特開 2024-107313 肺、腎臓、または肝臓の線維症疾患の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニスト

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024107313

(43)【公開日】2024-08-08

(54)【発明の名称】肺、腎臓、または肝臓の線維症疾患の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニスト

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20240801BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20240801BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20240801BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20240801BHJP

   C07K 16/18 20060101ALN20240801BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 N

A61P1/16

A61P11/00

A61P13/12

C07K16/18 ZNA

C07K16/18

【審査請求】有

【請求項の数】1

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2024094430

(22)【出願日】2024-06-11

(62)【分割の表示】P 2021543303の分割

【原出願日】2020-01-26

(31)【優先権主張番号】62/797,440

(32)【優先日】2019-01-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/911,511

(32)【優先日】2019-10-07

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/913,937

(32)【優先日】2019-10-11

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(71)【出願人】

【識別番号】521325503

【氏名又は名称】メイプル バイオテック エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】ワン イン

(72)【発明者】

【氏名】シェ シャオピン

(72)【発明者】

【氏名】ペイ シャオレイ

(72)【発明者】

【氏名】リー チンチン

(72)【発明者】

【氏名】リウ ジョンティアン

(72)【発明者】

【氏名】ソン ジャンミン

(72)【発明者】

【氏名】チュンフイ ディ

(72)【発明者】

【氏名】クリストファー リウ

(57)【要約】

【課題】肺、腎臓、または肝臓の線維症疾患の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストの提供。
【解決手段】ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）のアンタゴニスト、ならびに、肝線維症、肺線維症、または腎線維症に関連する種々の疾患または障害、例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）、薬物誘発肺傷害、急性腎傷害（ＡＫＩ）、慢性腎疾患（ＣＫＤ）、ループス腎炎、ＩｇＡ腎症、および膜性糸球体腎炎などを含めた肝線維症、肺線維症、または腎線維症を処置するためのアンタゴニストの使用が開示される。ＰＳＭＰアンタゴニストならびに移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）および全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を処置するためのそれらの使用も開示される。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

明細書に記載の発明。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年１月２８日出願の米国仮特許出願第６２／７９７，４４０号、２０１９年１０月７日出願の米国仮特許出願第６２／９１１，５１１号、および２０１９年１０月１１日出願の米国仮特許出願第６２／９１３，９３７号の利益を主張するものである。前述の出願はそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
配列表の参照

【0002】

本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩフォーマットで提出されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる配列表を含む。２０１９年１２月２６日に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーは「ＭＡＢ＿０１１０ＰＣ＿２０１９１２２６＿Ｓｅｑ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５」という名称であり、サイズは１１，１５３バイトである。

【背景技術】

【0003】

肝線維症および非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）
線維症は、多くの場合、繰り返されるかまたは慢性的な組織傷害に対する創傷治癒反応として生じる細胞外マトリックスの過剰な蓄積であり、器官構造の破壊および機能喪失に至る可能性がある。線維症は、体内のほぼすべての組織に影響を及ぼす。線維症消散の機構は、線維性細胞外マトリックスの分解ならびに線維形成筋線維芽細胞の消失を包含する。

【0004】

慢性肝傷害に対する創傷治癒応答である肝線維症は、肝炎ウイルス感染症、アルコールの乱用、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）または原発性胆汁性胆管炎を含めた種々の原因によって誘発される、肝臓における細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の過剰な沈着によって特徴付けられ、肝機能の喪失および肝臓構造の破壊に至る。ヒトにおける器官線維症の消散に関する最近のエビデンスは、肝臓において観察されたものである。抗ウイルス療法を用いた処置を受けた、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）またはＨＣＶ感染に関連する肝線維症を有する患者において、肝硬変の場合であっても線維症からの回復および組織学的改善が示されている。

【0005】

非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、慢性肝疾患の主な原因であることが明らかになっている。ＮＡＦＬＤは、良性肝臓脂肪症から、より侵襲性の壊死性炎症性顕在化であるＮＡＳＨまでにわたる複雑な一連の肝疾患である。ＮＡＳＨは、インスリン抵抗性および２型糖尿病などのメタボリックシンドロームの共存症、ならびに高血圧症および脂質異常症に関連する心血管合併症と密接に関連するので、他の肝疾患とは別個のものである。これらの共存症は単なるＮＡＦＬＤにすでに存在しており、これは、線維症および主要な肝臓の炎症が存在しないことによって定義される。これらの肝臓が関与しない疾患は主要な共存症であり、ＮＡＦＬＤによる死亡率およびステージ２線維症までの初期の線維性ＮＡＳＨの原因である。肝臓に関連する罹患率および死亡率は、ステージ１線維症を超えて初めて、特に肝硬変が出現すると有意に上昇する。したがって、予防および治療は、２つの大きく独立した標的：様々な医薬によって処置可能な代謝合併症、および、承認された薬物が存在しない中等度～進行した線維症（ステージ２～４）に対処するものでなければならない。

【0006】

肝線維症の一般的な実験的齧歯類モデルは、急性肝細胞傷害を誘発するための肝臓毒（例えば、四塩化炭素［ＣＣｌ_４］）の投与または胆汁うっ滞を誘発するための胆管結紮（ＢＤＬ）を含み、それぞれ中心周囲肝線維症または門脈周囲肝線維症が生じる。ＮＡＳＨモデルは、病因および／もしくは自然歴（肥満誘発性食餌モデル）を模倣するそれらの能力、または病理組織検査（栄養欠乏食餌モデルもしくは化学的に誘発されたモデル）によって本質的に区別される。メチオニンおよびコリン欠乏（ＭＣＤ）食は、ＮＡＳＨの最も重症の表現型を最短で生じさせる、極めて一般に使用される食餌の１つである。ＭＣＤ食は、他の食餌動物モデルと比較して有意な線維症を誘発するものである。また、遺伝モデル（単一遺伝子または多遺伝子）がＮＡＳＨ研究において広く使用されている。

【0007】

線維症の開始は、肝臓に存在するマクロファージおよびクッパー細胞が活性化され、トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ－β）ならびに肝星細胞（ＨＳＣ）を活性化する他の炎症促進性サイトカインが放出される炎症期に決定的に依存する。ＨＳＣは、ＥＣＭの大部分の産生に関与し、肝臓線維形成において中心的な役割を果たす。ＨＳＣは、静止状態にあり、肝細胞と類洞内皮との間の空間（ディッセ腔）内にレチノイド貯蔵細胞として位置する。肝臓が傷害を受けると、肝臓における主要なコラーゲン合成細胞であるＨＳＣが活性化され、より速く増殖し、また、走化性、生存およびコラーゲン産生の増強を示す筋線維芽細胞様細胞に分化転換される。ＨＳＣ活性化は、ケモカイン、活性酸素種、成長因子、マトリックス剛性、マトリックス細胞タンパク質および損傷関連分子パターンなどの複数のメディエーターによって駆動される。
アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）

【0008】

アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）は、世界的に毎年数百万人の患者に影響を及ぼしている。ＡＬＤの増悪は、よく特徴付けられており、実際に、脂肪症から、炎症および壊死（脂肪性肝炎）まで、線維症および肝硬変まで、ならびに一部の場合では最終的に肝細胞癌（ＨＣＣ）までにわたる一連の肝疾患である。脂肪肝（ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ）（脂肪症）は、過飲または慢性的なエタノール消費に対する肝臓の応答の最初のステージである。トリグリセリドなどの脂質産物が肝細胞に蓄積することにより、脂質の超酸化および酸化ストレスがもたらされ、その結果、アポトーシス、肝臓の炎症およびＨＳＣの活性化が生じる。

【0009】

アルコール誘発脂肪肝には、肝臓ステロール調節エレメント結合タンパク質（ＳＲＥＢＰ）－１の増加および肝臓ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体（ＰＰＡＲ）α活性の低下が伴う。ＳＲＥＢＰ１は、主に肝臓で発現され、コレステロール、脂肪酸、およびトリグリセリドの生合成の重要な転写調節因子である。ＰＰＡＲαは、肝臓による脂質代謝のマスター調節因子としての機能を果たす。

【0010】

現在、アルコール性肝疾患に関して最も広く使用されているモデルは、エタノールを含有するＬｉｅｂｅｒ－ＤｅＣａｒｌｉ液体食を４～６週間にわたって自由に給餌するものである。このモデルでは、肝臓脂肪症およびわずかな線維症を誘発することができる。さらに、国立アルコール乱用・依存症研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｎ Ａｌｃｏｈｏｌ Ａｂｕｓｅ ａｎｄ Ａｌｃｏｈｏｌｉｓｍ）（ＮＩＡＡＡ）モデルとも称される慢性＋過度のアルコール給餌モデルが報告されている。例えば、Ｂｅｒｔｏｌａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｐｒｏｔｏｃ． ８： ６２７－３７， ２０１３を参照されたい。ＮＩＡＡＡモデルは、患者における慢性アルコール性肝傷害の急性増悪を模倣するものであり、長年にわたる慢性的な飲酒（慢性的）および最近の過剰なアルコール消費歴（過度（ｂｉｎｇｅ））のバックグラウンドを有する多くのアルコール性肝炎患者の飲酒パターンと類似したものである。慢性＋過度のアルコール給餌モデルのプロトコールは、Ｌｉｅｂｅｒ－ＤｅＣａｒｌｉエタノール液体食の自由な慢性経口給餌（例えば、１０日間）＋単回の過度のエタノール給餌（例えば、エタノール、体重１ｋｇ当たり５ｇ、３１．５％エタノールの単回用量の強制飼養）である。そのような慢性＋過度のエタノール給餌により、マウスにおいて有意な脂肪症、肝傷害、および炎症が相乗的に誘発された。例えば、Ｂｅｒｔｏｌａ ｅｔ ａｌ．、上記を参照されたい。
原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）および原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）

【0011】

肝臓胆汁うっ滞は、胆汁流の欠陥によって特徴付けられる。胆汁うっ滞性疾患の中でも、原発性硬化性胆管炎および原発性胆汁性胆管炎は、慢性肝疾患に関連する原因であり、有意な罹患率および死亡率に関連付けられる。

【0012】

原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）は、病因不確定の稀な慢性胆汁うっ滞性肝疾患であり、生化学的には胆汁うっ滞によって特徴付けられ、組織学的かつ胆道造影的には胆管の線維性閉塞性炎症によって特徴付けられる。ＰＳＣは、臨床的に有意な割合の患者において、肝硬変、末期肝疾患、および／または肝胆道がんに進行するが、疾患経過は高度に変動し得る。

【0013】

原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）は、以前は原発性胆汁性肝硬変として公知であり、肝臓の小さな胆管が傷害を受け、炎症を起こし、最終的に破壊される慢性疾患である。胆管がない場合には、胆汁が増加し、肝損傷が引き起こされる。

【0014】

ＤＤＣと称される３，５－ジエトキシカルボニル－１，４－ジヒドロコリジンの慢性給餌は、管内ポルフィリン栓の形成に起因して、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）および原発性胆汁性胆管炎／原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）などの胆汁うっ滞性疾患のｉｎ ｖｉｖｏモデルとして提唱されている。ＤＤＣにおけるものと同様のこれらの疾患では、一次損傷は胆管細胞に向けられる。マウスにおけるＤＤＣの慢性給餌により、（１）細胆管反応（ｄｕｃｔｕｌａｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ）を生じる胆管区画のリモデリング、（２）細胆管周囲の線維化、および（３）炎症性浸潤などの、ヒト胆汁うっ滞性疾患の主要な病理組織学的特質が再現される。
肺線維症

【0015】

肺線維症は、強皮症（全身性硬化症）、サルコイドーシス、感染症、および毒性物質または放射線への曝露を含めた多様な病因に関連付けられる。特発性肺線維症（ＩＰＦ）は、特発性間質性肺炎の最も一般的な形態であり、通常は致死的であり、生存期間中央値は２～３年である。２０１４年には、線維化促進シグナル伝達阻害剤であるピルフェニドンおよびニンテダニブについて、努力肺活量によって測定されるそれらの肺機能の減退の緩徐化および総死亡率の低下に基づいて、ＩＰＦの処置に関するファスト・トラック承認がＦＤＡにより付与された。しかし、ＩＰＦにおける線維症消散の促進に関するこれらの薬物の有効性は実証されていない。肺線維症の最も一般的な実験的マウスモデルは、炎症に続いて線維症が誘発される、化学療法薬であるブレオマイシンの気管内投与である。種々の試験により、線維性肺における筋線維芽細胞の大部分が周皮細胞に由来し、中皮間葉転換（ＭＭＴ）を通じた中皮細胞の寄与を伴うことが見いだされている。
移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）

【0016】

ＧＶＨＤ（移植片対宿主病）は、ヒト同種造血幹細胞移植（アロＨＳＣＴ）後に生じる一般的な合併症であり、これは、ＨＳＣＴからの回復の主要な障害であると考えられている。単球およびマクロファージがＧＶＨＤの間に腸粘液、肝臓、および皮膚に誘引され、蓄積し、疾患を悪化させることが、多くの研究チームによって報告されている。例えば、Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｌｅｕｋｏｃ． Ｂｉｏｌ． ９９： ２７９－８７， ２０１６を参照されたい。当該疾患の進行の理解を助けるため、およびＧＶＨＤの蔓延を低減するための有効な方法を見いだすために、ＧＶＨＤの種々のマウスモデルが確立されている。一般に、例えば、Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｄｉｓ． Ｍｏｄｅｌ Ｍｅｃｈ． ４： ３１８－３３３， ２０１１を参照されたい。

【0017】

臨床では、ＧＶＨＤは、症状が生じた時間に基づいて２つの亜型、急性ＧＶＨＤおよび慢性ＧＶＨＤに定義される。急性ＧＶＨＤは、ＨＳＣＴ後の死亡の主要な原因であり、その症状としては、通常ＨＳＣＴ後１００日以内に生じる皮疹、胃腸管障害および肝障害が挙げられる。慢性ＧＶＨＤの症状は、１００日～数年後に生じ、体内の単一の器官または部位に制限される場合もあり、広範にわたる場合もある。症状は、以下のいずれかに影響を及ぼすものであり得る：眼、口、爪、皮膚、頭皮および体毛、胃腸管、肺、肝臓、筋肉および関節、生殖器および性器。ＧＶＨＤは、急性ＧＶＨＤの重症度に応じてグレードＩおよびグレードＩＩまたはそれよりも高次のＧＶＨＤに分類される。グレードＩは、肝臓または胃腸管の関与を伴わない、体表面積の５０パーセント以下を覆う皮膚ＧＶＨＤを意味し、その処置は、局部処置（例えば、ステロイド外用薬）の使用および予防措置（例えば、シクロスポリンレベル）の最適化である。より重症の患者は、グレードＩＩまたはそれよりも高次のＧＶＨＤを有するとみなされ、典型的には全身性グルココルチコイド（例えば、メチルプレドニゾロン）を使用した処置が行われる。胃腸の関与を伴う患者への使用に関しては経口ベクロメタゾンが提案されるが、胃腸感染症がある場合には中断すべきである。Ｚｅｉｓｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３７７：
２１６７－２１７９， ２０１７；Ｚｅｉｓｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ．
Ｊ． Ｍｅｄ． ３７７： ２５６５－２５７９， ２０１７を参照されたい。

【0018】

急性ＧＶＨＤの治療方針としては、臨床試験からの初期のデータに従って、共刺激経路遮断、標的化抗インターロイキン－６モノクローナル抗体、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤、キナーゼ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、抗炎症性プロテアーゼ阻害剤アルファ－１－抗トリプシン、ＣＴＬＡ－４拮抗作用、ＣＣＲ５遮断、および養子Ｔｒｅｇ移入の使用が挙げられる。これらおよび開発中の他の最近の戦略が急性ＧＶＨＤに対する標準治療になるには、その前に前向き第３相試験での試験を行わなければならない。Ｚｅｉｓｅｒ
ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３７７： ２１６７－２１７９， ２０１７を参照されたい。

【0019】

数十年にわたって、慢性ＧＶＨＤの処置に関してはほとんど進展がなく、グルココルチコイド依存性患者またはグルココルチコイド難治性疾患を有する患者の処置に関して食品医薬品局（Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）（ＦＤＡ）によって承認された薬物は存在しない。アロ反応性Ｔ細胞および抗体産生Ｂ細胞の負荷量を低減すること（例えば、移植後にシクロホスファミドを用いて処置すること、ナイーブＴ細胞の枯渇、およびリツキシマブの使用によるＢ細胞の枯渇によって）により、最近の進歩が実現されている。新しい治療手法は、慢性ＧＶＨＤの病理発生、特に、Ｂ細胞シグナル伝達およびある特定のＴ細胞サブセットの持続的な免疫活性化、Ｔｒｅｇ細胞欠乏、ならびに組織線維化の顕著な役割のよりよい理解に基づく。展望としては、線維症の標的化および機構の刺激（例えば、ピルフェニドンおよびインターロイキン－１７またはＲＯＲγｔ阻害剤を用いる）、形質細胞の標的化（例えば、免疫プロテアソーム阻害剤および抗インターロイキン－６受容体を用いる）、ならびにバイオマーカー研究において同定された慢性ＧＶＨＤの影響を受けている標的器官へのケモカイン誘導性Ｔ細胞およびＢ細胞動員の阻害（例えば、ＣＸＣＬ９阻害剤を用いる）が挙げられる。これらの開発は有望であるが、それでもなお、グルココルチコイドが、長期間使用で実質的な副作用があるにもかかわらず、標準の最先端治療を構成している。Ｚｅｉｓｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３７７： ２５６５－２５７９， ２０１７を参照されたい。
急性腎傷害（ＡＫＩ）および慢性腎疾患（ＣＫＤ）

【0020】

腎疾患は、世界的な健康問題としてますます認識されている。例えば、Ｆｅｌｉｘ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ． １５： ２６３－２７，
２０１９を参照されたい。急性腎傷害（ＡＫＩ）および慢性腎疾患（ＣＫＤ）は、高罹患率および死亡率に結び付けられる。ＡＫＩは、腎機能の急速かつ可逆的な減退とみなされ、ＣＫＤの加速に関連付けられる。ＡＫＩやＣＫＤの病歴を有さない患者と比較して、ＡＫＩ患者は、新しいＣＫＤまたは末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を発症する可能性が高い。逆に、ＣＫＤも、ＡＫＩにおいて重要な役割を果たす。ＣＫＤの患者は、ＡＫＩと一致して腎機能の一過性の低下の高リスクを負う場合がある。例えば、Ｙｉｎ－Ｗｕ Ｂａｏ ｅｔ ａｌ．， Ｚｏｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ． ３９： ７２－８６， ２０１８を参照されたい。ＡＫＩおよびＣＫＤは、密接に結び付いており、したがって、統合臨床症候群とみなされる。例えば、Ｃｈａｗｌａ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ．
Ｊ． Ｍｅｄ． ３７１： ５８－６６， ２０１４を参照されたい。

【0021】

ＡＫＩおよびＣＫＤの疾患生成および増悪の機構は依然として完全には理解されていない。例えば、Ｊｏｈｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． １２４：
２２９４－２２９８， ２０１４を参照されたい。したがって、腎疾患の増悪を緩徐化するために利用可能な戦略はわずかであり、大多数の処置選択肢は、血圧の低下およびタンパク尿の減少に集中している。明白に、追加的な治療の道筋が必要とされている。一般に、例えば、Ｓｉｅｗ ｅｔ ａｌ．， Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ．
８７： ４６－６１， ２０１５を参照されたい。

【0022】

横紋筋融解症は、骨格筋傷害、およびその後の、損傷を受けた筋肉細胞から体循環中への分解産物の放出によって引き起こされる重篤な症候群である。筋損傷は、激しい運動、筋肉低酸素症、薬物適用、または薬物乱用に起因することが多く、ＡＫＩなどの生命を脅かす合併症に至る恐れがある。例えば、Ｋｏｓｈｕ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｍｅｄ． ２４： ２３２－２３８， ２０１８を参照されたい。グリセロールの注射によって誘発される実験的ＡＫＩは、十分に確立された横紋筋融解症のモデルである。これは、激しい皮質急性尿細管壊死および炎症細胞浸潤によって特徴付けられる。一般に、例えば、Ｙａｎｑｉｕ ｅｔ ａｌ．， Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＆ Ｔｈｅｒａｐｙ ５： ８０， ２０１４を参照されたい。

【0023】

腎線維症は、腎機能の進行性喪失に寄与するＣＫＤの重要な病理学的現象である。腎線維症は、糸球体硬化症および／または間質性線維症を伴う。糸球体および間質領域の両方への細胞外マトリックス（ＥＣＭ）タンパク質の異所性かつ過剰な沈着が腎線維症の典型的な特質であり、それにより腎傷害の重症度が増幅される。

【0024】

閉塞性尿路疾患は、小児における末期腎疾患の主要な原因であり、小児腎移植の主要な理由の１つになっている。ＡＫＩおよびＣＫＤを研究するために使用される最も一般的な齧歯類モデルは片側性尿管閉塞（ＵＵＯ）であり、ＵＵＯの主要な特徴は、尿流が妨げられた結果としての間質性炎症、尿細管細胞傷害／死および線維化である。例えば、Ｅｌｅｎａ Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ｋｌｉｍｏｖａ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ
９： １４１， ２０１９を参照されたい。

【0025】

全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）は、体の免疫系が、体自身の組織および器官を攻撃した場合に生じる全身性自己免疫疾患である。ＳＬＥによって引き起こされる炎症は、多くの異なる体のシステムに影響を及ぼし得る。腎不全はＳＬＥを有する人の主な死亡原因の１つである。ループス腎炎は全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の一般的かつ重症の顕在化であり、急性腎傷害および末期腎疾患の両方の重要な原因である。例えば、Ｄａｖｉｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ， ６： １３－２０， ２０１０を参照されたい。ループス腎炎は、Ｆｃ受容体および補体の活性化、炎症細胞の動員、ならびに最終的な線維症を含む炎症性事象のカスケードを誘発する、免疫複合体の糸球体沈着によって開始される。例えば、Ａｎｎｅ Ｄａｖｉｄｓｏｎ， Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ． １２： １４３－１５３， ２０１５を参照されたい。ループス腎炎を管理するための現行の手法は、高用量コルチコステロイドとそれに加えて広域スペクトル免疫抑制剤に依拠する。例えば、Ｆｅｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ． １３： ４８３－４９５， ２０１７；Ｓａｍｉｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍ． Ｓｏｃ． Ｎｅｐｈｒｏｌ． ２７： ２９２９－２９３９， ２０１６を参照されたい。ループス腎炎の周知のマウスモデルでは、雌Ｂ６Ｄ２Ｆ１マウスへの雄ＤＢＡ／２マウス由来のＴリンパ球の接種を利用して、免疫賦活性ＧＶＨ反応、およびマウスがＳＬＥ患者の症状を示すループス様疾患を誘発する。例えば、Ｖｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３９： １８４０－１８４９， １９８７を参照されたい。

【0026】

５０年前にＪａｃｑｕｅｓ Ｂｅｒｇｅｒにより同定され、かつてはメサンギウム増殖性糸球体疾患の稀な変形であると考えられていたＩｇＡ腎症は、世界的に最も頻度の高い糸球体疾患であり、慢性腎疾患および末期腎不全の重要な原因である。ＩｇＡ腎症の病原機構は部分的にしか理解されていない。臨床研究および基礎研究からのデータにより、多数の仮説が示唆され、ガラクトース欠乏ＩｇＡ_１分子が特定の自己抗体によって認識されるものによると、その結果、糸球体間質に沈着したＩｇＡ_１－ＩｇＧ免疫複合体の形成がもたらされ、そこでそれらにより腎傷害が誘発される。例えば、Ｊｅｎｎｉｆｅｒ ｅｔ
ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｊ． Ａｍ． Ｓｏｃ． Ｎｅｐｈｒｏｌ． １２： ６７７－６８６， ２０１７を参照されたい。ＩｇＡ腎症は、免疫複合体疾患として認識される。
ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質

【0027】

ＰＳＭＰ、すなわちＰＣ３分泌型マイクロタンパク質は、ＰＣ３細胞ならびに良性および悪性前立腺組織において最初に発見された（Ｖａｌｔｏｎｅｎ－Ａｎｄｒｅ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ３８８： ２８９－９５， ２００７を参照されたい）。ＰＳＭＰは、前立腺関連マイクロセミノタンパク質（ＭＳＭＰ）とも称される（Ｆｒａｎｋｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．， ＢＭＣ Ｅｖｏｌ． Ｂｉｏｌ． １１： ３７３－８５， ２０１１を参照されたい）。ＭＳＭＰの組織発現は、ＰＣ３細胞ならびに良性および悪性前立腺組織における発現は別として、ベータ－マイクロセミノタンパク質ファミリーのメンバーとして精巣のみに制限されることが報告されている（同文献を参照されたい）。オミクス戦略を使用した研究により、ＰＳＭＰが末梢血単球およびリンパ球を動員するためのＣＣＲ２リガンドとして作用する新規の走化性サイトカインであることが明らかになっている（Ｐｅｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９２： １８７８－８６， ２０１４を参照されたい）。ＰＳＭＰとＣＣＲ２との親和性は、ＣＣＬ２とＣＣＲ２との親和性と同等であることが見いだされている（同文献を参照されたい）。

【0028】

別の研究により、ＰＳＭＰがヒト大腸炎組織において発現され、ＤＳＳ誘発マウス大腸炎において有意に上方調節されることが実証された（Ｐｅｉ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉ．
Ｒｅｐ． ７： ５１０７， ２０１７を参照されたい）。ＰＳＭＰは、Ｌｙ６Ｃｈｉ単球をＣＣＲ２依存的に化学誘引することにより、ＤＳＳ大腸炎の促進において極めて重要な役割を果たす（同文献を参照されたい）。抗ＰＳＭＰ中和抗体は、マクロファージ浸潤を低減すること、ならびにＩＬ－６、ＴＮＦαおよびＣＣＬ２の発現を阻害することによって大腸炎を和らげる（同文献を参照されたい）。
最近の研究により、抗ＶＥＧＦ治療抵抗性腫瘍では対照腫瘍と比較してＭＳＭＰ遺伝子の発現が実質的に上方調節されることが見いだされた。Ｍｉｔａｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ３７： ７２２－７３１， ２０１８を参照されたい。低酸素により、がん細胞からのＭＳＭＰ分泌が誘導された。がん細胞における低酸素条件下でのヒストンアセチル化により、転写リプレッサーＣＣＣＴＣ結合因子（ＣＴＣＦ）のＭＳＭＰエンハンサー領域への動員が減少した。ＤＯＰＣナノリポソームを使用してｉｎ ｖｉｖｏで送達されたＭＳＭＰ ｓｉＲＮＡにより、腫瘍の抗ＶＥＧＦ治療に対する感受性が回復した。ベバシズマブを用いた処置を受けた卵巣がん患者では、非応答者においてのみ血清中ＭＳＭＰ濃度が有意に上昇した。同文献を参照されたい。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0029】

【非特許文献1】Ｂｅｒｔｏｌａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｐｒｏｔｏｃ． ８： ６２７－３７， ２０１３

【非特許文献2】Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｌｅｕｋｏｃ． Ｂｉｏｌ． ９９： ２７９－８７， ２０１６

【非特許文献3】Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｄｉｓ． Ｍｏｄｅｌ Ｍｅｃｈ． ４： ３１８－３３３， ２０１１

【非特許文献4】Ｚｅｉｓｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３７７： ２１６７－２１７９， ２０１７

【非特許文献5】Ｚｅｉｓｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３７７： ２５６５－２５７９， ２０１７

【非特許文献6】Ｆｅｌｉｘ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ． １５： ２６３－２７， ２０１９

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0030】

一態様では、本発明は、肝線維症を処置するための方法を提供する。当該方法は、一般に、肝線維症を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、肝線維症の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、肝線維症を処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。上記の方法、ＰＳＭＰアンタゴニスト、または使用の一部の実施形態では、肝線維症は肝硬変に進行している。他の相互排他的でない実施形態では、肝線維症は、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）誘発肝線維症、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）誘発肝線維症、もしくはアルコール誘発肝線維症であるか、または肝線維症は、非アルコール性脂肪性肝疾患に関連するものである。肝線維症が肝硬変に進行している一部の変形形態では、肝硬変は、原発性胆汁性肝硬変である。肝線維症が非アルコール性脂肪性肝疾患に関連するものである一部の変形形態では、非アルコール性脂肪性肝疾患は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である。一部の実施形態では、肝線維症は、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、アルコール性肝炎、アルコール性肝硬変、Ｂ型慢性肝炎、Ｃ型慢性肝炎、Ｄ型慢性肝炎、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、ヘモクロマトーシス、嚢胞性線維症、ウィルソン病、胆道閉鎖症、アルファ１抗トリプシン欠損症、ガラクトース血症、糖原病、遺伝性消化系障害、アラジール症候群、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ、以前は原発性胆汁性肝硬変として公知）、感染症、薬物誘発肝傷害、およびバッドキアリ症候群から選択される疾患または障害に関連するものである。

【0031】

別の態様では、本発明は、肺線維症を処置する方法を提供する。当該方法は、一般に、肺線維症を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、肺線維症の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、肺線維症を処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。一部の実施形態では、肺線維症は、皮膚筋炎、多発性筋炎、混合性結合組織疾患、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、肺炎、慢性放射線肺炎、塵肺症、感染症、および薬物誘発肺傷害からなる群から選択される疾患または障害に関連するものである。

【0032】

別の態様では、本発明は、非アルコール性脂肪性肝疾患を処置する方法を提供する。当該方法は、一般に、非アルコール性脂肪性肝疾患を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、非アルコール性脂肪性肝疾患の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、非アルコール性脂肪性肝疾患を処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。上記の方法、ＰＳＭＰアンタゴニスト、または使用の一部の実施形態では、非アルコール性脂肪性肝疾患は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である。

【0033】

別の態様では、本発明は、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）を処置する方法を提供する。当該方法は、一般に、アルコール性肝疾患を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、アルコール性肝疾患の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、アルコール性肝疾患を処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。

