特開 2024-135131 領域選定支援方法、領域選定支援装置およびプログラム

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024135131

(43)【公開日】2024-10-04

(54)【発明の名称】領域選定支援方法、領域選定支援装置およびプログラム

(51)【国際特許分類】

   G06T 1/00 20060101AFI20240927BHJP

   G01N 33/48 20060101ALI20240927BHJP

   G01N 33/53 20060101ALI20240927BHJP

【ＦＩ】

G06T1/00 295

G06T1/00 510

G01N33/48 P

G01N33/53 Y

【審査請求】未請求

【請求項の数】14

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2023045668

(22)【出願日】2023-03-22

(71)【出願人】

【識別番号】000207551

【氏名又は名称】株式会社ＳＣＲＥＥＮホールディングス

(71)【出願人】

【識別番号】509349141

【氏名又は名称】京都府公立大学法人

(74)【代理人】

【識別番号】100110847

【弁理士】

【氏名又は名称】松阪 正弘

(74)【代理人】

【識別番号】100136526

【弁理士】

【氏名又は名称】田中 勉

(74)【代理人】

【識別番号】100136755

【弁理士】

【氏名又は名称】井田 正道

(72)【発明者】

【氏名】荻 寛志

(72)【発明者】

【氏名】柴田 沙耶

(72)【発明者】

【氏名】古田 智靖

(72)【発明者】

【氏名】辻川 敬裕

【テーマコード（参考）】

2G045

5B057

【Ｆターム（参考）】

2G045AA25

2G045CB01

2G045DA36

2G045FB03

2G045FB07

5B057AA10

5B057CA01

5B057CB01

5B057CE17

5B057DA08

5B057DA16

5B057DC30

(57)【要約】

【課題】染色画像中の解析に適した領域を容易に選定する。
【解決手段】領域選定支援方法は、免疫染色法による標本の染色画像を複数の分割領域に分割する工程（ステップＳ１１）と、当該複数の分割領域のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域における染色細胞の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる工程（ステップＳ１２）と、当該複数の分割領域のそれぞれをステップＳ１２にて割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像を生成する工程（ステップＳ１３）と、選定支援画像を画面上に表示する工程（ステップＳ１４）と、を備える。これにより、オペレータは、染色画像中の解析に適した領域を解析領域として容易に選定することができる。
【選択図】図５

【特許請求の範囲】

【請求項1】

免疫染色法による染色画像における解析領域の選定を支援する領域選定支援方法であって、
ａ）免疫染色法による標本の染色画像を複数の分割領域に分割する工程と、
ｂ）前記複数の分割領域のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域における染色細胞の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる工程と、
ｃ）前記複数の分割領域のそれぞれを前記ｂ）工程にて割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像を生成する工程と、
ｄ）前記選定支援画像を画面上に表示する工程と、
を備える領域選定支援方法。

【請求項2】

請求項１に記載の領域選定支援方法であって、
前記ｂ）工程では、前記分割領域における染色細胞の集簇性は、前記分割領域における染色強度に基づいて求められる領域選定支援方法。

【請求項3】

請求項２に記載の領域選定支援方法であって、
前記分割領域における染色細胞の集簇性の算出は、
ｅ）前記分割領域を構成するマトリクス状に配置された複数の小領域のそれぞれの染色強度を得る工程と、
ｆ）前記複数の小領域の染色強度のうち最大値を前記分割領域の代表値として画像縮小を行う工程と、
を備える領域選定支援方法。

【請求項4】

請求項１に記載の領域選定支援方法であって、
前記ｂ）工程では、前記分割領域における染色細胞の集簇性は、前記分割領域における陽性細胞の数に基づいて求められる領域選定支援方法。

【請求項5】

請求項１ないし４のいずれか１つに記載の領域選定支援方法であって、
前記ｄ）工程において、前記染色画像、または、免疫染色法による前記標本の他の染色画像から前記選定支援画像と同様の方法にて生成された他の選定支援画像が、前記選定支援画像と位置合わせされた状態で前記画面上に並べて表示される領域選定支援方法。

【請求項6】

請求項５に記載の領域選定支援方法であって、
前記選定支援画像の表示倍率と、前記染色画像または前記他の選定支援画像の表示倍率とが、連動して変更可能である領域選定支援方法。

【請求項7】

請求項５に記載の領域選定支援方法であって、
前記選定支援画像の前記標本上における表示範囲と、前記染色画像または前記他の選定支援画像の前記標本上における表示範囲とが、連動して変更可能である領域選定支援方法。

【請求項8】

請求項５に記載の領域選定支援方法であって、
前記選定支援画像上に表示されて画像上の位置を示す位置指示部と、前記染色画像または前記他の選定支援画像上に表示されて画像上の位置を示す位置指示部とが、連動して移動可能である領域選定支援方法。

【請求項9】

請求項５に記載の領域選定支援方法であって、
前記ｄ）工程において、前記選定支援画像の前記標本に対する縮尺と、前記染色画像または前記他の選定支援画像の前記標本に対する縮尺とは同じである領域選定支援方法。

【請求項10】

請求項１ないし４のいずれか１つに記載の領域選定支援方法であって、
ｇ）前記ｂ）工程よりも前に、免疫染色法による前記標本の他の染色画像を、前記ａ）工程における分割態様と同様の態様にて複数の分割領域に分割する工程をさらに備え、
前記ｂ）工程における表示色の割り当ては、前記分割領域における前記染色画像および前記他の染色画像のそれぞれの染色細胞の集簇性に基づいて行われる領域選定支援方法。

【請求項11】

請求項１ないし４のいずれか１つに記載の領域選定支援方法であって、
免疫染色法による前記標本の他の染色画像を閾値処理することにより陽性領域と陰性領域とを示す二値画像が生成され、前記ｄ）工程において、前記選定支援画像が前記陽性領域または前記陰性領域によってマスクされる領域選定支援方法。

【請求項12】

請求項１ないし４のいずれか１つに記載の領域選定支援方法であって、
免疫染色法による前記標本の他の染色画像を閾値処理することにより陽性領域または陰性領域の境界線が取得され、前記ｄ）工程において、前記選定支援画像に前記境界線が重ねて表示される領域選定支援方法。

【請求項13】

免疫染色法による染色画像における解析領域の選定を支援する領域選定支援装置であって、
免疫染色法による標本の染色画像を複数の分割領域に分割する画像分割部と、
前記複数の分割領域のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域における染色細胞の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる表示色割当部と、
前記複数の分割領域のそれぞれを前記表示色割当部により割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像を生成する選定支援画像生成部と、
前記選定支援画像を表示する画面と、
を備える領域選定支援装置。

【請求項14】

免疫染色法による染色画像における解析領域の選定を支援するプログラムであって、
コンピュータによって前記プログラムが実行されることにより、
ａ）免疫染色法による標本の染色画像を複数の分割領域に分割する工程と、
ｂ）前記複数の分割領域のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域における染色細胞の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる工程と、
ｃ）前記複数の分割領域のそれぞれを前記ｂ）工程にて割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像を生成する工程と、
ｄ）前記選定支援画像を画面上に表示する工程と、
が行われるプログラム。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、免疫染色法による染色画像における解析領域の選定を支援する技術に関する。

【背景技術】

【0002】

近年、医学研究や生物学研究において、疾患メカニズムの解明や生体メカニズムの解明、薬剤作用機序解明等を目的として、組織標本や細胞標本等の生体由来標本のシングルセル単位の解析が実施されている。例えば、免疫染色解析においては、タンパク質等の生体由来物質を染色し、染色状態を計測することで定量的・定性的な解析が行われている。

【0003】

特許文献１では、１つの細胞の標本画像を複数の区画に分割し、各区画におけるバイオマーカーの発現量および分布に基づいて、癌等の疾病の悪性度をスコア化する技術が提案されている。また、特許文献２では、ＣＴやＭＲＩ等で実施される動的検査において、病変内部の造影剤の継時的変化を計測して得られた血流特性から、当該血流特性を示す画素を診断画像上で特定する技術が提案されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】国際公開第２０１５／１９０２２５号

