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▶ ユーリカ セラピューティックス， インコーポレイテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2023093472
(43)【公開日】2023-07-04
(54)【発明の名称】キメラ抗体／Ｔ細胞受容体構築物及びその使用
(51)【国際特許分類】
C12N 15/62 20060101AFI20230627BHJP
C12N 15/63 20060101ALI20230627BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20230627BHJP
C07K 19/00 20060101ALI20230627BHJP
A61K 31/7088 20060101ALI20230627BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20230627BHJP
A61K 35/17 20150101ALI20230627BHJP
A61K 38/16 20060101ALI20230627BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230627BHJP
A61P 31/00 20060101ALI20230627BHJP
A61P 31/12 20060101ALI20230627BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20230627BHJP
A61K 35/76 20150101ALI20230627BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20230627BHJP
C12N 15/12 20060101ALN20230627BHJP
C07K 16/28 20060101ALN20230627BHJP
C07K 14/725 20060101ALN20230627BHJP
【ＦＩ】
C12N15/62 Z ZNA
C12N15/63 Z
C12N5/10
C07K19/00
A61K31/7088
A61K48/00
A61K35/17
A61K38/16
A61P43/00 111
A61P31/00
A61P31/12
A61P35/00
A61K35/76
C12N15/13
C12N15/12
C07K16/28
C07K14/725
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2023051860
(22)【出願日】2023-03-28
(62)【分割の表示】P 2019558421の分割
【原出願日】2018-04-24
(31)【優先権主張番号】62/490,576
(32)【優先日】2017-04-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/490,578
(32)【優先日】2017-04-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/490,580
(32)【優先日】2017-04-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】321002949
【氏名又は名称】ユーリカ セラピューティックス， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110002077
【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】ホラン， ルーカス
(72)【発明者】
【氏名】シュー， イーヤン
(72)【発明者】
【氏名】ヤン， ジユアン
(72)【発明者】
【氏名】リュー， ホン
(72)【発明者】
【氏名】モラレス， ハビエル
(72)【発明者】
【氏名】リュー， リャンシン
(57)【要約】 （修正有）
【課題】ヒトＴ細胞における発現及び機能性が改善された抗体－ＴＣＲキメラ受容体を提供する。
【解決手段】キメラ抗体Ｔ細胞受容体構築物（ｃａＴＣＲ）であって、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、前記ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが、天然に存在せず、前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進し、前記抗原結合モジュールが、天然に存在するＴ細胞受容体抗原結合部分ではない、ｃａＴＣＲを提供する。
【選択図】なし
【解決手段】キメラ抗体Ｔ細胞受容体構築物（ｃａＴＣＲ）であって、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、前記ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが、天然に存在せず、前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進し、前記抗原結合モジュールが、天然に存在するＴ細胞受容体抗原結合部分ではない、ｃａＴＣＲを提供する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
キメラ抗体Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、標的抗原に特異的
に結合する抗原結合モジュールと、第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む
第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ
細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、前記ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが
、天然に存在せず、前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動
員を促進し、前記抗原結合モジュールが、天然に存在するＴ細胞受容体抗原結合部分では
ない、ｃａＴＣＲ。
に結合する抗原結合モジュールと、第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む
第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ
細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、前記ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが
、天然に存在せず、前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動
員を促進し、前記抗原結合モジュールが、天然に存在するＴ細胞受容体抗原結合部分では
ない、ｃａＴＣＲ。
【請求項2】
前記ＴＣＲ－ＴＭが両方とも、天然に存在しないものである、請求項１に記載のｃａＴ
ＣＲ。
ＣＲ。
【請求項3】
前記第１のＴＣＲ－ＴＭが、前記第１の天然に存在するＴ細胞受容体の膜貫通ドメイン
の１つに由来し、前記第２のＴＣＲ－ＴＭが、前記第１の天然に存在するＴ細胞受容体の
他の膜貫通ドメインに由来する、請求項１又は２に記載のｃａＴＣＲ。
の１つに由来し、前記第２のＴＣＲ－ＴＭが、前記第１の天然に存在するＴ細胞受容体の
他の膜貫通ドメインに由来する、請求項１又は２に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項4】
前記第１の天然に存在するＴ細胞受容体が、γ／δ Ｔ細胞受容体である、請求項３に
記載のｃａＴＣＲ。
記載のｃａＴＣＲ。
【請求項5】
前記ＴＣＲＭが、前記第１の天然に存在するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲ
Ｍと比較して、前記少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化すること
を可能にする、請求項３又は４に記載のｃａＴＣＲ。
Ｍと比較して、前記少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化すること
を可能にする、請求項３又は４に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項6】
前記第１のＴＣＲ－ＴＭが、その由来となる膜貫通ドメインと比較して５個までのアミ
ノ酸置換を含み、及び／又は前記第２のＴＣＲ－ＴＭが、その由来となる膜貫通ドメイン
と比較して５個までのアミノ酸置換を含む、請求項３～５のいずれか一項に記載のｃａＴ
ＣＲ。
ノ酸置換を含み、及び／又は前記第２のＴＣＲ－ＴＭが、その由来となる膜貫通ドメイン
と比較して５個までのアミノ酸置換を含む、請求項３～５のいずれか一項に記載のｃａＴ
ＣＲ。
【請求項7】
前記第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸が、前記第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ
酸に対して近位である、請求項６に記載のｃａＴＣＲ。
酸に対して近位である、請求項６に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項8】
１つ以上の置換アミノ酸が、ＣＤ３に対する結合に関与する前記第１のＴＣＲ－ＴＭ中
又は前記第２のＴＣＲ－ＴＭ中のアミノ酸に対して近位である、請求項６又は７に記載の
ｃａＴＣＲ。
又は前記第２のＴＣＲ－ＴＭ中のアミノ酸に対して近位である、請求項６又は７に記載の
ｃａＴＣＲ。
【請求項9】
１つ以上の置換アミノ酸が、それらの対応する非置換アミノ酸よりも疎水性である、請
求項６～８のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
求項６～８のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項10】
前記第１のＴＣＲ－ＴＭが、配列番号７及び９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を
含み、前記第２のＴＣＲ－ＴＭが、配列番号８及び１４～２６のいずれか１つのアミノ酸
配列を含む、請求項１に記載のｃａＴＣＲ。
含み、前記第２のＴＣＲ－ＴＭが、配列番号８及び１４～２６のいずれか１つのアミノ酸
配列を含む、請求項１に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項11】
請求項１に記載のｃａＴＣＲであって、前記第１のＴＣＲ－ＴＭ及び前記第２のＴＣＲ
－ＴＭが、（ａ）それぞれ、配列番号９及び８、
（ｂ）それぞれ、配列番号７及び１４、
（ｃ）それぞれ、配列番号７及び１５、
（ｄ）それぞれ、配列番号７及び１６、
（ｅ）それぞれ、配列番号１０及び１６、
（ｆ）それぞれ、配列番号７及び１７、
（ｇ）それぞれ、配列番号７及び１８、
（ｈ）それぞれ、配列番号７及び１９、
（ｉ）それぞれ、配列番号７及び２０、
（ｊ）それぞれ、配列番号７及び２１、
（ｋ）それぞれ、配列番号７及び２２、
（ｌ）それぞれ、配列番号１１及び２３、
（ｍ）それぞれ、配列番号１２及び２４、
（ｎ）それぞれ、配列番号７及び２５、
（ｏ）それぞれ、配列番号１３及び２６のアミノ酸配列を含む、ｃａＴＣＲ。
－ＴＭが、（ａ）それぞれ、配列番号９及び８、
（ｂ）それぞれ、配列番号７及び１４、
（ｃ）それぞれ、配列番号７及び１５、
（ｄ）それぞれ、配列番号７及び１６、
（ｅ）それぞれ、配列番号１０及び１６、
（ｆ）それぞれ、配列番号７及び１７、
（ｇ）それぞれ、配列番号７及び１８、
（ｈ）それぞれ、配列番号７及び１９、
（ｉ）それぞれ、配列番号７及び２０、
（ｊ）それぞれ、配列番号７及び２１、
（ｋ）それぞれ、配列番号７及び２２、
（ｌ）それぞれ、配列番号１１及び２３、
（ｍ）それぞれ、配列番号１２及び２４、
（ｎ）それぞれ、配列番号７及び２５、
（ｏ）それぞれ、配列番号１３及び２６のアミノ酸配列を含む、ｃａＴＣＲ。
【請求項12】
前記ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジ
ュールを更に含み、前記第１の安定化ドメイン及び前記第２の安定化ドメインが、前記ｃ
ａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する、請求項１～１１のいずれか一項
に記載のｃａＴＣＲ。
ュールを更に含み、前記第１の安定化ドメイン及び前記第２の安定化ドメインが、前記ｃ
ａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する、請求項１～１１のいずれか一項
に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項13】
前記安定化モジュールが、ＣＨ１－ＣＬモジュール、ＣＨ２－ＣＨ２モジュール、ＣＨ
３－ＣＨ３モジュール及びＣＨ４－ＣＨ４モジュールからなる群から選択される、実施形
態１２に記載のｃａＴＣＲ。
３－ＣＨ３モジュール及びＣＨ４－ＣＨ４モジュールからなる群から選択される、実施形
態１２に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項14】
前記ｃａＴＣＲが、前記抗原結合モジュールと前記ＴＣＲＭとの間にスペーサーモジュ
ールを更に含み、前記スペーサーモジュールが、前記ＴＣＲＭに対して前記抗原結合モジ
ュールを接続する１つ以上のペプチドリンカーを含む、請求項１～１３のいずれか一項に
記載のｃａＴＣＲ。
ールを更に含み、前記スペーサーモジュールが、前記ＴＣＲＭに対して前記抗原結合モジ
ュールを接続する１つ以上のペプチドリンカーを含む、請求項１～１３のいずれか一項に
記載のｃａＴＣＲ。
【請求項15】
前記ｃａＴＣＲが多重特異性である、請求項１～１４のいずれか一項に記載のｃａＴＣ
Ｒ。
Ｒ。
【請求項16】
前記抗原結合モジュールが、前記ＴＣＲＤの１つに結合するＶＨドメインと、他のＴＣ
ＲＤに結合するＶＬドメインとを含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載のｃａＴＣ
Ｒ。
ＲＤに結合するＶＬドメインとを含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載のｃａＴＣ
Ｒ。
【請求項17】
前記標的抗原が、細胞表面抗原である、請求項１～１６のいずれか一項に記載のｃａＴ
ＣＲ。
ＣＲ。
【請求項18】
前記標的抗原が、ペプチドと主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）タンパク質とを含む複
合体である、請求項１～１６のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
合体である、請求項１～１６のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項19】
ｃａＴＣＲであって、
（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインと第２の標的抗原に
特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重特異性抗原結合モジュールと、
（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭ
を含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、
前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、ｃ
ａＴＣＲ。
（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインと第２の標的抗原に
特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重特異性抗原結合モジュールと、
（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭ
を含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、
前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、ｃ
ａＴＣＲ。
【請求項20】
前記第１の抗原結合ドメインが、第１の重鎖可変ドメイン（ＶＨ１）と第１の軽鎖可変
ドメイン（ＶＬ１）を含むＦｖであり、前記第２の抗原結合ドメインが、重鎖定常ドメイ
ン１（ＣＨ１）に融合した第２のＶＨ（ＶＨ２）と、軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）に融合し
た第２のＶＬ（ＶＬ２）とを含むＦａｂである、請求項１９に記載のｃａＴＣＲ。
ドメイン（ＶＬ１）を含むＦｖであり、前記第２の抗原結合ドメインが、重鎖定常ドメイ
ン１（ＣＨ１）に融合した第２のＶＨ（ＶＨ２）と、軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）に融合し
た第２のＶＬ（ＶＬ２）とを含むＦａｂである、請求項１９に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項21】
請求項２０に記載のｃａＴＣＲであって、
（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２
を含む第２のポリペプチド鎖；
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ
２を含む第２のポリペプチド鎖；
（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む
第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲ
Ｄ２を含む第２のポリペプチド鎖；
又は、
（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ
２を含む第２のポリペプチド鎖を含み、
Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２
を含む第２のポリペプチド鎖；
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ
２を含む第２のポリペプチド鎖；
（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む
第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲ
Ｄ２を含む第２のポリペプチド鎖；
又は、
（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ
２を含む第２のポリペプチド鎖を含み、
Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
【請求項22】
前記第１の抗原結合ドメインが第１のｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ１）であり、前記第２の抗原
結合ドメインが第２のｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ２）であり、前記ｃａＴＣＲが、ＣＨ１とＣＬ
を更に含む、請求項１９に記載のｃａＴＣＲ。
結合ドメインが第２のｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ２）であり、前記ｃａＴＣＲが、ＣＨ１とＣＬ
を更に含む、請求項１９に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項23】
請求項２２に記載のｃａＴＣＲであって、
（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ１－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポ
リペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第
２のポリペプチド鎖；
又は、
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１の
ポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ１－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む
第２のポリペプチド鎖を含み、
Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ１－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポ
リペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第
２のポリペプチド鎖；
又は、
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１の
ポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ１－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む
第２のポリペプチド鎖を含み、
Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
【請求項24】
前記第１の抗原結合ドメインがｓｃＦｖであり、前記第２の抗原結合ドメインが、ＣＨ
１に融合したＶＨとＣＬに融合したＶＬとを含むＦａｂである、請求項１９に記載のｃａ
ＴＣＲ。
１に融合したＶＨとＣＬに融合したＶＬとを含むＦａｂである、請求項１９に記載のｃａ
ＴＣＲ。
【請求項25】
請求項２４に記載のｃａＴＣＲであって、
（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリ
ペプチド鎖；
又は、
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド
鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポ
リペプチド鎖を含み、
Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリ
ペプチド鎖；
又は、
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド
鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポ
リペプチド鎖を含み、
Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
【請求項26】
Ｌ１及び／又はＬ２が、約５～約５０アミノ酸長である、請求項２１、２３又は２５に
記載のｃａＴＣＲ。
記載のｃａＴＣＲ。
【請求項27】
前記第１の標的抗原が、第１の細胞表面抗原であり、前記第２の標的抗原が、第２の細
胞表面抗原である、請求項１９～２６のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
胞表面抗原である、請求項１９～２６のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項28】
前記第１の標的抗原がＣＤ１９であり、前記第２の標的抗原がＣＤ２２であるか、又は
前記第１の標的抗原がＣＤ２２であり、前記第２の標的抗原がＣＤ１９である、請求項２
７に記載のｃａＴＣＲ。
前記第１の標的抗原がＣＤ２２であり、前記第２の標的抗原がＣＤ１９である、請求項２
７に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項29】
ＣＤ２２に特異的に結合する抗原結合ドメインが、配列番号６５のアミノ酸配列を含む
ＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号６９
のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む
ＶＬとを含む、請求項２８に記載のｃａＴＣＲ。
ＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号６９
のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む
ＶＬとを含む、請求項２８に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項30】
ＣＤ１９に特異的に結合する抗原結合ドメインが、配列番号７４のアミノ酸配列を含む
ＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号７８
のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む
ＶＬとを含む、請求項２８又は２９に記載のｃａＴＣＲ。
ＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号７８
のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む
ＶＬとを含む、請求項２８又は２９に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項31】
前記ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが、天然に存在しないものである、請求項１９
～３０のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
～３０のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項32】
前記第１のＴＣＲＤが、ＴＣＲサブユニットの第１の接続ペプチド又はそのフラグメン
トを更に含み、及び／又は前記第２のＴＣＲＤが、ＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプ
チド又はそのフラグメントを更に含む、請求項１～３１のいずれか一項に記載のｃａＴＣ
Ｒ。
トを更に含み、及び／又は前記第２のＴＣＲＤが、ＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプ
チド又はそのフラグメントを更に含む、請求項１～３１のいずれか一項に記載のｃａＴＣ
Ｒ。
【請求項33】
前記第１のＴＣＲＤが、ＴＣＲ細胞内配列を含む第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は前記第２のＴＣＲＤが、ＴＣＲ細胞内配列を含む第２のＴＣＲ細胞内ドメ
インを更に含む、請求項１～３２のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
み、及び／又は前記第２のＴＣＲＤが、ＴＣＲ細胞内配列を含む第２のＴＣＲ細胞内ドメ
インを更に含む、請求項１～３２のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ。
【請求項34】
請求項１～３３のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲをコードする、１つ以上の核酸。
【請求項35】
請求項３４に記載の１つ以上の核酸を含む、１つ以上のベクター。
【請求項36】
請求項１～３３のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζ
ζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子とを含む、複
合体。
ζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子とを含む、複
合体。
【請求項37】
請求項１～３３のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ又は請求項３６に記載の複合体をそ
の表面上に提示するエフェクター細胞。
の表面上に提示するエフェクター細胞。
【請求項38】
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞と、請求項３７
に記載のエフェクター細胞とを接触させることを含み、前記ｃａＴＣＲが、前記標的抗原
に特異的に結合する、方法。
に記載のエフェクター細胞とを接触させることを含み、前記ｃａＴＣＲが、前記標的抗原
に特異的に結合する、方法。
【請求項39】
医薬組成物であって、（ａ）請求項１～３３のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ、請求
項３４に記載の１つ以上の核酸、又は請求項３５に記載の１つ以上のベクター、又は請求
項３７に記載のエフェクター細胞と、（ｂ）医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成
物。
項３４に記載の１つ以上の核酸、又は請求項３５に記載の１つ以上のベクター、又は請求
項３７に記載のエフェクター細胞と、（ｂ）医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成
物。
【請求項40】
標的抗原関連疾患の治療を必要とする個体において当該疾患を治療する方法であって、
有効量の請求項３９に記載の組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
有効量の請求項３９に記載の組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７６号、２
０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７８号及び２０１７年４月
２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５８０号に対する優先権を主張するもので
あり、それらは全て、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
本出願は、２０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７６号、２
０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７８号及び２０１７年４月
２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５８０号に対する優先権を主張するもので
あり、それらは全て、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
【0002】
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出物の内容は、参照によりその全体が本明細
書に組み込まれる：コンピュータ可読形態（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：７５００４
２０００６４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ、記録日：２０１８年４月２４日、サイズ：１６
８ＫＢ）。
書に組み込まれる：コンピュータ可読形態（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：７５００４
２０００６４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ、記録日：２０１８年４月２４日、サイズ：１６
８ＫＢ）。
【0003】
（発明の分野）
本発明は、１つ以上の標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴ細胞受容体モジュールとを
含む、キメラ抗体－ＴＣＲ構築物に関する。
本発明は、１つ以上の標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴ細胞受容体モジュールとを
含む、キメラ抗体－ＴＣＲ構築物に関する。
【背景技術】
【0004】
Ｔ細胞性免疫は、ウイルス、細菌、寄生虫感染又は悪性細胞を排除するために、抗原（
Ａｇ）に特異的なＴリンパ球を発達させる獲得プロセスである。このプロセスは、自己抗
原の異常な認識も伴う場合があり、自己免疫炎症性疾患を引き起こす。Ｔリンパ球のＡｇ
特異性は、Ａｇ提示細胞（ＡＰＣ）上の主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）分子によって
提示される固有の抗原性ペプチドのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）による認識に基づく（Ｂｒｏ
ｅｒｅら、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２０
１１）。各Ｔリンパ球は、胸腺の成熟時の発達選択の結果として、細胞表面上で固有のＴ
ＣＲを発現する。ＴＣＲは、αβヘテロ二量体又はγδヘテロ二量体のいずれかとして、
２つの形態で生じる。Ｔ細胞は、細胞表面でαβ形態又はγδ形態のＴＣＲのいずれかを
発現する。４つの鎖（α／β／γ／δ）は全て、高度に多型である「免疫グロブリン可変
領域」様Ｎ末端ドメインと、「免疫グロブリン定常領域」様の第２のドメインとからなる
特徴的な細胞外構造を有する。これらのドメインは、それぞれ、特徴的なドメイン内ジス
ルフィド架橋を有する。定常領域は、細胞膜の近位にあり、定常領域の後には、接続ペプ
チド、膜貫通領域及び短い細胞質尾部が続く。ヘテロ二量体ＴＣＲの２本鎖間の共有結合
は、細胞外定常ドメインと、膜貫通領域とをつなぐ短い接続ペプチド配列内に位置するシ
ステイン残基によって形成される。これらのシステイン残基が、対応する位置にありペア
となるＴＣＲ鎖システイン残基とジスルフィド結合を形成する（Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ
Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ、２００１）。
Ａｇ）に特異的なＴリンパ球を発達させる獲得プロセスである。このプロセスは、自己抗
原の異常な認識も伴う場合があり、自己免疫炎症性疾患を引き起こす。Ｔリンパ球のＡｇ
特異性は、Ａｇ提示細胞（ＡＰＣ）上の主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）分子によって
提示される固有の抗原性ペプチドのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）による認識に基づく（Ｂｒｏ
ｅｒｅら、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２０
１１）。各Ｔリンパ球は、胸腺の成熟時の発達選択の結果として、細胞表面上で固有のＴ
ＣＲを発現する。ＴＣＲは、αβヘテロ二量体又はγδヘテロ二量体のいずれかとして、
２つの形態で生じる。Ｔ細胞は、細胞表面でαβ形態又はγδ形態のＴＣＲのいずれかを
発現する。４つの鎖（α／β／γ／δ）は全て、高度に多型である「免疫グロブリン可変
領域」様Ｎ末端ドメインと、「免疫グロブリン定常領域」様の第２のドメインとからなる
特徴的な細胞外構造を有する。これらのドメインは、それぞれ、特徴的なドメイン内ジス
ルフィド架橋を有する。定常領域は、細胞膜の近位にあり、定常領域の後には、接続ペプ
チド、膜貫通領域及び短い細胞質尾部が続く。ヘテロ二量体ＴＣＲの２本鎖間の共有結合
は、細胞外定常ドメインと、膜貫通領域とをつなぐ短い接続ペプチド配列内に位置するシ
ステイン残基によって形成される。これらのシステイン残基が、対応する位置にありペア
となるＴＣＲ鎖システイン残基とジスルフィド結合を形成する（Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ
Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ、２００１）。
【0005】
αβ及びγδＴＣＲは、非多型膜結合ＣＤ３タンパク質と会合し、ＴＣＲヘテロ二量体
と、３つの二量体シグナル伝達分子ＣＤ３δ／ε、ＣＤ３γ／ε及びＣＤ３ζ／ζ又はζ
／ηとからなる機能的な八量体ＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成する。各サブユニットの膜貫
通ドメイン中のイオン化可能な残基は、相互作用により極性の網目構造を形成し、複合体
を共に保持する。Ｔ細胞活性化のために、ＴＣＲのＮ末端可変領域は、標的細胞の表面上
に提示されるペプチド／ＭＨＣ複合体を認識し、一方、ＣＤ３タンパク質は、シグナル伝
達に関与する（Ｃａｌｌら、Ｃｅｌｌ．１１１（７）：９６７－７９、２００２）。Ｔｈ
ｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ、２００１）。
と、３つの二量体シグナル伝達分子ＣＤ３δ／ε、ＣＤ３γ／ε及びＣＤ３ζ／ζ又はζ
／ηとからなる機能的な八量体ＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成する。各サブユニットの膜貫
通ドメイン中のイオン化可能な残基は、相互作用により極性の網目構造を形成し、複合体
を共に保持する。Ｔ細胞活性化のために、ＴＣＲのＮ末端可変領域は、標的細胞の表面上
に提示されるペプチド／ＭＨＣ複合体を認識し、一方、ＣＤ３タンパク質は、シグナル伝
達に関与する（Ｃａｌｌら、Ｃｅｌｌ．１１１（７）：９６７－７９、２００２）。Ｔｈ
ｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ、２００１）。
【0006】
従来のＴＣＲとも呼ばれるαβＴＣＲは、ほとんどのリンパ球で発現されており、グリ
コシル化多型α鎖及びβ鎖からなる。異なるαβＴＣＲは、ＭＨＣＩＩ分子の表面に埋め
込まれた様々なペプチド（大部分はＡＰＣ細胞表面で発現する）及びＭＨＣＩ分子の表面
に埋め込まれた様々なペプチド（全て有核細胞で発現される）を識別することができ、こ
れらのペプチドの寸法及び形状は比較的一定である。γδＴＣＲは、αβＴＣＲと構造的
に類似しているが、ＭＨＣ提示とは独立した様式で、炭水化物を保有する抗原、ヌクレオ
チドを保有する抗原又は蛍光体を保有する抗原を認識する（Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅ
ｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ、２００１；Ｇｉｒａｒｄｉら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．
Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２６（１）：２５－３１、２００６；Ｈａｙｅｓら、Ｉｍｍｕｎｉ
ｔｙ．１６（６）：８２７－３８、２００２）。
コシル化多型α鎖及びβ鎖からなる。異なるαβＴＣＲは、ＭＨＣＩＩ分子の表面に埋め
込まれた様々なペプチド（大部分はＡＰＣ細胞表面で発現する）及びＭＨＣＩ分子の表面
に埋め込まれた様々なペプチド（全て有核細胞で発現される）を識別することができ、こ
れらのペプチドの寸法及び形状は比較的一定である。γδＴＣＲは、αβＴＣＲと構造的
に類似しているが、ＭＨＣ提示とは独立した様式で、炭水化物を保有する抗原、ヌクレオ
チドを保有する抗原又は蛍光体を保有する抗原を認識する（Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅ
ｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ、２００１；Ｇｉｒａｒｄｉら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．
Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２６（１）：２５－３１、２００６；Ｈａｙｅｓら、Ｉｍｍｕｎｉ
ｔｙ．１６（６）：８２７－３８、２００２）。
【0007】
過去２０年間における、免疫学及び腫瘍生物学における基本的な進歩と、多数の腫瘍抗
原の同定とが合わさることで、細胞ベースの免疫治療の分野は顕著に進歩した。自己Ｔ細
胞及びｅｘ ｖｉｖｏで増殖させたＴ細胞を患者に移すことによって癌を治療することを
目標としたＴ細胞療法が細胞系免疫療法の分野において占める割合は大きく、いくつかの
顕著な抗腫瘍応答が得られている（Ｂｌａｔｔｍａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ．３０５（５６
８１）：２００－５、２００４）。例えば、増殖させた天然に存在する腫瘍浸潤リンパ球
（ＴＩＬ）の投与は、肝臓、肺、軟組織及び脳を含む複数の部位での大きな浸潤性腫瘍を
含め、黒色腫患者の５０～７０％の範囲の客観的な応答率にｅｘ ｖｉｖｏで介在した（
Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇら、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ．８（４）：２９９－３０８、２
００８；Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３（１０）：２３４６－
５７、２００５）。
原の同定とが合わさることで、細胞ベースの免疫治療の分野は顕著に進歩した。自己Ｔ細
胞及びｅｘ ｖｉｖｏで増殖させたＴ細胞を患者に移すことによって癌を治療することを
目標としたＴ細胞療法が細胞系免疫療法の分野において占める割合は大きく、いくつかの
顕著な抗腫瘍応答が得られている（Ｂｌａｔｔｍａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ．３０５（５６
８１）：２００－５、２００４）。例えば、増殖させた天然に存在する腫瘍浸潤リンパ球
（ＴＩＬ）の投与は、肝臓、肺、軟組織及び脳を含む複数の部位での大きな浸潤性腫瘍を
含め、黒色腫患者の５０～７０％の範囲の客観的な応答率にｅｘ ｖｉｖｏで介在した（
Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇら、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ．８（４）：２９９－３０８、２
００８；Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３（１０）：２３４６－
５７、２００５）。
【0008】
ＴＩＬ療法の広範な応用に対する主な制限は、抗腫瘍能（ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｐｏｔ
ｅｎｔｉａｌ）を有するヒトＴ細胞の作成が難しいことである。代替的なアプローチとし
て、外来性高親和性ＴＣＲを、Ｔ細胞操作を通じて患者の正常な自己Ｔ細胞に導入するこ
とができる。リンパ球が枯渇した患者へのこれらの細胞の養子移入は、黒色腫、大腸直腸
癌及び滑膜肉腫などの癌の癌退縮に介在することが示されている（Ｋｕｎｅｒｔ Ｒら、
Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３、２０１３）。滑膜肉腫に対し抗ＮＹ－ＥＳＯ
－１ ＴＣＲを用いた近年の第Ｉ相臨床試験は、全奏効率６６％であり、Ｔ細胞療法を受
けた患者の１人において、完全な応答が達成されたことを報告した（Ｒｏｂｂｉｎｓ Ｐ
Ｆら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２１（５）：１０１９－２７、２０１５）。
ｅｎｔｉａｌ）を有するヒトＴ細胞の作成が難しいことである。代替的なアプローチとし
て、外来性高親和性ＴＣＲを、Ｔ細胞操作を通じて患者の正常な自己Ｔ細胞に導入するこ
とができる。リンパ球が枯渇した患者へのこれらの細胞の養子移入は、黒色腫、大腸直腸
癌及び滑膜肉腫などの癌の癌退縮に介在することが示されている（Ｋｕｎｅｒｔ Ｒら、
Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３、２０１３）。滑膜肉腫に対し抗ＮＹ－ＥＳＯ
－１ ＴＣＲを用いた近年の第Ｉ相臨床試験は、全奏効率６６％であり、Ｔ細胞療法を受
けた患者の１人において、完全な応答が達成されたことを報告した（Ｒｏｂｂｉｎｓ Ｐ
Ｆら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２１（５）：１０１９－２７、２０１５）。
【0009】
ＴＣＲを操作したＴ細胞療法の利点の１つは、プロセシングを受けた後にＭＨＣ提示に
より細胞表面に送達される、潜在的な細胞内腫瘍特異的タンパク質のアレイ全体を標的と
することができる点である。更に、ＴＣＲは高感度であり、ごく少量の抗原ペプチド／Ｍ
ＨＣ分子によって活性化することができ、この活性化により、サイトカイン分泌、Ｔ細胞
増殖及び所定の標的細胞の細胞分解を含む、細胞溶解性Ｔ細胞応答がトリガーされる。し
たがって、抗体又は低分子療法と比較して、ＴＣＲを操作したＴ細胞は、標的細胞内抗原
のごく少量の複製によって標的細胞を死滅させるという能力に特に価値がある（Ｋｕｎｅ
ｒｔら、Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３、２０１３）。
より細胞表面に送達される、潜在的な細胞内腫瘍特異的タンパク質のアレイ全体を標的と
することができる点である。更に、ＴＣＲは高感度であり、ごく少量の抗原ペプチド／Ｍ
ＨＣ分子によって活性化することができ、この活性化により、サイトカイン分泌、Ｔ細胞
増殖及び所定の標的細胞の細胞分解を含む、細胞溶解性Ｔ細胞応答がトリガーされる。し
たがって、抗体又は低分子療法と比較して、ＴＣＲを操作したＴ細胞は、標的細胞内抗原
のごく少量の複製によって標的細胞を死滅させるという能力に特に価値がある（Ｋｕｎｅ
ｒｔら、Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３、２０１３）。
【0010】
しかし、そのほとんどがハイブリドーマ又はディスプレイ技術によって開発される治療
抗体とは異なり、標的に特異的なＴＣＲの同定には、患者Ｔ細胞に由来する標的ペプチド
／ＭＨＣ特異的ＴＣＲクローンの樹立と、最適な標的抗原結合親和性を有する正しいα－
β鎖の組み合わせのスクリーニングが必要とされる。非常に多くの場合ＴＣＲの標的結合
親和性を更に向上させるために、患者Ｔ細胞に由来するＴＣＲのクローニングの後、ファ
ージ／酵母ディスプレイが使用される。この全プロセスは、多くの領域において専門知識
を必要とし、時間がかかるものである（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｅら、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ．３（１）：ｅ２７２５８、２０１４）。ＴＣＲ発見プロセスにおける課題が
、ＴＣＲを操作したＴ細胞療法の広範な応用を大きく妨げる。この応用はまた、特に、腫
瘍細胞上で過剰に発現するだけでなく健康な細胞上でも発現する抗原に対してＴＣＲを用
いる場合、又は標的外のペプチド／ＭＨＣ複合体を認識するＴＣＲを用いる場合に、治療
関連毒性により妨げられる（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＳＡら、Ｓｃｉｅｎｃｅ．３４８（６
２３０）：６２－８、２０１５）。
抗体とは異なり、標的に特異的なＴＣＲの同定には、患者Ｔ細胞に由来する標的ペプチド
／ＭＨＣ特異的ＴＣＲクローンの樹立と、最適な標的抗原結合親和性を有する正しいα－
β鎖の組み合わせのスクリーニングが必要とされる。非常に多くの場合ＴＣＲの標的結合
親和性を更に向上させるために、患者Ｔ細胞に由来するＴＣＲのクローニングの後、ファ
ージ／酵母ディスプレイが使用される。この全プロセスは、多くの領域において専門知識
を必要とし、時間がかかるものである（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｅら、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ．３（１）：ｅ２７２５８、２０１４）。ＴＣＲ発見プロセスにおける課題が
、ＴＣＲを操作したＴ細胞療法の広範な応用を大きく妨げる。この応用はまた、特に、腫
瘍細胞上で過剰に発現するだけでなく健康な細胞上でも発現する抗原に対してＴＣＲを用
いる場合、又は標的外のペプチド／ＭＨＣ複合体を認識するＴＣＲを用いる場合に、治療
関連毒性により妨げられる（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＳＡら、Ｓｃｉｅｎｃｅ．３４８（６
２３０）：６２－８、２０１５）。
【0011】
標的化された癌免疫療法のためにＴ細胞を組み合わせるために、近年、様々な手法が開
発されてきた。この新たな手法は、キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法（ＣＡＲ－Ｔ）と呼ばれ
る。この新しい手法は、モノクローナル抗体の優れた標的特異性と、細胞毒性Ｔ細胞によ
って与えられる強力な細胞毒性と長期間持続性とを併せもつ。ＣＡＲは、細胞表面抗原を
認識する細胞外ドメインと、膜貫通領域と、細胞内シグナル伝達ドメインとから構成され
る。細胞外ドメインは、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）に融合するモノクローナル抗
体の重鎖及び軽鎖に由来する抗原結合可変領域からなる。細胞内シグナル伝達ドメインは
、免疫受容体チロシン系活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）（例えば、ＣＤ３ζ又はＦｃＲγに
由来するもの）と、１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメイン（例えば、ＣＤ２８、４－１
ＢＢ又はＯＸ４０に由来するもの）とを含む（Ｂａｒｒｅｔｔ ＤＭら、Ａｎｎｕ．Ｒｅ
ｖ．Ｍｅｄ．６５：３３３－４７、２０１４；Ｄａｖｉｌａ ＭＬら、Ｏｎｃｏｉｍｍｕ
ｎｏｌｏｇｙ．１（９）：１５７７－１５８３、２０１２）。Ｔ細胞表面上に導入したＣ
ＡＲが標的抗原を結合すると、ＴＣＲ－ペプチド／ＭＨＣ複合体相互作用とは独立して、
Ｔ細胞エフェクター機能をトリガーし得る。したがって、ＣＡＲを備えたＴ細胞は、Ｔ細
胞上のＴＣＲのＭＨＣの種類は一致していないものの標的細胞表面抗原を発現するものを
含め、多種多様な細胞を攻撃するように再方向付けされてもよい。この手法は、ＭＨＣ制
限ＴＣＲ認識の制約を克服し、抗原提示又はＭＨＣ分子の発現における欠陥を介して腫瘍
がエスケープすることを回避する。臨床試験は、神経芽腫（Ｌｏｕｉｓ ＣＵら、Ｂｌｏ
ｏｄ．１１８（２３）：６０５０－６０５６、２０１１）、Ｂ－ＡＬＬ（Ｍａｕｄｅ，Ｓ
Ｌら、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３７１：１
６：１５０７－１５１７、２０１４）、ＣＬＬ（Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ，ＲＪら、Ｂｌｏｏ
ｄ １１８：１８：４８１７－４８２８、２０１１）及びＢ細胞リンパ腫（Ｋｏｃｈｅｎ
ｄｅｒｆｅｒ，ＪＮら、Ｂｌｏｏｄ １１６：２０：４０９９－４１０２、２０１０）に
おけるＣＡＲ－Ｔ療法について、臨床的に優位な抗腫瘍活性を示した。ある研究では、Ｃ
Ｄ１９－ＣＡＲ Ｔ療法で治療したＢ－ＡＬＬ患者３０名において９０％の完全寛解率を
報告した（Ｍａｕｄｅ，ＳＬら、前掲）。
発されてきた。この新たな手法は、キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法（ＣＡＲ－Ｔ）と呼ばれ
る。この新しい手法は、モノクローナル抗体の優れた標的特異性と、細胞毒性Ｔ細胞によ
って与えられる強力な細胞毒性と長期間持続性とを併せもつ。ＣＡＲは、細胞表面抗原を
認識する細胞外ドメインと、膜貫通領域と、細胞内シグナル伝達ドメインとから構成され
る。細胞外ドメインは、単鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）に融合するモノクローナル抗
体の重鎖及び軽鎖に由来する抗原結合可変領域からなる。細胞内シグナル伝達ドメインは
、免疫受容体チロシン系活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）（例えば、ＣＤ３ζ又はＦｃＲγに
由来するもの）と、１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメイン（例えば、ＣＤ２８、４－１
ＢＢ又はＯＸ４０に由来するもの）とを含む（Ｂａｒｒｅｔｔ ＤＭら、Ａｎｎｕ．Ｒｅ
ｖ．Ｍｅｄ．６５：３３３－４７、２０１４；Ｄａｖｉｌａ ＭＬら、Ｏｎｃｏｉｍｍｕ
ｎｏｌｏｇｙ．１（９）：１５７７－１５８３、２０１２）。Ｔ細胞表面上に導入したＣ
ＡＲが標的抗原を結合すると、ＴＣＲ－ペプチド／ＭＨＣ複合体相互作用とは独立して、
Ｔ細胞エフェクター機能をトリガーし得る。したがって、ＣＡＲを備えたＴ細胞は、Ｔ細
胞上のＴＣＲのＭＨＣの種類は一致していないものの標的細胞表面抗原を発現するものを
含め、多種多様な細胞を攻撃するように再方向付けされてもよい。この手法は、ＭＨＣ制
限ＴＣＲ認識の制約を克服し、抗原提示又はＭＨＣ分子の発現における欠陥を介して腫瘍
がエスケープすることを回避する。臨床試験は、神経芽腫（Ｌｏｕｉｓ ＣＵら、Ｂｌｏ
ｏｄ．１１８（２３）：６０５０－６０５６、２０１１）、Ｂ－ＡＬＬ（Ｍａｕｄｅ，Ｓ
Ｌら、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３７１：１
６：１５０７－１５１７、２０１４）、ＣＬＬ（Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ，ＲＪら、Ｂｌｏｏ
ｄ １１８：１８：４８１７－４８２８、２０１１）及びＢ細胞リンパ腫（Ｋｏｃｈｅｎ
ｄｅｒｆｅｒ，ＪＮら、Ｂｌｏｏｄ １１６：２０：４０９９－４１０２、２０１０）に
おけるＣＡＲ－Ｔ療法について、臨床的に優位な抗腫瘍活性を示した。ある研究では、Ｃ
Ｄ１９－ＣＡＲ Ｔ療法で治療したＢ－ＡＬＬ患者３０名において９０％の完全寛解率を
報告した（Ｍａｕｄｅ，ＳＬら、前掲）。
【0012】
全てではないが、今までに研究されたＣＡＲのほとんどは、細胞表面で高発現する腫瘍
抗原を対象としている。既知の全ての腫瘍特異的抗原の９５％に該当する、低複製数の細
胞表面腫瘍抗原及び細胞内腫瘍抗原を標的とするために、より強力かつ有効に操作された
細胞療法を開発する必要がある（Ｃｈｅｅｖｅｒら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．
１５（１７）：５３２３－３７、２００９）。
Ｔ細胞受容体エフェクター機能により抗体特異性を有するキメラ受容体分子を操作する
よういくつかの試みがなされてきた。例えば、Ｋｕｗａｎａ，Ｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１４９（３）：９６０－９６８、１９８７；Ｇｒ
ｏｓｓ，Ｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８６：１００２４－１
００２８、１９８９；Ｇｒｏｓｓ，Ｇ及びＥｓｈｈａｒ，Ｚ、ＦＡＳＥＢ Ｊ．６（１５
）：３３７０－３３７８、１９９２；及び米国特許第７，７４１，４６５号を参照。今日
まで、これらのキメラ受容体はいずれも臨床用途に採用されておらず、ヒトＴ細胞におけ
る発現及び機能性が改善された抗体－ＴＣＲキメラ受容体の新規設計が必要とされている
。
本明細書で参照した全ての出版物、特許、特許出願、及び特許出願公開の開示内容は、
参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／
０５８３０５号は、その全体が本明細書に参考として組み込まれる。
抗原を対象としている。既知の全ての腫瘍特異的抗原の９５％に該当する、低複製数の細
胞表面腫瘍抗原及び細胞内腫瘍抗原を標的とするために、より強力かつ有効に操作された
細胞療法を開発する必要がある（Ｃｈｅｅｖｅｒら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．
１５（１７）：５３２３－３７、２００９）。
Ｔ細胞受容体エフェクター機能により抗体特異性を有するキメラ受容体分子を操作する
よういくつかの試みがなされてきた。例えば、Ｋｕｗａｎａ，Ｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１４９（３）：９６０－９６８、１９８７；Ｇｒ
ｏｓｓ，Ｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８６：１００２４－１
００２８、１９８９；Ｇｒｏｓｓ，Ｇ及びＥｓｈｈａｒ，Ｚ、ＦＡＳＥＢ Ｊ．６（１５
）：３３７０－３３７８、１９９２；及び米国特許第７，７４１，４６５号を参照。今日
まで、これらのキメラ受容体はいずれも臨床用途に採用されておらず、ヒトＴ細胞におけ
る発現及び機能性が改善された抗体－ＴＣＲキメラ受容体の新規設計が必要とされている
。
本明細書で参照した全ての出版物、特許、特許出願、及び特許出願公開の開示内容は、
参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／
０５８３０５号は、その全体が本明細書に参考として組み込まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0013】
【特許文献1】米国特許第７，７４１，４６５号明細書
【非特許文献】
【0014】
【非特許文献1】Ｂｒｏｅｒｅら、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２０１１
【非特許文献2】Ｃａｌｌら、Ｃｅｌｌ．１１１（７）：９６７－７９、２００２
【非特許文献3】Ｇｉｒａｒｄｉら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２６（１）：２５－３１、２００６
【非特許文献4】Ｈａｙｅｓら、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１６（６）：８２７－３８、２００２
【非特許文献5】Ｂｌａｔｔｍａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ．３０５（５６８１）：２００－５、２００４
【非特許文献6】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇら、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ．８（４）：２９９－３０８、２００８
【非特許文献7】Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３（１０）：２３４６－５７、２００５
【非特許文献8】Ｋｕｎｅｒｔ Ｒら、Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３、２０１３
【非特許文献9】Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２１（５）：１０１９－２７、２０１５
【非特許文献10】Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｅら、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．３（１）：ｅ２７２５８、２０１４
【非特許文献11】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＳＡら、Ｓｃｉｅｎｃｅ．３４８（６２３０）：６２－８、２０１５
【非特許文献12】Ｂａｒｒｅｔｔ ＤＭら、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．６５：３３３－４７、２０１４
【非特許文献13】Ｄａｖｉｌａ ＭＬら、Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１（９）：１５７７－１５８３、２０１２
【非特許文献14】Ｌｏｕｉｓ ＣＵら、Ｂｌｏｏｄ．１１８（２３）：６０５０－６０５６、２０１１
【非特許文献15】Ｍａｕｄｅ，ＳＬら、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３７１：１６：１５０７－１５１７、２０１４
【非特許文献16】Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ，ＲＪら、Ｂｌｏｏｄ １１８：１８：４８１７－４８２８、２０１１
【非特許文献17】Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ，ＪＮら、Ｂｌｏｏｄ １１６：２０：４０９９－４１０２、２０１０
【非特許文献18】Ｃｈｅｅｖｅｒら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１５（１７）：５３２３－３７、２００９
【非特許文献19】Ｋｕｗａｎａ，Ｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１４９（３）：９６０－９６８、１９８７
【非特許文献20】Ｇｒｏｓｓ，Ｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８６：１００２４－１００２８、１９８９
【非特許文献21】Ｇｒｏｓｓ，Ｇ及びＥｓｈｈａｒ，Ｚ、ＦＡＳＥＢ Ｊ．６（１５）：３３７０－３３７８、１９９２
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0015】
本出願は、一態様では、Ｔ細胞受容体モジュールに融合した抗原結合モジュール（例え
ば、抗体部分）を含む構築物（例えば、単離された構築物）を提供する（当該構築物は、
本明細書で「キメラ抗体ＴＣＲ分子」又は「ｃａＴＣＲ」とも呼ばれる）。いくつかの実
施形態では、ｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴ細胞受容体モジュール
（ＴＣＲＭ）とを含む。いくつかの実施形態では、標的抗原は、ペプチドとＭＨＣタンパ
ク質（例えば、ＭＨＣクラスＩタンパク質又はＭＨＣクラスＩＩタンパク質）とを含む複
合体である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、細胞表面抗原である。
ば、抗体部分）を含む構築物（例えば、単離された構築物）を提供する（当該構築物は、
本明細書で「キメラ抗体ＴＣＲ分子」又は「ｃａＴＣＲ」とも呼ばれる）。いくつかの実
施形態では、ｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴ細胞受容体モジュール
（ＴＣＲＭ）とを含む。いくつかの実施形態では、標的抗原は、ペプチドとＭＨＣタンパ
ク質（例えば、ＭＨＣクラスＩタンパク質又はＭＨＣクラスＩＩタンパク質）とを含む複
合体である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、細胞表面抗原である。
【0016】
いくつかの実施形態では、キメラ抗体Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）で
あって、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、第１のＴＣＲ膜貫通ドメイ
ン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）及び第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、ＴＣＲ－ＴＭ
のうち少なくとも１つが、天然に存在せず、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を促進し、抗原結合モジュールが、天然に存在するＴ細胞受容体抗
原結合部分ではない、ｃａＴＣＲが提供される。
あって、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、第１のＴＣＲ膜貫通ドメイ
ン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）及び第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、ＴＣＲ－ＴＭ
のうち少なくとも１つが、天然に存在せず、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を促進し、抗原結合モジュールが、天然に存在するＴ細胞受容体抗
原結合部分ではない、ｃａＴＣＲが提供される。
【0017】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合
する第１の抗原結合ドメインと第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメイ
ンを含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ
－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ
（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在する。
する第１の抗原結合ドメインと第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメイ
ンを含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ
－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ
（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在する。
【0018】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲをコードする１つ以上の核酸が
提供される。いくつかの実施形態では、１つ以上の核酸を含む１つ以上のベクターが提供
される。いくつかの実施形態では、１つ以上の核酸又は１つ以上のベクターを含む組成物
が提供される。いくつかの実施形態では、１つ以上の核酸又は１つ以上のベクターを含む
エフェクター細胞が提供される。
提供される。いくつかの実施形態では、１つ以上の核酸を含む１つ以上のベクターが提供
される。いくつかの実施形態では、１つ以上の核酸又は１つ以上のベクターを含む組成物
が提供される。いくつかの実施形態では、１つ以上の核酸又は１つ以上のベクターを含む
エフェクター細胞が提供される。
【0019】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及
びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子とを含む
、複合体が提供される。
びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子とを含む
、複合体が提供される。
【0020】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のエフェクター細胞を含む組成物（例えば、
医薬組成物）が提供される。
医薬組成物）が提供される。
【0021】
いくつかの実施形態では、標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、標
的細胞と、本明細書に記載のエフェクター細胞とを接触させることを含む、方法が提供さ
れる。
的細胞と、本明細書に記載のエフェクター細胞とを接触させることを含む、方法が提供さ
れる。
【0022】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患の治療を必要とする個体において当該疾患
を治療する方法であって、本明細書に記載される有効量の医薬組成物を個体に投与するこ
とを含む、方法が提供される。
を治療する方法であって、本明細書に記載される有効量の医薬組成物を個体に投与するこ
とを含む、方法が提供される。
【0023】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のエフェクター細胞のため不均一な細胞集団
を濃縮する方法であって、（ａ）不均一な細胞集団と、標的抗原又はその中に含まれる１
つ以上のエピトープを含むリガンドとを接触させ、リガンドに結合したエフェクター細胞
の複合体を形成することと、（ｂ）この複合体を、不均一な細胞集団から分離し、それに
よって、エフェクター細胞が濃縮された細胞集団を生成することとを含む、方法が提供さ
れる。
を濃縮する方法であって、（ａ）不均一な細胞集団と、標的抗原又はその中に含まれる１
つ以上のエピトープを含むリガンドとを接触させ、リガンドに結合したエフェクター細胞
の複合体を形成することと、（ｂ）この複合体を、不均一な細胞集団から分離し、それに
よって、エフェクター細胞が濃縮された細胞集団を生成することとを含む、方法が提供さ
れる。
【0024】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される複数のｃａＴＣＲをコードする配列を
含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態では、標的抗原に対して高い親
和性を有するｃａＴＣＲについて、本明細書に記載のライブラリーをスクリーニングする
方法であって、（ａ）核酸ライブラリーを複数の細胞に導入し、その結果、ｃａＴＣＲが
複数の細胞の表面で発現することと、（ｂ）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれ
る１つ以上のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートすることと、（ｃ）リガン
ドに結合した細胞を集めることと、（ｄ）工程（ｃ）で集めた細胞から、ｃａＴＣＲをコ
ードする配列を単離し、それによって、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲを同定することと
を含む、方法が提供される。
含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態では、標的抗原に対して高い親
和性を有するｃａＴＣＲについて、本明細書に記載のライブラリーをスクリーニングする
方法であって、（ａ）核酸ライブラリーを複数の細胞に導入し、その結果、ｃａＴＣＲが
複数の細胞の表面で発現することと、（ｂ）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれ
る１つ以上のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートすることと、（ｃ）リガン
ドに結合した細胞を集めることと、（ｄ）工程（ｃ）で集めた細胞から、ｃａＴＣＲをコ
ードする配列を単離し、それによって、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲを同定することと
を含む、方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【0025】
【図1】様々な抗原結合モジュールを有する数種類のｃａＴＣＲ分子の概略図を示す。
【0026】
【図2】ｃａＴＣＲ－１－０構築物の概略図を示し、ＴＭ変異体を作製するために変異を導入されたその膜貫通領域を強調している。
【0027】
【図3】ｃａＴＣＲ膜貫通領域のらせん状の輪状突出部を示す。膜貫通変異体を作製するために変異を導入されたアミノ酸位置が強調されている。
【0028】
【図4】ＪＲＴ３．１細胞上のｃａＴＣＲ膜貫通変異体及びＣＤ３の発現を、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１結合部分を含むｃａＴＣＲ－１－０で形質導入された細胞上のそれぞれのＭＦＩ発現の割合として示す。表面ＣＤ３ε又はｃａＴＣＲ受容体のフローサイトメトリー分析を使用し、それぞれの受容体のＭＦＩを計算した。
【0029】
【図5】内在性ＣＤ３複合体とｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体との結合親和性を調べるために使用されるウェスタンブロット分析を示す。ｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ６、－ＴＭ１０）を用いて形質導入されたＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞に由来する溶解物又は抗ＦＬＡＧ免疫沈降物を、抗ＦＬＡＧ及び抗ＣＤ３ζ抗体を用いてブロットした。
【0030】
【図6】ｍｏｃｋ形質導入されたＴ細胞、又はｃａＴＣＲ－１－０を形質導入されたＴ細胞、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１結合部分を有するｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体で形質導入されたＴ細胞が介在する、癌細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１及びＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの殺傷に由来する特異的溶解率を示す。
【0031】
【図7】ｃａＴＣＲ－１－０で形質導入されたＴ細胞、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１結合部分を有するｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体で形質導入されたＴ細胞による、癌細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧのｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅後の上清中に見出されるサイトカインの濃度を示す。
【0032】
【図8】ｍｏｃｋ形質導入されたＴ細胞、又は形質導入されたＴ細胞ｃａＴＣＲ－１－０、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１結合部分を有するｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体で形質導入されたＴ細胞が介在する、癌細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１及びＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの死滅からの特異的溶解率を示す。
【0033】
【図9】ｃａＴＣＲ－１－０で形質導入されるＴ細胞、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１結合部分を有するｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体で形質導入されるＴ細胞による、癌細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧのｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅後の上清中に見出されるサイトカインの濃度を示す。
【0034】
【図10】形質導入されるＴ細胞ｃａＴＣＲ－１－０、又は抗ＣＤ１９結合部分を有するｃａＴＣＲ－ＴＭ５膜貫通変異体で形質導入されたＴ細胞が介在する、癌細胞株ＮＡＬＭ６の死滅からの特異的溶解率を示す。
【0035】
【図11】ｍｏｃｋ形質導入されたＴ細胞、又は形質導入されるＴ細胞ｃａＴＣＲ－１－０、又は抗ＣＤ１９結合部分を有するｃａＴＣＲ－１ーＴＭ５膜貫通変異体で形質導入されるＴ細胞による、癌細胞株ＮＡＬＭ６のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅後の上清中に見出されるサイトカインの濃度を示す。
【0036】
【図12A】ＮＡＬＭ６腫瘍細胞による刺激に応答する増殖速度の実証として、形質導入されるＴ細胞ｃａＴＣＲ－１－０、又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５で形質導入されたＴ細胞内のＣＦＳＥの量を示す。腫瘍細胞溶解後の生存Ｔ細胞の数を表５に列挙している。
【図12B】ＮＡＬＭ６腫瘍細胞による刺激に応答する増殖速度の実証として、形質導入されるＴ細胞ｃａＴＣＲ－１－０、又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５で形質導入されたＴ細胞内のＣＦＳＥの量を示す。腫瘍細胞溶解後の生存Ｔ細胞の数を表５に列挙している。
【0037】
【図13A】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略的な構造を示す。
【図13B】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略的な構造を示す。
【図13C】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略的な構造を示す。
【図13D】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略的な構造を示す。
【図13E】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略的な構造を示す。
【0038】
【図14】Ｋ５６２、Ｋ５６２－ＣＤ１９（ＣＤ１９＋）、Ｋ５６２－ＣＤ２２（ＣＤ２２＋）、Ｒａｊｉ、及びｍｏｃｋ形質導入されたＴ細胞、又は二重特異性ｃａＴＣＲ構築物、抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ－７－２ａをコードするベクターで形質導入されたＴ細胞を含むＲａｊｉ ＣＤ１９ Ｋ／Ｏといった癌細胞株をｉｎ ｖｉｔｒｏでインキュベーションした後に上清中に見出されるＩＦＮγの濃度を示す。
【0039】
【図15】Ｋ５６２、Ｋ５６２－ＣＤ１９（ＣＤ１９＋）、Ｋ５６２－ＣＤ２２（ＣＤ２２＋）、及び抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１又は４種類の異なる抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ構築物のいずれか１つをコードするベクターで形質導入されたＴ細胞が介在するＫ５６２－ＣＤ１９／ＣＤ２２（ＣＤ１９＋ＣＤ２２＋）といった癌細胞株の死滅に由来する特異的溶解率を示す。
【発明を実施するための形態】
【0040】
本出願は、一態様では、単離されたキメラ抗体／Ｔ細胞受容体構築物（本明細書で「ｃ
ａＴＣＲ」と呼ばれる）であって、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、
１つ以上の天然に存在しないＴＣＲ由来の膜貫通ドメインを含むＴ細胞受容体モジュール
（ＴＣＲＭ）とを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することが可能である、ｃａＴＣＲを提供する。別の態様では、本出願は、２つ以上の
異なる標的抗原又はエピトープに特異的に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗
原結合モジュールと、天然に存在するか、又は天然に存在しないＴＣＲ由来の膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭとを含むｃａＴＣＲを提供する。本明細書に記載されるｃａＴＣＲは
、標的抗原を発現する疾患細胞を死滅させるために、ヒトＴ細胞を特異的に再方向付けさ
せる。標的抗原は、細胞表面で発現するタンパク質であってもよく、又はペプチドとＭＨ
Ｃタンパク質とを含む複合体（本明細書では「ｐＭＨＣ複合体」又は「ｐＭＨＣ」と呼ば
れる）、例えば、疾患細胞表面にあるＭＨＣ提示疾患関連抗原ペプチドであってもよい。
ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞受容体活性化を制御する天然に存在する機構によって制御されるが
、天然に存在するＴ細胞受容体とは異なり、ｃａＴＣＲは、表面発現及び／又は機能を増
強する改変を含む。
ａＴＣＲ」と呼ばれる）であって、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、
１つ以上の天然に存在しないＴＣＲ由来の膜貫通ドメインを含むＴ細胞受容体モジュール
（ＴＣＲＭ）とを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することが可能である、ｃａＴＣＲを提供する。別の態様では、本出願は、２つ以上の
異なる標的抗原又はエピトープに特異的に結合する多重特異性（例えば、二重特異性）抗
原結合モジュールと、天然に存在するか、又は天然に存在しないＴＣＲ由来の膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭとを含むｃａＴＣＲを提供する。本明細書に記載されるｃａＴＣＲは
、標的抗原を発現する疾患細胞を死滅させるために、ヒトＴ細胞を特異的に再方向付けさ
せる。標的抗原は、細胞表面で発現するタンパク質であってもよく、又はペプチドとＭＨ
Ｃタンパク質とを含む複合体（本明細書では「ｐＭＨＣ複合体」又は「ｐＭＨＣ」と呼ば
れる）、例えば、疾患細胞表面にあるＭＨＣ提示疾患関連抗原ペプチドであってもよい。
ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞受容体活性化を制御する天然に存在する機構によって制御されるが
、天然に存在するＴ細胞受容体とは異なり、ｃａＴＣＲは、表面発現及び／又は機能を増
強する改変を含む。
【0041】
本願発明者らは、天然に存在するＴＣＲ配列のみを有する同様の構築物と比較して、表
面発現及び／又は機能を改善した、ＴＣＲ配列の天然に存在しない多様体を含む、一連の
新規な合成キメラ抗体－ＴＣＲ構築物を開発した。本願発明者らはまた、抗原の逃避を減
らすために複数の標的抗原を特異的に認識する、多重特異性キメラ抗体－ＴＣＲ構築物を
開発した。ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞表面上で効率的に発現させることができ、内在性ＣＤ３
分子に会合して、安定なＴＣＲ様シグナル伝達複合体を形成することが示されている。Ｔ
細胞において操作されると、ｃａＴＣＲは、ＭＨＣ依存性（ペプチド／ＭＨＣ抗原）の構
成及びＭＨＣ非依存性（細胞表面抗原）の構成の両方で、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖ
ｉｖｏの両方で、Ｔ細胞に、標的を有する腫瘍細胞に対する強力な細胞毒性を与えた。
面発現及び／又は機能を改善した、ＴＣＲ配列の天然に存在しない多様体を含む、一連の
新規な合成キメラ抗体－ＴＣＲ構築物を開発した。本願発明者らはまた、抗原の逃避を減
らすために複数の標的抗原を特異的に認識する、多重特異性キメラ抗体－ＴＣＲ構築物を
開発した。ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞表面上で効率的に発現させることができ、内在性ＣＤ３
分子に会合して、安定なＴＣＲ様シグナル伝達複合体を形成することが示されている。Ｔ
細胞において操作されると、ｃａＴＣＲは、ＭＨＣ依存性（ペプチド／ＭＨＣ抗原）の構
成及びＭＨＣ非依存性（細胞表面抗原）の構成の両方で、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖ
ｉｖｏの両方で、Ｔ細胞に、標的を有する腫瘍細胞に対する強力な細胞毒性を与えた。
【0042】
したがって、本出願の一態様は、ｃａＴＣＲ（例えば、単離されたｃａＴＣＲ）であっ
て、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、１つ以上の天然に存在しないＴ
ＣＲ由来の膜貫通ドメインを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、ＴＣＲ
Ｍが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である、ｃａ
ＴＣＲを提供する。ｃａＴＣＲは、抗原結合モジュール及び／又はＴＣＲＭにおける様々
な多数のフォーマットのうちのいずれかをとることができる。例えば、ｃａＴＣＲは、Ｆ
ａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及びｓｃＦｖからなる群から選択される部分を含
む抗原結合モジュールと、膜貫通ドメイン、接続ペプチド及び細胞内ドメインのうち１つ
以上が多様体を含み、α／β及び／又はγ／δ ＴＣＲに由来する１つ以上の天然に存在
しない配列を有するＴＣＲＭと、を含んでいてもよい。例示的なｃａＴＣＲ構築物の設計
については、図１を参照のこと。
て、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、１つ以上の天然に存在しないＴ
ＣＲ由来の膜貫通ドメインを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、ＴＣＲ
Ｍが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である、ｃａ
ＴＣＲを提供する。ｃａＴＣＲは、抗原結合モジュール及び／又はＴＣＲＭにおける様々
な多数のフォーマットのうちのいずれかをとることができる。例えば、ｃａＴＣＲは、Ｆ
ａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及びｓｃＦｖからなる群から選択される部分を含
む抗原結合モジュールと、膜貫通ドメイン、接続ペプチド及び細胞内ドメインのうち１つ
以上が多様体を含み、α／β及び／又はγ／δ ＴＣＲに由来する１つ以上の天然に存在
しない配列を有するＴＣＲＭと、を含んでいてもよい。例示的なｃａＴＣＲ構築物の設計
については、図１を参照のこと。
【0043】
本出願の別の態様は、ｃａＴＣＲであって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する
第１の抗原結合ドメインと第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを
含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（Ｔ
ＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１の
標的抗原はＣＤ１９であり、第２の標的抗原はＣＤ２２であるか、又は第１の標的抗原は
ＣＤ２２であり、第２の標的抗原はＣＤ１９である。いくつかの実施形態では、第１の標
的抗原はＣＤ１９であり、第２の標的抗原はＣＤ２０であるか、又は第１の標的抗原はＣ
Ｄ２０であり、第２の標的抗原はＣＤ２２である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、１つ以上の天然に存在しないＴＣＲ由来の膜貫通ドメインを含む。例示的な多重特異性
ｃａＴＣＲ構築物の設計については、図１３Ａ～１３Ｅを参照のこと。
第１の抗原結合ドメインと第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを
含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（Ｔ
ＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１の
標的抗原はＣＤ１９であり、第２の標的抗原はＣＤ２２であるか、又は第１の標的抗原は
ＣＤ２２であり、第２の標的抗原はＣＤ１９である。いくつかの実施形態では、第１の標
的抗原はＣＤ１９であり、第２の標的抗原はＣＤ２０であるか、又は第１の標的抗原はＣ
Ｄ２０であり、第２の標的抗原はＣＤ２２である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、１つ以上の天然に存在しないＴＣＲ由来の膜貫通ドメインを含む。例示的な多重特異性
ｃａＴＣＲ構築物の設計については、図１３Ａ～１３Ｅを参照のこと。
【0044】
別の態様では、ｃａＴＣＲをコードする１つ以上の核酸が提供される。
【0045】
更に別の態様では、ｃａＴＣＲと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子とを
含む、複合体（本明細書では、「ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体」と呼ばれる）が提供される
。複合体は、ｃａＴＣＲ、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζといった４つの二量体を含む
八量体であってもよい。ｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体を発現するか、又はこ
れに会合するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）も提供される。
含む、複合体（本明細書では、「ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体」と呼ばれる）が提供される
。複合体は、ｃａＴＣＲ、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζといった４つの二量体を含む
八量体であってもよい。ｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体を発現するか、又はこ
れに会合するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）も提供される。
【0046】
更に別の態様では、ｃａＴＣＲを含む組成物が提供される。組成物は、ｃａＴＣＲを発
現するか、又はこれに会合するｃａＴＣＲ又はエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲを
発現するＴ細胞）を含む医薬組成物であってもよい。
現するか、又はこれに会合するｃａＴＣＲ又はエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲを
発現するＴ細胞）を含む医薬組成物であってもよい。
【0047】
治療目的のために、ｃａＴＣＲ（又はｃａＴＣＲを発現するか、若しくはこれに会合す
る細胞）を作製し、使用する方法、並びにこのような方法に有用なキット及び製造物品も
提供される。更に、ｃａＴＣＲ（又はｃａＴＣＲを発現するか、又はこれに会合する細胞
）を用い、疾患を治療する方法が提供される。
定義
る細胞）を作製し、使用する方法、並びにこのような方法に有用なキット及び製造物品も
提供される。更に、ｃａＴＣＲ（又はｃａＴＣＲを発現するか、又はこれに会合する細胞
）を用い、疾患を治療する方法が提供される。
定義
【0048】
「抗体」又は「抗体部分」との用語は、完全長抗体及びその抗原結合フラグメントを含
む。完全長抗体は、２つの重鎖と２つの軽鎖とを含む。軽鎖及び重鎖の可変領域は、抗原
結合に関与する。両鎖の可変領域は、一般に、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる３つ
のきわめて可変性のループ（ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む
軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲと、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含む重鎖
（ＨＣ）ＣＤＲ）を含む。本明細書に開示される抗体及び抗原結合フラグメントのＣＤＲ
の境界は、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、又はＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉによって定義又は
同定されてもよい（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ １９９７；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８５；Ｃ
ｈｏｔｈｉａ １９８７；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８９；Ｋａｂａｔ １９８７；Ｋａｂａ
ｔ １９９１）。重鎖又は軽鎖の３つのＣＤＲは、フレームワーク領域（ＦＲ）として知
られるフランキング伸長部の間に挟まっており、ＣＤＲよりも高度に保存され、超可変ル
ープを支えるための骨格を形成する。重鎖及び軽鎖の定常領域は、抗原結合には関与しな
いが、様々なエフェクター機能を示す。抗体は、重鎖の定常領域のアミノ酸配列に基づき
、いくつかのクラスに割り当てられる。抗体の５つの主要なクラス又はアイソタイプは、
ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭであり、それぞれ、α、δ、ε、γ及びμ重
鎖の存在によって特徴付けられる。主要な抗体クラスのいくつかは、例えば、ｌｇＧ１（
γ１重鎖）、ｌｇＧ２（γ２重鎖）、ｌｇＧ３（γ３重鎖）、ｌｇＧ４（γ４重鎖）、ｌ
ｇＡ１（α１重鎖）又はｌｇＡ２（α２重鎖）などのサブクラスに分けられる。
む。完全長抗体は、２つの重鎖と２つの軽鎖とを含む。軽鎖及び重鎖の可変領域は、抗原
結合に関与する。両鎖の可変領域は、一般に、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる３つ
のきわめて可変性のループ（ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む
軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲと、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含む重鎖
（ＨＣ）ＣＤＲ）を含む。本明細書に開示される抗体及び抗原結合フラグメントのＣＤＲ
の境界は、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、又はＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉによって定義又は
同定されてもよい（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ １９９７；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８５；Ｃ
ｈｏｔｈｉａ １９８７；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８９；Ｋａｂａｔ １９８７；Ｋａｂａ
ｔ １９９１）。重鎖又は軽鎖の３つのＣＤＲは、フレームワーク領域（ＦＲ）として知
られるフランキング伸長部の間に挟まっており、ＣＤＲよりも高度に保存され、超可変ル
ープを支えるための骨格を形成する。重鎖及び軽鎖の定常領域は、抗原結合には関与しな
いが、様々なエフェクター機能を示す。抗体は、重鎖の定常領域のアミノ酸配列に基づき
、いくつかのクラスに割り当てられる。抗体の５つの主要なクラス又はアイソタイプは、
ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭであり、それぞれ、α、δ、ε、γ及びμ重
鎖の存在によって特徴付けられる。主要な抗体クラスのいくつかは、例えば、ｌｇＧ１（
γ１重鎖）、ｌｇＧ２（γ２重鎖）、ｌｇＧ３（γ３重鎖）、ｌｇＧ４（γ４重鎖）、ｌ
ｇＡ１（α１重鎖）又はｌｇＡ２（α２重鎖）などのサブクラスに分けられる。
【0049】
「抗原結合フラグメント」との用語は、本明細書で使用される場合、例えば、ダイアボ
ディ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖフラグメント、ジスルフィドで安定化さ
れたＦｖフラグメント（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦｖ）２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－
ｄｓＦｖ’）、ジスルフィドで安定化されたダイアボディ（ｄｓダイアボディ）、一本鎖
抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体（二価ダイアボディ）、１つ以上のＣＤＲを含む
抗体の一部から形成される多重特異性抗体、ラクダ化されたシングルドメイン抗体、ナノ
ボディ、ドメイン抗体、二価ドメイン抗体、又は抗原に結合するが完全な抗体構造を含ま
ない任意の他の抗体フラグメントを含む、抗体フラグメントを指す。抗原結合フラグメン
トは、親抗体又は親抗体フラグメント（例えば、親ｓｃＦｖ）が結合するのと同じ抗原に
結合することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合フラグメントは、１つ以上の
異なるヒト抗体由来のフレームワーク領域にグラフトした、特定のヒト抗体由来の１つ以
上のＣＤＲを含んでいてもよい。
ディ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖフラグメント、ジスルフィドで安定化さ
れたＦｖフラグメント（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦｖ）２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－
ｄｓＦｖ’）、ジスルフィドで安定化されたダイアボディ（ｄｓダイアボディ）、一本鎖
抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体（二価ダイアボディ）、１つ以上のＣＤＲを含む
抗体の一部から形成される多重特異性抗体、ラクダ化されたシングルドメイン抗体、ナノ
ボディ、ドメイン抗体、二価ドメイン抗体、又は抗原に結合するが完全な抗体構造を含ま
ない任意の他の抗体フラグメントを含む、抗体フラグメントを指す。抗原結合フラグメン
トは、親抗体又は親抗体フラグメント（例えば、親ｓｃＦｖ）が結合するのと同じ抗原に
結合することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合フラグメントは、１つ以上の
異なるヒト抗体由来のフレームワーク領域にグラフトした、特定のヒト抗体由来の１つ以
上のＣＤＲを含んでいてもよい。
【0050】
本明細書で使用される場合、等モル濃度の第１の抗体部分存在下、第１の抗体部分が、
第２の抗体部分の標的抗原結合を少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約５５％、６
０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％の
いずれか）まで阻害する場合、第１の抗体部分は、第２の抗体部分と、標的抗原への結合
について「競合する」か、又はその逆が成り立つ。これらの交差競合に基づく抗体の「ビ
ニング」のための高スループットプロセスは、ＰＣＴ公開第ＷＯ ０３／４８７３１号に
記載される。
第２の抗体部分の標的抗原結合を少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約５５％、６
０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％の
いずれか）まで阻害する場合、第１の抗体部分は、第２の抗体部分と、標的抗原への結合
について「競合する」か、又はその逆が成り立つ。これらの交差競合に基づく抗体の「ビ
ニング」のための高スループットプロセスは、ＰＣＴ公開第ＷＯ ０３／４８７３１号に
記載される。
【0051】
本明細書で使用される場合、「特異的に結合する」又は「～に特異的である」との用語
は、生体分子を含めた異種分子集団の存在下で標的が存在することの指標となる、測定可
能かつ再現性のある相互作用（例えば、標的と抗体又は抗体部分との間の結合）を指す。
例えば、標的（エピトープであってもよい）に特異的に結合する抗体部分は、他の標的に
対する結合よりも大きな親和性で、より大きなアビディティーで、より容易に、及び／又
はより長時間、標的に結合する抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗原に特異的
に結合する抗体部分は、抗原の１つ以上の抗原決定基（例えば、細胞表面抗原又はペプチ
ド／ＭＨＣタンパク質複合体）と、他の標的に対する結合親和性の少なくとも約１０倍の
結合親和性で反応する。
は、生体分子を含めた異種分子集団の存在下で標的が存在することの指標となる、測定可
能かつ再現性のある相互作用（例えば、標的と抗体又は抗体部分との間の結合）を指す。
例えば、標的（エピトープであってもよい）に特異的に結合する抗体部分は、他の標的に
対する結合よりも大きな親和性で、より大きなアビディティーで、より容易に、及び／又
はより長時間、標的に結合する抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗原に特異的
に結合する抗体部分は、抗原の１つ以上の抗原決定基（例えば、細胞表面抗原又はペプチ
ド／ＭＨＣタンパク質複合体）と、他の標的に対する結合親和性の少なくとも約１０倍の
結合親和性で反応する。
【0052】
「Ｔ細胞受容体」又は「ＴＣＲ」との用語は、Ｔ細胞の表面上で対を形成するαβ鎖又
はγδ鎖で構成されるヘテロ二量体受容体を指す。各α、β、γ、及びδ鎖は、相補性決
定領域（ＣＤＲ）を介して抗原認識を付与する可変ドメイン（Ｖ）と、次いで、接続ペプ
チド及び膜貫通（ＴＭ）領域によって細胞膜に固定される定常ドメイン（Ｃ）といった２
つのＩｇ様ドメインで構成される。ＴＭ領域は、ＣＤ３シグナル伝達装置のインバリアン
トなサブユニットと会合する。Ｖドメインはそれぞれ、３つのＣＤＲを含む。これらのＣ
ＤＲは、主要組織適合抗原複合体（ｐＭＨＣ）によりコードされるタンパク質に結合した
抗原ペプチド間の複合体と相互作用する（Ｄａｖｉｓ及びＢｊｏｒｋｍａｎ（１９８８）
Ｎａｔｕｒｅ、３３４、３９５－４０２；Ｄａｖｉｓら（１９９８）、Ａｎｎｕ Ｒｅｖ
Ｉｍｍｕｎｏｌ、１６、５２３－５４４；Ｍｕｒｐｈｙ（２０１２）、ｘｉｘ、８６８
ｐ）。
はγδ鎖で構成されるヘテロ二量体受容体を指す。各α、β、γ、及びδ鎖は、相補性決
定領域（ＣＤＲ）を介して抗原認識を付与する可変ドメイン（Ｖ）と、次いで、接続ペプ
チド及び膜貫通（ＴＭ）領域によって細胞膜に固定される定常ドメイン（Ｃ）といった２
つのＩｇ様ドメインで構成される。ＴＭ領域は、ＣＤ３シグナル伝達装置のインバリアン
トなサブユニットと会合する。Ｖドメインはそれぞれ、３つのＣＤＲを含む。これらのＣ
ＤＲは、主要組織適合抗原複合体（ｐＭＨＣ）によりコードされるタンパク質に結合した
抗原ペプチド間の複合体と相互作用する（Ｄａｖｉｓ及びＢｊｏｒｋｍａｎ（１９８８）
Ｎａｔｕｒｅ、３３４、３９５－４０２；Ｄａｖｉｓら（１９９８）、Ａｎｎｕ Ｒｅｖ
Ｉｍｍｕｎｏｌ、１６、５２３－５４４；Ｍｕｒｐｈｙ（２０１２）、ｘｉｘ、８６８
ｐ）。
【0053】
「ＴＣＲ関連シグナル伝達分子」との用語は、ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部である細胞
質免疫受容体チロシン系活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を有する分子を指す。ＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子としては、ＣＤ３γε、ＣＤ３δε、及びζζ（ＣＤ３ζ又はＣＤ３ζζ
としても知られる）が挙げられる。
質免疫受容体チロシン系活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を有する分子を指す。ＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子としては、ＣＤ３γε、ＣＤ３δε、及びζζ（ＣＤ３ζ又はＣＤ３ζζ
としても知られる）が挙げられる。
【0054】
「活性化」は、本明細書で、ＣＤ３を発現する細胞に関連して使用される場合、限定さ
れないが、細胞増殖及びサイトカイン産生を含め、下流のＣＤ３シグナル伝達経路のエフ
ェクター機能を検出可能なほどに増強するのに十分に刺激を受けた細胞の状態を指す。
れないが、細胞増殖及びサイトカイン産生を含め、下流のＣＤ３シグナル伝達経路のエフ
ェクター機能を検出可能なほどに増強するのに十分に刺激を受けた細胞の状態を指す。
【0055】
「モジュール」との用語は、タンパク質又はタンパク質の一部を指すとき、１つ以上の
ポリペプチド鎖（例えば、二量体タンパク質又は二量体タンパク質の一部）を含むことを
意味する。１つ以上の鎖は、リンカー（例えば、ペプチドリンカー）又は化学結合（例え
ば、ペプチド結合）などによって接続していてもよい。「モジュール」はまた、タンパク
質を構成する１つ以上のポリペプチドの構造及び／又は機能に関連する部分を含むことも
意味する。例えば、二量体受容体の膜貫通モジュールは、膜にまたがる受容体の各ポリペ
プチド鎖の部分を指していてもよい。モジュールはまた、単一のポリペプチド鎖の関連部
分を指す場合もある。例えば、単量体受容体の膜貫通モジュールは、膜にまたがる受容体
の単一のポリペプチド鎖の部分を指していてもよい。モジュールはまた、ポリペプチドの
単一部分のみを含んでもよい。
ポリペプチド鎖（例えば、二量体タンパク質又は二量体タンパク質の一部）を含むことを
意味する。１つ以上の鎖は、リンカー（例えば、ペプチドリンカー）又は化学結合（例え
ば、ペプチド結合）などによって接続していてもよい。「モジュール」はまた、タンパク
質を構成する１つ以上のポリペプチドの構造及び／又は機能に関連する部分を含むことも
意味する。例えば、二量体受容体の膜貫通モジュールは、膜にまたがる受容体の各ポリペ
プチド鎖の部分を指していてもよい。モジュールはまた、単一のポリペプチド鎖の関連部
分を指す場合もある。例えば、単量体受容体の膜貫通モジュールは、膜にまたがる受容体
の単一のポリペプチド鎖の部分を指していてもよい。モジュールはまた、ポリペプチドの
単一部分のみを含んでもよい。
【0056】
「単離された」構築物（例えば、ｃａＴＣＲ）は、本明細書で使用される場合、（１）
自然界で見出されるタンパク質と会合しておらず、（２）同じ供給源に由来する他のタン
パク質を含まず、（３）異なる種に由来する細胞によって発現されるか、又は（４）自然
界では生じない構築物を指す。
自然界で見出されるタンパク質と会合しておらず、（２）同じ供給源に由来する他のタン
パク質を含まず、（３）異なる種に由来する細胞によって発現されるか、又は（４）自然
界では生じない構築物を指す。
【0057】
「単離された核酸」との用語は、本明細書で使用される場合、ゲノム、ｃＤＮＡ、又は
合成された核酸、又はこれらのいくつかの組み合わせを意味することを意図し、その由来
という観点で、「単離された核酸」は、（１）「単離された核酸」が天然に見出されるポ
リヌクレオチドの全て又は一部に会合していない、（２）天然では接続されていないポリ
ヌクレオチドに作動可能に接続されている、又は（３）天然ではより大きな配列の一部と
して生じない。
合成された核酸、又はこれらのいくつかの組み合わせを意味することを意図し、その由来
という観点で、「単離された核酸」は、（１）「単離された核酸」が天然に見出されるポ
リヌクレオチドの全て又は一部に会合していない、（２）天然では接続されていないポリ
ヌクレオチドに作動可能に接続されている、又は（３）天然ではより大きな配列の一部と
して生じない。
【0058】
本明細書で使用される場合、「ＣＤＲ」又は「相補性決定領域」との用語は、重鎖及び
軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非連続な抗原結合部位を意味すること
を意図する。これらの具体的な領域は、Ｋａｂａｔら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２
：６６０９－６６１６（１９７７）；Ｋａｂａｔら、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌ
ｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔ
ｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ」（１９９１）；Ｃｈ
ｏｔｈｉａら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）；Ａｌ－Ｌ
ａｚｉｋａｎｉ Ｂ．ら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２７３：９２７－９４８（１９９７
）；ＭａｃＣａｌｌｕｍら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６
）；Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ及びＭａｒｔｉｎ、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、４５：３８３
２－３８３９（２００８）；Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ．Ｐ．ら、Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．、２７：５５－７７（２００３）；及びＨｏｎｅｇｇｅｒ及びＰｌｕｅｃｋｔｈ
ｕｎ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、３０９：６５７－６７０（２００１）によって記載され
ており、この定義は、互いに比較したときに、アミノ酸残基の重なり合い又は部分集合を
含む。しかしながら、抗体又はグラフト化した抗体又はこれらの多様体のＣＤＲを指すた
めのいずれかの定義の適用は、本明細書で定義され、本明細書で使用される用語の範囲内
であることが意図される。上に引用した参照文献のそれぞれによって定義されるＣＤＲを
包含するアミノ酸残基を、比較として以下の表１に記載する。ＣＤＲ予測アルゴリズム及
びインターフェースは、当該技術分野において既知であり、例えば、Ａｂｈｉｎａｎｄａ
ｎ及びＭａｒｔｉｎ、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、４５：３８３２－３８３９（２００８
）；Ｅｈｒｅｎｍａｎｎ Ｆ．ら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、３８：Ｄ３
０１－Ｄ３０７（２０１０）；及びＡｄｏｌｆ－Ｂｒｙｆｏｇｌｅ Ｊ．ら、Ｎｕｃｌｅ
ｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、４３：Ｄ４３２－Ｄ４３８（２０１５）を含む。本段落で
引用される参考文献の内容は、本発明で使用するため、また、本明細書の１つ以上の特許
請求の範囲に可能ならば包含するため、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
１残基の付番は、上掲のＫａｂａｔらの命名法に従う。
２残基の付番は、上掲のＣｈｏｔｈｉａらの命名法に従う。
３残基付番は、上掲のＭａｃＣａｌｌｕｍらの命名法に従う。
４残基の付番は、上掲のＬｅｆｒａｎｃらの命名法に従う。
５残基の付番は、上掲のＨｏｎｅｇｇｅｒ及びＰｌｕｅｃｋｔｈｕｎの命名法に従う。
軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非連続な抗原結合部位を意味すること
を意図する。これらの具体的な領域は、Ｋａｂａｔら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２
：６６０９－６６１６（１９７７）；Ｋａｂａｔら、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌ
ｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔ
ｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ」（１９９１）；Ｃｈ
ｏｔｈｉａら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）；Ａｌ－Ｌ
ａｚｉｋａｎｉ Ｂ．ら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２７３：９２７－９４８（１９９７
）；ＭａｃＣａｌｌｕｍら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６
）；Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ及びＭａｒｔｉｎ、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、４５：３８３
２－３８３９（２００８）；Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ．Ｐ．ら、Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．、２７：５５－７７（２００３）；及びＨｏｎｅｇｇｅｒ及びＰｌｕｅｃｋｔｈ
ｕｎ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、３０９：６５７－６７０（２００１）によって記載され
ており、この定義は、互いに比較したときに、アミノ酸残基の重なり合い又は部分集合を
含む。しかしながら、抗体又はグラフト化した抗体又はこれらの多様体のＣＤＲを指すた
めのいずれかの定義の適用は、本明細書で定義され、本明細書で使用される用語の範囲内
であることが意図される。上に引用した参照文献のそれぞれによって定義されるＣＤＲを
包含するアミノ酸残基を、比較として以下の表１に記載する。ＣＤＲ予測アルゴリズム及
びインターフェースは、当該技術分野において既知であり、例えば、Ａｂｈｉｎａｎｄａ
ｎ及びＭａｒｔｉｎ、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、４５：３８３２－３８３９（２００８
）；Ｅｈｒｅｎｍａｎｎ Ｆ．ら、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、３８：Ｄ３
０１－Ｄ３０７（２０１０）；及びＡｄｏｌｆ－Ｂｒｙｆｏｇｌｅ Ｊ．ら、Ｎｕｃｌｅ
ｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、４３：Ｄ４３２－Ｄ４３８（２０１５）を含む。本段落で
引用される参考文献の内容は、本発明で使用するため、また、本明細書の１つ以上の特許
請求の範囲に可能ならば包含するため、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【表1】
２残基の付番は、上掲のＣｈｏｔｈｉａらの命名法に従う。
３残基付番は、上掲のＭａｃＣａｌｌｕｍらの命名法に従う。
４残基の付番は、上掲のＬｅｆｒａｎｃらの命名法に従う。
５残基の付番は、上掲のＨｏｎｅｇｇｅｒ及びＰｌｕｅｃｋｔｈｕｎの命名法に従う。
【0059】
用語「キメラ抗体」は、本発明の生物活性を示すものであるという条件で、重鎖及び／
又は軽鎖が、特定の種に由来する抗体又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する
抗体における対応する配列と同一であり又は相同であり、なおかつ鎖の残部は別の種に由
来する抗体又は別の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体、及び係る抗体のフラグ
メントと同一である又は相同である抗体を指す（米国特許第４，８１６，５６７号、及び
Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８１：６８５１
－６８５５（１９８４）を参照）。
又は軽鎖が、特定の種に由来する抗体又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する
抗体における対応する配列と同一であり又は相同であり、なおかつ鎖の残部は別の種に由
来する抗体又は別の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体、及び係る抗体のフラグ
メントと同一である又は相同である抗体を指す（米国特許第４，８１６，５６７号、及び
Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８１：６８５１
－６８５５（１９８４）を参照）。
【0060】
抗体又は抗体部分を参照して、「半合成」との用語は、その抗体又は抗体部分が、１つ
以上の天然に存在する配列と、１つ以上の天然に存在しない（すなわち、合成の）配列と
を有することを意味する。
以上の天然に存在する配列と、１つ以上の天然に存在しない（すなわち、合成の）配列と
を有することを意味する。
【0061】
抗体又は抗体部分を参照して、「完全合成」との用語は、その抗体又は抗体部分が、定
型的なものであり、大部分又は全てが天然に存在するＶＨ／ＶＬフレームワーク対を有す
るが、重鎖及び軽鎖の両方の６つＣＤＲの全てが天然には存在しない（すなわち、合成の
）配列を有することを意味する。天然に存在しないＣＤＲとしては、改変されたヒトＣＤ
Ｒ配列を含むもの、例えば、保存的アミノ酸置換又はシステイン残基の導入によって改変
されたＣＤＲ配列が挙げられる。
型的なものであり、大部分又は全てが天然に存在するＶＨ／ＶＬフレームワーク対を有す
るが、重鎖及び軽鎖の両方の６つＣＤＲの全てが天然には存在しない（すなわち、合成の
）配列を有することを意味する。天然に存在しないＣＤＲとしては、改変されたヒトＣＤ
Ｒ配列を含むもの、例えば、保存的アミノ酸置換又はシステイン残基の導入によって改変
されたＣＤＲ配列が挙げられる。
【0062】
非ヒト（例えば、げっ歯類）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト抗体に由来する最小配列
を含むキメラ抗体である。大部分について、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域（
ＨＶＲ）に由来する残基が、所望の抗体特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット
、ウサギ、又はヒト以外の霊長類などのヒト以外の種（ドナー抗体）の超可変領域に由来
する残基によって置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である
。ある場合には、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）の残基は、ヒトのも
のではない対応する残基によって置き換わっている。更に、ヒト化抗体は、レシピエント
抗体中又はドナー抗体中に見出されない残基を含んでいてもよい。これらの改変は、抗体
性能を更に改良するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的に
は２つの可変ドメインの実質的に全てを含んでいてもよく、超可変ループの全て又は実質
的に全ては、ヒト以外の免疫グロブリンのものと対応し、ＦＲの全て又は実質的に全ては
、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体は、場合により、免疫グロブリン（
典型的には、ヒト免疫グロブリンの）定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部も含むだろう。
更なる詳細については、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８
６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；及
びＰｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９
９２）を参照。
を含むキメラ抗体である。大部分について、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域（
ＨＶＲ）に由来する残基が、所望の抗体特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット
、ウサギ、又はヒト以外の霊長類などのヒト以外の種（ドナー抗体）の超可変領域に由来
する残基によって置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である
。ある場合には、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）の残基は、ヒトのも
のではない対応する残基によって置き換わっている。更に、ヒト化抗体は、レシピエント
抗体中又はドナー抗体中に見出されない残基を含んでいてもよい。これらの改変は、抗体
性能を更に改良するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的に
は２つの可変ドメインの実質的に全てを含んでいてもよく、超可変ループの全て又は実質
的に全ては、ヒト以外の免疫グロブリンのものと対応し、ＦＲの全て又は実質的に全ては
、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体は、場合により、免疫グロブリン（
典型的には、ヒト免疫グロブリンの）定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部も含むだろう。
更なる詳細については、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８
６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；及
びＰｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９
９２）を参照。
【0063】
「ホモロジー」は、２つのポリペプチド間又は２つの核酸分子間の配列類似性又は配列
同一性を指す。２つの比較配列の両方の位置が、同じ塩基又はアミノ酸単量体サブユニッ
トによって占有される場合、例えば、２つのＤＮＡ分子のそれぞれの位置がアデニンによ
って占有される場合、分子は、その位置において「相同」である。２つの配列間の「相同
性（％）」又は「配列同一性（％）」は、配列同一性の一部として任意の保存的置換を考
慮しつつ、２つの配列によって共有される一致する位置又は相同な位置の数を、比較した
位置の数によって割り算し、１００を掛け算した関数である。例えば、２つの配列中の位
置の１０のうち６が一致しているか、又は相同である場合、２つの配列は、６０％相同性
である。例として、ＤＮＡ配列ＡＴＴＧＣＣ及びＴＡＴＧＧＣは、５０％の相同性を共有
する。一般に、相同性が最大となるように２つの配列をアラインメントして、比較が行わ
れる。アミノ酸配列同一性率を決定する目的のためのアラインメントは、当該技術分野に
おける様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉ
ｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）又はＭＵＳＣＬＥソフトウェアなどの公的に入手可能なコンピュ
ータソフトウェアを用いて達成することができる。当業者は、比較される配列の完全長に
わたって最大のアラインメントを得るのに必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメ
ント評価用の適切なパラメーターを決定することができる。しかしながら、本明細書の目
的のために、アミノ酸配列同一性％の値は、配列比較コンピュータプログラムＭＵＳＣＬ
Ｅを用いて作成される（Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ ３２（５）：１７９２－１７９７、２００４；Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．、ＢＭＣ
Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ５（１）：１１３、２００４）。
同一性を指す。２つの比較配列の両方の位置が、同じ塩基又はアミノ酸単量体サブユニッ
トによって占有される場合、例えば、２つのＤＮＡ分子のそれぞれの位置がアデニンによ
って占有される場合、分子は、その位置において「相同」である。２つの配列間の「相同
性（％）」又は「配列同一性（％）」は、配列同一性の一部として任意の保存的置換を考
慮しつつ、２つの配列によって共有される一致する位置又は相同な位置の数を、比較した
位置の数によって割り算し、１００を掛け算した関数である。例えば、２つの配列中の位
置の１０のうち６が一致しているか、又は相同である場合、２つの配列は、６０％相同性
である。例として、ＤＮＡ配列ＡＴＴＧＣＣ及びＴＡＴＧＧＣは、５０％の相同性を共有
する。一般に、相同性が最大となるように２つの配列をアラインメントして、比較が行わ
れる。アミノ酸配列同一性率を決定する目的のためのアラインメントは、当該技術分野に
おける様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉ
ｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）又はＭＵＳＣＬＥソフトウェアなどの公的に入手可能なコンピュ
ータソフトウェアを用いて達成することができる。当業者は、比較される配列の完全長に
わたって最大のアラインメントを得るのに必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメ
ント評価用の適切なパラメーターを決定することができる。しかしながら、本明細書の目
的のために、アミノ酸配列同一性％の値は、配列比較コンピュータプログラムＭＵＳＣＬ
Ｅを用いて作成される（Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ ３２（５）：１７９２－１７９７、２００４；Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．、ＢＭＣ
Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ５（１）：１１３、２００４）。
【0064】
ヒトＩｇＧの「ＣＨ１ドメイン」（「Ｈ１」ドメインの「Ｃ１」とも呼ばれる）は、通
常、アミノ酸約１１８～アミノ酸約２１５まで延在する（ＥＵ番号付けシステム）。
常、アミノ酸約１１８～アミノ酸約２１５まで延在する（ＥＵ番号付けシステム）。
【0065】
別途記載のない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、互いに縮重
態様であり、同じアミノ酸配列をコードする全てのヌクレオチド配列を含む。句「タンパ
ク質又はＲＮＡをコードするヌクレオチド配列」は、タンパク質をコードするヌクレオチ
ド配列が、ある態様でイントロンを含む程度まで、イントロンも含んでいてもよい。
態様であり、同じアミノ酸配列をコードする全てのヌクレオチド配列を含む。句「タンパ
ク質又はＲＮＡをコードするヌクレオチド配列」は、タンパク質をコードするヌクレオチ
ド配列が、ある態様でイントロンを含む程度まで、イントロンも含んでいてもよい。
【0066】
「作動可能に接続した」との用語は、異種核酸配列の発現をもたらす、制御配列と異種
核酸配列との間の機能的接続を指す。例えば、第１の核酸配列が、第２の核酸配列と機能
的な関係で配置されるとき、第１の核酸配列は、第２の核酸配列と作動可能に接続する。
例えば、プロモーターがコード配列の転写又は発現に影響を与える場合、プロモーターは
、コード配列に作動可能に接続する。一般的に、作動可能に接続したＤＮＡ配列は、連続
的であり、２つのタンパク質コード領域を接続することが必要とされる場合、同じリーデ
ィングフレーム内にある。
核酸配列との間の機能的接続を指す。例えば、第１の核酸配列が、第２の核酸配列と機能
的な関係で配置されるとき、第１の核酸配列は、第２の核酸配列と作動可能に接続する。
例えば、プロモーターがコード配列の転写又は発現に影響を与える場合、プロモーターは
、コード配列に作動可能に接続する。一般的に、作動可能に接続したＤＮＡ配列は、連続
的であり、２つのタンパク質コード領域を接続することが必要とされる場合、同じリーデ
ィングフレーム内にある。
【0067】
「誘導プロモーター」との用語は、１つ以上の特定のシグナルを加えるか、又は除去す
ることによって活性を制御可能なプロモーターを指す。例えば、誘導プロモーターは、例
えば、プロモーターを活性化させるか、及び／又はプロモーターの抑制を緩和する誘導剤
の存在下、特定の一連の条件下で、作動可能に接続した核酸の転写を活性化できる。
ることによって活性を制御可能なプロモーターを指す。例えば、誘導プロモーターは、例
えば、プロモーターを活性化させるか、及び／又はプロモーターの抑制を緩和する誘導剤
の存在下、特定の一連の条件下で、作動可能に接続した核酸の転写を活性化できる。
【0068】
本明細書で使用される場合、「治療」又は「治療する」は、臨床結果を含めて有益な結
果又は所望の結果を得るための手法である。本発明の目的のために、有益な又は所望の臨
床結果には、以下のうちの１つ以上が含まれるが、これらに限定されない。疾患から生じ
る１つ以上の症状を軽減すること、疾患の程度を低減させること、疾患を安定させること
（例えば、疾患の悪化を防止するか、又は遅らせること）、疾患の広がり（例えば、転移
）を防止するか、又は遅らせること、疾患の再発を防止するか、又は遅らせること、疾患
の進行を遅らせるか、又はゆっくりにすること、疾患状態を軽減すること、疾患の寛解（
部分的又は完全に）をもたらすこと、疾患を治療するために必要な１つ以上の他の医薬の
用量を減らすこと、疾患の進行を遅らせること、生活の質を高めるか、又は向上させるこ
と、体重増加を高めること、及び／又は生存期間を延ばすこと。また、「治療」に包含さ
れるのは、疾患に関する病理学的結果（例えば、癌における腫瘍体積など）の低減である
。本発明の方法は、治療のこれらの態様のうちのいずれか１つ以上を企図する。
果又は所望の結果を得るための手法である。本発明の目的のために、有益な又は所望の臨
床結果には、以下のうちの１つ以上が含まれるが、これらに限定されない。疾患から生じ
る１つ以上の症状を軽減すること、疾患の程度を低減させること、疾患を安定させること
（例えば、疾患の悪化を防止するか、又は遅らせること）、疾患の広がり（例えば、転移
）を防止するか、又は遅らせること、疾患の再発を防止するか、又は遅らせること、疾患
の進行を遅らせるか、又はゆっくりにすること、疾患状態を軽減すること、疾患の寛解（
部分的又は完全に）をもたらすこと、疾患を治療するために必要な１つ以上の他の医薬の
用量を減らすこと、疾患の進行を遅らせること、生活の質を高めるか、又は向上させるこ
と、体重増加を高めること、及び／又は生存期間を延ばすこと。また、「治療」に包含さ
れるのは、疾患に関する病理学的結果（例えば、癌における腫瘍体積など）の低減である
。本発明の方法は、治療のこれらの態様のうちのいずれか１つ以上を企図する。
【0069】
「再発（recurrence）」、「再発する（relapse）」又は「再発する（relapsed）」と
の用語は、疾患が消失したとする臨床評価の後の癌又は疾患の戻りを指す。遠隔転移又は
局所再発の診断は、再発とみなすことができる。
の用語は、疾患が消失したとする臨床評価の後の癌又は疾患の戻りを指す。遠隔転移又は
局所再発の診断は、再発とみなすことができる。
【0070】
「難治性」又は「抵抗性」との用語は、治療に応答しない癌又は疾患を指す。
【0071】
本明細書に開示されるｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物の「有効量」は、具体的
に記載された目的を実現するのに十分な量である。「有効量」は、経験的に、また、記載
された目的に関連する既知の方法によって決定することができる。
に記載された目的を実現するのに十分な量である。「有効量」は、経験的に、また、記載
された目的に関連する既知の方法によって決定することができる。
【0072】
「治療に有効な量」との用語は、個体において疾患又は障害を「治療する」のに有効な
、本明細書に開示されるｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物の量を指す。癌の場合、
治療に有効な量の本明細書に開示されるｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、癌細
胞の数を低減することができ、腫瘍の大きさ又は重量を小さくすることができ、末梢臓器
への癌細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度まで遅くさせ、好ましくは停止する）こ
とができ、腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度まで遅くさせ、好ましくは停止する
）ことができ、腫瘍成長をある程度まで阻害することができ、及び／又は癌に関連する症
状のうち１つ以上をある程度まで緩和することができる。本明細書に開示されるｃａＴＣ
Ｒ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、増殖を防止し、及び／又は既存の癌細胞を死滅させる
ことができ、細胞増殖抑制性及び／又は細胞毒性であってもよい。いくつかの実施形態で
は、治療有効量は、増殖抑制量である。いくつかの実施形態では、治療有効量は、患者の
無増悪生存率を改善する量である。ウイルス感染などの感染性疾患の場合、治療に有効な
量の本明細書に開示されるｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、病原体に感染した
細胞の数を低減することができ、病原体由来抗原の産生又は放出を低減することができ、
病原体の非感染細胞への伝播を阻害し（すなわち、ある程度遅くさせ、好ましくは停止す
る）、及び／又は感染に関連する１つ以上の症状をある程度緩和することができる。いく
つかの実施形態では、治療有効量は、患者の生存期間を延ばす量である。
、本明細書に開示されるｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物の量を指す。癌の場合、
治療に有効な量の本明細書に開示されるｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、癌細
胞の数を低減することができ、腫瘍の大きさ又は重量を小さくすることができ、末梢臓器
への癌細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度まで遅くさせ、好ましくは停止する）こ
とができ、腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度まで遅くさせ、好ましくは停止する
）ことができ、腫瘍成長をある程度まで阻害することができ、及び／又は癌に関連する症
状のうち１つ以上をある程度まで緩和することができる。本明細書に開示されるｃａＴＣ
Ｒ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、増殖を防止し、及び／又は既存の癌細胞を死滅させる
ことができ、細胞増殖抑制性及び／又は細胞毒性であってもよい。いくつかの実施形態で
は、治療有効量は、増殖抑制量である。いくつかの実施形態では、治療有効量は、患者の
無増悪生存率を改善する量である。ウイルス感染などの感染性疾患の場合、治療に有効な
量の本明細書に開示されるｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、病原体に感染した
細胞の数を低減することができ、病原体由来抗原の産生又は放出を低減することができ、
病原体の非感染細胞への伝播を阻害し（すなわち、ある程度遅くさせ、好ましくは停止す
る）、及び／又は感染に関連する１つ以上の症状をある程度緩和することができる。いく
つかの実施形態では、治療有効量は、患者の生存期間を延ばす量である。
【0073】
本明細書で使用されるとき、「医薬的に許容される」又は「薬理的に適合される」は、
生物学的又は非生物学的に望ましくないものではない物質を意味し、例えば、その物質を
、望まれない生物学的影響をほとんど起こさずに、又は、それが含有される組成物の別の
なんらかの構成成分と悪い相互作用をせずに、患者に投与される医薬組成物中に組み込む
ことができる。医薬的に許容される担体又は賦形剤は、好ましくは、必要な毒性学的及び
製造的検査基準を満たしており、並びに／又は、Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ
ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎが作成したＩｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｇ
ｕｉｄｅに含まれている。
生物学的又は非生物学的に望ましくないものではない物質を意味し、例えば、その物質を
、望まれない生物学的影響をほとんど起こさずに、又は、それが含有される組成物の別の
なんらかの構成成分と悪い相互作用をせずに、患者に投与される医薬組成物中に組み込む
ことができる。医薬的に許容される担体又は賦形剤は、好ましくは、必要な毒性学的及び
製造的検査基準を満たしており、並びに／又は、Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ
ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎが作成したＩｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｇ
ｕｉｄｅに含まれている。
【0074】
本明細書に記載の本発明の実施形態は、実施形態「からなる」及び／又は「から本質的
になる」を含むことを理解されたい。
になる」を含むことを理解されたい。
【0075】
本明細書に記載の「約」のついた値又はパラメーターへの言及は、値又はパラメーター
自体を対象とする変形を含む（及び記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する説明は、「
Ｘ」の説明を含む。
自体を対象とする変形を含む（及び記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する説明は、「
Ｘ」の説明を含む。
【0076】
本明細書で使用するとき、「～されない」などの否定（not）を伴うある値又はパラメ
ーターへの言及は、その値又はパラメーター「以外」が肯定されることを一般に意味し、
記載する。例えば、「方法は、タイプＸの癌を治療するのに使用されない」は、「方法は
、Ｘ以外のタイプの癌を治療するのに使用される」を意味する。
ーターへの言及は、その値又はパラメーター「以外」が肯定されることを一般に意味し、
記載する。例えば、「方法は、タイプＸの癌を治療するのに使用されない」は、「方法は
、Ｘ以外のタイプの癌を治療するのに使用される」を意味する。
【0077】
本明細書及び添付の「特許請求の範囲」で使用するとき、単数形の「ａ」、「ｏｒ」、
及び「ｔｈｅ」は、文脈から単数であることが明確に読み取れる場合を除き、対象の複数
形も含まれるものとする。
キメラ抗体／Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）構築物
及び「ｔｈｅ」は、文脈から単数であることが明確に読み取れる場合を除き、対象の複数
形も含まれるものとする。
キメラ抗体／Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）構築物
【0078】
一態様では、本発明は、標的抗原に特異的なキメラ抗体／Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）
であって、標的抗原（細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し
、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子（例えば、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及び
／又はζζ）を動員することが可能であり、ｃａＴＣＲが、少なくとも１つの天然に存在
しないＴＣＲドメイン（例えば、天然に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメイン）を含む、ｃａ
ＴＣＲを提供する。例えば、いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、１つ又は２つの天然
に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメインを含む。天然に存在しないＴＣＲドメインは、１つ以
上のアミノ酸の置換により、及び／又は対応するドメインの一部と、別のＴＣＲからの類
似したドメインの一部とを置き換えることにより改変された、天然に存在するＴＣＲの対
応するドメインであってもよい。
であって、標的抗原（細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し
、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子（例えば、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及び
／又はζζ）を動員することが可能であり、ｃａＴＣＲが、少なくとも１つの天然に存在
しないＴＣＲドメイン（例えば、天然に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメイン）を含む、ｃａ
ＴＣＲを提供する。例えば、いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、１つ又は２つの天然
に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメインを含む。天然に存在しないＴＣＲドメインは、１つ以
上のアミノ酸の置換により、及び／又は対応するドメインの一部と、別のＴＣＲからの類
似したドメインの一部とを置き換えることにより改変された、天然に存在するＴＣＲの対
応するドメインであってもよい。
【0079】
一態様では、本発明は、２つ以上の標的抗原又はエピトープ（２つの異なる細胞表面抗
原など）に特異的に結合し、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子（例えば、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε及び／又はζζ）を動員することが可能な、多重特異性ｃａＴＣＲ
を提供する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、二重可変ドメ
イン（ＤＶＤ）、クロスオーバー二重可変（ＣＯＤＶ）ドメイン、又はｓｃＦｖ－Ｆａｂ
融合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、第１
のＦｖ及び第２のＦｖ、第１のｓｃＦｖ及び第２のｓｃＦｖ、又はＦａｂ及びｓｃＦｖを
含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、１つ以上の天然に存在しないＴＣＲドメイ
ン（例えば、天然に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメイン）を含む。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、天然に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメインを含まない。
原など）に特異的に結合し、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子（例えば、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε及び／又はζζ）を動員することが可能な、多重特異性ｃａＴＣＲ
を提供する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、二重可変ドメ
イン（ＤＶＤ）、クロスオーバー二重可変（ＣＯＤＶ）ドメイン、又はｓｃＦｖ－Ｆａｂ
融合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、第１
のＦｖ及び第２のＦｖ、第１のｓｃＦｖ及び第２のｓｃＦｖ、又はＦａｂ及びｓｃＦｖを
含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、１つ以上の天然に存在しないＴＣＲドメイ
ン（例えば、天然に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメイン）を含む。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、天然に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメインを含まない。
【0080】
本明細書に記載のｃａＴＣＲは、抗原特異性を与える抗原結合モジュール（例えば、単
一特異性又は多重特異性の抗原結合モジュール）と、ＣＤ３の動員及びシグナル伝達を可
能にするＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含む。抗原結合モジュールは、天然に
存在するＴ細胞受容体抗原結合部分ではない。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュ
ールは、ＴＣＲＭ中のポリペプチド鎖のアミノ末端に結合している。いくつかの実施形態
では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。ＴＣＲＭは
、αβ及び／又はγδ ＴＣＲなどの１つ以上のＴＣＲの膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ
）に由来する膜貫通モジュールを含み、場合により、ＴＣＲの接続ペプチド又はそのフラ
グメント及び／又は１つ以上のＴＣＲ細胞内ドメイン又はそのフラグメントの一方又は両
方を更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、２つのポリペプチド鎖を含み、各
ポリペプチド鎖は、アミノ末端からカルボキシ末端まで、接続ペプチド、膜貫通ドメイン
を含み、場合により、ＴＣＲ細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖が合わさって抗原結合モジュールとＴＣＲＭを形成する。いくつか
の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、別個のポリペプチド
鎖であり、ｃａＴＣＲは、多量体（例えば、二量体）である。いくつかの実施形態では、
第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、例えば、ペプチド結合によって、又は
別の化学結合（例えば、ジスルフィド結合）によって、共有結合している。いくつかの実
施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、少なくとも１つのジスル
フィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、１つ以上のＴ細
胞共刺激シグナル伝達配列を更に含む。１つ以上の共刺激シグナル伝達配列は、個々に、
例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４
０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ
、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含め、共刺激分
子の細胞内ドメインの全て又は一部であってもよい。いくつかの実施形態では、１つ以上
の共刺激シグナル伝達配列は、第１のＴＣＲ－ＴＭと第１のＴＣＲ細胞内ドメインとの間
、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭと第２のＴＣＲ細胞内ドメインとの間にある。いくつか
の実施形態では、１つ以上の共刺激シグナル伝達配列は、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２
のＴＣＲＤに対してカルボキシ末端にある。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１
の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結
合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、抗原結合モジュール
とＴＣＲＭとの間に位置している。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールを更に含む。いくつか
の実施形態では、スペーサーモジュールは、２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインを
接続する１つ以上のペプチドリンカーを含む。
一特異性又は多重特異性の抗原結合モジュール）と、ＣＤ３の動員及びシグナル伝達を可
能にするＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含む。抗原結合モジュールは、天然に
存在するＴ細胞受容体抗原結合部分ではない。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュ
ールは、ＴＣＲＭ中のポリペプチド鎖のアミノ末端に結合している。いくつかの実施形態
では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。ＴＣＲＭは
、αβ及び／又はγδ ＴＣＲなどの１つ以上のＴＣＲの膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ
）に由来する膜貫通モジュールを含み、場合により、ＴＣＲの接続ペプチド又はそのフラ
グメント及び／又は１つ以上のＴＣＲ細胞内ドメイン又はそのフラグメントの一方又は両
方を更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、２つのポリペプチド鎖を含み、各
ポリペプチド鎖は、アミノ末端からカルボキシ末端まで、接続ペプチド、膜貫通ドメイン
を含み、場合により、ＴＣＲ細胞内ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖が合わさって抗原結合モジュールとＴＣＲＭを形成する。いくつか
の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、別個のポリペプチド
鎖であり、ｃａＴＣＲは、多量体（例えば、二量体）である。いくつかの実施形態では、
第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、例えば、ペプチド結合によって、又は
別の化学結合（例えば、ジスルフィド結合）によって、共有結合している。いくつかの実
施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、少なくとも１つのジスル
フィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、１つ以上のＴ細
胞共刺激シグナル伝達配列を更に含む。１つ以上の共刺激シグナル伝達配列は、個々に、
例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４
０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ
、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含め、共刺激分
子の細胞内ドメインの全て又は一部であってもよい。いくつかの実施形態では、１つ以上
の共刺激シグナル伝達配列は、第１のＴＣＲ－ＴＭと第１のＴＣＲ細胞内ドメインとの間
、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭと第２のＴＣＲ細胞内ドメインとの間にある。いくつか
の実施形態では、１つ以上の共刺激シグナル伝達配列は、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２
のＴＣＲＤに対してカルボキシ末端にある。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１
の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結
合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、抗原結合モジュール
とＴＣＲＭとの間に位置している。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールを更に含む。いくつか
の実施形態では、スペーサーモジュールは、２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインを
接続する１つ以上のペプチドリンカーを含む。
【0081】
本明細書に記載のｃａＴＣＲは、天然に存在しない膜貫通ドメインを含むｃａＴＣＲ及
び多重特異性ｃａＴＣＲを含め、この章に記載の１つ以上の特徴を有し得るものである。
本明細書に記載されるｃａＴＣＲのそれぞれの構成要素（例えば、抗原結合モジュール、
ＴＣＲＤ、ＴＣＲ－ＴＭ、スペーサーモジュール、安定化モジュール、Ｔ細胞共刺激配列
及び様々なリンカーなど）についての特徴のいずれも、それぞれの組み合わせ及び全ての
組み合わせが個々に記載されているかのように、互いに組み合わせることができることが
意図されている。
び多重特異性ｃａＴＣＲを含め、この章に記載の１つ以上の特徴を有し得るものである。
本明細書に記載されるｃａＴＣＲのそれぞれの構成要素（例えば、抗原結合モジュール、
ＴＣＲＤ、ＴＣＲ－ＴＭ、スペーサーモジュール、安定化モジュール、Ｔ細胞共刺激配列
及び様々なリンカーなど）についての特徴のいずれも、それぞれの組み合わせ及び全ての
組み合わせが個々に記載されているかのように、互いに組み合わせることができることが
意図されている。
【0082】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール（例えば、抗体部分）は、（ａ）他の分
子に対する結合親和性の少なくとも約１０倍（例えば、少なくとも約１０倍、２０倍、３
０倍、４０倍、５０倍、７５倍、１００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００倍、
７５０倍、１０００倍のいずれか、又はもっと多くを含む）の親和性で標的抗原に特異的
に結合するか、又は（ｂ）他の分子に対する結合のＫｄの約１／１０以下（例えば、１／
１０以下、１／２０以下、１／３０以下、１／４０以下、１／５０以下、１／７５以下、
１／１００以下、１／２００以下、１／３００以下、１／４００以下、１／５００以下、
１／７５０以下、１／１０００以下のいずれか、又はもっと小さい）のＫｄで標的抗原に
特異的に結合する。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）分析、
又は放射線免疫沈降アッセイ（ＲＩＡ）などの当該技術分野において既知の方法によって
求めることができる。Ｋｄは、例えばＢｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴
（ＳＰＲ）アッセイ、又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ装置を利用する動的排除アッセイ（Ｋ
ｉｎＥｘＡ）などの当該技術分野で既知の方法によって求めることができる。
子に対する結合親和性の少なくとも約１０倍（例えば、少なくとも約１０倍、２０倍、３
０倍、４０倍、５０倍、７５倍、１００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００倍、
７５０倍、１０００倍のいずれか、又はもっと多くを含む）の親和性で標的抗原に特異的
に結合するか、又は（ｂ）他の分子に対する結合のＫｄの約１／１０以下（例えば、１／
１０以下、１／２０以下、１／３０以下、１／４０以下、１／５０以下、１／７５以下、
１／１００以下、１／２００以下、１／３００以下、１／４００以下、１／５００以下、
１／７５０以下、１／１０００以下のいずれか、又はもっと小さい）のＫｄで標的抗原に
特異的に結合する。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）分析、
又は放射線免疫沈降アッセイ（ＲＩＡ）などの当該技術分野において既知の方法によって
求めることができる。Ｋｄは、例えばＢｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴
（ＳＰＲ）アッセイ、又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ装置を利用する動的排除アッセイ（Ｋ
ｉｎＥｘＡ）などの当該技術分野で既知の方法によって求めることができる。
【0083】
安定化ドメインの例としては、Ｆｃ領域；ヒンジ領域；ＣＨ３ドメイン；ＣＨ４ドメイ
ン；ＣＨ１又はＣＬドメイン；ロイシンジッパードメイン（例えば、ｊｕｎ／ｆｏｓロイ
シンジッパードメイン、例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｅｙら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ、１４８：
１５４７－１５５３、１９９２を参照；又は酵母ＧＣＮ４ロイシンジッパードメイン）；
イソロイシンジッパードメイン；細胞表面受容体（例えば、インターロイキン－８受容体
（ＩＬ－８Ｒ）を二量体化する二量体化領域；又はＬＦＡ－１又はＧＰＩＩＩｂ／ＩＩＩ
ａなどのインテグリンヘテロ二量体）；分泌される二量体化リガンドの二量体化領域（例
えば、神経成長因子（ＮＧＦ）、ニューロトロフィン－３（ＮＴ－３）、インターロイキ
ン－８（ＩＬ－８）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）又は脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ
）；例えば、Ａｒａｋａｗａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：２７８３３－２７８
３９、１９９４及びＲａｄｚｉｅｊｅｗｓｋｉら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１３５０、１
９９３）；コイル状コイル二量体化ドメイン（例えば、ＷＯ２０１４１５２８７８号を参
照；Ｆｌｅｔｃｈｅｒら、ＡＣＳ Ｓｙｎｔｈ．Ｂｉｏｌ．１：２４０－２５０、２０１
２；及びＴｈｏｍａｓら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１３５（１３）：５１６１－５
１６６、２０１３を参照）；ポリペプチドと、少なくとも１つのシステイン残基を含む第
２のポリペプチドとの間にジスルフィド結合を形成し得るような、少なくとも１つのシス
テイン残基（例えば、約１、２又は３個から約１０個までのシステイン残基）を含むポリ
ペプチドが挙げられる。
ン；ＣＨ１又はＣＬドメイン；ロイシンジッパードメイン（例えば、ｊｕｎ／ｆｏｓロイ
シンジッパードメイン、例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｅｙら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ、１４８：
１５４７－１５５３、１９９２を参照；又は酵母ＧＣＮ４ロイシンジッパードメイン）；
イソロイシンジッパードメイン；細胞表面受容体（例えば、インターロイキン－８受容体
（ＩＬ－８Ｒ）を二量体化する二量体化領域；又はＬＦＡ－１又はＧＰＩＩＩｂ／ＩＩＩ
ａなどのインテグリンヘテロ二量体）；分泌される二量体化リガンドの二量体化領域（例
えば、神経成長因子（ＮＧＦ）、ニューロトロフィン－３（ＮＴ－３）、インターロイキ
ン－８（ＩＬ－８）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）又は脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ
）；例えば、Ａｒａｋａｗａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：２７８３３－２７８
３９、１９９４及びＲａｄｚｉｅｊｅｗｓｋｉら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１３５０、１
９９３）；コイル状コイル二量体化ドメイン（例えば、ＷＯ２０１４１５２８７８号を参
照；Ｆｌｅｔｃｈｅｒら、ＡＣＳ Ｓｙｎｔｈ．Ｂｉｏｌ．１：２４０－２５０、２０１
２；及びＴｈｏｍａｓら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１３５（１３）：５１６１－５
１６６、２０１３を参照）；ポリペプチドと、少なくとも１つのシステイン残基を含む第
２のポリペプチドとの間にジスルフィド結合を形成し得るような、少なくとも１つのシス
テイン残基（例えば、約１、２又は３個から約１０個までのシステイン残基）を含むポリ
ペプチドが挙げられる。
【0084】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴＣＲＭは、（ａ）第１のＴＣＲ膜貫通ド
メイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）と、（ｂ）第２
のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子の動員を促進し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭが、天
然に存在するものである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴＣＲＭは、（ａ
）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（Ｔ
ＣＲＤ）と、（ｂ）第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、ＴＣＲＭが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第
２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものである。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭは両方とも、天然に存在しないものである。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ
－ＴＭは、天然に存在するＴ細胞受容体（例えば、αβＴＣＲ又はγδＴＣＲ）の膜貫通
ドメインの１つに由来し、第２のＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在するＴ細胞受容体の他の膜
貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するＴ細胞
受容体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子の動員を強化することができる。ＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員は、ＴＣ
Ｒ－ＣＤ３複合体表面発現のＦＡＣＳ分析、又はＣＤ３サブユニットとｃａＴＣＲとの同
時免疫沈降など、当該技術分野において既知の方法によって求めることができる。
メイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）と、（ｂ）第２
のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子の動員を促進し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭが、天
然に存在するものである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴＣＲＭは、（ａ
）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（Ｔ
ＣＲＤ）と、（ｂ）第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、ＴＣＲＭが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第
２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものである。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭは両方とも、天然に存在しないものである。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ
－ＴＭは、天然に存在するＴ細胞受容体（例えば、αβＴＣＲ又はγδＴＣＲ）の膜貫通
ドメインの１つに由来し、第２のＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在するＴ細胞受容体の他の膜
貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するＴ細胞
受容体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子の動員を強化することができる。ＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員は、ＴＣ
Ｒ－ＣＤ３複合体表面発現のＦＡＣＳ分析、又はＣＤ３サブユニットとｃａＴＣＲとの同
時免疫沈降など、当該技術分野において既知の方法によって求めることができる。
【0085】
例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴＣＲＭの第１のＴＣＲ－ＴＭは
、ＴＣＲα鎖の膜貫通ドメイン（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号：ＣＣＩ７３８９５）
又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＴＣＲＭの第
２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲβ鎖の膜貫通ドメイン（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号：
ＣＣＩ７３８９３）又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又はこれらから
なる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメイン（
例えば、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号：ＡＡＱ５７２７２）又はその多様体を含むか、これら
から本質的になり、又はこれらからなり、第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ド
メイン（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号：ＡＧＥ９１７８８）又はその多様体を含むか
、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、本明細書に
記載のＴＣＲＭの第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、ＴＣＲα鎖
定常ドメイン（例えば、配列番号１）の膜貫通ドメイン又はその多様体及びＴＣＲβ鎖定
常ドメイン（例えば、配列番号２）の膜貫通ドメイン又はその多様体を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及
び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、ＴＣＲδ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号３）の
膜貫通ドメイン又はその多様体及びＴＣＲγ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号４）の膜
貫通ドメイン又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。
いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配
列番号５及び６のアミノ酸配列、又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又
はこれらからなる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍは、それぞれ、配列番号７及び８のアミノ酸配列、又はその多様体を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなる。膜貫通ドメインの多様体としては、限定されない
が、参照配列と比較して、１つ以上のアミノ酸置換を有する膜貫通ドメインが挙げられる
。いくつかの実施形態では、多様体膜貫通ドメインは、参照配列と比較して、５個以下の
アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、膜貫通ドメインに対
してアミノ末端に第１の接続ペプチドを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、膜貫通
ドメインに対してアミノ末端に第２の接続ペプチドを更に含む。いくつかの実施形態では
、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペ
プチドの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２
のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はそ
の多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチド
は、それぞれ、ＴＣＲα鎖定常ドメイン（配列番号１）の接続ペプチドの全て又は一部、
又はその多様体及びＴＣＲβ鎖定常ドメイン（配列番号２）の接続ペプチドの全て又は一
部、又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつか
の実施形態では、第１の接続ペプチド及び／又は第２の接続ペプチドは、それぞれ、配列
番号２７又は２８の接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体及び配列番号２９又は
３０の接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含むか、これらから本質的になる
か、又はそれらからなる。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び／又は第２
の接続ペプチドは、それぞれ、ＴＣＲδ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号３）の接続ペ
プチドの全て又は一部、又はその多様体及びＴＣＲγ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号
４）の接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び／又は第２の
接続ペプチドは、それぞれ、配列番号３１又は３２の接続ペプチドの全て又は一部、又は
その多様体及び配列番号３３又は３４の接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を
含むか、これらから本質的になるか、又はそれらからなる。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭに対してカルボキシ末端に第１のＴＣＲ細胞内ドメ
インを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭに対してカルボキシ
末端に第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ
細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイ
ンの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、
第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインの全て又は一部、
又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列
番号３５～３６のアミノ酸配列又はその多様体のうち、いずれか１つを含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲＤは、天然に存在するＴＣＲの１つの鎖のフラグメント又は
その多様体であり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、天然に存在するＴＣＲの他の鎖のフラ
グメント又はその多様体である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤのうち少なくとも１
つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤは
、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤと第２
のＴＣＲＤは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残基との間のジス
ルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε及びζζのそれぞれを動員して、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成することが可
能である（すなわち、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する）。
、ＴＣＲα鎖の膜貫通ドメイン（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号：ＣＣＩ７３８９５）
又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＴＣＲＭの第
２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲβ鎖の膜貫通ドメイン（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号：
ＣＣＩ７３８９３）又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又はこれらから
なる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメイン（
例えば、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号：ＡＡＱ５７２７２）又はその多様体を含むか、これら
から本質的になり、又はこれらからなり、第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ド
メイン（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号：ＡＧＥ９１７８８）又はその多様体を含むか
、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、本明細書に
記載のＴＣＲＭの第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、ＴＣＲα鎖
定常ドメイン（例えば、配列番号１）の膜貫通ドメイン又はその多様体及びＴＣＲβ鎖定
常ドメイン（例えば、配列番号２）の膜貫通ドメイン又はその多様体を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及
び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、ＴＣＲδ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号３）の
膜貫通ドメイン又はその多様体及びＴＣＲγ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号４）の膜
貫通ドメイン又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。
いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配
列番号５及び６のアミノ酸配列、又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又
はこれらからなる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍは、それぞれ、配列番号７及び８のアミノ酸配列、又はその多様体を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなる。膜貫通ドメインの多様体としては、限定されない
が、参照配列と比較して、１つ以上のアミノ酸置換を有する膜貫通ドメインが挙げられる
。いくつかの実施形態では、多様体膜貫通ドメインは、参照配列と比較して、５個以下の
アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、膜貫通ドメインに対
してアミノ末端に第１の接続ペプチドを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、膜貫通
ドメインに対してアミノ末端に第２の接続ペプチドを更に含む。いくつかの実施形態では
、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペ
プチドの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２
のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はそ
の多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチド
は、それぞれ、ＴＣＲα鎖定常ドメイン（配列番号１）の接続ペプチドの全て又は一部、
又はその多様体及びＴＣＲβ鎖定常ドメイン（配列番号２）の接続ペプチドの全て又は一
部、又はその多様体を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつか
の実施形態では、第１の接続ペプチド及び／又は第２の接続ペプチドは、それぞれ、配列
番号２７又は２８の接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体及び配列番号２９又は
３０の接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含むか、これらから本質的になる
か、又はそれらからなる。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び／又は第２
の接続ペプチドは、それぞれ、ＴＣＲδ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号３）の接続ペ
プチドの全て又は一部、又はその多様体及びＴＣＲγ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号
４）の接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び／又は第２の
接続ペプチドは、それぞれ、配列番号３１又は３２の接続ペプチドの全て又は一部、又は
その多様体及び配列番号３３又は３４の接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を
含むか、これらから本質的になるか、又はそれらからなる。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭに対してカルボキシ末端に第１のＴＣＲ細胞内ドメ
インを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭに対してカルボキシ
末端に第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ
細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイ
ンの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、
第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインの全て又は一部、
又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列
番号３５～３６のアミノ酸配列又はその多様体のうち、いずれか１つを含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲＤは、天然に存在するＴＣＲの１つの鎖のフラグメント又は
その多様体であり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、天然に存在するＴＣＲの他の鎖のフラ
グメント又はその多様体である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤのうち少なくとも１
つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤは
、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤと第２
のＴＣＲＤは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残基との間のジス
ルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε及びζζのそれぞれを動員して、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成することが可
能である（すなわち、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する）。
【0086】
想定されるｃａＴＣＲ構築物としては、例えば、細胞表面抗原に特異的に結合するｃａ
ＴＣＲ、細胞表面提示ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合するｃａＴＣＲ、及び細胞
表面抗原と細胞表面提示ペプチド／ＭＨＣ複合体の両方に特異的に結合するｃａＴＣＲが
挙げられる。
ＴＣＲ、細胞表面提示ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合するｃａＴＣＲ、及び細胞
表面抗原と細胞表面提示ペプチド／ＭＨＣ複合体の両方に特異的に結合するｃａＴＣＲが
挙げられる。
【0087】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２
、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体部分である。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、単一特異性である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
多重特異性である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、二重特異性である。いくつか
の実施形態では、抗体部分は、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボ
ディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）
抗体、化学的に架橋した抗体、ヘテロ多量体抗体又はヘテロコンジュゲート抗体である。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチドリンカーによって結合した２つのｓｃＦ
ｖを含むタンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗体部分は、直接的に結合
していない２つのｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗体部分は、完全にヒトの
もの、ヒト抗体フレームワーク領域を有する半合成のもの、又はヒト化されたものである
。
、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体部分である。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、単一特異性である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
多重特異性である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、二重特異性である。いくつか
の実施形態では、抗体部分は、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボ
ディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）
抗体、化学的に架橋した抗体、ヘテロ多量体抗体又はヘテロコンジュゲート抗体である。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチドリンカーによって結合した２つのｓｃＦ
ｖを含むタンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗体部分は、直接的に結合
していない２つのｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗体部分は、完全にヒトの
もの、ヒト抗体フレームワーク領域を有する半合成のもの、又はヒト化されたものである
。
【0088】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原
結合ドメインと、ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとを含む。いくつかの
実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ抗体ドメインのＣＤＲは、同じ抗体部分に由来
する。いくつかの実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ抗体ドメインのＣＤＲの一部
は、異なる抗体部分に由来する。いくつかの実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及び／又は
ＶＬ抗体ドメインは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成、又は完全に合成されたものである
。
結合ドメインと、ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとを含む。いくつかの
実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ抗体ドメインのＣＤＲは、同じ抗体部分に由来
する。いくつかの実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ抗体ドメインのＣＤＲの一部
は、異なる抗体部分に由来する。いくつかの実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及び／又は
ＶＬ抗体ドメインは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成、又は完全に合成されたものである
。
【0089】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、完全なヒト配列と１つ以上の合成領
域とを含む、半合成の抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、完全なヒトＶＬと、完全なヒトＦＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ２、Ｆ
Ｒ３及びＦＲ４領域と合成ＨＣ－ＣＤＲ３とを含む半合成ＶＨとを含む、半合成の抗体部
分である。いくつかの実施形態では、半合成ＶＨは、約５～約２５（例えば、約５、６、
７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２
１、２２、２３、２４又は２５のいずれか）のアミノ酸長の配列を含む、完全に合成のＨ
Ｃ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、半合成ＶＨ又は合成ＨＣ－ＣＤＲ３は、
約５～約２５（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、
１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４又は２５のいずれか）のアミノ
酸長の配列を含む完全に合成のＨＣ－ＣＤＲ３を含む、半合成ライブラリー（例えば、半
合成ヒトライブラリー）から得られ、この配列中のそれぞれのアミノ酸は、互いに独立し
て、システインを除く標準的なヒトアミノ酸から無作為に選択される。いくつかの実施形
態では、合成ＨＣ－ＣＤＲ３は、約１０～約１９（例えば、１０、１１、１２、１３、１
４、１５、１６、１７、１８又は１９のいずれか）のアミノ酸長である。いくつかの実施
形態では、抗原結合モジュールは、半合成ＶＬと半合成ＶＨとを含む、半合成抗体部分で
ある。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、固定されたヒトＶＨ／ＶＬフレ
ームワーク対を含むが、重鎖及び軽鎖両方の６個のＣＤＲ全てについて無作為な合成配列
を含む、完全に合成の抗体部分である。
域とを含む、半合成の抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、完全なヒトＶＬと、完全なヒトＦＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ２、Ｆ
Ｒ３及びＦＲ４領域と合成ＨＣ－ＣＤＲ３とを含む半合成ＶＨとを含む、半合成の抗体部
分である。いくつかの実施形態では、半合成ＶＨは、約５～約２５（例えば、約５、６、
７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２
１、２２、２３、２４又は２５のいずれか）のアミノ酸長の配列を含む、完全に合成のＨ
Ｃ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、半合成ＶＨ又は合成ＨＣ－ＣＤＲ３は、
約５～約２５（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、
１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４又は２５のいずれか）のアミノ
酸長の配列を含む完全に合成のＨＣ－ＣＤＲ３を含む、半合成ライブラリー（例えば、半
合成ヒトライブラリー）から得られ、この配列中のそれぞれのアミノ酸は、互いに独立し
て、システインを除く標準的なヒトアミノ酸から無作為に選択される。いくつかの実施形
態では、合成ＨＣ－ＣＤＲ３は、約１０～約１９（例えば、１０、１１、１２、１３、１
４、１５、１６、１７、１８又は１９のいずれか）のアミノ酸長である。いくつかの実施
形態では、抗原結合モジュールは、半合成ＶＬと半合成ＶＨとを含む、半合成抗体部分で
ある。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、固定されたヒトＶＨ／ＶＬフレ
ームワーク対を含むが、重鎖及び軽鎖両方の６個のＣＤＲ全てについて無作為な合成配列
を含む、完全に合成の抗体部分である。
【0090】
抗原結合モジュールは、いくつかの実施形態では、１つ以上の抗体部分（例えば、モノ
クローナル抗体）に由来する特定のＣＤＲ配列、又は１つ以上のアミノ酸置換を含むこの
ような配列の特定の多様体を含む、抗体部分である。いくつかの実施形態では、多様体配
列中のアミノ酸置換は、抗原結合モジュールが標的抗原に結合する能力を実質的に低下さ
せない。標的抗原結合親和性を実質的に改善するか、又は標的抗原の関連する多様体との
特異性及び／又は交差反応性などのいくつかの他の特性に影響を与える改変も想定される
。
クローナル抗体）に由来する特定のＣＤＲ配列、又は１つ以上のアミノ酸置換を含むこの
ような配列の特定の多様体を含む、抗体部分である。いくつかの実施形態では、多様体配
列中のアミノ酸置換は、抗原結合モジュールが標的抗原に結合する能力を実質的に低下さ
せない。標的抗原結合親和性を実質的に改善するか、又は標的抗原の関連する多様体との
特異性及び／又は交差反応性などのいくつかの他の特性に影響を与える改変も想定される
。
【0091】
いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、抗体部分に由来する。例えば、いくつ
かの実施形態では、安定化モジュールは、ＣＨ１抗体ドメイン又はその多様体を含む第１
の安定化ドメインと、ＣＬ抗体ドメイン又はその多様体を含む第２の安定化ドメインとを
含む。別の実施形態では、安定化モジュールは、ＣＨ３抗体ドメイン又はその多様体を含
む第１の安定化ドメインと、ＣＨ３抗体ドメイン又はその多様体を含む第２の安定化ドメ
インとを含む。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含まれる抗体重鎖定常ドメ
イン（例えば、ＣＨ１又はＣＨ３）は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３
又はＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭ又はＩｇＥ
重鎖、場合により、ヒトに由来する。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含ま
れる抗体重鎖定常ドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＨ３）は、その由来となる配列と比較
して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入及び／又は欠失）を含む多様体であ
る。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含まれる抗体軽鎖定常ドメイン（ＣＬ
）は、κ軽鎖又はλ軽鎖に由来し、場合により、ヒトのものに由来する。いくつかの実施
形態では、安定化モジュールに含まれる抗体軽鎖定常ドメイン（例えば、ＣＬ）は、その
由来となる配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入及び／又は欠
失）を含む多様体である。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び／又は第
２の安定化ドメインは、互いに対する結合親和性を実質的に変えない１つ以上の改変を含
む。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び／又は第２の安定化ドメインは
、互いに対する結合親和性を高め、及び／又は天然に存在しないジスルフィド結合を導入
する１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、穴にノブを
入れる（knob-into-hole）改変を含む（例えば、Ｃａｒｔｅｒ Ｐ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ
Ｍｅｔｈｏｄｓ．２４８：７－１５、２００１を参照）。例えば、いくつかの実施形態
では、安定化モジュールは、穴にノブを入れる改変を含む抗体定常ドメイン領域（例えば
、ＣＨ３ドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、その会合を
高めるための静電的ステアリングによって改変された抗体定常ドメイン領域（例えば、Ｃ
Ｈ３ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２００６１０６９０５号及びＧｕｎａｓｅｋａｒａ
ｎ Ｋら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２８５：１９６３７－４６、２０１０を参照）。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド
結合によって結合する。
かの実施形態では、安定化モジュールは、ＣＨ１抗体ドメイン又はその多様体を含む第１
の安定化ドメインと、ＣＬ抗体ドメイン又はその多様体を含む第２の安定化ドメインとを
含む。別の実施形態では、安定化モジュールは、ＣＨ３抗体ドメイン又はその多様体を含
む第１の安定化ドメインと、ＣＨ３抗体ドメイン又はその多様体を含む第２の安定化ドメ
インとを含む。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含まれる抗体重鎖定常ドメ
イン（例えば、ＣＨ１又はＣＨ３）は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３
又はＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭ又はＩｇＥ
重鎖、場合により、ヒトに由来する。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含ま
れる抗体重鎖定常ドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＨ３）は、その由来となる配列と比較
して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入及び／又は欠失）を含む多様体であ
る。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含まれる抗体軽鎖定常ドメイン（ＣＬ
）は、κ軽鎖又はλ軽鎖に由来し、場合により、ヒトのものに由来する。いくつかの実施
形態では、安定化モジュールに含まれる抗体軽鎖定常ドメイン（例えば、ＣＬ）は、その
由来となる配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入及び／又は欠
失）を含む多様体である。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び／又は第
２の安定化ドメインは、互いに対する結合親和性を実質的に変えない１つ以上の改変を含
む。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び／又は第２の安定化ドメインは
、互いに対する結合親和性を高め、及び／又は天然に存在しないジスルフィド結合を導入
する１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、穴にノブを
入れる（knob-into-hole）改変を含む（例えば、Ｃａｒｔｅｒ Ｐ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ
Ｍｅｔｈｏｄｓ．２４８：７－１５、２００１を参照）。例えば、いくつかの実施形態
では、安定化モジュールは、穴にノブを入れる改変を含む抗体定常ドメイン領域（例えば
、ＣＨ３ドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、その会合を
高めるための静電的ステアリングによって改変された抗体定常ドメイン領域（例えば、Ｃ
Ｈ３ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２００６１０６９０５号及びＧｕｎａｓｅｋａｒａ
ｎ Ｋら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２８５：１９６３７－４６、２０１０を参照）。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド
結合によって結合する。
【0092】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、本明細書に記載のＴＣＲＭに結合する本明細
書に記載の抗原結合モジュールを含み、場合により、安定化モジュールを含む。例えば、
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＤの一方又は両方のＮ末端に結合した抗
原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＭと抗原結合
モジュールとの間に安定化モジュールを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、
任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールを更に含む
。いくつかの実施形態では、スペーサーモジュールは、約５～約７０（例えば、５、１０
、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５又は７０のいず
れか、これらの値の間にある任意の範囲を含む）のアミノ酸長の１つ以上のペプチドリン
カーを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、１つ以上のアクセサリー細胞内ド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは
、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに対してカルボキシ末端にある。いくつかの
実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭと第１の
ＴＣＲ細胞内ドメインとの間、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭと第２のＴＣＲ細胞内ドメ
インとの間にある。いくつかの実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは
、個々に、ＴＣＲ共刺激ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ共刺激ドメイ
ンは、免疫共刺激分子（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ
４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ
２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガン
ドなど）の細胞内ドメインの全て又は一部を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ共刺
激ドメインは、配列番号４９～５１のアミノ酸配列の全て又は一部又はその多様体を含む
。
書に記載の抗原結合モジュールを含み、場合により、安定化モジュールを含む。例えば、
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＤの一方又は両方のＮ末端に結合した抗
原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＭと抗原結合
モジュールとの間に安定化モジュールを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、
任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールを更に含む
。いくつかの実施形態では、スペーサーモジュールは、約５～約７０（例えば、５、１０
、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５又は７０のいず
れか、これらの値の間にある任意の範囲を含む）のアミノ酸長の１つ以上のペプチドリン
カーを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、１つ以上のアクセサリー細胞内ド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは
、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに対してカルボキシ末端にある。いくつかの
実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭと第１の
ＴＣＲ細胞内ドメインとの間、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭと第２のＴＣＲ細胞内ドメ
インとの間にある。いくつかの実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは
、個々に、ＴＣＲ共刺激ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ共刺激ドメイ
ンは、免疫共刺激分子（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ
４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ
２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガン
ドなど）の細胞内ドメインの全て又は一部を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ共刺
激ドメインは、配列番号４９～５１のアミノ酸配列の全て又は一部又はその多様体を含む
。
【0093】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面抗原に特異的に結合する。
いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物及び脂質からなる群か
ら選択される。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、疾患細胞中で発現される疾患
関連抗原である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ペプチドとＭＨＣタ
ンパク質とを含む複合体に特異的に結合する。ペプチド／ＭＨＣ複合体としては、例えば
、疾患細胞内で発現する疾患関連抗原に由来するペプチドと、ＭＨＣタンパク質とを含む
、表面提示複合体が挙げられる。いくつかの実施形態では、完全長疾患関連抗原は、疾患
細胞表面上で通常は発現しない（例えば、疾患関連抗原は、細胞内タンパク質又は分泌タ
ンパク質である）。いくつかの実施形態では、疾患は癌であり、疾患関連抗原は、癌細胞
中で発現される腫瘍関連抗原である。いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、癌タン
パク質である。いくつかの実施形態では、癌タンパク質は、癌原遺伝子における変異の結
果であり、癌タンパク質は、変異を含むネオエピトープを含む。例えば、いくつかの実施
形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトープを含
む癌タンパク質）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、癌細胞表面上で通常は発現しない腫瘍関連抗原（例えば、細胞内抗原又は分泌型の腫瘍
関連抗原）に由来するペプチド（例えば、ネオエピトープを含む癌タンパク質）とＭＨＣ
タンパク質とを含む複合体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、疾患はウイル
ス感染であり、疾患関連抗原は、感染細胞において発現されるウイルス関連抗原である。
例えば、いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面ウイルス関連抗原と
特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ウイルスに感染し
た細胞表面上で通常は発現しないウイルス関連抗原（例えば、細胞内抗原又は分泌型腫瘍
関連抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体に特異的に結合する。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ構築物は、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭ（例えば、
約０．１ｐＭ、１．０ｐＭ、１０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、５００ｐＭ、１ｎＭ、１
０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ又は５００ｎＭのいずれか、これらの値の間にある任意の
範囲を含む）のＫｄで、標的抗原に結合する。
いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物及び脂質からなる群か
ら選択される。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、疾患細胞中で発現される疾患
関連抗原である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ペプチドとＭＨＣタ
ンパク質とを含む複合体に特異的に結合する。ペプチド／ＭＨＣ複合体としては、例えば
、疾患細胞内で発現する疾患関連抗原に由来するペプチドと、ＭＨＣタンパク質とを含む
、表面提示複合体が挙げられる。いくつかの実施形態では、完全長疾患関連抗原は、疾患
細胞表面上で通常は発現しない（例えば、疾患関連抗原は、細胞内タンパク質又は分泌タ
ンパク質である）。いくつかの実施形態では、疾患は癌であり、疾患関連抗原は、癌細胞
中で発現される腫瘍関連抗原である。いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、癌タン
パク質である。いくつかの実施形態では、癌タンパク質は、癌原遺伝子における変異の結
果であり、癌タンパク質は、変異を含むネオエピトープを含む。例えば、いくつかの実施
形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトープを含
む癌タンパク質）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、癌細胞表面上で通常は発現しない腫瘍関連抗原（例えば、細胞内抗原又は分泌型の腫瘍
関連抗原）に由来するペプチド（例えば、ネオエピトープを含む癌タンパク質）とＭＨＣ
タンパク質とを含む複合体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、疾患はウイル
ス感染であり、疾患関連抗原は、感染細胞において発現されるウイルス関連抗原である。
例えば、いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面ウイルス関連抗原と
特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ウイルスに感染し
た細胞表面上で通常は発現しないウイルス関連抗原（例えば、細胞内抗原又は分泌型腫瘍
関連抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体に特異的に結合する。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ構築物は、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭ（例えば、
約０．１ｐＭ、１．０ｐＭ、１０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、５００ｐＭ、１ｎＭ、１
０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ又は５００ｎＭのいずれか、これらの値の間にある任意の
範囲を含む）のＫｄで、標的抗原に結合する。
【0094】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、細胞表面抗原に特異的に結合する抗原結合モ
ジュールを含み、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－
３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ又はＦＣＲＬ５であり、これらの多様
体又は変異体を含む。全長抗原（例えば、細胞表面抗原）に対する特異的な結合は、「非
ＭＨＣ制限結合」と呼ばれることがある。
ジュールを含み、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－
３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ又はＦＣＲＬ５であり、これらの多様
体又は変異体を含む。全長抗原（例えば、細胞表面抗原）に対する特異的な結合は、「非
ＭＨＣ制限結合」と呼ばれることがある。
【0095】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体
に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、このペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、Ｈ
ＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、Ｋ
ＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由
来し、これらの多様体又は変異体を含む。ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体に
対する特異的な結合は、「ＭＨＣ制限結合」と呼ばれることがある。
に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、このペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、Ｈ
ＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、Ｋ
ＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由
来し、これらの多様体又は変異体を含む。ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体に
対する特異的な結合は、「ＭＨＣ制限結合」と呼ばれることがある。
【0096】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、疾患関連抗原（腫瘍関連抗原又はウイルスに
よってコードされる抗原など）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩタンパク質とを含む
複合体に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ又はＨＬＡ－Ｇである。い
くつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ又はＨＬ
Ａ－Ｃである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａであ
る。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。いくつ
かの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。いくつかの実施形
態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０
３、ＨＬＡ－Ａ０９、ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２
３、ＨＬＡ－Ａ２４、ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２
９、ＨＬＡ－Ａ３０、ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３
４、ＨＬＡ－Ａ３６、ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６
９、ＨＬＡ－Ａ７４又はＨＬＡ－Ａ８０である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラス
Ｉタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタン
パク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－５５５、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：０５、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：１２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：１５、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：２２又はＨＬＡ－Ａ＊０２：２４のうち、いずれか１つである。いくつかの
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
よってコードされる抗原など）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩタンパク質とを含む
複合体に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ又はＨＬＡ－Ｇである。い
くつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ又はＨＬ
Ａ－Ｃである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａであ
る。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。いくつ
かの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。いくつかの実施形
態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０
３、ＨＬＡ－Ａ０９、ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２
３、ＨＬＡ－Ａ２４、ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２
９、ＨＬＡ－Ａ３０、ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３
４、ＨＬＡ－Ａ３６、ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６
９、ＨＬＡ－Ａ７４又はＨＬＡ－Ａ８０である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラス
Ｉタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタン
パク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－５５５、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：０５、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：１２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：１５、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：２２又はＨＬＡ－Ａ＊０２：２４のうち、いずれか１つである。いくつかの
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0097】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、疾患関連抗原（腫瘍関連抗原又はウイルスに
よってコードされる抗原など）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩＩタンパク質とを含
む複合体に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は
、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－ＤＱ又はＨＬＡ－ＤＲである。いくつかの実施形態では、ＭＨ
ＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラ
スＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＱである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩ
タンパク質は、ＨＬＡ－ＤＲである。
よってコードされる抗原など）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩＩタンパク質とを含
む複合体に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は
、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－ＤＱ又はＨＬＡ－ＤＲである。いくつかの実施形態では、ＭＨ
ＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラ
スＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＱである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩ
タンパク質は、ＨＬＡ－ＤＲである。
【0098】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ（例えば、単離されたｃａＴＣＲ）であって、（
ａ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、（ｂ）天然に存在するＴＣＲ（
例えば、αβＴＣＲ又はγδＴＣＲ）の膜貫通ドメインに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭ及
び第２のＴＣＲ－ＴＭを含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子を動員することが可能であり、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２の
ＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在しないものであ
る。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭ中の１つ以上のポリペプ
チド鎖のアミノ末端に結合している。例えば、いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、２
つのポリペプチド鎖を含み、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭポリペプチド鎖の一方又は
両方のアミノ末端に結合している。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ－ＴＭ
に対してアミノ末端に、天然に存在するＴＣＲの少なくとも１つの接続ペプチド又はその
フラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ－ＴＭに対して
カルボキシ末端に、天然に存在するＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む少なくとも
１つのＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に
存在するＴＣＲ鎖のフラグメントに由来するＴＣＲＤを含む。ＴＣＲＤのうち少なくとも
１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲ－ＴＭに対
してカルボキシ末端にＴ細胞共刺激シグナル伝達分子（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４
－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つ
のアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュー
ルは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＶＨ抗体ドメインと、Ｖ
Ｌ抗体ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ヒト、ヒト化、キメラ
、半合成、又は完全に合成されたものである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、
第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１
の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結
合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、安定化ドメインを結
合する少なくとも１つのジスルフィド結合を含む。いくつかの実施形態では、第１の安定
化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、
又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε
及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員
することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するＴ細胞受
容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａ
ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴ
ＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲは、ヘテロ多量体（例えば、ヘテロ二量体）である。例えば、いくつ
かの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１のＴＣＲＤを含む第１のポリペプチド鎖と第２の
ＴＣＲＤを含む第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり、抗原結合モジュール
は、第１のポリペプチド鎖及び／又は第２のポリペプチド鎖に結合している。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
ａ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、（ｂ）天然に存在するＴＣＲ（
例えば、αβＴＣＲ又はγδＴＣＲ）の膜貫通ドメインに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭ及
び第２のＴＣＲ－ＴＭを含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子を動員することが可能であり、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２の
ＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在しないものであ
る。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭ中の１つ以上のポリペプ
チド鎖のアミノ末端に結合している。例えば、いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、２
つのポリペプチド鎖を含み、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭポリペプチド鎖の一方又は
両方のアミノ末端に結合している。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ－ＴＭ
に対してアミノ末端に、天然に存在するＴＣＲの少なくとも１つの接続ペプチド又はその
フラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ－ＴＭに対して
カルボキシ末端に、天然に存在するＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む少なくとも
１つのＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に
存在するＴＣＲ鎖のフラグメントに由来するＴＣＲＤを含む。ＴＣＲＤのうち少なくとも
１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲ－ＴＭに対
してカルボキシ末端にＴ細胞共刺激シグナル伝達分子（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４
－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つ
のアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュー
ルは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＶＨ抗体ドメインと、Ｖ
Ｌ抗体ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ヒト、ヒト化、キメラ
、半合成、又は完全に合成されたものである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、
第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１
の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結
合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、安定化ドメインを結
合する少なくとも１つのジスルフィド結合を含む。いくつかの実施形態では、第１の安定
化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、
又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε
及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員
することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するＴ細胞受
容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａ
ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴ
ＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲは、ヘテロ多量体（例えば、ヘテロ二量体）である。例えば、いくつ
かの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１のＴＣＲＤを含む第１のポリペプチド鎖と第２の
ＴＣＲＤを含む第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり、抗原結合モジュール
は、第１のポリペプチド鎖及び／又は第２のポリペプチド鎖に結合している。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0099】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び
／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供され
る。いくつかの実施形態では、天然に存在するＴＣＲは、αβＴＣＲであり、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβサブユニット膜貫通ドメインに由来
する。いくつかの実施形態では、天然に存在するＴＣＲは、γδＴＣＲであり、第１のＴ
ＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲγ及びδサブユニット膜貫通ドメインに由
来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそ
のフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又
はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第１
のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はそ
の多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴ
ＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結
合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更
に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴ
ＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞
内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに
由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭ
の由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、
第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつかの
実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なく
とも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部
分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３
γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するＴ細
胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いく
つかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である
。
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び
／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供され
る。いくつかの実施形態では、天然に存在するＴＣＲは、αβＴＣＲであり、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβサブユニット膜貫通ドメインに由来
する。いくつかの実施形態では、天然に存在するＴＣＲは、γδＴＣＲであり、第１のＴ
ＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲγ及びδサブユニット膜貫通ドメインに由
来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそ
のフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又
はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第１
のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はそ
の多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴ
ＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結
合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更
に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴ
ＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞
内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに
由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭ
の由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、
第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつかの
実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なく
とも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部
分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３
γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するＴ細
胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いく
つかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である
。
【0100】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するαβＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭと天然に
存在するαβＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴ
ＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第
２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものである、第１のＴＣＲＤと、（ｂ）標的抗原
に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲ
Ｄ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提
供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又は
そのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド
又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第
１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又は
その多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの
実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって
結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細
胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン
に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、Ｃ
Ｄ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部
分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３
γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するαβ
Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつか
の実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）で
ある。
然に存在するαβＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭと天然に
存在するαβＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴ
ＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第
２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものである、第１のＴＣＲＤと、（ｂ）標的抗原
に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲ
Ｄ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提
供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又は
そのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド
又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第
１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又は
その多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの
実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって
結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細
胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン
に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、Ｃ
Ｄ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部
分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３
γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するαβ
Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつか
の実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）で
ある。
【0101】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するγδＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭと天然に
存在するγδＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴ
ＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第
２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものである、第１のＴＣＲＤと、（ｂ）標的抗原
に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲ
Ｄ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提
供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又は
そのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド
又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第
１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又は
その多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの
実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって
結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細
胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン
に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、Ｃ
Ｄ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部
分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３
γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するγδ
Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつか
の実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）で
ある。
然に存在するγδＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭと天然に
存在するγδＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴ
ＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第
２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものである、第１のＴＣＲＤと、（ｂ）標的抗原
に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲ
Ｄ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提
供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又は
そのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド
又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第
１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又は
その多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの
実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって
結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細
胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン
に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、Ｃ
Ｄ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部
分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３
γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するγδ
Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつか
の実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）で
ある。
【0102】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣ
ＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭ
を形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないもの
であり、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジ
ュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールと
を含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４
のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる接続ペプチドのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは
、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つ
のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプ
チドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤ
は、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及
び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸
配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を
含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ド
メインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列
（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣ
Ｄ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安
定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安
定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつか
の実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗
体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、配列番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の再動員
を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複
合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又
はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合
モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣ
ＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭ
を形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないもの
であり、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジ
ュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールと
を含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４
のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる接続ペプチドのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは
、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つ
のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプ
チドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤ
は、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及
び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸
配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を
含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ド
メインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列
（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣ
Ｄ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安
定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安
定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつか
の実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗
体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、配列番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の再動員
を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複
合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又
はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合
モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0103】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１
つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、４、５、又
はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標
的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１の
ＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣ
Ｒが提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、
その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、４、５、又はもっ
と多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又
は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較
して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの少なく
とも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、その由来となるアミノ酸配列と比較し
て、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換
アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ
酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置される。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は
第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立
して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる
接続ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び
第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様
体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプ
チドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列
番号１～４のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメ
インのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び
第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこ
れらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共
刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ
４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によっ
て結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ
細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子の再動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いく
つかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である
。
列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１
つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、４、５、又
はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標
的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１の
ＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣ
Ｒが提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、
その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、４、５、又はもっ
と多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又
は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較
して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの少なく
とも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、その由来となるアミノ酸配列と比較し
て、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換
アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ
酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置される。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は
第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立
して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる
接続ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び
第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様
体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプ
チドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列
番号１～４のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメ
インのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び
第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこ
れらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共
刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ
４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によっ
て結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ
細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子の再動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いく
つかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である
。
【0104】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１
つが、配列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメインに由来する連続アミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結
合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は
第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号３又は４に
含まれる膜貫通ドメインに由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互い
に独立して、配列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメインに由来する約１０以下（例えば
、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少ない）の連続アミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインに由来し、他方のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態で
は、第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作
用し得るように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミ
ノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる接続ペプチドのアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それ
ぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミ
ノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは
、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２
のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又
はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例え
ば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０
由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モ
ジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを
安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ド
メインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施
形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメ
インなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配
列番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の再動員を強化
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の
形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメ
インの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュ
ールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（
Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１
つが、配列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメインに由来する連続アミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結
合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は
第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号３又は４に
含まれる膜貫通ドメインに由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互い
に独立して、配列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメインに由来する約１０以下（例えば
、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少ない）の連続アミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインに由来し、他方のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態で
は、第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作
用し得るように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミ
ノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる接続ペプチドのアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それ
ぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミ
ノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは
、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２
のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又
はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例え
ば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０
由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モ
ジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを
安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ド
メインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施
形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメ
インなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配
列番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の再動員を強化
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の
形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメ
インの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュ
ールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（
Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0105】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣ
ＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭ
を形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないもの
であり、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジ
ュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールと
を含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４
のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる接続ペプチドのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは
、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つ
のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプ
チドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤ
は、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及
び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸
配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を
含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ド
メインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列
（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣ
Ｄ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安
定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安
定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつか
の実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗
体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、配列番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の再動員
を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複
合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又
はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合
モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣ
ＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭ
を形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないもの
であり、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジ
ュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールと
を含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４
のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる接続ペプチドのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは
、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つ
のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプ
チドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤ
は、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及
び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸
配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を
含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ド
メインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列
（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣ
Ｄ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安
定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安
定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつか
の実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗
体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、配列番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の再動員
を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複
合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又
はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合
モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0106】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１
つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、４、５、又
はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標
的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１の
ＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣ
Ｒが提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、
その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、４、５、又はもっ
と多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又
は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較
して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの少なく
とも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、その由来となるアミノ酸配列と比較し
て、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換
アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ
酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置される。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は
第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立
して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる
接続ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び
第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様
体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプ
チドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列
番号１～４のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメ
インのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び
第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこ
れらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共
刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ
４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によっ
て結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ
細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子の再動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いく
つかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である
。
列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１
つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、４、５、又
はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標
的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１の
ＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣ
Ｒが提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、
その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、４、５、又はもっ
と多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又
は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較
して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの少なく
とも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、その由来となるアミノ酸配列と比較し
て、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換
アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ
酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置される。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は
第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立
して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる
接続ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び
第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様
体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプ
チドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列
番号１～４のアミノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメ
インのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び
第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこ
れらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共
刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ
４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によっ
て結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ
細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子の再動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いく
つかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である
。
【0107】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１
つが、配列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメインに由来する連続アミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結
合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は
第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号１又は２に
含まれる膜貫通ドメインに由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互い
に独立して、配列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメインに由来する約１０以下（例えば
、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少ない）の連続アミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、配列番号１に含まれる膜貫通ドメインに由来し、他方のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、配列番号２に含まれる膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態で
は、第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作
用し得るように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミ
ノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる接続ペプチドのアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それ
ぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミ
ノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは
、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２
のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又
はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例え
ば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０
由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モ
ジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを
安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ド
メインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施
形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメ
インなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配
列番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の再動員を強化
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の
形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメ
インの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュ
ールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（
Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列の１つに含まれる膜貫通ドメインに由来する第１
のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に含まれる膜貫通ドメインに
由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１
つが、配列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメインに由来する連続アミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結
合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は
第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号１又は２に
含まれる膜貫通ドメインに由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互い
に独立して、配列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメインに由来する約１０以下（例えば
、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少ない）の連続アミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、配列番号１に含まれる膜貫通ドメインに由来し、他方のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、配列番号２に含まれる膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態で
は、第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作
用し得るように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミ
ノ酸配列又はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる接続ペプチドのアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それ
ぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミ
ノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは
、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２
のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又
はこれらの多様体のうちいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例え
ば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０
由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モ
ジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを
安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ド
メインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施
形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメ
インなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配
列番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の再動員を強化
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の
形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメ
インの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュ
ールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（
Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0108】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合
モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤ
に結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に
含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞ
れ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、
ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１
のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内
ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの
多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シ
グナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に
含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態
では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合
する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、Ｃ
Ｈ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含む
ＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化するこ
とができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの
間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ
’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジ
ュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合
モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤ
に結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に
含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞ
れ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、
ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１
のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内
ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの
多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シ
グナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に
含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態
では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合
する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、Ｃ
Ｈ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含む
ＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化するこ
とができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの
間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ
’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジ
ュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0109】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ
以上（例えば、２、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲ
Ｄと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが
可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであっ
て、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原
結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（
例えば、２、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、
その由来となるアミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して
、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、そ
の由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、
第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフ
ラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそ
のフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接
続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうち
いずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第
２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞
内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５
又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー
細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメ
インと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン
及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する
。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフ
ィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の
安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群か
ら選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体
膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－
ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジ
ュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ
以上（例えば、２、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲ
Ｄと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが
可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであっ
て、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原
結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（
例えば、２、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、
その由来となるアミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して
、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、そ
の由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、
第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフ
ラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそ
のフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接
続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうち
いずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第
２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞
内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５
又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー
細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメ
インと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン
及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する
。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフ
ィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の
安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群か
ら選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体
膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－
ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジ
ュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0110】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つが、配列番号７又は８に由来する連続アミノ酸の一
部を含むキメラ配列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特
異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及
び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供さ
れる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号７
又は８に由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列
番号７又は８に由来する約１０以下（例えば、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少
ない）の連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号７に由来し、他方の
ＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号８に由来する。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用し得る
ように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプ
チド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続
ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチ
ド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれら
の多様体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して
、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４
－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つ
のアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメイ
ンは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はそ
の多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζ
ζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有す
るＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つの
ｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。い
くつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）であ
る。
列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つが、配列番号７又は８に由来する連続アミノ酸の一
部を含むキメラ配列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特
異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及
び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供さ
れる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号７
又は８に由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列
番号７又は８に由来する約１０以下（例えば、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少
ない）の連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号７に由来し、他方の
ＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号８に由来する。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用し得る
ように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプ
チド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続
ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチ
ド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれら
の多様体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して
、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４
－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つ
のアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメイ
ンは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はそ
の多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζ
ζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有す
るＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つの
ｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。い
くつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）であ
る。
【0111】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合
モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤ
に結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に
含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞ
れ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、
ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１
のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内
ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの
多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シ
グナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に
含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態
では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合
する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、Ｃ
Ｈ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含む
ＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化するこ
とができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの
間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ
’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジ
ュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合
モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤ
に結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に
含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞ
れ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、
ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１
のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内
ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの
多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シ
グナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に
含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態
では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合
する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、Ｃ
Ｈ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含む
ＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化するこ
とができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの
間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ
’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジ
ュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0112】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ
以上（例えば、２、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲ
Ｄと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが
可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであっ
て、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原
結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（
例えば、２、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、
その由来となるアミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して
、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、そ
の由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、
第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフ
ラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそ
のフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接
続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうち
いずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第
２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞
内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５
又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー
細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメ
インと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン
及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する
。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフ
ィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の
安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群か
ら選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体
膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－
ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジ
ュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ
以上（例えば、２、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲ
Ｄと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが
可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであっ
て、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原
結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（
例えば、２、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、
その由来となるアミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して
、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、そ
の由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、
第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフ
ラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそ
のフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接
続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうち
いずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第
２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞
内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５
又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー
細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメ
インと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン
及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する
。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフ
ィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の
安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群か
ら選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体
膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分
子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－
ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジ
ュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0113】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つが、配列番号５又は６に由来する連続アミノ酸の一
部を含むキメラ配列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特
異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及
び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供さ
れる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号５
又は６に由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列
番号５又は６に由来する約１０以下（例えば、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少
ない）の連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号５に由来し、他方の
ＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号６に由来する。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用し得る
ように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプ
チド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続
ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチ
ド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれら
の多様体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して
、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４
－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つ
のアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメイ
ンは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はそ
の多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζ
ζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有す
るＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つの
ｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。い
くつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）であ
る。
列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤと、他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを
含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つが、配列番号５又は６に由来する連続アミノ酸の一
部を含むキメラ配列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特
異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及
び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴＣＲが提供さ
れる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号５
又は６に由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列
番号５又は６に由来する約１０以下（例えば、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少
ない）の連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号５に由来し、他方の
ＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号６に由来する。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用し得る
ように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプ
チド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続
ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチ
ド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれら
の多様体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して
、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４
－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つ
のアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメイ
ンは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はそ
の多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζ
ζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有す
るＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つの
ｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。い
くつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）であ
る。
【0114】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに記載のｃａＴＣＲ
と、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのシグナ
ル伝達分子とを含む、複合体が提供される。いくつかの実施形態では、複合体は、ＣＤ３
δε、ＣＤ３γε及びζζのそれぞれを含む。したがって、いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζを含む複合体が提供される。
と、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのシグナ
ル伝達分子とを含む、複合体が提供される。いくつかの実施形態では、複合体は、ＣＤ３
δε、ＣＤ３γε及びζζのそれぞれを含む。したがって、いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζを含む複合体が提供される。
【0115】
異なる態様は、以下の様々な章で更に詳細に論じられる。
ＴＣＲ－ＴＭ多様体
ＴＣＲ－ＴＭ多様体
【0116】
本明細書に記載のｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在するＴ細胞受容体に由来す
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つは、天然に存在しない
。天然に存在するＴ細胞受容体に由来する、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上
のアミノ酸置換によって改変された天然に存在するＴ細胞受容体に由来する膜貫通ドメイ
ンを含む。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非
置換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲ
Ｍ中のアミノ酸に対して近位（一次配列で、又は空間的に）である。例えば、いくつかの
実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣ
ＲＭ中のアミノ酸から、３以下の（例えば、０、１、２又は３の）アミノ酸だけ離れてい
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ＣＤ３への結合
に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸から、約１５（例えば、約１４、１２、１０、８、６、
４、２又は１以下のいずれか）Å以内で離れている。いくつかの実施形態では、置換アミ
ノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である
。
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つは、天然に存在しない
。天然に存在するＴ細胞受容体に由来する、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上
のアミノ酸置換によって改変された天然に存在するＴ細胞受容体に由来する膜貫通ドメイ
ンを含む。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非
置換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲ
Ｍ中のアミノ酸に対して近位（一次配列で、又は空間的に）である。例えば、いくつかの
実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣ
ＲＭ中のアミノ酸から、３以下の（例えば、０、１、２又は３の）アミノ酸だけ離れてい
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ＣＤ３への結合
に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸から、約１５（例えば、約１４、１２、１０、８、６、
４、２又は１以下のいずれか）Å以内で離れている。いくつかの実施形態では、置換アミ
ノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である
。
【0117】
例えば、いくつかの実施形態では、天然に存在するＴ細胞受容体に由来する、天然に存
在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変されたα、β、γ
又はδＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、又はこ
れらからなる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、５個
以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユ
ニットの膜貫通ドメインは、単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの
実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性
である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応す
る非置換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミ
ノ酸のうち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して
近位である。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関
与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変されたα、β、γ
又はδＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、又はこ
れらからなる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、５個
以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユ
ニットの膜貫通ドメインは、単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの
実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性
である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応す
る非置換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミ
ノ酸のうち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して
近位である。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関
与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
【0118】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載する天然に存在するＴ細胞受容
体に由来する、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によっ
て改変される、配列番号１に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号
５）を含むαＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、
又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、αＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン
は、配列番号１に含まれる膜貫通ドメイン中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改
変される。いくつかの実施形態では、αＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番
号１に含まれる膜貫通ドメイン中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いく
つかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも
疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、
対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置
換アミノ酸のうち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に
対して近位である。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結
合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
体に由来する、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によっ
て改変される、配列番号１に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号
５）を含むαＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、
又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、αＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメイン
は、配列番号１に含まれる膜貫通ドメイン中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改
変される。いくつかの実施形態では、αＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番
号１に含まれる膜貫通ドメイン中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いく
つかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも
疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、
対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置
換アミノ酸のうち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に
対して近位である。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結
合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
【0119】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載する天然に存在するＴ細胞受容体に由来する
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号５のアミノ酸配列を含むαＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユニ
ットの膜貫通ドメインは、配列番号５中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変さ
れる。いくつかの実施形態では、αＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号５
中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミ
ノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換される
。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎水
性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１
つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。いくつかの
実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミ
ノ酸に対して近位である。
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号５のアミノ酸配列を含むαＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユニ
ットの膜貫通ドメインは、配列番号５中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変さ
れる。いくつかの実施形態では、αＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号５
中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミ
ノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換される
。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎水
性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１
つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。いくつかの
実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミ
ノ酸に対して近位である。
【0120】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載する天然に存在するＴ細胞受容体に由来する
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号２に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号６）を含むβ
ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、又はこれらか
らなる。いくつかの実施形態では、βＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
２に含まれる膜貫通ドメイン中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。い
くつかの実施形態では、βＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号２に含まれ
る膜貫通ドメイン中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形
態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置
換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸の
うち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位で
ある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与する
ＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号２に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号６）を含むβ
ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、又はこれらか
らなる。いくつかの実施形態では、βＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
２に含まれる膜貫通ドメイン中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。い
くつかの実施形態では、βＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号２に含まれ
る膜貫通ドメイン中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形
態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置
換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸の
うち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位で
ある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与する
ＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
【0121】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載する天然に存在するＴ細胞受容体に由来する
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号６のアミノ酸配列を含むβＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、βＴＣＲサブユ
ニットの膜貫通ドメインは、配列番号６中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変
される。いくつかの実施形態では、βＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
６中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換ア
ミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換され
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎
水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも
１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。いくつか
の実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のア
ミノ酸に対して近位である。
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号６のアミノ酸配列を含むβＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、βＴＣＲサブユ
ニットの膜貫通ドメインは、配列番号６中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変
される。いくつかの実施形態では、βＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
６中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換ア
ミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換され
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎
水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも
１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。いくつか
の実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のア
ミノ酸に対して近位である。
【0122】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載する天然に存在するＴ細胞受容体に由来する
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号７）を含むδ
ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、又はこれらか
らなる。いくつかの実施形態では、δＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
３に含まれる膜貫通ドメイン中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。い
くつかの実施形態では、δＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号３に含まれ
る膜貫通ドメイン中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形
態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置
換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸の
うち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位で
ある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与する
ＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号７）を含むδ
ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、又はこれらか
らなる。いくつかの実施形態では、δＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
３に含まれる膜貫通ドメイン中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。い
くつかの実施形態では、δＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号３に含まれ
る膜貫通ドメイン中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形
態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置
換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸の
うち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位で
ある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与する
ＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
【0123】
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中のアミノ酸
配列Ｌ４、Ｍ６、Ｖ１２、Ｎ１５、Ｆ２４５及びＬ２５に対応するアミノ酸中の１つ以上
の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番号３に含
まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号７）を含む。いくつかの実施形
態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中のアミノ酸配列Ｖ１２及びＮ１
５に対応するアミノ酸中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変
される、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形
態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中の置換Ｌ４Ｃ、Ｍ６Ｖ、Ｖ１２
Ｆ、Ｎ１５Ｓ、Ｆ２４５Ｓ及びＬ２５Ｓに対応する１つ以上の置換によって改変される、
