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特開2024-149687ＣＤ１９及びＣＤ３と結合可能な多重特異性抗原結合タンパク質、ならびにその使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024149687
(43)【公開日】2024-10-18
(54)【発明の名称】ＣＤ１９及びＣＤ３と結合可能な多重特異性抗原結合タンパク質、ならびにその使用
(51)【国際特許分類】
C07K 16/46 20060101AFI20241010BHJP
C07K 16/28 20060101ALI20241010BHJP
【ＦＩ】
C07K16/46 ZNA
C07K16/28
C07K16/46
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2024129056
(22)【出願日】2024-08-05
(62)【分割の表示】P 2021536788の分割
【原出願日】2019-12-23
(31)【優先権主張番号】PCT/CN2018/123108
(32)【優先日】2018-12-24
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り 刊行物等１：２０１８年１２月３日に公開されたアメリカ血液学会（ＡＳＨ）年次総会、アブストラクト、２０１８年、ポスター発表、カリフォルニア州サンディエゴ、アメリカ合衆国 刊行物等２：２０１８年１１月２９日に公開されたアメリカ血液学会（ＡＳＨ）年次総会、アブストラクト、２０１８年、オンライン公開、リンパ腫：前臨床化学療法および生物学的薬剤：ポスターＩＩＩ血液（２０１８）１３２（補足１）：４１６９ 刊行物等３：２０１８年１１月１日に公開されたアメリカ血液学会（ＡＳＨ）年次総会、アブストラクト、２０１８年、オンライン公開
(71)【出願人】
【識別番号】521239808
【氏名又は名称】アイタブメッド （エイチケイ） リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】フアン ジフア
(72)【発明者】
【氏名】シェン ウージョン
(72)【発明者】
【氏名】ラオ イーチュン
(72)【発明者】
【氏名】ツイ ユミン
(72)【発明者】
【氏名】ヤン シャオチアン
(57)【要約】
【課題】ＣＤ１９及びＣＤ３と結合可能な多重特異性抗原結合タンパク質、ならびにその使用の提供。
【解決手段】ＣＤ３及びＣＤ１９に特異的に結合する多重特異性抗原結合タンパク質（ＭＳＡＰ）が提供される。医薬組成物の調製を目的としたＭＳＡＰの使用、がんを処置する方法、及びＭＳＡＰを含むキットがさらに提供される。一部の抗原は、腫瘍組織中において過剰発現される、変異誘発される、または選択的に変異誘発される。それゆえ、がん細胞の表面上にある特定の抗原を標的とする抗体は、がん治療薬として使用され得る。
【選択図】なし
【解決手段】ＣＤ３及びＣＤ１９に特異的に結合する多重特異性抗原結合タンパク質（ＭＳＡＰ）が提供される。医薬組成物の調製を目的としたＭＳＡＰの使用、がんを処置する方法、及びＭＳＡＰを含むキットがさらに提供される。一部の抗原は、腫瘍組織中において過剰発現される、変異誘発される、または選択的に変異誘発される。それゆえ、がん細胞の表面上にある特定の抗原を標的とする抗体は、がん治療薬として使用され得る。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
多重特異性抗原結合タンパク質であって、
Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、
（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに
（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片と、
ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片と、
ＩＩＩ．場合により、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び前記抗ＣＤ１９抗原結合断片を連結させるリンカーとを含む、前記多重特異性抗原結合タンパク質。
Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、
（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに
（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片と、
ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片と、
ＩＩＩ．場合により、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び前記抗ＣＤ１９抗原結合断片を連結させるリンカーとを含む、前記多重特異性抗原結合タンパク質。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年１２月２４日出願の国際特許出願第ＰＣＴ／ＣＮ２０１８／１２３１０８号の優先権の利益を主張し、その内容全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０１８年１２月２４日出願の国際特許出願第ＰＣＴ／ＣＮ２０１８／１２３１０８号の優先権の利益を主張し、その内容全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
【0002】
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出物に関する内容は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる：配列表のコンピュータ可読形式（ＣＲＦ）（ファイル名：７２０６２２００１６４１ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０１９年１２月１１日、サイズ：５４ＫＢ）。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出物に関する内容は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる：配列表のコンピュータ可読形式（ＣＲＦ）（ファイル名：７２０６２２００１６４１ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０１９年１２月１１日、サイズ：５４ＫＢ）。
【0003】
本発明は、ＣＤ３及びＣＤ１９に特異的に結合する多重特異性抗原結合タンパク質（ＭＳＡＰ）に関する。さらに、ＭＳＡＰを含む医薬組成物、ＭＳＡＰを使用してがんを処置する方法、及びＭＳＡＰを含むキットが本明細書で提供される。
【背景技術】
【0004】
一部の抗原は、腫瘍組織中において過剰発現される、変異誘発される、または選択的に変異誘発される。それゆえ、がん細胞の表面上にある特定の抗原を標的とする抗体は、がん治療薬として使用され得る。Ｂリンパ球抗原ＣＤ１９は、ＣＤ１９分子（分化抗原群１９）、Ｂリンパ球表面抗原Ｂ４、Ｔ細胞表面抗原Ｌｅｕ－１２及びＣＶＩＤ３としても知られている。ＣＤ１９は、正常及び悪性Ｂリンパ球の両方で発現され、Ｂ細胞腫瘍関連抗原と見なされている。これは、Ｂリンパ球分化のバイオマーカー、リンパ腫の診断、及び白血病免疫療法の標的として使用され得る。
【0005】
ＣＤ３は、３つの異なるポリペプチド鎖（ε鎖、δ鎖及びγ鎖）を含む、Ｔ細胞によって発現される抗原である。３本のＣＤ３ポリペプチド鎖は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）及びζ鎖と会合してＴＣＲ複合体を形成し、これはＴ細胞中においてシグナル伝達カスケードを活性化させる機能を有する。現在、多くの治療戦略がＴＣＲシグナル伝達を標的とし、抗ヒトＣＤ３モノクローナル抗体を使用して疾患を処置する。ＣＤ３特異的抗体のＯＫＴ３は、ヒトの治療用途用に承認された最初のモノクローナル抗体であり、同種移植片拒絶の処置を目的とした免疫調節剤として臨床で使用されている。
【0006】
二重特異性抗体は、がん細胞を効果的に死滅させる可能性があることが分かっているが、全身性免疫活性化、免疫原性（抗薬物抗体効果）を含む、これらの分子の重篤な有害作用、及び一般的に乏しい製造性によって、この種類の薬物の幅広い適用が大幅に制限されている。例えば、ＣＤ１９×ＣＤ３二重特異性ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ（一本鎖可変断片）融合タンパク質（ブリナツモマブ）の１つの欠点は、この薬物の半減期が短く、皮下投与とは不適合であるために、この薬物を毎日静脈内（ｉ．ｖ．）投与する必要があることであり、未だ、神経学的作用、例えば、失見当識、錯乱、発話及び言語障害、振戦または痙攣などが、依然として臨床試験中に生じた（Ｂａｒｇｏｕ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２１（５８９１）：９７４－７９７，２００８）。
現在の二重特異性抗体の形式に関する欠点は、良好な有効性及び安全性を有する、がん患者の処置におけるそれらの幅広い用途に関して今も大きな課題のままである。したがって、当該技術分野において、有効性、安定性、安全性及び製造性が改善された新規の二重特異性抗体または処置レジメンの開発が緊急に必要である。
現在の二重特異性抗体の形式に関する欠点は、良好な有効性及び安全性を有する、がん患者の処置におけるそれらの幅広い用途に関して今も大きな課題のままである。したがって、当該技術分野において、有効性、安定性、安全性及び製造性が改善された新規の二重特異性抗体または処置レジメンの開発が緊急に必要である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0007】
【非特許文献1】Ｂａｒｇｏｕ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２１（５８９１）：９７４－７９７，２００８
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明は、ＣＤ３及びＣＤ１９に特異的に結合する多重特異性抗原結合タンパク質（「ＭＳＡＰ」、二重特異性抗原結合タンパク質、「ＢＳＡＰ」など）、ＭＳＡＰを含む医薬組成物、ならびにＭＳＡＰを使用してがんを処置する方法を提供する。
【0009】
本発明の一態様では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片を連結させるリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含み、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。
【0010】
上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかによるいくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端、例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープなどに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含む重鎖超可変領域Ｈ１（ＨＶＲ－Ｈ１）、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含む軽鎖超可変領域Ｌ１（ＨＶＲ－Ｌ１）、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、ジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合、例えば、約２個のジスルフィド結合などによって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。
【0011】
上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかによるいくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）はＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片のＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）はＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片のＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨは、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬは、配列番号：５０のアミノ酸配列を含む。
【0012】
上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかによるいくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、異なるアミノ酸配列を有する。
【0013】
上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかによるいくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個のアミノ酸残基（約２～約１５個のアミノ酸残基など）を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択され、例えば、配列番号：４４などである。
【0014】
上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかによるいくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：６１のアミノ酸配列を含む。
【0015】
上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかによるいくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５８のアミノ酸配列を含む。
【0016】
上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかによるいくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５７のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５７のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５７のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：６１のアミノ酸配列を含む。
【0017】
上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかをコードする単離核酸分子、単離核酸分子を保有する発現ベクター、発現ベクターを含む単離宿主細胞、及び単離宿主細胞を培養し、細胞培養物からＭＳＡＰを回収することを含む、上に記載されるＭＳＡＰのいずれかを産生する方法が、さらに提供される。
【0018】
本明細書では、上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかを含む、使用、組成物（医薬組成物など）、キット及び製品もまた提供される。いくつかの実施形態では、上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれか、及び場合により、薬学的に許容される担体を含む組成物（医薬組成物など）が提供される。
【0019】
がんを処置するための医薬の調製における上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかの使用が、さらに本明細書で提供される。いくつかの実施形態では、がんの処置を必要とする個体におけるがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、個体に有効量の上に記載されるＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかまたはその組成物（医薬組成物など）を投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）または組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、個体はヒトである。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、がんはＤＬＢＣＬである。いくつかの実施形態では、がんはＡＬＬである。
【0020】
本発明のこれらの及び他の態様及び利点は、後続の発明を実施するための形態及び添付の特許請求の範囲から明らかとなる。本明細書に記載される様々な実施形態の１つ、いくつか、または全ての特性を組み合わせて、本発明の他の実施形態を形成してよいと理解されるべきである。
【0021】
本明細書で言及される全ての刊行物、特許、特許出願及び公開特許出願の開示は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【0022】
【図1】Ａは、例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ ＩＴＡＢ２００９の構造を図示する。Ｂは、例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ ＩＴＡＢ２００７の構造を図示する。
【図2】自己Ｂ細胞に対するＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（ＩＴＡＢ２００９またはＩＴＡＢ２００７）媒介ヒトＰＢＭＣ細胞傷害を示す。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰを添加せずにヒトＰＢＭＣのみと混合したＢ細胞が対照として機能した。
【図3】Ｄａｕｄｉ腫瘍細胞に対するＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（ＩＴＡＢ２００９またはＩＴＡＢ２００７）媒介ヒトＰＢＭＣ細胞傷害を示す。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰを添加せずにヒトＰＢＭＣのみと混合したＤａｕｄｉ腫瘍細胞が対照として機能した。
【図4】抗ＣＤ１９染色シグナルによって反映されるような、異なる細胞のＣＤ１９発現レベルを示す。
【図5-1】Ｐｆｅｉｆｆｅｒ細胞（図５Ａ）の存在下におけるＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（ＩＴＡＢ２００９またはＩＴＡＢ２００７）媒介Ｔ細胞活性化を示す。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰを添加せずにＰｆｅｉｆｆｅｒ細胞と混合したＴ細胞が対照として機能した。
【図5-2】Ｄａｕｄｉ細胞（図５Ｂ）の存在下におけるＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（ＩＴＡＢ２００９またはＩＴＡＢ２００７）媒介Ｔ細胞活性化を示す。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰを添加せずにＤａｕｄｉ細胞と混合したＴ細胞が対照として機能した。
【図6】Ｒｅｈ細胞に対するＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（ＩＴＡＢ２００９またはＩＴＡＢ２００７）媒介ヒトＰｒｉ－Ｔ細胞の細胞傷害を示す。
【図7】ヒトＰＢＭＣを接種した免疫再構築ＮＯＧマウスにおける、皮下Ｒａｊｉ異種移植腫瘍に対するＩＴＡＢ２００７ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰの成長阻害効果を示す。ビヒクル注射（ＰＢＳＴ）は対照として機能した。結果は、ＩＴＡＢ２００７が、ｈｕＰＢＭＣ移植マウスにおけるＲａｊｉ異種移植腫瘍の成長を濃度依存的様式で阻害したことを示した。
【図8】ヒト初代Ｔ細胞で再構築した免疫系を有するＲｅｈ接種マウスの、ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰまたはビヒクル対照による処置下での生存率を示す。
【発明を実施するための形態】
【0023】
本発明は、ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及びＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含む多重特異性抗原結合タンパク質（ＭＳＡＰ）（以後「ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ」と称される）を提供する。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含み、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、２つの抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは同じである。本発明はまた、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を使用して、がん、特に血液悪性腫瘍を処置する方法を提供する。
Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、２つの抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは同じである。本発明はまた、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を使用して、がん、特に血液悪性腫瘍を処置する方法を提供する。
【0024】
現在の抗がん二重特異性抗体は、いくつかの欠点、例えば、乏しい製造性、凝集、短い半減期、重篤な有害作用（全身性免疫活性化、免疫原性（抗薬物抗体応答）など）、長い注入時間、及び腫瘍組織中で保持できないことなどの問題を抱えていて、これは良好な有効性及び安全性を有する、がん処置におけるこれらの抗がん二重特異性抗体の幅広い用途に大きな課題を提示している。例えば、ブリナツモマブ（ＢＬＩＮＣＹＴＯ（登録商標）、抗ＣＤ３／抗ＣＤ１９二重特異性ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ）は、フィラデルフィア染色体陰性の再発性または難治性急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）の第２選択処置として２０１４年に米国で承認された。しかしながら、その半減期が短く、皮下投与とは不適合であるために、ブリナツモマブを毎日静脈内（ｉ．ｖ．）投与する必要があり、未だ、神経学的作用、例えば、失見当識、錯乱、発話及び言語障害、振戦または痙攣などが、依然として臨床試験中に生じた（Ｂａｒｇｏｕ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２１（５８９１）：９７４－７９７，２００８）。
【0025】
広範な調査の後、本出願の発明者らは、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）形式を予想外にも発見し、これは抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＮ末端に融合している。本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、当該技術分野において既知の他の多重特異性タンパク質と比較して、いくつかの利点を有することが見出された。第１に、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、がん細胞、特にＣＤ１９低発現腫瘍、例えば、Ｂ細胞リンパ腫及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）などのがん細胞に対する細胞傷害活性が増強している。第２に、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、非ヒト霊長類、例えば、カニクイザルなどと交差反応するため、これはヒトの臨床試験予測に関する利益を目的とした非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）に対する毒性研究に役立つ可能性がある。第３に、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は半減期が長時間にわたるため、投薬頻度の低下及び注入時間の短縮を可能にし、患者に対してより多くの利便性を提供する可能性がある。
【0026】
したがって、一態様では、本発明は、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を提供する：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカー。別の態様では、本発明は、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を提供する：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカー。
【0027】
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を含む医薬組成物及びキット、ならびにがんを処置するためのそれらの使用方法もまた提供される。
【0028】
Ｉ．定義
本発明の実施には、反対の具体的な指示がない限り、当業者の技能範囲内のウイルス学、免疫学、微生物学、分子生物学及び組換えＤＮＡ技術に関する従来の方法を用いることになり、その多くが例証の目的で以下に記載される。そのような技術は、文献中で十分に説明される。例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｒ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（２００９）、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ ｅｄ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９５、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ａｎｄ Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００１）、Ｍａｎｉａｔｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（１９８２）、ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，ｖｏｌ．Ｉ＆ＩＩ（Ｄ．Ｇｌｏｖｅｒ，ｅｄ．）、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｎ．Ｇａｉｔ，ｅｄ．，１９８４）、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（Ｂ．Ｈａｍｅｓ＆Ｓ．Ｈｉｇｇｉｎｓ，ｅｄｓ．，１９８５）、Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ（Ｂ．Ｈａｍｅｓ＆Ｓ．Ｈｉｇｇｉｎｓ，ｅｄｓ．，１９８４）、Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，ｅｄ．，１９８６）、Ｐｅｒｂａｌ，Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ（１９８４）及び他の同様の参考文献を参照のこと。
本発明の実施には、反対の具体的な指示がない限り、当業者の技能範囲内のウイルス学、免疫学、微生物学、分子生物学及び組換えＤＮＡ技術に関する従来の方法を用いることになり、その多くが例証の目的で以下に記載される。そのような技術は、文献中で十分に説明される。例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｒ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（２００９）、Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ ｅｄ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９５、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ａｎｄ Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００１）、Ｍａｎｉａｔｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（１９８２）、ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，ｖｏｌ．Ｉ＆ＩＩ（Ｄ．Ｇｌｏｖｅｒ，ｅｄ．）、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｎ．Ｇａｉｔ，ｅｄ．，１９８４）、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（Ｂ．Ｈａｍｅｓ＆Ｓ．Ｈｉｇｇｉｎｓ，ｅｄｓ．，１９８５）、Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ（Ｂ．Ｈａｍｅｓ＆Ｓ．Ｈｉｇｇｉｎｓ，ｅｄｓ．，１９８４）、Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，ｅｄ．，１９８６）、Ｐｅｒｂａｌ，Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ（１９８４）及び他の同様の参考文献を参照のこと。
【0029】
本明細書で使用される場合、「処置」という用語は、臨床病理学の過程において処置されている個体または細胞の自然経過を変化させるように設計された臨床的介入を指す。処置の望ましい効果としては、疾患進行速度の低下、疾患状態の改善または軽減、及び寛解または予後の改善が挙げられる。例えば、がんと関連する１つ以上の症状が軽減または排除される場合、例えば、がん性細胞の増殖の減少（もしくは破壊）、疾患に起因する症状の低減、疾患に罹患している患者の生活の質の向上、疾患を処置するのに必要な他の薬剤用量の低減、及び／または個体の生存期間の延長が挙げられるが、これらに限定されない場合に、個体の「処置」に成功している。
【0030】
本明細書で使用される場合、「有効量」は、対象の疾患または障害を処置するのに効果的な薬剤または薬物の量を指す。がんの場合、薬剤の有効量は、がん細胞の数を減少させる、腫瘍サイズを減少させる、末梢器官へのがん細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度遅延させる、好ましくは停止させる）、腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度遅延させる、好ましくは停止させる）、腫瘍成長をある程度阻害する、及び／またはがんと関連する症状のうち１つ以上をある程度緩和する場合がある。臨床状況において理解されるように、有効量の薬物、化合物、または医薬組成物は、別の薬物、化合物、または医薬組成物と組み合わせて得られても、または得られなくともよい。したがって、「有効量」は１つ以上の治療剤の投与に関連すると見なされてよく、単剤は１つ以上の他の薬剤と組み合わせて望ましい結果が達成される可能性がある、または達成される場合に、有効量で投与されていると見なされてよい。
【0031】
本明細書で使用される場合、「個体」または「対象」は、ヒト、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、げっ歯類、または霊長類を含むが、これらに限定されない哺乳動物を指す。いくつかの実施形態では、個体はヒトである。
【0032】
「抗体」という用語は最も広義に使用され、具体的には、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片が所望の生物活性または機能を呈する限り、その断片を網羅する。本明細書で使用される場合、「免疫グロブリン」（Ｉｇ）及び「抗体」という用語は、交換可能に使用される。
【0033】
「天然抗体」、「全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「全抗体」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、以下に定義されるような抗体断片ではなく、その実質的にインタクトな形態の抗体を指す。本用語は、特にＦｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。天然抗体は通常、２本の同一軽（Ｌ）鎖及び２本の同一重（Ｈ）鎖で構成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１個の共有ジスルフィド結合によって重鎖に連結されているが、ジスルフィド連結の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で異なる。各重鎖及び軽鎖はまた、規則的に間隔を空けて鎖内ジスルフィド架橋も有する。各重鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、続いて複数の定常ドメインを有する。各軽鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＬ）及びその他端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１定常ドメインと整列し、軽鎖可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列している。特定のアミノ酸残基は、軽鎖及び重鎖の可変ドメイン間に界面を形成すると考えられている。
【0034】
「定常ドメイン」という用語は、抗原結合部位を含有する可変ドメインである免疫グロブリンの他方の部分と比較して、より保存されたアミノ酸配列を有する免疫グロブリン分子の部分を指す。定常ドメインは、重鎖のＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３ドメイン（まとめてＣＨ）ならびに軽鎖のＣＨＬ（またはＣＬ）ドメインを含有する。
【0035】
抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖の可変ドメインは、「ＶＨ」と称される場合がある。軽鎖の可変ドメインは、「ＶＬ」と称される場合がある。これらのドメインは、一般に抗体の最も可変な部分であり、抗原結合部位を含有する。
【0036】
「可変」という用語は、可変ドメインのある特定の部分が、抗体間で配列が大きく異なり、その特定の抗原に対する各特定の抗体の結合性及び特異性に使用されているという事実を指す。しかしながら、可変性は、抗体の可変ドメイン全体にわたって均一に分布しているわけではない。それは、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインの両方における超可変領域（ＨＶＲ、ＣＤＲとも称される）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは各々、４つのＦＲ領域を含み、主として、３つのＨＶＲが連結しているベータシート配置を取り、ＨＶＲはベータシート構造に連結して、いくつかの場合ではベータシート構造の一部を形成しているループを形成する。各鎖内のＨＶＲは、ＦＲ領域によって近接して互いに保持され、他方の鎖のＨＶＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）を参照のこと）。定常ドメインは、抗体と抗原との結合に直接関与しないが、様々なエフェクター機能、例えば、抗体依存性細胞毒性への抗体の関与などを示す。
【0037】
任意の哺乳動物種由来の抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（「κ」）及びラムダ（「λ」）と呼ばれる、２つの明確に異なるタイプのうち１つに割り当てられ得る。
【0038】
ＩｇＧ「アイソタイプ」または「サブクラス」という用語は、本明細書で使用される場合、それらの定常領域の化学的及び抗原特性によって定義される免疫グロブリンのサブクラスのいずれかを意味する。
