0023】
表１、表２に記載したこれらの化合物及びクエン酸は、極めて安全性の高い化合物であることが知られている。
これらの化合物は、精製された化合物であってもよい。あるいは乳酸菌の培養液をそのまま、本発明の発芽促進剤とすることができる。
これらの化合物の中でも、乳酸、乳酸エチル、乳酸アミド、ピルビン酸、ピルビン酸メチル、こはく酸、こはく酸ジメチル、リンゴ酸、アスパラギン酸、クエン酸からなる群から選択される１以上の化合物がより好ましい。
これらの化合物は、精製された化合物であってもよい。あるいは乳酸菌の培養液をそのまま、本発明の発芽促進剤とすることができる。
これらの化合物の中でも、乳酸、乳酸エチル、乳酸アミド、ピルビン酸、ピルビン酸メチル、こはく酸、こはく酸ジメチル、リンゴ酸、アスパラギン酸、クエン酸からなる群から選択される１以上の化合物がより好ましい。
【0024】
乳酸菌の培養液を本発明の発芽促進剤として使用する場合は、あらかじめ、培養液中の化学式１，２の化合物の含量を測定して濃度を確認したうえで、種子の浸漬処理、粉衣処理、フィルムコート処理、あるいは種子の播種後又は播種前の土壌に散布するための製剤とする。
【0025】
本発明の発芽促進剤は、有効成分以外のその他の任意成分を常法に従い、混合、撹拌等することにより製剤として製造することができる。
本発明の発芽促進剤は、水和剤、乳剤、粒剤、粉剤等、通常の植物成長調整剤で用いられる担体を用いて製剤化することができる。
製剤の形状に制限はなく、粉剤、顆粒剤、粒剤、水和剤、フロアブル剤、乳剤及びペースト剤等のあらゆる製剤形態に成形することができる。
本発明の発芽促進剤は、水和剤、乳剤、粒剤、粉剤等、通常の植物成長調整剤で用いられる担体を用いて製剤化することができる。
製剤の形状に制限はなく、粉剤、顆粒剤、粒剤、水和剤、フロアブル剤、乳剤及びペースト剤等のあらゆる製剤形態に成形することができる。
【0026】
例えば、固体担体としては鉱物質粉末（カオリン、ベントナイト、クレー、モンモリロナイト、タルク、ケイソウ土、雲母、バーミキュライト、セッコウ、炭酸カルシウム、リン石灰等）、植物質粉末（大豆粉、小麦粉、木粉、タバコ粉、デンプン、結晶セルロース等）、高分子化合物（石油樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリビニル酢酸樹脂、ポリ塩化ビニル、ケトン樹脂等）、更に、アルミナ、ワックス類等を使用することができる。また、液体担体としては、例えば、アルコール類（メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、エチレングリコール、ベンジルアルコール等）、芳香族炭化水素類（トルエン、ベンゼン、キシレン等）、塩素化炭化水素類（クロロホルム、四塩化炭素、モノクロルベンゼン等）、エーテル類（ジオキサン、テトラヒドロフラン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン、シクロヘキサン等）、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、酸アミド類（Ｎ、Ｎ－ジメチルアセトアミド等）、エーテルアルコール類（エチレングリコールエチルエーテル等）、又は水等を使用することができる。
【0027】
乳化、分散、拡散等の目的で使用される界面活性剤としては、非イオン性、陰イオン性、陽イオン性及び両イオン性のいずれも使用することができる。本発明において使用することができる界面活性剤の例を挙げると、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、オキシエチレンポリマー、オキシプロピレンポリマー、ポリオキシエチレンアルキルリン酸エステル、脂肪酸塩、アルキル硫酸エステル塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリールスルホン酸塩、アルキルリン酸塩、アルキルリン酸エステル塩、ポリオキシエチレンアルキル硫酸エステル、第四級アンモニウム塩、オキシアルキルアミン、レシチン、サポニン等である。また、必要に応じてゼラチン、カゼイン、アルギン酸ソーダ、デンプン、寒天、ポリビニルアルコール等を補助剤として用いることができる。
【0028】
本発明の発芽促進剤は、水溶液又は懸濁液とした場合のｐＨ（２５℃）は、２～８となるのが好ましく、当該ｐＨを調整する緩衝剤としては、酢酸、クエン酸、フマル酸、リンゴ酸、乳酸、酒石酸等の有機酸塩、リン酸、塩酸、硫酸等の無機塩、水酸化ナトリウム等の水酸化物、アンモニア又はアンモニア水等が挙げられ、これらを単独又は２種以上組み合わせて用いてもよく、さらに他のｐＨ調整剤と適宜組み合わせてもよい。
【0029】
本発明の発芽促進剤を土壌に散布する場合、直接そのまま散布してもよいし、水で適宜希釈又は懸濁した水溶液として散布してもよい。
【0030】
本発明の発芽促進剤を土壌散布剤とする場合は、化学式１及び／又は化学式２で表される化合物１以上の合計濃度は、０．００１～１質量％、好ましくは０．０１～０．５質量％、より好ましく０．１～０．３質量％含有する。
【0031】
土壌に散布する肥料と混合する場合を含め、土壌に直接施用する場合の使用量としては、化学式１及び／又は化学式２で表される化合物の１以上の合計濃度として、１ヘクタール当たり１００～１０００００ｇ、特に５００～５００００ｇ用いるのが好ましい。
【0032】
播種前の種子処理用として用いる場合は、水、アルコール類（メタノール、エタノール等）、ケトン類（アセトン等）、エーテル類（ジエチルエーテル等）、エステル類（酢酸エチル等）等の液体担体に０．０１～１０００００ｐｐｍ、より好ましくは１～１００００ｐｐｍ、特に好ましくは５～１０００ｐｐｍとなるように希釈又は懸濁し、乾燥種子に噴霧するか、乾燥種子を希釈液に浸漬して種子に吸収させることができる。浸漬時間としては特に制限されないが、好ましくは１０分～１２０時間、より好ましくは１０分～１００時間、特に好ましくは１０分～６０時間種子を浸漬し、次いで浸漬した種子をそのまま土壌に播種するか、浸漬後水分又は溶剤を除去し、軽度風乾、あるいは完全に乾燥させる。乾燥方法は、風乾、減圧乾燥、加熱乾燥、真空乾燥等が例示できる。また乾燥方法によって液体担体を適宜選択できる。
さらにまた、クレー等の鉱物質粉末の固体担体を用いて製剤化したものを種子表面に付着させ使用することもできる。付着剤として、原液を希釈せずに付着させることができる。また、通常用いられている種子コーティング剤、種子コーティングフィルムに混合して種子に被覆することもできる。
さらにまた、クレー等の鉱物質粉末の固体担体を用いて製剤化したものを種子表面に付着させ使用することもできる。付着剤として、原液を希釈せずに付着させることができる。また、通常用いられている種子コーティング剤、種子コーティングフィルムに混合して種子に被覆することもできる。
【0033】
本発明の発芽促進剤の適用対象となる植物種子としては、特に限定されないが、次のものを例示できる。イネ科（トウモロコシ、イネ、コムギ、チモシー、オーチャードグラス、ペレニアルライグラス、メドウフェスク、イタリアンライグラス、ケンタッキーブルーグラス）、マメ科（ダイズ、エダマメ、インゲン、エンドウ、アズキ、アルファルファ、シロクローバ、アカクローバ）、アオイ科（ワタ）、ヒユ科（テンサイ）、アブラナ科（ダイコン、コマツナ、キャベツ、ブロッコリー、シロカラシ）、ウリ科（カボチャ）、セリ科（ニンジン）、キク科（レタス）、ユリ科（タマネギ）に適用すると好ましい効果を発揮し、低温条件での発芽を促進する。
【0034】
また、本発明の効果向上と発芽後の生育促進を目的として、他の植物成長調整剤と併用することもできる。また、場合によっては相乗効果を期待することもできる。
【0035】
さらにまた、本発明の発芽促進剤は、は、各種殺虫剤、殺菌剤、微生物農薬、肥料等と混用又は併用することも可能である。また、育苗期に使用する殺虫殺菌剤と混用は特に有効である。また、肥料と併用する場合、健苗育成を目的とした育苗用肥料との併用、活着促進を目的とした移植直前施用肥料との併用を行うことも可能である。
【0036】
本発明の発芽促進剤を得るための、乳酸菌としては、どのような物でも良いが、乳酸球菌、乳酸桿菌が好ましく、中でも乳酸桿菌が好ましい。乳酸桿菌のなかでもラクトバチルス属が好ましい。
ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ以下「Ｌ．」と略記する場合がある）属の中でも代表的な種としては、ラクトバチルス・アセトトレランス（Ｌ．ａｃｅｔｏｔｏｌｅｒａｎｓ）、ラクトバチルス・アシディファリナエ（Ｌ．ａｃｉｄｉｆａｒｉｎａｅ）、ラクトバチルス・アシドピスシス（Ｌ．ａｃｉｄｉｐｉｓｃｉｓ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・アジリス（Ｌ．ａｇｉｌｉｓ）、ラクトバチルス・アルジドゥス（Ｌ．ａｌｇｉｄｕｓ）、ラクトバチルス・アリメンタリウス（Ｌ．ａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ）、ラクトバチルス・アミロリチクス（Ｌ．ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・アミロフィルス（Ｌ．ａｍｙｌｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・アミロトロフィクス（Ｌ．ａｍｙｌｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・アミロボルス（Ｌ．ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）、ラクトバチルス・アニマリス（Ｌ．ａｎｉｍａｌｉｓ）、ラクトバチルス・アントリ（Ｌ．ａｎｔｒｉ）、ラクトバチルス・アピス（Ｌ．ａｐｉｓ）、ラクトバチルス・アポデミ（Ｌ．ａｐｏｄｅｍｉ）、ラクトバチルス・アクアチレ（Ｌ．ａｑｕａｔｉｌｅ）、ラクトバチルス・アクアチクス（Ｌ．ａｑｕａｔｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・アビアリウス（Ｌ．ａｖｉａｒｉｕｓ）、ラクトバチルス・バキイ（Ｌ．ｂａｃｋｉｉ）、ラクトバチルス・ビフェルメンタンス（Ｌ．ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、ラクトバチルス・ブランタエ（Ｌ．ｂｒａｎｔａｅ）、ラクトバチルス・ブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・ブクネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・カカオヌム（Ｌ．ｃａｃａｏｎｕｍ）、ラクトバチルス・カメリアエ（Ｌ．ｃａｍｅｌｌｉａｅ）、ラクトバチルス・カピラツス（Ｌ．ｃａｐｉｌｌａｔｕｓ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・セチ（Ｌ．ｃｅｔｉ）、ラクトバチルス・コレオホミニス（Ｌ．ｃｏｌｅｏｈｏｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・コリノイデス（Ｌ．ｃｏｌｌｉｎｏｉｄｅｓ）、ラクトバチルス・コンポスチ（Ｌ．ｃｏｍｐｏｓｔｉ）、ラクトバチルス・コンカブス（Ｌ．ｃｏｎｃａｖｕｓ）、ラクトバチルス・コリニフォルミス（Ｌ．ｃｏｒｙｎｉｆｏｒｍｉｓ）、ラクトバチルス・クリスパンツス（Ｌ．ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）、ラクトバチルス・クルストラム（Ｌ．ｃｒｕｓｔｏｒｕｍ）、ラクトバチルス・クリエアエ（Ｌ．ｃｕｒｉｅａｅ）、ラクトバチルス・クルバツス（Ｌ．ｃｕｒｖａｔｕｓ）、ラクトバチルス・デルブルエキイ（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、ラクトバチルス・デクストリニクス（Ｌ．ｄｅｘｔｒｉｎｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・ディオリボランス（Ｌ．ｄｉｏｌｉｖｏｒａｎｓ）、ラクトバチルス・エクイ（Ｌ．ｅｑｕｉ）、ラクトバチルス・イクイクルソリス（Ｌ．ｅｑｕｉｃｕｒｓｏｒｉｓ）、ラクトバチルス・エクイゲネロシ（Ｌ．ｅｑｕｉｇｅｎｅｒｏｓｉ）、ラクトバチルス・ファビファルメンタンス（Ｌ．ｆａｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、ラクトバチルス・ファエシス（Ｌ．ｆａｅｃｉｓ）、ラクトバチルス・ファシミニス（Ｌ．ｆａｒｃｉｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・ファラジニス（Ｌ．ｆａｒｒａｇｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・ファメンタム（Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）、ラクトバチルス・フロリコラ（Ｌ．ｆｌｏｒｉｃｏｌａ）、ラクトバチルス・フロルム（Ｌ．ｆｌｏｒｕｍ）、ラクトバチルス・フォルニカリス（Ｌ．ｆｏｒｎｉｃａｌｉｓ）、ラクトバチルス・フルクチボランス（Ｌ．ｆｒｕｃｔｉｖｏｒａｎｓ）、ラクトバチルス・フルメンチ（Ｌ．ｆｒｕｍｅｎｔｉ）、ラクトバチルス・フクエンシス（Ｌ．ｆｕｃｈｕｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・フツァイ（Ｌ．ｆｕｔｓａｉｉ）、ラクトバチルス・ガリナルム（Ｌ．ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ガセリ（Ｌ．ｇａｓｓｅｒｉ）、ラクトバチルス・ガストリカス（Ｌ．ｇａｓｔｒｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・ガネンシス（Ｌ．ｇｈａｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ギゲリオルム（Ｌ．ｇｉｇｅｒｉｏｒｕｍ）、ラクトバチルス・グラミニス（Ｌ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・ハメシ（Ｌ．ｈａｍｍｅｓｉｉ）、ラクトバチルス・ハムステリ（Ｌ．ｈａｍｓｔｅｒｉ）、ラクトバチルス・ハルビネンシス（Ｌ．ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ヘイロングジアンゲンシス（Ｌ．ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ハヤキテンシス（Ｌ．ｈａｙａｋｉｔｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ヘルベテ
ィカス（Ｌ．ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・ヒルガルディイ（Ｌ．ｈｉｌｇａｒｄｉｉ）、ラクトバチルス・ホッカイドネンシス（Ｌ．ｈｏｋｋａｉｄｏｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ホミニス（Ｌ．ｈｏｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・ホモヒオキイ（Ｌ．ｈｏｍｏｈｉｏｃｈｉｉ）、ラクトバチルス・ホルデイ（Ｌ．ｈｏｒｄｅｉ）、ラクトバチルス・イネルス（Ｌ．ｉｎｅｒｓ）、ラクトバチルス・イングルビエイ（Ｌ．ｉｎｇｌｕｖｉｅｉ）、ラクトバチルス・インテスチナリス（Ｌ．ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ）、ラクトバチルス・イワテンシス（Ｌ．ｉｗａｔｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ジェンセニイ（Ｌ．ｊｅｎｓｅｎｉｉ）、ラクトバチルス・ジョンソニイ（Ｌ．ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ）、ラクトバチルス・カリキセンシス（Ｌ．ｋａｌｉｘｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ケフィラノファシエンス（Ｌ．ｋｅｆｉｒａｎｏｆａｃｉｅｎｓ）、ラクトバチルス・ケフィリ（Ｌ．ｋｅｆｉｒｉ）、ラクトバチルス・キムチカス（Ｌ．ｋｉｍｃｈｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・キムチエンシス（Ｌ．ｋｉｍｃｈｉｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・キソネンシス（Ｌ．ｋｉｓｏｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・キタサトニス（Ｌ．ｋｉｔａｓａｔｏｎｉｓ）、ラクトバチルス・コリエンシス（Ｌ．ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・クンケエイ（Ｌ．ｋｕｎｋｅｅｉ）、ラクトバチルス・レイクマンイ（Ｌ．