特開 2023-65868 ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023065868

(43)【公開日】2023-05-15

(54)【発明の名称】ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法

(51)【国際特許分類】

   A01N 37/02 20060101AFI20230508BHJP

   A01N 37/06 20060101ALI20230508BHJP

   A01N 65/20 20090101ALI20230508BHJP

   A01P 1/00 20060101ALI20230508BHJP

   A01N 25/04 20060101ALI20230508BHJP

【ＦＩ】

A01N37/02

A01N37/06

A01N65/20

A01P1/00

A01N25/04

【審査請求】未請求

【請求項の数】4

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2021176254

(22)【出願日】2021-10-28

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り ウェブサイト：ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ２．ｋｕｆｍ．ｋａｇｏｓｈｉｍａ－ｕ．ａｃ．ｊｐ／ｆｉｅｌｄ／ｈｅａｌｔｈ－ｒｅｓｅａｒｃｈ／ｃ００１／０１．ｈｔｍｌ 公開日：令和３年７月１日 ウェブサイト：ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｎａｎｏｃｏｌｌｏ．ｃｏｍ／ａｎｔｉｔｅｓｔ／ 公開日：令和２年１２月２０日

(71)【出願人】

【識別番号】504258527

【氏名又は名称】国立大学法人 鹿児島大学

(71)【出願人】

【識別番号】519369032

【氏名又は名称】株式会社Ｎｅｘｔｉｎｇ

(74)【代理人】

【識別番号】100095407

【弁理士】

【氏名又は名称】木村 満

(74)【代理人】

【識別番号】100168114

【弁理士】

【氏名又は名称】山中 生太

(74)【代理人】

【識別番号】100162259

【弁理士】

【氏名又は名称】末富 孝典

(74)【代理人】

【識別番号】100146916

【弁理士】

【氏名又は名称】廣石 雅紀

(72)【発明者】

【氏名】馬場 昌範

(72)【発明者】

【氏名】岡本 実佳

(72)【発明者】

【氏名】外山 政明

(72)【発明者】

【氏名】浦田 和昭

【テーマコード（参考）】

4H011

【Ｆターム（参考）】

4H011AA04

4H011BA01

4H011BB06

4H011BB22

4H011BC17

4H011DA14

4H011DG05

(57)【要約】

【課題】より安全なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法を提供する。
【解決手段】ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤は、大豆脂肪酸を含有する微細粒子のコロイド溶液を含む。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

大豆脂肪酸を含有する微細粒子のコロイド溶液を含む、
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤。

【請求項2】

請求項１に記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤を含み、
塗布又は噴霧により使用されるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤。

【請求項3】

大豆脂肪酸及びレシチンを含む水を撹拌し、大豆脂肪酸を含有する微細粒子のコロイド溶液を生成するステップを含む、
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法。

【請求項4】

１体積部の前記コロイド溶液と、５～１５体積部の、ｐＨ９．５～１０．０かつ硬度２以下の水と、を混合するステップをさらに含む、
請求項３に記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法に関する。

【背景技術】

【0002】

ＳＡＲＳ（重症急性呼吸器症候群）を引き起こす新型コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）感染による新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）は世界でパンデミックとなっている。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するワクチンが開発され、ＣＯＶＩＤ－１９の重症化を抑えるという効果が証明されつつある。一方で、強い感染力を有する変異ウイルス株の出現等、ワクチンだけではＣＯＶＩＤ－１９の脅威を完全に払拭することはできない。このため、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２への感染を予防するためには、マスクの着用及び手指の消毒を徹底する必要がある。

【0003】

皮膚の消毒には、消毒用エタノールが汎用されているが、エタノールの刺激に皮膚が過敏に反応する人も多い。人体への安全性を考慮して、より安全なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤が求められている。

【0004】

天然由来の抗ウイルス剤として、特許文献１には、大豆脂肪酸及びレシチンを用いたコロイド状の組成物が開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】特開２０１５－５４９６６号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

特許文献１には、上記組成物がインフルエンザウイルス及びノロウイルスに有効であることが記載されているものの、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を不活化させるかは不明である。

【0007】

本発明は、上記実情に鑑みてなされたものであり、より安全なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明の第１の観点に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤は、
大豆脂肪酸を含有する微細粒子のコロイド溶液を含む。