【特許文献2】特開２０１７－１５３８５２号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

ところで、組織標本の解析において、標本全体をシングルセル単位で解析しようとすると解析に要する時間が多大となる。このため、標本の一部である部分領域を抽出して、当該部分領域に対する解析を行うことが考えられる。当該部分領域の抽出にあたっては、標本が有する特徴を好適に表現している解析に適した領域（すなわち、解析対象である各種細胞が適切に含まれている領域）を適切に選定する必要がある。

【0006】

しかしながら、組織標本の画像をオペレータがそのまま目視しても、染色された細胞（以下、「染色細胞」とも呼ぶ。）の数が少ない場合、組織全体が表示される程度の表示倍率では染色細胞を視認することができないおそれがある。また、染色細胞以外のノイズ（例えば、組織や細胞の構造に起因する濃い黒または白の画素）によって、染色細胞の視認性が低くなるおそれもある。したがって、組織標本の画像をそのまま目視したオペレータが、解析に適した領域を当該画像から選定することは容易ではない。

【0007】

本発明は、上記課題に鑑みなされたものであり、染色画像中の解析に適した領域を容易に選定することを目的としている。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明の態様１は、免疫染色法による染色画像における解析領域の選定を支援する領域選定支援方法であって、ａ）免疫染色法による標本の染色画像を複数の分割領域に分割する工程と、ｂ）前記複数の分割領域のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域における染色細胞の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる工程と、ｃ）前記複数の分割領域のそれぞれを前記ｂ）工程にて割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像を生成する工程と、ｄ）前記選定支援画像を画面上に表示する工程と、を備える。

【0009】

本発明の態様２は、態様１の領域選定支援方法であって、前記ｂ）工程では、前記分割領域における染色細胞の集簇性は、前記分割領域における染色強度に基づいて求められる。

【0010】

本発明の態様３は、態様２の領域選定支援方法であって、前記分割領域における染色細胞の集簇性の算出は、ｅ）前記分割領域を構成するマトリクス状に配置された複数の小領域のそれぞれの染色強度を得る工程と、ｆ）前記複数の小領域の染色強度のうち最大値を前記分割領域の代表値として画像縮小を行う工程と、を備える。

【0011】

本発明の態様４は、態様１の領域選定支援方法であって、前記ｂ）工程では、前記分割領域における染色細胞の集簇性は、前記分割領域における陽性細胞の数に基づいて求められる。

【0012】

本発明の態様５は、態様１ないし４のいずれか１つの領域選定支援方法であって、前記ｄ）工程において、前記染色画像、または、免疫染色法による前記標本の他の染色画像から前記選定支援画像と同様の方法にて生成された他の選定支援画像が、前記選定支援画像と位置合わせされた状態で前記画面上に並べて表示される。

【0013】

本発明の態様６は、態様５の領域選定支援方法であって、前記選定支援画像の表示倍率と、前記染色画像または前記他の選定支援画像の表示倍率とが、連動して変更可能である。

【0014】

本発明の態様７は、態様５（態様５または６、であってもよい。）の領域選定支援方法であって、前記選定支援画像の前記標本上における表示範囲と、前記染色画像または前記他の選定支援画像の前記標本上における表示範囲とが、連動して変更可能である。

【0015】

本発明の態様８は、態様５（態様５ないし７のいずれか１つ、であってもよい。）の領域選定支援方法であって、前記選定支援画像上に表示されて画像上の位置を示す位置指示部と、前記染色画像または前記他の選定支援画像上に表示されて画像上の位置を示す位置指示部とが、連動して移動可能である。

【0016】

本発明の態様９は、態様５（態様５ないし８のいずれか１つ、であってもよい。）の領域選定支援方法であって、前記ｄ）工程において、前記選定支援画像の前記標本に対する縮尺と、前記染色画像または前記他の選定支援画像の前記標本に対する縮尺とは同じである。

【0017】

本発明の態様１０は、態様１ないし４のいずれか１つ（態様１ないし９のいずれか１つ、であってもよい。）の領域選定支援方法であって、ｇ）前記ｂ）工程よりも前に、免疫染色法による前記標本の他の染色画像を、前記ａ）工程における分割態様と同様の態様にて複数の分割領域に分割する工程をさらに備え、前記ｂ）工程における表示色の割り当ては、前記分割領域における前記染色画像および前記他の染色画像のそれぞれの染色細胞の集簇性に基づいて行われる。

【0018】

本発明の態様１１は、態様１ないし４のいずれか１つ（態様１ないし１０のいずれか１つ、であってもよい。）の領域選定支援方法であって、免疫染色法による前記標本の他の染色画像を閾値処理することにより陽性領域と陰性領域とを示す二値画像が生成され、前記ｄ）工程において、前記選定支援画像が前記陽性領域または前記陰性領域によってマスクされる。

【0019】

本発明の態様１２は、態様１ないし４のいずれか１つ（態様１ないし１１のいずれか１つ、であってもよい。）の領域選定支援方法であって、免疫染色法による前記標本の他の染色画像を閾値処理することにより陽性領域または陰性領域の境界線が取得され、前記ｄ）工程において、前記選定支援画像に前記境界線が重ねて表示される。

【0020】

本発明の態様１３は、免疫染色法による染色画像における解析領域の選定を支援する領域選定支援装置であって、免疫染色法による標本の染色画像を複数の分割領域に分割する画像分割部と、前記複数の分割領域のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域における染色細胞の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる表示色割当部と、前記複数の分割領域のそれぞれを前記表示色割当部により割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像を生成する選定支援画像生成部と、前記選定支援画像を表示する画面と、を備える。

【0021】

本発明の態様１４は、免疫染色法による染色画像における解析領域の選定を支援するプログラムであって、コンピュータによって前記プログラムが実行されることにより、ａ）免疫染色法による標本の染色画像を複数の分割領域に分割する工程と、ｂ）前記複数の分割領域のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域における染色細胞の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる工程と、ｃ）前記複数の分割領域のそれぞれを前記ｂ）工程にて割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像を生成する工程と、ｄ）前記選定支援画像を画面上に表示する工程と、が行われる。

【発明の効果】

【0022】

本発明によれば、染色画像中の解析に適した領域を容易に選定することができる。

【図面の簡単な説明】

【0023】

【図1】一の実施の形態に係る画像表示装置の構成を示す図である。

【図2】画像表示装置の機能構成を示すブロック図である。

【図3】染色画像を示す図である。

【図4】選定支援画像を示す図である。

【図5】選定支援画像の表示の流れを示す図である。

【図6】選定支援画像の表示の流れの一部を示す図である。

【図7】選定支援画像の表示の流れの一部を示す図である。

【図8】画面表示の一例を示す図である。

【図9】画面表示の一例を示す図である。

【図10】画面表示の一例を示す図である。

【図11】画面表示の一例を示す図である。

【図12】画面表示の一例を示す図である。

【図13】画面表示の一例を示す図である。

【図14】画面表示の一例を示す図である。

【図15】画面表示の一例を示す図である。

【図16】画面表示の一例を示す図である。

【図17】画面表示の一例を示す図である。

【図18】画面表示の一例を示す図である。

【図19】画面表示の一例を示す図である。

【図20】選定支援画像の表示の流れの一部を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0024】

図１は、本発明の一の実施の形態に係る領域選定支援装置１として機能するコンピュータの構成を示す図である。領域選定支援装置１は、免疫染色法より得られた生体由来標本の染色画像において、解析に適した領域の選定支援に利用される。

【0025】

図１は、領域選定支援装置１として機能するコンピュータの構成を示す図である。当該コンピュータは、ＣＰＵ５１と、ＲＯＭ５２と、ＲＡＭ５３と、固定ディスク５４と、ディスプレイ５５と、入力部５６と、読取装置５７と、通信部５８と、ＧＰＵ５９と、バス５０とを含む一般的なコンピュータシステムの構成を有する。ＣＰＵ５１は、各種演算処理を行う。ＧＰＵ５９は、画像処理に関する各種演算処理を行う。ＲＯＭ５２は、基本プログラムを記憶する。ＲＡＭ５３は、各種情報を記憶する。固定ディスク５４は、情報記憶を行う。ディスプレイ５５は、画像等の各種情報の表示を行う表示部である。