配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、
天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中の置換Ｖ１２Ｆ及びＮ１５Ｓに対応する
置換によって改変される、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号９～１３のいずれ
か１つのアミノ酸配列を含む。
配列Ｌ４、Ｍ６、Ｖ１２、Ｎ１５、Ｆ２４５及びＬ２５に対応するアミノ酸中の１つ以上
の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番号３に含
まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号７）を含む。いくつかの実施形
態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中のアミノ酸配列Ｖ１２及びＮ１
５に対応するアミノ酸中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変
される、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形
態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中の置換Ｌ４Ｃ、Ｍ６Ｖ、Ｖ１２
Ｆ、Ｎ１５Ｓ、Ｆ２４５Ｓ及びＬ２５Ｓに対応する１つ以上の置換によって改変される、
配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、
天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中の置換Ｖ１２Ｆ及びＮ１５Ｓに対応する
置換によって改変される、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号９～１３のいずれ
か１つのアミノ酸配列を含む。
【0124】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載する天然に存在するＴ細胞受容体に由来する
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号７のアミノ酸配列を含むδＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、δＴＣＲサブユ
ニットの膜貫通ドメインは、配列番号７中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変
される。いくつかの実施形態では、δＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
７中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換ア
ミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換され
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎
水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも
１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。いくつか
の実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のア
ミノ酸に対して近位である。
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号７のアミノ酸配列を含むδＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、δＴＣＲサブユ
ニットの膜貫通ドメインは、配列番号７中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変
される。いくつかの実施形態では、δＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
７中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換ア
ミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換され
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎
水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも
１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。いくつか
の実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のア
ミノ酸に対して近位である。
【0125】
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中のアミノ酸
配列Ｌ４、Ｍ６、Ｖ１２、Ｎ１５、Ｆ２４５及びＬ２５に対応するアミノ酸中の１つ以上
の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番号７のア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番
号７中のアミノ酸配列Ｖ１２及びＮ１５に対応するアミノ酸中の置換（例えば、より疎水
性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番号７のアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中の置換Ｌ４Ｃ、Ｍ６
Ｖ、Ｖ１２Ｆ、Ｎ１５Ｓ、Ｆ２４５Ｓ及びＬ２５Ｓに対応する１つ以上の置換によって改
変される、配列番号７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しな
いＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中の置換Ｖ１２Ｆ及びＮ１５Ｓに対応する置換によって改
変される、配列番号７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しな
いＴＣＲ－ＴＭは、配列番号９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
配列Ｌ４、Ｍ６、Ｖ１２、Ｎ１５、Ｆ２４５及びＬ２５に対応するアミノ酸中の１つ以上
の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番号７のア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番
号７中のアミノ酸配列Ｖ１２及びＮ１５に対応するアミノ酸中の置換（例えば、より疎水
性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番号７のアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中の置換Ｌ４Ｃ、Ｍ６
Ｖ、Ｖ１２Ｆ、Ｎ１５Ｓ、Ｆ２４５Ｓ及びＬ２５Ｓに対応する１つ以上の置換によって改
変される、配列番号７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しな
いＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７中の置換Ｖ１２Ｆ及びＮ１５Ｓに対応する置換によって改
変される、配列番号７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しな
いＴＣＲ－ＴＭは、配列番号９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
【0126】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載する天然に存在するＴ細胞受容体に由来する
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号８）を含むγ
ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、又はこれらか
らなる。いくつかの実施形態では、γＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
４に含まれる膜貫通ドメイン中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。い
くつかの実施形態では、γＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号４に含まれ
る膜貫通ドメイン中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形
態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置
換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸の
うち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位で
ある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与する
ＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列（例えば、配列番号８）を含むγ
ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、これらから本質的になり、又はこれらか
らなる。いくつかの実施形態では、γＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
４に含まれる膜貫通ドメイン中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。い
くつかの実施形態では、γＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号４に含まれ
る膜貫通ドメイン中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形
態では、置換アミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置
換残基よりも疎水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸の
うち少なくとも１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位で
ある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与する
ＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。
【0127】
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸
配列Ｙ１、Ｙ２、Ｍ３、Ｌ５、Ｌ８、Ｖ１２、Ｖ１３、Ｆ１５、Ａ１６、Ｉ１８、Ｃ１９
、Ｃ２０及びＣ２１に対応するアミノ酸中の１つ以上の置換（例えば、より疎水性の残基
を用いた置換）によって改変される、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配
列（例えば、配列番号８）を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－
ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸配列Ｙ２、Ｍ３、Ａ１６及びＩ１８に対応するアミノ酸
中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番号４に
含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在し
ないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸配列Ｌ８、Ｖ１２及びＦ１５に対応するア
ミノ酸中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番
号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に
存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｙ１Ｑ、Ｙ２Ｌ、Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｖ、Ｍ３
Ｉ、Ｌ５Ｃ、Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、Ｖ１３Ｙ、Ｆ１５Ｓ、Ａ１６Ｖ、Ａ１６Ｉ、Ｉ１８Ｖ、
Ｉ１８Ｌ、Ｃ１９Ｍ、Ｃ２０Ｍ及びＣ２１Ｇに対応する１つ以上の置換によって改変され
る、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態で
は、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｙ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６Ｖ及
びＩ１８Ｖに対応する置換によって改変される、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインの
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列
番号８中の置換Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｉ、Ａ１６Ｉ及びＩ１８Ｌに対応する置換によって改変され
る、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態で
は、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ及びＦ１５
Ｓに対応する置換によって改変される、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸
配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号１４
～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
配列Ｙ１、Ｙ２、Ｍ３、Ｌ５、Ｌ８、Ｖ１２、Ｖ１３、Ｆ１５、Ａ１６、Ｉ１８、Ｃ１９
、Ｃ２０及びＣ２１に対応するアミノ酸中の１つ以上の置換（例えば、より疎水性の残基
を用いた置換）によって改変される、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配
列（例えば、配列番号８）を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－
ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸配列Ｙ２、Ｍ３、Ａ１６及びＩ１８に対応するアミノ酸
中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番号４に
含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在し
ないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸配列Ｌ８、Ｖ１２及びＦ１５に対応するア
ミノ酸中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変される、配列番
号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に
存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｙ１Ｑ、Ｙ２Ｌ、Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｖ、Ｍ３
Ｉ、Ｌ５Ｃ、Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、Ｖ１３Ｙ、Ｆ１５Ｓ、Ａ１６Ｖ、Ａ１６Ｉ、Ｉ１８Ｖ、
Ｉ１８Ｌ、Ｃ１９Ｍ、Ｃ２０Ｍ及びＣ２１Ｇに対応する１つ以上の置換によって改変され
る、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態で
は、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｙ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６Ｖ及
びＩ１８Ｖに対応する置換によって改変される、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインの
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列
番号８中の置換Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｉ、Ａ１６Ｉ及びＩ１８Ｌに対応する置換によって改変され
る、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態で
は、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ及びＦ１５
Ｓに対応する置換によって改変される、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸
配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号１４
～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
【0128】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載する天然に存在するＴ細胞受容体に由来する
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号８のアミノ酸配列を含むγＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、γＴＣＲサブユ
ニットの膜貫通ドメインは、配列番号８中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変
される。いくつかの実施形態では、γＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
８中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換ア
ミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換され
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎
水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも
１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。いくつか
の実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のア
ミノ酸に対して近位である。
、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変される
、配列番号８のアミノ酸配列を含むγＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、γＴＣＲサブユ
ニットの膜貫通ドメインは、配列番号８中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変
される。いくつかの実施形態では、γＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号
８中の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換ア
ミノ酸のうち少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性である残基で置換され
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、対応する非置換残基よりも疎
水性である残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうち少なくとも
１つは、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位である。いくつか
の実施形態では、置換アミノ酸は、それぞれ、ＣＤ３への結合に関与するＴＣＲＭ中のア
ミノ酸に対して近位である。
【0129】
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸
配列Ｙ１、Ｙ２、Ｍ３、Ｌ５、Ｌ８、Ｖ１２、Ｖ１３、Ｆ１５、Ａ１６、Ｉ１８、Ｃ１９
、Ｃ２０及びＣ２１に対応するアミノ酸中の１つ以上の置換（例えば、より疎水性の残基
を用いた置換）によって改変される、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施
形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸配列Ｙ２、Ｍ３、
Ａ１６及びＩ１８に対応するアミノ酸中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換
）によって改変される、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天
然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸配列Ｌ８、Ｖ１２及びＦ１５に
対応するアミノ酸中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変され
る、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣ
Ｒ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｙ１Ｑ、Ｙ２Ｌ、Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｖ、Ｍ３Ｉ、Ｌ５Ｃ、Ｌ
８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、Ｖ１３Ｙ、Ｆ１５Ｓ、Ａ１６Ｖ、Ａ１６Ｉ、Ｉ１８Ｖ、Ｉ１８Ｌ、Ｃ１
９Ｍ、Ｃ２０Ｍ及びＣ２１Ｇに対応する１つ以上の置換によって改変される、配列番号８
のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配
列番号８中の置換Ｙ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６Ｖ及びＩ１８Ｖに対応する置換によって改変さ
れる、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴ
ＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｉ、Ａ１６Ｉ及びＩ１８Ｌに対応する置
換によって改変される、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天
然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ及びＦ１５Ｓに対
応する置換によって改変される、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号１４～２６のいずれか１つのアミノ酸
配列を含む。
配列Ｙ１、Ｙ２、Ｍ３、Ｌ５、Ｌ８、Ｖ１２、Ｖ１３、Ｆ１５、Ａ１６、Ｉ１８、Ｃ１９
、Ｃ２０及びＣ２１に対応するアミノ酸中の１つ以上の置換（例えば、より疎水性の残基
を用いた置換）によって改変される、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施
形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸配列Ｙ２、Ｍ３、
Ａ１６及びＩ１８に対応するアミノ酸中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換
）によって改変される、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天
然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中のアミノ酸配列Ｌ８、Ｖ１２及びＦ１５に
対応するアミノ酸中の置換（例えば、より疎水性の残基を用いた置換）によって改変され
る、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣ
Ｒ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｙ１Ｑ、Ｙ２Ｌ、Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｖ、Ｍ３Ｉ、Ｌ５Ｃ、Ｌ
８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、Ｖ１３Ｙ、Ｆ１５Ｓ、Ａ１６Ｖ、Ａ１６Ｉ、Ｉ１８Ｖ、Ｉ１８Ｌ、Ｃ１
９Ｍ、Ｃ２０Ｍ及びＣ２１Ｇに対応する１つ以上の置換によって改変される、配列番号８
のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配
列番号８中の置換Ｙ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６Ｖ及びＩ１８Ｖに対応する置換によって改変さ
れる、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴ
ＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｉ、Ａ１６Ｉ及びＩ１８Ｌに対応する置
換によって改変される、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、天
然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８中の置換Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ及びＦ１５Ｓに対
応する置換によって改変される、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号１４～２６のいずれか１つのアミノ酸
配列を含む。
【0130】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のいずれか１つを含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号８及び１４
～２６のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる第２のＴ
ＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１
のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）
標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１
のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴ
ＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍは、表２に列挙したｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態で
は、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及
び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む
。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸配
列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４のア
ミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２
の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、
第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内
ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－
１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つの
アクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１
の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安
定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親
和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメイン
は、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイ
ン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその
多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζ
からなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員すること
が可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有する
Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
抗原結合モジュール
列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のいずれか１つを含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号８及び１４
～２６のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる第２のＴ
ＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１
のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）
標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１
のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールとを含む、ｃａＴ
ＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍは、表２に列挙したｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態で
は、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及
び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む
。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸配
列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４のア
ミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２
の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、
第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内
ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－
１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つの
アクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１
の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安
定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親
和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメイン
は、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイ
ン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその
多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζ
からなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員すること
が可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有する
Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
【表2】
【0131】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のいずれかのｃａＴＣＲによれば、抗原結合
モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつ
かの実施形態では、抗体部分が、第１の抗体部分鎖と第２の抗体部分鎖を含む多量体であ
る場合、ｃａＴＣＲは、第１の抗体部分鎖又は第２の抗体部分鎖に結合した第１のＴＣＲ
Ｄと、他の抗体部分鎖に結合した第２のＴＣＲＤとを含む。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、Ｒ
ＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は
変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、
ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩ
Ｖ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変
異体を含む、タンパク質に由来する。
モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつ
かの実施形態では、抗体部分が、第１の抗体部分鎖と第２の抗体部分鎖を含む多量体であ
る場合、ｃａＴＣＲは、第１の抗体部分鎖又は第２の抗体部分鎖に結合した第１のＴＣＲ
Ｄと、他の抗体部分鎖に結合した第２のＴＣＲＤとを含む。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、Ｒ
ＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は
変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、
ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩ
Ｖ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変
異体を含む、タンパク質に由来する。
【0132】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のいずれかのｃａＴＣＲによれば、抗原結合
モジュールは、ＣＨ１とＣＬドメインとを含む抗体部分である。いくつかの実施形態では
、ＣＨ１ドメインは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）重
鎖に由来し、場合により、ヒトのものに由来する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメ
インは、その由来となる配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入
及び／又は欠失）を含む多様体である。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配
列番号３７～４７及び８６のいずれか１つ又はその多様体のアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７又はその多様体のアミノ酸配列を含
む。いくつかの実施形態では、ＣＬドメインは、κ又はλ軽鎖に由来し、場合により、ヒ
トのものに由来する。いくつかの実施形態では、ＣＬドメインは、その由来となる配列と
比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入及び／又は欠失）を含む多様体
である。いくつかの実施形態では、ＣＬドメインは、配列番号４８又は８７、又はその多
様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメインは
、互いに対する結合親和性を実質的に変えない１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形
態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメインは、互いに対する結合親和性を高め、及び／又は
天然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つ以上の改変を含む。
モジュールは、ＣＨ１とＣＬドメインとを含む抗体部分である。いくつかの実施形態では
、ＣＨ１ドメインは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）重
鎖に由来し、場合により、ヒトのものに由来する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメ
インは、その由来となる配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入
及び／又は欠失）を含む多様体である。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配
列番号３７～４７及び８６のいずれか１つ又はその多様体のアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７又はその多様体のアミノ酸配列を含
む。いくつかの実施形態では、ＣＬドメインは、κ又はλ軽鎖に由来し、場合により、ヒ
トのものに由来する。いくつかの実施形態では、ＣＬドメインは、その由来となる配列と
比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入及び／又は欠失）を含む多様体
である。いくつかの実施形態では、ＣＬドメインは、配列番号４８又は８７、又はその多
様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメインは
、互いに対する結合親和性を実質的に変えない１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形
態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメインは、互いに対する結合親和性を高め、及び／又は
天然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つ以上の改変を含む。
【0133】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合する抗体部分を含む本明細書に記載
のｃａＴＣＲのいずれかによれば、抗体部分は、標的抗原に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号５４のアミノ酸配列を含むか、これらから本質
的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号５５のアミノ酸配列を
含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含ま
れるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号５６の
アミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及
び／又は配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらか
らなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、
抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、その内容が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、
２０１８年３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０，９５５号を参照）。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、これ
らから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号６９のアミ
ノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はそ
の中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異
的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば
、その内容が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１７年４月２６日に出願
されたＵＳＳＮ ６２／４９０，５８６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分
は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイ
ン）（例えば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこ
れらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９のアミノ酸配列を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含
む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可
変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７２２
０号及びＷＯ２０１６／１８７２１６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＲＯＲ２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８号を参照）。いくつかの実施形態では、
抗体部分は、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７号及びＷＯ２０１６／０９０
３２０号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体
部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２
０１６／０９０３２９号及びＷＯ２０１６／０９０３１２号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３３７号を参照）。いく
つかの実施形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイ
ン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４号、Ｗ
Ｏ２０１５／０７００７８号及びＷＯ２０１５／０７００６１号を参照）。いくつかの実
施形態では、抗体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１６１３９０号を参照）。いく
つかの実施形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可
変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５
７号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体
部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２
０１６／２１０３６５号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに
特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例
えば、ＷＯ２０１６／１９１２４６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７号を参照）。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（
ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４号を参照）
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＶＨドメインとＣＨ１ドメインとを含む１つの
Ｆａｂ鎖と、ＶＬドメインとＣＬドメインとを含む別のＦａｂ鎖とを含む、Ｆａｂである
。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７及び８６のいずれか
１つのアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８又は８７のアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ酸配
列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＣＬドメインは、配列番号
４８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。
ｃａＴＣＲ構築物
のｃａＴＣＲのいずれかによれば、抗体部分は、標的抗原に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号５４のアミノ酸配列を含むか、これらから本質
的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号５５のアミノ酸配列を
含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含ま
れるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号５６の
アミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及
び／又は配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらか
らなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、
抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、その内容が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、
２０１８年３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０，９５５号を参照）。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、これ
らから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号６９のアミ
ノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はそ
の中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異
的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば
、その内容が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１７年４月２６日に出願
されたＵＳＳＮ ６２／４９０，５８６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分
は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイ
ン）（例えば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこ
れらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９のアミノ酸配列を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含
む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可
変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７２２
０号及びＷＯ２０１６／１８７２１６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＲＯＲ２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８号を参照）。いくつかの実施形態では、
抗体部分は、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７号及びＷＯ２０１６／０９０
３２０号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体
部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２
０１６／０９０３２９号及びＷＯ２０１６／０９０３１２号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３３７号を参照）。いく
つかの実施形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイ
ン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４号、Ｗ
Ｏ２０１５／０７００７８号及びＷＯ２０１５／０７００６１号を参照）。いくつかの実
施形態では、抗体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１６１３９０号を参照）。いく
つかの実施形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可
変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５
７号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体
部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２
０１６／２１０３６５号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに
特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例
えば、ＷＯ２０１６／１９１２４６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７号を参照）。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（
ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４号を参照）
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＶＨドメインとＣＨ１ドメインとを含む１つの
Ｆａｂ鎖と、ＶＬドメインとＣＬドメインとを含む別のＦａｂ鎖とを含む、Ｆａｂである
。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７及び８６のいずれか
１つのアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８又は８７のアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ酸配
列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＣＬドメインは、配列番号
４８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。
ｃａＴＣＲ構築物
【0134】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する抗体部分であって、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤ
に結合する、抗体部分とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる
群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、
ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ
５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に
結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結
合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ
３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを
含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、
ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安
定化モジュールは、ＴＣＲＭと抗体部分との間に位置している。
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する抗体部分であって、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤ
に結合する、抗体部分とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる
群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、
ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ
５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に
結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結
合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ
３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを
含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、
ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安
定化モジュールは、ＴＣＲＭと抗体部分との間に位置している。
【0135】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のいずれか１つを含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号８及び１４
～２６のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる第２のＴ
ＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１
のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）
標的抗原に特異的に結合する抗体部分であって、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又は
第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部分とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙したｃａＴＣＲ
のいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ
４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み
、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定さ
れないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢ
Ｖ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、
これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又
は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いく
つかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又は
その多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸
配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続
ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメイ
ンは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ
（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセ
サリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定
化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を
有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジ
スルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及
び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態で
は、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在
する。
列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のいずれか１つを含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号８及び１４
～２６のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる第２のＴ
ＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１
のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）
標的抗原に特異的に結合する抗体部分であって、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又は
第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部分とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙したｃａＴＣＲ
のいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ
４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み
、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定さ
れないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢ
Ｖ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、
これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又
は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いく
つかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又は
その多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸
配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続
ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメイ
ンは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ
（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセ
サリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定
化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を
有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジ
スルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及
び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態で
は、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在
する。
【0136】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）第
１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤであ
って、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配列番号９及び８、７
及び１４、７及び１５、７及び１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及び１
９、７及び２０、７及び２１、７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２５、
又は１３及び２６のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからな
り、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分
であって、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部分
とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。例えば、いくつかの実施形態では、標的抗原に特異
的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配列番号９のアミノ酸配列を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列
番号８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる第２のＴ
ＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ
）標的抗原に特異的に結合する抗体部分であって、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又
は第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部分とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓ
ｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されな
いが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、Ｂ
ＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表
面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複
合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－
Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈ
ｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク
質に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド
又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプ
チド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは
、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペ
プチドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施
形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合
する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその
多様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列
（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣ
Ｄ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安
定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安
定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択され
る少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を
強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合
体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又は
ドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。
１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤであ
って、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配列番号９及び８、７
及び１４、７及び１５、７及び１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及び１
９、７及び２０、７及び２１、７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２５、
又は１３及び２６のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからな
り、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分
であって、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部分
とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。例えば、いくつかの実施形態では、標的抗原に特異
的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配列番号９のアミノ酸配列を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列
番号８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる第２のＴ
ＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ
）標的抗原に特異的に結合する抗体部分であって、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又
は第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部分とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓ
ｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されな
いが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、Ｂ
ＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表
面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複
合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－
Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈ
ｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク
質に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド
又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプ
チド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは
、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペ
プチドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施
形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合
する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその
多様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列
（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣ
Ｄ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安
定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安
定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択され
る少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を
強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合
体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又は
ドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。
【0137】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号１０のアミノ酸配列を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列番
号１６のアミノ酸配列を有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員す
ることが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分であって
、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部分とを含む
、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、
（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７
、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、こ
れらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されな
いが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－
ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これ
らの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又はその
多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列
又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプ
チドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤ
は、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは
、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（Ｃ
Ｄ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリ
ー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ド
メインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイ
ン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有す
る。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスル
フィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ
３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８
の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つ
のＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、
任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する
。
列番号１０のアミノ酸配列を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列番
号１６のアミノ酸配列を有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員す
ることが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分であって
、抗体部分が、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部分とを含む
、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、
（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７
、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、こ
れらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されな
いが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－
ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これ
らの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又はその
多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列
又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプ
チドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤ
は、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは
、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（Ｃ
Ｄ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリ
ー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ド
メインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイ
ン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有す
る。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスル
フィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ
３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８
の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つ
のＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、
任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する
。
【0138】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤに結合する第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプ
チド鎖と、（ｂ）天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－
ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに結合する第２のＦａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含
む第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つ
のＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ
－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、第１のＦａｂ鎖
及び第２のＦａｂ鎖が、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成
する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、（ａ）第１のＦａｂ鎖は、Ｖ
Ｈ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み
、又は（ｂ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、
ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、
（ａ）第１のＴＣＲＤに結合するＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む第１のＦａｂ鎖を含
む第１のポリペプチド鎖と、（ｂ）第２のＴＣＲＤに結合するＶＬ及びＣＬ抗体ドメイン
を含む第２のＦａｂ鎖とを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、（ａ）第１の
ＴＣＲＤに結合するＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第１のＦａｂ鎖と、（ｂ）第２のＴ
ＣＲＤに結合するＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む第２のＦａｂ鎖とを含む。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方と、それらに結合するＦａｂ鎖との間にペプチ
ドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイ
ン中の残基との間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び
／又はＣＬドメインは、互いに対するＦａｂ鎖の結合親和性を高める１つ以上の改変を含
む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１とＣＬドメインが交換されており、その結果、Ｆａ
ｂ鎖の一方がＶＨ及びＣＬ抗体ドメインを含み、他方のＦａｂ鎖が、ＶＬ及びＣＨ１抗体
ドメインを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、限定されな
いが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、Ｂ
ＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表
面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、
ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、Ａ
ＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ
－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異
体を含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定
化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を
有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、
第１のＴＣＲＤとその結合したＦａｂ鎖との間に位置しており、他の安定化ドメインは、
第２のＴＣＲＤとその結合したＦａｂ鎖との間に位置している。
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤに結合する第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプ
チド鎖と、（ｂ）天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－
ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに結合する第２のＦａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含
む第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つ
のＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ
－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、第１のＦａｂ鎖
及び第２のＦａｂ鎖が、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成
する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、（ａ）第１のＦａｂ鎖は、Ｖ
Ｈ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み
、又は（ｂ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、
ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、
（ａ）第１のＴＣＲＤに結合するＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む第１のＦａｂ鎖を含
む第１のポリペプチド鎖と、（ｂ）第２のＴＣＲＤに結合するＶＬ及びＣＬ抗体ドメイン
を含む第２のＦａｂ鎖とを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、（ａ）第１の
ＴＣＲＤに結合するＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第１のＦａｂ鎖と、（ｂ）第２のＴ
ＣＲＤに結合するＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む第２のＦａｂ鎖とを含む。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方と、それらに結合するＦａｂ鎖との間にペプチ
ドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイ
ン中の残基との間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び
／又はＣＬドメインは、互いに対するＦａｂ鎖の結合親和性を高める１つ以上の改変を含
む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１とＣＬドメインが交換されており、その結果、Ｆａ
ｂ鎖の一方がＶＨ及びＣＬ抗体ドメインを含み、他方のＦａｂ鎖が、ＶＬ及びＣＨ１抗体
ドメインを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、限定されな
いが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、Ｂ
ＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表
面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、
ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、Ａ
ＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ
－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異
体を含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定
化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を
有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、
第１のＴＣＲＤとその結合したＦａｂ鎖との間に位置しており、他の安定化ドメインは、
第２のＴＣＲＤとその結合したＦａｂ鎖との間に位置している。
【0139】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のいずれか１つを含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに結合する第１のＦａｂ
鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、（ｂ）配列番号８及び
１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれ
らからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに結合する第２のＦａｂ鎖を含む第
２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲ
Ｍを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないも
のであり、第１のＦａｂ鎖及び第２のＦａｂ鎖が、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様
抗原結合モジュールを形成する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙したｃａＴＣＲのいずれかに従
って選択される。いくつかの実施形態では、（ａ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗
体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、又は（ｂ）第
１のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１
抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７
及び８６のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４
８又は８７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番
号３７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＣＬド
メインは、配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれら
からなる。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、限定されないが、
ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ
、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原
に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ペプチ
ド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、
ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、
ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含
む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は
第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。い
くつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合
によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ド
メインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸
配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグ
ナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、Ｃ
Ｄ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含
む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメ
インを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイ
ンが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態で
は、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合す
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群
から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能であ
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容
体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ
－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモ
ジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。
列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のいずれか１つを含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに結合する第１のＦａｂ
鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、（ｂ）配列番号８及び
１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれ
らからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに結合する第２のＦａｂ鎖を含む第
２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲ
Ｍを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないも
のであり、第１のＦａｂ鎖及び第２のＦａｂ鎖が、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様
抗原結合モジュールを形成する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙したｃａＴＣＲのいずれかに従
って選択される。いくつかの実施形態では、（ａ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗
体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、又は（ｂ）第
１のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１
抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７
及び８６のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４
８又は８７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番
号３７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＣＬド
メインは、配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれら
からなる。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、限定されないが、
ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ
、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原
に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ペプチ
ド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、
ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、
ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含
む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は
第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。い
くつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合
によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ド
メインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸
配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグ
ナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、Ｃ
Ｄ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含
む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメ
インを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイ
ンが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態で
は、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合す
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群
から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能であ
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容
体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ
－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモ
ジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。
【0140】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）第
１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに結合する第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合
ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに結
合する第２のＦａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖とを含
み、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配列番号９及び８、７及
び１４、７及び１５、７及び１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及び１９
、７及び２０、７及び２１、７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２５、又
は１３及び２６のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり
、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＦａｂ鎖及び第２のＦａｂ鎖が、標的抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成する、ｃａＴＣＲが提供される
。いくつかの実施形態では、（ａ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含
み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、又は（ｂ）第１のＦａｂ鎖は
、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを
含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７及び８６のいず
れか１つのアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８又は８７のア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ
酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＣＬドメインは、配列
番号４８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いく
つかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ
２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ
及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合
する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ペプチド／ＭＨＣ複合
体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ
７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉ
ｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質
に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又
はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチ
ド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、
配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプ
チドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形
態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合す
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多
様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（
例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ
４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定
化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣ
Ｒを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定
化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメイ
ンを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強
化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体
の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はド
メインの間にスペーサーモジュールが存在する。
１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに結合する第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合
ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに結
合する第２のＦａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖とを含
み、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配列番号９及び８、７及
び１４、７及び１５、７及び１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及び１９
、７及び２０、７及び２１、７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２５、又
は１３及び２６のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり
、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＦａｂ鎖及び第２のＦａｂ鎖が、標的抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成する、ｃａＴＣＲが提供される
。いくつかの実施形態では、（ａ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含
み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、又は（ｂ）第１のＦａｂ鎖は
、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを
含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７及び８６のいず
れか１つのアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８又は８７のア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ
酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＣＬドメインは、配列
番号４８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いく
つかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ
２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ
及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合
する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ペプチド／ＭＨＣ複合
体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ
７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉ
ｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質
に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又
はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチ
ド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、
配列番号３１又は３２のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプ
チドは、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形
態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合す
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多
様体を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（
例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ
４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定
化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣ
Ｒを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定
化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメイ
ンを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強
化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体
の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はド
メインの間にスペーサーモジュールが存在する。
【0141】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）配
列番号１０のアミノ酸配列を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに結合する
第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、配列番号
１６のアミノ酸配列を有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに結合する第２の
Ｆａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のＴ
ＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＦａｂ鎖及び第２のＦａｂ鎖が、標的抗原に特異的
に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつか
の実施形態では、（ａ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２の
Ｆａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、又は（ｂ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＬ及び
ＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７及び８６のいずれか１つの
アミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８又は８７のアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ酸配列を含
むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＣＬドメインは、配列番号４８の
アミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施
形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲ
Ｌ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いく
つかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的
に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－
ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ
Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラ
グメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はその
フラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３
１又は３２のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配
列番号３３又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／
又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態で
は、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む
。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、Ｃ
Ｄ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）
を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュ
ールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定
化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイ
ンと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含む
ＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化するこ
とができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの
間にスペーサーモジュールが存在する。
列番号１０のアミノ酸配列を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに結合する
第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、配列番号
１６のアミノ酸配列を有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに結合する第２の
Ｆａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のＴ
ＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＦａｂ鎖及び第２のＦａｂ鎖が、標的抗原に特異的
に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつか
の実施形態では、（ａ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２の
Ｆａｂ鎖は、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、又は（ｂ）第１のＦａｂ鎖は、ＶＬ及び
ＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖は、ＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７及び８６のいずれか１つの
アミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８又は８７のアミノ酸配列
を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ酸配列を含
むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、ＣＬドメインは、配列番号４８の
アミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施
形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲ
Ｌ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いく
つかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的
に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－
ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ
Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラ
グメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はその
フラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３
１又は３２のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配
列番号３３又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／
又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態で
は、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む
。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、Ｃ
Ｄ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）
を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュ
ールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定
化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイ
ンと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含む
ＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化するこ
とができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの
間にスペーサーモジュールが存在する。
【0142】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合するＦａｂ’であって、Ｆａｂ’が、ＶＨ、ＣＨ１及び部分的なヒンジ抗体ドメ
インを含む第１のＦａｂ’鎖と、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第２のＦａｂ’鎖とを
含み、第１のＦａｂ’鎖が、第１のＴＣＲＤ又は第２のＴＣＲＤに結合し、第２のＦａｂ
’鎖が、他のＴＣＲＤに結合する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲＤの一方又は両方と、それらに結合するＦａｂ’鎖との間にペプチドリンカーが存
在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイン中の残基との
間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメ
インは、互いに対するＦａｂ’鎖の結合親和性を高める１つ以上の改変を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＨ１とＣＬドメインが交換されており、その結果、第１のＦａｂ’鎖
が、ＶＨ、ＣＬ及び部分的なヒンジ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ’鎖が、ＶＬ及び
ＣＨ１抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ’は、限定されないが、Ｃ
Ｄ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、
ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に
特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ’は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特
異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏ
ｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来
する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態
では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその結合し
たＦａｂ’鎖との間に位置しており、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤとその結合
したＦａｂ’鎖との間に位置している。
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合するＦａｂ’であって、Ｆａｂ’が、ＶＨ、ＣＨ１及び部分的なヒンジ抗体ドメ
インを含む第１のＦａｂ’鎖と、ＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第２のＦａｂ’鎖とを
含み、第１のＦａｂ’鎖が、第１のＴＣＲＤ又は第２のＴＣＲＤに結合し、第２のＦａｂ
’鎖が、他のＴＣＲＤに結合する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲＤの一方又は両方と、それらに結合するＦａｂ’鎖との間にペプチドリンカーが存
在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイン中の残基との
間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメ
インは、互いに対するＦａｂ’鎖の結合親和性を高める１つ以上の改変を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＨ１とＣＬドメインが交換されており、その結果、第１のＦａｂ’鎖
が、ＶＨ、ＣＬ及び部分的なヒンジ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ’鎖が、ＶＬ及び
ＣＨ１抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ’は、限定されないが、Ｃ
Ｄ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、
ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に
特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ’は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特
異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏ
ｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来
する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態
では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその結合し
たＦａｂ’鎖との間に位置しており、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤとその結合
したＦａｂ’鎖との間に位置している。
【0143】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する（Ｆａｂ’）２であって、（Ｆａｂ’）２が、ＶＨ、ＣＨ１及び部分的なヒ
ンジ抗体ドメインを含む第１の（Ｆａｂ’）２鎖及び第２の（Ｆａｂ’）２鎖と、ＶＬ及
びＣＬ抗体ドメインを含む第３の（Ｆａｂ’）２鎖及び第４の（Ｆａｂ’）２鎖とを含み
、第１の（Ｆａｂ’）２鎖が、第１のＴＣＲＤ又は第２のＴＣＲＤに結合し、第２の（Ｆ
ａｂ’）２鎖が、他のＴＣＲＤに結合する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲＤの一方又は両方と、それらに結合する（Ｆａｂ’）２鎖との間にペプチ
ドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイ
ン中の残基との間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び
／又はＣＬドメインは、互いに対する（Ｆａｂ’）２鎖の結合親和性を高める１つ以上の
改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１とＣＬドメインが交換されており、その結
果、第１の（Ｆａｂ’）２鎖及び第２の（Ｆａｂ’）２鎖が、ＶＨ、ＣＬ及び部分的なヒ
ンジ抗体ドメインを含み、第３の（Ｆａｂ’）２鎖及び第４の（Ｆａｂ’）２鎖が、ＶＬ
及びＣＨ１抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、（Ｆａｂ’）２は、限定され
ないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、
ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞
表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、（Ｆａｂ’）２は、ペプチド／
ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰ
Ｖ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲ
ＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、
タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメイン
と第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣ
ＲＤとその結合した（Ｆａｂ’）２鎖との間に位置しており、他の安定化ドメインは、第
２のＴＣＲＤとその結合した（Ｆａｂ’）２鎖との間に位置している。
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する（Ｆａｂ’）２であって、（Ｆａｂ’）２が、ＶＨ、ＣＨ１及び部分的なヒ
ンジ抗体ドメインを含む第１の（Ｆａｂ’）２鎖及び第２の（Ｆａｂ’）２鎖と、ＶＬ及
びＣＬ抗体ドメインを含む第３の（Ｆａｂ’）２鎖及び第４の（Ｆａｂ’）２鎖とを含み
、第１の（Ｆａｂ’）２鎖が、第１のＴＣＲＤ又は第２のＴＣＲＤに結合し、第２の（Ｆ
ａｂ’）２鎖が、他のＴＣＲＤに結合する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲＤの一方又は両方と、それらに結合する（Ｆａｂ’）２鎖との間にペプチ
ドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイ
ン中の残基との間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び
／又はＣＬドメインは、互いに対する（Ｆａｂ’）２鎖の結合親和性を高める１つ以上の
改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１とＣＬドメインが交換されており、その結
果、第１の（Ｆａｂ’）２鎖及び第２の（Ｆａｂ’）２鎖が、ＶＨ、ＣＬ及び部分的なヒ
ンジ抗体ドメインを含み、第３の（Ｆａｂ’）２鎖及び第４の（Ｆａｂ’）２鎖が、ＶＬ
及びＣＨ１抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、（Ｆａｂ’）２は、限定され
ないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、
ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞
表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、（Ｆａｂ’）２は、ペプチド／
ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰ
Ｖ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲ
ＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、
タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメイン
と第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣ
ＲＤとその結合した（Ｆａｂ’）２鎖との間に位置しており、他の安定化ドメインは、第
２のＴＣＲＤとその結合した（Ｆａｂ’）２鎖との間に位置している。
【0144】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合するＦｖであって、Ｆｖが、ＶＨ抗体ドメインを含む第１のＦｖ鎖と、ＶＬ抗体
ドメインを含む第２のＦｖ鎖とを含み、第１のＦｖ鎖が、第１のＴＣＲＤ又は第２のＴＣ
ＲＤに結合し、第２のＦｖ鎖が、他のＴＣＲＤに結合する、ｃａＴＣＲが提供される。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方と、それらに結合するＦｖ鎖との間にペ
プチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、Ｆｖは、限定されないが、ＣＤ１
９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰ
ＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異
的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆｖは、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結
合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ
３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを
含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、
ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその結合したＦｖ鎖
との間に位置しており、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤとその結合したＦｖ鎖と
の間に位置している。
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合するＦｖであって、Ｆｖが、ＶＨ抗体ドメインを含む第１のＦｖ鎖と、ＶＬ抗体
ドメインを含む第２のＦｖ鎖とを含み、第１のＦｖ鎖が、第１のＴＣＲＤ又は第２のＴＣ
ＲＤに結合し、第２のＦｖ鎖が、他のＴＣＲＤに結合する、ｃａＴＣＲが提供される。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方と、それらに結合するＦｖ鎖との間にペ
プチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、Ｆｖは、限定されないが、ＣＤ１
９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰ
ＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異
的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆｖは、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結
合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ
３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを
含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、
ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその結合したＦｖ鎖
との間に位置しており、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤとその結合したＦｖ鎖と
の間に位置している。
【0145】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する第１のｓｃＦｖであって、第１のｓｃＦｖが、ＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを
含み、第１のｓｃＦｖが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部
分とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の
ｓｃＦｖに結合するか、又は第１のｓｃＦｖに結合しないＴＣＲＤに結合する第２の抗原
結合モジュールを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュールは、標
的抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュールは、標
的抗原以外の抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュ
ールは、第２のｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖとその結合し
たＴＣＲＤとの間、及び／又は第２のｓｃＦｖとその結合したｓｃＦｖ又はＴＣＲＤとの
間にペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、限定されない
が、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣ
ＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面
抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、ペプチド／ＭＨＣ複合
体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ
７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉ
ｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質
に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のｓｃＦｖとその
結合したＴＣＲＤとの間に位置しており、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤに結合
している。
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する第１のｓｃＦｖであって、第１のｓｃＦｖが、ＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを
含み、第１のｓｃＦｖが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗体部
分とを含む、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の
ｓｃＦｖに結合するか、又は第１のｓｃＦｖに結合しないＴＣＲＤに結合する第２の抗原
結合モジュールを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュールは、標
的抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュールは、標
的抗原以外の抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュ
ールは、第２のｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖとその結合し
たＴＣＲＤとの間、及び／又は第２のｓｃＦｖとその結合したｓｃＦｖ又はＴＣＲＤとの
間にペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、限定されない
が、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣ
ＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面
抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、ペプチド／ＭＨＣ複合
体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ
７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉ
ｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質
に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のｓｃＦｖとその
結合したＴＣＲＤとの間に位置しており、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤに結合
している。
【0146】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲであって、（ａ）天
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する第１のｓｃＦｖと、第２のｓｃＦｖを含み、第１のｓｃＦｖ及び第２のｓｃ
Ｆｖが、ＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含み、第１のｓｃＦｖが、第１のＴＣＲＤ又は第２
のＴＣＲＤに結合し、第２のｓｃＦｖが、他のＴＣＲＤに結合する、ｃａＴＣＲが提供さ
れる。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲＤは、標的抗原に特異的に結合する。いく
つかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖのアミノ酸配列を含むか、これ
らから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは
、標的抗原以外の抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖ及
び／又は第２のｓｃＦｖは、独立して、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２
、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５
を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつか
の実施形態では、第１のｓｃＦｖ及び／又は第２のｓｃＦｖは、独立して、ペプチド／Ｍ
ＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ
１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡ
Ｓ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タ
ンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと
第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第
２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いく
つかの実施形態では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のｓｃＦ
ｖとその結合したＴＣＲＤとの間に位置しており、他の安定化ドメインは、第２のｓｃＦ
ｖとその結合したＴＣＲＤとの間に位置している。
多重特異性ｃａＴＣＲ
然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを
含む第２のＴＣＲＤを含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、天然に存在しないものであり、（ｂ）標的抗原に特異
的に結合する第１のｓｃＦｖと、第２のｓｃＦｖを含み、第１のｓｃＦｖ及び第２のｓｃ
Ｆｖが、ＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含み、第１のｓｃＦｖが、第１のＴＣＲＤ又は第２
のＴＣＲＤに結合し、第２のｓｃＦｖが、他のＴＣＲＤに結合する、ｃａＴＣＲが提供さ
れる。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲＤは、標的抗原に特異的に結合する。いく
つかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖのアミノ酸配列を含むか、これ
らから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは
、標的抗原以外の抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖ及
び／又は第２のｓｃＦｖは、独立して、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２
、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５
を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつか
の実施形態では、第１のｓｃＦｖ及び／又は第２のｓｃＦｖは、独立して、ペプチド／Ｍ
ＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ
１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡ
Ｓ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タ
ンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと
第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第
２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いく
つかの実施形態では、第１の安定化ドメイン又は第２の安定化ドメインは、第１のｓｃＦ
ｖとその結合したＴＣＲＤとの間に位置しており、他の安定化ドメインは、第２のｓｃＦ
ｖとその結合したＴＣＲＤとの間に位置している。
多重特異性ｃａＴＣＲ
【0147】
本出願の一態様は、２つ以上（例えば、２、３、４、又はもっと多く）の異なる標的抗
原又はエピトープに特異的に結合する多重特異性ｃａＴＣＲを提供する。いくつかの実施
形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、２つ以上（例えば、２、３、４、又はもっと多く）
の異なる標的抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲ
は、同じ標的抗原上の２つ以上（例えば、２、３、４、又はもっと多く）の異なる標的抗
原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、それぞれの
抗原又はエピトープのための抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重
特異性ｃａＴＣＲは、少なくとも１つの抗原又はエピトープのための２個より多い抗原結
合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、抗原又はエピ
トープにそれぞれ特異的に結合する２つ以上（例えば、２、３、４、又はもっと多く）の
抗原結合ドメインを含む多重特異性抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では
、多重特異性ｃａＴＣＲは、二重特異性である。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃ
ａＴＣＲは、三重特異性である。
原又はエピトープに特異的に結合する多重特異性ｃａＴＣＲを提供する。いくつかの実施
形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、２つ以上（例えば、２、３、４、又はもっと多く）
の異なる標的抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲ
は、同じ標的抗原上の２つ以上（例えば、２、３、４、又はもっと多く）の異なる標的抗
原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、それぞれの
抗原又はエピトープのための抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重
特異性ｃａＴＣＲは、少なくとも１つの抗原又はエピトープのための２個より多い抗原結
合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、抗原又はエピ
トープにそれぞれ特異的に結合する２つ以上（例えば、２、３、４、又はもっと多く）の
抗原結合ドメインを含む多重特異性抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では
、多重特異性ｃａＴＣＲは、二重特異性である。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃ
ａＴＣＲは、三重特異性である。
【0148】
多重特異性分子は、少なくとも２つの異なる抗原又はエピトープに対する結合特異性を
有する分子である（例えば、二重特異性抗体は、２つの抗原又はエピトープに対する結合
特異性を有する）。２より大きい価数及び／又は特異性を有する多重特異性ｃａＴＣＲも
想定される。二重特異性抗体は、例えば、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ Ｕ．及びＫｏｎｔｅｒｍ
ａｎｎ Ｒ．Ｅ．（２０１７）ＭＡＢＳ、９（２）、１８２－２１２を参照。三重特異性
抗体を調製することができる。Ｔｕｔｔら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９
１）を参照。当業者は、当該技術分野において既知の個々の多重特異性分子の適切な特徴
を選択して、多重特異性ｃａＴＣＲを形成することができることを理解されたい。
有する分子である（例えば、二重特異性抗体は、２つの抗原又はエピトープに対する結合
特異性を有する）。２より大きい価数及び／又は特異性を有する多重特異性ｃａＴＣＲも
想定される。二重特異性抗体は、例えば、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ Ｕ．及びＫｏｎｔｅｒｍ
ａｎｎ Ｒ．Ｅ．（２０１７）ＭＡＢＳ、９（２）、１８２－２１２を参照。三重特異性
抗体を調製することができる。Ｔｕｔｔら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９
１）を参照。当業者は、当該技術分野において既知の個々の多重特異性分子の適切な特徴
を選択して、多重特異性ｃａＴＣＲを形成することができることを理解されたい。
【0149】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ（本明細書では「多重特異性ｃａＴＣＲ」とも呼
ばれる）であって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインと
第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重特異性（例えば、
二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（
ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭ
とを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する
、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全
て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－
ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を
含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフ
ィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－
ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又
は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニット
の細胞内ドメインに由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は
第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメント
である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例え
ば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０
由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モ
ジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを
安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ド
メインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施
形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメ
インなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天
然に存在するαβＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１
つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態
では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存
在する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、両方
とも天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つは、
天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭは、その由来となる膜
貫通ドメインと比較して５個までのアミノ酸置換（例えば、単一のアミノ酸置換）を含み
、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、その由来となる膜貫通ドメインと比較して５個まで
のアミノ酸置換（例えば、単一のアミノ酸置換）を含む。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸に対して近位
である。いくつかの実施形態では、１つ以上の置換アミノ酸は、ＣＤ３に対する結合に関
与する第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のアミノ酸に対して近位である。
いくつかの実施形態では、１つ以上の（例えば、それぞれの）置換アミノ酸は、それらの
対応する非置換アミノ酸よりも疎水性である。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－
ＴＭは、配列番号７及び９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、第２のＴＣＲ－
ＴＭは、配列番号８及び１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
ばれる）であって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインと
第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重特異性（例えば、
二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（
ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭ
とを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する
、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接
続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全
て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－
ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を
含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフ
ィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ
細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－
ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又
は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニット
の細胞内ドメインに由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は
第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメント
である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例え
ば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０
由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モ
ジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを
安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ド
メインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施
形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメ
インなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天
然に存在するαβＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１
つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態
では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存
在する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、両方
とも天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つは、
天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭは、その由来となる膜
貫通ドメインと比較して５個までのアミノ酸置換（例えば、単一のアミノ酸置換）を含み
、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、その由来となる膜貫通ドメインと比較して５個まで
のアミノ酸置換（例えば、単一のアミノ酸置換）を含む。いくつかの実施形態では、第１
のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸に対して近位
である。いくつかの実施形態では、１つ以上の置換アミノ酸は、ＣＤ３に対する結合に関
与する第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のアミノ酸に対して近位である。
いくつかの実施形態では、１つ以上の（例えば、それぞれの）置換アミノ酸は、それらの
対応する非置換アミノ酸よりも疎水性である。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－
ＴＭは、配列番号７及び９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、第２のＴＣＲ－
ＴＭは、配列番号８及び１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
【0150】
二重特異性ｃａＴＣＲの例示的な構造を図１３Ａ～１３Ｅに示し、ここで、標的抗原は
、ＣＤ１９及びＣＤ２２であるが、当業者は、他の標的抗原又はエピトープを標的とする
二重特異性ｃａＴＣＲを同じ構造フォーマットを使用して調製してもよいことを容易に理
解するだろう。
、ＣＤ１９及びＣＤ２２であるが、当業者は、他の標的抗原又はエピトープを標的とする
二重特異性ｃａＴＣＲを同じ構造フォーマットを使用して調製してもよいことを容易に理
解するだろう。
【0151】
例えば、ＤＶＤ ＩｇＧに由来する二重可変ドメイン（ＤＶＤ）（ＤｉＧｉａｍｍａｒ
ｉｎｏら、ｍＡｂｓ ３（５）：４８７－４９４を参照）を、ｃａＴＣＲ中の二重特異性
抗原結合モジュールとして使用することができる（図１３Ａ）。外側可変ドメインと内側
可変ドメインの融合のための種々のリンカーが開発され、ＤＶＤ－Ｉｇについて最適化さ
れており、このリンカーは、ＤＶＤモジュールを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築する
のに有用であろう。しかし、ＤＶＤモジュールにおける可変ドメインのスタッキング手法
は、内側可変ドメインの折りたたみ及び標的結合親和性に影響を与える場合がある。２つ
の可変ドメイン間のリンカーと、この２つの可変ドメインの順序は、ｃａＴＣＲの効能に
影響を与える場合がある。
ｉｎｏら、ｍＡｂｓ ３（５）：４８７－４９４を参照）を、ｃａＴＣＲ中の二重特異性
抗原結合モジュールとして使用することができる（図１３Ａ）。外側可変ドメインと内側
可変ドメインの融合のための種々のリンカーが開発され、ＤＶＤ－Ｉｇについて最適化さ
れており、このリンカーは、ＤＶＤモジュールを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築する
のに有用であろう。しかし、ＤＶＤモジュールにおける可変ドメインのスタッキング手法
は、内側可変ドメインの折りたたみ及び標的結合親和性に影響を与える場合がある。２つ
の可変ドメイン間のリンカーと、この２つの可変ドメインの順序は、ｃａＴＣＲの効能に
影響を与える場合がある。
【0152】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合
するＦｖと、第２の標的抗原に特異的に結合するＦａｂとを含む、多重特異性（例えば、
二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（
ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）とを含むＴＣＲ
Ｍとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進す
る、ｃａＴＣＲが提供される。
するＦｖと、第２の標的抗原に特異的に結合するＦａｂとを含む、多重特異性（例えば、
二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（
ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）とを含むＴＣＲ
Ｍとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進す
る、ｃａＴＣＲが提供される。
【0153】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１
－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端
まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｉ）
Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプ
チド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ２を含む第
２のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１
－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－Ｖ
Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端ま
で、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端か
らＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖
を含み、ＶＨ１とＶＬ１は、第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン
を形成し、ＶＨ２とＶＬ２は、第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメイ
ンを形成し、ＴＣＲＤ１とＴＣＲＤ２が、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃ
ａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～約５０
（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミノ酸長である。いくつ
かの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、配列番号８３～８５のいずれか１つのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じ長さを有する。いくつかの
実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ
１とＬ２は、異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、異なるアミ
ノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ａに示す。
－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端
まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｉ）
Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプ
チド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ２を含む第
２のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１
－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－Ｖ
Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端ま
で、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端か
らＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖
を含み、ＶＨ１とＶＬ１は、第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン
を形成し、ＶＨ２とＶＬ２は、第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメイ
ンを形成し、ＴＣＲＤ１とＴＣＲＤ２が、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃ
ａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～約５０
（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミノ酸長である。いくつ
かの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、配列番号８３～８５のいずれか１つのアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じ長さを有する。いくつかの
実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ
１とＬ２は、異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、異なるアミ
ノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ａに示す。
【0154】
ＣＯＤＶ－ＩｇＧに由来するクロスオーバー二重可変ドメイン（ＣＯＤＶ）（Ｓｔｅｉ
ｎｍｅｔｚら、ｍＡｂｓ（２０１６）、８（５）：８６７－８７８）を、ｃａＴＣＲ中の
二重特異性抗原結合モジュールとして使用することができる（図１３Ｂ）。ＣＯＤＶは、
各Ｆｖに対する比較的障害のない抗原結合部位を可能にする。重鎖及び軽鎖の可変ドメイ
ンの融合のための種々のリンカーが開発され、ＣＯＤＶ－Ｉｇについて最適化されている
。このリンカーは、ＣＯＤＶモジュールを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築するのに有
用であろう。しかし、ＣＯＤＶモジュールの適切な折り畳みは困難な場合があり、ＣＯＤ
Ｖモジュールにおいて使用される長いリンカーは、免疫原性の原因となる可能性があり、
タンパク質分解による切断を受けやすい場合がある。
ｎｍｅｔｚら、ｍＡｂｓ（２０１６）、８（５）：８６７－８７８）を、ｃａＴＣＲ中の
二重特異性抗原結合モジュールとして使用することができる（図１３Ｂ）。ＣＯＤＶは、
各Ｆｖに対する比較的障害のない抗原結合部位を可能にする。重鎖及び軽鎖の可変ドメイ
ンの融合のための種々のリンカーが開発され、ＣＯＤＶ－Ｉｇについて最適化されている
。このリンカーは、ＣＯＤＶモジュールを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築するのに有
用であろう。しかし、ＣＯＤＶモジュールの適切な折り畳みは困難な場合があり、ＣＯＤ
Ｖモジュールにおいて使用される長いリンカーは、免疫原性の原因となる可能性があり、
タンパク質分解による切断を受けやすい場合がある。
【0155】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合
する第１のＦｖと、第２の標的抗原に特異的に結合する第２のＦａｂとを含む、多重特異
性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）と
を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の
動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｃ
Ｈ１とＣＬを更に含む。
する第１のＦｖと、第２の標的抗原に特異的に結合する第２のＦａｂとを含む、多重特異
性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１
のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）と
を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の
動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｃ
Ｈ１とＣＬを更に含む。
【0156】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１
－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端
まで、ＶＬ２－Ｌ２－ＶＬ１－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉ
ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリ
ペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ２－Ｌ２－ＶＨ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ２を含
む第２のポリペプチド鎖を含み、ＶＨ１とＶＬ１は、第１の標的抗原に特異的に結合する
第１の抗原結合ドメインを形成し、ＶＨ２とＶＬ２は、第２の標的抗原に特異的に結合す
る第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１とＴＣＲＤ２が、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子の動員を促進することが可能なＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２
がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、Ｌ１及
び／又はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５～２０、約１５～３０、又は約３０～５０
）のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、配列番号８３
～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、
同じ長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じアミノ酸配列を有する
。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、異なる長さを有する。いくつかの実施形態で
は、Ｌ１とＬ２は、異なるアミノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１
３Ｂに示す。
－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端
まで、ＶＬ２－Ｌ２－ＶＬ１－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉ
ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリ
ペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ２－Ｌ２－ＶＨ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ２を含
む第２のポリペプチド鎖を含み、ＶＨ１とＶＬ１は、第１の標的抗原に特異的に結合する
第１の抗原結合ドメインを形成し、ＶＨ２とＶＬ２は、第２の標的抗原に特異的に結合す
る第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１とＴＣＲＤ２が、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子の動員を促進することが可能なＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２
がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、Ｌ１及
び／又はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５～２０、約１５～３０、又は約３０～５０
）のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、配列番号８３
～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、
同じ長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じアミノ酸配列を有する
。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、異なる長さを有する。いくつかの実施形態で
は、Ｌ１とＬ２は、異なるアミノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１
３Ｂに示す。
【0157】
ｓｃＦｖ融合タンパク質に由来する二重特異性抗原結合モジュール、例えば、Ｃｈｅｎ
ら、ｍＡｂｓ ８（４）：７６１－７７４に記載されるものを、二重特異性ｃａＴＣＲで
使用してもよい（図１３Ｃ）。同様の融合フォーマットを有する二重特異性抗体の発現は
、このフォーマットの適切な折り畳み及び安定性を示している。ｓｃＦｖを定常ドメイン
に融合させるための種々のリンカーが開発され、これらの二重特異性抗体について最適化
されている。このリンカーは、同様のｓｃＦｖ融合ドメインを有する二重特異性ｃａＴＣ
Ｒを構築するのに有用であろう。しかし、ｓｃＦｖ間の立体障害が、標的抗原に対するｓ
ｃＦｖの結合を損なう場合がある。
