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特開2024-102268乾燥粉末吸入製剤、および肺の治療的処置のためのその使用

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024102268

(43)【公開日】2024-07-30

(54)【発明の名称】乾燥粉末吸入製剤、および肺の治療的処置のためのその使用

(51)【国際特許分類】

A61K 9/72 20060101AFI20240723BHJP

A61K 45/00 20060101ALI20240723BHJP

A61K 9/14 20060101ALI20240723BHJP

A61K 31/282 20060101ALI20240723BHJP

A61K 31/337 20060101ALI20240723BHJP

A61K 31/4748 20060101ALI20240723BHJP

A61K 31/519 20060101ALI20240723BHJP

A61K 31/7048 20060101ALI20240723BHJP

A61K 33/24 20190101ALI20240723BHJP

A61K 47/10 20170101ALI20240723BHJP

A61K 47/14 20170101ALI20240723BHJP

A61K 47/36 20060101ALI20240723BHJP

A61P 11/00 20060101ALI20240723BHJP

A61P 35/00 20060101ALI20240723BHJP

【ＦＩ】

A61K9/72

A61K45/00

A61K9/14

A61K31/282

A61K31/337

A61K31/4748

A61K31/519

A61K31/7048

A61K33/24

A61K47/10

A61K47/14

A61K47/36

A61P11/00

A61P35/00

【審査請求】有

【請求項の数】10

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2024076338

(22)【出願日】2024-05-09

(62)【分割の表示】P 2021538005の分割

【原出願日】2019-12-27

(31)【優先権主張番号】18248302.4

(32)【優先日】2018-12-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(71)【出願人】

【識別番号】514084347

【氏名又は名称】ユニベルシテリブレデブリュッセル

(74)【代理人】

【識別番号】110000338

【氏名又は名称】弁理士法人ＨＡＲＡＫＥＮＺＯＷＯＲＬＤＰＡＴＥＮＴ＆ＴＲＡＤＥＭＡＲＫ

(72)【発明者】

【氏名】アミーギ，カリム

(72)【発明者】

【氏名】ウォートズ，ナタリー

(72)【発明者】

【氏名】ロジエール，レミ

(57)【要約】（修正有）

【課題】乾燥粉末吸入製剤、および肺の治療的処置のためのその使用法を提供する。
【解決手段】乾燥粉末吸入製剤であって、少なくとも１つの活性医薬成分（ＡＰＩ）と、モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つのトリグリセリドを含む脂質マトリックスと、を含み、前記脂質マトリックスは、硬化ヒマシ油であり、前記少なくとも１つのＡＰＩと硬化ヒマシ油との間の比率は、１０／９０～８８／１２である、乾燥粉末吸入製剤とする。
【選択図】図２

【特許請求の範囲】

【請求項1】

乾燥粉末吸入製剤であって、
少なくとも１つの活性医薬成分（ＡＰＩ）と、
モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つのトリグリセリドを含む脂質マトリックスと、を含み、前記脂質マトリックスは、硬化ヒマシ油であり、
前記少なくとも１つのＡＰＩと硬化ヒマシ油との間の比率は、１０／９０～８８／１２である、乾燥粉末吸入製剤。

【請求項2】

前記少なくとも１つのＡＰＩと前記少なくとも１つのトリグリセリドとの間の重量比率：ＡＰＩ／硬化ヒマシ油は、前記乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、２５／７５～７５／２５である、請求項１に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【請求項3】

少なくとも１つのＡＰＩと硬化ヒマシ油との間の重量比率は、前記乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、４０／６０～６０／４０である、請求項１に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【請求項4】

ＰＥＧ化賦形剤または多糖類からなる群から選択される長期肺滞留賦形剤をさらに含む、請求項１に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【請求項5】

前記長期肺滞留賦形剤は、ＰＥＧ化賦形剤であり、前記乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、０．１ｗｔ％～２０ｗｔ％の量で存在する、請求項４に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【請求項6】

物理化学的特性および／または空気力学的特性を改善する賦形剤を、前記乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、０．１ｗｔ％～８０ｗｔ％の量でさらに含み、前記賦形剤は、糖アルコール；ポリオール；結晶性糖類；無機塩；有機塩；オリゴ糖類；二酸化チタン；二酸化シリコーン；ステアリン酸マグネシウム；レシチン；アミノ酸；アセスルファムＫまたはアスパルテームであるアミノ酸の誘導体；ラウリン酸またはそのエステルおよび塩；パルミチン酸またはそのエステルおよび塩；ステアリン酸またはそのエステルおよび塩；エルカ酸またはそのエステルおよび塩；ベヘン酸またはそのエステルおよび塩；ステアリルフマル酸ナトリウム；ステアリル乳酸ナトリウム；ホスファチジルコリン；ホスファチジルグリセロール；天然および合成の肺表面活性剤；トリグリセリド；糖エステル；リン脂質；コレステロール；タルクからなる群から選択される、請求項１に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【請求項7】

前記ＡＰＩは、ブデソニド、サルブタモール、フルチカゾン、ベクロメタゾン、モメタゾン、シクレソニド、ホルモテロール、サルブタモール、アルホルモテロール、インダカテロール、オロダテロール、サルメテロール、イプラトロピウム、アクリジニウム、グリコピロニウム、チオトロピウム、ウンメクリジニウム（unmeclidinium）、モメタゾン、シクレソニド、ホルモテロール、アルホルモテロール、イブプロフェン、トブラマイシン、バンコマイシン、テトラヒドロリプスタチン、クラリスロマイシン、イソニアジド、リファンピン、ピラジナミド、イトラコナゾール、ボリコナゾール、アズトレオナム、エタンブトール、ストレプトマイシン、カナマイシン、アミカシン、コリスチン、コリスチメタソディアム、カプレオマイシン、シプロフロキサシン、リファペンチン、ドキシサイクリン、サイクロセリンＥ、エチオナミド、ガチフロキサシン、レボフロキサシン、モキシフロキサシン、オフロキサシン、ホスホマイシン、ｐ－アミノサリチル酸、デヌホソル四ナトリウム、ランコブチド、リバビリン、ザナミビル、ラミナビル（laminavir）、ルピントリビル、ペンタミジン、アンホテリシンＢ、ポサコナゾール、イサブコナゾール、カプスフンギン（capsufungin）、ミカファンギン、アニデュラファンギン、イロプロスト、レボチロキシン、それらの塩、溶媒和物、水和物、およびそれらのエステル、ならびにそれらの組合せからなる群から選択される、全身治療または局所治療のために肺に吸着する任意の活性医薬成分のような、気管支拡張活性、グルココルチコイド、抗炎症活性、または抗感染症活性を有する小化学分子であるか、前記ＡＰＩは、ペプチド、タンパク質、抗体、抗体断片、ナノボディ、核酸からなる群から選択される巨大分子であり、前記ＡＰＩは、インスリン、プロインスリン、合成インスリン、半合成インスリン、ベバシズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブ、トル様受容体アゴニスト、グレリン、ＩｇＧモノクローナル抗体、低分子干渉リボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、ドルナーゼアルファ、シクロスポリンＡ、アルファ－１アンチトリプシン、インターロイキンアンタゴニスト、インターフェロン－α、インターフェロン－β、インターフェロン－γ、インターフェロン－ω、インターロイキン－２、抗ＩｇＥｍＡｂ、カタラーゼ、カルシトニン、パラチロイドホルモン、ヒト成長ホルモン、インスリン様増殖因子－Ｉ、ヘパリン、ｒｈＧ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、Ｅｐｏ－Ｆｃ、ＦＳＨ－Ｆｃ、ｓＦｃ－γ ＲＩＩｂ、ｍＲＮＡからなる群から選択されるか、前記ＡＰＩは、抗腫瘍剤である、請求項１に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【請求項8】

前記ＡＰＩは、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、ペメトレキセド、エトポシド、ビノレルビンからなる群から選択される抗腫瘍剤である、請求項７に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【請求項9】

前記ＡＰＩは、シスプラチンであり、前記少なくとも１つのＡＰＩと硬化ヒマシ油との間の比率は、４０／６０～６０／４０である、請求項８に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【請求項10】

二糖類である賦形剤を含む、請求項９に記載の乾燥粉末吸入製剤。

【発明の詳細な説明】

【0001】

本発明は、乾燥粉末吸入製剤、および肺の治療的処置のためのその使用に関する。

【0002】

乾燥粉末吸入（ＤＰＩ）療法は現在、例えば喘息の処置などの多くの処置を肺に送達するために主に使用されており、肺における活性医薬成分（ＡＰＩ）の滞留を延長するために、乾燥粉末吸入製剤を最適化する多くの努力がなされてきた。

【0003】

吸入は、生体内に事前に分布することなく、肺に対して直接高用量の薬物を投与することを可能にする。これは、一方では、より少量の活性医薬成分（ＡＰＩ）が使用され、生体内において消費される見込みがあるようにするだけでなく、ＡＰＩの毒性が懸念される場合には、直接的なインサイチュ投与が毒性を低下させることを可能にする。

【0004】

さらに、肺は膨大な吸収表面を特徴とするので、吸入は体循環にＡＰＩを送達するための有望な投与経路である。

【0005】

しかしながら、従来の即時放出乾燥粉末吸入（ＤＰＩ）製剤は、それにもかかわらず、肺内での短すぎる滞留につながる可能性がある。これは、外因性の吸入粒子に対するクリアランスの複数のメカニズム（すなわち、粘液繊毛およびマクロファージのクリアランス）、および体循環への迅速な吸収につながる薬剤粒子の速い溶解のためである。したがって、この短い滞留は、患者の服薬率不良につながる複数回投与を必要とする。即時のＡＰＩ放出はまた、薬剤粒子の速い溶解および肺沈着後の肺液中のＡＰＩの高いピーク濃度のために、局所耐性不良の原因でもあり得る。

【0006】

肺におけるＡＰＩの持続可能な滞留プロファイルのために、肺における滞留を延長する特異な賦形剤が同定されている。

【0007】

したがって、肺治療の有効性を増大させるために、さらなる乾燥粉末吸入製剤を開発する必要がある。

【0008】

その文脈で、例えば、高い薬物担持および高い微粒子画分を備えた制御放出シスプラチンベースのＤＰＩ製剤が開発された（Levet et al, Int J Pharm 2016）。当該製剤は、低い全身分布につながる制御放出および長期肺滞留能力を示した（Levet et al, Int J Pharm 2017）。

【0009】

この目的のために、Ｌｅｖｅｔらは、１つの抗腫瘍剤（すなわちシスプラチン）用の、肺上皮防御メカニズムによる速すぎる排除を回避するためにＰＥＧ化賦形剤を含む特異な製剤に取り組んでいる。Ｌｅｖｅｔらはまた、ポリマーおよび脂質マトリックスなどの異なる担体を比較して、肺における長い滞留時間を可能にし、それによって吸入の効率を増加させている。

【0010】

中でも、Ｌｅｖｅｔらの研究に記載された脂質マトリックスは、脂質マトリックスを提供するための有望な候補として同定されたトリステアリンを含む。

【0011】

さらに、マトリックスを形成するための脂質由来賦形剤でさえも、ポリマーよりも好ましいが、毒性の理由から、治療的処置の他の経路と比較して、吸入のための薬学的組成物について許容され、認可されるのは、脂質マトリックスを形成することができるほんの少しの物質のみである（Pilcer et Amighi, Int J Pharm 2010）。

【0012】

残念ながら、トリステアリンは有望な候補として同定されたが、その市場での入手可能性は医薬化合物としてはかなり限られている。

【0013】

本発明は、例えば単剤療法または多剤療法で使用されるための、少なくとも１つの活性医薬成分（ＡＰＩ）と、モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つのトリグリセリドを含む脂質マトリックスと、を含む乾燥粉末吸入製剤を提供することによって、これらの障害の少なくとも一部を解決することに直面する。

【0014】

驚くべきことに、医薬グレードが存在するモノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物を含む群から選択される前記少なくとも１つのトリグリセリドは、ＡＰＩ（活性医薬成分）と共に脂質マトリックスを形成することができ、肺における肺沈着速度の増加を示すことが同定された。後者は、肺吸入のために使用することができる。

