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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023052833
(43)【公開日】2023-04-12
(54)【発明の名称】抗炎症組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 31/704 20060101AFI20230404BHJP
A61K 36/11 20060101ALI20230404BHJP
A61K 8/9741 20170101ALI20230404BHJP
A61K 36/734 20060101ALI20230404BHJP
A61K 8/9789 20170101ALI20230404BHJP
A61K 36/65 20060101ALI20230404BHJP
A61K 36/185 20060101ALI20230404BHJP
A61K 36/53 20060101ALI20230404BHJP
A61K 8/63 20060101ALI20230404BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20230404BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230404BHJP
A61P 1/02 20060101ALI20230404BHJP
A61Q 11/00 20060101ALI20230404BHJP
C12N 15/09 20060101ALN20230404BHJP
【ＦＩ】
A61K31/704 ZNA
A61K36/11
A61K8/9741
A61K36/734
A61K8/9789
A61K36/65
A61K36/185
A61K36/53
A61K8/63
A61P29/00
A61P43/00 121
A61P1/02
A61Q11/00
C12N15/09 Z
【審査請求】有
【請求項の数】2
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2023014231
(22)【出願日】2023-02-01
(62)【分割の表示】P 2018129381の分割
【原出願日】2018-07-06
(31)【優先権主張番号】P 2017133008
(32)【優先日】2017-07-06
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．プルロニック
(71)【出願人】
【識別番号】000100539
【氏名又は名称】アース製薬株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】110002000
【氏名又は名称】弁理士法人栄光事務所
(72)【発明者】
【氏名】新居 沙織
(72)【発明者】
【氏名】芝 典江
(72)【発明者】
【氏名】浅井 梨加
(57)【要約】
【課題】本発明の課題は、抗炎症効果が増強された、グリチルリチン酸またはその塩を含
有する抗炎症組成物を提供することにある。
【解決手段】本発明は、グリチルリチン酸又はその塩と、スギナ、セイヨウサンザシ、シ
ャクヤク、ハマメリス、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも
１つの抽出物を含有する抗炎症組成物に関する。
【選択図】なし
有する抗炎症組成物を提供することにある。
【解決手段】本発明は、グリチルリチン酸又はその塩と、スギナ、セイヨウサンザシ、シ
ャクヤク、ハマメリス、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも
１つの抽出物を含有する抗炎症組成物に関する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
グリチルリチン酸又はその塩と、スギナ、セイヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス
、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出物を含有す
る抗炎症組成物。
、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出物を含有す
る抗炎症組成物。
【請求項2】
口腔用組成物である、請求項１に記載の抗炎症組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、グリチルリチン酸又はその塩を含有する抗炎症組成物に関し、特にグリチル
リチン酸又はその塩と、特定の植物抽出物を含有する抗炎症組成物に関する。
リチン酸又はその塩と、特定の植物抽出物を含有する抗炎症組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
グリチルリチン酸又はその塩は、カンゾウ（甘草）という生薬に含まれる成分であり、
抗炎症作用を示すことが知られている。グリチルリチン酸又はその塩は、抗炎症作用を有
することにより、炎症性疾患の一種である歯周病等の症状を抑えたり予防するための洗口
液や、皮膚の炎症を抑えるための皮膚外用剤、育毛剤、石鹸等に幅広く使用されている。
抗炎症作用を示すことが知られている。グリチルリチン酸又はその塩は、抗炎症作用を有
することにより、炎症性疾患の一種である歯周病等の症状を抑えたり予防するための洗口
液や、皮膚の炎症を抑えるための皮膚外用剤、育毛剤、石鹸等に幅広く使用されている。
【0003】
例えば、特許文献１には、抗炎症剤としてグリチルリチン酸塩を含有する液体口腔用組
成物が開示されており、歯肉炎等の口腔内疾患を予防できることが記載されている。
また、特許文献２には、グリチルリチン酸を含有する皮膚外用剤が開示されており、ア
レルギー性の炎症やアトピー性の皮膚炎等の炎症に効果がある旨記載されている。
成物が開示されており、歯肉炎等の口腔内疾患を予防できることが記載されている。
また、特許文献２には、グリチルリチン酸を含有する皮膚外用剤が開示されており、ア
レルギー性の炎症やアトピー性の皮膚炎等の炎症に効果がある旨記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】特開２００１－２６１５７６号公報
【特許文献2】特開２００６－３２７９６５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
上述したような抗炎症組成物に対しては、超高齢化社会を迎える中で進行した炎症を抱
える高齢者も増加していることもあり、より高い抗炎症効果が求められている。したがっ
て本発明の目的は、抗炎症効果が増強した、グリチルリチン酸又はその塩を含有する抗炎
症組成物を提供することにある。
える高齢者も増加していることもあり、より高い抗炎症効果が求められている。したがっ
て本発明の目的は、抗炎症効果が増強した、グリチルリチン酸又はその塩を含有する抗炎
症組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本発明者らは上記課題を解決するべく鋭意研究を重ねた結果、グリチルリチン酸又はそ
の塩とともに、ある特定の植物抽出物を含有させることにより、グリチルリチン酸又はそ
の塩の抗炎症効果が増強されることを見出し、本発明を完成するに至った。
の塩とともに、ある特定の植物抽出物を含有させることにより、グリチルリチン酸又はそ
の塩の抗炎症効果が増強されることを見出し、本発明を完成するに至った。
【0007】
すなわち、本発明は、下記に示す手段により上記課題を解決することができたものであ
る。
１．グリチルリチン酸又はその塩と、スギナ、セイヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリ
ス、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出物を含有
する抗炎症組成物。
２．口腔用組成物である、前記１に記載の抗炎症組成物。
る。
１．グリチルリチン酸又はその塩と、スギナ、セイヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリ
ス、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出物を含有
する抗炎症組成物。
２．口腔用組成物である、前記１に記載の抗炎症組成物。
【発明の効果】
【0008】
本発明の抗炎症組成物は、グリチルリチン酸又はその塩と、特定の植物抽出物を含有す
ることにより、グリチルリチン酸又はその塩の抗炎症効果を増強させることができる。
ることにより、グリチルリチン酸又はその塩の抗炎症効果を増強させることができる。
【図面の簡単な説明】
【0009】
【発明を実施するための形態】
【0010】
以下、本発明をさらに詳しく説明する。
【0011】
＜抗炎症組成物＞
本発明の抗炎症組成物は、グリチルリチン酸又はその塩と、スギナ、セイヨウサンザシ
、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なく
とも１つの抽出物を含有することを特徴とする。
本発明の抗炎症組成物は、グリチルリチン酸又はその塩と、スギナ、セイヨウサンザシ
、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なく
とも１つの抽出物を含有することを特徴とする。
【0012】
グリチルリチン酸又はその塩は、生薬の一種である甘草の根や茎に含まれている成分で
ある。グリチルリチン酸又はその塩は、口内炎や喉等の炎症を抑える効果が知られており
、すなわち、抗炎症作用を有することが知られている。
本発明におけるグリチルリチン酸又はその塩としては、例えばグリチルリチン酸、グリ
チルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）、グリチルリチン酸トリナトリウム、グリチルリチン
酸モノアンモニウム、グリチルリチン酸ジアンモニウム、グリチルリチン酸ジナトリウム
などが挙げられ、これらの１種を単独又は２種以上を併用して配合できる。なかでもグリ
チルリチン酸ジカリウムが、本発明の効果を高く得られる観点から、より好適である。
グリチルリチン酸又はその塩は、甘草から従来公知の方法を用いて抽出して得ることも
できるし、市販品を使用することもできる。市販品として、例えば、アルプス薬品工業社
製や丸善製薬社製のグリチルリチン酸ジカリウム、グリチルリチン酸モノアンモニウム等
を使用することができる。
ある。グリチルリチン酸又はその塩は、口内炎や喉等の炎症を抑える効果が知られており
、すなわち、抗炎症作用を有することが知られている。
本発明におけるグリチルリチン酸又はその塩としては、例えばグリチルリチン酸、グリ
チルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）、グリチルリチン酸トリナトリウム、グリチルリチン
酸モノアンモニウム、グリチルリチン酸ジアンモニウム、グリチルリチン酸ジナトリウム
などが挙げられ、これらの１種を単独又は２種以上を併用して配合できる。なかでもグリ
チルリチン酸ジカリウムが、本発明の効果を高く得られる観点から、より好適である。
グリチルリチン酸又はその塩は、甘草から従来公知の方法を用いて抽出して得ることも
できるし、市販品を使用することもできる。市販品として、例えば、アルプス薬品工業社
製や丸善製薬社製のグリチルリチン酸ジカリウム、グリチルリチン酸モノアンモニウム等
を使用することができる。
【0013】
グリチルリチン酸又はその塩は、本発明の抗炎症組成物の全量に対して、例えば、０．
０００１～１．０質量％、好ましくは０．０００５～０．１質量％、より好ましくは０．
００１～０．０１５質量％含有することができる。０．０００１質量％以上とすることに
よって、グリチルリチン酸又はその塩の抗炎症効果の増強が期待され、１．０質量％以下
とすることによって、処方化が容易となり、特に液体口腔用組成物において良好な使用感
が得られる。
０００１～１．０質量％、好ましくは０．０００５～０．１質量％、より好ましくは０．
００１～０．０１５質量％含有することができる。０．０００１質量％以上とすることに
よって、グリチルリチン酸又はその塩の抗炎症効果の増強が期待され、１．０質量％以下
とすることによって、処方化が容易となり、特に液体口腔用組成物において良好な使用感
が得られる。
【0014】
本発明の抗炎症組成物は、スギナ、セイヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラ
カバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出物を含有する。
本発明の抗炎症組成物は、グリチルリチン酸又はその塩に加え、上記特定の植物抽出物
を組み合わせたものである。すなわち、グリチルリチン酸又はその塩に対し、数ある植物
抽出物の中から、上記特定の植物抽出物を組み合わせることによって、抗炎症効果が増強
したものである。
カバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出物を含有する。
本発明の抗炎症組成物は、グリチルリチン酸又はその塩に加え、上記特定の植物抽出物
を組み合わせたものである。すなわち、グリチルリチン酸又はその塩に対し、数ある植物
抽出物の中から、上記特定の植物抽出物を組み合わせることによって、抗炎症効果が増強
したものである。
【0015】
なかでも、抗炎症作用を増強させるという本発明の効果の観点からは、スギナ、セイヨ
ウサンザシ、シャクヤク、ハマメリスの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの
抽出物を含有することが好ましく、スギナ及びセイヨウサンザシの少なくともいずれか一
方の抽出物を含有することがより好ましい。
また、上記抽出物を３種以上含有する場合は、スギナ及びセイヨウサンザシの抽出物に
加え、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ又はセージの抽出物を少なくとも含有すること
が好ましい。
