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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024160940
(43)【公開日】2024-11-15
(54)【発明の名称】組成物
(51)【国際特許分類】
A23L 33/17 20160101AFI20241108BHJP
A61P 3/00 20060101ALI20241108BHJP
A61K 38/02 20060101ALI20241108BHJP
A61K 36/23 20060101ALI20241108BHJP
A61K 36/254 20060101ALI20241108BHJP
A61K 36/21 20060101ALI20241108BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241108BHJP
A23L 33/105 20160101ALI20241108BHJP
A23L 5/00 20160101ALI20241108BHJP
A23L 2/66 20060101ALI20241108BHJP
A23L 2/52 20060101ALI20241108BHJP
【ＦＩ】
A23L33/17
A61P3/00
A61K38/02
A61K36/23
A61K36/254
A61K36/21
A61P43/00 121
A23L33/105
A23L5/00 A
A23L5/00 M
A23L2/66
A23L2/00 F
【審査請求】未請求
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2024060778
(22)【出願日】2024-04-04
(31)【優先権主張番号】P 2023076336
(32)【優先日】2023-05-02
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(71)【出願人】
【識別番号】398028503
【氏名又は名称】株式会社東洋新薬
(72)【発明者】
【氏名】野村 道康
(72)【発明者】
【氏名】山下 繭香
(72)【発明者】
【氏名】小松沢 里帆
(72)【発明者】
【氏名】田中夏子
(72)【発明者】
【氏名】白川未築
(72)【発明者】
【氏名】本岡香奈
(72)【発明者】
【氏名】友澤 寛
(72)【発明者】
【氏名】尾上 貴俊
(72)【発明者】
【氏名】高嶋 慎一郎
(72)【発明者】
【氏名】神谷 智康
【テーマコード（参考）】
4B018
4B035
4B117
4C084
4C088
【Ｆターム（参考）】
4B018LB08
4B018LB10
4B018LE01
4B018LE02
4B018LE03
4B018LE04
4B018LE05
4B018MD01
4B018MD02
4B018MD09
4B018MD14
4B018MD18
4B018MD20
4B018MD23
4B018MD25
4B018MD26
4B018MD27
4B018MD29
4B018MD30
4B018MD36
4B018MD37
4B018MD40
4B018MD48
4B018MD52
4B018MD57
4B018MD58
4B018MD61
4B018MD71
4B018MD86
4B018MD94
4B018ME14
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4B035LC06
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4B035LG12
4B035LG15
4B035LG19
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4B035LG32
4B035LG33
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4B035LP21
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4B117LG11
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4B117LK15
4B117LK18
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4B117LL02
4B117LL04
4B117LL06
4B117LL09
4C084AA02
4C084BA44
4C084MA52
4C084NA14
4C084ZC21
4C084ZC75
4C088AB12
4C088AB16
4C088AB40
4C088MA52
4C088NA14
4C088ZC21
4C088ZC75
(57)【要約】
【課題】
本発明は、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上に、優れた効果を有する組成物を提供することを目的とする。
【解決手段】
タンパク質と特定の植物素材を含有する組成物。
【選択図】なし
本発明は、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上に、優れた効果を有する組成物を提供することを目的とする。
【解決手段】
タンパク質と特定の植物素材を含有する組成物。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の特定の植物素材を含有することを特徴とする組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも１種の特定の植物素材を含有する組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
従来、タンパク質を粉末化して水などとともに摂取する栄養補助食品は、一部のアスリートが摂取するものであり、一般の人々にはあまり馴染みのないものであったが、近年は、健康に対する関心の高まり等を背景に、一般の人々も摂取する機会が増えてきている。
【0003】
近年においては、タンパク質を主成分とする栄養補助食品は、体重増加を目的として摂取されることが多く、効果的に体重を増加できる栄養補助食品として、低分子化したプロテインと、果糖と、黒胡椒抽出物とを含有する栄養補助食品が知られている（特許文献１）。しかしながら、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上等の効果に優れるタンパク質と特定成分との組み合わせに関しては十分に研究がなされていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】特開２０１９－１４９９８４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
