特開 2023-36220 蚊の幼虫防除用顆粒状組成物および蚊の幼虫の防除方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023036220

(43)【公開日】2023-03-14

(54)【発明の名称】蚊の幼虫防除用顆粒状組成物および蚊の幼虫の防除方法

(51)【国際特許分類】

   A01N 63/23 20200101AFI20230307BHJP

   A01N 25/12 20060101ALI20230307BHJP

   A01P 7/04 20060101ALI20230307BHJP

   A01M 1/20 20060101ALI20230307BHJP

【ＦＩ】

A01N63/23

A01N25/12

A01P7/04

A01M1/20 A

【審査請求】未請求

【請求項の数】9

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2021143137

(22)【出願日】2021-09-02

(71)【出願人】

【識別番号】596018735

【氏名又は名称】株式会社九州メディカル

(74)【代理人】

【識別番号】100197642

【弁理士】

【氏名又は名称】南瀬 透

(74)【代理人】

【識別番号】100099508

【弁理士】

【氏名又は名称】加藤 久

(74)【代理人】

【識別番号】100182567

【弁理士】

【氏名又は名称】遠坂 啓太

(74)【代理人】

【識別番号】100219483

【弁理士】

【氏名又は名称】宇野 智也

(72)【発明者】

【氏名】前田 稔

(72)【発明者】

【氏名】下川 智子

【テーマコード（参考）】

2B121

4H011

【Ｆターム（参考）】

2B121AA13

2B121CC02

2B121CC29

2B121EA26

2B121EA30

2B121FA01

2B121FA16

4H011AC02

4H011BA01

4H011BB21

4H011BC03

4H011BC18

4H011BC20

4H011DA02

4H011DD02

4H011DG16

(57)【要約】

【課題】ハマダラカを含む蚊の幼虫を効率的に防除することができ、水面での浮遊性、崩壊性および拡散性に優れた、蚊の幼虫防除用顆粒状組成物を提供する。また、ハマダラカを含む蚊の幼虫を効率的に防除することができる、蚊の幼虫の防除方法を提供する。
【解決手段】微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、中空体と、結合剤と、水溶性粉末と、界面活性剤とを含み、ｐＨが、３以上１０以下である、蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。前記蚊の幼虫防除用顆粒状組成物を、蚊の幼虫の生息場所に施用する蚊の幼虫の防除方法。
【選択図】 図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、
中空体と、
結合剤と、
水溶性粉末と、
界面活性剤とを含み、
ｐＨが、３以上１０以下である、蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。

【請求項2】

前記水溶性粉末は、ｐＨが３以上１０以下である、請求項１に記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。

【請求項3】

前記水溶性粉末は、無機塩、有機塩、糖類、および糖アルコールからなる群から選択される１種以上である、請求項１または２に記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。

【請求項4】

前記中空体の含有量が、３０質量％以上５５質量％以下である、請求項１から３のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。

【請求項5】

前記結合剤の含有量が、５質量％以上２５質量％以下である、請求項１から４のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。

【請求項6】

前記微生物が、バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）である、請求項１から５のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。

【請求項7】

直径が０．５ｍｍ以上２ｍｍ以下であり、長さが０．６ｍｍ以上１０ｍｍ以下の円柱状である、請求項１から６のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。

【請求項8】

前記蚊が、ハマダラカ属の蚊である、請求項１から７のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。

【請求項9】

請求項１から８のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物を、蚊の幼虫の生息場所に施用する蚊の幼虫の防除方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、蚊の幼虫防除用顆粒状組成物および蚊の幼虫の防除方法に関する。

【背景技術】

【0002】

デング熱やジカ熱によるウイルス感染症、マラリア原虫による原虫感染症などの蚊媒介感染症は人類に大きな被害をもたらしてきた。中でもマラリアは世界三大疾病の一つと言われており、いまだに終息されていない。現時点でも年間４０万人以上がマラリアによる感染症で亡くなっている。現在までに様々な対策が取られてきたが、いまだに根絶ができておらず大きな課題である。

【0003】

マラリアは、マラリア原虫を保有する蚊（ハマダラカ）が人を吸血するときにマラリア原虫が感染・発症する。特に夜に活動するために就寝時などに吸血されることが多い。

【0004】

その対策として「殺虫剤処理した蚊帳」と「室内残留性散布」が効果を上げている。この「殺虫剤処理した蚊帳」により就寝中の吸血のリスクを減らすことができる。また生活環境の屋内残留噴霧が推奨されており、効果を上げてきた。

【0005】

マラリア防除の方法としてピレスロイド系の殺虫剤が主に用いられてきたが、近年、耐性を持った蚊の出現により上記殺虫剤蚊帳や殺虫剤の効果の低下が指摘されている。加えて、化学殺虫剤の場合は非選択的に生物に影響を及ぼすため、マラリア生息域への殺虫剤の散布による自然界への影響が懸念されている。

【0006】

化学殺虫剤の代替手段として、微生物殺虫剤が使われている。また、蚊の発生をより効率的に抑制するために、蚊の幼虫（ボウフラ）の段階において防除することが行われている。蚊の幼虫の防除のための微生物殺虫剤の有効成分として、バチルス・チューリンジェンシスが用いられてきた。この微生物殺虫剤は、バチルス・チューリンジェンシスが体内に産生する結晶性タンパク質（殺虫性タンパク質）を摂食した双翅目（蚊などを含む）の幼虫は死に至ることを利用している。

【0007】

例えば、特許文献１には、微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫の誘引物質を含有してなることを特徴とする蚊の幼虫用駆除剤が開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0008】

