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特開2023-55601ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１分離株及びその使用

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023055601

(43)【公開日】2023-04-18

(54)【発明の名称】ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１分離株及びその使用

(51)【国際特許分類】

C12N 1/20 20060101AFI20230411BHJP

A61K 35/747 20150101ALI20230411BHJP

A61P 3/00 20060101ALI20230411BHJP

A61P 3/04 20060101ALI20230411BHJP

A61P 3/10 20060101ALI20230411BHJP

A61P 3/06 20060101ALI20230411BHJP

A61P 1/16 20060101ALI20230411BHJP

【ＦＩ】

C12N1/20 A

A61K35/747

A61P3/00

A61P3/04

A61P3/10

A61P3/06

A61P1/16

【審査請求】有

【請求項の数】7

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2022001515

(22)【出願日】2022-01-07

(31)【優先権主張番号】110137219

(32)【優先日】2021-10-06

(33)【優先権主張国・地域又は機関】TW

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り（その１）開催日２０２１年１月８日開催場所高雄醫學大學研究所（その２）ウェブサイトの掲載日２０２１年１月２５日ウェブサイトのアドレスｈｔｔｐｓ：／／ｈｄｌ．ｈａｎｄｌｅ．ｎｅｔ／１１２９６／ｅ２ｂｑｆａ

(71)【出願人】

【識別番号】522010303

【氏名又は名称】樂牧生技股▲フン▼有限公司

(74)【代理人】

【識別番号】110000796

【氏名又は名称】弁理士法人三枝国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】謝豐欽

(72)【発明者】

【氏名】呉慶軒

(72)【発明者】

【氏名】林志傑

【テーマコード（参考）】

4B065

4C087

【Ｆターム（参考）】

4B065AA30X

4B065CA41

4B065CA44

4C087AA01

4C087AA02

4C087AA03

4C087BC56

4C087CA08

4C087MA52

4C087MA55

4C087NA14

4C087ZA70

4C087ZA75

4C087ZC21

4C087ZC33

4C087ZC35

(57)【要約】

【課題】メタボリック代謝症候群関連疾患の予防や治療に有効な微生物を提供する。
【解決手段】台湾の財団法人食品工業發展研究所のバイオソース収集・研究センターに寄託番号ＢＣＲＣ９１１０３７で寄託されているラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１。
【選択図】図２

【特許請求の範囲】

【請求項1】

台湾の財団法人食品工業發展研究所のバイオソース収集・研究センターに寄託番号ＢＣＲＣ９１１０３７で寄託されているラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１。

【請求項2】

請求項１に記載のラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１を有効成分として含み、メタボリック代謝症候群関連疾患の予防や治療に使用されることを特徴とする組成物。

【請求項3】

前記メタボリック代謝症候群関連疾患は、肥満、高血糖症、糖尿病、脂質異常症、高脂血症、脂肪肝及びそれらの組み合わせからなる群より選択されることを特徴とする請求項２に記載の組成物。

【請求項4】

食品組成物であることを特徴とする請求項２または請求項３に記載の組成物。

【請求項5】

医薬品組成物であることを特徴とする請求項２または請求項３に記載の組成物。

【請求項6】

前記医薬品組成物は、薬学的に許容可能な担体を更に含むことを特徴とする請求項５に記載の組成物。

【請求項7】

前記医薬品組成物は、非経腸投与、経口投与または局所投与の剤形になっていることを特徴とする請求項５または請求項６に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、台湾の微生物寄託機関である財団法人食品工業發展研究所（ＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＩｎｓｔｉｔｕｔｅ、ＦＩＲＤＩ）のバイオソース収集・研究センター（ＢｉｏｓｏｕｒｃｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎａｎｄＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ、ＢＣＲＣ）に寄託番号ＢＣＲＣ９１１０３７で寄託されているラクトバチルス・パラカセイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐａｒａｃａｓｅｉ）ＬＭ－１４１分離株に関し、該ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１分離株は、メタボリック代謝症候群関連疾患（ｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ－ｒｅｌａｔｅｄｄｉｓｏｒｄｅｒｓ)の予防や治療に使用されることができる。

【背景技術】

【0002】

人体が過量の高脂質食品を摂取する上、充分な運動をしていないと、余分のカロリー（食物から得られる栄養学的熱量）が、脂肪の形で脂肪組織（ａｄｉｐｏｓｅｔｉｓｓｕｅ）に蓄積されて、体脂肪（ｂｏｄｙｆａｔ）になる。

【0003】

人の体内の体脂肪の蓄積が正常ではない場合、または脂肪代謝（ｆａｔｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ）に異常がある場合、例えば肥満（ｏｂｅｓｉｔｙ）、高トリグリセリド血症（ｈｙｐｅｒｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｍｉａ）、糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ）、高血圧（ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ）、心臓血管疾患（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅ、ＣＶＤｓ）などのメタボリック代謝症候群関連疾患に罹る可能性がある。