【0034】

別の態様では、本発明は、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）を処置する方法を提供する。当該方法は、一般に、原発性硬化性胆管炎を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、原発性硬化性胆管炎の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、原発性硬化性胆管炎を処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。

【0035】

別の態様では、本発明は、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）を処置する方法を提供する。当該方法は、一般に、原発性胆汁性胆管炎を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、原発性胆汁性胆管炎の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、原発性胆汁性胆管炎を処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。

【0036】

別の態様では、本発明は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を処置する方法を提供する。当該方法は、一般に、ＧＶＨＤを有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、ＧＶＨＤの処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、ＧＶＨＤを処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。一部の実施形態では、処置されるＧＶＨＤは、急性ＧＶＨＤ（ａＧＶＨＤ）である。他の実施形態では、処置されるＧＶＨＤは、慢性ＧＶＨＤ（ｃＧＶＨＤ）である。

【0037】

別の態様では、本発明は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を処置する方法を提供する。当該方法は、一般に、ＳＬＥを有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、ＳＬＥの処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、ＳＬＥを処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。

【0038】

別の態様では、本発明は、ループス腎炎を処置する方法を提供する。当該方法は、一般に、ループス腎炎を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、ループス腎炎の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、ループス腎炎を処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。

【0039】

別の態様では、本発明は、腎線維症を処置するための方法を提供する。当該方法は、一般に、腎線維症を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、腎線維症の処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、腎線維症を処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。上記の方法、ＰＳＭＰアンタゴニスト、または使用の一部の実施形態では、腎線維症は、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症、コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性または亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性または血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、および閉塞性腎症から選択される疾患または障害に関連するものである。

【0040】

さらに別の態様では、本発明は、急性腎傷害（ＡＫＩ）または慢性腎疾患（ＣＫＤ）を処置するための方法を提供する。当該方法は、一般に、ＡＫＩまたはＣＫＤを有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む。関連する態様では、本発明は、ＡＫＩまたはＣＫＤの処置に使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストを提供する。別の関連する態様では、本発明は、ＡＫＩまたはＣＫＤを処置するための医薬の製造におけるＰＳＭＰアンタゴニストの使用を提供する。上記のＡＫＩを処置するための方法、ＰＳＭＰアンタゴニスト、または使用の一部の実施形態では、ＡＫＩは、横紋筋融解症誘発性である。ＣＫＤを処置するための上記の方法、ＰＳＭＰアンタゴニスト、または使用の一部の実施形態では、ＣＫＤは、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症、コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性または亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性または血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、および閉塞性腎症から選択される疾患または障害によって引き起こされるものである。

【0041】

上記の方法、ＰＳＭＰアンタゴニスト、または使用のある特定の実施形態では、ＰＳＭＰアンタゴニストは、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である。特に適切な可溶性タンパク質アンタゴニストとしては、中和抗ＰＳＭＰ抗体が挙げられる。より詳細な変形形態では、抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体、またはヒト抗体である。他の相互排他的でない実施形態では、抗体は、単鎖抗体および／または二重特異性抗体である。典型的には、本発明に従って使用するための抗体は、モノクローナル抗体である。一部の変形形態では、抗体は、例えば、免疫グロブリン重鎖定常領域（例えば、免疫グロブリンＦｃ領域）などの免疫グロブリン定常領域（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｃｏｎｓｔａｎｔ）を含む。

【0042】

一部の実施形態では、可溶性タンパク質であるＰＳＭＰアンタゴニスト（例えば、中和抗ＰＳＭＰ抗体）は、（ｉ）配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および（ｉｉ）配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである。ＰＳＭＰアンタゴニストが抗体である一部のそのような実施形態では、抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、ＶＨ ＣＤＲのセットは、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆは、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆは、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆは、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である（例えば、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べてアミノ酸置換をゼロ個有するＶＨ ＣＤＲのセット、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である）。各ＶＨ ＣＤＲは、例えば、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものであり得る。具体的な変形形態では、各ＶＨ ＣＤＲは、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆは、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆは、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆは、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する。一部のそのような実施形態では、ＶＨ ＣＤＲのセットは、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆに対してアミノ酸置換をゼロ個有し、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する。一部の変形形態では、抗体は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインに由来するヒト化ＶＨドメインを含む。他の実施形態では、抗体は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む（例えば、抗体は、配列番号４のＶＨドメインを含むキメラ抗体である）。

【0043】

ＰＳＭＰアンタゴニストが、（ｉ）配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および（ｉｉ）配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合する抗体である他の相互排他的でない実施形態では、抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、ＶＬ ＣＤＲのセットは、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆは、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆは、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆは、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である（例えば、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べてアミノ酸置換をゼロ個有するＶＬ ＣＤＲのセット、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である）。各ＶＬ ＣＤＲは、例えば、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものであり得る。具体的な変形形態では、各ＶＬ ＣＤＲは、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆは、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆは、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆは、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する。一部のそのような実施形態では、ＶＬ ＣＤＲのセットは、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べてアミノ酸置換をゼロ個有し、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する。一部の変形形態では、抗体は、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインに由来するヒト化ＶＬドメインを含む。他の実施形態では、抗体は、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む（例えば、抗体は、配列番号５のＶＬドメインを含むキメラ抗体である）。

【0044】

上記の方法、ＰＳＭＰアンタゴニスト、または使用の一部の実施形態では、処置は、併用療法である。
定義

【0045】

別段の定義のない限り、本明細書において使用される全ての科学技術用語は、記載されている方法および組成物が関係する技術分野の当業者に一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で使用される場合、以下の用語および句は、特に指定のない限り、それらに帰する意味を有する。

【0046】

「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」という用語は、文脈によりそうでないことが明白に示されない限り、複数の指示対象を包含する。

【0047】

本明細書で使用される場合、「アンタゴニスト」という用語は、生物学的状況において別の化合物の活性を低下させる化合物を示す。

【0048】

本発明の範囲内では、「ＰＳＭＰアンタゴニスト」は、標的細胞上のＰＳＭＰの受容体媒介性生物活性（例えば、走化能）を低下させる化合物である。アンタゴニストは、それらの作用を、細胞表面受容体上の結合部位についてＰＳＭＰと競合することによって、ＰＳＭＰに結合し、ＰＳＭＰが細胞表面受容体に結合するのを妨げることによって、他のやり方で受容体機能に干渉することによって、ＰＳＭＰの産生を低下させることによって、または他の手段によって発揮し得る。

【0049】

「ポリペプチド」は、天然に産生されたものであるか合成により作製されたものであるかにかかわらず、ペプチド結合によって接合したアミノ酸残基のポリマーである。約３０アミノ酸残基未満のポリペプチドは、一般に「ペプチド」と称される。

【0050】

「タンパク質」は、１つまたは複数のポリペプチド鎖を含む高分子である。タンパク質は、炭水化物基などの非ペプチド性構成成分も含み得る。タンパク質を産生する細胞によって炭水化物および他の非ペプチド性置換基がタンパク質に付加される可能性があり、これは細胞型によって変動する。タンパク質は、本明細書では、それらのアミノ酸骨格構造に関して定義されており、炭水化物基などの置換基は、一般に指定されないが、それにもかかわらず、存在し得る。

【0051】

「抗体」という用語は、本明細書では、抗原の存在に応答して体により産生され、抗原に結合するタンパク質、ならびにその抗原結合性断片および操作されたバリアントを示すために使用される。したがって、「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」および「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」という用語は、ポリクローナル抗体、アフィニティー精製されたポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ならびにＦ（ａｂ’）_２およびＦａｂ断片などの抗原結合性抗体断片を含む。遺伝子操作されたインタクトな抗体および断片、例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、単鎖Ｆｖ断片、単鎖抗体、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、ミニボディ（ｍｉｎｉｂｏｄｙ）、直鎖状抗体、多価または多重特異性ハイブリッド抗体なども含まれる。したがって、「抗体」という用語は、抗原結合部位を含み、その抗原に結合することができる任意のタンパク質を含むように広く使用される。

【0052】

「遺伝子操作された抗体」という用語は、アミノ酸配列がネイティブな（すなわち、天然に存在する）抗体のアミノ酸配列から変わっている抗体を意味する。抗体の生成における組換えＤＮＡ技法の関連性のために、天然の抗体に見いだされるアミノ酸の配列に限定する必要はない；抗体を、所望の特徴が得られるように再設計することができる。可能性のあるバリエーションは多数あり、ただ１つまたは少数のアミノ酸の変化から、例えば可変領域または定常領域の完全な再設計までにわたる。定常領域の変化は、一般に、補体結合、細胞との相互作用および他のエフェクター機能などの特徴を改善するかまたは変更するために行われる。典型的には、可変領域の変化は、抗原結合性特徴を改善するため、可変領域の安定性を改善するため、または免疫原性のリスクを低減するために行われる。

【0053】

「抗原結合部位」は、抗体の一部であり、抗体が抗原に結合するために十分な部分である。最小のそのような領域は、典型的には、免疫グロブリン可変ドメインもしくはその断片、または免疫グロブリン可変ドメインもしくはその断片の遺伝子操作されたバリアントである。単一ドメイン結合部位は、ラクダ科動物の抗体から（Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ ａｎｄ Ｌａｕｗｅｒｅｙｓ， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｒｅｃｏｇ． １２： １３１－１４０， １９９９；Ｎｇｕｙｅｎ ｅｔ ａｌ．， ＥＭＢＯ Ｊ． １９： ９２１－９３０， ２０００を参照されたい）、または単一ドメイン抗体を作製するために他の種のＶＨドメインから（「ｄＡｂｓ」；Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３４１：
５４４－５４６， １９８９；Ｗｉｎｔｅｒらに対する米国特許第６，２４８，５１６号を参照されたい）生成することができる。ある特定の変形形態では、抗原結合部位は、天然に存在するまたは天然には存在しない（例えば、変異誘発された）重鎖可変ドメインもしくは軽鎖可変ドメイン、またはこれらの組合せの相補性決定領域（ＣＤＲ）を２つしか有さないポリペプチド領域である（例えば、Ｐｅｓｓｉ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３６２： ３６７－３６９， １９９３；Ｑｉｕ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２５： ９２１－９２９， ２００７を参照されたい）。より一般には、抗原結合部位は、共通のエピトープに結合する重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインの両方を含む。本発明の範囲内では、「抗原結合部位」に加えて、抗体は、例えば、第２の抗原結合部位（同じもしくは異なるエピトープまたは同じもしくは異なる抗原に結合し得る）、ペプチドリンカー、免疫グロブリン定常ドメイン、免疫グロブリン ヒンジ、両親媒性へリックス（例えば、Ｐａｃｋ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ， Ｂｉｏｃｈｅｍ． ３１： １５７９－１５８４， １９９２を参照されたい）、非ペプチドリンカー、オリゴヌクレオチド（例えば、Ｃｈａｕｄｒｉ ｅｔ ａｌ．， ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４５０： ２３－２６， １９９９を参照されたい）などのうちの１つまたは複数などの、１つまたは複数の追加的な構成成分をさらに含み得、また、単量体または多量体タンパク質であり得る。インタクトな、ネイティブな抗体の構造（すなわち、２つの免疫グロブリン重鎖と２つの免疫グロブリン軽鎖からなる四量体）を有するタンパク質に加えて、抗原結合部位を含む分子の例は、一般に、当技術分野で公知であり、それらとしては、例えば、Ｆｖ断片、単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ断片、ダイアボディ、ミニボディ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ融合物、二重特異性（ｓｃＦｖ）_４－ＩｇＧ、および二重特異性（ｓｃＦｖ）_２－Ｆａｂが挙げられる（例えば、Ｈｕ ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ５６： ３０５５－３０６１， １９９６；Ａｔｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ３３： １３０１－１３１２， １９９６；Ｃａｒｔｅｒ ａｎｄ Ｍｅｒｃｈａｎｔ， Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ８： ４４９－４５４， １９９７；Ｚｕｏ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ １３： ３６１－３６７， ２０００；およびＬｕ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ２６７： ２１３－２２６， ２００２．を参照されたい）。

【0054】

本明細書で使用される場合、「免疫グロブリン」という用語は、免疫グロブリン遺伝子（複数可）によって実質的にコードされる１つまたは複数のポリペプチドからなるタンパク質を指す。免疫グロブリンの１つの形態は、インタクトな、ネイティブな抗体の基本構造単位を構成する。この形態は、四量体であり、２つの同一の免疫グロブリン鎖の対からなり、各対が軽鎖を１つと重鎖を１つ有する。各対において、軽鎖可変領域と重鎖可変領域は一緒になって抗原への結合を担い、定常領域は抗体エフェクター機能を担う。免疫グロブリンは、典型的には、脊椎動物生物体において抗体として機能する。高等脊椎動物では５つのクラスの免疫グロブリンタンパク質（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＥ）が同定されている。ＩｇＧが主要なクラスを構成する；ＩｇＧは、通常、血漿中に見いだされる２番目に豊富なタンパク質として存在する。ヒトでは、ＩｇＧは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４と称される４つのサブクラスからなる。ＩｇＧクラスの重鎖定常領域はギリシャ記号γを用いて識別される。例えば、ＩｇＧ１サブクラスの免疫グロブリンは、γ１重鎖定常領域を含有する。各免疫グロブリン重鎖は、種における所与のサブクラスに対して本質的に不変である定常領域タンパク質ドメイン（ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、およびＣＨ３；ＩｇＧ３はＣＨ４ドメインも含有する）からなる定常領域を有する。ヒトおよび非ヒト免疫グロブリン鎖をコードするＤＮＡ配列は当技術分野で公知である（例えば、Ｅｌｌｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， ＤＮＡ １： １１－１８，
１９８１；Ｅｌｌｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．
１０： ４０７１－４０７９， １９８２；Ｋｅｎｔｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ７９： ６６６１－６６６５， １９８２；Ｓｅｎｏ ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃ． Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １１： ７１９－７２６， １９８３；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３３２： ３２３－３２７， １９８８；Ａｍｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃ． Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． ８： ２０５５－２０６５， １９８０；Ｒｕｓｃｏｎｉ ａｎｄ Ｋｏｈｌｅｒ， Ｎａｔｕｒｅ ３１４： ３３０－３３４， １９８５；Ｂｏｓｓ ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃ． Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １２： ３７９１－３８０６， １９８４；Ｂｏｔｈｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ２９８： ３８０－３８２， １９８２；ｖａｎ ｄｅｒ Ｌｏｏ ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ４２：
３３３－３４１， １９９５；Ｋａｒｌｉｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｅｖｏｌ． ２２： １９５－２０８， １９８５；Ｋｉｎｄｓｖｏｇｅｌ ｅｔ ａｌ．，
ＤＮＡ １： ３３５－３４３， １９８２；Ｂｒｅｉｎｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｇｅｎｅ １８： １６５－１７４， １９８２；Ｋｏｎｄｏ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２３： ２４５－２４９， １９９３；およびＧｅｎＢａｎｋ受託番号第Ｊ００２２８を参照されたい）。免疫グロブリンの構造および機能の概説については、Ｐｕｔｎａｍ， Ｔｈｅ Ｐｌａｓｍａ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ， Ｖｏｌ Ｖ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｉｎｃ．， ４９－１４０， １９８７；およびＰａｄｌａｎ， Ｍｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ３１： １６９－２１７， １９９４を参照されたい。「免疫グロブリン」という用語は、本明細書では、その一般的な意味で使用され、文脈に応じて、インタクトな抗体、その構成成分である鎖、または鎖の断片を意味する。

【0055】

全長免疫グロブリン「軽鎖」（約２５Ｋｄまたは２１４アミノ酸）は、ＮＨ_２末端の可変領域遺伝子（約１１０アミノ酸をコードする）によって、およびＣＯＯＨ末端のカッパまたはラムダ定常領域遺伝子によってコードされる。全長免疫グロブリン「重鎖」（約５０Ｋｄまたは４４６アミノ酸）は、可変領域遺伝子（約１１６アミノ酸をコードする）およびガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはイプシロン定常領域遺伝子（約３３０アミノ酸をコードする）によってコードされ、後者により、抗体のアイソタイプがそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、またはＩｇＥと定義される。軽鎖および重鎖内で、可変領域と定常領域は約１２アミノ酸またはそれよりも多くの「Ｊ」領域によって接合しており、重鎖は、さらに約１０アミノ酸の「Ｄ」領域も含む（一般に、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ （Ｐａｕｌ， ｅｄ．， Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ， Ｎ．Ｙ．， ２ｎｄ ｅｄ． １９８９）， Ｃｈ． ７を参照されたい）。

【0056】

免疫グロブリン「Ｆｖ」断片は、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含有し、これらは、非共有結合性の相互作用によって一緒に保持されている。したがって、免疫グロブリンＦｖ断片は、単一の抗原結合部位を含有する。Ｆｖ断片の二量体構造は、変異誘発によってジスルフィド結合を導入することによってさらに安定化することができる（Ａｌｍｏｇ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ３１： １２８－１３８， １９９８．を参照されたい）。

【0057】

本明細書で使用される場合、「単鎖抗体」という用語は、単一のポリペプチド鎖内に含有される抗原結合部位（例えば、単一のポリペプチド鎖内の重鎖由来の可変領域と軽鎖由来の可変領域の両方）を有する抗体を指す。「単鎖Ｆｖ」という用語は、重鎖由来の可変領域と軽鎖由来の可変領域の両方を含むが、定常領域を欠く単鎖抗体を指す。一般に、単鎖Ｆｖは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、それにより、単鎖Ｆｖが抗原への結合を可能にする所望の構造を形成することが可能になる。単鎖抗体は、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ
ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ， ｖｏｌ． １１３ （Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．， Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９９４）， ｐｐ． ２６９－３１５によって詳細に考察されている（ＷＩＰＯ公開ＷＯ８８／０１６４９；米国特許第４，９４６，７７８号および同第５，２６０，２０３号；Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２： ４２３－４２６， １９８８．も参照されたい）。単鎖抗体はまた、二重特異性かつ／またはヒト化されたものであり得る。

【0058】

「Ｆａｂ断片」は、１つの軽鎖と１つの重鎖のＣＨ１および可変領域とを含有する。Ｆａｂ断片の重鎖は、別の重鎖分子とジスルフィド結合を形成することができない。「Ｆａｂ’断片」は、１つの軽鎖と、ＣＨ１ドメインとＣＨ２ドメインとの間の定常領域をより多く含有する１つの重鎖とを含有し、したがって、２つの重鎖間に鎖間ジスルフィド結合を形成して、２つの軽鎖と２つの重鎖とを含有する「Ｆ（ａｂ’）_２断片」を形成することができる。

【0059】

「Ｆｃ断片」および「Ｆｃ領域」という用語は、本明細書で使用される場合、同義であり、細胞の抗体受容体および補体の構成成分Ｃ１ｑへの結合を担う抗体の部分を指す。Ｆｃは、タンパク質結晶を容易に形成する抗体の断片である「結晶性断片（ｆｒａｇｍｅｎｔ ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ）」の略である。元々はタンパク質分解消化により説明されていた別個のタンパク質断片により、免疫グロブリンタンパク質の全体的な一般構造を定義することができる。文献において元々定義されている通り、Ｆｃ断片は、ジスルフィド連結した重鎖ヒンジ領域ならびにＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインからなる。しかし、つい最近、この用語は、ＣＨ３、ＣＨ２、および第２のそのような鎖とジスルフィド連結した二量体を形成するために十分なヒンジの少なくとも一部分からなる単鎖に適用されている。免疫グロブリンの構造および機能の概説については、Ｐｕｔｎａｍ， Ｔｈｅ Ｐｌａｓｍａ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ， Ｖｏｌ． Ｖ （Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，
Ｉｎｃ．， １９８７）， ｐｐ． ４９－１４０；およびＰａｄｌａｎ， Ｍｏｌ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ． ３１： １６９－２１７， １９９４を参照されたい。本明細書で使用される場合、Ｆｃという用語は、天然に存在する配列のバリアントを含む。

【0060】

免疫グロブリン軽鎖または重鎖可変領域は、フレームワーク領域とその間に割り込んだ３つの超可変領域とからなる。「超可変領域」という用語は、本明細書では「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）とも称され、抗体の、抗原への結合を担うアミノ酸残基を指す。ＣＤＲは、いくつかの公知の分析方法のいずれかに従って定義することができる。そのような方法の例としては、例えば、Ｋａｂａｔ定義、Ｃｈｏｔｈｉａ定義、ＡｂＭ定義および接触定義が挙げられる。Ｋａｂａｔ定義が抗体の残基の番号付けの標準であり、ＣＤＲ領域を識別するために典型的に使用される。例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ ＆ Ｗｕ， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． ２８： ２１４－８， ２０００を参照されたい。Ｃｈｏｔｈｉａ定義はＫａｂａｔ定義と同様であるが、Ｃｈｏｔｈｉａ定義では、ある特定の構造的ループ領域の位置を考慮に入れる。例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６： ９０１－１７， １９８６；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３４２： ８７７－８３， １９８９を参照されたい。ＡｂＭ定義では、抗体構造をモデル化する、Ｏｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｒｏｕｐによって作製された一連の統合型コンピュータプログラムを使用する。例えば、Ｍａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．， １９８９， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８６： ９２６８－９２７２， １９８９；”ＡｂＭ^ＴＭ、Ａ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ Ｍｏｄｅｌｉｎｇ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ”， Ｏｘｆｏｒｄ， ＵＫ； Ｏｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ， Ｌｔｄを参照されたい。ＡｂＭ定義では、知見データベースと、例えば、Ｓａｍｕｄｒａｌａ ｅｔ ａｌ．， ”Ａｂ Ｉｎｉｔｉｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ ａ Ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ｈｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，” ｉｎ ＰＲＯＴＥＩＮＳ， Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｕｐｐｌ． ３：１９４－１９８， １９９９．によって記載されているものなどのａｂ ｉｎｉｔｉｏ方法の組合せを使用して抗体の三次構造を一次配列からモデル化する。接触定義は、入手可能な複雑な結晶構造の分析に基づく。例えば、ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ５： ７３２－４５， １９９６を参照されたい。ＶＬドメインのＣＤＲ Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３は、本明細書では、それぞれＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、およびＣＤＲ－Ｌ３とも称される；ＶＨドメインのＣＤＲ Ｈ１、Ｈ２、およびＨ３は、本明細書では、それぞれＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、およびＣＤＲ－Ｈ３とも称される。

【0061】

「フレームワーク領域」は、超可変領域残基以外（例えば、ＣＤＲのＫａｂａｔ定義、Ｃｈｏｔｈｉａ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義によって定義されるＣＤＲの残基以外）の可変ドメイン残基である。異なる軽鎖または重鎖のフレームワーク領域の配列は、種内で比較的保存されている。したがって、「ヒトフレームワーク領域」は、天然に存在するヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域と実質的に（約８５％またはそれよりも大きく、通常は９０～９５％またはそれよりも大きく）同一であるフレームワーク領域である。抗体のフレームワーク領域は、構成物である軽鎖および重鎖のフレームワーク領域の組合せであり、ＣＤＲの位置を定め、それらを整列させる働きをする。

【0062】

「キメラ抗体」は、軽鎖および重鎖遺伝子が、典型的には遺伝子操作により、異なる種に属する免疫グロブリン可変領域および定常領域遺伝子から構築された抗体である。例えば、マウスモノクローナル抗体由来の遺伝子の可変セグメントを、ヒト定常領域をコードするセグメント（例えば、ヒトガンマ１またはガンマ３重鎖遺伝子、およびヒトカッパ軽鎖遺伝子）と接合することができる。したがって、治療用キメラ抗体は、典型的にはマウス抗体由来の可変ドメインまたは抗原結合性ドメインとヒト抗体由来の定常ドメインとで構成されるハイブリッドタンパク質であるが、他の哺乳動物種も使用することができる。具体的には、キメラ抗体は、組換えＤＮＡ技術によって作製され、免疫グロブリン軽鎖、重鎖、またはその両方のヒンジおよび定常領域の全部または一部が、別の動物の免疫グロブリン軽鎖または重鎖由来の対応する領域で置換されている。このように、親モノクローナル抗体の抗原結合性部分を別の種の抗体の骨格に移植する。キメラ抗体は、必要に応じて、露出している残基を置き換えることによってヒト様表面で「覆う」ことができ、その結果、「ベニア化抗体」が生じる。

【0063】

本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」という用語は、ヒトにより産生されるおよび／または当業者に公知のもしくは本明細書に開示されるヒト抗体を作出するための技法のいずれかを使用して作出された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体を意味する。このヒト抗体の定義は、ヒト重鎖ポリペプチドを少なくとも１つ含むまたはヒト軽鎖ポリペプチドを少なくとも１つ含む抗体を包含する。そのような例の１つは、マウス軽鎖とヒト重鎖ポリペプチドを含む抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で公知の種々の技法を使用して作製することができる。一実施形態では、ヒト抗体をファージライブラリーから選択し、この場合、そのファージライブラリーはヒト抗体を発現するものである。例えば、Ｖａｕｇｈａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４： ３０９－３１４， １９９６；Ｓｈｅｅｔｓ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９５： ６１５７－６１６２， １９９８；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２７： ３８１， １９９１；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２２： ５８１， １９９１を参照されたい。ヒト抗体は、内在性遺伝子座の代わりにヒト免疫グロブリン遺伝子座が遺伝形質転換により（ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃａｌｌｙ）導入された動物、例えば、内在性免疫グロブリン遺伝子が部分的にまたは完全に不活化されたマウスを免疫することによって作出することもできる。この手法は、例えば、米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；同第５，６６１，０１６号；および同第７，０４１，８７０号に記載されている。あるいは、ヒト抗体は、標的抗原に対して向けられた抗体を産生するヒトＢリンパ球を不死化することによって調製することができる（そのようなＢリンパ球を個体から回収することができるか、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで免疫されていてもよい）。例えば、Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．， ”Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ”， Ａｌａｎ Ｒ． Ｌｉｓｓ、ｐ． ７７， １９８５；Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４７： ８６－９５， １９９１；および米国特許第５，７５０，３７３号を参照されたい。

【0064】

「ヒト化免疫グロブリン」という用語は、ヒトフレームワーク領域と非ヒト（例えば、マウスまたはラット）免疫グロブリン由来の１つまたは複数のＣＤＲとを含む免疫グロブリンを指す。ＣＤＲを提供する非ヒト免疫グロブリンは「ドナー」と称され、フレームワークを提供するヒト免疫グロブリンは「アクセプター」と称される。定常領域は存在する必要はないが、存在する場合には、ヒト免疫グロブリン定常領域と実質的に同一である、すなわち、少なくとも約８５～９０％、好ましくは約９５％またはそれよりも大きく同一である。したがって、できる限りＣＤＲ以外のヒト化免疫グロブリンの全ての部分が、天然のヒト免疫グロブリン配列の対応する部分と実質的に同一である。一部の場合には、ヒト化抗体は、相応の結合特徴を増強するために、ヒト可変領域フレームワークドメイン内に非ヒト残基を保持し得る（例えば、抗体がヒト化抗体である場合、結合親和性を保存するためにフレームワークの変異が必要になり得る）。「ヒト化抗体」は、ヒト化軽鎖免疫グロブリンおよび／またはヒト化重鎖免疫グロブリンを含む抗体である。例えば、上で定義された典型的なキメラ抗体は、例えば、キメラ抗体の可変領域全体が非ヒトである（または、ベニア化抗体の場合では実質的に非ヒトである）ので、ヒト化抗体には包含されない。

【0065】

「二重特異性」抗体は、それぞれが異なる特異性を有する２つの異なる抗原結合部位を有する抗体である。二重特異性抗体は、例えば、架橋剤との化学的コンジュゲーションによるもの、２つのハイブリドーマ株の体細胞融合によるもの（クアドローマ）、および遺伝子操作によるものを含めた種々の方法によって作製することができる。一般に、例えば、Ｓｅｄｙｋｈ ｅｔ ａｌ．， Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ， Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ
ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ １２： １９５－２０８， ２０１８を参照されたい。

【0066】

「ダイアボディ」という用語は、抗原結合部位を２つ有する小さな抗体断片を指し、この断片は、同じポリペプチド鎖内で接続した重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）（ＶＨ－ＶＬ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間の対形成を可能にするには短すぎるリンカーを使用することにより、これらのドメインは別の鎖の相補的なドメインと対形成するように強制され、抗原結合部位が２つ創出される。ダイアボディは、例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ９３／１１１６１；およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９０： ６４４４－６４４８， １９９３により詳細に記載されている。

【0067】

「ミニボディ」という用語は、本明細書では、天然に存在するまたは天然には存在しない（例えば、変異誘発された）重鎖可変ドメインもしくは軽鎖可変ドメイン、またはこれらの組合せの相補性決定領域（ＣＤＲ）を２つしかコードしないポリペプチドを指す。ミニボディの例は、例えば、Ｐｅｓｓｉ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３６２： ３６７－３６９， １９９３；およびＱｉｕ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２５： ９２１－９２９， ２００７によって記載されている。

【0068】

「直鎖状抗体」という用語は、Ｚａｐａｔａ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ． ８：１０５７－１０６２， １９９５に記載されている抗体を指す。簡単に述べると、これらの抗体は、抗原結合性領域の対を形成するタンデムなＦｄセグメントの対（ＶＨ－ＣＨ１－ＶＨ－ＣＨ１）を含む。直鎖状抗体は、二重特異性または単一特異性であり得る。

【0069】

本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られた抗体を指す、すなわち、集団を構成する個々の抗体のアミノ酸配列が、微量に存在し得る可能性のある天然に存在する変異以外は同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して向けられる。さらに、典型的には異なる決定因子（エピトープ）に対して向けられた異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定因子に対して向けられる。「モノクローナル」という修飾語は、抗体の特質が、抗体の実質的に均一な集団から得られたものであることを示し、抗体の作製が任意の特定の方法によるものである必要があるとは解釈されない。例えば、本発明に従って使用するためのモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ （Ｎａｔｕｒｅ ２５６： ４９５， １９７５）に最初に記載されたものなどによって作出することもでき、組換えＤＮＡ法、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているものなどによって作出することもできる。モノクローナル抗体はまた、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ． （Ｎａｔｕｒｅ ３４８： ５５２－５５４， １９９０）に記載されている技法を使用して作製されたファージライブラリーから単離することもできる。