【特許文献1】特開２０１７－３１０５７号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

従来の殺虫剤は、マラリアを媒介するハマダラカの幼虫にも使われてきたが、効果が低いことが指摘されてきた。また、ハマダラカの幼虫はきれいで汚れていない水域に生息しており、水田や沼地、マングローブ林の沼地、溝、川の縁、降雨後にできた水たまりなどあらゆる場所で生育する。このため、殺虫剤は使いやすさに加えて、さまざまな面積に対応できることを求められていた。

【0010】

かかる状況下、本発明の目的は、ハマダラカを含む蚊の幼虫を効率的に防除することができ、水面での浮遊性、崩壊性および拡散性に優れた、蚊の幼虫防除用顆粒状組成物を提供することである。また、本発明は、ハマダラカを含む蚊の幼虫を効率的に防除することができる、蚊の幼虫の防除方法を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0011】

本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、下記の発明が上記目的に合致することを見出し、本発明に至った。

【0012】

すなわち、本発明は、以下の発明に係るものである。
＜１＞ 微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、中空体と、結合剤と、水溶性粉末と、界面活性剤とを含み、ｐＨが、３以上１０以下である、蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。
＜２＞ 前記水溶性粉末は、ｐＨが３以上１０以下である、前記＜１＞に記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。
＜３＞ 前記水溶性粉末は、無機塩、有機塩、糖類、および糖アルコールからなる群から選択される１種以上である、前記＜１＞または＜２＞に記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。
＜４＞ 前記中空体の含有量が、３０質量％以上５５質量％以下である、前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。
＜５＞ 前記結合剤の含有量が、５質量％以上２５質量％以下である、前記＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。
＜６＞ 前記微生物が、バチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）である、前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。
＜７＞ 直径が０．５ｍｍ以上２ｍｍ以下であり、長さが０．６ｍｍ以上１０ｍｍ以下の円柱状である、前記＜１＞から＜６＞のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。
＜８＞ 前記蚊が、ハマダラカ属の蚊である、前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物。
＜９＞ 前記＜１＞から＜８＞のいずれかに記載の蚊の幼虫防除用顆粒状組成物を、蚊の幼虫の生息場所に施用する蚊の幼虫の防除方法。

【発明の効果】

【0013】

本発明によれば、ハマダラカを含む蚊の幼虫を効率的に防除することができ、水面での浮遊性、崩壊性および拡散性に優れた、蚊の幼虫防除用顆粒状組成物が提供される。また、本発明によれば、前記顆粒状組成物を用いた蚊の幼虫の防除方法が提供される。

【図面の簡単な説明】

【0014】

【図1】顆粒状組成物の外観写真である。

【図2】（ａ）は顆粒状組成物を水面に散布したときの写真であり、（ｂ）は顆粒状組成物を水面に散布して５０秒経過後の写真である。

【図3】顆粒状組成物を用いた殺虫試験の様子を示す写真である。

【発明を実施するための形態】

【0015】

以下、本発明について例示物等を示して詳細に説明するが、本発明は以下の例示物等に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において任意に変更して実施できる。なお、本明細書において「～」という表現を用いる場合、その前後の数値を含む表現として用いる。

【0016】

＜蚊の幼虫防除用顆粒状組成物＞
本発明は、微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、中空体と、結合剤と、水溶性粉末と、界面活性剤とを含み、ｐＨが３以上ｐＨ１０以下である、蚊の幼虫防除用顆粒状組成物（以下、「本発明の組成物」と記載する場合がある。）に関するものである。

【0017】

本発明者らは、殺虫成分とハマダラカの幼虫の接触を増やすためにハマダラカの生態に着目した。従来の殺虫剤では、有効成分である殺虫性タンパク質が水表面下にとどまらずに、水中に拡散するため、水表面下の微生物や藻類などを主食とするハマダラカの幼虫に対しては、期待する殺虫効果が発揮出来ていないのではないかと考え、ハマダラカの幼虫を殺虫するには水面直下にできる限り長く殺虫成分をとどまらせておく必要があると考えた。そこで、殺虫性タンパク質を溶解させにくい、酸性の水溶性粉末であり、安価に入手することも可能なクエン酸を、増量剤として選択して、その他の成分についても種々検討し、顆粒状の組成物を作製した。しかしながら、このような構成では、殺虫活性が低下することが判明した。本発明者らは、さらに鋭意検討を行い、顆粒状組成物が特定のｐＨとなるように水溶性粉末などを選択することで、ハマダラカの幼虫に対する殺虫効果を大幅に向上させることができることを見出し、本発明に至った。

【0018】

本発明の組成物は、中空体を含むため、水面での浮遊性に優れ、有効成分である殺虫性タンパク質が水表面下に長く留まることができる。また、結合剤、水溶性粉末および界面活性剤を含むことで、顆粒状に成形する成形性に優れ、水面での拡散性や崩壊性が向上する。顆粒状であるため、散布しやすく、組成物が徐々に崩壊し、水面に広く拡散することができ、様々な生息域に対応可能である。さらに、本発明の組成物のｐＨを３～１０とすることで、殺虫性タンパク質の殺虫活性を維持または殺虫活性の低下を抑制することができる。このような構成の本発明の組成物は、殺虫性タンパク質を、その殺虫活性を維持または活性低下を抑制した状態で、水面に広く拡散させ、水面に長く浮遊させた状態にできるため、特に、水面下に広く存在する蚊の幼虫を効果的に防除することができる。

【0019】

以下、本発明の組成物の構成成分について、より詳細に説明する。

【0020】

（殺虫性タンパク質）
本発明の組成物は、微生物が産生する、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質（以下、「本発明に係る殺虫性タンパク質」、あるいは、単に「殺虫性タンパク質」と記載する場合がある。）を含む。微生物としては、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質を産生できる微生物であればよく、例えば、土壌細菌の一種であるバチルス・チューリンジェンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）や、バチルス・スパリカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ）が挙げられ、バチルス・チューリンジェンシスが好適である。

