特開 2024-138363 重症筋無力症の治療方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024138363

(43)【公開日】2024-10-08

(54)【発明の名称】重症筋無力症の治療方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20241001BHJP

   A61P 21/04 20060101ALI20241001BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20241001BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20241001BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 N ZNA

A61P21/04

C07K16/28

C12N15/13

A61K39/395 N

【審査請求】有

【請求項の数】12

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2024108735

(22)【出願日】2024-07-05

(62)【分割の表示】P 2021520958の分割

【原出願日】2019-10-16

(31)【優先権主張番号】62/746,174

(32)【優先日】2018-10-16

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(71)【出願人】

【識別番号】514232085

【氏名又は名称】ユーシービー バイオファルマ エスアールエル

(74)【代理人】

【識別番号】110000855

【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ブロック、メリッサ ケイ

(72)【発明者】

【氏名】バーンズ、ウィリアム ジェイムズ

(72)【発明者】

【氏名】グレーブ、ベルンハルト ハインリッヒ

(72)【発明者】

【氏名】キースリング、クラウス ペーター

(72)【発明者】

【氏名】ラングドン、グラント

(72)【発明者】

【氏名】ウェブスター マニス、エリザベス

(57)【要約】      （修正有）

【課題】ヒトの重症筋無力症（ＭＧ）の治療における抗ＦｃＲｎ抗体の投薬レジメンを提供する。
【解決手段】ＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、方法とする。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片を該ヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、方法。

【請求項2】

少なくとも３回の用量の抗体又は抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、重症筋無力症（ＭＧ）の治療又は予防を必要とする該ヒトにおけるＭＧの治療又は予防に使用するための抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片。

【請求項3】

少なくとも３回の用量の抗体又はその結合断片を投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、重症筋無力症（ＭＧ）の治療又は予防のための医薬の製造のための抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片の使用。

【請求項4】

前記抗体又はその結合断片が、
ａ．重鎖又は可変領域を有する重鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｈ１について配列番号１、ＣＤＲ Ｈ２について配列番号２及びＣＤＲ Ｈ３について配列番号３に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、重鎖又は重鎖断片と、
ｂ．軽鎖又は可変領域を有する軽鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｌ１について配列番号４、ＣＤＲ Ｌ２について配列番号５及びＣＤＲ Ｌ３について配列番号６に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、軽鎖又は軽鎖断片と
を含む、請求項１から３までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項5】

前記抗体又はその抗原結合断片がヒト化されている、請求項１から４までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項6】

前記抗ＦｃＲｎ抗体又はその結合断片が、配列番号２９に示される配列又はそれと少なくとも８０％同一であるＦｃＲｎに特異的な配列を含む重鎖を含む、請求項１から５までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項7】

前記抗ＦｃＲｎ抗体又はその結合断片が、配列番号１５に示される配列又はそれと少なくとも８０％同一であるＦｃＲｎに特異的な配列を含む軽鎖を含む、請求項１から６までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項8】

前記抗ＦｃＲｎ抗体又はその結合断片が、配列番号２９に示される配列を有する重鎖可変ドメイン配列及び配列番号１５に示される配列を含む軽鎖可変ドメイン配列を含む、請求項６又は７に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項9】

前記抗体が完全長抗体である、請求項１から８までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体又は使用。

【請求項10】

前記完全長抗体が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ４及びＩｇＧ４Ｐからなる群から選択される、請求項９に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体又は使用。

【請求項11】

前記抗ＦｃＲｎ抗体が、配列番号７２又は配列番号８７又は配列番号４３に示される配列を含む重鎖及び配列番号２２に示される配列を含む軽鎖を有する、請求項９又は請求項１０に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体又は使用。

【請求項12】

前記抗ＦｃＲｎ抗体がＵＣＢ７６６５（ロザノリキシズマブ）である、請求項１から１１までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体又は使用。

【請求項13】

１００ｐＭ以下のヒトＦｃＲｎに対する結合親和性を有する、請求項１から１２までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項14】

ヒトＦｃＲｎに対する前記結合親和性が、ｐＨ６及びｐＨ７．４で測定した場合、１００ｐＭ以下である、請求項１３に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項15】

前記抗体又は抗原結合断片が、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤又は担体のうちの１つ又は複数を含む医薬組成物として提供される、請求項１から１４までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項16】

前記医薬組成物が１つ又は複数の他の活性成分を更に含む、請求項１５に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項17】

各用量が、４ｍｇ／ｋｇ又は７ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇである、請求項１から１６までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項18】

各用量が７ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇである、請求項１から１６までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項19】

各用量が１週間に１回投与される、請求項１から１８までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項20】

少なくとも４回、５回又は６回、１週間に１回投与され、任意選択により第３回の用量と第４回の用量との間に投薬休日がある、請求項１から１９までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項21】

少なくとも６回、抗体又は抗原結合断片が１週間に１回投与され、各用量が４ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば７ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇである、請求項１から２０までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項22】

前記抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片が皮下又は静脈内に投与される、請求項１から２１までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項23】

前記抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片が、ヒトＦｃＲｎへのヒトＩｇＧの結合を遮断する、請求項１から２２までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項24】

前記抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片がβ２ミクログロブリンに結合しない、請求項１から２３までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項25】

４回、５回又は６回、１週間に１回投与され、続いて最初の４回、５回又は６回の用量より少ない用量及び／又は少ない頻度で１回又は複数回の追加用量が投与される、請求項１から２４までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項26】

前記抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片が、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸並びに少なくとも１つの残基、例えば配列番号９４のＰ１００、Ｅ１１５、Ｅ１１６、Ｆ１１７、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３、Ｑ１２４、Ｇ１２８、Ｇ１２９、Ｄ１３０、Ｗ１３１、Ｐ１３２及びＥ１３３からなる群から選択される少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の残基を含むヒトＦｃＲｎのエピトープと結合する、請求項１から２５までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項27】

前記ヒトが中等度から重度と分類される全身型ＭＧに罹患している、請求項１から２６までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項28】

前記ヒトが抗ＡＣｈＲ及び／又は抗ＭｕＳＫ自己抗体陽性であり、任意選択によりＩＶＩｇ又は血漿交換での治療を考慮されている、請求項１から２７までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項29】

各用量が、２８０ｍｇ、４２０ｍｇ、５６０ｍｇ、８４０ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される固定単位用量として提供される、請求項１から２８までのいずれか一項に記載の方法、抗ＦｃＲｎ抗体若しくはその抗原結合断片又は使用。

【請求項30】

重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回、好ましくは少なくとも６回、抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片を該ヒトに投与するステップを含み、各用量が、２８０ｍｇ、３１５ｍｇ、３５０ｍｇ、３８５ｍｇ、４２０ｍｇ、４５５ｍｇ、４９０ｍｇ、５２５ｍｇ、５６０ｍｇ、５９５ｍｇ、６３０ｍｇ、６６５ｍｇ、７００ｍｇ、７３５ｍｇ、７７０ｍｇ、８０５ｍｇ、８４０ｍｇ、８７５ｍｇ、９１０ｍｇ、９４５ｍｇ、９８０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０８５ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択され、該抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片が、配列番号２９に示される配列を含む重鎖及び配列番号１５に示される配列を含む軽鎖を含む、方法。

【請求項31】

重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも６回、抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片を該ヒトに投与するステップを含み、５０ｋｇ未満の体重では用量は２８０ｍｇであり、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇであり、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量５６０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は８４０ｍｇである、方法。

【請求項32】

重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片を該ヒトに投与するステップを含み、５０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇであり、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は５６０ｍｇであり、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量は８４０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は１１２０ｍｇである、方法。

【請求項33】

各用量が１週間に１回投与される、請求項３０から３２までのいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、ＦｃＲｎに特異的な抗体を使用して重症筋無力症（ＭＧ）を治療する方法に関する。

【背景技術】

【0002】

新生児のＭＨＣクラスＩ様ＦｃＲｎは大部分の細胞から免疫グロブリン及びアルブミンを再循環させ、それを上皮バリアを越えて双方向で輸送して全身及び粘膜免疫に影響を及ぼす。ＦｃＲｎは、それを選別エンドソームから細胞表面に再循環させることによって細胞内リソソーム分解からＩｇＧ及びアルブミンの両方を救出することが示された（Ａｎｄｅｒｓｏｎら、２００６）。ＩｇＧに関して、これはＩｇＧと受容体であるＦｃＲｎとの相互作用によって達成される。それ故、実際には、ＦｃＲｎはＩｇＧを回収し、それを分解から救い、それを循環に戻す。アルブミンは、ＦｃＲｎ分子上の異なる結合部位を介してではあるが、ＦｃＲｎによって同様に再循環される。ＦｃＲｎのノックアウト又は遮断により、この再循環が取り除かれ、その結果、ＩｇＧのエンドソーム異化並びに血管及び血管外（組織）区画の両方でＩｇＧ濃度の顕著な低減が起こることが示されている。実際に、ＦｃＲｎの遮断は内因性ＩｇＧの除去を加速し、アルブミン結合部位も遮断される場合、アルブミンの除去も加速する可能性がある。

【0003】

ＵＣＢ７６６５（ロザノリキシズマブ）は、ＦｃＲｎへのアルブミン結合を阻害することなく、ＦｃＲｎへのＩｇＧ結合を阻害するように特異的に設計された、ＩｇＧ（ＦｃＲｎ）モノクローナル抗体に対するヒト化抗新生児Ｆｃ受容体である。ＵＣＢ７６６５は、ＩｇＧ自己抗体媒介疾患を有する患者における病原性ＩｇＧの濃度を低減させる目的でＦｃＲｎ活性の阻害剤として開発されている。

【0004】

個体の疾患の実体として、ＩｇＧ自己抗体媒介状態は比較的稀である。これらの障害の治療は依然として困難な臨床的問題のままであり、これらの状態の多くでは、単独での又は細胞傷害剤と併用した高用量コルチコステロイドの長期使用を必要とする。これらの治療アプローチは全ての患者及び状態において有効ではなく、かなりの毒性及び治療関連罹病を引き起こす広範な免疫抑制作用を有する。

【0005】

プラスマフェレーシス、免疫吸着又は高用量静注免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）を含む、循環ＩｇＧ自己抗体の量を低減させることを目的とした治療が、特にコルチコステロイドに基づいた免疫抑制が有効でないか、又はもはや有効でなくなった、自己免疫疾患の一次及び二次療法に使用されている。これらの治療の治療アプローチは、自己免疫疾患の合理的で有効な治療様式を表す、病原性自己抗体のレベルの低下に基づくと考えられる。

【0006】

重症筋無力症は、神経筋接合部（ＮＭＪ）においてアセチルコリンニコチン性受容体（ｎＡＣｈＲ）に対して自己免疫抗体を最も一般的に形成する、末梢運動系の稀な自己免疫障害である。ｎＡＣｈＲ自己抗体は受容体と結合するアセチルコリンの能力を損ない、エンドサイトーシスを介して受容体を除去するように筋細胞を誘導することによって、又は補体結合によってのいずれかで受容体の破壊をもたらす。

【0007】

ＭＧの第二のカテゴリーは、ＮＭＪの形成に必要なチロシンキナーゼ受容体である筋特異的キナーゼ（ＭｕＳＫ）タンパク質に対する自己抗体に起因する。ＭｕＳＫに対する抗体はシグナル伝達を阻害し、ＮＭＪの開存性が減少し、その結果としてＭＧの症状が生じる。両方のカテゴリーにおいて、これは、筋肉を繰り返し使用することで筋力を徐々に低減させ、休息期間後に筋力を回復させるという特徴的なパターンを生じる。更なる抗体がＭＧと関連することが見出されているが、それらについてはまだ知られておらず、それらは主要な２つよりもあまり一般的ではないようである。

【0008】

この病理を媒介する際の自己免疫抗体の本質的な役割は血漿交換（ＰＬＥＸ）後に見られる改善によって支持される。病原性ＩｇＧ自己抗体を含むＩｇＧレベルを低減させる血漿交換は、アセチルコリンエステラーゼ（ＡＣｈＥ）阻害剤又は免疫抑制治療に非応答性の患者及び筋無力症クリーゼを経験している患者の両方において使用される（Ｇｉｌｈｕｓ及びＶｅｒｓｃｈｕｕｒｅｎ、２０１５）。

【0009】

生存率を劇的に改善する新規療法により、ＭＧの予後は過去数十年間で著しく改善したが、著しく高い死亡率及び更に罹患率が依然として問題となっている。ＭＧの治療は依然として困難な臨床的問題のままであり、単独での又は細胞傷害剤と併用した高用量コルチコステロイドの長期使用を必要とする。ＭＧに有効であると考えられている療法の多くは、それらの使用を明確に支持するにはデータが不十分であり、全ての患者及び状態において有効ではなく、かなりの毒性及び治療関連罹病を引き起こす広範な免疫抑制作用を有する。更に、疾患の経過における自然変動に起因して、多くの患者は緊急治療を必要とする急性状況に対して有効な治療を必要とする。

【0010】

現在、ＰＬＥＸ及びＩＶＩｇの両方が長期の間欠治療を必要とする状況において症状を改善するための標準治療として使用されているが、どちらの治療もＭＧに対して米国では承認されておらず、手続は多くの場合、患者にとって重荷となる。それ故、この患者集団において、全身型ＭＧを有する患者にとって利便性が高い、有効な長期の間欠治療に対する、重要な満たされていない医学的必要性が存在する。

【0011】

それ故、ＭＧの治療における新たな治療選択肢に対する、かなりの満たされていない医学的必要性が依然として存在したままである。

【0012】

従って、ＦｃＲｎへのＩｇＧの結合を遮断するか、又は低減させる薬剤が、病原性ＩｇＧの除去によるＭＧの治療又は予防において有用であり得る。抗ＦｃＲｎ抗体は、ＷＯ２００９／１３１７０２、ＷＯ２００７／０８７２８９、ＷＯ２００６／１１８７７２、ＷＯ２０１４／０１９７２７、ＷＯ２０１５／０７１３３０、ＷＯ２０１５／１６７２９３及びＷＯ２０１６／１２３５２１において以前に記載されている。

【0013】

ＵＣＢ７６６５（ロザノリキシズマブ）は、ＦｃＲｎへのアルブミン結合を阻害することなくＦｃＲｎへのＩｇＧ結合を阻害するように特異的に設計されているヒト化抗ＦｃＲｎモノクローナル抗体である（本明細書及びＷＯ２０１４／０１９７２７及びＳｍｉｔｈら、２０１９、ＭＡＢＳ、１０、１１１－１１３０に記載されている）。ＵＣＢ７６６５は、ＭＧを有する患者における病原性ＩｇＧの濃度を低減させることを目的としてＦｃＲｎ活性の阻害剤として開発されている。ＵＣＢ７６６５は、ラット抗体をヒト化ＩｇＧ４Ｐフォーマットに操作することによってヒトＦｃＲｎに対して特異性を有するラット抗体から誘導された。ＵＣＢ７６６５をコードする構築物は、親ラット重鎖及び軽鎖可変領域からの相補性決定領域（ＣＤＲ）をヒトＩｇＧ４Ｐ及びカッパ鎖遺伝的バックグラウンド（それぞれ配列番号４３及び配列番号２２）にグラフトすることによって作製された。

【0014】

Ｋｉｅｓｓｌｉｎｇら、２０１７、Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．９、ｐｇｓ．１－１２は、健常な対象におけるロザノリキシズマブの無作為化、対象盲検、治験責任医師盲検、プラセボ対照、単回用量漸増第１相臨床試験を記載している。抗体は、血清アルブミン濃度を統計的に有意に低減させずに、血清ＩｇＧを低減させた。許容可能な安全性、薬物動態及び薬力学プロファイルが得られた。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0015】

本開示は、ヒトのＭＧの治療における抗ＦｃＲｎ抗体の治療効果を初めて実証し、このような治療についての好適な投薬レジメンを提供する。

【課題を解決するための手段】

【0016】

それ故、一態様では、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、方法が提供される。

【0017】

一態様では、任意選択により体重段階にわたって固定単位投薬が使用される。一例では、およそ７ｍｇ／ｋｇに相当する固定単位用量が使用される。従って、一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、５０ｋｇ未満の体重では用量は２８０ｍｇであり、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇであり、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量は５６０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は８４０ｍｇである、方法を提供する。

【0018】

一例では、およそ１０ｍｇ／ｋｇに相当する固定単位用量が使用される。従って、一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合部分をヒトに投与するステップを含み、５０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇであり、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は５６０ｍｇであり、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量は８４０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は１１２０ｍｇである、方法を提供する。

【0019】

一例では、抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片は、
ａ．重鎖又は可変領域を有する重鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｈ１について配列番号１、ＣＤＲ Ｈ２について配列番号２及びＣＤＲ Ｈ３について配列番号３に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、重鎖又は重鎖断片と、
ｂ．軽鎖又は可変領域を有する軽鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｌ１について配列番号４、ＣＤＲ Ｌ２について配列番号５及びＣＤＲ Ｌ３について配列番号６に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、軽鎖又は軽鎖断片と
を含む。

【0020】

別の態様では、少なくとも３回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、重症筋無力症（ＭＧ）の治療又は予防を必要とするヒトにおけるＭＧの治療又は予防に使用するための抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片が提供される。

【0021】

別の態様では、少なくとも３回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、重症筋無力症（ＭＧ）の治療又は予防を必要とするヒトにおけるＭＧの治療又は予防に使用するための、
重鎖又は可変領域を有する重鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｈ１について配列番号１、ＣＤＲ Ｈ２について配列番号２及びＣＤＲ Ｈ３について配列番号３に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、重鎖又は重鎖断片と、
軽鎖又は可変領域を有する軽鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｌ１について配列番号４、ＣＤＲ Ｌ２について配列番号５及びＣＤＲ Ｌ３について配列番号６に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、軽鎖又は軽鎖断片と
を含む、抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片が提供される。

【0022】

別の態様では、少なくとも３回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はそのＦｃＲｎ結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、重症筋無力症（ＭＧ）の治療又は予防のための医薬の製造のための、
ｉ．重鎖又は可変領域を有する重鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｈ１について配列番号１、ＣＤＲ Ｈ２について配列番号２及びＣＤＲ Ｈ３について配列番号３に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、重鎖又は重鎖断片と、
ｉｉ．ＣＤＲ Ｌ１について配列番号４、ＣＤＲ Ｌ２について配列番号５及びＣＤＲ Ｌ３について配列番号６に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む可変領域を有する軽鎖又はその軽鎖断片と
を含む、抗ＦｃＲｎ抗体又はその結合断片の使用が提供される。

【0023】

重要なことに、本発明の抗体は、同等及び高い結合親和性でｐＨ６及びｐＨ７．４の両方でヒトＦｃＲｎに結合することができる。従って、有益には、抗体はエンドソーム内でさえもＦｃＲｎに結合し続けることができ、それによってＩｇＧへのＦｃＲｎ結合の遮断を最大化することができる。

【0024】

一例では、本発明に使用するための抗ＦｃＲｎ抗体又はその結合断片は、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸並びに少なくとも１つの残基、例えば配列番号９４のＰ１００、Ｅ１１５、Ｅ１１６、Ｆ１１７、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３、Ｑ１２４、Ｇ１２８、Ｇ１２９、Ｄ１３０、Ｗ１３１、Ｐ１３２及びＥ１３３からなる群から選択される少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の残基を含むヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する。

【0025】

一実施形態では、本開示による抗体又は結合断片は、例えば、配列番号１、配列番号２及び配列番号３から独立して選択される１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む重鎖又は可変領域を有する重鎖断片を含み、特にＣＤＲ Ｈ１は配列番号１であり、ＣＤＲ Ｈ２は配列番号２であり、ＣＤＲ Ｈ３は配列番号３である。

【0026】

一実施形態では、本開示による抗体又は結合断片は、例えば、配列番号４、配列番号５及び配列番号６から独立して選択される１つ、２つ又は３つのＣＤＲを含む軽鎖又は可変領域を有する軽鎖断片を含み、特にＣＤＲ Ｌ１は配列番号４であり、ＣＤＲ Ｌ２は配列番号５であり、ＣＤＲ Ｌ３は配列番号６である。

【0027】

一実施形態では、本開示による抗体又は結合断片は配列番号１～６のＣＤＲ配列を含み、例えばＣＤＲ Ｈ１は配列番号１であり、ＣＤＲ Ｈ２は配列番号２であり、ＣＤＲ Ｈ３は配列番号３であり、ＣＤＲ Ｌ１は配列番号４であり、ＣＤＲ Ｌ２は配列番号５であり、ＣＤＲ Ｌ３は配列番号６である。

【0028】

本開示はまた、前記抗体及び断片を含む医薬組成物に関する。

【図面の簡単な説明】

【0029】

【図1】ある特定のアミノ酸及びポリヌクレオチド配列を示す図である。

【図2】ＭＧ０００２研究設計（ＳｕｂＱ；ＵＣＢ７６６５）の図である。

【図3】ＭＧ－ＡＤＬスコアのベースラインからの変化の図である。

【図4】ＱＭＧ、ＭＧ－複合（ＭＧ－Ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ）、ＭＧ－ＡＤＬスコア、血清ＩｇＧ濃度及び抗ＡＣｈＲ抗体（ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ／ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ）のベースラインからの変化の図である。

【図5】定量的重症筋無力症試験フォームの図である。

【図6】重症筋無力症複合スコアの図である。

【図7】重症筋無力症日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコア付けの図である。

【発明を実施するための形態】

【0030】

重症筋無力症（ＭＧ）は、ニコチン性アセチルコリン受容体（ＡＣｈＲ）及び筋特異的チロシンキナーゼ受容体（ＭｕＳＫ）を含む、シナプス後（ｐｏｓｔ－ｓｙｎｐａｔｉｃ）筋膜のエピトープに対して誘導された自己抗体、並びに接合後膜の補体媒介破壊を特徴とする衰弱性で致命的となる可能性がある自己免疫疾患である。臨床症状には、眼、球、呼吸器及び四肢筋の変動する衰弱が含まれる。ＭＧについての現在の長期療法には、胸腺摘出（ＴＨＸ）、コリンエステラーゼ阻害剤及び免疫抑制剤又は免疫調節剤が含まれる。増悪は典型的に、静脈内又は皮下免疫グロブリン（ＩＶＩｇ又はＳＣＩｇ）及び血漿交換（ＰＬＥＸ）などの療法により治療される。

【0031】

ほとんどの患者では、最初に影響を受ける筋肉は眼及び眼瞼の動きを制御する筋肉である。一部の患者では、重症筋無力症は常に眼筋のみに関与（重症眼筋無力症）するが、大多数では他の筋肉にも関与する（全身型重症筋無力症）。従って、本明細書で使用される場合、全身型重症筋無力症とは、眼筋だけではなく他の筋肉にも影響を及ぼす重症筋無力症を指す。

【0032】

一態様では、本発明は、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択され、好ましくは７ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇである、方法を提供する。

【0033】

一例では、本明細書以下に記載されているように、任意選択により体重に基づく段階を使用する固定単位投薬が使用され得る。

【0034】

本明細書に記載されているものを含む、任意の好適な抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片が本発明に使用され得る。

【0035】

一例では、抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片は、
ａ．重鎖又は可変領域を有する重鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｈ１について配列番号１、ＣＤＲ Ｈ２について配列番号２及びＣＤＲ Ｈ３について配列番号３に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、重鎖又は重鎖断片と、
ｂ．軽鎖又は可変領域を有する軽鎖断片であって、該可変領域が、ＣＤＲ Ｌ１について配列番号４、ＣＤＲ Ｌ２について配列番号５及びＣＤＲ Ｌ３について配列番号６に示される配列を有する３つのＣＤＲを含む、軽鎖又は軽鎖断片と
を含む。