【0039】
それらの重鎖の定常ドメインにおけるアミノ酸配列に応じて、抗体（免疫グロブリン）は、異なるクラスに割り当てられ得る。免疫グロブリンには５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２にさらに分類される場合がある。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、γ、ε、γ、及びμと呼ばれる。免疫グロブリンの異なるクラスのサブユニット構造及び三次元配置は周知であり、概して、例えば、Ａｂｂａｓ ｅｔ
ａｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．，２０００）に記載されている。抗体は、抗体と１つ以上の他のタンパク質またはペプチドとの共有または非共有会合によって形成される、より大きな融合分子の一部である場合がある。
ａｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．，２０００）に記載されている。抗体は、抗体と１つ以上の他のタンパク質またはペプチドとの共有または非共有会合によって形成される、より大きな融合分子の一部である場合がある。
【0040】
「抗体断片」は、インタクトな抗体の一部を含み、好ましくはその抗原結合領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗体断片は、抗原結合断片である。抗体断片または抗原結合断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ＡＢ’）２、及びＦｖ断片（一本鎖可変断片、ｓｃＦｖなど）、ダイアボディ、直鎖状抗体、一本鎖抗体分子、ならびに抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられる。
【0041】
抗体のパパイン消化によって、各々が単一の抗原結合部位を有する、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一抗原結合断片が産生され、残りが「Ｆｃ」断片であり、その名称が容易に結晶化するその能力を反映している。ペプシン処理によって、２つの抗原結合部位を有し、依然として抗原を架橋できるＦ（ａｂ’）２断片が産生される。
【0042】
「Ｆｖ」は、完全な抗原結合部位を含有する最小抗体断片である。一実施形態では、二本鎖Ｆｖ種は、密接に非共有会合した１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインの二量体からなる。一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）種では、１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインは、軽鎖及び重鎖が二本鎖Ｆｖ種の構造に類似した「二量体」構造で会合し得るように、柔軟なペプチドリンカーによって共有結合的に連結され得る。各可変ドメインの３つのＨＶＲが相互作用してＶＨ－ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を定義するのは、この配置においてである。まとめると、６つのＨＶＲが抗体に抗原結合特異性を付与する。しかしながら、単一可変ドメイン（または抗原に特異的な３つのＨＶＲのみを含むＦｖの半分）であっても、結合部位全体よりも親和性は低くなるが、抗原を認識してそれと結合する能力を有する。
【0043】
Ｆａｂ断片は、重鎖及び軽鎖可変ドメイン（ＶＨ、ＶＬ）を含有し、さらに軽鎖の定常ドメイン（ＣＬ）及び重鎖の第１定常ドメイン（ＣＨ１）も含有する、２つのポリペプチド鎖を有する。本明細書では、発明者らは「Ｆｄ」を、ＶＨ及びＣＨ１ドメインを含むＦａｂ断片の重鎖ポリペプチド部分と称する。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に数個の残基を付加することによって、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つＦａｂ’の本明細書における名称である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元々、それらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として作製された。抗体断片の他の化学結合もまた既知である。
【0044】
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨ及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖内に存在する。一般に、ｓｃＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、これによって、ｓｃＦｖが抗原結合に所望される構造を形成することが可能になる。ｓｃＦｖの概説については、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｂｅｒｌｉｎ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，１９９４．２６９－３１５を参照のこと。
【0045】
「Ｆｃ」断片は、ジスルフィドによって互いに保持されている両方の重鎖のカルボキシ末端部分を含む。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域の配列によって決定され、その領域はまた、ある特定の細胞型で見られるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される部分でもある。
【0046】
「モノクローナル抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、例えば、集団に含まれる個々の抗体が、少量で存在する場合がある可能な変異、例えば、天然に存在する変異を除いて同一である。したがって、「モノクローナル」という修飾語は、別個の抗体の混合物ではないという抗体の特徴を示す。いくつかの実施形態では、そのようなモノクローナル抗体は、典型的には標的と結合するポリペプチド配列を含む抗体を含み、標的結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列から単一の標的結合ポリペプチド配列を選択することを含むプロセスによって得られた。例えば、選択プロセスは、複数のクローン、例えば、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、または組換えＤＮＡクローンなどのプールからの、特有のクローンの選択であり得る。選択された標的結合配列はさらに変更され、例えば、標的に対する親和性を改善する、標的結合配列をヒト化する、細胞培養物中でその産生を改善する、インビボでのその免疫原性を減少させる、多重特異性抗体を作製することなどが可能であり、変更された標的結合配列を含む抗体も、本発明のモノクローナル抗体であることが理解されるべきである。異なる決定基（エピトープ）を対象とする異なる抗体を典型的に含む、ポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基を対象とする。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体調製物は、それらには通常、他の免疫グロブリンが混在していないという点で有利である。
【0047】
「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体の集団から得られるような抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、様々な技術、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５－９７（１９７５）、Ｈｏｎｇｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ １４（３）：２５３－２６０（１９９５）、Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ ｅｄ．１９８８）、Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ
Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）、Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－１２４７２（２００４）、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）を参照のこと）、ならびにヒト免疫グロブリン座位またはヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子の一部または全てを有する動物中においてヒト抗体またはヒト様抗体を産生するための技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３、ＷＯ１９９６／３４０９６、ＷＯ１９９６／３３７３５、ＷＯ１９９１／１０７４１、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５－２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）、米国特許第５，５４５，８０７号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６３３，４２５号、及び同第５，６６１，０１６号、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）、Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）、ならびにＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３（１９９５）を参照のこと）を含むものによって作製されてよい。
Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）、Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－１２４７２（２００４）、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）を参照のこと）、ならびにヒト免疫グロブリン座位またはヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子の一部または全てを有する動物中においてヒト抗体またはヒト様抗体を産生するための技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３、ＷＯ１９９６／３４０９６、ＷＯ１９９６／３３７３５、ＷＯ１９９１／１０７４１、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５－２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）、米国特許第５，５４５，８０７号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６３３，４２５号、及び同第５，６６１，０１６号、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）、Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）、ならびにＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３（１９９５）を参照のこと）を含むものによって作製されてよい。
【0048】
本明細書におけるモノクローナル抗体は、重鎖及び／または軽鎖の一部が特定の種に由来する抗体または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一か、またはそれと相同である一方で、鎖（複数可）の残りが、別の種に由来する抗体または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一か、またはそれと相同である「キメラ」抗体に加えて、そのような抗体の断片が所望の生物活性を示す限り、その断片を特に含む（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：６８５１－６８５５（１９８４）を参照のこと）。キメラ抗体は、ＰＲＩＭＡＴＴＺＥＤ（登録商標）抗体を含み、その抗体の抗原結合領域が、例えば、目的の抗原でマカクザルを免疫化することによって産生される抗体に由来する。
【0049】
非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。一実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲに由来する残基が、所望の特異性、親和性、及び／または能力を有する非ヒト種（ドナー抗体）、例えば、マウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などのＨＶＲに由来する残基によって置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの場合には、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体で、またはドナー抗体では見られない残基を含む場合がある。これらの修飾が、抗体の性能をさらに改良するために行われてよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むことになり、その場合に超可変ループの全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のＦＲである。ヒト化抗体はまた、場合により免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部を含むことになる。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照のこと。また例えば、Ｖａｓｗａｎｉ
ａｎｄ Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ＆Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５－１１５（１９９８）、Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ２３：１０３５－１０３８（１９９５）、Ｈｕｒｌｅ ａｎｄ Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）、ならびに米国特許第６，９８２，３２１号及び同第７，０８７，４０９号も参照のこと。
ａｎｄ Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ＆Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５－１１５（１９９８）、Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ２３：１０３５－１０３８（１９９５）、Ｈｕｒｌｅ ａｎｄ Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）、ならびに米国特許第６，９８２，３２１号及び同第７，０８７，４０９号も参照のこと。
【0050】
「ヒト抗体」は、ヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体及び／または本明細書で開示されるようなヒト抗体を作製するための技術のいずれかを使用して作製された抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特に除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含む、当該技術分野において既知の様々な技術を使用して産生され得る。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１（１９９１）。また、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能な方法は、Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，７７（１９８５）、Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（１）：８６－９５（１９９１）に記載されている。ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）も参照のこと。ヒト抗体は、抗原投与に応答してそのような抗体を産生するように改変されているが、その内因性座位が不活性化されているトランスジェニック動物、例えば、免疫化ｘｅｎｏｍｉｃｅ（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関する米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号を参照のこと）に抗原を投与することによって調製され得る。例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術によって生成されるヒト抗体に関しては、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０３：３５５７－３５６２（２００６）も参照のこと。
【0051】
「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、本明細書で使用される場合、配列において超可変である、及び／または構造的に定義されたループを形成する抗体可変ドメインの領域を指す。一般に、抗体は６つのＨＶＲを含み、ＶＨ中に３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）あり、ＶＬ中に３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）ある。天然抗体では、Ｈ３及びＬ３は、６つのＨＶＲのうちで最も高い多様性を示し、特にＨ３は、抗体に微細特異性を付与する上で特有の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：３７－４５（２０００）、Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ ＷｕのＭｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１－２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００３）を参照のこと。事実、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ抗体は、軽鎖が存在しなくとも機能的かつ安定している。例えば、Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６－４４８（１９９３）、Ｓｈｅｒｉｆｆ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：７３３－７３６（１９９６）を参照のこと。ＨＶＲは、「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」とも称される。
【0052】
免疫グロブリン可変領域の構造及び位置は、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ．ＵＳ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ．１９８７、及びインターネットで現在利用可能なその最新版（ｉｍｍｕｎｏ．ｂｍｅ．ｎｗｕ．ｅｄｕ）の参照によって決定されてよい。
【0053】
「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書で定義されるようなＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【0054】
「共有結合的に連結される」という用語は、本明細書で使用される場合、１つ以上の化学結合による直接的連結または１つ以上のリンカーによる間接的連結を指す。任意の好適な化学結合が直接的連結を作製するために使用され得、これらとしては、共有結合、例えば、ペプチド結合及びジスルフィド結合など、または非共有結合、例えば、水素結合、疎水結合、イオン結合、もしくはファンデルワールス結合などが挙げられるが、これらに限定されない。
【0055】
「共有結合」は、本明細書で使用される場合、１つ以上の電子を共有する２個の原子間の安定した結合を指す。共有結合の例としては、ペプチド結合及びジスルフィド結合が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で使用される場合、「ペプチド結合」は、アミノ酸のカルボキシル基と隣接アミノ酸のアミン基との間に形成される共有結合を指す。「ジスルフィド結合」は、本明細書で使用される場合、２個の硫黄原子間で形成される共有結合、例えば、１つ以上のジスルフィド結合による重鎖断片ＣＨ１及び軽鎖断片ＣＬの組合せなどを指す。１つ以上のジスルフィド結合は、２つの断片のチオール基を連結させることによって、２つの断片間に形成される場合がある。いくつかの実施形態では、１つ以上のジスルフィド結合は、それぞれ重鎖断片及び軽鎖断片の１つ以上のシステイン間に形成され得る。ジスルフィド結合は、２個のチオール基の酸化によって形成され得る。いくつかの実施形態では、共有連結は、共有結合によって直接連結される。いくつかの実施形態では、共有連結は、ペプチド結合またはジスルフィド結合によって直接連結される。
【0056】
本明細書で使用される場合、「結合する」、「に特異的に結合する」または「に特異的」であるという用語は、測定可能かつ再現可能な相互作用、例えば、標的と抗体との間の結合などを指し、これは、生体分子を含む分子の異種集団の存在下において標的の存在を決定する。例えば、標的（エピトープであり得る）に結合するか、または特異的に結合する抗体は、その抗体が他の標的に結合するよりも高い親和性、結合活性で、より容易に、及び／またはより長い期間でこの標的と結合する抗体である。一実施形態では、抗体と無関係な標的との結合の程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定されるように、抗体と標的との結合の約１０％未満である。いくつかの実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、または≦０．１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）を有する。いくつかの実施形態では、抗体は、異なる種に由来するタンパク質中に保存されているタンパク質上のエピトープに特異的に結合する。別の実施形態では、特異的結合は、排他的結合を含み得るが、必ずしもその必要はない。
【0057】
本明細書で使用される場合、ペプチド、ポリペプチドまたは抗体配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」及び「相同性」は、配列をアライメントし、最大の配列同一性パーセントを得るために必要であればギャップを導入した後、いかなる保存的置換も配列同一性の一部として考慮せずに、特定のペプチドまたはポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列におけるアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。アミノ酸配列同一性パーセントの決定を目的としたアライメントは、当該技術分野における技術の範囲内である様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭＥＧＡＬＩＧＮ（商標）（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの公的に利用可能なコンピュータソフトウェアを使用して達成され得る。当業者は、比較されている配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するのに必要な任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。
【0058】
アミノ酸置換としては、ポリペプチド中のあるアミノ酸の、別のアミノ酸による置換が挙げられてよいが、これに限定されない。例示的な置換が、表Ａに示される。アミノ酸置換が目的の抗体に導入され、その生成物が、所望の活性、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の低減、またはＡＤＣＣもしくはＣＤＣの改善についてスクリーニングされてよい。
表Ａ
表Ａ
【表A】
【0059】
アミノ酸は、共通の側鎖特性によってグループ分けされてよい：（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ、（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、（５）鎖配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。非保存的置換は、これらのクラスのうち１つのメンバーを別のクラスに交換することを伴うことになる。
【0060】
本明細書で使用される場合、「多重特異性抗原結合タンパク質」（ＭＳＡＰ）は、Ｆａｂ断片と比較して異なる特性を有する１つ以上の抗原結合断片に共有結合的に連結されたＦａｂ断片を有するタンパク質を指す。特性は、生物学的特性、例えば、インビトロまたはインビボ活性などであってよい。特性はまた、単純な化学的または物理的特性、例えば、標的分子への結合、触媒反応などであってよい。Ｆａｂ断片及び１つ以上の抗原結合断片は、単一のペプチド結合によって直接連結される、またはペプチドリンカーを介するが、互いにインフレーム様式で連結される場合がある。「多重特異性抗原結合タンパク質」及び「ＭＳＡＰ」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、ポリエピトープ特異性を有する抗原結合タンパク質を指す。
【0061】
「多重特異性」という用語は、抗体または抗原結合タンパク質（多重特異性抗原結合タンパク質、ＭＳＡＰなど）に関して使用される場合、ポリエピトープ特異性を有する（すなわち、１つの生体分子上の２つ、３つ、もしくはそれを超える異なるエピトープに特異的に結合できるか、または２つ、３つ、もしくはそれを超える異なる生体分子上のエピトープに特異的に結合できる）抗体または抗原結合タンパク質を指す。別段の指示がない限り、多重特異性抗体またはＭＳＡＰによって結合される抗原が、多重特異性抗体名またはＭＳＡＰ名中で列挙される順序は任意である。すなわち、「抗ＣＤ３／ＣＤ１９」、「抗ＣＤ１９／ＣＤ３」、「ＣＤ１９×ＣＤ３」及び「ＣＤ３×ＣＤ１９」という用語は、交換可能に使用されてよく、ＣＤ３及びＣＤ１９（例えば、異なるＣＤ１９エピトープ）の両方に特異的に結合する多重特異性抗体（ＭＳＡＰなど）を指す。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰはＢＳＡＰである。
【0062】
「二重特異性」という用語は、抗体または抗原結合タンパク質（二重特異性抗原結合タンパク質、ＢＳＡＰなど）に関して使用される場合、１つの生体分子上における２つの異なるエピトープに特異的に結合できるか、または２つの異なる生体分子上のエピトープに特異的に結合できる抗体または抗原結合タンパク質を指す。別段の指示がない限り、二重特異性抗体またはＢＳＡＰによって結合される抗原が、二重特異性抗体名またはＢＳＡＰ名中で列挙される順序は任意である。すなわち、「抗ＣＤ３／ＣＤ１９」、「抗ＣＤ１９／ＣＤ３」、「ＣＤ１９×ＣＤ３」及び「ＣＤ３×ＣＤ１９」という用語は、交換可能に使用されてよく、ＣＤ３及びＣＤ１９エピトープの両方に特異的に結合する二重特異性抗体（ＢＳＡＰなど）を指す。いくつかの実施形態では、ＢＳＡＰは二価である。いくつかの実施形態では、ＢＳＡＰは多価（例えば、三価）である。
【0063】
本明細書で使用される場合、ポリペプチドの「Ｃ末端」は、ポリペプチドの最後のアミノ酸残基を指し、これはそのアミン基を供与して、その隣接アミノ酸残基のカルボキシル基とペプチド結合を形成する。ポリペプチドの「Ｎ末端」は、本明細書で使用される場合、ポリペプチドの最初のアミノ酸を指し、これはそのカルボキシル基を供与して、その隣接アミノ酸残基のアミン基とペプチド結合を形成する。
【0064】
「ベクター」という用語は、本明細書で使用される場合、核酸分子に連結される別の核酸を増殖できる核酸分子を指す。本用語は、自己複製核酸構造としてのベクターに加えて、ベクターが導入されている宿主細胞のゲノム中に組み込まれるベクターを含む。ある特定のベクターは、それらが機能的に連結されている核酸の発現を誘導できる。そのようなベクターは、本明細書において「発現ベクター」と称される。
【0065】
「細胞」という用語は、初代対象細胞及びその子孫を含む。
【0066】
「サイトカインストーム」という用語は、「サイトカインカスケード」または「高サイトカイン血症」としても知られ、典型的にはサイトカインと免疫細胞との間の正のフィードバックループからなる致死的免疫反応を引き起こす可能性があり、様々なサイトカイン（例えば、ＩＮＦ－γ、ＩＬ－１０、ＩＬ－６、ＣＣＬ２など）のレベルが高く上昇する。
【0067】
本明細書に記載される本発明の実施形態が、実施形態「からなる」及び／または「から本質的になる」ことを含むと理解される。
【0068】
本明細書における「約」の値またはパラメータへの言及は、その値またはパラメータそれ自体を対象とする変化形を含む（かつ記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及している記載は「Ｘ」の記載を含む。
【0069】
本明細書で使用される場合、ある値またはパラメータ「ではない」ことへの言及は、一般にある値またはパラメータ「以外」を意味し、かつ記載する。例えば、方法がＸタイプのがんを処置するために使用されないとは、方法がＸ以外のタイプのがんを処置するために使用されることを意味する。
【0070】
本明細書で使用される「約Ｘ～Ｙ」という用語は、「約Ｘ～約Ｙ」と同じ意味を有する。
【0071】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ｏｒ」、及び「ｔｈｅ」は、その内容に別段の明確な指示がない限り、複数の指示対象を含む。
【0072】
ＩＩ．ＣＤ３×ＣＤ１９多重特異性抗原結合タンパク質（ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ）
本発明は、任意のリンカーによって互いに融合された、ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片（以後「抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片」と称される）及びＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）（以後「抗ＣＤ１９抗原結合断片」、例えば、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖと称される）を含む多重特異性抗原結合タンパク質（ＭＳＡＰ）を提供し、以後「ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ」と称される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびにＩｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびにＩｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含み、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰは、三価及び三重特異性である、すなわち、２つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、ＣＤ１９の異なるエピトープに特異的に結合し、以後「ＣＤ３×ＣＤ１９三重特異性抗原結合タンパク質」または「ＣＤ３×ＣＤ１９ ＴＳＡＰ」と称される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰは、三価及び二重特異性である、すなわち、２つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、同じＣＤ１９エピトープに特異的に結合し、以後「三価ＣＤ３×ＣＤ１９ ＢＳＡＰ」と称される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰは、二価及び二重特異性であり、以後「二価ＣＤ３×ＣＤ１９ ＢＳＡＰ」と称される。例示的なＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰが、図１Ｂに示される。
本発明は、任意のリンカーによって互いに融合された、ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片（以後「抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片」と称される）及びＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）（以後「抗ＣＤ１９抗原結合断片」、例えば、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖと称される）を含む多重特異性抗原結合タンパク質（ＭＳＡＰ）を提供し、以後「ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ」と称される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびにＩｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびにＩｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含み、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰは、三価及び三重特異性である、すなわち、２つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、ＣＤ１９の異なるエピトープに特異的に結合し、以後「ＣＤ３×ＣＤ１９三重特異性抗原結合タンパク質」または「ＣＤ３×ＣＤ１９ ＴＳＡＰ」と称される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰは、三価及び二重特異性である、すなわち、２つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、同じＣＤ１９エピトープに特異的に結合し、以後「三価ＣＤ３×ＣＤ１９ ＢＳＡＰ」と称される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰは、二価及び二重特異性であり、以後「二価ＣＤ３×ＣＤ１９ ＢＳＡＰ」と称される。例示的なＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰが、図１Ｂに示される。
【0073】
本発明のＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は重要な利点を有し、これらとしては、１）がん細胞死滅効果の増強を実証したこと、２）動物モデルにおいてバーキットリンパ腫及び前駆Ｂ細胞（ｐｒｅＢ）急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）に対して優れたインビボ治療効果を実証したこと、ならびに３）非ヒト霊長類、例えば、カニクイザルなどとの交差反応が、ヒトの臨床試験予測に関する利益を目的とした非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）に対する毒性研究に役立つ可能性があることを含むが、これらに限定されない。
【0074】
したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、ジスルフィド結合によって連結されている。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含み、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含む重鎖超可変領域Ｈ１（ＨＶＲ－Ｈ１）、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含む軽鎖超可変領域Ｌ１（ＨＶＲ－Ｌ１）、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、同じアミノ酸配列を有する２つの抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、異なるアミノ酸配列を有する２つの抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、約２～約１５個のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0075】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合される。
Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合される。
【0076】
したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0077】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＨを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＬを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0078】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＨを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＬを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0079】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＨを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＬを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0080】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片のＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片のＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0081】
いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供され、第１ポリペプチドが配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供され、第１ポリペプチドが配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５８のアミノ酸配列を含む。
【0082】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。
Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。
【0083】
したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0084】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＨを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＬを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0085】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＨを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＬを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0086】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＨを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖがＶＬを含み、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0087】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片のＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、抗ＣＤ１９抗原結合断片のＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（例えば、ＢＳＡＰ）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0088】
いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供され、第１ポリペプチドが配列番号：５７のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供され、第１ポリペプチドが配列番号：５７のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：６１のアミノ酸配列を含む。
【0089】
いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含み、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される。
【0090】
したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0091】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９
ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0092】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0093】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。したがって、いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ
ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0094】
いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＨを含み、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）がＶＬを含み、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、以下を含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供される：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。
【0095】
いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供され、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供され、第１ポリペプチドが配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含むＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が提供され、第１ポリペプチドが配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：６１のアミノ酸配列を含む。
【0096】
本発明は、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかを含む融合タンパク質、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ複合体（例えば、小分子薬物複合体）、または本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰのいずれかを発現する単離細胞をさらに提供する。
【0097】
抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ヒトＣＤ３などのＣＤ３に特異的に結合する。「ＣＤ３」は、６本鎖の多タンパク質複合体として当該技術分野において既知である（Ａｂｂａｓ ａｎｄ Ｌｉｃｈｔｍａｎ，２００３、Ｊａｎｅｗａｙ ｅｔ ａｌ．，ｐ１７２及び１７８，１９９９を参照のこと）。哺乳動物では、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）複合体は、ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、２本のＣＤ３イプシロン鎖、及びＣＤ３ゼータ鎖のホモ二量体を含む。ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、及びＣＤ３イプシロン鎖は、単一の免疫グロブリンドメインを含有する免疫グロブリンスーパーファミリーの関連性の高い細胞表面タンパク質である。ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、及びＣＤ３イプシロン鎖の膜貫通領域は負に荷電していて、これはこれらの鎖と正荷電ＴＣＲ鎖とが会合するのを可能にする特性である。ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、及びＣＤ３イプシロン鎖の細胞内尾部は各々、免疫受容体チロシンベース活性化モチーフまたはＩＴＡＭとして知られる単一の保存モチーフを含有しているのに対して、各ＣＤ３ゼータ鎖は３つ有している。理論に束縛されるものではないが、ＩＴＡＭは、ＴＣＲ複合体のシグナル伝達能に重要であると考えられている。ＣＤ３は、本明細書で使用される場合、様々な動物種、例えば、ヒト、霊長類、マウス、ラット、または他の哺乳動物を含む種に由来する場合がある。
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ヒトＣＤ３などのＣＤ３に特異的に結合する。「ＣＤ３」は、６本鎖の多タンパク質複合体として当該技術分野において既知である（Ａｂｂａｓ ａｎｄ Ｌｉｃｈｔｍａｎ，２００３、Ｊａｎｅｗａｙ ｅｔ ａｌ．，ｐ１７２及び１７８，１９９９を参照のこと）。哺乳動物では、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）複合体は、ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、２本のＣＤ３イプシロン鎖、及びＣＤ３ゼータ鎖のホモ二量体を含む。ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、及びＣＤ３イプシロン鎖は、単一の免疫グロブリンドメインを含有する免疫グロブリンスーパーファミリーの関連性の高い細胞表面タンパク質である。ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、及びＣＤ３イプシロン鎖の膜貫通領域は負に荷電していて、これはこれらの鎖と正荷電ＴＣＲ鎖とが会合するのを可能にする特性である。ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、及びＣＤ３イプシロン鎖の細胞内尾部は各々、免疫受容体チロシンベース活性化モチーフまたはＩＴＡＭとして知られる単一の保存モチーフを含有しているのに対して、各ＣＤ３ゼータ鎖は３つ有している。理論に束縛されるものではないが、ＩＴＡＭは、ＴＣＲ複合体のシグナル伝達能に重要であると考えられている。ＣＤ３は、本明細書で使用される場合、様々な動物種、例えば、ヒト、霊長類、マウス、ラット、または他の哺乳動物を含む種に由来する場合がある。
【0098】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片単独と比較して、インビボ半減期が増加している。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、個々の抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の少なくとも約１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍の、またはそれを超える半減期を有する。
【0099】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、≦１μＭの平衡結合定数（Ｋｄ）、例えば、≦１００ｎＭ、好ましくは≦１０ｎＭ、より好ましくは≦１ｎＭなどでＣＤ３に結合する。例えば、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＫｄ値は、約≦１ｎＭ～約１ｐＭである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、約０．１×１０－９Ｍ～約１×１０－７Ｍ、例えば、約５．９９×１０－９ＭなどのＫｄでヒトＣＤ３に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、約０．１×１０－９Ｍ～約１×１０－７Ｍ、例えば、約１．８８×１０－８ＭなどのＫｄでサル（例えば、カニクイザル）ＣＤ３に結合する。
【0100】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、個々のＣＤ３鎖、例えば、ＣＤ３ガンマ鎖、ＣＤ３デルタ鎖、またはＣＤ３イプシロン鎖などに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、２つ以上の個々のＣＤ３鎖から形成される複合体（例えば、１本超のＣＤ３イプシロン鎖の複合体、ＣＤ３ガンマ鎖とＣＤ３イプシロン鎖との複合体、ＣＤ３デルタ鎖とＣＤ３イプシロン鎖との複合体）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片は、ＣＤ３イプシロン鎖に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３イプシロンのＮ末端に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３イプシロンのアミノ酸１～２７内のエピトープに特異的に結合する。
Ｆａｂ断片は、ＣＤ３イプシロン鎖に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３イプシロンのＮ末端に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３イプシロンのアミノ酸１～２７内のエピトープに特異的に結合する。
【0101】
抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、当該技術分野において既知の様々な方法によって生成され得る（例えば、米国特許第６，２９１，１６１号、同第６，２９１，１５８号を参照のこと）。抗ＣＤ３ Ｆａｂの供給源としては、様々な種、例えば、ヒト、ラクダ科動物（ラクダ、ヒトコブラクダ、もしくはリャマに由来、Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ
ａｌ．（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ，３６３：４４６及びＮｇｕｙｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７５：４１３）、サメ（Ｒｏｕｘ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）９５：１１８０４）、魚類（Ｎｇｕｙｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，５４：３９）、げっ歯類、トリ、またはヒツジを含む種に由来するモノクローナル抗体またはその抗原結合断片が挙げられる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ヒト抗体またはヒト化抗体に由来する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片はキメラである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、例えば、ファージディスプレイ、酵母ディスプレイ、またはヒトＩｇ遺伝子を持つトランスジェニックマウスを使用して開発された完全ヒト抗体に由来する。
ａｌ．（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ，３６３：４４６及びＮｇｕｙｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７５：４１３）、サメ（Ｒｏｕｘ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）９５：１１８０４）、魚類（Ｎｇｕｙｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，５４：３９）、げっ歯類、トリ、またはヒツジを含む種に由来するモノクローナル抗体またはその抗原結合断片が挙げられる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ヒト抗体またはヒト化抗体に由来する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片はキメラである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、例えば、ファージディスプレイ、酵母ディスプレイ、またはヒトＩｇ遺伝子を持つトランスジェニックマウスを使用して開発された完全ヒト抗体に由来する。
【0102】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ヒト及び非ヒト霊長類（カニクイザルなど）ＣＤ３の両方に特異的に結合する。サルＣＤ３に対して交差反応性を有する例示的な抗ヒトＣＤ３抗体としては、ＳＰ３４マウスモノクローナル抗体が挙げられるが、これに限定されない（例えば、Ｐｒｅｓｓａｎｏ，Ｓ．Ｔｈｅ ＥＭＢＯ Ｊ．４：３３７－３４４，１９８５、Ａｌａｒｃｏｎ，Ｂ．ＥＭＢＯ Ｊ．１０：９０３－９１２，１９９１、Ｓａｌｍｅｒｏｎ Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：３０４７－５２，１９９１、Ｙｏｓｈｉｎｏ Ｎ．ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐ．Ａｎｉｍ ４９：９７－１１０，２０００、Ｃｏｎｒａｄ Ｍ Ｌ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ７１Ａ：９２５－３３，２００７、及びＹａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：１０９７－１１００：１９８６を参照のこと）。サルＣＤ３に対して交差反応性を有する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片を有するＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、非ヒト霊長類での毒性試験を容易にする可能性があり、これによってチンパンジーでの、または代用分子を使用した毒性試験を実施する必要なく、ヒト臨床試験候補のためのより適切な安全性評価が提供され得る。
【0103】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、非ヒト霊長類に対して交差反応性を有しない抗ＣＤ３抗体に由来する。例示的な抗ＣＤ３抗体としては、Ｃｒｉｓ－７モノクローナル抗体（Ｒｅｉｎｈｅｒｚ，Ｅ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｔｙｐｉｎｇ ＩＩ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，（１９８６））、ＢＣ３モノクローナル抗体（Ａｎａｓｅｔｔｉ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７２：１６９１）、ＯＫＴ３（Ｏｒｔｈｏ ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｕｐ（１９８５）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３１３：３３７）及びその誘導体、例えば、ＯＫＴ３ ａｌａ－ａｌａ（Ｈｅｒｏｌｄ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１：４０９）など、ビジリズマブ（Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｂｌｏｏｄ ９９：２７１２）、ならびに１４５－２Ｃ１１モノクローナル抗体（Ｈｉｒｓｃｈ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４０：３７６６）が挙げられる。本明細書で企図されるさらなるＣＤ３結合分子としては、ＵＣＨＴ－１（Ｂｅｖｅｒｌｅｙ，Ｐ Ｃ ａｎｄ Ｃａｌｌａｒｄ，Ｒ．Ｅ．（１９８１）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１：３２９－３３４）及びＷＯ２００４／１０６３８０、ＷＯ２０１０／０３７８３８、ＷＯ２００８／１１９５６７、ＷＯ２００７／０４２２６１、ＷＯ２０１０／０１５０９１８に記載されているＣＤ３結合分子が挙げられる。
【0104】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖の１つの定常（ＣＨ１）領域及び１つの可変（ＶＨ）領域、ならびにＩｇ軽鎖の１つの定常（ＣＬ）領域及び１つの可変（ＶＬ）領域を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及びＶＨは、ＶＬ及びＣＬとヘテロ二量体化し、重鎖及び軽鎖定常領域間のジスルフィド結合によって共有結合的に連結される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、基本構造ＮＨ２－ＶＬ－ＣＬ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ１－ＶＨ－ＮＨ２を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、１個以上のジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１とＣＬとの間のジスルフィド結合数は、少なくとも１個、例えば、２個、３個、４個、またはそれを超える数などである。いくつかの実施形態では、システイン残基は、ジスルフィド結合を導入するために、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片中で（ＣＨ１及びＣＬ領域中などで）操作される。
【0105】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ジスルフィド結合を含まない。例えば、重鎖及び軽鎖は、ジスルフィド結合を必要とすることなく安定に相互作用するような方法で操作される場合がある。いくつかの実施形態では、重鎖または軽鎖は、システイン残基を除去するように操作され得るが、重鎖及び軽鎖は、依然として安定に相互作用し、Ｆａｂとして機能する。いくつかの実施形態では、変異は、重鎖及び軽鎖間の安定した相互作用を促進するために作製される。例えば、「ノブイントゥホール」操作戦略が、Ｆａｂの重鎖及び軽鎖間の二量体化を促進するために使用され得る（例えば、１９９６ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，９：６１７－６２１を参照のこと）。特定の目的、例えば、ＣＨ１及び／またはＣＬの定常ドメインにおけるアミノ酸変化、ならびに精製のためのジスルフィド結合除去またはタグの付加などのために設計されたバリアントＦａｂ断片も、本明細書での使用が企図される。
【0106】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片内の可変領域及び定常領域の配置は、天然の抗ＣＤ３ Ｆａｂに見られるものとは異なっている場合がある。いくつかの実施形態では、可変領域及び定常領域の配向は、一方の鎖ではＶＨ－ＣＬ、及び別の鎖ではＶＬ－ＣＨ１であってよい（例えば、Ｓｈａｅｆｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１１），ＰＮＡＳ，１０８：１１１８７０－９２を参照のこと）。
【0107】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、モノクローナル抗体に由来する。好適なモノクローナル抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＥ及びそのサブタイプ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４などを含む、いずれかのタイプのものであってよい。軽鎖ドメインは、カッパ鎖またはラムダ鎖に由来してよい。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、組み換えて設計される。
【0108】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ヒト免疫グロブリンＣＨ１を含む。いくつかの実施形態では、ヒト免疫グロブリンＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ヒトラムダ軽鎖定常領域を含む。一実施形態では、ヒトラムダ軽鎖定常領域は、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個の（１個、２個、３個、４個、または５個などの）ジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約２個のジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。
配列番号：１８（ヒトＣＨ１）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳ
配列番号：５２（ヒトラムダＣＬ）
ＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥ
配列番号：１８（ヒトＣＨ１）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳ
配列番号：５２（ヒトラムダＣＬ）
ＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥ
【0109】
ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、重鎖可変領域（ＶＨ）と軽鎖可変領域（ＶＬ）との間に形成される抗原結合部位によってＣＤ３に特異的に結合する。抗原結合部位は、免疫グロブリン重鎖の少なくとも１つ（１つ、２つ、もしくは３つなど）のＨＶＲ及び／または免疫グロブリン軽鎖の少なくとも１つ（１つ、２つ、もしくは３つなど）のＨＶＲを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９
ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、ＣＤ３に特異的に結合する全長抗体のＶＨ及びＶＬ配列の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ全てのＨＶＲを含む。
ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、ＣＤ３に特異的に結合する全長抗体のＶＨ及びＶＬ配列の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ全てのＨＶＲを含む。
【0110】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＳＰ３４に由来する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、米国特許第８，８４６，０４２号に記載されているＣＤ３ Ｆａｂ断片である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、配列番号：１５からの１つ、２つもしくは３つのＨＶＲ（もしくはＣＤＲ）を含むＶＨ、及び／または配列番号：１６からの１つ、２つもしくは３つのＨＶＲ（もしくはＣＤＲ）を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、配列番号：１５からの３つのＨＶＲを含むＶＨ、及び／または配列番号：１６からの３つのＨＶＲを含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、配列番号：９～１１から選択される１つ、２つもしくは３つのＨＶＲを含むＶＨ、及び／または配列番号：１２～１４から選択される１つ、２つもしくは３つのＨＶＲを含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、配列番号：１５のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、配列番号：１６のアミノ酸配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨまたはＶＬ配列は、参照配列と比較して置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３に結合する能力を保持している。いくつかの実施形態では、１個または２個のアミノ酸が、ＨＶＲのいずれか１つ以上において置換、挿入及び／または欠失されている。いくつかの実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域中（すなわち、フレームワーク領域、「ＦＲ」中）で生じる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、配列番号：１５のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：１６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド、及び／または配列番号：５８のアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。
配列番号：９（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｈ１）
ＴＹＡＭＮ
配列番号：１０（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｈ２）
ＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＤ
配列番号：１１（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｈ３）
ＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹ
配列番号：１２（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｌ１）
ＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮ
配列番号：１３（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｌ２）
ＧＴＮＫＲＡＰ
配列番号：１４（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｌ３）
ＡＬＷＹＳＮＬＷＶ
配列番号：１５（抗ＣＤ３ ＶＨ、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：１６（抗ＣＤ３ ＶＬ、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：５７（抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＦｄポリペプチド、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：５８（抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の軽鎖ポリペプチド、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：９（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｈ１）
ＴＹＡＭＮ
配列番号：１０（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｈ２）
ＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＤ
配列番号：１１（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｈ３）
ＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹ
配列番号：１２（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｌ１）
ＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮ
配列番号：１３（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｌ２）
ＧＴＮＫＲＡＰ
配列番号：１４（抗ＣＤ３ ＨＶＲ－Ｌ３）
ＡＬＷＹＳＮＬＷＶ
配列番号：１５（抗ＣＤ３ ＶＨ、ＨＶＲには下線が引かれている）
【化1】
【化2】
【化3】
【化4】
【0111】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の特定のＶＨ及び／またはＶＬが、相補的可変領域のライブラリーをスクリーニングして、望ましい特性、例えば、ＣＤ３に対する高い親和性などを有するＶＨ／ＶＬを同定するために使用されてよい。そのような方法は、例えば、Ｐｏｒｔｏｌａｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（１９９３）１５０：８８０－８８７、Ｃｌａｒｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ（１９９１）３５２：６２４－６２８、及びＫｌｉｍｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ（２０００）８３：２５２－２６０、Ｂｅｉｂｏｅｒ ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（２０００）２９６：８３３－８４９、及びＲａｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ（１９９８）９５：８９１０－８９１５に記載されている。
ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（２０００）２９６：８３３－８４９、及びＲａｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ（１９９８）９５：８９１０－８９１５に記載されている。
【0112】
抗ＣＤ１９抗原結合断片
