特開 2024-142624 生体物質抽出用磁性ビーズ

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024142624

(43)【公開日】2024-10-11

(54)【発明の名称】生体物質抽出用磁性ビーズ

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/10 20060101AFI20241003BHJP

   B01J 23/755 20060101ALI20241003BHJP

   H01F 1/26 20060101ALI20241003BHJP

   H01F 1/44 20060101ALI20241003BHJP

   C12Q 1/6806 20180101ALI20241003BHJP

   C12M 1/00 20060101ALI20241003BHJP

   C12M 1/26 20060101ALI20241003BHJP

   G01N 33/543 20060101ALI20241003BHJP

【ＦＩ】

C12N15/10 114Z

B01J23/755 M

H01F1/26

H01F1/44 120

C12Q1/6806 Z

C12M1/00 A

C12M1/26

G01N33/543 541A

【審査請求】未請求

【請求項の数】8

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2023054844

(22)【出願日】2023-03-30

(71)【出願人】

【識別番号】000002369

【氏名又は名称】セイコーエプソン株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100179475

【弁理士】

【氏名又は名称】仲井 智至

(74)【代理人】

【識別番号】100216253

【弁理士】

【氏名又は名称】松岡 宏紀

(74)【代理人】

【識別番号】100225901

【弁理士】

【氏名又は名称】今村 真之

(72)【発明者】

【氏名】塚田 健太

(72)【発明者】

【氏名】花村 雅人

(72)【発明者】

【氏名】内田 美紀

【テーマコード（参考）】

4B029

4B063

4G169

5E041

【Ｆターム（参考）】

4B029AA09

4B029AA23

4B029BB20

4B029CC04

4B029CC13

4B029HA10

4B063QA13

4B063QA19

4B063QQ28

4B063QQ42

4B063QQ52

4B063QR08

4B063QR32

4B063QR35

4B063QR62

4B063QR83

4B063QS15

4B063QS25

4B063QS34

4B063QX02

4G169BB02B

4G169BC68B

4G169CB81

4G169DA06

4G169EA08

4G169EB15X

5E041AA01

5E041AA02

5E041AA03

5E041AA04

5E041AA05

5E041AA06

5E041AA07

5E041AA11

5E041BC01

5E041BC05

5E041BD07

5E041CA01

5E041HB14

5E041NN06

5E041NN12

5E041NN13

(57)【要約】

【課題】生体物質の抽出効率が良好な生体物質抽出用磁性ビーズを提供すること。
【解決手段】磁性金属粉末と、前記磁性金属粉末の粒子表面を被覆し、無機酸化物を含む無機酸化物層と、前記無機酸化物層の表面を被覆し、金イオンの還元剤または金イオンの還元反応の触媒を含む下地層と、前記下地層の表面を被覆し、金を含む金層と、Ａｕ－Ｓ結合を介して前記金層の表面に結合されている、リガンドまたはリガンド結合部位を有する化合物を含む固定化層と、を有することを特徴とする生体物質抽出用磁性ビーズ。
【選択図】図５

【特許請求の範囲】

【請求項1】

磁性金属粉末と、
前記磁性金属粉末の粒子表面を被覆し、無機酸化物を含む無機酸化物層と、
前記無機酸化物層の表面を被覆し、金イオンの還元剤または金イオンの還元反応の触媒を含む下地層と、
前記下地層の表面を被覆し、金を含む金層と、
Ａｕ－Ｓ結合を介して前記金層の表面に結合されている、リガンドまたはリガンド結合部位を有する化合物を含む固定化層と、
を有することを特徴とする生体物質抽出用磁性ビーズ。

【請求項2】

前記化合物は、下記式（１）で表されるチオール誘導体またはその塩と前記金層との反応生成物である請求項１に記載の生体物質抽出用磁性ビーズ。
Ｒ^１－（ＣＨ_２）_ｘ－（Ｃ_２Ｈ_５Ｏ）_ｙ－Ｒ^２ … （１）
［上記式（１）中、ｘは２以上１８以下の整数であり、ｙは０以上１００以下の整数である。また、上記式（１）中、Ｒ^１はチオール基またはジスルフィド結合であり、Ｒ^２は前記リガンドまたは前記リガンド結合部位である。］

【請求項3】

前記無機酸化物は、酸化ケイ素または酸化チタンである請求項１または２に記載の生体物質抽出用磁性ビーズ。

【請求項4】

前記下地層は、ニッケルを含む請求項１または２に記載の生体物質抽出用磁性ビーズ。

【請求項5】

前記無機酸化物層および前記下地層の合計の平均厚さが、１０ｎｍ以上６００ｎｍ以下である請求項１または２に記載の生体物質抽出用磁性ビーズ。

【請求項6】

平均粒径が０．５μｍ以上５０μｍ以下である請求項１または２に記載の生体物質抽出用磁性ビーズ。

【請求項7】

前記磁性金属粉末の飽和磁化は、８０ｅｍｕ／ｇ以上であり、
前記磁性金属粉末の保磁力は、１００Ａ／ｍ以下である請求項１または２に記載の生体物質抽出用磁性ビーズ。

【請求項8】

前記下地層の平均厚さは、前記無機酸化物層の平均厚さの１．２倍以上４．０倍以下である請求項１または２に記載の生体物質抽出用磁性ビーズ。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、生体物質抽出用磁性ビーズに関するものである。

【背景技術】

【0002】

近年、医療分野における診断や生命科学の分野において、生体物質の検査需要が高まっている。生体物質検査手法のうち、ＰＣＲ（Polymerase chain reaction）法は、ＤＮＡ（デオキシリボ核酸）やＲＮＡ（リボ核酸）等の核酸を抽出し、その核酸を特異的に増幅して検出する方法である。こうした生体物質を検査する過程では、まず、検体から検査対象の物質を抽出することが必要である。この生体物質の抽出には、例えば、生体物質に対する結合能を有する抽出担体が用いられる。

【0003】

特許文献１には、細胞表面受容体やウイルスに対する結合能を有する結合種として、リガンドを例示している。そして、リガンドを保持するコロイドを用いて生体分子を検出することが開示されている。また、金で被覆されている粒子の表面にチオールで構成された自己集合単層が形成されていること、および、自己集合単層がリガンドの結合パートナーを提示すること、が開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特開２０１７－１２２７２８号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

生体物質の抽出においては、抽出担体に対し、様々な物理的および化学的な負荷が加わる。特許文献１に記載のリガンドを保持するコロイドは、このような負荷が加わったとき、抽出担体に結合している生体物質が脱離したり、抽出担体が凝集したりして、生体物質の抽出効率が低下することが懸念される。また、特許文献１に記載のコロイドは、分散媒に対する分散性において改善の余地がある。分散性が低い場合、生体物質の捕捉効率が低下するため、結果として生体物質の抽出効率が低下する。

【0006】

そこで、生体物質の抽出効率が良好な生体物質抽出用磁性ビーズの実現が課題となっている。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明の適用例に係る生体物質抽出用磁性ビーズは、
磁性金属粉末と、
前記磁性金属粉末の粒子表面を被覆し、無機酸化物を含む無機酸化物層と、
前記無機酸化物層の表面を被覆し、金イオンの還元剤または金イオンの還元反応の触媒を含む下地層と、
前記下地層の表面を被覆し、金を含む金層と、
Ａｕ－Ｓ結合を介して前記金層の表面に結合されている、リガンドまたはリガンド結合部位を有する化合物を含む固定化層と、
を有する。

【図面の簡単な説明】

【0008】

【図1】生体物質抽出方法の一例を説明するための工程図である。

【図2】図１に示す生体物質抽出方法を説明するための模式図である。

【図3】図１に示す生体物質抽出方法を説明するための模式図である。

【図4】図１に示す生体物質抽出方法を説明するための模式図である。

【図5】実施形態に係る磁性ビーズを示す断面図である。

【図6】図５に示す被覆膜の部分拡大図である。

【図7】図５の磁性ビーズの変形例を示す断面図である。

【図8】機能性部位を有する化合物が、Ａｕ－Ｓ結合を介して金層に結合している状態を示す模式図である。

【発明を実施するための形態】

【0009】

以下、本発明の生体物質抽出用磁性ビーズの好適な実施形態を添付図面に基づいて詳細に説明する。

【0010】

実施形態に係る生体物質抽出用磁性ビーズは、生体物質を吸着するとともに、その状態で磁気分離に用いられる粒子群である。磁気分離とは、生体物質抽出用磁性ビーズを含む固相と分散媒を含む液相とが入った容器に外部磁場を印加し、固相を磁気吸引することにより、固相と液相とを分離する技術である。なお、以下の説明では、生体物質抽出用磁性ビーズを、単に「磁性ビーズ」という場合がある。

【0011】

生体物質とは、例えば、ＤＮＡやＲＮＡのような核酸、タンパク質、糖類、がん細胞のような各種細胞、ペプチド、細菌、ウイルス等の物質を指す。なお、核酸は、例えば、細胞や生体組織等の生体試料、ウイルス、細菌等に含まれた状態で存在していてもよい。生体物質抽出方法では、このような生体物質を、例えば溶解・吸着、洗浄、溶出の各工程を経て抽出する方法であり、その過程で、前述した磁気分離を利用することにより、生体物質を精製し、抽出することができる。

