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特開2024-150469がんの予防または治療方法において使用するためのがん／精巣抗原をコードするウイルスベクター
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024150469
(43)【公開日】2024-10-23
(54)【発明の名称】がんの予防または治療方法において使用するためのがん／精巣抗原をコードするウイルスベクター
(51)【国際特許分類】
C12N 15/861 20060101AFI20241016BHJP
C12N 15/12 20060101ALI20241016BHJP
C12N 15/863 20060101ALI20241016BHJP
C12N 15/09 20060101ALI20241016BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20241016BHJP
A61K 35/761 20150101ALI20241016BHJP
A61K 35/76 20150101ALI20241016BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20241016BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20241016BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20241016BHJP
A61K 31/337 20060101ALI20241016BHJP
A61K 31/475 20060101ALI20241016BHJP
A61K 31/7068 20060101ALI20241016BHJP
A61K 31/7048 20060101ALI20241016BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20241016BHJP
A61K 33/243 20190101ALI20241016BHJP
A61K 31/282 20060101ALI20241016BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241016BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241016BHJP
A61P 37/04 20060101ALI20241016BHJP
【ＦＩ】
C12N15/861 Z ZNA
C12N15/12
C12N15/863 Z
C12N15/09 Z
C12N5/10
A61K35/761
A61K35/76
A61K45/00 101
A61K48/00
A61K39/395 T
A61K31/337
A61K31/475
A61K31/7068
A61K31/7048
A61K31/519
A61K33/243
A61K31/282
A61P35/00
A61P43/00 121
A61P37/04
C12N15/861 Z
【審査請求】有
【請求項の数】25
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2024103713
(22)【出願日】2024-06-27
(62)【分割の表示】P 2021505666の分割
【原出願日】2019-07-30
(31)【優先権主張番号】1812647.4
(32)【優先日】2018-08-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(71)【出願人】
【識別番号】520143926
【氏名又は名称】ラディック インスティテュート フォア キャンサー リサーチ リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＬＵＤＷＩＧ ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ ＦＯＲ ＣＡＮＣＥＲ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ＬＴＤ
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100131990
【弁理士】
【氏名又は名称】大野 玲恵
(72)【発明者】
【氏名】ヴァン デン エンド，ベノイト ジェイ．
(72)【発明者】
【氏名】レオン，キャロル エス．
(72)【発明者】
【氏名】ヒル，アドリアン エス．
(72)【発明者】
【氏名】レドチェンコ，イリナ
(57)【要約】 （修正有）
【課題】がんの予防または治療のためのウイルスベクターベースのワクチンを提供する。
【解決手段】核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片；（ｉｉ）ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片；（ｉｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片、およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、（ｉｖ）ＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｖ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片を含むがん抗原（複数可）をコードするポリヌクレオチド配列であって、前記がん抗原（複数可）が、動物細胞において前記がん抗原（複数可）の翻訳、転写および／または発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、ならびにアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクターを提供する。
【選択図】なし
【解決手段】核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片；（ｉｉ）ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片；（ｉｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片、およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、（ｉｖ）ＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｖ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片を含むがん抗原（複数可）をコードするポリヌクレオチド配列であって、前記がん抗原（複数可）が、動物細胞において前記がん抗原（複数可）の翻訳、転写および／または発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、ならびにアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクターを提供する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
核酸分子をカプシドで包んだチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ）ベクターであっ
て、前記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗
原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＬＡ
ＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であって
、動物細胞において前記がん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発現を指令
する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、ならびにアデ
ノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクター。
て、前記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗
原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＬＡ
ＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であって
、動物細胞において前記がん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発現を指令
する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、ならびにアデ
ノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクター。
【請求項2】
（ａ）国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ１
；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示された配列番号
３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によりコ
ードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公開第２０１７／２２１０３１号パンフレ
ットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、国際公開第２０１７／２２１０３１号パ
ンフレットに開示された配列番号１０のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０
％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ２である、請求項１に記載のＣ
ｈＡｄベクター。
；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示された配列番号
３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によりコ
ードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公開第２０１７／２２１０３１号パンフレ
ットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、国際公開第２０１７／２２１０３１号パ
ンフレットに開示された配列番号１０のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０
％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ２である、請求項１に記載のＣ
ｈＡｄベクター。
【請求項3】
核酸分子をカプシドで包んだ改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）ベクターであ
って、前記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん
抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＬ
ＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であっ
て、動物細胞において前記がん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発現を指
令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を含む、ＭＶ
Ａベクター。
って、前記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん
抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＬ
ＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であっ
て、動物細胞において前記がん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発現を指
令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を含む、ＭＶ
Ａベクター。
【請求項4】
国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットまたは欧州特許出願公開第２０４４
９４７号明細書に開示された通りのものである、請求項３に記載のＭＶＡベクター。
９４７号明細書に開示された通りのものである、請求項３に記載のＭＶＡベクター。
【請求項5】
前記ＭＡＧＥ抗原が、配列番号１のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも４６％、好
ましくは少なくとも６９％、より好ましくは少なくとも９５％の同一性を有する配列、も
しくはその任意の免疫原性断片の配列を有するＭＡＧＥ ３Ａである、請求項１～４のい
ずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
ましくは少なくとも６９％、より好ましくは少なくとも９５％の同一性を有する配列、も
しくはその任意の免疫原性断片の配列を有するＭＡＧＥ ３Ａである、請求項１～４のい
ずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
【請求項6】
前記ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原が、配列番号３のアミノ酸配列、またはそれと少なくと
も７５％、好ましくは少なくとも７６．７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の
免疫原性断片の配列を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶ
Ａベクター。
も７５％、好ましくは少なくとも７６．７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の
免疫原性断片の配列を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶ
Ａベクター。
【請求項7】
前記ＬＡＧＥ１がん抗原が、配列番号５のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７８
％、好ましくは少なくとも９７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫原性断
片の配列を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター
。
％、好ましくは少なくとも９７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫原性断
片の配列を有する、請求項１～５のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター
。
【請求項8】
前記ポリヌクレオチド配列が、配列番号６のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７
９％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するヒトＨＬＡクラスＩＩ組織
適合性抗原ガンマ鎖（ｌｉ）をさらにコードし、それにより、前記がん抗原が、ｌｉとの
融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、
好ましくは、前記断片が膜貫通ドメインであり、より好ましくは、前記膜貫通ドメイン
が、アミノ酸残基３０～５５または３０～６１を含み、よりいっそう好ましくは、前記膜
貫通ドメインが、配列番号７のアミノ酸配列を有する、請求項１～７のいずれか一項に記
載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
９％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するヒトＨＬＡクラスＩＩ組織
適合性抗原ガンマ鎖（ｌｉ）をさらにコードし、それにより、前記がん抗原が、ｌｉとの
融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、
好ましくは、前記断片が膜貫通ドメインであり、より好ましくは、前記膜貫通ドメイン
が、アミノ酸残基３０～５５または３０～６１を含み、よりいっそう好ましくは、前記膜
貫通ドメインが、配列番号７のアミノ酸配列を有する、請求項１～７のいずれか一項に記
載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
【請求項9】
前記ポリヌクレオチド配列が、配列番号８のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも８
１％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するｔＰＡをさらにコードし、
それにより、前記がん抗原が、ｔＰＡとの融合物またはその断片として動物細胞中で発現
され、好ましくは、前記断片が、２１アミノ酸のリーダー配列を含み、より好ましくは、
前記２１アミノ酸のリーダー配列が配列番号９である、請求項１～８のいずれか一項に記
載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
１％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するｔＰＡをさらにコードし、
それにより、前記がん抗原が、ｔＰＡとの融合物またはその断片として動物細胞中で発現
され、好ましくは、前記断片が、２１アミノ酸のリーダー配列を含み、より好ましくは、
前記２１アミノ酸のリーダー配列が配列番号９である、請求項１～８のいずれか一項に記
載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
【請求項10】
前記ポリヌクレオチド配列が、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、（ｉ）
ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはそ
の免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＬＡ
ＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードする、請求項１～９のいずれか一項に
記載のＣｈＡｄベクター。
ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはそ
の免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＬＡ
ＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードする、請求項１～９のいずれか一項に
記載のＣｈＡｄベクター。
【請求項11】
前記ポリヌクレオチド配列が、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、（ｉ）
ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原
もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片
および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードし、前記ＭＡＧ
Ｅがん抗原、ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはＬＡＧＥ１がん抗原のうちの少なくとも１
つが断片である、請求項１～９のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原
もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片
および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードし、前記ＭＡＧ
Ｅがん抗原、ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはＬＡＧＥ１がん抗原のうちの少なくとも１
つが断片である、請求項１～９のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
【請求項12】
前記ＭＡＧＥがん抗原およびＮＹ－ＥＳＯ－１またはＭＡＧＥがん抗原およびＬＡＧＥ
１が免疫原性断片である、請求項１１に記載のＭＶＡベクター。
１が免疫原性断片である、請求項１１に記載のＭＶＡベクター。
【請求項13】
前記ポリヌクレオチド配列が、発現された場合に、前記ＭＡＧＥおよびＮＹ－ＥＳＯ－
１もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはその断片をいずれかの順序において融合タンパク質
として連結する、５～９アミノ酸のリンカー、好ましくは、アミノ酸配列ＧＧＧＰＧＧＧ
を有するリンカーをコードする、請求項１０～１２のいずれかに記載のＣｈＡｄまたはＭ
ＶＡベクター。
１もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはその断片をいずれかの順序において融合タンパク質
として連結する、５～９アミノ酸のリンカー、好ましくは、アミノ酸配列ＧＧＧＰＧＧＧ
を有するリンカーをコードする、請求項１０～１２のいずれかに記載のＣｈＡｄまたはＭ
ＶＡベクター。
【請求項14】
請求項１～１３のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクターを含む、免疫原
性組成物。
性組成物。
【請求項15】
アジュバントをさらに含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項16】
請求項１～１０もしくは１３のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、または請求項３～
９もしくは１１～１３のいずれかに記載のＭＶＡベクターをコードする配列を含む、単離
されたポリヌクレオチド。
９もしくは１１～１３のいずれかに記載のＭＶＡベクターをコードする配列を含む、単離
されたポリヌクレオチド。
【請求項17】
ヒトコドン用法についてコドン最適化されている、請求項１６に記載の単離されたポリ
ヌクレオチド。
ヌクレオチド。
【請求項18】
請求項１６または１７に記載のポリヌクレオチドを含む、細菌人工染色体（ＢＡＣ）ク
ローン。
ローン。
【請求項19】
請求項１～１３のいずれかに記載のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターを含む、単
離された宿主細胞。
離された宿主細胞。
【請求項20】
個体においてがんを予防または治療する方法であって、有効量の請求項１～１０または
１３のいずれかに記載のＣｈＡｄベクターを投与すること、および有効量の請求項３～９
または１１～１３のいずれかに記載のＭＶＡベクターを投与することを含み、それにより
、前記個体の適応免疫系が刺激されて、抗がん免疫応答が提供される、方法。
１３のいずれかに記載のＣｈＡｄベクターを投与すること、および有効量の請求項３～９
または１１～１３のいずれかに記載のＭＶＡベクターを投与することを含み、それにより
、前記個体の適応免疫系が刺激されて、抗がん免疫応答が提供される、方法。
【請求項21】
前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターの前記投与が、別々に、逐次的にまたは同時に実行
される、請求項２０に記載のがんを予防または治療する方法。
される、請求項２０に記載のがんを予防または治療する方法。
【請求項22】
有効量の１つまたは複数のチェックポイント阻害剤の投与をさらに含む、請求項２０ま
たは２１に記載の方法。
たは２１に記載の方法。
【請求項23】
前記チェックポイント阻害剤が、前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと同時に、別々に
または並行して投与される、請求項２０～２２のいずれかに記載の方法。
または並行して投与される、請求項２０～２２のいずれかに記載の方法。
【請求項24】
前記個体が、化学療法および／または放射線療法治療を受けた、受けている、または受
ける個体である、請求項２０～２３のいずれかに記載の方法。
ける個体である、請求項２０～２３のいずれかに記載の方法。
【請求項25】
前記ＣｈＡｄベクターが最初に投与される、請求項２０～２４のいずれかに記載の方法
。
。
【請求項26】
前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが、それぞれ１回より多く投与される、請求項２０
～２５のいずれかに記載の方法。
～２５のいずれかに記載の方法。
【請求項27】
前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与される、請求項２０～２６のいずれか
に記載の方法。
に記載の方法。
【請求項28】
ベクターの各投与の間の期間が、５日～８週の範囲内、好ましくは１週である、請求項
２０～２７のいずれかに記載の方法。
２０～２７のいずれかに記載の方法。
【請求項29】
前記チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮断する
、請求項２２～２８のいずれかに記載の方法。
、請求項２２～２８のいずれかに記載の方法。
【請求項30】
前記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ、トレ
メリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択される、
請求項２２～２８のいずれかに記載の方法。
メリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択される、
請求項２２～２８のいずれかに記載の方法。
【請求項31】
前記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキン
リンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫、または乳房の
がんである、請求項２２～２８のいずれかに記載の方法。
リンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫、または乳房の
がんである、請求項２２～２８のいずれかに記載の方法。
【請求項32】
がんの予防または治療において使用するための、請求項１、２、５～１０または１３の
いずれかに記載のＣｈＡｄベクター。
いずれかに記載のＣｈＡｄベクター。
【請求項33】
がんの予防または治療において使用するための、請求項３～９または１１～１３のいず
れかに記載のＭＶＡベクター。
れかに記載のＭＶＡベクター。
【請求項34】
がんの予防または治療のための患者への別々の、逐次的なまたは同時の投与のための、
請求項１、２、５～１０または１３のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、および請求項
３～９または１１～１３のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
請求項１、２、５～１０または１３のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、および請求項
３～９または１１～１３のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
【請求項35】
がんの治療のためにＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと共に投与するための１つまたは複
数のチェックポイント阻害剤をさらに含む、請求項３４に記載のがんの予防または治療に
おいて使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
数のチェックポイント阻害剤をさらに含む、請求項３４に記載のがんの予防または治療に
おいて使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
【請求項36】
前記チェックポイント阻害剤が、ベクターと同時に、別々にまたは並行して投与される
、請求項３５に記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶ
Ａベクター。
、請求項３５に記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶ
Ａベクター。
【請求項37】
患者が、化学療法を受けた、受けているまたは受ける患者である、請求項３１～３３の
いずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベ
クター。
いずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベ
クター。
【請求項38】
前記ＣｈＡｄベクターが最初に投与される、請求項３４～３６のいずれかに記載のがん
の予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
の予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
【請求項39】
前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが、それぞれ１回より多く投与される、請求項３４
～３８のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよび
ＭＶＡベクター。
～３８のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよび
ＭＶＡベクター。
【請求項40】
前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与される、請求項３４～３９のいずれか
に記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
に記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
【請求項41】
ベクターの各投与の間の期間が、５日～８週の範囲内、好ましくは１週である、請求項
３４～４０のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄお
よびＭＶＡベクター。
３４～４０のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄお
よびＭＶＡベクター。
【請求項42】
前記チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮断する
、請求項３５～４１のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣ
ｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
、請求項３５～４１のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣ
ｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
【請求項43】
前記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ、トレ
メリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択される、
請求項３５～４１のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈ
ＡｄおよびＭＶＡベクター。
メリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択される、
請求項３５～４１のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈ
ＡｄおよびＭＶＡベクター。
【請求項44】
前記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキン
リンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫または乳房のが
んである、請求項３５～４１のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用する
ためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
リンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫または乳房のが
んである、請求項３５～４１のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用する
ためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
【請求項45】
がんの予防または治療のための患者への別々の、逐次的なまたは同時の投与のための、
請求項１、２、５～１０または１３のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、請求項３～９
または１１～１３のいずれかに記載のＭＶＡベクター、化学療法剤、およびチェックポイ
ント阻害剤。
請求項１、２、５～１０または１３のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、請求項３～９
または１１～１３のいずれかに記載のＭＶＡベクター、化学療法剤、およびチェックポイ
ント阻害剤。
【請求項46】
前記化学療法剤が、（ｂ）パクリタキセル、ドセタキセル、ビノレルビン、ゲムシタビ
ン、エトポシドまたはペメトレキセドのうちの１つと組み合わせた（ａ）カルボプラチン
またはシスプラチンから選択される、請求項４５に記載のＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベク
ター、化学療法剤およびチェックポイント阻害剤。
ン、エトポシドまたはペメトレキセドのうちの１つと組み合わせた（ａ）カルボプラチン
またはシスプラチンから選択される、請求項４５に記載のＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベク
ター、化学療法剤およびチェックポイント阻害剤。
【請求項47】
前記チェックポイント阻害剤がＰＤ－１である、請求項４５または４６に記載のＣｈＡ
ｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤およびチェックポイント阻害剤。
ｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤およびチェックポイント阻害剤。
【請求項48】
前記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）もしくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）、黒色
腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、
腎臓、頭頸部、肉腫または乳がんから選択されるがんである、請求項４５～４７のいずれ
かに記載のＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤およびチェックポイント阻害
剤。
腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、
腎臓、頭頸部、肉腫または乳がんから選択されるがんである、請求項４５～４７のいずれ
かに記載のＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤およびチェックポイント阻害
剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、がんの予防または治療のためのウイルスベクターベースのワクチン、より特
に、目的のがんワクチン抗原を含み、かつ哺乳動物への投与のための、複製欠陥性アデノ
ウイルス（Ａｄ）および改変ワクシニアウイルスアンカラ（Modified Vaccinia Virus An
kara；ＭＶＡ）ベクターに関する。本発明は、したがって、ウイルス粒子、ウイルス粒子
を含む免疫原性組成物、およびウイルスベクターを含有する宿主細胞に関する。ウイルス
ベクターワクチンは、がんを患う対象を治療するためまたは対象ががんに罹ることを予防
するために使用される。好ましいレジームでは、本発明は、Ａｄベクターを使用するプラ
イム投与、続いてＭＶＡベクターを使用するブースト投与を伴う。本発明はさらに、本発
明の新規の複製欠陥性アデノウイルスベクターを含むワクチン組成物を提供する。
に、目的のがんワクチン抗原を含み、かつ哺乳動物への投与のための、複製欠陥性アデノ
ウイルス（Ａｄ）および改変ワクシニアウイルスアンカラ（Modified Vaccinia Virus An
kara；ＭＶＡ）ベクターに関する。本発明は、したがって、ウイルス粒子、ウイルス粒子
を含む免疫原性組成物、およびウイルスベクターを含有する宿主細胞に関する。ウイルス
ベクターワクチンは、がんを患う対象を治療するためまたは対象ががんに罹ることを予防
するために使用される。好ましいレジームでは、本発明は、Ａｄベクターを使用するプラ
イム投与、続いてＭＶＡベクターを使用するブースト投与を伴う。本発明はさらに、本発
明の新規の複製欠陥性アデノウイルスベクターを含むワクチン組成物を提供する。
【背景技術】
【0002】
毎年１６０万人より多くの米国人ががんと診断され、約６００，０００人が２０１８年
に米国単独でこの疾患で死亡したと予測される。過去数１０年の間に、がんの検出、診断
、および治療において著しい進歩が達成された。しかしながら、依然として６７％の人々
が治療の開始の５年後に生存しているに過ぎない。（Siegel, R. L. et al. (2017) Canc
er J. Clin. 67(1): 7 - 30を参照）
に米国単独でこの疾患で死亡したと予測される。過去数１０年の間に、がんの検出、診断
、および治療において著しい進歩が達成された。しかしながら、依然として６７％の人々
が治療の開始の５年後に生存しているに過ぎない。（Siegel, R. L. et al. (2017) Canc
er J. Clin. 67(1): 7 - 30を参照）
【0003】
現行の治療オプションとしては、外科的処置、放射線、高周波、化学療法薬、モノクロ
ーナル抗体などが挙げられる。これらのアプローチのほとんどは、重篤なリスク、毒性の
副作用、高いコスト、および疑わしい有効性と関連付けられる。
ーナル抗体などが挙げられる。これらのアプローチのほとんどは、重篤なリスク、毒性の
副作用、高いコスト、および疑わしい有効性と関連付けられる。
【0004】
だが、がん免疫療法は、近年ある程度の著しい進歩を実証しており、関心を引く進展中
の分野であり続けている。健常な正常ヒト免疫系は、腫瘍関連抗原（ＴＡ）を認識する細
胞溶解性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の能力に基づいて腫瘍細胞を同定および拒絶する先天的な
能力を有する。がん細胞は、通常、細胞性および液性の両方の、統合された免疫応答を活
性化させるはずである。細胞応答は、免疫応答に参加するＣＤ８＋およびＣＤ４＋ Ｔ細
胞を伴う。しかしながら、がんおよび悪性がんの発生において、腫瘍細胞に対する正常な
ＣＴＬ活性は弱体化または喪失される。がん免疫療法は、したがって、腫瘍細胞に対する
ヒト免疫系のＣＴＬ活性を回復または再燃させるための様々なアプローチを採る。ヒトが
ん患者の免疫系は、腫瘍関連抗原（ＴＡ）を発現する悪性細胞を根絶するという目標と共
に利用され得る。
の分野であり続けている。健常な正常ヒト免疫系は、腫瘍関連抗原（ＴＡ）を認識する細
胞溶解性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の能力に基づいて腫瘍細胞を同定および拒絶する先天的な
能力を有する。がん細胞は、通常、細胞性および液性の両方の、統合された免疫応答を活
性化させるはずである。細胞応答は、免疫応答に参加するＣＤ８＋およびＣＤ４＋ Ｔ細
胞を伴う。しかしながら、がんおよび悪性がんの発生において、腫瘍細胞に対する正常な
ＣＴＬ活性は弱体化または喪失される。がん免疫療法は、したがって、腫瘍細胞に対する
ヒト免疫系のＣＴＬ活性を回復または再燃させるための様々なアプローチを採る。ヒトが
ん患者の免疫系は、腫瘍関連抗原（ＴＡ）を発現する悪性細胞を根絶するという目標と共
に利用され得る。
【0005】
細胞傷害性Ｔ細胞はＣＤ８を発現し、がん性細胞を特異的に殺傷することができる。Ｃ
Ｄ４＋ Ｔ細胞またはＴヘルパー細胞は、細胞傷害性応答の発生をサポートし、サイトカ
インを産生し、そしてまたＢ細胞の成熟および増殖を補助する。液性応答の間に、Ｂ細胞
