特開 2024-154555 グルコシルセラミド含有物の製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024154555

(43)【公開日】2024-10-31

(54)【発明の名称】グルコシルセラミド含有物の製造方法

(51)【国際特許分類】

   C11B 11/00 20060101AFI20241024BHJP

   C07H 15/10 20060101ALI20241024BHJP

   C07H 1/08 20060101ALI20241024BHJP

   A23L 33/105 20160101ALI20241024BHJP

   A23L 33/115 20160101ALI20241024BHJP

【ＦＩ】

C11B11/00

C07H15/10

C07H1/08

A23L33/105

A23L33/115

【審査請求】未請求

【請求項の数】7

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2023068424

(22)【出願日】2023-04-19

(71)【出願人】

【識別番号】596170550

【氏名又は名称】かどや製油株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100180275

【弁理士】

【氏名又は名称】吉田 倫太郎

(74)【代理人】

【識別番号】100161861

【弁理士】

【氏名又は名称】若林 裕介

(74)【代理人】

【識別番号】100194836

【弁理士】

【氏名又は名称】長谷部 優一

(72)【発明者】

【氏名】山上 英一郎

(72)【発明者】

【氏名】小野 恒平

(72)【発明者】

【氏名】秡川 紫乃

【テーマコード（参考）】

4B018

4C057

4H059

【Ｆターム（参考）】

4B018MD10

4B018MD27

4B018MD56

4B018ME07

4B018ME08

4B018ME14

4B018MF01

4C057AA06

4C057AA09

4C057BB02

4C057DD01

4C057JJ12

4H059BA01

4H059BA12

4H059BA26

4H059BA30

4H059BA33

4H059BA46

4H059BA47

4H059BB03

4H059BB15

4H059BB22

4H059BB45

4H059BC14

4H059CA04

4H059CA05

4H059CA13

4H059EA24

(57)【要約】      （修正有）

【課題】ゴマ油の製造における脱色処理で得られる、色素成分が吸着した白土油滓を用いて、高濃度のグルコシルセラミドを含有する抽出物を効率的に製造する製造方法を提供することを目的とする。
【解決手段】本発明のグルコシルセラミド含有物の製造方法は、ゴマ油由来の白土油滓と無極性溶媒とを混合し、その後濾過した濾液から無極性用溶媒を除去してグルコシルセラミドを含む含有物を抽出する無極性溶媒抽出工程を有することを特徴とする。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ゴマ油由来の白土油滓と無極性溶媒とを混合し、その後濾過した濾液から前記無極性用溶媒を除去してグルコシルセラミドを含む含有物を抽出する無極性溶媒抽出工程を有することを特徴とするグルコシルセラミド含有物の製造方法。

【請求項2】

前記無極性溶媒抽出工程の残渣とアルコールとを混合し、その後濾過した濾液から前記アルコールを除去してグルコシルセラミドを含む含有物を抽出するアルコール抽出工程を有することを特徴とする請求項１に記載のグルコシルセラミド含有物の製造方法。

【請求項3】

ゴマ油由来の白土油滓とアルコールとを混合し、その後濾過した濾液から前記アルコールを除去してグルコシルセラミドを含む含有物を抽出するアルコール抽出工程を有することを特徴とするグルコシルセラミド含有物の製造方法。

【請求項4】

前記白土油滓が、焙煎ゴマ油由来の白土油滓であることを特徴とする請求項１又は３に記載のグルコシルセラミド含有物の製造方法。

【請求項5】

前記白土油滓が、精製ゴマ油由来の白土油滓であることを特徴とする請求項１又は３に記載のグルコシルセラミド含有物の製造方法。

【請求項6】

前記無極性溶媒が、ヘキサンであることを特徴とする請求項１に記載のグルコシルセラミド含有物の製造方法。

【請求項7】

前記アルコールが、エタノールであることを特徴とする請求項２又は３に記載のグルコシルセラミド含有物の製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、グルコシルセラミド含有物の製造方法に関するものである。

【背景技術】

【0002】

セラミド（Ｃｅｒａｍｉｄｅ）とは、スフィンゴ脂質の一種であり、スフィンゴシンと脂肪酸がアミド結合したものである。また、グルコシルセラミド（ＧＣ：Ｇｌｕｃｏｓｙｌ－Ｃｅｒａｍｉｄｅ）は、セラミドの１位のヒドロキシ基にグルコースがβ－グリコシド結合した構造を有する。グルコシルセラミドは、例えば皮膚保湿効果、経口摂取による皮膚保湿効果、抗アトピー効果、抗腫瘍効果、メラニン生成抑制効果等がある。そのため、グルコシルセラミドは、健康食品、化粧品、医薬品などへの利用が期待されている。

