▶ ケロス セラピューティクス インコーポレイテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024107352
(43)【公開日】2024-08-08
(54)【発明の名称】ＡＬＫ２阻害剤の結晶形
(51)【国際特許分類】
C07D 487/04 20060101AFI20240801BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20240801BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240801BHJP
【ＦＩ】
C07D487/04 142
C07D487/04 CSP
A61K31/519
A61P43/00 111
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2024094803
(22)【出願日】2024-06-12
(62)【分割の表示】P 2021522993の分割
【原出願日】2019-10-25
(31)【優先権主張番号】62/751,255
(32)【優先日】2018-10-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】519165308
【氏名又は名称】ケロス セラピューティクス インコーポレイテッド
【氏名又は名称原語表記】ＫＥＲＯＳ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，ＩＮＣ．
(74)【代理人】
【識別番号】100105957
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 誠
(74)【代理人】
【識別番号】100068755
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 博宣
(74)【代理人】
【識別番号】100142907
【弁理士】
【氏名又は名称】本田 淳
(74)【代理人】
【識別番号】100152489
【弁理士】
【氏名又は名称】中村 美樹
(72)【発明者】
【氏名】ベスーン、サラ
(72)【発明者】
【氏名】ディアス、クリスタ
(72)【発明者】
【氏名】エバンス、キャサリン エイ．
(57)【要約】
【課題】ＡＬＫ２阻害剤である結晶および関連する医薬組成物を提供すること。
【解決手段】ＡＬＫ２阻害剤である結晶は、以下の構造（Ｉ）を有する化合物の結晶である。医薬組成物は、該構造（Ｉ）を有する化合物の結晶および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む。
【選択図】 図１
【解決手段】ＡＬＫ２阻害剤である結晶は、以下の構造（Ｉ）を有する化合物の結晶である。医薬組成物は、該構造（Ｉ）を有する化合物の結晶および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む。
【選択図】 図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）：
の構造を有する結晶性化合物。
【化1】
の構造を有する結晶性化合物。
【請求項2】
前記化合物が無水である、請求項１に記載の結晶性化合物。
【請求項3】
約７．０５±０．２、１５．１６±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、および２４．４７±０．２の２θ値を有する、請求項１または２に記載の結晶性化合物。
【請求項4】
約３．５８±０．２、７．０５±０．２、１３．８±０．２、１４．１６±０．２、１５．１６±０．２、１６．１８±０．２、１６．８０±０．２、１７．１５±０．２、１７．６９±０．２、１８．２９±０．２、１８．８４±０．２、２０．２９±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、２２．６８±０．２、２３．８４±０．２、２４．４７±０．２、２４．８４±０．２および２８．４７±０．２の２θ値を有する、請求項３に記載の結晶性化合物。
【請求項5】
約３．５８±０．２、７．０５±０．２、１０．５９±０．２、１０．７５±０．２、１３．８０±０．２、１４．１６±０．２、１５．１６±０．２、１５．６８±０．２、１６．１８±０．２、１６．８０±０．２、１７．１５±０．２、１７．６９±０．２、１７．９７±０．２、１８．２９±０．２、１８．５９±０．２、１８．８４±０．２、１９．２７±０．２、２０．２９±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、２１．５６±０．２、２１．７８±０．２、２２．６８±０．２、２３．８４±０．２、２４．４７±０．２、２４．８４±０．２、２５．１５±０．２、２６．１０±０．２、２７．１２±０．２、２７．７８±０．２、２８．４７±０．２、および２９．０６±０．２の２θ値を有する、請求項４に記載の結晶性化合物。
【請求項6】
実質的に図１に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、形態Ａと表記されている、請求項１または２に記載の結晶性化合物。
【請求項7】
約９．７９±０．２，１３．０５±０．２，２２．９１±０．２，２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、請求項１または２に記載の結晶性化合物。
【請求項8】
約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１６．７５±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、請求項７に記載の結晶性化合物。
【請求項9】
約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１３．６１±０．２、１４．３９±０．２、１６．７５±０．２、１８．５０±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、請求項８に記載の結晶性化合物。
【請求項10】
実質的に図２に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、形態Ｂと表記されている、請求項１または２に記載の結晶性化合物。
【請求項11】
式（Ｉ）：
の構造を有する結晶性化合物。
【化2】
の構造を有する結晶性化合物。
【請求項12】
約６．００±０．２、１２．００±０．２、１６．１４±０．２、１７．７２±０．２、１８．００±０．２、１８．６４±０．２および２３．５０±０．２の２θ値を有する、請求項１１に記載の結晶性化合物。
【請求項13】
実質的に図３に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、遊離塩基と表記されている、請求項１１に記載の結晶性化合物。
【請求項14】
請求項１～１３のいずれか一項に記載の塩および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項15】
式（Ｉ）：
の構造を有する結晶性化合物を調製するための方法であって：前記方法は、
ａ）式（Ｉ）化合物を提供すること；
ｂ）酸を加えて混合物を形成すること；および
ｃ）式（Ｉ）の化合物を含む混合物から式（Ｉ）の化合物を結晶化させること、
を含み、前記結晶性化合物は塩である、方法。
【化3】
の構造を有する結晶性化合物を調製するための方法であって：前記方法は、
ａ）式（Ｉ）化合物を提供すること；
ｂ）酸を加えて混合物を形成すること；および
ｃ）式（Ｉ）の化合物を含む混合物から式（Ｉ）の化合物を結晶化させること、
を含み、前記結晶性化合物は塩である、方法。
【請求項16】
前記結晶性化合物が無水である、請求項１５に記載の方法。
【請求項17】
前記結晶性化合物が水和物である、請求項１５に記載の方法。
【請求項18】
前記式（Ｉ）の化合物が少なくとも１つの溶媒中に存在する、請求項１５に記載の方法。
【請求項19】
前記酸が少なくとも１つの溶媒中に存在する、請求項１５に記載の方法。
【請求項20】
前記式（Ｉ）の化合物および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成する、請求項１８に記載の方法。
【請求項21】
前記式（Ｉ）の化合物および前記少なくとも１つの溶媒がスラリーまたは懸濁液を形成する、請求項１８に記載の方法。
【請求項22】
前記酸および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成する、請求項１９に記載の方法。
【請求項23】
前記酸および少なくとも１つの溶媒がスラリーまたは懸濁液を形成する、請求項１９に記載の方法。
【請求項24】
前記酸は、ＨＣｌ、ＨＢｒ、コハク酸、１－ＯＨ－２－ナフトエ酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、マロン酸、メタンスルホン酸、リン酸、トルエンスルホン酸および硫酸から選択される、請求項１５～２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項25】
前記酸がコハク酸である、請求項２４に記載の方法。
【請求項26】
各溶媒は、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジオキサン、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、ヘキサン、酢酸イソプロピル、メタノール、メチルエチルケトン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トルエン、２－プロパノール、１－ブタノール、水またはこれらの任意の組み合わせから独立して選択される、請求項１８～２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項27】
前記溶媒は、ＴＨＦ、エタノール、またはそれらの混合物である、請求項２６に記載の方法。
【請求項28】
前記酸は、少なくとも１つの溶媒中に存在し、式（Ｉ）の化合物に添加されてスラリーを形成し、前記スラリーから化合物を結晶化するステップは、前記スラリーから前記化合物を沈殿させることを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項29】
前記式（Ｉ）の化合物、前記酸および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成し、前記混合物から前記式（Ｉ）の化合物を結晶化するステップが、前記溶液を過飽和状態にして前記式（Ｉ）の化合物を溶液から沈殿させることを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項30】
前記溶液を過飽和にするステップが、反溶媒をゆっくりと加えること、前記溶液を冷却させること、前記溶液の体積を減らすこと、またはそれらの任意の組み合わせを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項31】
前記溶液を過飽和にするステップが、溶液を周囲温度以下に冷却することを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項32】
前記結晶性化合物を単離することをさらに含む、請求項１５～３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項33】
前記結晶性化合物を単離することは、前記混合物から前記結晶化された化合物を得るために遠心分離することを含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項34】
前記結晶性化合物を単離することは、前記混合物から前記結晶化された化合物を濾過することを含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項35】
前記結晶性化合物を減圧下で乾燥させることをさらに含む、請求項３２～３４に記載のいずれか一項に記載の方法。
【請求項36】
前記結晶性化合物が、請求項１～１３のいずれか一項に記載の結晶性化合物である、請求項１５～３５のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ＡＬＫ２阻害剤の結晶形に関する。
【背景技術】
【0002】
ＢＭＰシグナル伝達ファミリーは、ＴＧＦ－βスーパーファミリーの多様なサブセットである。２０を超える既知のＢＭＰリガンドは、３つの異なるＩＩ型（ＢＭＰＲＩＩ、ＡｃｔＲＩＩａおよびＡｃｔＲＩＩｂ）および少なくとも４つのＩ型（ＡＬＫ１、ＡＬＫ２、ＡＬＫ３、およびＡＬＫ６）受容体により認識される。二量体リガンドは受容体ヘテロマーの集合を促進し、構成的に活性なＩＩ型受容体セリン／スレオニンキナーゼがＩ型受容体セリン／スレオニンキナーゼをリン酸化することを可能にする。活性化されたＩ型受容体はＢＭＰ応答性（ＢＲ－）ＳＭＡＤエフェクター（ＳＭＡＤ１、５、および８）をリン酸化して、ＴＧＦシグナル伝達も促進する共ＳＭＡＤであるＳＭＡＤ４と複合体を形成して核移行を促進する。加えて、ＢＭＰシグナルは、ＳＭＡＤ非依存的にＭＡＰＫｐ３８のような細胞内エフェクターを活性化することができる。ノギン、コージン、グレムリン、フォリスタチンなどの可溶性ＢＭＰ阻害剤は、リガンドの隔離によりＢＭＰシグナル伝達を制限する。
【0003】
また、ペプチドホルモンであり、全身の鉄分バランスの中心的な調整因子であるヘプシジンの発現をＢＭＰシグナルが制御する役割も示唆されている。ヘプシジンは、脊椎動物の唯一の鉄輸送体であるフェロポーティンに結合し、その分解を促進する。フェロポーティンの活性が失われると、腸球、マクロファージ、肝細胞などの細胞内貯蔵物から血流に鉄が動員されなくなる。ＢＭＰシグナル伝達と鉄代謝との関連性は、治療薬のターゲットとして期待されている。
【0004】
ＢＭＰおよびＴＧＦ－βスーパーファミリーは、リガンド（現在２５種類以上）および受容体（ＢＭＰを認識する４つのＩ型および３つのＩＩ型受容体）のレベルで非常に多様な構造を有し、受容体の結合様式もヘテロ４量体であることから、可溶性受容体、内因性阻害剤、中和抗体を介してＢＭＰシグナルを阻害する従来のアプローチは実用的ではなく、効果的でもない。ノギンやフォリスタチンのような内因性阻害剤は、リガンドサブクラスに対する特異性が限られている。単一の受容体はリガンドに対する親和性が限られているが、受容体のヘテロ４量体は特定のリガンドに対する特異性が高い。特定のリガンドまたは受容体に特異的な中和抗体はこれまでにも記載されているが、このシグナル伝達系の構造的な多様性によって制限されているのも事実である。したがって、当技術分野では、ＢＭＰシグナル伝達経路に特異的に拮抗し、上記のような治療上または実験上の用途でこれらの経路を操作するために使用できる薬剤が必要とされている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
本発明の目的は、ＡＬＫ２阻害剤である結晶および関連する医薬組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本発明の一態様は、式（Ｉ）：
【0007】
【化1】
【0008】
の構造を有する結晶性化合物に関するものである。
本発明の別の態様は、式（Ｉ）の結晶性化合物を調製するための方法に関する。
特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の結晶性化合物、および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む、対象において使用するのに適した医薬調製物を提供する。特定の実施形態において、医薬調製物は、本明細書に記載されるような状態または疾患を治療または予防するのに使用するためのものであり得る。
本発明の別の態様は、式（Ｉ）の結晶性化合物を調製するための方法に関する。
特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の結晶性化合物、および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む、対象において使用するのに適した医薬調製物を提供する。特定の実施形態において、医薬調製物は、本明細書に記載されるような状態または疾患を治療または予防するのに使用するためのものであり得る。
【発明の効果】
【0009】
以上、本発明によれば、ＡＬＫ２阻害剤である結晶および関連する医薬組成物が提供できた。
【図面の簡単な説明】
【0010】
【発明を実施するための形態】
【0011】
特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）：
【0012】
【化2】
【0013】
の構造を有する結晶性化合物を提供する。
特定の実施形態において、式（Ｉ）の結晶性化合物は溶媒和されていない（例えば、結晶格子は溶媒の分子を含まない）。特定のそのような実施形態において、式（Ｉ）の結晶性化合物は、無水であるか、または実質的に無水である。
特定の実施形態において、式（Ｉ）の結晶性化合物は溶媒和されていない（例えば、結晶格子は溶媒の分子を含まない）。特定のそのような実施形態において、式（Ｉ）の結晶性化合物は、無水であるか、または実質的に無水である。
【0014】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、塩化物、臭化物、コハク酸塩、キシナホ酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、ヘミリンゴ酸塩、酒石酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、硫酸塩およびビス硫酸塩から選択されるアニオンを有する塩の形態である。好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、モノコハク酸塩などのコハク酸塩の形態である。
【0015】
本明細書に記載の任意の結晶性化合物は、本明細書に開示される任意の疾患または状態の治療のための医薬品の製造に使用することができる。
式（Ｉ）の化合物のモノコハク酸塩は、以下で詳細に説明するように、少なくとも「形態（Ｆｏｒｍ）Ａ」、「形態Ｂ」、「形態Ｃ」、および「形態Ｄ」として存在する。これらの異なる形態は、本明細書では「多形」として理解される。
式（Ｉ）の化合物のモノコハク酸塩は、以下で詳細に説明するように、少なくとも「形態（Ｆｏｒｍ）Ａ」、「形態Ｂ」、「形態Ｃ」、および「形態Ｄ」として存在する。これらの異なる形態は、本明細書では「多形」として理解される。
【0016】
結晶性化合物の多形は、粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）によって特徴付けることができる。θは、回折角を表し、単位は度である。特定の実施形態において、ＸＲＰＤに使用される回折計は、回折角を２倍の回折角θとして測定する。したがって、特定の実施形態において、本明細書に記載される回折パターンは、角度２θに対して測定されたＸ線強度を指す。
【0017】
特定の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の化合物の第１の無水結晶形態は、約７．０５±０．２、１５．１６±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、および２４．４７±０．２の２θ値を有する。さらなる実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の無水結晶性化合物は、約３．５８±０．２、７．０５±０．２、１３．８±０．２、１４．１６±０．２、１５．１６±０．２、１６．１８±０．２、１６．８０±０．２、１７．１５±０．２、１７．６９±０．２、１８．２９±０．２、１８．８４±０．２、２０．２９±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、２２．６８±０．２、２３．８４±０．２、２４．４７±０．２、２４．８４±０．２、および２８．４７±０．２の２θ値を有する。さらに別の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の無水結晶性化合物は、約３．５８±０．２、７．０５±０．２、１０．５９±０．２、１０．７５±０．２、１３．８０±０．２、１４．１６±０．２、１５．１６±０．２、１５．６８±０．２、１６．１８±０．２、１６．８０±０．２、１７．１５±０．２、１７．６９±０．２、１７．９７±０．２、１８．２９±０．２、１８．５９±０．２、１８．８４±０．２、１９．２７±０．２、２０．２９±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、２１．５６±０．２、２１．７８±０．２、２２．６８±０．２、２３．８４±０．２、２４．４７±０．２、２４．８４±０．２、２５．１５±０．２、２６．１０±０．２、２７．１２±０．２、２７．７８±０．２、２８．４７±０．２、および２９．０６±０．２の２θ値を有する。
【0018】
特定の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の化合物の無水結晶形態は、実質的に図１に示されるようなＸＲＰＤパターンを有しており、形態Ａと表記されている。
特定の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の化合物の第２の無水結晶形態は、約９．７９±０．２、１３．０５±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２、および２６．２５±０．２の２θ値を有する。さらなる実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の無水結晶性化合物は、約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１６．７５±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する。さらに別の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の無水結晶性化合物は、約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１３．６１±０．２、１４．３９±０．２、１６．７５±０．２、１８．５０±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する。
特定の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の化合物の第２の無水結晶形態は、約９．７９±０．２、１３．０５±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２、および２６．２５±０．２の２θ値を有する。さらなる実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の無水結晶性化合物は、約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１６．７５±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する。さらに別の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の無水結晶性化合物は、約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１３．６１±０．２、１４．３９±０．２、１６．７５±０．２、１８．５０±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する。
【0019】
特定の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の化合物の無水結晶形態は、実質的に図２に示すようなＸＲＰＤパターンを有しており、形態Ｂと表記されている。
特定の実施形態において、式（Ｉ）遊離塩基の化合物の第３の無水結晶形態は、約６．００±０．２、１２．００±０．２、１６．１４±０．２、１７．７２±０．２、１８．００±０．２、１８．６４±０．２および２３．５０±０．２の２θ値を有する。特定の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の化合物の無水結晶形態は、遊離塩基を表示した図３に実質的に示すようなＸＲＰＤパターンを有する。
特定の実施形態において、式（Ｉ）遊離塩基の化合物の第３の無水結晶形態は、約６．００±０．２、１２．００±０．２、１６．１４±０．２、１７．７２±０．２、１８．００±０．２、１８．６４±０．２および２３．５０±０．２の２θ値を有する。特定の実施形態において、式（Ｉ）モノコハク酸塩の化合物の無水結晶形態は、遊離塩基を表示した図３に実質的に示すようなＸＲＰＤパターンを有する。
【0020】
特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）モノコハク酸塩の結晶性化合物と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物に関する。特定の実施形態において、医薬組成物は、錠剤、カプセル剤、および懸濁剤から選択される。
【0021】
本明細書で使用される「実質的に純粋な」という用語は、９０％を超える純度である結晶多形を指し、これは、対応する非晶質化合物または結晶塩の代替多形を含む他の化合物を１０％未満含むことを意味する。好ましくは、結晶多形は、９５％を超える純度、またはさらに９８％を超える純度である。
【0022】
式（Ｉ）の化合物の結晶形を作製する方法
特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の構造を有する結晶性化合物を調製する方法に関し、同方法は以下を含む：
ａ）式（Ｉ）の化合物を提供すること；
ｂ）酸を加えて混合物を形成すること；および
ｃ）式（Ｉ）の化合物を含む混合物から式（Ｉ）の化合物を結晶化させること。
特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の構造を有する結晶性化合物を調製する方法に関し、同方法は以下を含む：
ａ）式（Ｉ）の化合物を提供すること；
ｂ）酸を加えて混合物を形成すること；および
ｃ）式（Ｉ）の化合物を含む混合物から式（Ｉ）の化合物を結晶化させること。
【0023】
特定の実施形態において、本発明の方法によって作製された結晶性化合物は無水である。他の実施形態において、本発明の方法によって作製された結晶性化合物は水和物である。
【0024】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、少なくとも１つの溶媒中に存在する。特定の実施形態において、酸は、少なくとも１つの溶媒中に存在する。
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物および少なくとも１つの溶媒は、溶液を形成する。特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物および少なくとも１つの溶媒は、スラリーまたは懸濁液を形成する。特定の実施形態において、酸および少なくとも１つの溶媒は、溶液を形成する。特定の実施形態において、酸および少なくとも１つの溶媒は、スラリーまたは懸濁液を形成する。
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物および少なくとも１つの溶媒は、溶液を形成する。特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物および少なくとも１つの溶媒は、スラリーまたは懸濁液を形成する。特定の実施形態において、酸および少なくとも１つの溶媒は、溶液を形成する。特定の実施形態において、酸および少なくとも１つの溶媒は、スラリーまたは懸濁液を形成する。
【0025】
特定の実施形態において、酸は、ＨＣｌ、ＨＢｒ、コハク酸、１－ＯＨ－２－ナフトエ酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、マロン酸、メタンスルホン酸、リン酸、トルエンスルホン酸、および硫酸から選択される。好ましい実施形態において、酸はコハク酸である。
【0026】
特定の実施形態において、溶媒は、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジオキサン、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、ヘキサン、酢酸イソプロピル、メタノール、メチルエチルケトン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トルエン、２－プロパノール、１－ブタノール、水、またはこれらの任意の組み合わせが含まれる。特定の好ましい実施形態において、例えば形態Ａを達成するために、溶媒はＴＨＦ、エタノールまたはそれらの混合物である。その他の好ましい実施形態において、例えば形態Ｂを達成するために、溶媒はエタノールである。
【0027】
特定の実施形態において、酸は、少なくとも１つの溶媒中に存在し、式（Ｉ）の化合物に添加されてスラリーを形成し、スラリーから化合物を結晶化するステップは、スラリーから化合物を沈殿させることを含む。
【0028】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物、酸、および少なくとも１つの溶媒が溶液を形成し、混合物から化合物を結晶化するステップは、溶液を過飽和状態にして式（Ｉ）の化合物を溶液から析出させることを含む。
【0029】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物を含む混合物を過飽和状態にすることは、ヘプタン、ヘキサン、エタノール、または有機溶媒と混和する別の極性または非極性の液体などの反溶媒をゆっくりと添加すること、溶液を冷却すること（溶液をシードするかどうかにかかわらず）、溶液の体積を減らすこと、またはそれらの任意の組み合わせを含む。特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物を含む混合物を過飽和状態にすることは、反溶媒を添加すること、溶液を周囲温度以下に冷却すること、および溶液から溶媒を蒸発させるなどして溶液の体積を減少させることを含む。特定の実施形態において、溶液を冷却させることは、受動的（例えば、溶液を周囲温度に放置する）または能動的（例えば、氷浴またはフリーザで溶液を冷却すること）であり得る。
【0030】
特定の実施形態において、調製方法は、結晶を濾過すること、結晶から流体をデカンテーションすること、または他の適切な分離技術によって、結晶を分離することをさらに含む。さらなる実施形態において、調製方法は、結晶を洗浄することをさらに含む。
【0031】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物を含む混合物はスラリーであり、混合物から化合物を結晶化させるステップは、スラリーから化合物を沈殿させることを含む。いくつかの実施形態において、結晶性化合物は、遠心分離によって単離される。
【0032】
特定の実施形態において、調製方法は、結晶化を誘導することをさらに含む。本方法は、例えば減圧下で結晶を乾燥させることを含むこともできる。特定の実施形態において、沈殿または結晶化を誘導することは、二次核生成を含み、核生成は、種結晶の存在または環境との相互作用（結晶化装置の壁、撹拌インペラー、超音波処理など）で起こる。
【0033】
特定の実施形態において、結晶を洗浄することは、反溶媒、アセトニトリル、エタノール、ヘプタン、ヘキサン、メタノール、テトラヒドロフラン、トルエン、水、またはそれらの組み合わせから選択される液体で洗浄することを含む。本明細書で使用される場合、「反溶媒（ａｎｔｉ－ｓｏｌｖｅｎｔ）」は、塩結晶が不溶性、最小溶解性、または部分的に可溶性である溶媒を意味する。実際には、塩の結晶が溶解している溶液に反溶媒を加えると、溶液中の塩の結晶の溶解度が低下し、それによって塩の沈殿が刺激される。特定の実施形態において、結晶は、反溶媒と有機溶媒との組み合わせで洗浄される。特定の実施形態において、反溶媒は水であり、他の実施形態では、ヘキサンまたはペンタンなどのアルカン溶媒、またはベンゼン、トルエン、またはキシレンなどの芳香族炭化水素溶媒である。特定の実施形態において、反溶媒はメタノールである。
【0034】
特定の実施形態において、結晶を洗浄することは、式（Ｉ）の結晶性化合物を、上述した溶媒または１つ以上の溶媒の混合物で洗浄することを含む。特定の実施形態において、洗浄の前に、溶媒または溶媒の混合物を冷却する。
【0035】
式（Ｉ）の化合物の結晶形の用途
様々な実施形態において、本発明は、ＢＭＰシグナル伝達経路を阻害する化合物、ならびにＢＭＰシグナル伝達の阻害によって利益を得る対象の疾患または状態を治療または予防する方法を提供するものである。様々な実施形態において、本発明の化合物は、本明細書に開示される式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩（薬学的に許容される塩を含む）を含む。
様々な実施形態において、本発明は、ＢＭＰシグナル伝達経路を阻害する化合物、ならびにＢＭＰシグナル伝達の阻害によって利益を得る対象の疾患または状態を治療または予防する方法を提供するものである。様々な実施形態において、本発明の化合物は、本明細書に開示される式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩（薬学的に許容される塩を含む）を含む。
【0036】
本明細書で引用されているすべての文献は、その全体が完全に記載されているかのように、参照により組み込まれている。特に定義されていない限り、本明細書で使用されている技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の通常の技術者によって一般的に理解されているものと同じ意味を有する。分子生物学における一般的な用語の定義は、ベンジャミン ルイス（Ｂｅｎｊａｍｉｎ Ｌｅｗｉｎ）、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓから刊行された「Ｇｅｎｅｓ Ｖ」、１９９４年（ＩＳＢＮ ０－１９－８５４２８７－９）；ケンドリュー（Ｋｅｎｄｒｅｗ）他（編）、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｔｄから刊行された「Ｔｈｅ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」、１９９４年（ＩＳＢＮ ０－６３２－０２１８２－９）；ロバート Ａ．マイヤーズ（Ｒｏｂｅｒｔ Ａ．Ｍｅｙｅｒｓ）（編）、ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．から刊行された「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ａ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」、１９９５年（ＩＳＢＮ １－５６０８１－５６９－８）などがある。アレン（Ａｌｌｅｎ）他、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ」、第２２版、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ（２０１２年９月１５日）；ホーンヤク（Ｈｏｒｎｙａｋ）他、「Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｎａｎｏｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２００８年）；シングルトン（Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ）およびセインスベリ（Ｓａｉｎｓｂｕｒｙ）、「Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」、第３版、改訂版、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（ニューヨーク州ニューヨーク、２００６年）；スミス（Ｓｍｉｔｈ）、「Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ」、第７版、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（ニューヨーク州ニューヨーク、２０１３年）；シングルトン（Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ）、「Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ ＤＮＡ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」、第３版、Ｗｉｌｅｙ－Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ（２０１２年１１月２８日）；およびグリーン（Ｇｒｅｅｎ）およびサムブルック（Ｓａｍｂｒｏｏｋ）、「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」、第４版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（ニューヨーク州コールドスプリングハーバー、２０１２年）は、当業者に、本出願で使用される多くの用語の一般的なガイドを提供する。抗体の調製方法に関する参考資料については、グリーンフィールド（Ｇｒｅｅｎｆｉｅｌｄ）、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」、第２版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（ニューヨーク州コールドスプリングハーバー、２０１３年）；ケーラー（Ｋｏｅｈｌｅｒ）およびミルシュタイン（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ）、「Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｌｉｎｅｓ ｂｙ ｃｅｌｌ ｆｕｓｉｏｎ」、Ｅｕｒ．Ｊ． ｍｍｕｎｏｌ．、１９７６年７月、６（７）：５１１－９；クイーン（Ｑｕｅｅｎ）およびセリック（Ｓｅｌｉｃｋ）、「Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ」、米国特許第５，５８５，０８９号明細書（１９９６年１２月）；およびリーヒマン（Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ）他、「Ｒｅｓｈａｐｉｎｇ ｈｕｍａｎ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅｒａｐｙ」、Ｎａｔｕｒｅ、１９８８年３月２４日、３３２（６１６２）：３２３－７、を参照のこと。
【0037】
当業者であれば、本発明の実施に使用できる、本明細書に記載されたものと類似または同等の多くの方法および材料を認識するであろう。本発明の他の特徴および利点は、本発明の実施形態の様々な特徴を例示した添付の図面と併せて、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。実際、本発明は、記載された方法および材料に決して限定されるものではない。便宜上、本明細書、実施例および添付の特許請求の範囲において本明細書で使用される特定の用語をここに収集する。
【0038】
特に明記されていない限り、または文脈から暗示されている場合を除き、以下の用語および句には、以下に示す意味が含まれている。特に明記しない限り、または文脈から明らかでない限り、以下の用語および句は、その用語または句が関連する技術において獲得した意味を排除するものではない。特に定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのものと同じ意味を有する。本発明は、本明細書に記載される特定の方法論、プロトコル、および試薬などに限定されず、それ自体が変化し得ることを理解されたい。本明細書で使用される定義および用語は、特定の実施形態を説明するのを助けるために提供され、発明の範囲は特許請求の範囲によってのみ制限されるので、請求項の発明を制限することを意図しない。
【0039】
特に明記しない限り、本願の１つ以上の実施形態を説明する文脈（特に特許請求の範囲の文脈）で使用される用語「ａ」および「ａｎ」ならびに「ｔｈｅ」および同様の参照は、単数形および複数形の両方を包含するように解釈することができる。本明細書での値の範囲の記載は、単に、範囲内に入る各個別の値を個別に参照するための略記法として機能することを意図している。本明細書で別段の指示がない限り、各個別の値は、あたかも本明細書に個別に記載されているかのように、本明細書に組み込まれる。本明細書に記載されているすべての方法は、本明細書で別段の指示がない限り、または文脈上明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順序で実行することができる。本明細書で特定の実施形態に関して提供される任意のおよびすべての例、または例示的な言語（例えば、「など（ｓｕｃｈ ａｓ）」）の使用は、単に本出願をよりよく照らすことを意図しており、そうでなければ請求される本出願の範囲に制限を課すものではない。「ｅ．ｇ．」という略語は、ラテン語のｅｘｅｍｐｌｉ ｇｒａｔｉａに由来し、本明細書では非限定的な例を示すために使用されている。従って、「ｅ．ｇ．」は用語「ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅ」と同義である。明細書の如何なる文言も、出願の実施に不可欠なクレームされていない要素を示すものと解釈してはならない。
