2023-94856 ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛含有組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2023094856

(43)【公開日】2023-07-06

(54)【発明の名称】ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛含有組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/35 20060101AFI20230629BHJP

   A61Q 11/00 20060101ALI20230629BHJP

   A61K 8/365 20060101ALI20230629BHJP

   A61K 8/27 20060101ALI20230629BHJP

【ＦＩ】

A61K8/35

A61Q11/00

A61K8/365

A61K8/27

【審査請求】未請求

【請求項の数】5

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2021210411

(22)【出願日】2021-12-24

(71)【出願人】

【識別番号】000106324

【氏名又は名称】サンスター株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110000796

【氏名又は名称】弁理士法人三枝国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】浦川 李花

(72)【発明者】

【氏名】有田 卓矢

【テーマコード（参考）】

4C083

【Ｆターム（参考）】

4C083AC301

4C083AD551

4C083CC41

4C083EE33

(57)【要約】

【課題】好中球コラゲナーゼ活性を阻害する組成物の提供。
【解決手段】ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛を含有し、
ヒノキチオール１質量部に対する、グルコン酸亜鉛の含有量が、２～１５０質量部である、口腔用組成物。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛を含有し、
ヒノキチオール１質量部に対する、グルコン酸亜鉛の含有量が、２～１５０質量部である、口腔用組成物。

【請求項2】

歯周病進行予防のための、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

好中球コラゲナーゼ活性阻害、歯肉退縮抑制、歯周ポケット形成抑制、歯周ポケット深化抑制、歯周組織破壊抑制、歯ぐき下がり抑制、及び歯肉コラーゲン分解抑制からなる群より選択される少なくとも１種の用途に用いられるための、請求項１または２に記載の組成物。

【請求項4】

前記組成物中、ヒノキチオールの含有量が０．０００５質量％以上である、請求項１～３のいずれかに記載の組成物。

【請求項5】

前記組成物中、グルコン酸亜鉛の含有量が０．０１質量％以上である、請求項１～４のいずれかに記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛含有組成物、並びにその用途等に関する。

【背景技術】

【0002】

Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ（ＭＭＰ）は、活性部位に亜鉛（ＩＩ）イオンを保有する細胞外マトリックス分解酵素の総称である。その主たる基質は、コラーゲン、ラミニン、ゼラチン、フィブロネクチンなどの生体高分子である。

【0003】

ＭＭＰは、生体内における組織のリモデリングや創傷治癒の過程において、不要な細胞外マトリックスを分解し、血管新生や新たな組織の構築を制御することによって恒常性を維持する働きをすると考えられている。しかし、ＭＭＰの活性が亢進しすぎると組織破壊が進行し、歯周病、関節リウマチ、腫瘍浸潤やその転移現象等に関わるとされているため、その活性を制御できる成分の探索が行われている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特許第５３３９７０８号公報

【非特許文献】

【0005】

【非特許文献1】日歯周誌５９（４）：１８５－１９０，２０１７

【非特許文献2】Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌ．２０２１ Ａｕｇ；４８（８）：１０５１－１０６５．

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

ＭＭＰ－８は、好中球が産生するコラゲナーゼであることから、好中球コラゲナーゼとも称され、主にコラーゲン等の細胞外マトリックスを分解すること、歯肉溝浸出液中のＭＭＰの約８割を占めることが知られている。好中球が、歯周ポケットでの炎症に反応し歯肉溝浸出液中に集積し、好中球コラゲナーゼ（ＭＭＰ－８）を産生することで、歯周ポケット内の付着上皮が破壊され、歯周ポケットの深化が起こり、歯周病が進行すると考えられている（非特許文献１）。このため、歯周病の進行予防において、好中球コラゲナーゼの活性を制御できる成分の探索が望まれている（特許文献１）。

【0007】

本開示は、好中球コラゲナーゼ活性を阻害する組成物を提供することを課題とする。
また、歯周病の進行を予防するための組成物を提供することも課題の１つである。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明者らは、ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛を特定の比率で用いることによって、好中球コラゲナーゼに対して優れた阻害活性を示すことを見出し、さらに改良を重ねた。

【0009】

本開示は、例えば以下の項に記載の主題を包含する。
項１．
ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛を含有し、
ヒノキチオール１質量部に対する、グルコン酸亜鉛の含有量が、２～１５０質量部である、口腔用組成物。
項２．
歯周病進行予防のための、項１に記載の組成物。
項３．
好中球コラゲナーゼ活性阻害、歯肉退縮抑制、歯周ポケット形成抑制、歯周ポケット深化抑制、歯周組織破壊抑制、歯ぐき下がり抑制、及び歯肉コラーゲン分解抑制からなる群より選択される少なくとも１種の用途に用いられるための、項１又は２に記載の組成物。
項４．
前記組成物中、ヒノキチオールの含有量が０．０００５質量％以上である、項１～３のいずれかに記載の組成物。
項５．
前記組成物中、グルコン酸亜鉛の含有量が０．００１質量％以上である、項１～４のいずれかに記載の組成物。