【0003】

特許文献１には、植物および菌類から有機溶媒抽出を行なった抽出液に、水を加えた後、遠心分離をして沈殿物を回収してグルコシルセラミドを生成する方法が記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特開２０１０－１０６１２４号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

本発明は、ゴマ油の製造過程で、ゴマ油の脱色処理で利用された白土油滓を用いて、高濃度のグルコシルセラミドを含有する抽出物を効率的に製造する製造方法を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0006】

かかる課題を解決するために、第１の本発明のグルコシルセラミド含有物の製造方法は、ゴマ油由来の白土油滓と無極性溶媒とを混合し、その後濾過した濾液から無極性用溶媒を除去してグルコシルセラミドを含む含有物を抽出する無極性溶媒抽出工程を有する。

【0007】

第２の本発明のグルコシルセラミド含有物の製造方法は、ゴマ油由来の白土油滓とアルコールとを混合し、その後濾過した濾液からアルコールを除去してグルコシルセラミドを含む含有物を抽出するアルコール抽出工程を有する。

【発明の効果】

【0008】

本発明によれば、ゴマ油由来の白土油滓を用いて、高濃度のグルコシルセラミドを含有する抽出物を効率的に製造することができる。

【図面の簡単な説明】

【0009】

【図1】第１の実施形態におけるグルコシルセラミドを含む抽出物の製造方法を説明するフローチャートである。

【図2】実施形態に係るゴマ油の製造工程における得られる白土油滓を説明する説明図である。

【図3】第１の実施形態において、米由来グルコシルセラミドを用いたＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【図4】図４（Ａ）は、第１の実施形態による焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のヘキサン抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果であり、図４（Ｂ）は、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【図5】図５（Ａ）は、第１の実施形態による精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のヘキサン抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果であり、図４（Ｂ）は、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【図6】第２の実施形態におけるグルコシルセラミドを含む抽出物の製造方法を説明するフローチャートである。

【図7】第２の実施形態において米由来グルコシルセラミド群のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果を示す図である。

【図8】第２の実施形態による焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【図9】第２の実施形態による精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【図10】実施形態における前処理のフローチャートである。

【図11】実施形態において、前処理前のサンプルのＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【図12】実施形態において、前処理後のサンプルのＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【発明を実施するための形態】

【0010】

（Ａ）第１の実施形態
以下に、本発明に係るグルコシルセラミド含有物の製造方法の第１の実施形態を、図面を参照しながら説明する。

【0011】

（Ａ－１）第１の実施形態のグルコシルセラミドを含む抽出物の製造方法
図１は、第１の実施形態のグルコシルセラミドを含む抽出物の製造方法を説明するフローチャートである。

【0012】

［白土油滓の準備］
まず、ゴマ油の製造過程で得られる白土油滓を原料として準備する（ステップＳ１０１）。

【0013】

図２は、ゴマ油の製造過程における白土油滓を説明する説明図である。図２を参照して、ゴマ油の一般的な製造方法を簡単に説明すると共に、白土油滓を説明する。

【0014】

ゴマ種子を蒸煮し、蒸煮したゴマ種子を圧搾して搾油する。なお、ゴマ油には、大別して、焙煎ゴマ油と精製ゴマ油とがある。焙煎ゴマ油は、ゴマ種子を焙煎した後に蒸煮・圧搾して搾油したものをいい、精製ゴマ油は、焙煎せず、ゴマ種子を蒸煮・圧搾して搾油したものを精製処理したものいう。

【0015】

圧搾により搾油した油に脱色剤を投入して脱色処理を行ない、油に含まれる色素を取り除く。その際、脱色剤に色素成分が吸着して得られた脱色後の脱色剤を「白土油滓」とする。

【0016】

脱色剤は、例えば、活性炭、酸性白土などとすることができる。例えば、焙煎ゴマ油又は精製ゴマ油に、脱色剤として、例えば０．０～３．０ｗｔ程度の活性炭、例えば０．１～３．０ｗｔ程度の酸性白土を添加し、所定温度（例えば５０～１５０℃程度）で所定時間（例えば１０分～１２０分程度）静置して脱色する。原油に添加する脱色剤（活性炭、酸性白土など）の添加量は、焙煎ゴマ油の場合と、精製ゴマ油の場合とで変えてもよい。また、図２の製造工程に限らず、例えば、焙煎ゴマ油又は精製ゴマ油は、脱色工程前にヘキサン抽出したものとしてもよい。

【0017】

この実施形態では、精製ゴマ油の製造過程で得られた白土油滓を「精製ゴマ油由来の白土油滓」と呼び、焙煎ゴマ油の製造過程で得られた白土油滓を「焙煎ゴマ油由来の白土油滓」と呼ぶ。この実施形態では、これらの白土油滓を原料として用いる。