【0040】
本明細書で使用される場合、「軟組織（ｓｏｆｔ ｔｉｓｓｕｅ）」という用語は、身体の他の構造および器官を結合、支持、または取り囲む組織を指すために使用される。「軟組織」という用語は、筋肉、靭帯、腱、筋膜、皮膚、線維組織、脂肪、滑膜、神経および／または血管を指すことができる。
【0041】
本明細書では、「異常な骨形成」という用語は、軟組織など、通常は骨が存在しない領域に骨が生成されることを指す。
用語「患者」、「対象」および「個体」は、本明細書において互換的に使用され、予防的治療を含む治療が提供される動物、特にヒトを指す。本明細書で使用される「対象」という用語は、ヒトおよび非ヒトの動物を指す。「非ヒト動物」および「非ヒト哺乳動物」という用語は、本明細書では互換的に使用され、すべての脊椎動物、例えば、非ヒト霊長類、（特に高等霊長類）、ヒツジ、イヌ、げっ歯類（マウスまたはラットなど）、モルモット、ヤギ、ブタ、ネコ、ウサギ、ウシなどの哺乳類、およびニワトリ、両生類、爬虫類などの非哺乳類を含む。いくつかの実施形態において、対象はヒトである。別の実施形態において、対象は、疾患モデルとしての実験動物または代用動物である。別の実施形態において、対象は、コンパニオンアニマル（例えば、イヌ、ネコ、ラット、モルモット、ハムスターなど）を含む飼いならされた動物である。
用語「患者」、「対象」および「個体」は、本明細書において互換的に使用され、予防的治療を含む治療が提供される動物、特にヒトを指す。本明細書で使用される「対象」という用語は、ヒトおよび非ヒトの動物を指す。「非ヒト動物」および「非ヒト哺乳動物」という用語は、本明細書では互換的に使用され、すべての脊椎動物、例えば、非ヒト霊長類、（特に高等霊長類）、ヒツジ、イヌ、げっ歯類（マウスまたはラットなど）、モルモット、ヤギ、ブタ、ネコ、ウサギ、ウシなどの哺乳類、およびニワトリ、両生類、爬虫類などの非哺乳類を含む。いくつかの実施形態において、対象はヒトである。別の実施形態において、対象は、疾患モデルとしての実験動物または代用動物である。別の実施形態において、対象は、コンパニオンアニマル（例えば、イヌ、ネコ、ラット、モルモット、ハムスターなど）を含む飼いならされた動物である。
【0042】
本明細書では、「異常な骨形成のリスクがある」という用語は、対象の集団において異常な骨形成を引き起こすことが知られている条件にさらされた対象を指す。このような条件にさらされたすべての対象が異常な骨形成を有するようになるわけではないが、これらの条件にさらされたすべての対象は「リスクにさらされている（ａｔ ｒｉｓｋ）」と見なすことができる。そのような条件は、典型的には、外傷、例えば、筋骨格系の外傷、中枢神経系損傷または脊髄損傷を含む。
【0043】
本明細書において使用される場合、障害または状態を「予防する」治療薬とは、統計的試料において、未処理の対照試料と比較して、処理された試料における障害または状態の発生を減少させる、または未処理の対照試料と比較して、障害または状態の１つ以上の症状の発症を遅らせるもしくは重症度を減少させる化合物を指す。
【0044】
「治療する」という用語は、予防的および／または治療的な治療を含む。「予防的または治療的」治療という用語は、当技術分野で認識されており、１つまたは複数の対象組成物の宿主への投与を含む。望ましくない状態（例えば、宿主動物の疾患または他の望ましくない状態）が臨床的に顕在化する前に投与される場合、その治療は予防的（すなわち、望ましくない状態の発症から宿主を保護する）であり、一方、望ましくない状態が顕在化した後に投与される場合、その治療は治療的（すなわち、既存の望ましくない状態またはその副作用を減少、改善、または安定化させることを目的とする）である。
【0045】
本明細書では、「減少する」、「低減した」、「低減」、または「阻害する」という用語はすべて、統計的に有意な量による特性、レベル、または他のパラメータの減少または軽減を意味するために使用される。いくつかの実施形態において、「低減する」、「低減」または「減少する」または「阻害する」は、典型的には、参照レベル（例えば、特定の治療法が欠如している）と比較して少なくとも１０％の減少を意味し、例えば、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、またはそれ以上の減少を含むことができる。本明細書で使用される場合、「低減」または「阻害」は、参照レベルと比較して完全な阻害または低減を包含しない。「完全な阻害」は、参照レベルと比較して１００％の阻害である。減少は、好ましくは、所与の障害のない個体の正常範囲内であると認められるレベルまで下げることができる。
【0046】
用語「増加した」、「増加する」、「向上する」または「活性化する」という用語はすべて、本明細書において、一般に、統計的に有意な量による特性、レベル、または他のパラメータの増加を意味するために使用される。疑義を回避するために、「増加した」、「増加する」、「向上する」または「活性化する」という用語は、参照レベルと比較して少なくとも１０％の増加を意味し、例えば、参照レベルと比較した場合、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％、または１００％の増加を含む１００％までの増加または１０～１００％の間のいずれかの増加を含み、あるいは、参照レベルと比較した場合の少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、または少なくとも約４倍、または少なくとも約５倍または少なくとも約１０倍の増加、少なくとも約２０倍の増加、少なくとも約５０倍の増加、少なくとも約１００倍の増加、少なくとも約１０００倍以上の増加を含む。
【0047】
「薬学的に許容される」という用語は、過度の毒性なしに対象（例えば、哺乳動物またはヒト）に投与することができる化合物および組成物を指すことができる。
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、活性成分と組み合わせると、成分が生物学的活性を保持することを可能にし、対象の免疫系と非反応性である任意の材料または物質を含むことができる。例としては、限定されるものではないが、リン酸緩衝生理食塩水、水、油／水型のエマルジョンなどのエマルジョン、および様々な種類の湿潤剤などの標準的な医薬担体のいずれかが含まれる。「薬学的に許容される担体」という用語は、組織培養培地を除外する。
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、活性成分と組み合わせると、成分が生物学的活性を保持することを可能にし、対象の免疫系と非反応性である任意の材料または物質を含むことができる。例としては、限定されるものではないが、リン酸緩衝生理食塩水、水、油／水型のエマルジョンなどのエマルジョン、および様々な種類の湿潤剤などの標準的な医薬担体のいずれかが含まれる。「薬学的に許容される担体」という用語は、組織培養培地を除外する。
【0048】
語句「ＡＬＫ２の活性」は、ＡＬＫ－２酵素活性（例えば、キナーゼ活性のような；ＡＬＫ－２がＢＭＰ応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化する能力）および／またはＡＬＫ－２媒介性シグナル伝達（例えば、ＢＭＰリガンドの結合によるＡＬＫ－２の活性化に続く下流のシグナル伝達および転写活性を媒介するＡＬＫ－２の能力など）を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ２の活性」は、ＡＬＫ２媒介ＢＭＰシグナル伝達を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ２の活性」は、ＡＬＫ２媒介ＢＭＰ応答遺伝子転写（例えば、ＢＭＰ／ＡＬＫ２シグナル伝達によって媒介される転写活性）を意味する。
【0049】
語句「ＡＬＫ５の活性」は、ＡＬＫ－５酵素活性（例えば、キナーゼ活性のような；ＴＧＦ－β応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化するＡＬＫ－５の能力；ＡＬＫ－５がＳＭＡＤ２またはＳＭＡＤ３をリン酸化する能力）および／またはＡＬＫ－５媒介性シグナル伝達（例えば、ＴＧＦ－βリガンドの結合によるＡＬＫ－５の活性化に続く下流のシグナル伝達および転写活性を媒介するＡＬＫ－５の能力）を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ５の活性」は、ＡＬＫ５媒介性ＴＧＦ－βシグナル伝達を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ５の活性」は、ＡＬＫ５媒介性ＴＧＦ－β応答性遺伝子転写（例えば、ＴＧＦβ／ＡＬＫ５シグナル伝達によって媒介される転写活性）を意味する。
【0050】
語句「ＡＬＫ１の活性」は、ＡＬＫ－１酵素活性（例えば、キナーゼ活性のような；ＡＬＫ－１がＢＭＰ応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化する能力）および／またはＡＬＫ－１媒介性シグナル伝達（例えば、ＢＭＰリガンドの結合によるＡＬＫ－１の活性化に続く下流のシグナル伝達および転写活性を媒介するＡＬＫ－１の能力など）を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ１の活性」は、ＡＬＫ１媒介ＢＭＰシグナル伝達を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ１の活性」は、ＡＬＫ１媒介ＢＭＰ応答遺伝子転写（例えば、ＢＭＰ／ＡＬＫ１シグナル伝達によって媒介される転写活性）を意味する。
【0051】
語句「ＡＬＫ４の活性」はＡＬＫ－４酵素活性（例えば、キナーゼ活性のような；ＡＬＫ－４がアクチビン応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化する能力；ＡＬＫ－４がＳＭＡＤ２またはＳＭＡＤ３をリン酸化する能力）および／またはＡＬＫ－４媒介性シグナル伝達（例えば、アクチビンリガンドの結合によるＡＬＫ－４の活性化に続く下流のシグナル伝達および転写活性を媒介するＡＬＫ－４の能力）を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ４の活性」は、ＡＬＫ４媒介アクチビンシグナル伝達を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ４の活性」は、ＡＬＫ４媒介アクチビン応答性遺伝子転写（例えば、アクチビン／ＡＬＫ４シグナル伝達によって媒介される転写活性）を意味する。
【0052】
語句「ＡＬＫ６の活性」は、ＡＬＫ－６酵素活性（例えば、キナーゼ活性のような；ＡＬＫ－６がＢＭＰ応答性ＳＭＡＤタンパク質をリン酸化する能力）および／またはＡＬＫ－６媒介性シグナル伝達（例えば、ＢＭＰリガンドの結合によるＡＬＫ－６の活性化に続く下流のシグナル伝達および転写活性を媒介するＡＬＫ－６の能力など）を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ６の活性」は、ＡＬＫ６媒介ＢＭＰシグナル伝達を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ６の活性」は、ＡＬＫ６媒介ＧＤＦ５シグナル伝達を意味する。いくつかの実施形態において、「ＡＬＫ６の活性」は、ＡＬＫ６媒介ＢＭＰ応答遺伝子転写（例えば、ＢＭＰ／ＡＬＫ６シグナル伝達によって媒介される転写活性）を意味する。
【0053】
ヒトＡＬＫ２は５０９アミノ酸のタンパク質である。タンパク質配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿１１０４５３７．１、（対応するヌクレオチド配列がＮＭ＿１１１１０６７．２である）、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＱ ０４７７１として公開されている。
【0054】
ヒトのＡＬＫ５は、少なくとも、５０３アミノ酸のタンパク質（アイソフォーム１）と４２６アミノ酸のタンパク質の２つのアイソフォームを有する。ヒトＡＬＫ５のアイソフォーム１のタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００４６０３．１（対応するヌクレオチド配列はＮＭ＿００４６１２．２）として公開されている。４２６アミノ酸のアイソフォームのタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１１２４３８８．１ ９ｆ（対応するヌクレオチド配列はＮＭ＿００１１３０９１６．１）として公開されている。両方のアイソフォームに関する情報はまた、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ３６８９７として公開されている。
【0055】
ヒトのＡＬＫ１は、５０３アミノ酸のタンパク質である。このタンパク質の配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１０７０８６９．１（ＮＭ＿００１０７７４０１．１に対応するヌクレオチド配列を有する；転写バリアント２）およびＮＰ＿００００１１．２（ＮＭ＿００００２０．２に対応するヌクレオチド配列を有する；転写バリアント１）、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ３７０２３として公開されている。
【0056】
ヒトＡＬＫ３は、５３２アミノ酸のタンパク質である。このタンパク質の配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００４３２０（対応するヌクレオチド配列はＮＭ＿００４３２９．２）、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ３６８９４として公開されている。
【0057】
ヒトのＡＬＫ４には、少なくとも３つのアイソフォームが存在する。アイソフォームａは、５０５アミノ酸のタンパク質である。このタンパク質の配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００４２９３（対応するヌクレオチド配列はＮＭ＿００４３０２）、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ３６８９６として公開されている。
【0058】
ヒトＡＬＫ６のアイソフォームａは、５３２アミノ酸のタンパク質であり、アイソフォームｂは５０２アミノ酸のタンパク質である。ヒトＡＬＫ６のアイソフォームａのタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１２４３７２２（対応するヌクレオチド配列はＮＭ＿００１２５６７９３．１）として公開されている。ヒトＡＬＫ６アイソフォームｂのタンパク質配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１１９４（ＮＭ＿０１２０３．２に対応するヌクレオチド配列を有する）として公開されている。
【0059】
前述の各タンパク質は、インビボでシグナル配列の切断などによりさらに処理され、成熟した形態になることに留意されたい。
本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、提示された定義された要素に加えて、他の要素も存在し得ることを意味する。「含む」の使用は、限定ではなく包含を意味する。
本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、提示された定義された要素に加えて、他の要素も存在し得ることを意味する。「含む」の使用は、限定ではなく包含を意味する。
【0060】
本明細書で使用される場合、「本質的にからなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という用語は、所与の実施形態に必要な要素を指す。この用語は、本発明のその態様の基本的および新規または機能的特徴に実質的に影響を及ぼさない追加の要素の存在を許容する。
【0061】
「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」という用語は、本明細書に記載されている組成物、方法、およびそれらの各構成要素であって、その実施形態の説明に記載されていない任意の要素を含まないものを指す。
【0062】
「任意の」または「任意に」とは、その後に記載された状況が発生してもしなくてもよいことを意味し、説明には状況が発生する例と発生しない例が含まれる。
発現における変化：発現における変化（ａｌｔｅｒｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）とは、生体試料（シェーグレン症候群患者からの試料、例えば唾液腺生検など）において検出可能な遺伝子転写産物（例えば、ｍＲＮＡ）または遺伝子産物（例えば、タンパク質）のレベルが、対照（健常者など）と比較して変化することを指す。発現の「変化」には、発現の増加（アップレギュレーション）または発現の減少（ダウンレギュレーション）が含まれる。
発現における変化：発現における変化（ａｌｔｅｒｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）とは、生体試料（シェーグレン症候群患者からの試料、例えば唾液腺生検など）において検出可能な遺伝子転写産物（例えば、ｍＲＮＡ）または遺伝子産物（例えば、タンパク質）のレベルが、対照（健常者など）と比較して変化することを指す。発現の「変化」には、発現の増加（アップレギュレーション）または発現の減少（ダウンレギュレーション）が含まれる。
【0063】
骨形成タンパク質６（ＢＭＰ６）：ＴＧＦ－βスーパーファミリーの成長因子の一つ。ＢＭＰ６の発現は、平滑筋細胞、成長板軟骨細胞、気管支上皮、角膜、表皮、唾液腺、神経系の細胞など、いくつかの異なる哺乳類の組織や細胞タイプで検出されている（ブレッシング（Ｂｌｅｓｓｉｎｇ）他、Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ、１３５（１）：２２７－２３９、１９９６年）。インビトロでは、ＢＭＰ６は、細胞分裂を抑制し、末端上皮の分化を促進し、軟骨内骨形成、骨芽細胞の分化および神経細胞の成熟を誘導することが示されている（ハイキンハイモ（Ｈｅｉｋｉｎｈｅｉｍｏ）他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、５９：５８１５－５８２１、１９９９年）。ＢＭＰ６は、植物関連成長因子（ＴＧＦＢ関連）、ＶＧＲ、ＶＧＲ１、ＶＧ－１関連タンパク質としても知られている。数多くの異なる種からのＢＭＰ６のゲノム、ｍＲＮＡおよびタンパク質の配列は、アメリカ国立生物工学情報センター（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）のＧｅｎＢａｎｋデータベースなどで公開されている。
【0064】
対照：「対照」とは、シェーグレン症候群の患者から得られた唾液腺試料など、実験試料との比較に使用される試料または標準品をいう。いくつかの実施形態において、対照は、健康なボランティアから得られた試料である（本明細書では、「正常」対照とも呼ばれる）。いくつかの実施形態において、対照は、過去の対照または標準値（すなわちベースラインまたは正常値を表す、以前に試験された対照試料または試料群）である。
【0065】
診断：徴候、症状および／または様々な検査の結果によって疾患を特定するプロセス。その過程で得られた結論は「診断」とも呼ばれる。一般的に行われる検査の形態には、身体検査、血液検査、医用画像、遺伝子分析、尿検査、および生検が含まれる。
【0066】
診断上有意な量：いくつかの実施形態において、「診断上有意な量」とは、ある患者集団と別の患者集団（シェーグレン症候群の患者集団と健常者の集団など）とを区別するのに十分な、生体試料中のＢＭＰ６（または他の遺伝子やタンパク質）のレベルの増加または減少を指す。いくつかの例において、診断上有意な増加または減少は、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも８倍、少なくとも１０倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍または少なくとも４０倍である。ＲＴ－ＰＣＲは、ＢＭＰ６の発現を検出する方法の一例として本明細書に記載されている。ＥＬＩＳＡなどのイムノアッセイは、ＢＭＰ６の発現を検出する方法の別の例である。しかしながら、当業者であれば、遺伝子の発現を測定する方法は他にも存在し、使用する方法によっては検出される発現量にばらつきが生じることを認識するであろう。したがって、診断上有意な量は、別の検出方法が使用される場合、変動する可能性がある。他の実施形態において、「診断上有意な量」とは、ある患者集団と他の患者集団（シェーグレン症候群の患者集団と健常者の対照群など）とを区別するのに十分な唾液腺の電位の増加または減少を指す。いくつかの例において、診断上有意な増加または減少は、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％または約５０％である。
【0067】
免疫抑制薬：体の免疫系の反応を低下させる作用を持つ薬剤や化合物を含む。いくつかの実施形態において、免疫抑制薬はコルチコステロイドである。他の実施形態において、免疫抑制薬は、低分子（シクロスポリンなど）またはモノクローナル抗体（サイトカインブロッカーなど）である。
【0068】
阻害剤：遺伝子産物の活性を低下させたり、遺伝子の発現を妨げたりすることができる任意の化合物、核酸分子、低分子、ペプチドまたはポリペプチド（抗体など）のこと。いくつかの例において、阻害剤は、直接的または間接的に、遺伝子によってコードされるタンパク質の活性を低減または阻害することができる。直接的な阻害は、例えば、タンパク質に結合し、それによってタンパク質が受容体などの意図された標的に結合するのを防ぐことによって達成される。間接的な阻害は、例えば、タンパク質の意図された標的、例えば受容体や結合パートナーに結合し、それによってタンパク質の活性を阻害または低下させることによって達成される。いくつかの例において、本開示の阻害剤は、特に、遺伝子の発現（転写、プロセシング、翻訳、翻訳後修飾）を妨害することによって、例えば、遺伝子のｍＲＮＡを妨害して遺伝子産物の翻訳をブロックすることによって、または遺伝子産物の翻訳後修飾によって、または細胞内局在の変化を引き起こすことによって、遺伝子の発現を低減または阻害することによって、遺伝子を阻害することができる。本発明の様々な実施形態において、阻害剤は、式（Ｉ）の１つ以上の化合物である。
【0069】
発現または活性を阻害する：本明細書で使用される場合、遺伝子（ＢＭＰ６など）の発現または活性を阻害する薬剤とは、細胞または組織においてその遺伝子（ＢＭＰ６など）によって発現されるｍＲＮＡまたはタンパク質のレベルを低下させるか、またはその遺伝子またはコード化されたタンパク質（ＢＭＰ６など）の１つ以上の活性を低下させる（排除することを含む）薬剤である。同様に、ＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤は、ＢＭＰシグナル伝達経路におけるシグナル伝達事象、例えば下流の標的のリン酸化、例えばＳＭＡＤ１／５／８のリン酸化などを阻害、遮断または防止する任意の化合物である。
【0070】
発現レベルの測定：試料中に存在する遺伝子産物の量を定量すること。定量化は、数値的または相対的のいずれかである。遺伝子産物（ＢＭＰ６ ｍＲＮＡまたはタンパク質など）の発現を検出することは、ＲＴ－ＰＣＲ、抗体結合（例えば、ＥＬＩＳＡ）、または免疫組織化学など、当技術分野で知られている、または本明細書に記載されている任意の方法を用いて達成することができる。いくつかの実施形態において、検出された変化は、対照と比較した発現の増加または減少である。いくつかの例において、検出された増加または減少は、対照と比較して、少なくとも２倍、少なくとも３倍、または少なくとも４倍の増加または減少である。本発明の方法の他の実施形態において、増加または減少は、診断上有意な量であり、これは、診断の統計的確率を提供するのに十分な大きさの変化を意味する。
【0071】
メチルＣｐＧ結合タンパク質２（ＭＥＣＰ２）：ＤＮＡメチル化は、真核生物のゲノムの主要な修飾であり、哺乳類の発生に不可欠な役割を果たしている。ヒトタンパク質ＭＥＣＰ２、ＭＢＤ１、ＭＢＤ２、ＭＢＤ３およびＭＢＤ４は、それぞれメチルＣｐＧ結合ドメイン（ＭＢＤ）を持つ核内タンパク質ファミリーである。ＭＢＤ３を除いて、これらの各タンパク質はメチル化されたＤＮＡに特異的に結合することができる。また、ＭＥＣＰ２、ＭＢＤ１、ＭＢＤ２は、メチル化された遺伝子のプロモーターからの転写を抑制することができる。他のＭＢＤファミリーメンバーとは対照的に、ＭＥＣＰ２はＸ連鎖性で、Ｘの不活性化を受ける。ＭＥＣＰ２は、幹細胞では無意味だが、胚の発生には必須である。ＭＥＣＰ２遺伝子の変異は、進行性の神経学的発達障害であり、女性の精神遅滞の最も一般的な原因の１つであるレット症候群のほとんどの症例の原因となっている。ＭＥＣＰ２は、ＲＳ、ＲＴＳ、ＲＴＴ、ＰＰＭＸ、ＭＲＸ１６、ＭＲＸ７９、ＭＲＸＳＬ、ＡＵＴＳＸ３、ＭＲＸＳ１３、およびＤＫＦＺｐ６８６Ａ２４１６０としても知られている。ＭＥＣＰ２のゲノム、ｍＲＮＡ、タンパク質の配列は、アメリカ国立生物工学情報センターのＧｅｎＢａｎｋデータベースなどで公開されている。
【0072】
ノギン（ＮＯＧ）：ＢＭＰ４やＢＭＰ６などのトランスフォーミング成長因子ベータ（ＴＧＦ－β）スーパーファミリーシグナル伝達タンパク質のメンバーに結合して不活化する分泌タンパク質。このタンパク質は、ＴＧＦ－βスーパーファミリーのメンバーよりも細胞外マトリックス中を効率的に拡散することで、形態形成のグラデーションを形成する主要な役割を果たしていると考えられる。このタンパク質は、発生の初期と後期の両方において、多面的な効果を持つと考えられる。ノギンのヌクレオチドとアミノ酸の配列は、ＧｅｎＢａｎｋデータベースなどで公開されている（ヒトノギンについてはＮＣＢＩ Ｇｅｎｅ ＩＤ９２４１を参照）。
【0073】
非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）：プロスタグランジンの産生を阻害することによって作用する抗炎症剤の一種。ＮＳＡＩＤＳは、抗炎症作用、鎮痛作用、解熱作用を示す。ＮＳＡＩＤＳの例としては、イブプロフェン、ケトプロフェン、ピロキシカム、ナプロキセン、スリンダック、アスピリン、サブサリチル酸コリン、ジフルニサル、フェノプロフェン、インドメタシン、メクロフェナム酸、サルサレート、トルメチン、サリチル酸マグネシウムなどが含まれる。
【0074】
唾液流量の回復（または唾液流量の増加）：シェーグレン症候群および／またはＢＭＰ６発現の増加に起因するような、唾液流量が減少している対象において、唾液分泌量を増加させるプロセスをいう。唾液流量の増加は、例えば、唾液流の速度の増加および／または唾液流の体積の増加によって示すことができる。いくつかの実施形態において、唾液流量の回復は、治療薬を投与することによって達成することができる。いくつかの例でにおいて、治療薬は、ピロカルピン（Ｓａｌａｇｅｎ（登録商標））またはセビメリン（Ｅｖｏｘａｃ（登録商標））などの医薬品である。他の例において、治療薬は、ＢＭＰ６の発現または活性の阻害剤である。
【0075】
涙液産生の回復：シェーグレン症候群に起因するような涙液の量が減少している対象の涙液の量を増加させるプロセス。いくつかの実施形態において、涙液産生を回復させることは、治療剤を投与することによって達成することができる。特定の例において、治療剤は、ＢＭＰ６の発現または活性の阻害剤である。
【0076】
唾液腺：唾液を分泌する外分泌腺。本明細書で使用される場合、「唾液腺」は、例えば、耳下腺、小唾液腺、顎下腺、舌下腺、フォンエブナー腺を含む、ヒト対象の任意の唾液腺を含む。口腔内には６００以上の小唾液腺がある。
【0077】
シェーグレン症候群（ＳＳ）：涙液や唾液を分泌する腺を免疫細胞が攻撃して破壊することを特徴とする自己免疫疾患。シェーグレン症候群は、生命を脅かしたり、命を縮めたりするものではないが、生活の質を著しく低下させる可能性がある。この疾患の特徴的な症状は、ドライマウスとドライアイである。シェーグレン症候群は、皮膚、鼻、膣の乾燥も引き起こす可能性があり、腎臓、血管、肺、肝臓、膵臓、脳などの体の他の器官に影響を及ぼすこともある。シェーグレン症候群は、米国では１００万～４００万人が罹患しており、女性はこの病気を発症する可能性が９倍高くなっている。シェーグレン症候群の患者の大半は、診断時に少なくとも４０歳以上である。
【0078】
シェーグレン症候群の対象を特定するために、いくつかの異なる基準を使用でき、以下の１つ以上を含む：（ｉ）眼症状（例えば、持続的なドライアイ、および／または、眼に砂や砂利が入ったような感覚が繰り返し起こる）；（ｉｉ）口腔症状（例えば、日常的な口渇感、持続的な唾液腺の腫れ、および／または、乾燥した食物を飲み込むために液体を飲むこと）；（ｉｉｉ）無麻酔で行ったシルマーテストの陽性結果（５分間で５ｍｍ以上）、および／またはローズベンガルスコアまたはその他の眼表面染色スコア（ｖａｎ Ｂｉｊｓｔｅｒｖｅｌｄのスコアリングシステムによる≧４）として定義される眼病変の客観的証拠；（ｉｖ）小唾液腺における病理組織学的検査（フォーカススコアまたはターブリースコアの測定）；（ｖ）刺激されていない全唾液流量（１５分間で≦１．５ｍｌ）に対する陽性結果、大唾液管における閉塞の証拠を伴わないびまん性唾液腺拡張（点状、空洞状、または破壊的なパターン）の存在を示す耳下腺唾液腺造影、および／またはトレーサーの遅延した取り込み、減少した濃度および／または遅延した排泄を示す唾液腺シンチグラフィにより、唾液腺病変の客観的証拠が示された唾液腺病変；または（ｖｉ）自己抗体（血清中にＲｏ（ＳＳＡ）抗原またはＬａ（ＳＳＢ）抗原、またはその両方に対する抗体が存在すること）。したがって、いくつかの実施形態において、上記の徴候または症状のうちの１つ以上を示す対象が、本明細書に開示される方法に従う治療のために選択される。
【0079】
他の結合組織疾患が存在しないにもかかわらず、ｓｉｃｃａ（乾燥）症状（ｓｉｃｃａ ｓｙｍｐｔｏｍｏｌｏｇｙ）が存在することを「原発性シェーグレン症候群」とする。原発性シェーグレン症候群は、病理組織学（項目ｉｖ）または血清学（項目ｖｉ）のいずれかが陽性である限り、上記６つの基準のうちいずれか４つの基準が陽性である対象、または上記４つ（つまり項目ｉｉｉ、ｉｖ、ｖ、ｖｉ）の客観的基準のうちいずれか３つの基準が存在する対象においても特徴づけることができる。自己免疫疾患（関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、進行性全身性硬化症、強皮症、多発性筋炎など）を有する患者は、上記の項目ｉまたは項目ｉｉに加え、項目ｉｉｉ、ｉｖ、およびｖのうちいずれか２つの基準が存在する場合、「二次性シェーグレン症候群」として特徴づけられる。
【0080】
治療上有効量：薬剤で治療されている対象または細胞において所望の効果を達成するのに十分な特定の薬剤または治療薬の量。薬剤の有効量は、治療される対象または細胞、および治療用組成物の投与方法を含むがこれらに限定されないいくつかの要因に依存するであろう。
【0081】
Ｘ（不活性）特異的転写産物（非タンパク質コーディング）（ＸＩＳＴ）：Ｘの不活性化は哺乳類の雌における初期発生過程であり、Ｘ染色体対の一方を転写的に不活性化し、それにより雄と雌の間の用量等価性を提供する。この過程は、Ｘ染色体のＸ不活性化中心（ＸＩＣ）と呼ばれる領域など、いくつかの因子によって制御されている。ＸＩＳＴ遺伝子は不活性なＸ染色体のＸＩＣのみから発現する。転写産物はスプライシングされるが、タンパク質をコードしていない。転写産物は核内に残り、不活性なＸ染色体を覆う。ＸＩＳＴは、ＸＣＥ、ＸＩＣ、ＳＸＩ１としても知られている。ＸＩＳＴのゲノムおよびＲＮＡ配列は、アメリカ国立生物工学情報センターのＧｅｎＢａｎｋデータベースなどで公開されている。
【0082】
略語
ＡＡＶ：アデノ随伴ウイルス
ＡＴＰ：アデノシン三リン酸
ＢＭＰ６：骨形成タンパク質６
ＢＳＡ：ウシ血清アルブミン
ＢＷ：体重
ＣＧＨ：比較ゲノムハイブリダイゼーション
ＥＬＩＳＡ：酵素結合免疫吸着アッセイ
ＥＰ：電位
ＦＳ：フォーカススコア
ＨＩＦ－１アルファ：低酸素誘導因子１－アルファ
ＨＯ：異所性骨化
ＨＴＳ：低張液
ＨＶ：健常ボランティア
ＩＦＮ：インターフェロン
ＩＬ：インターロイキン
ＩＭ：筋肉内
ＩＰＡ：Ｉｎｇｅｎｕｉｔｙ経路解析
ＭＥＣＰ２：メチルＣｐＧ結合タンパク質２
ＭｙＤ８８：骨髄分化一次応答遺伝子８８
ＮＯＤ：非肥満糖尿病
ＯＤ：光学密度
Ｏ／Ｎ：一晩
ＰＤＧＦ：血小板由来成長因子
ｐＳＳ：原発性シェーグレン症候群
ｑＰＣＲ：定量的ポリメラーゼ連鎖反応
ＲＩＮ：ＲＮＡ ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ ｎｕｍｂｅｒ
ＲＴ：室温
ＲＴ－ＰＣＲ：逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応
Ｒｕｎｘ２：ｒｕｎｔ関連転写因子２
ＲＶＤ：調節性容積減少
ＳＦＲ：唾液流量
ＳＧ：唾液腺
ＳＭＧ：顎下腺
ＳＳ：シェーグレン症候群
ＴＥＥＲ：経上皮電気抵抗
ＴＧＦ：トランスフォーミング成長因子
ＴＲＩＦ：ＴＩＲ－ドメインを含むアダプター誘導インターフェロン－β
ＷＴ：野生型
ＸＩＳＴ：Ｘ（不活性）特異的転写産物（非タンパク質コーディング）
さらに、文脈上別段の必要がない限り、単数形には複数形が含まれ、複数形には単数形が含まれるものとする。
ＡＡＶ：アデノ随伴ウイルス
ＡＴＰ：アデノシン三リン酸
ＢＭＰ６：骨形成タンパク質６
ＢＳＡ：ウシ血清アルブミン
ＢＷ：体重
ＣＧＨ：比較ゲノムハイブリダイゼーション
ＥＬＩＳＡ：酵素結合免疫吸着アッセイ
ＥＰ：電位
ＦＳ：フォーカススコア
ＨＩＦ－１アルファ：低酸素誘導因子１－アルファ
ＨＯ：異所性骨化
ＨＴＳ：低張液
ＨＶ：健常ボランティア
ＩＦＮ：インターフェロン
ＩＬ：インターロイキン
ＩＭ：筋肉内
ＩＰＡ：Ｉｎｇｅｎｕｉｔｙ経路解析
ＭＥＣＰ２：メチルＣｐＧ結合タンパク質２
ＭｙＤ８８：骨髄分化一次応答遺伝子８８
ＮＯＤ：非肥満糖尿病
ＯＤ：光学密度
Ｏ／Ｎ：一晩
ＰＤＧＦ：血小板由来成長因子
ｐＳＳ：原発性シェーグレン症候群
ｑＰＣＲ：定量的ポリメラーゼ連鎖反応
ＲＩＮ：ＲＮＡ ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ ｎｕｍｂｅｒ
ＲＴ：室温
ＲＴ－ＰＣＲ：逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応
Ｒｕｎｘ２：ｒｕｎｔ関連転写因子２
ＲＶＤ：調節性容積減少
ＳＦＲ：唾液流量
ＳＧ：唾液腺
ＳＭＧ：顎下腺
ＳＳ：シェーグレン症候群
ＴＥＥＲ：経上皮電気抵抗
ＴＧＦ：トランスフォーミング成長因子
ＴＲＩＦ：ＴＩＲ－ドメインを含むアダプター誘導インターフェロン－β
ＷＴ：野生型
ＸＩＳＴ：Ｘ（不活性）特異的転写産物（非タンパク質コーディング）
さらに、文脈上別段の必要がない限り、単数形には複数形が含まれ、複数形には単数形が含まれるものとする。
【0083】
本発明は、本明細書に記載される特定の方法論、プロトコル、および試薬などに限定されず、それ自体が変化し得ることを理解されたい。本明細書において使用されている用語は、特定の実施形態を説明するためのものであり、特許請求の範囲によってのみ定義される本発明の範囲を限定するものではない。
【0084】
本明細書において提供される方法および組成物は、部分的に、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物が、ＢＭＰＩ型受容体であるＡＬＫ２を介したシグナル伝達を阻害することによってＢＭＰ阻害剤として作用するという発見に基づく。さらに、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物は、軟組織における異常な骨形成の治療および／または予防に有効であることが本明細書に示されている。したがって、本明細書で提供されるのは、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物での治療を含む、軟組織における異常な骨形成の治療のための方法および組成物である。
【0085】
様々な実施形態において、本発明は、対象の軟組織における異常な骨の形成を治療するための方法を提供し、同方法は、本明細書に記載の治療有効量の１つ以上の結晶性化合物または組成物を投与することを含む。いくつかの実施形態において、対象は、治療前に異常な骨形成を有するか、または有するリスクがあると決定される。いくつかの実施形態において、対象は、筋骨格外傷、脊髄損傷、または中枢神経系損傷を受けている。いくつかの実施形態において、異常な骨の形成は、異所性骨化疾患に関連している。いくつかの実施形態において、異所性骨化疾患は、後天性異所性骨化症、進行性骨化性線維異形成症、強直性脊椎症、外傷性異所性骨化症、火傷または爆傷に関連する異所性骨化症、および関節置換手術に関連する異所性骨化症からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、軟組織は、筋肉、腱、靭帯、および／または筋膜を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの追加の薬剤が対象に投与される。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの追加の薬剤は、コルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、リポキシゲナーゼ阻害剤、ロイコトリエン阻害剤、マスト細胞安定剤、抗ヒスタミン剤、ＴＮＦ阻害剤、ＩＬ－２３ブロッカー、またはＩＬ－１シグナル伝達の阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される１つ以上の結晶性化合物または組成物の治療有効量は、５ｍｇ／ｋｇ～２５０ｍｇ／ｋｇの範囲内の用量を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物の治療有効量は、総体重の２０％を超える体重減少を引き起こさない。
【0086】
様々な実施形態において、本発明は、対象の軟組織における異常な骨の形成を治療するための方法を提供し、同方法は、治療有効量のＢＭＰＩ型セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤を対象に投与することを含み、ここで、ＢＭＰＩ型セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩ型セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＡＬＫ２、ＡＬＫ３、またはＡＬＫ６である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩ型セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＡＬＫ２またはＡＬＫ３である。
【0087】
様々な実施形態において、本発明は、対象の軟組織における異常な骨の形成を治療するための方法を提供し、同方法は、治療有効量のＢＭＰＩＩ型セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤を対象に投与することを含み、ここで、ＢＭＰＩＩ型セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩＩ型セリン－スレオニン受容体は、ＡＣＶＲ２Ａ、ＡＣＶＲ２Ｂ、ＢＭＰＲ２、またはＴＧＦβＲ２である。
【0088】
様々な実施形態において、本発明は、対象においてセリン－スレオニンキナーゼ受容体を阻害するための方法を提供し、同方法は、セリン－スレオニンキナーゼ受容体を阻害するのに有効な条件下で、セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤を対象に投与することを含み、ここで、セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＢＭＰＩ型受容体、ＢＭＰＩＩ型受容体、またはＴＧＦ－βＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＢＭＰＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩ型受容体は、ＡＬＫ２、ＡＬＫ３、またはＡＬＫ６である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩ型受容体は、ＡＬＫ２またはＡＬＫ３である。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＢＭＰＩＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩＩ型受容体は、ＡＣＶＲ２Ａ、ＡＣＶＲ２Ｂ、ＢＭＰＲ２、またはＴＧＦβＲ２である。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＴＧＦ－βＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、ＴＧＦ－βＩ型受容体は、ＡＬＫ５である。
【0089】
様々な実施形態において、本発明は、セリン－スレオニンキナーゼ受容体を阻害するための１つ以上の化合物を同定するための方法を提供し、同方法は、以下を含む：ａ）セリン－スレオニンキナーゼ受容体を含む試料を提供すること；ｂ）試料を本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物と接触させること；およびｃ）セリン－スレオニンキナーゼ受容体を阻害する１つ以上の化合物を同定するためのアッセイを行うことであって、アッセイがインビトロアッセイ、インビボアッセイ、またはエクスビボアッセイであること。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＢＭＰＩ型受容体、ＢＭＰＩＩ型受容体、またはＴＧＦ－βＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、アッセイは、インビトロアッセイである。
