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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024105355
(43)【公開日】2024-08-06
(54)【発明の名称】アッセイ測定を実行するための組成物および方法
(51)【国際特許分類】
G01N 33/543 20060101AFI20240730BHJP
【ＦＩ】
G01N33/543 575
G01N33/543 541A
【審査請求】有
【請求項の数】2
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2024071628
(22)【出願日】2024-04-25
(62)【分割の表示】P 2021538813の分割
【原出願日】2019-12-23
(31)【優先権主張番号】62/787,892
(32)【優先日】2019-01-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＲＩＴＯＮ
２．ＰＬＵＲＯＮＩＣ
３．ＢＲＩＪ
４．ＴＷＥＥＮ
５．ＮＯＮＩＤＥＴ
６．ジップロック
(71)【出願人】
【識別番号】505243216
【氏名又は名称】メソ スケール テクノロジーズ エルエルシー
(74)【代理人】
【識別番号】100079108
【弁理士】
【氏名又は名称】稲葉 良幸
(74)【代理人】
【識別番号】100109346
【弁理士】
【氏名又は名称】大貫 敏史
(74)【代理人】
【識別番号】100117189
【弁理士】
【氏名又は名称】江口 昭彦
(74)【代理人】
【識別番号】100134120
【弁理士】
【氏名又は名称】内藤 和彦
(72)【発明者】
【氏名】タッカー－シュウォーツ，アレクサンダー ケイ．
(72)【発明者】
【氏名】シーガル，ジョージ
(57)【要約】
【課題】アッセイ測定を実行するための組成物および方法に関する。
【解決手段】本開示は、アッセイを実施するための組成物、試薬、キット、系、系構成成分、および方法を提供する。より具体的には、本開示は、アルキルジエタノールアミン、例えば、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）を含む、発光を検出するためのアッセイ組成物に関する。実施形態では、アッセイ組成物は、２－ジブチルアミノエタノール（ＢＤＡＥ）を含む。
【選択図】なし
【解決手段】本開示は、アッセイを実施するための組成物、試薬、キット、系、系構成成分、および方法を提供する。より具体的には、本開示は、アルキルジエタノールアミン、例えば、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）を含む、発光を検出するためのアッセイ組成物に関する。実施形態では、アッセイ組成物は、２－ジブチルアミノエタノール（ＢＤＡＥ）を含む。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
（ａ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、および（ｉｉｉ）イオン性構成成分、または
（ｂ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）界面活性剤、または
（ｃ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）液体希釈剤、または
（ｄ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、（ｉｖ）界面活性剤、および（ｖ）液体希釈剤、を含む、組成物。
（ｂ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）界面活性剤、または
（ｃ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）液体希釈剤、または
（ｄ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、（ｉｖ）界面活性剤、および（ｖ）液体希釈剤、を含む、組成物。
【請求項2】
（ａ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、および（ｉｉｉ）イオン性構成成分、または
（ｂ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）界面活性剤、または
（ｃ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）液体希釈剤、または
（ｄ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、（ｉｖ）界面活性剤、および（ｖ）液体希釈剤、から本質的になる、組成物。
（ｂ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）界面活性剤、または
（ｃ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）液体希釈剤、または
（ｄ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、（ｉｖ）界面活性剤、および（ｖ）液体希釈剤、から本質的になる、組成物。
【請求項3】
（ａ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、および（ｉｉｉ）イオン性構成成分、または
（ｂ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）界面活性剤、または
（ｃ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）液体希釈剤、または
（ｄ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、（ｉｖ）界面活性剤、および（ｖ）液体希釈剤、からなる、組成物。
（ｂ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）界面活性剤、または
（ｃ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）液体希釈剤、または
（ｄ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、（ｉｖ）界面活性剤、および（ｖ）液体希釈剤、からなる、組成物。
【請求項4】
ＥＣＬ標識、結合アッセイ用の結合試薬、防腐剤、殺生物剤、消泡剤、過塩素酸塩化合物、着色剤、トレーサー化学物質、固体支持体、またはそれらの組み合わせのうちの少なくとも１つをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項5】
前記ｐＨ緩衝構成成分が、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）である、請求項１～４のいずれかに記載の組成物。
【請求項6】
前記ｐＨ緩衝構成成分が、トリスであり、前記組成物が、界面活性剤を含む、請求項１～５のいずれかに記載の組成物。
【請求項7】
前記界面活性剤が、フェノールエーテルを含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項8】
前記界面活性剤が、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００である、請求項７に記載の組成物。
【請求項9】
前記界面活性剤が、フェノールエーテルを含まない、請求項６に記載の組成物。
【請求項10】
前記組成物が、脂質二重層膜を破壊しない、請求項９に記載の組成物。
【請求項11】
前記界面活性剤が、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項12】
前記界面活性剤が、ＴＷＥＥＮ－２０である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項13】
前記界面活性剤が、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項14】
フェノールエーテルを含まない界面活性剤を含む、請求項１～４のいずれかに記載の組成物。
【請求項15】
前記組成物が、脂質二重層膜を破壊しない、請求項１４に記載の組成物。
【請求項16】
前記界面活性剤が、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、Ｔｅｔｒｏｎｉｃ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項17】
前記界面活性剤が、ＴＷＥＥＮ２０である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項18】
前記界面活性剤が、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルである、請求項１６に記載の組成物。
【請求項19】
前記ｐＨ緩衝構成成分が、リン酸塩、ＨＥＰＥＳ、グリシルグリシン、ホウ酸塩、酢酸塩、またはクエン酸塩である、請求項１４～１８のいずれかに記載の組成物。
【請求項20】
前記組成物が、ＢＤＥＡを含む、請求項１～１９のいずれかに記載の組成物。
【請求項21】
前記組成物が、ＤＢＡＥを含む、請求項１～２０のいずれかに記載の組成物。
【請求項22】
前記組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬが、１８℃～３０℃の温度範囲にわたって、平均して１℃あたり１％未満しか変化しない、請求項１～２１のいずれかに記載の組成物。
【請求項23】
前記ＥＣＬが、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される、請求項２２に記載の組成物。
【請求項24】
前記ｐＨが、約６～約９である、請求項１～２３のいずれかに記載の組成物。
【請求項25】
前記ｐＨが、約７～約８である、請求項２４に記載の組成物。
【請求項26】
前記ｐＨが、約７．６～約７．９である、請求項２５に記載の組成物。
【請求項27】
前記ｐＨが、約７．８である、請求項２６に記載の組成物。
【請求項28】
前記組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬのｐＨでのＥＣＬの変化の傾きが、ｐＨ単位あたり１０％未満である、請求項１～２７のいずれかに記載の組成物。
【請求項29】
前記ＥＣＬが、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される、請求項２８に記載の組成物。
【請求項30】
前記イオン性構成成分が、塩化物イオンを含む、請求項１～２９のいずれかに記載の組成物。
【請求項31】
前記イオン性構成成分が、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＬｉＣｌ、または前記塩のうちの任意の２つまたは任意の３つの組み合わせを含む、請求項３０に記載の組成物。
【請求項32】
前記イオン性構成成分が、ＮａＣｌを含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項33】
前記イオン性構成成分が、ＫＣｌを含む、請求項３１に記載の組成物。
【請求項34】
液体希釈剤を含む、請求項１～３３のいずれかに記載の組成物。
【請求項35】
前記液体希釈剤が、水であり、前記組成物が、実質的に水性である、請求項３４に記載の組成物。
【請求項36】
ＢＤＥＡまたはＤＢＡＥの濃度が、約１０ｍＭ～約８００ｍＭである、請求項１～３５のいずれかに記載の組成物。
【請求項37】
ＢＤＥＡまたはＤＢＡＥの濃度が、約７５ｍＭ～約３００ｍＭである、請求項３６に記載の組成物。
【請求項38】
ＢＤＥＡまたはＤＢＡＥの濃度が、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭである、請求項３７に記載の組成物。
【請求項39】
ＢＤＥＡまたはＤＢＡＥの濃度の公称値の０．８～１．２倍への変化が、前記組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬの１０％未満の変化を提供する、請求項１～３８のいずれかに記載の組成物。
【請求項40】
前記ＥＣＬが、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される、請求項３９に記載の組成物。
【請求項41】
前記ｐＨ緩衝構成成分の濃度が、約１０ｍＭ～約８００ｍＭである、請求項１～４０のいずれかに記載の組成物。
【請求項42】
前記ｐＨ緩衝構成成分の濃度が、約１００ｍＭ～約３００ｍＭである、請求項４１に記載の組成物。
【請求項43】
前記ｐＨ緩衝構成成分の濃度が、約１５０ｍＭ～約２５０ｍＭである、請求項４２に記載の組成物。
【請求項44】
前記組成物が、約０．３Ｍ超のイオン強度を有する、請求項１～４３のいずれかに記載の組成物。
【請求項45】
前記組成物が、約０．５Ｍ超のイオン強度を有する、請求項４４に記載の組成物。
【請求項46】
前記組成物が、約０．８Ｍ超のイオン強度を有する、請求項４５に記載の組成物。
【請求項47】
前記組成物が、約１．０Ｍ超のイオン強度を有する、請求項４６に記載の組成物。
【請求項48】
前記組成物が、塩化物イオンを含み、前記塩化物イオンの濃度が、約０．２５Ｍ超である、請求項１～４７のいずれかに記載の組成物。
【請求項49】
前記組成物が、塩化物イオンを含み、前記塩化物イオンの濃度が、約０．５Ｍ超である、請求項１～４８のいずれかに記載の組成物。
【請求項50】
前記組成物が、塩化物イオンを含み、前記塩化物イオンの濃度が、約０．７５Ｍ超である、請求項１～４９のいずれかに記載の組成物。
【請求項51】
前記組成物が、塩化物イオンを含み、前記塩化物イオンの濃度が、約１．０Ｍ超である、請求項１～５０のいずれかに記載の組成物。
【請求項52】
前記ｐＨ緩衝構成成分が、リン酸塩ではなく、前記組成物が、前記ｐＨ緩衝構成成分としてリン酸塩を含有する同じ組成物と比較して、ＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬの少なくとも２０％の増加および／またはＥＣＬ標識の不在下で生成されるバックグラウンドＥＣＬの少なくとも２０％の減少を提供する、請求項１～５１のいずれかに記載の組成物。
【請求項53】
前記ＥＣＬ標識からの前記ＥＣＬが、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される、および／またはＥＣＬ標識の不在下でのＥＣＬが、炭素系電極で生成される、請求項５２に記載の組成物。
【請求項54】
イオン性構成成分を含有しない同じ組成物と比較して、前記イオン性構成成分を含有する前記組成物を用いるイムノアッセイにおける非特異的結合（ＮＳＢ）が、より低い、請求項１～５３のいずれかに記載の組成物。
【請求項55】
前記組成物が、液体希釈剤を含まず、前記組成物が、乾燥形態で提供される、請求項１～３３のいずれかに記載の組成物。
【請求項56】
１つ以上の容器に、以下の材料、
（ａ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、
（ｂ）ｐＨ緩衝構成成分と、
（ｃ）イオン性構成成分と、を含む、キット。
（ａ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、
（ｂ）ｐＨ緩衝構成成分と、
（ｃ）イオン性構成成分と、を含む、キット。
【請求項57】
前記材料のうちの１つ以上が、乾燥形態である、請求項５６に記載のキット。
【請求項58】
前記キットが、液体希釈剤をさらに含む、請求項５７に記載のキット。
【請求項59】
前記キットが、界面活性剤または液体希釈剤を含まない、請求項５６または５７に記載のキット。
【請求項60】
前記キットが、界面活性剤をさらに含む、請求項５６または５７に記載のキット。
【請求項61】
組成物を生成するための方法であって、
（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、
（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分と、
（ｉｉｉ）イオン性構成成分と、を組み合わせることを含む、方法。
（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、
（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分と、
（ｉｉｉ）イオン性構成成分と、を組み合わせることを含む、方法。
【請求項62】
前記材料のうちの１つ以上が、乾燥形態である、請求項６１に記載の方法。
【請求項63】
請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と、
（ａ）アッセイ機器、
（ｂ）アッセイ消耗品、
（ｃ）追加のアッセイ試薬、
（ｄ）アッセイ試料、
またはそれらの組み合わせと、を含む、キット。
（ａ）アッセイ機器、
（ｂ）アッセイ消耗品、
（ｃ）追加のアッセイ試薬、
（ｄ）アッセイ試料、
またはそれらの組み合わせと、を含む、キット。
【請求項64】
請求項５６～６０のいずれかに記載のキット構成成分と、
（ａ）アッセイ機器、
（ｂ）アッセイ消耗品、
（ｃ）追加のアッセイ試薬、
（ｄ）アッセイ試料、
またはそれらの組み合わせと、を含む、キット。
（ａ）アッセイ機器、
（ｂ）アッセイ消耗品、
（ｃ）追加のアッセイ試薬、
（ｄ）アッセイ試料、
またはそれらの組み合わせと、を含む、キット。
【請求項65】
アッセイ機器を含み、前記アッセイ機器が、ＥＣＬアッセイを行うために構成されている、請求項６３および６４のいずれかに記載のキット。
【請求項66】
アッセイ消耗品を含み、ＥＣＬアッセイで使用するために構成された電極をさらに含む、請求項６３～６５のいずれかに記載のキット。
【請求項67】
前記電極が、炭素系電極である、請求項６６に記載のキット。
【請求項68】
前記電極が、スクリーン印刷されたカーボンインク電極である、請求項６７に記載のキット。
【請求項69】
追加のアッセイ試薬を含み、前記追加のアッセイ試薬が、結合試薬である、請求項６３～６８のいずれかに記載のキット。
【請求項70】
前記結合試薬が、ＥＣＬ標識で標識されている、請求項６９に記載のキット。
【請求項71】
前記標識が、有機金属ルテニウム錯体である、請求項７０に記載のキット。
【請求項72】
追加のアッセイ試薬を含み、前記追加のアッセイ試薬が、結合試薬であり、前記追加のアッセイ試薬が、前記電極上に固定化されている、請求項６６～６８のいずれかに記載のキット。
【請求項73】
追加のアッセイ試薬を含み、前記追加のアッセイ試薬が、前記電極上にアレイとして固定化された複数の結合試薬である、請求項６６～６８のいずれかに記載のキット。
【請求項74】
追加のアッセイ試薬を含み、前記追加のアッセイ試薬が、粒子上に固定化された結合試薬である、請求項６６～６８のいずれかに記載のキット。
【請求項75】
前記粒子が、磁気によって収集可能である、請求項７４に記載のキット。
【請求項76】
少なくとも１つのアッセイ試料を含み、前記少なくとも１つのアッセイ試料が、アッセイ較正試料および／またはアッセイ対照試料を含む、請求項６４～７５のいずれかに記載のキット。
【請求項77】
ＥＣＬを生成するための方法であって、
（ａ）電極を、
（ｉ）請求項１～５６のいずれかに記載の組成物、および
（ｉｉ）ＥＣＬ標識と接触させることと、
（ｂ）前記電極に電圧を印加することと、
（ｃ）ＥＣＬを生成することと、を含む、方法。
（ａ）電極を、
（ｉ）請求項１～５６のいずれかに記載の組成物、および
（ｉｉ）ＥＣＬ標識と接触させることと、
（ｂ）前記電極に電圧を印加することと、
（ｃ）ＥＣＬを生成することと、を含む、方法。
【請求項78】
（ｄ）前記ＥＣＬを測定することをさらに含む、請求項７７に記載の方法。
【請求項79】
ＥＣＬ標識の量を測定するための方法であって、
（ａ）電極を、
（ｉ）請求項１～５５のいずれかに記載の組成物、および
（ｉｉ）前記ＥＣＬ標識と接触させることと、
（ｂ）前記電極に電圧を印加することと、
（ｃ）ＥＣＬを生成することと、
（ｄ）前記ＥＣＬを測定することと、
（ｅ）前記測定されたＥＣＬから、前記標識の前記量を決定することと、を含む、方法。
（ａ）電極を、
（ｉ）請求項１～５５のいずれかに記載の組成物、および
（ｉｉ）前記ＥＣＬ標識と接触させることと、
（ｂ）前記電極に電圧を印加することと、
（ｃ）ＥＣＬを生成することと、
（ｄ）前記ＥＣＬを測定することと、
（ｅ）前記測定されたＥＣＬから、前記標識の前記量を決定することと、を含む、方法。
【請求項80】
ＥＣＬ標識に連結された結合試薬を含む結合錯体の量を測定するための方法であって、
（ａ）電極上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、
（ｂ）前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬を含む前記電極上に結合錯体を形成することと、
（ｃ）前記電極上の前記結合錯体を、請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と接触させることと、
（ｄ）前記組成物の存在下で前記電極に電圧を印加することと、
（ｅ）ＥＣＬを生成することと、
（ｆ）前記ＥＣＬを測定して、前記電極上の前記結合錯体の前記量を決定することと、を含む、方法。
（ａ）電極上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、
（ｂ）前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬を含む前記電極上に結合錯体を形成することと、
（ｃ）前記電極上の前記結合錯体を、請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と接触させることと、
（ｄ）前記組成物の存在下で前記電極に電圧を印加することと、
（ｅ）ＥＣＬを生成することと、
（ｆ）前記ＥＣＬを測定して、前記電極上の前記結合錯体の前記量を決定することと、を含む、方法。
【請求項81】
前記方法が、前記結合錯体の形成後、ならびに前記電極を前記組成物と接触させる前および／または接触中に、前記電極を洗浄することをさらに含む、請求項８０に記載の方法。
【請求項82】
ＥＣＬ標識に連結された結合試薬を含む結合錯体の量を測定するための方法であって、
（ａ）粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、
（ｂ）前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬を含む前記粒子上に結合錯体を形成することと、
（ｃ）前記粒子上の前記結合錯体を、請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と接触させることと、
（ｄ）電極上に前記粒子を収集することと、
（ｅ）前記組成物の存在下で前記電極に電圧を印加することと、
（ｆ）ＥＣＬを生成することと、
（ｇ）前記ＥＣＬを測定して、前記電極上の前記結合錯体の前記量を決定することと、を含む、方法。
（ａ）粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、
（ｂ）前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬を含む前記粒子上に結合錯体を形成することと、
（ｃ）前記粒子上の前記結合錯体を、請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と接触させることと、
（ｄ）電極上に前記粒子を収集することと、
（ｅ）前記組成物の存在下で前記電極に電圧を印加することと、
（ｆ）ＥＣＬを生成することと、
（ｇ）前記ＥＣＬを測定して、前記電極上の前記結合錯体の前記量を決定することと、を含む、方法。
【請求項83】
前記粒子が、磁気によって収集可能な粒子であり、前記粒子が、磁場を使用して前記電極上に収集される、請求項８２に記載の方法。
【請求項84】
前記方法が、前記結合錯体の形成後、ならびに前記粒子を前記組成物と接触させる前および／または接触中に、前記粒子を洗浄することをさらに含む、請求項８２または請求項８３に記載の方法。
【請求項85】
前記固定化された結合試薬および標識された結合試薬が、互いに直接結合する、請求項８０～８４のいずれかに記載の方法。
【請求項86】
前記固定化された結合試薬および標識された結合試薬が、他の結合種を通じて互いに間接的に結合する、請求項８０～８４のいずれかに記載の方法。
【請求項87】
分析物の量を測定するための方法であって、
（ａ）電極上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬および前記分析物（または前記分析物を含む試料）と接触させることと、
（ｂ）前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬を含む前記電極上に結合錯体を形成することと、
（ｃ）前記電極上の前記結合錯体を、請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と接触させることと、
（ｄ）前記組成物の存在下で前記電極に電圧を印加することと、
（ｅ）ＥＣＬを生成することと、
（ｆ）前記ＥＣＬを測定して、前記分析物の前記量を決定することと、を含む、方法。
（ａ）電極上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬および前記分析物（または前記分析物を含む試料）と接触させることと、
（ｂ）前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬を含む前記電極上に結合錯体を形成することと、
（ｃ）前記電極上の前記結合錯体を、請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と接触させることと、
