特開 2023-3756 消化管の栄養吸収を改善する漢方薬組成物、その製造方法及び使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023003756

(43)【公開日】2023-01-17

(54)【発明の名称】消化管の栄養吸収を改善する漢方薬組成物、その製造方法及び使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/258 20060101AFI20230110BHJP

   A61K 36/889 20060101ALI20230110BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230110BHJP

   A61P 1/14 20060101ALI20230110BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230110BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20230110BHJP

【ＦＩ】

A61K36/258

A61K36/889

A61P43/00 111

A61P1/14

A61P35/00

A61P3/10

A61P43/00 121

【審査請求】有

【請求項の数】10

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2021105022

(22)【出願日】2021-06-24

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＲＩＴＯＮ

(71)【出願人】

【識別番号】521278737

【氏名又は名称】広東省中医院

【氏名又は名称原語表記】ＧＵＡＮＧＤＯＮＧ ＰＲＯＶＩＮＣＩＡＬ ＨＯＳＰＩＴＡＬ ＯＦ ＣＨＩＮＥＳＥ ＭＥＤＩＣＩＮＥ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ． １１１ Ｄａｄｅ Ｒｏａｄ， Ｙｕｅｘｉｕ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ， Ｃｈｉｎａ

(71)【出願人】

【識別番号】518117810

【氏名又は名称】広州中医薬大学第二附属医院

【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ ＳＥＣＯＮＤ ＡＦＦＩＬＩＡＴＥＤ ＨＯＳＰＩＴＡＬ ＯＦ ＧＵＡＮＧＺＨＯＵ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＣＨＩＮＥＳＥ ＭＥＤＩＣＩＮＥ

【住所又は居所原語表記】Ｄａｔｅ Ｒｏａｄ １１１，Ｙｕｅｘｉｕ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１００００ Ｃｈｉｎａ

(71)【出願人】

【識別番号】521278748

【氏名又は名称】広州中医薬大学第二臨床医学院

【氏名又は名称原語表記】ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ． １１１ Ｄａｄｅ Ｒｏａｄ， Ｙｕｅｘｉｕ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ， Ｃｈｉｎａ

(71)【出願人】

【識別番号】521278759

【氏名又は名称】広東省中医薬科学院

【氏名又は名称原語表記】Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ． ５５ Ｎｅｉｈｕａｎｘｉ Ｒｏａｄ， Ｐａｎｙｕ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ， Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】110001139

【氏名又は名称】ＳＫ弁理士法人

(74)【代理人】

【識別番号】100130328

【弁理士】

【氏名又は名称】奥野 彰彦

(74)【代理人】

【識別番号】100130672

【弁理士】

【氏名又は名称】伊藤 寛之

(72)【発明者】

【氏名】陳志強

(72)【発明者】

【氏名】蒋志

(72)【発明者】

【氏名】曹立幸

(72)【発明者】

【氏名】李岱

(72)【発明者】

【氏名】陳其城

【テーマコード（参考）】

4C088

【Ｆターム（参考）】

4C088AB18

4C088AB83

4C088AC04

4C088AC11

4C088BA06

4C088CA02

4C088MA07

4C088NA05

4C088NA14

4C088ZA69

4C088ZB26

4C088ZC35

4C088ZC41

4C088ZC54

(57)【要約】      （修正有）

【課題】消化管の栄養吸収を改善する漢方薬組成物、その製造方法及び使用を提供する。
【解決手段】漢方薬組成物は、オタネニンジン及びビンロウを含み、オタネニンジンとビンロウとの質量比が１００：１～１：２である。
【効果】本発明の漢方薬組成物は、処方が簡単であり、消化管の栄養吸収を改善する効果を有し、オタネニンジンはＴＲＰＶ１の発現を調整することにより、胃腸粘膜組織の炎症を緩和し、粘膜の血流量を高めることができ、これにより消化管を保護する作用を発揮し、かつ、オタネニンジンのＴＲＰＶ１調整レベルは消化管平滑筋の収縮運動と関連し、ビンロウは消化管副交感神経を興奮させ、平滑筋収縮を増強することができ、ビンロウとオタネニンジンを特定の質量比で配合することにより、消化管の栄養吸収を促進し、腫瘍、多臓器機能障害症候群（ＭＯＤＳ）、糖尿病などの臨床難治性疾患に新しい解決手段を提供する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

消化管吸収を改善する漢方薬組成物であって、
オタネニンジン及びビンロウを含み、前記オタネニンジンとビンロウとの質量比が１００：１～１：２である、ことを特徴とする漢方薬組成物。

