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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023007947
(43)【公開日】2023-01-19
(54)【発明の名称】液相ペプチド製造方法
(51)【国際特許分類】
C07K 1/02 20060101AFI20230112BHJP
C07K 1/06 20060101ALI20230112BHJP
【ＦＩ】
C07K1/02
C07K1/06
【審査請求】有
【請求項の数】5
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2021111125
(22)【出願日】2021-07-02
(11)【特許番号】
(45)【特許公報発行日】2022-05-09
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り （１）令和３年６月８日「Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ２０２１， ２６（１２）， ３４９７」（ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．３３９０／ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ２６１２３４９７）にて公開した。
(71)【出願人】
【識別番号】517349083
【氏名又は名称】ペプチスター株式会社
(71)【出願人】
【識別番号】390037327
【氏名又は名称】積水メディカル株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】110000084
【氏名又は名称】特許業務法人アルガ特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】根本 圭崇
(72)【発明者】
【氏名】矢野 真也
(72)【発明者】
【氏名】森 利裕
【テーマコード（参考）】
4H045
【Ｆターム（参考）】
4H045AA20
4H045BA10
4H045FA20
4H045FA30
4H045FA41
4H045FA57
(57)【要約】
【課題】液相ペプチド合成用担体を用いるペプチド製造法において、アミノ酸活性エステルを液相処理により除去を可能とする液相ペプチド製造法を提供すること。
【解決手段】次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
【選択図】なし
【解決手段】次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
【請求項2】
前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、次の一般式（１）で表されるアミノスルホン酸類及びアミノ硫酸類、
（Ｒ1は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ1は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
（Ｒ2は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ2は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である請求項１記載の液相ペプチド製造方法。
（ｎは０～２０の整数を示し、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
【化1】
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
【化2】
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である請求項１記載の液相ペプチド製造方法。
【化3】
【請求項3】
前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、次の一般式（１ａ）で表されるアミノスルホン酸類、
（Ｒ1は炭素数１～１０の２価の有機基を示す）
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
（Ｒ2は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ2は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である請求項１記載の液相ペプチド製造方法。
（ｎは０～２０の整数を示し、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
【化4】
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
【化5】
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である請求項１記載の液相ペプチド製造方法。
【化6】
【請求項4】
前記アミノ保護基が、Ｆｍоｃ基、Ｂоｃ基、Ｃｂｚ基及びＡｃ基から選ばれる保護基である請求項１～３のいずれか１項に記載の液相ペプチド製造方法。
【請求項5】
前記液相ペプチド合成用担体が、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接またはリンカーを介して結合して、それらを有機溶媒に溶解性で水に不溶性にする化合物である請求項１～４のいずれか１項に記載の液相ペプチド製造方法。
【請求項6】
前記液相ペプチド合成用担体が、下記式（Ｉ）：
［式中、
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；
Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示し；
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；
Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
（式中、＊は結合位置を示し；
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
で表される化合物である請求項１～５のいずれか１項に記載の液相ペプチド製造方法。
【化7】
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；
Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示し；
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；
Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
【化8】
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
で表される化合物である請求項１～５のいずれか１項に記載の液相ペプチド製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、液相におけるペプチド製造方法に関する。
【背景技術】
【0002】
ペプチドの製造技術には、固相ペプチド合成法と液相ペプチド合成法とがあるが、医薬品等として用いられるペプチドを製造するには、大量生産に向いている液相ペプチド合成法が広く採用されている。そして、最近、保護アミノ酸や保護ペプチドの有機溶媒への溶解性を大きく向上させる化合物である液相ペプチド合成用担体（Ｔａｇ）が報告されている（特許文献１～１４）。
【0003】
液相ペプチド合成では、アミノ酸残基の欠落を防ぐために過剰のアミノ酸及び縮合剤を使用することから、ペプチド伸長反応においてアミノ酸縮合反応時にアミノ酸活性エステルが残存し、残存したアミノ酸活性エステルが次のアミノ酸伸長反応時においても反応してしまい、望まない「ダブルヒット体」が生成し、目的物の収率や純度が低下することが問題となっている。
【0004】
このアミノ酸活性エステルの除去手段として、アルカリ水でアミノ酸活性エステルを加水分解する方法（特許文献１５）、縮合反応時に炭素数１～１４のアルキルアミン、芳香族アミン、ヒドロキルアミンを添加してクエンチした後、副生物を固液分離する方法（特許文献１６）が報告されている。また、縮合反応後の反応液に２価の水溶性アミンを添加し、脱保護工程後の反応液に酸を添加して中和し、さらに酸性水溶液を添加して洗浄することにより、アミノ酸活性エステルとジベンゾフルベン（ＤＢＦ）の双方を除去する方法（特許文献１７）が報告されている。なお、ＤＢＦは、アミノ基の保護基であるＦｍｏｃ基を脱保護する際に生じる副生成物である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【特許文献1】特許第５１１３１１８号公報
【特許文献2】特許第５９２９７５６号公報
【特許文献3】特許第６０９２５１３号公報
【特許文献4】特許第５７６８７１２号公報
【特許文献5】特許第５８０３６７４号公報
【特許文献6】特許第６１１６７８２号公報
【特許文献7】特許第６２０１０７６号公報
【特許文献8】特許第６２８３７７４号公報
【特許文献9】特許第６２８３７７５号公報
【特許文献10】特許第６３２２３５０号公報
【特許文献11】特許第６３９３８５７号公報
【特許文献12】特許第６５３１２３５号公報
【特許文献13】国際公開第２０２０／１７５４７２号
【特許文献14】国際公開第２０２０／１７５４７３号
【特許文献15】国際公開第２００７／０９９６５６号
【特許文献16】国際公開第２０１６／１４０２３２号
【特許文献17】特許第６７０３６６８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
しかしながら、特許文献１５、１６に記載のアミノ酸活性エステルの除去方法では、固液分離手段が必要であり、ワンポット合成には適用できない。また、特許文献１７記載の方法においては、酸性条件下での分液が必要であることから、アミノ酸活性エステルと生成物であるペプチドとの分液不良が起こりやすいという問題があった。
本発明の課題は、液相ペプチド合成用担体を用いるペプチド製造法において、アミノ酸活性エステルを液相処理により除去することを可能とする液相ペプチド製造法を提供することにある。
本発明の課題は、液相ペプチド合成用担体を用いるペプチド製造法において、アミノ酸活性エステルを液相処理により除去することを可能とする液相ペプチド製造法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【0007】
そこで本発明者は、有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させた後に、縮合せずに残存するアミノ酸活性エステルのスカベンジャーとして、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれる化合物を用いることにより、系内を酸性条件とすることなく、アミノ酸活性エステルの除去が可能となることを見出し、従来法における固液分離や分液不良という問題点を解決し、本発明の完成に至った。
【0008】
すなわち、本発明は、次の発明［１］～［６］を提供するものである。
［１］次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
［２］前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、次の一般式（１）で表されるアミノスルホン酸類及びアミノ硫酸類、
［１］次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
ｃ．反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
［２］前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、次の一般式（１）で表されるアミノスルホン酸類及びアミノ硫酸類、
【0009】
【化1】
【0010】
（Ｒ1は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ1は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
【0011】
【化2】
【0012】
（Ｒ2は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ2は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である［１］記載の液相ペプチド製造方法。
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である［１］記載の液相ペプチド製造方法。
【0013】
【化3】
【0014】
（ｎは０～２０の整数を示し、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
［３］前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、次の一般式（１ａ）で表されるアミノスルホン酸類、
［３］前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、次の一般式（１ａ）で表されるアミノスルホン酸類、
【0015】
【化4】
【0016】
（Ｒ1は炭素数１～１０の２価の有機基を示す）
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
【0017】
【化5】
【0018】
（Ｒ2は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ2は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である［１］記載の液相ペプチド製造方法。
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である［１］記載の液相ペプチド製造方法。
【0019】
【化6】
【0020】
（ｎは０～２０の整数を示し、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
［４］前記アミノ保護基が、Ｆｍоｃ基、Ｂоｃ基、Ｃｂｚ基及びＡｃ基から選ばれる保護基である［１］～［３］記載の液相ペプチド製造方法。
［５］前記液相ペプチド合成用担体が、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接又はリンカーを介して結合して、それらを有機溶媒に溶解性で水に不溶性にする化合物である［１］～［４］のいずれかに記載の液相ペプチド製造方法。
［６］前記液相ペプチド合成用担体が、下記式（Ｉ）：
［４］前記アミノ保護基が、Ｆｍоｃ基、Ｂоｃ基、Ｃｂｚ基及びＡｃ基から選ばれる保護基である［１］～［３］記載の液相ペプチド製造方法。
［５］前記液相ペプチド合成用担体が、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接又はリンカーを介して結合して、それらを有機溶媒に溶解性で水に不溶性にする化合物である［１］～［４］のいずれかに記載の液相ペプチド製造方法。
［６］前記液相ペプチド合成用担体が、下記式（Ｉ）：
【0021】
【化7】
【0022】
［式中、
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；
Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示し；
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；
Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；
Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示し；
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；
Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
【0023】
【化8】
【0024】
（式中、＊は結合位置を示し；
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
で表される化合物である［１］～［４］のいずれかに記載の液相ペプチド製造方法。
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
で表される化合物である［１］～［４］のいずれかに記載の液相ペプチド製造方法。
【発明の効果】
【0025】
本発明によれば、有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させた後に、残存するアミノ酸活性エステルのスカベンジャーとして、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれる化合物を用いれば、系内を酸性条件とすることなく、アミノ酸活性エステルの除去が可能となることを見出し、従来法における固液分離や分液不良という問題点を解消した。
これにより、ペプチドの液相製造をワンポットで効率よく行うことが可能になった。
これにより、ペプチドの液相製造をワンポットで効率よく行うことが可能になった。
【発明を実施するための形態】
【0026】
本発明のペプチド製造法は、有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる、液相ペプチド製造法である。
【0027】
用いられる液相ペプチド合成用担体は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドを保護して、当該保護されたアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドを有機溶媒に可溶化する担体である。
このような液相ペプチド合成用担体としては、例えば前記特許文献１－１４に記載の化合物が挙げられる。好ましい液相ペプチド合成用担体としては、下記式（Ｉ）で表される化合物が挙げられる。
このような液相ペプチド合成用担体としては、例えば前記特許文献１－１４に記載の化合物が挙げられる。好ましい液相ペプチド合成用担体としては、下記式（Ｉ）で表される化合物が挙げられる。
【0028】
【化9】
【0029】
［式中、
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；
Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示し；
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；
Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；
Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示し；
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；
Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
【0030】
【化10】
【0031】
（式中、＊は結合位置を示し；
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
【0032】
式（Ｉ）中の環Ａは、ヘテロ原子を含んでいてもよく、単環性でも、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示す。当該芳香環としては、Ｃ６～１８の芳香族炭化水素環、及びＣ４～１０の芳香族複素環が挙げられる。