【0036】

本明細書で利用される場合、ＦｃＲｎとは、新生児Ｆｃ受容体としても知られている、ヒトＩｇＧ受容体アルファ鎖の間の非共有結合複合体を指し、そのアミノ酸配列は、β２ミクログロブリン（β２Ｍ）と一緒に番号Ｐ５５８９９の下でＵｎｉＰｒｏｔにあり、そのアミノ酸配列は番号Ｐ６１７６９の下でＵｎｉＰｒｏｔにある。
本明細書で利用される場合、抗体分子とは、抗体又は抗原結合断片を指す。本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、概して、インタクトな（全）抗体、すなわち２本の完全長重鎖及び軽鎖のエレメントを含む抗体に関する。抗体は、例えばＷＯ２００７／０２４７１５に開示されているような分子ＤＶＤ－Ｉｇ、又はＷＯ２０１１／０３０１０７に記載されているいわゆる（ＦａｂＦｖ）_２Ｆｃのように更なる結合ドメインを更に含んでもよい。このように本明細書に利用される抗体は、二、三又は四価完全長抗体を含む。本明細書上記のように、方法に使用するための抗体は完全長重鎖及び軽鎖を有する完全な抗体分子を含む。或いは、方法は抗原結合断片を利用する。抗原結合断片には、従来の抗体断片構造、例えば、Ｆａｂ断片、修飾Ｆａｂ、Ｆａｂ’又はＦ（ａｂ’）_２断片が含まれ得る。抗体は、例えば、パパイン（２つのＦａｂ断片及びＦｃ断片を生成するため）及びペプシン（Ｆ（ａｂ’）_２断片及びｐＦｃ’断片を生成するため）などの酵素によって断片に切断され得る。抗原結合断片はまた、非従来型の構造を含んでもよい（すなわち、抗原結合能を保持することによって抗体断片活性を模倣するポリペプチドを含む、代替のフォーマットで抗体の抗原結合部分を含む）。これに関して、抗原結合断片には、ドメイン抗体又はナノボディ、例えば、ＶＨ、ＶＬ、Ｖ_ＨＨ及びＶ_ＮＡＲベースの構造、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、ペプチボディ（ｐｅｐｔｉｂｏｄｙ）又はペプチド－Ｆｃ融合、並びにダイアボディ、トリアボディ及びテトラボディのような二量体及び多量体抗体様分子、又はオリゴマー化ドメインと連結しているｓｃＦｖからなる異なるフォーマットを含むミニボディ（ｍｉｎｉＡｂ）が含まれる。多重特異性抗原結合断片の例には、国際特許出願公開番号ＷＯ２００９０４０５６２、ＷＯ２０１００３５０１２、ＷＯ２０１１／０８６０９、ＷＯ２０１１／０３０１０７及びＷＯ２０１１／０６１４９２にそれぞれ記載されているＦａｂ－Ｆｖ、Ｆａｂ－ｄｓＦｖ、Ｆａｂ－Ｆｖ－Ｆｖ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ、Ｆａｂ－Ｆｖ－Ｆｃ及びＦａｂ－ｄｓＦｖ－ＰＥＧ断片が含まれ、それらの全ては抗原結合部分のそれらの論述に関して参照により本明細書に組み込まれる。多重特異性抗原結合断片の更なる例には、直列に連結しているＶ_ＨＨ断片が含まれる。代替の抗原結合断片は２つのｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖと連結しているＦａｂを含み、ｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖの各々は同じ又は異なる標的に結合している（例えば、１つのｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖが治療標的に結合し、１つのｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖが例えばアルブミンに結合することによって半減期を増加させる）。このような抗体断片は国際特許出願公開番号ＷＯ２０１５／１９７７７２に記載されており、それはその全体が参照により、特に抗体断片の論述に関して本明細書に組み込まれる。抗体断片及びそれらを生成する方法は当該分野において周知であり、例えば、Ｖｅｒｍａら、１９９８、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ、２１６、１６５－１８１；Ａｄａｉｒ及びＬａｗｓｏｎ、２００５．治療抗体（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）． Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ Ｒｅｖｉｅｗｓ－Ｏｎｌｉｎｅ ２（３）：２０９－２１７を参照のこと。また、本開示の文脈に使用するために企図される多重特異性抗体又はその抗原結合断片の例には、二、三又は四価抗体、Ｂｉｓ－ｓｃＦｖ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ビボディ及びトリボディが含まれる（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ及びＨｕｄｓｏｎ、２００５、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ ２３（９）：１１２６－１１３６；Ｓｃｈｏｏｎｊａｎｓら、２００１、Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、１７（６）、１９３－２０２を参照のこと）。

【0037】

特にエピトープ、結合親和性及び特異性、並びに活性に関して、抗体に関連する本明細書における開示はまた、抗体断片及び抗体様分子にも適用可能である。抗体断片はまた、モノクローナル、キメラ、ヒト化、完全にヒト、多重特異性、二重特異性などとして特徴付けられ得ること、及びまた、以下のこれらの用語の論述は抗原結合断片にも関連することは理解されるであろう。

【0038】

上記の抗体及び抗原結合断片は参照及び例のみの目的のために記載され、本発明の範囲を限定するものではない。

【0039】

一実施形態では、抗体又は抗原結合断片は結合ドメインを含む。結合ドメインは概して、６つのＣＤＲを含み、３つは重鎖由来であり、３つは軽鎖由来である。一実施形態では、ＣＤＲはフレームワーク内にあり、可変領域を一緒に形成する。それ故、一実施形態では、抗体又は抗原結合断片は軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗原に特異的な結合ドメインを含む。

【0040】

１つ又は複数（例えば、１、２、３又は４つ）のアミノ酸の置換、付加及び／又は欠失が、ＦｃＲｎと結合する抗体の能力を大きく変化させることなく、本発明によって提供されるＣＤＲ又は他の配列（例えば可変ドメイン）に対してなされてもよいことは理解されるであろう。任意のアミノ酸の置換、付加及び／又は欠失の効果は、ＦｃＲｎ結合及び遮断を決定するために、例えば、ＷＯ２０１４／０１９７２７に記載されている方法を使用することによって当業者によって容易に試験され得る。

【0041】

一例では、１つ又は複数（例えば１、２、３又は４つ）のアミノ酸の置換、付加及び／又は欠失は、本発明によって提供される抗体又は断片に利用されるフレームワーク領域に対してなされてもよく、ＦｃＲｎに対する結合親和性が保持されるか、又は増加する。

【0042】

抗体可変ドメイン内の残基は、Ｋａｂａｔらによって考案されているシステムに従って慣例的に番号付けされる。このシステムは、Ｋａｂａｔら、１９８７、免疫学的対象のタンパク質の配列（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ）、ＵＳ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ、ＵＳＡ（本明細書以下において「Ｋａｂａｔら（上記）」）に記載されている。他に示されている場合を除いて、この番号付けシステムが本明細書に使用される。

【0043】

Ｋａｂａｔ残基の指定はアミノ酸残基の線形番号付けと常に直接的に対応するわけではない。実際の線形アミノ酸配列は、基礎可変ドメイン構造のフレームワーク又は相補性決定領域（ＣＤＲ）であるかに関わらず、構造構成成分の短縮又は構造構成成分内への挿入に対応する厳格なＫａｂａｔ番号付けにおけるよりも少ない又は追加のアミノ酸を含有してもよい。残基の正確なＫａｂａｔ番号付けは、抗体の配列と「標準的な」Ｋａｂａｔ番号付け配列との相同性の残基のアラインメントによって所与の抗体について決定され得る。

【0044】

重鎖可変ドメインのＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って残基３１～３５（ＣＤＲ－Ｈ１）、残基５０～６５（ＣＤＲ－Ｈ２）及び残基９５～１０２（ＣＤＲ－Ｈ３）に位置する。しかしながら、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．及びＬｅｓｋ，Ａ．Ｍ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１９６、９０１－９１７（１９８７））に従って、ＣＤＲ－Ｈ１に等価なループは残基２６から残基３２まで伸長する。それ故、他に示されない限り、本明細書において利用される「ＣＤＲ－Ｈ１」は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムとＣｈｏｔｈｉａのトポロジカルループ定義との組合せによって記載されている、残基２６から３５を指すことを意図する。

【0045】

軽鎖可変ドメインのＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに従って残基２４～３４（ＣＤＲ－Ｌ１）、残基５０～５６（ＣＤＲ－Ｌ２）及び残基８９～９７（ＣＤＲ－Ｌ３）に位置する。

【0046】

本開示の抗体及び抗原結合断片はＦｃＲｎを遮断するので、ＩｇＧの再循環においてそのＦｃＲｎが機能することを防ぐことができる。本明細書で利用される場合、遮断とは、受容体を閉塞することなどの物理的に遮断することを指すが、また、抗体又は断片が、例えば立体構造変化の原因となるエピトープに結合することも含み、このことは受容体に対して天然リガンドがもはや結合しないことを意味する。本発明の抗体分子はＦｃＲｎと結合するので、ＩｇＧ定常領域に対するＦｃＲｎ結合を減少させるか、又は阻止（例えば阻害）する。

【0047】

一実施形態では、抗体又は抗原結合断片はＩｇＧに対して競合的にＦｃＲｎに結合する。

【0048】

一例では、抗体又は抗原結合断片はヒトＩｇＧに対するヒトＦｃＲｎ結合の競合的阻害剤として機能する。一例では、抗体又は抗原結合断片はＦｃＲｎ上のＩｇＧ結合部位と結合する。一例では、抗体又は抗原結合断片はβ２Ｍに結合しない。

【0049】

本開示に使用するための抗体は当該分野において公知の任意の適切な方法を使用して得られ得る。融合タンパク質、細胞（組換え又は天然）を発現するポリペプチド（活性化Ｔ細胞など）を含むＦｃＲｎポリペプチド／タンパク質は、ＦｃＲｎを特異的に認識する抗体を作製するために使用され得る。ポリペプチドは、「成熟」ポリペプチド又はその生物学的に活性な断片若しくは誘導体であってもよい。ヒトタンパク質は、番号Ｐ５５８９９の下でＳｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔに登録されている。ヒトＦｃＲｎアルファ鎖の細胞外ドメインは配列番号９４に提供される。β２Ｍの配列は配列番号９５に提供される。

【0050】

一実施形態では、抗原は細胞の表面上にＦｃＲｎを提示するように操作されるＦｃＲｎの変異型であるので、ＦｃＲｎが細胞内に内在化する動的処理はほとんど又は全く存在せず、例えば、このことは、Ｏｂｅｒら ２００１ Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３、１５５１－１５５９に記載されているようにジロイシンがジアラニンに変異される、ＦｃＲｎアルファ鎖の細胞質尾部における変異を起こすことによって達成され得る。

【0051】

宿主を免疫化するために使用するためのポリペプチドは、発現系を含む、遺伝的に操作される宿主細胞から当該分野において周知のプロセスによって調製され得るか、又はそれらは天然の生物学的起源から回収され得る。本出願において、「ポリペプチド」という用語は、ペプチド、ポリペプチド及びタンパク質を含む。これらは他に特定されない限り互換的に使用される。ＦｃＲｎポリペプチドは、一部の場合、例えば親和性タグ又は類似物と融合される融合タンパク質などのより大きなタンパク質の部分であってもよい。

【0052】

動物の免疫化が必要な場合、ＦｃＲｎポリペプチドに対して生成される抗体は、周知及び慣用のプロトコルを使用して、ポリペプチドを動物、好ましくは非ヒト動物に投与することによって得られ得る。例えば、実験免疫学のハンドブック（Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ）、Ｄ．Ｍ．Ｗｅｉｒ（ｅｄ．）、Ｖｏｌ４、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、Ｅｎｇｌａｎｄ、１９８６）を参照のこと。ウサギ、マウス、ラット、ヒツジ、ウシ、ラクダ又はブタなどの多くの温血動物が免疫化され得る。しかしながら、マウス、ウサギ、ブタ及びラットが一般に最も好適である。

【0053】

モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術（Ｋｏｈｌｅｒ ＆ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ、１９７５、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５－４９７）、トリオーマ技術、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術（Ｋｏｚｂｏｒら、１９８３、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ、４：７２）及びＥＢＶ－ハイブリドーマ技術（Ｃｏｌｅら、モノクローナル抗体及びがん療法（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ）、ｐｐ７７－９６、Ａｌａｎ Ｒ Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、１９８５）などの当該分野において公知の任意の方法によって調製され得る。

【0054】

本発明に使用するための抗体はまた、例えば、Ｂａｂｃｏｏｋ，Ｊら、１９９６、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９３（１５）：７８４３－７８４８１、ＷＯ９２／０２５５１、ＷＯ２００４／０５１２６８及び国際特許出願番号ＷＯ２００４／１０６３７７に記載されている方法によって特異的抗体を作製するために選択される単一のリンパ球から生成された免疫グロブリン可変領域ｃＤＮＡをクローニングし、発現することによって単一のリンパ球抗体方法を使用して生成され得る。

【0055】

抗体についてのスクリーニングは、ヒトＦｃＲｎに対する結合を測定するためのアッセイ及び／又は受容体に対するＩｇＧ結合を遮断する能力を測定するためのアッセイを使用して実施され得る。結合アッセイの例は、特に、プレート上に固定化される、ヒトＦｃＲｎ及びヒトＦｃの融合タンパク質を使用し、融合タンパク質と結合した抗ＦｃＲｎ抗体を検出するために二次抗体を利用する、ＥＬＩＳＡである。好適なアンタゴニスト及び遮断アッセイの例は当該分野において周知であり、ＷＯ２０１４／０１９７２７に記載されている。

【0056】

本明細書に利用される特異性とは、特異的である抗原のみを認識する抗体又は非特異的である抗原に対する結合と比較して特異的である抗原に対して顕著に高い結合親和性、例えば少なくとも５、６、７、８、９、１０倍高い結合親和性を有する抗体を指すことを意図する。結合親和性は本明細書及びＷＯ２０１４／０１９７２７に記載されているＢＩＡｃｏｒｅなどの技術によって測定され得る。一例では、本発明の抗体はβ２ミクログロブリン（β２Ｍ）に結合しない。一例では、本発明の抗体はカニクイザルＦｃＲｎに結合する。一例では、本発明の抗体はラット又はマウスＦｃＲｎに結合しない。

【0057】

本開示によるある特定の抗体のアミノ酸配列及びポリヌクレオチド配列は図面に提供される。

【0058】

本発明に有用な他の抗体は、ＷＯ２００９／１３１７０２、ＷＯ２００７／０８７２８９、ＷＯ２００６／１１８７７２、ＷＯ２０１５／０７１３３０、ＷＯ２０１５／１６７２９３及びＷＯ２０１６／１２３５２１に記載されており、参照により本明細書に組み込まれる。また、例には、Ｍｏｍｅｎｔａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ製のＭ２８１及びＳｙｎｔｉｍｍｕｎｅ製のＳＹＮＴ０００１が含まれる。

【0059】

一実施形態では、本開示による抗体又は断片はヒト化されている。

【0060】

本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体分子」という用語は、重鎖及び／又は軽鎖が、アクセプター抗体（例えばヒト抗体）の重鎖及び／又は軽鎖可変領域フレームワーク内にグラフトされたドナー抗体（例えばネズミモノクローナル抗体などの非ヒト抗体）由来の１つ又は複数のＣＤＲ（所望の場合、１つ又は複数の修飾ＣＤＲを含む）を含有する、抗体分子を指す。概説のために、Ｖａｕｇｈａｎら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１６、５３５－５３９、１９９８を参照のこと。一実施形態では、全ＣＤＲが転移されるのではなく、本明細書上記のＣＤＲのいずれか１つに由来する特異性決定残基の１つ又は複数のみがヒト抗体フレームワークに転移される（例えば、Ｋａｓｈｍｉｒｉら、２００５、Ｍｅｔｈｏｄｓ、３６、２５－３４を参照のこと）。一実施形態では、本明細書上記のＣＤＲの１つ又は複数に由来する特異性決定残基のみがヒト抗体フレームワークに転移される。別の実施形態では、本明細書上記のＣＤＲの各々に由来する特異性決定残基のみがヒト抗体フレームワークに転移される。

【0061】

ＣＤＲ又は特異性決定残基がグラフトされる場合、ＣＤＲが誘導されるドナー抗体のクラス／種類に関して、マウス、霊長類及びヒトフレームワーク領域を含む、任意の適切なアクセプター可変領域フレームワーク配列が使用されてもよい。

【0062】

好適には、本発明によるヒト化抗体は、ヒトアクセプターフレームワーク領域及び本明細書において具体的に提供されるＣＤＲの１つ又は複数を含む可変ドメインを有する。それ故、一実施形態では、可変ドメインがヒトアクセプターフレームワーク領域及び非ヒトドナーＣＤＲを含む、ヒトＦｃＲｎに結合するヒト化抗体を遮断することが提供される。

【0063】

本発明に使用され得るヒトフレームワークの例は、ＫＯＬ、ＮＥＷＭ、ＲＥＩ、ＥＵ、ＴＵＲ、ＴＥＩ、ＬＡＹ及びＰＯＭ（Ｋａｂａｔら、上記）である。例えば、ＫＯＬ及びＮＥＷＭが重鎖のために使用されてもよく、ＲＥＩが軽鎖のために使用されてもよく、ＥＵ、ＬＡＹ及びＰＯＭが重鎖及び軽鎖の両方のために使用されてもよい。或いは、ヒト生殖細胞配列が使用されてもよく、それらは、ｈｔｔｐ：／／ｖｂａｓｅ．ｍｒｃ－ｃｐｅ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／にて利用可能である。

【0064】

本発明のヒト化抗体において、アクセプター重鎖及び軽鎖は、同じ抗体に由来することを必ずしも必要とせず、所望の場合、異なる鎖に由来するフレームワーク領域を有する複合鎖を含んでもよい。

【0065】

本発明のヒト化抗体の重鎖のための１つのこのような好適なフレームワーク領域は、ＪＨ４（配列番号５６）と一緒にヒトサブグループＶＨ３配列１－３ ３－０７に由来する。

【0066】

従って、一例では、ＣＤＲ－Ｈ１について配列番号１に示される配列、ＣＤＲ－Ｈ２について配列番号２に示される配列及びＣＤＲＨ３について配列番号３に示される配列を含み、重鎖フレームワーク領域がＪＨ４と一緒にヒトサブグループＶＨ３配列１－３ ３－０７に由来するヒト化抗体が提供される。

【0067】

ヒトＪＨ４の配列は以下の通りである：（ＹＦＤＹ）ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ（配列番号７０）。ＹＦＤＹモチーフはＣＤＲ－Ｈ３の一部であり、フレームワーク４の一部ではない（Ｒａｖｅｔｃｈ，ＪＶら、１９８１、Ｃｅｌｌ、２７、５８３－５９１）。

【0068】

一例では、抗体の重鎖可変ドメインは配列番号２９に示される配列を含む。

【0069】

本発明のヒト化抗体の軽鎖についての好適なフレームワーク領域は、ＪＫ２（配列番号５４）と一緒にヒト生殖細胞サブグループＶＫ１配列２－１－（１）Ａ３０に由来する。

【0070】

従って、一例では、ＣＤＲ－Ｌ１について配列番号４に示される配列、ＣＤＲ－Ｌ２について配列番号５に示される配列及びＣＤＲＬ３について配列番号６に示される配列を含み、軽鎖フレームワーク領域が、ＪＫ２と一緒にヒトサブグループＶＫ１配列２－１－（１）Ａ３０に由来するヒト化抗体が提供される。

【0071】

ＪＫ２配列は以下の通りである：（ＹＴ）ＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号７１）。ＹＴモチーフはＣＤＲ－Ｌ３の一部であり、フレームワーク４の一部ではない（Ｈｉｅｔｅｒ，ＰＡ．ら、１９８２、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２５７、１５１６－１５２２）。

【0072】

一例では、抗体の軽鎖可変ドメインは配列番号１５に示される配列を含む。

【0073】

本発明のヒト化抗体において、フレームワーク領域はアクセプター抗体の配列と正確に同じ配列を有することを必要としない。例えば、異常な残基は、アクセプター鎖のクラス又は種類について、より頻繁に存在する残基に変更されてもよい。或いは、アクセプターフレームワーク領域内の選択される残基は、それらがドナー抗体内の同じ位置に見られる残基に対応するように変更されてもよい（Ｒｅｉｃｈｍａｎｎら、１９９８、Ｎａｔｕｒｅ、３３２、３２３－３２４を参照のこと）。このような変更はドナー抗体の親和性を戻すための最低限の必要性にとどめられるべきである。変更する必要があり得るアクセプターフレームワーク領域内の残基を選択するためのプロトコルはＷＯ９１／０９９６７に記載されている。

【0074】

それ故、一実施形態では、フレームワーク内の１、２、３、４又は５個の残基は代替のアミノ酸残基と置き換えられる。

【0075】

従って、一例では、重鎖の可変ドメインの少なくとも３、２４、７６、９３及び９４位の各々における残基（Ｋａｂａｔ番号付け）がドナー残基である、ヒト化抗体が提供される。例えば、配列番号２９に示される配列を参照のこと。

【0076】

一実施形態では、重鎖可変ドメインの残基３は代替のアミノ酸、例えばグルタミンと置き換えられる。

【0077】

一実施形態では、重鎖可変ドメインの残基２４は代替のアミノ酸、例えばアラニンと置き換えられる。

【0078】

一実施形態では、重鎖可変ドメインの残基７６は代替のアミノ酸、例えばアスパラギンと置き換えられる。

【0079】

一実施形態では、重鎖の残基９３は代替のアミノ酸、例えばアラニンと置き換えられる。

【0080】

一実施形態では、重鎖の残基９４は代替のアミノ酸、例えばアルギニンと置き換えられる。

【0081】

一実施形態では、本開示によるヒト化重鎖可変領域において、残基３はグルタミンであり、残基２４はアラニンであり、残基７６はアスパラギンであり、残基９３はアラニンであり、残基９４はアルギニンである。

【0082】

従って、一例では、軽鎖の可変ドメインの少なくとも３６、３７及び５８位の各々における残基（Ｋａｂａｔ番号付け）がドナー残基である、ヒト化抗体が提供される。例えば配列番号１５に示される配列を参照のこと。

【0083】

一実施形態では、軽鎖可変ドメインの残基３６は、代替のアミノ酸、例えばチロシンと置き換えられる。

【0084】

一実施形態では、軽鎖可変ドメインの残基３７は、代替のアミノ酸、例えばグルタミンと置き換えられる。

【0085】

一実施形態では、軽鎖可変ドメインの残基５８は、代替のアミノ酸、例えばバリンと置き換えられる。

【0086】

一実施形態では、本開示によるヒト化重鎖可変領域において、残基３６はチロシンであり、残基３７はグルタミンであり、残基５８はバリンである。

【0087】

一実施形態では、本開示は、本明細書に開示されている配列と８０％類似又は同一である、例えば、関連配列、例えば、可変ドメイン配列、ＣＤＲ配列又はＣＤＲを除く可変ドメイン配列の一部又は全てにわたって８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％類似又は同一である抗体配列を提供する。一実施形態では、関連配列は配列番号１５である。一実施形態では、関連配列は配列番号２９である。

【0088】

一実施形態では、本発明は、重鎖の可変ドメインが、配列番号２９に示される配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性又は類似性を有する配列を含む、重鎖を含むヒトＦｃＲｎに結合する抗体分子を提供する。

【0089】

一実施形態では、本発明は、軽鎖の可変ドメインが、配列番号１５に示される配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性又は類似性を有する配列を含む、軽鎖を含むヒトＦｃＲｎに結合する抗体分子を提供する。

【0090】

一実施形態では、本発明は、抗体が、配列番号２９に示される配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％類似又は同一である重鎖可変ドメインを有するが、抗体分子が、ＣＤＲ－Ｈ１について配列番号１に示される配列、ＣＤＲ－Ｈ２について配列番号２に示される配列及びＣＤＲ－Ｈ３について配列番号３に示される配列を有する、ヒトＦｃＲｎに結合する抗体分子を提供する。

【0091】

一実施形態では、本発明は、抗体が、配列番号１５に示される配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％類似又は同一である軽鎖可変ドメインを有するが、抗体分子が、ＣＤＲ－Ｌ１について配列番号４に示される配列、ＣＤＲ－Ｌ２について配列番号５に示される配列及びＣＤＲ－Ｌ３について配列番号６に示される配列を有する、ヒトＦｃＲｎに結合する抗体分子を提供する。

【0092】

一実施形態では、本発明は、抗体が、配列番号２９に示される配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％類似又は同一である重鎖可変ドメイン及び配列番号１５に示される配列と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％類似又は同一である軽鎖可変ドメインを有するが、抗体分子は、ＣＤＲ－Ｈ１について配列番号１に示される配列、ＣＤＲ－Ｈ２について配列番号２に示される配列、ＣＤＲ－Ｈ３について配列番号３に示される配列、ＣＤＲ－Ｌ１について配列番号４に示される配列、ＣＤＲ－Ｌ２について配列番号５に示される配列及びＣＤＲ－Ｌ３について配列番号６に示される配列を有する、ヒトＦｃＲｎに結合する抗体分子を提供する。

【0093】

本明細書で使用される場合、「同一性」とは、並べられた配列における任意の特定の位置にて、アミノ酸残基が配列間で同一であることを示す。本明細書で使用される場合、「類似性」とは、並べられた配列における任意の特定の位置にて、アミノ酸残基が配列間で類似の種類であることを示す。例えば、ロイシンはイソロイシン又はバリンと置換されてもよい。多くの場合、互いに置換され得る他のアミノ酸には、限定されないが、以下が含まれる：
－ フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）、
－ リシン、アルギニン及びヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）、
－ アスパラギン酸及びグルタミン酸（酸性側鎖を有するアミノ酸）、
－ アスパラギン及びグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）、並びに
－ システイン及びメチオニン（硫黄含有側鎖を有するアミノ酸）。同一性及び類似性の程度は容易に計算され得る（分子計算生物学（Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．、ｅｄ．、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８８；バイオコンピューティング．インフォマティクス及びゲノムプロジェクト（Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ．Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ）、Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．、ｅｄ．、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９９３；配列データのコンピュータ解析（Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄａｔａ）、Ｐａｒｔ １、Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．、及びＧｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．、ｅｄｓ．、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ、１９９４；分子生物学における配列解析（Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）、ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９８７、配列解析プライマー（Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐｒｉｍｅｒ）、Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．及びＤｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．、ｅｄｓ．、Ｍ Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９９１、ＮＣＢＩから入手可能なＢＬＡＳＴ（商標）ソフトウェア（ｔｈｅ ＢＬＡＳＴ^ＴＭ ｓｏｆｔｗａｒｅ ａｖａｉｌａｂｌｅ ｆｒｏｍ ＮＣＢＩ）（Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら、１９９０、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０；Ｇｉｓｈ，Ｗ． ＆ Ｓｔａｔｅｓ、Ｄ．Ｊ．１９９３、Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔ．３：２６６－２７２．Ｍａｄｄｅｎ，Ｔ．Ｌ．ら、１９９６、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２６６：１３１－１４１；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら、１９９７、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２；Ｚｈａｎｇ，Ｊ． ＆ Ｍａｄｄｅｎ，Ｔ．Ｌ．１９９７、Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．７：６４９－６５６）。