【0018】

なお、脱色処理の際に得られた白土油滓であれば、上述した精製ゴマ油由来の白土油滓又は焙煎ゴマ油由来の白土油滓に限らない。

【0019】

［ヘキサン抽出工程］
次に、白土油滓にヘキサンを加えて攪拌して脱脂する（ステップＳ１０２）。そして、白土油滓にヘキサンを加えた溶液を濾過して（ステップＳ１０３）、これにより得た瀘液からヘキサンを除去するために、エバポレーターを用いて、瀘液からヘキサンを蒸発させる（ステップＳ１０４）。この脱溶剤処理で得たものを、ヘキサン抽出物とする（ステップＳ１０５）。ヘキサン抽出工程では、無極性溶媒であるヘキサンを用いて白土油滓を脱脂して、瀘液からヘキサンを除去することで得た抽出物を、ヘキサン抽出物と呼ぶ。つまり、ヘキサン抽出物は、無極性溶媒（ヘキサン）に溶け込んだ、例えばリグナン類、グルコシルセラミドなどの成分と言える。

【0020】

なお、この脱脂工程では、無極性のヘキサンを溶媒として用いるが、ヘキサンに限らず、無極性溶媒、若しくは低い極性の溶媒を用いてもよい。例えば、無極性溶媒であれば、ジエチルエーテル、酢酸エチル、シクロヘキサン、イソオクタン等を用いるようにしてもよい。また、極性溶媒であれば、水、酢酸、アセトン、メチルエチルケトン、ジエチルケトン、メタノール、エタノール、2-プロパノール、アセトニトリル等を用いるようにしてもよい。

【0021】

また、ヘキサン抽出物として含まれるリグナンの種類は、例えば、セサミン、セサミノール、エピセサミン、エピセサミノール、セサモリン、２－（３，４－メチレンジオキシフェニル）－６－（３－メトキシ－４－ヒドロキシフェニル）－３，７－ジオキサビシクロ［３，３，０］オクタン、２，６－ビス－（３－メトキシ－４－ヒドロキシフェニル）－３，７－ジオキサビシクロ［３，３，０］オクタン、又は２－（３，４－メチレンジオキシフェニル）－６－（３－メトキシ－４－ヒドロキシフェノキシ）－３，７－ジオキサビシクロ［３，３，０］オクタン、セサモール、３,４－メチレンジオキシフェノール、５－ヒドロキシ－１,２－メチレンジオキシベンゼン、１，３－ベンゾジオキソール－５－オール、３，４－(メチレンビスオキシ)フェノール、５－ヒドロキシ－１，３－ベンゾジオキソール等がある。

【0022】

［エタノール抽出工程］
ステップＳ１０３で濾過して得た残渣に、エタノールを加えて攪拌する（ステップＳ１０６）。

【0023】

そして、残渣にエタノールを加えた溶液を濾過して（ステップＳ１０７）、残渣を抽出する（ステップＳ１１０）と共に瀘液を得る。ステップＳ１０７の濾過で得た瀘液からエタノールを除去するために、エバポレーターを用いて、瀘液からエタノールを蒸発させる（ステップＳ１０８）。この脱溶剤処理で得たものを、エタノール抽出物とする（ステップＳ１０９）。エタノール抽出工程では、アルコールであるエタノールを用いて、アルコールに溶け込んだリグナン類、グルコシルセラミド等を含む抽出物を抽出する工程である。言い換えると、エタノール抽出物は、アルコールに溶け込んだ、例えばリグナン類、グルコシルセラミドなどの成分と言える。

【0024】

（Ａ－２）焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたときの結果
次に、図１に例示する製造方法に従って、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたヘキサン抽出物、エタノール抽出物を得て、ヘキサン抽出物、エタノール抽出物のそれぞれに、グルコシルセラミドが含まれていることを分析した。

【0025】

以下において、白土油滓や残渣等の溶質に「１倍量の溶媒を加える」とは、１ｇの溶質に１０ｍｌの溶媒を加えることを意味する。例えば、白土油滓に１倍量のヘキサンを加えるとは、１ｇの白土油滓に１０ｍｌのヘキサンを加えることをいう。又例えば、白土油滓に５倍量のヘキサンを加えるとは、１ｇの白土油滓に、５０ｍｌのヘキサンを加えることをいう。このように、１ｇの溶質に１０ｍｌの溶媒を加えることを１倍量とし、Ｘ倍量の溶媒を加えることは、１ｇの溶質に、（１０×Ｘ）ｍｌの溶媒を加えることをいう。

【0026】

［ヘキサン抽出物の抽出工程］
図１に例示する製造方法に従って、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いてヘキサン抽出物を得る。