具体的なＣ６～１８の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナントレン環、トリフェニレン環、テトラセン環、インダン環、インデン環、フルオレン環、ビフェニル環などが挙げられる。このうち、ベンゼン環、ナフタレン環、フェナントレン環、フルオレン環がより好ましい。
Ｃ４～１０の芳香族複素環としては、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～１０員環の芳香族複素環が好ましく、具体的には、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環、イミダゾール環、ピリジン環、キノリン環、イソキノリン環などが挙げられる。このうち、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～８員環の芳香族複素環が好ましく、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環がより好ましい。
具体的なＣ６～１８の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナントレン環、トリフェニレン環、テトラセン環、インダン環、インデン環、フルオレン環、ビフェニル環などが挙げられる。このうち、ベンゼン環、ナフタレン環、フェナントレン環、フルオレン環がより好ましい。
Ｃ４～１０の芳香族複素環としては、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～１０員環の芳香族複素環が好ましく、具体的には、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環、イミダゾール環、ピリジン環、キノリン環、イソキノリン環などが挙げられる。このうち、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～８員環の芳香族複素環が好ましく、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環がより好ましい。
【0033】
Ｒ11は、水素原子を示すか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが前記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよい。Ｒ11とＲ14が一緒になって形成してもよい環としては、フルオレン環又はキサンテン環が好ましい。
【0034】
ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示す。
ここで、Ｒ17としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などの直鎖又は分岐鎖のＣ1～１０のアルキル基が挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
ここで、Ｒ17としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などの直鎖又は分岐鎖のＣ1～１０のアルキル基が挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
【0035】
ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示す。
ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示す。
【0036】
本明細書において、脂肪族炭化水素基を有する有機基とは、その分子構造中に脂肪族炭化水素基を有する一価の有機基である。当該脂肪族炭化水素基を有する有機基中の脂肪族炭化水素基の部位は、特に限定されず、末端に存在してもよく、それ以外の部位に存在してもよい。
当該有機基中に存在する脂肪族炭化水素基とは、直鎖、分岐状若しくは環状の飽和又は不飽和の脂肪族炭化水素基であり、有機溶媒溶解性の点から、Ｃ５以上の脂肪族炭化水素基が好ましく、Ｃ５～３０の脂肪族炭化水素基がより好ましく、Ｃ８～３０の脂肪族炭化水素基がさらに好ましい。当該脂肪族炭化水素基の具体例としては、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基等が挙げられるが、特にアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基が好ましく、アルキル基がより好ましい。さらに、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、Ｃ３～８のシクロアルキル基、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルケニル基が好ましく、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、Ｃ３～８のシクロアルキル基がより好ましく、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基がさらに好ましく、Ｃ８～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基がよりさらに好ましい。
当該有機基中に存在する脂肪族炭化水素基とは、直鎖、分岐状若しくは環状の飽和又は不飽和の脂肪族炭化水素基であり、有機溶媒溶解性の点から、Ｃ５以上の脂肪族炭化水素基が好ましく、Ｃ５～３０の脂肪族炭化水素基がより好ましく、Ｃ８～３０の脂肪族炭化水素基がさらに好ましい。当該脂肪族炭化水素基の具体例としては、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基等が挙げられるが、特にアルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基が好ましく、アルキル基がより好ましい。さらに、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、Ｃ３～８のシクロアルキル基、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルケニル基が好ましく、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、Ｃ３～８のシクロアルキル基がより好ましく、Ｃ５～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基がさらに好ましく、Ｃ８～３０の直鎖又は分岐鎖のアルキル基がよりさらに好ましい。
【0037】
アルキル基の具体例としては、炭素数１～３０のアルキル基が挙げられ、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、オクチル基、デシル基、ラウリル基、トリデシル基、ミリスチル基、セチル基、ステアリル基、アラキル基、べへニル基、テトラコサニル基、ヘキサコサニル基、イソステアリル基などの一価の基、それらから誘導される二価の基、各種ステロイド基から水酸基などを除外した基が挙げられる。
アルケニル基としては、ビニル基、１－プロぺニル基、アリル基、イソプロペニル基、ブテニル基、イソブテニル基、オレイル基などの一価の基、それらから誘導される二価の基が挙げられる。
アルキニル基としては、エチニル基、プロパルギル基、１－プロピニル基などが挙げられる。
アルケニル基としては、ビニル基、１－プロぺニル基、アリル基、イソプロペニル基、ブテニル基、イソブテニル基、オレイル基などの一価の基、それらから誘導される二価の基が挙げられる。
アルキニル基としては、エチニル基、プロパルギル基、１－プロピニル基などが挙げられる。
【0038】
上記の脂肪族炭化水素基には、酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基が置換していてもよい。
脂肪族炭化水素基に酸素原子を介して置換し得るシリル基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基及び置換基を有していてもよいアリール基から選ばれる３個が置換したシリル基が好ましい。従って、前記脂肪族炭化水素基には、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基及び置換基を有していてもよいアリール基から選ばれる３個が置換したシリルオキシ基が置換していてもよい。ここで、置換基を有していてもよいアリール基としては、フェニル基、ナフチル基などが挙げられる。
好ましい酸素原子を介して置換するシリル基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が３個置換したシリルオキシ基であり、より好ましくは炭素数１～４の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が３個置換したシリルオキシ基である。シリルオキシ基に置換する３個のアルキル基又はアリール基は、同一でも異なっていてもよい。なお、当該シリルオキシ基は、前記脂肪族炭化水素基に１～３個置換しているのが好ましい。
脂肪族炭化水素基に酸素原子を介して置換し得るシリル基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基及び置換基を有していてもよいアリール基から選ばれる３個が置換したシリル基が好ましい。従って、前記脂肪族炭化水素基には、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基及び置換基を有していてもよいアリール基から選ばれる３個が置換したシリルオキシ基が置換していてもよい。ここで、置換基を有していてもよいアリール基としては、フェニル基、ナフチル基などが挙げられる。
好ましい酸素原子を介して置換するシリル基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が３個置換したシリルオキシ基であり、より好ましくは炭素数１～４の直鎖又は分岐鎖のアルキル基が３個置換したシリルオキシ基である。シリルオキシ基に置換する３個のアルキル基又はアリール基は、同一でも異なっていてもよい。なお、当該シリルオキシ基は、前記脂肪族炭化水素基に１～３個置換しているのが好ましい。
【0039】
脂肪族炭化水素基に酸素原子を介して置換し得る脂肪族炭化水素基としては、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルコキシ基、炭素数２～６のアルケニルオキシ基、炭素数３～６のシクロアルキルオキシ基などの一価の基、それらから誘導される二価の基などが挙げられる。
【0040】
ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示す。ここで、ｐは、１～４が好ましく、１～３がより好ましく、１～２がさらに好ましい。
【0041】
環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。
ハロゲン原子としては、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１-６アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、トリフルオロメチル基などが挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ－ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ基、トリクロロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基などが挙げられる。
ハロゲン原子としては、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１-６アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、トリフルオロメチル基などが挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ－ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ基、トリクロロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基などが挙げられる。
【0042】
Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示す。
ここで、芳香族環としては、Ｃ６～１８の芳香族炭化水素環、及びＣ４～１０の芳香族複素環が挙げられる。
具体的なＣ６～１８の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナントレン環、トリフェニレン環、テトラセン環、インダン環、インデン環、フルオレン環、ビフェニル環などが挙げられる。このうち、ベンゼン環、ナフタレン環、フェナントレン環、フルオレン環がより好ましい。
Ｃ４～１０の芳香族複素環としては、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～１０員環の複素環が好ましく、具体的には、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環、イミダゾール環、ピリジン環、キノリン環、イソキノリン環などが挙げられる。このうち、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～８員環の複素環が好ましく、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環がより好ましい。
Ｒａの芳香族環には、１～３個のハロゲン原子が置換していてもよい。
ここで、芳香族環としては、Ｃ６～１８の芳香族炭化水素環、及びＣ４～１０の芳香族複素環が挙げられる。
具体的なＣ６～１８の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環、ナフタレン環、アントラセン環、フェナントレン環、トリフェニレン環、テトラセン環、インダン環、インデン環、フルオレン環、ビフェニル環などが挙げられる。このうち、ベンゼン環、ナフタレン環、フェナントレン環、フルオレン環がより好ましい。
Ｃ４～１０の芳香族複素環としては、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～１０員環の複素環が好ましく、具体的には、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環、イミダゾール環、ピリジン環、キノリン環、イソキノリン環などが挙げられる。このうち、ヘテロ原子として窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～３個を含む５員環～８員環の複素環が好ましく、ピロール環、フラン環、チオフェン環、インドール環、ベンゾフラン環、ベンゾチオフェン環、カルバゾール環、ピラゾール環、インダゾール環がより好ましい。
Ｒａの芳香族環には、１～３個のハロゲン原子が置換していてもよい。
【0043】
Ｒｂは、水素原子、又は前記式（ａ）で表される基を示す。
式（ａ）中のｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが０～４を示す。
ｒは、０～４が好ましく、１～３がより好ましく、１～２がさらに好ましい。
式（ａ）中のｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが０～４を示す。
ｒは、０～４が好ましく、１～３がより好ましく、１～２がさらに好ましい。
【0044】
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示す。
ここで、Ｒ18としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
ここで、Ｒ18としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
【0045】
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
Ｒ15及びＲ16で表される酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基は、前記のＲ12及びＲ13と同じものが挙げられ、前記のＲ12及びＲ13と同じものが好ましい。
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示す。
Ｒ15及びＲ16で表される酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基は、前記のＲ12及びＲ13と同じものが挙げられ、前記のＲ12及びＲ13と同じものが好ましい。
【0046】
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよい。
【0047】
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。
ハロゲン原子としては、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１-６アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、トリフルオロメチル基などが挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ－ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ基、トリクロロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基などが挙げられる。
ハロゲン原子としては、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１-６アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ジクロロメチル基、トリクロロメチル基、トリフルオロメチル基などが挙げられる。ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ－ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ－ブチルオキシ基、トリクロロメトキシ基、トリフルオロメトキシ基などが挙げられる。
【0048】
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。
ここで、Ｒ19としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
ここで、Ｒ19としては、水素原子、Ｃ１～１０のアルキル基又はＣ７～２０のアラルキル基が好ましい。アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などが挙げられる。
アラルキル基としては、Ｃ７～１６アラルキル基、例えば、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基などが挙げられる。
【0049】
本発明の製造法に用いられる原料の一つである、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸又は液相ペプチド合成用担体が結合したペプチドとは、アミノ酸又はペプチドの反応性基の一つが前記の液相ペプチド合成用担体と結合しており、少なくとも一つのアミノ基が反応性の状態であるアミノ酸又はペプチドをいう。好ましくは、アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基が前記の液相ペプチド合成用担体と結合し、一方、アミノ基は保護されておらず反応性であるものである。液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸アミドとは、アミノ酸アミドの少なくとも一つのアミド基が前記の液相ペプチド合成用担体と結合しており、少なくとも一つのアミノ基は保護されておらず反応性であるアミノ酸アミドをいう。