は、活性化され、複製され、分化し、ＴＡ特異的な抗体を産生する。さらなる情報のため
に、Murphy, K. & Weaver, C. "Janeway's Immunobiology" 9th Edition (2016): Garlan
d Science/Taylor & Francis: New York, NYを参照されたい。
Ｄ４＋ Ｔ細胞またはＴヘルパー細胞は、細胞傷害性応答の発生をサポートし、サイトカ
インを産生し、そしてまたＢ細胞の成熟および増殖を補助する。液性応答の間に、Ｂ細胞
は、活性化され、複製され、分化し、ＴＡ特異的な抗体を産生する。さらなる情報のため
に、Murphy, K. & Weaver, C. "Janeway's Immunobiology" 9th Edition (2016): Garlan
d Science/Taylor & Francis: New York, NYを参照されたい。
【0006】
養子Ｔ細胞療法および免疫チェックポイントモジュレーターは、腫瘍を拒絶するヒト免
疫系の能力をブーストすることを目的とした臨床アプローチである。しかしながら、両方
のアプローチは制限を有する。養子Ｔ細胞療法は、要求される特異性のエフェクターＴ細
胞の拡大増殖および形質導入を要求する（Baruch E. N. et al. (2017) Cancer 123(S11)
: 2154 - 62）を参照。この複雑性は現在、このアプローチの応用性を制限している。免
疫チェックポイントモジュレーターのセグメントであるチェックポイント阻害剤治療は、
エフェクター機能を向上させるためにＴ細胞へのブレーキを解放するモノクローナル抗体
に基づく。チェックポイント阻害剤は進行性がん患者のある比率において長期間の臨床応
答を誘導することがあるが、全てのＴ細胞のこの刺激により引き起こされる自己免疫毒性
の副作用が依然として問題である。また、既存のチェックポイント阻害剤治療は、Ｔ細胞
により浸潤されていない「冷」腫瘍に関して有効性の欠如を抱えている。
疫系の能力をブーストすることを目的とした臨床アプローチである。しかしながら、両方
のアプローチは制限を有する。養子Ｔ細胞療法は、要求される特異性のエフェクターＴ細
胞の拡大増殖および形質導入を要求する（Baruch E. N. et al. (2017) Cancer 123(S11)
: 2154 - 62）を参照。この複雑性は現在、このアプローチの応用性を制限している。免
疫チェックポイントモジュレーターのセグメントであるチェックポイント阻害剤治療は、
エフェクター機能を向上させるためにＴ細胞へのブレーキを解放するモノクローナル抗体
に基づく。チェックポイント阻害剤は進行性がん患者のある比率において長期間の臨床応
答を誘導することがあるが、全てのＴ細胞のこの刺激により引き起こされる自己免疫毒性
の副作用が依然として問題である。また、既存のチェックポイント阻害剤治療は、Ｔ細胞
により浸潤されていない「冷」腫瘍に関して有効性の欠如を抱えている。
【0007】
上記に対する有望な代替を表す別のアプローチは、がんワクチンまたはより詳細には治
療用がんワクチンであり、これは腫瘍細胞に対する免疫応答を誘発するために使用される
。これは、腫瘍細胞は本来的に免疫原性に乏しく、ワクチンはこの欠乏を克服するために
役立つことを助けるべきであるという概念に基づく。多くの異なる種類のがんワクチンが
研究されており、一部は有望な結果を示している。Sahin U. et al. (2017) Nature 547(
7662): 222 - 226は、がんに対する多重特異性治療免疫を動員する個別化ＲＮＡミュータ
ノーム（mutanome）ワクチンを試みた。また、Ott P. A. et al. (2017) Nature 547(766
2): 217 - 221は、黒色腫を有する患者のための個別化免疫原性ネオ抗原ワクチンを試み
た。
療用がんワクチンであり、これは腫瘍細胞に対する免疫応答を誘発するために使用される
。これは、腫瘍細胞は本来的に免疫原性に乏しく、ワクチンはこの欠乏を克服するために
役立つことを助けるべきであるという概念に基づく。多くの異なる種類のがんワクチンが
研究されており、一部は有望な結果を示している。Sahin U. et al. (2017) Nature 547(
7662): 222 - 226は、がんに対する多重特異性治療免疫を動員する個別化ＲＮＡミュータ
ノーム（mutanome）ワクチンを試みた。また、Ott P. A. et al. (2017) Nature 547(766
2): 217 - 221は、黒色腫を有する患者のための個別化免疫原性ネオ抗原ワクチンを試み
た。
【0008】
しかしながら、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ（ＧＳＫ）による２つの大きい第ＩＩ
Ｉ相試験を含むいくつかの大スケール臨床試験の失敗後に、がんワクチンの可能性は疑問
のあるものとなった。これらの試験では、アジュバントと組み合わせた組換え腫瘍関連タ
ンパク質に基づくワクチン接種アプローチが使用された。このワクチンプラットフォーム
は、多くの他のもののように、良好な抗体およびＣＤ４＋ Ｔヘルパー応答を誘導できる
ことを証明したが、一貫したＣＴＬ応答を開始させることはできなかった。ＣＴＬは抗腫
瘍免疫応答の鍵となるエフェクターであることを考慮すると、これはそれらのワクチンの
臨床的失敗を説明する可能性がある。技術的課題は、したがって、ヒトにおいて良好なＣ
Ｄ８応答を誘導する新たながんワクチンプラットフォームを提供することである。
Ｉ相試験を含むいくつかの大スケール臨床試験の失敗後に、がんワクチンの可能性は疑問
のあるものとなった。これらの試験では、アジュバントと組み合わせた組換え腫瘍関連タ
ンパク質に基づくワクチン接種アプローチが使用された。このワクチンプラットフォーム
は、多くの他のもののように、良好な抗体およびＣＤ４＋ Ｔヘルパー応答を誘導できる
ことを証明したが、一貫したＣＴＬ応答を開始させることはできなかった。ＣＴＬは抗腫
瘍免疫応答の鍵となるエフェクターであることを考慮すると、これはそれらのワクチンの
臨床的失敗を説明する可能性がある。技術的課題は、したがって、ヒトにおいて良好なＣ
Ｄ８応答を誘導する新たながんワクチンプラットフォームを提供することである。
【0009】
何らかの有効性を達成するために、がんワクチンは、ｉ）がん細胞上で潜在的に発現さ
れるか、またはがん細胞上にのみ発現され、かつ統合された免疫応答を誘発できる抗原を
標的化する能力、ならびにｉｉ）抗原特異的Ｔ細胞の堅牢なクローン性拡大増殖およびエ
フェクターおよびメモリー分化を誘導する能力を有するべきであると考えられる（Coulie
, P. G. (2014) Nat. Rev. Cancer, 14(2): 135 - 146）を参照。
れるか、またはがん細胞上にのみ発現され、かつ統合された免疫応答を誘発できる抗原を
標的化する能力、ならびにｉｉ）抗原特異的Ｔ細胞の堅牢なクローン性拡大増殖およびエ
フェクターおよびメモリー分化を誘導する能力を有するべきであると考えられる（Coulie
, P. G. (2014) Nat. Rev. Cancer, 14(2): 135 - 146）を参照。
【0010】
伝統的に、治療用がんワクチンは、腫瘍抗原（ＴＡ）タンパク質およびアジュバントを
含んでいた。例えば、スティムバックス（Stimuvax）（かつてはＢＬＰ２５リポソームワ
クチン（Ｌ－ＢＬＰ２５）として公知）と呼ばれるワクチンは、ムチン１（ＭＵＣ１）抗
原およびアジュバントＭＰＬ４に由来する合成ペプチドを被包するリポソームであり、米
国特許第６，６００，０１２号明細書、ＢＩＯＭＩＲＡ ＩＮＣ．がこれに関する。また
、切除されたＭＡＧＥ－Ａ３陽性非小細胞肺がんを有する患者における第３相試験におい
て査定されたマグリット（MAGRIT）ワクチン（Vansteenkiste, J. F. et al Lancet Onco
l. 17(6): 822 - 835を参照）は、組換え黒色腫関連抗原ＭＡＧＥ－Ａ３タンパク質と組
み合わせたＡＳ１５アジュバントを含有していた。しかしながら、上記に一般に指し示さ
れるように、これらのスティムバックスおよびマグリットワクチンは、大きい第ＩＩＩ相
試験において有効性を示さなかった。
含んでいた。例えば、スティムバックス（Stimuvax）（かつてはＢＬＰ２５リポソームワ
クチン（Ｌ－ＢＬＰ２５）として公知）と呼ばれるワクチンは、ムチン１（ＭＵＣ１）抗
原およびアジュバントＭＰＬ４に由来する合成ペプチドを被包するリポソームであり、米
国特許第６，６００，０１２号明細書、ＢＩＯＭＩＲＡ ＩＮＣ．がこれに関する。また
、切除されたＭＡＧＥ－Ａ３陽性非小細胞肺がんを有する患者における第３相試験におい
て査定されたマグリット（MAGRIT）ワクチン（Vansteenkiste, J. F. et al Lancet Onco
l. 17(6): 822 - 835を参照）は、組換え黒色腫関連抗原ＭＡＧＥ－Ａ３タンパク質と組
み合わせたＡＳ１５アジュバントを含有していた。しかしながら、上記に一般に指し示さ
れるように、これらのスティムバックスおよびマグリットワクチンは、大きい第ＩＩＩ相
試験において有効性を示さなかった。
【0011】
米国および欧州において承認された最初の「がんワクチン」はプロベンジ（PROVENGE）
であり、これは患者の抗原提示細胞（ＡＰＣ）が前立腺酸ホスファターゼ（ＰＡＰ）抗原
とインキュベートされた自己細胞ワクチンである。適切なＴ細胞応答を活性化させる有効
性および能力にもかかわらず、このワクチンは各患者のために個々に作られることを要求
し、それにより、複雑かつ高価な生産プロセスを伴う。結果として、ワクチンの実用性は
限定されている（米国特許出願公開第２００４／１４１９９１号明細書、ＬＡＵＳ ｅｔ
ａｌ．を参照）。
であり、これは患者の抗原提示細胞（ＡＰＣ）が前立腺酸ホスファターゼ（ＰＡＰ）抗原
とインキュベートされた自己細胞ワクチンである。適切なＴ細胞応答を活性化させる有効
性および能力にもかかわらず、このワクチンは各患者のために個々に作られることを要求
し、それにより、複雑かつ高価な生産プロセスを伴う。結果として、ワクチンの実用性は
限定されている（米国特許出願公開第２００４／１４１９９１号明細書、ＬＡＵＳ ｅｔ
ａｌ．を参照）。
【0012】
ベクターベースのがんワクチンは、大きな有望性を示して強い治療的関心を生じさせて
おり、いくつかのベクター技術、アジュバントおよび組合せが診療所において試験されて
いる。この戦略の基礎は、腫瘍抗原を送達するために組換えウイルスベクターを使用する
ことである。ウイルスベクター自体は複製欠陥性となるように改変されているため、もは
や患者に対して有害ではない。ベクターは、ＴＡの他に、アジュバントとして作用して免
疫応答の誘導を増強する他のウイルス抗原の両方を発現する。理想的なウイルスベクター
は、いくつかの特性：ｉ）安全であること、ｉｉ）効率的な抗原提示を可能にすること、
ｉｉｉ）統合された免疫応答を誘発すること、およびｉｖ）大スケールで製造できること
を有するべきである（Melief, C. J. M. et al. (2015) J. Clin. Invest. 125(9): 3401
- 3412）を参照。
おり、いくつかのベクター技術、アジュバントおよび組合せが診療所において試験されて
いる。この戦略の基礎は、腫瘍抗原を送達するために組換えウイルスベクターを使用する
ことである。ウイルスベクター自体は複製欠陥性となるように改変されているため、もは
や患者に対して有害ではない。ベクターは、ＴＡの他に、アジュバントとして作用して免
疫応答の誘導を増強する他のウイルス抗原の両方を発現する。理想的なウイルスベクター
は、いくつかの特性：ｉ）安全であること、ｉｉ）効率的な抗原提示を可能にすること、
ｉｉｉ）統合された免疫応答を誘発すること、およびｉｖ）大スケールで製造できること
を有するべきである（Melief, C. J. M. et al. (2015) J. Clin. Invest. 125(9): 3401
- 3412）を参照。
【0013】
いくつかのウイルスベクターが臨床使用のために提唱されてきた。例えば、複製欠陥性
アデノウイルス（Ａｄ）は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）－１について欧州特許第２
，１３０，９２１号明細書、ＧＬＡＸＯＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＩＯＬＯＧＡＬＳ Ｓ
Ａ、またはマラリアについて米国特許出願公開第２０１２／０８２６９４号明細書、ＣＲ
ＵＣＥＬＬにおいて開示されるものなど、感染性疾患のためのワクチンベクターとして研
究されてきた。
アデノウイルス（Ａｄ）は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）－１について欧州特許第２
，１３０，９２１号明細書、ＧＬＡＸＯＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＩＯＬＯＧＡＬＳ Ｓ
Ａ、またはマラリアについて米国特許出願公開第２０１２／０８２６９４号明細書、ＣＲ
ＵＣＥＬＬにおいて開示されるものなど、感染性疾患のためのワクチンベクターとして研
究されてきた。
【0014】
ワクチン接種の分野において、ワクチン投与には、典型的には、１回目の注射と同じ方
式であるが、後の１つまたは複数の時点において投与される１つまたは複数のブースティ
ング注射が後続する。１回目（プライミング）の投与および以後（ブースティング）の投
与の間隔の間に、免疫系は、細胞性および液性の両方の応答を誘発することにより応答す
る（Woodland, D. L. (2004) Trends Immunol. 25(2): 98 - 104を参照）。
式であるが、後の１つまたは複数の時点において投与される１つまたは複数のブースティ
ング注射が後続する。１回目（プライミング）の投与および以後（ブースティング）の投
与の間隔の間に、免疫系は、細胞性および液性の両方の応答を誘発することにより応答す
る（Woodland, D. L. (2004) Trends Immunol. 25(2): 98 - 104を参照）。
【0015】
しかしながら、同じベクターを用いる繰返しの投与（同種ブースティング）は、腫瘍抗
原特異的Ｔ細胞応答をブーストせず、その理由は、競合する免疫原性がウイルス抗原に対
して生成され、ウイルスカプシドの表面抗原を認識し、組換えベクターによる抗原提示細
胞のさらなる感染を予防する抗体の産生が結果としてもたらされるからである。特に、同
種ブースティングは、挿入された腫瘍抗原に対してＣＤ８ Ｔ細胞を誘導しない。この問
題を回避するための潜在的なアプローチは、２つの異なるウイルスベクターなどの異なる
抗原送達システムを使用するワクチンの逐次的な投与（異種ブースティング）を伴う。欧
州特許出願公開第２，６３１，２９０号明細書、ＮＡＴＩＯＮＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴ
Ｙ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮは、ワクシニアウイルスベクターおよびセンダイウイルスベ
クターを含むプライム／ブーストワクチン用のウイルスベクターを開示する。Chen, J.-L
. et al. (2015) Int. J. Cancer 136(6): E590 - 601は、ＮＹ－ＥＳＯ－１特異的抗体
、ならびにイスコマトリックス（ISCOMATRIX）中のＮＹ－ＥＳＯ－１タンパク質を用いて
プライミングされ、組換えＮＹ－ＥＳＯ－１鶏痘ウイルスを用いてブーストされた黒色腫
患者における細胞応答を記載する。
原特異的Ｔ細胞応答をブーストせず、その理由は、競合する免疫原性がウイルス抗原に対
して生成され、ウイルスカプシドの表面抗原を認識し、組換えベクターによる抗原提示細
胞のさらなる感染を予防する抗体の産生が結果としてもたらされるからである。特に、同
種ブースティングは、挿入された腫瘍抗原に対してＣＤ８ Ｔ細胞を誘導しない。この問
題を回避するための潜在的なアプローチは、２つの異なるウイルスベクターなどの異なる
抗原送達システムを使用するワクチンの逐次的な投与（異種ブースティング）を伴う。欧
州特許出願公開第２，６３１，２９０号明細書、ＮＡＴＩＯＮＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴ
Ｙ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮは、ワクシニアウイルスベクターおよびセンダイウイルスベ
クターを含むプライム／ブーストワクチン用のウイルスベクターを開示する。Chen, J.-L
. et al. (2015) Int. J. Cancer 136(6): E590 - 601は、ＮＹ－ＥＳＯ－１特異的抗体
、ならびにイスコマトリックス（ISCOMATRIX）中のＮＹ－ＥＳＯ－１タンパク質を用いて
プライミングされ、組換えＮＹ－ＥＳＯ－１鶏痘ウイルスを用いてブーストされた黒色腫
患者における細胞応答を記載する。
【0016】
多くのプライム／ブーストワクチンはＤＮＡワクチンから構成され、様々なウイルスベ
クターが試みられてきた。例えば、国際公開第２００６／０５７４５４号パンフレット、
ＪＡＰＡＮ ＳＣＩＥＮＣＥ ＡＮＤ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＡＧＥＮＣＹは、プライ
ミングのためにバチルス・カルメット－ゲラン（Bacillus Calmette-Guerin）（ＢＣＧ）
ベクターおよびブースティングのために弱毒化ワクシニアウイルス株ＤＩｓを使用するこ
とによるＨＩＶ－１ ｇａｇ Ｅ抗原に対して開発された異種プライム／ブーストＨＩＶ
ワクチンを開示する。Odunsi, K. et al. (2012) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 109
(15): 5797 - 5802は、２つの異なるオルソポックスベクター（ワクシニアおよび鶏痘）
ならびに抗原ＮＹ－ＥＳＯ－１を用いるプライム－ブーストアプローチを使用した限定さ
れたサイズの第Ｉ相研究を記載し、黒色腫および卵巣がん患者の中でのあり得る臨床的利
益を示した。
クターが試みられてきた。例えば、国際公開第２００６／０５７４５４号パンフレット、
ＪＡＰＡＮ ＳＣＩＥＮＣＥ ＡＮＤ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＡＧＥＮＣＹは、プライ
ミングのためにバチルス・カルメット－ゲラン（Bacillus Calmette-Guerin）（ＢＣＧ）
ベクターおよびブースティングのために弱毒化ワクシニアウイルス株ＤＩｓを使用するこ
とによるＨＩＶ－１ ｇａｇ Ｅ抗原に対して開発された異種プライム／ブーストＨＩＶ
ワクチンを開示する。Odunsi, K. et al. (2012) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 109
(15): 5797 - 5802は、２つの異なるオルソポックスベクター（ワクシニアおよび鶏痘）
ならびに抗原ＮＹ－ＥＳＯ－１を用いるプライム－ブーストアプローチを使用した限定さ
れたサイズの第Ｉ相研究を記載し、黒色腫および卵巣がん患者の中でのあり得る臨床的利
益を示した。
【0017】
ヒトアデノウイルスは、それらの特性（例えば、複製欠損、安定性、高い免疫原性、多
数の細胞種に形質導入する能力など）のため、がんワクチンの開発のために科学者により
広く使用されている。天然のアデノウイルス感染症はヒト集団において風土性であり、ヒ
トの大部分は人生の最初の５年以内に血清転換する。そのため、ヒトアデノウイルスに由
来するがんワクチンは、既存の液性および細胞性免疫に遭遇し、それがその有効性を制限
する（Coughlan, L. (2015) et al. J. Pharm. Pharmacol. 67(3): 382 - 399、および
米国特許第６，１４０，０８７号明細書、ＡＤＶＥＣ ＩＮＣ、名称「Adenovirus Vecto
rs for Gene Therapy」を参照）。
数の細胞種に形質導入する能力など）のため、がんワクチンの開発のために科学者により
広く使用されている。天然のアデノウイルス感染症はヒト集団において風土性であり、ヒ
トの大部分は人生の最初の５年以内に血清転換する。そのため、ヒトアデノウイルスに由
来するがんワクチンは、既存の液性および細胞性免疫に遭遇し、それがその有効性を制限
する（Coughlan, L. (2015) et al. J. Pharm. Pharmacol. 67(3): 382 - 399、および
米国特許第６，１４０，０８７号明細書、ＡＤＶＥＣ ＩＮＣ、名称「Adenovirus Vecto
rs for Gene Therapy」を参照）。
【0018】
米国特許第９，７１４，４３５号明細書、ＩＳＩＳ ＩＮＮＯＶＡＴＩＯＮ、名称「Si
mian Adenovirus and hybrid Adenoviral vectors」および欧州特許出願公開第２，１６
３，２６０号明細書、ＩＳＴＩＴＵＴＯ ＲＩＣＨＥＲＣＨＥ ＤＩ ＢＩＯＬＯＧＩＣ
Ａ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲＥ、名称「Chimpanzee Adenovirus Vaccine Carriers」は、ヒト
においていかなる既存の免疫も逃れる非ヒト霊長動物に由来する複製欠陥性アデノウイル
スを科学者がどのように開発したのかを説明する。チンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡ
ｄ）は、いくつかのクオリティ：ｉ）堅牢な免疫原性、ｉｉ）ヒトにおける低い血清有病
率、ｉｉｉ）標準化された生産的製造を示す。
mian Adenovirus and hybrid Adenoviral vectors」および欧州特許出願公開第２，１６
３，２６０号明細書、ＩＳＴＩＴＵＴＯ ＲＩＣＨＥＲＣＨＥ ＤＩ ＢＩＯＬＯＧＩＣ
Ａ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲＥ、名称「Chimpanzee Adenovirus Vaccine Carriers」は、ヒト
においていかなる既存の免疫も逃れる非ヒト霊長動物に由来する複製欠陥性アデノウイル
スを科学者がどのように開発したのかを説明する。チンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡ
ｄ）は、いくつかのクオリティ：ｉ）堅牢な免疫原性、ｉｉ）ヒトにおける低い血清有病
率、ｉｉｉ）標準化された生産的製造を示す。
【0019】
弱毒化非複製性ワクシニアウイルスアンカラ株（ＭＶＡ）もまた公知である。このウイ
ルスベクターは、優れた安全性プロファイルと共に免疫応答を誘発することが示されてい
る。ＭＶＡは、結果としてそのゲノムの約１５％の喪失を伴うニワトリ胚線維芽細胞にお
ける５７０回より多くの継代により弱毒化されている。そのため、ＭＶＡは、多くの哺乳
動物細胞においてビリオンを成熟させる能力を欠如しており、強い免疫原性および増幅の
低減したリスクと関連付けられる。ＩＳＩＳ ＩＮＮＯＶＡＴＩＯＮ Ｌｉｍｉｔｅｄの
国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットは、導入遺伝子がポックスウイルスゲ
ノムに挿入される、ＭＶＡを含むポックスウイルス発現系を記載し、したがって、感染症
に対するワクチン、がん治療および遺伝子療法の目的のためのポックスウイルスベクター
ならびに目的の遺伝子を標的細胞に移入するためのその使用を提供する。Ｉｓｉｓ Ｉｎ
ｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの欧州特許出願公開第２０４４９４７号明細書もあり
、これは、免疫応答、特に、インフルエンザウイルスに対するＴ細胞免疫応答を誘導する
ために使用されるＭＶＡウイルスベクターを記載する。
ルスベクターは、優れた安全性プロファイルと共に免疫応答を誘発することが示されてい
る。ＭＶＡは、結果としてそのゲノムの約１５％の喪失を伴うニワトリ胚線維芽細胞にお
ける５７０回より多くの継代により弱毒化されている。そのため、ＭＶＡは、多くの哺乳
動物細胞においてビリオンを成熟させる能力を欠如しており、強い免疫原性および増幅の
低減したリスクと関連付けられる。ＩＳＩＳ ＩＮＮＯＶＡＴＩＯＮ Ｌｉｍｉｔｅｄの
国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットは、導入遺伝子がポックスウイルスゲ
ノムに挿入される、ＭＶＡを含むポックスウイルス発現系を記載し、したがって、感染症
に対するワクチン、がん治療および遺伝子療法の目的のためのポックスウイルスベクター
ならびに目的の遺伝子を標的細胞に移入するためのその使用を提供する。Ｉｓｉｓ Ｉｎ
ｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの欧州特許出願公開第２０４４９４７号明細書もあり
、これは、免疫応答、特に、インフルエンザウイルスに対するＴ細胞免疫応答を誘導する
ために使用されるＭＶＡウイルスベクターを記載する。
【0020】
感染性疾患の治癒を目的として、異種プライム－ブーストレジームにおけるウイルスベ
クターベースのワクチンが開発され、強いＣＴＬ応答を誘導するために最適化されている
。このワクチン戦略は、同じ免疫原を持つ改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）を用いるプ
ライムおよびブーストのためにチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ）を用いた。Coug
hlan L. et al. (2015) J. Pharm. Pharmacol. 67(3): 382 - 99およびHui E. P. et al.
(2013) Cancer Res. 73(6): 1676 - 88は、前臨床研究および感染性疾患状況における臨
床研究における両方のウイルスベクターの個々の試験、ならびにそれらがどのように非常
に高い安全性プロファイルを有するのかを報告する。
クターベースのワクチンが開発され、強いＣＴＬ応答を誘導するために最適化されている
。このワクチン戦略は、同じ免疫原を持つ改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）を用いるプ
ライムおよびブーストのためにチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ）を用いた。Coug
hlan L. et al. (2015) J. Pharm. Pharmacol. 67(3): 382 - 99およびHui E. P. et al.
(2013) Cancer Res. 73(6): 1676 - 88は、前臨床研究および感染性疾患状況における臨
床研究における両方のウイルスベクターの個々の試験、ならびにそれらがどのように非常
に高い安全性プロファイルを有するのかを報告する。
【0021】
欧州特許出願公開第２，０４４，９４７号明細書、ＩＳＩＳ ＩＮＮＯＶＡＴＩＯＮは
、インフルエンザの予防におけるプライミング用のアデノウイルスベクターおよび次にブ
ースティング用のＭＶＡを有するワクチンを開示する。
、インフルエンザの予防におけるプライミング用のアデノウイルスベクターおよび次にブ
ースティング用のＭＶＡを有するワクチンを開示する。
【0022】
Ewer K. J. et al. (2013) Nat. Commun. 4: 2836およびOgwang, C. et al. (2015) Sc
i. Transl. Med. 7(286): 286re5は、マラリア用のプライミングとしてのＣｈＡｄおよび
ブースティングとしてのＭＶＡを有するワクチンを開示する。
i. Transl. Med. 7(286): 286re5は、マラリア用のプライミングとしてのＣｈＡｄおよび
ブースティングとしてのＭＶＡを有するワクチンを開示する。
【0023】
同じプライム－ブーストアプローチは、５Ｔ４抗原を発現するがんマウスモデルにおい
てCappuccini, F. et al. (2017) Oncotarget 8(29): 47474 - 47489、がんマウスモデル
が前立腺がん抗原であるＳＴＥＡＰ１を発現するCappuccini, F. et al. (2016) Cancer
Immunol. Immunother. CII 65(6): 701 - 713において記載されている。全てのこれらの
研究において、異種プライム－ブーストワクチンは、ＴＡに対する強い免疫応答および抗
原特異的ＣＤ８＋ Ｔ細胞の活性化を誘導した。
てCappuccini, F. et al. (2017) Oncotarget 8(29): 47474 - 47489、がんマウスモデル
が前立腺がん抗原であるＳＴＥＡＰ１を発現するCappuccini, F. et al. (2016) Cancer
Immunol. Immunother. CII 65(6): 701 - 713において記載されている。全てのこれらの
研究において、異種プライム－ブーストワクチンは、ＴＡに対する強い免疫応答および抗
原特異的ＣＤ８＋ Ｔ細胞の活性化を誘導した。
【0024】
国際公開第２０１７／１２０６７０号パンフレット（Ｌｉｃｈｔｙ、Ｂ． ＆ Ｂｅｌ
ｌ， Ｊ．）もあり、これは、抗原特異的Ｔリンパ球の刺激および有意な生存を結果とし
てもたらす、臨床的に関連するがんモデルの結果における複製性腫瘍溶解性ラブドウイル
スおよび免疫チェックポイント阻害剤の併用投与を記載する。腫瘍溶解性ラブドウイルス
は、悪性細胞に特異的に感染し、それにおいて複製され、それを殺傷し、正常組織は影響
されないままとする。腫瘍溶解性ラブドウイルス（例えば、ＶＳＶｄｅｌｔａ５ ｌまた
はＭａｍｂａ ＭＧ １）は、ＭＡＧＥＡ３、ヒトパピローマウイルスＥ６／Ｅ７融合タ
ンパク質、前立腺タンパク質のヒト６回膜貫通上皮抗原、またはがん精巣抗原から選択さ
れる、試験動物が既存の免疫を有する腫瘍抗原を発現する。
ｌ， Ｊ．）もあり、これは、抗原特異的Ｔリンパ球の刺激および有意な生存を結果とし
てもたらす、臨床的に関連するがんモデルの結果における複製性腫瘍溶解性ラブドウイル
スおよび免疫チェックポイント阻害剤の併用投与を記載する。腫瘍溶解性ラブドウイルス
は、悪性細胞に特異的に感染し、それにおいて複製され、それを殺傷し、正常組織は影響
されないままとする。腫瘍溶解性ラブドウイルス（例えば、ＶＳＶｄｅｌｔａ５ ｌまた
はＭａｍｂａ ＭＧ １）は、ＭＡＧＥＡ３、ヒトパピローマウイルスＥ６／Ｅ７融合タ
ンパク質、前立腺タンパク質のヒト６回膜貫通上皮抗原、またはがん精巣抗原から選択さ
れる、試験動物が既存の免疫を有する腫瘍抗原を発現する。
【0025】
治療用がんワクチンの成功は、腫瘍上に発現されるが正常組織上には発現されない腫瘍
抗原を標的化することを必要とする。がん生殖細胞系列抗原は、いくつかの種類のがんに
おいて生理学的に発現されるが、ＭＨＣ Ｉ分子の欠如に起因して免疫系に抗原を提示で
きない生殖細胞系列細胞を除いて、分化した正常組織において発現されないタンパク質の
異種群である。これらの抗原は、がん生殖細胞系列遺伝子によりコードされる。Gnjatic,
S. et al. (2006) Cancer Res. 95: 1 - 30に記載されるように、ＮＹ－ＥＳＯ－１およ
びＭＡＧＥ－Ａ３は、原型的なＭＡＧＥ型抗原であり、群の最も代表的なもののうちの２
つである。また、Coulie P. G. et al. (2014)、上掲は、多数の患者において起こること
が示された応答を記載する。
抗原を標的化することを必要とする。がん生殖細胞系列抗原は、いくつかの種類のがんに
おいて生理学的に発現されるが、ＭＨＣ Ｉ分子の欠如に起因して免疫系に抗原を提示で
きない生殖細胞系列細胞を除いて、分化した正常組織において発現されないタンパク質の
異種群である。これらの抗原は、がん生殖細胞系列遺伝子によりコードされる。Gnjatic,
S. et al. (2006) Cancer Res. 95: 1 - 30に記載されるように、ＮＹ－ＥＳＯ－１およ
びＭＡＧＥ－Ａ３は、原型的なＭＡＧＥ型抗原であり、群の最も代表的なもののうちの２
つである。また、Coulie P. G. et al. (2014)、上掲は、多数の患者において起こること
が示された応答を記載する。
【発明の概要】
【0026】
本発明によれば、核酸分子をカプシドで包んだチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ
）ベクターであって、核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１がん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／
もしくはＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド
配列であって、動物細胞においてがん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発
現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、なら
びにアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクターが提供される
。有利には、そのようなＣｈＡｄウイルスベクターは、安定かつ十分に研究されており、
ヒトアデノウイルスに対する抗体により中和されず、かつ複製欠損性となるように操作さ
れている。それらは、挿入される目的の抗原のために高容量を有し、アデノウイルスＥ１
遺伝子を含有するＨＥＫ２９３細胞中で製造することができる。
）ベクターであって、核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１がん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／
もしくはＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド
配列であって、動物細胞においてがん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発
現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、なら
びにアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクターが提供される
。有利には、そのようなＣｈＡｄウイルスベクターは、安定かつ十分に研究されており、
ヒトアデノウイルスに対する抗体により中和されず、かつ複製欠損性となるように操作さ
れている。それらは、挿入される目的の抗原のために高容量を有し、アデノウイルスＥ１
遺伝子を含有するＨＥＫ２９３細胞中で製造することができる。
【0027】
ＭＡＧＥ型抗原は、がん患者においてＣＤ８ Ｔ細胞を誘導することが公知である腫瘍
特異的な共有されるヒト腫瘍抗原である。それらは、多くのがん種において発現され、Ｍ
ＨＣ－１分子を有しない男性生殖細胞系列細胞を除いて、正常組織中で発現されない。
特異的な共有されるヒト腫瘍抗原である。それらは、多くのがん種において発現され、Ｍ
ＨＣ－１分子を有しない男性生殖細胞系列細胞を除いて、正常組織中で発現されない。
【0028】
ＮＹ－ＥＳＯ－１（遺伝子名ＣＴＡＧ１）は多くのがん患者において強いＣＤ８応答を
誘導し、複数のＨＬＡクラスＩ特異性により表されるように、多数のＣＤ８エピトープが
同定され得る。
誘導し、複数のＨＬＡクラスＩ特異性により表されるように、多数のＣＤ８エピトープが
同定され得る。
【0029】
特定の形態では、ＣｈＡｄベクターは、（ａ）国際公開第２０１２／１７２２７７号パ
ンフレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ１；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７
７号パンフレットに開示された配列番号３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくと
も８０％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公
開第２０１７／２２１０３１号パンフレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、
国際公開第２０１７／２２１０３１号パンフレットに開示された配列番号１０のポリヌク
レオチドもしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈ
ＡｄＯｘ２であってもよい。
ンフレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ１；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７
７号パンフレットに開示された配列番号３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくと
も８０％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公
開第２０１７／２２１０３１号パンフレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、
国際公開第２０１７／２２１０３１号パンフレットに開示された配列番号１０のポリヌク
レオチドもしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈ
ＡｄＯｘ２であってもよい。
【0030】
核酸分子をカプシドで包んだ（encapdisating）改変ワクシニアウイルスアンカラ（Ｍ
ＶＡ）ベクターであって、核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－
ＥＳＯ－１がん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原およ
び／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオ
チド配列であって、動物細胞においてがん抗原またはその断片の翻訳、転写および／また
は発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を
含む、ＭＶＡベクターもまた本発明により提供される。有利には、そのようなＭＶＡベク
ターは、ヒトにおいて複製ができず、天然痘ワクチンとしての長い安全性追跡記録を有す
る。ＭＶＡは、ＣｈＡｄを用いるプライミング後に優れたブースティングを提供する。Ｍ
ＶＡは、病原性および免疫系逃避因子を有さず、高度に免疫原性であり、かつニワトリ胚
性線維芽細胞または不死化アヒル胚性細胞系において容易に製造される。
ＶＡ）ベクターであって、核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－
ＥＳＯ－１がん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原およ
び／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオ
チド配列であって、動物細胞においてがん抗原またはその断片の翻訳、転写および／また
は発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を
含む、ＭＶＡベクターもまた本発明により提供される。有利には、そのようなＭＶＡベク
ターは、ヒトにおいて複製ができず、天然痘ワクチンとしての長い安全性追跡記録を有す
る。ＭＶＡは、ＣｈＡｄを用いるプライミング後に優れたブースティングを提供する。Ｍ
ＶＡは、病原性および免疫系逃避因子を有さず、高度に免疫原性であり、かつニワトリ胚
性線維芽細胞または不死化アヒル胚性細胞系において容易に製造される。
【0031】
ＭＶＡベクターは、より特定の形態では、国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフ
レットまたは欧州特許出願公開第２０４４９４７号明細書に開示された通りであってもよ
い。
レットまたは欧州特許出願公開第２０４４９４７号明細書に開示された通りであってもよ
い。
【0032】
本明細書に記載されるような本発明のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターについて
、ＭＡＧＥ抗原は、好ましくは、ＭＡＧＥ３Ａであり、そのため、配列番号１のアミノ酸
配列、またはそれと少なくとも４６％、好ましくは少なくとも６９％、より好ましくは少
なくとも９５％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫原性断片の配列を有する
。
、ＭＡＧＥ抗原は、好ましくは、ＭＡＧＥ３Ａであり、そのため、配列番号１のアミノ酸
配列、またはそれと少なくとも４６％、好ましくは少なくとも６９％、より好ましくは少
なくとも９５％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫原性断片の配列を有する
。
【0033】
本明細書に記載されるような本発明のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターについて
、ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原は、配列番号３のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７
５％、好ましくは少なくとも７６．７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫
原性断片の配列を有する。
、ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原は、配列番号３のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７