【0004】

現在、臨床でメタボリック代謝症候群関連疾患の予防や治療に使用される方法は、食事制限と運動以外、抗肥満薬（ａｎｔｉ－ｏｂｅｓｉｔｙｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）、血糖降下薬（ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉｃａｇｅｎｔｓ）または脂質低下薬（ｈｙｐｏｌｉｐｉｄｅｍｉｃａｇｅｎｔｓ）の服用を含む。しかし、上記の薬の長期服用は、希望の効果が得られないだけでなく更には患者に厳重な副作用（ｓｉｄｅｅｆｆｅｃｔｓ）をもたらす可能性がある。従って、この技術分野に関連する研究者は、メタボリック代謝症候群関連疾患の有効な予防や治療が可能であり且つ望まない副作用が生じない薬物の開発に取り組んでいる。

【0005】

乳酸菌（ｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａ、ＬＡＢ）は、一般に安全と認められ（ｇｅｎｅｒａｌｌｙｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄａｓｓａｆｅ、ＧＲＡＳ）、且つ、広く知られて使用されているプロバイオティクス（ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ）である。

【0006】

そのような乳酸菌は、ラクトバシラス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス属（レンサ球菌属）（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）などを含む。

【0007】

従来の研究により、ラクトバチルス・パラカセイ（またはラクチカゼイバチルス・パラカセイ（Ｌａｃｔｉｃａｓｅｉｂａｃｉｌｌｕｓｐａｒａｃａｓｅｉ）と称する）は、抗肥満、及び、血中や体内の脂質を低下させるなどの効果がある。例えば、非特許文献１では、高脂肪飼料誘発された肥満［ｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔ（ＨＦＤ）－ｉｎｄｕｃｅｄｏｂｅｓｉｔｙ］のラットに対して、ラクトバチルス・パラカセイＳＴ１１を投与することにより、ラクトバチルス・パラカセイＳＴ１１に、ラットの体重を低減し且つ腹部の脂肪重量を減らす効果があることを発見したと示されている。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0008】

【非特許文献1】ＴａｎｉｄａＭ．ｅｔａｌ．（２００８），Ｏｂｅｓ．Ｒｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｐｒａｃｔ．，ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｏｒｃｐ．２００８．０４．００３

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

しかし、業界においては、非特許文献１に記載されている微生物以外にも、メタボリック代謝症候群関連疾患の予防や治療に有効な微生物が尚も求められている。

【課題を解決するための手段】

【0010】

本願発明者は１種のラクトバチルス分離株の分離に成功し、該分離株は特徴鑑定によりラクトバチルス・パラカセイに属するので、本願出願人によりラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１と命名され、台湾の財団法人食品工業發展研究所のバイオソース収集・研究センターに寄託番号ＢＣＲＣ９１１０３７で寄託されている。

【0011】

そこで本発明は、台湾の財団法人食品工業發展研究所のバイオソース収集・研究センターに寄託番号ＢＣＲＣ９１１０３７で寄託されているラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１を提供する。

【0012】

また、本発明は、上記のラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１を有効成分として含んでいて、メタボリック代謝症候群関連疾患の予防や治療に使用されることを特徴とする組成物を提供する。

【発明の効果】

【0013】

ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１は、生体内の（ｉｎｖｉｖｏ）の実験により、高脂肪飼料（ＨＦＤ）誘発された肥満のラットに対して、体重、体脂肪、血糖を低減する効果と、耐糖能性（ｇｌｕｃｏｓｅｔｏｌｅｒａｎｃｅ）とインスリン抵抗性（ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）とを改善する効果と、脂質異常症（ｄｙｓｌｉｐｉｄｅｍｉａ）及び肝臓の脂肪の蓄積を遅らせる効果とを有するので、本願発明者は、ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１においてメタボリック代謝症候群関連疾患を予防や治療する薬などに発展する潜在能力が高いと考えている。

【0014】

すなわち、本発明のラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１は、メタボリック代謝症候群関連疾患の予防や治療に使用することができる。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1】各群のラットで経口ブドウ糖負荷試験（ｏｒａｌｇｌｕｃｏｓｅｔｏｌｅｒａｎｃｅｔｅｓｔ）を行って得られた血糖濃度－時間曲線（ｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ－ｔｉｍｅｃｕｒｖｅ）を示す図である。一般対照群は特に処理されていないラットであり、病態対照群は高脂肪飼料が与えられたラットであり、実験群１はラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の実験菌液１が投与され且つＨＦＤが与えられたラットであり、実験群２はラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の実験菌液２が投与され且つＨＦＤが与えられたラットであり、“＊”は一般対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示し、“＃” は病態対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示す。