【発明の効果】

【0010】

好中球コラゲナーゼ活性を阻害することができる。また、効果的な歯周病進行予防組成物を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛を添加した場合の好中球コラゲナーゼ活性の測定結果を示す。

【発明を実施するための形態】

【0012】

以下、本開示に包含される各実施形態について、さらに詳細に説明する。
本開示に包含される組成物は、ヒノキチオール及びグルコン酸亜鉛を含有する。本明細書において、当該組成物を「本開示の組成物」と表記することがある。

【0013】

ヒノキチオールは、以下の式：

【0014】

【化1】

【0015】

で表される化合物である。本開示の組成物に用いられるヒノキチオールは、合成品であってもよく、また天然物（例えばヒバ等）から抽出されたものであってもよい。

【0016】

本開示の組成物におけるヒノキチオール含有量は、効果が奏される範囲であれば、特に限定されない。例えば、本開示の組成物中、ヒノキチオールの含有量は、０．０００５質量％以上とすることができる。当該範囲の上限又は下限は、例えば、０．０００６、０．０００７、０．０００８、０．０００９、０．００１、０．００２、０．００３、０．００４、０．００５、０．００６、０．００７、０．００８、０．００９、０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、又は０．３質量％であってもよい。例えば、０．０００５～０．３質量％であってもよく、０．００１～０．３質量％であってもよい。

【0017】

本開示の組成物におけるグルコン酸亜鉛の含有量は、効果が奏される範囲であれば、特に限定されない。例えば、本開示の組成物中、グルコン酸亜鉛の含有量は、０．０１質量％以上とすることができる。当該範囲の上限又は下限は、例えば、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、又は０．５質量％であってもよい。例えば、０．０１～０．５質量％であってもよく、０．０５～０．３質量％であってもよい。

【0018】

本開示の組成物におけるヒノキチオール１質量部に対する、グルコン酸亜鉛の含有量は、２～１５０質量部であることが好ましい。当該範囲の上限又は下限は、例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、又は１２５質量部であってもよい。例えば、３～１２５質量部であってもよく、３～１００質量部であってもよい。

【0019】

好中球コラゲナーゼ（ＥＣ ３．４．２４．３４）とは、好中球が産生するコラゲナーゼであり、ＭＭＰ－８とも称される。

【0020】

好中球コラゲナーゼ活性阻害とは、好中球コラゲナーゼによる基質（例えば、Ｉ型コラーゲン、ＩＩ型コラーゲン、ＩＩＩ型コラーゲン等のコラーゲン等）の分解作用を阻害することを意味する。

【0021】

本開示の組成物は、好中球コラゲナーゼによる基質の分解を阻害することから、好中球コラゲナーゼによる組織（例えば、付着上皮、歯肉溝上皮、歯根膜等）の破壊、歯肉コラーゲン（歯肉を構成するコラーゲン線維）の分解等を抑制することができる。また、本開示の組成物は、好中球コラゲナーゼ活性阻害作用を有することから、既に産生された好中球コラゲナーゼの活性を阻害することができる。

【0022】

このため、本開示の組成物は、口腔用組成物として好適である。より具体的には、本開示の組成物は、例えば、歯周病の進行抑制、好中球コラゲナーゼ活性阻害、歯肉退縮抑制、歯周ポケット形成抑制、歯周ポケット深化抑制、歯周組織破壊抑制、歯ぐき下がり抑制、歯肉コラーゲン分解抑制、アタッチメントロス抑制、歯周組織コラーゲン保護、慢性炎症に伴う歯周組織の破壊抑制等の歯周病の進行予防のために用いる、及び／又は象牙質コラーゲンの保護等のために用いることができる。
本明細書において、「歯周ポケット形成抑制」とは、歯周ポケット（歯と歯茎（歯肉）の間にある溝）の形成を抑制することを意味する。本明細書において、「歯周ポケット深化抑制」とは、歯周ポケット（歯と歯茎（歯肉）の間にある溝）の深化を抑制することを意味する。本明細書において、「アタッチメントロス抑制」とは、歯肉の付着上皮が歯の表面から剥離し、歯肉と歯の付着位置が歯根側に移行していくことを抑制することを意味する。本明細書において、「歯肉退縮抑制」とは、歯肉全体が歯根側に移動することを抑制することを意味する。本明細書において、「歯ぐき下がり抑制」とは、歯肉全体の歯根側への移動に伴う歯根部の露出を抑制することを意味する。