ウサンザシ、シャクヤク、ハマメリスの抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの
抽出物を含有することが好ましく、スギナ及びセイヨウサンザシの少なくともいずれか一
方の抽出物を含有することがより好ましい。
また、上記抽出物を３種以上含有する場合は、スギナ及びセイヨウサンザシの抽出物に
加え、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ又はセージの抽出物を少なくとも含有すること
が好ましい。
【0016】
また、本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比
で、グリチルリチン酸又はその塩：スギナ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、シャクヤク
抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物、及びセージ抽出物＝６００：１～５：４で
あることが好ましく、より好ましくは４５０：１～３：２、さらに好ましくは３００：１
～２：１、最も好ましくは、２００：１～１０：３である。なお、上記含有比率における
「スギナ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラ
カバ抽出物、及びセージ抽出物」とは、各植物抽出物の含有量の合計を意味する。
で、グリチルリチン酸又はその塩：スギナ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、シャクヤク
抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物、及びセージ抽出物＝６００：１～５：４で
あることが好ましく、より好ましくは４５０：１～３：２、さらに好ましくは３００：１
～２：１、最も好ましくは、２００：１～１０：３である。なお、上記含有比率における
「スギナ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラ
カバ抽出物、及びセージ抽出物」とは、各植物抽出物の含有量の合計を意味する。
【0017】
また、上記抽出物を３種以上含有する場合は質量比で、グリチルリチン酸又はその塩：
スギナ抽出物：セイヨウサンザシ抽出物：シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカ
バ抽出物、又はセージ抽出物＝６００：１：１：１～１．２５：１：１：１であることが
好ましく、より好ましくは４５０：１：１：１～１．５：１：１：１、さらに好ましくは
３００：１：１：１～２：１：１：１、最も好ましくは、２００：１：１：１～３：１：
１：１である。なお、上記含有比率における「シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シ
ラカバ抽出物、又はセージ抽出物」とは、各植物抽出物のいずれか１種の含有量を意味す
る。
スギナ抽出物：セイヨウサンザシ抽出物：シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカ
バ抽出物、又はセージ抽出物＝６００：１：１：１～１．２５：１：１：１であることが
好ましく、より好ましくは４５０：１：１：１～１．５：１：１：１、さらに好ましくは
３００：１：１：１～２：１：１：１、最も好ましくは、２００：１：１：１～３：１：
１：１である。なお、上記含有比率における「シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シ
ラカバ抽出物、又はセージ抽出物」とは、各植物抽出物のいずれか１種の含有量を意味す
る。
【0018】
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、グ
リチルリチン酸又はその塩：スギナ抽出物＝６００：１～５：４であることが好ましく、
４５０：１～３：２であることがより好ましく、３００：１～２：１であることがさらに
好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、グ
リチルリチン酸又はその塩：セイヨウサンザシ抽出物＝６００：１～５：４であることが
好ましく、４５０：１～３：２であることがより好ましく、３００：１～２：１であるこ
とがさらに好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、グ
リチルリチン酸又はその塩：シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物、又
はセージ抽出物＝６００：１～５：４であることが好ましく、４５０：１～３：２である
ことがより好ましく、３００：１～２：１であることがさらに好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、ス
ギナ抽出物：セイヨウサンザシ抽出物＝１：１００００～１００００：１であることが好
ましく、１：１０００～１０００：１であることがより好ましく、１：５００～５００：
１であることがさらに好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、ス
ギナ抽出物：シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物、又はセージ抽出物
＝１：１００００～１００００：１であることが好ましく、１：１０００～１０００：１
であることがより好ましく、１：５００～５００：１であることがさらに好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、セ
イヨウサンザシ抽出物：シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物、又はセ
ージ抽出物＝１：１００００～１００００：１であることが好ましく、１：１０００～１
０００：１であることがより好ましく、１：５００～５００：１であることがさらに好ま
しい。
なお、上記含有比率における「シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物
、又はセージ抽出物」とは、各植物抽出物のいずれか１種の含有量を意味する。
リチルリチン酸又はその塩：スギナ抽出物＝６００：１～５：４であることが好ましく、
４５０：１～３：２であることがより好ましく、３００：１～２：１であることがさらに
好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、グ
リチルリチン酸又はその塩：セイヨウサンザシ抽出物＝６００：１～５：４であることが
好ましく、４５０：１～３：２であることがより好ましく、３００：１～２：１であるこ
とがさらに好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、グ
リチルリチン酸又はその塩：シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物、又
はセージ抽出物＝６００：１～５：４であることが好ましく、４５０：１～３：２である
ことがより好ましく、３００：１～２：１であることがさらに好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、ス
ギナ抽出物：セイヨウサンザシ抽出物＝１：１００００～１００００：１であることが好
ましく、１：１０００～１０００：１であることがより好ましく、１：５００～５００：
１であることがさらに好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、ス
ギナ抽出物：シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物、又はセージ抽出物
＝１：１００００～１００００：１であることが好ましく、１：１０００～１０００：１
であることがより好ましく、１：５００～５００：１であることがさらに好ましい。
本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比で、セ
イヨウサンザシ抽出物：シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物、又はセ
ージ抽出物＝１：１００００～１００００：１であることが好ましく、１：１０００～１
０００：１であることがより好ましく、１：５００～５００：１であることがさらに好ま
しい。
なお、上記含有比率における「シャクヤク抽出物、ハマメリス抽出物、シラカバ抽出物
、又はセージ抽出物」とは、各植物抽出物のいずれか１種の含有量を意味する。
【0019】
また、本発明の抗炎症組成物が液体組成物である場合は、長期保管時にも凝集物を生じ
にくいという観点から、スギナ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、及びハマメリス抽出物
の少なくとも１つを含有することが好ましい。
にくいという観点から、スギナ抽出物、セイヨウサンザシ抽出物、及びハマメリス抽出物
の少なくとも１つを含有することが好ましい。
【0020】
上記植物抽出物は、実施例で後述するように市販のものを使用することもできるし、植
物から後述する方法等により抽出したものを使用することもできる。植物抽出物の抽出方
法は特に制限されず、従来公知の方法に従えばよい。例えば、上記植物の任意の部位をそ
のまま、または裁断、粉砕等したのち、搾取、溶媒抽出、水蒸留、及び水蒸気蒸留等によ
って抽出物を得ることができる。溶媒抽出の方法としては、当該技術分野において公知の
方法を採用すればよく、例えば水（温水、熱水を含む）抽出、アルコール抽出、超臨界抽
出、マイクロウエーブ抽出、及び圧搾抽出等の従来公知の抽出方法を利用することができ
る。
物から後述する方法等により抽出したものを使用することもできる。植物抽出物の抽出方
法は特に制限されず、従来公知の方法に従えばよい。例えば、上記植物の任意の部位をそ
のまま、または裁断、粉砕等したのち、搾取、溶媒抽出、水蒸留、及び水蒸気蒸留等によ
って抽出物を得ることができる。溶媒抽出の方法としては、当該技術分野において公知の
方法を採用すればよく、例えば水（温水、熱水を含む）抽出、アルコール抽出、超臨界抽
出、マイクロウエーブ抽出、及び圧搾抽出等の従来公知の抽出方法を利用することができ
る。
【0021】
溶媒抽出を行う場合、溶媒としては、例えば水；メタノール、エタノール、イソプロピ
ルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、及び１，３－ブチレングリ
コール等のアルコール類（無水、含水の別を問わない）；アセトン等のケトン類；ジエチ
ルエーテル、ジオキサン等のエーテル類；アセトニトリル等のニトリル類；酢酸エチルエ
ステル等のエステル類；ヘキサン、キシレン、ベンゼン、及びクロロホルム等が例示され
る。
溶媒抽出における溶媒として好ましくは、水、アルコール類、ケトン類、及びヘキサン
等であり、より好ましくは水、アルコール類、及びケトン類である。これらの溶媒は１種
単独で使用してもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。
ルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、及び１，３－ブチレングリ
コール等のアルコール類（無水、含水の別を問わない）；アセトン等のケトン類；ジエチ
ルエーテル、ジオキサン等のエーテル類；アセトニトリル等のニトリル類；酢酸エチルエ
ステル等のエステル類；ヘキサン、キシレン、ベンゼン、及びクロロホルム等が例示され
る。
溶媒抽出における溶媒として好ましくは、水、アルコール類、ケトン類、及びヘキサン
等であり、より好ましくは水、アルコール類、及びケトン類である。これらの溶媒は１種
単独で使用してもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。
【0022】
得られた抽出物は、そのままの状態で使用してもよく、乾燥させて使用してもよい。ま
た、必要に応じて、得られた抽出物に精製、及び濃縮処理等を施してもよい。精製処理と
しては、例えば濾過またはイオン交換樹脂や活性炭カラム等を用いた吸着、脱色、及び分
離といった処理を例示できる。また、濃縮処理としては、エバポレーター等の常法を例示
できる。また、これらに対して更に凍結乾燥等の乾燥処理を施してもよく、更に従来公知
の方法に従って粉末化させてもよい。また、このようにして得た抽出物を、必要に応じて
水やエタノール等に溶解して用いてもよい。
た、必要に応じて、得られた抽出物に精製、及び濃縮処理等を施してもよい。精製処理と
しては、例えば濾過またはイオン交換樹脂や活性炭カラム等を用いた吸着、脱色、及び分
離といった処理を例示できる。また、濃縮処理としては、エバポレーター等の常法を例示
できる。また、これらに対して更に凍結乾燥等の乾燥処理を施してもよく、更に従来公知
の方法に従って粉末化させてもよい。また、このようにして得た抽出物を、必要に応じて
水やエタノール等に溶解して用いてもよい。
【0023】
本発明の抗炎症組成物は、口腔用組成物である場合は、上記植物抽出物全体（固形物換
算）を例えば０．００１質量ｐｐｍ～３質量％、好ましくは０．０１質量ｐｐｍ～０．１
質量％含有することができる。０．００１質量ｐｐｍ以上とすることによって、上記抽出
物（固形物換算）の抗炎症効果を発揮しうる濃度となり、３質量％以下にすることにより
、着色しにくく、香味に与える影響も少ない。
算）を例えば０．００１質量ｐｐｍ～３質量％、好ましくは０．０１質量ｐｐｍ～０．１
質量％含有することができる。０．００１質量ｐｐｍ以上とすることによって、上記抽出
物（固形物換算）の抗炎症効果を発揮しうる濃度となり、３質量％以下にすることにより
、着色しにくく、香味に与える影響も少ない。
【0024】
また、本発明の抗炎症組成物が含有する植物抽出物（固形物換算）の含有比率は質量比
で、グリチルリチン酸又はその塩：（植物抽出物）＝４５０：１～３：２であることが好
ましく、３００：１～２：１であることがより好ましく、２００：１～１０：３であるこ
