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特開2023-36022植物活性化剤及び肥料組成物、並びに病害防除方法及び植物生育方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023036022
(43)【公開日】2023-03-13
(54)【発明の名称】植物活性化剤及び肥料組成物、並びに病害防除方法及び植物生育方法
(51)【国際特許分類】
C05F 11/10 20060101AFI20230306BHJP
A01N 61/00 20060101ALI20230306BHJP
A01P 21/00 20060101ALI20230306BHJP
A01P 3/00 20060101ALI20230306BHJP
A01N 25/02 20060101ALI20230306BHJP
C05G 5/20 20200101ALI20230306BHJP
A01G 7/06 20060101ALI20230306BHJP
【ＦＩ】
C05F11/10
A01N61/00 Z
A01P21/00
A01P3/00
A01N25/02
C05G5/20
A01G7/06 A
【審査請求】未請求
【請求項の数】8
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2022137033
(22)【出願日】2022-08-30
(31)【優先権主張番号】P 2021141851
(32)【優先日】2021-08-31
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(71)【出願人】
【識別番号】505462677
【氏名又は名称】株式会社グリーンテクノ２１
(71)【出願人】
【識別番号】503044019
【氏名又は名称】下 浩史
(74)【代理人】
【識別番号】100195327
【弁理士】
【氏名又は名称】森 博
(72)【発明者】
【氏名】下 浩史
(72)【発明者】
【氏名】江頭 順也
(72)【発明者】
【氏名】白水 亮真
【テーマコード（参考）】
2B022
4H011
4H061
【Ｆターム（参考）】
2B022AB11
2B022AB13
2B022AB15
2B022AB20
2B022EA03
2B022EA10
4H011AA01
4H011AB03
4H011BB18
4H011BB20
4H011DA13
4H011DC05
4H011DC11
4H011DD04
4H011DG06
4H061AA01
4H061AA04
4H061CC42
4H061DD11
4H061FF01
4H061GG28
(57)【要約】
【課題】卵由来成分を原料とした植物活性化剤及びこれを配合した肥料組成物、並びにこれらを使用した病害防除方法及び植物生育方法を提供する。
【解決手段】卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤。当該植物活性化剤を対象植物に吸収させることによって、対象植物の生長を促進させ、対象となる病害を防除することができる。卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤及び肥料成分を含有する肥料組成物。当該肥料組成物を対象植物に吸収させることによって、対象植物の生長を促進させ、対象となる病害を防除することができる。
【選択図】 図２
【解決手段】卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤。当該植物活性化剤を対象植物に吸収させることによって、対象植物の生長を促進させ、対象となる病害を防除することができる。卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤及び肥料成分を含有する肥料組成物。当該肥料組成物を対象植物に吸収させることによって、対象植物の生長を促進させ、対象となる病害を防除することができる。
【選択図】 図２
【特許請求の範囲】
【請求項1】
卵由来加水分解物を含有することを特徴とする植物活性化剤。
【請求項2】
前記卵由来加水分解物が、卵殻膜加水分解物を含有する請求項１に記載の植物活性化剤。
【請求項3】
前記卵由来加水分解物が、卵殻膜加水分解物及び卵白加水分解物の混合物である請求項１に記載の植物活性化剤。
【請求項4】
液状である請求項１に記載の植物活性化剤。
【請求項5】
請求項１に記載の植物活性化剤及び肥料成分を含有することを特徴とする肥料組成物。
【請求項6】
液状である請求項５に記載の肥料組成物。
【請求項7】
請求項１から４のいずれかに記載の植物活性化剤、又は請求項５若しくは６に記載の肥料組成物を対象植物に吸収させることを特徴とする病害防除方法。
【請求項8】
請求項１から４のいずれかに記載の植物活性化剤、又は請求項５若しくは６に記載の肥料組成物を対象植物に吸収させることを特徴とする植物生育方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、植物活性化剤及び肥料組成物、並びに病害防除方法及び植物生育方法に関する。
【背景技術】
【0002】
従来より、カルシウム源や多孔質体として卵殻を配合した肥料が広く知られている。例えば、特許文献１には家畜排泄物等に乾燥卵殻を混合した熟成させた粒状化肥料が報告されている。また、特許文献２には卵殻と米糠の混合物をペレット状に加工した肥料が開示されている。また、特許文献３には、食酢もろみ粕と卵殻と珪藻土を含む肥料が開示されている。
【0003】
卵殻は、糖蛋白質からなる卵殻膜や卵白を含み、これらが腐敗して悪臭を発生させるため、通常、卵殻に付着したタンパク質成分（卵殻膜や卵白）は除去して使用されている。例えば、特許文献４には、卵殻内から卵白を洗浄除去したのちに、卵殻膜付の卵殻を炭酸水溶液に浸漬して卵殻から卵殻膜を分離し夫々を回収する卵殻と卵殻膜との分離回収方法が報告されている。回収した卵殻は肥料等の原料とされ、卵殻膜は例えば、化粧料等の原料等として利用されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】特開２００３－２７７３号公報
【特許文献2】特許第４８６８３４３号公報
【特許文献3】特許第６０２３４１３号公報
【特許文献4】特開２０１２－１３９２０５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
上記の通り、卵殻を配合した肥料が広く知られているが、卵殻膜は、肥料としてほとんど使用されていない。その理由の一つとして、卵殻膜は比較的分解されにくい蛋白質であり、そのままの状態では土壌にいれても生分解されにくいことが挙げられる。また、卵白や卵黄においても、肥料として利用することは一般的に行われていない。
【0006】
かかる状況下、本発明の目的は、卵由来成分を原料とした植物活性化剤及びこれを配合した肥料組成物、並びにこれらを使用した病害防除方法及び植物生育方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【0007】
本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、卵由来成分の加水分解物が植物の生長を促進させる作用があることを見出し、本発明に至った。
【0008】
すなわち、本発明は、以下の発明に係るものである。
＜１＞ 卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤。
＜２＞ 前記卵由来加水分解物が、卵殻膜加水分解物を含有する＜１＞に記載の植物活性化剤。
＜３＞ 前記卵由来加水分解物が、卵殻膜加水分解物及び卵白加水分解物の混合物である＜１＞または＜２＞に記載の植物活性化剤。
＜４＞ 液状である＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の植物活性剤。
＜５＞ ＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の植物活性化剤及び肥料成分を含有する肥料組成物。
＜６＞ 液状である＜５＞に記載の肥料組成物。
＜１＞ 卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤。
＜２＞ 前記卵由来加水分解物が、卵殻膜加水分解物を含有する＜１＞に記載の植物活性化剤。
＜３＞ 前記卵由来加水分解物が、卵殻膜加水分解物及び卵白加水分解物の混合物である＜１＞または＜２＞に記載の植物活性化剤。
＜４＞ 液状である＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の植物活性剤。
＜５＞ ＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の植物活性化剤及び肥料成分を含有する肥料組成物。
＜６＞ 液状である＜５＞に記載の肥料組成物。
【0009】
＜Ａ１＞ ＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の植物活性化剤、又は＜５＞若しくは＜６＞に記載の肥料組成物を対象植物に吸収させる病害防除方法。
＜Ａ２＞ 前記対象植物が、野菜類、果樹類、又は穀物類である＜Ａ１＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ３＞ 前記対象植物が、アブラナ科又はキク科である＜Ａ１＞または＜Ａ２＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ４＞ 防除対象病害が、葉先枯れ症である＜Ａ３＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ５＞ 前記対象植物が、ナス科である＜Ａ１＞または＜Ａ２＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ６＞ 防除対象病害が、心腐症である＜Ａ５＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ２＞ 前記対象植物が、野菜類、果樹類、又は穀物類である＜Ａ１＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ３＞ 前記対象植物が、アブラナ科又はキク科である＜Ａ１＞または＜Ａ２＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ４＞ 防除対象病害が、葉先枯れ症である＜Ａ３＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ５＞ 前記対象植物が、ナス科である＜Ａ１＞または＜Ａ２＞に記載の病害防除方法。