５％、好ましくは少なくとも７６．７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫
原性断片の配列を有する。
【0034】
本明細書に記載されるような本発明のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターについて
、ＬＡＧＥ１抗原は、配列番号５のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７８％、好ま
しくは少なくとも９７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫原性断片の配列
を有する。
、ＬＡＧＥ１抗原は、配列番号５のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７８％、好ま
しくは少なくとも９７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫原性断片の配列
を有する。
【0035】
本発明の好ましいＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターにおいて、ポリヌクレオチド
配列は、ヒトＨＬＡクラスＩＩ組織適合性抗原ガンマ鎖（ｈｌｉまたはｌｉ）をさらにコ
ードしてもよく、かつｌｉは、配列番号６のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７９
％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有してもよく、それにより、がん抗
原は、ｌｉとの融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、より好ましくは、断
片は膜貫通ドメインであり、よりいっそう好ましくは、膜貫通ドメインは、アミノ酸残基
３０～５５または３０～６１を含む。特に好ましい実施形態では、膜貫通ドメインは、配
列番号７のアミノ酸配列を有する。
配列は、ヒトＨＬＡクラスＩＩ組織適合性抗原ガンマ鎖（ｈｌｉまたはｌｉ）をさらにコ
ードしてもよく、かつｌｉは、配列番号６のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７９
％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有してもよく、それにより、がん抗
原は、ｌｉとの融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、より好ましくは、断
片は膜貫通ドメインであり、よりいっそう好ましくは、膜貫通ドメインは、アミノ酸残基
３０～５５または３０～６１を含む。特に好ましい実施形態では、膜貫通ドメインは、配
列番号７のアミノ酸配列を有する。
【0036】
本発明の代替的に好ましいＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターにおいて、ポリヌク
レオチド配列は、配列番号８のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも８１％の同一性を
有する配列、もしくはその断片の配列を有するｔＰＡをさらにコードしてもよく、それに
より、がん抗原は、ｔＰＡとの融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、より
好ましくは、断片は、２１アミノ酸のリーダー配列を含み、よりいっそう好ましくは、２
１アミノ酸のリーダー配列は配列番号９である。
レオチド配列は、配列番号８のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも８１％の同一性を
有する配列、もしくはその断片の配列を有するｔＰＡをさらにコードしてもよく、それに
より、がん抗原は、ｔＰＡとの融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、より
好ましくは、断片は、２１アミノ酸のリーダー配列を含み、よりいっそう好ましくは、２
１アミノ酸のリーダー配列は配列番号９である。
【0037】
有利には、ｌｉまたはｔＰＡを含めることは、ウイルスベクターで製造される抗原の免
疫原性を増加させる。これは、抗原特異的Ｔ細胞応答の大きさ、広さおよび持続期間を増
加させる。
疫原性を増加させる。これは、抗原特異的Ｔ細胞応答の大きさ、広さおよび持続期間を増
加させる。
【0038】
本発明のＣｈＡｄベクターは、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、（ｉ）
本明細書においてそれぞれ定義されるような、ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断
片およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）本明細書
においてそれぞれ定義されるような、ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片および
ＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列を有す
るように構築されてもよい。
本明細書においてそれぞれ定義されるような、ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断
片およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）本明細書
においてそれぞれ定義されるような、ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片および
ＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列を有す
るように構築されてもよい。
【0039】
本発明のＭＶＡベクターは、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、（ｉ）本
明細書においてそれぞれ定義されるような、ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片
および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）
本明細書においてそれぞれ定義されるような、ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断
片および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌク
レオチド配列であって、ＭＡＧＥがん抗原、ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはＬＡＧＥ１
がん抗原のうちの少なくとも１つが断片である、ポリヌクレオチド配列を有するように構
築されてもよい。
明細書においてそれぞれ定義されるような、ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片
および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）
本明細書においてそれぞれ定義されるような、ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断
片および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌク
レオチド配列であって、ＭＡＧＥがん抗原、ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはＬＡＧＥ１
がん抗原のうちの少なくとも１つが断片である、ポリヌクレオチド配列を有するように構
築されてもよい。
【0040】
本発明者らは、ＮＹＥＳＯ－１は、ヒトにおいてＭＡＧＥＡ３よりも免疫原性であり得
ると考える。また、がん患者において、患者のある特定の群において、腫瘍は、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１ではなくＭＡＧＥＡ３を発現することがより頻繁に見出される。したがって、あ
り得る懸念は、ＭＡＧＥＡ３抗原およびＮＹ－ＥＳＯ－１抗原の両方を含む、本発明のプ
ライム－ブーストレジメンにおけるＭＶＡブーストベクターを有することで、ＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１に対して免疫優性の免疫応答およびＭＡＧＥＡ３に対して有効でない免疫化に繋が
る可能性があるということである。したがって、少なくともそのような特定の患者群、ま
たはＮＹ－ＥＳＯ－１と比較してＭＡＧＥＡ３のより高い発現を有する群について、ＭＡ
ＧＥＡ３がん抗原またはその免疫原性断片のみを含むＭＶＡベクターがプライム－ブース
トレジメンにおいて好ましい。すなわち、ある特定の実施形態では、本発明は、何らかの
ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはその免疫原性断片を含むＭＶＡベクターを含まない。同
様に、ある特定の実施形態では、本発明は、何らかのＬＡＧＥ１がん抗原またはその免疫
原性断片を含むＭＶＡベクターを含まない。
ると考える。また、がん患者において、患者のある特定の群において、腫瘍は、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１ではなくＭＡＧＥＡ３を発現することがより頻繁に見出される。したがって、あ
り得る懸念は、ＭＡＧＥＡ３抗原およびＮＹ－ＥＳＯ－１抗原の両方を含む、本発明のプ
ライム－ブーストレジメンにおけるＭＶＡブーストベクターを有することで、ＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１に対して免疫優性の免疫応答およびＭＡＧＥＡ３に対して有効でない免疫化に繋が
る可能性があるということである。したがって、少なくともそのような特定の患者群、ま
たはＮＹ－ＥＳＯ－１と比較してＭＡＧＥＡ３のより高い発現を有する群について、ＭＡ
ＧＥＡ３がん抗原またはその免疫原性断片のみを含むＭＶＡベクターがプライム－ブース
トレジメンにおいて好ましい。すなわち、ある特定の実施形態では、本発明は、何らかの
ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはその免疫原性断片を含むＭＶＡベクターを含まない。同
様に、ある特定の実施形態では、本発明は、何らかのＬＡＧＥ１がん抗原またはその免疫
原性断片を含むＭＶＡベクターを含まない。
【0041】
好ましい実施形態では、ＭＶＡベクターのそれぞれ、ＭＡＧＥがん抗原およびＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、またはＭＡＧＥがん抗原およびＬＡＧＥ１のそれぞれは、免疫原性断片である
。
ＳＯ－１、またはＭＡＧＥがん抗原およびＬＡＧＥ１のそれぞれは、免疫原性断片である
。
【0042】
本発明のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターが、発現時に抗原の融合物をもたらす
ように構築される場合、ポリヌクレオチド配列はまた、好ましくは、発現された場合に、
ＭＡＧＥおよびＮＹ－ＥＳＯ－１もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはその断片をいずれか
の順序において融合タンパク質として連結する、５～９アミノ酸の好適なポリペプチドリ
ンカー、より好ましくは、アミノ酸配列ＧＧＧＰＧＧＧを有するポリペプチドリンカーを
コードする。
ように構築される場合、ポリヌクレオチド配列はまた、好ましくは、発現された場合に、
ＭＡＧＥおよびＮＹ－ＥＳＯ－１もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはその断片をいずれか
の順序において融合タンパク質として連結する、５～９アミノ酸の好適なポリペプチドリ
ンカー、より好ましくは、アミノ酸配列ＧＧＧＰＧＧＧを有するポリペプチドリンカーを
コードする。
【0043】
本発明はまた、したがって、上述のようなおよび本明細書に記載されるようなＣｈＡｄ
またはＭＶＡベクターを含む免疫原性組成物を提供する。そのような組成物は、好適なア
ジュバントをさらに含んでもよい。
またはＭＶＡベクターを含む免疫原性組成物を提供する。そのような組成物は、好適なア
ジュバントをさらに含んでもよい。
【0044】
本発明はさらに、本明細書に記載されるようなＣｈＡｄベクターまたはＭＶＡベクター
中に含有される、融合タンパク質をコードする配列を含む単離されたポリヌクレオチドを
提供する。
中に含有される、融合タンパク質をコードする配列を含む単離されたポリヌクレオチドを
提供する。
【0045】
好ましいポリヌクレオチドは、ＭＡＧＥＡ３／リンカー／ＮＹ－ＥＳＯ－１融合タンパ
ク質をコードする配列番号１０の核酸配列を含む。配列番号１０と少なくとも７０％の同
一性を有する配列を有するポリヌクレオチドもまた可能である。５０１アミノ酸の翻訳さ
れたタンパク質配列は、配列番号１１またはそれと少なくとも７０％の同一性を有する配
列に示される通りである。
ク質をコードする配列番号１０の核酸配列を含む。配列番号１０と少なくとも７０％の同
一性を有する配列を有するポリヌクレオチドもまた可能である。５０１アミノ酸の翻訳さ
れたタンパク質配列は、配列番号１１またはそれと少なくとも７０％の同一性を有する配
列に示される通りである。
【0046】
別の好ましいポリヌクレオチドは、ｈｌｉ／ＭＡＧＥＡ３／リンカー／ＮＹ－ＥＳＯ－
１融合タンパク質をコードする配列番号１２の核酸配列を有する。配列番号１２と少なく
とも７０％の同一性を有する配列を有するポリヌクレオチドもまた可能である。翻訳され
たタンパク質配列は、配列番号１３またはそれと少なくとも７０％の同一性を有する配列
に示される。
１融合タンパク質をコードする配列番号１２の核酸配列を有する。配列番号１２と少なく
とも７０％の同一性を有する配列を有するポリヌクレオチドもまた可能である。翻訳され
たタンパク質配列は、配列番号１３またはそれと少なくとも７０％の同一性を有する配列
に示される。
【0047】
さらに別の好ましいポリヌクレオチドは、ｔＰＡ／ＭＡＧＥＡ３／リンカー／ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１融合タンパク質をコードする配列番号１４の核酸配列を有する。配列番号１２と
少なくとも７０％の同一性を有する配列を有するポリヌクレオチドもまた可能である。翻
訳されたタンパク質配列は、配列番号１５またはそれと少なくとも７０％の同一性を有す
る配列に示される。
ＳＯ－１融合タンパク質をコードする配列番号１４の核酸配列を有する。配列番号１２と
少なくとも７０％の同一性を有する配列を有するポリヌクレオチドもまた可能である。翻
訳されたタンパク質配列は、配列番号１５またはそれと少なくとも７０％の同一性を有す
る配列に示される。
【0048】
特定の実施形態では、単離されたポリヌクレオチドは、上述の配列またはそのバリアン
トのいずれかからなる。
トのいずれかからなる。
【0049】
本発明の全ての態様において、抗原をコードするポリヌクレオチドは、好ましくは、ヒ
トにおける発現のためにコドン最適化されている。当業者は、例えば、米国特許第８，３
２６，５４７号明細書、またはPuigbo, P. et al. (2007) OPTIMIZER: A web server for
optimizing the codon usage of DNA sequences: Nucleic Acids Research, 35:W126-W1
31に記載のものを含む、多数の利用可能なソフトウェアパッケージに精通している。また
、Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ＤＮＡ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓまたはＧｅｎＳｃｒｉｐｔ
により提供されるものなどの商業的に利用可能なサービスおよびソフトウェアもある。
トにおける発現のためにコドン最適化されている。当業者は、例えば、米国特許第８，３
２６，５４７号明細書、またはPuigbo, P. et al. (2007) OPTIMIZER: A web server for
optimizing the codon usage of DNA sequences: Nucleic Acids Research, 35:W126-W1
31に記載のものを含む、多数の利用可能なソフトウェアパッケージに精通している。また
、Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ＤＮＡ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓまたはＧｅｎＳｃｒｉｐｔ
により提供されるものなどの商業的に利用可能なサービスおよびソフトウェアもある。
【0050】
本発明はまた、本明細書に記載されるようなポリヌクレオチドを含む細菌人工染色体（
ＢＡＣ）クローンを含む。ウイルスゲノムのＢＡＣクローンのウイルスへの変換（「レス
キュー」）は、ＩＳＩＳ ＩＮＮＯＶＡＴＩＯＮ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１２
／１７２２７７号パンフレット（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるよう
な周知の方法により実行することができる。
ＢＡＣ）クローンを含む。ウイルスゲノムのＢＡＣクローンのウイルスへの変換（「レス
キュー」）は、ＩＳＩＳ ＩＮＮＯＶＡＴＩＯＮ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１２
／１７２２７７号パンフレット（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるよう
な周知の方法により実行することができる。
【0051】
本発明は、本明細書に記載されるようなＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターを含む
単離された宿主細胞をさらに含む。
単離された宿主細胞をさらに含む。
【0052】
また、本発明は、個体においてがんを予防または治療する方法であって、有効量の本明
細書に記載されるようなＣｈＡｄベクターを投与すること、および有効量の本明細書に記
載されるようなＭＶＡベクターを投与することを含み、それにより、個体の適応免疫系が
刺激されて、抗がん免疫応答が提供される、方法を提供する。有利には、本発明の方法は
、強いＴ細胞免疫応答、特に、長く持続する保護免疫に繋がる強いＣＤ８＋免疫応答を生
成する。
細書に記載されるようなＣｈＡｄベクターを投与すること、および有効量の本明細書に記
載されるようなＭＶＡベクターを投与することを含み、それにより、個体の適応免疫系が
刺激されて、抗がん免疫応答が提供される、方法を提供する。有利には、本発明の方法は
、強いＴ細胞免疫応答、特に、長く持続する保護免疫に繋がる強いＣＤ８＋免疫応答を生
成する。
【0053】
本発明によるがんを予防または治療する好ましい方法において、ＣｈＡｄおよびＭＶＡ
ベクターの投与は、別々に、逐次的にまたは同時に実行される。
ベクターの投与は、別々に、逐次的にまたは同時に実行される。
【0054】
本発明によるがんを予防または治療する特定の方法において、有効量の１つまたは複数
の免疫チェックポイントモジュレーターがさらに投与される。そのようなチェックポイン
トモジュレーターは、ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと同時に、別々にまたは並行して投
与されてもよい。
の免疫チェックポイントモジュレーターがさらに投与される。そのようなチェックポイン
トモジュレーターは、ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと同時に、別々にまたは並行して投
与されてもよい。
【0055】
本発明のがんを予防または治療する方法の態様では、治療されている個体は、化学療法
および／または放射線療法治療を受けた、受けている、または受ける個体であってもよい
。
および／または放射線療法治療を受けた、受けている、または受ける個体であってもよい
。
【0056】
本発明によるがんを予防または治療する方法において、ＣｈＡｄベクターは、好ましく
は、最初に投与される。
は、最初に投与される。
【0057】
本発明のがんの予防または治療方法において、ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターは、それ
ぞれ１回より多く投与されてもよい。好ましい態様では、ＣｈＡｄがプライミング免疫化
として使用される場合、これらは１回のみ行われ、続いて２回のＭＶＡブースター免疫化
が行われる。ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与されるがんの治療または予防方
法もまた可能である。
ぞれ１回より多く投与されてもよい。好ましい態様では、ＣｈＡｄがプライミング免疫化
として使用される場合、これらは１回のみ行われ、続いて２回のＭＶＡブースター免疫化
が行われる。ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与されるがんの治療または予防方
法もまた可能である。
【0058】
本発明のベクターの各投与の間の期間は、５日～８週の範囲内であってもよいが、好ま
しくは、約１週の期間が、プライムおよびその後の１回または複数回のブーストの間に使
用される。
しくは、約１週の期間が、プライムおよびその後の１回または複数回のブーストの間に使
用される。
【0059】
チェックポイントモジュレーターが投与され、そしてまた治療レジメンの部分を形成す
る、本発明のがんの予防または治療方法において、チェックポイントモジュレーターは、
ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮断する阻害剤であってもよい。有利には、
１つまたは複数のチェックポイントモジュレーターと共に本発明のベクターおよび免疫原
性組成物を使用することは、同等の効果（すなわち、単独で使用される場合の同等の効果
）のために必要とされるチェックポイントモジュレーターの投薬量を低減するために役立
ち得る。効果は、本発明のウイルスベクター治療レジメンおよびチェックポイントモジュ
レーターの間で単に付加的なものではなく、相乗的なものである。
る、本発明のがんの予防または治療方法において、チェックポイントモジュレーターは、
ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮断する阻害剤であってもよい。有利には、
１つまたは複数のチェックポイントモジュレーターと共に本発明のベクターおよび免疫原
性組成物を使用することは、同等の効果（すなわち、単独で使用される場合の同等の効果
）のために必要とされるチェックポイントモジュレーターの投薬量を低減するために役立
ち得る。効果は、本発明のウイルスベクター治療レジメンおよびチェックポイントモジュ
レーターの間で単に付加的なものではなく、相乗的なものである。
【0060】
特に好ましいチェックポイントモジュレーターは、ニボルマブ（オプジーボ（Opdivo）
（登録商標））、ペムブロリズマブ（キイトルーダ（Keytruda）（登録商標））、イピリ
ムマブ（ヤーボイ（Yervoy）（登録商標））、トレメリムマブもしくはアテゾリズマブ（
テセントリク（Tecentriq）（登録商標））、デュルバルマブ（durvaliumab）（イミフィ
ンジ（Imfinzi）（登録商標））またはアベルマブ（バベンチオ（Bavencio）（登録商標
））から選択されてもよい。
（登録商標））、ペムブロリズマブ（キイトルーダ（Keytruda）（登録商標））、イピリ
ムマブ（ヤーボイ（Yervoy）（登録商標））、トレメリムマブもしくはアテゾリズマブ（
テセントリク（Tecentriq）（登録商標））、デュルバルマブ（durvaliumab）（イミフィ
ンジ（Imfinzi）（登録商標））またはアベルマブ（バベンチオ（Bavencio）（登録商標
））から選択されてもよい。
【0061】
本発明によるがんを予防または治療する方法は、がん生殖細胞系列遺伝子、好ましくは
、ＭＡＧＥ型、ＮＹＥＳＯ、およびＬＡＧＥ抗原をコードする遺伝子を発現するがんを対
象とし、好ましくは、例えば、がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキ
ンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、食道、膀胱、小細胞肺がん、腎臓
、頭頸部、肉腫、または乳房のがんである、特定のがん種を対象とする。
、ＭＡＧＥ型、ＮＹＥＳＯ、およびＬＡＧＥ抗原をコードする遺伝子を発現するがんを対
象とし、好ましくは、例えば、がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキ
ンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、食道、膀胱、小細胞肺がん、腎臓
、頭頸部、肉腫、または乳房のがんである、特定のがん種を対象とする。
【0062】
よって、本発明は、がんの予防または治療において使用するための本発明のＣｈＡｄベ
クターを含む。また、がんの予防または治療において使用するための本発明のＭＶＡベク
ター。そのような使用に関して、本発明の方法の様々な態様のそれぞれが等しく適用され
る。
クターを含む。また、がんの予防または治療において使用するための本発明のＭＶＡベク
ター。そのような使用に関して、本発明の方法の様々な態様のそれぞれが等しく適用され
る。
【0063】
さらに、本発明は、がんの予防または治療のための患者への別々の、逐次的なまたは同
時の投与のための、本明細書において定義されるような本発明のＣｈＡｄベクター、およ
び本明細書において定義されるような本発明のＭＶＡベクターを含む。
時の投与のための、本明細書において定義されるような本発明のＣｈＡｄベクター、およ
び本明細書において定義されるような本発明のＭＶＡベクターを含む。
【0064】
本明細書において定義されるようながんの予防または治療において使用するためのＣｈ
ＡｄおよびＭＶＡベクターは、Chen, D.S. and Mellman, I. (2013) Immunity 39(1):1-1
0、およびChen, D.S. and Mellman, I. (2017) Nature 541(7637):321-330に記載される
ような、がん免疫サイクルまたはがん免疫セットポイントの１つまたは複数のモジュレー
ター、好ましくは、がんの治療のためにＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと共に投与するた
めのチェックポイント阻害剤をさらに含んでもよい。
ＡｄおよびＭＶＡベクターは、Chen, D.S. and Mellman, I. (2013) Immunity 39(1):1-1
0、およびChen, D.S. and Mellman, I. (2017) Nature 541(7637):321-330に記載される
ような、がん免疫サイクルまたはがん免疫セットポイントの１つまたは複数のモジュレー
ター、好ましくは、がんの治療のためにＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと共に投与するた
めのチェックポイント阻害剤をさらに含んでもよい。
【0065】
進行性がんを有する患者の大部分は、現在、チェックポイントモジュレーターに基づく
免疫療法に応答しない。例えば、抗ＰＤ１阻害剤が、黒色腫、腎細胞癌、頭頸部癌および
肺癌において使用される。一態様では、本発明は、抗ＰＤ１および化学療法と組み合わせ
てＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１に対するＣＤ８ Ｔ細胞を誘導するためにＣｈ
Ａｄ／ＭＶＡワクチンを使用する。いかなる特定の理論によっても縛られることを望まな
いが、本発明者らは、そうでなければ「冷」腫瘍であるものが、抗ＰＤ１によりブースト
される腫瘍特異的ＣＤ８ Ｔ細胞により浸潤されることを予期する。
免疫療法に応答しない。例えば、抗ＰＤ１阻害剤が、黒色腫、腎細胞癌、頭頸部癌および
肺癌において使用される。一態様では、本発明は、抗ＰＤ１および化学療法と組み合わせ
てＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１に対するＣＤ８ Ｔ細胞を誘導するためにＣｈ
Ａｄ／ＭＶＡワクチンを使用する。いかなる特定の理論によっても縛られることを望まな
いが、本発明者らは、そうでなければ「冷」腫瘍であるものが、抗ＰＤ１によりブースト
される腫瘍特異的ＣＤ８ Ｔ細胞により浸潤されることを予期する。
【0066】
本発明者らはまた、本発明によるワクチン＋化学療法剤＋チェックポイント阻害剤の三
重の組合せは、ワクチン単独またはワクチン＋化学療法剤またはワクチン＋チェックポイ
ント阻害剤と比較した場合に、マウスモデルにおいて有意に向上した抗腫瘍効果、および
マウスの有意な生存時間を提供することを見出した。実際、三重の組合せの効果は、相乗
的であるようなものである。三重の組合せを用いて骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の有意
な枯渇が達成される。本発明はまた、したがって、そのような三重の組合せの治療方法お
よび対応する医療用途を提供する。本発明はまた、がんの予防または治療のための患者へ
の別々の、逐次的なまたは同時の投与のための、上記に定義されるようなＣｈＡｄベクタ
ー、上記に定義されるようなＭＶＡベクター、化学療法剤、およびチェックポイント阻害
剤を提供する。
重の組合せは、ワクチン単独またはワクチン＋化学療法剤またはワクチン＋チェックポイ
ント阻害剤と比較した場合に、マウスモデルにおいて有意に向上した抗腫瘍効果、および
マウスの有意な生存時間を提供することを見出した。実際、三重の組合せの効果は、相乗
的であるようなものである。三重の組合せを用いて骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）の有意
な枯渇が達成される。本発明はまた、したがって、そのような三重の組合せの治療方法お
よび対応する医療用途を提供する。本発明はまた、がんの予防または治療のための患者へ
の別々の、逐次的なまたは同時の投与のための、上記に定義されるようなＣｈＡｄベクタ
ー、上記に定義されるようなＭＶＡベクター、化学療法剤、およびチェックポイント阻害
剤を提供する。
【0067】
化学療法剤は、（ｂ）パクリタキセル、ドセタキセル、ビノレルビン、ゲムシタビン、
エトポシドまたはペメトレキセドのうちの１つと組み合わせた（ａ）カルボプラチンまた
はシスプラチンから選択されてもよい（但し、それに限定されない）。チェックポイント
阻害剤について、これはＰＤ－１であってもよい。そのような特定の三重の組合せは、非
小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）もしくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリン
パ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、腎臓、頭頸部、肉腫または乳がん
に対する有用な治療を提供し得る。
エトポシドまたはペメトレキセドのうちの１つと組み合わせた（ａ）カルボプラチンまた
はシスプラチンから選択されてもよい（但し、それに限定されない）。チェックポイント
阻害剤について、これはＰＤ－１であってもよい。そのような特定の三重の組合せは、非
小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）もしくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリン
パ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、腎臓、頭頸部、肉腫または乳がん
に対する有用な治療を提供し得る。
【0068】
がんの予防または治療のための本明細書に記載されるようなＣｈＡｄおよび／またはＭ
ＶＡベクターを含むキットもまた、本発明の部分として提供される。そのようなキットは
、本発明のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターのうちの１つを保持する少なくとも１
つの容器を含む。キットは、異なる本発明のウイルスベクターをそれぞれ有する、２つま
たはより多く、すなわち、複数の容器を含んでもよい。キットは、使用されるワクチンレ
ジメンに関する必須の情報、例えば、プライム－ブースト、および投与の間の期間を含む
、ワクチンとしてのベクターの使用における説明書のセットを含んでもよい。より複合的
な実施形態では、キットは、本明細書に記載の発明による、さらなる治療エレメント、例
えば、チェックポイントモジュレーターのいずれかを含んでもよい。
ＶＡベクターを含むキットもまた、本発明の部分として提供される。そのようなキットは
、本発明のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターのうちの１つを保持する少なくとも１
つの容器を含む。キットは、異なる本発明のウイルスベクターをそれぞれ有する、２つま
たはより多く、すなわち、複数の容器を含んでもよい。キットは、使用されるワクチンレ
ジメンに関する必須の情報、例えば、プライム－ブースト、および投与の間の期間を含む
、ワクチンとしてのベクターの使用における説明書のセットを含んでもよい。より複合的
な実施形態では、キットは、本明細書に記載の発明による、さらなる治療エレメント、例
えば、チェックポイントモジュレーターのいずれかを含んでもよい。
【0069】
本発明の実施形態は、添付の図面を参照して以下においてさらに記載される。
【図面の簡単な説明】
【0070】
【図3】図３は、同系Ｐ１Ａ発現がん細胞系、Ｐ８１５および１５Ｖ４Ｔ３を用いた負荷に対するマウスＤＢＡ／２マウスのＣｈＡｄＯｘ１－Ｐ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａプライム－ブースト予防ワクチン接種の図式的な概要を示す。
【図6】［図６Ａ］図６Ａは、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）対照に対して図３に示されるようなマウスのＣｈＡｄＯｘ１－ＩｉＰ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａのプライム－ブーストワクチン接種、または細胞系Ｌ１２１０．Ｐ１Ａ．Ｂ７．１を用いた免疫化後の経時的な平均１５Ｖ４Ｔ３腫瘍成長を示す。 ［図６Ｂ］図６Ｂは、図６Ａに示されるワクチン接種マウスについてのカプラン－マイヤー生存曲線を示す。
【図8-1】［図８Ａ］図８Ａは、Ｐ１Ａ発現同系がん株１５Ｖ４Ｔ３を用いた負荷に対して治療的状況においてＤＢＡ／２マウスにおける異なるＣｈＡｄＯｘ１－Ｐ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａプライム－ブーストワクチン接種レジームを用いたワクチン接種後の経時的な腫瘍体積成長を示す。 ［図８Ｂ］図８Ｂは、プライムブーストワクチン接種スキーム（単一のプライム－ブースト、高用量（１０８ ＣｈａｄＯｘ／１０７ＭＶＡ）後２５日目までの平均腫瘍成長を示す。
【図9】図９は、マウスにおける治療的状況において抗ＰＤ１チェックポイント阻害剤治療とＣｈＡｄＯｘ１－ＩｉＰ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａのプライム－ブーストワクチン接種を組み合わせた効果を示すための実験において使用されたワクチン接種スキームを示す。
【図10】図１０は、Ｐ１Ａ発現同系がん株１５Ｖ４Ｔ３を用いた負荷に対してＤＢＡ／２マウスにおいて、免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせたＣｈＡｄＯｘ１－ＩｉＰ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａプライム－ブーストワクチン接種レジームについての経時的な腫瘍体積成長を示す。
【図12】図１２は、ＭＡＧＥ－Ａ３（Ｍ）およびＮＹ－ＥＳＯ－１（ＮＹ）タンパク質をコードするウイルスベクターを非近交系ＣＤ１マウスにワクチン接種し、次にＣＤ８＋ Ｔ細胞応答を決定する実験についての図式的な概要を示す。
【図13】図１３は、インバリアント鎖ｌｉまたはｔＰＡありおよびなしでの、ＣｈＡｄＯｘ－ＭＡＧＥＡ３／ＮＹ－ＥＳＯ－１融合物を用いた非近交系ＣＤ１マウスの免疫化の結果としての（ＩＦＮγ産生により測定された場合の）ＣＤ８ Ｔ細胞の誘導を示す。免疫化後に単離されたＰＢＭＣをｅｘ ｖｉｖｏでオーバーラップするＭＡＧＥＡ３またはオーバーラップするＮＹ－ＥＳＯ－１ペプチドを用いて刺激した。
【図16】図１６Ａは、ＣｈＡｄＯｘ－Ｍ－ＮＹ、ＣｈＡｄＯｘ－ｔＰＡ－Ｍ－ＮＹまたはＣｈＡｄＯｘ－Ｉｉ－Ｍ－ＮＹを用いたプライム、およびＭＶＡ－Ｍ、ＭＶＡ－ＮＹ、ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｍ、またはＭＶＡ－ｔＰＡ－ＮＹベクターを用いたブースト後のＰＢＭＣにおけるＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹＥＳＯ特異的応答を示す。図１６Ｂは、ＭＶＡ－Ｍ、ＭＶＡ－ＮＹ、ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｍ、またはＭＶＡ－ｔＰＡ－ＮＹベクターのいずれかを用いた２回目のブースト後のＰＢＭＣにおけるＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹＥＳＯ特異的応答を示す。
【図17】［図１７Ａ］図１７Ａは、ＣｈＡｄＯｘ－Ｉｉ－ＭＡＧＥＡ３／ＮＹ－ＥＳＯ－１融合物を用いた免疫化、およびＭＶＡ－Ｍ、ＭＶＡ－ＮＹ、ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｍ、またはＭＶＡ－ｔＰＡ－ＮＹベクターを用いたブースト後の非近交系ＣＤ１マウスにおけるＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹＥＳＯに対するＣＤ８ Ｔ細胞応答の誘導を示す。 ［図１７Ｂ］図１７Ｂは、ＭＶＡ－Ｍ、ＭＶＡ－ＮＹ、ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｍ、またはＭＶＡ－ｔＰＡ－ＮＹベクターを用いた２回目のブースト後のＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹＥＳＯ特異的応答を示す。
【図19】図１９は、図１８に示される実験の平均腫瘍成長結果のグラフを示す。結果は、二元配置分散分析により分析している。＊＝ｐ＜０．０５。＊＊＝ｐ＜０．０１。＊＊＊＝ｐ＜０．００１。＊＊＊＊＝ｐ＜０．０００１。
【図26】図２６は、マウスのＰＢＳ対照、αＰＤ１のみ、ならびに２つの試験群（１）低用量１週間隔プライムブースト（ＣｈＡｄＯｘ１－Ｉｉ－Ｐ１Ａ＋ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｐ１Ａ）および（２）低用量１週間隔プライムブースト（ＣｈＡｄＯｘ１－Ｉｉ－Ｐ１Ａ＋ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｐ１Ａ）＋αＰＤ１についてのワクチン接種の時間表を示す。
【発明を実施するための形態】
【0071】
詳細な説明
本発明に従って使用するための好適なチンパンジーアデノウイルスベクターは、国際公
開第２０１２／１７２７７号パンフレット、Ｉｓｉｓ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ Ｌｉｍ
ｉｔｅｄ、または国際公開第２００５／０７１０９３号パンフレット、Ｉｓｔｉｔｕｔｏ
ｄｉ Ｒｉｃｅｒｃｈｅ ｄｉ Ｂｉｏｌｏｇｉａ Ｍｏｌｅｃｏｌａｒｅ Ｐ． Ａ
ｎｇｅｌｅｔｔｉ Ｓ． ｐ． Ａ、またはＯｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｉｎ
ｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１７／２２１０３１号パンフレット
（これらの全ては参照により本明細書に組み込まれる）に詳細に記載されている。
本発明に従って使用するための好適なチンパンジーアデノウイルスベクターは、国際公
開第２０１２／１７２７７号パンフレット、Ｉｓｉｓ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ Ｌｉｍ
ｉｔｅｄ、または国際公開第２００５／０７１０９３号パンフレット、Ｉｓｔｉｔｕｔｏ
ｄｉ Ｒｉｃｅｒｃｈｅ ｄｉ Ｂｉｏｌｏｇｉａ Ｍｏｌｅｃｏｌａｒｅ Ｐ． Ａ
ｎｇｅｌｅｔｔｉ Ｓ． ｐ． Ａ、またはＯｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｉｎ
ｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１７／２２１０３１号パンフレット
（これらの全ては参照により本明細書に組み込まれる）に詳細に記載されている。
【0072】
特に好ましいアデノウイルスベクターは、Ｖａｃｃｉｔｅｃｈ Ｌｔｄ、Ｏｘｆｏｒｄ
のチンパンジーアデノウイルスＯｘｆｏｒｄ １および２（ＣｈＡｄＯｘ１およびＣｈＡ
ｄＯｘ２）である。ＣｈＡｄＯｘ１は、野生型分離株Ｙ２５（種ヒトアデノウイルスＥ）
からの複製欠陥性Ｅ１／Ｅ３欠失チンパンジーアデノウイルスベクターであり、Dicks M.