【0023】

本開示組成物の適用対象としては、例えば、好中球コラゲナーゼ活性が亢進している対象が好ましい。より具体的には、例えば、歯周病の診断基準でステージ１、２、３、又は４に該当する人、あるいはグレードＣに該当する人等が挙げられる（非特許文献２）。歯周病の診断基準は、アメリカ歯周病学会とヨーロッパ歯周病学連盟共催ワークショップにて作成された診断基準で、日本歯周病学会のウェブサイト（https://www.perio.jp/file/news/info_191220.pdf）で確認できる。歯周病の診断基準でステージ１に該当する人としては、例えば、歯間部の最も大きなクリニカルアタッチメントレベル（セメントエナメル境から歯肉溝上皮までの距離（１ｍｍ単位で測定））が、１～２ｍｍ程度の人等が挙げられる。歯周病の診断基準でステージ２に該当する人としては、例えば、歯間部の最も大きなクリニカルアタッチメントレベルが、３～４ｍｍ程度の人等が挙げられる。歯周病の診断基準でステージ３又は４に該当する人としては、例えば、歯間部の最も大きなクリニカルアタッチメントレベルが、５ｍｍ以上の人等が挙げられる。中でも、歯周病の診断基準でステージ３に該当する人としては、例えば、歯周病を起因とする歯の喪失を１～４本経験している人等が挙げられる。また、歯周病の診断基準でステージ４に該当する人としては、例えば、歯周病を起因とする歯の喪失を５本以上経験している人等が挙げられる。歯周病の診断基準でグレードＣに該当する人としては、例えば、クリニカルアタッチメントレベルの経年変化が、５年で２ｍｍ以上の人等が挙げられる。
また、本開示組成物の適用対象としては、ヒトを含む哺乳動物（例えばイヌ、ネコ、マウス、ラット、ヒツジ、ウマ、ウシ、サル等）等が例示される。中でもヒトが好ましい。

【0024】

本開示の組成物は、例えば、固形組成物、液体組成物等で有り得る。また、本開示の組成物は、本開示の組成物（特に口腔用組成物）は、常法に従って例えば軟膏剤、ペースト剤、パスタ剤、ジェル剤、液剤、スプレー剤、洗口液剤、液体歯磨剤、練歯磨剤、ガム剤、タブレット、ドロップ等の形態（剤形）にすることができる。なかでも、洗口液剤、液体歯磨剤、練歯磨剤、軟膏剤、ペースト剤、液剤、ジェル剤であることが好ましい。

【0025】

本開示の組成物には、効果を損なわない範囲で、例えば口腔用組成物に配合し得る任意成分を単独で又は２種以上さらに含有してもよい。

【0026】

例えば、界面活性剤として、ノニオン界面活性剤、アニオン界面活性剤または両性界面活性剤を配合することができる。具体的には、例えば、ノニオン界面活性剤としてはショ糖脂肪酸エステル、マルトース脂肪酸エステル、ラクトース脂肪酸エステル等の糖脂肪酸エステル；脂肪酸アルカノールアミド類；グリセリン脂肪酸エステル；ソルビタン脂肪酸エステル；脂肪酸モノグリセライド；ポリオキシエチレン付加係数が８～１０、アルキル基の炭素数が１３～１５であるポリオキシエチレンアルキルエーテル；ポリオキシエチレン付加係数が１０～１８、アルキル基の炭素数が９であるポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル；セバシン酸ジエチル；ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油；脂肪酸ポリオキシエチレンソルビタン等が挙げられる。アニオン界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム等の硫酸エステル塩；ラウリルスルホコハク酸ナトリウム、ポリオキシエチレンラウリルエーテルスルホコハク酸ナトリウム等のスルホコハク酸塩；ココイルサルコシンナトリウム、ラウロイルメチルアラニンナトリウム等のアシルアミノ酸塩；ココイルメチルタウリンナトリウム等が挙げられる。両性イオン界面活性剤としては、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン、ヤシ油脂肪酸アミドプロピルジメチルアミノ酢酸ベタイン等の酢酸ベタイン型活性剤；Ｎ－ココイル－Ｎ－カルボキシメチル－Ｎ－ヒドロキシエチルエチレンジアミンナトリウム等のイミダゾリン型活性剤等が挙げられる。これらの界面活性剤は、単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。その配合量は、通常、組成物全量に対して０．１～５質量％である。