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、ＣＤ１９に特異的に結合する１つまたは２つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＮ末端で、例えば、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端で、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端で融合される。
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、ＣＤ１９に特異的に結合する１つまたは２つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＮ末端で、例えば、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端で、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端で融合される。
【0113】
Ｂリンパ球抗原ＣＤ１９は、ＣＤ１９分子（分化抗原群１９）、Ｂリンパ球表面抗原Ｂ４、Ｔ細胞表面抗原Ｌｅｕ－１２及びＣＶＩＤ３としても知られている。ヒトでは、ＣＤ１９は、形質細胞を除く全てのＢ系細胞中で、及び濾胞樹状細胞中で発現される。ＣＤ１９は、２つの主要な役割を有する：１）細胞質シグナル伝達タンパク質を膜に動員するアダプタータンパク質として機能すること、及び２）ＣＤ１９／ＣＤ２１複合体内で機能し、Ｂ細胞受容体シグナル伝達経路の閾値を低減させること。ＣＤ１９は、正常Ｂリンパ球及び悪性Ｂリンパ球の両方で発現され、Ｂ細胞腫瘍関連抗原と見なされている。例えば、ＣＤ１９は、Ｂリンパ球分化のバイオマーカー、がん診断マーカー、または免疫療法の標的、例えば、Ｂ細胞リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、及び慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）などの標的として機能し得る。
【0114】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、細胞表面上のＣＤ１９に特異的に結合し得る。いくつかの実施形態では、細胞はがん細胞である。いくつかの実施形態では、がん細胞は、固形腫瘍中にある。いくつかの実施形態では、がん細胞は、転移がん細胞、例えば、血液がんなど、例えば、ＡＬＬ、ＣＬＬ、ＭＣＬ、Ｂ細胞リンパ腫などである。
【0115】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）単独と比較して、インビボ半減期が増加している。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、個々の抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）の少なくとも約１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍の、またはそれを超える半減期を有する。
【0116】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、≦１μＭの平衡結合定数（Ｋｄ）、例えば、≦１００ｎＭ、好ましくは≦１０ｎＭ、より好ましくは≦１ｎＭなどでＣＤ１９に結合する。例えば、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＫｄ値は、約≦１ｎＭ～約１ｐＭである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、約０．０１×１０－９Ｍ～約１×１０－７Ｍ、例えば、約８．９１×１０－１０ＭなどのＫｄでヒトＣＤ１９に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、約０．１×１０－９Ｍ～約１×１０－７Ｍ、例えば、約８．９１×１０－９ＭなどのＫｄでサル（例えば、カニクイザル）ＣＤ１９に結合する。
【0117】
ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）中の抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、結合特異性の追加及び特性増強（例えば、血清半減期の増加、または免疫活性化カスケードの活性化）を提供するだけでなく、ＶＨ鎖及び／またはＶＬ鎖のＮ末端への融合によって、ＣＤ３に対する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の結合親和性を著しく減少させる立体障害も生じさせる。これは他のＦａｂ融合タンパク質、例えば、ＴＲＩＢＯＤＹ（商標）などとは全く対照的であり、これはＦａｂ断片のＣ末端に追加の結合ドメインを融合する（例えば、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０００，１６５：７０５０－７０５７を参照のこと）。抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、他の既知の融合タンパク質、例えば、ＷＯ２００８／０２４１８８及びＷＯ２００９／１４９１８５に記載されているものなどとは異なり、二量体化することを意図しない。ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のさらに際立った特徴は、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が腫瘍細胞上のＣＤ１９に結合されない場合、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、ＣＤ３に対する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の結合親和性を減少させることである。
【0118】
本明細書に記載される抗ＣＤ１９抗原結合断片は、任意の形式のものであり、任意の好適な抗ＣＤ１９抗体に由来し得る。例えば、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、ｓｃＦｖ、ＶＨ、ＶＬ、ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、ミニボディ、ダイアボディ、ドメイン抗体バリアント（ｄＡｂ）、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）、ラクダ抗体（ＶＨＨ）、フィブロネクチン３ドメインバリアント、アンキリンリピートバリアント、及び他のタンパク質足場に由来する他の抗原特異的結合ドメインから選択され得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）はヒト化されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）はキメラである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、マウス、ラット、サルまたはウサギのモノクローナル抗体に由来する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、Ｂ４３、ＭＥＤＩ－５５１、ＣＬＢ－ＣＤ１９、４Ｇ７、ＳＪ２５－Ｃ１ＬＴ１９、Ｌｅｕ－１２、ＨＤ３７、または任意の他の既知である抗ＣＤ１９抗体から選択される任意のモノクローナル抗体に由来する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、例えば、ファージディスプレイ、酵母ディスプレイ、またはヒトＩｇ遺伝子を持つトランスジェニックマウスを使用して開発された完全ヒト抗体に由来する。
【0119】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、ヒト及び非ヒト霊長類（カニクイザルなど）ＣＤ１９の両方に特異的に結合する。サルＣＤ１９に対して交差反応性を有する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を有するＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、非ヒト霊長類での毒性試験を容易にする可能性があり、これによってチンパンジーでの、または代用分子を使用した毒性試験を実施する必要なく、ヒト臨床試験候補のためのより適切な安全性評価が提供され得る。
【0120】
本発明の抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＣＤ１９の機能活性を完全にまたは部分的に調節、遮断、阻害、減少、拮抗、中和する、またはそれに干渉する場合がある。抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が結合しない場合と比較して、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）の存在下ではＣＤ１９の機能活性が、少なくとも９５％（９６％、９７％、９８％、９９％または１００％など）減少する場合、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＣＤ１９の機能活性を完全に調節、遮断、阻害、減少、拮抗、中和できる、またはそれに干渉できると考えられる。抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が結合しない場合と比較して、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）の存在下ではＣＤ１９の機能活性が、少なくとも５０％（５５％、６０％、７５％、８０％、８５％、または９０％など）減少する場合、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＣＤ１９の機能活性を著しく調節、遮断、阻害、減少、拮抗、中和できる、またはそれに干渉できると考えられる。抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が結合しない場合と比較して、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）の存在下ではＣＤ１９の機能活性が、９５％未満で減少する場合（１０％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７５％、８０％、８５％、または９０％減少するなど）、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＣＤ１９の機能活性を部分的に調節、遮断、阻害、減少、拮抗、中和できる、またはそれに干渉できると考えられる。
【0121】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、特定の配列またはこれらの配列のある特定のバリアントを含む。いくつかの実施形態では、バリアント配列中のアミノ酸置換は、ＣＤ１９に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）の能力を実質的に減少させない。ＣＤ１９に対する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）の結合親和性または他の特性、例えば、特異性、免疫原性、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）もしくは補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）、及び／またはＣＤ１９バリアントとの交差反応性などを実質的に改善する修飾もまた企図される。
【0122】
抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＣＤ１９に特異的に結合する全長抗体の免疫グロブリン重鎖の少なくとも１つ（１つ、２つ、もしくは３つなど）のＨＶＲ及び／または免疫グロブリン軽鎖の少なくとも１つ（１つ、２つ、もしくは３つなど）のＨＶＲを含んでよい。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＣＤ１９に特異的に結合する全長抗体のＶＨ及びＶＬ配列の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つ全てのＨＶＲを含む。
【0123】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、ＣＤ１９に特異的に結合するｓｃＦｖ（本明細書では「抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ」とも称される）である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬは、グリシン及び／またはセリンを含む柔軟なリンカーなどのペプチドリンカーによって互いに連結される。以下の「リンカー」小節におけるペプチドリンカーのいずれも、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬ間で連結ペプチドとして使用され得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬは、互いに直接連結される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、Ｎ’－ＶＨ－Ｌ－ＶＬ－Ｃ’融合ポリペプチドを含み、Ｌは任意のペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、Ｎ’－ＶＬ－Ｌ－ＶＨ－Ｃ’融合ポリペプチドを含み、Ｌは任意のペプチドリンカーである。
【0124】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、ＶＨ及び／またはＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７からの１つ、２つもしくは３つのＨＶＲ（もしくはＣＤＲ）を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０からの１つ、２つもしくは３つのＨＶＲ（もしくはＣＤＲ）を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７からの１つ、２つもしくは３つのＨＶＲ（もしくはＣＤＲ）を含むＶＨ、及び／または配列番号：５０からの１つ、２つもしくは３つのＨＶＲ（もしくはＣＤＲ）を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７からの３つのＨＶＲを含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０からの３つのＨＶＲを含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７からの３つのＨＶＲを含むＶＨ、及び／または配列番号：５０からの３つのＨＶＲを含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、もしくは少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０（配列番号：５０など）の配列と少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、もしくは少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９
ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１のアミノ酸配列を含む。
配列番号：１（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｈ１）
ＳＹＶＭＨ
配列番号：２（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｈ２）
ＷＩＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹ
配列番号：３（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｈ３）
ＧＴＹＹＹＧＳＲＶＦＤＹ
配列番号：４７（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ１－１．３）
ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ
配列番号：４８（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ２－１．３）
ＲＭＳＮＬＮＳ
配列番号：４９（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ３－１．３）
ＭＱＨＬＥＹＰＬＴ
配列番号：４（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ１－１．２）
ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ
配列番号：５（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ２－１．２）
ＲＭＳＮＬＮＳ
配列番号：６（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ３－１．２）
ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ
配列番号：７（抗ＣＤ１９ ＶＨ、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：５０（抗ＣＤ１９ ＶＬ１．３、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：８（抗ＣＤ１９ ＶＬ１．２、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：５１（抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ（ＶＬ－ＶＨ）１．３）、ＨＶＲには下線が引かれ、ペプチドリンカーは太字である）
配列番号：５９（抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ（ＶＬ－ＶＨ）１．２）、ＨＶＲには下線が引かれ、ペプチドリンカーは太字である）
ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１のアミノ酸配列を含む。
配列番号：１（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｈ１）
ＳＹＶＭＨ
配列番号：２（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｈ２）
ＷＩＧＹＩＮＰＹＮＤＧＴＫＹ
配列番号：３（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｈ３）
ＧＴＹＹＹＧＳＲＶＦＤＹ
配列番号：４７（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ１－１．３）
ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ
配列番号：４８（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ２－１．３）
ＲＭＳＮＬＮＳ
配列番号：４９（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ３－１．３）
ＭＱＨＬＥＹＰＬＴ
配列番号：４（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ１－１．２）
ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ
配列番号：５（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ２－１．２）
ＲＭＳＮＬＮＳ
配列番号：６（抗ＣＤ１９ ＨＶＲ－Ｌ３－１．２）
ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ
配列番号：７（抗ＣＤ１９ ＶＨ、ＨＶＲには下線が引かれている）
【化5】
【化6】
【化7】
【化8】
【化9】
【0125】
リンカー
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨまたはＶＬ及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカー（ペプチドリンカーなど）を含んでよい。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、２つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨと第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーは、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬと第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーと同じである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨと第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーは、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬと第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーとは異なる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬを連結させるリンカー（ペプチドリンカーなど）を含み、これは抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及びＶＬと抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖとの間のリンカーのいずれかと同じか、またはそれとは異なってよい。
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨまたはＶＬ及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカー（ペプチドリンカーなど）を含んでよい。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、２つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨと第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーは、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬと第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーと同じである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨと第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーは、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬと第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーとは異なる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬを連結させるリンカー（ペプチドリンカーなど）を含み、これは抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及びＶＬと抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖとの間のリンカーのいずれかと同じか、またはそれとは異なってよい。
【0126】
リンカーは、任意の長さのペプチドリンカーであり得る。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、約１アミノ酸～約１０アミノ酸長、約２アミノ酸～約１５アミノ酸長、約３アミノ酸～約１２アミノ酸長、約４アミノ酸～約１０アミノ酸長、約５アミノ酸～約９アミノ酸長、約６アミノ酸～約８アミノ酸長、約１アミノ酸～約２０アミノ酸長、約２１アミノ酸～約３０アミノ酸長、約１アミノ酸～約３０アミノ酸長、約２アミノ酸～約２０アミノ酸長、約１０アミノ酸～約３０アミノ酸長、約２アミノ酸～約１９アミノ酸長、約２アミノ酸～約１８アミノ酸長、約２アミノ酸～約１７アミノ酸長、約２アミノ酸～約１６アミノ酸長、約２アミノ酸～約１０アミノ酸長、約２アミノ酸～約１４アミノ酸長、約２アミノ酸～約１３アミノ酸長、約２アミノ酸～約１２アミノ酸長、約２アミノ酸～約１１アミノ酸長、約２アミノ酸～約９アミノ酸長、約２アミノ酸～約８アミノ酸長、約２アミノ酸～約７アミノ酸長、約２アミノ酸～約６アミノ酸長、約２アミノ酸～約５アミノ酸長、約２アミノ酸～約４アミノ酸長、または約２アミノ酸～約３アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０アミノ酸長のいずれかである。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０アミノ酸長のいずれかである。例えば、いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、約５アミノ酸長である。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーのＮ末端は、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＣ末端に共有結合的に連結され、ペプチドリンカーのＣ末端は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨまたはＶＬのＮ末端に共有結合的に連結される。
【0127】
ペプチドリンカーは、天然に存在する配列または天然に存在しない配列を有し得る。例えば、重鎖のみの抗体のヒンジ領域に由来する配列が、リンカーとして使用され得る。例えば、ＷＯ１９９６／３４１０３を参照のこと。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４ヒンジである。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、変異型ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４ヒンジである。いくつかの実施形態では、リンカーは、柔軟なリンカーである。例示的な柔軟なリンカーとしては、グリシンポリマー（Ｇ）ｎ（配列番号：３１）、グリシン－セリンポリマー（例えば、（ＧＳ）ｎ（配列番号：３２）、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号：３３）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号：３４）、または（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号：３５）を含み、式中、ｎは少なくとも１つの整数である）、グリシン－アラニンポリマー、アラニン－セリンポリマー、及び当該技術分野において既知の他の柔軟なリンカーが挙げられる。グリシン及びグリシン－セリンポリマーは、比較的構造化されていないため、構成要素間の中性テザーとして機能できる場合がある。グリシンは、ファイ－プサイ空間をアラニンよりも大幅に広く利用し、より長い側鎖を有する残基よりもはるかに制限が少ない（Ｓｃｈｅｒａｇａ，Ｒｅｖ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｃｈｅｍ．１１ １７３－１４２（１９９２）を参照のこと）。例示的な柔軟なリンカーとしては、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号：３６）、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（配列番号：３７）、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号：３８）、Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（配列番号：３９）、Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号：４０）、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（配列番号：４１）、Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（配列番号：４２）、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ（配列番号：２０）、Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ（配列番号：２１）、Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号：２２）、Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（配列番号：２９）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号：４３）、ＧＧＧＧＳ（配列番号：４４）などが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨと抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号：４４）である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬと抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号：４４）である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖのＶＨ及びＶＬを連結させるリンカーは、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号：４３）である。当業者は、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の設計は、リンカーが柔軟なリンカー部分に加えて、所望のＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）構造を提供するために、柔軟性の低い構造を付与する１つ以上の部分を含み得るように、全てまたは部分的に柔軟であるリンカーを含み得ると認識することになる。
【0128】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片と抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーは、安定したリンカー（プロテアーゼ、特にＭＭＰによって切断できない）である。
【0129】
いくつかの実施形態では、リンカーは、切断可能なリンカーである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨまたはＶＬと抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）との間のリンカーは、プロテアーゼ基質切断配列、例えば、ＭＭＰ基質切断配列を含む。ＭＭＰによって切断され得る基質配列は、広く研究されている。例えば、ＰＬＧＬＡＧ（配列番号：３０）の配列は、ほとんどのＭＭＰによって切断され得る。いくつかの実施形態では、プロテアーゼ切断部位は、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９、またはそれらの組合せによって認識される。
【0130】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ２－抗ＣＤ３
ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ３－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ４－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ３－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ４－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ３－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ４－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、及びＬ４は、本明細書に記載される任意の可能なリンカー（ペプチドライナーなど）である。Ｌ１～Ｌ４は同じか、または異なり得る。
ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ３－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ４－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ３－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ４－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ１－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ２－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－Ｃ’を含む第１ポリペプチド、及び構造：Ｎ’－抗ＣＤ１９ ＶＬ－Ｌ３－抗ＣＤ１９ ＶＨ－Ｌ４－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－Ｃ’を含む第２ポリペプチドを含む。Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、及びＬ４は、本明細書に記載される任意の可能なリンカー（ペプチドライナーなど）である。Ｌ１～Ｌ４は同じか、または異なり得る。
【0131】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列、または配列番号：５３の配列と少なくとも約８５％（少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、もしくは少なくとも約９９％など）同一のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列、または配列番号：６０の配列と少なくとも約８５％（少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、もしくは少なくとも約９９％など）同一のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５４のアミノ酸配列、または配列番号：５４の配列と少なくとも約８５％（少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、もしくは少なくとも約９９％など）同一のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６１のアミノ酸配列、または配列番号：６１の配列と少なくとも約８５％（少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、もしくは少なくとも約９９％など）同一のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、第１ポリペプチドは、配列番号：５５の配列を含む核酸によってコードされる。いくつかの実施形態では、第２ポリペプチドは、配列番号：５６の配列を含む核酸によってコードされる。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）及びその組成物（医薬組成物など）がさらに提供される。配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）及びその組成物（医薬組成物など）がさらに提供される。配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）及びその組成物（医薬組成物など）がさらに提供される。配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）及びその組成物（医薬組成物など）がさらに提供される。