【0094】

本発明の抗体分子は、完全長重鎖及び軽鎖又はそれらの断片を有する完全抗体分子を含んでもよく、限定されないが、Ｆａｂ、修飾Ｆａｂ、Ｆａｂ’、修飾Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ、単一ドメイン抗体（例えばＶＨ又はＶＬ又はＶＨＨ）、ｓｃＦｖ、二、三又は四価抗体、Ｂｉｓ－ｓｃＦｖ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ及び上記のいずれかのエピトープ結合断片であってもよい（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ及びＨｕｄｓｏｎ、２００５、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（９）：１１２６－１１３６；Ａｄａｉｒ及びＬａｗｓｏｎ、２００５、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ Ｒｅｖｉｅｗｓ－Ｏｎｌｉｎｅ ２（３）、２０９－２１７を参照のこと）。これらの抗体断片を創出し、製造する方法は、当該分野において周知である（例えば、Ｖｅｒｍａら、１９９８、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ、２１６、１６５－１８１を参照のこと）。本発明に使用するための他の抗体断片は、国際特許出願ＷＯ２００５／００３１６９、ＷＯ２００５／００３１７０及びＷＯ２００５／００３１７１に記載されているＦａｂ及びＦａｂ’断片を含む。多価抗体は、複数の特異性、例えば二重特異性を含んでもよいか、又は単一特異性であってもよい（例えば、ＷＯ９２／２２８５３、ＷＯ０５／１１３６０５、ＷＯ２００９／０４０５６２及びＷＯ２０１０／０３５０１２を参照のこと）。

【0095】

一実施形態では、本開示の抗体分子は、例えば軽鎖及び重鎖のそれぞれについて配列番号１５及び２９に示される可変領域を含む抗体Ｆａｂ’断片である。一実施形態では、抗体分子は、配列番号２２に示される配列を含む軽鎖及び配列番号３６に示される配列を含む重鎖を有する。

【0096】

一実施形態では、本開示の抗体分子は、例えば軽鎖及び重鎖のそれぞれについて配列番号１５及び２９に示される可変領域を含む完全長ＩｇＧ１抗体である。一実施形態では、抗体分子は、配列番号２２に示される配列を含む軽鎖及び配列番号７２に示される配列を含む重鎖を有する。

【0097】

一実施形態では、本開示の抗体分子は、例えば軽鎖及び重鎖のそれぞれについて配列番号１５及び２９に示される可変領域を含む完全長ＩｇＧ４フォーマットである。一実施形態では、抗体分子は、配列番号２２に示される配列を含む軽鎖及び配列番号８７に示される配列を含む重鎖を有する。

【0098】

一実施形態では、本開示の抗体分子は、例えば軽鎖及び重鎖のそれぞれについて配列番号１５及び２９に示される可変領域を含む完全長ＩｇＧ４Ｐフォーマットである。一実施形態では、抗体分子は、配列番号２２に示される配列を含む軽鎖及び配列番号４３に示される配列を含む重鎖を有する。

【0099】

本明細書で利用されるＩｇＧ４Ｐは、アミノ酸２４１がプロリンで置き換えられる野生型ＩｇＧ４アイソタイプの変異であり、例えば、Ａｎｇａｌら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９９３、３０（１）、１０５－１０８に記載されているように２４１位におけるセリンがプロリンに変化している場所を参照のこと。

【0100】

一実施形態では、本開示による抗体は、例えば、ＷＯ２００９／０４０５６２、ＷＯ２０１００３５０１２、ＷＯ２０１１／０３０１０７、ＷＯ２０１１／０６１４９２及びＷＯ２０１１／０８６０９１（これらの全ては本明細書に参照により組み込まれる）に記載されているように、免疫グロブリン部分、例えばＦａｂ又はＦａｂ’断片を含むＦｃＲｎ結合抗体融合タンパク質、及びそれらに直接又は間接的に連結された１つ又は２つの単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）として提供される。

【0101】

一実施形態では、融合タンパク質は、例えばジスルフィド結合によって任意選択に連結された可変重（ＶＨ）及び可変軽（ＶＬ）対として２つのドメイン抗体を含む。

【0102】

一実施形態では、融合タンパク質のＦａｂ又はＦａｂ’エレメントは、単一ドメイン抗体（単数又は複数）と同じ又は類似の特異性を有する。一実施形態では、Ｆａｂ又はＦａｂ’は、単一ドメイン抗体（単数又は複数）と異なる特異性を有する。すなわち、融合タンパク質は多価である。一実施形態では、本発明による多価融合タンパク質はアルブミン結合部位を有し、例えばその中のＶＨ／ＶＬ対はアルブミン結合部位を提供する。１つのこのような実施形態では、重鎖は配列番号５０に示される配列を含み、軽鎖は配列番号４６又は配列番号７８に示される配列を含む。

【0103】

一実施形態では、本開示によるＦａｂ又はＦａｂ’はＰＥＧ分子又はヒト血清アルブミンにコンジュゲートされている。

【0104】

ＣＡ１７０＿０１５１９ｇ５７及び１５１９及び１５１９．ｇ５７は、本明細書において互換的に利用され、多くの異なるフォーマットで使用され得る抗体可変領域の特異的対を指すために使用される。これらの可変領域は、配列番号２９に示される重鎖配列及び配列番号１５に示される軽鎖配列である（図１）。

【0105】

本発明の抗体分子の定常領域ドメインは、存在する場合、抗体分子の提案される機能、特に必要とされ得るエフェクター機能を考慮して選択されてもよい。例えば、定常領域ドメインは、ヒトＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ又はＩｇＭドメインであってもよい。特に、抗体分子が治療的使用を意図し、抗体エフェクター機能が必要とされる場合、特にＩｇＧ１及びＩｇＧ３アイソタイプのヒトＩｇＧ定常領域ドメインが使用されてもよい。或いは、抗体分子が治療目的を意図し、抗体エフェクター機能が必要とされない場合、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４アイソタイプが使用されてもよい。これらの定常領域ドメインの配列バリアントも使用されてもよいことが理解されるであろう。例えば、Ａｎｇａｌら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９９３、３０（１）、１０５－１０８に記載されているように、２４１位におけるセリンがプロリンに変化されているＩｇＧ４分子が使用されてもよい。また、抗体は様々な翻訳後修飾を受けてもよいことは当業者により理解されるであろう。これらの修飾の種類及び程度は、多くの場合、抗体を発現するために使用される宿主細胞系及び培養条件に依存する。このような修飾は、グリコシル化の変化、メチオニン酸化、ジケトピペラジン形成、アスパラギン酸異性化及びアスパラギン脱アミド化を含んでもよい。頻繁な修飾は、（Ｈａｒｒｉｓ、ＲＪ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ７０５：１２９－１３４、１９９５に記載されているように）カルボキシペプチダーゼの作用に起因するカルボキシ末端塩基性残基（リシン又はアルギニンなど）の損失である。従って、抗体重鎖のＣ末端リシンは存在しなくてもよい。

【0106】

一実施形態では、抗体重鎖はＣＨ１ドメインを含み、抗体軽鎖はＣＬドメイン、カッパ又はラムダのいずれかを含む。

【0107】

一実施形態では、軽鎖は配列番号２２に示される配列を有し、重鎖は配列番号４３に示される配列を有する。

【0108】

一実施形態では、軽鎖は配列番号２２に示される配列を有し、重鎖は配列番号７２に示される配列を有する。

【0109】

一実施形態では、抗体分子由来のＣ末端アミノ酸は翻訳後修飾の間に切断される。

【0110】

一実施形態では、抗体分子由来のＮ末端アミノ酸は翻訳後修飾の間に切断される。

【0111】

本開示によって提供される抗体、特に重鎖配列ｇＨ２０（配列番号２９）及び／又は軽鎖配列ｇＬ２０（配列番号１５）を含む抗体が結合することができるヒトＦｃＲｎの特異的領域又はエピトープも本開示によって提供される。

【0112】

ヒトＦｃＲｎポリペプチドのこの特定の領域又はエピトープは、本発明によって提供される抗体のいずれか１つと組み合わせて、当該分野において公知の任意の好適なエピトープマッピング法によって識別され得る。このような方法の例は、抗体によって認識されるエピトープの配列を含有する抗体と特異的に結合できる最小の断片を有する本発明の抗体への結合に関して、ＦｃＲｎに由来する様々な長さのペプチドをスクリーニングすることを含む。ＦｃＲｎペプチドは、合成的に又はＦｃＲｎポリペプチドのタンパク質分解によって作製され得る。抗体に結合するペプチドは、例えば、質量分光分析によって識別され得る。別の例では、ＮＭＲ分光法又はＸ線結晶学が、本開示の抗体が結合しているエピトープを識別するために使用されてもよい。一旦識別されると、本開示の抗体に結合するエピトープ断片は、必要とされる場合、同じエピトープに結合する更なる抗体を得るための免疫原として使用されてもよい。

【0113】

一実施形態では、本開示の抗体は、以下に示されているようなヒトＦｃＲｎアルファ鎖細胞外配列に結合する：

【化1】

【0114】

下線の残基は、ヒトＦｃＲｎとヒトＩｇＧのＦｃ領域との相互作用に重要であることが知られているものであり、太字で強調されているこれらの残基は、ＦｃＲｎと、重鎖配列ｇＨ２０（配列番号２９）及び軽鎖配列ｇＬ２０（配列番号１５）を含む本開示の１５１９抗体との相互作用に関与するものである。

【0115】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸並びに配列番号９４のＰ１００、Ｅ１１５、Ｅ１１６、Ｆ１１７、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３、Ｑ１２４、Ｇ１２８、Ｇ１２９、Ｄ１３０、Ｗ１３１、Ｐ１３２及びＥ１３３からなる群から選択される少なくとも１つの残基、例えば、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の残基を含むヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0116】

一例では、抗体分子のエピトープは、本明細書の例に記載されているように、β２Ｍとの複合体においてＦｃＲｎアルファ鎖細胞外配列（配列番号９４）を使用してＸ線結晶学によって決定される。

【0117】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸並びに配列番号９４のＥ１１５、Ｅ１１６、Ｆ１１７、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３及びＱ１２４からなる群から選択される少なくとも１つの残基、例えば、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の残基を含む、ヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0118】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９からなる群から選択される少なくとも２、３、４又は５個のアミノ酸並びに配列番号９４のＥ１１５、Ｅ１１６、Ｆ１１７、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３及びＱ１２４からなる群から選択される少なくとも１つの残基を含む、ヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0119】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸並びに配列番号９４のＰ１００、Ｅ１１５、Ｅ１１６、Ｆ１１７、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３、Ｑ１２４、Ｇ１２８、Ｇ１２９、Ｄ１３０、Ｗ１３１、Ｐ１３２及びＥ１３３からなる群から選択される少なくとも１つの残基を含む、ヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0120】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸並びに配列番号９４のＰ１００、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３、Ｑ１２４及びＧ１２８からなる群から選択される少なくとも１つの残基を含む、ヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0121】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９並びに配列番号９４のＰ１００、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３、Ｑ１２４及びＧ１２８からなる群から選択される少なくとも１つの残基を含む、ヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0122】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９並びに配列番号９４のＰ１００、Ｅ１１５、Ｅ１１６、Ｆ１１７、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３、Ｑ１２４、Ｇ１２８、Ｇ１２９、Ｄ１３０、Ｗ１３１、Ｐ１３２及びＥ１３３からなる群から選択される少なくとも１つの残基を含む、ヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0123】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基Ｐ１００、Ｖ１０５、Ｐ１０６、Ｔ１０７、Ａ１０８及びＫ１０９並びに配列番号９４のＥ１１５、Ｅ１１６、Ｆ１１７、Ｍ１１８、Ｎ１１９、Ｆ１２０、Ｄ１２１、Ｌ１２２、Ｋ１２３、Ｑ１２４、Ｇ１２８、Ｇ１２９、Ｄ１３０、Ｗ１３１、Ｐ１３２及びＥ１３３からなる群から選択される少なくとも１つの残基を含む、ヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0124】

一例では、「少なくとも１つの残基」は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６個の残基であってもよい。

【0125】

一例では、本発明に使用するための抗体は、配列番号９４の残基１００、１０５～１０９、１１５～１２４及び１２９～１３３を含む又はそれらからなる、ヒトＦｃＲｎのエピトープに結合する抗ＦｃＲｎ抗体分子である。

【0126】

本開示による抗体分子、特に、配列番号２９に示される重鎖配列及び配列番号１５に示される軽鎖配列を含む抗体分子の結合を交差遮断する抗体は、ＦｃＲｎ活性を遮断するのに同様に有用であり得る。従って、本開示はまた、ヒトＦｃＲｎに対する本明細書上記の抗体分子のいずれか１つの結合を交差遮断する、及び／又はこれらの抗体のいずれか１つによってヒトＦｃＲｎへの結合から交差遮断される、本発明に使用するための抗ＦｃＲｎ抗体分子を提供する。一実施形態では、このような抗体は本明細書上記の抗体と同じエピトープと結合する。別の実施形態では、交差遮断中和抗体は、本明細書上記の抗体が結合しているエピトープと隣接及び／又は重複しているエピトープと結合する。

【0127】

交差遮断抗体は、例えば、ヒトＦｃＲｎへの交差遮断抗体の結合が本発明の抗体の結合を防ぐ、又はその逆である、競合的ＥＬＩＳＡ又はＢＩＡｃｏｒｅアッセイを使用することによって、当該分野における任意の好適な方法を使用して識別され得る。このような交差遮断アッセイは、単離された天然若しくは組換えＦｃＲｎ又は好適な融合タンパク質／ポリペプチドを使用してもよい。一例では、結合及び交差遮断は組換えヒトＦｃＲｎ細胞外ドメイン（配列番号９４）を使用して測定される。一例では、組換えヒトＦｃＲｎアルファ鎖細胞外ドメインは、β２ミクログロブリン（β２Ｍ）（配列番号９５）との複合体において使用される。

【0128】

一実施形態では、ＩｇＧに対するＦｃＲｎ結合を遮断し、重鎖が配列番号２９に示される配列を含み、軽鎖が配列番号１５に示される配列を含む、ヒトＦｃＲｎへの抗体の結合を交差遮断する、本発明に使用するための抗ＦｃＲｎ抗体分子が提供される。一実施形態では、本発明によって提供される交差遮断抗体は、配列番号２９に示される重鎖配列及び配列番号１５に示される軽鎖配列を含む抗体の結合を、８０％超、例えば８５％超、例えば９０％超、特に９５％超、阻害する。

【0129】

或いは又は更に、本発明のこの態様による抗ＦｃＲｎ抗体は、配列番号２９に示される重鎖配列及び配列番号１５に示される軽鎖配列を含む抗体によってヒトＦｃＲｎへの結合から交差遮断され得る。従って、ＩｇＧへのＦｃＲｎ結合を遮断し、配列番号２９に示される重鎖配列及び配列番号１５に示される軽鎖配列を含む抗体によってヒトＦｃＲｎへの結合から交差遮断される抗ＦｃＲｎ抗体分子も提供される。一実施形態では、本発明のこの態様によって提供される抗ＦｃＲｎ抗体は、配列番号２９に示される重鎖配列及び配列番号１５に示される軽鎖配列を含む抗体によってヒトＦｃＲｎへ結合することを、８０％超、例えば８５％超、例えば９０％超、特に９５％超、阻害する。

【0130】

一実施形態では、本開示によって提供される交差遮断抗体は完全にヒトである。一実施形態では、本開示によって提供される交差遮断抗体はヒト化されている。一実施形態では、本開示によって提供される交差遮断抗体は、１００ｐＭ以下のヒトＦｃＲｎに対する親和性を有する。一実施形態では、本開示によって提供される交差遮断抗体は、５０ｐＭ以下のヒトＦｃＲｎに対する親和性を有する。親和性は本明細書以下に記載されている方法を使用して測定され得る。

【0131】

抗体又は断片などの生体分子は酸性及び／又は塩基性官能基を含有するので、分子を正味の正又は負電荷にする。全体の「観察される」電荷の量は、実体の絶対的アミノ酸配列、３Ｄ構造における荷電基の局所環境及び分子の環境条件に依存する。等電点（ＰＩ）は、特定の分子又はその溶媒接触可能表面が正味の電荷を保有しないｐＨである。一例では、本発明のＦｃＲｎ抗体及び断片は適切な等電点を有するように操作されてもよい。これにより、より強力な特性、特に好適な溶解度及び／又は安定化プロファイル及び／又は改良された精製特性を有する抗体及び／又は断片が導かれ得る。

【0132】

それ故、一態様では、本開示は、最初に識別された抗体の等電点と異なる等電点を有するように操作されるヒト化ＦｃＲｎ抗体を提供する。抗体は、例えば、酸性アミノ酸残基を１つ又は複数の塩基性アミノ酸残基と置き換えることなどのアミノ酸残基を置き換えることによって操作されてもよい。或いは、塩基性アミノ酸残基が導入されてもよいか、又は酸性アミノ酸残基が除去されてもよい。或いは、分子が許容し難い高ｐＩ値を有する場合、酸性残基が、必要な場合、ｐＩを下げるために導入されてもよい。ｐＩを操作する場合、抗体又は断片の所望の活性を保持することに注意が払われなければならないことが重要である。それ故、一実施形態では、操作された抗体又は断片は、「修飾されていない」抗体又は断片と同じ又は実質的に同じ活性を有する。

【0133】

^＊＊ＥｘＰＡＳＹ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｘｐａｓｙ．ｃｈ／ｔｏｏｌｓ／ｐｉ＿ｔｏｏｌ．ｈｔｍｌ及びｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｕｔ－ａｒｌｅｓ．ｕｐ．ｕｎｉｖ－ｍｒｓ．ｆｒ／ｗ３ｂｂ／ｄ＿ａｂｉｍ／ｃｏｍｐｏ－ｐ．ｈｔｍｌなどのプログラムが、抗体又は断片の等電点を予測するために使用されてもよい。

【0134】

本発明に使用するための抗体分子は、好適には、特にナノモル範囲で高い結合親和性を有する。親和性は、単離された天然又は組換えＦｃＲｎ又は好適な融合タンパク質／ポリペプチドを使用して、本明細書の例に記載されているようにＢＩＡｃｏｒｅを含む、当該分野において公知の任意の好適な方法を使用して測定され得る。一例では、親和性は、本明細書の例（配列番号９４）及びＷＯ２０１４／０１９７２７に記載されている組換えヒトＦｃＲｎ細胞外ドメインを使用して測定される。一例では、親和性は、β２ミクログロブリン（β２Ｍ）（配列番号９５）と会合する組換えヒトＦｃＲｎアルファ鎖細胞外ドメイン（配列番号９４）を使用して測定される。好適には、本発明に使用するための抗体分子は、単離されたヒトＦｃＲｎに対して約１ｎＭ以下の結合親和性を有する。一実施形態では、本発明の抗体分子は、約５００ｐＭ以下の結合親和性（すなわち、より高い親和性）を有する。一実施形態では、本発明の抗体分子は、約２５０ｐＭ以下の結合親和性を有する。一実施形態では、本発明の抗体分子は、約２００ｐＭ以下の結合親和性を有する。一実施形態では、本発明は、約１００ｐＭ以下の結合親和性を有する抗ＦｃＲｎ抗体を提供する。一実施形態では、本発明は、約１００ｐＭ以下の結合親和性を有するヒト化抗ＦｃＲｎ抗体を提供する。一実施形態では、本発明は、５０ｐＭ以下の結合親和性を有する抗ＦｃＲｎ抗体を提供する。

【0135】

重要なことに、本発明に使用するための抗体は、同等の結合親和性でｐＨ６及びｐＨ７．４の両方にてヒトＦｃＲｎに結合できる。従って、有益には、抗体は、エンドソームを有さなくても、ＦｃＲｎに結合し続け、それにより、ＩｇＧに対するＦｃＲｎ結合の遮断を最大化することができる。

【0136】

一例では、本開示は、ｐＨ６及びｐＨ７．４にて測定した場合、１００ｐＭ以下の結合親和性を有する抗ＦｃＲｎ抗体を提供する。一例では、本発明に使用するための抗体は、ｐＨ６及びｐＨ７．４にて測定した場合、５０ｐＭ以下の結合親和性を有する抗ＦｃＲｎ抗体である。

【0137】

本発明の抗体又は結合断片の親和性並びに結合剤（抗体など）が結合を阻害する程度は、従来技術、例えば、Ｓｃａｔｃｈａｒｄら（Ａｎｎ．ＫＹ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．５１：６６０－６７２（１９４９））により記載されているものを使用して当業者によって、又はＢＩＡｃｏｒｅなどのシステムを使用して表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によって決定され得る。表面プラズモン共鳴に関して、標的分子は固相上に固定化され、フローセルと共に流している移動相においてリガンドに曝露される。固定化された標的と結合しているリガンドが存在する場合、局所屈折率が変化し、反射光の強さの変化を検出することによってリアルタイムでモニターされ得る、ＳＰＲ角の変化が生じる。ＳＰＲ信号の変化の速度は、結合反応の会合及び解離段階について見かけの速度定数を得るように分析され得る。これらの値の比は見かけの平衡定数（親和性）を与える（例えば、Ｗｏｌｆｆら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５３：２５６０－６５（１９９３）を参照のこと）。

【0138】

本発明では、試験抗体分子の親和性は典型的に、以下のようにＳＰＲを使用して決定される。試験抗体分子は固相上で捕捉され、β２Ｍとの非共有結合複合体におけるヒトＦｃＲｎアルファ鎖細胞外ドメインは移動相において捕捉抗体の上を流れ、ヒトＦｃＲｎに対する試験抗体分子の親和性が決定される。試験抗体分子は、任意の適切な方法を使用して、例えば、抗Ｆｃ又は抗Ｆａｂ’特異的捕捉剤を使用して固相チップ表面上で捕捉され得る。一例では、親和性がｐＨ６にて決定される。一例では、親和性がｐＨ７．４にて決定される。

【0139】

本発明によって提供される抗体の親和性は、当該分野において公知の任意の好適な方法を使用して変化されてもよいことは理解されるであろう。従って、本発明はまた、ＦｃＲｎに対して改良された親和性を有する、本発明の抗体分子のバリアントに関する。このようなバリアントは、ＣＤＲを変異させること（Ｙａｎｇら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２５４、３９２－４０３、１９９５）、鎖シャッフリング（Ｍａｒｋｓら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０、７７９－７８３、１９９２）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）の変異誘発系の使用（Ｌｏｗら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２５０、３５９－３６８、１９９６）、ＤＮＡシャッフリング（Ｐａｔｔｅｎら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、８、７２４－７３３、１９９７）、ファージディスプレイ（Ｔｈｏｍｐｓｏｎら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２５６、７７－８８、１９９６）及びセクシャルＰＣＲ（Ｃｒａｍｅｒｉら、Ｎａｔｕｒｅ、３９１、２８８－２９１、１９９８）を含む多くの親和性成熟プロトコルによって得られ得る。Ｖａｕｇｈａｎら（上記）は親和性成熟のこれらの方法を説明している。

【0140】

一実施形態では、本発明に使用するための抗体分子はヒトＦｃＲｎ活性を遮断する。ＦｃＲｎを遮断する抗体の能力を決定するのに好適なアッセイはＷＯ２０１４／０１９７２７に記載されている。抗体が循環ＩｇＧ分子とのＦｃＲｎ相互作用を遮断するかどうかを決定するのに好適なアッセイもまた、ｉｎ ｖｉｔｒｏで再循環するＩｇＧを遮断する抗体分子の能力を決定するための好適なアッセイと共にＷＯ２０１４／０１９７２７に記載されている。

【0141】

所望の場合、本発明に使用するための抗体は、１つ又は複数のエフェクター分子（単数又は複数）にコンジュゲートされてもよい。エフェクター分子は、単一のエフェクター分子又は２つ以上のこのような分子を含んでもよいので、本発明の抗体と結合できる単一部分を形成するように連結されることは理解されるであろう。エフェクター分子と連結された抗体断片を得ることが望ましい場合、これは、抗体断片が直接的に又はカップリング剤を介してのいずれかでエフェクター分子と連結される、標準的な化学又は組換えＤＮＡ手順によって調製され得る。このようなエフェクター分子を抗体にコンジュゲートするための技術は当該分野において周知である（Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、第２版、Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、ｅｄｓ、１９８７、ｐｐ．６２３－５３；Ｔｈｏｒｐｅら、１９８２、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．、６２：１１９－５８及びＤｕｂｏｗｃｈｉｋら、１９９９、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、８３、６７－１２３を参照のこと）。特定の化学的手順には、例えば、ＷＯ９３／０６２３１、ＷＯ９２／２２５８３、ＷＯ８９／００１９５、ＷＯ８９／０１４７６及びＷＯ０３／０３１５８１に記載されているものが含まれる。或いは、エフェクター分子がタンパク質又はポリペプチドである場合、例えばＷＯ８６／０１５３３及びＥＰ０３９２７４５に記載されている組換えＤＮＡ手順を使用して連結が達成され得る。