【0012】

１．生体物質抽出方法
以下、磁気分離を利用した生体物質抽出方法の一例について説明する。なお、以下の説明では、生体物質が核酸である場合を例に説明する。

【0013】

図１は、生体物質抽出方法の一例を説明するための工程図である。図２ないし図４は、図１に示す生体物質抽出方法を説明するための模式図である。

【0014】

図１に示す生体物質抽出方法は、溶解・吸着工程Ｓ１０２と、洗浄工程Ｓ１０８と、溶出工程Ｓ１１０と、を有する。以下、各工程について順次説明する。

【0015】

１．１．溶解・吸着工程
溶解・吸着工程Ｓ１０２では、核酸を含む検体試料および溶解吸着液を含む液体３、ならびに、磁性ビーズ２を、図２に示す容器１に入れる。そして、容器１の収容物を混合する。これにより、磁性ビーズ２は、図２に示すように、容器１内の液体３中で分散する。核酸は、通常、細胞膜や核に内包されているため、溶解吸着液の溶解作用により、細胞膜や核のいわゆる外殻を溶解除去して核酸が取り出される。その後、溶解吸着液の吸着作用により、磁性ビーズ２に核酸が吸着される。

【0016】

溶解吸着液としては、例えば、カオトロピック物質を含む液体が用いられる。カオトロピック物質は、水溶液中でカオトロピックイオンを生じ、水分子の相互作用を減少させ、それにより構造を不安定化させる作用を有し、核酸の磁性ビーズ２への吸着に寄与する。

【0017】

なお、核酸のうち、特にＲＮＡを抽出する場合には、酸を加える等して、容器１内の液体３を酸性にすることが好ましい。ＲＮＡモノマーは、リボースを含むため、ＤＮＡに比べて極性溶媒に溶けやすい。この差を利用し、ＲＮＡとＤＮＡとを分離する場合には、外殻を溶解除去した後、例えば、酸を加えて液体３を酸性にしてもよい。その後、液体３にフェノールやクロロホルム等の無極性溶媒を加える。これにより、ＤＮＡは無極性溶媒に移行する一方、ＲＮＡは極性溶媒に留まる。その結果、ＲＮＡとＤＮＡとを分離し、ＲＮＡを抽出することができる。

【0018】

ＲＮＡを抽出する場合、容器１内の液体３のｐＨは、５．０以下であることが好ましく、２．０以上４．０以下であることがより好ましい。これにより、ＲＮＡが含むリン酸基の電離平衡が水酸基に偏るため、ＲＮＡが極性溶媒に特に溶けやすくなる。したがって、ＲＮＡの抽出効率をより高めることができる。

【0019】

１．１．１．磁気分離操作
溶解・吸着工程Ｓ１０２では、核酸が吸着された磁性ビーズ２に外部磁場を作用させ、磁気吸引する。これにより、磁性ビーズ２を容器１の内壁に移動させ、固定する。その結果、図３に示すように、固相である磁性ビーズ２と、液相である液体３と、を分離することができる。本明細書では、このような外部磁場を印加して磁性ビーズ２を固定する操作を「磁気分離操作」という。

【0020】

磁気分離操作を行う前、必要に応じて、容器１の収容物を撹拌する。これにより、磁性ビーズ２に核酸が吸着される確率が高くなる。撹拌には、例えば、ボルテックスミキサー、手振り振とう、ピペッティング等が用いられる。

【0021】

外部磁場の印加には、例えば、容器の側方に配置された磁石５が用いられる。磁石５は、電磁石であってもよいし、永久磁石であってもよい。磁性ビーズ２に外部磁場が作用すると、磁性ビーズ２は磁石５に向かって移動する。

【0022】

なお、磁気分離操作を行った後、必要に応じて、容器に加速度を与えるようにしてもよい。これにより、磁性ビーズ２に付着していた液体３を振り落とすことができるので、分離できていなかった液体３を減らすことができる。加速度は、遠心加速度であってもよい。遠心加速度の付与には、遠心分離機を用いればよい。

【0023】

１．１．２．液体排出操作
溶解・吸着工程Ｓ１０２では、磁性ビーズ２を容器１の内壁に固定した状態で、図４に示すように、容器１の底に溜まった液体３を、例えばピペット６等で吸引して排出する。本明細書では、このような液体３を排出する操作を「液体排出操作」という。液体排出操作により、容器１内には、核酸が吸着された磁性ビーズ２が残る。

【0024】

１．２．洗浄工程
洗浄工程Ｓ１０８では、核酸が吸着された磁性ビーズ２を洗浄する。洗浄とは、磁性ビーズ２に吸着した夾雑物を除去するため、核酸が吸着されている磁性ビーズ２を洗浄液と接触させた後、再び分離することによって、夾雑物を除去する操作のことをいう。

【0025】

具体的には、核酸が吸着された磁性ビーズ２が入った容器１に洗浄液を入れた後、再び、前述した磁気分離操作および液体排出操作を行う。

【0026】

このうち、磁気分離操作では、まず、ピペット等により、容器１内に洗浄液を供給する。そして、磁性ビーズ２および洗浄液を撹拌する。これにより、洗浄液が磁性ビーズ２と接触し、核酸が吸着されている磁性ビーズ２が洗浄される。撹拌には、例えば、ボルテックスミキサー、手振り振とう、ピペッティング等が用いられる。また、このとき、一時的に外部磁場の印加をオフにしてもよい。これにより、磁性ビーズ２が洗浄液に再分散するため、洗浄効率をより高めることができる。

【0027】

次に、液体排出操作として、磁性ビーズ２を容器１の内壁に固定した状態で、容器１の底に溜まった洗浄液を排出する。以上のような洗浄液の供給および排出を少なくとも１回行うことにより、磁性ビーズ２を洗浄する。これにより、夾雑物を精度よく除去することができる。

【0028】

洗浄液は、核酸の溶出を促進せず、かつ、夾雑物の磁性ビーズ２に対する結合を促進しない液体であれば、特に限定されないが、例えば、エタノール、イソプロピルアルコール、アセトン等の有機溶媒またはその水溶液、低塩濃度水溶液等が挙げられる。

【0029】

洗浄液は、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、ＳＤＳ等の界面活性剤を含有していてもよい。また、洗浄液は、グアニジン塩酸塩等のカオトロピック物質を含有していてもよい。

【0030】

また、洗浄工程Ｓ１０８は、必要に応じて行えばよく、洗浄の必要がない場合には、省略されてもよい。

【0031】

１．３．溶出工程
溶出工程Ｓ１１０では、磁性ビーズ２に吸着している核酸を溶出液に溶出させる。溶出とは、核酸が吸着されている磁性ビーズ２を溶出液と接触させた後、再び分離することによって、核酸を溶出液に移行させる操作である。

【0032】

具体的には、核酸が吸着された磁性ビーズ２が入った容器１に溶出液を入れた後、再び、前述した磁気分離操作および液体排出操作を行う。

【0033】

このうち、磁気分離操作では、まず、ピペット等により、容器１内に溶出液を供給する。そして、磁性ビーズ２および溶出液を攪拌する。これにより、溶出液が磁性ビーズ２と接触し、核酸が溶出液に溶出する。撹拌には、例えば、ボルテックスミキサー、手振り振とう、ピペッティング等が用いられる。また、このとき、一時的に外部磁場の印加をオフにしてもよい。これにより、磁性ビーズ２が溶出液に分散するため、溶出効率をより高めることができる。

【0034】

次に、液体排出操作として、磁性ビーズ２を容器１の内壁に固定した状態で、容器１の底に溜まった溶出液を排出する。これにより、核酸を含む溶出液を回収することができる。

【0035】

溶出液は、核酸が吸着されている磁性ビーズ２から核酸の溶出を促進する液体であれば、特に限定されないが、例えば、滅菌水や純水のような水の他、ＴＥ緩衝液、すなわち、１０ｍＭトリス塩酸緩衝液および１ｍＭのＥＤＴＡを含み、ｐＨが８程度の水溶液が好ましく用いられる。

【0036】

溶出液は、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、ＳＤＳ等の界面活性剤を含有していてもよい。また、防腐剤としてアジ化ナトリウムを含有していてもよい。

【0037】

また、溶出工程Ｓ１１０では、溶出液を加熱するようにしてもよい。これにより、核酸の溶出を促進することができる。溶出液の加熱温度は、特に限定されないが、７０℃以上２００℃以下であるのが好ましく、８０℃以上１５０℃以下であるのがより好ましく、９５℃以上１２５℃以下であるのがさらに好ましい。

【0038】

２．生体物質抽出用磁性ビーズ
次に、磁性ビーズ２（実施形態に係る生体物質抽出用磁性ビーズ）について説明する。磁性ビーズ２は、磁性を有するとともに、表面に生体物質との結合性を有する粒子である。

【0039】

図５は、実施形態に係る磁性ビーズ２を示す断面図である。図５に示す磁性ビーズ２は、磁性金属粉末２２と、被覆膜２４と、を有する。磁性金属粉末２２には、磁性を有する金属粉末が用いられる。被覆膜２４は、少なくとも表面が、生体物質との結合性を有する物質または化学構造で構成される。前述した磁気分離操作には、このような磁性ビーズ２の集合体である粒子群が用いられる。なお、本明細書において磁性ビーズ２とは、粒子群またはそれを構成する１つの粒子を指す。