【0021】

本発明に係る殺虫性タンパク質は、微生物、例えば、バチルス・チューリンジェンシスが、栄養細胞中に芽胞を形成する際、芽胞に隣接して結晶性のタンパク質を産生し、このタンパク質は特定の昆虫の腸内で、プロテアーゼにより活性化され、特定の昆虫に対して殺虫活性を示す。

【0022】

バチルス・チューリンジェンシスはその血清型（亜種）の違いにより殺虫活性が異なっている。双翅目昆虫である蚊（幼虫含む）に対する殺虫性タンパク質を産生できるバチルス・チューリンジェンシスとして、鱗翅目、双翅目昆虫に活性を示す血清型（亜種）クルスタキー（ｋｕｒｓｔａｋｉ）およびアイザワイ（ａｉｚａｗａｉ）、双翅目昆虫に活性を示すイスラエレンシス（ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）が挙げられる。この中でも、ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓが好ましい。

【0023】

殺虫性タンパク質としては、殺虫性タンパク質そのものだけでなく、殺虫性タンパク質を含むものを用いることができる。例えば、バチルス・チューリンジェンシスの培養物、生菌体、その菌芽胞、熱や化学的手段により死菌化処理された菌体、又はこれらの菌体の破砕物を、殺虫性タンパク質を含むものとして用いてもよい。これらは、市販のものや、特開２００５－１３９１６７号公報や、特開２０１７－３１０５７号公報に開示された方法に準じて得ることができる。

【0024】

好適な殺虫性タンパク質のひとつとしては、バチルス・チューリンジェンシス Ｄ１４２株由来の殺虫性タンパク質が挙げられる。

【0025】

殺虫性タンパク質の含有量（殺虫性タンパク質の質量／本発明の組成物の質量×１００（％））は、施用量等によって調整することもできるため、特に限定されない。例えば、殺虫性タンパク質の含有量は、０．５～５質量％や、１～３質量％等とすることができる。

【0026】

（中空体）
本発明の組成物は、中空体を含む。中空体は、本発明の組成物の水面での浮遊性に寄与する。

【0027】

中空体は、内部に空隙を有し、比重が１未満であり、水面に浮遊する性質を有するものであれば、特に限定されない。中空体としては、シラスバルーン、パーライト、ガラスバルーン、フラッシュアイバルーン、セラミックバルーンなどの無機バルーン；フェノール樹脂、エポキシ樹脂、ポリウレタン、ポリアクリロニトリルなどの樹脂から形成される樹脂製バルーン；樹脂中空体の表面を無機材料で被覆した有機無機複合バルーン等が挙げられる。これらの中空体は１種を単独で用いてもよいし、２種以上を併用して用いてもよい。

【0028】

中でも、本発明の組成物を構成する中空体は、高硬度で、安定性が高いことから、無機バルーンが好ましい。また、低嵩密度であり、天然物由来で環境への影響も小さいことから、シラスバルーンがより好ましい。

【0029】

本発明の組成物を水面に浮遊させることができれば、中空体の含有量は特に限定されないが、中空体の含有量が少なすぎると、顆粒の浮遊性にバラツキが生じ、水面に浮遊しにくく、沈みやすい顆粒の割合が多くなる傾向にある。また、中空体の含有量が多すぎると、顆粒状に成形することが困難であったり、顆粒が脆くなり、安定性や保存性が低下したりする傾向にある。中空体の含有量（中空体の質量／本発明の組成物の質量×１００（％））は、３０質量％以上が好ましく、３５質量％以上がより好ましく、４０質量％以上がさらに好ましい。また、中空体の含有量は、５５質量％以下が好ましく、５０質量％以下がより好ましい。２種以上の中空体を用いる場合には、中空体の合計の含有量（中空体の合計質量／本発明の組成物の質量×１００（％））が、上記範囲であることが好ましい。

【0030】

中空体の平均粒径は特に限定されず、２．５μｍ～５００μｍや、１０μｍ～２５０μｍ、２０μｍ～２００μｍなど任意である。

【0031】

（結合剤）
本発明の組成物は、結合剤（バインダー）を含む。結合剤としては、顆粒の造粒等に用いられる一般的なものを用いることができる。結合剤としては、多糖類結合剤や合成高分子結合剤などの有機結合剤；粘土鉱物等が挙げられる。これらの結合剤は、１種を単独で用いてもよいし、２種以上を併用して用いてもよい。

【0032】

多糖類結合剤としては、単糖類が３個以上結合した多糖類が挙げられ、デキストリンや、デンプン、アラビアガム、キサンタンガム、セルロース類（カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム塩、カルボキシメチルセルロースカリウム塩、ヒドロキシプロピルセルロースなど）等が挙げられる。合成高分子結合剤としては、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール等が挙げられる。粘土鉱物としては、ベントナイト等が挙げられる。

【0033】

本発明の組成物は、結合剤として、有機結合剤および／または粘土鉱物を含むことが好ましく、有機結合剤と粘土鉱物を含むことがより好ましく、多糖類結合剤と粘土鉱物を含むことがさらに好ましい。有機結合剤は、成形性に優れ、粘土鉱物は、成形性に加えて水中での崩壊性にも優れるため、これらを併用することで、水面に散布したときの顆粒状組成物の崩壊性および拡散性をより優れたものとすることができる。