ら、ｍＡｂｓ ８（４）：７６１－７７４に記載されるものを、二重特異性ｃａＴＣＲで
使用してもよい（図１３Ｃ）。同様の融合フォーマットを有する二重特異性抗体の発現は
、このフォーマットの適切な折り畳み及び安定性を示している。ｓｃＦｖを定常ドメイン
に融合させるための種々のリンカーが開発され、これらの二重特異性抗体について最適化
されている。このリンカーは、同様のｓｃＦｖ融合ドメインを有する二重特異性ｃａＴＣ
Ｒを構築するのに有用であろう。しかし、ｓｃＦｖ間の立体障害が、標的抗原に対するｓ
ｃＦｖの結合を損なう場合がある。
【0158】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合
する第１のｓｃＦｖと、第２の標的抗原に特異的に結合する第２のｓｃＦｖとを含む、多
重特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含
む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ
２）とを含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
は、ＣＨ１とＣＬを更に含む。
する第１のｓｃＦｖと、第２の標的抗原に特異的に結合する第２のｓｃＦｖとを含む、多
重特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含
む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ
２）とを含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
は、ＣＨ１とＣＬを更に含む。
【0159】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦ
ｖ１－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで
、ｓｃＦｖ２－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｉ）Ｎ末
端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖
と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ１－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプ
チド鎖を含み、ここで、ｓｃＦｖ１は、第１の標的抗原に特異的に結合し、ｓｃＦｖ２は
、第２の標的抗原に特異的に結合し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、少なくとも１つのＴ
ＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２がペプチ
ドリンカーである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又は
Ｌ２は、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミ
ノ酸長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、配列番号８３～８５の
いずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じ長さ
を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じアミノ酸配列を有する。いくつ
かの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１
とＬ２は、異なるアミノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ｃに示
す。
ｖ１－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで
、ｓｃＦｖ２－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｉ）Ｎ末
端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖
と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ１－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプ
チド鎖を含み、ここで、ｓｃＦｖ１は、第１の標的抗原に特異的に結合し、ｓｃＦｖ２は
、第２の標的抗原に特異的に結合し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、少なくとも１つのＴ
ＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２がペプチ
ドリンカーである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又は
Ｌ２は、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミ
ノ酸長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、配列番号８３～８５の
いずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じ長さ
を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、同じアミノ酸配列を有する。いくつ
かの実施形態では、Ｌ１とＬ２は、異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１
とＬ２は、異なるアミノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ｃに示
す。
【0160】
ＩｇＧ－ｓｃＦｖ二重特異性抗体又はＦａｂ－ｓｃＦｖ－Ｆｃ二重特異性抗体に由来す
る二重特異性抗原結合モジュールを、二重特異性ｃａＴＣＲに使用してもよい。あるフォ
ーマット（図１３Ｄ）において、ｓｃＦｖは、ＦａｂのＶＨ又はＶＬのいずれかに接続し
、ｓｃＦｖの可撓性を大きくし、それにより、Ｆａｂのその標的抗原へのアクセスを大き
くすることを可能にする。しかしながら、ｓｃＦｖ－Ｆａｂモジュールには、安全性の問
題があり得る。第２のフォーマット（図１３Ｅ）において、Ｆａｂは、第１のＴＣＲＤに
融合し、ｓｃＦｖは、第２のＴＣＲＤに融合する。
る二重特異性抗原結合モジュールを、二重特異性ｃａＴＣＲに使用してもよい。あるフォ
ーマット（図１３Ｄ）において、ｓｃＦｖは、ＦａｂのＶＨ又はＶＬのいずれかに接続し
、ｓｃＦｖの可撓性を大きくし、それにより、Ｆａｂのその標的抗原へのアクセスを大き
くすることを可能にする。しかしながら、ｓｃＦｖ－Ｆａｂモジュールには、安全性の問
題があり得る。第２のフォーマット（図１３Ｅ）において、Ｆａｂは、第１のＴＣＲＤに
融合し、ｓｃＦｖは、第２のＴＣＲＤに融合する。
【0161】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合
するｓｃＦｖと、第２の標的抗原に特異的に結合するＦａｂとを含む、多重特異性（例え
ば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲ
Ｄ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）とを含むＴ
ＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促
進する、ｃａＴＣＲが提供される。
するｓｃＦｖと、第２の標的抗原に特異的に結合するＦａｂとを含む、多重特異性（例え
ば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲ
Ｄ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）とを含むＴ
ＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促
進する、ｃａＴＣＲが提供される。
【0162】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦ
ｖ－Ｌ１－ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端
まで、ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｉ）Ｎ末端からＣ
末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端
まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖を含み、こ
こで、ｓｃＦＶは、第１の標的抗原に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬは、第２の標的抗原
に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、少
なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１
及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では
、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１
５～３０）のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、配列
番号８３～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを
図１３Ｄに示す。
ｖ－Ｌ１－ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端
まで、ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｉ）Ｎ末端からＣ
末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端
まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖を含み、こ
こで、ｓｃＦＶは、第１の標的抗原に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬは、第２の標的抗原
に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、少
なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１
及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では
、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１
５～３０）のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、配列
番号８３～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを
図１３Ｄに示す。
【0163】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－
ＣＬ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－
ＣＨ１を含む第２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＴＣＲ
Ｄ２を含む第３のポリペプチド鎖；（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－Ｌ１
－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬを含む
第２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第
３のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を
含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１を含む第２のポリペ
プチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬ－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペ
プチド鎖；又は（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬを含む第２のポリペプチド鎖と
、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖
を含み、ここで、ｓｃＦＶは、第１の標的抗原に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬは、第２
の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲ
Ｄ２は、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形
成し、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実
施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５
、又は約１５～３０）のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ
２は、配列番号８３～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。例示的な二重特異性ｃ
ａＴＣＲを図１３Ｅに示す。ｓｃＦｖとＴＣＲＤとの間のペプチドリンカーの長さと、Ｆ
ａｂとＴＣＲＤとの間のペプチドリンカーの長さは、その標的抗原に対するｓｃＦｖ及び
Ｆａｂのアクセス性に影響を与え得るように最適化することができる。
ＣＬ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－
ＣＨ１を含む第２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＴＣＲ
Ｄ２を含む第３のポリペプチド鎖；（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－Ｌ１
－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬを含む
第２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第
３のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を
含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１を含む第２のポリペ
プチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬ－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペ
プチド鎖；又は（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬを含む第２のポリペプチド鎖と
、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖
を含み、ここで、ｓｃＦＶは、第１の標的抗原に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬは、第２
の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲ
Ｄ２は、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形
成し、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実
施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５
、又は約１５～３０）のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ
２は、配列番号８３～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。例示的な二重特異性ｃ
ａＴＣＲを図１３Ｅに示す。ｓｃＦｖとＴＣＲＤとの間のペプチドリンカーの長さと、Ｆ
ａｂとＴＣＲＤとの間のペプチドリンカーの長さは、その標的抗原に対するｓｃＦｖ及び
Ｆａｂのアクセス性に影響を与え得るように最適化することができる。
【0164】
多重特異性ｃａＴＣＲの多重特異性抗原結合モジュールは、標的抗原又はエピトープの
任意の好適な組み合わせに特異的に結合し得る。いくつかの実施形態では、多重特異性抗
原結合モジュールは、少なくとも１つの細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実
施形態では、少なくとも１つの細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４
７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５からなる
群から選択され、これらの多様体又は変異体を含む。いくつかの実施形態では、多重特異
性抗原結合モジュールは、少なくとも１つのペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合する
。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのペプチド／ＭＨＣ複合体は、ＷＴ－１、Ａ
ＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ
－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡからなる群から選択され、これら
の多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来するペプチドを含む。いくつかの実施形態
では、多重特異性抗原結合モジュールは、第１の細胞表面抗原及び第２の細胞表面抗原に
特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、ＣＤ１
９及びＣＤ２２に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジ
ュールは、ＣＤ１９及びＣＤ２０に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特
異性抗原結合モジュールは、第１のペプチド／ＭＨＣ複合体及び第２のペプチド／ＭＨＣ
複合体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは
、細胞表面抗原及びペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合する。
任意の好適な組み合わせに特異的に結合し得る。いくつかの実施形態では、多重特異性抗
原結合モジュールは、少なくとも１つの細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実
施形態では、少なくとも１つの細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４
７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５からなる
群から選択され、これらの多様体又は変異体を含む。いくつかの実施形態では、多重特異
性抗原結合モジュールは、少なくとも１つのペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合する
。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのペプチド／ＭＨＣ複合体は、ＷＴ－１、Ａ
ＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ
－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡからなる群から選択され、これら
の多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来するペプチドを含む。いくつかの実施形態
では、多重特異性抗原結合モジュールは、第１の細胞表面抗原及び第２の細胞表面抗原に
特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、ＣＤ１
９及びＣＤ２２に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジ
ュールは、ＣＤ１９及びＣＤ２０に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特
異性抗原結合モジュールは、第１のペプチド／ＭＨＣ複合体及び第２のペプチド／ＭＨＣ
複合体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは
、細胞表面抗原及びペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合する。
【0165】
第１の抗原結合ドメイン及び第２の抗原結合ドメインは、好適な抗体に由来する抗体部
分であってもよい。例示的な抗ＣＤ１９抗体及び抗ＣＤ２２抗体は、当該技術分野におい
て既知である。例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２号に記載されている抗ＣＤ１９抗
体、及び２０１８年３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０，９５５号（その内
容が、全体的に本明細書に参考として組み込まれる）に記載されている抗ＣＤ２２抗体を
参照。
分であってもよい。例示的な抗ＣＤ１９抗体及び抗ＣＤ２２抗体は、当該技術分野におい
て既知である。例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２号に記載されている抗ＣＤ１９抗
体、及び２０１８年３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０，９５５号（その内
容が、全体的に本明細書に参考として組み込まれる）に記載されている抗ＣＤ２２抗体を
参照。
【0166】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ａ）ＣＤ１９に特異的に結合する第
１の抗原結合ドメインとＣＤ２２に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重
特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む
第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２
）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。
１の抗原結合ドメインとＣＤ２２に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重
特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む
第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２
）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。
【0167】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ａ）配列番号７４のアミノ酸配列を
含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号
７８のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を
含むＶＬとを含む、ＣＤ１９に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインと、（ｉｉ）配
列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤ
Ｒ３を含むＶＨと、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－Ｃ
ＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む、ＣＤ２２に特異的に結合する第１の抗原
結合ドメインとを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ
）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つの
ＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実
施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインは、配列番号７１のア
ミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ１、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ２及
び配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号７５のアミ
ノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ１、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ２及び
配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。いくつかの実施
形態では、ＣＤ２２に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインは、配列番号６２のアミ
ノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ１、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ２及び
配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号６６のアミノ
酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ２及び配
列番号６８のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。いくつかの実施形
態では、ＣＤ１９に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインは、配列番号７４のアミノ
酸配列を含むＶＨと、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む。いくつかの実施
形態では、ＣＤ２２に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインは、配列番号６５のアミ
ノ酸配列を含むＶＨと、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む。いくつかの実
施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインは、配列番号７９のア
ミノ酸配列を含むｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合す
る第１の抗原結合ドメインは、配列番号７０のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖを含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＤ１は、配列番号８０のアミノ酸配列を含み、ＴＣＲＤ２は
、配列番号８１のアミノ酸配列を含むか、又はＴＣＲＤ１は、配列番号８１のアミノ酸配
列を含み、ＴＣＲＤ２は、配列番号８０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＤ１に融合するＣＨ１と、ＴＣＲＤ２に融合するＣＬとを含むか
、又はＴＣＲＤ１に融合するＣＬと、ＴＣＲＤ２に融合するＣＨ１とを含む。いくつかの
実施形態では、ＣＨ１は、配列番号３７のアミノ酸配列を含み、ＣＬは、配列番号４８の
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及びＣＬは、二量体形成を安定化
させる１つ以上の変異を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１は、配列番号８６のアミ
ノ酸配列を含み、ＣＬは、配列番号８７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では
、第１の抗原結合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチド
リンカーを介して、第２の抗原結合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶ
Ｌ）に融合する。いくつかの実施形態では、第１の抗原結合ドメイン又はそのフラグメン
ト（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチドリンカーを介して、ＣＨ１又はＣＬに融合する
。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、Ｖ
Ｈ又はＶＬ）は、ペプチドリンカーを介して、ＣＨ１又はＣＬに融合する。いくつかの実
施形態では、ペプチドリンカーは、約５～約５０アミノ酸長である。いくつかの実施形態
では、ペプチドリンカーは、配列番号８３～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号
７８のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を
含むＶＬとを含む、ＣＤ１９に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインと、（ｉｉ）配
列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤ
Ｒ３を含むＶＨと、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－Ｃ
ＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む、ＣＤ２２に特異的に結合する第１の抗原
結合ドメインとを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ
）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つの
ＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実
施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインは、配列番号７１のア
ミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ１、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ２及
び配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号７５のアミ
ノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ１、配列番号７６のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ２及び
配列番号７７のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。いくつかの実施
形態では、ＣＤ２２に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインは、配列番号６２のアミ
ノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ１、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ２及び
配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号６６のアミノ
酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ１、配列番号６７のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ２及び配
列番号６８のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。いくつかの実施形
態では、ＣＤ１９に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインは、配列番号７４のアミノ
酸配列を含むＶＨと、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む。いくつかの実施
形態では、ＣＤ２２に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインは、配列番号６５のアミ
ノ酸配列を含むＶＨと、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む。いくつかの実
施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインは、配列番号７９のア
ミノ酸配列を含むｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合す
る第１の抗原結合ドメインは、配列番号７０のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖを含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＤ１は、配列番号８０のアミノ酸配列を含み、ＴＣＲＤ２は
、配列番号８１のアミノ酸配列を含むか、又はＴＣＲＤ１は、配列番号８１のアミノ酸配
列を含み、ＴＣＲＤ２は、配列番号８０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＤ１に融合するＣＨ１と、ＴＣＲＤ２に融合するＣＬとを含むか
、又はＴＣＲＤ１に融合するＣＬと、ＴＣＲＤ２に融合するＣＨ１とを含む。いくつかの
実施形態では、ＣＨ１は、配列番号３７のアミノ酸配列を含み、ＣＬは、配列番号４８の
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及びＣＬは、二量体形成を安定化
させる１つ以上の変異を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１は、配列番号８６のアミ
ノ酸配列を含み、ＣＬは、配列番号８７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では
、第１の抗原結合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチド
リンカーを介して、第２の抗原結合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶ
Ｌ）に融合する。いくつかの実施形態では、第１の抗原結合ドメイン又はそのフラグメン
ト（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチドリンカーを介して、ＣＨ１又はＣＬに融合する
。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、Ｖ
Ｈ又はＶＬ）は、ペプチドリンカーを介して、ＣＨ１又はＣＬに融合する。いくつかの実
施形態では、ペプチドリンカーは、約５～約５０アミノ酸長である。いくつかの実施形態
では、ペプチドリンカーは、配列番号８３～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
【0168】
いくつかの実施形態では、ＣＤ１９及びＣＤ２０に特異的に結合するｃａＴＣＲであっ
て、（ｉ）配列番号８８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号８９のア
ミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列を含む第１
のポリペプチドと、配列番号９１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｉｉｉ）
配列番号９２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号９３のアミノ酸配列
を含む第２のポリペプチド、（ｉｖ）配列番号９４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプ
チドと、配列番号９５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｖ）配列番号９６の
アミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号９７のアミノ酸配列を含む第２のポ
リペプチド、（ｖｉ）配列番号９８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番
号９９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｖｉｉ）配列番号１００のアミノ酸
配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１０１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプ
チド、（ｖｉｉｉ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番
号１０３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｉｘ）配列番号１０４のアミノ酸
配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１０５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプ
チド、（ｘ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１０
７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｘｉ）配列番号１０８のアミノ酸配列を
含む第１のポリペプチドと、配列番号１０９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、
（ｘｉｉ）配列番号１１０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１１１
のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、又は（ｘｉｉｉ）配列番号１１２のアミノ酸
配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１１３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプ
チドを含む、ｃａＴＣＲが提供される。
て、（ｉ）配列番号８８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号８９のア
ミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列を含む第１
のポリペプチドと、配列番号９１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｉｉｉ）
配列番号９２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号９３のアミノ酸配列
を含む第２のポリペプチド、（ｉｖ）配列番号９４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプ
チドと、配列番号９５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｖ）配列番号９６の
アミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号９７のアミノ酸配列を含む第２のポ
リペプチド、（ｖｉ）配列番号９８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番
号９９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｖｉｉ）配列番号１００のアミノ酸
配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１０１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプ
チド、（ｖｉｉｉ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番
号１０３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｉｘ）配列番号１０４のアミノ酸
配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１０５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプ
チド、（ｘ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１０
７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、（ｘｉ）配列番号１０８のアミノ酸配列を
含む第１のポリペプチドと、配列番号１０９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、
（ｘｉｉ）配列番号１１０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１１１
のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド、又は（ｘｉｉｉ）配列番号１１２のアミノ酸
配列を含む第１のポリペプチドと、配列番号１１３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプ
チドを含む、ｃａＴＣＲが提供される。
【0169】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲであって、（ａ）ＣＤ１９に特異的に結合する第
１の抗原結合ドメインとＣＤ２０に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重
特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む
第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２
）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９に特異
的に結合する抗原結合ドメインは、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤ
Ｒ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号７８のアミノ酸配列を
含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。い
くつかの実施形態では、ＣＤ２０に特異的に結合する抗原結合ドメインは、配列番号５６
のアミノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含む
ＶＨと、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及び
ＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合
する第１の抗原結合ドメインは、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨを含み、ＶＬは
、配列番号７８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ２０に特異的に結
合する第２の抗原結合ドメインは、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨを含み、ＶＬ
は、配列番号５７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤ１は、配列
番号８０のアミノ酸配列を含み、ＴＣＲＤ２は、配列番号８１のアミノ酸配列を含むか、
又はＴＣＲＤ１は、配列番号８１のアミノ酸配列を含み、ＴＣＲＤ２は、配列番号８０の
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＤ１に融合するＣ
Ｈ１と、ＴＣＲＤ２に融合するＣＬとを含むか、又はＴＣＲＤ１に融合するＣＬと、ＴＣ
ＲＤ２に融合するＣＨ１とを含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１は、配列番号３７の
アミノ酸配列を含み、ＣＬは、配列番号４８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＨ１及びＣＬは、二量体形成を安定化させる１つ以上の変異を含む。いくつかの
実施形態では、ＣＨ１は、配列番号８６のアミノ酸配列を含み、ＣＬは、配列番号８７の
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の抗原結合ドメイン又はそのフラグ
メント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチドリンカーを介して、第２の抗原結合ドメイ
ン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）に融合する。いくつかの実施形態では
、第１の抗原結合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチド
リンカーを介して、ＣＨ１又はＣＬに融合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結
合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチドリンカーを介し
て、ＣＨ１又はＣＬに融合する。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、約５～
約５０アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、配列番号８３
～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
キメラ共刺激受容体（ＣＳＲ）構築物
１の抗原結合ドメインとＣＤ２０に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重
特異性（例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む
第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２
）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提供される。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９に特異
的に結合する抗原結合ドメインは、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤ
Ｒ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと、配列番号７８のアミノ酸配列を
含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。い
くつかの実施形態では、ＣＤ２０に特異的に結合する抗原結合ドメインは、配列番号５６
のアミノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含む
ＶＨと、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及び
ＬＣ－ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合
する第１の抗原結合ドメインは、配列番号７４のアミノ酸配列を含むＶＨを含み、ＶＬは
、配列番号７８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ２０に特異的に結
合する第２の抗原結合ドメインは、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＶＨを含み、ＶＬ
は、配列番号５７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤ１は、配列
番号８０のアミノ酸配列を含み、ＴＣＲＤ２は、配列番号８１のアミノ酸配列を含むか、
又はＴＣＲＤ１は、配列番号８１のアミノ酸配列を含み、ＴＣＲＤ２は、配列番号８０の
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＤ１に融合するＣ
Ｈ１と、ＴＣＲＤ２に融合するＣＬとを含むか、又はＴＣＲＤ１に融合するＣＬと、ＴＣ
ＲＤ２に融合するＣＨ１とを含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１は、配列番号３７の
アミノ酸配列を含み、ＣＬは、配列番号４８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＨ１及びＣＬは、二量体形成を安定化させる１つ以上の変異を含む。いくつかの
実施形態では、ＣＨ１は、配列番号８６のアミノ酸配列を含み、ＣＬは、配列番号８７の
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の抗原結合ドメイン又はそのフラグ
メント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチドリンカーを介して、第２の抗原結合ドメイ
ン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）に融合する。いくつかの実施形態では
、第１の抗原結合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチド
リンカーを介して、ＣＨ１又はＣＬに融合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結
合ドメイン又はそのフラグメント（例えば、ＶＨ又はＶＬ）は、ペプチドリンカーを介し
て、ＣＨ１又はＣＬに融合する。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、約５～
約５０アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、配列番号８３
～８５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
キメラ共刺激受容体（ＣＳＲ）構築物
【0170】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれか１つと、キメラ共刺
激受容体（ＣＳＲ）とを含む、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、キメラ共刺激受容
体（ＣＳＲ）は、（ｉ）標的リガンドと結合するか、又は相互作用することが可能なリガ
ンド結合モジュールと、（ｉｉ）膜貫通モジュールと、（ｉｉｉ）共刺激信号を免疫細胞
に与えることが可能な共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールとを含み、リガンド結合モ
ジュールと共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは、同じ分子に由来せず、ＣＳＲが、
機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠いている、免疫細胞が提供される。この
ような免疫細胞は、本明細書では「ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞」とも呼ばれる。
激受容体（ＣＳＲ）とを含む、免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、キメラ共刺激受容
体（ＣＳＲ）は、（ｉ）標的リガンドと結合するか、又は相互作用することが可能なリガ
ンド結合モジュールと、（ｉｉ）膜貫通モジュールと、（ｉｉｉ）共刺激信号を免疫細胞
に与えることが可能な共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールとを含み、リガンド結合モ
ジュールと共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは、同じ分子に由来せず、ＣＳＲが、
機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠いている、免疫細胞が提供される。この
ような免疫細胞は、本明細書では「ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞」とも呼ばれる。
【0171】
本明細書に記載のリガンド特異的キメラ共刺激受容体（ＣＳＲ）は、標的リガンド（例
えば、細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体）に特異的に結合し、標的リガンドが結
合すると機能的に発現する表面で免疫細胞を刺激することが可能である。ＣＳＲは、リガ
ンド結合特異性を与えるリガンド結合モジュールと、膜貫通モジュールと、免疫細胞を刺
激することが可能な共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールとを含む。ＣＳＲは、機能的
な一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、任
意の一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、
リガンド結合モジュールと、膜貫通モジュールと、共刺激シグナル伝達モジュールとを含
む、単一のポリペプチド鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、第１のポリペプ
チド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖
が合わさって、リガンド結合モジュール、膜貫通モジュール及び共刺激シグナル伝達モジ
ュールを形成する。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖は、別個のポリペプチド鎖であり、ＣＳＲは、多量体（例えば、二量体）である。い
くつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、例えば、ペプ
チド結合によって、又は別の化学結合（例えば、ジスルフィド結合）によって、共有結合
している。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、
少なくとも１つのジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、誘導性である。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の発現は、ｃａＴＣＲを介してシグナル伝達するときに誘
導性である。
えば、細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体）に特異的に結合し、標的リガンドが結
合すると機能的に発現する表面で免疫細胞を刺激することが可能である。ＣＳＲは、リガ
ンド結合特異性を与えるリガンド結合モジュールと、膜貫通モジュールと、免疫細胞を刺
激することが可能な共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールとを含む。ＣＳＲは、機能的
な一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、任
意の一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、
リガンド結合モジュールと、膜貫通モジュールと、共刺激シグナル伝達モジュールとを含
む、単一のポリペプチド鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、第１のポリペプ
チド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖
が合わさって、リガンド結合モジュール、膜貫通モジュール及び共刺激シグナル伝達モジ
ュールを形成する。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖は、別個のポリペプチド鎖であり、ＣＳＲは、多量体（例えば、二量体）である。い
くつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、例えば、ペプ
チド結合によって、又は別の化学結合（例えば、ジスルフィド結合）によって、共有結合
している。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖は、
少なくとも１つのジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、誘導性である。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の発現は、ｃａＴＣＲを介してシグナル伝達するときに誘
導性である。
【0172】
本発明のＣＳＲで使用するための共刺激免疫細胞シグナル伝達ドメインの例は、ｃａＴ
ＣＲと協働して作用し、ｃａＴＣＲ係合後のシグナル伝達を開始させることができる、Ｔ
細胞受容体（ＴＣＲ）の細胞質配列、及びこれらの配列の任意の誘導体又は多様体、及び
同じ機能能力を有する任意の合成配列が挙げられる。
ＣＲと協働して作用し、ｃａＴＣＲ係合後のシグナル伝達を開始させることができる、Ｔ
細胞受容体（ＴＣＲ）の細胞質配列、及びこれらの配列の任意の誘導体又は多様体、及び
同じ機能能力を有する任意の合成配列が挙げられる。
【0173】
いくつかの状況下では、ＴＣＲのみによって生成されたシグナルは、Ｔ細胞の完全な活
性化には不十分であり、二次シグナル又は共刺激シグナルも必要である。したがって、い
くつかの実施形態では、Ｔ細胞活性化には、ＴＣＲによる抗原依存性一次活性化を開始さ
せるもの（本明細書では、「一次Ｔ細胞シグナル伝達配列」と呼ばれる）と、二次シグナ
ル又は共刺激シグナルを与える抗原非依存性の様式で作用するもの（本明細書では、「共
刺激性Ｔ細胞シグナル伝達配列」と呼ばれる）といった、２つの別個のクラスの細胞内シ
グナル伝達配列が介在している。
性化には不十分であり、二次シグナル又は共刺激シグナルも必要である。したがって、い
くつかの実施形態では、Ｔ細胞活性化には、ＴＣＲによる抗原依存性一次活性化を開始さ
せるもの（本明細書では、「一次Ｔ細胞シグナル伝達配列」と呼ばれる）と、二次シグナ
ル又は共刺激シグナルを与える抗原非依存性の様式で作用するもの（本明細書では、「共
刺激性Ｔ細胞シグナル伝達配列」と呼ばれる）といった、２つの別個のクラスの細胞内シ
グナル伝達配列が介在している。
【0174】
刺激による経路で作用する一次免疫細胞シグナル伝達配列は、免疫受容体チロシン由来
の活性化モチーフ、又はＩＴＡＭとして知られる、シグナル伝達モチーフを含んでいても
よい。ＩＴＡＭを含有する一次免疫細胞シグナル伝達配列の例としては、ＴＣＲζ、Ｆｃ
Ｒγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ
７９ｂ及びＣＤ６６ｄに由来するものが挙げられる。「機能的」一次免疫細胞シグナル伝
達配列は、適切な受容体に作動可能に接続すると、免疫細胞活性化シグナルを形質導入す
ることが可能な配列である。「非機能的」一次免疫細胞シグナル伝達配列は、一次免疫細
胞シグナル伝達配列のフラグメント又は多様体を含んでいてもよいが、免疫細胞活性化シ
グナルを形質導入することができない。本明細書に記載のＣＳＲは、機能的一次免疫細胞
シグナル伝達配列（例えば、ＩＴＡＭを含む機能的シグナル伝達配列）を欠いている。い
くつかの実施形態では、ＣＳＲは、任意の一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。
の活性化モチーフ、又はＩＴＡＭとして知られる、シグナル伝達モチーフを含んでいても
よい。ＩＴＡＭを含有する一次免疫細胞シグナル伝達配列の例としては、ＴＣＲζ、Ｆｃ
Ｒγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ
７９ｂ及びＣＤ６６ｄに由来するものが挙げられる。「機能的」一次免疫細胞シグナル伝
達配列は、適切な受容体に作動可能に接続すると、免疫細胞活性化シグナルを形質導入す
ることが可能な配列である。「非機能的」一次免疫細胞シグナル伝達配列は、一次免疫細
胞シグナル伝達配列のフラグメント又は多様体を含んでいてもよいが、免疫細胞活性化シ
グナルを形質導入することができない。本明細書に記載のＣＳＲは、機能的一次免疫細胞
シグナル伝達配列（例えば、ＩＴＡＭを含む機能的シグナル伝達配列）を欠いている。い
くつかの実施形態では、ＣＳＲは、任意の一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。
【0175】
共刺激免疫細胞シグナル伝達配列は、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原
－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３
と特異的に結合するリガンドなどを含め、共刺激分子の細胞内ドメインの一部であっても
よい。
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原
－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３
と特異的に結合するリガンドなどを含め、共刺激分子の細胞内ドメインの一部であっても
よい。
【0176】
いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態
では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的
リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの
実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原とは異
なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、標的抗原を提示する細胞の表面上に提
示される分子である。例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲの標的抗原は、癌細
胞上に提示される癌関連抗原であり、標的リガンドは、インテグリンなどの癌細胞の表面
上に発現されるユビキチン分子である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患
関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガンドである
。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２
、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ又はＦ
ＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰ
Ｖ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ及びＰＳＡを含むタ
ンパク質に由来するペプチドを含む、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形
態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的
リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェック
ポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ
３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０及びＧＡＬ
９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつ
かの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１及びＴＮＦＲ
２を含む。
では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的
リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの
実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原とは異
なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、標的抗原を提示する細胞の表面上に提
示される分子である。例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲの標的抗原は、癌細
胞上に提示される癌関連抗原であり、標的リガンドは、インテグリンなどの癌細胞の表面
上に発現されるユビキチン分子である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患
関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガンドである
。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２
、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ又はＦ
ＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰ
Ｖ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ及びＰＳＡを含むタ
ンパク質に由来するペプチドを含む、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形
態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的
リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェック
ポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ
３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０及びＧＡＬ
９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつ
かの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１及びＴＮＦＲ
２を含む。
【0177】
いくつかの実施形態では、リガンド結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実
施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃ
Ｆｖ）である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ
２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ
及びＦＣＲＬ５を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、Ｗ
Ｔ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２
Ａ及びＰＳＡを含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）（例えば、配列番号５４のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、
又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号５５のアミノ酸配列を含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ
）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ
又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号５６のアミノ酸配
列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配
列番号５７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬ
ドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、その内容が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１８年
３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０，９５５号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、これらから本質
的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号６９のアミノ酸配列を
含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含ま
れるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、その内容
が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１７年４月２６日に出願されたＵＳ
ＳＮ ６２／４９０，５８６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ
３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例え
ば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからな
るＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的に
なり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７２２０号及びＷ
Ｏ２０１６／１８７２１６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ２
に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（
例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７号及びＷＯ２０１６／０９０３２０号を
参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤ
Ｒ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０
９０３２９号及びＷＯ２０１６／０９０３１２号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３３７号を参照）。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４号、ＷＯ２０１５
／０７００７８号及びＷＯ２０１５／０７００６１号を参照）。いくつかの実施形態では
、抗体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１６１３９０号を参照）。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７号を参照
）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部分のＣＤ
Ｒ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２
１０３６５号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１６／１９１２４６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）
を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／
又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４号を参照）。
施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃ
Ｆｖ）である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ
２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ
及びＦＣＲＬ５を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、限定されないが、Ｗ
Ｔ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２
Ａ及びＰＳＡを含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）（例えば、配列番号５４のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、
又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号５５のアミノ酸配列を含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ
）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ
又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号５６のアミノ酸配
列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配
列番号５７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬ
ドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、その内容が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１８年
３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０，９５５号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、これらから本質
的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号６９のアミノ酸配列を
含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含ま
れるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、その内容
が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１７年４月２６日に出願されたＵＳ
ＳＮ ６２／４９０，５８６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ
３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例え
ば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからな
るＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的に
なり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７２２０号及びＷ
Ｏ２０１６／１８７２１６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ２
に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（
例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７号及びＷＯ２０１６／０９０３２０号を
参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤ
Ｒ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０
９０３２９号及びＷＯ２０１６／０９０３１２号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３３７号を参照）。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４号、ＷＯ２０１５
／０７００７８号及びＷＯ２０１５／０７００６１号を参照）。いくつかの実施形態では
、抗体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１６１３９０号を参照）。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７号を参照
）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部分のＣＤ
Ｒ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２
１０３６５号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１６／１９１２４６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）
を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／
又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４号を参照）。
【0178】
いくつかの実施形態では、リガンド結合モジュールは、標的リガンドの受容体の細胞外
ドメインの全て又は一部である（又はこれらに由来する）。いくつかの実施形態では、受
容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－
４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７及びＴ
ＩＭ－３を含む。
ドメインの全て又は一部である（又はこれらに由来する）。いくつかの実施形態では、受
容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－
４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７及びＴ
ＩＭ－３を含む。
【0179】
いくつかの実施形態では、膜貫通モジュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３
ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ
３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１５４に由来す
る１つ以上の膜貫通ドメインを含む。
ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ
３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１５４に由来す
る１つ以上の膜貫通ドメインを含む。
【0180】
いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達モジュールは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球
機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ
３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメ
インの全て又は一部を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつか
の実施形態では、共刺激性シグナル伝達分子は、配列番号４９又は１１８のアミノ酸配列
を含むＣＤ２８のフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、共刺激性シグナル伝達
分子は、配列番号５０又は１１９のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢのフラグメントを含む
。いくつかの実施形態では、共刺激性シグナル伝達分子は、配列番号５１又は１２０のア
ミノ酸配列を含むＯＸ４０のフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、共刺激性シ
グナル伝達分子は、配列番号１２２又は１２３のアミノ酸配列を含むＣＤ２７のフラグメ
ントを含む。いくつかの実施形態では、共刺激性シグナル伝達分子は、配列番号１２４又
は１２５のアミノ酸配列を含むＣＤ３０のフラグメントを含む。いくつかの実施形態では
、共刺激性シグナル伝達分子は、配列番号１２１のアミノ酸配列を含むＣＤ８のフラグメ
ントを含む。
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球
機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ
３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメ
インの全て又は一部を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつか
の実施形態では、共刺激性シグナル伝達分子は、配列番号４９又は１１８のアミノ酸配列
を含むＣＤ２８のフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、共刺激性シグナル伝達
分子は、配列番号５０又は１１９のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢのフラグメントを含む
。いくつかの実施形態では、共刺激性シグナル伝達分子は、配列番号５１又は１２０のア
ミノ酸配列を含むＯＸ４０のフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、共刺激性シ
グナル伝達分子は、配列番号１２２又は１２３のアミノ酸配列を含むＣＤ２７のフラグメ
ントを含む。いくつかの実施形態では、共刺激性シグナル伝達分子は、配列番号１２４又
は１２５のアミノ酸配列を含むＣＤ３０のフラグメントを含む。いくつかの実施形態では
、共刺激性シグナル伝達分子は、配列番号１２１のアミノ酸配列を含むＣＤ８のフラグメ
ントを含む。
【0181】
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合モジュール、膜貫通モジュール及び
共刺激シグナル伝達モジュールのいずれかの間にスペーサーモジュールを更に含む。いく
つかの実施形態では、スペーサーモジュールは、２つのＣＳＲモジュールを接続する１つ
以上のペプチドリンカーを含む。いくつかの実施形態では、スペーサーモジュールは、約
５～約７０（例えば、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５
５、６０、６５又は７０のいずれか、これらの値の間にある任意の範囲を含む）のアミノ
酸長の１つ以上のペプチドリンカーを含む。
共刺激シグナル伝達モジュールのいずれかの間にスペーサーモジュールを更に含む。いく
つかの実施形態では、スペーサーモジュールは、２つのＣＳＲモジュールを接続する１つ
以上のペプチドリンカーを含む。いくつかの実施形態では、スペーサーモジュールは、約
５～約７０（例えば、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５
５、６０、６５又は７０のいずれか、これらの値の間にある任意の範囲を含む）のアミノ
酸長の１つ以上のペプチドリンカーを含む。
【0182】
いくつかの実施形態では、リガンド結合モジュール（例えば、抗体部分）は、（ａ）他
の分子に対する結合親和性の少なくとも約１０倍（例えば、少なくとも約１０倍、２０倍
、３０倍、４０倍、５０倍、７５倍、１００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００
倍、７５０倍、１０００倍のいずれか、又はもっと多くを含む）の親和性で標的抗原に特
異的に結合するか、又は（ｂ）他の分子に対する結合のＫｄの約１／１０以下（例えば、
１／１０以下、１／２０以下、１／３０以下、１／４０以下、１／５０以下、１／７５以
下、１／１００以下、１／２００以下、１／３００以下、１／４００以下、１／５００以
下、１／７５０以下、１／１０００以下のいずれか、又はもっと小さい）のＫｄで標的抗
原に特異的に結合する抗体部分を含む。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化細胞選別
（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降アッセイ（ＲＩＡ）などの当該技術分野において
既知の方法によって決定することができる。Ｋｄは、例えばＢｉａｃｏｒｅ機器を利用す
る表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ装置を利用する
動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当該技術分野で既知の方法によって決定するこ
とができる。
の分子に対する結合親和性の少なくとも約１０倍（例えば、少なくとも約１０倍、２０倍
、３０倍、４０倍、５０倍、７５倍、１００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００
倍、７５０倍、１０００倍のいずれか、又はもっと多くを含む）の親和性で標的抗原に特
異的に結合するか、又は（ｂ）他の分子に対する結合のＫｄの約１／１０以下（例えば、
１／１０以下、１／２０以下、１／３０以下、１／４０以下、１／５０以下、１／７５以
下、１／１００以下、１／２００以下、１／３００以下、１／４００以下、１／５００以
下、１／７５０以下、１／１０００以下のいずれか、又はもっと小さい）のＫｄで標的抗
原に特異的に結合する抗体部分を含む。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化細胞選別
（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降アッセイ（ＲＩＡ）などの当該技術分野において
既知の方法によって決定することができる。Ｋｄは、例えばＢｉａｃｏｒｅ機器を利用す
る表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ装置を利用する
動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当該技術分野で既知の方法によって決定するこ
とができる。
【0183】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンド（例えば、細胞表
面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体）に特異的に結合し、（ａ）標的リガンド結合ドメイ
ン（ＬＢＤ）と、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインとを含み
、ＣＳＲは、標的リガンド結合の際に機能的に発現される表面で免疫細胞を刺激すること
が可能である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗原である。いくつ
かの実施形態では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形
態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原と同じである
。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標
的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンドである
。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガンドである。いくつかの実施形
態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４
、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ又はＦＣＲＬ５である。い
くつかの実施形態では、癌関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ及びＰＳＡを含むタンパク質に由来する
ペプチドを含む、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガン
ドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免疫チ
ェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は、Ｐ
Ｄ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、Ｈ
ＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０及びＧＡＬ９を含む。いくつか
の実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態では、
アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１及びＴＮＦＲ２を含む。いくつか
の実施形態では、リガンド結合ドメインは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、
抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である
。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、標的リガンドの受容体の細胞外ド
メインの全て又は一部である（又はこれらに由来する）。いくつかの実施形態では、受容
体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４
、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７及びＴＩ
Ｍ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通モジュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ
３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、Ｃ
Ｄ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１
５４を含む、膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態で
は、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質（ｆＴＭＰ）のフラグメントを含み、ｆＴＭＰは、ＣＳ
Ｒ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０
、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、
ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む、免疫細胞共
刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、これらから本質的になり、又はこれ
らからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免疫細胞共刺激分子（ｆＣＳＭ）のフ
ラグメントを含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメインと、ＣＳＲ共刺激シグナル伝達ド
メインとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメイン、膜貫通ド
メイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペーサードメインを更に含む
。いくつかの実施形態では、スペーサードメインは、２つのＣＳＲドメインを接続するペ
プチドリンカーを含む。
面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体）に特異的に結合し、（ａ）標的リガンド結合ドメイ
ン（ＬＢＤ）と、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインとを含み
、ＣＳＲは、標的リガンド結合の際に機能的に発現される表面で免疫細胞を刺激すること
が可能である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗原である。いくつ
かの実施形態では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形
態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原と同じである
。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標
的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンドである
。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガンドである。いくつかの実施形
態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４
、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ又はＦＣＲＬ５である。い
くつかの実施形態では、癌関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ及びＰＳＡを含むタンパク質に由来する
ペプチドを含む、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガン
ドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免疫チ
ェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は、Ｐ
Ｄ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、Ｈ
ＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０及びＧＡＬ９を含む。いくつか
の実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態では、
アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１及びＴＮＦＲ２を含む。いくつか
の実施形態では、リガンド結合ドメインは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、
抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である
。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、標的リガンドの受容体の細胞外ド
メインの全て又は一部である（又はこれらに由来する）。いくつかの実施形態では、受容
体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４
、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７及びＴＩ
Ｍ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通モジュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ
３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、Ｃ
Ｄ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１
５４を含む、膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態で
は、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質（ｆＴＭＰ）のフラグメントを含み、ｆＴＭＰは、ＣＳ
Ｒ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０
、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、
ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む、免疫細胞共
刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、これらから本質的になり、又はこれ
らからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免疫細胞共刺激分子（ｆＣＳＭ）のフ
ラグメントを含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメインと、ＣＳＲ共刺激シグナル伝達ド
メインとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメイン、膜貫通ド
メイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペーサードメインを更に含む
。いくつかの実施形態では、スペーサードメインは、２つのＣＳＲドメインを接続するペ
プチドリンカーを含む。
【0184】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合し
、（ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル
伝達ドメインとを含み、標的リガンドは、細胞表面抗原であり、ＣＳＲは、標的リガンド
結合の際に機能的に発現される表面で免疫細胞を刺激することが可能である。いくつかの
実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原と同じ
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣ
Ｒの標的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンド
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガンドである。いくつかの
実施形態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、
ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ又はＦＣＲＬ５であ
る。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつか
の実施形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形
態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、
ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０
、ＣＤ４０及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシ
ス分子である。いくつかの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、Ｔ
ＮＦＲ１及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、抗
体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）
２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメ
インは、標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部である（又はこれらに由
来する）。いくつかの実施形態では、受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦ
Ｒ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、
４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫
通モジュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、
ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ
８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１５４を含む、膜貫通タンパク質に由来する膜貫
通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質（ｆＴＭＰ）
のフラグメントを含み、ｆＴＭＰは、ＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態
では、共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦ
Ａ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に
結合するリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含
むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲ
は、免疫細胞共刺激分子（ｆＣＳＭ）のフラグメントを含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通
ドメインと、ＣＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、Ｃ
ＳＲは、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいず
れかの間にスペーサードメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサードメイ
ンは、２つのＣＳＲドメインを接続するペプチドリンカーを含む。
、（ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル
伝達ドメインとを含み、標的リガンドは、細胞表面抗原であり、ＣＳＲは、標的リガンド
結合の際に機能的に発現される表面で免疫細胞を刺激することが可能である。いくつかの
実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原と同じ
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣ
Ｒの標的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンド
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガンドである。いくつかの
実施形態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、
ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ又はＦＣＲＬ５であ
る。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつか
の実施形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形
態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、
ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０
、ＣＤ４０及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシ
ス分子である。いくつかの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、Ｔ
ＮＦＲ１及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、抗
体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）
２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメ
インは、標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部である（又はこれらに由
来する）。いくつかの実施形態では、受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦ
Ｒ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、
４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫
通モジュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、
ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ
８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１５４を含む、膜貫通タンパク質に由来する膜貫
通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質（ｆＴＭＰ）
のフラグメントを含み、ｆＴＭＰは、ＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態
では、共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦ
Ａ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に
結合するリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含
むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲ
は、免疫細胞共刺激分子（ｆＣＳＭ）のフラグメントを含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通
ドメインと、ＣＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、Ｃ
ＳＲは、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいず
れかの間にスペーサードメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサードメイ
ンは、２つのＣＳＲドメインを接続するペプチドリンカーを含む。
【0185】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合し
、（ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル
伝達ドメインとを含み、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体であり、ＣＳＲは、標
的リガンド結合の際に機能的に発現される表面で免疫細胞を刺激することが可能である。
いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的
抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現され
たｃａＴＣＲの標的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関
連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガンドである。
いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ及びＰＳＡを含むタンパク質に由来す
るペプチドを含む、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガ
ンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイン
は、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａ
ｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、膜貫通モジ
ュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８
、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、
ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１５４を含む、膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ドメ
インを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質（ｆＴＭＰ）のフラ
グメントを含み、ｆＴＭＰは、ＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、
共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１
）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合す
るリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、
これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免
疫細胞共刺激分子（ｆＣＳＭ）のフラグメントを含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイ
ンと、ＣＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは
、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの
間にスペーサードメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサードメインは、
２つのＣＳＲドメインを接続するペプチドリンカーを含む。
、（ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル
伝達ドメインとを含み、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体であり、ＣＳＲは、標
的リガンド結合の際に機能的に発現される表面で免疫細胞を刺激することが可能である。
いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的
抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現され
たｃａＴＣＲの標的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関
連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガンドである。
いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ及びＰＳＡを含むタンパク質に由来す
るペプチドを含む、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガ
ンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイン
は、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａ
ｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、膜貫通モジ
ュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８
、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、
ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１５４を含む、膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ドメ
インを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質（ｆＴＭＰ）のフラ
グメントを含み、ｆＴＭＰは、ＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、
共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１
）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合す
るリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、
これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免
疫細胞共刺激分子（ｆＣＳＭ）のフラグメントを含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイ
ンと、ＣＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは
、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの
間にスペーサードメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサードメインは、
２つのＣＳＲドメインを接続するペプチドリンカーを含む。
【0186】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンド（例えば、細胞表
面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体）に特異的に結合し、（ａ）標的リガンド結合ドメイ
ンと、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインとを含み、リガンド
結合ドメインは、抗体部分であり、ＣＳＲは、標的リガンド結合の際に機能的に発現され
る表面で免疫細胞を刺激することが可能である。いくつかの実施形態では、標的リガンド
は、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ
複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃ
ａＴＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫
細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガ
ンドは、疾患関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リ
ガンドである。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲ
Ｃ５Ｄ又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、ＷＴ－１、
ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ及びＰ
ＳＡを含むタンパク質に由来するペプチドを含む、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形
態では、標的リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、
免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ
Ｌ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４
０及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子で
ある。いくつかの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１
及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、膜貫通モ
ジュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ
８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６
、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１５４を含む、膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ド
メインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質（ｆＴＭＰ）のフ
ラグメントを含み、ｆＴＭＰは、ＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では
、共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３
７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－
１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合
するリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか
、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、
免疫細胞共刺激分子（ｆＣＳＭ）のフラグメントを含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメ
インと、ＣＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲ
は、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれか
の間にスペーサードメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサードメインは
、２つのＣＳＲドメインを接続するペプチドリンカーを含む。
面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体）に特異的に結合し、（ａ）標的リガンド結合ドメイ
ンと、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインとを含み、リガンド
結合ドメインは、抗体部分であり、ＣＳＲは、標的リガンド結合の際に機能的に発現され
る表面で免疫細胞を刺激することが可能である。いくつかの実施形態では、標的リガンド
は、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ
複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃ
ａＴＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫
細胞で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガ
ンドは、疾患関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リ
ガンドである。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲ
Ｃ５Ｄ又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、ＷＴ－１、
ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ及びＰ
ＳＡを含むタンパク質に由来するペプチドを含む、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形
態では、標的リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、
免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ
Ｌ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４
０及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子で
ある。いくつかの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１
及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、膜貫通モ
ジュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ
８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６
、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７又はＣＤ１５４を含む、膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ド
メインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質（ｆＴＭＰ）のフ
ラグメントを含み、ｆＴＭＰは、ＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では
、共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３
７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－
１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合
するリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか
、これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、
免疫細胞共刺激分子（ｆＣＳＭ）のフラグメントを含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメ
インと、ＣＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲ
は、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれか
の間にスペーサードメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサードメインは
、２つのＣＳＲドメインを接続するペプチドリンカーを含む。
【0187】
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ＣＤ２８のｆＣＳＭを含む。いくつかの実施形態
では、ＣＳＲは、（ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号１１８のアミノ酸
配列を含むＣＤ２８のフラグメントとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、標的
リガンド結合ドメインと、配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＣＳＲドメインとを含む
。
では、ＣＳＲは、（ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号１１８のアミノ酸
配列を含むＣＤ２８のフラグメントとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、標的
リガンド結合ドメインと、配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＣＳＲドメインとを含む
。
【0188】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンド（例えば、細胞表
面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体）に特異的に結合し、（ａ）標的リガンド結合ドメイ
ンと、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインとを含み、リガンド
結合ドメインは、標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部であるか（又は
これらに由来し）、ＣＳＲは、標的リガンド結合の際に機能的に発現される表面で免疫細
胞を刺激することが可能である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗
原である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴ
ＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞
で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンド
は、疾患関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガン
ドである。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、
ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５
Ｄ又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイ
ント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、
ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４
－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態
では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態では、アポトーシ
ス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態
では、標的リガンド受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、
ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ
４０、ＣＤ２７及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、例
えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、Ｃ
Ｄ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、
ＣＤ１３７又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、
共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１
）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合す
るリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、
これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リ
ガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間に
スペーサードメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサードメインは、２つ
のＣＳＲドメインを接続するペプチドリンカーを含む。
面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体）に特異的に結合し、（ａ）標的リガンド結合ドメイ
ンと、（ｂ）膜貫通ドメインと、（ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインとを含み、リガンド
結合ドメインは、標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部であるか（又は
これらに由来し）、ＣＳＲは、標的リガンド結合の際に機能的に発現される表面で免疫細
胞を刺激することが可能である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗
原である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現されたｃａＴ
ＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞
で発現されたｃａＴＣＲの標的抗原とは異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンド
は、疾患関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、癌関連リガン
ドである。いくつかの実施形態では、癌関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、
ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５
Ｄ又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイ
ント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、
ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４
－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態
では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態では、アポトーシ
ス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態
では、標的リガンド受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、
ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ
４０、ＣＤ２７及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、例
えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、Ｃ
Ｄ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、
ＣＤ１３７又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、
共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１
）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合す
るリガンドなどを含む、免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、
これらから本質的になり、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リ
ガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間に
スペーサードメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサードメインは、２つ
のＣＳＲドメインを接続するペプチドリンカーを含む。
【0189】
いくつかの実施形態では、ＣＤ１９に特異的に結合する本明細書に記載のＣＳＲは、（
ａ）配列番号７４のアミノ酸配列を有するＶＨドメインと配列番号７８のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインと、（ｂ）配列番号４９又は１１８のアミノ酸配列を含むか、これら
から本質的になり、又はこれらからなるＣＤ２８のフラグメントとを含む。いくつかの実
施形態では、ＣＤ２８のフラグメントは、配列番号１１８のアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端まで、ｓｃＦｖと、ペプチ
ドリンカーと、ＣＤ２８のフラグメントとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、
配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる
。
ａ）配列番号７４のアミノ酸配列を有するＶＨドメインと配列番号７８のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインと、（ｂ）配列番号４９又は１１８のアミノ酸配列を含むか、これら
から本質的になり、又はこれらからなるＣＤ２８のフラグメントとを含む。いくつかの実
施形態では、ＣＤ２８のフラグメントは、配列番号１１８のアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端まで、ｓｃＦｖと、ペプチ
ドリンカーと、ＣＤ２８のフラグメントとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、
配列番号１２７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる
。
【0190】
いくつかの実施形態では、ＧＰＣ３に特異的に結合する本明細書に記載のＣＳＲは、（
ａ）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメインと配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインと、（ｂ）配列番号４９又は８０のアミノ酸配列を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなるＣＤ２８のフラグメントとを含む。いくつかの実施
形態では、ｓｃＦｖは、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的にな
り、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８のフラグメントは、配列番
号１１８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカ
ルボキシ末端まで、ｓｃＦｖと、ペプチドリンカーと、ＣＤ２８のフラグメントとを含む
。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、これら
から本質的になり、又はこれらからなる。
ａ）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメインと配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインと、（ｂ）配列番号４９又は８０のアミノ酸配列を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなるＣＤ２８のフラグメントとを含む。いくつかの実施
形態では、ｓｃＦｖは、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的にな
り、又はこれらからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８のフラグメントは、配列番
号１１８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカ
ルボキシ末端まで、ｓｃＦｖと、ペプチドリンカーと、ＣＤ２８のフラグメントとを含む
。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号１２８のアミノ酸配列を含むか、これら
から本質的になり、又はこれらからなる。
【0191】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、誘導
性である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、本明細書に記載の
誘導プロモーターのいずれかを含む、誘導プロモーターに作動可能に接続するＣＳＲをコ
ードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけ
るＣＳＲの発現は、ｃａＴＣＲを介してシグナル伝達するときに誘導性である。いくつか
のこのような実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ｃａＴＣＲによるシグナル
伝達に応答してプロモーター又は調節エレメントに作動可能に接続するＣＳＲをコードす
る核酸配列を組む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲをコードする核酸配列は、活性化Ｔ
細胞（ＮＦＡＴ）由来プロモーターの核因子に作動可能に接続する。いくつかの実施形態
では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、ＮＦＡＴ由来最小プロモーターである（例えば、Ｄ
ｕｒａｎｄ，Ｄ．ら、Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８、１７１５－１７２４（１９
８８）；Ｃｌｉｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ、Ｃｒａｂｔｒｅｅ，ＧＲ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２
３５７（６３８０）：６９５－７；Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ，Ｍ．ら、Ｃａｎｃｅｒ
ｒｅｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５６９７－５７０６；及びＺｈａｎｇ，Ｌ
．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７５９を
参照）。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番号１１６のヌク
レオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲをコードする核酸配列は、ＩＬ－
２プロモーターに作動可能に接続する。
分泌二次エフェクター（ＳＳＥ）構築物
性である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、本明細書に記載の
誘導プロモーターのいずれかを含む、誘導プロモーターに作動可能に接続するＣＳＲをコ
ードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけ
るＣＳＲの発現は、ｃａＴＣＲを介してシグナル伝達するときに誘導性である。いくつか
のこのような実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ｃａＴＣＲによるシグナル
伝達に応答してプロモーター又は調節エレメントに作動可能に接続するＣＳＲをコードす
る核酸配列を組む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲをコードする核酸配列は、活性化Ｔ
細胞（ＮＦＡＴ）由来プロモーターの核因子に作動可能に接続する。いくつかの実施形態
では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、ＮＦＡＴ由来最小プロモーターである（例えば、Ｄ
ｕｒａｎｄ，Ｄ．ら、Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８、１７１５－１７２４（１９
８８）；Ｃｌｉｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ、Ｃｒａｂｔｒｅｅ，ＧＲ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２
３５７（６３８０）：６９５－７；Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ，Ｍ．ら、Ｃａｎｃｅｒ
ｒｅｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５６９７－５７０６；及びＺｈａｎｇ，Ｌ
．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７５９を
参照）。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番号１１６のヌク
レオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲをコードする核酸配列は、ＩＬ－
２プロモーターに作動可能に接続する。
分泌二次エフェクター（ＳＳＥ）構築物
【0192】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれか１つを含む免疫細胞
（例えば、Ｔ細胞）が提供され、当該免疫細胞は、分泌二次エフェクター（ＳＳＥ）を分
泌することが可能である。このような免疫細胞は、本明細書では「ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免
疫細胞」とも呼ばれる。ＳＳＥは、機能的に発現され、分泌型であり、ｃａＴＣＲ＋ＳＳ
Ｅ免疫細胞が介在する免疫応答を強化する。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、他の免
疫細胞（例えば、バイスタンダーＴ細胞又はＮＫ細胞）を、標的疾患細胞（又は、標的癌
細胞）に再指向させることが可能である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫細胞
（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）及び疾患細胞（例えば、癌細胞）を標的とする多重特異
性抗体（例えば、二重特異性抗体）である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑
制腫瘍環境などの免疫抑制環境からｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞を保護する。いくつかの
実施形態では、ＳＳＥは、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞上での刺激受容体の自己分泌活性
化を与える。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、外来性増殖因子又は刺激サイトカイン
である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は
、誘導性である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥ
の発現は、ｃａＴＣＲを介してシグナル伝達するときに誘導性である。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞は、本明細書に記載されるＣＳＲのうちのいずれか
の１つを更に含む。
（例えば、Ｔ細胞）が提供され、当該免疫細胞は、分泌二次エフェクター（ＳＳＥ）を分
泌することが可能である。このような免疫細胞は、本明細書では「ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免
疫細胞」とも呼ばれる。ＳＳＥは、機能的に発現され、分泌型であり、ｃａＴＣＲ＋ＳＳ
Ｅ免疫細胞が介在する免疫応答を強化する。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、他の免
疫細胞（例えば、バイスタンダーＴ細胞又はＮＫ細胞）を、標的疾患細胞（又は、標的癌
細胞）に再指向させることが可能である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫細胞
（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）及び疾患細胞（例えば、癌細胞）を標的とする多重特異
性抗体（例えば、二重特異性抗体）である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑
制腫瘍環境などの免疫抑制環境からｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞を保護する。いくつかの
実施形態では、ＳＳＥは、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞上での刺激受容体の自己分泌活性
化を与える。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、外来性増殖因子又は刺激サイトカイン
である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は
、誘導性である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥ
の発現は、ｃａＴＣＲを介してシグナル伝達するときに誘導性である。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞は、本明細書に記載されるＣＳＲのうちのいずれか
の１つを更に含む。
【0193】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、Ｔ細胞及び疾患細胞を標的とする多重特異性抗体
（例えば、二重特異性抗体）である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、Ｔ細胞の表面
抗原に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞表面抗原は、
ＣＤ３である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、疾患関連抗原（例えば、癌関連抗原
）に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、疾患関連抗原は、疾患
細胞（癌細胞など）の表面抗原である。いくつかの実施形態では、疾患関連抗原は、グリ
ピカン－３（ＧＰＣ３）、ＣＤ４７、ムチン－１６（ＭＵＣ１６）、ＣＤ１９、ＣＤ２０
、ＣＤ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、Ｂ
ＣＭＡ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６又はＦｏｘＰ３であり、これらの多様体
又は変異体を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボデ
ィ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体及び
二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から選択される多重特異性抗体である。いく
つかの実施形態では、ＳＳＥは、二重特異性である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは
、Ｔ細胞表面抗原を標的とする第１のｓｃＦｖと、疾患関連抗原を標的とする第２のｓｃ
Ｆｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。
（例えば、二重特異性抗体）である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、Ｔ細胞の表面
抗原に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞表面抗原は、
ＣＤ３である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、疾患関連抗原（例えば、癌関連抗原
）に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、疾患関連抗原は、疾患
細胞（癌細胞など）の表面抗原である。いくつかの実施形態では、疾患関連抗原は、グリ
ピカン－３（ＧＰＣ３）、ＣＤ４７、ムチン－１６（ＭＵＣ１６）、ＣＤ１９、ＣＤ２０
、ＣＤ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、Ｂ
ＣＭＡ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６又はＦｏｘＰ３であり、これらの多様体
又は変異体を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボデ
ィ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体及び
二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から選択される多重特異性抗体である。いく
つかの実施形態では、ＳＳＥは、二重特異性である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは
、Ｔ細胞表面抗原を標的とする第１のｓｃＦｖと、疾患関連抗原を標的とする第２のｓｃ
Ｆｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0194】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的とする第１のｓｃＦｖと、疾患関連
抗原を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形
態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣＭＡ
、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６又はＦｏｘＰ３であり、これらの多様体又は変
異体を含む。
抗原を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形
態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣＭＡ
、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６又はＦｏｘＰ３であり、これらの多様体又は変
異体を含む。
【0195】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的とする第１のｓｃＦｖと、ＧＰＣ３
を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態で
は、第２のｓｃＦｖは、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなるＶＨドメインと、配列番号５９のアミノ酸配列を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメインとを含む。いくつかの実施形態では、
ＶＨドメインは、ＶＬドメインに対してアミノ末端にある。いくつかの実施形態では、Ｖ
Ｌドメインは、ＶＨドメインに対してアミノ末端にある。いくつかの実施形態では、第２
のｓｃＦｖは、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又は
これらからなる。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖは、第２のｓｃＦｖに対して
アミノ末端にある。いくつかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖに対し
てアミノ末端にある。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、配列番号１２９のアミノ酸配
列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。
を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態で
は、第２のｓｃＦｖは、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり
、又はこれらからなるＶＨドメインと、配列番号５９のアミノ酸配列を含むか、これらか
ら本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメインとを含む。いくつかの実施形態では、
ＶＨドメインは、ＶＬドメインに対してアミノ末端にある。いくつかの実施形態では、Ｖ
Ｌドメインは、ＶＨドメインに対してアミノ末端にある。いくつかの実施形態では、第２
のｓｃＦｖは、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又は
これらからなる。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖは、第２のｓｃＦｖに対して
アミノ末端にある。いくつかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖに対し
てアミノ末端にある。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、配列番号１２９のアミノ酸配
列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなる。
【0196】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的とする第１のｓｃＦｖと、ＣＤ４７
を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態で
は、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的とする第１のｓｃＦｖと、ＭＵＣ１６を標的とする第２のｓ
ｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。
を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態で
は、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的とする第１のｓｃＦｖと、ＭＵＣ１６を標的とする第２のｓ
ｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0197】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＮＫ細胞及び疾患関連抗原（例えば、癌関連抗原
）を標的とする多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）である。いくつかの実施形態
では、ＳＳＥは、ＮＫ細胞の表面抗原に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実
施形態では、ＮＫ細胞表面抗原は、ＣＤ１６ａである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥ
は、疾患関連抗原（例えば、癌関連抗原）に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつか
の実施形態では、疾患関連抗原は、疾患細胞（癌細胞など）の表面抗原である。いくつか
の実施形態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、
ＢＣＭＡ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６又はＦｏｘＰ３であり、これらの多様
体又は変異体を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボ
ディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体及
び二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から選択される多重特異性抗体である。い
くつかの実施形態では、ＳＳＥは、二重特異性である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥ
は、ＮＫ細胞表面抗原を標的とする第１のｓｃＦｖと、疾患関連抗原を標的とする第２の
ｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。
）を標的とする多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）である。いくつかの実施形態
では、ＳＳＥは、ＮＫ細胞の表面抗原に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実
施形態では、ＮＫ細胞表面抗原は、ＣＤ１６ａである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥ
は、疾患関連抗原（例えば、癌関連抗原）に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつか
の実施形態では、疾患関連抗原は、疾患細胞（癌細胞など）の表面抗原である。いくつか
の実施形態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、
ＢＣＭＡ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６又はＦｏｘＰ３であり、これらの多様
体又は変異体を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボ
ディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体及
び二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から選択される多重特異性抗体である。い
くつかの実施形態では、ＳＳＥは、二重特異性である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥ
は、ＮＫ細胞表面抗原を標的とする第１のｓｃＦｖと、疾患関連抗原を標的とする第２の
ｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0198】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ１６ａを標的とする第１のｓｃＦｖと、疾患
関連抗原を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実
施形態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、
ＣＤ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣ
ＭＡ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６又はＦｏｘＰ３であり、これらの多様体又
は変異体を含む。
関連抗原を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実
施形態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、
ＣＤ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣ
ＭＡ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６又はＦｏｘＰ３であり、これらの多様体又
は変異体を含む。
【0199】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ１６ａを標的とする第１のｓｃＦｖと、ＧＰ
Ｃ３を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形
態では、ＳＳＥは、ＣＤ１６ａを標的とする第１のｓｃＦｖと、ＣＤ４７を標的とする第
２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、
ＣＤ１６ａを標的とする第１のｓｃＦｖと、ＭＵＣ１６を標的とする第２のｓｃＦｖとを
含む、タンデムｓｃＦｖである。
Ｃ３を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形
態では、ＳＳＥは、ＣＤ１６ａを標的とする第１のｓｃＦｖと、ＣＤ４７を標的とする第
２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、
ＣＤ１６ａを標的とする第１のｓｃＦｖと、ＭＵＣ１６を標的とする第２のｓｃＦｖとを
含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0200】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＳＳＥは、疾患関連抗原に特異的に結合す
る抗体部分を含み、抗体部分は、疾患関連抗原に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメ
イン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）（例えば、配列番号５４のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、
又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号５５のアミノ酸配列を含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ
）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ
又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号５６のアミノ酸配
列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配
列番号５７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬ
ドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、その内容が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１８年
３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０，９５５号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、これらから本質
的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号６９のアミノ酸配列を
含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含ま
れるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、その内容
が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１７年４月２６日に出願されたＵＳ
ＳＮ ６２／４９０，５８６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ
３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例え
ば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからな
るＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的に
なり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７２２０号及びＷ
Ｏ２０１６／１８７２１６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ２
に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（
例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７号及びＷＯ２０１６／０９０３２０号を
参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤ
Ｒ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０
９０３２９号及びＷＯ２０１６／０９０３１２号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３３７号を参照）。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４号、ＷＯ２０１５
／０７００７８号及びＷＯ２０１５／０７００６１号を参照）。いくつかの実施形態では
、抗体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１６１３９０号を参照）。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７号を参照
）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部分のＣＤ
Ｒ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２
１０３６５号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１６／１９１２４６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）
を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／
又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４号を参照）。いくつか
の実施形態では、抗体部分は、ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、（
ａ）Ｔ細胞（例えば、ＣＤ３）又はＮＫ細胞（例えば、ＣＤ１６ａ）の表面抗原に特異的
に結合する第１のｓｃＦｖと、（ｂ）抗体部分とを含み、抗体部分が第２のｓｃＦｖであ
る、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ペプチドリンカーに
よって接続した第１のｓｃＦｖと第２のｓｃＦｖとを含む。いくつかの実施形態では、第
１のｓｃＦｖは、第２のｓｃＦｖに対してアミノ末端にある。いくつかの実施形態では、
第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖに対してアミノ末端にある。
る抗体部分を含み、抗体部分は、疾患関連抗原に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメ
イン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）（例えば、配列番号５４のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、
又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号５５のアミノ酸配列を含むか、こ
れらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ
）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ
又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号５６のアミノ酸配
列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配
列番号５７のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬ
ドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、その内容が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１８年
３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０，９５５号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、これらから本質
的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン、及び／又は配列番号６９のアミノ酸配列を
含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含ま
れるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、その内容
が全体的に本明細書に参考として組み込まれる、２０１７年４月２６日に出願されたＵＳ
ＳＮ ６２／４９０，５８６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ
３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例え
ば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからな
るＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的に
なり、又はこれらからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７２２０号及びＷ
Ｏ２０１６／１８７２１６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ２
に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（
例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７号及びＷＯ２０１６／０９０３２０号を
参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤ
Ｒ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０
９０３２９号及びＷＯ２０１６／０９０３１２号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３３７号を参照）。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４号、ＷＯ２０１５
／０７００７８号及びＷＯ２０１５／０７００６１号を参照）。いくつかの実施形態では
、抗体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１６１３９０号を参照）。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７号を参照
）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部分のＣＤ
Ｒ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２
１０３６５号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１６／１９１２４６号を参照）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）
を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４号を参照）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７号を参照）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／
又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４号を参照）。いくつか
の実施形態では、抗体部分は、ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、（
ａ）Ｔ細胞（例えば、ＣＤ３）又はＮＫ細胞（例えば、ＣＤ１６ａ）の表面抗原に特異的
に結合する第１のｓｃＦｖと、（ｂ）抗体部分とを含み、抗体部分が第２のｓｃＦｖであ
る、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ペプチドリンカーに
よって接続した第１のｓｃＦｖと第２のｓｃＦｖとを含む。いくつかの実施形態では、第
１のｓｃＦｖは、第２のｓｃＦｖに対してアミノ末端にある。いくつかの実施形態では、
第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖに対してアミノ末端にある。
【0201】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、１つ以上の可溶性免疫抑制剤を標的とする多重特
異性抗体（例えば、二重特異性抗体）である。このようなＳＳＥは、可溶性免疫抑制剤を
その標的から隔離するための捕捉剤として作用し、それによって、その免疫抑制効果を減
らすことができる。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、１つ以上の可溶性免疫抑制剤に
特異的に結合する１つ以上の抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、免疫抑制剤は、
免疫抑制性サイトカインである。いくつかの実施形態では、免疫抑制性サイトカインとし
ては、ＴＧＦ－βファミリーメンバー（例えば、ＴＧＦ－β１～４）、ＩＬ－４及びＩＬ
－１０（これらの多様体又は変異体を含む）が挙げられる。いくつかの実施形態では、Ｓ
ＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二