【請求項2】

前記オタネニンジンとビンロウとの質量比が１０：１～１：２である、ことを特徴とする請求項１に記載の漢方薬組成物。

【請求項3】

前記オタネニンジンとビンロウとの質量比が１：１である、ことを特徴とする請求項２に記載の漢方薬組成物。

【請求項4】

医薬製剤であって、
請求項１に記載の漢方薬組成物を含むことを特徴とする医薬製剤。

【請求項5】

薬学的に許容可能な担体をさらに含む、ことを特徴とする請求項４に記載の医薬製剤。

【請求項6】

漢方薬組成物の製造方法であって、
オタネニンジンとビンロウを秤量して、８～１２倍の重量の水を加えて、浸漬して蒸留し、揮発油を収集してからろ過し、薬残渣と薬液を得るステップＳ１と、
ステップＳ１で調製された薬残渣に４～６倍の重量の水を加えて０．５～１．５時間煎じ、ろ過し、薬液を合わせるステップＳ２と、
合わせた薬液を６０℃における相対密度が１．０７～１．１２となるように減圧濃縮させ、５５体積％のエタノールを加えて抽出し、静置し、ろ過して混合液を得て、アルコール臭がなくなるまでエタノールを回収し、混合液を６０℃における相対密度が１．２８～１．３３となるように濃縮させるステップＳ３と、
ステップＳ１で調製された揮発油を加え、均一に混合して乾燥して漢方薬組成物を得るステップＳ４と、を含む、ことを特徴とする漢方薬組成物の製造方法。

【請求項7】

前記ステップＳ１の蒸留時間は２．５時間である、ことを特徴とする請求項６に記載の製造方法。

【請求項8】

請求項６又は７に記載の製造方法により製造された漢方薬組成物。

【請求項9】

請求項８に記載の漢方薬組成物によるＴＲＰＶ１の発現の調整の、消化管の栄養吸収の改善における使用。

【請求項10】

腫瘍、多臓器機能障害症候群及び糖尿病を治療するための、請求項８に記載の漢方薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、漢方薬の技術分野に関し、具体的には、消化管の栄養吸収を改善する漢方薬組成物、その製造方法及び使用に関する。

【背景技術】

【0002】

腸管は、消化器官の中で最も長い管路であり、十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結腸及び直腸を含み、全長が約７ｍであり、空腸と回腸は腹部中央にあり、その周囲が結腸で囲まれている。腸管の機能としては、小腸粘膜層の表面は腸絨毛で覆われており、主に食物の消化と吸収の役割を果たし、各種の消化液は小腸でび汁をブドウ糖、アミノ酸に分解し、食物を消化吸収した後、残りのものは糞便になり、左半結腸に貯蔵されて体外に排出される。

【0003】

消化管は多くの疾患の進展過程において最も早く損傷する器官であり、同時に、ほとんどの合併症のプロモータでもある。医学の発展に従って、消化管の栄養吸収は疾患の治療及び予後と密接に関連することを見出した。ある研究により、栄養レベルは、９０％の腫瘍患者の生活レベルに影響する独立予測因子であることを示している。疾患自体又は治療の副反応により、患者の消費するエネルギーは、補充されるエネルギーよりも大きくなってしまうことが多く、更に患者を負の窒素状態にさせやすく、生体の消費が多すぎて、病状の悪化及び合併症の発生を招きやすく、その結果、患者の生活水準を深刻に低下させるだけでなく、患者の生命を直接脅かす。栄養サポートは上記の疾患の患者にとって極めて重要であり、長期間の栄養不良は合併症の発生率、再入院率、死亡率の増加を引き起こすことがある。しかし、病的状態では、疾患による胃腸粘膜損傷、消化機序障害、胃腸動力不足、胃腸ホルモン分泌異常などは、よく胃腸機能異常を引き起こし、栄養吸収障害を招く。

【0004】

西洋医学による栄養吸収障害の治療では、病状に応じて薬を投与し、栄養補助剤及び消化器系疾患の治療に関連する化学薬を使用する場合が多く、しかし、これらの薬物のほとんどは副作用が多くて大きく、すでに多種の化学薬は国外で何度も警告され、さらに使用制限が提案され、また、病因を取り除くことができないため、栄養補助剤の使用による効果も理想的ではない。漢方薬は、胃腸機能異常による栄養吸収障害を治療する点で確実な治療効果があり、しかも不良反応が小さく、臨床でますます重視化されている。現在、有効に開発され、スクリーニングされた漢方薬の作用機序は、主に消化管の神経伝達物質、脳－腸ペプチド、Ｃａｊａｌ間質細胞及び胃腸の電気活動の調整に基づくものである。栄養吸収障害の生理学的・病理学的研究の発展に従って、未来、漢方医学理論の指導の下で、現代科学技術を基として、メカニズムが明確で、治療効果が顕著で、不良反応が小さい栄養吸収促進漢方薬は多くの患者に応用することが期待できる。