（ｄ）前記組成物の存在下で前記電極に電圧を印加することと、
（ｅ）ＥＣＬを生成することと、
（ｆ）前記ＥＣＬを測定して、前記分析物の前記量を決定することと、を含む、方法。
【請求項88】
前記方法が、前記結合錯体の形成後、ならびに前記電極を前記組成物と接触させる前および／または接触中に、前記電極を洗浄することをさらに含む、請求項８７に記載の方法。
【請求項89】
前記方法が、複数の分析物の多重測定を実行するために構成され、前記電極が、前記複数の分析物用の固定化された結合試薬のアレイをその上に固定化されている、請求項８７または８８に記載の方法。
【請求項90】
分析物の量を測定するための方法であって、
（ａ）粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬および分析物（または前記分析物を含む試料）と接触させることと、
（ｂ）前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬を含む前記粒子上に結合錯体を形成することと、
（ｃ）前記粒子上の前記結合錯体を、請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と接触させることと、
（ｄ）電極上に前記粒子を収集することと、
（ｅ）前記組成物の存在下で前記電極に電圧を印加することと、
（ｆ）ＥＣＬを生成することと、
（ｇ）前記ＥＣＬを測定して、前記分析物の前記量を決定することと、を含む、方法。
（ａ）粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬および分析物（または前記分析物を含む試料）と接触させることと、
（ｂ）前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬を含む前記粒子上に結合錯体を形成することと、
（ｃ）前記粒子上の前記結合錯体を、請求項１～５５のいずれかに記載の組成物と接触させることと、
（ｄ）電極上に前記粒子を収集することと、
（ｅ）前記組成物の存在下で前記電極に電圧を印加することと、
（ｆ）ＥＣＬを生成することと、
（ｇ）前記ＥＣＬを測定して、前記分析物の前記量を決定することと、を含む、方法。
【請求項91】
前記粒子が、磁気によって収集可能な粒子であり、前記粒子が、磁場を使用して前記電極上に収集される、請求項９０に記載の方法。
【請求項92】
前記方法が、前記結合錯体の形成後、ならびに前記粒子を前記組成物と接触させる前および／または接触中に、前記粒子を洗浄することをさらに含む、請求項９０または請求項９１に記載の方法。
【請求項93】
前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬が、（ｉ）対象の分析物の結合パートナー、（ｉｉ）前記対象の分析物、もしくはその類似体および／もしくは競合物、または（ｉｉｉ）種（ｉ）もしくは（ｉｉ）と結合可能な反応性構成成分を含む、請求項８０～８６のいずれかに記載の方法。
【請求項94】
前記固定化された結合試薬および前記標識された結合試薬が、（ｉ）前記分析物の結合パートナー、（ｉｉ）前記分析物、もしくはその類似体および／もしくは競合物、または（ｉｉｉ）種（ｉ）もしくは（ｉｉ）と結合可能な反応性構成成分を含む、請求項８７～９２のいずれかに記載の方法。
【請求項95】
前記電極が、炭素系電極である、請求項７７～９４のいずれかに記載の方法。
【請求項96】
前記電極が、スクリーン印刷されたカーボンインク電極である、請求項９５に記載の方法。
【請求項97】
前記ＥＣＬが、カメラを使用して画像化される、請求項７７～９６のいずれかに記載の方法。
【請求項98】
前記ＥＣＬが、フォトダイオードを使用して測定される、請求項７７～９７のいずれかに記載の方法。
【請求項99】
前記電極が、マルチウェルプレートアッセイ消耗品内にある、請求項７７～９８のいずれかに記載の方法。
【請求項100】
前記電極が、フローセル内にある、請求項７７～９８のいずれかに記載の方法。
【請求項101】
前記電極が、白金である、請求項７７～９８のいずれかに記載の方法。
【請求項102】
前記界面活性剤の濃度が、約０．２ｍＭ～約１０ｍＭである、請求項１～５５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項103】
前記界面活性剤の濃度が、約０．５ｍＭ～約８ｍＭである、請求項１０２に記載の組成物。
【請求項104】
前記界面活性剤の濃度が、約１．０ｍＭ～約５ｍＭである、請求項１０３に記載の組成物。
【請求項105】
前記界面活性剤の濃度が、前記界面活性剤の臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）超である、請求項１～５５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項106】
前記界面活性剤の濃度が、約０．２ｍＭ～約１０ｍＭである、請求項６０または６３～７６のいずれか一項に記載のキット。
【請求項107】
前記界面活性剤の濃度が、約０．５ｍＭ～約８ｍＭである、請求項１０６に記載のキット。
【請求項108】
前記界面活性剤の濃度が、約１．０ｍＭ～約５ｍＭである、請求項１０７に記載のキット。
【請求項109】
前記界面活性剤の濃度が、前記界面活性剤の臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）超である、請求項６０または６３～７６のいずれか一項に記載のキット。
【請求項110】
前記界面活性剤の濃度が、約０．２ｍＭ～約１０ｍＭである、請求項７７～１０１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項111】
前記界面活性剤の濃度が、約０．５ｍＭ～約８ｍＭである、請求項１１０に記載の方法。
【請求項112】
前記界面活性剤の濃度が、約１．０ｍＭ～約５ｍＭである、請求項１１１に記載の方法。
【請求項113】
前記界面活性剤の濃度が、前記界面活性剤の臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）超である、請求項７７～１０１のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本明細書は、アッセイ、特にエレクトロケミルミネッセントアッセイで使用するための組成物、およびそれを使用する方法に関する。各々が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第６，９１９，１７３号、同第７，２８８，４１０号、同第７，４９１，５４０号、および同第８，７８５，２０１号を参照されたい。
【背景技術】
【0002】
分析測定にエレクトロケミルミネッセンス（ＥＣＬ）を利用する市販の機器は数多く存在する。ＥＣＬ標識の例としては、ｉ）発光性有機金属化合物、例えば、Ｒｕ、Ｏｓ、Ｉｒ、Ｒｅ、またはトリス－ビピリジル－ルテニウム（ＲｕＢｐｙ）部分などのランタノイド金属を含有する化合物、ｉｉ）ルミノールおよび関連化合物、ならびにｉｉｉ）貴金属ナノクラスター、例えば、一般式Ａｕｎ（ＳＲ）ｍを有する金ナノクラスター（式中、ｎおよびｍが、整数（例えば、ｎおよびｍが、１８～１４４）である）が挙げられる。ＥＣＬプロセスでＥＣＬ標識に関与する種は、本明細書ではＥＣＬ共反応物と称される。通常使用される共反応物としては、第三級アミン（例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，８４６，４８５号を参照されたい）、シュウ酸塩、およびＲｕＢｐｙからのＥＣＬ用の過硫酸塩、およびルミノールからのＥＣＬ用の過酸化水素（例えば、米国特許第５，２４０，８６３号を参照されたい）が挙げられる。ＥＣＬ標識によって生成される光は、診断手順のレポーターシグナルとして使用することができる（Ｂａｒｄ ｅｔ ａｌ．、米国特許第５，２３８，８０８号）。例えば、ＥＣＬ標識は、抗体、抗原、核酸、受容体、リガンド、または小分子などの結合剤に共有結合することができ、結合相互作用における結合試薬の関与は、ＥＣＬ標識から放出されたＥＣＬを測定することによって監視することができる。あるいは、ＥＣＬ活性化合物からのＥＣＬシグナルは、化学的環境の指標であり得る（例えば、ＥＣＬ共反応物の形成または破壊を監視するＥＣＬアッセイについて説明している米国特許第５，６４１，６２３号を参照されたい）。ＥＣＬ、ＥＣＬ標識、ＥＣＬアッセイ、およびＥＣＬアッセイを行うための機器のさらなる背景については、米国特許第５，０９３，２６８号、同第５，１４７，８０６号、同第５，３２４，４５７号、同第５，５９１，５８１号、同第５，５９７，９１０号、同第５，６４１，６２３号、同第５，６４３，７１３号、同第５，６７９，５１９号、同第５，７０５，４０２号、同第５，８４６，４８５号、同第５，８６６，４３４号、同第５，７８６，１４１号、同第５，７３１，１４７号、同第６，０６６，４４８号、同第６，１３６，２６８号、同第５，７７６，６７２号、同第５，３０８，７５４号、同第５，２４０，８６３号、同第６，２０７，３６９号、同第５，５８９，１３６号、ならびに公開ＰＣＴ第ＷＯ９９／６３３４７号、同第ＷＯ００／０３２３３号、同第ＷＯ９９／５８９６２号、同第ＷＯ９９／３２６６２号、同第ＷＯ９９／１４５９９号、同第ＷＯ９８／１２５３９号、同第ＷＯ９７／３６９３１号、および同第ＷＯ９８／５７１５４号を参照されたい。
【0003】
市販のＥＣＬ機器は、良好な性能を実証している。それらは、錯体試料マトリックスの感度、ダイナミックレンジ、精度、許容誤差を含む理由で広く使用されるようになっている。ＥＣＬに基づく測定を実行するために、いくつかのタイプの商用機器が利用可能である（Ｄｅｂａｄ，Ｊ．Ｄ．，ｅｔ ａｌ．，２００４．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＥＣＬ，ｉｎ：Ｅｌｅｃｔｒｏｇｅｎｅｒａｔｅｄ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ．Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ｐｐ．４３－７８．）。ビーズ上で結合アッセイを実行するために構成され、ＥＣＬを誘導するための電極上にビーズを収集するためのフローセルを含む機器について開示されている（米国特許第５，９３５，７７９号および同第５，９９３，７４０号）。ＥＣＬを誘導するために使用される電極上に固定化された試薬を使用するＥＣＬ機器についても開示されている（例えば、米国特許第６，１４０，０４５号、同第６，０６６，４４８号、同第６，０９０，５４５号、同第６，２０７，３６９号、および公開ＰＣＴ出願番号ＷＯ９８／１２５３９号を参照されたい）。そのようなＥＣＬ測定に好適な一体型電極を有するマルチウェルプレートについても開示されている（例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，９７７，７２２号および同第７，８４２，２４６号を参照されたい）。ＥＣＬ測定用の電極を有するカートリッジについても開示されている（例えば、ＵＳ２０１２／０１９０５８９およびＵＳ２０１２／０１７８０９１）。
【0004】
現在、ＥＣＬ共反応物トリプロピルアミン（ＴＰＡ）を含有する試薬は、ＥＣＬ標識からの光生成を向上するために利用することができる。出願人は、そのような構成成分が顕著な欠点を有することを発見した。
【発明の概要】
【0005】
本開示は、アッセイを実施するための組成物、試薬、キット、系、系構成成分、および方法に関する。実施形態では、本開示は、発光を誘導するためのアッセイ組成物に関し、組成物が、アルキルジエタノールアミンを含む。実施形態では、アルキルジエタノールアミンは、式（ＨＯＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ－ＣＨＲ１－ＣＨＲ２－ＣＨＲ３－Ｒ４を有し、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々独立して－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２である。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、－Ｈであり、Ｒ４は、－Ｈまたは－ＣＨ３である。実施形態では、本開示は、発光を誘導するためのアッセイ組成物に関し、組成物が、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）または２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）を含む。実施形態では、組成物は、ＢＤＥＡを含む。
【0006】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、を含む組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、を含む組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、液体希釈剤と、を含む組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、液体希釈剤と、を含む組成物を提供する。
【0007】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、から本質的になる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、から本質的になる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、液体希釈剤と、から本質的になる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、液体希釈剤と、から本質的になる組成物を提供する。
【0008】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、からなる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、からなる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、液体希釈剤と、からなる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、液体希釈剤と、からなる組成物を提供する。
【0009】
いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、ＥＣＬ標識、結合アッセイ用の結合試薬、防腐剤、殺生物剤、消泡剤、過塩素酸塩化合物、着色剤、トレーサー化学物質、固体支持体、またはそれらの組み合わせをさらに含む。
【0010】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬは、１８℃～３０℃の温度範囲にわたって、平均して１℃あたり１％未満しか変化しない。いくつかの実施形態では、組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬのｐＨでのＥＣＬの変化の傾きは、ｐＨ単位あたり１０％未満である。いくつかの実施形態では、ＥＣＬ共反応物の濃度の公称値の０．８～１．２倍への変化は、本明細書に記載の組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬの１０％未満の変化を提供する。いくつかの実施形態では、ＥＣＬは、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される。
【0011】
追加の実施形態では、本開示は、１つ以上の容器内に以下の材料、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、を含むキットを提供する。
【0012】
いくつかの実施形態では、本開示のキットは、本明細書に記載の組成物と、アッセイ機器、アッセイ消耗品、追加のアッセイ試薬、アッセイ試料、またはそれらの組み合わせと、を含む。いくつかの実施形態では、アッセイ機器は、ＥＣＬアッセイを行うために構成されている。
【0013】
さらなる実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、を含む組成物を生成するための方法を提供する。
【0014】
実施形態では、本開示は、電極を本明細書に記載の組成物およびＥＣＬ標識と接触させることと、電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、を含む、ＥＣＬを生成するための方法を提供する。
【0015】
実施形態では、本開示は、ＥＣＬ標識の量を測定するための方法であって、電極を本明細書に記載の組成物およびＥＣＬ標識と接触させることと、電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定することと、測定されたＥＣＬから、標識の量を決定することと、を含む、方法を提供する。
【0016】
実施形態では、本開示は、ＥＣＬ標識に連結された結合試薬を含む結合錯体の量を測定するための方法であって、電極上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む電極上に結合錯体を形成することと、電極上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、電極上の結合錯体の量を決定することと、を含む、方法を提供する。
【0017】
実施形態では、本開示は、ＥＣＬ標識に連結された結合試薬を含む結合錯体の量を測定するための方法であって、粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む粒子上に結合錯体を形成することと、粒子上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、電極上に粒子を収集することと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、電極上の結合錯体の量を決定することと、を含む、方法を提供する。
【0018】
実施形態では、本開示は、分析物の量を測定するための方法であって、電極上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬および分析物（または分析物を含む試料）と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む電極上に結合錯体を形成することと、電極上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、分析物の量を決定することと、を含む、方法を提供する。
【0019】
実施形態では、本開示は、分析物の量を測定するための方法であって、粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬および分析物（または分析物を含む試料）と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む粒子上に結合錯体を形成することと、粒子上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、電極上に粒子を収集することと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、分析物の量を決定することと、を含む、方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【0020】
【図1】図１Ａは、電極表面上のＥＣＬ標識試薬の特異的ＥＣＬシグナルを示し、図１Ｂは、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００が存在する場合または存在しない場合の、ＢＤＥＡ、ＤＢＥＡ、またはＴＰＡ共反応物を含有するＥＣＬ読み取り緩衝液の存在下でＥＣＬが生成されたときの、標識された試薬の不在下でのバックグラウンドＥＣＬシグナルを示す。図１Ｃは、また、読み取り緩衝液中のｐＨ緩衝構成成分を変化させた影響を示す。
【図2】図２Ａおよび２Ｂは、ＥＣＬサンドイッチイムノアッセイの多重パネルによって生成された特異的シグナルおよびバックグラウンドシグナルを示す。図２Ａは、ＢＤＥＡ含有共反応物組成物の存在下で生成されたシグナルを、従来のＴＰＡ含有共反応物組成物によって生成されたシグナルと比較しており、図２Ｂは、高レベルの塩を含有するＢＤＥＡ含有共反応物組成物の存在下で生成されたシグナルを、従来のＴＰＡ含有共反応物組成物によって生成されたシグナルと比較している。
【図3】図３Ａ～３Ｆは、読み取り緩衝液のｐＨの影響を含む、ＢＤＥＡおよびＴＰＡを含有するＥＣＬ読み取り緩衝液の存在下で生成される特異的ＥＣＬシグナルおよびＥＣＬバックグラウンドシグナルに対する組成および環境変動の原因の影響（図３Ａ）、ＥＣＬ生成中の読み取り緩衝液温度の影響（図３Ｂ）、共反応物濃度および界面活性剤の存在または不在の影響（図３Ｃ）、読み取り緩衝液内のすべての成分の希釈または濃縮の影響（図３Ｄ）、読み取り緩衝液の温度およびｐＨの影響（図３Ｅ）、ならびに異なる読み取り緩衝液の温度およびｐＨでのバックグラウンド変化％（図３Ｆ）を示す。
【図4】ＢＤＥＡおよびＴＰＡを含有する読み取り緩衝液の存在下で生成された特異的ＥＣＬシグナルおよびＥＣＬバックグラウンドシグナルの生成における、電圧波形および持続時間の影響を示す。
【図7】ＣＤ９表面タンパク質を発現する細胞外小胞のＥＣＬサンドイッチイムノアッセイからのＥＣＬシグナルを示し、異なる界面活性剤を含む異なるＢＤＥＡ含有読み取り緩衝液を使用して測定されたシグナルを比較し、各読み取り緩衝液について、読み取り緩衝液の添加直後（Ｔ＝０）に測定されたシグナルを、シグナルの測定前にアッセイ生成物を読み取り緩衝液中で１５分間インキュベートした場合（Ｔ＝１５）に測定されたシグナルと比較している。
【図8】ＣＤ９表面タンパク質を発現する細胞外小胞（ＥＶ）のＥＣＬサンドイッチイムノアッセイからのＥＣＬシグナルを示し、ＴＷＥＥＮ２０またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル（ＰＥＧ１８ＴＤＥ）のいずれかを含む異なるＢＤＥＡ含有読み取り緩衝液を使用して測定されたシグナルを、様々な濃度で比較している。４つの異なる濃度のＥＶを試験した。
【図9】図９Ａ～９Ｄは、ＢＤＥＡまたはＴＰＡ読み取り緩衝液を使用した、分析物ｓＲａｎｇｅ（図９Ａ）、ＩＬ－９（図９Ｂ）、Ｋｉｍ－１（図９Ｃ）、およびＭＩＧ（図９Ｄ）での抗体スクリーニング中の平均ＥＣＬ損失％を示す。
【発明を実施するための形態】
【0021】
本開示、ならびにその追加の目的、特色、および利点は、ある特定の実施形態の以下の詳細な説明からより完全に理解されるであろう。
【0022】
本明細書に記載されているように、ＥＣＬ共反応物トリプロピルアミン（ＴＰＡ）は、ある特定の欠点を有する。例えば、ＴＰＡは、水への低い溶解度を有し、それにより製造が困難であり、不快な臭気を伴い揮発性である。したがって、本発明者らは、ＴＰＡが別のＥＣＬ共反応物で置き換えられた配合物を見出すことが可能であるかどうかを決定することに着手した。
【0023】
実施形態では、発明は、以下の式（ＨＯＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ－ＣＨＲ１－ＣＨＲ２－ＣＨＲ３－Ｒ４）のアルキルジエタノールアミンを含む、ＥＣＬ共反応試薬および配合物であって、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２である、ＥＣＬ共反応試薬および配合物を提供する。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、各々－Ｈ、およびＲ４＝－ＣＨ３（ＢＤＥＡ）である。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、各々Ｈである。
【化1】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２である、ＥＣＬ共反応試薬および配合物を提供する。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、各々－Ｈ、およびＲ４＝－ＣＨ３（ＢＤＥＡ）である。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、各々Ｈである。
【0024】
本発明は、ＥＣＬ共反応物としてＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、好ましくはＢＤＥＡを含む試薬および配合物を含み、ＥＣＬ共反応物としてのＴＰＡの使用に代わるものを提供する。これらの共反応物は、水溶性が高く、不揮発性であり、臭気をほとんどからまったく有さず、したがって、ＴＰＡの主な制限に対処している。本発明者らは、アッセイのバックグラウンドシグナルを最小限に抑えながらまた、ＴＰＡ含有組成物に匹敵するＥＣＬシグナル生成を提供することが可能な新しい共反応物を含有する、好ましい組成物を発見した。本発明の組成物はまた、（ｉ）ＥＣＬシグナルが、微量なレベルの汚染物質の変動などの、共反応物構成成分のロット間の変動に対して感度が低いこと、ｉｉ）ＥＣＬシグナルが、ｐＨ、温度、塩濃度の変化に対しても感度が低いこと、（ｉｉｉ）ＴＰＡ含有組成物とは異なり、ＥＣＬシグナルが、界面活性剤の存在または不在に対して鈍感であり、最適なシグナル生成のために、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００（ある特定の分析物、特に脂質膜を含む分析物を破壊し得る）などの過酷な芳香族系界面活性剤の存在を必要としないこと、および（ｉｖ）分析物と結合試薬との間のオフレートが低いことの指標である、ＥＣＬシグナル損失の低減、を含む、従来のＴＰＡ含有組成物を上回る追加の予想外の利点を提供する。これらの予想外の利点は、ひいては、製造におけるロット間の変動性およびアッセイを行うときの測定間の変動性の原因に対して、ＴＰＡ含有組成物よりも高い堅牢性を提供する。アッセイの変動性のこれらの原因の低減は、現場で非常に望まれている。例えば、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２００６を参照されたい。加えて、界面活性剤の存在に対する予想外に低い感度により、界面活性剤の組成および濃度を調整して、溶液の表面張力およびメニスカス形状の制御、ならびにアッセイ混合物中での構成成分の会合を維持または破壊する能力の制御などの特定の望ましい属性を達成することが可能になる。