本発明の課題は、タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を含有する組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本出願人は、上記課題を解決するために、種々の物質について鋭意検討を積み重ねたところ、驚くべきことに、タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を含有することにより、筋肉量維持及び/又は増加、筋力維持及び/又は向上や嗜好性向上の効果に優れた組成物が得られることを見出した。本発明は、かかる知見に基づき、完成された発明である。
【0007】
本発明の概要は、以下の通りである。
＜１＞タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を含有することを特徴とする組成物。
＜２＞タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を有効成分とすることを特徴とする組成物。
＜３＞タンパク質を有効成分とし、さらにブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を含有することを特徴とする組成物。
＜４＞組成物中のタンパク質含有量が２０質量％以上である、＜１＞～＜３＞のいずれかに記載の組成物。
＜５＞筋肉量維持及び/又は増加用である、＜１＞～＜３＞のいずれかに記載の組成物。
＜６＞筋力維持及び/又は向上筋力維持用である、＜１＞～＜３＞のいずれかに記載の組成物。
＜７＞タンパク質とブラッククミンを含有する組成物であって、チモキノンを組成物中に０．０００１～２０質量％含有することを特徴とする組成物。
＜８＞タンパク質とパフィアを含有する組成物であって、２０―ヒドロキシエクジゾンを組成物中に０．００００１～１０質量％含有することを特徴とする組成物。
＜９＞タンパク質とエゾウコギを含有する組成物であって、エレウテロシドを組成物中に０．００００１～１０質量％含有することを特徴とする組成物。
＜１＞タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を含有することを特徴とする組成物。
＜２＞タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を有効成分とすることを特徴とする組成物。
＜３＞タンパク質を有効成分とし、さらにブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を含有することを特徴とする組成物。
＜４＞組成物中のタンパク質含有量が２０質量％以上である、＜１＞～＜３＞のいずれかに記載の組成物。
＜５＞筋肉量維持及び/又は増加用である、＜１＞～＜３＞のいずれかに記載の組成物。
＜６＞筋力維持及び/又は向上筋力維持用である、＜１＞～＜３＞のいずれかに記載の組成物。
＜７＞タンパク質とブラッククミンを含有する組成物であって、チモキノンを組成物中に０．０００１～２０質量％含有することを特徴とする組成物。
＜８＞タンパク質とパフィアを含有する組成物であって、２０―ヒドロキシエクジゾンを組成物中に０．００００１～１０質量％含有することを特徴とする組成物。
＜９＞タンパク質とエゾウコギを含有する組成物であって、エレウテロシドを組成物中に０．００００１～１０質量％含有することを特徴とする組成物。
【発明の効果】
【0008】
本発明の組成物は、筋肉量維持及び/又は増加、筋力維持及び/又は向上や嗜好性向上の効果に優れるものである。また、本発明の組成物はミトコンドリア活性化作用およびアミノ酸吸収促進作用を有することから、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の優れた効果が得られる。
【発明を実施するための形態】
【0009】
以下、本発明を詳細に説明する。
【0010】
［１.タンパク質］
本発明は、タンパク質を必須成分とする。本発明で用いられるタンパク質としては、動物性タンパク質、植物性タンパク質、微生物由来タンパク質又はこれらの組み合わせを使用することができる。動物性タンパク質としては、例えば、ホエイタンパク質（乳清）、カゼインタンパク質などの乳由来タンパク質、鶏卵、卵黄、卵白などの卵由来タンパク質、シルクプロテイン、昆虫タンパク質が挙げられる。植物性タンパク質としては、例えば、小麦由来タンパク質、大豆由来タンパク質、米由来タンパク質、はと麦由来タンパク質、カラス麦由来タンパク質、とうもろこし由来タンパク質、エンドウ豆由来タンパク質、そら豆由来タンパク質等の穀類由来タンパク質、アーモンド由来タンパク質、ジャガイモ由来タンパク質、芋カス等の芋類由来タンパク質、麻の実由来タンパク質、クランベリー由来タンパク質、藻類由来タンパク質が挙げられる。微生物由来タンパク質としては酵母由来タンパク質、麹由来タンパク質、キノコ由来タンパク質などの真菌由来タンパク質、納豆菌由来タンパク質、乳酸菌由来タンパク質などの細菌由来タンパク質が挙げられる。本発明においては、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質などの乳由来タンパク質、鶏卵、卵黄、卵白などの卵由来タンパク質、小麦由来タンパク質、大豆由来タンパク質、米由来タンパク質、エンドウ豆由来タンパク質、真菌由来タンパク質、細菌由来タンパク質が好ましく、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質などの乳由来タンパク質、鶏卵、卵黄、卵白などの卵由来タンパク質、大豆由来タンパク質、エンドウ豆由来タンパク質、真菌由来タンパク質、細菌由来タンパク質がより好ましく、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質、鶏卵、卵黄、卵白などの卵由来タンパク質、大豆由来タンパク質、エンドウ豆由来タンパク質、真菌由来タンパク質、細菌由来タンパク質が特に好ましい。なお、本発明に用いるタンパク質は加水分解されたもの（ペプチド）や濃縮物（コンセントレート）、高純度物（アイソレート）である。また、本発明においては賦形剤等のタンパク質以外の成分を含むタンパク質含有原料を使用することもできる。タンパク質の平均分子量（重量平均分子量）としては、特に制限されるものではないが、例えば、３００～１０００００であることが好ましく、５００～８００００であることがより好ましい。