【0090】
様々な実施形態において、本発明は、シェーグレン症候群を有する対象を治療する方法を提供し、同方法は以下を含む：ａ）対照と比較して対象の唾液腺においてＢＭＰ６の発現が増加した対象を選択すること；ｂ）ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する治療有効量の薬剤を対象に投与し、それによりシェーグレン症候群に罹患した対象を治療することであって、ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する薬剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である治療すること。いくつかの実施形態において、唾液腺は、小唇唾液腺、耳下腺、または顎下腺である。
【0091】
様々な実施形態において、本発明は、びまん性内因性橋グリオーマ（ｄｉｆｆｕｓｅ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｐｏｎｔｉｎｅ ｇｌｉｏｍａ）（ＤＩＰＧ）を有する対象を治療する方法であって、びまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）を有する対象を選択することと、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物の治療有効量を対象に投与することと、を含み、それによって、びまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）を有する対象を治療する方法を提供する。
【0092】
様々な実施形態において、本発明は、対象の軟組織における異常な骨の形成を治療するための方法を提供し、同方法は、治療有効量のＴＧＦ－βＩ型受容体セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤を対象に投与することを含み、ここで、ＴＧＦ－βＩ型セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。いくつかの実施形態において、ＴＧＦ－βＩ型受容体は、ＡＬＫ５である。
【0093】
様々な実施形態において、本発明は、対象においてセリン－スレオニンキナーゼ受容体を阻害するための方法を提供し、同方法は、セリン－スレオニンキナーゼ受容体を阻害するのに有効な条件下で、セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤を対象に投与することを含み、ここで、セリン－スレオニンキナーゼ受容体の阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＢＭＰＩ型受容体、ＢＭＰＩＩ型受容体、またはＴＧＦ－βＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＢＭＰＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩ型受容体は、ＡＬＫ２、ＡＬＫ３、またはＡＬＫ６である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩ型受容体は、ＡＬＫ２またはＡＬＫ３である。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＢＭＰＩＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰＩＩ型受容体は、ＡＣＶＲ２Ａ、ＡＣＶＲ２Ｂ、ＢＭＰＲ２、またはＴＧＦβＲ２である。いくつかの実施形態において、セリン－スレオニンキナーゼ受容体は、ＴＧＦ－βＩ型受容体である。いくつかの実施形態において、ＴＧＦ－βＩ型受容体は、ＡＬＫ５である。
【0094】
様々な実施形態において、本発明は、対象における唾液流量を増加させる方法を提供し、同方法は以下を含む：ａ）対照と比較して対象の唾液腺におけるＢＭＰ６の発現が増加した対象を選択すること；ｂ）ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する治療有効量の薬剤を対象に投与し、それにより対象の唾液流量を増加させることであって、ここでＢＭＰ６の発現または活性を阻害する薬剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である増加させること、あるいは顎下腺。
【0095】
様々な実施形態において、本発明は、対象における唾液流量を増加させる方法を提供し、同方法は以下を含む：ａ）対照と比較して対象の唾液腺におけるＢＭＰ６の発現が増加した対象を選択すること；ｂ）ＢＭＰシグナル伝達を阻害する治療有効量の薬剤を対象に投与し、それにより対象の唾液流量を増加させ、ここで、ＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤は、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物である、増加させること。いくつかの実施形態において、唾液腺は、小唇唾液腺、耳下腺、または顎下腺である。
【0096】
異所性骨化疾患
「異所性骨化」という用語は、通常、骨が存在しない軟組織における骨の異常な形成を指す。後天性異所性骨化症は、基本的にあらゆる筋骨格外傷、脊髄損傷、中枢神経系損傷、頭部外傷、脳血管障害、鎌状赤血球貧血、血友病、破傷風、ポリオ、多発性硬化症、中毒性表皮壊死症および火傷などで発生する可能性がある。筋骨格系の外傷の例としては、限定されるものではないが、股関節、膝関節、肩関節、肘関節の人工関節置換術、骨折、関節脱臼、あるいは大腿四頭筋や上腕筋などの軟組織の外傷などが挙げられる。後天性異所性骨化症はまた、発熱、腫れ、および紅斑（例えば、皮膚の局所的な斑状の発赤）と関連している可能性がある。一実施形態において、神経原性異所性骨化は、局所的な外傷と関連していない。
「異所性骨化」という用語は、通常、骨が存在しない軟組織における骨の異常な形成を指す。後天性異所性骨化症は、基本的にあらゆる筋骨格外傷、脊髄損傷、中枢神経系損傷、頭部外傷、脳血管障害、鎌状赤血球貧血、血友病、破傷風、ポリオ、多発性硬化症、中毒性表皮壊死症および火傷などで発生する可能性がある。筋骨格系の外傷の例としては、限定されるものではないが、股関節、膝関節、肩関節、肘関節の人工関節置換術、骨折、関節脱臼、あるいは大腿四頭筋や上腕筋などの軟組織の外傷などが挙げられる。後天性異所性骨化症はまた、発熱、腫れ、および紅斑（例えば、皮膚の局所的な斑状の発赤）と関連している可能性がある。一実施形態において、神経原性異所性骨化は、局所的な外傷と関連していない。
【0097】
遺伝性疾患である進行性骨化性線維異形成症（ＦＯＰ）および進行性骨化性異形成症（ＰＯＨ）は、異所性骨形成の最も重篤な症状である。ＦＯＰははまれに発生し、骨形成タンパクＩ型受容体をコードするＡＣＶＲ１の変異の結果である。ＰＯＨ患者はＧＮＡＳ遺伝子の不活性化変異を有し、この変異が母親から遺伝する場合、オルブライト遺伝性骨異栄養症（ＡＨＯ）を生じる。
【0098】
円周性骨化性筋炎は、線維芽細胞、新しい骨、および／または軟骨が筋肉内で増殖することを特徴とする。
一般的にＨＯは、怪我をしてから３週間から１２週間の間に発症する。異所性骨化は、コンピュータ断層撮影、骨シンチグラフィ、超音波検査で確実に診断することができる。２～６週間後には、異常な骨形成が進行し、Ｘ線撮影で検出できるようになる。骨の成熟は通常６ヶ月以内に起こる。
一般的にＨＯは、怪我をしてから３週間から１２週間の間に発症する。異所性骨化は、コンピュータ断層撮影、骨シンチグラフィ、超音波検査で確実に診断することができる。２～６週間後には、異常な骨形成が進行し、Ｘ線撮影で検出できるようになる。骨の成熟は通常６ヶ月以内に起こる。
【0099】
異所性骨化症の従来の治療法：従来の治療では、通常、非ステロイド性抗炎症薬（インドメトシン、ロフェコキシブ）、またはビスフォスフォネート（エチドロネート、パミドロネート）、クマジン／ワルファリン、サリチル酸塩、および／または局所放射線を投与することができる。多くの場合、治療の唯一の選択肢は手術である。
【0100】
治療の成果は、ＨＯの標準的な放射線学的評価システムで測定することができ、この評価システムには、ゴニオメータで測定した患部の関節可動域の変化、ＨＯに関連する臨床症状や徴候が客観的に改善するまでの平均時間、標準化された機能的または関節固有の指標の変化に関する測定が含まれる。
【0101】
用途
ＢＭＰおよびＴＧＦ－βのシグナル伝達経路は、正常な器官形成やパターン形成、また成熟した組織の正常および病的なリモデリングに不可欠である。ＢＭＰシグナル伝達経路の欠損は、遺伝性出血性毛細血管拡張症症候群、原発性肺高血圧症、若年性家族性ポリポーシス、さらには散発性の腎細胞癌や前立腺癌など、多くの先天性および後天性の疾患プロセスに関与している。シグナル伝達成分の欠損に関連する特定の疾患状態では、ＢＭＰシグナルの減衰が原因である可能性が示唆されているが、一方で、一部の状況では過剰なＢＭＰシグナルが病因となる可能性も示唆されている（ウエイテ（Ｗａｉｔｅ）他、Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．、４：７６３－７７３、２００５；ユ（Ｙｕ）他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８０：２４４４３－２４４５０、２００３）。ＢＭＰシグナル伝達を実験的に調節することができれば、治療法を検討するための手段、およびこれらの状態の根本原因を決定するための手段を提供することができる。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ＢＭＰ１型受容体であるＡＬＫ２の阻害剤であり、ＢＭＰ経路を介したシグナル伝達を妨害するために使用することができる。
ＢＭＰおよびＴＧＦ－βのシグナル伝達経路は、正常な器官形成やパターン形成、また成熟した組織の正常および病的なリモデリングに不可欠である。ＢＭＰシグナル伝達経路の欠損は、遺伝性出血性毛細血管拡張症症候群、原発性肺高血圧症、若年性家族性ポリポーシス、さらには散発性の腎細胞癌や前立腺癌など、多くの先天性および後天性の疾患プロセスに関与している。シグナル伝達成分の欠損に関連する特定の疾患状態では、ＢＭＰシグナルの減衰が原因である可能性が示唆されているが、一方で、一部の状況では過剰なＢＭＰシグナルが病因となる可能性も示唆されている（ウエイテ（Ｗａｉｔｅ）他、Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．、４：７６３－７７３、２００５；ユ（Ｙｕ）他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８０：２４４４３－２４４５０、２００３）。ＢＭＰシグナル伝達を実験的に調節することができれば、治療法を検討するための手段、およびこれらの状態の根本原因を決定するための手段を提供することができる。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ＢＭＰ１型受容体であるＡＬＫ２の阻害剤であり、ＢＭＰ経路を介したシグナル伝達を妨害するために使用することができる。
【0102】
鉄欠乏症や慢性疾患の貧血を含む貧血の治療
総説については、ウェイス（Ｗｅｉｓｓ）他、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３５２：１０１１－１０２３、２００５を参照されたい。炎症性貧血（慢性疾患貧血とも呼ばれる）は、慢性感染症、自己免疫疾患（全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、キャッスルマン病など）、炎症性腸疾患、がん（多発性骨髄腫を含む）、腎不全などの患者に見られる。炎症性貧血は、多くの場合、ペプチドホルモンであるヘプシジンの不適応な発現によって引き起こされる。ヘプシジンは、マクロファージの細胞内貯蔵庫や腸管上皮細胞からの鉄の輸送を可能にする重要なタンパク質であるフェロポーティンの分解を引き起こす。腎不全患者の多くは、エリスロポエチンの欠乏とヘプシジンの過剰発現を併せ持っている。ＢＭＰシグナル伝達は、ヘプシジンの発現を誘導し、ＢＭＰアンタゴニストでヘプシジンの発現を阻害すると、鉄レベルが上昇する。本明細書に記載の化合物は、慢性疾患や炎症による貧血、およびそれに伴う高ヘプシジン血症の治療に用いることができる。
総説については、ウェイス（Ｗｅｉｓｓ）他、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３５２：１０１１－１０２３、２００５を参照されたい。炎症性貧血（慢性疾患貧血とも呼ばれる）は、慢性感染症、自己免疫疾患（全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、キャッスルマン病など）、炎症性腸疾患、がん（多発性骨髄腫を含む）、腎不全などの患者に見られる。炎症性貧血は、多くの場合、ペプチドホルモンであるヘプシジンの不適応な発現によって引き起こされる。ヘプシジンは、マクロファージの細胞内貯蔵庫や腸管上皮細胞からの鉄の輸送を可能にする重要なタンパク質であるフェロポーティンの分解を引き起こす。腎不全患者の多くは、エリスロポエチンの欠乏とヘプシジンの過剰発現を併せ持っている。ＢＭＰシグナル伝達は、ヘプシジンの発現を誘導し、ＢＭＰアンタゴニストでヘプシジンの発現を阻害すると、鉄レベルが上昇する。本明細書に記載の化合物は、慢性疾患や炎症による貧血、およびそれに伴う高ヘプシジン血症の治療に用いることができる。
【0103】
炎症性サイトカインであるＩＬ－６は、様々な病因の炎症性貧血におけるＩＬ－６の上昇、インビボでのＩＬ－６の慢性投与の影響、ＩＬ－６を欠損したネズミの貧血に対する保護などから、炎症状態におけるヘプシジンの発現上昇の主要な原因であると考えられている（ウェイス（Ｗｅｉｓｓ）他、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３５２：１０１１－１０２３、２００５年）。また、肝細胞株をＩＬ－６で刺激するとヘプシジンの発現が誘導されるが、ＢＭＰアンタゴニストで処理するとＩＬ－６誘導によるヘプシジン発現が無効になることが示されている（ユ（Ｙｕ）他、Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．、４：３３－４１、２００８年）。さらに、ＢＭＰアンタゴニストは、インビボでの病原性細菌の注入によって誘発されるヘプシジン発現を抑制することができる。また、マウスやゼブラフィッシュの全身に鉄を投与すると、肝臓のＢＭＰ応答性ＳＭＡＤおよびヘプシジンの発現が急速に活性化され、ＢＭＰアンタゴニストがこれらの反応を効果的にブロックすることが示されている（ユ（Ｙｕ）他、Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．、４：３３－４１、２００８年）。鉄調節におけるＢＭＰシグナルの機能的重要性は、ＢＭＰアンタゴニストがインビボでヘプシジンの発現を阻害し、血清鉄レベルを上昇させることができるという以前の知見によって裏付けられている（データは示されていない）。これらのデータを総合すると、鉄や炎症を介したヘプシジンや循環鉄濃度の調節にはＢＭＰシグナル伝達が必要であることがわかる。したがって、ＡＬＫ２を介したＢＭＰシグナル伝達を阻害する本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、治療上の利益のために多様な状況で鉄の利用能を変化させるために使用することができる。
【0104】
本明細書に記載されている化合物および／または医薬組成物は、貧血状態において、（ｉ）血清鉄濃度を高めるための食事性鉄または経口鉄補給（鉄の静脈内投与よりも安全である）の効果を増強するために；（ｉｉ）手術を想定して血液中のヘモグロビンの蓄積を増強する、または手術を想定して自己献血を可能にするために；および（ｉｉｉ）エリスロポエチンおよびその関連物質の有効性を増強し、それにより、エリスロポエチンの既知の毒性および副作用（すなわち、高血圧、心血管イベント、腫瘍の成長）を最小限に抑えながら、貧血のために低用量のエリスロポエチンを投与することを可能にするために、使用することができる。
【0105】
Ｂ．進行性骨化性線維異形成症（ＦＯＰ）の治療
様々な実施形態において、本開示は、対象の軟組織における異常な骨成長を含む疾患または障害の治療および／または予防に関するものである。異所性骨化（ＨＯ）は、骨形成細胞への細胞の不適切な分化によって特徴付けられ得る望ましくない骨成長を伴う。この状態では、通常、関節の近くに骨が形成され、この骨形成が関節の可動性を制限することが多い。ＨＯは、神経系の損傷や、関節周辺の筋肉や結合組織などの軟組織に直接傷がついた後に発症することがある。
様々な実施形態において、本開示は、対象の軟組織における異常な骨成長を含む疾患または障害の治療および／または予防に関するものである。異所性骨化（ＨＯ）は、骨形成細胞への細胞の不適切な分化によって特徴付けられ得る望ましくない骨成長を伴う。この状態では、通常、関節の近くに骨が形成され、この骨形成が関節の可動性を制限することが多い。ＨＯは、神経系の損傷や、関節周辺の筋肉や結合組織などの軟組織に直接傷がついた後に発症することがある。
【0106】
ＨＯの病因としては、外傷性、神経因性、遺伝性の３つが認められている。外傷性ＨＯは、骨折、脱臼、手術、重度の火傷などの後に起こる。最も一般的には、ＨＯは、骨折および観血的整復内固定術（ＯＲＩＦ）または人工股関節置換術（ＴＨＡ）後の股関節周囲にみられる。また、ＨＯは外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脊髄損傷（ＳＣｌ）、中枢神経系（ＣＮＳ）の感染症、腫瘍、脳卒中、破傷風、ポリオ、脊髄癆、多発性硬化症、選択的後根管切除術などの病態と関連していることが多いと言われている。また、特発性筋痙縮の存在もＨＯの発症と関連している。
【0107】
骨形成タンパク質（ＢＭＰ）は、骨、軟骨、血管、心臓、腎臓、神経細胞、肝臓、肺などの様々な組織で幅広い生物活性を示す。ＢＭＰは、トランスフォーミング成長因子β（ＴＧＦ－β）ファミリーの一員であり、ＩＩ型およびＩ型のセリン－スレオニンキナーゼ受容体に結合し、Ｓｍａｄおよび非Ｓｍａｄシグナル伝達経路を介してシグナルを伝達する。異所性骨化症の一種である進行性骨化性線維異形成症（ＦＯＰ）は、常染色体優性の稀な疾患であり、１００～２００万人に１人の割合で発症する。ＦＯＰの特徴は、胎児期に大指の奇形が発生し、出生後に異所性軟骨内骨化が進行して、異所性の骨で第２の骨格が形成されることである。古典的なＦＯＰの特徴を持つ患者は、ＢＭＰ１型受容体であるＡＣＲＶ１（ＡＬＫ２としても知られる）をコードする遺伝子に同一のヘテロ接合の活性化変異（Ｒ２０６Ｈ）を有している。この稀で破滅的な疾患には、現在のところ有効な治療法がない。そのため、異所性骨化や異所性骨化の疾患および障害を治療するための組成物や方法が必要とされている。
【0108】
ＦＯＰは、罹患した個体においてＡＬＫ２の構成的に活性な変異型が存在することによって引き起こされる（ショア（Ｓｈｏｒｅ）他、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．、３８：５２５－５２７、２００６年）。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物などのＢＭＰシグナル伝達の特異的阻害剤は、外傷、筋骨格のストレスまたは炎症に応答して過剰な骨形成を防止するために使用することができる。そのような化合物は、病的な骨の退縮を助けるためにも使用することができる。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を全身的または局所的に投与して、外傷または炎症の領域に効果を集中または制限することができる。
【0109】
ＡＬＫ２阻害剤である本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、感受性の高い個体における自発的な骨形成を抑制するための慢性療法として使用することができる。本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、感受性の高い個体における自発的な骨形成を抑制するための慢性療法として使用することができる。一過性の治療は、外傷に関連して最も頻繁に骨腫または病的骨を発症するＦＯＰの個体において、外傷事故の前、最中、または後にも投与することによって、異常な骨形成を防止するために使用することができる。ＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物）を用いた一過性の治療は、ＦＯＰを有する個体において、必要または緊急の医療または外科的処置（さらには重要な予防接種および抜歯）の前、最中、または直後に使用して、病理学的石灰化を防止することができる。他の骨阻害剤、免疫調節剤または抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ、ステロイド、シクロスポリン、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、リツクスマブ、エタネルセプト、または類似の薬剤など）との併用療法は、この障害における異所性骨形成を阻害するＢＭＰアンタゴニストの効果を高めることができる。
【0110】
本明細書では、軟組織における異常な骨形成の治療および／または予防のための方法および組成物が提供される。特定の実施形態において、方法および組成物は、軟組織における異常な骨形成を含む疾患または障害を治療および／または予防する。本明細書に記載の方法および組成物で治療することができる例示的な疾患または障害には、限定されるものではないが、進行性骨化性線維異形成症、強直性脊椎症、外傷性異所性骨化、熱傷または爆傷に関連する異所性骨化、および関節置換手術に関連する異所性骨化などの異所性骨化疾患が含まれる。
【0111】
したがって、本明細書の一態様で提供されるのは、対象の軟組織における異常な骨の形成を治療および／または予防する方法であって、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む方法である。
【0112】
Ｃ．がんの治療
過剰なＢＭＰシグナルは、ＢＭＰの過剰発現によって、あるいは逆説的にＢＭＰＩＩ型受容体の発現が失われた結果として生じる可能性があり、乳癌、前立腺癌、骨癌、肺癌、腎細胞癌など、ある種の固形癌の発癌、成長、転移に寄与している可能性がある（ユ（Ｙｕ）他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８０：２４４４３－２４４５０、２００８年；ウエイテ（Ｗａｉｔｅ）他、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．、４：７６３－７７３、２００３年；アラルモ（Ａｌａｒｍｏ）他、Ｇｅｎｅｓ、Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ Ｃａｎｃｅｒ、４５：４１１－４１９、２００６年；キム（Ｋｉｍ）他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、６０：２８４０－２８４４、２０００年；キム（Ｋｉｍ）他、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、９：６０４６－６０５１、２００３年；キム（Ｋｉｍ）他、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２３：７６５１－７６５９、２００４年）。ＢＭＰの過剰発現またはＢＭＰＩＩ型受容体欠損に関連するＢＭＰ活性の増加が疾患の病因に寄与する場合、ＢＭＰＩ型受容体（リガンドおよびＩＩ型受容体の両方の下流）のレベルで本明細書に記載の化合物を用いてＢＭＰシグナル伝達活性を阻害することは、ＢＭＰシグナル伝達活性を正常化し、腫瘍の成長または転移を潜在的に阻害する有効な手段となり得る。
過剰なＢＭＰシグナルは、ＢＭＰの過剰発現によって、あるいは逆説的にＢＭＰＩＩ型受容体の発現が失われた結果として生じる可能性があり、乳癌、前立腺癌、骨癌、肺癌、腎細胞癌など、ある種の固形癌の発癌、成長、転移に寄与している可能性がある（ユ（Ｙｕ）他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８０：２４４４３－２４４５０、２００８年；ウエイテ（Ｗａｉｔｅ）他、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．、４：７６３－７７３、２００３年；アラルモ（Ａｌａｒｍｏ）他、Ｇｅｎｅｓ、Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ Ｃａｎｃｅｒ、４５：４１１－４１９、２００６年；キム（Ｋｉｍ）他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、６０：２８４０－２８４４、２０００年；キム（Ｋｉｍ）他、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、９：６０４６－６０５１、２００３年；キム（Ｋｉｍ）他、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２３：７６５１－７６５９、２００４年）。ＢＭＰの過剰発現またはＢＭＰＩＩ型受容体欠損に関連するＢＭＰ活性の増加が疾患の病因に寄与する場合、ＢＭＰＩ型受容体（リガンドおよびＩＩ型受容体の両方の下流）のレベルで本明細書に記載の化合物を用いてＢＭＰシグナル伝達活性を阻害することは、ＢＭＰシグナル伝達活性を正常化し、腫瘍の成長または転移を潜在的に阻害する有効な手段となり得る。
【0113】
本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物は、本明細書において、癌の治療に使用することが企図されており、例えば、それらは、補助化学療法または一次化学療法のいずれかとして、臨床的利益のために、そのような腫瘍細胞（および他の腫瘍構成細胞タイプ）の成長または転移を遅延するまたは停止するために使用することができる。また、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤は、ある種の癌（例えば、前立腺癌や乳癌などの腺癌）の骨転移特性を妨害するために使用することができる。さらに、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、骨肉腫などの骨を形成するかまたは骨由来の腫瘍における骨芽細胞活性を阻害するために使用することができる（補助化学療法または一次化学療法として）。さらに、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を使用して、多発性骨髄腫および骨を標的とする腫瘍などの状態で病理学的に増加している破骨細胞活性（その標的遺伝子ＲＡＮＫＬの作用を通じてＢＭＰによっても制御される）を阻害することができる。このような状態でＢＭＰ阻害剤を適用すると、腫瘍の関与による溶骨性病変や骨折の存在を低減することができる。いくつかの実施形態において、癌はびまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）である。
【0114】
Ｄ．病的な骨形成の治療
本明細書に記載するように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む組成物は、強直性脊椎炎または他の「血清陰性（ｓｅｒｏｎｅｇａｔｉｖｅ）」脊椎関節症などの炎症性疾患における病的な骨形成／骨融合を治療または改善するために使用することができ、このような疾患における自己免疫および炎症は、骨形成を刺激するようである。化合物の１つの応用例としては、特に強直性脊椎炎や関節リウマチの患者において、関節手術後の過剰な骨形成を防ぐことが挙げられる。また、本明細書に記載するように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む組成物は、全身性エリテマトーデス、強皮症、または皮膚筋炎などの疾患におけるカルシノーシス（ジストロフィー性軟組織石灰化）を予防するために使用することができる。
本明細書に記載するように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む組成物は、強直性脊椎炎または他の「血清陰性（ｓｅｒｏｎｅｇａｔｉｖｅ）」脊椎関節症などの炎症性疾患における病的な骨形成／骨融合を治療または改善するために使用することができ、このような疾患における自己免疫および炎症は、骨形成を刺激するようである。化合物の１つの応用例としては、特に強直性脊椎炎や関節リウマチの患者において、関節手術後の過剰な骨形成を防ぐことが挙げられる。また、本明細書に記載するように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む組成物は、全身性エリテマトーデス、強皮症、または皮膚筋炎などの疾患におけるカルシノーシス（ジストロフィー性軟組織石灰化）を予防するために使用することができる。
【0115】
筋肉への鈍的な（ｂｌｕｎｔ）外傷は、特定の個体において筋肉内の異常な骨形成を引き起こし、外傷性骨化性筋炎と呼ばれる障害を引き起こす可能性がある（クッシュナー（Ｃｕｓｈｎｅｒ）他、Ｏｒｔｈｏｐ．Ｒｅｖ．、２１：１３１９－１３２６、１９９２年）。また、頭部外傷や火傷は異所性骨形成を誘発し、患者のリハビリや回復を著しく阻害する。本明細書に記載するように、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物による治療は、任意に、そのような状態に対して通常処方される抗炎症薬（例えば、インドメタシンまたはイブプロフェンなどの非ステロイド性抗炎症薬）に加えて、素因のある個体における病的な骨の形成を防止するのに役立ち、または最近または遠隔で（ｒｅｃｅｎｔｌｙ ｏｒ ｒｅｍｏｔｅｌｙ）罹患した個体における病変を軽減または退縮させるのに役立つ。ごく稀に、心筋を含む他の筋肉が、損傷や外傷の存在下で骨化を発症することが記載されており、本明細書に記載されているようなＢＭＰ阻害剤による同様の治療は、そのような状況において役立つ可能性がある。
【0116】
Ｅ．異所性または不適応な骨形成の治療
ＢＭＰシグナルおよびその転写標的は、モンケベルグ血管石灰化症およびアテローム性血管疾患における内膜および内側の血管リモデリングおよび石灰化に関与している（ボストロム（Ｂｏｓｔｒｏｍ）他、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、９１：１８００－１８０９、１９９３年；タイソン（Ｔｙｓｏｎ）他、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．、２３：４８９－４９４、２００３年）。ＢＭＰおよびＢＭＰによって誘導された骨分化は、心臓弁の石灰化にも関与している。本来の心臓弁は、すでに異常がある場合には特に石灰化しやすい。典型的な例は二尖性大動脈弁であり、これらの弁は典型的に石灰化して狭窄を引き起こす。石灰化した大動脈弁狭窄症の患者は、弁置換のための心臓手術を必要とすることが多い。異常な石灰化は、人工血管や心臓弁の機能に悪影響を及ぼすことがある。例えば、人工心臓弁が石灰化して狭くなり、しばしば漏れが発生する。
ＢＭＰシグナルおよびその転写標的は、モンケベルグ血管石灰化症およびアテローム性血管疾患における内膜および内側の血管リモデリングおよび石灰化に関与している（ボストロム（Ｂｏｓｔｒｏｍ）他、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、９１：１８００－１８０９、１９９３年；タイソン（Ｔｙｓｏｎ）他、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．、２３：４８９－４９４、２００３年）。ＢＭＰおよびＢＭＰによって誘導された骨分化は、心臓弁の石灰化にも関与している。本来の心臓弁は、すでに異常がある場合には特に石灰化しやすい。典型的な例は二尖性大動脈弁であり、これらの弁は典型的に石灰化して狭窄を引き起こす。石灰化した大動脈弁狭窄症の患者は、弁置換のための心臓手術を必要とすることが多い。異常な石灰化は、人工血管や心臓弁の機能に悪影響を及ぼすことがある。例えば、人工心臓弁が石灰化して狭くなり、しばしば漏れが発生する。
【0117】
本明細書に記載するように、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物は、血管または弁の石灰化疾患を単独で、またはアテローム性疾患、腎疾患、腎骨異栄養症または副甲状腺疾患と併せて抑制するために使用することができる。
【0118】
本明細書に記載された式Ｉの１つ以上の化合物を含む医薬組成物は、血管または弁膜の石灰化疾患を単独で、またはアテローム性疾患、腎疾患、腎骨異栄養症または副甲状腺疾患と併せて阻害するために使用することができる。
【0119】
本明細書に記載するように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、全身または局所的な投与、またはプロテーゼ材料もしくは他のインプラントへの直接的な組み込み（例えば、インプラントまたはプロテーゼの全部または一部を被覆または構成するポリマーとの混和）によって、プロテーゼ血管または弁膜材料の石灰化を阻害するために使用することができる。
【0120】
本明細書に記載するように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む医薬組成物は、全身または局所的な投与、またはプロテーゼ材料もしくは他のインプラントへの直接的な組み込み（例えば、インプラントまたはプロテーゼの全てまたは一部を被覆または構成するポリマーとの混和）によって、プロテーゼ血管または弁膜材料の石灰化を抑制するために使用することができる。
【0121】
いくつかの例において、骨折後の骨折治癒を遅らせること、または不適応な骨形成による機能障害を防ぐために特定の場所の骨折治癒を意図的に阻害することが望まれる。例えば、骨折が発生し、医学的または実用的な理由で手術をすぐに行うことができない場合、決定的な手術または操作を行うことができるまで、本明細書に記載するように、本明細書に記載されている１つまたは複数の結晶性化合物または組成物を使用して、骨折治癒を一時的に「中断」することができる。これにより、例えば、骨片の正しい配置を確保するために、その後の意図的な再骨折の必要性を防ぐことができる。本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物の投与を停止すると、治療期間が比較的短い場合には、通常の骨折治癒プロセスが生じることが予想される。他の症例では、骨折が直接関節に影響を与える場合など、新たな骨成長の量が機能を損なう可能性がある。これらの場合、ＢＭＰ活性の全体的または局所的な阻害（局所的なインプラントまたはマトリックスからの拡散を介した本明細書に記載のＢＭＰアンタゴニストの全身的または局所的な送達による）を使用して、骨折治癒を阻害するか、または重要な領域における骨折カルスを防止することができる。
【0122】
Ｆ．ＢＭＰアンタゴニストを用いた免疫系の調節
ＢＭＰは、炎症や免疫反応を抑制することが報告されており（チェ（Ｃｈｏｉ）他、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、７：１０５７－１０６５、２００６年；ケルステン（Ｋｅｒｓｔｅｎ）他、ＢＭＣ Ｉｍｍｕｎｏｌ．、６：９、２００５年）、それは、感染症（ウイルス性、細菌性、真菌性、寄生虫性、結核性など）と戦う個体の能力を損なう可能性がある。ＡＬＫ２を介したＢＭＰシグナル伝達の阻害剤である、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を使用して、炎症反応または免疫反応を増強し、個体が感染症をより迅速に排除できるようにすることができる。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物は、炎症反応または免疫反応を増強し、個体が感染症をより迅速に排除することができるようにするために使用することができる。
ＢＭＰは、炎症や免疫反応を抑制することが報告されており（チェ（Ｃｈｏｉ）他、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、７：１０５７－１０６５、２００６年；ケルステン（Ｋｅｒｓｔｅｎ）他、ＢＭＣ Ｉｍｍｕｎｏｌ．、６：９、２００５年）、それは、感染症（ウイルス性、細菌性、真菌性、寄生虫性、結核性など）と戦う個体の能力を損なう可能性がある。ＡＬＫ２を介したＢＭＰシグナル伝達の阻害剤である、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を使用して、炎症反応または免疫反応を増強し、個体が感染症をより迅速に排除できるようにすることができる。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物は、炎症反応または免疫反応を増強し、個体が感染症をより迅速に排除することができるようにするために使用することができる。
【0123】
リンパ球および他の免疫細胞は、その細胞表面にＢＭＰ受容体を発現しており、ＢＭＰが様々な体液性および細胞性の免疫学的コンパートメントの発達および成熟を制御し、成熟した生物における体液性および細胞性の免疫応答を制御するという証拠が増えつつある。免疫細胞に対するＢＭＰシグナルの影響は、免疫学的に重要な多数のサイトカインの影響で一般的に知られているように、状況に固有である可能性が高く、したがって、特定のリンパ球集団の発達または機能を増強または減少させるかどうかを経験的に決定する必要がある。本明細書に記載されているような化合物を用いたＢＭＰ拮抗作用は、治療のために細胞性免疫、自然免疫、体液性免疫のコンパートメントの発達を意図的に偏らせるための効果的な戦略、あるいは成熟した免疫系における免疫反応を治療的に逸脱させるための戦略となりうる。これらの戦略は、細胞性免疫、自然免疫、または体液性免疫の先天的な障害を対象としたり、免疫反応が不適切に弱い障害（例えば、他の手段で免疫化が困難または効果がない場合に、抗原感作の成功を促進するためのアジュバントとして）を対象としたり、または免疫反応が過剰または不適切な障害（例えば、自己免疫および自己感作）を対象としたりする。また、本明細書に記載のＢＭＰアンタゴニストは、一部の文脈において、免疫寛容の意図的な誘導にも有効であると考えられる（すなわち、同種移植や自己免疫において）。
【0124】
Ｇ．皮膚疾患の治療
培養ケラチノサイトの増殖－インビトロにおいて、ＢＭＰはケラチノサイトの増殖を抑制し、分化を促進する（ボッチカレブ（Ｂｏｔｃｈｋａｒｅｖ）他、Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ、７２：５１２－５２６、２００４年の総説）。皮膚移植（例えば、火傷の後）を必要とする患者において、皮膚移植片は培養されたケラチノサイトから作られる。ケラチノサイトは、他の動物（異種移植片）に由来することができるが、これらは一般的に免疫系によって拒絶されるため、一時的なものに過ぎない。ケラチノサイトは患者自身に由来することができ、実験室でシート状の細胞に成長させることができる（培養上皮自家移植片）。患者自身が自分の体に由来するケラチノサイトを拒絶することはまずないであろう。ケラチノサイトの培養物に本明細書に記載のＢＭＰアンタゴニストを添加することで、ケラチノサイトの増殖を促進し、患者がより早く移植を受けられるようにすることができる。
培養ケラチノサイトの増殖－インビトロにおいて、ＢＭＰはケラチノサイトの増殖を抑制し、分化を促進する（ボッチカレブ（Ｂｏｔｃｈｋａｒｅｖ）他、Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ、７２：５１２－５２６、２００４年の総説）。皮膚移植（例えば、火傷の後）を必要とする患者において、皮膚移植片は培養されたケラチノサイトから作られる。ケラチノサイトは、他の動物（異種移植片）に由来することができるが、これらは一般的に免疫系によって拒絶されるため、一時的なものに過ぎない。ケラチノサイトは患者自身に由来することができ、実験室でシート状の細胞に成長させることができる（培養上皮自家移植片）。患者自身が自分の体に由来するケラチノサイトを拒絶することはまずないであろう。ケラチノサイトの培養物に本明細書に記載のＢＭＰアンタゴニストを添加することで、ケラチノサイトの増殖を促進し、患者がより早く移植を受けられるようにすることができる。
【0125】
上皮化の改善－ＢＭＰ６は皮膚の損傷にて高発現し、高レベルのＢＭＰ６が異なる病因のヒト慢性創傷で検出される（カイザー（Ｋａｉｓｅｒ）他、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、１１１：１１４５－１１５２、１９９８年）。ＢＭＰ６を皮膚に過剰発現させたマウスでは、皮膚の傷の再上皮化と治癒が著しく遅れた（カイザー（Ｋａｉｓｅｒ）他、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、１１１：１１４５－１１５２、１９９８年）。上皮化の改善は、瘢痕形成を減少させることができる。本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物の局所的または全身的な投与は、例えば、褥瘡（床ずれ）または非治癒もしくは治癒不良の皮膚潰瘍（例えば、末梢血管疾患、糖尿病、静脈無力症の患者）の治療において、皮膚創傷の上皮化を増強するために本明細書において企図されている。化合物はまた、瘢痕形成を減少させることも期待される。
【0126】