なお、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後に、必要に応じて保護基を脱離、除去することで目的化合物を得ることができる。その場合の水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
なお、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後に、必要に応じて保護基を脱離、除去することで目的化合物を得ることができる。その場合の水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
【0050】
前記の液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、液相ペプチド合成用担体をＴＨＦ等の有機溶媒に溶解し、例えばＢｏｃ保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミド及び縮合剤、例えば、Ｎ，Ｎ’－ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＩ）を添加して縮合を行い、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基に液相ペプチド合成用担体が結合した中間体であるＮ－Ｂｏｃ－液相合成用担体保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドを製造できる。
【0051】
また、液相ペプチド合成用担体は、前記アミノ酸又はぺプチドのカルボキシル基にリンカーを介して結合させることもできる。
ここでいうリンカーとは、リンカーの一方が、前記アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基と結合し、他方が液相ペプチド合成用担体と結合する２つの反応基をもつ有機基である。好ましいリンカーは、分子量が約２０００以下（好ましくは約１５００以下、より好ましくは約１０００以下）の有機基であって、反応基として、同じでも異なってもよく、アミノ基、カルボキシル基、及びハロメチル基からなる群より選ばれる少なくとも２つの基を分子内にもつ化合物である。リンカーとして、例えば、以下の化合物を挙げることができる。
ここでいうリンカーとは、リンカーの一方が、前記アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基と結合し、他方が液相ペプチド合成用担体と結合する２つの反応基をもつ有機基である。好ましいリンカーは、分子量が約２０００以下（好ましくは約１５００以下、より好ましくは約１０００以下）の有機基であって、反応基として、同じでも異なってもよく、アミノ基、カルボキシル基、及びハロメチル基からなる群より選ばれる少なくとも２つの基を分子内にもつ化合物である。リンカーとして、例えば、以下の化合物を挙げることができる。
【0052】
【化11】
【0053】
【化12】
【0054】
【化13】
【0055】
【化14】
（上記リンカーの構造式は、側鎖官能基等に結合する前の状態かつ液相ペプチド合成用担体と結合する前の状態を示す）。
【0056】
もう一方の原料である、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとは、アミノ酸又はペプチドのアミノ基がアミノ保護基で保護されており、一方、カルボキシル基は保護されておらず反応性であるアミノ酸又はペプチドを意味する。アミノ酸又はペプチドが１以上のアミノ基を有する場合は、少なくとも一つのアミノ基がアミノ保護基で保護されていれば良い。
アミノ保護基としては、Ｆｍоｃ基、Ｂоｃ基、Ｃｂｚ基、Ａｃ基などが挙げられ、このうち塩基性条件で脱保護できるＦｍоｃ基がより好ましい。
なお、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後の任意の時点で、必要に応じて保護基を除去することで目的化合物を得ることができる。
水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
アミノ保護基としては、Ｆｍоｃ基、Ｂоｃ基、Ｃｂｚ基、Ａｃ基などが挙げられ、このうち塩基性条件で脱保護できるＦｍоｃ基がより好ましい。
なお、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後の任意の時点で、必要に応じて保護基を除去することで目的化合物を得ることができる。
水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ－ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
【0057】
アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドは、例えば、アミノ保護基でアミノ基を保護したいアミノ酸又はペプチドに、例えばＴＨＦなどの溶媒中でクロロギ酸９－フルオレニルメチルエステルを縮合剤の存在下に反応させることにより、製造することができる。
【0058】
本発明の工程ａは前記の原料を縮合させる工程であり、工程ａに用いられる反応溶媒は有機溶媒を含む溶媒である。本発明で用いる前記の液相ペプチド合成用担体でアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドを保護すれば、当該液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、有機溶媒に溶解するようになるため、液相ペプチド合成が可能となる。
そのような有機溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、シクロヘキサン、シクロペンチルメチルエーテル（ＣＰＭＥ）、メチル－ｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、２－メチルＴＨＦ、４－メチルテトラヒドロピラン（４－メチルＴＨＰ）、酢酸イソプロピル、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ－メチルピロリドンを挙げることができ、好ましくは、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、２－メチルＴＨＦ、４－メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、Ｎ－メチルピロリドンである。さらに、上記溶媒の２種以上の混合溶媒でもよい。
そのような有機溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、シクロヘキサン、シクロペンチルメチルエーテル（ＣＰＭＥ）、メチル－ｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、２－メチルＴＨＦ、４－メチルテトラヒドロピラン（４－メチルＴＨＰ）、酢酸イソプロピル、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ－メチルピロリドンを挙げることができ、好ましくは、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、２－メチルＴＨＦ、４－メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、Ｎ－メチルピロリドンである。さらに、上記溶媒の２種以上の混合溶媒でもよい。
【0059】
縮合反応は、前記有機溶媒を含む溶媒中で、前記液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミド（以下、液相ペプチド合成用担体結合ペプチドと略する）と、前記アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチド（以下、アミノ基保護アミノ酸と略する）と、縮合剤とを混合することにより行うことができる。
【0060】
液相ペプチド合成用担体結合ペプチドに対する、アミノ基保護アミノ酸の使用量は、液相ペプチド合成用担体結合ペプチドに対して、通常１．０１～４当量、好ましくは１．０３～３当量、より好ましくは１．０５～２当量、さらに好ましくは１．１～１．５当量である。本発明のペプチド製造法では、未反応のアミノ酸の活性エステルをその後に添加するスカベンジャーで捕捉して不活性化することができる。そのため、過剰のアミノ基保護アミノ酸を用いても、残存の問題が生じない。
【0061】
縮合剤としては、ペプチド合成において一般的に用いられる縮合剤を、本発明においても用いることができる、例えば、４－（４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン－２－イル）－４－メチルモルホニウムクロリド（ＤＭＴ－ＭＭ）、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、Ｏ－（６－クロロベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ（６－Ｃｌ））、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、Ｏ－（６－クロロベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＣＯＭＵ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＩ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、及び１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＷＳＣ）を挙げることができる。好ましくは、ＤＭＴ－ＭＭ、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、又はＣＯＭＵである。縮合剤の使用量は、液相ペプチド合成用担体結合ペプチドに対して、好ましくは１～４当量、より好ましくは１～２当量、さらに好ましくは１．０５～１．３当量である。
【0062】
縮合工程において、反応を促進し、ラセミ化などの副反応を抑制するために、好ましくは、活性化剤が添加される。ここで活性化剤とは、縮合剤との共存化で、アミノ酸を、対応する活性エステル、対称酸無水物などに導いて、ペプチド結合（アミド結合）を形成させやすくする試薬である。活性化剤としては、ペプチド合成において一般的に用いられる活性化剤を用いることができる。例えば、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、１－ヒドロキシ－１Ｈ－１，２，３－トリアゾールカルボン酸エチル（ＨＯＣｔ）、１－ヒドロキシ－7－アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）、３－ヒドロキシ－４－ケトベンゾトリアジン（ＨＯＯＢｔ）、Ｎ－ヒドロキシコハク酸イミド（ＨＯＳｕ）、Ｎ－ヒドロキシフタルイミド（ＨＯＰｈｔ）、Ｎ－ヒドロキシ－５－ノルボルネン－２，３－ジカルボキシイミド（ＨＯＮｂ）、ペンタフルオロフェノール、シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル（Ｏｘｙｍａ）等を挙げることができる。好ましくは、ＨＯＢｔ、ＨＯＯＢｔ、ＨＯＣｔ、ＨＯＡｔ、ＨＯＮｂ、ＨＯＳｕ、Ｏｘｙｍａである。活性化剤の使用量は、液相ペプチド合成用担体結合ペプチドに対して、好ましくは１～４当量、より好ましくは１～２当量、さらに好ましくは１．０５～１．３当量である。
【0063】
前記溶媒の使用量は、液相ぺプチド合成用担体結合ペプチド等を溶解した濃度が、好ましくは０．１ｍＭ～１Ｍとなる量であり、より好ましくは１ｍＭ～０．５Ｍとなる量である。
反応温度は、ペプチド合成において一般的に用いられる温度、例えば、－２０～４０℃が好ましく、より好ましくは０～３０℃である。反応時間（１サイクルの時間）は、通常０．５～３０時間である。
反応温度は、ペプチド合成において一般的に用いられる温度、例えば、－２０～４０℃が好ましく、より好ましくは０～３０℃である。反応時間（１サイクルの時間）は、通常０．５～３０時間である。
【0064】
工程ｂは、縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程である。
この工程は、縮合反応で副生するアミノ酸活性エステルをスカベンジする工程であり、当該スカベンジャーとしてアミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれる化合物を用いることを特徴とする。これらの化合物をスカベンジャーとして用いることにより、系内を酸性条件とすることなく、アミノ酸活性エステルを捕捉、除去できる。
この工程は、縮合反応で副生するアミノ酸活性エステルをスカベンジする工程であり、当該スカベンジャーとしてアミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれる化合物を用いることを特徴とする。これらの化合物をスカベンジャーとして用いることにより、系内を酸性条件とすることなく、アミノ酸活性エステルを捕捉、除去できる。
【0065】
当該アミノ酸活性エステルスカベンジャーとしては、次の一般式（１）で表されるアミノスルホン酸類及びアミノ硫酸類；
【0066】
【化15】
【0067】
（Ｒ1は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ1は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類；
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類；
【0068】
【化16】
【0069】
（Ｒ2は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ2は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（３）で表されるアミノアルコール類が好ましい。
一般式（３）で表されるアミノアルコール類が好ましい。
【0070】
【化17】
【0071】
（ｎは０～２０の整数を示し、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
【0072】
一般式（１）中のＲ1及び一般式（２）のＲ2は、独立して、炭素数１～１０の２価の有機基であり、好ましくは、炭素数１～１０の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、炭素数６～１０のアリーレン基が挙げられる。具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、ペンタメチレン基、フェニレン基、ナフチレン基などが挙げられる。
このうち、これらの化合物の溶解性の点から、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、炭素数６～８のアリーレン基がより好ましく、炭素数１～６の直鎖又は分岐際のアルキレン基がさらに好ましく、炭素数１～５の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基がよりさらに好ましく、炭素数１～３の直鎖アルキレン基がさらに好ましく、炭素数１又は２の直鎖アルキレン基が最も好ましい。
一般式（１）において、Ｘ1が単結合の場合はアミノスルホン酸類であり、Ｘ1が酸素原子の場合はアミノ硫酸類である。
一般式（２）において、Ｘ2が単結合の場合はアミノホスホン酸類であり、Ｘ2が酸素原子の場合はアミノリン酸類である。
このうち、これらの化合物の溶解性の点から、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、炭素数６～８のアリーレン基がより好ましく、炭素数１～６の直鎖又は分岐際のアルキレン基がさらに好ましく、炭素数１～５の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基がよりさらに好ましく、炭素数１～３の直鎖アルキレン基がさらに好ましく、炭素数１又は２の直鎖アルキレン基が最も好ましい。
一般式（１）において、Ｘ1が単結合の場合はアミノスルホン酸類であり、Ｘ1が酸素原子の場合はアミノ硫酸類である。
一般式（２）において、Ｘ2が単結合の場合はアミノホスホン酸類であり、Ｘ2が酸素原子の場合はアミノリン酸類である。
【0073】
一般式（３）中のｎは、０～２０の整数を示す。このうちｎは、０又は２～２０が好ましく、０又は２～６がより好ましく、０又は２～４がさらに好ましい。一般式（３）中のＲ3、Ｒ4は、水素原子またはヒドロキシルメチル基が好ましい。
【0074】
工程ｂにおける本発明のスカベンジャーの添加量は、理論上残存する活性アミノ酸エステル１当量に対して、好ましくは１～１０当量、より好ましくは１～６当量、さらに好ましくは１～４当量である。本発明のスカベンジャーの添加量が少なすぎると、アミノ酸活性エステルのスカベンジ（捕捉）が不充分となり、残存したアミノ酸活性エステルと工程ｄで生成したアミノ基が反応するダブルヒットが起こり、純度、収率を低下させる。一方、多すぎると、同時に脱アミノ保護基反応が進行し、残存しているアミノ酸活性エステルが、アミノ保護基の脱離により再生したアミノ基と反応するダブルヒットが起こり、純度、収率を低下させる。
【0075】
また、工程ｂの別の態様として、以下を挙げることができる。
工程ｂの別の態様は、縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程である。
この工程は、縮合反応で副生するアミノ酸活性エステルをスカベンジする工程であり、当該スカベンジャーとしてアミノスルホン酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれる化合物を用いることを特徴とする。これらの化合物をスカベンジャーとして用いることにより、系内を酸性条件とすることなく、アミノ酸活性エステルが除去でき、固液分離や分液不良を解消した。
工程ｂの別の態様は、縮合反応後の反応液に、アミノスルホン酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程である。
この工程は、縮合反応で副生するアミノ酸活性エステルをスカベンジする工程であり、当該スカベンジャーとしてアミノスルホン酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類から選ばれる化合物を用いることを特徴とする。これらの化合物をスカベンジャーとして用いることにより、系内を酸性条件とすることなく、アミノ酸活性エステルが除去でき、固液分離や分液不良を解消した。
【0076】
当該アミノ酸活性エステルスカベンジャーとしては、次の一般式（１ａ）で表されるアミノスルホン酸類；
【0077】
【化18】
【0078】
（Ｒ1は炭素数１～１０の２価の有機基を示す）
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類；
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類；
【0079】
【化19】
【0080】
（Ｒ2は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ2は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（３）で表されるアミノアルコール類が好ましい。
一般式（３）で表されるアミノアルコール類が好ましい。
【0081】
【化20】
【0082】
（ｎは０～２０の整数を示し、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
【0083】
一般式（１ａ）中のＲ1及び一般式（２）のＲ2は、独立して、炭素数１～１０の２価の有機基であり、好ましくは、炭素数１～１０の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、炭素数６～１０のアリーレン基が挙げられる。具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、ペンタメチレン基、フェニレン基、ナフチレン基などが挙げられる。