【0025】
本発明は、（ｉ）本明細書に記載の組成物、（ｉｉ）これらの組成物の構成成分のうちの１つ以上を含むアッセイ試薬、（ｉｉｉ）これらの組成物または試薬のうちの１つ、および任意選択的に他のアッセイ構成成分を含有するキット、ならびに（ｉｖ）ＥＣＬプロセスまたは測定を実行するためにこれらの組成物、試薬、および／またはキットを用いる方法、を含む。
【0026】
本明細書の考察および特許請求の範囲において、用いられる本発明の成分または反応物の量を修飾する「約」という用語は、例えば、濃縮物を作製するために使用される典型的な測定および液体取り扱い手順、もしくは溶液を使用することを通じて、これらの手順での不注意による誤差を通じて、組成物の作製もしくは方法の実行に用いられる成分の製造、供給源、もしくは純度の違いなどを通じて生じ得る、数値的量の変動を指す。「約」という用語はまた、特定の初期混合物から生じる組成物の異なる平衡条件に起因して異なる量を包含する。「約」という用語によって修飾されているかどうかにかかわらず、特許請求の範囲は、量に相当するものを含む。一実施形態では、「約」という用語は、報告された数値の１０％以内、好ましくは報告された数値の５％以内を意味する。
【0027】
本明細書で使用される場合、特に断りのない限り、「または」という用語が接続する、構成成分を含有する組成物は、構成成分の組み合わせを含む組成物を包含する。例えば、「ｘ」、「ｙ」、または「ｚ」を含む組成物としては、限定されないが、「ｘ」、「ｙ」、および「ｚ」を含む組成物、「ｘ」および「ｙ」を含む組成物、「ｘ」および「ｚ」を含む組成物、ならびに「ｙ」および「ｚ」を含む組成物が挙げられる。
【0028】
本明細書で使用される場合、「実質的に」または「実質的な」という用語は、作用、特徴、特性、状態、構造、物品、または結果の完全またはほぼ完全な欠如を指すために否定的な意味合いで使用されるときに、等しく適用可能である。例えば、「実質的に」平坦である表面は、完全に平坦であるか、または完全に平坦である場合と同じであろう影響を有するようにほぼ平坦であるかのいずれかであろう。
【0029】
本明細書で使用される場合、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」などの用語は、単一の実体のみを指すことを意図するものではなく、特定の例を例示として使用することができる一般的な部類を含む。
【0030】
本明細書における任意の数値範囲への言及は、その範囲によって包含される各数値（小数および整数を含む）を明らかに含む。説明のために、本明細書における「少なくとも５０」または「少なくとも約５０」の範囲への言及は、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０などの整数、および小数５０．１、５０．２ ５０．３、５０．４、５０．５、５０．６、５０．７、５０．８、５０．９などを含む。さらなる説明では、本明細書における「５０未満」または「約５０未満」の範囲への言及は、整数４９、４８、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０など、および小数４９．９、４９．８、４９．７、４９．６、４９．５、４９．４、４９．３、４９．２、４９．１、４９．０などを含む。さらに別の説明では、本明細書における「５～１０」の範囲への言及は、５、６、７、８、９、および１０の整数、ならびに小数５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９などを含む。
【0031】
ＥＣＬを放出するように誘導することができる物質は、ＥＣＬ活性である、またはＥＣＬ活性を有すると言及され得る。これはまた、ＥＣＬ活性種、ＥＣＬ部分、ＥＣＬ標識、ＥＣＬ標識化合物、またはＥＣＬ標識物質などと称され得る。本開示に従ったある特定の組成物、試薬、キット、方法、または系の実施形態で利用されるとき、これは、他の分子、特に、生化学的もしくは生物学的アッセイの構成成分、例えば、分析物もしくはその類似体、分析物もしくはその類似体、分析物もしくはその類似体の結合パートナー、そのような前述の結合パートナーのさらなる結合パートナー、または分析物と結合することが可能な反応性構成成分、その類似体もしくは本明細書に記載の結合パートナーに連結される、これらのＥＣＬ活性種の開示の範囲内である。本明細書に記載のＥＣＬ活性種はまた、１つ以上の結合パートナーおよび／または１つ以上の反応性構成成分の組み合わせに連結することができる。ある特定の酵素アッセイでは、ＥＣＬ活性種は、酵素基質に連結し得る。ＥＣＬの測定の励起の文脈において、ＥＣＬ活性種は、「結合」または「遊離」していると説明され得る。この文脈において、「結合」は、ＥＣＬを誘導するために使用される電極に近接して保持されるＥＣＬ活性種、例えば、電極上に固定化されている他の種への結合相互作用を通じて保持され、電極の表面上に収集されたビーズの表面上に存在する、電極上に直接固定化された種を指す。対照的に、この文脈において、「遊離」は、ＥＣＬ活性種を含有する溶液、懸濁液、またはエマルションなどの、電極と接触しているバルク液体媒体中で遊離して拡散している標識を指す。
【0032】
同様に、前述の励起状態にあるＥＣＬ部分などの、ＥＣＬ反応の過程で形成される不安定な種、準安定な種、および他の中間種を含有する前述の「組成物」、以降時折「ＥＣＬ組成物」、または「系」は、本開示の範囲内である。加えて、可視光の放出は、本開示のある特定の実施形態の有利な特色であるが、赤外線または紫外線、Ｘ線、マイクロ波などの他のタイプの電磁放射を放出する組成物（以降時折「ＥＣＬ組成物」）または系は、本開示の範囲内である。本開示に関連して「エレクトロケミルミネッセンス」、「エレクトロケミルミネッセント」、「発光」、「発光性」、および「冷光」という用語の使用は、放出が光であることを必要としないが、放出がそのような他の形態の電磁放射であることが認められる。
【0033】
本開示の組成物は、例えば、水性組成物のｐＨに応じて、プロトン化または脱プロトン化された形態で存在し得る酸性または塩基性構成成分を含み得る。例えば、アミンまたは他の塩基（ＢＤＥＡ、ＤＢＡＥ、またはトリスなど）への言及は、非プロトン化（アミン）形態またはプロトン化（アンモニウム）形態を指す場合がある。同様に、リン酸塩への言及は、リン酸、またはリン酸塩の脱プロトン化状態のうちのいずれかを指す場合がある。
【0034】
本開示は、ＥＣＬ読み取り緩衝液、アッセイ組成物およびそれを含有するキット、ならびにそれを使用する方法に関する。キットは、一緒に使用して、例えば、組成物を作製するために、デバイスを製造するために、または方法を実行するために提供される一組の構成成分を指す。キットは、１つ以上の構成成分を含み得る。キットの構成成分は、１つのパッケージまたは複数のパッケージで提供され得、各パッケージが、１つ以上の構成成分を含有し得る。
【0035】
実施形態では、本開示の組成物は、ＴＰＡを含有する組成物と置き換えて、またはそれと組み合わせて、またはその代替物として、アッセイ系で使用される。
【0036】
本開示の一態様は、ＥＣＬ共反応物を含む改善されたＥＣＬアッセイ組成物に関し、ＥＣＬ共反応物が、ＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、好ましくはＢＤＥＡである。これらのＥＣＬアッセイ組成物は、ＥＣＬ標識を誘導してＥＣＬを放出するための、およびＥＣＬの測定を介してＥＣＬ標識を高感度に測定するための好適な環境を提供する。本開示のＥＣＬアッセイ組成物は、任意選択的に、ｐＨ緩衝液、洗剤、保存剤、界面活性剤、消泡剤、ＥＣＬ活性種、塩、キレート剤、酸、塩基、金属イオンおよび／もしくは金属キレート剤、および／または追加の共反応物を含む、追加の構成成分を含み得る。
【0037】
本開示のＥＣＬアッセイ組成物はまた、場合によっては、ＥＣＬ標識で標識され得る、抗体、抗体の断片、タンパク質、酵素、酵素基質、酵素阻害剤、補因子、抗原、ハプテン、リポタンパク質、リポ糖、細胞、細胞内構成成分、細胞受容体、膜断片、エキソソーム、細胞外小胞、ウイルス、核酸、核酸類似体（タンパク質核酸または非天然ヌクレオチド塩基などの非天然連結部を有する類似体を含む）、抗原、脂質、糖タンパク質、炭水化物、ペプチド、アミノ酸、受容体、ホルモン、結合試薬、タンパク質結合リガンド、リガンド、薬理学的薬剤、膜小胞、リポソーム、細胞小器官、細菌、真菌、またはそれらの組み合わせを含む、生物学的アッセイの構成成分を含み得る。これらの生物学的アッセイ構成成分は、非固定化形態であってもよいか、または限定されないが、スライド、チップ、ウェル、アッセイセル、チューブ、または他の容器、ビーズ、または微粒子の表面を含む、固相結合アッセイで使用される固相の表面を含む、固相表面上に固定化されていてもよい。ＥＣＬアッセイ組成物はまた、生物学的アッセイで測定される分析物、および／または生物学的アッセイによって測定される分析物を含む試料もしくは試料の構成成分を含み得る。
【0038】
本開示はまた、ＥＣＬ共反応物、および任意選択的に本明細書に記載のＥＣＬアッセイ組成物の１つ以上の追加構成成分を含む組成物であり、試料中の分析物を測定するアッセイで使用するのに有用である、ＥＣＬ読み取り緩衝液に関する。次いで、ＥＣＬ読み取り緩衝液は、本明細書に記載のＥＣＬアッセイ組成物を形成するために、それ自体で、または他のアッセイ構成成分と組み合わせて使用される。一実施形態では、ＥＣＬ読み取り緩衝液は、（ｉ）ＥＣＬ共反応物と、（ｉｉ）読み取り緩衝液のｐＨを定義された範囲内に保持するｐＨ緩衝構成成分と、（ｉｉｉ）追加のイオン性構成成分と、任意選択的に（ｉｖ）界面活性剤と、を含む。
【0039】
本開示のＥＣＬアッセイ組成物およびＥＣＬ読み取り緩衝液は、本質的に水性または実質的に水性（例えば、＞７５重量％、または好ましくは＞８５重量％の水）であり得るが、いくつかの用途では、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、ホルムアミド、エチレングリコール、プロピレングリコール、メタノール、エタノール、グリセロール、または他のアルコールなどの有機共溶媒を添加することが望ましい場合がある。本開示の実施形態では、ＥＣＬ読み取り緩衝液（またはその１つ以上の構成成分）は、乾燥形態で提供され、ユーザーが、適切な溶媒またはマトリックス（好ましくは水または水性媒体）を添加することによって、好ましくは、溶液構成成分の事前に指定された濃度で溶液を生成するために、定義された量の適切な溶媒またはマトリックスを添加することによって、液体試薬に変換する。
【0040】
５．１ ＥＣＬ共反応物
出願人は、いくつかの用途においてＴＰＡに匹敵するかまたはより良好な性能を提供する、非ＴＰＡ共反応物を含むＥＣＬ読み取り緩衝液およびＥＣＬアッセイ組成物を発見した。
出願人は、いくつかの用途においてＴＰＡに匹敵するかまたはより良好な性能を提供する、非ＴＰＡ共反応物を含むＥＣＬ読み取り緩衝液およびＥＣＬアッセイ組成物を発見した。
【0041】
実施形態では、非ＴＰＡ共反応物は、以下の式（ＨＯＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ－ＣＨＲ１－ＣＨＲ２－ＣＨＲ３－Ｒ４）のアルキルジエタノールアミンであり、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２である。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、各々－Ｈ、およびＲ４＝－ＣＨ３（ＢＤＥＡ）である。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、各々Ｈである。
【化2】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２である。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、各々－Ｈ、およびＲ４＝－ＣＨ３（ＢＤＥＡ）である。実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、各々Ｈである。
【0042】
非ＴＰＡ共反応物としては、ＢＤＥＡまたはＤＢＡＥが挙げられる（構造を以下に示す）。好ましくは、非ＴＰＡ共反応物は、ＢＤＥＡである。
【化3】
【0043】
ＴＰＡと比較して、ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥは、低い揮発性（室温で２ｍｍ Ｈｇ未満の蒸気圧）、高い沸点（大気圧で２００℃超の沸点）、良好な水溶性、少ない臭気、および低い可燃性を有する。出願人は、ＥＣＬ共反応物として、ＢＤＥＡが、その濃度によって比較的影響を受けないという驚くほど有利な影響を有することを発見した。この共反応物は、以下に論じられるように、他の構成成分と組み合わせて組成物を形成することができる。これは、ＴＰＡ、またはＮ，Ｎ－ジブチルエタノールアミン、またはその両方などの他のＥＣＬ共反応物を添加することを含む。
【0044】
本発明のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液中のＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ共反応物の濃度は、約１０ｍＭ～約８００ｍＭ、約７５ｍＭ～約４００ｍＭ、約７５ｍＭ～約３００ｍＭ、約１００ｍＭ～約３００ｍＭ、約１００ｍＭ～約２２５ｍＭ、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭ、約１００ｍＭ～約１７５ｍＭ、約１５０ｍＭ、または約１２５ｍＭであり得る。濃度は、組成物および／または読み取り緩衝液を用いるＥＣＬアッセイにおいて、特異的ＥＣＬシグナルが、共反応物濃度の小さい変化に比較的鈍感であり、例えば、公称値の約０．５倍～約５倍、または約０．６倍～約２．５倍、または約０．７倍～約１．２倍、または約０．８倍～約１．５倍、または約０．８倍～約１．４倍、または約０．８倍～約１．２倍の濃度変化が、約５％以下、約１０％以下、または約２０％以下の特異的ＥＣＬシグナル変化をもたらすように選択され得る。
【0045】
一実施形態では、ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液は、それらを用いるＥＣＬアッセイにおけるＥＣＬ生成ステップが、温度変化に比較的鈍感であり、例えば、ＥＣＬアッセイ組成物の存在下でＥＣＬ標識からＥＣＬを生成するステップでの１８℃～３０℃への温度変化が、１０％未満、２０％未満、もしくは３０％未満の特異的ＥＣＬの変化をもたらすか、またはこの範囲を上回る温度でのＥＣＬにおける変化の傾きが、１℃あたり２％未満、もしくは１℃あたり１０％未満であるようなものである。
【0046】
本開示の組成物の実施形態では、ＥＣＬ共反応物は、ＢＤＥＡである。実施形態では、ＥＣＬ共反応物は、ＤＢＡＥである。実施形態では、組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬは、１８℃～３０℃の温度範囲にわたって、平均して１℃あたり１％未満しか変化しない。実施形態では、ＥＣＬは、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される。
【0047】
実施形態では、組成物中のＥＣＬ共反応物の濃度は、約１０ｍＭ～約８００ｍＭである。実施形態では、ＥＣＬ共反応物の濃度は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭである。実施形態では、ＥＣＬ共反応物の濃度は、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭである。実施形態では、ＥＣＬ共反応物の濃度の公称値の０．８～１．２倍への変化は、組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬの１０％未満の変化を提供する。実施形態では、ＥＣＬは、生成された炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体形態である。
【0048】
５．２ ｐＨ緩衝液
共反応物を含有する本発明のＥＣＬアッセイ組成物および読み取り緩衝液は、好ましくは、ｐＨを所望の範囲内に維持するように設計される。ｐＨの制御を達成するために、これらの組成物および緩衝液は、ｐＨ緩衝構成成分を含み得る。溶液を特定のｐＨ範囲内に維持するためのｐＨ緩衝構成成分として作用することができる材料は、当技術分野で周知である。好適なｐＨ緩衝構成成分の例としては、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（本明細書では「トリス」とも称される）、リン酸塩、ＨＥＰＥＳ、グリシルグリシン（ＧｌｙＧｌｙとも称される）、ホウ酸塩、酢酸塩、およびクエン酸塩が挙げられる。好ましいｐＨ緩衝構成成分は、トリスおよびリン酸塩である。トリスとＢＤＥＡ（またはＤＢＡＥ）との混合物は、ＥＣＬ標識の存在下でＥＣＬの効率的な生成を提供するが、ＥＣＬ標識の不在下では非常に低いＥＣＬバックグラウンドシグナルを提供するので、トリスが特に好ましい。本発明の一実施形態では、ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液で使用される緩衝構成成分は、緩衝構成成分が同じ濃度のリン酸塩で置き換えられた類似の組成物と比較して、その組成物を使用するＥＣＬアッセイの特異的シグナルが、リン酸塩組成物を用いるシグナルよりも大きいか、または少なくとも約２０％大きいか、または少なくとも約５０％大きく、ＥＣＬ標識の不在下での読み取り緩衝液バックグラウンドシグナルが、リン酸塩組成物を用いた読み取り緩衝液のバックグラウンドよりも小さいか、または少なくとも約２０％小さいか、または少なくとも約５０％小さいか、または少なくとも約８０％小さいように、選択される。
共反応物を含有する本発明のＥＣＬアッセイ組成物および読み取り緩衝液は、好ましくは、ｐＨを所望の範囲内に維持するように設計される。ｐＨの制御を達成するために、これらの組成物および緩衝液は、ｐＨ緩衝構成成分を含み得る。溶液を特定のｐＨ範囲内に維持するためのｐＨ緩衝構成成分として作用することができる材料は、当技術分野で周知である。好適なｐＨ緩衝構成成分の例としては、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（本明細書では「トリス」とも称される）、リン酸塩、ＨＥＰＥＳ、グリシルグリシン（ＧｌｙＧｌｙとも称される）、ホウ酸塩、酢酸塩、およびクエン酸塩が挙げられる。好ましいｐＨ緩衝構成成分は、トリスおよびリン酸塩である。トリスとＢＤＥＡ（またはＤＢＡＥ）との混合物は、ＥＣＬ標識の存在下でＥＣＬの効率的な生成を提供するが、ＥＣＬ標識の不在下では非常に低いＥＣＬバックグラウンドシグナルを提供するので、トリスが特に好ましい。本発明の一実施形態では、ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液で使用される緩衝構成成分は、緩衝構成成分が同じ濃度のリン酸塩で置き換えられた類似の組成物と比較して、その組成物を使用するＥＣＬアッセイの特異的シグナルが、リン酸塩組成物を用いるシグナルよりも大きいか、または少なくとも約２０％大きいか、または少なくとも約５０％大きく、ＥＣＬ標識の不在下での読み取り緩衝液バックグラウンドシグナルが、リン酸塩組成物を用いた読み取り緩衝液のバックグラウンドよりも小さいか、または少なくとも約２０％小さいか、または少なくとも約５０％小さいか、または少なくとも約８０％小さいように、選択される。
【0049】
本発明のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液中のｐＨ緩衝構成成分の濃度は、約１０ｍＭ～約８００ｍＭ、約５０ｍＭ～約４００ｍＭ、約１００ｍＭ～約３００ｍＭ、約１５０ｍＭ～２５０ｍＭ、または約２００ｍＭであり得る。
【0050】
ＥＣＬアッセイ組成物または読み取り緩衝液は、定義された範囲内のｐＨを有するように設計または調節することができる。組成物は、約６～約１０、約６～約９、約７～約８、約７．６～約７．９、または約７．８の範囲のｐＨを有し得る。一実施形態では、ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の配合およびｐＨは、組成物を使用するＥＣＬアッセイにおけるＥＣＬシグナルが、ｐＨの変化に、例えば、ｐＨの０．１の増加または減少が５％未満もしくは１０％未満であるか、またはこのｐＨ範囲を上回るＥＣＬシグナルの変化率がｐＨ単位あたり１０％未満もしくはｐＨ単位あたり２５％未満である特異的ＥＣＬシグナルの変化に、鈍感であるように選択される。
【0051】
本開示の組成物の実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分は、リン酸塩、ＨＥＰＥＳ、グリシルグリシン、ホウ酸塩、酢酸塩、またはクエン酸塩である。
【0052】
本開示の組成物の実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分は、トリスである。実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分はトリスであり、組成物は界面活性剤を含む。実施形態では、界面活性剤は、非イオン性界面活性剤である。実施形態では、界面活性剤は、フェノールエーテルを含む非イオン性界面活性剤である。実施形態では、界面活性剤は、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００である。実施形態では、界面活性剤は、芳香族基を含まない非イオン性界面活性剤である。実施形態では、界面活性剤は、フェノールエーテルを含まない非イオン性界面活性剤である。実施形態では、組成物は、脂質二重層膜を破壊しない。実施形態では、界面活性剤は、非イオン性界面活性剤、例えば、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（ｎ）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である。実施形態では、界面活性剤は、アルキルエーテル－ＰＥＧを含む。実施形態では、界面活性剤は、線状アルキルエーテル－ＰＥＧである。実施形態では、界面活性剤は、ＰＥＧ（１０）トリデシルエーテル、ＰＥＧ（１２）トリデシルエーテル、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルである。実施形態では、界面活性剤は、ＴＷＥＥＮ－２０である。実施形態では、界面活性剤は、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルである。「ＰＥＧ」は、洗剤中のポリエチレングリコール部分を指し、ＰＥＧ（ｎ）は、ｎ個のモノマーサブユニットを含むポリエチレングリコール部分を指す。
【0053】
本開示の組成物の実施形態では、組成物のｐＨは、約６～約９である。実施形態では、ｐＨは、約７～約８である。実施形態では、ｐＨは、約７．６～約７．９である。実施形態では、ｐＨは、約７．８である。実施形態では、組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬのｐＨでのＥＣＬの変化の傾きは、ｐＨ単位あたり１０％未満である。実施形態では、ＥＣＬは、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される。
【0054】
組成物の実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分の濃度は、約１０ｍＭ～約８００ｍＭである。実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分の濃度は、約１００ｍＭ～約３００ｍＭである。実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分の濃度は、約１５０ｍＭ～約２５０ｍＭである。
【0055】
組成物の実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分は、リン酸塩ではなく、組成物は、ｐＨ緩衝構成成分としてリン酸塩を含有する同じ組成物と比較して、ＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬの少なくとも２０％の増加および／またはＥＣＬ標識の不在下で生成されるバックグラウンドＥＣＬの少なくとも２０％の減少を提供する。実施形態では、ＥＣＬ標識からのＥＣＬは、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される、および／またはＥＣＬ標識の不在下でのＥＣＬは、炭素系電極で生成される。
【0056】
５．３ イオンおよび塩