【0132】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の第１及び／または第２ポリペプチドのＣ末端は、分子間ジスルフィド結合を形成できる共有結合領域ＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）を含む。例えば、いくつかの実施形態では、分子間ジスルフィド結合を形成できる共有結合領域は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端に位置している。いくつかの実施形態では、第１及び／または第２ポリペプチドのＮ末端またはＣ末端は、タンパク質精製のためにヒスチジンタグ（ＨＩＳタグ）を含んでよい。例えば、いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）のＮ末端は、ヒスチジンタグとさらに融合される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及び／またはＣＬのＣ末端は、ヒスチジンタグとさらに融合される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の第１及び／または第２ポリペプチドのＮ末端は、良好な発現のためにシグナルペプチド、例えば、配列番号：２５に示されるシグナルペプチド配列など、または配列番号：２６の核酸配列によってコードされるシグナルペプチドとさらに融合される。配列番号：５３（第１ポリペプチドの抗ＣＤ１９ ＶＬ－抗ＣＤ１９ ＶＨ－ＧＧＧＧＳリンカー－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－ＣＰＰＣＳのアミノ酸配列、リンカーは太字であり、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：５４（第２ポリペプチドの抗ＣＤ１９ ＶＬ－抗ＣＤ１９ ＶＨ－ＧＧＧＧＳリンカー－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－ＣＰＰＣＳのアミノ酸配列、リンカーは太字であり、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：５５（第１ポリペプチドの抗ＣＤ１９ ＶＬ－抗ＣＤ１９ ＶＨ－ＧＧＧＧＳリンカー－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－ＣＰＰＣＳをコードする核酸配列）
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配列番号：５６（第２ポリペプチドの抗ＣＤ１９ ＶＬ－抗ＣＤ１９ ＶＨ－ＧＧＧＧＳリンカー－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－ＣＰＰＣＳをコードする核酸配列）
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配列番号：６０（第１ポリペプチドの抗ＣＤ１９ ＶＬ－抗ＣＤ１９ ＶＨ－ＧＧＧＧＳリンカー－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－ＣＰＰＣＳのアミノ酸配列、リンカーは太字であり、ＨＶＲには下線が引かれている）
配列番号：６１（第２ポリペプチドの抗ＣＤ１９ ＶＬ－抗ＣＤ１９ ＶＨ－ＧＧＧＧＳリンカー－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－ＣＰＰＣＳのアミノ酸配列、リンカーは太字であり、ＨＶＲには下線が引かれている）
【化10】
【化11】
ｇａｔｇｔｔｇｔｇａｔｇａｃｔｃａｇｔｃｔｃｃｃａｇｃａｇｃａｔｃｃｃｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｇｇｃｇａｇｔｃｔｇｔｇｔｃｃａｔｃａｇｃｔｇｃａｇａａｇｃａｇｃａａｇａｇｃｃｔｇｃａｇａａｃｇｔｃａａｃｇｇｃａａｃａｃｃｔａｃｃｔｇｔａｃｔｇｇｔｔｃｃａｇｃａｇｃｇｇｃｃｔｇｇｃｃａｇｔｃｔｃｃｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｃｔａｃｃｇｇａｔｇａｇｃａａｃｃｔｇａａｃａｇｃｇｇｃｇｔｇｃｃｃｇａｔａｇａｔｔｔｔｃｔｇｇｃｔｃｔｇｇｃａｇｃｇｇｃａｃｃｇａｃｔｔｃａｃｃｃｔｇａｇａａｔｃｔｃｃｇｇｃｇｔｇｇａａｃｃｃｇａｇｇａｃｇｔｇｇｇｃｇｔｇｔａｃｔａｃｔｇｔａｔｇｃａｇｃａｃｃｔｇｇａａｔａｃｃｃｃｃｔｇａｃｃｔｔｃｇｇａｇｃｃｇｇｃａｃｃａａｇｃｔｇｇａｇａｔｃａａａｇｇｃｇｇａｇｇｃｇｇｔａｇｔｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｇｔｔｃａｇｇｃｇｇｔｇｇｃｇｇａｔｃｔｃａｇｇｔｇｃａｇｃｔｇｇｔｇｃａｇｔｃｔｇｇｃｃｃｃｇａｇｃｔａａｔｃａａｇｃｃｔｇｇｃｇｇｃａｇｃｇｔｇａａｇａｔｇａｇｃｔｇｃａａｇｇｃｃｔｃｃｇｇｃｔａｃａｃｃｔｔｃａｃｃａｇｃｔａｃｇｔｇａｔｇｃａｃｔｇｇｇｔｇｃｇｃｃａｇａａｇｃｃｔｇｇａｃａｇｇｇｃｃｔｇｇａａｔｇｇａｔｃｇｇｃｔａｃａｔｃａａｃｃｃｃｔａｃａａｃｇａｔｇｇｃａｃｃａａｇｔａｃａａｃｇａｇａａｇｔｔｃａａｇｇｇｃａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｇａｃｃａｇｃｇａｃａａｇａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｃｃｔａｃａｔｇｇａａｃｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃｇｇａｇｃｇａｇｇａｃａｇｃｇｃｃｇｔｇｔａｃｔａｔｔｇｔｇｃｃａｇａｇｇｃａｃｃｔａｃｔａｃｔａｃｇｇｃａｇｃｃｇｇｇｔｇｔｔｃｇａｃｔａｃｔｇｇｇｇａｃａｇｇｇｃａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇｇｔｇｇｃｇｇａｇｇａｔｃｔｇａｇｇｔｇｃａｇｃｔｇｇｔｇｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｔｔｇｇｔａｃａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａｃｃｔｔｔａａｃａｃｃｔａｃｇｃｃａｔｇａａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｇｃａｃｇｃａｔａａｇａａｇｔａａａｔａｔａａｔａａｔｔａｔｇｃａａｃａｔａｔｔａｔｇｃｃｇａｔｔｃａｇｔｇａａａｇａｃｃｇｇｔｔｃａｃｃａｔｃｔｃｃａｇａｇａｃｇａｔｔｃｃａａｇａａｃａｃｇｃｔｇｔａｔｃｔｇｃａａａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｇａｇｃｃｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔａｔａｔｔａｃｔｇｔｇｔｇａｇａｃａｔｇｇｇａａｃｔｔｃｇｇｔａａｔａｇｃｔａｃｇｔｔｔｃｃｔｇｇｔｔｔｇｃｔｔａｃｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃａａｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｔｔｃａｇｃｔａｇｃａｃｃａａｇｇｇｃｃｃａｔｃｃｇｔｃｔｔｃｃｃｃｃｔｇｇｃａｃｃｃｔｃｃｔｃｃａａｇａｇｃａｃｃｔｃｔｇｇｇｇｇｃａｃａｇｃｇｇｃｃｃｔｇｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｇａｃｔａｃｔｔｃｃｃｃｇａａｃｃｇｇｔｇａｃｇｇｔｇｔｃｇｔｇｇａａｃｔｃａｇｇｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｇｃｇｇｃｇｔｇｃａｃａｃｃｔｔｃｃｃｇｇｃｔｇｔｃｃｔａｃａｇｔｃｃｔｃａｇｇａｃｔｃｔａｃｔｃｃｃｔｃａｇｃａｇｃｇｔｇｇｔｇａｃｃｇｔｇｃｃｃｔｃｃａｇｃａｇｃｔｔｇｇｇｃａｃｃｃａｇａｃｃｔａｃａｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇａａｔｃａｃａａｇｃｃｃａｇｃａａｃａｃｃａａｇｇｔｇｇａｃａａｇａａａｇｔｔｇａｇｃｃｃａａａｔｃｔｔｇｔｃｃａｃｃｇｔｇｃｔｃａｔａｇ
配列番号：５６（第２ポリペプチドの抗ＣＤ１９ ＶＬ－抗ＣＤ１９ ＶＨ－ＧＧＧＧＳリンカー－抗ＣＤ３ ＶＬ－ＣＬ－ＣＰＰＣＳをコードする核酸配列）
ｇａｔｇｔｔｇｔｇａｔｇａｃｔｃａｇｔｃｔｃｃｃａｇｃａｇｃａｔｃｃｃｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｇｇｃｇａｇｔｃｔｇｔｇｔｃｃａｔｃａｇｃｔｇｃａｇａａｇｃａｇｃａａｇａｇｃｃｔｇｃａｇａａｃｇｔｃａａｃｇｇｃａａｃａｃｃｔａｃｃｔｇｔａｃｔｇｇｔｔｃｃａｇｃａｇｃｇｇｃｃｔｇｇｃｃａｇｔｃｔｃｃｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｃｔａｃｃｇｇａｔｇａｇｃａａｃｃｔｇａａｃａｇｃｇｇｃｇｔｇｃｃｃｇａｔａｇａｔｔｔｔｃｔｇｇｃｔｃｔｇｇｃａｇｃｇｇｃａｃｃｇａｃｔｔｃａｃｃｃｔｇａｇａａｔｃｔｃｃｇｇｃｇｔｇｇａａｃｃｃｇａｇｇａｃｇｔｇｇｇｃｇｔｇｔａｃｔａｃｔｇｔａｔｇｃａｇｃａｃｃｔｇｇａａｔａｃｃｃｃｃｔｇａｃｃｔｔｃｇｇａｇｃｃｇｇｃａｃｃａａｇｃｔｇｇａｇａｔｃａａａｇｇｃｇｇａｇｇｃｇｇｔａｇｔｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｇｔｔｃａｇｇｃｇｇｔｇｇｃｇｇａｔｃｔｃａｇｇｔｇｃａｇｃｔｇｇｔｇｃａｇｔｃｔｇｇｃｃｃｃｇａｇｃｔａａｔｃａａｇｃｃｔｇｇｃｇｇｃａｇｃｇｔｇａａｇａｔｇａｇｃｔｇｃａａｇｇｃｃｔｃｃｇｇｃｔａｃａｃｃｔｔｃａｃｃａｇｃｔａｃｇｔｇａｔｇｃａｃｔｇｇｇｔｇｃｇｃｃａｇａａｇｃｃｔｇｇａｃａｇｇｇｃｃｔｇｇａａｔｇｇａｔｃｇｇｃｔａｃａｔｃａａｃｃｃｃｔａｃａａｃｇａｔｇｇｃａｃｃａａｇｔａｃａａｃｇａｇａａｇｔｔｃａａｇｇｇｃａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｇａｃｃａｇｃｇａｃａａｇａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｃｃｔａｃａｔｇｇａａｃｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃｇｇａｇｃｇａｇｇａｃａｇｃｇｃｃｇｔｇｔａｃｔａｔｔｇｔｇｃｃａｇａｇｇｃａｃｃｔａｃｔａｃｔａｃｇｇｃａｇｃｃｇｇｇｔｇｔｔｃｇａｃｔａｃｔｇｇｇｇａｃａｇｇｇｃａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇｇｔｇｇｃｇｇａｇｇａｔｃｔｃａｇｇｃｔｇｔｇｇｔｇａｃｔｃａｇｇａｇｃｃｃｔｃａｃｔｇａｃｔｇｔｇｔｃｃｃｃａｇｇａｇｇｇａｃａｇｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃｔｇｔｃｇｃｔｃａａｇｔａｃｔｇｇｇｇｃｔｇｔｔａｃａａｃｔａｇｔａａｃｔａｔｇｃｃａａｃｔｇｇｇｔｃｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇａｃａａｇｃａｃｃｃａｇｇｇｇｔｃｔｇａｔｔｇｇｔｇｇｔａｃｃａａｃａａｇｃｇａｇｃｔｃｃａｇｇｔａｃｃｃｃｔｇｃｃｃｇｇｔｔｃｔｃａｇｇｃｔｃｃｃｔｃｃｔｔｇｇｇｇｇｃａａａｇｃｔｇｃｃｃｔｇａｃａｃｔｇｔｃａｇｇｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｇａｇｇａｃｇａｇｇｃｔｇａｇｔａｔｔａｃｔｇｃｇｃｔｃｔａｔｇｇｔａｃａｇｃａａｃｃｔｃｔｇｇｇｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｃｔｇａｃｃｇｔｃｃｔａｇｇｃｃａａｃｃｇａａａｇｃｇｇｃｇｃｃｃｔｃｇｇｔｃａｃｔｃｔｇｔｔｃｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｃｔｇａｇｇａｇｃｔｔｃａａｇｃｃａａｃａａｇｇｃｃａｃａｃｔｇｇｔｇｔｇｔｃｔｃａｔａａｇｔｇａｃｔｔｃｔａｃｃｃｇｇｇａｇｃｃｇｔｇａｃａｇｔｇｇｃｃｔｇｇａａｇｇｃａｇａｔａｇｃａｇｃｃｃｃｇｔｃａａｇｇｃｇｇｇａｇｔｇｇａｇａｃｃａｃｃａｃａｃｃｃｔｃｃａａａｃａａａｇｃａａｃａａｃａａｇｔａｃｇｃｇｇｃｃａｇｃａｇｃｔａｔｃｔｇａｇｃｃｔｇａｃｇｃｃｔｇａｇｃａｇｔｇｇａａｇｔｃｃｃａｃａｇａａｇｃｔａｃａｇｃｔｇｃｃａｇｇｔｃａｃｇｃａｔｇａａｇｇｇａｇｃａｃｃｇｔｇｇａｇａａｇａｃａｇｔｇｇｃｃｃｃｔａｃａｇａａｔｇｔｃｃａｃｃｇｔｇｃｔｃａｔａｇ
配列番号：６０（第１ポリペプチドの抗ＣＤ１９ ＶＬ－抗ＣＤ１９ ＶＨ－ＧＧＧＧＳリンカー－抗ＣＤ３ ＶＨ－ＣＨ１－ＣＰＰＣＳのアミノ酸配列、リンカーは太字であり、ＨＶＲには下線が引かれている）
【化12】
【化13】
【0133】
ＩＩＩ．調製方法
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、当該技術分野において既知のタンパク質発現及び精製方法のいずれかによって調製されてよい。例えば、実施例１を参照のこと。ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）をコードするＤＮＡ配列は、完全に合成され得る。そのような配列を得た後、それを好適な発現ベクターにクローニングし、次いで好適な宿主細胞にトランスフェクトする。トランスフェクト宿主細胞を培養し、上清を回収して精製し、本発明のＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を得る。
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、当該技術分野において既知のタンパク質発現及び精製方法のいずれかによって調製されてよい。例えば、実施例１を参照のこと。ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）をコードするＤＮＡ配列は、完全に合成され得る。そのような配列を得た後、それを好適な発現ベクターにクローニングし、次いで好適な宿主細胞にトランスフェクトする。トランスフェクト宿主細胞を培養し、上清を回収して精製し、本発明のＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を得る。
【0134】
いくつかの実施形態では、本出願は、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれか１つのポリペプチドのうち１つ以上をコードする単離核酸を提供する。いくつかの実施形態では、単離核酸は、配列番号：５５または５６の核酸配列を含む。単離核酸は、ＤＮＡまたはＲＮＡであってよい。
【0135】
いくつかの実施形態では、単離核酸は、ベクター、例えば、発現ベクター、ウイルスベクター、またはクローニングベクターなどの中に挿入される。核酸発現のために、ベクターを宿主細胞中に導入し、宿主細胞内での核酸の発現を可能にしてよい。発現ベクターは、プロモーター配列、転写開始配列、エンハンサー配列、選択可能マーカー、及びシグナル配列をこれらに限定されることなく含む、発現を制御するための様々なエレメントを含有してよい。これらのエレメントは、当業者によって適宜選択されてよい。例えば、プロモーター配列は、ベクター中のポリヌクレオチドの転写を促進するために選択されてよい。好適なプロモーター配列としては、Ｔ７プロモーター、Ｔ３プロモーター、ＳＰ６プロモーター、ベータ－アクチンプロモーター、ＥＦ１ａプロモーター、ＣＭＶプロモーター、及びＳＶ４０プロモーターが挙げられるが、これらに限定されない。エンハンサー配列は、核酸の転写を増強するために選択されてよい。選択可能マーカーは、ベクターが挿入されている宿主細胞を、挿入されていない宿主細胞から選択することを可能にするために選択されてよく、例えば、選択可能マーカーは、抗生物質耐性を付与する遺伝子であってよい。シグナル配列は、発現ポリペプチドを宿主細胞の外側に輸送できるように選択されてよい。いくつかの実施形態では、単離核酸は、シグナルペプチドをコードする核酸配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号：２５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、シグナルペプチドをコードする核酸配列は、配列番号：２６の核酸配列を含む。
配列番号：２５（シグナルペプチドのアミノ酸配列）
ＭＥＷＳＷＶＦＬＦＦＬＳＶＴＴＧＶＨＳ
配列番号：２６（シグナルペプチドをコードする核酸）
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配列番号：２５（シグナルペプチドのアミノ酸配列）
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配列番号：２６（シグナルペプチドをコードする核酸）
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【0136】
いくつかの実施形態では、上に記載されるベクターを含有する単離宿主細胞が提供される。ベクターを含有する宿主細胞は、単離核酸の発現またはクローニングに有用な場合がある。好適な宿主細胞としては、原核細胞、真菌細胞、酵母細胞、または高等真核細胞、例えば、哺乳動物細胞などが挙げられ得るが、これらに限定されない。Ｅ．ｃｏｌｉなどの原核細胞中における抗体及び抗原結合断片の発現は、当該技術分野において十分に確立されている。概説については、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ａ．ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：５４５－５５１（１９９１）を参照のこと。培養真核細胞中における発現もまた、抗体またはその抗原結合断片を産生するための選択肢として当業者に利用可能であり、最近の概説、例えば、Ｒｅｆ，Ｍ．Ｅ．（１９９３）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ．４：５７３－５７６、Ｔｒｉｌｌ Ｊ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ ６：５５３－５６０を参照のこと。高等真核細胞、特に多細胞生物に由来するその細胞は、グリコシル化ポリペプチドの発現に使用され得る。好適な高等真核細胞としては、無脊椎動物細胞及び昆虫細胞、ならびに脊椎動物細胞が挙げられるが、これらに限定されない。
【0137】
ベクターは、当該技術分野において既知の任意の好適な方法、例えば、ＤＥＡＥ－デキストラン媒介送達、リン酸カルシウム沈降法、カチオン性脂質媒介送達、リポソーム媒介トランスフェクション、エレクトロポレーション、微粒子銃、受容体媒介遺伝子送達、ポリリジン、ヒストン、キトサン、及びペプチドによって媒介される送達を含むが、これらに限定されない方法を使用して宿主細胞中に導入され得る。目的のベクターを発現するための細胞のトランスフェクション及び形質転換に関する標準的な方法は、当該技術分野において周知である。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、第１ポリペプチドをコードする第１ベクター及び第２ポリペプチドをコードする第２ベクターを含む。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドをコードする単離核酸を含む単一のベクターを含む。
【0138】
いくつかの実施形態では、本出願は、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれかを発現する方法を提供し、本方法は、ベクターを含有する単離宿主細胞を培養すること、及び細胞培養物からＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を回収することを含む。単離宿主細胞は、ベクターに挿入された単離核酸の発現を可能にする条件下で培養される。ポリヌクレオチドの発現に好適な条件としては、好適な培地、培養培地中の宿主細胞の好適な密度、必要な栄養素の存在、補助因子の存在、好適な温度及び湿度、ならびに微生物夾雑物が存在しないことを挙げてよいが、これらに限定されない。当業者は、発現を目的として適宜好適な条件を選択することができる。
【0139】
いくつかの実施形態では、宿主細胞中で発現されるポリペプチドは、二量体を形成するため、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）を産生し得る。いくつかの実施形態では、宿主細胞中で発現されるポリペプチドは、ホモ二量体であるポリペプチド複合体を形成し得る。いくつかの実施形態では、宿主細胞は第１ポリヌクレオチド及び第２ポリヌクレオチドを発現し、第１ポリヌクレオチド及び第２ポリヌクレオチドは、ヘテロ二量体であるポリペプチド複合体を形成し得る。
【0140】
いくつかの実施形態では、ポリペプチド複合体（ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰまたはＢＳＡＰなど）は、宿主細胞内で形成されてよい。例えば、二量体は、適切な酵素及び／または補因子の補助によって宿主細胞内で形成されてよい。いくつかの実施形態では、ポリペプチド複合体は、細胞外に分泌されてよい。いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドは、宿主細胞外に分泌され、宿主細胞の外側で二量体（ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰまたはＢＳＡＰなど）を形成してよい。
【0141】
いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドは、別々に発現され、好適な条件下で二量体化してＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の形成が可能であってよい。例えば、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドは、好適な緩衝液中で組み合わされ、第１タンパク質モノマー及び第２タンパク質モノマーが疎水性相互作用などの適切な相互作用によって二量体化することを可能にする場合がある。いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドは、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドの二量体化を促進し得る酵素及び／または補因子を含有する好適な緩衝液中で組み合わされてよい。いくつかの実施形態では、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドは、好適なビヒクル中で組み合わされ、好適な試薬及び／または触媒の存在下でそれらが互いに反応することを可能にする場合がある。
【0142】
発現ポリペプチド（複数可）及び／またはポリペプチド複合体は、任意の好適な方法を使用して収集され得る。ポリペプチド（複数可）及び／またはポリペプチド複合体は、細胞内のペリプラズム空間で発現され得るか、または細胞外側の培地に分泌され得る。ポリペプチド及び／またはポリペプチド複合体が、細胞内で発現される場合、ポリペプチド及び／またはポリペプチド複合体を含有する宿主細胞が溶解される場合があり、ポリペプチド及び／またはポリペプチド複合体は、遠心分離または限外濾過によって望ましくない残屑を除去することによって溶解物から単離されてよい。ポリペプチド及び／またはポリペプチド複合体が、Ｅ．ｃｏｌｉのペリプラズム空間に分泌される場合、細胞ペーストを、薬剤、例えば、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、及びフェニルメチルスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）などの存在下で約３０分間解凍してよく、細胞残屑が遠心分離によって除去され得る（Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：１６３－１６７（１９９２））。ポリペプチド及び／またはポリペプチド複合体が、培地中に分泌される場合、細胞培養物の上清は、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、ＡｍｉｎｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外濾過ユニットを使用して収集及び濃縮されてよい。プロテアーゼ阻害剤及び／または抗生物質が収集及び濃縮ステップ中に含まれてよく、タンパク質分解及び／または汚染微生物の成長を阻害する。
【0143】
発現ポリペプチド（複数可）及び／またはポリペプチド複合体は、好適な方法、例えば、限定されることなく、アフィニティークロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、イオン交換カラム上でのイオン交換分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカ上でのクロマトグラフィー、ｈｅｐａｒｉｎ ｓｅｐｈａｒｏｓｅ上でのクロマトグラフィー、陰イオンまたは陽イオン交換樹脂（ポリアスパラギン酸カラムなど）上でのクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈殿などによってさらに精製され得る（概説については、Ｂｏｎｎｅｒ，Ｐ．Ｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ．により出版，２００７、Ｊａｎｓｏｎ，Ｊ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，ｈｉｇｈ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨにより出版，１９９８を参照のこと）。
【0144】
いくつかの実施形態では、ポリペプチド及び／またはポリペプチド二量体複合体は、アフィニティークロマトグラフィーによって精製され得る。いくつかの実施形態では、プロテインＡクロマトグラフィーまたはプロテインＡ／Ｇ（プロテインＡ及びプロテインＧの融合タンパク質）クロマトグラフィーは、抗体ＣＨ２ドメイン及び／またはＣＨ３ドメインに由来する構成要素を含むポリペプチド及び／またはポリペプチド複合体の精製に有用であり得る（Ｌｉｎｄｍａｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．６２：１－１３（１９８３））、Ｚｅｔｔｌｉｔ，Ｋ．Ａ．，Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｐａｒｔ Ｖ，５３１－５３５，２０１０）。いくつかの実施形態では、プロテインＧクロマトグラフィーは、ＩｇＧγ３重鎖を含むポリペプチド及び／またはポリペプチド複合体の精製に有用であり得る（Ｇｕｓｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．５：１５６７ １５７５（１９８６））。いくつかの実施形態では、プロテインＬクロマトグラフィーは、κ軽鎖を含むポリペプチド及び／またはポリペプチド複合体の精製に有用であり得る（Ｓｕｄｈｉｒ，Ｐ．，Ａｎｔｉｇｅｎ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｃｈａｐｔｅｒ ２６，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓにより出版，１９９５、Ｎｉｌｓｏｎ，Ｂ．Ｈ．Ｋ．ａｔ ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６７，２２３４－２２３９（１９９２））。親和性リガンドが結合されるマトリックスは、ほとんどの場合にアガロースであるが、他のマトリックスも利用可能である。機械的に安定したマトリックス、例えば、多孔性ガラス粉体またはポリ（スチレンジビニル）ベンゼンなどは、アガロースを用いて達成され得る場合よりも、より速い流速及びより短い処理時間を可能にする。ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）が追加のＣＨ３ドメインを含む場合、Ｂａｋｅｒｂｏｎｄ ＡＢＸ樹脂（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，Ｎ．Ｊ．）が精製に有用である。
【0145】
ＩＶ．医薬組成物、単位投与量、製品、及びキット
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれか１つ、及び場合により薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が、本出願によってさらに提供される。
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれか１つ、及び場合により薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が、本出願によってさらに提供される。
【0146】
医薬組成物は、本明細書に記載される様々な投与方法、例えば、全身投与または局所投与を含む方法に好適であってよい。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、静脈内投与用に製剤化される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、皮下投与用に製剤化される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、腫瘍部位への局所投与用に製剤化される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、腫瘍内注射用に製剤化される。
【0147】
「担体」は、本明細書で使用される場合、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤を含み、これらは用いられる投与量及び濃度でそれらに曝露されている細胞または哺乳動物にとって非毒性である。多くの場合、生理学的に許容される担体は、ｐＨ緩衝水溶液である。許容される担体、賦形剤、または安定剤は、用いられる投与量及び濃度でレシピエントにとって非毒性であり、これらとしては、緩衝液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸など、アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤、防腐剤（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチルもしくはベンジルアルコール、アルキルパラベン、例えば、メチルもしくはプロピルパラベンなど、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール、及びｍ－クレゾールなど）、低分子量（約１０残基未満の）ポリペプチド、タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなど、親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドンなど、アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリジンなど、グルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む単糖類、二糖類、及び他の炭水化物、キレート剤、例えば、ＥＤＴＡなど、糖、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトールなど、塩形成対イオン、例えば、ナトリウムなど、金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）、及び／または非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（登録商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などが挙げられる。
【0148】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、約４．５～約９．０の範囲のｐＨ、例えば、約５．０～約８．０、約６．５～約７．５、または約６．５～約７．０のいずれか１つのｐＨ範囲を含むｐＨを有するように製剤化される。いくつかの実施形態では、医薬組成物はまた、グリセロールなどの好適な張度調節剤の添加によって、血液と等張になるように作製され得る。
【0149】
インビボ投与に使用される医薬組成物は、一般に滅菌、実質的に等張として、米国食品医薬品局の全ての医薬品及び医薬部外品の製造管理及び品質管理の基準（ＧＭＰ）規制を完全に遵守して製剤化される。滅菌性は、滅菌濾過膜に通して濾過することによって容易に達成される。いくつかの実施形態では、組成物は病原体を含まない。注射用に、医薬組成物は、溶液の形態、例えば、生理学的に適合する緩衝液、例えば、ハンクス液またはリンゲル液などの中にあり得る。加えて、医薬組成物は固体形態であり、使用の直前に再溶解または懸濁され得る。凍結乾燥組成物も含まれる。
【0150】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、静脈内、腹腔内、または硝子体内注射に適した医薬組成物として日常的な手順に従って製剤化される。典型的には、注射用組成物は、滅菌等張水性緩衝液中の溶液である。必要に応じて、組成物はまた、可溶化剤及び注射部位の痛みを和らげるためにリグノカインなどの局所麻酔薬も含んでよい。一般に、成分は別個に、または単位剤形中で互いに混合させるかのいずれかで、例えば、活性剤の量を示すアンプルまたはサシェなどの密封された密閉容器中の乾燥凍結乾燥粉末または無水濃縮物として供給される。組成物が注入によって投与される場合、組成物は医薬グレードの滅菌水または生理食塩水を含有する注入ボトルを用いて調剤され得る。組成物が注射によって投与される場合、注射用滅菌水または生理食塩水のアンプルが、投与前に成分を混合できるように提供され得る。
【0151】
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、ヒトへの投与に好適である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、げっ歯類（例えば、マウス、ラット）または非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）への投与に好適である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、単回使用バイアル、例えば、単回使用密封バイアルなどの中に含有される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、複数回使用バイアル中に含有される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、容器中にまとめて含有される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は凍結保存される。
【0152】
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）、またはその組成物（医薬組成物など）の単位剤形もまた提供される。「単位剤形」という用語は、個体への単一投与量として好適な物理的に個別の単位を指し、各単位が、好適な医薬担体、希釈剤、または賦形剤と関連して、所望の治療効果をもたらすように算出された所定量の活性物質を含有する。これらの単位剤形は、単一または複数の単位投与量で好適な包装内に保存され得、さらに滅菌及び密封されてもよい。
【0153】
本出願は、本明細書に記載される組成物（医薬組成物など）を好適な包装内に含む製品をさらに提供する。本明細書に記載される組成物（医薬組成物など）の好適な包装は、当該技術分野において既知であり、これらとしては、例えば、バイアル（密封バイアルなど）、容器、アンプル、ボトル、ジャー、軟包装（例えば、密封Ｍｙｌａｒまたはプラスチックバッグ）などが挙げられる。これらの製品は、さらに滅菌及び／または密封されてよい。
【0154】