D. et al. (2012) PLoS ONE 7: e40385に記載されている。ＣｈＡｄＯｘ２は、ＨＥＫ２
９３細胞中でのウイルス収率を増加させるために改変されたＥ４領域を有するＣｈＡｄ６
８に由来するＥ１／Ｅ３欠失ワクチンベクターである。
のチンパンジーアデノウイルスＯｘｆｏｒｄ １および２（ＣｈＡｄＯｘ１およびＣｈＡ
ｄＯｘ２）である。ＣｈＡｄＯｘ１は、野生型分離株Ｙ２５（種ヒトアデノウイルスＥ）
からの複製欠陥性Ｅ１／Ｅ３欠失チンパンジーアデノウイルスベクターであり、Dicks M.
D. et al. (2012) PLoS ONE 7: e40385に記載されている。ＣｈＡｄＯｘ２は、ＨＥＫ２
９３細胞中でのウイルス収率を増加させるために改変されたＥ４領域を有するＣｈＡｄ６
８に由来するＥ１／Ｅ３欠失ワクチンベクターである。
【0073】
本発明のＣｈＡｄベクターは、（ａ）国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレッ
トに開示されたＣｈＡｄＯｘ１；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７７号パン
フレットに開示された配列番号３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０％
の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公開第２０
１７／２２１０３１号パンフレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、国際公開
第２０１７／２２１０３１号パンフレットに開示された配列番号１０のポリヌクレオチド
もしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ
２であってもよい。本発明において使用されるＣｈＡｄベクターは、本明細書にさらに記
載されるように、核酸配列の全てのホモログ、均等物および誘導体を含んでもよいことを
当業者は理解する。
トに開示されたＣｈＡｄＯｘ１；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７７号パン
フレットに開示された配列番号３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０％
の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公開第２０
１７／２２１０３１号パンフレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、国際公開
第２０１７／２２１０３１号パンフレットに開示された配列番号１０のポリヌクレオチド
もしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ
２であってもよい。本発明において使用されるＣｈＡｄベクターは、本明細書にさらに記
載されるように、核酸配列の全てのホモログ、均等物および誘導体を含んでもよいことを
当業者は理解する。
【0074】
本発明に従って使用するための好適な改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ベクターは、
国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットまたは欧州特許出願公開第２０４４９
４７号明細書（これらのそれぞれは参照により本明細書に組み込まれる）に詳細に記載さ
れている。
国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットまたは欧州特許出願公開第２０４４９
４７号明細書（これらのそれぞれは参照により本明細書に組み込まれる）に詳細に記載さ
れている。
【0075】
本発明のウイルスベクターのいずれかによりコードおよび発現されるような、がん抗原
は、別々であれ、互いおよび任意選択的に他のポリペプチドとの融合物の形態であれ、好
ましくは、本明細書において定義されるように免疫原性であり、これは、がん抗原の断片
ならびに互いおよび他のポリペプチドとのそれらの融合物を含む。
は、別々であれ、互いおよび任意選択的に他のポリペプチドとの融合物の形態であれ、好
ましくは、本明細書において定義されるように免疫原性であり、これは、がん抗原の断片
ならびに互いおよび他のポリペプチドとのそれらの融合物を含む。
【0076】
本明細書において使用される場合、「抗原」は、一般に、タンパク質またはポリペプチ
ドの１つまたは複数のエピトープと等しく、これには、その融合物および断片およびバリ
アントが含まれる。そのような断片およびバリアントは、親抗原と本質的に同じ生物学的
活性または機能を保持してもよい。「抗原性の」（antigenic）は、通常、タンパク質ま
たはポリペプチドまたは断片が、抗体またはＴ細胞を産生するために使用されることがで
き、そのため対象において抗体またはＴ細胞応答を誘導できることが意味される。「免疫
原性の」（immunogenic）は、タンパク質またはポリペプチドまたは断片が、対象におい
て強力かつ好ましくは保護的な免疫応答を誘発できることが意味される。そのため、後者
の場合、タンパク質またはポリペプチドまたは断片は、抗体応答および非抗体ベースの免
疫応答を生成することが可能であり得る。
ドの１つまたは複数のエピトープと等しく、これには、その融合物および断片およびバリ
アントが含まれる。そのような断片およびバリアントは、親抗原と本質的に同じ生物学的
活性または機能を保持してもよい。「抗原性の」（antigenic）は、通常、タンパク質ま
たはポリペプチドまたは断片が、抗体またはＴ細胞を産生するために使用されることがで
き、そのため対象において抗体またはＴ細胞応答を誘導できることが意味される。「免疫
原性の」（immunogenic）は、タンパク質またはポリペプチドまたは断片が、対象におい
て強力かつ好ましくは保護的な免疫応答を誘発できることが意味される。そのため、後者
の場合、タンパク質またはポリペプチドまたは断片は、抗体応答および非抗体ベースの免
疫応答を生成することが可能であり得る。
【0077】
本明細書において使用される場合、参照配列に対して同一性を有する核酸配列が言及さ
れる場合は常に、同一性の程度は、以下の任意のものから選択されてもよく、「少なくと
も」がここに列記される各パーセンテージの数値に適用される：少なくとも４６％、４７
％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７
％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７
％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７
％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７
％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７
％、９８％、９８．１％、９８．２％、９８．３％、９８．４％、９８．５％、９８．６
％、９８．７％、９８．８％、９８．９％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３
％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％または９９．９％。
相同性または同一性の程度を決定する目的のために核酸配列を比較する場合、ＢＥＳＴＦ
ＩＴおよびＧＡＰ（両方ともＷｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ
Ｇｒｏｕｐ（ＧＣＧ）ソフトウェアパッケージから）などのプログラムを使用すること
ができる。例えば、ＢＥＳＴＦＩＴは、２つの配列を比較し、最も類似したセグメントの
最適なアライメントを生成する。ＧＡＰは、全長に沿って配列をアライメントすることを
可能にし、適宜いずれかの配列にスペースを挿入することにより最適なアライメントを見
出す。好適には、本発明の文脈において、核酸配列の同一性を議論する場合、比較はそれ
らの全長に沿った配列のアライメントにより為される。上記は、適宜変更の上で、本出願
に開示される全ての核酸配列に適用される。
れる場合は常に、同一性の程度は、以下の任意のものから選択されてもよく、「少なくと
も」がここに列記される各パーセンテージの数値に適用される：少なくとも４６％、４７
％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７
％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７
％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７
％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７
％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７
％、９８％、９８．１％、９８．２％、９８．３％、９８．４％、９８．５％、９８．６
％、９８．７％、９８．８％、９８．９％、９９％、９９．１％、９９．２％、９９．３
％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％または９９．９％。
相同性または同一性の程度を決定する目的のために核酸配列を比較する場合、ＢＥＳＴＦ
ＩＴおよびＧＡＰ（両方ともＷｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ
Ｇｒｏｕｐ（ＧＣＧ）ソフトウェアパッケージから）などのプログラムを使用すること
ができる。例えば、ＢＥＳＴＦＩＴは、２つの配列を比較し、最も類似したセグメントの
最適なアライメントを生成する。ＧＡＰは、全長に沿って配列をアライメントすることを
可能にし、適宜いずれかの配列にスペースを挿入することにより最適なアライメントを見
出す。好適には、本発明の文脈において、核酸配列の同一性を議論する場合、比較はそれ
らの全長に沿った配列のアライメントにより為される。上記は、適宜変更の上で、本出願
に開示される全ての核酸配列に適用される。
【0078】
追加的に、本明細書に例示される特定の核酸分子からのバリエーションが、遺伝コード
の縮重を考慮して可能であることもまた当業者は認める。好ましくは、そのようなバリア
ントは、全長にわたり本明細書に記載の核酸配列に対して実質的な同一性を有する。
の縮重を考慮して可能であることもまた当業者は認める。好ましくは、そのようなバリア
ントは、全長にわたり本明細書に記載の核酸配列に対して実質的な同一性を有する。
【0079】
本発明との繋がりにおいて記載される任意のアミノ酸配列に関して、これは、これらの
アミノ酸配列のバリアントを含む。当業者に周知のように、本明細書に開示される所与の
開始または参照配列について、１つまたは複数のアミノ酸残基が、任意の組合せで置換、
欠失または付加されてもよい。本発明のタンパク質の特性および活性を変更しないサイレ
ント置換、付加および欠失は、変化として好ましい。様々なアミノ酸は類似した特性を有
し、１つまたは複数のそのようなアミノ酸は、その物質の所望の免疫原性も他の活性も排
除することなく１つまたは複数の他のそのようなアミノ酸により置換され得る。そのため
、アミノ酸グリシン、アラニン、バリン、ロイシンおよびイソロイシンは、脂肪族側鎖を
有し、多くの場合に互いに置換され得る。これらのうち、グリシンおよびアラニンは、互
いを置換するために好ましく使用される。また、バリン、ロイシンおよびイソロイシンは
、疎水性であるより大きい脂肪族側鎖を有し、互いを置換するために使用されてもよい。
フェニルアラニン、チロシンおよびトリプトファンは、芳香族側鎖を有するアミノ酸であ
り、互いを置換してもよい。リジン、アルギニンおよびヒスチジンは、塩基性側鎖を有す
るアミノ酸であり、互いを置換してもよい。アスパラギン酸およびグルタミン酸は、酸性
側鎖を有し、互いを置換してもよい。アスパラギンおよびグルタミンは、アミド側鎖を有
し、互いを置換してもよい。システインおよびメチオニンは、硫黄含有側鎖を有し、互い
を置換してもよい。
アミノ酸配列のバリアントを含む。当業者に周知のように、本明細書に開示される所与の
開始または参照配列について、１つまたは複数のアミノ酸残基が、任意の組合せで置換、
欠失または付加されてもよい。本発明のタンパク質の特性および活性を変更しないサイレ
ント置換、付加および欠失は、変化として好ましい。様々なアミノ酸は類似した特性を有
し、１つまたは複数のそのようなアミノ酸は、その物質の所望の免疫原性も他の活性も排
除することなく１つまたは複数の他のそのようなアミノ酸により置換され得る。そのため
、アミノ酸グリシン、アラニン、バリン、ロイシンおよびイソロイシンは、脂肪族側鎖を
有し、多くの場合に互いに置換され得る。これらのうち、グリシンおよびアラニンは、互
いを置換するために好ましく使用される。また、バリン、ロイシンおよびイソロイシンは
、疎水性であるより大きい脂肪族側鎖を有し、互いを置換するために使用されてもよい。
フェニルアラニン、チロシンおよびトリプトファンは、芳香族側鎖を有するアミノ酸であ
り、互いを置換してもよい。リジン、アルギニンおよびヒスチジンは、塩基性側鎖を有す
るアミノ酸であり、互いを置換してもよい。アスパラギン酸およびグルタミン酸は、酸性
側鎖を有し、互いを置換してもよい。アスパラギンおよびグルタミンは、アミド側鎖を有
し、互いを置換してもよい。システインおよびメチオニンは、硫黄含有側鎖を有し、互い
を置換してもよい。
【0080】
「バリアント」は、本明細書において記載される場合、天然に存在するまたは人工的な
バリアントを含む。人工的なバリアントは、核酸分子、細胞または生物に応用されるもの
を含む、突然変異誘発または遺伝子操作または遺伝子編集技術を使用して生成されてもよ
い。本明細書において使用される場合、参照配列に対して同一性を有するアミノ酸配列が
言及される場合は常に、同一性の程度は、以下の任意のものから選択されてもよく、「少
なくとも」がここに列記される各パーセンテージの数値に適用される：少なくとも４６％
、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％
、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％
、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％
、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％
、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％
、９７％、９８％、９８．１％、９８．２％、９８．３％、９８．４％、９８．５％、９
８．６％、９８．７％、９８．８％、９８．９％、９９％、９９．１％、９９．２％、９
９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％または９９．
９％。当業者は、アミノ酸配列を比較するためにＣＬＵＳＴＡＬプログラムなどのプログ
ラムを使用してもよい。このプログラムは、アミノ酸配列を比較し、適宜いずれかの配列
にスペースを挿入することにより最適なアライメントを見出す。最適なアライメントのた
めにアミノ酸の同一性または類似性（同一性プラスアミノ酸種の保存）を算出することが
可能である。ＢＬＡＳＴｘのようなプログラムは、類似した配列の最も長いストレッチを
アライメントし、フィットに対して値を割り当てる。そのため、それぞれが異なるスコア
を有する、類似性のいくつかの領域が見出される比較を得ることが可能である。上記は、
適宜変更の上で、本出願に開示される全てのアミノ酸配列に適用される。
バリアントを含む。人工的なバリアントは、核酸分子、細胞または生物に応用されるもの
を含む、突然変異誘発または遺伝子操作または遺伝子編集技術を使用して生成されてもよ
い。本明細書において使用される場合、参照配列に対して同一性を有するアミノ酸配列が
言及される場合は常に、同一性の程度は、以下の任意のものから選択されてもよく、「少
なくとも」がここに列記される各パーセンテージの数値に適用される：少なくとも４６％
、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％
、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％
、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％
、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％
、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％
、９７％、９８％、９８．１％、９８．２％、９８．３％、９８．４％、９８．５％、９
８．６％、９８．７％、９８．８％、９８．９％、９９％、９９．１％、９９．２％、９
９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％または９９．
９％。当業者は、アミノ酸配列を比較するためにＣＬＵＳＴＡＬプログラムなどのプログ
ラムを使用してもよい。このプログラムは、アミノ酸配列を比較し、適宜いずれかの配列
にスペースを挿入することにより最適なアライメントを見出す。最適なアライメントのた
めにアミノ酸の同一性または類似性（同一性プラスアミノ酸種の保存）を算出することが
可能である。ＢＬＡＳＴｘのようなプログラムは、類似した配列の最も長いストレッチを
アライメントし、フィットに対して値を割り当てる。そのため、それぞれが異なるスコア
を有する、類似性のいくつかの領域が見出される比較を得ることが可能である。上記は、
適宜変更の上で、本出願に開示される全てのアミノ酸配列に適用される。
【0081】
特に好ましいＭＶＡベクターは、当該技術分野において最も一般的に使用されるように
、ＣＥＦ中での５７０回の継代後のＡｎｔｏｎ Ｍａｙｒにより製造される標準的なＭＶ
Ａである。これは、天然痘根絶との繋がりで開発されたワクシニアウイルスの高度に弱毒
化された株である。ＭＶＡは、ワクシニアゲノムの約１０％を喪失しており、それと共に
霊長動物細胞中で効率的に複製する能力を喪失している。
、ＣＥＦ中での５７０回の継代後のＡｎｔｏｎ Ｍａｙｒにより製造される標準的なＭＶ
Ａである。これは、天然痘根絶との繋がりで開発されたワクシニアウイルスの高度に弱毒
化された株である。ＭＶＡは、ワクシニアゲノムの約１０％を喪失しており、それと共に
霊長動物細胞中で効率的に複製する能力を喪失している。
【0082】
ＭＡＧＥヒトがん抗原に関して、ＭＡＧＥファミリーは約４０のメンバーからなる。Ｍ
ＡＧＥ－Ａタンパク質は、少なくとも４６％の配列同一性、定義された生化学構造および
特性を共有する。ＭＡＧＥ－Ａ３は、がんの主要な形態において著しく発現され、その発
現は、負のアウトカムと関連付けられる。他のＭＡＧＥ－ＡファミリーメンバーとのＭＡ
ＧＥ－Ａ３アミノ酸配列のアライメントは、以下の同一性％値を与える：
ＡＧＥ－Ａタンパク質は、少なくとも４６％の配列同一性、定義された生化学構造および
特性を共有する。ＭＡＧＥ－Ａ３は、がんの主要な形態において著しく発現され、その発
現は、負のアウトカムと関連付けられる。他のＭＡＧＥ－ＡファミリーメンバーとのＭＡ
ＧＥ－Ａ３アミノ酸配列のアライメントは、以下の同一性％値を与える：
【0083】
【表1】
【0084】
上記に示されるＭＡＧＥ抗原のそれぞれは、配列番号１のＭＡＧＥＡ３参照配列との任
意の同一性パーセンテージの点で定義され得るように、本発明の遂行において使用されて
もよい。
意の同一性パーセンテージの点で定義され得るように、本発明の遂行において使用されて
もよい。
【0085】
ＮＹ－ＥＳＯ－１に関して、これは、１８０アミノ酸の公知のがん抗原である。配列は
、ＬＡＧＥ－１に対して７６．６％の同一性を有する。いくつかの研究は、配列の免疫原
性を定義することを試みてきた。主な領域は、ＮＹ－ＥＳＯ－１のａａ ７９～１７３に
わたる。Gnjatic S, et al. (2006) Adv. Cancer Res. vol 95:1-30; Sabbatini P, et a
l. (2012) Clin. Cancer Res. Vol 18(23): 6497-508;およびBaumgaertner P, et al. (2
016) Oncoimmunology vol 9:5(10)は、黒色腫または卵巣がんがどのように特定の目的の
断片を強調してきたのかを報告する。これらは、本発明の任意の態様において使用するた
めの各オプションである：
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ ７９～１７３
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ ７９～１０８
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ １００～１２９
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ １２１～１５０
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ ４２～１７３
、ＬＡＧＥ－１に対して７６．６％の同一性を有する。いくつかの研究は、配列の免疫原
性を定義することを試みてきた。主な領域は、ＮＹ－ＥＳＯ－１のａａ ７９～１７３に
わたる。Gnjatic S, et al. (2006) Adv. Cancer Res. vol 95:1-30; Sabbatini P, et a
l. (2012) Clin. Cancer Res. Vol 18(23): 6497-508;およびBaumgaertner P, et al. (2
016) Oncoimmunology vol 9:5(10)は、黒色腫または卵巣がんがどのように特定の目的の
断片を強調してきたのかを報告する。これらは、本発明の任意の態様において使用するた
めの各オプションである：
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ ７９～１７３
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ ７９～１０８
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ １００～１２９
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ １２１～１５０
・ＮＹ－ＥＳＯ－１ ４２～１７３
【0086】
ＬＡＧＥ１もまた公知のがん抗原であり、それまたはその断片もまた、本発明のウイル
スベクターおよび方法および使用においてＭＡＧＥＡ３と共に使用されてもよい。
スベクターおよび方法および使用においてＭＡＧＥＡ３と共に使用されてもよい。
【0087】
アジュバントは、本明細書に記載の発明のＡｄＣｈおよび／またはＭＶＡベクターの送
達用の組成物において使用されてもよい。有利には、これらのウイルスベクターは、がん
抗原または断片およびＣＤ７４、ＭＨＣクラスＩＩインバリアント鎖（ｌｉ）の間の融合
タンパク質をコードするポリヌクレオチド構築物を含むように操作されてもよい。これは
、増進したＣＤ８＋ Ｔ細胞免疫原性に繋がることが予期される。そのようなタンパク質
融合物および好ましいｌｉ配列を作る方法についてのより詳細な情報は、Ｉｓｉｓ Ｉｎ
ｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１５／０８２９２２号パンフレット
（参照により本明細書に組み込まれる）に提供される。
達用の組成物において使用されてもよい。有利には、これらのウイルスベクターは、がん
抗原または断片およびＣＤ７４、ＭＨＣクラスＩＩインバリアント鎖（ｌｉ）の間の融合
タンパク質をコードするポリヌクレオチド構築物を含むように操作されてもよい。これは
、増進したＣＤ８＋ Ｔ細胞免疫原性に繋がることが予期される。そのようなタンパク質
融合物および好ましいｌｉ配列を作る方法についてのより詳細な情報は、Ｉｓｉｓ Ｉｎ
ｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１５／０８２９２２号パンフレット
（参照により本明細書に組み込まれる）に提供される。
【0088】
本発明のウイルスベクターは、エピトープストリングとして１つまたは複数の抗原遺伝
子を発現するように設計されてもよい。好ましくは、複数のエピトープのストリング中の
エピトープは、不必要な核酸および／またはアミノ酸材料が回避されるように、介在配列
なしで連結されて一緒になっている。エピトープストリングの作出は、好ましくは、同じ
リーディングフレームにおいて１つまたは複数のエピトープをコードするＤＮＡと共に、
エピトープストリングのアミノ酸配列をコードする組換えＤＮＡ構築物を使用して達成さ
れる。代替的に、抗原は、別々のポリペプチドとして発現されてもよい。
子を発現するように設計されてもよい。好ましくは、複数のエピトープのストリング中の
エピトープは、不必要な核酸および／またはアミノ酸材料が回避されるように、介在配列
なしで連結されて一緒になっている。エピトープストリングの作出は、好ましくは、同じ
リーディングフレームにおいて１つまたは複数のエピトープをコードするＤＮＡと共に、
エピトープストリングのアミノ酸配列をコードする組換えＤＮＡ構築物を使用して達成さ
れる。代替的に、抗原は、別々のポリペプチドとして発現されてもよい。
【0089】
抗原の任意の断片は、別々であれ、記載されるようなエピトープストリング中であれ、
好ましくは、親抗原の配列からの少なくともｎ個の連続するアミノ酸を含み、ｎは、好ま
しくは、少なくとも７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１
、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、
４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５
７、５８、５９、６０、７０、８０、９０もしくは１００アミノ酸、または７、８、９、
１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２
３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６
、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、
５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５７、５８、５９、６０、７０、８
０、９０もしくは１００アミノ酸より多い。断片は、好ましくは、親抗原の１つまたは複
数のエピトープを含む。断片は、一部の状況では、親抗原の単一のエピトープのみを含む
またはからなるものであってもよい。通常、断片は、抗原性／免疫原性の特性が維持され
るように、親領域またはエピトープと十分に類似している。
好ましくは、親抗原の配列からの少なくともｎ個の連続するアミノ酸を含み、ｎは、好ま
しくは、少なくとも７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１
、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、
４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５
７、５８、５９、６０、７０、８０、９０もしくは１００アミノ酸、または７、８、９、
１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２
３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６
、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、
５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５７、５８、５９、６０、７０、８
０、９０もしくは１００アミノ酸より多い。断片は、好ましくは、親抗原の１つまたは複
数のエピトープを含む。断片は、一部の状況では、親抗原の単一のエピトープのみを含む
またはからなるものであってもよい。通常、断片は、抗原性／免疫原性の特性が維持され
るように、親領域またはエピトープと十分に類似している。
【0090】
本発明において使用される抗原または抗原遺伝子の１つまたは複数は、Ｃ末端および／
またはＮ末端において切断されていてもよい。これは、クローニングおよびベクター化ワ
クチンの構築を促し得、かつ／または抗原の免疫原性もしくは抗原性を増進し得る。切断
の方法は当業者に公知である。例えば、遺伝子操作の様々な周知の技術を使用して、抗原
遺伝子のいずれかの末端においてコーディング核酸配列を選択的に欠失させ、次に所望の
コーディング配列をウイルスベクターに挿入することができる。例えば、候補タンパク質
の切断は、コーディング核酸のそれぞれ３’および／または５’末端を選択的に侵食する
３’および／または５’エキソヌクレアーゼ戦略を使用して作出される。野生型遺伝子配
列は、発現される抗原が、親抗原と比較して１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０
、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０またはより多くのアミ
ノ酸だけ切断され得るように切断されてもよい。一部の事例では、抗原遺伝子は、野生型
抗原と比較してＣ末端において（発現された場合に）１０～２０アミノ酸だけ切断されて
いる。他の事例では、抗原遺伝子は、野生型抗原と比較してＣ末端において（発現された
場合に）１３～１８アミノ酸、好ましくは、（発現された場合に）１５アミノ酸だけ切断
されている。
またはＮ末端において切断されていてもよい。これは、クローニングおよびベクター化ワ
クチンの構築を促し得、かつ／または抗原の免疫原性もしくは抗原性を増進し得る。切断
の方法は当業者に公知である。例えば、遺伝子操作の様々な周知の技術を使用して、抗原
遺伝子のいずれかの末端においてコーディング核酸配列を選択的に欠失させ、次に所望の
コーディング配列をウイルスベクターに挿入することができる。例えば、候補タンパク質
の切断は、コーディング核酸のそれぞれ３’および／または５’末端を選択的に侵食する
３’および／または５’エキソヌクレアーゼ戦略を使用して作出される。野生型遺伝子配
列は、発現される抗原が、親抗原と比較して１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０
、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０またはより多くのアミ
ノ酸だけ切断され得るように切断されてもよい。一部の事例では、抗原遺伝子は、野生型
抗原と比較してＣ末端において（発現された場合に）１０～２０アミノ酸だけ切断されて
いる。他の事例では、抗原遺伝子は、野生型抗原と比較してＣ末端において（発現された
場合に）１３～１８アミノ酸、好ましくは、（発現された場合に）１５アミノ酸だけ切断
されている。
【0091】
一部の状況では、抗原遺伝子はリーダー配列を含んでもよく、これは、ｍＲＮＡへの一
次転写物のプロセシング、翻訳効率、ｍＲＮＡ安定性に影響してもよく、かつ抗原の発現
および／または免疫原性を増進してもよい。本発明との繋がりにおいて、アジュバント能
力にも役立ち得る一部の好ましいリーダー配列は、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ
ＰＡ）またはＭＨＣ ＩＩシャペロンタンパク質インバリアント鎖（Ｉｉ）である。好ま
しくは、リーダー配列は、１つまたは複数の抗原に対してＮ末端に配置される。
次転写物のプロセシング、翻訳効率、ｍＲＮＡ安定性に影響してもよく、かつ抗原の発現
および／または免疫原性を増進してもよい。本発明との繋がりにおいて、アジュバント能
力にも役立ち得る一部の好ましいリーダー配列は、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ
ＰＡ）またはＭＨＣ ＩＩシャペロンタンパク質インバリアント鎖（Ｉｉ）である。好ま
しくは、リーダー配列は、１つまたは複数の抗原に対してＮ末端に配置される。
【0092】
本発明は、任意選択的に１つまたは複数の追加の活性原料成分、薬学的に許容される担
体、希釈剤、賦形剤またはアジュバントと組み合わせて、本発明の１つまたは複数のウイ
ルスベクターを含む、薬学的または免疫原性組成物を含む。好ましくは、組成物は、免疫
原性および／または抗原性組成物である。
体、希釈剤、賦形剤またはアジュバントと組み合わせて、本発明の１つまたは複数のウイ
ルスベクターを含む、薬学的または免疫原性組成物を含む。好ましくは、組成物は、免疫
原性および／または抗原性組成物である。
【0093】
好適なアジュバントは当該技術分野において周知であり、不完全フロイントアジュバン
ト、完全フロイントアジュバント、ＭＤＰ（ムラミルジペプチド）を含むフロイントアジ
ュバント、ミョウバン（水酸化アルミニウム）、ミョウバン＋百日咳菌（Bordatella per
tussis）および免疫刺激性複合体（ＩＳＣＯＭ、典型的には、ウイルスタンパク質を含有
するＱｕｉｌ Ａのマトリックス）が挙げられる。
ト、完全フロイントアジュバント、ＭＤＰ（ムラミルジペプチド）を含むフロイントアジ
ュバント、ミョウバン（水酸化アルミニウム）、ミョウバン＋百日咳菌（Bordatella per
tussis）および免疫刺激性複合体（ＩＳＣＯＭ、典型的には、ウイルスタンパク質を含有
するＱｕｉｌ Ａのマトリックス）が挙げられる。
【0094】
本発明の免疫原性および／または抗原性組成物は、予防的（がんの形成を予防する免疫
応答を誘導する）または治療的（抗がん活性を有する免疫応答を誘導する）であってもよ
い。
応答を誘導する）または治療的（抗がん活性を有する免疫応答を誘導する）であってもよ
い。
【0095】
本発明のベクターまたは組成物は、単回の免疫化または複数回の免疫化のいずれかとし
て個々の対象に投与される。好ましくは、ウイルスベクターまたはその免疫原性組成物は
、単一、二重または三重の免疫化レジームの部分として投与される。それらはまた、同種
または異種プライム－ブースト免疫化レジームの部分として投与されてもよい。
て個々の対象に投与される。好ましくは、ウイルスベクターまたはその免疫原性組成物は
、単一、二重または三重の免疫化レジームの部分として投与される。それらはまた、同種
または異種プライム－ブースト免疫化レジームの部分として投与されてもよい。
【0096】
免疫化レジームは、本発明のウイルスベクターまたは免疫原性組成物の２回目またはそ
の後の投与を含んでもよい。２回目の投与は、短い期間でまたは長い期間で投与され得る
。用量は、時間、日、週、月または年の期間で、例えば、１回目の投与から１、２、３、
４、５、６、７、８、９、もしくは１０もしくはより多くの週もしくは０．２５、０．５
、０．７５、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５もしくは４０もしくはより多
くの年の後までに、または１回目の投与から少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８
、９、もしくは１０もしくはより多くの週もしくは０．２５、０．５、０．７５、１、５
、１０、１５、２０、２５、３０、３５もしくは４０もしくはより多くの年の後に投与さ
れてもよい。好ましくは、２回目の投与は、１回目の投与から少なくとも２か月後に行わ
れる。好ましくは、２回目の投与は、１回目の投与から１０年後までに行われる。これら
の時間間隔は、好ましくは、適宜変更の上で、任意のその後の用量の間の期間に適用され
る。
の後の投与を含んでもよい。２回目の投与は、短い期間でまたは長い期間で投与され得る
。用量は、時間、日、週、月または年の期間で、例えば、１回目の投与から１、２、３、
４、５、６、７、８、９、もしくは１０もしくはより多くの週もしくは０．２５、０．５
、０．７５、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５もしくは４０もしくはより多
くの年の後までに、または１回目の投与から少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８
、９、もしくは１０もしくはより多くの週もしくは０．２５、０．５、０．７５、１、５
、１０、１５、２０、２５、３０、３５もしくは４０もしくはより多くの年の後に投与さ
れてもよい。好ましくは、２回目の投与は、１回目の投与から少なくとも２か月後に行わ
れる。好ましくは、２回目の投与は、１回目の投与から１０年後までに行われる。これら
の時間間隔は、好ましくは、適宜変更の上で、任意のその後の用量の間の期間に適用され
る。
【0097】
投与に関して、本発明のウイルスベクターは、１０、１００、１０３、１０４、１０５
、１０６、１０７、１０８、１０９、１０１０、１０１１、１０１２、１０１３、１０１
４またはより多くのウイルス粒子（ｖｐ）の１つまたは複数の用量の量において投与され
てもよい。
、１０６、１０７、１０８、１０９、１０１０、１０１１、１０１２、１０１３、１０１
４またはより多くのウイルス粒子（ｖｐ）の１つまたは複数の用量の量において投与され
てもよい。
【0098】
投与は、腹腔内、静脈内、動脈内、筋肉内、皮内、皮下、または鼻腔内投与により為さ
れてもよい。好ましい実施形態では、ウイルスベクターは、全身的に、特に、注射および
灌流などを含む、血管内投与により投与される。
れてもよい。好ましい実施形態では、ウイルスベクターは、全身的に、特に、注射および
灌流などを含む、血管内投与により投与される。
【0099】
免疫チェックポイントモジュレーター（アゴニストまたは阻害剤）は、がんの治療にお
いて使用される免疫療法である。それらは、がん細胞を攻撃するＴ細胞をチューニングす
ることが公知のタンパク質であるチェックポイントタンパク質を調節する。本発明に従っ
て使用するためのチェックポイントモジュレーターのセグメント、チェックポイント阻害