【0070】

本明細書における肝線維症、肺線維症、または腎線維症「を処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「の処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ」への言及は、肝線維症、肺線維症、または腎線維症に関連する種々の疾患または障害のいずれかに関する処置を含む。疾患または障害は、肝線維症、肺線維症、または腎線維症がその疾患または障害の病理の一部（例えば、疾患増悪の指標および／または肝臓、肺、もしくは腎臓の機能喪失の原因）であると臨床医に解釈される場合、肝線維症、肺線維症、または腎線維症「に関連する（ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ）」。これに関連して「病理」は、疾患または障害増悪の一部としての予測されたまたは実際の病理学的組織変化のいずれかとしての線維症を含み、したがって、肝線維症、肺線維症、または腎線維症に関連する疾患または障害を有し、本開示に従ってＰＳＭＰアンタゴニストの投与を受ける対象は、処置時に疾患または障害の実際の身体的顕在化として線維症を有していても有していなくてもよい。さらに、本明細書における、対象における肝線維症、肺線維症、または腎線維症を処置することおよび肝線維症、肺線維症、または腎線維症を疾患または障害「に関連する（ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ）」として特徴付けることへの言及は、処置される対象が特定の疾患または障害を有するかまたはそれが発生するリスクを有することを意味する。

【0071】

文脈により明確に別段の規定がなされない限り、本明細書における「疾患または障害」への一般的な言及は、肝線維症、肺線維症、腎線維症、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、または全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、ならびに、肝線維症、肺線維症、または腎線維症（例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）、急性腎傷害（ＡＫＩ）、慢性腎疾患（ＣＫＤ）、ループス腎炎、ＩｇＡ腎症、または膜性糸球体腎炎）に関連する特定の疾患または障害への言及を含む。

【0072】

「代替足場」という用語は、標的分子（例えば、ＰＳＭＰ）に特異的に結合する１つまたは複数の結合性ドメインが生じるように１つまたは複数の領域を多様化することができる非抗体タンパク質を指す。一部の実施形態では、結合性ドメインは、標的分子に抗体と同様の特異性および親和性で結合する。例示的な代替足場としては、フィブロネクチン（例えば、Ａｄｎｅｃｔｉｎｓ（商標））、β－サンドイッチ（例えば、ｉＭａｂ）、リポカリン（例えば、Ａｎｔｉｃａｌｉｎｓ（登録商標））、ＥＥＴＩ－ＩＩ／ＡＧＲＰ、ＢＰＴＩ／ＬＡＣＩ－Ｄ１／ＩＴＩ－Ｄ２（例えば、Ｋｕｎｉｔｚドメイン）、プロテインＡ（例えば、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標））、アンキリンリピート（例えば、ＤＡＲＰｉｎｓ）、ガンマ－Ｂ－クリスタリン／ユビキチン（例えば、Ａｆｆｉｌｉｎｓ）、ＣＴＬＤ_３（例えば、Ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ）、Ｆｙｎｏｍｅｒ、およびＡｖｉｍｅｒに由来するものが挙げられる。代替足場に関する追加的な情報は、そのそれぞれの全体が参照によって組み込まれるＢｉｎｚ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２３： １２５７－１２６８， ２００５；Ｓｋｅｒｒａ， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ． ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ． １８： ２９５－３０４， ２００７；およびＳｉｌａｃｃｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２８９： １４３９２－１４３９８， ２０１４において提供される。ＰＳＭＰアンタゴニストとして機能するように（例えば、ＰＳＭＰに特異的に結合し、それを中和することによって）操作された代替足場タンパク質は、本明細書では「代替足場ＰＳＭＰアンタゴニスト」または「代替足場に基づくＰＳＭＰアンタゴニスト」と称することができる。

【0073】

「阻害性ポリヌクレオチド」は、第２の（標的）ポリヌクレオチド（例えば、ＰＳＭＰをコードする遺伝子またはｍＲＮＡ）の発現（転写または翻訳）を低減するかまたは妨げるＤＮＡ分子またはＲＮＡ分子である。阻害性ポリヌクレオチドとしては、アンチセンスポリヌクレオチド、リボザイム、および外部ガイド配列が挙げられる。「阻害性ポリヌクレオチド」という用語は、リボザイムをコードするＤＮＡ分子などの、実際の阻害種をコードするＤＮＡ分子およびＲＮＡ分子をさらに含む。

【0074】

「処置する（ｔｒｅａｔ）」および「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、病理学的状態を好都合に変更する治療的介入および予防的介入を示すために広範に使用される。

【0075】

組成物の「有効量」という用語は、本明細書に記載の処置に関しては、任意の１つまたは複数の有益なまたは所望の結果をもたらすために十分な量である。予防的使用に関しては、有益なまたは所望の結果として、リスクの排除もしくは低減、重症度の緩和、または、疾患もしくは障害の生化学的、組織学的、および／もしくは理学的症状、その合併症、ならびに疾患もしくは障害の発生の間に存在する中間の病理学的表現型を含めた、疾患もしくは障害の発症（ｏｕｔｓｅｔ）の遅延が挙げられる。治療的使用に関しては、有益なまたは所望の結果として、疾患もしくは障害の１つもしくは複数の症状の好転もしくはその発生率の低下、疾患もしくは障害を処置するために必要な他の医薬の用量の減少、別の医薬の効果の増強、疾患もしくは障害の増悪の遅延、および／または患者の器官機能の改善を生じさせることなどの臨床結果が挙げられる。例えば、本明細書に記載の通り対象にＰＳＭＰアンタゴニストを投与することによる肝線維症、肺線維症、または腎線維症の処置に関しては、対象における線維症の発症を遅延させる、その重症度を低下させる、もしくはその増悪を低減するために十分であるか、または、対象における肝機能、肺機能、または腎機能の改善を生じさせるために十分である、そのような薬剤の量が、ＰＳＭＰアンタゴニストの「有効量」とみなされる。

【0076】

有効な投与量は、１回または複数回の投与で施行することができる。有効量の組成物を本発明の方法に従って「有効なレジーム」で投与する。「有効なレジーム」という用語は、処置を実現するのに適した、投与される組成物の量と投与頻度の組合せを指す。本発明の目的に関しては、組成物の有効な投与量は、予防的または治療的処置を直接または間接的に実現するために十分な量である。臨床の場で理解されている通り、組成物の有効な投与量は、別の薬物組成物と併せて実現される場合もあり、そうでない場合もある。したがって、「有効量」は、１種または複数種の治療剤を投与する状況とみなすことができ、単一の薬剤は、１種または複数種の他の薬剤と併せて望ましい結果が実現され得るかまたは実現される場合、有効量で投薬されたとみなすことができる。

【0077】

「患者」または「対象」という用語は、本明細書に記載の疾患または障害の処置に関しては、例えば、ヒトおよび他の霊長類などの哺乳動物を含む。この用語はまた、飼育動物、例えば、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、イヌ、およびネコなども含む。

【0078】

「併用療法」という用語は、指示された治療効果を実現するために少なくとも２種の別個の治療を提供することを伴う治療レジメンを指す。例えば、併用療法は、２種またはそれよりも多くの化学的に別個の活性成分、または薬剤、例えば、ＰＳＭＰアンタゴニスト（例えば、抗ＰＳＭＰ抗体）と別の薬剤、例えば、別の抗炎症剤または抗線維化剤などを投与することを伴う。併用療法を構成する別個の治療は、例えば、同時の、重複する、または逐次的な投与レジメンとして送達することができる。２種またはそれよりも多くの化学的に別個の薬剤の投与に関しては、活性成分を同じ組成物の一部として投与することもでき、異なる組成物として投与することもできることが理解される。別の組成物として投与する場合、異なる活性成分を含む組成物を、同じ時間または異なる時間に、同じ経路または異なる経路で、同じ投与レジメンまたは異なる投与レジメンを使用して、全て特定の状況が必要とする通りに、ならびに主治医によって決定される通りに、投与することができる。

【0079】

本明細書において実施形態が「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という言葉と共に記載されている場合は必ず、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」および／または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という用語で記載される、他の点では類似の実施形態も提供されることが理解される。

【0080】

「および／または」、例えば、「Ｘおよび／またはＹ」という用語は、「ＸおよびＹ」または「ＸまたはＹ」を意味すると理解されるものとし、両方の意味またはいずれかの意味に対する明示的な支持を提示するとみなされるものとする。

【0081】

本発明の態様または実施形態がマーカッシュ群または他の代替の群分けによって記載されている場合、本発明は、まとめて列挙されている群全体を包含するが、群の各メンバーも個別に包含し、かつ、主要群の可能性のある全てのサブグループを包含するだけでなく、群のメンバーのうちの１つまたは複数が存在しない主要群も包含する。本発明はまた、特許請求された発明における群のメンバーのいずれか１つまたは複数の明示的な除外も想定する。

【図面の簡単な説明】

【0082】

【図1】図１Ａおよび１Ｂは、硬変のおよび付近の非腫瘍肝組織におけるＰＳＭＰの上方調節を例示する図である（実施例１を参照されたい）。免疫組織化学的検査を実施例６に記載の通り実施した。

【0083】

【図2】図２Ａおよび２Ｂは、原因が異なるヒト肝臓線維化組織におけるＰＳＭＰの上方調節を例示する図である（実施例１を参照されたい）。免疫組織化学的検査を実施例６に記載の通り実施した。

【0084】

【図3-1】図３Ａ～３Ｄは、ＣＣｌ_４によって誘発される肝線維症のマウスモデルにおけるＰＳＭＰの上方調節を例示する図である（実施例１を参照されたい）。マウスＣＣｌ_４誘発肝線維症モデル、定量的リアルタイムＰＣＲアッセイ（図３Ａ）、サイトメトリックビーズアッセイ（ＣＢＡ）（図３Ｂおよび３Ｃ）、および免疫組織化学的検査（図３Ｄ）を実施例６に記載の通り実施した。

【図3-2】同上。

【0085】

【図4】図４Ａおよび４Ｂは、胆管結紮によって誘発される肝線維症のマウスモデルにおけるＰＳＭＰの上方調節を例示する図である（実施例１を参照されたい）。マウスＢＤＬ肝線維症モデル、免疫組織化学的検査、および定量的リアルタイムＰＣＲアッセイを実施例６に記載の通り実施した。

【0086】

【図5-1】図５Ａ～５Ｋは、ＣＣｌ_４誘発線維症モデルを使用したＰＳＭＰノックアウトマウスにおける肝線維症からの保護を例示する図である（実施例２を参照されたい）。マウスＣＣｌ_４誘発肝線維症モデル、免疫組織化学的検査、免疫ブロッティング分析、ヒドロキシプロリンの決定、および定量的リアルタイムＰＣＲアッセイを実施例６に記載の通り実施した。

【図5-2】同上。

【図5-3】同上。

【図5-4】同上。

【0087】

【図6-1】図６Ａ～６Ｋは、ＢＤＬ誘発線維症モデルを使用したＰＳＭＰノックアウトマウスにおける肝線維症からの保護を例示する図である（実施例２を参照されたい）。マウスＢＤＬ誘発肝線維症モデル、免疫組織化学的検査、免疫ブロッティング分析、ヒドロキシプロリンの決定、および定量的リアルタイムＰＣＲアッセイを実施例６に記載の通り実施した。

【図6-2】同上。

【図6-3】同上。

【図6-4】同上。

【0088】

【図7-1】図７Ａ～７Ｌは、ＣＣｌ_４誘発線維症モデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の保護効果を例示する図である（実施例３を参照されたい）。マウスＣＣｌ_４誘発肝線維症モデル、抗体による処置、免疫組織化学的検査、免疫ブロッティング分析、ヒドロキシプロリンの決定、および定量的リアルタイムＰＣＲアッセイを実施例６に記載の通り実施した。

【図7-2】同上。

【図7-3】同上。

【図7-4】同上。

【0089】

【図8-1】図８Ａ～８Ｋは、ＣＣｌ_４誘発線維症モデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の治療効果を例示する図である（実施例３を参照されたい）。マウスＣＣｌ_４誘発肝線維症モデル、抗体による処置、免疫組織化学的検査、ヒドロキシプロリンの決定、および定量的リアルタイムＰＣＲアッセイを実施例６に記載の通り実施した。

【図8-2】同上。

【図8-3】同上。

【図8-4】同上。

【0090】

【図9-1】図９Ａ～９Ｌは、ＣＣｌ_４誘発線維症モデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の用量依存的な治療効果を例示する図である（実施例３を参照されたい）。マウスＣＣｌ_４誘発肝線維症モデル、抗体による処置、免疫組織化学的検査、免疫ブロッティング分析、ヒドロキシプロリンの決定、および定量的リアルタイムＰＣＲアッセイを実施例６に記載の通り実施した。

【図9-2】同上。

【図9-3】同上。

【図9-4】同上。

【0091】

【図10-1】図１０Ａ～１０Ｌは、ＰＳＭＰノックアウトマウスにおいてＰＳＭＰ発現を回復させ、肝線維症を促進するための、ＡＡＶ８－ｈＰＳＭＰベクターの使用を例示する図である（実施例４を参照されたい）。マウスＣＣｌ_４誘発肝線維症モデル、ＡＡＶ８の構築および注射、免疫組織化学的検査、ヒドロキシプロリンの決定、ならびに定量的リアルタイムＰＣＲアッセイを実施例６に記載の通り実施した。

【図10-2】同上。

【図10-3】同上。

【図10-4】同上。

【0092】

【図11-1】図１１Ａ～１１Ｎは、肝臓免疫細胞および炎症促進性サイトカイン産生に対するＰＳＭＰ欠乏の影響を例示する図である（実施例５を参照されたい）。ＣＣｌ_４を用いて処置したＰＳＭＰノックアウトマウスでは、肝臓マクロファージ浸潤の低減（フローサイトメトリーによって決定された；図１１Ａ～１１Ｅ）および炎症促進性サイトカイン産生の低減（サイトメトリックビーズアッセイ（ＣＢＡ）によって決定された；図１１Ｋ－１１Ｎ）が観察された。好中球、Ｂ細胞、およびＴ細胞などの他の免疫細胞を、フローサイトメトリーを使用して調査し、影響を受けないことが見いだされた（図１１Ｆ～１１Ｊ）。マウスＣＣｌ_４誘発肝線維症モデル、フローサイトメトリー、およびＣＢＡを実施例６に記載の通り実施した。

【図11-2】同上。

【図11-3】同上。

【図11-4】同上。

【図11-5】同上。

【0093】

【図12-1】図１２Ａ～１２Ｇは、ブレオマイシンマウスモデルにおける肺線維症の間のＰＳＭＰの上方調節およびＰＳＭＰ欠乏の影響を例示する図である。実施例７を参照されたい。肺およびＢＡＬＦにおけるＰＳＭＰタンパク質レベルをサイトカインビーズアッセイによって測定した（図１２Ａおよび１２Ｂ）。図１２Ｃは、ＰＳＭＰの代表的な肺免疫組織化学染色を示す。体重指数を１４日間測定した（図１２Ｄ）。図１２Ｅは、マッソントリクローム染色の代表的な肺組織学的検査を示す。α－ＳＭＡの発現を免疫組織化学的検査によって決定した（図１２Ｆ）。図１２Ｇは、正常なヒト肺および気道線維症のヒト肺におけるＰＳＭＰの代表的な免疫組織化学染色を示す。スケールバー、１００μｍ。^＊、Ｐ＜０．０５；^＊＊、ｐ＜０．０１、ｎ≧６／群。

【図12-2】同上。

【図12-3】同上。

【0094】

【図13】図１３は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のマウスモデルにおけるＰＳＭＰノックアウトマウスにおける線維症の低減を例示する図である。実施例８を参照されたい。

【0095】

【図14】図１４は、急性ＧＶＨＤ（ａＧＶＨＤ）マウスモデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の治療効果（生存時間の延長）を例示するグラフである。実施例９を参照されたい。

【0096】

【図15-1】図１５Ａ～１５Ｋは、慢性エタノール給餌モデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の治療効果を例示する図である。実施例１０を参照されたい。図１５Ａは、慢性エタノール給餌マウスモデルにおけるＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳによる処置の実験設計に関する概略図を示す。血清トリグリセリドおよびコレステロールを測定した（図１５Ｂおよび１５Ｃ）。肝臓組織学的検査を、Ｈ＆Ｅ染色およびオイルレッド染色（図１５Ｄおよび１５Ｅ）ならびにオイルレッド陽性領域の定量（図１５Ｆ）によって実施した。肝臓ＰｐａｒａおよびＳｒｅｂｐ－１のｍＲＮＡレベルをＲＴ－ｑＰＣＲによって測定した（図１５Ｇおよび１５Ｈ）。さらなる肝臓組織学的検査をシリウスレッド染色およびその定量によって実施した（図１５Ｉおよび図１５Ｊ）。肝臓非実質細胞を染色し、フローサイトメトリーによって分析した。浸潤マクロファージ（ｉＭΦ、ＣＤ４５^＋Ｌｙ６Ｇ^－Ｆ４／８０^＋ＣＤ１１ｂ^ｈｉｇｈ）をフローサイトメトリー分析によって定量した（図１５Ｋ）。（スケールバー、１００μｍ／５０μｍ。^＊、Ｐ＜０．０５；^＊＊、ｐ＜０．０１、一元配置ＡＮＯＶＡによる、ｎ＝３～１１／群）。

【図15-2】同上。

【図15-3】同上。

【図15-4】同上。

【図15-5】同上。

【図15-6】同上。

【0097】

【図15-7】図１５Ｌ～１５Ｔは、慢性＋過度のアルコール給餌モデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の治療効果を例示する図である。実施例１０を参照されたい。図１５Ｌは、当該モデルにおけるＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳによる処置の実験設計に関する概略図を示す。肝臓中トリグリセリドおよびコレステロールを測定した（図１５Ｍおよび１５Ｎ）。図１５Ｏは、ＰＢＳで処置したマウスおよび３Ｄ５で処置したマウス由来の肝組織の代表的なＨ＆Ｅ染色を示す。肝臓非実質細胞を染色し、フローサイトメトリーによって分析した。浸潤マクロファージ（ｉＭΦ、ＣＤ４５^＋Ｌｙ６Ｇ^－Ｆ４／８０^＋ＣＤ１１ｂ^ｈｉｇｈ）をフローサイトメトリー分析によって定量した（図１５Ｐ）。図１５Ｑおよび１５Ｒは、ＷＴマウスおよびＰｓｍｐ^－／－マウス由来の肝組織の代表的なＨ＆Ｅ染色（１５Ｑ）およびオイルレッドＯ染色（１５Ｒ）を示す。ＡＬＴの血清中レベルを測定した（図１５Ｓ）。肝臓Ｓｒｅｂｐ－１およびＰｐａｒａのｍＲＮＡレベルをＲＴ－ｑＰＣＲによって測定した（図１５Ｔおよび１５Ｕ）。スケールバー、５０μｍ。^＊、Ｐ＜０．０５；^＊＊、ｐ＜０．０１、一元配置ＡＮＯＶＡによる、ｎ≧４／群。

【図15-8】同上。

【図15-9】同上。

【図15-10】同上。

【図15-11】同上。

【0098】

【図16】図１６Ａ～１６Ｃは、マウス肝傷害および線維症におけるＰＳＭＰの発現を例示する図である。実施例１１を参照されたい。ＤＤＣ食またはＡＰＡＰを用いて処置したＷＴマウス（白棒）およびＰｓｍｐ^－／－マウス（黒棒）を使用し、ＰＳＭＰに関する肝臓の免疫組織化学染色（図１６Ａ）およびｑＲＴ－ＰＣＲによるＰＳＭＰ ｍＲＮＡレベルの測定（図１６Ｂおよび１６Ｃ）を実施した。

【0099】

【図17-1】図１７Ａ～１７Ｉは、ＤＤＣマウスにおけるＰＳＭＰ欠乏の肝線維症からの保護効果を例示する図である。実施例１２を参照されたい。ＷＴマウスおよびＰｓｍｐ^－／－マウスに、４週間にわたってＤＤＣを給餌した。肝臓組織学的検査をＨ＆Ｅ染色およびシリウスレッド染色（図１７Ａ）ならびにその定量（図１７Ｂおよび１７Ｃ）によって実施した。α－ＳＭＡの発現を免疫組織化学的検査およびウエスタンブロッティングによって決定した（図１７Ａおよび１７Ｄ）。線維形成遺伝子の肝臓ｍＲＮＡレベルをｑＲＴ－ＰＣＲによって測定した（図１７Ｅ～１７Ｉ）。

【図17-2】同上。

【図17-3】同上。

【0100】

【図18-1】図１８Ａ～１８Ｇは、マウスＤＤＣ誘発肝線維症に対する中和抗ＰＳＭＰ抗体の効果を例示する図である。実施例１３を参照されたい。図１８Ａは、マウスにおけるＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはｍＩｇＧによる処置の実験設計に関する概略図を示す。肝臓組織学的検査を、Ｈ＆Ｅ染色およびシリウスレッド染色（図１８Ｂ）ならびにその定量（図１８Ｃおよび１８Ｄ）によって実施した。α－ＳＭＡの発現を免疫組織化学的検査およびウエスタンブロッティングによって決定した（図１８Ｂおよび１８Ｅ）。線維形成遺伝子の肝臓ｍＲＮＡレベルをｑＲＴ－ＰＣＲによって測定した（図１８Ｆおよび１８Ｇ）。

【図18-2】同上。

【図18-3】同上。

【0101】

【図19-1】図１９Ａ～１９Ｇは、ＭＣＤマウスにおけるＰＳＭＰ欠乏の肝線維症からの保護効果を例示する図である。実施例１４を参照されたい。ＷＴマウスおよびＰｓｍｐ^－／－マウスに６週間にわたってＭＣＤを給餌した。図１９Ａは、ＷＴマウスにおける代表的なＰＳＭＰに関する肝臓の免疫組織化学染色を示す。肝臓組織学的検査を、Ｈ＆Ｅ染色およびシリウスレッド染色（図１９Ｂ）ならびにその定量（図１９Ｃおよび１９Ｄ）によって実施した。線維形成遺伝子の肝臓ｍＲＮＡレベルをｑＲＴ－ＰＣＲによって測定した（図１９Ｅ～１９Ｇ）。

【図19-2】同上。

【図19-3】同上。

【0102】

【図20-1】図２０Ａ～２０Ｄは、マウスＭＣＤ食誘発肝線維症に対する中和抗ＰＳＭＰ抗体の効果を例示する図である（第４週から第５．５週までの処置）。実施例１５を参照されたい。図２０Ａは、マウスにおけるＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳによる処置の実験設計に関する概略図を示す。肝臓組織学的検査を、Ｈ＆Ｅ染色およびシリウスレッド染色（図２０Ｂ）ならびにその定量（図２０Ｃおよび２０Ｄ）によって実施した。（スケールバー、１００μｍ。^＊＊、Ｐ＜０．０１；^＊＊＊、Ｐ＜０．００１、スチューデントのｔ検定による、ｎ＝５／群）。

【図20-2】同上。

【0103】

【図20-3】図２０Ｅ～２０Ｉは、マウスＭＣＤ食誘発肝線維症に対する中和抗ＰＳＭＰ抗体の効果を例示する図である（第５週から第８週までの処置）。実施例１５を参照されたい。図２０Ｅは、マウスにおけるＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳによる処置の実験設計に関する概略図を示す。肝臓組織学的検査を、シリウスレッドおよびα－ＳＭＡ免疫組織化学染色（図２０Ｆ）ならびにその定量（図２０Ｇ～２０Ｉ）によって実施した。（スケールバー、１００μｍ。^＊＊、Ｐ＜０．０１、スチューデントｔ検定による、対照、ｎ＝３；ＭＣＤ－ＰＢＳ、ｎ＝６；ＭＣＤ－３Ｄ５、ｎ＝５）。

【図20-4】同上。

【0104】

【図21-1】図２１Ａおよび２１Ｂは、異なる腎疾患組織におけるＰＳＭＰ発現を例示する図である。実施例１６を参照されたい。図２１Ａは、付近の明細胞癌からのヒト正常腎組織、ＬＮ腎組織およびＩｇＡＮ腎組織におけるＰＳＭＰの代表的な免疫組織化学染色を示す。図２１Ｂは、異なる腎疾患におけるＰＳＭＰ免疫染色の統計学的要約を示す。ＬＮ：ループス腎炎、ＩｇＡＮ：ＩｇＡ腎症、ＭＧＮ：膜性糸球体腎炎。スケールバー、１００μｍ。^＊＊、ｐ＜０．０１；^＊＊＊、ｐ＜０．００１、スチューデントｔ検定による。

【0105】

【図21-2】図２１Ｃ～２１Ｅは、急性腎傷害（ＡＫＩ）のマウスモデルにおけるＰＳＭＰ欠乏の影響または中和を例示する図である。実施例１６を参照されたい。図２１Ｃは、Ｐｓｍｐ^－／－またはＷＴマウスにおけるグリセロールの注射の４８時間後の血清中クレアチニンレベルを示す。図２１Ｄおよび２１Ｅは、ＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳを注射したマウスにおけるグリセロールの注射の４８時間後の血清中クレアチニンレベル（２１Ｄ）およびＢＵＮレベル（２１Ｅ）を示す。^＊、Ｐ＜０．０５、スチューデントｔ検定による、ｎ＝４～６／群。

【0106】

【図21-3】図２１Ｆ～２１Ｈは、慢性腎疾患（ＣＫＤ）のマウスモデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の治療効果を例示する図である。実施例１６を参照されたい。図２１Ｆは、ＵＵＯマウスにおけるＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳによる処置の実験設計に関する概略図を示す。図２１Ｇおよび２１Ｈは、シリウスレッド染色（２１Ｇ）による代表的な腎臓組織学的検査、およびその定量（２１Ｈ；灰色の棒－３Ｄ５処置群、黒色の棒－ＰＢＳ処置群）を示す。スケールバー、１００μｍ。^＊、Ｐ＜０．０５、スチューデントｔ検定による、ｎ＝４～６／群。

【図21-4】同上。

【図21-5】同上。

【0107】

【図22-1】図２２Ａ～２２Ｄは、慢性ＧＶＨＤ（ｃＧＶＨＤ）マウスモデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の治療効果を例示する図である。実施例１７を参照されたい。図２２Ａは、経時的にモニタリングした体重を示す。図２２Ｂは、抗ＰＳＭＰ抗体３Ｄ５を用いて処置したマウスと比較した、対照群における毛皮の脱落（ｆｕｒ ｓｈｅｄｄｉｎｇ）を示す。肝損傷、ＡＬＴおよびＡＳＴの血清マーカーを測定した（図２２Ｃおよび２２Ｄ）。^＊、Ｐ＜０．０５；^＊＊、ｐ＜０．０１、スチューデントｔ検定による、ｎ≧６／群。

【図22-2】同上。

【0108】

【図23-1】図２３Ａ～２３Ｃは、ループス腎炎マウスモデルにおける中和抗ＰＳＭＰ抗体の治療効果を例示する図である。実施例１８を参照されたい。腎機能マーカーである血清中クレアチニン（図２３Ａ）および血中尿素窒素（ＢＵＮ）（図２３Ｂ）、血清総ＩｇＧレベル（図２３Ｃ）、ならびに糸球体内の自己抗体沈着（図２３Ｄ）を測定した。スケールバー、１００μｍ。^＊、Ｐ＜０．０５；^＊＊、ｐ＜０．０１、スチューデントｔ検定による、ｎ≧６／群。

【図23-2】同上。

【発明を実施するための形態】

【0109】

本発明は、一般に、疾患を処置するための、例えば中和抗ＰＳＭＰ抗体を含めたＰＳＭＰアンタゴニストの使用を対象とする。具体的には、一部の態様では、本発明は、肝線維症を処置するための、ＰＳＭＰアンタゴニストの使用に関する。他の態様では、本発明は、肺線維症を処置するための、ＰＳＭＰアンタゴニストの使用に関する。他の態様では、本発明は、腎線維症を処置するための、ＰＳＭＰアンタゴニストの使用に関する。さらに他の態様では、本発明は、肝線維症、肺線維症、または腎線維症に関連する疾患または障害、例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患（例えば、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ））、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）、薬物誘発肺傷害、急性腎傷害（ＡＫＩ）、慢性腎疾患（ＣＫＤ）、ループス腎炎、ＩｇＡ腎症、および膜性糸球体腎炎から選択される疾患または障害などを処置するための、ＰＳＭＰアンタゴニストの使用に関する。さらに他の態様では、本発明は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）または全身性エリテマトーデスを処置するためのＰＳＭＰアンタゴニストの使用に関する。

【0110】

本明細書に記載の研究により、ＰＳＭＰシグナル伝達が肝線維症、肺線維症、および腎線維症の病理発生に関与すること、ならびにｉｎ ｖｉｖｏにおいてＰＳＭＰを遮断することにより、疾患モデルにおける線維症を好転させることができることが示される。具体的には、本発明者らは、ヒト肝線維症およびマウス肝線維症においてＰＳＭＰ発現が上方調節されることを見いだした（実施例１を参照されたい）。ＰＳＭＰノックアウトマウスおよび肝線維症モデルを使用して、本発明者らは、ＰＳＭＰ欠乏により肝線維症の発生が有意に減弱すること（実施例２を参照されたい）、肝臓ＰＳＭＰ発現の回復により、肝線維症がＣＣＲ２依存的に促進されること（実施例４を参照されたい）、および、予防的または治療的処置レジメンのいずれかを使用してＰＳＭＰシグナル伝達を中和することによって肝線維症が有意に好転すること（実施例３を参照されたい）も示した。さらに、本発明者らは、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のモデルにおいて線維症を確立するためにはＰＳＭＰが必要であること（実施例８を参照されたい）、ＭＣＤ食誘発ＮＡＳＨモデルにおいて、ＰＳＭＰ欠乏により肝線維症からの保護がもたらされること（実施例１４を参照されたい）、および、ＭＣＤ食誘発ＮＡＳＨモデルにおいてＰＳＭＰを中和することにより、肝線維症が緩和されること（実施例１５を参照されたい）も示した。本発明者らは、ＰＳＭＰの中和または欠乏により、慢性エタノール給餌モデルにおける脂肪肝（ｌｉｖｅｒ ｓｔｅａｔｏｓｉｓ）および肝線維症が緩和され、また、慢性＋過度のアルコール給餌モデル（ＮＩＡＡＡモデルとも称される）における脂肪肝、肝傷害、および炎症が緩和されることも見いだした（実施例１０を参照されたい）。本明細書に記載の研究により、ＤＤＣ食誘発肝線維症モデルおよび急性肝傷害モデルにおいてＰＳＭＰが上方調節されること（実施例１１を参照されたい）、ＤＤＣモデルにおいて、ＰＳＭＰ欠乏により、肝線維症からの保護がもたらされること（実施例１２を参照されたい）、ならびに、ＰＳＭＰを中和することにより、マウスＤＤＣ誘発肝線維症が緩和されること（実施例１３を参照されたい）も示される。さらにまた、本明細書に記載の研究により、肺線維症のブレオマイシン誘発モデルにおいてＰＳＭＰが上方調節されること、このモデルにおけるＰＳＭＰ欠乏により肺線維症からの保護がもたらされること、および、ＰＳＭＰシグナル伝達の中和により、このモデルにおける肺線維症が緩和されることが示される（実施例７を参照されたい）。