【0040】

磁性ビーズ２の飽和磁化は、５０ｅｍｕ／ｇ以上であることが好ましく、８０ｅｍｕ／ｇ以上であることがより好ましく、１００ｅｍｕ／ｇ以上であることがさらに好ましい。飽和磁化とは、外部から十分大きな磁場を印加した時に磁性材料が示す磁化が磁場に関係なく一定となる場合の磁化の値である。飽和磁化が前記範囲内であれば、磁性材料としての機能を十分に発揮させることができる。具体的には、磁場中における磁性ビーズ２の移動速度を向上させることができるため、磁気分離に要する時間の短縮を図ることができる。また、磁性ビーズ２の飽和磁化は、外部磁場によって固定されたときの吸着力を左右する。飽和磁化が前記範囲内であれば、十分に高い吸着力が得られるため、磁性ビーズ２を固定した状態で液体３を排出するとき、磁性ビーズ２が液体３と一緒に排出されるのを抑制することできる。これにより、磁性ビーズ２の減少に伴う核酸の収率の低下を抑制することができる。

【0041】

なお、磁性ビーズ２の飽和磁化の上限値は、特に限定されないが、性能とコストのバランスに適する材料選択の容易性の観点から、２２０ｅｍｕ／ｇ以下とするのが好ましい。

【0042】

磁性ビーズ２の飽和磁化は、振動試料型磁力計（ＶＳＭ：Ｖｉｂｒａｔｉｎｇ Ｓａｍｐｌｅ Ｍａｇｎｅｔｏｍｅｔｅｒ）等により測定することができる。振動試料型磁力計としては、例えば、株式会社玉川製作所製のＴＭ－ＶＳＭ１２３０－ＭＨＨＬ等が挙げられる。飽和磁化を測定する際の最大印加磁場は、例えば０．５Ｔ以上とされる。

【0043】

磁性ビーズ２の平均粒径Ｄ５０は、好ましくは０．５μｍ以上５０μｍ以下とされ、より好ましくは１μｍ以上３０μｍ以下とされ、さらに好ましくは２μｍ以上２０μｍ以下とされ、特に好ましくは３μｍ以上１５μｍ以下とされる。磁性ビーズ２の平均粒径Ｄ５０が前記範囲内であれば、磁性ビーズ２の比表面積を十分に大きくすることができ、かつ、磁気分離に適した吸引力および吸着力を磁性ビーズ２に発生させることができる。また、磁性ビーズ２の凝集を抑え、分散性を高めることができる。なお、磁性ビーズ２の平均粒径Ｄ５０が前記下限値を下回ると、磁性ビーズ２の磁化の値が小さくなるとともに、凝集しやすくなり、結果として核酸の抽出効率が低下するおそれがある。また、磁性ビーズ２の移動速度が低下し、磁気分離に要する時間が長くなるおそれがある。一方、磁性ビーズ２の平均粒径Ｄ５０が前記上限値を上回ると、磁性ビーズ２の比表面積が小さくなるため、十分な量の核酸を吸着することができず、核酸の抽出量が減少するおそれがある。また、磁性ビーズ２が沈降しやすくなり、核酸の抽出に寄与できる磁性ビーズ２が減少して、核酸の抽出効率が低下するおそれがある。

【0044】

なお、磁性ビーズ２の平均粒径Ｄ５０は、レーザー回折・分散法により体積基準の粒度分布を測定し、この粒度分布から得られた積算分布曲線から求めることができる。具体的には、積算分布曲線において、小径側から累積値が５０％である粒子径（メディアン径）が、磁性ビーズ２の平均粒径Ｄ５０である。レーザー回折・分散法により粒度分布を測定する装置としては、例えばマイクロトラック・ベル社製のＭＴ３３００シリーズ等が挙げられる。なお、レーザー回折・分散法に限らず、画像解析等の手法を用いてもよい。

【0045】

また、磁性ビーズ２の９０％粒径をＤ９０とする。磁性ビーズ２において平均粒径Ｄ５０に対する９０％粒径Ｄ９０の比Ｄ９０／Ｄ５０は、３．００以下であるのが好ましく、２．００以下であるのがより好ましく、１．７５以下であるのがさらに好ましい。これにより、粗大な粒子の含有率が低くなるため、粗大な粒子が周囲の比較的小さな粒子を引き寄せて凝集し、凝集体が生じるのを抑制することができる。凝集体が生じると、自重によって沈降し、抽出効率の低下やそれに伴う生体物質の検査時間の長時間化が生じるおそれがある。したがって、比Ｄ９０／Ｄ５０が前記範囲内であれば、これらの問題が発生するのを抑制することができる。なお、比Ｄ９０／Ｄ５０が前記上限値を上回ると、粗大な粒子の含有率が高くなるため、外部磁場の印加をオフにしても、磁性ビーズ２の分散性が低下し、凝集が発生しやすくなるおそれがある。

【0046】

なお、磁性ビーズ２の９０％粒径Ｄ９０は、レーザー回折・分散法により体積基準の粒度分布を測定し、この粒度分布から得られた積算分布曲線から求めることができる。具体的には、積算分布曲線において、小径側から累積値が９０％である粒子径が、磁性ビーズ２の９０％粒径Ｄ９０である。

【0047】

また、被覆膜２４の平均厚さをｔとし、磁性ビーズ２の平均粒径をＤ５０とするとき、Ｄ５０に対するｔの比ｔ／Ｄ５０は、０．０００１以上０．０５以下であることが好ましく、０．００１以上０．０１以下であることがより好ましい。ｔ／Ｄ５０が前記下限値を下回ると、磁性金属粉末２２の大きさに対して被覆膜２４の厚さの比率が小さくなりすぎるため、磁性ビーズ２同士の衝突または磁性ビーズ２と容器１の内壁等との衝突が生じた際に、被覆膜２４が破壊または剥離してしまうおそれがある。このため、被覆膜２４の表面に吸着して抽出される核酸の量が減少し、抽出効率が低下するおそれがある。また、剥離した被覆膜２４や磁性金属粉末２２の破片が抽出液中に存在すると、核酸を取り出す際に夾雑物（コンタミネーション）として同時に混入してしまうおそれがある。さらに、被覆膜２４が破壊、剥離することで磁性金属粉末２２が露出し、酸性溶液と接触した場合等では鉄イオン等の溶出が起きて、結果として核酸の抽出効率の低下を招くおそれがある。一方、ｔ／Ｄ５０が前記上限値を上回ると、磁性ビーズ２の体積全体に占める被覆膜２４の体積比率が大きくなってしまい、磁性ビーズ２が有する体積当たりの磁化が低下するおそれがある。これにより、磁性ビーズ２に外部磁場が作用したときの移動速度が低下し、磁気分離に要する時間が長くなるおそれがある。

【0048】

被覆膜２４の厚さは、例えば、透過電子顕微鏡または走査電子顕微鏡等による磁性ビーズ２の断面観察像から測定することができる。また、被覆膜２４の平均厚さｔは、観察像を複数取得し、画像処理等からの計測値を平均することで算出することができる。例えば、平均厚さｔは、１つの磁性ビーズ２について５箇所以上で被覆膜２４の厚さを計測し、その平均値を求めた後、１０個以上の磁性ビーズ２でその平均値を平均した値である。また、ＥＤＸ（Energy Dispersive X-ray spectroscopy）等の分析装置により、例えばＳｉ－Ｋ特性Ｘ線やＦｅ－Ｌ特性Ｘ線の強度を比較し、その比較結果から被覆膜２４の厚さを算出するようにしてもよい。つまり、後述するように、被覆膜２４がシリコンを含み、磁性金属粉末２２がＦｅ基合金で構成される場合、被覆膜２４由来のＳｉ－Ｋ特性Ｘ線の、磁性金属粉末２２由来のＦｅ－Ｌ特性Ｘ線と被覆膜２４由来のＳｉ－Ｋ特性Ｘ線との和に対する強度比を、被覆膜２４の厚さに換算することができる。

【0049】

また、磁性ビーズ２の保磁力Ｈｃは、１５００Ａ／ｍ以下であることが好ましく、８００Ａ／ｍ以下であることがより好ましく、４００Ａ／ｍ以下であることがさらに好ましく、１００Ａ／ｍ以下であることが特に好ましい。保磁力Ｈｃとは、磁化された磁性体を、磁化されていない状態に戻すために必要な反対向きの外部磁場の値をいう。つまり、保磁力Ｈｃは、外部磁場に対する抵抗力を意味する。磁性ビーズ２の保磁力Ｈｃが小さいほど、磁場が印加された状態から、印加されていない状態に切り替えても、磁性ビーズ２同士が凝集しにくく、分散液中において磁性ビーズ２を均一に分散させることができる。さらに、磁場印加の切り替えを繰り返す場合でも、保磁力Ｈｃが小さいほど磁性ビーズ２の再分散性は優れるため、磁性ビーズ２同士の凝集をより抑制することができる。なお、磁性ビーズ２の保磁力Ｈｃの下限値は、特に限定されないが、性能とコストのバランスに適する材料選択の容易性の観点から、５Ａ／ｍ以上であることが好ましい。

【0050】

磁性ビーズの保磁力Ｈｃは、前述した飽和磁化と同様、振動試料型磁力計等により測定することができる。保磁力Ｈｃを測定する際の最大印加磁場は、例えば１５ｋＯｅとされる。

【0051】

また、磁性ビーズ２の比透磁率は、５以上であることが好ましい。磁性ビーズ２の比透磁率が前記下限値を下回ると、磁性ビーズ２の移動速度が低下し、磁気分離に要する時間が長くなるおそれがある。なお、磁性ビーズ２の比透磁率の上限値は、特に限定されないが、磁性ビーズ２は粉末形態であることから、反磁界の影響により比透磁率は実質的には１００以下の値をとることが多い。