剤は、ＣＴＬＡ－４（細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４）、ＰＤ－１（プログラム
細胞死タンパク質１）またはＰＤ－Ｌ１（プログラム細胞死リガンド１）を含む、異なる
チェックポイントタンパク質を遮断する。ＣＴＬＡ－４およびＰＤ－１はＴ細胞上に見出
される一方、ＰＤ－Ｌ１はがん細胞上に見出される。ＰＤ－１を遮断するための好適なチ
ェックポイント阻害剤としては、ニボルマブ（オプジーボ（登録商標））、ペムブロリズ
マブ（キイトルーダ（登録商標））が挙げられ、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非小細胞肺
がん、尿路（尿路上皮）、膀胱などのがんを患う患者を治療するために本発明のワクチン
接種アプローチと共に使用されてもよい。ＣＴＬＡ－４を遮断するための好適なチェック
ポイント阻害剤としてはイピリムマブ（ヤーボイ（登録商標））が挙げられ、黒色腫の治
療のために本発明と共に使用されてもよい。ＰＤ－Ｌ１を遮断するための好適なチェック
ポイント阻害剤としてはアテゾリズマブ（テセントリク（登録商標））が挙げられ、肺、
乳房および尿路上皮を含むがんの治療のために本発明と共に使用されてもよい。
いて使用される免疫療法である。それらは、がん細胞を攻撃するＴ細胞をチューニングす
ることが公知のタンパク質であるチェックポイントタンパク質を調節する。本発明に従っ
て使用するためのチェックポイントモジュレーターのセグメント、チェックポイント阻害
剤は、ＣＴＬＡ－４（細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４）、ＰＤ－１（プログラム
細胞死タンパク質１）またはＰＤ－Ｌ１（プログラム細胞死リガンド１）を含む、異なる
チェックポイントタンパク質を遮断する。ＣＴＬＡ－４およびＰＤ－１はＴ細胞上に見出
される一方、ＰＤ－Ｌ１はがん細胞上に見出される。ＰＤ－１を遮断するための好適なチ
ェックポイント阻害剤としては、ニボルマブ（オプジーボ（登録商標））、ペムブロリズ
マブ（キイトルーダ（登録商標））が挙げられ、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非小細胞肺
がん、尿路（尿路上皮）、膀胱などのがんを患う患者を治療するために本発明のワクチン
接種アプローチと共に使用されてもよい。ＣＴＬＡ－４を遮断するための好適なチェック
ポイント阻害剤としてはイピリムマブ（ヤーボイ（登録商標））が挙げられ、黒色腫の治
療のために本発明と共に使用されてもよい。ＰＤ－Ｌ１を遮断するための好適なチェック
ポイント阻害剤としてはアテゾリズマブ（テセントリク（登録商標））が挙げられ、肺、
乳房および尿路上皮を含むがんの治療のために本発明と共に使用されてもよい。
【0100】
本発明の方法および使用の施行において有用な免疫チェックポイントモジュレーターの
他の好適な標的としては、例えば、ＡＭＨＲＩＩ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、
ＢＴＮＬ２、ブチロフィリンファミリー、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、Ｃ
Ｄ４０Ｌ、ＣＤ４７、ＣＤ４８、ＣＤ７０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１５５、ＣＤ１６
０、ＣＤ２２６、ＣＤ２４４、ＣＥＡＣＡＭ６、ＣＬＤＮ６、ＣＣＲ２、ＣＴＬＡ４、Ｃ
ＸＣＲ４、ＧＤ２、ＧＧＧ（グアニリルシクラーゼＧ）、ＧＩＲＴ、ＧＩＲＴリガンド、
ＨＨＬＡ２、ＨＶＥＭ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳリガンド、ＩＦＮ、ＩＬ１、ＩＬ１Ｒ、ＩＬ
１ＲＡＰ、ＩＬ６、ＩＬ６Ｒ、ＩＬ７、ＩＬ７Ｒ、ＩＬ１２、ＩＬ１２Ｒ、ＩＬ１５、Ｉ
Ｌ１５Ｒ、ＬＡＧ３、ＬＩＧＨＴ、ＬＩＦ、ＭＵＣ１６、ＮＫＧ２Ａファミリー、ＯＸ４
０、ＯＸ４０リガンド、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＰＤＬ２、Ｒｅｓｏｋｉｎｅ、ＳＥＭＡ４Ｄ
、Ｓｉｇｌｅｃファミリー、ＳＩＲＰアルファ、ＳＴＩＮＧ、ＴＧＦベータファミリー、
ＴＩＧＩＴ、ＴＩＭ３、ＴＬ１Ａ、ＴＭＩＧＤ２、ＴＮＦＲＳＦ、ＶＩＳＴＡ、４－１Ｂ
Ｂおよび４－１ＢＢリガンドから選択される任意のものが挙げられる。
他の好適な標的としては、例えば、ＡＭＨＲＩＩ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、
ＢＴＮＬ２、ブチロフィリンファミリー、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、Ｃ
Ｄ４０Ｌ、ＣＤ４７、ＣＤ４８、ＣＤ７０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１５５、ＣＤ１６
０、ＣＤ２２６、ＣＤ２４４、ＣＥＡＣＡＭ６、ＣＬＤＮ６、ＣＣＲ２、ＣＴＬＡ４、Ｃ
ＸＣＲ４、ＧＤ２、ＧＧＧ（グアニリルシクラーゼＧ）、ＧＩＲＴ、ＧＩＲＴリガンド、
ＨＨＬＡ２、ＨＶＥＭ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳリガンド、ＩＦＮ、ＩＬ１、ＩＬ１Ｒ、ＩＬ
１ＲＡＰ、ＩＬ６、ＩＬ６Ｒ、ＩＬ７、ＩＬ７Ｒ、ＩＬ１２、ＩＬ１２Ｒ、ＩＬ１５、Ｉ
Ｌ１５Ｒ、ＬＡＧ３、ＬＩＧＨＴ、ＬＩＦ、ＭＵＣ１６、ＮＫＧ２Ａファミリー、ＯＸ４
０、ＯＸ４０リガンド、ＰＤ１、ＰＤＬ１、ＰＤＬ２、Ｒｅｓｏｋｉｎｅ、ＳＥＭＡ４Ｄ
、Ｓｉｇｌｅｃファミリー、ＳＩＲＰアルファ、ＳＴＩＮＧ、ＴＧＦベータファミリー、
ＴＩＧＩＴ、ＴＩＭ３、ＴＬ１Ａ、ＴＭＩＧＤ２、ＴＮＦＲＳＦ、ＶＩＳＴＡ、４－１Ｂ
Ｂおよび４－１ＢＢリガンドから選択される任意のものが挙げられる。
【0101】
チェックポイントモジュレーターのより完全な総説は、Mahoney, A. M. et al., (2015
) Nature Reviews Drug Discovery vol 14: 561 - 584（特に図１を参照）により提供さ
れる。
) Nature Reviews Drug Discovery vol 14: 561 - 584（特に図１を参照）により提供さ
れる。
【0102】
チェックポイントモジュレーターの投与は、本発明のプライムまたは１回もしくは複数
回のブースト免疫化のいずれかと同時に為されてもよい。これは、したがって、予防また
は治療目的のための組合せ治療を提供する。同時投与の改変として、チェックポイントモ
ジュレーターは、プライムおよび／またはブースト投与の実質的に後に、実際上同時に、
投与されてもよい。あるいは、プライムおよび／またはブースト投与から時間的に遅延し
た逐次投与が為されてもよい。遅延は、プライムおよびブースト投与と比較して異なって
もよく、チェックポイントモジュレーターがワクチン投与の間に時間的に別々に投与され
るように十分に長くてもよい。本発明の免疫原性組成物とは別々のチェックポイントモジ
ュレーターの投与は、各投与の間の等しい期間を結果としてもたらしてもよい。一部の事
例では、チェックポイントモジュレーターは、本発明のＣｈＡｄベースの免疫原性組成物
を使用するプライムワクチン接種の前に投与されてもよい。
回のブースト免疫化のいずれかと同時に為されてもよい。これは、したがって、予防また
は治療目的のための組合せ治療を提供する。同時投与の改変として、チェックポイントモ
ジュレーターは、プライムおよび／またはブースト投与の実質的に後に、実際上同時に、
投与されてもよい。あるいは、プライムおよび／またはブースト投与から時間的に遅延し
た逐次投与が為されてもよい。遅延は、プライムおよびブースト投与と比較して異なって
もよく、チェックポイントモジュレーターがワクチン投与の間に時間的に別々に投与され
るように十分に長くてもよい。本発明の免疫原性組成物とは別々のチェックポイントモジ
ュレーターの投与は、各投与の間の等しい期間を結果としてもたらしてもよい。一部の事
例では、チェックポイントモジュレーターは、本発明のＣｈＡｄベースの免疫原性組成物
を使用するプライムワクチン接種の前に投与されてもよい。
【0103】
１つまたは複数のチェックポイントモジュレーターの文脈における「組合せ治療」は、
組合せの成分の同時の、逐次的なまたは別々の投与を想定する。例えば、本発明のウイル
スベクターおよびチェックポイント阻害剤の同時の投与である。例えば、本発明のウイル
スベクターおよび１つまたは複数のチェックポイント阻害剤の逐次的な投与もまた可能で
ある。さらに、本発明のウイルスベクターおよび１つまたは複数のチェックポイント阻害
剤の別々の投与の例がある。ウイルスベクターおよびチェックポイント阻害剤の投与が逐
次的または別々である場合、ウイルスおよびチェックポイント阻害剤は、治療剤が協同的
な、例えば、相乗的な、効果を示すことを可能とする時間間隔内に投与されてもよい。好
ましい実施形態では、本発明のウイルスベクターおよび１つまたは複数のチェックポイン
ト阻害剤は、互いの１、２、３、６、１２、２４、４８、７２時間以内、または４、５、
６もしくは７日以内または８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、
１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０もし
くは３１日以内に投与される。一部の実施形態では、本発明のウイルスベクターの第１の
用量は、チェックポイント阻害剤の第１の用量の前に投与され、またはその逆であり、ウ
イルスベクターおよびチェックポイント阻害剤を用いる治療がオーバーラップする時期を
含んでもよい。他の実施形態では、本発明のウイルスベクターの第１の用量は、チェック
ポイント阻害剤の第１の用量と同じ時点またはおおよそ同じ時点に投与されてもよい。他
の実施形態では、本発明のウイルスベクターの第１の用量は、チェックポイント阻害剤の
第１の用量（または第２、第３もしくはその後の用量）の後に投与され、ウイルスベクタ
ーおよびチェックポイント阻害剤を用いる治療がオーバーラップする時期を含んでもよい
。
組合せの成分の同時の、逐次的なまたは別々の投与を想定する。例えば、本発明のウイル
スベクターおよびチェックポイント阻害剤の同時の投与である。例えば、本発明のウイル
スベクターおよび１つまたは複数のチェックポイント阻害剤の逐次的な投与もまた可能で
ある。さらに、本発明のウイルスベクターおよび１つまたは複数のチェックポイント阻害
剤の別々の投与の例がある。ウイルスベクターおよびチェックポイント阻害剤の投与が逐
次的または別々である場合、ウイルスおよびチェックポイント阻害剤は、治療剤が協同的
な、例えば、相乗的な、効果を示すことを可能とする時間間隔内に投与されてもよい。好
ましい実施形態では、本発明のウイルスベクターおよび１つまたは複数のチェックポイン
ト阻害剤は、互いの１、２、３、６、１２、２４、４８、７２時間以内、または４、５、
６もしくは７日以内または８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、
１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０もし
くは３１日以内に投与される。一部の実施形態では、本発明のウイルスベクターの第１の
用量は、チェックポイント阻害剤の第１の用量の前に投与され、またはその逆であり、ウ
イルスベクターおよびチェックポイント阻害剤を用いる治療がオーバーラップする時期を
含んでもよい。他の実施形態では、本発明のウイルスベクターの第１の用量は、チェック
ポイント阻害剤の第１の用量と同じ時点またはおおよそ同じ時点に投与されてもよい。他
の実施形態では、本発明のウイルスベクターの第１の用量は、チェックポイント阻害剤の
第１の用量（または第２、第３もしくはその後の用量）の後に投与され、ウイルスベクタ
ーおよびチェックポイント阻害剤を用いる治療がオーバーラップする時期を含んでもよい
。
【実施例0104】
材料および方法
ウイルスベクターの構築
翻訳効率のためにコドン最適化された、ウイルスベクターへの挿入用の遺伝子配列は、
ＧｅｎｅＡｒｔ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によりＤＮＡスト
リングまたはプラスミドとして合成された。チンパンジーアデノウイルスベクター（Ｃｈ
ＡｄＯｘ）の構築のために、ＤＮＡストリング挿入物およびｐ１９９０骨格（Ｇａｔｅｗ
ａｙ（登録商標）エントリーベクター）を制限酵素ＫｐｎＩ／ＮｏｔＩを用いて消化し、
次に終夜のインキュベーションを介してライゲートした。目的の遺伝子配列をコードする
プラスミドｐ１９９０でＤＨ５α（商標）コンピテント大腸菌（E. coli）を形質転換し
、次にＰＣＲ法を介して陽性クローンについてスクリーニングした。陽性のクローニング
されたＤＮＡをｍｉｄｉｐｒｅｐを介して増幅し、次にＬＲクロナーゼを使用して、遺伝
子挿入物を含有するｐ１９９０およびｐ２５６３［配列番号２４］、ＣｈＡｄＯｘデステ
ィネーションベクターの間でＧａｔｅｗａｙ（登録商標）クローニング（ＴｈｅｒｍｏＦ
ｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を実行した。ｐ２５６３デスティネーションベクタ
ーＤＮＡを細菌形質転換、ｍａｘｉｐｒｅｐおよび重力カラム精製を介して増幅した。ｐ
２５６３デスティネーションベクターをＰｍｅ１を用いて消化してＤＮＡを線状化した後
に、ウイルス製造用とした。
ウイルスベクターの構築
翻訳効率のためにコドン最適化された、ウイルスベクターへの挿入用の遺伝子配列は、
ＧｅｎｅＡｒｔ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によりＤＮＡスト
リングまたはプラスミドとして合成された。チンパンジーアデノウイルスベクター（Ｃｈ
ＡｄＯｘ）の構築のために、ＤＮＡストリング挿入物およびｐ１９９０骨格（Ｇａｔｅｗ
ａｙ（登録商標）エントリーベクター）を制限酵素ＫｐｎＩ／ＮｏｔＩを用いて消化し、
次に終夜のインキュベーションを介してライゲートした。目的の遺伝子配列をコードする
プラスミドｐ１９９０でＤＨ５α（商標）コンピテント大腸菌（E. coli）を形質転換し
、次にＰＣＲ法を介して陽性クローンについてスクリーニングした。陽性のクローニング
されたＤＮＡをｍｉｄｉｐｒｅｐを介して増幅し、次にＬＲクロナーゼを使用して、遺伝
子挿入物を含有するｐ１９９０およびｐ２５６３［配列番号２４］、ＣｈＡｄＯｘデステ
ィネーションベクターの間でＧａｔｅｗａｙ（登録商標）クローニング（ＴｈｅｒｍｏＦ
ｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を実行した。ｐ２５６３デスティネーションベクタ
ーＤＮＡを細菌形質転換、ｍａｘｉｐｒｅｐおよび重力カラム精製を介して増幅した。ｐ
２５６３デスティネーションベクターをＰｍｅ１を用いて消化してＤＮＡを線状化した後
に、ウイルス製造用とした。
【0105】
ＣｈＡｄＯｘ１ベクターを生成するための寄託された生物学的材料の核酸配列および供
給源を含む、より包括的な技術情報は、Ｉｓｉｓ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅ
ｄの国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレット（参照により本明細書に組み込ま
れる）に開示されている。ＣｈＡｄＯｘ２ベクターを生成するための生物学的材料の核酸
配列および供給源を含む、より包括的な技術情報は、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ
ｙ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１７／２２１０３１号パン
フレット（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
給源を含む、より包括的な技術情報は、Ｉｓｉｓ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅ
ｄの国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレット（参照により本明細書に組み込ま
れる）に開示されている。ＣｈＡｄＯｘ２ベクターを生成するための生物学的材料の核酸
配列および供給源を含む、より包括的な技術情報は、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ
ｙ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１７／２２１０３１号パン
フレット（参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【0106】
本発明のＣｈＡｄＯｘウイルスベクターの製造のためのさらなる材料および方法の情報
を提供する、参照により本明細書に組み込まれる他の関連する開示は、Dicks, M. D. J.,
et al. (2012) "A Novel Chimpanzee Adenovirus Vector with Low Human Seroprevalen
ce: Improved Systems for Vector Derivation and Comparative Immunogenicity" PlosO
ne e40385である。
を提供する、参照により本明細書に組み込まれる他の関連する開示は、Dicks, M. D. J.,
et al. (2012) "A Novel Chimpanzee Adenovirus Vector with Low Human Seroprevalen
ce: Improved Systems for Vector Derivation and Comparative Immunogenicity" PlosO
ne e40385である。
【0107】
改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ベクターを生成するために、ＧｅｎｅＡｒｔ ＤＮ
ＡストリングまたはプラスミドをＰｈｕｓｉｏｎ（登録商標）ポリメラーゼ（Ｔｈｅｒｍ
ｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用するＰＣＲを介して増幅し、ＩｎＦｕｓ
ｉｏｎ反応のための正しいオーバーハングを確実にした。遺伝子挿入物およびｐ４７１９
［配列番号２５］、ＭＶＡデスティネーションベクターを次に制限酵素Ａｌｅ Ｉを用い
て消化した。増幅された挿入物およびｐ４７１９を次にＩｎＦｕｓｉｏｎ法を使用してラ
イゲートした。ライゲートされたプラスミドでＤＨ５α（商標）コンピテント大腸菌（E.
coli）を形質転換した。陽性クローンをスクリーニングし、ＤＮＡをｍｉｄｉｐｒｅｐ
を介して増幅した。ＤＮＡを線状化させるためのＸｈｏ１＋Ａｃｃ６５１を用いる最終の
消化をウイルス製造の前に行った。
ＡストリングまたはプラスミドをＰｈｕｓｉｏｎ（登録商標）ポリメラーゼ（Ｔｈｅｒｍ
ｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用するＰＣＲを介して増幅し、ＩｎＦｕｓ
ｉｏｎ反応のための正しいオーバーハングを確実にした。遺伝子挿入物およびｐ４７１９
［配列番号２５］、ＭＶＡデスティネーションベクターを次に制限酵素Ａｌｅ Ｉを用い
て消化した。増幅された挿入物およびｐ４７１９を次にＩｎＦｕｓｉｏｎ法を使用してラ
イゲートした。ライゲートされたプラスミドでＤＨ５α（商標）コンピテント大腸菌（E.
coli）を形質転換した。陽性クローンをスクリーニングし、ＤＮＡをｍｉｄｉｐｒｅｐ
を介して増幅した。ＤＮＡを線状化させるためのＸｈｏ１＋Ａｃｃ６５１を用いる最終の
消化をウイルス製造の前に行った。
【0108】
本発明のために必要なＭＶＡベクターを生成および再製造するための寄託された生物学
的材料の核酸配列および供給源を含む、より包括的な技術情報は、Ｉｓｉｓ Ｉｎｎｏｖ
ａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットおよび
欧州特許出願公開第２０４４９４７号明細書（これらのそれぞれは参照により全体が組み
込まれる）に開示されている。本発明のＭＶＡウイルスベクターの製造のためのさらなる
材料および方法の情報を提供する、参照により本明細書に組み込まれる他の関連する開示
は、Pavot V., Sebastian S., Turner A. V., Matthews J., Gilbert S.C. (2017) "Gene
ration and Production of Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA) as a Vaccine Vecto
r" In: Ferran M., Skuse G. (eds) Recombinant Virus Vaccines, Methods in Molecula
r Biology, vol 1581 Humana Press, New York, NYである。
的材料の核酸配列および供給源を含む、より包括的な技術情報は、Ｉｓｉｓ Ｉｎｎｏｖ
ａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄの国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットおよび
欧州特許出願公開第２０４４９４７号明細書（これらのそれぞれは参照により全体が組み
込まれる）に開示されている。本発明のＭＶＡウイルスベクターの製造のためのさらなる
材料および方法の情報を提供する、参照により本明細書に組み込まれる他の関連する開示
は、Pavot V., Sebastian S., Turner A. V., Matthews J., Gilbert S.C. (2017) "Gene
ration and Production of Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA) as a Vaccine Vecto
r" In: Ferran M., Skuse G. (eds) Recombinant Virus Vaccines, Methods in Molecula
r Biology, vol 1581 Humana Press, New York, NYである。
【0109】
ペプチドの製造
Ｐ１Ａ、ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１タンパク質の全体をカバーする１５ア
ミノ酸の長さの短いペプチドのオーバーラップするプールをＭｉｍｏｔｏｐｅｓ、Ｍｕｌ
ｇｒａｖｅ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、Ａｕｓｔｒａｌｉａに注文して製造した。
Ｐ１Ａ、ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１タンパク質の全体をカバーする１５ア
ミノ酸の長さの短いペプチドのオーバーラップするプールをＭｉｍｏｔｏｐｅｓ、Ｍｕｌ
ｇｒａｖｅ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、Ａｕｓｔｒａｌｉａに注文して製造した。
【0110】
マウス
６～８週齢Ｃ５７ＢＬ／６、ＤＢＡ／２およびＣＤ１マウスをＥｎｖｉｇｏ、ＵＫから
購入し、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｆａｃｉｌｉｔｙ、Ｕｎｉｖｅｒｓ
ｉｔｙ ｏｆ Ｏｘｆｏｒｄ、ＵＫにおいて飼育した。マウスの世話および実験の手順は
、ＵＫ Ａｎｉｍａｌｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ Ａｃｔ Ｐｒ
ｏｊｅｃｔ Ｌｉｃｅｎｓｅ ３０／２９４７の条項に従って実行した。
６～８週齢Ｃ５７ＢＬ／６、ＤＢＡ／２およびＣＤ１マウスをＥｎｖｉｇｏ、ＵＫから
購入し、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｆａｃｉｌｉｔｙ、Ｕｎｉｖｅｒｓ
ｉｔｙ ｏｆ Ｏｘｆｏｒｄ、ＵＫにおいて飼育した。マウスの世話および実験の手順は
、ＵＫ Ａｎｉｍａｌｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ Ａｃｔ Ｐｒ
ｏｊｅｃｔ Ｌｉｃｅｎｓｅ ３０／２９４７の条項に従って実行した。
【0111】
ｉｎ ｖｉｖｏ研究
ワクチンの免疫原性を査定するために、全身麻酔下での５０μｌの総容量の筋肉内（ｉ
．ｍ．）注射を介して図中に指し示される用量において製造されたＣｈＡｄＯｘ１および
ＭＶＡウイルスベクターをマウスに投与した。各実験について詳述するスキームに従って
ワクチン接種を時点において投与した。生Ｌ１２１０．Ｐ１Ａ．Ｂ７－１細胞を用いる免
疫化は、腹腔内注射を介して行った。ｅｘ ｖｉｖｏアッセイ用のＰＢＭＣを得るために
、尾静脈出血を介して血液を採取し、ＡＣＫ溶解緩衝液を用いて赤血球細胞を除去するた
めの処理を行った。
ワクチンの免疫原性を査定するために、全身麻酔下での５０μｌの総容量の筋肉内（ｉ
．ｍ．）注射を介して図中に指し示される用量において製造されたＣｈＡｄＯｘ１および
ＭＶＡウイルスベクターをマウスに投与した。各実験について詳述するスキームに従って
ワクチン接種を時点において投与した。生Ｌ１２１０．Ｐ１Ａ．Ｂ７－１細胞を用いる免
疫化は、腹腔内注射を介して行った。ｅｘ ｖｉｖｏアッセイ用のＰＢＭＣを得るために
、尾静脈出血を介して血液を採取し、ＡＣＫ溶解緩衝液を用いて赤血球細胞を除去するた
めの処理を行った。
【0112】
１０の異なる組換えウイルスワクチン（以下の表１を参照）を生成し、抗原発現を感染
細胞において確認した。
細胞において確認した。
【0113】
【表2】
【0114】
Ｐ１Ａ抗原を発現するこれらのウイルスベクター化ワクチンの免疫原性を、ＤＢＡ／２
、Ｃ５７ＢＬ／６およびＣＤ１非近交系マウスを含むマウスの３つの異なる系統において
試験した。
、Ｃ５７ＢＬ／６およびＣＤ１非近交系マウスを含むマウスの３つの異なる系統において
試験した。
【0115】
ｅｘ ｖｉｖｏペプチド刺激
単離されたマウスＰＢＭＣまたは脾臓細胞を、１０％のＦＣＳを添加したＲＰＭＩ １
６４０培地に懸濁し、Ｖ底９６ウェルプレートに加えた。抗ＣＤ２８抗体（２μｇ／ｍｌ
）およびＤＮａｓｅ（２０μｇ／ｍｌ）と共にＰ１Ａ、ＭＡＧＥ－Ａ３もしくはＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１ペプチドまたはＤＭＳＯ対照を４ｍｇ／ｍｌの作用濃度において培養培地に加え
ることにより細胞を刺激した。細胞内サイトカイン蓄積を促進するために１時間後にＢｒ
ｅｆａｌｄｉｎ Ａを添加すると共に、ペプチド刺激細胞を５％のＣＯ２中３７℃で５時
間インキュベートした。
単離されたマウスＰＢＭＣまたは脾臓細胞を、１０％のＦＣＳを添加したＲＰＭＩ １
６４０培地に懸濁し、Ｖ底９６ウェルプレートに加えた。抗ＣＤ２８抗体（２μｇ／ｍｌ
）およびＤＮａｓｅ（２０μｇ／ｍｌ）と共にＰ１Ａ、ＭＡＧＥ－Ａ３もしくはＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１ペプチドまたはＤＭＳＯ対照を４ｍｇ／ｍｌの作用濃度において培養培地に加え
ることにより細胞を刺激した。細胞内サイトカイン蓄積を促進するために１時間後にＢｒ
ｅｆａｌｄｉｎ Ａを添加すると共に、ペプチド刺激細胞を５％のＣＯ２中３７℃で５時
間インキュベートした。
【0116】
フローサイトメトリー － 細胞内サイトカイン染色
ペプチド刺激後、ＰＢＭＣをＰＢＳを用いて洗浄し、ＰＢＳ中のＡｑｕａ ｌｉｖｅ／
ｄｅａｄ ｆｉｘａｂｌｅ ｄｙｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）および抗ＣＤ８／抗ＣＤ４
抗体と４℃で２０分間インキュベートすることにより表面マーカー／生存能のための染色
を行った。サイトカインを産生する活性化細胞のパーセンテージを査定するために、細胞
を次にＣｙｔｏＦｉｘ／ＣｙｔｏＰｅｒｍ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて固
定および透過処理し（permeabalised）、１ｘのｐｅｒｍ緩衝液（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅ
ｎｃｅｓ）中の抗ＩＦＮ－γ、抗ＴＮＦ－αおよび抗ＩＬ－２抗体と４℃で２０分間イン
キュベートした。試料をＢＤ Ｆｏｒｔｅｓｓａで取得し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（
Ｔｒｅｅ Ｓｔａｒ， Ｉｎｃ．）を使用して解析を行った。
ペプチド刺激後、ＰＢＭＣをＰＢＳを用いて洗浄し、ＰＢＳ中のＡｑｕａ ｌｉｖｅ／
ｄｅａｄ ｆｉｘａｂｌｅ ｄｙｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）および抗ＣＤ８／抗ＣＤ４
抗体と４℃で２０分間インキュベートすることにより表面マーカー／生存能のための染色
を行った。サイトカインを産生する活性化細胞のパーセンテージを査定するために、細胞
を次にＣｙｔｏＦｉｘ／ＣｙｔｏＰｅｒｍ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて固
定および透過処理し（permeabalised）、１ｘのｐｅｒｍ緩衝液（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅ
ｎｃｅｓ）中の抗ＩＦＮ－γ、抗ＴＮＦ－αおよび抗ＩＬ－２抗体と４℃で２０分間イン
キュベートした。試料をＢＤ Ｆｏｒｔｅｓｓａで取得し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（
Ｔｒｅｅ Ｓｔａｒ， Ｉｎｃ．）を使用して解析を行った。
【0117】
統計解析
全ての統計的検定および解析は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用し
て行った。複数の群間の差異は、クラスカル・ウォリスノンパラメトリック分散分析を用
い、個々の群間の差異は、マン－ホイットニーノンパラメトリックｔ検定を用いて決定し
た。
全ての統計的検定および解析は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用し
て行った。複数の群間の差異は、クラスカル・ウォリスノンパラメトリック分散分析を用
い、個々の群間の差異は、マン－ホイットニーノンパラメトリックｔ検定を用いて決定し
た。
【0118】
[実施例１]
ＣｈＡｄＯｘ／ＭＶＡを用いる免疫化によるＰ１Ａに対するＣＤ８ Ｔ細胞の誘導
Ｐ１Ａは、同系宿主における非突然変異ＭＡＧＥ型抗原に対するＣＤ８応答の誘導を確
認するためおよびＰ１Ａ発現腫瘍Ｐ８１５に対する保護を誘導するために使用できるマウ
スＭＡＧＥ型抗原である。それはＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１のサロゲートで
ある。
ＣｈＡｄＯｘ／ＭＶＡを用いる免疫化によるＰ１Ａに対するＣＤ８ Ｔ細胞の誘導
Ｐ１Ａは、同系宿主における非突然変異ＭＡＧＥ型抗原に対するＣＤ８応答の誘導を確
認するためおよびＰ１Ａ発現腫瘍Ｐ８１５に対する保護を誘導するために使用できるマウ
スＭＡＧＥ型抗原である。それはＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１のサロゲートで
ある。
【0119】
図１Ｂは、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）が採取され、ワクチン接種応答について試験さ
れるマウスのプライム－ブースト免疫化の図式的な概要を示す。図２は、Ｐ１Ａをコード
するＣｈＡｄＯｘ１／ＭＶＡウイルスベクターを用いてワクチン接種されたマウスにおけ
るＣＤ８＋ Ｔ細胞応答を示す。ワクチン接種スキームの時間表（図１）に従って、ＢＬ
／６、ＤＢＡ／２およびＣＤ１マウスにＣｈＡｄＯｘ１．Ｐ１ＡまたはＣｈＡｄＯｘ１．
Ｐ１Ａ－Ｉｉのいずれか（プライム）、続いて４週後にＭＶＡ．Ｐ１Ａ（ブースト）をワ
クチン接種した。Ｐ１Ａ特異的Ｔ細胞応答を試験するために、Ｐ１Ａペプチドプールを用
いてＰＭＢＣをｅｘ ｖｉｖｏで刺激し、Ｉ型サイトカインを産生する細胞のパーセンテ
ージをフローサイトメトリーにより解析した。サイトカインＩＦＮ－γ（Ａ）およびＴＮ
Ｆ－α（Ｂ）を産生するＣＤ８＋細胞のパーセンテージ（ｎ＝６／群）を測定した。異種
プライム－ブーストワクチン接種は、ＩＦＮ－γおよびＴＮＦ－αの細胞内染色により示
されるように、マウスの３つ全ての系統においてＰ１Ａに対する強いＣＤ８応答を誘導し
た（図２）。Ｐ１ＡをＭＨＣ ＩＩシャペロンタンパク質インバリアント鎖（Ｉｉ）に融
合させた場合に応答はさらに増進された。これらの結果は、ＩＦＮ－γ ＥＬＩＳＰＯＴ
アッセイおよびＤＢＡ／２マウスにおけるＰ１Ａ特異的四量体染色により確認された（結
果は示さない）。
れるマウスのプライム－ブースト免疫化の図式的な概要を示す。図２は、Ｐ１Ａをコード
するＣｈＡｄＯｘ１／ＭＶＡウイルスベクターを用いてワクチン接種されたマウスにおけ
るＣＤ８＋ Ｔ細胞応答を示す。ワクチン接種スキームの時間表（図１）に従って、ＢＬ
／６、ＤＢＡ／２およびＣＤ１マウスにＣｈＡｄＯｘ１．Ｐ１ＡまたはＣｈＡｄＯｘ１．
Ｐ１Ａ－Ｉｉのいずれか（プライム）、続いて４週後にＭＶＡ．Ｐ１Ａ（ブースト）をワ
クチン接種した。Ｐ１Ａ特異的Ｔ細胞応答を試験するために、Ｐ１Ａペプチドプールを用
いてＰＭＢＣをｅｘ ｖｉｖｏで刺激し、Ｉ型サイトカインを産生する細胞のパーセンテ
ージをフローサイトメトリーにより解析した。サイトカインＩＦＮ－γ（Ａ）およびＴＮ
Ｆ－α（Ｂ）を産生するＣＤ８＋細胞のパーセンテージ（ｎ＝６／群）を測定した。異種
プライム－ブーストワクチン接種は、ＩＦＮ－γおよびＴＮＦ－αの細胞内染色により示
されるように、マウスの３つ全ての系統においてＰ１Ａに対する強いＣＤ８応答を誘導し
た（図２）。Ｐ１ＡをＭＨＣ ＩＩシャペロンタンパク質インバリアント鎖（Ｉｉ）に融
合させた場合に応答はさらに増進された。これらの結果は、ＩＦＮ－γ ＥＬＩＳＰＯＴ
アッセイおよびＤＢＡ／２マウスにおけるＰ１Ａ特異的四量体染色により確認された（結
果は示さない）。
【0120】
全体として、観察されたものは、ＤＢＡ／２、Ｂ６および非近交系ＣＤ１マウスにおけ
る非常に強いＣＤ８応答であった。ＣＤ８応答は、ＣｈＡｄＯｘベクターにＩｉを加える
ことにより増加した。見出されたものは、ＣＤ８ Ｔ細胞がオーバーラップペプチドによ
り誘導された場合に、それらはＩＦＮγ、ＩＬ２、およびＴＮＦαを分泌したことであっ
た。Ｐ１Ａに対するＣＤ４応答はほとんどなかった（ＣＤ４エピトープは公知ではない）
。
る非常に強いＣＤ８応答であった。ＣＤ８応答は、ＣｈＡｄＯｘベクターにＩｉを加える
ことにより増加した。見出されたものは、ＣＤ８ Ｔ細胞がオーバーラップペプチドによ
り誘導された場合に、それらはＩＦＮγ、ＩＬ２、およびＴＮＦαを分泌したことであっ
た。Ｐ１Ａに対するＣＤ４応答はほとんどなかった（ＣＤ４エピトープは公知ではない）
。
【0121】
[実施例２]
腫瘍発生に対するＰ１Ａを持つＣｈＡｄＯｘ１およびＭＶＡウイルスベクターの保護有効
性の査定
腫瘍負荷に対するワクチン保護有効性の査定の部分として、マウスの１つの脇腹の皮下
（ｓ．ｃ．）に無血清細胞培養培地中の腫瘍細胞を注射した。触知可能な腫瘍が発生した
ら、成長を記録し、腫瘍サイズがいずれかの方向において１０ｍｍに達したらマウスを安
楽死させた。腫瘍体積は、式：長さ（ｍｍ）×幅２（ｍｍ）×０．５を使用して測定した
。生存曲線をカプラン－マイヤー法に従って作成し、生存における差異をログランク検定
を使用して試験した。０．０５より低いＰ値を有意と考えた。
腫瘍発生に対するＰ１Ａを持つＣｈＡｄＯｘ１およびＭＶＡウイルスベクターの保護有効
性の査定
腫瘍負荷に対するワクチン保護有効性の査定の部分として、マウスの１つの脇腹の皮下
（ｓ．ｃ．）に無血清細胞培養培地中の腫瘍細胞を注射した。触知可能な腫瘍が発生した
ら、成長を記録し、腫瘍サイズがいずれかの方向において１０ｍｍに達したらマウスを安
楽死させた。腫瘍体積は、式：長さ（ｍｍ）×幅２（ｍｍ）×０．５を使用して測定した
。生存曲線をカプラン－マイヤー法に従って作成し、生存における差異をログランク検定
を使用して試験した。０．０５より低いＰ値を有意と考えた。
【0122】
より詳細には、ＤＢＡ／２マウスを４週間隔で与えたＰＢＳ、生Ｌ１２１０．Ｐ１Ａ．
Ｂ７－１細胞またはＣｈＡｄＯｘ１－Ｐ１Ａ（±Ｉｉ）／ＭＶＡ－Ｐ１Ａプライム－ブー
ストのいずれかを用いて免疫化し、次に脇腹における皮下注射を介して１．５×１０６個
のＰ８１５細胞または１×１０６個の１５Ｖ４Ｔ３細胞を用いた負荷を行った。Ｐ８１５
および１５Ｖ４Ｔ３は、同系Ｐ１Ａ陽性肥満症細胞腫細胞系である。１５Ｖ４Ｔ３細胞は
、Boon T, Van den Eynde B, Hirsch H, Moroni C, De Plaen E, van der Bruggen P, De
Smet C, Lurquin C, Szikora JP, De Backer O. (1994) "Genes coding for tumor-spec
ific rejection antigens" Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 59: 617 - 22に記載さ
れている。
Ｂ７－１細胞またはＣｈＡｄＯｘ１－Ｐ１Ａ（±Ｉｉ）／ＭＶＡ－Ｐ１Ａプライム－ブー
ストのいずれかを用いて免疫化し、次に脇腹における皮下注射を介して１．５×１０６個
のＰ８１５細胞または１×１０６個の１５Ｖ４Ｔ３細胞を用いた負荷を行った。Ｐ８１５
および１５Ｖ４Ｔ３は、同系Ｐ１Ａ陽性肥満症細胞腫細胞系である。１５Ｖ４Ｔ３細胞は
、Boon T, Van den Eynde B, Hirsch H, Moroni C, De Plaen E, van der Bruggen P, De
Smet C, Lurquin C, Szikora JP, De Backer O. (1994) "Genes coding for tumor-spec
