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特開2024-124589キャッピング剤前駆体及びその製造方法、並びに、キャッピング剤の合成方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024124589
(43)【公開日】2024-09-13
(54)【発明の名称】キャッピング剤前駆体及びその製造方法、並びに、キャッピング剤の合成方法
(51)【国際特許分類】
C07H 21/02 20060101AFI20240906BHJP
A61K 39/00 20060101ALI20240906BHJP
A61P 37/04 20060101ALI20240906BHJP
A61K 31/7105 20060101ALI20240906BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20240906BHJP
【ＦＩ】
C07H21/02 CSP
A61K39/00 A
A61P37/04
A61K31/7105
A61K48/00
【審査請求】未請求
【請求項の数】17
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2023032353
(22)【出願日】2023-03-03
(71)【出願人】
【識別番号】594134833
【氏名又は名称】藤本化学製品株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】110000729
【氏名又は名称】弁理士法人ユニアス国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】吉田 祐也
(72)【発明者】
【氏名】植村 恵理香
(72)【発明者】
【氏名】水谷 春菜
【テーマコード（参考）】
4C057
4C084
4C085
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C057AA18
4C057BB10
4C057CC03
4C057DD03
4C057MM02
4C057MM09
4C084AA13
4C084NA14
4C084ZB09
4C085AA03
4C085BA01
4C085CC33
4C085EE01
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086EA16
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZB09
(57)【要約】 （修正有）
【課題】本発明は、擬似固相保護基を使用する液相合成法によるキャッピング剤の簡易迅速な合成が可能となる、キャッピング剤前駆体、キャッピング剤合成用試薬、及び、それらを用いたキャッピング剤の製造方法を提供することに関する。また、本発明は、液相合成法による簡易迅速なｍＲＮＡの製造方法を提供することに関する。また、本発明は、液相合成法による簡易迅速なｍＲＮＡワクチンの製造方法を提供することに関する。
【解決手段】例えば、下記式の７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵ－Ｔａｇ及び７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵ等の化合物。
【選択図】なし
【解決手段】例えば、下記式の７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵ－Ｔａｇ及び７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵ等の化合物。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
一般式（１）で表される化合物又はその塩。
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。複数存在する場合、Ｒ３は、同一又は異なる。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。）
【化1】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。複数存在する場合、Ｒ３は、同一又は異なる。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。）
【請求項2】
一般式（２）で表される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在するＲ２は、同一又は異なる。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。
Ｖは、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、擬似固相保護基を表す。）
【化2】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在するＲ２は、同一又は異なる。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。
Ｖは、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、擬似固相保護基を表す。）
【請求項3】
前記Ｌ１は、一般式（３）で表される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、前記一般式（１）との結合部を表す。）
【化3】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、前記一般式（１）との結合部を表す。）
【請求項4】
前記Ｌ１は、一般式（４）で表される、請求項２に記載の化合物又はその塩。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、前記一般式（２）との結合部を表す。）
【化4】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、前記一般式（２）との結合部を表す。）
【請求項5】
請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を含む、キャッピング剤前駆体。
【請求項6】
請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を含む、キャッピング剤合成用試薬。
【請求項7】
一般式（５）で表される化合物又はその塩
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
（式中、
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
と、一般式（６）で表される化合物又はその塩
（式中、
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する液相合成担体由来部を表す。
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
（式中、
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－１）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
とを、触媒を用いて反応させる工程（１）を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩の製造方法。
【化5】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
【化6】
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
と、一般式（６）で表される化合物又はその塩
【化7】
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する液相合成担体由来部を表す。
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
【化8】
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－１）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
とを、触媒を用いて反応させる工程（１）を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩の製造方法。
【請求項8】
前記Ｌ１は、一般式（７）で表される、請求項７に記載の製造方法。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、下記一般式（６）との結合部を表す。）
【化9】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、下記一般式（６）との結合部を表す。）
【請求項9】
前記工程（１）以降に、水を加えて沈殿物を生成させ、ろ過により分離させる工程（２）を含む、請求項７に記載の製造方法。
【請求項10】
前記工程（１）以降に、水を加えて沈殿物を生成させ、ろ過により分離させる工程（２）を含む、請求項８に記載の製造方法。
【請求項11】
前記Ｂａｓｅは、保護基で修飾されている、請求項７に記載の製造方法。
【請求項12】