本発明は、タンパク質を必須成分とする。本発明で用いられるタンパク質としては、動物性タンパク質、植物性タンパク質、微生物由来タンパク質又はこれらの組み合わせを使用することができる。動物性タンパク質としては、例えば、ホエイタンパク質（乳清）、カゼインタンパク質などの乳由来タンパク質、鶏卵、卵黄、卵白などの卵由来タンパク質、シルクプロテイン、昆虫タンパク質が挙げられる。植物性タンパク質としては、例えば、小麦由来タンパク質、大豆由来タンパク質、米由来タンパク質、はと麦由来タンパク質、カラス麦由来タンパク質、とうもろこし由来タンパク質、エンドウ豆由来タンパク質、そら豆由来タンパク質等の穀類由来タンパク質、アーモンド由来タンパク質、ジャガイモ由来タンパク質、芋カス等の芋類由来タンパク質、麻の実由来タンパク質、クランベリー由来タンパク質、藻類由来タンパク質が挙げられる。微生物由来タンパク質としては酵母由来タンパク質、麹由来タンパク質、キノコ由来タンパク質などの真菌由来タンパク質、納豆菌由来タンパク質、乳酸菌由来タンパク質などの細菌由来タンパク質が挙げられる。本発明においては、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質などの乳由来タンパク質、鶏卵、卵黄、卵白などの卵由来タンパク質、小麦由来タンパク質、大豆由来タンパク質、米由来タンパク質、エンドウ豆由来タンパク質、真菌由来タンパク質、細菌由来タンパク質が好ましく、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質などの乳由来タンパク質、鶏卵、卵黄、卵白などの卵由来タンパク質、大豆由来タンパク質、エンドウ豆由来タンパク質、真菌由来タンパク質、細菌由来タンパク質がより好ましく、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質、鶏卵、卵黄、卵白などの卵由来タンパク質、大豆由来タンパク質、エンドウ豆由来タンパク質、真菌由来タンパク質、細菌由来タンパク質が特に好ましい。なお、本発明に用いるタンパク質は加水分解されたもの（ペプチド）や濃縮物（コンセントレート）、高純度物（アイソレート）である。また、本発明においては賦形剤等のタンパク質以外の成分を含むタンパク質含有原料を使用することもできる。タンパク質の平均分子量（重量平均分子量）としては、特に制限されるものではないが、例えば、３００～１０００００であることが好ましく、５００～８００００であることがより好ましい。
【0011】
本発明の組成物におけるタンパク質の含有量は特に制限はないが、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の優れた効果をもたらす点から、タンパク質含有原料として乾燥重量で２０～９５質量％が好ましく、３０～９３質量％がより好ましく、４０～９１質量％が特に好ましく、５０～９０質量％がとりわけ好ましい。また、使用する原料中のタンパク質含有量は乾燥重量で４０質量％以上が好ましく、より好ましくは５０質量％以上であり、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果を発揮する観点から、特に好ましくは６０質量％以上である。
【0012】
［２．植物素材］
本発明の組成物は、タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を必須成分とする。以下、各植物素材について詳述する。
本発明の組成物は、タンパク質と、ブラッククミン、パフィア及びエゾウコギから選ばれる少なくとも1種の植物素材を必須成分とする。以下、各植物素材について詳述する。
【0013】
（ブラッククミン）
ブラッククミンは、キンポウゲ科クロタネソウ属に属する花をつける一年草であり、学名が「Ｎｉｇｅｌｌａ ｓａｔｉｖａ」、和名が「ニオイクロタネソウ」の植物である。ブラッククミンには、チモキノン等の成分が含まれている。
ブラッククミンは、キンポウゲ科クロタネソウ属に属する花をつける一年草であり、学名が「Ｎｉｇｅｌｌａ ｓａｔｉｖａ」、和名が「ニオイクロタネソウ」の植物である。ブラッククミンには、チモキノン等の成分が含まれている。
【0014】
本発明において用いる部位としては、チモキノンが多く含まれ、ブラッククミンが有する効果をより享受できる観点から、種子（ブラッククミンシード）が好ましい。ブラッククミンは、通常知られるブラッククミンの加工物であれば特に限定されず、例えば、粉砕物及びその乾燥粉末（粉砕末とも言う）、細片化物、搾汁及びその乾燥粉末（搾汁末とも言う）並びに抽出物及びその乾燥粉末（抽出末とも言う）等を用いることができる。本発明においては、ブラッククミンの有する効果をより享受できる観点から、抽出末が好ましい。
【0015】
抽出方法としては、超臨界抽出、溶媒抽出、水蒸留、水蒸気蒸留、マイクロウエーブ抽出法、圧搾法（コールドプレス法）等が挙げられ、チモキノンをより多く抽出でき、本発明の効果をより享受できる点から、超臨界抽出が好ましい。超臨界抽出に用いられる溶媒としては、臨界温度が６００Ｋ以下の溶媒が好ましく、例えば、二酸化炭素、飽和炭化水素、アルコール等が挙げられ、二酸化炭素、炭素数１～４の飽和炭化水素、炭素数１～４の１価のアルコールが好ましく、二酸化炭素が特に好ましい。これらの溶媒は、１種単独で用いても、２種以上併用してもよい。なお、２種以上の溶媒を併用する場合、少なくとも１種の溶媒を超臨界状態とすればよい。
【0016】
二酸化炭素を用いた超臨界抽出では、例えば、ブラッククミンを抽出容器に充填し、必要圧に昇圧した二酸化炭素を所定速度で容器内に流通させた後、減圧することにより抽出物を回収することができる。なお、ブラッククミン抽出物は、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。
【0017】
また、溶媒抽出に用いられる溶媒としては、ブラッククミンが有する効果をより享受できる観点から水、エタノール、含水エタノール、１，３－ブチレングリコール（ＢＧ）、含水ＢＧ等の親水性溶媒が好ましく、水、含水エタノールが特に好ましい。また、各溶媒の温度は、常温～沸点以下で適宜設定することができる。
【0018】
本発明においては、ブラッククミンが有する効果をより享受できる観点から、チモキノンを含有することが好ましい。ブラッククミンに含まれるチモキノンの含有量が０．０１質量％以上であることが好ましく、０．１質量％以上であることがより好ましく、１．０質量％以上であることがさらに好ましい。日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、ブラッククミンに含まれるチモキノンの含有量が７０質量％以下であることが好ましく、５０質量％以下であることがより好ましく、３０質量％以下であることが特に好ましい。
【0019】
本発明において、ブラッククミンに含まれるチモキノンの含有量、及び、組成物におけるチモキノンの含有量は、例えばＨＰＬＣにて分析することができる。
【0020】
本発明の組成物におけるブラッククミンの含有量は特に制限はないが、本発明の効果を高める観点から、固形分中、０．００１～５０質量％が好ましく、０．０１～４０質量％がより好ましく、０．１～３０質量％が特に好ましい。特に、顆粒剤および粉末剤においては、０．１～５０質量％が好ましく、１～４０質量％がより好ましく、２～３０質量％が特に好ましい。バー状の食品においては、本発明の効果を高める観点から、０．０１～１０質量％が好ましく、０．１～５質量％が好ましく、０．１～２．５質量％が特に好ましい。また、水等の溶媒を含有する液体飲料においては、本発明の効果を高める観点から、０．００１～５質量％が好ましく、０．０１～２．５質量％がより好ましく、０．０５～１質量％が特に好ましい。
【0021】
本発明の組成物におけるチモキノンの含有量は限定されず、チモキノンを含有していなくても良いが、ブラッククミンが有する効果を享受しやすい観点から、乾燥質量換算で、０．０００１質量％以上含有させることが好ましく、０．００１質量％以上含有させることがより好ましく、０．０１質量％以上含有させることがよりさらに好ましく、０．１質量％以上含有させることが特に好ましい。また、得られる組成物を日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、チモキノンを乾燥質量換算で、２０質量％以下含有させることがより好ましく、１５質量％以下含有させることが好ましく、１０質量％以下含有させることがよりさらに好ましく、５質量％以下含有させることが特に好ましい。