【0111】

本発明者らは、ヒト腎疾患においてＰＳＭＰ発現が上方調節されること、グリセロール誘発横紋筋融解症モデルにおいて、ＰＳＭＰの欠乏および中和により、腎傷害が緩和されること、ならびに、急性腎傷害（ＡＫＩ）および慢性腎疾患のＵＵＯ誘発モデルにおいて、ＰＳＭＰの中和により腎線維症が緩和されることも見いだした（実施例１６を参照されたい）。

【0112】

本発明者らは、急性ＧＶＨＤマウスモデルにおける生存の延長によって（実施例９を参照されたい）、ならびに慢性ＧＶＨＤモデルにおける毛皮の脱落の欠如および有意に低いレベルの肝損傷マーカー（実施例１７を参照されたい）によって示される通り、ＰＳＭＰを中和することにより、移植片対宿主病を有効に処置することができることも見いだした。

【0113】

本発明者らは、マウスループスモデルにおける腎機能の改善、血清ＩｇＧレベルの低下、および糸球体内の自己抗体沈着の低減によって示される通り、ＰＳＭＰを中和することにより、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の一般的な顕在化であるループス腎炎を有効に処置することができることも見いだした（実施例１８を参照されたい）。

【0114】

本発明の範囲内での使用のためのＰＳＭＰアンタゴニストとしては、例えば、ＰＳＭＰ受容体、例えばＣＣＲ２などを発現する細胞においてＰＳＭＰに結合し、ＰＳＭＰの活性を低下させる分子が挙げられる。特に適切なＰＳＭＰアンタゴニストとしては、中和抗ＰＳＭＰ抗体が挙げられる。適切なＰＳＭＰアンタゴニストとしては、例えば、ＰＳＭＰに特異的に結合し、それを中和する代替足場タンパク質およびペプチドアプタマーを含めた、ＰＳＭＰとその受容体の相互作用を阻害することができる非抗体可溶性タンパク質も挙げられる。一部の実施形態では、ＰＳＭＰアンタゴニストは、ＰＳＭＰに特異的に結合し、それを中和する核酸アプタマーである。他の変形形態では、ＰＳＭＰとその受容体の相互作用を阻害することができるか、または他のやり方でＰＳＭＰ受容体を通じたＰＳＭＰ誘導性細胞内シグナル伝達を阻害することができる小分子アンタゴニストを用いることができる。ＰＳＭＰ遺伝子またはＰＳＭＰをコードするｍＲＮＡを標的とする阻害性ポリヌクレオチドも使用することができる。

【0115】

候補ＰＳＭＰアンタゴニスト（例えば、抗体または他の可溶性結合性タンパク質）の中和活性を、例えば、ＰＳＭＰ受容体を発現する細胞を使用した走化性アッセイにおいて評価することができる。例えば、走化性アッセイでは、ヒトＣＣＲ２のアイソフォーム（ＣＣＲ２Ａおよび／またはＣＣＲ２Ｂ、それぞれ配列番号２および配列番号３に示されるアミノ酸配列）のいずれかまたは両方を発現する細胞を利用することができる。ＣＣＲ２発現細胞を利用する走化性アッセイは当技術分野で公知である。例えば、Ｐｅｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９２： １８７８－８６， ２０１４を参照されたい。１つの例示的なアッセイでは、ＣＣＲ２Ｂ（配列番号３）を発現するプラスミド（１０μｇ）をＨＥＫ２９３細胞に電気パルス発生装置を使用した電気穿孔（１２０Ｖで２０ｍｓ）によって一過性にトランスフェクトする。４８時間後、ＣＣＲ２Ｂを発現するＨＥＫ２９３細胞を、４８ウェルマイクロ走化性チャンバーを使用した走化性アッセイに使用する。ＰＳＭＰ（配列番号１の残基３７～１３９）（７ｎｇ／ｍｌ、７０ｎｇ／ｍｌ、または７００ｎｇ／ｍｌ）を候補ＰＳＭＰアンタゴニスト（１０または５０μｇ／ｍｌ）で３０分間にわたって前処理する。フィルターの下部に遊走する細胞を固定し、Ｔｈｒｅｅ
Ｓｔｅｐ Ｓｔａｉｎ Ｓｅｔを用いて染色する。ウェル当たり５つのランダムに選択した強拡大視野（×４００）で細胞を計数する。候補アンタゴニストの存在下での、ＣＣＲ２Ｂを発現するＨＥＫ２９３細胞に向かうＰＳＭＰの走化能を、候補アンタゴニストの非存在下での走化能と比べて評価して、候補がＰＳＭＰ活性の中和に有効であるかどうかを決定する。

【0116】

一部の実施形態では、本発明によるＰＳＭＰアンタゴニストは、ＰＳＭＰ（配列番号１の残基３７～１３９）に特異的に結合する可溶性タンパク質（例えば、抗体）である。結合性タンパク質は、（１）閾値レベルの結合活性を示し、かつ（２）対照ポリペプチド分子と有意に交差反応しない場合、特異的に結合するとみなされる。例えば、結合の閾値レベルは、タンパク質がＰＳＭＰポリペプチド、ペプチドまたはエピトープに、対照（非ＰＳＭＰ）ポリペプチドに対する結合親和性の少なくとも１０倍の親和性で結合する場合に決定される。本発明の範囲内で使用される結合性タンパク質（例えば、抗体）は、１０^６Ｍ^－１またはそれよりも大きい、好ましくは１０^７Ｍ^－１またはそれよりも大きい、より好ましくは１０^８Ｍ^－１またはそれよりも大きい、最も好ましくは１０^９Ｍ^－１またはそれよりも大きい結合親和性（Ｋ_ａ）を示すことが好ましい。

【0117】

可溶性結合性タンパク質（例えば、抗体）を、結合活性について種々の公知のアッセイのいずれかを使用して評価することができる。例えば、１つのアッセイシステムでは、市販のバイオセンサー機器（ＢＩＡｃｏｒｅ（商標）、Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を用いるが、その場合、結合性タンパク質（例えば、抗ＰＳＭＰ抗体）をセンサーチップの表面に固定し、可溶性標的分子（例えば、ＰＳＭＰ）を含有する試験試料に、セルを通過させる。固定されたタンパク質が標的分子に対する親和性を有する場合、標的に結合し、媒体の屈折率の変化を引き起こし、これが金フィルムの表面プラズモン共鳴の変化として検出される。このシステムにより、会合速度および解離速度を決定し、それらから結合親和性を算出することができ、結合のストイキオメトリーを評価することが可能になる。この機器の使用は、例えば、Ｋａｒｌｓｓｏｎ （ Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ １４５： ２２９－２４０， １９９１）およびＣｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ （Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２３４： ５５４－５６３， １９９３）によって開示されている。候補タンパク質分子の結合活性を当技術分野で公知の他のアッセイシステムの範囲内で使用することもできる。そのようなシステムとしては、結合親和性を決定するためのスキャッチャード分析（Ｓｃａｔｃｈａｒｄ， Ａｎｎ． ＮＹ Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ５１： ６６０－６７２， １９４９を参照されたい）および熱量測定アッセイ（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５３： ５４５－５４８， １９９１；Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５４： ８２１－８２５， １９９１を参照されたい）が挙げられる。

【0118】

ある特定の実施形態では、ＰＳＭＰアンタゴニストは、モノクローナル抗体３Ｄ５と同じ重鎖および軽鎖可変ドメイン（ＶＨおよびＶＬ）を有する抗体とＰＳＭＰ（配列番号１の残基３７～１３９）への結合について競合する可溶性タンパク質（例えば、抗体）である。ｍＡｂ ３Ｄ５ ＶＨドメインおよびＶＬドメインのアミノ酸配列は、本明細書ではそれぞれ配列番号４および配列番号５として示されている。ｍＡｂ ３Ｄ５は、ＰＳＭＰ活性を有効に中和することが示されている。Ｐｅｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９２： １８７８－８６， ２０１４を参照されたい；実施例３、下記も参照されたい。ｍＡｂ ３Ｄ５のＶＨドメインおよびＶＬドメインを有する抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するＰＳＭＰ結合性タンパク質の能力は、試験ＰＳＭＰ結合性タンパク質（例えば、抗体）またはその機能的結合性断片により、ｍＡｂ ３Ｄ５のＶＨドメインおよびＶＬドメインを有する参照抗体（すなわち、それぞれ配列番号４および配列番号５のＶＨドメインおよびＶＬドメインを有する）のＰＳＭＰへの特異的結合を妨げるかまたは阻害するアッセイによって決定することができる。典型的には、そのようなアッセイは、標的タンパク質、標識されていない試験タンパク質（すなわち、ＰＳＭＰ結合性タンパク質または候補ＰＳＭＰ結合性タンパク質）、および標識された参照抗体を担持する固体表面または細胞に結合させた精製された標的タンパク質（例えば、配列番号１の残基３７～１３９またはその断片）の使用を伴う。競合阻害は、試験タンパク質の存在下で固体表面または細胞に結合した標識の量を決定することによって測定される。通常、試験タンパク質を過剰に存在させ、かつ／または最初に結合させる。競合アッセイによって同定される可溶性ＰＳＭＰ結合性タンパク質（「競合ＰＳＭＰ結合性タンパク質」）としては、参照抗体が結合するものと同じエピトープに結合するタンパク質、参照抗体が結合するエピトープと重複するエピトープに結合するタンパク質、および参照抗体が結合するエピトープと、立体的障害が生じるのに十分な近位にあるエピトープに結合するタンパク質が挙げられる。通常、競合ＰＳＭＰ結合性タンパク質（例えば、競合抗ＰＳＭＰ抗体）が過剰に存在する場合、競合ＰＳＭＰ結合性タンパク質（例えば、競合抗ＰＳＭＰ抗体）は、参照抗体のＰＳＭＰ標的タンパク質への特異的結合を少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、または少なくとも７５％阻害し、一部の場合では、結合は、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、またはそれよりも大きく阻害される。逆に、参照抗体が結合する場合、参照抗体は、その後添加された競合ＰＳＭＰ結合性タンパク質（例えば、競合抗ＰＳＭＰ抗体）の結合を少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、または少なくとも７５％阻害することが好ましく、一部の場合では、結合は、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、またはそれよりも大きく阻害される。

【0119】

ある特定の好ましい実施形態では、本発明に従って使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストは、抗体である。本発明による抗体は、抗原結合特異性を保持するインタクトな抗体の少なくとも一部分を含む、またはそれからなる。適切な抗体としては、例えば、完全ヒト抗体；ヒト化抗体；キメラ抗体；抗体断片、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）_２、Ｆ（ａｂ’）_２およびＦｖ抗体断片など；単鎖抗体；ならびに抗体重鎖もしくは軽鎖の単量体もしくは二量体またはそれらの混合物が挙げられる。本発明の好ましい抗体は、モノクローナル抗体である。軽鎖を含む抗体は、カッパまたはラムダ軽鎖を含み得る。

【0120】

ある特定の実施形態では、本発明の抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはＩｇＭ（そのサブタイプを含む）を含む任意のアイソタイプのインタクトな免疫グロブリンを含む。本発明によるインタクトな免疫グロブリンは、インタクトなＩｇＧ（例えば、インタクトなＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）を含むことが好ましい。

【0121】

ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、およびそれらの抗原結合性抗体断片を調製および単離するための方法は当技術分野で周知である。例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， （Ｃｏｏｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ． ｅｄｓ．， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， Ｉｎｃ． ２００６）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ （Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， ＮＹ， ２ｎｄ ｅｄ． １９８９）；およびＭｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ （Ｈｕｒｒｅｌｌ ｅｄ．， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ， Ｉｎｃ．， Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ， ＦＬ， １９８２）を参照されたい。ｓｃＦｖを含めた抗原結合性断片は、例えば、当技術分野で公知の方法に従ってファージディスプレイライブラリーを使用して調製することができる。組換えヒトポリクローナル抗体を調製するための方法は、Ｗｉｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｅｎｇ． ９４： ３９６－４０５， ２００６；Ｍｅｉｊｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ３５８： ７６４－７７２， ２００６；Ｈａｕｒｕｍ ｅｔ ａｌ．、米国特許出願公開第２００２／０００９４５３号；およびＨａｕｒｕｍ ｅｔ ａｌ．、米国特許出願公開第２００５／０１８０９６７号に開示されている。当業者には明らかになる通り、これらの方法は、ＰＳＭＰに対する抗体の作製に同等に適用可能である。

【0122】

当業者には明らかになる通り、本発明の範囲内で使用するためのポリクローナル抗体は、ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、イヌ、ニワトリ、ウサギ、マウス、およびラットなどの種々の温血動物のいずれかに免疫原性ポリペプチドまたはポリペプチド断片を接種することによって生成することができる。免疫原性ポリペプチドの免疫原性は、アラム（水酸化アルミニウム）またはフロイント完全アジュバントもしくは不完全アジュバントなどのアジュバントを使用することによって増加させることができる。免疫に有用なポリペプチドとしては、ＰＳＭＰと免疫グロブリンポリペプチドとの融合物またはＰＳＭＰとマルトース結合性タンパク質との融合物などの融合ポリペプチドも挙げられる。ポリペプチド免疫原は、全長分子またはその一部であり得る。ポリペプチド部分がハプテン様である場合、免疫のために高分子担体（例えば、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）または破傷風トキソイドなど）に有利に接合または連結することができる。

【0123】

さらに、抗体を、抗体標的に関連する既知のポリペプチド（例えば、ＰＳＭＰのオルソログ、パラログ、または配列バリアント）に対してスクリーニングして、標的タンパク質への結合に関して高度に特異的な抗体の集団を単離することができる。そのような、関連するポリペプチド分子との交差反応性がないことは、例えば、標準のウエスタンブロット分析（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ （Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ． ｅｄｓ．， Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， ＮＹ １９９３））またはＥＬＩＳＡ（酵素イムノアッセイ）（Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ， Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ （Ｃｈａｎ ｅｄ．，
Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｉｎｃ． １９８７））を使用して、抗体によりＰＳＭＰポリペプチドは検出されるが、既知の関連するポリペプチドは検出されないことによって示される。別の例では、ＰＳＭＰポリペプチドに対して生じた抗体を、不溶性マトリックスに接着させた関連するポリペプチドに吸着させる；ＰＳＭＰポリペプチドに対して高度に特異的な抗体は、相応のバッファー条件下でマトリックスを素通りする。スクリーニングにより、既知の密接に関連するポリペプチドに対して非交差反応性のポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を単離することが可能になる（Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ （Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ ｅｄｓ．， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ
１９８８）；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ （Ｃｏｏｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ． ｅｄｓ．， Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， Ｉｎｃ． １９９５））。特異的抗体のスクリーニングおよび単離は当技術分野において周知である。Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ （Ｐａｕｌ ｅｄ．， Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ １９９３）；Ｇｅｔｚｏｆｆ ｅｔ ａｌ．， Ａｄｖ． ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ４３： １－９８， １９８８；Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ （Ｇｏｄｉｎｇ ｅｄ．， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｌｔｄ． １９９６）；Ｂｅｎｊａｍｉｎ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２： ６７－１０１， １９８４を参照されたい。

【0124】

ネイティブなモノクローナル抗体（「ｍＡｂ」）は、例えば、対象動物（例えば、ラットまたはマウス）を精製された免疫原性タンパク質またはその断片を用いて免疫することによって調製することができる。典型的な手順では、動物それぞれに、精製されたタンパク質または断片の最初の腹腔内（ＩＰ）注射を、典型的にはアジュバント（例えば、完全フロイントアジュバントまたはＲＩＢＩアジュバント（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ、Ｌｏｕｉｓ、ＭＯから入手可能））と組み合わせて行い、その後、精製されたタンパク質による追加免疫ＩＰ注射を、例えば２週間の間隔で行う。第３の追加免疫注射の投与の７～１０日後に、動物から採血し、血清を収集する。必要な場合、さらなる追加免疫を行うことができる。力価が高い動物から脾細胞およびリンパ節細胞を回収し、骨髄腫細胞（例えば、マウスＳＰ２／０またはＡｇ８細胞）と従来の方法を使用して融合する。次いで、融合混合物を胸腺細胞のフィーダー層上で培養するか、または妥当な培地補充物質（Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ Ｆｕｓｉｏｎ ａｎｄ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ；Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮなどの市販の補充物質を含む）を用いて培養する。融合の約１０日後に、標準のアッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ）を使用して特異的抗体を産生するハイブリドーマプールを同定する。陽性プールを、標的タンパク質の活性を遮断するかまたは低下させるそれらの能力についてさらに分析することができる。陽性プールを限界希釈によってクローニングする。

【0125】

ネイティブな抗体のアミノ酸配列は、組換えＤＮＡ技法を適用することによって変えることができる。したがって、抗体を再設計して所望の特徴を得ることができる。改変された抗体は、例えば、その改変されていない形態と比べて安定性および／または治療有効性の改善をもたらすことができるものである。可能性のあるバリエーションは多数あり、ただ１つまたは少数のアミノ酸の変化から、例えば可変領域または定常領域の完全な再設計までにわたる。定常領域の変化は、一般に、補体結合、膜との相互作用、および他のエフェクター機能などの特徴を改善するかまたは変更するために行われる。特徴（例えば、エフェクター機能）を変更させるための定常領域の種々の変化が公知である。例えば、Ｍｏｒｇａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ８６： ３１９－３２４， １９９５；Ｌｕｎｄ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １５７： ４９６３－９ １５７： ４９６３－４９６９， １９９６；Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １６４： ４１７８－４１８４， ２０００；Ｔａｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４３： ２５９５－２６０１， １９８９；Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ １６３： ５９－７６， １９９８；Ａｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ２９： ２６１３－２６２４， １９９９；ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＧＢ９９／０１４４１号；ＵＫ特許出願第９８０９９５１．８号を参照されたい。典型的には、可変領域の変化は、抗原結合性特徴を改善するため、可変領域の安定性を改善するため、または免疫原性のリスクを低減するために行われる。ファージディスプレイ技法を用いることもできる。例えば、Ｈｕｓｅ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６： １２７５－１２８１， １９８９；Ｌａｄｎｅｒ ｅｔ ａｌ．、米国特許第５，５７１，６９８号を参照されたい。

【0126】

ヒトに使用するための治療用抗体に関しては、通常、抗体の非ヒト領域を公知の手順に従ってヒト化することが望ましい。ヒト化抗体を作出する方法は、例えば、米国特許第５，５３０，１０１号；同第５，８２１，３３７号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６２号；および同第６，１８０，３７０号に開示されている。ヒト化抗体を作出する方法は、例えば、米国特許第７，７３２，５７８号にも開示されている。典型的には、ヒト化抗ＰＳＭＰ抗体は、マウスドナー免疫グロブリンの相補性決定領域（ＣＤＲ）とヒトアクセプター免疫グロブリンの重鎖および軽鎖フレームワークとを含む。多くの場合、変更する、好ましくは抗原結合を改善するために、ヒトフレームワーク領域内のフレームワーク残基をドナー抗体由来の対応する残基で置換する。これらのフレームワーク置換は、当技術分野で周知の方法によって、例えば、ＣＤＲとフレームワーク残基の相互作用をモデル化して抗原結合のために重要なフレームワーク残基を同定し、配列を比較して、特定の位置における普通でないフレームワーク残基を同定することによって同定される。例えば、Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．、米国特許第５，５８５，０８９号；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３３２： ３２３， １９８８を参照されたい。

【0127】

非ヒト化キメラ抗体を治療的に使用することもできる（例えば、免疫抑制された患者において）。したがって、一部の変形形態では、本発明に従って使用するための抗体は、とりわけ、非ヒト抗ＰＳＭＰ抗体に由来するキメラ抗体である。好ましくは、キメラ抗体は、マウスまたはラット抗体に由来する可変領域およびヒトに由来する定常領域を含み、したがって、キメラ抗体は、ヒト対象に投与された場合に、より長い半減期を有し、免疫原性が低い。キメラ抗体を作製するための方法は当技術分野で公知である。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９： １２０２， １９８５；Ｏｉ ｅｔ ａｌ．， ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４： ２１４， １９８６；Ｇｉｌｌｉｅｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ １２５： １９１－２０２， １９８９；米国特許第５，８０７，７１５号；同第４，８１６，５６７号；および同第４，８１６，３９７号を参照されたい。

【0128】

本発明は、例えばヒト抗体発現ライブラリー（例えば、ファージディスプレイライブラリー）から選択されるもの；ヒト重鎖遺伝子座およびヒト軽鎖遺伝子座に関してトランスジェニックであり、対応する内在性免疫グロブリン遺伝子座が不活化されている非ヒト動物（例えば、マウス）において作出されるもの；またはＰＳＭＰ標的抗原に対する抗体を産生するヒトＢリンパ球を不死化することによって調製されるものなどの完全ヒト抗体の使用も包含する。

【0129】

本発明に従って使用するための抗体は、例えば、５×１０^－４Ｍ未満、１０^－４Ｍ未満、５×１０^－５Ｍ未満、１０^－５Ｍ未満、５×１０^－６Ｍ未満、１０^－６Ｍ未満、５×１０^－７Ｍ未満、１０^－７Ｍ未満、５×１０^－８Ｍ未満、１０^－８Ｍ未満、５×１０^－９Ｍ未満、１０^－９Ｍ未満、５×１０^－１０Ｍ未満、１０^－１０Ｍ未満、５×１０^－１１Ｍ未満、１０^－１１Ｍ未満、５×１０^－１２Ｍ未満、１０^－１２Ｍ未満、５×１０^－１３Ｍ未満、１０^－１３Ｍ未満、５×１０^－１４Ｍ未満、１０^－１４Ｍ未満、５×１０^－１５Ｍ未満、または１０^－１５Ｍ未満である解離定数（Ｋ_ｄ）を含む結合親和性を有する。

【0130】

本発明の抗体は、例えば、任意の型の分子を抗体に、共有結合による付着により、抗体のそのエピトープへの結合が妨げられないように共有結合により付着させることによって修飾された誘導体をさらに含む。適切な修飾としては、例えば、フコシル化、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、およびアミド化が挙げられる。抗体およびその誘導体は、公知の保護基／ブロック基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ／ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）、タンパク質分解による切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質への連結などによってそれ自体を誘導体化することができる（ｍａｙ ｔｈｅｍｓｅｌｖｅｓ ｂｙ ｄｅｒｉｖａｔｉｚｅｄ）。本発明の一部の実施形態では、抗体の重鎖の少なくとも１つがフコシル化されている。特定の変形形態では、フコシル化はＮ結合である。ある特定の実施形態では、抗体の重鎖の少なくとも１つは、フコシル化されたＮ結合オリゴ糖を含む。

【0131】

本発明に従って使用するための抗体は、参照抗体と比べて、参照抗体の１つまたは複数の生物学的特性が保持されるような、１つまたは複数のアミノ酸置換、欠失、または付加を有するバリアントを含む。ある特定の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号４および配列番号５に示されるＶＨおよび／またはＶＬ配列を有する参照抗ＰＳＭＰ中和抗体と比べて、参照抗体のＰＳＭＰに特異的に結合し、ＰＳＭＰ活性を中和する能力が保持されるような、１つまたは複数のアミノ酸置換、欠失、または付加を有するバリアントである。当業者は、参照抗体と比べて１つまたは複数のアミノ酸置換、欠失、または付加を有するバリアントを容易に作製することができる。遺伝学的技法（抑制、欠失、変異など）、化学的技法、および酵素的技法を含めたこれらのバリアントを得るための技法は当業者には公知である。

【0132】

一部の実施形態では、本発明に従って使用するための中和抗ＰＳＭＰ抗体は、抗ＰＳＭＰ ｍＡｂ ３Ｄ５の１つまたは複数のＣＤＲを含む。したがって、ある特定の変形形態では、抗体は、３Ｄ５ ＶＨドメイン（配列番号４）の重鎖ＣＤＲ（ＣＤＲ－Ｈ１領域、ＣＤＲ－Ｈ２領域、およびＣＤＲ－Ｈ３領域のうちの少なくとも１つ）ならびに／または３Ｄ５ ＶＬドメイン（配列番号５）の軽鎖ＣＤＲ（ＣＤＲ－Ｌ１領域、ＣＤＲ－Ｌ２領域、およびＣＤＲ－Ｌ３領域のうちの少なくとも１つ）を含む。典型的な実施形態では、抗体は、３Ｄ５ ＶＨドメイン（配列番号４）のＣＤＲの２つもしくは３つおよび／または３Ｄ５ ＶＬドメイン（配列番号５）のＣＤＲの２つもしくは３つを有する。一部の変形形態では、抗体が３Ｄ５ ＶＨドメインのＣＤＲの少なくとも１つを有する場合、抗体は、３Ｄ５ ＶＬドメインのＣＤＲの少なくとも１つをさらに含む；一部のそのような実施形態では、抗体は、ｍＡｂ ３Ｄ５の３つの重鎖ＣＤＲ全ておよび３つの軽鎖ＣＤＲの全て（すなわち、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、およびＣＤＲ－Ｈ３ならびに配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、およびＣＤＲ－Ｌ３）を有する。１つまたは複数のＣＤＲは、例えば、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものであり得る。ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義の下では、ｍＡｂ ３Ｄ５のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、およびＣＤＲ－Ｈ３は、それぞれ配列番号４の残基３１～３５、５０～６９、および９９～１０８に対応し、ｍＡｂ ３Ｄ５のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、およびＣＤＲ－Ｌ３は、それぞれ配列番号５の残基２４～３４、５０～５６、および８９～９７に対応する。上記の抗体の特定の変形形態では、抗体は、ヒト免疫グロブリンフレームワーク領域、またはヒト免疫グロブリンフレームワーク領域に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％アミノ酸配列同一性を有するそのバリアントを有するＶＨドメインおよび／またはＶＬドメインを含む。

【0133】

一部の実施形態では、抗ＰＳＭＰ抗体は、（ａ）配列番号４のアミノ酸配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一である重鎖可変ドメイン、および／または（ｂ）配列番号５のアミノ酸配列と少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一である軽鎖可変ドメインを含む。

【0134】

一部の実施形態では、本発明に従って使用するための抗ＰＳＭＰ抗体は、重鎖ＣＤＲであるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含み、ＣＤＲのうちの少なくとも１つは、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べてアミノ酸置換をゼロから３つまで含む。ここで、参照ＣＤＲは、それぞれ、３Ｄ５ ＶＨドメイン（配列番号４）のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、およびＣＤＲ－Ｈ３である。他の実施形態では、本発明に従って使用するための抗ＰＳＭＰ抗体は、軽鎖ＣＤＲであるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含み、ＣＤＲのうちの少なくとも１つは、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べてアミノ酸置換をゼロから３つまで含む。ここで、参照ＣＤＲは、それぞれ、３Ｄ５ ＶＬドメイン（配列番号５）のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、およびＣＤＲ－Ｌ３である。ある特定の実施形態では、抗ＰＳＭＰ抗体は、上記の重鎖ＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲのセットの両方を含む。特に適切なＰＳＭＰ抗体は、ＣＤＲであるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含む重鎖可変ドメインと、ＣＤＲであるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含む軽鎖可変ドメインとを含み、重鎖ＣＤＲのセットは、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて６つまたはそれよりも少ない、典型的には５つまたはそれよりも少ない、より典型的には４つまたはそれよりも少ない、最も典型的には３つまたはそれよりも少ないアミノ酸置換を有し、軽鎖ＣＤＲのセットは、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて６つまたはそれよりも少ない、典型的には５つまたはそれよりも少ない、より典型的には４つまたはそれよりも少ない、最も典型的には３つまたはそれよりも少ないアミノ酸置換を有する。上記のＣＤＲは、例えば、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものであり得る。上記の抗体の特定の変形形態では、ＶＨドメインおよびＶＬドメインは、それぞれがヒト免疫グロブリンフレームワーク領域、またはヒト免疫グロブリンフレームワーク領域に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％アミノ酸配列同一性を有するそのバリアントを有する。

【0135】

本発明に従って使用するための抗ＰＳＭＰ抗体は、親和性成熟した実施形態を含む。親和性成熟した抗体は、当技術分野で公知の手順によって作製することができる。例えば、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０： ７７９－７８３， １９９２；Ｂａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ Ｎａｔ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９１： ３８０９－３８１３， １９９４；Ｓｃｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｇｅｎｅ １６９： １４７－１５５， １９９５；Ｙｅｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，
Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １５５： １９９４－２００４， １９９５；Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １５４： ３３１０－９， １９９５；Ｈａｗｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２２６： ８８９－８９６， １９９２；およびＰＣＴ公開番号第ＷＯ２００４／０５８１８４号を参照されたい。一部の実施形態では、抗ＰＳＭＰ抗体は、ｍＡｂ ３Ｄ５の１つまたは複数のＣＤＲを含む抗体の親和性成熟によって得られる（例えば、（ｉ）配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、およびＣＤＲ－Ｈ３を有するＶＨドメインと（ｉｉ）配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、およびＣＤＲ－Ｌ３を有するＶＬドメインとを含む抗体の親和性成熟によって得られる）；一部のそのような変形形態では、ＣＤＲは、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである。