請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、
を含む、キャッピング剤の製造方法。
を含む、キャッピング剤の製造方法。
【請求項13】
前記工程（３）は、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を脱保護させる工程（４）を含む、請求項１２に記載のキャッピング剤の製造方法。
【請求項14】
前記工程（４）は、塩基性下で行われる、請求項１３に記載の製造方法。
【請求項15】
前記工程（４）において用いられる脱保護試薬は、アミン、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物、アルカリ金属炭酸塩、アルカリ土類金属炭酸塩、アミンの炭酸塩，アルカリ金属水素炭酸塩、アルカリ土類金属水素炭酸塩，及び、アミン水素炭酸塩からなる群より選ばれる１つ以上を含む、請求項１３に記載の製造方法。
【請求項16】
請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、及び、
前記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、
を含む、ｍＲＮＡの製造方法。
前記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、
を含む、ｍＲＮＡの製造方法。
【請求項17】
請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、
前記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、及び、
前記工程（５）で得られたｍＲＮＡを用いてｍＲＮＡワクチンを製造する工程（６）、
を含む、ｍＲＮＡワクチンの製造方法。
前記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、及び、
前記工程（５）で得られたｍＲＮＡを用いてｍＲＮＡワクチンを製造する工程（６）、
を含む、ｍＲＮＡワクチンの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、擬似固相保護基を使用する液相合成法によるキャッピング剤の合成方法、並びに、キャッピング剤前駆体及びその塩、それらの製造方法、等に関する。
【背景技術】
【0002】
昨今、新型コロナウイルス（ＣＯＶＩＤ－１９）ワクチンをはじめとするｍＲＮＡワクチンやｍＲＮＡ治療薬の開発が特に強く求められている。ｍＲＮＡは「５‘－Ｃａｐ」「５’－ＵＴＲ」「ＧＯＩ」「３‘－ＵＴＲ」「ポリＡ鎖」から成り立っており、ｐＤＮＡを鋳型ＤＮＡとして、ＲＮＡポリメラーゼやヌクレオチド三リン酸などを用いて、ｍＲＮＡに転写される。最終的なｍＲＮＡ構造は、その安定性および細胞への効率的な導入のため、５’－Ｃａｐ構造を必要とする。Ｃａｐは、酵素法と共転写法の２種類の方法で付加されるが、酵素法では転写工程後にＣａｐ付加工程が必要であるのに対し、共転写法では転写工程で同時にＣａｐ付加も行われるため、操作が簡便となり製造コストが安い。共転写法は、Ｃａｐ付加の原料となるキャッピング剤が必須となる。
【0003】
キャッピング剤の合成は、一般的に、特許文献１に記載されている方法で行われている（特許文献１参照）。この方法においては、多くの工程が存在し、かつ、各段階毎にカラム精製等が必要であり、工数や作業工程、収率等の面で十分なものではなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】米国特許第１０，５１９，１８９号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
また、本発明は、擬似固相保護基を使用する液相合成法によるキャッピング剤の簡易迅速な合成が可能となる、キャッピング剤前駆体、キャッピング剤合成用試薬、及び、それらを用いたキャッピング剤の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討した結果、簡便に合成できるとともに、簡便にキャッピング剤合成等に変換可能な以下に示す新規化合物の創製に成功し、上記化合物及びそれを用いた手法等により上記目的を達成できることを見出して、本発明を完成するに至った。
【0007】
すなわち、本発明は以下の化合物又はその塩を提供する。
【0008】
［１］一般式（１）（以下、本明細書中において、「化合物（１）」と言う場合もある。また、他の一般式で表される化合物もこれに準ずる。）で表される、化合物又はその塩。
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。複数存在する場合、Ｒ３は、同一又は異なる。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。）
【化1】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。複数存在する場合、Ｒ３は、同一又は異なる。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。）
【0009】
本発明の化合物又はその塩によると、上記一般式（１）で表される構造を有することにより、液相合成法によるキャッピング剤の簡便な合成が可能となる。より詳細には、本発明の化合物又はその塩は、Ｌ１として炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基（以下、「Ｔａｇ部分」という場合もある。）を有しており、当該擬似固相保護基（Ｔａｇ部分）が例えば一般式（３）又は（４）のような場合、水の添加により、７－メチルグアノシン二リン酸などの副原料などとろ過操作などによって簡便に分離することができ、キャッピング剤の簡便な合成が可能となる。
【0010】
なお、上記化合物の塩とは、本発明の作用効果を損なわないものであれば、上記化合物の化学構造を一部塩形態（イオン形態）に変換したものが広く含まれ、たとえば、リン酸のＯＨ基部分がＯ－Ａ＋（水酸基アニオンと、Ａカチオンの塩形態等）等の塩が含まれる。また、上記塩において、分子内に複数のイオン塩部位が存在していてもよい。
【0011】
［２］一般式（２）で表される、［１］に記載の化合物又はその塩。
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在するＲ２は、同一又は異なる。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。
Ｖは、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、擬似固相保護基を表す。）
【化2】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在するＲ２は、同一又は異なる。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。
Ｖは、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、擬似固相保護基を表す。）
【0012】
［３］上記Ｌ１は、一般式（３）で表される、［１］に記載の化合物又はその塩。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（１）との結合部を表す。）
【化3】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（１）との結合部を表す。）
【0013】
［４］上記Ｌ１は、一般式（４）で表される、［２］に記載の化合物又はその塩。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（２）との結合部を表す。）
【化4】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（２）との結合部を表す。）
【0014】
また、本発明は、以下のキャッピング剤前駆体を提供する。
【0015】
［５］［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその塩を含む、キャッピング剤前駆体。
【0016】
また、本発明は、以下のキャッピング剤合成用試薬を提供する。
【0017】
［６］［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその塩を含む、キャッピング剤合成用試薬。
【0018】
また、本発明は、以下の化合物又はその塩の製造方法を提供する。
【0019】
［７］一般式（５）で表される化合物又はその塩
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
（式中、
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
と、一般式（６）で表される化合物又はその塩
（式中、
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
（式中、
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－１）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
とを、触媒を用いて反応させる工程（１）を含む、［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその塩の製造方法。