【0022】
本発明におけるブラッククミンの摂取量としては特に制限はないが、ブラッククミンが有する効果を享受しやすい観点から、ブラッククミンの摂取量が、成人の１日当たり１０ｍｇ以上となるように摂取することが好ましく、５０ｍｇ以上となるように摂取することがより好ましく、１００ｍｇ以上となるように摂取することが特に好ましい。また、日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、１日当たり２０００ｍｇ以下となるように摂取することが好ましく、１０００ｍｇ以下となるように摂取することがより好ましく、５００ｍｇ以下となるように摂取することが特に好ましい。
【0023】
（パフィア）
パフィアとは、ヒユ科パフィア属の植物である。南米に自生しており、ブラジルニンジン、アマゾンニンジン、ナンベイニンジンとも呼ばれる。本発明で使用できるパフィアとしては、例えばパフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ ｇｌｏｍｅｒａｔｅ）、パフィア・イレジノイデス（Ｐ．ｉｒｅｓｉｎｏｉｄｅｓ）、パフィア・パニキュラータ（Ｐ．ｐａｎｉｃｕｌａｔａ）、パフィア・ジュバータ（Ｐ．ｊｕｂａｔａ）、パフィア・プルベルレンタ（Ｐ．ｐｕｌｖｅｒｕｌｅｎｔａ）、パフィア・スピカータ（Ｐ．ｓｐｉｃａｔａ）、パフィア・アクティフォリア（Ｐ．ａｃｔｉｆｏｌｉａ）、パフィア・アフィラ（Ｐ．ａｐｈｙｌｌａ）、パフィア・シネレア（Ｐ．ｃｉｎｅｒｅａ）、パフィア・デヌダタ（Ｐ．ｄｅｎｕｄａｔａ）、パフィア・エラタ（Ｐ．ｅｌａｔａ）、パフィア・エクイセティフォルミス（Ｐ．ｅｑｕｉｓｅｔｉｆｏｒｍｉｓ）、パフィア・エリアンサ（Ｐ．ｅｒｉａｎｔｈａ）、パフィア・グラブラタ（Ｐ．ｇｌａｂｒａｔａ）、パフィア・グラブラトイデス（Ｐ．ｇｌａｂｒａｔｏｉｄｅｓ）、パフィア・グナファロイデス（Ｐ．ｇｎａｐｈａｌｏｉｄｅｓ）、パフィア・ヘリクリソイデス（Ｐ．ｈｅｌｉｃｈｒｙｓｏｉｄｅｓ）、パフィア・ヒルテュラ（Ｐ．ｈｉｒｔｕｌａ）、パフィア・ラナタ（Ｐ．ｌａｎａｔａ）、パフィア・レティキュラータ（Ｐ．ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ）、パフィア・ステノフィーラ（Ｐ．ｓｔｅｎｏｐｈｙｌａ）、パフィア・テュベローザ（Ｐ．ｔｕｂｅｒｏｓａ）およびパフィア・ヴェルティナ（Ｐ．ｖｅｌｕｔｉｎａ）等が挙げられ、これら１種または２種以上を使用することができる。中でもパフィア・グロメラータ（Ｐ．ｇｌｏｍｅｒａｔｅ）、パフィア・イレジノイデス（Ｐ．ｉｒｅｓｉｎｏｉｄｅｓ）を使用するのが好ましい。
パフィアとは、ヒユ科パフィア属の植物である。南米に自生しており、ブラジルニンジン、アマゾンニンジン、ナンベイニンジンとも呼ばれる。本発明で使用できるパフィアとしては、例えばパフィア・グロメラータ（Ｐｆａｆｆｉａ ｇｌｏｍｅｒａｔｅ）、パフィア・イレジノイデス（Ｐ．ｉｒｅｓｉｎｏｉｄｅｓ）、パフィア・パニキュラータ（Ｐ．ｐａｎｉｃｕｌａｔａ）、パフィア・ジュバータ（Ｐ．ｊｕｂａｔａ）、パフィア・プルベルレンタ（Ｐ．ｐｕｌｖｅｒｕｌｅｎｔａ）、パフィア・スピカータ（Ｐ．ｓｐｉｃａｔａ）、パフィア・アクティフォリア（Ｐ．ａｃｔｉｆｏｌｉａ）、パフィア・アフィラ（Ｐ．ａｐｈｙｌｌａ）、パフィア・シネレア（Ｐ．ｃｉｎｅｒｅａ）、パフィア・デヌダタ（Ｐ．ｄｅｎｕｄａｔａ）、パフィア・エラタ（Ｐ．ｅｌａｔａ）、パフィア・エクイセティフォルミス（Ｐ．ｅｑｕｉｓｅｔｉｆｏｒｍｉｓ）、パフィア・エリアンサ（Ｐ．ｅｒｉａｎｔｈａ）、パフィア・グラブラタ（Ｐ．ｇｌａｂｒａｔａ）、パフィア・グラブラトイデス（Ｐ．ｇｌａｂｒａｔｏｉｄｅｓ）、パフィア・グナファロイデス（Ｐ．ｇｎａｐｈａｌｏｉｄｅｓ）、パフィア・ヘリクリソイデス（Ｐ．ｈｅｌｉｃｈｒｙｓｏｉｄｅｓ）、パフィア・ヒルテュラ（Ｐ．ｈｉｒｔｕｌａ）、パフィア・ラナタ（Ｐ．ｌａｎａｔａ）、パフィア・レティキュラータ（Ｐ．ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ）、パフィア・ステノフィーラ（Ｐ．ｓｔｅｎｏｐｈｙｌａ）、パフィア・テュベローザ（Ｐ．ｔｕｂｅｒｏｓａ）およびパフィア・ヴェルティナ（Ｐ．ｖｅｌｕｔｉｎａ）等が挙げられ、これら１種または２種以上を使用することができる。中でもパフィア・グロメラータ（Ｐ．ｇｌｏｍｅｒａｔｅ）、パフィア・イレジノイデス（Ｐ．ｉｒｅｓｉｎｏｉｄｅｓ）を使用するのが好ましい。
【0024】
本発明において用いる部位としては、２０―ヒドロキシエクジゾンが多く含まれ、パフィアが有する効果をより享受できる観点から、根が好ましい。パフィアは、通常知られるパフィアの加工物であれば特に限定されず、例えば、粉砕物及びその乾燥粉末（粉砕末とも言う）、細片化物、搾汁及びその乾燥粉末（搾汁末とも言う）並びに抽出物及びその乾燥粉末（抽出末とも言う）等を用いることができる。本発明においては、パフィアの有する効果をより享受できる観点から、抽出末が好ましい
【0025】
抽出方法としては、超臨界抽出、溶媒抽出等が挙げられ、２０―ヒドロキシエクジゾンをより多く抽出でき、パフィアが有する効果をより享受できる点から、溶媒抽出が好ましい。溶媒抽出に用いられる溶媒としては、本発明の効果をより享受できる点及び組成物への配合し易さから、水、エタノール、含水エタノール、１，３－ブチレングリコール（ＢＧ）、含水ＢＧ等の親水性溶媒が好ましく、水、含水エタノールが特に好ましい。また、各溶媒の温度は、常温～沸点以下で適宜設定することができる。含水エタノールを用いた溶媒抽出では、例えば、パフィアを抽出容器に秤量し、含水エタノールで抽出後、ろ過、濃縮することにより抽出物を回収することができる。なお、パフィア抽出物には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。
【0026】
本発明においては、パフィアが有する効果をより享受できる観点から、２０―ヒドロキシエクジゾンを含有することが好ましい。パフィアに含まれる２０―ヒドロキシエクジゾンの含有量が０．０１質量％以上であることが好ましく、０．１質量％以上であることがより好ましく、０．５質量％以上であることがさらに好ましい。日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、パフィアに含まれる２０―ヒドロキシエクジゾンの含有量が７０質量％以下であることが好ましく、５０質量％以下であることがより好ましく、３０質量％以下であることが特に好ましい。
【0027】
本発明において、パフィアに含まれる２０―ヒドロキシエクジゾンの含有量、及び、組成物における２０―ヒドロキシエクジゾンの含有量は、例えば、ＨＰＬＣにて分析することができる。
【0028】