ｌｅｉｃｈｍａｎｎｉｉ）、ラクトバチルス・インドネリ（Ｌ．ｌｉｎｄｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・マレフェレメンタンス（Ｌ．ｍａｌｅｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、ラクトバチルス・マリ（Ｌ．ｍａｌｉ）、ラクトバチルス・マニホチボランス（Ｌ．ｍａｎｉｈｏｔｉｖｏｒａｎｓ）、ラクトバチルス・ミンデンシス（Ｌ．ｍｉｎｄｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ムコサエ（Ｌ．ｍｕｃｏｓａｅ）、ラクトバチルス・ムリヌス（Ｌ．ｍｕｒｉｎｕｓ）、ラクトバチルス・ナゲリイ（Ｌ．ｎａｇｅｌｉｉ）、ラクトバチルス・ナムレンシス（Ｌ．ｎａｍｕｒｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ナンテンシス（Ｌ．ｎａｎｔｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ナスエンシス（Ｌ．ｎａｓｕｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ネンジアンゲンシス（Ｌ．ｎｅｎｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ノデンシス（Ｌ．ｎｏｄｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・オドラチトフイ（Ｌ．ｏｄｏｒａｔｉｔｏｆｕｉ）、ラクトバチルス・オエニ（Ｌ．ｏｅｎｉ）、ラクトバチルス・オリゴファーメンタス（Ｌ．ｏｌｉｇｏｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、ラクトバチルス・オリス（Ｌ．ｏｒｉｓ）、ラクトバチルス・オリザエ（Ｌ．ｏｒｙｚａｅ）、ラクトバチルス・オタキエンシス（Ｌ．ｏｔａｋｉｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・オゼンシス（Ｌ．ｏｚｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・パニス（Ｌ．ｐａｎｉｓ）、ラクトバチルス・パンテリス（Ｌ．ｐａｎｔｈｅｒｉｓ）、ラクトバチルス・パラブレビス（Ｌ．ｐａｒａｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・パラブクネリ（Ｌ．ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・パラカゼイ（Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・パラコリノイデス（Ｌ．ｐａｒａｃｏｌｌｉｎｏｉｄｅｓ）、ラクトバチルス・パラケフィリ（Ｌ．ｐａｒａｋｅｆｉｒｉ）、ラクトバチルス・パラリメンタリウス（Ｌ．ｐａｒａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ）、ラクトバチルス・パラプランタラム（Ｌ．ｐａｒａｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・パステウリイ（Ｌ．ｐａｓｔｅｕｒｉｉ）、ラクトバチルス・パウキボランス（Ｌ．ｐａｕｃｉｖｏｒａｎｓ）、ラクトバチルス・ペントスス（Ｌ．ｐｅｎｔｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・ペロレンス（Ｌ．ｐｅｒｏｌｅｎｓ）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ポブジヒイ（Ｌ．ｐｏｂｕｚｉｈｉｉ）、ラクトバチルス・ポンチス（Ｌ．ｐｏｎｔｉｓ）、ラクトバチルス・ポルシナエ（Ｌ．ｐｏｒｃｉｎａｅ）、ラクトバチルス・プシタキ（Ｌ．ｐｓｉｔｔａｃｉ）、ラクトバチルス・ラピ（Ｌ．ｒａｐｉ）、ラクトバチルス・レニニ（Ｌ．ｒｅｎｎｉｎｉ）、ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチルス・ラムノサス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・ロデンチウム（Ｌ．ｒｏｄｅｎｔｉｕｍ）、ラクトバチルス・ロゴサエ（Ｌ．ｒｏｇｏｓａｅ）、ラクトバチルス・ロシアエ（Ｌ．ｒｏｓｓｉａｅ）、ラクトバチルス・ルミニス（Ｌ．ｒｕｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・サエリムネリ（Ｌ．ｓａｅｒｉｍｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・サケイ（Ｌ．ｓａｋｅｉ）、ラクトバチルス・サリバリウス（Ｌ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、ラクトバチルス・サンフランシスエンシス（Ｌ．ｓａｎｆｒａｎｃｉｓｃｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・サニビリ（Ｌ．ｓａｎｉｖｉｒｉ）、ラクトバチルス・サツメンシス（Ｌ．ｓａｔｓｕｍｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・セカリフィリス（Ｌ．ｓｅｃａｌｉｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・セロンゴレンシス（Ｌ．ｓｅｌａｎｇｏｒｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・セニオロリス（Ｌ．ｓｅｎｉｏｒｉｓ）、ラクトバチルス・センマイズケ（Ｌ．ｓｅｎｍａｉｚｕｋｅｉ）、ラクトバチルス・シェレピエア（Ｌ．ｓｈａｒｐｅａｅ）、ラクトバチルス・シェンゼーネンシス（Ｌ．ｓｈｅｎｚｈｅｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・シラゲイ（Ｌ．ｓｉｌａｇｅｉ）、ラクトバチルス・シリギンシス（Ｌ．ｓｉｌｉｇｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・シミリス（Ｌ．ｓｉｍｉｌｉｓ）、ラクトバチルス・ソンガウジンジェネシス（Ｌ．ｓｏｎｇｈｕａｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・スピチェリ（Ｌ．ｓｐｉｃｈｅｒｉ）、ラクトバチルス・スシコーラ（Ｌ．ｓｕｃｉｃｏｌａ）、ラクトバチルス・スエビカス（Ｌ．ｓｕｅｂｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・スンキ（Ｌ．ｓｕｎｋｉｉ）、ラクトバチルス・タイワネンシス（Ｌ．ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・タイランデンシス（Ｌ．ｔｈａｉｌａｎｄｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ツセチ（Ｌ．ｔｕｃｃｅｔｉ）、ラクトバチルス・ウルツネンシス（Ｌ．ｕｌｔｕｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ウバラム（Ｌ．ｕｖａｒｕｍ）、ラクトバチルス・バクシノストレカス（Ｌ．ｖａｃｃｉｎｏｓｔｅｒｃｕｓ）、ラクトバチルス・バギナリス（Ｌ．ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、ラクトバチルス・ベルソモルデネシス（Ｌ．ｖｅｒｓｍｏｌｄｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ヴィニ（Ｌ．ｖｉｎｉ）、ラクトバチルス・クサンガファンゲネシス（Ｌ．ｘｉａｎｇｆａｎｇｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ヨンギネンシス（Ｌ．ｙｏｎｇｉｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ゼアエ（Ｌ．ｚｅａｅ）、ラクトバチルス・ザイマエ（Ｌ．ｚｙｍａｅ）等を例示できる。
ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ以下「Ｌ．」と略記する場合がある）属の中でも代表的な種としては、ラクトバチルス・アセトトレランス（Ｌ．ａｃｅｔｏｔｏｌｅｒａｎｓ）、ラクトバチルス・アシディファリナエ（Ｌ．ａｃｉｄｉｆａｒｉｎａｅ）、ラクトバチルス・アシドピスシス（Ｌ．ａｃｉｄｉｐｉｓｃｉｓ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・アジリス（Ｌ．ａｇｉｌｉｓ）、ラクトバチルス・アルジドゥス（Ｌ．ａｌｇｉｄｕｓ）、ラクトバチルス・アリメンタリウス（Ｌ．ａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ）、ラクトバチルス・アミロリチクス（Ｌ．ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・アミロフィルス（Ｌ．ａｍｙｌｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・アミロトロフィクス（Ｌ．ａｍｙｌｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・アミロボルス（Ｌ．ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）、ラクトバチルス・アニマリス（Ｌ．ａｎｉｍａｌｉｓ）、ラクトバチルス・アントリ（Ｌ．ａｎｔｒｉ）、ラクトバチルス・アピス（Ｌ．ａｐｉｓ）、ラクトバチルス・アポデミ（Ｌ．ａｐｏｄｅｍｉ）、ラクトバチルス・アクアチレ（Ｌ．ａｑｕａｔｉｌｅ）、ラクトバチルス・アクアチクス（Ｌ．ａｑｕａｔｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・アビアリウス（Ｌ．ａｖｉａｒｉｕｓ）、ラクトバチルス・バキイ（Ｌ．ｂａｃｋｉｉ）、ラクトバチルス・ビフェルメンタンス（Ｌ．ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、ラクトバチルス・ブランタエ（Ｌ．ｂｒａｎｔａｅ）、ラクトバチルス・ブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・ブクネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・カカオヌム（Ｌ．ｃａｃａｏｎｕｍ）、ラクトバチルス・カメリアエ（Ｌ．ｃａｍｅｌｌｉａｅ）、ラクトバチルス・カピラツス（Ｌ．ｃａｐｉｌｌａｔｕｓ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・セチ（Ｌ．ｃｅｔｉ）、ラクトバチルス・コレオホミニス（Ｌ．ｃｏｌｅｏｈｏｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・コリノイデス（Ｌ．ｃｏｌｌｉｎｏｉｄｅｓ）、ラクトバチルス・コンポスチ（Ｌ．ｃｏｍｐｏｓｔｉ）、ラクトバチルス・コンカブス（Ｌ．ｃｏｎｃａｖｕｓ）、ラクトバチルス・コリニフォルミス（Ｌ．ｃｏｒｙｎｉｆｏｒｍｉｓ）、ラクトバチルス・クリスパンツス（Ｌ．ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）、ラクトバチルス・クルストラム（Ｌ．ｃｒｕｓｔｏｒｕｍ）、ラクトバチルス・クリエアエ（Ｌ．ｃｕｒｉｅａｅ）、ラクトバチルス・クルバツス（Ｌ．ｃｕｒｖａｔｕｓ）、ラクトバチルス・デルブルエキイ（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、ラクトバチルス・デクストリニクス（Ｌ．ｄｅｘｔｒｉｎｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・ディオリボランス（Ｌ．ｄｉｏｌｉｖｏｒａｎｓ）、ラクトバチルス・エクイ（Ｌ．ｅｑｕｉ）、ラクトバチルス・イクイクルソリス（Ｌ．ｅｑｕｉｃｕｒｓｏｒｉｓ）、ラクトバチルス・エクイゲネロシ（Ｌ．ｅｑｕｉｇｅｎｅｒｏｓｉ）、ラクトバチルス・ファビファルメンタンス（Ｌ．ｆａｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、ラクトバチルス・ファエシス（Ｌ．ｆａｅｃｉｓ）、ラクトバチルス・ファシミニス（Ｌ．ｆａｒｃｉｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・ファラジニス（Ｌ．ｆａｒｒａｇｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・ファメンタム（Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）、ラクトバチルス・フロリコラ（Ｌ．ｆｌｏｒｉｃｏｌａ）、ラクトバチルス・フロルム（Ｌ．ｆｌｏｒｕｍ）、ラクトバチルス・フォルニカリス（Ｌ．ｆｏｒｎｉｃａｌｉｓ）、ラクトバチルス・フルクチボランス（Ｌ．ｆｒｕｃｔｉｖｏｒａｎｓ）、ラクトバチルス・フルメンチ（Ｌ．ｆｒｕｍｅｎｔｉ）、ラクトバチルス・フクエンシス（Ｌ．ｆｕｃｈｕｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・フツァイ（Ｌ．ｆｕｔｓａｉｉ）、ラクトバチルス・ガリナルム（Ｌ．ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ガセリ（Ｌ．ｇａｓｓｅｒｉ）、ラクトバチルス・ガストリカス（Ｌ．ｇａｓｔｒｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・ガネンシス（Ｌ．ｇｈａｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ギゲリオルム（Ｌ．ｇｉｇｅｒｉｏｒｕｍ）、ラクトバチルス・グラミニス（Ｌ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・ハメシ（Ｌ．ｈａｍｍｅｓｉｉ）、ラクトバチルス・ハムステリ（Ｌ．ｈａｍｓｔｅｒｉ）、ラクトバチルス・ハルビネンシス（Ｌ．ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ヘイロングジアンゲンシス（Ｌ．ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ハヤキテンシス（Ｌ．ｈａｙａｋｉｔｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ヘルベテ
ィカス（Ｌ．ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・ヒルガルディイ（Ｌ．ｈｉｌｇａｒｄｉｉ）、ラクトバチルス・ホッカイドネンシス（Ｌ．ｈｏｋｋａｉｄｏｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ホミニス（Ｌ．ｈｏｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・ホモヒオキイ（Ｌ．ｈｏｍｏｈｉｏｃｈｉｉ）、ラクトバチルス・ホルデイ（Ｌ．ｈｏｒｄｅｉ）、ラクトバチルス・イネルス（Ｌ．ｉｎｅｒｓ）、ラクトバチルス・イングルビエイ（Ｌ．ｉｎｇｌｕｖｉｅｉ）、ラクトバチルス・インテスチナリス（Ｌ．ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ）、ラクトバチルス・イワテンシス（Ｌ．ｉｗａｔｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ジェンセニイ（Ｌ．ｊｅｎｓｅｎｉｉ）、ラクトバチルス・ジョンソニイ（Ｌ．ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ）、ラクトバチルス・カリキセンシス（Ｌ．ｋａｌｉｘｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ケフィラノファシエンス（Ｌ．ｋｅｆｉｒａｎｏｆａｃｉｅｎｓ）、ラクトバチルス・ケフィリ（Ｌ．ｋｅｆｉｒｉ）、ラクトバチルス・キムチカス（Ｌ．ｋｉｍｃｈｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・キムチエンシス（Ｌ．ｋｉｍｃｈｉｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・キソネンシス（Ｌ．ｋｉｓｏｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・キタサトニス（Ｌ．ｋｉｔａｓａｔｏｎｉｓ）、ラクトバチルス・コリエンシス（Ｌ．ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・クンケエイ（Ｌ．ｋｕｎｋｅｅｉ）、ラクトバチルス・レイクマンイ（Ｌ．ｌｅｉｃｈｍａｎｎｉｉ）、ラクトバチルス・インドネリ（Ｌ．ｌｉｎｄｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・マレフェレメンタンス（Ｌ．ｍａｌｅｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、ラクトバチルス・マリ（Ｌ．ｍａｌｉ）、ラクトバチルス・マニホチボランス（Ｌ．ｍａｎｉｈｏｔｉｖｏｒａｎｓ）、ラクトバチルス・ミンデンシス（Ｌ．ｍｉｎｄｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ムコサエ（Ｌ．ｍｕｃｏｓａｅ）、ラクトバチルス・ムリヌス（Ｌ．ｍｕｒｉｎｕｓ）、ラクトバチルス・ナゲリイ（Ｌ．ｎａｇｅｌｉｉ）、ラクトバチルス・ナムレンシス（Ｌ．ｎａｍｕｒｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ナンテンシス（Ｌ．ｎａｎｔｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ナスエンシス（Ｌ．ｎａｓｕｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ネンジアンゲンシス（Ｌ．ｎｅｎｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ノデンシス（Ｌ．ｎｏｄｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・オドラチトフイ（Ｌ．ｏｄｏｒａｔｉｔｏｆｕｉ）、ラクトバチルス・オエニ（Ｌ．ｏｅｎｉ）、ラクトバチルス・オリゴファーメンタス（Ｌ．ｏｌｉｇｏｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、ラクトバチルス・オリス（Ｌ．ｏｒｉｓ）、ラクトバチルス・オリザエ（Ｌ．ｏｒｙｚａｅ）、ラクトバチルス・オタキエンシス（Ｌ．ｏｔａｋｉｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・オゼンシス（Ｌ．ｏｚｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・パニス（Ｌ．ｐａｎｉｓ）、ラクトバチルス・パンテリス（Ｌ．ｐａｎｔｈｅｒｉｓ）、ラクトバチルス・パラブレビス（Ｌ．ｐａｒａｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・パラブクネリ（Ｌ．ｐａｒａｂｕｃｈｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・パラカゼイ（Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・パラコリノイデス（Ｌ．ｐａｒａｃｏｌｌｉｎｏｉｄｅｓ）、ラクトバチルス・パラケフィリ（Ｌ．ｐａｒａｋｅｆｉｒｉ）、ラクトバチルス・パラリメンタリウス（Ｌ．ｐａｒａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ）、ラクトバチルス・パラプランタラム（Ｌ．ｐａｒａｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・パステウリイ（Ｌ．ｐａｓｔｅｕｒｉｉ）、ラクトバチルス・パウキボランス（Ｌ．ｐａｕｃｉｖｏｒａｎｓ）、ラクトバチルス・ペントスス（Ｌ．ｐｅｎｔｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・ペロレンス（Ｌ．ｐｅｒｏｌｅｎｓ）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ポブジヒイ（Ｌ．ｐｏｂｕｚｉｈｉｉ）、ラクトバチルス・ポンチス（Ｌ．ｐｏｎｔｉｓ）、ラクトバチルス・ポルシナエ（Ｌ．ｐｏｒｃｉｎａｅ）、ラクトバチルス・プシタキ（Ｌ．ｐｓｉｔｔａｃｉ）、ラクトバチルス・ラピ（Ｌ．ｒａｐｉ）、ラクトバチルス・レニニ（Ｌ．ｒｅｎｎｉｎｉ）、ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチルス・ラムノサス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・ロデンチウム（Ｌ．ｒｏｄｅｎｔｉｕｍ）、ラクトバチルス・ロゴサエ（Ｌ．ｒｏｇｏｓａｅ）、ラクトバチルス・ロシアエ（Ｌ．ｒｏｓｓｉａｅ）、ラクトバチルス・ルミニス（Ｌ．ｒｕｍｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・サエリムネリ（Ｌ．ｓａｅｒｉｍｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・サケイ（Ｌ．ｓａｋｅｉ）、ラクトバチルス・サリバリウス（Ｌ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、ラクトバチルス・サンフランシスエンシス（Ｌ．ｓａｎｆｒａｎｃｉｓｃｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・サニビリ（Ｌ．ｓａｎｉｖｉｒｉ）、ラクトバチルス・サツメンシス（Ｌ．ｓａｔｓｕｍｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・セカリフィリス（Ｌ．ｓｅｃａｌｉｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・セロンゴレンシス（Ｌ．ｓｅｌａｎｇｏｒｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・セニオロリス（Ｌ．ｓｅｎｉｏｒｉｓ）、ラクトバチルス・センマイズケ（Ｌ．ｓｅｎｍａｉｚｕｋｅｉ）、ラクトバチルス・シェレピエア（Ｌ．ｓｈａｒｐｅａｅ）、ラクトバチルス・シェンゼーネンシス（Ｌ．ｓｈｅｎｚｈｅｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・シラゲイ（Ｌ．ｓｉｌａｇｅｉ）、ラクトバチルス・シリギンシス（Ｌ．ｓｉｌｉｇｉｎｉｓ）、ラクトバチルス・シミリス（Ｌ．ｓｉｍｉｌｉｓ）、ラクトバチルス・ソンガウジンジェネシス（Ｌ．ｓｏｎｇｈｕａｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・スピチェリ（Ｌ．ｓｐｉｃｈｅｒｉ）、ラクトバチルス・スシコーラ（Ｌ．ｓｕｃｉｃｏｌａ）、ラクトバチルス・スエビカス（Ｌ．ｓｕｅｂｉｃｕｓ）、ラクトバチルス・スンキ（Ｌ．ｓｕｎｋｉｉ）、ラクトバチルス・タイワネンシス（Ｌ．ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・タイランデンシス（Ｌ．ｔｈａｉｌａｎｄｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ツセチ（Ｌ．ｔｕｃｃｅｔｉ）、ラクトバチルス・ウルツネンシス（Ｌ．ｕｌｔｕｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ウバラム（Ｌ．ｕｖａｒｕｍ）、ラクトバチルス・バクシノストレカス（Ｌ．ｖａｃｃｉｎｏｓｔｅｒｃｕｓ）、ラクトバチルス・バギナリス（Ｌ．ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、ラクトバチルス・ベルソモルデネシス（Ｌ．ｖｅｒｓｍｏｌｄｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ヴィニ（Ｌ．ｖｉｎｉ）、ラクトバチルス・クサンガファンゲネシス（Ｌ．ｘｉａｎｇｆａｎｇｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ヨンギネンシス（Ｌ．ｙｏｎｇｉｎｅｎｓｉｓ）、ラクトバチルス・ゼアエ（Ｌ．ｚｅａｅ）、ラクトバチルス・ザイマエ（Ｌ．ｚｙｍａｅ）等を例示できる。
【0037】
乳酸菌として、これら例示した菌種の中でもラクトバチルス・パラカゼイ（Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・ラムノサス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ディオリボランス（Ｌ．ｄｉｏｌｉｖｏｒａｎｓ）が好ましく、ラクトバチルス・パラカゼイ（Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・ラムノサス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）から選択される乳酸菌がより好ましい。