【0005】

ＴＲＰＶ１は、一過性受容体電位型チャネルのサブタイプの一つであり、最初にラット後根神経節ニューロンに発見され、ＴＲＰＶ１に対する研究の発展に従い、消化管系において、消化管筋層、粘膜層、胃洞、胃壁細胞及びその他の消化管の部位のすべてに分布しており、消化管疾患の発生、進行及び調整作用と密接に関係する可能性があることを見出した。現在、漢方薬によるＴＲＰＶ１の制御については、消化管の栄養吸収を促進する点に関する研究がなく、かつ、漢方薬用の植物中に活性成分の不確定性が存在し、ＴＲＰＶ１の特性、構造及び機能に対する制御の生体における具体的な生理学的作用や作用機序及び病的状態下の調整動向はまだ不明である。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

本発明の目的は、上記従来技術の欠点を解決するために、処方が簡単であり、ＴＲＰＶ１の発現を調整することで消化管の栄養吸収を改善する効果を奏し、かつ、オタネニンジンとビンロウとの相乗作用を利用することにより、消化管の栄養吸収を改善する点では、従来の漢方薬の古典的な処方よりも好適な効果を有する、消化管の栄養吸収を改善する漢方薬組成物、その製造方法及び使用を提供する。

【課題を解決するための手段】

【0007】

第１の態様によれば、本発明は、漢方薬組成物の消化管吸収改善薬の製造における使用を提供し、前記漢方薬組成物がオタネニンジン及びビンロウを含み、前記オタネニンジンとビンロウとの質量比が１００：１～１：２である。

【0008】

本発明者による複数回の実験の結果、オタネニンジンとビンロウとを特定の質量比で配合してなる漢方薬組成物は、ＴＲＰＶ１発現を調整することで、消化管の栄養吸収を改善する作用を果たし、ここで、オタネニンジンは、ＴＲＰＶ１の発現を調整することにより胃腸粘膜組織の炎症を緩和し、粘膜の血流量を高めることができ、これにより消化管を保護する作用を発揮し、ビンロウは、消化管副交感神経を興奮させ、平滑筋収縮を増強することができる。本発明の漢方薬組成物は、腫瘍、多臓器機能障害症候群（ＭＯＤＳ）、糖尿病などの臨床難治性疾患の治療に新しい解決手段を提供する。

【0009】

本発明に係る前記漢方薬組成物の消化管吸収改善薬の製造における使用の好ましい実施形態として、前記オタネニンジンとビンロウとの質量比が１０：１～１：２である。

【0010】

オタネニンジンとビンロウとの質量比が１０：１～１：２である場合、消化管の栄養吸収を改善する効果がより高く、胃腸粘膜組織の炎症を効果的に緩和し、粘膜の血流量を高め、消化管副交感神経を興奮させ、平滑筋収縮を増強する。

【0011】

本発明に係る前記漢方薬組成物の消化管吸収改善薬の製造における使用の好ましい実施形態として、前記オタネニンジンとビンロウとの質量比が１：１である。

【0012】

第２の態様によれば、本発明は、上記の漢方薬組成物を含む医薬製剤を提供する。

【0013】

本発明に係る医薬製剤の好ましい実施形態として、前記医薬製剤は、薬学的に許容可能な担体をさらに含む。

【0014】

より好ましくは、前記医薬製剤は、錠剤、糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶錠、カプセル剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、経口液剤、バッカル剤、顆粒剤、沖剤、丸薬、散剤、膏剤、懸濁剤、粉末剤、液剤、注射剤、坐剤、軟膏剤、硬膏剤、クリーム剤、スプレー剤、ドロップ剤、及び貼付剤であってもよい。

【0015】

医薬製剤とする場合、単位用量の薬剤は、本発明の漢方薬組成物の活性物質を０．１～１０００ｍｇ含有してもよく、残りは薬学的に許容可能な担体であり、薬学的に許容可能な担体は、重量基準で製剤の全量の０．０１～９９．９９％であってもよい。