本発明の組成物におけるパフィアの含有量は特に制限はないが、本発明の効果を高める観点から、固形分中、０．０００１～４０質量％が好ましく、０．００１～３０質量％がより好ましく、０．０１～２０質量％が特に好ましい。特に、顆粒剤および粉末剤においては、０．００１～４０質量％が好ましく、０．０１～３０質量％がより好ましく、０．１～２０質量％が特に好ましい。バー状の食品においては、本発明の効果を高める観点から、０．００１～５質量％が好ましく、０．０１～２．５質量％が好ましく、０．１～１質量％が特に好ましい。また、水等の溶媒を含有する液体飲料においては、本発明の効果を高める観点から、０．０００１～５質量％が好ましく、０．００１～２．５質量％がより好ましく、０．０１～１質量％が特に好ましい。
【0029】
本発明の組成物における２０―ヒドロキシエクジゾンの含有量は限定されず、２０―ヒドロキシエクジゾンを含有していなくても良いが、パフィアが有する効果を享受しやすい観点から、乾燥質量換算で、０．００００１質量％以上含有させることが好ましく、０．０００１質量％以上含有させることがより好ましく、０．００１質量％以上含有させることがよりさらに好ましく、０．０１質量％以上含有させることが特に好ましい。また、得られる組成物を日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、２０―ヒドロキシエクジゾンを乾燥質量換算で、１０質量％以下含有させることが好ましく、８質量％以下含有させることがより好ましく、５質量％以下含有させることがよりさらに好ましく、１質量％以下含有させることが特に好ましい。
【0030】
本発明におけるパフィアの摂取量としては特に制限はないが、パフィアが有する効果を享受しやすい観点から、パフィアの摂取量が、成人の１日当たり０．１ｍｇ以上となるように摂取することが好ましく、１ｍｇ以上となるように摂取することがより好ましく、１０ｍｇ以上となるように摂取することが特に好ましい。また、得られる組成物を日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、１日当たり１０００ｍｇ以下となるように摂取することが好ましく、５００ｍｇ以下となるように摂取することがより好ましく、２００ｍｇ以下となるように摂取することが特に好ましい。
【0031】
（エゾウコギ）
エゾウコギとは、ウコギ科に属する落葉潅木であり、学名が「Ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ」であり、シゴカ（刺五加）とも称される。
エゾウコギとは、ウコギ科に属する落葉潅木であり、学名が「Ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ」であり、シゴカ（刺五加）とも称される。
【0032】
本発明において用いる部位としては、エレウテロシドが多く含まれ、エゾウコギが有する効果をより享受できる観点から、根が好ましい。エゾウコギは、通常知られるエゾウコギの加工物であれば特に限定されず、例えば、粉砕物及びその乾燥粉末（粉砕末とも言う）、細片化物、搾汁及びその乾燥粉末（搾汁末とも言う）並びに抽出物及びその乾燥粉末（抽出末とも言う）等を用いることができる。本発明においては、エゾウコギの有する効果をより享受できる観点から、抽出末が好ましい。
【0033】
抽出方法としては、超臨界抽出、溶媒抽出等が挙げられ、エレウテロシドをより多く抽出でき、エゾウコギの有する効果をより享受できる点から、溶媒抽出が好ましい。溶媒抽出に用いられる溶媒としては、本発明の効果をより享受できる点及び組成物への配合し易さから、水、エタノール、含水エタノール、１，３－ブチレングリコール（ＢＧ）、含水ＢＧ等の親水性溶媒が好ましく、水、含水エタノールが特に好ましい。また、各溶媒の温度は、常温～沸点以下で適宜設定することができる。含水エタノールを用いた溶媒抽出では、例えば、エゾウコギを抽出容器に秤量し、含水エタノールで抽出後、ろ過、濃縮することにより抽出物を回収することができる。なお、上記「エゾウコギの抽出物」には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。具体的には、エゾウコギを必要に応じて適当な大きさとした後に、適当な浸出液（抽出溶媒）を加えて浸出した液や、当該浸出液を濃縮した液（軟エキス、流エキス、チンキ等）、さらにこれらを乾燥させたもの（乾燥エキス等）等も本発明のエゾウコギ抽出物に包含される。
【0034】
本発明においては、エゾウコギが有する効果をより享受できる観点から、エレウテロシドを含有することが好ましい。エレウテロシドの種類は限定されないが、エレウテロシドＡ、エレウテロシドＢ、エレウテロシドＣ、エレウテロシドＤ、エレウテロシドＥなどが挙げられる。エゾウコギが有する効果をより享受できる観点から、エレウテロシドＢ及びエレウテロシドＥを含有することが好ましい。
【0035】
本発明においては、エゾウコギが有する効果をより享受できる観点から、エゾウコギに含まれるエレウテロシドの含有量が０．０１質量％以上であることが好ましく、０．１質量％以上であることがより好ましく、０．５質量％以上であることがさらに好ましい。日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、エゾウコギに含まれるエレウテロシドの含有量が７０質量％以下であることが好ましく、５０質量％以下であることがより好ましく、３０質量％以下であることが特に好ましい。
【0036】
本発明において、エゾウコギに含まれるエレウテロシドの含有量、及び、組成物におけるエレウテロシドの含有量は、例えばＨＰＬＣにて分析することができる。
【0037】
本発明の組成物におけるエゾウコギの含有量は特に制限はないが、本発明の効果を高める観点から、固形分中、０．００１～４０質量％が好ましく、０．０１～３０質量％がより好ましく、０．１～２０質量％が特に好ましい。特に、顆粒剤および粉末剤においては、０．００１～４０質量％が好ましく、０．０１～３０質量％がより好ましく、０．１～２０質量％が特に好ましい。バー状の食品においては、本発明の効果を高める観点から、０．００１～５質量％が好ましく、０．０１～２．５質量％が好ましく、０．１～１質量％が特に好ましい。また、水等の溶媒を含有する液体飲料においては、本発明の効果を高める観点から、０．０００１～５質量％が好ましく、０．００１～２．５質量％がより好ましく、０．０１～１質量％が特に好ましい。
【0038】
本発明の組成物におけるエレウテロシドの含有量は限定されず、エレウテロシドを含有していなくても良いが、エゾウコギが有する効果を享受しやすい観点から、乾燥質量換算で、０．００００１質量％以上含有させることが好ましく、０．０００１質量％以上含有させることがより好ましく、０．００１質量％以上含有させることがよりさらに好ましく、０．０１質量％以上含有させることが特に好ましい。また、得られる組成物を日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、エレウテロシドを乾燥質量換算で、１０質量％以下含有させることが好ましく、８質量％以下含有させることがより好ましく、５質量％以下含有させることがよりさらに好ましく、１質量％以下含有させることが特に好ましい。
【0039】