【0015】

実際に、モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物は、以下のような物理化学的特性を有する化合物である：振盪フラスコ法を使用して測定すると、５より高い、好ましくは１４～２５、より特には１８～２５、好ましくは約２０のＬｏｇＰ値を有する；および／または、４０℃以上、好ましくは６０℃以上、より好ましくは７５℃以上の融点温度を有する。

【0016】

これにより、乾燥粉末吸入器での適切な使用のために、油相でも粘着性ペーストでもない、乾燥粉末の形態で吸入製剤を製造することができる。

【0017】

さらに、本発明によれば、ＡＰＩの量と、モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物を含む群から選択される少なくとも１つのトリグリセリドの量との間の比率を変化させることによって、トリステアリンなどの他の従来のトリグリセリドに対してＡＰＩの肺沈着速度を増加させ、ＡＰＩの溶解プロファイルを調節することが可能になることが、すべての予想に対して同定された。これは、従来のトリグリセリドの場合にはなかった。

【0018】

好ましくは、本発明に係る乾燥粉末吸入製剤は、前記少なくとも１つのＡＰＩと前記少なくとも１つのトリグリセリドとの間の重量比率：ＡＰＩ／トリグリセリドが、０．１／９９．９～９９．９／０．１であり、好ましくは１０／９０～８８／１２であり、好ましくは１５／８５～８５／１５であり、好ましくは２５／７５～７５／２５であり、より好ましくは３０／７０～７０／３０であり、特には４０／６０～６０／４０であり、例えば約５０／５０である。

【0019】

有利には、本発明に係る製剤において、前記少なくとも１つのトリグリセリドは、硬化ヒマシ油である。

【0020】

ヒマシ油は、文献において、一般的な賦形剤（米国特許出願公開第２００５／００４２１７８号を参照のこと）、または粉砕助剤（国際公開第２０１３／１２８２８３号）の長いリストに記載されている。

【0021】

本発明に係る好ましい一実施形態において、乾燥粉末吸入製剤は、前記少なくとも１つのＡＰＩを、乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、０．１ｗｔ％～９８ｗｔ％含む。本発明に係る第１の特定の実施形態において、前記活性剤は、少なくとも０．１ｗ％／ｖ、または少なくとも０．５ｗ％／ｖ、より好ましくは少なくとも１ｗ％／ｖ、より特には少なくとも５ｗ％／ｖの、アルコール中での溶解度を有する小化学分子である。この第１の特定の実施形態によれば、前記小化学分子は、０．１％ｗ／ｖ以上のアルコール中での溶解度を有し、本発明においてアルコール可溶性ＡＰＩとして定義される、任意の活性医薬成分（ＡＰＩ）である。このような任意の活性医薬成分（ＡＰＩ）は、例えば、ブデソニド、パクリタキセル、ペメトレキセド、イトラコナゾール、ボリコナゾール、クラリスロマイシン、サルブタモール、サルブタモール硫酸塩、フルチカゾン、ベクロメタゾン、モメタゾン、フロ酸モメタゾン、シクレソニド、ホルモテロール、アルホルモテロール、インダカテロール、インダカテロールマレイン酸塩、オロダテロール、オロダテロール塩酸塩、サルメテロール、イプラトロピウム臭化物、グリコピロニウム臭化物、チオトロピウム臭化物、ウメクリジニウム臭化物、イブプロフェン、バンコマイシン、バンコマイシン塩酸塩、テトラヒドロリプスタチン、イソニアジド、リファンピシン、ピラジナミド、ドセタキセル、ビンクリスチン、ビンクリスチン硫酸塩、エトポシド、ビノレルビン、ゲムシタビンなどである。

【0022】

より具体的には、第１の特定の実施形態に係る乾燥粉末吸入製剤は、前記少なくとも１つのＡＰＩを、乾燥粉末吸入製剤の重量に対して、０，１ｗｔ％～９５ｗｔ％、好ましくは１ｗｔ％～９０ｗｔ％、より好ましくは１ｗｔ％～８５ｗｔ％含む。

【0023】

本発明に係る好ましい一実施形態において、乾燥粉末吸入製剤は、前記アルコール可溶性ＡＰＩが溶解または微細に分散した脂質マトリックス粒子に存在する。

【0024】

本発明に係る第２の特定の実施形態において、前記活性剤は、０，５ｗ％／ｖ未満のアルコール中での溶解度を有する小化学分子である。この第２の特定の実施形態において、前記小化学分子は、０．５％ｗ／ｖ未満、特には０．１％ｗ／ｖ未満、より特には０．０１％ｗ／ｖ未満のアルコール中での溶解度を有し、アルコール不溶性ＡＰＩとして定義される、任意のＡＰＩである。このような任意のＡＰＩは、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ペメトレキセド二ナトリウム、アザシチジン、ベクロメタゾンジプロピオネート、トブラマイシン、アクリジニウム臭化物などである。

【0025】

より具体的には、第２の特定の実施形態に係る乾燥粉末吸入製剤は、前記少なくとも１つのＡＰＩを、乾燥粉末吸入製剤の重量に対して、０，１ｗｔ％～９５ｗｔ％、好ましくは１ｗｔ％～９０ｗｔ％、より好ましくは１ｗｔ％～８５ｗｔ％含む。

【0026】

したがって、乾燥粉末吸入製剤は、前記アルコール不溶性ＡＰＩを、前記乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、０．１ｗｔ％～９５ｗｔ％、好ましくは１ｗｔ％～９０ｗｔ％、より好ましくは１ｗｔ％～８５ｗｔ％、例えば１ｗｔ％～６０ｗｔ％、または１～５０ｗｔ％含む。

【0027】

本発明に係る好ましい一実施形態において、乾燥粉末吸入製剤は、前記アルコール不溶性ＡＰＩが分散した脂質マトリックス粒子に存在する。

【0028】

本発明に係る第３の特定の実施形態において、前記活性剤は、巨大分子である。本発明に係るこの第３の特定の実施形態において、乾燥粉末吸入製剤は、前記少なくとも１つのＡＰＩを、乾燥粉末吸入製剤の重量に対して、０，１ｗｔ％～９５ｗｔ％、好ましくは１ｗｔ％～９０ｗｔ％、より好ましくは１ｗｔ％～８５ｗｔ％含む。

【0029】

したがって、乾燥粉末吸入製剤は、前記巨大分子を、前記乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、０．１ｗｔ％～９５ｗｔ％、好ましくは１ｗｔ％～９０ｗｔ％、より好ましくは１ｗｔ％～８５ｗｔ％、例えば１ｗｔ％～６０ｗｔ％、または１～５０ｗｔ％含む。

【0030】

さらに別の好ましい実施形態において、本発明に係る製剤は、ＰＥＧ化賦形剤などの長期肺滞留賦形剤、または、キトサンもしくはデキストランなどの多糖類をさらに含む。

【0031】

好ましくは、本発明によれば、前記長期肺滞留賦形剤は、ＰＥＧ化賦形剤であり、前記乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、０．１ｗｔ％～２０ｗｔ％、好ましくは０．２～１０ｗｔ％、より好ましくは０．５～５ｗｔ％の量で存在する。

【0032】

より具体的には、本発明によれば、前記ＰＥＧ化賦形剤は、ビタミンＥ由来、または、トコフェリルポリエチレングリコールスクシネート（ＴＰＧＳ）もしくはジステアロイルホスホエタノールアミンポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ－ｍＰＥＧ－２０００）などのリン脂質由来である。

【0033】

さらに別の好ましい実施形態において、本発明に係る製剤は、吸入のために、乾燥粉末の物理化学的特性および／または空気力学的特性を改善する賦形剤などの、１つ以上の賦形剤をさらに含む。

【0034】

用語「１つ以上の賦形剤」は、以下から選択される化合物を意味する：糖アルコール；ポリオール（ソルビトール、マンニトール、およびキシリトールなど）；単糖類（グルコース、アラビノースなど）、および二糖類（ラクトース、マルトース、スクロース、デキストロース、トレハロース、マルチトールなど）を含む結晶性糖類；無機塩（塩化ナトリウム、および炭酸カルシウムなど）；有機塩（乳酸ナトリウム、リン酸カリウムまたはリン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、尿素など）；多糖類（デキストラン、キトサン、デンプン、セルロース、ヒアルロン酸、およびそれらの誘導体など）；オリゴ糖類（シクロデキストリン、およびデキストリンなど）；二酸化チタン；二酸化シリコーン；ステアリン酸マグネシウム；レシチン；アミノ酸（ロイシン、イソロイシン、ヒスチジン、スレオニン、リジン、バリン、メチオニン、フェニルアラニンなど）；アミノ酸の誘導体（アセスルファムＫ、アスパルテームなど）；ラウリン酸または誘導体（エステルおよび塩など）；パルミチン酸または誘導体（エステルおよび塩など）；ステアリン酸または誘導体（エステルおよび塩など）；エルカ酸または誘導体（エステルおよび塩など）；ベヘン酸または誘導体（エステルおよび塩など）；ステアリルフマル酸ナトリウム；ステアリル乳酸ナトリウム；ホスファチジルコリン；ホスファチジルグリセロール；天然および合成の肺表面活性剤；ラウリン酸およびその塩（ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウムなど）；トリグリセリド；糖エステル；リン脂質；コレステロール；タルク。

【0035】

特定の好ましい実施形態において、賦形剤は、マンニトール、デキストラン、またはラクトースである。

【0036】

特定の好ましい実施形態において、賦形剤は、リン脂質、またはコレステロールである。

【0037】

特定の好ましい実施形態において、賦形剤は、マンニトール、デキストラン、ヒアルロン酸、ラクトース、リン脂質、またはコレステロールである。

【0038】

特定の好ましい実施形態において、賦形剤は、マンニトール、デキストラン、リン脂質、またはコレステロールである。

【0039】

特定の実施形態において、前記少なくとも１つの賦形剤は、担体である。

【0040】

本発明に係る製剤の好ましい一実施形態において、前記製剤は、３０μｍ以下、好ましくは１５μｍ以下、好ましくは１０μｍ以下、好ましくは５μｍ以下の幾何学的粒径分布（ＰＳＤ）ｄ_５０を有する微粒子の形態である。

【0041】

本発明に係る製剤のさらに好ましい実施形態において、前記製剤は、６０μｍ以下、好ましくは３０μｍ以下、より好ましくは１５μｍ以下、好ましくは１０μｍ以下、より好ましくは７μｍ以下の幾何学的粒径分布（ＰＳＤ）ｄ_９０を有する微粒子の形態である。

【0042】

本発明に係る製剤のまたさらに好ましい実施形態において、前記製剤は、４０μｍ以下、好ましくは２０μｍ以下、より好ましくは１５μｍ以下、好ましくは１０μｍ以下、好ましくは６μｍ以下の体積平均径Ｄ［４，３］を有する粒子の形態である。

【0043】

好ましくは、本発明によれば、前記改善賦形剤および／または前記賦形剤は、前記乾燥粉末吸入製剤の総重量に対して、０．１％ｗ／ｗ～８０ｗｔ％、好ましくは７０ｗｔ％未満、より好ましくは６０ｗｔ％未満、特には５０ｗｔ％未満、例えば５０ｗｔ％未満の量で存在する。

【0044】

用語「微粒子用量」または「ＦＰＤ」は一般に、名目用量の質量（すなわち、吸入デバイスに装填された用量の質量）に対して、５μｍ未満の空気力学的径を有する粒子の質量を指す。

【0045】

微粒子用量または微粒子画分は、深く吸入することができ、理論的に薬理活性に利用可能である医薬製剤の画分を表す（Dunbar et al, Kona 16: 7-45, 1998）。

【0046】

本発明に係る有利な実施形態において、製剤は、６μｍ以下、好ましくは５μｍ以下、好ましくは４μｍ以下の空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有する微粒子の形態である。