【0026】

入力部５６は、操作者からの入力を受け付けるキーボード５６ａおよびマウス５６ｂを備える。読取装置５７は、光ディスク、磁気ディスク、光磁気ディスク、メモリカード等のコンピュータ読み取り可能な記録媒体５７１から情報の読み取りを行う。ディスプレイ５５、キーボード５６ａ、マウス５６ｂおよび読取装置５７は、インターフェイスＩ／Ｆを介してバス５０に接続される。通信部５８は、領域選定支援装置１の外部の装置等との間で信号を送受信する。バス５０は、ＣＰＵ５１、ＧＰＵ５９、ＲＯＭ５２、ＲＡＭ５３、固定ディスク５４、ディスプレイ５５、入力部５６、読取装置５７および通信部５８を接続する信号回路である。

【0027】

領域選定支援装置１では、事前に読取装置５７を介して記録媒体５７１からプログラム５７２が読み出されて固定ディスク５４に記憶されている。プログラム５７２はネットワークを介して固定ディスク５４に記憶されてもよい。ＣＰＵ５１およびＧＰＵ５９は、プログラム５７２に従ってＲＡＭ５３や固定ディスク５４を利用しつつ演算処理を実行する。ＣＰＵ５１およびＧＰＵ５９は、領域選定支援装置１において演算部として機能する。ＣＰＵ５１およびＧＰＵ５９以外に演算部として機能する他の構成が採用されてもよい。

【0028】

図２は、上述のコンピュータがプログラム５７２に従って演算処理等を実行することにより実現される領域選定支援装置１の機能構成を示すブロック図である。これらの機能構成には、記憶部５０１と、画像分割部５０２と、表示色割当部５０３と、選定支援画像生成部５０４と、表示制御部５０５と、解析用画像取得部５０６と、マスク生成部５０７と、境界線取得部５０８とが含まれる。これらの機能の全部または一部は、専用の電気回路により実現されてもよい。また、複数のコンピュータによりこれらの機能が実現されてもよい。

【0029】

図２に示す機能構成のうち、記憶部５０１は、主としてＲＡＭ５３および固定ディスク５４により実現される。また、画像分割部５０２、表示色割当部５０３、選定支援画像生成部５０４、表示制御部５０５、解析用画像取得部５０６、マスク生成部５０７および境界線取得部５０８は、ＣＰＵ５１、ＧＰＵ５９、ＲＯＭ５２、ＲＡＭ５３、固定ディスク５４およびこれらの周辺構成により実現される。

【0030】

記憶部５０１は、生体由来標本（以下、単に「標本」とも呼ぶ。）の染色画像を予め記憶する。図３は、記憶部５０１に記憶されている標本９０の染色画像９１の一例を示す図である。染色画像９１は、免疫染色法により染色された状態の標本９０を撮像して得られた撮像画像である。染色画像９１は、例えば、標本９０を一の染色方法にて染色して撮像した単染色画像である。当該染色方法は、例えば、ＣＤ分類の一つであるＣＤ４５タンパク質を検出するＣＤ４５抗体を用いた染色方法である。この場合、染色画像９１では、標本９０に含まれる多数の細胞のうち、ＣＤ４５抗体によって検出された細胞９６が単色にて染色されて示される。なお、標本９０の染色は、抗体を用いた様々な染色方法による染色であってもよく、抗体を用いない様々な染色方法による染色であってもよい。

【0031】

図２に示す記憶部５０１は、また、後述する選定支援画像にて使用する表示色群を予め記憶する。当該表示色群は、誘目性が異なる複数の色（すなわち、表示色）を含む。「誘目性」とは、画像を目視するオペレータ等の注意を引きつける度合いを意味する。例えば、暖色は寒色よりも誘目性が高く、明度が高くなると誘目性も高くなる。また、上述の「複数の色」とは、濃淡が異なる同じ色（すなわち、単色）のみで構成されるものではなく、色相が異なる複数種類の色を含むものを意味する。表示色群は、例えば、誘目性が高い順に「黄色」、「緑色」、「水色」および「紺色」を表示色として含む。本実施の形態では、上述のように、染色画像９１は単染色画像（すなわち、単色にて表示される画像）であるため、複数の色を含む表示色群は、染色画像９１を構成する色群（すなわち、単色）よりも識別性が高い。

【0032】

画像分割部５０２は、染色画像９１を複数の分割領域９５に分割する。図３に示す例では、染色画像９１は、図中の縦方向および横方向にマトリクス状に配列される複数の分割領域９５に分割される。各分割領域９５の形状は、例えば正方形である。各分割領域９５は、例えば、染色画像９１を構成する各画素よりも大きい。換言すれば、各分割領域９５は複数の画素を含む。また、各分割領域９５は、例えば、染色画像９１に含まれる各細胞９６よりも大きい。なお、各分割領域９５は、正方形以外の様々な形状（例えば、長方形）を有していてもよい。また、染色画像９１では、標本９０以外の領域には分割領域９５は生成されなくてもよい。実際の染色画像９１では、複数の分割領域９５の境界を示す線は含まれていないため、染色画像９１がディスプレイ５５（図１参照）上に表示される場合、当該境界は表示されない。

【0033】

表示色割当部５０３は、複数の分割領域９５のそれぞれにおける染色された細胞９６（以下、「染色細胞９６」とも呼ぶ。）の集簇性を求める。また、表示色割当部５０３は、各分割領域９５における染色細胞９６の集簇性に基づいて、各分割領域９５に対して上述の表示色群から一の表示色を割り当てる。分割領域９５に割り当てられる表示色の誘目性は、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性が高くなるに従って高くなる。なお、表示色割当部５０３では、標本９０以外の領域には、背景色である「黒色」が割り当てられる。

【0034】

選定支援画像生成部５０４は、染色画像９１に対応する選定支援画像を生成する。図４は、選定支援画像８１の一例を示す図である。選定支援画像８１は、染色画像９１の各分割領域９５が、表示色割当部５０３によって割り当てられた一の表示色にて塗り潰された画像である。

【0035】

例えば、染色細胞９６（図３参照）の集簇性が最も高い範囲に含まれる分割領域９５は「黄色」に塗り潰され、選定支援画像８１における第１領域８１１を構成する。図４では、図示の都合上、２つの第１領域８１１には平行斜線を付さず、白色の領域として示す。染色細胞９６の集簇性が２番目に高い範囲に含まれる分割領域９５は「緑色」に塗り潰され、選定支援画像８１における第２領域８１２を構成する。図４では、第２領域８１２に比較的間隔が大きい平行斜線を付す。染色細胞９６の集簇性が３番目に高い範囲に含まれる分割領域９５は「水色」に塗り潰され、選定支援画像８１における第３領域８１３を構成する。図４では、第３領域８１３に第２領域８１２よりも間隔が小さい平行斜線を付す。染色細胞９６の集簇性が最も低い範囲に含まれる分割領域９５は「紺色」に塗り潰され、選定支援画像８１における第４領域８１４を構成する。図４では、第４領域８１４に最も間隔が小さい平行斜線を付す。図４に示す例では、表示色の誘目性が低くなるに従って平行斜線の間隔を小さくしている。

【0036】

図２に示す表示制御部５０５は、上述の選定支援画像８１をディスプレイ５５（図１参照）の画面上に表示させる。表示制御部５０５は、当該画面上に表示された選定支援画像８１の表示倍率を変更することもできる。また、選定支援画像８１の標本９０上における表示範囲を変更することもできる。

【0037】

解析用画像取得部５０６は、ディスプレイ５５に表示された選定支援画像８１を利用して設定された染色画像９１上の領域を、詳細解析用の画像として染色画像９１から切り出して記憶部５０１に記憶させる。