本発明におけるエゾウコギの摂取量としては特に制限はないが、エゾウコギが有する効果を享受しやすい観点から、エゾウコギの摂取量が、成人の１日当たり１ｍｇ以上となるように摂取することが好ましく、１０ｍｇ以上となるように摂取することがより好ましく、５０ｍｇ以上となるように摂取することが特に好ましい。また、日常生活において継続的に経口摂取しやすい観点から、１日当たり２０００ｍｇ以下となるように摂取することが好ましく、１０００ｍｇ以下となるように摂取することがより好ましく、５００ｍｇ以下となるように摂取することが特に好ましい。
【0040】
本発明の組成物が顆粒剤である場合のメジアン径は特に制限はないが、本発明の効果を高める観点から、１０～７５０μｍ以下であることが好ましく、２５～５００μｍ以下であることがより好ましく、５０～２５０μｍ以下であることが特に好ましい。
【0041】
本発明の組成物は、ミトコンドリア活性化作用を有することから、筋肉量維持及び/又は増加用組成物として機能し得る。筋肉量維持及び/又は増加用組成物としては、例えば、「理想の筋肉のために」、「理想的なカラダをサポート」、「強いカラダづくりに」、「運動時のプロテイン補給のために」、「体型を維持したい方に」、「筋肉量を維持する」、「筋肉の減少を防ぐ」、「シェイプアップ」、「スタイルを維持したい方に」、「スタイルを改善したい方に」、「体づくりを支える」等を表示したいわゆる健康食品を例示することができる。
【0042】
また、本発明の組成物は、ミトコンドリア活性化作用を有することから、筋力維持及び/又は向上用組成物として機能し得る。本発明の筋力維持及び/又は向上用組成物としては、例えば、「シニア世代のたんぱく質不足に」、「アクティブに生活したい方に」、「アクティブな毎日に」、「元気に歩きたい方に」、「加齢による筋力の低下に」、「歩行能力の維持、向上」、「歩くピッチおよび歩行速度の維持、向上」、「握力の維持、改善」、「筋機能の低下のために」、「足腰の衰えのために」等を表示したいわゆる健康食品を例示することができる。
【0043】
本発明の組成物の形態は特に限定されず、任意の形態とすることができる。例えば、経口的な使用に適した形態、具体的には、粉末状、粒状、顆粒状、錠状、液状、ペースト状、ハードカプセルやソフトカプセルのようなカプセル状、カプレット状、タブレット状、ソーセージ状、カマボコ状、バー状などの各形態が挙げられる。
【0044】
本発明の組成物の包装形態は特に限定されず、剤形などに応じて適宜選択できるが、例えば、ＰＴＰなどのブリスターパック；ストリップ包装；ヒートシール；アルミパウチ；プラスチックや合成樹脂などを用いるフィルム包装；バイアルなどのガラス容器；アンプルなどのプラスチック容器などが挙げられる。
【0045】
本発明の組成物は、粉末状（粉末、顆粒などの粉の形態）であって、水と混合した混合物を経口的に使用する形態であると、腐敗を防ぎ長期保存に適することから好ましい。また本発明の組成物が粉末状やタブレット状などの固体の形態である場合、上述したように、これを水と混合して液状体となし、経口的に使用することができるが、使用者の好みなどに応じて、固体のまま経口的に使用してもよい。
【0046】
本発明の組成物の１日の使用量は特に限定されず、使用態様や使用者の使用内容などに応じて適宜設定され得るが、例えば、使用者の体重を基準として、１～６０００ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは５～４０００ｍｇ／ｋｇであり、より好ましくは１０～３０００ｍｇ／ｋｇであり、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、さらに好ましくは１０～２０００ｍｇ／ｋｇである。本発明の組成物の１回の使用量についても同様に特に限定されず、例えば、使用者の体重を基準として、０．５～３０００ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは１～２０００ｍｇ／ｋｇであり、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、より好ましくは５～１０００ｍｇ／ｋｇである。
【0047】
また、本発明の組成物の１日の使用量は特に限定されず、例えば、顆粒（粉末）剤の場合、０．１～１００ｇ、好ましくは０．５～８０ｇ、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは１．５～６０ｇとすることができる。バー状の組成物の場合、１５～２００ｇ、好ましくは２０～１５０ｇ、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは３０～１００ｇとすることができる。液体飲料の場合、５０～１０００ｇ、好ましくは１００～８００ｇ、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは１５０～６００ｇとすることができる。本発明の組成物の１回の使用量は、例えば、顆粒（粉末）剤の場合、０．１～５０ｇ、好ましくは０．５～４０ｇ、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、より好ましくは１～３０ｇとすることができる。バー状の組成物の場合、１５～１５０ｇ、好ましくは２０～１００ｇ、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは３０～６０ｇとすることができる。液体飲料の場合、５０～１０００ｇ、好ましくは１００～８００ｇ、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは１５０～６００ｇとすることができる。
【0048】
本発明の組成物におけるタンパク質と特定の植物素材の配合比は特に限定されないが、タンパク質：特定の植物素材＝１００：０．００１～１００が好ましく、より好ましくは１００：０．０１～５０であり、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは１００：０．１～２０である。
【0049】
ブラッククミンがチモキノンを含む場合、タンパク質とチモキノンの含有量は特に制限されないが、タンパク質：チモキノン＝１００００：０．００５～７０００が好ましく、より好ましくは１００００：０．０５～３５００であり、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは１００００：０．１～１０００である。
【0050】
パフィアが２０―ヒドロキシエクジゾンを含む場合、タンパク質と２０―ヒドロキシエクジゾンの含有量は特に制限されないが、タンパク質：２０―ヒドロキシエクジゾン＝１００００：０．０００５～７００が好ましく、より好ましくは１００００：０．００５～３５０であり、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは１００００：０．０５～１５０である。
【0051】
エゾウコギがエレウテロシドを含む場合、タンパク質とエレウテロシドの含有量は特に制限されないが、タンパク質：エレウテロシド＝１００００：０．０００１～３０００が好ましく、より好ましくは１００００：０．００１～１５００であり、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果の観点から、特に好ましくは１００００：０．０１～１０００である。