【0027】

また、香味剤として、例えば、メントール、カルボン、アネトール、オイゲノール、サリチル酸メチル、リモネン、オシメン、ｎ－デシルアルコール、シトロネロール、α－テルピネオール、メチルアセタート、シトロネニルアセテート、メチルオイゲノール、シネオール、リナロール、エチルリナロール、チモール、スペアミント油、ペパーミント油、レモン油、オレンジ油、セージ油、ローズマリー油、珪皮油、シソ油、冬緑油、丁子油、ユーカリ油、ピメント油、ｄ－カンフル、ｄ－ボルネオール、ウイキョウ油、ケイヒ油、シンナムアルデヒド、ハッカ油、バニリン等の香料を用いることができる。これらは、単独または２種以上を組み合わせて組成物全量に対して例えば０．００１～１．５質量％配合することができる。

【0028】

また、甘味剤として、例えば、サッカリンナトリウム、アセスルファームカリウム、ステビオサイド、ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、ペリラルチン、タウマチン、アスパラチルフェニルアラニルメチルエステル、ｐ－メトキシシンナミックアルデヒド等を用いることができる。これらは、組成物全量に対して例えば０．０１～１質量％配合することができる。

【0029】

さらに、湿潤剤として、ソルビット、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、１，３―ブチレングリコール、ポリプロピレングリコール、キシリット、マルチット、ラクチット、ポリオキシエチレングリコール等を単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。

【0030】

粘結剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルエチルセルロース塩、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、結晶セルロース、結晶セルロース・カルメロースナトリウムなどのセルロース誘導体、キサンタンガムなどの微生物産生高分子、トラガントガム、カラヤガム、アラビヤガム、カラギーナン、デキストリン、寒天、ペクチン、プルラン、ジェランガム、ローカストビーンガム、アルギン酸ナトリウムなどの天然高分子または天然ゴム類、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルメチルエーテル、ポリアクリル酸ナトリウムなどの合成高分子、増粘性シリカ、ビーガムなどの無機粘結剤、塩化Ｏ－［２－ヒドロキシ－３－（トリメチルアンモニオ）プロピル］ヒドロキシエチルセルロースなどのカチオン性粘結剤が挙げられる。これら粘結剤は、単独であるいは２種以上を組み合わせて使用することができる。

【0031】

防腐剤として、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン等のパラベン類、安息香酸ナトリウム、フェノキシエタノール、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン等を配合することができる。

【0032】

着色剤として、青色１号、黄色４号、赤色２０２号、緑３号等の法定色素、群青、強化群青、紺青等の鉱物系色素、酸化チタン等を配合してもよい。

【0033】

ｐＨ調整剤として、クエン酸、リン酸、リンゴ酸、ピロリン酸、乳酸、酒石酸、グリセロリン酸、酢酸、硝酸、またはこれらの化学的に可能な塩や水酸化ナトリウム等を配合してもよい。これらは、組成物のｐＨが４～８、好ましくは５～７の範囲となるよう、単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。ｐＨ調整剤の配合量は例えば０．０１～２重量％であってよい。

【0034】

なお、本開示の口腔用組成物には、さらに、薬効成分として酢酸ｄｌ－α－トコフェロール、コハク酸トコフェロール、またはニコチン酸トコフェロール等のビタミンＥ類、ドデシルジアミノエチルグリシン等の両性殺菌剤、トリクロサン、イソプロピルメチルフェノール等の非イオン性殺菌剤、ラウロイルサルコシンナトリウム等のアニオン系殺菌剤、塩化セチルピリジニウム、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム等のカチオン系殺菌剤、デキストラナーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、ムタナーゼ、リゾチーム、溶菌酵素（リテックエンザイム）等の酵素、モノフルオロリン酸ナトリウム、モノフルオロリン酸カリウム等のアルカリ金属モノフルオロフォスフェート、フッ化ナトリウム、フッ化第一錫等のフッ化物、トラネキサム酸やイプシロンアミノカプロン酸、アルミニウムクロルヒドロキシルアラントイン、ジヒドロコレステロール、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸、銅クロロフィリンナトリウム、グリセロフォスフェート、クロロフィル、塩化ナトリウム、カロペプタイド、アラントイン、カルバゾクロム、硝酸カリウム、パラチニット等を、単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。

【0035】

また、基剤として、アルコール類、シリコン、アパタイト、白色ワセリン、パラフィン、流動パラフィン、マイクロクリスタリンワックス、スクワラン、プラスチベース等を添加することも可能である。