【0047】

ＭＭＡＤは、５０％（ｗ／ｗ）の粒子がこれより低い直径を有し、５０％（ｗ／ｗ）がこれより高い直径を有する、インパクター中に沈着した粒子の直径を指す。

【0048】

粒子の「空気力学的径」または「ｄａｅ」という用語は、考慮される粒子と同じ静止空気中での沈降速度を有する、単位密度（すなわち、密度１）の球の直径として定義することができる。「ｄａｅ」は、吸入可能な粒子の有用な測定を提供し、それらの空気力学的特性に影響を及ぼす因子を考慮する。「ｄａｅ」は、異なる物理的サイズの粒子を比較するために使用することができ、それらの密度および形状、ならびにそれらの幾何学的サイズを考慮する。

【0049】

「ｄａｅ」を測定するための方法は、欧州または米国薬局方に記載されている方法であり、ガラスインピンジャー、多段液体インピンジャー（ＭｓＬＩ）、Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクター、もしくは次世代インパクター（ＮＧＩ）などのインパクターまたはインパクション装置を使用する。これらにより、ＤＰＩ製剤の空気力学的特性（ＭＭＡＤ、幾何学的標準偏差、肺沈着パターン、微粒子用量、微粒子画分を含む）を、シミュレーションされた呼吸条件下で測定することができる。

【0050】

５μｍ未満の空気力学的径を有する粒子の総用量は、収集効率曲線からの内挿によって計算することができ、微粒子用量（ＦＰＤ）または微粒子画分（ＦＰＦ）とみなすことができ、名目ＡＰＩ用量（すなわち、ＤＰＩデバイスに含まれる用量）の割合として表される。

【0051】

好ましくは、本発明に係る乾燥粉末吸入製剤は、乾燥粉末吸入器、または密閉型乾燥粉末吸入器および／もしくは使い捨て乾燥粉末吸入器において使用されるように、例えばブリスターまたはカプセル中に包装される。

【0052】

特定の実施形態において、前記活性剤は、気管支拡張活性、グルココルチコイド、抗炎症活性、抗感染症活性を有する小化学分子（例えば、抗生物質、抗結核薬、抗真菌薬、抗ウイルス薬）である。

【0053】

別の具体的な実施形態において、前記小化学分子は、例えば、ブデソニド、サルブタモール、フルチカゾン、ベクロメタゾン、モメタゾン、シクレソニド、ホルモテロール、サルブタモール、アルホルモテロール、インダカテロール、オロダテロール、サルメテロール、イプラトロピウム、アクリジニウム、グリコピロニウム、チオトロピウム、ウンメクリジニウム（unmeclidinium）、モメタゾン、シクレソニド、ホルモテロール、アルホルモテロール、イブプロフェン、トブラマイシン、バンコマイシン、テトラヒドロリプスタチン、クラリスロマイシン、イソニアジド、リファンピン、ピラジナミド、イトラコナゾール、ボリコナゾール、アズトレオナム、エタンブトール、ストレプトマイシン、カナマイシン、アミカシン、コリスチン、コリスチンメタンスルホン酸ナトリウム、カプレオマイシン、シプロフロキサシン、リファペンチン、ドキシサイクリン、サイクロセリンＥ、エチオナミド、ガチフロキサシン、レボフロキサシン、モキシフロキサシン、オフロキサシン、ホスホマイシン、ｐ－アミノサリチル酸、デヌホソル四ナトリウム、ランコブチド、リバビリン、ザナミビル、ラミナビル（laminavir）、ルピントリビル、ペンタミジン、アンホテリシンＢ、ポサコナゾール、イサブコナゾール、カプスフンギン（capsufungin）、ミカファンギン、アニデュラファンギン、イロプロスト、レボチロキシン、それらの塩、溶媒和物、水和物、多形体、ならびにそれらのエステル、それらの組合せ、アナログおよび誘導体などの、全身治療または局所治療のために肺に吸収される任意の活性医薬成分である。

【0054】

またさらなる実施形態において、前記活性剤は、ペプチド、タンパク質、抗体、抗体断片、ナノボディ、核酸などの巨大分子である。

【0055】

好ましくは、上述の本発明によれば、前記巨大分子は、インスリン、プロインスリン、合成インスリン、半合成インスリン、ベバシズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブ、トル様受容体アゴニスト、グレリン、ＩｇＧモノクローナル抗体、低分子干渉リボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、ドルナーゼアルファ、シクロスポリンＡ、アルファ－１アンチトリプシン、インターロイキンアンタゴニスト、インターフェロン－α、インターフェロン－β、インターフェロン－γ、インターフェロン－ω、インターロイキン－２、抗ＩｇＥｍＡｂ、カタラーゼ、カルシトニン、パラチロイドホルモン、ヒト成長ホルモン、インスリン様増殖因子－Ｉ、ヘパリン、ｒｈＧ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、Ｅｐｏ－Ｆｃ、ＦＳＨ－Ｆｃ、ｓＦｃ－γ ＲＩＩｂ、ｍＲＮＡである。

【0056】

さらに好ましい実施形態において、前記活性剤は、例えば肺癌および肺腫瘍に対して提供される、抗腫瘍剤である。

【0057】

肺癌は、世界で最も高い有病率および死亡率を有する癌である。ほとんどの場合、肺癌は、進行した段階で診断される。そのため、患者は既に、肺または他の臓器に転移、すなわち肺外転移を呈することが多い。処置様式は、たいてい併用で用いられ、手術、放射線療法、化学療法、標的療法、および免疫療法にある。

【0058】

化学療法は、主に病気が進行した段階の、肺癌患者の６０％にまで用いられる。化学療法は現在、静脈内注射もしくは輸液、または経口、すなわち全身投与経路によって投与される、すなわち全身化学療法である。化学療法は、重度の全身毒性の原因となるが、これは（ｉ）化学療法薬が生体内に広く分布すること、および（ｉｉ）癌細胞に対する選択性が欠如していること、によるものである。結果的に、癌専門医は、より効率的でより許容性が高い新しい処置アプローチを大いに必要としている。

【0059】

化学療法は実際に、化学療法によって生じる不可逆的な毒性副作用および不快な副作用を最大レベルで減少させることによって、投与されるべき最高量の抗腫瘍剤を見出すに過ぎない。

【0060】

したがって、非常に複雑な治療スキームは、異なる治療的処置および活動（例えば、手術）を、放射線療法の第１のサイクル、続いて抗腫瘍剤注射または静脈内注入の複雑なサイクルと非常に頻繁に組み合わせることが予測される。抗腫瘍剤注射または静脈内注入は、各サイクルについて同じであってもよいし異なっていてもよく、患者の身体上で同定された副作用に応じて、低減または適合されてもよい。

【0061】

抗腫瘍剤または分子それぞれは、腎毒性、神経毒性など、治療スキーム中に休止期間を導入する必要がある用量規定毒性（ＤＬＴ）を有する。不可逆的でない場合には、休止期間により、患者の身体は有害な副作用から回復することが可能となる。

【0062】

さらに、抗腫瘍剤は、しばしばその半減期として知られている半減期を有する。半減期とは、体内の薬物の濃度または量が半分に減少するために必要な期間である。抗腫瘍剤の半減期は、典型的には１２時間～３６時間である。前記半減期は、抗腫瘍剤の有益な作用に対する人体の暴露時間を表すものとして、短くすることができる。

【0063】

しかしながら、抗腫瘍剤の用量規定毒性（ＤＬＴ）のために、いくつかの投与期間中に投与される用量の量は制限されたままであり、前述したように、前記量は、休止期間または除外期間によって互いに分離されるべきである。

【0064】

抗腫瘍剤が経口または注射または静脈内注入によって投与される場合という事実と共に、半減期と用量規定毒性との組み合わせは、固形腫瘍部位に効率的に到達する抗腫瘍剤の濃度が低く、腫瘍自体に対する効果が限定され、患者の身体に対する全身毒性が高いという結果を有する。

【0065】

抗腫瘍剤のさらに別の制約は、累積用量である。累積用量とは、身体の同じ部分または全身の抗腫瘍剤への反復暴露から生じる総用量である。

【0066】

シスプラチンについては、静脈内経路で投与され、累積用量は、４～６サイクル以内に３００ｍｇ／ｍ^２である。

【0067】

それらの考察から、本発明の研究者らは、より標的化された療法およびオンサイト注射／注入を開発することができた。

【0068】

吸入療法は異なる種類のものであり、ＡＰＩを気道に送達するための異なる様式としてネブライザー形式吸入器とは区別することができる。吸入器はまた、異なる種類のものであってもよく、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）がその１つである。

【0069】

ネブライザーと比較して、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）は、化学療法によく適合している。それらは、高用量のＡＰＩだけでなく、難水溶性化合物（すなわち、癌におけるほとんどの化学療法剤）も投与することを可能にする。さらに、ＤＰＩは、（ｉ）患者の吸気流のみによるそれらの活性化および駆動、ならびに（ｉｉ）無視できる呼気薬物用量のために、エアロゾルによる環境汚染を制限する。最後に、ＤＰＩは、単回使用の使い捨てデバイスとして設計することができる。

【0070】

したがって、腫瘍を有する肺に有効な抗癌療法を送達するために、抗腫瘍薬の肺経路を開発し、臨床試験で使用される現在の吸入装置および製剤を十分に適合させる必要がある。

【0071】

肺における抗腫瘍剤の滞留プロファイルを延長させ、速すぎない吸収を確実化することは、多くの利点を有する。しかしながら、肺の吸収表面積は膨大であり、それによって前記薬剤の素早い全身吸収がもたらされるため、長期放出プロファイルに到達することは、今日でも依然として難しい課題である。

【0072】

先に説明したように、制御放出シスプラチンベースのＤＰＩ製剤は、高い薬物担持および高い微粒子画分を備えるよう開発され、低い全身分布につながる制御放出および長期肺滞留能力を有する。（Levet et al, Int J Pharm 2017）。この文献によると、肺癌マウスモデルにおいて、このアプローチにより、インビボにて、静脈内レジメンと同等の腫瘍反応が半用量（それぞれ、１．０ｍｇ／ｋｇ対０．５ｍｇ／ｋｇ）で得られた。静脈内レジメンが肺外転移に対して良好な結果をもたらした一方で、シスプラチン吸入は肺腫瘍に対してより有効と思われた。

【0073】

パクリタキセルベースのナノキャリアで構成されたＤＰＩ製剤もまた、増加した肺における滞留時間、限定的な全身分布を備えるよう開発され、葉酸受容体（ＦＲ）を標的とすることによって、特異的に肺癌細胞を標的にする（Rosiere et al, Int J Pharm 2016; Rosiere et al, Mol Pharm, 2018）。ＦＲ、特にＦＲ－αは、多くの肺腫瘍（すなわち、腺癌の７０％超）において癌細胞表面に過剰発現しており、肺癌において標的となる有望な膜受容体である。肺癌マウスモデルにおけるタキソール（登録商標）（市販のパクリタキセル）静脈内投与と組み合わせたＦＲ標的化吸入処置では、タキソール（登録商標）静脈内投与単独よりも有意に長い生存率が観察された。

【0074】

本論に戻ると、ＤＰＩ化学療法の使用は、薬物動態プロファイルおよび安全性の観点では有望な前臨床結果につながったが、それらの有効性はかなり限定されている。

【0075】

抗腫瘍剤の長期放出プロファイルに到達することからは多数の利点が生じ得るが、吸入化学療法の文脈においては、ＡＰＩを素早く吸収させ体循環に提供する有意に巨大な吸収表面を肺が示すので、この課題はさらに強調される。

【0076】

さらに、肺には強力な防御メカニズムが備わっているので、異物沈着粒子に対する肺における非常に効率的なクリアランスメカニズムにより、吸入療法におけるＡＰＩの排除は非常に素早い。

【0077】

Ｓｅｂｔｉら（Sebti et al, Eur J Pharm Biopharm 2006a; Sebti et al, Eur J Pharm Biopharm 2006b）は、ブデソニドと、コレステロールから構成される脂質マトリックスとを備えた固体脂質マクロ粒子を開発したが、ブデソニド放出プロファイルのなんら遅延も観察されなかった。

【0078】

同じ目的のために、ＤｅｐｒｅｔｅｒおよびＡｍｉｇｈｉ（Depreter and Amighi, Eur
J Pharm Biopharm 2010）は、コレステロールから構成される脂質マトリックスでコーティングされたインスリン微粒子を開発したが、これについては、インスリン放出のわずかな遅延のみが観察された。