【0136】

抗体の親和性を調整するための１つの方法は、「ライブラリースキャニング変異誘発」と称される。一般に、ライブラリースキャニング変異誘発は、以下の通り行われる。当技術分野において認められている方法を使用し、少なくとも１つのＣＤＲ（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＣＤＲ）の１つまたは複数のアミノ酸位を、２個またはそれよりも多く（例えば、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、または２０個）のアミノ酸で置き換える。これにより、クローンの小さなライブラリー（一部の実施形態では、分析されるアミノ酸位毎に１つ）が生成され、それぞれが、２つまたはそれよりも多くのメンバーという複雑さを有する（位置毎に２個またはそれよりも多くのアミノ酸が置換される場合）。一般に、ライブラリーは、ネイティブな（非置換型）アミノ酸を含むクローンも含む。各ライブラリーからの少数のクローン、例えば、約２０～８０クローン（ライブラリーの複雑さに応じて）を、標的ポリペプチド（または他の結合標的）に対する結合親和性についてスクリーニングし、結合の増加を有する、同じ結合を有する、減少した結合を有する、または結合を有さない候補を同定する。結合親和性は、例えば、約２倍またはそれよりも大きい結合親和性の差異を検出するＢｉａｃｏｒｅ（商標）表面プラズモン共鳴分析を使用して決定することができる。Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）は、出発抗体がすでに比較的高い親和性、例えば約１０ｎＭまたはそれ未満のＫ_Ｄで結合するものである場合に特に有用である。

【0137】

本発明の一部の実施形態では、抗体は、免疫グロブリン定常領域（例えば、免疫グロブリン重鎖定常領域、例えば、Ｆｃ領域など）を含む。一部のそのような実施形態では、定常領域は、例えば、ヒトＦｃガンマ受容体に対して増加したもしくは減少した親和性を有するか、または以下の任意の１つまたは複数に関する活性が低下している（改変されていない抗体と比較して）定常領域などの、天然に存在する（例えば、野生型）定常領域のバリアントである：補体媒介性溶解の誘発、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）の刺激、またはミクログリアの活性化。定常領域の種々の改変を使用して、エフェクター機能の最適なレベルおよび／または組合せを実現することができる。例えば、Ｍｏｒｇａｎ
ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ８６： ３１９－３２４， １９９５；Ｌｕｎｄ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １５７： ４９６３－９ １５７： ４９６３－４９６９， １９９６；Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １６４： ４１７８－４１８４， ２０００；Ｔａｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４３： ２５９５－２６０１， １９８９；およびＪｅｆｆｅｒｉｓ ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ １６３： ５９－７６， １９９８を参照されたい。一部の実施形態では、定常領域をＡｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ２９： ２６１３－２６２４， １９９９；ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＧＢ９９／０１４４１号、および／またはＵＫ特許出願第９８０９９５１．８号に記載されている通り改変する。他の実施形態では、定常領域をＮ結合グリコシル化について脱グリコシル化する。一部の実施形態では、定常領域をＮ結合グリコシル化について、定常領域内のグリコシル化されたアミノ酸残基またはＮ－グリコシル化認識配列の一部である隣接する残基を変異させることによって脱グリコシル化する。例えば、Ｎ－グリコシル化部位Ｎ２９７をＡ、Ｑ、Ｋ、またはＨに変異させることができる。Ｔａｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４３： ２５９５－２６０１， １９８９；Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ １６３： ５９－７６， １９９８を参照されたい。定常領域をＮ結合グリコシル化について酵素的に（例えば、炭水化物を酵素ＰＮＧアーゼによって除去するなど）、またはグリコシル化欠乏宿主細胞において発現することによって脱グリコシル化することもできる。他の適切なバリアント定常領域は、ＦｃＲｎおよびＦｃγＲＩＩｂ結合活性を保持し、標的の有意な補体依存性溶解または細胞媒介性破壊を誘発しない２つまたはそれよりも多くのヒト免疫グロブリン重鎖ＣＨ２ドメインに由来するキメラドメインに基づく配列を含む。ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／５８５７２号の記載を参照されたい。

【0138】

一部の実施形態では、本発明に従って使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストは、代替足場に基づく非抗体タンパク質である。例えば、Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２３： １５５６－６１， ２００５；Ｚａｈｎｄ
ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ３６９： １０１５－２８， ２００７；米国特許第７，１１５，３９６号；Ｂｉｎｚ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２３： １２５７－１２６８， ２００５；Ｓｋｅｒｒａ， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ． ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ． １８： ２９５－３０４， ２００７；Ｓｉｌａｃｃｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２８９： １４３９２－１４３９８， ２０１４を参照されたい。一部の実施形態では、代替足場アンタゴニストは、ＰＳＭＰに特異的に結合し、それを中和する。特定の変形形態では、代替足場ＰＳＭＰアンタゴニストは、Ａｄｎｅｃｔｉｎ（商標）、ｉＭａｂ、リポカリン、Ｋｕｎｉｔｚドメイン、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）、アンキリンリピート、Ａｆｆｌｉｎ、Ｔｅｔｒａｎｅｃｔｉｎ、Ｆｙｎｏｍｅｒ、またはＡｖｉｍｅｒタンパク質である。代替足場に基づくＰＳＭＰ結合性タンパク質は、例えば、代替足場フレームワーク内に１つまたは複数のランダム化またはセミランダム化された領域を含む発現ライブラリー（例えば、ファージディスプレイ、リボソームディスプレイ）をスクリーニングすることによって調製することができる。例えば、Ｋｏｉｄｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２８４： １１４１－１１５１， １９９８；Ｚａｈｎｄ ｅｔ ａｌ．、上記を参照されたい。

【0139】

他の実施形態では、本発明に従って使用するためのＰＳＭＰアンタゴニストは、ペプチドアプタマー（例えば、ＰＳＭＰに特異的に結合し、それを中和するペプチドアプタマー）である。ペプチドアプタマーは、一般に、典型的には小さく安定なタンパク質足場内にループとして包埋した可変ペプチドループ（例えば、約５～２０アミノ酸）からなる。ペプチドアプタマーは、アプタマーを特異的な標的との結合親和性についてランダムなプールまたはペプチドライブラリーから選択することによって調製することができる。例えば、ペプチドアプタマーは、酵母ツーハイブリッドスクリーニングによってランダムなペプチドライブラリーから（例えば、Ｘｕ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９４： １２４７３， １９９７を参照されたい）、またはファージディスプレイライブラリーから単離することができる。ペプチドアプタマーは、例えば、Ｒｅｖｅｒｄａｔｔｏ ｅｔ ａｌ．， Ｃｕｒｒ． Ｔｏｐ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １５： １０８２－１１０１， ２０１５において総説されている。

【0140】

さらに他の実施形態では、ＰＳＭＰアンタゴニストは、核酸アプタマー（例えば、ＰＳＭＰに特異的に結合し、それを中和する核酸アプタマー）である。一般に、核酸アプタマーは、特異的な三次元構造に起因して標的に高い親和性および特異性で結合することができる、リボ核酸（ＲＮＡ）または一本鎖デオキシリボ核酸（ｓｓＤＮＡ）などのオリゴヌクレオチドである。標的高分子に特異的に結合する核酸アプタマーは、そのようなオリゴマーのライブラリーからＳＥＬＥＸなどの技術によって容易に単離することができる。例えば、Ｓｔｏｌｔｅｎｂｕｒｇ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉａｍａｌ． Ｅｎｇ． ２４： ３８１， ２００７を参照されたい。核酸アプタマーは、例えば、Ｎｉ ｅｔ ａｌ．，
Ｃｕｒｒ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １８： ４２０６－４２１４， ２０１１；およびＥｓｐｏｓｉｔｏ ｅｔ ａｌ．， Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １１：
４８７－４９６， ２０１１において総説されている。

【0141】

本発明のある特定の態様に従って、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して肝線維症を処置する。一部の実施形態では、処置される肝線維症は肝硬変に進行している。他の相互排他的でない実施形態では、線維症は、肝臓の線維症によって特徴付けられるかまたはそれをもたらすことが分かっている疾患または障害に関連するものである。例えば、処置される肝線維症は、慢性的なアルコールの乱用（例えば、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、アルコール性肝炎、アルコール性肝硬変）、慢性ウイルス性肝炎（例えば、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、もしくはＤ型肝炎）、肝臓内の脂肪の蓄積（非アルコール性脂肪性肝疾患（例えば、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ））、体内の鉄の蓄積（ヘモクロマトーシス）、嚢胞性線維症、肝臓内の銅の蓄積（ウィルソン病）、形成不良の胆管（胆道閉鎖症）、アルファ１抗トリプシン欠損症、糖代謝の遺伝性障害（例えば、ガラクトース血症、糖原病）、遺伝性消化系障害（例えば、アラジール症候群）、自己免疫性肝疾患（例えば、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ、以前は原発性胆汁性肝硬変として公知）、感染症（例えば、梅毒、ブルセラ症）、薬物誘発肝傷害（例えば、メトトレキセート誘発もしくはイソニアジド誘発肝臓傷害）、またはバッドキアリ症候群に関連するものであり得る。

【0142】

本発明の他の態様に従って、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して肺（ｌｕｎｇ（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ））線維症を処置する。一部の実施形態では、線維症は、肺の線維症によって特徴付けられるかまたはそれをもたらすことが分かっている疾患または障害に関連するものである。例えば、処置される肺線維症は、皮膚筋炎、多発性筋炎、混合性結合組織疾患、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、肺炎、慢性放射線肺炎、塵肺症、感染症、または薬物誘発肺傷害に関連するものであり得る。肺線維症が塵肺症に関連するものである一部の実施形態では、塵肺症は、シリカ粉塵、アスベスト繊維、超硬合金粉塵、炭塵、穀物粉塵、または鳥類もしくは動物の糞便への曝露によって引き起こされるかまたは悪化するものである。肺線維症が薬物誘発肺傷害に関連するものである一部の実施形態では、肺傷害は、化学療法薬（例えば、メトトレキセート、シクロホスファミド）、心臓医薬（例えば、不整脈を処置するために使用される薬物、例えばアミオダロンなど）、抗生物質（例えば、ニトロフラントイン、エタンブトール）、または抗炎症薬（例えば、リツキシマブ、スルファサラジン）によって誘発される。

【0143】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を処置する。一部のそのような変形形態では、ＮＡＦＬＤは、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である。

【0144】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用してアルコール性肝疾患（ＡＬＤ）を処置する。

【0145】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）を処置する。

【0146】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）を処置する。

【0147】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して腎線維症を処置する。一部の実施形態では、線維症は、腎臓の線維症によって特徴付けられるかまたはそれをもたらすことが分かっている疾患または障害に関連するものである。例えば、処置される腎線維症は、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症；コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性もしくは亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性もしくは血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、または閉塞性腎症に関連するものであり得る。

【0148】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して急性腎傷害（ＡＫＩ）または慢性腎疾患（ＣＫＤ）を処置する。ＰＳＭＰアンタゴニストを使用してＣＫＤを処置する一部の実施形態では、ＣＫＤは、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症；コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性もしくは亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性もしくは血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、または閉塞性腎症によって引き起こされるものである。

【0149】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を処置する。一部の実施形態では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して急性ＧＶＨＤ（ａＧＶＨＤ）を処置する。他の実施形態では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して慢性ＧＶＨＤ（ｃＧＶＨＤ）を処置する。

【0150】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を処置する。

【0151】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用してループス腎炎を処置する。

【0152】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用してＩｇＡ腎症を処置する。

【0153】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して膜性糸球体腎炎を処置する。

【0154】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して肝線維症に関連する疾患または障害、例えば、慢性的なアルコールの乱用（例えば、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、アルコール性肝炎、アルコール性肝硬変）、慢性ウイルス性肝炎（例えば、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、またはＤ型肝炎）、肝臓内の脂肪の蓄積（非アルコール性脂肪性肝疾患（例えば、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ））、体内の鉄の蓄積（ヘモクロマトーシス）、嚢胞性線維症、肝臓内の銅の蓄積（ウィルソン病）、形成不良の胆管（胆道閉鎖症）、アルファ１抗トリプシン欠損症、糖代謝の遺伝性障害（例えば、ガラクトース血症、糖原病）、遺伝性消化系障害（例えば、アラジール症候群）、自己免疫性肝疾患（例えば、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ、以前は原発性胆汁性肝硬変として公知）、感染症（例えば、梅毒、ブルセラ症）、薬物誘発肝傷害（例えば、メトトレキセート誘発もしくはイソニアジド誘発肝臓傷害）、またはバッドキアリ症候群などを処置する。

【0155】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して肺線維症に関連する疾患または障害、例えば、皮膚筋炎、多発性筋炎、混合性結合組織疾患、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、肺炎、慢性放射線肺炎、塵肺症、感染症、または薬物誘発肺傷害などを処置する。ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して塵肺症を処置する一部の実施形態では、塵肺症は、シリカ粉塵、アスベスト繊維、超硬合金粉塵、炭塵、穀物粉塵、または鳥類もしくは動物の糞便への曝露によって引き起こされるかまたは悪化するものである。ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して薬物誘発肺傷害を処置する一部の実施形態では、肺傷害は、化学療法薬（例えば、メトトレキセート、シクロホスファミド、ブレオマイシン）、心臓医薬（例えば、不整脈を処置するために使用される薬物、例えばアミオダロンなど）、抗生物質（例えば、ニトロフラントイン、エタンブトール）、または抗炎症薬（例えば、リツキシマブ、スルファサラジン）によって誘発されるものである。

【0156】

本発明のさらに他の態様では、ＰＳＭＰアンタゴニストを使用して腎線維症に関連する疾患または障害、例えば、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症；コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性もしくは亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性もしくは血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、または閉塞性腎症などを処置する。

【0157】

本明細書に記載の処置方法の実施形態のそれぞれでは、ＰＳＭＰアンタゴニストを、処置が探求されている疾患または障害の管理に関連する従来の方法体系と一致した様式で送達する。本明細書の開示に従って、有効量のアンタゴニストを、そのような処置を必要とする対象に、疾患または障害を処置するために十分な時間にわたって、それに十分な条件下で投与する。

【0158】

本明細書に記載のＰＳＭＰアンタゴニストを投与する対象は、特定の疾患または障害（例えば、肝線維症、肺線維症、腎線維症、または肝線維症もしくは肺線維症に関連する疾患もしくは障害）が発生するリスクが高い患者、および既存の疾患または障害を示している患者を含む。ある特定の実施形態では、対象は、処置が探求されている疾患または障害を有すると診断されている。さらに、対象を、処置の過程中、疾患または障害のあらゆる変化について（例えば、疾患または障害の臨床症状の増加または減少について）モニタリングすることができる。また、一部の変形形態では、対象は、ＰＳＭＰシグナル伝達経路の阻害をもたらす処置が必要な別の疾患や障害に罹患していない。

【0159】

予防的適用では、医薬組成物または医薬品（ｍｅｄｉｃａｎｔ）を、特定の疾患または障害にかかりやすいか、または他の点でそのリスクがある患者に、疾患または障害のリスクを排除もしくは低減するか、または発症を遅延させるために十分な量で投与する。治療的適用では、組成物または医薬品を、そのような疾患に罹患している疑いがあるか、またはすでに罹患している患者に、疾患または障害およびその合併症の症状を治癒するかまたは少なくとも部分的に停止させるために十分な量で投与する。これを実現するために適した量は、治療的にまたは薬学的に有効な用量または量と称される。予防的レジームおよび治療的レジームのどちらにおいても、薬剤は通常、十分な応答（例えば、線維症または線維症のバイオマーカーの阻害）が実現されるまで、数回の投薬で投与される。典型的には、応答をモニタリングし、所望の応答が消え始めたら繰り返し投薬を行う。

【0160】

本発明の方法に従った処置の対象患者を同定するために、許容されるスクリーニング方法を用いて、特定の疾患もしくは障害の関連する危険因子を決定すること、または対象において同定された既存の疾患もしくは障害の状態を決定することができる。そのような方法は、例えば、特定の疾患を有すると診断された親類を有するかどうかを決定することを含み得る。スクリーニング方法は、例えば、遺伝性成分（ｈｅｒｉｔａｂｌｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）を有することが公知の特定の疾患に関する家族性の状態を決定するための従来のワークアップも含み得る。例えば、種々の肝疾患が、ある特定の遺伝性成分（ｉｎｈｅｒｉｔａｂｌｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）を有することも公知である。例えば、Ｓｃｏｒｚａ ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， Ｖｏｌｕｍｅ ２０１４， Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ ７１３７５４， １１ ｐａｇｅｓ （ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｅｆｅｃｔｓ ｃａｕｓｉｎｇ ｅａｒｌｙ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｉｖｅｒ ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ）；Ｓｅｖｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｗｏｒｌｄ Ｊ． Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ． ２２： ６７４２－６７５６， ２０１６ （ｇｅｎｅｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ）を参照されたい。この目的で、分子診断アッセイ（例えば、核酸に基づく診断アッセイ）を常套的に用いて、目的の疾患に関連する遺伝子マーカーを有する個体を同定することができる。既知の患者の総体症状（ｓｙｍｐｔｏｍｏｌｏｇｙ）、年齢因子、関連する危険因子などによって示される通りスクリーニングを実行することもできる。これらの方法により、臨床医が、本明細書に記載の処置方法を必要としている患者を常套的に選択することが可能になる。これらの方法に従って、ＰＳＭＰアンタゴニストの投与を、独立した処置プログラムとして、または他の処置に対するフォローアップ、補助、もしくは調整処置レジメンとして実行することができる。

【0161】

投与のために、ＰＳＭＰアンタゴニストを医薬組成物として製剤化する。ＰＳＭＰアンタゴニストを含む医薬組成物は、治療用分子を薬学的に許容される担体と組み合わせて混合物にする、薬学的に有用な組成物を調製するための公知の方法に従って製剤化することができる。組成物は、活性成分と組み合わせた場合に、活性成分が生物活性を保持することを可能にするものであり、また、その投与をレシピエント患者が許容できるものであれば、「薬学的に許容される担体」であると言える。例としては、これだけに限定されないが、リン酸緩衝食塩水溶液、水、油／水エマルションなどのエマルション、および種々の型の湿潤剤などの標準の医薬担体のいずれかが挙げられる。エアロゾルまたは非経口投与に好ましい希釈剤は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）またはノーマルセーライン（０．９％）である。そのような担体を含む組成物は、周知の従来の方法によって製剤化される（例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ （ｅｄ）．， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， １９ｔｈ ｅｄ． １９９５）；Ａｌｌｅｎ （ｅｄ）．， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ （Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃ Ｐｒｅｓｓ， ２２ｎｄ ｒｅｖｉｓｅｄ ｅｄ）を参照されたい）。製剤は、１種または複数種の賦形剤、保存剤、可溶化剤、緩衝剤、バイアル表面でのタンパク質喪失を防ぐためのアルブミンなどをさらに含み得る。単一特異性のアンタゴニストを個別に製剤化すること、または複合製剤として提供することができる。

【0162】

ＰＳＭＰアンタゴニストを含む医薬組成物を対象に有効量で投与する。本発明の方法に従って、アンタゴニストを対象に、例えば、筋肉内、皮下、静脈内、心房内、関節内、非経口、鼻腔内、肺内、経皮、胸膜内、髄腔内、および経口投与経路によるものを含めた種々の投与形式によって投与することができる。防止および処置目的で、アンタゴニストを対象に、単回のボーラス送達で、長期間にわたる連続的な送達（例えば、連続的な経皮送達）によって、または繰り返し投与プロトコールで（例えば、毎時、毎日、もしくは毎週のように）投与することができる。正確な用量は、臨床医により、処置される状態の性質および重症度、患者の体質などを考慮に入れて、許容される標準に従って決定される。用量の決定は、当技術分野における通常の技術のレベルの範囲内に入る。

【0163】

これに関連した有効な投与量の決定は、典型的には、動物モデル研究、ヒト臨床試験による追跡調査に基づき、モデル対象における対象疾患または障害の発生または重症度を有意に低下させる有効な投与量および投与プロトコールを決定することによってガイドされる。本発明の組成物の有効用量は、投与手段、標的部位、患者の生理的状態、患者がヒトであるか動物であるか、投与される他の医薬、処置が予防的なものであるか治療的なものであるか、ならびに組成物自体の特定の活性および個体において所望の応答を引き出す能力を含めた多くの異なる因子に応じて変動する。通常、患者はヒトであるが、一部の疾患では、患者は非ヒト哺乳動物であり得る。典型的には、投与量レジメンは、最適な治療応答がもたらされるように、すなわち、安全性および有効性が最適化されるように調整される。したがって、治療的にまたは予防的に有効な量はまた、あらゆる望ましくない副次作用よりも有益な効果が上回る量でもある。ＰＳＭＰアンタゴニストの投与に関しては、投与量は、典型的には、対象の体重１ｋｇ当たり約０．１μｇから１００ｍｇまで、または１μｇから約５０ｍｇまで、より通常には１０μｇから５ｍｇまでにわたる。より具体的な実施形態では、薬剤の有効量は、約１μｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇの間、約１０μｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇの間、または約０．１ｍｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇの間である。この範囲内の投与量は、単回投与、または、例えば、１日当たりまたは毎日、毎週、隔週、または毎月の投与の複数回投与を含めた複数回投与によって実現することができる。例えば、ある特定の変形形態では、レジメンは、最初の投与と、それに続く毎週または隔週の間隔での複数回のその後の投与とからなる。別のレジメンは、最初の投与と、それに続く、毎月または隔月の間隔での複数回のその後の投与とからなる。あるいは、投与は、線維症および／または疾患もしくは障害の臨床症状のモニタリングによって示される通りに、不規則ベースであり得る。

【0164】

肝線維症、肺線維症、または腎線維症の処置に関するＰＳＭＰアンタゴニストの有効性を評価するための特に適切な動物モデルは、一般に、当技術分野で公知である。例えば、肝線維症のモデルの１つでは、ＣＣＬ_４注射を使用する。例えば、Ｙｏｕ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌ． Ｍｅｄ． Ｒｅｐ． １２： ５５９４－５６００， ２０１５を参照されたい。ＣＣＬ_４毒性肝線維症を、例えば６～８週齢の雄マウスにおいて、ＣＣｌ_４（例えば、体重１ｋｇ当たり１．０ｍｌ、トウモロコシ油中に１：９の比で溶解させたもの）を週に２回、４週間または６週間にわたって腹腔内（ｉ．ｐ．）注射することによって誘発することができる。別の例示的な肝線維症のモデルでは、マウスにおいて胆管結紮（ＢＤＬ）を使用して胆汁うっ滞を誘発する。例えば、Ｙｏｎｇｐｉｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ． １６９： ２００ ２０９， ２０１５を参照されたい。このモデルを使用すると、マウス（例えば、６～８週齢の雄マウス）において総胆管結紮後ある期間（例えば、１４日間）にわたって胆汁うっ滞および付随する線維症が発生する。

【0165】

肺線維症の適切なモデルの１つは、ブレオマイシン誘発肺線維症モデルである。例えば、Ｒａｎｇａｒａｊａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｍｅｄ． ８： １１２１－１１２７， ２０１８；ｄｏｉ： １０．１０３８／ｓ４１５９１－０１８－００８７－６を参照されたい。ブレオマイシン誘発肺線維症に関しては、マウス（例えば、６～８週齢の雌Ｃ５７Ｂｌ／６Ｊマウス）に麻酔をかけた後、気管切開を行い、ブレオマイシンを注射し（例えば、３．５Ｕ／ｋｇのブレオマイシンを含有する単回注射液）、注射後、ある期間（例えば、１４日間）で肺線維症が発生する。

【0166】

腎（ｋｉｄｎｅｙ、ｒｅｎａｌ）線維症の適切なモデルは、尿流が妨げられた結果としての尿細管の傷害によって腎線維症が引き起こされた、片側性尿管閉塞（ＵＵＯ）モデルである。例えば、Ｅｌｅｎａ Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ｋｌｉｍｏｖａ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ９： １４１， ２０１９を参照されたい。

【0167】

肝線維症、肺線維症、または腎線維症に関連する疾患または障害の動物モデルも公知である。アルコール性肝線維症の例示的なモデルは、例えば、Ａｍｂａｄｅ ｅｔ ａｌ．
（Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２０１８， ｄｏｉ： １０．１００２／ｈｅｐ．３０２４９）によって記載されている。非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）に関しては、種々の食餌性、化学的、および遺伝モデルを使用することができる。一般に、例えば、Ｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ， ２２， １７０７， ２０１７を参照されたい。例えば、ＮＡＳＨモデルの１つは、ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）を高脂肪食（ＨＦＤ）と共に投与することによる化学的攻撃と食餌性攻撃の複合モデルである。ＳＴＺ－ＨＦＤモデルでは、ＳＴＺの注射（例えば、生後２日の雄マウスへのＳＴＺ、２００μｇの単回皮下注射）および典型的には４週齢後に８週間にわたってＨＦＤを自由に給餌することによってＮＡＳＨを誘発する。別の例示的なＮＡＳＨモデルは、栄養欠乏食餌モデル － 前臨床ＮＡＳＨ研究において一般に使用されるメチオニン－コリン欠乏（ＭＣＤ）モデルである。ＭＣＤモデルでは、ＭＣＤを自由に給餌することによってＮＡＳＨを誘発させる。典型的には、ＭＣＤマウスにおいて１～３週間食物を与えた後に肝臓大滴性脂肪症および炎症細胞の浸潤が発生し、第５週から第７週までに頑強な類洞周囲線維症が生じる。原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）および原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）などの胆汁うっ滞性疾患に関しては、３，５－ジエトキシカルボニル－１，４－ジヒドロコリジン（ＤＤＣ）の慢性給餌が例示的なモデルである。

【0168】

急性腎傷害（ＡＫＩ）および慢性腎疾患（ＣＫＤ）を研究するために使用される最も一般的な齧歯類モデルは腎線維症の片側性尿管閉塞（ＵＵＯ）モデル（Ｅｌｅｎａ Ｍａｒｔｉｎｅｚ－Ｋｌｉｍｏｖａ ｅｔ ａｌ．、上記を参照されたい）である。さらに、横紋筋融解症後のＡＫＩの一般的なマウスモデルは、脚の筋肉へのグリセロールの注射である。例えば、Ｙａｎｑｉｕ ｅｔ ａｌ．， Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＆ Ｔｈｅｒａｐｙ ５： ８０， ２０１４を参照されたい。ループス腎炎に関してはＤＢＡ／２→Ｂ６Ｄ２Ｆ１モデルが周知のモデルであり、このモデルでは、ＤＢＡ／２マウス脾臓細胞をＢ６Ｄ２Ｆ１マウスに輸注する。例えば、Ｖｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３９： １８４０－１８４９， １９８７を参照されたい。

【0169】

ＧＶＨＤの処置に関するＰＳＭＰアンタゴニストの有効性を評価するための動物モデルも一般に公知である。一般に、例えば、Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｄｉｓ．
Ｍｏｄｅｌ Ｍｅｃｈ． ４： ３１８－３３３， ２０１１を参照されたい。例示的な急性ＧＶＨＤ（ａＧＶＨＤ）モデルの１つでは、ＢＡＢＬ／ｃマウス（例えば、６～８週齢の雄）がレシピエントとして働き、Ｃ５７ＢＬ／６マウスがドナーになる。Ｃ５７ＢＬ／６マウス由来の脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞および骨髄細胞をマウスの屠殺後に分離する。細胞注入前（例えば、１２時間前）に、レシピエントマウスを放射線に曝露させる（例えば、それぞれ４Ｇｙの２回Ｃｏ^６０線量、合計８Ｇｙ）。ＣＤ３＋細胞と骨髄細胞を例えば５×１０^６対１×１０^７の比で混合し、次いで、ＢＡＢＬ／ｃマウスに静脈内注射する。典型的には注入から１カ月と定義されるａＧＶＨＤ期間中、マウスの体重および生存率を２日毎にモニタリングする。さらに、周知の慢性ＧＶＨＤ（ｃＧＶＨＤ）マウスモデルは、ＤＢＡ／２マウス脾臓細胞をＢ６Ｄ２Ｆ１マウスに輸注することによって確立されたＤＢＡ／２→Ｂ６Ｄ２Ｆ１モデルである（全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）およびループス腎炎のモデルでもある、例えば、Ｖｉａ ｅｔ ａｌ．、上記を参照されたい）。一般に、例えば、Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １８１： ７３８０－７３８９， ２００８を参照されたい。

【0170】

医薬組成物の投与量は、標的部位において所望の濃度が維持されるように、担当臨床医が変動させることができる。例えば、静脈内方式の送達を選択する場合、標的組織における血流中の薬剤の局所濃度は、対象の状態および予測される測定される応答に応じて、１リットル当たり約１～５０ナノモルの組成物、時には１リットル当たり約１．０ナノモルから１リットル当たり１０ナノモル、１５ナノモル、または２５ナノモルの間になり得る。例えば、経表皮送達とそれに対して粘膜表面への送達など、送達方式に基づいて、より高いまたは低い濃度を選択することができる。投与量は、例えば、経鼻スプレーとそれに対して、粉剤・散剤（ｐｏｗｄｅｒ）、持続放出経口または注射用粒子、経皮用製剤など、投与される製剤の放出速度に基づいても調整すべきである。同じ血清中濃度レベルを達成するために、例えば、放出量が５ナノモル濃度（標準の条件下で）である徐放粒子は、放出量が１０ナノモル濃度である粒子に対して約２倍の投与量で投与されるはずである。