このうち、これらの化合物の溶解性の点から、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、炭素数６～８のアリーレン基がより好ましく、炭素数１～６の直鎖又は分岐際のアルキレン基がさらに好ましく、炭素数１～５の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基がよりさらに好ましく、炭素数１～３の直鎖アルキレン基がさらに好ましく、炭素数１又は２の直鎖アルキレン基が最も好ましい。
一般式（１ａ）の化合物はアミノスルホン酸類である。
一般式（２）において、Ｘ2が単結合の場合はアミノホスホン酸類であり、Ｘ2が酸素原子の場合はアミノリン酸類である。
このうち、これらの化合物の溶解性の点から、炭素数１～６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、炭素数６～８のアリーレン基がより好ましく、炭素数１～６の直鎖又は分岐際のアルキレン基がさらに好ましく、炭素数１～５の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基がよりさらに好ましく、炭素数１～３の直鎖アルキレン基がさらに好ましく、炭素数１又は２の直鎖アルキレン基が最も好ましい。
一般式（１ａ）の化合物はアミノスルホン酸類である。
一般式（２）において、Ｘ2が単結合の場合はアミノホスホン酸類であり、Ｘ2が酸素原子の場合はアミノリン酸類である。
【0084】
一般式（３）中のｎは、０～２０の整数を示す。このうちｎは、０又は２～２０が好ましく、０又は２～６がより好ましく、０又は２～４がさらに好ましい。一般式（３）中のＲ3、Ｒ4は、水素原子またはヒドロキシルメチル基が好ましい。
【0085】
工程ｂにおける本発明のスカベンジャーの添加量は、理論上残存する活性アミノ酸エステル１当量に対して、好ましくは１～１０当量、より好ましくは１～６当量、さらに好ましくは１～４当量である。本発明のスカベンジャーの添加量が少なすぎると、アミノ酸活性エステルのスカベンジ（捕捉）が不充分となり、残存したアミノ酸活性エステルと工程ｃで生成したアミノ基が反応するダブルヒットが起こり、純度、収率を低下させる。一方、多すぎると、同時に脱アミノ保護基反応が進行し、残存しているアミノ酸活性エステルが、アミノ保護基の脱離により再生したアミノ基と反応するダブルヒットが起こり、純度、収率を低下させる。
【0086】
工程ｃは、反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程である。
当該アミノ保護基の脱離工程は、アミノ保護基の種類により相違する。例えば、アミノ保護基がＦｍｏｃ基の場合は反応液を塩基性条件とすればよい。アミノ保護基がＢｏｃ基の場合は反応液を酸性条件とすればよい。アミノ保護基がＣｂｚ基の場合は接触還元すればよい。アミノ保護基がＡｃ基の場合は、強酸又は強塩基条件で脱保護すればよい。このうち、ワンポット液相合成とするには、アミノ保護基をＦｍｏｃ基とするのがより好ましい。
当該アミノ保護基の脱離工程は、アミノ保護基の種類により相違する。例えば、アミノ保護基がＦｍｏｃ基の場合は反応液を塩基性条件とすればよい。アミノ保護基がＢｏｃ基の場合は反応液を酸性条件とすればよい。アミノ保護基がＣｂｚ基の場合は接触還元すればよい。アミノ保護基がＡｃ基の場合は、強酸又は強塩基条件で脱保護すればよい。このうち、ワンポット液相合成とするには、アミノ保護基をＦｍｏｃ基とするのがより好ましい。
【0087】
アミノ保護基がＦｍｏｃ基の場合のアミノ保護基の脱離工程について説明する。
Ｆｍｏｃ脱離工程は、反応液を塩基性にできればよいが、アミン化合物、例えば、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン（ＤＢＵ）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］－５－ノネン（ＤＢＮ）、１，４－ジアザビシクロ［２．２．２］－オクタン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、トリブチルアミンなどの３級アミン類；１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１－エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン、ピぺリジン、ピペラジンなどの１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミン類を用いることができる。好ましくは、ＤＢＵ、ピぺリジン、１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミンであり、より好ましくは、ＤＢＵ、ピぺリジン、１－メチルピペラジンである。さらに好ましくはＤＢＵである。
工程ｃにおいて添加するアミン化合物の当量は、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、１～３０当量、好ましくは４～２０当量、より好ましくは４～１０当量である。
Ｆｍｏｃ脱離工程は、反応液を塩基性にできればよいが、アミン化合物、例えば、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン（ＤＢＵ）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］－５－ノネン（ＤＢＮ）、１，４－ジアザビシクロ［２．２．２］－オクタン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、トリブチルアミンなどの３級アミン類；１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１－エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン、ピぺリジン、ピペラジンなどの１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミン類を用いることができる。好ましくは、ＤＢＵ、ピぺリジン、１－メチルピペラジン、４－アミノピペリジン、ジエチレントリアミンであり、より好ましくは、ＤＢＵ、ピぺリジン、１－メチルピペラジンである。さらに好ましくはＤＢＵである。
工程ｃにおいて添加するアミン化合物の当量は、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、１～３０当量、好ましくは４～２０当量、より好ましくは４～１０当量である。
【0088】
また、前記アミン化合物に加えて、脱Ｆｍｏｃ反応により生じるＤＢＦ（ジベンゾフルベン）のトラッピング剤を添加するのが好ましい。ここで用いられるＤＢＦのトラッピング剤としては、メルカプト化合物が挙げられる。用いることができるメルカプト化合物としては、メルカプト基を有し、ＤＢＦと反応した化合物が水溶性を示すものであれば特に限定されないが、例えばメルカプト脂肪酸又はそのアルカリ金属塩、下記の一般式（４）又は（５）
【0089】
【化21】
【0090】
（式中、Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示し、Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す）
で表される化合物が挙げられる。
で表される化合物が挙げられる。
【0091】
メルカプト脂肪酸又はそのアルカリ金属塩としては、メルカプトＣ１～２０脂肪酸又はそのアルカリ金属塩が好ましく、メルカプトＣ１～６脂肪酸又はそのアルカリ金属塩がより好ましい。
一般式（４）又は（５）中Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示す。当該２価の有機基としては、炭素数１～１０の２価の有機基が好ましく、より好ましくは、メルカプト基を有していてもよい炭素数１～１０の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数６～１０のアリーレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数４～９のヘテロアリーレン基が挙げられる。具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、メルカプトトリメチレン基、メルカプトプロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、ペンタメチレン基、フェニレン基、ナフチレン基、インドール基、ベンズイミダゾール基、キノリル基、イソキノリン基などが挙げられる。
Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す。具体的には、水素原子、ナトリウム、カリウムが挙げられる。
具体的には、メルカプトメタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸、３－メルカプトプロパンスルホン酸ナトリウム、１，３－ジメルカプトプロパンスルホン酸、２－メルカプトベンズイミダゾール－５－スルホン酸ナトリウム、メルカプトメタンホスホン酸ナトリウム、メルカプトエタンホスホン酸、３－メルカプトプロパンホスホン酸ナトリウム、１，３－ジメルカプトプロパンホスホン酸ナトリウムなどが挙げられる。
一般式（４）又は（５）中Ｌ１及びＬ２は、それぞれ２価の有機基を示す。当該２価の有機基としては、炭素数１～１０の２価の有機基が好ましく、より好ましくは、メルカプト基を有していてもよい炭素数１～１０の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数６～１０のアリーレン基、メルカプト基を有していてもよい炭素数４～９のヘテロアリーレン基が挙げられる。具体的には、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、メルカプトトリメチレン基、メルカプトプロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、ペンタメチレン基、フェニレン基、ナフチレン基、インドール基、ベンズイミダゾール基、キノリル基、イソキノリン基などが挙げられる。
Ｍは水素原子又はアルカリ金属を示す。具体的には、水素原子、ナトリウム、カリウムが挙げられる。
具体的には、メルカプトメタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸ナトリウム、２－メルカプトエタンスルホン酸、３－メルカプトプロパンスルホン酸ナトリウム、１，３－ジメルカプトプロパンスルホン酸、２－メルカプトベンズイミダゾール－５－スルホン酸ナトリウム、メルカプトメタンホスホン酸ナトリウム、メルカプトエタンホスホン酸、３－メルカプトプロパンホスホン酸ナトリウム、１，３－ジメルカプトプロパンホスホン酸ナトリウムなどが挙げられる。
【0092】
メルカプト化合物の添加量は、理論上副生するＤＢＦの量に対して１～３０当量が好ましく、１～１０当量がより好ましく、１～５当量がさらに好ましい。
前記アミン化合物とメルカプト化合物は、同時に添加してもよく、メルカプト化合物、次いでアミン化合物の順に添加してもよく、塩基を加えＦｍｏｃ基を除去したのちにメルカプト化合物を加えてもよい。
Ｆｍｏｃ脱離工程は、－２０～４０℃の温度で、５分～５時間行えばよい。
前記アミン化合物とメルカプト化合物は、同時に添加してもよく、メルカプト化合物、次いでアミン化合物の順に添加してもよく、塩基を加えＦｍｏｃ基を除去したのちにメルカプト化合物を加えてもよい。
Ｆｍｏｃ脱離工程は、－２０～４０℃の温度で、５分～５時間行えばよい。
【0093】
工程ｄは、反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程である。
工程ｃの反応液に水溶液を添加した後、水層と有機溶媒層を分液する。
水層には、アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドと活性エステルスカベンジャーとの縮合体と、ＤＢＦ－トラッピング剤付加体が含まれる。すなわち、アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドと活性エステルスカベンジャーとの縮合体は、工程ｄの水溶液の添加だけで、容易に水層に抽出される。
一方、有機溶媒層には、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体が含まれる。
ここで、用いられる水溶液としては、水、又は中性付近のｐHを有する水溶液が挙げられる。具体的には、水、塩化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液、炭酸カリウム水溶液、リン酸水素二ナトリウム水溶液、リン酸三ナトリウム水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液、炭酸水素カリウム水溶液、リン酸水素二カリウム水溶液、リン酸三カリウム水溶液等が挙げられる。
工程ｃの反応液に水溶液を添加した後、水層と有機溶媒層を分液する。
水層には、アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドと活性エステルスカベンジャーとの縮合体と、ＤＢＦ－トラッピング剤付加体が含まれる。すなわち、アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドと活性エステルスカベンジャーとの縮合体は、工程ｄの水溶液の添加だけで、容易に水層に抽出される。
一方、有機溶媒層には、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体が含まれる。
ここで、用いられる水溶液としては、水、又は中性付近のｐHを有する水溶液が挙げられる。具体的には、水、塩化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液、炭酸カリウム水溶液、リン酸水素二ナトリウム水溶液、リン酸三ナトリウム水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液、炭酸水素カリウム水溶液、リン酸水素二カリウム水溶液、リン酸三カリウム水溶液等が挙げられる。
【0094】
このように、本発明の工程ａ～ｄによれば、単に水溶液を添加して分液するだけで、酸性水溶液を使用する必要がないので、アミノ酸活性エステルと生成物であるペプチドとの分液不良が起こることがない。また、固液分離を必要としないので、ペプチドの液相製造において、単離操作を行うことなく、次工程のペプチド伸長反応を行えるためワンポット合成が可能になる。前記した一連の工程は、マイクロフロー技術を用いて実施しても良い。マイクロフロー技術を用いたペプチド合成技術については、例えばＮａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ７， Ａｒｔｉｃｌｅ ｎｕｍｂｅｒ：１３４９１（２０１６）に記載がある。また、得られた有機溶媒層は、さらに任意のアミノ酸との縮合反応に利用できる。
【実施例0095】
次に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではない。
なお、液相ペプチド合成用担体として、以下に示す化合物を使用した。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型ベンジル化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｂ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
なお、液相ペプチド合成用担体として、以下に示す化合物を使用した。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型ベンジル化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｂ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
【0096】
【化22】
【0097】
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型ジフェニルメタン化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｄ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
【0098】
【化23】
【0099】
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）は、上記Ｄ－ＳＴａｇのアミノ基がＦｍｏｃ基で保護された化合物である。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型キサンテン化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｘ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
・ＴＩＰＳ２－ＯＨ（Ｃ１１）型キサンテン化合物（積水メディカル社製）（以下、Ｘ－ＳＴａｇと記すことがある）。但し、ＴＩＰＳは、トリイソプロピルシリル基を示す。
【0100】
【化24】
【0101】
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）は、上記Ｘ－ＳＴａｇのアミノ基がＦｍｏｃ基で保護された化合物である。
また、以下の実施例では、Ｂ－ＳＴａｇがＦｍｏｃ保護ｔＢｕ保護グルタミン酸（Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ）と結合した化合物を、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）と表記し、下記の構造を示すものとする。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨに限らず、他のアミノ酸と結合した場合も、これに準ずる表記とする。
また、以下の実施例では、Ｂ－ＳＴａｇがＦｍｏｃ保護ｔＢｕ保護グルタミン酸（Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ）と結合した化合物を、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）と表記し、下記の構造を示すものとする。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨに限らず、他のアミノ酸と結合した場合も、これに準ずる表記とする。
【0102】
【化25】
【0103】
また、Ｄ－ＳＴａｇがＦｍｏｃ保護ｔＢｕ保護スレオニン（Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ）と結合した化合物を、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）と表記し、これは下記の構造を示すものとする。スレオニンに限らず、他のアミノ酸と結合した場合も、これに準ずる表記とする。
【0104】
【化26】
【0105】
また、Ｘ－ＳＴａｇがＦｍｏｃ保護フェニルアラニン（Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ）と結合した化合物をＦｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）と表記し、これは下記の構造を示すものとする。フェニルアラニンに限らず、他のアミノ酸と結合した場合も、これに準ずる表記とする。
【0106】
【化27】
【0107】
実施例１
アミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物の、水洗浄による除去率に関する検討
スカベンジャーとして、タウリン（実施例１－１）、２－ＡＥＨＳ（硫酸水素２－アミノエチル：２-アミノエチル硫酸）（実施例１－２）又はＡＥＡＥ（２－（２－アミノエチルアミノ）エタノール）（比較例１）のいずれかを使用し、以下の検討を実施した。なお、タウリンは０．６Ｍの水溶液として、２－ＡＥＨＳは０．２５ＭのＤＭＳＯ溶液として添加した。
ＣＰＭＥ ７ｍＬ、ＤＭＦ ３ｍＬの混合溶液に、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．８８ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．６４ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、Ｏｘｙｍａ ０．６４ｇ（４．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ １．５５ｇ（１２．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。スカベンジャーを１．８ｍｍｏｌ添加し、室温で１５分攪拌した後、本液をＨＰＬＣにて分析し、アミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物の量を検証した。続いて、ＤＢＵ ０．６９ｇ（４．５ｍｍｏｌ）を加え、３０分撹拌し、本液をＨＰＬＣにて分析した後に（分析（１））、１Ｎ塩酸４．５ｍＬを加え、分液した。得られた有機層をＨＰＬＣにて分析し（分析（２））、アミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物の水層への除去率、すなわち洗浄性を検証した。結果を表１に示した。
アミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物の、水洗浄による除去率に関する検討
スカベンジャーとして、タウリン（実施例１－１）、２－ＡＥＨＳ（硫酸水素２－アミノエチル：２-アミノエチル硫酸）（実施例１－２）又はＡＥＡＥ（２－（２－アミノエチルアミノ）エタノール）（比較例１）のいずれかを使用し、以下の検討を実施した。なお、タウリンは０．６Ｍの水溶液として、２－ＡＥＨＳは０．２５ＭのＤＭＳＯ溶液として添加した。
ＣＰＭＥ ７ｍＬ、ＤＭＦ ３ｍＬの混合溶液に、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．８８ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．６４ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、Ｏｘｙｍａ ０．６４ｇ（４．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ １．５５ｇ（１２．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。スカベンジャーを１．８ｍｍｏｌ添加し、室温で１５分攪拌した後、本液をＨＰＬＣにて分析し、アミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物の量を検証した。続いて、ＤＢＵ ０．６９ｇ（４．５ｍｍｏｌ）を加え、３０分撹拌し、本液をＨＰＬＣにて分析した後に（分析（１））、１Ｎ塩酸４．５ｍＬを加え、分液した。得られた有機層をＨＰＬＣにて分析し（分析（２））、アミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物の水層への除去率、すなわち洗浄性を検証した。結果を表１に示した。
【0108】
ＨＰＬＣ分析条件
カラム：ＭｏｎｏＢｉｓカラム ３．２×１５０ｍｍ 低圧タイプ、メソポア径１１ｍｍ、ＯＤＳ・エンドキャップ（株式会社京都モノテック、製品番号３２１５０Ｌ１１ＯＤＳ）
移動相A：０．１%ギ酸含有５%イソプロパノール―５%イソプロピルエーテル水溶液
移動相B：０．１%ギ酸含有８５%イソプロパノール―５%イソプロピルエーテル水溶液
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：６０℃
検出波長：２１５ｎｍ
グラジエント条件：５％Ｂ（０分）→５%Ｂ（１分）→１００%Ｂ（１１分）→１００%Ｂ（１６分）→５%Ｂ（１７分）→５%Ｂ（２０分）
カラム：ＭｏｎｏＢｉｓカラム ３．２×１５０ｍｍ 低圧タイプ、メソポア径１１ｍｍ、ＯＤＳ・エンドキャップ（株式会社京都モノテック、製品番号３２１５０Ｌ１１ＯＤＳ）
移動相A：０．１%ギ酸含有５%イソプロパノール―５%イソプロピルエーテル水溶液
移動相B：０．１%ギ酸含有８５%イソプロパノール―５%イソプロピルエーテル水溶液
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：６０℃
検出波長：２１５ｎｍ
グラジエント条件：５％Ｂ（０分）→５%Ｂ（１分）→１００%Ｂ（１１分）→１００%Ｂ（１６分）→５%Ｂ（１７分）→５%Ｂ（２０分）
【0109】
【表1】
【0110】
アミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物の除去率は、分析（１）におけるアミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物のＨＰＬＣピーク面積Ａと、分析（２）におけるアミノ酸活性エステルとスカベンジャーの縮合物のＨＰＬＣピーク面積Ｂより算出した。
除去率＝｛（Ａ－Ｂ）／Ａ｝×１００（％）
除去率が高いほど、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルとスカベンジャーの縮合物が水層に除去されやすく、有用なスカベンジャーであると言える。
除去率＝｛（Ａ－Ｂ）／Ａ｝×１００（％）
除去率が高いほど、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルとスカベンジャーの縮合物が水層に除去されやすく、有用なスカベンジャーであると言える。
【0111】
表１より、スカベンジャーとして実施例１－１のタウリン、実施例１－２の２－ＡＥＨＳを用いた場合は、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルとスカベンジャーの縮合体を全て水層に除去することができた。これは、比較例１のＡＥＡＥを用いた場合の３４％と比較すると極めて良好な結果であった。なお、ＡＥＡＥは２価の水溶性アミンであり、２価の水溶性アミンは特許文献１７でスカベンジャーとして有用とされている化合物である。
【0112】
実施例２
Ｘ－ＳＴａｇに対して３．０当量のＦｍｏｃ保護フェニルアラニン（Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ）を添加し、３段階に分けてペプチド鎖を伸長する反応において、スカベンジャーを使用しなかった場合（比較例２）、スカベンジャーとしてタウリンを使用した場合（実施例２）のＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＮＨ2の合成結果を比較した。なお、タウリンは０．６Ｍの水溶液として添加した。
Ｘ－ＳＴａｇに対して３．０当量のＦｍｏｃ保護フェニルアラニン（Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ）を添加し、３段階に分けてペプチド鎖を伸長する反応において、スカベンジャーを使用しなかった場合（比較例２）、スカベンジャーとしてタウリンを使用した場合（実施例２）のＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＮＨ2の合成結果を比較した。なお、タウリンは０．６Ｍの水溶液として添加した。
【0113】
１）Ｈ―Ｐｈｅ－ＮＨ－（X－ＳＴａｇ）の合成
Ｘ－ＳＴａｇ ０．４４ｇ（０．５ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ ７ｍＬ、ＤＭＦ ３ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ―ＯＨ ０．５８ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．６４（１．５ｍｍｏｌ）、Ｏｘｙｍａ ０．２１ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ ０．２６ｇ（２．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｘ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、スカベンジャーを添加する場合は２．０ｍｍｏｌ分を加え、室温で１５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－プロパンスルホン酸ナトリウム０．５４ｇ（３．０ｍｍｏｌ）（１．２ｍｏｌ／ＬとなるようＤＭＳＯに溶解）を添加し、ＤＢＵ ０．８８ｇ（５．８ｍｍｏｌ）を加え、３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｐｈｅ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｎ 塩酸３．４ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に５０％リン酸水素二カリウム水溶液６．７ｍＬ、ＤＭＳＯ ０．１８ｍＬ、ＤＭＦ ０．１８ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーと縮合した化合物がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ ７ｍＬを加え、Ｈ―Ｐｈｅ―ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｘ－ＳＴａｇ ０．４４ｇ（０．５ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ ７ｍＬ、ＤＭＦ ３ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ―ＯＨ ０．５８ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．６４（１．５ｍｍｏｌ）、Ｏｘｙｍａ ０．２１ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ ０．２６ｇ（２．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｘ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、スカベンジャーを添加する場合は２．０ｍｍｏｌ分を加え、室温で１５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－プロパンスルホン酸ナトリウム０．５４ｇ（３．０ｍｍｏｌ）（１．２ｍｏｌ／ＬとなるようＤＭＳＯに溶解）を添加し、ＤＢＵ ０．８８ｇ（５．８ｍｍｏｌ）を加え、３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｐｈｅ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｎ 塩酸３．４ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に５０％リン酸水素二カリウム水溶液６．７ｍＬ、ＤＭＳＯ ０．１８ｍＬ、ＤＭＦ ０．１８ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーと縮合した化合物がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ ７ｍＬを加え、Ｈ―Ｐｈｅ―ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0114】
２）同様に、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成を実施した。得られたＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）のＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、得られた固体を室温で減圧乾燥し、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）を得た。
【0115】
３）Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ2の合成
各条件で得られたＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）に、トリフルオロ酢酸、水、トリイソプロピルシラン、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオールの９２．５／２．５／２．５／２．５混合液を、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）の濃度が５０ｍＭとなるよう添加し、室温で１時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）の９０％（ｖ/ｗ）のＭＴＢＥをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物を、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）に対して６８．４％（ｖ/ｗ）のＭＴＢＥで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ2を得た。
得られたＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ2の純度をＨＰＬＣで測定した。結果を表２に示した。ＨＰＬＣ分析条件は、実施例１と同一である。
各条件で得られたＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）に、トリフルオロ酢酸、水、トリイソプロピルシラン、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオールの９２．５／２．５／２．５／２．５混合液を、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）の濃度が５０ｍＭとなるよう添加し、室温で１時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）の９０％（ｖ/ｗ）のＭＴＢＥをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物を、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ―（Ｘ－ＳＴａｇ）に対して６８．４％（ｖ/ｗ）のＭＴＢＥで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ2を得た。
得られたＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ2の純度をＨＰＬＣで測定した。結果を表２に示した。ＨＰＬＣ分析条件は、実施例１と同一である。
【0116】
【表2】
【0117】
スカベンジャーを使用しなかった比較例２の場合、目的物であるＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－ＮＨ2の純度は６２．８％であり、ダブルヒット体であるＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＮＨ2や、トリプルヒット体であるＨ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ―Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＮＨ2の混入が確認された。一方、スカベンジャーとしてタウリンを使用した場合（実施例２）、目的物の純度は８８．５％と、比較例２よりも高くなった。上記成績から、タウリンがアミノ酸活性エステルのスカベンジャーとして有用であることが示された。
【0118】
実施例３
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ２．４０ｇ（３．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ６ｍＬ、ＴＨＦ９ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ３.２１ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ １．４４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン３６．８ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．９４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３８ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．４２ｇ（８．６ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ５．１ｍＬ（３４ｍｍｏｌ）を加え、２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液７５ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１７ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液６ｍＬ、ＤＭＦ １．２ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ２７ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ２．４０ｇ（３．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ６ｍＬ、ＴＨＦ９ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ３.２１ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ １．４４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン３６．８ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．９４ｇ（７．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３８ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．４２ｇ（８．６ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ５．１ｍＬ（３４ｍｍｏｌ）を加え、２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液７５ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１７ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液６ｍＬ、ＤＭＦ １．２ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ２７ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0119】