【0052】

２．１．磁性金属粉末
磁性金属粉末２２は、磁性を有する粒子であり、構成元素としてＦｅ、ＣｏおよびＮｉのうち少なくとも１種を含むことが好ましい。特に、高い飽和磁化を得る観点から、磁性金属粉末２２の組成は、Ｆｅを主成分とする合金（Ｆｅ系合金）であるのが好ましい。具体的には、Ｆｅを原子数比で５０％以上とすることがより好ましく、７０％以上とすることがさらに好ましい。Ｆｅ系合金としては、Ｆｅ－Ｃｏ系合金、Ｆｅ－Ｎｉ系合金、Ｆｅ－Ｃｏ－Ｎｉ系合金、または、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉを含む化合物等が例示できる。また、高磁化を得る観点から、磁性金属粉末２２としては、実質１００質量％のＦｅからなるカルボニル鉄粉やＦｅ－Ｓｉ系合金粉、Ｆｅ－Ｓｉ－Ｃｒ系合金粉等が好ましく用いられる。このようなＦｅ系合金によれば、粒径が小さくても、飽和磁化が高く、かつ高透磁率を示す磁性金属粉末２２を実現することができる。これにより、外部磁場の作用による移動速度が高く、外部磁場に捕捉されたときの吸引力が大きい磁性ビーズ２を実現することができる。その結果、磁気分離に要する時間を短縮することができ、かつ、磁性ビーズ２自体が溶出液に混入して夾雑物になることを抑制することができる。

【0053】

Ｆｅ系合金は、前述のような、Ｆｅという単独で強磁性を示す元素の他に、目標とする特性に応じて、Ｃｒ、Ｎｂ、Ｃｕ、Ａｌ、Ｍｎ、Ｍｏ、Ｓｉ、Ｓｎ、Ｂ、Ｃ、Ｐ、ＴｉおよびＺｒからなる群から選ばれる１種または２種以上を含むことができる。Ｓｉは、合金粉では主要な構成元素であるが、アモルファス化を促進させる元素でもある。

【0054】

なお、Ｆｅ系合金中には、磁性金属粉末２２の効果を損なわない範囲で、不純物が含まれていてもよい。本実施形態における不純物とは、磁性金属粉末２２の原料や磁性ビーズ２の製造時に意図せずに混入する元素である。不純物としては、特に限定されないが、例えば、О、Ｎ、Ｓ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｋ等が挙げられる。

【0055】

Ｆｅ系合金の一例として、Ｓｉの含有率が好ましくは１．０原子％以上３０．０原子％以下、より好ましくは１．５原子％以上１３．０原子％以下、さらに好ましくは２．０原子％以上７．０原子％以下である合金が挙げられる。このような合金は、透磁率が高いため、飽和磁化が高くなる傾向がある。

【0056】

また、Ｆｅ系合金は、含有率が５．０原子％以上１６．０原子％以下のＢ（ホウ素）、および、含有率が０．５原子％以上５．０原子％以下のＣ（炭素）のうちの少なくとも１種を含有していてもよい。これらは、アモルファス化を促進させる元素であり、磁性金属粉末２２に安定したアモルファス組織またはナノ結晶組織を形成することに寄与する。

【0057】

さらに、Ｆｅ系合金は、含有率が１．０原子％以上８．０原子％以下のＣｒ（クロム）を含有することが好ましい。これにより、磁性金属粉末２２の耐食性を高めることができる。

【0058】

なお、不純物の含有率は、合計で１．０原子％以下であることが好ましい。この程度であれば、不純物が含有していても、磁性金属粉末２２の効果が損なわれない。

【0059】

特に好ましいＦｅ系合金の一例として、Ｆｅを主成分とし、Ｓｉの含有率が２．０質量％以上９．０質量％以下であり、Ｂの含有率が１．０質量％以上５．０質量％以下であり、Ｃｒの含有率が１．０質量％以上３．０質量％以下である合金が挙げられる。このようなＦｅ系合金は、安定したアモルファス組織を含み得るため、保磁力が低い。また、Ｆｅ含有率が高いため、飽和磁化が高い。さらに、Ｃｒを含むため、耐食性が高くなり、鉄イオン等の溶出を抑制することができる。鉄イオンは、生体物質の検査に悪影響を及ぼすことがあるため、溶出が抑制されることが好ましい。

【0060】

磁性金属粉末２２の構成元素および組成は、ＪＩＳ Ｇ １２５８：２０１４に規定されたＩＣＰ発光分析法、ＪＩＳ Ｇ １２５３：２００２に規定されたスパーク発光分析法などにより特定することができる。また、磁性金属粉末２２が被覆膜２４で被覆されている場合には、化学的または物理的手法で被覆膜２４を除去した後、上記手法により測定することができる。また、被覆膜２４を除去するのが難しい場合は、例えば磁性ビーズ２を切断した上で、コアである磁性金属粉末２２の部分をＥＰＭＡ（Electron Probe Micro Analyzer）、ＥＤＸ（Energy Dispersive X-ray spectroscopy）等の分析装置にて分析することが可能である。

【0061】

磁性金属粉末２２のビッカース硬度は、１００以上であることが好ましく、３００以上であることがより好ましく、８００以上であることがさらに好ましい。磁性金属粉末２２の硬さの測定方法は、例えば以下の通りである。磁性金属粉末２２の粒子を複数個取り出して、これを樹脂に包埋して樹脂埋めサンプルを作製した後、研削および研磨によって磁性金属粉末２２の断面を樹脂埋めサンプル表面に出現させる。これをマイクロビッカース試験機、または、ナノインデンター等によって圧痕を付け、そのサイズから硬さを測定する。

【0062】

なお、磁性金属粉末２２のビッカース硬度が前記下限値未満である場合、磁性ビーズ２が衝突した場合の衝撃により、磁性金属粉末２２が塑性変形してしまうおそれがある。塑性変形が生じた場合、被覆膜２４の剥離や脱落が生じるおそれがある。なお、ビッカース硬度の上限は、特に限定されないが、性能やコストのバランスに適する材料選択の容易性の観点から３０００以下であることが好ましい。

【0063】

磁性金属粉末２２を構成する主要な金属組織は、結晶組織、アモルファス組織、ナノ結晶組織等の種々の形態をとることができる。アモルファス組織とは、結晶が存在しない非晶質組織であり、ナノ結晶とは、結晶粒径が１００ｎｍ以下である微細結晶を主とする組織を指す。アモルファス組織およびナノ結晶組織は、磁性金属粉末２２に高い硬さを与える。また、アモルファス組織またはナノ結晶組織とすることで、磁性ビーズ２の保磁力Ｈｃが特に低い値となり、磁性ビーズ２の再分散性の向上に寄与する。なお、アモルファス組織またはナノ結晶組織の磁性金属粉末２２における体積分率は、４０％以上であるのが好ましく、６０％以上であるのがより好ましい。この体積分率は、Ｘ線回折による結晶構造解析の結果から求められる。また、結晶組織、アモルファス組織およびナノ結晶組織は、それぞれが単独で存在していてもよいし、これらのうちの２つ以上が混在していてもよい。

【0064】

磁性金属粉末２２の金属組織は、磁性金属粉末２２に対してＸ線回折法による結晶構造解析を行うことで同定することができる。さらには、切り出したサンプルを透過電子顕微鏡（ＴＥＭ）により組織観察像または回折パターンを解析することにより特定できる。例えば、アモルファス組織の場合、Ｘ線回折法におけるピーク解析において、α－Ｆｅ相等の金属結晶に由来する回折ピークは見られない。また、アモルファス組織の場合、ＴＥＭでの電子線回折パターンにおいていわゆるハローパターンを形成し、結晶によるスポットの形成は見られない。ナノ結晶組織は、粒径が例えば１００ｎｍ以下の結晶組織からなり、ＴＥＭ観察像から確認可能である。より正確には、複数の結晶が存在する複数のＴＥＭ組織観察画像から画像処理等により平均粒径を算出することができる。また、Ｘ線回折法による対象となる結晶相の回折ピークからＳｈｅｒｅｒ法により結晶粒径を推測することができる。さらに、粒径の大きな結晶組織については、光学顕微鏡や走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）により断面を観察する等の手法により、結晶粒径を測定することができる。

【0065】

アモルファス組織およびナノ結晶組織を得るには、磁性金属粉末２２を製造するとき、溶融した原料を微粉化した後、冷却するときの冷却速度を高くすることが有効である。また、アモルファス組織およびナノ結晶組織の形成のしやすさは、合金組成にも依存する。アモルファス組織およびナノ結晶組織を形成するために適した具体的な合金系としては、Ｆｅに、Ｃｒ、Ｓｉ、Ｂ、Ｃ、Ｐ、ＮｂおよびＣｕからなる群から選ばれる１種または２種以上を添加した組成が好ましい。

【0066】

磁性金属粉末２２は、一般的な金属粉末の製造方法に準ずる方法で製造される。製造方法としては、例えば、金属を溶解・凝固して粉末化する溶解プロセス、還元法やカルボニル法等により粉末を製造する化学プロセス、インゴット等のより大きな形状のものを機械的に粉砕して粉末を得る機械プロセスが挙げられる。このうち、磁性金属粉末２２の製造に適しているのは溶解プロセスによるものである。