【図2】投与開始から４週、９週、１４週が経過した時の、上記各群のラットの空腹時血糖値を示す図である。“＊”または“＊＊＊”は一般対照群と比べてｐ＜０．０５またはｐ＜０．００１であることを示し、“＃＃” は病態対照群と比べてｐ＜０．０１であることを示す。

【図3】投与開始から１４週が経過した時の、上記各群のラットの恒常性モデル評価のインスリン抵抗性（ＨＯＭＡ－ＩＲ）指数を示す図である。“＊”は一般対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示し、“＃” は病態対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示す。

【図4】投与開始から１４週が経過した時の、上記各群のラットの血清中の総コレステロール濃度を示す図である。“＊”は一般対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示し、“＃” は病態対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示す。

【図5】投与開始から１４週が経過した時の、上記各群のラットの血清中のトリグリセリド濃度を示す図である。“＊”は一般対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示し、“＃”または“＃＃”は病態対照群と比べてｐ＜０．０５またはｐ＜０．０１であることを示す。

【図6】投与開始から１４週が経過した時の、上記各群のラットの血清中の低密度リポタンパク質／高密度リポタンパク質（ＬＤＬ／ＨＤＬ）比率を示す図である。“＊”は一般対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示し、“＃” は病態対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示す。

【図7】投与開始から１４週が経過した時の、上記各群のラットの血清中のアスパラギン酸アミノ基転移酵素/アラニンアミノ基転移酵素（ＡＳＴ／ＡＬＴ）比率を示す図である。“＊”は一般対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示し、“＃” は病態対照群と比べてｐ＜０．０５であることを示す。

【図8】投与開始から１４週が経過した時の、上記各群のラットの肝臓組織がオイルレッドＯ（ＯｉｌＲｅｄＯ）により染色された後観察された結果を示す図である。矢印は脂肪滴（ｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓ）の蓄積を指す。

【図9】投与開始から１４週が経過した時の、上記各群のラットの肝臓組織がヘマトキシリン－エオシン（ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－ｅｏｓｉｎ）染色により染色された後観察された結果を示す図である。矢印は脂肪空胞（ｆａｔｖａｃｕｏｌｅｓ）の蓄積を指す。

【発明を実施するための形態】

【0016】

まず、何らかの先行技術文献が本明細書において引用されても、台湾またはいかなる国においても、該先行技術文献の内容が本発明の属する分野における一般知識であることを示すものではないことを理解されたい。

【0017】

また、「含む」という用語は「含むが、これに限定されない」ことを意味し、「有する」という用語もこれに対応する意味を有することも理解されたい。

【0018】

他に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、本開示が属する分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。当業者であれば、本開示の実施において、本明細書に記載のものと類似又は同等の多くの方法及び材料を認識し、利用することができる。実際、本開示は記載された方法及び材料に決して限定されない。

【0019】

本発明は、台湾の財団法人食品工業發展研究所のバイオソース収集・研究センター（ＢＣＲＣｏｆＦＩＲＤＩ）に寄託番号ＢＣＲＣ９１１０３７で寄託されているラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１分離株を提供する。

【0020】

本発明は、また、ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１を有効成分として含み、メタボリック代謝症候群関連疾患の予防や治療に使用される組成物を提供する。

【0021】

本明細書で使用する場合、「メタボリック代謝症候群（ｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ）」という用語は、個体において慢性の代謝異常により１つ以上の関連疾患が（多数の場合には同時に）発生することを指す。