【0142】

本明細書で使用される場合、エフェクター分子という用語は、例えば、抗腫瘍剤、薬物、毒素、生物学的に活性なタンパク質、例えば酵素、他の抗体又は抗体断片、合成又は天然に存在するポリマー、核酸及びその断片、例えばＤＮＡ、ＲＮＡ及びそれらの断片、放射性核種、特に放射性ヨウ化物（ｒａｄｉｏｉｏｄｉｄｅ）、放射性同位体、キレート金属、ナノ粒子及び蛍光化合物などのレポーター基又はＮＭＲ若しくはＥＳＲ分光法によって検出され得る化合物を含む。

【0143】

エフェクター分子の例には、細胞毒素又は細胞に有害である（例えば死滅させる）任意の薬剤を含む細胞傷害剤が含まれ得る。例には、コンブレスタチン（ｃｏｍｂｒｅｓｔａｔｉｎ）、ドラスタチン、エポチロン、スタウロスポリン、マイタンシノイド、スポンギスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）、リゾキシン、ハリコンドリン、ロリジン、ヘミアステリン、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド（ｔｅｎｏｐｏｓｉｄｅ）、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１－デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、及びピューロマイシン並びにそれらの類似体又は相同体が含まれる。

【0144】

エフェクター分子にはまた、限定されないが、代謝拮抗薬（例えばメトトレキサート、６－メルカプトプリン、６－チオグアニン、シタラビン、５－フルオロウラシルデカルバジン）、アルキル化剤（例えばメクロレタミン、チオテパクロラムブシル（ｔｈｉｏｅｐａ ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）及びロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｔｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ及びｃｉｓ－ジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン（例えばダウノルビシン（以前はダウノマイシン）及びドキソルビシン）、抗生物質（例えばダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシン、アントラマイシン（ＡＭＣ）、カリケアマイシン又はデュオカルマイシン）及び抗有糸分裂剤（例えばビンクリスチン及びビンブラスチン）が含まれる。

【0145】

他のエフェクター分子は、^１１１Ｉｎ及び^９０Ｙ、Ｌｕ^１７７、ビスマス^２１３、カリフォルニウム^２５２、イリジウム^１９２及びタングステン^１８８／レニウム^１８８などのキレート放射性核種又は限定されないが、アルキルホスホコリン、トポイソメラーゼＩ阻害剤、タキソイド及びスラミンなどの薬物を含んでもよい。

【0146】

他のエフェクター分子は、タンパク質、ペプチド及び酵素を含む。目的の酵素には、限定されないが、タンパク質分解酵素、加水分解酵素、リアーゼ、イソメラーゼ、トランスフェラーゼが含まれる。目的のタンパク質、ポリペプチド及びペプチドには、限定されないが、免疫グロブリン、アブリン、リシンＡ、緑膿菌外毒素又はジフテリア毒素などの毒素、インスリン、腫瘍壊死因子、α－インターフェロン、β－インターフェロン、神経成長因子、血小板由来成長因子又は組織プラスミノゲン活性化因子などのタンパク質、血栓剤又は血管新生阻害剤、例えばアンギオスタチン若しくはエンドスタチン又はリンホカイン、インターロイキン－１（ＩＬ－１）、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）若しくは他の成長因子などの生物反応修飾物質及び免疫グロブリンが含まれる。

【0147】

他のエフェクター分子は、例えば診断に有用な検出可能な物質を含んでもよい。検出可能な物質の例には、種々の酵素、補欠分子族、蛍光材料、発光材料、生物発光材料、放射性核種、陽電子放出金属（陽電子放出断層撮影法における使用のため）、及び非放射性常磁性金属イオンが含まれる。概して、診断として使用するための抗体にコンジュゲートされ得る金属イオンについて米国特許第４，７４１，９００号を参照のこと。好適な酵素には、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ又はアセチルコリンエステラーゼが含まれ、好適な補欠分子族には、ストレプトアビジン、アビジン及びビオチンが含まれ、好適な蛍光材料には、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアナート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、塩化ダンシル及びフィコエリトリンが含まれ、好適な発光材料には、ルミノールが含まれ、好適な生物発光材料には、ルシフェラーゼ、ルシフェリン及びエクオリンが含まれ、好適な放射性核種には、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^１１１Ｉｎ及び^９９Ｔｃが含まれる。

【0148】

別の例では、エフェクター分子は、ｉｎ ｖｉｖｏで抗体の半減期を増加させることができ、及び／又は抗体の免疫原性を低減させることができ、及び／又は上皮バリアにわたって抗体の免疫系への送達を向上させることができる。この種類の好適なエフェクター分子の例には、ＷＯ０５／１１７９８４に記載されているものなどのポリマー、アルブミン、アルブミン結合タンパク質又はアルブミン結合化合物が含まれる。

【0149】

エフェクター分子がポリマーである場合、それは、概して、合成又は天然に存在するポリマー、例えば任意選択に置換された直鎖若しくは分岐鎖ポリアルキレン、ポリアルケニレン若しくはポリオキシアルキレンポリマー又は分岐若しくは非分岐多糖、例えばホモ－又はヘテロ－多糖であってもよい。

【0150】

上述の合成ポリマーに存在し得る特定の任意選択の置換基には、１つ又は複数のヒドロキシ、メチル又はメトキシ基が含まれる。

【0151】

合成ポリマーの特定の例には、任意選択に置換された直鎖又は分岐鎖ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）ポリ（ビニルアルコール）又はそれらの誘導体、特に、メトキシポリ（エチレングリコール）などの任意選択に置換されたポリ（エチレングリコール）又はそれらの誘導体が含まれる。

【0152】

特定の天然に存在するポリマーには、ラクトース、アミロース、デキストラン、グリコーゲン又はそれらの誘導体が含まれる。

【0153】

一実施形態では、ポリマーは、ヒト血清アルブミン又はその断片などのアルブミン又はその断片である。

【0154】

本明細書で使用される場合、「誘導体」は、反応性誘導体、例えばマレイミドなどのチオール選択的反応基を含むことを意図する。反応基は、直接的に又はリンカーセグメントを介してポリマーに連結され得る。このような基の残基は、一部の場合、抗体断片とポリマーとの間の連結基として製品の一部を形成することは理解されるであろう。

【0155】

ポリマーのサイズは、所望の場合、変化されてもよいが、一般に、５００Ｄａ～５００００Ｄａ、例えば５０００～４００００Ｄａ、例えば２００００～４００００Ｄａの範囲の平均分子量である。ポリマーのサイズは、特に、製品の意図する使用、例えば腫瘍などのある特定の組織に局在化する能力又は延長した循環半減期に基づいて選択されてもよい（概説のために、Ｃｈａｐｍａｎ、２００２、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ、５４、５３１－５４５を参照のこと）。それ故、例えば、腫瘍の治療に使用するために、例えば、製品が循環したままで、組織に浸透することを意図する場合、例えば、約５０００Ｄａの分子量を有する低分子量ポリマーを使用することが有利であり得る。製品が循環中に存在したままである用途に関して、例えば、２００００Ｄａ～４００００Ｄａの範囲の分子量を有する、より高い分子量のポリマーを使用することが有利であり得る。

【0156】

好適なポリマーには、特に、約１５０００Ｄａ～約４００００Ｄａの範囲の分子量を有する、ポリ（エチレングリコール）若しくは特に、メトキシポリ（エチレングリコール）などのポリアルキレンポリマー又はそれらの誘導体が含まれる。

【0157】

一例では、本発明に使用するための抗体は、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）部分と結合される。１つの特定の例では、抗体は抗体断片であり、ＰＥＧ分子は、抗体断片内に局在化する任意の利用可能なアミノ酸側鎖又は末端アミノ酸官能基、例えば任意の遊離アミノ、イミノ、チオール、ヒドロキシル又はカルボキシル基を介して結合され得る。このようなアミノ酸は抗体断片内に天然に存在し得るか、又は組換えＤＮＡ法を使用して断片内で操作され得る（例えば米国特許第５，２１９，９９６号、米国特許第５，６６７，４２５号、ＷＯ９８／２５９７１、ＷＯ２００８／０３８０２４を参照のこと）。一例では、本発明の抗体分子は、修飾が、エフェクター分子の結合を可能にするために、その重鎖の１つ又は複数のアミノ酸のＣ末端への付加である、修飾されたＦａｂ断片である。

【0158】

好適には、更なるアミノ酸は、エフェクター分子が結合され得る１つ又は複数のシステイン残基を含有する修飾されたヒンジ領域を形成する。多部位が２つ以上のＰＥＧ分子を結合するために使用されてもよい。

【0159】

好適には、ＰＥＧ分子は、抗体断片に局在化した少なくとも１つのシステイン残基のチオール基を介して共有結合する。修飾された抗体断片と結合された各々のポリマー分子は、断片に局在化するシステイン残基の硫黄原子と共有結合され得る。共有結合は一般に、ジスルフィド結合又は特に、硫黄－炭素結合である。チオール基が適切に活性化されたエフェクター分子の結合点として使用される場合、例えばマレイミド及びシステイン誘導体などのチオール選択的誘導体が使用されてもよい。活性化ポリマーは上記のポリマー修飾抗体断片の調製における出発材料として使用されてもよい。活性化ポリマーは、α－ハロカルボン酸又はエステル、例えばヨードアセトアミド、イミド、例えばマレイミド、ビニルスルホン又はジスルフィドなどのチオール反応基を含有する任意のポリマーであってもよい。このような出発材料は、（例えば、Ｎｅｋｔａｒ、以前はＳｈｅａｒｗａｔｅｒ Ｐｏｌｙｍｅｒｓ Ｉｎｃ．、Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ、ＡＬ、ＵＳＡから）商業的に得られてもよいか、又は従来の化学的手順を使用して市販の出発材料から調製されてもよい。特定のＰＥＧ分子には、２０Ｋメトキシ－ＰＥＧ－アミン（Ｎｅｋｔａｒ、以前はＳｈｅａｒｗａｔｅｒ、Ｒａｐｐ Ｐｏｌｙｍｅｒｅ、及びＳｕｎＢｉｏから入手可能）及びＭ－ＰＥＧ－ＳＰＡ（Ｎｅｋｔａｒ、以前はＳｈｅａｒｗａｔｅｒから入手可能）が含まれる。

【0160】

一実施形態では、抗体は、例えばＥＰ０９４８５４４又はＥＰ１０９００３７に開示されている方法に従って、ＰＥＧ化されている、すなわち、それに共有結合しているＰＥＧ（ポリ（エチレングリコール））を有する、修飾されたＦａｂ断片、Ｆａｂ’断片又はｄｉＦａｂである［「ポリ（エチレングリコール）化学、バイオ技術及び生体医学応用（Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ） Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）」、１９９２、Ｊ．Ｍｉｌｔｏｎ Ｈａｒｒｉｓ （ｅｄ）、Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、「ポリ（エチレングリコール）化学及び生物学的応用（Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ） Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）」、１９９７、Ｊ．Ｍｉｌｔｏｎ Ｈａｒｒｉｓ及びＳ．Ｚａｌｉｐｓｋｙ（ｅｄｓ）、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ並びに「生体医科学についてのバイオコンジュゲーションタンパク質カップリング技術（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｏｕｐｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）」、１９９８、Ｍ．Ａｓｌａｍ及びＡ．Ｄｅｎｔ、Ｇｒｏｖｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；Ｃｈａｐｍａｎ，Ａ． ２００２、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ ２００２、５４：５３１－５４５も参照のこと］。一例では、ＰＥＧはヒンジ領域においてシステインと結合される。一例では、ＰＥＧ修飾Ｆａｂ断片は、修飾されたヒンジ領域において単一のチオール基と共有結合したマレイミド基を有する。リシン残基はマレイミド基と共有結合され得、リシン残基上のアミン基の各々は、およそ２０，０００Ｄａの分子量を有するメトキシポリ（エチレングリコール）ポリマーに結合され得る。従って、Ｆａｂ断片と結合したＰＥＧの全分子量は、およそ４０，０００Ｄａであり得る。

【0161】

特定のＰＥＧ分子には、ＰＥＧ２ＭＡＬ４０Ｋ（Ｎｅｋｔａｒ、以前はＳｈｅａｒｗａｔｅｒから入手可能）としても知られている、Ｎ，Ｎ’－ビス（メトキシポリ（エチレングリコール）ＭＷ２０，０００）修飾リシンの２－［３－（Ｎ－マレイミド）プロピオンアミド］エチルアミドが含まれる。

【0162】

ＰＥＧリンカーの代替源には、ＧＬ２－４００ＭＡ３（以下の構造におけるｍは５である）及びＧＬ２－４００ＭＡ（ｍは２である）を供給するＮＯＦが含まれ、ｎはおよそ４５０である：

【化2】

【0163】

すなわち、各ＰＥＧは約２０，０００Ｄａである。

【0164】

それ故、一実施形態では、ＰＥＧは、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＧＬ２－４００ＭＡ３として知られている２，３－ビス（メチルポリオキシエチレン－オキシ）－１－｛［３－（６－マレイミド－１－オキソヘキシル）アミノ］プロピルオキシ｝ヘキサン（２アーム分岐ＰＥＧ、－ＣＨ_２）_３ＮＨＣＯ（ＣＨ_２）_５－ＭＡＬ、Ｍｗ４０，０００である。

【0165】

更に以下の種類の代替のＰＥＧエフェクター分子：

【化3】

がＤｒ Ｒｅｄｄｙ、ＮＯＦ及びＪｅｎｋｅｍから入手可能である。

【0166】

一実施形態では、鎖内のアミノ酸２２６、例えば重鎖のアミノ酸２２６（連続番号付けにより）、例えば配列番号３６のアミノ酸２２６において又は周囲でシステインアミノ酸残基を介して結合される、ＰＥＧ化される（例えば本明細書に記載されているＰＥＧを有する）抗体が提供される。

【0167】

一実施形態では、本開示は、１つ又は複数のＰＥＧポリマー、例えば１つ又は２つのポリマー、例えば４０ｋＤａポリマー（単数又は複数）を含むＦａｂ’ＰＥＧ分子を提供する。

【0168】

一実施形態では、ＰＥＧ分子、デンプン分子又はアルブミン分子などのポリマーにコンジュゲートされたＦａｂ’が提供される。

【0169】

一実施形態では、抗体又は断片は、例えば半減期を増加させるためにデンプン分子にコンジュゲートされている。デンプンをタンパク質にコンジュゲートする方法は、本明細書に参照により組み込まれている米国特許第８，０１７，７３９号に記載されている。

【0170】

本開示はまた、本発明の抗体分子の重鎖及び／又は軽鎖（単数又は複数）をコードする単離されたＤＮＡ配列を提供する。好適には、ＤＮＡ配列は本発明の抗体分子の重鎖又は軽鎖をコードする。本発明のＤＮＡ配列は、例えば、化学的処理によって作製される合成ＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ又はそれらの任意の組合せを含んでもよい。

【0171】

本発明の抗体分子をコードするＤＮＡ配列は当業者に周知の方法により得られ得る。例えば、抗体重鎖及び軽鎖の一部又は全てをコードするＤＮＡ配列は、所望の場合、決定されたＤＮＡ配列から、又は対応するアミノ酸配列に基づいて合成され得る。

【0172】

アクセプターフレームワーク配列をコードするＤＮＡは、当業者に広範に利用可能であり、それらの既知のアミノ酸配列に基づいて容易に合成され得る。

【0173】

分子生物学の標準技術が、本発明の抗体分子をコードするＤＮＡ配列を調製するために使用されてもよい。所望のＤＮＡ配列はオリゴヌクレオチド合成技術を使用して完全に又は部分的に合成されてもよい。部位特異的変異誘発法及びポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術が必要に応じて使用されてもよい。

【0174】

好適なＤＮＡ配列の例は本明細書に提供される。

【0175】

１５１９軽鎖可変領域をコードする好適なＤＮＡ配列の例は、配列番号１６、配列番号１７及び配列番号９０に提供される。１５１９重鎖可変領域をコードする好適なＤＮＡ配列の例は、配列番号３０、配列番号３１及び配列番号９２に提供される。

【0176】

１５１９軽鎖（可変及び定常）をコードする好適なＤＮＡ配列の例は、配列番号２３、配列番号７５及び配列番号９１に提供される。

【0177】

１５１９重鎖（可変及び定常、フォーマットに依存する）をコードする好適なＤＮＡ配列の例は、配列番号３７、３８及び７６（Ｆａｂ’）、配列番号７２又は８５（ＩｇＧ１）、配列番号４４又は９３（ＩｇＧ４Ｐ）及び配列番号８８（ＩｇＧ４）に提供される。

【0178】

本開示はまた、本発明の１つ又は複数のＤＮＡ配列を含む、クローニング又は発現ベクターに関する。従って、本発明の抗体をコードする１つ又は複数のＤＮＡ配列を含む、クローニング又は発現ベクターが提供される。好適には、クローニング又は発現ベクターは、本発明の抗体分子の軽鎖及び重鎖のそれぞれをコードする２つのＤＮＡ配列並びに好適なシグナル配列を含む。一例では、ベクターは重鎖と軽鎖との間に遺伝子間配列を含む（ＷＯ０３／０４８２０８を参照のこと）。

【0179】

ベクターが構築され得る一般的な方法、トランスフェクション法及び培養法は当業者に周知である。これに関して、参照が、「分子生物学における現在のプロトコル（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）」、１９９９、Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ（ｅｄ）、Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ及びＣｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇによって作成されたＭａｎｉａｔｉｓ Ｍａｎｕａｌに対してなされる。

【0180】

本発明の抗体をコードする１つ又は複数のＤＮＡ配列を含む１つ又は複数のクローニング又は発現ベクターを含む宿主細胞も提供される。任意の好適な宿主細胞／ベクター系が、本発明の抗体分子をコードするＤＮＡ配列の発現のために使用されてもよい。細菌、例えば大腸菌及び他の微生物系が使用されてもよいか、又は真核生物、例えば哺乳動物、宿主細胞発現系もまた、使用されてもよい。好適な哺乳動物宿主細胞には、ＣＨＯ、骨髄腫又はハイブリドーマ細胞が含まれる。

【0181】

本発明に使用するための好適な種類のチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）には、ＣＨＯ－ＤＧ４４細胞及びＣＨＯ－ＤＸＢ１１細胞などのｄｈｆｒ－ＣＨＯ細胞を含むＣＨＯ及びＣＨＯ－Ｋ１細胞が含まれ得、それは、ＤＨＦＲ選択可能マーカー又はグルタミン合成酵素選択可能マーカーと共に使用され得るＣＨＯＫ１－ＳＶ細胞と共に使用されてもよい。抗体の発現に使用する他の細胞種類には、リンパ球細胞系、例えばＮＳＯ骨髄腫細胞及びＳＰ２細胞、ＣＯＳ細胞が含まれる。

【0182】

本開示はまた、本発明の抗体分子をコードするＤＮＡからタンパク質の発現を導くのに好適な条件下で本発明のベクターを含有する宿主細胞を培養するステップ、及び抗体分子を単離するステップを含む、本発明による抗体分子を作製するプロセスを提供する。

【0183】

抗体分子は重鎖又は軽鎖ポリペプチドのみを含んでもよく、この場合、重鎖又は軽鎖ポリペプチドのみをコードする配列が、宿主細胞をトランスフェクトするために使用するために必要とされる。重鎖及び軽鎖の両方を含む産物の作製に関して、細胞系が２つのベクターでトランスフェクトされてもよく、第１のベクターは軽鎖ポリペプチドをコードし、第２のベクターは重鎖ポリペプチドをコードする。或いは、単一ベクターが使用されてもよく、ベクターは軽鎖及び重鎖ポリペプチドをコードする配列を含む。

【0184】

本発明に使用するための抗体は、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤又は担体のうちの１つ又は複数と組み合わせて本開示の抗体分子を含む医薬又は診断組成物として提供されてもよい。組成物は、普通、薬学的に許容される担体を通常含む無菌の医薬組成物の一部として供給される。本発明の医薬組成物は、薬学的に許容される賦形剤を更に含んでもよい。

【0185】

本開示はまた、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤又は担体のうちの１つ又は複数と一緒に本発明の抗体分子を添加し、混合するステップを含む、医薬又は診断組成物を調製するプロセスを提供する。

【0186】

抗体分子は、医薬若しくは診断組成物中の唯一の活性成分であってもよいか、又はステロイド若しくは他の薬物分子などの他の抗体成分若しくは非抗体成分を含む他の活性成分を伴ってもよく、一例ではそれらは半減期がＦｃＲｎ結合と独立している薬物分子である。

【0187】

医薬組成物は便宜的に、用量当たり本発明の所定量の活性剤を含有する単位用量形態で提示されてもよい。

【0188】

本開示による抗体の治療用量は、ｉｎ ｖｉｖｏで明らかな毒性作用を示さない。

【0189】

組成物は、患者に個々に投与されてもよいか、又は他の薬剤、薬物若しくはホルモンと組み合わせて（例えば同時、連続又は別々に）投与されてもよい。一実施形態では、本開示による抗体又は抗原結合断片は、コリンエステラーゼ阻害剤、免疫抑制剤又は免疫調節剤と共に利用される。

【0190】

一実施形態では、本開示による抗体又は抗原結合断片は、ステロイド、特にプレドニゾンなどの免疫抑制療法と共に利用される。一実施形態では、本開示による抗体又は抗原結合断片は、ピリドスチグミンなどのコリンエステラーゼ阻害剤と共に利用される。

【0191】

一実施形態では、本開示による抗体又は抗原結合断片は、シクロスポリン又はタクロリムスなどの免疫抑制剤と共に利用される。

【0192】

一実施形態では、本開示による抗体又は断片は、リツキシマブ又は他のＢ細胞療法と共に利用される。

【0193】

一実施形態では、本開示による抗体又は断片は、任意のＢ細胞若しくはＴ細胞調節剤又は免疫調節剤と共に利用される。例には、メトトレキサート、ミコフェノラート（ｍｉｃｒｏｐｈｅｎｙｏｌａｔｅ）及びアザチオプリンが含まれる。

【0194】

好適な併用療法の例は本明細書の例に記載されている。一実施形態では、生物製剤は併用療法として許容されない。

【0195】

薬学的に許容される担体は、組成物を受容する個体に有害な抗体の産生をそれ自体で誘導すべきではなく、毒性であるべきではない。好適な担体は、タンパク質、ポリペプチド、リポソーム、多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリマーアミノ酸、アミノ酸コポリマー及び不活性ウイルス粒子などの、大きく、ゆっくり代謝される巨大分子であってもよい。

【0196】

薬学的に許容される塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩及び硫酸塩などの鉱酸塩又は酢酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩及び安息香酸塩などの有機酸の塩が使用されてもよい。

【0197】

治療組成物中の薬学的に許容される担体は、水、生理食塩水、グリセロール及びエタノールなどの液体を更に含有してもよい。更に、湿潤剤又は乳化剤又はｐＨ緩衝物質などの補助物質がこのような組成物中に存在してもよい。このような担体により、医薬組成物が、患者が摂取するための錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ゲル、シロップ、スラリー及び懸濁剤として製剤化され得る。

【0198】

好適な投与形態には、例えば注射又は注入による、例えばボーラス注射又は持続注入による非経口投与に好適な形態が含まれる。製品が注射又は注入用である場合、それは、油性又は水性ビヒクル中の懸濁剤、液剤又は乳剤の形態をとってもよく、それは、懸濁化剤、防腐剤、安定剤及び／又は分散剤などの製剤化剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ ａｇｅｎｔ）を含有してもよい。或いは、抗体分子は適切な滅菌液を用いて使用前に再構成するための乾燥形態であってもよい。

【0199】

一旦製剤化されると、本発明の組成物は対象に直接投与されてもよい。治療される対象は動物であってもよい。しかしながら、１つ又は複数の実施形態では、組成物はヒト対象への投与に適合される。

【0200】

好適には、本開示による製剤では、最終製剤のｐＨは抗体又は断片の等電点の値と類似しておらず、例えばタンパク質のｐＩが８～９又はそれ以上の範囲である場合、７のｐＨの製剤が適切であり得る。理論により束縛されることを望まないが、このことは最終的に、改良された安定性を有する、例えば抗体又は断片が溶液中に存在したままである最終製剤を提供することができると考えられる。