【0067】

溶解プロセスによる製造方法のうち、代表的な製法としてアトマイズ法が挙げられる。これは溶解によって形成された所望の組成からなる金属溶湯を噴霧して粉末とするものである。

【0068】

アトマイズ法は、金属溶湯を高速で噴射された流体（液体または気体）に衝突させることによって急冷凝固させて粉末化するものであり、冷却媒の種類や装置構成の違いによって、水アトマイズ法、高圧水アトマイズ法、回転水流アトマイズ法、ガスアトマイズ法等に分けられる。アトマイズ法によれば、磁性金属粉末２２を効率よく製造することができる。さらに、高圧水アトマイズ法や回転水流水アトマイズ法、ガスアトマイズ法では、金属粉末の粒子形状が表面張力の作用により球形状に近くなる。

【0069】

２．２．被覆膜
被覆膜２４は、図５に示すように磁性金属粉末２２の粒子表面を被覆している。被覆膜２４は、磁性金属粉末２２の粒子表面の少なくとも一部に形成されていればよいが、粒子表面の全体を被覆していることが好ましい。

【0070】

図６は、図５に示す被覆膜２４の部分拡大図である。
被覆膜２４は、図６に示すように、無機酸化物層２４２、下地層２４４、金層２４６および固定化層２４８を有する。つまり、被覆膜２４は、これらの層を有する多層構造になっている。なお、各層は、その下地全体を被覆していることが好ましいが、途切れている部分があってもよい。

【0071】

２．２．１．無機酸化物層
無機酸化物層２４２は、磁性金属粉末２２の粒子表面を被覆し、無機酸化物を含む。無機酸化物としては、例えば、酸化ケイ素、酸化マグネシウム、酸化カルシウム、酸化アルミニウム、酸化チタン、酸化ジルコニウム、酸化ホウ素、酸化イットリウム等が挙げられ、これらのうちの１種または２種以上の混合物が用いられる。このような無機酸化物を含む無機酸化物層２４２は、多孔質状になるため、下地層２４４との接触面積を大きく確保できる。これにより、無機酸化物層２４２に対する下地層２４４の密着性を高めることができる。

【0072】

このうち、無機酸化物は、酸化ケイ素または酸化チタンであるのが好ましい。これらは、化学的に安定であるため、磁性金属粉末２２の酸化や腐食を特に抑制することができ、磁性ビーズ２の耐食性を特に高めることができる。

【0073】

酸化ケイ素は、組成式でＳｉＯｘ（０＜ｘ≦２）と表されるが、好ましくはＳｉＯ_２である。また、酸化ケイ素は、Ａｌ、Ｔｉ、Ｖ、Ｎｂ、Ｃｒ、Ｍｎ、ＳｎおよびＺｒからなる群から選ばれた１種または２種以上と複合酸化物または複合物を形成していてもよい。

【0074】

酸化チタンは、組成式でＴｉＯｘ（０＜ｘ≦２）と表されるが、好ましくはＴｉＯ_２である。また、酸化チタンは、Ｓｉ、Ａｌ、Ｖ、Ｎｂ、Ｃｒ、Ｍｎ、ＳｎおよびＺｒからなる群から選ばれた１種または２種以上と複合酸化物または複合物を形成していてもよい。

【0075】

無機酸化物は、その効果を損なわない範囲内、例えば、前述した無機酸化物の５０質量％以下となる割合で、無機酸化物以外の物質（不純物）を含んでもよい。例えば、無気酸化物として酸化ケイ素が用いられる場合、不純物としては、Ｃ、Ｎ、Ｐ等が挙げられる。
無機酸化物の組成は、例えば、ＥＤＸ分析、オージェ電子分光測定等にて確認できる。

【0076】

なお、無機酸化物層２４２は、磁性金属粉末２２の１粒子の表面を被覆していてもよいが、複数の粒子をまとめて被覆していてもよい。

【0077】

図７は、図５の磁性ビーズ２の変形例を示す断面図である。
図７に示す磁性ビーズ２Ａは、磁性金属粉末２２の複数の粒子を包含している。そして、複数の粒子にまたがって被覆するように無機酸化物層２４２が設けられている。また、下地層２４４、金層２４６および固定化層２４８も、その無機酸化物層２４２に積層されている。このようにして、図７に示す被覆膜２４が構成されている。このような磁性ビーズ２Ａでも、図５に示す磁性ビーズ２と同様の効果が得られる。なお、無機酸化物層２４２は各粒子を被覆していてもよい。そして、下地層２４４、金層２４６および固定化層２４８が、複数の粒子にまたがって設けられていてもよい。また、下地層２４４も各粒子を被覆し、金層２４６および固定化層２４８が、複数の粒子にまたがって設けられていてもよい。

【0078】

磁性ビーズ２Ａが有する磁性金属粉末２２の粒子の数は、特に限定されないが、２個以上１００個以下とされる。

【0079】

無機酸化物層２４２の平均厚さは、１０ｎｍ以上２００ｎｍ以下であることが好ましく、２０ｎｍ以上１５０ｎｍ以下であることがより好ましく、３０ｎｍ以上１００ｎｍ以下であることがさらに好ましい。これにより、磁性ビーズ２同士の衝突または容器の内壁等との衝突が生じたとしても、無機酸化物層２４２が破壊または剥離してしまうのを抑制することができる。その結果、磁性金属粉末２２が露出することに伴う鉄イオン等の溶出を抑制することができる。また、磁性ビーズ２が有する体積当たりの磁化が低下するのを抑制し、磁性ビーズ２の移動速度が低下するのを抑制することができる。

【0080】

無機酸化物層２４２の平均厚さは、前述した被覆膜２４の平均厚さの測定方法と同様にして測定される。

【0081】

無機酸化物層２４２の形成方法としては、例えば、ゾルゲル法のような湿式での形成方法、気相成膜法のような乾式での形成方法が挙げられる。このうち、ゾルゲル法の一種であるストーバー法や、ＡＬＤ（Ａｔｏｍｉｃ Ｌａｙｅｒ Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ）法を、好ましく用いることができる。ストーバー法は、金属アルコキシドの加水分解により、単分散粒子を形成する手法である。例えば、無機酸化物層２４２を酸化ケイ素で形成する場合は、シリコンアルコキシドの加水分解反応により、酸化ケイ素を生成することができる。なお、無機酸化物層２４２の形成前には、その下地、例えば磁性金属粉末２２の粒子の表面に対し、水や有機溶剤を用いた洗浄処理を施すようにしてもよい。

【0082】

２．２．２．下地層
下地層２４４は、後述する金層２４６の下地となり得る層である。金層２４６の下地とは、金層２４６を無電解金めっき法で成膜するとき、金を良好に析出させ得る面のことをいう。具体的には、下地層２４４は、金イオンを金に還元する還元剤、または、金イオンを金に還元する還元反応の触媒を含む。このような下地層２４４は、金層２４６の密着性を高める。その結果、金層２４６に成膜される固定化層２４８の密着性を高めることができる。

【0083】

還元剤は、無電解金めっき液に溶出し、イオン化するとともに電子を放出することにより、金イオンを金に還元する。したがって、還元剤を含む下地層２４４は、置換めっき法による金層２４６の形成を可能にする。還元剤としては、例えば、金よりもイオン化傾向が大きいニッケル、パラジウム、銅等の金属単体またはこれらを含む合金等が挙げられる。

【0084】

触媒は、無電解金めっき液に含まれる還元剤が金イオンの還元反応を生じさせるとき、その反応を触媒する触媒活性を有する。したがって、触媒を含む下地層２４４は、自己触媒型の還元めっき法による金層２４６の形成を可能にする。触媒としては、例えば、ニッケル、パラジウム、銅等の金属単体またはこれらを含む合金等が挙げられる。下地層２４４におけるこれらの金属の含有率は、５０質量％超であるのが好ましく、７０質量％以上であるのがより好ましい。

【0085】

このうち、下地層２４４は、ニッケルを含むことが好ましい。下地層２４４がニッケルの単体またはニッケル合金を含むことにより、置換めっき法や自己触媒型の還元めっき法のような無電解金めっき法により、金層２４６を良好に成膜することができる。

【0086】

これらの還元剤や触媒は、いかなる形態で存在していてもよい。例えば、下地層２４４は、めっき皮膜であってもよいし、気相成膜法で成膜された皮膜であってもよいし、液相成膜法で成膜された皮膜であってもよい。めっき皮膜としては、例えば、無電解めっき皮膜が挙げられる。なお、下地層２４４の形成前には、その下地、例えば無機酸化物層２４２の表面に対し、脱脂処理、酸浸漬処理等の表面処理、水や有機溶剤を用いた洗浄処理を施すようにしてもよい。

【0087】

下地層２４４の平均厚さは、特に限定されないが、１０ｎｍ以上５００ｎｍ以下であることが好ましく、３０ｎｍ以上３００ｎｍ以下であることがより好ましく、５０ｎｍ以上２００ｎｍ以下であることがさらに好ましい。これにより、下地層２４４が下地として十分に機能するための厚さを確保することができる。

【0088】

下地層２４４の平均厚さは、前述した被覆膜２４の平均厚さの測定方法と同様にして測定される。

【0089】

また、無機酸化物層２４２と下地層２４４の合計の平均厚さは、１０ｎｍ以上６００ｎｍ以下であることが好ましく、５０ｎｍ以上４５０ｎｍ以下であることがより好ましく、１００ｎｍ以上３００ｎｍ以下であることがさらに好ましい。これにより、磁性ビーズ２の耐食性を十分に確保することができる。また、磁性ビーズ２の体積全体に占める被覆膜２４の体積比率を最適化することができ、磁性ビーズ２が有する体積当たりの磁化が低下することを抑制できる。