【0034】

本発明の組成物において、成形できる程度に各種材料を接着させることができれば、結合剤の含有量は特に限定されないが、結合剤の含有量が多すぎると、結合剤の種類によっては、べたつきが生じ、造粒が難しく、均一な顆粒状組成物を得ることが困難になる傾向にある。また、結合剤の含有量が少なすぎる場合も、顆粒状にすることが困難になる。そのため、本発明の組成物において、結合剤の含有量（結合剤の質量／本発明の組成物の質量×１００（％））は、２５質量％以下が好ましく、２０質量％以下がより好ましく、１５質量％以下がさらに好ましい。また、結合剤の含有量は、５質量％以上が好ましく、１０質量％以上がより好ましい。２種以上の結合剤を用いる場合には、結合剤の合計の含有量（結合剤の合計質量／本発明の組成物の質量×１００（％））が、上記範囲であることが好ましい。

【0035】

（水溶性粉末）
本発明の組成物は、水溶性粉末を含む。水溶性粉末を含むことで、水面での崩壊性に優れたものとなる。また、水溶性粉末は、本発明の組成物の増量剤や賦形剤等として機能する。

【0036】

水溶性粉末は、水に溶解するものであれば特に限定されず、例えば、無機塩、有機塩、糖類、および糖アルコールからなる群から選択される１種以上とすることができる。

【0037】

本発明者らは、実施例にて後述する通り、本発明の組成物のｐＨは、水溶性粉末のｐＨに大きく影響されることを見出している。本発明の組成物のｐＨを３～１０としやすいため、水溶性粉末は、ｐＨが３～１０の水溶性粉末であることが好ましい。ｐＨ３～１０の水溶性粉末を用いることで、組成物に局所的にｐＨが小さい部分が存在するなどのばらつきも生じにくい。なお、水溶性粉末のｐＨは、１ｗ／ｖ％水溶液（水溶液１００ｍＬ中に水溶性粉末を１ｇ含む水溶液）としたときのｐＨとして、２５℃でｐＨメータを用いて求めることができる。

【0038】

水溶性粉末のｐＨは、４以上であることが好ましく、５以上であることがより好ましい。また、水溶性粉末のｐＨは、９以下が好ましく、８以下がより好ましく、７．５以下がさらに好ましい。

【0039】

ｐＨ３～１０の水溶性粉末としては、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、塩化ナトリウム、硫酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、塩化カリウム、硝酸カリウム、硫酸マグネシウム等の無機塩；クエン酸ナトリウム、酢酸カリウム等の有機塩；ラクトース、マルトース、トレハロース、グルコース、フルクトース、キシロース等の糖類；ソルビトールやマンニトール等の糖アルコール等が挙げられる。また、これらは水和物の形態であってもよい。

【0040】

ｐＨ３～１０の水溶性粉末は、１種を単独で用いてもよいし、２種以上を併用して用いてもよい。例えば、本発明の組成物は、水溶性粉末として、ｐＨ３～１０（好ましくは、ｐＨ４～７．５）の無機塩、有機塩、糖類、および糖アルコールからなる群から選択される１種以上を含むものとすることができる。また、本発明の組成物は、水溶性粉末として、ｐＨ３～１０（好ましくは、ｐＨ４～７．５）の無機塩、糖類、および糖アルコールからなる群から選択される１種以上を含むものとすることができる。

【0041】

殺虫活性の観点からは、水溶性粉末は、ｐＨ３～１０の無機塩を含むことが好ましく、硫酸アンモニウムおよび／または硝酸カリウムを含むことが好ましい。

【0042】

糖類は、殺虫性タンパク質の保護剤として、殺虫活性の低下を抑制することができるため、水溶性粉末は、糖類を含むことが好ましい。糖類は、二糖類（ラクトース、マルトース、トレハロース等）および／または単糖類（グルコール、フルクトース、キシロース等）とすることができ、二糖類が好ましく、ラクトースがより好ましい。

【0043】

成形性の観点からは、水溶性粉末は、糖アルコールを含むことが好ましい。

【0044】

中でも、水溶性粉末は、硫酸アンモニウム、硝酸カリウム、ラクトースおよびソルビトールからなる群から選択される１種以上を含むことが好ましく、硫酸アンモニウム、ラクトースおよびソルビトールからなる群から選択される１種以上を含むことがより好ましい。

【0045】

本発明の組成物において、水溶性粉末の含有量（水溶性粉末の質量／本発明の組成物の質量×１００（％））は、中空体や結合剤等の含有量に応じて適宜調整される。例えば、水溶性粉末の含有量は、５０質量％以下や、４５質量％以下、４０質量％以下等とすることができる。また、水溶性粉末の含有量は、２５質量％以上や、３０質量％以上、３５質量％以上とすることができる。２種以上の水溶性粉末を用いる場合には、水溶性粉末の合計の含有量（水溶性粉末の合計質量／本発明の組成物の質量×１００（％））を上記範囲とすることができる。

【0046】

（界面活性剤）
本発明の組成物は、界面活性剤を含む。界面活性剤を含むことで、本発明の組成物は、水面での拡散性に優れたものとなる。

【0047】

界面活性剤としては、特に限定されないが、アセチレン系界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、シリコーン系界面活性剤等が挙げられる。これらは、１種を単独で用いても、２種以上を併用して用いてもよい。

【0048】

アセチレン系界面活性剤としては、アセチレンアルコールおよび／またはアセチレンジオールや、これらにアルキレンオキサイドを付加したもの等が挙げられる。ノニオン性界面活性剤としては、ポリエチレングリコール高級脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、ソルビンタンモノアルキレート等が挙げられる。アニオン性界面活性剤としては、アルキルアリールスルホン酸塩、ジアルキルスルホン酸、アルキル硫酸エステル塩、アルキル燐酸エステル塩、アルキルアリール硫酸エステル塩、アルキルアリール燐酸エステル塩等が挙げられる。