ific rejection antigens" Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 59: 617 - 22に記載さ
れている。
【0123】
【0124】
図４および図５に示されるように、Ｐ１Ａを伴うアデノウイルスプライムおよびＭＶＡ
ブーストワクチン接種は、ＰＢＳ対照群と比較してワクチン接種マウスにおいて、有意に
腫瘍成長を低減し、生存を向上させた。興味深いことに、Ｉｉ＿Ｐ１Ａを用いてワクチン
接種された群は、Ｌ１２１０．Ｐ１Ａ Ｂ７．１細胞を用いて免疫化された陽性対照群と
比較してより小さい腫瘍体積およびより良好な生存を有した。この細胞系は、非常に強い
Ｐ１Ａ特異的細胞傷害活性およびＰ１Ａ陽性腫瘍負荷に対する保護を誘導することが以前
に示されている（Brandle D. et al. (1998) Eur. J. Immunol. 28(12): 4010 - 4019お
よびNaslund T. I. et al. (2007) J. Immunol. 178(11): 6761 - 6769）を参照。これは
、ワクチン接種からの刺激された免疫応答は、Ｐ８１５腫瘍からのマウスの保護において
効率的であることを指し示した。図６Ａおよび図６Ｂは、他のＰ１Ａ陽性腫瘍細胞系１５
Ｖ４Ｔ３を使用して観察された同じ結果を示す。
ブーストワクチン接種は、ＰＢＳ対照群と比較してワクチン接種マウスにおいて、有意に
腫瘍成長を低減し、生存を向上させた。興味深いことに、Ｉｉ＿Ｐ１Ａを用いてワクチン
接種された群は、Ｌ１２１０．Ｐ１Ａ Ｂ７．１細胞を用いて免疫化された陽性対照群と
比較してより小さい腫瘍体積およびより良好な生存を有した。この細胞系は、非常に強い
Ｐ１Ａ特異的細胞傷害活性およびＰ１Ａ陽性腫瘍負荷に対する保護を誘導することが以前
に示されている（Brandle D. et al. (1998) Eur. J. Immunol. 28(12): 4010 - 4019お
よびNaslund T. I. et al. (2007) J. Immunol. 178(11): 6761 - 6769）を参照。これは
、ワクチン接種からの刺激された免疫応答は、Ｐ８１５腫瘍からのマウスの保護において
効率的であることを指し示した。図６Ａおよび図６Ｂは、他のＰ１Ａ陽性腫瘍細胞系１５
Ｖ４Ｔ３を使用して観察された同じ結果を示す。
【0125】
全体として、観察されたものは、異なるＰ１Ａ発現腫瘍モデルＰ８１５および１５Ｖ４
Ｔ３（およびＶ４Ｄ６；データは示さない）における腫瘍負荷に対する保護および生存の
増加と関連付けられるＣＤ８応答であった。プライム－ブーストレジメンは、陽性対照細
胞ワクチンを用いるよりも良好な保護を与えた。インバリアント鎖（Ｉｉ）－Ｐ１Ａ融合
物がベクターにおいてＰ１Ａ単独よりもどのように良好であるらしいのかも観察される。
任意の腫瘍が、長期間後に治療を用いた成長効果の低減から逃れている場合、これらはＰ
１Ａ発現を喪失していた（データは示さない）。
Ｔ３（およびＶ４Ｄ６；データは示さない）における腫瘍負荷に対する保護および生存の
増加と関連付けられるＣＤ８応答であった。プライム－ブーストレジメンは、陽性対照細
胞ワクチンを用いるよりも良好な保護を与えた。インバリアント鎖（Ｉｉ）－Ｐ１Ａ融合
物がベクターにおいてＰ１Ａ単独よりもどのように良好であるらしいのかも観察される。
任意の腫瘍が、長期間後に治療を用いた成長効果の低減から逃れている場合、これらはＰ
１Ａ発現を喪失していた（データは示さない）。
【0126】
[実施例３]
Ｐ１Ａを持つＣｈＡｄＯｘ１およびＭＶＡウイルスベクターのワクチン治療有効性の査定
ワクチン治療有効性を査定するための実験を行った。１５Ｖ４Ｔ３腫瘍が確立されたら
、マウスを５日後からＣｈＡｄＯｘベクターを用いてプライミングし、次に２６日目にＭ
ＶＡベクターを用いてブーストした。ワクチン接種スキームを図７に示す。３つの異なる
ワクチン接種スキームを試験した。ＤＢＡ／２マウスを脇腹における皮下注射を介して１
×１０６個の１５Ｖ４Ｔ３細胞を用いて負荷し、次に負荷の５日後に３週間隔の単一の標
準用量ＣｈＡｄＯｘ－Ｐ１Ａ（１０８ＩＵ）／ＭＶＡ－Ｐ１Ａ（１０７ＰＦＵ）プライム
－ブーストワクチン接種、３週間隔の単一の低用量プライム－ブーストワクチン接種（Ｃ
ｈＡｄＯｘ － １０７ＩＵ、ＭＶＡ － １０６ＰＦＵ）、週毎の交互の低用量ＣｈＡ
ｄＯｘ－Ｐ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａワクチン接種または週毎の対照抗原、ＤＰＹをコードす
るＣｈＡｄＯｘ／ＭＶＡワクチン接種のいずれかを与えた。各治療群における１５Ｖ４Ｔ
３腫瘍成長および生存を次にモニターした。
Ｐ１Ａを持つＣｈＡｄＯｘ１およびＭＶＡウイルスベクターのワクチン治療有効性の査定
ワクチン治療有効性を査定するための実験を行った。１５Ｖ４Ｔ３腫瘍が確立されたら
、マウスを５日後からＣｈＡｄＯｘベクターを用いてプライミングし、次に２６日目にＭ
ＶＡベクターを用いてブーストした。ワクチン接種スキームを図７に示す。３つの異なる
ワクチン接種スキームを試験した。ＤＢＡ／２マウスを脇腹における皮下注射を介して１
×１０６個の１５Ｖ４Ｔ３細胞を用いて負荷し、次に負荷の５日後に３週間隔の単一の標
準用量ＣｈＡｄＯｘ－Ｐ１Ａ（１０８ＩＵ）／ＭＶＡ－Ｐ１Ａ（１０７ＰＦＵ）プライム
－ブーストワクチン接種、３週間隔の単一の低用量プライム－ブーストワクチン接種（Ｃ
ｈＡｄＯｘ － １０７ＩＵ、ＭＶＡ － １０６ＰＦＵ）、週毎の交互の低用量ＣｈＡ
ｄＯｘ－Ｐ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａワクチン接種または週毎の対照抗原、ＤＰＹをコードす
るＣｈＡｄＯｘ／ＭＶＡワクチン接種のいずれかを与えた。各治療群における１５Ｖ４Ｔ
３腫瘍成長および生存を次にモニターした。
【0127】
図８に示されるように、腫瘍成長は、関連しないタンパク質ＤＰＹを発現するウイルス
ベクターを用いてワクチン接種された対照群と比較してワクチン接種マウスにおいて顕著
に遅延された。さらに、単一の標準用量プライム－ブーストは、腫瘍負荷に対する最良の
保護および生存を実証した。しかしながら、ワクチン接種マウスは、後のステージ（６週
目）において腫瘍成長を制御する能力を喪失し始めた。
ベクターを用いてワクチン接種された対照群と比較してワクチン接種マウスにおいて顕著
に遅延された。さらに、単一の標準用量プライム－ブーストは、腫瘍負荷に対する最良の
保護および生存を実証した。しかしながら、ワクチン接種マウスは、後のステージ（６週
目）において腫瘍成長を制御する能力を喪失し始めた。
【0128】
治療有効性は、したがって、１５Ｖ４Ｔ３モデルにおいて観察された。
【0129】
[実施例４]
免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせたＣｈＡｄＯｘ１－Ｐ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａプ
ライム－ブーストワクチン接種レジームの治療有効性の査定
より良好な腫瘍保護を達成し、ワクチン有効性を増加させるために、ワクチンをチェッ
クポイント阻害剤での遮断と組合せ、同じ１５Ｖ４Ｔ３腫瘍モデルを使用して、ＤＢＡ／
２マウスにＰ１Ａ発現同系１５Ｖ４Ｔ３腫瘍細胞を接種した。ＤＢＡ／２マウスを脇腹に
おける皮下注射を介して１×１０６個の１５Ｖ４Ｔ３細胞を用いて負荷し、次に腫瘍サイ
ズに基づいて負荷後８日目に異なる治療群に無作為化した。マウスにＰＢＳ（シャム）ワ
クチン接種、単独のもしくは抗ＰＤ１もしくは抗ＣＴＬＡ－４抗体のいずれか（３日間隔
の３用量）と組み合わせた週毎のＣｈＡｄＯｘ／ＭＶＡワクチン接種、または単独の抗Ｐ
Ｄ１もしくは抗ＣＴＬＡ－４抗体のいずれかを与えた。各治療群における１５Ｖ４Ｔ３腫
瘍成長（図１０）および生存（図１１）をモニターし、継続期間の全体を通じて記録した
。触知可能な腫瘍の確立後、腫瘍サイズを測定し、マウスを異なる群に無作為化した。図
１０（左手グラフ）に示されるように、組合せ療法を与えたマウスの腫瘍成長は、対照お
よび単一療法群におけるマウスと比較してはるかに遅延した。また、抗ＰＤ１およびワク
チンの組合せ療法を与えたマウスの１００％は、腫瘍負荷後３６日目まで生存し、抗ＣＴ
ＬＡ４およびワクチン治療の群においてマウスの５０％が生存したが、他のマウスは全て
生存が不良であった。
免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせたＣｈＡｄＯｘ１－Ｐ１Ａ／ＭＶＡ－Ｐ１Ａプ
ライム－ブーストワクチン接種レジームの治療有効性の査定
より良好な腫瘍保護を達成し、ワクチン有効性を増加させるために、ワクチンをチェッ
クポイント阻害剤での遮断と組合せ、同じ１５Ｖ４Ｔ３腫瘍モデルを使用して、ＤＢＡ／
２マウスにＰ１Ａ発現同系１５Ｖ４Ｔ３腫瘍細胞を接種した。ＤＢＡ／２マウスを脇腹に
おける皮下注射を介して１×１０６個の１５Ｖ４Ｔ３細胞を用いて負荷し、次に腫瘍サイ
ズに基づいて負荷後８日目に異なる治療群に無作為化した。マウスにＰＢＳ（シャム）ワ
クチン接種、単独のもしくは抗ＰＤ１もしくは抗ＣＴＬＡ－４抗体のいずれか（３日間隔
の３用量）と組み合わせた週毎のＣｈＡｄＯｘ／ＭＶＡワクチン接種、または単独の抗Ｐ
Ｄ１もしくは抗ＣＴＬＡ－４抗体のいずれかを与えた。各治療群における１５Ｖ４Ｔ３腫
瘍成長（図１０）および生存（図１１）をモニターし、継続期間の全体を通じて記録した
。触知可能な腫瘍の確立後、腫瘍サイズを測定し、マウスを異なる群に無作為化した。図
１０（左手グラフ）に示されるように、組合せ療法を与えたマウスの腫瘍成長は、対照お
よび単一療法群におけるマウスと比較してはるかに遅延した。また、抗ＰＤ１およびワク
チンの組合せ療法を与えたマウスの１００％は、腫瘍負荷後３６日目まで生存し、抗ＣＴ
ＬＡ４およびワクチン治療の群においてマウスの５０％が生存したが、他のマウスは全て
生存が不良であった。
【0130】
ワクチン＋抗ＰＤ１の相乗効果が１５Ｖ４Ｔ３モデルの治療的状況において観察された
。
。
【0131】
[実施例５]
ＣＤ１非近交系マウスにおけるＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１の免疫原性の査定
マウスＰ１Ａ遺伝子をコードするベクターからの応答が確立されたので、ヒトＭＡＧＥ
型抗原をコードするベクター構築物を製造し、試験した。異なる形態のヒトＭＡＧＥ型抗
原、ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１の免疫原性をＣＤ１非近交系マウスにおいて
調べた。ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１を融合タンパク質としてチンパンジーア
デノウイルスベクターにクローニングすると共に、それらをＭＶＡに個々にクローニング
した。これは２つの主な理由に起因する。第１に、アデノウイルスベクター化ワクチンの
製造はＭＶＡより高価である。臨床的状況用の調製のために試みたことは、コストを最小
化して、ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１の融合物を発現する１つの単一のアデノ
ウイルスベクター化ワクチンのみを含ませることであった。第２に、一部のヒト腫瘍はＭ
ＡＧＥ－Ａ３またはＮＹ－ＥＳＯ－１のいずれかを発現する。腫瘍に対するより特異的な
応答を誘導するために、腫瘍により発現される特定の抗原がブースティングのために標的
化される。より詳細には、マウスを時間表（図１２）に従ってワクチン接種し、ＭＡＧＥ
－Ａ３－ＮＹ－ＥＳＯ－１±ＩｉまたはｔＰＡをコードするＣｈＡｄＯｘ１を用いるプラ
イム、続いてＭＡＧＥ－Ａ３またはＮＹ－ＥＳＯ－１のいずれか、±ｔＰＡをコードする
ＭＶＡを用いる２回のブーストを行った（２回目のＭＶＡブーストは１回目のＭＶＡブー
ストに対して交替の抗原を含有する）。指し示される時点において各ワクチン接種後に抗
原特異的Ｔ細胞応答を査定した。ＰＢＭＣを回収し、ＭＡＧＥ－Ａ３（青丸）またはＮＹ
－ＥＳＯ－１（赤四角）ペプチドを用いてｅｘ ｖｉｖｏで刺激し、ＩＦＮ－γ＋応答細
胞のパーセンテージをフローサイトメトリーにより解析した。
ＣＤ１非近交系マウスにおけるＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１の免疫原性の査定
マウスＰ１Ａ遺伝子をコードするベクターからの応答が確立されたので、ヒトＭＡＧＥ
型抗原をコードするベクター構築物を製造し、試験した。異なる形態のヒトＭＡＧＥ型抗
原、ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１の免疫原性をＣＤ１非近交系マウスにおいて
調べた。ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１を融合タンパク質としてチンパンジーア
デノウイルスベクターにクローニングすると共に、それらをＭＶＡに個々にクローニング
した。これは２つの主な理由に起因する。第１に、アデノウイルスベクター化ワクチンの
製造はＭＶＡより高価である。臨床的状況用の調製のために試みたことは、コストを最小
化して、ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１の融合物を発現する１つの単一のアデノ
ウイルスベクター化ワクチンのみを含ませることであった。第２に、一部のヒト腫瘍はＭ
ＡＧＥ－Ａ３またはＮＹ－ＥＳＯ－１のいずれかを発現する。腫瘍に対するより特異的な
応答を誘導するために、腫瘍により発現される特定の抗原がブースティングのために標的
化される。より詳細には、マウスを時間表（図１２）に従ってワクチン接種し、ＭＡＧＥ
－Ａ３－ＮＹ－ＥＳＯ－１±ＩｉまたはｔＰＡをコードするＣｈＡｄＯｘ１を用いるプラ
イム、続いてＭＡＧＥ－Ａ３またはＮＹ－ＥＳＯ－１のいずれか、±ｔＰＡをコードする
ＭＶＡを用いる２回のブーストを行った（２回目のＭＶＡブーストは１回目のＭＶＡブー
ストに対して交替の抗原を含有する）。指し示される時点において各ワクチン接種後に抗
原特異的Ｔ細胞応答を査定した。ＰＢＭＣを回収し、ＭＡＧＥ－Ａ３（青丸）またはＮＹ
－ＥＳＯ－１（赤四角）ペプチドを用いてｅｘ ｖｉｖｏで刺激し、ＩＦＮ－γ＋応答細
胞のパーセンテージをフローサイトメトリーにより解析した。
【0132】
図１３は、ＣｈＡｄＯｘ１－ＭＡＧＥ－Ａ３／ＮＹ－ＥＳＯ－１融合物（Ｍ－ＮＹ）、
ｔＰＡを有するＣｈＡｄＯｘ１－ＭＡＧＥ－Ａ３／ＮＹ－ＥＳＯ－１融合物（ｔＰＡ－Ｍ
－ＮＹ）およびインバリアント鎖を有するＣｈＡｄＯｘ１－ＭＡＧＥ－Ａ３／ＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１融合物（ｌｉ－Ｍ－ＮＹ）を用いた非近交系ＣＤ１マウスのプライミング注射後の
ＭＡＧＥ－Ａ３／ＮＹ－ＥＳＯ－１に対するＣＤ８ Ｔ細胞の誘導を示す。２週後、ＰＢ
ＭＣを単離し、ＭＡＧＥ－Ａ３オーバーラップペプチド（赤丸）およびＮＹ－ＥＳＯ－１
オーバーラップペプチド（青四角）に対する応答をｅｘ ｖｉｖｏの細胞内サイトカイン
染色により試験した。プライム後のＣＤ８ ＩＦＮγ応答は、融合タンパク質を含有する
ＣｈＡｄＯｘプライムは両方の抗原に対して特異的なＣＤ８ Ｔ細胞を誘発できることを
示す。
ｔＰＡを有するＣｈＡｄＯｘ１－ＭＡＧＥ－Ａ３／ＮＹ－ＥＳＯ－１融合物（ｔＰＡ－Ｍ
－ＮＹ）およびインバリアント鎖を有するＣｈＡｄＯｘ１－ＭＡＧＥ－Ａ３／ＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１融合物（ｌｉ－Ｍ－ＮＹ）を用いた非近交系ＣＤ１マウスのプライミング注射後の
ＭＡＧＥ－Ａ３／ＮＹ－ＥＳＯ－１に対するＣＤ８ Ｔ細胞の誘導を示す。２週後、ＰＢ
ＭＣを単離し、ＭＡＧＥ－Ａ３オーバーラップペプチド（赤丸）およびＮＹ－ＥＳＯ－１
オーバーラップペプチド（青四角）に対する応答をｅｘ ｖｉｖｏの細胞内サイトカイン
染色により試験した。プライム後のＣＤ８ ＩＦＮγ応答は、融合タンパク質を含有する
ＣｈＡｄＯｘプライムは両方の抗原に対して特異的なＣＤ８ Ｔ細胞を誘発できることを
示す。
【0133】
次に、ＣｈＡｄＯｘプライムしたマウスに（ｉ）ｔＰＡへの融合ありまたはなしのＭＡ
ＧＥＡ３を含有するＭＶＡ、および（ｉｉ）ｔＰＡへの融合ありまたはなしのＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１を含有するＭＶＡを用いるブースター注射を与えた。ＰＢＭＣを次に再びこれらの
マウスから単離し、オーバーラップペプチドを用いた刺激後にｅｘ ｖｉｖｏの細胞内サ
イトカイン染色を使用してＭＡＧＥＡ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１応答について試験した。
図１４はＭＶＡ－ＭＡＧＥＡ３±ｔＰＡブーストの効果を示し、図１５はＭＶＡ－ＮＹ－
ＥＳＯ－１±ｔＰＡブーストの効果を示す。図１４および図１５のそれぞれにおいて、プ
ライムのみの結果とのブーストの結果の簡便な比較のために左手部分として図１３を含め
ている。見ることができるように、初期のプライム応答は、ＭＶＡを使用する選択された
抗原のいずれかに対してはるかにより高い大きさまでブーストされる。
ＧＥＡ３を含有するＭＶＡ、および（ｉｉ）ｔＰＡへの融合ありまたはなしのＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１を含有するＭＶＡを用いるブースター注射を与えた。ＰＢＭＣを次に再びこれらの
マウスから単離し、オーバーラップペプチドを用いた刺激後にｅｘ ｖｉｖｏの細胞内サ
イトカイン染色を使用してＭＡＧＥＡ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１応答について試験した。
図１４はＭＶＡ－ＭＡＧＥＡ３±ｔＰＡブーストの効果を示し、図１５はＭＶＡ－ＮＹ－
ＥＳＯ－１±ｔＰＡブーストの効果を示す。図１４および図１５のそれぞれにおいて、プ
ライムのみの結果とのブーストの結果の簡便な比較のために左手部分として図１３を含め
ている。見ることができるように、初期のプライム応答は、ＭＶＡを使用する選択された
抗原のいずれかに対してはるかにより高い大きさまでブーストされる。
【0134】
プライムとしてのＣｈＡｄＯｘ－インバリアント鎖（ｌｉ）およびＭＶＡ－ｔＰＡは、
試料サイズおよび何らかの程度の変動性を有する非近交系マウスの使用であるとしても、
最も免疫原性のレジームであるようである。
試料サイズおよび何らかの程度の変動性を有する非近交系マウスの使用であるとしても、
最も免疫原性のレジームであるようである。
【0135】
二重ブーストにおいて、初期のプライム応答は、より高い大きさまで同時に増加した（
データは示さない）。観察された応答は、他のＩ型サイトカインに概ねマッチする（デー
タは示さない）。
データは示さない）。観察された応答は、他のＩ型サイトカインに概ねマッチする（デー
タは示さない）。
【0136】
どれほどの頻度の抗原特異的Ｔ細胞がはるかにより高いレベルにブーストされるようで
あるのか、および選択された抗原を標的とする応答を考慮すれば、本発明は、問題とされ
る個々の腫瘍の特定の発現パターンに従って予防または治療に対するより個別化されたア
プローチを可能とし得る。
あるのか、および選択された抗原を標的とする応答を考慮すれば、本発明は、問題とされ
る個々の腫瘍の特定の発現パターンに従って予防または治療に対するより個別化されたア
プローチを可能とし得る。
【0137】
図１６Ａは、ＭＶＡ－Ｍ、ＭＶＡ－ＮＹ、ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｍ、またはＭＶＡ－ｔＰＡ
－ＮＹベクターを用いたブースト後のＣＤ８＋細胞中のＩＦＮ－γ＋細胞のパーセンテー
ジを示す。図１６Ｂは、ＭＶＡ－Ｍ、ＭＶＡ－ＮＹ、ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｍ、またはＭＶＡ
－ｔＰＡ－ＮＹベクターのいずれかを用いた２回目のブースト後のＣＤ８＋細胞中のＩＦ
Ｎ－γ＋細胞のパーセンテージを示す。
－ＮＹベクターを用いたブースト後のＣＤ８＋細胞中のＩＦＮ－γ＋細胞のパーセンテー
ジを示す。図１６Ｂは、ＭＶＡ－Ｍ、ＭＶＡ－ＮＹ、ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｍ、またはＭＶＡ
－ｔＰＡ－ＮＹベクターのいずれかを用いた２回目のブースト後のＣＤ８＋細胞中のＩＦ
Ｎ－γ＋細胞のパーセンテージを示す。
【0138】
マウスを融合物ＭＡＧＥ－Ａ３およびＮＹ－ＥＳＯ－１を発現するアデノウイルスを用
いてプライムし、ＭＡＧＥ－Ａ３またはＮＹ－ＥＳＯ－１のいずれかを発現するＭＶＡを
用いてブーストした場合、増加したＣＤ８応答は、ＭＶＡにより発現される抗原を標的と
した（図１４および図１５）。また、両方のＭＶＡ（ＭＶＡ＿ＭＡＧＥＡ３およびＭＶＡ
＿ＮＹＥＳＯ）を用いてマウスをブーストすることは、これらの２つの抗原に対する類似
したレベルのＣＤ８応答を誘導した。
いてプライムし、ＭＡＧＥ－Ａ３またはＮＹ－ＥＳＯ－１のいずれかを発現するＭＶＡを
用いてブーストした場合、増加したＣＤ８応答は、ＭＶＡにより発現される抗原を標的と
した（図１４および図１５）。また、両方のＭＶＡ（ＭＶＡ＿ＭＡＧＥＡ３およびＭＶＡ
＿ＮＹＥＳＯ）を用いてマウスをブーストすることは、これらの２つの抗原に対する類似
したレベルのＣＤ８応答を誘導した。
【0139】
Bolhassani A. et al. (2011) Mol. Cancer. 10:3に記載されるように、抗原の免疫原
性は、遺伝子を一部の分子アジュバントに融合させることにより増進され得る。これらの
中で、ヒト組織プラスミノーゲン（plasmogen）活性化因子（ｔＰＡ）シグナルペプチド
（Delogu G. et al. (2002) Infect. Immun.70(1): 292 - 302を参照）は、感染細胞内の
タンパク質発現を増加させ、そのためＴ細胞応答を増進することがある（例えば、Biswas
S. et al. (2011) PLoS One 6(6): e20977）。また、抗原をＭＨＣ ＩＩ関連Ｉｉに融
合させることは、ＣＤ８応答を強化し得る（Mikkelsen M. et al. (2011) Journal of Im
munology 186(4): 2355 -2364;およびSorensen M. R. et al. (2009) European Journal
of Immunology 39(10): 2725 - 2736）。
性は、遺伝子を一部の分子アジュバントに融合させることにより増進され得る。これらの
中で、ヒト組織プラスミノーゲン（plasmogen）活性化因子（ｔＰＡ）シグナルペプチド
（Delogu G. et al. (2002) Infect. Immun.70(1): 292 - 302を参照）は、感染細胞内の
タンパク質発現を増加させ、そのためＴ細胞応答を増進することがある（例えば、Biswas
S. et al. (2011) PLoS One 6(6): e20977）。また、抗原をＭＨＣ ＩＩ関連Ｉｉに融
合させることは、ＣＤ８応答を強化し得る（Mikkelsen M. et al. (2011) Journal of Im
munology 186(4): 2355 -2364;およびSorensen M. R. et al. (2009) European Journal
of Immunology 39(10): 2725 - 2736）。
【0140】
上記の様々な実施例から要約すると、Ｐ１Ａに対するＣＤ８応答は、抗原をＩｉに融合
させた場合に増進される（図２）。より良好な刺激されたＣＤ８応答がどのようにマウス
におけるより良好な腫瘍保護に変換されたのかもまた示される（図４および図５）。ｔＰ
Ａ融合物の効果は、ウイルスベクター化ワクチンにおいて今までに研究されていない。実
施例は、Ｉｉとは異なり、ＭＡＧＥ抗原へのｔＰＡ融合物は、アデノウイルスを用いる単
一のワクチン接種においてＣＤ８＋ Ｔ細胞応答を増進できなかったことを示す。また、
単一のプライムブーストワクチン接種において、マウスをＩｉに融合した抗原を発現する
アデノウイルスを用いてプライムし、ｔＰＡに融合した抗原をコードするＭＶＡを用いて
ブーストした場合に、ＣＤ８応答における増加が観察された（図１６Ａおよび図１６Ｂを
参照）。しかしながら、さらなる解析は、ＭＶＡブーストにおけるＭＡＧＥ抗原へのｔＰ
Ａ融合物はＣＤ８応答を増進できなかったことを示す。
させた場合に増進される（図２）。より良好な刺激されたＣＤ８応答がどのようにマウス
におけるより良好な腫瘍保護に変換されたのかもまた示される（図４および図５）。ｔＰ
Ａ融合物の効果は、ウイルスベクター化ワクチンにおいて今までに研究されていない。実
施例は、Ｉｉとは異なり、ＭＡＧＥ抗原へのｔＰＡ融合物は、アデノウイルスを用いる単
一のワクチン接種においてＣＤ８＋ Ｔ細胞応答を増進できなかったことを示す。また、
単一のプライムブーストワクチン接種において、マウスをＩｉに融合した抗原を発現する
アデノウイルスを用いてプライムし、ｔＰＡに融合した抗原をコードするＭＶＡを用いて
ブーストした場合に、ＣＤ８応答における増加が観察された（図１６Ａおよび図１６Ｂを
参照）。しかしながら、さらなる解析は、ＭＶＡブーストにおけるＭＡＧＥ抗原へのｔＰ
Ａ融合物はＣＤ８応答を増進できなかったことを示す。
【0141】
[実施例６]
ＤＢＡ／２マウスにおける１５Ｖ４Ｔ３腫瘍に対する効果におけるワクチン、チェックポ
イント阻害剤および化学療法の三重の組合せ
図１８は、化学療法およびチェックポイント阻害剤治療を伴う試験マウスのワクチン接
種の他に、関連付けられる対照治療についての実験クロノロジーを示す。簡潔に述べれば
、１００万個の１５Ｖ４Ｔ３細胞をＤＢＡ／２マウスのそれぞれの皮下に注射した。６日
目に腫瘍サイズに基づいてマウスを群に無作為に分割した。マウスの任意のワクチン接種
を含む治療を腫瘍移植後８日目に開始した。投与される場合、２０ｍｇ／ｋｇのパクリタ
キセルおよび４０ｍｇ／ｋｇのカルボプラチンを８日目にＩ．Ｐによりマウスに与え、２
０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルを９日目にＩ．Ｐにより与えた。投与される場合、３用量
の１００μｇのａＰＤ１を１８、２１および２４日目にＩ．Ｐにより与えた。群当たりの
マウスの数は６または７または８であった。
ＤＢＡ／２マウスにおける１５Ｖ４Ｔ３腫瘍に対する効果におけるワクチン、チェックポ
イント阻害剤および化学療法の三重の組合せ
図１８は、化学療法およびチェックポイント阻害剤治療を伴う試験マウスのワクチン接
種の他に、関連付けられる対照治療についての実験クロノロジーを示す。簡潔に述べれば
、１００万個の１５Ｖ４Ｔ３細胞をＤＢＡ／２マウスのそれぞれの皮下に注射した。６日
目に腫瘍サイズに基づいてマウスを群に無作為に分割した。マウスの任意のワクチン接種
を含む治療を腫瘍移植後８日目に開始した。投与される場合、２０ｍｇ／ｋｇのパクリタ
キセルおよび４０ｍｇ／ｋｇのカルボプラチンを８日目にＩ．Ｐによりマウスに与え、２
０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルを９日目にＩ．Ｐにより与えた。投与される場合、３用量
の１００μｇのａＰＤ１を１８、２１および２４日目にＩ．Ｐにより与えた。群当たりの
マウスの数は６または７または８であった。
【0142】
図１９は、実験および対照治療のそれぞれについてのマウスにおける平均腫瘍体積の時
間経過を示す。
間経過を示す。
【0143】
図２０は、各実験群または対照群における個々のマウスの腫瘍体積についての時間経過
を示す。ワクチン接種および／または化学療法および／またはチェックポイント阻害剤の
いずれであれ、治療の時間を示す。４８日のエンドポイントでの腫瘍なしであることが見
出される各群中のマウスの数もまた指し示す。ワクチン接種、化学療法およびチェックポ
イント阻害剤の三重の組合せは明確に、様々な治療の中で最も有効に腫瘍の形成を阻害す
る。
を示す。ワクチン接種および／または化学療法および／またはチェックポイント阻害剤の
いずれであれ、治療の時間を示す。４８日のエンドポイントでの腫瘍なしであることが見
出される各群中のマウスの数もまた指し示す。ワクチン接種、化学療法およびチェックポ
イント阻害剤の三重の組合せは明確に、様々な治療の中で最も有効に腫瘍の形成を阻害す
る。
【0144】
図２１は、各実験群および対照群における経時的なマウスの生存を示す。ワクチン接種
、化学療法およびチェックポイント阻害剤の三重の組合せは明確に、他の治療および対照
と比較してマウスの最良の生存を提供する。
、化学療法およびチェックポイント阻害剤の三重の組合せは明確に、他の治療および対照
と比較してマウスの最良の生存を提供する。
【0145】
ａＰＤ１および化学療法とのワクチンの三重の組合せは、他の群と比較して腫瘍成長を
有意に阻害した。腫瘍注射後２３日目に８匹のうち６匹が腫瘍なしマウスであり、これら
のマウスは４８日目まで腫瘍なしのままであった。また、図２２に示されるように、三重
の組合せの群はまた、腫瘍注射後２７日目に最も高い末梢Ｐ１Ａ特異的ＣＤ８応答を有す
る。
有意に阻害した。腫瘍注射後２３日目に８匹のうち６匹が腫瘍なしマウスであり、これら
のマウスは４８日目まで腫瘍なしのままであった。また、図２２に示されるように、三重
の組合せの群はまた、腫瘍注射後２７日目に最も高い末梢Ｐ１Ａ特異的ＣＤ８応答を有す
る。
【0146】
[実施例７]
ＤＢＡ／２マウスにおける１５Ｖ４Ｔ３腫瘍に対する効果におけるワクチン、チェックポ
イント阻害剤および化学療法の三重の組合せ
図２３は、マウスの各実験群および対照についての時間表を示す。１００万個の１５Ｖ
４Ｔ３細胞（早期継代）をＤＢＡ／２マウスに同時に注射した。１１日目に腫瘍サイズに
基づいてマウスを群に無作為に分割し、マウスのワクチン接種を腫瘍移植後１１日目に開
始した。投与される場合、２０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルおよび４０ｍｇ／ｋｇのカル
ボプラチンを１１日目にＩ．Ｐにより与え、２０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルを１２日目
にＩ．Ｐ．により与えた。投与される場合、３用量の１００μｇのａＰＤ１を２１、２４
および２７日目にＩ．Ｐ．により与えた。群当たりｎ＝６または７。腫瘍負荷を伴わない
ナイーブ群もまたこの実験に含めた。出血を１４日目に実行し、試料を使用して骨髄由来
抑制細胞（ＭＤＳＣ）枯渇を調べた。
ＤＢＡ／２マウスにおける１５Ｖ４Ｔ３腫瘍に対する効果におけるワクチン、チェックポ
イント阻害剤および化学療法の三重の組合せ
図２３は、マウスの各実験群および対照についての時間表を示す。１００万個の１５Ｖ
４Ｔ３細胞（早期継代）をＤＢＡ／２マウスに同時に注射した。１１日目に腫瘍サイズに
基づいてマウスを群に無作為に分割し、マウスのワクチン接種を腫瘍移植後１１日目に開
始した。投与される場合、２０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルおよび４０ｍｇ／ｋｇのカル
ボプラチンを１１日目にＩ．Ｐにより与え、２０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルを１２日目
にＩ．Ｐ．により与えた。投与される場合、３用量の１００μｇのａＰＤ１を２１、２４
および２７日目にＩ．Ｐ．により与えた。群当たりｎ＝６または７。腫瘍負荷を伴わない
ナイーブ群もまたこの実験に含めた。出血を１４日目に実行し、試料を使用して骨髄由来
抑制細胞（ＭＤＳＣ）枯渇を調べた。
【0147】
【0148】
[実施例８]
ＤＢＡ／２マウスにおける１５Ｖ４Ｔ３腫瘍 － ＣＰＩを用いるワクチン接種は腫瘍Ｔ
細胞浸潤を増加させる
１００万個の１５Ｖ４Ｔ３細胞をＤＢＡ／２マウスの皮下に注射した。ワクチン接種ス
ケジュールをＰＢＳ対照、ａＰＤ１のみ、ならびにマウスの２つの試験群：（１）低用量
１週間隔プライムブースト（ＣｈＡｄＯｘ１－Ｉｉ－Ｐ１Ａ＋ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｐ１Ａ）
および（２）低用量１週間隔プライムブースト（ＣｈＡｄＯｘ１－Ｉｉ－Ｐ１Ａ＋ＭＶＡ
－ｔＰＡ－Ｐ１Ａ）＋ａＰＤ１について図２６に示す。マウスのワクチン接種を腫瘍移植
後１０日目に開始した。ＣＰＩ（αＰＤ１）をプライムの３日後に与え、腫瘍注射後１３
、１６および１９日目に３用量の１００μｇを用いた。全てのマウスを２０日目に出血さ
せ、２１日目に屠殺した。腫瘍微環境の免疫プロファイルをＦＡＣＳにより研究した。結
果を図２７～５３に示す。
ＤＢＡ／２マウスにおける１５Ｖ４Ｔ３腫瘍 － ＣＰＩを用いるワクチン接種は腫瘍Ｔ
細胞浸潤を増加させる
１００万個の１５Ｖ４Ｔ３細胞をＤＢＡ／２マウスの皮下に注射した。ワクチン接種ス
ケジュールをＰＢＳ対照、ａＰＤ１のみ、ならびにマウスの２つの試験群：（１）低用量
１週間隔プライムブースト（ＣｈＡｄＯｘ１－Ｉｉ－Ｐ１Ａ＋ＭＶＡ－ｔＰＡ－Ｐ１Ａ）
および（２）低用量１週間隔プライムブースト（ＣｈＡｄＯｘ１－Ｉｉ－Ｐ１Ａ＋ＭＶＡ
－ｔＰＡ－Ｐ１Ａ）＋ａＰＤ１について図２６に示す。マウスのワクチン接種を腫瘍移植
後１０日目に開始した。ＣＰＩ（αＰＤ１）をプライムの３日後に与え、腫瘍注射後１３
、１６および１９日目に３用量の１００μｇを用いた。全てのマウスを２０日目に出血さ
せ、２１日目に屠殺した。腫瘍微環境の免疫プロファイルをＦＡＣＳにより研究した。結
果を図２７～５３に示す。
【0149】
より詳細には、図２７は、屠殺時のマウスの全ての群における腫瘍サイズの均一な広が
りを示す。図２８は、ワクチン＋抗ＰＤ－１組合せ群におけるマウスのサブセットにおけ
る腫瘍量の低減を示し、これらのマウスにおける腫瘍クリアランスの開始を指し示す。
りを示す。図２８は、ワクチン＋抗ＰＤ－１組合せ群におけるマウスのサブセットにおけ
る腫瘍量の低減を示し、これらのマウスにおける腫瘍クリアランスの開始を指し示す。
【0150】
図２９は、各群におけるマウスのそれぞれについての個々の腫瘍成長曲線を示す。
【0151】
【0152】
【0153】
図３６および図３７は、ＣｈＡｄＯｘプライム後１１日目の早期の時点において評価さ
れた場合に、αＰＤ－１治療の追加がどのようにＣｈＡｄＯｘ／ＭＶＡワクチン接種によ
りプライムされたＰ１Ａ特異的応答をブーストするようであるのかを示す。
れた場合に、αＰＤ－１治療の追加がどのようにＣｈＡｄＯｘ／ＭＶＡワクチン接種によ
りプライムされたＰ１Ａ特異的応答をブーストするようであるのかを示す。
【0154】
図４６は、腫瘍におけるＰ１Ａ特異的ＴＥＭ ＣＤ８＋の浸潤はどのようにＰ１Ａ特異
的ＣＤ８と同じパターンに従うのかを示す。
的ＣＤ８と同じパターンに従うのかを示す。
【0155】
全体として、図２７～５３の結果は、対照と比較してマウスのワクチン群におけるＣＤ
３＋ＣＤ８＋ ＴＩＬの増加およびＰ１Ａ特異的ＴＩＬの増加と共に、ワクチンがどのよ
うに腫瘍のＴ細胞浸潤を増加させるのかを示す。
３＋ＣＤ８＋ ＴＩＬの増加およびＰ１Ａ特異的ＴＩＬの増加と共に、ワクチンがどのよ
うに腫瘍のＴ細胞浸潤を増加させるのかを示す。
【0156】
また、ＣＤ３＋ＣＤ８＋ ＴＩＬは主に、エフェクターメモリー細胞ＴＥＭ（ＣＤ６２
Ｌ－ＣＤ４４＋）およびＴＣＭ（ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ４４＋）である。
Ｌ－ＣＤ４４＋）およびＴＣＭ（ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ４４＋）である。
【0157】
さらに、Ｐ１Ａ特異的ＴＩＬはワクチン群においてＰＤ－１を発現するが、発現はαＰ
Ｄ１遮断と共に減少する。
Ｄ１遮断と共に減少する。
【0158】
本明細書において参照されるヌクレオチドおよびアミノ酸配列
ある特定のタンパク質またはポリペプチドが本明細書において参照され、これらについ
ての参照ヌクレオチドおよび／またはアミノ酸配列は、本明細書の部分として提出される
添付の配列表において提供される。配列の一部をアノテーション付けして、以下のように
さらなる情報を提供する：
ヒトＨＬＡクラスＩＩ組織適合性抗原ガンマ鎖（ｌｉ）ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ
－Ｐｒｏｔ：Ｐ０４２３３．３。下線を引いた配列部分はベクターにおいて使用される膜
貫通ドメインを表す：
ある特定のタンパク質またはポリペプチドが本明細書において参照され、これらについ
ての参照ヌクレオチドおよび／またはアミノ酸配列は、本明細書の部分として提出される
添付の配列表において提供される。配列の一部をアノテーション付けして、以下のように
さらなる情報を提供する：
ヒトＨＬＡクラスＩＩ組織適合性抗原ガンマ鎖（ｌｉ）ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ
－Ｐｒｏｔ：Ｐ０４２３３．３。下線を引いた配列部分はベクターにおいて使用される膜
貫通ドメインを表す：
【0159】
【化1】
クターにおいて使用されるリーダー配列である。
【0160】
【化2】
３に下線を引いている。リンカーを太字としている。ＮＹ－ＥＳＯ－１を斜体としている
。
【0161】
【化3】
引いている。リンカーを太字としている。ＮＹ－ＥＳＯ－１を斜体としている：
【0162】
【化4】
物。ｌｉ配列を太字とし、斜体文字としている。ＭＡＧＥＡ３に下線を引いている。配列
リンカーを太字としている。ＮＹ－ＥＳＯ－１を斜体としている：
【0163】
【化5】
ｉ配列を太字とし、斜体文字としている。ＭＡＧＥＡ３に下線を引いている。リンカーを
太字としている。ＮＹ－ＥＳＯ－１を斜体としている：
【0164】
【化6】
物。ｔＰＡ配列を太字とし、斜体文字としている。ＭＡＧＥＡ３に下線を引いている。リ
ンカーを太字としている。ＮＹ－ＥＳＯ－１を斜体としている：
【0165】
【化7】
配列を太字とし、斜体文字としている。ＭＡＧＥＡ３に下線を引いている。リンカーを太
字としている。ＮＹ－ＥＳＯ－１を斜体としている：
【0166】
【化8】
ている：
【0167】
【化9】
【0168】
【化10】
いる：
【0169】
【化11】
【0170】
【化12】
引いている：
【0171】
【化13】
：
【0172】
【化14】
【0173】
本明細書の記載および特許請求の範囲の全体を通じて、「含む」および「含有する」と
いう語ならびにそれらのバリエーションは、「含むがそれに限定されない」を意味し、そ