本開示の組成物および／または読み取り緩衝液は、様々な濃度の１つ以上のイオンまたは塩（本明細書に記載のｐＨ緩衝構成成分を含むかまたはそれに加えて）を含み得る。本発明の非ＴＰＡ含有組成物および読み取り緩衝液の開発における重要な予想外の発見は、類似のＴＰＡ含有組成物で典型的に使用されるイオン濃度と比較して、高イオン濃度の有益な影響、特に、標識された種の非特異的結合の低減に対する高イオン濃度の有益な影響である。イオン濃度を増加させるために添加され得る塩は、当技術分野で周知であり、カチオンＬｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｒｂ＋、Ｃｓ＋、Ｍｇ＋２、Ｃａ＋２、ＮＨ４ ＋（好ましくは、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、およびＫ＋）を含む塩、および／またはアニオンＦ－、Ｃｌ－、Ｂｒ－、Ｉ－、リン酸塩、硫酸塩、ホウ酸塩（好ましくは、Ｃｌ－）を含む塩が挙げられる。使用され得る塩としては、塩化カリウム（ＫＣｌ）、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、塩化リチウム（ＬｉＣｌ）、およびそれらの組み合わせが挙げられる。本発明の一実施形態では、非ＴＰＡ含有ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液中のイオン種の同一性および濃度は、非ＴＰＡ共反応物がＴＰＡで置き換えられた類似のＥＣＬアッセイ組成物と比較して、ＥＣＬアッセイの特異的シグナルが、ＴＰＡ組成物を用いたシグナルの約５０％～約２００％、または約７５～約１２５％であり、非特異的バックグラウンドシグナルが、ＴＰＡ組成物を用いた非特異的バックグラウンドシグナルの約５０％～約２００％、または約７５～約１２５％であるように選択される。
本開示の組成物および／または読み取り緩衝液は、様々な濃度の１つ以上のイオンまたは塩（本明細書に記載のｐＨ緩衝構成成分を含むかまたはそれに加えて）を含み得る。本発明の非ＴＰＡ含有組成物および読み取り緩衝液の開発における重要な予想外の発見は、類似のＴＰＡ含有組成物で典型的に使用されるイオン濃度と比較して、高イオン濃度の有益な影響、特に、標識された種の非特異的結合の低減に対する高イオン濃度の有益な影響である。イオン濃度を増加させるために添加され得る塩は、当技術分野で周知であり、カチオンＬｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｒｂ＋、Ｃｓ＋、Ｍｇ＋２、Ｃａ＋２、ＮＨ４ ＋（好ましくは、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、およびＫ＋）を含む塩、および／またはアニオンＦ－、Ｃｌ－、Ｂｒ－、Ｉ－、リン酸塩、硫酸塩、ホウ酸塩（好ましくは、Ｃｌ－）を含む塩が挙げられる。使用され得る塩としては、塩化カリウム（ＫＣｌ）、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、塩化リチウム（ＬｉＣｌ）、およびそれらの組み合わせが挙げられる。本発明の一実施形態では、非ＴＰＡ含有ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液中のイオン種の同一性および濃度は、非ＴＰＡ共反応物がＴＰＡで置き換えられた類似のＥＣＬアッセイ組成物と比較して、ＥＣＬアッセイの特異的シグナルが、ＴＰＡ組成物を用いたシグナルの約５０％～約２００％、または約７５～約１２５％であり、非特異的バックグラウンドシグナルが、ＴＰＡ組成物を用いた非特異的バックグラウンドシグナルの約５０％～約２００％、または約７５～約１２５％であるように選択される。
【0057】
共反応物を含有する本発明のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液は、アニオン種の総濃度が、約２５０ｍＭ以上、約５００ｍＭ以上、約７５０ｍＭ以上、約１０００ｍＭ以上、約２５０ｍＭ～約１４００ｍＭ、約５００ｍＭ～約１２００ｍＭ、または約１０５０ｍＭであるように、本明細書に記載のものなどの塩を含み得る。そのような組成物および／または読み取り緩衝液は、塩化物イオン（Ｃｌ－）の総濃度が、約２５０ｍＭ以上、約５００ｍＭ以上、約７５０ｍＭ以上、約１０００ｍＭ以上、約２５０ｍＭ～約１４００ｍＭ、約５００ｍＭ～約１２００ｍＭ、または約１０５０ｍＭである実施形態を含む。
【0058】
Ｃｌ－構成成分を含む実施形態では、開示の組成物は、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＬｉＣｌ、またはそれらの混合物を含み得る。この実施形態では、ＮａＣｌの濃度は、約２００ｍＭ～約１４００ｍＭ、約６００ｍＭ～約１２００ｍＭ、または約８００ｍＭであり得、ＫＣｌの濃度は、約５０ｍＭ、約２００ｍＭ～約１４００ｍＭ、約５００ｍＭ、約６００ｍＭ～約１２００ｍＭ、または約８００ｍＭであり得、ＬｉＣｌの濃度は、約２００ｍＭ～約１４００ｍＭ、約６００ｍＭ～約１２００ｍＭ、または約８００ｍＭであり得る。開示の組成物は、約８００ｍＭの濃度でＮａＣｌを含み得、ＫＣｌの濃度は、約５０ｍＭであり得る。開示の組成物はまた、約８００ｍＭの濃度でＬｉＣｌを含み得、ＫＣｌの濃度は、約５０ｍＭであり得る。
【0059】
開示の組成物の一実施形態では、組成物は、約０．３Ｍ～約１．９Ｍまたは約１．４Ｍ、約０．５Ｍ～約１．２Ｍまたは約１．０Ｍ、約０．８Ｍ～約１．２Ｍ、約１．０Ｍ～１．２Ｍまたは約１．１Ｍのイオン強度を有し得る。
【0060】
本開示の組成物の実施形態では、イオン性構成成分は、塩化物イオンを含む。実施形態では、イオン性構成成分は、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＬｉＣｌ、またはそれらの塩のうちの任意の２つまたは任意の３つの組み合わせを含む。実施形態では、イオン性構成成分は、ＮａＣｌを含む。実施形態では、イオン性構成成分は、ＫＣｌを含む。
【0061】
実施形態では、組成物は、約０．３Ｍ超のイオン強度を有する。実施形態では、組成物は、約０．５Ｍ超のイオン強度を有する。実施形態では、組成物は、約０．８Ｍ超のイオン強度を有する。実施形態では、組成物は、約１．０Ｍ超のイオン強度を有する。
【0062】
実施形態では、組成物は塩化物イオンを含み、塩化物イオンの濃度は約０．２５Ｍ超である。実施形態では、組成物は、塩化物イオンを含み、塩化物イオンの濃度は、約０．５Ｍ超である。実施形態では、組成物は、塩化物イオンを含み、塩化物イオンの濃度は、約０．７５Ｍ超である。実施形態では、組成物は、塩化物イオンを含み、塩化物イオンの濃度は、約１．０Ｍ超である。
【0063】
実施形態では、イオン性構成成分を含有しない同じ構成成分と比較して、イオン性構成成分を含有する組成物を用いるイムノアッセイにおける非特異的結合（ＮＳＢ）は、より低い。
【0064】
５．４ 界面活性剤
ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥ系ＥＣＬ組成物および読み取り緩衝液の予想外の態様は、界面活性剤の存在、濃度、または構造に対するＥＣＬ生成の鈍感性である。対照的に、ＴＰＡ系組成物は、最適なシグナル生成のために界面活性剤の存在を必要とする。特に、ＴＰＡは、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００のフェノールエーテル部分などの芳香族部分を含む界面活性剤の存在下で、最適なＥＣＬ生成を提供する。
ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥ系ＥＣＬ組成物および読み取り緩衝液の予想外の態様は、界面活性剤の存在、濃度、または構造に対するＥＣＬ生成の鈍感性である。対照的に、ＴＰＡ系組成物は、最適なシグナル生成のために界面活性剤の存在を必要とする。特に、ＴＰＡは、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００のフェノールエーテル部分などの芳香族部分を含む界面活性剤の存在下で、最適なＥＣＬ生成を提供する。
【0065】
したがって、本発明の共反応物含有ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液は、（ｉ）界面活性剤を含まないか、または（ｉｉ）界面活性剤を含むが、界面活性剤の臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）未満の濃度でのみ含む、組成物を含む。臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）は、それを超えるとミセルが形成され、組成物に添加されるすべての追加の界面活性剤がミセルに行く、界面活性剤の濃度として知られている。本発明の共反応物含有ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液はまた、（ｉ）芳香族界面活性剤、もしくはより具体的にはフェノールエーテル部分を含有する界面活性剤、もしくはより具体的にはＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含まない組成物、または（ｉｉ）（ｉ）に記載の界面活性剤を含むが、界面活性剤の臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）未満の濃度でのみ含む、組成物を含む。
【0066】
あるいは、界面活性剤を含むこと、例えば、より低い表面張力を提供すること、または望ましくない分子凝集体を分解することは、いくつかの用途において依然として有利であり得る。存在し得る界面活性剤としては、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００などの芳香族界面活性剤、および／または非芳香族界面活性剤が挙げられる。存在し得る界面活性剤としては、非イオン性界面活性剤およびイオン性界面活性剤が挙げられる。存在し得る非イオン性界面活性剤としては、ＮＯＮＩＤＥＴ、ＢＲＩＪ、ＴＲＩＴＯＮ、ＴＷＥＥＮ、ＴＨＥＳＩＴ、ＬＵＢＲＯＬ、ＧＥＮＡＰＯＬ、ＰＬＵＲＯＮＩＣ、ＴＥＴＲＯＮＩＣ、Ｆ１０８、およびＳＰＡＮの商品名で知られている界面活性剤の部類が挙げられる。好ましくは、界面活性剤は、５０ダイン／ｃｍ以下、約４０ダイン／ｃｍ以下、または約３５ダイン／ｃｍ以下の気－液表面張力を有する溶液を提供する濃度で含まれる。好ましくは、含まれる界面活性剤は、それらのｃｍｃ以上、それらのｃｍｃの約２倍以上、またはそれらのｃｍｃの約５倍以上の濃度で存在する。実施形態では、本開示の組成物および／または読み取り緩衝液は、組成物の体積あたり、約０．１％、約０．２％、約０．３％、約０．４％、約０．５％、約０．６％、約０．７％、約０．８重量％、約０．９重量％、約１重量％、約２重量％、約３重量％、約４重量％、約５重量％、約６重量％、約７重量％、約８重量％、約９重量％、または約１０重量％の濃度で界面活性剤を含む。実施形態では、本開示の組成物および／または読み取り緩衝液は、約０．１ｍＭ～約１０ｍＭ、約０．２ｍＭ～約８ｍＭ、約０．３ｍＭ～約５ｍＭ、約０．４ｍＭ～約０．８ｍＭ、約０．５ｍＭ～約０．６ｍＭ、約１ｍＭ、または約０．５ｍＭの濃度で界面活性剤を含む。実施形態では、ＥＣＬ共反応物含有組成物および／または読み取り緩衝液中に含まれる界面活性剤は、約０．１ｍＭ、約０．２ｍＭ、約０．３ｍＭ、約０．４ｍＭ、約０．５ｍＭ、約０．６ｍＭ、約０．７ｍＭ、約０．８ｍＭ、約０．９ｍＭ、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、または約１０ｍＭの濃度で含まれる。実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．２ｍＭ～約１０ｍＭである。実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．５ｍＭ～約８ｍＭである。実施形態では、界面活性剤の濃度は、約１．０ｍＭ～約５ｍＭである。実施形態では、界面活性剤の濃度は、約０．５ｍＭである。実施形態では、界面活性剤の濃度は、約１．０ｍＭである。実施形態では、界面活性剤の濃度は、５．０ｍＭである。実施形態では、界面活性剤の濃度は、約１０ｍＭである。実施形態では、界面活性剤の濃度は、界面活性剤の臨界ミセル濃度（ｃｍｃ）超である。
【0067】
有利なことに、界面活性剤は、低い表面張力（およびより良好に制御されたメニスカス角度）などの界面活性剤のいくつかの望ましい属性を提供するが、特定の生物学的アッセイターゲットに関してＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００よりも変性が少ない組成物および／または読み取り緩衝液中に含めるために選択され得る。本発明は、脂質二重層膜を含む分析物を破壊しない、穏やかな界面活性剤が含まれる実施形態を含む。そのような穏やかな界面活性剤としては、限定されないが、（ｉ）エチレングリコールおよび／もしくはプロピレングリコールのオリゴマー、または（ｉｉ）エーテル基を介してエチレングリコールおよび／もしくはプロピレングリコールのオリゴマーに連結されたアルキル鎖が挙げられる。そのような穏やかな界面活性剤はまた、ＢＲＩＪ、ＴＷＥＥＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣ、またはＫＯＬＬＩＰＨＯＲの商品名で知られている界面活性剤の部類であり得る。そのような穏やかな界面活性剤はまた、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－５－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＨＯ（ＣＨ２ＣＨ２）１８Ｃ１３Ｈ２７（ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルとも称される）、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０などの特定の界面活性剤であり得る。そのような穏やかな界面活性剤はまた、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルなどの特定の界面活性剤であり得る。好ましくは、界面活性剤は、エステル連結部を含まない。
【0068】
実施形態では、本開示の組成物は、フェノールエーテルを含まない非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、脂質二重層膜を破壊しない。実施形態では、界面活性剤は、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０などの非イオン性界面活性剤である。実施形態では、界面活性剤は、ＴＷＥＥＮ２０である。実施形態では、界面活性剤は、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルである。実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分は、リン酸塩、ＨＥＰＥＳ、グリシルグリシン、ホウ酸塩、酢酸塩、またはクエン酸塩である。
【0069】
５．５ ＥＣＬ標識および他のアッセイ試薬
本発明の組成物は、アッセイ測定を実行するために有用な多様なアッセイ試薬および／または構成成分を含み得、場合によっては、ＥＣＬ標識で標識され得、全細胞、細胞表面抗原、細胞内粒子（例えば、細胞小器官、または膜断片）、エキソソーム、細胞外小胞、リポソーム、膜小胞、ウイルス、プリオン、イエダニもしくはその断片、ウイロイド、抗体、抗原、ハプテン、脂肪酸、核酸（および合成類似体）、タンパク質（および合成類似体）、リポタンパク質、多糖、阻害剤、補因子、ハプテン、細胞受容体、受容体リガンド、リポ多糖、糖タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、酵素、酵素基質、酵素生成物、セカンドメッセンジャー、細胞代謝生成物、ホルモン、薬理学的薬剤、合成有機分子、有機金属分子、鎮静剤、バルビツール酸塩、アルカロイド、ステロイド、ビタミン、アミノ酸、糖、レクチン、組み換えもしくは誘導タンパク質、ビオチン、アビジン、および／またはストレプトアビジンが挙げられる。アッセイ試薬は、例えば、結合アッセイまたは酵素アッセイにおいて、結合試薬または酵素基質として有用であり得る。
本発明の組成物は、アッセイ測定を実行するために有用な多様なアッセイ試薬および／または構成成分を含み得、場合によっては、ＥＣＬ標識で標識され得、全細胞、細胞表面抗原、細胞内粒子（例えば、細胞小器官、または膜断片）、エキソソーム、細胞外小胞、リポソーム、膜小胞、ウイルス、プリオン、イエダニもしくはその断片、ウイロイド、抗体、抗原、ハプテン、脂肪酸、核酸（および合成類似体）、タンパク質（および合成類似体）、リポタンパク質、多糖、阻害剤、補因子、ハプテン、細胞受容体、受容体リガンド、リポ多糖、糖タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、酵素、酵素基質、酵素生成物、セカンドメッセンジャー、細胞代謝生成物、ホルモン、薬理学的薬剤、合成有機分子、有機金属分子、鎮静剤、バルビツール酸塩、アルカロイド、ステロイド、ビタミン、アミノ酸、糖、レクチン、組み換えもしくは誘導タンパク質、ビオチン、アビジン、および／またはストレプトアビジンが挙げられる。アッセイ試薬は、例えば、結合アッセイまたは酵素アッセイにおいて、結合試薬または酵素基質として有用であり得る。
【0070】
本発明の組成物は、ＥＣＬ標識を含み得る。有用なＥＣＬ標識としては、共反応物としてのＴＰＡの存在下でＥＣＬを生成する標識が挙げられる。使用され得るＥＣＬ標識の例としては、Ｒｕ、Ｏｓ、Ｉｒ、Ｒｅ、またはランタノイド金属を含有する有機金属化合物などの発光性有機金属化合物が挙げられる（例えば、米国特許第５，７１４，０８９号、同第６，３１６，６０７号、同第６，８０８，９３９号、同第９，４１６，１５０号に記載の標識を参照されたい）。好ましいＥＣＬ標識は、ルテニウムまたはオスミウム含有有機金属種である。これらのルテニウムまたはオスミウム含有有機金属は、ポリピリジルリガンド（最も好ましくは、ビピリジン、フェナントロリン、および／またはそれらの置換誘導体）にキレート化されたルテニウムまたはオスミウムを含み得る。最も好ましくは、ＥＣＬ標識は、ルテニウム－トリス－ビピリジンを含み、ビピリジンリガンドは、例えば、標識をアッセイ試薬に結合するための連結基および／または非特異的結合を最小限にするための親水性置換基で任意選択的に置換されている。一実施形態では、使用されるＥＣＬ標識は、１つまたは２つの４，４’－ビス（スルホメチル）－ビピリジンリガンドを含むルテニウムトリ－ビピリジン誘導体（米国特許第６，８０８，９３９号に記載の標識など）である。ＥＣＬ標識は、本明細書に記載のアッセイ試薬に連結することができる。
【0071】
本発明の組成物が分析物の結合アッセイで使用される特定の実施形態では、標識は、アッセイの結合構成成分、例えば、分析物もしくはその類似体、分析物もしくはその類似体の結合パートナー、そのような前述の結合パートナーのさらなる結合パートナー、または分析物、その類似体、もしくは本明細書に記載の結合パートナーと結合可能である反応性構成成分に連結することができる。本明細書に記載の標識はまた、１つ以上の結合パートナーおよび／または１つ以上の反応性構成成分の組み合わせに連結することができる。反応性構成成分は、別のアッセイ構成成分を間接的に固定化または標識するために使用することができる。例として、分析物に対する結合試薬を用いる結合アッセイでは、結合試薬は、直接固定化または標識することができるか、あるいは、反応性構成成分を使用して間接的に標識または固定化することができる。そのようなアプローチは当技術分野で周知であり、（ｉ）アッセイ試薬を標識もしくは固定化するための抗種抗体（例えば、抗分析物抗体）などの二次結合試薬の使用、または（ｉｉ）ビオチン結合試薬コンジュゲートを標識もしくは固定化するために標識もしくは固定化されたストレプトアビジンの使用、が挙げられる。
【0072】
５．６ 他の構成成分
本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液は、様々な濃度の１つ以上の他の構成成分を含み得る。列挙された構成成分から本質的になる組成物では、そのような組成物は、列挙された構成成分、および組成物の基本的かつ新規な特徴に物理的に影響を及ぼさないものを含有する。組成物の基本的かつ新規な特徴に物理的に影響を及ぼさない構成成分は、組成物の本質的なＥＣＬ特徴（例えば、ＥＣＬシグナルの生成）を変化させないものである。組成物中に含まれ得る構成成分の非限定的な例としては、共溶媒（例えば、本明細書に記載の共溶媒など）、防腐剤および／または殺生物剤（例えば、アジド、５－クロロ－２－メチル－４－イソチアゾリン－３－オンおよび／または２－メチル－イソチアゾリン－３－オン）、消泡剤（シリコーンおよび／または非シリコーン系剤、例えば、Ａｎｔｉｆｏａｍｓ ２０４、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｙ－３０および／またはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ ＳｉｇｍａからのＳＥ－１５が挙げられる）、着色剤、ならびに試薬の出所または信頼性を検証するための化学的フィンガープリントを提供するために添加されるトレーサー化学物質が挙げられる。実施形態では、過塩素酸塩化合物が挙げられる。
本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液は、様々な濃度の１つ以上の他の構成成分を含み得る。列挙された構成成分から本質的になる組成物では、そのような組成物は、列挙された構成成分、および組成物の基本的かつ新規な特徴に物理的に影響を及ぼさないものを含有する。組成物の基本的かつ新規な特徴に物理的に影響を及ぼさない構成成分は、組成物の本質的なＥＣＬ特徴（例えば、ＥＣＬシグナルの生成）を変化させないものである。組成物中に含まれ得る構成成分の非限定的な例としては、共溶媒（例えば、本明細書に記載の共溶媒など）、防腐剤および／または殺生物剤（例えば、アジド、５－クロロ－２－メチル－４－イソチアゾリン－３－オンおよび／または２－メチル－イソチアゾリン－３－オン）、消泡剤（シリコーンおよび／または非シリコーン系剤、例えば、Ａｎｔｉｆｏａｍｓ ２０４、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｙ－３０および／またはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ ＳｉｇｍａからのＳＥ－１５が挙げられる）、着色剤、ならびに試薬の出所または信頼性を検証するための化学的フィンガープリントを提供するために添加されるトレーサー化学物質が挙げられる。実施形態では、過塩素酸塩化合物が挙げられる。
【0073】
５．７ 濃縮形態および乾燥形態
本開示の別の実施形態は、希釈剤（例えば、水または水溶液）で希釈して、上記のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液を形成することができる、乾燥または濃縮試薬組成物に関する。例として、そのような濃縮試薬組成物は、目的のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液中の試薬の濃度よりも高い濃度（例えば、濃度は、目的濃度の２Ｘ以上、４Ｘ以上、または１０Ｘ以上であり得る）の乾燥形態または液体形態の試薬構成成分を有し得る。本発明はまた、本発明のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液を形成する方法であって、乾燥または濃縮組成物を希釈剤（水溶液、好ましくは水など）と混合することを含む、方法を含む。好ましくは、事前に定義された量の乾燥または濃縮組成物が提供され、事前に定義された量の希釈剤が添加される。濃縮組成物が使用される実施形態では、希釈剤の体積対濃縮組成物の体積の比は、約１以上、約２以上、または約３以上であり得る。
本開示の別の実施形態は、希釈剤（例えば、水または水溶液）で希釈して、上記のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液を形成することができる、乾燥または濃縮試薬組成物に関する。例として、そのような濃縮試薬組成物は、目的のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液中の試薬の濃度よりも高い濃度（例えば、濃度は、目的濃度の２Ｘ以上、４Ｘ以上、または１０Ｘ以上であり得る）の乾燥形態または液体形態の試薬構成成分を有し得る。本発明はまた、本発明のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液を形成する方法であって、乾燥または濃縮組成物を希釈剤（水溶液、好ましくは水など）と混合することを含む、方法を含む。好ましくは、事前に定義された量の乾燥または濃縮組成物が提供され、事前に定義された量の希釈剤が添加される。濃縮組成物が使用される実施形態では、希釈剤の体積対濃縮組成物の体積の比は、約１以上、約２以上、または約３以上であり得る。
【0074】
本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の配合物は、例えば、乾燥試薬を再水和するか、または濃縮組成物を希釈するのに使用する希釈剤の量をユーザーが正確に測定しない場合に、成分の濃度または希釈に比較的鈍感であるように選択され得る。一実施形態では、組成物および／または読み取り緩衝液は、成分の公称濃度の０．８～１．２倍の濃度範囲にわたって、ＥＣＬアッセイからの特異的ＥＣＬシグナルが比較的変化しないか、または１０％未満しか変化しないか、もしくは２０％未満しか変化しないか、もしくは３０％未満しか変化しないように構成される。
【0075】
本開示の実施形態では、組成物は、液体希釈剤を含む。実施形態では、液体希釈剤は水であり、組成物は実質的に水性である。
【0076】
本開示の実施形態では、組成物は、液体希釈剤を含まず、組成物は、乾燥形態で提供される。
【0077】
５．８ キット
本開示の一態様は、１つ以上の容器内に、本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の１つ以上の構成成分を含むキットに関する。好ましくは、容器のうちの少なくとも１つは、ＢＤＥＡ（または、あるいは、ＤＢＡＥ）を含有する。使用され得る好適な容器としては、限定されないが、ガラスおよび／またはプラスチック容器、ならびにプラスチックおよび／またはホイルパウチが挙げられる。キットのパッケージまたは構成成分の容器は、キットもしくは容器の内容物に関する情報、または適切な保管および／もしくはアッセイでの使用に関する指示を記載し得る。これらの構成成分は、任意選択的に追加の試薬と組み合わせて、本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液を形成することができる。キットはまた、ＥＣＬ標識、ＥＣＬ標識アッセイ試薬、酵素、結合試薬、電極、アッセイプレートなどの、追加のアッセイに関係する構成成分を含み得る。キットは、液体または乾燥状態にある構成成分を含み得る。