とが最も好ましい。ここで、上記含有比率における「植物抽出物」とは、組成物が含有す
る植物抽出物の全体量を意味する。
で、グリチルリチン酸又はその塩：（植物抽出物）＝４５０：１～３：２であることが好
ましく、３００：１～２：１であることがより好ましく、２００：１～１０：３であるこ
とが最も好ましい。ここで、上記含有比率における「植物抽出物」とは、組成物が含有す
る植物抽出物の全体量を意味する。
【0025】
本発明の抗炎症組成物の用途としては、グリチルリチン酸又はその塩の抗炎症作用の効
果を享受できるような用途であれば特に制限されず、様々な用途に使用できる。例えば、
口腔用組成物、皮膚外用組成物、化粧料、及び洗浄剤等が挙げられる。
果を享受できるような用途であれば特に制限されず、様々な用途に使用できる。例えば、
口腔用組成物、皮膚外用組成物、化粧料、及び洗浄剤等が挙げられる。
【0026】
本発明の抗炎症組成物が口腔用組成物である場合、口腔内に生じる種々の炎症性疾患、
例えば、歯肉炎や歯周炎等の歯周病や、口内炎やカンジダ菌等の真菌感染に起因する炎症
、義歯等の補綴物との接触により生じる粘膜炎、歯科治療に伴う創傷部の腫れ等に適用す
ることができる。
口腔用組成物は、例えば、洗口液、歯磨き、口中清涼剤、うがい薬（含嗽剤）、液状歯
磨き及び練り歯磨き等の歯磨き類、トローチ、チューインガム等の形態とすることができ
る。
なかでも、組成物全体を口腔内に十分にいきわたらせるため、口腔内に適量を含み使用
する洗口液としての用途が好適である。洗口液とするには、例えば、水やエタノール等を
溶剤とし、常法によって調製すればよい。
また、例えば、液体歯磨き剤としては、例えば、リン酸水素カルシウム、水酸化アルミ
ニウム、無水ケイ酸、及び炭酸カルシウム等の研磨剤を必要に応じて含有したものとして
使用することもできる。
例えば、歯肉炎や歯周炎等の歯周病や、口内炎やカンジダ菌等の真菌感染に起因する炎症
、義歯等の補綴物との接触により生じる粘膜炎、歯科治療に伴う創傷部の腫れ等に適用す
ることができる。
口腔用組成物は、例えば、洗口液、歯磨き、口中清涼剤、うがい薬（含嗽剤）、液状歯
磨き及び練り歯磨き等の歯磨き類、トローチ、チューインガム等の形態とすることができ
る。
なかでも、組成物全体を口腔内に十分にいきわたらせるため、口腔内に適量を含み使用
する洗口液としての用途が好適である。洗口液とするには、例えば、水やエタノール等を
溶剤とし、常法によって調製すればよい。
また、例えば、液体歯磨き剤としては、例えば、リン酸水素カルシウム、水酸化アルミ
ニウム、無水ケイ酸、及び炭酸カルシウム等の研磨剤を必要に応じて含有したものとして
使用することもできる。
【0027】
また、口腔用組成物は、本発明の効果を損なわない限り、その他任意の成分を含有して
よい。
例えば、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム等のフッ化物；アズレン、
アズレンスルホン酸塩、β－グリチルレチン酸、ジヒドロコレステロール、エピジヒドロ
コレステリン、酢酸ｄｌ－α－トコフェロール、ニコチン酸ｄｌ－α－トコフェロール、
ε－アミノカプロン酸、トラネキサム酸、アラントイン、アスコルビン酸等の抗炎症剤；
リン酸塩、ポリリン酸塩、メトキシエチレン無水マレイン酸共重合体、塩化亜鉛、有機酸
亜鉛等の歯石予防剤；ヒノキチオール、アラントインクロルヒドロキシアルミニウム、ア
ラントインジヒドロキシアルミニウム、塩化ナトリウム等の収斂剤；グリセリン、ソルビ
トール、ポリエチレングリコール等の湿潤剤；ラウリル硫酸ナトリウム等の発泡剤；ピネ
ン、ペパーミント油、シナモンオイル、クローブオイル、オイゲノール、レモンオイル、
バニリン、シネオール、ユーカリオイル等の香料；サッカリン、サッカリンナトリウム、
スクラロース、キシリトール、エリスリトール、ソルビトール、マルチトール、ステビア
等の甘味料；青色１号、黄色５号、黄色４号、黄色２０３号、緑色３号、緑色２０１号、
赤色１０２号等の着色剤；パラベン類、安息香酸ナトリウム等の保存剤；リン酸一ナトリ
ウム、リン酸二ナトリウム、クエン酸、クエン酸ナトリウム等のｐＨ調整剤；ＰＯＥ硬化
ヒマシ油、ＰＯＥ・ＰＯＰブロックポリマー、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル、ＰＯＥ
アルキルエーテル、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル、ＰＯＥ脂肪酸エステル、ＰＯＥ高
級アルコールエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ脂肪酸エステル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステ
ル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エス
テル、プロピレングリコール脂肪酸エステル等の非イオン性界面活性剤；ラウリル硫酸ナ
トリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム、ＰＯＥアルキルエーテル硫酸塩、ラウロイルサル
コシナトリウム、ミリストイルサルコシンナトリウム、アルキルエーテルカルボン酸塩、
アルキルリン酸塩、ＰＯＥアルキルエーテルリン酸塩、Ｎ－アシルタウリン塩、ＰＯＥア
ルキルエーテルリン酸・リン酸塩、スルホン酸塩等のアニオン性界面活性剤；塩化アルキ
ルトリメチルアンモニウム、塩化ジアルキルジメチルアンモニウム、ＰＯＥアルキルアミ
ン・脂肪酸アミド等のカチオン性界面活性剤；２－アルキル－Ｎ－カルボキシメチル－Ｎ
－ヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタイン、ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン、
ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム等の両性界面活性剤等が挙げられる。
よい。
例えば、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム等のフッ化物；アズレン、
アズレンスルホン酸塩、β－グリチルレチン酸、ジヒドロコレステロール、エピジヒドロ
コレステリン、酢酸ｄｌ－α－トコフェロール、ニコチン酸ｄｌ－α－トコフェロール、
ε－アミノカプロン酸、トラネキサム酸、アラントイン、アスコルビン酸等の抗炎症剤；
リン酸塩、ポリリン酸塩、メトキシエチレン無水マレイン酸共重合体、塩化亜鉛、有機酸
亜鉛等の歯石予防剤；ヒノキチオール、アラントインクロルヒドロキシアルミニウム、ア
ラントインジヒドロキシアルミニウム、塩化ナトリウム等の収斂剤；グリセリン、ソルビ
トール、ポリエチレングリコール等の湿潤剤；ラウリル硫酸ナトリウム等の発泡剤；ピネ
ン、ペパーミント油、シナモンオイル、クローブオイル、オイゲノール、レモンオイル、
バニリン、シネオール、ユーカリオイル等の香料；サッカリン、サッカリンナトリウム、
スクラロース、キシリトール、エリスリトール、ソルビトール、マルチトール、ステビア
等の甘味料；青色１号、黄色５号、黄色４号、黄色２０３号、緑色３号、緑色２０１号、
赤色１０２号等の着色剤；パラベン類、安息香酸ナトリウム等の保存剤；リン酸一ナトリ
ウム、リン酸二ナトリウム、クエン酸、クエン酸ナトリウム等のｐＨ調整剤；ＰＯＥ硬化
ヒマシ油、ＰＯＥ・ＰＯＰブロックポリマー、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル、ＰＯＥ
アルキルエーテル、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル、ＰＯＥ脂肪酸エステル、ＰＯＥ高
級アルコールエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ脂肪酸エステル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステ
ル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エス
テル、プロピレングリコール脂肪酸エステル等の非イオン性界面活性剤；ラウリル硫酸ナ
トリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム、ＰＯＥアルキルエーテル硫酸塩、ラウロイルサル
コシナトリウム、ミリストイルサルコシンナトリウム、アルキルエーテルカルボン酸塩、
アルキルリン酸塩、ＰＯＥアルキルエーテルリン酸塩、Ｎ－アシルタウリン塩、ＰＯＥア
ルキルエーテルリン酸・リン酸塩、スルホン酸塩等のアニオン性界面活性剤；塩化アルキ
ルトリメチルアンモニウム、塩化ジアルキルジメチルアンモニウム、ＰＯＥアルキルアミ
ン・脂肪酸アミド等のカチオン性界面活性剤；２－アルキル－Ｎ－カルボキシメチル－Ｎ
－ヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタイン、ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン、
ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム等の両性界面活性剤等が挙げられる。
【0028】
また、本発明の抗炎症組成物が皮膚外用組成物である場合、皮膚に生じる種々の炎症性
疾患、例えば、アレルゲンとの接触や虫刺されなどによるアレルギー性の皮膚炎、アトピ
ー性皮膚炎などの内因性の皮膚疾患、乾皮症などバリア機能の低下に伴う皮膚炎等に適用
することができる。
皮膚外用組成物は、例えば、ローション剤型、乳液やクリーム等の乳化剤型、オイル剤
型等、特に限定されず、任意に設計することができる。
皮膚外用組成物は、例えば、通常化粧料などの皮膚外用剤で使用される任意成分を含有
することができ、上記所望の剤型に応じて適宜選択して使用できるものである。この様な
任意成分としては、例えば、マカデミアナッツ油、アボカド油、トウモロコシ油、オリー
ブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワー油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム
油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデ
リラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホ
バロウ等のオイル、ワックス類；流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライ
ト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類；
オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン
酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類；セチルアルコール、ステアリルアルコ
ール、イソステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、オクチルドデカノール、ミリス
チルアルコール、セトステアリルアルコール等の高級アルコール類；イソオクタン酸セチ
ル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプ
ロピル、セバシン酸－２－エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ
－２－エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジ
－２－ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ－２－エチルヘキサン酸グリセリン、トリ
－２－エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロール
プロパン、テトラ－２－エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット等の合成エステル油類；
ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ジフェニルポリシロキサン等
の鎖状ポリシロキサン；オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタ
シロキサン、ドデカメチルシクロヘキサンシロキサン等の環状ポリシロキサン；アミノ変
性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フ
ッ素変性ポリシロキサン等の変性ポリシロキサン等のシリコーン油等の油剤類；脂肪酸セ
ッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、
アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類；塩化ステアリル
トリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオ
ン界面活性剤類；イミダゾリン系両性界面活性剤（２－ココイル－２－イミダゾリニウム
ヒドロキサイド－１－カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤
（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の
両性界面活性剤類；ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキ
オレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プ
ロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬
化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（
ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、
ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ－ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグ
リセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ－グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪
酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯ
Ｅアルキルエーテル類（ＰＯＥ２－オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェ
ニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯ
Ｐアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２－デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニ
ック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等
）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類；ポリエチレ
ングリコール、グリセリン、１，３－ブチレングリコール、エリスリトール、ソルビトー
ル、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ジ
グリセリン、イソプレングリコール、１，２－ペンタンジオール、２，４－ヘキサンジオ
ール、１，２－ヘキサンジオール、１，２－オクタンジオール等の多価アルコール類；ピ
ロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類；表面を処理され
ていてもよい、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウ
ム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類；表面を処理さ
れていてもよい、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタ
ン、酸化亜鉛の無機顔料類；表面を処理されていてもよい雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩
化ビスマス等のパール剤類；レーキ化されていてもよい赤色２０２号、赤色２２８号、赤
色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２
２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２
０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類；ポリエチレン末、ポリメタクリル
酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類；パラア
ミノ安息香酸系紫外線吸収剤；アントラニル酸系紫外線吸収剤；サリチル酸系紫外線吸収
剤；桂皮酸系紫外線吸収剤；ベンゾフェノン系紫外線吸収剤；糖系紫外線吸収剤；２－（
２’－ヒドロキシ－５’－ｔ－オクチルフェニル）ベンゾトリアゾール、４－メトキシ－
４’－ｔ－ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類；エタノール、イソプロパノー
ル等の低級アルコール類；ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＢ６塩酸塩、ビタミンＢ
６トリパルミテート、ビタミンＢ６ジオクタノエート、ビタミンＢ２又はその誘導体、ビ
タミンＢ１２、ビタミンＢ１５又はその誘導体等のビタミンＢ類；α－トコフェロール、
β－トコフェロール、γ－トコフェロール、ビタミンＥアセテート等のビタミンＥ類、ビ
タミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ピロロキノリンキノン等のビタミ
ン類；フェノキシエタノール等の抗菌剤などが例示できる。
疾患、例えば、アレルゲンとの接触や虫刺されなどによるアレルギー性の皮膚炎、アトピ
ー性皮膚炎などの内因性の皮膚疾患、乾皮症などバリア機能の低下に伴う皮膚炎等に適用
することができる。
皮膚外用組成物は、例えば、ローション剤型、乳液やクリーム等の乳化剤型、オイル剤
型等、特に限定されず、任意に設計することができる。
皮膚外用組成物は、例えば、通常化粧料などの皮膚外用剤で使用される任意成分を含有
することができ、上記所望の剤型に応じて適宜選択して使用できるものである。この様な
任意成分としては、例えば、マカデミアナッツ油、アボカド油、トウモロコシ油、オリー
ブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワー油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム
油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデ
リラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホ
バロウ等のオイル、ワックス類；流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライ
ト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類；
オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン
酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類；セチルアルコール、ステアリルアルコ
ール、イソステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、オクチルドデカノール、ミリス
チルアルコール、セトステアリルアルコール等の高級アルコール類；イソオクタン酸セチ
ル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプ
ロピル、セバシン酸－２－エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ
－２－エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジ
－２－ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ－２－エチルヘキサン酸グリセリン、トリ
－２－エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロール
プロパン、テトラ－２－エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット等の合成エステル油類；
ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ジフェニルポリシロキサン等
の鎖状ポリシロキサン；オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタ
シロキサン、ドデカメチルシクロヘキサンシロキサン等の環状ポリシロキサン；アミノ変
性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フ
ッ素変性ポリシロキサン等の変性ポリシロキサン等のシリコーン油等の油剤類；脂肪酸セ
ッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、
アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類；塩化ステアリル
トリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオ
ン界面活性剤類；イミダゾリン系両性界面活性剤（２－ココイル－２－イミダゾリニウム
ヒドロキサイド－１－カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤
（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の
両性界面活性剤類；ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキ
オレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プ
ロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬
化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（
ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、
ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ－ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグ
リセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ－グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪
酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯ
Ｅアルキルエーテル類（ＰＯＥ２－オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェ
ニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯ
Ｐアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２－デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニ
ック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等
）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類；ポリエチレ
ングリコール、グリセリン、１，３－ブチレングリコール、エリスリトール、ソルビトー
ル、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ジ
グリセリン、イソプレングリコール、１，２－ペンタンジオール、２，４－ヘキサンジオ
ール、１，２－ヘキサンジオール、１，２－オクタンジオール等の多価アルコール類；ピ
ロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類；表面を処理され
ていてもよい、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウ
ム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類；表面を処理さ
れていてもよい、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタ
ン、酸化亜鉛の無機顔料類；表面を処理されていてもよい雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩
化ビスマス等のパール剤類；レーキ化されていてもよい赤色２０２号、赤色２２８号、赤
色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２
２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２
０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類；ポリエチレン末、ポリメタクリル
酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類；パラア
ミノ安息香酸系紫外線吸収剤；アントラニル酸系紫外線吸収剤；サリチル酸系紫外線吸収
剤；桂皮酸系紫外線吸収剤；ベンゾフェノン系紫外線吸収剤；糖系紫外線吸収剤；２－（
２’－ヒドロキシ－５’－ｔ－オクチルフェニル）ベンゾトリアゾール、４－メトキシ－
４’－ｔ－ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類；エタノール、イソプロパノー
ル等の低級アルコール類；ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＢ６塩酸塩、ビタミンＢ
６トリパルミテート、ビタミンＢ６ジオクタノエート、ビタミンＢ２又はその誘導体、ビ
タミンＢ１２、ビタミンＢ１５又はその誘導体等のビタミンＢ類；α－トコフェロール、
β－トコフェロール、γ－トコフェロール、ビタミンＥアセテート等のビタミンＥ類、ビ
タミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ピロロキノリンキノン等のビタミ
ン類；フェノキシエタノール等の抗菌剤などが例示できる。
【0029】
本発明の抗炎症組成物による抗炎症効果は、例えば、炎症が生じている各種器官から採
取した組織、細胞や、実施例で後述するように、ＬＰＳ等の刺激を与えた培養細胞におい
て、炎症性サイトカインのｍＲＮＡやタンパク質の発現量を測定することで評価すること
ができる。
炎症性サイトカインとしては、例えば、ＩＬ－６やＴＮＦ-α等を炎症マーカーとして
使用することができる。
取した組織、細胞や、実施例で後述するように、ＬＰＳ等の刺激を与えた培養細胞におい
て、炎症性サイトカインのｍＲＮＡやタンパク質の発現量を測定することで評価すること
ができる。
炎症性サイトカインとしては、例えば、ＩＬ－６やＴＮＦ-α等を炎症マーカーとして