【0049】

本発明の組成物において、界面活性剤の含有量が多すぎると、中空体や結合剤の割合が少なくなるため、造粒が難しくなったり、水面での浮遊性が低下したりする場合がある。また、界面活性剤の含有量が少なすぎる場合も、水面での拡散性が低下する場合がある。界面活性剤の含有量（界面活性剤の質量／本発明の組成物の質量×１００（％））は、１０質量％以下が好ましく、５質量％以下がより好ましい。また、界面活性剤の含有量は、０．１質量％以上が好ましく、０．５質量％以上がより好ましく、１質量％以上がさらに好ましい。２種以上の界面活性剤を用いる場合には、界面活性剤の合計の含有量（界面活性剤の合計質量／本発明の組成物の質量×１００（％））が、上記範囲であることが好ましい。

【0050】

本発明の組成物は、本発明の目的を損なわない範囲で、殺虫性タンパク質、中空体、結合剤、水溶性粉末、および界面活性剤以外にも、害虫の駆除剤、防除剤、忌避剤に用いられる任意の成分を含んでいてもよい。また、造粒時に加えた水を含んでもよい。

【0051】

例えば、本発明の組成物における、殺虫性タンパク質、中空体、結合剤、水溶性粉末、および界面活性剤の合計の質量の割合は、６５質量％以上や、７０質量％以上、７５質量％以上、８０質量％以上、８５質量％以上、９０質量％以上、９５質量％以上などとすることができる

【0052】

（顆粒状組成物）
本発明の組成物は、顆粒状である。顆粒状とは、粉末よりも大きな粒径の粒を意味する。具体的には、ＪＩＳ Ｚ ８８０１－１（２０１９）で規定される目開き５００μｍの篩を通過しない粒径のものである。

【0053】

本発明の組成物の大きさは、水面に浮遊できれば特に限定されない。大きさが大きすぎると水面に浮遊しにくくなるため、本発明の組成物の大きさは、１０ｍｍ以下が好ましく、８ｍｍ以下がより好ましく、５ｍｍ以下がさらに好ましい。また、大きさが小さすぎると、散布が難しく、水面に浮遊しにくくなるため、本発明の組成物の大きさは、０．６ｍｍ以上が好ましく、０．８ｍｍ以上がより好ましく、１ｍｍ以上がさらに好ましい。なお、本発明の組成物の大きさは、デジタルノギス等を用いて測定することができ、球状である場合はその粒径を意味し、球状以外の形状である場合は、その最大の長さを意味する。

【0054】

本発明の組成物の形状は、特に限定されず、円柱状、楕円形、直方体状、多角形状、球状、不定形など任意の形状に成形されたものとすることができる。

【0055】

本発明の組成物の好適な形状として、直径０．５～２ｍｍかつ長さ０．６～１０ｍｍの円柱状が挙げられる。より好ましくは、直径０．８～１．２ｍｍかつ長さ１～５ｍｍの円柱状である。なお、円柱状の直径と長さは、デジタルノギスを用いて顆粒１０個の直径と長さをそれぞれ測定した値の平均値である。

【0056】

顆粒状組成物のｐＨが低いと、殺虫性タンパク質が変性することで、殺虫活性が低下してしまい、所望の活性を得ることが難しくなると考えられる。また、顆粒状組成物のｐＨが高いと、殺虫性タンパク質が溶解することで、殺虫活性が低下してしまい、所望の活性を得ることが難しくなると考えられる。本発明の組成物は、ｐＨが３以上１０以下であるため、殺虫性タンパク質の殺虫活性の低下を抑えることができ、顆粒状組成物としたときにも十分な殺虫活性を有するものとできる。なお、本発明の組成物のｐＨは、１ｗ／ｖ％水溶液（水溶液１００ｍＬ中に本発明の組成物を１ｇ含む水溶液）としたときのｐＨとして、２５℃でｐＨメータを用いて求めることができる。この１ｗ／ｖ％水溶液は懸濁液でもよい。

【0057】

本発明の組成物のｐＨは、４以上が好ましく、５以上がより好ましく、５．５以上がさらに好ましい。また、本発明の組成物のｐＨは、９以下が好ましく、８以下がより好ましく、７．５以下がさらに好ましい。

【0058】

蚊の幼虫に対する本発明の組成物のＬＣ₅₀は、１０ｍｇ／Ｌ以下、７ｍｇ／Ｌ以下、５ｍｇ／Ｌ以下、４．５ｍｇ／Ｌ以下、４ｍｇ／Ｌ以下等とすることができる。

【0059】

（蚊）
防除対象となる蚊（幼虫含む）としては、特に限定はなく、ハマダラカ属（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ）、ヤブカ属（Ａｅｄｅｓ）、ナガハシカ属（Ｔｒｉｐｔｅｒｏｉｄｅｓ）、イエカ属（Ｃｕｌｅｘ）などが挙げられる。また、オオチョウバエやユスリカ等の蚊以外の双翅目昆虫（幼虫含む）も防除対象となりうる。

【0060】

ハマダラカ属（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ）に属する蚊としては、ステフェンシ・ハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｓｔｅｐｈｅｎｓｉ）、アコニタス・ハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ａｃｏｎｉｔｕｓ）、コガタハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｍｉｎｉｍｕｓ）、シナハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｓｉｎｅｓｉｓ）、バラバセンシス・ハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｂａｌａｂａｃｅｎｓｉｓ）、ファラウティ・ハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｆａｒａｕｔｉ）、サンダニカス・ハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｓｕｎｄａｉｃｕｓ）、サブピクタス・ハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｓｕｂｐｉｃｔｕｓ）、ガンビエ・ハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｇａｍｂｉａｅ）、ロイコスフィラス・ハマダラカ（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ｌｅｕｃｏｓｐｈｙｒｕｓ）等が挙げられる。