【0016】

好ましくは、前記医薬製剤は経口製剤とする。

【0017】

本発明に係る医薬製剤の好ましい実施形態として、前記担体は、ステビオシド、デキストリン、及びショ糖のうちの少なくとも１種を含む。

【0018】

本発明では、担体は、ステビオシド、デキストリン、及びショ糖に加えて、マンニトール、ソルビトール、ピロ亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、塩酸システイン、メチオニン、ビタミンＣ、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡカルシウムナトリウム、一価のアルカリ金属の炭酸塩、酢酸塩、リン酸塩又はその水溶液、塩酸、酢酸、硫酸、リン酸、アミノ酸、塩化ナトリウム、塩化カリウム、乳酸ナトリウム、キシリトール、マルトース、ブドウ糖、果糖、デキストラン、グリシン、デンプン、乳糖、マンノトール、ケイ素誘導体、セルロース及びその誘導体、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルビロリドン、グリセリン、ツイーン８０、寒天、炭酸カルシウム、界面活性剤、ポリエチレングリコール、リン脂質類材料、カオリン、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウムのうちの少なくとも１種であってもよい。

【0019】

第３の態様によれば、本発明は、
オタネニンジンとビンロウを秤量して、８～１２倍の重量の水を加えて、浸漬して蒸留し、揮発油を収集してからろ過し、薬残渣と薬液を得るステップＳ１と、
ステップＳ１で調製された薬残渣に４～６倍の重量の水を加えて０．５～１．５時間煎じ、ろ過し、薬液を合わせるステップＳ２と、
合わせた薬液を６０℃における相対密度が１．０７～１．１２となるように減圧濃縮させ、５５体積％のエタノールを加えて抽出し、静置し、ろ過して混合液を得て、アルコール臭がなくなるまでエタノールを回収し、混合液を６０℃における相対密度が１．２８～１．３３となるように濃縮させるステップＳ３と、
ステップＳ１で調製された揮発油を加え、均一に混合して乾燥して漢方薬組成物を得るステップＳ４と、を含む上記の漢方薬組成物の製造方法を提供する。

【0020】

より好ましくは、ステップＳ１では、１０倍の重量の水を加え、ステップＳ２では、５倍の重量の水を加えて１時間煎じる。

【0021】

本発明に係る漢方薬組成物の製造方法の好ましい実施形態として、前記ステップＳ１での蒸留時間は２．５時間である。

【0022】

第４の態様によれば、本発明は、上記製造方法で製造された漢方薬組成物を提供する。

【0023】

第５の態様によれば、本発明は、上記漢方薬組成物によるＴＲＰＶ１の発現の調整の、消化管の栄養吸収の改善における使用を提供する。

【0024】

第６の態様によれば、本発明は、腫瘍、多臓器機能障害症候群及び糖尿病を治療するための漢方薬組成物を提供する。

【発明の効果】

【0025】

従来技術と比較して、本発明は以下の有益な効果を有する。

【0026】

本発明は、消化管の栄養吸収を改善する漢方薬組成物、その製造方法及び使用を提供し、この漢方薬組成物は、オタネニンジン及びビンロウを含み、ここで、オタネニンジンはＴＲＰＶ１の発現を調整することにより、胃腸粘膜組織の炎症を緩和し、粘膜の血流量を高めることができ、これにより消化管を保護する作用を発揮し、かつ、オタネニンジンのＴＲＰＶ１調整レベルは消化管平滑筋の収縮運動と関連し、ビンロウは消化管副交感神経を興奮させ、平滑筋収縮を増強することができ、ビンロウとオタネニンジンを特定の質量比で配合することにより、消化管の栄養吸収を改善する。