毛髪の成長促進－頭皮の毛包の成長は、成長期（ａｎａｇｅｎ）、退行期（ｃａｔａｇｅｎ）、休止期（ｔｅｌｏｇｅｎ）の３つの段階を経て周期的に行われる。最近の証拠では、ＢＭＰシグナルが休止期から成長期への移行を遅らせることが示されている（プリカス（Ｐｌｉｋｕｓ）他、Ｎａｔｕｒｅ、４５１：３４０－３４４、２００８年）。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を用いてＢＭＰシグナル伝達を阻害すると、休止期を短縮し、成長期の毛包の数を増加させることができる。本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、毛包が不足している状況、または毛髪が成長するよりも頻繁に失われている状況を治療するために使用することができる。これらの状況には、アンドロゲン性脱毛症（男性型脱毛症）、壮年性脱毛症、および休止期脱毛症が含まれる。
【0127】
尋常性乾癬の治療－尋常性乾癬は、皮膚の外傷とそれに続く修復および炎症（ケブナー現象）の後に発生する可能性のある炎症性の皮膚疾患である。マウスの皮膚でＢＭＰ６を過剰発現させると、乾癬患者に見られるものと同様の皮膚病変が生じることから、ＢＭＰは乾癬の原因となる修復・炎症メカニズムに関与していると考えられている（ブレッシング（Ｂｌｅｓｓｉｎｇ）他、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、１３５：２２７－２３９、１９９６年）。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を局所的または全身的に投与して、確立した乾癬を治療したり、皮膚損傷後の乾癬の発症を予防したりすることができる。
【0128】
角膜瘢痕の治療－ＢＭＰ６の発現は、結膜瘢痕と関連する（Ａｎｄｒｅｅｖら、Ｅｘｐ．Ｅｙｅ Ｒｅｓ．８３：１１６２－１１７０、２００６年）。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、角膜瘢痕およびその結果としての失明を予防または治療するために使用することができる。
【0129】
Ｈ．全身性高血圧症の治療
ＢＭＰ４を注入すると、マウスに全身性高血圧が誘発される（ミリヤラ（Ｍｉｒｉｙａｌａ）他、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１１３：２８１８－２８２５、２００６年）。血管平滑筋細胞は様々なＢＭＰリガンドを発現している。ＢＭＰは電圧ゲート式カリウムチャネルの発現を増加させ、それによって血管平滑筋の収縮を増加させる（ファントツィ（Ｆａｎｔｏｚｚｉ）他、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、２９１：Ｌ９９３－１００４、２００６年）。したがって、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物は、本明細書において、ＢＭＰシグナル伝達を阻害することが企図されており、それは血圧を低下させるために使用できる。高血圧患者における血圧の持続的な低下は、心筋梗塞、うっ血性心不全、脳血管障害、および腎不全を予防することが期待される。本明細書に記載されているような治療は、局所的な送達を介して（例えば、エアロゾルを介して）、肺高血圧症のように、特定の血管床における高血圧を標的とするために使用することができる。
ＢＭＰ４を注入すると、マウスに全身性高血圧が誘発される（ミリヤラ（Ｍｉｒｉｙａｌａ）他、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１１３：２８１８－２８２５、２００６年）。血管平滑筋細胞は様々なＢＭＰリガンドを発現している。ＢＭＰは電圧ゲート式カリウムチャネルの発現を増加させ、それによって血管平滑筋の収縮を増加させる（ファントツィ（Ｆａｎｔｏｚｚｉ）他、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、２９１：Ｌ９９３－１００４、２００６年）。したがって、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物は、本明細書において、ＢＭＰシグナル伝達を阻害することが企図されており、それは血圧を低下させるために使用できる。高血圧患者における血圧の持続的な低下は、心筋梗塞、うっ血性心不全、脳血管障害、および腎不全を予防することが期待される。本明細書に記載されているような治療は、局所的な送達を介して（例えば、エアロゾルを介して）、肺高血圧症のように、特定の血管床における高血圧を標的とするために使用することができる。
【0130】
肺高血圧症の治療
ＢＭＰシグナル伝達は、肺高血圧症の発症に寄与している。例えば、ＢＭＰ４レベルを低下させたマウスは、低濃度の酸素を長時間呼吸することで誘発される肺高血圧症や肺血管リモデリングから保護される（フランク（Ｆｒａｎｋ）他、Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．、９７：４９６－５０４、２００５年）。さらに、ＩＩ型ＢＭＰ受容体をコードする遺伝子（ＢＭＰＲＩＩ）の変異は、散発性および家族性肺動脈性肺高血圧症の患者に頻繁に見られる。ＢＭＰシグナルの減少が肺高血圧症を引き起こすのではないかと予測されるかもしれない。しかしながら、ユ（Ｙｕ）および共同研究者（ユ他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８０：２４４４３－２４４５０、２００８年）は、ＢＭＰＲＩＩの欠損は、逆説的にＢＭＰリガンドのサブセットによるＢＭＰシグナル伝達を増加させることを報告しており、したがって、ＢＭＰシグナル伝達の増加は、実際に肺高血圧症の発症に寄与する可能性があるとしている。
ＢＭＰシグナル伝達は、肺高血圧症の発症に寄与している。例えば、ＢＭＰ４レベルを低下させたマウスは、低濃度の酸素を長時間呼吸することで誘発される肺高血圧症や肺血管リモデリングから保護される（フランク（Ｆｒａｎｋ）他、Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．、９７：４９６－５０４、２００５年）。さらに、ＩＩ型ＢＭＰ受容体をコードする遺伝子（ＢＭＰＲＩＩ）の変異は、散発性および家族性肺動脈性肺高血圧症の患者に頻繁に見られる。ＢＭＰシグナルの減少が肺高血圧症を引き起こすのではないかと予測されるかもしれない。しかしながら、ユ（Ｙｕ）および共同研究者（ユ他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８０：２４４４３－２４４５０、２００８年）は、ＢＭＰＲＩＩの欠損は、逆説的にＢＭＰリガンドのサブセットによるＢＭＰシグナル伝達を増加させることを報告しており、したがって、ＢＭＰシグナル伝達の増加は、実際に肺高血圧症の発症に寄与する可能性があるとしている。
【0131】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、肺動脈性高血圧症のリスクがある患者（例えば、ＢＭＰＲＩＩ変異を有する患者）における肺動脈性高血圧症の発症を予防するため、または特発性または後天性肺動脈性高血圧症の患者を治療するために使用することができる。本明細書に記載されているように治療された個体における肺高血圧症の減少は、息切れ、右心室肥大、および右心室不全の減少をもたらすことが期待される。
【0132】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む医薬組成物は、肺動脈性高血圧症のリスクがある患者（例えば、ＢＭＰＲＩＩ変異を有する患者）における肺動脈性高血圧症の発症を予防するため、または特発性もしくは後天性肺動脈性高血圧症の患者を治療するために使用することができる。本明細書に記載されているように治療された個体における肺高血圧症の減少は、息切れ、右心室肥大、および右心室不全の減少をもたらすことが期待される。
【0133】
心室肥大症の治療
高血圧ラットの心室肥大では、ＢＭＰ－１０レベルが上昇しており、このＢＭＰリガンドは新生児ラット心室筋細胞の培養で肥大を誘導する（ナカノ（Ｎａｋａｎｏ）他、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｈｅａｒｔ．Ｃｉｒｃ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、２９３：Ｈ３３９６－３４０３、２００７年）。ＢＭＰ－１０シグナル伝達の阻害は、心室肥大の予防／治療に用いることができる。心室肥大は、拡張機能障害によるうっ血性心不全を引き起こす可能性がある。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む医薬組成物は、うっ血性心不全を予防／治療することができる。
高血圧ラットの心室肥大では、ＢＭＰ－１０レベルが上昇しており、このＢＭＰリガンドは新生児ラット心室筋細胞の培養で肥大を誘導する（ナカノ（Ｎａｋａｎｏ）他、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｈｅａｒｔ．Ｃｉｒｃ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、２９３：Ｈ３３９６－３４０３、２００７年）。ＢＭＰ－１０シグナル伝達の阻害は、心室肥大の予防／治療に用いることができる。心室肥大は、拡張機能障害によるうっ血性心不全を引き起こす可能性がある。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む医薬組成物は、うっ血性心不全を予防／治療することができる。
【0134】
神経学的障害の治療
脊髄損傷および神経障害の治療－ＢＭＰは、脊髄損傷後の成人脊髄における軸索再生の強力な阻害剤である（ミツウラ（Ｍａｔｓｕｕｒａ）他、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、２００８年）。ＢＭＰの発現は、脊髄挫傷後の損傷部位周辺のオリゴデンドロサイトやアストロサイトで上昇していることが報告されている。ＢＭＰ阻害剤であるノギンを髄腔内に投与すると、脊髄挫傷後の運動能力が向上し、皮質脊髄路が有意に再生した。
脊髄損傷および神経障害の治療－ＢＭＰは、脊髄損傷後の成人脊髄における軸索再生の強力な阻害剤である（ミツウラ（Ｍａｔｓｕｕｒａ）他、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、２００８年）。ＢＭＰの発現は、脊髄挫傷後の損傷部位周辺のオリゴデンドロサイトやアストロサイトで上昇していることが報告されている。ＢＭＰ阻害剤であるノギンを髄腔内に投与すると、脊髄挫傷後の運動能力が向上し、皮質脊髄路が有意に再生した。
【0135】
ＲＧＭａは、脊髄損傷後の軸索の成長と回復、およびシナプスの再形成を阻害するが、その効果はＲＧＭａに対する抗体で阻害される（ハタ（Ｈａｔａ）他、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、１７３：４７－５８、２００６年；キョート（Ｋｙｏｔｏ）他、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．、１１８６：７４－８６、２００７年）。ＲＧＭａはＢＭＰシグナル伝達を増強する（バビット（Ｂａｂｉｔｔ）他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８０：２９８２０－２９８２７、２００５年）ことから、ＢＭＰシグナル伝達が軸索の成長と回復を妨げる原因となっている可能性がある。
【0136】
これらの考察に基づき、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物による治療は、脊髄損傷後の軸索成長および回復を増加させることが期待される。本明細書に記載の治療は、糖尿病を含む広範な障害に関連する神経障害を予防／治療することが期待されるであろう。さらに、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を用いた治療は、神経障害に関連する痛みと運動機能障害の両方を治療するために使用することができる。
【0137】
中枢神経系の炎症に関連する神経障害の治療－ＢＭＰ４および５は、多発性硬化症およびクロイツフェルト－ヤコブ病の病変において検出されている（ダイニンガー（Ｄｅｉｎｉｎｇｅｒ）他、Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．、９０：７６－７９、１９９５年）。また、ＢＭＰは、多発性硬化症の動物モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎のマウスでも検出されている（アラ（Ａｒａ）他、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅｓ．、８６：１２５－１３５、２００８年）。本明細書に記載の治療は、多発性硬化症だけでなく、中枢神経系の炎症、またはＢＭＰシグナル伝達によって媒介される不適応な傷害修復プロセスに関連する他の神経疾患の予防または治療に使用することができる。
【0138】
認知症の治療－ＢＭＰシグナルの阻害剤は、マウスの神経前駆細胞におけるニューロン新生を促進することができる（コイケ（Ｋｏｉｋｅ）他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２８２：１５８４３－１５８５０、２００７年）。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を本明細書に記載されているように処理することは、脳血管障害およびアルツハイマー病、ならびに他の認知症を含む、ニューロンの加速度的な損失に関連する様々な神経学的障害において、ニューロン新生を増強するために使用することができる。
【0139】
記憶と学習の変化－ＢＭＰシグナル伝達は、記憶および認知行動に関わる神経細胞の発達と維持に重要な役割を果たしている。例えば、ＢＭＰアンタゴニストであるコージンを欠損させたマウスでは、空間学習能力は向上するが、新規環境での探索活動が低下する（サン（Ｓｕｎ）他、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、２７：７７４０－７７５０、２００７年）。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を本明細書に記載されているように処理することは、記憶または学習を変更または防止するために使用することができ、例えば、麻酔のためにまたは苦痛を引き起こす可能性が高い他の状況で記憶喪失を誘導すること、または心的外傷後ストレス障害を防止することができる。
【0140】
アテローム性動脈硬化症の治療
ＢＭＰリガンドは、血管壁において炎症を起こし、動脈硬化を促進することが多くの証拠によって示されている（チャン（Ｃｈａｎｇ）他、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１１６：１２５８－１２６６、２００７年）。ＢＭＰ４の発現をノックダウンすると炎症シグナルが減少し、ＢＭＰアンタゴニスト（例えば、フォリスタチンやノギン）をノックダウンすると炎症シグナルが増加した。本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つまたは複数の結晶性化合物または組成物での治療は、アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患、および他の血管炎に関連する血管炎症を減少させるために使用することができる。アテローム性動脈硬化症を減少させることにより、本明細書に記載の治療は、急性冠症候群（狭心症および心臓発作）、一過性虚血発作、脳卒中、末梢血管疾患、および他の血管虚血性事象を減少させるであろう。さらに、アテローム性動脈硬化症が動脈瘤形成の病因に寄与する限りにおいて、本明細書に記載の化合物を使用して動脈瘤形成の進行を遅らせ、動脈瘤構造の発生頻度や血管手術の必要性を減少させることができる。
ＢＭＰリガンドは、血管壁において炎症を起こし、動脈硬化を促進することが多くの証拠によって示されている（チャン（Ｃｈａｎｇ）他、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１１６：１２５８－１２６６、２００７年）。ＢＭＰ４の発現をノックダウンすると炎症シグナルが減少し、ＢＭＰアンタゴニスト（例えば、フォリスタチンやノギン）をノックダウンすると炎症シグナルが増加した。本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つまたは複数の結晶性化合物または組成物での治療は、アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患、および他の血管炎に関連する血管炎症を減少させるために使用することができる。アテローム性動脈硬化症を減少させることにより、本明細書に記載の治療は、急性冠症候群（狭心症および心臓発作）、一過性虚血発作、脳卒中、末梢血管疾患、および他の血管虚血性事象を減少させるであろう。さらに、アテローム性動脈硬化症が動脈瘤形成の病因に寄与する限りにおいて、本明細書に記載の化合物を使用して動脈瘤形成の進行を遅らせ、動脈瘤構造の発生頻度や血管手術の必要性を減少させることができる。
【0141】
マトリックスリモデリングに影響を与えるＢＭＰおよびＢＭＰ誘導遺伝子産物の多くは、初期のアテローム性動脈硬化病変で過剰に発現しているため、ＢＭＰシグナルはプラークの形成および進行を促進する可能性がある（ボストロム（Ｂｏｓｔｒｏｍ）他、Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．、９１：１８００－１８０９、１９９３年；ドーア（Ｄｈｏｒｅ）他、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ．、２１：１９９８－２００３、２００１年）。このように、動脈硬化性プラークにおけるＢＭＰシグナル伝達活性は、不適応な損傷修復の一形態を示すこともあれば、炎症の一因となることもある。また、ＢＭＰシグナルは、時間の経過とともに、血管の常在または新生細胞集団を骨芽細胞様細胞に分化させ、血管の内膜および内側の石灰化を引き起こす可能性がある（ルスカ（Ｈｒｕｓｋａ）他、Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ．、９７：１０５－１１２、２００５年）。石灰化した血管疾患、すなわち動脈硬化症は、血管の伸展性の低下、心血管イベントおよび死亡率のリスクの増加と関連しており、基礎となるアテローム性動脈硬化疾患と関連する場合には特に問題となる（ボストロム（Ｂｏｓｔｒｏｍ）他、Ｃｒｉｔ Ｒｅｖ Ｅｕｋａｒｙｏｔ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒ．、１０：１５１－１５８、２０００年）。しかしながら、動脈硬化性病変および石灰化病変の両方とも、その進行に寄与するシグナルを遮断できれば、退縮しやすい可能性がある（サノ（Ｓａｎｏ）他、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１０３：２９５５－２９６０、２００１年）。特定の態様において、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物による治療は、インビボでのアテローム性プラークおよび血管石灰化の進行を制限するために使用することができる。
【0142】
シェーグレン症候群の治療
シェーグレン症候群は、免疫細胞が涙や唾液を分泌する腺を攻撃して破壊する自己免疫疾患である。シェーグレン症候群はリウマチ性疾患と考えられており、関節、筋肉、皮膚、その他の臓器に炎症を引き起こす。この疾患の特徴的な症状は、ドライマウスとドライアイである。シェーグレン症候群は、皮膚、鼻、膣の乾燥も引き起こす可能性があり、腎臓、血管、肺、肝臓、膵臓、脳などの体の他の器官に影響を及ぼすこともある。シェーグレン症候群は、米国で１００万人～４００万人が罹患しており、現在、米国で２番目に多い自己免疫性リウマチ性疾患である。シェーグレン症候群の患者の大半は、診断時に４０歳以上で、女性の方が９倍も発症しやすいと言われている。シェーグレン症候群は、原発性リウマチ性疾患として、または全身性エリテマトーデス（「ループス」）、強皮症、胆汁性肝硬変または関節リウマチなどの他のリウマチ性疾患と関連する二次性疾患として起こりうる。
シェーグレン症候群は、免疫細胞が涙や唾液を分泌する腺を攻撃して破壊する自己免疫疾患である。シェーグレン症候群はリウマチ性疾患と考えられており、関節、筋肉、皮膚、その他の臓器に炎症を引き起こす。この疾患の特徴的な症状は、ドライマウスとドライアイである。シェーグレン症候群は、皮膚、鼻、膣の乾燥も引き起こす可能性があり、腎臓、血管、肺、肝臓、膵臓、脳などの体の他の器官に影響を及ぼすこともある。シェーグレン症候群は、米国で１００万人～４００万人が罹患しており、現在、米国で２番目に多い自己免疫性リウマチ性疾患である。シェーグレン症候群の患者の大半は、診断時に４０歳以上で、女性の方が９倍も発症しやすいと言われている。シェーグレン症候群は、原発性リウマチ性疾患として、または全身性エリテマトーデス（「ループス」）、強皮症、胆汁性肝硬変または関節リウマチなどの他のリウマチ性疾患と関連する二次性疾患として起こりうる。
【0143】
シェーグレン症候群は、安定した症状を維持したり、悪化したり、寛解したりしながら、身体の重要な器官にダメージを与える可能性がある。患者の中には、ドライアイや口内炎などの軽度の症状しか出ない人もいれば、健康な状態が続いた後に重度の病気になる人もいる。多くの患者は対症療法で問題を解決することができるが、目がかすむ、常に目の不快感がある、口内炎が再発する、耳下腺が腫れる、声が枯れる、飲み込みや食事が困難になるなどの症状に悩まされる患者もいる。また、衰弱した疲労感や関節痛は、生活の質を著しく損なう可能性がある。
【0144】
現在、シェーグレン症候群の治療法は確立されておらず、腺の分泌を回復させるための特別な治療法も存在していない。治療は一般的に対症療法と支持療法で、目や口の乾きの症状を和らげる水分補給療法などが含まれる。筋骨格の症状には、非ステロイド性抗炎症薬が用いられる。重度の合併症がある個人には、多くの場合、コルチコステロイドや免疫抑制剤が処方されることがある。これらの薬剤は重大な副作用を引き起こす可能性がある。さらに、この疾患の診断は、現在のところ、客観的および主観的な乾燥、自己抗体、単核浸潤などの適応症の組み合わせに基づいており、主にシェーグレン症候群の診断に到達するためには、他の既知の疾患を排除するプロセスとなっている。したがって、シェーグレン症候群の患者を正確に診断するだけでなく、この疾患を治療するための有効な治療標的を特定することが求められている。
【0145】
骨形成タンパク質６（ＢＭＰ６）は、成長因子であるＴＧＦ－βスーパーファミリーの一員である。ＢＭＰ６の発現は、平滑筋細胞、成長板軟骨細胞、気管支上皮、角膜、表皮、唾液腺、神経系の細胞など、いくつかの異なる哺乳類の組織や細胞タイプで検出されている（ブレッシング（Ｂｌｅｓｓｉｎｇ）他、Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ、１３５（１）：２２７－２３９、１９９６年）。インビトロでは、ＢＭＰ６は、細胞分裂を抑制し、末端上皮の分化を促進し、軟骨内骨形成、骨芽細胞の分化および神経細胞の成熟を誘導することが示されている（ハイキンハイモ（Ｈｅｉｋｉｎｈｅｉｍｏ）他、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、５９：５８１５－５８２１、１９９９年）。
【0146】
ＤＮＡメチル化は、真核生物のゲノムの主要な修飾であり、哺乳類の発生に不可欠な役割を果たしている。ヒトタンパク質ＭＥＣＰ２、ＭＢＤ１、ＭＢＤ２、ＭＢＤ３およびＭＢＤ４は、それぞれメチルＣｐＧ結合ドメイン（ＭＢＤ）を持つ核内タンパク質ファミリーである。ＭＢＤ３を除いて、これらの各タンパク質はメチル化されたＤＮＡに特異的に結合することができる。また、ＭＥＣＰ２、ＭＢＤ１、ＭＢＤ２は、メチル化された遺伝子のプロモーターからの転写を抑制することができる。他のＭＢＤファミリーメンバーとは対照的に、ＭＥＣＰ２はＸ連鎖性で、Ｘの不活性化を受ける。
【0147】
Ｘの不活性化は哺乳類の雌における初期発生過程であり、Ｘ染色体対の一方を転写的に不活性化し、それにより雄と雌の間の用量等価性を提供する。この過程は、Ｘ染色体のＸ不活性化中心（ＸＩＣ）と呼ばれる領域など、いくつかの因子によって制御されている。ＸＩＳＴ遺伝子（Ｘ（不活性）特異的転写産物（非タンパク質コーディング））は不活性なＸ染色体のＸＩＣのみから発現する。転写産物はスプライシングされるが、タンパク質をコードしていない。転写産物は核内に残り、不活性なＸ染色体を覆う。
【0148】
また、本明細書では、ＢＭＰ６の発現が増加している対象を選択し、ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する治療有効量の薬剤を対象に投与することにより、シェーグレン症候群に罹患した対象を治療する方法であって、薬剤が本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である方法が提供される。また、本明細書では、治療上有効な量の本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を対象に投与し、それによって対象を治療することを含む、シェーグレン症候群に罹患した対象を治療する方法が提供される。
【0149】
男性のシェーグレン症候群患者は、男性では典型的に発現しない非コードＲＮＡであるＸＩＳＴを発現する。また、男性のシェーグレン症候群患者は、ＤＮＡメチル化に関与する他のタンパク質と同様に、ＭＥＣＰ２をダウンレギュレートするという知見も記載されている。いくつかの実施形態において、生物学的試料は、小唾液腺などの唾液腺である。
【0150】
男性シェーグレン症候群患者の一部では、Ｙ染色体遺伝子の発現がダウンレギュレートされており、ＲＮＡプロセシングおよびウイルス複製を調節するリボソームタンパク質、ならびにＤＮＡメチル化を調節するタンパクの発現もダウンレギュレートされている。これらの所見はシェーグレン症候群の診断と治療に利用できる追加のマーカを提供する。
【0151】
さらに、ＸＩＳＴの発現が増加している男性の対象を選択し、ＸＩＳＴの発現を阻害する薬剤の治療有効量を同対象に投与することにより、シェーグレン症候群の男性の対象を治療する方法を提供する。さらに、ＸＩＳＴの発現が増加している男性の対象を選択し、治療有効量の本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を対象に投与することにより、シェーグレン症候群の男性対象を治療する方法も提供される。さらに、ＭＥＣＰ２の発現が低下している男性の対象を選択し、治療有効量の本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を対象に投与することにより、シェーグレン症候群の男性対象を治療する方法も提供される。また、治療上有効な量の本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を男性の対象に投与し、それによって男性の対象を治療することを含む、シェーグレン症候群に罹患した男性の対象を治療する方法が提供される。
【0152】
シェーグレン症候群の患者は、健常対照者と比較して、唾液腺におけるＢＭＰ６の発現が統計的に有意に増加していることを示す。唾液腺におけるＢＭＰ６の過剰発現は、唾液腺全体の電位を上昇させる。本明細書では、ＢＭＰ６シグナル伝達の阻害剤を投与すると、唾液腺における唾液流量が増加するという知見が開示されており、阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。
【0153】
本明細書では、対象の唾液流量を増加させる方法が提供される。いくつかの実施形態において、方法は、対象にＢＭＰ６シグナル伝達の阻害剤を投与することを含み、阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。他の実施形態において、方法は、対照と比較して対象の唾液腺におけるＢＭＰ６の発現が増加している対象を選択することと、対象にＢＭＰ６シグナル伝達の阻害剤を投与することと、を含み、阻害剤は、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物である。場合によっては、対象はシェーグレン症候群に罹患している。
【0154】
いくつかの実施形態において、ＢＭＰ６の発現増加を示す唾液腺は、小唇唾液腺、耳下腺、または顎下腺である。
いくつかの実施形態において、ＢＭＰ６の阻害剤は、唾液腺に局所的に投与され、同阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。
いくつかの実施形態において、ＢＭＰ６の阻害剤は、唾液腺に局所的に投与され、同阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。
【0155】
いくつかの実施形態において、ＢＭＰ６シグナル伝達の阻害剤は、ＢＭＰＩ型受容体ＡＬＫ２および／またはＢＭＰＩ型受容体ＡＬＫ３を阻害し、阻害剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。
【0156】
いくつかの実施形態において、生物学的試料は、唾液腺組織（例えば、唾液腺の生検によって得られた組織）などの組織試料である。いくつかの例において、唾液腺は、小唇唾液腺、耳下腺、または顎下腺である。他の実施形態において、生物学的試料は、唾液、涙、血液または血清試料などの体液試料である。
【0157】
いくつかの実施形態では、開示された方法は、シェーグレン症候群と診断された対象に適切な治療を提供することをさらに含む。いくつかの例では、適切な治療は、唾液分泌を促進する薬剤（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）を投与すること、コルチコステロイドを投与すること、免疫抑制剤を投与すること、非ステロイド性抗炎症剤を投与すること、ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する薬剤を投与すること、ＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）を投与すること、またはそれらの任意の組み合わせを含む。
【0158】
また、唾液腺におけるＢＭＰ６の発現が増加している対象を選択し、ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する治療有効量の薬剤を対象に投与することにより、対象の唾液流量を増加させる方法を提供する。いくつかの例において、薬剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。いくつかの実施形態において、唾液腺は、小唇唾液腺、耳下腺、または顎下腺である。
【0159】
いくつかの実施形態において、ＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。
いくつかの実施形態において、ＢＭＰ６の発現もしくは活性を阻害する、またはＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤は、唾液腺に局所的に投与され、その薬剤は、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物である。他の実施形態において、ＢＭＰ６の発現もしくは活性を阻害する、またはＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤は、全身に投与され、その薬剤は、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物である。
いくつかの実施形態において、ＢＭＰ６の発現もしくは活性を阻害する、またはＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤は、唾液腺に局所的に投与され、その薬剤は、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物である。他の実施形態において、ＢＭＰ６の発現もしくは活性を阻害する、またはＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤は、全身に投与され、その薬剤は、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物である。
【0160】
いくつかの実施形態において、方法は、シェーグレン症候群と診断された対象に適切な治療法を提供することをさらに含む。いくつかの例では、適切な治療法は、唾液分泌を促進する薬剤（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）を投与すること、コルチコステロイドを投与すること、免疫抑制剤を投与すること、非ステロイド性抗炎症剤を投与すること、ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する薬剤を投与すること、ＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤（例えば、式Ｉの１つ以上の化合物）を投与すること、またはそれらの任意の組み合わせを含む。
【0161】
いくつかの実施形態では、開示された方法は、シェーグレン症候群と診断された男性の対象に適切な治療を提供することをさらに含む。いくつかの例において、適切な治療は、唾液分泌を促進する薬剤（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）を投与すること、コルチコステロイドを投与すること、免疫抑制剤を投与すること、非ステロイド性抗炎症剤を投与すること、ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する薬剤を投与すること、ＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）を投与すること、ＸＩＳＴの発現を阻害する薬剤を投与すること、ＭＥＣＰ２をコードする核酸分子を投与すること、またはそれらの任意の組み合わせを含む。
【0162】
さらに、ＸＩＳＴの発現が増加した男性の対象および／またはＭＥＣＰ２の発現が減少した男性の対象を選択し、（ｉ）ＸＩＳＴの発現を阻害する治療有効量の薬剤を対象に投与するか、（ｉｉ）ＭＥＣＰ２をコードする治療有効量の核酸分子を対象に投与するか、または（ｉ）および（ｉｉ）の両方を行うことにより、シェーグレン症候群の男性の対象を治療する方法が提供される。
【0163】
さらに、ＸＩＳＴの発現が増加した男性の対象および／またはＭＥＣＰ２の発現が減少した男性の対象を選択し、（ｉ）ＸＩＳＴの発現を阻害する治療有効量の薬剤を対象に投与するか、（ｉｉ）ＭＥＣＰ２をコードする治療有効量の核酸分子を対象に投与するか、または（ｉ）および（ｉｉ）の両方を行うことにより、男性の対象の唾液流量を増加させる方法も提供される。
【0164】
例示的なＸＩＳＴ阻害剤には、例えば、ＸＩＳＴ核酸分子と特異的にハイブリダイズするアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはｓｉＲＮＡ分子が含まれる。ＸＩＳＴの核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）アクセッション番号ＮＲ－００１５６４に寄託されているヒトＸＩＳＴ ＲＮＡ配列のように、一般に入手可能である。ＸＩＳＴを標的とする適切なアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはｓｉＲＮＡは、公開されているＸＩＳＴ配列を用いて当業者が設計することができる。ＸＩＳＴアンチセンス転写物Ｔｓｉｘは、開示された方法で使用できる既知のＸＩＳＴの阻害剤である（センナー（Ｓｅｎｎｅｒ）およびブロックドルフ（Ｂｒｏｃｋｄｏｒｆｆ）、Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇｅｎｅｔ Ｄｅｖ、１９（２）：１２２－１２６、２００９年；スタブロポウロス（Ｓｔａｖｒｏｐｏｕｌｏｓ）他、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、９８（１８）：１０２３２－１０２３７、２００１年）。
【0165】
本明細書に記載されているように、男性ＳＳ患者では、ＸＩＳＴの発現、ＭＥＣＰ２の発現低下、Ｙ染色体遺伝子発現の明らかな抑制など、性染色体遺伝子の発現に著しい変化が確認された。このような遺伝子発現パターンは、「自己免疫性Ｘｉｓｔ Ｙ染色体不活性化症候群（ＡＸＹＩＳ）」と呼ばれ、関節リウマチ、２型糖尿病、全身性硬化症、リンパ腫など、ｐＳＳに関連する自己免疫疾患と診断された男性の患部組織でも確認された。
【0166】
特に、本明細書に記載されているのは、男性のシェーグレン症候群患者のサブセットにおいて、Ｙ染色体遺伝子の発現がダウンレギュレートされており（例えば、遺伝子ＲＰＳ４Ｙ１、ＲＰＳ４Ｙ２、ＪＡＲ１Ｄ１Ｄ、ＣＹＯＲＦ１５ＢおよびＣＹＯＲＦ１４の発現がダウンレギュレートされている）、ＲＮＡプロセッシングおよびウイルス複製を制御するリボソームタンパク質（例えば、ＲＰＳ４Ｙ１、ＲＰＳ４Ｙ２、ＲＰＳ４Ｘなど）、ＤＮＡのメチル化を制御するタンパク質（ＭＤＢ６、ＮＡＳＰなど）の発現がダウンレギュレートされるという知見である。さらに、シェーグレン症候群の男性患者のＸ染色体のオプシン（ＯＰＮ１ＬＷ、ＯＰＮ１ＭＷ、ＯＰＮ１ＭＷ２）およびｔｅｘ２８領域には、かなりの数の重複や欠失が確認された。これらの知見は、男性のシェーグレン症候群の診断および治療に利用できる追加のマーカを提供するものである。
【0167】
本明細書では、治療を必要とする対象（唾液腺においてＢＭＰ６の発現が増加している対象など）においてシェーグレン症候群を治療する方法であって、ＢＭＰ６を阻害する薬剤、例えば、ＢＭＰ６の発現（ｍＲＮＡまたはタンパク質発現）または少なくとも１つの生物学的活性を阻害する化合物を対象に投与することによる方法であって、薬剤または化合物は、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物である方法を提供する。また、薬剤または化合物は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物などの、ＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤または化合物であってもよい。
【0168】
様々な実施形態において、本発明は、シェーグレン症候群の対象者を治療する方法、または対象の唾液流量を増加させる方法を提供し、同方法は、対照と比較して対象の唾液腺におけるＢＭＰ６の発現が増加している対象を選択し、ＢＭＰ６の発現もしくは活性を阻害する薬剤、またはＢＭＰシグナル伝達を阻害する薬剤の治療有効量を対象に投与し、それによって対象のシェーグレン症候群を治療するか、または対象の唾液流量を増加させることを含み、薬剤は本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。いくつかの実施形態において、唾液腺は、小唇唾液腺、耳下腺、または顎下腺である。いくつかの実施形態において、ＢＭＰ６の発現または活性を阻害する薬剤は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物である。
【0169】
びまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）の治療
びまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）（びまん性内因性橋グリオーマとも呼ばれる）は、脳幹の橋（ｐｏｎｓ）（中央）に位置する腫瘍である。脳幹とは、大脳と脊髄をつなぐ、脳の一番下の部分である。びまん性内因性橋グリオーマは、進行性骨化性線維異形成症と同じＡＣＶＲ１の機能変異の獲得と関連している。
びまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）（びまん性内因性橋グリオーマとも呼ばれる）は、脳幹の橋（ｐｏｎｓ）（中央）に位置する腫瘍である。脳幹とは、大脳と脊髄をつなぐ、脳の一番下の部分である。びまん性内因性橋グリオーマは、進行性骨化性線維異形成症と同じＡＣＶＲ１の機能変異の獲得と関連している。
【0170】
様々な実施形態において、本発明は、びまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）を有する対象を治療する方法であって、びまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）を有する対象を選択することと、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物の治療有効量を対象に投与することと、を含み、それによって、びまん性内因性橋グリオーマ（ＤＩＰＧ）を有する対象を治療する方法を提供する。
【0171】
インビトロおよびインビボにおける胚性幹細胞および成体幹細胞を含む前駆細胞の増殖、生着および分化
ＢＭＰシグナルは、前駆細胞および幹細胞集団の分化および再生を調節するために重要であり、一部の状況および組織では、系統への分化を阻止する（一方、他の状況では分化を誘導する）。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を本明細書に記載されているように処理することで、（ｉ）インビボまたはインビトロで幹細胞または多能性細胞集団の多能性状態を維持する；（ｉｉ）インビボまたはインビトロで幹細胞または多能性細胞集団を増殖させる；（ｉｉｉ）インビボまたはインビトロで幹細胞または多能性細胞集団の分化を誘導する；（ｉｖ）単独で、あるいは他の治療法と組み合わせて、あるいは他の治療法と順番に、インビボまたはインビトロで幹細胞や多能性細胞の分化を操作・誘導する；そして、（ｖ）分化した細胞集団から多能性細胞や前駆細胞集団への脱分化を調節する、ために使用することができる。