＜Ａ６＞ 防除対象病害が、心腐症である＜Ａ５＞に記載の病害防除方法。
【0010】
＜Ｂ１＞ ＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の植物活性化剤、又は＜５＞若しくは
＜６＞に記載の肥料組成物を対象植物に吸収させる植物生育方法。
＜Ｂ２＞ 前記対象植物が、野菜類、果樹類、又は穀物類である＜Ｂ１＞に記載の植物生育方法。
＜６＞に記載の肥料組成物を対象植物に吸収させる植物生育方法。
＜Ｂ２＞ 前記対象植物が、野菜類、果樹類、又は穀物類である＜Ｂ１＞に記載の植物生育方法。
【0011】
また、本発明は、以下の植物活性化剤の製造方法に係るものである。
＜Ｃ１＞ ＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の植物活性化剤の製造方法であって、卵殻膜粉末、卵白粉末又は卵黄粉末を酵素法にて加水分解させる工程を有する植物活性化剤の製造方法。
＜Ｃ２＞ ＜５＞または＜６＞に記載の肥料組成物の製造方法であって、卵殻膜粉末、卵白粉末又は卵黄粉末を酵素法にて加水分解させ植物活性化剤を得る工程と、
前記植物活性化剤と肥料成分を混合する工程と、を含む肥料組成物の製造方法。
＜Ｃ１＞ ＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の植物活性化剤の製造方法であって、卵殻膜粉末、卵白粉末又は卵黄粉末を酵素法にて加水分解させる工程を有する植物活性化剤の製造方法。
＜Ｃ２＞ ＜５＞または＜６＞に記載の肥料組成物の製造方法であって、卵殻膜粉末、卵白粉末又は卵黄粉末を酵素法にて加水分解させ植物活性化剤を得る工程と、
前記植物活性化剤と肥料成分を混合する工程と、を含む肥料組成物の製造方法。
【発明の効果】
【0012】
本発明によれば、植物の生長促進に有用な植物活性化剤及び肥料組成物、並びに病害防除方法及び植物生育方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【0013】
【図1】植物活性化剤の投与前のきゅうりの様子を示す写真である。
【図2】実施例１、比較例１及び参考例（対照）のきゅうり（１０日後）の様子を示す写真である。
【図3】実施例２の小松菜（３０日後）の様子を示す写真である。
【図4】生育調査の結果を示すグラフであり、（ａ）はカブ、（ｂ）は青梗菜、（ｃ）はサンチュを示す。
【図5】新鮮物収穫量を示すグラフであり、（ａ）はカブ、（ｂ）は青梗菜を示す。
【図6】青梗菜及びサンチュの葉先枯れ障害の発生率を示すグラフである。
【図7】実施例（試料６）及び参考例（試料５）のジャガイモを輪切りした状態を示す写真である。
【図8】植物活性化剤Ｄ及びＥのアミノ酸組成分析の結果である。
【図9】植物活性化剤Ｆ（ＥＨ－ＥＳＭ１）、植物活性化剤Ｇ（ＥＨ－ＥＳＭ２）及び植物活性化剤Ｈ（ＡＨ－ＥＳＭ）のサイズ排除クロマトグラムである。
【発明を実施するための形態】
【0014】
以下、本発明について例示物等を示して詳細に説明するが、本発明は以下の例示物等に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において任意に変更して実施できる。なお、本明細書において、「～」とはその前後の数値又は物理量を含む表現として用いるものとする。また、本明細書において、「Ａ及び／又はＢ」と いう表現には、「Ａのみ」、「Ｂのみ」、「Ａ及びＢの双方」が含まれる。
【0015】
（１．植物活性化剤）
本発明は、卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤（以下、「本発明の植物活性化剤」と記載する。）に関する。本発明の植物活性化剤は、対象植物に吸収させることによって有効成分である卵由来加水分解物に起因する植物活性化作用（植物生長促進作用や病害抵抗作用）を有する。
本発明は、卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤（以下、「本発明の植物活性化剤」と記載する。）に関する。本発明の植物活性化剤は、対象植物に吸収させることによって有効成分である卵由来加水分解物に起因する植物活性化作用（植物生長促進作用や病害抵抗作用）を有する。
【0016】
本明細書において「植物活性化作用」は、植物生長促進作用又は病害抵抗作用を意味する。本発明の植物活性化剤は植物生長促進作用及び病害抵抗作用の少なくとも一つの作用を有し、両方の作用を有していることがより好ましい。
【0017】
「植物生長促進作用」は、発芽後の植物の生長を促進させる作用を意味し、茎の伸長・肥大、根の伸長・肥大及び葉の生長、果実の発生・肥大等を含む。具体的には、植物の生長促進、発根性の向上、花や葉への発色性の向上などが含まれる。
「病害抵抗作用」は、植物の病気の予防、抑制、改善の少なくともひとつの作用を意味する。
「病害抵抗作用」は、植物の病気の予防、抑制、改善の少なくともひとつの作用を意味する。
【0018】
本発明の植物活性化剤は、含有する卵由来加水分解物に起因して植物生長促進作用、病害抵抗作用に対して効果を奏するため、「植物生長促進用」や「病害抵抗用」の植物活性化剤として用いることができる。
【0019】
本明細書において「卵由来加水分解物」は、卵殻膜加水分解物、卵白加水分解物及び卵黄加水分解物を総称したものであり、卵殻膜、卵白又は卵黄のタンパク質を水に可溶化するまで加水分解した加水分解物を意味する。
なお、本明細書において、「水に可溶化する」とは、卵由来加水分解物が溶解している状態だけでなく、自然沈降せずに分散している状態を含むものとする。
なお、本明細書において、「水に可溶化する」とは、卵由来加水分解物が溶解している状態だけでなく、自然沈降せずに分散している状態を含むものとする。
【0020】
本明細書において「卵殻膜加水分解物」は、卵殻膜に含まれる成分の加水分解物を意味する。卵殻膜は鳥類（特には鶏）の卵殻の内側にある繊維質の薄膜であり、外卵殻膜及び内卵殻膜の二層の網目状構造からなる。卵殻膜の水分を除く主成分はタンパク質であるが、その他にも脂質や糖質等を含む。なお、卵殻膜のタンパク質は約２０種類のアミノ酸で構成され、特にシスチンを多く含む。卵殻膜はさらにコラーゲンとヒアルロン酸を含むという特徴がある。
【0021】
卵殻膜のタンパク質は、通常、加水分解（酸、アルカリ、酵素等）を行ったとしても分解されにくく、完全に遊離アミノ酸まで分離されにくい。後述する実施例に示すように、本発明の植物活性化剤に含有される卵殻膜加水分解物は、加水分解ペプチドを含有する。
【0022】
なお、本明細書において、用語「ペプチド」は、アミド結合（ペプチド結合）によって連結された２つ以上のアミノ酸から構成される分子のうち、重量平均分子量（ＭＷ）が２００００以下の分子を意味するものとする。したがって、ジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド、ポリペプチド、または２つ以上のアミノ酸の鎖（複数可）を指すために使用される他の用語は、当該「ペプチド」の定義に含まれるものとする。なお、以下において、単に「分子量」と記載された場合は「重量平均分子量」を意味するものとする。
【0023】
本明細書において「卵白加水分解物」は、卵白に含まれる成分の加水分解物を意味する。卵白は鳥類（特には鶏）の卵黄膜と卵殻膜の間にあるゾル状の物質であり、水分を除く主成分はタンパク質であるが、その他にも脂質や糖質等を含む。なお、卵白のタンパク質の主成分はアルブミンであり、上記卵殻膜タンパク質とは異なる。
【0024】
本明細書において「卵黄加水分解物」は、卵黄に含まれる成分の加水分解物を意味する。卵黄は鳥類（特には鶏）の卵白に内包された卵細胞に貯蔵される栄養物質である。卵黄は脂質（中性脂質、リン脂質及びコレステロール）を主成分とし、その他にもタンパク質や糖質等を含む。
【0025】
加水分解処理に供される卵殻膜、卵白、卵黄の形態は、特に限定されず、例えば、乾燥状態や湿潤状態のものを使用できる。
【0026】
本発明の植物活性化剤は、植物活性化作用を有する卵由来加水分解物を有効成分として含有する。すなわち、本発明の植物活性化剤は、植物活性化作用を有する限り、卵殻膜加水分解物、卵白加水分解物及び卵黄加水分解物を含有することができ、これらの加水分解物の配合割合は、本発明の植物活性化剤が植物活性化効果を奏する範囲で適宜選択することができる。
【0027】
また、本発明の植物活性化剤は、植物活性化作用を有する限り様々な分子量の卵由来加水分解物を含んでいてもよい。
また、所望の分子量分布に調整してもよい。例えば、分子量が大きく非水溶性の卵由来加水分解物を得たのちに、さらなる加水分解によって植物活性化作用を有する加水分解物（加水分解ペプチド）として水に可溶化したり、様々な分子量の加水分解物を含む溶液から遠心分離や分離膜等を使用して所望の分子量分布のものを回収したりして使用してもよい。
また、所望の分子量分布に調整してもよい。例えば、分子量が大きく非水溶性の卵由来加水分解物を得たのちに、さらなる加水分解によって植物活性化作用を有する加水分解物（加水分解ペプチド）として水に可溶化したり、様々な分子量の加水分解物を含む溶液から遠心分離や分離膜等を使用して所望の分子量分布のものを回収したりして使用してもよい。
【0028】
卵由来加水分解物は、重量平均分子量の上限及び下限は、植物活性化作用を有する範囲で適宜決定される。なお、重量平均分子量は、サイズ排除クロマトグラフィーで得られる分子量分布から求めることができる。
【0029】