【化5】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
【化6】
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
と、一般式（６）で表される化合物又はその塩
【化7】
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
【化8】
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－１）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
とを、触媒を用いて反応させる工程（１）を含む、［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその塩の製造方法。
【0020】
［８］上記Ｌ１は、一般式（７）で表される、［７］に記載の製造方法。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、下記一般式（６）との結合部を表す。）
【化9】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、下記一般式（６）との結合部を表す。）
【0021】
［９］上記工程（１）以降に、水を加えて沈殿物を生成させ、ろ過により分離させる工程（２）を含む、［７］に記載の製造方法。
【0022】
［１０］上記工程（１）以降に、水を加えて沈殿物を生成させ、ろ過により分離させる工程（２）を含む、［８］に記載の製造方法。
【0023】
［１１］上記Ｂａｓｅは、保護基で修飾されている、［７］～［１０］のいずれかに記載の製造方法。
【0024】
また、本発明は、以下のキャッピング剤の製造方法を提供する。
【0025】
［１２］［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、
を含む、キャッピング剤の製造方法。
を含む、キャッピング剤の製造方法。
【0026】
［１３］上記工程（３）は、［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその塩を脱保護させる工程（４）を含む、［１２］に記載のキャッピング剤の製造方法。
【0027】
［１４］上記工程（４）は、塩基性下で行われる、［１３］に記載の製造方法。
【0028】
［１５］上記工程（４）において用いられる脱保護試薬は、アミン、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物、アルカリ金属炭酸塩、アルカリ土類金属炭酸塩、アミンの炭酸塩，アルカリ金属水素炭酸塩、アルカリ土類金属水素炭酸塩，及び、アミン水素炭酸塩からなる群より選ばれる１つ以上を含む、［１３］又は［１４］に記載の製造方法。
【0029】
また、本発明は、以下のｍＲＮＡの製造方法を提供する。
【0030】
［１６］［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、及び、
上記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、
を含む、ｍＲＮＡの製造方法。
上記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、
を含む、ｍＲＮＡの製造方法。
【0031】
また、本発明は、以下のｍＲＮＡワクチンの製造方法を提供する。
【0032】
［１７］［１］～［４］、
上記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、及び、
上記工程（５）で得られたｍＲＮＡを用いてｍＲＮＡワクチンを製造する工程（６）、
を含む、ｍＲＮＡワクチンの製造方法。
上記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、及び、
上記工程（５）で得られたｍＲＮＡを用いてｍＲＮＡワクチンを製造する工程（６）、
を含む、ｍＲＮＡワクチンの製造方法。
【発明の効果】
【0033】
本発明の化合物又はその塩（化合物（１）、（２）等）は、新規化合物であって、これを用いることにより、液相合成法によるキャッピング剤の合成等を簡易迅速に行うことが可能となる。
【0034】
また、本発明の化合物又はその塩の製造方法等は、上記工程を有することにより、上記化合物又はその塩を簡便に得ることができる。
【発明を実施するための形態】
【0035】
以下、本発明の実施の形態について詳細に説明する。
【0036】
〔化合物又はその塩〕
本発明の化合物又はその塩は、一般式（１）で表される化合物又はその塩（化合物（１））である。
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。複数存在する場合、Ｒ３は、同一又は異なる。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。）
本発明の化合物又はその塩は、一般式（１）で表される化合物又はその塩（化合物（１））である。
【化10】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。複数存在する場合、Ｒ３は、同一又は異なる。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。）
【0037】
上記一般式（１）において、Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
【0038】
Ｒ１としての炭素数１～４のアルコキシル基は、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロピロキシ基、イソプロピロキシ基、ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ－ブトキシ基、ｔ－ブトキシ基等をあげることができる。
【0039】
また、Ｒ１は、複数のＲ１同士で環を形成する基であってもよく、例えば、メチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基をあげることができる。
【0040】
上記一般式（１）において、Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
【0041】
Ｒ２としてのハロゲン原子は、例えば、Ｆ原子、Ｃｌ原子、Ｂｒ原子、ヨウ素原子などをあげることができる。
【0042】
Ｒ２としての炭素数１～４のアルコキシル基は、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロピロキシ基、イソプロピロキシ基、ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ－ブトキシ基、ｔ－ブトキシ基等をあげることができる。
【0043】
上記一般式（１）において、ｎは、０～３０の整数を表す。ｎは、使用目的や用途に応じて、例えば、０～２０であってもよく、０～１０であってもよく、１～５であってもよい。キャッピング剤前駆体、キャッピング剤合成用試薬、又は、キャッピング剤に用いる場合、例えば、ｎは、０～５の整数の場合が好適な例としてあげることができる。また、ｎが１位以上の場合のＲ２、Ｒ３、ｎが２位以上の場合のＹ、Ｖ等、同様の凡例のものが複数存在する場合は、それぞれ、同一又は異なる。
【0044】
上記一般式（１）において、Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。複数存在する場合、Ｒ３は、同一又は異なる。
【0045】
Ｒ３としてのハロゲン原子は、例えば、Ｆ原子、Ｃｌ原子、Ｂｒ原子、ヨウ素原子等をあげることができる。
【0046】
Ｒ３としての炭素数１～４のアルコキシル基は、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロピロキシ基、イソプロピロキシ基、ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ－ブトキシ基、ｔ－ブトキシ基等をあげることができる。
【0047】
Ｒ３のＬＮＡ環における置換基の炭素数１～４のアルキル基は、例えば、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔ－ブチル基等をあげることができる。
【0048】
Ｒ３のＬＮＡ環における置換基の炭素数１～４のアルコキシル基は、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロピロキシ基、イソプロピロキシ基、ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ－ブトキシ基、ｔ－ブトキシ基等をあげることができる。
【0049】
上記一般式（１）において、Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
【0050】
Ｂａｓｅとしての核酸塩基は、特に限定されず、天然由来の核酸塩基であっても、人工合成核酸塩基であってもよい。
【0051】
上記Ｂａｓｅとして、例えば、アデニル基、グアニル基、シトシル基、チミニル基、若しくはウラシル基、及び、これらの誘導体、ならびに、これらの修飾体をあげることができる。上記修飾体として、例えば、８－ブロモアデニル基、８－ブロモグアニル基、５－ブロモシトシル基、５－ヨードシトシル基、５－ウラシル基（シュードウラシル基）、５－ブロモウラシル基、５－ヨードウラシル基、５－フルオロウラシル基、５－メチルシトシル基、８－オキソグアニル基、ヒポキサンチニル基等をあげることができる。上記Ｂａｓｅの極性基等が公知の保護基等で保護されたものであってもよい。