【0090】

なお、下地層２４４の平均厚さは、無機酸化物層２４２の平均厚さより薄くてもよいが、好ましくは厚くなるように設定される。そして、より好ましくは下地層２４４の平均厚さを、無機酸化物層２４２の平均厚さの１．２倍以上４．０倍以下に設定され、さらに好ましくは１．５倍以上３．０倍以下に設定される。これにより、金層２４６を安定して成膜するという下地層２４４の下地としての機能を高めるとともに、磁性ビーズ２の耐食性の向上を図ることができる。その結果、固定化層２４８の安定化を図るとともに、磁性金属粉末２２の酸化や腐食を抑制することができ、核酸の抽出効率が特に良好な磁性ビーズ２を実現することができる。

【0091】

また、下地層２４４は、多層構造になっていてもよい。例えば、第一層をニッケル含有層とし、第二層をパラジウム含有層としてもよい。このような多層構造にすることで、下地層２４４の酸化や腐食をより確実に抑制することができる。その結果、磁性ビーズ２の耐食性をさらに高めることができる。

【0092】

２．２．３．金層
金層２４６は、固定化層２４８の下地となり得る層である。固定化層２４８の下地とは、固定化層２４８が含む化合物を良好に結合させ得る面のことをいう。具体的には、金層２４６の構成材料としては、金の単体または金を含む合金等が挙げられる。金層２４６は、耐食性が高いため、磁性金属粉末２２の酸化や腐食を抑制する機能が高い。これにより、磁性金属粉末２２の磁化の減少を抑制するとともに、鉄イオン等の溶出に伴う核酸の抽出効率の低下を抑制できる。

【0093】

磁性ビーズ２における金の含有率は、１質量％以上３０質量％以下であるのが好ましく、３質量％以上２５質量％以下であるのがより好ましく、５質量％以上２０質量％以下であるのがさらに好ましい。これにより、金層２４６による被覆率を十分に確保して、固定化層２４８をムラなく形成することができる。

【0094】

また、金層２４６の平均厚さは、０．５ｎｍ以上５０ｎｍ以下であることが好ましく、１ｎｍ以上３０ｎｍ以下であることがより好ましく、２ｎｍ以上２０ｎｍ以下であることがさらに好ましい。これにより、磁性ビーズ２の耐食性を特に良好に確保することができる。

【0095】

金層２４６の成膜方法としては、前述したように、置換めっき法や自己触媒型の還元めっき法のような無電解金めっき法が挙げられる。なお、金層２４６の形成前には、その下地、例えば下地層２４４の表面に対し、脱脂処理、酸浸漬処理等の表面処理、水や有機溶剤を用いた洗浄処理を施すようにしてもよい。

【0096】

２．２．４．固定化層
固定化層２４８は、リガンドまたはリガンド結合部位を有する化合物を含む。リガンドとは、標的とする生体物質と特異的に結合する機能を持つ部位である。また、リガンド結合部位とは、このようなリガンドを結合可能な部位（リガンド反応性基）である。このような固定化層２４８を有することにより、磁性ビーズ２は、標的とする生体物質を効率よく吸着できる。

【0097】

リガンドの具体例としては、例えば、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、イミノジ酢酸（ＩＤＡ）、フェナンスロリン、テルピリジン、ビピリジン、トリエチレンテトラアミン、トリス（カルボキシメチル）エチレンジアミン、ジエチレントリアミンペンタ酢酸、ポリピラゾリルホウ酸、１，４，７－トリアゾシクロノナン、ジメチルグリオキシム、ジフェニルグリオキシム、またはそれらの誘導体等の多座配位子等が挙げられる。

【0098】

このうち、リガンドには、ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）またはイミノジ酢酸（ＩＤＡ）が好ましく用いられる。

【0099】

リガンド結合部位の具体例としては、例えば、アルデヒド基、カルボキシ基、アミド基、Ｎ－ヒドロキシコハク酸スクシンイミド（ＮＨＳ）、アミノ基、ヒドロキシ基、－ＣＨ＝ＣＨ－、－（Ｃ＝Ｏ）－ＣＨ＝ＣＨ－等が挙げられる。

【0100】

このうち、リガンド結合部位には、アルデヒド基、カルボキシ基、アミド基、または、Ｎ－ヒドロキシコハク酸スクシンイミド（ＮＨＳ）が好ましく用いられる。

【0101】

これらのリガンドまたはリガンド結合部位は、必要に応じて設けられるスペーサー、および、Ａｕ－Ｓ結合を介して金層２４６に結合されている。Ａｕ－Ｓ結合は、強固な結合であるため、金層２４６に対するリガンドやリガンド結合部位の強固な固定に寄与する。これにより、核酸が吸着された磁性ビーズ２に様々な物理的、化学的な負荷が加わった場合でも、リガンドが脱離するのを抑制することができる。その結果、核酸の捕捉効率の低下を抑制することができるので、核酸の抽出効率が良好な磁性ビーズ２を実現できる。

【0102】

また、磁性ビーズ２では、金層２４６の下地として下地層２４４が設けられている。下地層２４４は、金層２４６の密着性を高める。これにより、金層２４６の剥離を抑制することができるので、その観点でも、リガンドの脱離を抑制することができる。さらに、磁性ビーズ２では、下地層２４４の下地として無機酸化物層２４２が設けられている。無機酸化物層２４２は、下地層２４４の密着性を高める。これにより、下地層２４４の剥離を抑制することができるので、その観点でも、リガンドの脱離を抑制することができる。したがって、上記のような多層構造を持つ被覆膜２４は、リガンドの脱離を抑制し、核酸の抽出効率が良好な磁性ビーズ２を実現できる。

【0103】

リガンドまたはリガンド結合部位を有する化合物とは、Ａｕ－Ｓ結合を形成可能なチオール基またはジスルフィド基を有する化合物であって、後述するチオール誘導体またはその塩と金層２４６との反応による反応生成物である。

【0104】

図８は、機能性部位Ｘを有する化合物１０が、Ａｕ－Ｓ結合を介して金層２４６に結合している状態を示す模式図である。なお、図８では、リガンドまたはリガンド結合部位を「機能性部位Ｘ」としている。

【0105】

図８に示す化合物１０は、Ａｕ－Ｓ結合、スペーサーＬおよび機能性部位Ｘで構成されている。

【0106】

スペーサーＬは、－Ｓ－結合と、機能性部位Ｘと、を連結する部位である。スペーサーＬを構成する単位構造としては、例えば、ＰＥＧ（ポリエチレングリコール）、ＰＰＧ（ポリプロピレングリコール）、ＰＢＧ（ポリブチレングリコール）、カーボネート結合とＰＥＧの複合構造、アミド結合とＰＥＧとの複合構造、メチレン等が挙げられ、これらのうちの１種または２種以上が混在した構造が挙げられる。

【0107】

また、図８に示すように、隣り合う化合物１０同士の間では、スペーサーＬ間に生じる相互作用によって自己組織化が図られ、化合物１０が配向しやすくなる。これにより、機能性部位Ｘが高密度に配置された固定化層２４８を実現することができる。このような固定化層２４８では、磁性ビーズ２の単位量当たりの生体物質吸着量を増やすことができる。なお、図８に示す化合物１０の構造には、図示しない分子鎖の分岐構造が含まれていてもよい。
下記式（１）は、化合物１０を生成するチオール誘導体が有する構造の一例である。

【0108】

Ｒ^１－（ＣＨ_２）_ｘ－（Ｃ_２Ｈ_５Ｏ）_ｙ－Ｒ^２ … （１）
［上記式（１）中、ｘは２以上１８以下の整数であり、ｙは０以上１００以下の整数である。また、上記式（１）中、Ｒ^１はチオール基またはジスルフィド結合であり、Ｒ^２はリガンドまたはリガンド結合部位である。］

【0109】

上記式（１）で表される構造を有するチオール誘導体またはその塩は、金層２４６と反応することにより、リガンドまたはリガンド結合部位を高密度に配置可能な化合物１０を生成できる。これにより、核酸の抽出効率が特に良好な磁性ビーズ２が得られる。

【0110】

上記式（１）で表される構造は、チオール誘導体の分子構造の全部または一部である。したがって、チオール誘導体の分子構造は、上記式（１）で表される構造と、別の構造と、を含んでいてもよい。

【0111】

また、チオール誘導体の塩としては、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩のようなアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩のようなアルカリ土類金属塩等が挙げられる。

【0112】

チオール基は、－ＳＨで表される反応性官能基である。ジスルフィド結合は、－Ｓ－Ｓ－で表される官能基であって、還元によってチオール基に変換される。したがって、上記式（１）のＲ^１がジスルフィド結合である場合、チオール誘導体は、上記式（１）からＲ^１を除いた部位を２つ有していてもよい。チオール基は、金と反応し、強固なＡｕ－Ｓ結合を生成する。この反応による生成物が上記化合物１０である。

【0113】

また、－（ＣＨ_２）_ｘ－（Ｃ_２Ｈ_５Ｏ）_ｙ－は、前述したスペーサーＬに相当する。上記式（１）で表されるチオール誘導体は、スペーサーＬとしてメチレンやＰＥＧを含んでいるため、金層２４６に結合したとき、化合物１０の自己組織化が図られやすい。これにより、化合物１０が配向し、機能性部位Ｘの高密度配置が可能になる。