【0009】

本発明の第２の観点に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤は、
上記本発明の第１の観点に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤を含み、
塗布又は噴霧により使用される。

【0010】

本発明の第３の観点に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法は、
大豆脂肪酸及びレシチンを含む水を撹拌し、大豆脂肪酸を含有する微細粒子のコロイド溶液を生成するステップを含む。

【0011】

上記本発明の第３の観点に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法は、
１体積部の前記コロイド溶液と、５～１５体積部の、ｐＨ９．５～１０．０かつ硬度２以下の水と、を混合するステップをさらに含む、
こととしてもよい。

【発明の効果】

【0012】

本発明によれば、より安全なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤が得られる。

【図面の簡単な説明】

【0013】

【図1】試験例１に係る生細胞数の割合を示す図である。（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）は、それぞれサンプル１、２及び３における生細胞数の割合を示す。

【図2】試験例３に係る生細胞数の割合を示す図である。（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）は、それぞれサンプルＡ、Ｂ及びＣにおける生細胞数の割合を示す。

【図3】試験例３に係る生細胞数の割合を示す図である。（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）は、それぞれサンプルＤ、Ｅ及びＦにおける生細胞数の割合を示す。

【発明を実施するための形態】

【0014】

本発明に係る実施の形態について図面を参照しながら説明する。なお、本発明は下記の実施の形態によって限定されるものではない。

【0015】

本実施の形態に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤は、大豆脂肪酸を含有する微細粒子のコロイド溶液を含む。大豆脂肪酸は、例えば大豆油を加水分解し、タンパク質及びグリセリンを除去した大豆油脂から抽出できる。

【0016】

コロイド溶液において、大豆脂肪酸は、ブラウン運動を行うことが可能な大きさの微細粒子として溶液中に分散している。微細粒子の大きさは、ブラウン運動が可能であれば特に限定されないが、好ましくは、ナノサイズである。微細粒子の粒径は、例えば０．１～１０００ｎｍ、１～９００ｎｍ又は５～８００ｎｍである。微細粒子の粒径は、ふるい分け法、沈降法、顕微鏡法、光散乱法、レーザー回折・散乱法、電気的抵抗試験、透過型電子顕微鏡による観察及び走査型電子顕微鏡による観察等の公知の方法で測定できる。粒径は公知の粒度分布計で測定してもよい。粒径は、複数の粒子を測定対象として、平均で表した平均粒径、体積平均粒径及び面積平均粒径等であってもよい。また、粒径は、レーザー回折・散乱法等の測定に基づく個数分布等から算出される平均粒径であってもよい。

【0017】

大豆脂肪酸を含有する微細粒子のコロイド溶液は、例えば、ナノコロナチュレ（商標）（株式会社Ｎｅｘｔｉｎｇ製）等の市販のものであってもよい。

【0018】

続いて、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法について説明する。当該製造方法では、大豆脂肪酸及びレシチンを含む水を撹拌し、大豆脂肪酸を含有する微細粒子のコロイド溶液を生成するステップを含む。大豆脂肪酸とレシチンとを水中で撹拌することで脂肪酸の分子が切断され、微細粒子となる。撹拌では、大豆脂肪酸とレシチンとを含む水を撹拌機等で撹拌すればよい。得られたコロイド状の混合物に対してさらに鹸化工法を適用してもよい。なお、酸化を防ぐために、得られたコロイド溶液にα－トコフェロール等の抗酸化剤を添加してもよい。

【0019】

レシチンとして、公知のレシチンが使用できるが、好ましくは、大豆レシチンが挙げられる。原料として大豆から抽出した大豆脂肪酸を使用する場合、大豆に含まれるレシチンを分子の切断に利用できる。大豆から抽出した大豆脂肪酸を使用する場合、大豆由来のレシチンがコロイド溶液に含まれてもよい。

【0020】

本実施の形態に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の製造方法は、１体積部のコロイド溶液と、５～１５体積部の水と、を混合するステップをさらに含んでもよい。好ましくは、コロイド溶液と混合される水はｐＨ９．５～１０．０かつ硬度２以下の水である。コロイド溶液と混合される水として、天然水等が挙げられ、好ましくは鹿児島県の垂水温泉から湧き出す天然水が使用できる。好適には、コロイド溶液と混合される水は温泉水９９（商標）（エスオーシー株式会社製）である。