重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体及び二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から
選択される多重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、二重特異性であ
る。例えば、いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、第１の免疫抑制サイトカイン（例えば
、ＴＧＦβ）を標的とする第１のｓｃＦｖと、第２の免疫抑制サイトカイン（例えば、Ｉ
Ｌ－４）を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。
異性抗体（例えば、二重特異性抗体）である。このようなＳＳＥは、可溶性免疫抑制剤を
その標的から隔離するための捕捉剤として作用し、それによって、その免疫抑制効果を減
らすことができる。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、１つ以上の可溶性免疫抑制剤に
特異的に結合する１つ以上の抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、免疫抑制剤は、
免疫抑制性サイトカインである。いくつかの実施形態では、免疫抑制性サイトカインとし
ては、ＴＧＦ－βファミリーメンバー（例えば、ＴＧＦ－β１～４）、ＩＬ－４及びＩＬ
－１０（これらの多様体又は変異体を含む）が挙げられる。いくつかの実施形態では、Ｓ
ＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二
重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体及び二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から
選択される多重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、二重特異性であ
る。例えば、いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、第１の免疫抑制サイトカイン（例えば
、ＴＧＦβ）を標的とする第１のｓｃＦｖと、第２の免疫抑制サイトカイン（例えば、Ｉ
Ｌ－４）を標的とする第２のｓｃＦｖとを含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0202】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫チェックポイント分子を標的とする抗体部分
である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、阻害性免疫チェックポイント分子のアンタ
ゴニストである。いくつかの実施形態では、阻害免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－１
、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３及
びＡ２ａＲからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、刺激性免疫
チェックポイント分子のアゴニストである。いくつかの実施形態では、刺激免疫チェック
ポイント分子は、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７及びＣＤ４０か
らなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、完全長抗体、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、ｓｃＦｖである。
である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、阻害性免疫チェックポイント分子のアンタ
ゴニストである。いくつかの実施形態では、阻害免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－１
、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３及
びＡ２ａＲからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、刺激性免疫
チェックポイント分子のアゴニストである。いくつかの実施形態では、刺激免疫チェック
ポイント分子は、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７及びＣＤ４０か
らなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、完全長抗体、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、ｓｃＦｖである。
【0203】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＰＤ－１を標的とするアンタゴニスト性抗体部分
である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＤ－１に特異的なアンタゴニスト性抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１６／２１０１２９号を参照）。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部分
は、完全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）で
ある。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト性抗体部分は、ｓｃＦｖである。
である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＤ－１に特異的なアンタゴニスト性抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１６／２１０１２９号を参照）。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部分
は、完全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）で
ある。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト性抗体部分は、ｓｃＦｖである。
【0204】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ４７を標的とするアンタゴニスト性抗体部分
である。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト性抗体部分は、ＣＤ４７に特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号６
０のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン
、及び／又は配列番号６１のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれ
らからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態で
は、アンタゴニスト抗体部分は、完全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ
又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト性抗体部分
は、ｓｃＦｖである。
である。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト性抗体部分は、ＣＤ４７に特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）（例えば、配列番号６
０のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなるＶＨドメイン
、及び／又は配列番号６１のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれ
らからなるＶＬドメイン、又はその中に含まれるＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態で
は、アンタゴニスト抗体部分は、完全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ
又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト性抗体部分
は、ｓｃＦｖである。
【0205】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、（ａ）他の分子に対する結合親和性の少なくとも
約１０倍（例えば、少なくとも約１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、７５倍、１
００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００倍、７５０倍、１０００倍のいずれか、
又はもっと多くを含む）の親和性で標的抗原に特異的に結合するか、又は（ｂ）他の分子
に対する結合のＫｄの約１／１０以下（例えば、１／１０以下、１／２０以下、１／３０
以下、１／４０以下、１／５０以下、１／７５以下、１／１００以下、１／２００以下、
１／３００以下、１／４０以下、１／５００以下、１／７５０以下、１／１０００以下の
いずれか、又はもっと小さい）のＫｄで標的抗原に特異的に結合する抗体部分を含む。結
合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降ア
ッセイ（ＲＩＡ）などの当該技術分野において既知の方法によって決定することができる
。Ｋｄは、例えばＢｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ
、又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ装置を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの
当該技術分野で既知の方法によって決定することができる。
約１０倍（例えば、少なくとも約１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、７５倍、１
００倍、２００倍、３００倍、４００倍、５００倍、７５０倍、１０００倍のいずれか、
又はもっと多くを含む）の親和性で標的抗原に特異的に結合するか、又は（ｂ）他の分子
に対する結合のＫｄの約１／１０以下（例えば、１／１０以下、１／２０以下、１／３０
以下、１／４０以下、１／５０以下、１／７５以下、１／１００以下、１／２００以下、
１／３００以下、１／４０以下、１／５００以下、１／７５０以下、１／１０００以下の
いずれか、又はもっと小さい）のＫｄで標的抗原に特異的に結合する抗体部分を含む。結
合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降ア
ッセイ（ＲＩＡ）などの当該技術分野において既知の方法によって決定することができる
。Ｋｄは、例えばＢｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ
、又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ装置を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの
当該技術分野で既知の方法によって決定することができる。
【0206】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体のリガンドに特異的に結合する可
溶性分子である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体の細胞外ドメイン
に由来するリガンド結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイ
ンは、受容体の細胞外ドメインの一部である。いくつかの実施形態では、免疫抑制受容体
は、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＳＩＲＰα、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－
４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ
４０及びＴＩＭ－３からなる群から選択される。
溶性分子である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体の細胞外ドメイン
に由来するリガンド結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイ
ンは、受容体の細胞外ドメインの一部である。いくつかの実施形態では、免疫抑制受容体
は、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＳＩＲＰα、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－
４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ
４０及びＴＩＭ－３からなる群から選択される。
【0207】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体に特異的に結合し、拮抗作用をも
たらす可溶性分子である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体のリガン
ドの細胞外ドメインに由来する受容体結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、受
容体結合ドメインは、リガンドの細胞外ドメインの一部である。いくつかの実施形態では
、リガンドは、ＦａｓＬ、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ４７、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｉ
ＣＯＳＬ、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０Ｌ及びＧＡＬ９か
らなる群から選択される。
たらす可溶性分子である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体のリガン
ドの細胞外ドメインに由来する受容体結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、受
容体結合ドメインは、リガンドの細胞外ドメインの一部である。いくつかの実施形態では
、リガンドは、ＦａｓＬ、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ４７、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｉ
ＣＯＳＬ、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０Ｌ及びＧＡＬ９か
らなる群から選択される。
【0208】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、外来性刺激サイトカインである。本明細書に記載
の外来性サイトカインは、外来性遺伝子から発現されるサイトカインである。いくつかの
実施形態では、外来性刺激サイトカインは、ＩＬ－１２ファミリーメンバーである。いく
つかの実施形態では、ＩＬ－１２ファミリーメンバーは、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３、ＩＬ
－２７又はＩＬ－３５である。いくつかの実施形態では、外来性刺激サイトカインは、Ｉ
Ｌ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８又はＩＬ－２１である。いくつかの実施形態では、外来
性刺激サイトカインは、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞上のサイトカインの受容体の自己分
泌活性化を与えることができる。
の外来性サイトカインは、外来性遺伝子から発現されるサイトカインである。いくつかの
実施形態では、外来性刺激サイトカインは、ＩＬ－１２ファミリーメンバーである。いく
つかの実施形態では、ＩＬ－１２ファミリーメンバーは、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３、ＩＬ
－２７又はＩＬ－３５である。いくつかの実施形態では、外来性刺激サイトカインは、Ｉ
Ｌ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８又はＩＬ－２１である。いくつかの実施形態では、外来
性刺激サイトカインは、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞上のサイトカインの受容体の自己分
泌活性化を与えることができる。
【0209】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は、誘導
性である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞は、本明細書に記載の
誘導プロモーターのいずれかを含む、誘導プロモーターに作動可能に接続するＳＳＥをコ
ードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞におけ
るＳＳＥの発現は、ｃａＴＣＲを介してシグナル伝達するときに誘導性である。いくつか
のこのような実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞は、ｃａＴＣＲによるシグナル
伝達に応答してプロモーター又は調節エレメントに作動可能に接続するＳＳＥをコードす
る核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥをコードする核酸配列は、活性化Ｔ
細胞（ＮＦＡＴ）由来プロモーターの核因子に作動可能に接続する。いくつかの実施形態
では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、ＮＦＡＴ由来最小プロモーターである（例えば、Ｄ
ｕｒａｎｄ，Ｄ．ら、Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８、１７１５－１７２４（１９
８８）；Ｃｌｉｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ、Ｃｒａｂｔｒｅｅ，ＧＲ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２
３５７（６３８０）：６９５－７；Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ，Ｍ．ら、Ｃａｎｃｅｒ
ｒｅｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５６９７－５７０６；及びＺｈａｎｇ，Ｌ
．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７５９を
参照）。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番号１１６のヌク
レオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥをコードしている核酸配列は、Ｉ
Ｌ－２プロモーターに操作可能に連結されている。
核酸
性である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞は、本明細書に記載の
誘導プロモーターのいずれかを含む、誘導プロモーターに作動可能に接続するＳＳＥをコ
ードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞におけ
るＳＳＥの発現は、ｃａＴＣＲを介してシグナル伝達するときに誘導性である。いくつか
のこのような実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＳＳＥ免疫細胞は、ｃａＴＣＲによるシグナル
伝達に応答してプロモーター又は調節エレメントに作動可能に接続するＳＳＥをコードす
る核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥをコードする核酸配列は、活性化Ｔ
細胞（ＮＦＡＴ）由来プロモーターの核因子に作動可能に接続する。いくつかの実施形態
では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、ＮＦＡＴ由来最小プロモーターである（例えば、Ｄ
ｕｒａｎｄ，Ｄ．ら、Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８、１７１５－１７２４（１９
８８）；Ｃｌｉｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ、Ｃｒａｂｔｒｅｅ，ＧＲ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２
３５７（６３８０）：６９５－７；Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ，Ｍ．ら、Ｃａｎｃｅｒ
ｒｅｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５６９７－５７０６；及びＺｈａｎｇ，Ｌ
．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７５９を
参照）。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番号１１６のヌク
レオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥをコードしている核酸配列は、Ｉ
Ｌ－２プロモーターに操作可能に連結されている。
核酸
【0210】
本明細書に記載されるｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及び／又はＳＳＥをコードする核酸分子も想
定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及び／又
はＳＳＥのいずれかによれば、ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及び／又はＳＳＥをコードする核酸（
又は核酸のセット）が提供される。
定される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及び／又
はＳＳＥのいずれかによれば、ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及び／又はＳＳＥをコードする核酸（
又は核酸のセット）が提供される。
【0211】
本発明はまた、本発明の核酸が挿入されるベクターも提供する。
【0212】
簡潔に要約すると、ｃａＴＣＲをコードする核酸によるｃａＴＣＲの発現は、核酸を適
切な発現ベクターに挿入することによって達成することができ、その結果、核酸は、５’
及び３’調節エレメント（例えば、プロモーター（例えば、リンパ球に特異的なプロモー
ターを含む））及び３’非翻訳領域（ＵＴＲ）に作動可能に接続する。ベクターは、真核
生物宿主細胞における複製及び組み込みに適している場合がある。典型的なクローニング
及び発現ベクターは、転写及び翻訳停止部と、開始配列と、所望の核酸配列の発現の制御
に有用なプロモーターとを含む。
切な発現ベクターに挿入することによって達成することができ、その結果、核酸は、５’
及び３’調節エレメント（例えば、プロモーター（例えば、リンパ球に特異的なプロモー
ターを含む））及び３’非翻訳領域（ＵＴＲ）に作動可能に接続する。ベクターは、真核
生物宿主細胞における複製及び組み込みに適している場合がある。典型的なクローニング
及び発現ベクターは、転写及び翻訳停止部と、開始配列と、所望の核酸配列の発現の制御
に有用なプロモーターとを含む。
【0213】
本発明の核酸は、標準的な遺伝子送達プロトコルを用いて、核酸免疫化及び遺伝子治療
に使用することも可能である。遺伝子送達の方法は、当該技術分野において既知である。
例えば、その全体が本明細書に参考として組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６号
、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照。いくつかの実施形態で
は、本発明は、遺伝子治療ベクターを提供する。
に使用することも可能である。遺伝子送達の方法は、当該技術分野において既知である。
例えば、その全体が本明細書に参考として組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６号
、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照。いくつかの実施形態で
は、本発明は、遺伝子治療ベクターを提供する。
【0214】
核酸は、多数の種類のベクターにクローニングすることができる。例えば、核酸は、限
定されないが、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス及びコスミド
を含むベクターにクローニングすることができる。特定の目的のベクターとしては、発現
ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター及びシークエンシングベクターが挙げら
れる。
定されないが、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス及びコスミド
を含むベクターにクローニングすることができる。特定の目的のベクターとしては、発現
ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター及びシークエンシングベクターが挙げら
れる。
【0215】
更に、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞に提供されてもよい。ウイルス
ベクター技術は、当該技術分野において周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２０
０１、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ
、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）
に記載されており、他のウイルス学及び分子生物学のマニュアルに記載されている。ベク
ターとして有用なウイルスとしては、限定されないが、レトロウイルス、アデノウイルス
、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルスが挙げられる。一般に、好
適なベクターは、少なくとも１つの有機体と、プロモーター配列と、簡便な制限エンドヌ
クレアーゼ部位と、１つ以上の選択可能なマーカーとを含む（例えば、国際公開第０１／
９６５８４号；国際公開第０１／２９０５８号及び米国特許第６，３２６，１９３号を参
照）。
ベクター技術は、当該技術分野において周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２０
０１、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ
、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）
に記載されており、他のウイルス学及び分子生物学のマニュアルに記載されている。ベク
ターとして有用なウイルスとしては、限定されないが、レトロウイルス、アデノウイルス
、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルスが挙げられる。一般に、好
適なベクターは、少なくとも１つの有機体と、プロモーター配列と、簡便な制限エンドヌ
クレアーゼ部位と、１つ以上の選択可能なマーカーとを含む（例えば、国際公開第０１／
９６５８４号；国際公開第０１／２９０５８号及び米国特許第６，３２６，１９３号を参
照）。
【0216】
哺乳類細胞への遺伝子導入のために、多数のウイルス由来の系が開発されてきた。例え
ば、レトロウイルスは、遺伝子送達系に簡便なプラットフォームを提供する。選択された
遺伝子をベクターに挿入し、当該技術分野において既知の技術を使用してレトロウイルス
粒子に封入することができる。次いで、組換えウイルスを単離し、ｉｎ ｖｉｖｏ又はｅ
ｘ ｖｉｖｏのいずれかで対象の細胞に送達することができる。多くのレトロウイルス系
が当該技術分野において既知である。いくつかの実施形態では、アデノウイルスベクター
が使用される。多くのアデノウイルスベクターが当該技術分野において既知である。いく
つかの実施形態では、レンチウイルスベクターが使用される。レンチウイルスなどのレト
ロウイルス由来のベクターは、長期間の遺伝子転写を達成するのに適したツールである。
これらのベクターは、長期間にわたる導入遺伝子の安定した組み込み及び娘細胞における
その伝播を可能にするからである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖性細
胞を形質導入することができるという点で、マウス白血病ウイルスなどの癌性レトロウイ
ルス由来のベクターと比較して、利点を有する。これらのベクターはまた、免疫原性が低
いという更なる利点も有する。
ば、レトロウイルスは、遺伝子送達系に簡便なプラットフォームを提供する。選択された
遺伝子をベクターに挿入し、当該技術分野において既知の技術を使用してレトロウイルス
粒子に封入することができる。次いで、組換えウイルスを単離し、ｉｎ ｖｉｖｏ又はｅ
ｘ ｖｉｖｏのいずれかで対象の細胞に送達することができる。多くのレトロウイルス系
が当該技術分野において既知である。いくつかの実施形態では、アデノウイルスベクター
が使用される。多くのアデノウイルスベクターが当該技術分野において既知である。いく
つかの実施形態では、レンチウイルスベクターが使用される。レンチウイルスなどのレト
ロウイルス由来のベクターは、長期間の遺伝子転写を達成するのに適したツールである。
これらのベクターは、長期間にわたる導入遺伝子の安定した組み込み及び娘細胞における
その伝播を可能にするからである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖性細
胞を形質導入することができるという点で、マウス白血病ウイルスなどの癌性レトロウイ
ルス由来のベクターと比較して、利点を有する。これらのベクターはまた、免疫原性が低
いという更なる利点も有する。
【0217】
例えば、エンハンサーなどの更なるプロモーター配列は、転写開始の頻度を調節する。
典型的には、これらは、開始部位から３０～１１０ｂｐ上流の領域に位置しているが、近
年、多くのプロモーターが、同様に開始部位の下流に機能配列を含むことが示されている
。プロモーター配列間の間隔は、多くの場合、フレキシブルであり、そのため、配列が互
いに対して反転しているか、又は移動するときにも、プロモーター機能が保存される。チ
ミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、プロモーター配列間の間隔は、活性が低下し
始める前に、５０ｂｐまで増加させることができる。
典型的には、これらは、開始部位から３０～１１０ｂｐ上流の領域に位置しているが、近
年、多くのプロモーターが、同様に開始部位の下流に機能配列を含むことが示されている
。プロモーター配列間の間隔は、多くの場合、フレキシブルであり、そのため、配列が互
いに対して反転しているか、又は移動するときにも、プロモーター機能が保存される。チ
ミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、プロモーター配列間の間隔は、活性が低下し
始める前に、５０ｂｐまで増加させることができる。
【0218】
好適なプロモーターの一例は、前初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター配
列である。このプロモーター配列は、作動可能に接続した任意のポリヌクレオチド配列の
高レベルでの発現を促すことが可能な、強力な構成型プロモーター配列である。好適なプ
ロモーターの別の例は、伸長増殖因子－１α（ＥＦ－１α）である。しかしながら、他の
構成型プロモーター配列としては、限定されないが、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）
初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩ
Ｖ）長末端反復（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイル
スプロモーター、エプスタインバールウイルスの前初期プロモーター、ラウス肉腫ウイル
スプロモーター、及びヒト遺伝子プロモーター、限定されないが、アクチンプロモーター
、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター及びクレアチンキナーゼプロモータ
ーが挙げられ、これらも使用可能である。
列である。このプロモーター配列は、作動可能に接続した任意のポリヌクレオチド配列の
高レベルでの発現を促すことが可能な、強力な構成型プロモーター配列である。好適なプ
ロモーターの別の例は、伸長増殖因子－１α（ＥＦ－１α）である。しかしながら、他の
構成型プロモーター配列としては、限定されないが、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）
初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩ
Ｖ）長末端反復（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイル
スプロモーター、エプスタインバールウイルスの前初期プロモーター、ラウス肉腫ウイル
スプロモーター、及びヒト遺伝子プロモーター、限定されないが、アクチンプロモーター
、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター及びクレアチンキナーゼプロモータ
ーが挙げられ、これらも使用可能である。
【0219】
更に、本発明は、構成型プロモーターの使用に限定されるべきではない。誘導プロモー
ターもまた、本発明の一部として想定される。誘導プロモーターの使用は、作動可能に接
続したポリヌクレオチド配列の発現を、このような発現が望ましいときにオンにするか、
又は発現が望ましくないときに発現をオフにすることが可能な分子スイッチを与える。真
核細胞で使用するための例示的な誘導プロモーター系としては、限定されないが、ホルモ
ン応答配列（例えば、Ｍａｄｅｒ，Ｓ．及びＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｈ．（１９９３）Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５６０３－５６０７を参照）、合成リガ
ンド制御要素（例えば、Ｓｐｅｎｃｅｒ，Ｄ．Ｍ．ら、１９９３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６
２：１０１９－１０２４を参照）及びイオン化照射制御要素（例えば、Ｍａｎｏｍｅ，Ｙ
．ら、（１９９３）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３２：１０６０７－１０６１３；Ｄａｔ
ｔａ，Ｒ．ら、（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：１
０１４－１０１５３を参照）が挙げられる。ｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｉｎ ｖｉｖｏの哺乳
動物系で使用するための更なる例示的な誘導プロモーター系は、Ｇｉｎｇｒｉｃｈら（１
９９８）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２１：３７７－４０５にまとめられ
ている。
ターもまた、本発明の一部として想定される。誘導プロモーターの使用は、作動可能に接
続したポリヌクレオチド配列の発現を、このような発現が望ましいときにオンにするか、
又は発現が望ましくないときに発現をオフにすることが可能な分子スイッチを与える。真
核細胞で使用するための例示的な誘導プロモーター系としては、限定されないが、ホルモ
ン応答配列（例えば、Ｍａｄｅｒ，Ｓ．及びＷｈｉｔｅ，Ｊ．Ｈ．（１９９３）Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５６０３－５６０７を参照）、合成リガ
ンド制御要素（例えば、Ｓｐｅｎｃｅｒ，Ｄ．Ｍ．ら、１９９３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６
２：１０１９－１０２４を参照）及びイオン化照射制御要素（例えば、Ｍａｎｏｍｅ，Ｙ
．ら、（１９９３）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３２：１０６０７－１０６１３；Ｄａｔ
ｔａ，Ｒ．ら、（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：１
０１４－１０１５３を参照）が挙げられる。ｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｉｎ ｖｉｖｏの哺乳
動物系で使用するための更なる例示的な誘導プロモーター系は、Ｇｉｎｇｒｉｃｈら（１
９９８）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２１：３７７－４０５にまとめられ
ている。
【0220】
本発明で使用するための例示的な誘導プロモーター系は、Ｔｅｔ系である。係る系は、
Ｇｏｓｓｅｎら（１９９３）によって記載されるＴｅｔシステムに基づく。例示的な実施
形態では、目的のポリヌクレオチドは、１つ以上のＴｅｔ操作（ＴｅｔＯ）部位を含むプ
ロモーターの制御下にある。非活性状態では、Ｔｅｔリプレッサー（ＴｅｔＲ）は、Ｔｅ
ｔＯ部位に結合し、プロモーターからの転写を抑制する。活性状態では、例えば、テトラ
サイクリン（Ｔｃ）、無水テトラサイクリン、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）、又はその活
性類似体などの誘導剤存在下で、誘導剤は、ＴｅｔＯからＴｅｔＲを放出させ、それによ
って、転写を行うことができる。ドキシサイクリンは、抗生物質であるテトラサイクリン
ファミリーの一員であり、１－ジメチルアミノ－２，４ａ，５，７，１２－ペンタヒドロ
キシ－１１－メチル－４，６－ジオキソ－１，４ａ，１１，１１ａ，１２，１２ａ－ヘキ
サヒドロテトラセン－３－カルボキサミドの化学名を有する。
Ｇｏｓｓｅｎら（１９９３）によって記載されるＴｅｔシステムに基づく。例示的な実施
形態では、目的のポリヌクレオチドは、１つ以上のＴｅｔ操作（ＴｅｔＯ）部位を含むプ
ロモーターの制御下にある。非活性状態では、Ｔｅｔリプレッサー（ＴｅｔＲ）は、Ｔｅ
ｔＯ部位に結合し、プロモーターからの転写を抑制する。活性状態では、例えば、テトラ
サイクリン（Ｔｃ）、無水テトラサイクリン、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）、又はその活
性類似体などの誘導剤存在下で、誘導剤は、ＴｅｔＯからＴｅｔＲを放出させ、それによ
って、転写を行うことができる。ドキシサイクリンは、抗生物質であるテトラサイクリン
ファミリーの一員であり、１－ジメチルアミノ－２，４ａ，５，７，１２－ペンタヒドロ
キシ－１１－メチル－４，６－ジオキソ－１，４ａ，１１，１１ａ，１２，１２ａ－ヘキ
サヒドロテトラセン－３－カルボキサミドの化学名を有する。
【0221】
一実施形態では、ＴｅｔＲは、哺乳類細胞、例えば、マウス又はヒト細胞における発現
のためにコドン最適化される。大部分のアミノ酸は、遺伝子コードの縮重により、１つよ
り多いコドンによりコードされており、核酸によりコードされるアミノ酸配列を何ら変更
することなく、所与の核酸のヌクレオチド配列の実質的な多様性を可能にする。しかし、
多くの生物は、使用コドンにおいて違いを示し、この違いは、「コドンバイアス」（すな
わち、所与のアミノ酸についての特定のコドンの使用に関する偏り）としても知られる。
コドンバイアスは、多くは、特定のコドンについての主なｔＲＮＡ種の存在と相関関係に
あり、ひいてはｍＲＮＡ翻訳の効率を高める。したがって、特定の生物（例えば、原核生
物）由来のコード配列は、コドン最適化を介して、異なる生物（例えば、真核生物）にお
ける発現の改善に合わせて調整されてもよい。
のためにコドン最適化される。大部分のアミノ酸は、遺伝子コードの縮重により、１つよ
り多いコドンによりコードされており、核酸によりコードされるアミノ酸配列を何ら変更
することなく、所与の核酸のヌクレオチド配列の実質的な多様性を可能にする。しかし、
多くの生物は、使用コドンにおいて違いを示し、この違いは、「コドンバイアス」（すな
わち、所与のアミノ酸についての特定のコドンの使用に関する偏り）としても知られる。
コドンバイアスは、多くは、特定のコドンについての主なｔＲＮＡ種の存在と相関関係に
あり、ひいてはｍＲＮＡ翻訳の効率を高める。したがって、特定の生物（例えば、原核生
物）由来のコード配列は、コドン最適化を介して、異なる生物（例えば、真核生物）にお
ける発現の改善に合わせて調整されてもよい。
【0222】
Ｔｅｔ系の他の特定の変形例としては、以下の「Ｔｅｔ－Ｏｆｆ」及び「Ｔｅｔ－Ｏｎ
」系が挙げられる。Ｔｅｔ－Ｏｆｆ系では、Ｔｃ又はＤｏｘ存在下、転写は不活性である
。この系では、テトラサイクリン制御性転写活性化タンパク質（ｔＴＡ）は、ヘルペス単
純ウイルス由来のＶＰ１６の強力な転写活性化ドメインに融合したＴｅｔＲで構成されて
おり、テトラサイクリン応答性プロモーター配列（ＴＲＥ）の転写制御下にある標的核酸
の発現を調整する。ＴＲＥは、プロモーター（一般的に、ヒトサイトメガロウイルス（ｈ
ＣＭＶ）前初期プロモーターに由来する最小プロモーター配列）に融合したＴｅｔＯ配列
コンカテマーで構成される。Ｔｃ又はＤｏｘが存在しない状態では、ｔＴＡはＴＲＥに結
合し、標的遺伝子の転写を活性化する。Ｔｃ又はＤｏｘが存在する状態では、ｔＴＡは、
ＴＲＥに結合することができず、標的遺伝子からの発現は、不活性なままである。
」系が挙げられる。Ｔｅｔ－Ｏｆｆ系では、Ｔｃ又はＤｏｘ存在下、転写は不活性である
。この系では、テトラサイクリン制御性転写活性化タンパク質（ｔＴＡ）は、ヘルペス単
純ウイルス由来のＶＰ１６の強力な転写活性化ドメインに融合したＴｅｔＲで構成されて
おり、テトラサイクリン応答性プロモーター配列（ＴＲＥ）の転写制御下にある標的核酸
の発現を調整する。ＴＲＥは、プロモーター（一般的に、ヒトサイトメガロウイルス（ｈ
ＣＭＶ）前初期プロモーターに由来する最小プロモーター配列）に融合したＴｅｔＯ配列
コンカテマーで構成される。Ｔｃ又はＤｏｘが存在しない状態では、ｔＴＡはＴＲＥに結
合し、標的遺伝子の転写を活性化する。Ｔｃ又はＤｏｘが存在する状態では、ｔＴＡは、
ＴＲＥに結合することができず、標的遺伝子からの発現は、不活性なままである。
【0223】
逆に、Ｔｅｔ－Ｏｎ系では、転写は、Ｔｃ又はＤｏｘが存在する状態で活性である。Ｔ
ｅｔ－Ｏｎ系は、逆テトラサイクリン制御転写活性化剤ｒｔＴＡに基づく。ｔＴＡと同様
に、ｒｔＴＡは、ＴｅｔＲリプレッサーとＶＰ１６転写活性化ドメインとで構成される融
合タンパク質である。しかし、ＴｅｔＲ ＤＮＡ結合部分中の４つのアミノ酸の変化は、
Ｄｏｘ存在下で標的転写遺伝子のＴＲＥ中のｔｅｔＯ配列のみを認識することができるよ
うに、ｒｔＴＡの結合特性を変える。したがって、Ｔｅｔ－Ｏｎシステムでは、ＴＲＥ制
御された標的遺伝子の転写は、Ｄｏｘの存在下、ｒｔＴＡのみによって刺激される。
ｅｔ－Ｏｎ系は、逆テトラサイクリン制御転写活性化剤ｒｔＴＡに基づく。ｔＴＡと同様
に、ｒｔＴＡは、ＴｅｔＲリプレッサーとＶＰ１６転写活性化ドメインとで構成される融
合タンパク質である。しかし、ＴｅｔＲ ＤＮＡ結合部分中の４つのアミノ酸の変化は、
Ｄｏｘ存在下で標的転写遺伝子のＴＲＥ中のｔｅｔＯ配列のみを認識することができるよ
うに、ｒｔＴＡの結合特性を変える。したがって、Ｔｅｔ－Ｏｎシステムでは、ＴＲＥ制
御された標的遺伝子の転写は、Ｄｏｘの存在下、ｒｔＴＡのみによって刺激される。
【0224】
別の誘導プロモーター系は、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のｌａｃリプレッサー系である。（Ｂｒ
ｏｗｎら、Ｃｅｌｌ ４９：６０３－６１２（１９８７）を参照。）ｌａｃリプレッサー
系は、ｌａｃオペレーター（ｌａｃＯ）を含むプロモーターに作動可能に接続する目的の
ポリヌクレオチドの転写を制御することによって機能する。ｌａｃリプレッサー（ｌａｃ
Ｒ）は、ＬａｃＯに結合し、それにより、目的のポリヌクレオチドの転写を抑制する。目
的のポリヌクレオチドの発現は、適切な誘導剤、例えば、イソプロピル－β－Ｄ－チオガ
ラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって誘導される。
ｏｗｎら、Ｃｅｌｌ ４９：６０３－６１２（１９８７）を参照。）ｌａｃリプレッサー
系は、ｌａｃオペレーター（ｌａｃＯ）を含むプロモーターに作動可能に接続する目的の
ポリヌクレオチドの転写を制御することによって機能する。ｌａｃリプレッサー（ｌａｃ
Ｒ）は、ＬａｃＯに結合し、それにより、目的のポリヌクレオチドの転写を抑制する。目
的のポリヌクレオチドの発現は、適切な誘導剤、例えば、イソプロピル－β－Ｄ－チオガ
ラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって誘導される。
【0225】
ポリペプチド又はその部分の発現を評価するために、細胞に導入される発現ベクターは
、ウイルスベクターによってトランスフェクションされるか、又は感染することが求めら
れる細胞集合からの発現細胞の同定及び選択を容易にするために、選択可能なマーカー遺
伝子又はレポーター遺伝子又はこれらを両方とも含んでいてもよい。他の態様では、選択
可能なマーカーは、ＤＮＡの別個の断片上に保有され、同時導入法で使用されてもよい。
選択可能なマーカー及びレポーター遺伝子が両方とも、宿主細胞における発現を可能にす
るために適切な調節配列と隣接していてもよい。有用な選択可能なマーカーとしては、例
えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性遺伝子が挙げられる。
、ウイルスベクターによってトランスフェクションされるか、又は感染することが求めら
れる細胞集合からの発現細胞の同定及び選択を容易にするために、選択可能なマーカー遺
伝子又はレポーター遺伝子又はこれらを両方とも含んでいてもよい。他の態様では、選択
可能なマーカーは、ＤＮＡの別個の断片上に保有され、同時導入法で使用されてもよい。
選択可能なマーカー及びレポーター遺伝子が両方とも、宿主細胞における発現を可能にす
るために適切な調節配列と隣接していてもよい。有用な選択可能なマーカーとしては、例
えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性遺伝子が挙げられる。
【0226】
レポーター遺伝子は、トランスフェクションされ得る細胞を同定するため、また、調節
配列の機能性を評価するために使用される。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエント
生物又は組織内に存在しないか、又は発現していない遺伝子であり、一部の容易に検出可
能な特性、例えば、酵素活性によって発現が示されるポリペプチドをコードする遺伝子で
ある。ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後、レポーター遺伝子の発現を好適な時間
でアッセイする。好適なレポーター遺伝子としては、ルシフェラーゼ、β－ガラクトシダ
ーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌アルカリホスファターゼ
、又は緑色蛍光タンパク質遺伝子をコードする遺伝子を挙げることができる（例えば、Ｕ
ｉ－Ｔｅｌら、２０００ ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９：７９－８２）。好適な発
現系は周知であり、既知の技術を使用して調製することができ、又は商業的に入手するこ
とができる。一般に、レポーター遺伝子の発現の最高レベルを示す最小５’隣接領域を有
する構築物は、プロモーターとして同定される。このようなプロモーター領域を、レポー
ター遺伝子に接続させて、プロモーターによって促される転写を調節する能力について薬
剤を評価するために使用してもよい。
配列の機能性を評価するために使用される。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエント
生物又は組織内に存在しないか、又は発現していない遺伝子であり、一部の容易に検出可
能な特性、例えば、酵素活性によって発現が示されるポリペプチドをコードする遺伝子で
ある。ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後、レポーター遺伝子の発現を好適な時間
でアッセイする。好適なレポーター遺伝子としては、ルシフェラーゼ、β－ガラクトシダ
ーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌アルカリホスファターゼ
、又は緑色蛍光タンパク質遺伝子をコードする遺伝子を挙げることができる（例えば、Ｕ
ｉ－Ｔｅｌら、２０００ ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９：７９－８２）。好適な発
現系は周知であり、既知の技術を使用して調製することができ、又は商業的に入手するこ
とができる。一般に、レポーター遺伝子の発現の最高レベルを示す最小５’隣接領域を有
する構築物は、プロモーターとして同定される。このようなプロモーター領域を、レポー
ター遺伝子に接続させて、プロモーターによって促される転写を調節する能力について薬
剤を評価するために使用してもよい。
【0227】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲを
コードする核酸が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲをコードする核酸は
、ｃａＴＣＲの全てのポリペプチド鎖をコードする１つ以上の核酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、１つ以上の核酸配列はそれぞれ、別個のベクター上に位置する。いくつ
かの実施形態では、核酸配列の少なくとも一部は、同じベクター上に位置する。ベクター
は、例えば、哺乳動物発現ベクター及びウイルスベクター（例えば、レトロウイルス、ア
デノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルス由来のもの）
からなる群から選択されてもよい。例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖と第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖とを含み、ｃａＴＣＲ
をコードする核酸が、第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、
第２のｃａＴＣＲ鎖をコードする第２の核酸配列とを含む、二量体である。いくつかの実
施形態では、第１の核酸配列は、第１のベクター上に位置し、第２の核酸配列は、第２の
ベクター上に位置する。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列と第２の核酸配列は、
同じベクター上に位置する。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、第１のプロモ
ーターの制御下にあり、第２の核酸配列は、第２のプロモーターの制御下にある。いくつ
かの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。い
くつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有す
る。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列及び第２の核酸配列は、多重シストロン性
（例えば、二重シストロン性）ベクターにおいて、単一プロモーター制御下で、単一の転
写物として発現される。例えば、Ｋｉｍ，ＪＨら、ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６（４）：ｅ１８
５５６、２０１１を参照。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター、第２のプロモ
ーター及び／又は単一のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、第１
の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細胞中の第２の核酸
配列の発現レベルとほぼ同じである。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主
細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベ
ルの少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれか
、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞な
ど）における発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベルの約１／２以
下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５以下のいずれか、又はもっと少な
い）。発現は、ｍＲＮＡレベル又はタンパク質レベルで求めることができる。ｍＲＮＡ発
現レベルは、ノーザンブロット、定量的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロアレイ解析などを含む種
々の周知の方法を用い、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を測定することによって求める
ことができる。タンパク質の発現レベルは、免疫細胞化学染色、酵素結合免疫吸着アッセ
イ（ＥＬＩＳＡ）、ウェスタンブロット分析、発光アッセイ、質量分析、高速液体クロマ
トグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析などを含む既知の方法に
よって測定することができる。本明細書に記載される実施形態の特徴は、ｃａＴＣＲをコ
ードする核酸が、３つ以上の核酸配列を含む実施形態（例えば、ｃａＴＣＲが、３つ以上
の別個のポリペプチド鎖を含む場合）、又は単一の核酸配列を含む実施形態（例えば、ｃ
ａＴＣＲが、単一のポリペプチド鎖を含む場合）を包含するように採用され、組み合わさ
せることが可能であることを理解すべきである。
コードする核酸が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲをコードする核酸は
、ｃａＴＣＲの全てのポリペプチド鎖をコードする１つ以上の核酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、１つ以上の核酸配列はそれぞれ、別個のベクター上に位置する。いくつ
かの実施形態では、核酸配列の少なくとも一部は、同じベクター上に位置する。ベクター
は、例えば、哺乳動物発現ベクター及びウイルスベクター（例えば、レトロウイルス、ア
デノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルス由来のもの）
からなる群から選択されてもよい。例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖と第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖とを含み、ｃａＴＣＲ
をコードする核酸が、第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、
第２のｃａＴＣＲ鎖をコードする第２の核酸配列とを含む、二量体である。いくつかの実
施形態では、第１の核酸配列は、第１のベクター上に位置し、第２の核酸配列は、第２の
ベクター上に位置する。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列と第２の核酸配列は、
同じベクター上に位置する。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、第１のプロモ
ーターの制御下にあり、第２の核酸配列は、第２のプロモーターの制御下にある。いくつ
かの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。い
くつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有す
る。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列及び第２の核酸配列は、多重シストロン性
（例えば、二重シストロン性）ベクターにおいて、単一プロモーター制御下で、単一の転
写物として発現される。例えば、Ｋｉｍ，ＪＨら、ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６（４）：ｅ１８
５５６、２０１１を参照。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター、第２のプロモ
ーター及び／又は単一のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、第１
の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細胞中の第２の核酸
配列の発現レベルとほぼ同じである。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主
細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベ
ルの少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれか
、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞な
ど）における発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベルの約１／２以
下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５以下のいずれか、又はもっと少な
い）。発現は、ｍＲＮＡレベル又はタンパク質レベルで求めることができる。ｍＲＮＡ発
現レベルは、ノーザンブロット、定量的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロアレイ解析などを含む種
々の周知の方法を用い、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を測定することによって求める
ことができる。タンパク質の発現レベルは、免疫細胞化学染色、酵素結合免疫吸着アッセ
イ（ＥＬＩＳＡ）、ウェスタンブロット分析、発光アッセイ、質量分析、高速液体クロマ
トグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析などを含む既知の方法に
よって測定することができる。本明細書に記載される実施形態の特徴は、ｃａＴＣＲをコ
ードする核酸が、３つ以上の核酸配列を含む実施形態（例えば、ｃａＴＣＲが、３つ以上
の別個のポリペプチド鎖を含む場合）、又は単一の核酸配列を含む実施形態（例えば、ｃ
ａＴＣＲが、単一のポリペプチド鎖を含む場合）を包含するように採用され、組み合わさ
せることが可能であることを理解すべきである。
【0228】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係る
第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含む二量体ｃａＴＣＲをコードする核
酸であって、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、
（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含み、第１の
核酸配列が、第１のベクター（例えば、レンチウイルスベクター）上に位置し、第１のプ
ロモーターに作動可能に接続し、第２の核酸配列が、第２のベクター（例えば、レンチウ
イルスベクター）上に位置し、第２のプロモーターに作動可能に接続する、核酸が提供さ
れる。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列
を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、異な
る配列を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモ
ーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細
胞など）における発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベルとほぼ同
じである。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）におけ
る発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベルの少なくとも約２倍であ
る（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれか、又はもっと多い）。いく
つかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが
、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベルの約１／２以下である（例えば、約１／
２、１／３、１／４、１／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形態
では、第１のベクター及び／又は第２のベクターは、ウイルスベクター（例えば、レンチ
ウイルスベクター）である。
第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含む二量体ｃａＴＣＲをコードする核
酸であって、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、
（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含み、第１の
核酸配列が、第１のベクター（例えば、レンチウイルスベクター）上に位置し、第１のプ
ロモーターに作動可能に接続し、第２の核酸配列が、第２のベクター（例えば、レンチウ
イルスベクター）上に位置し、第２のプロモーターに作動可能に接続する、核酸が提供さ
れる。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列
を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、異な
る配列を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモ
ーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細
胞など）における発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベルとほぼ同
じである。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）におけ
る発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベルの少なくとも約２倍であ
る（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれか、又はもっと多い）。いく
つかの実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが
、宿主細胞における第２の核酸配列の発現レベルの約１／２以下である（例えば、約１／
２、１／３、１／４、１／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形態
では、第１のベクター及び／又は第２のベクターは、ウイルスベクター（例えば、レンチ
ウイルスベクター）である。
【0229】
いくつかの実施形態では、ベクター（例えば、レンチウイルスベクター）であって、（
ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に接続し
た第１のプロモーターと、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の
核酸配列に作動可能に接続した第２のプロモーターとを含む、本明細書に記載のｃａＴＣ
Ｒのいずれかに係る第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含む二量体ｃａＴ
ＣＲをコードする核酸を含む、ベクターが提供される。いくつかの実施形態では、第１の
プロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第
１のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態で
は、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実
施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細
胞における第２の核酸配列の発現レベルとほぼ同じである。いくつかの実施形態では、第
１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細胞における第２
の核酸配列の発現レベルの少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、
４倍、５倍のいずれか、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は
、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発
現レベルの約１／２以下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５以下のいず
れか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター（
例えば、レンチウイルスベクター）である。
ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に接続し
た第１のプロモーターと、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の
核酸配列に作動可能に接続した第２のプロモーターとを含む、本明細書に記載のｃａＴＣ
Ｒのいずれかに係る第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含む二量体ｃａＴ
ＣＲをコードする核酸を含む、ベクターが提供される。いくつかの実施形態では、第１の
プロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第
１のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態で
は、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実
施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細
胞における第２の核酸配列の発現レベルとほぼ同じである。いくつかの実施形態では、第
１の核酸配列は、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細胞における第２
の核酸配列の発現レベルの少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、
４倍、５倍のいずれか、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は
、宿主細胞（Ｔ細胞など）における発現レベルが、宿主細胞における第２の核酸配列の発
現レベルの約１／２以下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５以下のいず
れか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター（
例えば、レンチウイルスベクター）である。
【0230】
いくつかの実施形態では、ベクター（例えば、レンチウイルスベクター）であって、本
明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係る第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド
鎖とを含む二量体ｃａＴＣＲをコードする核酸を含み、ｃａＴＣＲが、（ａ）ｃａＴＣＲ
の第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリ
ペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含み、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、
単一のプロモーターの制御下にある、ベクターが提供される。いくつかの実施形態では、
プロモーターは、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し、第１の核酸配列には、
配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配
列の５’に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
と第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡとして転写される。いくつかの
実施形態では、プロモーターは、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し、第２の
核酸配列には、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第２の核酸配列の３’末端
を第１の核酸配列の５’に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、
Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、
第１の核酸配列と第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡとして転写され
る。いくつかの実施形態では、プロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では
、ベクターは、ウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係る第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド
鎖とを含む二量体ｃａＴＣＲをコードする核酸を含み、ｃａＴＣＲが、（ａ）ｃａＴＣＲ
の第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリ
ペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含み、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、
単一のプロモーターの制御下にある、ベクターが提供される。いくつかの実施形態では、
プロモーターは、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し、第１の核酸配列には、
配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配
列の５’に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
と第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡとして転写される。いくつかの
実施形態では、プロモーターは、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し、第２の
核酸配列には、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第２の核酸配列の３’末端
を第１の核酸配列の５’に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、
Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、
第１の核酸配列と第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡとして転写され
る。いくつかの実施形態では、プロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では
、ベクターは、ウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
【0231】
遺伝子を細胞に導入し、発現させる方法は、当該技術分野において既知である。発現ベ
クターの文脈において、ベクターは、当該技術分野における任意の方法により、宿主細胞
、例えば、哺乳類、細菌、酵母又は昆虫細胞に容易に導入することができる。例えば、発
現ベクターは、物理的、化学的又は生物学的手段によって、宿主細胞に移行することがで
きる。
クターの文脈において、ベクターは、当該技術分野における任意の方法により、宿主細胞
、例えば、哺乳類、細菌、酵母又は昆虫細胞に容易に導入することができる。例えば、発
現ベクターは、物理的、化学的又は生物学的手段によって、宿主細胞に移行することがで
きる。
【0232】
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入する物理的な方法としては、リン酸カルシウム沈殿
、リポフェクション、粒子衝突、マイクロインジェクション、エレクトロポレーションな
どが挙げられる。ベクター及び／又は外因性核酸を含む細胞を産生する方法は、当該技術
分野において周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２００１、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ
Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を参照。いくつかの実施形
態では、宿主細胞へのポリヌクレオチドの導入は、リン酸カルシウムによるトランスフェ
クションによって行われる。
、リポフェクション、粒子衝突、マイクロインジェクション、エレクトロポレーションな
どが挙げられる。ベクター及び／又は外因性核酸を含む細胞を産生する方法は、当該技術
分野において周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２００１、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ
Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を参照。いくつかの実施形
態では、宿主細胞へのポリヌクレオチドの導入は、リン酸カルシウムによるトランスフェ
クションによって行われる。
【0233】
宿主細胞に目的のポリヌクレオチドを導入するための生物学的方法としては、ＤＮＡ及
びＲＮＡベクターの使用が挙げられる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクター
は、哺乳動物（例えば、ヒト）の細胞に遺伝子を挿入するための最も広く使用されている
方法となっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、ヘル
ペスウイルス１、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルスなどに由来していてもよい。例
えば、米国特許第５，３５０，６７４号及び同第５，５８５，３６２号も参照。
びＲＮＡベクターの使用が挙げられる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクター
は、哺乳動物（例えば、ヒト）の細胞に遺伝子を挿入するための最も広く使用されている
方法となっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、ヘル
ペスウイルス１、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルスなどに由来していてもよい。例
えば、米国特許第５，３５０，６７４号及び同第５，５８５，３６２号も参照。
【0234】
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための化学的手段としては、コロイド状分散系
、例えば、高分子複合体、ナノカプセル、微小球、ビーズ、水中油エマルションを含む脂
質由来の系、ミセル、混合ミセル及びリポソームが挙げられる。ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉ
ｎ ｖｉｖｏでの送達ビヒクルとして使用するための例示的なコロイド系は、リポソーム
（例えば、人工膜小胞）である。
、例えば、高分子複合体、ナノカプセル、微小球、ビーズ、水中油エマルションを含む脂
質由来の系、ミセル、混合ミセル及びリポソームが挙げられる。ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉ
ｎ ｖｉｖｏでの送達ビヒクルとして使用するための例示的なコロイド系は、リポソーム
（例えば、人工膜小胞）である。
【0235】
非ウイルス送達系が利用される場合、例示的な送達ビヒクルは、リポソームである。脂
質製剤の使用は、核酸の宿主細胞への（ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ又はｉｎ ｖ
ｉｖｏで）導入について想定されている。別の態様では、核酸は、脂質と会合していても
よい。脂質と会合する核酸は、リポソームの水性内側に封入され、リポソームの脂質二重
層内に散在し、リポソーム及びオリゴヌクレオチドの両方に会合する接続分子を介してリ
ポソームに接続し、リポソーム内に捕捉され、リポソームと複合体化し、脂質を含有する
溶液中に分散し、脂質と混合され、脂質と組み合わせられ、脂質中の懸濁物として含まれ
、ミセルと共に含まれるか、又はミセルと複合体化し、又はその他の様式で脂質と会合し
てもよい。脂質、脂質／ＤＮＡ又は脂質／発現ベクターの会合組成物は、溶液中の任意の
特定の構造に限定されない。例えば、これらは、ミセルとして、又は「潰れた」構造を有
する二重層構造で存在してもよい。これらはまた、単に溶液中に散在してもよく、場合に
よっては、大きさ又は形状が均一ではない凝集体を形成してもよい。脂質は、天然に存在
し得る脂肪物質又は合成脂質である。例えば、脂質としては、天然に細胞質中に生じる脂
肪液滴や、長鎖脂肪族炭化水素及びその誘導体（例えば、脂肪酸、アルコール、アミン、
アミノアルコール及びアルデヒド）を含む化合物群が挙げられる。
質製剤の使用は、核酸の宿主細胞への（ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ又はｉｎ ｖ
ｉｖｏで）導入について想定されている。別の態様では、核酸は、脂質と会合していても
よい。脂質と会合する核酸は、リポソームの水性内側に封入され、リポソームの脂質二重
層内に散在し、リポソーム及びオリゴヌクレオチドの両方に会合する接続分子を介してリ
ポソームに接続し、リポソーム内に捕捉され、リポソームと複合体化し、脂質を含有する
溶液中に分散し、脂質と混合され、脂質と組み合わせられ、脂質中の懸濁物として含まれ
、ミセルと共に含まれるか、又はミセルと複合体化し、又はその他の様式で脂質と会合し
てもよい。脂質、脂質／ＤＮＡ又は脂質／発現ベクターの会合組成物は、溶液中の任意の
特定の構造に限定されない。例えば、これらは、ミセルとして、又は「潰れた」構造を有
する二重層構造で存在してもよい。これらはまた、単に溶液中に散在してもよく、場合に
よっては、大きさ又は形状が均一ではない凝集体を形成してもよい。脂質は、天然に存在
し得る脂肪物質又は合成脂質である。例えば、脂質としては、天然に細胞質中に生じる脂
肪液滴や、長鎖脂肪族炭化水素及びその誘導体（例えば、脂肪酸、アルコール、アミン、
アミノアルコール及びアルデヒド）を含む化合物群が挙げられる。
【0236】
外因性核酸を宿主細胞に導入するために使用される方法、又はその他、本発明の阻害剤
に細胞をさらす方法に関わらず、宿主細胞中の組換えＤＮＡ配列の存在を確認するために
、様々なアッセイを実施することができる。このようなアッセイとしては、例えば、サザ
ンブロット法及びノーザンブロット法、ＲＴ－ＰＣＲ及びＰＣＲなどの当業者に周知の「
分子生物学的」アッセイ、「生化学」アッセイ、例えば、免疫学的手法（ＥＬＩＳＡ及ぶ
ウェスタンブロット法）によって、又は本発明の範囲内に含まれる薬剤を同定するための
本明細書に記載のアッセイによる、例えば、特定のペプチドの有無を検出するものが挙げ
られる。
ｃａＴＣＲエフェクター細胞
に細胞をさらす方法に関わらず、宿主細胞中の組換えＤＮＡ配列の存在を確認するために
、様々なアッセイを実施することができる。このようなアッセイとしては、例えば、サザ
ンブロット法及びノーザンブロット法、ＲＴ－ＰＣＲ及びＰＣＲなどの当業者に周知の「
分子生物学的」アッセイ、「生化学」アッセイ、例えば、免疫学的手法（ＥＬＩＳＡ及ぶ
ウェスタンブロット法）によって、又は本発明の範囲内に含まれる薬剤を同定するための
本明細書に記載のアッセイによる、例えば、特定のペプチドの有無を検出するものが挙げ
られる。
ｃａＴＣＲエフェクター細胞
【0237】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲを
その表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）が提供される。いくつかの実
施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲをコードする核酸を含み、ｃａＴＣＲは、
核酸から発現して、エフェクター細胞表面に局在する。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、外因的に発現し、エフェクター細胞と組み合わされる。いくつかの実施形態では
、エフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、
細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞から
なる群から選択される。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴ
ＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態
では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、
ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか、又は、Ｔ細胞はγδＴ細胞であり、導入され
たｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実
施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤの由来となる内在性ＴＣＲサブ
ユニットのうちの一方又は両方の発現を遮断するか、又は減少させるように改変される。
例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現
を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣ
ＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞は
、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたγδＴ
細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖に由来する配列を含
む。遺伝子発現を破壊する細胞の改変としては、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮ
Ａ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ系又はＴＡＬＥＮ系
の遺伝子ノックアウト）などを含む、当該技術分野において既知の任意のそのような技術
が挙げられる。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、キメラ共刺激受容体（Ｃ
ＳＲ）を更に含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲが介在す
る免疫応答を増強することが可能な分泌二次エフェクター（ＳＳＥ）を分泌することが可
能である。
その表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）が提供される。いくつかの実
施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲをコードする核酸を含み、ｃａＴＣＲは、
核酸から発現して、エフェクター細胞表面に局在する。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、外因的に発現し、エフェクター細胞と組み合わされる。いくつかの実施形態では
、エフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、
細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞から
なる群から選択される。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴ
ＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態
では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、
ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか、又は、Ｔ細胞はγδＴ細胞であり、導入され
たｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実
施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤの由来となる内在性ＴＣＲサブ
ユニットのうちの一方又は両方の発現を遮断するか、又は減少させるように改変される。
例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現
を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣ
ＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞は
、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたγδＴ
細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖に由来する配列を含
む。遺伝子発現を破壊する細胞の改変としては、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮ
Ａ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ系又はＴＡＬＥＮ系
の遺伝子ノックアウト）などを含む、当該技術分野において既知の任意のそのような技術
が挙げられる。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、キメラ共刺激受容体（Ｃ
ＳＲ）を更に含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲが介在す
る免疫応答を増強することが可能な分泌二次エフェクター（ＳＳＥ）を分泌することが可
能である。
【0238】
例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａ
ＴＣＲをコードする核酸を含むエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴＣ
Ｒが、核酸から発現し、エフェクター細胞表面に局在化する、エフェクター細胞が提供さ
れる。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲをコードする核酸は、ｃａＴＣＲの第１のポ
リペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコー
ドする第２の核酸配列とを含む。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、第１のベ
クター上に位置し、第２の核酸配列は、第２のベクター上に位置する。いくつかの実施形
態では、第１の核酸配列と第２の核酸配列は、同じベクター上に位置する。ベクターは、
例えば、哺乳動物発現ベクター及びウイルスベクター（例えば、レトロウイルス、アデノ
ウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルス由来のもの）から
なる群から選択されてもよい。いくつかの実施形態では、ベクターのうちの１つ以上は、
エフェクター細胞の宿主ゲノムに組み込まれる。いくつかの実施形態では、第１の核酸配
列は、第１のプロモーターの制御下にあり、第２の核酸配列は、第２のプロモーターの制
御下にある。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同
じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは
、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１の核酸と第２の核酸は、単一のプ
ロモーターの制御下にある。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター、第２のプロ
モーター及び／又は単一のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、第
１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。いくつか
の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なく
とも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれか、又はもっ
と多い）。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチ
ド鎖の発現の約１／２以下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５以下のい
ずれか、又はもっと少ない）。発現は、ｍＲＮＡレベル又はタンパク質レベルで求めるこ
とができる。ｍＲＮＡ発現レベルは、ノーザンブロット、定量的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロ
アレイ解析などを含む種々の周知の方法を用い、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を測定
することによって求めることができる。タンパク質の発現レベルは、免疫細胞化学染色、
酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウェスタンブロット分析、発光アッセイ、質
量分析、高速液体クロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析
などを含む既知の方法によって測定することができる。いくつかの実施形態では、エフェ
クター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
ＴＣＲをコードする核酸を含むエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴＣ
Ｒが、核酸から発現し、エフェクター細胞表面に局在化する、エフェクター細胞が提供さ
れる。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲをコードする核酸は、ｃａＴＣＲの第１のポ
リペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコー
ドする第２の核酸配列とを含む。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は、第１のベ
クター上に位置し、第２の核酸配列は、第２のベクター上に位置する。いくつかの実施形
態では、第１の核酸配列と第２の核酸配列は、同じベクター上に位置する。ベクターは、
例えば、哺乳動物発現ベクター及びウイルスベクター（例えば、レトロウイルス、アデノ
ウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルス由来のもの）から
なる群から選択されてもよい。いくつかの実施形態では、ベクターのうちの１つ以上は、
エフェクター細胞の宿主ゲノムに組み込まれる。いくつかの実施形態では、第１の核酸配
列は、第１のプロモーターの制御下にあり、第２の核酸配列は、第２のプロモーターの制
御下にある。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同
じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは
、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１の核酸と第２の核酸は、単一のプ
ロモーターの制御下にある。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター、第２のプロ
モーター及び／又は単一のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、第
１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。いくつか
の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なく
とも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれか、又はもっ
と多い）。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチ
ド鎖の発現の約１／２以下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５以下のい
ずれか、又はもっと少ない）。発現は、ｍＲＮＡレベル又はタンパク質レベルで求めるこ
とができる。ｍＲＮＡ発現レベルは、ノーザンブロット、定量的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロ
アレイ解析などを含む種々の周知の方法を用い、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を測定
することによって求めることができる。タンパク質の発現レベルは、免疫細胞化学染色、
酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウェスタンブロット分析、発光アッセイ、質
量分析、高速液体クロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析
などを含む既知の方法によって測定することができる。いくつかの実施形態では、エフェ
クター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
【0239】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係る
ｃａＴＣＲをその表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であ
って、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコー
ドする核酸配列に作動可能に接続した第１のプロモーターを含む第１の核酸と、（ｂ）ｃ
ａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする核酸配列に作動可能に接続した第２のプロ
モーターを含む第２の核酸とを含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸から発現し、第
２のポリペプチド鎖が第２の核酸から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、ｃａＴＣＲが、エ
フェクター細胞の表面に局在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供される。いくつか
の実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。いく
つかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有する
。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターは、誘導
性である。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチ
ド鎖の発現とほぼ同じである。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は
、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、
３倍、４倍、５倍のいずれか、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１のポリ
ペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２以下である（例えば、約１
／２、１／３、１／４、１／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形
態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニッ
トを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であ
り、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか
、又は、エフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは
、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞
は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤの由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの一方又は両方
の発現を遮断するか、又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態で
は、エフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させる
ように改変されたαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及び
β鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発
現を遮断するか、又は減少させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴ
ＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、
エフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサ
プレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ベクターは、エ
フェクター細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（例えば、レンチウイルス
ベクター）である。
ｃａＴＣＲをその表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であ
って、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコー
ドする核酸配列に作動可能に接続した第１のプロモーターを含む第１の核酸と、（ｂ）ｃ
ａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする核酸配列に作動可能に接続した第２のプロ
モーターを含む第２の核酸とを含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸から発現し、第
２のポリペプチド鎖が第２の核酸から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、ｃａＴＣＲが、エ
フェクター細胞の表面に局在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供される。いくつか
の実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。いく
つかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有する
。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターは、誘導
性である。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチ
ド鎖の発現とほぼ同じである。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は
、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、
３倍、４倍、５倍のいずれか、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１のポリ
ペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２以下である（例えば、約１
／２、１／３、１／４、１／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形
態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニッ
トを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であ
り、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか
、又は、エフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは
、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞
は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤの由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの一方又は両方
の発現を遮断するか、又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態で
は、エフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させる
ように改変されたαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及び
β鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発
現を遮断するか、又は減少させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴ
ＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、
エフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサ
プレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ベクターは、エ
フェクター細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（例えば、レンチウイルス
ベクター）である。
【0240】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲを
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列に作動可能に接続した第１のプロモーターを含む第１のベクターと、（ｂ）ｃａ
ＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列に作動可能に接続した第２の
プロモーターを含む第２のベクターとを含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列か
ら発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、
ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供
される。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同じ配
列を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、異
なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター及び／又は第２のプロ
モーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、
第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。いくつかの実施形態では、第１のポリペ
プチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２倍である（例えば、少
なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれか、又はもっと多い）。いくつかの実施形態
では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２以下であ
る（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。
いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞
はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来
する配列を含むか、又は、エフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲ
のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、
エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤの由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのう
ちの一方又は両方の発現を遮断するか、又は減少させるように改変される。例えば、いく
つかの実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか
、又は減少させるように改変されたαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤ
は、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及
び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたγδＴ細胞であり、
導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつか
の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキ
ラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では
、第１ベクター及び第２のベクターは、エフェクター細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウ
イルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列に作動可能に接続した第１のプロモーターを含む第１のベクターと、（ｂ）ｃａ
ＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列に作動可能に接続した第２の
プロモーターを含む第２のベクターとを含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列か
ら発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、
ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供
される。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、同じ配
列を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターと第２のプロモーターは、異
なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター及び／又は第２のプロ
モーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、
第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。いくつかの実施形態では、第１のポリペ
プチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２倍である（例えば、少
なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれか、又はもっと多い）。いくつかの実施形態
では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２以下であ
る（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。
いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞
はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来
する配列を含むか、又は、エフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲ
のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、
エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤの由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのう
ちの一方又は両方の発現を遮断するか、又は減少させるように改変される。例えば、いく
つかの実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか
、又は減少させるように改変されたαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤ
は、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及
び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたγδＴ細胞であり、
導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつか
の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキ
ラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では
、第１ベクター及び第２のベクターは、エフェクター細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウ
イルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
【0241】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲを
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列に作動可能に接続した第１のプロモーターと、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペ
プチド鎖をコードする第２の核酸配列に作動可能に接続した第２のプロモーターとを含み
、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核
酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局
在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供される。いくつかの実施形態では、第１のプ
ロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第１
のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では
、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実施
形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じであ
る。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の
発現の少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれ
か、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２
のポリペプチド鎖の発現の約１／２以下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１
／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞
は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、
いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲ
のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞
はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来
する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤ
の由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの一方又は両方の発現を遮断するか、又は
減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、
ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ細
胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む
か、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少
させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲ
γ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、細胞
毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる
群から選択される。いくつかの実施形態では、第１ベクター及び第２のベクターは、エフ
ェクター細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベ
クター）である。
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列に作動可能に接続した第１のプロモーターと、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペ
プチド鎖をコードする第２の核酸配列に作動可能に接続した第２のプロモーターとを含み
、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核
酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局
在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供される。いくつかの実施形態では、第１のプ
ロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第１
のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では
、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実施
形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じであ
る。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の
発現の少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれ
か、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２
のポリペプチド鎖の発現の約１／２以下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１
／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞
は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、
いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲ
のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞
はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来
する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤ
の由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの一方又は両方の発現を遮断するか、又は
減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、
ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ細
胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む
か、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少
させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲ
γ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、細胞
毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる
群から選択される。いくつかの実施形態では、第１ベクター及び第２のベクターは、エフ
ェクター細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベ
クター）である。
【0242】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲを
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列に作動可能に接続した第１のプロモーターと、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペ
プチド鎖をコードする第２の核酸配列に作動可能に接続した第２のプロモーターとを含み
、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核
酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局
在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供される。いくつかの実施形態では、第１のプ
ロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第１
のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では
、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実施
形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じであ
る。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の
発現の少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれ
か、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２
のポリペプチド鎖の発現の約１／２以下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１
／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞
は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、
いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲ
のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞
はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来
する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤ
の由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの一方又は両方の発現を遮断するか、又は
減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、
ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ細
胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む
か、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少
させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲ
γ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、細胞
毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる
群から選択される。
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列に作動可能に接続した第１のプロモーターと、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペ
プチド鎖をコードする第２の核酸配列に作動可能に接続した第２のプロモーターとを含み
、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核
酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局
在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供される。いくつかの実施形態では、第１のプ
ロモーターと第２のプロモーターは、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第１
のプロモーターと第２のプロモーターは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では
、第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターは、誘導性である。いくつかの実施
形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じであ
る。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の
発現の少なくとも約２倍である（例えば、少なくとも約２倍、３倍、４倍、５倍のいずれ
か、又はもっと多い）。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２
のポリペプチド鎖の発現の約１／２以下である（例えば、約１／２、１／３、１／４、１
／５以下のいずれか、又はもっと少ない）。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞
は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、
いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲ
のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞
はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来
する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤ
の由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの一方又は両方の発現を遮断するか、又は
減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、
ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ細
胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む
か、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少
させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲ
γ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、細胞
毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる
群から選択される。
【0243】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲを
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列と、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを
含み、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にあり、第１の
ポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列か
ら発現して、ｃａＴＣＲを形成し、ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、
ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供される。いくつかの実施形態では、プロモーターは、
第１の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し、第１の核酸配列には、配列内リボソーム
進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’に接続す
る自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ）をコードする
核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列と第２の核酸配列
が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡとして転写される。いくつかの実施形態では、プ
ロモーターは、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し、第２の核酸配列には、配
列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ
）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列と
第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡとして転写される。いくつかの実
施形態では、プロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、エフェクター細
胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば
、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣ
ＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細
胞はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由
来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ
Ｄの由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの一方又は両方の発現を遮断するか、又
は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は
、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ
細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含
むか、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減
少させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣ
Ｒγ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、細
胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からな
る群から選択される。いくつかの実施形態では、ベクターは、エフェクター細胞の宿主ゲ
ノムに組み込まれたウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列と、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを
含み、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にあり、第１の
ポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列か
ら発現して、ｃａＴＣＲを形成し、ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、
ｃａＴＣＲエフェクター細胞が提供される。いくつかの実施形態では、プロモーターは、
第１の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し、第１の核酸配列には、配列内リボソーム
進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’に接続す
る自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ）をコードする
核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列と第２の核酸配列
が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡとして転写される。いくつかの実施形態では、プ
ロモーターは、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し、第２の核酸配列には、配
列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ
）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列と
第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡとして転写される。いくつかの実
施形態では、プロモーターは、誘導性である。いくつかの実施形態では、エフェクター細
胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば
、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣ
ＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細
胞はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由
来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ
Ｄの由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの一方又は両方の発現を遮断するか、又
は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は
、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ
細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含
むか、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減
少させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣ
Ｒγ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、細
胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からな
る群から選択される。いくつかの実施形態では、ベクターは、エフェクター細胞の宿主ゲ
ノムに組み込まれたウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
【0244】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲを
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列と、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを
含む、宿主ゲノムに組み込まれたレンチウイルスベクターを含み、第１の核酸配列と第２
の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にあり、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸
配列から発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形
成し、ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞
が提供される。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し
たプロモーターが存在し、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第１の核酸配列
の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ
２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リン
カーが存在し、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡ
として転写される。いくつかの実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に接
続したプロモーターが存在し、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第２の核酸
配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば
、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸
リンカーが存在し、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲ
ＮＡとして転写される。いくつかの実施形態では、プロモーターは、誘導性である。いく
つかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣ
Ｒサブユニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はα
βＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する
配列を含むか、又は、エフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴ
ＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフ
ェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤの由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの
一方又は両方の発現を遮断するか、又は減少させるように改変される。例えば、いくつか
の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又
は減少させるように改変されたαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、
ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／
又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入
されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実
施形態では、エフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー
Ｔ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及びＳＳＥの調製
その表面上で発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞が、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の
核酸配列と、（ｂ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを
含む、宿主ゲノムに組み込まれたレンチウイルスベクターを含み、第１の核酸配列と第２
の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にあり、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸
配列から発現し、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形
成し、ｃａＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ｃａＴＣＲエフェクター細胞
が提供される。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に接続し
たプロモーターが存在し、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第１の核酸配列
の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば、Ｐ
２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リン
カーが存在し、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲＮＡ
として転写される。いくつかの実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に接
続したプロモーターが存在し、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、及び第２の核酸
配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に接続する自己切断型２Ａペプチド（例えば
、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ又はＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸
リンカーが存在し、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、プロモーター制御下、単一のＲ
ＮＡとして転写される。いくつかの実施形態では、プロモーターは、誘導性である。いく
つかの実施形態では、エフェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣ
Ｒサブユニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、エフェクター細胞はα
βＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲδ及びγ鎖に由来する
配列を含むか、又は、エフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴ
ＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、エフ
ェクター細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲＤの由来となる内在性ＴＣＲサブユニットのうちの
一方又は両方の発現を遮断するか、又は減少させるように改変される。例えば、いくつか
の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又
は減少させるように改変されたαβＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、
ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含むか、又は、エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／
又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたγδＴ細胞であり、導入
されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実
施形態では、エフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー
Ｔ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及びＳＳＥの調製
【0245】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及びＳＳＥのいずれか
によれば、抗原結合モジュールは、モノクローナル抗体由来の配列を含むＦａｂ様抗原結
合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、モノク
ローナル抗体からのＶＨ、ＣＨ１、ＶＬ及びＣＬドメインを含む。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュールは、モノクローナル抗体由来の配列を含むＦｖ又はｓｃＦｖを含
む。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、モノクローナル抗体に由来する１
つ以上のＦａｂ、Ｆｖ及びｓｃＦｖを含む二重特異性融合ドメインを含む。モノクローナ
ル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５
（１９７５）及びＳｅｒｇｅｅｖａら、Ｂｌｏｏｄ、１１７（１６）：４２６２－４２７
２に記載されるような、例えば、ハイブリドーマ法を用いて調製することができる。
によれば、抗原結合モジュールは、モノクローナル抗体由来の配列を含むＦａｂ様抗原結
合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、モノク
ローナル抗体からのＶＨ、ＣＨ１、ＶＬ及びＣＬドメインを含む。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュールは、モノクローナル抗体由来の配列を含むＦｖ又はｓｃＦｖを含
む。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、モノクローナル抗体に由来する１
つ以上のＦａｂ、Ｆｖ及びｓｃＦｖを含む二重特異性融合ドメインを含む。モノクローナ
ル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎ、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５
（１９７５）及びＳｅｒｇｅｅｖａら、Ｂｌｏｏｄ、１１７（１６）：４２６２－４２７
２に記載されるような、例えば、ハイブリドーマ法を用いて調製することができる。
【0246】
ハイブリドーマ法では、ハムスター、マウス、又は他の適切な宿主動物を、典型的には
、免疫剤を用いて免疫し、免疫剤に特異的に結合する抗体を産生するか、又は産生するこ
とが可能なようにリンパ球を導く。あるいは、リンパ球をｉｎ ｖｉｔｒｏで免疫しても
よい。免疫剤は、目的のタンパク質のポリペプチド又は融合タンパク質、又は少なくとも
２つの分子を含む複合体、例えば、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体を含んで
いてもよい。一般に、ヒト由来の細胞が望まれる場合は、末梢血リンパ球（「ＰＢＬ」）
を使用し、又は、供給源としてヒト以外の哺乳類が望まれる場合は、脾臓細胞又はリンパ
節細胞を使用する。その後、リンパ球を、好適な融合剤、例えばポリエチレングリコール
を用いて不死化細胞株と融合し、ハイブリドーマ細胞を形成する。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ
、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒ
ａｃｔｉｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９８６）、ｐｐ．
５９－１０３を参照。不死化細胞株は、通常は、形質転換された哺乳類細胞、特に、げっ
歯類、ウシ及びヒト由来の骨髄腫細胞である。通常は、ラット又はマウス骨髄腫細胞株を
用いる。ハイブリドーマ細胞を、適切な培地中で培養してもよく、当該培地は、好ましく
は、融合していない不死化細胞の増殖又は生存を阻害する１つ以上の物質を含む。例えば
、親細胞が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲ
Ｔ又はＨＰＲＴ）を欠損している場合、ハイブリドーマ用の培養培地は、典型的には、ヒ
ポキサンチン、アミノプテリン及びチミジンを含み（ＨＡＴ培地）、この培地は、ＨＧＰ
ＲＴ欠損細胞の増殖を抑制する。
、免疫剤を用いて免疫し、免疫剤に特異的に結合する抗体を産生するか、又は産生するこ
とが可能なようにリンパ球を導く。あるいは、リンパ球をｉｎ ｖｉｔｒｏで免疫しても
よい。免疫剤は、目的のタンパク質のポリペプチド又は融合タンパク質、又は少なくとも
２つの分子を含む複合体、例えば、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体を含んで
いてもよい。一般に、ヒト由来の細胞が望まれる場合は、末梢血リンパ球（「ＰＢＬ」）
を使用し、又は、供給源としてヒト以外の哺乳類が望まれる場合は、脾臓細胞又はリンパ
節細胞を使用する。その後、リンパ球を、好適な融合剤、例えばポリエチレングリコール
を用いて不死化細胞株と融合し、ハイブリドーマ細胞を形成する。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ
、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒ
ａｃｔｉｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９８６）、ｐｐ．
５９－１０３を参照。不死化細胞株は、通常は、形質転換された哺乳類細胞、特に、げっ
歯類、ウシ及びヒト由来の骨髄腫細胞である。通常は、ラット又はマウス骨髄腫細胞株を
用いる。ハイブリドーマ細胞を、適切な培地中で培養してもよく、当該培地は、好ましく
は、融合していない不死化細胞の増殖又は生存を阻害する１つ以上の物質を含む。例えば
、親細胞が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲ
Ｔ又はＨＰＲＴ）を欠損している場合、ハイブリドーマ用の培養培地は、典型的には、ヒ
ポキサンチン、アミノプテリン及びチミジンを含み（ＨＡＴ培地）、この培地は、ＨＧＰ
ＲＴ欠損細胞の増殖を抑制する。
【0247】
いくつかの実施形態では、不死化細胞株は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞
による抗体の安定な高レベル発現を補助し、ＨＡＴ培地などの培地に感受性である。いく
つかの実施形態では、不死化細胞株は、マウス骨髄腫株であり、例えば、Ｓａｌｋ Ｉｎ
ｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ（サンディエゴ、
カリフォルニア）及びＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉ
ｏｎ（マナサッス、バージニア）から得ることができる。ヒト骨髄腫及びマウス－ヒトヘ
テロ骨髄腫細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生について記載されている。Ｋｏ
ｚｂｏｒ、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒら、
Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ
ｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．：Ｎｅ
ｗ Ｙｏｒｋ、１９８７）、ｐｐ．５１－６３。
による抗体の安定な高レベル発現を補助し、ＨＡＴ培地などの培地に感受性である。いく
つかの実施形態では、不死化細胞株は、マウス骨髄腫株であり、例えば、Ｓａｌｋ Ｉｎ
ｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ（サンディエゴ、
カリフォルニア）及びＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉ
ｏｎ（マナサッス、バージニア）から得ることができる。ヒト骨髄腫及びマウス－ヒトヘ
テロ骨髄腫細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生について記載されている。Ｋｏ
ｚｂｏｒ、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒら、
Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ
ｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．：Ｎｅ
ｗ Ｙｏｒｋ、１９８７）、ｐｐ．５１－６３。
【0248】
次いで、ハイブリドーマ細胞を培養する培養培地を、ポリペプチドに対して指向するモ
ノクローナル抗体の存在についてアッセイすることができる。ハイブリドーマ細胞によっ
て産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降法により、又は、ラジオイム
ノアッセイ（ＲＩＡ）又は酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などのｉｎ ｖｉｔ
ｒｏ結合アッセイによって求めることができる。このような技術及びアッセイは、当該技
術分野において既知である。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎ
及びＰｏｌｌａｒｄ、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１０７：２２０（１９８０）のＳｃ
ａｔｃｈａｒｄ分析によって決定されてもよい。
ノクローナル抗体の存在についてアッセイすることができる。ハイブリドーマ細胞によっ
て産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降法により、又は、ラジオイム
ノアッセイ（ＲＩＡ）又は酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などのｉｎ ｖｉｔ
ｒｏ結合アッセイによって求めることができる。このような技術及びアッセイは、当該技
術分野において既知である。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎ
及びＰｏｌｌａｒｄ、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１０７：２２０（１９８０）のＳｃ
ａｔｃｈａｒｄ分析によって決定されてもよい。
【0249】
所望のハイブリドーマ細胞を同定した後、限界希釈法によってクローンをサブクローニ
ングし、標準的な方法により増殖させることができる。Ｇｏｄｉｎｇ（前掲）。この目的
のための好適な培地としては、例えば、ダルベッコ変法イーグル培地及びＲＰＭＩ－１６
４０培地が挙げられる。あるいは、ハイブリドーマ細胞を哺乳動物体内の腹水などといっ
たｉｎ ｖｉｖｏで増殖させてもよい。
ングし、標準的な方法により増殖させることができる。Ｇｏｄｉｎｇ（前掲）。この目的
のための好適な培地としては、例えば、ダルベッコ変法イーグル培地及びＲＰＭＩ－１６
４０培地が挙げられる。あるいは、ハイブリドーマ細胞を哺乳動物体内の腹水などといっ
たｉｎ ｖｉｖｏで増殖させてもよい。
【0250】
サブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体は、例えば、プロテインＡ－セフ
ァロース、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又はアフィ
ニティクロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順によって、培養培地又は
腹水液から単離されるか、又は精製されてもよい。
ァロース、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又はアフィ
ニティクロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順によって、培養培地又は
腹水液から単離されるか、又は精製されてもよい。
【0251】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及びＳＳＥのいず
れかによれば、抗原結合モジュールは、抗体部分ライブラリー（ｓｃＦｖ又はＦａｂフラ
グメントを提示するファージライブラリーなど）から選択されるクローンに由来する配列
を含む抗体部分である。クローンは、所望の活性又は複数の活性を有する抗体フラグメン
トのコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることによって同定されてもよい
。例えば、ファージディスプレイライブラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体に
ついて係るライブラリーをスクリーニングするための様々な方法が当該技術分野において
既知である。このような方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉ
ｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編集、
Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００１）にまとめられており、更
に、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４；Ｃｌａ
ｃｋｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ
．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｍａｒｋｓ及びＢｒａｄｂ
ｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１
－１７５（Ｌｏ編集、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３）；
Ｓｉｄｈｕら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌ
ｅｅら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅ
ｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２
４６７－１２４７２（２００４）；及びＬｅｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）に記載されている。
れかによれば、抗原結合モジュールは、抗体部分ライブラリー（ｓｃＦｖ又はＦａｂフラ
グメントを提示するファージライブラリーなど）から選択されるクローンに由来する配列
を含む抗体部分である。クローンは、所望の活性又は複数の活性を有する抗体フラグメン
トのコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることによって同定されてもよい
。例えば、ファージディスプレイライブラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体に
ついて係るライブラリーをスクリーニングするための様々な方法が当該技術分野において
既知である。このような方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉ
ｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編集、
Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００１）にまとめられており、更
に、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４；Ｃｌａ
ｃｋｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ
．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｍａｒｋｓ及びＢｒａｄｂ
ｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１
－１７５（Ｌｏ編集、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３）；
Ｓｉｄｈｕら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌ
ｅｅら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅ
ｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２
４６７－１２４７２（２００４）；及びＬｅｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）に記載されている。
【0252】
特定のファージディスプレイ方法では、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーを、ポリメ
ラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別々にクローニングし、ファージライブラリーにおい
て無作為に再結合し、次いで、Ｗｉｎｔｅｒら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１
２：４３３－４５５（１９９４）に記載されるように、抗原結合ファージについてスクリ
ーニングしてもよい。ファージは、典型的には、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント又は
Ｆａｂフラグメントのいずれかとして抗体フラグメントを提示する。免疫源からのライブ
ラリーは、ハイブリドーマを構築する必要なく、免疫原に対して高親和性の抗体を提供す
る。あるいは、ナイーブ型レパートリーを（例えば、ヒトから）クローン化して、Ｇｒｉ
ｆｆｉｔｈｓら、ＥＭＢＯ Ｊ、１２：７２５－７３４（１９９３）に記載されているよ
うな免疫を行わずに、広範囲の非自己抗原及び自己抗原に対し単一の抗体源を提供するこ
とができる。最後に、ナイーブライブラリーはまた、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ及びＷｉｎｔ
ｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１－３８８（１９９２）に記載されている
ように、幹細胞からの再配置されていないＶ遺伝子をクローニングし、ランダム配列を含
むＰＣＲプライマーを用い、高度に可変性のＣＤＲ３領域をコードし、ｉｎ ｖｉｔｒｏ
での再配置を達成することによって、合成することができる。ヒト抗体ファージライブラ
リーを記載する特許刊行物としては、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、及び米
国特許出願公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第
２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６
０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号及び同
第２００９／０００２３６０号が含まれる。
ラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別々にクローニングし、ファージライブラリーにおい
て無作為に再結合し、次いで、Ｗｉｎｔｅｒら、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１
２：４３３－４５５（１９９４）に記載されるように、抗原結合ファージについてスクリ
ーニングしてもよい。ファージは、典型的には、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）フラグメント又は
Ｆａｂフラグメントのいずれかとして抗体フラグメントを提示する。免疫源からのライブ
ラリーは、ハイブリドーマを構築する必要なく、免疫原に対して高親和性の抗体を提供す
る。あるいは、ナイーブ型レパートリーを（例えば、ヒトから）クローン化して、Ｇｒｉ
ｆｆｉｔｈｓら、ＥＭＢＯ Ｊ、１２：７２５－７３４（１９９３）に記載されているよ
うな免疫を行わずに、広範囲の非自己抗原及び自己抗原に対し単一の抗体源を提供するこ
とができる。最後に、ナイーブライブラリーはまた、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ及びＷｉｎｔ
ｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１－３８８（１９９２）に記載されている
ように、幹細胞からの再配置されていないＶ遺伝子をクローニングし、ランダム配列を含
むＰＣＲプライマーを用い、高度に可変性のＣＤＲ３領域をコードし、ｉｎ ｖｉｔｒｏ
での再配置を達成することによって、合成することができる。ヒト抗体ファージライブラ
リーを記載する特許刊行物としては、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、及び米
国特許出願公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第
２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６
０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号及び同
第２００９／０００２３６０号が含まれる。
【0253】
抗体部分は、標的抗原（ペプチド／ＭＨＣクラスＩ／ＩＩ複合体又は細胞表面抗原など
）に特異的な抗体のライブラリーをスクリーニングするために、ファージディスプレイを
使用して調製することができる。ライブラリーは、少なくとも１×１０９（例えば、少な
くとも約１×１０９、２．５×１０９、５×１０９、７．５×１０９、１×１０１０、２
．５×１０１０、５×１０１０、７．５×１０１０、又は１×１０１１のいずれか）の多
様性を有するヒトｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーであってもよい。いくつか
の実施形態では、ライブラリーは、ヒトＰＭＢＣから抽出されたＤＮＡ及び健康なドナー
の脾臓から構築されたナイーブ型ヒトライブラリーであり、全てのヒト重鎖及び軽鎖サブ
ファミリーを包含する。いくつかの実施形態では、ライブラリーは、自己免疫疾患患者、
癌患者及び感染性疾患を有する患者などの様々な疾患を有する患者から単離されたＰＢＭ
Ｃから抽出されたＤＮＡから構築されたナイーブ型ヒトライブラリーである。いくつかの
実施形態では、ライブラリーは、半合成ヒトライブラリーであり、重鎖ＣＤＲ３は、完全
にランダム化され、全てのアミノ酸（システイン以外）は、任意の所与の位置に存在する
可能性が等しくなる（例えば、Ｈｏｅｔ，Ｒ．Ｍ．ら、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．
２３（３）：３４４－３４８、２００５を参照）。いくつかの実施形態では、半合成ヒト
ライブラリーの重鎖ＣＤＲ３は、約５～約２４（例えば、約５、６、７、８、９、１０、
１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３又は
２４のいずれか）のアミノ酸長を有する。いくつかの実施形態では、ライブラリーは、完
全合成ファージディスプレイライブラリーである。いくつかの実施形態では、ライブラリ
ーは、ヒト以外のファージディスプレイライブラリーである。
）に特異的な抗体のライブラリーをスクリーニングするために、ファージディスプレイを
使用して調製することができる。ライブラリーは、少なくとも１×１０９（例えば、少な
くとも約１×１０９、２．５×１０９、５×１０９、７．５×１０９、１×１０１０、２
．５×１０１０、５×１０１０、７．５×１０１０、又は１×１０１１のいずれか）の多
様性を有するヒトｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーであってもよい。いくつか
の実施形態では、ライブラリーは、ヒトＰＭＢＣから抽出されたＤＮＡ及び健康なドナー
の脾臓から構築されたナイーブ型ヒトライブラリーであり、全てのヒト重鎖及び軽鎖サブ
ファミリーを包含する。いくつかの実施形態では、ライブラリーは、自己免疫疾患患者、
癌患者及び感染性疾患を有する患者などの様々な疾患を有する患者から単離されたＰＢＭ
Ｃから抽出されたＤＮＡから構築されたナイーブ型ヒトライブラリーである。いくつかの
実施形態では、ライブラリーは、半合成ヒトライブラリーであり、重鎖ＣＤＲ３は、完全
にランダム化され、全てのアミノ酸（システイン以外）は、任意の所与の位置に存在する
可能性が等しくなる（例えば、Ｈｏｅｔ，Ｒ．Ｍ．ら、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．
２３（３）：３４４－３４８、２００５を参照）。いくつかの実施形態では、半合成ヒト
ライブラリーの重鎖ＣＤＲ３は、約５～約２４（例えば、約５、６、７、８、９、１０、
１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３又は
２４のいずれか）のアミノ酸長を有する。いくつかの実施形態では、ライブラリーは、完
全合成ファージディスプレイライブラリーである。いくつかの実施形態では、ライブラリ
ーは、ヒト以外のファージディスプレイライブラリーである。
【0254】
高親和性で標的抗原に結合するファージクローンは、固体支持体（例えば、溶液パニン
グのためのビーズ又は細胞パニングのための哺乳動物細胞など）に結合させた標的抗原に
対しファージを結合させて、その後、結合していないファージを除去し、特異的に結合し
たファージを溶出することを反復して選択することができる。溶液パニングの一例では、
標的抗原は、固体支持体への固定のためにビオチン化されてもよい。ビオチン化標的抗原
は、ファージライブラリー及び固体支持体（例えば、ストレプトアビジン標識したＤｙｎ
ａｂｅａｄｓ Ｍ－２８０）と混合され、次いで、標的抗原ファージビーズ複合体が単離
される。次いで、結合したファージクローンを溶出させ、発現及び精製のために、Ｅ．ｃ
ｏｌｉ ＸＬ１－Ｂｌｕｅなどの適切な宿主細胞を感染させる。細胞パニングの一例では
、ＡＦＰペプチドを保有するＴ２細胞（ＴＡＰ欠乏、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＋リンパ芽
細胞株）をファージライブラリーと混合した後、細胞を集め、結合したクローンを溶出さ
せ、発現及び精製のために適切な宿主細胞を感染させるために使用される。パニングは、
標的抗原に特異的に結合するファージクローンを濃縮するために、溶液パニング、細胞パ
ニング、又はそれらの両方の組み合わせのいずれかで、複数回（２、３、４、５、６回、
又はもっと多くのいずれか）行うことができる。濃縮されたファージクローンは、例えば
、ＥＬＩＳＡ及びＦＡＣＳを含め、当該技術分野において既知の任意の方法による標的抗
原への特異的結合について試験することができる。
ヒト及びヒト化抗体部分
グのためのビーズ又は細胞パニングのための哺乳動物細胞など）に結合させた標的抗原に
対しファージを結合させて、その後、結合していないファージを除去し、特異的に結合し
たファージを溶出することを反復して選択することができる。溶液パニングの一例では、
標的抗原は、固体支持体への固定のためにビオチン化されてもよい。ビオチン化標的抗原
は、ファージライブラリー及び固体支持体（例えば、ストレプトアビジン標識したＤｙｎ
ａｂｅａｄｓ Ｍ－２８０）と混合され、次いで、標的抗原ファージビーズ複合体が単離
される。次いで、結合したファージクローンを溶出させ、発現及び精製のために、Ｅ．ｃ
ｏｌｉ ＸＬ１－Ｂｌｕｅなどの適切な宿主細胞を感染させる。細胞パニングの一例では
、ＡＦＰペプチドを保有するＴ２細胞（ＴＡＰ欠乏、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＋リンパ芽
細胞株）をファージライブラリーと混合した後、細胞を集め、結合したクローンを溶出さ
せ、発現及び精製のために適切な宿主細胞を感染させるために使用される。パニングは、
標的抗原に特異的に結合するファージクローンを濃縮するために、溶液パニング、細胞パ
ニング、又はそれらの両方の組み合わせのいずれかで、複数回（２、３、４、５、６回、
又はもっと多くのいずれか）行うことができる。濃縮されたファージクローンは、例えば
、ＥＬＩＳＡ及びＦＡＣＳを含め、当該技術分野において既知の任意の方法による標的抗
原への特異的結合について試験することができる。
ヒト及びヒト化抗体部分
【0255】
ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ及びＳＳＥ抗体部分は、ヒトであってもよく、又はヒト化されたも
のであってもよい。ヒト以外（例えば、マウス）の抗体部分をヒト化させたものは、典型
的にはヒト以外の免疫グロブリン由来の配列を最小限で含む、キメラ免疫グロブリン、免
疫グロブリン鎖又はそのフラグメント（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）
２、又はその他抗体の抗原結合サブ配列）である。ヒト化抗体部分としては、レシピエン
トのＣＤＲに由来する残基が、所望の特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット又
はウサギなどのヒト以外の種のＣＤＲ（ドナー抗体）に由来する残基と置き換わった、ヒ
ト免疫グロブリン、ヒト免疫グロブリン鎖、又はこれらのフラグメント（レシピエント抗
体）が挙げられる。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基が、
対応するヒト以外の残基で置換される。ヒト化抗体の部分はまた、レシピエント抗体部分
又は移入されたＣＤＲ又はフレームワーク配列のいずれにおいても見られない残基も含ん
でよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質
的に全てを含んでいてもよく、ＣＤＲ領域の全て又は実質的に全ては、非ヒト免疫グロブ
リンのものと対応し、ＦＲ領域の全て又は実質的に全ては、ヒト免疫グロブリンコンセン
サス配列のものである。例えば、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３２１：５２２－５２５
（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３３２：３２３－３２９（１９８
８）；Ｐｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．、２：５９３－５９６
（１９９２）を参照。
のであってもよい。ヒト以外（例えば、マウス）の抗体部分をヒト化させたものは、典型
的にはヒト以外の免疫グロブリン由来の配列を最小限で含む、キメラ免疫グロブリン、免
疫グロブリン鎖又はそのフラグメント（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）