【0114】

上記式（１）においてメチレンの個数を表すｘは、２以上１８以下とされるが、好ましくは３以上１０以下とされ、より好ましくは４以上６以下とされる。これにより、化合物１０の安定化が図られ、磁気分離操作や液体排出操作に伴う固定化層２４８の劣化等を抑制することができる。なお、ｘが前記下限値を下回ると、スペーサーＬの長さが短くなるため、機能性部位Ｘの機能性が低下、すなわち、リガンドまたはリガンド結合部位が機能しにくくなるおそれがある。また、スペーサーＬの長さが短くなることで、化合物１０の自己組織化を図りにくくなるおそれがある。一方、ｘが前記上限値を上回ると、化合物１０の分子鎖が長くなりすぎる場合があり、化合物１０が配向しにくくなって機能性部位Ｘの密度を十分に高められないおそれがある。

【0115】

上記式（１）においてＰＥＧの個数を表すｙは、０以上１００以下とされるが、好ましくは１以上３０以下とされ、より好ましくは２以上１０以下とされる。これにより、化合物１０の安定化が図られる。なお、ｙが前記下限値を下回ると、スペーサーＬの長さが短くなるため、機能性部位Ｘの機能性が低下するおそれがある。また、スペーサーＬの長さが短くなることで、化合物１０の自己組織化を図りにくくなるおそれがある。一方、ｙが前記上限値を上回ると、化合物１０の分子鎖が長くなりすぎる場合があり、化合物１０が配向しにくくなって機能性部位Ｘの密度を十分に高められないおそれがある。

【0116】

リガンドを有するチオール誘導体の具体例としては、下記式（Ａ－１）～（Ａ－７）で表される化合物が挙げられる。

【0117】

【化1】

【0118】

【化2】

【0119】

【化3】

【0120】

【化4】

【0121】

【化5】

【0122】

【化6】

【0123】

【化7】

【0124】

リガンド結合部位を有するチオール誘導体の具体例としては、下記式（Ｂ－１）～（Ｂ－４）で表される化合物が挙げられる。

【0125】

【化8】

【0126】

【化9】

【0127】

【化10】

【0128】

【化11】

【0129】

このような化合物は、例えば、ＰＥＧ鎖やアルキル鎖に各種官能基を付与したリンカー化合物を用い、ＰＥＧ鎖やアルキル鎖を介してそれらを結合する等の方法で合成される。

【0130】

３．前記実施形態が奏する効果
以上のように、実施形態に係る生体物質抽出用磁性ビーズである磁性ビーズ２は、磁性金属粉末２２と、無機酸化物層２４２と、下地層２４４と、金層２４６と、固定化層２４８と、を有する。無機酸化物層２４２は、磁性金属粉末２２の粒子表面を被覆し、無機酸化物を含む。下地層２４４は、無機酸化物層２４２の表面を被覆し、金イオンの還元剤または金イオンの還元反応の触媒を含む。金層２４６は、下地層２４４の表面を被覆し、金を含む。固定化層２４８は、Ａｕ－Ｓ結合を介して金層２４６の表面に結合されている、リガンドまたはリガンド結合部位を有する化合物１０を含む。

【0131】

このような構成によれば、負荷が加わった場合でも、リガンドの脱離を抑制でき、かつ、磁性金属粉末２２の酸化や腐食を抑制できる。これにより、生体物質の抽出効率が良好な磁性ビーズ２が得られる。

【0132】

また、上記の化合物１０は、下記式（１）で表されるチオール誘導体またはその塩と金層２４６との反応生成物であることが好ましい。

【0133】

Ｒ^１－（ＣＨ_２）_ｘ－（Ｃ_２Ｈ_５Ｏ）_ｙ－Ｒ^２ … （１）
［上記式（１）中、ｘは２以上１８以下の整数であり、ｙは０以上１００以下の整数である。また、上記式（１）中、Ｒ^１はチオール基またはジスルフィド結合であり、Ｒ^２は前記リガンドまたは前記リガンド結合部位である。］
上記式（１）で表される構造を有するチオール誘導体またはその塩は、金層２４６と反応することにより、リガンドまたはリガンド結合部位が高密度に配置可能な化合物１０を生成できる。これにより、生体物質の抽出効率が特に良好な磁性ビーズ２が得られる。

【0134】

また、無機酸化物は、酸化ケイ素または酸化チタンであることが好ましい。
これらは、化学的に安定であるため、磁性金属粉末２２の酸化や腐食を特に抑制することができ、磁性ビーズ２の耐食性を特に高めることができる。

【0135】

また、下地層２４４は、ニッケルを含むことが好ましい。
下地層２４４がニッケルの単体またはニッケル合金を含むことにより、置換めっき法や自己触媒型の還元めっき法のような無電解金めっき法により、金層２４６を良好に成膜することができる。

【0136】

また、無機酸化物層２４２および下地層２４４の合計の平均厚さが、１０ｎｍ以上６００ｎｍ以下であることが好ましい。

【0137】

これにより、磁性ビーズ２の耐食性を十分に確保することができる。また、磁性ビーズ２の体積全体に占める被覆膜２４の体積比率を最適化することができ、磁性ビーズ２が有する体積当たりの磁化が低下することを抑制できる。

【0138】

また、磁性ビーズ２の平均粒径Ｄ５０は、０．５μｍ以上５０μｍ以下であることが好ましい。

【0139】

これにより、磁性ビーズ２の比表面積を十分に大きくすることができ、かつ、磁気分離に適した吸引力および吸着力を磁性ビーズ２に発生させることができる。また、磁性ビーズ２の凝集を抑え、分散性を高めることができる。

【0140】

また、磁性金属粉末２２の飽和磁化は、８０ｅｍｕ／ｇ以上であり、磁性金属粉末２２の保磁力は、１００Ａ／ｍ以下であることが好ましい。

【0141】

これにより、磁場中における磁性ビーズ２の移動速度を向上させることができるため、磁気分離に要する時間の短縮を図ることができる。また、十分に高い吸着力が得られるため、磁性ビーズ２を固定した状態で液体３を排出するとき、磁性ビーズ２が液体３と一緒に排出されるのを抑制することできる。これにより、磁性ビーズ２の減少に伴う生体物質の収率の低下を抑制することができる。さらに、磁場印加の切り替えを繰り返す場合でも、磁性ビーズ２同士の凝集を抑制することができる。

【0142】

また、下地層２４４の平均厚さは、無機酸化物層２４２の平均厚さの１．２倍以上４．０倍以下であることが好ましい。

【0143】

これにより、金層２４６を安定して成膜するという下地層２４４の下地としての機能を高めるとともに、磁性ビーズ２の耐食性の向上を図ることができる。その結果、固定化層２４８の安定化を図るとともに、磁性金属粉末２２の酸化や腐食を抑制することができ、生体物質の抽出効率が特に良好な磁性ビーズ２を実現することができる。

【0144】

以上、本発明の生体物質抽出用磁性ビーズを図示の実施形態に基づいて説明したが、本発明はこれに限定されるものではない。例えば、本発明の生体物質抽出用磁性ビーズは、前記実施形態に任意の成分が付加されたものであってもよい。

【実施例0145】

次に、本発明の具体的実施例について説明する。
４．磁性ビーズの作製
４．１．実施例１
まず、磁性金属粉末として、水アトマイズ法により製造した、アモルファス組織を主要な組織とする金属粉末を用意した。用意した金属粉末を、超純水およびエタノールで洗浄した。

【0146】

次に、ストーバー法により、磁性金属粉末の粒子表面に酸化ケイ素（ＳｉＯ_２）を成膜し、無機酸化物層を得た。シリコンアルコキシドには、テトラエトキシシラン（ＴＥＯＳ）を用いた。無機酸化物層を成膜した磁性金属粉末に対し、脱脂処理および酸浸漬処理を施した。

【0147】

次に、無電解ニッケルめっき法により、無機酸化物層の表面にニッケルを成膜し、下地層を得た。下地層を成膜した磁性金属粉末に対し、脱脂処理を施した。

【0148】

次に、置換型無電解金めっき法により、下地層の表面に金を成膜し、金層を得た。金層を成膜した磁性金属粉末を、超純水およびエタノールで洗浄した。

【0149】

次に、表１に示す記号で表される構造を有するチオール誘導体をエタノールに溶解させ、エタノール溶液を調製した。続いて、金層を成膜した磁性金属粉末を、エタノール溶液に浸漬させ、撹拌処理を施した。これにより、チオール誘導体を金層に反応させ、固定化層を得た。

【0150】

なお、磁性金属粉末の平均粒径、飽和磁化および保磁力、ならびに、被覆膜の形成条件は、表１に示す通りである。また、表１に示すチオール誘導体を表す記号は、前述した式（Ａ－１）に対応している。

【0151】

４．２．実施例２～１１
磁性金属粉末の構成および被覆膜の形成条件を表１に示すようにした以外は、実施例１と同様にして磁性ビーズを得た。なお、表１に示すチオール誘導体を表す記号は、前述した式（Ａ－２）～（Ａ－７）および式（Ｂ－１）～（Ｂ－４）で表されるチオール誘導体に対応している。

【0152】

４．３．比較例１
磁性金属粉末に代えて金コロイド粒子を用いるようにした以外は、実施例１と同様にして磁性ビーズを得た。なお、金コロイド粒子は、金のみで構成された粒子であり、無機酸化物層および下地層を含まない。