【0022】

ここでいうメタボリック代謝症候群関連疾患は、具体的には例えば、これらに限らないが、メタボリック代謝症候群、肥満、高血糖症（ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ）、高インスリン血症（ｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎｅｍｉａ）、糖尿病[２型真性糖尿病（ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ、Ｔ２ＤＭ）を含む]及びそれによる合併症（ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ） [例えば、糖尿病性網膜症（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ）、糖尿病性白内障（ｄｉａｂｅｔｉｃｃａｔａｒａｃｔ）、糖尿病性神経障害（ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）、糖尿病性ネフロパシー腎症（ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ）及び糖尿病性心筋症（ｄｉａｂｅｔｉｃｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ）など]、脂質異常症（ｄｙｓｌｉｐｉｄｅｍｉａ）[高脂血症（ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａ）、高トリグリセリド血症（ｈｙｐｅｒｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｍｉａ）、高コレステロール血症（ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ）及び高リポタンパク血症（ｈｙｐｅｒｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｅｍｉａ）を含む]、高血圧、心臓血管疾患[例えば、冠動脈疾患（ｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｙｄｉｓｅａｓｅｓ、ＣＡＤｓ）、心筋梗塞（ｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ）、脳卒中（ｓｔｒｏｋｅ）、心不全（ｈｅａｒｔｆａｉｌｕｒｅ）、狭心症（ａｎｇｉｎａｐｅｃｔｏｒｉｓ）及び心不整脈（ｃａｒｄｉａｃａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ）など]、脂肪肝（ｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ） [また肝脂肪変性（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅａｔｏｓｉｓ）と称し、急性脂肪肝（ａｃｕｔｅｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ）、慢性脂肪肝（ｃｈｒｏｎｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ）、大滴性の脂肪肝（ｍａｃｒｏｖｅｓｉｃｕｌａｒｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ）、小滴性脂肪肝（ｍｉｃｒｏｖｅｓｉｃｕｌａｒｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ）及び非アルコール性脂肪性肝疾患（ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅ、ＮＡＦＬＤ）を含む]、肝線維症（ｈｅｐａｔｉｃｆｉｂｒｏｓｉｓ）、肝硬変（ｃｉｒｒｈｏｓｉｓ）を含むことができる。

【0023】

好ましくは、メタボリック代謝症候群関連疾患は、肥満である。

【0024】

好ましくは、メタボリック代謝症候群関連疾患は、２型真性糖尿病（Ｔ２ＤＭ）である。

【0025】

本明細書で使用する場合、メタボリック代謝症候群関連疾患に対する用語「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、該疾患の重症度（ｓｅｖｅｒｉｔｙ）または該疾患の症状（ｓｙｍｐｔｏｍ）が低減される（ｒｅｄｕｃｅｄ）、あるいは、該疾患が部分的に（ｐａｒｔｉａｌｌｙ）または完全に（ｅｎｔｉｒｅｌｙ）取り除かれる（ｅｌｉｍｉｎａｔｅｄ）ようにすることを指す。

【0026】

本明細書で使用する場合、メタボリック代謝症候群関連疾患に対する用語「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」又は「予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」は、個体が診査により該疾患を罹患していない時に、該疾患の発生率（ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ）を削減（ｅｌｉｍｉｎａｔｅ）または低減し（ｒｅｄｕｃｅ）、及び、該疾患の可能性（ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ）または確率（ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）を遅らせ（ｓｌｏｗ）、遅延（ｄｅｌａｙ）、制御（ｃｏｎｔｒｏｌ）または減らす（ｄｅｃｒｅａｓｅ）ことを指す。

【0027】

本発明において、ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１は、生菌、死菌、濃縮された（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄ）、未濃縮（ｎｏｎ－ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄ）、液体（ｌｉｑｕｉｄ）、ペースト（ｐａｓｔｅ）、半固形（ｓｅｍｉ－ｓｏｌｉｄ）、固形（ｓｏｌｉｄ） [例えば、ペレット（ｐｅｌｌｅｔ）、顆粒（ｇｒａｎｕｌｅ）または粉末（ｐｏｗｄｅｒ）]、加熱不活性化した（ｈｅａｔ－ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ）、冷凍（ｆｒｏｚｅｎ）、乾燥した（ｄｒｉｅｄ）、凍結乾燥した（ｆｒｅｅｚｅ－ｄｒｉｅｄ）[例えば、凍結乾燥またはスプレー／流動床乾燥（ｓｐｒａｙ／ｆｌｕｉｄｂｅｄｄｒｉｅｄ）] の形態であり得る。本発明の好ましい具体例において、ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１は生菌の形態である。