【0061】

ヤブカ属（Ａｅｄｅｓ）に属する蚊としては、オオムラヤブカ（Ａｅｄｅｓ ａｌｂｏｓｃｕｔｅｌｌａｔｕｓ）、キンイロヤブカ（Ａｅｄｅｓ ｖｅｘａｎｓ ｎｉｐｐｏｎｉｉ）、ネッタイシマカ（Ａｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉ）、ヒトスジシマカ（Ａｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）、ヤマダシマカ（Ａｅｄｅｓ ｆｌａｖｏｐｉｃｔｕｓ）、セスジヤブカ（Ａｅｄｅｓ ｄｏｒｓａｌｉｓ）、トウゴウヤブカ（Ａｅｄｅｓ ｔｏｇｏｉ）、ヤマトヤブカ（Ａｅｄｅｓ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）等が挙げられる。

【0062】

ナガハシカ属（Ｔｒｉｐｔｅｒｏｉｄｅｓ）に属する蚊としては、キンパラナガハシカ（Ｔｒｉｐｔｅｒｏｉｄｅｓ ｂａｍｂｕｓａ）が挙げられる。

【0063】

イエカ属（Ｃｕｌｅｘ）に属する蚊としては、アカイエカ（Ｃｕｌｅｘ ｐｉｐｉｅｎｓ ｐａｌｌｅｎｓ）、チカイエカ（Ｃｕｌｅｘ ｐｉｐｉｅｎｓ ｍｏｌｅｓｔｕ）、ネッタイイエカ（Ｃｕｌｅｘ ｐｉｐｉｅｎｓ ｑｕｉｎｑｕｅｆａｓｃｉａｔｕｓ）、コガタイエカ（Ｃｕｌｅｘ ｔｒｉｔａｅｎｉｏｒｈｙｎｃｈｕｓ）等が挙げられる。

【0064】

中でも、好適な防除対象は、ハマダラカ属（Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ）および／またはヤブカ属（Ａｅｄｅｓ）の蚊の幼虫であり、より好適な防除対象は、ハマダラカ属の蚊の幼虫である。

【0065】

本発明の組成物は、従来公知の方法で製造することができる。例えば、本発明の組成物は、殺虫性タンパク質と、中空体と、結合剤と、水溶性粉末と、界面活性剤および水を含む混合物を混練後、混練物を造粒し、造粒物を乾燥することで得ることができる。

【0066】

原料成分の混合順に特に制限はなく、例えば、一度にすべての成分を混合する方法や、原料成分を任意の組み合わせで混合したものを先に調整して、これらをさらに混合する方法などが挙げられる。実施例に記載の通り、乾燥によってｐＨは大きく変化しないため、混練では、混練物の１ｗ／ｖ％水溶液としたときのｐＨが３～１０（好ましくは、ｐＨ４～７．５）となるように各種材料を混合することができる。

【0067】

造粒は、湿式押出造粒などの公知の方法を利用することができる。乾燥は、自然乾燥や送風乾燥など公知の方法を利用でき、高温になりすぎないように、６０℃以下や４０℃以下で乾燥させることができる。

【0068】

また、乾燥後に造粒物をＪＩＳ Ｚ ８８０１－１（２０１９）で規定される５００μｍ（０．５ｍｍ）篩を用いて篩かけすることが好ましい。これにより、造粒や乾燥時に崩壊しているものを除いて用いることができ、散布しやすく、水面での浮遊性、崩壊性および拡散性に優れたものとできる。

【0069】

＜蚊の幼虫の防除方法＞
本発明の蚊の幼虫の防除方法は、上述した本発明の組成物を蚊の幼虫の生息場所に施用することを特徴とする。
蚊の幼虫の生息場所としては、湿地帯、貯水槽、沼地、河川、側溝、水たまり等の水が滞留するあらゆる場所が挙げられる。上述の通り、本発明の組成物は、水面での浮遊性、拡散性および崩壊性に優れ、長期間にわたって水面直下に殺虫性タンパク質をとどまらせておくことができるので、湿地帯、側溝、住宅の周囲のあらゆる水が滞留している場所で有効に蚊の発生を抑制することができる。

【0070】

本発明の蚊の幼虫の防除方法は、上述の通り、ハマダラカ属および／またはヤブカ属の蚊の幼虫を防除する方法として好適であり、ハマダラカ属の蚊の幼虫を防除する方法として特に好適である。

【0071】

（施用方法）
蚊の幼虫の生息場所への本発明の組成物の散布方法は、特に限定されない。本発明の組成物は、希釈せずに直接散布することができる。本発明の組成物は軽いため無人ヘリコプターやドローンなどを用いた散布も可能である。本発明の組成物の散布は、水面全体をカバーできるように一定間隔で行うことが好ましい。また、施用対象となる水域の周縁部に散布してもよい。

【0072】

本発明の顆粒用組成物の施用量や、施用頻度などは、目的とする水源に応じて適宜選択される。例えば、殺虫タンパク質としては、表面積１平方メートル当たり０．５ｍｇ～１００ｍｇや１ｍｇ～５０ｍｇを目安に投与すればよい。殺虫タンパク質の含有量にもよるが、表面積１平方メートル当たりの本発明の組成物の施用量（ｇ／ｍ²）は、０．０１ｇ／ｍ²以上や、０．０３ｇ／ｍ²以上、０．０５ｇ／ｍ²以上などとすることができる。本発明の組成物の施用量の上限は、５ｇ／ｍ²以下や、２．５ｇ／ｍ²以下などとすることができる。施用頻度としては、幼虫の残存数に応じて頻度を調整すればよい。