本発明の植物活性化剤は、卵由来加水分解物の中でも、特に卵殻膜加水分解物を含有することが好ましい。卵殻膜加水分解物を含有させることによって、植物活性化作用である植物生長促進作用及び病害抵抗作用の両方に対して優れた効果を発揮することができる。
【0030】
卵殻膜加水分解物が優れた植物活性化作用（植物生長促進作用及び病害抵抗作用の両方）を有する理由については不明な点もあるが、卵殻膜のタンパク質は、上述の通り、約２０種類のアミノ酸で構成され、特にシスチンを多く含んでいる点や、実施例で示されるように卵殻膜加水分解物には卵殻膜由来のペプチドを多く含んでいることから、当該ペプチドが植物活性化作用に優れているものと推測される。
【0031】
また、卵殻膜加水分解物は化粧品等の原料としても使用される成分であるため、本発明の植物活性化剤が皮膚に付着した場合に皮膚を保護する作用が期待される。
【0032】
このような卵殻膜加水分解物に由来する作用を得るためには、卵殻膜加水分解物の割合は、卵由来加水分解物１００重量％としたときに、１０重量％以上であり、好ましくは３０重量％以上であり、より好ましくは５０重量％以上であり、さらに好ましくは８０重量％以上である。また、卵由来加水分解物が卵殻膜加水分解物のみ（１００重量％）であってもよい。
【0033】
一方、卵殻膜加水分解物の割合が多くなりすぎると流動性が低下する場合がある。そのため、流動性を高める点では、卵由来加水分解物は、卵殻膜加水分解物と卵白加水分解物の混合物としてもよい。その配合割合は、卵殻膜加水分解物と卵白加水分解物の合計を１００重量％としたときに、卵白加水分解物が１０重量％～５０重量％である。
【0034】
本発明の植物活性化剤は、通常、液状組成物（卵由来加水分解物が可溶化した状態）として施用されるが、溶媒を留去させて固体組成物として施用することもできる。固体組成物の場合は、卵由来加水分解物を乾燥させて粉末や顆粒などの形状として施用することができる。
なお、本明細書において、「液状」とは、常温（１０～２５℃、以下同様）において、組成物が固化しておらず、流動性のある状態を意味する。
なお、本明細書において、「液状」とは、常温（１０～２５℃、以下同様）において、組成物が固化しておらず、流動性のある状態を意味する。
【0035】
本発明の植物活性化剤が液状組成物である場合、卵由来加水分解物は、溶媒に溶解又は分散されている。また、凝集や沈殿の発生した場合でもこれを再度撹拌することにより、本発明の植物活性化剤を液状組成物として施用することができる。
【0036】
溶媒としては、通常、水のみが用いられるが、卵由来加水分解物の溶解や分散を阻害せず、施用対象となる植物に悪影響を及ぼさない範囲で水に相溶性の溶媒であれば、水に混合して用いることもできる。溶媒における水の割合は、８０重量％以上（１００重量％含む）である。水以外の溶媒としては、エタノールなど低級アルコールが挙げられる。
【0037】
また、卵由来加水分解物の溶解や分散を阻害せず、施用対象となる植物に悪影響を及ぼさないものであれば、本発明の植物活性化剤は、溶媒以外にも任意の成分を含んでいてもよい。このような成分として、例えば、公知の分散剤、ｐＨ調整剤等が挙げられる。
【0038】
本発明の植物活性化剤における卵由来加水分解物の含有割合は、施用対象となる植物の種類等の条件に応じて適宜決定される。液状とした場合は、卵由来加水分解物は植物活性化剤に対して、例えば、０．０１重量％以上３０重量％以下である。なお、濃度は対象植物の種類や施用方法に応じて適宜変更可能である。
本発明の植物活性化剤が卵由来加水分解物を高濃度で含有する場合には、溶媒（通常、水）で希釈して使用してもよい。また、卵由来加水分解物が固形物（乾燥物）の場合には、使用直前に溶媒に添加して溶解・分散させて液状組成物として使用することもできる。
本発明の植物活性化剤が卵由来加水分解物を高濃度で含有する場合には、溶媒（通常、水）で希釈して使用してもよい。また、卵由来加水分解物が固形物（乾燥物）の場合には、使用直前に溶媒に添加して溶解・分散させて液状組成物として使用することもできる。
【0039】
本発明の植物活性化剤の形態は、固体状、粉末状、粒状、液状などが挙げられ、用途に応じて適宜選択すればよい。
例えば、散布のしやすさからは、液状の植物活性化剤が好適に使用される。液状の植物活性化剤の場合、固形分（卵由来加水分解物）の濃度は、散布がスムーズに行われる粘度であればよい。
例えば、散布のしやすさからは、液状の植物活性化剤が好適に使用される。液状の植物活性化剤の場合、固形分（卵由来加水分解物）の濃度は、散布がスムーズに行われる粘度であればよい。
【0040】
本発明に係る卵由来加水分解物は、原料である卵殻膜、卵白、卵黄を、酸、アルカリ、酵素等によって加水分解することによって得ることができる。また、卵殻膜、卵白及び卵黄を同一の加水分解方法で処理してもよいし、異なる加水分解方法で処理してもよい。
【0041】
この中でも、卵由来加水分解物が、酵素を利用した酵素法由来の加水分解物であることが好ましい。
酵素法では、アルカリ性プロテアーゼ、酸性プロテアーゼのいずれも使用することができる。アルカリ性プロテアーゼは、アルカリ性条件下で、卵由来タンパク質を可溶化できる程度に加水分解できるものであればよい。アルカリ性プロテアーゼは市販品を用いることができ、例えば、ナガセケムテックス株式会社のビオプラーゼシリーズ等が挙げられる。
酵素法では、アルカリ性プロテアーゼ、酸性プロテアーゼのいずれも使用することができる。アルカリ性プロテアーゼは、アルカリ性条件下で、卵由来タンパク質を可溶化できる程度に加水分解できるものであればよい。アルカリ性プロテアーゼは市販品を用いることができ、例えば、ナガセケムテックス株式会社のビオプラーゼシリーズ等が挙げられる。
【0042】
酸性プロテアーゼとしては、酸性条件下で、卵由来タンパク質を可溶化できる程度に加水分解できるものであればよい。酸性プロテアーゼとしては麹由来の酸性プロテアーゼが好適な一例である。なお、麹由来のプロテアーゼには、酸性プロテアーゼ以外にアルカリ性プロテアーゼも存在するがこれを利用することもできる。
【0043】
また、麹からプロテアーゼを分離させずに、麹そのものを酵素含有物として利用することもできる。麹は、麹菌を米、麦、大豆等の穀物、その他食品素材に接種して発育させたものである。本発明においては、卵由来タンパク質を分解する酵素を生成する限り、使用する麹菌の種類は特に制限はなく、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属、Ｍｕｃｏｒ属、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ属、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属、Ｍｏｎａｓｃｕｓ属、Ａｂｓｉｄｉａ属に属する菌が挙げられる。好ましい麹菌の具体例としては、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓａｉｔｏｉ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓａｉｔｏｉ ｖｅｒ ｋａｇｏｓｈｉｍａｅｎｓｉｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｕｓａｍｉ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｏｊａｅ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ ｖｅｒ ｋａｗａｃｈｉｉ等が挙げられる。
【0044】
麹の中でも、有機酸を含有する麹が好ましい。麹が含有する有機酸の種類としては、例えば、クエン酸、リンゴ酸、乳酸等が挙げられる。麹が有機酸を含有することにより、雑菌の発生数が抑えられると共に、対象植物への栄養分となりうる。
【0045】
卵由来加水分解物の製造において、原料となる卵殻膜、卵白及び卵黄の割合は任意であり、本発明の植物活性化剤の目的（施用対象となる植物等）に応じて適宜選択することができる。
【0046】
本発明の植物活性化剤は、これらの製剤をそのまま、あるいは希釈して土壌施用、水面施用または育苗箱施用等により施用することができる。本発明の植物活性化剤の施用量は、含有される卵由来加水分解物の性状（加水分解物の分子量、アミノ酸割合、原料となる卵殻膜、卵白、卵黄の割合等）、環境条件、施用する剤型などによって変動するため、対象植物に応じて適宜変更される。
【0047】
さらに、本発明の植物活性化剤は、その目的を阻害しない範囲で、必要に応じて殺虫剤、殺菌剤、除草剤、他の植物活性化剤、生長促進剤等の任意の成分と混合してもよい。また、本発明の植物活性化剤は、窒素、リン、カリウムやその他の無機成分として、例えば、カルシウム、硫黄、マグネシウム、鉄、マンガン、ホウ素、亜鉛、銅、塩素、を含んでいてもよい。なお、本発明の植物活性化剤が無機成分（窒素、リン、カリウム等）を含む場合には、本発明の植物活性化剤が含有する無機成分を、後述する本発明の肥料組成物の肥料成分の一部にすることもできる。
【0048】
また、上述の通り、本発明の植物活性化剤の有効成分は、卵殻膜、卵白及び卵黄を原料とした卵由来加水分解物であるが、これら以外の卵由来成分（卵殻やカラザ等）を含んでいてもよい。例えば、本発明の植物活性化剤は、粉砕化した卵殻粉末を含んでいてもよいし、卵殻を、酸（例えば酢酸）で溶解した卵殻由来のカルシウム成分を含んでいてもよい。さらに、本発明の目的を損なわない限り、卵由来成分以外の成分として、魚や肉等から得られる動物由来タンパク質などの有機物を含んでいてもよい。これらの卵由来成分以外の有機物は必要に応じて加水分解処理を行い、加水分解物として使用してもよい。
【0049】
本発明の植物活性化剤は、他の成分を加えて任意の組成物（典型的には肥料組成物）としても使用でき、これを含む培土としても使用することができる。さらに、植物の種子と、本発明の植物活性化剤を含む肥料組成物及び／又は本発明の植物活性化剤を含む培土とを含む植物栽培キットとして使用することもできる。
【0050】
（２．肥料組成物）
本発明の肥料組成物は、上記本発明の植物活性化剤及び肥料成分を含有する組成物であり、本発明の植物活性化剤に起因した植物活性化作用（植物生長促進作用や病害抵抗作用）と、肥料成分による作用を有する。