使用することができる。
【0030】
例えば、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量により抗炎症効果を評価する場合、後述する実施例
に記載の条件で各種測定したＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量に基づき、ＩＬ－６のｍＲＮＡの
相対発現量を求めることにより評価できる。
詳細は実施例にて後述する。
に記載の条件で各種測定したＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量に基づき、ＩＬ－６のｍＲＮＡの
相対発現量を求めることにより評価できる。
詳細は実施例にて後述する。
【0031】
あるいは、ＴＮＦ-αのタンパク質発現量により、抗炎症効果を評価する場合、後述す
る実施例に記載の条件で各種測定したＴＮＦ-αのタンパク質発現量から、下記式により
、炎症抑制率を求め、植物抽出物を用いない場合（ＧＫ２処理：ＧＫ２のみを適用しかつ
ＬＰＳ刺激を行う場合）の炎症抑制率を１とした場合の各検体における炎症抑制率を求め
ることにより評価できる。
「ＧＫ２処理」の炎症抑制率＝（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「ＧＫ２処理」のＴ
ＮＦ-α量）／（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「無処理」のＴＮＦ-α量）
各検体における炎症抑制率＝｛（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－各検体のＴＮＦ-α量
）／（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「無処理」のＴＮＦ-α量）｝／ＧＫ２処理の炎症
抑制率
詳細は実施例にて後述する。
る実施例に記載の条件で各種測定したＴＮＦ-αのタンパク質発現量から、下記式により
、炎症抑制率を求め、植物抽出物を用いない場合（ＧＫ２処理：ＧＫ２のみを適用しかつ
ＬＰＳ刺激を行う場合）の炎症抑制率を１とした場合の各検体における炎症抑制率を求め
ることにより評価できる。
「ＧＫ２処理」の炎症抑制率＝（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「ＧＫ２処理」のＴ
ＮＦ-α量）／（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「無処理」のＴＮＦ-α量）
各検体における炎症抑制率＝｛（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－各検体のＴＮＦ-α量
）／（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「無処理」のＴＮＦ-α量）｝／ＧＫ２処理の炎症
抑制率
詳細は実施例にて後述する。
【0032】
上記炎症抑制率は、１．０以上であることが好ましく、２．０以上であることがより好
ましい。
また、上記ＩＬ－６のｍＲＮＡの相対発現量は、１．０以下であることが好ましく、０
．５以下であることがより好ましい。
ましい。
また、上記ＩＬ－６のｍＲＮＡの相対発現量は、１．０以下であることが好ましく、０
．５以下であることがより好ましい。
【実施例0033】
以下、本発明を実施例によりさらに説明するが、本発明は下記例に制限されるものでは
ない。
ない。
【0034】
実施例１：炎症性サイトカインのｍＲＮＡ発現量を指標とした抗炎症効果の評価
（実施例１－１）
本試験では、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ(以下、Ｐ．ｇ．と
いう）由来ＬＰＳで細胞に炎症を惹起した細胞について、炎症性サイトカインの１種であ
るＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量を測定することにより、本発明の抗炎症組成物の抗炎症効果
を評価した。
具体的には、まず、グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）を含有するＧＫ２溶液、植
物抽出物１種を含む植物抽出物溶液、および細胞を刺激するＰ．ｇ．由来ＬＰＳを含むＬ
ＰＳ溶液をそれぞれ調製した。つづいて、上記調製した溶液の存在下で細胞の培養を行い
、炎症性サイトカインの一種であるＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量を測定することによって、
抗炎症効果の評価を行った。
なお、本試験では、対照検体として、ＧＫ２のみを適用しかつＬＰＳ刺激を行った「Ｇ
Ｋ２処理」（植物抽出物なし）、ＬＰＳ刺激のみを行った「ＬＰＳ処理」（ＧＫ２及び植
物抽出物なし）、およびＧＫ２及び植物抽出物を適用せずＬＰＳ刺激も行わない「無処理
」（ＧＫ２、植物抽出物、及びＬＰＳ刺激なし）についても試験を行った。
また、細胞培養用培地は、１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培地を使用した。
（実施例１－１）
本試験では、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ(以下、Ｐ．ｇ．と
いう）由来ＬＰＳで細胞に炎症を惹起した細胞について、炎症性サイトカインの１種であ
るＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量を測定することにより、本発明の抗炎症組成物の抗炎症効果
を評価した。
具体的には、まず、グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）を含有するＧＫ２溶液、植
物抽出物１種を含む植物抽出物溶液、および細胞を刺激するＰ．ｇ．由来ＬＰＳを含むＬ
ＰＳ溶液をそれぞれ調製した。つづいて、上記調製した溶液の存在下で細胞の培養を行い
、炎症性サイトカインの一種であるＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量を測定することによって、
抗炎症効果の評価を行った。
なお、本試験では、対照検体として、ＧＫ２のみを適用しかつＬＰＳ刺激を行った「Ｇ
Ｋ２処理」（植物抽出物なし）、ＬＰＳ刺激のみを行った「ＬＰＳ処理」（ＧＫ２及び植
物抽出物なし）、およびＧＫ２及び植物抽出物を適用せずＬＰＳ刺激も行わない「無処理
」（ＧＫ２、植物抽出物、及びＬＰＳ刺激なし）についても試験を行った。
また、細胞培養用培地は、１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培地を使用した。
【0035】
［方法］
１．グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）溶液の調製
ＧＫ２（丸善製薬社製）およびポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製
、ＨＣＯ－１００）、精製水を、いずれも１質量％となるようにプロピレングリコールに
溶解し、ＧＫ２原液を得た。このＧＫ２原液を１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培地で２５
００倍に希釈することで、ＧＫ２溶液を調製した。
１．グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）溶液の調製
ＧＫ２（丸善製薬社製）およびポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製
、ＨＣＯ－１００）、精製水を、いずれも１質量％となるようにプロピレングリコールに
溶解し、ＧＫ２原液を得た。このＧＫ２原液を１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培地で２５
００倍に希釈することで、ＧＫ２溶液を調製した。
【0036】
２．植物抽出物溶液の調製
濃度が０．１質量％となるように植物抽出物を量りとり、ＧＫ２およびポリオキシエチ
レン硬化ヒマシ油、精製水をそれぞれ１質量％となるように加え、プロピレングリコール
に溶解し植物抽出物原液を得た。この植物抽出物原液を１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培
地で２５００倍に希釈することで、各種植物抽出物溶液を調製した。
濃度が０．１質量％となるように植物抽出物を量りとり、ＧＫ２およびポリオキシエチ
レン硬化ヒマシ油、精製水をそれぞれ１質量％となるように加え、プロピレングリコール
に溶解し植物抽出物原液を得た。この植物抽出物原液を１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培
地で２５００倍に希釈することで、各種植物抽出物溶液を調製した。
【0037】
３．ＬＰＳ溶液の調製
１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培地でＰ．ｇ．由来のＬＰＳ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ社製
）を５００倍希釈し、ＬＰＳ溶液を調製した。
１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培地でＰ．ｇ．由来のＬＰＳ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ社製
）を５００倍希釈し、ＬＰＳ溶液を調製した。
【0038】
４．供試細胞の準備
１２ｗｅｌｌプレートに培地とヒト口腔扁平上皮癌細胞：Ｃａ９－２２を１０６個／ｗ
ｅｌｌずつ播種し、ＣＯ２インキュベーター（ＣＯ２：５％、３７℃）で２４時間培養し
、供試細胞とした。
１２ｗｅｌｌプレートに培地とヒト口腔扁平上皮癌細胞：Ｃａ９－２２を１０６個／ｗ
ｅｌｌずつ播種し、ＣＯ２インキュベーター（ＣＯ２：５％、３７℃）で２４時間培養し
、供試細胞とした。
【0039】
５．ＬＰＳによる炎症誘導および検体暴露、ＲＮＡの抽出
（１）供試細胞から培地を除いたのち、ＧＫ２溶液、植物抽出物溶液、及びＬＰＳ溶液を
、下記（ｉ）～（ｉｖ）のとおり全量２ｍＬになるよう添加し、ＣＯ２インキュベーター
（ＣＯ２：５％、３７℃）で２４時間培養した。
（ｉ）各検体（植物抽出物含有検体）には、各種植物抽出物溶液とＬＰＳ溶液をそれぞ
れ１ｍＬずつ添加し、終濃度をＧＫ２は２．０質量ｐｐｍ、植物抽出物は０．２質量ｐｐ
ｍとした。
（ｉｉ）「ＧＫ２処理」（対照検体）には、ＧＫ２溶液とＬＰＳ溶液をそれぞれ１ｍＬ
ずつ添加した。
（ｉｉｉ）「ＬＰＳ処理」（対照検体）には、ＬＰＳ溶液と１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－Ｍ
ＥＭ培地をそれぞれ１ｍＬずつ添加した。
（ｉｖ）「無処理」（対照検体）には、１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培地を２ｍＬ添
加した。
（２）ＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いて、細胞からトータ
ルＲＮＡを抽出・精製した。
（１）供試細胞から培地を除いたのち、ＧＫ２溶液、植物抽出物溶液、及びＬＰＳ溶液を
、下記（ｉ）～（ｉｖ）のとおり全量２ｍＬになるよう添加し、ＣＯ２インキュベーター
（ＣＯ２：５％、３７℃）で２４時間培養した。
（ｉ）各検体（植物抽出物含有検体）には、各種植物抽出物溶液とＬＰＳ溶液をそれぞ
れ１ｍＬずつ添加し、終濃度をＧＫ２は２．０質量ｐｐｍ、植物抽出物は０．２質量ｐｐ
ｍとした。
（ｉｉ）「ＧＫ２処理」（対照検体）には、ＧＫ２溶液とＬＰＳ溶液をそれぞれ１ｍＬ
ずつ添加した。
（ｉｉｉ）「ＬＰＳ処理」（対照検体）には、ＬＰＳ溶液と１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－Ｍ
ＥＭ培地をそれぞれ１ｍＬずつ添加した。
（ｉｖ）「無処理」（対照検体）には、１質量％ＦＢＳ添加Ｅ－ＭＥＭ培地を２ｍＬ添
加した。
（２）ＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いて、細胞からトータ
ルＲＮＡを抽出・精製した。
【0040】
６．ｍＲＮＡ発現量の測定（ＲＴ－ＰＣＲ）
細胞から抽出したＲＮＡをＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｒ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｃＤＮＡ
Ｍａｓｔｅｒ（Ｒｏｃｈｅ社製）を用いて、ｃＤＮＡを合成した。
細胞から抽出したＲＮＡをＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｒ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｃＤＮＡ
Ｍａｓｔｅｒ（Ｒｏｃｈｅ社製）を用いて、ｃＤＮＡを合成した。
【0041】
（リアルタイムＰＣＲ）
ＦａｓｔＳｔａｒｔ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ＤＮＡ Ｇｒｅｅｎ Ｍａｓｔｅｒ（Ｒｏ
ｃｈｅ社製）を用いてリアルタイムＰＣＲを実施した。なお、９５℃で６００秒を１サイ
クル、９５℃で１０秒および６０℃で３０秒のサイクルを計５０サイクルとして、リアル
タイムＰＣＲを行った。使用したＰｒｉｍｅｒを下記に示す。
ＧＡＰＤＨ
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＣＡＣＣＧＴＣＡＡＧＧＣＴＧＡＧＡＡＣ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＧＧＴＧＡＡＧＡＣＧＣＣＡＧＴＧＧＡ－３’
ＩＬ－６
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＣＣＡＧＡＧＣＴＧＴＧＣＡＧＡＴＧＡＧ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＣＡＧＣＡＧＧＣＴＧＧＣＡＴＴＴＧ－３’