【0201】

本発明の医薬組成物は、限定されないが、経口、静脈内、筋肉内、動脈内、髄内、髄腔内、脳室内、経皮的、経皮性（例えば、ＷＯ９８／２０７３４を参照のこと）、皮下、腹腔内、鼻腔内、腸内、局所、舌下、膣内又は直腸経路を含む、任意の数の経路によって投与されてもよい。皮下噴射器もまた、本発明の医薬組成物を投与するために使用されてもよい。典型的に、治療組成物は、液体の液剤又は懸濁剤のいずれかとして注射剤として調製されてもよい。注射前に液体ビヒクル中の液剤又は懸濁剤に好適な固体形態もまた、調製されてもよい。

【0202】

組成物の直接送達は、一般に、皮下、腹腔内、静脈内若しくは筋肉内の注射により、又は組織の間質空間への送達により達成される。投薬治療は単回用量スケジュール又は複数回用量スケジュールであってもよい。好ましくは、送達は皮下である。一例では、送達は皮下注入による。一例では、送達は静脈内ではない。

【0203】

組成物中の活性成分は、抗体分子であることが理解されるだろう。従って、それは消化管内で分解しやすい。それ故、組成物が消化管を使用した経路によって投与される場合、組成物は分解から抗体を保護するが、それが消化管から吸収されると、抗体を放出する薬剤を含有することを必要とする。

【0204】

薬学的に許容される担体の十分な説明はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｎ．Ｊ．１９９１）において入手可能である。

【0205】

本発明の抗体は、例えば液剤又は懸濁剤の形態で、溶媒中に分散されて送達されてもよい。それは、適切な生理溶液、例えば、生理食塩水又は他の薬理学的に許容される溶媒若しくは緩衝溶液中に懸濁されてもよい。懸濁剤は、例えば、凍結乾燥抗体を利用できる。

【0206】

治療用の懸濁剤又は液剤の製剤はまた、１つ又は複数の賦形剤を含有してもよい。賦形剤は当該分野において周知であり、緩衝液（例えばクエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液及び重炭酸緩衝液）、アミノ酸、尿素、アルコール、アスコルビン酸、リン脂質、タンパク質（例えば血清アルブミン）、ＥＤＴＡ、塩化ナトリウム、リポソーム、マンニトール、ソルビトール及びグリセロールを含む。液剤又は懸濁剤はリポソーム又は生分解性ミクロスフェア内に封入されてもよい。製剤は一般に、無菌製造プロセスを利用して、実質的に無菌形態で提供される。

【0207】

これは、製剤に使用される緩衝溶媒／溶液の濾過による作製及び滅菌、無菌緩衝溶媒溶液中の抗体の無菌懸濁及び当業者によく知られた方法による無菌容器内での製剤の調剤を含んでもよい。

【0208】

一旦製剤化されると、本開示の組成物はヒト対象に直接投与されてもよいが、本開示はまた、方法が非ヒト対象に利用されてもよいことを企図する。本開示では、ヒトは重症筋無力症（ＭＧ）、一例では全身型重症筋無力症、一例では中等度から重度のＭＧ、一例では中等度から重度の全身型ＭＧに罹患している。ＭＧについての臨床的分類ツールは以下に提示され、アメリカ重症筋無力症財団（ＭＧＦＡ）臨床的分類（ＭＧ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ（ＭＧＦＡ）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）として知られている（Ｊａｒｅｔｚｋｉら、２０００）。これは５段階の分類（Ｉ～Ｖ）であり、クラスが高いほど、より重度の疾患を示す。典型的に、中等度から重度はクラスＩＩ～クラスＩＶａとして分類される。

【0209】

ＭＧＦＡ臨床的分類
クラスＩ：いくらかの眼筋の低下；閉眼の低下を示し得る。他の全ての筋力は正常である。

【0210】

クラスＩＩ：眼筋以外の筋肉に影響を及ぼす軽度の低下；いずれかの重症度の眼筋の低下も示し得る。
Ａ．ＩＩａ．肢筋、体軸筋又は両方に主に影響を及ぼす。口腔咽頭筋のより少ない関与も示し得る。
Ｂ．ＩＩｂ．口腔咽頭筋、呼吸筋又は両方に主に影響を及ぼす。肢筋、体軸筋又は両方のより少ない又は同等の関与も示し得る。

【0211】

クラスＩＩＩ：眼筋以外の筋肉に影響を及ぼす中等度の低下；いずれかの重症度の眼筋の低下も示し得る。
Ａ．ＩＩＩａ．肢筋、体軸筋又は両方に主に影響を及ぼす。口腔咽頭筋のより少ない関与も示し得る。
Ｂ．ＩＩＩｂ．口腔咽頭筋、呼吸筋又は両方に主に影響を及ぼす。肢筋、体軸筋又は両方のより少ない又は同等の関与も示し得る。

【0212】

クラスＩＶ：眼筋以外の筋肉に影響を及ぼす重度の低下；いずれかの重症度の眼筋低下も示し得る。
Ａ．ＩＶａ．肢筋、体軸筋又は両方に主に影響を及ぼす。口腔咽頭筋のより少ない関与も示し得る。
Ｂ．ＩＶｂ．口腔咽頭筋、呼吸筋又は両方に主に影響を及ぼす。肢筋、体軸筋又は両方のより少ない又は同等の関与も示し得る。

【0213】

クラスＶ：慣用の術後管理の間に利用される場合を除いて、人工呼吸器の有無にかかわらず、挿管と定義される。挿管を用いていない栄養チューブの使用は患者をクラスＩＶｂに入れる。

【0214】

ＭＧに至る主な病態生理は、ニコチン性アセチルコリン受容体（ＡＣｈＲ）又は筋特異的キナーゼ（ＭｕＳＫ）タンパク質に対して誘導されたＩｇＧ自己抗体の異常産生であり、両方は、放射性免疫沈降法、ＥＬＩＳＡ及び細胞ベースのアッセイなどの当該分野において公知の標準的な方法を使用して測定され得る。

【0215】

従って、一例では、ヒトは抗ＡＣｈＲ及び／又は抗ＭｕＳＫ自己抗体陽性である。本開示の一例では、ヒトは中等度から重度の全身型ＭＧであり、抗ＡＣｈＲ及び／又は抗ＭｕＳＫ自己抗体陽性である。一例では、ヒトは中等度から重度の全身型ＭＧであり、抗ＡＣｈＲ及び／又は抗ＭｕＳＫ自己抗体陽性であり、ＩＶＩｇ又は血漿交換（ＰＬＥＸ）での治療を考慮されている。

【0216】

臨床研究基準に関する正式な推奨により、患者により報告される機能的及び生活の質の尺度を含む、ＭＧ臨床試験における治療応答を評価するための検証済みの疾患特異的尺度についての必要性が特定された。これらの推奨により、定量的ＭＧスコア（ＱＭＧ）、ＭＧ－日常生活動作プロファイル（ＭＧ－ＡＤＬ）及びＭＧ複合スコア（ＭＧ－Ｃ）の検証研究が導かれた。本明細書並びに図５、６及び７に提供されるこれらの尺度は臨床応答を評価するための一貫した方法論を提供し、患者中心アウトカムを含む。これらのアウトカム尺度、特にＱＭＧ及びＭＧ－ＡＤＬは、新たなＭＧ療法のための臨床試験における主要エンドポイントとして使用されている。

【0217】

従って、一例では、ヒトは、中等度から重度の全身型重症筋無力症と診断され、抗ＡＣｈＲ及び／若しくは抗ＭｕＳＫ自己抗体陽性であり、並びに／又は少なくとも３の重症筋無力症－日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコア及び／若しくは少なくとも１１の定量的重症筋無力症（ＱＭＧ）スコアを有する。

【0218】

一例では、ヒトは、全身型重症筋無力症と診断され、抗ＡＣｈＲ及び／若しくは抗ＭｕＳＫ自己抗体陽性であり、アメリカ重症筋無力症財団（ＭＧＦＡ）クラスＩＩからＩＶａを有し、並びに／又は少なくとも３の重症筋無力症－日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコア及び／若しくは少なくとも１１の定量的重症筋無力症（ＱＭＧ）スコアを有する。

【0219】

ＭＧの治療は依然として困難な臨床的問題のままであり、単独での又は細胞傷害剤と組み合わせた高用量のコルチコステロイドの長期の使用を必要とする。ＭＧにおいて有効であると考えられる療法の多くは、それらの使用を明確に支持するにはデータが不十分であり、全ての患者及び状態において有効ではなく、かなりの毒性及び治療関連罹病を引き起こす広範な免疫抑制作用を有する。更に、疾患の経過における自然変動に起因して、多くの患者は緊急治療を必要とする深刻な状況についての有効な治療を必要とする。

【0220】

現在、ＰＬＥＸ及びＩＶＩｇの両方は、長期の間欠治療を必要とする状況における症状を改善するための標準治療として使用されている。しかしながら、いずれの治療もＭＧについて米国では承認されておらず、それらの手順は多くの場合、患者にとって重荷となる。それ故、全身型ＭＧを有する患者にとって利便性を高めた有効な長期の間欠治療に対する重大なまだ満たされていない医学的必要性がこの患者集団において存在する。

【0221】

一例では、このような患者は、免疫抑制剤などの他の療法に対してもはや応答しない。

【0222】

従って、ＭＧにおける治療に対する目標は、長期の間欠治療（疾患再燃のため）及び／又は長期間維持のための治療を提供することである。

【0223】

従って、一例では、本発明の治療方法はＭＧの長期の間欠治療のために使用され得る。

【0224】

従って、一例では、本発明の治療方法はＭＧの長期間維持治療のために使用され得る。

【0225】

一例では、本発明の治療方法はＭＧの長期の間欠治療及び長期間維持治療の両方のために使用され得る。

【0226】

投与レジメン
組成物は好ましくは治療有効量の抗体（又はその抗原結合断片）を含む。本明細書で使用される場合、「治療有効量」という用語は、標的とする疾患若しくは状態を治療、回復若しくは予防するため、又は検出可能な治療若しくは予防効果を提示するために必要とされる治療剤の量を指す。「投与レジメン」は、投与される抗体又はその断片の量（用量）及び複数回用量が提供される場合、投与時期を企図する。

【0227】

ＭＧ及び治効を特徴付けるいくつかの方法が存在し、対象における陽性生物学的応答を検出するのに適しており、それらは本明細書の例に更に記載されている。

【0228】

１つの評価は定量的重症筋無力症（ＱＭＧ）スコアである（図５）。ＱＭＧは検証済みの評価であり（Ｂａｒｎｅｔｔら、２０１２）、スコアが高いほど、より重度の疾患を示す。各項目についてのスコア付けは、低下なし（０）から重度の低下（３）の範囲であり、総合スコアは０～３９の範囲である。合計スコアの３点の変化は臨床的に関連があるとみなされる。

【0229】

１つの評価は重症筋無力症日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコアである（図７）。ＭＧＡＤＬは、ＱＭＧに基づいて開発された８項目のＰＲＯ手段である（Ｗｏｌｆｅら、１９９９）。ＭＧＡＤＬは、眼、球、呼吸器及び体軸の症状に及ぶ症状及び身体障害を標的とする。最近の研究では、ＭＧＡＤＬの信頼性、妥当性及び反応性が更に評価され、２点の改善が臨床改善を示すことが実証された（Ｍｕｐｐｉｄｉ、２０１２；Ｍｕｐｐｉｄｉら、２０１１）。合計ＭＧＡＤＬスコアは０～２４の範囲であり、スコアが高いほど、より高度の身体障害を示す。

【0230】

１つの評価はＭＧ複合スコアである（図６）。ＭＧ－複合スケールは検証済みの評価であり（Ｂｕｒｎｓら、２０１０ ＭＧ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ａｎｄ ＭＧ－ＱＯＬ１５ Ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｕｐ． ＭＧ複合：重症筋無力症のための有効で信頼できるアウトカム尺度（Ｔｈｅ ＭＧＣｏｍｐｏｓｉｔｅ： Ａ ｖａｌｉｄ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ ｏｕｔｃｏｍｅ ｍｅａｓｕｒｅ ｆｏｒ ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ）． Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ． ２０１０年５月４日、７４（１８）：１４３４－４０）、スコアが高いほど、より重度の疾患を示し、３点の変化は臨床的関連がある。このスケールは１０項目を試験し、個々の項目は異なって重み付けされる。総合スコアは０～５０の範囲である。

【0231】

ＭＧについての治療効果は、本明細書の例に記載されているように、重症筋無力症日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコアの（ベースラインと比較した）低下及び／又は定量的重症筋無力症スコア（ＱＭＧ）の低下及び／又はＭＧ複合スコアの低下によって決定され得る。

【0232】

治効（臨床応答）はベースラインからの変化を測定することによって決定される。例えば、ＱＭＧ応答者はベースラインから３．０点以上の改善を実証する。

【0233】

一例では、ＭＧ－複合応答者はベースラインから３．０点以上の改善を実証する。
一例では、ＭＧ－複合応答者はベースラインから５．０点以上の改善を実証する。
一例では、ＭＧ－ＡＤＬ応答者はベースラインから３．０点以上の改善を実証する。
一例では、ＭＧ－ＡＤＬ応答者はベースラインから２．０点以上の改善を実証する。
他の評価には、ＩｇＧ血清レベルの低下及び／又は血清中のＭＧ特異的自己抗体（抗ＭｕＳＫ及び／又は抗ＡＣｈＲ抗体）レベルの低下の測定が含まれる。

【0234】

本明細書で使用される場合、「治療する」及び「治療」とは、ＭＧの重症度のいくらかの低下を指し、「予防する」又は「予防」とは、ＭＧの症状の発症のいくらかの低下又は遅延を指す。当業者は、ＭＧ又はそれに関連する症状からの保護又はそれらの回復の任意の程度がヒト患者などの対象に有益であることを理解するであろう。患者の生活の質は、対象における症状の重症度を任意の程度まで低下させること及び／又は症状の出現を遅延させることによって改善される。従って、一態様では、方法は、対象がＭＧ、特に全身型ＭＧに罹患しているか、又はそれらに罹患するリスクがあることを決定した後にできるだけ早く実施される。

【0235】

種々の態様では、抗体又はその断片は、治療前（ベースライン）と比較してＱＭＧ、ＭＧ－複合又はＭＧ－ＡＤＬスコアの改善を達成する投与レジメンによって投与される。スコアの改善は、抗体又はその抗原結合断片の初回投与から、例えば、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間又は１２週間後に観察され得る。一例では、ベースラインと比較したスコアの改善は、抗体又はその抗原結合断片の初回投与から２９日又は４３日又は５０日後に観察される。

【0236】

改善は臨床応答について上記に提示した通りであり、例えば改善は、ベースラインスコアから３．０点以上の改善、例えばベースラインＱＭＧスコア、ＭＧ－複合及び／又はＭＧ－ＡＤＬスコアから３．０点以上の改善であってもよい。

【0237】

一例では、改善は、ベースラインスコアから３．０点以上の改善、例えばベースラインＱＭＧスコア及び／又はＭＧ－複合及び／又はＭＧ－ＡＤＬスコアから３．０点以上の改善であってもよい。

【0238】

一例では、改善は、ベースラインスコアから３．０点以上の改善、例えばベースラインＱＭＧスコアから３．０点以上の改善及び／又はベースラインＭＧ－複合スコアから３．０点以上の改善及び／又はベースラインＭＧ－ＡＤＬスコアから２．０点以上の改善であってもよい。

【0239】

一例では、ＭＧ－ＡＤＬスコアは４３日でベースラインと比較して改善され、すなわちＭＧ－ＡＤＬスコアは少なくとも２点、例えば少なくとも３点減少する。

【0240】

一例では、ＭＧ－複合スコアは４３日でベースラインと比較して改善され、すなわちＭＧ－複合スコアは少なくとも３点減少する。一例では、ＭＧ－複合スコアは少なくとも４、５又は６点低下する。

【0241】

一例では、ＱＭＧスコアは４３日でベースラインと比較して改善され、すなわちＱＭＧスコアは少なくとも２点、例えば少なくとも３点減少する。

【0242】

或いは又は更に、抗体又はその断片は、治療前（ベースライン）と比較してＩｇＧ血清レベルの低下及び／又はＭＧ特異的自己抗体（抗ＭｕＳＫ及び／又は抗ＡＣｈＲ抗体）血清レベルの低下を達成する投与レジメンによって投与される。レベルの低下は、抗体又はその抗原結合断片の初回投与から、例えば、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間又は１２週間後に観察され得る。一例では、血清レベルの低下は、抗体又はその抗原結合断片の初回投与から２９日又は４３日又は５０日後に観察される。ＩｇＧ血清レベル及び／又はＭＧ特異的自己抗体（抗ＭｕＳＫ及び／又は抗ＡＣｈＲ抗体）血清レベルは、特にベースラインと比較して少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％又は少なくとも７０％低下し得る。

【0243】

ヒト対象についての正確な治療有効量は、疾患状態の重症度、対象の全体的な健康、対象の年齢、体重及び性別、食事、投与の時間及び頻度、薬物の組合せ（単数又は複数）、反応感度並びに療法に対する耐性／応答に依存する。一般に、治療有効量は、４ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ（例えば４ｍｇ／ｋｇ～２５ｍｇ／ｋｇ、例えば約７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇ）である。組成物は便宜的に、用量当たり本開示の所定量の活性剤を含有する単位用量形態で提示され得る。本明細書に記載されている実施形態のいずれかについての用量範囲及びレジメンには、限定されないが、（皮下又は静脈内投与のいずれかなどの投与経路によって）１～１０週間毎に与えられる１ｍｇ～１０００ｍｇの単位用量（例えば１００ｍｇ、１４０ｍｇ、１６０ｍｇの単位用量）の投薬範囲が含まれる。更に好適な単位用量は、２５０～１２５０ｍｇの範囲の用量、例えば２８０ｍｇ、４２０ｍｇ、５６０ｍｇ、８４０ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される用量であり得る。他の好適な単位用量の例は、２８０ｍｇ、３１５ｍｇ、３５０ｍｇ、３８５ｍｇ、４２０ｍｇ、４５５ｍｇ、４９０ｍｇ、５２５ｍｇ、５６０ｍｇ、５９５ｍｇ、６３０ｍｇ、６６５ｍｇ、７００ｍｇ、７３５ｍｇ、７７０ｍｇ、８０５ｍｇ、８４０ｍｇ、８７５ｍｇ、９１０ｍｇ、９４５ｍｇ、９８０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０８５ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される用量であり得る。

【0244】

従って、本発明は、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防するヒトにおいて重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、方法を提供する。

【0245】

上記に提示したように、固定単位投薬も使用されてもよい。一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、２８０ｍｇ、４２０ｍｇ、５６０ｍｇ、８４０ｍｇ及び１１２０ｍｇから独立して選択され、用量は任意選択により患者の体重に基づいて選択される、方法を提供する。

【0246】

一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、２８０ｍｇ、３１５ｍｇ、３５０ｍｇ、３８５ｍｇ、４２０ｍｇ、４５５ｍｇ、４９０ｍｇ、５２５ｍｇ、５６０ｍｇ、５９５ｍｇ、６３０ｍｇ、６６５ｍｇ、７００ｍｇ、７３５ｍｇ、７７０ｍｇ、８０５ｍｇ、８４０ｍｇ、８７５ｍｇ、９１０ｍｇ、９４５ｍｇ、９８０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０８５ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択され、抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片が、配列番号２９に示される配列を含む重鎖及び配列番号１５に示される配列を含む軽鎖を任意選択で含む、方法を提供する。再び、用量は患者の体重に基づいて選択され得る。

【0247】

一例では、体重段階にわたる固定単位用量が利用されてもよい。

【0248】

例えば１週間間隔で６回の皮下用量（およそ７ｍｇ／ｋｇに相当）
・ 体重＜５０ｋｇ：投与されるべき用量２８０ｍｇ
・ 体重≧５０ｋｇ且つ＜７０ｋｇ：投与されるべき用量４２０ｍｇ
・ 体重≧７０ｋｇ且つ＜１００ｋｇ：投与されるべき用量５６０ｍｇ
・ 体重≧１００ｋｇ；投与されるべき用量８４０ｍｇ
又は
例えば１週間間隔で６回の皮下用量（およそ１０ｍｇ／ｋｇに相当）
・ 体重＜５０ｋｇ：投与されるべき用量４２０ｍｇ
・ 体重≧５０ｋｇ且つ＜７０ｋｇ：投与されるべき用量５６０ｍｇ
・ 体重≧７０ｋｇ且つ＜１００ｋｇ：投与されるべき用量８４０ｍｇ
・ 体重≧１００ｋｇ：投与されるべき用量１１２０ｍｇ

【0249】

一例では、およそ７ｍｇ／ｋｇに相当する固定単位用量が使用され、一例では、５０ｋｇ未満の体重では用量は２８０ｍｇである。一例では、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇである。一例では、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量は５６０ｍｇである。一例では、１００ｋｇ以上の体重では用量は８４０ｍｇである。

【0250】

従って、一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、５０ｋｇ未満の体重では用量は２８０ｍｇであり、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇであり、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量は５６０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は８４０ｍｇである、方法を提供する。

【0251】

一例では、およそ１０ｍｇ／ｋｇに相当する固定単位用量が使用され、一例では、５０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇである。一例では、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は５６０ｍｇである。一例では、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量は８４０ｍｇである。一例では、１００ｋｇ以上の体重では用量は１１２０ｍｇである。

【0252】

従って、一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、５０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇであり、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は５６０ｍｇであり、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量は８４０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は１１２０ｍｇである、方法を提供する。

【0253】

一例では、１００ｋｇ以上又は未満の単一の体重段階についての固定単位用量が使用される。一例では、１００ｋｇ未満の体重では固定単位用量は、２８０ｍｇ、３１５ｍｇ、３５０ｍｇ、３８５ｍｇ、４２０ｍｇ、４５５ｍｇ、４９０ｍｇ、５２５ｍｇ、５６０ｍｇ、５９５ｍｇ、６３０ｍｇ、６６５ｍｇ、７００ｍｇ、７３５ｍｇ、７７０ｍｇ、８０５ｍｇ、８４０ｍｇ、８７５ｍｇ、９１０ｍｇ、９４５ｍｇ、９８０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０８５ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される。一例では、１００ｋｇ未満の体重では固定単位用量は、４２０ｍｇ又は５６０ｍｇ又は８４０ｍｇである。

【0254】

従って、一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、１００ｋｇ未満の体重では用量は、２８０ｍｇ、３１５ｍｇ、３５０ｍｇ、３８５ｍｇ、４２０ｍｇ、４５５ｍｇ、４９０ｍｇ、５２５ｍｇ、５６０ｍｇ、５９５ｍｇ、６３０ｍｇ、６６５ｍｇ、７００ｍｇ、７３５ｍｇ、７７０ｍｇ、８０５ｍｇ、８４０ｍｇ、８７５ｍｇ、９１０ｍｇ、９４５ｍｇ、９８０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０８５ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される、方法を提供する。

【0255】

一例では、１００ｋｇ以上の体重では固定単位用量は、２８０ｍｇ、３１５ｍｇ、３５０ｍｇ、３８５ｍｇ、４２０ｍｇ、４５５ｍｇ、４９０ｍｇ、５２５ｍｇ、５６０ｍｇ、５９５ｍｇ、６３０ｍｇ、６６５ｍｇ、７００ｍｇ、７３５ｍｇ、７７０ｍｇ、８０５ｍｇ、８４０ｍｇ、８７５ｍｇ、９１０ｍｇ、９４５ｍｇ、９８０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０８５ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される。

【0256】

一例では、１００ｋｇ以上の体重では固定単位用量は８４０ｍｇ又は１１２０ｍｇである。

【0257】

従って、一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、１００ｋｇ以上の体重では用量は、２８０ｍｇ、３１５ｍｇ、３５０ｍｇ、３８５ｍｇ、４２０ｍｇ、４５５ｍｇ、４９０ｍｇ、５２５ｍｇ、５６０ｍｇ、５９５ｍｇ、６３０ｍｇ、６６５ｍｇ、７００ｍｇ、７３５ｍｇ、７７０ｍｇ、８０５ｍｇ、８４０ｍｇ、８７５ｍｇ、９１０ｍｇ、９４５ｍｇ、９８０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０８５ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される、方法を提供する。

【0258】

一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、１００ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇ又は５６０ｍｇ又は８４０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は８４０ｍｇ又は１１２０ｍｇである、方法を提供する。

【0259】

一例では、本発明はまた、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量、好ましくは少なくとも６回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、１００ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇ又は５６０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は８４０ｍｇ又は１１２０ｍｇである、方法を提供する。

【0260】

一例では、抗体又はその抗原結合断片の用量は、毎週、例えば少なくとも３週間の間、毎週投与される。一例では、抗体の用量は、少なくとも５週間又は６週間の間、毎週投与される。治療期間（すなわち、１回又は複数回の用量の抗体が対象に投与される間の期間）は、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、少なくとも６週間、少なくとも７週間、少なくとも８週間又はそれ以上を含んでもよい。本明細書に記載されている用量及び投与の間の時間などの、任意の好適な回数の用量が治療期間内に投与されてもよい。例えば、６回の用量の抗体が、例えば５週間の治療期間（０週、１週、２週、３週、４週及び５週）にわたって対象に投与されてもよい。