【0052】
上記保護基として、例えば、アセチル基，イソブチリル基，トリフルオロアセチル基、ピバロイル基、ピバロイロキシメチル基、ベンゾイル基、ジメチルホルムアミジノ（ｄｍｆ）基，フェノキシアセチル基，４－イソプロピルフェノキシアセチル基、４－ｔ－ブチルフェノキシアセチル基、９－フルオレニルメチルオキシカルボニル基等をあげることができる。
【0053】
上記修飾体として、例えば、アミノ基がアシル基で修飾された核酸塩基等をあげることができる。
【0054】
上記一般式（１）において、Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
【0055】
Ｖにおける炭素数１～６のアルコキシ基は、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロピロキシ基、イソプロピロキシ基、ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ－ブトキシ基、ｔ－ブトキシ基、ｎ－ペンチル基等をあげることができる。
【0056】
Ｖにおける炭素数１～６のジアルキルアミノ基は、例えば、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、エチルメチルアミノ基、ジイソプロピルアミノ基等をあげることができる。
【0057】
Ｖにおけるピペラジノ基は、４位窒素原子が公知の窒素原子の保護基で保護されたものをあげることができる。また、上記ピペラジノ基はさらに置換されていてもよく、当該置換基として、例えば、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基等をあげることができる。
【0058】
上記一般式（１）において、Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
【0059】
上記一般式（１）において、Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。
【0060】
Ｌ１としての炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基は、例えば、炭素数１３以上２００以下のアルキルオキシ基、炭素数１５以上１００以下のアルキルオキシ基、炭素数２０以上５０以下のアルキルオキシ基などをあげることができる。
【0061】
Ｌ１としての炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基は、例えば、炭素数１３以上２００以下のアルキルオキシ基、炭素数１５以上１００以下のアルケニルオキシ基、炭素数２０以上５０以下のアルケニルオキシ基などをあげることができる。
【0062】
また、本発明において、擬似固相保護基としては、例えば、特許公開公報第２０２０－０１１９３２号に記載のアルコキシフェニル誘導体等をあげることができる。
【0063】
上記一般式（１）において、上記Ｌ１は、例えば、一般式（３）で表される基であることが好ましい。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（１）との結合部を表す。）
【化11】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（１）との結合部を表す。）
【0064】
上記一般式（３）において、Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。上記Ｒは、炭素数１３～３０のアルキル基であってもよく、炭素数１５～２０のアルキル基であってもよく、なかでも炭素数１８のアルキル基が好適なものとしてあげることができる。また、上記Ｒは、複数存在する場合にはそれぞれ独立して、直鎖アルキル基であっても、分岐アルキル基であってもよいが、直鎖アルキル基であることが好ましい。また、上記Ｒが炭素原子数１０から４０のアルキル基であることにより、本発明の液相合成法によるキャッピング剤の合成が容易となるとともに、溶解度や分離能の向上作用も得ることができる。
【0065】
上記一般式（３）において、ｍは、１～５の整数を表す。ｍが２以上の場合には、複数存在するＲＯは同一、または、異なっていてもよい。ｍが、２～４の整数であることが好ましく、ｍが、３であることがより好ましい。また、上記ＲＯ基は、フェニル基に直接結合しているカルボニル基（Ｃ＝Ｏ基）を１位とした場合、３位、４位、または、５位に結合していることが好ましく、ｍ＝３の場合には、３位、４位、または、５位に結合していることが好ましい。また、上記ｍの値を上記範囲内で調整することにより、本発明のキャッピング剤の合成過程における、非極性溶媒に対する溶解能を調整することができる。
【0066】
上記一般式（３）において、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、または、ＮＲＮを表す。なかでも、Ｘが、Ｏであることが好ましい。
【0067】
上記一般式（３）において、ｎは、１～４の整数を表す。なかでも、ｎが、１、又は、２であることが好ましい。
【0068】
上記一般式（３）において、ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。上記ＲＮとして、たとえば、メチル基、エチル基、１－プロピル基、１－メチル－１－エチル基、１－ブチル基、１－メチル－１－プロピル基、１，１－ジメチル－１－エチル基、２－メチル－１－プロピル基、１－ペンチル基、２－ペンチル基等をあげることができる。
【0069】
また、本発明の化合物又はその塩は、一般式（２）で表される化合物又はその塩（化合物（２））である。
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在するＲ２は、同一又は異なる。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。
Ｖは、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、擬似固相保護基を表す。）
【化12】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在するＲ２は、同一又は異なる。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。
Ｖは、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、擬似固相保護基を表す。）
【0070】
上記一般式（２）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｂａｓｅ、Ｖ、Ｙ、及びＬ１は、それぞれ、上記一般式（１）の場合と同様である。
【0071】
上記一般式（２）において、上記Ｌ１は、例えば、一般式（４）で表される基であることが好ましい。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（２）との結合部を表す。）
【化13】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（２）との結合部を表す。）
【0072】
上記一般式（４）において、Ｒ、ｍ１、Ｘ、ｎ１、ＲＮ、及び＊は、それぞれ、上記一般式（３）の場合と同様である。
【0073】
また、上記Ｌ１として上記一般式（３）で表される基、及び、上記一般式（４）で表される基は、下記一般式（８）で表される基であることが好ましい。
であってもよい。
（式中、
Ｒ１０、Ｒ２０、および、Ｒ３０は、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、または、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（１）又は（２）との結合部を表す。）
【化14】
（式中、
Ｒ１０、Ｒ２０、および、Ｒ３０は、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、または、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、上記一般式（１）又は（２）との結合部を表す。）
【0074】
上記一般式（８）において、Ｒ１０、Ｒ２０、および、Ｒ３０は、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。上記Ｒ１０、Ｒ２０、および、Ｒ３０は、炭素数１３～３０のアルキル基であってもよく、炭素数１５～２０のアルキル基であってもよく、なかでも炭素数１８のアルキル基が好適なものとしてあげることができる。また、上記Ｒ１０、Ｒ２０、および、Ｒ３０は、それぞれ独立して、直鎖アルキル基であっても、分岐アルキル基であってもよいが、すべて直鎖アルキル基であることが好ましい。
【0075】
上記一般式（８）において、Ｘ、ｎ１、および、ＲＮは、上記一般式（１）の場合と同様である。
【0076】
〔化合物又はその塩の製造方法〕
本発明の化合物又はその塩の製造方法は、
一般式（５）で表される化合物又はその塩
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
（式中、
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