本出願は、本明細書に記載される組成物（医薬組成物など）を含むキットも提供し、本明細書に記載される使用などの、組成物を使用する方法に関する説明書（複数可）をさらに含んでよい。本明細書に記載されるキットは、商業的及び使用者の観点から望ましい他の材料、例えば、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、シリンジ、及び本明細書に記載されるいずれかの方法を実施するための説明書を含む添付文書を含む材料をさらに含んでよい。
【0155】
Ｖ．がんの処置方法
本出願の一態様は、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法を提供し、本方法は、有効量の本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれか、またはその組成物（医薬組成物など）を個体に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。
本出願の一態様は、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法を提供し、本方法は、有効量の本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）のいずれか、またはその組成物（医薬組成物など）を個体に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。
【0156】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医
薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医
薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
【0157】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいず
れかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
れかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
【0158】
いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、２つよりも多い（３つ以上などの）エピトープに特異的に結合する。例えば、いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合される第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含み、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは三重特異性である。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、二重特異性（例えば、ＢＳＡＰ）及び二価である。例えば、いくつかの実施形態では、二価及び二重特異性ＭＳＡＰ（またはＢＳＡＰ）は、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨまたはＶＬのいずれかのＮ末端に融合される１つの抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、二重特異性（例えば、ＢＳＡＰ）及び三価である。例えば、いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合される第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、及び抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を含み、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列及び／または構造を有するが、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。
【0159】
したがって、いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ
ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、同じアミノ酸配列、例えば、配列番号：５１または５９などを有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５７のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、同じアミノ酸配列、例えば、配列番号：５１または５９などを有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５７のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
【0160】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び／または第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長
する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長
する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
【0161】
いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、２つの抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、２つの抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは両方とも、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。
【0162】
したがって、いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結され、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖであって、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合され、第１及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが両方とも、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
【0163】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含み、第１ポリペプチドが配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を処置する方法が提供され、本方法は、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含み、第１ポリペプチドが配列番号：５７のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるがんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
【0164】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん細胞（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を死滅させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん細胞（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を死滅させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん細胞（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を死滅させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）によって媒介される腫瘍細胞死率は、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％のいずれか、またはそれを超える。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）によって媒介される腫瘍細胞死率は、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％のいずれか、またはそれを超える。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0165】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん細胞（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）の増殖を阻害する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん細胞（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）の増殖を阻害する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん細胞（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）の増殖を阻害する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、がん細胞増殖率は、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）の存在下において少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％のいずれか、またはそれを超えて減少する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９
ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん細胞（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）の増殖を阻害する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん細胞（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）の増殖を阻害する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、がん細胞増殖率は、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）の存在下において少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％のいずれか、またはそれを超えて減少する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９
ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0166】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ
ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）方法があり、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ
ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）方法があり、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ
ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0167】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の腫瘍サイズを減少させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の腫瘍サイズを減少させる方法があり、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の腫瘍サイズを減少させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、腫瘍サイズは、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）の存在下において少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0168】
いくつかの実施形態では、がん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を有する個体（ヒトなど）の１つ以上の症状を軽減させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、がん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を有する個体（ヒトなど）の１つ以上の症状を軽減させる方法があり、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、がん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を有する個体（ヒトなど）の１つ以上の症状を軽減させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0169】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の既存の腫瘍転移（リンパ節への転移など）を減少させる（根絶するなどの）方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の既存の腫瘍転移（リンパ節への転移など）を減少させる（根絶するなどの）方法があり、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の既存の腫瘍転移（リンパ節への転移など）を減少させる（根絶するなどの）方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）は、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）の存在下において少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0170】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の既存の腫瘍転移（リンパ節への転移など）の発生率または負荷を減少させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の既存の腫瘍転移（リンパ節への転移など）の発生率または負荷を減少させる方法があり、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）の既存の腫瘍転移（リンパ節への転移など）の発生率または負荷を減少させる方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0171】
いくつかの実施形態では、がん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を有する個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、がん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を有する個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法があり、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、がん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）を有する個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、本方法は、個体の生存期間を少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、または２４か月のいずれかで延長する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0172】
いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）の疾患進行までの時間を延長する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰ、またはその医薬組成物など）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）の疾患進行までの時間を延長する方法があり、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰ、またはその医薬組成物など）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のがん（例えば、ＤＬＢＣＬまたはＡＬＬ）の疾患進行までの時間を延長する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰ、またはその医薬組成物など）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なるアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、本方法は、疾患進行までの時間を少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長する。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖは、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0173】
本明細書で提供される方法は、アジュバント設定で実施されてよい。いくつかの実施形態では、本方法はネオアジュバント設定で実施される、すなわち、本方法は一次／根治治療前に実施されてよい。いくつかの実施形態では、本方法は、これまでに処置を受けたことがある個体（ヒトなど）を処置するために使用される。本明細書で提供される処置方法のいずれかが、これまでに処置を受けたことがない個体（ヒトなど）を処置するために使用されてよい。いくつかの実施形態では、本方法は、第１選択療法として使用される。いくつかの実施形態では、本方法は、第２選択療法として使用される。
【0174】
本明細書に記載される方法は、固形がん及び液状がんの両方を含む、様々ながんの処置に好適である。本方法は、初期段階のがん、非転移性がん、原発性がん、進行がん、局所進行がん、転移がん、または寛解期のがんを含む、全ての段階のがんに適用可能である。本明細書に記載される方法は、第１療法、第２療法、第３療法、または当該技術分野において既知の他の種類のがん療法、例えば、化学療法、外科手術、放射線、遺伝子治療、免疫療法、骨髄移植、幹細胞移植、標的療法、凍結療法、超音波療法、光力学療法、ラジオ波焼灼療法などとの併用療法としてアジュバント設定またはネオアジュバント設定で使用されてよい。いくつかの実施形態では、がんは、以前の療法に抵抗性を示している。
【0175】
本発明の方法によって処置される可能性がある固形がんの例としては、膠芽腫、非小細胞肺癌、非小細胞肺癌以外の肺癌、乳癌、前立腺癌、膵臓癌、肝臓癌、結腸癌、上皮癌、胃癌、脾臓癌、皮膚癌、膠芽腫以外の脳癌、腎臓癌、甲状腺癌などが挙げられるが、これらに限定されない。
【0176】
本発明の方法によって処置される可能性がある非固形がんの例としては、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、がんはＤＬＢＣＬまたはＢ－ＡＬＬである。
【0177】
いくつかの実施形態では、本方法は、がん細胞の表面上でＣＤ１９を過剰発現するがんを処置するのに好適である。いくつかの実施形態では、個体のがん細胞は、正常細胞と比較して少なくとも約２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、２００倍、５００倍、１０００倍超のいずれか、またはそれを超える倍数でＣＤ１９を発現する。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９陽性がんは、白血病またはリンパ腫である。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９陽性がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。
【0178】
したがって、いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のＣＤ１９陽性がん（白血病またはリンパ腫など）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ
ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のＣＤ１９陽性がん（白血病またはリンパ腫など）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のＣＤ１９陽性がん（白血病またはリンパ腫など）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９陽性がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ１９陽性がんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のＣＤ１９陽性がん（白血病またはリンパ腫など）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させるリンカーであって、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合されているリンカー。いくつかの実施形態では、個体（ヒトなど）のＣＤ１９陽性がん（白血病またはリンパ腫など）を処置する方法が提供され、本方法は、以下を含む有効量のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）を個体に投与することを含む：Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、（ａ）Ｉｇ ＶＨ及びＩｇ ＣＨ１、ならびに（ｂ）Ｉｇ ＶＬ及びＩｇ ＣＬを含み、場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片、ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）であって、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合され、第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）が、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合される、第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）、ならびにＩＩＩ．場合により、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨ及び第１抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第１リンカー、ならびに抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬ及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）を連結させる第２リンカー。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、同じＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、異なるＣＤ１９エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、配列中で同一である。いくつかの実施形態では、第１及び第２リンカーは、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片は、ＣＤ３εのＮ末端（例えば、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープ）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨは、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬは、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬは、約１～約５個のジスルフィド結合（例えば、２個のジスルフィド結合）によって連結されている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＨ１は、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＣＬは、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３
Ｆａｂ断片のＣＨ１及びＣＬのＣ末端は各々、分子間ジスルフィド結合を形成できるＣＰＰＣ（配列番号：４５）またはＣＰＰＣＳ（配列番号：４６）の共有結合配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含むＶＨ、及び／または配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片（例えば、ｓｃＦｖ）は、配列番号：７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／または配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１９抗原結合断片は、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個（例えば、約２～約１５個）のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される（例えば、配列番号：４４）。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５８のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、配列番号：５７のアミノ酸配列を含む第１ポリペプチド、及び配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその組成物（医薬組成物など）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、本方法は、サイトカインストームを誘導しない。いくつかの実施形態では、ＣＤ１９陽性がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ１９陽性がんを処置する方法は、以下の生物活性のうち１つ以上を有する：（１）がん細胞を死滅させる、（２）がん細胞の増殖を阻害する、（３）末梢Ｔ細胞の再分布を誘導する（例えば、ＣＤ１９を発現する組織または腫瘍にＴ細胞を動員する）、（４）腫瘍サイズを減少させる、（５）がんを有する個体の１つ以上の症状を軽減させる、（６）腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する、（７）生存期間を延長する、（８）がんが進行するまでの時間を延長する、及び（９）がんの再発可能性を予防、阻害、または減少させる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがん細胞を死滅させる方法は、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはそれを超えるいずれかの腫瘍細胞死率を達成し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍サイズを減少させる方法は、腫瘍サイズを少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）減少させ得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される腫瘍転移（例えば、リンパ節への転移）を阻害する方法は、転移を少なくとも約１０％（例えば、少なくとも約２０％、３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかを含む）阻害し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介される個体（ヒトなど）の生存期間を延長する方法は、個体の生存期間を、少なくとも１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１８か月、もしくは２４か月のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物によって媒介されるがんが進行するまでの時間を延長する方法は、がんが進行するまでの時間を、少なくとも１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、もしくは１２週間のいずれか、またはそれを超えて延長し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物は、エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞）を活性化することによって、対象の免疫応答または機能を増加、増強、または刺激し得る。いくつかの実施形態では、個体のＣＤ４及び／またはＣＤ８ Ｔ細胞は、プライミング、活性化、増殖、サイトカイン放出及び／または細胞溶解活性が、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）またはその医薬組成物の投与前と比較して増加または増強している。
【0179】
本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、もしくはその医薬組成物）（またはその医薬組成物）の例示的な投与経路としては、経口、静脈内、腔内、腫瘍内、動脈内、筋肉内、皮下、非経口、経粘膜、経皮、点眼、局所、腹腔内、頭蓋内、胸膜内、及び表皮経路、またはがん細胞を含有することで知られているリンパ腺、体腔、臓器もしくは組織に送達される経路が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内投与される。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、注入によって投与される。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、皮下投与される。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰは、注射によって投与される。
【0180】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、静脈内注入によって投与される。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、約２４時間、２０時間、１５時間、１０時間、８時間、６時間、３時間、２時間、１時間、３０分以下のいずれか、またはそれ未満の時間にわたって個体に注入される。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、約３０分～約１時間、約１時間～約２時間、約２時間～約４時間、約４時間～約６時間、約６時間～約８時間、約８時間～約１０時間、約１０時間～約１２時間、約１２時間～約１８時間、約１８時間～約２４時間、約３０分～約２時間、約２時間～約５時間、約５時間～約１０時間、約１０時間～約２０時間、約３０分～約１０時間、または約３０分～約２０時間のいずれか１つの期間にわたって個体に注入される。ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、任意の好適な速度で個体に注入されてよい。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）は、約０．０１μｇ／ｋｇ／時、０．０２μｇ／ｋｇ／時、０．０５μｇ／ｋｇ／時、０．１μｇ／ｋｇ／時、０．２μｇ／ｋｇ／時、０．５μｇ／ｋｇ／時、０．６μｇ／ｋｇ／時、０．７μｇ／ｋｇ／時、０．８μｇ／ｋｇ／時、０．９μｇ／ｋｇ／時、１μｇ／ｋｇ／時、１．５μｇ／ｋｇ／時、２μｇ／ｋｇ／時、３μｇ／ｋｇ／時、４μｇ／ｋｇ／時、５μｇ／ｋｇ／時、１０μｇ／ｋｇ／時、１５μｇ／ｋｇ／時、２０μｇ／ｋｇ／時、２５μｇ／ｋｇ／時、５０μｇ／ｋｇ／時、７５μｇ／ｋｇ／時、１００μｇ／ｋｇ／時超のいずれか、またはそれを超える速度で注入されてよい。
【0181】
個体（ヒトなど）に投与されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）の投薬レジメンは、特定のＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）組成物（医薬組成物など）、投与方法、ならびに処置されているがんの特定の型及び段階によって異なる場合がある。いくつかの実施形態では、ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）のその有効量は、組成物が個体に投与される場合に、毒性効果（すなわち、臨床的に許容されるレベルの毒性を超える効果）を誘導するレベルを下回るか、または潜在的な副作用が制御もしくは忍容され得るレベルである。
【0182】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）の有効量は、中枢神経系に有害作用を誘導するレベルを下回る。例えば、抗体療法で観察される有害作用は、注入関連副作用、例えば、サイトカイン放出症候群（「ＣＲＳ」）などの発症であり、その重症例は「サイトカインストーム」として知られている。「サイトカインストーム」が誘導されると、健康な個体の免疫系が活性化され、大量の炎症性サイトカイン、例えば、ＩＮＦ－γ、ＣＣＬ２、ＩＬ－１０、ＩＬ－６などを放出する。これは、典型的にはサイトカインと免疫細胞との間の正のフィードバックループからなる致死的免疫反応を引き起こす可能性があり、様々なサイトカインのレベルが高く上昇する。ＣＲＳに関連すると記載されている他の有害な副作用は、倦怠感、嘔吐、頻拍、高血圧、背痛であるが、中枢神経系反応（ＣＮＳ反応）、例えば、発作、脳症、脳浮腫、無菌性髄膜炎、及び頭痛などでもある。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、サイトカインストームなどのサイトカイン放出症候群を誘導しない用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＴＮＦ、及びＩＮＦ－γからなる群から選択される１つ以上のサイトカインの多量放出を誘導しない用量で投与される。いくつかの実施形態では、サイトカインの多量放出は、少なくとも約１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１８時間、２４時間のいずれか、またはそれを超える時間にわたるサイトカインの持続放出である。いくつかの実施形態では、サイトカインの多量放出は、少なくとも約１、５、１０、２０、５０、１００、２００、５００、１０００ｐｇ／ｍＬのいずれか、またはそれを超える濃度のサイトカインの血清レベルまたは血中レベルである。いかなる理論にも束縛されることなく、本明細書に記載されるＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど）（またはその医薬組成物）は、Ｔ細胞を動員して活性化するために、標的腫瘍細胞上のＣＤ１９への結合を必要とする。そのような要件は、望ましくないサイトカインストーム、及び所望の標的腫瘍細胞が存在しない場合に望ましくないＴ細胞の活性化を大幅に減少させ得る。