【0261】

それ故、一態様では、重症筋無力症（ＭＧ）を治療又は予防する必要があるヒトにおいてＭＧを治療又は予防する方法であって、少なくとも３回の用量の抗ＦｃＲｎ抗体又はその抗原結合断片をヒトに投与するステップを含み、各用量が、４ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ及び２０ｍｇ／ｋｇから独立して選択される、方法が提供される。

【0262】

一例では、各用量は４ｍｇ／ｋｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0263】

一例では、各用量は７ｍｇ／ｋｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0264】

一例では、各用量は１０ｍｇ／ｋｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0265】

一例では、各用量は１５ｍｇ／ｋｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0266】

一例では、各用量は２０ｍｇ／ｋｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0267】

上記に提示したように、固定単位投薬も利用されてもよく、例えば各用量は、２８０ｍｇ、３１５ｍｇ、３５０ｍｇ、３８５ｍｇ、４２０ｍｇ、４５５ｍｇ、４９０ｍｇ、５２５ｍｇ、５６０ｍｇ、５９５ｍｇ、６３０ｍｇ、６６５ｍｇ、７００ｍｇ、７３５ｍｇ、７７０ｍｇ、８０５ｍｇ、８４０ｍｇ、８７５ｍｇ、９１０ｍｇ、９４５ｍｇ、９８０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０８５ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される用量であってもよく、６回の個々の用量、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0268】

一例では、各用量は２８０ｍｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0269】

一例では、各用量は４２０ｍｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0270】

一例では、各用量は５６０ｍｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0271】

一例では、各用量は８４０ｍｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0272】

一例では、各用量は１１２０ｍｇであり、例えば６回の個々の用量として投与され、特に連続６週にわたる６回の個々の用量として投与される。

【0273】

本明細書上記に記載されているように、固定単位投薬は体重段階に基づいてもよく、体重段階に基づいて選択される用量は、例えば少なくとも連続６週の間、週に１回投与される。上記のように、例えば２８０ｍｇ用量が５０ｋｇ未満の体重のために使用される。

【0274】

一例では、方法は、第３回の用量と第４回の用量との間に投薬休日を利用する。一例では、投薬休日は１週間である。一例では、投薬休日は２週間である。

【0275】

任意選択により、方法は、より高い初回用量（すなわち、「負荷用量」）に続いて、１回又は複数回のより低い用量（すなわち、初回用量より低い１回又は複数回の２回目又は追加用量（維持用量））を含む異なる投薬レジメンを用いる反復用量投与ストラテジーを利用するが、より低い負荷用量に続いて、より高い維持用量も企図される。一実施形態では、維持用量は、負荷用量の４分の１、３分の１、２分の１、３分の２、４分の３、負荷用量と同じ、１と４分の１、１と３分の１、１と２分の１、１と３分の２、１と４分の３、２倍又はそれ以上であってもよい。負荷用量を用いない複数回用量レジメンもまた、本開示の一部として企図される。

【0276】

一実施形態では、１回又は複数回の維持用量は負荷用量の投与後に一定の間隔で投与される。この間隔は各用量で一貫してもよいか、又は変化してもよい。この間隔は、１日、１週間、２週間、３週間、４週間、１ヵ月間、６週間、８週間、２ヵ月毎、又は任意の他の間隔であってもよい。

【0277】

従って、一例では、本発明の治療方法は、初回用量（単数又は複数）より低い１回又は複数回の２回目又は追加用量を投与するステップを更に含む。

【0278】

これらの追加用量は、より高い「負荷用量」についての初回治療期間を超えて投与されてもよいことは理解されるであろう。

【0279】

従って、一例では、好ましくは４～６週間の治療期間にわたる初回投薬に続いて、より低い用量及び／又はより低い投薬頻度で更なる維持投薬治療期間があってもよい。
一例では、各用量は７ｍｇ／ｋｇであり、例えば連続６週にわたる６回の個々の用量として投与され、任意選択によりその後、もう１回の追加用量として投与される。

【0280】

一例では、各用量は１０ｍｇ／ｋｇであり、例えば連続６週にわたる６回の個々の用量として投与され、任意選択によりその後、もう１回の追加用量として投与される。

【0281】

一例では、追加用量はより低い「維持」用量である。一例では、各々のより低い（「維持」）用量は４から１０ｍｇ／Ｋｇの間であり、好ましくは４又は７ｍｇ／Ｋｇである。

【0282】

一例では、各々のより低い（「維持」）用量は４から２０ｍｇ／Ｋｇの間、好ましくは７又は１０ｍｇ／Ｋｇであり、初回「負荷」用量より低い頻度、例えば１週間に１回より低い頻度、例えば２週間毎若しくは４週間毎又は月に１回で与えられる。

【0283】

上記に提示したように、これらの維持用量は、１週間、２週間、３週間、４週間、１ヵ月間、６週間、８週間、２ヵ月毎などの任意の好適な間隔、又は任意の他の間隔で与えられてもよい。
一例では、維持用量は１週間に１回の間隔で与えられる。
一例では、維持用量は２週間に１回の間隔で与えられる。
一例では、維持用量は４週間に１回の間隔で与えられる。
一例では、維持用量は１ヵ月に１回の間隔で与えられる。

【0284】

一例では、より高い初回用量（負荷用量）は、第１の治療期間にわたって１週間に１回の間隔で４ｍｇ／Ｋｇ又は７ｍｇ／Ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇの６回の用量による治療を含み、維持投薬は、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、１ヵ月に１回、６週間に１回、８週間に１回、２ヵ月に１回などの好適な間隔、又は任意の他の間隔で４ｍｇ／Ｋｇ又は７ｍｇ／Ｋｇでの投薬を含んでもよい。

【0285】

一例では、より高い初回用量（負荷用量）は、第１の治療期間にわたって１週間に１回の間隔で４ｍｇ／Ｋｇ又は７ｍｇ／Ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ又は１５ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇの６回の用量による治療を含み、維持投薬は、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、１ヵ月に１回、６週間に１回、８週間に１回、２ヵ月に１回などの好適な間隔、又は任意の他の間隔で４ｍｇ／Ｋｇ又は７ｍｇ／Ｋｇ又は１０ｍｇ／Ｋｇでの投薬を含んでもよい。

【0286】

一例では、より高い初回用量（負荷用量）は、６週間の第１の治療期間にわたって１週間に１回の間隔で１０ｍｇ／ｋｇの６回の用量による治療を含み、維持投薬は、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、１ヵ月に１回、６週間に１回、８週間に１回、２ヵ月に１回などの好適な間隔、又は任意の他の間隔で７ｍｇ／ｋｇでの投薬を含んでもよい。

【0287】

一例では、より高い初回用量（負荷用量）は、６週間の第１の治療期間にわたって１週間に１回の間隔で１０ｍｇ／ｋｇの６回の用量による治療を含み、維持投薬は、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、１ヵ月に１回、６週間に１回、８週間に１回、２ヵ月に１回などの好適な低い頻度の間隔、又は任意の他の間隔で１０ｍｇ／ｋｇでの投薬を含んでもよい。

【0288】

上記に提示したように、任意選択により本明細書で上記されている体重段階に基づく固定単位投薬もまた、本発明に使用されてもよい。一例では、より高い初回用量（負荷用量）は、第１の治療期間にわたって１週間に１回の間隔で任意選択により体重段階に基づいて、２８０ｍｇ又は４２０ｍｇ又は５６０ｍｇ又は８４０ｍｇ又は１１２０ｍｇの６回の用量による治療を含み、維持投薬は、（ｉ）１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、１ヵ月に１回、６週間に１回、８週間に１回、２ヵ月に１回などの好適な間隔、若しくは任意の他の間隔でより低い用量での投薬又は（ｉｉ）低い頻度での同じ用量の投薬を含んでもよい。

【0289】

本発明の治療方法は長期の間欠治療及び／又は維持療法の両方に好適であり得る。

【0290】

投薬頻度は、例えば疾患のバイオマーカーモニタリング並びに／又は患者のＭＧ特異的自己抗体（抗ＭｕＳＫ及び／又は抗ＡＣｈＲ抗体）血清レベル及び／若しくは血清ＩｇＧレベルのモニタリングによって決定される疾患の重症度によって決定され得ることは理解されるであろう。

【0291】

投与間のタイミングは、状態が改善するにつれて減少させてもよいか、又は状態が悪化する場合、急性発症の必要に応じてより高い用量に戻して増加させてもよい。

【0292】

投与のタイミングはまた、患者の抗ＡＣｈＲ抗体力価並びに／又は抗ＭｕＳＫ力価及び／若しくは血清ＩｇＧレベルをモニタリングすることによって決定され得る。

【0293】

ＭＧの病因に関与する自己抗体はＩｇＧ及び非ＩｇＧの両方のアイソタイプを含み得る。一例では、本開示の治療方法は、ＩｇＧが優勢なアイソタイプであると決定されるＭＧ患者の治療のために使用され得る。

【0294】

本明細書の文脈において含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）は、包含する（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）を意味することを意図する。
技術的に適切な場合、本発明の実施形態は組み合わされてもよい。

【0295】

実施形態はある特定の特徴／要素を含むものとして本明細書に記載されている。本開示はまた、前記特徴／要素からなる又はそれらから実質的になる別々の実施形態に拡張する。

【0296】

特許及び出願などの技術的参考文献が本明細書に参照により組み込まれる。

【0297】

本発明は更に、添付の図面を参照して、以下の例において例示目的のみとして記載されている。

【0298】

図１は、ある特定のアミノ酸及びポリヌクレオチド配列を示す。
図２は、ＭＧ０００２研究設計（ＳｕｂＱ；ＵＣＢ７６６５）である。
図３は、ＭＧ－ＡＤＬスコア（ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ／ロザノリキシズマブ４ｍｇ／ｋｇ）及び（ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ／ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ）のベースラインからの変化である。
図４は、ＱＭＧ、ＭＧ－複合、ＭＧ－ＡＤＬスコア、血清ＩｇＧ濃度及び抗ＡＣｈＲ抗体（ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ／ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ）のベースラインからの変化である。
図５は、定量的重症筋無力症試験フォームである。
図６は、重症筋無力症複合スコアである。
図７は、重症筋無力症日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコア付けである。

【実施例0299】

（例１）
ＵＣＢ７６６５はＷＯ２０１４０１９７２７に最初に記載され、配列番号１～６で本明細書に示されるＣＤＲ配列を含む。それは配列番号２２の軽鎖及び配列番号４３の重鎖を含む。

【0300】

ＵＣＢ７６６５はＩＮＮロザノリキシズマブを有する。

【0301】

ＵＣＢ７６６５（ＷＯ２０１４０１９７２７から複製した）のｈＦｃＲｎ結合に対する親和性
表面プラズモン共鳴技術（ＳＰＲ）を使用した生体分子相互作用分析を、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００システム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で実施し、ヒトＦｃＲｎ細胞外ドメインへの結合を決定した。ヒトＦｃＲｎ細胞外ドメインは、ヒトＦｃＲｎアルファ鎖細胞外ドメイン（配列番号９４）とβ２ミクログロブリン（β２Ｍ）（配列番号９５）との間の非共有結合複合体として提供された。１０ｍＭ ＮａＡｃ、ｐＨ５緩衝液中のアフィニピュア（Ａｆｆｉｎｉｐｕｒｅ）Ｆ（ａｂ’）_２断片ヤギ抗ヒトＩｇＧ、Ｆ（ａｂ’）_２断片特異的（Ｆａｂ’－ＰＥＧ捕捉用）又はＦｃ断片特異的（ＩｇＧ１又はＩｇＧ４捕捉用）（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂ、Ｉｎｃ．）を、ランニング緩衝液としてＨＢＳ－ＥＰ^＋（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して４０００から５０００の間の反応単位（ＲＵ）の捕捉レベルでアミンカップリング化学を介してＣＭ５センサーチップ上に固定した。５０ｍＭリン酸塩、ｐＨ６＋１５０ｍＭ ＮａＣｌ＋０．０５％Ｐ２０又はＨＢＳ－Ｐ、ｐＨ７．４（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を、親和性アッセイのためのランニング緩衝液として使用した。抗体をランニング緩衝液中で４μｇ／ｍｌ（ＩｇＧ４）に希釈した。１０μｌ／分でのＩｇＧ４の６０秒の注射を、固定した抗ヒトＩｇＧ、Ｆ（ａｂ’）_２による捕捉のために使用した。ヒトＦｃＲｎ細胞外ドメインを、３０μｌ／分にて３００秒間、捕捉した抗ＦｃＲｎ抗体に対して２０ｎＭ～１．２５ｎＭまで滴定し、続いて１２００秒解離した。表面を１０μｌ／分にて２×６０秒の５０ｍＭ ＨＣｌによって再生した。Ｔ２００評価ソフトウェア（バージョン１．０）を使用してデータを分析した。

【表1】

ｐＨ７．４及びｐＨ６での抗ｈＦｃＲｎ １５１９．ｇ５７ ＩｇＧ４Ｐについての親和性データ
（３回の実験の平均）

【0302】

ＵＣＢ７６６５（ＷＯ２０１４０１９７２７から複製した）の結晶学及び結合エピトープ
結晶化を容易にするためにＦｃＲｎオリゴ糖を除外して、１５１９ｇ５７ Ｆａｂ’及び脱グリコシル化ヒトＦｃＲｎ細胞外ドメイン（ベータ２ミクログロブリン配列番号９５と関連するアルファ鎖細胞外ドメイン（配列番号９４））の結晶構造を決定した。１５１９．ｇ５７ Ｆａｂ’を１０倍モル過剰のＮ－エチルマレイミドと反応させて、ｄｉＦａｂ’及びＳＥＣ（Ａｋｔａ ＦＰＬＣ上のＳ２００）によって除去されたあらゆる既存のｄｉＦａｂ’の形成を阻止した。ヒトＦｃＲｎ細胞外ドメインをＰＮＧａｓｅＦによって処理してＮ結合糖を除去した。このために、ＦｃＲｎ試料濃度を、ＰＢＳ（ｐＨ７．４）を使用して５ｍｇ／ｍｌ及び１ｍｌの総容量に調整した。２００単位のＰＮＧａｓｅＦ（Ｒｏｃｈｅ）をヒトＦｃＲｎのこの溶液に添加した。これを３７℃で約１８時間インキュベートし、その後、ＳＤＳ ＰＡＧＥを使用して脱グリコシル化の程度をチェックした。反応の完了時に、脱グリコシル化ＦｃＲｎを５０ｍＭ酢酸ナトリウム、１２５ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ６．０に緩衝液交換した。

【0303】

室温で６０分間の試薬の混合物（Ｆａｂ’：ＦｃＲｎ：：１．２：１、ｗ／ｗ）のインキュベーションによって複合体を形成し、次いでＳＥＣ（Ａｋｔａ ＦＰＬＣを使用するＳ２００）を使用して精製した。Ｑｉａｇｅｎから利用可能であった様々な条件（およそ２０００の条件）を使用してスクリーニングを実施した。Ｆｏｒｍｕｌａｔｒｉｘ Ｒｏｃｋ Ｉｍａｇｅｒ １０００によって（２１日の総インキュベーション期間の間）インキュベーション及びイメージングを実施した。

【0304】

１５１９ｇ５７ Ｆａｂ’（この複合体を公開されたＦｃＲｎの構造と比較した）の結合時にＦｃＲｎ構造において明らかな変化はなかった。その結晶構造から、二次構造含量は、α－ヘリックス９．４％；β－シート４５．２％；３～１０ターン２．５％であると計算した。

【0305】

１５１９ｇ５７ Ｆａｂ’と相互作用する残基は全てＦｃＲｎα鎖（β２Ｍではない）にあり、以下に太字で示す。関係する残基は、Ｆｃを結合するのに不可欠な残基の１つを除いて全てを包含する。１５１９ｇ５７はＦｃ結合領域と重なる領域内で結合し、このことは、１５１９ｇ５７ Ｆａｂ’によるＦｃＲｎの遮断は単純な競合によるものであり、抗ＦｃＲｎがその優れた親和性のために有効であることを示唆する。

【化4】

１５１９ｇ５７ Ｆａｂ’との相互作用に関与する残基（太字）及びＩｇＧのＦｃとの相互作用に不可欠な残基（下線）を示すＦｃＲｎα鎖配列。後者の１つを除く全てが前者に含まれる。

【0306】

（例２）
ＭＧ０００２研究は、第２ａ相、多施設、無作為化、治験責任医師及び対象盲検、プラセボ対照、２群、反復投与、治療順序研究であり、中等度から重度の全身型重症筋無力症（ＭＧ）を有する対象におけるＵＣＢ７６６５による長期の間欠治療の有効性、安全性及び耐容性を評価する。ＵＣＢ７６６５は、１８歳以上の対象において４ｍｇ／ｋｇ又は７ｍｇ／ｋｇの皮下（ｓｃ）用量として投与する。
この研究は、米国（ＵＳＡ）、カナダ及び欧州におけるおよそ３０の施設で行うように計画し、他の地域及び国々へも拡張可能である。合計４２人の対象がこの研究の治療期間に入る計画である。個々の対象についての最長研究期間はおよそ１８週である。
この研究は３つの期間からなる：スクリーニング、治療及び観察。スクリーニング後、対象は、投薬期間１、その後の投薬期間２からなる治療期間に入る。対象は、以下のように各投薬期間の間、１週間に１回の間隔で治験医薬品（ＩＭＰ）の３回の用量を受ける：
投薬期間１は２つの並行した群（ＵＣＢ７６６５ ７ｍｇ／ｋｇ又はプラセボ）で４週間である。
投薬期間２は２つの並行した治療群（ＵＣＢ７６６５ ７ｍｇ／ｋｇ又はＵＣＢ７６６５ ４ｍｇ／ｋｇ）で２週間である。
観察期間はＵＣＢ７６６５の最終用量後８週間に及び、最終来院（ＦＶ）は２０回目の来院で予定する。ｓｃ注入はおよそ３０分続け、対象は、各注入後、安全性モニタリングのために少なくとも４時間、病院／クリニックに留まることを必要とする。

【0307】

主要有効性変数は、９回目の来院（２９日目）までの定量的ＭＧ（ＱＭＧ）スコアのベースラインからの変化である。副次有効性変数は、９回目の来院（２９日目）までのＭＧ－複合スコアのベースラインからの変化及び９回目の来院（２９日目）までのＭＧ－日常生活動作（ＭＧＡＤＬ）スコアのベースラインからの変化である。他の有効性変数は以下の通りである：
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＱＭＧの値及びベースラインからの変化；治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＱＭＧ応答者（ベースラインから３．０点以上の改善）；治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧ－複合スコアの値及びベースラインからの変化；
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧ－複合応答者（ベースラインから３．０点以上の改善）；治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧＡＤＬの値及びベースラインからの変化；治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧＡＤＬ応答者（ベースラインから３．０点以上の改善）；治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のアメリカ重症筋無力症財団（ＭＧＦＡ）分類；治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧ筋力低下の重症度、疲労スケール及び重症筋無力症機能障害指数（ＭＧＩＩ）スコアの値及びベースラインからの変化；
並びに参加施設においてこの尺度に同意している対象について９回目の来院までのベースラインからのジッター（単線維筋電図［ＳＦＥＭＧ］）研究の平均連続差（ＭＣＤ）の変化。

【0308】

他の変数及び診査変数には、安全性及び耐容性変数、薬物動態（ＰＫ）、薬力学（ＰＤ）及び免疫学的変数が含まれる。
安全性及び耐容性変数には以下が含まれる：治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）の発現；バイタルサイン値及びベースラインからの変化（収縮期及び拡張期血圧［ＢＰ］、温度、脈拍数、呼吸数及び体重）；１２誘導心電図（ＥＣＧ）値及びベースラインからの変化；検査値（血液学、臨床化学及び尿検査）及びベースラインからの変化；重度の頭痛及び／又は中等度から重度の胃腸（ＧＩ）障害を経験している対象における診査安全性バイオマーカー（限定されないが、Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ｂ［Ｓ１００Ｂ］、ニューロン特異的エノラーゼ、プロスタグランジン及び／又はそれらの代謝産物、セロトニン並びにトリプターゼを含み得る）のベースラインからの変化；並びにＩＭＰの使用中止に至るＴＥＡＥ。
経時的なＵＣＢ７６６５の血漿濃度はＰＫ変数として評価する。主なＰＤ変数は、血清総免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）濃度のベースラインからの最大減少；治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時の総血清ＩｇＧ濃度の値及びベースラインからの変化；治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時の血清ＩｇＧサブクラス濃度の値及びベースラインからの変化；並びに治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のベースラインからの血清中のＭＧ特異的自己抗体（抗ＭｕＳＫ／抗ＡＣｈＲ）レベルの変化である。更に、治療及び観察期間の間の他の免疫学的変数及び他の診査バイオマーカーのベースラインからの変化が評価される。

【0309】

研究変数
１ 有効性変数
１．１ 主要有効性変数
主要有効性変数は以下の通りである：
９回目の来院（２９日目）までのＱＭＧスコアのベースラインからの変化
１．２ 副次有効性変数
副次有効性変数は以下の通りである：
９回目の来院（２９日目）までのＭＧ－複合スコアのベースラインからの変化
９回目の来院（２９日目）までのＭＧＡＤＬスコアのベースラインからの変化
１．３ 他の有効性変数
他の有効性変数は以下の通りである：
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＱＭＧの値及びベースラインからの変化
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＱＭＧ応答者（ベースラインから３．０点以上の改善）
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧ－複合スコアの値及びベースラインからの変化
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧ－複合応答者（ベースラインから３．０点以上の改善）
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧＡＤＬの値及びベースラインからの変化
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧＡＤＬ応答者（ベースラインから３．０点以上の改善）
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧＦＡ分類
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧ筋力低下及び易疲労性の値及びベースラインからの変化
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時の疲労の値及びベースラインからの変化
治療及び観察期間の間の各々の予定した評価時のＭＧＩＩスコアの値及びベースラインからの変化
参加施設においてこの尺度に同意している対象についての９回目の来院までのベースラインからのジッター（ＳＦＥＭＧ）研究における正常線維対のパーセンテージの変化
参加施設においてこの尺度に同意している対象についての９回目の来院までのベースラインからのジッター（ＳＦＥＭＧ）研究における電位間隔（ｉｎｔｅｒｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｉｎｔｅｒｖａｌ）（ＩＰＩ）のＭＣＤの変化
ジッター（ＳＦＥＭＧ）研究における９μｓ以上のＭＣＤの低下は臨床改善を定義する

【0310】

研究設計
研究の説明
これは、中等度から重度の全身型ＭＧを有する対象に対する長期の間欠治療としてＵＣＢ７６６５の安全性及び有効性を評価する、第２ａ相、多施設、無作為化、治験責任医師及び対象盲検、プラセボ対照、２群、反復投与、治療順序研究である。
およそ４２人の無作為化した対象を、４０人の評価可能な対象の目標とする数字を達成するためにＵＳＡ、カナダ及び欧州からのおよそ３０の施設に登録する。
１人の対象当たりの研究の最長期間は、スクリーニング期間（１～２８日）、治療期間（６週間）及び観察期間（８週間）からなる、およそ１８週である。
スクリーニング期間：スクリーニング期間の目的は、対象の適格性を評価し、確認することである。スクリーニング来院（１回目の来院）の間、対象は、あらゆる研究関連手順を行う前に書面によるインフォームドコンセントのフォームに署名する。この研究の間の併用薬の使用については話し合い、対象の適格性は組み入れ／除外基準に基づいて決定する。スクリーニング期間は合計で２８日を超えるべきではない。
治療期間：治療期間は、投薬期間１、その後の投薬期間２からなる（図２を参照のこと）。対象は、以下の通りの各投薬期間の間、１週間に１回の間隔で３回の用量のＩＭＰを受ける。