本発明の肥料組成物は植物生長促進作用及び病害抵抗作用の少なくとも一つの作用を有し、両方の作用を有していることがより好ましい。
本発明の肥料組成物は、後述する実施例の通り、植物生長促進作用、病害抵抗作用に対して効果を奏するため、「植物生長促進用肥料組成物」、「病害抵抗用肥料組成物」として用いることができる。
本発明の肥料組成物は、上記本発明の植物活性化剤及び肥料成分を含有する組成物であり、本発明の植物活性化剤に起因した植物活性化作用（植物生長促進作用や病害抵抗作用）と、肥料成分による作用を有する。
本発明の肥料組成物は植物生長促進作用及び病害抵抗作用の少なくとも一つの作用を有し、両方の作用を有していることがより好ましい。
本発明の肥料組成物は、後述する実施例の通り、植物生長促進作用、病害抵抗作用に対して効果を奏するため、「植物生長促進用肥料組成物」、「病害抵抗用肥料組成物」として用いることができる。
【0051】
本明細書において、「肥料成分」とは、肥料取締法における「肥料」と同義であり、これを対象植物に吸収させることによって「植物の栄養に供すること」または「植物の栽培に資するため土壌に化学的変化をもたらすことを目的として土地に施されるもの」及び「植物の栄養に供することを目的として植物に施されるもの」を意味する。
肥料成分は植物を構成する成分を含み、その成分が栄養となって植物を生長させるものであり、植物の持つ生理的機能を高め、それによって植物が生育するようなものは肥料成分とはいわない。
肥料成分は植物を構成する成分を含み、その成分が栄養となって植物を生長させるものであり、植物の持つ生理的機能を高め、それによって植物が生育するようなものは肥料成分とはいわない。
【0052】
肥料組成物中の植物活性化剤（卵由来加水分解物換算）の割合は、本発明の目的を損なわない限り任意であり、対象植物の種類や施用方法に応じて適宜設定されるが、肥料組成物１００重量％（液状の場合は、固形物換算）としたときに、通常、５重量％以上であり、好ましくは１０重量％以上であり、より好ましくは、３０重量％以上である。
植物活性化剤（卵由来加水分解物換算）の上限は本発明の効果を損なわない限り特に制限はないが、肥料組成物１００重量％としたときに、例えば、７０重量％以下であり、５０重量％以下である。
植物活性化剤（卵由来加水分解物換算）の上限は本発明の効果を損なわない限り特に制限はないが、肥料組成物１００重量％としたときに、例えば、７０重量％以下であり、５０重量％以下である。
【0053】
肥料成分として、典型的には肥料の三要素と呼ばれる窒素、リン、カリウムが挙げられる。これらは肥料の三要素の配合割合は、対象植物の種類や栽培目的により使い分けることができる。一般的に、窒素は、「葉肥」ともいわれ、植物の生長を促進し、葉色を濃くし、リンは、「実肥」ともいわれ、開花や結実を促進し、カリウムは、「根肥」ともいわれ、根の発達を促進することが知られている。なお、以下、窒素、リン及びカリウムを総称して「ＮＰＫ肥料成分」と称す場合がある。
【0054】
肥料組成物中のＮＰＫ肥料成分の割合は、本発明の目的を損なわない限り任意であり、対象植物の種類や施用方法に応じて適宜設定されるが、肥料組成物１００重量％（液状の場合は、固形物換算）としたときに、通常、５重量％以上であり、１０重量％以上であり、３０重量％以上である。ＮＰＫ肥料成分の上限は本発明の効果を損なわない限り特に制限はないが、肥料組成物１００重量％としたときに、例えば、９０重量％以下であり、７０重量％以下であり、５０重量％以下である。
【0055】
ＮＰＫ肥料成分における窒素、リン及びカリウムの割合は、対象となる植物の種類に応じて適宜選択される。典型的には、窒素の濃度は０重量％以上３０重量％以下であり、リンの濃度は０重量％以上３０重量％以下であり、カリウムの濃度は０重量％以上３０重量％以下である（但し、窒素、リン及びカリウムがすべて０重量％である場合は除く。）。
なお、後述する実施例にて、Ｎ―Ｐ―Ｋ＝７－７－７が例示されるが、肥料組成物において、Ｎ－Ｐ－Ｋ＝７－７－７とは、肥料中の窒素（Ｎ）、リン（Ｐ２Ｏ５）、カリウム（Ｋ２Ｏ）換算の成分割合がそれぞれ７重量％、７重量％、７重量％であることを示す。
また、ＮＰＫ肥料成分における窒素、リン及びカリウムの態様は特に限定はないが、典型的には硝酸カルシウム、リン酸、硝酸アンモニウム、リン酸一アンモニウム、リン酸一カリウム、水酸化カリウム、尿素、リン酸二水素カリウム、硝酸マグネシウム、塩化カリウムなどの成分を用いて調整される。
なお、後述する実施例にて、Ｎ―Ｐ―Ｋ＝７－７－７が例示されるが、肥料組成物において、Ｎ－Ｐ－Ｋ＝７－７－７とは、肥料中の窒素（Ｎ）、リン（Ｐ２Ｏ５）、カリウム（Ｋ２Ｏ）換算の成分割合がそれぞれ７重量％、７重量％、７重量％であることを示す。
また、ＮＰＫ肥料成分における窒素、リン及びカリウムの態様は特に限定はないが、典型的には硝酸カルシウム、リン酸、硝酸アンモニウム、リン酸一アンモニウム、リン酸一カリウム、水酸化カリウム、尿素、リン酸二水素カリウム、硝酸マグネシウム、塩化カリウムなどの成分を用いて調整される。
【0056】
本発明の肥料組成物は、ＮＰＫ肥料成分以外のその他の肥料成分を任意に加えることができる。その他の肥料成分として、例えば、カルシウム、硫黄、マグネシウム、鉄、マンガン、ホウ素、亜鉛、銅、塩素、などが挙げられる。
【0057】
本発明の肥料組成物の形態は、特に限定されず、固体組成物、及び、液状組成物のいずれでもよいが、液状組成物であれば、溶媒と共に土壌内部へ浸透させることができるので、土壌改善用として好ましい。なお、本発明における「液状組成物」とは上述の通りである。
【0058】
（３．病害防除方法・植物生育方法）
本発明の病害防除方法又は本発明の植物生育方法は、対象植物に本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を吸収させる方法であり、植物活性化剤又は本発明の肥料組成物が含有する卵由来加水分解物の有効量を吸収させることによって対象植物に植物活性化作用（植物生長促進作用や病害抵抗作用）を発現させる。
なお、本発明の病害防除方法又は本発明の植物生育方法における「有効量」は、本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を、対象植物に施用した際に、植物生長促進作用及び病害抵抗作用の少なくとも一つの作用のいずれか（好ましくは両方の作用）が発現する量を意味する。
本発明の病害防除方法又は本発明の植物生育方法は、対象植物に本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を吸収させる方法であり、植物活性化剤又は本発明の肥料組成物が含有する卵由来加水分解物の有効量を吸収させることによって対象植物に植物活性化作用（植物生長促進作用や病害抵抗作用）を発現させる。
なお、本発明の病害防除方法又は本発明の植物生育方法における「有効量」は、本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を、対象植物に施用した際に、植物生長促進作用及び病害抵抗作用の少なくとも一つの作用のいずれか（好ましくは両方の作用）が発現する量を意味する。
【0059】
ここで、「病害防除方法」とは、対象となる植物の病気の予防、抑制、改善の少なくともひとつに対して有用な方法を意味する。
また、「植物生育方法」とは、発芽後の植物の生長促進に対して有用な方法を意味し、植物の生長促進とは、茎の伸長・肥大、根の伸長・肥大及び葉の生長、果実の発生・肥大等のうち少なくともひとつのことをいう。
また、「植物生育方法」とは、発芽後の植物の生長促進に対して有用な方法を意味し、植物の生長促進とは、茎の伸長・肥大、根の伸長・肥大及び葉の生長、果実の発生・肥大等のうち少なくともひとつのことをいう。
【0060】
本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を対象植物に吸収させる方法としては、植物活性化作用（植物生長促進作用や病害抵抗作用）が発現されれば、特に制限はなくその方法や態様については限定されない。本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物が液状組成物の場合には、例えば、葉面に散布する方法、土壌に散布する方法、液状物中に根を浸漬する方法、還流状態の液状物に根を常に接触させる方法などが挙げられ、葉面に散布する方法が好ましい。また、本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物が固体組成物の場合には、粉剤、粒剤等の固形状のまま、土壌に散布する方法が挙げられる。
【0061】
本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を対象植物の葉面に散布すると、葉に直接、栄養分を吸収させることができるため、栄養吸収に即効性がある。また、根や株元が弱っている状態でも葉から栄養補給を行うことができ、植物の病害防除（予防、抑制、改善）や植物の生長促進などに非常に有用である。
【0062】
本発明において施用対象となる植物の種類は特に限定されないが、例えばキュウリ、メロン、カボチャ、スイカ等のウリ科、ナス、トマト、ジャガイモ、ピーマン、トウガラシ等のナス科、エンドウ、インゲン等のマメ科、タマネギ、ネギ等のユリ科、ダイコン、カブ、ハクサイ、カンラン、ハナヤサイ、ブロッコリー、小松菜、青梗菜等のアブラナ科、ニンジン、セルリー等のセリ科、ゴボウ、レタス、サンチュ、シュンギク等のキク科、アズキ、大豆、エンドウ等のマメ科の野菜類や、ソバ等のタデ科、米、小麦、大麦等のイネ科の穀物類、リンゴやナシ、サクランボ、モモなどのバラ科、キウイフルーツなどのツバキ科、ブドウなどのブドウ科の果実類等の植物が挙げられる。
【0063】
本発明の病害防除方法では、植物活性化剤又は肥料組成物に含有する卵由来加水分解物由来の成分を葉や根等から吸収することによって、対象病害を防除（予防、抑制、改善）することができる。