【0079】

同じ目的のために、前述のように、Ｌｅｖｅｔらは、肺における長期滞留時間を可能にし、それによって吸入化学療法の効率を増加させることに取り組み、有望な候補としてトリステアリンおよびＴＰＧＳから構成される脂質マトリックスを同定した。

【0080】

さらに、マトリックスを形成するための脂質由来賦形剤がポリマーよりも好ましい場合であっても、毒性の理由から、治療的処置の他の経路と比較して、吸入のための薬学的組成物について許容され、認可されるのは、脂質マトリックスを形成することができるほんの少しの物質のみである（Pilcer and Amighi, Int J Pharm 2010）。

【0081】

残念ながら、トリステアリンベースのマトリックスは有望であると同定されたが、その市場での入手可能性は医薬化合物としてはかなり限定されている。一方で、モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物を含む群から選択される前記少なくとも１つのトリグリセリドの入手可能性は大部分でより広い。

【0082】

さらに、トリステアリンベースのマトリックスはボリコナゾールの放出プロファイルを制御するためには有望ではなかったが、調製方法（すなわち、噴霧乾燥）および賦形剤組成物は、シスプラチンについてＬｅｖｅｔらに記載されているものと同様であった。

【0083】

さらに、本発明によれば、本発明により限定された群から選択される前記少なくとも１つのトリグリセリドは、肺における化学療法の持続放出プロファイルおよび長期滞留を得ることに加えて、最も近いトリグリセリドであるトリステアリンに対して、肺沈着速度を有意に増加させることを可能にすることが同定された。

【0084】

好ましくは、前記抗腫瘍剤は、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ドセタキセル、パクリタキセル、ペメトレキセド、エトポシド、ビノレルビンである。

【0085】

本発明に係る乾燥粉末吸入製剤の他の実施形態は、添付の特許請求の範囲に記載されている。

【0086】

本発明は、本発明に係る乾燥粉末吸入製剤の製造方法に関する。当該方法は、以下の工程を含む：
ａ）溶媒を用いて、または用いずに、モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物を含む群から選択される、所定量の少なくとも１つのトリグリセリド中で、１つ以上のＡＰＩを混合する工程；
ｂ）懸濁液もしくは溶液の噴霧乾燥、前記少なくとも１つのトリグリセリド中の活性薬物もしくはＡＰＩの溶液の噴霧凝固、または、ＡＰＩと前記少なくとも１つのトリグリセリドとの物理的混合物の押出、続いてジェットミルなどの、先の混合物から吸入可能な粒子をもたらすボトムアップ法、またはトップダウン法。

【0087】

例えば、本発明は、本発明に係る乾燥粉末吸入製剤の製造方法に関する。当該方法は、以下の工程を含む：モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物を含む群から選択される、所定量の少なくとも１つのトリグリセリド中で、１つ以上のＡＰＩの粉末を懸濁または可溶化し、１つ以上のＡＰＩの粒子の懸濁液または溶液を形成し（例えば、溶融および／または押出による）、次いで、冷却（例えば、噴霧凝固による）または押出後に得られる１つ以上のＡＰＩの溶液または懸濁液の粒子のサイズを、高速および／もしくは高圧にて縮小し、前記乾燥粉末吸入製剤を得る工程。

【0088】

別の例において、製造方法は、以下の工程を含む：
ａ）少なくとも１つのＡＰＩを少なくとも１つのトリグリセリドと均質に混合し、均質な混合物を形成する工程；
ｂ）適切な温度にて、（２軸）押出機を用いて均質な混合物を押し出して、前記ＡＰＩを含む均質な脂質マトリックスを得る工程；
ｃ）押出物を切断し、粗いペレット／シリンダーを得る工程；
ｄ）任意で、前記粗いペレット／シリンダーを適切な貯蔵条件にて貯蔵することによって、安定な多形相にトリグリセリドを変換する工程；
ｅ）適切なミルを使用することによってペレットを粉砕し、前記少なくとも１つのトリグリセリドと共に前記ＡＰＩを含む吸入用微粒子（ＤＰＩ）を得る工程。

【0089】

また別の例において、本発明は、本発明に係る乾燥粉末吸入製剤の製造方法に関する。当該方法は、以下の工程を含む：
ａ）１つ以上のＡＰＩの粉末を溶媒中に懸濁または可溶化し、１つ以上のＡＰＩの粒子の懸濁液または溶液を形成する工程；
ｂ）冷却下で、高速および／または高圧均質化にて、前記１つ以上のＡＰＩの粒子のサイズを任意に縮小し、１つ以上のＡＰＩの粒子のサイズが縮小した懸濁液を形成する工程；
ｃ）モノヒドロキシステアリン、ジヒドロキシステアリン、トリヒドロキシステアリン、およびそれらの混合物を含む群から選択される、所定量の少なくとも１つのトリグリセリドを溶媒中で前記微結晶懸濁液または溶液と混合し、前記少なくとも１つのＡＰＩと前記少なくとも１つのトリグリセリドとの混合物を得る工程；
ｄ）前記少なくとも１つのＡＰＩと前記少なくとも１つのトリグリセリドとの混合物を噴霧乾燥し、前記乾燥粉末吸入製剤を得る工程。

【0090】

本発明に係る方法の好ましい実施形態において、サイズ縮小のために適用される前記高速は、１００００～３００００ｒｐｍであり、好ましくは１５０００～２６０００ｒｐｍであり、適用される時間は、８～１５分であり、好ましくは９～１２分である。

【0091】

好ましくは、本発明によれば、均質化工程のための前記高圧は、８～１２、好ましくは９～１１である所定の数の予備粉砕サイクルにわたって、２０００～１００００ｐｓｉ、好ましくは４０００～６０００ｐｓｉである第１の圧力から、８～１２、好ましくは９～１１である所定の数の予備粉砕サイクルにわたって、８０００～１２０００ｐｓｉ、好ましくは９０００～１１０００ｐｓｉである第２の圧力へと徐々に増加し、１８～２２、好ましくは１９～２１である所定の数の予備粉砕サイクルにわたって、１８０００～２４０００ｐｓｉ、好ましくは１９０００～２４０００ｐｓｉである第３の圧力へ、徐々に増加する。

【0092】

本発明に係る特に好ましい実施形態において、微結晶懸濁液の前記微結晶は、３０μｍ以下、好ましくは１５μｍ以下、好ましくは１０μｍ以下、好ましくは５μｍ以下の幾何学的粒径分布（ＰＳＤ）ｄ_５０を有する。

【0093】

本発明に係るさらに特に好ましい実施形態において、微結晶懸濁液の前記微結晶は、６０μｍ以下、好ましくは３０μｍ以下、より好ましくは１５μｍ以下、好ましくは１０μｍ以下、より好ましくは７μｍ以下の幾何学的粒径分布（ＰＳＤ）ｄ_９０を有する。

【0094】

本発明に係る別の特に好ましい実施形態において、微結晶懸濁液の前記微結晶は、４０μｍ以下、好ましくは２０μｍ以下、より好ましくは１５μｍ以下、好ましくは１０μｍ以下、好ましくは６μｍ以下の体積平均径Ｄ［４，３］を有する。

【0095】

本発明に係る有利な好ましい実施形態において、ＰＥＧ化賦形剤または他の賦形剤がさらに添加される。

【0096】

本発明に係る方法の他の実施形態は、添付の特許請求の範囲に記載されている。

【0097】

本発明はさらに、肺治療における乾燥粉末吸入製剤の使用に関する。

【0098】

好ましくは、本発明に係る使用は、局所肺疾患：喘息、ＣＯＰＤ、肺感染症（例えば、嚢胞性線維症患者、アスペルギルス症、結核など）、または全身性疾患（例えば、糖尿病、疼痛など）を処置するために予見される。

【0099】

本発明に係る変形例において、乾燥粉末吸入化学療法製剤は、任意の肺腫瘍、肺転移（例えば骨肉腫転移）、小細胞肺癌または非小細胞肺癌などの、肺癌の処置のための多剤療法において使用される。

【0100】

有利には、前記多剤療法は、静脈内注射または注入化学療法、免疫療法、腫瘍切除手術、腫瘍を有する器官の一部または全部を除去するための切除手術、治癒手術、放射線療法およびそれらの組み合わせからなる群から選択される１つの一次療法と、追加療法として吸入による１つ以上の化学療法とを含む。

【0101】

本発明はまた、対応する治療方法にも関する。

【0102】

〔発明の詳細な説明〕
本発明の他の特徴および利点は、以下の非限定的な説明から、ならびに、実施例および図面を参照することによって、得られる。

【0103】

図面において、図１は、比較例（Ｌｅｖｅｔらにおける組成物Ｆ５）ならびに実施例１および２のＦＰＦ値（％）を示す（平均±標準偏差、ｎ＝２～３）。

【0104】

図２は、シスプラチン微粒子のみから構成される比較製剤と比較した、実施例１および２によって調製されたＤＰＩ製剤の呼吸可能画分からのシスプラチンの放出プロファイルを示す。

【0105】

図３は、実施例１０のＦＰＦ値を、ペメトレキセド微粒子のみから構成される比較製剤と比較して示し（それぞれ、平均±標準偏差、ｎ＝３および１）、肺沈着に関する従来のＤＰＩ製剤に対する実施例１０の優位性を実証する。

【0106】

図４は、ペメトレキセド微粒子のみからなる比較製剤と比較した、実施例１０によって調製されたＤＰＩ製剤の呼吸可能画分からのペメトレキセドの放出プロファイルを示す（平均±標準偏差、ｎ＝３）。

【0107】

図５は、実施例１３のＦＰＦ値を示し（平均±標準偏差）、本発明において開示されるインスリンベースのＤＰＩ組成物の高い肺沈着速度を実証する。

【0108】

図６は、Ｄｅｐｒｅｔｅｒらによって記載された比較製剤（１８０分まで）（Ｂ）と比較した、実施例１３によって調製されたＤＰＩ製剤（２４０分まで、平均±標準偏差、ｎ＝２）（Ａ）の呼吸可能画分からのインスリンの放出プロファイルを示す。

【0109】

図７は、シスプラチン微粒子からなる比較製剤と比較した、実施例１６によって調製されたＤＰＩ製剤の呼吸可能画分からのシスプラチンの放出プロファイルを示す（平均±標準偏差、ｎ＝３）。

【0110】

図８は、比較例ＢＵＤ－ＴＳ４およびＢＵＤ－ＴＳ５と比較した、実施例１９および２０のＦＰＦ値を示す（平均±標準偏差、ｎ＝３）。（＊＊＊）ｐ＜０．００１、ｔ検定、肺沈着に関して、他のトリグリセリドベースのブデソニドＤＰＩ製剤と比較して、本発明において開示されるブデソニド組成物の優位性を実証する。

【0111】

図９は、微粉化ブデソニド比較例、ならびに実施例１９、２０および２１によって調製されたＤＰＩ製剤の呼吸可能画分からのブデソニドの放出プロファイルを示し（ｎ＝１）、本発明の組成物からのブデソニドの制御放出プロファイルを示し、薬物／脂質比率を調節することによって放出プロファイルを調節する可能性を示す。

【0112】

〔実施例〕
〔実施例１．吸入用シスプラチン乾燥粉末製剤の調製ｎ°１〕

【0113】

簡単に説明すると、原末（Shanghai Jinhe Bio-technology Co., Ltd., Shanghai, PRC）由来の原料シスプラチン微結晶を、まず５％ｗ／ｖの濃度になるようにイソプロパノール５０ｍＬ中に懸濁させ、高速（２４０００ｒｐｍにて１０分間）（Ｘ６２０モーターおよびＴ１０分散シャフト、Ingenieurburo CAT M. Zipperer GmbH, Staufen, Germany）でサイズを縮小させ、５０００ｐｓｉ、次いで１００００ｐｓｉにて、それぞれ１０予備粉砕サイクル、次いで２００００ｐｓｉにて２０粉砕サイクル、高圧均質化（ＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ－Ｃ５高圧ホモジナイザー、Avestin Inc., Ottawa, Canada）を行った。熱交換器を均質化バルブに接続し、Ｆ３２－ＭＡ冷却サーキュレータ（Julabo GmbH, Seelbach,
Germany）を用いて－１５℃に維持した。プロセスの最後に懸濁液からアリコートを除去し、レーザー回折（下記参照）によってシスプラチン微結晶の粒径分布（ＰＳＤ）を測定した。