【0171】

ＰＳＭＰアンタゴニストを含む医薬組成物は、液体形態、エアロゾル、または固体形態で供給することができる。液体形態は、注射液、エアロゾル、液滴、トポロジー溶液および経口懸濁液によって例示される。例示的な固体形態としては、カプセル剤、錠剤、および制御放出形態が挙げられる。後者の形態は、ミニ浸透圧ポンプおよび埋め込み物によって例示される。例えば、Ｂｒｅｍｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． １０： ２３９， １９９７；Ｒａｎａｄｅ， ”Ｉｍｐｌａｎｔｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”， ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ
９５－１２３ （Ｒａｎａｄｅ ａｎｄ Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ， ｅｄｓ．， ＣＲＣ
Ｐｒｅｓｓ １９９５）；Ｂｒｅｍｅｒ ｅｔ ａｌ．， ”Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｗｉｔｈ Ｉｎｆｕｓｉｏｎ Ｐｕｍｐｓ”， ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ： Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ ２３９－２５４ （Ｓａｎｄｅｒｓ ａｎｄ Ｈｅｎｄｒｅｎ， ｅｄｓ．， Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ １９９７）；Ｙｅｗｅｙ ｅｔ ａｌ．， ”Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｆｒｏｍ ａ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｉｍｐｌａｎｔ”， ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ： Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ ９３－１１７ （Ｓａｎｄｅｒｓ ａｎｄ Ｈｅｎｄｒｅｎ， ｅｄｓ．， Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ １９９７）を参照されたい。他の固体形態としては、クリーム剤、ペースト剤、他のトポロジー適用などが挙げられる。

【0172】

リポソームにより、治療用ポリペプチドを対象に、例えば、静脈内に、腹腔内に、髄腔内に、筋肉内に、皮下に、または経口投与、吸入、もしくは鼻腔内投与によって送達するための１つの手段がもたらされる。リポソームは、１つまたは複数の脂質二重層と周囲の水性区画からなる顕微鏡的小胞である。一般に、Ｂａｋｋｅｒ－Ｗｏｕｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ．
Ｄｉｓ． １２ （Ｓｕｐｐｌ． １）： Ｓ６１， １９９３；Ｋｉｍ， Ｄｒｕｇｓ ４６： ６１８， １９９３；Ｒａｎａｄｅ， ”Ｓｉｔｅ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｕｓｉｎｇ Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ａｓ Ｃａｒｒｉｅｒｓ”， ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ ３－２４ （Ｒａｎａｄｅ ａｎｄ Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ， ｅｄｓ．， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ １９９５）を参照されたい。リポソームは、細胞膜と組成が類似しており、結果としてリポソームを安全に投与することができ、また、リポソームは生分解性である。調製方法に応じて、リポソームは、単層または多層であり得、また、リポソームは、サイズが変動し得、直径が０．０２μｍから１０μｍを超えるまでにわたる。種々の薬剤をリポソームに封入することができる：疎水性薬剤は二重層内に分配され、親水性薬剤は内部の水性空間（複数可）に分配される。例えば、Ｍａｃｈｙ ｅｔ ａｌ．， Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ Ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ （Ｊｏｈｎ Ｌｉｂｂｅｙ １９８７）；Ｏｓｔｒｏ ｅｔ ａｌ．， Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊ． Ｈｏｓｐ． Ｐｈａｒｍ． ４６： １５７６， １９８９を参照されたい。さらに、リポソームサイズ、二重層の数、脂質組成、ならびにリポソームの電荷および表面特徴を変動させることにより、封入された薬剤の治療への利用可能性を制御することが可能である。

【0173】

リポソームは、事実上あらゆる細胞型に吸着し、次いで、封入された薬剤をゆっくりと放出することができる。あるいは、吸収されたリポソームが食作用性細胞にエンドサイトーシスによって取り込まれ得る。エンドサイトーシスの後、リポソーム脂質のリソソーム内分解および封入された薬剤の放出が起こる（Ｓｃｈｅｒｐｈｏｆ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ． Ｎ．Ｙ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ４４６： ３６８， １９８５を参照されたい）。静脈内投与後、小さなリポソーム（０．１～１．０μｍ）は、典型的には、主に肝臓および脾臓に位置する細網内皮系の細胞に取り込まれるが、３．０μｍよりも大きなリポソームは肺内に沈着する。この細網内皮系の細胞による小さなリポソームの優先的な取り込みを使用して、治療剤の肝臓への送達が行われている。

【0174】

細網内皮系は、大きな用量のリポソーム粒子を用いた飽和、または薬理学的手段による選択的マクロファージ不活化を含めたいくつかの方法によって回避することができる（Ｃｌａａｓｓｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ ８０２： ４２８， １９８４を参照されたい）。さらに、糖脂質で誘導体化されたリン脂質またはポリエチレングリコールで誘導体化されたリン脂質のリポソーム膜への組み入れにより、細網内皮系による取り込みの有意な低下がもたらされることが示されている（Ａｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １０６８： １３３， １９９１；Ａｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １１５０： ９， １９９３を参照されたい）。

【0175】

リポソームは、リン脂質組成を変動させることによって、または受容体もしくはカウンター受容体をリポソームに挿入することによって、特定の細胞または器官を標的とするように調製することもできる。例えば、高含有量の非イオン性界面活性剤で調製されたリポソームが肝臓を標的とするために使用されている。例えば、Ｈａｙａｋａｗａらへの日本特許０４－２４４，０１８（Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｐａｔｅｎｔ ０４－２４４，０１８）；Ｋａｔｏ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｌ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ． １６： ９６０， １９９３を参照されたい。これらの製剤は、ダイズホスファチジルコリン（ｐｈｏｓｐａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、α－トコフェロール、およびエトキシ化硬化ヒマシ油（ＨＣＯ－６０）をメタノール中に混合し、混合物を真空下で濃縮し、次いで、混合物を水で再構成することによって調製した。ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）とダイズ由来ステリルグルコシド混合物（ＳＧ）およびコレステロール（Ｃｈ）のリポソーム製剤も肝臓を標的とすることが示されている。Ｓｈｉｍｉｚｕ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｌ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ． ２０： ８８１， １９９７を参照されたい。

【0176】

あるいは、抗体、抗体断片、炭水化物、ビタミン、および輸送タンパク質などの種々の標的化カウンター受容体をリポソームの表面に結合させることができる。例えば、肝臓を標的とするために、リポソームを、肝細胞の表面上に排他的に発現されるアシアロ糖タンパク質（ガラクトース）受容体を標的とするように分枝型ガラクトシル脂質誘導体で修飾することができる。Ｋａｔｏ ａｎｄ Ｓｕｇｉｙａｍａ， Ｃｒｉｔ． Ｒｅｖ． Ｔｈｅｒ． Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔ． １４： ２８７， １９９７；Ｍｕｒａｈａｓｈｉ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｌ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ．２０： ２５９， １９９７を参照されたい。組織標的化のためのより一般的な手法では、標的細胞を、標的細胞によって発現されるカウンター受容体に特異的なビオチン化抗体で前標識する。Ｈａｒａｓｙｍ ｅｔ ａｌ．， Ａｄｖ． Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ． Ｒｅｖ． ３２： ９９， １９９８を参照されたい。遊離の抗体が血漿から消失した後、ストレプトアビジンとコンジュゲートしたリポソームを投与する。別の手法では、標的化抗体をリポソームに直接付着させる。Ｈａｒａｓｙｍ ｅｔ ａｌ．、上記を参照されたい。

【0177】

タンパク質のマイクロカプセル封入の標準の技法を使用して、抗体および他の可溶性タンパク質をリポソームに封入することができる。例えば、Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ． ３１： １０９９， １９８１；Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ５０： １８５３， １９９０；Ｃｏｈｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １０６３： ９５， １９９１；Ａｌｖｉｎｇ ｅｔ ａｌ． ”Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｔｕｄｉｅｓ”， ｉｎ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ （Ｖｏｌ． ＩＩＩ） ３１７ （Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ， ｅｄ．， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ， ２ｎｄ ｅｄ． １９９３）；Ｗａｓｓｅｆ ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｔｈ． Ｅｎｚｙｍｏｌ． １４９：
１２４， １９８７を参照されたい。上記の通り、治療的に有用なリポソームは、種々の構成成分を含有し得る。例えば、リポソームは、ポリ（エチレングリコール）の脂質誘導体を含み得る。Ａｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １１５０： ９， １９９３を参照されたい。

【0178】

治療用タンパク質の高全身レベルを維持するために、分解性ポリマーマイクロスフェアが設計されている。マイクロスフェアは、分解性ポリマー、例えば、ポリ（ラクチド－ｃｏ－グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリ酸無水物、ポリ（オルトエステル）、非生分解性エチルビニルアセテートポリマーから調製され、ポリマーの中にタンパク質が閉じ込められている。例えば、Ｇｏｍｂｏｔｚ ａｎｄ Ｐｅｔｔｉｔ， Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ． ６： ３３２， １９９５；Ｒａｎａｄｅ， ”Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｐｏｌｙｍｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”， ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ
Ｓｙｓｔｅｍｓ ５１－９３ （Ｒａｎａｄｅ ａｎｄ Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ， ｅｄｓ．， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ １９９５）；Ｒｏｓｋｏｓ ａｎｄ Ｍａｓｋｉｅｗｉｃｚ， ”Ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｕｓｅｆｕｌ ｆｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”， ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ： Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ ４５－９２ （Ｓａｎｄｅｒｓ ａｎｄ Ｈｅｎｄｒｅｎ， ｅｄｓ．， Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ １９９７）；Ｂａｒｔｕｓ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８１： １１６１， １９９８；Ｐｕｔｎｅｙ ａｎｄ Ｂｕｒｋｅ， Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
１６： １５３， １９９８；Ｐｕｔｎｅｙ， Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｃｈｅｍ．
Ｂｉｏｌ． ２： ５４８， １９９８を参照されたい。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）でコーティングされたナノスフェアも、治療用タンパク質を静脈内投与するための担体をもたらすことができるものである。例えば、Ｇｒｅｆ ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． １０： １６７， １９９７を参照されたい。

【0179】

例えば、Ａｎｓｅｌ ａｎｄ Ｐｏｐｏｖｉｃｈ， Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ （Ｌｅａ ＆ Ｆｅｂｉｇｅｒ， ５ｔｈ ｅｄ． １９９０）；Ｇｅｎｎａｒｏ （ｅｄ）．， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， １９ｔｈ ｅｄ． １９９５）；Ｒａｎａｄｅ ａｎｄ Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ， Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ （ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ １９９６）；およびＡｌｌｅｎ （ｅｄ）．， Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ （Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃ Ｐｒｅｓｓ， ２２ｎｄ ｒｅｖｉｓｅｄ ｅｄ）に示されている通り、当業者は他の剤形を考案することができる。

【0180】

医薬組成物は、本明細書に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト組成物を含む容器を含むキットとして供給することができる。医薬組成物は、例えば、単回投与もしくは複数回投与用の注射用液剤の形態で、または注射前に再構成される滅菌粉剤・散剤として提供することができる。あるいは、そのようなキットは、医薬組成物を投与するための乾燥粉末分散機、液体エアロゾル発生器、またはネブライザーを含み得る。そのようなキットは、医薬組成物の適応症および使用に関する書面の情報をさらに含み得る。
表１：例示的な配列

【表1-1】

【表1-2】

【0181】

本発明を以下の非限定的な例によってさらに例示する。

【実施例0182】

（実施例１）
ＰＳＭＰ発現はヒト肝線維症およびマウス肝線維症において上方調節される
ＰＳＭＰ発現が肝疾患に関連するかどうかを評価するために、ＰＳＭＰレベルを、異なる肝疾患組織を含有する組織マイクロアレイでの免疫組織化学的検査によって調査した。ＰＳＭＰは硬変のおよび付近の非腫瘍肝組織において有意に上方調節された（図１Ａおよび１Ｂ）。この所見は、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）誘発肝硬変（ｎ＝１４）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）誘発肝硬変（ｎ＝１）、原発性胆汁性肝硬変（ｎ＝５）、およびアルコール誘発肝硬変（ｎ＝２）を含めた、原因が異なるヒト肝臓線維化組織において確認された。免疫組織化学的分析により、肝硬変を有する患者では正常なヒト肝組織と比較して肝臓ＰＳＭＰ発現が有意に上昇したことが明らかになった（図２Ａおよび２Ｂ）。ヒトデータと同様に、ＣＣｌ_４によって誘発された肝線維症およびＢＤＬによって誘発された肝線維症のマウスモデルにおいても、対照マウス由来の肝臓と比較してＰＳＭＰの発現が著しく増加した（図３Ａ～３Ｄ、４Ａ、および４Ｂ）。これらのデータから、ＰＳＭＰが硬変の肝臓において上方調節されることが示され、ＰＳＭＰシグナル伝達の活性化が肝線維症の病理発生に関与し得るという仮説が生じる。
（実施例２）
マウスにおいてＰＳＭＰの欠乏により肝線維症からの保護がもたらされる

【0183】

肝線維症におけるＰＳＭＰシグナル伝達の役割をさらに調査するために、次いで、ＣＣｌ_４処理によって誘発される毒性線維症マウスモデルに供されたＰＳＭＰノックアウトマウスにおける線維形成を調査した。マウスを、４週間にわたってＣＣｌ_４に繰り返し曝露させ（１週間当たり２回）、Ｐｓｍｐ^－／－マウスでは、Ｃｃｒ２^－／－マウスと同等の油対照と比較して、ヘマトキシリン・エオシン（Ｈ＆Ｅ）、シリウスレッド染色および肝臓ヒドロキシプロリン含有量によって評価される肝傷害および線維症の有意な減弱が示された（図５Ａ～５Ｄ）。一貫して、Ｐｓｍｐ^－／－マウスでは、Ｃｃｒ２^－／－マウスと一致して、免疫組織化学的検査および免疫ブロッティングによって評価されるＨＳＣ活性化のマーカーであるα－ＳＭＡの上方調節が顕著に減少した（図５Ａおよび５Ｆ）。アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）の血清中レベルがＰｓｍｐ^－／－マウスにおいて低下する明らかな傾向が示され、これにより、肝損傷が改善したことが示される（図５Ｅ）。Ｃｃｒ２^－／－マウスと同様に、原型線維化促進遺伝子（Ａｃｔａ２、Ｃｏｌ１ａ１、Ｔｇｆｂ１、Ｔｉｍｐ１およびＰｄｇｆｒｂ）の肝臓でのｍＲＮＡ発現が、ＣＣｌ_４誘発Ｐｓｍｐ^－／－マウスにおいて低減した（図５Ｇ～５Ｋ）。

【0184】

肝線維症におけるＰＳＭＰの役割をさらに分析するために、別の十分に確立されたモデルであるＢＤＬ肝線維症マウスモデルを用いた。ＢＤＬ後にも、Ｐｓｍｐ^－／－マウスにおいてシリウスレッド陽性領域、ヒドロキシプロリン含有量、およびα－ＳＭＡ発現の有意な低減が示された（図６Ａ～６Ｄおよび６Ｆ）。血清中ＡＬＴレベルもＰｓｍｐ^－／－マウスにおいてＢＤＬ後に上昇した（図６Ｅ）。Ｐｓｍｐ^－／－マウスでは、Ａｃｔａ２、Ｃｏｌ１ａ１、Ｔｇｆｂ１、Ｔｉｍｐ１およびＰｄｇｆｒｂのｍＲＮＡレベルの有意な低下も見いだされた（図６Ｇ－６Ｋ）。

【0185】

総合すると、これらの結果から、ＰＳＭＰシグナル伝達の活性化が肝線維症（ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）の病理発生に関与する可能性があることが示唆される。
（実施例３）
ＰＳＭＰシグナル伝達の中和によりマウス肝線維症が緩和される

【0186】

ＰＳＭＰ欠乏によりマウスにおける肝線維症の発生が有意に減弱することに基づいて、特異的なＰＳＭＰ中和抗体である３Ｄ５の、ＣＣｌ_４によって誘発される肝線維症に対する効果を調査した。まず、４週間のＣＣｌ_４誘発肝線維症のマウスに対する３Ｄ５の保護効果を調査するために、マウスを、各ＣＣｌ_４注射後に３Ｄ５で処置した（図７Ａ）。Ｈ＆Ｅ染色およびシリウスレッド染色アッセイにより、３Ｄ５による処置後に、対照およびｍＩｇＧ処置群と比較して肝傷害および線維症の低減が示された（図７Ｂ～７Ｄ）。したがって、３Ｄ５により、線維性肝臓におけるα－ＳＭＡ発現が顕著に低減した（図７Ｂおよび７Ｇ）。さらに、３Ｄ５処置群では対照およびｍＩｇＧ処置群と比して肝臓ヒドロキシプロリン含有量が有意に減少した（図７Ｅ）。３Ｄ５処置群では対照およびｍＩｇＧ処置群と比してＡＬＴの血清中レベルが有意に低下し、これにより、肝機能が改善したことが示される（図７Ｆ）。ｑＲＴ－ＰＣＲにより、３Ｄ５により線維形成遺伝子（Ａｃｔａ２、Ｃｏｌ１ａ１、Ｔｇｆｂ１、Ｔｉｍｐ１およびＰｄｇｆｒｂ）のｍＲＮＡレベルも有意に低下したことが示された（図７Ｈ～７Ｌ）。

【0187】

さらに、６週間のＣＣｌ_４誘発肝線維症における３Ｄ５の治療的潜在性を評価するために、マウスにおいて、３Ｄ５による処置を、第４週から第６週まで、ＣＣｌ_４による処置と共に使用した（図８Ａ）。３Ｄ５による処置を受けたマウスでは、対照およびｍＩｇＧ処置群と比較して、シリウスレッド陽性領域、ヒドロキシプロリン含有量、α－ＳＭＡ発現、血清中ＡＬＴの有意な低減が示された（図８Ｂ～８Ｆ）。一貫して、３Ｄ５を用いて処置したマウスではＡｃｔａ２、Ｃｏｌ１ａ１、Ｔｇｆｂ１、Ｔｉｍｐ１、およびＰｄｇｆｒｂのｍＲＮＡレベルの有意な低下も観察された（図８Ｇ－８Ｋ）。

【0188】

異なる用量の３Ｄ５（１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、および１０ｍｇ／ｍＬ）を使用して、ＣＣｌ_４誘発肝線維症を有するマウスを処置した（図９Ａ）。Ｈ＆Ｅ染色およびシリウスレッド染色アッセイにより、肝線維症を有し、３Ｄ５を用いて処置されたマウスが、用量依存的に、対照およびｍＩｇＧ処置群よりも軽度の肝線維症を有したことが示された（図９Ｂ～９Ｅ）。ＣＣｌ_４で処置したマウスにおけるα－ＳＭＡ発現、血清中ＡＬＴ、線維形成遺伝子（Ａｃｔａ２、Ｃｏｌ１ａ１、Ｔｇｆｂ１、Ｔｉｍｐ１およびＰｄｇｆｒｂ）のｍＲＮＡ発現のレベルも、３Ｄ５による処置後に用量依存的に低下した（図９Ｂおよび９Ｆ～９Ｌ）。

【0189】

これらの結果から、マウスにおいて、ＰＳＭＰシグナル伝達の遮断により肝線維症の病理発生が有意に好転することが示唆される。
（実施例４）
ＡＡＶ８－ｈＰＳＭＰにより肝臓ＰＳＭＰ発現が回復し、肝線維症がＣＣＲ２依存的に促進される

【0190】

肝線維症におけるＰＳＭＰの役割をさらに探究するために、ＡＡＶ８（アカゲザルから単離された遺伝子ベクター、肝細胞に対する親和性が高いことから、肝細胞への形質導入に使用される）を使用して、ＰＳＭＰ^－／－マウスにおいてヒトＰＳＭＰを過剰発現させた（図１０Ａ）。予測通り、ＡＡＶ８－ｈＰＳＭＰを受けたＰＳＭＰ^－／－マウスでは、ｈＰＳＭＰの発現のレベルが、対照ＡＡＶ８－ヌルを受けたマウスと比較して強く上昇した（図１０Ｅ）。次に、この手法を使用して、慢性肝損傷の条件下でのＰＳＭＰ過剰発現の結果を調査した。ＡＡＶ８注射後の４週間に、マウスを、ＣＣｌ_４を用いてさらに４週間にわたって処置して、肝線維症を誘発した（図１０Ａ）。ＡＡＶ８－ヌルを注射したマウスにおいて観察された影響と比較して、ＰＳＭＰ過剰発現によって引き出された肝傷害および線維症の有意な増強が見いだされた（図１０Ｂ～１０Ｄ、１０Ｆ～１０Ｌ）。

【0191】

データから、ＰＳＭＰ過剰発現により肝線維症の発生が促進されることがさらに示される。
（実施例５）
ＰＳＭＰ欠乏により、ＣＣＬ_４による攻撃によって誘導される肝臓マクロファージ浸潤および炎症促進性サイトカイン産生が阻害される

【0192】

マウスおよびヒトにおいて、慢性傷害の際の肝臓へのマクロファージの浸潤は肝臓の炎症および線維症の増悪に説得力をもって結び付けられている。したがって、ＣＣｌ_４による処置後の肝臓における免疫細胞の組成をフローサイトメトリー分析によって調査した。Ｐｓｍｐ^－／－マウスでは肝臓マクロファージ（ｉＭΦ、ＣＤ１１ｂ^＋Ｆ４／８０^ｉｎｔ）の浸潤およびＣＤ１１ｂ^＋ＣＣＲ２^＋細胞の蓄積が有意に減少した（図１１Ａ～１１Ｅ）。肝内マクロファージと並行して、好中球（ＣＤ１１ｂ^＋Ｌｙ６Ｇ^＋）、Ｂ細胞およびＴ細胞（ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＣＤ８^＋）などの他の免疫細胞も調査し、これらは、ＰＳＭＰ－ノックアウトマウスにおいてＴ細胞がいくらか上昇または減少した以外は影響を受けないことが見いだされた（図１１Ｆ～１１Ｊ）。

【0193】

次に、肝臓におけるＰＳＭＰ欠乏に起因する肝臓マクロファージ蓄積の低下の結果を調査した。疾患増悪の間の肝臓マクロファージの重要な機能は、炎症促進サイトカインの分泌である。Ｐｓｍｐ^－／－マウスでは、ＣＣｌ_４による処置でＣＣＬ２、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６およびＩＬ－１２の血清中濃度が低下し、これは、肝内マクロファージの数の低下と一致する（図１１Ｋ～１１Ｎ）。

【0194】

これらのデータから、ＰＳＭＰが、マクロファージの浸潤、そして炎症促進サイトカインの産生に影響を及ぼすことによって線維症を促進し得ることが示される。
（実施例６）
肝線維症に関する研究のための材料および方法

【0195】

本実施例では、実施例１～５に記載されている肝線維症に関する研究のための材料および方法を記載する。
ヒト試料

【0196】

ヒト肝臓試料は全て病院で収集した。肝硬変試料をＨＢＶ誘発肝硬変、ＨＣＶ誘発肝硬変、原発性胆汁性肝硬変、アルコール性誘発肝硬変から収集した。正常な肝組織を、肝腺腫および限局性結節性過形成を含めた非腫瘍疾患に対する肝臓切除を受けた患者から収集した。
動物

【0197】

特定病原体未感染Ｃ５７ＢＬ／６マウスをＰｅｋｉｎｇ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｎｔｅｒ（Ｂｅｉｊｉｎｇ、Ｃｈｉｎａ）から購入した。ＰＳＭＰノックアウトマウスはＣ５７ＢＬ／６バックグラウンドであった。ＣＣＲ２ノックアウトマウスはＣ５７ＢＬ／６バックグラウンドであり、Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ Ｙｕ Ｚｈａｎｇ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｅｎｔｅｒ）から入手した。ＰＳＭＰＫＯマウスとＣＣＲ２ＫＯマウスを交配することにより、ＰＳＭＰおよびＣＣＲ２の２重ノックアウト（ＤＫＯ）を有するマウスを得た。動物実験は全て、Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓに従って行い、Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｅｎｔｅｒにより承認されたものであった。
マウス肝線維症モデル

【0198】

毒性肝線維症のために、６～８週齢の雄マウスにＣＣｌ_４（体重１ｋｇ当たり１．０ｍｌ、トウモロコシ油中に１：９の比で溶解させたもの）またはビヒクル（トウモロコシ油）の腹腔内（ｉ．ｐ．）注射を週に２回、４週間または６週間にわたって受けさせた。マウスを最終的なＣＣｌ_４（Ａｌａｄｄｉｎ、Ｓｈａｎｇｈａｉ、Ｃｈｉｎａ）注射の２日後に屠殺した。

【0199】

胆汁うっ滞性肝線維症を誘発するために、６～８週齢の雄マウスに総胆管の結紮を行った。偽手術マウスにも同じ手順を行ったが結紮は伴わなかった。胆管結紮（ＢＤＬ）マウスでは１４日間の期間で胆汁うっ滞および付随する線維症が発生した。
抗体による処置

【0200】

ＰＳＭＰに対する中和抗体（３Ｄ５；Ｐｅｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９２： １８７８－８６， ２０１４）を発現するモノクローナルハイブリドーマ細胞をマウス腹腔に注射し、腹水を得た。腹水中のｍＡｂ ３Ｄ５を、プロテインＧを使用して精製した。保護的処置に関しては、マウスに、５ｍｇ／ｋｇの３Ｄ５を、４週間全体にわたって週に２回、各ＣＣｌ_４注射後に注射した（ｉ．ｐ．）。治療的処置に関しては、マウスに、５ｍｇ／ｋｇの３Ｄ５を第４週から第６週まで週に２回、各ＣＣｌ_４注射後に注射した（ｉ．ｐ．）。
マウスアデノ随伴ウイルス８（ＡＡＶ８）の構築および注射

【0201】

マウス肝臓においてヒトＰＳＭＰ遺伝子を過剰発現するＡＡＶ８送達系はＶｉｇｅｎｅ
Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｓｈａｎｇｄｏｎｇ、Ｃｈｉｎａ）により構築される。空の随伴アデノウイルス（ＡＡＶ８－ヌル）が対照としての機能を果たした。ベクターゲノムの力価を、ベクターに特異的なプライマーを用いたｑＰＣＲによって測定した。マウスに、ＡＡＶ８ベクターゲノムを２×１０^１１個含有するウイルス１００μｌを尾静脈注射した。
サイトメトリックビーズアッセイ（ＣＢＡ）

【0202】

マイクロスフェア（Ａ３７３０４、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を、ポリクローナルウサギ抗ＰＳＭＰ抗体を製造者の指示に従って用いてコーティングした。コーティングされたビーズを２０％ＦＢＳで３０分間ブロッキングし、次いで、試料に添加して室温で２時間置き、次いで、モノクローナル抗ＰＳＭＰ抗体を添加して１時間置いた。混合物をＰＥヤギ抗マウス抗体（ｅＢｉｏｃｉｅｎｃｅ）と懸濁させて室温で３０分間置いた。フローサイトメトリーによってデータを取得した。

【0203】

サイトカインＩＬ－６、ＣＣＬ２、ＴＮＦ－α、およびＩＬ－１２ｐ７０をＢＤ（商標）Ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｂｅａｄ Ａｒｒａｙ（ＣＢＡ）Ｍｏｕｓｅ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（５５２３６４、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて製造者の指示に従って検出した。フローサイトメトリーによってデータを取得した。
肝臓の組織学的染色および免疫組織学的染色

【0204】

肝臓検体を１０％ホルマリン中に保存し、４μｍ厚の切片に切り取った。次いで、切片をヘマトキシリン・エオシン（Ｈ＆Ｅ）を用いて正常な手順によって、およびシリウスレッド染色を用いて１時間にわたって染色した。シリウスレッド染色を使用して、Ｉｓｈａｋスコアリングシステムに従って線維症の程度をグレード付けした。肝線維症（ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）をＩｓｈａｋスコアリングシステムに従ってグレード付けした：グレード０－線維症なし；グレード１－短い線維性隔壁を伴うまたは伴わない、一部の門脈域の線維性拡大；グレード２－短い線維性隔壁を伴うまたは伴わない、大部分の門脈域の線維性拡大；グレード３－時々の門脈－門脈（Ｐ－Ｐ）架橋を伴う大部分の門脈域の線維性拡大；グレード４－顕著な架橋［門脈－門脈（Ｐ－Ｐ）ならびに門脈－中心静脈（Ｐ－Ｃ）］を伴う門脈域の線維性拡大；グレード５－時々の小結節（不完全な肝硬変）を伴う顕著な架橋（Ｐ－Ｐおよび／またはＰ－Ｃ）；グレード６－肝硬変、ほぼ確実または確実。累積的な組織学的スコアは、０（完全に正常）から６（肝硬変を伴う重症疾患）までにわたり得る。
免疫組織化学的検査

【0205】

免疫組織化学的検査（ＩＨＣ）のために、肝臓検体を１０％緩衝ホルマリン中に固定した。ＰＳＭＰ ＩＨＣ染色をＰｅｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９２： １８７８－８６， ２０１４に記載されている通り実施した。α－ＳＭＡ ＩＨＣ染色のために、α－ＳＭＡに対するモノクローナル抗体（Ａｂｃａｍ、ａｂ７８１７）を使用した。
免疫ブロッティング分析

【0206】

溶解物中のタンパク質をＳＤＳ－ＰＡＧＥ電気泳動によって分離し、ＰＶＤＦ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＭＡ、ＵＳＡ）に移した。ブロットを、α－ＳＭＡに対するウサギポリクローナル抗体と一緒にインキュベートし、増強化学発光（ＥＣＬ）システムによって可視化した。各バンドのデンシトメトリー測定値を、Ｑｕａｎｔｉｔｙ－Ｏｎｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＵＳＡ）を使用して分析し、内部対照としてＧＡＰＤＨ（β－アクチン）に対して正規化した。
定量的リアルタイムＰＣＲアッセイ

【0207】

組織または細胞をＴｒｉｚｏｌ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中にホモジナイズした。ＲＴ
ＭａｓｔｅｒＭｉｘ ｓｙｓｔｅｍ（ＡＢＭ Ｉｎｃ．）を使用することによって逆転写（ＲＴ）反応を実施した。ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ ＰＣＲ ｍｉｘ（ＡＢＭ Ｉｎｃ．）を使用してリアルタイムＰＣＲを行った。全ての遺伝子発現をＧａｐｄｈに対して正規化した。
肝臓ヒドロキシプロリンの決定

【0208】

マウスの屠殺直後に得た肝臓試料を、改変酸加水分解プロトコールに供して、それらのヒドロキシプロリンレベルを決定した。肝臓のヒドロキシプロリン含有量は、肝臓１グラム当たりのヒドロキシプロリンのｍｇ数として表される。
血清中ＡＬＴ