本明細書において「対象病害」は、植物の生理機能や形態に継続して起こる異常な病的症状のことをいい、農作物（野菜類、穀物類、果実類）等の植物に立枯れ、萎縮、徒長等の全身的に現れる異常や斑点、葉枯れ、根腐れ等の部分的に現れる異常が含まれる。ここでいう植物の病害の原因は、微生物（糸状菌，細菌，ウイルス，ウイロイド，ファイトプラズマ，線虫）及び栄養要素の過不足や土壌汚染等のような環境要因のことである。
本明細書において「対象病害」は、植物の生理機能や形態に継続して起こる異常な病的症状のことをいい、農作物（野菜類、穀物類、果実類）等の植物に立枯れ、萎縮、徒長等の全身的に現れる異常や斑点、葉枯れ、根腐れ等の部分的に現れる異常が含まれる。ここでいう植物の病害の原因は、微生物（糸状菌，細菌，ウイルス，ウイロイド，ファイトプラズマ，線虫）及び栄養要素の過不足や土壌汚染等のような環境要因のことである。
【0064】
対象病害としては、微生物による伝染性病害及び環境要因による非伝染性病害（生理病）があり、例えば、伝染性病害の場合、立枯病、株腐病、心腐病、黄化病、黒点病、黒斑病、根こぶ病、白さび病、べと病、さび病、紫紋羽病、白絹病、うどんこ病、炭そ病、灰色かび病、いもち病、軟腐病、そうか病等が挙げられ、非伝染性病害（生理病）の場合は、ふち腐れ症、尻腐れ症、すじ腐れ症、心腐症、葉巻き症、葉先枯れ症、うるみ果、乱形果、空洞果等が挙げられる。本発明の病害防除方法は、１種単独又は２種以上の病害に対して適用することができる。
【0065】
また、本発明の植物生育方法では、植物活性化剤又は肥料組成物に含有する卵由来加水分解物由来の成分を葉や根等から吸収することによって、植物（農作物）の生長を促進させるだけでなく、栄養成分が多く含有された農作物を得ることもできる。含有される栄養成分としては、例えば、クエン酸やリンゴ酸等の有機酸類、グルコースやフルクトース等の糖質類、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、葉酸等のビタミン類、カルシウム、マグネシウム、カリウム等のミネラル類等が挙げられる。
【0066】
また、本発明の植物生育方法で栽培された農作物は、栄養成分が豊富なため、食した際に感じる風味や呈味（酸味、うま味、甘味等）のバランスに優れるという利点がある。
【0067】
本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物の施用量、施用濃度としては、植物活性化剤中の有効成分である卵由来加水分解物における卵殻膜、卵白、卵黄のそれぞれの加水分解物の割合、卵由来加水分解物の濃度、製剤の形態、対象植物の種類や対象の植物病害の種類、生育状態、施用間隔、施用回数等に応じて適宜調節することができる。
【0068】
例えば、本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を粉末等の固体組成物として施用する場合は、栽培培土にそのまま撒いても良く、必要に応じて事前に栽培培土に混和してもよい。なお、本明細書における栽培培土は、種子が発芽でき、植物が生育できる基盤となるものであればよく、土や砂だけではなく、脱脂綿、スポンジ等も含まれるものとする。
培土に播種する場合には、播種する前に予め培土と混和しておいてもよいし、播種の後に本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を混和してもまいてもよい。発芽後の植物に施用する場合も同様に、当該植物体を植える前に本発明の植物活性化剤を培土と混和しておいてもよいし、植えた後に本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を散布してもよい。散布する方法として、例えば、霧吹き、スプリンクラー、農薬等散布用噴霧器などの器具を用いることができる。
培土に播種する場合には、播種する前に予め培土と混和しておいてもよいし、播種の後に本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を混和してもまいてもよい。発芽後の植物に施用する場合も同様に、当該植物体を植える前に本発明の植物活性化剤を培土と混和しておいてもよいし、植えた後に本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物を散布してもよい。散布する方法として、例えば、霧吹き、スプリンクラー、農薬等散布用噴霧器などの器具を用いることができる。
【0069】
以上、本発明について述べたが、今回開示された内容は制限的なものではない。特に今回の開示において、明示的に開示されていない事項は、当業者が通常実施する範囲を逸脱するものではなく、通常の当業者であれば、容易に想定することが可能である。
【0070】
例えば、本発明の植物活性化剤又は本発明の肥料組成物の変形例として、有効成分である卵由来加水分解物の原料として、鳥類以外の卵を原料の一部又は全部に使用することもできる。鳥類以外の卵として、爬虫類（例えば、カメ）の卵、魚類の卵などが挙げられる。
【実施例0071】
以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。以下において、ｐＨはｐＨメータ（堀場製作所製、Ｄ－５１）で測定した値である。
【0072】
卵殻膜粉末は、以下の手順で得た。
食品工場から廃棄された、鶏卵由来の乾燥済みの卵殻と卵殻に付着した卵殻膜（それぞれ鶏卵由来）を、比重分離装置にて卵殻と卵殻膜を分離した後、得られた卵殻膜を粉砕して卵殻膜粉末（粒径２０～１００μｍ）を得た。
食品工場から廃棄された、鶏卵由来の乾燥済みの卵殻と卵殻に付着した卵殻膜（それぞれ鶏卵由来）を、比重分離装置にて卵殻と卵殻膜を分離した後、得られた卵殻膜を粉砕して卵殻膜粉末（粒径２０～１００μｍ）を得た。
【0073】
乾燥卵白粉末（鶏卵由来）は、卵白加工品として販売されているキューピータマゴ株式会社製乾燥卵白Ｗタイプを使用した。
【0074】
（卵由来加水分解物の製造１）
水２０００ｇに卵殻膜粉末２５０ｇ及び乾燥卵白粉末２５０ｇを添加して、よく混合し、５５℃保温下にて完全に分散させた。次いで、２５重量％水酸化ナトリウムを添加してｐＨ１１．２に調整後、プロテアーゼ（ビオプラーゼＯＰ、ナガセケムテックス株式会社）５ｇを添加し、５５℃で攪拌しながら２時間反応させた。次いで、２５重量％水酸化ナトリウムを再度添加してｐＨ１０．８に調整後、プロテアーゼ５ｇを添加し、１８時間反応させた。
反応後、酢酸１１０ｇを添加してｐＨ４．７に調整し、８５℃に加温して酵素を失活させた。次いで、反応液を遠心分離して卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）を得た。
水２０００ｇに卵殻膜粉末２５０ｇ及び乾燥卵白粉末２５０ｇを添加して、よく混合し、５５℃保温下にて完全に分散させた。次いで、２５重量％水酸化ナトリウムを添加してｐＨ１１．２に調整後、プロテアーゼ（ビオプラーゼＯＰ、ナガセケムテックス株式会社）５ｇを添加し、５５℃で攪拌しながら２時間反応させた。次いで、２５重量％水酸化ナトリウムを再度添加してｐＨ１０．８に調整後、プロテアーゼ５ｇを添加し、１８時間反応させた。
反応後、酢酸１１０ｇを添加してｐＨ４．７に調整し、８５℃に加温して酵素を失活させた。次いで、反応液を遠心分離して卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）を得た。
【0075】
得られた植物活性化剤の溶液（原液）のｐＨ、蒸発残分、全窒素、タンパク質及びアンモニア態窒素を表１に示す。
表１において、蒸発残分は、赤外線水分計（メトラー・トレド製ＭＪ３３、蒸発温度１３５℃）で求めた。また、全窒素は、住化分析センター製スミグラフＮＣ-Ｔｒｉｎｉｔｙを用いて燃焼法（改良デュマ法）にて定量した。タンパク質含量は、全窒素に６．２５を乗じて表した。アンモニア態窒素は、ＡｃｃＱ-Ｔａｇ誘導体化試薬（Ｗａｔｅｒｓ製）を用いてアンモニウムイオンを誘導体化したのち、高速液体クロマトグラフを用いて定量した。
表１において、蒸発残分は、赤外線水分計（メトラー・トレド製ＭＪ３３、蒸発温度１３５℃）で求めた。また、全窒素は、住化分析センター製スミグラフＮＣ-Ｔｒｉｎｉｔｙを用いて燃焼法（改良デュマ法）にて定量した。タンパク質含量は、全窒素に６．２５を乗じて表した。アンモニア態窒素は、ＡｃｃＱ-Ｔａｇ誘導体化試薬（Ｗａｔｅｒｓ製）を用いてアンモニウムイオンを誘導体化したのち、高速液体クロマトグラフを用いて定量した。
【0076】
【表1】
【0077】
試験例１（きゅうり）
＜実施例１＞
上記（卵由来加水分解物の製造１）の方法で得られた植物活性化剤の溶液（原液）に加水し、３００倍に希釈して、実施例１の植物活性化剤とした。
きゅうり苗（品種：夏すずみ）を所定の容器（容量６Ｌ、横２７４ｍｍ×高さ１９６ｍｍ）に入れ（植え替え）、市販の培土（株式会社グリーン産業製、商品名「花と野菜の土」）６ｋｇと鉢底石１．２Ｌを投入した。また肥料成分が流れ出ないよう、鉢受皿（鉢皿Ｆ型８号（鉢受け皿）横２４０ｍｍ×高さ３９ｍｍ）を設置した。
きゅうり苗の植え替えから３日後より、午前に水１Ｌ、午後に実施例１の植物活性化剤５０ｍＬ及び水１Ｌを与え、きゅうりの生育を観察した（２４日間）。図１に生育試験開始１日目（投与前）、図２に生育試験開始１０日目の写真を示す。また、表２に生育試験開始２４日目に得られた果実の個数を示す。
＜実施例１＞
上記（卵由来加水分解物の製造１）の方法で得られた植物活性化剤の溶液（原液）に加水し、３００倍に希釈して、実施例１の植物活性化剤とした。
きゅうり苗（品種：夏すずみ）を所定の容器（容量６Ｌ、横２７４ｍｍ×高さ１９６ｍｍ）に入れ（植え替え）、市販の培土（株式会社グリーン産業製、商品名「花と野菜の土」）６ｋｇと鉢底石１．２Ｌを投入した。また肥料成分が流れ出ないよう、鉢受皿（鉢皿Ｆ型８号（鉢受け皿）横２４０ｍｍ×高さ３９ｍｍ）を設置した。
きゅうり苗の植え替えから３日後より、午前に水１Ｌ、午後に実施例１の植物活性化剤５０ｍＬ及び水１Ｌを与え、きゅうりの生育を観察した（２４日間）。図１に生育試験開始１日目（投与前）、図２に生育試験開始１０日目の写真を示す。また、表２に生育試験開始２４日目に得られた果実の個数を示す。
【0078】
＜比較例１＞