【0028】

本発明において、前記組成物は、食品組成物（ｆｏｏｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）とすることができ、例えば食品添加物（ｆｏｏｄａｄｄｉｔｉｖｅ）の形態で、食用材料（ｅｄｉｂｌｅｍａｔｅｒｉａｌ）に添加されて、人や動物が食用するための食品製品に作成することができる。本発明において、該食品製品の例として、これらに限らないが、牛乳（ｍｉｌｋ）や濃縮乳（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄｍｉｌｋ）などの液状乳製品（ｆｌｕｉｄｍｉｌｋｐｒｏｄｕｃｔｓ）、ヨーグルト（ｙｏｇｕｒｔ）やサワーミルク（ｓｏｕｒｍｉｌｋ）やフローズンヨーグルト（ｆｒｏｚｅｎｙｏｇｕｒｔ）などの発酵乳（ｆｅｒｍｅｎｔｅｄｍｉｌｋ）、粉ミルク（ｍｉｌｋｐｏｗｄｅｒ）、アイスクリーム（ｉｃｅｃｒｅａｍ）、クリームチーズ（ｃｒｅａｍｃｈｅｅｓｅｓ）、ドライチーズ（ｄｒｙｃｈｅｅｓｅｓ）、豆乳（ｓｏｙｂｅａｎｍｉｌｋ）、発酵豆乳（ｆｅｒｍｅｎｔｅｄｓｏｙｂｅａｎｍｉｌｋ）などの乳酸菌発酵飲料（ｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａｆｅｒｍｅｎｔｅｄｂｅｖｅｒａｇｅｓ）、野菜・フルーツジュース（ｖｅｇｅｔａｂｌｅ－ｆｒｕｉｔｊｕｉｃｅｓ）、フルーツジュース（ｆｒｕｉｔｊｕｉｃｅｓ）、スポーツドリンク（ｓｐｏｒｔｓｄｒｉｎｋｓ）、菓子（ｃｏｎｆｅｃｔｉｏｎｅｒｙ）、ゼリー（ｊｅｌｌｙ）、キャンディー（ｃａｎｄｉｅｓ）、乳児用調製粉乳（ｉｎｆａｎｔｆｏｒｍｕｌａ）などの乳児用食品（ｉｎｆａｎｔｆｏｏｄ）、漢方薬（Ｃｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂａｌｍｅｄｉｃｉｎｅ）などの健康食品（ｈｅａｌｔｈｆｏｏｄｓ）、動物用飼料（ａｎｉｍａｌｆｅｅｄｓ）、栄養補助食品（ｄｉｅｔａｒｙｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ）を含むことができる。

【0029】

本発明において、前記組成物は、医薬品組成物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）とすることができる。

【0030】

本発明において、該医薬品組成物は、非経口投与、非経腸投与（ｐａｒｅｎｔｅｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）、経口投与（ｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）または局所投与（ｔｏｐｉｃａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）の剤形（ｄｏｓａｇｅｆｏｒｍ）にすることができる。該医薬品組成物は、経口投与の剤形にすることが好ましい。

【0031】

本発明において、該医薬品組成物は、薬物の製造技術に広く使用されている薬学的に許容可能な担体（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙａｃｃｅｐｔａｂｌｅｃａｒｒｉｅｒ）を更に含むことができる。該薬学的に許容可能な担体は、以下に挙げられているもの及びそれらの組み合わせからなる群より選択されるものを含むことができ、例えば、溶剤（ｓｏｌｖｅｎｔ）、緩衝剤（ｂｕｆｆｅｒ）、乳化剤（ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒ）、懸濁剤（ｓｕｓｐｅｎｄｉｎｇａｇｅｎｔ）、分解剤（ｄｅｃｏｍｐｏｓｅｒ）、崩壊剤（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇａｇｅｎｔ）、分散剤（ｄｉｓｐｅｒｓｉｎｇａｇｅｎｔ）、結合剤（ｂｉｎｄｉｎｇａｇｅｎｔ）、賦形剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）、安定化剤（ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇａｇｅｎｔ）、キレート剤（ｃｈｅｌａｔｉｎｇａｇｅｎｔ）、希釈剤（ｄｉｌｕｅｎｔ）、ゲル化剤（ｇｅｌｌｉｎｇａｇｅｎｔ）、防腐剤（ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ）、湿潤剤（ｗｅｔｔｉｎｇａｇｅｎｔ）、潤滑剤（ｌｕｂｒｉｃａｎｔ）、吸収遅延剤（ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｄｅｌａｙｉｎｇａｇｅｎｔ）、リポソーム（ｌｉｐｏｓｏｍｅ）及びそれらと類似するものが挙げられる。前述の薬学的に許容可能な担体の選択及び量は、当業者の専門知識及び通常の技術の範囲内である。

【0032】

本発明において、該医薬品組成物は、当業者の専門的な知識技術により非経腸投与に適する剤形[注射品（ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、例えば、滅菌水溶液（ｓｔｅｒｉｌｅａｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕｔｉｏｎ）または分散液（ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ）を含む]に作成することができ、且つ、腹腔内注射（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、胸腔内注射（ｉｎｔｒａｐｌｅｕｒａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、筋肉内注射（ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、静脈内注射（ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、動脈内注射（ｉｎｔｒａａｒｔｅｒｉａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、関節内注射（ｉｎｔｒａａｒｔｉｃｕｌａｒｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、滑液嚢内注射（ｉｎｔｒａｓｙｎｏｖｉａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、髄腔内注射（ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、頭蓋内注射（ｉｎｔｒａｃｒａｎｉａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、表皮内注射（ｉｎｔｒａｅｐｉｄｅｒｍａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、皮下注射（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、皮内注射（ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、病巣内注射（ｉｎｔｒａｌｅｓｉｏｎａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）及び舌下投与（ｓｕｂｌｉｎｇｕａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）からなる方法の群より選択されて投与する。