【0038】

次に、領域選定支援装置１による選定支援画像８１の表示の流れについて、図５ないし図７を参照しつつ説明する。まず、画像分割部５０２（図２参照）により、染色画像９１が、図３に示すように複数の分割領域９５に分割される（ステップＳ１１）。続いて、表示色割当部５０３（図２参照）により、複数の分割領域９５のそれぞれについて、染色細胞９６の集簇性が求められる。そして、各分割領域９５に対して、染色細胞９６の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように、一の表示色が割り当てられる（ステップＳ１２）。

【0039】

ステップＳ１２では、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性は様々な方法により求められてよい。例えば、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性は、当該分割領域９５における陽性細胞の数に基づいて求められる。具体的には、まず、染色画像９１における染色細胞９６の位置を特定する（図６：ステップＳ２１）。染色細胞９６の位置の特定には、ディープラーニングによる画像セグメンテーション等の公知技術を用いることができる。続いて、特定された各染色細胞９６について、所定の解析手法に関する特徴量（例えば、細胞領域内の平均輝度等）を算出する（ステップＳ２２）。

【0040】

次に、各染色細胞９６が陽性であるか否かを、各染色細胞９６の上記特徴量と所定の閾値とを比較することにより判定する（ステップＳ２３）。そして、各分割領域９５において、陽性と判定された染色細胞９６（すなわち、陽性細胞）の数を求める（ステップＳ２４）。これにより、上記解析手法に合致した陽性細胞数を得ることができる。その後、各分割領域９５について、陽性細胞の数が多くなる（すなわち、集簇性が高くなる）に従って誘目性が高くなるように、上述の表示色群から一の表示色を割り当てる（ステップＳ２５）。

【0041】

また、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性は、当該分割領域９５における染色強度に基づいて求められてもよい。分割領域９５の平均的な染色強度の値は、分割領域９５に複数の染色細胞９６が含まれる場合、分割領域９５における染色細胞９６の密度に依存する。したがって、分割領域９５における染色強度が高くなると染色細胞９６の集簇性も高くなり、分割領域９５における染色強度が低くなると染色細胞９６の集簇性も低くなる。

【0042】

図７は、染色強度に基づく染色細胞９６の集簇性の算出例を示す図である。図７に示す例では、まず、染色画像９１に対してノイズ除去処理（例えば、ぼかし処理）を行った後、色分解処理を行って染色細胞９６の染色に対応する１つの色を抽出する。続いて、分割領域９５を、マトリクス状に配置された複数の小領域（例えば、２×２の４つの小領域）に分割し、抽出された当該１つの色について各小領域（いわゆる、カーネル）の染色強度を求める（ステップＳ３１）。次に、最大値プーリングを行い、上記複数の小領域の染色強度のうち、最大値（すなわち、最も大きい染色強度）を分割領域９５の染色強度の代表値として画像縮小を行う（ステップＳ３２）。その後、各分割領域９５について、染色強度が大きくなる（すなわち、集簇性が高くなる）に従って誘目性が高くなるように、上述の表示色群から一の表示色を割り当てる（ステップＳ３３）。

【0043】

ステップＳ３１～Ｓ３３に示す方法では、染色画像９１中の個々の染色細胞９６を特定する必要がないため、ステップＳ２１～Ｓ２５に示す方法に比べて、各分割領域９５への表示色の割り当てに要する処理量を低減することができるとともに、低倍率で取得された染色画像９１を用いた処理が可能となる。例えば、ステップＳ３１～Ｓ３３に示す方法によれば、１画素の大きさが細胞の大きさと同じ程度となる解像度（例えば、画素ピッチが１０μｍ等）の染色画像９１を用いた場合であっても、表示色の割り当てを好適に行って染色細胞の集簇性が高い領域（すなわち、解析に適した領域）の誘目性を向上させることができる。また、ステップＳ３１～Ｓ３３に示す方法では、染色画像９１中に含まれる染色細胞９６の数が少ない場合であっても、表示色の割り当てを好適に行うことができる。

【0044】

ステップＳ１２が終了すると、選定支援画像生成部５０４（図２参照）により、複数の分割領域９５のそれぞれが、ステップＳ１２にて割り当てられた表示色にて塗り潰された状態の画像である選定支援画像８１（図４参照）が生成される（ステップＳ１３）。そして、表示制御部５０５（図２参照）により、選定支援画像８１がディスプレイ５５の画面上に表示される（ステップＳ１４）。

【0045】

領域選定支援装置１では、ディスプレイ５５上の選定支援画像８１の表示倍率、および、選定支援画像８１の標本９０上における表示範囲（すなわち、標本９０のうち選定支援画像８１として画面上に表示される範囲）が変更可能である。オペレータは、選定支援画像８１の表示態様を必要に応じて様々に変更しつつ、選定支援画像８１上にて解析用の領域（以下、「解析領域」とも呼ぶ。）を指定する（ステップＳ１５）。解析用画像取得部５０６は、当該解析領域に対応する染色画像９１上の領域を切り出し、詳細解析用の画像として記憶部５０１へと送る（ステップＳ１６）。

【0046】

表示制御部５０５は、選定支援画像８１のみをディスプレイ５５の画面上に表示させることもでき、選定支援画像８１と共に他の様々な画像をディスプレイ５５の画面上に表示させることもできる。例えば、ステップＳ１４では、図８に示すように、選定支援画像８１と染色画像９１とが、ディスプレイ５５の画面５５１上に互いに重ならないように並べて表示されてもよい。図８に示す例では、選定支援画像８１と染色画像９１とは、互いに位置合わせされた状態で同縮尺にて表示される。すなわち、選定支援画像８１および染色画像９１は、選定支援画像８１中における標本９０の大きさおよび位置と、染色画像９１中における標本９０の大きさおよび位置とが略同じになるように、必要に応じて補正されて表示される。これにより、オペレータは、選定支援画像８１を染色画像９１とを容易に見比べることができる。

【0047】

領域選定支援装置１では、画面５５１上における選定支援画像８１の表示倍率と、染色画像９１の表示倍率とが、連動して変更可能であることが好ましい。また、選定支援画像８１の標本９０上における表示範囲と、染色画像９１の標本９０上における表示範囲（すなわち、標本９０のうち染色画像９１として画面５５１上に表示される範囲）とが、連動して変更可能であることが好ましい。

【0048】

例えば、オペレータが、選定支援画像８１上に図示省略のマウスポインタを位置させ、マウスホイール等を操作して選定支援画像８１の表示倍率を変更すると、図９に示すように、画面５５１上の染色画像９１の表示倍率も、選定支援画像８１の表示倍率と同じになるように連動して変更される。選定支援画像８１の表示倍率が初期状態よりも大きくされると、画面５５１上には、選定支援画像８１の一部および染色画像９１の一部のみが表示される。オペレータが染色画像９１の表示倍率を変更した場合も同様に、選定支援画像８１の表示倍率が連動して変更される。

【0049】

これにより、オペレータは、選定支援画像８１および染色画像９１のそれぞれにて表示倍率の調整を行うことなく、選定支援画像８１と染色画像９１とを同一の表示倍率にて見比べることができる。

【0050】

また、オペレータは、図９に示すように選定支援画像８１および染色画像９１が初期状態（図８参照）よりも拡大された状態で、選定支援画像８１上にマウスポインタを位置させ、マウスボタン等を操作して選定支援画像８１の標本９０（図８参照）上における表示範囲を変更する（すなわち、選定支援画像８１の表示範囲の標本９０上における位置を変更する）。これに伴い、図１０に示すように、画面５５１上の染色画像９１の標本９０上における表示範囲も、選定支援画像８１の表示範囲と同じになるように連動して変更される。オペレータが染色画像９１の標本９０上における表示範囲を変更した場合も同様に、選定支援画像８１の標本９０上における表示範囲が連動して変更される。