２、又はその他抗体の抗原結合サブ配列）である。ヒト化抗体部分としては、レシピエン
トのＣＤＲに由来する残基が、所望の特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット又
はウサギなどのヒト以外の種のＣＤＲ（ドナー抗体）に由来する残基と置き換わった、ヒ
ト免疫グロブリン、ヒト免疫グロブリン鎖、又はこれらのフラグメント（レシピエント抗
体）が挙げられる。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基が、
対応するヒト以外の残基で置換される。ヒト化抗体の部分はまた、レシピエント抗体部分
又は移入されたＣＤＲ又はフレームワーク配列のいずれにおいても見られない残基も含ん
でよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質
的に全てを含んでいてもよく、ＣＤＲ領域の全て又は実質的に全ては、非ヒト免疫グロブ
リンのものと対応し、ＦＲ領域の全て又は実質的に全ては、ヒト免疫グロブリンコンセン
サス配列のものである。例えば、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３２１：５２２－５２５
（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３３２：３２３－３２９（１９８
８）；Ｐｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．、２：５９３－５９６
（１９９２）を参照。
【0256】
一般的に、ヒト化抗体部分は、ヒト以外の供給源から導入された１つ以上のアミノ酸残
基を有する。これらのヒト以外のアミノ酸残基は、典型的には「移入」可変ドメインから
取り込まれた「移入」残基と呼ばれることが多い。いくつかの実施形態によれば、ヒト化
は、ヒト抗体部分の対応する配列のためにげっ歯類ＣＤＲ又はＣＤＲ配列を置換すること
により、Ｗｉｎｔｅｒ及び共同研究者らの方法（Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３２１：
５２２－５２５（１９８６）Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３３２：３２３－３
２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３９：１５３４－１５３
６（１９８８））に本質的に従って行うことができる。したがって、このような「ヒト化
」抗体部分は、抗体部分（米国特許第４，８１６，５６７号）であり、加工を受けていな
いヒト可変ドメインより実質的に小さい部分が、非ヒト種由来の対応する配列によって置
換されている。実際には、ヒト化抗体部分は、典型的には、いくつかのＣＤＲ残基及び可
能ならいくつかのＦＲ残基が、げっ歯類抗体の類似部位に由来する残基で置換された、ヒ
ト抗体部分である。
基を有する。これらのヒト以外のアミノ酸残基は、典型的には「移入」可変ドメインから
取り込まれた「移入」残基と呼ばれることが多い。いくつかの実施形態によれば、ヒト化
は、ヒト抗体部分の対応する配列のためにげっ歯類ＣＤＲ又はＣＤＲ配列を置換すること
により、Ｗｉｎｔｅｒ及び共同研究者らの方法（Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３２１：
５２２－５２５（１９８６）Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ、３３２：３２３－３
２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３９：１５３４－１５３
６（１９８８））に本質的に従って行うことができる。したがって、このような「ヒト化
」抗体部分は、抗体部分（米国特許第４，８１６，５６７号）であり、加工を受けていな
いヒト可変ドメインより実質的に小さい部分が、非ヒト種由来の対応する配列によって置
換されている。実際には、ヒト化抗体部分は、典型的には、いくつかのＣＤＲ残基及び可
能ならいくつかのＦＲ残基が、げっ歯類抗体の類似部位に由来する残基で置換された、ヒ
ト抗体部分である。
【0257】
ヒト化の代替として、ヒト抗体部分を作成してもよい。例えば、今では、免疫によって
、内因性免疫グロブリンを産生せずにヒト抗体の完全なレパートリーを産生可能なトラン
スジェニック動物（例えば、マウス）を作製可能である。例えば、キメラ及び生殖系変異
マウスの抗体重鎖連結領域（ＪＨ）遺伝子のホモ結合型欠失により、内因性抗体の産生を
完全に阻害することが記載されている。ヒト生殖系免疫グロブリン遺伝子アレイをこのよ
うな生殖系変異マウスに導入すると、抗原チャレンジ時にヒト抗体が産生する。例えば、
Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂ
ｏｖｉｔｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３６２：２５５－２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａ
ｎｎら、Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．、７：３３（１９９３）；米国特許第５，５
４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，５９１，６６９号；同第５，５４
５，８０７号及び国際公開第９７／１７８５２号を参照。あるいは、ヒト免疫グロブリン
遺伝子座を、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的に又は完全に不活性化されている、ト
ランスジェニック動物、例えば、マウスに導入することによって、ヒト抗体を作製するこ
とができる。チャレンジ時、遺伝子再配置、アセンブリ及び抗体レパートリーなどの全て
の点において、ヒトで見られるものとよく似たヒト抗体産生が観察される。この手法は、
例えば、米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９
，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；及び同第５，６６
１，０１６号、及びＭａｒｋｓら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０：７７９－７８
３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ、３６８：８５６－８５９（１９９４
）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ、３６８：８１２－８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈ
ｗｉｌｄら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：８４５－８５１（１９
９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：８２
６（１９９６）；Ｌｏｎｂｅｒｇ及びＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．、１３：６５－９３（１９９５）に記載される。
、内因性免疫グロブリンを産生せずにヒト抗体の完全なレパートリーを産生可能なトラン
スジェニック動物（例えば、マウス）を作製可能である。例えば、キメラ及び生殖系変異
マウスの抗体重鎖連結領域（ＪＨ）遺伝子のホモ結合型欠失により、内因性抗体の産生を
完全に阻害することが記載されている。ヒト生殖系免疫グロブリン遺伝子アレイをこのよ
うな生殖系変異マウスに導入すると、抗原チャレンジ時にヒト抗体が産生する。例えば、
Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂ
ｏｖｉｔｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３６２：２５５－２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａ
ｎｎら、Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．、７：３３（１９９３）；米国特許第５，５
４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，５９１，６６９号；同第５，５４
５，８０７号及び国際公開第９７／１７８５２号を参照。あるいは、ヒト免疫グロブリン
遺伝子座を、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的に又は完全に不活性化されている、ト
ランスジェニック動物、例えば、マウスに導入することによって、ヒト抗体を作製するこ
とができる。チャレンジ時、遺伝子再配置、アセンブリ及び抗体レパートリーなどの全て
の点において、ヒトで見られるものとよく似たヒト抗体産生が観察される。この手法は、
例えば、米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９
，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；及び同第５，６６
１，０１６号、及びＭａｒｋｓら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０：７７９－７８
３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ、３６８：８５６－８５９（１９９４
）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ、３６８：８１２－８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈ
ｗｉｌｄら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：８４５－８５１（１９
９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：８２
６（１９９６）；Ｌｏｎｂｅｒｇ及びＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．、１３：６５－９３（１９９５）に記載される。
【0258】
ヒト抗体はまた、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの活性化Ｂ細胞（米国特許第５，５６７，６１０
号及び同第５，２２９，２７５号を参照）によって、又はファージディスプレイライブラ
リーを含む当該技術分野において既知の様々な技術を使用することによって生成されても
よい。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ及びＷｉｎｔｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８
１（１９９１）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１（１９９１）
を参照）。Ｃｏｌｅら及びＢｏｅｒｎｅｒらの技術もまた、ヒトモノクローナル抗体の調
製に利用可能である。Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎ
ｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ、ｐ．７７（１９８５）及
びＢｏｅｒｎｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７（１）：８６－９５（１９９１）。
多様体
号及び同第５，２２９，２７５号を参照）によって、又はファージディスプレイライブラ
リーを含む当該技術分野において既知の様々な技術を使用することによって生成されても
よい。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ及びＷｉｎｔｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８
１（１９９１）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１（１９９１）
を参照）。Ｃｏｌｅら及びＢｏｅｒｎｅｒらの技術もまた、ヒトモノクローナル抗体の調
製に利用可能である。Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎ
ｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ、ｐ．７７（１９８５）及
びＢｏｅｒｎｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７（１）：８６－９５（１９９１）。
多様体
【0259】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗原結合モジュールのアミノ酸配列の
多様体が想定される。例えば、多様体は、抗原結合モジュールの結合親和性及び／又はそ
の他の生物学的特性を改善するのに望ましい場合がある。抗原結合モジュールのアミノ酸
配列多様体は、抗原結合モジュールをコードするヌクレオチド配列に適切な修飾を導入す
ることによって、又はペプチド合成によって、調製することができる。このような改変と
しては、例えば、抗原結合モジュールのアミノ酸配列内の残基の欠失及び／又は挿入及び
／又は置換が挙げられる。最終構築物が所望の特徴（例えば、抗原結合）を有するように
最終構築物に達するように、欠失、挿入及び置換の任意の組み合わせが行われてもよい。
多様体が想定される。例えば、多様体は、抗原結合モジュールの結合親和性及び／又はそ
の他の生物学的特性を改善するのに望ましい場合がある。抗原結合モジュールのアミノ酸
配列多様体は、抗原結合モジュールをコードするヌクレオチド配列に適切な修飾を導入す
ることによって、又はペプチド合成によって、調製することができる。このような改変と
しては、例えば、抗原結合モジュールのアミノ酸配列内の残基の欠失及び／又は挿入及び
／又は置換が挙げられる。最終構築物が所望の特徴（例えば、抗原結合）を有するように
最終構築物に達するように、欠失、挿入及び置換の任意の組み合わせが行われてもよい。
【0260】
いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗原結合モジュール変異体
が提供される。置換変異導入の目的の部位としては、抗体部分のＨＶＲ及びＦＲが挙げら
れる。アミノ酸置換は、例えば、抗原結合の保持／改善、又は免疫原性低減などといった
所望の活性についてスクリーニングされた、対象の抗原結合モジュール及び生成物に導入
することができる。
が提供される。置換変異導入の目的の部位としては、抗体部分のＨＶＲ及びＦＲが挙げら
れる。アミノ酸置換は、例えば、抗原結合の保持／改善、又は免疫原性低減などといった
所望の活性についてスクリーニングされた、対象の抗原結合モジュール及び生成物に導入
することができる。
【0261】
保存的置換を以下の表３に示す。
【表3】
【0262】
アミノ酸は、共通の側鎖特性に従って、異なるクラスに分類されてもよい。
ａ．疎水性：Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖の向きに影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
ａ．疎水性：Ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖の向きに影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【0263】
非保存的置換は、これらの分類のうち１つを別の分類のものに交換することを伴う。
【0264】
例示的な置換多様体は、親和性成熟した抗体部分であり、例えば、ファージディスプレ
イをベースとした親和性成熟技術を使用し、簡便に生成することができる。簡潔に述べる
と、１つ以上のＣＤＲ残基に変異を導入し、ファージ上に表示された当該多様体抗体部分
を、特定の生体活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングする。例えば、抗体
部分の親和性を改善するために、改変（例えば、置換）をＨＶＲで作製することができる
。このような改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高
頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９－１９６（２００８）を参照）、及び
／又は特異性決定残基（ＳＤＲ）でなされてもよく、得られた多様体ＶＨ又はＶＬは、結
合親和性について試験される。二次ライブラリーを構築し、再選択することによる親和性
成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編集、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ
、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ（２００１））に記載されている。
イをベースとした親和性成熟技術を使用し、簡便に生成することができる。簡潔に述べる
と、１つ以上のＣＤＲ残基に変異を導入し、ファージ上に表示された当該多様体抗体部分
を、特定の生体活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングする。例えば、抗体
部分の親和性を改善するために、改変（例えば、置換）をＨＶＲで作製することができる
。このような改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高
頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９－１９６（２００８）を参照）、及び
／又は特異性決定残基（ＳＤＲ）でなされてもよく、得られた多様体ＶＨ又はＶＬは、結
合親和性について試験される。二次ライブラリーを構築し、再選択することによる親和性
成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編集、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ
、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ（２００１））に記載されている。
【0265】
親和性成熟のいくつかの実施形態では、多様性は、多様な方法（例えば、エラープロー
ンＰＣＲ、連鎖シャッフル、又はオリゴヌクレオチド指向突然変異誘発）のいずれかによ
って、成熟のために選択された可変遺伝子に導入される。次いで、二次ライブラリーが作
成される。次いで、このライブラリーをスクリーニングし、所望の親和性を有する任意の
抗体部分多様体を同定する。多様性を導入するための別の方法は、いくつかのＨＶＲ残基
（例えば、一度に４～６残基）がランダム化される、ＨＶＲを対象とする手法を伴う。抗
原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異導入又はモデリング
を用いて特異的に同定されてもよい。ＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３は、特に標的とされ
ることが多い。
ンＰＣＲ、連鎖シャッフル、又はオリゴヌクレオチド指向突然変異誘発）のいずれかによ
って、成熟のために選択された可変遺伝子に導入される。次いで、二次ライブラリーが作
成される。次いで、このライブラリーをスクリーニングし、所望の親和性を有する任意の
抗体部分多様体を同定する。多様性を導入するための別の方法は、いくつかのＨＶＲ残基
（例えば、一度に４～６残基）がランダム化される、ＨＶＲを対象とする手法を伴う。抗
原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異導入又はモデリング
を用いて特異的に同定されてもよい。ＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３は、特に標的とされ
ることが多い。
【0266】
いくつかの実施形態では、置換、挿入又は欠失は、このような改変により抗体部分の抗
原結合能を実質的に低下させないようにして、１つ以上のＨＶＲ内で行われてもよい。例
えば、結合親和性を実質的に低下させない保存的改変（例えば、本明細書で提供される保
存的置換）が、ＨＶＲにおいて行われてもよい。このような変更は、ＨＶＲ「ホットスポ
ット」又はＳＤＲの外側にあってもよい。上に提供された多様体ＶＨ及びＶＬ配列のいく
つかの実施形態では、各ＨＶＲは、変更されていないか、又は１つ以下、２つ又は３つ以
下のアミノ酸置換を含む。
原結合能を実質的に低下させないようにして、１つ以上のＨＶＲ内で行われてもよい。例
えば、結合親和性を実質的に低下させない保存的改変（例えば、本明細書で提供される保
存的置換）が、ＨＶＲにおいて行われてもよい。このような変更は、ＨＶＲ「ホットスポ
ット」又はＳＤＲの外側にあってもよい。上に提供された多様体ＶＨ及びＶＬ配列のいく
つかの実施形態では、各ＨＶＲは、変更されていないか、又は１つ以下、２つ又は３つ以
下のアミノ酸置換を含む。
【0267】
変異導入のために標的とされ得る抗原結合モジュールの残基又は領域の同定に有用な方
法は、「アラニンスキャニング変異導入」と呼ばれ、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ及びＷｅｌｌ
ｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５に記載されている。この方
法では、標的残基又は標的残基群（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ及びｇｌｕ
などの帯電した残基）が同定され、中性又は負に帯電したアミノ酸（例えば、アラニン又
はポリアラニン）によって置き換えられ、抗原結合モジュールと抗原との相互作用が影響
を受けているかどうかを判定する。更なる置換は、初期の置換に対する機能的感受性を示
すアミノ酸位置に導入されてもよい。あるいは、又更に、抗原－抗原－結合モジュール複
合体の結晶構造を決定し、抗原結合モジュールと抗原との間の接触点を同定することがで
きる。このような接触残基及び隣接する残基は、置換の候補として標的とされてもよく、
又は除外されてもよい。多様体をスクリーニングし、所望の特性を含有するかどうかを判
定してもよい。
法は、「アラニンスキャニング変異導入」と呼ばれ、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ及びＷｅｌｌ
ｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５に記載されている。この方
法では、標的残基又は標的残基群（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ及びｇｌｕ
などの帯電した残基）が同定され、中性又は負に帯電したアミノ酸（例えば、アラニン又
はポリアラニン）によって置き換えられ、抗原結合モジュールと抗原との相互作用が影響
を受けているかどうかを判定する。更なる置換は、初期の置換に対する機能的感受性を示
すアミノ酸位置に導入されてもよい。あるいは、又更に、抗原－抗原－結合モジュール複
合体の結晶構造を決定し、抗原結合モジュールと抗原との間の接触点を同定することがで
きる。このような接触残基及び隣接する残基は、置換の候補として標的とされてもよく、
又は除外されてもよい。多様体をスクリーニングし、所望の特性を含有するかどうかを判
定してもよい。
【0268】
アミノ酸配列挿入として、１つの残基から１００以上の残基を含むポリペプチドまで長
さに幅がある、アミノ及び／又はカルボキシル末端融合、並びに、単一若しくは複数のア
ミノ酸残基の配列内挿入が挙げられる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を
有する抗原結合モジュールが挙げられる。抗原結合モジュールのその他の挿入多様体とし
ては、酵素に対する抗原結合モジュールのＮ末端又はＣ末端への融合（例えば、ＡＤＥＰ
Ｔ向け）、又は抗原結合モジュールの血清半減期を延長するポリペプチドが挙げられる。
誘導体
さに幅がある、アミノ及び／又はカルボキシル末端融合、並びに、単一若しくは複数のア
ミノ酸残基の配列内挿入が挙げられる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を
有する抗原結合モジュールが挙げられる。抗原結合モジュールのその他の挿入多様体とし
ては、酵素に対する抗原結合モジュールのＮ末端又はＣ末端への融合（例えば、ＡＤＥＰ
Ｔ向け）、又は抗原結合モジュールの血清半減期を延長するポリペプチドが挙げられる。
誘導体
【0269】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲｓのいずれかに係るｃａＴ
ＣＲ、本明細書に記載されるＣＳＲのいずれかに係るＣＳＲ、及び／又は本明細書に記載
のＳＳＥのいずれかに係るＳＳＥは、当該技術分野において既知であり、容易に入手可能
な更なる非タンパク質性部分を含有するように更に改変されてもよい。ｃａＴＣＲ及び／
又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥの誘導体化に好適な部分としては、水溶性ポリマーが挙げら
れるが、これに限定されない。水溶性ポリマーの非限定例としては、限定されないが、ポ
リエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリ
マー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニル
ピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン
／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマーのい
ずれか）、及びデキストラン又はポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール
、プロプロピレン（propropylene）グリコールホモポリマー、プロリプロピレン（prolyp
ropylene）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例
えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、及びそれらの混合物が挙げられる。ポリ
エチレングリコールプロピオンアルデヒドは、その水中安定性から、製造における利点を
有し得る。ポリマーは、任意の分子量であってよく、分枝型又は非分枝型であってよい。
ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥに接続するポリマーの数は、様々であって
もよく、１つより多いポリマーが接続する場合、ポリマーは、同じ分子であってもよく、
又は異なる分子であってもよい。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／又は
種類は、改良されるｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥの特定の性質又は機能
、ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥ誘導体が、所定の条件などで治療に使用
されるかどうかなどを含むがこれらに限定されない検討事項に基づいて決定することがで
きる。
ＣＲ、本明細書に記載されるＣＳＲのいずれかに係るＣＳＲ、及び／又は本明細書に記載
のＳＳＥのいずれかに係るＳＳＥは、当該技術分野において既知であり、容易に入手可能
な更なる非タンパク質性部分を含有するように更に改変されてもよい。ｃａＴＣＲ及び／
又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥの誘導体化に好適な部分としては、水溶性ポリマーが挙げら
れるが、これに限定されない。水溶性ポリマーの非限定例としては、限定されないが、ポ
リエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリ
マー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニル
ピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン
／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマーのい
ずれか）、及びデキストラン又はポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール
、プロプロピレン（propropylene）グリコールホモポリマー、プロリプロピレン（prolyp
ropylene）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例
えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、及びそれらの混合物が挙げられる。ポリ
エチレングリコールプロピオンアルデヒドは、その水中安定性から、製造における利点を
有し得る。ポリマーは、任意の分子量であってよく、分枝型又は非分枝型であってよい。
ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥに接続するポリマーの数は、様々であって
もよく、１つより多いポリマーが接続する場合、ポリマーは、同じ分子であってもよく、
又は異なる分子であってもよい。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／又は
種類は、改良されるｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥの特定の性質又は機能
、ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥ誘導体が、所定の条件などで治療に使用
されるかどうかなどを含むがこれらに限定されない検討事項に基づいて決定することがで
きる。
【0270】
いくつかの実施形態では、放射線への曝露によって選択的に加熱され得るｃａＴＣＲ及
び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥ及び非タンパク質性部分の標識が提供される。いくつか
の実施形態では、非タンパク質性部分は、カーボンナノチューブである（Ｋａｍら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０２：１１６００－１１６０５（２００
５））。放射線は、任意の波長を有するものであってもよく、限定されないが、通常の細
胞を害しないが、ｃａＴＣＲ－及び／又はＣＳＲ－及び／又はＳＳＥ－非タンパク質性部
分の近位の細胞が死滅する温度に非タンパク質性部分を加熱する波長が挙げられる。
ｃａＴＣＲエフェクター細胞の調製
び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥ及び非タンパク質性部分の標識が提供される。いくつか
の実施形態では、非タンパク質性部分は、カーボンナノチューブである（Ｋａｍら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０２：１１６００－１１６０５（２００
５））。放射線は、任意の波長を有するものであってもよく、限定されないが、通常の細
胞を害しないが、ｃａＴＣＲ－及び／又はＣＳＲ－及び／又はＳＳＥ－非タンパク質性部
分の近位の細胞が死滅する温度に非タンパク質性部分を加熱する波長が挙げられる。
ｃａＴＣＲエフェクター細胞の調製
【0271】
本発明は、一態様では、ｃａＴＣＲを発現するエフェクター細胞（例えば、リンパ球、
例えばＴ細胞）を提供する。ｃａＴＣＲを発現するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）
（ｃａＴＣＲエフェクター細胞、例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞）を調製する例示的な方法
が、本明細書で提供される。
例えばＴ細胞）を提供する。ｃａＴＣＲを発現するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）
（ｃａＴＣＲエフェクター細胞、例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞）を調製する例示的な方法
が、本明細書で提供される。
【0272】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞（ｃａＴＣＲ Ｔ細胞など）は
、標的抗原（例えば、疾患関連抗原）に特異的に結合するｃａＴＣＲ（例えば、本明細書
に記載のｃａＴＣＲのいずれか）をコードする１つ以上の核酸（例えば、レンチウイルス
ベクターを含む）をエフェクター細胞に導入することによって生成することができる。エ
フェクター細胞への１つ以上の核酸の導入は、核酸について本明細書に記載される技術な
ど、当該技術分野において既知の技術を使用して達成することができる。いくつかの実施
形態では、本発明のｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞）は、ｉ
ｎ ｖｉｖｏで複製することができ、その結果、標的抗原（例えば、癌又はウイルス感染
）の発現に関連する疾患の持続的な制御をもたらし得る、長期持続性をもたらす。
、標的抗原（例えば、疾患関連抗原）に特異的に結合するｃａＴＣＲ（例えば、本明細書
に記載のｃａＴＣＲのいずれか）をコードする１つ以上の核酸（例えば、レンチウイルス
ベクターを含む）をエフェクター細胞に導入することによって生成することができる。エ
フェクター細胞への１つ以上の核酸の導入は、核酸について本明細書に記載される技術な
ど、当該技術分野において既知の技術を使用して達成することができる。いくつかの実施
形態では、本発明のｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞）は、ｉ
ｎ ｖｉｖｏで複製することができ、その結果、標的抗原（例えば、癌又はウイルス感染
）の発現に関連する疾患の持続的な制御をもたらし得る、長期持続性をもたらす。
【0273】
いくつかの実施形態では、本発明は、例えば癌又はウイルス感染を含む標的抗原の発現
に関連する疾患及び／又は障害（本明細書では、「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患
又は障害とも呼ばれる）を発症するか、又は発症するリスクがある患者の治療のために、
本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係る標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを
発現する遺伝子改変Ｔ細胞を、リンパ球注入を用いて投与することに関する。いくつかの
実施形態では、自己リンパ球注入が、治療に使用される。自己ＰＢＭＣは、治療を必要と
する患者から集められ、Ｔ細胞は、本明細書に記載され、当該技術分野において既知の方
法を使用して活性化され、増殖され、次いで患者に注入により戻される。
に関連する疾患及び／又は障害（本明細書では、「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患
又は障害とも呼ばれる）を発症するか、又は発症するリスクがある患者の治療のために、
本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係る標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを
発現する遺伝子改変Ｔ細胞を、リンパ球注入を用いて投与することに関する。いくつかの
実施形態では、自己リンパ球注入が、治療に使用される。自己ＰＢＭＣは、治療を必要と
する患者から集められ、Ｔ細胞は、本明細書に記載され、当該技術分野において既知の方
法を使用して活性化され、増殖され、次いで患者に注入により戻される。
【0274】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲ（本明細書では「ｃａＴＣＲ
Ｔ細胞」とも呼ばれる）のいずれかに係る標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現
するＴ細胞が提供される。本発明のｃａＴＣＲ Ｔ細胞は、安定したｉｎ ｖｉｖｏでの
Ｔ細胞増殖を受けることができ、血液及び骨髄の中で長期間にわたって高レベルを維持す
る標的抗原に特異的なメモリー細胞を確立することができる。いくつかの実施形態では、
患者に注入された本発明のｃａＴＣＲ Ｔ細胞は、標的抗原に関連する疾患を有する患者
について、ｉｎ ｖｉｖｏで標的抗原提示細胞（例えば、標的抗原提示癌又はウイルスに
よって感染した細胞）を排除することができる。いくつかの実施形態では、患者に注入さ
れた本発明のｃａＴＣＲ Ｔ細胞は、少なくとも１つの従来の治療に対して難治性の標的
抗原関連疾患を有する患者についてｉｎ ｖｉｖｏで標的抗原提示細胞（例えば、標的抗
原提示癌又はウイルスに感染した細胞）を排除することができる。
Ｔ細胞」とも呼ばれる）のいずれかに係る標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現
するＴ細胞が提供される。本発明のｃａＴＣＲ Ｔ細胞は、安定したｉｎ ｖｉｖｏでの
Ｔ細胞増殖を受けることができ、血液及び骨髄の中で長期間にわたって高レベルを維持す
る標的抗原に特異的なメモリー細胞を確立することができる。いくつかの実施形態では、
患者に注入された本発明のｃａＴＣＲ Ｔ細胞は、標的抗原に関連する疾患を有する患者
について、ｉｎ ｖｉｖｏで標的抗原提示細胞（例えば、標的抗原提示癌又はウイルスに
よって感染した細胞）を排除することができる。いくつかの実施形態では、患者に注入さ
れた本発明のｃａＴＣＲ Ｔ細胞は、少なくとも１つの従来の治療に対して難治性の標的
抗原関連疾患を有する患者についてｉｎ ｖｉｖｏで標的抗原提示細胞（例えば、標的抗
原提示癌又はウイルスに感染した細胞）を排除することができる。
【0275】
Ｔ細胞の増殖及び遺伝子改変の前に、Ｔ細胞源は、対象から得られる。Ｔ細胞は、末梢
血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位からの組織、腹水、胸膜
滲出液、脾臓組織及び腫瘍を含む多数の供給源から得ることができる。本発明のいくつか
の実施形態では、当該技術分野において利用可能な任意の数のＴ細胞株を使用することが
できる。本発明のいくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離などの
当業者に既知の任意の数の技術を使用して、対象から採取された血液単位から得ることが
できる。いくつかの実施形態では、個体の循環血液由来の細胞は、アフェレーシスによっ
て得られる。アフェレーシス製品は、典型的には、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の
有核白血球、赤血球、及び血小板を含むリンパ球を含有する。いくつかの実施形態では、
アフェレーシスによって収集された細胞を洗浄して血漿画分を除去し、後続の処理工程の
ために適切な緩衝液又は培地に細胞を配置することができる。いくつかの実施形態では、
細胞は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。いくつかの実施形態では、洗浄
溶液はカルシウムを含まず、マグネシウムを含まなくてもよく、又は二価カチオンが全く
存在しない場合には、多く存在しなくてもよい。当業者であれば、製造業者の指示に従っ
て、半自動化「フロースルー」遠心分離器（例えば、Ｃｏｂｅ ２９９１細胞処理機、Ｂ
ａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭａｔｅ，又はＨａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ Ｃｅｌｌ Ｓａｖｅｒ
５）を使用するなどして、当該技術分野において既知の方法によって洗浄工程を達成して
もよいことを容易に理解するだろう。洗浄後、細胞は、Ｃａ２＋を含まず、Ｍｇ２＋を含
まないＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ、又は緩衝剤を含むか、又は含まない他の生理
食塩水溶液などの様々な生体適合性緩衝液中に再懸濁されてもよい。あるいは、アフェレ
ーシスサンプルの望ましくない成分を除去し、細胞を培地に直接再懸濁させてもよい。
血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位からの組織、腹水、胸膜
滲出液、脾臓組織及び腫瘍を含む多数の供給源から得ることができる。本発明のいくつか
の実施形態では、当該技術分野において利用可能な任意の数のＴ細胞株を使用することが
できる。本発明のいくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離などの
当業者に既知の任意の数の技術を使用して、対象から採取された血液単位から得ることが
できる。いくつかの実施形態では、個体の循環血液由来の細胞は、アフェレーシスによっ
て得られる。アフェレーシス製品は、典型的には、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の
有核白血球、赤血球、及び血小板を含むリンパ球を含有する。いくつかの実施形態では、
アフェレーシスによって収集された細胞を洗浄して血漿画分を除去し、後続の処理工程の
ために適切な緩衝液又は培地に細胞を配置することができる。いくつかの実施形態では、
細胞は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。いくつかの実施形態では、洗浄
溶液はカルシウムを含まず、マグネシウムを含まなくてもよく、又は二価カチオンが全く
存在しない場合には、多く存在しなくてもよい。当業者であれば、製造業者の指示に従っ
て、半自動化「フロースルー」遠心分離器（例えば、Ｃｏｂｅ ２９９１細胞処理機、Ｂ
ａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭａｔｅ，又はＨａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ Ｃｅｌｌ Ｓａｖｅｒ
５）を使用するなどして、当該技術分野において既知の方法によって洗浄工程を達成して
もよいことを容易に理解するだろう。洗浄後、細胞は、Ｃａ２＋を含まず、Ｍｇ２＋を含
まないＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ、又は緩衝剤を含むか、又は含まない他の生理
食塩水溶液などの様々な生体適合性緩衝液中に再懸濁されてもよい。あるいは、アフェレ
ーシスサンプルの望ましくない成分を除去し、細胞を培地に直接再懸濁させてもよい。
【0276】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、赤血球細胞を溶解し、単球を枯渇させることによ
り、例えばＰＥＲＣＯＬＬ（商標）勾配による遠心分離、又は対向流遠心分離溶出によっ
て、末梢血リンパ球から単離される。ＣＤ３＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ
４５ＲＡ＋及びＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞などのＴ細胞の特定の部分集合は、陽性又は陰性の
選択法によって更に単離されてもよい。例えば、いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、所
望のＴ細胞を陽性選択するのに十分な時間にわたって、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８（すなわち
、３×２８）標識ビーズ（例えば、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３
／ＣＤ２８ Ｔ）とのインキュベーションによって、所望のＴ細胞の陽性選択に十分な時
間にわたって、Ｔ細胞を単離する。いくつかの実施形態では、期間は、約３０分である。
いくつかの実施形態では、期間は、３０分～３６時間の範囲、又はもっと長い（これらの
値の間の全ての範囲を含む）。いくつかの実施形態では、期間は、少なくとも１時間、２
時間、３時間、４時間、５時間又は６時間である。いくつかの実施形態では、期間は、１
０～２４時間である。いくつかの実施形態では、インキュベーション時間は、２４時間で
ある。白血病患者からＴ細胞を単離する際、２４時間などのより長いインキュベーション
時間を用いることよって、細胞収率を増加させることができる。腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩ
Ｌ）を腫瘍組織から単離する際、又は免疫不全の個体から腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を
単離する際、他の細胞型と比較して、数種類のＴ細胞が存在する任意の状況でＴ細胞を単
離するために、より長いインキュベーション時間を使用することができる。更に、より長
いインキュベーション時間の使用は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の捕捉効率を高めることができる。
したがって、Ｔ細胞をＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに結合させる時間を単純に短くするか、又
は長くすることによって、及び／又はＴ細胞に対するビーズの比率を増やすか、又は減ら
すことによって、Ｔ細胞の分集団を、培養開始のために、又は培養開始に対して、又はこ
のプロセス中の他の時点で優先的に選択することができる。更に、ビーズ又は他の表面上
の抗ＣＤ３抗体及び／又は抗ＣＤ２８抗体の比を増加させるか、又は減少させることによ
って、Ｔ細胞の分集団は、培養開始のために、又は培養開始時に、又は他の所望な時間点
で優先的に選択されてもよい。当業者は、本発明の文脈において、複数回の選択を使用し
てもよいことを認識するだろう。いくつかの実施形態では、選択手順を実行し、活性化及
び増殖プロセスにおいて、「選択されていない」細胞を使用することが望ましい場合があ
る。「選択されていない」細胞にも、更なる選択を行ってもよい。
り、例えばＰＥＲＣＯＬＬ（商標）勾配による遠心分離、又は対向流遠心分離溶出によっ
て、末梢血リンパ球から単離される。ＣＤ３＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ
４５ＲＡ＋及びＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞などのＴ細胞の特定の部分集合は、陽性又は陰性の
選択法によって更に単離されてもよい。例えば、いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、所
望のＴ細胞を陽性選択するのに十分な時間にわたって、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８（すなわち
、３×２８）標識ビーズ（例えば、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３
／ＣＤ２８ Ｔ）とのインキュベーションによって、所望のＴ細胞の陽性選択に十分な時
間にわたって、Ｔ細胞を単離する。いくつかの実施形態では、期間は、約３０分である。
いくつかの実施形態では、期間は、３０分～３６時間の範囲、又はもっと長い（これらの
値の間の全ての範囲を含む）。いくつかの実施形態では、期間は、少なくとも１時間、２
時間、３時間、４時間、５時間又は６時間である。いくつかの実施形態では、期間は、１
０～２４時間である。いくつかの実施形態では、インキュベーション時間は、２４時間で
ある。白血病患者からＴ細胞を単離する際、２４時間などのより長いインキュベーション
時間を用いることよって、細胞収率を増加させることができる。腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩ
Ｌ）を腫瘍組織から単離する際、又は免疫不全の個体から腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を
単離する際、他の細胞型と比較して、数種類のＴ細胞が存在する任意の状況でＴ細胞を単
離するために、より長いインキュベーション時間を使用することができる。更に、より長
いインキュベーション時間の使用は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の捕捉効率を高めることができる。
したがって、Ｔ細胞をＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに結合させる時間を単純に短くするか、又
は長くすることによって、及び／又はＴ細胞に対するビーズの比率を増やすか、又は減ら
すことによって、Ｔ細胞の分集団を、培養開始のために、又は培養開始に対して、又はこ
のプロセス中の他の時点で優先的に選択することができる。更に、ビーズ又は他の表面上
の抗ＣＤ３抗体及び／又は抗ＣＤ２８抗体の比を増加させるか、又は減少させることによ
って、Ｔ細胞の分集団は、培養開始のために、又は培養開始時に、又は他の所望な時間点
で優先的に選択されてもよい。当業者は、本発明の文脈において、複数回の選択を使用し
てもよいことを認識するだろう。いくつかの実施形態では、選択手順を実行し、活性化及
び増殖プロセスにおいて、「選択されていない」細胞を使用することが望ましい場合があ
る。「選択されていない」細胞にも、更なる選択を行ってもよい。
【0277】
陰性選択によるＴ細胞集団の濃縮は、負に選択された細胞に固有の表面マーカーを対象
とする抗体の組み合わせで達成することができる。１つの方法は、負であると選択された
細胞上に存在する細胞表面マーカーを指向するモノクローナル抗体のカクテルを使用する
、陰性磁気免疫接着又はフローサイトメトリーによる細胞選別及び／又は選択である。例
えば、陰性選択によってＣＤ４＋細胞を濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは
、典型的には、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ及びＣＤ８に
対する抗体を含む。いくつかの実施形態では、典型的には、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ
６２Ｌｈｉ、ＧＩＴＲ＋及びＦｏｘＰ３＋を発現する制御Ｔ細胞を濃縮するか、又は陽性
選択することが望ましい場合がある。あるいは、いくつかの実施形態では、制御性Ｔ細胞
は、抗ＣＤ２５標識したビーズ又は他の同様の選択方法によって消耗される。
とする抗体の組み合わせで達成することができる。１つの方法は、負であると選択された
細胞上に存在する細胞表面マーカーを指向するモノクローナル抗体のカクテルを使用する
、陰性磁気免疫接着又はフローサイトメトリーによる細胞選別及び／又は選択である。例
えば、陰性選択によってＣＤ４＋細胞を濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは
、典型的には、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ及びＣＤ８に
対する抗体を含む。いくつかの実施形態では、典型的には、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ
６２Ｌｈｉ、ＧＩＴＲ＋及びＦｏｘＰ３＋を発現する制御Ｔ細胞を濃縮するか、又は陽性
選択することが望ましい場合がある。あるいは、いくつかの実施形態では、制御性Ｔ細胞
は、抗ＣＤ２５標識したビーズ又は他の同様の選択方法によって消耗される。
【0278】
陽性選択又は陰性選択による所望の細胞集団の単離のために、細胞及び表面（例えば、
ビーズなどの粒子）の濃度を変化させることができる。いくつかの実施形態では、細胞と
ビーズとを確実に最大限に接触させるために、ビーズと細胞が一緒に混合される体積を著
しく減少させる（すなわち、細胞の濃度を増加させる）ことが望ましい場合がある。例え
ば、いくつかの実施形態では、約２０億細胞／ｍＬの濃度が使用される。いくつかの実施
形態では、約１０億細胞／ｍＬの濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１億細
胞／ｍＬより多く使用される。いくつかの実施形態では、約１千万、１千５百万、２千万
、２千５百万、３千万、３千５百万、４千万、４千５百万又は５千万個の細胞／ｍＬのい
ずれかの細胞濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約７千５百万、８千万、８千
５百万、９千万、９千５百万又は１億個の細胞／ｍＬのいずれかの細胞濃度が使用される
。いくつかの実施形態では、約１億２千５百万細胞／ｍＬ又は約１億５千万細胞／ｍＬの
濃度が使用される。高濃度を使用すると、細胞収率、細胞活性化及び細胞増殖を増加させ
ることができる。更に、高い細胞濃度を用いることで、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞などの目的の
標的抗原を弱く発現し得る細胞、又は多くの腫瘍細胞が存在するサンプル（すなわち、白
血病血液、腫瘍組織など）からの、より効率的な細胞の捕捉を可能にする。このような細
胞集団は、治療価値を有し得るものであり、治療価値が得られることが望ましいだろう。
例えば、高濃度の細胞を使用することにより、ＣＤ２８発現が通常より弱いＣＤ８＋Ｔ細
胞のより効率的な選択を可能にする。
ビーズなどの粒子）の濃度を変化させることができる。いくつかの実施形態では、細胞と
ビーズとを確実に最大限に接触させるために、ビーズと細胞が一緒に混合される体積を著
しく減少させる（すなわち、細胞の濃度を増加させる）ことが望ましい場合がある。例え
ば、いくつかの実施形態では、約２０億細胞／ｍＬの濃度が使用される。いくつかの実施
形態では、約１０億細胞／ｍＬの濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１億細
胞／ｍＬより多く使用される。いくつかの実施形態では、約１千万、１千５百万、２千万
、２千５百万、３千万、３千５百万、４千万、４千５百万又は５千万個の細胞／ｍＬのい
ずれかの細胞濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約７千５百万、８千万、８千
５百万、９千万、９千５百万又は１億個の細胞／ｍＬのいずれかの細胞濃度が使用される
。いくつかの実施形態では、約１億２千５百万細胞／ｍＬ又は約１億５千万細胞／ｍＬの
濃度が使用される。高濃度を使用すると、細胞収率、細胞活性化及び細胞増殖を増加させ
ることができる。更に、高い細胞濃度を用いることで、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞などの目的の
標的抗原を弱く発現し得る細胞、又は多くの腫瘍細胞が存在するサンプル（すなわち、白
血病血液、腫瘍組織など）からの、より効率的な細胞の捕捉を可能にする。このような細
胞集団は、治療価値を有し得るものであり、治療価値が得られることが望ましいだろう。
例えば、高濃度の細胞を使用することにより、ＣＤ２８発現が通常より弱いＣＤ８＋Ｔ細
胞のより効率的な選択を可能にする。
【0279】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、治療直後に患者から得られる。この点に
関し、特定の癌治療後、特に、免疫系を損傷する薬物による治療に続いて、患者が通常治
療から回復する期間中に、治療からすぐ後に、得られるＴ細胞の質は、ｅｘ ｖｉｖｏで
増殖する能力に関して最適であるか、又は改善され得ることが観察されている。同様に、
本明細書に記載される方法を使用したｅｘ ｖｉｖｏでの操作に続いて、これらの細胞は
、強化された生着及びｉｎ ｖｉｖｏでの増殖のための好ましい状態であってもよい。し
たがって、本発明の文脈内では、この回復期間中に、Ｔ細胞、樹状細胞、又は造血系の他
の細胞を含む血液細胞を集めることが、本発明の文脈内で想定される。更に、いくつかの
実施形態では、動員（例えば、ＧＭ－ＣＳＦによる動員）及びコンディショニングレジメ
ンを使用して、対象において、特に治療後の定義された期間に、特定の細胞型の再増殖、
再循環、再生、及び／又は増殖が有利である条件をもたらす事ができる。例示的な細胞型
としては、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、及び免疫系の他の細胞が挙げられる。
関し、特定の癌治療後、特に、免疫系を損傷する薬物による治療に続いて、患者が通常治
療から回復する期間中に、治療からすぐ後に、得られるＴ細胞の質は、ｅｘ ｖｉｖｏで
増殖する能力に関して最適であるか、又は改善され得ることが観察されている。同様に、
本明細書に記載される方法を使用したｅｘ ｖｉｖｏでの操作に続いて、これらの細胞は
、強化された生着及びｉｎ ｖｉｖｏでの増殖のための好ましい状態であってもよい。し
たがって、本発明の文脈内では、この回復期間中に、Ｔ細胞、樹状細胞、又は造血系の他
の細胞を含む血液細胞を集めることが、本発明の文脈内で想定される。更に、いくつかの
実施形態では、動員（例えば、ＧＭ－ＣＳＦによる動員）及びコンディショニングレジメ
ンを使用して、対象において、特に治療後の定義された期間に、特定の細胞型の再増殖、
再循環、再生、及び／又は増殖が有利である条件をもたらす事ができる。例示的な細胞型
としては、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、及び免疫系の他の細胞が挙げられる。
【0280】
所望なｃａＴＣＲを発現するためのＴ細胞の遺伝子改変の前又は後に、多くの場合、例
えば、米国特許第６，３５２，６９４号、同第６，５３４，０５５号；同第６，９０５，
６８０号；同第６，６９２，９６４号；同第５，８５８，３５８号；同第６，８８７，４
６６号；同第６，９０５，６８１号；同第７，１４４，５７５号；同第７，０６７，３１
８号；同第７，１７２，８６９号；同第７，２３２，５６６号；同第７，１７５，８４３
号；同第５，８８３，２２３号；同第６，９０５，８７４号；同第６，７９７，５１４号
；同第６，８６７，０４１号；及び米国特許出願公開第２００６０１２１００５号に記載
されている方法を使用して、Ｔ細胞が活性化され、増殖されてもよい。
えば、米国特許第６，３５２，６９４号、同第６，５３４，０５５号；同第６，９０５，
６８０号；同第６，６９２，９６４号；同第５，８５８，３５８号；同第６，８８７，４
６６号；同第６，９０５，６８１号；同第７，１４４，５７５号；同第７，０６７，３１
８号；同第７，１７２，８６９号；同第７，２３２，５６６号；同第７，１７５，８４３
号；同第５，８８３，２２３号；同第６，９０５，８７４号；同第６，７９７，５１４号
；同第６，８６７，０４１号；及び米国特許出願公開第２００６０１２１００５号に記載
されている方法を使用して、Ｔ細胞が活性化され、増殖されてもよい。
【0281】
一般的に、本発明のＴ細胞は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体関連シグナルを刺激する薬剤と、
Ｔ細胞の表面上にある共刺激分子を刺激するリガンドと、Ｔ細胞に接続されている表面と
を接触させることによって増殖される。特に、Ｔ細胞集団は、例えば、抗ＣＤ３抗体又は
その抗原結合フラグメント、又はある表面に固定された抗ＣＤ２抗体との接触によって、
又はカルシウムイオノフォアと組み合わせたタンパク質キナーゼＣ活性化因子（例えば、
ブリオスタチン）との接触によって、刺激されてもよい。Ｔ細胞表面上のアクセサリー分
子の共刺激のために、アクセサリー分子に結合するリガンドが使用される。例えば、Ｔ細
胞集団は、Ｔ細胞の増殖を刺激するのに適切な条件で、抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体
と接触してもよい。ＣＤ４＋Ｔ細胞又はＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれかの増殖を刺激するため
の、抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体。抗ＣＤ２８抗体の例としては、９．３、Ｂ－Ｔ３
、当該技術分野で一般的に知られる他の方法であり得るような、使用可能なＸＲ－ＣＤ２
８（Ｄｉａｃｌｏｎｅ、ブザンソン、フランス）が挙げられる（Ｂｅｒｇら、Ｔｒａｎｓ
ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．３０（８）：３９７５－３９７７、１９９８；Ｈａａｎｅｎら、
Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０（９）：１３１９１３２８、１９９９；Ｇａｒｌａｎｄら、
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２２７（１－２）：５３－６３、１９９９）。
Ｔ細胞の表面上にある共刺激分子を刺激するリガンドと、Ｔ細胞に接続されている表面と
を接触させることによって増殖される。特に、Ｔ細胞集団は、例えば、抗ＣＤ３抗体又は
その抗原結合フラグメント、又はある表面に固定された抗ＣＤ２抗体との接触によって、
又はカルシウムイオノフォアと組み合わせたタンパク質キナーゼＣ活性化因子（例えば、
ブリオスタチン）との接触によって、刺激されてもよい。Ｔ細胞表面上のアクセサリー分
子の共刺激のために、アクセサリー分子に結合するリガンドが使用される。例えば、Ｔ細
胞集団は、Ｔ細胞の増殖を刺激するのに適切な条件で、抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体
と接触してもよい。ＣＤ４＋Ｔ細胞又はＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれかの増殖を刺激するため
の、抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体。抗ＣＤ２８抗体の例としては、９．３、Ｂ－Ｔ３
、当該技術分野で一般的に知られる他の方法であり得るような、使用可能なＸＲ－ＣＤ２
８（Ｄｉａｃｌｏｎｅ、ブザンソン、フランス）が挙げられる（Ｂｅｒｇら、Ｔｒａｎｓ
ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．３０（８）：３９７５－３９７７、１９９８；Ｈａａｎｅｎら、
Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０（９）：１３１９１３２８、１９９９；Ｇａｒｌａｎｄら、
Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２２７（１－２）：５３－６３、１９９９）。
【0282】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のいくつかにおいて、ｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞の調製は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の疲弊を最小限に抑えるか、又は実
質的に全くもたらさない。例えば、いくつかの実施形態では、調製によって、約５０％未
満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％未満などのい
ずれか）のｃａＴＣＲエフェクター細胞が消耗する。エフェクター細胞の疲弊は、本明細
書に記載される任意の手段を含め、当該技術分野において既知の任意の手段によって求め
ることができる。
ェクター細胞の調製は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の疲弊を最小限に抑えるか、又は実
質的に全くもたらさない。例えば、いくつかの実施形態では、調製によって、約５０％未
満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％未満などのい
ずれか）のｃａＴＣＲエフェクター細胞が消耗する。エフェクター細胞の疲弊は、本明細
書に記載される任意の手段を含め、当該技術分野において既知の任意の手段によって求め
ることができる。
【0283】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のいくつかにおいて、ｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞の調製は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の最終分化を最小限に抑えるか、又
は実質的に全くもたらさない。例えば、いくつかの実施形態では、調製によって、約５０
％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％未満など
のいずれか）のｃａＴＣＲエフェクター細胞が最終分化する。エフェクター細胞の分化は
、本明細書に記載される任意の手段を含め、当該技術分野において既知の任意の手段によ
って判定することができる。
ェクター細胞の調製は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の最終分化を最小限に抑えるか、又
は実質的に全くもたらさない。例えば、いくつかの実施形態では、調製によって、約５０
％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％未満など
のいずれか）のｃａＴＣＲエフェクター細胞が最終分化する。エフェクター細胞の分化は
、本明細書に記載される任意の手段を含め、当該技術分野において既知の任意の手段によ
って判定することができる。
【0284】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のいくつかにおいて、ｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞の調製は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞のｃａＴＣＲの内在化を最小限に抑
えるか、又は実質的に全くもたらさない。例えば、いくつかの実施形態では、調製によっ
て、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、
２５、２０、１５、１０又は５％未満などのいずれか）のｃａＴＣＲが内在化する。ｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞でのｃａＴＣＲの内在化は、本明細書に記載される任意の手段を
含め、当該技術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
遺伝子改変
ェクター細胞の調製は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞のｃａＴＣＲの内在化を最小限に抑
えるか、又は実質的に全くもたらさない。例えば、いくつかの実施形態では、調製によっ
て、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、
２５、２０、１５、１０又は５％未満などのいずれか）のｃａＴＣＲが内在化する。ｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞でのｃａＴＣＲの内在化は、本明細書に記載される任意の手段を
含め、当該技術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
遺伝子改変
【0285】
いくつかの実施形態では、本発明のｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲ
Ｔ細胞）は、本明細書に記載のｃａＴＣＲをコードするウイルスベクターを用いてエフ
ェクター細胞（本明細書に記載の方法によって調製されるＴ細胞など）に形質導入するこ
とによって生成される。ウイルスベクター送達システムは、エフェクター細胞への送達後
にエピソーム又は統合ゲノムのいずれかを有するＤＮＡ及びＲＮＡウイルスを含む。遺伝
子治療手技の概説としては、Ａｎｄｅｒｓｏｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５６：８０８－８１
３（１９９２）；Ｎａｂｅｌ及びＦｅｉｇｎｅｒ、ＴＩＢＴＥＣＨ １１：２１１－２１
７（１９９３）；Ｍｉｔａｎｉ及びＣａｓｋｅｙ、ＴＩＢＴＥＣＨ １１：１６２－１６
６（１９９３）；Ｄｉｌｌｏｎ、ＴＩＢＴＥＣＨ １１：１６７－１７５（１９９３）；
Ｍｉｌｌｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ ３５７：４５５－４６０（１９９２）；Ｖａｎ Ｂｒｕｎ
ｔ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６（１０）：１１４９－１ １５４（１９８８）；Ｖ
ｉｇｎｅ、Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｖｅ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅ
ｎｃｅ ８：３５－３６（１９９５）；Ｋｒｅｍｅｒ ＆ Ｐｅｒｒｉｃａｕｄｅｔ、Ｂ
ｒｉｔｉｓｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ５１（ｌ）：３１－４４（１９９５
）；及びＹｕら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ １：１３－２６（１９９４）を参照のこと
。いくつかの実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターであり、ｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞ゲノムに組み込まれたレンチウ
イルスベクターを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、その
ゲノムに組み込まれたレンチウイルスベクターを含むｃａＴＣＲ Ｔ細胞である。
Ｔ細胞）は、本明細書に記載のｃａＴＣＲをコードするウイルスベクターを用いてエフ
ェクター細胞（本明細書に記載の方法によって調製されるＴ細胞など）に形質導入するこ
とによって生成される。ウイルスベクター送達システムは、エフェクター細胞への送達後
にエピソーム又は統合ゲノムのいずれかを有するＤＮＡ及びＲＮＡウイルスを含む。遺伝
子治療手技の概説としては、Ａｎｄｅｒｓｏｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５６：８０８－８１
３（１９９２）；Ｎａｂｅｌ及びＦｅｉｇｎｅｒ、ＴＩＢＴＥＣＨ １１：２１１－２１
７（１９９３）；Ｍｉｔａｎｉ及びＣａｓｋｅｙ、ＴＩＢＴＥＣＨ １１：１６２－１６
６（１９９３）；Ｄｉｌｌｏｎ、ＴＩＢＴＥＣＨ １１：１６７－１７５（１９９３）；
Ｍｉｌｌｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ ３５７：４５５－４６０（１９９２）；Ｖａｎ Ｂｒｕｎ
ｔ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６（１０）：１１４９－１ １５４（１９８８）；Ｖ
ｉｇｎｅ、Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｖｅ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅ
ｎｃｅ ８：３５－３６（１９９５）；Ｋｒｅｍｅｒ ＆ Ｐｅｒｒｉｃａｕｄｅｔ、Ｂ
ｒｉｔｉｓｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ５１（ｌ）：３１－４４（１９９５
）；及びＹｕら、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ １：１３－２６（１９９４）を参照のこと
。いくつかの実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターであり、ｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞ゲノムに組み込まれたレンチウ
イルスベクターを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、その
ゲノムに組み込まれたレンチウイルスベクターを含むｃａＴＣＲ Ｔ細胞である。
【0286】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、その内在性ＴＣＲ鎖のうち
の一方又は両方の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたＴ細胞である。例
えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ
鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ細胞であり、導入された
ｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含むか、又は、ｃａＴＣＲ
エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるよう
に改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖
に由来する配列を含む。遺伝子発現を破壊する細胞の改変としては、例えば、ＲＮＡ干渉
（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ
系又はＴＡＬＥＮ系の遺伝子ノックアウト）などを含む、当該技術分野において既知の任
意のそのような技術が挙げられる。
の一方又は両方の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたＴ細胞である。例
えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、ＴＣＲα及び／又はβ
鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されたαβＴ細胞であり、導入された
ｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲα及びβ鎖に由来する配列を含むか、又は、ｃａＴＣＲ
エフェクター細胞は、ＴＣＲγ及び／又はδ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるよう
に改変されたγδＴ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγ及びδ鎖
に由来する配列を含む。遺伝子発現を破壊する細胞の改変としては、例えば、ＲＮＡ干渉
（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ
系又はＴＡＬＥＮ系の遺伝子ノックアウト）などを含む、当該技術分野において既知の任
意のそのような技術が挙げられる。
【0287】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞の内在性ＴＣＲ鎖の一方又は両方の発現が減少したｃ
ａＴＣＲ Ｔ細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系を使用して生成される。遺伝子編集のＣＲ
ＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムの概説としては、例えば、Ｊｉａｎ Ｗ及びＭａｒｒａｆｆｉ
ｎｉ ＬＡ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６９、２０１５；Ｈｓｕ ＰＤら
、Ｃｅｌｌ、１５７（６）：１２６２－１２７８、２０１４；及びＯ’Ｃｏｎｎｅｌｌ
ＭＲら、ＮａｔｕｒｅＶｏｌｕｍｅ：５１６：２６３－２６６、２０１４を参照。いくつ
かの実施形態では、Ｔ細胞の内在性ＴＣＲ鎖の一方又は両方の発現が減少したｃａＴＣＲ
Ｔ細胞は、ＴＡＬＥＮ系のゲノム編集を使用して生成される。
濃縮
ａＴＣＲ Ｔ細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系を使用して生成される。遺伝子編集のＣＲ
ＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムの概説としては、例えば、Ｊｉａｎ Ｗ及びＭａｒｒａｆｆｉ
ｎｉ ＬＡ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６９、２０１５；Ｈｓｕ ＰＤら
、Ｃｅｌｌ、１５７（６）：１２６２－１２７８、２０１４；及びＯ’Ｃｏｎｎｅｌｌ
ＭＲら、ＮａｔｕｒｅＶｏｌｕｍｅ：５１６：２６３－２６６、２０１４を参照。いくつ
かの実施形態では、Ｔ細胞の内在性ＴＣＲ鎖の一方又は両方の発現が減少したｃａＴＣＲ
Ｔ細胞は、ＴＡＬＥＮ系のゲノム編集を使用して生成される。
濃縮
【0288】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲエフェクター細胞のいずれ
かに係るｃａＴＣＲエフェクター細胞の不均一な細胞集団を濃縮する方法が提供される。
かに係るｃａＴＣＲエフェクター細胞の不均一な細胞集団を濃縮する方法が提供される。
【0289】
標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細
胞）の特定の分集団は、陽性選択技術によって濃縮することができる。例えば、いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞）は、所望
のｃａＴＣＲエフェクター細胞を陽性選択するのに十分な時間にわたる、標的抗原結合ビ
ーズとのインキュベーションによって濃縮される。いくつかの実施形態では、期間は、約
３０分である。いくつかの実施形態では、期間は、３０分～３６時間の範囲、又はもっと
長い（これらの値の間の全ての範囲を含む）。いくつかの実施形態では、期間は、少なく
とも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間又は６時間である。いくつかの実施形態で
は、期間は、１０～２４時間である。いくつかの実施形態では、インキュベーション時間
は、２４時間である。不均一な細胞集団において低濃度で存在するｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞の単離のために、更に長いインキュベーション時間（例えば２４時間）を使用する
と、細胞収率を高めることができる。他の細胞型と比較して存在するｃａＴＣＲエフェク
ター細胞が少ない任意の状況において、ｃａＴＣＲエフェクター細胞を単離するために、
更に長いインキュベーション時間を使用してもよい。当業者は、本発明の文脈において、
複数回の選択を使用してもよいことを認識するだろう。
胞）の特定の分集団は、陽性選択技術によって濃縮することができる。例えば、いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞）は、所望
のｃａＴＣＲエフェクター細胞を陽性選択するのに十分な時間にわたる、標的抗原結合ビ
ーズとのインキュベーションによって濃縮される。いくつかの実施形態では、期間は、約
３０分である。いくつかの実施形態では、期間は、３０分～３６時間の範囲、又はもっと
長い（これらの値の間の全ての範囲を含む）。いくつかの実施形態では、期間は、少なく
とも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間又は６時間である。いくつかの実施形態で
は、期間は、１０～２４時間である。いくつかの実施形態では、インキュベーション時間
は、２４時間である。不均一な細胞集団において低濃度で存在するｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞の単離のために、更に長いインキュベーション時間（例えば２４時間）を使用する
と、細胞収率を高めることができる。他の細胞型と比較して存在するｃａＴＣＲエフェク
ター細胞が少ない任意の状況において、ｃａＴＣＲエフェクター細胞を単離するために、
更に長いインキュベーション時間を使用してもよい。当業者は、本発明の文脈において、
複数回の選択を使用してもよいことを認識するだろう。
【0290】
陽性選択によりｃａＴＣＲエフェクター細胞の所望の集団を単離するために、細胞と表
面（例えば、ビーズなどの粒子）の濃度を変えてもよい。いくつかの実施形態では、細胞
とビーズの最大接触を確実にするために、ビーズと細胞が一緒に混合される（すなわち、
細胞の濃度を増加させる）体積を著しく減少させることが望ましい場合がある。例えば、
いくつかの実施形態では、約２０億細胞／ｍＬの濃度が使用される。いくつかの実施形態
では、約１０億細胞／ｍＬの濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１億細胞／
ｍＬより多く使用される。いくつかの実施形態では、約１千万、１千５百万、２千万、２
千５百万、３千万、３千５百万、４千万、４千５百万又は５千万細胞／ｍＬのいずれかの
細胞濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約７千５百万、８千万、８千５百万、
９千万、９千５百万又は１億細胞／ｍＬのいずれかの細胞濃度が使用される。いくつかの
実施形態では、約１億２千５百万又は約１億５千万細胞／ｍＬの濃度が使用される。高濃
度を使用すると、細胞収率、細胞活性化及び細胞増殖を増加させることができる。更に、
高い細胞濃度の使用は、ｃａＴＣＲを弱く発現し得るｃａＴＣＲエフェクター細胞のより
効率的な捕捉を可能にする。
面（例えば、ビーズなどの粒子）の濃度を変えてもよい。いくつかの実施形態では、細胞
とビーズの最大接触を確実にするために、ビーズと細胞が一緒に混合される（すなわち、
細胞の濃度を増加させる）体積を著しく減少させることが望ましい場合がある。例えば、
いくつかの実施形態では、約２０億細胞／ｍＬの濃度が使用される。いくつかの実施形態
では、約１０億細胞／ｍＬの濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１億細胞／
ｍＬより多く使用される。いくつかの実施形態では、約１千万、１千５百万、２千万、２
千５百万、３千万、３千５百万、４千万、４千５百万又は５千万細胞／ｍＬのいずれかの
細胞濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約７千５百万、８千万、８千５百万、
９千万、９千５百万又は１億細胞／ｍＬのいずれかの細胞濃度が使用される。いくつかの
実施形態では、約１億２千５百万又は約１億５千万細胞／ｍＬの濃度が使用される。高濃
度を使用すると、細胞収率、細胞活性化及び細胞増殖を増加させることができる。更に、
高い細胞濃度の使用は、ｃａＴＣＲを弱く発現し得るｃａＴＣＲエフェクター細胞のより
効率的な捕捉を可能にする。
【0291】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のいくつかにおいて、濃縮は、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞の疲弊を最小限に抑えるか、又は実質的に全くもたらさない。例え
ば、いくつかの実施形態では、濃縮によって、約５０％未満（例えば、約４５、４０、３
５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％未満などのいずれか）のｃａＴＣＲエフェク
ター細胞が枯渇する。エフェクター細胞の疲弊は、本明細書に記載される任意の手段を含
め、当該技術分野において既知の任意の手段によって決定することができる。
ＣＲエフェクター細胞の疲弊を最小限に抑えるか、又は実質的に全くもたらさない。例え
ば、いくつかの実施形態では、濃縮によって、約５０％未満（例えば、約４５、４０、３
５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％未満などのいずれか）のｃａＴＣＲエフェク
ター細胞が枯渇する。エフェクター細胞の疲弊は、本明細書に記載される任意の手段を含
め、当該技術分野において既知の任意の手段によって決定することができる。
【0292】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のいくつかにおいて、濃縮は、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞の最終分化を最小限に抑えるか、又は実質的に全くもたらさない。
例えば、いくつかの実施形態では、濃縮によって、約５０％未満（例えば、約４５、４０
、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％未満などのいずれか）のｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞が最終分化する。エフェクター細胞の分化は、本明細書に記載される任意の
手段を含め、当該技術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
ＣＲエフェクター細胞の最終分化を最小限に抑えるか、又は実質的に全くもたらさない。
例えば、いくつかの実施形態では、濃縮によって、約５０％未満（例えば、約４５、４０
、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５％未満などのいずれか）のｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞が最終分化する。エフェクター細胞の分化は、本明細書に記載される任意の
手段を含め、当該技術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
【0293】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のいくつかにおいて、濃縮は、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞のｃａＴＣＲの内在化を最小限に抑えるか、又は実質的に全くもた
らさない。例えば、いくつかの実施形態では、濃縮によって、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５
％未満などのいずれか）のｃａＴＣＲエフェクター細胞が内在化する。ｃａＴＣＲエフェ
クター細胞でのｃａＴＣＲの内在化は、本明細書に記載される任意の手段を含め、当該技
術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
ＣＲエフェクター細胞のｃａＴＣＲの内在化を最小限に抑えるか、又は実質的に全くもた
らさない。例えば、いくつかの実施形態では、濃縮によって、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０又は５
％未満などのいずれか）のｃａＴＣＲエフェクター細胞が内在化する。ｃａＴＣＲエフェ
クター細胞でのｃａＴＣＲの内在化は、本明細書に記載される任意の手段を含め、当該技
術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
【0294】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のいくつかにおいて、濃縮は、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞の増殖を増加させる。例えば、いくつかの実施形態では、濃縮によ
って、濃縮後のｃａＴＣＲエフェクター細胞の数を少なくとも約１０％（例えば、少なく
とも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４
００、５００、１０００％のいずれか、又はもっと多く）増加させる。
ＣＲエフェクター細胞の増殖を増加させる。例えば、いくつかの実施形態では、濃縮によ
って、濃縮後のｃａＴＣＲエフェクター細胞の数を少なくとも約１０％（例えば、少なく
とも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４
００、５００、１０００％のいずれか、又はもっと多く）増加させる。
【0295】
したがって、いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現
するｃａＴＣＲエフェクター細胞の不均一な細胞集団を濃縮する方法であって、（ａ）不
均一な細胞集団と、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含む捕捉分子
とを接触させ、捕捉分子に結合するｃａＴＣＲエフェクター細胞を含む複合体を形成する
ことと、（ｂ）この複合体を、不均一な細胞集団から分離し、それによって、ｃａＴＣＲ
エフェクター細胞が濃縮された細胞集団を生成することとを含む、方法が提供される。い
くつかの実施形態では、捕捉分子は、固体支持体に固定される。いくつかの実施形態では
、固体支持体は、粒状物（ビーズなど）である。いくつかの実施形態では、固体支持体は
、表面（ウェルの底部など）である。いくつかの実施形態では、捕捉分子は、タグで標識
される。いくつかの実施形態では、タグは、蛍光分子、親和性タグ又は磁気タグである。
いくつかの実施形態では、本方法は、捕捉分子からｃａＴＣＲエフェクター細胞を溶出さ
せ、溶出物を回収することを更に含む。
ライブラリースクリーニング
するｃａＴＣＲエフェクター細胞の不均一な細胞集団を濃縮する方法であって、（ａ）不
均一な細胞集団と、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含む捕捉分子
とを接触させ、捕捉分子に結合するｃａＴＣＲエフェクター細胞を含む複合体を形成する
ことと、（ｂ）この複合体を、不均一な細胞集団から分離し、それによって、ｃａＴＣＲ
エフェクター細胞が濃縮された細胞集団を生成することとを含む、方法が提供される。い
くつかの実施形態では、捕捉分子は、固体支持体に固定される。いくつかの実施形態では
、固体支持体は、粒状物（ビーズなど）である。いくつかの実施形態では、固体支持体は
、表面（ウェルの底部など）である。いくつかの実施形態では、捕捉分子は、タグで標識
される。いくつかの実施形態では、タグは、蛍光分子、親和性タグ又は磁気タグである。
いくつかの実施形態では、本方法は、捕捉分子からｃａＴＣＲエフェクター細胞を溶出さ
せ、溶出物を回収することを更に含む。
ライブラリースクリーニング
【0296】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的な候補ｃａＴＣＲ構築物を単離するために
、ｃａＴＣＲライブラリー（例えば、複数のｃａＴＣＲをコードする核酸のライブラリー
を発現する細胞）が、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含む捕捉分
子にさらされてもよく、その後、捕捉分子に特異的に結合するライブラリーの親和性メン
バーの単離が行われてもよい。いくつかの実施形態では、捕捉分子は、固体支持体上に固
定される。いくつかの実施形態では、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、免
疫チューブ、又はそのような目的に有用な当該技術分野において既知の任意の材料の表面
であってもよい。いくつかの実施形態では、相互作用は、タグ付き捕捉分子（例えば、ビ
オチン化捕捉分子）により、溶液中で起こる。いくつかの実施形態では、この手順は、非
特異的かつ非反応性のライブラリーメンバーを除去するための１つ以上の洗浄工程（パニ
ング）を含む。いくつかの実施形態では、溶液中の複合体を精製するために、複合体は、
固定又は遠心分離のいずれかによって集められる。いくつかの実施形態では、親和性メン
バーは、可溶性ビオチン化捕捉分子上に捕捉され、その後、ストレプトアビジンビーズ上
への親和性複合体（親和性メンバーと捕捉分子）の固定が続く。いくつかの実施形態では
、固体支持体は、ビーズである。いくつかの実施形態では、ビーズとしては、例えば、磁
気ビーズ（例えば、Ｂａｎｇｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ
ｉｎｃ．、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ又はＱｕ
ａｎｔｕｍ Ｍａｇｎｅｔｉｃ製）、非磁気ビーズ（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ ａｎｄ Ｕ
ｐｓｔａｔｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、単分散ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔ
ｅｃｈ及びＭｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｇｍｂｈ）及び多分散ビーズ（例えば、Ｃｈｅ
ｍａｇｅｎ）が挙げられる。磁気ビーズの使用は、文献（Ｕｈｌｅｎ，Ｍら（１９９４）
、Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｂｉｏｍａｇｎｅｔｉｃ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ、ＢｉｏＴ
ｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｐｒｅｓｓ、ウェストボロー、ＭＡ）に記載されている。いくつか
の実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択によって精製される。いくつかの実施形態
では、親和性メンバーは、望ましくないライブラリーメンバーを除去するために、陰性選
択によって精製される。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択工程及び
陰性選択工程の両方によって精製される。
、ｃａＴＣＲライブラリー（例えば、複数のｃａＴＣＲをコードする核酸のライブラリー
を発現する細胞）が、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含む捕捉分
子にさらされてもよく、その後、捕捉分子に特異的に結合するライブラリーの親和性メン
バーの単離が行われてもよい。いくつかの実施形態では、捕捉分子は、固体支持体上に固
定される。いくつかの実施形態では、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、免
疫チューブ、又はそのような目的に有用な当該技術分野において既知の任意の材料の表面
であってもよい。いくつかの実施形態では、相互作用は、タグ付き捕捉分子（例えば、ビ
オチン化捕捉分子）により、溶液中で起こる。いくつかの実施形態では、この手順は、非
特異的かつ非反応性のライブラリーメンバーを除去するための１つ以上の洗浄工程（パニ
ング）を含む。いくつかの実施形態では、溶液中の複合体を精製するために、複合体は、
固定又は遠心分離のいずれかによって集められる。いくつかの実施形態では、親和性メン
バーは、可溶性ビオチン化捕捉分子上に捕捉され、その後、ストレプトアビジンビーズ上
への親和性複合体（親和性メンバーと捕捉分子）の固定が続く。いくつかの実施形態では
、固体支持体は、ビーズである。いくつかの実施形態では、ビーズとしては、例えば、磁
気ビーズ（例えば、Ｂａｎｇｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ
ｉｎｃ．、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ又はＱｕ
ａｎｔｕｍ Ｍａｇｎｅｔｉｃ製）、非磁気ビーズ（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ ａｎｄ Ｕ
ｐｓｔａｔｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、単分散ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔ
ｅｃｈ及びＭｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｇｍｂｈ）及び多分散ビーズ（例えば、Ｃｈｅ
ｍａｇｅｎ）が挙げられる。磁気ビーズの使用は、文献（Ｕｈｌｅｎ，Ｍら（１９９４）
、Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｂｉｏｍａｇｎｅｔｉｃ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ、ＢｉｏＴ
ｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｐｒｅｓｓ、ウェストボロー、ＭＡ）に記載されている。いくつか
の実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択によって精製される。いくつかの実施形態
では、親和性メンバーは、望ましくないライブラリーメンバーを除去するために、陰性選
択によって精製される。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択工程及び
陰性選択工程の両方によって精製される。
【0297】
一般に、ライブラリー構築物を調製するために使用される技術は、既知の遺伝子工学技
術に基づく。これに関し、ライブラリー内で発現されるｃａＴＣＲをコードする核酸配列
は、使用される発現系の種類に適した発現ベクターに組み込まれる。ＣＤ３＋細胞などの
細胞における提示に使用するのに適した発現ベクターは、周知であり、当該技術分野にお
いて記載されている。例えば、いくつかの実施形態では、発現ベクターは、ウイルスベク
ター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
術に基づく。これに関し、ライブラリー内で発現されるｃａＴＣＲをコードする核酸配列
は、使用される発現系の種類に適した発現ベクターに組み込まれる。ＣＤ３＋細胞などの
細胞における提示に使用するのに適した発現ベクターは、周知であり、当該技術分野にお
いて記載されている。例えば、いくつかの実施形態では、発現ベクターは、ウイルスベク
ター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
【0298】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれか１つに係る複数の
ｃａＴＣＲをコードする配列を含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態
では、核酸ライブラリーは、複数のｃａＴＣＲをコードするウイルスベクターを含む。い
くつかの実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
ｃａＴＣＲをコードする配列を含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態
では、核酸ライブラリーは、複数のｃａＴＣＲをコードするウイルスベクターを含む。い
くつかの実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
【0299】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲをコードする配列について、
本明細書に記載の実施形態のいずれかに係る核酸ライブラリーをスクリーニングする方法
であって、（ａ）核酸ライブラリーを複数の細胞に導入し、その結果、ｃａＴＣＲが複数
の細胞の表面で発現することと、（ｂ）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれる１
つ以上のエピトープを含む捕捉分子と共にインキュベートすることと、（ｃ）捕捉分子に
結合した細胞を集めることと、（ｄ）工程（ｃ）で集めた細胞から、ｃａＴＣＲをコード
する配列を単離し、それによって、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲを同定することとを含
む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、１つ以上の洗浄工程を更に
含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の洗浄工程は、工程（ｂ）と工程（ｃ）との間
で実施される。いくつかの実施形態では、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。い
くつかの実施形態では、捕捉分子は、固体支持体上に固定される。いくつかの実施形態で
は、固体支持体は、ビーズである。いくつかの実施形態では、捕捉分子に結合した細胞を
集めることは、固体支持体に結合した捕捉リガンドから細胞を溶出させることと、溶出物
を集めることとを含む。いくつかの実施形態では、捕捉分子は、タグで標識される。いく
つかの実施形態では、タグは、蛍光分子、親和性タグ又は磁気タグである。いくつかの実
施形態では、捕捉分子に結合した細胞を集めることは、細胞と標識されたリガンドとを含
む複合体を単離することを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、複合体から解離され
る。
ＭＨＣタンパク質
本明細書に記載の実施形態のいずれかに係る核酸ライブラリーをスクリーニングする方法
であって、（ａ）核酸ライブラリーを複数の細胞に導入し、その結果、ｃａＴＣＲが複数
の細胞の表面で発現することと、（ｂ）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれる１
つ以上のエピトープを含む捕捉分子と共にインキュベートすることと、（ｃ）捕捉分子に
結合した細胞を集めることと、（ｄ）工程（ｃ）で集めた細胞から、ｃａＴＣＲをコード
する配列を単離し、それによって、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲを同定することとを含
む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、１つ以上の洗浄工程を更に
含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の洗浄工程は、工程（ｂ）と工程（ｃ）との間
で実施される。いくつかの実施形態では、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。い
くつかの実施形態では、捕捉分子は、固体支持体上に固定される。いくつかの実施形態で
は、固体支持体は、ビーズである。いくつかの実施形態では、捕捉分子に結合した細胞を
集めることは、固体支持体に結合した捕捉リガンドから細胞を溶出させることと、溶出物
を集めることとを含む。いくつかの実施形態では、捕捉分子は、タグで標識される。いく
つかの実施形態では、タグは、蛍光分子、親和性タグ又は磁気タグである。いくつかの実
施形態では、捕捉分子に結合した細胞を集めることは、細胞と標識されたリガンドとを含
む複合体を単離することを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、複合体から解離され
る。
ＭＨＣタンパク質
【0300】
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）分子の２つの主要な
クラスの１つであり（他方はＭＨＣクラスＩＩである）、身体のほぼ全ての有核細胞に見
出される。それらの機能は、Ｔ細胞に対し、細胞内からのタンパク質のフラグメントを提
示するためのものであり、健康な細胞は無視されるが、外来タンパク質又は変異タンパク
質を含有する細胞は、免疫系によって攻撃されるであろう。ＭＨＣクラスＩタンパク質は
、細胞質タンパク質に由来するペプチドを提示するため、ＭＨＣクラスＩ提示の経路は、
細胞質経路又は内在性経路と呼ばれることが多い。クラスＩ ＭＨＣ分子は、プロテアソ
ームによる細胞質タンパク質の分解から主に生成されたペプチドに結合する。ＭＨＣ Ｉ
：ペプチド複合体を、次いで、細胞の形質膜に挿入する。ペプチドは、クラスＩ ＭＨＣ
分子の細胞外部分に結合する。したがって、クラスＩ ＭＨＣの機能は、細胞内タンパク
質を細胞毒性Ｔ細胞（ＣＴＬ）に提示することである。しかし、クラスＩ ＭＨＣはまた
、交差提示として知られるプロセスにおいて、外因性タンパク質から生成されたペプチド
も提示することができる。
クラスの１つであり（他方はＭＨＣクラスＩＩである）、身体のほぼ全ての有核細胞に見
出される。それらの機能は、Ｔ細胞に対し、細胞内からのタンパク質のフラグメントを提
示するためのものであり、健康な細胞は無視されるが、外来タンパク質又は変異タンパク
質を含有する細胞は、免疫系によって攻撃されるであろう。ＭＨＣクラスＩタンパク質は
、細胞質タンパク質に由来するペプチドを提示するため、ＭＨＣクラスＩ提示の経路は、
細胞質経路又は内在性経路と呼ばれることが多い。クラスＩ ＭＨＣ分子は、プロテアソ
ームによる細胞質タンパク質の分解から主に生成されたペプチドに結合する。ＭＨＣ Ｉ
：ペプチド複合体を、次いで、細胞の形質膜に挿入する。ペプチドは、クラスＩ ＭＨＣ
分子の細胞外部分に結合する。したがって、クラスＩ ＭＨＣの機能は、細胞内タンパク
質を細胞毒性Ｔ細胞（ＣＴＬ）に提示することである。しかし、クラスＩ ＭＨＣはまた
、交差提示として知られるプロセスにおいて、外因性タンパク質から生成されたペプチド
も提示することができる。
【0301】
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、２つのポリペプチド鎖であるα及びβ２－ミクログロブ
リン（β２Ｍ）からなる。この２つの鎖は、β２Ｍとα３ドメインとの相互作用によって
、非共有結合的に結合する。α鎖のみが多型であり、ＨＬＡ遺伝子によりコードされてお
り、一方、β２Ｍサブユニットは、多型ではなく、β－２ミクログロブリン遺伝子により
コードされる。α３ドメインは、形質膜に広がっており、Ｔ細胞のＣＤ８共受容体と相互
作用する。α３－ＣＤ８相互作用によりＭＨＣ Ｉ分子が所定の位置に保持される一方で
、細胞毒性Ｔ細胞の表面上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）がそのα１－α２ヘテロ二量体リガ
ンドに結合し、結合したペプチドの抗原性を調べる。α１ドメイン及びα２ドメインは、
結合するペプチドのための溝を形成するように折り畳まれる。ＭＨＣクラスＩタンパク質
は、８～１０アミノ酸長のペプチドに結合する。
リン（β２Ｍ）からなる。この２つの鎖は、β２Ｍとα３ドメインとの相互作用によって
、非共有結合的に結合する。α鎖のみが多型であり、ＨＬＡ遺伝子によりコードされてお
り、一方、β２Ｍサブユニットは、多型ではなく、β－２ミクログロブリン遺伝子により
コードされる。α３ドメインは、形質膜に広がっており、Ｔ細胞のＣＤ８共受容体と相互
作用する。α３－ＣＤ８相互作用によりＭＨＣ Ｉ分子が所定の位置に保持される一方で
、細胞毒性Ｔ細胞の表面上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）がそのα１－α２ヘテロ二量体リガ
ンドに結合し、結合したペプチドの抗原性を調べる。α１ドメイン及びα２ドメインは、
結合するペプチドのための溝を形成するように折り畳まれる。ＭＨＣクラスＩタンパク質
は、８～１０アミノ酸長のペプチドに結合する。
【0302】
ＭＨＣクラスＩＩ分子は、樹状細胞、単核食細胞、一部の内皮細胞、胸腺上皮細胞及び
Ｂ細胞などの抗原提示細胞上にのみ通常見出される分子のファミリーである。クラスＩＩ
ペプチドによって提示される抗原は、細胞外タンパク質（クラスＩのような細胞質ではな
い）由来であり、したがって、抗原提示のＭＨＣクラスＩＩ依存的経路は、エンドサイト
ーシス経路又は外因性経路と呼ばれる。ＭＨＣクラスＩＩ分子のローディングは、食作用
によって生じる。細胞外タンパク質は、取り込まれ、リソソーム内で消化され、得られた
エピトープペプチドフラグメントは、細胞表面に移動する前に、ＭＨＣクラスＩＩ分子上
にロードされる。
Ｂ細胞などの抗原提示細胞上にのみ通常見出される分子のファミリーである。クラスＩＩ
ペプチドによって提示される抗原は、細胞外タンパク質（クラスＩのような細胞質ではな
い）由来であり、したがって、抗原提示のＭＨＣクラスＩＩ依存的経路は、エンドサイト
ーシス経路又は外因性経路と呼ばれる。ＭＨＣクラスＩＩ分子のローディングは、食作用
によって生じる。細胞外タンパク質は、取り込まれ、リソソーム内で消化され、得られた
エピトープペプチドフラグメントは、細胞表面に移動する前に、ＭＨＣクラスＩＩ分子上
にロードされる。
【0303】
ＭＨＣクラスＩ分子と同様に、クラスＩＩ分子もヘテロ二量体であるが、この場合、２
つの均一なペプチドであるα鎖及びβ鎖からなる。サブ表記であるα１、α２などは、Ｈ
ＬＡ遺伝子内の別個のドメインを指す。各ドメインは、通常、遺伝子内の異なるエクソン
によってコードされ、いくつかの遺伝子は、リーダー配列、膜貫通配列などをコードする
更なるドメインを有する。ＭＨＣクラスＩＩ分子の抗原結合溝は両端で開放しており、一
方、クラスＩ分子上の対応する溝は、各末端で閉じているため、ＭＨＣクラスＩＩ分子に
よって提示される抗原は、より長く、一般的に、１５～２４アミノ酸長である。
つの均一なペプチドであるα鎖及びβ鎖からなる。サブ表記であるα１、α２などは、Ｈ
ＬＡ遺伝子内の別個のドメインを指す。各ドメインは、通常、遺伝子内の異なるエクソン
によってコードされ、いくつかの遺伝子は、リーダー配列、膜貫通配列などをコードする
更なるドメインを有する。ＭＨＣクラスＩＩ分子の抗原結合溝は両端で開放しており、一
方、クラスＩ分子上の対応する溝は、各末端で閉じているため、ＭＨＣクラスＩＩ分子に
よって提示される抗原は、より長く、一般的に、１５～２４アミノ酸長である。
【0304】
ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）遺伝子は、ＭＨＣ遺伝子のヒト態様である。ヒトにおける３
つの主要なＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ及びＨＬＡ－Ｃであり
、一方、３つの少数のＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ及びＨＬＡ
－Ｇである。ヒトにおける抗原提示に関与する３つの主要なＭＨＣクラスＩＩタンパク質
は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＤＡ－ＤＱ及びＨＬＡ－ＤＲであり、一方、他のＭＨＣクラスＩ
Ｉタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＭ及びＨＬＡ－ＤＯであり、初期の処理及び抗原のローディ
ングに関与する。進化が最も速いコード配列を持つＨＬＡ－Ａは、ヒトの遺伝子の中でラ
ンク付けされる。２０１３年１２月の時点で、１７４０個の活性タンパク質及び１１７個
のヌルタンパク質をコードする２４３２個の既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が存在した。Ｈ
ＬＡ－Ａ遺伝子は、６番染色体の短腕上に位置し、ＨＬＡ－Ａのより大きなα鎖構成要素
をコードする。ＨＬＡ－Ａα鎖の変動は、ＨＬＡ機能にとって鍵となる。この変動によっ
て、集団における遺伝的多様性を促進する。各ＨＬＡは、特定の構造のペプチドについて
異なる親和性を有するため、ＨＬＡが多様であるほど、細胞表面に「提示される」抗原が
より多様であることを意味し、この集団の分集団が、任意の所与の外来侵入物に対して耐
性である可能性を高める。これにより、単一の病原体が、ヒト集団全体を一掃する能力を
有する可能性が減少する。各個体は、これらの親それぞれから１つずつ、２種類までのＨ
ＬＡ－Ａを発現してもよい。個体の一部は、両方の親から同じＨＬＡ－Ａを受け継ぎ、こ
の個体のＨＬＡ多様性は減少する。しかし、個体の大部分は、２種類の異なるＨＬＡ－Ａ
の複製物を受け取る。この同じパターンは、全てのＨＬＡ群について成り立つ。言い換え
ると、ヒトは、２４３２個の既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子の１つ又は２つのいずれかのみ
を発現することができる。
つの主要なＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ及びＨＬＡ－Ｃであり
、一方、３つの少数のＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ及びＨＬＡ
－Ｇである。ヒトにおける抗原提示に関与する３つの主要なＭＨＣクラスＩＩタンパク質
は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＤＡ－ＤＱ及びＨＬＡ－ＤＲであり、一方、他のＭＨＣクラスＩ
Ｉタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＭ及びＨＬＡ－ＤＯであり、初期の処理及び抗原のローディ
ングに関与する。進化が最も速いコード配列を持つＨＬＡ－Ａは、ヒトの遺伝子の中でラ
ンク付けされる。２０１３年１２月の時点で、１７４０個の活性タンパク質及び１１７個
のヌルタンパク質をコードする２４３２個の既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が存在した。Ｈ
ＬＡ－Ａ遺伝子は、６番染色体の短腕上に位置し、ＨＬＡ－Ａのより大きなα鎖構成要素
をコードする。ＨＬＡ－Ａα鎖の変動は、ＨＬＡ機能にとって鍵となる。この変動によっ
て、集団における遺伝的多様性を促進する。各ＨＬＡは、特定の構造のペプチドについて
異なる親和性を有するため、ＨＬＡが多様であるほど、細胞表面に「提示される」抗原が
より多様であることを意味し、この集団の分集団が、任意の所与の外来侵入物に対して耐
性である可能性を高める。これにより、単一の病原体が、ヒト集団全体を一掃する能力を
有する可能性が減少する。各個体は、これらの親それぞれから１つずつ、２種類までのＨ
ＬＡ－Ａを発現してもよい。個体の一部は、両方の親から同じＨＬＡ－Ａを受け継ぎ、こ
の個体のＨＬＡ多様性は減少する。しかし、個体の大部分は、２種類の異なるＨＬＡ－Ａ
の複製物を受け取る。この同じパターンは、全てのＨＬＡ群について成り立つ。言い換え
ると、ヒトは、２４３２個の既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子の１つ又は２つのいずれかのみ
を発現することができる。
【0305】
全ての対立遺伝子は、少なくとも４桁の分類、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２を受け
取る。Ａは、対立遺伝子がどのＨＬＡ遺伝子に属するかを意味する。多くのＨＬＡ－Ａ対
立遺伝子が存在し、その結果、血清型による分類が、カテゴリー化を単純化する。次の１
対の数字は、この割り当てを示す。例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０４及びＨＬＡ－Ａ＊０２：３２４は、全てＡ２血清型のメンバーである（＊０２とい
う接頭語によって示される）。この群は、ＨＬＡ適合性に関与する主要な因子である。そ
の後の全ての数字は、血清型によって決定することはできず、遺伝子配列決定によって指
定される。２番目の数字のセットは、どのＨＬＡタンパク質が産生されるかを示す。これ
らは、発見の順序で割り当てられ、２０１３年１２月時点で、４５６個の異なるＨＬＡ－
Ａ－Ａ０２タンパク質が既知である（割り当てられた名称はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１から
ＨＬＡ－Ａ＊０２：４５６）。最も短い可能なＨＬＡ名は、これらの詳細の両方を含む。
これを超えるそれぞれの長くなった部分は、タンパク質を変化させてもよく、又は変化さ
せなくてもよいヌクレオチド変化を示す。
取る。Ａは、対立遺伝子がどのＨＬＡ遺伝子に属するかを意味する。多くのＨＬＡ－Ａ対
立遺伝子が存在し、その結果、血清型による分類が、カテゴリー化を単純化する。次の１
対の数字は、この割り当てを示す。例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０４及びＨＬＡ－Ａ＊０２：３２４は、全てＡ２血清型のメンバーである（＊０２とい
う接頭語によって示される）。この群は、ＨＬＡ適合性に関与する主要な因子である。そ
の後の全ての数字は、血清型によって決定することはできず、遺伝子配列決定によって指
定される。２番目の数字のセットは、どのＨＬＡタンパク質が産生されるかを示す。これ
らは、発見の順序で割り当てられ、２０１３年１２月時点で、４５６個の異なるＨＬＡ－
Ａ－Ａ０２タンパク質が既知である（割り当てられた名称はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１から
ＨＬＡ－Ａ＊０２：４５６）。最も短い可能なＨＬＡ名は、これらの詳細の両方を含む。
これを超えるそれぞれの長くなった部分は、タンパク質を変化させてもよく、又は変化さ
せなくてもよいヌクレオチド変化を示す。
【0306】
いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合分子は、疾患関連抗原（腫瘍関連抗原又は
ウイルスによってコードされる抗原など）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩタンパク
質とを含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ
－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ又はＨＬＡ－Ｇである。いくつかの実施形態
では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ又はＨＬＡ－Ｃである。い
くつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。いくつかの実
施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。いくつかの実施形態では
、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣク
ラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ－Ａ０
９、ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ－Ａ２
４、ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ－Ａ３
０、ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ－Ａ３
６、ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ－Ａ７
４又はＨＬＡ－Ａ８０である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、
ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１－５５５、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：０９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：１９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２２
又はＨＬＡ－Ａ＊０２：２４のうち、いずれか１つである。いくつかの実施形態では、Ｍ
ＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１は
、全白人の３９～４６％で発現され、したがって、本発明で使用するためのＭＨＣクラス
Ｉタンパク質の好適な選択を表す。
ウイルスによってコードされる抗原など）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩタンパク
質とを含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ
－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ又はＨＬＡ－Ｇである。いくつかの実施形態
では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ又はＨＬＡ－Ｃである。い
くつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。いくつかの実
施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。いくつかの実施形態では
、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣク
ラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ－Ａ０
９、ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ－Ａ２
４、ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ－Ａ３
０、ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ－Ａ３
６、ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ－Ａ７
４又はＨＬＡ－Ａ８０である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、
ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１－５５５、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：０９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：１９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２２
又はＨＬＡ－Ａ＊０２：２４のうち、いずれか１つである。いくつかの実施形態では、Ｍ
ＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１は
、全白人の３９～４６％で発現され、したがって、本発明で使用するためのＭＨＣクラス
Ｉタンパク質の好適な選択を表す。
【0307】
いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合分子は、疾患関連抗原（腫瘍関連抗原又は
ウイルスによってコードされる抗原など）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩＩタンパ
ク質とを含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、
ＨＬＡ－ＤＱ又はＨＬＡ－ＤＲである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタン
パク質は、ＨＬＡ－ＤＰである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質
は、ＨＬＡ－ＤＱである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－ＤＲである。
ウイルスによってコードされる抗原など）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩＩタンパ
ク質とを含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、
ＨＬＡ－ＤＱ又はＨＬＡ－ＤＲである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタン
パク質は、ＨＬＡ－ＤＰである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質
は、ＨＬＡ－ＤＱである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－ＤＲである。
【0308】
Ｆａｂ様抗原結合モジュールの生成に使用するのに好適なペプチドは、例えば、当業者
に既知のコンピュータ予測モデルを使用して、ＨＬＡ（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
）結合モチーフと、プロテアソーム及び免疫プロテアソームの切断部位の存在に基づいて
決定することができる。ＭＨＣ結合部位を予測するために、このようなモデルとしては、
限定されないが、ＰｒｏＰｒｅｄ１（Ｓｉｎｇｈ ａｎｄ Ｒａｇｈａｖａ，ＰｒｏＰｒ
ｅｄ：ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ＨＬＡ－ＤＲ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅｓ．ＢＩ
ＯＩＮＦＯＲＭＡＴＩＣＳ １７（１２）：１２３６－１２３７、２００１に更に詳細な
記載）及びＳＹＦＰＥＩＴＨＩ（Ｓｃｈｕｌｅｒら、ＳＹＦＰＥＩＴＨＩ，Ｄａｔａｂａ
ｓｅ ｆｏｒ Ｓｅａｒｃｈｉｎｇ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｐｒｅｄ
ｉｃｔｉｏｎ．ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、ｖｏｌ ４０９（１）：７５－９３、２００７を参
照）が挙げられる。
に既知のコンピュータ予測モデルを使用して、ＨＬＡ（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
）結合モチーフと、プロテアソーム及び免疫プロテアソームの切断部位の存在に基づいて
決定することができる。ＭＨＣ結合部位を予測するために、このようなモデルとしては、
限定されないが、ＰｒｏＰｒｅｄ１（Ｓｉｎｇｈ ａｎｄ Ｒａｇｈａｖａ，ＰｒｏＰｒ
ｅｄ：ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ＨＬＡ－ＤＲ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅｓ．ＢＩ
ＯＩＮＦＯＲＭＡＴＩＣＳ １７（１２）：１２３６－１２３７、２００１に更に詳細な
記載）及びＳＹＦＰＥＩＴＨＩ（Ｓｃｈｕｌｅｒら、ＳＹＦＰＥＩＴＨＩ，Ｄａｔａｂａ
ｓｅ ｆｏｒ Ｓｅａｒｃｈｉｎｇ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｐｒｅｄ
ｉｃｔｉｏｎ．ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、ｖｏｌ ４０９（１）：７５－９３、２００７を参
照）が挙げられる。
【0309】
適切なペプチドが同定されたら、当業者に周知のプロトコルに従ってペプチド合成を行
うことができる。本発明のペプチドは、大きさが比較的小さいため、従来のペプチド合成
技術に従って、溶液中又は固体支持体上で直接合成されてもよい。様々な自動合成装置が
市販されており、既知のプロトコルに従って使用することができる。溶液相中のペプチド
の合成は、合成ペプチドの大規模生産のための十分に確立された手順となっており、した
がって、本発明のペプチドを調製するための好適な代替方法である（例えば、Ｊｏｈｎ
Ｍｏｒｒｏｗ Ｓｔｅｗａｒｔ及びＭａｒｔｉｎらによるＳｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅ
ｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｌｍｅｚ－ｍｅｄ
ｉａｔｅｄ Ａｍｉｄａｔｉｏｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｔｏ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｐｈ
ａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒ
ｓ Ｖｏｌ．３９、ページ１５１７－１５２０、１９９８を参照）。
医薬組成物
うことができる。本発明のペプチドは、大きさが比較的小さいため、従来のペプチド合成
技術に従って、溶液中又は固体支持体上で直接合成されてもよい。様々な自動合成装置が
市販されており、既知のプロトコルに従って使用することができる。溶液相中のペプチド
の合成は、合成ペプチドの大規模生産のための十分に確立された手順となっており、した
がって、本発明のペプチドを調製するための好適な代替方法である（例えば、Ｊｏｈｎ
Ｍｏｒｒｏｗ Ｓｔｅｗａｒｔ及びＭａｒｔｉｎらによるＳｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅ
ｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｌｍｅｚ－ｍｅｄ
ｉａｔｅｄ Ａｍｉｄａｔｉｏｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｔｏ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｐｈ
ａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒ
ｓ Ｖｏｌ．３９、ページ１５１７－１５２０、１９９８を参照）。
医薬組成物
【0310】
本明細書では、本明細書に記載される実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲ、又は本明
細書に記載される実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲをコードする核酸、又は本明細書
に記載される実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲエフェクター細胞を含む、組成物（例
えば、医薬組成物、本明細書では製剤とも呼ばれる）も提供される。いくつかの実施形態
では、組成物は、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲをその表面上
に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組
成物（例えば、医薬組成物）である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター
細胞組成物は、医薬組成物である。
細書に記載される実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲをコードする核酸、又は本明細書
に記載される実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲエフェクター細胞を含む、組成物（例
えば、医薬組成物、本明細書では製剤とも呼ばれる）も提供される。いくつかの実施形態
では、組成物は、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかに係るｃａＴＣＲをその表面上
に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組
成物（例えば、医薬組成物）である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター
細胞組成物は、医薬組成物である。
【0311】
組成物は、同じ細胞型を有し、同じｃａＴＣＲを発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞
を含む均一な細胞集団を含んでいてもよく、又は異なる細胞型を有し、及び／又は異なる
ｃａＴＣＲを発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞を含む複数のｃａＴＣＲエフェクター
細胞集団を含む不均一な細胞集団を含んでいてもよい。組成物は、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞ではない細胞を更に含んでもよい。
を含む均一な細胞集団を含んでいてもよく、又は異なる細胞型を有し、及び／又は異なる
ｃａＴＣＲを発現するｃａＴＣＲエフェクター細胞を含む複数のｃａＴＣＲエフェクター
細胞集団を含む不均一な細胞集団を含んでいてもよい。組成物は、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞ではない細胞を更に含んでもよい。
【0312】
したがって、いくつかの実施形態では、同じ細胞型を有し、同じｃａＴＣＲを発現する
ｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞）を含む均一な細胞集団を含
むｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサー
Ｔ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞組成物は、医薬組成物である。
ｃａＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞）を含む均一な細胞集団を含
むｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサー
Ｔ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞組成物は、医薬組成物である。
【0313】
いくつかの実施形態では、異なる細胞型を有し、及び／又は異なるｃａＴＣＲを発現す
るｃａＴＣＲエフェクター細胞を含む複数のｃａＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均
一な細胞集団を含むｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物が提供される。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、互いに独立して、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞
、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型を有
する。いくつかの実施形態では、組成物中のｃａＴＣＲエフェクター細胞の全ては、同じ
細胞型を有する（例えば、全てのｃａＴＣＲエフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞である
）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、
他とは異なる細胞型を有する（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は細胞
毒性Ｔ細胞からなり、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、ナチュラルキラーＴ細
胞からなる）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ
ｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なく
とも１つの集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現する。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異
的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター
細胞の少なくとも１つの集団は、他の集団とは異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴ
ＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体
に特異的に結合し、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的
に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合、ｃａＴＣＲエ
フェクター細胞の各集団は、同じ疾患又は障害と関連する標的抗原に特異的に結合するｃ
ａＴＣＲを発現する（例えば、それぞれの標的抗原は、癌、例えば、乳癌に関連する）。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組成物である。
るｃａＴＣＲエフェクター細胞を含む複数のｃａＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均
一な細胞集団を含むｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物が提供される。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、互いに独立して、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞
、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型を有
する。いくつかの実施形態では、組成物中のｃａＴＣＲエフェクター細胞の全ては、同じ
細胞型を有する（例えば、全てのｃａＴＣＲエフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞である
）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、
他とは異なる細胞型を有する（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は細胞
毒性Ｔ細胞からなり、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、ナチュラルキラーＴ細
胞からなる）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ
ｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なく
とも１つの集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現する。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異
的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター
細胞の少なくとも１つの集団は、他の集団とは異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴ
ＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体
に特異的に結合し、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的
に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合、ｃａＴＣＲエ
フェクター細胞の各集団は、同じ疾患又は障害と関連する標的抗原に特異的に結合するｃ
ａＴＣＲを発現する（例えば、それぞれの標的抗原は、癌、例えば、乳癌に関連する）。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組成物である。
【0314】
したがって、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物であって、
本明細書に記載される実施形態のいずれかに係る複数のｃａＴＣＲエフェクター細胞集団
を含み、組成物中のｃａＴＣＲエフェクター細胞の全てが、同じ細胞型を有し（例えば、
ｃａＴＣＲエフェクター細胞の全てが、細胞毒性Ｔ細胞である）、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞のそれぞれの集団が、他とは異なるｃａＴＣＲを発現する、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞組成物が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、
Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細
胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選
択される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ標的
抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエ
フェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他の集団とは異なる標的抗原に特異的に結合
するｃａＴＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、ｐＭ
ＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、細胞表面受容
体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少な
くとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合、ｃ
ａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ疾患又は障害と関連する標的抗原に特異的に
結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、それぞれの標的抗原は、癌、例えば、乳癌に関
連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組成物
である。
本明細書に記載される実施形態のいずれかに係る複数のｃａＴＣＲエフェクター細胞集団
を含み、組成物中のｃａＴＣＲエフェクター細胞の全てが、同じ細胞型を有し（例えば、
ｃａＴＣＲエフェクター細胞の全てが、細胞毒性Ｔ細胞である）、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞のそれぞれの集団が、他とは異なるｃａＴＣＲを発現する、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞組成物が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、
Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細
胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選
択される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ標的
抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエ
フェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他の集団とは異なる標的抗原に特異的に結合
するｃａＴＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、ｐＭ
ＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、細胞表面受容
体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少な
くとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合、ｃ
ａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ疾患又は障害と関連する標的抗原に特異的に
結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、それぞれの標的抗原は、癌、例えば、乳癌に関
連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組成物
である。
【0315】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれかに係る複数のｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞集団を含む組成物であって、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少な
くとも１つの集団が、他とは異なる細胞型である、組成物が提供される。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団は全て、異なる細胞型を有する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、互いに独立して、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパ
ーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細
胞型を有する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ
ｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なく
とも１つの集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現する。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異
的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター
細胞の少なくとも１つの集団は、他の集団とは異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴ
ＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体
に特異的に結合し、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的
に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合、ｃａＴＣＲエ
フェクター細胞の各集団は、同じ疾患又は障害と関連する標的抗原に特異的に結合するｃ
ａＴＣＲを発現する（例えば、それぞれの標的抗原は、癌、例えば、乳癌に関連する）。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組成物である。
ＴＣＲエフェクター細胞集団を含む組成物であって、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少な
くとも１つの集団が、他とは異なる細胞型である、組成物が提供される。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団は全て、異なる細胞型を有する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、互いに独立して、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパ
ーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細
胞型を有する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ
ｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なく
とも１つの集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現する。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異
的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター
細胞の少なくとも１つの集団は、他の集団とは異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴ
ＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体
に特異的に結合し、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的
に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合、ｃａＴＣＲエ
フェクター細胞の各集団は、同じ疾患又は障害と関連する標的抗原に特異的に結合するｃ
ａＴＣＲを発現する（例えば、それぞれの標的抗原は、癌、例えば、乳癌に関連する）。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組成物である。
【0316】
組成物の調製中の様々な点において、細胞を凍結保存することが必要であるか、又は有
益な場合がある。「凍結され／凍結」及び「凍結保存され／冷凍保存」との用語は、相互
に置き換え可能に使用することができる。凍結は、凍結乾燥を含む。
益な場合がある。「凍結され／凍結」及び「凍結保存され／冷凍保存」との用語は、相互
に置き換え可能に使用することができる。凍結は、凍結乾燥を含む。
【0317】
当業者には理解されるように、細胞の凍結は破壊的な場合がある（Ｍａｚｕｒ，Ｐ．、
１９７７、Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ １４：２５１－２７２を参照）が、このような損傷
を防ぐために利用可能な多くの手順が存在する。例えば、損傷は、（ａ）凍結保護剤（cr
yoprotective agent）の使用、（ｂ）凍結速度の制御及び／又は（ｃ）分解反応を最小
限にするのに十分に低い温度での保存によって避けることができる。例示的な凍結保護剤
としては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（Ｌｏｖｅｌｏｃｋ及びＢｉｓｈｏｐ、１
９５９、Ｎａｔｕｒｅ １８３：１３９４－１３９５；Ａｓｈｗｏｏｄ－Ｓｍｉｔｈ、１
９６１、Ｎａｔｕｒｅ １９０：１２０４－１２０５）、グリセロール、ポリビニルピロ
リジン（Ｒｉｎｆｒｅｔ、１９６０、Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５７６
）、ポリエチレングリコール（Ｓｌｏｖｉｔｅｒ及びＲａｖｄｉｎ、１９６２、Ｎａｔｕ
ｒｅ １９６：５４８）、アルブミン、デキストラン、ショ糖、エチレングリコール、ｉ
－エリスリトール、Ｄ－リビトール、Ｄ－マンニトール（Ｒｏｗｅら、１９６２、Ｆｅｄ
．Ｐｒｏｃ．２１：１５７）、Ｄ－ソルビトール、ｉ－イノシトール、Ｄ－ラクトース、
塩化コリン（Ｂｅｎｄｅｒら、１９６０、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１５：５２０
）、アミノ酸（Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ Ｂｅｎｄｅｒ、１９６０、Ｅｘｐ
．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．２０：６５１）、メタノール、アセトアミド、グリセロールモノア
セテート（Ｌｏｖｅｌｏｃｋ、１９５４、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．５６：２６５）、及び無
機塩（Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ Ｂｅｎｄｅｒ、１９６０、Ｐｒｏｃ．Ｓｏ
ｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１０４：３８８；Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ
Ｂｅｎｄｅｒ、１９６１、Ｒａｄｉｏｂｉｏｌｏｇｙ、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ
ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｒａｄｉ
ｏｂｉｏｌｏｇｙ、ｌｌｂｅｒｙ編集、Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈ、Ｌｏｎｄｏｎ、ｐ．５
９）が挙げられる。特定の実施形態では、ＤＭＳＯを使用することができる。血漿の添加
（例えば、２０～２５％の濃度になるまで）によって、ＤＭＳＯの保護効果を増強するこ
とができる。ＤＭＳＯを添加した後、１％のＤＭＳＯ濃度は４℃より高い温度では毒性な
場合があるため、凍結するまで細胞を０℃に維持してもよい。
１９７７、Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ １４：２５１－２７２を参照）が、このような損傷
を防ぐために利用可能な多くの手順が存在する。例えば、損傷は、（ａ）凍結保護剤（cr
yoprotective agent）の使用、（ｂ）凍結速度の制御及び／又は（ｃ）分解反応を最小
限にするのに十分に低い温度での保存によって避けることができる。例示的な凍結保護剤
としては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（Ｌｏｖｅｌｏｃｋ及びＢｉｓｈｏｐ、１
９５９、Ｎａｔｕｒｅ １８３：１３９４－１３９５；Ａｓｈｗｏｏｄ－Ｓｍｉｔｈ、１
９６１、Ｎａｔｕｒｅ １９０：１２０４－１２０５）、グリセロール、ポリビニルピロ
リジン（Ｒｉｎｆｒｅｔ、１９６０、Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５７６
）、ポリエチレングリコール（Ｓｌｏｖｉｔｅｒ及びＲａｖｄｉｎ、１９６２、Ｎａｔｕ
ｒｅ １９６：５４８）、アルブミン、デキストラン、ショ糖、エチレングリコール、ｉ
－エリスリトール、Ｄ－リビトール、Ｄ－マンニトール（Ｒｏｗｅら、１９６２、Ｆｅｄ
．Ｐｒｏｃ．２１：１５７）、Ｄ－ソルビトール、ｉ－イノシトール、Ｄ－ラクトース、
塩化コリン（Ｂｅｎｄｅｒら、１９６０、Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１５：５２０
）、アミノ酸（Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ Ｂｅｎｄｅｒ、１９６０、Ｅｘｐ
．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．２０：６５１）、メタノール、アセトアミド、グリセロールモノア
セテート（Ｌｏｖｅｌｏｃｋ、１９５４、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．５６：２６５）、及び無
機塩（Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ Ｂｅｎｄｅｒ、１９６０、Ｐｒｏｃ．Ｓｏ
ｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１０４：３８８；Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ
Ｂｅｎｄｅｒ、１９６１、Ｒａｄｉｏｂｉｏｌｏｇｙ、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ
ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｒａｄｉ
ｏｂｉｏｌｏｇｙ、ｌｌｂｅｒｙ編集、Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈ、Ｌｏｎｄｏｎ、ｐ．５
９）が挙げられる。特定の実施形態では、ＤＭＳＯを使用することができる。血漿の添加
（例えば、２０～２５％の濃度になるまで）によって、ＤＭＳＯの保護効果を増強するこ
とができる。ＤＭＳＯを添加した後、１％のＤＭＳＯ濃度は４℃より高い温度では毒性な
場合があるため、凍結するまで細胞を０℃に維持してもよい。
【0318】
細胞の凍結保存において、冷却速度をゆっくりに制御することが重要な場合があり、凍
結保護剤が異なる場合（Ｒａｐａｔｚら、１９６８、Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ ５（１）
：１８－２５）及び細胞型が異なる場合は、最適冷却速度が異なる（例えば、幹細胞の生
存及びその移植可能性に対する冷却速度の影響について、Ｒｏｗｅ及びＲｉｎｆｒｅｔ、
１９６２、Ｂｌｏｏｄ ２０：６３６；Ｒｏｗｅ、１９６６、Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ
３（１）：１２－１８；Ｌｅｗｉｓら、１９６７、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ７（１）：
１７－３２；及びＭａｚｕｒ、１９７０、Ｓｃｉｅｎｃｅ １６８：９３９－９４９を参
照）。水が氷になるときの融合相の熱は、最小限であるべきである。冷却手順は、例えば
、プログラム可能な凍結装置又はメタノール浴手順の使用によって実施することができる
。プログラム可能な冷凍装置は、最適な冷却速度の決定を可能にし、標準的な再現可能な
冷却を容易にする。
結保護剤が異なる場合（Ｒａｐａｔｚら、１９６８、Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ ５（１）
：１８－２５）及び細胞型が異なる場合は、最適冷却速度が異なる（例えば、幹細胞の生
存及びその移植可能性に対する冷却速度の影響について、Ｒｏｗｅ及びＲｉｎｆｒｅｔ、
１９６２、Ｂｌｏｏｄ ２０：６３６；Ｒｏｗｅ、１９６６、Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ
３（１）：１２－１８；Ｌｅｗｉｓら、１９６７、Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ７（１）：
１７－３２；及びＭａｚｕｒ、１９７０、Ｓｃｉｅｎｃｅ １６８：９３９－９４９を参
照）。水が氷になるときの融合相の熱は、最小限であるべきである。冷却手順は、例えば
、プログラム可能な凍結装置又はメタノール浴手順の使用によって実施することができる
。プログラム可能な冷凍装置は、最適な冷却速度の決定を可能にし、標準的な再現可能な
冷却を容易にする。
【0319】
特定の実施形態では、ＤＭＳＯ処理した細胞を、氷であらかじめ冷却し、冷却メタノー
ルを含むトレーに移してもよく、次に、これを－８０℃の機械的冷蔵庫（例えば、Ｈａｒ
ｒｉｓ又はＲｅｖｃｏ）内に入れる。メタノール浴及びサンプルの熱電対測定値は、１℃
～３℃／分の冷却速度が好ましい場合があることを示している。少なくとも２時間後、標
本は、温度－８０℃に達してもよく、液体窒素（－１９６℃）に直接入れられてもよい。
ルを含むトレーに移してもよく、次に、これを－８０℃の機械的冷蔵庫（例えば、Ｈａｒ
ｒｉｓ又はＲｅｖｃｏ）内に入れる。メタノール浴及びサンプルの熱電対測定値は、１℃
～３℃／分の冷却速度が好ましい場合があることを示している。少なくとも２時間後、標
本は、温度－８０℃に達してもよく、液体窒素（－１９６℃）に直接入れられてもよい。
【0320】
十分に凍結させた後、長期凍結保存容器に細胞をすぐに移してもよい。好ましい実施形
態では、サンプルは、液体窒素（－１９６℃）又は蒸気（－１℃）中で凍結保存されても
よい。このような保存は、高効率の液体窒素冷蔵庫が利用可能であれば促進される。
態では、サンプルは、液体窒素（－１９６℃）又は蒸気（－１℃）中で凍結保存されても
よい。このような保存は、高効率の液体窒素冷蔵庫が利用可能であれば促進される。
【0321】
細胞の操作、凍結保存及び長期保存のための更なる検討事項及び手順は、以下の例示的
な参考文献中に見出すことができる。米国特許第４，１９９，０２２号；同第３，７５３
，３５７号及び同第４，５５９，２９８号Ｇｏｒｉｎ、１９８６、Ｃｌｉｎｉｃｓ Ｉｎ
Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ １５（１）：１９－４８；Ｂｏｎｅ－Ｍａｒｒｏｗ Ｃｏｎ
ｓｅｒｖａｔｉｏｎ，Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｐｒ
ｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ａ Ｐａｎｅｌ，Ｍｏｓｃｏｗ、７月２２～２６日、１９６
８年、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ａｔｏｍｉｃ Ｅｎｅｒｇｙ Ａｇｅｎｃｙ、Ｖｉ
ｅｎｎａ、ｐｐ．１０７－１８６；Ｌｉｖｅｓｅｙ及びＬｉｎｎｅｒ、１９８７、Ｎａｔ
ｕｒｅ ３２７：２５５；Ｌｉｎｎｅｒら、１９８６、Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔ
ｏｃｈｅｍ．３４（９）：１ １２３－１ １３５；Ｓｉｍｉｏｎｅ、１９９２、Ｊ．Ｐ
ａｒｅｎｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．４６（６）：２２６－３２）。
な参考文献中に見出すことができる。米国特許第４，１９９，０２２号；同第３，７５３
，３５７号及び同第４，５５９，２９８号Ｇｏｒｉｎ、１９８６、Ｃｌｉｎｉｃｓ Ｉｎ
Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ １５（１）：１９－４８；Ｂｏｎｅ－Ｍａｒｒｏｗ Ｃｏｎ
ｓｅｒｖａｔｉｏｎ，Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｐｒ
ｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ａ Ｐａｎｅｌ，Ｍｏｓｃｏｗ、７月２２～２６日、１９６
８年、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ａｔｏｍｉｃ Ｅｎｅｒｇｙ Ａｇｅｎｃｙ、Ｖｉ
ｅｎｎａ、ｐｐ．１０７－１８６；Ｌｉｖｅｓｅｙ及びＬｉｎｎｅｒ、１９８７、Ｎａｔ
ｕｒｅ ３２７：２５５；Ｌｉｎｎｅｒら、１９８６、Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔ
ｏｃｈｅｍ．３４（９）：１ １２３－１ １３５；Ｓｉｍｉｏｎｅ、１９９２、Ｊ．Ｐ
ａｒｅｎｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．４６（６）：２２６－３２）。
【0322】
凍結保存の後、凍結した細胞を、当業者に既知の方法に従って、使用するために解凍し
てもよい。凍結した細胞は、好ましくは迅速に解凍され、解凍直後に冷却される。特定の
実施形態では、凍結した細胞を含有するバイアルを、温水浴中にその首部まで浸漬しても
よく、穏やかに回転させることにより、解凍に伴い、細胞懸濁物を確実に混合し、温水か
ら内部の氷塊への熱移動を増加させる。氷が完全に融けたらすぐに、バイアルを氷上に置
いてもよい。
てもよい。凍結した細胞は、好ましくは迅速に解凍され、解凍直後に冷却される。特定の
実施形態では、凍結した細胞を含有するバイアルを、温水浴中にその首部まで浸漬しても
よく、穏やかに回転させることにより、解凍に伴い、細胞懸濁物を確実に混合し、温水か
ら内部の氷塊への熱移動を増加させる。氷が完全に融けたらすぐに、バイアルを氷上に置
いてもよい。
【0323】
特定の実施形態では、解凍中の細胞凝集を防止するための方法を使用することができる
。例示的な方法としては、凍結前及び／又は凍結後のＤＮａｓｅの添加（Ｓｐｉｔｚｅｒ
ら、１９８０、Ｃａｎｃｅｒ ４５：３０７５－３０８５）、低分子量デキストラン及び
クエン酸、ヒドロキシエチルデンプンの添加（Ｓｔｉｆｆら、１９８３、Ｃｒｙｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ ２０：１７－２４）などが挙げられる。［０１６２］当業者には理解されるよ
うに、ヒトに毒性がある凍結保護剤が使用される場合、治療目的の使用の前に除去するべ
きである。ＤＭＳＯは、重大な毒性を有していない。
。例示的な方法としては、凍結前及び／又は凍結後のＤＮａｓｅの添加（Ｓｐｉｔｚｅｒ
ら、１９８０、Ｃａｎｃｅｒ ４５：３０７５－３０８５）、低分子量デキストラン及び
クエン酸、ヒドロキシエチルデンプンの添加（Ｓｔｉｆｆら、１９８３、Ｃｒｙｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ ２０：１７－２４）などが挙げられる。［０１６２］当業者には理解されるよ
うに、ヒトに毒性がある凍結保護剤が使用される場合、治療目的の使用の前に除去するべ
きである。ＤＭＳＯは、重大な毒性を有していない。
【0324】
細胞の例示的な担体及び投与態様は、米国特許公開第２０１０／０１８３５６４号のペ
ージ１４－１５に記載されている。更なる医薬担体は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、２１ｓｔ Ｅｄｉ
ｔｉｏｎ、Ｄａｖｉｄ Ｂ．Ｔｒｏｙ編集、Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ及び
Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）に記載されている。
ージ１４－１５に記載されている。更なる医薬担体は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、２１ｓｔ Ｅｄｉ
ｔｉｏｎ、Ｄａｖｉｄ Ｂ．Ｔｒｏｙ編集、Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ及び
Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）に記載されている。
【0325】
特定の実施形態では、細胞を培養培地から収集し、洗浄し、治療有効量で担体に濃縮す
ることができる。例示的な担体としては、食塩水、緩衝化食塩水、生理食塩水、水、Ｈａ
ｎｋｓ溶液、Ｒｉｎｇｅｒ溶液、Ｎｏｎｎｏｓｏｌ－Ｒ（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｓ）、Ｐ
ｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ（Ｒ）（Ｂａｘｔｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、
モートングローブ、ＩＬ）、グリセロール、エタノール、及びこれらの組み合わせが挙げ
られる。
ることができる。例示的な担体としては、食塩水、緩衝化食塩水、生理食塩水、水、Ｈａ
ｎｋｓ溶液、Ｒｉｎｇｅｒ溶液、Ｎｏｎｎｏｓｏｌ－Ｒ（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｓ）、Ｐ
ｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ（Ｒ）（Ｂａｘｔｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、
モートングローブ、ＩＬ）、グリセロール、エタノール、及びこれらの組み合わせが挙げ
られる。
【0326】
特定の実施形態では、担体は、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）又は他のヒト血清成分又
はウシ胎児血清を追加してもよい。特定の実施形態では、注入用担体は、５％ＨＡＳ又は
デキストロースを含む緩衝化食塩水を含む。更なる等張化剤として、三価以上の糖アルコ
ールを含む多価糖アルコール、例えば、グリセリン、エリスリトール、アラビトール、キ
シリトール、ソルビトール及びマンニトールが挙げられる。
はウシ胎児血清を追加してもよい。特定の実施形態では、注入用担体は、５％ＨＡＳ又は
デキストロースを含む緩衝化食塩水を含む。更なる等張化剤として、三価以上の糖アルコ
ールを含む多価糖アルコール、例えば、グリセリン、エリスリトール、アラビトール、キ
シリトール、ソルビトール及びマンニトールが挙げられる。
【0327】
担体としては、緩衝剤、例えば、クエン酸緩衝剤、コハク酸緩衝剤、酒石酸緩衝剤、フ
マル酸緩衝剤、グルコン酸緩衝剤、シュウ酸緩衝剤、乳酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、リン酸緩
衝剤、ヒスチジン緩衝剤、及び／又はトリメチルアミン塩を挙げることができる。
マル酸緩衝剤、グルコン酸緩衝剤、シュウ酸緩衝剤、乳酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、リン酸緩
衝剤、ヒスチジン緩衝剤、及び／又はトリメチルアミン塩を挙げることができる。
【0328】
安定化剤は、増量剤から、容器壁への細胞の付着を防止するのに役立つ添加剤までの機
能範囲であり得る広範なカテゴリーの賦形剤を指す。典型的な安定化剤としては、多価糖
アルコール；アミノ酸、例えば、アルギニン、リジン、グリシン、グルタミン、アスパラ
ギン、ヒスチジン、アラニン、オルニチン、Ｌ－ロイシン、２－フェニルアラニン、グル
タミン酸及びスレオニン；有機糖又は糖アルコール、例えば、ラクトース、トレハロース
、スタキオース、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、リビトール、ミオニシト
ール、ガラクチトール、グリセロール及びシクリトール、例えば、イノシトール；ＰＥＧ
；アミノ酸ポリマー；硫黄含有還元剤、例えば、尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオ
グリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、α－モノチオグリセロール及びチオ硫酸ナ
トリウム；低分子量ポリペプチド（すなわち、１０残基未満）；ＨＳＡ、ウシ血清アルブ
ミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質；親水性ポリマー、例えば、ポリ
ビニルピロリドン；単糖類、例えば、キシロース、マンノース、フルクトース及びグルコ
ース；二糖類、例えば、ラクトース、マルトース及びショ糖；三糖類、例えば、ラフィノ
ース、及び多糖類、例えば、デキストランが挙げられる。
能範囲であり得る広範なカテゴリーの賦形剤を指す。典型的な安定化剤としては、多価糖
アルコール；アミノ酸、例えば、アルギニン、リジン、グリシン、グルタミン、アスパラ
ギン、ヒスチジン、アラニン、オルニチン、Ｌ－ロイシン、２－フェニルアラニン、グル
タミン酸及びスレオニン；有機糖又は糖アルコール、例えば、ラクトース、トレハロース
、スタキオース、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、リビトール、ミオニシト
ール、ガラクチトール、グリセロール及びシクリトール、例えば、イノシトール；ＰＥＧ
；アミノ酸ポリマー；硫黄含有還元剤、例えば、尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオ
グリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、α－モノチオグリセロール及びチオ硫酸ナ
トリウム；低分子量ポリペプチド（すなわち、１０残基未満）；ＨＳＡ、ウシ血清アルブ
ミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質；親水性ポリマー、例えば、ポリ
ビニルピロリドン；単糖類、例えば、キシロース、マンノース、フルクトース及びグルコ
ース；二糖類、例えば、ラクトース、マルトース及びショ糖；三糖類、例えば、ラフィノ
ース、及び多糖類、例えば、デキストランが挙げられる。
【0329】
必要な場合又は有益な場合、組成物は、注射部位での痛みを和らげるリドカインなどの
局所麻酔薬を含んでいてもよい。
局所麻酔薬を含んでいてもよい。
【0330】
例示的な防腐剤としては、フェノール、ベンジルアルコール、メタ－クレゾール、メチ
ルパラベン、プロピルパラベン、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、
ハロゲン化ベンザルコニウム、塩化ヘキサメトニウム、アルキルパラベン、例えば、メチ
ルパラベン又はプロピルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール及
び３－ペンタノールが挙げられる。
ルパラベン、プロピルパラベン、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、
ハロゲン化ベンザルコニウム、塩化ヘキサメトニウム、アルキルパラベン、例えば、メチ
ルパラベン又はプロピルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール及
び３－ペンタノールが挙げられる。
【0331】
組成物内の細胞の治療有効な量は、１０２個より多く、１０３個より多く、１０４個よ
り多く、１０５個より多く、１０６個より多く、１０７個より多く、１０８個より多く、
１０９個より多く、１０１０個より多く、又は１０１１個より多くてもよい。
り多く、１０５個より多く、１０６個より多く、１０７個より多く、１０８個より多く、
１０９個より多く、１０１０個より多く、又は１０１１個より多くてもよい。
【0332】
本明細書に開示される組成物及び製剤において、細胞は、一般的に、１リットル以下、
５００ｍＬ以下、２５０ｍＬ以下、又は１００ｍＬ以下の体積である。したがって、投与
される細胞の密度は、典型的には、１０４個／ｍＬより大きく、１０７個／ｍＬより大き
く、又は１０８個／ｍＬより大きい。
５００ｍＬ以下、２５０ｍＬ以下、又は１００ｍＬ以下の体積である。したがって、投与
される細胞の密度は、典型的には、１０４個／ｍＬより大きく、１０７個／ｍＬより大き
く、又は１０８個／ｍＬより大きい。
【0333】
本明細書では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲをコードする核酸のいずれかを含む、
ｃａＴＣＲ核酸組成物（例えば、医薬組成物、本明細書では製剤とも呼ばれる）も提供さ
れる。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ核酸組成物は、医薬組成物である。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲ核酸組成物は、等張化剤、賦形剤、希釈剤、増粘剤、安定化
剤、緩衝剤、及び／又は防腐剤、及び／又は水性ビヒクル、例えば、精製水、水性糖溶液
、緩衝液、生理食塩水、水性ポリマー溶液、又はＲＮａｓｅフリー水のいずれかを更に含
む。添加されるこのような添加剤及び水性ビヒクルの量は、ｃａＴＣＲ核酸組成物の使用
形態に従って好適に選択することができる。
ｃａＴＣＲ核酸組成物（例えば、医薬組成物、本明細書では製剤とも呼ばれる）も提供さ
れる。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ核酸組成物は、医薬組成物である。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲ核酸組成物は、等張化剤、賦形剤、希釈剤、増粘剤、安定化
剤、緩衝剤、及び／又は防腐剤、及び／又は水性ビヒクル、例えば、精製水、水性糖溶液
、緩衝液、生理食塩水、水性ポリマー溶液、又はＲＮａｓｅフリー水のいずれかを更に含
む。添加されるこのような添加剤及び水性ビヒクルの量は、ｃａＴＣＲ核酸組成物の使用
形態に従って好適に選択することができる。
【0334】
本明細書に開示される組成物及び製剤は、例えば、注射、注入、灌流、又は洗浄によっ
て投与するために調製することができる。組成物及び製剤は、更に、骨髄、静脈内、皮内
、動脈内、節内、リンパ管内、腹腔内、病変内、前立腺内、膣内、直腸内、局所、髄腔内
、腫瘍内、筋肉内、小胞内及び／又は皮下注射用に配合することができる。
て投与するために調製することができる。組成物及び製剤は、更に、骨髄、静脈内、皮内
、動脈内、節内、リンパ管内、腹腔内、病変内、前立腺内、膣内、直腸内、局所、髄腔内
、腫瘍内、筋肉内、小胞内及び／又は皮下注射用に配合することができる。
【0335】
ｉｎ ｖｉｖｏ投与に使用される製剤は、無菌でなければならない。これは、例えば、
滅菌濾過膜を通した濾過によって容易に達成される。
ｃａＴＣＲを使用した治療方法
滅菌濾過膜を通した濾過によって容易に達成される。
ｃａＴＣＲを使用した治療方法
【0336】
本発明のｃａＴＣＲ及び／又は組成物は、例えば、癌及び感染性疾患（例えばウイルス
感染）を含め、標的抗原（ＴＡ）発現に関連する疾患及び／又は障害（本明細では、「標
的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも呼ばれる）を治療するために、個体（例
えば、ヒトなどの哺乳動物）に投与することができる。したがって、本出願は、いくつか
の実施形態では、個体において標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染）を治療
するための方法であって、抗体部分を含むｃａＴＣＲ（例えば、本明細書に記載のｃａＴ
ＣＲのいずれか１つ）を含む組成物（例えば、医薬組成物）を有効量、個体に投与するこ
とを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ｃａＴＣＲに関連する
細胞（エフェクター細胞など）を更に含む。いくつかの実施形態では、癌は、例えば、副
腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管癌、大腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、
肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞
腫、形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌及び甲状腺癌からな
る群から選択される。いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、例えば、サイトメガロ
ウイルス（ＣＭＶ）、エプスタインバールウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢ
Ｖ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ
）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、
ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）及びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択さ
れるウイルスによって引き起こされる。
感染）を含め、標的抗原（ＴＡ）発現に関連する疾患及び／又は障害（本明細では、「標
的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも呼ばれる）を治療するために、個体（例
えば、ヒトなどの哺乳動物）に投与することができる。したがって、本出願は、いくつか
の実施形態では、個体において標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染）を治療
するための方法であって、抗体部分を含むｃａＴＣＲ（例えば、本明細書に記載のｃａＴ
ＣＲのいずれか１つ）を含む組成物（例えば、医薬組成物）を有効量、個体に投与するこ
とを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ｃａＴＣＲに関連する
細胞（エフェクター細胞など）を更に含む。いくつかの実施形態では、癌は、例えば、副
腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管癌、大腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、
肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞
腫、形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌及び甲状腺癌からな
る群から選択される。いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、例えば、サイトメガロ
ウイルス（ＣＭＶ）、エプスタインバールウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢ
Ｖ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ
）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、
ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）及びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択さ
れるウイルスによって引き起こされる。
【0337】
例えば、いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患の治療を必要とする個体において
、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）天然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１
つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜
貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭ
のうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤ
が、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形
成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュ
ールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールを含
む、その表面上でｃａＴＣＲ（例えば、単離されたｃａＴＣＲ）を提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、天然に存在するＴＣＲは、
αβＴＣＲであり、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβサブ
ユニット膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、天然に存在するＴＣＲは
、γδＴＣＲであり、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲγ及びδサ
ブユニット膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では
、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペ
プチドの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２
のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はそ
の多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは
、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１
のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み
、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサ
ブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、
及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフ
ラグメントである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又
はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを
含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、
ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及び
ＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つの
ＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、天然に存在するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少な
くとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にス
ペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体
部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２
、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール
は、多重特異性（例えば、二重特異性）である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、
細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物
及び脂質からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、腫瘍関
連抗原又はウイルスによってコードされる抗原などの疾患関連抗原である。いくつかの実
施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ
又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、表面提示ペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。いくつかの実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（
腫瘍関連抗原又はウイルスによってコードされる抗原など）に由来するペプチドと、ＭＨ
Ｃタンパク質とを含む。いくつかの実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチド
とＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎ
ｅ Ｈ３．３及びＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来し、これらの多様体
又は変異体を含む。いくつかの実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａであ
る。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形
態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。いくつかの実施形態では、
エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は
、ＴＣＲα鎖及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されている
αβＴ細胞である。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘ
ルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択され
る。
、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）天然に存在するＴＣＲの膜貫通ドメインの１
つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと天然に存在するＴＣＲの他の膜
貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭ
のうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤ
が、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形
成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジュ
ールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールを含
む、その表面上でｃａＴＣＲ（例えば、単離されたｃａＴＣＲ）を提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、天然に存在するＴＣＲは、
αβＴＣＲであり、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲα及びβサブ
ユニット膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、天然に存在するＴＣＲは
、γδＴＣＲであり、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲγ及びδサ
ブユニット膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では
、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペ
プチドの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２
のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はそ
の多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは
、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１
のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み
、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサ
ブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、
及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフ
ラグメントである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又
はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを
含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、
ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及び
ＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つの
ＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、天然に存在するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少な
くとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にス
ペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体
部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２
、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール
は、多重特異性（例えば、二重特異性）である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、
細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物
及び脂質からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、腫瘍関
連抗原又はウイルスによってコードされる抗原などの疾患関連抗原である。いくつかの実
施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ
又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、表面提示ペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。いくつかの実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（
腫瘍関連抗原又はウイルスによってコードされる抗原など）に由来するペプチドと、ＭＨ
Ｃタンパク質とを含む。いくつかの実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチド
とＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎ
ｅ Ｈ３．３及びＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来し、これらの多様体
又は変異体を含む。いくつかの実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａであ
る。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形
態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。いくつかの実施形態では、
エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は
、ＴＣＲα鎖及び／又はβ鎖の発現を遮断するか、又は減少させるように改変されている
αβＴ細胞である。いくつかの実施形態では、エフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘ
ルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択され
る。
【0338】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）天然に存在するＴＣ
Ｒの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと天然に
存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲ
Ｄを含み、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、第１のＴ
ＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールで
あって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、
抗原結合モジュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提
示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有
効量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユ
ニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペ
プチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又
は一部、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の
接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ド
メインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来
する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来
となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグ
メントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサ
ブユニットのフラグメントである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺
激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを
更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定
化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によっ
て結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するαβＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲ
Ｍと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することを可
能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促
進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴＣＲＭ
のいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合
モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）天然に存在するＴＣ
Ｒの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと天然に
存在するＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲ
Ｄを含み、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、第１のＴ
ＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールで
あって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、
抗原結合モジュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提
示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有
効量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユ
ニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペ
プチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又
は一部、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の
接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ド
メインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来
する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来
となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグ
メントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサ
ブユニットのフラグメントである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺
激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを
更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定
化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によっ
て結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するαβＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲ
Ｍと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することを可
能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促
進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴＣＲＭ
のいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合
モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0339】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）天然に存在するγδ
ＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと天
然に存在するγδＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２
のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、
第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジ
ュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結
合する、抗原結合モジュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴ
ＣＲを提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組
成物を有効量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び
／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。
いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣ
Ｒサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２
の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチド
の全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド
と第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲ
Ｄは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ
細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイ
ンに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニット
のフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第
２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第
２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いく
つかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結
合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化
ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択
される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するγδＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含
むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化する
ことを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の
形成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及び
ＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）天然に存在するγδ
ＴＣＲの膜貫通ドメインの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと天
然に存在するγδＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２
のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、
第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジ
ュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結
合する、抗原結合モジュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴ
ＣＲを提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組
成物を有効量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び
／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。
いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣ
Ｒサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含み、及び／又は第２
の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチド
の全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド
と第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲ
Ｄは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ
細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイ
ンに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニット
のフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第
２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第
２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いく
つかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結
合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化
ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択
される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するγδＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含
むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化する
ことを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の
形成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及び
ＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0340】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号５及び配列
番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、ＴＣＲ－
ＴＭのうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣ
ＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭ
を形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モ
ジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュール
を含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～
３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ
互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む
少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを
更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する
互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第
２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、
第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの
抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及
び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモ
ジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特
異性（例えば、二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号５及び配列
番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、ＴＣＲ－
ＴＭのうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣ
ＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭ
を形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モ
ジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュール
を含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～
３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ
互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む
少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを
更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する
互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第
２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、
第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの
抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及
び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモ
ジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特
異性（例えば、二重特異性）である。
【0341】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号５及び配列
番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍの少なくとも１つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２
、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲ
Ｄが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを
形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジ
ュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールと
を含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ
互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、
４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるア
ミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣ
Ｒ－ＴＭの少なくとも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸
置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、その由来となるアミ
ノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍ中の置換アミノ酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置される。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを
更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、そ
れぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチド
は、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細
胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第
２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれ
らの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺
激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを
更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定
化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によっ
て結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメイン
を含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の
形成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及び
ＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号５及び配列
番号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍの少なくとも１つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２
、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲ
Ｄが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを
形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジ
ュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールと
を含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ
互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、
４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるア
ミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣ
Ｒ－ＴＭの少なくとも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸
置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、その由来となるアミ
ノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍ中の置換アミノ酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置される。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを
更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、そ
れぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチド
は、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細
胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第
２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれ
らの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺
激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを
更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定
化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によっ
て結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメイン
を含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の
形成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及び
ＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、
抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0342】
いくつかの実施形態では、的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を必
要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号５及び配列番
号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他の
アミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭ
の少なくとも１つが、配列番号７又は８に由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列
を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原
結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣ
ＲＤに結合する、抗原結合モジュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識す
るｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）
を含む組成物を有効量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号７又は８に由来する連続
アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号７又は８に由来す
る約１０以下（例えば、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少ない）の連続アミノ酸
の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は第
２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号７に由来し、他方のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号８に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキ
メラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用し得るように配置される。い
くつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメ
ントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラ
グメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプ
チドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれ
か１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接
続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２
のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメ
イン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３
６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、
Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内
ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと
第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド
結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選
択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫
通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の
動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ
３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジ
ュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施
形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分
は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつ
かの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号５及び配列番
号６のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他の
アミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－ＴＭ
の少なくとも１つが、配列番号７又は８に由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配列
を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原
結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣ
ＲＤに結合する、抗原結合モジュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識す
るｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）
を含む組成物を有効量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号７又は８に由来する連続
アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ
及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号７又は８に由来す
る約１０以下（例えば、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少ない）の連続アミノ酸
の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は第
２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号７に由来し、他方のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号８に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキ
メラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用し得るように配置される。い
くつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメ
ントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラ
グメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプ
チドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれ
か１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接
続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２
のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメ
イン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３
６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、
Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内
ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと
第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド
結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選
択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫
通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の
動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ
３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジ
ュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施
形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分
は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつ
かの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0343】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号７及び配列
番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、ＴＣＲ－
ＴＭのうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣ
ＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭ
を形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モ
ジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュール
を含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～
３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ
互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む
少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを
更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する
互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第
２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、
第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの
抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及
び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモ
ジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２の
ＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙したｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号７及び配列
番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、ＴＣＲ－
ＴＭのうち少なくとも１つが天然に存在しないものであり、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣ
ＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭ
を形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モ
ジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュール
を含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第
１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～
３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ
互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む
少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとを含む安定化モジュールを
更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する
互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第
２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、
第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの
抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及
び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモ
ジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２の
ＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙したｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0344】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号７及び配列
番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍの少なくとも１つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２
、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲ
Ｄが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを
形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジ
ュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールと
を含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ
互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、
４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるア
ミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣ
Ｒ－ＴＭの少なくとも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸
置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、その由来となるアミ
ノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍ中の置換アミノ酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置される。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを
更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、そ
れぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチド
は、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細
胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第
２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれ
らの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺
激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを
更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定
化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化
ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施
形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって
結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは
、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少な
くとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化す
ることができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形
成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴ
ＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗
原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙したｃａＴＣＲのいず
れかに従って選択される。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性
（例えば、二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号７及び配列
番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍの少なくとも１つが、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２
、３、４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲ
Ｄが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを
形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原結合モジ
ュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールと
を含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ
互いに独立して、その由来となるアミノ酸配列と比較して、１つ以上（例えば、２、３、
４、５、又はもっと多く）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、その由来となるア
ミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣ
Ｒ－ＴＭの少なくとも１つは、その由来となるアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸
置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、その由来となるアミ
ノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ中の置換アミノ酸の少なくとも１つが、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍ中の置換アミノ酸の少なくとも１つと相互作用し得るように配置される。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを
更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペプチドは、そ
れぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいずれか１つのア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチド
は、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細
胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第
２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は３６又はこれ
らの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺
激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを
更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定
化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化
ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。いくつかの実施
形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって
結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは
、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少な
くとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化す
ることができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形
成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジュール及びＴ
ＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗
原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙したｃａＴＣＲのいず
れかに従って選択される。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性
（例えば、二重特異性）である。
【0345】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）第１のＴＣＲ－ＴＭ
を含む第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤであって、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配列番号９及び８、７及び１４、７及び
１５、７及び１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及び１９、７及び２０、
７及び２１、７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２５、又は１３及び２６
のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、第１のＴＣＲ
Ｄと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが
可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであっ
て、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原
結合モジュールとを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示
するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効
量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、抗体部分
は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から
選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及
びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合す
る。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、
ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３
及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメン
トを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２
のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３
又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペ
プチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２の
ＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、Ｃ
Ｄ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比
較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。い
くつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサ
ーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性
（例えば、二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）第１のＴＣＲ－ＴＭ
を含む第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤであって、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配列番号９及び８、７及び１４、７及び
１５、７及び１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及び１９、７及び２０、
７及び２１、７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２５、又は１３及び２６
のアミノ酸配列を含むか、これらから本質的になり、又はこれらからなり、第１のＴＣＲ
Ｄと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが
可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであっ
て、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原
結合モジュールとを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示
するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効
量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、抗体部分
は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から
選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及
びＦＣＲＬ５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合す
る。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、
ペプチドは、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３
及びＰＳＡを含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメン
トを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２
のアミノ酸配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３
又は３４のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペ
プチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２の
ＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、Ｃ
Ｄ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比
較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。い
くつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサ
ーモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性
（例えば、二重特異性）である。
【0346】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号１０のアミ
ノ酸配列を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号１６のアミノ酸
配列を有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１のＴＣＲＤと第２
のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴ
ＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原
結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジ
ュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェ
クター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に
投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２
２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ
５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは
、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭ
Ｅ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡ
を含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、
及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含
む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸
配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４の
アミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第
２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４
－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つ
のアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメイ
ンは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ
３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列
番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実
施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュー
ルが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、
二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号１０のアミ
ノ酸配列を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号１６のアミノ酸
配列を有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤとを含み、第１のＴＣＲＤと第２
のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能なＴ
ＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールであって、抗原
結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに結合する、抗原結合モジ
ュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識するｃａＴＣＲを提示するエフェ
クター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に
投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ
、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、限定されないが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２
２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ
５を含み、これらの多様体又は変異体を含む、細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは
、限定されないが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭ
Ｅ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３及びＰＳＡ
を含み、これらの多様体又は変異体を含む、タンパク質に由来する。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含み、
及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグメントを更に含
む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、配列番号３１又は３２のアミノ酸
配列又はその多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、配列番号３３又は３４の
アミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第
２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインは、配列番号３６のアミノ酸配列又はその多様体を含む。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４
－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つ
のアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第
１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメイ
ンは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ
３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子を動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列
番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実
施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュー
ルが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、
二重特異性）である。
【0347】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号７及び配列
番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍの少なくとも１つが、配列番号５又は６に由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗
原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴ
ＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識
するｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞
）を含む組成物を有効量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号５又は６に由来する連
続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号７又は８に由来
する約１０以下（例えば、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少ない）の連続アミノ
酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は
第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号５に由来し、他方のＴＣＲ－ＴＭ中のキ
メラ配列は、配列番号６に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用し得るように配置される。
いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグ
メントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフ
ラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペ
プチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいず
れか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の
接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ド
メイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は
３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは
、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３
７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞
内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメイン
と第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド
結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選
択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫
通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の
動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ
３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジ
ュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施
形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分
は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつ
かの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、（ａ）配列番号７及び配列
番号８のアミノ酸配列の１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤと、他
のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍの少なくとも１つが、配列番号５又は６に由来する連続アミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含み、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子を動員することが可能なＴＣＲＭを形成し、（ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗
原結合モジュールであって、抗原結合モジュールが、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴ
ＣＲＤに結合する、抗原結合モジュールを含む、その表面上で、標的抗原を特異的に認識
するｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞
）を含む組成物を有効量、個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号５又は６に由来する連
続アミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ互いに独立して、配列番号７又は８に由来
する約１０以下（例えば、約９、８、７、６、５以下、又はもっと少ない）の連続アミノ
酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中又は
第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号５に由来し、他方のＴＣＲ－ＴＭ中のキ
メラ配列は、配列番号６に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の
キメラ配列は、第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用し得るように配置される。
いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフラグ
メントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド又はそのフ
ラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチド及び第２の接続ペ
プチドは、それぞれ互いに独立して、配列番号２７～３４又はこれらの多様体のうちいず
れか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の
接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ド
メイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、それぞれ互いに独立して、配列番号３５又は
３６又はこれらの多様体のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは
、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３
７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少なくとも１つのアクセサリー細胞
内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１の安定化ドメイン
と第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する。い
くつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインは、ジスルフィド
結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメイン及び第２の安定
化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその多様体を含む。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζからなる群から選
択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することが可能である。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫
通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の
動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ
３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール、安定化モジ
ュール及びＴＣＲＭのいずれかの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつかの実施
形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分
は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつ
かの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。
【0348】
いくつかの実施形態では、第１の標的抗原及び第２の標的抗原に関連する疾患（例えば
、癌又はウイルス感染）の治療を必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であ
って、その表面上でｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュ
ラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与することを含み、このｃａＴＣＲが
、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインと第２の標的抗原に
特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗原
結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第
２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲ
Ｍが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提
供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又は
そのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド
又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第
１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又は
その多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの
実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって
結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細
胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン
に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、Ｃ
Ｄ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部
分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３
γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するαβ
Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、両方とも天然に存在す
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つは、天然に存在しない
。いくつかの実施形態では、第１の標的抗原はＣＤ１９であり、第２の標的抗原はＣＤ２
２であるか、又は第１の標的抗原はＣＤ２２であり、第２の標的抗原はＣＤ１９である。
いくつかの実施形態では、第１の標的抗原はＣＤ１９であり、第２の標的抗原はＣＤ２０
であるか、又は第１の標的抗原はＣＤ２０であり、第２の標的抗原はＣＤ１９である。い
くつかの実施形態では、疾患は、白血病である。
、癌又はウイルス感染）の治療を必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であ
って、その表面上でｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はナチュ
ラルキラー細胞）を含む組成物を有効量、個体に投与することを含み、このｃａＴＣＲが
、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインと第２の標的抗原に
特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗原
結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）と第
２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲ
Ｍが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、ｃａＴＣＲが提
供される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ接続ペプチド又は
そのフラグメントを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ接続ペプチド
又はそのフラグメントを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の接続ペプチドは、第
１のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又は
その多様体を含み、及び／又は第２の接続ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全て又は一部、又はその多様体を含む。いくつかの
実施形態では、第１の接続ペプチドと第２の接続ペプチドは、ジスルフィド結合によって
結合する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭの由来となる
ＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインに由来する配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細
胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン
に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントであり、及び／又は第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲ－ＴＭの由来となるＴＣＲサブユニットのフラグメントである。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、Ｃ
Ｄ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０又はＣＤ４０由来）を含む少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含
み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化する互いに
対する結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１の安定化ドメインと第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって結合する。いくつかの実施形態では、第１の
安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部
分、又はその多様体を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３
γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することが可能である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するαβ
Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を強化することを可能にする。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体の形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール又はドメインの間にスペーサーモジュールが存在する。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、両方とも天然に存在す
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つは、天然に存在しない
。いくつかの実施形態では、第１の標的抗原はＣＤ１９であり、第２の標的抗原はＣＤ２
２であるか、又は第１の標的抗原はＣＤ２２であり、第２の標的抗原はＣＤ１９である。
いくつかの実施形態では、第１の標的抗原はＣＤ１９であり、第２の標的抗原はＣＤ２０
であるか、又は第１の標的抗原はＣＤ２０であり、第２の標的抗原はＣＤ１９である。い
くつかの実施形態では、疾患は、白血病である。
【0349】
また、標的抗原関連疾患を治療する必要がある個体において、当該疾患を治療する方法
であって、異なるｃａＴＣＲを発現する複数のエフェクター細胞を含む組成物を個体に投
与することを含む方法も想定される。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に
記載される個体において標的抗原関連疾患を治療するための方法のいずれかによれば、組
成物は、本明細書に記載されるような不均一なｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物である
。
であって、異なるｃａＴＣＲを発現する複数のエフェクター細胞を含む組成物を個体に投
与することを含む方法も想定される。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に
記載される個体において標的抗原関連疾患を治療するための方法のいずれかによれば、組
成物は、本明細書に記載されるような不均一なｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物である
。
【0350】
例えば、いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）
の治療を必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、本明細書に記載の
いずれかの実施形態に係る複数のｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団を含む不均一なｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞組成物を有効量、個体に投与することを含み、組成物中のｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞の全てが、同じ細胞型を有し（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の全てが細胞毒性Ｔ細胞である）、ｃａＴＣＲエフェクター細胞のそれぞれの集団が、
他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現し、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する、方法が提供される。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラル
キラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを
発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集
団は、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に
結合するｃａＴＣＲを発現する場合、異なる標的抗原はそれぞれ、標的抗原関連疾患と関
連する。
の治療を必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、本明細書に記載の
いずれかの実施形態に係る複数のｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団を含む不均一なｃａ
ＴＣＲエフェクター細胞組成物を有効量、個体に投与することを含み、組成物中のｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞の全てが、同じ細胞型を有し（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の全てが細胞毒性Ｔ細胞である）、ｃａＴＣＲエフェクター細胞のそれぞれの集団が、
他の集団とは異なるｃａＴＣＲを発現し、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する、方法が提供される。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラル
キラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを
発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集
団は、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態で
は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に
結合するｃａＴＣＲを発現する場合、異なる標的抗原はそれぞれ、標的抗原関連疾患と関
連する。
【0351】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療を
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、本明細書に記載のいずれか
の実施形態に係る複数のｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団を含む不均一なｃａＴＣＲエ
フェクター細胞組成物を有効量、個体に投与することを含み、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の少なくとも１つの集団が、他の集団とは異なる細胞型を有し、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する、
方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団は全て
、異なる細胞型を有する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ
細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、互いに
独立して、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサー
Ｔ細胞からなる群から選択される細胞型を有する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
エフェクター細胞の各集団は、同じｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを
発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他の集団
とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、異なる標的抗原に特異的
に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する
場合、異なる標的抗原はそれぞれ、標的抗原関連疾患と関連する。
必要とする個体において、当該疾患を治療する方法であって、本明細書に記載のいずれか
の実施形態に係る複数のｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団を含む不均一なｃａＴＣＲエ
フェクター細胞組成物を有効量、個体に投与することを含み、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の少なくとも１つの集団が、他の集団とは異なる細胞型を有し、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する、
方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団は全て
、異なる細胞型を有する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ
細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、互いに
独立して、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサー
Ｔ細胞からなる群から選択される細胞型を有する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
エフェクター細胞の各集団は、同じｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣＲを
発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他の集団
とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、異なる標的抗原に特異的
に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する
場合、異なる標的抗原はそれぞれ、標的抗原関連疾患と関連する。
【0352】
いくつかの実施形態では、複数の標的抗原に関連する疾患の治療を必要とする個体にお
いて、当該疾患を治療する方法であって、本明細書に記載のいずれかの実施形態に係る複
数のｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団を含む不均一なｃａＴＣＲエフェクター細胞組成
物を有効量、個体に投与することを含み、組成物中のｃａＴＣＲエフェクター細胞の全て
が、同じ細胞型を有し（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の全てが細胞毒性Ｔ細胞で
ある）、ｃａＴＣＲエフェクター細胞のそれぞれの集団が、他の集団とは異なるｃａＴＣ
Ｒを発現し、複数の標的抗原のそれぞれの標的抗原について、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する、方法
が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である
。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパー
Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
いて、当該疾患を治療する方法であって、本明細書に記載のいずれかの実施形態に係る複
数のｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団を含む不均一なｃａＴＣＲエフェクター細胞組成
物を有効量、個体に投与することを含み、組成物中のｃａＴＣＲエフェクター細胞の全て
が、同じ細胞型を有し（例えば、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の全てが細胞毒性Ｔ細胞で
ある）、ｃａＴＣＲエフェクター細胞のそれぞれの集団が、他の集団とは異なるｃａＴＣ
Ｒを発現し、複数の標的抗原のそれぞれの標的抗原について、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する、方法
が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である
。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパー
Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0353】
いくつかの実施形態では、複数の標的抗原に関連する疾患の治療を必要とする個体にお
いて、当該疾患を治療する方法であって、本明細書に記載のいずれかの実施形態に係る複
数のｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団を含む不均一なｃａＴＣＲエフェクター細胞組成
物を有効量、個体に投与することを含み、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、他の集合とは異なる細胞型を有し、複数の標的抗原のそれぞれの標的抗原につ
いて、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合
するｃａＴＣＲを発現する、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエ
フェクター細胞の集団は全て、異なる細胞型を有する。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェク
ター細胞の各集団は、互いに独立して、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキ
ラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型を有する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣ
Ｒを発現する。
いて、当該疾患を治療する方法であって、本明細書に記載のいずれかの実施形態に係る複
数のｃａＴＣＲエフェクター細胞の集団を含む不均一なｃａＴＣＲエフェクター細胞組成
物を有効量、個体に投与することを含み、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、他の集合とは異なる細胞型を有し、複数の標的抗原のそれぞれの標的抗原につ
いて、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合
するｃａＴＣＲを発現する、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエ
フェクター細胞の集団は全て、異なる細胞型を有する。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェク
ター細胞の各集団は、互いに独立して、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキ
ラーＴ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型を有する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他の集団とは異なるｃａＴＣ
Ｒを発現する。
【0354】
いくつかの実施形態では、個体は、哺乳動物（例えば、ヒト、非ヒト霊長類、ラット、
マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなど）である。いくつかの実施形
態では、個体はヒトである。いくつかの実施形態では、個体は、臨床患者、臨床試験志願
者、実験動物などである。いくつかの実施形態では、個体は、約６０歳より若い（例えば
、５０歳、４０歳、３０歳、２５歳、２０歳、１５歳又は１０歳より若いのいずれかを含
む）。いくつかの実施形態では、個体は、約６０歳よりも年上である（例えば、７０歳、
８０歳、９０歳又は１００歳より年上のいずれかを含む）。いくつかの実施形態では、個
体は、本明細書に記載の疾患又は障害（例えば、癌又はウイルス感染）の１つ以上である
と診断されているか、又は環境的又は遺伝的にこれらにかかりやすい。いくつかの実施形
態では、個体は、本明細書に記載の１つ以上の疾患又は障害に関連する１つ以上のリスク
因子を有する。
マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなど）である。いくつかの実施形
態では、個体はヒトである。いくつかの実施形態では、個体は、臨床患者、臨床試験志願
者、実験動物などである。いくつかの実施形態では、個体は、約６０歳より若い（例えば
、５０歳、４０歳、３０歳、２５歳、２０歳、１５歳又は１０歳より若いのいずれかを含
む）。いくつかの実施形態では、個体は、約６０歳よりも年上である（例えば、７０歳、
８０歳、９０歳又は１００歳より年上のいずれかを含む）。いくつかの実施形態では、個
体は、本明細書に記載の疾患又は障害（例えば、癌又はウイルス感染）の１つ以上である
と診断されているか、又は環境的又は遺伝的にこれらにかかりやすい。いくつかの実施形
態では、個体は、本明細書に記載の１つ以上の疾患又は障害に関連する１つ以上のリスク
因子を有する。
【0355】
いくつかの実施形態では、本発明のｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、標的抗原の
発現を伴う疾患又は障害を治療するために、第２、第３又は第４の薬剤（例えば、抗新生
物剤、成長阻害剤、細胞毒性剤又は化学療法剤）と組み合わせて投与される。いくつかの
実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、サイトカイン（ＩＬ－２など）と
組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＭＨＣタンパク質の
発現を増加させるか、及び／又はＭＨＣタンパク質によるペプチドの表面提示を増強する
薬剤と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、薬剤としては、例えば、ＩＦ
Ｎ受容体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハンサー及び化学療法剤が挙
げられる。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ及びＩＦＮα
を含むＩＦＮ受容体アゴニストである。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、タネ
スピマイシン（１７－ＡＡＧ）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、レタスピマイ
シン（ＩＰＩ－５０４）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－
３１００、Ｄｅｂｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、ガネテスピブ（
ＳＴＡ－９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、Ｋ
Ｗ－２４７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８及びＸＬ８８８を含
む、Ｈｓｐ９０阻害剤である。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、５－フルオロ
ウラシル及びヌトリン－３を含む、ｐ５３発現のエンハンサーである。いくつかの実施形
態では、薬剤は、例えば、トポテカン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル及び
ビンブラスチンを含む化学療法剤である。
発現を伴う疾患又は障害を治療するために、第２、第３又は第４の薬剤（例えば、抗新生
物剤、成長阻害剤、細胞毒性剤又は化学療法剤）と組み合わせて投与される。いくつかの
実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物は、サイトカイン（ＩＬ－２など）と
組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＭＨＣタンパク質の
発現を増加させるか、及び／又はＭＨＣタンパク質によるペプチドの表面提示を増強する
薬剤と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、薬剤としては、例えば、ＩＦ
Ｎ受容体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハンサー及び化学療法剤が挙
げられる。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ及びＩＦＮα
を含むＩＦＮ受容体アゴニストである。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、タネ
スピマイシン（１７－ＡＡＧ）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、レタスピマイ
シン（ＩＰＩ－５０４）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－
３１００、Ｄｅｂｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、ガネテスピブ（
ＳＴＡ－９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、Ｋ
Ｗ－２４７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８及びＸＬ８８８を含
む、Ｈｓｐ９０阻害剤である。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、５－フルオロ
ウラシル及びヌトリン－３を含む、ｐ５３発現のエンハンサーである。いくつかの実施形
態では、薬剤は、例えば、トポテカン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル及び
ビンブラスチンを含む化学療法剤である。
【0356】
いくつかの実施形態では、標的抗原陽性疾患の治療を必要とする個体において、当該疾
患を治療する方法であって、本明細書に記載の実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞組成物を、サイトカイン（例えばＩＬ－２）と組み合わせて個体に投与する
ことを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞
組成物とサイトカインは、同時に投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞組成物とサイトカインは、順次投与される。
患を治療する方法であって、本明細書に記載の実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞組成物を、サイトカイン（例えばＩＬ－２）と組み合わせて個体に投与する
ことを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞
組成物とサイトカインは、同時に投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフ
ェクター細胞組成物とサイトカインは、順次投与される。
【0357】
いくつかの実施形態では、標的抗原陽性疾患の治療を必要とする個体において、当該疾
患を治療する方法であって、標的抗原を発現する細胞が、標的抗原とＭＨＣクラスＩタン
パク質とを含む複合体がその表面に通常は存在しないか、又は比較的低レベルで存在し、
この方法は、本明細書に記載の実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲエフェクター細胞組
成物を、ＭＨＣクラスＩタンパク質の発現を高めるか、及び／又はＭＨＣクラスＩタンパ
ク質によって標的抗原の表面提示を増強させる薬剤と組み合わせて個体に投与することを
含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、薬剤としては、例えば、ＩＦＮ受容
体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハンサー及び化学療法剤が挙げられ
る。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ及びＩＦＮαを含む
ＩＦＮ受容体アゴニストである。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、タネスピマ
イシン（１７－ＡＡＧ）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、レタスピマイシン（
ＩＰＩ－５０４）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３１０
０、Ｄｅｂｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、ガネテスピブ（ＳＴＡ
－９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、ＫＷ－２
４７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８及びＸＬ８８８を含む、Ｈ
ｓｐ９０阻害剤である。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、５－フルオロウラシ
ル及びヌトリン－３を含む、ｐ５３発現のエンハンサーである。いくつかの実施形態では
、薬剤は、例えば、トポテカン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル及びビンブ
ラスチンを含む化学療法剤である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞組成物と薬剤は、同時に投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞組成物と薬剤は、順次投与される。
患を治療する方法であって、標的抗原を発現する細胞が、標的抗原とＭＨＣクラスＩタン
パク質とを含む複合体がその表面に通常は存在しないか、又は比較的低レベルで存在し、
この方法は、本明細書に記載の実施形態のいずれかに係るｃａＴＣＲエフェクター細胞組
成物を、ＭＨＣクラスＩタンパク質の発現を高めるか、及び／又はＭＨＣクラスＩタンパ
ク質によって標的抗原の表面提示を増強させる薬剤と組み合わせて個体に投与することを
含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、薬剤としては、例えば、ＩＦＮ受容
体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハンサー及び化学療法剤が挙げられ
る。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ及びＩＦＮαを含む
ＩＦＮ受容体アゴニストである。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、タネスピマ
イシン（１７－ＡＡＧ）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、レタスピマイシン（
ＩＰＩ－５０４）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３１０
０、Ｄｅｂｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、ガネテスピブ（ＳＴＡ
－９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、ＫＷ－２
４７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８及びＸＬ８８８を含む、Ｈ
ｓｐ９０阻害剤である。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、５－フルオロウラシ
ル及びヌトリン－３を含む、ｐ５３発現のエンハンサーである。いくつかの実施形態では
、薬剤は、例えば、トポテカン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル及びビンブ
ラスチンを含む化学療法剤である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細
胞組成物と薬剤は、同時に投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクタ
ー細胞組成物と薬剤は、順次投与される。
【0358】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患の治療を必要とする個体において、当該疾
患（例えば、癌又はウイルス感染）を治療する方法であって、本明細書に記載の実施形態
のいずれかに係るｃａＴＣＲをコードする核酸を含む組成物を有効量、個体に投与するこ
とを含む、方法が提供される。遺伝子送達の方法は、当該技術分野において既知である。
例えば、その全体が本明細書に参考として組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６号
、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照。
患（例えば、癌又はウイルス感染）を治療する方法であって、本明細書に記載の実施形態
のいずれかに係るｃａＴＣＲをコードする核酸を含む組成物を有効量、個体に投与するこ
とを含む、方法が提供される。遺伝子送達の方法は、当該技術分野において既知である。
例えば、その全体が本明細書に参考として組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６号
、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照。
【0359】
癌治療は、例えば、腫瘍退縮、腫瘍の重量又は大きさの収縮、進行するまでの時間、生
存期間、無増悪生存率、全奏効率、応答期間、生活の質、タンパク質発現及び／又は活性
によって評価することができる。治療の効能を判定するための手法は、例えば、放射線イ
メージングによる応答の測定を含め、利用することができる。
存期間、無増悪生存率、全奏効率、応答期間、生活の質、タンパク質発現及び／又は活性
によって評価することができる。治療の効能を判定するための手法は、例えば、放射線イ
メージングによる応答の測定を含め、利用することができる。
【0360】
いくつかの実施形態では、治療の効能は、腫瘍成長阻害率（％ＴＧＩ）として測定され
、式１００－（Ｔ／Ｃ×１００）を用いて計算され、ここで、Ｔは、治療される腫瘍の平
均相対腫瘍体積であり、Ｃは、治療されていない腫瘍の平均相対腫瘍体積である。いくつ
かの実施形態では、％ＴＧＩは、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、
約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、
約９５％であるか、又は９５％より大きい。
、式１００－（Ｔ／Ｃ×１００）を用いて計算され、ここで、Ｔは、治療される腫瘍の平
均相対腫瘍体積であり、Ｃは、治療されていない腫瘍の平均相対腫瘍体積である。いくつ
かの実施形態では、％ＴＧＩは、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、
約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、
約９５％であるか、又は９５％より大きい。
【0361】
ウイルス感染治療は、例えば、ウイルス負荷、生存期間、生活の質、タンパク質発現及
び／又は活性によって評価することができる。
疾患
び／又は活性によって評価することができる。
疾患
【0362】
ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、いくつかの実施形態では、標的抗原と関連する癌を治
療するのに有用であり得る。本明細書に記載される方法のいずれかを使用して治療され得
る癌としては、血管形成されていないか、又はまだ実質的に血管形成されていない腫瘍、
及び血管形成された腫瘍が挙げられる。癌は、非固形腫瘍（例えば、血液腫瘍、例えば、
白血病及びリンパ腫）を含んでもよく、又は固形腫瘍を含んでもよい。本発明のｃａＴＣ
Ｒエフェクター細胞で治療される癌の種類としては、限定されないが、癌腫、芽腫及び肉
腫、及び特定の白血病又はリンパ系悪性腫瘍、良性及び悪性の腫瘍、及び悪性腫瘍、例え
ば、肉腫、癌腫及び黒色腫が挙げられる。成人腫瘍／癌及び小児腫瘍／癌もまた含まれる
。
療するのに有用であり得る。本明細書に記載される方法のいずれかを使用して治療され得
る癌としては、血管形成されていないか、又はまだ実質的に血管形成されていない腫瘍、
及び血管形成された腫瘍が挙げられる。癌は、非固形腫瘍（例えば、血液腫瘍、例えば、
白血病及びリンパ腫）を含んでもよく、又は固形腫瘍を含んでもよい。本発明のｃａＴＣ
Ｒエフェクター細胞で治療される癌の種類としては、限定されないが、癌腫、芽腫及び肉
腫、及び特定の白血病又はリンパ系悪性腫瘍、良性及び悪性の腫瘍、及び悪性腫瘍、例え
ば、肉腫、癌腫及び黒色腫が挙げられる。成人腫瘍／癌及び小児腫瘍／癌もまた含まれる
。
【0363】
血液癌は、血液又は骨髄の癌である。血液学的（又は血液系）癌の例としては、急性白
血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄球性白血病、急性骨髄性白血病及び骨髄芽球性、前
骨髄球性、骨髄球性、単球性及び赤血球性白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄球性（顆
粒球）白血病など）、慢性骨髄性白血病及び慢性リンパ性白血病）、真性多血症、リンパ
腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（緩慢性及び高悪性度形態）、多発性骨髄腫、形質
細胞腫、ワルデンストロムマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、有毛細胞
白血病及び骨髄異形成症が挙げられる。
血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄球性白血病、急性骨髄性白血病及び骨髄芽球性、前
骨髄球性、骨髄球性、単球性及び赤血球性白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄球性（顆
粒球）白血病など）、慢性骨髄性白血病及び慢性リンパ性白血病）、真性多血症、リンパ
腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（緩慢性及び高悪性度形態）、多発性骨髄腫、形質
細胞腫、ワルデンストロムマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、有毛細胞
白血病及び骨髄異形成症が挙げられる。
【0364】
固形腫瘍は、通常、嚢胞又は液体領域を含まない、異常な組織の塊である。固形腫瘍は
、良性であってもよく、又は悪性であってもよい。異なる種類の固形腫瘍は、それらを形
成する細胞の種類について命名されている（例えば、肉腫、癌腫及びリンパ腫）。肉腫及
び癌腫などの固形腫瘍の例としては、副腎皮質癌、胆管癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉
腫、軟骨肉腫、骨肉腫、及び他の肉腫、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫
、横紋筋肉腫、結腸癌、胃癌、リンパ腫悪性疾患、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺
癌、肝細胞癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺癌（例えば、髄甲状腺癌
及び乳頭甲状腺癌）、褐色細胞腫、脂腺癌、乳頭癌、乳糖腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細
胞癌、肝癌、胆管癌、絨毛腫、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌（例えば、子宮頸癌及び子宮頸
部異形成）、大腸直腸癌、肛門、肛門管又は肛門直腸の癌、膣癌、陰門癌（例えば、扁平
上皮癌、上皮内癌、腺癌及び線維肉腫）、陰茎癌、口腔咽頭癌、食道癌、頭部癌（例えば
、扁平上皮癌）、頸部癌（例えば、扁平上皮癌）、精巣癌（例えば、精上皮腫、奇形腫、
胎生期癌、奇形癌、絨毛腫、肉腫、ライディッヒ細胞腫、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍及
び脂肪腫）、膀胱癌、腎臓癌、黒色腫、子宮の癌（例えば、子宮内膜癌）、尿路上皮癌（
例えば、扁平上皮癌、移行上皮癌、腺癌、尿管癌及び膀胱癌）、及びＣＮＳ腫瘍（例えば
、神経膠腫（例えば、脳幹神経膠腫及び混合性神経膠腫）、膠芽細胞腫（多形性膠芽腫と
しても知られている）、星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽腫、シュワンノー
マ頭蓋骨髄腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、神経
芽細胞腫、網膜芽腫及び脳転移）が挙げられる。
、良性であってもよく、又は悪性であってもよい。異なる種類の固形腫瘍は、それらを形
成する細胞の種類について命名されている（例えば、肉腫、癌腫及びリンパ腫）。肉腫及
び癌腫などの固形腫瘍の例としては、副腎皮質癌、胆管癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉
腫、軟骨肉腫、骨肉腫、及び他の肉腫、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫
、横紋筋肉腫、結腸癌、胃癌、リンパ腫悪性疾患、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺
癌、肝細胞癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺癌（例えば、髄甲状腺癌
及び乳頭甲状腺癌）、褐色細胞腫、脂腺癌、乳頭癌、乳糖腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細
胞癌、肝癌、胆管癌、絨毛腫、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌（例えば、子宮頸癌及び子宮頸
部異形成）、大腸直腸癌、肛門、肛門管又は肛門直腸の癌、膣癌、陰門癌（例えば、扁平
上皮癌、上皮内癌、腺癌及び線維肉腫）、陰茎癌、口腔咽頭癌、食道癌、頭部癌（例えば
、扁平上皮癌）、頸部癌（例えば、扁平上皮癌）、精巣癌（例えば、精上皮腫、奇形腫、
胎生期癌、奇形癌、絨毛腫、肉腫、ライディッヒ細胞腫、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍及
び脂肪腫）、膀胱癌、腎臓癌、黒色腫、子宮の癌（例えば、子宮内膜癌）、尿路上皮癌（
例えば、扁平上皮癌、移行上皮癌、腺癌、尿管癌及び膀胱癌）、及びＣＮＳ腫瘍（例えば
、神経膠腫（例えば、脳幹神経膠腫及び混合性神経膠腫）、膠芽細胞腫（多形性膠芽腫と
しても知られている）、星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽腫、シュワンノー
マ頭蓋骨髄腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、神経
芽細胞腫、網膜芽腫及び脳転移）が挙げられる。
【0365】
癌治療は、例えば、腫瘍退縮、腫瘍の重量又は大きさの収縮、進行するまでの時間、生
存期間、無増悪生存率、全奏効率、応答期間、生活の質、タンパク質発現及び／又は活性
によって評価することができる。治療の効能を判定するための手法は、例えば、放射線イ
メージングによる応答の測定を含め、利用することができる。
存期間、無増悪生存率、全奏効率、応答期間、生活の質、タンパク質発現及び／又は活性
によって評価することができる。治療の効能を判定するための手法は、例えば、放射線イ
メージングによる応答の測定を含め、利用することができる。
【0366】
他の実施形態におけるｃａＴＣＲエフェクター細胞は、病原体関連（ウイルスによって
コードされる）抗原を標的とすることによって感染症を治療するのに有用であり得る。予
防されるか、又は治療される感染症は、例えば、ウイルス、細菌、原虫又は寄生体によっ
て引き起こされ得る。標的抗原は、病原体によって引き起こされる疾患に関与する病原性
タンパク質、ポリペプチド、若しくはペプチドであってもよく、病原体に感染した宿主に
おいて免疫応答を誘導し得るものである。ｃａＴＣＲエフェクター細胞によって標的とす
ることができる病原性抗原としては、限定されないが、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂ
ａｕｍａｎｎｉｉ、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｇｅｎｕｓ、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐｈａｇｏ
ｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｅ、Ａｎｃｙｌ
ｏｓｔｏｍａ ｄｕｏｄｅｎａｌｅ、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙ
ｔｉｃｕｍ、Ａｓｃａｒｉｓ ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｇ
ｅｎｕｓ、Ａｓｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｂａｂｅｓｉａ ｇｅｎｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅ
ｎｓｅｌａｅ、ＢＫ ｖｉｒｕｓ、Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｂｌａ
ｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓ
ｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｇｅｎｕｓ、Ｂ
ｏｒｒｅｌｉａ ｓｐｐ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｇｅｎｕｓ、Ｂｒｕｇｉａ ｍａｌａｙｉ
、Ｂｕｎｙａｖｉｒｉｄａｅファミリー、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ及
び他のＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ種、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒ
ｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅファミリ
ー、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ属、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃａｎｄｉｄ
ａ ｓｐｐ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌ
ａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ、ＣＪＤプ
リオン、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕ
ｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓ
ｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｐ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉ
ｄｅｓ ｓｐｐ、ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉ
ｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎｅｔｉｉ、Ｃｒｉｍｅａｎ－Ｃｏｎｇ
ｏ出血熱ウイルス、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｃｒｙｐｔｏｓ
ｐｏｒｉｄｉｕｍ属、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、デングウイルス（ＤＥＮ－１、
ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３及びＤＥＮ－４）、Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂａ ｆｒａｇｉｌｉｓ
、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃ
ｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ属、
Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、エンテロ
ウイルス属、エンテロウイルス、主に、Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ Ａウイルス及びエンテロウ
イルス７１（ＥＶ７１）、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ、エプスタインバール
ウイルス（ＥＢＶ）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：Ｈ７、Ｏ１１１及
びＯ１０４：Ｈ４、Ｆａｓｃｉｏｌａ ｈｅｐａｔｉｃａ及びＦａｓｃｉｏｌａ ｇｉｇ
ａｎｔｉｃａ、ＦＦＩプリオン、Ｆｉｌａｒｉｏｉｄｅａスーパーファミリー、フラビウ
イルス、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
属、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ
ｉｓ、Ｇｎａｔｈｏｓｔｏｍａ ｓｐｐ、ＧＳＳプリオン、Ｇｕａｎａｒｉｔｏウイルス
、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎ
ｚａｅ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ヘニパウイルス（Ｈｅｎｄｒａウイ
ルス、Ｎｉｐａｈウイルス）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝
炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ヘルペス単純ウイルス１
型及び２型（ＨＳＶ－１及びＨＳＶ－２）、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔ
ｕｍ、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、Ｈｏｒｔａｅａ ｗｅｒｎｅｃｋｉｉ、ヒトボ
カウイルス（ＨＢｏＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ－６）及びヒトヘルペスウイ
ルス７（ＨＨＶ－７）、ヒトメタニューもウイルス（ｈＭＰＶ）、ヒトパピローマウイル
ス（ＨＰＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイル
ス１（ＨＴＬＶ－１）、日本脳炎ウイルス、ＪＣウイルス、Ｊｕｎｉｎウイルス、カポジ
肉腫に関連するヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ、Ｋｌ
ｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ、Ｋｕｒｕプリオン、ラッサウイルス、Ｌ
ｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ属、Ｌｅｐｔｏｓ
ｐｉｒａ属、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、リンパ球性脈絡髄膜炎ウ
イルス（ＬＣＭＶ）、Ｍａｃｈｕｐｏウイルス、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ、Ｍａｒ
ｂｕｒｇウイルス、Ｍｅａｓｌｅｓウイルス、Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ ｙｏｋａｇａｗ
ａｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ ｐｈｙｌｕｍ、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、
Ｍｕｍｐｓウイルス、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ及びＭｙｃｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕ
ｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ
ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎａｅｇｌｅｒｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ、Ｎｅｃａｔｏｒ ａｍｅ
ｒｉｃａｎｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ
ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｎｏｃａｒｄｉ
ａ ｓｐｐ、Ｏｎｃｈｏｃｅｒｃａ ｖｏｌｖｕｌｕｓ、Ｏｒｉｅｎｔｉａ ｔｓｕｔｓ
ｕｇａｍｕｓｈｉ、Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅファミリー（インフルエンザ）、
Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕ
ｓ ｓｐｐ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｗｅｓｔｅｒｍａｎｉ、Ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ
Ｂ１９、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｇｅｎｕｓ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属、Ｐｎｅｕｍｏ
ｃｙｓｔｉｓ ｊｉｒｏｖｅｃｉｉ、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、呼吸系発疹ウイ
ルス（ＲＳＶ）、ライノウイルス、ライノウイルス、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｋａｒｉ
、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、Ｒｉｃｋｅ
ｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔｓｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ、リフトバレー
熱ウイルス、ロタウイルス、風疹ウイルス、サビアウイルス、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ属、
Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ ｓｃａｂｉｅｉ、ＳＡＲＳコロナウイルス、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍ
ａ属、Ｓｈｉｇｅｌｌａ属、Ｓｉｎ Ｎｏｍｂｒｅウイルス、ハンタウイルス、Ｓｐｏｒ
ｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔａｐｈｙｌ
ｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅ
ｓ、Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ、Ｔａｅｎｉａ属、Ｔａｅｎ
ｉａ ｓｏｌｉｕｍ、ダニ媒介性脳炎ウイルス（ＴＢＥＶ）、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｎ
ｉｓ又はＴｏｘｏｃａｒａ ｃａｔｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、Ｔｒｅｐ
ｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｔｒｉｃ
ｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ、Ｔｒｉｃｈ
ｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐａｎ
ｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、水痘帯状疱
疹ウイルス（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、Ｖａｒｉｏｌａ ｍａｊｏｒ
又はＶａｒｉｏｌａ ｍｉｎｏｒ、ｖＣＪＤプリオン、ベネズエラ馬脳炎ウイルス、Ｖｉ
ｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、西ナイルウイルス、西部馬脳脊髄炎ウイルス、Ｗｕｃｈｅ
ｒｅｒｉａ ｂａｎｃｒｏｆｔｉ、黄熱ウイルス、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏ
ｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ及びＹｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔ
ｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに由来する抗原が挙げられる。
コードされる）抗原を標的とすることによって感染症を治療するのに有用であり得る。予
防されるか、又は治療される感染症は、例えば、ウイルス、細菌、原虫又は寄生体によっ
て引き起こされ得る。標的抗原は、病原体によって引き起こされる疾患に関与する病原性
タンパク質、ポリペプチド、若しくはペプチドであってもよく、病原体に感染した宿主に
おいて免疫応答を誘導し得るものである。ｃａＴＣＲエフェクター細胞によって標的とす
ることができる病原性抗原としては、限定されないが、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂ
ａｕｍａｎｎｉｉ、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｇｅｎｕｓ、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐｈａｇｏ
ｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｅ、Ａｎｃｙｌ
ｏｓｔｏｍａ ｄｕｏｄｅｎａｌｅ、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙ
ｔｉｃｕｍ、Ａｓｃａｒｉｓ ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｇ
ｅｎｕｓ、Ａｓｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｂａｂｅｓｉａ ｇｅｎｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅ
ｎｓｅｌａｅ、ＢＫ ｖｉｒｕｓ、Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｂｌａ
ｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓ
ｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｇｅｎｕｓ、Ｂ
ｏｒｒｅｌｉａ ｓｐｐ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｇｅｎｕｓ、Ｂｒｕｇｉａ ｍａｌａｙｉ
、Ｂｕｎｙａｖｉｒｉｄａｅファミリー、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ及
び他のＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ種、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒ
ｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅファミリ
ー、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ属、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃａｎｄｉｄ
ａ ｓｐｐ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌ
ａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ、ＣＪＤプ
リオン、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕ
ｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓ
ｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｐ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉ
ｄｅｓ ｓｐｐ、ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉ
ｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎｅｔｉｉ、Ｃｒｉｍｅａｎ－Ｃｏｎｇ
ｏ出血熱ウイルス、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｃｒｙｐｔｏｓ
ｐｏｒｉｄｉｕｍ属、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、デングウイルス（ＤＥＮ－１、
ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３及びＤＥＮ－４）、Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂａ ｆｒａｇｉｌｉｓ
、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃ
ｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ属、
Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、エンテロ
ウイルス属、エンテロウイルス、主に、Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ Ａウイルス及びエンテロウ
イルス７１（ＥＶ７１）、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ、エプスタインバール
ウイルス（ＥＢＶ）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：Ｈ７、Ｏ１１１及
びＯ１０４：Ｈ４、Ｆａｓｃｉｏｌａ ｈｅｐａｔｉｃａ及びＦａｓｃｉｏｌａ ｇｉｇ
ａｎｔｉｃａ、ＦＦＩプリオン、Ｆｉｌａｒｉｏｉｄｅａスーパーファミリー、フラビウ
イルス、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
属、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ
ｉｓ、Ｇｎａｔｈｏｓｔｏｍａ ｓｐｐ、ＧＳＳプリオン、Ｇｕａｎａｒｉｔｏウイルス
、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎ
ｚａｅ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ヘニパウイルス（Ｈｅｎｄｒａウイ
ルス、Ｎｉｐａｈウイルス）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝
炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ヘルペス単純ウイルス１
型及び２型（ＨＳＶ－１及びＨＳＶ－２）、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔ
ｕｍ、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、Ｈｏｒｔａｅａ ｗｅｒｎｅｃｋｉｉ、ヒトボ
カウイルス（ＨＢｏＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ－６）及びヒトヘルペスウイ
ルス７（ＨＨＶ－７）、ヒトメタニューもウイルス（ｈＭＰＶ）、ヒトパピローマウイル
ス（ＨＰＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイル
ス１（ＨＴＬＶ－１）、日本脳炎ウイルス、ＪＣウイルス、Ｊｕｎｉｎウイルス、カポジ
肉腫に関連するヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ、Ｋｌ
ｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ、Ｋｕｒｕプリオン、ラッサウイルス、Ｌ
ｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ属、Ｌｅｐｔｏｓ
ｐｉｒａ属、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、リンパ球性脈絡髄膜炎ウ
イルス（ＬＣＭＶ）、Ｍａｃｈｕｐｏウイルス、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ、Ｍａｒ
ｂｕｒｇウイルス、Ｍｅａｓｌｅｓウイルス、Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ ｙｏｋａｇａｗ
ａｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ ｐｈｙｌｕｍ、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、
Ｍｕｍｐｓウイルス、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ及びＭｙｃｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕ
ｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ
ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎａｅｇｌｅｒｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ、Ｎｅｃａｔｏｒ ａｍｅ
ｒｉｃａｎｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ
ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｎｏｃａｒｄｉ
ａ ｓｐｐ、Ｏｎｃｈｏｃｅｒｃａ ｖｏｌｖｕｌｕｓ、Ｏｒｉｅｎｔｉａ ｔｓｕｔｓ
ｕｇａｍｕｓｈｉ、Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅファミリー（インフルエンザ）、
Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕ
ｓ ｓｐｐ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｗｅｓｔｅｒｍａｎｉ、Ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ
Ｂ１９、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｇｅｎｕｓ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属、Ｐｎｅｕｍｏ
ｃｙｓｔｉｓ ｊｉｒｏｖｅｃｉｉ、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、呼吸系発疹ウイ
ルス（ＲＳＶ）、ライノウイルス、ライノウイルス、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｋａｒｉ
、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、Ｒｉｃｋｅ
ｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔｓｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ、リフトバレー
熱ウイルス、ロタウイルス、風疹ウイルス、サビアウイルス、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ属、
Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ ｓｃａｂｉｅｉ、ＳＡＲＳコロナウイルス、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍ
ａ属、Ｓｈｉｇｅｌｌａ属、Ｓｉｎ Ｎｏｍｂｒｅウイルス、ハンタウイルス、Ｓｐｏｒ
ｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔａｐｈｙｌ
ｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅ
ｓ、Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ、Ｔａｅｎｉａ属、Ｔａｅｎ
ｉａ ｓｏｌｉｕｍ、ダニ媒介性脳炎ウイルス（ＴＢＥＶ）、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｎ
ｉｓ又はＴｏｘｏｃａｒａ ｃａｔｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、Ｔｒｅｐ
ｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｔｒｉｃ
ｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ、Ｔｒｉｃｈ
ｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐａｎ
ｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、水痘帯状疱
疹ウイルス（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、Ｖａｒｉｏｌａ ｍａｊｏｒ
又はＶａｒｉｏｌａ ｍｉｎｏｒ、ｖＣＪＤプリオン、ベネズエラ馬脳炎ウイルス、Ｖｉ
ｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、西ナイルウイルス、西部馬脳脊髄炎ウイルス、Ｗｕｃｈｅ
ｒｅｒｉａ ｂａｎｃｒｏｆｔｉ、黄熱ウイルス、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏ
ｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ及びＹｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔ
ｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに由来する抗原が挙げられる。
【0367】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲエフェクター細胞は、発癌ウイルスによる感染な
どの発癌性感染疾患を治療するために使用される。発癌ウイルスとしては、ＣＭＶ、ＥＢ
Ｖ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１及びＨＣＶが挙げら
れるが、これらに限定されない。ｃａＴＣＲの標的抗原は、Ｔａｘ、Ｅ７、Ｅ６／Ｅ７、
Ｅ６、ＨＢｘ、ＥＢＮＡタンパク質（例えば、ＥＢＮＡ３ Ａ、ＥＢＮＡ３ Ｃ及びＥＢ
ＮＡ ２）、ｖ－サイクリン、ＬＡＮＡ１、ＬＡＮＡ２、ＬＭＰ－１、ｋ－ｂＺＩＰ、Ｒ
ＴＡ、ＫＳＨＶ Ｋ８、及びこれらのフラグメントを含む、ウイルス由来の癌タンパク質
であってもよい。Ａｈｕｊａ、Ｒｉｃｈａら、Ｃｕｒｒ．Ｓｃｉ．、２０１４を参照。
製造物品及びキット
どの発癌性感染疾患を治療するために使用される。発癌ウイルスとしては、ＣＭＶ、ＥＢ
Ｖ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１及びＨＣＶが挙げら
れるが、これらに限定されない。ｃａＴＣＲの標的抗原は、Ｔａｘ、Ｅ７、Ｅ６／Ｅ７、
Ｅ６、ＨＢｘ、ＥＢＮＡタンパク質（例えば、ＥＢＮＡ３ Ａ、ＥＢＮＡ３ Ｃ及びＥＢ
ＮＡ ２）、ｖ－サイクリン、ＬＡＮＡ１、ＬＡＮＡ２、ＬＭＰ－１、ｋ－ｂＺＩＰ、Ｒ
ＴＡ、ＫＳＨＶ Ｋ８、及びこれらのフラグメントを含む、ウイルス由来の癌タンパク質
であってもよい。Ａｈｕｊａ、Ｒｉｃｈａら、Ｃｕｒｒ．Ｓｃｉ．、２０１４を参照。
製造物品及びキット
【0368】
本発明のいくつかの実施形態では、標的抗原陽性疾患、例えば、癌（例えば、副腎皮質
癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管癌、大腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞
癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形
質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌又は甲状腺癌）又はウイル
ス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、
ＨＩＶ－１又はＨＣＶによる感染）の治療に有用な物質を含む製造物品が提供される。製
品は、容器と、この容器上にある又はこの容器に付随したラベル又は添付文書と、を含む
ことができる。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジなどが挙げら
れる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成されてもよい。一般に
、容器は、本明細書に記載の疾患又は障害を処置するのに有効な組成物を保持するもので
あり、無菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、皮下注射針によって貫通可能な
ストッパーを有する静脈輸液バッグ又はバイアルであってよい）。組成物中の少なくとも
１つの活性薬剤は、その表面上に本発明のｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞である
。ラベル又は添付文書は、組成物が特定の状態を治療するために使用されることを示す。
ラベル又は添付文書は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を患者に投与するための指示
書を更に含む。本明細書に記載の併用療法を含む製造物品及びキットも想定される。
癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管癌、大腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞
癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形
質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌又は甲状腺癌）又はウイル
ス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、
ＨＩＶ－１又はＨＣＶによる感染）の治療に有用な物質を含む製造物品が提供される。製
品は、容器と、この容器上にある又はこの容器に付随したラベル又は添付文書と、を含む
ことができる。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジなどが挙げら
れる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成されてもよい。一般に
、容器は、本明細書に記載の疾患又は障害を処置するのに有効な組成物を保持するもので
あり、無菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、皮下注射針によって貫通可能な
ストッパーを有する静脈輸液バッグ又はバイアルであってよい）。組成物中の少なくとも
１つの活性薬剤は、その表面上に本発明のｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞である
。ラベル又は添付文書は、組成物が特定の状態を治療するために使用されることを示す。
ラベル又は添付文書は、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を患者に投与するための指示
書を更に含む。本明細書に記載の併用療法を含む製造物品及びキットも想定される。
【0369】
添付文書は、治療用製品の商品パッケージに習慣的に含まれている、このような治療用
製品の使用に関しての指示、使用法、用量、投与、禁忌及び／又は警告に関する情報を記
載している説明書を参照する。いくつかの実施形態では、添付文書は、組成物が、標的抗
原陽性癌（例えば、副腎皮質癌、膀胱癌、白血病、乳癌、子宮頸癌、胆管癌、大腸癌、食
道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多
発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃
癌、子宮癌又は甲状腺癌）を治療するために使用されることを示す。他の実施形態では、
添付文書は、組成物が標的抗原陽性ウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、Ｋ
ＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１又はＨＣＶによる感染）を治療する
ために使用されることを示す。
製品の使用に関しての指示、使用法、用量、投与、禁忌及び／又は警告に関する情報を記
載している説明書を参照する。いくつかの実施形態では、添付文書は、組成物が、標的抗
原陽性癌（例えば、副腎皮質癌、膀胱癌、白血病、乳癌、子宮頸癌、胆管癌、大腸癌、食
道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、黒色腫、中皮腫、多
発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃
癌、子宮癌又は甲状腺癌）を治療するために使用されることを示す。他の実施形態では、
添付文書は、組成物が標的抗原陽性ウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、Ｋ
ＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１又はＨＣＶによる感染）を治療する
ために使用されることを示す。
【0370】
更に、製造物品は、医薬的に許容される緩衝剤、例えば、静菌注射用水（ＢＷＦＩ）、
リン酸緩衝食塩水、Ｒｉｎｇｅｒ液及びデキストロース液などを含む第２の容器を更に含
んでいてもよい。これは、他の緩衝液、希釈液、濾過器、針、及び注射器を含めて、商業
上及び利用者の立場からの他の好ましい材料を更に含んでよい。
リン酸緩衝食塩水、Ｒｉｎｇｅｒ液及びデキストロース液などを含む第２の容器を更に含
んでいてもよい。これは、他の緩衝液、希釈液、濾過器、針、及び注射器を含めて、商業
上及び利用者の立場からの他の好ましい材料を更に含んでよい。
【0371】
例えば、本明細書に記載される標的抗原陽性疾患又は障害の治療のために、場合により
、製造物品と組み合わせて、様々な目的で有用なキットも提供される。本発明のキットは
、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物（又は単位剤形及び／又は製造物品）を含む１つ以
上の容器を含み、いくつかの実施形態では、別の薬剤（本明細書に記載の薬剤など）及び
／又は本明細書に記載される方法のいずれかに従って使用するための指示書を更に含む。
このキットは、処置に適している個体の選択についての説明を更に含んでよい。本発明の
キットで提供される使用説明書は、典型的には、ラベル又は添付文書（例えば、キットに
含まれる紙シート）に書かれた説明書であるが、機械読み出し可能な命令（例えば、磁気
又は光学記憶ディスクで実行される命令）も許容される。
、製造物品と組み合わせて、様々な目的で有用なキットも提供される。本発明のキットは
、ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物（又は単位剤形及び／又は製造物品）を含む１つ以
上の容器を含み、いくつかの実施形態では、別の薬剤（本明細書に記載の薬剤など）及び
／又は本明細書に記載される方法のいずれかに従って使用するための指示書を更に含む。
このキットは、処置に適している個体の選択についての説明を更に含んでよい。本発明の
キットで提供される使用説明書は、典型的には、ラベル又は添付文書（例えば、キットに
含まれる紙シート）に書かれた説明書であるが、機械読み出し可能な命令（例えば、磁気
又は光学記憶ディスクで実行される命令）も許容される。
【0372】
例えば、いくつかの実施形態では、キットは、その表面上にｃａＴＣＲを提示するエフ
ェクター細胞を含む組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）その表面
上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞を含む組成物と、（ｂ）有効量の少なくとも
１つの他の薬剤とを含み、他の薬剤は、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させ、及び／又は
ＭＨＣタンパク質によるペプチド（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮα又はＨｓｐ９