【0153】

４．４．比較例２、３
チオール誘導体に代えてシランカップリング剤を用いて固定化層を形成するようにした以外は、実施例１と同様にして磁性ビーズを得た。なお、表１に示すシランカップリング剤を表す記号は、下記式（Ｃ－１）、（Ｄ－１）で表されるシランカップリング剤に対応している。

【0154】

【化12】

【0155】

【化13】

【0156】

４．５．実施例１２～２５
磁性金属粉末の構成および被覆膜の形成条件を表２に示すようにした以外は、実施例１と同様にして磁性ビーズを得た。なお、表２に示すチオール誘導体を表す記号は、前述した式（Ａ－１）に対応している。

【0157】

４．６．比較例４
無機酸化物層を省略するとともに、被覆層の形成条件を表２に示すようにした以外は、実施例１と同様にして磁性ビーズを得た。

【0158】

４．７．比較例５
下地層を省略するとともに、被覆層の形成条件を表２に示すようにした以外は、実施例１と同様にして磁性ビーズを得た。

【0159】

４．８．比較例６
磁性金属粉末に代えてフェライト含有粒子を用いるとともに、被覆層の形成条件を表２に示すようにした以外は、実施例１と同様にして磁性ビーズを得た。なお、フェライト含有粒子は、フェライト粒子がシリカ中に分散してなる粒子である。

【0160】

５．磁性ビーズの評価
５．１．生体物質の精製量
まず、標的生体物質としてのプロテインＡを純水に分散させ、マイクロチューブ内に検体水溶液を調製した。プロテインＡの濃度は、５０μｇ／ｍＬとした。

【0161】

次に、検体水溶液に対し、濃度が３０質量％となるように、各実施例および各比較例の磁性ビーズを分散させた。

【0162】

次に、マイクロチューブの側面に磁石を近づけ、磁場を印加した後、上澄み液を除去した。そして、マイクロチューブ内に残った磁性ビーズを回収した。これにより、標的生体物質を磁性ビーズに吸着させた。続いて、回収した磁性ビーズをＰＢＳバッファー水溶液中に分散させ、分散液を調製した。ＰＢＳバッファー水溶液は、濃度１３７ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、濃度８．１ｍｍｏｌ／ＬのＮａ_２ＨＰＯ_４、濃度２．７ｍｍｏｌ／ＬのＫＣｌ、および、濃度１．５ｍｍｏｌ／ＬのＫＨ_２ＰＯ_４を含むリン酸緩衝液である。

【0163】

次に、調製した分散液を転倒撹拌により３０分間撹拌した後、上澄み液を回収し、ＢＣＡアッセイ検査液を添加した。その後、検査液を添加した分散液について、ＵＶ－ｖｉｓ測定器（Ｕ－３９００Ｈ型分光高度計）により吸光度を測定した。そして、イミダゾール溶液単体のａｂｓ．－５６２ｎｍの値を基準値とし、各実施例および各比較例の磁性ビーズを用いて得られた上澄み液のａｂｓ．－５６２ｎｍの値の比を算出した。この比が１．０に近いほど、磁性ビーズによる生体物質の精製量が多いといえる。続いて、算出した比を以下の評価基準に照らして評価した。評価結果を表１および表２に示す。

【0164】

Ａ：上澄み液のａｂｓ．－５６２ｎｍの値／基準値の比が０．８以上である
Ｂ：上澄み液のａｂｓ．－５６２ｎｍの値／基準値の比が０．７以上０．８未満である
Ｃ：上澄み液のａｂｓ．－５６２ｎｍの値／基準値の比が０．６以上０．７未満である
Ｄ：上澄み液のａｂｓ．－５６２ｎｍの値／基準値の比が０．３以上０．６未満である
Ｅ：上澄み液のａｂｓ．－５６２ｎｍの値／基準値の比が０．３未満である

【0165】

５．２．再分散性
まず、各実施例および各比較例の磁性ビーズを、濃度が３０質量％となるように、ＰＢＳバッファー水溶液に分散させ、分散液を調製した。ＰＢＳバッファー水溶液は、５．１．で用いたものと同じである。

【0166】

次に、調製した分散液を、レーザー回折・散乱式粒子径分布測定装置にセットし、体積基準での平均粒径Ｄ５０を測定した。得られた平均粒径Ｄ５０の測定値を、標的生体物質の分離作業前の値とし、これを基準値とする。

【0167】

次に、５．１．と同様にして調製した検体水溶液に、５．１．と同様にして磁性ビーズを分散させ、磁気分離を行い、生体物質を吸着させた磁性ビーズを回収した。その後、５．１．と同様にして、回収した磁性ビーズをＰＢＳバッファー水溶液中に分散させ、分散液を調製した。そして、上記と同様にして、体積基準での平均粒径Ｄ５０を測定し、その測定値を、標的生体物質の分離作業後の値とした。

【0168】

次に、基準値に対する分離作業後の値の比を算出した。この比が１．０に近いほど、磁性ビーズの再分散性が良好であるといえる。続いて、算出した比を以下の評価基準に照らして評価した。評価結果を表１および表２に示す。
Ａ：分離作業後の値／基準値の比が１．１未満である
Ｂ：分離作業後の値／基準値の比が１．１以上１．３未満である
Ｃ：分離作業後の値／基準値の比が１．３以上１．５未満である
Ｄ：分離作業後の値／基準値の比が１．５以上２．０未満である
Ｅ：分離作業後の値／基準値の比が２．０以上である

【0169】

５．３．耐食性
まず、各実施例および各比較例の磁性ビーズを、濃度が３０質量％となるように、ＰＢＳバッファー水溶液に分散させ、分散液を調製した。ＰＢＳバッファー水溶液は、５．１．で用いたものと同じである。

【0170】

次に、調製した分散液を、気圧１０１３ｈＰａ、温度７０℃の条件下に１０日間静置した後に、アジレント・テクノロジー社製、ＩＣＰ分析装置、５１００ ＩＣＰ－ＯＥＳを用いて上澄み液の元素濃度測定を行った。

【0171】

そして、ＰＢＳバッファー水溶液単体の元素濃度の値を基準値として、上澄み液の元素濃度との差分を計算した。上澄み液のイオン濃度と基準値のイオン濃度の差分が小さいほど、磁気成分溶出量が少ないといえる。評価結果を表１および表２に示す。

【0172】

Ａ：イオン濃度の差分が１０ｐｐｍ未満である
Ｂ：イオン濃度の差分が１０ｐｐｍ以上２０ｐｐｍ未満である
Ｃ：イオン濃度の差分が２０ｐｐｍ以上３５ｐｐｍ未満である
Ｄ：イオン濃度の差分が３５ｐｐｍ以上１００ｐｐｍ未満である
Ｅ：イオン濃度の差分が１００ｐｐｍ以上である

【0173】

５．４．磁気分離速度
まず、各実施例および各比較例の磁性ビーズを、濃度が０．１質量％となるように、２５℃の純水に分散させて分散液を調製した。次に、分散液を分光セルに入れ、超音波照射による撹拌またはボルテックスミキサーによる撹拌を行った。撹拌時間は、１分とした。次に、撹拌処理を行った分光セルを速やかに分光光度計のセルホルダーにセットした。なお、セルホルダーには、あらかじめ分光セルが配置される位置に合わせて、磁石を取り付けておいた。また、セルホルダーにセットされた分光セルの外壁と磁石との最短距離を２．０ｍｍとし、磁石には、表面磁束密度が１８０ｍＴの磁石を用いた。

【0174】

次に、分光セルの静置を開始するのと同時に、分光セルについて、波長５５０ｎｍにおける吸光度の測定を開始した。そして、測定された吸光度が、初期吸光度の１０％に減衰するまでの時間を計測し、その計測結果を、磁気分離速度を評価するための評価指標とした。そして、求めた評価指標を以下の評価基準に照らして評価した。評価結果を表１および表２に示す。

【0175】

Ａ：磁気分離速度の評価指標が２０秒未満である
Ｂ：磁気分離速度の評価指標が２０秒以上３０秒未満である
Ｃ：磁気分離速度の評価指標が３０秒以上４５秒未満である
Ｄ：磁気分離速度の評価指標が４５秒以上６０秒未満である
Ｅ：磁気分離速度の評価指標が６０秒以上である

【0176】

【表1】

【0177】

【表2】

【0178】

表１および表２に示すように、各実施例の磁性ビーズでは、磁気分離操作を経た後でも、生体物質の精製量が多く、かつ、再分散性も良好であった。また、各実施例の磁性ビーズは、酸を含有するＰＢＳバッファー水溶液に１０日間浸漬した状態でも、良好な耐食性を有していた。さらに、各実施例の磁性ビーズは、磁気分離速度が十分に大きいことも認められた。

【0179】

以上の結果から、本発明によれば、生体物質の抽出効率が良好な磁性ビーズを提供できると認められる。

【符号の説明】

【0180】

１…容器、２…磁性ビーズ、２Ａ…磁性ビーズ、３…液体、５…磁石、６…ピペット、１０…化合物、２２…磁性金属粉末、２４…被覆膜、２４２…無機酸化物層、２４４…下地層、２４６…金層、２４８…固定化層、Ｓ１０２…溶解・吸着工程、Ｓ１０８…洗浄工程、Ｓ１１０…溶出工程、Ｌ…スペーサー、Ｘ…機能性部位

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】