【0036】

なお、本明細書において「含む」とは、「本質的にからなる」と、「からなる」をも包含する（The term "comprising" includes "consisting essentially of” and "consisting of."）。また、本開示は、本明細書に説明した構成要件の任意の組み合わせを全て包含する。

【0037】

また、上述した本開示の各実施形態について説明した各種特性（性質、構造、機能等）は、本開示に包含される主題を特定するにあたり、どのように組み合わせられてもよい。すなわち、本開示には、本明細書に記載される組み合わせ可能な各特性のあらゆる組み合わせからなる主題が全て包含される。

【実施例0038】

本開示の内容を以下の実験例を用いて具体的に説明する。しかし、本開示はこれらに何ら限定されるものではない。下記において、特に言及する場合を除いて、実験は大気圧及び常温条件下で行っている。また特に言及する場合を除いて、「％」は「（重量／容積）％」を意味する。

【0039】

好中球コラゲナーゼ活性阻害
１．ヒノキチオール、グルコン酸亜鉛を溶媒（キット付属のバッファー＋５％ＤＭＳＯ）で目的の添加濃度の２倍の濃度となるよう溶解した。各濃度のヒノキチオールとグルコン酸亜鉛を等量ずつ混和し、目的の濃度の混合溶液を作製した。
２．好中球コラゲナーゼ活性は、ＭＭＰ－８ ｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃｄｒｕｇ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｋｉｔ（Ｅｎｚｏ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．，ＢＭＬ－ＡＫ４１５－０００１）を用いて評価を実施した。すなわち、上記１で調製した各素材溶液２０μｌ、２００倍に希釈したＭＭＰ－８ ２０μｌ、キット添付のバッファー５０μｌを混和し、３７℃で６０分間反応させた。このとき、陽性コントロールとして素材を添加せずバッファーを等量加えたサンプル、また基質のみのバックグラウンドの測定のためにＭＭＰ－８を添加せずバッファーを等量加えたサンプルを用意した。
３．蛍光基質（ＢＭＬ－Ｐ１２６－９０９０）を溶かし、バッファーを用いて１０倍希釈した（濃度４０μＭ）。希釈した蛍光基質１０μｌを添加し、３７℃で２０分反応させた後に、励起光：３２８ｎｍ、放出光：４２０ｎｍの蛍光強度を測定した。陽性コントロールサンプルの蛍光強度から基質のみの蛍光強度をバックグラウンドとして引いた値（ＮＣ）を１００％として、各素材溶液添加サンプルの蛍光強度から基質のみの蛍光強度をバックグラウンドとして引いた値の比率を酵素活性として算出した。

【0040】

ヒノキチオールとグルコン酸亜鉛とを併用したことによる効果を評価するため、下記式に従い、ＣＩ（Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ Ｉｎｄｅｘ）値を算出した（TING-CHAO CHOU, et al. Trends Pharmacol Sci. 1983;4:450-454、C Patrick Reynolds, et al. Methods Mol Med. 2005;110:173-83.）。
ＣＩ＝（Ｄ）１／（Ｄｘ）１＋（Ｄ）２／（Ｄｘ）２
（Ｄ）１：ヒノキチオール添加濃度
（Ｄ）２：グルコン酸亜鉛添加濃度
（Ｄｘ）１：ヒノキチオール単独で好中球コラゲナーゼ活性を５０％阻害する濃度（ＩＣ５０値）
（Ｄｘ）２：グルコン酸亜鉛単独で好中球コラゲナーゼ活性を５０％阻害する濃度（ＩＣ５０値）
ＣＩ＜１の場合には、相乗効果あり、ＣＩ＝１の場合には、相加効果あり、ＣＩ＞１の場合には、拮抗作用ありと判断した。結果を表１に示す。なお、表１中の濃度は、上記１の調整時の各素材の濃度を示しており、上記３の反応系での濃度より５倍高い濃度になる。これは、歯磨剤等の口腔用組成物を使用した場合、唾液等によって希釈されることから、実際に口腔内に使用された状態を想定して評価するためである。

【0041】

【表1】

【0042】

表１に示すとおり、グルコン酸亜鉛：ヒノキチオールが１００：１～３．１２５：１の場合、好中球コラゲナーゼに対する阻害活性について相乗効果が得られることが確認された。なお、相乗効果が確認された組合せ（１００：１、５０：１、２５：１、１２．５：１、６．２５：１、３．１２５：１）において、好中球コラゲナーゼ活性は、それぞれ、４５、４２、４１、４４、３９、４９％程度に低下することが確認された。一部の結果を図１に示す。なお、図１中の濃度は、上記１の調整時の各素材の濃度を示す。

【図1】