２）Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２.３８ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２.３８ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0120】
３）Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２.４３ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ２.４３ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0121】
４）Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ一水和物 １.３３ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で１時間半撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下した後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ一水和物 １.３３ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で１時間半撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下した後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0122】
５）Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．６７ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下した後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） ４．５８ｇを得た。
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ２ｍＬ、ＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．６７ｇ（４．１ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ １．６７ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ２．１ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、タウリン０．５５ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １６ｍＬを加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム１．１９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ １．３ｍＬを添加し、ＤＢＵ２．７ｍＬ（１８ｍｍｏｌ）を加え、４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液９．６ｍＬを滴下した後、５％炭酸ナトリウム水溶液６０ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水３８ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬ、ＤＭＦ ２．７ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたタウリンと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） ４．５８ｇを得た。
【0123】
６）Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６２ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２９ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２９ｍＬ、ジチオトレイトール８６５ｍｇ、アニソール０．５８ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ジイソプロピルエーテル７２ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をジイソプロピルエーテル１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は９０．５%であった。
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６２ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２９ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２９ｍＬ、ジチオトレイトール８６５ｍｇ、アニソール０．５８ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ジイソプロピルエーテル７２ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をジイソプロピルエーテル１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は９０．５%であった。
【0124】
実施例４
Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
１）Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ） １．０９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ９ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ＤＩＥＰＡ ０．３２ｍＬ（１．９ｍｍｏｌ）、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３０ｇ（１．８ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．６７ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１時間撹拌し、Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液２．４ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液し、ＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
このＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．６ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ ０.５５ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。ＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－［２－（２－アミノエトキシ）エトキシ］エタノール（ＡＥＥＥ）６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
１）Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ） １．０９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ９ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ＤＩＥＰＡ ０．３２ｍＬ（１．９ｍｍｏｌ）、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３０ｇ（１．８ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．６７ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１時間撹拌し、Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液２．４ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液し、ＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
このＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．６ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ ０.５５ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。ＮＨ2－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－［２－（２－アミノエトキシ）エトキシ］エタノール（ＡＥＥＥ）６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0125】
２）Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．７ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、５０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．７ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、５０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0126】
３）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０.５８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０.５８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0127】
４)Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ ０.７１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ ０.７１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0128】
５）Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.８２ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３．０ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ２４ｍＬ、ＩＰＡ１８ｍＬ、ＣＰＭＥ６ｍＬ、水１２ｍＬを加え、析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ） １．８４ｇを得た。
上記のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.８２ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、ＡＥＥＥ６２μＬ（０．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３．０ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ２４ｍＬ、ＩＰＡ１８ｍＬ、ＣＰＭＥ６ｍＬ、水１２ｍＬを加え、析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ） １．８４ｇを得た。
【0129】
６）Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）１．１４ｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２５ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２５ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ７０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2 ２２７ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の純度は７７．２%であった。
Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｄ－ＳＴａｇ）１．１４ｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２５ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２５ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ７０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2 ２２７ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の純度は７７．２%であった。
【0130】
実施例５
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ０．７９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ２ｍＬ、ＴＨＦ３ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．０６ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ ０．４８ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン１２．２ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール１５０μＬ（２．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．７４ｇ（４．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ４．５ｍＬを添加し、ＤＢＵ１．７ｍＬ（１１．３ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液６ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１９ｍＬを加えた後、室温まで昇温し分液した。得られた有機層に２０％食塩水２０ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ９ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ０．７９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ２ｍＬ、ＴＨＦ３ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ １．０６ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ ０．４８ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン１２．２ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール１５０μＬ（２．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．７４ｇ（４．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ４．５ｍＬを添加し、ＤＢＵ１．７ｍＬ（１１．３ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液６ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１９ｍＬを加えた後、室温まで昇温し分液した。得られた有機層に２０％食塩水２０ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ９ｍＬ加え、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0131】
２）Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.７９ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５７ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間半撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、２５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.７９ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５７ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間半撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、２５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0132】
３)Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．８１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬを加え、室温で５５分撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で２５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．８１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬを加え、室温で５５分撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で２５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0133】
４）Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ・一水和物 ０．４７ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．６４ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７８ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８９μＬ（１．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．５ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ・一水和物 ０．４７ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．６４ｇ（１．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７８ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８９μＬ（１．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．５ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0134】