ＢＭＰシグナルは、前駆細胞および幹細胞集団の分化および再生を調節するために重要であり、一部の状況および組織では、系統への分化を阻止する（一方、他の状況では分化を誘導する）。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を本明細書に記載されているように処理することで、（ｉ）インビボまたはインビトロで幹細胞または多能性細胞集団の多能性状態を維持する；（ｉｉ）インビボまたはインビトロで幹細胞または多能性細胞集団を増殖させる；（ｉｉｉ）インビボまたはインビトロで幹細胞または多能性細胞集団の分化を誘導する；（ｉｖ）単独で、あるいは他の治療法と組み合わせて、あるいは他の治療法と順番に、インビボまたはインビトロで幹細胞や多能性細胞の分化を操作・誘導する；そして、（ｖ）分化した細胞集団から多能性細胞や前駆細胞集団への脱分化を調節する、ために使用することができる。
【0172】
多くの幹細胞や前駆細胞は、それらが増殖するか、特定の組織系列に分化するか、特定の組織に定着・統合するか、あるいはプログラムされた細胞死を迎えるかを決定するために、ＢＭＰシグナルを必要とする。多くの場合、ＢＭＰシグナルは、成長因子（ｂＦＧＦ、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦ、ＨＢＥＧＦ、ＰＩＧＦなど）、ソニックヘッジホッグ（ＳＨＨ）、ノッチ、Ｗｎｔシグナル伝達経路によって提供されるシグナルと相互作用して、これらの変化をもたらす（オキタ（Ｏｋｉｔａ）他、Ｃｕｒｒ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．、Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．Ｔｈｅｒ．、１：１０３－１１１、２００６年）。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物で本明細書に記載されているように処理することで、幹細胞（例えば、胚性幹細胞）または組織前駆細胞の分化を、治療的適用のために特定の系統に向けて誘導することができる（パーク（Ｐａｒｋ）他、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、１３１：２７４９－２７６２、２００４年；パシュムフォロウシュ（Ｐａｓｈｍｆｏｒｏｕｓｈ）他、Ｃｅｌｌ、１１７：３７３－３８６、２００４年）。あるいは、特定の細胞集団について、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤は、臨床応用に有効であるのに十分な数の細胞を産生するために、分化を防止し、増殖を促進するのに有効であり得る。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物、ならびに他のＢＭＰアンタゴニストまたは成長因子またはシグナル伝達分子の正確な用量および／または組み合わせは、各細胞および組織タイプに非常に特異的であり得る。
【0173】
例えば、特定の胚性幹細胞株では、特定の培養した胚性幹細胞株の分化を阻害して多能性を維持するために、白血病抑制因子（ＬＩＦ）との共培養が必要である（オキタ（Ｏｋｉｔａ）他、Ｃｕｒｒ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．、Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．Ｔｈｅｒ．、１：１０３－１１１、２００６年）。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を本明細書に記載されているように使用することは、ＬＩＦの非存在下で多能性を維持するために使用することができる。他のＥＳ細胞株は、多能性を維持するために、特定のフィーダー細胞層との共培養を必要とする。フィーダー細胞層、またはそのＤＮＡもしくはタンパク質成分の汚染が懸念され、ヒト治療のための細胞の使用が複雑化または妨げられる場合、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を単独で、または他の薬剤と組み合わせて使用することは、多能性の維持に効果的である。
【0174】
別の例において、いくつかの状況では、培養中のＬＩＦの停止の直前にノギンなどのタンパク質でＢＭＰシグナルを拮抗させると、心筋細胞系への分化を誘導することができる（ユアサ（Ｙｕａｓａ）他、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、２３：６０７－６１１、２００５年）。本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物などの薬理学的ＢＭＰアンタゴニストを本明細書に記載されているように使用すると、より強力ではないとしても同様の効果を得ることができる。そのような分化した細胞は、治療的に罹患した心筋に導入することができる。あるいは、そのような治療は、実際には、すでに罹患した心筋に帰巣している生着した前駆細胞に対してより効果的である可能性がある。ノギンのようなＢＭＰのタンパク質アンタゴニストを全身に投与することは、非常に高価であり、投与方法も複雑である。本明細書中に記載されるＢＭＰアンタゴニストの送達は、全身的にまたは局所的に、そのような前駆細胞のインサイチュで機能する心筋細胞への分化にバイアスをかけ得る。
【0175】
化合物の哺乳類への応用
本明細書に記載されるように、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む医薬組成物は、当業者によって適切であると判断される投与量および投与レジメンを使用して、対象（例えば、ヒト、家庭用ペット、家畜、または他の動物）を治療するために使用することができ、これらのパラメータは、例えば、治療される障害の種類および程度、対象の全体的な健康状態、化合物の治療指数、および投与経路に応じて変化し得る。標準的な臨床試験を使用して、本明細書に記載されるように、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む任意の特定の医薬組成物の投与量および投与頻度を最適化することができる。使用することができる例示的な投与経路には、経口、非経口、静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、局所、頭蓋内、眼窩内、眼球内、脳室内、嚢内、脊髄内、槽内、腹腔内、鼻腔内、エアロゾル、または坐剤による投与、が含まれる。本明細書に記載されている方法および組成物と共に使用することができる製剤を製造するための方法は、当該技術分野でよく知られており、例えば、レミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（第２０版、編、Ａ．Ｒ．ゲナロ（Ｇｅｎｎａｒｏ））、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ、２０００、に記載されている。
本明細書に記載されるように、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む医薬組成物は、当業者によって適切であると判断される投与量および投与レジメンを使用して、対象（例えば、ヒト、家庭用ペット、家畜、または他の動物）を治療するために使用することができ、これらのパラメータは、例えば、治療される障害の種類および程度、対象の全体的な健康状態、化合物の治療指数、および投与経路に応じて変化し得る。標準的な臨床試験を使用して、本明細書に記載されるように、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む任意の特定の医薬組成物の投与量および投与頻度を最適化することができる。使用することができる例示的な投与経路には、経口、非経口、静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、局所、頭蓋内、眼窩内、眼球内、脳室内、嚢内、脊髄内、槽内、腹腔内、鼻腔内、エアロゾル、または坐剤による投与、が含まれる。本明細書に記載されている方法および組成物と共に使用することができる製剤を製造するための方法は、当該技術分野でよく知られており、例えば、レミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（第２０版、編、Ａ．Ｒ．ゲナロ（Ｇｅｎｎａｒｏ））、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ、２０００、に記載されている。
【0176】
昆虫におけるＢＭＰシグナル伝達の阻害
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、節足動物のＢＭＰ受容体対脊索動物のＢＭＰ受容体に対する活性、およびおそらく選択性さえも有し得る。節足動物の幼虫または卵においてＢＭＰシグナル伝達を阻害すると、深刻な発生異常を引き起こす可能性が高く、おそらく、例えば、この経路が阻害された場合にゼブラフィッシュおよびショウジョウバエで観察されるのと同じ背側化を介して、繁殖する能力が損なわれると考えられる。節足動物のＢＭＰ受容体とヒトのＢＭＰ受容体との間に非常に強い選択性を持つＢＭＰアンタゴニストは、現在の戦略よりも明らかに毒性が低く、環境に優しい殺虫剤や害虫駆除剤として使用することができる。
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、節足動物のＢＭＰ受容体対脊索動物のＢＭＰ受容体に対する活性、およびおそらく選択性さえも有し得る。節足動物の幼虫または卵においてＢＭＰシグナル伝達を阻害すると、深刻な発生異常を引き起こす可能性が高く、おそらく、例えば、この経路が阻害された場合にゼブラフィッシュおよびショウジョウバエで観察されるのと同じ背側化を介して、繁殖する能力が損なわれると考えられる。節足動物のＢＭＰ受容体とヒトのＢＭＰ受容体との間に非常に強い選択性を持つＢＭＰアンタゴニストは、現在の戦略よりも明らかに毒性が低く、環境に優しい殺虫剤や害虫駆除剤として使用することができる。
【0177】
エクスビボでの応用
治療方法において患者に投与されることに加えて、本明細書に記載されるように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、細胞および組織、ならびに患者に移植される構造材料（上記を参照）をエクスビボで処理するために使用することもできる。例えば、本明細書に記載される１つ以上の結晶性化合物または組成物は、例えば、移植において使用され得る外植された組織を治療するために使用され得る。
治療方法において患者に投与されることに加えて、本明細書に記載されるように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、細胞および組織、ならびに患者に移植される構造材料（上記を参照）をエクスビボで処理するために使用することもできる。例えば、本明細書に記載される１つ以上の結晶性化合物または組成物は、例えば、移植において使用され得る外植された組織を治療するために使用され得る。
【0178】
高コレステロール血症または高リポタンパク血症の治療
低分子または組み換えのＢＭＰ阻害剤での処理は、低密度リポタンパク質受容体欠損マウス（ＬＤＬＲ－／－）において、マクロファージの蓄積やカテプシン活性を介した血管炎症、アテローム形成、血管石灰化を低減する。理論にとらわれることなく、血管炎症への影響を説明する可能性として、酸化ＬＤＬ（ｏｘＬＤＬ）は、ヒト大動脈内皮細胞のＢＭＰ２発現を増加させ、活性酸素種（ＲＯＳ）の産生を誘導することがわかっている。低分子ＢＭＰ阻害剤や組み換えＢＭＰ阻害剤による阻害効果から、ｏｘＬＤＬによる活性酸素生成にはＢＭＰシグナル伝達が必要であると考えられる。低分子ＢＭＰ阻害剤で処理すると、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素の活性を阻害することなく、血漿中の低密度リポ蛋白質レベルが低下することから、ＬＤＬコレステロール生合成の制御にＢＭＰシグナル伝達が関与していることが示唆される。また、低分子のＢＭＰ阻害剤は、高脂肪食を与えたＬＤＬＲ欠損マウスに見られる肝脂肪症を抑制することがわかっている。低分子ＢＭＰ阻害剤や組み換えＢＭＰ阻害剤は、インビトロの肝細胞でＡｐｏＢ－１００の合成を阻害する。これらの結果は、ＢＭＰシグナル伝達が血管石灰化や動脈硬化に関与していることを示しており、ＢＭＰシグナル伝達が動脈硬化の病因に寄与している可能性を示す少なくとも２つの新しいメカニズムを提供している。これらの研究は、ＢＭＰシグナル伝達経路が動脈硬化の治療標的であることを強調するとともに、血管の酸化ストレス、炎症、脂質代謝の制御におけるＢＭＰシグナル伝達のいくつかの新しい機能を明らかにしている。
低分子または組み換えのＢＭＰ阻害剤での処理は、低密度リポタンパク質受容体欠損マウス（ＬＤＬＲ－／－）において、マクロファージの蓄積やカテプシン活性を介した血管炎症、アテローム形成、血管石灰化を低減する。理論にとらわれることなく、血管炎症への影響を説明する可能性として、酸化ＬＤＬ（ｏｘＬＤＬ）は、ヒト大動脈内皮細胞のＢＭＰ２発現を増加させ、活性酸素種（ＲＯＳ）の産生を誘導することがわかっている。低分子ＢＭＰ阻害剤や組み換えＢＭＰ阻害剤による阻害効果から、ｏｘＬＤＬによる活性酸素生成にはＢＭＰシグナル伝達が必要であると考えられる。低分子ＢＭＰ阻害剤で処理すると、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素の活性を阻害することなく、血漿中の低密度リポ蛋白質レベルが低下することから、ＬＤＬコレステロール生合成の制御にＢＭＰシグナル伝達が関与していることが示唆される。また、低分子のＢＭＰ阻害剤は、高脂肪食を与えたＬＤＬＲ欠損マウスに見られる肝脂肪症を抑制することがわかっている。低分子ＢＭＰ阻害剤や組み換えＢＭＰ阻害剤は、インビトロの肝細胞でＡｐｏＢ－１００の合成を阻害する。これらの結果は、ＢＭＰシグナル伝達が血管石灰化や動脈硬化に関与していることを示しており、ＢＭＰシグナル伝達が動脈硬化の病因に寄与している可能性を示す少なくとも２つの新しいメカニズムを提供している。これらの研究は、ＢＭＰシグナル伝達経路が動脈硬化の治療標的であることを強調するとともに、血管の酸化ストレス、炎症、脂質代謝の制御におけるＢＭＰシグナル伝達のいくつかの新しい機能を明らかにしている。
【0179】
様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、患者におけるＡｐｏＢ－１００の循環レベルの低下に使用されてもよい。様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、患者におけるＡｐｏＬＤＬの循環レベルの低下に使用されてもよい。様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、先天性または後天性の高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症を含む、高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症の治療に使用されてもよい。いくつかの実施形態において、先天性高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク血症は、常染色体優性高コレステロール血症（ＡＤＨ）、家族性高コレステロール血症（ＦＨ）、多遺伝子性高コレステロール血症、家族性複合高脂血症（ＦＣＨＬ）、高アポベータリポタンパク血症、または小高密度ＬＤＬ症候群（ＬＤＬ表現型Ｂ）である。
【0180】
いくつかの実施形態において、後天性の高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症は、糖尿病、高脂血症の食事および／または座りがちな生活習慣、肥満、メタボリックシンドローム、内因性または二次性の肝疾患、原発性胆汁性肝硬変または他の胆汁うっ滞障害、アルコール依存症、膵炎、ネフローゼ症候群、末期腎疾患、甲状腺機能低下症、チアジド系薬剤、β遮断薬、レチノイド、高活性抗レトロウイルス薬、エストロゲン、プロゲスチン、グルココルチコイドなどの投与による医原病に関連している。様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、シトステロール症、脳腱性黄色腫症、または家族性低ベタリポ蛋白質血症などの、脂質吸収または代謝の欠陥に関連する疾患、障害、または症候群の治療に使用することができる。
【0181】
様々な実施形態において、本明細書に記載されている１つまたは複数の結晶性化合物または組成物は、高脂血症によって引き起こされる疾患、障害、または症候群、例えば、冠動脈疾患およびその症状（例えば、心筋梗塞、狭心症、不安定狭心症などの急性冠動脈症候群、心筋梗塞に起因するうっ血性心不全などの心機能障害、心筋虚血・梗塞に伴う不整脈など）、脳の一部に供給する動脈の閉塞による脳卒中、脳出血、末梢動脈疾患（例えば、腸間膜虚血、腎動脈狭窄、四肢虚血および跛行、鎖骨下盗血症候群、腹部大動脈瘤、胸部大動脈瘤、仮性動脈瘤、壁内血腫、または穿通性大動脈潰瘍、大動脈解離、大動脈狭窄、血管石灰化、腱に影響を与える黄色腫または強膜および皮膚の黄色腫などの黄色腫、黄色腫、または肝脂肪症、の治療において使用され得る。
【0182】
様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物、あるいはそれらの組み合わせは、正常な循環脂質レベルまたは代謝を示す個体のように、循環脂質レベルに関係なく、前述の疾患、障害、または症候群の治療に使用することができる。
【0183】
様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、冠動脈疾患、脳疾患、または末梢血管疾患から生じる二次的な心血管イベントの低減に使用されてもよい。様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、正常な循環コレステロールおよび脂質レベルを示す個体の治療に使用されるなど、脂質レベルに関係なく個体を治療するために使用されてもよい。様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤と併用して投与してもよい。
【0184】
様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、心血管リスクのマーカ（例えば、Ｃ反応性タンパク質）が上昇しているか、または例えばフラミンガムリスクスコアが上昇している個体など、心血管疾患の予防に使用されてもよい。様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、正常な循環コレステロールおよび脂質レベルを示す個体において、心血管疾患を予防するために使用することができる。
【0185】
様々な実施形態において、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物は、前述の疾患、障害、または症候群の治療または予防に使用され、治療を受ける患者は、以下の状態の１つ以上と診断されていない、および／または罹患していない：アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患、および他の血管炎に関連する血管炎症；アテローム性動脈硬化疾患、アテローム性プラーク、および／または血管石灰化；動脈瘤および／または動脈瘤形成；急性冠症候群（狭心症および心臓発作）、一過性脳虚血発作、脳卒中、末梢血管疾患、または他の血管虚血性事象。
【0186】
様々な実施形態において、本明細書に記載された１つまたは複数の結晶性化合物または組成物は、前述の疾患、障害、または症候群の治療または予防に（例えば、患者におけるＡｐｏＢ－１００および／またはＬＤＬの循環レベルを低下させるために）；先天性または後天性の高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症を含む、高コレステロール血症、高脂血症、または高リポタンパク質血症の治療のために；脂質の吸収または代謝の欠陥に関連する疾患、障害、または症候群の治療のために；高脂血症に起因する疾患、障害、または症候群の治療のために；冠動脈、脳、または末梢血管疾患に起因する二次的な心血管イベントの軽減のために；冠動脈、脳、または末梢血管疾患に起因する二次的な心血管イベントの軽減のために）使用され、治療を受けている患者はまた、以下の状態の１つ以上とも診断されている、および／または、罹患している：アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患、およびその他の血管炎に関連する血管炎症、アテローム性動脈硬化症、アテローム性プラーク、および／または血管石灰化、動脈瘤および／または動脈瘤形成、急性冠症候群（狭心症および心筋梗塞）、一過性脳虚血発作、脳卒中、末梢血管疾患、またはその他の血管虚血性事象。
【0187】
Ｔ．軟骨欠損症の治療
特定のＢＭＰ受容体を選択的に阻害することで、間葉系幹細胞が作製した足場の石灰化や鉱物化を防ぎ、軟骨形成を可能にする（ヘリングマン（Ｈｅｌｌｉｎｇｍａｎ）他、Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ Ｐａｒｔ Ａ．、２０１１年４月、１７（７－８）：１１５７－６７．、Ｅｐｕｂ：２０１１年１月１７日）。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書に記載された本発明の化合物は、軟骨損傷または欠損を有する患者における軟骨の修復／再生を促進するために有用であり、また、間葉系幹細胞などの適切な細胞から、例えば移植用の軟骨組織をエクスビボまたはインビトロで製造する際にも有用である。
特定のＢＭＰ受容体を選択的に阻害することで、間葉系幹細胞が作製した足場の石灰化や鉱物化を防ぎ、軟骨形成を可能にする（ヘリングマン（Ｈｅｌｌｉｎｇｍａｎ）他、Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ Ｐａｒｔ Ａ．、２０１１年４月、１７（７－８）：１１５７－６７．、Ｅｐｕｂ：２０１１年１月１７日）。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書に記載された本発明の化合物は、軟骨損傷または欠損を有する患者における軟骨の修復／再生を促進するために有用であり、また、間葉系幹細胞などの適切な細胞から、例えば移植用の軟骨組織をエクスビボまたはインビトロで製造する際にも有用である。
【0188】
Ｕ．選択性の程度が異なる化合物の適用：特定のＢＭＰＩ型受容体を介したＢＭＰシグナル伝達を阻害する化合物、またはＴＧＦ－β、アクチビン、ＡＭＰキナーゼ、もしくはＶＥＧＦ受容体を介したシグナル伝達にも影響を与える化合物。
【0189】
様々な実施形態において、本明細書に記載される本発明の化合物のいくつかは、特定のＢＭＰＩ型受容体に対して比較的高い選択性を有するであろう。特定の疾患の病因は、１つの特定の受容体のシグナル伝達の機能不全に起因する可能性がある。例えば、進行性骨化性線維異形成症は、異常な（構成的に活性な）ＡＬＫ２の機能によって引き起こされる疾患である（ユ（Ｙｕ）他、Ｎａｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．、４：３３－４１、２００８年）。そのような場合、様々な実施形態において、ＢＭＰＩ型受容体のサブセットの機能に特異的に拮抗する本明細書に記載の本発明の化合物は、毒性または副作用の低減、またはより大きな有効性、あるいはその両方の利点を有し得る。
【0190】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される本発明の化合物は、ＢＭＰ対ＴＧＦ－β、アクチビン、ＡＭＰキナーゼ、およびＶＥＧＦ受容体シグナル伝達に対して高度の選択性を有し得る。他の化合物は、特異性が低くてもよく、ＢＭＰシグナル伝達に加えて他の経路を標的にしてもよい。腫瘍の治療において、例えば、特定の患者の腫瘍の分子表現型解析によって複数の経路の調節異常が明らかになった場合、ＢＭＰシグナル伝達だけでなく、上記の経路の１つ以上を阻害する薬剤が有益な効果（例えば、腫瘍サイズの縮小）をもたらす可能性がある。
【0191】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の本発明の化合物（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）は、ＡＬＫ１またはＡＬＫ３またはＡＬＫ４またはＡＬＫ５またはＡＬＫ６に対するＡＬＫ２の高度な選択性を有する。ＡＬＫ１またはＡＬＫ３またはＡＬＫ４またはＡＬＫ５またはＡＬＫ６に対するＡＬＫ２の選択的な阻害は、望ましくない効果または毒性を最小限に抑えることができる。ＡＬＫ３を慢性的に阻害すると、腸腺窩幹細胞リサイクルにおける既知の重要性と若年性家族性ポリポーシスにおけるＡＬＫ３機能の関与により、正常な粘膜上皮ターンオーバーを損なう可能性がある。ＡＬＫ１が阻害されると、正常な血管リモデリングが損なわれ、ヒト遺伝性毛細血管拡張症症候群２型（ＨＨＴ２）と同様の合併症（毛細血管漏出、ＡＶ奇形、出血など）を引き起こす可能性がある。したがって、ＡＬＫ３およびＡＬＫ１に比べてＡＬＫ２を選択的に阻害する化合物は、非選択的な阻害剤を使用することで遭遇する可能性のあるこの種の毒性を回避するのに役立つ可能性がある。
【0192】
特定の実施形態において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ１の活性に対してヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物をヒトに投与することを含む方法を提供する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ１の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも約２倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ１の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも５倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ１の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも１０倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ１の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも１５倍または２０倍または３０倍または４０倍または５０倍または１００倍または２００倍または３００倍または４００倍または５００倍または６００倍または８００倍または１０００倍または１５００倍または２０００倍または５０００倍または１００００倍または１５０００倍または２００００倍または４００００倍または５００００倍または６００００倍または７００００倍または８００００倍または９００００倍または１０００００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。
【0193】
特定の実施形態において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ３の活性に対してヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物をヒトに投与することを含む方法を提供する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ３の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも１５倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ３の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも２０倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ３の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも３０倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ３の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも５０倍または１００倍または２００倍または３００倍または４００倍または５００倍または６００倍または８００倍または１０００倍または１５００倍または２０００倍または５０００倍または１００００倍または１５０００倍または２００００倍または４００００倍または６００００倍または７００００倍または８００００倍または９００００倍または１０００００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。
【0194】
特定の実施形態において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ４の活性に対してヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物をヒトに投与することを含む方法を提供する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ４の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも１０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ４の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも２０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ４の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも３０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ４の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも４０００倍または５０００倍または６０００倍または７０００倍または８０００倍または９０００倍または１００００倍または１２０００倍または１４０００倍または１６０００倍または１８０００倍または２００００倍または２５０００倍または３００００倍または４００００倍または５００００倍または６００００倍または７００００倍または８００００倍または９００００倍または１０００００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。
【0195】
特定の実施形態において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ６の活性に対してヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物をヒトに投与することを含む方法を提供する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ６の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも２倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ６の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも５倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ６の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも１０倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ６の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも１５倍または２０倍または３０倍または４０倍または５０倍または１００倍または２００倍または３００倍または４００倍または５００倍または６００倍または８００倍または１０００倍または１５００倍または２０００倍または５０００倍または１００００倍または１５０００倍または２００００倍または４００００倍または５００００倍または６００００倍または７００００倍または８００００倍または９００００倍または１０００００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。
【0196】
一態様において、本発明は、ヒトにおけるＡＬＫ２の活性を阻害する方法であって、ヒトＡＬＫ５の活性に対してヒトＡＬＫ２の活性を選択的に阻害する、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物をヒトに投与することを含む方法を提供する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも１０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも２０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも３０００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。いくつかのそのような実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、ヒトＡＬＫ５の活性を阻害するためのＩＣ５０よりも４０００倍または５０００倍または６０００倍または７０００倍または８０００倍または９０００倍または１００００倍または１２０００倍または１４０００倍または１６０００倍または１８０００倍または２００００倍または２５０００倍または３００００倍または４００００倍または５００００倍または６００００倍または７００００倍または８００００倍または９００００倍または１０００００倍低いＩＣ５０で、ヒトＡＬＫ２の活性を阻害する。
【0197】
本明細書において使用される場合、障害または状態を「予防する」治療薬とは、統計的試料において、未処理の対照試料と比較して、処理された試料における障害または状態の発生または頻度を減少させる、または未処理の対照試料と比較して、障害または状態の１つ以上の症状の発症を遅らせるもしくは重症度を減少させる化合物を指す。したがって、癌の予防には、例えば、予防的治療を受けている患者の集団における検出可能な癌の成長の数を、未治療の対照集団と比較して減少させること、および／または、治療を受けた集団における検出可能な癌の成長の出現を、未治療の対照集団と比較して、例えば、統計的および／または臨床的に有意な量だけ遅延させることが含まれる。感染症の予防には、例えば、治療を受けた集団における感染症の診断数を未治療の対照集団と比較して減少させること、および／または治療を受けた集団における感染症の症状の発現を未治療の対照集団と比較して遅らせることが含まれる。痛みの予防には、例えば、治療を受けた集団と治療を受けていない対照集団の対象が経験する痛みの感覚の大きさを減少させること、または代替的に遅延させることが含まれる。
【0198】
「治療する」という用語は、予防的および／または治療的な治療を含む。「予防的または治療的」治療という用語は、当技術分野で認識されており、１つまたは複数の対象組成物の宿主への投与を含む。望ましくない状態（例えば、宿主動物の疾患または他の望ましくない状態）が臨床的に顕在化する前に投与される場合、その治療は予防的（すなわち、望ましくない状態の発症から宿主を保護する）であり、一方、望ましくない状態が顕在化した後に投与される場合、その治療は治療的（すなわち、既存の望ましくない状態またはその副作用を減少、改善、または安定化させることを目的とする）である。
【0199】
併用療法
特定の例において、本明細書に記載される本明細書に記載される１つ以上の結晶性化合物または組成物は、他の現在または将来の薬物療法と組み合わせて使用することができる。その理由は、ＢＭＰを単独で阻害する効果は、それだけでは最適ではない可能性があり、および／または、ＢＭＰシグナル伝達と機能的に相互作用する別の経路に作用する治療法、またはＢＭＰ経路自体に作用する治療法と組み合わせて、相乗効果またはより高い効果を得ることができるからである。特定の例において、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物）を追加の薬物療法と併用することで、追加の薬物療法の用量を、単剤療法（例えば、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤がない場合）で使用した場合に治療効果を達成する量よりも少なくなるように減らすことができる。
特定の例において、本明細書に記載される本明細書に記載される１つ以上の結晶性化合物または組成物は、他の現在または将来の薬物療法と組み合わせて使用することができる。その理由は、ＢＭＰを単独で阻害する効果は、それだけでは最適ではない可能性があり、および／または、ＢＭＰシグナル伝達と機能的に相互作用する別の経路に作用する治療法、またはＢＭＰ経路自体に作用する治療法と組み合わせて、相乗効果またはより高い効果を得ることができるからである。特定の例において、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物）を追加の薬物療法と併用することで、追加の薬物療法の用量を、単剤療法（例えば、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤がない場合）で使用した場合に治療効果を達成する量よりも少なくなるように減らすことができる。
【0200】
併用療法のいくつかの非限定的な例には、以下が含まれ得る。
エリスロポエチン（Ｅｐｏｇｅｎ（登録商標））と本明細書に記載のＢＭＰアンタゴニストとの共投与は、上述したようなある種の炎症性貧血、特に慢性炎症とエリスロポエチン不全との両方が貧血を促進するように作用する末期腎疾患などの疾患に特に有効であると考えられる。
エリスロポエチン（Ｅｐｏｇｅｎ（登録商標））と本明細書に記載のＢＭＰアンタゴニストとの共投与は、上述したようなある種の炎症性貧血、特に慢性炎症とエリスロポエチン不全との両方が貧血を促進するように作用する末期腎疾患などの疾患に特に有効であると考えられる。
【0201】
特定の実施形態において、本明細書に記載されるＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載される１つ以上の結晶性化合物または組成物）は、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤（例えば、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチンなど）、フィブラート系薬剤（例えば、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、ゲムフィブロジル、フェノフィブラートなど）、エゼチミブ、ナイアシン、コレステリルエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）阻害剤（例えば、トルセトラピブ、アナセトラピブ、ダルセトラピブなど）、コレスチラミン、コレスチポール、プロブコール、デキストロチロキシン、胆汁酸隔離剤、またはこれらの組み合わせを含むがこれらに限定されない他の抗高脂血症剤または抗脂質血症剤と一緒に投与され得る。
【0202】
特定の実施形態において、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物）は、糖尿病の治療薬と併用して投与することができ、これらには、限定されるものではないが、スルホニル尿素（例えば、クロルプロパミド、トルブタミド、グリブリド、グリピジド、またはグリメピリド）、肝臓で生成されるグルコースの量を減少させる薬剤（例えば、メトホルミン）、メグリチニド（例えば、レパグリニドまたはナテグリニド）、腸からの炭水化物の吸収を減少させる薬剤（例えば、アカルボースなどのアルファグルコシダーゼ阻害剤）、血糖コントロールに効果のある薬剤（例えば、プラムリンチド、エキセナチド）、ＤＰＰ－ＩＶ阻害剤（シタグリプチンなど）、インスリン治療、チアゾリジノン系薬剤（トログリタゾン、シグリタゾン、ピオグリタゾンまたはロシグリタゾンなど）、オキサジアゾリジンジオン、α－グルコシダーゼ阻害剤（例えば、ミグリトールまたはアカルボース）、β細胞のＡＴＰ依存性カリウムチャネルに作用する薬剤（例えば、トルブタミド、グリベンクラミド、グリピジド、グリカジド、レパグリニドなど）、ナテグリニド、グルカゴン阻害剤、グルコン生成および／またはグリコーゲン分解の刺激に関与する肝酵素の阻害剤、またはこれらの組み合わせなど、が含まれる。
【0203】
特定の実施形態において、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物）は、肥満の治療薬と併用して投与することができ、これらには、限定されるものではないが、オルリスタット、シブトラミン、フェンジメトラジン、フェンテルミン、ジエチルプロピオン、ベンズフェタミン、マジンドール、デキストロアンフェタミン，リモナバント、セチリスタット、ＧＴ３８９－２５５、ＡＰＤ３５６、プラムリンチド／ＡＣ１３７、ＰＹＹ３－３６、ＡＣ１６２３５２／ＰＹＹ３－３６、オキシントモデュリン、ＴＭ３０３３８、ＡＯＤ９６０４、オレイル－エストロン、ブロモクリプチン、エフェドリン、レプチン、プソイドエフェドリン、またはこれらの製薬上許容される塩、あるいはこれらの組み合わせ、が含まれる。
【0204】