【実施例0073】

以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

【0074】

［原料］
・殺虫性タンパク質：Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ Ｄ１４２株を、特開２００５－１３９１６７号公報に開示された方法に準じる方法で培養し、培養された微生物およびその産生物である殺虫タンパク質を培地ごと遠心分離および乾燥して、殺虫タンパク質（Ｄ１４２）として用いた。
・中空体：シラスバルーン（ザンワーズ製、ＭＳＢ－５０２１）
・結合剤：デキストリン（三和澱粉工業製、コーンデックスＦ）、ベントナイト（クニミネ工業製、筑前１号）
・水溶性粉末：塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸アンモニウム、硝酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸（無水）（昭和加工製）、ラクトース（ＧＬＡＮＢＩＡ製、ＲＥＦＩＮＥＤ ＥＤＩＢＬＥ ＬＡＣＴＯＳＥ １００ Ｍｅｓｈ）
・界面活性剤液：オルフィン１０％液（オルフィンＰＤ－００１（日信化学工業製）が１０質量％となるように、蒸留水で希釈し、作製した。）

【0075】

［評価］
・殺虫活性試験
殺虫活性（殺幼虫活性）は、実験室で育てたＡｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓの３齢及び４齢初期ボウフラ（幼虫）を用いて調べた。一晩汲み置きし、塩素を除去した水４ｍＬを入れた１２穴細胞培養用プレートの中で５匹の幼虫を準備し、試験液を加えた。各濃度の試験液で３回ずつ試験を行い、２４時間後の死亡ボウフラ数を記録し、死亡率、半数致死濃度（ＬＣ₅₀ｍｇ／Ｌ）を算出した。また、半数致死濃度を用いてＩＴＵを算出した。
試験液は、試験試料の１０％（１００，０００ｍｇ／Ｌ）液を、４段階（１，０００ｍｇ／Ｌ、１００ｍｇ／Ｌ、１０ｍｇ／Ｌ、１ｍｇ／Ｌ（終濃度）、または、８ｍｇ／Ｌ、６ｍｇ／Ｌ、４ｍｇ／Ｌ、２ｍｇ／Ｌ）に希釈して用いた。

【0076】

・菌数測定
試験試料の１０％（１００，０００ｍｇ／Ｌ）液を１０倍希釈液として、１０⁷倍まで希釈した。普通寒天培地に塗沫し、２７℃で１晩培養後コロニーをカウントした。

【0077】

・ｐＨの確認
試験試料を水に加えて、１ｗ／ｖ％の水溶液（水溶液１００ｍＬ中に試験試料を１ｇ含む水溶液）を調整し、ｐＨメータを用いて、この水溶液のｐＨを測定し、試験試料のｐＨとした。

【0078】

[参考例Ａ]
（参考例Ａ－１）
シラスバルーン４．２ｇ、デキストリン１ｇ、ベントナイト０．４ｇ、オルフィン１０％液２．２ｇ、塩化ナトリウム２．２ｇ、ラクトース１．８ｇ、殺虫性タンパク質０．２ｇを混合し、混練物を得た。

【0079】

混練物１ｇをシャーレにのせ、２７℃で１２時間乾燥して、乾燥物を得た。

【0080】

（参考例Ａ－２～Ａ－７）
水溶性粉末を、塩化ナトリウムおよびラクトースから表１に示すものに変更した以外は参考例Ａ－１と同様にして、参考例Ａ－２～Ａ－７の混練物と乾燥物を得た。

【0081】

（評価Ａ）
試験試料として参考例Ａ－１～Ａ－７の混練物と乾燥物を用いて、殺虫活性試験、菌数測定、およびｐＨ測定を行った。菌数は、参考例Ａ－７のものと比較した。表１に結果を示す。また、乾燥物の質量から、予め測定したシャーレの質量を引いて、乾燥物の含水量を算出した。表１に結果を示す。

【0082】

【表1】

【0083】

[参考例Ｂ]
シラスバルーン４２ｇ、クエン酸２２ｇ、デキストリン２８ｇ、ベントナイト４ｇ、オルフィン（ＰＤ－００１）２ｇ、殺虫性タンパク質２ｇ、水を加えて、混練した。次いで、押出造粒機（ＭＧ－５５－２型（ダルトン）を用いて造粒を試みた。しかしながら、べたつきにより造粒が困難であった。

【0084】

[実施例１]
（実施例１－１）
シラスバルーン４２ｇ、デキストリン１０ｇ、ベントナイト４ｇ、塩化カリウム２２ｇ、ラクトース１８ｇ、オルフィン１０％液２０ｇ、殺虫性タンパク質２ｇの混合物に４ｍＬ加水して、混練した。得られた混練物を、押出造粒機（ＭＧ－５５－２型、ダルトン製）で造粒し、６５時間自然乾燥し、顆粒状組成物を得た。

【0085】

得られた顆粒状組成物は円柱状であった。デジマチックキャリパＣＤ－１５Ｃ（ｍｉｔｕｔｏｙｏ）を用いて、顆粒状組成物１０個の直径と大きさを測定したところ、直径１ｍｍ、大きさ１ｍｍ～５ｍｍであった。また、評価には、顆粒状組成物をＪＩＳ Ｚ ８８０１－１（２０１９）に規定する目開き５００μｍの篩にかけて、篩網の上に残ったものを使用した。

【0086】

（実施例１－２～１－４、比較例１－５、１－６）
表２に示すように、水溶性粉末および加水する水の量を変更した以外は、実施例１－１と同様にして、顆粒状組成物を得た。

【0087】

（顆粒状組成物の外観）
図１に、顆粒状組成物の外観写真を示す。顆粒状態は、実施例１－３および実験例１－４で良好であった。

【0088】

（評価１－１）
混練後の混練物および顆粒状組成物について、ｐＨを求めた。表２に結果を示す。
なお、各原料の１ｗ／ｖ％水溶液のｐＨを測定したところ、シラスバルーンのｐＨは５．９、デキストリンのｐＨは６．５、ベントナイトのｐＨは７．７、ラクトースのｐＨは６．５であった。