実施例１の植物活性化剤を施用せず、これに代えて、市販の培土（株式会社グリーン産業製、商品名「花と野菜の土」）に卵殻膜粉末及び乾燥卵白粉末（各７０ｇ）を混合した以外は実施例１と同様の条件にてきゅうりの生育を観察した（２４日間）。図１に生育試験開始１日目（投与前）、図２に生育試験開始１０日目の写真を示す。また、表２に生育試験開始２４日目に得られた果実の個数を示す。
実施例１の植物活性化剤を施用せず、これに代えて、市販の培土（株式会社グリーン産業製、商品名「花と野菜の土」）に卵殻膜粉末及び乾燥卵白粉末（各７０ｇ）を混合した以外は実施例１と同様の条件にてきゅうりの生育を観察した（２４日間）。図１に生育試験開始１日目（投与前）、図２に生育試験開始１０日目の写真を示す。また、表２に生育試験開始２４日目に得られた果実の個数を示す。
【0079】
＜参考例（対照）＞
実施例１の植物活性化剤を施用せず、水のみを施用した以外は実施例１と同様にしてきゅうりの条件にて生育を観察した（２４日間）。図１に生育試験開始１日目（投与前）、図２に生育試験開始１０日目の写真を示す。また、表２に生育試験開始２４日目に得られた果実の個数を示す。
実施例１の植物活性化剤を施用せず、水のみを施用した以外は実施例１と同様にしてきゅうりの条件にて生育を観察した（２４日間）。図１に生育試験開始１日目（投与前）、図２に生育試験開始１０日目の写真を示す。また、表２に生育試験開始２４日目に得られた果実の個数を示す。
【0080】
【表2】
【0081】
試験例１において、当該植物活性化剤を投与した７日後より、草丈に差分が表れ始めた。１０日後にはきゅうりの先端の成長点、主枝において実施例１が好調に生育し、葉色も比較例１に比べ鮮やかな緑色となった。
【0082】
試験例２（小松菜）
＜実施例２＞
原料として乾燥卵白粉末を使用せず、卵殻膜粉末のみを使用した以外は上記（卵由来加水分解物の製造１）と同様の方法で実施例２の卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）を得た。これに加水し３００倍に希釈して、実施例２の植物活性化剤とした。
小松菜の種子を市販の培土と共に所定の容器に入れ、発芽後（１週間後）から３日に１回５０ｍＬの実施例２の植物活性化剤及び水を与え、小松菜の生育を観察した（３０日間）。また、対照として植物活性化剤を与えず、水のみを与えた小松菜についても同期間観察を行った。
図３に実施例２の植物活性化剤を与えた小松菜の生育試験開始３０日目の写真を示す。実施例２の植物活性化剤を与えた小松菜は、水のみを与えた小松菜と比較して色が鮮やかな緑色であり、葉の数も多いことが認められた。
＜実施例２＞
原料として乾燥卵白粉末を使用せず、卵殻膜粉末のみを使用した以外は上記（卵由来加水分解物の製造１）と同様の方法で実施例２の卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）を得た。これに加水し３００倍に希釈して、実施例２の植物活性化剤とした。
小松菜の種子を市販の培土と共に所定の容器に入れ、発芽後（１週間後）から３日に１回５０ｍＬの実施例２の植物活性化剤及び水を与え、小松菜の生育を観察した（３０日間）。また、対照として植物活性化剤を与えず、水のみを与えた小松菜についても同期間観察を行った。
図３に実施例２の植物活性化剤を与えた小松菜の生育試験開始３０日目の写真を示す。実施例２の植物活性化剤を与えた小松菜は、水のみを与えた小松菜と比較して色が鮮やかな緑色であり、葉の数も多いことが認められた。
【0083】
（卵由来加水分解物の製造２）
水２０００ｇに卵殻膜粉末５００ｇを添加して、よく混合し、５５℃保温下にて完全に分散させた。次いで、４８重量％水酸化カリウムを添加してｐＨ１１．２に調整後、プロテアーゼ（ビオプラーゼＯＰ、ナガセケムテックス株式会社）５ｇを添加し、５５℃で攪拌しながら２時間反応させた。次いで、４８重量％水酸化カリウムを再度添加してｐＨ１０．８に調整後、プロテアーゼ５ｇを添加し、１８時間反応させた。
反応後、リン酸を添加してｐＨ５．０～５．４に調整し、８５℃に加温して酵素を失活させた。次いで、反応液を遠心分離して卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）を得た。
水２０００ｇに卵殻膜粉末５００ｇを添加して、よく混合し、５５℃保温下にて完全に分散させた。次いで、４８重量％水酸化カリウムを添加してｐＨ１１．２に調整後、プロテアーゼ（ビオプラーゼＯＰ、ナガセケムテックス株式会社）５ｇを添加し、５５℃で攪拌しながら２時間反応させた。次いで、４８重量％水酸化カリウムを再度添加してｐＨ１０．８に調整後、プロテアーゼ５ｇを添加し、１８時間反応させた。
反応後、リン酸を添加してｐＨ５．０～５．４に調整し、８５℃に加温して酵素を失活させた。次いで、反応液を遠心分離して卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）を得た。
【0084】
上記（卵由来加水分解物の製造２）で得られた、卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）とＮＰＫ肥料成分（液体）であるＮ－Ｐ－Ｋ＝７－７－７（以下、「ＮＰＫ配合肥料」と記載する。）を用いて、液状の肥料組成物（試料１～５）を調整した。試料１～５を用いて、野菜の生育、新鮮物収穫量、葉先枯れ障害について検討を行った。なお、参考例として「ハイポネックス原液」（株式会社ハイポネックスジャパン製）（以下、「液体肥料１」と称する。）を用いた。
【0085】
表３に示す配合割合、希釈倍率に従い、肥料組成物を製造した。
試料１（比較例２）は、ＮＰＫ配合肥料の溶液を用い、肥料組成物（原液）に加水し、５００倍希釈した。
試料２、３及び４（実施例）は、ＮＰＫ配合肥料の溶液に、表３の配合割合に従い、植物活性化剤（実施例３）を添加し、肥料組成物（原液）を得た。得られた肥料組成物（原液）に加水し、５００倍希釈した。
試料５（参考例）は、液体肥料１（ハイポネックス原液）に加水し、５００倍希釈した。
試料１（比較例２）は、ＮＰＫ配合肥料の溶液を用い、肥料組成物（原液）に加水し、５００倍希釈した。
試料２、３及び４（実施例）は、ＮＰＫ配合肥料の溶液に、表３の配合割合に従い、植物活性化剤（実施例３）を添加し、肥料組成物（原液）を得た。得られた肥料組成物（原液）に加水し、５００倍希釈した。
試料５（参考例）は、液体肥料１（ハイポネックス原液）に加水し、５００倍希釈した。
【0086】
【表3】
【0087】
試験例３（生育調査）
カブ（品種：絹はだ、会社名：株式会社ウタネ）、青梗菜（品種：武帝、会社名：株式会社サカタのタネ）、サンチュ（品種：チマサンチュ、会社名：タキイ種苗株式会社）の種蒔を実施し、区画ごとに栽培を開始した。１区画の大きさは、縦１２０ｃｍ×横１８０ｃｍである。栽培野菜は、淀川砂を用いて栽培した。試料１から５の散布は、種蒔当日から、毎日実施した。種蒔１日目から２７日目までの２７日間は、１日４回散布した。１回に散布する試料の量は１区画当たり１８９０ｍＬとした。なお、散布方法は葉面散布とした。栽培開始から１４日目と２７日目の生育調査を実施した。
生育調査比較の結果は、２７日目の測定結果と１４日目の測定結果の差を算出することで示した。
カブ（品種：絹はだ、会社名：株式会社ウタネ）、青梗菜（品種：武帝、会社名：株式会社サカタのタネ）、サンチュ（品種：チマサンチュ、会社名：タキイ種苗株式会社）の種蒔を実施し、区画ごとに栽培を開始した。１区画の大きさは、縦１２０ｃｍ×横１８０ｃｍである。栽培野菜は、淀川砂を用いて栽培した。試料１から５の散布は、種蒔当日から、毎日実施した。種蒔１日目から２７日目までの２７日間は、１日４回散布した。１回に散布する試料の量は１区画当たり１８９０ｍＬとした。なお、散布方法は葉面散布とした。栽培開始から１４日目と２７日目の生育調査を実施した。
生育調査比較の結果は、２７日目の測定結果と１４日目の測定結果の差を算出することで示した。
【0088】
生育調査の項目は、葉長（ｃｍ）、草丈（ｃｍ）、葉幅（ｃｍ）の３項目とした。
「葉長」：株元から葉先までの長さ
「草丈」：栽培野菜の地上部の高さ
「葉幅」：葉身が最も広くなる箇所の長さ
「葉長」：株元から葉先までの長さ
「草丈」：栽培野菜の地上部の高さ
「葉幅」：葉身が最も広くなる箇所の長さ
【0089】
図４に各栽培野菜の生育調査のグラフを示す。
図４（ａ）に示す通り、カブの生育は、卵殻膜加水分解物を添加した試料２、３及び４と試料１（卵殻膜加水分解物未添加）を比較すると、葉長、葉幅についてはわずかに増加傾向を示していたが、草丈については顕著な増加が認められた。
図４（ｂ）に示す通り、青梗菜の生育は、卵殻膜加水分解物を添加した試料２、３及び４と試料１（卵殻膜加水分解物未添加）を比較すると、葉長、草丈、葉幅ともに、増加傾向が認められた。
図４（ｃ）に示す通り、サンチュの生育は、卵殻膜加水分解物を添加した試料２、３及び４と試料１（卵殻膜加水分解物未添加）を比較すると、草丈、葉幅は同等であったが、葉長については増加傾向が認められた。
以上のように、栽培野菜により、各項目の生育状況は異なるものの、いずれの栽培野菜においても試料２、３及び４を散布した区画の方が、卵殻膜加水分解物を添加していない試料１を散布した区画と比較してより好調に生育し、生育増加の傾向が認められた。
図４（ａ）に示す通り、カブの生育は、卵殻膜加水分解物を添加した試料２、３及び４と試料１（卵殻膜加水分解物未添加）を比較すると、葉長、葉幅についてはわずかに増加傾向を示していたが、草丈については顕著な増加が認められた。
図４（ｂ）に示す通り、青梗菜の生育は、卵殻膜加水分解物を添加した試料２、３及び４と試料１（卵殻膜加水分解物未添加）を比較すると、葉長、草丈、葉幅ともに、増加傾向が認められた。
図４（ｃ）に示す通り、サンチュの生育は、卵殻膜加水分解物を添加した試料２、３及び４と試料１（卵殻膜加水分解物未添加）を比較すると、草丈、葉幅は同等であったが、葉長については増加傾向が認められた。
以上のように、栽培野菜により、各項目の生育状況は異なるものの、いずれの栽培野菜においても試料２、３及び４を散布した区画の方が、卵殻膜加水分解物を添加していない試料１を散布した区画と比較してより好調に生育し、生育増加の傾向が認められた。
【0090】
試験例４（新鮮物収穫量）