ＦａｓｔＳｔａｒｔ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ＤＮＡ Ｇｒｅｅｎ Ｍａｓｔｅｒ（Ｒｏ
ｃｈｅ社製）を用いてリアルタイムＰＣＲを実施した。なお、９５℃で６００秒を１サイ
クル、９５℃で１０秒および６０℃で３０秒のサイクルを計５０サイクルとして、リアル
タイムＰＣＲを行った。使用したＰｒｉｍｅｒを下記に示す。
ＧＡＰＤＨ
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＣＡＣＣＧＴＣＡＡＧＧＣＴＧＡＧＡＡＣ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＧＧＴＧＡＡＧＡＣＧＣＣＡＧＴＧＧＡ－３’
ＩＬ－６
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＣＣＡＧＡＧＣＴＧＴＧＣＡＧＡＴＧＡＧ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＣＡＧＣＡＧＧＣＴＧＧＣＡＴＴＴＧ－３’
【0042】
［結果］
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたとき
の各検体の数値（相対発現量）を図１に示す（各検体及び「ＧＫ２処理」のみ図示）。な
お、図１中のＩＬ－６の相対発現量は合計２回試験を行った平均を示している。
また、図１中の各種植物抽出物は下記のものを使用した。
・スギナ：丸善製薬社製、（製品名）スギナ抽出液ＢＧ
・セイヨウサンザシ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックス セイヨウサン
ザシＢ
・シャクヤク：丸善製薬社製、（製品名）シャクヤク抽出液ＢＧ－ＪＣ
・ハマメリス：丸善製薬社製、（製品名）ハマメリス抽出液ＢＧ‐Ｊ
・シラカバ：丸善製薬社製、（製品名）シラカバ抽出液ＢＧ－ＪＣ
・セージ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスセージＢ
・ドクダミ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスドクダミＢ
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたとき
の各検体の数値（相対発現量）を図１に示す（各検体及び「ＧＫ２処理」のみ図示）。な
お、図１中のＩＬ－６の相対発現量は合計２回試験を行った平均を示している。
また、図１中の各種植物抽出物は下記のものを使用した。
・スギナ：丸善製薬社製、（製品名）スギナ抽出液ＢＧ
・セイヨウサンザシ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックス セイヨウサン
ザシＢ
・シャクヤク：丸善製薬社製、（製品名）シャクヤク抽出液ＢＧ－ＪＣ
・ハマメリス：丸善製薬社製、（製品名）ハマメリス抽出液ＢＧ‐Ｊ
・シラカバ：丸善製薬社製、（製品名）シラカバ抽出液ＢＧ－ＪＣ
・セージ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスセージＢ
・ドクダミ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスドクダミＢ
【0043】
図１の結果から分かるとおり、グリチルリチン酸ジカリウムに加えて、スギナ、セイヨ
ウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ、又はセージの抽出物を加えた場合、植
物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量が減少した。
一方、ドクダミの抽出物を加えた場合は、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較
して、ＩＬ－６の相対発現量が増加した。
したがって、植物抽出物の中でも、スギナ、セイヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリ
ス、シラカバ、又はセージの抽出物を選択し、グリチルリチン酸ジカリウムに加えること
によって、抗炎症効果が向上することが確認された。
ウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ、又はセージの抽出物を加えた場合、植
物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量が減少した。
一方、ドクダミの抽出物を加えた場合は、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較
して、ＩＬ－６の相対発現量が増加した。
したがって、植物抽出物の中でも、スギナ、セイヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリ
ス、シラカバ、又はセージの抽出物を選択し、グリチルリチン酸ジカリウムに加えること
によって、抗炎症効果が向上することが確認された。
【0044】
（実施例１－２）
実施例１－１において、植物抽出物をスギナ及び／又はセイヨウサンザシの植物抽出物
とし、植物抽出物の終濃度を図２に示す濃度にしたことを除いては実施例１－１と同様に
、抗炎症効果の評価を行った。
実施例１－１において、植物抽出物をスギナ及び／又はセイヨウサンザシの植物抽出物
とし、植物抽出物の終濃度を図２に示す濃度にしたことを除いては実施例１－１と同様に
、抗炎症効果の評価を行った。
【0045】
［結果］
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたとき
の、各検体の数値（相対発現量）を図２に示す（各検体及び「ＧＫ２処理」のみ図示）。
なお、図２中のＩＬ－６相対発現量は合計２回試験を行った平均を示している。
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたとき
の、各検体の数値（相対発現量）を図２に示す（各検体及び「ＧＫ２処理」のみ図示）。
なお、図２中のＩＬ－６相対発現量は合計２回試験を行った平均を示している。
【0046】
図２の結果から分かるとおり、グリチルリチン酸ジカリウムに加えて、スギナ及びセイ
ヨウサンザシの抽出物の両方を加えた場合も、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比
較して、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量が減少した。特に、スギナ０．２質量ｐｐｍとセイヨ
ウサンザシ０．２質量ｐｐｍの両方を加えた場合にＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量は最も減少
した。また、たとえば、スギナを単独で０．２質量ｐｐｍまたはセイヨウサンザシを単独
で０．２質量ｐｐｍ加えるよりも、スギナ０．０４質量ｐｐｍとセイヨウサンザシ０．０
４質量ｐｐｍを組み合わせて加えた場合の方がＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量が減少している
ように、スギナまたはセイヨウサンザシの抽出物を単独で加える場合よりも、スギナおよ
びセイヨウサンザシの抽出物の両方を組み合わせて加えた場合の方が、ＩＬ－６のｍＲＮ
Ａ発現量が減少することがわかった。
ヨウサンザシの抽出物の両方を加えた場合も、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比
較して、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量が減少した。特に、スギナ０．２質量ｐｐｍとセイヨ
ウサンザシ０．２質量ｐｐｍの両方を加えた場合にＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量は最も減少
した。また、たとえば、スギナを単独で０．２質量ｐｐｍまたはセイヨウサンザシを単独
で０．２質量ｐｐｍ加えるよりも、スギナ０．０４質量ｐｐｍとセイヨウサンザシ０．０
４質量ｐｐｍを組み合わせて加えた場合の方がＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量が減少している
ように、スギナまたはセイヨウサンザシの抽出物を単独で加える場合よりも、スギナおよ
びセイヨウサンザシの抽出物の両方を組み合わせて加えた場合の方が、ＩＬ－６のｍＲＮ
Ａ発現量が減少することがわかった。
【0047】
（実施例１－３）
実施例１－１において、使用する植物抽出物を表１に示す３種の植物抽出物とし、ＧＫ
２及び各植物抽出物の終濃度を表１に示す濃度にしたことを除いては実施例１－１と同様
に、抗炎症効果の評価を行った。
実施例１－１において、使用する植物抽出物を表１に示す３種の植物抽出物とし、ＧＫ
２及び各植物抽出物の終濃度を表１に示す濃度にしたことを除いては実施例１－１と同様
に、抗炎症効果の評価を行った。
【0048】
［結果］
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたとき
の、各検体の数値（相対発現量）を下記表１に示す。なお、表１中のＩＬ－６相対発現量
は合計２回試験を行った平均を示している。
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたとき
の、各検体の数値（相対発現量）を下記表１に示す。なお、表１中のＩＬ－６相対発現量
は合計２回試験を行った平均を示している。
【0049】
【表1】
【0050】
表１の結果から分かるとおり、植物抽出物として、スギナ及びセイヨウサンザシの抽出
物に加え、さらにシャクヤク、ハマメリス、シラカバ、又はセージの抽出物を加えても、
植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量が減少した
。
物に加え、さらにシャクヤク、ハマメリス、シラカバ、又はセージの抽出物を加えても、
植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、ＩＬ－６のｍＲＮＡ発現量が減少した
。
【0051】
（実施例１－４）
本試験では、Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｏｒ Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉ
ｔａｎｃｅ(以下、Ａ．ａ．という）由来ＬＰＳで細胞に炎症を惹起した細胞について、
各種炎症性サイトカイン（ＩＬ－６、ＴＮＦ－α）のｍＲＮＡ発現量を測定することによ
り、本発明の抗炎症組成物の抗炎症効果を評価した。
具体的には、まず、グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）を含有するＧＫ２溶液、植
物抽出物を含む植物抽出物溶液、細胞を刺激するＡ．ａ．由来ＬＰＳを含むＬＰＳ溶液、
及びコントロール溶液をそれぞれ調製した。つづいて、上記調製した溶液の存在下で細胞
の培養を行い、炎症性サイトカインの一種であるＩＬ－６およびＴＮＦ－αのｍＲＮＡ発
現量を測定することによって、抗炎症効果の評価を行った。
なお、本試験では、対照検体として、ＧＫ２のみを適用しかつＬＰＳ刺激を行った「Ｇ
Ｋ２処理」（植物抽出物なし）、ＬＰＳ刺激のみを行った「ＬＰＳ処理」（ＧＫ２及び植
物抽出物なし）、およびＧＫ２及び植物抽出物を適用せずＬＰＳ刺激も行わない「無処理
」（ＧＫ２、植物抽出物、及びＬＰＳ刺激なし）についても試験を行った。
また、細胞培養用培地は、Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ－ＳＦＭ（１×）［＋］Ｌ－Ｇｌ
ｕｔａｍｉｎにＢｏｖｉｎｅ Ｐｉｔｕｉｔａｒｙ Ｅｘｔｒａｃｔ（終濃度：２５μｇ
／ｍＬ）、ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（終濃度：０．０５ｎｇ／
ｍＬ）、ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ（終濃度：１００Ｕ／ｍＬ）、ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ
（終濃度：１００ｍｇ／ｍＬ）を添加した後、フィルター減菌したもの（以下、Ｋ－ＳＦ
Ｍ培地という）を使用した。
本試験では、Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｏｒ Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉ
ｔａｎｃｅ(以下、Ａ．ａ．という）由来ＬＰＳで細胞に炎症を惹起した細胞について、
各種炎症性サイトカイン（ＩＬ－６、ＴＮＦ－α）のｍＲＮＡ発現量を測定することによ
り、本発明の抗炎症組成物の抗炎症効果を評価した。
具体的には、まず、グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）を含有するＧＫ２溶液、植
物抽出物を含む植物抽出物溶液、細胞を刺激するＡ．ａ．由来ＬＰＳを含むＬＰＳ溶液、
及びコントロール溶液をそれぞれ調製した。つづいて、上記調製した溶液の存在下で細胞
の培養を行い、炎症性サイトカインの一種であるＩＬ－６およびＴＮＦ－αのｍＲＮＡ発
現量を測定することによって、抗炎症効果の評価を行った。
なお、本試験では、対照検体として、ＧＫ２のみを適用しかつＬＰＳ刺激を行った「Ｇ
Ｋ２処理」（植物抽出物なし）、ＬＰＳ刺激のみを行った「ＬＰＳ処理」（ＧＫ２及び植
物抽出物なし）、およびＧＫ２及び植物抽出物を適用せずＬＰＳ刺激も行わない「無処理
」（ＧＫ２、植物抽出物、及びＬＰＳ刺激なし）についても試験を行った。
また、細胞培養用培地は、Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ－ＳＦＭ（１×）［＋］Ｌ－Ｇｌ
ｕｔａｍｉｎにＢｏｖｉｎｅ Ｐｉｔｕｉｔａｒｙ Ｅｘｔｒａｃｔ（終濃度：２５μｇ
／ｍＬ）、ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（終濃度：０．０５ｎｇ／