【0027】

この例では、例えば、焙煎ゴマ油由来の白土油滓６０ｇを準備し、５倍量のヘキサンを加えた。すなわち、６０ｇの焙煎ゴマ油由来の白土油滓に、３００ｍｌのヘキサンを加え、温度２５℃で３０分攪拌した。なお、ここでは、歩留等を考慮して５倍量のヘキサンを加える場合を例示したが、ヘキサン量はこれに限らない。また、焙煎ゴマ油由来の白土油滓の質量、ヘキサン量、攪拌時の温度、攪拌時間は一例であり、上述したものに限らない。

【0028】

その後、ヘキサン溶液を濾過して、瀘液に含まれるヘキサンをエバポレーター等で除去してヘキサン抽出物を得た。ヘキサン除去後、７．３ｇのヘキサン抽出物を得た。

【0029】

［エタノール抽出物の抽出工程］
次に、上述のヘキサン溶液を濾過したときの残渣に対して、１０倍量相当のエタノールを加えて、温度２５℃で３０分攪拌した。残渣の質量にもよるが、ここでは、１０倍量のエタノールを残渣に加える場合を例示する。なお、ここでも、歩留等を考慮して、１０倍量相当のエタノールを残渣に加える場合を例示したが、これに限らない。また、攪拌時の温度、攪拌時間は一例であり、これらに限らない。

【0030】

その後、エタノール溶液を濾過して、瀘液に含まれるエタノールをエバポレーターなどにより除去してエタノール抽出物を得た。この例では、２．７ｇのエタノール抽出物を得た。

【0031】

［分析処理］
＜前処理＞
ヘキサン抽出物とエタノール抽出物に含まれているグルコシルセラミドの定量分析の前に、ゴマ油由来のグルコシルセラミドの分子量に近い米由来グルコシルセラミドの標準品（Ｇｌｕｃｏｓｙｌｃｅｒａｍｉｄｅ，ｆｒｏｍ Ｒｉｃｅ Ｗａｋｏ 商品コード３８０－０９６３１）をサンプルとした。

【0032】

そして、米由来グルコシルセラミドの極性を分析するため、薄膜クロマトグラフィーで米由来グルコシルセラミド群のＲｆ値を導出した。

【0033】

図１０は、実施形態における前処理のフローチャートである。

【0034】

２ｍｌチューブに、米由来グルコシルセラミドを数ｍｇ～数重ｍｇと（ステップＳ３０１）、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）を２００μｌとを加えて（ステップＳ３０２）、２０分間ソニケーションする（ステップＳ３０３）。

【0035】

そして、［ジクロロメタン：メタノール：水＝６５：１６：２］を展開溶液として、薄膜クロマトグラフィーのガラスプレートに２００μｌを添着して（ステップＳ３０４）、薄層クロマトグラフィーで定性分析をする（ステップＳ３０５）。展開終了後、乾燥処理を行ない（ステップＳ３０６）、米由来グルコシルセラミドのＲｆ値は０．５２であるため、Ｒｆ値が０．４６～０．７１の成分を分取した（ステップＳ３０７）。

【0036】

５０ｍｌチューブに、分取した成分と、イソプロピルアルコール２５ｍｌとを加えて（ステップＳ３０８）、２０分間ソニケーションする（ステップＳ３０９）。その後、溶液を濾過して（ステップＳ３１０）、５０ｍｌのナス型フラスコに瀘液を入れて、エバポレーターで乾固し（ステップＳ３１１）、イソプロピルアルコール１ｍｌを加えて（ステップＳ３１２）、高速液体クロマトグラムシステム（ＨＰＬＣ）で分析した（ステップＳ３１３）。

【0037】

高速液体クロマトグラムシステム（ＨＰＬＣ）は、以下のように、荷電化粒子検出器（ＣＡＤ：Ｃｈａｒｇｅｄ Ａｅｒｏｓｏｌ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ）を用いたＨＰＬＣ－ＣＡＤで分析した。

【0038】

（分析条件）
ＨＰＬＣ－ＣＡＤ（日立 高速液体クロマトグラフシステム クロムマスター＋Ｔｈｅｒｍｏ 荷電化粒子検出器ｃｏｒｏｎａ ｖｅｏ）
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ－３ Ｃ１８（５μｍ ４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）
移動相：メタノール
流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ
温度：２５℃
注入量：２０μｌ
図１１は、前処理前のサンプルのＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果であり、図１２は、前処理後のサンプルのＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。図１１及び図１２の結果より、溶出時間（ＲＴ）１４．５付近に現れるピークが、グルコシルセラミド群のうちの一成分が含まれているものとする。

【0039】

図１１において、前処理前のサンプル（米由来グルコシルセラミド）のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果は、溶出時間（ＲＴ）１４．５のピーク面積（ＡＲＥＡ）が「７８０８３８７．０」であり、当該ピークの面積比（面積％）が「２４．７６４」であった。