特定の実施形態において、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物）は、抗高血圧剤と併用して投与することができ、これらには、限定されるものではないが、β－ブロッカー（例えば、アルプレノロール、アテノロール、チモロール、ピンドロール、プロプラノロール、メトプロロール）、ＡＣＥ（アンジオテンシン変換酵素）阻害剤（例えば、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、フォシノプリル、リシノプリル、キナプリルおよびラミプリル）、カルシウムチャネル遮断剤（例えば、ニフェジピン、フェロジピン、ニカルジピン、イスラジピン、ニモジピン、ジルチアゼムおよびベラパミル）、α遮断薬（例えば、ドキサゾシン、ウラピジル、プラゾシンおよびテラゾシン）、またはこれらの組み合わせ、が含まれる。特定の実施形態において、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤は、赤血球造血刺激剤（例えば、エリスロポエチン）を含むがこれらに限定されない貧血（例えば、腎不全および血液透析に関連する炎症の貧血）の治療と併せて投与され得る。
【0205】
ＳＵ－５４１６などのチロシンキナーゼ受容体阻害剤と、本明細書に記載されているＢＭＰ阻害剤（例えば、の化合物の１つ以上）は、特に腫瘍に対する抗血管新生療法において、血管新生を阻害する際に相乗効果を発揮する可能性がある。ＢＭＰシグナル（ＢＭＰ－４）は、幹細胞または前駆細胞の造血／内皮共通前駆細胞へのコミットメントに重要であると考えられており、血管新生に必要な成熟内皮細胞の増殖、生存、および移動を促進する可能性がある（パーク（Ｐａｒｋ）他、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、１３１：２７４９－２７６２、２００４年）。したがって、本明細書に記載されているような化合物を用いたＢＭＰシグナルの拮抗は、内皮前駆体および細胞のレベルでの血管新生のさらなる阻害をもたらす可能性がある。同様に、本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）と、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））などの他のチロシンキナーゼ受容体阻害剤と、による併用治療は、特定の腫瘍の血管リモデリングおよび血管新生を阻害するために使用され得る。
【0206】
ソニックヘッジホッグアゴニストと本明細書に記載のＢＭＰ阻害剤（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）との組み合わせは、ＳＨＨ活性が毛包のテロゲン（休止）期からの移行を刺激することが知られており（パラディーニ（Ｐａｌａｄｉｎｉ）他、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、１２５：６３８－６４６、２００５年）、一方でＢＭＰ経路を阻害するとテロゲン期が短縮される（プリクス（Ｐｌｉｋｕｓ）他、Ｎａｔｕｒｅ、４５１：３４０－３４４、２００８年）ことから、毛髪成長を促進するのに特に有用であると考えられる。両者を併用することで、ａｎａｇｅｎ期または成長期の時間が相対的に長くなることが予想される。
【0207】
ノッチモジュレータ（例えば、ガンマ－セクレターゼ阻害剤）および本明細書に記載のＢＭＰアンタゴニスト（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）を組み合わせて使用すると、骨の分化を阻害するように設計された用途では、両方の経路が協調的に機能して細胞の分化をもたらすことを示唆する証拠が増えているため、いずれかの薬剤を単独で使用するよりも効果的であるかもしれない（クルッペル（Ｋｌｕｐｐｅｌ）他、Ｂｉｏｅｓｓａｙｓ、２７：１１５－１１８、２００５年）。これらの治療法は、一方または両方の経路が異常をきたしている腫瘍の治療において、相乗効果を発揮する可能性がある（カトウ（Ｋａｔｏｈ）、Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｖ．、３：３０－３８、２００７年）。
【0208】
インディアンヘッジホッグ（ＩＨＨ）アンタゴニストとＢＭＰアンタゴニスト（例えば、本明細書に記載されているように、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物）を組み合わせて使用することで、病的な骨形成を阻害することができる。ＩＨＨは、骨前駆体の軟骨細胞または軟骨形成細胞へのコミットメント（ｃｏｍｍｉｔｍｅｎｔ）を担う。軟骨内骨形成は、（ＢＭＰシグナルおよびＩＨＨシグナルによって促進される）軟骨形成およびＢＭＰシグナルによって開始されるミネラル化プログラムによるそれらの後続の石灰化の両方の調整された活性を含む（セキ（Ｓｅｋｉ）他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７９：１８５４４－１８５４９、２００４年；ミニナ（Ｍｉｎｉｎａ）他、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、１２８：４５２３－４５３４、２００１年）。したがって、ＩＨＨアンタゴニストと、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物とを、本明細書に記載されたように共投与することは、（ＦＯＰにおけるような）過活動のＢＭＰシグナルによる病的な骨成長、または上述の病的な骨形成の炎症性または外傷性障害のいずれかにおいて、より効果的であると考えられる。
【0209】
ＳｍｏアンタゴニストとＢＭＰアンタゴニストの両方が膠芽腫の治療に効果があるという強い実験的証拠が存在する。本明細書に記載の化合物（例えば、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物）は、膠芽腫を治療するためにＳｍｏアンタゴニストと組み合わせて使用することができる。
【0210】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、以下からなる群から選択される薬剤と組み合わせて投与される：コルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、リポキシゲナーゼ阻害剤、ロイコトリエン阻害剤、肥満細胞安定化剤、抗ヒスタミン剤、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）阻害剤、ＩＬ－２３遮断薬、ＩＬ１－ＲＡ療法、細胞障害性療法、ビスフォスフォネート、抗リウマチ薬、ＣＴＡ４－Ｉｇ療法、抗成長因子療法、インターロイキン－１シグナル阻害薬。
【0211】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物と組み合わせて使用するための例示的なコルチコステロイドには、プレドニゾン、コルチゾール、およびヒドロコルチゾンが含まれるが、これらに限定されない。一実施形態において、コルチコステロイドはプレドニゾンである。
【0212】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物と組み合わせて使用するための例示的なＮＳＡＩＤには、ナプロキセン、イブプロフェン、メロキシカム、ジクロフェナク、アスピリン、ピロキシカム、スリンダク、メクロフェナム酸およびインドメタシンが含まれるが、これらに限定されない。
【0213】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、メクロフェナム酸ナトリウムまたはジレトンなどのリポキシゲナーゼ阻害剤と組み合わせて投与される。
【0214】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物と組み合わせて使用するための例示的なロイコトリエン阻害剤には、モンテルカスト、ザフィルルカストおよびプランルカストが含まれるが、これらに限定されない。
【0215】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物と組み合わせて使用するための肥満細胞安定剤の非限定的な例には、クロモリンナトリウム、クロモグリク酸、ケトチフェン、オロパタジン、オマリズマブ、ペミロラスト、ケルセチン、テオフィリン、カフェイン、パラキサンチン、アミノフィリン、およびテオブロミンが含まれるが、これらに限定されない。
【0216】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、抗ヒスタミン剤、例えば、ジフェンヒドラミン、セチリジン、ラニチジン、ファモチジン、クロルフェナミン、クロロジフェンヒドラミン、およびフェキソフェニジンなどと組み合わせて投与される。
【0217】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物との使用が企図される例示的な抗腫瘍壊死因子（抗ＴＮＦ）薬剤には、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、セルトリズマブ、ブプロピオン、およびゴリムマブが含まれるが、これらに限定されない。
【0218】
本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物での使用が企図されているインターロイキン－２３（ＩＬ－２３）シグナル伝達の例示的な阻害剤には、ウステキヌマブおよびＢＩ－８５５０６６が含まれるが、これらに限定されない。
【0219】
本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物との使用が企図されているインターロイキン－１（ＩＬ－１）シグナル伝達の例示的な阻害剤またはＩＬ－１ＲＡ療法には、アナキンラ、カナキヌマブ、およびリロナセプトが含まれるが、これらに限定されない。
【0220】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物と組み合わせて使用するための例示的な細胞毒性療法には、メトトレキサート、シクロホスファミド、５－フルオロウラシル、ドキソルビシン、ビンクリスチン、ブレオマイシン、プロカルバジン、プレドニシロン、ダカルバジン、エトポシド、シスプラチン、オキサリプラチンなどが含まれるが、これらに限定されない。
【0221】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物と組み合わせて使用するための例示的なビスフォスフォネートには、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ（商標））、イバンドロネート（ＢＯＮＩＶＡ（商標））、リセドロネート（ＡＣＴＯＮＥＬ（商標）、ＡＴＥＬＶＩＡ（商標））、およびゾレドロン酸（ＲＥＣＬＡＳＴ（商標））が含まれるが、これらに限定されない。
【0222】
本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物と組み合わせて使用するための例示的な抗成長因子療法には、抗ＰＤＧＦ療法、抗ＦＧＦ療法、および抗ＶＥＧＦ療法が含まれるが、これらに限定されない。
【0223】
本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物と組み合わせて使用するための例示的な疾患修飾性抗リウマチ薬には、アザチオプリン（ＩＭＵＲＡＮ（商標））、シクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（商標））、シクロスポリン（ＮＥＯＲＡＬ（商標））、ヒドロキシクロロキン（ＰＬＡＱＵＥＮＩＬ（商標））、レフルノミド（ＡＲＡＶＡ（商標））、メトトレキサート（ＲＨＥＵＭＡＴＲＥＸ（商標）、ＴＲＥＸＡＬＬ（商標））、スルファサラジン（ＡＺＵＬＦＩＤＩＮＥ（商標））、およびトファシチニブ（ＸＥＬＪＡＮＺ（商標））などが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【0224】
さらなる実施形態において、本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物は、シクロスポリン、ミコフェノール酸モフェチルなどと組み合わせて投与することができる。
【0225】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、少なくとも１つの追加の薬剤と組み合わせて投与され、少なくとも１つの追加の薬剤は、抗炎症剤を含んでいる。例示的な抗炎症剤には、サブスタンスＰの活性の阻害剤；サブスタンスＰの分泌の阻害剤；サブスタンスＰの効果の阻害剤；ヒスタミンの活性の阻害剤；ヒスタミンの分泌の阻害剤；ヒスタミンの効果の阻害剤；マスト細胞の機能の阻害剤；Ｔｏｌｌ様受容体シグナル伝達の阻害剤；ＭｙＤ８８の阻害剤；ＴＲＩＦの阻害剤；アピラーゼ；およびＡＴＰの加水分解を触媒する薬剤が含まれるが、これらに限定されない。
【0226】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、少なくとも１つの追加の薬剤と組み合わせて投与され、少なくとも１つの追加の薬剤は、抗成長因子剤を含む。例示的な抗成長因子剤には、ＰＤＧＦリガンドの阻害剤；ＰＤＧＦ－ＡＡの阻害剤；ＰＤＧＦ－ＢＢの阻害剤；ＰＤＧＦＲ－α受容体機能の阻害剤；ＰＤＧＦＲ－β受容体機能の阻害剤；アクチビンＡに対する中和抗体；アクチビンＢに対する中和抗体；アクチビンＡリガンドに対する中和抗体；アクチビンＢリガンドに対する中和抗体；ＩＮＨＢＡでコードされるインヒビンｂＡサブユニットを含むヘテロ二量体リガンドに対する中和抗体；ＩＮＨＢＢ遺伝子でコードされるインヒビンｂＢサブユニットを含むヘテロ二量体リガンドに対する中和抗体；ＢＭＰリガンドのリガンドトラップ；アクチビンリガンドのリガンドトラップ；ＩＩ型アクチビン受容体ＡｃｔＲＩＩＡの可溶性細胞外ドメインのリガンドトラップ；ＩＩ型アクチビン受容体ＡｃｔＲＩＩＢの可溶性細胞外ドメインのリガンドトラップ；ＢＭＰＩ型受容体ＡＬＫ２の可溶性細胞外ドメインのリガンドトラップ；ＢＭＰＩ型受容体ＡＬＫ３の可溶性細胞外ドメインのリガンドトラップ；およびＢＭＰＩ型受容体ＡＬＫ６の可溶性細胞外ドメインのリガンドトラップ、が含まれるが、これらに限定されない。
【0227】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、少なくとも１つの追加の薬剤と組み合わせて投与され、少なくとも１つの追加の薬剤は、抗骨形成シグナル剤または抗軟骨形成シグナル剤を含んでいる。例示的な抗骨形成シグナル剤または抗軟骨形成シグナル剤には、ＲＡＲ－γアゴニスト；非選択的ＲＡＲアゴニスト；骨形成転写因子Ｒｕｎｘ２の活性を阻害する薬剤；骨形成転写因子Ｒｕｎｘ２の発現を阻害する薬剤；骨形成転写因子Ｒｕｎｘ２の分解を促進する薬剤；軟骨性転写因子Ｓｏｘ９の活性を阻害する薬剤、軟骨性転写因子Ｓｏｘ９の発現を阻害する薬剤、軟骨性転写因子Ｓｏｘ９の分解を促進する薬剤、ＨＩＦ－１αの活性を阻害する薬剤、およびＨＩＦ－１αの発現を阻害する薬剤、が含まれるが、これらに限定されない。
【0228】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、単独で使用してもよいし、別の種類の治療薬と併用してもよい。本明細書では、「併用投与（ｃｏｎｊｏｉｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という語句は、２つ以上の異なる治療用化合物を、先に投与された治療用化合物が体内でまだ有効である間に第２の化合物が投与されるように（例えば、２つの化合物が対象において同時に有効であり、２つの化合物の相乗効果を含む場合がある）投与する任意の形態を指す。例えば、異なる治療用化合物は、同じ製剤でも別の製剤でも、同時または順次に投与することができる。特定の実施形態において、異なる治療用化合物は、互いに１時間以内、１２時間以内、２４時間以内、３６時間以内、４８時間以内、７２時間以内、または１週間以内に投与することができる。いくつかの実施形態において、追加の治療用化合物は、式（Ｉ）の化合物、式（Ｉ）Ｉの化合物、または式（Ｉ）ＩＩの化合物の投与に先立って、または投与後に、約５分以内から約１６８時間以内に投与される。したがって、このような治療を受ける対象は、異なる治療用化合物の併用効果の恩恵を受けることができる。
【0229】
特定の実施形態において、本発明の化合物を１つ以上の追加の治療剤（例えば、１つ以上の追加の化学療法剤）と併用投与することにより、本発明の化合物または１つ以上の追加の治療剤の各個別の投与に比べて、改善された有効性が得られる。ある種の実施形態において、併用投与によって付加的な効果が得られ、付加的な効果とは、本発明の化合物および１つ以上の追加治療剤の個々の投与による効果のそれぞれの合計を意味する。
【0230】
併用する場合、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物は、本明細書に記載されている少なくとも１つの追加薬剤とは別個にまたは異なる製剤で投与することができ、または本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物と追加薬剤とを含む単一の製剤で投与することができる。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物は、少なくとも１つの追加薬剤と同時にまたは同時並行にて投与することができる。本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物の投与は、同じまたは異なる投与様式（例えば、経口、静脈内、注射など）を使用して投与することができる。本明細書に記載の１つまたは複数の結晶性化合物または組成物と、少なくとも１つの追加薬剤の投与は、同時に、１５分以内、３０分以内に行うことができ、または少なくとも１時間（例えば、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも７時間、少なくとも８時間、少なくとも９時間、少なくとも１０時間、少なくとも１１時間、少なくとも１２時間またはそれ以上）を隔てて行うことができる。当業者であれば、本明細書に記載されている１つ以上の結晶性化合物または組成物と、少なくとも１つの追加の薬剤とを含む併用治療について、例えば、副作用を軽減するため、薬剤のうちの１つからの代謝干渉を防ぐため、本明細書に記載されている４つの１つ以上の結晶性化合物または組成物の活性を高めるため、またはそうでなければ薬力学的または薬物動態学的因子を改善するために、適切な投与レジメンを容易に決定することができる。
【0231】
明細書では、上記のような少なくとも１つの追加の薬剤と、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物との組み合わせが、単独で投与される各薬剤の効果の合計よりも大きい相乗効果をもたらすことが企図されている。そのような実施形態において、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を単独で投与したときの治療効果に必要とされる用量よりも低い用量の第２の薬剤と組み合わせて投与することが企図される。
【0232】
投与量および投与方法
一態様において、本明細書に記載の方法は、対象における異常な骨形成を含む疾患または障害（例えば、異所性骨化疾患）を治療するための方法を提供する。一実施形態において、対象は、哺乳類であり得る。別の実施形態において、アプローチはすべての哺乳動物に関して有効であるが、哺乳動物はヒトであり得る。本発明の方法は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む。
一態様において、本明細書に記載の方法は、対象における異常な骨形成を含む疾患または障害（例えば、異所性骨化疾患）を治療するための方法を提供する。一実施形態において、対象は、哺乳類であり得る。別の実施形態において、アプローチはすべての哺乳動物に関して有効であるが、哺乳動物はヒトであり得る。本発明の方法は、本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【0233】
薬剤の投与量範囲は、効力に依存し、所望の効果、例えば、異常な骨形成の少なくとも１つの症状の減少をもたらすのに十分な量を含む。投与量は、容認できない有害な副作用を引き起こすほど大きくてはいけない。一般に、投与量は、阻害剤の種類（例えば、抗体またはフラグメント、低分子、ｓｉＲＮＡなど）、および患者の年齢、状態、および性別によって異なる。投与量は、当業者によって決定することができ、合併症が発生した場合に個々の医師によって調整することもできる。典型的には、投与量は、０．１ｍｇ／ｋｇ体重～１ｇ／ｋｇ体重の範囲である。いくつかの実施形態において、投与量の範囲は、０．１ｍｇ／ｋｇ体重～１ｇ／ｋｇ体重、０．１ｍｇ／ｋｇ体重～５００ｍｇ／ｋｇ体重、０．１ｍｇ／ｋｇ体重～２５０ｍｇ／ｋｇ体重、０．１ｍｇ／ｋｇ体重～１００ｍｇ／ｋｇ体重、０．１ｍｇ／ｋｇｋｇ体重～５０ｍｇ／ｋｇ体重、０．１ｍｇ／ｋｇ体重～１０ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ～２００ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ～２５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ～３００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ～２００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ～４００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ～５００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ～７５０ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、７００ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、８００ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、９００ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ～７５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ～６００ｍｇ／ｋｇ、またはそれらの間の任意の範囲、である。
【0234】
特定の実施形態において、薬剤の用量は少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ／日であり；他の実施形態において、薬剤の用量は、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも６０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも７０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも８０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも９０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１００ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１７５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２００ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３００ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４００ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５００ｍｇ／ｋｇ／日、またはそれ以上、である。
【0235】
いくつかの実施形態において、ヒト対象において使用するための薬剤の投与量範囲は、１０ｍｇ／日～２５０ｍｇ／日、１５ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、２０ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、２５ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、２５ｍｇ／日～１７５ｍｇ／日、２５ｍｇ／日～１５０ｍｇ／日、２５ｍｇ／日～１２５ｍｇ／日、２５ｍｇ／日～１００ｍｇ／日、２５ｍｇ／日～７５ｍｇ／日、２５ｍｇ／日～５０ｍｇ／日、５０ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、７５ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、１００ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、１２５ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、１５０ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、１７５ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、５０ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、５０ｍｇ／日～１７５ｍｇ／日、５０ｍｇ／日～１５０ｍｇ／日、５０ｍｇ／日～１００ｍｇ／日、５０ｍｇ／日～７５ｍｇ／日、７５ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、７５ｍｇ／日～１７５ｍｇ／日、７５ｍｇ／日～１５０ｍｇ／日、７５ｍｇ／日～１２５ｍｇ／日、７５ｍｇ／日～１００ｍｇ／日、１００ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、１００ｍｇ／日～１７５ｍｇ／日、１００ｍｇ／日～１２５ｍｇ／日、１２５ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、１２５ｍｇ／日～１７５ｍｇ／日、１２５ｍｇ／日～１５０ｍｇ／日、１５０ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、１５０ｍｇ／日～１７５ｍｇ／日、１７５ｍｇ／日～２００ｍｇ／日、またはそれらの間の任意の範囲である。
【0236】
一実施形態において、軟組織における異常な骨形成の治療のためにヒトで使用される本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物の用量は、腫瘍性疾患および癌の治療に典型的に使用される本明細書に記載の１つ以上の結晶性化合物または組成物の用量よりも少ない。
【0237】
上記に記載された用量の投与は、限られた期間、繰り返し行うことができる。いくつかの実施形態において、用量は、１日１回、または１日複数回、例えば、１日３回に限定されない。別の実施形態において、上記の用量は、数週間または数ヶ月間毎日投与される。治療期間は、対象の臨床経過および治療への反応性に依存する。最初に高い治療量を投与した後、比較的低い維持量を継続的に投与することが企図される。
【0238】
治療有効量とは、がんの少なくとも１つの症状において、統計的に有意で測定可能な変化をもたらすのに十分な薬剤の量である（下記の「有効性の測定」を参照）。このような有効量は、特定の薬剤の臨床試験や動物実験で測定できる。
【0239】
本明細書に記載の方法および組成物において有用な薬剤は、全身投与することも、経口投与することもできる。本明細書では、薬剤は、静脈内（ボーラスまたは連続注入による）、吸入、鼻腔内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内に送達することもでき、所望であれば蠕動手段により送達することができ、または当業者に知られている他の手段により送達することができることが企図されている。
【0240】
いくつかの実施形態において、活性化合物を投与するために使用される薬学的に許容される製剤は、対象への活性化合物の「徐放性」などの持続的な送達を提供する。例えば、製剤は、薬学的に許容される製剤を対象に投与した後、少なくとも１週間、２週間、３週間、または４週間、薬剤または組成物を送達することができる。好ましくは、本明細書に記載の方法に従って治療される対象は、少なくとも３０日間（反復投与または持続送達システムの使用、あるいはその両方によって）活性組成物で治療される。
【0241】
本明細書で使用される「持続的送達」という用語は、投与後の一定期間、好ましくは少なくとも数日、１週間、数週間、１ヶ月またはそれ以上にわたって、生体内で組成物を継続的に送達することを含むことを意図している。活性化合物の持続的な送達は、例えば、組成物の治療効果が経時的に継続することによって実証することができる（例えば、薬剤の持続的な送達は、対象における癌症状の継続的な改善または維持された改善によって実証することができる）。
【0242】
少なくとも１つの薬剤を含む治療用組成物は、従来、単位用量で投与することができる。治療用組成物に関して使用される場合、用語「単位用量」は、対象のための単一用量として適した物理的に別個の単位を意味し、各単位は、必要な生理学的に許容される希釈剤、すなわち、担体またはビヒクルに関連して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性物質を含有する。
【0243】
組成物は、投与形態に適合した方法で、治療上有効な量を投与する。投与量および投与時期は、治療対象、活性成分を利用するための対象のシステムの能力、および望む治療効果の程度に依存する。薬剤は、例えば、抗体または標的化リポソーム技術などの標的化部分によって標的化することができる。いくつかの実施形態において、薬剤は、例えば、抗リガンド抗体（Ａｂ）と特定の標的に向けられたＡｂとの化学的結合によって生成される二重特異性抗体を使用することによって組織を標的とすることができる。化学的コンジュゲートの制限を回避するために、抗体の分子コンジュゲートを使用して、細胞表面分子にリガンドおよび／またはキメラ阻害剤を向ける組換え二重特異性一本鎖抗体を産生することができる。薬剤への抗体の添加は、薬剤が所望の標的部位（例えば、腫瘍部位）に相加的に蓄積することを可能にする。抗体ベースまたは非抗体ベースの標的化部分を使用して、リガンドまたは阻害剤を標的部位に送達することができる。好ましくは、調節されていないまたは疾患に関連する抗原のための天然の結合剤がこの目的のために使用される。
【0244】
投与されるべき活性成分の正確な量は、医師の判断に依存し、各個人に特有のものである。しかしながら、全身適用に適した投与量範囲が本明細書に開示されており、投与経路に依存する。投与方法も様々であるが、初回投与後、１回または複数回の間隔をあけて、注射などの方法で繰り返し投与することが一般的である。あるいは、インビボ治療のために指定された範囲で血液または骨格筋組織の濃度を維持するのに十分な持続的な静脈内注入が企図される。
【0245】
有効性の測定
本明細書に記載されているような、骨の異常成長からなる疾患に対する所定の治療法の有効性は、当業者であれば判断することができる。しかしながら、疾患または障害の兆候または症状のいずれか１つまたはすべてが有益な方法で変化し（例えば、骨化の減少、異常な骨成長の退行、痛みの減少、可動域の増加など）、疾患の他の臨床的に認められた症状またはマーカが改善され、あるいは、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む薬剤による治療後に、例えば少なくとも１０％改善された場合、本明細書で使用される用語として、治療は「有効な治療」とみなされる。有効性は、疾患または障害の安定化、入院または医療介入の必要性によって評価されるように、個人が悪化しないことによっても測定することができる（すなわち、疾患の進行が停止するか、少なくとも遅れる）。これらの指標を測定する方法は、当業者に知られており、および／または本明細書に記載されている。治療は、個人または動物（いくつかの非限定的な例は、ヒト、または哺乳類を含む）における疾患の任意の治療を含み、以下を含む：（１）疾患を抑制すること、例えば、異常な骨の成長を阻止する、または進行を遅らせること；または（２）疾患を緩和すること、例えば、症状の退行を引き起こすこと；および（３）疾患の発症（例えば、外傷後の骨化）を予防する、またはその可能性を低減すること。
本明細書に記載されているような、骨の異常成長からなる疾患に対する所定の治療法の有効性は、当業者であれば判断することができる。しかしながら、疾患または障害の兆候または症状のいずれか１つまたはすべてが有益な方法で変化し（例えば、骨化の減少、異常な骨成長の退行、痛みの減少、可動域の増加など）、疾患の他の臨床的に認められた症状またはマーカが改善され、あるいは、本明細書に記載された１つ以上の結晶性化合物または組成物を含む薬剤による治療後に、例えば少なくとも１０％改善された場合、本明細書で使用される用語として、治療は「有効な治療」とみなされる。有効性は、疾患または障害の安定化、入院または医療介入の必要性によって評価されるように、個人が悪化しないことによっても測定することができる（すなわち、疾患の進行が停止するか、少なくとも遅れる）。これらの指標を測定する方法は、当業者に知られており、および／または本明細書に記載されている。治療は、個人または動物（いくつかの非限定的な例は、ヒト、または哺乳類を含む）における疾患の任意の治療を含み、以下を含む：（１）疾患を抑制すること、例えば、異常な骨の成長を阻止する、または進行を遅らせること；または（２）疾患を緩和すること、例えば、症状の退行を引き起こすこと；および（３）疾患の発症（例えば、外傷後の骨化）を予防する、またはその可能性を低減すること。
【0246】
ある疾患の治療に有効な量とは、それを必要とする哺乳動物に投与したときに、その疾患に対して本明細書で定義されている有効な治療をもたらすのに十分な量を意味する。薬剤の有効性は、例えば、異常な骨成長のサイズの縮小、異常な骨の沈着の遅延、骨成長の退行、可動性の改善などの異常な骨成長の物理的指標を評価することによって決定することができる。
【0247】
医薬組成物
特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の結晶性化合物および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物、ならびにそのような結晶性化合物および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を使用して調製される製剤に関する。特定の実施形態において、医薬調製物は、本明細書に記載されるような状態または疾患を治療または予防するのに使用するためのものであり得る。特定の実施形態において、医薬調製物は、ヒト患者における静脈内での使用に適した十分に低いパイロジェン活性を有する。特定の実施形態において、本発明はまた、栄養補助食品、獣医、および農業関連の使用に適した調製物に関する。
特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の結晶性化合物および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物、ならびにそのような結晶性化合物および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を使用して調製される製剤に関する。特定の実施形態において、医薬調製物は、本明細書に記載されるような状態または疾患を治療または予防するのに使用するためのものであり得る。特定の実施形態において、医薬調製物は、ヒト患者における静脈内での使用に適した十分に低いパイロジェン活性を有する。特定の実施形態において、本発明はまた、栄養補助食品、獣医、および農業関連の使用に適した調製物に関する。
【0248】
例示的な薬学的に許容される賦形剤が本明細書に提示され、例えば、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、腐食剤、可溶化剤、懸濁助剤、乳化剤、コーティング剤、シクロデキストリン、および／または緩衝剤が含まれる。投与量は、患者の症状、年齢、体重、治療または予防する障害の性質と重症度、投与経路、および薬剤の形態によって異なるが、一般的には、成人の患者には１日あたり０．０１～３０００ｍｇの化合物を投与することが推奨されており、これを単回で投与してもよいし、分割して投与してもよい。担体と組み合わせて１つの剤形を作ることができる有効成分の量は、一般的に治療効果をもたらす化合物の量となる。
【0249】
所与の患者における治療の有効性に関して最も効果的な結果をもたらす投与の正確な時間および／または組成物の量は、特定の化合物の活性、薬物動態およびバイオアベイラビリティ、患者の生理学的状態（年齢、性別、疾患の種類および段階、一般的な身体状態、所定の投与量に対する反応性、および投薬の種類を含む）、投与経路などに依存する。しかしながら、上記のガイドラインは、治療を微調整するための基礎として使用することができ、例えば、最適な投与時間および／または量を決定することができるが、これには、対象をモニタし、投与量および／またはタイミングを調整することからなる日常的な実験以上のことは必要ではない。
【0250】
特定の実施形態において、組成物が投与される個体は、ヒトなどの哺乳動物、または非ヒト哺乳動物である。ヒトなどの動物に投与される場合、組成物または化合物は、好ましくは、例えば、本発明の化合物および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物として投与される。薬学的に許容される担体は当技術分野で周知であり、例えば、水または生理学的に緩衝された生理食塩水または他の溶媒またはビヒクル（グリコール、グリセロールなど）、オリーブ油などの油、または注射可能な有機エステルなどの水溶液が含まれる。好ましい実施形態において、そのような医薬組成物がヒトへの投与、特に侵襲的投与経路（すなわち、上皮バリアを通る輸送または拡散を回避する注射または移植などの経路）のためのものである場合、水溶液は、パイロジェンフリーまたは実質的にパイロジェンフリーである。賦形剤は、例えば、薬剤の遅延放出をもたらすために、または１つまたは複数の細胞、組織または器官を選択的に標的化するために選択することができる。医薬組成物は、錠剤、カプセル剤（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、顆粒、再構成用の凍結乾燥物（ｌｙｏｐｈｉｌｅ）、散剤、液剤、シロップ、坐剤、注射剤などの投与単位形態であり得る。組成物はまた、経皮送達システム、例えば、皮膚パッチに存在させてもよい。組成物はまた、眼の粘膜投与による点眼薬などの局所投与に適した溶液中に存在することができる。
【0251】
薬学的に許容される担体は、例えば、本発明の化合物などの化合物の安定化、溶解性の増加、または吸収の増加に作用する生理学的に許容される薬剤を含有することができる。そのような生理学的に許容される薬剤としては、例えば、グルコース、スクロースまたはデキストランのような炭水化物、アスコルビン酸またはグルタチオンのような抗酸化剤、キレート剤、低分子量タンパク質または他の安定剤または賦形剤が挙げられる。生理学的に許容される薬剤を含む薬学的に許容される担体の選択は、例えば、組成物の投与経路に依存する。調製物または医薬組成物は、自己乳化ドラッグデリバリーシステムまたは自己微小乳化ドラッグデリバリーシステムであり得る。医薬組成物（調製物）はまた、リポソームまたは他のポリマーマトリックスであってよく、それらは、例えば、本発明の化合物をその中に組み込むことができる。例えば、リン脂質または他の脂質を含むリポソームは、毒性がなく、生理学的に許容され、代謝可能な担体であり、製造および投与が比較的簡単である。
【0252】
「薬学的に許容できる」という語句は、本明細書においては、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題または合併症を伴わずにヒトおよび動物の組織と接触して使用するのに適し、合理的な利益／リスク比と釣り合う化合物、材料、組成物、および／または剤形を指すために使用される。
【0253】
本明細書で使用される「薬学的に許容される担体」という句は、液体または固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒またはカプセル化材料などの薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクルを意味する。各担体は、製剤の他の成分と適合性があり、患者に害を及ぼさないという意味で「許容可能」でなければならない。薬学的に許容される担体として役立つことができる材料のいくつかの例には、以下が含まれる：（１）糖（ラクトース、グルコース、スクロースなど）；（２）でん粉（コーンスターチ、バレイショデンプンなど）；（３）セルロース及びその誘導体（カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロースなど）；（４）トラガカント末；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤（ココアバター、坐薬用ワックスなど）；（９）油（落花生油、綿実油、紅花油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油及び大豆油など）；（１０）グリコール類（プロピレングリコールなど）；（１１）ポリオール類（グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコールなど）；（１２）エステル類（オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなど）；（１３）寒天；（１４）緩衝剤（水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなど）；（１５）アルギン酸；（１６）パイロジェンフリー水；（１７）等張生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸塩緩衝液；（２１）医薬品製剤に使用されるその他の非毒性の適合性物質。特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、非発熱性であり、すなわち、患者に投与されたときに有意な温度上昇を誘発しない。