【0311】

投薬期間１は、２つの並行した治療群（ＵＣＢ７６６５ ７ｍｇ／ｋｇ又はプラセボ）で４週間である。
投薬期間２は、２つの並行した治療群（ＵＣＢ７６６５ ７ｍｇ／ｋｇ又はＵＣＢ７６６５ ４ｍｇ／ｋｇ）で２週間である。
ＩＭＰによる注入を受ける前に、治療期間における各々の来院時に有効性尺度について対象を評価する。安全性及び有効性尺度の全てに関して、研究手順マニュアルに指定された命令を指針として使用することが推奨される。
投薬期間１：投薬期間１はおよそ４週間（１日目～２８日目）続き、２、３、４、５、６、７及び８回目の来院を含む。スクリーニング期間の終了後、適格な対象は無作為化した来院（２回目の来院）のためにクリニック／病院に予約を取る。適格要件を満たし続ける対象を、７ｍｇ／ｋｇのＵＣＢ７６６５又はプラセボを与えるために１：１で無作為化し、３週間の間（２、４及び６回目の来院）、１週間に１回の間隔でおよそ３０分、ｓｃ注入により投与し、その後、４週目の来院（８回目の来院）で評価する。投薬期間１における２、４及び６回目の来院時に、対象は、注入後の安全性モニタリングのために少なくとも４時間、クリニック／病院に留まることを要求される。投与後の安全性モニタリング期間が終了し、治験責任医師又は被指名者が安全性の懸念を持たないときは、対象はクリニック／病院から出ていくことができる。対象の状況を評価するために電話による追跡調査が投与後２４時間行われる（３、５及び７回目の来院）。対象は安全性及び有効性評価のために８回目の来院時にクリニック／病院に戻る。再無作為化の前の９回目の来院時（２９日目）の投薬期間２の初めに主要有効エンドポイントであるＱＭＧスコアのベースラインからの変化を評価する。従って、９回目の来院時に実施する有効性評価は投薬期間１における研究薬の最終用量から２週間後に行う。
投薬期間２：投薬期間２はおよそ２週間（２９日目～４３日目）続き、９、１０、１１、１２、１３及び１４日目の来院を含む。対象は、安全性及び有効性評価のために９、１１及び１３回目の来院のためにクリニックに戻る。
９回目の来院時に、安全性及び有効性評価の実施後、プラセボ又は７ｍｇ／ｋｇのＵＣＢ７６６５に対してベースライン時に最初に無作為化した対象を、１週間に１回の間隔（９、１１及び１３回目の来院）で３０分、ｓｃ注入によって投与される３回の用量の７ｍｇ／ｋｇ又は３回の用量の４ｍｇ／ｋｇのいずれかを与えるために１：１で再無作為化する。自動応答技術（ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）（ＩＲＴ）は投薬期間１において受けた治療に基づいて再無作為化を階層化する。投薬期間２（９、１１及び１３回目の来院）における各々の１週間に１回のクリニック来院時に、対象は、決定されたように投与後の安全性モニタリング期間である少なくとも４時間の間、クリニック／病院に留まることを要求される。投与後の安全性モニタリング期間が終了し、治験責任医師又は被指名者が安全性の懸念を持たないときは、対象はクリニック／病院から出ていくことができる。対象の状況を評価するために電話による追跡調査が投与後２４時間行われる（１０、１２及び１４回目の来院）。
観察期間：全ての対象は、ＩＭＰの最終用量が投与された後、８週間追跡されなければならない。対象は有効性及び安全性評価のために１５、１６、１８及び２０回目の来院のためにクリニックに戻る。対象は、クリニック／病院に戻るか、又は可能であれば、治験責任医師及び対象の両者が同意した場合、１７及び１９回目の来院については、資格を持っている医療従事者が訪問診察を行う。観察期間はＩＭＰの最終用量（すなわち、１３回目の来院、４３日目）の翌日に開始し、１５回目の来院（５０日目）が観察期間における最初の来院である。

【0312】

組み入れ基準
この研究に参加する資格を得るには、以下の基準の全てを満たさなければならない：
１．治験審査委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｂｏａｒｄ）（ＩＲＢ）／独立倫理委員会（Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）（ＩＥＣ）が、対象によって署名され、日付を入れられている書面によるインフォームドコンセントのフォームを承認した。
２．対象は１回目の来院（スクリーニング）時に１８歳以上である。
３．対象は、対象の病歴に基づき、以前の評価によって支持された、１回目の来院（スクリーニング）時に十分に裏付けされたＭＧの診断を受けている。
４．対象は、現在、治験責任医師によって免疫学的療法（例えばＩＶＩＧ／ＰＬＥＸ）での治療を考慮されている。
５．対象は、１回目の来院（スクリーニング）の前にＡＣｈＲ又はＭｕＳＫに対する自己抗体の十分に裏付けされた記録を有する。
６．妊娠の可能性がある女性の対象はスクリーニング来院時に陰性の血清妊娠検査でなればならず、これは、１週目（２回目の来院）の研究薬の初回用量前、且つその後の各研究の来院時の更なる投薬前に尿検査により陰性であると確認される。妊娠の可能性がある女性の対象は、研究の間及び研究薬のそれらの最終用量後の２ヵ月間、非常に効果的な避妊法を使用することに同意しなければならない。

【0313】

医薬品規制調和国際会議（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｕｎｃｉｌ ｆｏｒ Ｈａｒｍｏｎｉｓａｔｉｏｎ）（ＩＣＨ）Ｍ３（Ｒ２）によれば、避妊の非常に有効な形態は、一貫して正しく使用された場合、１年当たり１％未満の失敗率を達成する方法である。避妊の非常に有効な方法には以下が含まれる：
排卵抑制と関連する併用（エストロゲン及びプロゲステロンを含有する）ホルモン避妊法（経口、インプラント、注射用）（これは、スクリーニング［１回目の来院］前の少なくとも１ヵ月全ての間、安定でなければならず、研究の間、安定なままであるべきである）。排卵抑制と関連するプロゲステロンのみのホルモン避妊法（経口、インプラント、注射用）（これは、スクリーニング［１回目の来院］前の少なくとも１ヵ月全ての間、安定でなければならず、研究の間、安定なままであるべきである）。
プロゲステロン放出子宮内避妊システム又はＴＣｕ ３８０Ａ子宮内避妊器具。
精管切除したパートナー（唯一のパートナー及び手術成功の医学的証拠を有するパートナーを条件とする）。
真の異性愛の性的禁欲は、これがその人の好ましく、普通の生活様式に沿っている場合、避妊の許容される形態である。定期的な禁欲（例えば、カレンダー法、排卵法、徴候体温（ｓｙｍｐｔｏｔｈｅｒｍａｌ）法、排卵後（ｐｏｓｔｏｖｕｌａｔｉｏｎ）法）、研究期間の間の禁欲の宣言、及び膣外射精は、許容される避妊法ではない。
避妊を使用することに同意していない女性は、以下であると定義される、妊娠不可能でなければならない：スクリーニング来院時に血清卵巣刺激ホルモンレベル＞４０ｍＩＵ／ｍＬによって検証された閉経後（スクリーニング来院の前の少なくとも２年間）、又は
永久的に不妊である（例えば、両側卵管閉塞、子宮摘出、両側卵管切除）、又は□先天的に不妊である。
７．男性対象及び彼らの女性パートナーのための避妊法：
妊娠する可能性があるパートナーを有する男性対象は、研究の間及びＩＭＰの最終投与後３ヵ月間、性的に活発である場合、コンドームを使用する意志がなければならない。
更に、男性対象の妊娠の可能性がある女性パートナーは、研究期間の間、及びＩＭＰの最終投与後３ヵ月間、避妊法（上記のような）の非常に有効な方法を使用する意志がなければならない。
６．２
除外基準
以下の基準のいずれかを満たす場合、対象は研究に登録することは認められない：
１．対象はこの研究において以前に治療を受けているか、又は対象はＵＣＢ７６６５に対して以前に曝露されている。
２．対象は、スクリーニングの前の３０日以内にＩＭＰ（又は医療機器）の別の研究に参加していたか、又はＩＭＰ（又は医療機器）の別の研究に現在参加している。
３．対象はＩＭＰの任意の成分に対して既知の過敏性を有する。
４．Ｌ－プロリンはＵＣＢ７６６５ ＩＭＰの構成要素であるので、対象は高プロリン血症の病歴を有する。

【0314】

併用薬／治療
許可される併用薬
安定な用量で研究課程の間に許可されている併用薬は以下の通りである
用量コメント
経口コルチコステロイド
（例えば、プレドニゾロン）
－ ベースライン前の２週間安定
前の６カ月間、メトトレキサート≦３０ｍｇ／週で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
前の６カ月間、ミコフェノール酸モフェチル≦３ｇ／日で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
前の６ヵ月間、未変更についてシクロスポリンａ≦５ｍｇ／ｋｇ／日、変更（マイクロエマルション）について≦４ｍｇ／ｋｇ／日で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
前の６ヵ月間、アザチオプリン≦３ｍｇ／ｋｇ／日で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
コリンエステラーゼ阻害剤≦６００ｍｇ
ピリドスチグミン／日
安定な用量は必要とされない－用量は有効なアウトカムの日に保持した
前の６ヵ月間、タクロリムス（Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｂ）≦５ｍｇ／日で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
ａ トラフレベルが３００ｎｇ／Ｌ以下である場合、記載したものより高い用量が許容される。
ｂ 体重に基づく１日総用量が５ｍｇ超である場合、対象が推奨される治療域を超えないことを確保するために血漿トラフレベルがチェックされなければならない。
対象は、試験を標準化するためにそうすることが医学的に安全である場合、試験前の真夜中からピリドスチグミン（又は任意のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬）を摂取すべきではないが、医学的に適切でない場合、治療を継続することができるが、試験は、研究の間の各々の評価のために任意の最後のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤投薬の後、同じ時間枠で可能な限り最適に実施されなければならい。

【0315】

有効性の評価
１．定量的重症筋無力症スケール
ＱＭＧスケールの評価のために、治験責任医師は、定量的重症筋無力症試験フォーム（図５を参照のこと）として以下に提示しているように、ＭＧＦＡのＱＭＧマニュアルの説明書に従う。臨床治療の職員は、必須訓練を完了し、対象のＱＭＧスコアを評価するための資格を取得しなければならない（詳細は研究手順マニュアルに提供されている）。
対象は、試験を標準化するためにそうすることが医学的に安全である場合、試験前に真夜中からピリドスチグミン（又は任意のＡＣｈＥ阻害薬）を摂取すべきではないが、医学的に適切でない場合、治療を継続することができるが、試験は、研究の間の各々の評価のために最後のＡＣｈＥ阻害剤投薬の後、同じ時間枠で可能な限り最適に実施されなければならい。
スケールは、眼及び顔の関与、飲み込み、発話、肢の強さ及び強制肺活量（ＦＶＣ）を含む１３項目を試験する。ＦＶＣの評価のために、対象が試験される各時間に同じ肺活量計が使用されるべきであり、可能な場合、同じ人が評価を実施すべきである。ＦＶＣについてのパラメーター及び正常値は、全ての施設が同じ情報を使用するように研究施設間で決定される。ＱＭＧは検証済みの評価であり（Ｂａｒｎｅｔｔら、２０１２）、スコアが高いほど、より重度の疾患を示す。各項目についてのスコア付けは低下なし（０）から重度の低下（３）の範囲であり、総合スコアは０～３９の範囲である。合計スコアの３点の変化は臨床的に関連があるとみなされる。試験は実施するのにおよそ３０分かかる。

【0316】

一般的な指示
１．患者は、試験の１２時間前の間、ピリドスチグミン（又は任意のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬）を中止しなければならない（そうすることが医学的に安全である場合）。
２．このマニュアルに与えられ、ビデオテープに示された順序で試験を実施する。
３．試験開始前に製造業者の説明書に従って試験の日に呼吸機器を較正する。較正記録をアクセス可能な場所のフォルダに置く。
４．全ての尺度について、実際の数字及びグレードを記録する。すなわち、患者が二重に見えるまでに３０秒かかる場合、右端のボックスに３０秒について３０／１及び１のグレードを記録する。
５．患者は呼吸試験のために着席したままでなければならない。
６．スコア付けシートの最後に、その患者についてのグレードを合計し、合計ＱＭＧスコアとする。

【0317】

定量的ＭＧスコア
Ｉ．複視：
患者の準備：患者は座っている。患者が真っすぐ前を見て複視を経験しているかどうかを尋ねる。そうである場合、スコア付けシートに０／３（実際の時間／グレード）を記録する。そうでない場合、患者に一瞬だけ右を見、次いで患者の頭を動かさずに左を見るように依頼する。患者が一方向のみにおいて二重に見える場合、側を記録し、結果を０／３と記録する。眼球運動がない場合、０／３と記録する。患者が二重に見えない場合、又は両方向で二重に見える場合、以下に記載されているように右を注視する試験を患者に実施する。
患者への説明：「私はあなたに前を向くようにお願いします。私が依頼すると、あなたの頭を回転させずにあなたの右（左）側を見てください。あなたが二重に見え始めた場合又は二重に見え始めると、私に知らせてください。」
検査員への注意：患者の頭は普通、注視の方向に回転し始める。頭を前方の位置に維持するようにする。時間及びグレードを記録する。例：複視は１５秒で明らかになる。スコア付けの欄に１５／１を記録する。
ＩＩ．下垂（上方注視）：
患者の準備：患者は座っている。患者に真っすぐ前を見るように依頼する。上眼瞼が瞳孔に触れている場合、０／３と記録する。頭を動かさずに天井を見上げるように患者に依頼する。
患者への説明：「私はあなたに前を向くようにお願いします。私が依頼すると、あなたの頭を動かさずに天井を見上げてください。私があなたにリラックスするように伝えるまで見上げ続けてください。」
検査員への注意：患者の頭は普通、上に動き始める。前方の位置に頭を維持するようにする。あなたがどちらかの眼瞼（まつげ）が垂れ下がり始めるのを見ると時間及びグレードを記録する。
例：右眼瞼が９秒で垂れ下がると、９／２を記録する。どちらかの眼瞼が瞳孔に触れる場合、６０／０を記録する。
ＩＩＩ．顔面筋力：
患者の準備：患者は前を向いて座っている。
患者への説明：「あなたの眼をぎゅっと閉じてください。私にあなたの眼を開けさせないでください。」
検査員への注意：患者がどちらかの眼を完全に閉じることができない場合、グレードを３と記録する。時間のスコアはこの試験では必要とされない。弱い方の眼のグレードを記録する。

【0318】

ＩＶ．飲み込み：
患者の準備：患者は座っている。４オンスの水（氷なし）をカップに注ぐ。水は噴水式水飲み器の冷たさより冷たくないようにすべきである。
患者への説明：「私はあなたが通常通りにこの水を飲むようにあなたにお願いします。」
検査員への注意：試験の間及び試験後すぐに咳及び／又は咳払いを聞く。患者が心地良く感じるよりも速く飲むように患者に依頼しない。
Ｖ．発話：
患者の準備：患者は座っている。
患者への説明：「心地良いペースで１～５０まで声に出して数え上げてください。」
検査員への注意：これは様々なアクセントのためにスコアを付けるのが最も難しい試験の１つである。あなたが発話の鼻声又は不明瞭に気付いた場合、数字を記録する。
ＶＩ．右及び左上肢挙上：
患者の準備：患者は床に両足をつけて椅子に座っていることを必要とする。患者は椅子の背にもたれないで着席しなければならない。両方の上肢を同時に試験する。
上肢は手のひらを下にして９０°横に伸ばす必要がある。（この位置を実演する）。患者が肩の問題に起因して９０°まで上肢を上げることができない場合、その上肢を試験しない。肘は完全な機械的範囲まで伸ばす。
患者への説明：「私はあなたにこのように両方の上肢を横に伸ばして保持するようにお願いします。できるだけ長く上肢を伸ばし続けてください。一方の上肢が他方より疲れた場合、あなたはその上肢を下げてもよく、他方の上肢を伸ばし続けてください。」
検査員への注意：上肢が垂れ下がり始めることは珍しいことではない。上肢が開始位置から１０°より多く下がった場合、患者に上肢を引き上げるように思い出させる。患者が上肢を引き上げることができるが、２秒より長い間、その位置を維持することができない場合、試験を終了する。一方の上肢が下がる場合、患者が、彼／彼女が９０°の角度を維持している様子を見せるために上肢が下がった側に傾き始めないように注意すること。時間／グレードを記録する（例：右上肢について４５秒は４５／２であり、一方、左上肢について１００秒は１００／１である）。
ＶＩＩ：強制肺活量：患者の準備：患者はこの試験のために着席し続けなければならない。
患者への説明：「私は全肺気量を試験します。私はこのマウスピースをあなたの顔から離して保持するようにあなたに依頼します。次に私はあなたの鼻にノーズクリップを付けます。私はあなたに息を深く吸い、次にマウスピースをあなたの口に入れるように伝えます。あなたは、あなたができるだけ思い切り且つ速く息を吐いてください。私があなたに止めるように伝えるまで息を吐き続けてください。」
検査員への注意：我々はＦＶＣを試験するのみである。最低３回の試行及び最高で５回の試行を実施する。目標は互いに５％以内に最良の２つの試行を得ることである。多くの激励を与える。最良のＦＶＣ（リットル及びパーセンテージ）及びグレードをシートに記録する（例：２．５５－６０％／２）。
「正常な」ＦＶＣ値、及びそれによるパーセントの予測計算は、使用される肺活量計により変動し得る。いくつかの肺活量計は特定の正常値を伴う。それが、同じ肺活量計が、あなたが対象を試験する各時間に使用されるべき理由である。多施設研究では、全ての施設が同じ情報を使用するようにパラメーター及び正常値が決定されるべきである。
ＶＩＩＩ．右及び左握力：
患者の準備：患者は椅子に座っている。肘は９０°であるべきである。支持は前腕内側面の下及び動力計の下にあるべきである。
患者への説明：「私は握力を試験します。私はあなたにできるだけ強く握るようにお願いします。何も動かないが、あなたがどれくらい強く握っているかを測定しています。」
検査員への注意：口頭の激励を与える。２回の試行（ｋｇ）を欄に記録し、スコアを付ける（例：女性を試験し、結果が１０及び８ｋｇである場合、１０／１と記録する）。
ＩＸ．頭部挙上：
患者の準備：患者は頭の下に枕を入れずに横になる。枕は膝の下に置いてもよいか、又は足が床にぴったり付くように膝を曲げる。
患者への説明：「私はテーブルからあなたの頭を持ち上げるようにあなたにお願いします。頭をできるだけ長く上げたままにしてください。」
検査員への注意：頭が落ちて元の位置に戻る場合、いくらかのクッションを提供するためにあなたの手を患者の頭の下に（触れずに）置く。頭は上限まで上がるだけでなく、上がり、前に出てくるはずである。頭が中間の１０°以内に下がった場合、試験を終了する。
Ｘ．右及び左下肢挙上：
患者の準備：患者は頭の下に枕を置いて仰臥位になる。両方の下肢は真っすぐに伸ばし、靴を脱がなければならない。
患者への説明：「私はあなたの右下肢を持ち上げて保持するようにあなたにお願いします。できるだけ長くこの位置に下肢を持ち上げて保持してください。」
検査員への注意：下肢は股関節屈曲の４５～５０％に維持しなければならない。下肢が垂れ下がり始めた場合、患者に下肢を持ち上げるように依頼する。患者が下肢を持ち上げるが、その位置を２秒間維持できない場合、試験を終了する。股関節の下の手及び／又は下肢の回転を監視する。

【0319】

２．ＭＧ－複合スケール
ＭＧ－複合スケールの評価に関して、治験責任医師は、対象が自己評価する会話、咬む及び飲み込みを除いて、全ての項目のスコアを付けるために対象を検査する。ＭＧ－複合スケールは検証済みの評価であり（Ｂｕｒｎｓら、２０１０ ＭＧ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ａｎｄ ＭＧ－ＱＯＬ１５ Ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｕｐ． ＭＧ複合：重症筋無力症のための有効で信頼できるアウトカム尺度（Ｔｈｅ ＭＧ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ：Ａ ｖａｌｉｄ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ ｏｕｔｃｏｍｅ ｍｅａｓｕｒｅ ｆｏｒ ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ）． Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ． ２０１０年５月４日；７４（１８）：１４３４－４０）、スコアが高いほど、より重度の疾患を示し（図６を参照のこと）、３点の変化は臨床的関連がある。このスケールは１０項目を試験し、個々の項目は異なって重み付けされる。総合スコアは０～５０の範囲である。臨床治療の職員は、必須訓練を完了し、対象のＭＧ－複合スコアを評価するための資格を取得しなければならない（詳細は研究手順マニュアルに提供されている）。

【0320】

３．患者により報告されるアウトカム
対象は、４回の患者により報告されるアウトカム（ＰＲＯ）（そのうちの１回がＭＧＡＤＬである）を完了し、研究評価のスケジュールに記載されている時点の通りに１回の対象の退出面接に参加する。
治療医師以外の研究の職員がＰＲＯを管理するべきである。ＰＲＯは静かな場所で対象自身によって完了されるべきである。
ＰＲＯ及び対象の退出面接は以下の順序で完了されるべきである：ＭＧ筋力低下及び易疲労感、疲労、ＭＧＡＤＬ及びＭＧＩＩ、その後の対象の退出面接（これはＦＶ時のみに実施する）。ＰＲＯは完全性についてのみチェックされるべきである。投薬日では、ＰＲＯは投薬前に完了されている。

【0321】

ＭＧ－日常生活動作（ＭＧＡＤＬ）
ＭＧＡＤＬはＱＭＧに基づいて開発された８項目のＰＲＯ手段であり（Ｗｏｌｆｅら、１９９９）、図７を参照のこと。ＭＧＡＤＬは、眼、球、呼吸器及び体軸の症状に及ぶ症状及び身体障害を標的とする。最近の研究では、ＭＧＡＤＬの信頼性、妥当性及び反応性が更に評価された。ＭＧ－複合に対してだけでなく、ＭＧ－ＱＯＬ１５に対しても評価した場合、質問表は強力な構成概念妥当性を示し、高度な試験は１週間間隔で信頼性を再試験し、２点の改善が臨床改善を示すことが実証された（Ｍｕｐｐｉｄｉ、２０１２；Ｍｕｐｐｉｄｉら、２０１１）。合計ＭＧＡＤＬスコアは０～２４の範囲であり、スコアが高いほど、より高度の身体障害を示す。対象は、ＰＲＯの標準化された管理に記載されているように自身によってＭＧＡＤＬを完了する。

【0322】

（例３）
ＭＧ００２研究の結果
研究設計
ＭＧ０００２（ＮＣＴ０３０５２７５１）（例２に提供されているプロトコル）は、全身型筋力低下及び少なくとも１１の合計定量的重症筋無力症スコア（ＱＭＧ）を有する北米及び欧州出身の４３人のＭＧ患者を登録した、第２相、無作為化、プラセボ対照、概念実証試行であった。ＭＧ０００２は、１、８、１５日目にプラセボ（Ｎ＝２２）及び７ｍｇ／ｋｇのロザノリキシズマブ（Ｎ＝２１）の１回／週の３回の皮下注入を比較し、４週間の期間（投薬期間１）の間比較した。
投薬期間１の後、参加者を再無作為化して、９９日まで観察を継続して、２９、３６及び４３日目（投薬期間２）に７ｍｇ／ｋｇ又は４ｍｇ／ｋｇのいずれかのロザノリキシズマブを与えた（図２を参照のこと）。従来の療法は許可され、コルチコステロイド及び／又は免疫調節剤及び／又はコリンエステラーゼ阻害剤を含んだ。両方の投薬期間にわたる安全性及び有効性の予め特定した分析を６回のロザノリキシズマブの皮下注入後のデータで調べた。

【0323】

研究結果：
投薬期間１の終了時：定量的重症筋無力症（ＱＭＧ）応答者の割合はプラセボについての２２．７％と比較して３８．１％であり（ｐ＝０．２２３）、重症筋無力症複合（ＭＧＣ）応答者の割合はプラセボについての２７．３％と比較して４７．６％であった（ｐ＝０．１４４）。重症筋無力症－日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）については、応答者の割合はプラセボについての１３．６％と比較して４７．６％であった（ｐ＝０．０１７）。ベースラインからの３点以上の低下が、ＱＭＧ、ＭＧＣ及びＭＧ－ＡＤＬについての応答と定義された。

【0324】

確立された登録エンドポイントである重症筋無力症－日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコアのベースラインからの変化はプラセボと比較して顕著な改善であった（ｐ＝０．０３６）。

【0325】

投薬期間２の間、スコアの臨床的に意義のある低下が、９９日まで、最終用量後の効果の持続性と共に観察された。概して、ＱＭＧ、ＭＧ－複合及びＭＧ－ＡＤＬスコアのベースラインからの最も大きな低下が、ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ／ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇグループにおいて観察された（図３及び４を参照のこと）。

【0326】

２つの投薬期間（すなわち、６回のロザノリキシズマブの皮下注入後）にわたる予め特定された分析により、ＱＭＧ、ＭＧＣ及びＭＧ－ＡＤＬを含む、いくつかの疾患特異的エンドポイントにわたって一貫して臨床的に意義のある患者の利益が示された。積極的治療中の参加者は総ＩｇＧレベル及びＩｇＧ自己抗体レベルの顕著な低下を示した。血清ＩｇＧ濃度はロザノリキシズマブ治療の２週間後５５％低下した。総ＩｇＧ及び抗アセチルコリン受容体（抗ＡＣｈＲ）抗体は、両方の投薬期間においてロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇを受けた参加者において、投薬期間２の間、ベースラインからほぼ７０％減少した。抗ＭｕＳＫ抗体を有する患者はＭＧ０００２に対して適格であったが、抗ＭｕＳＫ抗体は、少ない患者数（ｎ＝１のロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇ／ロザノリキシズマブ７ｍｇ／ｋｇグループ）に起因して評価されなかった。

【0327】

（例４）
全身型重症筋無力症を有する成人患者の有効性及び安全性を評価する第３相、無作為化、二重盲検、プラセボ対照研究（ＭＧ０００３ ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒ：ＮＣＴ０３９７１４２２）
これは、中等度から重度の症状を経験し、ＩＶＩｇ又はＰＬＥＸでの治療を考慮されている全身型ＭＧを有する抗ＡＣｈＲ又は抗ＭｕＳＫ自己抗体陽性患者におけるロザノリキシズマブの第３相研究である。この研究の主な目的は、全身型ＭＧを有する患者におけるロザノリキシズマブの臨床的有効性を実証することである。この研究は、最長４週間のスクリーニング期間、続いて６週間の二重盲検治療期間及び８週間の観察期間から構成される。