【0114】

次いで、加熱したイソプロパノールに可溶化させた硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）およびＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を微結晶懸濁液に添加し、最終濃度が１．３２％ｗ／ｖのシスプラチンおよび０．６８％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油／ＴＰＧＳ（９９：１ｗ／ｗ）の混合物を得、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。

【0115】

噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0116】

バルクシスプラチン、サイズ縮小プロセスからのシスプラチン微粒子、およびシスプラチン乾燥粉末製剤の幾何学的ＰＳＤを、懸濁および個別化された粒子として測定した。これは、４０Ｗ超音波プローブ（Malvern Instruments Ltd.）を備えたＨｙｄｒｏＭＶディスペンサーに接続したＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ３０００レーザー回折計（Malvern Instruments Ltd., Worcestershire, UK）を使用して行われた。バルクシスプラチン、およびサイズ縮小プロセスからのアリコートの測定は、シスプラチン飽和イソプロパノール中で行った。シスプラチン乾燥粉末製剤は、予め分散させ、ボルテックスし、シスプラチン飽和０．１％ｗ／ｖのＰｏｌｏｘａｍｅｒ４０７（BASF, Ludwigshafen, Germany）ＮａＣｌ０．９％水溶液中で測定した。ＰＳＤは、体積中位径ｄ（０．５）（粒子の５０％が表された直径未満である）、体積平均径Ｄ［４，３］、および累積篩下曲線から決定された微粒子の割合（５μｍ未満の粒子の割合）として、表された。ＰＳＤの結果は、本発明によって予想される範囲内である。

【0117】

〔実施例２．吸入用シスプラチン乾燥粉末製剤の調製ｎ°２〕

【0118】

簡単に説明すると、原末（Shanghai Jinhe Bio-technology Co., Ltd., Shanghai, PRC）由来の原料シスプラチン微結晶を、まず５％ｗ／ｖの濃度になるようにイソプロパノール５０ｍＬ中に懸濁させ、高速（２４０００ｒｐｍにて１０分間）（Ｘ６２０モーターおよびＴ１０分散シャフト、Ingenieurburo CAT M. Zipperer GmbH, Staufen, Germany）でサイズを縮小させ、５０００ｐｓｉ、次いで１００００ｐｓｉにて、それぞれ１０予備粉砕サイクル、次いで２００００ｐｓｉにて２０粉砕サイクル、高圧均質化（ＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ－Ｃ５高圧ホモジナイザー、Avestin Inc., Ottawa, Canada）を行った。熱交換器を均質化バルブに接続し、Ｆ３２－ＭＡ冷却サーキュレータ（Julabo GmbH, Seelbach,
Germany）を用いて－１５℃に維持した。プロセスの最後に懸濁液からアリコットを除去し、レーザー回折（下記参照）によってシスプラチン微結晶の粒径分布（ＰＳＤ）を測定した。

【0119】

次いで、加熱したイソプロパノールに可溶化させた硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）およびＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を微結晶懸濁液に添加し、最終濃度が１．０％ｗ／ｖのシスプラチンおよび１．０％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油／ＴＰＧＳ（９９：１ｗ／ｗ）の混合物を得、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0120】

【0121】

〔実施例３．実施例１および２によって調製されたシスプラチン乾燥粉末製剤の沈着速度の分析〕

【0122】

比較例（Ｌｅｖｅｔらにおける組成物Ｆ５）ならびに実施例１および２による製剤を、それらの微粒子画分値に関して分析した。

【0123】

微粒子画分（ＦＰＦ）（５μｍ未満の空気力学的直径（ｄａｅ）を有するシスプラチンベースの粒子の回収された用量に対する割合）、および、空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）によって特性付けられる空気力学的ＰＳＤを、欧州薬局方８．０．（２０１４）に記載されるようにして、ＭｓＬＩ（Copley Scientific, Nottingham, UK）（装置Ｃ）を使用して決定した。あらかじめ３５５ｍｍのステンレス鋼メッシュを通してふるい分けした各ＤＰＩ製剤（比較例および実施例２による）２０ｍｇの質量を、サイズ３ＨＰＭＣカプセル（Quali-V-I, Qualicaps, Madrid, Spain）中で秤量し、そのアダプターを備えた吸入ポート上に取り付けたＲＳ．０１乾燥粉末吸入器（RPC Plastiape, Osnago, Italy）を使用して、ＭｓＬＩ中に沈着させた（ｎ＝３）。

【0124】

ＤＦＭ３流量計（Copley Scientific, Nottingham, UK）を使用して測定した１００±５Ｌ／ｍｉｎの沈着流量を、ＴＰＫ臨界流量制御器（Copley Scientific, Nottingham, UK）に直列に接続した２台のＨＣＰ５エアポンプ（Copley Scientific, Nottingham, UK）を用いて、得た。

【0125】

この流量において、カットオフ直径は、ＭｓＬＩの各ステージ間で、１０．０、５．３、２．４、１．３、および０．４ｍｍであった。マイクロオリフィスコレクター（ＭＯＣ）フィルター（すなわち、ステージ５）は、０．４５ｍｍの細孔径を有し、高密度ポリエチレン支持体（Merck Millipore, Darmstadt, Germany）上に結合したＦｌｕｏｒｏｐｏｒｅ９ｃｍＰＴＦＥ膜を含んでいた。臨界流量制御器を使用して、欧州薬局方８．０．（２０１４）によって要求されるように、１００Ｌ／ｍｉｎにて２．４秒の沈着時間、およびＰ３／Ｐ２比＜０．５の臨界流量を確保した。

【0126】

インパクション後、希釈相として超純水／イソプロパノール（６０：４０ｖ／ｖ）中の予め充填された０．５％ｗ／ｖのＰｏｌｏｘａｍｅｒ４０７を２０ｍＬ使用する第１のリンス、ＤＭＦを２５ｍＬ使用する第２のリンス、および１００．０ｍＬに調整され３０分間超音波処理された希釈相を使用する第３のリンスを、ＭｓＬＩの４つの上部ステージに加えた。１００．０ｍＬの希釈相を用いて可溶化させ、３０分間超音波処理した後、カプセル、装置、誘導ポート、およびＭＯＣフィルターへの薬物沈着を測定した。各ステージにおけるインパクション質量は、Ｌｅｖｅｔら（Levet, Int J Pharm 2016）に記載された有効な電熱原子吸光分析（ＥＴＡＡＳ）法によるシスプラチン含量の定量によって決定した。

【0127】

次いで、結果をＣｏｐｌｅｙＩｎｈａｌｅｒＴｅｓｔｉｎｇＤａｔａＡｎａｌｙｓｉｓＳｏｆｔｗａｒｅ１（Copley Scientific, Nottingham, UK）にてプロットし、５μｍ未満のＦＰＤを得た。これは、対応するステージのカットオフ直径に対する、回収された質量の内挿から行った。ＦＰＦは、名目用量の割合として表した。

【0128】

図１は、比較例（Ｌｅｖｅｔらにおける組成物Ｆ５）ならびに実施例１および２のＦＰＦ値（％）を示し（平均±標準偏差、ｎ＝２～３）、肺沈着に関して、他のトリグリセリドベースのシスプラチンＤＰＩ製剤と比較して、本発明において開示されるシスプラチン組成物の優位性を実証する。

【0129】

〔実施例４．実施例１および２によって調製されたシスプラチン乾燥粉末製剤からのシスプラチンの溶解速度の分析〕

【0130】

ＤＰＩ製剤の溶解特性は、Ｌｅｖｅｔら（Levet et al, Int J Pharm 2016）に記載された方法を適用することによって、証明した。この方法は、経皮パッチのために改造された溶解装置タイプＶを使用するＵＳＰ３９からのパドルオーバーディスク法に由来する。シスプラチンの放出プロファイルは、ＦａｓｔＳｃｒｅｅｎｉｎｇＩｍｐａｃｔｏｒ（FSI, Copley Scientific, Nottingham, UK）を使用して選択された、ＤＰＩ製剤の全呼吸可能画分（ｄａｅが５μｍ以下）から決定した。３ｍｇのシスプラチンの沈着用量に相当する、ＤＰＩ製剤それぞれの適切な質量を、サイズ３のＨＰＭＣカプセル（Quali-V-I Qualicaps, Madrid, Spain）中に秤量した。次いで、これを、ＲＳ．０１ＤＰＩ装置（RPC Plastiape）を使用して、対応するプレセパレータインサートを備えたＦＳＩ（２．４ｓ、１００Ｌ／ｍｉｎ）を有する、孔径０．４５ｍｍのＦｌｕｏｒｏｐｏｒｅ（登録商標）疎水性ＰＴＦＥ膜フィルター（Merck Millipore, Darmstadt, Germany）上に沈着させた。次いで、沈着した粉末を上に向けたＦｌｕｏｒｏｐｏｒｅフィルターを、Ｉｓｏｐｏｒｅ（登録商標）０．４ｍｍ親水性ポリカーボネートフィルター（Merck-Milipore, Germany）で覆い、クリップおよびＰＴＦＥメッシュスクリーンを備えた時計皿－ＰＴＦＥディスクアセンブリ（Copley, Nottingham, UK）上に固定した。次いで、ディスクアセンブリを、４００ｍＬの改変模擬肺液（ｍＳＬＦ）（Son and McConville, 2009）（肺電解質および界面活性剤組成物を模した媒体）を含むＡＴ７溶解装置（Sotax AG, Aesch, Switzerland）の溶解容器に浸漬した。

【0131】

溶解試験は、３７±０．２℃、ｐＨ７．３５±０．０５でのシンク条件に基づき、実施した。ブレードとディスクアセンブリの中心との間で２５±２ｍｍに設定されたパドルは、５０±４ｒｐｍの回転速度に設定された。サンプリング量２．０ｍＬを、細孔サイズが０．２２ｍｍである酢酸セルロースシリンジフィルター（VWR, Leuven, Belgium）に通して、２分～２４時間の間の予め設定された時間で濾過し、２．０ｍＬの遊離予熱ｍＳＬＦを用いて置き換えた。

【0132】

溶解アッセイの最後に、ディスクアセンブリを溶解容器に開け、３０分間、超音波処理して、１００％シスプラチン溶解値を確立した。

【0133】

【0134】

〔実施例５．インスリン乾燥粉末製剤の調製ｎ°１〕

【0135】

最初に、インスリンをイソプロパノール（２％ｗ／ｖ）中に懸濁させ、４０ｋＨｚのＢｒａｎｓｏｎ２５１０バス中で１０分間、超音波処理することによって、粉末の分散を確保した。次いで、ＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ－Ｃ５高圧ホモジナイザー（Aves-tin Inc., Ottawa, Canada）を使用して、粒径を縮小させた。まず、予備粉砕低圧均質化サイクルをインスリン懸濁液に対して行い、粒径をさらに縮小させた（７０００ＰＳＩにて１０サイクル、および１２，０００ＰＳＩにて１０サイクル）。次いで、最後に、ＨＰＨを２４，０００ＰＳＩにて３０サイクル、適用した。これらのサイクルは、処理された懸濁液をサンプルタンク（閉ループ）に直接再循環させることによって行った。ＨＰＨは、サンプル温度の上昇（２４，０００ＰＳＩにて２０サイクルの後には、３０℃上昇する）を引き起こすので、すべての操作は、均質化バルブの前に配置した熱交換器を使用して行い、サンプル温度を５±１℃に維持した。

【0136】

プロセスの最後に懸濁液からアリコートを除去し、レーザー回折（下記参照）によってインスリン微結晶の粒径分布（ＰＳＤ）を測定した。

【0137】

次いで、加熱したイソプロパノールに可溶化させた硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）およびＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を微結晶懸濁液に添加し、最終濃度が１．０％ｗ／ｖのインスリンおよび１．０％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油／ＴＰＧＳ（９９：１ｗ／ｗ）の混合物を得、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0138】