カブ（品種：絹はだ、会社名：株式会社ウタネ）、青梗菜（品種：武帝、会社名：株式会社サカタのタネ）については、種蒔２８日目から３５日目までの８日間、肥料組成物（試料１～５）を１日６回散布した以外は上記（試験例３）と同じ方法で栽培し、種蒔から３５日目の収穫時における新鮮物重量を測定した。測定結果を「新鮮物収穫量」として算出した。
なお、「新鮮物収穫量」とは、収穫した栽培野菜の重量のことを意味する。カブは地下部と地上部（葉）の総重量を測定したもの、青梗菜は地下部（根）を取り除いた地上部のみの重量を測定したものを「新鮮物収穫量」とした。
カブ（品種：絹はだ、会社名：株式会社ウタネ）、青梗菜（品種：武帝、会社名：株式会社サカタのタネ）については、種蒔２８日目から３５日目までの８日間、肥料組成物（試料１～５）を１日６回散布した以外は上記（試験例３）と同じ方法で栽培し、種蒔から３５日目の収穫時における新鮮物重量を測定した。測定結果を「新鮮物収穫量」として算出した。
なお、「新鮮物収穫量」とは、収穫した栽培野菜の重量のことを意味する。カブは地下部と地上部（葉）の総重量を測定したもの、青梗菜は地下部（根）を取り除いた地上部のみの重量を測定したものを「新鮮物収穫量」とした。
【0091】
図５に各栽培野菜の新鮮物収穫量のグラフを示す。卵殻膜加水分解物を添加した試料２、３及び４を散布したカブ及び青梗菜は、卵殻膜加水分解物を添加していない試料１を散布したカブ及び青梗菜と比較して、新鮮物収穫量が多いことが認められた。
【0092】
試験例５（葉先枯れ症障害）
上記（試験例４）と同様の方法で栽培し、試料１、４及び５を散布した青梗菜（品種：武帝、会社名：株式会社サカタのタネ）、サンチュ（品種：チマサンチュ、会社名：タキイ種苗株式会社）は、種蒔から３５日目での収穫時における葉の先枯れ症障害について調査を行った。葉の先枯れは外葉と成長点付近の葉を目視で確認し、葉先枯れ症障害の有無を調べ、葉先枯れ症障害の発生率を算出した。
図６に葉先枯れ症障害の発生率についてのグラフを示す。青梗菜の葉先枯れ症障害の発生率は試料１、４ともに０％と良好な結果であった。サンチュの葉先枯れ症障害の発生率は、試料１と比較して試料４の方が葉先枯れ症障害の発生率が低い傾向を示した。
以上のことにより、卵殻膜加水分解物を添加することで葉先枯れ症障害の発生率が抑えられることが認められた。
上記（試験例４）と同様の方法で栽培し、試料１、４及び５を散布した青梗菜（品種：武帝、会社名：株式会社サカタのタネ）、サンチュ（品種：チマサンチュ、会社名：タキイ種苗株式会社）は、種蒔から３５日目での収穫時における葉の先枯れ症障害について調査を行った。葉の先枯れは外葉と成長点付近の葉を目視で確認し、葉先枯れ症障害の有無を調べ、葉先枯れ症障害の発生率を算出した。
図６に葉先枯れ症障害の発生率についてのグラフを示す。青梗菜の葉先枯れ症障害の発生率は試料１、４ともに０％と良好な結果であった。サンチュの葉先枯れ症障害の発生率は、試料１と比較して試料４の方が葉先枯れ症障害の発生率が低い傾向を示した。
以上のことにより、卵殻膜加水分解物を添加することで葉先枯れ症障害の発生率が抑えられることが認められた。
【0093】
試験例６（小松菜の生育観察）
上記（卵由来加水分解物の製造２）で得られた、卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）とＮＰＫ配合肥料の溶液を用いて、試料６（実施例）を調整した。
試料６は、ＮＰＫ配合肥料の溶液に、植物活性化剤の溶液を５重量％添加し、肥料組成物（原液）を得た。得られた肥料組成物（原液）に加水し、５００倍希釈した。
上記（卵由来加水分解物の製造２）で得られた、卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤の溶液（原液）とＮＰＫ配合肥料の溶液を用いて、試料６（実施例）を調整した。
試料６は、ＮＰＫ配合肥料の溶液に、植物活性化剤の溶液を５重量％添加し、肥料組成物（原液）を得た。得られた肥料組成物（原液）に加水し、５００倍希釈した。
【0094】
小松菜（品種：みすぎ小松菜）の種蒔を実施し、市販の培土（商品名「花ちゃん培養土」）を用いて、ミニプランターにて栽培を開始した。実施例として試料３及び６、参考例として試料５を散布した。散布は、種蒔から３５日間毎週１回実施した。なお、散布方法は葉面散布とした。
種蒔から３５日後の小松菜の生育を目視にて行った。
種蒔から３５日後の小松菜の生育を目視にて行った。
【0095】
卵殻膜加水分解物を含有する試料３及び６を散布した小松菜の生育観察の結果、葉色は鮮やかな緑色であり、葉の数も多いことが認められた。
【0096】
試験例７（ジャガイモの心腐症）
ジャガイモ（品種：キタアカリ、北海道農業試験場）を土壌に植え付けし、区画ごとに栽培を開始した。試料５及び試料６の散布は植え付け当日から毎日実施した。試料は１日４回散布（土壌が乾燥している場合は１日６回散布）した。１回に散布する試料の量は１区画当たり１８９０ｍＬとした。植え付けから１１３日目に収穫し、収穫時におけるジャガイモの黒変（心腐症）の発生について調査を行った。輪切りにしたジャガイモを目視で確認し、ジャガイモの黒変（心腐症）の発生について調べた。
ジャガイモ（品種：キタアカリ、北海道農業試験場）を土壌に植え付けし、区画ごとに栽培を開始した。試料５及び試料６の散布は植え付け当日から毎日実施した。試料は１日４回散布（土壌が乾燥している場合は１日６回散布）した。１回に散布する試料の量は１区画当たり１８９０ｍＬとした。植え付けから１１３日目に収穫し、収穫時におけるジャガイモの黒変（心腐症）の発生について調査を行った。輪切りにしたジャガイモを目視で確認し、ジャガイモの黒変（心腐症）の発生について調べた。
【0097】
図７に輪切りにしたジャガイモの写真を示す。図７で示すとおり、試料５（参考例）と比較して試料６（実施例）を散布して栽培した方がジャガイモの黒変（心腐症）の発生が低い傾向を示した。
以上のことにより、卵殻膜加水分解物を添加することによってジャガイモの心腐症の発生が抑えられることが認められた。
以上のことにより、卵殻膜加水分解物を添加することによってジャガイモの心腐症の発生が抑えられることが認められた。
【0098】
試験例８（トマトの成分分析（有機酸））
トマト（ホーム桃太郎ＥＸ、会社名：タキイ種苗株式会社）を土壌に定植し、上記（試験例７）と同様の方法で栽培した。定植から９２日目に収穫し、収穫時におけるトマトを用いて、有機酸（クエン酸、リンゴ酸）の成分分析を行った。なお、有機酸（クエン酸、リンゴ酸）の成分分析の結果は、各トマト（試料５及び試料６）から３個ずつの個体を選び、各トマトの成分を測定し、算出した。
表４に試料５及び試料６を散布して栽培したトマトの成分分析の結果（平均値）を示す。
トマト（ホーム桃太郎ＥＸ、会社名：タキイ種苗株式会社）を土壌に定植し、上記（試験例７）と同様の方法で栽培した。定植から９２日目に収穫し、収穫時におけるトマトを用いて、有機酸（クエン酸、リンゴ酸）の成分分析を行った。なお、有機酸（クエン酸、リンゴ酸）の成分分析の結果は、各トマト（試料５及び試料６）から３個ずつの個体を選び、各トマトの成分を測定し、算出した。
表４に試料５及び試料６を散布して栽培したトマトの成分分析の結果（平均値）を示す。
【0099】
【表4】
【0100】
表４で示すとおり、試料５（参考例）と比較して試料６（実施例）を散布して栽培したトマトの方が有機酸（クエン酸、リンゴ酸）の含有量が多いことが認められた。
【0101】
試験例９（流動性の評価）
以下の方法で、卵殻膜加水分解物又は卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤Ａ、Ｂ及びＣの製造を行った。得られた植物活性化剤（原液）を用いて、溶液の流動性を確認した。
以下の方法で、卵殻膜加水分解物又は卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤Ａ、Ｂ及びＣの製造を行った。得られた植物活性化剤（原液）を用いて、溶液の流動性を確認した。
【0102】
＜植物活性化剤Ａ＞
卵由来加水分解物の製造２において、水１２００ｇに卵殻膜粉末３００ｇを添加して、プロテアーゼ３ｇずつを添加した以外は同様の製造方法で植物活性化剤Ａ（原液）を得た。なお、卵殻膜粉末及び卵白粉末の合計に対する卵白粉末の割合は、０重量％である。
＜植物活性化剤Ｂ＞
植物活性化剤Ａにおいて、卵殻膜粉末２２５ｇ及び乾燥卵白粉末７５ｇを混合した以外は、同様の製造方法で植物活性化剤Ｂ（原液）を得た。なお、卵殻膜粉末及び卵白粉末の合計に対する卵白粉末の割合は、２５重量％である。
＜植物活性化剤Ｃ＞
植物活性化剤Ａにおいて、卵殻膜粉末１５０ｇ及び乾燥卵白粉末１５０ｇを混合した以外は、同様の製造方法で植物活性化剤Ｃ（原液）を得た。なお、卵殻膜粉末及び卵白粉末の合計に対する卵白粉末の割合は、５０重量％である。
卵由来加水分解物の製造２において、水１２００ｇに卵殻膜粉末３００ｇを添加して、プロテアーゼ３ｇずつを添加した以外は同様の製造方法で植物活性化剤Ａ（原液）を得た。なお、卵殻膜粉末及び卵白粉末の合計に対する卵白粉末の割合は、０重量％である。
＜植物活性化剤Ｂ＞
植物活性化剤Ａにおいて、卵殻膜粉末２２５ｇ及び乾燥卵白粉末７５ｇを混合した以外は、同様の製造方法で植物活性化剤Ｂ（原液）を得た。なお、卵殻膜粉末及び卵白粉末の合計に対する卵白粉末の割合は、２５重量％である。
＜植物活性化剤Ｃ＞
植物活性化剤Ａにおいて、卵殻膜粉末１５０ｇ及び乾燥卵白粉末１５０ｇを混合した以外は、同様の製造方法で植物活性化剤Ｃ（原液）を得た。なお、卵殻膜粉末及び卵白粉末の合計に対する卵白粉末の割合は、５０重量％である。
【0103】
得られた植物活性化剤（原液）の流動性を目視にて調査した結果、卵殻膜粉末のみを含む卵殻加水分解物を含有した植物活性化剤Ａに比べると、卵殻膜粉末及び卵白粉末を含む卵由来加水分解物を含有した植物活性化剤Ｂ及びＣの方が、粘性が少なく、流動性が高いことが認められた。流動性の高さは卵白粉末の含有割合に比例していた。
流動性が高くなることで、製造しやすくなり、また、原液を水などの溶媒で希釈しやすくなる。製造時もしくは希釈時の操作性が向上した。
流動性が高くなることで、製造しやすくなり、また、原液を水などの溶媒で希釈しやすくなる。製造時もしくは希釈時の操作性が向上した。