５）Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０．５６ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、水 ３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） １．５６ｇを得た。
上記のＨ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０．５６ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、水 ３．２ｍＬを滴下したのち、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ４０ｍＬを加え析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） １．５６ｇを得た。
【0135】
６）Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの合成
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６２ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸７．５ｍＬ、水０．２１ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２１ｍＬ、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール０．４２ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ６０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は７８．４%であった。
Ｈ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ａｌａ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）９６２ｍｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸７．５ｍＬ、水０．２１ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２１ｍＬ、３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール０．４２ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ６０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ａｓｐ－Ａｌａ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ｇｌｕ－ＯＨの純度は７８．４%であった。
【0136】
実施例６
Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
１）Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ） １．１０ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ９ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ＤＩＥＰＡ ０．３３ｍＬ（１．９ｍｍｏｌ）、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３０ｇ（１．８ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．６７ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１時間撹拌し、Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液４．８ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液し、ＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
このＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．６ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ ０.５４ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５７ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。ＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、アミノメタンホスホン酸０．１１ｇ（１．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを加え、室温で２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたアミノメタンホスホン酸と縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたアミノメタンホスホン酸と縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
１）Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ） １．１０ｇ（１．０ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ９ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬに溶解し、０℃に冷却した後、ＤＩＥＰＡ ０．３３ｍＬ（１．９ｍｍｏｌ）、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３０ｇ（１．８ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．６７ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１時間撹拌し、Ｆｍｏｃ－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液４．８ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１０ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液し、ＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
このＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．６ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ ０.５４ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５７ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。ＮＨ2－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、アミノメタンホスホン酸０．１１ｇ（１．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを加え、室温で２０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたアミノメタンホスホン酸と縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、７０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水２５ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬ、ＤＭＦ １．８ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたアミノメタンホスホン酸と縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0137】
２）Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．７ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、５０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．７ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８８ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、５０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0138】
３）Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０.５７ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬ、ＤＭＦ０．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ ０.５７ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＥＥと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬ、ＤＭＦ０．４ｍＬを添加し、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを滴下した後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0139】
４）Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ ０.７１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ ０.７１ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で７０分撹拌した。Ｈ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．４ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0140】
５）Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.８３ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３．０ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ２５ｍＬ、ＭｅＯＨ１５ｍＬを加え、析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ） １．２６ｇを得た。
上記のＨ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液に、ＣＰＭＥ０．５ｍＬ、ＤＭＦ２ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０.８３ｇ（１．４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．５６ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．７１ｍＬ（４．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。Ｈ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、２－アミノエタノール８１μＬ（１．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で４０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．４０ｇ（２．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ３．０ｍＬを添加し、ＤＭＦ ０．４ｍＬ、ＤＢＵ ０．９１ｍＬ（６．１ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）に対し５％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液３．２ｍＬを滴下し、５％炭酸ナトリウム水溶液１３ｍＬを加えた後、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水１３ｍＬ、５％炭酸ナトリウム水溶液４ｍＬ、ＤＭＦ ０．９ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いた２－アミノエタノールと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣にＭｅＣＮ ２５ｍＬ、ＭｅＯＨ１５ｍＬを加え、析出した固体をろ取し、得られた固体を３０℃で減圧乾燥した。Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ） １．２６ｇを得た。
【0141】
６）Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の合成
Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）１．１５ｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２５ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２５ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ７０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2 ３５８ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の純度は７８．１%であった。
Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＮＨ－（Ｘ－ＳＴａｇ）１．１５ｇ（０．５０ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸９．５ｍＬ、水０．２５ｍＬ、トリイソプロピルシラン０．２５ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ７０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2 ３５８ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ－Ｔｒｐ－Ｇｌｕ－Ａｒｇ－Ｔｈｒ－ＮＨ2の純度は７８．１%であった。
【0142】
実施例７
Ｈ－Ｇｌｎ－Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ０．４０ｇ（０．５ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ１ｍＬ、ＴＨＦ１．５ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８１ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ ０．２４ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン６．１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、リン酸二水素２－アミノエチル（ＡＥＤＰ）０．１８ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．５ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３７ｇ（２．３ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．８４ｍＬ（５．６ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液１５ｍＬ、ＣＰＭＥ３ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水６ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ０．６ｍＬ加え、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
Ｈ－Ｇｌｎ－Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－ＯＨの合成
１）Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
Ｂ－ＳＴａｇ ０．４０ｇ（０．５ｍｍｏｌ）をＣＰＭＥ１ｍＬ、ＴＨＦ１．５ｍＬに溶解し、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ ０.８１ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ・ＨＣｌ ０．２４ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン６．１ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。Ｂ－ＳＴａｇが生成物のＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、リン酸二水素２－アミノエチル（ＡＥＤＰ）０．１８ｇ（１．３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ ２．５ｍＬを加え、室温で１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．３７ｇ（２．３ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．８４ｍＬ（５．６ｍｍｏｌ）を加え、６５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、５％炭酸水素カリウム水溶液１５ｍＬ、ＣＰＭＥ３ｍＬを滴下し、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水６ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物がないことを確認し、有機層を濃縮したのち、残渣にＣＰＭＥ０．６ｍＬ加え、Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0143】