【0051】

これにより、オペレータは、選定支援画像８１および染色画像９１のうち一方の画像上において注目した領域について、他方の画像上において改めて当該領域を探すことなく、すぐに当該領域を観察することができる。

【0052】

領域選定支援装置１では、図８ないし図１０に示すように、選定支援画像８１および染色画像９１上に、各画像上の位置を示す位置指示部５５３がそれぞれ表示されてもよい。位置指示部５５３は、例えば、マウス５６ｂ等によって変位可能な十字マークや矩形枠等である。選定支援画像８１および染色画像９１上にそれぞれ表示される２つの位置指示部５５３は、マウス５６ｂ等の移動に伴って、連動して移動可能であることが好ましい。これにより、オペレータは、選定支援画像８１および染色画像９１において、位置指示部５５３が示す略同じ位置に容易に注目することができる。

【0053】

オペレータは、選定支援画像８１および染色画像９１の表示態様を必要に応じて様々に変更しつつ、選定支援画像８１上にて解析領域を指定する。具体的には、オペレータは、図１１に例示する解析用ウインドウ８７を選定支援画像８１上の所望の位置にマウス５６ｂ等を用いて設定する。領域選定支援装置１では、選定支援画像８１における解析用ウインドウ８７の設定に連動して、染色画像９１上にも解析用ウインドウ９７が表示される。解析用ウインドウ９７の大きさおよび染色画像９１上の標本９０に対する相対位置は、解析用ウインドウ８７の大きさおよび選定支援画像８１上の標本９０に対する相対位置と同じである。図１１に示す例では、解析用ウインドウ８７の形状は矩形であり、その大きさは変更可能である。解析用ウインドウ８７の大きさや位置が変更される際には、解析用ウインドウ９７の大きさや位置も連動して変更される。

【0054】

解析用ウインドウ８７，９７の設定（すなわち、解析領域の指定）が終了すると、解析用画像取得部５０６（図２参照）が、染色画像９１の解析用ウインドウ９７に含まれる領域を切り出し、詳細解析用の画像として記憶部５０１へと送る。これにより、オペレータは、染色細胞９６の集簇性の分布を選定支援画像８１において容易に確認しつつ、染色画像９１中の解析に適した領域を当該分布に基づいて選定することができる。例えば、オペレータは、染色細胞９６の集簇性が高い領域を選定支援画像８１において確認しつつ、当該領域に対応する染色画像９１上の領域から、解析に適した領域を選定することができる。

【0055】

なお、オペレータは、選定支援画像８１上で操作を行って解析用ウインドウ８７を設定する代わりに、染色画像９１上に直接的に解析用ウインドウ９７を設定してもよい。この場合、解析用ウインドウ９７に連動する解析用ウインドウ８７が選定支援画像８１上に表示されてもよい。また、解析用ウインドウ８７，９７の設定は、図９および図１０に示すように、選定支援画像８１および染色画像９１の表示倍率や表示範囲が初期状態から変更された画面５５１において行われてもよい。

【0056】

ステップＳ１４では、図１２に示すように、染色画像９１とは異なる他の染色画像９２、および、当該他の染色画像９２から選定支援画像８１と同様の方法にて生成された他の選定支援画像８２が、染色画像９１および選定支援画像８１と互いに重ならないように並べて画面５５１上に表示されてもよい。

【0057】

染色画像９２は、染色画像９１と同一の標本９０を、染色画像９１とは異なる染色方法（例えば、ＣＤ２０抗体を用いた免疫染色法）にて染色した単染色画像である。染色画像９１および染色画像９２は、例えば、１つの標本９０に対して、第１の抗体を用いた染色および撮像、標本９０の脱色、並びに、第２の抗体を用いた染色および撮像、を順次行うことにより取得される。あるいは、１つの標本９０に対して、複数種類の抗体をまとめて用いた染色を行い、撮像により得られた多色画像を各抗体に対応する色毎に色分解することにより、複数種類の単染色画像が得られてもよい。

【0058】

選定支援画像８２では、選定支援画像８１と同様に、染色細胞９６の集簇性が最も高い範囲に含まれる分割領域は「黄色」に塗り潰され、選定支援画像８２における第１領域８２１を構成する。図１２では、図示の都合上、第１領域８２１には平行斜線を付さず、白色の領域として示す。染色細胞９６の集簇性が２番目に高い範囲に含まれる分割領域は「緑色」に塗り潰され、選定支援画像８２における第２領域８２２を構成する。図１２では、第２領域８２２に比較的間隔が大きい平行斜線を付す。染色細胞９６の集簇性が３番目に高い範囲に含まれる分割領域は「水色」に塗り潰され、選定支援画像８２における第３領域８２３を構成する。図１２では、第３領域８２３に第２領域８２２よりも間隔が小さい平行斜線を付す。染色細胞９６の集簇性が最も低い範囲に含まれる分割領域は「紺色」に塗り潰され、選定支援画像８２における第４領域８２４を構成する。図１２では、第４領域８２４に最も間隔が小さい平行斜線を付す。図１２に示す例では、表示色の誘目性が低くなるに従って平行斜線の間隔を小さくしている。

【0059】

図１２に示す例では、選定支援画像８１、染色画像９１、選定支援画像８２および染色画像９２は、互いに位置合わせされた状態、かつ、標本９０に対する縮尺が同じ状態にて表示される。すなわち、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２は、選定支援画像８１中における標本９０の大きさおよび位置、染色画像９１中における標本９０の大きさおよび位置、選定支援画像８２中における標本９０の大きさおよび位置、並びに、染色画像９２中における標本９０の大きさおよび位置が略同じになるように、必要に応じて補正されて表示される。これにより、オペレータは、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２を容易に見比べることができる。

【0060】

選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２の位置合わせは、例えば、公知のイメージレジストレーション技術によって自動的に行われてもよく、オペレータが手動により行ってもよい。手動で位置合わせが行われる際には、まず、オペレータがマウス５６ｂ（図１参照）等を操作して、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２のそれぞれに基準点を設定する。当該基準点は、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２のそれぞれにおいて、標本９０上の同じ位置と思われる点に設定される。そして、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２の各画像において、当該基準点が所定の位置（例えば、各画像の中心）に位置するように、画像の表示範囲が調整される。

【0061】

領域選定支援装置１では、画面５５１上における選定支援画像８１および染色画像９１の表示倍率と、選定支援画像８２および染色画像９２の表示倍率とが、連動して変更可能であることが好ましい。また、選定支援画像８１および染色画像９１の標本９０上における表示範囲と、選定支援画像８２および染色画像９２の標本９０上における表示範囲（すなわち、標本９０のうち選定支援画像８２および染色画像９２として画面５５１上に表示される範囲）とが、連動して変更可能であることが好ましい。

【0062】

例えば、オペレータが、選定支援画像８１上に図示省略のマウスポインタを位置させ、マウスホイール等を操作して選定支援画像８１の表示倍率を変更すると、図１３に示すように、画面５５１上の選定支援画像８２および染色画像９１，９２の表示倍率も、選定支援画像８１の表示倍率と同じになるように連動して変更される。選定支援画像８１の表示倍率が初期状態よりも大きくされると、画面５５１上には、選定支援画像８１，８２の一部および染色画像９１，９２の一部のみが表示される。オペレータが選定支援画像８２、染色画像９１または染色画像９２の表示倍率を変更した場合も同様に、他の３つの画像の表示倍率が連動して変更される。

【0063】

これにより、オペレータは、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２のそれぞれにて表示倍率の調整を行うことなく、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２を同一の表示倍率にて見比べることができる。

【0064】

また、オペレータは、図１３に示すように選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２が初期状態（図１２参照）よりも拡大された状態で、選定支援画像８１上にマウスポインタを位置させ、マウスボタン等を操作して選定支援画像８１の標本９０（図１２参照）上における表示範囲を変更する。これに伴い、図１４に示すように、画面５５１上の選定支援画像８２および染色画像９１，９２の標本９０上における表示範囲も、選定支援画像８１の表示範囲と同じになるように連動して変更される。オペレータが選定支援画像８２、染色画像９１または染色画像９２の標本９０上における表示範囲を変更した場合も同様に、他の３つの画像の標本９０上における表示範囲が連動して変更される。