本開示の一態様は、１つ以上の容器内に、本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の１つ以上の構成成分を含むキットに関する。好ましくは、容器のうちの少なくとも１つは、ＢＤＥＡ（または、あるいは、ＤＢＡＥ）を含有する。使用され得る好適な容器としては、限定されないが、ガラスおよび／またはプラスチック容器、ならびにプラスチックおよび／またはホイルパウチが挙げられる。キットのパッケージまたは構成成分の容器は、キットもしくは容器の内容物に関する情報、または適切な保管および／もしくはアッセイでの使用に関する指示を記載し得る。これらの構成成分は、任意選択的に追加の試薬と組み合わせて、本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液を形成することができる。キットはまた、ＥＣＬ標識、ＥＣＬ標識アッセイ試薬、酵素、結合試薬、電極、アッセイプレートなどの、追加のアッセイに関係する構成成分を含み得る。キットは、液体または乾燥状態にある構成成分を含み得る。
【0078】
本開示の別の態様は、混合されると、本明細書に記載のＥＣＬアッセイ組成物または読み取り緩衝液を形成する、２つ以上の構成成分を含むキットに関する。構成成分は、固体および／または液体であり得、好ましくは、少なくとも１つの構成成分は、液体である。本発明はまた、そのようなキット内の構成成分を混合することを含む、ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液を形成する方法を含む。一実施形態では、所定量の各構成成分が混合される。そのような所定量の構成成分は、別個の容器で事前に測定された状態で提供され得る。一実施形態では、方法はまた、キットの一部ではない１つ以上の追加の構成成分を提供し、それらをキットの構成成分と組み合わせることを含む。一例では、追加の構成成分は、液体希釈剤（例えば、水）である。
【0079】
本開示の別の態様は、１つ以上の容器内にＥＣＬ読み取り緩衝液および１つ以上の追加のアッセイ構成成分を含む、アッセイを実行するためのキットに関する。そのようなキット内では、ＥＣＬ読み取り緩衝液は、単一の構成成分として、または上記の２つ以上の構成成分として提供することができる。キットの一部であり得る、アッセイを実行するのに使用される追加のアッセイ構成成分としては、限定されないが、（ｉ）アッセイ機器、（ｉｉ）アッセイ消耗品、（ｉｉｉ）追加のアッセイ試薬、および（ｉｖ）例えば、較正標準物質またはアッセイ対照として使用するためのアッセイ試料、が挙げられる。
【0080】
キットに含まれ得るアッセイ消耗品の例は、アッセイの１つ以上のステップ中に試料および／もしくは試薬を収容するように設計されたアッセイモジュール、液体試料および試薬を移すためのピペットチップおよび他の消耗品、アッセイモジュール用のカバーおよびシール、ならびにアッセイで使用される他の消耗品、他のアッセイ消耗品を保持するためのラック、試料を同定するための標識（バーコード、ＲＦＩＤなどの人間が読み取り可能または機械が読み取り可能な形式を含む）、または他のアッセイ消耗品、ならびにアッセイに関する情報および／またはアッセイを実行するための指示を提供するための媒体（紙および電子媒体を含む）である。
【0081】
アッセイモジュールとしては、チューブ、キュベット、ウェル、マルチウェルプレート、カートリッジ、ラテラルフローデバイス、フローセルなどを挙げることができる。キットは、各々が参照により本明細書に組み込まれる、「Ａｓｓａｙ Ｐｌａｔｅｓ，Ｒｅａｄｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｔｅｓｔ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ」と題された、米国特許第７，８４２，２４６号および同第６，９７７，７２２号に従ったアッセイプレートもしくはマルチウェルアッセイプレート、または、「Ａｓｓａｙ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｓａｍｅ」と題された米国特許第９，７３１，２９７号に従ったアッセイカートリッジなどの１つ以上のアッセイ電極を有するアッセイモジュールを含み得る。好ましくは、アッセイ電極としては、カーボンインク電極であり得るカーボン電極が挙げられる。一実施形態によれば、キットは、アッセイモジュールを含み、アッセイモジュールは、キットで提供される１つ以上の他のアッセイ構成成分用の容器として使用される。そのような実施形態では、１つ以上の他のアッセイ構成成分は、ＥＣＬ読み取り緩衝液またはＥＣＬ読み取り緩衝液の１つ以上の構成成分を含み得、例えば、読み取り緩衝液またはその構成成分は、マルチウェルプレートウェルのうちの１つ以上のウェルに、任意選択的に乾燥形態で提供され得る。
【0082】
別の実施形態によれば、キットは、アッセイモジュールを含み、アッセイモジュールは、少なくとも１つの結合試薬用の容器として使用される。任意選択的に、結合試薬は、アッセイモジュールに固定化される。任意選択的に、複数の結合試薬は、アッセイモジュール内に結合試薬のアレイとして固定化される。固定化された結合試薬および／または固定化された結合試薬のアレイは、アッセイモジュール内の電極（炭素電極またはカーボンインク電極であり得る）上に固定化され得る。
【0083】
別の実施形態によれば、キットは、複数のウェルを有するマルチウェルアッセイプレートを含み、アッセイプレートは、少なくとも１つの結合試薬用の容器として使用される。任意選択的に、結合試薬は、プレートに固定化される。プレート内の複数のウェルは、それらの中に固定化された結合試薬を有し得る。これらのウェルの各々の結合試薬は、これらのウェルのすべて、これらのウェルのうちの一部と同じ、またはこれらのウェルのいずれとも同じではない場合がある。任意選択的に、複数の結合試薬は、これらのウェルに各々の結合試薬のアレイとして固定化される。固定化された結合試薬および／または固定化された結合試薬のアレイは、ウェル内の電極（炭素系電極、またはより具体的には、カーボンインク電極であり得る）上に固定化され得る。
【0084】
キットに（および／またはアッセイモジュール内に、固定化または非固定化されて）含まれ得る結合試薬としては、限定されないが、全細胞、細胞表面抗原、細胞内粒子（例えば、細胞小器官、または膜断片）、エキソソーム、細胞外小胞、膜小胞、リポソーム、ウイルス、プリオン、イエダニもしくはその断片、ウイロイド、抗体、抗原、ハプテン、脂肪酸、核酸（および合成類似体）、タンパク質（および合成類似体）、リポタンパク質、多糖、阻害剤、補因子、ハプテン、細胞受容体、受容体リガンド、リポ多糖、糖タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、酵素、酵素基質、酵素生成物、セカンドメッセンジャー、細胞代謝生成物、ホルモン、薬理学的薬剤、合成有機分子、有機金属分子、鎮静剤、バルビツール酸塩、アルカロイド、ステロイド、ビタミン、アミノ酸、糖、レクチン、組み換えもしくは誘導タンパク質、ビオチン、アビジン、および／またはストレプトアビジンが挙げられる。
【0085】
一実施形態では、キットは、脂質二重層膜（アッセイモジュールで提供され、任意選択的にアッセイモジュールに固定化され得る）およびＥＣＬ読み取り緩衝液（１つ以上の部分で提供される）を含む結合試薬を含み、この試薬中で脂質二重層膜が破壊されない。読み取り緩衝液は、界面活性剤を含まなくてもよい。あるいは、読み取り緩衝液は、界面活性剤を含有し得るが、界面活性剤のｃｍｃ未満の濃度である。あるいは、読み取り緩衝液は、脂質二重層膜を破壊しない穏やかな界面活性剤（ｃｍｃ超の濃度で存在し得る）を含有し得る。実施形態では、脂質二層膜は、無傷の細胞、細胞溶解物、細胞断片、細胞膜、膜ゴースト、細胞小器官、細胞小器官断片、細胞小器官膜、ビリオン、ビリオン断片、ビリオン膜、リポソーム、原形質膜断片、エンドソーム、クラスリン被覆小胞、小胞体断片、シナプス小胞、ゴルジ体断片、膜サブドメイン、ミトコンドリア、ペルオキシソーム、リソソーム、リポソーム、エキソソーム、細胞外小胞、ウイルス粒子、細胞から脱落したウイルス誘導膜封入粒子、または生物由来の無傷の脂質膜体のうちの少なくとも１つに由来する。
【0086】
別の実施形態によれば、キットは、２つ以上、４つ以上、８つ以上、１５個以上、または２５個以上のアッセイモジュールまたはプレートを含む。一実施形態によれば、キットは、再封可能な袋または容器（例えば、ジップロック開口部を有する容器）に収容される。
【0087】
実施形態では、本開示は、１つ以上の容器内に以下の材料、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、を含むキットを提供する。
【0088】
実施形態では、材料のうちの１つ以上が、乾燥形態で提供される。実施形態では、キットは、液体希釈剤をさらに含む。実施形態では、キットは、界面活性剤をさらに含む。実施形態では、キットは、界面活性剤または液体希釈剤を含まない。
【0089】
実施形態では、本開示は、本明細書に記載の組成物と、アッセイ機器、アッセイ消耗品、追加のアッセイ試薬、アッセイ試料、またはそれらの組み合わせと、を含む、キットを提供する。実施形態では、キットは、アッセイ機器を含み、アッセイ機器が、ＥＣＬアッセイを行うために構成されている。実施形態では、キットは、アッセイ消耗品を含み、ＥＣＬアッセイで使用するために構成された電極をさらに含む。実施形態では、電極は、炭素系電極である。実施形態では、電極は、スクリーン印刷されたカーボンインク電極である。
【0090】
実施形態では、キットは、追加のアッセイ試薬を含み、追加のアッセイ試薬が、結合試薬である。実施形態では、結合試薬は、ＥＣＬ標識で標識されている。実施形態では、標識は、有機金属ルテニウム錯体である。実施形態では、キットは、追加のアッセイ試薬を含み、追加のアッセイ試薬が、結合試薬であり、追加のアッセイ試薬が、電極上に固定化されている。実施形態では、キットは、追加のアッセイ試薬を含み、追加のアッセイ試薬が、結合試薬であり、追加のアッセイ試薬が、電極上にアレイとして固定化されている。実施形態では、キットは、追加のアッセイ試薬を含み、追加のアッセイ試薬が、結合試薬であり、追加のアッセイ試薬が、粒子上に固定化されている。実施形態では、粒子は、磁気によって収集可能である。
【0091】
実施形態では、キットは、少なくとも１つのアッセイ試料を含み、少なくとも１つのアッセイ試料が、アッセイ較正試料および／またはアッセイ対照試料を含む。
【0092】
５．９ 方法
本開示の別の態様は、本開示の緩衝液、試薬、および／または組成物を使用する方法に関する。
本開示の別の態様は、本開示の緩衝液、試薬、および／または組成物を使用する方法に関する。
【0093】
本開示の一実施形態は、エレクトロケミルミネッセンスアッセイを行うための方法であって、エレクトロケミルミネッセンスが、本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の存在下で誘導される、方法に関する。エレクトロケミルミネッセンスは、炭素系電極を使用して誘導することができる。この実施形態に従った方法は、電極をＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液と接触させることと、電極に電圧を印加することと、得られたエレクトロケミルミネッセンスを測定することと、を含む。
【0094】
本開示の別の実施形態は、ＥＣＬ標識の量を測定するための方法であって、標識が、本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の存在下で、エレクトロケミルミネッセンスを放出するように誘導され、エレクトロケミルミネッセンスを測定して、ＥＣＬ標識の量を測定する、方法に関する。エレクトロケミルミネッセンスは、炭素系電極を使用して誘導することができる。この実施形態に従った方法は、電極をＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液と接触させることと、電極に電圧を印加することと、得られたエレクトロケミルミネッセンスを測定することと、を含み、ＥＣＬ標識の量が、当該電極に近接して固定化されるか、または保持される。あるいは、ＥＣＬ標識の量は、ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の構成成分であり得る。
【0095】
本開示の別の実施形態は、ＥＣＬ標識で標識された結合アッセイ試薬を含む結合錯体の量を測定するための方法であって、標識が、本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の存在下で、エレクトロケミルミネッセンスを放出するように誘導され、エレクトロケミルミネッセンスを測定して、結合錯体の量を測定する、方法に関する。エレクトロケミルミネッセンスは、炭素系電極を使用して誘導することができる。この実施形態に従った方法は、（ｉ）電極を結合反応溶液と接触させることであって、電極が、その上に固定化された固定化された結合試薬を有し、結合反応溶液が、ＥＣＬ標識で標識された標識された結合試薬を含む、電極を結合反応溶液と接触させることと、（ｉｉ）固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む電極上に結合錯体を形成することと、（ｉｉｉ）電極上の結合錯体を、共反応物を含有するＥＣＬアッセイ組成物と接触させることと、（ｉｖ）ＥＣＬアッセイ組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、（ｖ）得られたＥＣＬを測定して、結合錯体の量を測定することと、を含む。この実施形態に従った別の方法は、（ｉ）粒子（または他の固相結合反応支持体）を結合反応溶液と接触させることであって、粒子が、その上に固定化された固定化された結合試薬を有し、結合反応溶液が、ＥＣＬ標識で標識された標識された結合試薬を含む、粒子を結合反応溶液と接触させることと、（ｉｉ）固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む粒子上に結合錯体を形成することと、（ｉｉｉ）粒子上の結合錯体を、共反応物を含有するＥＣＬアッセイ組成物と接触させることと、（ｉｖ）（例えば、重力、遠心分離、ろ過によって、または磁性粒子の場合は磁石の使用によって）電極上に粒子を収集することと、（ｖ）ＥＣＬアッセイ組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、（ｖｉ）得られたＥＣＬを測定して、結合錯体の量を測定することと、を含む。さらなる実施形態では、電極は、白金を含むか、または白金から本質的になる。
【0096】
方法は、本明細書に記載の方法のステップ（ｉｉｉ）が、電極（または粒子）を洗浄して未結合の標識された結合試薬を除去することと、電極（または粒子）をＥＣＬ共反応物含有ＥＣＬ読み取り緩衝液と接触させてＥＣＬアッセイ組成物を提供することをさらに含む、「洗浄」アッセイ形式を使用してもよい。あるいは、ステップ（ｉｉｉ）が洗浄ステップを含まず、結合反応溶液をＥＣＬ共反応物含有ＥＣＬ読み取り緩衝液と組み合わせてＥＣＬアッセイ組成物を形成することを含む、「非洗浄」形式を使用してもよい。代替的な「非洗浄」形式では、結合反応溶液は、共反応物含有ＥＣＬアッセイ組成物である。
【0097】
本開示の別の実施形態は、本明細書に記載の結合錯体を測定するための方法を用いる、分析物用のアッセイを実行するための方法を含む。この実施形態では、方法のステップ（ｉ）は、（ａ）電極（または粒子）をある量の分析物を含有する試料と接触させること、および／または（ｂ）標識された結合試薬をある量の分析物を含有する試料と組み合わせることによって、結合反応溶液を形成することと、をさらに含み得る。さらに、ステップ（ｖ）は、結合錯体の量から分析物の量を決定することを含み得る。実行され得る結合アッセイ形式としては、限定されないが、（ｉ）標識された結合試薬が対象の分析物であり、固定化された結合試薬が分析物の結合パートナーであり、錯体が２つの試薬の直接結合によって形成される、直接結合アッセイ、（ｉｉ）固定化および標識された結合試薬が対象の分析物の両方の結合パートナーであり、分析物が２つの結合パートナーに結合して錯体を形成する、サンドイッチ結合アッセイ、（ｉｉｉ）固定化された結合試薬が分析物の結合パートナーであり、標識された結合試薬が、分析物への結合について固定化された結合試薬と競合する競合物（例えば、分析物または分析物の類似体）であるか、あるいは標識された結合試薬が分析物の結合パートナーであり、固定化された結合試薬が、分析物への結合について固定化された結合試薬と競合する競合物質である（競合形式では、標識された結合錯体－固定化および標識された結合試薬の直接結合によって形成される－が、分析物の量が増加すると量が減少する）競合結合アッセイ、が挙げられる。固定化および／または標識された結合試薬が、分析物の結合パートナーまたは競合物であると本明細書に記載される場合、それらは、ひいては、直接または追加の反応性構成成分を通じてのいずれかで、分析物の結合パートナーまたは競合物に結合する反応性構成成分で置き換えることができることが当技術分野でよく理解されている。
【0098】
本開示の別の実施形態は、分析物の量または活性を測定するための方法であって、分析物が、ＥＣＬ標識を含む標識物質と反応するか、錯体を形成するか、または特異的結合相互作用において競合し、標識が、本開示のＥＣＬ共反応物含有ＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の存在下でエレクトロケミルミネッセンスを放出するように誘導され、エレクトロケミルミネッセンスを測定して、分析物の量または活性を測定する、方法に関する。エレクトロケミルミネッセンスは、炭素系電極を使用して誘導することができる。分析物の存在または活性により、（例えば、特異的結合錯体の形成を介して、または化学結合の切断もしくは形成を介して）標識が、電極に結合するかまたは電極から開放されることが生じる。この実施形態に従った方法は、電極をＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液と接触させることと、電極に電圧を印加することと、得られたエレクトロケミルミネッセンスを測定することと、を含み得、ＥＣＬ標識の量が、当該電極に近接して固定化されるか、または保持される。有利なことに、本開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の存在下でＥＣＬを誘導するために使用される波形は、持続時間が短くてもよく、例えば、波形の持続時間は、１２秒未満、６秒未満、３秒未満、２秒未満、または１秒未満であり得る。
【0099】
ＥＣＬアッセイにおいて測定されたＥＣＬの量を使用して、ＥＣＬ標識または分析物の量および／または濃度を決定するためのアプローチは、当技術分野で確立されており、例えば、較正標準物質および／または較正曲線を使用して、ＥＣＬシグナルと標識および／または分析物の量および／または濃度との間の関係性を確立することを含み得る。較正は、異なる時点で、例えば、方法の展開中、特定のロットのアッセイ材料の認定中、またはアッセイ測定時に実行することができる。較正はまた、アッセイ構成成分および機器の既知の物理的および化学的挙動に基づく計算を使用して実行することができる。
【0100】
本開示の実施形態は、対象の分析物または活性を含有し得る多様な試料を試験するために使用することができる。そのような試料は、固体、エマルション、懸濁液、液体、または気体の形態であり得る。それらは、限定されないが、例えば、細胞（生または死）および細胞由来の生成物、不死化細胞、細胞断片、細胞画分、細胞溶解物、細胞小器官、細胞膜、ハイブリドーマ、細胞培養上清（ハイブリドーマなどの抗体生成生物からの上清を含む）、廃水、または飲料水、食品、飲料、医薬組成物、血液、血清、血漿、毛髪、汗、尿、糞便、組織、生検、廃液、分離および／もしくは分画された試料、分離および／もしくは分画された液体、臓器、唾液、動物の一部、動物の副生成物、植物、植物の一部、植物の副生成物、土壌、ミネラル、ミネラル堆積物、水、給水器、水源、流体からろ過された残留物（気体および液体）、スワイプ、吸収性材料、ゲル、細胞骨格、タンパク質錯体、未分画試料、未分画細胞溶解物、内分泌因子、パラクリン因子、オートクリン因子、サイトカイン、ホルモン、細胞シグナル伝達因子およびもしくは構成成分、セカンドメッセンジャーシグナル伝達因子および／もしくは構成成分、細胞核／核、核画分、化学物質、化学組成物、構造生物学的構成成分、骨格（靭帯、腱）構成成分、分離および／もしくは分画された骨格構成成分、毛髪、毛皮、羽、毛髪画分および／もしくは分離物、皮膚、皮膚試料、皮膚画分、真皮、内皮、真核細胞、原核細胞、真菌、酵母、抗体、抗体断片、免疫因子、免疫細胞、薬物、治療薬、油、抽出物、粘膜、毛皮、油、下水、環境試料、有機溶媒、または空気、を含有するかまたはそれらに由来する試料であり得る。試料は、例えば、水、有機溶媒（例えば、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ｎ－メチルピロリドン、またはアルコール）またはそれらの混合物をさらに含み得る。
【0101】
測定され得る分析物としては、限定されないが、試料中に存在する、全細胞、細胞表面抗原、細胞内粒子（例えば、細胞小器官、または膜断片）、エキソソーム、細胞外小胞、リポソーム、膜小胞、ウイルス、プリオン、イエダニもしくはその断片、ウイロイド、抗体、抗原、ハプテン、脂肪酸、核酸（および合成類似体）、タンパク質（および合成類似体）、リポタンパク質、多糖、阻害剤、補因子、ハプテン、細胞受容体、受容体リガンド、リポ多糖、糖タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、酵素、酵素基質、酵素生成物、セカンドメッセンジャー、細胞代謝生成物、ホルモン、薬理学的薬剤、合成有機分子、有機金属分子、鎮静剤、バルビツール酸塩、アルカロイド、ステロイド、ビタミン、アミノ酸、糖、レクチン、組み換えもしくは誘導タンパク質、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジン、または無機分子が挙げられる。測定され得る活性としては、限定されないが、ホスホリラーゼ、ホスファターゼ、エステラーゼ、トランス－グルタミナーゼ、核酸損傷活性、トランスフェラーゼ、オキシダーゼ、レダクターゼ、デヒドロゲナーゼ、グリコシダーゼ、リボソーム、タンパク質プロセシング酵素（例えば、プロテアーゼ、キナーゼ、タンパク質ホスファターゼ、ユビキチン－タンパク質リガーゼなど）、核酸プロセシング酵素（例えば、ポリメラーゼ、ヌクレアーゼ、インテグラーゼ、リガーゼ、ヘリカーゼ、テロメラーゼなど）、細胞受容体活性化、セカンドメッセンジャー系活性化などの活性が挙げられる。
【0102】
全細胞は、動物、植物、または細菌であり得、生存可能であっても死んでいてもよい。例としては、真菌および線虫などの植物病原菌が挙げられる。「細胞内粒子」という用語は、例えば、細胞内小器官、破壊された細胞からの膜粒子、細胞壁の断片、リボソーム、多酵素錯体、および生物に由来し得る他の粒子を包含することを意味する。核酸としては、例えば、染色体ＤＮＡ、プラスミドＮＡ、ウイルスＤＮＡ、および複数の源に由来する組み換えＤＮＡが挙げられる。核酸としてはまた、ＲＮＡのもの、例えばメッセンジャーＲＮＡのもの、リボソームＲＮＡのもの、およびトランスファーＲＮＡのものが挙げられる。ポリペプチドとしては、例えば、酵素、輸送タンパク質、受容体タンパク質、およびウイルスコートタンパク質などの構造タンパク質が挙げられる。好ましいポリペプチドは、酵素および抗体である。特に好ましいポリペプチドは、モノクローナル抗体である。ホルモンとしては、例えば、インスリンおよびＴ４甲状腺ホルモンが挙げられる。薬理学的薬剤としては、例えば、強心性配糖体が挙げられる。合成ポリペプチド、合成核酸、および合成膜、小胞、およびリポソームなどの生物学的材料に化学的によく似た合成物質を含むことは、当然、本開示の範囲内である。前述は、本開示での使用に好適な生物学的物質の包括的な列挙であることを意図するものではなく、本開示の広い範囲を説明することのみを意味している。
【0103】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、を含む組成物を生成するための方法を提供する。方法の実施形態では、材料のうちの１つ以上が、乾燥形態で提供される。
【0104】
実施形態では、本開示は、電極を本明細書に記載の組成物およびＥＣＬ標識と接触させることと、電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、を含む、ＥＣＬを生成するための方法を提供する。
【0105】
実施形態では、本開示は、ＥＣＬ標識の量を測定するための方法であって、電極を本明細書に記載の組成物およびＥＣＬ標識と接触させることと、電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定することと、測定されたＥＣＬから、標識の量を決定することと、を含む、方法を提供する。
【0106】
実施形態では、本開示は、ＥＣＬ標識に連結された結合試薬を含む結合錯体の量を測定するための方法であって、電極上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む電極上に結合錯体を形成することと、電極上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、電極上の結合錯体の量を決定することと、を含む、方法を提供する。
【0107】
実施形態では、本開示は、ＥＣＬ標識に連結された結合試薬を含む結合錯体の量を測定するための方法であって、粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む粒子上に結合錯体を形成することと、粒子上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、電極上に粒子を収集することと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、電極上の結合錯体の量を決定することと、を含む、方法を提供する。実施形態では、方法は、結合錯体の形成後、ならびに電極を組成物と接触させる前および／または接触中に、電極を洗浄することをさらに含む。