この乳酸菌を培養することで得られる発芽促進剤には、乳酸、乳酸エチル、乳酸アミド、ピルビン酸、ピルビン酸メチル、こはく酸、こはく酸ジメチル、リンゴ酸、アスパラギン酸、クエン酸のいずれか１以上が含有されている。
この乳酸菌を培養することで得られる発芽促進剤には、乳酸、乳酸エチル、乳酸アミド、ピルビン酸、ピルビン酸メチル、こはく酸、こはく酸ジメチル、リンゴ酸、アスパラギン酸、クエン酸のいずれか１以上が含有されている。
【実施例0038】
次に実施例・試験例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例・試験例に限定されるものではない。
＜試験例１：アブラナ科植物の代表例としてシロイヌナズナ種子を用いた発芽試験例＞
（１）試験試料
次の濃度の各種溶液を調製し、これを試験試料とした。
乳酸 ０．０１００％
こはく酸 ０．０１００％
こはく酸ジメチル ０．１０００％
リンゴ酸 ０．０１３４％
アスパラギン酸 ０．１３３１％
アスパラギン酸 ０．０１３３％
乳酸エチル ０．１０００％
乳酸アミド ０．８９０９％
乳酸アミド ０．０８９１％
ピルビン酸 ０．０１００％
ピルビン酸メチル ０．１０００％
＜試験例１：アブラナ科植物の代表例としてシロイヌナズナ種子を用いた発芽試験例＞
（１）試験試料
次の濃度の各種溶液を調製し、これを試験試料とした。
乳酸 ０．０１００％
こはく酸 ０．０１００％
こはく酸ジメチル ０．１０００％
リンゴ酸 ０．０１３４％
アスパラギン酸 ０．１３３１％
アスパラギン酸 ０．０１３３％
乳酸エチル ０．１０００％
乳酸アミド ０．８９０９％
乳酸アミド ０．０８９１％
ピルビン酸 ０．０１００％
ピルビン酸メチル ０．１０００％
【0039】
（２）発芽試験
１）試験試料の添加と播種
９ｃｍプラスチックシャーレに濾紙（アドバンテック社製、Ｎｏ．２）を２枚重ねて置き、シャーレ１枚あたり試験溶液を５ｍｌずつ添加した。
各試験溶液を添加したシャーレ１枚当たりシロイヌナズナ種子１００粒を播種した後、４℃の恒温槽で６日間低温処理を行った。
その後３４℃の恒温槽に移しインキュベートした。
目視により濾紙が乾燥してきたらその都度、蒸留水を加えた。
１）試験試料の添加と播種
９ｃｍプラスチックシャーレに濾紙（アドバンテック社製、Ｎｏ．２）を２枚重ねて置き、シャーレ１枚あたり試験溶液を５ｍｌずつ添加した。
各試験溶液を添加したシャーレ１枚当たりシロイヌナズナ種子１００粒を播種した後、４℃の恒温槽で６日間低温処理を行った。
その後３４℃の恒温槽に移しインキュベートした。
目視により濾紙が乾燥してきたらその都度、蒸留水を加えた。
【0040】
２）発芽率
発芽率の調査は実態顕微鏡下で種子の形態観察を行い、次の通り評価した。
・種皮の裂開がみられないＮｏｎ－ｒａｐｔｕｒｅステージ
・種皮の裂開がみられるＲａｐｔｕｒｅステージ
・幼根の突出がみられるＲａｄｉｃｌｅステージ、又は子葉の展開がみられるＧｒｅｅｎ
Ｃｏｔｙｌｅｄｏｎステージ
発芽率の調査は実態顕微鏡下で種子の形態観察を行い、次の通り評価した。
・種皮の裂開がみられないＮｏｎ－ｒａｐｔｕｒｅステージ
・種皮の裂開がみられるＲａｐｔｕｒｅステージ
・幼根の突出がみられるＲａｄｉｃｌｅステージ、又は子葉の展開がみられるＧｒｅｅｎ
Ｃｏｔｙｌｅｄｏｎステージ
【0041】
以上の３段階の変化を指標とした。シロイヌナズナ種子の場合は、幼根の突出が確認された時点（Ｒａｉｄｉｃｌｅステージ又はＣｏｔｙｌｅｄｏｎステージ）を発芽したと判断した。
また、発芽率は、播種した１００個当たりの発芽数をカウントし、これを発芽率（％）とした。
また、発芽率は、播種した１００個当たりの発芽数をカウントし、これを発芽率（％）とした。
【0042】
（３）試験結果
下記表３及び図１に試験結果を示した。なお比較対照として蒸留水（ＤＷ）を用いた。
下記表３及び図１に試験結果を示した。なお比較対照として蒸留水（ＤＷ）を用いた。
【0043】
【表3】
【0044】
乳酸０．０１％、こはく酸０．０１％、こはく酸ジメチル０．１％、リンゴ酸０．１３３４％、アスパラギン酸０．１３３１％、アスパラギン酸０．０１３３％、乳酸エチル０．１％、乳酸アミド０．８９０９％、乳酸アミド０．０８９１％、ピルビン酸０．０１％、ピルビン酸メチル０．１％の処理が、低温による発芽抑制に対して有効であった。
中でもピルビン酸とピルビン酸メチルは播種０日目時点で１１～２４％発芽率を向上させた。つまり４℃６日間の予冷期間中に発芽率を向上させたことを意味しており、低温による発芽抑制の軽減に特に有効な化合物であると考えられる。
中でもピルビン酸とピルビン酸メチルは播種０日目時点で１１～２４％発芽率を向上させた。つまり４℃６日間の予冷期間中に発芽率を向上させたことを意味しており、低温による発芽抑制の軽減に特に有効な化合物であると考えられる。
【0045】
＜試験例２：ダイコン発芽試験＞
１．試験方法
乳酸、ピルビン酸、こはく酸、クエン酸をそれぞれ０．０１％、０．１％（ｗ／ｗ）の濃度で水に溶解し、これを試験溶液とした。
直径９ｃｍのガラスシャーレにアドバンテック社製Ｎｏ．２濾紙を２枚敷き、蒸留水（ＤＷ）または試験溶液を５ｍｌ加えダイコン種子（品種：晩々Ｇ（雪印種苗））を３０粒（／シャーレ）播種し、ダイコン種子の発芽が遅延することが知られている温度１０℃、暗所でインキュベートし播種後１０日目（通常条件のダイコン種子が発芽する日数）の発芽率を測定した。発芽の判定は、幼根が突出した時点とし、これを発芽個体としてカウントした。
１．試験方法
乳酸、ピルビン酸、こはく酸、クエン酸をそれぞれ０．０１％、０．１％（ｗ／ｗ）の濃度で水に溶解し、これを試験溶液とした。
直径９ｃｍのガラスシャーレにアドバンテック社製Ｎｏ．２濾紙を２枚敷き、蒸留水（ＤＷ）または試験溶液を５ｍｌ加えダイコン種子（品種：晩々Ｇ（雪印種苗））を３０粒（／シャーレ）播種し、ダイコン種子の発芽が遅延することが知られている温度１０℃、暗所でインキュベートし播種後１０日目（通常条件のダイコン種子が発芽する日数）の発芽率を測定した。発芽の判定は、幼根が突出した時点とし、これを発芽個体としてカウントした。
【0046】
２．試験結果
下記表４に試験結果を示す。
下記表４に試験結果を示す。
【0047】
【表4】
【0048】
水のみの場合、発芽率は１３％と極めて低率であった。
各試験試料が０．０１％濃度の場合、ピルビン酸の４７％が最大であった。
一方、試験試料の濃度を０．１％とした場合は、７３～９３％に発芽率が向上した。ピルビン酸の９３％が最大であった。
各試験試料が０．０１％濃度の場合、ピルビン酸の４７％が最大であった。
一方、試験試料の濃度を０．１％とした場合は、７３～９３％に発芽率が向上した。ピルビン酸の９３％が最大であった。
【0049】
＜試験例３：シロガラシ発芽試験＞
１．試験方法
ダイコン発芽試験と同様の条件で実施した。なおシロガラシ種子が通常条件では１００％発芽することが確認されている播種後１日目の発芽をカウントし、発芽率を得た。
１．試験方法
ダイコン発芽試験と同様の条件で実施した。なおシロガラシ種子が通常条件では１００％発芽することが確認されている播種後１日目の発芽をカウントし、発芽率を得た。
【0050】
２．試験結果
表５に試験結果を示す。
表５に試験結果を示す。
【0051】
【表5】
【0052】
水のみの添加の場合、発芽率は１％と極めて低率であった。各試験試料が０．０１％濃度の場合、クエン酸の発芽率７％が最大であった。一方、試験試料の濃度を０．１％とした場合は、９～１７％に発芽率が向上した。中でもクエン酸の１７％が最大であった。
【0053】
＜試験例４：コマツナ発芽試験＞
１．試験方法
ダイコン発芽試験と同様条件で実施した。なお通常条件ではコマツナ種子が１００％発芽することが確認されている播種翌日に発芽を確認し発芽率を得た。
１．試験方法
ダイコン発芽試験と同様条件で実施した。なお通常条件ではコマツナ種子が１００％発芽することが確認されている播種翌日に発芽を確認し発芽率を得た。
【0054】
２．試験結果
表６に試験結果を示す。
表６に試験結果を示す。
【0055】
【表6】
【0056】
水のみの場合、発芽率は９％と極めて低率であった。各試験試料の濃度が０．０１％の場合、クエン酸の発芽率１３％が最大であった。一方、試験試料の濃度を０．１％とした場合は、発芽率２７～４２％に増加した。クエン酸濃度０．１％の発芽率４２％が最大であった。
【0057】
＜試験例５：シロクローバ発芽試験＞
１．試験方法
乳酸を０．００１％、０．０１％、０．１％（ｗ／ｗ）の３濃度で水に溶解し、試験溶液を調製した。