【0065】

これにより、オペレータは、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２のうちいずれか１つの画像上において注目した領域について、他の３つの画像上において改めて当該領域を探すことなく、すぐに当該領域を観察することができる。

【0066】

領域選定支援装置１では、図１２ないし図１４に示すように、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２上に、各画像上の位置を示す位置指示部５５３がそれぞれ表示されてもよい。位置指示部５５３は、例えば、マウス５６ｂ等によって変位可能な十字マークや矩形枠等である。選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２上にそれぞれ表示される４つの位置指示部５５３は、マウス５６ｂ等の移動に伴って、連動して移動可能であることが好ましい。これにより、オペレータは、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２において、位置指示部５５３が示す略同じ位置に容易に注目することができる。

【0067】

オペレータは、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２の表示態様を必要に応じて様々に変更しつつ、選定支援画像８１または選定支援画像８２上にて解析領域を指定する。例えば、オペレータは、図１５に例示する解析用ウインドウ８７を選定支援画像８１上の所望の位置にマウス５６ｂ等を用いて設定することにより、解析領域を指定する（ステップＳ１５）。領域選定支援装置１では、選定支援画像８１における解析用ウインドウ８７の設定に連動して、選定支援画像８２上に解析用ウインドウ８８が表示され、染色画像９１，９２上に解析用ウインドウ９７，９８が表示される。

【0068】

解析用ウインドウ８８の大きさおよび選定支援画像８２上の標本９０に対する相対位置、解析用ウインドウ９７の大きさおよび染色画像９１上の標本９０に対する相対位置、および、解析用ウインドウ９８の大きさおよび染色画像９２上の標本９０に対する相対位置は、解析用ウインドウ８７の大きさおよび選定支援画像８１上の標本９０に対する相対位置と同じである。図１５に示す例では、解析用ウインドウ８７の形状は矩形であり、その大きさは変更可能である。解析用ウインドウ８７の大きさや位置が変更される際には、解析用ウインドウ８８，９７，９８の大きさや位置も連動して変更される。

【0069】

解析用ウインドウ８７，８８，９７，９８の設定（すなわち、解析領域の指定）が終了すると、解析用画像取得部５０６（図２参照）が、染色画像９１の解析用ウインドウ９７に含まれる領域、および／または、染色画像９２の解析用ウインドウ９８に含まれる領域を切り出し、詳細解析用の画像として記憶部５０１へと送る（ステップＳ１６）。これにより、オペレータは、染色細胞９６の集簇性の分布を選定支援画像８１，８２において容易に確認しつつ、染色画像９１，９２中の解析に適した領域を当該分布に基づいて選定することができる。例えば、オペレータは、選定支援画像８１および選定支援画像８２の双方において染色細胞９６の集簇性が最も高い領域（上記例では、「黄色」にて表示されている領域）を画面５５１上にて確認しつつ、当該領域に対応する染色画像９１，９２上の領域から、解析に適した領域を選定することができる。

【0070】

なお、オペレータは、選定支援画像８１上で操作を行って解析用ウインドウ８７を設定する代わりに、選定支援画像８２上に解析用ウインドウ８８を設定してもよい。この場合も、解析用ウインドウ８８に連動する解析用ウインドウ８７，９７，９８が、選定支援画像８１、染色画像９１および染色画像９２上にそれぞれ表示される。

【0071】

また、オペレータは、選定支援画像８１上で操作を行って解析用ウインドウ８７を設定する代わりに、染色画像９１上に解析用ウインドウ９７を直接的に設定してもよく、染色画像９２上に解析用ウインドウ９８を直接的に設定してもよい。これらの場合、解析用ウインドウ９７または解析用ウインドウ９８に連動する解析用ウインドウ８７，８８が選定支援画像８１，８２上に表示されてもよい。また、解析用ウインドウ８７，８８，９７，９８の設定は、図１３および図１４に示すように、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２の表示倍率や表示範囲が初期状態から変更された画面５５１において行われてもよい。

【0072】

上述のように、染色画像９１，９２の双方に基づいて解析領域を指定する場合、ステップＳ１４では、必ずしも選定支援画像８１と選定支援画像８２とが画面５５１上に並べて表示される必要はない。例えば、図１６および図１７に示すように、マスク生成部５０７（図２参照）が染色画像９２（図１２参照）に基づいて生成したマスク８５ａ，８５ｂが、選定支援画像８１上に重ねて表示されることにより、選定支援画像８１の一部のみが視認可能な状態で表示されてもよい。マスク生成部５０７は、例えば、染色画像９１と位置合わせされた染色画像９２を閾値処理することにより、陽性領域と陰性領域とを示す二値画像を生成する。そして、陽性領域および陰性領域のうち一方が透過領域とされ、他方がマスク領域（すなわち、不透過領域）とされることにより、マスク８５ａ，８５ｂが生成される。

【0073】

図１６に例示されるマスク８５ａでは、染色画像９２において染色細胞９６の集簇性が最も高い範囲に含まれる領域（すなわち、図１２に示す第１領域８２１に対応する領域）のみが陽性領域とされ、当該陽性領域が透過領域である開口８５１ａとされる。また、開口８５１ａ以外の領域（すなわち、陰性領域）は、背景色である「黒色」にて塗り潰されてマスク領域とされる。

【0074】

図１６に示す例では、染色画像９２に基づいて生成されたマスク８５ａが、染色画像９１に基づいて生成された選定支援画像８１上に重ねて表示される。選定支援画像８１では、染色画像９２の陽性領域と重なる領域のみが視認可能とされるため、オペレータは、視認可能な当該領域において解析領域を指定することにより、染色画像９２における陽性領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。例えば、開口８５１ａ内において選定支援画像８１の第１領域８１１上に解析領域を指定することにより、染色画像９２における陽性領域に限定した上で、染色画像９１において染色細胞９６の集簇性が高い領域を解析領域として選定することができる。

【0075】

図１７に例示されるマスク８５ｂでは、染色画像９２において染色細胞９６の集簇性が最も高い範囲に含まれる領域、および、当該集簇性が２番目に高い範囲に含まれる領域（すなわち、図１２に示す第１領域８２１および第２領域８２２に対応する領域）が陽性領域とされ、当該陽性領域が透過領域である開口８５１ｂとされる。また、開口８５１ｂ以外の領域（すなわち、陰性領域）は、背景色である「黒色」にて塗り潰されてマスク領域とされる。

【0076】

図１７に示す例では、染色画像９２に基づいて生成されたマスク８５ｂが、染色画像９１に基づいて生成された選定支援画像８１上に重ねて表示される。この場合も、オペレータは、選定支援画像８１上の視認可能な領域（すなわち、マスク８５ｂの開口８５１ｂと重なる領域）において解析領域を指定することにより、染色画像９２における陽性領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。

【0077】

なお、図１６および図１７に示す例では、選定支援画像８１は、染色画像９２において陰性領域とされた領域によってマスクされているが、上述のように、染色画像９２において陽性領域とされた領域によってマスクされてもよい。この場合、オペレータは、染色画像９２における陰性領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。

【0078】

ステップＳ１４では、上述のマスク８５ａ，８５ｂに代えて、図１８に示すように、境界線取得部５０８（図２参照）が染色画像９２（図１２参照）に基づいて取得した境界線８６ａが、選定支援画像８１上に重ねて表示されてもよい。境界線取得部５０８は、例えば、染色画像９２を閾値処理することにより、陽性領域と陰性領域とを示す二値画像を生成し、陽性領域と陰性領域との境界線８６ａを取得する。図１８に示す例では、染色画像９２において染色細胞９６の集簇性が最も高い範囲に含まれる領域（すなわち、図１２に示す第１領域８２１に対応する領域）のみが陽性領域とされ、他の領域は陰性領域とされる。そして、当該陽性領域の外周縁が境界線８６ａとされる。