０阻害剤）の表面提示を強化する。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）その表面
上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞を含む組成物と、（ｂ）標的抗原陽性疾患（
例えば、癌又はウイルス感染）の治療のためにｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を個体
に投与するための使用説明書とを含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）その
表面上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞を含む組成物と、（ｂ）有効量の少なく
とも１つの他の薬剤であって、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させ、及び／又はＭＨＣタ
ンパク質によるペプチド（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮα又はＨｓｐ９０阻害剤
）の表面提示を強化する、薬剤と、（ｃ）標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感
染）の治療のためにｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物と他の薬剤とを個体に投与するた
めの使用説明書と、を含む。ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物及び他の薬剤は、別個の
容器に存在してもよく、又は単一の容器内に存在してもよい。例えば、キットは、１つの
別個の組成物又は２つ以上の組成物を含んでもよく、１つの組成物はｃａＴＣＲエフェク
ター細胞を含み、別の組成物は他の薬剤を含む。
ェクター細胞を含む組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）その表面
上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞を含む組成物と、（ｂ）有効量の少なくとも
１つの他の薬剤とを含み、他の薬剤は、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させ、及び／又は
ＭＨＣタンパク質によるペプチド（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮα又はＨｓｐ９
０阻害剤）の表面提示を強化する。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）その表面
上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞を含む組成物と、（ｂ）標的抗原陽性疾患（
例えば、癌又はウイルス感染）の治療のためにｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を個体
に投与するための使用説明書とを含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）その
表面上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター細胞を含む組成物と、（ｂ）有効量の少なく
とも１つの他の薬剤であって、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させ、及び／又はＭＨＣタ
ンパク質によるペプチド（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮα又はＨｓｐ９０阻害剤
）の表面提示を強化する、薬剤と、（ｃ）標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感
染）の治療のためにｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物と他の薬剤とを個体に投与するた
めの使用説明書と、を含む。ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物及び他の薬剤は、別個の
容器に存在してもよく、又は単一の容器内に存在してもよい。例えば、キットは、１つの
別個の組成物又は２つ以上の組成物を含んでもよく、１つの組成物はｃａＴＣＲエフェク
ター細胞を含み、別の組成物は他の薬剤を含む。
【0373】
いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣＲを含む組成物と、（ｂ）ｃａＴ
ＣＲとエフェクター細胞（例えば、個体に由来する、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞な
どのエフェクター細胞）とを合わせ、その表面上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター細
胞を含む組成物を生成し、標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療のた
めにｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を個体に投与するための使用説明書とを含む。い
くつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣＲを含む組成物と、（ｂ）エフェクタ
ー細胞（細胞毒性細胞など）を含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴ
ＣＲを含む組成物と、（ｂ）エフェクター細胞（例えば、細胞毒性細胞）と、（ｃ）ｃａ
ＴＣＲとエフェクター細胞とを合わせ、その表面上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞を含む組成物を生成し、標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療の
ためにｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を個体に投与するための使用説明書とを含む。
ＣＲとエフェクター細胞（例えば、個体に由来する、Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞な
どのエフェクター細胞）とを合わせ、その表面上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター細
胞を含む組成物を生成し、標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療のた
めにｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を個体に投与するための使用説明書とを含む。い
くつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣＲを含む組成物と、（ｂ）エフェクタ
ー細胞（細胞毒性細胞など）を含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴ
ＣＲを含む組成物と、（ｂ）エフェクター細胞（例えば、細胞毒性細胞）と、（ｃ）ｃａ
ＴＣＲとエフェクター細胞とを合わせ、その表面上にｃａＴＣＲを提示するエフェクター
細胞を含む組成物を生成し、標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染）の治療の
ためにｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を個体に投与するための使用説明書とを含む。
【0374】
いくつかの実施形態では、キットは、ｃａＴＣＲをコードする核酸（又は核酸のセット
）を含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣＲをコードする核酸（又
は核酸のセット）と、（ｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現するための宿主細胞（例え
ば、エフェクター細胞）とを含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣ
Ｒをコードする核酸（又は核酸のセット）と、（ｂ）（ｉ）宿主細胞（例えば、エフェク
ター細胞、例えば、Ｔ細胞）でｃａＴＣＲを発現し、（ｉｉ）ｃａＴＣＲを発現する宿主
細胞を含む組成物を調製し、（ｉｉｉ）標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染
）の治療のためにｃａＴＣＲを発現する宿主細胞を含む組成物を個体に投与するための使
用説明書とを含む。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、個体に由来する。いくつかの
実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣＲをコードする核酸（又は核酸のセット）と、
（ｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現するための宿主細胞（例えば、エフェクター細胞
）と、（ｃ）（ｉ）宿主細胞でｃａＴＣＲを発現し、（ｉｉ）ｃａＴＣＲを発現する宿主
細胞を含む組成物を調製し、（ｉｉｉ）標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染
）の治療のためにｃａＴＣＲを発現する宿主細胞を含む組成物を個体に投与するための使
用説明書とを含む。
）を含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣＲをコードする核酸（又
は核酸のセット）と、（ｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現するための宿主細胞（例え
ば、エフェクター細胞）とを含む。いくつかの実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣ
Ｒをコードする核酸（又は核酸のセット）と、（ｂ）（ｉ）宿主細胞（例えば、エフェク
ター細胞、例えば、Ｔ細胞）でｃａＴＣＲを発現し、（ｉｉ）ｃａＴＣＲを発現する宿主
細胞を含む組成物を調製し、（ｉｉｉ）標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染
）の治療のためにｃａＴＣＲを発現する宿主細胞を含む組成物を個体に投与するための使
用説明書とを含む。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、個体に由来する。いくつかの
実施形態では、キットは、（ａ）ｃａＴＣＲをコードする核酸（又は核酸のセット）と、
（ｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現するための宿主細胞（例えば、エフェクター細胞
）と、（ｃ）（ｉ）宿主細胞でｃａＴＣＲを発現し、（ｉｉ）ｃａＴＣＲを発現する宿主
細胞を含む組成物を調製し、（ｉｉｉ）標的抗原陽性疾患（例えば、癌又はウイルス感染
）の治療のためにｃａＴＣＲを発現する宿主細胞を含む組成物を個体に投与するための使
用説明書とを含む。
【0375】
本発明のキットは、好適なパッケージに入っている。好適なパッケージには、バイアル
、ボトル、ジャー、可撓性パッケージ（例えば、密閉マイラー又はプラスチック袋）など
が挙げられるが、これらに限定されない。キットは、任意追加的に、緩衝剤及び解釈的情
報など追加の構成要素を提供してよい。したがって、本願はまた、バイアル（密閉バイア
ルなど）、ボトル、ジャー、可撓性パッケージなどを含む製品を提供する。
、ボトル、ジャー、可撓性パッケージ（例えば、密閉マイラー又はプラスチック袋）など
が挙げられるが、これらに限定されない。キットは、任意追加的に、緩衝剤及び解釈的情
報など追加の構成要素を提供してよい。したがって、本願はまた、バイアル（密閉バイア
ルなど）、ボトル、ジャー、可撓性パッケージなどを含む製品を提供する。
【0376】
ｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物の使用に関する使用説明書は、意図する治療向けの
用量、投与スケジュール及び投与経路に関する情報を概ね含む。容器は、単位用量、大量
容器（例えば、多用量パッケージ）又は分割単位用量（sub-unit doses）であってよい
。例えば、長期間（例えば、１週間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、
１３日間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、
７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間のいずれか、又はもっと長く）にわたって個体に有効な治
療を与えるのに十分な用量の本明細書に記載のｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を含む
キットが提供されてもよい。キットはまた、複数単位用量のｃａＴＣＲと医薬組成物と、
使用のための指示書とを含んでいてもよく、例えば、院内薬局及び調剤薬局など薬局での
保管及び使用に十分な量で包装されてもよい。
用量、投与スケジュール及び投与経路に関する情報を概ね含む。容器は、単位用量、大量
容器（例えば、多用量パッケージ）又は分割単位用量（sub-unit doses）であってよい
。例えば、長期間（例えば、１週間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、
１３日間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、
７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間のいずれか、又はもっと長く）にわたって個体に有効な治
療を与えるのに十分な用量の本明細書に記載のｃａＴＣＲエフェクター細胞組成物を含む
キットが提供されてもよい。キットはまた、複数単位用量のｃａＴＣＲと医薬組成物と、
使用のための指示書とを含んでいてもよく、例えば、院内薬局及び調剤薬局など薬局での
保管及び使用に十分な量で包装されてもよい。
【0377】
当業者は、本発明の範囲及び趣旨内でいくつかの実施形態が可能であることを理解する
であろう。次に、以下の非限定的な実施例を参照して、本発明を更に詳細に説明する。以
下の実施例は、本発明を更に説明するが、当然のことながら、決してその範囲を限定する
ものとして解釈されるべきではない。
例示的な実施形態
であろう。次に、以下の非限定的な実施例を参照して、本発明を更に詳細に説明する。以
下の実施例は、本発明を更に説明するが、当然のことながら、決してその範囲を限定する
ものとして解釈されるべきではない。
例示的な実施形態
【0378】
実施形態１．キメラ抗体Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、標的
抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－
ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣ
ＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくと
も１つが、天然に存在せず、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
の動員を促進し、抗原結合モジュールが、天然に存在するＴ細胞受容体抗原結合部分では
ない、ｃａＴＣＲ。
抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－
ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣ
ＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくと
も１つが、天然に存在せず、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
の動員を促進し、抗原結合モジュールが、天然に存在するＴ細胞受容体抗原結合部分では
ない、ｃａＴＣＲ。
【0379】
実施形態２．ＴＣＲ－ＴＭが両方とも、天然に存在しないものである、実施形態１に記
載のｃａＴＣＲ。
載のｃａＴＣＲ。
【0380】
実施形態３．第１のＴＣＲ－ＴＭが、第１の天然に存在するＴ細胞受容体の膜貫通ドメ
インの１つに由来し、第２のＴＣＲ－ＴＭが、第１の天然に存在するＴ細胞受容体の他の
膜貫通ドメインに由来する、実施形態１又は２に記載のｃａＴＣＲ。
インの１つに由来し、第２のＴＣＲ－ＴＭが、第１の天然に存在するＴ細胞受容体の他の
膜貫通ドメインに由来する、実施形態１又は２に記載のｃａＴＣＲ。
【0381】
実施形態４．ＴＣＲＭが、第１の天然に存在するＴ細胞受容体の膜貫通ドメインを含む
ＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ伝達分子の動員を強化すること
を可能にする、実施形態３に記載のｃａＴＣＲ。
ＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ伝達分子の動員を強化すること
を可能にする、実施形態３に記載のｃａＴＣＲ。
【0382】
実施形態５．第１のＴＣＲ－ＴＭが、その由来となる膜貫通ドメインと比較して５個ま
でのアミノ酸置換を含み、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、その由来となる膜貫通ドメ
インと比較して５個までのアミノ酸置換を含む、実施形態３又は４に記載のｃａＴＣＲ。
でのアミノ酸置換を含み、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭが、その由来となる膜貫通ドメ
インと比較して５個までのアミノ酸置換を含む、実施形態３又は４に記載のｃａＴＣＲ。
【0383】
実施形態６．第１のＴＣＲ－ＴＭが、１個のアミノ酸置換を含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲ－ＴＭが、１個のアミノ酸置換を含む、実施形態５に記載のｃａＴＣＲ。
ＣＲ－ＴＭが、１個のアミノ酸置換を含む、実施形態５に記載のｃａＴＣＲ。
【0384】
実施形態７．第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸が、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換ア
ミノ酸に対して近位である、実施形態５又は６に記載のｃａＴＣＲ。
ミノ酸に対して近位である、実施形態５又は６に記載のｃａＴＣＲ。
【0385】
実施形態８．１つ以上の置換アミノ酸が、ＣＤ３に対する結合に関与する第１のＴＣＲ
－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のアミノ酸に対して近位である、実施形態５～７のい
ずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
－ＴＭ中又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のアミノ酸に対して近位である、実施形態５～７のい
ずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0386】
実施形態９．１つ以上の置換アミノ酸が、それらの対応する非置換アミノ酸よりも疎水
性である、実施形態５～８のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
性である、実施形態５～８のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0387】
実施形態１０．置換アミノ酸はそれぞれ、それらの対応する非置換アミノ酸よりも疎水
性である、実施形態９に記載のｃａＴＣＲ。
性である、実施形態９に記載のｃａＴＣＲ。
【0388】
実施形態１１．第１のＴＣＲ－ＴＭが、配列番号７及び９～１３のいずれか１つのアミ
ノ酸配列を含み、第２のＴＣＲ－ＴＭが、配列番号８及び１４～２６のいずれか１つのア
ミノ酸配列を含む、実施形態１に記載のｃａＴＣＲ。
ノ酸配列を含み、第２のＴＣＲ－ＴＭが、配列番号８及び１４～２６のいずれか１つのア
ミノ酸配列を含む、実施形態１に記載のｃａＴＣＲ。
【0389】
実施形態１２．実施形態１に記載のｃａＴＣＲであって、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２
のＴＣＲ－ＴＭが、（ａ）それぞれ、配列番号９及び８、（ｂ）それぞれ、配列番号７及
び１４、（ｃ）それぞれ、配列番号７及び１５、（ｄ）それぞれ、配列番号７及び１６、
（ｅ）それぞれ、配列番号１０及び１６、（ｆ）それぞれ、配列番号７及び１７、（ｇ）
それぞれ、配列番号７及び１８、（ｈ）それぞれ、配列番号７及び１９、（ｉ）それぞれ
、配列番号７及び２０、（ｊ）それぞれ、配列番号７及び２１、（ｋ）それぞれ、配列番
号７及び２２、（ｌ）それぞれ、配列番号１１及び２３、（ｍ）それぞれ、配列番号１２
及び２４、（ｎ）それぞれ、配列番号７及び２５、（ｏ）それぞれ、配列番号１３及び２
６のアミノ酸配列を含む、ｃａＴＣＲ。
のＴＣＲ－ＴＭが、（ａ）それぞれ、配列番号９及び８、（ｂ）それぞれ、配列番号７及
び１４、（ｃ）それぞれ、配列番号７及び１５、（ｄ）それぞれ、配列番号７及び１６、
（ｅ）それぞれ、配列番号１０及び１６、（ｆ）それぞれ、配列番号７及び１７、（ｇ）
それぞれ、配列番号７及び１８、（ｈ）それぞれ、配列番号７及び１９、（ｉ）それぞれ
、配列番号７及び２０、（ｊ）それぞれ、配列番号７及び２１、（ｋ）それぞれ、配列番
号７及び２２、（ｌ）それぞれ、配列番号１１及び２３、（ｍ）それぞれ、配列番号１２
及び２４、（ｎ）それぞれ、配列番号７及び２５、（ｏ）それぞれ、配列番号１３及び２
６のアミノ酸配列を含む、ｃａＴＣＲ。
【0390】
実施形態１３．ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインを含む安
定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する、実施形態１～１２のいずれか１つに
記載のｃａＴＣＲ。
定化モジュールを更に含み、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化する互いに対する結合親和性を有する、実施形態１～１２のいずれか１つに
記載のｃａＴＣＲ。
【0391】
実施形態１４．安定化モジュールが、ＣＨ１－ＣＬモジュール、ＣＨ２－ＣＨ２モジュ
ール、ＣＨ３－ＣＨ３モジュール及びＣＨ４－ＣＨ４モジュールからなる群から選択され
る、実施形態１３に記載のｃａＴＣＲ。
ール、ＣＨ３－ＣＨ３モジュール及びＣＨ４－ＣＨ４モジュールからなる群から選択され
る、実施形態１３に記載のｃａＴＣＲ。
【0392】
実施形態１５．第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとの間に共有結合が存在
する、実施形態１３又は１４に記載のｃａＴＣＲ。
する、実施形態１３又は１４に記載のｃａＴＣＲ。
【0393】
実施形態１６．共有結合がジスルフィド結合である、実施形態１５に記載のｃａＴＣＲ
。
。
【0394】
実施形態１７．安定化モジュールが、抗原結合モジュールとＴＣＲＭとの間に位置して
いる、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
いる、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0395】
実施形態１８．ｃａＴＣＲが、抗原結合モジュールとＴＣＲＭとの間にスペーサーモジ
ュールを更に含み、スペーサーモジュールが、ＴＣＲＭに対して抗原結合モジュールを接
続する１つ以上のペプチドリンカーを含む、実施形態１～１７のいずれか１つに記載のｃ
ａＴＣＲ。
ュールを更に含み、スペーサーモジュールが、ＴＣＲＭに対して抗原結合モジュールを接
続する１つ以上のペプチドリンカーを含む、実施形態１～１７のいずれか１つに記載のｃ
ａＴＣＲ。
【0396】
実施形態１９．ペプチドリンカーが、約５～約５０アミノ酸長である、実施形態１８に
記載のｃａＴＣＲ。
記載のｃａＴＣＲ。
【0397】
実施形態２０．抗原結合モジュールが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ及び
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体部分である、実施形態１～１９のい
ずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体部分である、実施形態１～１９のい
ずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0398】
実施形態２１．ｃａＴＣＲが、２つ以上の抗原結合モジュールを含む、実施形態１～２
０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0399】
実施形態２２．ｃａＴＣＲが多重特異性である、実施形態２１に記載のｃａＴＣＲ。
【0400】
実施形態２３．抗原結合モジュールが、ＴＣＲＤの少なくとも１つに結合する少なくと
も１つのｓｃＦｖを含む、実施形態１～２２のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
も１つのｓｃＦｖを含む、実施形態１～２２のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0401】
実施形態２４．抗原結合モジュールが、ＴＣＲＤの１つに結合するＶＨドメインと、他
のＴＣＲＤに結合するＶＬドメインとを含む、実施形態１～２３のいずれか１つに記載の
ｃａＴＣＲ。
のＴＣＲＤに結合するＶＬドメインとを含む、実施形態１～２３のいずれか１つに記載の
ｃａＴＣＲ。
【0402】
実施形態２５．ｃａＴＣＲが、第１のＴＣＲＤを含む第１のポリペプチド鎖と、第２の
ＴＣＲＤを含む第２のポリペプチド鎖とを含む、ヘテロダイマーである、実施形態１～２
４のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
ＴＣＲＤを含む第２のポリペプチド鎖とを含む、ヘテロダイマーである、実施形態１～２
４のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0403】
実施形態２６．標的抗原が、細胞表面抗原である、実施形態１～２５のいずれか１つに
記載のｃａＴＣＲ。
記載のｃａＴＣＲ。
【0404】
実施形態２７．細胞表面抗原が、タンパク質、炭水化物及び脂質からなる群から選択さ
れる、実施形態２６に記載のｃａＴＣＲ。
れる、実施形態２６に記載のｃａＴＣＲ。
【0405】
実施形態２８．細胞表面抗原が、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－
３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５からなる群から選択さ
れる、実施形態２６に記載のｃａＴＣＲ。
３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ及びＦＣＲＬ５からなる群から選択さ
れる、実施形態２６に記載のｃａＴＣＲ。
【0406】
実施形態２９．標的抗原が、ペプチドと主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）タンパク質
とを含む複合体である、実施形態１～２５のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
とを含む複合体である、実施形態１～２５のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0407】
実施形態３０．ペプチドが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３
及びＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する、実施形態２９に記載のｃａ
ＴＣＲ。
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、Ｈｉｓｔｏｎｅ Ｈ３．３
及びＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する、実施形態２９に記載のｃａ
ＴＣＲ。
【0408】
実施形態３１．ｃａＴＣＲが、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で
標的抗原に結合する、実施形態１～３０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
標的抗原に結合する、実施形態１～３０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0409】
実施形態３２．ｃａＴＣＲであって、（ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の
抗原結合ドメインと第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多
重特異性抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣ
ＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを
含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、ｃ
ａＴＣＲ。
抗原結合ドメインと第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多
重特異性抗原結合モジュールと、（ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣ
ＲＤ１）と第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭとを
含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、ｃ
ａＴＣＲ。
【0410】
実施形態３３．第１の抗原結合ドメインが、第１の重鎖可変ドメイン（ＶＨ１）と第１
の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ１）を含むＦｖであり、第２の抗原結合ドメインが、重鎖定常
ドメイン１（ＣＨ１）に融合した第２のＶＨ（ＶＨ２）と、軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）に
融合した第２のＶＬ（ＶＬ２）とを含むＦａｂである、実施形態３２に記載のｃａＴＣＲ
。
の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ１）を含むＦｖであり、第２の抗原結合ドメインが、重鎖定常
ドメイン１（ＣＨ１）に融合した第２のＶＨ（ＶＨ２）と、軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）に
融合した第２のＶＬ（ＶＬ２）とを含むＦａｂである、実施形態３２に記載のｃａＴＣＲ
。
【0411】
実施形態３４．実施形態３３に記載のｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端ま
で、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端
からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖
；（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ
２を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＨ
２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１
－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｖ）Ｎ末端か
らＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と
、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリ
ペプチド鎖を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
で、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端
からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖
；（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ
２を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＨ
２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１
－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｖ）Ｎ末端か
らＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と
、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリ
ペプチド鎖を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
【0412】
実施形態３５．第１の抗原結合ドメインが、ＶＨ１とＶＬ１を含む第１のＦｖであり、
第２の抗原結合ドメインが、ＶＨ２とＶＬ２を含む第２のＦｖであり、ｃａＴＣＲが、Ｃ
Ｈ１とＣＬを更に含む、実施形態３２に記載のｃａＴＣＲ。
第２の抗原結合ドメインが、ＶＨ２とＶＬ２を含む第２のＦｖであり、ｃａＴＣＲが、Ｃ
Ｈ１とＣＬを更に含む、実施形態３２に記載のｃａＴＣＲ。
【0413】
実施形態３６．実施形態３５に記載のｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端ま
で、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端
からＣ末端まで、ＶＬ２－Ｌ２－ＶＬ１－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖
；又は（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む
第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ２－Ｌ２－ＶＨ１－ＣＨ１－ＴＣ
ＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃ
ａＴＣＲ。
で、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端
からＣ末端まで、ＶＬ２－Ｌ２－ＶＬ１－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖
；又は（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む
第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ２－Ｌ２－ＶＨ１－ＣＨ１－ＴＣ
ＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃ
ａＴＣＲ。
【0414】
実施形態３７．第１の抗原結合ドメインが第１のｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ１）であり、第２
の抗原結合ドメインが第２のｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ２）であり、ｃａＴＣＲが、ＣＨ１とＣ
Ｌを更に含む、実施形態３２に記載のｃａＴＣＲ。
の抗原結合ドメインが第２のｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ２）であり、ｃａＴＣＲが、ＣＨ１とＣ
Ｌを更に含む、実施形態３２に記載のｃａＴＣＲ。
【0415】
実施形態３８．実施形態３７に記載のｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端ま
で、ｓｃＦｖ１－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端から
Ｃ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（
ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリ
ペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ１－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２
のポリペプチド鎖を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
で、ｓｃＦｖ１－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端から
Ｃ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（
ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ２－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリ
ペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ１－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２
のポリペプチド鎖を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
【0416】
実施形態３９．第１の抗原結合ドメインがｓｃＦｖであり、第２の抗原結合ドメインが
、ＣＨ１に融合したＶＨとＣＬに融合したＶＬとを含むＦａｂである、実施形態３２に記
載のｃａＴＣＲ。
、ＣＨ１に融合したＶＨとＣＬに融合したＶＬとを含むＦａｂである、実施形態３２に記
載のｃａＴＣＲ。
【0417】
実施形態４０．実施形態３９に記載のｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端ま
で、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端
からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｉ）Ｎ
末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端
からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖
を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
で、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端
からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｉｉ）Ｎ
末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端
からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖
を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
【0418】
実施形態４１．実施形態３９に記載のｃａＴＣＲであって、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端ま
で、ＶＬ－ＣＬ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端ま
で、ＶＨ－ＣＨ１を含む第２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ
２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖；（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－Ｃ
Ｈ１－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－
ＣＬを含む第２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＴＣＲＤ
２を含む第３のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－Ｔ
ＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１を含む第
２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬ－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第
３のポリペプチド鎖；又は（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１
を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬを含む第２のポリペ
プチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリ
ペプチド鎖を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
で、ＶＬ－ＣＬ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端ま
で、ＶＨ－ＣＨ１を含む第２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ
２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖；（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－Ｃ
Ｈ１－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－
ＣＬを含む第２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＴＣＲＤ
２を含む第３のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－Ｔ
ＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１を含む第
２のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬ－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第
３のポリペプチド鎖；又は（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端まで、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１
を含む第１のポリペプチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＬ－ＣＬを含む第２のポリペ
プチド鎖と、Ｎ末端からＣ末端まで、ＶＨ－ＣＨ１－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリ
ペプチド鎖を含み、Ｌ１及びＬ２がペプチドリンカーである、ｃａＴＣＲ。
【0419】
実施形態４２．Ｌ１及び／又はＬ２が、約５～約５０アミノ酸長である、実施形態３４
、３６、３８、４０又は４１に記載のｃａＴＣＲ。
、３６、３８、４０又は４１に記載のｃａＴＣＲ。
【0420】
実施形態４３．Ｌ１及び／又はＬ２が、配列番号８２～８５のいずれか１つのアミノ酸
配列を含む、実施形態４２に記載のｃａＴＣＲ。
配列を含む、実施形態４２に記載のｃａＴＣＲ。
【0421】
実施形態４４．第１の標的抗原が、第１の細胞表面抗原であり、第２の標的抗原が、第
２の細胞表面抗原である、実施形態３２～４３のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
２の細胞表面抗原である、実施形態３２～４３のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0422】
実施形態４５．第１の標的抗原がＣＤ１９であり、第２の標的抗原がＣＤ２２であるか
、又は第１の標的抗原がＣＤ２２であり、第２の標的抗原がＣＤ１９である、実施形態４
４に記載のｃａＴＣＲ。
、又は第１の標的抗原がＣＤ２２であり、第２の標的抗原がＣＤ１９である、実施形態４
４に記載のｃａＴＣＲ。
【0423】
実施形態４６．第１の標的抗原がＣＤ１９であり、第２の標的抗原がＣＤ２０であるか
、又は第１の標的抗原がＣＤ２０であり、第２の標的抗原がＣＤ１９である、実施形態４
４に記載のｃａＴＣＲ。
、又は第１の標的抗原がＣＤ２０であり、第２の標的抗原がＣＤ１９である、実施形態４
４に記載のｃａＴＣＲ。
【0424】
実施形態４７．ＣＤ２２に特異的に結合する抗原結合ドメインが、配列番号６５のアミ
ノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと
、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－
ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む、実施形態４５又は４６に記載のｃａＴＣＲ。
ノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと
、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－
ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む、実施形態４５又は４６に記載のｃａＴＣＲ。
【0425】
実施形態４８．ＣＤ２２に特異的に結合する抗原結合ドメインが、配列番号６５のアミ
ノ酸配列を含むＶＨと、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む、実施形態４７
に記載のｃａＴＣＲ。
ノ酸配列を含むＶＨと、配列番号６９のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む、実施形態４７
に記載のｃａＴＣＲ。
【0426】
実施形態４９．ＣＤ１９に特異的に結合する抗原結合ドメインが、配列番号７４のアミ
ノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと
、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－
ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む、実施形態４５～４８のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
ノ酸配列を含むＶＨのＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含むＶＨと
、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＬのＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－
ＣＤＲ３を含むＶＬとを含む、実施形態４５～４８のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0427】
実施形態５０．ＣＤ１９に特異的に結合する抗原結合ドメインが、配列番号７４のアミ
ノ酸配列を含むＶＨと、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む、実施形態４９
に記載のｃａＴＣＲ。
ノ酸配列を含むＶＨと、配列番号７８のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む、実施形態４９
に記載のｃａＴＣＲ。
【0428】
実施形態５１．第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭが、両方とも天然に存在す
るものである、実施形態３２～５０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
るものである、実施形態３２～５０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0429】
実施形態５２．ＴＣＲ－ＴＭのうち少なくとも１つが、天然に存在しないものである、
実施形態３２～５０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
実施形態３２～５０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0430】
実施形態５３．多重特異性抗原結合モジュールが二重特異性である、実施形態３２～５
２のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
２のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0431】
実施形態５４．第１のＴＣＲＤが、ＴＣＲサブユニットの第１の接続ペプチド又はその
フラグメントを更に含む、実施形態１～５３のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
フラグメントを更に含む、実施形態１～５３のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0432】
実施形態５５．第２のＴＣＲＤが、ＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチド又はその
フラグメントを更に含む、実施形態１～５４のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
フラグメントを更に含む、実施形態１～５４のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0433】
実施形態５６．ＴＣＲＭが、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残
基との間にジスルフィド結合を含む、実施形態５５に記載のｃａＴＣＲ。
基との間にジスルフィド結合を含む、実施形態５５に記載のｃａＴＣＲ。
【0434】
実施形態５７．第１のＴＣＲＤが、ＴＣＲ細胞内配列を含む第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ンを更に含む、実施形態１～５６のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
ンを更に含む、実施形態１～５６のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0435】
実施形態５８．第２のＴＣＲＤが、ＴＣＲ細胞内配列を含む第２のＴＣＲ細胞内ドメイ
ンを更に含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
ンを更に含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0436】
実施形態５９．ｃａＴＣＲが、共刺激細胞内シグナル伝達配列を含む第１のアクセサリ
ー細胞内ドメインを更に含む、実施形態１～５８のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
ー細胞内ドメインを更に含む、実施形態１～５８のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0437】
実施形態６０．ＴＣＲ関連シグナル伝達分子が、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζから
なる群から選択される、実施形態１～５９のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
なる群から選択される、実施形態１～５９のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0438】
実施形態６１．第１の天然に存在するＴ細胞受容体が、γ／δ Ｔ細胞受容体である、
実施形態３～６０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
実施形態３～６０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0439】
実施形態６２．第１の天然に存在するＴ細胞受容体が、α／β Ｔ細胞受容体である、
実施形態３～６０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
実施形態３～６０のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ。
【0440】
実施形態６３．実施形態１～６２のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲをコードする、１
つ以上の核酸。
つ以上の核酸。
【0441】
実施形態６４．ｃａＴＣＲが、同じ核酸分子上にコードされる、実施形態６３に記載の
１つ以上の核酸。
１つ以上の核酸。
【0442】
実施形態６５．実施形態６３又は６４に記載の１つ以上の核酸を含む、１つ以上のベク
ター。
ター。
【0443】
実施形態６６．１つ以上の核酸を含む単一のベクターを含む、実施形態６５に記載の１
つ以上のベクター。
つ以上のベクター。
【0444】
実施形態６７．実施形態６３又は６４に記載の１つ以上の核酸、又は実施形態６５又は
６６に記載の１つ以上のベクターを含む、組成物。
６６に記載の１つ以上のベクターを含む、組成物。
【0445】
実施形態６８．実施形態１～６２のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲと、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子とを含む、複合体。
ＣＤ３γε及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子とを含む、複合体。
【0446】
実施形態６９．複合体が、ｃａＴＣＲと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε及びζζとを含む八
量体である、実施形態６８に記載の複合体。
量体である、実施形態６８に記載の複合体。
【0447】
実施形態７０．実施形態１～６２のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ又は実施形態６８
又は６９に記載の複合体をその表面上に提示するエフェクター細胞。
又は６９に記載の複合体をその表面上に提示するエフェクター細胞。
【0448】
実施形態７１．実施形態６３又は６４に記載の１つ以上の核酸、又は実施形態６５又は
６６に記載の１つ以上のベクターを含み、エフェクター細胞がｃａＴＣＲを発現する、エ
フェクター細胞。
６６に記載の１つ以上のベクターを含み、エフェクター細胞がｃａＴＣＲを発現する、エ
フェクター細胞。
【0449】
実施形態７２．エフェクター細胞が、第１及び／又は第２のＴＣＲＤと対を形成するこ
とが可能な内在性Ｔ細胞受容体サブユニットを発現しない、実施形態７０又は７１に記載
のエフェクター細胞。
とが可能な内在性Ｔ細胞受容体サブユニットを発現しない、実施形態７０又は７１に記載
のエフェクター細胞。
【0450】
実施形態７３．エフェクター細胞が、第１及び／又は第２のＴＣＲＤと対を形成するこ
とが可能な内在性Ｔ細胞受容体サブユニットを天然には発現しない、実施形態７２に記載
のエフェクター細胞。
とが可能な内在性Ｔ細胞受容体サブユニットを天然には発現しない、実施形態７２に記載
のエフェクター細胞。
【0451】
実施形態７４．エフェクター細胞が、第１の内在性ＴＣＲサブユニット及び／又は第２
の内在性ＴＣＲサブユニットの発現を遮断するか、又は減少させるように改変されている
、実施形態７２に記載のエフェクター細胞。
の内在性ＴＣＲサブユニットの発現を遮断するか、又は減少させるように改変されている
、実施形態７２に記載のエフェクター細胞。
【0452】
実施形態７５．エフェクター細胞がＣＤ３＋細胞である、実施形態７０～７４のいずれ
か１つに記載のエフェクター細胞。
か１つに記載のエフェクター細胞。
【0453】
実施形態７６．ＣＤ３＋細胞が、細胞毒性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー
Ｔ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、実施形態７５に記載のエフェ
クター細胞。
Ｔ細胞及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、実施形態７５に記載のエフェ
クター細胞。
【0454】
実施形態７７．ｃａＴＣＲがヘテロ二量体であり、（ａ）第１のプロモーターの制御下
で、ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列を含む第１のベクタ
ーと、（ｂ）第２のプロモーターの制御下で、ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコー
ドする第２の核酸配列を含む第２のベクターとを含む、実施形態７０～７６のいずれか１
つに記載のエフェクター細胞。
で、ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列を含む第１のベクタ
ーと、（ｂ）第２のプロモーターの制御下で、ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコー
ドする第２の核酸配列を含む第２のベクターとを含む、実施形態７０～７６のいずれか１
つに記載のエフェクター細胞。
【0455】
実施形態７８．ｃａＴＣＲがヘテロ二量体であり、（ａ）第１のプロモーターの制御下
で、ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、（ｂ）第２のプ
ロモーターの制御下で、ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列
とを含む、ベクターを含む、実施形態７０～７６のいずれか１つに記載のエフェクター細
胞。
で、ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、（ｂ）第２のプ
ロモーターの制御下で、ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列
とを含む、ベクターを含む、実施形態７０～７６のいずれか１つに記載のエフェクター細
胞。
【0456】
実施形態７９．ｃａＴＣＲがヘテロ二量体であり、（ａ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列とｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第
２の核酸配列を含むベクターを含み、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、単一のプロモ
ーターの制御下にある、実施形態７０～７６のいずれか１つに記載のエフェクター細胞。
チド鎖をコードする第１の核酸配列とｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第
２の核酸配列を含むベクターを含み、第１の核酸配列と第２の核酸配列が、単一のプロモ
ーターの制御下にある、実施形態７０～７６のいずれか１つに記載のエフェクター細胞。
【0457】
実施形態８０．ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖の発現が、ｃａＴＣＲの第２のポリ
ペプチド鎖の発現の２倍より多い、実施形態７０～７８のいずれか１つに記載のエフェク
ター細胞。
ペプチド鎖の発現の２倍より多い、実施形態７０～７８のいずれか１つに記載のエフェク
ター細胞。
【0458】
実施形態８１．標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、標的細胞と、
実施形態７０～８０のいずれか１つに記載のエフェクター細胞とを接触させることを含み
、ｃａＴＣＲが、標的抗原に特異的に結合する、方法。
実施形態７０～８０のいずれか１つに記載のエフェクター細胞とを接触させることを含み
、ｃａＴＣＲが、標的抗原に特異的に結合する、方法。
【0459】
実施形態８２．接触させることが、ｉｎ ｖｉｖｏでの接触である、実施形態８１に記
載の方法。
載の方法。
【0460】
実施形態８３．接触させることが、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの接触である、実施形態８１に
記載の方法。
記載の方法。
【0461】
実施形態８４．医薬組成物であって、（ａ）実施形態１～６２のいずれか１つに記載の
ｃａＴＣＲ、実施形態６３又は６４に記載の１つ以上の核酸、又は実施形態６５又は６６
に記載の１つ以上のベクター、又は実施形態７０～８０のいずれか１つに記載のエフェク
ター細胞と、（ｂ）医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
ｃａＴＣＲ、実施形態６３又は６４に記載の１つ以上の核酸、又は実施形態６５又は６６
に記載の１つ以上のベクター、又は実施形態７０～８０のいずれか１つに記載のエフェク
ター細胞と、（ｂ）医薬的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【0462】
実施形態８５．標的抗原関連疾患の治療を必要とする個体において当該疾患を治療する
方法であって、有効量の実施形態８４に記載の組成物を個体に投与することを含む、方法
。
方法であって、有効量の実施形態８４に記載の組成物を個体に投与することを含む、方法
。
【0463】
実施形態８６．標的抗原関連疾患が癌である、実施形態８５に記載の方法。
【0464】
実施形態８７．癌が、副腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管癌、大腸癌、食道癌
、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、白血病、肺癌、リンパ腫、黒色
腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立
腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌及び甲状腺癌からなる群から選択される、実施形態８６に記載
の方法。
、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、白血病、肺癌、リンパ腫、黒色
腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立
腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌及び甲状腺癌からなる群から選択される、実施形態８６に記載
の方法。
【0465】
実施形態８８．標的抗原関連疾患がウイルス感染である、実施形態８５に記載の方法。
【0466】
実施形態８９．ウイルス感染が、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタインバー
ルウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス
（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、
ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）及びＣ
型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる、
実施形態８８に記載の方法。
ルウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス
（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、
ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）及びＣ
型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる、
実施形態８８に記載の方法。
【0467】
実施形態９０．実施形態７０～８０のいずれか１つに記載のエフェクター細胞のための
不均一な細胞集団を濃縮する方法であって、（ａ）不均一な細胞集団と、標的抗原又はそ
の中に含まれる１つ以上のエピトープを含むリガンドとを接触させ、リガンドに結合した
エフェクター細胞の複合体を形成することと、（ｂ）この複合体を、不均一な細胞集団か
ら分離し、それによって、エフェクター細胞が濃縮された細胞集団を生成することとを含
む、方法。
不均一な細胞集団を濃縮する方法であって、（ａ）不均一な細胞集団と、標的抗原又はそ
の中に含まれる１つ以上のエピトープを含むリガンドとを接触させ、リガンドに結合した
エフェクター細胞の複合体を形成することと、（ｂ）この複合体を、不均一な細胞集団か
ら分離し、それによって、エフェクター細胞が濃縮された細胞集団を生成することとを含
む、方法。
【0468】
実施形態９１．実施形態１～６２のいずれか１つに記載の複数のｃａＴＣＲをコードす
る配列を含む、核酸ライブラリー。
る配列を含む、核酸ライブラリー。
【0469】
実施形態９２．標的抗原に対して高い親和性を有するｃａＴＣＲについて、実施形態９
１に記載のライブラリーをスクリーニングする方法であって、（ａ）核酸ライブラリーを
複数の細胞に導入し、その結果、ｃａＴＣＲが複数の細胞の表面で発現することと、（ｂ
）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含むリガンドと
共にインキュベートすることと、（ｃ）リガンドに結合した細胞を集めることと、（ｄ）
工程（ｃ）で集めた細胞から、ｃａＴＣＲをコードする配列を単離し、それによって、標
的抗原に特異的なｃａＴＣＲを同定することとを含む、方法が提供される。
１に記載のライブラリーをスクリーニングする方法であって、（ａ）核酸ライブラリーを
複数の細胞に導入し、その結果、ｃａＴＣＲが複数の細胞の表面で発現することと、（ｂ
）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含むリガンドと
共にインキュベートすることと、（ｃ）リガンドに結合した細胞を集めることと、（ｄ）
工程（ｃ）で集めた細胞から、ｃａＴＣＲをコードする配列を単離し、それによって、標
的抗原に特異的なｃａＴＣＲを同定することとを含む、方法が提供される。
【実施例0470】
材料及び方法
細胞サンプル、細胞株及び抗体
細胞株ＨｅｐＧ２（ＡＴＣＣ ＨＢ－８０６５；ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ＋）、ＳＫ－
ＨＥＰ－１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－５２；ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ－）、Ｒａｊｉ（ＡＴＣ
Ｃ ＣＣＬ－８６；ＣＤ１９＋）、ＣＡ４６（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１６４８；ＣＤ１９＋
）、Ｊｕｒｋａｔ（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－２８９９、ＣＤ１９－）、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５
（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－１５３）、Ｊｅｋｏ－１（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－３００６；ＣＤ１９
＋）、Ｋ５６２（ＡＴＣＣ ＣＣ－２４３、ＣＤ１９－）、ＴＨＰ－１（ＡＴＣＣ ＴＩ
Ｂ－２０２、ＣＤ１９－）、Ｄａｕｄｉ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－２１３；ＣＤ１９＋）、Ｈ
ｅＬａ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－２）、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２６）及
びＭＣＦ－７（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２２）を、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕ
ｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得た。Ｊｕｒｋａｔは、Ｔ細胞白血病由来のヒトＴリン
パ球細胞株である。Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５は、Ｔ細胞受容体β鎖を欠く、Ｊｕｒｋａｔ細
胞由来の突然変異株である。Ｒａｊｉは、ＣＤ１９を発現するバーキットリンパ腫細胞株
である。Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ノックアウト（Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ＫＯ）株を、ＣＲＩＳＰ
Ｒ技術によって作成した。Ｒａｊｉ細胞中のＣＤ１９を標的とするために、３種類のガイ
ド配列を設計した。ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９ベクターをＯｒｉｇｅｎｅから購入し、各ガ
イドを、ｐＣａｓ－Ｇｕｉｄｅベクターに別々にクローニングした。エレクトロポレーシ
ョンの３日後、各ガイドによるノックアウト効率をフローサイトメトリーによって評価し
、限界希釈によって、クローン選択のために最良のＣＤ１９ノックアウトプールを選択し
た。選択されたクローンを、配列決定によって完全なＣＤ１９ノックアウトであると確認
した。別のコントロール細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧは、ＡＦＰペプチドＡＦ
Ｐ１５８を発現するミニ遺伝子カセットを用いてＳＫ－ＨＥＰ－１細胞株に形質導入する
ことによって生成され、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体の高レベルの細胞
表面発現をもたらす。Ｋ５６２は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）細胞株である。Ｋ５６２
－ＣＤ２２は、ＣＤ２２を発現するベクターを用い、Ｋ５６２細胞株に形質導入すること
によって生成した。Ｋ５６２－ＣＤ１９は、ＣＤ１９を発現するベクターを用い、Ｋ５６
２細胞株に形質導入することによって生成した。Ｋ５６２－ＣＤ１９／ＣＤ２２は、ＣＤ
１９を発現するベクター及びＣＤ２２を発現するベクターを用い、Ｋ５６２細胞株に形質
導入することによって生成した。全ての細胞株を、３７℃／５％ＣＯ２で、１０％ＦＢＳ
及び２ｍＭグルタミンを添加したＲＰＭＩ １６４０又はＤＭＥＭ中で培養した。
細胞サンプル、細胞株及び抗体
細胞株ＨｅｐＧ２（ＡＴＣＣ ＨＢ－８０６５；ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ＋）、ＳＫ－
ＨＥＰ－１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－５２；ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ－）、Ｒａｊｉ（ＡＴＣ
Ｃ ＣＣＬ－８６；ＣＤ１９＋）、ＣＡ４６（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１６４８；ＣＤ１９＋
）、Ｊｕｒｋａｔ（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－２８９９、ＣＤ１９－）、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５
（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－１５３）、Ｊｅｋｏ－１（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－３００６；ＣＤ１９
＋）、Ｋ５６２（ＡＴＣＣ ＣＣ－２４３、ＣＤ１９－）、ＴＨＰ－１（ＡＴＣＣ ＴＩ
Ｂ－２０２、ＣＤ１９－）、Ｄａｕｄｉ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－２１３；ＣＤ１９＋）、Ｈ
ｅＬａ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－２）、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２６）及
びＭＣＦ－７（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２２）を、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕ
ｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得た。Ｊｕｒｋａｔは、Ｔ細胞白血病由来のヒトＴリン
パ球細胞株である。Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５は、Ｔ細胞受容体β鎖を欠く、Ｊｕｒｋａｔ細
胞由来の突然変異株である。Ｒａｊｉは、ＣＤ１９を発現するバーキットリンパ腫細胞株
である。Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ノックアウト（Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ＫＯ）株を、ＣＲＩＳＰ
Ｒ技術によって作成した。Ｒａｊｉ細胞中のＣＤ１９を標的とするために、３種類のガイ
ド配列を設計した。ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９ベクターをＯｒｉｇｅｎｅから購入し、各ガ
イドを、ｐＣａｓ－Ｇｕｉｄｅベクターに別々にクローニングした。エレクトロポレーシ
ョンの３日後、各ガイドによるノックアウト効率をフローサイトメトリーによって評価し
、限界希釈によって、クローン選択のために最良のＣＤ１９ノックアウトプールを選択し
た。選択されたクローンを、配列決定によって完全なＣＤ１９ノックアウトであると確認
した。別のコントロール細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧは、ＡＦＰペプチドＡＦ
Ｐ１５８を発現するミニ遺伝子カセットを用いてＳＫ－ＨＥＰ－１細胞株に形質導入する
ことによって生成され、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体の高レベルの細胞
表面発現をもたらす。Ｋ５６２は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）細胞株である。Ｋ５６２
－ＣＤ２２は、ＣＤ２２を発現するベクターを用い、Ｋ５６２細胞株に形質導入すること
によって生成した。Ｋ５６２－ＣＤ１９は、ＣＤ１９を発現するベクターを用い、Ｋ５６
２細胞株に形質導入することによって生成した。Ｋ５６２－ＣＤ１９／ＣＤ２２は、ＣＤ
１９を発現するベクター及びＣＤ２２を発現するベクターを用い、Ｋ５６２細胞株に形質
導入することによって生成した。全ての細胞株を、３７℃／５％ＣＯ２で、１０％ＦＢＳ
及び２ｍＭグルタミンを添加したＲＰＭＩ １６４０又はＤＭＥＭ中で培養した。
【0471】
ＦＩＴＣ又はＡＰＣ標識したヒトＨＬＡ Ａ０２（クローンＢＢ７．２）に対するモノ
クローナルＡｂ、ＦＩＴＣ又はＡＰＣ標識したそのアイソタイプコントロールマウスＩｇ
Ｇ２ｂ、ヒト又はマウスＣＤ３に対する抗体、ヒトＴ細胞受容体の種々のサブユニット、
３×Ｆｌａｇタグ、ＨＡタグ、ＦＩＴＣ又はＡＰＣに標識したヤギＦ（ａｂ）２抗ヒトＩ
ｇＧ、蛍光標識したヤギＦ（ａｂ’）２抗マウスＩｇ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を購入し
た。ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１に特異的な抗体に対する抗イディオタイプ抗
体を開発し、Ｅｕｒｅｋａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓにおいて、社内で製造した。フロ
ーサイトメトリーデータをＢＤ ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩを使用して集め、ＦｌｏｗＪ
ｏソフトウェアパッケージを使用して分析した。
クローナルＡｂ、ＦＩＴＣ又はＡＰＣ標識したそのアイソタイプコントロールマウスＩｇ
Ｇ２ｂ、ヒト又はマウスＣＤ３に対する抗体、ヒトＴ細胞受容体の種々のサブユニット、
３×Ｆｌａｇタグ、ＨＡタグ、ＦＩＴＣ又はＡＰＣに標識したヤギＦ（ａｂ）２抗ヒトＩ
ｇＧ、蛍光標識したヤギＦ（ａｂ’）２抗マウスＩｇ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を購入し
た。ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１に特異的な抗体に対する抗イディオタイプ抗
体を開発し、Ｅｕｒｅｋａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓにおいて、社内で製造した。フロ
ーサイトメトリーデータをＢＤ ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩを使用して集め、ＦｌｏｗＪ
ｏソフトウェアパッケージを使用して分析した。
【0472】
全てのペプチドを購入し、Ｅｌｉｍ Ｂｉｏｐｈａｒｍａにより合成した。ペプチドは
、９０％超の純度であった。ペプチドをＤＭＳＯに溶解するか、又は食塩水で１０ｍｇ／
ｍＬになるまで希釈し、－８０℃で凍結させた。ビオチン化単鎖ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１及びコントロールペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体単量体を、組
換えＨＬＡ－Ａ＊０２：０１及びβ－２ミクログロブリン（β２Ｍ）を用いてペプチドを
再折り畳みすることにより生成した。単量体は、ＢｉｒＡ酵素によるＨＬＡ－Ａ＊０２：
０１細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＣ末端に接続するＢＳＰペプチドを介してビオチン化し
た。蛍光標識ストレプトアビジンをビオチン化ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体
単量体と混合して、蛍光標識されたペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を形成した
。
、９０％超の純度であった。ペプチドをＤＭＳＯに溶解するか、又は食塩水で１０ｍｇ／
ｍＬになるまで希釈し、－８０℃で凍結させた。ビオチン化単鎖ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１及びコントロールペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体単量体を、組
換えＨＬＡ－Ａ＊０２：０１及びβ－２ミクログロブリン（β２Ｍ）を用いてペプチドを
再折り畳みすることにより生成した。単量体は、ＢｉｒＡ酵素によるＨＬＡ－Ａ＊０２：
０１細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＣ末端に接続するＢＳＰペプチドを介してビオチン化し
た。蛍光標識ストレプトアビジンをビオチン化ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体
単量体と混合して、蛍光標識されたペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を形成した
。
【0473】
ヒトＣＤ１９に特異的又はＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１に特異的なＣＡＲ又
はｃａＴＣＲを含有するレンチウイルスを、例えば、キメラ構築物をコードするベクター
を用いた２９３Ｔ細胞のトランスフェクションによって作製した。初代ヒトＴ細胞を、１
００Ｕ／ｍＬのインターロイキン－２（ＩＬ－２）の存在下で、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ
（ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）による１日間の刺激後に形
質導入に使用した。濃縮レンチウイルスを、レトロネクチン（Ｔａｋａｒａ）コーティン
グされた６ウェルプレート中のＴ細胞に９６時間適用した。抗ＡＦＰ及び抗ＣＤ１９キメ
ラ構築物の形質導入効率を、それぞれＰＥ標識したストレプトアビジン又は抗ｍｙｃ抗体
を含むビオチン化ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体（「ＡＦＰ１５８四量体
」）を使用して、フローサイトメトリーによって評価した。フローサイトメトリーによる
反復分析を、５日目と、その後に３～４日おきに行った。
はｃａＴＣＲを含有するレンチウイルスを、例えば、キメラ構築物をコードするベクター
を用いた２９３Ｔ細胞のトランスフェクションによって作製した。初代ヒトＴ細胞を、１
００Ｕ／ｍＬのインターロイキン－２（ＩＬ－２）の存在下で、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ
（ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）による１日間の刺激後に形
質導入に使用した。濃縮レンチウイルスを、レトロネクチン（Ｔａｋａｒａ）コーティン
グされた６ウェルプレート中のＴ細胞に９６時間適用した。抗ＡＦＰ及び抗ＣＤ１９キメ
ラ構築物の形質導入効率を、それぞれＰＥ標識したストレプトアビジン又は抗ｍｙｃ抗体
を含むビオチン化ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体（「ＡＦＰ１５８四量体
」）を使用して、フローサイトメトリーによって評価した。フローサイトメトリーによる
反復分析を、５日目と、その後に３～４日おきに行った。
【0474】
細胞株には、ｃａＴＣＲ構築物の２つのサブユニットをコードする１つ又は２つのベク
ターのいずれかを用いて形質導入した。形質導入から５日後に、抗ＨＡ（抗ＨＡタグ抗体
－ＣｈＩＰグレード、Ａｂｃａｍ）又は抗Ｆｌａｇ抗体（ウサギで作られた抗Ｆｌａｇ抗
体、Ｓｉｇｍａ）を使用し、ウェスタンブロットのために細胞溶解物を生成した。
ターのいずれかを用いて形質導入した。形質導入から５日後に、抗ＨＡ（抗ＨＡタグ抗体
－ＣｈＩＰグレード、Ａｂｃａｍ）又は抗Ｆｌａｇ抗体（ウサギで作られた抗Ｆｌａｇ抗
体、Ｓｉｇｍａ）を使用し、ウェスタンブロットのために細胞溶解物を生成した。
【0475】
腫瘍細胞毒性を、Ｃｙｔｏｘ ９６非放射性ＬＤＨ細胞毒性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ
）によりアッセイした。ＣＤ３＋Ｔ細胞は、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、
ＣＤ３６、ＣＤ５６、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ１２３、グリコホリンＡを発現する細胞を負に枯
渇させるＥａｓｙＳｅｐ Ｈｕｍａｎ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ｓ
ｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用し、ＰＢＭＣを濃縮した全血から調
製した。ヒトＴ細胞を活性化し、例えば、製造元のプロトコルに従ってＣＤ３／ＣＤ２８
Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で増殖させた。活性化Ｔ細胞（ＡＴＣ）
を培養し、１０％ＦＢＳ＋１００Ｕ／ｍＬ ＩＬ－２を添加したＲＰＭＩ１６４０培地で
維持し、７～１４日目に使用した。活性化Ｔ細胞（エフェクター細胞）及び標的細胞を、
様々なエフェクターと標的の比率（例えば、２：１、２．５：１又は５：１）で１６時間
共培養し、細胞毒性についてアッセイした。
実施例１．キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）の設計
）によりアッセイした。ＣＤ３＋Ｔ細胞は、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、
ＣＤ３６、ＣＤ５６、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ１２３、グリコホリンＡを発現する細胞を負に枯
渇させるＥａｓｙＳｅｐ Ｈｕｍａｎ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ｓ
ｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用し、ＰＢＭＣを濃縮した全血から調
製した。ヒトＴ細胞を活性化し、例えば、製造元のプロトコルに従ってＣＤ３／ＣＤ２８
Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で増殖させた。活性化Ｔ細胞（ＡＴＣ）
を培養し、１０％ＦＢＳ＋１００Ｕ／ｍＬ ＩＬ－２を添加したＲＰＭＩ１６４０培地で
維持し、７～１４日目に使用した。活性化Ｔ細胞（エフェクター細胞）及び標的細胞を、
様々なエフェクターと標的の比率（例えば、２：１、２．５：１又は５：１）で１６時間
共培養し、細胞毒性についてアッセイした。
実施例１．キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）の設計
【0476】
様々なキメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）の設計が想定され、６種類の異なる例
が図１に示される（ｃａＴＣＲ－１、ｃａＴＣＲ－２、ｃａＴＣＲ－３、ｃａＴＣＲ－４
、ｃａＴＣＲ－５及びｃａＴＣＲ－６）。これらの設計では、様々な抗体部分（Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又はｓｃＦｖ）は、可変ドメイン及び定常ドメインを欠
くＴ細胞受容体α／β鎖又はγ／δ鎖のアミノ末端に融合され、それらの接続ペプチドの
全て又は一部（定常ドメインの後の領域）、それらの膜貫通ドメイン又はその変異体、及
び任意の細胞内ドメインを含み、Ｔ細胞の表面上で発現され得るｃａＴＣＲヘテロ二量体
を形成する。ネイティブなＴＣＲでは、Ｖα／Ｖβ又はＶδ／Ｖγドメインは、ＴＣＲの
抗原結合ドメインを形成する。本願発明者らの設計は、Ｖα－Ｃα／Ｖβ－Ｃβ領域又は
Ｖδ－Ｃδ／Ｖγ－Ｃγ領域を種々の抗体部分と置き換え、少なくとも１つのＴＣＲ膜貫
通ドメイン多様体を導入し、それにより、抗体の結合特異性を構築物に付与し、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γε及びＣＤ３ζζなどのＴＣＲ複合体において、天然に存在するＴＣＲ膜貫
通ドメインのみを有するＴＣＲ又は関連する構築物と比較して、アクセサリー分子を動員
する構築物の能力が向上する。ｃａＴＣＲ構築物は、以下のように命名された。ｃａＴＣ
Ｒ［設計番号］－［多様体の位置］［番号］。設計番号１は、Ｆａｂ抗体部分を有するｃ
ａＴＣＲに対応し、設計番号２は、Ｆａｂ’抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計
番号３は、（Ｆａｂ’）２抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計番号４は、Ｆｖ抗
体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計番号５は、単一のｓｃＦｖ抗体部分を有するｃ
ａＴＣＲに対応し、設計番号６は、２つのｓｃＦｖ抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応す
る（図１参照）。多様体の位置がなく、０番（例えば、ｃａＴＣＲ－１－０）は、天然に
存在するＴＣＲドメインを有する構築物に対応し、１以上の番号は、多様体の位置に特定
の多様体を有するｃａＴＣＲに対応する（例えば、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ１は、１つの膜
貫通ドメイン多様体に対応し、ｃａＴＣＲ－１－ＥＣ１は、１つの細胞外ドメイン多様体
に対応する。表２を参照のこと）。
が図１に示される（ｃａＴＣＲ－１、ｃａＴＣＲ－２、ｃａＴＣＲ－３、ｃａＴＣＲ－４
、ｃａＴＣＲ－５及びｃａＴＣＲ－６）。これらの設計では、様々な抗体部分（Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ又はｓｃＦｖ）は、可変ドメイン及び定常ドメインを欠
くＴ細胞受容体α／β鎖又はγ／δ鎖のアミノ末端に融合され、それらの接続ペプチドの
全て又は一部（定常ドメインの後の領域）、それらの膜貫通ドメイン又はその変異体、及
び任意の細胞内ドメインを含み、Ｔ細胞の表面上で発現され得るｃａＴＣＲヘテロ二量体
を形成する。ネイティブなＴＣＲでは、Ｖα／Ｖβ又はＶδ／Ｖγドメインは、ＴＣＲの
抗原結合ドメインを形成する。本願発明者らの設計は、Ｖα－Ｃα／Ｖβ－Ｃβ領域又は
Ｖδ－Ｃδ／Ｖγ－Ｃγ領域を種々の抗体部分と置き換え、少なくとも１つのＴＣＲ膜貫
通ドメイン多様体を導入し、それにより、抗体の結合特異性を構築物に付与し、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γε及びＣＤ３ζζなどのＴＣＲ複合体において、天然に存在するＴＣＲ膜貫
通ドメインのみを有するＴＣＲ又は関連する構築物と比較して、アクセサリー分子を動員
する構築物の能力が向上する。ｃａＴＣＲ構築物は、以下のように命名された。ｃａＴＣ
Ｒ［設計番号］－［多様体の位置］［番号］。設計番号１は、Ｆａｂ抗体部分を有するｃ
ａＴＣＲに対応し、設計番号２は、Ｆａｂ’抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計
番号３は、（Ｆａｂ’）２抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計番号４は、Ｆｖ抗
体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計番号５は、単一のｓｃＦｖ抗体部分を有するｃ
ａＴＣＲに対応し、設計番号６は、２つのｓｃＦｖ抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応す
る（図１参照）。多様体の位置がなく、０番（例えば、ｃａＴＣＲ－１－０）は、天然に
存在するＴＣＲドメインを有する構築物に対応し、１以上の番号は、多様体の位置に特定
の多様体を有するｃａＴＣＲに対応する（例えば、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ１は、１つの膜
貫通ドメイン多様体に対応し、ｃａＴＣＲ－１－ＥＣ１は、１つの細胞外ドメイン多様体
に対応する。表２を参照のこと）。
【0477】
ｃａＴＣＲ－１（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲδ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲγ）
の設計では、抗体重鎖の可変ドメイン及び第１定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）が
、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、Ｖδ－Ｃδ領域の後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中
の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣ
Ｒδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている
。対応する抗体軽鎖の可変ドメイン及び定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲ
γ鎖のアミノ末端部分を、Ｖγ－Ｃγ領域の後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペ
プチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の
膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている。
の設計では、抗体重鎖の可変ドメイン及び第１定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）が
、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、Ｖδ－Ｃδ領域の後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中
の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣ
Ｒδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている
。対応する抗体軽鎖の可変ドメイン及び定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲ
γ鎖のアミノ末端部分を、Ｖγ－Ｃγ領域の後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペ
プチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の
膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている。
【0478】
ｃａＴＣＲ－１の一実施形態では、１つの鎖は、膜貫通ドメインとＴＣＲγ鎖の接続ペ
プチドの全て又は一部とを含むＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分に融合した、抗ＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号５２）のＩｇＶＨドメイン（配列番号３７
）を含み、他の鎖は、膜貫通ドメインとＴＣＲγ鎖の接続ペプチドの全て又は一部とを含
むＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分に融合した、ＩｇＣＬドメイン（配列番号４８）に融
合した抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号５３）のＩｇＶＬドメイ
ンを含み、ＴＣＲドメインの少なくとも１つ（例えば、ＴＣＲ膜貫通ドメイン）は、１つ
以上のアミノ酸置換を含む天然に存在しない多様体である。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列を有する接続ペ
プチドを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号
７及び９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を有する膜貫通ドメインを含む。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号３３又は３４のアミノ酸
配列を有する接続ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲγ鎖のカルボキシ末
端部分は、配列番号８及び１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を有する膜貫通ドメ
インを含む。
プチドの全て又は一部とを含むＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分に融合した、抗ＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号５２）のＩｇＶＨドメイン（配列番号３７
）を含み、他の鎖は、膜貫通ドメインとＴＣＲγ鎖の接続ペプチドの全て又は一部とを含
むＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分に融合した、ＩｇＣＬドメイン（配列番号４８）に融
合した抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号５３）のＩｇＶＬドメイ
ンを含み、ＴＣＲドメインの少なくとも１つ（例えば、ＴＣＲ膜貫通ドメイン）は、１つ
以上のアミノ酸置換を含む天然に存在しない多様体である。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列を有する接続ペ
プチドを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号
７及び９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を有する膜貫通ドメインを含む。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号３３又は３４のアミノ酸
配列を有する接続ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲγ鎖のカルボキシ末
端部分は、配列番号８及び１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を有する膜貫通ドメ
インを含む。
【0479】
ｃａＴＣＲ－２（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ－ＴＣＲδ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－リ
ンカー－ＴＣＲγ）の設計では、抗体重鎖の可変ドメイン、第１定常ドメイン及びヒンジ
（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）が、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、Ｖδ－Ｃδ領域
の後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位
置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の
置換によって改変される。リンカーに融合した、対応する抗体軽鎖の可変ドメイン及び定
常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－リンカー）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、ＴＣ
Ｒγ鎖の細胞外ドメイン内の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置
き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、例えば、１つ以上のアミノ酸の置
換によって改変される。
ンカー－ＴＣＲγ）の設計では、抗体重鎖の可変ドメイン、第１定常ドメイン及びヒンジ
（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）が、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、Ｖδ－Ｃδ領域
の後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位
置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の
置換によって改変される。リンカーに融合した、対応する抗体軽鎖の可変ドメイン及び定
常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－リンカー）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、ＴＣ
Ｒγ鎖の細胞外ドメイン内の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置
き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、例えば、１つ以上のアミノ酸の置
換によって改変される。
【0480】
ｃａＴＣＲ－３（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ－ＴＣＲδ／ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－
ヒンジ－ＴＣＲγ＋ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）の設計において、抗体重鎖の可変ドメイン、第
１定常ドメイン、ヒンジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）が、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、
Ｖδ－Ｃδ領域の後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位置、又は
その中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば
、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている。抗体重鎖の可変ドメイン、第１の
定常ドメイン及びヒンジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端
部分を、Ｖγ－Ｃγ領域の後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位
置、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインが
、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている。対応する抗体軽鎖の可変
ドメイン及び定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１ドメインと
関連がある。
ヒンジ－ＴＣＲγ＋ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）の設計において、抗体重鎖の可変ドメイン、第
１定常ドメイン、ヒンジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）が、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、
Ｖδ－Ｃδ領域の後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位置、又は
その中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば
、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている。抗体重鎖の可変ドメイン、第１の
定常ドメイン及びヒンジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端
部分を、Ｖγ－Ｃγ領域の後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位
置、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインが
、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている。対応する抗体軽鎖の可変
ドメイン及び定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１ドメインと
関連がある。
【0481】
ｃａＴＣＲ－４（ＩｇＶＨ－ＴＣＲδ／ＩｇＶＬ－ＴＣＲγ）の設計では、抗体重鎖の
可変ドメイン（ＩｇＶＨ）が、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、Ｖδ－Ｃδ領域の後のＴ
ＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、
置き換え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の
置換によって改変されている。対応する抗体軽鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＬ）は、ＴＣＲ
γ鎖のアミノ末端部分を、Ｖγ－Ｃγ領域の後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペ
プチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の
膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている。
可変ドメイン（ＩｇＶＨ）が、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、Ｖδ－Ｃδ領域の後のＴ
ＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、
置き換え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の
置換によって改変されている。対応する抗体軽鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＬ）は、ＴＣＲ
γ鎖のアミノ末端部分を、Ｖγ－Ｃγ領域の後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペ
プチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の
膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されている。
【0482】
ｃａＴＣＲ－５（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ－ＴＣＲδ／ＴＣＲγ）の設計では、対応する抗
体軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ又はＩｇ
ＶＬ－ＩｇＶＨ）は、Ｖδ－Ｃδ領域の後に、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、ＴＣＲδ
鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置き換
え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換に
よって改変されている。Ｖγ－Ｃγ領域の後に、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペ
プチドの境界の位置、又はその中にある位置までのＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分が削除さ
れ、場合により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換に
よって改変されている。
体軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ又はＩｇ
ＶＬ－ＩｇＶＨ）は、Ｖδ－Ｃδ領域の後に、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、ＴＣＲδ
鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの境界の位置、又はその中にある位置まで、置き換
え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換に
よって改変されている。Ｖγ－Ｃγ領域の後に、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペ
プチドの境界の位置、又はその中にある位置までのＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分が削除さ
れ、場合により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換に
よって改変されている。
【0483】
ｃａＴＣＲ－６（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ－ＴＣＲδ／ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ－ＴＣＲγ）の
設計では、対応する抗体軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶ
Ｈ－ＩｇＶＬ又はＩｇＶＬ－ＩｇＶＨ）が、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、Ｖδ－Ｃδ
領域の後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドに属するか、又はその中にある
位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上の
アミノ酸の置換によって改変されている。対応する抗体軽鎖の可変ドメインに融合した抗
体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ又はＩｇＶＬ－ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲγ鎖の
アミノ末端部分を、Ｖγ－Ｃγ領域の後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン内の接続ペプチド
に属するか、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ド
メインは、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変される。
実施例２：ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ多様体を作製するために置換された膜貫通アミノ酸
設計では、対応する抗体軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶ
Ｈ－ＩｇＶＬ又はＩｇＶＬ－ＩｇＶＨ）が、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、Ｖδ－Ｃδ
領域の後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドに属するか、又はその中にある
位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインが、例えば、１つ以上の
アミノ酸の置換によって改変されている。対応する抗体軽鎖の可変ドメインに融合した抗
体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ又はＩｇＶＬ－ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲγ鎖の
アミノ末端部分を、Ｖγ－Ｃγ領域の後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン内の接続ペプチド
に属するか、又はその中にある位置まで、置き換え、場合により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ド
メインは、例えば、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変される。
実施例２：ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ多様体を作製するために置換された膜貫通アミノ酸
【0484】
この実施例は、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ構築物の生成に使用される、天然に存在するＴＣ
Ｒ膜貫通ドメインの多様体を記載する。ｃａＴＣＲ－１受容体は、δ及びγＴＣＲサブユ
ニットに由来の膜貫通ドメインを含有していた。ｃａＴＣＲ－１受容体の概略図を図２に
示し、膜貫通ドメインが強調されている。ｃａＴＣＲ治療の効能を高めるための置換は、
２つの鎖の膜貫通ドメインを構成するアミノ酸に焦点を合わせた。ｃａＴＣＲ－１－０受
容体を構成する膜貫通領域のαヘリックス様の輪状突出部は、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ膜貫
通変異体を形成するように変異した位置を強調している（図３）。
Ｒ膜貫通ドメインの多様体を記載する。ｃａＴＣＲ－１受容体は、δ及びγＴＣＲサブユ
ニットに由来の膜貫通ドメインを含有していた。ｃａＴＣＲ－１受容体の概略図を図２に
示し、膜貫通ドメインが強調されている。ｃａＴＣＲ治療の効能を高めるための置換は、
２つの鎖の膜貫通ドメインを構成するアミノ酸に焦点を合わせた。ｃａＴＣＲ－１－０受
容体を構成する膜貫通領域のαヘリックス様の輪状突出部は、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ膜貫
通変異体を形成するように変異した位置を強調している（図３）。
【0485】
δＴＣＲサブユニットの天然に存在する膜貫通ドメインは、配列番号７のアミノ酸配列
を有し、以下の置換によって改変された。Ｌ４Ｃ；Ｍ６Ｖ；Ｖ１２Ｆ及びＮ１５Ｓ；Ｆ２
４５Ｓ；又はＬ２５Ｓ。γＴＣＲサブユニットの天然に存在する膜貫通ドメインは、配列
番号８のアミノ酸配列を有し、以下の置換によって改変された。Ｙ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６
Ｖ及びＩ１８Ｖ；Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｉ、Ａ１６Ｉ及びＩ１８Ｌ；Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ及びＦ１５
Ｓ；Ｙ１Ｑ；Ｙ２Ｌ；Ｍ３Ｖ；Ｍ３Ｉ；Ｌ５Ｃ；Ｖ１３Ｙ；Ａ１６Ｖ；Ｉ１８Ｖ；Ｃ１９
Ｍ；又はＣ２１Ｇ。作成したｃａＴＣＲ－１－ＴＭ多様体を表２にまとめる。
実施例３．フローサイトメトリーによるｃａＴＣＲ細胞表面発現及びＴＣＲ－ＣＤ３複
合体形成の検出
を有し、以下の置換によって改変された。Ｌ４Ｃ；Ｍ６Ｖ；Ｖ１２Ｆ及びＮ１５Ｓ；Ｆ２
４５Ｓ；又はＬ２５Ｓ。γＴＣＲサブユニットの天然に存在する膜貫通ドメインは、配列
番号８のアミノ酸配列を有し、以下の置換によって改変された。Ｙ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６
Ｖ及びＩ１８Ｖ；Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｉ、Ａ１６Ｉ及びＩ１８Ｌ；Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ及びＦ１５
Ｓ；Ｙ１Ｑ；Ｙ２Ｌ；Ｍ３Ｖ；Ｍ３Ｉ；Ｌ５Ｃ；Ｖ１３Ｙ；Ａ１６Ｖ；Ｉ１８Ｖ；Ｃ１９
Ｍ；又はＣ２１Ｇ。作成したｃａＴＣＲ－１－ＴＭ多様体を表２にまとめる。
実施例３．フローサイトメトリーによるｃａＴＣＲ細胞表面発現及びＴＣＲ－ＣＤ３複
合体形成の検出
【0486】
ｃａＴＣＲ－１－０と共に、３種類の膜貫通変異体受容体（ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ３、
－ＴＭ４、－ＴＭ５）は、個々にＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞に形質導入された。ｃａＴＣ
Ｒ－１－０及びｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体構築物を用いて形質導入された細胞を、抗Ｃ
Ｄ３ε抗体によって評価し、ＴＣＲ陰性Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞及びＰＥ標識されたＡ
ＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体上でのＣＤ３ε発現の補助を評価し、細胞表
面でのｃａＴＣＲ構築物の発現を測定した。フローサイトメトリー分析を使用し、細胞の
表面上のＣＤ３及びｃａＴＣＲのＭＦＩを測定した。ＣＤ３又はｃａＴＣＲの発現は、ｃ
ａＴＣＲ－１－０形質導入細胞に対するＭＦＩ測定値の百分率として表される。
－ＴＭ４、－ＴＭ５）は、個々にＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞に形質導入された。ｃａＴＣ
Ｒ－１－０及びｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体構築物を用いて形質導入された細胞を、抗Ｃ
Ｄ３ε抗体によって評価し、ＴＣＲ陰性Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞及びＰＥ標識されたＡ
ＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体上でのＣＤ３ε発現の補助を評価し、細胞表
面でのｃａＴＣＲ構築物の発現を測定した。フローサイトメトリー分析を使用し、細胞の
表面上のＣＤ３及びｃａＴＣＲのＭＦＩを測定した。ＣＤ３又はｃａＴＣＲの発現は、ｃ
ａＴＣＲ－１－０形質導入細胞に対するＭＦＩ測定値の百分率として表される。
【0487】
結果を図４に示す。Ｍｏｃｋ形質導入は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量
体への結合を与えず、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞表面上でＣＤ３εの発現をもたらさなか
った。ＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞を個別に形質導入して変異体受容体を発現させ、蛍光標識
されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１で染色し、抗ＣＤ３εは、ｃａＴＣＲ－１
－０で観察されたＭＦＩ値を上回る蛍光強度の別個のピークを示した。顕著には、変異体
受容体は、ＴＣＲ陰性ＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞株におけるＣＤ３εの細胞表面発現を補助
することができただけでなく、細胞表面でのｃａＴＣＲ－１－０の発現に関連する上述の
ＣＤ３シグナル伝達複合体の発現を増加させることも可能であった。
体への結合を与えず、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞表面上でＣＤ３εの発現をもたらさなか
った。ＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞を個別に形質導入して変異体受容体を発現させ、蛍光標識
されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１で染色し、抗ＣＤ３εは、ｃａＴＣＲ－１
－０で観察されたＭＦＩ値を上回る蛍光強度の別個のピークを示した。顕著には、変異体
受容体は、ＴＣＲ陰性ＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞株におけるＣＤ３εの細胞表面発現を補助
することができただけでなく、細胞表面でのｃａＴＣＲ－１－０の発現に関連する上述の
ＣＤ３シグナル伝達複合体の発現を増加させることも可能であった。
【0488】
このことから、膜貫通変異体が、内在性ＣＤ３複合体を動員するためのｃａＴＣＲの重
要な要件を改善することができたことが実証された。これは、ＴＣＲの定常ドメインが、
ＣＤ３鎖との相互作用に寄与しているため、予想されないものとして見ることができ（Ｋ
ｕｈｎｓ ａｎｄ Ｄａｖｉｓ、Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１２；３：１５９；
及びＷａｎｇ及びＲｅｉｎｈｅｒｚ、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２０１２、２５０：１０
２）、ＴＣＲ－ＣＤ３シグナル伝達複合体の安定性に関するＴＣＲ膜貫通領域の役割は、
正しく評価されていない。更に、本キメラは、ＴＣＲ定常ドメインをＩｇＧ ＣＨ１で置
換しており、このことは、ＴＣＲ定常ドメインが、アッセイしたいずれのｃａＴＣＲ受容
体とのＣＤ３アセンブリにも必要ではないことを示している。これは、試験した外因性ｃ
ａＴＣＲキメラの全てが、それらの同族抗原に結合し得る機能的な受容体を形成し、Ｊ．
ＲＴ３－Ｔ３．５細胞上のＣＤ３複合体の細胞表面発現を補助することができることを示
す。
実施例４．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体を用いたＣＤ３ζのＣｏ－ＩＰプルダウン
要な要件を改善することができたことが実証された。これは、ＴＣＲの定常ドメインが、
ＣＤ３鎖との相互作用に寄与しているため、予想されないものとして見ることができ（Ｋ
ｕｈｎｓ ａｎｄ Ｄａｖｉｓ、Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１２；３：１５９；
及びＷａｎｇ及びＲｅｉｎｈｅｒｚ、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２０１２、２５０：１０
２）、ＴＣＲ－ＣＤ３シグナル伝達複合体の安定性に関するＴＣＲ膜貫通領域の役割は、
正しく評価されていない。更に、本キメラは、ＴＣＲ定常ドメインをＩｇＧ ＣＨ１で置
換しており、このことは、ＴＣＲ定常ドメインが、アッセイしたいずれのｃａＴＣＲ受容
体とのＣＤ３アセンブリにも必要ではないことを示している。これは、試験した外因性ｃ
ａＴＣＲキメラの全てが、それらの同族抗原に結合し得る機能的な受容体を形成し、Ｊ．
ＲＴ３－Ｔ３．５細胞上のＣＤ３複合体の細胞表面発現を補助することができることを示
す。
実施例４．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体を用いたＣＤ３ζのＣｏ－ＩＰプルダウン
【0489】
抗ＦＬＡＧ免疫沈降は、（図４）のように形質導入されたＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞の細
胞溶解物から行い、ｃａＴＣＲ複合体を、ｃａＴＣＲ受容体の全ての鎖ＩＩに融合したＦ
ＬＡＧタグによってプルダウンした。形質導入されたＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞を溶解し、
ｃａＴＣＲ複合体を非イオン性洗剤で洗浄し、そのまま精製した（Ｃｏｈｅｎら、２００
６ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）。抗Ｆｌａｇ抗体を使用し、ウェスタンブロットで、ｃａ
ＴＣＲ鎖ＩＩの発現を検出した（図５）。ＣＤ３複合体とのＦＬＡＧタグ化ｃａＴＣＲの
会合は、抗ＣＤ３ζ抗体とのウェスタンブロットによって可視化した（図５）。ｃａＴＣ
Ｒ－１－ＴＭ４及びｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５は、２つの受容体によってプルダウンされた
ＣＤ３ζの量の増加によって分かるように、ＣＤ３複合体に対してより高い親和性を有し
た（図５、矢印）。ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ４は、鎖ＩＩ上に変異を有し、一方、ｃａＴＣ
Ｒ－１－ＴＭ５は、鎖１上の更なる変異と共に、鎖ＩＩに同一の変異を有する。
実施例５．ｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体で形質導入されたＴ細胞を用いた、ＡＦＰ陽性
腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅活性の特性決定
胞溶解物から行い、ｃａＴＣＲ複合体を、ｃａＴＣＲ受容体の全ての鎖ＩＩに融合したＦ
ＬＡＧタグによってプルダウンした。形質導入されたＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞を溶解し、
ｃａＴＣＲ複合体を非イオン性洗剤で洗浄し、そのまま精製した（Ｃｏｈｅｎら、２００
６ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）。抗Ｆｌａｇ抗体を使用し、ウェスタンブロットで、ｃａ
ＴＣＲ鎖ＩＩの発現を検出した（図５）。ＣＤ３複合体とのＦＬＡＧタグ化ｃａＴＣＲの
会合は、抗ＣＤ３ζ抗体とのウェスタンブロットによって可視化した（図５）。ｃａＴＣ
Ｒ－１－ＴＭ４及びｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５は、２つの受容体によってプルダウンされた
ＣＤ３ζの量の増加によって分かるように、ＣＤ３複合体に対してより高い親和性を有し
た（図５、矢印）。ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ４は、鎖ＩＩ上に変異を有し、一方、ｃａＴＣ
Ｒ－１－ＴＭ５は、鎖１上の更なる変異と共に、鎖ＩＩに同一の変異を有する。
実施例５．ｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体で形質導入されたＴ細胞を用いた、ＡＦＰ陽性
腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅活性の特性決定
【0490】
初代Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ形質導入するか、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１結合部分（それぞれ、配列番号５２及び５３のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコー
ドするｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ１～－ＴＭ５、及び
－ＴＭ１４～－ＴＭ１６）を用いて形質導入した。形質導入効率は、ＰＥ標識されたＡＦ
Ｐ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１テトラマーで染色することによって決定した。全ての
ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによって、受容体陽性率４
０％で一致させた。２つの細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）及びＳ
Ｋ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子で形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）
を、エフェクターと標的の比率２．５：１で使用した。Ｃｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａ
ｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用
し、１６時間インキュベーションした後に、特異的なＴ細胞溶解を測定した。抗ＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を有する全てのｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体で形
質導入されたＴ細胞は、抗原陽性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの死滅を指向し
たが、抗原陰性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１の死滅は引き起こさなかった（図６）。全てのｃ
ａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体で形質導入された細胞で観察される特異的溶解のレベルは、ｃ
ａＴＣＲ－１－０で形質導入されたＴ細胞のレベルに匹敵するものであり、このことは、
ＴＭ変異体（ＴＭ１～ＴＭ５）が、抗原陽性腫瘍細胞に対してＴ細胞の細胞毒性をシグナ
ル伝達する機能的能力を保持していることを示している。
実施例６．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体Ｔ細胞を用いた、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－
ＭＧ腫瘍細胞株のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅中に放出されるサイトカイン
１結合部分（それぞれ、配列番号５２及び５３のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコー
ドするｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ１～－ＴＭ５、及び
－ＴＭ１４～－ＴＭ１６）を用いて形質導入した。形質導入効率は、ＰＥ標識されたＡＦ
Ｐ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１テトラマーで染色することによって決定した。全ての
ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによって、受容体陽性率４
０％で一致させた。２つの細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）及びＳ
Ｋ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子で形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）
を、エフェクターと標的の比率２．５：１で使用した。Ｃｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａ
ｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用
し、１６時間インキュベーションした後に、特異的なＴ細胞溶解を測定した。抗ＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を有する全てのｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体で形
質導入されたＴ細胞は、抗原陽性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの死滅を指向し
たが、抗原陰性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１の死滅は引き起こさなかった（図６）。全てのｃ
ａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体で形質導入された細胞で観察される特異的溶解のレベルは、ｃ
ａＴＣＲ－１－０で形質導入されたＴ細胞のレベルに匹敵するものであり、このことは、
ＴＭ変異体（ＴＭ１～ＴＭ５）が、抗原陽性腫瘍細胞に対してＴ細胞の細胞毒性をシグナ
ル伝達する機能的能力を保持していることを示している。
実施例６．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体Ｔ細胞を用いた、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－
ＭＧ腫瘍細胞株のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅中に放出されるサイトカイン
【0491】
初代Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ形質導入するか、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１結合部分（それぞれ、配列番号５２及び５３のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコー
ドするｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ１～－ＴＭ５）を用
いて形質導入した。形質導入効率は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０１テトラマーで染色することによって決定した。全てのｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞を、ｍ
ｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによって、受容体陽性率４０％で一致させた。ＳＫ－ＨＥ
Ｐ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子で形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）を、エフ
ェクターと標的の比率２．５：１で使用した。１６時間のＳＫ－ＨＥＰ１－ＡＦＰ－ＭＧ
ｉｎ ｖｉｔｒｏ死滅アッセイ（図６）の後に、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＧＭ－ＣＳＦ
、ＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの培地へのサイトカイン放出を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ
Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８－ｐｌｅｘ Ａｓｓａｙ（ＢｉｏＲａｄ）を備えた
Ｍａｇｐｉｘ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘシステム（Ｌｕｍｉｎｅｘ）を用いて測定した。ＳＫ
－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ標的反応からのアッセイ上清を１０倍に希釈した。サイトカ
イン濃度は、ＢｉｏＲａｄ Ｂｉｏ－ｐｌｅｘキットにより供給される標準曲線を用いて
測定された（図７）。膜貫通変異体を用いたときのサイトカイン放出のわずかな増加は、
特定の膜貫通変異体が、毒性レベルのサイトカイン放出を防ぐ制御機構を維持しつつ、抗
原により誘導されるＴ細胞シグナル伝達強度を増加させ得ることを示唆している。
実施例７．ｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体で形質導入されたＴ細胞を用いた、ＡＦＰ陽性
腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅活性の特性決定
１結合部分（それぞれ、配列番号５２及び５３のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコー
ドするｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ１～－ＴＭ５）を用
いて形質導入した。形質導入効率は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０１テトラマーで染色することによって決定した。全てのｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞を、ｍ
ｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによって、受容体陽性率４０％で一致させた。ＳＫ－ＨＥ
Ｐ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子で形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）を、エフ
ェクターと標的の比率２．５：１で使用した。１６時間のＳＫ－ＨＥＰ１－ＡＦＰ－ＭＧ
ｉｎ ｖｉｔｒｏ死滅アッセイ（図６）の後に、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＧＭ－ＣＳＦ
、ＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの培地へのサイトカイン放出を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ
Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８－ｐｌｅｘ Ａｓｓａｙ（ＢｉｏＲａｄ）を備えた
Ｍａｇｐｉｘ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘシステム（Ｌｕｍｉｎｅｘ）を用いて測定した。ＳＫ
－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ標的反応からのアッセイ上清を１０倍に希釈した。サイトカ
イン濃度は、ＢｉｏＲａｄ Ｂｉｏ－ｐｌｅｘキットにより供給される標準曲線を用いて
測定された（図７）。膜貫通変異体を用いたときのサイトカイン放出のわずかな増加は、
特定の膜貫通変異体が、毒性レベルのサイトカイン放出を防ぐ制御機構を維持しつつ、抗
原により誘導されるＴ細胞シグナル伝達強度を増加させ得ることを示唆している。
実施例７．ｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体で形質導入されたＴ細胞を用いた、ＡＦＰ陽性
腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅活性の特性決定
【0492】
初代Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ形質導入するか、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１結合部分（それぞれ、配列番号５２及び５３のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコー
ドするｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ５～－ＴＭ１３）を
用いて形質導入した。形質導入効率は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１テトラマーで染色することによって求めた。全てのｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞を、ｍ
ｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによって、受容体陽性率４０％で一致させた。３つの細胞
株ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（
ＡＦＰミニ遺伝子で形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）、及び内因性のＡＦＰ発現Ｈｅｐ
Ｇ２（ＡＦＰ＋／ＨＬＡ－Ａ２＋）を、エフェクターと標的の比率２．５：１で使用した
。Ｃｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａ
ｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用し、１６時間インキュベーションした後に、特異的な
Ｔ細胞溶解を測定した。抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を有する全て
のｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体で形質導入されたＴ細胞は、抗原陽性細胞株ＨｅｐＧ２及
びＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの死滅を指向したが、抗原陰性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－
１の死滅は引き起こさなかった（図８）。ＡＦＰ陽性腫瘍細胞であるＳＫ－ＨＥＰ１－Ａ
ＦＰ－ＭＧ及びＨｅｐＧ２の両方の特異的溶解は、全てのｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体で
形質導入されたＴ細胞の間に匹敵するものであり、このことは、ＴＭ変異体（－ＴＭ５～
－ＴＭ１３）が、抗原陽性腫瘍細胞に対してＴ細胞の細胞毒性をシグナル伝達する機能的
能力を保持していることを示している。
実施例８．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体Ｔ細胞を用いた、ＨｅｐＧ２腫瘍細胞株のｉｎ
ｖｉｔｒｏでの死滅中に放出されるサイトカイン
１結合部分（それぞれ、配列番号５２及び５３のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコー
ドするｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ５～－ＴＭ１３）を
用いて形質導入した。形質導入効率は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１テトラマーで染色することによって求めた。全てのｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞を、ｍ
ｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによって、受容体陽性率４０％で一致させた。３つの細胞
株ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（
ＡＦＰミニ遺伝子で形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）、及び内因性のＡＦＰ発現Ｈｅｐ
Ｇ２（ＡＦＰ＋／ＨＬＡ－Ａ２＋）を、エフェクターと標的の比率２．５：１で使用した
。Ｃｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａ
ｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用し、１６時間インキュベーションした後に、特異的な
Ｔ細胞溶解を測定した。抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を有する全て
のｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体で形質導入されたＴ細胞は、抗原陽性細胞株ＨｅｐＧ２及
びＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの死滅を指向したが、抗原陰性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－
１の死滅は引き起こさなかった（図８）。ＡＦＰ陽性腫瘍細胞であるＳＫ－ＨＥＰ１－Ａ
ＦＰ－ＭＧ及びＨｅｐＧ２の両方の特異的溶解は、全てのｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体で
形質導入されたＴ細胞の間に匹敵するものであり、このことは、ＴＭ変異体（－ＴＭ５～
－ＴＭ１３）が、抗原陽性腫瘍細胞に対してＴ細胞の細胞毒性をシグナル伝達する機能的
能力を保持していることを示している。
実施例８．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ変異体Ｔ細胞を用いた、ＨｅｐＧ２腫瘍細胞株のｉｎ
ｖｉｔｒｏでの死滅中に放出されるサイトカイン
【0493】
初代Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ形質導入するか、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１結合部分（それぞれ、配列番号５２及び５３のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコー
ドするｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ５～－ＴＭ１３）を
用いて形質導入した。形質導入効率は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１テトラマーで染色することによって決定した。全てのｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞を、
ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによって、受容体陽性率４０％で一致させた。ＨｅｐＧ
２細胞を、エフェクターと標的の比率２．５：１で使用した。１６時間のＨｅｐＧ２ ｉ
ｎ ｖｉｔｒｏ死滅アッセイ（図８）の後にＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの
培地へのサイトカイン放出を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎ
ｅ ８－ｐｌｅｘ Ａｓｓａｙ（ＢｉｏＲａｄ）を備えたＭａｇｐｉｘ ｍｕｌｔｉｐｌ
ｅｘシステム（Ｌｕｍｉｎｅｘ）を用いて測定した。ＨｅｐＧ２標的反応からのアッセイ
上清を４倍に希釈した。サイトカイン濃度は、ＢｉｏＲａｄ Ｂｉｏ－ｐｌｅｘキットに
より供給される標準曲線を用いて測定した（図９）。ＨｅｐＧ２を死滅させるときのｃａ
ＴＣＲ－１－ＴＭ５を用いたサイトカイン放出の顕著な増加は、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５
受容体内の膜貫通変異が、細胞毒性シグナル伝達能力を増加させていることを示す。
実施例９．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５で形質導入されたＴ細胞を用いたＣＤ１９陽性ＮＡ
ＬＭ６腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅
１結合部分（それぞれ、配列番号５２及び５３のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコー
ドするｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１膜貫通変異体（－ＴＭ５～－ＴＭ１３）を
用いて形質導入した。形質導入効率は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１テトラマーで染色することによって決定した。全てのｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞を、
ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによって、受容体陽性率４０％で一致させた。ＨｅｐＧ
２細胞を、エフェクターと標的の比率２．５：１で使用した。１６時間のＨｅｐＧ２ ｉ
ｎ ｖｉｔｒｏ死滅アッセイ（図８）の後にＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの
培地へのサイトカイン放出を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎ
ｅ ８－ｐｌｅｘ Ａｓｓａｙ（ＢｉｏＲａｄ）を備えたＭａｇｐｉｘ ｍｕｌｔｉｐｌ
ｅｘシステム（Ｌｕｍｉｎｅｘ）を用いて測定した。ＨｅｐＧ２標的反応からのアッセイ
上清を４倍に希釈した。サイトカイン濃度は、ＢｉｏＲａｄ Ｂｉｏ－ｐｌｅｘキットに
より供給される標準曲線を用いて測定した（図９）。ＨｅｐＧ２を死滅させるときのｃａ
ＴＣＲ－１－ＴＭ５を用いたサイトカイン放出の顕著な増加は、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５
受容体内の膜貫通変異が、細胞毒性シグナル伝達能力を増加させていることを示す。
実施例９．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５で形質導入されたＴ細胞を用いたＣＤ１９陽性ＮＡ
ＬＭ６腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅
【0494】
初代Ｔ細胞を、ｃａＴＣＲ－１－０、又は抗ＣＤ１９結合部分（それぞれ、配列番号５
４及び５５のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコードするｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を用
いて形質導入した。形質導入効率を決定し、Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合すること
によって、受容体陽性率４０％で一致させた。ＮＡＬＭ６標的細胞をＣＦＳＥで５分間標
識した後、エフェクターと標的の比率１：１、１：２又は１：４で、適切なＴ細胞を４時
間インキュベーションした。ＦＡＣＳ分析によりＣＦＳＥ陽性細胞の数を計数し、Ｔ細胞
を含まないウェル中のＣＦＳＥ陽性細胞の数で除算することによって、死滅率を決定した
（図１０）。ＣＤ１９陽性ＮＡＬＭ６腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅効率は、親のｃａ
ＴＣＲ－１－０と変異体ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５で形質導入された細胞の間に相当する効
率を維持しており、このことは、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５変異体が、抗ＣＤ１９モデルに
おいて、その細胞毒性シグナル伝達機能を維持していることを示している。
実施例１０．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５ Ｔ細胞を用いた、ＮＡＬＭ６腫瘍細胞株のｉｎ
ｖｉｔｒｏでの死滅中に放出されるサイトカイン
４及び５５のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコードするｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を用
いて形質導入した。形質導入効率を決定し、Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合すること
によって、受容体陽性率４０％で一致させた。ＮＡＬＭ６標的細胞をＣＦＳＥで５分間標
識した後、エフェクターと標的の比率１：１、１：２又は１：４で、適切なＴ細胞を４時
間インキュベーションした。ＦＡＣＳ分析によりＣＦＳＥ陽性細胞の数を計数し、Ｔ細胞
を含まないウェル中のＣＦＳＥ陽性細胞の数で除算することによって、死滅率を決定した
（図１０）。ＣＤ１９陽性ＮＡＬＭ６腫瘍のｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅効率は、親のｃａ
ＴＣＲ－１－０と変異体ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５で形質導入された細胞の間に相当する効
率を維持しており、このことは、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５変異体が、抗ＣＤ１９モデルに
おいて、その細胞毒性シグナル伝達機能を維持していることを示している。
実施例１０．ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５ Ｔ細胞を用いた、ＮＡＬＭ６腫瘍細胞株のｉｎ
ｖｉｔｒｏでの死滅中に放出されるサイトカイン
【0495】
初代Ｔ細胞を、ｃａＴＣＲ－１－０、又は抗ＣＤ１９結合部分（それぞれ、配列番号５
４及び５５のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコードするｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を用
いて形質導入した。形質導入効率を決定し、Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合すること
によって、受容体陽性率４０％で一致させた。ＮＡＬＭ６細胞を、エフェクターと標的の
比率２．５：１で使用した。１６時間のＮＡＬＭ６ ｉｎ ｖｉｔｒｏ死滅アッセイ（図
１０）の後に、ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの培地へのサイトカ
イン放出を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８－ｐｌｅｘ
Ａｓｓａｙ（ＢｉｏＲａｄ）を備えたＭａｇｐｉｘ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘシステム（Ｌ
ｕｍｉｎｅｘ）を用いて測定した。ＮＡＬＭ６標的反応からのアッセイ上清を４倍に希釈
した。サイトカイン濃度は、ＢｉｏＲａｄ Ｂｉｏ－ｐｌｅｘキットにより供給される標
準曲線を用いて測定した（図１１）。ＮＡＬＭ６を死滅させるときのｃａＴＣＲ－１－Ｔ
Ｍ５を用いたサイトカイン放出の増加は、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５変異体受容体が、抗Ｃ
Ｄ１９モデルにおいて、細胞毒性シグナル伝達能力を維持していることを示す。
実施例１１．ＣＤ１９陽性標的細胞に応答した細胞内サイトカイン産生
４及び５５のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコードするｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を用
いて形質導入した。形質導入効率を決定し、Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合すること
によって、受容体陽性率４０％で一致させた。ＮＡＬＭ６細胞を、エフェクターと標的の
比率２．５：１で使用した。１６時間のＮＡＬＭ６ ｉｎ ｖｉｔｒｏ死滅アッセイ（図
１０）の後に、ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの培地へのサイトカ
イン放出を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８－ｐｌｅｘ
Ａｓｓａｙ（ＢｉｏＲａｄ）を備えたＭａｇｐｉｘ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘシステム（Ｌ
ｕｍｉｎｅｘ）を用いて測定した。ＮＡＬＭ６標的反応からのアッセイ上清を４倍に希釈
した。サイトカイン濃度は、ＢｉｏＲａｄ Ｂｉｏ－ｐｌｅｘキットにより供給される標
準曲線を用いて測定した（図１１）。ＮＡＬＭ６を死滅させるときのｃａＴＣＲ－１－Ｔ
Ｍ５を用いたサイトカイン放出の増加は、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５変異体受容体が、抗Ｃ
Ｄ１９モデルにおいて、細胞毒性シグナル伝達能力を維持していることを示す。
実施例１１．ＣＤ１９陽性標的細胞に応答した細胞内サイトカイン産生
【0496】
サイトカイン発現に対するｃａＴＣＲ－１シグナル伝達の結果をより直接的に求めるた
めに、抗原陽性腫瘍細胞による刺激に応答する細胞内サイトカイン産生を測定した。初代
Ｔ細胞を、ｃａＴＣＲ－１－０、又は抗ＣＤ１９結合部分（それぞれ、配列番号５４及び
５５のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコードするｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を用いて形
質導入した。形質導入効率を決定し、Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによっ
て、受容体陽性率４０％で一致させた。サイトカイン分泌を防ぐために、タンパク質輸送
阻害剤カクテル（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅカタログ番号００４９８００３）と共に、Ｍｏ
ｃｋ形質導入されたＴ細胞、又はｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５で形質
導入されたＴ細胞を、ＮＡＬＭ６又はＲａｊｉ標的細胞と共に比率２．５：１で培養した
。４時間の治療後、Ｔ細胞を、抗ＴＮＦ－α、抗ＩＦＮ－γ、又は抗ＩＬ－２抗体と共に
、ｃａＴＣＲ－１受容体及び抗ＣＤ４抗体に対して染色した。フローサイトメトリーを使
用して、ｃａＴＣＲ－１受容体陽性細胞に対しゲーティングすることで、細胞内ＴＮＦ－
α、ＩＦＮ－γ及びＩＬ－２について陽性の細胞の割合を計算した（表４）。ｃａＴＣＲ
－１－ＴＭ５変異体受容体による刺激は、細胞内サイトカイン発現を伴う細胞の増加をも
たらし、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５における膜貫通変異が、Ｔ細胞の細胞毒性シグナル伝達
能の増加をもたらす能力を更に実証する。
実施例１２．ｃａＴＣＲ－１受容体による刺激後の増殖及び持続性
めに、抗原陽性腫瘍細胞による刺激に応答する細胞内サイトカイン産生を測定した。初代
Ｔ細胞を、ｃａＴＣＲ－１－０、又は抗ＣＤ１９結合部分（それぞれ、配列番号５４及び
５５のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコードするｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を用いて形
質導入した。形質導入効率を決定し、Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合することによっ
て、受容体陽性率４０％で一致させた。サイトカイン分泌を防ぐために、タンパク質輸送
阻害剤カクテル（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅカタログ番号００４９８００３）と共に、Ｍｏ
ｃｋ形質導入されたＴ細胞、又はｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５で形質
導入されたＴ細胞を、ＮＡＬＭ６又はＲａｊｉ標的細胞と共に比率２．５：１で培養した
。４時間の治療後、Ｔ細胞を、抗ＴＮＦ－α、抗ＩＦＮ－γ、又は抗ＩＬ－２抗体と共に
、ｃａＴＣＲ－１受容体及び抗ＣＤ４抗体に対して染色した。フローサイトメトリーを使
用して、ｃａＴＣＲ－１受容体陽性細胞に対しゲーティングすることで、細胞内ＴＮＦ－
α、ＩＦＮ－γ及びＩＬ－２について陽性の細胞の割合を計算した（表４）。ｃａＴＣＲ
－１－ＴＭ５変異体受容体による刺激は、細胞内サイトカイン発現を伴う細胞の増加をも
たらし、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５における膜貫通変異が、Ｔ細胞の細胞毒性シグナル伝達
能の増加をもたらす能力を更に実証する。
【表4】
【0497】
初代Ｔ細胞を、ｃａＴＣＲ－１－０、又は抗ＣＤ１９結合部分（それぞれ、配列番号５
４及び５５のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコードするｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を用
いて形質導入した。形質導入効率を決定し、Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合すること
によって、受容体陽性率４０％で一致させた。Ｔ細胞をＣＦＳＥで標識し、Ｒａｊｉ又は
ＮＡＬＭ６標的細胞で刺激した。５×１０４個のＮＡＬＭ６細胞を、エフェクターと標的
の比率２：１で使用した。ＦＡＣＳ分析を用い、ＣＦＳＥ蛍光を測定した（図１２Ａ及び
１２Ｂ）。ＣＦＳＥ蛍光強度は、各細胞分裂と共に減少するため、これを、抗原刺激に応
答したＴ細胞の増殖力をアッセイするために使用することができる。刺激後に生存するＴ
細胞の生存期間（persistence）を観察するために、標的細胞の曝露から３日後に残った
生存Ｔ細胞の総数を数えた（表５）。ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５受容体を介する刺激は、３
日目のＣＦＳＥピークの左方向へのシフト及び生存Ｔ細胞総数の生存期間に見られるよう
に、両方の増殖能の増加を示した。養子Ｔ細胞療法中のＴ細胞の生存期間及び増殖の両方
が、より良好な臨床転帰に関連するため、これらは重要な特性である。
実施例１３．二重特異性抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲの構築及び特性決定
４及び５５のＶＨドメイン及びＶＬドメイン）をコードするｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を用
いて形質導入した。形質導入効率を決定し、Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ Ｔ細胞と混合すること
によって、受容体陽性率４０％で一致させた。Ｔ細胞をＣＦＳＥで標識し、Ｒａｊｉ又は
ＮＡＬＭ６標的細胞で刺激した。５×１０４個のＮＡＬＭ６細胞を、エフェクターと標的
の比率２：１で使用した。ＦＡＣＳ分析を用い、ＣＦＳＥ蛍光を測定した（図１２Ａ及び
１２Ｂ）。ＣＦＳＥ蛍光強度は、各細胞分裂と共に減少するため、これを、抗原刺激に応
答したＴ細胞の増殖力をアッセイするために使用することができる。刺激後に生存するＴ
細胞の生存期間（persistence）を観察するために、標的細胞の曝露から３日後に残った
生存Ｔ細胞の総数を数えた（表５）。ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５受容体を介する刺激は、３
日目のＣＦＳＥピークの左方向へのシフト及び生存Ｔ細胞総数の生存期間に見られるよう
に、両方の増殖能の増加を示した。養子Ｔ細胞療法中のＴ細胞の生存期間及び増殖の両方
が、より良好な臨床転帰に関連するため、これらは重要な特性である。
【表5】
【0498】
単一の標的抗原を標的とするキメラ抗原受容体を用いた療法は、標的抗原遺伝子の消失
、代替的スプライシング及びエピトープ喪失に起因して、抗原のエスケープに対して脆弱
な場合がある。二重特異性ｃａＴＣＲは、抗原がエスケープする可能性を減らすことによ
って、有効性の改善された治療を提供するように設計された。
、代替的スプライシング及びエピトープ喪失に起因して、抗原のエスケープに対して脆弱
な場合がある。二重特異性ｃａＴＣＲは、抗原がエスケープする可能性を減らすことによ
って、有効性の改善された治療を提供するように設計された。
【0499】
抗ＣＤ１９抗体に由来する１つの抗原結合ドメインと、抗ＣＤ２２抗体に由来する１つ
の抗原結合ドメインとを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築した（本明細書では、「抗Ｃ
Ｄ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ」と称されるか、又は「ＣＤ１９ ＣＤ２２ ＣＡＴＣＲ
」と略される）。抗ＣＤ１９抗体は、国際公開第２０１７０６６１３６（Ａ２）号に既報
である。抗ＣＤ２２抗体は、２０１８年３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０
，９５５号に記載の「抗ＣＤ２２クローン２」として知られている。各抗ＣＤ１９抗ＣＤ
２２ ｃａＴＣＲは、２つのポリペプチドを含み、１つはＴＣＲ δドメインを含有し、
１つはＴＣＲγドメインを含有する。異なる構造フォーマット及びリンカー（異なる長さ
及び配列）を構築物に使用した。抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ－９－２変異をＣＨ
１（Ｓ６４Ｅ及びＳ６６Ｖ変異）及びＣＬ（Ｓ６９Ｌ及びＴ７１Ｓ変異）ドメインに導入
して二量体形成を安定化させた。他の抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ構築物は、リン
カー、安定化ドメイン及び／又は膜貫通ドメインを変更することによって（例えば、変異
膜貫通ドメインを使用して）、及び／又は抗原結合ドメインを交換することによって、生
成することができる。
の抗原結合ドメインとを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築した（本明細書では、「抗Ｃ
Ｄ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ」と称されるか、又は「ＣＤ１９ ＣＤ２２ ＣＡＴＣＲ
」と略される）。抗ＣＤ１９抗体は、国際公開第２０１７０６６１３６（Ａ２）号に既報
である。抗ＣＤ２２抗体は、２０１８年３月３０日に出願されたＵＳＳＮ ６２／６５０
，９５５号に記載の「抗ＣＤ２２クローン２」として知られている。各抗ＣＤ１９抗ＣＤ
２２ ｃａＴＣＲは、２つのポリペプチドを含み、１つはＴＣＲ δドメインを含有し、
１つはＴＣＲγドメインを含有する。異なる構造フォーマット及びリンカー（異なる長さ
及び配列）を構築物に使用した。抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ－９－２変異をＣＨ
１（Ｓ６４Ｅ及びＳ６６Ｖ変異）及びＣＬ（Ｓ６９Ｌ及びＴ７１Ｓ変異）ドメインに導入
して二量体形成を安定化させた。他の抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ構築物は、リン
カー、安定化ドメイン及び／又は膜貫通ドメインを変更することによって（例えば、変異
膜貫通ドメインを使用して）、及び／又は抗原結合ドメインを交換することによって、生
成することができる。
【0500】
以下の表６は、各抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ構築物における各ポリペプチドの
Ｎ末端からＣ末端への構造的特徴を示す。抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ構築物のポ
リペプチドの各対をコードするレンチウイルスベクターを調製した。
サイトカイン分泌
Ｎ末端からＣ末端への構造的特徴を示す。抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ構築物のポ
リペプチドの各対をコードするレンチウイルスベクターを調製した。
【表6】
【0501】
初代Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ形質導入するか、又は抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ｃａＴＣＲ－７－
２ａ構築物をコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入した。形質導入された
Ｔ細胞を、Ｋ５６２（ＣＤ１９ ＣＤ２２二重陰性）、Ｋ５６２－ＣＤ２２（ＣＤ２２で
形質導入されたＫ５６２）、Ｋ５６２－ＣＤ１９（ＣＤ１９で形質導入されたＫ５６２）
、Ｒａｊｉ（ＣＤ１９及びＣＤ２２の両方を発現するＲａｊｉ）、又はＲａｊｉ ＣＤ１
９ Ｋ／Ｏ（ＣＤ１９ノックアウトを有するＲａｊｉ）細胞と、エフェクターと標的との
比率２．５：１で混合した。Ｔ細胞は、標的リガンドとのＴＣＲエンゲージメントによっ
て活性化されると、ＩＦＮ－γを分泌する。ＩＦＮ－γのサイトカイン放出レベルを測定
し、受容体のシグナル伝達電位の指標として使用した（レベルが高いほど、受容体のシグ
ナル伝達電位及び細胞毒性Ｔ細胞活性が高い）。Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ
Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘアッセイ（ＢｉｏＲａｄ）を用い、Ｍａｇｐｉｘ多重
系（Ｌｕｍｉｎｅｘ）を使用して、１６時間の共培養後にサイトカイン濃度を測定した。
２ａ構築物をコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入した。形質導入された
Ｔ細胞を、Ｋ５６２（ＣＤ１９ ＣＤ２２二重陰性）、Ｋ５６２－ＣＤ２２（ＣＤ２２で
形質導入されたＫ５６２）、Ｋ５６２－ＣＤ１９（ＣＤ１９で形質導入されたＫ５６２）
、Ｒａｊｉ（ＣＤ１９及びＣＤ２２の両方を発現するＲａｊｉ）、又はＲａｊｉ ＣＤ１
９ Ｋ／Ｏ（ＣＤ１９ノックアウトを有するＲａｊｉ）細胞と、エフェクターと標的との
比率２．５：１で混合した。Ｔ細胞は、標的リガンドとのＴＣＲエンゲージメントによっ
て活性化されると、ＩＦＮ－γを分泌する。ＩＦＮ－γのサイトカイン放出レベルを測定
し、受容体のシグナル伝達電位の指標として使用した（レベルが高いほど、受容体のシグ
ナル伝達電位及び細胞毒性Ｔ細胞活性が高い）。Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ
Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘアッセイ（ＢｉｏＲａｄ）を用い、Ｍａｇｐｉｘ多重
系（Ｌｕｍｉｎｅｘ）を使用して、１６時間の共培養後にサイトカイン濃度を測定した。
【0502】
図１４に示すように、一連のＣＤ１９＋及び／又はＣＤ２２＋細胞株にわたって、抗原
特異的ＩＦＮ－γ放出が観察された。抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ－７－２ａ構築
物を発現するＴ細胞は、ＣＤ１９抗原又はＣＤ２２抗原のいずれかを発現するＫ５６２と
共にインキュベートしたときに、ＩＦＮ－γ分泌を特異的に活性化した。ｃａＴＣＲ－７
－２ａ Ｔ細胞はまた、ＣＤ１９遺伝子がＣＤ１９＋ＣＤ２２＋Ｒａｊｉリンパ腫細胞株
（Ｒａｊｉ ＣＤ１９ Ｋ／Ｏ）からノックアウトされた抗原エスケープモデルにおいて
ＩＦＮ－γを放出し、したがって、単一のｃａＴＣＲ－７が２つの独立した抗原に結合す
る能力を実証した。
ｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅
特異的ＩＦＮ－γ放出が観察された。抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ－７－２ａ構築
物を発現するＴ細胞は、ＣＤ１９抗原又はＣＤ２２抗原のいずれかを発現するＫ５６２と
共にインキュベートしたときに、ＩＦＮ－γ分泌を特異的に活性化した。ｃａＴＣＲ－７
－２ａ Ｔ細胞はまた、ＣＤ１９遺伝子がＣＤ１９＋ＣＤ２２＋Ｒａｊｉリンパ腫細胞株
（Ｒａｊｉ ＣＤ１９ Ｋ／Ｏ）からノックアウトされた抗原エスケープモデルにおいて
ＩＦＮ－γを放出し、したがって、単一のｃａＴＣＲ－７が２つの独立した抗原に結合す
る能力を実証した。
ｉｎ ｖｉｔｒｏでの死滅
【0503】
様々な抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ－７構築物のｉｎ ｖｉｔｒｏでの細胞死滅
活性を、方法に記載のＬＤＨ細胞毒性アッセイによって評価した。簡潔に述べると、ドナ
ー（Ｒ１７７）由来のヒト初代Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ形質導入し、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴ
ＣＲ－１をコードするレンチウイルス又は抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ構築物（ｃ
ａＴＣＲ－７－１ｂ、ｃａＴＣＲ－７－２ｂ、ｃａＴＣＲ－７－１ｃ又はｃａＴＣＲ－７
－２ｃ）をコードするレンチウイルスを用いて形質導入した。形質導入されたＴ細胞を、
Ｋ５６２、Ｋ５６２－ＣＤ２２（ＣＤ２２を発現するＫ５６２）、Ｋ５６２－ＣＤ１９（
ＣＤ１９を発現するＫ５６２）、又はＫ５６２－ＣＤ１９／ＣＤ２２（ＣＤ１９及びＣＤ
２２抗原を発現するＫ５６２細胞）細胞と、エフェクターと標的の比率２：１で混合した
。Ｃｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａ
ｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用し、１６時間インキュベーションした後に、特異的な
Ｔ細胞溶解を測定した。
活性を、方法に記載のＬＤＨ細胞毒性アッセイによって評価した。簡潔に述べると、ドナ
ー（Ｒ１７７）由来のヒト初代Ｔ細胞を、ｍｏｃｋ形質導入し、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴ
ＣＲ－１をコードするレンチウイルス又は抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲ構築物（ｃ
ａＴＣＲ－７－１ｂ、ｃａＴＣＲ－７－２ｂ、ｃａＴＣＲ－７－１ｃ又はｃａＴＣＲ－７
－２ｃ）をコードするレンチウイルスを用いて形質導入した。形質導入されたＴ細胞を、
Ｋ５６２、Ｋ５６２－ＣＤ２２（ＣＤ２２を発現するＫ５６２）、Ｋ５６２－ＣＤ１９（
ＣＤ１９を発現するＫ５６２）、又はＫ５６２－ＣＤ１９／ＣＤ２２（ＣＤ１９及びＣＤ
２２抗原を発現するＫ５６２細胞）細胞と、エフェクターと標的の比率２：１で混合した
。Ｃｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａ
ｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用し、１６時間インキュベーションした後に、特異的な
Ｔ細胞溶解を測定した。
【0504】
図１５に示すように、様々な二重特異性抗ＣＤ１９抗ＣＤ２２ ｃａＴＣＲｓを発現す
るＴ細胞は、ＣＤ１９、ＣＤ２２、又はＣＤ１９及びＣＤ２２の両方を発現するＫ５６２
標的細胞を溶解させることができた。しかしながら、単一特異性ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－
１を発現するＴ細胞は、ＣＤ１９を発現するＫ５６２標的細胞を溶解させることのみが可
能であった。
るＴ細胞は、ＣＤ１９、ＣＤ２２、又はＣＤ１９及びＣＤ２２の両方を発現するＫ５６２
標的細胞を溶解させることができた。しかしながら、単一特異性ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－
１を発現するＴ細胞は、ＣＤ１９を発現するＫ５６２標的細胞を溶解させることのみが可
能であった。
【表7-1】
【表7-2】
【表7-3】
【表7-4】
【表7-5】
【表7-6】
【表7-7】
【表7-8】
【表7-9】
【表7-10】
【表7-11】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12A】
【図12B】
【図13A】
【図13B】
【図13C】
【図13D】
【図13E】
【図14】
【図15】
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2023-04-26
【手続補正1】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0001】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７６号、２
０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７８号及び２０１７年４月
２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５８０号に対する優先権を主張するもので
あり、それらは全て、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
電子配列表への参照
本出願は、２０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７６号、２
０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７８号及び２０１７年４月
２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５８０号に対する優先権を主張するもので
あり、それらは全て、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
電子配列表への参照
【手続補正2】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0002】
電子配列表（750042000653seqlist.xml、サイズ：178,256 bytes、作成日：２０２３年４月１４日）の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【手続補正3】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
明細書に記載された一発明。
【外国語明細書】