９ｃｍガラスシャーレにアドバンテック社製Ｎｏ．２濾紙を２枚敷き、蒸留水または試験溶液を５ｍｌ加えシロクローバ種子（品種：アバパール（雪印種苗））を５０粒（／シャーレ）播種し、シロクローバ種子の発芽が遅延することが知られている温度１０℃、暗所でインキュベートした。通常条件ではシロクローバ種子が１００％発芽する播種後４日目の発芽率を求めた。なお発芽の判定は、幼根が突出した時点を発芽とした。
１．試験方法
乳酸を０．００１％、０．０１％、０．１％（ｗ／ｗ）の３濃度で水に溶解し、試験溶液を調製した。
９ｃｍガラスシャーレにアドバンテック社製Ｎｏ．２濾紙を２枚敷き、蒸留水または試験溶液を５ｍｌ加えシロクローバ種子（品種：アバパール（雪印種苗））を５０粒（／シャーレ）播種し、シロクローバ種子の発芽が遅延することが知られている温度１０℃、暗所でインキュベートした。通常条件ではシロクローバ種子が１００％発芽する播種後４日目の発芽率を求めた。なお発芽の判定は、幼根が突出した時点を発芽とした。
【0058】
２．試験結果
表７に試験結果を示す。
表７に試験結果を示す。
【0059】
【表7】
【0060】
水のみの添加の場合の発芽率は４２％であった。乳酸濃度が０．０１％及び０．００１％の場合は、水と同程度の発芽率であった。しかし乳酸濃度を０．１％にした場合、発芽率が７４％に向上した。
【0061】
＜試験例６：トウモロコシ発芽試験＞
１．試験方法
乳酸を０．０１％、０．１％（ｗ／ｗ）の２濃度で水に溶解して試験溶液を調製した。
１５ｃｍガラスシャーレにアドバンテック社製Ｎｏ．２濾紙を２枚敷き、蒸留水または試験溶液を＃ｍｌ加え飼料用トウモロコシ種子（試作系統（雪印種苗））を１５粒（／シャーレ）播種し、その上にアドバンテック社製Ｎｏ．２濾紙を１枚載せ蒸留水または試験溶液＃ｍｌを加えた。これをとうもろこしの発芽が遅延することが知られている、１０℃暗所でインキュベートした。通常の温度条件でトウモロコシ種子が１００％発芽する播種後５日目の発芽率を調査した。なお発芽の判定は、幼根が突出した時点を発芽したと判断した。
１．試験方法
乳酸を０．０１％、０．１％（ｗ／ｗ）の２濃度で水に溶解して試験溶液を調製した。
１５ｃｍガラスシャーレにアドバンテック社製Ｎｏ．２濾紙を２枚敷き、蒸留水または試験溶液を＃ｍｌ加え飼料用トウモロコシ種子（試作系統（雪印種苗））を１５粒（／シャーレ）播種し、その上にアドバンテック社製Ｎｏ．２濾紙を１枚載せ蒸留水または試験溶液＃ｍｌを加えた。これをとうもろこしの発芽が遅延することが知られている、１０℃暗所でインキュベートした。通常の温度条件でトウモロコシ種子が１００％発芽する播種後５日目の発芽率を調査した。なお発芽の判定は、幼根が突出した時点を発芽したと判断した。
【0062】
２．試験結果
表８に試験結果を示す。
表８に試験結果を示す。
【0063】
【表8】
【0064】
水のみの添加の場合、５日目の発芽率は４０％であった。乳酸０．０１％では８０％に達したが、乳酸０．１％の場合６０％であった
【0065】
以上の試験１～６の結果から、低温条件による発芽遅延を抑制し、発芽を促進するためには、乳酸、ピルビン酸、こはく酸、クエン酸のいずれか１以上を０．０１％～０．１％添加した溶液で種子を浸漬処理するとよいことが判明した。
また乳酸をとうもろこし種子に適用する場合の最適濃度は、０．０１～０．１％の間にあるものと考えられた。
また乳酸をとうもろこし種子に適用する場合の最適濃度は、０．０１～０．１％の間にあるものと考えられた。
【0066】
また以上の試験１～６の結果を総合すると、発芽促進剤としてはＣＨ３Ｃ（Ａ）ＣＯ（Ｒ）の構造を有する化合物（但し（Ａ）は、二重結合したＯまたはＯＨ、（Ｒ）はＯＨ、ＯＣＨ３、ＯＣ２Ｈ５、ＮＨ２のいずれかを表す）、
あるいは（Ｒ１）ＣＯＣＨＣ（Ｒ３）ＣＯＣＨ２（Ｒ２）の構造を有する化合物（但し
化学式２の（Ｒ１）はＯＨ又はＯＣＨ３、（Ｒ２）はＯＨ又はＯＣＨ３、（Ｒ３）はＨ、ＯＨ、ＮＨ２のいずれかを表す）、
そしてクエン酸
以上のいずれかを有効成分として含有するものであれば本発明の発芽促進剤として有効であるものと考えられた。
あるいは（Ｒ１）ＣＯＣＨＣ（Ｒ３）ＣＯＣＨ２（Ｒ２）の構造を有する化合物（但し
化学式２の（Ｒ１）はＯＨ又はＯＣＨ３、（Ｒ２）はＯＨ又はＯＣＨ３、（Ｒ３）はＨ、ＯＨ、ＮＨ２のいずれかを表す）、
そしてクエン酸
以上のいずれかを有効成分として含有するものであれば本発明の発芽促進剤として有効であるものと考えられた。
【0067】
＜試験例７：乳酸菌培養液を用いた発芽試験＞
種子を乳酸菌培養液で前処理することによる効果試験を実施した。
１．試験方法
（１）乳酸菌の培養
ＭＲＳ寒天培地（ＢＤ社製）に－８０℃で保管しておいたＬ．ｐａｒａｃａｓｅｉ（ＪＣＭ８１３０）を画線塗抹し、３７℃で２４時間培養した。シングルコロニーを１０ｍｌのＭＲＳ液体培地（ＢＤ社製）に接種し３７℃で２４時間静置培養した。その後１ｍｌをエッペンチューブに分注し、１０，０００ｒｐｍ、５分間室温で遠心分離し上清を得た。上清は０．２μｍフィルターを通し、生菌を除去した。このように調製した溶液を乳酸菌培養液とした。
種子を乳酸菌培養液で前処理することによる効果試験を実施した。
１．試験方法
（１）乳酸菌の培養
ＭＲＳ寒天培地（ＢＤ社製）に－８０℃で保管しておいたＬ．ｐａｒａｃａｓｅｉ（ＪＣＭ８１３０）を画線塗抹し、３７℃で２４時間培養した。シングルコロニーを１０ｍｌのＭＲＳ液体培地（ＢＤ社製）に接種し３７℃で２４時間静置培養した。その後１ｍｌをエッペンチューブに分注し、１０，０００ｒｐｍ、５分間室温で遠心分離し上清を得た。上清は０．２μｍフィルターを通し、生菌を除去した。このように調製した溶液を乳酸菌培養液とした。
【0068】
（２）ダイコン種子の浸漬処理
乳酸菌培養液は蒸留水で１００倍及び１，０００倍に希釈し、試験液を調製した。また対照として蒸留水（ＤＷ）を用いた。
５０ｍｌファルコン製プラスチックチューブに市販のダイコン種子である「冬侍」（雪印種苗株式会社製）を、３ｇを測り取り、さらに試験液を２０ｍｌ添加した。
次いで１０℃暗所で１８時間ダイコン種子の浸漬を継続した。
乳酸菌培養液は蒸留水で１００倍及び１，０００倍に希釈し、試験液を調製した。また対照として蒸留水（ＤＷ）を用いた。
５０ｍｌファルコン製プラスチックチューブに市販のダイコン種子である「冬侍」（雪印種苗株式会社製）を、３ｇを測り取り、さらに試験液を２０ｍｌ添加した。
次いで１０℃暗所で１８時間ダイコン種子の浸漬を継続した。
【0069】
（３）発芽試験：
浸漬処理後、種子を回収し、蒸留水で３回洗浄を行った。
その後９ｃｍプラスチックシャーレに濾紙（Ｎｏ．２、アドバンテック社製）を２枚敷き、蒸留水を５ｍｌ添加した。
次いで、ダイコン種子を３０粒／シャーレになるように播種した。
播種したシャーレは、その後暗所１０℃でインキュベートし、播種５０．５時間後の発芽率を調査した。
発芽率の調査は実態顕微鏡下で種子の形態観察を行い、次の通り発芽の進行を評価した。
浸漬処理後、種子を回収し、蒸留水で３回洗浄を行った。
その後９ｃｍプラスチックシャーレに濾紙（Ｎｏ．２、アドバンテック社製）を２枚敷き、蒸留水を５ｍｌ添加した。
次いで、ダイコン種子を３０粒／シャーレになるように播種した。
播種したシャーレは、その後暗所１０℃でインキュベートし、播種５０．５時間後の発芽率を調査した。
発芽率の調査は実態顕微鏡下で種子の形態観察を行い、次の通り発芽の進行を評価した。
【0070】
［発芽のステージ分類］
発芽のステージは次の３分類とした。
・種皮の裂開がみられないＮｏｎ－ｒａｐｔｕｒｅステージ
・種皮の裂開がみられるＲａｐｔｕｒｅステージ
・幼根の突出がみられるＲａｄｉｃｌｅステージ
発芽のステージは次の３分類とした。
・種皮の裂開がみられないＮｏｎ－ｒａｐｔｕｒｅステージ
・種皮の裂開がみられるＲａｐｔｕｒｅステージ
・幼根の突出がみられるＲａｄｉｃｌｅステージ
【0071】
発芽率は、播種した各シャーレの発芽数をカウントし、これを播種した種子数に対する割合を求めて発芽率（％）とした。反復数は３とした。
【0072】
２．試験結果
下記表９に、試験結果を示した。ＴｕｋｅｙのＨＳＤ検定による統計解析を行い、５％水準で蒸留水区－乳酸菌培養液１００倍希釈液区間と、蒸留水区－乳酸菌培養液１，０００倍希釈液区間に有意差が認められた。
下記表９に、試験結果を示した。ＴｕｋｅｙのＨＳＤ検定による統計解析を行い、５％水準で蒸留水区－乳酸菌培養液１００倍希釈液区間と、蒸留水区－乳酸菌培養液１，０００倍希釈液区間に有意差が認められた。
【0073】
【表9】
【0074】
表９に示す通り、乳酸菌培養液であらかじめダイコン種子を浸漬処理すると、蒸留水による前処理と比較して平均発芽率が１７－１８％高まった。