【0033】

本発明において、該医薬品組成物は、当業者の専門的な知識技術により経口投与に適する剤形に作成することができ、例えば、これらに限らないが、無菌粉末、タブレット（ｔａｂｌｅｔ）、トローチ（ｔｒｏｃｈｅ）、ロゼンジ（ｌｏｚｅｎｇｅ）、ペレット（ｐｅｌｌｅｔ）、カプセル（ｃａｐｓｕｌｅ）、分散性粉末（ｄｉｓｐｅｒｓｉｂｌｅｐｏｗｄｅｒ）、顆粒（ｇｒａｎｕｌｅ）、溶液、懸濁液（ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）、エマルジョン（ｅｍｕｌｓｉｏｎ）、シロップ（ｓｙｒｕｐ）、エリキシル剤（ｅｌｉｘｉｒ）、スラリー（ｓｌｕｒｒｙ）及びそれらと類似するものを含む。

【0034】

本発明において、該医薬品組成物は、当業者の専門的な技術知識により局所的に皮膚上に使用する外用剤（ｅｘｔｅｒｎａｌｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）に作成することができ、例えば、これらに限らないが、エマルジョン（ｅｍｕｌｓｉｏｎ）、ゲル（ｇｅｌ）、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、クリーム（ｃｒｅａｍ）、パッチ（ｐａｔｃｈ）、塗布薬（ｌｉｎｉｍｅｎｔ）、パウダー（ｐｏｗｄｅｒ）、エアロゾル（ａｅｒｏｓｏｌ）、スプレー（ｓｐｒａｙ）、ローション（ｌｏｔｉｏｎ）、セラム（ｓｅｒｕｍ）、ペースト（ｐａｓｔｅ）、泡（ｆｏａｍ）、ドロップ（ｄｒｏｐ）、懸濁液（ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）、膏薬（ｓａｌｖｅ）、包帯（ｂａｎｄａｇｅ）を含む。

【0035】

本発明はまた、メタボリック代謝症候群関連疾患の予防や治療に使用する方法を提供し、それは個体に上記のラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１を投与することを含む。

【0036】

また、メタボリック代謝症候群関連疾患を罹患する個体または罹患する疑いがある個体を、上記のラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１を投与することにより治療する方法を提供する。

【0037】

本明細書で使用する場合、用語「投与すること（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」及び「投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」は、互換的に使用することができ、且つ、任意の適切なルートで個体に予定の活性成分を導入（ｉｎｔｒｏｄｕｃｉｎｇ）、提供（ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ）または供給（ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ）し、予定の効果を奏することを指す。

【0038】

本明細書で使用する場合、用語「個体（ｓｕｂｊｅｃｔ）」は、関心対象の哺乳類を指し、例えば、ヒト（ｈｕｍａｎｓ）、サル（ｍｏｎｋｅｙｓ）、牛（ｃｏｗｓ）、羊（ｓｈｅｅｐ）、馬（ｈｏｒｓｅｓ）、豚（ｐｉｇｓ）、ヤギ（ｇｏａｔｓ）、イヌ（ｄｏｇｓ）、猫（ｃａｔｓ）、マウス（ｍｉｃｅ）、ラット（ｒａｔｓ）が挙げられる。

【0039】

本発明により、ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の投与量及び投与回数は、治療する疾患の重症度、投与ルート、治療する個体の年齢、身体状況及び反応といった要因により変化する。一般的に、ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１は、１回の投与量または複数回の投与量で非経腸投与、経口投与または局所投与により投与されることができる。

【0040】

以下、本発明の実施例について説明する。これらの実施例は、例示的かつ説明的なものであり、且つ、本発明を限定するものと解釈されるべきではないことを理解されたい。
実施例
一般実験材料
１．実験動物
以下の実施例に使用するオスのＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラット（５週齢）は、台湾ＢｉｏＬａｓｃｏＴａｉｗａｎＣｏ., Ｌｔｄ社から購入したものである。

【0041】

すべての実験動物は、明期が１２時間及び暗期が１２時間の明暗周期で、室温を２５±１℃に維持する独立の空気調節システムがある動物ルームで飼養されていて、充分の水分及び飼料が提供されている。

【0042】

実験動物の飼養環境、処理及びすべての実験手順について、アメリカ国立衛生研究所（ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ、ＮＩＨ）の実験動物の管理と使用に関する指針（ＧｕｉｄｅｆｏｒｔｈｅＣａｒｅａｎｄＵｓｅｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌｓ）に合致する。

【0043】

２.以下の実施例に使用された一般飼料（ｎｏｒｍａｌｄｉｅｔ）と高脂肪飼料（ｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔ、ＨＦＤ）は表１に示される成分を有する。