【発明を実施するための形態】

【0027】

本発明の目的、技術的解決手段及び利点をよりよく説明するために、以下、具体的な実施例を参照しながら本発明をさらに説明する。

【0028】

以下の実施例及び比較例では、特に断らない限り、使用する実験方法は、いずれも常套の方法であり、使用する材料、試薬などはすべて市販品として入手できる。

【0029】

実施例１．漢方薬組成物及びその製造方法
本発明の漢方薬組成物は、重量基準で、成分として、オタネニンジン２０ｇとビンロウ０．２ｇとを含む。

【0030】

本発明の漢方薬組成物の製造方法は、
オタネニンジンとビンロウを秤量して、１０倍の重量の水を加えて、浸漬して２．５時間蒸留し、揮発油を収集してからろ過し、薬残渣と薬液を得るステップＳ１と、
ステップＳ１で調製された薬残渣に５倍の重量の水を加えて１時間煎じ、ろ過し、薬液を合わせるステップＳ２と、
合わせた薬液を６０℃における相対密度が１．０７～１．１２となるように減圧濃縮させ、５５体積％のエタノールを加えて抽出し、２４時間静置し、ろ過して混合液を得て、アルコール臭がなくなるまでエタノールを回収し、混合液を６０℃における相対密度が１．２８～１．３３となるように濃縮させるステップＳ３と、
ステップＳ１で調製された揮発油を加え、ステビオシド、デキストリン、ショ糖を適量で加え、均一に混合して造粒し、６０℃～７０℃で乾燥させて前記漢方薬組成物を得るステップＳ４と、を含む。

【0031】

実施例２．漢方薬組成物及びその製造方法
本発明の漢方薬組成物は、重量基準で、成分として、オタネニンジン２０ｇとビンロウ２ｇとを含む。
本実施例の漢方薬組成物の製造方法は実施例１と同様である。

【0032】

実施例３．漢方薬組成物及びその製造方法
本発明の漢方薬組成物は、重量基準で、成分として、オタネニンジン２０ｇとビンロウ２０ｇとを含む。
本実施例の漢方薬組成物の製造方法は実施例１と同様である。

【0033】

実施例４．漢方薬組成物及びその製造方法
本発明の漢方薬組成物は、重量基準で、成分として、オタネニンジン２０ｇとビンロウ４０ｇとを含む。
本実施例の漢方薬組成物の製造方法は実施例１と同様である。

【0034】

比較例１
漢方薬組成物におけるオタネニンジンは２０ｇ、ビンロウは０．１ｇであったこと以外、実施例３と同様である。

【0035】

比較例２
漢方薬組成物におけるオタネニンジンは２０ｇ、ビンロウは２００ｇであったこと以外、実施例３と同様である。

【0036】

比較例３
漢方薬組成物にビンロウを含有しなかったこと以外、実施例３と同様である。

【0037】

比較例４
漢方薬組成物にオタネニンジンを含有しなかったこと以外、実施例３と同様である。

【0038】

実施例５．医薬製剤
上記実施例１～４のいずれか１つの漢方薬組成物及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬製剤である。

【0039】

前記医薬製剤は、錠剤、糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶錠、カプセル剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、経口液剤、バッカル剤、顆粒剤、沖剤、丸薬、散剤、膏剤、懸濁剤、粉末剤、液剤、注射剤、坐剤、軟膏剤、硬膏剤、クリーム剤、スプレー剤、ドロップ剤、及び貼付剤であってもよい。医薬製剤とする場合、単位用量の薬剤は、本発明の漢方薬組成物の活性物質を０．１～１０００ｍｇ含有することができ、残りは薬学的に許容可能な担体であり、この薬学的に許容可能な担体は、重量基準で製剤の全量の０．０１～９９．９９％であってもよい。

【0040】

本発明では、担体は、ステビオシド、デキストリン、及びショ糖に加えて、マンニトール、ソルビトール、ピロ亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、塩酸システイン、メチオニン、ビタミンＣ、ＥＤＴＡ二ナトリウム、ＥＤＴＡカルシウムナトリウム、一価のアルカリ金属の炭酸塩、酢酸塩、リン酸塩又はその水溶液、塩酸、酢酸、硫酸、リン酸、アミノ酸、塩化ナトリウム、塩化カリウム、乳酸ナトリウム、キシリトール、マルトース、ブドウ糖、果糖、デキストラン、グリシン、デンプン、乳糖、マンノトール、ケイ素誘導体、セルロース及びその誘導体、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルビロリドン、グリセリン、ツイーン８０、寒天、炭酸カルシウム、界面活性剤、ポリエチレングリコール、リン脂質類材料、カオリン、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウムのうちの少なくとも１種であってもよい。

【0041】

試験例１．過敏性腸症候群の内臓知覚過敏ラットのＴＲＰＶ１の発現に対する漢方薬組成物の影響の実験
新生ラットは、空白群、モデル群、各実施例及び比較例群というｎ群にランダムに分け、各群は１０匹とした。Ａｌｃｈａｅｒ直腸酢酸刺激法を参照して過敏性腸症候群（ＩＢＳ）モデルを作成し、すなわち、生後８日目の子ラットに対して直腸酢酸刺激モデリングを開始し、氷酢酸を用いて０．５％酢酸溶液を調製し、持続硬膜外カテーテルを注射器に接続し、カテーテルの末端をパラフィン油で潤滑して、子ラットの肛門から直腸に２ｃｍ軽く挿入し、酢酸溶液をゆっくり注入して２０ｓ保留した。空白群を除くｎ－１群のラットに対して、連続的に注腸モデリング１４ｄを行った。