バルクインスリン、サイズ縮小プロセスからのインスリン微粒子、およびインスリン乾燥粉末製剤の幾何学的ＰＳＤを、懸濁および個別化された粒子として測定すると、本発明の範囲内であった。これは、４０Ｗ超音波プローブ（Malvern Instruments Ltd.）を備えたＨｙｄｒｏＭＶディスペンサーに接続したＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ３０００レーザー回折計（Malvern Instruments Ltd., Worcestershire, UK）を使用して、実施例１に記載したように、行われた。

【0139】

〔実施例６．インスリン乾燥粉末製剤の調製ｎ°２〕

【0140】

【0141】

プロセスの最後に懸濁液からアリコートを除去し、レーザー回折（下記参照）によってインスリン微結晶の粒径分布（ＰＳＤ）を測定した。

【0142】

次いで、加熱したイソプロパノールに可溶化させた硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）およびＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を微結晶懸濁液に添加し、最終濃度が１．５％ｗ／ｖのインスリンおよび０．５％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油／ＴＰＧＳ（９９：１ｗ／ｗ）の混合物を得、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0143】

【0144】

〔実施例７．吸入用ブデソニド乾燥粉末製剤の調製ｎ°１〕

【0145】

最初に、ブデソニド（１％ｗ／ｖ）を、磁気撹拌下でイソプロパノールに可溶化させた。次いで、加熱したイソプロパノールに可溶化させた硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）およびＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を微結晶懸濁液に添加し、最終濃度が１．０％ｗ／ｖのブデソニドおよび１．０％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油／ＴＰＧＳ（９９：１ｗ／ｗ）の混合物を得、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0146】

バルクブデソニド乾燥粉末製剤の幾何学的ＰＳＤを、懸濁および個別化された粒子として測定すると、本発明の範囲内であった。これは、４０Ｗ超音波プローブ（Malvern Instruments Ltd.）を備えたＨｙｄｒｏＭＶディスペンサーに接続したＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ３０００レーザー回折計（Malvern Instruments Ltd., Worcestershire, UK）を使用して、実施例１に記載したように、行われた。

【0147】

〔実施例８．吸入用ブデソニド乾燥粉末製剤の調製ｎ°２〕

【0148】

最初に、ブデソニド（１．５％ｗ／ｖ）を、磁気撹拌下でイソプロパノールに可溶化させた。次いで、加熱したイソプロパノールに可溶化させた硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）およびＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を微結晶懸濁液に添加し、最終濃度が１．５％ｗ／ｖのブデソニドおよび０．５％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油／ＴＰＧＳ（９９：１ｗ／ｗ）の混合物を得、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0149】

【0150】

〔実施例９．ブデソニド乾燥粉末製剤の調製ｎ°３〕

【0151】

Ｔｕｒｂｕｌａ（登録商標）ミキサー（Willy A. Bachofen AG, Muttenz, Switzerland）中で、１０ｇの量の微粉化ブデソニド、９．９ｇの硬化ヒマシ油、および０．１ｇのＴＰＧＳを均質にブレンドした。次いで、均質なブレンドを、適切な温度にて、二軸押出機（Process-11, Thermo Fischer Scientific, Massachusetts, USA）を通して押し出し、均質な脂質マトリックスを得た。次いで、押出物を切断して粗いペレットを得、ペレットを適切な貯蔵条件のインキュベーターに入れて、安定な多形相に脂質マトリックスを変換した。最後に、ジェットミル（適切なペレット供給速度、射出圧力、および粉砕圧力）によってペレットを粉砕し、ヒト用の吸入用微粒子を得た。

【0152】

〔実施例１０．吸入用ペメトレキセド乾燥粉末製剤の調製ｎ°１〕

【0153】

簡単に述べると、原末（Carbosynth Limited, Berkshire, United Kingdom）由来の原料ペメトレキセド二ナトリウム（ヘプタハイドレート形態）微結晶を、まず０．０５％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）の存在下で１％ｗ／ｖの濃度になるようにイソプロパノール５０ｍＬ中に懸濁させ、高速（２４０００ｒｐｍにて１０分間）（Ｘ６２０モーターおよびＴ１０分散シャフト、Ingenieurburo CAT M. Zipperer GmbH, Staufen, Germany）でサイズを縮小させ、２５０００ｐｓｉにて２０粉砕サイクル、高圧均質化（ＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ－Ｃ３高圧ホモジナイザー、Avestin Inc., Ottawa, Canada）を行った。熱交換器を均質化バルブに接続し、Ｆ３２－ＭＡ冷却サーキュレータ（Julabo GmbH, Seelbach, Germany）を用いて＋５℃に維持した。プロセスの最後に懸濁液からアリコートを除去し、レーザー回折（下記参照）によってペメトレキセド微結晶の粒径分布（ＰＳＤ）を測定した。

【0154】

次いで、１％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）を、加熱した（５０℃）微結晶懸濁液懸濁液に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0155】

バルクペメトレキセド、サイズ縮小プロセスからのペメトレキセド微粒子、およびペメトレキセド乾燥粉末製剤の幾何学的ＰＳＤを、懸濁および個別化された粒子として測定すると、本発明の範囲内であった。これは、４０Ｗ超音波プローブ（Malvern Instruments Ltd.）を備えたＨｙｄｒｏＭＶディスペンサーに接続したＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ３０００レーザー回折計（Malvern Instruments Ltd., Worcestershire, UK）を使用して、実施例１に記載したように、行われた。

【0156】

〔実施例１１．実施例１０によって調製されたペメトレキセド乾燥粉末製剤の沈着速度の分析〕

【0157】

実施例１０による製剤を、そのインビトロ肺沈着パターンおよびＦＰＦ値に関して分析した。

【0158】

ＦＰＦ（５μｍ未満の空気力学的直径（ｄａｅ）を有するペメトレキセドベースの粒子の回収された用量に対する割合）、および、ＭＭＡＤによって特性付けられる空気力学的ＰＳＤを、欧州薬局方８．０．（２０１４）に記載されるようにして、ＮＧＩ（Copley Scientific, Nottingham, UK）（装置Ｅ）を使用して決定した。あらかじめ３５５ｍｍのステンレス鋼メッシュを通してふるい分けしたＤＰＩ製剤（実施例１０によるもの、およびペメトレキセド微粒子のみで構成された比較製剤）２０ｍｇの質量を、サイズ３ＨＰＭＣカプセル（Quali-V-I, Qualicaps, Madrid, Spain）中で秤量し、そのアダプターを備えた吸入ポート上に取り付けたＲＳ．０１乾燥粉末吸入器（RPC Plastiape, Osnago, Italy）を使用して、ＮＧＩ中に沈着させた（ｎ＝３）。

【0159】

【0160】

この流量において、カットオフ直径は、ＮＧＩの各ステージ間で、６．１２、３．４２、２．１８、１．３１、０．７２、０．４０、および０．２４μｍであった。臨界流量制御器を使用して、欧州薬局方８．０（２０１４）によって要求されるように、１００Ｌ／分にて２．４秒の沈着時間、およびＰ３／Ｐ２比＜０．５の臨界流量を確保した。

【0161】

インパクション後、カプセル、装置、誘導ポート、予備分離器、７ステージ、およびＮＧＩのＭＯＣに沈着したペメトレキセド質量を、希釈相として超純水／ＤＭＦ（３０：７０ｖ／ｖ）を用いて収集し、３０分間超音波処理した。各ステージにおけるインパクション質量は、有効なＨＰＬＣによるペメトレキセド含有量の定量によって決定した。クロマトグラフィーシステム（HP 1200 series, Agilent Technologies, Diegem, Belgium）は、４基のポンプ、オートサンプラー、およびダイオードアレイ検出器を備えていた。分離は、逆相ＨｙｐｅｒｓｉｌＧｏｌｄＣ１８カラム（５ｍｍ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）（Thermo Fisher Scientific, Waltham, USA）で行った。移動相は、０．４％ギ酸で酸性化した超純水／アセトニトリル（８６：１４）からなり、１ｍＬ／ｍｉｎの流速で送達された。定量は、２５６ｎｍにて行った。注入量は２０μＬであり、温度は３０℃に設定され、分析実行時間は１５分であった。

【0162】

【0163】

【0164】

〔実施例１２．実施例１０によって調製されたペメトレキセド乾燥粉末製剤からのペメトレキセドの溶解速度の分析〕

【0165】

ＤＰＩ製剤の溶解特性は、Ｐｉｌｃｅｒら（Pilcer et al, J Pharm Sci 2013）に記載された方法の適合を適用することによって、証明した。ＤＰＩ放出プロファイルの調査のために特別に開発された溶解システム（Copley Scientific, Nottingham, UK）を、「ＰａｄｄｌｅｏｖｅｒＤｉｓｃ」（Eur.Ph. 7）から適合させた方法を用いて、使用した。肺に沈着する粒子の放出プロファイルを調査するために、ペメトレキセド製剤の分画を最初にＮＧＩで行った。ステージ３のカップは、粒子を収集するための取り外し可能なディスク挿入部分を備えるように選択された。特に興味深いことに、選択された吸入速度（１００Ｌ／ｍｉｎで２．４秒間）では、ステージ３のカットオフ直径は、２．１８～３．４２μｍの範囲であり、肺を標的とする粒子の選択を可能にした。実施例１０による製剤を適切な量で含むカプセルを秤量して、ステージ３において約６ｍｇのペメトレキセドを収集した。次いで、ディスク挿入部分をポリカーボネート膜（孔径０．４μｍ）（Merck Millipore）で覆い、４００ｍＬのｍＳＬＦ（Son and McConville, 2009）（肺電解質および界面活性剤組成物を模した培地）を充填したパドル溶解装置（Erweka DT6; ERWEKA
GmbH, Heusenstamm, Hesse, Germany）に入れた。

【0166】

【0167】

溶解アッセイの最後に、ディスクアセンブリを溶解容器に開け、３０分間、超音波処理して、１００％ペメトレキセド溶解値を確立した。

【0168】

【0169】

類似性因子ｆ２を使用して、２つの溶解プロファイルを比較した（Shah et al, Pharm Res 1998）。曲線は、有意に異なっていた（ｆ２＜５０）。さらに、実施例１０からのすべての時点での累積放出値は、ペメトレキセド微結晶からのものと比較して、有意に低く（ｐ＜０．０５、ｔ検定）、例えば、１時間ではそれぞれ５３±９％および９７．９±０．９％（ｐ＜０．０１）であり、これは、本発明の組成物からのペメトレキセドの制御放出プロファイルを示す。

【0170】

〔実施例１３．インスリン乾燥粉末製剤の調製ｎ°３〕

【0171】

最初に、磁気撹拌機を使用して、インスリン（Sigma-Aldrich）をイソプロパノール（１％ｗ／ｖ）中に懸濁させ、４０ｋＨｚのＢｒａｎｓｏｎ２５１０バス中で１０分間、超音波処理することによって、粉末の分散を確保した。次いで、ＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ－Ｃ３高圧ホモジナイザー（Avestin Inc., Ottawa, Canada）を使用して、２２，０００ＰＳＩにて３０サイクル、粒径を縮小させた。これらのサイクルは、処理された懸濁液をサンプルタンク（閉ループ）に直接再循環させることによって行った。ＨＰＨは、サンプル温度の上昇を引き起こすので、すべての操作は、均質化バルブの前に配置した熱交換器を使用して行い、サンプル温度を５±１℃に維持した。

【0172】

プロセスの最後に懸濁液からアリコートを除去し、レーザー回折（下記参照）によってインスリン微結晶の粒径分布（ＰＳＤ）を測定した。

【0173】

次いで、１％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）を、加熱した（５０℃）微結晶懸濁液懸濁液に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃，０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0174】