【0209】

肝傷害を有するマウスの肝機能を、ＡＳＴおよびＡＬＴの血清中レベルに基づいてモニタリングした。酵素活性は１リットル当たりの単位数（Ｕ／Ｌ）として表される。
フローサイトメトリー

【0210】

肝臓単核細胞を取得し、５％ウシ胎仔血清中に２０分間にわたってブロッキングし、次いで、ＣＤ４５－ＦＩＴＣ、ＣＤ１１ｂ－ＰＥ、ＣＣＲ２－ＡＰＣ、Ｌｙ６Ｃ－ＰｅｒＣＰ Ｃｙ５．５、Ｌｙ６Ｇ－ＰｅｒＣＰ Ｃｙ５．５、Ｆ４／８０－ＡＰＣ、およびＣＤ１１ｃ－ＡＰＣ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）を用いて４℃で３０分間染色した。データをＦＡＣＳ ｃａｌｉｂｅｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）から取得し、ＦｌｏｗＪｏ ７．６（ＴｒｅｅＳｔａｒ、Ａｓｈｌａｎｄ、ＯＲ、ＵＳＡ）を使用して分析した。
統計分析

【0211】

全てのデータが平均値±平均値の標準誤差として表される。２つの群間の統計学的有意差を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ６．０（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ、ＵＳＡ）を用いてスチューデントｔ検定によって分析した。２つの群間の統計的に有意な差異は、^＊０．０１＜ｐ＜０．０５、^＊＊０．００１＜ｐ＜０．０１、および^＊＊＊ｐ＜０．００１によって表される。
（実施例７）
肺線維症の間のＰＳＭＰ発現およびＰＳＭＰ欠乏または中和の影響

【0212】

肺線維症の間のＰＳＭＰ発現およびＰＳＭＰ欠乏の影響を、線維症のブレオマイシンモデルを使用して分析した。マウスモデルでは、ＰＳＭＰシグナル伝達の中和によりブレオマイシン誘発肺線維症が緩和される。
方法

【0213】

本研究には６～８週齢の雌Ｃ５７Ｂｌ／６Ｊ（ＷＴ）マウスを使用した。動物に、腹腔内麻酔した後、気管切開を行った。生理食塩水中に希釈した３．５Ｕ／ｋｇのブレオマイシン（ＢＬＭ）（日本化薬株式会社）を含有する単回注射液、または生理食塩水のみを含有する単回注射液（ＮＳ）（対照群）を気管内に滴注した。ブレオマイシンの１４日後に、動物を安楽死させて、気管支肺胞洗浄を実施し、生化学的分析および組織学的分析用の肺試料を収集した。肺コラーゲンの総含有量をマッソントリクローム（Ｍａｓｓｏｎ’ｓ
ｔｒｉｃｈｏｍｅ）染色により、製造者の指示に従って測定した。処置のために、マウスに、単回ＢＬＭ注射後に１０ｍｇ／ｋｇのＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳを週に１回、３週間にわたって注射した（ｉ．ｐ．）。

【0214】

２群間の比較のためにスチューデントｔ検定を使用した。全ての検定に片側方法体系を利用した。０．０５未満のＰ値を有意であるとみなした。反復実験は 少なくとも３回の独立した実験からなるものであった。
結果

【0215】

ブレオマイシンを滴注した動物の肺組織では、ＰＳＭＰの上方調節が観察され（図１２Ａおよび１２Ｃ）、これは、気管支肺胞洗浄において観察された現象と一致した（図１２Ｂ）。ＷＴ動物と比較して、ＰＳＭＰ^－／－マウスでは、体重喪失の減少が示された（図１２Ｄ）。これと一致して、ブレオマイシンを滴注したＷＴ動物において観察された肺コラーゲン含有量の増加がＰＳＭＰ^－／－マウスでは有意に低減した（図１２Ｅ）。３Ｄ５を用いて処置したマウスでは、ＰＢＳで処置したマウスと比較して、線維芽細胞活性化のマーカーであるα－ＳＭＡ発現の有意な低減が示された（図１２Ｆ）。免疫組織化学的分析から、気道線維症のヒト肺ではＰＳＭＰの顕著な染色が認められるが、正常な組織ではＰＳＭＰの染色が認められないことが明らかになった（図１２Ｇ）。
（実施例８）
非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）モデルにおいてＰＳＭＰの欠乏により肝線維症からの保護がもたらされる
方法

【0216】

２日齢の乳仔マウスに、ストレプトゾトシン（ＳＴＺ、Ｓｉｇｍａ、ＭＯ、ＵＳＡ）２００μｇを皮下投与した。マウスが４週齢に達したら高脂肪食（ＨＦＤ、６０ｋｃａｌ％の脂肪で構成される）を開始し、１２週まで実験期間全体を通して継続した。線維症を、パラフィン切片を用いたシリウスレッド染色によって評価した。
結果

【0217】

ＰＳＭＰ^－／－マウスの肝組織において、線維症の有意な低減が観察された（図１３）。
（実施例９）
抗ＰＳＭＰ中和抗体を用いた急性ＧＶＨＤの処置
方法

【0218】

本研究では、６～８週齢の雄ＢＡＢＬ／ｃマウスがレシピエントとして働き、Ｃ５７ＢＬ／６マウスがドナーであった。マウスの屠殺後にＣ５７ＢＬ／６マウス由来の脾臓ＣＤ３＋Ｔ細胞および骨髄細胞を分離した。細胞をＢＡＢＬ／ｃマウスに注入する１２時間前に、レシピエントマウスをＣｏ^６０放射線の２回の線量（各線量４Ｇｙ、合計８Ｇｙ）に曝露させた。ＣＤ３＋細胞および骨髄細胞を５×１０^６個と１×１０^７個の比で混合し、ＢＡＢＬ／ｃマウスに静脈内注射した。注入から１カ月の期間中（急性ＧＶＨＤ（ａＧＶＨＤ）期間）、２つの群（ｍＡｂ ３Ｄ５処置群およびＩｇＧ対照群）のそれぞれについて、マウスの体重および生存率を２日毎にモニタリングした。

【0219】

ＰＳＭＰの中和抗体である３Ｄ５を毎週、細胞注入後に５ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内に注入し、また、陰性対照処置としてマウスＩｇＧを使用した。
結果

【0220】

抗ＰＳＭＰ中和抗体により、ａＧＶＨＤマウスの生存時間が延長した。体重喪失が３０％を超えるまでに達したマウスを生存できないと定義し、屠殺した。図１４に示される通り、ａＧＶＨＤマウスは注入後約１９日目に死亡したが、３Ｄ５処置群のマウスは注入後約２４日目に死亡した。ＩｇＧで処置したマウスまたは３Ｄ５で処置したマウスの２群におけるａＧＶＨＤマウスの生存時間を要約し、有意差を算出した。ａＧＶＨＤマウスの生存時間には、ＩｇＧ処置群と３Ｄ５処置群との間で有意差が示された。
（実施例１０）
慢性エタノール給餌モデルにおいてＰＳＭＰシグナル伝達の中和または欠乏により脂肪肝および線維症が緩和される
方法
マウスモデル

【0221】

慢性エタノール給餌モデルでは、等カロリーであり、脂肪（カロリーの３５％）およびタンパク質（カロリーの１８％）に関して同じ組成を有する市販の対照およびエタノールＬｉｅｂｅｒ－ＤｅＣａｒｌｉ食を使用する。炭水化物の含有量は、対照食では総カロリーの４７％であり（デキストリン－マルトース）、エタノール食では総カロリーの１１％であり、炭水化物カロリーの最大３６％がエタノールで置き換えられている。

【0222】

エタノールＬｉｅｂｅｒ－ＤｅＣａｒｌｉ食を用いた慢性エタノール給餌モデルに関しては、１０週齢の雌マウス（体重約２２ｇ）を、対照食を５日間給餌することによって液体食に順化させた。エタノール由来カロリーのパーセンテージを１週間の期間にわたって次第に上昇させ、次いで、５％エタノール食で８週間維持した。マウスを、実験全体を通してペアフィードした。

【0223】

慢性＋過度のアルコール給餌モデルに関しては、８週齢の雌マウス（体重約２０ｇ）を、対照食を５日間給餌することによって液体食に順化させた。エタノール由来カロリーのパーセンテージを１週間の期間にわたって次第に上昇させ、次いで、５％エタノール食で１０日間維持した。１１日目に、マウスに単回用量のエタノール（体重１ｋｇ当たり５ｇ、３１．５％エタノール）を強制飼養した。強制飼養は常に早朝に実施した。強制飼養後、マウスをエタノール食で保持し、温暖なブランケット上のケージで水を循環させて保持した。強制飼養後、マウスは動きが遅かったが、意識はあり、４～６時間以内に正常な挙動に戻った。マウスを常に強制飼養の９時間後に安楽死させた。

【0224】

慢性エタノール給餌モデルにおける抗体による処置に関しては、マウスに１０ｍｇ／ｋｇのＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳを週に１回、４週間にわたって注射した（ｉ．ｐ．）（アルコール給餌の第５週から開始して第８週の間中、１週間の中間時点で）。慢性＋過度のアルコール給餌モデルにおける抗体による処置に関しては、マウスに２０ｍｇ／ｋｇの３Ｄ５またはＰＢＳを強制飼養の１時間前に注射した（ｉ．ｐ．）。
血清脂質含有量

【0225】

血清トリグリセリドまたはコレステロール含有量を、トリグリセリドまたはコレステロールアッセイキット（Ｚｈｏｎｇ Ｓｈｅｎｇ、Ｂｅｉｊｉｎｇ、Ｃｈｉｎａ）を使用して決定した。
病理組織検査

【0226】

肝臓形態を調査し、肝線維症を評価するために、ヘマトキシリン・エオシン（Ｈ＆Ｅ）染色およびシリウスレッド染色を実施した。肝線維症をシリウスレッド染色によって定量した。肝臓検体を１０％中性緩衝ホルマリン中に固定し、パラフィンに包埋し、４μｍの切片に切り取った。肝臓内の脂肪の蓄積を分析するために、凍結試料から１０μｍの切片を切り取り、オイルレッドＯ（Ｓｏｌａｒｂｉｏ Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｏ，Ｌｔｄ．Ｂｅｉｊｉｎｇ、Ｃｈｉｎａ）を用いて１０分間染色した。これらのスライドを水ですすぎ、マイアーのヘマトキシリンで対比染色し、光学顕微鏡法によって分析した。少なくとも１０倍（×２００）視野で陽性領域を計算した。
肝臓の免疫組織化学染色

【0227】

免疫組織化学染色のために、切片を、１０％ヤギ血清溶液を用いて室温で３０分間ブロッキングし、その後、α－ＳＭＡに対する一次抗体（Ａｂｃａｍ、ａｂ３２５７５）と一緒に４℃で終夜インキュベートした。切片を、二次抗体（ＺＳＧＢ－Ｂｉｏ）および３，３－ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）と一緒にインキュベートし、その後、Ｈ＆Ｅ染色を用いた簡単な対比染色を行い、および中性ガムでマウントした。
生化学的アッセイ

【0228】

アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）の血清中レベルを、標準の酵素的手順を使用し、製造者の指示に従って測定した（Ｎａｎｊｉｎｇ Ｊｉａｎｃｈｅｎｇ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、Ｎａｎｊｉｎｇ、Ｃｈｉｎａ）。血清および肝臓中トリグリセリドまたはコレステロール含有量を、トリグリセリドまたはコレステロールアッセイキット（Ｚｈｏｎｇ Ｓｈｅｎｇ、Ｂｅｉｊｉｎｇ、Ｃｈｉｎａ）を使用して決定した。
逆転写反応および定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ｑＰＣＲ）

【0229】

組織または細胞をＴＲＩｚｏｌ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、１５５９６０１８）中にホモジナイズした。逆転写反応を、Ｈｉｆａｉｒ ＩＩ １ｓｔ Ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ＳｕｐｅｒＭｉｘ（Ｙｅａｓｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ、１１１２０ＥＳ６０）を使用して実施した。定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応を、Ｈｉｅｆｆ ｑＰＣＲ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｍａｓｔｅｒ ｍｉｘ （Ｙｅａｓｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ、１１２０２ＥＳ０３）を使用して行った。全ての遺伝子発現レベルをＧａｐｄｈに対して正規化した。
結果

【0230】

血清脂質含有量の分析により、エタノール給餌後、３Ｄ５で処置したマウスではＰＢＳで処置したマウスよりもトリグリセリドおよびコレステロールのレベルが低いことが確認された（図１５Ｂおよび１５Ｃ）。肝臓ヘマトキシリン・エオシン（Ｈ＆Ｅ）およびオイルレッドＯ染色により、３Ｄ５で処置したエタノール給餌マウスではＰＢＳで処置したエタノール給餌マウスよりも脂肪症および線維症の程度が低いことが明らかになった（図１５Ｄ～１５Ｆ）。ＰｐａｒａおよびＳｒｅｂｐ－１ ｍＲＮＡの肝臓での発現レベルをＲＴ－ｑＰＣＲによって測定した。これらの所見と一致して、エタノール給餌マウスにおいて、３Ｄ５による処置では、ＰＢＳによる処置と比して、Ｓｒｅｂｐ－１の発現が下方調節され、Ｐｐａｒａの発現が上方調節された（図１５Ｇおよび１５Ｈ）。肝線維症はシリウスレッド染色によってさらに決定された。図１５Ｉおよび１５Ｊに例示される通り、ＰＢＳ処置群では、マウスは３Ｄ５で処置したマウスよりも大きなシリウスレッドを有した。さらに、慢性＋過度のアルコール給餌モデルにおいて肝臓における免疫細胞の組成をフローサイトメトリー分析によって調査した。３Ｄ５で処置したマウスでは浸潤性肝臓マクロファージ（ｉＭΦ、Ｆ４／８０^＋ＣＤ１１ｂ^ｈｉｇｈ）の蓄積が低減した（図１５Ｋ）。

【0231】

慢性＋過度のアルコール給餌モデルでは（図１５Ｌ）、肝臓脂質含有量の分析により、エタノール給餌後、３Ｄ５で処置したマウスが同様にＰＢＳで処置したマウスよりも低いレベルのトリグリセリドおよびコレステロールを有することが確認された（図１５Ｍおよび１５Ｎ）。肝臓ヘマトキシリン・エオシン（Ｈ＆Ｅ）から、３Ｄ５で処置したエタノール給餌マウスではＰＢＳで処置したエタノール給餌マウスよりも脂肪症の程度が低いことが明らかになった（図１５Ｏ）。肝臓における免疫細胞の組成もフローサイトメトリー分析によって調査した。３Ｄ５で処置したマウスでは浸潤性肝臓マクロファージ（ｉＭΦ、Ｆ４／８０^＋ＣＤ１１ｂ^ｈｉｇｈ）の蓄積が低減した（図１５Ｐ）。

【0232】

慢性＋過度のアルコール給餌モデルでは、Ｈ＆ＥおよびオイルレッドＯ染色によって評価して、Ｐｓｍｐ^－／－マウスではＷＴマウスと比較して有意に減弱した肝傷害および脂肪症が示された（図１５Ｑおよび１５Ｒ）。アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）の血清中レベルがＰｓｍｐ^－／－マウスにおいて減少することが示され、これにより、肝損傷の改善が示される（図１５Ｓ）。一貫して、Ｐｓｍｐ^－／－マウスではＷＴマウスと比較してＳｒｅｂｐ－１の発現が下方調節され、Ｐｐａｒａの発現が上方調節された（図１５Ｔおよび１５Ｕ）。
（実施例１１）
マウス肝傷害および線維症ではＰＳＭＰ発現が上方調節される
方法

【0233】

急性肝傷害を誘発するために、６～８週齢の雄ＷＴマウスおよびＰｓｍｐ^－／－マウスに対して、アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ、体重１ｋｇ当たり３００ｍｇ、温かいＰＢＳ（５５℃）中に溶解させたもの（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）の単回ｉ．ｐ．注射による誘発を行った（ｎ＝５／群）。対照マウスは同様の体積のビヒクルを受けた。注射の２４時間後にマウスを安楽死させた。

【0234】

５－ジエトキシカルボニル－１，４－ジヒドロコリジン（ＤＤＣ）食に関しては、８週齢の雄ＷＴマウスに０．１％ＤＤＣ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）を補充した食餌を４週間にわたって給餌した（ｎ＝５／群）。対照マウスは、標準のマウス食を受けた。抗体による処置に関しては、マウスに５ｍｇ／ｋｇのＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはｍＩｇＧを第３週から第４週まで週に２回注射した（ｉ．ｐ．）。
結果

【0235】

ＤＤＣ食によって誘発された肝線維症のマウスモデルまたはアセトアミノフェン（ＡＰＡＰ）処置によるマウス急性肝傷害モデルでは、対照マウス由来の肝臓と比較してＰＳＭＰ発現が著しく増加した（図１６Ａ～１６Ｃ）。
（実施例１２）
ＤＤＣマウスにおいて、ＰＳＭＰ欠乏により肝線維症からの保護がもたらされる

【0236】

他の原因による肝線維症におけるＰＳＭＰの役割を分析するために、ＤＤＣ食モデル（実施例１１、方法を参照されたい）を用いた。ＤＤＣ食モデルは、ヒト胆管線維症の臨床的特色を再現するものである。ＤＤＣ給餌の４週間後、Ｐｓｍｐ^－／－マウスでは同様にシリウスレッド陽性領域およびα－ＳＭＡ発現の有意な低減が示された（図１７Ａ～１７Ｄ）。Ｐｓｍｐ^－／－マウスにおけるＡｃｔａ２、Ｃｏｌ１ａ１、Ｔｇｆｂ１、Ｔｉｍｐ１およびＰｄｇｆｒのｍＲＮＡレベルの有意な低下も観察された（図１７Ｅ～１７Ｉ）。
（実施例１３）
ＰＳＭＰシグナル伝達の中和によりマウスＤＤＣ誘発肝線維症が緩和される

【0237】

ＤＤＣ食によって誘発される肝線維症（実施例１１、方法を参照されたい）に対する３Ｄ５の治療的潜在性を評価するために、マウスに第３週から第４週まで３Ｄ５による処置を使用した（図１８Ａ）。Ｈ＆Ｅ染色およびシリウスレッド染色アッセイにより、３Ｄ５による処置後、ｍＩｇＧ処置群と比較して肝傷害および線維症の低減が示された（図１８Ｂ～１８Ｄ）。したがって、３Ｄ５により、線維性肝臓におけるα－ＳＭＡ発現が顕著に低減した（図１８Ｂおよび１８Ｅ）。定量的リアルタイムＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）アッセイにより、３Ｄ５により、線維形成遺伝子（Ａｃｔａ２、Ｃｏｌ１ａ１）のｍＲＮＡレベルも有意に低下したことが示された（図１８Ｆおよび１８Ｇ）。
（実施例１４）
ＭＣＤマウスにおいて、ＰＳＭＰ欠乏により肝線維症からの保護がもたらされる
方法

【0238】

メチオニン－コリン欠乏（ＭＣＤ）食に関しては、８週齢の雄ＷＴマウスおよびＰｓｍｐ^－／－マウスにＭＣＤ食（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ、Ａ０２０８２００２Ｂ）を６週間にわたって給餌した（ｎ＝５／群）。対照マウスは標準のマウス食を受けた。
結果

【0239】

メチオニン－コリン欠乏（ＭＣＤ）食誘発マウス非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）モデルを構築した。ＭＣＤ給餌の６週間後、ＷＴマウスではＰＳＭＰ発現が著しく増加した（図１９Ａ）。Ｐｓｍｐ^－／－マウスでは、ＷＴマウスと比較して、シリウスレッドでの領域染色の有意な減少が示された（図１９Ｂ～１９Ｄ）。Ｐｓｍｐ^－／－マウスの肝臓におけるＡｃｔａ２、Ｃｏｌ１ａ１およびＴｇｆｂ１のｍＲＮＡ発現レベルの有意な減少も検出された（図１９Ｅ～１９Ｇ）。
（実施例１５）
ＭＣＤ誘発ＮＡＳＨモデルにおいてＰＳＭＰ中和抗体による処置によりマウス肝線維症が緩和される
方法

【0240】

抗体による処置に関しては、８週齢の雄マウスにメチオニンおよびコリン欠乏（ＭＣＤ）食を５．５週間にわたって給餌した。マウスに１０ｍｇ／ｋｇのＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳを第４週から第５．５週まで週に１回注射した（ｉ．ｐ．）。別の抗体による処置に関しては、８週齢の雄マウスにＭＣＤ食を８週間にわたって給餌した。マウスに１０ｍｇ／ｋｇのＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５またはＰＢＳを第５週から第８週まで週に１回注射した（ｉ．ｐ．）。
結果

【0241】

ＭＣＤ食によって誘発される肝線維症に対するＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５の治療的潜在性を評価するために、マウスに第４週から第５．５週まで３Ｄ５による処置を使用した（図２０Ａ）。Ｈ＆Ｅ染色およびシリウスレッド染色アッセイならびにその定量により、３Ｄ５による処置後に、ＰＢＳ処置群と比較して肝傷害および線維症の低減が示された（図２０Ｂ～２０Ｄ）。ＭＣＤマウスにおいて第５週から第８週までさらなる３Ｄ５による処置を行った（図２０Ｅ）。シリウスレッドおよびα－ＳＭＡ免疫組織化学染色およびその定量により、３Ｄ５による処置後にＰＢＳ処置群と比較して肝線維症の低減が示された（図２０Ｆ－２０Ｉ）。
（実施例１６）
ＰＳＭＰの欠乏または中和によりマウス急性腎傷害（ＡＫＩ）および慢性腎疾患（ＣＫＤ）が緩和される
方法
マウスモデル

【0242】

ＵＵＯ群では、６週齢の雄マウス（約２０ｇ）の左側の尿管を腹部の左側腹部切開によって露出させ、４－０絹糸縫合を用いて２回結紮した。処置のために、マウスに５ｍｇ／ｋｇの３Ｄ５またはＰＢＳをＵＵＯ後１日目、４日目に注射した（ｉ．ｐ．）。５日後にマウスを屠殺した。

【0243】

グリセロールにより誘発された横紋筋融解症群では、マウスの大腿筋に７．５ｍｌ／ｋｇの、ＰＢＳで希釈した５０％グリセロールを筋肉内注射した。処置のために、マウスに、グリセロールの注射後に５ｍｇ／ｋｇの３Ｄ５またはＰＢＳを注射した（ｉ．ｐ．）。４８時間後にマウスを屠殺した。

【0244】

その後、左側の腎臓を取り出し、横方向に切断し、病理組織検査のために４％パラホルムアルデヒド中に固定したか、または他の実験のために液体窒素でスナップ凍結した。
生化学的アッセイ

【0245】

血清中クレアチニンおよび血中尿素窒素レベルの決定は、臨床の場での腎機能の確認を補助することにおいて大きな価値があるものである。クレアチニンの血清中レベルおよび血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、アッセイキットを使用し、製造者の指示に従って測定した（Ｎａｎｊｉｎｇ Ｊｉａｎｃｈｅｎｇ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、Ｎａｎｊｉｎｇ、Ｃｈｉｎａ）。
病理組織検査および免疫組織化学的分析

【0246】

パラホルムアルデヒドに固定した腎組織をパラフィンに包埋し、４μｍに切片作製した。キシレンで切片を脱ろうし、漸減エタノール濃度で再水化し、シリウスレッドで染色した。免疫組織化学染色のために、切片を、１０％ヤギ血清溶液を用いて室温で３０分間ブロッキングし、その後、α－ＳＭＡに対する一次抗体（Ａｂｃａｍ、ａｂ３２５７５）と一緒に４℃で終夜インキュベートした。切片を、二次抗体（ＺＳＧＢ－Ｂｉｏ）および３、３－ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）と一緒にインキュベートし、その後、Ｈ＆Ｅ染色を用いて簡単な対比染色を行い、中性ガムでマウントした。陽性領域を少なくとも１０倍（×２００）視野で計算した。
結果
ヒト腎疾患ではＰＳＭＰ発現が上方調節される

【0247】

ＰＳＭＰ発現が腎疾患に関連するかどうかを決定するために、ＰＳＭＰレベルを免疫組織化学的検査によって最初に調査した。付近の明細胞癌からのヒト正常腎組織ではＰＳＭＰの陰性または弱い発現が示された。ループス腎炎、ＩｇＡ腎炎、および膜性糸球体腎炎の尿細管においてＰＳＭＰが上方調節された（図２１Ａおよび２１Ｂ）。
ＰＳＭＰの欠乏および中和により、グリセロールにより誘発された横紋筋融解症が緩和される

【0248】

グリセロールにより誘発された横紋筋融解症のＰｓｍｐ^－／－マウスでは、血清中クレアチニンによって評価して、ＷＴマウスと比較して腎傷害の有意な減弱が示された（図２１Ｃ）。同時に、血清中クレアチニンおよびＢＵＮレベルを使用して決定される、グリセロール誘発横紋筋融解症のマウスに対するＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５の治療効果を調査した（図２１Ｄおよび２１Ｅ）。
ＵＵＯモデルにおいて、ＰＳＭＰシグナル伝達の中和により腎線維症が緩和される

【0249】

ＵＵＯ誘発腎線維症のマウスに対するＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５の治療効果を調査するために、マウスを、ＵＵＯ後１日目および４日目に３Ｄ５を用いて処置した（図２１Ｆ）。シリウスレッド染色アッセイにより、３Ｄ５による処置後にＰＢＳ処置群と比較して腎線維症の低減が示された（図２１Ｇおよび２１Ｈ；灰色の棒－３Ｄ５処置群、黒色の棒－ＰＢＳ処置群）。
（実施例１７）
抗ＰＳＭＰ中和抗体を用いた慢性ＧＶＨＤの処置

【0250】

慢性ＧＶＨＤは、自己免疫様症候群として現れる多様な臨床的特色のある症候群である。マウスにおけるｃＧＶＨＤ器官損傷には、皮膚、消化管、肝臓、肺、唾液腺、または口腔粘膜が関与し得る。一般に、例えば、Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｄｉｓ．
ｍｏｄｅｌ Ｍｅｃｈ． ４： ３１８－３３３， ２０１１を参照されたい。
方法

【0251】

本研究では慢性ＧＶＨＤ（ｃＧＶＨＤ）モデルを、６週齢の雄ＤＢＡ２マウス由来の脾臓細胞７×１０^７個を６週齢の雌Ｂ６Ｄ２Ｆ１マウスに照射を伴わずに注入することによって確立した。抗ＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５を２．５ｍｇ／ｋｇの用量で、毎週、細胞注入後に腹腔内に注入し、陰性対照処置としてマウスＩｇＧを使用した。マウスを体重および外見についてモニタリングし、脾臓細胞注入後８０日目に肝機能のマーカーを検出した。
結果

【0252】

抗ＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５により、ｃＧＶＨＤマウスの進行が逆転した。図２２Ａに示される通り、対照群と３Ｄ５処置群との間で体重に差異はなかった。脾臓細胞注入後４０日目に、眼瞼領域に毛皮の脱落が対照群のマウスで観察されたが、中和抗体３Ｄ５群では観察されなかった。図２２Ｂに示される通り、４０日目から８０日目まで毛皮の脱落は徐々に重度になったが、中和抗体３Ｄ５群では毛皮の脱落は観察されなかった。脾臓細胞注入後８０日目に、２つの群から末梢血を採取し、肝機能のマーカーを検出した。対照群由来の血清試料中の肝損傷のマーカーであるＡＬＴおよびＡＳＴは、３Ｄ５処置群におけるものよりも有意に高かった（図２２Ｃおよび２２Ｄ）。
（実施例１８）
抗ＰＳＭＰ中和抗体を用いたループスの処置
方法

【0253】

雄ＤＢＡ／２→雌Ｂ６Ｄ２Ｆ１移植片対宿主病モデルは、マウスループス腎炎モデルとしても周知である。本研究では、マウスループスモデルを、６週齢の雄ＤＢＡ／２マウス由来の脾臓細胞７×１０^７個を６週齢の雌Ｂ６Ｄ２Ｆ１マウスに注入することによって確立した。マウスＩｇＧまたは抗ＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５を２．５ｍｇ／ｋｇの用量で、毎週、細胞注入後に腹腔内に注入した。脾臓細胞注入後８０日目に腎機能のマーカーを検出した。血清中の総ＩｇＧを検出するためのＥＬＩＳＡのために、マウスの尾静脈から採血し、血清試料を得た。ＳｉｇｍａのＭｏｕｓｅ ＩｇＧ ＥＬＩＳＡ ｋｉｔ（カタログ番号１１３３３１５１００１）によって、製造者のプロトコールに従って総ＩｇＧを検出した。糸球体内の自己抗体沈着を検出するために、腎臓を包埋し、液体窒素でスナップ凍結した。切片（８μｍ）をアセトンで固定し、ＦＩＴＣとコンジュゲートした抗マウスＩｇＧ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で染色した。蛍光を共焦点顕微鏡法によって調査した。
結果

【0254】

ループス腎炎患者由来の腎組織においてＰＳＭＰの発現が上方調節されることが見いだされたので（実施例１６ならびに図２１Ａおよび２１Ｂを参照されたい）、マウスループスモデルに対するＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５を探究した。脾臓細胞注入後８０日目に、３Ｄ５で処置したマウスの腎機能を検出し、対照群と比較した。血清中クレアチニンおよび血中尿素窒素（ＢＵＮ）のレベルによって示される通り、ＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５群では対照群と比べて腎機能が有意に改善した（図２３Ａおよび２３Ｂ）。ループスにおける腎傷害は腎組織内に沈着した自己抗体に関連し得る。この研究により、ＰＳＭＰ中和抗体３Ｄ５により、対照群と比較して血清総ＩｇＧレベルおよび糸球体内の自己抗体沈着を低減することができることが示され（図２３Ｃおよび２３Ｄ）、これにより、ＰＳＭＰに対する中和抗体３Ｄ５がループスの間の腎臓保護の潜在性を有することが示される。
実施形態

【0255】

実施形態１．肝線維症を処置するための方法であって、肝線維症を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む方法。