【0108】
実施形態では、本開示は、ＥＣＬ標識に連結された結合試薬を含む結合錯体の量を測定するための方法であって、粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む粒子上に結合錯体を形成することと、粒子上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、電極上に粒子を収集することと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、電極上の結合錯体の量を決定することと、を含む、方法を提供する。実施形態では、粒子は、磁気によって収集可能であり、粒子は、磁場を使用して電極上に収集される。実施形態では、方法は、結合錯体の形成後、ならびに粒子を組成物と接触させる前および／または接触中に、粒子を洗浄することをさらに含む。
【0109】
方法の実施形態では、固定化された結合試薬および標識された結合試薬は、互いに直接結合する。方法の実施形態では、固定化された結合試薬および標識された結合試薬は、他の結合種を通じて互いに間接的に結合する。実施形態では、固定化された結合試薬および標識された結合試薬は、（ｉ）対象の分析物の結合パートナー、（ｉｉ）対象の分析物、もしくはその類似体および／もしくは競合物、または（ｉｉｉ）種（ｉ）もしくは（ｉｉ）と結合可能な反応性構成成分を含む。
【0110】
実施形態では、本開示は、分析物の量を測定するための方法であって、電極上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬および分析物（または分析物を含む試料）と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む電極上に結合錯体を形成することと、電極上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、分析物の量を決定することと、を含む、方法を提供する。実施形態では、方法は、結合錯体の形成後、ならびに電極を組成物と接触させる前および／または接触中に、電極を洗浄することをさらに含む。実施形態では、方法は、複数の分析物の多重測定を実行するために構成され、電極は、複数の分析物用の固定化された結合試薬のアレイをその上に固定化されている。
【0111】
実施形態では、本開示は、分析物の量を測定するための方法であって、粒子上に固定化された結合試薬を、ＥＣＬ標識を含む標識された結合試薬および分析物（または分析物を含む試料）と接触させることと、固定化された結合試薬および標識された結合試薬を含む粒子上に結合錯体を形成することと、粒子上の結合錯体を本明細書に記載の組成物と接触させることと、電極上に粒子を収集することと、組成物の存在下で電極に電圧を印加することと、ＥＣＬを生成することと、ＥＣＬを測定して、分析物の量を決定することと、を含む、方法を提供する。実施形態では、粒子は、磁気によって収集可能な粒子であり、粒子は、磁場を使用して電極上に収集される。実施形態では、方法は、結合錯体の形成後、ならびに粒子を組成物と接触させる前および／または接触中に、粒子を洗浄することをさらに含む。実施形態では、固定化された結合試薬および標識された結合試薬は、（ｉ）分析物の結合パートナー、（ｉｉ）分析物、もしくはその類似体および／もしくは競合物、または（ｉｉｉ）種（ｉ）もしくは（ｉｉ）と結合可能な反応性構成成分を含む。
【0112】
方法の実施形態では、電極は、炭素系電極である。実施形態では、電極は、スクリーン印刷されたカーボンインク電極である。実施形態では、ＥＣＬは、カメラを使用して画像化される。実施形態では、ＥＣＬは、フォトダイオードを使用して測定される。実施形態では、電極は、マルチウェルプレートアッセイ消耗品内にある。実施形態では、電極は、フローセル内にある。実施形態では、電極は、白金である。
【0113】
５．１０ 組成物
以下は、開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の実施形態のいくつかの非限定的な例である。
以下は、開示のＥＣＬアッセイ組成物および／または読み取り緩衝液の実施形態のいくつかの非限定的な例である。
【0114】
開示の組成物の一実施形態では、以下の構成成分、約７５ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でＢＤＥＡ、ゼロまたは約１００ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）緩衝液、ゼロまたは約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの濃度でＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００（Ｃ１４Ｈ２２Ｏ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｎ）界面活性剤、ゼロまたは約２００ｍＭ～約１，０００ｍＭの濃度で塩化物イオン、ゼロまたは約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの濃度で非フェノール含有非イオン性界面活性剤、ゼロまたは約２００ｍＭ～約８００ｍＭの濃度でグリセロール、およびゼロまたは約２００ｍＭ～約８００ｍＭの濃度でＮａ２ＳＯ４が含まれ得る。
【0115】
開示の組成物の別の実施形態では、以下の構成成分、約７５ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でＢＤＥＡ、約１００ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でトリス、約２００ｍＭ～１，０００ｍＭの濃度で塩化物イオン、約０．２～約１０ｍＭの濃度でＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００が含まれ得る。
【0116】
開示の組成物の別の実施形態では、以下の構成成分、約１５０ｍＭの濃度でＢＤＥＡ、約２００ｍＭの濃度でトリス、約５０ｍＭの濃度でＫＣｌ、約１ｍＭの濃度でＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００、および約８００ｍＭの濃度でＮａＣｌが含まれ得る。
【0117】
開示の組成物の別の実施形態では、以下の構成成分、約７５ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でＢＤＥＡ、約１００ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でトリス、約２００ｍＭ～１，０００ｍＭの濃度で塩化物イオン、約０．２～約５ｍＭの濃度で非フェノール含有非イオン性界面活性剤が含まれ得、界面活性剤が、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である。
【0118】
開示の組成物の別の実施形態では、以下の構成成分、約１５０ｍＭの濃度でＢＤＥＡ、約２００ｍＭの濃度でトリス、約５０ｍＭの濃度でＫＣｌ、約１ｍＭの濃度で非フェノール含有非イオン性界面活性剤、および８００ｍＭの濃度でＮａｃｌが含まれ得、界面活性剤が、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である。
【0119】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、を含む組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、から本質的になる組成物を提供する。
【0120】
実施形態では、本発明は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭの濃度で以下の式、（ＨＯＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ－ＣＨＲ１－ＣＨＲ２－ＣＨＲ３－Ｒ４（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２であり、例えば、Ｒ Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々、Ｈである）のアルキルジエタノールアミン、ゼロまたは約１００ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）緩衝液、ゼロまたは約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの濃度でＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００（Ｃ１４Ｈ２２Ｏ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｎ）界面活性剤、ゼロまたは約２００ｍＭ～約１，０００ｍＭの濃度で塩化物イオン、ゼロまたは約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの濃度で非フェノール含有非イオン性界面活性剤、ゼロまたは約２００ｍＭ～約８００ｍＭの濃度でグリセロール、およびゼロまたは約２００ｍＭ～約８００ｍＭの濃度でＮａ２ＳＯ４を含む、組成物を提供する。
【0121】
開示の組成物の別の実施形態では、以下の構成成分、約７５ｍＭ～約３００ｍＭの濃度で以下の式、（ＨＯＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ－ＣＨＲ１－ＣＨＲ２－ＣＨＲ３－Ｒ４（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２であり、例えば、Ｒ Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々Ｈである）のアルキルジエタノールアミン、約１００ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でトリス、約２００ｍＭ～１，０００ｍＭの濃度で塩化物イオン、約０．２～約１０ｍＭの濃度でＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００が含まれ得る。
【0122】
開示の組成物の別の実施形態では、以下の構成成分、約１５０ｍＭの濃度で以下の式、（ＨＯＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ－ＣＨＲ１－ＣＨＲ２－ＣＨＲ３－Ｒ４（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２であり、例えば、Ｒ Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々Ｈである）のアルキルジエタノールアミン、約２００ｍＭの濃度でトリス、約５０ｍＭの濃度でＫＣｌ、約１ｍＭの濃度でＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００、および約８００ｍＭの濃度でＮａｃｌが含まれ得る。
【0123】
開示の組成物の別の実施形態では、以下の構成成分、約７５ｍＭ～約３００ｍＭの濃度で以下の式、（ＨＯＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ－ＣＨＲ１－ＣＨＲ２－ＣＨＲ３－Ｒ４）式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、および Ｒ４が、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２であり、例えば、Ｒ Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々Ｈである）のアルキルジエタノールアミン、約１００ｍＭ～約３００ｍＭの濃度でトリス、約２００ｍＭ～１，０００ｍＭの濃度で塩化物イオン、約０．２～約５ｍＭの濃度で非フェノール含有非イオン性界面活性剤が含まれ得、界面活性剤が、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である。
【0124】
開示の組成物の別の実施形態では、以下の構成成分、約１５０ｍＭの濃度で以下の式、（ＨＯＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ－ＣＨＲ１－ＣＨＲ２－ＣＨＲ３－Ｒ４（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々独立して、－Ｈ、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ３、または－ＣＨ（ＣＨ３）２であり、例えば、Ｒ Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４が、各々Ｈである）のアルキルジエタノールアミン、約２００ｍＭの濃度でトリス、約５０ｍＭの濃度でＫＣｌ、約１ｍＭの濃度で非フェノール含有非イオン性界面活性剤、および約８００ｍＭの濃度でＮａｃｌが含まれ得、界面活性剤が、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である。
【0125】
実施形態では、本開示の組成物は、界面活性剤、液体希釈剤、ＥＣＬ標識、結合アッセイ用の結合試薬、防腐剤、殺生物剤、消泡剤、過塩素酸塩化合物、着色剤、またはトレーサー化学物質のうちの少なくとも１つをさらに含む。
【0126】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、からなる組成物を提供する。
【0127】
実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分は、トリス（ヒドロキシメチル）－アミノメタン（トリス）である。
【0128】
実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分は、トリス（ヒドロキシメチル）－アミノメタン（トリス）であり、組成物は、界面活性剤を含む。実施形態では、界面活性剤は、フェノールエーテルを含む。実施形態では、界面活性剤は、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００である。実施形態では、界面活性剤は、フェノールエーテルを含まない。実施形態では、組成物は、脂質二重層膜を破壊しない。実施形態では、界面活性剤は、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である。実施形態では、界面活性剤は、ＴＷＥＥＮ－２０である。実施形態では、界面活性剤は、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルである。
【0129】
実施形態では、本開示の組成物は、フェノールエーテルを含まない界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、脂質二重層膜を破壊しない。実施形態では、界面活性剤は、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０である。実施形態では、界面活性剤は、ＴＷＥＥＮ－２０である。実施形態では、界面活性剤は、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルである。実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分は、リン酸塩、ＨＥＰＥＳ、グリシルグリシン、ホウ酸塩、酢酸塩、またはクエン酸塩である。
【0130】
実施形態では、ＥＣＬ共反応物は、ＢＤＥＡである。実施形態では、ＥＣＬ共反応物は、ＤＢＡＥである。実施形態では、組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬは、１８℃～３０℃の温度範囲にわたって、平均して１℃あたり１％未満しか変化しない。実施形態では、ＥＣＬは、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される。
【0131】
本明細書に記載の組成物の実施形態では、ｐＨは、６～９である。実施形態では、ｐＨは、７～８である。実施形態では、ｐＨは、７．６～７．９である。実施形態では、ｐＨは、約７．８である。本明細書に記載の組成物の実施形態では、組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬのｐＨでのＥＣＬの変化の傾きは、ｐＨ単位あたり１０％未満である。実施形態では、ＥＣＬは、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される。
【0132】
本明細書に記載の組成物の実施形態では、イオン性構成成分は、ＮａＣｌを含む。実施形態では、イオン性構成成分は、ＫＣｌを含む。実施形態では、イオン性構成成分は、ＬｉＣｌを含む。実施形態では、イオン性構成成分は、塩化物イオンを含む。
【0133】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、液体希釈剤を含む。実施形態では、液体希釈剤は水であり、組成物は実質的に水性である。
【0134】
本明細書に記載の組成物の実施形態では、ＥＣＬ共反応物の濃度は、約１０ｍＭ～約８００ｍＭである。実施形態では、ＥＣＬ共反応物の濃度は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭである。実施形態では、ＥＣＬ共反応物の濃度は、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭである。本明細書に記載の組成物の実施形態では、ＥＣＬ共反応物の濃度の公称値の０．８～１．２倍への変化は、組成物の存在下でＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬの１０％未満の変化を提供する。実施形態では、ＥＣＬは、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される。実施形態では、ＥＣＬ標識からのＥＣＬは、炭素系電極に近接したエレクトロケミルミネッセントルテニウム有機金属錯体から生成される、および／またはＥＣＬ標識の不在下でのＥＣＬは、炭素系電極で生成される。
【0135】
実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分の濃度は、約１０ｍＭ～約８００ｍＭである。実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分の濃度は、約１００ｍＭ～約３００ｍＭである。実施形態では、ｐＨ緩衝構成成分の濃度は、約１５０ｍＭ～約２５０ｍＭである。
【0136】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、０．３Ｍ超のイオン強度を有する。実施形態では、本明細書に記載の組成物は、０．５Ｍ超のイオン強度を有する。実施形態では、本明細書に記載の組成物は、０．８Ｍ超のイオン強度を有する。実施形態では、本明細書に記載の組成物は、１．０Ｍ超のイオン強度を有する。実施形態では、組成物は、塩化物イオンを含み、塩化物イオンの濃度は、約０．２５Ｍ超である。実施形態では、組成物は、塩化物イオンを含み、塩化物イオンの濃度は約０．５Ｍ超である。実施形態では、組成物は、塩化物イオンを含み、塩化物イオンの濃度は、約０．７５Ｍ超である。実施形態では、組成物は、塩化物イオンを含み、塩化物イオンの濃度は、約１．０Ｍ超である。
【0137】
本明細書に記載の組成物の実施形態では、組成物が、ｐＨ緩衝構成成分としてリン酸塩を含有する同じ組成物と比較して、ＥＣＬ標識によって生成されるＥＣＬの少なくとも２０％の減少および／またはＥＣＬ標識の不在下で生成されるバックグラウンドＥＣＬの少なくとも２０％の減少を提供するように、ｐＨ緩衝構成成分は選択される。
【0138】
実施形態では、イオン性構成成分を含有しない同じ組成物と比較して、イオン性構成成分を含有する組成物を用いるイムノアッセイにおける非特異的結合（ＮＳＢ）は、より低い。
【0139】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、液体希釈剤を含まず、組成物は、乾燥形態で提供される。
【0140】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、を含む組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、を含む組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、液体希釈剤と、を含む組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、液体希釈剤と、を含む組成物を提供する。
【0141】
いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、ＥＣＬ標識、結合アッセイ用の結合試薬、防腐剤、殺生物剤、消泡剤、過塩素酸塩化合物、着色剤、トレーサー化学物質、固体支持体、またはそれらの組み合わせのうちの少なくとも１つをさらに含む。
【0142】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、から本質的になる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、から本質的になる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、液体希釈剤と、から本質的になる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、液体希釈剤と、から本質的になる組成物を提供する。
【0143】
実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、からなる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、からなる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、液体希釈剤と、からなる組成物を提供する。実施形態では、本開示は、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、またはその両方と、ｐＨ緩衝構成成分と、イオン性構成成分と、界面活性剤と、液体希釈剤と、からなる組成物を提供する。