【0040】

他方、図１２に示すように、前処理後のサンプル（米由来グルコシルセラミド）のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果は、溶出時間（ＲＴ）１４．７のピーク面積（ＡＲＥＡ）が「４２３７４１０．５」であり、当該ピークの面積比（面積％）が「１１．８８９」であった。

【0041】

したがって、前処理前のサンプルのＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果のピーク面積が「７８０８３８７．０」であり、前処理後のサンプルのＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果のピーク面積が「４２３７４１０．５」であるので、前処理によるサンプルの回収率は「５４．２％」となる。つまり、米由来グルコシルセラミドから算出したＨＰＬＣ－ＣＡＤ分析濃度に０．５４２を割って、濃度を算出する。

【0042】

焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたヘキサン抽出物とエタノール抽出物のそれぞれを添着して、Ｒｆ値が０．４６～０．７１の成分を分取した。ヘキサン抽出物中の分取物は９．７ｗｔ％、エタノール抽出物中の分取物は１０．２ｗｔであった。

【0043】

＜定量分析＞
焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたヘキサン抽出物とエタノール抽出物のそれぞれを、荷電化粒子検出器（ＣＡＤ）を用いた高速液体クロマトグラムシステム（ＨＰＬＣ－ＣＡＤ）で、上述と同じ分析条件で分析した。

【0044】

図３は、第１の実施形態で、米由来グルコシルセラミド群のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果を示す図である。

【0045】

図４（Ａ）は、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のヘキサン抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果であり、図４（Ｂ）は、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【0046】

ここでは、図３の米由来グルコシルセラミド群のピークのうち、溶出時間（ＲＴ）が１４．２程度付近に現れるピークをターゲットとする。

【0047】

図３より、米由来グルコシルセラミドを用いた場合、溶出時間（ＲＴ）１４．２程度付近のピークの面積（ＡＲＥＡ）は「１２５４８３５９４．５」であり、全体の面積に対する当該ピークの面積比（面積％）は「１７．７１６」であり、面積比からサンプルに含まれるグルコシルセラミド含有量は「０．３５４ｍｇ／ｍｌ」とする。

【0048】

したがって、溶出時間１４．２付近に現れるピークについて、１ｍｇ／ｍｌの米由来グルコシルセラミドの場合、その面積（ＡＲＥＡ）は「３５４４７３４３０．８」として、ヘキサン抽出物及びエタノール抽出物のそれぞれに含まれるグルコシルセラミド含有量を導出する。

【0049】

図４（Ａ）に示すように、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のヘキサン抽出物のサンプル量を３０．３ｍｇ／ｍｌとしてＨＰＬＣ－ＣＡＤで分析をした。

【0050】

図４（Ａ）のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果より、溶出時間（ＲＴ）１４．１にピークが現れた。このことから、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のヘキサン抽出物には、グルコシルセラミド群のうち一成分が含まれていることが分かる。

【0051】

また、溶出時間（ＲＴ）のピークの面積（ＡＲＥＡ）は「９３１９５３７．３」であり、当該ピークの面積比（面積％）は「１５．６９５」であった。上述したように、１ｍｇ／ｍｌの米由来グルコシルセラミドの場合、その面積（ＡＲＥＡ）は「３５４４７３４３０．８」である。また、ヘキサン抽出物のサンプル量は３０．３ｍｇ／ｍｌである。したがって、ヘキサン抽出物のサンプルに含まれるグルコシルセラミドの質量％（ｗｔ％）は、「０．０８７ｗｔ％」であり、図１１及び図１２の結果より回収率５４．２％で換算すると、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合、１ｇのヘキサン抽出物には、１．６０ｍｇ相当のグルコシルセラミドが含まれていることが分かる。

【0052】

図４（Ｂ）に示すように、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のサンプル量を２６．５７５ｍｇ／ｍｌとしてＨＰＬＣ－ＣＡＤで分析をした。

【0053】

図４（Ｂ）のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果より、溶出時間（ＲＴ）１４．１にピークが現れた。このことから、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物には、グルコシルセラミド群のうち一成分が含まれていることが分かる。

【0054】

また、溶出時間（ＲＴ）のピークの面積（ＡＲＥＡ）は「８１０３１５０．２」であり、当該ピークの面積比（面積％）は「１６．６５８」であった。上述したように、１ｍｇ／ｍｌの米由来グルコシルセラミドの場合、その面積（ＡＲＥＡ）は「３５４４７３４３０．８」であり、エタノール抽出物のサンプル量は２６．５７５ｍｇ／ｍｌである。したがって、エタノール抽出物のサンプルに含まれるグルコシルセラミドの質量％（ｗｔ％）は、「０．０８６ｗｔ％」であり、図１１及び図１２の結果より回収率５４．２％で換算すると、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合、１ｇのエタノール抽出物には、１．５８ｍｇ相当のグルコシルセラミドが含まれていることが分かる。