【0042】

モデリングの間、空白群を除いて、各群に２ｍｇ／ｋｇ体重の溶媒を腹腔に注射した（酢酸刺激前３０ｍｉｎ）。７週齢の時、ラットの平均体重は（２００±２５）ｇであり、８週目から、空白群、モデル群は毎日２ｍＬの脱イオン水を胃に注入し、治療群は毎日それぞれ５．０ｇ／ｋｇの用量で薬物を胃に注入した（脱イオン水で２ｍｌまで希釈し、用量は２００ｇのラットと体重６０ｋｇの成人を基準として換算したものである）。各群に対して、上記胃への注入は４週間持続した。

【0043】

ラットの首を切断して殺し、氷上で速やかにＬ５～Ｓ１脊髄後根神経節、胃粘膜及び結腸組織（長さ約１ｃｍ）を採取し、標本を－７０℃の冷蔵庫で保存して使用に備えた。測定の際には、Ｔｒｉｚｏｌで組織トータルＲＮＡを抽出し、ＤＥＰＣ処理水で溶解し、－８０℃で保存した。紫外分光光度計を用いて２６０ｎｍと２８０ｎｍでのＲＮＡ濃度をそれぞれ検出し、比が１．８～２．０である場合は、純度が高かった。逆転写反応キットの操作ステップに従って、３７℃ １５ｍｉｎ、８５℃ ５ｓという反応条件で逆転写してｃＤＮＡを合成し、－２０℃で保存した。製造したｃＤＮＡについて、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｍｉｘ、上流プライマーおよび下流プライマー、ＲｏｘＤｙｅ（ＩＩ）、ｄｄＨ_２Ｏ、ｃＤＮＡテンプレートという増幅系で、９５℃ ３０ｓ、９５℃ ３ｓ、６０℃ ３０ｓ、４０サイクルという増幅条件でリアルタイムＰＣＲ増幅を行った。反応終了後、データについて、ＲＴ－ＰＣＲ検出装置に付属したソフトウェア（ＡＢＩ Ｐｒｉｓｍ ７５００ ＳＤＳ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いてＰＣＲ過程中の各サンプルのサイクル数閾値（ＣＴ値）を分析した。ΔΔＣＴ法によりターゲット遺伝子の相対発現量を分析することができ、一般的には、正常又は陰性のものを対照サンプルとした。各群のラットのＴＲＰＶ１ ｍＲＮＡの相対発現量の結果を表１に示す。

【0044】

ＴＲＰＶ１ ｍＲＮＡ相対発現量＝２^{－ΔΔＣＴ}、ΔＣＴ＝ターゲット遺伝子のＣＴ値－内部標準（ＧＡＰＤＨ）のＣＴ値、ΔΔＣＴ＝ターゲットサンプルのΔＣＴ－対照サンプルのΔＣＴ。

【0045】

【0046】

表１のデータから分かるように、実施例１～４及び比較例１～４で製造された漢方薬組成物を用いたラットのＴＲＰＶ１ ｍＲＮＡ発現はいずれもモデル群よりも有意に高かく、その中でも、実施例１～４で製造された漢方薬組成物によるＴＲＰＶ１ ｍＲＮＡ発現のアップレギュレーションが四磨湯の場合よりも更に明らかであり、これは、オタネニンジンとビンロウとの質量比が１００：１～１：２である場合、ＴＲＰＶ１ ｍＲＮＡの発現のアップレギュレーションは更に明らかであり、オタネニンジンとビンロウとの質量比が１：１である場合、後根神経節、胃粘膜及び結腸中のＴＲＰＶ１ ｍＲＮＡの発現量は最も高いことを示す。

【0047】

比較例１～４で製造された漢方薬組成物は、オタネニンジンとビンロウとの質量比を変化させたものであり、それによるＴＲＰＶ１ ｍＲＮＡ発現のアップレギュレーションは実施例１～４で製造された漢方薬組成物の場合よりも低く、これは、オタネニンジンとビンロウとのいずれの質量比でも本発明のＴＲＰＶ１ ｍＲＮＡ発現をアップレギュレートする効果を達成できるわけではないことを示す。