と、一般式（６）で表される化合物又はその塩
（式中、
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
（式中、
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
とを、触媒を用いて反応させる工程（１）を含む。
本発明の化合物又はその塩の製造方法は、
一般式（５）で表される化合物又はその塩
【化15】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
【化16】
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
と、一般式（６）で表される化合物又はその塩
【化17】
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
【化18】
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
とを、触媒を用いて反応させる工程（１）を含む。
【0077】
上記工程（１）において、一般式（５）で表される化合物又はその塩
（式中、
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
（式中、
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
が用いられる。
【化19】
Ｒ１は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ１同士で環を形成するメチレンジオキシ基、エチリデン－１，１－ジオキシ基、イソプロピリデンジオキシキ基を表す。複数存在するＲ１は、同一又は異なる。
Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
【化20】
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
が用いられる。
【0078】
一般式（５）において、Ｒ１は、上記一般式（１）の場合と同様である。
【0079】
一般式（５）において、Ｌ２は、水素原子、又は、以下のＬ（２－１）、Ｌ（２－２）、若しくは、Ｌ（２－３）を表す。
（式中、
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
【化21】
Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。））
【0080】
一般式Ｌ（２－１）、Ｌ（２－２）、及び、Ｌ（２－３）において、Ｒ４は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ４は、同一又は異なる。
【0081】
Ｒ４としてのアルコキシル基は、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロピロキシ基、イソプロピロキシ基、ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ－ブトキシ基、ｔ－ブトキシ基等をあげることができる。
【0082】
一般式Ｌ（２－１）、Ｌ（２－２）、及び、Ｌ（２－３）において、Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
【0083】
Ｍ＋としての無機カチオンは、例えば、公知の金属カチオン、アンモニウムカチオン等をあげることができる。これらは単独で使用してもよく、また２種以上を混合して使用してもよい。
【0084】
上記金属カチオンとしては、例えば、１価、２価、又は、３価の金属カチオンをあげることができる。上記金属カチオンは、例えば、リチウムカチオン、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、ルビジウムカチオン、セシウムカチオン、マグネシウムカチオン、カルシウムカチオン、ストロンチウムカチオン、バリウムカチオン、アルミニウムカチオン、鉄カチオン、亜鉛カチオン、マンガンカチオン等をあげることができる。これらは単独で使用してもよく、また２種以上を混合して使用してもよい。
【0085】
Ｍ＋としての有機カチオンは、例えば、公知の有機アンモニウムカチオン等をあげることができる。これらは単独で使用してもよく、また２種以上を混合して使用してもよい。
【0086】
上記有機アンモニウム塩としては、例えば、メチルアンモニウムカチオン、エチルアンモニウムカチオン、プロピルアンモニウムカチオン、イソプロピルアンモニウムカチオン、ブチルアンモニウムカチオン、ジメチルアンモニウムカチオン、ジエチルアンモニウムカチオン、ジプロピルアンモニウムカチオン、ジイソプロピルアンモニウムカチオン、ジブチルアンモニウムカチオン、トリメチルアンモニウムカチオン、トリエチルアンモニウムカチオン、ジイソプロピルエチルアンモニウムカチオン、テトラメチルアンモニウムカチオン、テトラエチルアンモニウムカチオン、テトラプロピルアンモニウムカチオン、テトラブチルアンモニウムカチオン、ジアザビシクロウンデセニウムカチオン、ピリジニウムカチオン、メチルピリジニウムカチオン、ジメチルピリジニウムカチオン、トリメチルピリジニウムカチオン、アニリニウムカチオン、フェネチルアンモニウムカチオン、ピロリジニウムカチオン、ピペリジニウムカチオン、モルホリニウムカチオン等をあげることができる。これらは単独で使用してもよく、また２種以上を混合して使用してもよい。
【0087】
一般式Ｌ（２－１）、Ｌ（２－２）、及び、Ｌ（２－３）において、Ｌ３は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。
【0088】
Ｌ３としての脱離基は、例えば、有機リン化合物合成に用いられる公知の脱離基を用いることができる。
【0089】
上記脱離基としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、イミダゾール基、アセチルオキシ基、トリフルオロアセチルオキシ基、ピバロイルオキシ基、ヒドロカルボニルオキシ基、メタンスルホニルオキシ基、ｐ－トルエンスルホニルオキシ基等をあげることができる。
【0090】
上記工程（１）において、一般式（６）で表される化合物又はその塩
（式中、
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
（式中、
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
が用いられる。
【化22】
Ｒ２は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基を表す。複数存在する場合、Ｒ２は、同一又は異なる。
ｎは、０～３０の整数を表す。
Ｒ３は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数１～４のアルコキシル基、又は、メトキシエトキシ（ＭＯＥ）基、又は、Ｒ２と結合してＬＮＡ（Ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）環を形成する。ＬＮＡ環は、炭素数１～４のアルキル基、水酸基、又は、炭素数１～４のアルコキシル基で置換されていてもよい。
Ｂａｓｅは、修飾されていてもよい核酸塩基を表す。ｎが１以上の場合には、複数存在するＢａｓｅは、同一又は異なっていてもよい。
Ｖは、それぞれ独立して、ヒドロキシル基、スルファニル基、炭素数１～６のアルコキシ基、炭素数１～６のジアルキルアミノ基、アリルオキシ基、２－シアノエトキシ基、２－ニトロエトキシ基、又は４位窒素原子が保護基で保護され、さらに置換されていてもよいピペラジノ基を表す。
Ｙは、それぞれ独立して、Ｏ又はＳを表す。
Ｌ１は、炭素数１０以上３００以下のアルキルオキシ基及び／又は炭素数１０以上３００以下のアルケニルオキシ基で置換されたフェニル基を有する擬似固相保護基を表す。
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
【化23】
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
が用いられる。
【0091】
上記一般式（６）において、Ｒ２、ｎ、Ｒ３、Ｂａｓｅ、Ｖ、Ｙ、及び、Ｌ１は、上記一般式（１）の場合と同様である。
【0092】
Ｌ４は、水素原子、又は、以下のＬ（４－１）、Ｌ（４－２）、若しくは、Ｌ（４－３）を表す。
（式中、
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
【化24】
Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、Ｓ－Ｍ＋、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。）
ただし、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。）
【0093】
上記一般式Ｌ（４－１）、Ｌ（４－２）、又は、Ｌ（４－３）において、Ｒ５は、ヒドロキシル基、アルコキシル基、スルファニル基、又は、Ｏ－Ｍ＋を表す。複数存在する場合、Ｒ５は、同一又は異なる。
【0094】
Ｒ５としてのアルコキシル基は、Ｒ４としてのアルコキシル基の場合と同様である。
【0095】
上記一般式Ｌ（４－１）、Ｌ（４－２）、又は、Ｌ（４－３）において、Ｍ＋は、無機カチオン、又は、有機カチオンを表す。
【0096】