【0052】
本発明の組成物は、タンパク質および特定の植物素材の他、必要に応じて他の成分を添加して、公知の方法によって製造することができる。本発明の組成物は、一般食品の他、例えば、医薬品（医薬部外品を含む）や、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品等の所定機関より効能の表示が認められた機能性食品等のいわゆる健康食品などの経口組成物として用いることができる。また、医薬品（医薬部外品を含む）や化粧品などの外用剤として用いることができる。
【0053】
本発明の組成物は、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の効果を得ることを目的とした種々の形態で利用され得る。
【実施例0054】
以下、本発明を実施例に基づき説明する。
試験１．ミトコンドリア活性化能の評価
ミトコンドリアは、細胞内のエネルギー産生において中心的な役割を担う細胞小器官で、筋肉の活動や発達、維持においても不可欠であり、その活性が低下すると筋肉の急速な萎縮が進行することが知られている。よって、ミトコンドリア活性化作用を確認することで、筋肉量維持及び/又は増加作用や筋力維持及び/又は向上作用を確認することができる。
［被験物質］
被験物質として、以下の物質を使用した。
・大豆由来タンパク質：市販されている粉末状大豆タンパク質を用いた。
・ブラッククミン：市販されているNigella sativaの種子から抽出した、チモキノンを含有する粉末状の抽出物を用いた。
・パフィア：市販されているPfaffia glomerata、Pfaffia iresinoides又はその他の同属植物（Amaranthaceae）の根から抽出した、２０－ヒドロキシエクジゾンを含有する粉末状の抽出物を用いた。
・エゾウコギ：市販されているEleutherococcus senticosus (Rupr. Et Maxim.) Maximの根から抽出した、エレウテロシドを含有する粉末状の抽出物を用いた。
・ロイシン：ミトコンドリア活性作用が知られている成分として市販されている粉末状のＬ－ロイシンを用いた。
・デキストリン：ミトコンドリア活性に影響を与えない物質である市販されているデキストリンを用いた。
試験１．ミトコンドリア活性化能の評価
ミトコンドリアは、細胞内のエネルギー産生において中心的な役割を担う細胞小器官で、筋肉の活動や発達、維持においても不可欠であり、その活性が低下すると筋肉の急速な萎縮が進行することが知られている。よって、ミトコンドリア活性化作用を確認することで、筋肉量維持及び/又は増加作用や筋力維持及び/又は向上作用を確認することができる。
［被験物質］
被験物質として、以下の物質を使用した。
・大豆由来タンパク質：市販されている粉末状大豆タンパク質を用いた。
・ブラッククミン：市販されているNigella sativaの種子から抽出した、チモキノンを含有する粉末状の抽出物を用いた。
・パフィア：市販されているPfaffia glomerata、Pfaffia iresinoides又はその他の同属植物（Amaranthaceae）の根から抽出した、２０－ヒドロキシエクジゾンを含有する粉末状の抽出物を用いた。
・エゾウコギ：市販されているEleutherococcus senticosus (Rupr. Et Maxim.) Maximの根から抽出した、エレウテロシドを含有する粉末状の抽出物を用いた。
・ロイシン：ミトコンドリア活性作用が知られている成分として市販されている粉末状のＬ－ロイシンを用いた。
・デキストリン：ミトコンドリア活性に影響を与えない物質である市販されているデキストリンを用いた。
【0055】
［被験物質の調製］
各被験物質は、分化誘導培地（2%HS（ウマ血清）-DMEM）を用いて調製した。下記試験に用いた被験物質の配合比は表１のとおりである。
各被験物質は、分化誘導培地（2%HS（ウマ血清）-DMEM）を用いて調製した。下記試験に用いた被験物質の配合比は表１のとおりである。
【0056】
［ミトコンドリア活性測定］
（１）37℃、5容量％CO２インキュベーター内で、75 cm２フラスコを用いて、マウス筋芽細胞 （C2C12）を増殖培地（10%FBS-DMEM）で培養した。
（２）トリプシン処理により浮遊させた細胞を、96ウェルコラーゲンコートプレートの各ウェルに8×10^3 cells／wellの細胞密度で播種し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で、24時間前培養した。
（３）各ウェルより培地を除去後、無血清DMEMで2回洗浄し、分化誘導培地（2%HS-DMEM）を200 μL／wellで添加し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で5、6日間培養した。
（４）2、3日に1回、培地交換を行い、筋管細胞へ分化させた。
（５）各ウェルより培地を除去後、被験物質含有培地を100 μL／wellで添加し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で24時間培養した。
（６）培地には分化誘導培地を用い、被験物質の培地中の合計濃度を100 μg／mLとした。
（７）24時間培養後、培地を除去し、無血清DMEMで各ウェルを2回洗浄後、無血清DMEMで調製した10 μM Rhodamine123（富士フィルム和光純薬製）を各ウェルに50 μLずつ添加した。
（８）37℃、5容量％CO２インキュベーター内に30分間静置させた後、試薬を除去し、PBSで各ウェルを2回洗浄した。
（９）各ウェルよりPBSを除去後、さらにウェルにPBSを添加し、蛍光強度（励起波長Ex.507nm、蛍光波長Em.529nm）を測定した。
（１０）得られたデータを元に％ of controlを算出した。
% of control = (Data sample - Data blank) ／ (Data control - Data blank) × 100
比較例１の値を100としたときの相対値を表１に示した。
（１）37℃、5容量％CO２インキュベーター内で、75 cm２フラスコを用いて、マウス筋芽細胞 （C2C12）を増殖培地（10%FBS-DMEM）で培養した。
（２）トリプシン処理により浮遊させた細胞を、96ウェルコラーゲンコートプレートの各ウェルに8×10^3 cells／wellの細胞密度で播種し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で、24時間前培養した。
（３）各ウェルより培地を除去後、無血清DMEMで2回洗浄し、分化誘導培地（2%HS-DMEM）を200 μL／wellで添加し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で5、6日間培養した。
（４）2、3日に1回、培地交換を行い、筋管細胞へ分化させた。
（５）各ウェルより培地を除去後、被験物質含有培地を100 μL／wellで添加し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で24時間培養した。