【0048】

試験例２．マウスの胃遠位筋細胞に対する漢方薬組成物の影響の実験
８～１２週齢の野生型の体重１８～２５ｇのＣ５７ＢＬ／６マウスを用い、飼育室の明暗周期を１２時間、室温を２２～２４℃に制御した。それぞれのマウスに対して、毎日５．０ｇ／ｋｇの用量で実施例１～４の漢方薬組成物、四磨湯、及びモサプリドを胃に注入した。

【0049】

４週間後、マウスをジエチルエーテル吸入で麻酔し、保持台に四肢を固定し、腹部の毛を剃り、ヨードフォア消毒後に眼科剪刀を用いて腹腔を開いた。遠位胃を十分に露出させた後、マイクロ応力センサを針付きナイロン糸（０＃）で胃体（胃洞上５ｍｍ）と胃洞（幽門から５ｍｍ）漿膜に貼り付けて固定した。皮下を経て電極ワイヤを頸部背部に導出し、その後、腹腔を閉じた。マウス覚醒１５ｍｉｎ後、電極ワイヤをそれぞれ生理記録装置に接続し、胃収縮運動を記録した。

【0050】

頸椎脱臼方法によりマウスを殺し、その胃組織を迅速に取り出した。マウスの遠位胃平滑筋組織の全層標本を作製し、ＰＢＳで３回洗浄した後、４℃のパラホルムアルデヒドで２０ｍｉｎ固定した後、ＰＢＳで３回、毎回５ｍｉｎ洗浄した。０．３％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘを含むＰＢＳ溶液を用いて室温で３０ｍｉｎ易透化し、その後、０．０１ｍｏｌ／ＬのＰＢＳ溶液で十分に５分×３回リンスし、１％ＢＳＡ溶液に入れて３７℃で１時間密閉し、ろ紙で少し乾かした後、１：１００Ｃ－ｋｉｔ（ｃ－１９）ヤギ抗ウサギポリクローナルＩｇＧ抗体溶液に入れて、４℃で一晩インキュベートした。０．０１ｍｏｌ／ＬのＰＢＳ溶液で５分×３回十分にリンスした。ろ紙で少し乾かした後、１：４００ ＡＦ５９４標識ロバ抗ウサギ二次抗体に入れて、溶液にて３７℃で１時間インキュベートした。０．０１ｍｏｌ／ＬのＰＢＳ溶液で５分×３回十分にリンスした。組織切片をピックアップ法によりスライドガラス上に敷き、ＤＡＰＩを含む蛍光消光防止剤を滴下し、ＧＶＡ水溶性封入剤で封入し、レーザー共焦点顕微鏡の２０×対物レンズで胃体と胃洞全筋層のｃ－ｋｉｔ陽性細胞の細胞発現を観察した。

【0051】

実験の結果により、本発明の実施例１～４で製造された漢方薬組成物を胃に注入したマウスは、遠位胃の収縮が増強し、収縮の振幅や頻度が四磨湯又はモサプリドを与えたマウスの場合よりも強く、また、本発明の実施例１～４で製造された組成物を胃に注入したマウスは、平滑筋同士の間には、大量のｃ－ｋｉｔ陽性のＩＣＣ細胞が多極形態を呈して、軸索が相互に連結され、豊富で緻密なＩＣＣ－ＭＹネットワークが形成され、胃体と胃洞の単位体積当たりのｃ－Ｋｉｔ陽性のＩＣＣ－ＭＹ細胞の密度が有意に上昇した。このことから、本発明の漢方薬組成物は、ＴＲＰＶ１通路を介して媒介し、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの胃腸平滑筋運動のペースメーカー細胞の遠位胃における分布に影響を与え、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの遠位胃平滑筋細胞膜を脱分極させ、収縮運動を発生させる可能性があることが明らかになった。

【0052】

試験例３．消化管機能障害モデルマウスの胃腸吸収に対する漢方薬組成物の影響の実験
動物の群分け及びモデリング：新生マウスは、空白群、モデル群、陽性薬モサプリド対照群、各実施例群及び比較例群というｎ群にランダムに分け、各群は１０匹とした。以下のような胃腸機能障害総合法を用いてモデリング処理を行い、すなわち、マウスを自作のモデリングボックス（Ｔ２３±２℃、Ｒ８０±５％）で飼育し、毎日朝９時前に４℃の氷生理食塩水（０．４ｍｌ／匹）を胃に注入し、９：００～１７：００にマウスを深さ０．５ｃｍの水中に立たせて、１７時後に調理済みラード（０．４ｍｌ／匹）を胃に注入した。空白群を除く他の群は、１週間連続してモデリングした。