上記一般式Ｌ（４－１）、Ｌ（４－２）、又は、Ｌ（４－３）におけるＭ＋は、上記一般式Ｌ（２－１）、Ｌ（２－２）、及び、Ｌ（２－３）におけるＭ＋の場合と同様である。
【0097】
上記一般式Ｌ（４－１）、Ｌ（４－２）、又は、Ｌ（４－３）において、Ｌ５は、ヒドロキシル基又は脱離基を表す。
【0098】
Ｌ５における脱離基は、上記Ｌ３としての脱離基の場合と同様である。
【0099】
また、上記工程（１）において、Ｌ２が水素原子の場合、Ｌ４はＬ（４－３）である。Ｌ２がＬ（２－１）の場合、Ｌ４はＬ（４－２）である。Ｌ２がＬ（２－２）の場合、Ｌ４はＬ（４－１）である。Ｌ２がＬ（２－３）の場合、Ｌ４は水素原子である。
【0100】
また、上記工程（１）において、触媒を用いて反応させる工程（１）を含む。
【0101】
上記触媒は、例えば、塩化亜鉛、塩化マンガン、塩化カルシウム等をあげることができる。
【0102】
上記工程（１）において、上記Ｌ１は、一般式（７）で表される基であることが好ましい。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、下記一般式（６）との結合部を表す。）
【化25】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍ１は、１～５の整数を表す。ｍ１が２以上の場合には、複数存在するＲＯは、同一又は異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、又は、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。
＊は、下記一般式（６）との結合部を表す。）
【0103】
上記一般式（７）において、Ｒ、ｍ１、Ｘ、ｎ１、及び、ＲＮは、上記一般式（３）の場合と同様である。
【0104】
また、一般式（６）で表される化合物又はその塩におけるＬ１は、例えば、下記一般式（８）で表される化合物（化合物（９））を用いて、例えば縮合反応を用いて得ることが可能である。
（式中、
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍは、１～５の整数を表す。ｍが２以上の場合には、複数存在するＲＯは同一、または、異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、または、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。）
【化26】
Ｒは、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
ｍは、１～５の整数を表す。ｍが２以上の場合には、複数存在するＲＯは同一、または、異なっていてもよい。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、または、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。）
【0105】
上記一般式（９）において、Ｒ、ｍ、Ｘ、ｎ１，及び、ＲＮは、上記一般式（３）の場合と同様である。
【0106】
また、上記一般式（９）で表される化合物又はその塩は、下記一般式（１０）で表される基であることが好ましい。
であってもよい。
（式中、
Ｒ１０、Ｒ２０、および、Ｒ３０は、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、または、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。）
【化27】
（式中、
Ｒ１０、Ｒ２０、および、Ｒ３０は、それぞれ独立して、置換されていてもよい、炭素数１０～４０のアルキル基を表す。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、または、ＮＲＮを表す。
ｎ１は、１～４の整数を表す。
ＲＮは、置換されていてもよい、炭素数１～６のアルキル基を表す。）
【0107】
上記一般式（１０）において、Ｒ１０、Ｒ２０、Ｒ３０、及び、ｎ１は、上記一般式（８）と同様である。
【0108】
上記工程（１）は、本発明の作用効果を損なわない限り、その他、市販の原料を用いて公知の方法を組み合わせてもよい。
【0109】
また、本発明において、上記工程（１）以降に、水を加えて沈殿物を生成させ、ろ過により分離させる工程（２）を含むことができる。
【0110】
上記工程（２）において、ろ過による分離は、公知の手法を適宜用いることができる。
【0111】
上記工程（２）は、本発明の作用効果を損なわない限り、その他、市販の原料を用いて公知の方法を組み合わせてもよい。
【0112】
また、本発明において、上記Ｂａｓｅは、保護基で修飾されているものであることが好ましい。
【0113】
上記Ｂａｓｅの保護基は、上記一般式（１）におけるＢａｓｅの場合と同様である。
【0114】
〔キャッピング剤前駆体〕
本発明のキャッピング剤前駆体は、上記化合物又はその塩を含む。
本発明のキャッピング剤前駆体は、上記化合物又はその塩を含む。
【0115】
本発明において、「キャッピング剤前駆体」とは、適切な操作を加えることでキャッピング剤に変換等して、キャッピング剤を得うるものをいう。上記適切な操作とは、適宜、公知の合成反応や、公知の操作・処理であってもよい。
【0116】
上記キャッピング剤は、例えば、上記化合物又はその塩において、擬似固相保護基を水素原子へ変換し、Ｂａｓｅとリン酸の保護基を除去する等によって行うことができ得る。より具体的には、例えば、化合物（１）、（２）において、－ＯＬ１基を、－ＯＨに変換することで、キャッピング剤を得ることができ得る。
【0117】
〔キャッピング剤合成用試薬〕
本発明のキャッピング剤合成用試薬は、上記化合物又はその塩を含む。
本発明のキャッピング剤合成用試薬は、上記化合物又はその塩を含む。
【0118】
本発明において、「キャッピング剤合成用試薬」とは、それを用いて適切な操作を加えることでキャッピング剤を合成可能にするものをいう。上記適切な操作とは、適宜、公知の合成反応や、公知の操作・処理であってもよい。
【0119】
上記キャッピング剤合成用試薬は、例えば、上記キャッピング剤合成用試薬において、擬似固相保護基を水素原子へ変換し、Ｂａｓｅとリン酸の保護基を除去する等によって行うことができ得る。より具体的には、例えば、化合物（１）、（２）において、－ＯＬ１基を、－ＯＨに変換することで、キャッピング剤を得ることができ得る。
【0120】
〔キャッピング剤の製造方法〕
本発明のキャッピング剤の製造方法は、
上記化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、を含む。
本発明のキャッピング剤の製造方法は、
上記化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、を含む。
【0121】
上記工程（３）は、上記化合物又はその塩に対して、適宜公知の手法を用いることができる。上記工程（３）は、例えば、上記キャッピング剤合成用試薬において、液相合成用担体由来部を水素原子へ変換する等によって行うことができ得る。より具体的には、例えば、化合物（１）、（２）において、－ＯＬ１基を、－ＯＨに変換することで、キャッピング剤を得ることができ得る。
【0122】
上記工程（３）は、本発明の作用効果を損なわない限り、その他、市販の原料を用いて公知の方法を組み合わせてもよい。
【0123】
また、上記工程（３）は、上記化合物又はその塩を脱保護させる工程（４）を含むことが好ましい。
【0124】
上記化合物又はその塩の合成と組み合わせる場合には、例えば、上記工程（２）以降に、さらに脱保護させる工程（４）を含むことができる。
【0125】
上記工程（４）において、脱保護は、当該脱離基に応じて、公知の手法を適宜用いることができる。
【0126】
上記工程（４）は、塩基性下で行われることが好ましい。
【0127】
上記工程（４）において用いられる脱保護試薬は、アミン、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物、アルカリ金属炭酸塩、アルカリ土類金属炭酸塩、アミンの炭酸塩，アルカリ金属水素炭酸塩、アルカリ土類金属水素炭酸塩，及び、アミン水素炭酸塩からなる群より選ばれる１つ以上を含むことが好ましい。これらは単独で使用してもよく、また２種以上を混合して使用してもよい。
【0128】
また、本発明において、上記Ｂａｓｅは、保護基で修飾されているものであることが好ましい。
【0129】
上記Ｂａｓｅの保護基は、上記一般式（１）におけるＢａｓｅの場合と同様である。
【0130】
上記工程（４）は、本発明の作用効果を損なわない限り、その他、市販の原料を用いて公知の方法を組み合わせてもよい。
【0131】
〔ｍＲＮＡの製造方法〕
本発明のｍＲＮＡの製造方法は、
上記化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、及び、
上記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、
を含む。
本発明のｍＲＮＡの製造方法は、
上記化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、及び、
上記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、
を含む。
【0132】
上記工程（３）は、上記キャッピング剤の製造方法の場合と同様である。
【0133】
上記工程（５）は、本発明の作用効果を損なわない限り、適宜、公知の手法を用いることができる。
【0134】