れらは、他の部分、添加物、成分、整数またはステップを除外することを意図しない（お
よび除外しない）。本明細書の記載および特許請求の範囲の全体を通じて、文脈が他に要
求しなければ、単数は複数を包含する。特に、不定冠詞が使用される場合、文脈が他に要
求しなければ、本明細書は、複数の他に単数を想定するものと理解されるべきである。
いう語ならびにそれらのバリエーションは、「含むがそれに限定されない」を意味し、そ
れらは、他の部分、添加物、成分、整数またはステップを除外することを意図しない（お
よび除外しない）。本明細書の記載および特許請求の範囲の全体を通じて、文脈が他に要
求しなければ、単数は複数を包含する。特に、不定冠詞が使用される場合、文脈が他に要
求しなければ、本明細書は、複数の他に単数を想定するものと理解されるべきである。
【0174】
本発明の特定の態様、実施形態または例と組み合わせて記載される特色、整数、特徴、
化合物、化学的部分または基は、それと不適合でなければ、本明細書に記載の任意の他の
態様、実施形態または例に適用可能であることが理解されるべきである。本明細書（任意
の添付の特許請求の範囲、要約書および図面を含む）に開示される特色の全て、ならびに
／またはそのように開示される任意の方法もしくはプロセスのステップの全ては、そのよ
うな特色および／またはステップの少なくとも一部が互いに排他的である組合せを除いて
、任意の組合せで組み合わせられてもよい。本発明は、いかなる以上の実施形態の詳細に
も制限されない。本発明は、本明細書（任意の添付の特許請求の範囲、要約書および図面
を含む）に開示される特色の任意の新規の１つ、もしくは任意の新規の組合せ、またはそ
のように開示される任意の方法もしくはプロセスのステップの任意の新規の１つ、もしく
は任意の新規の組合せに拡張される。
化合物、化学的部分または基は、それと不適合でなければ、本明細書に記載の任意の他の
態様、実施形態または例に適用可能であることが理解されるべきである。本明細書（任意
の添付の特許請求の範囲、要約書および図面を含む）に開示される特色の全て、ならびに
／またはそのように開示される任意の方法もしくはプロセスのステップの全ては、そのよ
うな特色および／またはステップの少なくとも一部が互いに排他的である組合せを除いて
、任意の組合せで組み合わせられてもよい。本発明は、いかなる以上の実施形態の詳細に
も制限されない。本発明は、本明細書（任意の添付の特許請求の範囲、要約書および図面
を含む）に開示される特色の任意の新規の１つ、もしくは任意の新規の組合せ、またはそ
のように開示される任意の方法もしくはプロセスのステップの任意の新規の１つ、もしく
は任意の新規の組合せに拡張される。
【0175】
本出願との繋がりで本明細書と同時にまたはそれに先行して提出され、本明細書と共に
公衆に閲覧される全ての書類および文書に対して読者の注意が向けられ、全てのそのよう
な書類および文書の内容は参照により本明細書に組み込まれる。
公衆に閲覧される全ての書類および文書に対して読者の注意が向けられ、全てのそのよう
な書類および文書の内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【図1-1】
【図1-2】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8-1】
【図8-2】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20-1】
【図20-2】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【図33】
【図34】
【図35】
【図36】
【図37】
【図38】
【図39】
【図40】
【図41】
【図42】
【図43】
【図44】
【図45】
【図46】
【図47】
【図48】
【図49】
【図50】
【図51】
【図52】
【図53】
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2024-07-26
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
核酸分子をカプシドで包んだチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ）ベクターであっ
て、前記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片；（ｉｉ）ＮＹ－ＥＳＯ－
１がん抗原もしくはその免疫原性断片；（ｉｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原
性断片、およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、（ｉｖ）ＬＡＧＥ
１がん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｖ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫
原性断片およびＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片を含むがん抗原（複数可）
をコードするポリヌクレオチド配列であって、前記がん抗原（複数可）が、動物細胞にお
いて前記がん抗原（複数可）の翻訳、転写および／または発現を指令する発現制御配列に
作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、ならびにアデノウイルスパッケー
ジングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクター。
て、前記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片；（ｉｉ）ＮＹ－ＥＳＯ－
１がん抗原もしくはその免疫原性断片；（ｉｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原
性断片、およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、（ｉｖ）ＬＡＧＥ
１がん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｖ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫
原性断片およびＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片を含むがん抗原（複数可）
をコードするポリヌクレオチド配列であって、前記がん抗原（複数可）が、動物細胞にお
いて前記がん抗原（複数可）の翻訳、転写および／または発現を指令する発現制御配列に
作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、ならびにアデノウイルスパッケー
ジングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクター。
【請求項2】
（ａ）国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ１
；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示された配列番号
３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によりコ
ードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公開第２０１７／２２１０３１号パンフレ
ットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、国際公開第２０１７／２２１０３１号パ
ンフレットに開示された配列番号１０のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０
％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ２である、請求項１に記載のＣ
ｈＡｄベクター。
；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示された配列番号
３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によりコ
ードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公開第２０１７／２２１０３１号パンフレ
ットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、国際公開第２０１７／２２１０３１号パ
ンフレットに開示された配列番号１０のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０
％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ２である、請求項１に記載のＣ
ｈＡｄベクター。
【請求項3】
核酸分子をカプシドで包んだ改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）ベクターであ
って、前記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片、（ｉｉ）ＮＹ－ＥＳＯ
－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、（ｉｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片お
よびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原の免疫原性断片、（ｉｖ）ＬＡＧＥ１がん抗原もしくはそ
の免疫原性断片、または（ｖ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＬＡＧ
Ｅ１がん抗原もしくはその免疫原性断片、を含むがん抗原（複数可）をコードするポリヌ
クレオチド配列を含み、前記がん抗原（複数可）が、動物細胞において前記がん抗原また
はその断片の翻訳、転写および／または発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結し
ている、ＭＶＡベクター。
って、前記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片、（ｉｉ）ＮＹ－ＥＳＯ
－１がん抗原もしくはその免疫原性断片、（ｉｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片お
よびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原の免疫原性断片、（ｉｖ）ＬＡＧＥ１がん抗原もしくはそ
の免疫原性断片、または（ｖ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＬＡＧ
Ｅ１がん抗原もしくはその免疫原性断片、を含むがん抗原（複数可）をコードするポリヌ
クレオチド配列を含み、前記がん抗原（複数可）が、動物細胞において前記がん抗原また
はその断片の翻訳、転写および／または発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結し
ている、ＭＶＡベクター。
【請求項4】
国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットまたは欧州特許出願公開第２０４４
９４７号明細書に開示された通りのものである、請求項３に記載のＭＶＡベクター。
９４７号明細書に開示された通りのものである、請求項３に記載のＭＶＡベクター。
【請求項5】
（ａ）前記ＭＡＧＥ抗原が、配列番号１のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも４６
％、好ましくは少なくとも６９％、より好ましくは少なくとも９５％の同一性を有する配
列、もしくはその任意の免疫原性断片の配列を有するＭＡＧＥ ３Ａである、および／ま
たは
（ｂ）前記ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原が、配列番号３のアミノ酸配列、またはそれと少
なくとも７５％、好ましくは少なくとも７６．７％の同一性を有する配列、もしくはその
任意の免疫原性断片の配列を有する、および／または
（ｃ）前記ＬＡＧＥ１がん抗原が、配列番号５のアミノ酸配列、またはそれと少なくと
も７８％、好ましくは少なくとも９７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫
原性断片の配列を有する、請求項１～４のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベ
クター。
％、好ましくは少なくとも６９％、より好ましくは少なくとも９５％の同一性を有する配
列、もしくはその任意の免疫原性断片の配列を有するＭＡＧＥ ３Ａである、および／ま
たは
（ｂ）前記ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原が、配列番号３のアミノ酸配列、またはそれと少
なくとも７５％、好ましくは少なくとも７６．７％の同一性を有する配列、もしくはその
任意の免疫原性断片の配列を有する、および／または
（ｃ）前記ＬＡＧＥ１がん抗原が、配列番号５のアミノ酸配列、またはそれと少なくと
も７８％、好ましくは少なくとも９７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫
原性断片の配列を有する、請求項１～４のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベ
クター。
【請求項6】
前記ポリヌクレオチド配列が、配列番号６のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも７
９％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するヒトＨＬＡクラスＩＩ組織
適合性抗原ガンマ鎖（ｌｉ）をさらにコードし、それにより、前記がん抗原が、ｌｉとの
融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、
好ましくは、前記断片が膜貫通ドメインであり、より好ましくは、前記膜貫通ドメイン
が、アミノ酸残基３０～５５または３０～６１を含み、よりいっそう好ましくは、前記膜
貫通ドメインが、配列番号７のアミノ酸配列を有する、請求項１～５のいずれか一項に記
載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
９％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するヒトＨＬＡクラスＩＩ組織
適合性抗原ガンマ鎖（ｌｉ）をさらにコードし、それにより、前記がん抗原が、ｌｉとの
融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、
好ましくは、前記断片が膜貫通ドメインであり、より好ましくは、前記膜貫通ドメイン
が、アミノ酸残基３０～５５または３０～６１を含み、よりいっそう好ましくは、前記膜
貫通ドメインが、配列番号７のアミノ酸配列を有する、請求項１～５のいずれか一項に記
載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
【請求項7】
前記ポリヌクレオチド配列が、配列番号８のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも８
１％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するｔＰＡをさらにコードし、
それにより、前記がん抗原が、ｔＰＡとの融合物またはその断片として動物細胞中で発現
され、好ましくは、前記断片が、２１アミノ酸のリーダー配列を含み、より好ましくは、
前記２１アミノ酸のリーダー配列が配列番号９である、請求項１～６のいずれか一項に記
載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
１％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するｔＰＡをさらにコードし、
それにより、前記がん抗原が、ｔＰＡとの融合物またはその断片として動物細胞中で発現
され、好ましくは、前記断片が、２１アミノ酸のリーダー配列を含み、より好ましくは、
前記２１アミノ酸のリーダー配列が配列番号９である、請求項１～６のいずれか一項に記
載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
【請求項8】
前記ポリヌクレオチド配列が、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、（ｉ）
ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはそ
の免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＬＡ
ＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードする、請求項１～７のいずれか一項に
記載のＣｈＡｄベクター。
ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もしくはそ
の免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＬＡ
ＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードする、請求項１～７のいずれか一項に
記載のＣｈＡｄベクター。
【請求項9】
前記ポリヌクレオチド配列が、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、（ｉ）
ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原の免疫原性
断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片および／もしくはＬＡ
ＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片、をコードし、前記ＭＡＧＥがん抗原、ＮＹ－
ＥＳＯ－１がん抗原またはＬＡＧＥ１がん抗原のうちの少なくとも１つが断片であり、場
合により、前記ＭＡＧＥがん抗原およびＮＹ－ＥＳＯ－１、またはＭＡＧＥがん抗原およ
びＬＡＧＥ１が免疫原性断片である、請求項１～７のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
ＭＡＧＥがん抗原の免疫原性断片および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原の免疫原性
断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片および／もしくはＬＡ
ＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片、をコードし、前記ＭＡＧＥがん抗原、ＮＹ－
ＥＳＯ－１がん抗原またはＬＡＧＥ１がん抗原のうちの少なくとも１つが断片であり、場
合により、前記ＭＡＧＥがん抗原およびＮＹ－ＥＳＯ－１、またはＭＡＧＥがん抗原およ
びＬＡＧＥ１が免疫原性断片である、請求項１～７のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
【請求項10】
前記ＭＡＧＥがん抗原およびＮＹ－ＥＳＯ－１またはＭＡＧＥがん抗原およびＬＡＧＥ
１が免疫原性断片であり、
好ましくは、前記ポリヌクレオチド配列が、発現された場合に、前記ＭＡＧＥおよびＮ
Ｙ－ＥＳＯ－１もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはその断片をいずれかの順序において融
合タンパク質として連結する、５～９アミノ酸のリンカー、好ましくは、アミノ酸配列Ｇ
ＧＧＰＧＧＧを有するリンカーをコードする、請求項８または９に記載のＣｈＡｄまたは
ＭＶＡベクター。
１が免疫原性断片であり、
好ましくは、前記ポリヌクレオチド配列が、発現された場合に、前記ＭＡＧＥおよびＮ
Ｙ－ＥＳＯ－１もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはその断片をいずれかの順序において融
合タンパク質として連結する、５～９アミノ酸のリンカー、好ましくは、アミノ酸配列Ｇ
ＧＧＰＧＧＧを有するリンカーをコードする、請求項８または９に記載のＣｈＡｄまたは
ＭＶＡベクター。
【請求項11】
請求項１～１０のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクターを含み、場合に
より、アジュバントをさらに含む、免疫原性組成物。
より、アジュバントをさらに含む、免疫原性組成物。
【請求項12】
請求項１～８もしくは１０のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、または請求項３～７
または請求項９もしくは１０のいずれかに記載のＭＶＡベクターをコードする配列を含み
、場合により、ヒトコドン用法についてコドン最適化されている、単離されたポリヌクレ
オチド。
または請求項９もしくは１０のいずれかに記載のＭＶＡベクターをコードする配列を含み
、場合により、ヒトコドン用法についてコドン最適化されている、単離されたポリヌクレ
オチド。
【請求項13】
（ａ）（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはそれ
らの免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗
原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であって、動物細胞に
おいて前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／もしくは発現を指令する発
現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、およびアデノウイル
スパッケージングシグナル配列を含む核酸分子をカプシドで包んだＣｈＡｄベクター、ま
たは
（ｂ）（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはその
免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原ま
たはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であって、動物細胞におい
て前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／もしくは発現を指令する発現制
御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を含む核酸分子をカプシド
で包んだＭＶＡベクター
をコードする配列を含むポリヌクレオチドを含む、細菌人工染色体（ＢＡＣ）クローン。
らの免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗
原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であって、動物細胞に
おいて前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／もしくは発現を指令する発
現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、およびアデノウイル
スパッケージングシグナル配列を含む核酸分子をカプシドで包んだＣｈＡｄベクター、ま
たは
（ｂ）（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはその
免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原ま
たはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であって、動物細胞におい
て前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／もしくは発現を指令する発現制
御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を含む核酸分子をカプシド
で包んだＭＶＡベクター
をコードする配列を含むポリヌクレオチドを含む、細菌人工染色体（ＢＡＣ）クローン。
【請求項14】
（ａ）ＣｈＡｄベクターが請求項２～８または請求項１０のいずれかに記載のものであ
るか、または（ｂ）ＭＶＡベクターが請求項３～７、９または１０のいずれかに記載のも
のであり、場合により、前記ポリヌクレオチド配列がヒトコドン用法のために最適化され
ている、請求項１３に記載のＢＡＣクローン。
るか、または（ｂ）ＭＶＡベクターが請求項３～７、９または１０のいずれかに記載のも
のであり、場合により、前記ポリヌクレオチド配列がヒトコドン用法のために最適化され
ている、請求項１３に記載のＢＡＣクローン。
【請求項15】
請求項１～１０のいずれかに記載のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクターを含む、単
離された宿主細胞。
離された宿主細胞。
【請求項16】
がんを予防または治療するための医薬の製造のための請求項１、２、５～８、または１
０のいずれかに記載のＣｈＡｄベクターの使用。
０のいずれかに記載のＣｈＡｄベクターの使用。
【請求項17】
がんを予防または治療するための医薬の製造のための請求項３～７、請求項９または１
０のいずれかに記載のＭＶＡベクターの使用。
０のいずれかに記載のＭＶＡベクターの使用。
【請求項18】
がんの予防または治療のための医薬の製造のためのＣｈＡｄベクターおよびＭＶＡベク
ターの使用であって、前記ＣｈＡｄベクター及びＭＶＡベクターが、別々に、逐次的にま
たは同時に、それを必要とする患者に投与され、
（ａ）前記ＣｈＡｄベクターが、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１がん抗原またはそれらの免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／
もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド
配列であって、動物細胞において前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／
もしくは発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド
配列、およびアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む核酸分子をカプシドで包
んでいる、または
（ｂ）前記ＭＶＡベクターが、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ
－１がん抗原またはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしく
はＬＡＧＥ１がん抗原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列で
あって、動物細胞において前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／もしく
は発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を
含む核酸分子をカプシドで包んでいる、使用。
ターの使用であって、前記ＣｈＡｄベクター及びＭＶＡベクターが、別々に、逐次的にま
たは同時に、それを必要とする患者に投与され、
（ａ）前記ＣｈＡｄベクターが、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１がん抗原またはそれらの免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／
もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド
配列であって、動物細胞において前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／
もしくは発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド
配列、およびアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む核酸分子をカプシドで包
んでいる、または
（ｂ）前記ＭＶＡベクターが、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ
－１がん抗原またはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしく
はＬＡＧＥ１がん抗原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列で
あって、動物細胞において前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／もしく
は発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を
含む核酸分子をカプシドで包んでいる、使用。
【請求項19】
がんの治療のための前記ＣｈＡｄベクターまたはＭＶＡベクターを用いた１つまたは複
数のチェックポイント阻害剤の投与をさらに含み、場合により、前記チェックポイント阻
害剤が、ベクターと同時に、別々にまたは並行して投与される、請求項１８に記載の使用
。
数のチェックポイント阻害剤の投与をさらに含み、場合により、前記チェックポイント阻
害剤が、ベクターと同時に、別々にまたは並行して投与される、請求項１８に記載の使用
。
【請求項20】
前記患者が、化学療法および／または放射線療法治療を受けた、受けている、または受
けようとしている、請求項１６～１８のいずれかに記載の使用。
けようとしている、請求項１６～１８のいずれかに記載の使用。
【請求項21】
（ａ）前記ＣｈＡｄベクターが最初に投与される、および／または
（ｂ）前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが、それぞれ１回より多く投与される、およ
び／または
（ｃ）前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与される、および／または
（ｄ）ベクターの各投与の間の期間が、５日～８週の範囲内、好ましくは３週である、
請求項１８～２０のいずれかに記載の使用。
（ｂ）前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが、それぞれ１回より多く投与される、およ
び／または
（ｃ）前記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与される、および／または
（ｄ）ベクターの各投与の間の期間が、５日～８週の範囲内、好ましくは３週である、
請求項１８～２０のいずれかに記載の使用。
【請求項22】
（ａ）前記チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮
断する、または
（ｂ）前記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ
、トレメリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択さ
れる、請求項１９～２１のいずれかに記載の方法。
断する、または
（ｂ）前記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ
、トレメリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択さ
れる、請求項１９～２１のいずれかに記載の方法。
【請求項23】
前記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキン
リンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫、または乳房の
がんである、請求項１９～２１のいずれかに記載の使用。
リンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫、または乳房の
がんである、請求項１９～２１のいずれかに記載の使用。
【請求項24】
ＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤、およびチェックポイント阻害剤の、
がんの予防または治療のための医薬の製造における使用であって、前記ＣｈＡｄベクター
、ＭＶＡベクター、化学療法剤、およびチェックポイント阻害剤が、それを必要とする患
者への別々の、逐次的な、または同時の投与のためのものであり、
（ａ）前記ＣｈＡｄベクターが、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１がん抗原またはそれらの免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／
もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド
配列であって、動物細胞において前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／
もしくは発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド
配列、およびアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む核酸分子をカプシドで包
んでいる、または
（ｂ）前記ＭＶＡベクターが、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ
－１がん抗原またはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしく
はＬＡＧＥ１がん抗原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列で
あって、動物細胞において前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／もしく
は発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を
含む核酸分子をカプシドで包んでいる、使用。
がんの予防または治療のための医薬の製造における使用であって、前記ＣｈＡｄベクター
、ＭＶＡベクター、化学療法剤、およびチェックポイント阻害剤が、それを必要とする患
者への別々の、逐次的な、または同時の投与のためのものであり、
（ａ）前記ＣｈＡｄベクターが、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１がん抗原またはそれらの免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／
もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド
配列であって、動物細胞において前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／
もしくは発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド
配列、およびアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む核酸分子をカプシドで包
んでいる、または
（ｂ）前記ＭＶＡベクターが、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ
－１がん抗原またはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしく
はＬＡＧＥ１がん抗原またはそれらの免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列で
あって、動物細胞において前記がん抗原もしくはその断片の翻訳、転写、および／もしく
は発現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列を
含む核酸分子をカプシドで包んでいる、使用。
【請求項25】
前記化学療法剤が、（ｂ）パクリタキセル、ドセタキセル、ビノレルビン、ゲムシタビ
ン、エトポシドまたはペメトレキセドのうちの１つと組み合わせた（ａ）カルボプラチン
またはシスプラチンから選択され、場合により、
（ｉ）前記チェックポイント阻害剤がＰＤ－１であり、および／または
（ｉｉ）前記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）もしくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ
）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞
肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫または乳がんから選択されるがんである、請求項２４に記載
の使用。
ン、エトポシドまたはペメトレキセドのうちの１つと組み合わせた（ａ）カルボプラチン
またはシスプラチンから選択され、場合により、
（ｉ）前記チェックポイント阻害剤がＰＤ－１であり、および／または
（ｉｉ）前記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）もしくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ
）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞
肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫または乳がんから選択されるがんである、請求項２４に記載
の使用。
【手続補正2】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0026】
本開示は以下の［１］から［４８］を含む。
［１］核酸分子をカプシドで包んだチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ）ベクターで
あって、上記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１が
ん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくは
ＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であ
って、動物細胞において上記がん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発現を
指令する発現制御配列に作動可能に連結している、上記ポリヌクレオチド配列、ならびに
アデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクター。
［２］（ａ）国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示されたＣｈＡｄＯ
ｘ１；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示された配列
番号３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によ
りコードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公開第２０１７／２２１０３１号パン
フレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、国際公開第２０１７／２２１０３１
号パンフレットに開示された配列番号１０のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも
８０％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ２である、上記［１］に記
載のＣｈＡｄベクター。
［３］核酸分子をカプシドで包んだ改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）ベクター
であって、上記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１
がん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしく
はＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列で
あって、動物細胞において上記がん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発現
を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、上記ポリヌクレオチド配列を含む、
ＭＶＡベクター。
［４］国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットまたは欧州特許出願公開第２０
４４９４７号明細書に開示された通りのものである、上記［３］に記載のＭＶＡベクター
。
［５］上記ＭＡＧＥ抗原が、配列番号１のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも４６％
、好ましくは少なくとも６９％、より好ましくは少なくとも９５％の同一性を有する配列
、もしくはその任意の免疫原性断片の配列を有するＭＡＧＥ ３Ａである、上記［１］～
［４］のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
［６］上記ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原が、配列番号３のアミノ酸配列、またはそれと少な
くとも７５％、好ましくは少なくとも７６．７％の同一性を有する配列、もしくはその任
意の免疫原性断片の配列を有する、上記［１］～［５］のいずれか一項に記載のＣｈＡｄ
またはＭＶＡベクター。
［７］上記ＬＡＧＥ１がん抗原が、配列番号５のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも
７８％、好ましくは少なくとも９７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫原
性断片の配列を有する、上記［１］～［５］のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶ
Ａベクター。
［８］上記ポリヌクレオチド配列が、配列番号６のアミノ酸配列、またはそれと少なくと
も７９％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するヒトＨＬＡクラスＩＩ
組織適合性抗原ガンマ鎖（ｌｉ）をさらにコードし、それにより、上記がん抗原が、ｌｉ
との融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、
好ましくは、上記断片が膜貫通ドメインであり、より好ましくは、上記膜貫通ドメイン
が、アミノ酸残基３０～５５または３０～６１を含み、よりいっそう好ましくは、上記膜
貫通ドメインが、配列番号７のアミノ酸配列を有する、上記［１］～［７］のいずれか一
項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
［９］上記ポリヌクレオチド配列が、配列番号８のアミノ酸配列、またはそれと少なくと
も８１％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するｔＰＡをさらにコード
し、それにより、上記がん抗原が、ｔＰＡとの融合物またはその断片として動物細胞中で
発現され、好ましくは、上記断片が、２１アミノ酸のリーダー配列を含み、より好ましく
は、上記２１アミノ酸のリーダー配列が配列番号９である、上記［１］～［８］のいずれ
か一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
［１０］上記ポリヌクレオチド配列が、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、
（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もし
くはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およ
びＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードする、上記［１］～［９］のい
ずれか一項に記載のＣｈＡｄベクター。
［１１］上記ポリヌクレオチド配列が、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、
（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１が
ん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原
性断片および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードし、上記
ＭＡＧＥがん抗原、ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはＬＡＧＥ１がん抗原のうちの少なく
とも１つが断片である、上記［１］～［９］のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
［１２］上記ＭＡＧＥがん抗原およびＮＹ－ＥＳＯ－１またはＭＡＧＥがん抗原およびＬ
ＡＧＥ１が免疫原性断片である、上記［１１］に記載のＭＶＡベクター。
［１３］上記ポリヌクレオチド配列が、発現された場合に、上記ＭＡＧＥおよびＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはその断片をいずれかの順序において融合タン
パク質として連結する、５～９アミノ酸のリンカー、好ましくは、アミノ酸配列ＧＧＧＰ
ＧＧＧを有するリンカーをコードする、上記［１０］～［１２］のいずれかに記載のＣｈ
ＡｄまたはＭＶＡベクター。
［１４］上記［１］～［１３］のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクターを
含む、免疫原性組成物。
［１５］アジュバントをさらに含む、上記［１４］に記載の組成物。
［１６］上記［１］～［１０］もしくは［１３］のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、
または上記［３］～［９］もしくは［１１］～［１３］のいずれかに記載のＭＶＡベクタ
ーをコードする配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
［１７］ヒトコドン用法についてコドン最適化されている、上記［１６］に記載の単離さ
れたポリヌクレオチド。
［１８］上記［１６］または［１７］に記載のポリヌクレオチドを含む、細菌人工染色体
（ＢＡＣ）クローン。
［１９］上記［１］～［１３］のいずれかに記載のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクタ
ーを含む、単離された宿主細胞。
［２０］個体においてがんを予防または治療する方法であって、有効量の上記［１］～［
１０］または［１３］のいずれかに記載のＣｈＡｄベクターを投与すること、および有効
量の上記［３］～［９］または［１１］～［１３］のいずれかに記載のＭＶＡベクターを
投与することを含み、それにより、上記個体の適応免疫系が刺激されて、抗がん免疫応答
が提供される、方法。
［２１］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターの上記投与が、別々に、逐次的にまたは同時
に実行される、上記［２０］に記載のがんを予防または治療する方法。
［２２］有効量の１つまたは複数のチェックポイント阻害剤の投与をさらに含む、上記［
２０］または［２１］に記載の方法。
［２３］上記チェックポイント阻害剤が、上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと同時に、
別々にまたは並行して投与される、上記［２０］～［２２］のいずれかに記載の方法。
［２４］上記個体が、化学療法および／または放射線療法治療を受けた、受けている、ま
たは受ける個体である、上記［２０］～［２３］のいずれかに記載の方法。
［２５］上記ＣｈＡｄベクターが最初に投与される、上記［２０］～［２４］のいずれか
に記載の方法。
［２６］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが、それぞれ１回より多く投与される、上記
［２０］～［２５］のいずれかに記載の方法。
［２７］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与される、上記［２０］～［２６
］のいずれかに記載の方法。
［２８］ベクターの各投与の間の期間が、５日～８週の範囲内、好ましくは１週である、
上記［２０］～［２７］のいずれかに記載の方法。
［２９］上記チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮
断する、上記［２２］～［２８］のいずれかに記載の方法。
［３０］上記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ
、トレメリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択さ
れる、上記［２２］～［２８］のいずれかに記載の方法。
［３１］上記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホ
ジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫、または
乳房のがんである、上記［２２］～［２８］のいずれかに記載の方法。
［３２］がんの予防または治療において使用するための、上記［１］、［２］、［５］～
［１０］または［１３］のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター。
［３３］がんの予防または治療において使用するための、上記［３］～［９］または［１
１］～［１３］のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
［３４］がんの予防または治療のための患者への別々の、逐次的なまたは同時の投与のた
めの、上記［１］、［２］、［５］～［１０］または［１３］のいずれかに記載のＣｈＡ
ｄベクター、および上記［３］～［９］または［１１］～［１３］のいずれかに記載のＭ
ＶＡベクター。
［３５］がんの治療のためにＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと共に投与するための１つま
たは複数のチェックポイント阻害剤をさらに含む、上記［３４］に記載のがんの予防また
は治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［３６］上記チェックポイント阻害剤が、ベクターと同時に、別々にまたは並行して投与
される、上記［３５］に記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄお
よびＭＶＡベクター。
［３７］患者が、化学療法を受けた、受けているまたは受ける患者である、上記［３１］
～［３３］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄお
よびＭＶＡベクター。
［３８］上記ＣｈＡｄベクターが最初に投与される、上記［３４］～［３６］のいずれか
に記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［３９］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが、それぞれ１回より多く投与される、上記
［３４］～［３８］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣ
ｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４０］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与される、上記［３４］～［３９
］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶ
Ａベクター。
［４１］ベクターの各投与の間の期間が、５日～８週の範囲内、好ましくは１週である、
上記［３４］～［４０］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するため
のＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４２］上記チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮
断する、上記［３５］～［４１］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用
するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４３］上記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ
、トレメリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択さ
れる、上記［３５］～［４１］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用す
るためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４４］上記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホ
ジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫または乳
房のがんである、上記［３５］～［４１］のいずれかに記載のがんの予防または治療にお
いて使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４５］がんの予防または治療のための患者への別々の、逐次的なまたは同時の投与のた
めの、上記［１］、［２］、［５］～［１０］または［１３］のいずれかに記載のＣｈＡ
ｄベクター、上記［３］～［９］または［１１］～［１３］のいずれかに記載のＭＶＡベ
クター、化学療法剤、およびチェックポイント阻害剤。
［４６］上記化学療法剤が、（ｂ）パクリタキセル、ドセタキセル、ビノレルビン、ゲム
シタビン、エトポシドまたはペメトレキセドのうちの１つと組み合わせた（ａ）カルボプ
ラチンまたはシスプラチンから選択される、上記［４５］に記載のＣｈＡｄベクター、Ｍ
ＶＡベクター、化学療法剤およびチェックポイント阻害剤。
［４７］上記チェックポイント阻害剤がＰＤ－１である、上記［４５］または［４６］に
記載のＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤およびチェックポイント阻害剤。
［４８］上記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）もしくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）
、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺
がん、腎臓、頭頸部、肉腫または乳がんから選択されるがんである、上記［４５］～［４
７］のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤およびチェック
ポイント阻害剤。
本発明によれば、核酸分子をカプシドで包んだチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ
）ベクターであって、核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１がん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／
もしくはＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド
配列であって、動物細胞においてがん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発
現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、なら
びにアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクターが提供される
。有利には、そのようなＣｈＡｄウイルスベクターは、安定かつ十分に研究されており、
ヒトアデノウイルスに対する抗体により中和されず、かつ複製欠損性となるように操作さ
れている。それらは、挿入される目的の抗原のために高容量を有し、アデノウイルスＥ１
遺伝子を含有するＨＥＫ２９３細胞中で製造することができる。
［１］核酸分子をカプシドで包んだチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ）ベクターで
あって、上記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１が
ん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくは
ＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列であ
って、動物細胞において上記がん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発現を
指令する発現制御配列に作動可能に連結している、上記ポリヌクレオチド配列、ならびに
アデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクター。
［２］（ａ）国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示されたＣｈＡｄＯ
ｘ１；好ましくは、国際公開第２０１２／１７２２７７号パンフレットに開示された配列
番号３８のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも８０％の同一性を有する配列によ
りコードされるＣｈＡｄＯｘ１、または（ｂ）国際公開第２０１７／２２１０３１号パン
フレットに開示されたＣｈＡｄＯｘ２；好ましくは、国際公開第２０１７／２２１０３１
号パンフレットに開示された配列番号１０のポリヌクレオチドもしくはそれと少なくとも
８０％の同一性を有する配列によりコードされるＣｈＡｄＯｘ２である、上記［１］に記
載のＣｈＡｄベクター。
［３］核酸分子をカプシドで包んだ改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）ベクター
であって、上記核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１
がん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしく
はＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド配列で
あって、動物細胞において上記がん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発現
を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、上記ポリヌクレオチド配列を含む、
ＭＶＡベクター。
［４］国際公開第２０１１／１２８７０４号パンフレットまたは欧州特許出願公開第２０
４４９４７号明細書に開示された通りのものである、上記［３］に記載のＭＶＡベクター
。
［５］上記ＭＡＧＥ抗原が、配列番号１のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも４６％
、好ましくは少なくとも６９％、より好ましくは少なくとも９５％の同一性を有する配列
、もしくはその任意の免疫原性断片の配列を有するＭＡＧＥ ３Ａである、上記［１］～
［４］のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
［６］上記ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原が、配列番号３のアミノ酸配列、またはそれと少な
くとも７５％、好ましくは少なくとも７６．７％の同一性を有する配列、もしくはその任
意の免疫原性断片の配列を有する、上記［１］～［５］のいずれか一項に記載のＣｈＡｄ
またはＭＶＡベクター。
［７］上記ＬＡＧＥ１がん抗原が、配列番号５のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも
７８％、好ましくは少なくとも９７％の同一性を有する配列、もしくはその任意の免疫原
性断片の配列を有する、上記［１］～［５］のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶ
Ａベクター。
［８］上記ポリヌクレオチド配列が、配列番号６のアミノ酸配列、またはそれと少なくと
も７９％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するヒトＨＬＡクラスＩＩ
組織適合性抗原ガンマ鎖（ｌｉ）をさらにコードし、それにより、上記がん抗原が、ｌｉ
との融合物またはその断片として動物細胞中で発現され、
好ましくは、上記断片が膜貫通ドメインであり、より好ましくは、上記膜貫通ドメイン
が、アミノ酸残基３０～５５または３０～６１を含み、よりいっそう好ましくは、上記膜
貫通ドメインが、配列番号７のアミノ酸配列を有する、上記［１］～［７］のいずれか一
項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
［９］上記ポリヌクレオチド配列が、配列番号８のアミノ酸配列、またはそれと少なくと
も８１％の同一性を有する配列、もしくはその断片の配列を有するｔＰＡをさらにコード
し、それにより、上記がん抗原が、ｔＰＡとの融合物またはその断片として動物細胞中で
発現され、好ましくは、上記断片が、２１アミノ酸のリーダー配列を含み、より好ましく
は、上記２１アミノ酸のリーダー配列が配列番号９である、上記［１］～［８］のいずれ
か一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクター。
［１０］上記ポリヌクレオチド配列が、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、
（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およびＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原もし
くはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片およ
びＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードする、上記［１］～［９］のい
ずれか一項に記載のＣｈＡｄベクター。
［１１］上記ポリヌクレオチド配列が、融合タンパク質として動物細胞中で発現される、
（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原性断片および／もしくはＮＹ－ＥＳＯ－１が
ん抗原もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原もしくはその免疫原
性断片および／もしくはＬＡＧＥ１がん抗原もしくはその免疫原性断片をコードし、上記
ＭＡＧＥがん抗原、ＮＹ－ＥＳＯ－１がん抗原またはＬＡＧＥ１がん抗原のうちの少なく
とも１つが断片である、上記［１］～［９］のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
［１２］上記ＭＡＧＥがん抗原およびＮＹ－ＥＳＯ－１またはＭＡＧＥがん抗原およびＬ
ＡＧＥ１が免疫原性断片である、上記［１１］に記載のＭＶＡベクター。
［１３］上記ポリヌクレオチド配列が、発現された場合に、上記ＭＡＧＥおよびＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１もしくはＬＡＧＥ１がん抗原またはその断片をいずれかの順序において融合タン
パク質として連結する、５～９アミノ酸のリンカー、好ましくは、アミノ酸配列ＧＧＧＰ
ＧＧＧを有するリンカーをコードする、上記［１０］～［１２］のいずれかに記載のＣｈ
ＡｄまたはＭＶＡベクター。
［１４］上記［１］～［１３］のいずれか一項に記載のＣｈＡｄまたはＭＶＡベクターを
含む、免疫原性組成物。
［１５］アジュバントをさらに含む、上記［１４］に記載の組成物。
［１６］上記［１］～［１０］もしくは［１３］のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、
または上記［３］～［９］もしくは［１１］～［１３］のいずれかに記載のＭＶＡベクタ
ーをコードする配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
［１７］ヒトコドン用法についてコドン最適化されている、上記［１６］に記載の単離さ
れたポリヌクレオチド。
［１８］上記［１６］または［１７］に記載のポリヌクレオチドを含む、細菌人工染色体
（ＢＡＣ）クローン。
［１９］上記［１］～［１３］のいずれかに記載のＣｈＡｄおよび／またはＭＶＡベクタ
ーを含む、単離された宿主細胞。
［２０］個体においてがんを予防または治療する方法であって、有効量の上記［１］～［
１０］または［１３］のいずれかに記載のＣｈＡｄベクターを投与すること、および有効
量の上記［３］～［９］または［１１］～［１３］のいずれかに記載のＭＶＡベクターを
投与することを含み、それにより、上記個体の適応免疫系が刺激されて、抗がん免疫応答
が提供される、方法。
［２１］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターの上記投与が、別々に、逐次的にまたは同時
に実行される、上記［２０］に記載のがんを予防または治療する方法。
［２２］有効量の１つまたは複数のチェックポイント阻害剤の投与をさらに含む、上記［
２０］または［２１］に記載の方法。
［２３］上記チェックポイント阻害剤が、上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと同時に、
別々にまたは並行して投与される、上記［２０］～［２２］のいずれかに記載の方法。
［２４］上記個体が、化学療法および／または放射線療法治療を受けた、受けている、ま
たは受ける個体である、上記［２０］～［２３］のいずれかに記載の方法。
［２５］上記ＣｈＡｄベクターが最初に投与される、上記［２０］～［２４］のいずれか
に記載の方法。
［２６］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが、それぞれ１回より多く投与される、上記
［２０］～［２５］のいずれかに記載の方法。
［２７］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与される、上記［２０］～［２６
］のいずれかに記載の方法。
［２８］ベクターの各投与の間の期間が、５日～８週の範囲内、好ましくは１週である、
上記［２０］～［２７］のいずれかに記載の方法。
［２９］上記チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮
断する、上記［２２］～［２８］のいずれかに記載の方法。
［３０］上記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ
、トレメリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択さ
れる、上記［２２］～［２８］のいずれかに記載の方法。
［３１］上記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホ
ジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫、または
乳房のがんである、上記［２２］～［２８］のいずれかに記載の方法。
［３２］がんの予防または治療において使用するための、上記［１］、［２］、［５］～
［１０］または［１３］のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター。
［３３］がんの予防または治療において使用するための、上記［３］～［９］または［１
１］～［１３］のいずれかに記載のＭＶＡベクター。
［３４］がんの予防または治療のための患者への別々の、逐次的なまたは同時の投与のた
めの、上記［１］、［２］、［５］～［１０］または［１３］のいずれかに記載のＣｈＡ
ｄベクター、および上記［３］～［９］または［１１］～［１３］のいずれかに記載のＭ
ＶＡベクター。
［３５］がんの治療のためにＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターと共に投与するための１つま
たは複数のチェックポイント阻害剤をさらに含む、上記［３４］に記載のがんの予防また
は治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［３６］上記チェックポイント阻害剤が、ベクターと同時に、別々にまたは並行して投与
される、上記［３５］に記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄお
よびＭＶＡベクター。
［３７］患者が、化学療法を受けた、受けているまたは受ける患者である、上記［３１］
～［３３］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄお
よびＭＶＡベクター。
［３８］上記ＣｈＡｄベクターが最初に投与される、上記［３４］～［３６］のいずれか
に記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［３９］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが、それぞれ１回より多く投与される、上記
［３４］～［３８］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣ
ｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４０］上記ＣｈＡｄおよびＭＶＡベクターが交互に投与される、上記［３４］～［３９
］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶ
Ａベクター。
［４１］ベクターの各投与の間の期間が、５日～８週の範囲内、好ましくは１週である、
上記［３４］～［４０］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用するため
のＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４２］上記チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－Ｌ１を遮
断する、上記［３５］～［４１］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用
するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４３］上記チェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ
、トレメリムマブもしくはアテゾリズマブ、デュルバルマブまたはアベルマブから選択さ
れる、上記［３５］～［４１］のいずれかに記載のがんの予防または治療において使用す
るためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４４］上記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホ
ジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺がん、腎臓、頭頸部、肉腫または乳
房のがんである、上記［３５］～［４１］のいずれかに記載のがんの予防または治療にお
いて使用するためのＣｈＡｄおよびＭＶＡベクター。
［４５］がんの予防または治療のための患者への別々の、逐次的なまたは同時の投与のた
めの、上記［１］、［２］、［５］～［１０］または［１３］のいずれかに記載のＣｈＡ
ｄベクター、上記［３］～［９］または［１１］～［１３］のいずれかに記載のＭＶＡベ
クター、化学療法剤、およびチェックポイント阻害剤。
［４６］上記化学療法剤が、（ｂ）パクリタキセル、ドセタキセル、ビノレルビン、ゲム
シタビン、エトポシドまたはペメトレキセドのうちの１つと組み合わせた（ａ）カルボプ
ラチンまたはシスプラチンから選択される、上記［４５］に記載のＣｈＡｄベクター、Ｍ
ＶＡベクター、化学療法剤およびチェックポイント阻害剤。
［４７］上記チェックポイント阻害剤がＰＤ－１である、上記［４５］または［４６］に
記載のＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤およびチェックポイント阻害剤。
［４８］上記がんが、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）もしくは小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）
、黒色腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、尿路（尿路上皮）、膀胱、小細胞肺
がん、腎臓、頭頸部、肉腫または乳がんから選択されるがんである、上記［４５］～［４
７］のいずれかに記載のＣｈＡｄベクター、ＭＶＡベクター、化学療法剤およびチェック
ポイント阻害剤。
本発明によれば、核酸分子をカプシドで包んだチンパンジーアデノウイルス（ＣｈＡｄ
）ベクターであって、核酸分子が、（ｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／もしくはＮＹ－ＥＳ
Ｏ－１がん抗原、もしくはその免疫原性断片、または（ｉｉ）ＭＡＧＥがん抗原および／
もしくはＬＡＧＥ１がん抗原、もしくはその免疫原性断片をコードするポリヌクレオチド
配列であって、動物細胞においてがん抗原またはその断片の翻訳、転写および／または発
現を指令する発現制御配列に作動可能に連結している、前記ポリヌクレオチド配列、なら
びにアデノウイルスパッケージングシグナル配列を含む、ＣｈＡｄベクターが提供される
。有利には、そのようなＣｈＡｄウイルスベクターは、安定かつ十分に研究されており、
ヒトアデノウイルスに対する抗体により中和されず、かつ複製欠損性となるように操作さ
れている。それらは、挿入される目的の抗原のために高容量を有し、アデノウイルスＥ１
遺伝子を含有するＨＥＫ２９３細胞中で製造することができる。
【外国語明細書】