【0175】

〔実施例１４．実施例１３によって調製されたインスリン乾燥粉末製剤の沈着速度の分析〕

【0176】

実施例１３による製剤を、そのＦＰＦ値に関して分析した。

【0177】

ＦＰＦ（５μｍ未満のｄａｅを有するインスリンベースの粒子の回収された用量に対する割合）を、ＦａｓｔＳｃｒｅｅｎｉｎｇＩｍｐａｃｔｏｒ（ＦＳＩ）（Copley Scientific, Nottingham, UK）を使用して、決定した。ＦＳＩは、２段階分離プロセスを採用しており、ここで、第１の大きな非吸入性ボーラスが液体トラップに捕捉され、次いで５ミクロン（すなわち、ＦＰＦに対応する）での微細切断インパクション段階が続く。あらかじめ３５５ｍｍのステンレス鋼メッシュを通してふるい分けしたＤＰＩ製剤（実施例１３によるもの）１０ｍｇの質量を、サイズ３ＨＰＭＣカプセル（Quali-V-I, Qualicaps, Madrid, Spain）中で秤量し、そのアダプターを備えた吸入ポート上に取り付けたＲＳ．０１乾燥粉末吸入器（RPC Plastiape, Osnago, Italy）を使用して、ＦＳＩ中に沈着させた（ｎ＝３）。

【0178】

ＤＦＭ３流量計（Copley Scientific, Nottingham, UK）を使用して測定した１００±５Ｌ／分の沈着流量を、ＴＰＫ臨界流量制御器（Copley Scientific, Nottingham, UK）に直列に接続した２台のＨＣＰ５エアポンプ（Copley Scientific, Nottingham, UK）を用いて、得た。臨界流量制御器を使用して、１００Ｌ／分にて２．４秒の沈着時間を確保した。

【0179】

インパクション後、カプセル、装置、誘導ポート、予備分離機、および、０．４５ｍｍの細孔径を有し、高密度ポリエチレン支持体（Merck Millipore, Darmstadt, Germany）上に結合したＦｌｕｏｒｏｐｏｒｅ９ｃｍＰＴＦＥ膜上に沈着したインスリン質量を、希釈相として０．０１ＭＨＣｌを用いて収集し、３０分間超音波処理した。各ステージにおけるインパクション質量は、欧州薬局方９．２．（２０１７）に記載されているＨＰＬＣ法によるインスリン含量の定量によって決定した。ＦＰＦは、名目用量の割合として表した。

【0180】

図５は、実施例１３のＦＰＦ値を示し（平均±標準偏差）、本発明において開示されるインスリンベースのＤＰＩ組成物の高い肺沈着速度を実証している。

【0181】

〔実施例１５．実施例１３によって調製されたインスリン乾燥粉末製剤からのインスリンの溶解速度の分析〕

【0182】

実施例１３によるＤＰＩ製剤の溶解特性は、Ｄｅｐｒｅｔｅｒら（Depreter et al, Eur J Pharm Biopharm 2012）に記載された方法の適合を適用することによって、証明した。ＤＰＩ放出プロファイルの調査のために特別に開発された溶解システム（Copley Scientific, Nottingham, UK）を、「ＰａｄｄｌｅｏｖｅｒＤｉｓｃ」（Eur.Ph. 7）から適合させた方法を用いて、使用した。肺に沈着する粒子の放出プロファイルを調査するために、インスリン製剤の分画を最初にＮＧＩで行った。ステージ３のカップは、粒子を収集するための取り外し可能なディスク挿入部分を備えるように選択された。特に興味深いことに、選択された吸入速度（１００Ｌ／ｍｉｎで２．４秒間）では、ステージ３のカットオフ直径は、２．１８～３．４２μｍの範囲であり、肺を標的とする粒子の選択を可能にした。実施例１３による製剤を適切な量で含むカプセルを秤量して、ステージ３において約３ｍｇのインスリンを収集した。次いで、ディスク挿入部分をポリカーボネート膜（孔径０．４μｍ）（Merck Millipore）で覆い、４００ｍＬの０．０１ｍＭリン酸バッファ生理食塩水（ｐＨ７．４）を充填したパドル溶解装置（Erweka DT6; ERWEKA GmbH, Heusenstamm, Hesse, Germany）に入れた。

【0183】

溶解試験は、３７±０．２℃、ｐＨ７．３５±０．０５でのシンク条件に基づき、実施した。ブレードとディスクアセンブリの中心との間で２５±２ｍｍに設定されたパドルは、５０±４ｒｐｍの回転速度に設定された。５．０ｍＬ量を、２分～２４時間の間の予め設定された時間でサンプリングし、５．０ｍＬの遊離予熱ＰＢＳを用いて置き換えた。

【0184】

溶解アッセイの最後に、ディスクアセンブリを溶解容器に開け、３０分間、超音波処理して、１００％インスリン溶解値を確立した。

【0185】

サンプルを３％ｗ／ｖのトレハロースの存在下で凍結乾燥した（Christ Epsilon 1-6）。凍結乾燥物を０．０２ＮＨＣｌ５００μＬに溶解し、欧州薬局方９．２．（２０１７）に記載の方法を使用してＨＰＬＣシステムに注入した。

【0186】

【0187】

実施例１３からの種々の時点での累積放出値は、Ｄｅｐｒｅｔｅｒらからの２つの製剤からのものと比較して低く、例えば、１時間ではそれぞれ、約６０％および約１００％であり、これは、インスリン放出の制御に関して、Ｄｅｐｒｅｔｅｒらに記載されたインスリン微結晶および脂質被覆インスリン微結晶（それぞれ図６のＦ１およびＦ２）の両方に対する、本発明に開示されたインスリン組成物の優位性を実証する。

【0188】

〔実施例１６．シスプラチン乾燥粉末製剤の調製ｎ°３および比較例〕

【0189】

最初に、シスプラチン（Umicore, Hanau-Wolfgang, Germany）を、５％ｗ／ｖの濃度になるようにエタノール５０ｍＬ中に懸濁させ、高速（２４０００ｒｐｍにて１０分間）（Ｘ６２０モーターおよびＴ１０分散シャフト、Ingenieurburo CAT M. Zipperer GmbH, Staufen, Germany）でサイズを縮小させ、ＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ－Ｃ３高圧ホモジナイザー（Avestin Inc., Ottawa, Canada）を用いた高圧均質化（２０，０００ＰＳＩにて４０サイクル）を行った。これらのサイクルは、処理された懸濁液をサンプルタンク（閉ループ）に直接再循環させることによって行った。ＨＰＨは、サンプル温度の上昇を引き起こすので、すべての操作は、均質化バルブの前に配置した熱交換器を使用して行い、サンプル温度を１５±１℃に維持した。

【0190】

プロセスの最後に懸濁液からアリコートを除去し、レーザー回折（下記参照）によってシスプラチン微結晶のＰＳＤを測定した。

【0191】

次いで、加熱したイソプロパノールに可溶化させた硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）およびＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）（または、比較例についてはトリステアリン）を微結晶懸濁液に添加し、最終濃度が２．０％ｗ／ｖのシスプラチンおよび２．０％ｗ／ｖのトリグリセリド／ＴＰＧＳ（９９：１ｗ／ｗ）の混合物を得、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0192】

バルクシスプラチン、サイズ縮小プロセスからのシスプラチン微粒子、およびシスプラチン乾燥粉末製剤の幾何学的ＰＳＤを、懸濁および個別化された粒子として測定すると、本発明の範囲内であった。これは、４０Ｗ超音波プローブ（Malvern Instruments Ltd.）を備えたＨｙｄｒｏＭＶディスペンサーに接続したＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ３０００レーザー回折計（Malvern Instruments Ltd., Worcestershire, UK）を使用して、実施例１に記載したように、行われた。

【0193】

〔実施例１７．実施例６１６によって調製されたシスプラチン乾燥粉末製剤の沈着速度の分析〕

【0194】

実施例１６による製剤を、そのインビトロでの肺沈着パターンおよびＦＰＦ値に関して分析した。

【0195】

ＦＰＦ（５μｍ未満のｄａｅを有するシスプラチンベースの粒子の回収された用量に対する割合）、および、ＭＭＡＤによって特性付けられる空気力学的ＰＳＤを、欧州薬局方８．０．（２０１４）に記載されるようにして、ＮＧＩ（Copley Scientific, Nottingham, UK）（装置Ｅ）を使用して決定した。あらかじめ３５５ｍｍのステンレス鋼メッシュを通してふるい分けしたＤＰＩ製剤（実施例１７によるもの）２０ｍｇの質量を、サイズ３ＨＰＭＣカプセル（Quali-V-I, Qualicaps, Madrid, Spain）中で秤量し、そのアダプターを備えた吸入ポート上に取り付けたＲＳ．０１乾燥粉末吸入器（RPC Plastiape, Osnago, Italy）を使用して、ＮＧＩ中に沈着させた（ｎ＝３）。

【0196】

【0197】

この流量において、カットオフ直径は、ＮＧＩの各ステージ間で、６．１２、３．４２、２．１８、１．３１、０．７２、０．４０、および０．２４μｍであった。臨界流量制御器を使用して、欧州薬局方８．０．（２０１４）によって要求されるように、１００Ｌ／分にて２．４秒の沈着時間、およびＰ３／Ｐ２比＜０．５の臨界流量を確保した。

【0198】

インパクション後、カプセル、装置、誘導ポート、予備分離器、７ステージ、およびＮＧＩのＭＯＣに沈着したシスプラチン質量を、希釈相としてＤＭＦを用いて収集し、３０分間超音波処理した。各ステージにおけるインパクション質量は、Ｌｅｖｅｔら（Levet et al, Int J Pharm 2016）に記載された有効なＥＴＡＡＳ法によるシスプラチン含量の定量によって決定した。

【0199】

【0200】

得られた結果は、実施例３で得られた結果と統合され、肺沈着に関して、他のトリグリセリドベースのシスプラチンＤＰＩ製剤と比較して、本発明で開示されるシスプラチン組成物の優位性を実証した。

【0201】

〔実施例１８．実施例１６によって調製されたシスプラチン乾燥粉末製剤からのシスプラチンの溶解速度の分析〕

【0202】

ＤＰＩ製剤の溶解特性は、Ｐｉｌｃｅｒら（Pilcer et al, J Pharm Sci 2013）に記載された方法の適合を適用することによって、証明した。ＤＰＩ放出プロファイルの調査のために特別に開発された溶解システム（Copley Scientific, Nottingham, UK）を、「ＰａｄｄｌｅｏｖｅｒＤｉｓｃ」（Eur.Ph. 7）から適合させた方法を用いて、使用した。肺に沈着する粒子の放出プロファイルを調査するために、シスプラチン製剤の分画を最初にＮＧＩで行った。ステージ３のカップは、粒子を収集するための取り外し可能なディスク挿入部分を備えるように選択された。特に興味深いことに、選択された吸入速度（１００Ｌ／ｍｉｎで２．４秒間）では、ステージ３のカットオフ直径は、２．１８～３．４２μｍの範囲であり、実施例１６による製剤が適切な量で充填されたカプセルから肺を標的とする粒子の選択を可能にし、ステージ３において約２ｍｇのシスプラチンを沈着させた。次いで、ディスク挿入部分をポリカーボネート膜（孔径０．４μｍ）（Merck Millipore）で覆い、４００ｍＬのｍＳＬＦ（Son and McConville, 2009）（肺電解質および界面活性剤組成物を模した培地）を充填したパドル溶解装置（Erweka DT6; ERWEKA GmbH,
Heusenstamm, Hesse, Germany）に入れた。

【0203】

【0204】

溶解アッセイの最後に、ディスクアセンブリを溶解容器に開け、３０分間、超音波処理して、１００％シスプラチン溶解値を確立した。

【0205】

【0206】

類似性因子ｆ２を使用して、２つの溶解プロファイルを比較した（Shah et al, Pharm Res 1998）。曲線は、有意に異なっていた（ｆ２＜５０）。さらに、実施例１６からのすべての時点での累積放出値は、シスプラチン微結晶からのものと比較して、有意に低く（ｐ＜０．０５、ｔ検定）、例えば、４時間ではそれぞれ５７±４％および７６±５％（ｐ＜０．０１）であり、これは、本発明の組成物からのシスプラチンの制御放出プロファイルを示す。

【0207】

〔実施例１９．吸入用ブデソニド乾燥粉末製剤の調製ｎ°４〕

【0208】

０．１５００％ｗ／ｖのブデソニド、２．８２１５％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）（または、比較例ＢＵＤ－ＴＳ４についてはトリステアリン）、および０．０２８５％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温イソプロパノール（６５℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒ
Ｂ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0209】