上記工程（５）は、本発明の作用効果を損なわない限り、その他、市販の原料を用いて公知の方法を組み合わせてもよい。
【0135】
〔ｍＲＮＡワクチンの製造方法〕
本発明のｍＲＮＡワクチンの製造方法は、
上記化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、
上記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、及び、
上記工程（５）で得られたｍＲＮＡを用いてｍＲＮＡワクチンを製造する工程（６）、
を含む。
本発明のｍＲＮＡワクチンの製造方法は、
上記化合物又はその塩を用いてキャッピング剤を合成する工程（３）、
上記工程（３）で得られたキャッピング剤を用いてｍＲＮＡを製造する工程（５）、及び、
上記工程（５）で得られたｍＲＮＡを用いてｍＲＮＡワクチンを製造する工程（６）、
を含む。
【0136】
上記工程（３）、（５）は、上記ｍＲＮＡの製造方法の場合と同様である。
【0137】
上記工程（６）は、本発明の作用効果を損なわない限り、適宜、公知の手法を用いることできる。
【0138】
上記工程（６）は、本発明の作用効果を損なわない限り、その他、市販の原料等を用いて公知の方法を組み合わせてもよい。
【0139】
上記工程（６）は、例えば、上記工程（５）で得られたｍＲＮＡを新規または公知の溶媒や添加剤等とともに調整する方法等で行うことができ得る。
【0140】
上記で得られたｍＲＮＡワクチンは、ヒトや動物に接種する等により、その体内（細胞内）で上記ｍＲＮＡを翻訳させること等により、抗原となるポリペプチド等を合成し、その結果、当該抗原に対する免疫性を獲得することができ得る。
【0141】
上記翻訳は、上記ｍＲＮＡが細胞の核の外にあるリボソームで解読され、特定の
1677733495957_0
鎖（
1677733495957_1
ともよぶ）が作られることをいう。
1677733495957_0
鎖（
1677733495957_1
ともよぶ）が作られることをいう。
【実施例0142】
以下、本発明の構成と効果を具体的に示す実施例等について説明する。以下、実施例における濃縮操作は特に指定のない限り、減圧下で行った。また、特に明記のない配合量については、質量部を基本とする。
【0143】
なお、実施例等における評価項目は下記のようにして測定を行った。
【0144】
＜ＴＯＦ／ＭＳスペクトルの測定＞
ＴＯＦ／ＭＳスペクトルの測定は、飛行時間型質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ社製、製品名ＬＣＴ－ＰｒｅｍｉｅｒＸＥを用いて行った。
ＴＯＦ／ＭＳスペクトルの測定は、飛行時間型質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ社製、製品名ＬＣＴ－ＰｒｅｍｉｅｒＸＥを用いて行った。
【0145】
〔実施例１〕
７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵの合成
７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵの合成
【0146】
〔実施例１－１〕
（Ａ）２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）ウリジン－３’－イルの合成
（Ａ）２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）ウリジン－３’－イルの合成
【化28】
【0147】
２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸（１５．００ｇ，１５．２２ｍｍｏｌ）、５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）ウリジン（１１．０６ｇ，１６．７４ｍｍｏｌ）、１－メチルイミダゾール（６．８７ｇ，８３．７０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）懸濁液にＣＯＭＵ（（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩）（１３．０４ｇ，３０．４４ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温で４時間撹拌した。反応液にアセトニトリル（７５０ｍＬ）を滴下することで析出した固体をろ過した。固体をアセトニトリル－ＴＨＦ混合溶媒で洗浄したのち、５０℃で減圧乾燥し、表題の化合物（２４．１３ｇ，９７％）を得た。
【0148】
ＴＯＦ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ９９Ｈ１５８Ｎ２Ｏ１４ＳｉＮａ［Ｍ＋Ｎａ］＋ １６５０．０３，ｆｏｕｎｄ １６５０．１４．
【0149】
〔実施例１－２〕
（Ｂ）２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）ウリジン－３’－イルの合成
（Ｂ）２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）ウリジン－３’－イルの合成
【化29】
【0150】
２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）ウリジン－３’－イル（５．００ｇ，３．０７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（５０ｍＬ）にトリエチルアミン三フッ化水素酸塩（３．４６ｇ，２１．４９ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温で２６時間撹拌した。反応液をアセトニトリル（３５０ｍＬ）に滴下することで析出した固体をろ過した。固体をアセトニトリル－ＴＨＦ混合溶媒とアセトニトリルで洗浄したのち、５０℃で減圧乾燥し、表題の化合物（４．５７ｇ，９８％）を得た。
【0151】
ＴＯＦ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ９３Ｈ１４４Ｎ２Ｏ１４Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋ １５３６．０５，ｆｏｕｎｄ １５３６．０２．
【0152】
〔実施例１－３〕
（Ｃ）２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸２’－Ｏ－アセチルウリジン－３’－イルの合成
（Ｃ）２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸２’－Ｏ－アセチルウリジン－３’－イルの合成
【化30】
【0153】
窒素下で、２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）ウリジン－３’－イル（４．００ｇ，２．６４ｍｍｏｌ）、１－メチルイミダゾール（０．４２ｇ，５．２８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（４８ｍＬ）に無水酢酸（０．３０ｇ，２．９１ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温で１時間撹拌した。次に、メタノール（０．０３４ｇ，１．０６ｍｍｏｌ）、ピロール（１．５５ｇ，２３．０４ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（１．２６ｇ，１１．０４ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温１時間撹拌した。反応液にピリジン（０．８７ｇ，１１．０４ｍｍｏｌ）を加え、アセトニトリル（２８０ｍＬ）に滴下することで析出した固体をろ過した。固体をアセトニトリル－ジクロロメタン混合溶媒で洗浄したのち、５０℃で減圧乾燥し、表題の化合物（３．２９ｇ，９９％）を白色固体として得た。
【0154】
ＴＯＦ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ７４Ｈ１２９Ｎ２Ｏ１３［Ｍ＋Ｈ］＋ １２５３．９５，ｆｏｕｎｄ １２３．９８．
【0155】
〔実施例１－４〕
（Ｄ）ＤＭＴ－２ｍｅｒ－Ｔａｇの合成
（Ｄ）ＤＭＴ－２ｍｅｒ－Ｔａｇの合成
【化31】
【0156】
窒素下で、２－（（３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）オキシ）酢酸２’－Ｏ－アセチルウリジン－３’－イル（３．００ｇ，２．３９ｍｍｏｌ）、Ｎ６－ベンゾイル－５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－メチルアデノシン３’－シアノエチル－ホスホロアミダイト（４．２５ｇ，４．７９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン懸濁液（３０ｍＬ）に５－ベンジルチオ－１Ｈ－テトラゾール（０．９０ｇ，４．６７ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温で３時間撹拌した。次に、クメンヒドロペルオキシド（含量８２％）（１．３７ｇ，７．１８ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温で０．５時間撹拌した。反応液にアセトニトリル（２１０ｍＬ）を滴下することで析出した固体をろ過した。固体をアセトニトリル－ジクロロメタン混合溶媒で洗浄したのち、５０℃で減圧乾燥し、表題の化合物（４．８２ｇ，９８％）を白色固体として得た。