【0055】

（Ａ－３）精製ゴマ油由来の白土油滓を用いたときの結果
次に、図１に例示する製造方法に従って、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いたヘキサン抽出物及びエタノール抽出物を得て、ヘキサン抽出物及びエタノール抽出物のそれぞれに、グルコシルセラミドが含まれていることを分析した。

【0056】

なお、分析方法及び分析条件は、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合と同様であるため、ここでの詳細な説明は省略する。

【0057】

［ヘキサン抽出物の抽出工程］
精製ゴマ油由来の白土油滓６０ｇを準備し、５倍量のヘキサンを加えた。すなわち、６０ｇの精製ゴマ油由来の白土油滓に、３００ｍｌのヘキサンを加え、温度２５℃で３０分攪拌した。

【0058】

その後、ヘキサン溶液を濾過して、瀘液に含まれるヘキサンをエバポレーター等で除去してヘキサン抽出物を得た。ヘキサン除去後、１２．１ｇのヘキサン抽出物を得た。

【0059】

［エタノール抽出物の抽出工程］
次に、上述のヘキサン溶液を濾過したときの残渣に対して、１０倍量相当のエタノールを加えて、温度２５℃で３０分攪拌した。残渣の質量にもよるが、ここでは、１０倍量のエタノールを残渣に加える場合を例示する。

【0060】

その後、エタノール溶液を濾過して、瀘液に含まれるエタノールをエバポレーターなどにより除去してエタノール抽出物を得た。この例では、２．２ｇのエタノール抽出物を得た。

【0061】

図５（Ａ）は、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のヘキサン抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果であり、図５（Ｂ）は、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【0062】

ここでも、図３の米由来グルコシルセラミド群のピークのうち、溶出時間（ＲＴ）が１４．２程度付近に現れるピークをターゲットとする。

【0063】

図５（Ａ）に示すように、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のヘキサン抽出物のサンプル量を３３．９３ｍｇ／ｍｌとしてＨＰＬＣ－ＣＡＤで分析をした。

【0064】

図５（Ａ）のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果より、溶出時間（ＲＴ）１４．１にピークが現れた。このことから、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のヘキサン抽出物には、グルコシルセラミド群のうち一成分が含まれていることが分かる。

【0065】

また、溶出時間（ＲＴ）のピークの面積（ＡＲＥＡ）は「８１４４１６０．８」であり、当該ピークの面積比（面積％）は「１６．１７４」であった。上述したように、１ｍｇ／ｍｌの米由来グルコシルセラミドの場合、その面積（ＡＲＥＡ）は「３５４４７３４３０．８」であり、ヘキサン抽出物のサンプル量は３３．９３ｍｇ／ｍｌである。したがって、ヘキサン抽出物のサンプルに含まれるグルコシルセラミドの質量％（ｗｔ％）は、「０．０６７ｗｔ％」であり、回収率５４．２％で換算すると、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合、１ｇのヘキサン抽出物には、１．２３ｍｇ相当のグルコシルセラミドが含まれていることが分かる。

【0066】

図５（Ｂ）に示すように、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のサンプル量を２６．５７５ｍｇ／ｍｌとしてＨＰＬＣ－ＣＡＤで分析をした。

【0067】

図５（Ｂ）のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果より、溶出時間（ＲＴ）１４．１にピークが現れた。このことから、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物には、グルコシルセラミド群のうち一成分が含まれていることが分かる。

【0068】

また、溶出時間（ＲＴ）のピークの面積（ＡＲＥＡ）は「６５６９３９．２」であり、当該ピークの面積比（面積％）は「１０．９８９」であった。上述したように、１ｍｇ／ｍｌの米由来グルコシルセラミドの場合、その面積（ＡＲＥＡ）は「３５４４７３４３０．８」であり、エタノール抽出物のサンプル量は２６．５７５ｍｇ／ｍｌである。したがって、エタノール抽出物のサンプルに含まれるグルコシルセラミドの質量％（ｗｔ％）は、「０．０７０ｗｔ％」であり、回収率５４．２％で換算すると、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合、１ｇのエタノール抽出物には、１．２９ｍｇ相当のグルコシルセラミドが含まれていることが分かる。

【0069】

（Ａ－４）第１の実施形態の効果
以上のように、第１の実施形態によれば、ゴマ油の製造過程の一工程である脱色工程で得られた白土油滓に対して無極性溶媒で加えた溶液からグルコシルセラミドを含む抽出物を得ることができる。又さらに、上記残渣に対してアルコールを加えた溶液からグルコシルセラミドを含む抽出物を得ることができる。