【0183】
いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、約０．０１μｇ／ｋｇ、０．０５μｇ／ｋｇ、０．１μｇ／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、２μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、１５μｇ／ｋｇ、２０μｇ／ｋｇ、２５μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１５０μｇ／ｋｇ、２００μｇ／ｋｇ、２５０μｇ／ｋｇ、３００μｇ／ｋｇ、４００μｇ／ｋｇ、５００μｇ／ｋｇ、６００μｇ／ｋｇ、７００μｇ／ｋｇ、８００μｇ／ｋｇ、９００μｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇ以下のいずれか１つの用量で投与される。本明細書に記載される用量は、カニクイザルに好適な用量、そのヒト等価用量、または個体の特定の種に対する等価用量を指す場合がある。
【0184】
有効量のＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、単回用量で、または複数回用量で投与されてよい。ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）の複数回用量での投与を含む方法の場合、例示的な投薬頻度としては、毎日、中断することなく毎日、毎週、中断することなく毎週、３週間のうち２週間、４週間のうち３週間、３週間ごとに１回、２週間ごとに１回、毎月、６か月ごと、毎年などが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、約２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、４週間ごとに１回、６週間ごとに１回、または８週間ごとに１回投与される。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、１週間に少なくとも約１回、２回、３回、４回、５回、６回、または７回（すなわち、毎日）のいずれかで投与される。いくつかの実施形態では、各投与間の間隔は、約３年、２年、１２か月、１１か月、１０か月、９か月、８か月、７か月、６か月、５か月、４か月、３か月、２か月、１か月、４週、３週、２週、１週、６日、５日、４日、３日、２日、または１日未満のいずれかである。いくつかの実施形態では、各投与間の間隔は、約１日、２日、３日、４日、５日、６日、１週、２週、３週、４週、１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、２年、または３年超のいずれかである。いくつかの実施形態では、投薬スケジュール中に中断しない。
【0185】
ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）の投与は、長期間、例えば、１日～約１週間、約１週間～約１か月、約１か月～約１年、約１年～約数年などにわたって延長され得る。いくつかの実施形態では、ＣＤ３×ＣＤ１９ ＭＳＡＰ（ＢＳＡＰなど、またはその医薬組成物）は、少なくとも約１日、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、１か月間、２か月間、３か月間、４か月間、５か月間、６か月間、７か月間、８か月間、９か月間、１０か月間、１１か月間、１２か月間、１年間、２年間、３年間、４年間のいずれか、またはそれを超える期間にわたって投与される。
【0186】
例示的な実施形態
実施形態１．多重特異性抗原結合タンパク質であって、
Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、
（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに
（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、
場合により、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片と、
ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片と、
ＩＩＩ．場合により、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び前記抗ＣＤ１９抗原結合断片を連結させるリンカーとを含む、前記多重特異性抗原結合タンパク質。
実施形態１．多重特異性抗原結合タンパク質であって、
Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、
（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに
（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含み、
場合により、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片と、
ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片と、
ＩＩＩ．場合により、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び前記抗ＣＤ１９抗原結合断片を連結させるリンカーとを含む、前記多重特異性抗原結合タンパク質。
【0187】
実施形態２．前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨのＮ末端に融合される、実施形態１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0188】
実施形態３．前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬのＮ末端に融合される、実施形態１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0189】
実施形態４．第１抗ＣＤ１９抗原結合断片及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片を含み、前記第１抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨのＮ末端に融合され、前記第２抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬのＮ末端に融合される、実施形態１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0190】
実施形態５．前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、ＣＤ３εのＮ末端に特異的に結合する、実施形態１～４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0191】
実施形態６．前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープに特異的に結合する、実施形態５に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0192】
実施形態７．前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含む重鎖超可変領域Ｈ１（ＨＶＲ－Ｈ１）、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、ならびに／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含む軽鎖超可変領域Ｌ１（ＨＶＲ－Ｌ１）、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、実施形態５または６に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0193】
実施形態８．前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、実施形態５～７のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0194】
実施形態９．前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、約１～約５個のジスルフィド結合によって連結されている、実施形態１～８のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0195】
実施形態１０．前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、約２個のジスルフィド結合によって連結されている、実施形態９に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0196】
実施形態１１．前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１が、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＬが、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む、実施形態１～１０のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0197】
実施形態１２．前記抗ＣＤ１９抗原結合断片がＶＨを含み、前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、ならびに／または前記抗ＣＤ１９抗原結合断片がＶＬを含み、前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、実施形態１～１１のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0198】
実施形態１３．前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、実施形態１２に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0199】
実施形態１４．前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、実施形態１～１３のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0200】
実施形態１５．前記抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、実施形態１４に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0201】
実施形態１６．前記多重特異性抗原結合タンパク質が、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを含む、実施形態１４または１５に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0202】
実施形態１７．前記第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び前記第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、同じアミノ酸配列を有する、実施形態１６に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0203】
実施形態１８．前記リンカーが、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個のアミノ酸残基を含む、実施形態１～１７のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0204】
実施形態１９．前記リンカーが、約２～約１５個のアミノ酸残基を含む、実施形態１８に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0205】
実施形態２０．前記リンカーが、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される、実施形態１８または１９に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0206】
実施形態２１．前記多重特異性抗原結合タンパク質が、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、前記第１ポリペプチドが、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む、実施形態１～２０のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0207】
実施形態２２．前記第１ポリペプチドが、配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：５４のアミノ酸配列を含む、実施形態２１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0208】
実施形態２３．前記第１ポリペプチドが、配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：６１のアミノ酸配列を含む、実施形態２１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【0209】
実施形態２４．実施形態１～２３のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質をコードする、単離核酸。
【0210】
実施形態２５．実施形態１～２３のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質と、場合により薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【0211】
実施形態２６．がんの処置を必要とする個体におけるがんの処置方法であって、有効量の実施形態２５に記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む、前記方法。
【0212】
実施形態２７．前記医薬組成物が静脈内投与される、実施形態２６に記載の方法。
【0213】
実施形態２８．前記個体がヒトである、実施形態２６または２７に記載の方法。
【0214】
実施形態２９．前記がんが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、例えば、ＣＭＬの急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含むＣＭＬ、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、例えば、ＣＬＬのリヒター症候群またはリヒター形質転換を含むＣＬＬ、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含むＮＨＬ、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される、実施形態２６～２８のいずれか１項に記載の方法。
【0215】
実施形態３０．前記がんがＤＬＢＣＬまたはＡＬＬである、実施形態２９に記載の方法。
【実施例0216】
以下の実施例は、単に本発明の例示であることを意図し、それゆえ、決して本発明を限定するものと解釈されるべきではない。以下の実施例及び詳細な説明は、限定するものではなく、実例として提供される。実験方法の詳細を記載していない実施形態については、そのような方法を、従来の条件、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９８９）に記載されているものなどに従って、または製造業者の提案通りに実施する。
【0217】
実施例１：例示的な多重特異性抗原結合タンパク質の発現及び精製
多重特異性抗原結合タンパク質（ＭＳＡＰ）を、標準的なプロトコールを使用して発現させた。ＭＳＡＰの第１ポリペプチド鎖及び第２ポリペプチド鎖をコードするＤＮＡ断片を、ｐＢＯＳベースのベクターにクローニングし、第１ポリペプチド鎖及び第２ポリペプチド鎖を発現する構築物を生成した。この構築物はまた、第１ポリペプチド鎖及び第２ポリペプチド鎖タンパク質の分泌を促進するために、シグナルペプチドをコードする配列も含有した。
多重特異性抗原結合タンパク質（ＭＳＡＰ）を、標準的なプロトコールを使用して発現させた。ＭＳＡＰの第１ポリペプチド鎖及び第２ポリペプチド鎖をコードするＤＮＡ断片を、ｐＢＯＳベースのベクターにクローニングし、第１ポリペプチド鎖及び第２ポリペプチド鎖を発現する構築物を生成した。この構築物はまた、第１ポリペプチド鎖及び第２ポリペプチド鎖タンパク質の分泌を促進するために、シグナルペプチドをコードする配列も含有した。
【0218】
例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰのアミノ酸配列及びそれをコードする核酸配列を表１に示す。図１Ａは、抗ＣＤ１９ Ｆａｂ断片のＮ末端ＶＨに融合された抗ＣＤ３ ｓｃＦｖを有するＩＴＡＢ２００９ ＭＳＡＰコンフォメーションを図示する。図１Ｂは、抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＨのＮ末端に融合された第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ、及び抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片のＶＬのＮ末端に融合された第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを有するＩＴＡＢ２００７ ＭＳＡＰコンフォメーションを図示する。
表１．例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ
表１．例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ
【表1】
【0219】
一例としてＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ ＩＴＡＢ２００７を使用するために、ＩＴＡＢ２００７の第１ポリペプチド鎖をコードするＤＮＡ断片（核酸配列配列番号：５５）及びＩＴＡＢ２００７の第２ポリペプチド鎖をコードするＤＮＡ断片（核酸配列配列番号：５６）を、それぞれｐＢＯＳベースのベクターにクローニングした。この構築物はまた、Ｋｏｚａｋ配列及びシグナルペプチドをコードする配列（アミノ酸配列を配列番号：２５として示し、核酸配列を配列番号：２６として示す）を、第１ポリペプチド鎖及び／または第２ポリペプチド鎖の上流に含有することによって、ＩＴＡＢ２００７ ＭＳＡＰの第１ポリペプチド鎖及び第２ポリペプチド鎖を発現する構築物を作製した。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ ＩＴＡＢ２００９も同様に構築した。シーケンシング結果は、正確な遺伝子挿入を示した。構築物をＥ．ｃｏｌｉに形質転換し、トランスフェクショングレードのプラスミドＤＮＡを得た。ＨＥＫ２９３細胞を、ＥＸＰＩ２９３（商標）発現培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で増殖させた。トランスフェクションのために、プラスミドＤＮＡ（ＭＳＡＰの第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドをコードするＤＮＡ構築物）ならびに２５ｋＤのポリエチレンイミン（ＰＥＩ、１：３のＤＮＡ／直鎖状２５ｋＤ ＰＥＩ重量比）を含有する１０ｍＬの培地を、９０ｍＬの細胞培養物に添加した。あるいは、約３０μｇのＤＮＡ混合物（ＭＳＡＰの第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドをコードするＤＮＡ構築物）を、製造業者の指示に従ってＥｘｐｉＦｅｃｔａｍｉｎｅ ２９３トランスフェクションキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用し、ＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクトした。トランスフェクト細胞を、ＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２、１２５ｒｐｍ）中で約６日間培養し、次いで上清を収集した。
【0220】
細胞培養上清を、ＩｇＧ－ＣＨ１アフィニティークロマトグラフィー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で精製して、標的タンパク質を得た。細胞培養上清を、０．２２μｍの滅菌膜に通して濾過し、１５０ｍＭのＮａＣｌ及び１０ｍＭのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、ｐＨ７．５）で平衡化したＩｇＧ－ＣＨ１アフィニティーマトリックス上にロードして、１５０ｍＭのＮａＣｌ及び５０ｍＭのＮａＡｃ緩衝液（ｐＨ３．５）で溶出した。溶出液を、２Ｍのトリス溶出液で７．２のｐＨに調整し、１０ｋＤ分画分子量を有するＶｉｖａｓｐｉｎ遠心濃縮器（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）で濃縮した。精製したタンパク質を４℃で保存した。
【0221】
実施例２：ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰの結合親和性の決定
抗原結合親和性
例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（すなわち、ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９）の抗ＣＤ１９及び抗ＣＤ３結合ドメインと、対応するヒト及びカニクイザル抗原との結合親和性を、抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ捕捉（ＡＨＣ）バイオセンサーを備えたＯｃｔｅｔ
ＱＫｅを使用して測定した。ヒトＣＤ３抗原構築物（ＣＤ３εＡＡ１～２７．Ｆｃ）及びカニクイザルＣＤ３抗原構築物（ｃｙｎｏＣＤ３εＡＡ１～２７．Ｆｃ）は、ヒトＩｇＧ Ｆｃに融合したＣＤ３イプシロンのアミノ酸１～２７からなるペプチドを有する。ＣＤ３抗原構築物の発現は、ＵＳ８，８４６，０４２に記載されている。ＣＤ３抗原構築物またはＣＤ１９抗原（カニクイザル／アカゲザルＣＤ１９タンパク質（Ｆｃタグ）、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ．Ｉｎｃ、組換えヒトＣＤ１９ Ｆｃキメラ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｉｎｃ）を、希釈液（ＰＢＳ）で０．０２ｍｇ／ｍＬに希釈し、次いで抗ヒトＦｃ捕捉（ＡＨＣ）バイオセンサー上に固定化した。ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９を様々な濃度に希釈し、黒色マイクロプレートに添加した。ＰＢＳのみを含有する対照ウェルも設定した。検出結果を、ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｄａｔａ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ及びＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェアを使用して分析した。
抗原結合親和性
例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（すなわち、ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９）の抗ＣＤ１９及び抗ＣＤ３結合ドメインと、対応するヒト及びカニクイザル抗原との結合親和性を、抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ捕捉（ＡＨＣ）バイオセンサーを備えたＯｃｔｅｔ
ＱＫｅを使用して測定した。ヒトＣＤ３抗原構築物（ＣＤ３εＡＡ１～２７．Ｆｃ）及びカニクイザルＣＤ３抗原構築物（ｃｙｎｏＣＤ３εＡＡ１～２７．Ｆｃ）は、ヒトＩｇＧ Ｆｃに融合したＣＤ３イプシロンのアミノ酸１～２７からなるペプチドを有する。ＣＤ３抗原構築物の発現は、ＵＳ８，８４６，０４２に記載されている。ＣＤ３抗原構築物またはＣＤ１９抗原（カニクイザル／アカゲザルＣＤ１９タンパク質（Ｆｃタグ）、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ．Ｉｎｃ、組換えヒトＣＤ１９ Ｆｃキメラ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｉｎｃ）を、希釈液（ＰＢＳ）で０．０２ｍｇ／ｍＬに希釈し、次いで抗ヒトＦｃ捕捉（ＡＨＣ）バイオセンサー上に固定化した。ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９を様々な濃度に希釈し、黒色マイクロプレートに添加した。ＰＢＳのみを含有する対照ウェルも設定した。検出結果を、ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｄａｔａ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ及びＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓソフトウェアを使用して分析した。
【0222】
表２に示す通り、例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（ＩＴＡＢ２００７またはＩＴＡＢ２００９）は、ヒト及びカニクイザル抗原（ＣＤ１９またはＣＤ３）に対してインビトロで交差反応性を示した。ＭＳＡＰの交差反応性によって、カニクイザルの毒性及び有効性試験結果からヒトの臨床試験の外挿が容易になり得る。
表２．インビトロ結合親和性（ＫＤ）
表２．インビトロ結合親和性（ＫＤ）
【表2】
【0223】
実施例３．自己Ｂ細胞に対するＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ媒介性ＰＢＭＣ細胞傷害
ヒトＰＢＭＣ（ｈＰＢＭＣ）調製：健康なヒト成人からの白血球濃縮試料をＰＢＳ緩衝液（Ｇｉｂｃｏ）で希釈し、密度勾配遠心分離（Ｆｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）によって遠心分離してＰＢＭＣを得て、ＰＢＳで２回洗浄し、次いで室温、１０００ｇで１０分間遠心分離した。細胞を収集し、１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。
ヒトＰＢＭＣ（ｈＰＢＭＣ）調製：健康なヒト成人からの白血球濃縮試料をＰＢＳ緩衝液（Ｇｉｂｃｏ）で希釈し、密度勾配遠心分離（Ｆｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）によって遠心分離してＰＢＭＣを得て、ＰＢＳで２回洗浄し、次いで室温、１０００ｇで１０分間遠心分離した。細胞を収集し、１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。
【0224】
１ウェルあたり２００μＬの３×１０５ＰＢＭＣを、９６ウェルプレートに添加した。次いで、実験計画に従って、様々な濃度に希釈したＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９を添加した。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰを添加していない、ＰＢＭＣを含有するウェルを対照として設定した。混合物を３７℃、５％ＣＯ２で約１８～２４時間インキュベートした。細胞を回収し、抗体ＦＩＴＣマウス抗ヒトＣＤ２０（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ（商標））と共に３０分間、室温でインキュベートした。ヨウ化プロピジウム（Ｓｉｇｍａ）を２μｇ／ｍＬで添加し、１５分間染色した。分析を、ＡＣＣＵＲＩ Ｃ６（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して実施した。
【0225】
ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）は、一般的に使用される核蛍光色素である。ＰＩは無傷の細胞膜を透過できないため、無傷の細胞膜を有する生細胞を染色できない。死細胞の膜完全性の喪失によって、ＰＩは死細胞に侵入し、ＤＮＡに結合できる。したがって、ＰＩ染色を使用して死細胞を同定できる。ＣＤ２０陽性は生存Ｂ細胞を示しているが、ＣＤ２０及びＰＩの両方に陽性である細胞は死滅Ｂ細胞を表す。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ媒介性細胞傷害は、次の式：死亡率％＝［１－（試料ウェルの生存Ｂ細胞／試料ウェルの全Ｂ細胞）／（対照ウェルの生存Ｂ細胞／対照ウェルの全Ｂ細胞）］×１００％を使用して算出した。
【0226】
死亡率をｙ軸として設定し、ＭＳＡＰ濃度をｘ軸として設定した。曲線を、４パラメータロジスティックモデルを使用してフィッティングし、ＥＣ５０を決定した。
【0227】
図２から確認できる通り、ＣＤ１９×ＣＤ３ ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９
ＭＳＡＰの両方とも、ヒトＰＢＭＣによる自己Ｂ細胞死滅を媒介でき、それぞれ約０．１６ｐＭ及び２．４ｐＭのＥＣ５０であった。ＩＴＡＢ２００７ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰは、自己Ｂ細胞の死滅においてＩＴＡＢ２００９よりも優れている。
ＭＳＡＰの両方とも、ヒトＰＢＭＣによる自己Ｂ細胞死滅を媒介でき、それぞれ約０．１６ｐＭ及び２．４ｐＭのＥＣ５０であった。ＩＴＡＢ２００７ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰは、自己Ｂ細胞の死滅においてＩＴＡＢ２００９よりも優れている。
【0228】
実施例４．腫瘍細胞に対するＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ媒介性ＰＢＭＣ細胞傷害（細胞傷害性アッセイ）
ヒトＰＢＭＣを、実施例３に記載した方法に従って調製し、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。
ヒトＰＢＭＣを、実施例３に記載した方法に従って調製し、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。
【0229】
Ｄａｕｄｉ細胞（標的細胞）を洗浄して遠心分離し、ＤｉＯＣ１８（３，３’－ジオクタデシルオキサカルボシアニン過塩素酸塩、Ｌｉｆｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）によって１５分間染色し、次いで１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地中に再懸濁させた。１００μＬの３×１０４Ｄａｕｄｉ細胞及び１００μＬの３×１０５ＰＢＭＣを、９６ウェルプレートの各ウェルに添加した。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（例えば、ＩＴＡＢ２００７、ＩＴＡＢ２００９）を、実験計画に従って様々な濃度に希釈し、細胞混合物に添加した。ＭＳＡＰを添加していないウェル（ＰＢＭＣ＋Ｄａｕｄｉ標的細胞）を対照として設定した。約４８時間のインキュベーションを、３７℃で５％ＣＯ２によって実施した。ＤｉＯＣ１８非染色対照ウェルを設定した。細胞をヨウ化プロピジウム（ＰＩ、Ｓｉｇｍａ）によって染色し、死細胞を表した。ＡＣＣＵＲＩ Ｃ６サイトメーター（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を分析に使用した。
【0230】
ＤｉＯＣ１８陽性細胞は生存Ｄａｕｄｉ細胞を表しているが、ＤｉＯＣ１８及びＰＩの両方に陽性である細胞は死滅Ｄａｕｄｉ細胞を表す。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ媒介性細胞傷害は、以下の式：死亡率％＝［１－（試料ウェルの生存Ｂ細胞／試料ウェルの全Ｂ細胞）／（対照ウェルの生存Ｂ細胞／対照ウェルの全Ｂ細胞）］×１００％を使用して算出した。
【0231】
死亡率をｙ軸として設定し、ＭＳＡＰ濃度をｘ軸として設定した。曲線を、４パラメータロジスティックモデルを使用してフィッティングし、ＥＣ５０を決定した。
【0232】
図３から確認できる通り、ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９は両方とも、ヒトＰＢＭＣを媒介してＤａｕｄｉなどの腫瘍細胞を死滅させるのに効果的であった。
【0233】
実施例５：ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰによるヒトＰｒｉ－Ｔ細胞の腫瘍依存的活性化
ＣＤ８は、典型的なＴ細胞表面抗原である。ＣＤ６９は細胞表面受容体であり、これはＴ細胞活性化時に上方制御される。ＣＤ６９＋ＣＤ８＋サブタイプのパーセンテージは、Ｔ細胞の活性化状態に関する効果的な指標として機能し得る。ＦＡＣＳに基づくＴ細胞活性化アッセイを実施して、Ｔ細胞活性化における例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（すなわち、ＩＴＡＢ２００９及びＩＴＡＢ２００７）の能力を決定した。
ＣＤ８は、典型的なＴ細胞表面抗原である。ＣＤ６９は細胞表面受容体であり、これはＴ細胞活性化時に上方制御される。ＣＤ６９＋ＣＤ８＋サブタイプのパーセンテージは、Ｔ細胞の活性化状態に関する効果的な指標として機能し得る。ＦＡＣＳに基づくＴ細胞活性化アッセイを実施して、Ｔ細胞活性化における例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（すなわち、ＩＴＡＢ２００９及びＩＴＡＢ２００７）の能力を決定した。
【0234】
異なるＣＤ１９発現レベルを有する２つのＢリンパ腫細胞株（図４）である、Ｐｆｅｉｆｆｅｒ（びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫）及びＤａｕｄｉ（バーキットリンパ腫）を、ＩＴＡＢ２００９またはＩＴＡＢ２００７媒介ヒトＴ細胞活性化において試験した（全ＣＤ８＋Ｔ細胞に対するＣＤ６９＋ＣＤ８＋Ｔ細胞比）。
【0235】
Ｐｒｉ－Ｔ細胞の調製：ヒトＰＢＭＣを、実施例３に記載した方法に従って調製し、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。ＰＢＭＣを、マウスＩｇＧ２ａ抗ヒトＣＤ３抗体（５μｇ／ｍＬ、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ，Ｉｎｃ．）及びマウスＩｇＧ１抗ヒトＣＤ２８抗体（１μｇ／ｍＬ、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ，Ｉｎｃ．）でコーティングした培養フラスコ中に播種し、３日間、３７℃の５％ＣＯ２インキュベーター内で培養した。細胞をＩＬ－２でさらに３日間処理し、次いで今後の実験のために収集した。これらの細胞をＰｒｉ－Ｔと命名した。
【0236】
Ｐｒｉ－Ｔ（３×１０４細胞／１００μＬ）及びＤａｕｄｉまたはＰｆｅｉｆｆｅｒ細胞（３×１０４細胞／１００μＬ）を穏やかに混合し、次いでＩＴＡＢ２００９またはＩＴＡＢ２００７ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰを添加して、異なるインキュベーション時間でインキュベートした。次いで、細胞を収集して、ＦＩＴＣマウス抗ヒトＣＤ６９抗体（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ（商標））及びＣＤ８抗体（３Ｂ５）ＲＰＥ複合体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で３０分間染色し、フローサイトメーターを分析に使用した。試料を、ＡＣＣＵＲＩ（登録商標）Ｃ６サイトメーター（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して分析した。結果を図５Ａ～５Ｂに示す。データを、ＣＤ８＋に対するＣＤ６９＋のパーセンテージを算出することによって提示した。