【0256】

実施形態２．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態１に記載の方法。

【0257】

実施形態３．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態２に記載の方法。

【0258】

実施形態４．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態２に記載の方法。

【0259】

実施形態５．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態４に記載の方法。

【0260】

実施形態６．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセット（ｓａｉｄ ｓｅｔ ｏｆ ＶＨ ＣＤＲｓ）が、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態５に記載の方法。

【0261】

実施形態７．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態６に記載の方法。

【0262】

実施形態８．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態６に記載の方法。

【0263】

実施形態９．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態７に記載の方法。

【0264】

実施形態１０．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態８に記載の方法。

【0265】

実施形態１１．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１０に記載の方法。

【0266】

実施形態１２．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセット（ｓａｉｄ ｓｅｔ ｏｆ ＶＬ ＣＤＲｓ）が、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態５から１１のいずれか１つに記載の方法。

【0267】

実施形態１３．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態１２に記載の方法。

【0268】

実施形態１４．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１２に記載の方法。

【0269】

実施形態１５．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１３に記載の方法。

【0270】

実施形態１６．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１４に記載の方法。

【0271】

実施形態１７．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１６に記載の方法。

【0272】

実施形態１８．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態１１に記載の方法。

【0273】

実施形態１９．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態１７に記載の方法。

【0274】

実施形態２０．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態４から１７のいずれか１つに記載の方法。

【0275】

実施形態２１．抗体が、ヒト抗体である、実施形態４または５に記載の方法。

【0276】

実施形態２２．抗体が、単鎖抗体である、実施形態４から１９のいずれか１つに記載の方法。

【0277】

実施形態２３．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態４から１９のいずれか１つに記載の方法。

【0278】

実施形態２４．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態４から１９のいずれか１つに記載の方法。

【0279】

実施形態２５．肝線維症が、肝硬変に進行している、実施形態１から２４のいずれか１つに記載の方法。

【0280】

実施形態２６．肝線維症が、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）誘発肝線維症、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）誘発肝線維症、またはアルコール誘発肝線維症である、実施形態１から２５のいずれか１つに記載の方法。

【0281】

実施形態２７．肝硬変が、原発性胆汁性肝硬変である、実施形態２５に記載の方法。

【0282】

実施形態２８．肝線維症が、非アルコール性脂肪性肝疾患に関連するものである、実施形態１から２５のいずれか１つに記載の方法。

【0283】

実施形態２９．非アルコール性脂肪性肝疾患が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である、実施形態２８に記載の方法。

【0284】

実施形態３０．肝線維症の処置が、併用療法である、実施形態１から２９のいずれか１つに記載の方法。

【0285】

実施形態３１．肝線維症の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。

【0286】

実施形態３２．肝線維症を処置するための医薬の製造における、ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストの使用。

【0287】

実施形態３３．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態３１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは実施形態３２に記載の使用。

【0288】

実施形態３４．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態３３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0289】

実施形態３５．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態３３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0290】

実施形態３６．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態３５に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0291】

実施形態３７．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態３６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0292】

実施形態３８．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態３７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0293】

実施形態３９．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態３７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0294】

実施形態４０．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態３８に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0295】

実施形態４１．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態３９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0296】

実施形態４２．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態４１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0297】

実施形態４３．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態３７から４２のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0298】

実施形態４４．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態４３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0299】

実施形態４５．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態４３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0300】

実施形態４６．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態４４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0301】

実施形態４７．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態４５に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0302】

実施形態４８．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態４７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0303】

実施形態４９．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態４２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0304】

実施形態５０．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態４８に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0305】

実施形態５１．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態３５から４８のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0306】

実施形態５２．抗体が、ヒト抗体である、実施形態３５または３６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0307】

実施形態５３．抗体が、単鎖抗体である、実施形態３５から５０のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0308】

実施形態５４．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態３５から５０のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0309】

実施形態５５．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態３５から５０のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0310】

実施形態５６．肝線維症が、肝硬変に進行している、実施形態３１から５５のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0311】

実施形態５７．肝線維症が、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）誘発肝線維症、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）誘発肝線維症、またはアルコール誘発肝線維症である、実施形態３１から５６のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0312】

実施形態５８．肝硬変が、原発性胆汁性肝硬変である、実施形態５６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0313】

実施形態３９．肝線維症が、非アルコール性脂肪性肝疾患に関連するものである、実施形態３１から５６のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0314】

実施形態６０．非アルコール性脂肪性肝疾患が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である、実施形態５９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0315】

実施形態６１．肝線維症の処置が、併用療法である、実施形態３１から６０のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0316】

実施形態６２．肺線維症を処置するための方法であって、肺線維症を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む方法。

【0317】

実施形態６３．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態６２に記載の方法。

【0318】

実施形態６４．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態６３に記載の方法。

【0319】

実施形態６５．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態６３に記載の方法。

【0320】

実施形態６６．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態６５に記載の方法。

【0321】

実施形態６７．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態６６に記載の方法。

【0322】

実施形態６８．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態６７に記載の方法。

【0323】

実施形態６９．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態６７に記載の方法。

【0324】

実施形態７０．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態６８に記載の方法。

【0325】

実施形態７１．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態６９に記載の方法。

【0326】

実施形態７２．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態７１に記載の方法。

【0327】

実施形態７３．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態６６から７２のいずれか１つに記載の方法。

【0328】

実施形態７４．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態７３に記載の方法。

【0329】

実施形態７５．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態７３に記載の方法。

【0330】

実施形態７６．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態７４に記載の方法。

【0331】

実施形態７７．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態７５に記載の方法。

【0332】

実施形態７８．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態７７に記載の方法。

【0333】

実施形態７９．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態７２に記載の方法。

【0334】

実施形態８０．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態７８に記載の方法。

【0335】

実施形態８１．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態６５から７８のいずれか１つに記載の方法。

【0336】

実施形態８２．抗体が、ヒト抗体である、実施形態６５または６６に記載の方法。

【0337】

実施形態８３．抗体が、単鎖抗体である、実施形態６５から８０のいずれか１つに記載の方法。

【0338】

実施形態８４．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態６５から８０のいずれか１つに記載の方法。

【0339】

実施形態８５．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態６５から８０のいずれか１つに記載の方法。

【0340】

実施形態８６．肺線維症の処置が、併用療法である、実施形態６５から８４のいずれか１つに記載の方法。

【0341】

実施形態８７．肺線維症の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。

【0342】

実施形態８８．肺線維症を処置するための医薬の製造における、ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストの使用。

【0343】

実施形態８９．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態８７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは実施形態８８に記載の使用。

【0344】

実施形態９０．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態８９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0345】

実施形態９１．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態８９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0346】

実施形態９２．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態９１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0347】

実施形態９３．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態９２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0348】

実施形態９４．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態９３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0349】

実施形態９５．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態９３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0350】

実施形態９６．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態９４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0351】

実施形態９７．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態９５に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0352】

実施形態９８．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態９７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0353】

実施形態９９．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態９２から９８のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0354】

実施形態１００．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態９９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0355】

実施形態１０１．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態９９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0356】

実施形態１０２．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１００に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0357】

実施形態１０３．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１０１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0358】

実施形態１０４．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１０３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0359】

実施形態１０５．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態９８に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0360】

実施形態１０６．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態１０４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0361】

実施形態１０７．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態９１から１０４のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0362】

実施形態１０８．抗体が、ヒト抗体である、実施形態９１または９２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0363】

実施形態１０９．抗体が、単鎖抗体である、実施形態９１から１０６のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0364】

実施形態１１０．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態９１から１０６のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0365】

実施形態１１１．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態９１から１０６のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0366】

実施形態１１２．肺線維症の処置が併用療法である、実施形態８７から１１１のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0367】

実施形態１１３．非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、および原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）からなる群から選択される疾患を処置するための方法であって、ＮＡＦＬＤ、ＡＬＤ、ＰＳＣ、またはＰＢＣを有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む方法。

【0368】

実施形態１１４．非アルコール性脂肪性肝疾患が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である、実施形態１１３に記載の方法。

【0369】

実施形態１１５．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態１３３または１１４に記載の方法。

【0370】

実施形態１１６．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態１１５に記載の方法。

【0371】

実施形態１１７．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態１１５に記載の方法。

【0372】

実施形態１１８．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態１１７に記載の方法。

【0373】

実施形態１１９．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態１１８に記載の方法。

【0374】

実施形態１２０．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態１１９に記載の方法。

【0375】

実施形態１２１．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１１９に記載の方法。

【0376】

実施形態１２２．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１２０に記載の方法。

【0377】

実施形態１２３．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１２１に記載の方法。

【0378】

実施形態１２４．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１２３に記載の方法。

【0379】

実施形態１２５．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態１１８から１２４のいずれか１つに記載の方法。

【0380】

実施形態１２６．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態１２５に記載の方法。

【0381】

実施形態１２７．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１２５に記載の方法。

【0382】

実施形態１２８．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１２６に記載の方法。

【0383】

実施形態１２９．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１２７に記載の方法。

【0384】

実施形態１３０．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１２９に記載の方法。

【0385】

実施形態１３１．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態１２４に記載の方法。

【0386】

実施形態１３２．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態１３０に記載の方法。

【0387】

実施形態１３３．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態１１７から１３０のいずれか１つに記載の方法。

【0388】

実施形態１３４．抗体が、ヒト抗体である、実施形態１１７または１１８に記載の方法。

【0389】

実施形態１３５．抗体が、単鎖抗体である、実施形態１１７から１３２のいずれか１つに記載の方法。

【0390】

実施形態１３６．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態１１７から１３２のいずれか１つに記載の方法。

【0391】

実施形態１３７．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態１１７から１３２のいずれか１つに記載の方法。

【0392】

実施形態１３８．非アルコール性脂肪性肝疾患の処置が併用療法である、実施形態１１６から１３６のいずれか１つに記載の方法。

【0393】

実施形態１３９． 非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、および原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）からなる群から選択される疾患の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。

【0394】

実施形態１４０．非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、および原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）からなる群から選択される疾患を処置するための医薬の製造における、ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストの使用。

【0395】

実施形態１４１．非アルコール性脂肪性肝疾患が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である、実施形態１３９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは実施形態１４０に記載の使用。

【0396】

実施形態１４２．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態１３９から１４１のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0397】

実施形態１４３．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態１４２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0398】

実施形態１４４．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態１４２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0399】

実施形態１４５．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態１４４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0400】

実施形態１４６．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態１４５に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0401】

実施形態１４７．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態１４６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0402】

実施形態１４８．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１４６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0403】

実施形態１４９．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１４７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0404】

実施形態１５０．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１４８に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0405】

実施形態１５１．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１５０に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0406】

実施形態１５２．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態１４５から１５１のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0407】

実施形態１５３．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態１５２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0408】

実施形態１５４．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１５２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0409】

実施形態１５５．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１５３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0410】

実施形態１５６．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１５４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0411】

実施形態１５７．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１５６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0412】

実施形態１５８．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態１５１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0413】

実施形態１５９．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態１５７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0414】

実施形態１６０．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態１４４から１５７のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0415】

実施形態１６１．抗体が、ヒト抗体である、実施形態１４４または１４５に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0416】

実施形態１６２．抗体が、単鎖抗体である、実施形態１４４から１５９のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0417】

実施形態１６３．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態１４４から１５９のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0418】

実施形態１６４．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態１４４から１５９のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0419】

実施形態１６５．非アルコール性脂肪性肝疾患の処置が併用療法である、実施形態１３９から１６４のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0420】

実施形態１６６．肝線維症が、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、アルコール性肝炎、アルコール性肝硬変、Ｂ型慢性肝炎、Ｃ型慢性肝炎、Ｄ型慢性肝炎、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、ヘモクロマトーシス、嚢胞性線維症、ウィルソン病、胆道閉鎖症、アルファ１抗トリプシン欠損症、ガラクトース血症、糖原病、遺伝性消化系障害、アラジール症候群、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）、感染症、薬物誘発肝傷害、およびバッドキアリ症候群からなる群から選択される疾患または障害に関連するものである、実施形態１から２５のいずれか１つに記載の方法。

【0421】

実施形態１６７．肝線維症が、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、アルコール性肝炎、アルコール性肝硬変、Ｂ型慢性肝炎、Ｃ型慢性肝炎、Ｄ型慢性肝炎、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、ヘモクロマトーシス、嚢胞性線維症、ウィルソン病、胆道閉鎖症、アルファ１抗トリプシン欠損症、ガラクトース血症、糖原病、遺伝性消化系障害、アラジール症候群、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）、感染症、薬物誘発肝傷害、およびバッドキアリ症候群からなる群から選択される疾患または障害に関連するものである、実施形態３１から５６のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0422】

実施形態１６８．肺線維症が、皮膚筋炎、多発性筋炎、混合性結合組織疾患、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、肺炎、慢性放射線肺炎、塵肺症、感染症、および薬物誘発肺傷害からなる群から選択される疾患または障害に関連するものである、実施形態６２から８６のいずれか１つに記載の方法。

【0423】

実施形態１６９．肺線維症が、皮膚筋炎、多発性筋炎、混合性結合組織疾患、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、肺炎、慢性放射線肺炎、塵肺症、感染症、および薬物誘発肺傷害からなる群から選択される疾患または障害に関連するものである、実施形態８７から１１２のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0424】

実施形態１７０．移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、およびループス腎炎からなる群から選択される疾患または障害を処置するための方法であって、ＧＶＨＤまたはＳＬＥを有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む方法。

【0425】

実施形態１７１．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態１７０に記載の方法。

【0426】

実施形態１７２．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態１７１に記載の方法。

【0427】

実施形態１７３．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態１７１に記載の方法。

【0428】

実施形態１７４．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態１７３に記載の方法。

【0429】

実施形態１７５．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態１７４に記載の方法。

【0430】

実施形態１７６．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態１７５に記載の方法。

【0431】

実施形態１７７．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１７５に記載の方法。

【0432】

実施形態１７８．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１７６に記載の方法。

【0433】

実施形態１７９．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１７７に記載の方法。

【0434】

実施形態１８０．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１７９に記載の方法。

【0435】

実施形態１８１．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態１７４から１８０のいずれか１つに記載の方法。

【0436】

実施形態１８２．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態１８１に記載の方法。

【0437】

実施形態１８３．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１８１に記載の方法。

【0438】

実施形態１８４．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態１８２に記載の方法。

【0439】

実施形態１８５．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１８３に記載の方法。

【0440】

実施形態１８６．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態１８５に記載の方法。

【0441】

実施形態１８７．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態１８０に記載の方法。

【0442】

実施形態１８８．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態１８６に記載の方法。

【0443】

実施形態１８９．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態１７３から１８１のいずれか１つに記載の方法。

【0444】

実施形態１９０．抗体が、ヒト抗体である、実施形態１７３または１７４に記載の方法。

【0445】

実施形態１９１．抗体が、単鎖抗体である、実施形態１７３から１８８のいずれか１つに記載の方法。

【0446】

実施形態１９２．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態１７３から１８８でのいずれか１つに記載の方法。

【0447】

実施形態１９３．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態１７３から１８８のいずれか１つに記載の方法。

【0448】

実施形態１９４．疾患の処置が併用療法である、実施形態１７３から１９２のいずれか１つに記載の方法。

【0449】

実施形態１９５．移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、およびループス腎炎からなる群から選択される疾患または障害の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。

【0450】

実施形態１９６．移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、およびループス腎炎からなる群から選択される疾患または障害を処置するための医薬の製造における、ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストの使用。

【0451】

実施形態１９７．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態１９５に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは実施形態１９６に記載の使用。

【0452】

実施形態１９８．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態１９７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0453】

実施形態１９９．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態１９７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0454】

実施形態２００．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態１９９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0455】

実施形態２０１．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態２００に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0456】

実施形態２０２．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態２０１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0457】

実施形態２０３．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２０１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0458】

実施形態２０４．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２０２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0459】

実施形態２０５．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２０３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0460】

実施形態２０６．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２０５に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0461】

実施形態２０７．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態２００から２０６のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0462】

実施形態２０８．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態２０７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0463】

実施形態２０９．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２０７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0464】

実施形態２１０．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２０８に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0465】

実施形態２１１．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２０９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0466】

実施形態２１２．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２１１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0467】

実施形態２１３．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態２０６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0468】

実施形態２１４．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態２１２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0469】

実施形態２１５．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態１９９から２１２のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0470】

実施形態２１６．抗体が、ヒト抗体である、実施形態１９９または２００に記載の方法。

【0471】

実施形態２１７．抗体が、単鎖抗体である、実施形態１９９から２１４のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0472】

実施形態２１８．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態１９９から２１４のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0473】

実施形態２１９．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態１９９から２１４のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0474】

実施形態２２０．疾患の処置が併用療法である、実施形態１９５から２１９のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0475】

実施形態２２１．腎線維症を処置するための方法であって、腎線維症を有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む方法。

【0476】

実施形態２２２．急性腎傷害（ＡＫＩ）または慢性腎疾患を処置するための方法であって、ＡＫＩまたはＣＫＤを有する対象に、有効量のＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストを投与することを含む方法。

【0477】

実施形態２２３．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態２２１または２２２に記載の方法。

【0478】

実施形態２２４．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態２２３に記載の方法。

【0479】

実施形態２２５．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態２２３に記載の方法。

【0480】

実施形態２２６．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態２２５に記載の方法。

【0481】

実施形態２２７．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態２２６に記載の方法。

【0482】

実施形態２２８．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態２２７に記載の方法。

【0483】

実施形態２２９．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２２７に記載の方法。

【0484】

実施形態２３０．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２２８に記載の方法。

【0485】

実施形態２３１．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２２９に記載の方法。

【0486】

実施形態２３２．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２３１に記載の方法。

【0487】

実施形態２３３．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態２２６から２３２のいずれか１つに記載の方法。

【0488】

実施形態２３４．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態２３３に記載の方法。

【0489】

実施形態２３５．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２３３に記載の方法。

【0490】

実施形態２３６．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２３４に記載の方法。

【0491】

実施形態２３７．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２３５に記載の方法。

【0492】

実施形態２３８．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２３７に記載の方法。

【0493】

実施形態２３９．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態２３２に記載の方法。

【0494】

実施形態２４０．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態２３８に記載の方法。

【0495】

実施形態２４１．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態２２５から２３３のいずれか１つに記載の方法。

【0496】

実施形態２４２．抗体が、ヒト抗体である、実施形態２２５または２２６に記載の方法。

【0497】

実施形態２４３．抗体が、単鎖抗体である、実施形態２２５から２４０のいずれか１つに記載の方法。

【0498】

実施形態２４４．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態２２５から２４０のいずれか１つに記載の方法。

【0499】

実施形態２４５．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態２２５から２４０のいずれか１つに記載の方法。

【0500】

実施形態２４６．疾患の処置が併用療法である、実施形態２２５から２４４のいずれか１つに記載の方法。

【0501】

実施形態２４７．腎線維症が、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症、コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性または亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性または血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、および閉塞性腎症からなる群から選択される疾患または障害に関連するものである、実施形態２２１および２２３から２４６のいずれか１つに記載の方法。

【0502】

実施形態２４８．ＡＫＩが、横紋筋融解症誘発性である、実施形態２２２から２４６のいずれか１つに記載の方法。

【0503】

実施形態２４９．ＣＫＤが、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症、コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性または亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性または血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、および閉塞性腎症からなる群から選択される疾患または障害によって引き起こされるものである、実施形態２２２から２４６のいずれか１つに記載の方法。

【0504】

実施形態２５０．腎線維症の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。

【0505】

実施形態２５１．急性腎傷害（ＡＫＩ）または慢性腎疾患（ＣＫＤ）の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。

【0506】

実施形態２５２．腎線維症を処置するための医薬の製造における、ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストの使用。

【0507】

実施形態２５３．急性腎傷害（ＡＫＩ）および慢性腎疾患（ＣＫＤ）を処置するための医薬の製造における、ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストの使用。

【0508】

実施形態２５４．ＰＳＭＰアンタゴニストが、ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、実施形態２５０もしくは２５１に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは実施形態２５２もしくは２５３に記載の使用。

【0509】

実施形態２５５．可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態２５４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0510】

実施形態２５６．可溶性タンパク質が抗体である、実施形態２５４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0511】

実施形態２５７．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、実施形態２５６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0512】

実施形態２５８．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態２５７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0513】

実施形態２５９．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、実施形態２５８に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0514】

実施形態２６０．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２５８に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0515】

実施形態２６１．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２５９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0516】

実施形態２６２．各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２６０に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0517】

実施形態２６３．ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２６２に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0518】

実施形態２６４．抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、実施形態２５７から２６３のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0519】

実施形態２６５．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、実施形態２６４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0520】

実施形態２６６．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２６４に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0521】

実施形態２６７．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、実施形態２６５に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0522】

実施形態２６８．各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２６６に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0523】

実施形態２６９．ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、実施形態２６８に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0524】

実施形態２７０．抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、実施形態２６３に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0525】

実施形態２７１．抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、実施形態２６９に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0526】

実施形態２７２．抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、実施形態２５６から２６９のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0527】

実施形態２７３．抗体が、ヒト抗体である、実施形態２５６または２５７に記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0528】

実施形態２７４．抗体が、単鎖抗体である、実施形態２５６から２７１のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0529】

実施形態２７５．抗体が、二重特異性抗体である、実施形態２５６から２７１のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0530】

実施形態２７６．抗体が、免疫グロブリン定常領域をさらに含む、実施形態２５６から２７１のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0531】

実施形態２７７．疾患の処置が併用療法である、実施形態２５０から２７６のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0532】

実施形態２７８．腎線維症が、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症、コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性または亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性または血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、および閉塞性腎症からなる群から選択される疾患または障害に関連するものである、実施形態２５０、２５２および２５４から２７７のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0533】

実施形態２７９．ＡＫＩが、横紋筋融解症誘発性である、実施形態２５１および２５３から２７７のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0534】

実施形態２８０．ＣＫＤが、ＩｇＡ腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、半月体形成性糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧腎症、ループス腎炎、肝性腎症、多嚢胞性腎疾患、アルポート症候群、ファブリー病、原発性高シュウ酸尿症、シスチン蓄積症、コエンザイムＱ１０関連遺伝子変異により引き起こされる巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、補体３糸球体腎炎、急性または亜急性免疫複合体糸球体腎炎、腎血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、最近発症した腎動脈狭窄症（線維筋性または血管炎性）、糖尿病性腎疾患、慢性尿酸腎症、中毒性腎症、細菌性腎盂腎炎、ウイルス性腎症、多発性骨髄腫、および閉塞性腎症からなる群から選択される疾患または障害によって引き起こされるものである、実施形態２５１および２５３から２７７のいずれか１つに記載のＰＳＭＰアンタゴニストまたは使用。

【0535】

前述のことから、本明細書では例示のために本発明の特定の実施形態が記載されているが、本発明の主旨および範囲から逸脱することなく種々の改変が成され得ることが理解されよう。したがって、本発明は添付の特許請求の範囲による場合を除いて限定されない。本明細書において引用されている全ての刊行物、特許および特許出願は、これによりそれらの全体があらゆる目的に関して参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
肝線維症、肺線維症、または腎線維症の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。
(項目２)
前記ＰＳＭＰアンタゴニストが肝線維症の処置に使用するためのものであり、必要に応じて、前記肝線維症が肝硬変に進行している、項目１に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目３)
前記肝線維症が、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）誘発肝線維症、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）誘発肝線維症、もしくはアルコール誘発肝線維症であるか、または、
前記肝線維症が、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、および原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）からなる群から選択される疾患に関連するものであり、必要に応じて、前記非アルコール性脂肪性肝疾患が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である、項目２に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目４)
前記ＰＳＭＰアンタゴニストが肺線維症の処置に使用するためのものであり、必要に応じて、前記肺線維症が、薬物誘発肺傷害に関連するものである、項目１に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目５)
前記ＰＳＭＰアンタゴニストが腎線維症の処置に使用するためのものであり、
必要に応じて、前記腎線維症が、ループス腎炎、ＩｇＡ腎症、および膜性糸球体腎炎からなる群から選択される疾患または障害に関連するものである、項目１に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目６)
非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性肝疾患（ＡＬＤ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、および原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）からなる群から選択される疾患の処置に使用するための、ＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。
(項目７)
非アルコール性脂肪性肝疾患が、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である、項目６に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目８)
急性腎傷害（ＡＫＩ）または慢性腎疾患（ＣＫＤ）の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニストであって、
必要に応じて、前記ＡＫＩが、横紋筋融解症誘発性であり、
必要に応じて、前記ＣＫＤが、ループス腎炎、ＩｇＡ腎症、および膜性糸球体腎炎からなる群から選択される疾患または障害によって引き起こされるものである、
ＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目９)
移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、およびループス腎炎からなる群から選択される疾患または障害の処置に使用するためのＰＣ３分泌型マイクロタンパク質（ＰＳＭＰ）アンタゴニスト。
(項目１０)
ＰＳＭＰに特異的に結合する可溶性タンパク質である、項目１から９のいずれか一項に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目１１)
前記可溶性タンパク質が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、項目１０に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目１２)
前記可溶性タンパク質が抗体である、項目１０に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目１３)
前記抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む第２の抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合するものである、項目１２に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト
(項目１４)
前記抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂを含むＶＨドメインを含み、前記ＶＨ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、
ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、
ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、
ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、
項目１３に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目１５)
ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ１であり、
ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ２であり、
ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４のＣＤＲ－Ｈ３である、
項目１４に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目１６)
各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、項目１４に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目１７)
各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、項目１５に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目１８)
各ＶＨ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、
ＣＤＲ－Ｈ１_Ｒｅｆが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、
ＣＤＲ－Ｈ２_Ｒｅｆが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、
ＣＤＲ－Ｈ３_Ｒｅｆが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、
項目１６に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目１９)
ＣＤＲ－Ｈ１_Ａｂが、配列番号４の残基３１～３５に示されるアミノ酸配列を有し、
ＣＤＲ－Ｈ２_Ａｂが、配列番号４の残基５０～６９に示されるアミノ酸配列を有し、
ＣＤＲ－Ｈ３_Ａｂが、配列番号４の残基９９～１０８に示されるアミノ酸配列を有する、
項目１８に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２０)
前記抗体が、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、前記ＶＬ ＣＤＲのセットが、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、
ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、
ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、
ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１である、
項目１４から１９のいずれか一項に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２１)
ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、
ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、
ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である、
項目２０に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２２)
各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、項目２０に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２３)
各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものである、項目２１に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２４)
各ＶＬ ＣＤＲが、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、
ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、
ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、
ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、
項目２２に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２５)
ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、
ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、
ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する、項目２４に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２６)
前記抗体が、配列番号４に示されるアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む、項目１９に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２７)
前記抗体が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む、項目２５に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２８)
前記抗体が、ヒト化抗体またはキメラ抗体である、項目１２から２５のいずれか一項に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目２９)
前記抗体が、ヒト抗体である、項目１２または１３に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。
(項目３０)
前記抗体が、単鎖抗体である、項目１２から２７のいずれか一項に記載のＰＳＭＰアンタゴニスト。

【図1】

【図2】

【図3-1】

【図3-2】

【図4】

【図5-1】

【図5-2】

【図5-3】

【図5-4】

【図6-1】

【図6-2】

【図6-3】

【図6-4】

【図7-1】

【図7-2】

【図7-3】

【図7-4】

【図8-1】

【図8-2】

【図8-3】

【図8-4】

【図9-1】

【図9-2】

【図9-3】

【図9-4】

【図10-1】

【図10-2】

【図10-3】

【図10-4】

【図11-1】

【図11-2】

【図11-3】

【図11-4】

【図11-5】

【図12-1】

【図12-2】

【図12-3】

【図13】

【図14】

【図15-1】

【図15-2】

【図15-3】

【図15-4】

【図15-5】

【図15-6】

【図15-7】

【図15-8】

【図15-9】

【図15-10】

【図15-11】

【図16】

【図17-1】

【図17-2】

【図17-3】

【図18-1】

【図18-2】

【図18-3】

【図19-1】

【図19-2】

【図19-3】

【図20-1】

【図20-2】

【図20-3】

【図20-4】

【図21-1】

【図21-2】

【図21-3】

【図21-4】

【図21-5】

【図22-1】

【図22-2】

【図23-1】

【図23-2】

【配列表】

2024107313000001.app

【手続補正書】

【提出日】2024-06-11

【手続補正1】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４３

【補正方法】変更

【補正の内容】

【0043】

ＰＳＭＰアンタゴニストが、（ｉ）配列番号４に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）および（ｉｉ）配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体とＰＳＭＰへの結合に関して競合する抗体である他の相互排他的でない実施形態では、抗体は、相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂを含むＶＬドメインを含み、ＶＬ ＣＤＲのセットは、ＣＤＲの参照セットであるＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べて３つまたはそれ未満のアミノ酸置換を有し、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆは、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆは、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆは、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である（例えば、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べてアミノ酸置換をゼロ個有するＶＬ ＣＤＲのセット、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ１であり、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ２であり、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５のＣＤＲ－Ｌ３である）。各ＶＬ ＣＤＲは、例えば、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義、Ｋａｂａｔ定義、ＡｂＭ定義、または接触定義に従って定義されたものであり得る。具体的な変形形態では、各ＶＬ ＣＤＲは、ＣＤＲに関するＣｈｏｔｈｉａ定義に従って定義されたものであり、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆは、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆは、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆは、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する。一部のそのような実施形態では、ＶＬ ＣＤＲのセットは、ＣＤＲ－Ｌ１_Ｒｅｆ、ＣＤＲ－Ｌ２_Ｒｅｆ、およびＣＤＲ－Ｌ３_Ｒｅｆと比べてアミノ酸置換をゼロ個有し、したがって、ＣＤＲ－Ｌ１_Ａｂが、配列番号５の残基２４～３４に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ２_Ａｂが、配列番号５の残基５０～５６に示されるアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ－Ｌ３_Ａｂが、配列番号５の残基８９～９７に示されるアミノ酸配列を有する。一部の変形形態では、抗体は、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインに由来するヒト化ＶＬドメインを含む。他の実施形態では、抗体は、配列番号５に示されるアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む（例えば、抗体は、配列番号５のＶＬドメインを含むキメラ抗体である）。

【外国語明細書】