【0254】
「薬学的に許容される塩」という用語は、化合物の比較的毒性のない無機および有機の酸付加塩を指す。これらの塩は、化合物の最終的な単離および精製中にインサイチュで調製することができ、または遊離塩基形態の精製化合物を適切な有機または無機酸と別々に反応させ、こうして形成された塩を単離することによって調製することができる。代表的な塩には、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、吉草酸、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリン酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナフチル酸塩、メシル酸塩、グルコヘプトン酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリルスルホン酸塩、およびアミノ酸塩などが含まれる。結晶性塩の調製は、以下の実施例に詳述されている（例えば、ベージュ（Ｂｅｒｇｅ）他、（１９７７）、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、６６：１－１９を参照されたい）。
【0255】
他の場合において、本発明の方法において有用な化合物は、１つ以上の酸性官能基を含み得、したがって、薬学的に許容される塩基と薬学的に許容される塩を形成することができる。これらの場合の「薬学的に許容される塩」という用語は、化合物の比較的毒性のない無機および有機の塩基付加塩を指す。これらの塩は、同様に、化合物の最終的な単離および精製中にその場で調製することができ、またはその遊離酸形態の精製された化合物を、薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩、または重炭酸塩などの適切な塩基、アンモニア、または薬学的に許容される有機第一級、第二級、または第三級アミンと別々に反応させることによって調製することができる。代表的なアルカリ塩またはアルカリ土類塩には、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アルミニウム塩などが含まれる。塩基付加塩の形成に有用な代表的な有機アミンには、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが含まれる（例えば、上記のベージュ他を参照のこと）。
【0256】
医薬組成物（調製物）は、例えば経口投与（例えば、水性または非水性の溶液または懸濁液、錠剤、カプセル（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、ボーラス、散剤、顆粒剤、舌への適用のためのペースト）；口腔粘膜からの吸収（例えば、舌下）、肛門に、直腸に、または、膣内に（例えば、ペッサリー、クリームまたはフォームなど）；非経口的に（例えば、滅菌溶液または懸濁液として、筋肉内、静脈内、皮下または髄腔内を含む）；鼻腔内；腹腔内；皮下；経皮（例えば皮膚に貼るパッチ）；および局所的に（例えば、皮膚に塗布するクリーム、軟膏、スプレー、または点眼薬として）、を含む多数の投与経路の任意のものによって対象に投与され得る。化合物はまた、吸入用に処方されてもよい。特定の実施形態において、化合物は、滅菌水に単純に溶解または懸濁されてもよい。適切な投与経路およびそれに適した組成物の詳細は、例えば、米国特許第５，０５９，０５９号明細書、米国特許第６，１１０，９７３号明細書、米国特許第５，７６３，４９３号明細書、米国特許第５，７３１，０００号明細書、米国特許第５，５４１，２３１号明細書、米国特許第５，４２７，７９８号明細書、米国特許第５，３５８，９７０号明細書および米国特許第４，１７２，８９６号明細書、ならびにそこに引用されている特許に見出すことができる。
【0257】
製剤は、簡便には単位剤形で提示することができ、薬学の分野でよく知られている任意の方法によって調製することができる。担体材料と組み合わせて単一の剤形を生成することができる活性成分の量は、治療される宿主、特定の投与様式に応じて変化するであろう。担体材料と組み合わせて単一の剤形を生成することができる活性成分の量は、一般に、治療効果を生成する化合物のその量である。一般に、１００パーセントのうち、この量は、有効成分の約１パーセントから約９９パーセント、好ましくは約５パーセントから約７０パーセント、最も好ましくは約１０パーセントから約３０パーセントの範囲である。
【0258】
これらの製剤または組成物を調製する方法は、本発明の化合物などの活性化合物を、担体、および任意選択的に１つ以上の補助成分と混合する（ｂｒｉｎｇ ｉｎｔｏ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）ステップを含む。一般に、製剤は、本発明の化合物を液体担体または細かく分割された固体担体、あるいはその両方と均一かつ密接に混合し、次いで必要に応じて生成物を成形することによって調製される。
【0259】
経口投与に適した本発明の製剤は、活性成分としてそれぞれ所定量の本発明の化合物を含有する、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、トローチ剤（通常、スクロースとアカシアまたはトラガカントの風味をつけたベースを使用する）、凍結乾燥物、粉末剤、顆粒剤、または水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液として、または水中油型もしくは油中水型の液体エマルジョンとして、またはエリキシル剤もしくはシロップとして、またはパスチル剤（ゼラチンとグリセリン、またはスクロースとアカシアのような不活性塩基を使用する）および／または洗口剤などの形態であり得る。組成物または化合物は、ボーラス、舐剤またはペーストとして投与することもできる。
【0260】
経口投与用のカプセル剤（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、錠剤、丸剤、糖衣錠、散剤、顆粒などのための固体剤形を調製するために、活性成分を、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなどの１つ以上の薬学的に許容される担体、および／または以下のいずれかと混合する：（１）充填剤または増量剤（デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸など）；（２）結合剤（カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアカシアなど）；（３）湿潤剤（グリセロールなど）；（４）崩壊剤（寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプンまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩および炭酸ナトリウムなど）；（５）溶解遅延剤（パラフィンなど）；（６）吸収促進剤（四級アンモニウム化合物など）；（７）湿潤剤（セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなど）；（８）吸収剤（カオリン、ベントナイト粘土など）；（９）滑剤（タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム及びそれらの混合物など）；（１０）錯化剤（修飾および非修飾シクロデキストリンなど）；（１１）着色剤。カプセル（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、錠剤および丸薬の場合、医薬組成物はまた、緩衝剤を含み得る。同様のタイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセルの充填剤として使用され得る。
【0261】
錠剤は、任意選択で１つまたは複数の補助成分を用いて、圧縮または成形によって製造することができる。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、保存剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性剤または分散剤を使用して調製することができる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適切な機械で成形することによって製造することができる。
【0262】
錠剤、ならびに糖衣錠、カプセル剤（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、丸剤および顆粒剤などの医薬組成物の他の固体剤形は、必要に応じて、割線が付与される（ｓｃｏｒｅｄ）か、あるいはコーティングおよびシェル、例えば腸溶性コーティングおよび薬学的製剤化技術において周知の他のコーティングを用いて調製されてもよい。それらはまた、例えば、所望の放出プロファイルを提供するために様々な比率でヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはミクロスフェアを用いて、その中で活性成分のゆっくりした、または制御された放出を提供するように製剤化されてもよい。それらは、例えば、細菌保持フィルタによる濾過によって、または使用直前に滅菌水またはいくつかの他の滅菌注射可能媒体に溶解することができる滅菌固体組成物の形態の滅菌剤を組み込むことによって、滅菌され得る。これらの組成物はまた、任意選択的に不透明化剤を含有することができ、それらは、胃腸管の特定の部分においてのみ、または優先的に、任意選択的に、遅延様式で、活性成分を放出する組成物であり得る。使用可能な包埋組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。活性成分は、適当な場合には、１種以上の上記賦形剤と共にマイクロカプセル化された形態であってもよい。
【0263】
経口投与に有用な液体剤形には、薬学的に許容されるエマルジョン、再構成のための凍結乾燥物、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが含まれる。有効成分に加えて、液体投与形態は、例えば、水または他の溶媒、シクロデキストリンおよびそれらの誘導体、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、油（特に綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物など、当技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤を含有してもよい。
【0264】
不活性希釈剤に加えて、本発明の組成物はまた、湿潤剤、潤滑剤、ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの乳化剤および懸濁剤、または甘味剤、香味料、着色剤、芳香剤、防腐剤、または抗酸化剤などのアジュバントを含むことができる。
【0265】
懸濁剤は、活性化合物に加えて、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタヒドロキシアルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカント、ならびにそれらの混合物などの懸濁化剤を含み得る。
【0266】
直腸、膣、または尿道投与用の医薬組成物の製剤は、坐剤として提示することができ、これは１つ以上の活性化合物を、例えば、カカオバター、ポリエチレングリコール、坐剤ワックスまたはサリチル酸塩を含む１つ以上の適切な非刺激性賦形剤または担体と混合することによって調製することができ、それは、室温では固体であるが、体温では液体であるため、直腸または膣腔内で溶融し、活性化合物を放出する。
【0267】
口腔に投与するための医薬組成物の製剤は、マウスウォッシュ、経口スプレー、または経口軟膏として提供することができる。
代替的または追加的に、組成物は、カテーテル、ステント、ワイヤ、または他の管腔内デバイスを介した送達のために処方することができる。このようなデバイスを介した送達は、膀胱、尿道、尿管、直腸、または腸への送達に特に有用であり得る。
代替的または追加的に、組成物は、カテーテル、ステント、ワイヤ、または他の管腔内デバイスを介した送達のために処方することができる。このようなデバイスを介した送達は、膀胱、尿道、尿管、直腸、または腸への送達に特に有用であり得る。
【0268】
膣内投与に適した製剤には、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、または当技術分野で適切であることが知られているような担体を含むスプレー製剤も含まれる。
【0269】
局所または経皮投与用の剤形には、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチおよび吸入剤が含まれる。活性化合物は、無菌条件下で、薬学的に許容される担体、および必要とされる可能性のある任意の防腐剤、緩衝液、または噴射剤と混合することができる。
【0270】
軟膏、ペースト、クリームおよびゲルは、活性化合物に加えて、動物性および植物性脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはこれらの混合物などの賦形剤を含有してもよい。
【0271】
粉末およびスプレーは、活性化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含有することができる。スプレーはさらに、クロロフルオロ炭化水素および揮発性非置換炭化水素、例えばブタンおよびプロパンのような通常の噴射剤を含むことができる。
【0272】
本明細書に記載の化合物は、代替的に、エアロゾルによって投与することができる。これは、水性エアロゾル、リポソーム調製物、または組成物を含む固体粒子を調製することによって達成される。非水性（例えば、フルオロカーボン推進剤）懸濁液を使用することができる。ソニックネブライザーは、化合物の分解を引き起こす可能性のあるせん断への薬剤の曝露を最小限に抑えるため、好ましい。
【0273】
通常、水性エアロゾルは、従来の薬学的に許容される担体および安定剤と一緒に薬剤の水溶液または懸濁液を処方することによって作製される。担体および安定剤は、特定の組成物の必要条件によって異なるが、典型的には、非イオン界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標））、ソルビタンエステル、レシチン、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒｓ（登録商標）、ポリエチレングリコールのような薬学的に許容される共溶媒、血清アルブミンのような無害なタンパク質、オレイン酸、グリシンのようなアミノ酸、緩衝液、塩、糖、または糖アルコールを含む。エアロゾルは一般的に等張溶液から調製される。
【0274】
経皮パッチは、本発明の化合物の身体への制御された送達を提供するという付加的な利点を有する。そのような剤形は、活性化合物を適切な媒体に溶解または分散させることによって製造することができる。吸収促進剤を使用して、皮膚を横切る化合物の流れを増加させることもできる。そのようなフラックスの速度は、速度制御膜を設けるか、またはポリマーマトリックスまたはゲルに化合物を分散させることによって制御することができる。
【0275】
眼科用処方物、眼軟膏、粉末、溶液などもまた、本発明の範囲内であると考えられる。代表的な眼科用処方物は、米国特許出願公開第２００５／００８００５６号明細書、米国特許出願公開第２００５／００５９７４４号明細書、米国特許出願公開第２００５／００３１６９７号明細書及び米国特許出願公開第２００５／００４０７４号明細書、並びに米国特許第６，５８３，１２４号明細書に記載されており、これらの内容は参照により本明細書に組み込まれる。必要に応じて、液体眼科用製剤は、涙液、房水または硝子体液と同様の特性を有するか、またはそのような液体と適合可能である。好ましい投与経路は、局所投与（例えば、点眼剤などの局所投与、またはインプラントを介した投与）である。
【0276】
本明細書で使用される「非経口投与」および「非経口投与される」という語句は、通常は注射による、経腸および局所投与以外の投与様式を意味し、限定されるものではないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、被膜内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管内、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、表皮下（ｓｕｂｃｕｔｉｃｕｌａｒ）、関節内、被膜下内、くも膜下内、脊髄内および胸骨内の注射および注入を含む。非経口投与に適した薬学的組成物は、使用直前に滅菌注射可能な溶液または分散液に再構成され得る１種以上の薬学的に許容される滅菌等張水性もしくは非水性溶液、分散液、懸濁液もしくはエマルジョン、または滅菌粉末と組み合わせた１種以上の活性化合物を含み、これらは、処方物を、意図されたレシピエントの血液または懸濁化剤もしくは増粘剤と等張にする抗酸化剤、緩衝液、静菌剤（ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｓ）、溶質を含み得る。
【0277】
本明細書で使用される「全身投与」、「全身投与される」、「末梢投与」および「末梢投与される」という句は、リガンド、薬剤、その他の物質を中枢神経系に直接投与するのではなく、患者の体内に入り、代謝および他の同様のプロセスを経るように投与することを意味し、例えば皮下投与などが挙げられる。
【0278】
本発明の医薬組成物に採用することができる好適な水性および非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、およびそれらの好適な混合物、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用、分散液の場合は必要な粒子径の維持、界面活性剤の使用などによって維持することができる。
【0279】
これらの組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤などのアジュバントを含み得る。微生物の作用の防止は、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などの各種抗菌剤や抗真菌剤を含有させることによって確保することができる。糖、塩化ナトリウムなどの等張化剤を組成物に含めることも望ましい場合がある。さらに、モノステアリン酸アルミニウムやゼラチンなどの吸収を遅延させる薬剤を配合することにより、注射剤の吸収を延長させることができる。
【0280】
場合によっては、薬物の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅らせることが望ましい。これは、水溶性が低い結晶性またはアモルファス材料の液体懸濁液を使用することによって達成することができる。その場合、薬物の吸収速度はその溶解速度に依存し、溶解速度は結晶の大きさと結晶形に依存する可能性がある。あるいは、非経口的に投与された薬物形態の遅延吸収は、薬物を油性ビヒクルに溶解または懸濁することによって達成される。
【0281】
注射可能なデポ型は、ポリラクチド－ポリグリコリドのような生分解性ポリマー中に、対象化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成することによって作製される。ポリマーに対する薬物の比率、および使用される特定のポリマーの性質に応じて、薬物放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポ注射用製剤はまた、体内組織と適合性のあるリポソームまたはマイクロエマルジョンに薬物を封入することによって調製される。
【0282】
薬剤の調製物は、経口的、非経口的、局所的、または直腸的に与えられ得る。無論、それぞれの投与経路に適した形で投与される。例えば、それらは、錠剤またはカプセルの形態で、注射、吸入、点眼薬、軟膏、坐剤、注入によって、ローションまたは軟膏によって局所的に、そして坐剤によって経直腸的に、投与される。経口投与が好ましい。
【0283】
本発明の方法で使用するために、活性化合物は、それ自体で、または例えば、薬学的に許容される担体と組み合わせて０．１～９９．５％（より好ましくは０．５～９０％）の活性成分を含む医薬組成物として与えることができる。
【0284】
導入方法は、再充填可能な（ｒｅｃｈａｒｇｅａｂｌｅ）デバイスまたは生分解性のデバイスによって提供されてもよい。近年、蛋白質性バイオ医薬品を含む薬物の制御された送達のために、様々な徐放性高分子デバイスが開発され、インビボで試験されている。生分解性ポリマーおよび非分解性ポリマーの両方を含む種々の生体適合性ポリマー（ヒドロゲルを含む）を使用して、特定の標的部位における化合物の持続放出のためのインプラントを形成することができる。
【0285】
これらの化合物は、治療のために、経口、経鼻（例えばスプレー）、経直腸、膣内、非経口、槽内、および局所的（例えば、粉末、軟膏またはドロップ）、例えば、口腔内および舌下を含む、任意の適切な投与経路によってヒトおよび他の動物に投与することができる。
【0286】
選択された投与経路に関係なく、適切な水和形態で使用され得る化合物、および／または本発明の医薬組成物は、当業者に知られている従来の方法によって薬学的に許容される剤形に処方される。
【0287】
医薬組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、患者に毒性を及ぼすことなく、特定の患者、組成物、および投与様式について、所望の治療応答を達成するのに有効な活性成分の量が得られるように変更することができる。
【0288】
選択された投与レベルは、採用された特定の化合物もしくは化合物の組み合わせ、またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、投与経路、投与時間、採用された特定の化合物の排泄率、治療期間、採用された特定の化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または材料、治療を受ける患者の年齢、性別、体重、状態、一般的な健康状態および以前の病歴など、医療技術の分野でよく知られているような要因を含む様々な要因に依存する。一般的に、本発明の組成物は、非経口投与のために、他の物質の中でも、本明細書に開示された化合物を約０．１～３０％ｗ／ｖ含む水溶液で提供されてもよい。典型的な投与量の範囲は、１日あたり約０．０１～約５０ｍｇ／ｋｇ体重で、１回の単回投与または２～４回の分割投与で与えられる。各分割投与は、本発明の同じ化合物または異なる化合物を含んでいてもよい。
【0289】
当業者である医師または獣医師は、必要とされる医薬組成物の治療有効量を容易に決定し、処方することができる。例えば、医師または獣医師は、所望の治療効果を得るために必要とされるレベルよりも低いレベルで医薬組成物または化合物の投与を開始し、所望の効果が得られるまで投与量を徐々に増加させることができる。主題の治療方法に関する化合物の「治療有効量」は、治療対象となる疾患や状態、または美容目的のための臨床的に許容される基準、例えば、あらゆる医療行為に適用される妥当な利益／リスク比で、（哺乳類、好ましくはヒトに）所望の投与レジメンの一部として投与された場合に、症状を緩和し、状態を改善し、または病状の発症を遅らせる製剤中の化合物の量を指す。化合物の有効量は、対象の体重、性別、年齢、および病歴に応じて異なることが一般的に理解されている。有効量に影響を与える他の要因としては、患者の症状の重さ、治療対象の疾患、化合物の安定性、および必要に応じて本発明の化合物と一緒に投与される別の種類の治療薬などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。薬剤の複数回投与により、より多くの総用量を送達することができる。本発明の化合物を複数回投与することにより、より多くの総投与量を得ることができる。有効性および投与量を決定する方法は、当業者に知られている（アイセルベーカー（Ｉｓｓｅｌｂａｃｈｅｒ）他、１９９６年、「Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」、第１３版、１８１４－１８８２、参照により本明細書に組み込まれる）。
【0290】
一般に、本発明の組成物および方法で使用される活性化合物の適切な１日用量は、治療効果を生み出すのに有効な最低用量である化合物の量である。このような有効量は、一般的に上述の要因に依存する。
【0291】
所望であれば、１日の有効量の活性化合物は、１、２、３、４、５、６またはそれ以上のサブ用量として、１日を通して適切な間隔で別々に投与することができ、任意に、単位剤形で投与することができる。本発明の特定の実施形態において、活性化合物は、１日２回または３回投与されてもよい。好ましい実施形態において、活性化合物は、１日１回投与されるであろう。
【0292】
この治療を受ける患者は、必要とする任意の動物であり、霊長類、特にヒト、およびウマ、ウシ、ブタ、ヒツジなどの他の哺乳類；ならびに家禽およびペット全般を含む。
特定の実施形態において、本発明の化合物は、単独で使用してもよいし、別の種類の治療薬と併用してもよい。本明細書では、「併用投与（ｃｏｎｊｏｉｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という語句は、２つ以上の異なる治療用化合物を、先に投与された治療用化合物が体内でまだ有効である間に第２の化合物が投与されるように（例えば、２つの化合物が患者において同時に有効であり、２つの化合物の相乗効果を含む場合がある）投与する任意の形態を指す。例えば、異なる治療用化合物は、同じ製剤でも別の製剤でも、同時または順次に投与することができる。特定の実施形態において、異なる治療用化合物は、互いに１時間以内、１２時間以内、２４時間以内、３６時間以内、４８時間以内、７２時間以内、または１週間以内に投与することができる。したがって、そのような治療を受ける個体は、異なる治療化合物の複合効果から利益を得ることができる。
特定の実施形態において、本発明の化合物は、単独で使用してもよいし、別の種類の治療薬と併用してもよい。本明細書では、「併用投与（ｃｏｎｊｏｉｎｔ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という語句は、２つ以上の異なる治療用化合物を、先に投与された治療用化合物が体内でまだ有効である間に第２の化合物が投与されるように（例えば、２つの化合物が患者において同時に有効であり、２つの化合物の相乗効果を含む場合がある）投与する任意の形態を指す。例えば、異なる治療用化合物は、同じ製剤でも別の製剤でも、同時または順次に投与することができる。特定の実施形態において、異なる治療用化合物は、互いに１時間以内、１２時間以内、２４時間以内、３６時間以内、４８時間以内、７２時間以内、または１週間以内に投与することができる。したがって、そのような治療を受ける個体は、異なる治療化合物の複合効果から利益を得ることができる。
【0293】
本発明は、本発明の組成物および方法における本発明の化合物の薬学的に許容される塩の使用を含む。特定の実施形態において、本発明の企図される塩には、これらに限定されないが、アルキル、ジアルキル、トリアルキルまたはテトラアルキルアンモニウム塩が含まれる。特定の実施形態において、本発明の企図される塩には、Ｌ－アルギニン、ベネンタミン、ベンザチン、ベタイン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２－（ジエチルアミノ）エタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ－メチルグルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ－イミダゾール、リチウム、Ｌ－リジン、マグネシウム、４－（２－ヒドロキシエチル）モルホリン、ピペラジン、カリウム、１－（２－ヒドロキシエチル）ピロリジン、ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミンおよび亜鉛の塩が含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、本発明の企図される塩には、これらに限定されないが、Ｎａ、Ｃａ、Ｋ、Ｍｇ、Ｚｎまたは他の金属塩が含まれる。
【0294】
薬学的に許容される酸付加塩はまた、水、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどとの様々な溶媒和物として存在することができる。そのような溶媒和物の混合物も調製することができる。そのような溶媒和物の供給源は、結晶化の溶媒からのもの、調製または結晶化の溶媒に固有のもの、またはそのような溶媒に付随するものであり得る。いくつかの実施形態において、開示された化合物の溶媒和物は、ジメチルスルホキシド溶媒和物であり得る。
【0295】
ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの湿潤剤、乳化剤および潤滑剤、ならびに着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味料、香味料および芳香剤、防腐剤および抗酸化剤もまた、組成物中に存在し得る。
【0296】
薬学的に許容される抗酸化剤の例には以下が含まれる：（１）アスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤；（２）パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α－トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤；（３）クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート剤。
【0297】
現在一般的に説明されている本発明は、本発明の特定の態様および実施形態を説明する目的でのみ含まれ、本発明を限定することを意図しない以下の実施例を参照することにより、より容易に理解される。
【実施例0298】
実施例１：式Ｉ遊離塩基の化合物の合成
ステップ１：化合物４の合成
ステップ１：化合物４の合成
【0299】
【化3】
【0300】
ＤＭＳＯ（２１００ｍＬ、３容量）中の２－ブロモマロンアルデヒド（７００ｇ、４．６４モル）およびＤＩＥＡ（８８９ｍＬ、５．１モル）の溶液に、ＤＭＳＯ（１０５０ｍＬ、１．５容量）中の１－メチル－４－（ピペリジン－４－イル）ピペラジン（１０２０ｇ、５．５６モル）の溶液を加えた。反応物を５０℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた溶液に、ＤＭＳＯ（３５０ｍＬ、０．５容量）中の３－アミノピラゾール（３８５．２ｇ、４．６４モル）の４０℃溶液を加えた。氷酢酸（１．３０Ｌ、２２．４モル）を添加漏斗で添加した。添加により５０．８℃から６３．６℃の発熱が観察された。反応物を９５℃に６時間加熱し、室温に冷却し、一晩撹拌した。得られた固形物を濾過により除去し、ＤＭＳＯ（２×３５０ｍＬ）で洗浄し、３Ｌの４ネックのＲＢＦに移した。ＭＴＢＥ（３０００ｍＬ）を加え、スラリーを３時間撹拌した。固形物を濾過し、ＭＴＢＥ（２×７００ｍＬ）で洗浄し、真空下５５℃で２時間乾燥した。５０５．０ｇの化合物４を単離した。収率＝３６．３％。
【0301】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝８．４３（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．９４（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．５７（ｓ，１Ｈ），３．５５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），２．７３－２．５３（ｍ，７Ｈ），２．４７（ｂｒ ｓ，３Ｈ），２．４０－２．２５（ｍ，５Ｈ），１．９９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，２Ｈ），１．７３（ｄｑ，Ｊ＝４．０，１２．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【0302】
ステップ２：化合物５の合成
【0303】
【化4】
【0304】
６－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）ピペリジン－１－イル）ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン（８００ｇ、２．６６モル）、クロロホルム（９６００ｍＬ）およびＴＨＦ（２４００ｍＬ）の０～５℃溶液に、固体のＮＢＳ（４７７ｇ、２．６６モル）を、内部温度を＜５℃に維持しながら３時間かけて少しずつ加えた。得られたスラリーを一晩撹拌しながら室温まで温めた。反応物を濾過し、望ましくない固形物をクロロホルム（２×８００ｍＬ）ですすいだ。濾液を分液漏斗に移し、飽和ＮａＨＣＯ３（６０００ｍＬ、７．５容量）で洗浄した。層を分離し、水層をクロロホルム（１６００ｍＬ、２容量）で逆抽出した。底部の有機層を合わせ、ブライン（５０００ｍＬ）で洗浄した。上部の水層をクロロホルム（１６００ｍＬ、２容量）で逆抽出した。底部の有機層を約４容量が残るまで濃縮した。濃縮されたスラリーをヘプタン（３×２４００ｍＬ）と溶媒交換し、毎回４容量（ｖｏｌｕｍｅｓ）まで濃縮し、得られたスラリーを周囲温度で一晩撹拌した。スラリーをろ過し、ＭＴＢＥ（２×１６００ｍＬ）で洗浄し、真空下、４０℃で一晩乾燥して、黄褐色の固体化合物５を８８９ｇ得た。収率＝８５．６％。
【0305】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝８．４８（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ），３．５５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），３．０７－２．８１（ｍ，１Ｈ），２．７６－２．６５（ｍ，４Ｈ），２．６２（ｂｒ ｓ，４Ｈ），２．５０－２．２７（ｍ，８Ｈ），１．９８（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，２Ｈ），１．７３（ｄｑ，Ｊ＝３．８，１２．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【0306】
ステップ３：式Ｉ遊離塩基の化合物の合成
【0307】
【化5】
【0308】
フラスコ中の３－ブロモ－６－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）ピペリジン－１－イル）ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン（化合物５、５００ｇ、１．３２モル）、７－フルオロ－６－メトキシ－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）キノリン（４２０ｇ、１．０５当量）、２－ＭｅＴＨＦ（７．５リットル、１５容量）および３ＭのＫ３ＰＯ４（１．３２リットル、２．６４容量、３当量）のスラリーを、室温で窒素流を用いて３０分間脱気した。脱気したスラリーにＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）ＤＣＭ（７５．４ｇ）を加え、得られた混合物をさらに３０分間窒素で脱気した。反応物を６０℃に加熱し、６０℃で一晩撹拌した。得られた混合物を冷却し、最小容量まで濃縮した。濃縮物に、ＣＨＣｌ３（７リットル、１４容量）および水（３．５リットル、７容量）を加え、３０分間撹拌した後、層を分離した。水層（最上層）を２×５リットル（２×１０容量）のＣＨＣｌ３で抽出した。合わせた有機層を最小容量に濃縮し、８．５リットル（１７容量）の１：１ＭｅＯＨ：ＣＨＣｌ３まで取り出した。得られた溶液に２５０ｇのネキサゲン（Ｎｅｘａｇｅｎ）チオプロピルシリカルゲルおよび２５０ｇのＮｏｒｉｔ（登録商標）ＣＡ１炭素を加えた。得られたスラリーを５０℃に一晩加熱した。スラリーを室温で濾過して固形物を除去し、得られた濾液を最小容量に濃縮した。濃厚なスラリーを８．５リットル（１７容量）のＤＣＭに取り、得られた溶液に２５０ｇのネキサゲンチオプロピルシリカゲルおよび２５０ｇのＮｏｒｉｔ（登録商標）ＣＡ１炭素を加え、得られたスラリーを一晩３５℃に加熱した。スラリーを室温で濾過して固形物を除去した。濾液を分液漏斗に入れ、水層を除去した。得られた溶液を、固体が形成されたＥｔＯＡｃと溶媒交換した。得られたスラリーをＥｔＯＡｃで希釈して全容量を５リットル（１０容量）にした。ＭＴＢＥ（２．５リットル）を添加し、得られたスラリーを室温で一晩撹拌した。固形物を濾過し、２×２．５リットル（２×５容量）のＭＴＢＥで洗浄し、４３０ｇの表題化合物を得た。（全体の収率６８．５％）。
【0309】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝８．８３（ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ），８．５７（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ），８．２２（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６０－７．５３（ｍ，２Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．７５－３．５５（ｍ，３Ｈ），２．８９－２．７３（ｍ，２Ｈ），２．６８（ｂｒ ｓ，４Ｈ），２．６０－２．３９（ｍ，５Ｈ）２．３３（ｓ，３Ｈ），２．１６－１．９８（ｍ，２Ｈ，１．７９（ｄｑ，Ｊ＝３．７，１１．９Ｈｚ，２Ｈ）。
【0310】
実施例２Ａ：式Ｉモノコハク酸塩のアモルファス化合物の合成
【0311】
【化6】
【0312】
７－フルオロ－６－メトキシ－４－（６－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）ピペリジン－１－イル）ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－３－イル）キノリン（７０１．９３ｇ、１．４８モル）およびエタノール（１４リットル、２００プルーフ（Ｐｒｏｏｆ））を７０℃で２時間撹拌した。コハク酸溶液（１７６ｇ、１．４９モル）およびエタノール（５リットル、２００プルーフ）をゆっくり加え、内容物を７５℃で８時間撹拌して、完全な塩を形成させた。得られたスラリーを、真空下で５リットルに濃縮し、その際に内部温度を常に２０℃以上に維持した。ヘプタンを加え全量１４リットルとし、内部温度を２０℃以上に維持しながらスラリーを再度濃縮した。プロトンＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）で測定したヘプタンに対するエタノールの溶媒比が５重量％以下になるように、上記の濃縮／再置換を６回行った。最終スラリーを２０℃に冷却し、固形物を濾過し、洗浄はしなかった。固形物を真空下４５℃のオーブンに入れ、恒量にして、表題の化合物を黄色固体として得た（８６４．１ｇ、収率９８．６％）。
【0313】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝８．８３（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．７９（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），８．６６（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，２Ｈ），２．７８－２．６２（ｍ，３Ｈ），２．６１－２．５２（ｍ，３Ｈ），２．４７－２．３３（ｍ，９Ｈ），２．２３（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ），１．６５－１．５５（ｍ，２Ｈ）。
【0314】
実施例２Ｂ：式Ｉモノコハク酸塩のアモルファス化合物の合成
【0315】
【化7】
【0316】
７－フルオロ－６－メトキシ－４－（６－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）ピペリジン－１－イル）ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－３－イル）キノリン（１６ｇ、０．３３６モル）およびエタノール（３６０ｍＬ、２００プルーフ）を７０℃で２時間撹拌した。コハク酸溶液（４．０ｇ、０．３３９モル）およびエタノール（１６０ｍＬ、２００プルーフ）をゆっくり加え、内容物を７５℃で８時間撹拌して、完全な塩を形成させた。得られたスラリーを、真空下で１６０ｍＬに濃縮し、その際に内部温度を常に２０℃以上に維持した（正しい多形体を得るために重要）。ヘプタンを総量１６０ｍＬになるように加え、スラリーを２０℃以上で８時間撹拌した。最終スラリーを２０℃に冷却し、固形物をろ過し、２×２３ｍＬの１：１＝エタノール：ヘプタンで洗浄した。固形物を真空下の４５℃のオーブンに入れ、恒量になるまで乾燥させて、表題の化合物を固体として得た（１８．２６ｇ、収率９１％）。
【0317】