【0044】

【表1】

【0045】

一般実験方法
１. 統計分析（ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓ）
以下の実施例において、各群の実験データは、「平均値（ｍｅａｎ）±標準誤差（ｓｔａｎｄａｒｄｅｒｒｏｒｏｆｔｈｅｍｅａｎ、ＳＥＭ）」で示される。すべてのデータは、統計ソフトＳｉｇｍａＰｌｏｔ（ｖｅｒｓｉｏｎ１０．０、ＳｙｓｔａｔＳｏｆｔｗａｒｅＩｎｃ．）で統計分析を行い、且つ、スチューデントのｔ検定（Ｓｔｕｄｅｎｔ‘ｓｔ－ｔｅｓｔ）で分析し、各群の間の差異を評価した。得られた結果はｐ＜０．０５であれば、統計的有意性（ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ）があることを意味する。

【0046】

実施例１：ラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１の選別と特徴鑑定
Ａ. ラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１の取得元及び分離：
出願者は、台湾泡菜（台湾風の野菜の漬物、台湾の伝統的な市場から購入）をサンプルの取得元として、ラクトバシラスＭＲＳ寒天培地（ＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉＭＲＳＡｇａｒ）(米Ｂｅｃｔｏｎ、ＤｉｃｋｉｎｓｏｎａｎｄＣｏｍｐａｎｙ社製、ＢＤＤｉｆｃｏ)を用いて、ラクトバチルスの分離及び選別を行い、ラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１を得た。

【0047】

ラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１が所属する菌種を特定するため、ラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１に対して以下Ｂに記載の解析を行った。

【0048】

Ｂ.１６ＳｒＤＮＡ解析（１６ＳｒＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ）
１６ＳｒＤＮＡ解析は、台湾の国立嘉義大学の食品科学科及び研究所（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｔＮａｔｉｏｎａｌＣｈｉａｙｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ)の呂英震（ＬｅｕＹｉｎｇＣｈｅｎ）教授の研究室に依頼して行われた。簡単に説明すると、ラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１のゲノム（ｇｅｎｏｍｅ）ＤＮＡをテンプレート（ｔｅｍｐｌａｔｅ）として、細菌の１６ＳｒＤＮＡ遺伝子により設計され以下に示されるヌクレオチド配列（ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｅｑｕｅｎｃｅ）を有するプライマー対（ｐｒｉｍｅｒｐａｉｒ）のフォワードプライマー（ｆｏｒｗａｒｄｐｒｉｍｅｒ）Ｆ１及びリバースプライマー（ｒｅｖｅｒｓｅｐｒｉｍｅｒ）Ｒ１を使用して、ポリメラーゼ連鎖反応（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ、ＰＣＲ）を行って、ラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１の１６ＳｒＤＮＡ断片（ｆｒａｇｍｅｎｔ）を増幅した。ＰＣＲの反応条件は以下の表２に示される。

【0049】

フォワードプライマーＦ１
５’－ａｇａｇｔｔｔｇａｔｃｃｔｇｇｃｔｃａｇ－３’(配列識別番号：１)
リバースプライマーＲ１
５’－ｇｔａｔｔａｃｃｇｃｇｇｃｔｇｃｔｇ－３’(配列識別番号：２)

【0050】

【表2】

【0051】

ＰＣＲが完了した後、１．５％のアガロースゲル電気泳動（ａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）により、大きさが約５５０ｂｐのＰＣＲ増幅生成物を得たかを確認し、ゲルから確認されたＰＣＲ生成物を回収純化した。

【0052】

そして、ターゲティング分析（ＴａｒｇｅｔｉｎｇＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）によりラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１の１６ＳｒＤＮＡ配列（配列識別番号：３）を得た。更に、米国ＮＣＢＩ（ＮａｔｉｏｎａｌＣｅｎｔｅｒｆｏｒＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）のウェブサイトにおける遺伝子データベースと照会したところ、ラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１の１６ＳｒＤＮＡ配列は、ラクトバチルス・パラカセイの１６ＳｒＤＮＡ配列［Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号（ａｃｃｅｓｓｉｏｎｎｕｍｂｅｒ）：ＮＣ＿０１４３３４．２］と９７％の類似性を有するという結果が得られた。

【0053】

上記の実験結果により、発明者は、本発明のラクトバチルス分離株ＬＭ－１４１が１種のラクトバチルス・パラカセイ分離株であることが判明したので、ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１と命名し、２０２１年１月２９日付で台湾財団法人食品工業發展研究所のバイオソース収集・研究センター（住所：Ｎｏ．３３１，ＳｈｉｐｉｎＲｄ．，ＥａｓｔＤｉｓｔ．，ＨｓｉｎｃｈｕＣｉｔｙ３００１９３，Ｔａｉｗａｎ）に寄託番号ＢＣＲＣ９１１０３７で寄託した。