２）Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．４０ｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．２８ｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．２４ｍＬを加え、室温で８０分撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、ＡＥＤＰ ９２ｍｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １．３ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．２１ｇ（１．２ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．４５ｍＬ（３ｍｍｏｌ）を加え、５０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液１．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸水素カリウム水溶液７ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水８ｍＬ、ＤＭＦ ０．４ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＤＭＦ７ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．４０ｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．２８ｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．２４ｍＬを加え、室温で８０分撹拌した。Ｈ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、ＡＥＤＰ ９２ｍｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １．３ｍＬを加え、室温で２時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．２１ｇ（１．２ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．４５ｍＬ（３ｍｍｏｌ）を加え、５０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液１．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸水素カリウム水溶液７ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水８ｍＬ、ＤＭＦ ０．４ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0144】
３）Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．２ｍＬ、ＤＭＦ１．１ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．４０ｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．２８ｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．２４ｍＬを加え、室温で６５分撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、ＡＥＤＰ９２ｍｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １．３ｍＬを加え、室温で９０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．２１ｇ（１．２ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．４５ｍＬ（３ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液１．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸水素カリウム水溶液７ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水８ｍＬ、ＤＭＦ ０．４ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
上記のＨ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．２ｍＬ、ＤＭＦ１．１ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ ０．４０ｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．２８ｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．２４ｍＬを加え、室温で６５分撹拌した。Ｈ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、ＡＥＤＰ９２ｍｇ（０．７ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １．３ｍＬを加え、室温で９０分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．２１ｇ（１．２ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．４５ｍＬ（３ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液１．６ｍＬを滴下したのち、５％炭酸水素カリウム水溶液７ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水８ｍＬ、ＤＭＦ ０．４ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
【0145】
４）Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）の合成
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．２ｍＬ、ＤＭＦ１．１ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ０．４８ｇ（０．７５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．３１ｇ（０．７３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．３９ｍＬを加え、室温で８０分撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、ＡＥＤＰ ０．１０ｇ（０．７３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １。５ｍＬを加え、室温で４５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．２２ｇ（１．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．５０ｍＬ（３．４ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液１．８ｍＬを滴下した後、５％炭酸水素カリウム水溶液７ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水８ｍＬ、ＤＭＦ ０．４ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣として、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） １．５８ｇを得た。
上記のＨ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液にＣＰＭＥ０．２ｍＬ、ＤＭＦ１．１ｍＬ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ０．４８ｇ（０．７５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ ０．３１ｇ（０．７３ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＰＡ ０．３９ｍＬを加え、室温で８０分撹拌した。Ｈ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、ＡＥＤＰ ０．１０ｇ（０．７３ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ １。５ｍＬを加え、室温で４５分撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物を確認したのち、０℃に冷却し、２－メルカプト－１－エタンスルホン酸ナトリウム０．２２ｇ（１．４ｍｍｏｌ）を添加し、ＤＢＵ０．５０ｍＬ（３．４ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）が生成物のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）に対し１０％以下になったことを確認後、１Ｍ硫酸水溶液１．８ｍＬを滴下した後、５％炭酸水素カリウム水溶液７ｍＬを加え、室温まで昇温し、分液した。得られた有機層に２０％食塩水８ｍＬ、ＤＭＦ ０．４ｍＬを加え、分液した。得られた有機層にＦｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨの活性エステルがスカベンジャーとして用いたＡＥＤＰと縮合した化合物がないことを確認し、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）を含むＣＰＭＥ溶液を得た。
得られたＣＰＭＥ溶液を減圧下で濃縮し、残渣として、Ｈ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ） １．５８ｇを得た。
【0146】
５）Ｈ－Ｇｌｎ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－ＯＨの合成
上記のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）１．５８（０．５０ｍｍｏｌ相当）に事前に調製したトリフルオロ酢酸／水／トリイソプロピルシラン／３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール混液（９０／２．５／２．５／５）１０ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ６０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－ＯＨの純度は８２．６%であった。
以上のように、本発明で見いだされたアミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類は、アミノ酸活性エステルのスカベンジャーとして機能し、ペプチド伸長反応、特にワンポットで行う連続したペプチド伸長反応に有用であることが示された。
上記のＨ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－Ｏ－（Ｂ－ＳＴａｇ）１．５８（０．５０ｍｍｏｌ相当）に事前に調製したトリフルオロ酢酸／水／トリイソプロピルシラン／３，６－ジオキサ－１，８－オクタンジチオール混液（９０／２．５／２．５／５）１０ｍＬを添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を０℃に冷却し、ＭＴＢＥ６０ｍＬをゆっくりと滴下し、沈澱物を濾取した。ろ取した沈殿物をＭＴＢＥ１０ｍＬで３回洗浄行った後、沈澱物を減圧下で乾燥し、Ｈ－Ｇｌｎ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－ＯＨ ２７５ｍｇを得た。得られたＨ－Ｇｌｎ―Ａｓｎ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ－ＯＨの純度は８２．６%であった。
以上のように、本発明で見いだされたアミノスルホン酸類、アミノ硫酸類、アミノホスホン酸類、アミノリン酸類及びアミノアルコール類は、アミノ酸活性エステルのスカベンジャーとして機能し、ペプチド伸長反応、特にワンポットで行う連続したペプチド伸長反応に有用であることが示された。
【手続補正書】
【提出日】2022-03-01
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
次の工程ａ～ｄを含むことを特徴とする液相ペプチド製造方法。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、次の一般式（１）で表されるアミノスルホン酸類及びアミノ硫酸類、
（Ｒ
1
は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ
1
は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
（Ｒ
2
は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ
2
は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
（ｎは０又は２～２０の整数を示し、Ｒ
3
、Ｒ
4
はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
ｃ．反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
ａ．有機溶媒を含む溶媒中で、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、アミノ保護基でアミノ基が保護されたアミノ酸又はペプチドとを縮合させる工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に、次の一般式（１）で表されるアミノスルホン酸類及びアミノ硫酸類、
【化1】
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
【化2】
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれるアミノ酸活性エステルスカベンジャーを添加する工程、
【化3】
ｃ．反応液中の前記アミノ保護基でアミノ基が保護された化合物のアミノ保護基を脱離する工程、
ｄ．反応液に水溶液を添加した後、分液して、液相ペプチド合成用担体が結合したアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、前記アミノ保護基が脱離したアミノ酸又はペプチドとの縮合体を含有する有機溶媒層を得る工程。
【請求項2】
前記アミノ酸活性エステルスカベンジャーが、次の一般式（１ａ）で表されるアミノスルホン酸類、
（Ｒ1は炭素数１～１０の２価の有機基を示す）
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
（Ｒ2は炭素数１～１０の２価の有機基を示し、Ｘ2は単結合又は酸素原子を示す）
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である請求項１記載の液相ペプチド製造方法。
（ｎは０又は２～２０の整数を示し、Ｒ3、Ｒ4はそれぞれ独立して水素原子、メチル基、エチル基、又はヒドロキシメチル基を示す）
【化4】
一般式（２）で表されるアミノホスホン酸類及びアミノリン酸類、並びに
【化5】
一般式（３）で表されるアミノアルコール類から選ばれる化合物である請求項１記載の液相ペプチド製造方法。
【化6】
【請求項3】
前記アミノ保護基が、Ｆｍоｃ基、Ｂоｃ基、Ｃｂｚ基及びＡｃ基から選ばれる保護基である請求項１又は２記載の液相ペプチド製造方法。
【請求項4】
前記液相ペプチド合成用担体が、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接またはリンカーを介して結合して、それらを有機溶媒に溶解性で水に不溶性にする化合物である請求項１～３のいずれか１項に記載の液相ペプチド製造方法。
【請求項5】
前記液相ペプチド合成用担体が、下記式（Ｉ）：
［式中、
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示し；環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
（式中、＊は結合位置を示し；
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
で表される化合物である請求項１～４のいずれか１項に記載の液相ペプチド製造方法。
【化7】
環Ａはヘテロ原子を含んでいてもよく、多環性でもよいＣ４～１８の芳香環を示し；Ｒ11は、水素原子であるか、又は環Ａがベンゼン環でＲｂが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ14と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか、又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；ｐ個のＸは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ17－（Ｒ17は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；ｐ個のＲ12は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；ｑ個のＲ13は、それぞれ独立して水素原子であるか、又は酸素原子を介してシリル基若しくは脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；ｐ、ｑは、それぞれ０～３の整数かつｐ＋ｑが1以上４以下を示し；環Ａは、ｐ個のＸＲ12に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；Ｒａは、水素原子、又はハロゲン原子により置換されていてもよい芳香族環を示し；Ｒｂは、水素原子、又は式（ａ）：
【化8】
ｒ、ｓは、それぞれ０～３の整数かつｒ＋ｓが４以下を示し；
ｒ個のＺは、それぞれ独立して－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－又は－ＮＲ18－（Ｒ18は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）を示し；
ｒ個のＲ15は、独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
ｓ個のＲ16は、それぞれ独立して酸素原子を介してシリル基又は脂肪族炭化水素基で置換されていてもよい脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し；
Ｒ14は、水素原子を示すか、Ｒ11と一緒になって単結合を示して、環Ａ及び環Ｂと共にフルオレン環を形成するか，又は酸素原子を介して環Ａ及び環Ｂと共にキサンテン環を形成してもよく；
環Ｂは、ｒ個のＺＲ15に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、及びハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示し；
Ｙは、ヒドロキシ基、ＮＨＲ19（Ｒ19は水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す。）又はハロゲン原子を示す。］
で表される化合物である請求項１～４のいずれか１項に記載の液相ペプチド製造方法。