〔実施例２０．吸入用ブデソニド乾燥粉末製剤の調製ｎ°５〕

【0210】

０．６００％ｗ／ｖのブデソニド、２．３７６％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）（または、比較例ＢＵＤ－ＴＳ５についてはトリステアリン）、および０．０２４％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温イソプロパノール（６５℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0211】

〔実施例２１．吸入用ブデソニド乾燥粉末製剤の調製ｎ°６〕

【0212】

１．５００％ｗ／ｖのブデソニド、１．４８５％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）、および０．０１５％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温イソプロパノール（６５℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0213】

〔実施例２２．実施例１９および２０によって調製されたブデソニド乾燥粉末製剤の沈着速度の分析〕

【0214】

実施例１９および２０による製剤を、そのインビトロでの肺沈着パターンおよび微粒子画分値に関して分析した。製剤１９および２０の比較例、すなわち、ＢＵＤ－ＴＳ４およびＢＵＤ－ＴＳ５をそれぞれ、硬化ヒマシ油の代わりにトリステアリン（ＴＳ）（Tokyo Chemical Company, Tokyo, Japan）を用いて、対応する同一のプロトコルによって製造した。

【0215】

ＦＰＦ（５μｍ未満のｄａｅを有するブデソニドベースの粒子の回収された用量に対する割合）、および、ＭＭＡＤによって特性付けられる空気力学的ＰＳＤを、欧州薬局方８．０．（２０１４）に記載されるようにして、ＮＧＩ（Copley Scientific, Nottingham,
UK）（装置Ｅ）を使用して決定した。あらかじめ３５５ｍｍのステンレス鋼メッシュを通してふるい分けしたＤＰＩ製剤（実施例１９および２０、ならびに比較粉末ＢＵＤ－ＴＳ４およびＢＵＤ－ＴＳ５によるもの）１０ｍｇの質量を、サイズ３ＨＰＭＣカプセル（Quali-V-I, Qualicaps, Madrid, Spain）中で秤量し、そのアダプターを備えた吸入ポート上に取り付けたＲＳ．０１乾燥粉末吸入器（RPC Plastiape, Osnago, Italy）を使用して、ＮＧＩ中に沈着させた（ｎ＝３）。

【0216】

【0217】

この流量において、カットオフ直径は、ＮＧＩの各ステージ間で、６．１２、３．４２、２．１８、１．３１、０．７２、０．４０、および０．２４μｍであった。臨界流量制御器を使用して、欧州薬局方８．０．（２０１４）によって要求されるように、１００Ｌ／ｍｉｎにて２．４秒の沈着時間、およびＰ３／Ｐ２比＜０．５の臨界流量を確保した。

【0218】

インパクション後、カプセル、装置、誘導ポート、予備分離器、７ステージ、およびＮＧＩのＭＯＣに沈着したブデソニド質量を、希釈相として超純水：イソプロパノールが６０：４０（ｖ／ｖ）の混合物中の０．５％ｗ／ｖのポロキサマー４０７を用いて収集し、６０℃にて３０分間、超音波処理した。次いで、溶液を、細孔径が０．４５μｍである再生セルロースＭｉｎｉｓａｒｔシリンジフィルター（Sartorius Stedim Biotech GmbH, Germany）を通して濾過した。各ステージにおけるインパクション質量は、有効なＨＰＬＣ法によるブデソニド含有量の定量によって決定した。クロマトグラフィーシステム（HP 1200 series, Agilent Technologies, Diegem, Belgium）は、４基のポンプ、オートサンプラー、およびダイオードアレイ検出器を備えていた。分離は、逆相ＡｌｌｔｉｍａＣ１８カラム（５ｍｍ、１５０ｍｍ×４．６ｍｍ）（Hichrom, Theale, UK）で行った。移動相は、ＰＨ３．２０のリン酸バッファ：アセトニトリル（６５：３５ｖ／ｖ）からなり、１ｍ．５Ｌ／ｍｉｎの流速で送達された。定量は、２４５ｎｍにて行った。注入量は１００μＬであり、温度は４０℃に設定され、分析実行時間は２２分であった。

【0219】

【0220】

【0221】

〔実施例２３．実施例１９、２０および２１によって調製されたブデソニド乾燥粉末製剤からのブデソニドの溶解速度の分析〕

【0222】

実施例１９、２０および２１によるＤＰＩ製剤、および比較ブデソニド粉末（すなわち、微粉化ブデソニド）の溶解特性はＰｉｌｃｅｒら（Pilcer et al, J Pharm Sci 2013）に記載された方法の適合を適用することによって、証明した。比較微粉化ブデソニド粉末を、３％ｗ／ｖのブデソニドイソプロパノール溶液を噴霧乾燥（Mini-Spray Dryer B-290, Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）することによって製造して、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。

【0223】

ＤＰＩ放出プロファイルの調査のために特別に開発された溶解システム（Copley Scientific, Nottingham, UK）を、「ＰａｄｄｌｅｏｖｅｒＤｉｓｃ」（Eur.Ph. 7）から適合させた方法を用いて、使用した。肺に沈着する粒子の放出プロファイルを調査するために、ブデソニド製剤の分画を最初にＮＧＩを用いて行った。ステージ２のカップは、粒子を収集するための取り外し可能なディスク挿入部分を備えるように選択された。特に興味深いことに、選択された吸入速度（１００Ｌ／ｍｉｎで２．４秒間）では、ステージ２のカットオフ直径は、６．１２～３．４２μｍの範囲であり、微粉化ブデソニド、ならびに実施例２０、２１および２２による製剤が適切な量で充填されたカプセルから肺を標的とする粒子の選択を可能にし、ステージ３において約５００μｇのブデソニドを沈着させた。次いで、ディスク挿入部分をポリカーボネート膜（孔径０．４μｍ）（Merck Millipore）で覆い、４００ｍＬの０．０１ｍＭリン酸バッファ生理食塩水（ｐＨ７．４）を充填したパドル溶解装置（Erweka DT6; ERWEKA GmbH, Heusenstamm, Hesse, Germany）に入れた。

【0224】

【0225】

１００％ブデソニド溶解値は、ステージ３で沈着した質量に対応する。

【0226】

【0227】

〔実施例２４．吸入用パクリタキセル乾燥粉末製剤の調製ｎ°１〕

【0228】

０．１５００％ｗ／ｖのパクリタキセル、２．８２１５％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）、および０．０２８５％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温エタノール（５０℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0229】

〔実施例２５．吸入用パクリタキセル乾燥粉末製剤の調製ｎ°２〕

【0230】

０．６００％ｗ／ｖのパクリタキセル、２．３７６％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）、および０．０２４％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温エタノール（５０℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0231】

〔実施例２６．吸入用パクリタキセル乾燥粉末製剤の調製ｎ°３〕

【0232】

１．５００％ｗ／ｖのパクリタキセル、１．４８５％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）、および０．０１５％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温エタノール（５０℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0233】

〔実施例２７．吸入用パクリタキセル乾燥粉末製剤の調製ｎ°４〕

【0234】

２．７００％ｗ／ｖのパクリタキセル、０．２９７％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）、および０．００３％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温エタノール（５０℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0235】

〔実施例２８．吸入用パクリタキセル乾燥粉末製剤の調製ｎ°５〕

【0236】

１．５０％ｗ／ｖのパクリタキセル、１．３５％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）、および０．１５％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温エタノール（５０℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0237】

〔実施例２９．吸入用パクリタキセル乾燥粉末製剤の調製ｎ°６〕

【0238】

１．５％ｗ／ｖのパクリタキセル、１．２％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）、および０．３％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）を、磁気撹拌下で温エタノール（５０℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0239】

〔実施例３０．吸入用パクリタキセル乾燥粉末製剤の調製ｎ°７〕

【0240】

１．５００％ｗ／ｖのパクリタキセル、１．４８５％ｗ／ｖの硬化ヒマシ油（BASF, Ludwigshafen, Germany）、０．０１５％ｗ／ｖのＴＰＧＳ（Sigma-Aldrich, St-Louis, USA）、および０．３％ｗ／ｖのＬ－ロイシン（Sigma-Aldrich）を、磁気撹拌下で温エタノール（５０℃）中に可溶化させ、Ｍｉｎｉ－ＳｐｒａｙＤｒｙｅｒＢ－２９０（Buchi Labortechnik AG, Flawil, Switzerland）を用いて噴霧乾燥し、ヒト用のＤＰＩ製剤を得た。噴霧乾燥の間に用いた操作パラメータは、以下の通りであった：供給速度３．０ｇ／ｍｉｎ、入口温度７０℃、０．７ｍｍノズル、１．５ｍｍノズルキャップ、圧縮空気８００Ｌ／ｍｉｎ、および乾燥空気流３５ｍ^３／ｈ。装置は、Ｂ－２９６除湿器（Buchi Labortechnik AG）を備え、噴霧乾燥の間、相対湿度を５０％ＨＲに維持した。

【0241】

〔実施例３１．吸入用ブデソニド乾燥粉末製剤の調製ｎ°７〕

【0242】

吸入用ブデソニド乾燥粉末製剤ｎ°４を、最初に実施例１９に従って調製した。次いで、１０ｇ量の吸入用ブデソニド乾燥粉末製剤ｎ°４および３０ｇのラクトース（Respitose（登録商標）SV003, DFE Pharma, Goch, Germany）を、Ｔｕｒｂｕｌａ（登録商標）ミキサー（Willy A. Bachofen AG, Muttenz, Switzerland）中で均質になるようにブレンドし、吸入用の担体ベース乾燥粉末製剤を得た。

【0243】

本発明は、記載された実施形態に限定されず、添付の特許請求の範囲から逸脱することなく変形を適用することができることが理解されるべきである。

【図面の簡単な説明】

【0244】

【図1】図１は、比較例（Ｌｅｖｅｔらにおける組成物Ｆ５）ならびに実施例１および２のＦＰＦ値（％）を示す（平均±標準偏差、ｎ＝２～３）。

【図2】図２は、シスプラチン微粒子のみから構成される比較製剤と比較した、実施例１および２によって調製されたＤＰＩ製剤の呼吸可能画分からのシスプラチンの放出プロファイルを示す。

【図3】図３は、実施例１０のＦＰＦ値を、ペメトレキセド微粒子のみから構成される比較製剤と比較して示し（それぞれ、平均±標準偏差、ｎ＝３および１）、肺沈着に関する従来のＤＰＩ製剤に対する実施例１０の優位性を実証する。

【図4】図４は、ペメトレキセド微粒子のみからなる比較製剤と比較した、実施例１０によって調製されたＤＰＩ製剤の呼吸可能画分からのペメトレキセドの放出プロファイルを示す（平均±標準偏差、ｎ＝３）。

【図5】図５は、実施例１３のＦＰＦ値を示し（平均±標準偏差）、本発明において開示されるインスリンベースのＤＰＩ組成物の高い肺沈着速度を実証する。

【図6】図６は、Ｄｅｐｒｅｔｅｒらによって記載された比較製剤（１８０分まで）（Ｂ）と比較した、実施例１３によって調製されたＤＰＩ製剤（２４０分まで、平均±標準偏差、ｎ＝２）（Ａ）の呼吸可能画分からのインスリンの放出プロファイルを示す。

【図7】図７は、シスプラチン微粒子からなる比較製剤と比較した、実施例１６によって調製されたＤＰＩ製剤の呼吸可能画分からのシスプラチンの放出プロファイルを示す（平均±標準偏差、ｎ＝３）。

【図8】図８は、比較例ＢＵＤ－ＴＳ４およびＢＵＤ－ＴＳ５と比較した、実施例１９および２０のＦＰＦ値を示す（平均±標準偏差、ｎ＝３）。（＊＊＊）ｐ＜０．００１、ｔ検定、肺沈着に関して、他のトリグリセリドベースのブデソニドＤＰＩ製剤と比較して、本発明において開示されるブデソニド組成物の優位性を実証する。

【図9】図９は、微粉化ブデソニド比較例、ならびに実施例１９、２０および２１によって調製されたＤＰＩ製剤の呼吸可能画分からのブデソニドの放出プロファイルを示し（ｎ＝１）、本発明の組成物からのブデソニドの制御放出プロファイルを示し、薬物／脂質比率を調節することによって放出プロファイルを調節する可能性を示す。

【図1】