【0328】

ＭＧ０００２からの結果により、ロザノリキシズマブの皮下（ｓｃ）投与が血清ＩｇＧ濃度の急速な低下を生じたことが示され、また、６回の用量（５０日）後、ＱＭＧ、ＭＧ－複合及びＭＧ－ＡＤＬのベースラインからの最も大きな低下も示された。従って、６週間の治療期間がＭＧ０００３に対して選択された。８週間の観察期間が、ＩｇＧ及びＡＣｈＲ及びＭｕＳＫ抗体の回復を追跡し、更に中断後の臨床効果の持続性をモニタリングするために規定された。

【0329】

参加者の数
この研究の合計サンプルサイズは１５０から２４０人の間の研究参加者の範囲であり得る。

【0330】

治療グループ及び期間
研究参加者当たりの研究の最長期間は、スクリーニング期間（中央検査室のターンアラウンド時間を考慮して１～２８日）、治療期間（６週間）、及び観察期間（８週間）からなり、最長で１８週間である。
体重段階及び研究群にわたる固定単位用量が利用される。
プラセボ群は、皮下（ｓｃ）投与のために０．９％塩化ナトリウム水溶液（生理食塩水、防腐剤を含まない）である。
２つのｓｃ治療群は、以下に記載されているように体重段階に基づいて階層化した固定単位用量を想定する：

【0331】

治療群１（ロザノリキシズマブ）－１週間間隔で６回のｓｃ用量（およそ７ｍｇ／ｋｇに相当）
・ 体重＜５０ｋｇ：投与されるべき用量２８０ｍｇ
・ 体重≧５０ｋｇ且つ＜７０ｋｇ：投与されるべき用量４２０ｍｇ
・ 体重≧７０ｋｇ且つ＜１００ｋｇ：投与されるべき用量５６０ｍｇ
・ 体重≧１００ｋｇ；投与されるべき用量８４０ｍｇ

【0332】

治療群２（ロザノリキシズマブ）－１週間間隔で６回のｓｃ用量（およそ１０ｍｇ／ｋｇに相当）
・ 体重＜５０ｋｇ：投与されるべき用量４２０ｍｇ
・ 体重≧５０ｋｇ且つ＜７０ｋｇ：投与されるべき用量５６０ｍｇ
・ 体重≧７０ｋｇ且つ＜１００ｋｇ：投与されるべき用量８４０ｍｇ
・ 体重≧１００ｋｇ：投与されるべき用量１１２０ｍｇ

【0333】

用量－曝露－ＩｇＧの関係を特徴付ける集団ＰＫＰＤモデルを使用して、シミュレーションにより、以前に研究した体重に基づいた（ｍｇ／ｋｇ）投薬レジメンと同等のＩｇＧ低下（平均及び９０％予測区間）を達成した各体重階層での固定単位用量の選択を導いた。これらのモデルに基づくシミュレーションにより、提案された連続６週の間の１週間に１回の用量のロザノリキシズマブが、７５％以上の平均最大ＩｇＧ低下を生じると予測されることが実証される。

【0334】

アウトカム尺度
主要アウトカム尺度：
１．重症筋無力症－日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコアの１０回目の来院までのベースラインからの変化［時間枠：ベースライン及び１０回目の来院（４３日目）］

【0335】

合計ＭＧ－ＡＤＬスコアは、各個別の項目（８項目；グレード：０、１、２、３）に対する応答を合計することによって得られる。スコアは０～２４の範囲であり、スコアが高いほど、より高度の身体障害を示す。

【0336】

副次アウトカム尺度：
１．１０回目の来院時に重症筋無力症－日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）応答を達成している参加者のパーセンテージ［時間枠：１０回目の来院（４３日目）］
２．重症筋無力症－複合スコアの１０回目の来院までのベースラインからの変化［時間枠：ベースライン及び１０回目の来院（４３日目）］

【0337】

合計重症筋無力症（ＭＧ）－複合スコアは、各個別の項目（１０項目；グレード：項目に応じて０～９）に対する応答を合計することによって得られる。スコアは０～５０の範囲であり、スコアが低いほど、より低い疾患活動性を示す。

【0338】

３．定量的重症筋無力症（ＱＭＧ）スコアの１０回目の来院までのベースラインからの変化［時間枠：ベースライン及び１０回目の来院（４３日目）］

【0339】

合計ＱＭＧスコアは、各個別の項目（１３項目；応答：なし＝０、軽度＝１、中等度＝２、重度＝３）に対する応答を合計することによって得られる。スコアは０～３９の範囲であり、スコアが低いほど、より低い疾患活動性を示す。

【0340】

４．重症筋無力症（ＭＧ）症状患者により報告されるアウトカム（ＰＲＯ）の「易疲労感」スコアの１０回目の来院までのベースラインからの変化［時間枠：ベースライン及び１０回目の来院（４３日目）］

【0341】

ＭＧ症状ＰＲＯ手段は５つのスケールにわたる４２項目からなる；眼症状（項目１～５）；球症状（項目６～１５）；呼吸器症状（項目１６～１８）；身体的疲労（項目１９～３３）及び筋力低下易疲労性（項目３４～４２）。

【0342】

研究参加者に、４点リッカートスケール（「なし」から「重度」）を使用して過去７日間にわたる眼、球及び呼吸器症状の重症度並びに５点リッカートスケール（「全然ない」から「いつも」）を使用して過去７日間にわたって彼らが身体的疲労及び筋力低下易疲労性を経験する頻度がどれくらいかをそれぞれ最適に記載している応答選択肢を選択するように依頼する。

【0343】

５．重症筋無力症（ＭＧ）症状患者により報告されるアウトカム（ＰＲＯ）の「身体的疲労、肢及び体軸低下」スコアの１０回目の来院までのベースラインからの変化［時間枠：ベースライン及び１０回目の来院（４３日目）］

【0344】

ＭＧ症状ＰＲＯ手段は５つのスケールにわたる４２項目からなる：眼症状（項目１～５）；球症状（項目６～１５）；呼吸器症状（項目１６～１８）；身体的疲労（項目１９～３３）及び筋力低下易疲労性（項目３４～４２）。

【0345】

研究参加者に、４点リッカートスケール（「なし」から「重度」）を使用して過去７日間にわたる眼、球及び呼吸器症状の重症度並びに５点リッカートスケール（「全然ない」から「いつも」）を使用して過去７日間にわたって彼らが身体的疲労及び筋力低下易疲労性を経験する頻度がどれくらいかをそれぞれ最適に記載している応答選択肢を選択するように依頼する。

【0346】

６．重症筋無力症（ＭＧ）症状患者により報告されるアウトカム（ＰＲＯ）の「球」スコアの１０回目の来院までのベースラインからの変化［時間枠：ベースライン及び１０回目の来院（４３日目）］

【0347】

ＭＧ症状ＰＲＯ手段は５つのスケールにわたる４２項目からなる：眼症状（項目１～５）；球症状（項目６～１５）；呼吸器症状（項目１６～１８）；身体的疲労（項目１９～３３）及び筋力低下易疲労性（項目３４～４２）。

【0348】

研究参加者に、４点リッカートスケール（「なし」から「重度」）を使用して過去７日間にわたる眼、球及び呼吸器症状の重症度並びに５点リッカートスケール（「全然ない」から「いつも」）を使用して過去７日間にわたって彼らが身体的疲労及び筋力低下易疲労性を経験する頻度がどれくらいかをそれぞれ最適に記載している応答選択肢を選択するように依頼する。

【0349】

７．治療中に発生した有害事象の発現（ＴＥＡＥ）［時間枠：ベースラインから研究来院の終了まで（最長１４週間）］

【0350】

有害事象（ＡＥ）は、医薬品を投与された患者又は臨床調査の対象におけるあらゆる不都合な医療上の発現であり、必ずしもこの治療との因果関係を有するわけではない。従って、ＡＥは、医薬（治験）品に関連するか否かにかかわらず、医薬（治験）品の使用と一時的に関連する、あらゆる好ましくなく、意図しない徴候、症状又は疾患であり得る。

【0351】

治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）は、ＩＭＰの最初の投与の前に存在しなかったあらゆる事象又は治療への曝露後に強さが悪化するＩＭＰの最初の投与の前に既に存在していたあらゆる解消されていない事象と定義される。

【0352】

８．治験医薬品（ＩＭＰ）の使用中止に至る治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）［時間枠：ベースラインから研究来院の終了まで（最長１４週間）］

【0353】

副次アウトカム尺度の１つはＭＧ患者におけるＩＭＰの安全性及び耐容性を評価することである。これは、ＩＭＰの使用中止に至る治療中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）によって測定され得る。

【0354】

ＴＥＡＥは、ＩＭＰの最初の投与の前に存在しなかったあらゆる事象又は治療への曝露後に強さが悪化するＩＭＰの最初の投与の前に既に存在していたあらゆる解消されていない事象と定義される。

【0355】

適格性基準
基準
組み入れ基準：
研究参加者は、インフォームドコンセントに署名する時点で１８歳以上でなければならない。
研究参加者は、研究参加者の病歴に基づいて１回目の来院時に全身型重症筋無力症（ｇＭＧ）の診断と実証され、以前の評価によって支持されている。
研究参加者は、１回目の来院の前にアセチルコリン受容体（ＡＣｈＲ）又は筋特異的キナーゼ（ＭｕＳＫ）に対する自己抗体の陽性の記録が確認されている。
研究参加者は、１回目の来院時にアメリカ重症筋無力症財団（ＭＧＦＡ）クラスＩＩ～ＩＶａを有する。
１回目の来院時及びベースライン時に少なくとも３の重症筋無力症－日常生活動作（ＭＧ－ＡＤＬ）スコア及び少なくとも１１の定量的重症筋無力症（ＱＭＧ）スコアを有する研究参加者。
除外基準：
研究参加者は、治験責任医師の意見では臨床的に関連する活動性感染症（例えば、敗血症、肺炎又は膿瘍）を有するか、又は治験医薬品（ＩＭＰ）の初回用量前の６週間以内に重症感染症（入院に至る又は非経口抗生物質治療を必要とする）を有した。
研究参加者は、他の抗新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）薬物への曝露後、過敏性反応を経験している。
口腔咽頭筋若しくは呼吸筋に影響を及ぼす重度（ＭＧ－ＡＤＬスケールでグレード３と定義される）の低下を有するか、又は１回目の来院時に筋無力症クリーゼ若しくは差し迫った危機を有する研究参加者。

【0356】

許可される併用治療
許可される医薬
用量コメント
経口コルチコステロイド
（例えば、プレドニゾロン）
－ ベースライン前の２週間安定
前の６カ月間、メトトレキサート≦３０ｍｇ／週で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
前の６カ月間、ミコフェノール酸モフェチル≦３ｇ／日で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
前の６ヵ月間、未変更についてシクロスポリンａ≦５ｍｇ／ｋｇ／日、変更（マイクロエマルション）について≦４ｍｇ／ｋｇ／日で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
前の６ヵ月間、アザチオプリン≦３ｍｇ／ｋｇ／日で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
コリンエステラーゼ阻害剤≦６００ｍｇ
ピリドスチグミン／日
安定な用量は必要とされない－用量は有効なアウトカムの日に保持した
前の６ヵ月間、タクロリムス≦５ｍｇ／日で治療し、且つベースライン前の２ヵ月間安定な用量である
ａ トラフレベルが３００ｎｇ／Ｌ以下である場合、記載したものより高い用量が許容される。
ｂ 体重に基づく１日総用量が５ｍｇ超である場合、研究参加者が推奨される治療域を超えないことを確保するために血漿トラフレベルがチェックされなければならない。

【0357】

禁止される併用治療（医薬及び療法）
以下の併用医薬が研究の間禁止される：
リツキシマブを含む全ての生物製剤
シクロホスファミド
ピメクロリムス
ＩＰＰ－２０１１０１（Ｌｕｐｕｚｏｒ（商標））
免疫吸着

【0358】

参考文献

【0359】

本明細書に引用される全ての参考文献はそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。前述の例は本発明を例示することを意図し、決して本発明を限定するものではない。本明細書に開示されている本発明の趣旨及び範囲内の変更は含まれる。

【配列表フリーテキスト】

【0360】

配列番号１：＜２２３＞ＣＡ１７０＿１５１９ ＣＤＲＨ１
配列番号２：＜２２３＞ＣＡ１７０＿１５１９ ＣＤＲＨ２
配列番号３：＜２２３＞ＣＡ１７０＿１５１９ ＣＤＲＨ３
配列番号４：＜２２３＞ＣＡ１７０＿１５１９ ＣＤＲＬ１
配列番号５：＜２２３＞ＣＡ１７０＿１５１９ ＣＤＲＬ２
配列番号６：＜２２３＞ＣＡ１７０＿１５１９ ＣＤＲＬ３
配列番号７：＜２２３＞ラットＡｂ １５１９ ＶＬ領域
配列番号８：＜２２３＞ラットＡｂ １５１９ ＶＬ領域
配列番号９：＜２２３＞シグナル配列を有するラットＡｂ １５１９ ＶＬ領域
配列番号１０：＜２２３＞シグナル配列を有するラットＡｂ １５１９ ＶＬ領域
配列番号１１：＜２２３＞ラットＡｂ １５１９ ＶＨ領域
配列番号１２：＜２２３＞ラットＡｂ １５１９ ＶＨ領域
配列番号１３：＜２２３＞シグナル配列を有するラットＡｂ １５１９ ＶＨ領域
配列番号１４：＜２２３＞シグナル配列を有するラットＡｂ １５１９ ＶＨ領域
配列番号１５：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０ Ｖ領域
配列番号１６：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０ Ｖ領域（大腸菌発現）
配列番号１７：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０ Ｖ領域（哺乳動物発現）
配列番号１８：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＬ２０ Ｖ領域（大腸菌発現）
配列番号１９：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＬ２０ Ｖ領域（大腸菌発現）
配列番号２０：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＬ２０ Ｖ領域（哺乳動物発現）
配列番号２１：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＬ２０ Ｖ領域（哺乳動物発現）
配列番号２２：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０軽鎖（Ｖ＋定常）
配列番号２３：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０軽鎖（Ｖ＋定常、大腸菌発現）
配列番号２４：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０軽鎖（Ｖ＋定常、哺乳動物発現）
配列番号２５：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＬ２０軽鎖（大腸菌発現）
配列番号２６：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＬ２０軽鎖（大腸菌発現）
配列番号２７：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＬ２０軽鎖（哺乳動物発現）
配列番号２８：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＬ２０軽鎖（哺乳動物発現）
配列番号２９：＜２２３＞１５１９ ｇＨ２０ Ｖ領域
配列番号３０：＜２２３＞１５１９ ｇＨ２０ Ｖ領域（大腸菌発現）
配列番号３１：＜２２３＞１５１９ ｇＨ２０ Ｖ領域（哺乳動物発現）
配列番号３２：＜２２３＞１５１９ ｇＨ２０ Ｖ領域（大腸菌発現）
配列番号３３：＜２２３＞１５１９ ｇＨ２０ Ｖ領域（大腸菌発現）
配列番号３４：＜２２３＞１５１９ ｇＨ２０ Ｖ領域（哺乳動物発現）
配列番号３５：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＨ２０ Ｖ領域（哺乳動物発現）
配列番号３６：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－１ ＣＨ１＋ヒンジ）
配列番号３７：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－１ ＣＨ１＋ヒンジ、大腸菌発現）
配列番号３８：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－１ ＣＨ１＋ヒンジ、哺乳動物発現）
配列番号３９：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（大腸菌発現）
配列番号４０：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（大腸菌発現）
配列番号４１：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（哺乳動物発現）
配列番号４２：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（哺乳動物発現）
配列番号４３：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ４重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－４Ｐ定常）
配列番号４４：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ４重鎖（エクソンを有するＶ＋ヒトガンマ－４Ｐ定常）
配列番号４５：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ４重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－４Ｐ定常）
配列番号４６：＜２２３＞１５１９ｇＬ２０ ＦａｂＦｖ軽鎖
配列番号４７：＜２２３＞１５１９ｇＬ２０ ＦａｂＦｖ軽鎖
配列番号４８：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ｇＬ２０ ＦａｂＦｖ軽鎖
配列番号４９：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ｇＬ２０ ＦａｂＦｖ軽鎖
配列番号５０：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＦａｂＦｖ重鎖
配列番号５１：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＦａｂＦｖ重鎖
配列番号５２：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ｇＨ２０ ＦａｂＦｖ重鎖
配列番号５３：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ｇＨ２０ ＦａｂＦｖ重鎖
配列番号５４：＜２２３＞ヒトＶＫ１ ２－１－（１）Ａ３０ ＪＫ２アクセプターフレームワーク
配列番号５５：＜２２３＞ヒトＶＫ１ ２－１－（１）Ａ３０ ＪＫ２アクセプターフレームワーク
配列番号５６：＜２２３＞ヒトＶＨ３ １－３ ３－０７ ＪＨ４アクセプターフレームワーク
配列番号５７：＜２２３＞ヒトＶＨ３ １－３ ３－０７ ＪＨ４アクセプターフレームワーク
配列番号５８：＜２２３＞ラットＡｂ １５４８ ＶＬ領域
配列番号５９：＜２２３＞ラットＡｂ １５４８ ＶＬ領域
配列番号６０：＜２２３＞ラットＡｂ １５４８ ＶＨ領域
配列番号６１：＜２２３＞ラットＡｂ １５４８ ＶＨ領域
配列番号６２：＜２２３＞ラットＡｂ １６４４ ＶＬ領域
配列番号６３：＜２２３＞ラットＡｂ １６４４ ＶＬ領域
配列番号６４：＜２２３＞ラットＡｂ １６４４ ＶＨ領域
配列番号６５：＜２２３＞ラットＡｂ １６４４ ＶＨ領域
配列番号６６：＜２２３＞ラットＡｂ １４９６ ＶＫ領域
配列番号６７：＜２２３＞ラットＡｂ １４９６ ＶＫ領域
配列番号６８：＜２２３＞ラットＡｂ １４９６ ＶＨ領域
配列番号６９：＜２２３＞ラットＡｂ １４９６ ＶＨ領域
配列番号７０：＜２２３＞フレームワーク
配列番号７１：＜２２３＞フレームワーク
配列番号７２：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ１重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－１定常）
配列番号７３：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ１重鎖（エクソンを有するＶ＋ヒトガンマ－１定常）
配列番号７４：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ１重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－１定常）
配列番号７５：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０軽鎖（Ｖ＋定常、哺乳動物発現代替）
配列番号７６：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－１ ＣＨ１＋ヒンジ、配列番号３８から哺乳動物発現の１塩基変化）
配列番号７７：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ ｇＨ２０ Ｆａｂ’重鎖（配列番号４２から哺乳動物発現の１塩基が変化した）
配列番号７８：＜２２３＞１５１９ｇＬ２０ ＦａｂＦｖ軽鎖（配列番号４６に対する代替配列）
配列番号７９：＜２２３＞１５１９ｇＬ２０ ＦａｂＦｖ軽鎖（配列番号４７に対する代替配列）
配列番号８０：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＦａｂＦｖ重鎖（配列番号５１に対する代替配列）
配列番号８１：＜２２３＞ラットＡｂ １５４８ ＶＬ領域（配列番号５８に対する代替配列）
配列番号８２：＜２２３＞ラットＡｂ １５４８ ＶＬ領域（配列番号５９に対する代替配列）
配列番号８３：＜２２３＞ラットＡｂ １５４８ ＶＨ領域（配列番号６０に対する代替配列）
配列番号８４：＜２２３＞ラットＡｂ １５４８ ＶＨ領域（配列番号６１に対する代替配列）
配列番号８５：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ１重鎖（エクソンを有するＶ＋ヒトガンマ－１定常、配列番号７１に対して１塩基変化）
配列番号８６：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ１重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－１定常）（配列番号７２から１塩基変化）
配列番号８７：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ４重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－４定常、Ｐ変異はなし）
配列番号８８：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ４重鎖（エクソンを有するＶ＋ヒトガンマ－４定常、Ｐ変異はなし）
配列番号８９：＜２２３＞シグナル配列を有する１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ４重鎖（Ｖ＋ヒトガンマ－４定常）－Ｐ変異はなし
配列番号９０：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０ Ｖ領域（配列番号１７に対して代替の哺乳動物発現）
配列番号９１：＜２２３＞１５１９ ｇＬ２０軽鎖（Ｖ＋定常、配列番号２４に対して代替の哺乳動物発現）
配列番号９２：＜２２３＞１５１９ ｇＨ２０ Ｖ領域（配列番号３１に対して代替の哺乳動物発現）
配列番号９３：＜２２３＞１５１９ｇＨ２０ ＩｇＧ４重鎖（配列番号４４に対して代替のＶ＋ヒトガンマ－４Ｐ定常）
配列番号９４：＜２２３＞ＦｃＲｎアルファ鎖細胞外配列

【図1】

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図1E】

【図1F】

【図1G】

【図1H】

【図1I】

【図1J】

【図1K】

【図1L】

【図1M】

【図1N】

【図1P】

【図1Q】

【図1R】

【図1S】

【図1T】

【図1U】

【図1V】

【図1W】

【図1X】

【図1Y】

【図1Z】

【図1AA】

【図1BB】

【図1CC】

【図1DD】

【図1EE】

【図1FF】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【配列表】

2024138363000001.app

【手続補正書】

【提出日】2024-07-10

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【請求項1】

抗ＦｃＲｎ抗体を含む、重症筋無力症（ＭＧ）を治療する必要があるヒトにおいてＭＧを治療するための医薬組成物であって、
前記抗ＦｃＲｎ抗体は、配列番号４３に示されるアミノ配列または配列番号４３に示されるアミノ酸配列のＣ末端リシンは存在しないアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号２２に示される配列を含む軽鎖と
を含み、
前記抗ＦｃＲｎ抗体は、少なくとも６回、毎週前記ヒトに皮下投与され、
各用量が、２８０ｍｇ、４２０ｍｇ、５６０ｍｇ、８４０ｍｇ及び１１２０ｍｇから選択される固定単位用量として提供される、医薬組成物。

【請求項2】

各用量が、７ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇである、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

抗ＦｃＲｎ抗体を含む、重症筋無力症（ＭＧ）を治療する必要があるヒトにおいてＭＧを治療するための医薬組成物であって、
前記抗ＦｃＲｎ抗体は、配列番号４３に示されるアミノ配列または配列番号４３に示されるアミノ酸配列のＣ末端リシンは存在しないアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号２２に示される配列を含む軽鎖と
を含み、
前記抗ＦｃＲｎ抗体は、少なくとも６回、毎週前記ヒトに皮下投与され、５０ｋｇ未満の体重では用量は２８０ｍｇであり、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇであり、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量５６０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は８４０ｍｇである、医薬組成物。

【請求項4】

抗ＦｃＲｎ抗体を含む、重症筋無力症（ＭＧ）を治療する必要があるヒトにおいてＭＧを治療するための医薬組成物であって、
前記抗ＦｃＲｎ抗体は、配列番号４３に示されるアミノ配列または配列番号４３に示されるアミノ酸配列のＣ末端リシンは存在しないアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号２２に示される配列を含む軽鎖と
を含み、
前記抗ＦｃＲｎ抗体は、少なくとも６回、毎週前記ヒトに皮下投与され、５０ｋｇ未満の体重では用量は４２０ｍｇであり、５０ｋｇ以上であるが７０ｋｇ未満の体重では用量は５６０ｍｇであり、７０ｋｇ以上であるが１００ｋｇ未満の体重では用量は８４０ｍｇであり、１００ｋｇ以上の体重では用量は１１２０ｍｇである、医薬組成物。

【請求項5】

前記抗ＦｃＲｎ抗体がロザノリキシズマブである、請求項１から４までのいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項6】

薬学的に許容される賦形剤、希釈剤又は担体のうちの１つ又は複数を含む、請求項１から５までのいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項7】

１つ又は複数の他の活性成分を更に含む、請求項１から６までのいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項8】

前記抗ＦｃＲｎ抗体が、ヒトＦｃＲｎへのヒトＩｇＧの結合を遮断する、請求項１から７までのいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記抗ＦｃＲｎ抗体が、β２ミクログロブリンに結合しない、請求項１から８までのいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項10】

６回、１週間に１回投与され、続いて最初の４回、５回又は６回の用量より少ない用量及び／又は少ない頻度で１回又は複数回の追加用量が投与される、請求項１から９までのいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記ヒトが中等度から重度と分類される全身型ＭＧに罹患している、請求項１から１０までのいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項12】

前記ヒトが抗ＡＣｈＲ又は抗ＭｕＳＫ自己抗体陽性である、請求項１から１１までのいずれか一項に記載の医薬組成物。

【手続補正2】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】配列表

【補正方法】変更

【補正の内容】

【配列表】

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【外国語明細書】