以上の試験から乳酸菌培養液は、種子浸漬処理においても発芽促進剤として有用であることが明らかとなった。
以上の試験から乳酸菌培養液は、種子浸漬処理においても発芽促進剤として有用であることが明らかとなった。
【0075】
＜試験例８：乳酸菌培養液を用いた発芽試験＞
１．試験方法
（１）乳酸菌の培養
ＭＲＳ寒天培地（ＢＤ社製）に－８０℃で保管しておいたＬ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、Ｌ．ｄｉｏｌｉｖｏｒａｎｓ、Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍを画線塗抹し３７℃で２４時間培養した。シングルコロニーを１０ｍｌのＭＲＳ液体培地（ＢＤ社製）に接種し３７℃で２４時間静置培養した。その後１ｍｌをエッペンチューブに分注し、１０，０００ｒｐｍ、５分間室温で遠心分離し上清を得た。上清は０．２μｍフィルターを通し、生菌を除去した。このように調製した溶液を乳酸菌培養液とした。
１．試験方法
（１）乳酸菌の培養
ＭＲＳ寒天培地（ＢＤ社製）に－８０℃で保管しておいたＬ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、Ｌ．ｄｉｏｌｉｖｏｒａｎｓ、Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍを画線塗抹し３７℃で２４時間培養した。シングルコロニーを１０ｍｌのＭＲＳ液体培地（ＢＤ社製）に接種し３７℃で２４時間静置培養した。その後１ｍｌをエッペンチューブに分注し、１０，０００ｒｐｍ、５分間室温で遠心分離し上清を得た。上清は０．２μｍフィルターを通し、生菌を除去した。このように調製した溶液を乳酸菌培養液とした。
【0076】
（２）発芽試験
１）試験試料の添加と播種
乳酸菌培養液は蒸留水で１００倍に希釈し、試験液を調製した。９ｃｍプラスチックシャーレに濾紙（アドバンテック社製、Ｎｏ．２）を２枚重ねて置き、シャーレ１枚あたり試験溶液を５ｍｌずつ添加した。対照区は乳酸菌を接種していないＭＲＳ液体培地の１００倍希釈液とした。
各試験溶液を添加したシャーレ１枚当たりシロイヌナズナ種子１００粒を播種した後、４℃の恒温槽で６日間低温処理を行った。
その後３４℃の恒温槽に移しインキュベートした。
目視により濾紙が乾燥してきたらその都度、蒸留水を加えた。
１）試験試料の添加と播種
乳酸菌培養液は蒸留水で１００倍に希釈し、試験液を調製した。９ｃｍプラスチックシャーレに濾紙（アドバンテック社製、Ｎｏ．２）を２枚重ねて置き、シャーレ１枚あたり試験溶液を５ｍｌずつ添加した。対照区は乳酸菌を接種していないＭＲＳ液体培地の１００倍希釈液とした。
各試験溶液を添加したシャーレ１枚当たりシロイヌナズナ種子１００粒を播種した後、４℃の恒温槽で６日間低温処理を行った。
その後３４℃の恒温槽に移しインキュベートした。
目視により濾紙が乾燥してきたらその都度、蒸留水を加えた。
【0077】
２）発芽率
発芽率の調査は実態顕微鏡下で種子の形態観察を行い、次の通り評価した。
・種皮の裂開がみられないＮｏｎ－ｒａｐｔｕｒｅステージ
・種皮の裂開がみられるＲａｐｔｕｒｅステージ
・幼根の突出がみられるＲａｄｉｃｌｅステージ、又は子葉の展開がみられるＧｒｅｅｎ
Ｃｏｔｙｌｅｄｏｎステージ
発芽率の調査は実態顕微鏡下で種子の形態観察を行い、次の通り評価した。
・種皮の裂開がみられないＮｏｎ－ｒａｐｔｕｒｅステージ
・種皮の裂開がみられるＲａｐｔｕｒｅステージ
・幼根の突出がみられるＲａｄｉｃｌｅステージ、又は子葉の展開がみられるＧｒｅｅｎ
Ｃｏｔｙｌｅｄｏｎステージ
【0078】
以上の３段階の変化を指標とした。シロイヌナズナ種子の場合は、幼根の突出が確認された時点（Ｒａｉｄｉｃｌｅステージ又はＣｏｔｙｌｅｄｏｎステージ）を発芽したと判断した。
また、発芽率は、播種した１００個当たりの発芽数をカウントし、これを発芽率（％）とした。
また、発芽率は、播種した１００個当たりの発芽数をカウントし、これを発芽率（％）とした。
【0079】
２．試験結果
下記表１０に試験結果を示した。なお比較対照として蒸留水（ＤＷ）を用いた。
下記表１０に試験結果を示した。なお比較対照として蒸留水（ＤＷ）を用いた。
【表10】
【0080】
表１０に示す通り、Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ、Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ、Ｌ．ｄｉｏｌｉｖｏｒａｎｓ、Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍの培養液は、ＭＲＳ液体培地と比べて発芽率が４１－７６％高まった。
以上の試験から乳酸菌培養液は、発芽促進剤として有用であることが明らかとなった。
以上の試験から乳酸菌培養液は、発芽促進剤として有用であることが明らかとなった。
【0081】
＜試験例９ 有機酸原液種子処理試験＞
有機酸の原液を種子に直接散布して、発芽を確認する試験を行った。
試験薬は、乳酸、ピルビン酸を用いた。試験種子は、ダイコンを用いた。
＜乳酸試験＞
１．試験方法
試験区：無処理区、乳酸区
供試種子：ダイコン（冬侍）
供試濃度：0.5mg/30粒
反復数：3
２．種子処理
ダイコン種子90粒に対し、DL-乳酸（和光,純度85.0-92.0%）を、それぞれ1.5mgを種子に直接塗布することで処理を行った。
３．発芽試験
・直径9ｃｍのプラスチックシャーレにアドバンテック社製No.2濾紙を2枚敷き、蒸留水を5ｍｌ（/シャーレ）加えダイコン種子を30粒播種した。
・11℃暗所で65時間インキュベートし発芽状況を確認しながら発芽率をカウントした。
・発芽の判定は、幼根が突出した時点とし、これを発芽個体としてカウントした。
４．試験結果
試験結果を表１１に示す。
乳酸の原液を種子に塗布した場合、発芽率の向上が確認された。
有機酸の原液を種子に直接散布して、発芽を確認する試験を行った。
試験薬は、乳酸、ピルビン酸を用いた。試験種子は、ダイコンを用いた。
＜乳酸試験＞
１．試験方法
試験区：無処理区、乳酸区
供試種子：ダイコン（冬侍）
供試濃度：0.5mg/30粒
反復数：3
２．種子処理
ダイコン種子90粒に対し、DL-乳酸（和光,純度85.0-92.0%）を、それぞれ1.5mgを種子に直接塗布することで処理を行った。
３．発芽試験
・直径9ｃｍのプラスチックシャーレにアドバンテック社製No.2濾紙を2枚敷き、蒸留水を5ｍｌ（/シャーレ）加えダイコン種子を30粒播種した。
・11℃暗所で65時間インキュベートし発芽状況を確認しながら発芽率をカウントした。
・発芽の判定は、幼根が突出した時点とし、これを発芽個体としてカウントした。
４．試験結果
試験結果を表１１に示す。
乳酸の原液を種子に塗布した場合、発芽率の向上が確認された。
【0082】
【表11】
【0083】
＜ピルビン酸試験＞
１．試験方法
試験区：無処理区、ピルビン酸区
供試種子：ダイコン（冬侍）
供試濃度：0.5mg/30粒
反復数：4
２．種子処理
ダイコン種子120粒に対し、ピルビン酸（和光,純度97.0%）2.0mgを種子に直接塗布することで処理を行った。
３．発芽試験
・直径9ｃｍのプラスチックシャーレにアドバンテック社製No.2濾紙を2枚敷き、蒸留水を5ｍｌ（/シャーレ）加えダイコン種子を30粒播種した。
・10℃暗所で67時間インキュベートし発芽状況を確認しながら発芽率をカウントした。
・発芽の判定は、幼根が突出した時点とし、これを発芽個体としてカウントした。
４．試験結果
試験結果を表１２に示す。
ピルビン酸の原液を種子に塗布した場合、発芽率の向上が確認された。
１．試験方法
試験区：無処理区、ピルビン酸区
供試種子：ダイコン（冬侍）
供試濃度：0.5mg/30粒
反復数：4
２．種子処理
ダイコン種子120粒に対し、ピルビン酸（和光,純度97.0%）2.0mgを種子に直接塗布することで処理を行った。
３．発芽試験
・直径9ｃｍのプラスチックシャーレにアドバンテック社製No.2濾紙を2枚敷き、蒸留水を5ｍｌ（/シャーレ）加えダイコン種子を30粒播種した。
・10℃暗所で67時間インキュベートし発芽状況を確認しながら発芽率をカウントした。
・発芽の判定は、幼根が突出した時点とし、これを発芽個体としてカウントした。
４．試験結果
試験結果を表１２に示す。
ピルビン酸の原液を種子に塗布した場合、発芽率の向上が確認された。
【0084】
【表12】
【0085】
この試験結果から、少量の有機酸を塗布方法が有効であることが確認され、塗布処理種子の製法として使用することができる。低濃度に希釈した剤を用いた場合、水分の乾燥処理などが発生するが、不要になる。
【図1】