【0237】
図５Ａ～５Ｂに示す通り、同じ条件下で、ＩＴＡＢ２００７ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰは、ＣＤ１９発現が低いびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞株であるＰｆｅｉｆｆｅｒ細胞について、ＩＴＡＢ２００９よりも効果的にＴ細胞活性化を誘導した（図５Ａ、図４）が、一方でＣＤ１９発現が高いリンパ腫細胞株（図４）であるＤａｕｄｉについては、ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰは、同様のＴ細胞活性化効果を示した（図５Ｂ）。これらの結果は、二重特異性三価ＩＴＡＢ２００７ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰが、ＣＤ１９低発現腫瘍細胞を標的とする可能性を有することを示している。
【0238】
実施例６．腫瘍細胞に対するＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ媒介性ヒトＰｒｉ－Ｔ細胞細胞傷害（細胞傷害性アッセイ）
Ｐｒｉ－Ｔ細胞を、実施例５に記載した方法に従って調製し、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。
Ｐｒｉ－Ｔ細胞を、実施例５に記載した方法に従って調製し、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。
【0239】
Ｒｅｈ細胞（急性リンパ性白血病）を洗浄して遠心分離し、ＣＦＳＥ（５－（及び６）－カルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステル、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）によって１０分間染色し、次いで１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。１００μＬの１×１０４Ｒｅｈ細胞及び１００μＬの４×１０４Ｐｒｉ－Ｔ細胞を、９６ウェルプレートの各ウェルに添加した。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（例えば、ＩＴＡＢ２００７、ＩＴＡＢ２００９）を、実験計画に従って様々な濃度に希釈し、細胞混合物に添加した。ＭＳＡＰを添加していないウェル（Ｐｒｉ－Ｔ＋Ｒｅｈ標的細胞）を対照として設定した。約２４時間のインキュベーションを、３７℃で５％ＣＯ２によって実施した。細胞を７－ＡＡＤ（７－アミノ－アクチノマイシン、ＢＤ）によって１０分間染色した。Ｃｙｔｏｆｌｅｘ Ｓ（Ｂｅｃｋｍａｎ）を分析に使用した。
【0240】
ＣＦＳＥ陽性細胞はＲｅｈ細胞を表しているが、７－ＡＡＤに陽性である細胞は死細胞を表す。ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ媒介性細胞傷害は、以下の式：死亡率％＝［１－（試料ウェルの生存Ｂ細胞／試料ウェルの全生存細胞）／（対照ウェルの生存Ｂ細胞／対照ウェルの全生存細胞）］×１００％を使用して算出した。
【0241】
死亡率をｙ軸として設定し、ＭＳＡＰ濃度をｘ軸として設定した。曲線を、４パラメータロジスティックモデルを使用してフィッティングし、ＥＣ５０を決定した。
【0242】
図６に示す通り、ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ ＩＴＡＢ２００７は、ヒトＰｒｉ－Ｔ細胞を媒介してＲｅｈ細胞などの腫瘍細胞を死滅させるのに、ＩＴＡＢ２００９と比較して有意に優れた有効性を示した。
【0243】
実施例７：免疫再構築マウスモデルにおけるヒトバーキットリンパ腫腫瘍異種移植片の死滅におけるＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰの有効性アッセイ
ヒトバーキットリンパ腫腫瘍異種移植片の成長阻害に対する例示的なＣＤ１９×ＣＤ３
ＭＳＡＰ（すなわち、ＩＴＡＢ２００７）の効果を調べるために、インビボ薬効アッセイを、ヒトリンパ球で再構築した免疫系を有し、Ｒａｊｉ腫瘍細胞を移植した免疫不全マウスで実施した。
ヒトバーキットリンパ腫腫瘍異種移植片の成長阻害に対する例示的なＣＤ１９×ＣＤ３
ＭＳＡＰ（すなわち、ＩＴＡＢ２００７）の効果を調べるために、インビボ薬効アッセイを、ヒトリンパ球で再構築した免疫系を有し、Ｒａｊｉ腫瘍細胞を移植した免疫不全マウスで実施した。
【0244】
がん細胞接種のために、Ｒａｊｉバーキットリンパ腫細胞株をインビトロで培養して収集し、氷上であらかじめ冷却しておいた無血清Ｌ－１５培地（Ｇｉｂｃｏ）で再懸濁させ、後で使用するために氷上に置いた。ヒトＰＢＭＣの再構成については、健康なヒトドナーによって提供された白血球濃縮物を収集し、密度勾配遠心分離（Ｆｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）によって遠心分離してＰＢＭＣを得て、氷上であらかじめ冷却しておいたＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させ、後で使用するために氷上に置いた。
【0245】
７～８週齢の雌ＮＯＧマウス（ＮＯＤ．Ｃｇ－ＰｒｋｄｃｓｃｉｄＩＩ２ｒｇｔｍ１Ｓｕｇ／ＪｉｃＣｒｌ）を、試験開始前の少なくとも１週間、ＳＰＦ条件（ＡＡＡＬＡＣ認定）下で飼育した。マウスを、ブスルファン（Ｓｉｇｍａ）を用いて２５ｍｇ／ｋｇ／日の濃度で２日間（－４日目及び－３日目）腹腔内処置し、次いで２．０×１０６細胞／マウスのＲａｊｉ細胞をマウスの右背側側腹部に、０．２ｍＬ／マウスの量で０日目に皮下接種し、続いて１人の健康なドナーに由来する４．０×１０６細胞／マウスの未刺激ヒトＰＢＭＣを使用して、０．２ｍＬ／マウスの量で３日目に腹腔内処置をして再構成させた。
【0246】
Ｒａｊｉ腫瘍がおよそ１００～３００ｍｍ３に成長した場合、１４日目に３２匹の担腫瘍マウスをＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ処置のために４群（１群あたり８匹のマウス）に無作為に分け、それぞれビヒクル（ＰＢＳＴ、対照）、ＩＴＡＢ２００７を０．５μｇ／ｋｇで、ＩＴＡＢ２００７を５μｇ／ｋｇで、またはＩＴＡＢ２００７を５０μｇ／ｋｇで用いて毎日腹腔内処置した。無作為化後、１週間に２回、キャリパーを使用して各腫瘍の長さ及び幅を測定した。個々の腫瘍体積を、次の式：腫瘍体積（ｍｍ３）＝長さ（ｍｍ）×幅（ｍｍ）×幅（ｍｍ）×０．５に基づいて算出した。腫瘍成長阻害率（ＴＧＩ％）を使用して薬効を評価した。ＴＧＩ％＝［１－（ａｖＴｉ－ａｖＴ０）／（ａｖＣｉ－ａｖＣ０）］×１００、式中、ａｖＴｉ－ａｖＴ０は、処置群についてｉ日目の平均腫瘍体積から処置開始日（すなわち、１４日目）の平均腫瘍体積を差し引いたものであり、ａｖＣｉ－０は、ビヒクル対照群についてｉ日目の平均腫瘍体積から処置開始日（すなわち、１４日目）の平均腫瘍体積を差し引いたものである。
【0247】
図７は、ヒトＰＢＭＣを接種した免疫再構築ＮＯＧマウスにおける、皮下Ｒａｊｉ異種移植腫瘍に対するＩＴＡＢ２００７の成長阻害効果を示す。試験終了時に、平均腫瘍体積は、ビヒクル対照群では２３２０．９６±２７６．６２ｍｍ３（２９日目）、０．５μｇ／ｋｇのＩＴＡＢ２００７群では２４７７．０４±３３１．３４ｍｍ３（３２日目）、５μｇ／ｋｇのＩＴＡＢ２００７群では１５３４．０２±１５９．２１ｍｍ３（３２日目）、及び５０μｇ／ｋｇのＩＴＡＢ２００７群では３７０．０５±２０７．６８ｍｍ３（４３日目）であった。腫瘍成長阻害率（ＴＧＩ％）は、０．５μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ、及び５０μｇ／ｋｇのＩＴＡＢ２００７で２９日目に処置した場合、それぞれ２３．０％（ｐ＝０．９９９９）、５７．０％（ｐ＝０．５１７６）、及び９５．１％（ｐ＝０．０００２）であった。
【0248】
したがって、ＮＯＧマウスの骨髄のブスルファン前処置、及びヒトＰＢＭＣを使用した免疫系の再構築後の、ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（すなわち、ＩＴＡＢ２００７）の投与は、マウスにおいてヒトバーキットリンパ腫細胞Ｒａｊｉのインビボ増殖を効果的に阻害でき、このことは、ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰが、インビボで腫瘍細胞を死滅させるために免疫細胞を媒介し、用量依存的様式で腫瘍成長を有意に阻害できたことを示していた。
【0249】
実施例８：Ｒｅｈ白血病腫瘍異種移植片及びヒト初代Ｔ細胞を静脈内注射したマウス生存モデル（免疫再構築マウスモデル）でのＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰの有効性アッセイ
異種移植腫瘍に対する例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９）の成長阻害効果を調べるために、ヒト前駆Ｂ細胞（ｐｒｅＢ）急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）Ｒｅｈ細胞及びヒト初代Ｔ細胞を静脈内注射した免疫不全ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスを、白血病の生存期間延長に関するＭＳＡＰインビボ有効性について評価した。
異種移植腫瘍に対する例示的なＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ（ＩＴＡＢ２００７及びＩＴＡＢ２００９）の成長阻害効果を調べるために、ヒト前駆Ｂ細胞（ｐｒｅＢ）急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）Ｒｅｈ細胞及びヒト初代Ｔ細胞を静脈内注射した免疫不全ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスを、白血病の生存期間延長に関するＭＳＡＰインビボ有効性について評価した。
【0250】
８～１０週齢の雌ＮＯＤ／ＳＣＩＤ（ＮＯＤ．ＣＢ１７－Ｐｒｋｄｃｓｃｉｄ／ＮｃｒＣｒｌ）マウスを、試験開始前の少なくとも１週間、ＳＰＦ条件（ＡＡＡＬＡＣ認定）下で飼育した。
【0251】
Ｐｒｉ－Ｔ細胞を、実施例５に記載した方法に従って調製し、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中に再懸濁させた。
【0252】
Ｒｅｈ細胞を、１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地（Ｇｉｂｃｏ）中において３７℃の５％ＣＯ２インキュベーター内で培養した。
【0253】
マウスに、１．０×１０７細胞／マウスのＲｅｈ細胞を尾静脈から、０．２ｍＬ／マウスの量で０日目に静脈内接種し、続いて４．０×１０６細胞／動物のインビトロ培養ヒト初代Ｔ細胞（Ｐｒｉ－Ｔ）を用いて、０．２ｍＬ／マウスの量で尾静脈から静脈内に３日目、９日目、１５日目、及び２１日目に合計４回注射して再構成させた。
【0254】
Ｒｅｈがん細胞接種及びヒト初代Ｔ細胞再構成を行った３７匹のＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスを３群に無作為に分け、３日目にヒト初代Ｔ細胞を注射した後、ビヒクル（ＰＢＳＴ、ｎ＝１３）、ＩＴＡＢ２００９（ｎ＝１２）、またはＩＴＡＢ２００７（ｎ＝１２）で腹腔内処置した。ＩＴＡＢ２００９及びＩＴＡＢ２００７の投薬レジメンは、以下の通りであった：１サイクルごとに５０μｇ／ｋｇ、ｑ．ｄ．を３日間、続いて１００μｇ／ｋｇ、ｑ．ｄ．を３日間、これを３日目～２６日目までに合計４サイクル行い、ヒト初代Ｔ細胞の注射から２時間後に開始した。臨床観察及び生存を毎日モニターして記録した。
【0255】
図８に示す通り、ビヒクル群におけるマウスの生存期間中央値は、腫瘍細胞接種後３５日間であって、全てのマウスが５０日目までに死亡したか、または安楽死させた。ＩＴＡＢ２００９またはＩＴＡＢ２００７ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰ処置は、マウスの生存期間を有意に延長し、ビヒクル対照と比較した場合、ＩＴＡＢ２００９の生存期間中央値は５３．５日間（ｐ＜０．０００１、ＨＲ＝０．２２９４）及びＩＴＡＢ２００７では４７．５日間（ｐ＝０．０００３、ＨＲ＝０．２９７７）であった。
【0256】
要約すると、三価形式ＩＴＡＢ２００７ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰは、大きなインビボＲｅｈ細胞（ＡＬＬ細胞株）死滅効果、及びヒトＰｒｉ－Ｔ細胞によるインビトロでのＲｅｈ細胞死滅の媒介においてＩＴＡＢ２００９と比較して有意に良好な効力を実証した。さらに、ＩＴＡＢ２００７は、二価形式ＩＴＡＢ２００９ ＣＤ１９×ＣＤ３ ＭＳＡＰと比較して、インビトロ及びインビボヒトＢ細胞腫瘍死滅においてはるかに良好な有効性を示した。要約すると、ＩＴＡＢ２００７は、ＣＤ１９低発現腫瘍細胞を標的とする大きな可能性を実証した。
【0257】
本発明で言及される全ての参考文献は、それらの参考文献の各々が個別に参照によって組み込まれている場合と同様に、参照によって本明細書に組み込まれる。記載は特定の実施形態に言及しているが、本発明がこれらの特定の詳細に関する変化形で実施される場合があると当業者には明らかとなる。したがって、本発明は、本明細書に示される実施形態に限定されると解釈されるべきではない。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
多重特異性抗原結合タンパク質であって、
Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、
（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに
（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片と、
ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片と、
ＩＩＩ．場合により、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び前記抗ＣＤ１９抗原結合断片を連結させるリンカーとを含む、前記多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨのＮ末端に融合される、項目１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目３)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬのＮ末端に融合される、項目１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目４)
第１抗ＣＤ１９抗原結合断片及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片を含み、前記第１抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨのＮ末端に融合され、前記第２抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬのＮ末端に融合される、項目１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目５)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、ＣＤ３εのＮ末端に特異的に結合する、項目１～４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目６)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープに特異的に結合する、項目１～５のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目７)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含む重鎖超可変領域Ｈ１（ＨＶＲ－Ｈ１）、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、ならびに／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含む軽鎖超可変領域Ｌ１（ＨＶＲ－Ｌ１）、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、項目５または６に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目８)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、項目５～７のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目９)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている、項目１～８のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１０)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、約１～約５個のジスルフィド結合によって連結されている、項目９に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１１)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、約２個のジスルフィド結合によって連結されている、項目９または１０に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１２)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１が、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＬが、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む、項目１～１１のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１３)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片がＶＨを含み、前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、ならびに／または前記抗ＣＤ１９抗原結合断片がＶＬを含み、前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、項目１～１２のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１４)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、項目１３に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１５)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、項目１～１４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１６)
前記抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、項目１５に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１７)
前記多重特異性抗原結合タンパク質が、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９
ｓｃＦｖを含む、項目１５または１６に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１８)
前記第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び前記第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、同じアミノ酸配列を有する、項目１７に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１９)
前記リンカーが、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個のアミノ酸残基を含む、項目１～１８のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２０)
前記リンカーが、約２～約１５個のアミノ酸残基を含む、項目１～１９のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２１)
前記リンカーが、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される、項目１～２０のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２２)
前記多重特異性抗原結合タンパク質が、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、前記第１ポリペプチドが、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む、項目１～２１のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２３)
前記第１ポリペプチドが、配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：５４のアミノ酸配列を含む、項目２２に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２４)
前記第１ポリペプチドが、配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：６１のアミノ酸配列を含む、項目２２に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２５)
項目１～２４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質をコードする、単離核酸。
(項目２６)
項目１～２４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質と、場合により薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
(項目２７)
がんの処置を必要とする個体におけるがんの処置方法であって、有効量の項目２６に記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む、前記方法。
(項目２８)
前記医薬組成物が静脈内投与される、項目２７に記載の方法。
(項目２９)
前記個体がヒトである、項目２７または２８に記載の方法。
(項目３０)
前記がんが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含む慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）のリヒター症候群またはリヒター形質転換を含む慢性リンパ性白血病、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含む非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される、項目２７～２９のいずれか１項に記載の方法。
(項目３１)
前記がんがＤＬＢＣＬまたはＡＬＬである、項目３０に記載の方法。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
多重特異性抗原結合タンパク質であって、
Ｉ．ＣＤ３に特異的に結合する抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片であって、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、
（ａ）免疫グロブリン（Ｉｇ）重鎖可変領域（ＶＨ）及びＩｇ重鎖定常領域（ＣＨ１）、ならびに
（ｂ）Ｉｇ軽鎖可変領域（ＶＬ）及びＩｇ軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片と、
ＩＩ．ＣＤ１９に特異的に結合する抗ＣＤ１９抗原結合断片と、
ＩＩＩ．場合により、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片及び前記抗ＣＤ１９抗原結合断片を連結させるリンカーとを含む、前記多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨのＮ末端に融合される、項目１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目３)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬのＮ末端に融合される、項目１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目４)
第１抗ＣＤ１９抗原結合断片及び第２抗ＣＤ１９抗原結合断片を含み、前記第１抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨのＮ末端に融合され、前記第２抗ＣＤ１９抗原結合断片が、前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬのＮ末端に融合される、項目１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目５)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、ＣＤ３εのＮ末端に特異的に結合する、項目１～４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目６)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片が、ＣＤ３εのアミノ酸１～２７内のエピトープに特異的に結合する、項目１～５のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目７)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨが、配列番号：９のアミノ酸配列を含む重鎖超可変領域Ｈ１（ＨＶＲ－Ｈ１）、配列番号：１０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：１１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、ならびに／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬが、配列番号：１２のアミノ酸配列を含む軽鎖超可変領域Ｌ１（ＨＶＲ－Ｌ１）、配列番号：１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、項目５または６に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目８)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＨが、配列番号：１５のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＶＬが、配列番号：１６のアミノ酸配列を含む、項目５～７のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目９)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、ジスルフィド結合によって連結されている、項目１～８のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１０)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、約１～約５個のジスルフィド結合によって連結されている、項目９に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１１)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１及び前記ＣＬが、約２個のジスルフィド結合によって連結されている、項目９または１０に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１２)
前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＨ１が、配列番号：１８のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ３ Ｆａｂ断片の前記ＣＬが、配列番号：５２のアミノ酸配列を含む、項目１～１１のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１３)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片がＶＨを含み、前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＨが、配列番号：１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、配列番号：２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号：３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、ならびに／または前記抗ＣＤ１９抗原結合断片がＶＬを含み、前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＬが、配列番号：４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、配列番号：４８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号：６もしくは４９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む、項目１～１２のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１４)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＨが、配列番号：７のアミノ酸配列を含み、及び／または前記抗ＣＤ１９抗原結合断片の前記ＶＬが、配列番号：８もしくは５０のアミノ酸配列を含む、項目１３に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１５)
前記抗ＣＤ１９抗原結合断片が一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、項目１～１４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１６)
前記抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、配列番号：５１または５９のアミノ酸配列を含む、項目１５に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１７)
前記多重特異性抗原結合タンパク質が、第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び第２抗ＣＤ１９
ｓｃＦｖを含む、項目１５または１６に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１８)
前記第１抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖ及び前記第２抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖが、同じアミノ酸配列を有する、項目１７に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目１９)
前記リンカーが、グリシン、セリン、アルギニン、及びアラニンからなる群から選択される約２～約３０個のアミノ酸残基を含む、項目１～１８のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２０)
前記リンカーが、約２～約１５個のアミノ酸残基を含む、項目１～１９のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２１)
前記リンカーが、配列番号：２０～２２、２９、及び３１～４４からなる群から選択される、項目１～２０のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２２)
前記多重特異性抗原結合タンパク質が、第１ポリペプチド及び第２ポリペプチドを含み、前記第１ポリペプチドが、配列番号：５３または６０のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：５４または６１のアミノ酸配列を含む、項目１～２１のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２３)
前記第１ポリペプチドが、配列番号：５３のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：５４のアミノ酸配列を含む、項目２２に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２４)
前記第１ポリペプチドが、配列番号：６０のアミノ酸配列を含み、前記第２ポリペプチドが、配列番号：６１のアミノ酸配列を含む、項目２２に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
(項目２５)
項目１～２４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質をコードする、単離核酸。
(項目２６)
項目１～２４のいずれか１項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質と、場合により薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
(項目２７)
がんの処置を必要とする個体におけるがんの処置方法であって、有効量の項目２６に記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む、前記方法。
(項目２８)
前記医薬組成物が静脈内投与される、項目２７に記載の方法。
(項目２９)
前記個体がヒトである、項目２７または２８に記載の方法。
(項目３０)
前記がんが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の急性転化及びＣＭＬと関連するＡｂｅｌｓｏｎがん遺伝子（Ｂｃｒ－ＡＢＬ転座）を含む慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、急性Ｂリンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）のリヒター症候群またはリヒター形質転換を含む慢性リンパ性白血病、有毛細胞白血病（ＨＣＬ）、芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍（ＢＰＤＣＮ）、マントル細胞白血病（ＭＣＬ）及び小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）を含む非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、ホジキンリンパ腫、全身性肥満細胞症、ならびにバーキットリンパ腫からなる群から選択される、項目２７～２９のいずれか１項に記載の方法。
(項目３１)
前記がんがＤＬＢＣＬまたはＡＬＬである、項目３０に記載の方法。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5-1】
【図5-2】
【図6】
【図7】
【図8】
【配列表】
【外国語明細書】