【0070】

また、第１の実施形態によれば、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた、ヘキサン抽出物中のグルコシルセラミド含有量は０．０８７ｗｔ％、エタノール抽出物中のグルコシルセラミド含有量は０．０８６ｗｔ％であった。また、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた、ヘキサン抽出物中のグルコシルセラミド含有量は０．０６７ｗｔ％、エタノール抽出物中のグルコシルセラミド含有量は０．０７０ｗｔ％であった。

【0071】

一般的に、米由来グルコシルセラミドの一日当たりの有効摂取量は１．８ｍｇと言われている。従って、第１の実施形態の結果より、白土油滓を用いた抽出物に換算すると、２．０～２．６ｇの摂取で、上述した有効摂取量に達する。

【0072】

言い換えると、第１の実施形態によれば、高濃度のグルコシルセラミドを効率的に抽出していることが分かる。

【0073】

（Ｂ）第２の実施形態
次に、本発明のグルコシルセラミド含有物の製造方法の第２の実施形態を、図面を参照しながら説明する。

【0074】

（Ｂ－１）第２の実施形態のグルコシルセラミドを含む抽出物の製造方法
図６は、第２の実施形態におけるグルコシルセラミドを含む抽出物の製造方法を説明するフローチャートである。

【0075】

［白土油滓の準備］
まず、ゴマ油製造工程で得られる白土油滓を原料として準備する（ステップＳ２０１）。

【0076】

第２の実施形態においても、第１の実施形態と同様に、精製ゴマ油由来の白土油滓と、焙煎ゴマ油由来の白土油滓との２種類の油滓のそれぞれを原料とする。

【0077】

［エタノール抽出工程］
次に、白土油滓にエタノールを加えて攪拌する（ステップＳ２０２）。そして、白土油滓にエタノールを加えた溶液を濾過して（ステップＳ２０３）、残渣を抽出する（ステップＳ２０６）と共に瀘液を得る。ステップＳ２０３の濾過で得た瀘液からエタノールを除去するために、エバポレーターを用いて、瀘液からエタノールを蒸発する（ステップＳ２０４）。この脱溶剤処理で得たものを、エタノール抽出物とする（ステップＳ２０５）。エタノール抽出工程では、アルコールであるエタノールを用いて、アルコールに溶け込んだゴマリグナン類含有物を抽出する工程である。

【0078】

（Ｂ－２）焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたときの結果
次に、図６に例示する製造方法に従って、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたエタノール抽出物を得て、エタノール抽出物に、グルコシルセラミドが含まれていることを分析した。

【0079】

［エタノール抽出物の抽出工程］
図６に例示する製造方法に従って、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いてエタノール抽出物を得る。

【0080】

例えば、焙煎ゴマ油由来の白土油滓６０ｇを準備し、１０倍量のエタノールを加えた。すなわち、６０ｇの焙煎ゴマ油由来の白土油滓に、６００ｍｌのエタノールを加え、温度２５℃で３０分攪拌した。なお、ここでは、歩留等を考慮して１０倍量のエタノールを加える場合を例示したが、エタノール量はこれに限らない。また、焙煎ゴマ油由来の白土油滓の質量、エタノール量、攪拌時の温度、攪拌時間は一例であり、上述したものに限らない。

【0081】

その後、エタノール溶液を濾過して、瀘液に含まれるエタノールをエバポレーター等で除去してエタノール抽出物を得た。ヘキサン除去後、６．３ｇのヘキサン抽出物を得た。

【0082】

［分析処理］
＜前処理＞
この例でも、米由来グルコシルセラミドの標準品をサンプルとして、薄膜クロマトグラフィーで米由来グルコシルセラミド群のＲｆ値を導出した。

【0083】

例えば、展開溶媒は、［ジクロロメタン：メタノール：水＝６５：１６：２］とし、薄膜クロマトグラフィーのガラスプレートに、米由来グルコシルセラミドを添着し、米由来グルコシルセラミドのＲｆ値は０．５２である。そのため、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたエタノール抽出物のそれぞれを添着して、Ｒｆ値が０．４６～０．６２の成分を分取した。

【0084】

＜定量分析＞
第１の実施形態と同様に、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたエタノール抽出物を高速液体クロマトグラムシステム（ＨＰＬＣ－ＣＡＤ）で分析した。そのときの分析条件は、第１の実施形態と同様である。

【0085】

図７は、第２の実施形態で、米由来グルコシルセラミド群のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果を示す図である。