【0144】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、および約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および約１．０ｍＭの界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、約１．０ｍＭの界面活性剤、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0145】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約１００ｍＭ～約３００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、および約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約１００ｍＭ～約３００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および約１．０ｍＭの界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約１００ｍＭ～約３００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約１００ｍＭ～約３００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、約１．０ｍＭの界面活性剤、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0146】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭのイオン性構成成分を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約５００ｍＭ～約１５００ｍＭのイオン性構成成分、および約１．０ｍＭの界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約５００ｍＭ～約１５００ｍＭのイオン性構成成分、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約５００ｍＭ～約１５００ｍＭのイオン性構成成分、約１．０ｍＭの界面活性剤、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0147】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥから選択される約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＥＣＬ共反応物、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、および約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分を含む。実施形態では、組成物は、ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥＢＤＥＡまたはＤＢＡＥから選択される約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＥＣＬ共反応物、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および約０．２～約１０ｍＭの界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、約０．２～約１０ｍＭの界面活性剤、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0148】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、および約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および約０．２～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、約０．２～約５．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0149】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、および約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および約０．２～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、約０．２～約５．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0150】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、および約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および約０．２～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリエチルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、約０．２～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリエチルエーテル、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0151】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、および約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および約０．２～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡまたはＤＢＡＥ、約２００ｍＭのｐＨ緩衝構成成分、約７５０ｍＭ以上のイオン性構成成分、約０．２～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、および水性液体希釈剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0152】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、および約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約０または約１００ｍＭ～約３００ｍＭのトリス、および約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、および約０または約５００ｍＭ～約１５００ｍＭ塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0153】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0154】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0155】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0156】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0157】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0158】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0159】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0160】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0161】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0162】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0163】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0164】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0165】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0166】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0167】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0168】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。ｇｒｅａｔｅｒ ｔｈａｎ ｉｔｓ ｃｍｃ．実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0169】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0170】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0171】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0172】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0173】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0174】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0175】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0176】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0177】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0178】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0179】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0180】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0181】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0182】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0183】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0184】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0185】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0186】
Ｉ実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。Ｉ実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0187】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＢＤＥＡ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0188】
実施形態では、本明細書に記載の組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、および約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約０または約１００ｍＭ～約３００ｍＭのトリス、および約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、および約０または約５００ｍＭ～約１５００ｍＭ塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0189】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0190】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。
【0191】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0192】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0193】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭ～約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0194】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0195】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0196】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0197】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0198】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７， ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0199】
実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約７５ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0200】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0201】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0202】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0203】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0204】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0205】
実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0206】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0207】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0208】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0209】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0210】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0211】
実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約１５０ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0212】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0213】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0214】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0215】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0216】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0217】
実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約２００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0218】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、および約５００ｍＭ～約１５００ｍＭの塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオンを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0219】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0220】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭの非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度の非フェノール含有非イオン性界面活性剤を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0221】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－ｄ－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、またはＴＷＥＥＮ２０を含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0222】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＰ－１２３、またはＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【0223】
実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭ～約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約０．２ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１．０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約５ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、および約１０ｍＭのＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物は、約３００ｍＭのＤＢＡＥ、約２００ｍＭのトリス、約７５０ｍＭ以上の塩化物イオン、およびそのｃｍｃ超の濃度のＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルを含む。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．０～約８．０である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．５である。実施形態では、組成物のｐＨは、約７．８である。
【実施例0224】
以下の実施例は、本開示の範囲内にある電極、プレート、キット、および方法のうちのいくつかの例示である。当然、それらは開示を制限するものとは決して見なされるものではない。当業者は、過度の実験を行うことなく、本開示に対する多数の変更および修正を行うことができる。
【0225】
実施例Ｉ：ＥＣＬ共反応物の比較
トリプロピルアミン（ＴＰＡ）、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）、および２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）の３つの異なるＥＣＬ共反応物を用いて、ＥＣＬ読み取り緩衝液を調製した。ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥは、ＴＰＡ（蒸気圧＝２．９ｍｍ Ｈｇ、沸点＝１５６℃）と比較すると、低い揮発性（蒸気圧＝０．１ｍｍ Ｈｇおよび１ｍｍ Ｈｇ）、高い沸点（４４６℃および２７３～２７５℃）、低い可燃性、高い水溶性、および少ない臭気を有する。ＴＰＡ含有読み取り緩衝液は、ＭＳＤ読み取り緩衝液Ｔ（１Ｘ）（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）であった。ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥ読み取り緩衝液は、ＴＰＡをＢＤＥＡまたはＤＢＡＥに置き換えることを除いて同じ配合物（１２５ｍＭの共反応物、２００ｍＭのトリス－ＨＣｌ、５０ｍＭのＫＣｌ、０．１％（ｖ／ｖ）のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００、ＨＣｌでｐＨ７．８に調節）を使用して調製した。加えて、界面活性剤（ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００）の省略を除いて上記のＴＰＡおよびＢＤＥＡ読み取り緩衝液に類似した、２つの追加の読み取り緩衝液を調製した。
トリプロピルアミン（ＴＰＡ）、Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）、および２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）の３つの異なるＥＣＬ共反応物を用いて、ＥＣＬ読み取り緩衝液を調製した。ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥは、ＴＰＡ（蒸気圧＝２．９ｍｍ Ｈｇ、沸点＝１５６℃）と比較すると、低い揮発性（蒸気圧＝０．１ｍｍ Ｈｇおよび１ｍｍ Ｈｇ）、高い沸点（４４６℃および２７３～２７５℃）、低い可燃性、高い水溶性、および少ない臭気を有する。ＴＰＡ含有読み取り緩衝液は、ＭＳＤ読み取り緩衝液Ｔ（１Ｘ）（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）であった。ＢＤＥＡおよびＤＢＡＥ読み取り緩衝液は、ＴＰＡをＢＤＥＡまたはＤＢＡＥに置き換えることを除いて同じ配合物（１２５ｍＭの共反応物、２００ｍＭのトリス－ＨＣｌ、５０ｍＭのＫＣｌ、０．１％（ｖ／ｖ）のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００、ＨＣｌでｐＨ７．８に調節）を使用して調製した。加えて、界面活性剤（ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００）の省略を除いて上記のＴＰＡおよびＢＤＥＡ読み取り緩衝液に類似した、２つの追加の読み取り緩衝液を調製した。
【化4】
【0226】
ＭＳＤ ＭＵＬＴＩ－ＡＲＲＡＹストレプトアビジンプレート（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）を使用して、ＥＣＬ測定を実行した。プレートの各ウェルは、ストレプトアビジンの固定化層を支持するカーボンインク作動電極が組み込まれている。使用前に、ＴＷＥＥＮ２０を含有するリン酸塩緩衝生理食塩水（ＰＢＳＴ）でウェルを洗浄した。ＥＣＬ標識からのＥＣＬシグナルを測定するために、プレートの一部のウェルを、ビオチンＮＨＳエステル（プレートへの結合を提供するため）およびＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ ＮＨＳエステル（ＥＣＬ標識、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）の両方で標識した低濃度ウシＩｇＧを含有する溶液でインキュベートした。標識の不在下でＥＣＬバックグラウンドを測定するために、標識したウシＩｇＧを省略したことを除いて同じ溶液で、一部のウェルをインキュベートした。振とうさせながら室温でインキュベートして、ストレプトアビジンでコーティングした電極に、標識されたＩｇＧを結合させた後、ウェルをＰＢＳＴで洗浄し、試験読み取り緩衝液のうちの１つを添加した。次いで、ＥＣＬプレートリーダー（ＭＳＤ ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ６０００、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）を使用して、ＥＣＬを測定した。
【0227】
図１Ａおよび１Ｂは、界面活性剤（ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００）含有読み取り緩衝液の場合、ＢＤＥＡ、ＤＢＥＡ、およびＴＰＡはすべて、ＥＣＬ標識の存在下で同様の特異的シグナルを提供し（図１Ａ）、ＥＣＬの不在下では同様のバックグラウンドシグナルを提供したこと（図１Ｂ）を示し、ＢＤＥＡおよびＤＢＥＡが、有力なＴＰＡの代替物であることを示している。ＴＰＡ含有読み取り緩衝液の存在下でのＥＣＬに対する界面活性剤（特に、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００などの芳香族エーテル含有界面活性剤）の既知の利点と一致して、界面活性剤を含まないＴＰＡ読み取り緩衝液の特異的シグナルは、界面活性剤含有ＴＰＡ読み取り緩衝液よりも実質的に少なかった。比較すると、ＢＤＥＡ含有読み取り緩衝液からの界面活性剤の省略は、特異的シグナルについて最小限の影響を有する。
【0228】
図１Ｃは、図１Ａおよび１Ｂで記載の界面活性剤含有ＢＤＥＡ読み取り緩衝液を、緩衝構成成分としてトリスｐＨ緩衝構成成分をリン酸塩に置き換えたことを除いた類似の読み取り緩衝液と比較している。この図は、緩衝構成成分としてリン酸塩を使用すると、特異的シグナルの損失およびバックグラウンドシグナルの増加の両方に起因する、性能の減少をもたらすことを示している。
【0229】
実施例ＩＩ：ＢＤＥＡ系読み取り緩衝液を使用するイムノアッセイ
ＭＳＤ Ｖ－ＰＬＥＸ Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｐａｎｅｌ １キット（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）の１０個のマルチプレックスアッセイを使用して、マルチプレックスサンドイッチイムノアッセイ用のＢＤＥＡ系読み取り緩衝液の性能を、従来のＴＰＡ系読み取り緩衝液と比較した。キットは、ＭＳＤ ＭＵＬＴＩ－ＡＲＲＡＹプレートを使用し、各ウェルは底部にスクリーン印刷されたカーボンインク電極、および電極上に固定化された１０個の分析物に対する捕捉抗体の１０個のアレイが組み込まれている。ＢＤＥＡ含有ＥＣＬ読み取り緩衝液を使用したことを除いて、キットの説明書に従ってアッセイを行った。要するに、（ｉ）試料を添加する前にプレートを洗浄し、（ｉｉ）５０μＬの（キットアッセイ希釈液中に希釈された各分析物の較正標準物質を含有する）試料を各ウェルに添加し、（ｉｉｉ）プレートを振とうさせながら１２０分間インキュベートして、分析物を捕捉抗体に結合させ、次いで洗浄して未結合の試料を除去し、（ｉｖ）キット抗体希釈液中の１０個の（ＭＳＤ ＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ ＮＨＳエステルで標識した）分析物の、１０個の標識した検出抗体の混合物２５μＬを各ウェルに添加し、（ｖ）プレートを振とうさせながら９０分間インキュベートして検出抗体を分析物に結合させて捕捉し、次いで洗浄して未結合の検出抗体を除去し、（ｖｉ）１５０μＬのＥＣＬ読み取り緩衝液を添加し、ＭＳＤ ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ６０００プレートリーダーでＥＣＬを測定した。