【0104】
試験例１０（アミノ酸組成分析）
以下の方法で、卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤Ｄ及びＥの製造を行った。得られた植物活性化剤（原液）を用いて、アミノ酸組成の分析を行った。
以下の方法で、卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤Ｄ及びＥの製造を行った。得られた植物活性化剤（原液）を用いて、アミノ酸組成の分析を行った。
【0105】
＜植物活性化剤Ｄ＞
卵由来加水分解物の製造１において、卵殻膜粉末のみ２５０ｇを添加して、ｐＨ調整しなかった以外は同様の製造方法で植物活性化剤Ｄ（原液）を得た。
＜植物活性化剤Ｅ＞
卵由来加水分解物の製造１において、卵殻膜粉末のみ２５０ｇを添加した以外は同様の製造方法で植物活性化剤Ｅ（原液）を得た。
卵由来加水分解物の製造１において、卵殻膜粉末のみ２５０ｇを添加して、ｐＨ調整しなかった以外は同様の製造方法で植物活性化剤Ｄ（原液）を得た。
＜植物活性化剤Ｅ＞
卵由来加水分解物の製造１において、卵殻膜粉末のみ２５０ｇを添加した以外は同様の製造方法で植物活性化剤Ｅ（原液）を得た。
【0106】
図８に植物活性化剤Ｄ及びＥのアミノ酸組成分析の結果を示す。
【0107】
試験１１（卵殻膜加水分解物における分子量分布の評価）
上記（卵由来加水分解物の製造２）に準じた以下の方法で、卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤Ｆ，Ｇ及びＨの製造を行った。得られた卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤を用いて、サイズ排除クロマトグラフィーを測定した。なお、植物活性化剤は、下記試料濃度（５～１０ｍｇ／ｍＬ）に調整後、精密ろ過フィルター（ザルトリウス製ミニザルトＲＣ１５、孔径０．２μｍ）を通して、装置に注入した。得られたサイズ排除クロマトグラムを図９に示す。
上記（卵由来加水分解物の製造２）に準じた以下の方法で、卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤Ｆ，Ｇ及びＨの製造を行った。得られた卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤を用いて、サイズ排除クロマトグラフィーを測定した。なお、植物活性化剤は、下記試料濃度（５～１０ｍｇ／ｍＬ）に調整後、精密ろ過フィルター（ザルトリウス製ミニザルトＲＣ１５、孔径０．２μｍ）を通して、装置に注入した。得られたサイズ排除クロマトグラムを図９に示す。
【0108】
＜植物活性化剤Ｆ＞
卵殻膜（タンパク質含量８０重量％）の乾燥粉砕物１０重量部に、水９０重量部を添加し、５０～５５℃の範囲で調温しながら撹拌し、８ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１１．２に調整することにより、卵殻膜懸濁液を得た。これに、タンパク質分解酵素であるアルカリ性プロテアーゼ（ビオプラーゼＯＰ、ナガセケムテックス株式会社）を０．０５重量部添加し、酵素加水分解反応を開始した。反応２時間後に水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１０．８に調整し、再度プロテアーゼ（ビオプラーゼＯＰ）を０．０５重量部添加して１６時間反応させた。反応後沸騰水中で湯煎により９０℃以上に加温して酵素を失活させ、遠心分離により加水分解反応液を得た。得られた加水分解反応液を電気透析により脱塩させた後、これを凍結乾燥により乾燥させることによって、酵素法による植物活性化剤Ｆを得た。
卵殻膜（タンパク質含量８０重量％）の乾燥粉砕物１０重量部に、水９０重量部を添加し、５０～５５℃の範囲で調温しながら撹拌し、８ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１１．２に調整することにより、卵殻膜懸濁液を得た。これに、タンパク質分解酵素であるアルカリ性プロテアーゼ（ビオプラーゼＯＰ、ナガセケムテックス株式会社）を０．０５重量部添加し、酵素加水分解反応を開始した。反応２時間後に水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１０．８に調整し、再度プロテアーゼ（ビオプラーゼＯＰ）を０．０５重量部添加して１６時間反応させた。反応後沸騰水中で湯煎により９０℃以上に加温して酵素を失活させ、遠心分離により加水分解反応液を得た。得られた加水分解反応液を電気透析により脱塩させた後、これを凍結乾燥により乾燥させることによって、酵素法による植物活性化剤Ｆを得た。
【0109】
＜植物活性化剤Ｇ＞
植物活性化剤Ｆの製造方法において、酵素（アルカリ性プロテアーゼ）の添加直前に、亜硫酸水素ナトリウムを卵殻膜懸濁液（卵殻膜１０重量部＋水９０重量部）に０．５重量部添加した以外は同様な方法で植物活性化剤Ｇを得た。
植物活性化剤Ｆの製造方法において、酵素（アルカリ性プロテアーゼ）の添加直前に、亜硫酸水素ナトリウムを卵殻膜懸濁液（卵殻膜１０重量部＋水９０重量部）に０．５重量部添加した以外は同様な方法で植物活性化剤Ｇを得た。
【0110】
＜植物活性化剤Ｈ＞
卵殻膜（タンパク質含量８０重量％）の乾燥粉砕物１０重量部に、４重量％水酸化ナトリウム水溶液９０重量部を添加し、５０～５５℃の範囲で調温しながら５時間静置して、卵殻膜をアルカリ加水分解反応させた。反応後、濃塩酸によりｐＨ７．５に中和し、遠心し、これを凍結乾燥により乾燥させることによって、植物活性化剤Ｈを得た。
卵殻膜（タンパク質含量８０重量％）の乾燥粉砕物１０重量部に、４重量％水酸化ナトリウム水溶液９０重量部を添加し、５０～５５℃の範囲で調温しながら５時間静置して、卵殻膜をアルカリ加水分解反応させた。反応後、濃塩酸によりｐＨ７．５に中和し、遠心し、これを凍結乾燥により乾燥させることによって、植物活性化剤Ｈを得た。
【0111】
なお、サイズ排除クロマトグラフィーの条件は以下のとおりである。
株式会社島津製作所社製高速液体クロマトグラフ、装置名「プロミネンス」
カラム：ＧＥ製、商品名「Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ｐｅｐｔｉｄｅ ＨＲ １０／３００」１本
溶離液：３０％アセトニトリル－７０％水－０．１％トリフルオロ酢酸
流量：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
検出器：紫外吸光光度計（測定波長２１４ｎｍ）
試料濃度：５～１０ｍｇ／ｍＬ
試料注入量：２５μＬ
株式会社島津製作所社製高速液体クロマトグラフ、装置名「プロミネンス」
カラム：ＧＥ製、商品名「Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ｐｅｐｔｉｄｅ ＨＲ １０／３００」１本
溶離液：３０％アセトニトリル－７０％水－０．１％トリフルオロ酢酸
流量：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
検出器：紫外吸光光度計（測定波長２１４ｎｍ）
試料濃度：５～１０ｍｇ／ｍＬ
試料注入量：２５μＬ
【0112】
また、同条件のサイズ排除クロマトグラフィーにて既知分子量のペプチド注入時におけるピークトップ保持時間から分子量検量曲線を作成し、植物活性化剤の重量平均分子量を算出した。結果を表５に示す。
【0113】
【表5】
【0114】
図９に示すように、酵素処理による植物活性化剤Ｆ（ＥＨ－ＥＳＭ１）及び還元剤共存下で酵素処理による加水分解を促進させた植物活性化剤Ｇ（ＥＨ－ＥＳＭ２）と、アルカリ処理による植物活性化剤Ｈ（ＡＨ－ＥＳＭ）とは異なる分子量分布を示した。植物活性化剤Ｆ及び植物活性化剤Ｇ（酵素処理）のメインピークはＭＷ５５６に相当し、植物活性化剤Ｈ（アルカリ処理）のメインピークはＭＷ６５１１に相当した。
分子量検量曲線から算出されるクロマトグラムのピークトップ分子量は、植物活性化剤Ｆ及び植物活性化剤Ｇ（酵素処理）では各々３３３及び５０９、植物活性化剤Ｈ（アルカリ処理）では７２２２となった。
分子量検量曲線から算出されるクロマトグラムのピークトップ分子量は、植物活性化剤Ｆ及び植物活性化剤Ｇ（酵素処理）では各々３３３及び５０９、植物活性化剤Ｈ（アルカリ処理）では７２２２となった。
【0115】
また、表５に示すように、植物活性化剤Ｆ及び植物活性化剤Ｇ（酵素処理）の重量平均分子量は、２０００～２２００程度、植物活性化剤Ｈ（アルカリ処理）の重量平均分子量は、３４００程度であることから、卵殻膜を構成するアミノ酸１分子（例えば、ピロリン（ＭＷ１１５）、システイン（ＭＷ１２１）、シスチン（ＭＷ２４０）等）と比較してはるかに大きい。
すなわち、異なる製法で製造された植物活性化剤Ｆ～Ｈはいずれも遊離アミノ酸が主体であるのではなく、ペプチドが主体であることが認められた。
すなわち、異なる製法で製造された植物活性化剤Ｆ～Ｈはいずれも遊離アミノ酸が主体であるのではなく、ペプチドが主体であることが認められた。
【0116】
さらに、卵殻膜加水分解物を含有する植物活性化剤Ｆ（ＥＨ－ＥＳＭ１）について、サイズ排除クロマトグラフィーを実施し、カラムから溶出する試料を含んだ移動相を保持時間毎に試験管に採取した。溶媒を留去して７つの分画物を得た。得られた分画物の分画時の保持時間範囲（分）、重量平均分子量（ＭＷ）及び収率（％）を表６に示す。
【0117】
【表6】
【0118】
表６に示すように、分画物（Ｆｒｃ１～７）は、分子量が大きくアミノ酸１分子に相当せず、収率の合計が約１００％であったことから、植物活性化剤Ｆ（ＥＨ－ＥＳＭ１）には遊離アミノ酸はほとんど存在せず、ペプチドが主体であることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【0119】
本発明によれば、卵由来加水分解物を含有する植物活性化剤及び肥料組成物、並びに病害防除方法及び植物生育方法が提供されるため、産業上有益である。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