ｍＬ）、ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ（終濃度：１００Ｕ／ｍＬ）、ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ
（終濃度：１００ｍｇ／ｍＬ）を添加した後、フィルター減菌したもの（以下、Ｋ－ＳＦ
Ｍ培地という）を使用した。
【0052】
［方法］
１．グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）溶液の調製
ＧＫ２（丸善製薬社製）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製、Ｈ
ＣＯ－１００）及び精製水がそれぞれ１質量％となるようにプロピレングリコールに溶解
し、ＧＫ２原液を得た。このＧＫ２原液をＫ－ＳＦＭ培地で２５００倍に希釈することで
、ＧＫ２溶液を調製した。
２．植物抽出物溶液の調製
ＧＫ２（丸善製薬社製）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製、Ｈ
ＣＯ－１００）及び精製水がそれぞれ１質量％、植物抽出物が０．０５質量％または０．
０１質量％となるようにプロピレングリコールに溶解し、植物抽出物原液を得た。この植
物抽出物原液をＫ－ＳＦＭ培地で２５００倍に希釈することで、各種植物抽出物溶液を調
製した。
３．ＬＰＳ溶液の調製
Ａ．ａ．由来のＬＰＳを、その濃度が２μｇ／ｍＬとなるようにＫ－ＳＦＭ培地で希釈
し、ＬＰＳ溶液を調製した。
４．コントロール溶液の調製
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製、ＨＣＯ－１００）及び精製水
がそれぞれ１質量％となるようにプロピレングリコールに溶解し、さらにＫ－ＳＦＭ培地
で２５００倍に希釈することで、コントロール溶液を調製した。
５．供試細胞の準備
１２ｗｅｌｌプレートに培地と不死化口腔粘膜上皮細胞：ＲＴ７を１．０×１０５ｃｅ
ｌｌｓ／ｗｅｌｌずつ播種し、ＣＯ２インキュベーター（ＣＯ２：５％、３７℃）で２４
時間培養し、供試細胞とした。
１．グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）溶液の調製
ＧＫ２（丸善製薬社製）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製、Ｈ
ＣＯ－１００）及び精製水がそれぞれ１質量％となるようにプロピレングリコールに溶解
し、ＧＫ２原液を得た。このＧＫ２原液をＫ－ＳＦＭ培地で２５００倍に希釈することで
、ＧＫ２溶液を調製した。
２．植物抽出物溶液の調製
ＧＫ２（丸善製薬社製）、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製、Ｈ
ＣＯ－１００）及び精製水がそれぞれ１質量％、植物抽出物が０．０５質量％または０．
０１質量％となるようにプロピレングリコールに溶解し、植物抽出物原液を得た。この植
物抽出物原液をＫ－ＳＦＭ培地で２５００倍に希釈することで、各種植物抽出物溶液を調
製した。
３．ＬＰＳ溶液の調製
Ａ．ａ．由来のＬＰＳを、その濃度が２μｇ／ｍＬとなるようにＫ－ＳＦＭ培地で希釈
し、ＬＰＳ溶液を調製した。
４．コントロール溶液の調製
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製、ＨＣＯ－１００）及び精製水
がそれぞれ１質量％となるようにプロピレングリコールに溶解し、さらにＫ－ＳＦＭ培地
で２５００倍に希釈することで、コントロール溶液を調製した。
５．供試細胞の準備
１２ｗｅｌｌプレートに培地と不死化口腔粘膜上皮細胞：ＲＴ７を１．０×１０５ｃｅ
ｌｌｓ／ｗｅｌｌずつ播種し、ＣＯ２インキュベーター（ＣＯ２：５％、３７℃）で２４
時間培養し、供試細胞とした。
【0053】
６．ＬＰＳによる炎症誘導および検体暴露、ＲＮＡの抽出
（１）供試細胞から培地を除いたのち、新たに培地を５００μＬずつ添加し、３７℃で４
８時間培養した。培地を除去した後、調製したＧＫ２溶液、植物抽出物溶液、ＬＰＳ溶液
、及びコントロール溶液を、下記（ｉ）～（ｉｖ）のとおり全量１ｍＬになるよう添加し
、ＣＯ２インキュベーター（ＣＯ２：５％、３７℃）内で３時間静置後、細胞を回収した
。
（ｉ）各検体（植物抽出物含有検体）には、各種植物抽出物溶液とＬＰＳ溶液をそれぞ
れ５００μＬずつ添加した。ＧＫ２及び植物抽出物の終濃度は表２に示す濃度とした。
（ｉｉ）「ＧＫ２処理」（対照検体）には、ＧＫ２溶液とＬＰＳ溶液をそれぞれ５００
μＬずつ添加した。
（ｉｉｉ）「ＬＰＳ処理」（対照検体）には、ＬＰＳ溶液とコントロール溶液をそれぞ
れ５００μＬずつ添加した。
（ｉｖ）「無処理」（対照検体）には、Ｋ－ＳＦＭ培地とコントロール溶液をそれぞれ
５００μＬずつ添加した。
（２）ＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いて、細胞からトータ
ルＲＮＡを抽出・精製した。
（１）供試細胞から培地を除いたのち、新たに培地を５００μＬずつ添加し、３７℃で４
８時間培養した。培地を除去した後、調製したＧＫ２溶液、植物抽出物溶液、ＬＰＳ溶液
、及びコントロール溶液を、下記（ｉ）～（ｉｖ）のとおり全量１ｍＬになるよう添加し
、ＣＯ２インキュベーター（ＣＯ２：５％、３７℃）内で３時間静置後、細胞を回収した
。
（ｉ）各検体（植物抽出物含有検体）には、各種植物抽出物溶液とＬＰＳ溶液をそれぞ
れ５００μＬずつ添加した。ＧＫ２及び植物抽出物の終濃度は表２に示す濃度とした。
（ｉｉ）「ＧＫ２処理」（対照検体）には、ＧＫ２溶液とＬＰＳ溶液をそれぞれ５００
μＬずつ添加した。
（ｉｉｉ）「ＬＰＳ処理」（対照検体）には、ＬＰＳ溶液とコントロール溶液をそれぞ
れ５００μＬずつ添加した。
（ｉｖ）「無処理」（対照検体）には、Ｋ－ＳＦＭ培地とコントロール溶液をそれぞれ
５００μＬずつ添加した。
（２）ＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いて、細胞からトータ
ルＲＮＡを抽出・精製した。
【0054】
７．ｍＲＮＡ発現量の測定
（ＲＴ－ＰＣＲ）
細胞から抽出したＲＮＡをＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｒ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｃＤＮＡ
Ｍａｓｔｅｒ（Ｒｏｃｈｅ社製）を用いて、ＲＴ－ＰＣＲ法によりｃＤＮＡを合成した
。
（ＲＴ－ＰＣＲ）
細胞から抽出したＲＮＡをＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｒ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｃＤＮＡ
Ｍａｓｔｅｒ（Ｒｏｃｈｅ社製）を用いて、ＲＴ－ＰＣＲ法によりｃＤＮＡを合成した
。
【0055】
（リアルタイムＰＣＲ）
ＦａｓｔＳｔａｒｔ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ＤＮＡ Ｇｒｅｅｎ Ｍａｓｔｅｒ（Ｒｏ
ｃｈｅ社製）を用いてリアルタイムＰＣＲを実施した。なお、９５℃で６０秒を１サイク
ル、９５℃で１０秒および６０℃で３０秒のサイクルを計４５サイクルとして、リアルタ
イムＰＣＲを行った。使用したＰｒｉｍｅｒを下記に示す。
・ＧＡＰＤＨ
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＣＡＣＣＧＴＣＡＡＧＧＣＴＧＡＧＡＡＣ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＧＧＴＧＡＡＧＡＣＧＣＣＡＧＴＧＧＡ－３’
・ＩＬ－６
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＣＣＡＧＡＧＣＴＧＴＧＣＡＧＡＴＧＡＧ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＣＡＧＣＡＧＧＣＴＧＧＣＡＴＴＴＧ－３’
・Ｈｕｍａｎ ＴＮＦ－α
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＡＣＡＡＣＣＣＴＣＡＧＡＣＧＣＣＡＣＡＴ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＴＧＧＡＧＣＣＧＴＧＧＧＴＣＡＧＴＡＴ－３
’
ＦａｓｔＳｔａｒｔ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ＤＮＡ Ｇｒｅｅｎ Ｍａｓｔｅｒ（Ｒｏ
ｃｈｅ社製）を用いてリアルタイムＰＣＲを実施した。なお、９５℃で６０秒を１サイク
ル、９５℃で１０秒および６０℃で３０秒のサイクルを計４５サイクルとして、リアルタ
イムＰＣＲを行った。使用したＰｒｉｍｅｒを下記に示す。
・ＧＡＰＤＨ
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＣＡＣＣＧＴＣＡＡＧＧＣＴＧＡＧＡＡＣ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＧＧＴＧＡＡＧＡＣＧＣＣＡＧＴＧＧＡ－３’
・ＩＬ－６
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＣＣＡＧＡＧＣＴＧＴＧＣＡＧＡＴＧＡＧ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＴＣＡＧＣＡＧＧＣＴＧＧＣＡＴＴＴＧ－３’
・Ｈｕｍａｎ ＴＮＦ－α
Ｆｏｒｗａｒｄ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＡＣＡＡＣＣＣＴＣＡＧＡＣＧＣＣＡＣＡＴ－３
’
Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｐｒｉｍｅｒ：５’－ＧＴＧＧＡＧＣＣＧＴＧＧＧＴＣＡＧＴＡＴ－３
’
【0056】
［結果］
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたとき
の各検体の数値（相対発現量）を表２に示す。なお、表２中のＩＬ－６の相対発現量は合
計３回試験を行った平均を示している。
また、ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＴＮＦ－αの相対発現量を１と
したときの各検体の数値（相対発現量）を表３に示す。なお、表３中のＴＮＦ－αの相対
発現量は合計５回試験を行った平均を示している。
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたとき
の各検体の数値（相対発現量）を表２に示す。なお、表２中のＩＬ－６の相対発現量は合
計３回試験を行った平均を示している。
また、ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＴＮＦ－αの相対発現量を１と
したときの各検体の数値（相対発現量）を表３に示す。なお、表３中のＴＮＦ－αの相対
発現量は合計５回試験を行った平均を示している。
【0057】
【表2】
【0058】
【表3】
【0059】
表２、３の結果から分かるとおり、グリチルリチン酸ジカリウムに加えて、スギナ、セ
イヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ、又はセージの抽出物を加えた場合
、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、ＩＬ－６やＴＮＦ－αのｍＲＮＡ発
現量が減少した。
したがって、スギナ、セイヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ、又はセ
ージの抽出物を選択し、グリチルリチン酸ジカリウムに加えることによって、抗炎症効果
が向上することが確認された。
イヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ、又はセージの抽出物を加えた場合
、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、ＩＬ－６やＴＮＦ－αのｍＲＮＡ発
現量が減少した。
したがって、スギナ、セイヨウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ、又はセ
ージの抽出物を選択し、グリチルリチン酸ジカリウムに加えることによって、抗炎症効果
が向上することが確認された。
【0060】
実施例２：ＴＮＦ-αのタンパク質発現量を指標とした抗炎症効果の評価
（実施例２－１）
本試験では、Ｐ．ｇ．由来ＬＰＳで細胞に炎症を惹起した細胞について、炎症性サイト
カインの１種であるＴＮＦ-αのタンパク質発現量を下記のＥＬＩＳＡ法で測定すること
により、本発明の抗炎症組成物の抗炎症効果を評価した。
（実施例２－１）
本試験では、Ｐ．ｇ．由来ＬＰＳで細胞に炎症を惹起した細胞について、炎症性サイト
カインの１種であるＴＮＦ-αのタンパク質発現量を下記のＥＬＩＳＡ法で測定すること
により、本発明の抗炎症組成物の抗炎症効果を評価した。
【0061】
［方法］
１．１０質量％ＦＢＳ添加ＲＰＭＩ１６４０培地に１０ｎＭ ＰＭＡを加え、ＴＨＰ－１
細胞を１０５個／ｗｅｌｌずつ２４ｗｅｌｌプレートに播種して７日間培養し、マクロフ
ァージ様に分化誘導した。
２．分化誘導を確認した後、１質量％ＦＢＳ添加ＲＰＭＩ１６４０培地に交換し、２４時
間培養した。
３．後述の被検体をＲＰＭＩ１６４０培地で５０００倍希釈した希釈被検体液１ｍＬを細
胞に添加し、２時間後に希釈被検体液を除去した。その後、ＲＰＭＩ１６４０培地で１回
洗浄し、Ｐ．ｇ．由来ＬＰＳ（０．２μｇ／ｍＬ、１質量％ＦＢＳ添加培地）で細胞を刺
激した。
４．刺激６時間後に上清を回収してＥＬＩＳＡ法にてＴＮＦ-αタンパク質の量を測定し
た。
１．１０質量％ＦＢＳ添加ＲＰＭＩ１６４０培地に１０ｎＭ ＰＭＡを加え、ＴＨＰ－１
細胞を１０５個／ｗｅｌｌずつ２４ｗｅｌｌプレートに播種して７日間培養し、マクロフ
ァージ様に分化誘導した。
２．分化誘導を確認した後、１質量％ＦＢＳ添加ＲＰＭＩ１６４０培地に交換し、２４時