【0079】

オペレータは、境界線８６ａの内側にて解析領域を指定することにより、染色画像９２における陽性領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。また、オペレータは、境界線８６ａの外側にて解析領域を指定することにより、染色画像９２における陰性領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。さらに、オペレータは、境界線８６ａと重なる位置にて解析領域を指定することにより、染色画像９２における陽性領域と陰性領域との境界上に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。

【0080】

また、ステップＳ１４では、図１９に示すように、境界線取得部５０８（図２参照）が染色画像９２に基づいて取得した境界線８６ｂ，８６ｃが、選定支援画像８１上に重ねて表示されてもよい。境界線取得部５０８は、例えば、染色画像９２を閾値処理することにより、陽性領域、陰性領域、および、陽性領域と陰性領域との境界の領域（以下、「境界領域」とも呼ぶ。）を示す画像を生成し、陽性領域と境界領域との境界線８６ｂ、および、境界領域と陰性領域との境界線８６ｃを取得する。

【0081】

図１９に示す例では、染色画像９２において染色細胞９６の集簇性が最も高い範囲に含まれる領域（すなわち、図１２に示す第１領域８２１に対応する領域）が陽性領域とされ、染色細胞９６の集簇性が２番目に高い範囲に含まれる領域（すなわち、図１２に示す第２領域８２２に対応する領域）が境界領域とされ、他の領域は陰性領域とされる。そして、当該陽性領域の外周縁が境界線８６ｂとされ、当該陰性領域の内周縁が境界線８６ｃとされる。

【0082】

オペレータは、境界線８６ｂの内側にて解析領域を指定することにより、染色画像９２における陽性領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。また、オペレータは、境界線８６ｂと境界線８６ｃとの間にて解析領域を指定することにより、染色画像９２における境界領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。さらに、オペレータは、境界線８６ｂの外側にて解析領域を指定することにより、染色画像９２における陰性領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。

【0083】

ステップＳ１２における各分割領域９５への表示色の割り当ては、必ずしも、１つの染色画像９１における染色細胞９６の集簇性のみに基づいて行われる必要はなく、互いに異なる複数種類の染色方法によって同一の標本９０を染色して得られた複数種類の染色画像のそれぞれにおける染色細胞９６の集簇性に基づいて行われてもよい。

【0084】

例えば、上述の染色画像９１および染色画像９２が表示色の割り当てに用いられる場合、まず、ステップＳ１１よりも前に、染色画像９１と染色画像９２との位置合わせが行われる。当該位置合わせは、上述のように、公知のイメージレジストレーション技術によって自動的に行われてもよく、オペレータが手動により行ってもよい。また、染色画像９１および染色画像９２の標本９０に対する縮尺が異なっている場合は、当該縮尺も同じになるように画像処理される。

【0085】

続いて、上述のように、染色画像９１が図３に示す複数の分割領域９５に分割される（図５：ステップＳ１１）。また、染色画像９２が、染色画像９１の分割態様と同様の態様にて、複数の分割領域９５に分割される（図２０：ステップＳ４１）。すなわち、染色画像９２には、染色画像９１に設定された複数の分割領域９５と同じ大きさおよび同じ配置の複数の分割領域９５が設定される。なお、ステップＳ４１は、ステップＳ１１と並行して行われてもよく、ステップＳ１１よりも前または後に行われてもよい。

【0086】

ステップＳ１１，Ｓ４１が終了すると、表示色割当部５０３（図２参照）により、染色画像９１の各分割領域９５、および、染色画像９２の各分割領域９５について、染色細胞９６の集簇性が求められる。そして、各分割領域９５に対して、染色細胞９６の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように、一の表示色が割り当てられる（ステップＳ１２）。

【0087】

ステップＳ１２における表示色の割り当ては、分割領域９５における染色画像９１および染色画像９２のそれぞれの染色細胞９６の集簇性に基づいて行われる。例えば、各分割領域９５において、染色画像９１の染色細胞９６の集簇性および染色画像９２の染色細胞９６の集簇性のうち低い方の集簇性に基づいて表示色が割り当てられてもよい。あるいは、各分割領域９５において、染色画像９１の染色細胞９６の集簇性および染色画像９２の染色細胞９６の集簇性のうち高い方の集簇性に基づいて表示色が割り当てられてもよい。いずれの場合も、ステップＳ１４において、複数種類の染色画像における染色細胞９６の集簇性を考慮した選定支援画像を表示することができる。

【0088】

あるいは、ステップＳ１２では、複数種類の染色画像を画素毎にＭａｘ合成した合成染色画像（すなわち、各画素において、複数種類の染色画像のうち最大の画素値を当該画素の画素値とした画像）を準備し、当該合成染色画像を複数の分割領域９５に分割した上で、各分割領域９５における合成染色画像の染色細胞９６の集簇性に基づいて、表示色の割り当てが行われてもよい。この場合、合成染色画像を複数の分割領域９５に分割することにより、例えば上述のステップＳ１１，Ｓ４１が同時に行われる。当該方法によれば、ステップＳ１４にて表示される上述の選定支援画像において、複数種類の染色画像のいずれかにおいて染色細胞９６の集簇性が高い領域を、高い誘目性にて表示することができる。

【0089】

以上に説明したように、免疫染色法による染色画像における解析領域の選定を支援する領域選定支援方法は、免疫染色法による標本９０の染色画像９１を複数の分割領域９５に分割する工程（ステップＳ１１）と、当該複数の分割領域９５のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる工程（ステップＳ１２）と、当該複数の分割領域９５のそれぞれをステップＳ１２にて割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像８１を生成する工程（ステップＳ１３）と、選定支援画像８１を画面５５１上に表示する工程（ステップＳ１４）と、を備える。これにより、染色画像９１の各位置における染色細胞９６の集簇性の高低を容易に視認することができる。その結果、オペレータは、染色細胞９６の集簇性に基づいて染色画像９１中の解析に適した領域を解析領域として容易に選定することができる。

【0090】

上述のように、ステップＳ１２では、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性は、分割領域９５における染色強度に基づいて求められることが好ましい。この場合、染色画像９１中の個々の細胞を特定する必要がないため、ステップＳ１２における表示色の割り当てに要する処理量が低減されるとともに、低倍率で取得された染色画像９１を用いた処理が可能となる。その結果、ステップＳ１２に要する時間を短くすることができる。

【0091】

上述のように、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性の算出は、分割領域９５を構成する複数の小領域のそれぞれの染色強度を得る工程（ステップＳ３１）と、当該複数の小領域の染色強度のうち最大値を分割領域９５の代表値として画像縮小を行う工程（ステップＳ３２）と、を備えることが好ましい。これにより、分割領域９５に含まれる染色細胞９６の数が少ない場合であっても、選定支援画像８１における当該分割領域９５の誘目性を向上することができる。

【0092】

上述のように、ステップＳ１２では、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性は、分割領域９５における陽性細胞の数に基づいて求められることも好ましい。これにより、陽性細胞が多い領域の誘目性向上を精度良く行うことができる。

【0093】

上述のように、ステップＳ１４において、染色画像９１、または、免疫染色法による標本９０の他の染色画像９２から選定支援画像８１と同様の方法にて生成された他の選定支援画像８２が、選定支援画像８１と位置合わせされた状態で画面５５１上に並べて表示されることが好ましい。選定支援画像８１および染色画像９１が並べて表示される場合、一般的に標本９０における組織の構造は染色画像９１の方が分かりやすいため、オペレータは、染色画像９１における実際の染色細胞９６の分散態様等を見ながら解析領域の選定を行うことができる。また、選定支援画像８１のみでは判断が困難な場合もあるアーチファクト（例えば、組織のよれ等によって非特異的に染色性が強くなったもの等）について、オペレータは、選定支援画像８１および染色画像９１を見ることにより、精度良く判断することができる。選定支援画像８１および他の選定支援画像８２が並べて表示される場合、オペレータは、選定支援画像８１および他の選定支援画像８２を見比べることにより、染色画像９１および他の染色画像９２の双方における染色細胞９６の集簇性を考慮した解析領域の選定を容易に行うことができる。