【0054】

実施例２. ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１が肥満関連メタボリック代謝症候群（ｏｂｅｓｉｔｙ－ｒｅｌａｔｅｄｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ）を改善する効果の評価
実験材料：
１. ラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の実験菌液の作成
上記実施例１で得られたラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１をＭＲＳ培地（ＭＲＳＢｒｏｔｈ）（米Ｂｅｃｔｏｎ、ＤｉｃｋｉｎｓｏｎａｎｄＣｏｍｐａｎｙ社製、ＢＤＤｉｆｃｏ）に接種し、３７℃で１２時間培養した。そして、得られた培養物を４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、上清液を除いて、適量のＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅ）で沈殿物（ｐｅｌｌｅｔｓ）を洗って、適量の殺菌された水で分散させて、２×１０^７ＣＦＵ／ｍＬ及び２×１０^９ＣＦＵ／ｍＬの細菌濃度に調整して、細菌濃度が２×１０^７ＣＦＵ／ｍＬであるラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の実験菌液１及び細菌濃度が２×１０^９ＣＦＵ／ｍＬであるラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の実験菌液２を得られた。なお、細菌濃度は、寒天平板計数法（ａｇａｒｐｌａｔｅｃｏｕｎｔ）で細菌数を計算して得た。

【0055】

実験方法
Ａ．肥満の誘発及びラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の投与
先ず、オスのＳＤラットを、１つの一般対照群（ｎ＝６）、１つの病態対照群（ｎ＝６）、２つの実験群（各群ｎ＝８）(即ち実験群１と実験群２)との４群にランダムに分けた。そして、経口胃管栄養法（ｏｒａｌｇａｖａｇｅ）で、実験群１と実験群２とのラットのそれぞれに１ｍＬの、上記の実験材料の第１項で得られたラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の実験菌液１とラクトバチルス・パラカセイＬＭ－１４１の実験菌液２とを投与した。一般対照群及び病態対照群のラットには１ｍＬの逆浸透水を投与した。各群のラットは、毎日一回投与され、投与時間合計１４週である。

【0056】

投与から２週経過した後、病態対照群、実験群１及び実験群２のラットに高脂肪飼料を与え、一般対照群のラットに一般飼料を与え、合計１２週与えた。

【0057】

投与前及び投与開始から１４週経過後に、各群のラットの体重を測定した。

【0058】

Ｂ．生物サンプルの作成
投与開始から４週及び９週経過した時、及び１４週経過した後の体重測定の後に、各群のラットを１６時間断食させて（ｆａｓｔｉｎｇ）、そして静脈穿刺からの採血（ｖｅｎｉｐｕｎｃｔｕｒｅｂｌｅｅｄｉｎｇ）により、各群のラットの尾静脈（ｃａｕｄａｌｖｅｉｎ）から血液を収集し、得られた血液サンプルを以下の第Ｆ項の実験に使用した。また、第１４週の血液サンプルの一部を、４℃で４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して、得られた血清サンプルを以下の第Ｇ項～第Ｊ項の実験に使用した。

【0059】

第１４週後の血液サンプルを収集した後、経口胃管栄養法により各群のラットにブドウ糖溶液（ハネウェル・リーデルデハーン社から購入、商品番号（ａｒｔｉｃｌｅｎｕｍｂｅｒ）１６３２５）（用量：２ｇ／ｋｇ）を投与し、且つ、ブドウ糖溶液の投与前（即ち第０分）及び投与開始から第１５分、第３０分に、静脈穿刺からの採血により、各群のラットの尾静脈から血液を収集し、得られた血液サンプルを以下の第Ｅ項の実験に使用した。

【0060】

その後、二酸化炭素でラットを屠殺して、各群のラットの脂肪組織（ａｄｉｐｏｓｅｔｉｓｓｕｅ）［即ち、副睾丸脂肪（ｅｐｉｄｉｄｙｍａｌｆａｔ）及び腎周囲脂肪（ｐｅｒｉｒｅｎａｌｆａｔ）]及び肝組織（ｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅ）を取り出して、それぞれを以下の第Ｄ項及び第Ｋ項の実験に使用した。

【0061】

Ｃ．体重増加比率（ｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔｇａｉｎｒａｔｉｏ）の測定
体重増加比率は、各群のラットの投与前及び投与開始から１４週経過後の体重を以下の数式（１）に代入して計算された。
数式（１）：Ａ＝（Ｂ－Ｃ）／Ｃ
Ａ＝体重増加比率
Ｂ＝投与開始から１４週経過後の体重（ｇ）
Ｃ＝投与前の体重（ｇ）

【0062】