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝８．８３（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．７９（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），８．６６（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，２Ｈ），２．７８－２．６２（ｍ，３Ｈ），２．６１－２．５２（ｍ，３Ｈ），２．４７－２．３３（ｍ，９Ｈ），２．２３（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ），１．６５－１．５５（ｍ，２Ｈ）。
【0318】
実施例３～７の分析方法
Ｘ線粉末回折
ＣｕＫα放射線（４０ｋＶ、４０ｍＡ），θ－２θゴニオメータおよび０．６ｍｍの発散と受信スリット、およびＬｙｎｘｅｙｅ（登録商標）検出器を用いてＢｒｕｋｅｒ Ｄ８回折計でＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを収集した。機器は、認証されたコランダム標準（ＮＩＳＴ１９７６）を用いて性能チェックされている。データ収集に使用されたソフトウェアは、Ｄｉｆｆｒａｃ Ｐｌｕｓ ＸＲＤ Ｃｏｍｍａｎｄｅｒ ｖ２．６．１であり、データは、Ｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｄａｔａ（登録商標）Ｊａｄｅ Ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖ９．７．０を使用して分析および提示された。試料は、２～５０ｍｇの試料をワセリンの薄層で被覆されたゼロバックグラウンドホルダーに移し、ガラスプレートで平らにして調製し、周囲温度で分析した。分析中に試料をそれ自身の平面内で回転させた。機器のパラメータを以下の表１に示す。
Ｘ線粉末回折
ＣｕＫα放射線（４０ｋＶ、４０ｍＡ），θ－２θゴニオメータおよび０．６ｍｍの発散と受信スリット、およびＬｙｎｘｅｙｅ（登録商標）検出器を用いてＢｒｕｋｅｒ Ｄ８回折計でＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを収集した。機器は、認証されたコランダム標準（ＮＩＳＴ１９７６）を用いて性能チェックされている。データ収集に使用されたソフトウェアは、Ｄｉｆｆｒａｃ Ｐｌｕｓ ＸＲＤ Ｃｏｍｍａｎｄｅｒ ｖ２．６．１であり、データは、Ｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｄａｔａ（登録商標）Ｊａｄｅ Ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖ９．７．０を使用して分析および提示された。試料は、２～５０ｍｇの試料をワセリンの薄層で被覆されたゼロバックグラウンドホルダーに移し、ガラスプレートで平らにして調製し、周囲温度で分析した。分析中に試料をそれ自身の平面内で回転させた。機器のパラメータを以下の表１に示す。
【0319】
【表1】
【0320】
示差走査熱量測定
ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（登録商標）Ｑ１０００ ＤＳＣ、ｓ／ｎ１０００－０１８９を用いて示差走査熱量測定（ＤＳＣ）分析を行った。試料を秤量し、アルミニウム製の密閉パンと手動ピンホール付きの蓋に入れた。パンはＴｚｅｒｏ（商標）プレスを用いて圧着した。試料を１０℃／分で２５～３５０℃まで分析した。データをＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０００、ｖ４．５Ａを用いて処理した。
ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（登録商標）Ｑ１０００ ＤＳＣ、ｓ／ｎ１０００－０１８９を用いて示差走査熱量測定（ＤＳＣ）分析を行った。試料を秤量し、アルミニウム製の密閉パンと手動ピンホール付きの蓋に入れた。パンはＴｚｅｒｏ（商標）プレスを用いて圧着した。試料を１０℃／分で２５～３５０℃まで分析した。データをＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０００、ｖ４．５Ａを用いて処理した。
【0321】
熱重量分析
ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（登録商標）Ｑ５０ ＴＧＡ、ｓ／ｎ５０－０１８０を用いて熱重量分析（ＴＧＡ）を行った。風袋を量った白金ＴＧＡパンに試料を装填し、１０℃／分で２５～３５０℃まで分析した。データをＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０００、ｖ４．５Ａを用いて処理した。
ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（登録商標）Ｑ５０ ＴＧＡ、ｓ／ｎ５０－０１８０を用いて熱重量分析（ＴＧＡ）を行った。風袋を量った白金ＴＧＡパンに試料を装填し、１０℃／分で２５～３５０℃まで分析した。データをＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ２０００、ｖ４．５Ａを用いて処理した。
【0322】
動的蒸気吸着／脱着
Ｈｉｄｅｎ Ｉｓｏｃｈｅｍａ社のＩＧＡｓｏｒｐ，ｓ／ｎ ＩＧＳＡ１２６を用いて動的蒸気吸着／脱着（ＤＶＳ）分析を行った。試料を機器の風袋を量ったバスケットに装填し、４０℃で１時間乾燥させた。次に、試料を２５℃で以下の相対湿度（％ＲＨ）ステップで分析した：吸着（％ＲＨ）：０．０、１０．０、２０．０、３０．０、４０．０、５０．０、６０．０、７０．０、８０．０、９０．０、９５．０、脱着（％ＲＨ）：９０．０、８０．０、７０．０、６０．０、５０．０、４０．０、３０．０、２０．０、１０．０、０．０。
Ｈｉｄｅｎ Ｉｓｏｃｈｅｍａ社のＩＧＡｓｏｒｐ，ｓ／ｎ ＩＧＳＡ１２６を用いて動的蒸気吸着／脱着（ＤＶＳ）分析を行った。試料を機器の風袋を量ったバスケットに装填し、４０℃で１時間乾燥させた。次に、試料を２５℃で以下の相対湿度（％ＲＨ）ステップで分析した：吸着（％ＲＨ）：０．０、１０．０、２０．０、３０．０、４０．０、５０．０、６０．０、７０．０、８０．０、９０．０、９５．０、脱着（％ＲＨ）：９０．０、８０．０、７０．０、６０．０、５０．０、４０．０、３０．０、２０．０、１０．０、０．０。
【0323】
実施例３Ａ：式Ｉ遊離塩基の化合物の特性評価
上記のＸＲＰＤ技術を用いて、式Ｉ遊離塩基の化合物は結晶性であり、以下のピークを示した：ｐｇ．４ 図３。さらに、熱データは、遊離塩基が無水であり、溶媒和されていないことを示す（図４）。ＤＳＣは、オンセット（ｏｎｓｅｔ）が２３８．６℃の鋭い吸熱を示し、融解を示す。ＴＧＡでは、２６６．３℃で分解するまで重量減少はわずか（０．４％）であった。ＤＶＳデータによると、材料は吸湿性がなく、重量増加と損失が０．５％であり、脱着時にはわずかなヒステリシスがある（図５）。ＤＶＳ分析後のＸＲＰＤでは変化は観察されなかった。
上記のＸＲＰＤ技術を用いて、式Ｉ遊離塩基の化合物は結晶性であり、以下のピークを示した：ｐｇ．４ 図３。さらに、熱データは、遊離塩基が無水であり、溶媒和されていないことを示す（図４）。ＤＳＣは、オンセット（ｏｎｓｅｔ）が２３８．６℃の鋭い吸熱を示し、融解を示す。ＴＧＡでは、２６６．３℃で分解するまで重量減少はわずか（０．４％）であった。ＤＶＳデータによると、材料は吸湿性がなく、重量増加と損失が０．５％であり、脱着時にはわずかなヒステリシスがある（図５）。ＤＶＳ分析後のＸＲＰＤでは変化は観察されなかった。
【0324】
実施例４Ａ：式Ｉモノコハク酸塩の形態Ａの結晶性化合物の合成
２ｇの式Ｉ遊離塩基の化合物を６０ｍＬの容器に添加した。０．５ｇのコハク酸を３０ｍＬのＴＨＦに溶解し、次いで酸溶液を遊離塩基固体に添加し、周囲温度で一晩撹拌した。０．４５μｍナイロンフィルタチューブを用いた遠心分離によって固形物を単離し、ＸＲＰＤ（図６）およびＮＭＲ（図７）分析の前に真空下で約２時間乾燥した。両分析は、形態Ａがスケールアップから単離されることを示した。２．６ｐｐｍのピークは１モルのコハク酸に起因する。スケールアップの収率は８８％であった。
２ｇの式Ｉ遊離塩基の化合物を６０ｍＬの容器に添加した。０．５ｇのコハク酸を３０ｍＬのＴＨＦに溶解し、次いで酸溶液を遊離塩基固体に添加し、周囲温度で一晩撹拌した。０．４５μｍナイロンフィルタチューブを用いた遠心分離によって固形物を単離し、ＸＲＰＤ（図６）およびＮＭＲ（図７）分析の前に真空下で約２時間乾燥した。両分析は、形態Ａがスケールアップから単離されることを示した。２．６ｐｐｍのピークは１モルのコハク酸に起因する。スケールアップの収率は８８％であった。
【0325】
実施例４Ｂ：式Ｉモノコハク酸塩の形態Ａおよび形態Ｃの結晶性化合物の合成
２ｇの式Ｉ遊離塩基の化合物を２０ｍＬのシンチレーションバイアルに添加した。０．５ｇのコハク酸を２０ｍＬのＥｔＯＨに溶解し、次いで酸溶液を遊離塩基固体に添加し、周囲温度で一晩撹拌した。固形物を、０．４５μｍのナイロンフィルタチューブを用いた遠心分離によって単離し、ＸＲＰＤ分析（図８）の前に周囲条件下で乾燥し、これは、形態Ａがスケールアップから単離されることを示した。スケールアップの収率は７９％であった。この材料はＤＶＳ（図９）でも分析した。ＤＶＳは、材料が吸湿性であり、重量の増加および損失が３８％であり、脱着時に顕著なヒステリシスを有することを示す。これは、実施例３Ａの生成物に類似している。この材料は、８０％ＲＨ以下で非吸湿性である。ＤＶＳ後のＸＲＰＤ分析（図１０）は、この材料が高度に無秩序化し、水和物、形態Ｃに変化することを示している。
２ｇの式Ｉ遊離塩基の化合物を２０ｍＬのシンチレーションバイアルに添加した。０．５ｇのコハク酸を２０ｍＬのＥｔＯＨに溶解し、次いで酸溶液を遊離塩基固体に添加し、周囲温度で一晩撹拌した。固形物を、０．４５μｍのナイロンフィルタチューブを用いた遠心分離によって単離し、ＸＲＰＤ分析（図８）の前に周囲条件下で乾燥し、これは、形態Ａがスケールアップから単離されることを示した。スケールアップの収率は７９％であった。この材料はＤＶＳ（図９）でも分析した。ＤＶＳは、材料が吸湿性であり、重量の増加および損失が３８％であり、脱着時に顕著なヒステリシスを有することを示す。これは、実施例３Ａの生成物に類似している。この材料は、８０％ＲＨ以下で非吸湿性である。ＤＶＳ後のＸＲＰＤ分析（図１０）は、この材料が高度に無秩序化し、水和物、形態Ｃに変化することを示している。
【0326】
実施例４Ｃ：式Ｉモノコハク酸塩の形態Ａおよび形態Ｂの結晶性化合物の合成
１００ｍｇの式Ｉ遊離塩基の化合物を１グラム（ｄｒａｍ）のバイアルに添加した。２５ｍｇのコハク酸を１ｍＬのＥｔＯＨに溶解し、次いで酸溶液を遊離塩基固体に添加し、１日間スラリー化した。固形物を、０．４５μｍのナイロンフィルタチューブを用いた遠心分離によって単離し、ＸＲＰＤ分析の前に周囲条件下で乾燥し、これは、物質が形態Ａおよび形態Ｂの混合物であることを示した（図１１）。
１００ｍｇの式Ｉ遊離塩基の化合物を１グラム（ｄｒａｍ）のバイアルに添加した。２５ｍｇのコハク酸を１ｍＬのＥｔＯＨに溶解し、次いで酸溶液を遊離塩基固体に添加し、１日間スラリー化した。固形物を、０．４５μｍのナイロンフィルタチューブを用いた遠心分離によって単離し、ＸＲＰＤ分析の前に周囲条件下で乾燥し、これは、物質が形態Ａおよび形態Ｂの混合物であることを示した（図１１）。
【0327】
実施例５：多形体溶媒スクリーニング試験
３０の実験は、最初に式Ｉモノコハク酸塩の化合物の安定な多形スクリーニングの一部として行われ、表２に詳述され、表３は、式Ｉモノコハク酸塩の化合物で始まり、より安定な多形の形成を促進する結晶化技術、例えば、徐冷、徐蒸発、蒸気拡散、および長時間にわたるスラリーのような技術を用いて実施された１９の実験を示す。表４．３は、式Ｉの化合物のコハク酸塩形成を研究するために、遊離塩基から出発して、他の化学量論が存在するかどうかを決定するために、コハク酸の種々の比率にて、１１の実験を実施したことを示す。
３０の実験は、最初に式Ｉモノコハク酸塩の化合物の安定な多形スクリーニングの一部として行われ、表２に詳述され、表３は、式Ｉモノコハク酸塩の化合物で始まり、より安定な多形の形成を促進する結晶化技術、例えば、徐冷、徐蒸発、蒸気拡散、および長時間にわたるスラリーのような技術を用いて実施された１９の実験を示す。表４．３は、式Ｉの化合物のコハク酸塩形成を研究するために、遊離塩基から出発して、他の化学量論が存在するかどうかを決定するために、コハク酸の種々の比率にて、１１の実験を実施したことを示す。
【0328】
安定な多形および塩形成の実験は、形態Ａ、形態Ｂ、形態Ｃ、または形態の混合物のいずれかをもたらした。形態Ｃは、水または水を含有することが知られている溶媒（すなわちエタノールまたはＴＨＦ）を含有する系から生じた水和物であってもよい。形態Ｂは、スクリーニング中の種々の条件および溶媒系に由来する無水多形であると特徴付けられた。すべての多形は、式Ｉの遊離塩基およびコハク酸の化合物との１：１の化学量論的塩であることが確認された。コハク酸塩の他の化学量論は確認されなかった。
【0329】
【表2】
【0330】
【表3-1】
【0331】
【表3-2】
【0332】
実施例６：安定な多形溶媒スクリーニング試験
式（Ｉ）形態Ａの化合物を出発物質として使用して、以下の表４の実験は、形態Ａおよび形態Ｂの両方とも無水であるため、両者の間の相違を特定した。エタノールおよびヘプタンの比率を変化させ、これらの溶媒を使用した温度条件を調べた。その理由は、これらが最終的な結晶化条件として選択されたためである。長時間の徐冷やスラリー化（ｓｌｕｒｒｉｅｓ）のようなより安定した多形の形成を促進する結晶化技術を用いて追加実験を行った。衝突沈殿（ｃｒａｓｈ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ）、衝突冷却、高速蒸発技術など、準安定形態を対象とした他の実験も実施した。
式（Ｉ）形態Ａの化合物を出発物質として使用して、以下の表４の実験は、形態Ａおよび形態Ｂの両方とも無水であるため、両者の間の相違を特定した。エタノールおよびヘプタンの比率を変化させ、これらの溶媒を使用した温度条件を調べた。その理由は、これらが最終的な結晶化条件として選択されたためである。長時間の徐冷やスラリー化（ｓｌｕｒｒｉｅｓ）のようなより安定した多形の形成を促進する結晶化技術を用いて追加実験を行った。衝突沈殿（ｃｒａｓｈ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ）、衝突冷却、高速蒸発技術など、準安定形態を対象とした他の実験も実施した。
【0333】
形態Ａ、Ｂ、およびＣに加えて、混合物中で新しい多形が形態Ｄとして同定された。特性データに基づくと、この物質は水和物である可能性が高い。形態Ｃの無秩序なＸＲＰＤパターンはより結晶性の高い形態Ｄのパターンとは異なる。
【0334】
【表4-1】
【0335】
【表4-2】
【0336】
形態Ａは、無水で溶媒和されていない結晶性の固体である（図１２）。ＤＳＣは、１８４．３℃のオンセットを伴う鋭い吸熱を示す（図１３）。２０１．１℃で分解するまで、ＴＧＡで最小重量損失（ｍｉｎｉｍａｌ ｗｅｉｇｈｔ ｌｏｓｓ）（０．５％）が観察される。
【0337】
形態Ｂは、無水で溶媒和されていない結晶性に乏しい固体である（図１４）。ＤＳＣは１３８．６℃で小さな吸熱を示し、続いて１６９．６℃のオンセットを伴う鋭い吸熱を示す。最初の小さな吸熱現象の性質を決定するには、ホットステージ顕微鏡が必要であろう。１７８．０℃で分解するまで、ＴＧＡでは最小重量減少（０．９％）が観察された（図１５）。ＤＶＳデータは、材料がわずかに吸湿性であり、重量の増加および損失が１２％であり、脱着時にわずかなヒステリシスがあることを示している（図１６）。Ｂ型は全体的に吸湿性が低いが、相対湿度が低い場合でも直ちに吸湿を開始する。ＤＶＳ後のＸＲＰＤ分析は、形態Ｂとも一致している（図１７）。プロトンＮＭＲにおける化学シフトは、この物質が、残留溶媒が存在しない化学構造と一致することを示す（図１８）。２．６ｐｐｍのピークはコハク酸１モルに起因する。
【0338】
形態Ｃは、水和または溶媒和された（図１９）無秩序な物質である。ＤＳＣは、最初に最大８３．７℃の幅広い吸熱を示し、次に最大１２０．８℃の別の吸熱を示し、その直後に最大１３４．８℃の発熱が続く。最後の鋭い吸熱は、１８１．８℃のオンセットを伴って観察される。これは、形態Ｃが脱溶媒および再結晶して１８４℃の溶融物を有する形態Ａになることを示唆している（図２０）。プロトンＮＭＲの化学シフトは化学構造と一致しており、残留溶媒は存在せず、形態Ｃが実際に水和物であることを示している（図２１）。２．６ｐｐｍのピークは１モルのコハク酸に起因する。
【0339】
形態Ｄは、図２２に示される比較ＸＲＰＤスペクトルの矢印によって示されるように、形態Ａまたは形態Ｂとの混合物として上記のように得られた。形態Ｄは、エタノールまたはヘプタンのいずれかを使用して得られた。熱データは、形態Ｄが水和または溶媒和されていることを示している（図２３）。熱データは、形態Ｄが水和または溶媒和されていることを示す（図２３）。ＤＳＣは、最大４９．８℃の最初の幅広い吸熱に続いて、最大１３２．３℃の小さな発熱が生じ、その直後に、最大１３４．８℃の発熱が生じる。最後の鋭い吸熱は、１８２．７℃のオンセットを伴って観察される。したがって、形態Ｄは脱溶媒して再結晶し、１８４℃の溶融物を有する形態Ａになる。この試料には形態Ａの混合物も含まれていたので、再結晶を促進した可能性のある形態Ａのシードが存在していた。プロトンＮＭＲの化学シフトは化学構造と一致しており、残留溶媒はほとんど存在せず（１．５重量％ＥｔＯＨ）、形態Ｄがおそらくは水和物であることを示している（図２４）。２．６ｐｐｍのピークは１モルのコハク酸に起因する。
【0340】
実施例７：式Ｉの形態Ａおよび形態Ｂの化合物の競合スラリー
無水の形態Ａと無水の形態Ｂとの間の熱力学的に安定な多形を決定するために、３つの異なる溶媒系：すなわちエタノール，テトラヒドロフランおよび２－ブタノン（ＭＥＫ）／水（９５：５）中で競合スラリーを行った。各溶媒系を、表５に示すように、５℃、周囲温度（ＲＴ）、および４０℃の３つの異なる温度で評価した。エタノールおよびテトラヒドロフランは、材料の溶解度に基づいて選択した。潜在的なプロセス溶媒としてＭＥＫを選択し、溶解度を高めるために水を添加した。
無水の形態Ａと無水の形態Ｂとの間の熱力学的に安定な多形を決定するために、３つの異なる溶媒系：すなわちエタノール，テトラヒドロフランおよび２－ブタノン（ＭＥＫ）／水（９５：５）中で競合スラリーを行った。各溶媒系を、表５に示すように、５℃、周囲温度（ＲＴ）、および４０℃の３つの異なる温度で評価した。エタノールおよびテトラヒドロフランは、材料の溶解度に基づいて選択した。潜在的なプロセス溶媒としてＭＥＫを選択し、溶解度を高めるために水を添加した。
【0341】
【表5】
【0342】
５％の水の添加は、水和物、形態Ｃへの部分的な変換をもたらした。ＴＨＦのような水を含有することが知られている溶媒の使用も、形態Ｃへの部分的な変換ももたらした。したがって、さらなる競合スラリーを、３つのさらなる溶媒系：エタノール／ヘプタン（１：５）、酢酸エチル／水（９７：３）およびイソプロパノール／水（９９：１）において実施した。エタノール／ヘプタン系は、－１５℃、５℃、周囲温度（ＲＴ）および４０℃で評価した。含水システムは、周囲温度（ａｍｂｉｅｎｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）でのみ評価した。結果は以下の表６のとおりである。スラリーは、上記のスラリーで実施された５日間ではなく７日間実施した。形態Ｄも水を含む競合スラリーに含まれた。
【0343】
【表6】
【0344】
上記の結果は、５日間にわたって行われたスラリーと比較して、形態Ｂの存在が減少するため、時間の経過とともに形態Ａが最も安定した多形であることを示す。検討した広い温度範囲（約４０℃～－１５℃）は、形態Ａと形態Ｂの間に臨界転移温度が存在するかどうかを決定するために設計した。形態Ａはより高い融解吸熱事象を有したが、形態Ｂの方が融解熱量が大きいので、熱力学的な安定性は形態Ａにあると考えられる。
【0345】
９７：３のＥｔＯＡｃ／水スラリーは形態Ｃに完全に変換したが、９９：１のＩＰＡ／水スラリーは形態Ａに変換した。これらのデータは、水分活性が低い場合は、無水の形態Ａが熱力学的に最も安定していることを示す。水分活性が高い場合、水和物の形態Ｃがより好ましい。
【0346】
実施例８：血清鉄濃度
この試験では、形態Ａの投与による血液の鉄パラメータを評価した。８週齢の健康な雄のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットに経口強制投与により毎日、ビヒクルまたは形態Ａを１ｍｇおよび２．５ｍｇの用量で投与した。投与９０日後に試験を終了し、血清試料を採取して鉄パラメータを分析した。採取した血液を室温で凝固させた後、遠心分離機でスピンダウンし、血清を分取した。血清鉄および不飽和鉄結合能（ＵＩＢＣ）は、Ｃｏｂａｓ（登録商標）６０００（Ｒｏｃｈｅ）血液化学分析器を用い測定した。トランスフェリン飽和度は、総血清鉄レベルに対する総鉄結合能のパーセンテージとして計算した。
この試験では、形態Ａの投与による血液の鉄パラメータを評価した。８週齢の健康な雄のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットに経口強制投与により毎日、ビヒクルまたは形態Ａを１ｍｇおよび２．５ｍｇの用量で投与した。投与９０日後に試験を終了し、血清試料を採取して鉄パラメータを分析した。採取した血液を室温で凝固させた後、遠心分離機でスピンダウンし、血清を分取した。血清鉄および不飽和鉄結合能（ＵＩＢＣ）は、Ｃｏｂａｓ（登録商標）６０００（Ｒｏｃｈｅ）血液化学分析器を用い測定した。トランスフェリン飽和度は、総血清鉄レベルに対する総鉄結合能のパーセンテージとして計算した。
【0347】
実施例９：鉄不応性鉄欠乏性貧血に対する形態Ａの影響
鉄不応性鉄欠乏性貧血（ＩＲＩＤＡ）のマウスモデルを用いてＩＲＩＤＡにおける形態Ａの影響を決定した。簡単に説明すると、８週齢のＣ５７ＢＬ／６マウスに、ルシフェラーゼ（対照）またはＴＭＰＲＳＳ６（０．７５ｍｇ／ｋｇ）のいずれかを標的とした脂質カプセル化ｓｉＲＮＡを３日毎に静脈内投与した。ＴＭＰＲＳＳ６ｓｉＲＮＡを受けるコホートがヘプシジンを増加させ、血清ヘモグロビンおよび血清鉄を減少させる時点まで、マウスはｓｉＲＮＡ処理を受ける。この時点で、マウスをさらにビヒクルまたは形態Ａのいずれかを受けるようにランダム化する。マウスは、最初のｓｉＲＮＡ投与の１２日後に安楽死させる。全血を採取し、血液学的パラメータについてアッセイする。さらに、血清を採取し、ＥＬＩＳＡによってヘプシジン濃度を測定し、比色分析によって総鉄含有量を測定する。
鉄不応性鉄欠乏性貧血（ＩＲＩＤＡ）のマウスモデルを用いてＩＲＩＤＡにおける形態Ａの影響を決定した。簡単に説明すると、８週齢のＣ５７ＢＬ／６マウスに、ルシフェラーゼ（対照）またはＴＭＰＲＳＳ６（０．７５ｍｇ／ｋｇ）のいずれかを標的とした脂質カプセル化ｓｉＲＮＡを３日毎に静脈内投与した。ＴＭＰＲＳＳ６ｓｉＲＮＡを受けるコホートがヘプシジンを増加させ、血清ヘモグロビンおよび血清鉄を減少させる時点まで、マウスはｓｉＲＮＡ処理を受ける。この時点で、マウスをさらにビヒクルまたは形態Ａのいずれかを受けるようにランダム化する。マウスは、最初のｓｉＲＮＡ投与の１２日後に安楽死させる。全血を採取し、血液学的パラメータについてアッセイする。さらに、血清を採取し、ＥＬＩＳＡによってヘプシジン濃度を測定し、比色分析によって総鉄含有量を測定する。
【0348】
参照による組み込み
本明細書に記載されるすべての刊行物および特許は、それぞれの個々の刊行物または特許が、具体的かつ個別に、参照により組み込まれるように示されたかのように、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。矛盾がある場合、本明細書中の任意の定義を含む本出願が支配する。
本明細書に記載されるすべての刊行物および特許は、それぞれの個々の刊行物または特許が、具体的かつ個別に、参照により組み込まれるように示されたかのように、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。矛盾がある場合、本明細書中の任意の定義を含む本出願が支配する。
【0349】
均等物
本発明の特定の実施形態が議論されてきたが、上記の明細書は例示的なものであり、限定的なものではない。本明細書および以下の特許請求の範囲を検討すると、本発明の多くの変形が当業者に明らかになるであろう。本発明の全範囲は、特許請求の範囲、それらの均等物の全範囲、および明細書、ならびにそのような変形を参照することによって決定されるべきである。
本発明の特定の実施形態が議論されてきたが、上記の明細書は例示的なものであり、限定的なものではない。本明細書および以下の特許請求の範囲を検討すると、本発明の多くの変形が当業者に明らかになるであろう。本発明の全範囲は、特許請求の範囲、それらの均等物の全範囲、および明細書、ならびにそのような変形を参照することによって決定されるべきである。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【手続補正書】
【提出日】2024-07-11
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
本明細書に記載の発明。
【手続補正2】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0349】
均等物
本発明の特定の実施形態が議論されてきたが、上記の明細書は例示的なものであり、限定的なものではない。本明細書および以下の特許請求の範囲を検討すると、本発明の多くの変形が当業者に明らかになるであろう。本発明の全範囲は、特許請求の範囲、それらの均等物の全範囲、および明細書、ならびにそのような変形を参照することによって決定されるべきである。
以下に、上記実施形態から把握できる技術思想を付記として記載する。
［付記１］
式（Ｉ）：
の構造を有する結晶性化合物。
［付記２］
前記化合物が無水である、付記１に記載の結晶性化合物。
［付記３］
約７．０５±０．２、１５．１６±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、および２４．４７±０．２の２θ値を有する、付記１または２に記載の結晶性化合物。
［付記４］
約３．５８±０．２、７．０５±０．２、１３．８±０．２、１４．１６±０．２、１５．１６±０．２、１６．１８±０．２、１６．８０±０．２、１７．１５±０．２、１７．６９±０．２、１８．２９±０．２、１８．８４±０．２、２０．２９±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、２２．６８±０．２、２３．８４±０．２、２４．４７±０．２、２４．８４±０．２および２８．４７±０．２の２θ値を有する、付記３に記載の結晶性化合物。
［付記５］
約３．５８±０．２、７．０５±０．２、１０．５９±０．２、１０．７５±０．２、１３．８０±０．２、１４．１６±０．２、１５．１６±０．２、１５．６８±０．２、１６．１８±０．２、１６．８０±０．２、１７．１５±０．２、１７．６９±０．２、１７．９７±０．２、１８．２９±０．２、１８．５９±０．２、１８．８４±０．２、１９．２７±０．２、２０．２９±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、２１．５６±０．２、２１．７８±０．２、２２．６８±０．２、２３．８４±０．２、２４．４７±０．２、２４．８４±０．２、２５．１５±０．２、２６．１０±０．２、２７．１２±０．２、２７．７８±０．２、２８．４７±０．２、および２９．０６±０．２の２θ値を有する、付記４に記載の結晶性化合物。
［付記６］
実質的に図１に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、形態Ａと表記されている、付記１または２に記載の結晶性化合物。
［付記７］
約９．７９±０．２，１３．０５±０．２，２２．９１±０．２，２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、付記１または２に記載の結晶性化合物。
［付記８］
約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１６．７５±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、付記７に記載の結晶性化合物。
［付記９］
約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１３．６１±０．２、１４．３９±０．２、１６．７５±０．２、１８．５０±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、付記８に記載の結晶性化合物。
［付記１０］
実質的に図２に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、形態Ｂと表記されている、付記１または２に記載の結晶性化合物。
［付記１１］
式（Ｉ）：
の構造を有する結晶性化合物。
［付記１２］
約６．００±０．２、１２．００±０．２、１６．１４±０．２、１７．７２±０．２、１８．００±０．２、１８．６４±０．２および２３．５０±０．２の２θ値を有する、付記１１に記載の結晶性化合物。
［付記１３］
実質的に図３に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、遊離塩基と表記されている、付記１１に記載の結晶性化合物。
［付記１４］
付記１～１３のいずれか一項に記載の塩および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
［付記１５］
式（Ｉ）：
の構造を有する結晶性化合物を調製するための方法であって：前記方法は、
ａ）式（Ｉ）化合物を提供すること；
ｂ）酸を加えて混合物を形成すること；および
ｃ）式（Ｉ）の化合物を含む混合物から式（Ｉ）の化合物を結晶化させること、
を含み、前記結晶性化合物は塩である、方法。
［付記１６］
前記結晶性化合物が無水である、付記１５に記載の方法。
［付記１７］
前記結晶性化合物が水和物である、付記１５に記載の方法。
［付記１８］
前記式（Ｉ）の化合物が少なくとも１つの溶媒中に存在する、付記１５に記載の方法。
［付記１９］
前記酸が少なくとも１つの溶媒中に存在する、付記１５に記載の方法。
［付記２０］
前記式（Ｉ）の化合物および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成する、付記１８に記載の方法。
［付記２１］
前記式（Ｉ）の化合物および前記少なくとも１つの溶媒がスラリーまたは懸濁液を形成する、付記１８に記載の方法。
［付記２２］
前記酸および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成する、付記１９に記載の方法。
［付記２３］
前記酸および少なくとも１つの溶媒がスラリーまたは懸濁液を形成する、付記１９に記載の方法。
［付記２４］
前記酸は、ＨＣｌ、ＨＢｒ、コハク酸、１－ＯＨ－２－ナフトエ酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、マロン酸、メタンスルホン酸、リン酸、トルエンスルホン酸および硫酸から選択される、付記１５～２３のいずれか一項に記載の方法。
［付記２５］
前記酸がコハク酸である、付記２４に記載の方法。
［付記２６］
各溶媒は、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジオキサン、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、ヘキサン、酢酸イソプロピル、メタノール、メチルエチルケトン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トルエン、２－プロパノール、１－ブタノール、水またはこれらの任意の組み合わせから独立して選択される、付記１８～２５のいずれか一項に記載の方法。
［付記２７］
前記溶媒は、ＴＨＦ、エタノール、またはそれらの混合物である、付記２６に記載の方法。
［付記２８］
前記酸は、少なくとも１つの溶媒中に存在し、式（Ｉ）の化合物に添加されてスラリーを形成し、前記スラリーから化合物を結晶化するステップは、前記スラリーから前記化合物を沈殿させることを含む、付記１５に記載の方法。
［付記２９］
前記式（Ｉ）の化合物、前記酸および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成し、前記混合物から前記式（Ｉ）の化合物を結晶化するステップが、前記溶液を過飽和状態にして前記式（Ｉ）の化合物を溶液から沈殿させることを含む、付記１５に記載の方法。
［付記３０］
前記溶液を過飽和にするステップが、反溶媒をゆっくりと加えること、前記溶液を冷却させること、前記溶液の体積を減らすこと、またはそれらの任意の組み合わせを含む、付記２９に記載の方法。
［付記３１］
前記溶液を過飽和にするステップが、溶液を周囲温度以下に冷却することを含む、付記２９に記載の方法。
［付記３２］
前記結晶性化合物を単離することをさらに含む、付記１５～３１のいずれか一項に記載の方法。
［付記３３］
前記結晶性化合物を単離することは、前記混合物から前記結晶化された化合物を得るために遠心分離することを含む、付記３２に記載の方法。
［付記３４］
前記結晶性化合物を単離することは、前記混合物から前記結晶化された化合物を濾過することを含む、付記３２に記載の方法。
［付記３５］
前記結晶性化合物を減圧下で乾燥させることをさらに含む、付記３２～３４に記載のいずれか一項に記載の方法。
［付記３６］
前記結晶性化合物が、付記１～１３のいずれか一項に記載の結晶性化合物である、付記１５～３５のいずれか一項に記載の方法。
本発明の特定の実施形態が議論されてきたが、上記の明細書は例示的なものであり、限定的なものではない。本明細書および以下の特許請求の範囲を検討すると、本発明の多くの変形が当業者に明らかになるであろう。本発明の全範囲は、特許請求の範囲、それらの均等物の全範囲、および明細書、ならびにそのような変形を参照することによって決定されるべきである。
以下に、上記実施形態から把握できる技術思想を付記として記載する。
［付記１］
式（Ｉ）：
【化8】
の構造を有する結晶性化合物。
［付記２］
前記化合物が無水である、付記１に記載の結晶性化合物。
［付記３］
約７．０５±０．２、１５．１６±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、および２４．４７±０．２の２θ値を有する、付記１または２に記載の結晶性化合物。
［付記４］
約３．５８±０．２、７．０５±０．２、１３．８±０．２、１４．１６±０．２、１５．１６±０．２、１６．１８±０．２、１６．８０±０．２、１７．１５±０．２、１７．６９±０．２、１８．２９±０．２、１８．８４±０．２、２０．２９±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、２２．６８±０．２、２３．８４±０．２、２４．４７±０．２、２４．８４±０．２および２８．４７±０．２の２θ値を有する、付記３に記載の結晶性化合物。
［付記５］
約３．５８±０．２、７．０５±０．２、１０．５９±０．２、１０．７５±０．２、１３．８０±０．２、１４．１６±０．２、１５．１６±０．２、１５．６８±０．２、１６．１８±０．２、１６．８０±０．２、１７．１５±０．２、１７．６９±０．２、１７．９７±０．２、１８．２９±０．２、１８．５９±０．２、１８．８４±０．２、１９．２７±０．２、２０．２９±０．２、２１．０５±０．２、２１．２６±０．２、２１．５６±０．２、２１．７８±０．２、２２．６８±０．２、２３．８４±０．２、２４．４７±０．２、２４．８４±０．２、２５．１５±０．２、２６．１０±０．２、２７．１２±０．２、２７．７８±０．２、２８．４７±０．２、および２９．０６±０．２の２θ値を有する、付記４に記載の結晶性化合物。
［付記６］
実質的に図１に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、形態Ａと表記されている、付記１または２に記載の結晶性化合物。
［付記７］
約９．７９±０．２，１３．０５±０．２，２２．９１±０．２，２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、付記１または２に記載の結晶性化合物。
［付記８］
約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１６．７５±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、付記７に記載の結晶性化合物。
［付記９］
約３．２５±０．２、９．７９±０．２、１３．０５±０．２、１３．６１±０．２、１４．３９±０．２、１６．７５±０．２、１８．５０±０．２、１９．５０±０．２、２２．９１±０．２、２３．６０±０．２および２６．２５±０．２の２θ値を有する、付記８に記載の結晶性化合物。
［付記１０］
実質的に図２に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、形態Ｂと表記されている、付記１または２に記載の結晶性化合物。
［付記１１］
式（Ｉ）：
【化9】
の構造を有する結晶性化合物。
［付記１２］
約６．００±０．２、１２．００±０．２、１６．１４±０．２、１７．７２±０．２、１８．００±０．２、１８．６４±０．２および２３．５０±０．２の２θ値を有する、付記１１に記載の結晶性化合物。
［付記１３］
実質的に図３に示されるようなＸＲＰＤパターンを有し、遊離塩基と表記されている、付記１１に記載の結晶性化合物。
［付記１４］
付記１～１３のいずれか一項に記載の塩および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
［付記１５］
式（Ｉ）：
【化10】
の構造を有する結晶性化合物を調製するための方法であって：前記方法は、
ａ）式（Ｉ）化合物を提供すること；
ｂ）酸を加えて混合物を形成すること；および
ｃ）式（Ｉ）の化合物を含む混合物から式（Ｉ）の化合物を結晶化させること、
を含み、前記結晶性化合物は塩である、方法。
［付記１６］
前記結晶性化合物が無水である、付記１５に記載の方法。
［付記１７］
前記結晶性化合物が水和物である、付記１５に記載の方法。
［付記１８］
前記式（Ｉ）の化合物が少なくとも１つの溶媒中に存在する、付記１５に記載の方法。
［付記１９］
前記酸が少なくとも１つの溶媒中に存在する、付記１５に記載の方法。
［付記２０］
前記式（Ｉ）の化合物および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成する、付記１８に記載の方法。
［付記２１］
前記式（Ｉ）の化合物および前記少なくとも１つの溶媒がスラリーまたは懸濁液を形成する、付記１８に記載の方法。
［付記２２］
前記酸および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成する、付記１９に記載の方法。
［付記２３］
前記酸および少なくとも１つの溶媒がスラリーまたは懸濁液を形成する、付記１９に記載の方法。
［付記２４］
前記酸は、ＨＣｌ、ＨＢｒ、コハク酸、１－ＯＨ－２－ナフトエ酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、マロン酸、メタンスルホン酸、リン酸、トルエンスルホン酸および硫酸から選択される、付記１５～２３のいずれか一項に記載の方法。
［付記２５］
前記酸がコハク酸である、付記２４に記載の方法。
［付記２６］
各溶媒は、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジオキサン、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、ヘキサン、酢酸イソプロピル、メタノール、メチルエチルケトン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トルエン、２－プロパノール、１－ブタノール、水またはこれらの任意の組み合わせから独立して選択される、付記１８～２５のいずれか一項に記載の方法。
［付記２７］
前記溶媒は、ＴＨＦ、エタノール、またはそれらの混合物である、付記２６に記載の方法。
［付記２８］
前記酸は、少なくとも１つの溶媒中に存在し、式（Ｉ）の化合物に添加されてスラリーを形成し、前記スラリーから化合物を結晶化するステップは、前記スラリーから前記化合物を沈殿させることを含む、付記１５に記載の方法。
［付記２９］
前記式（Ｉ）の化合物、前記酸および前記少なくとも１つの溶媒が溶液を形成し、前記混合物から前記式（Ｉ）の化合物を結晶化するステップが、前記溶液を過飽和状態にして前記式（Ｉ）の化合物を溶液から沈殿させることを含む、付記１５に記載の方法。
［付記３０］
前記溶液を過飽和にするステップが、反溶媒をゆっくりと加えること、前記溶液を冷却させること、前記溶液の体積を減らすこと、またはそれらの任意の組み合わせを含む、付記２９に記載の方法。
［付記３１］
前記溶液を過飽和にするステップが、溶液を周囲温度以下に冷却することを含む、付記２９に記載の方法。
［付記３２］
前記結晶性化合物を単離することをさらに含む、付記１５～３１のいずれか一項に記載の方法。
［付記３３］
前記結晶性化合物を単離することは、前記混合物から前記結晶化された化合物を得るために遠心分離することを含む、付記３２に記載の方法。
［付記３４］
前記結晶性化合物を単離することは、前記混合物から前記結晶化された化合物を濾過することを含む、付記３２に記載の方法。
［付記３５］
前記結晶性化合物を減圧下で乾燥させることをさらに含む、付記３２～３４に記載のいずれか一項に記載の方法。
［付記３６］
前記結晶性化合物が、付記１～１３のいずれか一項に記載の結晶性化合物である、付記１５～３５のいずれか一項に記載の方法。