【0094】

上述のように、好ましくは、選定支援画像８１の表示倍率と、染色画像９１または他の選定支援画像８２の表示倍率とが、連動して変更可能である。これにより、オペレータは、選定支援画像８１と、染色画像９１または他の選定支援画像８２とのそれぞれにおいて表示倍率の調整を行うことなく、複数の画像を同一の表示倍率にて容易に見比べることができる。

【0095】

上述のように、好ましくは、選定支援画像８１の標本９０上における表示範囲と、染色画像９１または他の選定支援画像８２の標本９０上における表示範囲とが、連動して変更可能である。これにより、オペレータは、選定支援画像８１と、染色画像９１または他の選定支援画像８２とのうち一の画像上において注目した領域について、他の画像上において改めて当該領域を探すことなく、すぐに当該領域を観察することができる。

【0096】

上述のように、好ましくは、選定支援画像８１上に表示されて画像上の位置を示す位置指示部５５３と、染色画像９１または他の選定支援画像８２上に表示されて画像上の位置を示す位置指示部５５３とが、連動して移動可能である。これにより、オペレータは、選定支援画像８１と、染色画像９１または他の選定支援画像８２とにおいて、位置指示部５５３が示す略同じ位置に容易に注目することができる。

【0097】

上述のように、ステップＳ１４において、選定支援画像８１の標本９０に対する縮尺と、染色画像９１または他の選定支援画像８２の標本９０に対する縮尺とは同じであることが好ましい。これにより、オペレータは、選定支援画像８１と、染色画像９１または他の選定支援画像８２とを容易に見比べることができる。

【0098】

上述の領域選定支援方法は、ステップＳ１２よりも前に、免疫染色法による標本９０の他の染色画像９２を、ステップＳ１１における分割態様と同様の態様にて複数の分割領域９５に分割する工程（ステップＳ４１）をさらに備えることが好ましい。また、ステップＳ１２における表示色の割り当ては、分割領域９５における染色画像９１および他の染色画像９２のそれぞれの染色細胞９６の集簇性に基づいて行われることが好ましい。これにより、オペレータは、染色画像９１および染色画像９２の双方における染色細胞９６の集簇性を考慮した解析領域の選定を容易に行うことができる。

【0099】

上述のように、好ましくは、免疫染色法による標本９０の他の染色画像９２を閾値処理することにより、陽性領域と陰性領域とを示す二値画像が生成され、ステップＳ１４において、選定支援画像８１が当該陽性領域または当該陰性領域によってマスクされる。これにより、オペレータは、染色画像９２における陽性領域または陰性領域に限定した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。

【0100】

上述のように、好ましくは、免疫染色法による標本９０の他の染色画像９２を閾値処理することにより陽性領域または陰性領域の境界線８６ａ，８６ｂ，８６ｃが取得され、ステップＳ１４において、選定支援画像８１に境界線８６ａ，８６ｂ，８６ｃが重ねて表示される。これにより、オペレータは、染色画像９２における陽性領域および陰性領域等も考慮した上で、染色画像９１における染色細胞９６の集簇性を考慮して解析領域を選定することができる。

【0101】

上述の領域選定支援装置１は、画像分割部５０２と、表示色割当部５０３と、選定支援画像生成部５０４と、画面５５１とを備える。画像分割部５０２は、免疫染色法による標本９０の染色画像９１を複数の分割領域９５に分割する。表示色割当部５０３は、複数の分割領域９５のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる。選定支援画像生成部５０４は、複数の分割領域９５のそれぞれを表示色割当部５０３により割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像８１を生成する。画面５５１は、選定支援画像８１を表示する。これにより、上記と同様に、オペレータは、染色細胞９６の集簇性に基づいて染色画像９１中の解析に適した領域を解析領域として容易に選定することができる。

【0102】

また、上述のプログラム５７２がコンピュータによって実行されることにより、免疫染色法による標本９０の染色画像９１を複数の分割領域９５に分割する工程（ステップＳ１１）と、当該複数の分割領域９５のそれぞれに対して、誘目性が異なる複数の色を含む表示色群から、分割領域９５における染色細胞９６の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように一の表示色を割り当てる工程（ステップＳ１２）と、当該複数の分割領域９５のそれぞれをステップＳ１２にて割り当てられた表示色にて塗り潰した選定支援画像８１を生成する工程（ステップＳ１３）と、選定支援画像８１を画面５５１上に表示する工程（ステップＳ１４）と、が行われる。これにより、上記と同様に、オペレータは、染色細胞９６の集簇性に基づいて染色画像９１中の解析に適した領域を解析領域として容易に選定することができる。

【0103】

上述の領域選定支援方法、領域選定支援装置１およびプログラム５７２では、様々な変更が可能である。

【0104】

例えば、ディスプレイ５５の画面５５１上に表示される画像の数は、上記例には限定されず、様々に変更されてよい。また、画面５５１上における画像の配置も様々に変更されてよい。

【0105】

領域選定支援装置１では、複数のディスプレイ５５を縦方向および／または横方向に並べて１つの表示部として使用する場合、上述の画面５５１は、当該複数のディスプレイ５５の画面をまとめたものである。

【0106】

上述の境界線８６ａ，８６ｂ，８６ｃは、マスク８５ａまたはマスク８５ｂと共に、選定支援画像８１上に重ねて表示されてもよい。

【0107】

選定支援画像８１，８２では、例えば、各分割領域９５における染色細胞９６の集簇性が高くなるに従って誘目性が高くなるように割り当てられた上述の表示色によって、当該集簇性に応じた等高線が表示されてもよい。この場合、同一の表示色が割り当てられるとともに隣接して配置される複数の分割領域９５の集合の外周縁が、当該表示色にて表示される。また、隣接する全ての分割領域９５と異なる表示色が割り当てられた一の分割領域９５の外周縁は、当該一の分割領域９５に割り当てられた表示色にて表示される。なお、選定支援画像８１，８２において上記等高線が表示される場合、各分割領域９５の塗りつぶしは省略されてもよい。この場合であっても、上記と略同様に、染色画像９１，９２の各位置における染色細胞９６の集簇性の高低を容易に視認することができる。

【0108】

上述のように、画面５５１上に複数の画像（例えば、選定支援画像８１，８２および染色画像９１，９２）が表示される場合、当該複数の画像の表示倍率は、連動することなく個別に変更可能であってもよい。また、当該複数の画像の標本９０上における表示範囲は、連動することなく個別に変更可能であってもよい。さらに、当該複数の画像上にそれぞれ表示される位置指示部５５３は、連動することなく個別に移動可能であってもよい。なお、位置指示部５５３の表示は省略されてもよい。

【0109】

領域選定支援装置１の記憶部５０１に記憶される染色画像は、例えば、１つの標本９０に対して複数種類の抗体をまとめて用いた多色画像であってもよい。この場合、例えば、当該多色画像を色分解することにより、特定の１つの抗体に対応する単染色画像が取得され、当該単染色画像が上述の染色画像９１とされる。あるいは、上記多色画像が染色画像９１とされ、当該多色画像から特定の１つの抗体に対応する染色細胞９６が検出されてその集簇性が求められ、当該集簇性に基づいて選定支援画像８１が生成されてもよい。

【0110】

上記実施の形態および各変形例における構成は、相互に矛盾しない限り適宜組み合わされてよい。

【符号の説明】

【0111】

１ 領域選定支援装置
８１，８２ 選定支援画像
８６ａ，８６ｂ，８６ｃ 境界線
９０ 標本
９１，９２ 染色画像
９５ 分割領域
９６ 染色細胞
５０２ 画像分割部
５０３ 表示色割当部
５０４ 選定支援画像生成部
５５１ 画面
５５３ 位置指示部
５７２ プログラム
Ｓ１１～Ｓ１６，Ｓ２１～Ｓ２５，Ｓ３１～Ｓ３３，Ｓ４１ ステップ

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】