【0021】

コロイド溶液と混合される上記水は、コロイド溶液１体積部に対して、好ましくは５～１４体積部、６～１３体積部、７～１２体積部又は８～１１体積部である。好適には、コロイド溶液と混合される上記水は、コロイド溶液１体積部に対して９体積部である。

【0022】

下記実施例に示すように、本実施の形態に係るコロイド溶液は、標準株はもちろん、英国型アルファ変異株及びインド型デルタ変異株等の変異株を含むＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を不活化させる作用を有する。当該コロイド溶液は、特に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の感染価を減少させる。本実施の形態に係るコロイド溶液は、天然由来の大豆脂肪酸を有効成分とするため、安全性が高い。

【0023】

本実施の形態に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤は、手指及び皮膚の他、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が付着しているおそれがあるドアノブ、レバー、洋式便器の便座、携帯端末及び医療機器等を構成する基材等の表面を対象として適用される。基材の種類は、特に限定されず、金属、天然樹脂、合成樹脂、ガラス及びゴム等の任意である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤を使用する態様としては、対象がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤に暴露されればよく、例えば対象に塗布及び噴霧する等が挙げられる。

【0024】

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤の使用量は、特に限定されず、対象の表面の面積等に応じて適宜調整される。

【0025】

本実施の形態に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤は、大豆から抽出した大豆脂肪酸を含む場合、大豆に含まれるイソフラボン等の成分を含んでもよい。また、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の不活化作用を維持する限り、添加剤、特に天然由来の成分を含んでいてもよい。

【0026】

なお、本実施の形態に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤におけるコロイド溶液における大豆脂肪酸の濃度は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する有効性を評価することで任意に調整すればよい。また、別の実施の形態では、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤が提供され、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２用消毒剤は、本実施の形態に係るＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２不活化剤を含み、塗布又は噴霧により使用される。

【実施例0027】

以下の実施例により、本発明をさらに具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されるものではない。

【0028】

試験例１：培養細胞に対する影響の検討１
２０μＬのナノコロナチュレ（商標）（株式会社Ｎｅｘｔｉｎｇ製）と、８０μＬの温泉水９９（商標）（エスオーシー株式会社製）、ｐＨ８．８～９．４のアルカリ水又は精製水とを混合し（５倍希釈）、サンプルを調製した。以下では、温泉水９９（商標）（エスオーシー株式会社製）で希釈したサンプル、アルカリ水で希釈したサンプル及び精製水で希釈したサンプルをそれぞれサンプル１、サンプル２及びサンプル３とする。

【0029】

試験前日からＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ細胞をマイクロプレートに播種し（２×１０^４細胞／ウェル）、３７℃にて培養した。培養液には５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含むＤＭＥＭを用いた。培養液で希釈した各サンプルを、各サンプルが４０倍、２００倍、１０００倍又は５０００倍に希釈されるようにマイクロプレートに添加し、細胞を３日間培養した。培養後、細胞を顕微鏡で観察するとともに、生細胞数を色素（ＭＴＴ）法にて定量した。

【0030】

（結果）
サンプル１～３は、培養液でさらに４０倍に希釈しても細胞の形態を変化させた。一方、２００倍希釈では形態の変化は認められなかった。色素法で定量した生細胞数の割合を図１に示す。サンプル１～３は、４０倍希釈で生細胞数をやや減少させたものの、ほとんど影響はなかった。以下の当該細胞を用いたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する不活化作用の検討では、ナノコロナチュレ（商標）の希釈倍率が４０倍以下では不活化作用を正しく評価できないため、細胞を含む培養液におけるナノコロナチュレ（商標）の希釈倍率が２００倍を超えるようにした。