【0157】
〔実施例１－５〕
（Ｅ）ＨＯ－２ｍｅｒ－Ｔａｇの合成
（Ｅ）ＨＯ－２ｍｅｒ－Ｔａｇの合成
【化32】
【0158】
窒素下で、ＤＭＴ－２ｍｅｒ－Ｔａｇ（４．７０ｇ，２．２９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（４７ｍＬ）にピロール（１．５１ｇ，２２．５６ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（０．６４ｇ，５．６４ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温で１時間撹拌した。反応液にピリジン（０．４５ｇ，５．６４ｍｍｏｌ）を加えたのち、アセトニトリル（３２９ｍＬ）を滴下することで析出した固体をろ過した。固体をアセトニトリル－ジクロロメタン混合溶媒とアセトニトリルで洗浄したのち、５０℃で減圧乾燥し、表題の化合物（３．８７ｇ，９７％）を白色固体として得た。
【0159】
ＴＯＦ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１９Ｈ１５０Ｎ８Ｏ２０［Ｍ＋Ｈ］＋ １７５４．０７，ｆｏｕｎｄ １７５３．９７．
【0160】
〔実施例１－６〕
（Ｆ）Ｂｕ－ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇの合成
（Ｆ）Ｂｕ－ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇの合成
【化33】
【0161】
アルゴン下で、ＨＯ－２ｍｅｒ－Ｔａｇ（０．６５ｇ，０．３７ｍｍｏｌ）、１－メチルイミダゾリウムクロリド（０．１３ｇ，１．１１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（９．８ｍＬ）にモレキュラーシーブス３Ａ（０．１３ｇ）を加えたのち、室温で１時間撹拌した。次に、反応液を－５℃に冷却したのち、ジ（ｔｅｒｔ－ブチル）Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルホスホロアミダイト（０．３１ｇ，１．１１ｍｍｏｌ）を加え、－５℃で２時間撹拌した．反応液にクメンヒドロペルオキシド（含量８２％）（０．２８ｇ，１．４８ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温で１時間撹拌した。反応液を不溶物ろ過したのち、アセトニトリル（５２ｍＬ）を滴下することで析出した固体をろ過した。固体をアセトニトリル－ジクロロメタン混合溶媒で洗浄したのち、４０℃で減圧乾燥し、表題の化合物（０．７１ｇ，９７％）を淡黄色固体として得た。
【0162】
ＴＯＦ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１０３Ｈ１６７Ｎ８Ｏ２３Ｐ２［Ｍ；Ｈ］＋ １９４６．１６，ｆｏｕｎｄ １９４５．８８．
【0163】
〔実施例１－７〕
（Ｇ）Ｂｕ－ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇ（ｄｅＣＥ）の合成
（Ｇ）Ｂｕ－ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇ（ｄｅＣＥ）の合成
【化34】
【0164】
窒素下で、Ｂｕ－ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇ（０．６１ｇ，０．３１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（７．３ｍＬ）にジエチルアミン（１．８ｍＬ）を加えたのち、室温で２時間撹拌した。アセトニトリル（４３ｍＬ）を滴下することで析出した固体をろ過した。固体をアセトニトリル－ジクロロメタン混合溶媒で洗浄したのち、４０℃で減圧乾燥し、表題の化合物（０．５６ｇ，９３％）を淡黄色固体として得た。
【0165】
ＴＯＦ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ１００Ｈ１６４Ｎ７Ｏ２３Ｐ２［Ｍ＋Ｈ］＋ １８９３．１４，ｆｏｕｎｄ １８９２．７７．
【0166】
〔実施例１－８〕
（Ｈ）ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇの合成
（Ｈ）ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇの合成
【化35】
【0167】
窒素下で、Ｂｕ－ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇ（ｄｅＣＥ）（０．４０ｇ，０．２１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（４．０ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（０．３６ｇ，３．１７ｍｍｏｌ）を加えたのち、室温で４時間撹拌した。次に、ジクロロメタン（４．０ｍＬ）を加えたのち、トリエチルアミン（０．３３ｇ，３．２７ｍｍｏｌ）を滴下した。反応液にアセトニトリル（１６ｍＬ）を滴下することで析出した固体をろ過した。固体をアセトニトリル－ジクロロメタン混合溶媒で洗浄したのち、４０℃で減圧乾燥し、表題の化合物（０．３７ｇ，９９％）を白色固体として得た。
【0168】
ＴＯＦ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ９２Ｈ１４８Ｎ７Ｏ２３Ｐ２［Ｍ＋Ｈ］＋ １７８１．０１，ｆｏｕｎｄ １７８０．８２．
【0169】
〔実施例１－９〕
（Ｉ）７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵ－Ｔａｇの合成
（Ｉ）７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵ－Ｔａｇの合成
【化36】
【0170】
アルゴン下で、ｐ－２ｍｅｒ－Ｔａｇ（１．１５ｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、Ｉｍ－ｐｐ７ｍＧ（０．７０ｇ，１．３２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ懸濁液（１７．３ｍＬ）を３５℃に昇温し、塩化亜鉛（０．６６ｇ，４．８３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ懸濁液（１７．３ｍＬ）を加えたのち、３５℃で２時間撹拌した。反応液を５℃まで冷却し、３８ｍMエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム水溶液（１７２．５ｍＬ）を滴下することで析出した固体をろ過した。固体を精製水とアセトニトリルで洗浄したのち、２５℃で減圧乾燥し、表題の化合物（１．８６ｇ，１２９．５％）を白色固体として得た。
【0171】
〔実施例１－１０〕
（Ｊ）７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵの合成
（Ｊ）７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵの合成
【化37】
【0172】
アルゴン下で、７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵ－Ｔａｇ（０．２０ｇ，０．０９２ｍｍｏｌ）のメタノール懸濁液（１８ｍＬ）を５℃に冷却し、４０％メチルアミン－メタノール溶液（２ｍＬ，１９．６ｍｍｏｌ）を加えたのち、５℃で１６時間撹拌した。反応液に酢酸水溶液（１３ｍＬ，１９．６ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で液量１０ｍＬ以下になるまで濃縮した。濃縮液中の不溶物をろ過し、１Ｍ炭酸水素アンモニウム水溶液（１．８４ｍＬ）と精製水で全量が９２ｍＬとなるように希釈した。
【0173】
希釈液の陰イオン交換カラム精製によって得られた溶出液を濃縮し、目的物である７ｍＧｐｐｐＡｍｐＵ水溶液を得た。
ＨＰＬＣ（ｃｙｔｉｖａＨｉＰｒｅｐＤＥＡＥ ＦＦ（１６Φ×１００ｍｍ），流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ，移動相：精製水、１ｍｏｌ／Ｌアンモニア－塩化アンモニウム緩衝液（ｐＨ７．０）ｇｒａｄｉｅｎｔ：０-１５ｍｉｎ（２ｔｏ９８％アセトニトリル），Ｒｔ＝３．９ｍｉｎ（９８．６％）
ＨＰＬＣ（ｃｙｔｉｖａＨｉＰｒｅｐＤＥＡＥ ＦＦ（１６Φ×１００ｍｍ），流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ，移動相：精製水、１ｍｏｌ／Ｌアンモニア－塩化アンモニウム緩衝液（ｐＨ７．０）ｇｒａｄｉｅｎｔ：０-１５ｍｉｎ（２ｔｏ９８％アセトニトリル），Ｒｔ＝３．９ｍｉｎ（９８．６％）
【0174】
ＴＯＦ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ４３Ｎ１２Ｏ２５Ｐ４［Ｍ＋Ｈ］＋ １１０７．１４，ｆｏｕｎｄ １１０７．１２．
【産業上の利用可能性】
【0175】
本発明の化合物又はその塩は、例えば、キャッピング剤の製造等に利用可能である。また、本発明のキャッピング剤の製造方法は、キャッピング剤を簡便に得ることができる。これらはいずれも、様々なキャッピング剤の合成に非常に有用な化合物および手法であり、ひいてはｍＲＮＡワクチンやｍＲＮＡ医薬の開発等に有用である。