【0053】

モデリングが終わった翌日、モデル群と空白群について、マウスを殺して材料を採取した。薬物投与群について、５．０ｇ／ｋｇの用量で３日間連続して薬物投与した後、マウスを殺して材料を採取した。材料採取前の１２時間にマウスが断食したが断水せず、投与群に最終投与から３０ｍｉｎ後、０．４ｍｌ／匹の投与量でマウスに３％Ｄ－キシロース溶液を投与し、４０ｍｉｎ後、０．８ｍｌ／匹で１ｇ／ｍｌの半固形ペーストを胃に投与し、２０ｍｉｎ後眼球から採血して殺した。血液を試験管に入れて、室温で１時間静置し、回転速度２０００ｒｐｍで１０ｍｉｎ遠心分離し、血清を取って冷蔵庫（－２０℃）で保存した。採血後、肝臓を採取して錫箔で包んで、冷蔵庫（－２０℃）で保存した。また、幽門下端部と噴門部を同時に結紮し、胃と小腸を取り出し、胃総重量と胃正味重量を秤量し、かつ、小腸全長と黒色半固形ペーストの前縁から幽門までの距離を測定し、併せて記録した。

【0054】

計算式：胃残留率（％）＝（胃総重量－胃正味重量）／注入した半固形ペーストの質量×１００％、小腸推進率（intestinal propulsion rate）（％）＝カーボンペーストの小腸内推進距離／小腸全長×１００％。血清を取り出し、常温に回復させた後、Ｄ－キシロースキットの操作要求に厳格にしたがって、Ｄ－キシロース含有量を測定した。

【0055】

結果を表２に示す。

【0056】

【0057】

表２のデータから分かるように、本発明の実施例１～４及び比較例１～４で製造された漢方薬組成物を利用した場合は、マウスの胃残留率、腸推進率及びＤ－キシロースの吸収がいずれもモデル群の場合よりも優れており、特に、オタネニンジンとビンロウとの質量比が１００：１～１：２である場合、マウスの胃残留率、腸推進率及びＤ－キシロースの吸収の改善効果は四磨湯及びモサプリド群の場合よりも優れており、特にオタネニンジンとビンロウとの質量比が１：１である場合、消化管機能障害モデルマウスの胃腸吸収改善効果が最も高かった。

【0058】

比較例１（オタネニンジンとビンロウとの質量比は２００：１）、比較例２（オタネニンジンとビンロウとの質量比は１：１０）及び比較例３（ビンロウを含まない）で製造された漢方薬組成物を用いたマウスは、胃残留率、腸推進率及びＤ－キシロース吸収の効果が、実施例１～４で製造された漢方薬組成物を使用する場合よりも低く、消化管機能障害モデルマウスの胃腸吸収改善効果が実施例１～４の場合よりも低く、比較例４（オタネニンジンを含まない）で製造された漢方薬組成物の場合も、実施例１～４で製造された漢方薬組成物の場合よりも低く、消化管機能障害モデルマウスの胃腸吸収改善効果が比較例１～３で製造された漢方薬組成物の場合よりも低く、このことから、オタネニンジンとビンロウとの質量比の範囲が任意に選択できるものではないことが明らかになった。本発明のオタネニンジンは、ＴＲＰＶ１の発現を調整することにより、胃腸粘膜組織の炎症を緩和し、粘膜血流量を高めることができ、これにより、消化管を保護する作用を発揮する。また、オタネニンジンのＴＲＰＶ１調整レベルは消化管平滑筋の収縮運動と関連し、ビンロウは消化管副交感神経を興奮させ、平滑筋収縮を増強することができ、ビンロウとオタネニンジンとを特定の質量比（１００：１～１：２）で配合すると、消化管の栄養吸収をよりよく改善する。本発明の漢方薬組成物は、消化管吸収改善の点では従来の漢方薬の古典的な処方よりも優れた効果を有し、腫瘍、多臓器機能障害症候群（ＭＯＤＳ）、糖尿病などの臨床難治性疾患に新しい解決手段を提供する。

【0059】

なお、上記の実施例は、本発明の技術的解決手段を説明するためのものであり、本発明の特許範囲を限定するものではなく、好ましい実施例を参照して本発明を詳細に説明したが、当業者は、本発明の技術的解決手段の主旨及び範囲から逸脱することなく、本発明の技術的解決手段について修正又は同等置換を行うことができる。

【外国語明細書】