【0031】

試験例２：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する不活化作用の検討１
試験前日からＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ細胞をマイクロプレートに播種し（２×１０^４細胞／ウェル）、３７℃にて培養した。上記の０．１ｍＬのサンプル１、２又は３と等量のウイルス液（ＷＫ－５２１標準株（以下、“標準株”とする）又は英国型アルファ変異株（以下、“アルファ変異株”とする））とを混合し、室温で１分間放置した。なお、対照では、０．１ｍＬの培養液を使用した。その後、１．８ｍＬの培養液を添加し、混合することで反応を停止させた。次に、これを培養液で種々の濃度に階段希釈し、培養細胞を播種したプレートに添加し、３日間培養した。培養後、細胞を顕微鏡にて観察することで、ウイルス増殖の有無を判定した。判定の結果に基づいてウイルス感染価（１ｍＬあたりの感染力のある新型コロナウイルスの数）を定量した。

【0032】

（結果）
標準株及びアルファ変異株の結果をそれぞれ表１及び表２に示す。希釈した水の種類に関わらず、ウイルス液と混合後１分間で、ウイルス感染価が標準株で９７％以上、アルファ変異株で９４％以上減少した。

【0033】

【表1】

【0034】

【表2】

【0035】

試験例３：培養細胞に対する影響の検討２
ナノコロナチュレ（商標）（株式会社Ｎｅｘｔｉｎｇ製）と、温泉水９９（商標）（エスオーシー株式会社製）と、表３に示す比率で混合し、サンプルＢ～Ｆを調製した。サンプルＢ～Ｆを用いて、上記試験例１と同様に、細胞に対する影響を評価した。

【0036】

【表3】

【0037】

（結果）
サンプルＢ、Ｃ及びＦは培養液でさらに４０倍に希釈しても細胞の形態を変化させた。この変化は２００倍希釈では認められなかった。サンプルＡ、Ｂ及びＣについて色素法で定量した生細胞数の割合をそれぞれ図２（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）に示す。サンプルＤ、Ｅ及びＦについて色素法で定量した生細胞数の割合をそれぞれ図３（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）に示す。サンプルＢ～Ｆは、４０倍希釈で生細胞数をやや減少させたものの、ほとんど影響はなかった。

【0038】

試験例４：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する不活化作用の検討２
試験前日からＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ細胞をマイクロプレートに播種し（２×１０^４細胞／ウェル）、３７℃にて培養した。上記の０．１ｍＬのサンプルＡ～Ｆそれぞれと等量のウイルス液（標準株）とを混合し、室温で２分間放置した。その後、１．８ｍＬの培養液を添加し、混合することで反応を停止させた。次に、これを培養液で種々の濃度に階段希釈し、培養細胞を播種したプレートに添加し、３日間培養した。培養後、試験例２と同様に、ウイルス感染価を定量した。

【0039】

（結果）
結果を表４に示す。サンプルＢ、Ｃ及びＦは、ウイルス液と混合後２分間で、標準株のウイルス感染価を９９．９％以上減少させた。一方、２０倍以上に希釈したサンプルＤ及びＥでは、新型コロナウイルスに対する不活化作用が消失した。

【0040】

【表4】

【0041】

試験例５：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する不活化作用の検討３
試験前日からＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ細胞をマイクロプレートに播種し（２×１０^４細胞／ウェル）、３７℃にて培養した。ナノコロナチュレ（商標）と温泉水９９（商標）とを体積比１：９で混合し、ナノコロナチュレ（商標） ＳＥＮを調製した。標準株又はインド型デルタ変異株（以下、“デルタ変異株”とする）のウイルス液１００μＬとナノコロナチュレ（商標） ＳＥＮ又は蒸留水１００μＬとを混合し、室温で２分間放置した。その後、１．８ｍＬの培養液を混合することで反応を停止させ、ウイルス感染価を定量した。

【0042】

（結果）
結果を表５に示す。ナノコロナチュレ（商標） ＳＥＮは、標準株及びデルタ変異株の感染価を２分間で９９．９％以上減少させることが示された。

【0043】

【表5】

【0044】

上述した実施の形態は、本発明を説明するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。すなわち、本発明の範囲は、実施の形態ではなく、特許請求の範囲によって示される。そして、特許請求の範囲内及びそれと同等の発明の意義の範囲内で施される様々な変形が、本発明の範囲内とみなされる。

【産業上の利用可能性】

【0045】

本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する感染予防に有用である。

【図1】

【図2】

【図3】