【0089】

（評価１－２）
試験試料として実施例１－１～１－４、比較例１－５、１－６の顆粒状組成物を用いて、殺虫活性試験および菌数測定を行った。表２に結果を示す。

【0090】

【表2】

【0091】

（評価１－３：保存安定性）
実施例１－２～１－４の顆粒状組成物をアルミニウム製の袋で包装し、４℃、２７℃、４０℃湿度７５％、６５℃で２週間保存し、殺虫活性試験および菌数測定を行った。表３に結果を示す。

【0092】

【表3】

【0093】

［実施例２］
（実施例２－１）
シラスバルーンの含有量が３２質量％となるように混合し、実施例１－２と同様の方法で造粒して、実施例２－１の顆粒状組成物を得た。得られた実施例２－１の顆粒状組成物と、実施例１－２の顆粒状組成物をそれぞれ、水を入れた水槽の水面に散布し、目視評価にて浮遊性を評価した。実施例１－２の顆粒状組成物は水面に浮遊するものが多く、水中に沈むものは少なかった。実施例２－１の顆粒状組成物は、実施例１－２に比べて水面に浮遊せずに沈み込むものの割合が多かった。

【0094】

（実施例２－２）
シラスバルーンの含有量が５２質量％となるように混合し、実施例１－２と同様の方法で造粒して、実施例２－２の顆粒状組成物を得た。得られた実施例２－２の顆粒状組成物は、実施例１－２の顆粒状組成物をと比べると脆かった。そのため、流通中に、顆粒の形状を維持できずに崩れて粉末になってしまう可能性があると考えられた。

【0095】

[実施例３]
塩化カリウム２２ｇに代えて、表４に示す割合で硫酸アンモニウムおよびソルビトールを用いた以外は、実施例１－１と同様にして、実施例３－１～３－４の顆粒状組成物を得た。

【0096】

（評価３－１）
得られた実施例３－１～３－４の顆粒状組成物を用いて殺虫活性試験および菌数測定を行った。表４に結果を示す。

【0097】

【表4】

【0098】

（評価３－２）
実施例３－２の顆粒状組成物を、水を入れた水槽の表面に散布し、浮遊性、拡散性および崩壊性を目視により評価した。
図２（ａ）は顆粒状組成物を水面に散布したときの写真であり、図２（ｂ）は顆粒状組成物を水面に散布して５０秒経過後の写真である。図２（ａ）、（ｂ）に示すように、実施例３－２の顆粒状組成物を、水面に散布すると、組成物が浮遊した状態で拡散し、少しずつ崩壊しており、崩壊時に弾けるように崩壊することがわかる。

【0099】

（評価３－３：ステフェンシ・ハマダラカに対する殺虫活性）
殺虫試験にはＡｎｏｐｈｅｌｅｓ ｓｔｅｐｈｅｎｓｉを使用した。ポリプロピレン容器に２リットルの脱塩素水を加えて１００匹の４齢初期幼虫を加えた（図３参照）。実施例３－２の顆粒状組成物４．２ｍｇを表面散布した（ｎ＝３）。２４時間後までの生残虫数を計数し、生残率を計算した。表５に、実施例３－２の顆粒状組成物を散布した区（本発明）と、薬剤を何も散布しなかった区（対照区）の生残率の結果を示す。

【0100】

表５に示す通り、実施例３－２の顆粒状組成物を用いると、散布後２４時間後にはすべての幼虫が死亡し、有効性を示すことができた。

【0101】

【表5】

【0102】

（評価３－４：アコニタス・ハマダラカに対する殺虫活性）
殺虫試験にはＡｎｏｐｈｅｌｅｓ ａｃｏｎｉｔｕｓ（アコニタス・ハマダラカ）の３齢幼虫を使用した。プラスチック容器に２リットルの飼育水を加えて、２５頭の幼虫を加えた。実施例３－２の顆粒状組成物を規定濃度となるように表面散布したのち、２４時間と４８時間後の死虫数を計数し、死虫率を計算した。表６に結果を示す。

【0103】

９０％以上の死亡率が認められる濃度を有効とした。表６に示したように２４時間後では、０．５ｇ／１０ｍ²、０．６ｇ／１０ｍ²、０．７ｇ／１０ｍ²で有効性を示し、４８時間後ではすべての濃度で死虫率が１００％となった。以上の結果から、Ａｎｏｐｈｅｌｅｓ ａｃｏｎｉｔｕｓへの実施例３－２の顆粒状組成物の有効性が確認できた。

【0104】

【表6】

【0105】

（評価３－５：アエデス・アエジプティに対する殺虫活性）
生態が異なる別属のＡｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉに対する有効性を調べた。ポリプロピレン容器に２リットルの脱塩素水を加えて１００匹の４齢初期幼虫を加えた。実施例３－２の顆粒状組成物４．２ｍｇを表面散布した。２４時間後までの生残虫数を計数し、生残率を計算した。表７に、実施例３－２の顆粒状組成物を散布した区（本発明）と、薬剤を何も散布しなかった区（対照区）の生残率の結果を示す。

【0106】

表７に示すように、水面直下の飼料を摂らないＡｅｄｅｓ ａｅｇｙｐｔｉにおいても実施例３－２の顆粒状組成物が殺虫効果を示すことが示された。

【0107】

【表7】

【産業上の利用可能性】

【0108】

本発明の顆粒状組成物によれば、従来ハマダラカの幼虫に殺虫効果が劣るとされた微生物殺虫剤の有効性を高めることが可能となる。また、殺虫剤抵抗性が付きにくく、環境にやさしく、マラリアを含む蚊媒介感染症の防除に貢献することができる。

【図1】

【図2】

【図3】