【0086】

図７の米由来グルコシルセラミド群のピークのうち、溶出時間（ＲＴ）が１４．４程度付近に現れるピークをターゲットとする。

【0087】

図７より、米由来グルコシルセラミドを用いた場合、溶出時間（ＲＴ）１４．４程度付近のピークの面積（ＡＲＥＡ）は「３７１７６６７６．１」であり、全体の面積に対する当該ピークの面積比（面積％）は「２１．９９８」であり、面積比からサンプルに含まれるグルコシルセラミド含有量は「２１９．９８ｍｇ／ｍｌ」とする。

【0088】

したがって、溶出時間１４．２付近に現れるピークについて、１ｍｇ／ｍｌの米由来グルコシルセラミドの場合、その面積（ＡＲＥＡ）は「８４５００１２７．５１」として、エタノール抽出物に含まれるグルコシルセラミド含有量を導出する。

【0089】

図８は、第２の実施形態による焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【0090】

図８に示すように、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のサンプル量を２０ｍｇ／ｍｌとしてＨＰＬＣ－ＣＡＤで分析をした。

【0091】

図８のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果より、溶出時間（ＲＴ）１４．３にピークが現れた。このことから、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物には、グルコシルセラミド群のうち一成分が含まれていることが分かる。

【0092】

また、溶出時間（ＲＴ）１４．３のピークの面積（ＡＲＥＡ）は「４０１７８２８．６」であり、当該ピークの面積比（面積％）は「１０．５６３」であった。上述したように、１ｍｇ／ｍｌの米由来グルコシルセラミドの場合、その面積（ＡＲＥＡ）は「８４５００１２７．５１」であり、エタノール抽出物のサンプル量は２０ｍｇ／ｍｌである。したがって、エタノール抽出物のサンプルに含まれるグルコシルセラミドの質量％（ｗｔ％）は、「０．２３ｗｔ％」であり、図１１及び図１２の結果より回収率５４．２％で換算すると、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合、１ｇのエタノール抽出物には、４．３７ｍｇ相当のグルコシルセラミドが含まれていることが分かる。

【0093】

図９は、第２の実施形態による生成ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果である。

【0094】

図９に示すように、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物のサンプル量を２０ｍｇ／ｍｌとしてＨＰＬＣ－ＣＡＤで分析をした。

【0095】

図９のＨＰＬＣ－ＣＡＤ結果より、溶出時間（ＲＴ）１４．３にピークが現れた。このことから、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合のエタノール抽出物には、グルコシルセラミド群のうち一成分が含まれていることが分かる。

【0096】

また、溶出時間（ＲＴ）１４．３のピークの面積（ＡＲＥＡ）は「４２７４４３６」であり、当該ピークの面積比（面積％）は「１１．３７２」であった。上述したように、１ｍｇ／ｍｌの米由来グルコシルセラミドの場合、その面積（ＡＲＥＡ）は「８４５００１２７．５１」であり、エタノール抽出物のサンプル量は２０ｍｇ／ｍｌである。したがって、エタノール抽出物のサンプルに含まれるグルコシルセラミドの質量％（ｗｔ％）は、「０．２５２ｗｔ％」であり、図１１及び図１２の結果より回収率５４．２％で換算すると、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いた場合、１ｇのエタノール抽出物には、４．６４ｍｇ相当のグルコシルセラミドが含まれていることが分かる。

【0097】

（Ｂ－３）第２の実施形態の効果
以上のように、第２の実施形態によれば、ゴマ油の製造過程の一工程である脱色工程で得られた白土油滓に対してアルコールを加えた溶液からグルコシルセラミドを含む抽出物を得ることができる。

【0098】

また、第２の実施形態によれば、焙煎ゴマ油由来の白土油滓を用いたエタノール抽出物中のグルコシルセラミド含有量は０．２３ｗｔ％であった。また、精製ゴマ油由来の白土油滓を用いたエタノール抽出物中のグルコシルセラミド含有量は０．２５２ｗｔ％であった。一般的に、米由来グルコシルセラミドの一日当たりの有効摂取量は１．８ｍｇと言われているので、第２の実施形態の結果より、白土油滓を用いた抽出物に換算すると、０．７１～０．７５ｇの摂取で、上述した有効摂取量に達する。言い換えると、第２の実施形態によれば、高濃度のグルコシルセラミドを効率的に抽出していることが分かる。

【0099】

（Ｃ）他の実施形態
上述した実施形態で抽出したリグナン類含有物は、少なくとも、セサモール、セサミノール、セサミン、エピセサミン、セサモリンが含まれている。これらリグナンは、強力な抗酸化活性があり、コレステロール低下作用、アルコール代謝改善効果、抗高血圧作用、ビタミン増強調整作用、抗動脈硬化作用、糖尿病予防効果、抗ガン作用などがある。

【0100】

そのため、リグナン類抽出物を含む組成物は、医薬品、サプリメント等の健康食品（経口組成物）、化粧品などへの利用が期待されている。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】