ＭＳＤ Ｖ－ＰＬＥＸ Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｐａｎｅｌ １キット（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）の１０個のマルチプレックスアッセイを使用して、マルチプレックスサンドイッチイムノアッセイ用のＢＤＥＡ系読み取り緩衝液の性能を、従来のＴＰＡ系読み取り緩衝液と比較した。キットは、ＭＳＤ ＭＵＬＴＩ－ＡＲＲＡＹプレートを使用し、各ウェルは底部にスクリーン印刷されたカーボンインク電極、および電極上に固定化された１０個の分析物に対する捕捉抗体の１０個のアレイが組み込まれている。ＢＤＥＡ含有ＥＣＬ読み取り緩衝液を使用したことを除いて、キットの説明書に従ってアッセイを行った。要するに、（ｉ）試料を添加する前にプレートを洗浄し、（ｉｉ）５０μＬの（キットアッセイ希釈液中に希釈された各分析物の較正標準物質を含有する）試料を各ウェルに添加し、（ｉｉｉ）プレートを振とうさせながら１２０分間インキュベートして、分析物を捕捉抗体に結合させ、次いで洗浄して未結合の試料を除去し、（ｉｖ）キット抗体希釈液中の１０個の（ＭＳＤ ＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ ＮＨＳエステルで標識した）分析物の、１０個の標識した検出抗体の混合物２５μＬを各ウェルに添加し、（ｖ）プレートを振とうさせながら９０分間インキュベートして検出抗体を分析物に結合させて捕捉し、次いで洗浄して未結合の検出抗体を除去し、（ｖｉ）１５０μＬのＥＣＬ読み取り緩衝液を添加し、ＭＳＤ ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ６０００プレートリーダーでＥＣＬを測定した。
【0230】
図２Ａは、ＴＰＡおよびＢＤＥＡ読み取り緩衝液を使用して測定したシグナルを、最適化した濃度の各共反応物（キットによって指定された従来のＴＰＡ含有読み取り緩衝液（ＭＳＤ読み取り緩衝液Ｔ（２Ｘ））および実施例１に記載のＢＤＥＡ含有読み取り緩衝液）と比較した。そのアッセイの定量範囲の中間にある各分析物の濃度を含有する「Ｍｉｄ－Ｃａｌ」試料のシグナル、および分析物を追加していないキットアッセイ希釈剤である「ＮＳＢ」試料のシグナルが示されている。図は、各分析物／アレイ要素の測定したＥＣＬシグナル、およびＴＰＡ読み取り緩衝液を使用して測定したシグナルに正規化したＥＣＬシグナルを示している。各値は、場合によっては９９％の信頼区間を使用したグロスマン検定を使用して外れ値を除去した後の、２４０回の反復の平均（５つのアッセイプレートｘプレートあたり４８回の反復）を表す。図はまた、５つのプレートの各々について測定したプレート内変動係数（ＣＶ）の平均（プレート内ＣＶ）、ならびに各プレートの平均シグナルの変動係数（プレート間ＣＶ）を提供する。結果は、最適化された濃度では、ＴＰＡおよびＢＤＥＡ系読み取り緩衝液が、分析物の存在下で同様のシグナルを提供することを示している（ＢＤＥＡ系読み取り緩衝液を使用したＭｉｄ－Ｃａｌ試料の正規化されたシグナルは、９０％～１４０％である）。ＢＤＥＡ読み取り緩衝液の変動性（ＣＶで表される）は、平均してＴＰＡ読み取り緩衝液と同様であるか、またはわずかに良好であった。予想外にも、ＢＤＥＡ緩衝液を使用すると、ＮＳＢ試料シグナル（アレイ要素を捕捉する検出抗体への非特異的結合からの望ましくない非特異的バックグラウンドシグナルを表す）は非常に高かった（１つのアレイ要素の正規化ＮＳＢシグナルは３００％に近かった）。
【0231】
図２Ｂは、さらに最適化されたＢＤＥＡ読み取り緩衝液を使用し、条件ごとに４つのプレートのみを試験したことを除いて、図２Ａに上記の実験を繰り返した結果を示している。読み取り緩衝液の組成は実施例１に記載の通りであったが、わずかに高いＢＤＥＡ濃度（１５０ｍＭ）、およびまた８００ｍＭのＮａＣｌを有した。高い塩レベルの添加は、Ｍｉｄ－Ｃａｌ試料を用いて測定した特異的シグナルにわずかな影響しか及ぼさなかった（正規化されたシグナルは、約７５％～１２５％の範囲であった）が、ＮＳＢ試料での非特異的結合を劇的に低減する予想外の能力を有した（最も高い正規化されたＮＳＢシグナルは１５２％であったが、ほとんどが約７５％～１２５％の範囲であった）。
【0232】
実施例ＩＩＩ：最適化されたＢＤＥＡ読み取り緩衝液の堅牢性
この実施例は、最適化されたＢＤＥＡ読み取り緩衝液（図２Ｂに上記）および従来のＴＰＡ読み取り緩衝液の堅牢性を、環境および組成の変動の異なる潜在的な原因に対して比較した、いくつかの実験結果を示している。ＭＳＤストレプトアビジンプレートに結合したビオチンおよびＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ標識ウシＩｇＧ（実施例１に記載）を使用して、特異的シグナルを生成した。
この実施例は、最適化されたＢＤＥＡ読み取り緩衝液（図２Ｂに上記）および従来のＴＰＡ読み取り緩衝液の堅牢性を、環境および組成の変動の異なる潜在的な原因に対して比較した、いくつかの実験結果を示している。ＭＳＤストレプトアビジンプレートに結合したビオチンおよびＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ標識ウシＩｇＧ（実施例１に記載）を使用して、特異的シグナルを生成した。
【0233】
図３Ａは、結合した標識ＩｇＧからの特異的ＥＣＬシグナル（ＥＣＬ）および標識ＩｇＧの不在下で測定したバックグラウンドＥＣＬ（バックグラウンドＥＣＬ）に対する、読み取り緩衝液ｐＨの影響を示している。結果は、ｐＨ７．８で測定された値に対する変化％として示されている。ｐＨ７．７～７．９の範囲にわたって測定した特異的ＥＣＬシグナルは、ｐＨ７．８のＢＤＥＡ読み取り緩衝液（黒丸記号）を用いて測定したシグナルの５％以内であったが、２つの従来のＴＰＡ含有読み取り緩衝液（ＭＳＤ読み取り緩衝液Ｔ（ＭＳＤ Ｔ）１Ｘおよび２Ｘ、それぞれひし形および白丸）では違った。同じｐＨ範囲にわたる特異的ＥＣＬシグナルの変化の傾きは、読み取り緩衝液Ｔ（１Ｘ）のｐＨ単位あたり１６１％、読み取り緩衝液Ｔ（２Ｘ）のｐＨ単位あたり９３％と比較して、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液ではｐＨ単位あたり約７．４％であり、最適化されたＢＤＥＡ配合物がｐＨ変動に対してはるかに感度が低いことを実証している。
【0234】
図３Ｂは、異なる読み取り緩衝液の存在下でのＥＣＬ生成に対する温度の影響を示している。温度を約１８℃～３０℃に変動させ、最適化されたＢＤＥＡ配合物を読み取り緩衝液として使用すると、ストレプトアビジンプレート上のビオチンおよびＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ標識ＩｇＧからの特異的シグナル（２１．８℃でのシグナルからの変化％として報告）は、２１．８℃の値の１０％以内にとどまったが、従来のＴＰＡ読み取り緩衝液（ＭＳＤ読み取り緩衝液Ｔ（２Ｘ））を使用すると、非常に大きい変化が見られた。試験した温度範囲にわたる特異的ＥＣＬシグナルの変化の傾きは、読み取り緩衝液Ｔ（２Ｘ）の１℃あたり３．９％と比較して、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液では１℃あたり約１．６％であり、最適化されたＢＤＥＡ配合物が温度変動に対してはるかに感度が低いことを実証している。
【0235】
図３Ｃは、異なる読み取り緩衝液の存在下でのＥＣＬ生成に対する共反応物濃度の影響を示している。最適化されたＢＤＥＡ読み取り緩衝液配合物中のＢＤＥＡの濃度を、公称濃度（１Ｘ、１２５ｍＭ）の０．８倍（０．８Ｘ、１００ｍＭ）～１．４倍（１．４Ｘ、１７５ｍＭ）に変動させた。これらの濃度範囲にわたり、測定された特異的ＥＣＬシグナルにほとんど変化はなかった（１Ｘ条件の５％以内にとどまった）。ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を配合物から省略した場合、同様のシグナルおよび挙動が観察された。結果は、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液が、ＢＤＥＡ原材料の違いから生じるか、または製造上の変動性に起因するＢＤＥＡ濃度の変化に比較的鈍感であることを示している。
【0236】
図３Ｄは、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液中のすべての構成成分の希釈または濃縮の影響を示している。最適化されたＢＤＥＡ読み取り緩衝液配合物のすべての構成成分の濃度を、公称濃度（１Ｘ）の０．８倍（０．８Ｘ）～１．４倍（１．４Ｘ）に変動させた。０．８Ｘ～１．２Ｘの範囲にわたり、ＢＤＥＡ配合物を用いて測定した特異的シグナルは、１Ｘ条件の１０％以内にとどまったが、ＴＰＡ読み取り緩衝液（ＭＳＤ読み取り緩衝液Ｔ ２Ｘ）を用いて測定した特異的シグナルの変動は、ＢＤＥＡ配合物のもののほぼ２倍であった。結果は、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液が、乾燥試薬の再構成または液体濃縮物の希釈によるＢＤＥＡ読み取り緩衝液の調製におけるユーザーエラーなどの、希釈の変化に比較的鈍感であることを示している。
【0237】
図３Ｅは、異なる読み取り緩衝液（ＴＰＡ読み取り緩衝液、ＭＳＤ読み取り緩衝液Ｔ（２Ｘ）、およびＢＤＥＡ配合）の存在下、および７．６０～７．９０の範囲の様々なｐＨでの、ＥＣＬ生成に対する温度の影響を示している。図３Ｆは、異なる温度およびｐＨでの、ＴＰＡ読み取り緩衝液およびＢＤＥＡ配合物の存在下での、ＥＣＬシグナルのバックグラウンド変化％を示している。ｐＨ７．８０で試験した温度範囲にわたる特異的ＥＣＬシグナルの変化の傾きは、読み取り緩衝液Ｔ（２Ｘ）の１℃あたり６％と比較して、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液では１℃あたり１％未満であり、異なる温度でのＢＤＥＡ読み取り緩衝液の堅牢性をさらに実証している。
【0238】
図４は、ストレプトアビジンマルチアレイプレートのストレプトアビジンでコーティングした電極に印加した、異なる電圧波形の影響を示している。プロットは、異なる持続時間（ランプ電圧に応じて１．５～１２秒）にわたり印加した、４つの異なる電圧ランプ（２．０～５．０Ｖ、２．５～４．５Ｖ、３．０～４．５Ｖ、および３．０～５．０Ｖ）での特異的シグナル（ＥＣＬ）およびバックグラウンドシグナル（バックグラウンドＥＣＬ）を示している。ランプレートは、ランプ電圧および持続時間によって決定し、例えば、３秒の持続時間にわたる２．０～５．０Ｖのランプは、（５Ｖ－２Ｖ）／３ｓ＝１Ｖ／ｓのランプレートを有するであろう。図は、所与のランプについて、バックグラウンドＥＣＬが、ＴＰＡ系およびＢＤＥＡ系の両方の読み取り緩衝液の持続時間とともに増加することを示している。対照的に、特異的ＥＣＬは、ＴＰＡ読み取り緩衝液（ＭＳＤ読み取り緩衝液Ｔ ２Ｘ）を使用すると、持続時間とともに増加するが、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液を使用すると、持続時間とは比較的無関係である。結果は、ＢＤＥＡ配合物が、ＥＣＬ励起条件の変動に対してより耐性があることを示しており、また、感度を損失することなく、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液を用いてより高速な波形および測定を達成可能であることを示している。
【0239】
実施例ＩＶ：代替的な界面活性剤を含むＢＤＥＡ読み取り緩衝液
１ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００構成成分を０．５ｍＭの多様な代替的なより穏やかな界面活性剤で置き換えた（または対照として界面活性剤を省略した）ことを除いて、実施例２の最適化された高塩配合物の組成で、いくつかのＢＤＥＡ含有ＥＣＬ読み取り緩衝液を調製した。図５Ａは、この実験で試験した界面活性剤を示している。図５Ｂは、界面活性剤の添加により、界面活性剤を含まない読み取り緩衝液と比較して、（ペンダント形状の液滴によって決定した）読み取り緩衝液の液－気表面張力の顕著な低減を生じたことを示している。９６ウェルプレートのウェルへの再現性のある画像化では、４０ダイン／ｃｍ未満の表面張力は、一貫したメニスカル形状を提供した。
１ｍＭのＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００構成成分を０．５ｍＭの多様な代替的なより穏やかな界面活性剤で置き換えた（または対照として界面活性剤を省略した）ことを除いて、実施例２の最適化された高塩配合物の組成で、いくつかのＢＤＥＡ含有ＥＣＬ読み取り緩衝液を調製した。図５Ａは、この実験で試験した界面活性剤を示している。図５Ｂは、界面活性剤の添加により、界面活性剤を含まない読み取り緩衝液と比較して、（ペンダント形状の液滴によって決定した）読み取り緩衝液の液－気表面張力の顕著な低減を生じたことを示している。９６ウェルプレートのウェルへの再現性のある画像化では、４０ダイン／ｃｍ未満の表面張力は、一貫したメニスカル形状を提供した。
【0240】
異なる読み取り緩衝液でのＥＣＬ生成の効率は、ＭＳＤストレプトアビジンプレートに結合したビオチンおよびＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ標識ウシＩｇＧからの特異的シグナルを測定することによって測定し、バックグラウンドシグナルは（実施例１に記載の）標識ＩｇＧの不在下で同じ系で測定した。特異的ＥＣＬシグナル（図６Ａ）およびバックグラウンドＥＣＬシグナル（図６Ｂ）は、界面活性剤の構造にまったく無関係であり、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含有する読み取り緩衝液で測定した値に対して、特異的シグナルはすべて１０％以内であり、バックグラウンドシグナルはすべて１０ＥＣＬ単位以内であった。
【0241】
脂質二重層膜（ＣＤ９表面タンパク質を提示する細胞外小胞）を有する界面活性剤に感度の高い生物学的構造のアッセイに、異なる読み取り緩衝液配合物を使用した。統合されたカーボンインク作動電極に固定化されたＣＤ９に対する捕捉抗体を用いて、ＭＳＤ ＭＵＬＴＩ－ＡＲＲＡＹプレートを調製した。細胞外小胞を含有する試料で、ウェルをインキュベートした。次いで、ウェルを洗浄して未結合の試料を除去し、ＣＤ９に対するＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ標識検出抗体を含有する溶液でインキュベートして、捕捉された細胞外小胞に標識検出抗体を結合させた。次いで、ウェルを洗浄して未結合の検出抗体を除去し、読み取り緩衝液を添加した。次いで、ＭＳＤ ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ６０００ ＥＣＬプレートリーダーでプレートを直ちに分析するか（時間＝０）、またはＥＣＬ測定の前に１５分間インキュベートして分析した（時間＝１５）。図７は、測定されたＥＣＬシグナルを示している。図は、時間＝０でも、捕捉された細胞外小胞をＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含有する読み取り緩衝液に曝露させると、おそらく小胞の溶解に起因して、ほぼ完全にシグナルの損失がもたらされたことを示している。対照的に、ＢＲＩＪ Ｃ１０を除いて他のすべての読み取り緩衝液は、時間＝０で、互いの約５％以内のシグナルを出したが、ＢＲＩＪ Ｃ１０は、依然として約２０％以内のシグナルを出した。さらに、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００、ＢＲＩＪ Ｃ１０、ＢＲＩＪ Ｓ１０、およびＢＲＩＪ Ｓ２０を含有するものを除くすべての読み取り緩衝液は、プレートを読み取り緩衝液で１５分間インキュベートすると、５％未満のシグナル変化を呈し、残りの界面活性剤（ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ Ｐ－４０７、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｐ－１２３、ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ－１２１、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、ＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１、２，４，７，９－テトラメチル－５－デシン－４，７－ジオールエトキシレート、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテル、ＢＲＩＪ Ｌ４、ＢＲＩＪ５８、およびＴＷＥＥＮ２０）は、捕捉された細胞外小胞を破壊しないか、または結合したＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ標識検出抗体の解離を引き起こさないことを実証している。
【0242】
読み取り緩衝液配合物は非常に安定であり、暗所で５０℃でのこれらの配合物の加速安定性試験では、ＴＷＥＥＮ２０、ＰＬＵＲＯＮＩＣ ３１Ｒ１、およびＴＥＴＲＯＮＩＣ７０１配合物（２２０日間この温度に曝露させた後、これらは約２５％少ない特異的シグナルを生成した）を除いて、ほとんどの場合、性能に最小限の変化が見られたか、または顕著な変化はまったく見られなかった。配合物はまた、界面活性剤濃度の変化に対して堅牢であった。図８は、ＰＥＧ（１８）トリデシルエーテルの濃度を０．５～４ｍＭに変化させることにより、ＣＤ９細胞外小胞アッセイでの特異的ＥＣＬシグナルに対して、または読み取り緩衝液での１５分間のインキュベーションでの捕捉された結合反応生成物の安定性に対して、顕著な影響がまったくなかったことを示している。
【0243】
実施例Ｖ：イムノアッセイのオフレート
様々な分析物への異なる捕捉抗体および検出抗体での抗体スクリーニング実験で、ＴＰＡ（ＭＳＤ Ｔ２Ｘ）およびＢＤＥＡを含有する読み取り緩衝液を試験した。図９Ａ～９Ｄは、ｓＲａｎｇｅ（図９Ａ）、ＩＬ－９（図９Ｂ）、Ｋｉｍ－１（図９Ｃ）、およびＭＩＧ（図９Ｄ）の抗体スクリーニングでの、平均ＥＣＬ損失％を示しており、これは、抗体と分析物との間（例えば、捕捉抗体および／または検出抗体と分析物との間）のオフレートの指標である。抗体スクリーニングの各々では、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液は、ＴＰＡ読み取り緩衝液と比較してＥＣＬ損失％を低減し、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液が、ＴＰＡ読み取り緩衝液と比較して抗体－分析物のオフレートを低減することができることを実証している。
様々な分析物への異なる捕捉抗体および検出抗体での抗体スクリーニング実験で、ＴＰＡ（ＭＳＤ Ｔ２Ｘ）およびＢＤＥＡを含有する読み取り緩衝液を試験した。図９Ａ～９Ｄは、ｓＲａｎｇｅ（図９Ａ）、ＩＬ－９（図９Ｂ）、Ｋｉｍ－１（図９Ｃ）、およびＭＩＧ（図９Ｄ）の抗体スクリーニングでの、平均ＥＣＬ損失％を示しており、これは、抗体と分析物との間（例えば、捕捉抗体および／または検出抗体と分析物との間）のオフレートの指標である。抗体スクリーニングの各々では、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液は、ＴＰＡ読み取り緩衝液と比較してＥＣＬ損失％を低減し、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液が、ＴＰＡ読み取り緩衝液と比較して抗体－分析物のオフレートを低減することができることを実証している。
【0244】
図１０Ａ～１０Ｃは、分析物ＩＬ－１３（図１０Ａ）、ＭＤＣ（図１０Ｂ）、およびＴＮＦ－β（図１０Ｃ）を用いる多重パネル実験において、ＴＰＡ読み取り緩衝液と比較した、ＢＤＥＡでの抗体－分析物オフレートの改善をさらに実証している。実験の各々では、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液は、抗体－分析物のオフレートの低減を示したが、ＢＤＥＡ読み取り緩衝液を用いた非特異的バックグラウンドシグナル（ＮＳＢ）は、ＴＰＡ読み取り緩衝液と比較して同等か、または改善されたかのいずれかであった。
【0245】
実施例ＶＩ：細胞外小胞アッセイ
無傷の細胞外小胞（ＥＶ）アッセイでの性能について、変動する濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含有するＴＰＡ読み取り緩衝液（ＭＳＤ Ｔ１Ｘ）およびＢＤＥＡ読み取り緩衝液を試験した。各緩衝液タイプおよびＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００濃度でのＥＶアッセイシグナルの変化を測定した。
無傷の細胞外小胞（ＥＶ）アッセイでの性能について、変動する濃度のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含有するＴＰＡ読み取り緩衝液（ＭＳＤ Ｔ１Ｘ）およびＢＤＥＡ読み取り緩衝液を試験した。各緩衝液タイプおよびＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００濃度でのＥＶアッセイシグナルの変化を測定した。
【0246】
結果を図１１Ａに示す。ＭＳＤ Ｔ１Ｘでは、ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００の濃度が０．１％～０．０１％に減少するにつれて、アッセイの性能が改善された。ＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００の濃度が０．０１％～０％にさらに減少するにつれて、ＭＳＤ Ｔ１Ｘアッセイの性能が低下した。０．１％のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含むＢＤＥＡ読み取り緩衝液は、低いアッセイ性能を有するが、０％のＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００を含むＢＤＥＡ読み取り緩衝液は、試験したすべての緩衝液タイプおよびＴＲＩＴＯＮ Ｘ－１００濃度のうちで、最良のアッセイ性能を有した。
【0247】
アッセイ性能の変動性について、ＥＶを溶解しない界面活性剤を含有するＢＤＥＡ読み取り緩衝液を試験した。非ＴＲＩＴＯＮ ＢＤＥＡ読み取り緩衝液の２つの異なるロットの、既知の濃度のＣＤ８１＋ＥＶを使用した滴定曲線を生成した。結果を図１１Ｂに示す。非ＴＲＩＴＯＮ ＢＤＥＡ読み取り緩衝液の２つの試験したロットは、非常に類似した滴定曲線を有し、性能における、ロット間での低い変動性を示している。
【0248】
７．参考文献の組み込み
本開示は、本明細書に記載の特定の実施形態によって範囲が限定されるものではない。実際に、前述の説明および付随する図から、本明細書に記載されたものに追加して本開示の様々な変更が、当業者には明らかになるであろう。そのような変更は、特許請求の範囲内に含まれることを意図している。様々な刊行物が本明細書に引用されており、それらの開示は、それらの全体が参照により組み込まれる。
本開示は、本明細書に記載の特定の実施形態によって範囲が限定されるものではない。実際に、前述の説明および付随する図から、本明細書に記載されたものに追加して本開示の様々な変更が、当業者には明らかになるであろう。そのような変更は、特許請求の範囲内に含まれることを意図している。様々な刊行物が本明細書に引用されており、それらの開示は、それらの全体が参照により組み込まれる。
【0249】
本開示の説明された実施形態および実施例は、限定的ではなく例示的であることを意図しており、本開示のすべての実施形態または実施例を表すことを意図していない。また、その様々な特定の実施形態に適用される本開示の基本的な新規の特色が示され、説明され、指摘されているが、図示されたデバイスの形態および詳細、ならびにそれらの操作における様々な省略、置換、および変更が、本開示の趣旨から逸脱することなく、当業者によって行われ得ることが理解されるであろう。例えば、同じ結果を達成するために実質的に同じ方式で実質的に同じ機能を発揮するこれらの要素および／または方法ステップのすべての組み合わせが、本開示の範囲内であることが明らかに意図されている。さらに、任意の開示された形態または開示の実施形態に関連して示されたおよび／または説明された構造および／または要素および／または方法ステップは、一般的な設計の選択の問題として、任意の他の開示または説明または提案された形態または実施形態に組み込まれ得ることが認識されるべきである。さらに、文字通りかつ法律で認識されている同等物の両方で以下の特許請求の範囲に記載のように、開示の趣旨または範囲から逸脱することなく、様々な変更および変形を行うことができる。
【図1A】
【図1B】
【図1C】
【図2A】
【図2B】
【図3A】
【図3B】
【図3C】
【図3D】
【図3E】
【図3F】
【図4】
【図5A-1】
【図5A-2】
【図5B】
【図6A】
【図6B】
【図7】
【図8】
【図9A】
【図9B】
【図9C】
【図9D】
【図10A】
【図10B】
【図10C】
【図11A】
【図11B】
【手続補正書】
【提出日】2024-05-15
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
明細書に記載の発明。
【請求項2】
（ａ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、および（ｉｉｉ）イオン性構成成分、または
（ｂ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）界面活性剤、または
（ｃ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）液体希釈剤、または
（ｄ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、（ｉｖ）界面活性剤、および（ｖ）液体希釈剤、を含む、組成物。
（ｂ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）界面活性剤、または
（ｃ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、（ｉｉ）ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、および（ｉｖ）液体希釈剤、または
（ｄ）（ｉ）Ｎ－ブチルジエタノールアミン（ＢＤＥＡ）もしくは２－ジブチルアミノエタノール（ＤＢＡＥ）、もしくはその両方、ｐＨ緩衝構成成分、（ｉｉｉ）イオン性構成成分、（ｉｖ）界面活性剤、および（ｖ）液体希釈剤、を含む、組成物。
【外国語明細書】