間培養した。
３．後述の被検体をＲＰＭＩ１６４０培地で５０００倍希釈した希釈被検体液１ｍＬを細
胞に添加し、２時間後に希釈被検体液を除去した。その後、ＲＰＭＩ１６４０培地で１回
洗浄し、Ｐ．ｇ．由来ＬＰＳ（０．２μｇ／ｍＬ、１質量％ＦＢＳ添加培地）で細胞を刺
激した。
４．刺激６時間後に上清を回収してＥＬＩＳＡ法にてＴＮＦ-αタンパク質の量を測定し
た。
【0062】
炎症抑制率は下記の式を用いて算出し、下記「ＧＫ２処理」の炎症抑制率を１．０とし
た場合の各検体における炎症抑制率を求めた。
「ＧＫ２処理」の炎症抑制率＝（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「ＧＫ２処理」のＴ
ＮＦ-α量）／（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「無処理」のＴＮＦ-α量）
各検体における炎症抑制率＝｛（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－各検体のＴＮＦ-α量
）／（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「無処理」のＴＮＦ-α量）｝／「ＧＫ２処理」の
炎症抑制率
式中、「ＬＰＳ処理のＴＮＦ-α量」とは、上記方法３．において、希釈被検体液の代
わりに液体培地を用いて試験を行った際のＴＮＦ-α量を示す。
また、「無処理のＴＮＦ-α量」とは、ＬＰＳ刺激を行わずに、代わりに１質量％ＦＢ
Ｓ ＲＰＭＩ培地で６時間培養した際の上清を用いて試験を行った際のＴＮＦ-α量を示
す。
た場合の各検体における炎症抑制率を求めた。
「ＧＫ２処理」の炎症抑制率＝（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「ＧＫ２処理」のＴ
ＮＦ-α量）／（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「無処理」のＴＮＦ-α量）
各検体における炎症抑制率＝｛（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－各検体のＴＮＦ-α量
）／（「ＬＰＳ処理」のＴＮＦ-α量－「無処理」のＴＮＦ-α量）｝／「ＧＫ２処理」の
炎症抑制率
式中、「ＬＰＳ処理のＴＮＦ-α量」とは、上記方法３．において、希釈被検体液の代
わりに液体培地を用いて試験を行った際のＴＮＦ-α量を示す。
また、「無処理のＴＮＦ-α量」とは、ＬＰＳ刺激を行わずに、代わりに１質量％ＦＢ
Ｓ ＲＰＭＩ培地で６時間培養した際の上清を用いて試験を行った際のＴＮＦ-α量を示
す。
【0063】
［被検体］
・植物抽出物含有検体：ＧＫ２ １質量％＋ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミ
カルズ社製、ＨＣＯ－１００）＋植物抽出物（ＧＫ２の終濃度が２．０質量ｐｐｍ、植物
抽出物の終濃度が０．０５質量ｐｐｍまたは０．０１質量ｐｐｍになるように添加）
・ＧＫ２処理：ＧＫ２ １質量％＋ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社
製、ＨＣＯ－１００）（ＧＫ２の終濃度が２．０質量ｐｐｍになるように添加）
・植物抽出物含有検体：ＧＫ２ １質量％＋ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミ
カルズ社製、ＨＣＯ－１００）＋植物抽出物（ＧＫ２の終濃度が２．０質量ｐｐｍ、植物
抽出物の終濃度が０．０５質量ｐｐｍまたは０．０１質量ｐｐｍになるように添加）
・ＧＫ２処理：ＧＫ２ １質量％＋ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社
製、ＨＣＯ－１００）（ＧＫ２の終濃度が２．０質量ｐｐｍになるように添加）
【0064】
［結果］
結果を表２に示す。なお、用いた植物抽出物は下記のとおりである。
・スギナ：丸善製薬社製、（製品名）スギナ抽出液ＢＧ
・セイヨウサンザシ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックス セイヨウサン
ザシＢ
・シャクヤク：丸善製薬社製、（製品名）シャクヤク抽出液ＢＧ－ＪＣ
・ドクダミ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスドクダミＢ
・シナノキ：丸善製薬社製、（製品名）シナノキ抽出液ＢＧ－Ｊ
・チャ：丸善製薬社製、（製品名）緑茶抽出液ＢＧ
・ユリ：丸善製薬社製、（製品名）ユリ抽出液ＢＧ
・海藻：一丸ファルコス社製、（製品名）ＩＰＦ－１００Ｋ
結果を表２に示す。なお、用いた植物抽出物は下記のとおりである。
・スギナ：丸善製薬社製、（製品名）スギナ抽出液ＢＧ
・セイヨウサンザシ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックス セイヨウサン
ザシＢ
・シャクヤク：丸善製薬社製、（製品名）シャクヤク抽出液ＢＧ－ＪＣ
・ドクダミ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスドクダミＢ
・シナノキ：丸善製薬社製、（製品名）シナノキ抽出液ＢＧ－Ｊ
・チャ：丸善製薬社製、（製品名）緑茶抽出液ＢＧ
・ユリ：丸善製薬社製、（製品名）ユリ抽出液ＢＧ
・海藻：一丸ファルコス社製、（製品名）ＩＰＦ－１００Ｋ
【0065】
【表4】
【0066】
表４の結果から分かるとおり、グリチルリチン酸ジカリウムに加えて、スギナ、セイヨ
ウサンザシ、又はシャクヤクの抽出物を加えた場合、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理
」と比較して、炎症抑制率が高い結果となった。
一方、植物抽出物であっても、ドクダミ、シナノキ、チャ、ユリ、又は海藻の抽出物を
加えた場合は、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、炎症抑制率が低い結果
となった。
ウサンザシ、又はシャクヤクの抽出物を加えた場合、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理
」と比較して、炎症抑制率が高い結果となった。
一方、植物抽出物であっても、ドクダミ、シナノキ、チャ、ユリ、又は海藻の抽出物を
加えた場合は、植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、炎症抑制率が低い結果
となった。
【0067】
（実施例２－２）
本試験では、Ａ．ａ．由来ＬＰＳで細胞に炎症を惹起した細胞について、炎症性サイト
カインの１種であるＴＮＦ-αのタンパク質発現量を下記のＥＬＩＳＡ法で測定すること
により、本発明の抗炎症組成物の抗炎症効果を評価した。
なお、グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）溶液、植物抽出物溶液、ＬＰＳ溶液、コ
ントロール溶液および供試細胞は、上記実施例１－４と同様に調製したものを使用した。
本試験では、Ａ．ａ．由来ＬＰＳで細胞に炎症を惹起した細胞について、炎症性サイト
カインの１種であるＴＮＦ-αのタンパク質発現量を下記のＥＬＩＳＡ法で測定すること
により、本発明の抗炎症組成物の抗炎症効果を評価した。
なお、グリチルリチン酸ジカリウム（ＧＫ２）溶液、植物抽出物溶液、ＬＰＳ溶液、コ
ントロール溶液および供試細胞は、上記実施例１－４と同様に調製したものを使用した。
【0068】
［方法］
１．供試細胞から培地を除いたのち、その後ＧＫ２溶液、植物抽出物溶液、ＬＰＳ溶液、
コントロール溶液を、下記（ｉ）～（ｉｖ）のとおり添加した。
（ｉ）各検体（植物抽出物含有検体）には、各種植物抽出物溶液とＬＰＳ溶液をそれぞ
れ５０μＬずつ添加した。ＧＫ２及び植物抽出物の終濃度は表５に示す濃度とした。
（ｉｉ）「ＧＫ２処理」（対照検体）には、ＧＫ２溶液とＬＰＳ溶液をそれぞれ５０μ
Ｌずつ添加した。
（ｉｉｉ）「ＬＰＳ処理」（対照検体）には、ＬＰＳ溶液とコントロール溶液をそれぞ
れ５０μＬずつ添加した。
（ｉｖ）「無処理」（対照検体）には、Ｋ－ＳＦＭ培地とコントロール溶液をそれぞれ
５０μＬずつ添加した。
２．各検体をＣＯ２インキュベーター（ＣＯ２：５％、３７℃）内に静置し、６時間後に
細胞および上清を回収した。
３．Ｈｕｍａｎ ＴＮＦ－ａｌｐｈａ ＤｕｏＳｅｔ ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅ
ｍｓ社製）を用いてメーカー指定の手順に従い実施した。
４．炎症抑制率は上記実施例２－１と同様に求めた。
１．供試細胞から培地を除いたのち、その後ＧＫ２溶液、植物抽出物溶液、ＬＰＳ溶液、
コントロール溶液を、下記（ｉ）～（ｉｖ）のとおり添加した。
（ｉ）各検体（植物抽出物含有検体）には、各種植物抽出物溶液とＬＰＳ溶液をそれぞ
れ５０μＬずつ添加した。ＧＫ２及び植物抽出物の終濃度は表５に示す濃度とした。
（ｉｉ）「ＧＫ２処理」（対照検体）には、ＧＫ２溶液とＬＰＳ溶液をそれぞれ５０μ
Ｌずつ添加した。
（ｉｉｉ）「ＬＰＳ処理」（対照検体）には、ＬＰＳ溶液とコントロール溶液をそれぞ
れ５０μＬずつ添加した。
（ｉｖ）「無処理」（対照検体）には、Ｋ－ＳＦＭ培地とコントロール溶液をそれぞれ
５０μＬずつ添加した。
２．各検体をＣＯ２インキュベーター（ＣＯ２：５％、３７℃）内に静置し、６時間後に
細胞および上清を回収した。
３．Ｈｕｍａｎ ＴＮＦ－ａｌｐｈａ ＤｕｏＳｅｔ ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅ
ｍｓ社製）を用いてメーカー指定の手順に従い実施した。
４．炎症抑制率は上記実施例２－１と同様に求めた。
【0069】
［結果］
結果を表５に示す。なお、用いた植物抽出物は実施例２－１と同様である。
結果を表５に示す。なお、用いた植物抽出物は実施例２－１と同様である。
【0070】
【表5】
【0071】
表５の結果から分かるとおり、グリチルリチン酸ジカリウムに加えて、スギナ、セイヨ
ウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ、またはセージの抽出物を加えた場合、
植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、炎症抑制率が高い結果となった。
ウサンザシ、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ、またはセージの抽出物を加えた場合、
植物抽出物を加えない「ＧＫ２処理」と比較して、炎症抑制率が高い結果となった。
【0072】
以上の実施例の結果より、グリチルリチン酸又はその塩と、スギナ、セイヨウサンザシ
、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なく
とも１つの抽出物を含有する組成物は、抗炎症効果を有することがわかった。
、シャクヤク、ハマメリス、シラカバ及びセージの抽出物からなる群より選ばれる少なく
とも１つの抽出物を含有する組成物は、抗炎症効果を有することがわかった。
【図1】
【図2】
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2023-03-17
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
グリチルリチン酸又はその塩と、セイヨウサンザシ、ハマメリス、シャクヤク、及びセージのアルコール類による抽出物からなる群より選ばれる少なくとも１つの抽出物を含有する、口腔用の抗炎症組成物。
【請求項2】
グリチルリチン酸又はその塩と、セイヨウサンザシ、スギナ、ハマメリス、シャクヤク、セージ、及びシラカバのアルコール類による抽出物からなる群より選ばれる少なくとも２つの抽出物を含有する、口腔用の抗炎症組成物（但し、グリチルリチン酸又はその塩と、スギナのアルコール類による抽出物と、シラカバのアルコール類による抽出物とを含有する、口腔用の抗炎症組成物を除く）。
【手続補正2】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0042】
［結果］
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたときの各検体の数値（相対発現量）を図１に示す（各検体及び「ＧＫ２処理」のみ図示）。なお、図１中のＩＬ－６の相対発現量は合計２回試験を行った平均を示している。
また、図１中の各種植物抽出物は下記のものを使用した。
・スギナ：丸善製薬社製、（製品名）スギナ抽出液ＢＧ
・セイヨウサンザシ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックス セイヨウサンザシＢ
・シャクヤク：丸善製薬社製、（製品名）シャクヤク抽出液ＢＧ－ＪＣ
・ハマメリス：丸善製薬社製、（製品名）ハマメリス抽出液ＢＧ‐Ｊ
・シラカバ：丸善製薬社製、（製品名）シラカバ抽出液ＢＧ
・セージ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスセージＢ
・ドクダミ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスドクダミＢ
ＧＡＰＤＨの発現量で補正した「ＧＫ２処理」のＩＬ－６の相対発現量を１としたときの各検体の数値（相対発現量）を図１に示す（各検体及び「ＧＫ２処理」のみ図示）。なお、図１中のＩＬ－６の相対発現量は合計２回試験を行った平均を示している。
また、図１中の各種植物抽出物は下記のものを使用した。
・スギナ：丸善製薬社製、（製品名）スギナ抽出液ＢＧ
・セイヨウサンザシ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックス セイヨウサンザシＢ
・シャクヤク：丸善製薬社製、（製品名）シャクヤク抽出液ＢＧ－ＪＣ
・ハマメリス：丸善製薬社製、（製品名）ハマメリス抽出液ＢＧ‐Ｊ
・シラカバ：丸善製薬社製、（製品名）シラカバ抽出液ＢＧ
・セージ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスセージＢ
・ドクダミ：一丸ファルコス社製、（製品名）ファルコレックスドクダミＢ