（６）培地には分化誘導培地を用い、被験物質の培地中の合計濃度を100 μg／mLとした。
（７）24時間培養後、培地を除去し、無血清DMEMで各ウェルを2回洗浄後、無血清DMEMで調製した10 μM Rhodamine123（富士フィルム和光純薬製）を各ウェルに50 μLずつ添加した。
（８）37℃、5容量％CO２インキュベーター内に30分間静置させた後、試薬を除去し、PBSで各ウェルを2回洗浄した。
（９）各ウェルよりPBSを除去後、さらにウェルにPBSを添加し、蛍光強度（励起波長Ex.507nm、蛍光波長Em.529nm）を測定した。
（１０）得られたデータを元に％ of controlを算出した。
% of control = (Data sample - Data blank) ／ (Data control - Data blank) × 100
比較例１の値を100としたときの相対値を表１に示した。
【0057】
【表1】
【0058】
各被験物質を単独で添加した比較例１～４においては、ミトコンドリア活性の値は９８．８～１０１．１％ of controlであるのに対し、タンパク質と特定の植物成分とを含有する実施例１～３においては、１１８．６～１２４．９％とミトコンドリア活性が顕著に増加することがわかる。また、タンパク質とミトコンドリア活性化作用が知られているロイシンとを含有した比較例６と比べて、各実施例はより優れたミトコンドリア活性化作用を示すことがわかる。以上より、本発明の組成物は、優れたミトコンドリア活性化作用を有することから、筋肉量維持及び/又は増加効果や筋力維持及び/又は向上効果を有するものであることがわかる。すなわち、本発明の組成物は筋肉量維持及び/又は増加用組成物や筋力維持及び/又は向上用組成物として有用である。
【0059】
試験２．アミノ酸吸収促進の評価
本発明の組成物を用いてヒト大腸癌由来細胞株の単層透過性によるアミノ酸吸収促進作用を確認した。ヒト大腸癌由来細胞株の単層透過性は、ヒト腸を介した化合物の吸収性を評価するために利用される一般的なインビトロモデルである。アミノ酸の透過性を確認することで、アミノ酸吸収促進による筋肉増強作用、筋力維持作用を確認することができる。
［被験物質］
被験物質として、試験１と同じもののほか、下記のものも使用した。
・ビタミンＤ：軟骨細胞活性化作用が知られている成分として市販されている粉末状のビタミンＤを用いた。
・デキストリン：アミノ酸吸収に影響を与えない物質である市販されているデキストリンを用いた。
本発明の組成物を用いてヒト大腸癌由来細胞株の単層透過性によるアミノ酸吸収促進作用を確認した。ヒト大腸癌由来細胞株の単層透過性は、ヒト腸を介した化合物の吸収性を評価するために利用される一般的なインビトロモデルである。アミノ酸の透過性を確認することで、アミノ酸吸収促進による筋肉増強作用、筋力維持作用を確認することができる。
［被験物質］
被験物質として、試験１と同じもののほか、下記のものも使用した。
・ビタミンＤ：軟骨細胞活性化作用が知られている成分として市販されている粉末状のビタミンＤを用いた。
・デキストリン：アミノ酸吸収に影響を与えない物質である市販されているデキストリンを用いた。
【0060】
［アミノ酸吸収量測定］
（１）37℃、5容量％CO２インキュベーター内で、75 cm２フラスコを用いて、ヒト大腸癌由来細胞を10%FBS-1%NEAA-DMEMで培養した。
（２）トリプシン処理により浮遊させた細胞を、24ウェルプレート上のインサートウェルに4×10^4 cells／wellの細胞密度で播種し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で、24時間前培養した。
（３）24時間後培地を交換し、その後 3～4日ごとに培地交換を行いながら14～15日間培養し、単層を形成させた。
（４）電気抵抗値を測定し、 HBSSバッファーで洗浄した。
（５）被験物質は、以下の手順でペプシンおよびパンクレアチンによる酵素処理を行った。また、コントロール用に被験物質を含まない超純水も同様に酵素処理を行った。
被験物質を超純水で溶解し、37℃のブロックヒーターでプレインキュベートした。
0.5N-HClでpH2.0に調整し、10mM-HClで20 μg/mLに調整したペプシン溶液を100μL添加した。
37℃のウォーターバスで1hインキュベートした後、0.5N-NaOHでpH7.5に調整し、チューブ内の合計液量が1.5mLになるよう超純水を添加した。
超純水で8mg/mLに調製したパンクレアチン溶液を100μg/mL添加し、37℃のウォーターバスで1hインキュベートした。
インキュベート後、超純水を添加して25mg／mLに調整した。
（６）酵素処理をした被験物質を終濃度8.33mg/mLで添加し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で2時間培養した。
（７）L-アミノ酸定量キット(Sigma-Aldrich)を用いて透過液中のアミノ酸濃度を測定した。
（８）コントロールの値を1としたときの相対値を表２に示した。
（１）37℃、5容量％CO２インキュベーター内で、75 cm２フラスコを用いて、ヒト大腸癌由来細胞を10%FBS-1%NEAA-DMEMで培養した。
（２）トリプシン処理により浮遊させた細胞を、24ウェルプレート上のインサートウェルに4×10^4 cells／wellの細胞密度で播種し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で、24時間前培養した。
（３）24時間後培地を交換し、その後 3～4日ごとに培地交換を行いながら14～15日間培養し、単層を形成させた。
（４）電気抵抗値を測定し、 HBSSバッファーで洗浄した。
（５）被験物質は、以下の手順でペプシンおよびパンクレアチンによる酵素処理を行った。また、コントロール用に被験物質を含まない超純水も同様に酵素処理を行った。
被験物質を超純水で溶解し、37℃のブロックヒーターでプレインキュベートした。
0.5N-HClでpH2.0に調整し、10mM-HClで20 μg/mLに調整したペプシン溶液を100μL添加した。
37℃のウォーターバスで1hインキュベートした後、0.5N-NaOHでpH7.5に調整し、チューブ内の合計液量が1.5mLになるよう超純水を添加した。
超純水で8mg/mLに調製したパンクレアチン溶液を100μg/mL添加し、37℃のウォーターバスで1hインキュベートした。
インキュベート後、超純水を添加して25mg／mLに調整した。
（６）酵素処理をした被験物質を終濃度8.33mg/mLで添加し、37℃、5容量％CO２インキュベーター内で2時間培養した。
（７）L-アミノ酸定量キット(Sigma-Aldrich)を用いて透過液中のアミノ酸濃度を測定した。
（８）コントロールの値を1としたときの相対値を表２に示した。
【0061】
【表2】
【0062】
大豆由来タンパク質又は特定の他成分を単独で添加した比較例７～１０においては、コントロールの吸収量を1とした時のアミノ酸吸収量の相対値は０．８５～２．１９であり、コントロールの吸収量よりも低いか、高くても増加量は１．１９であった。それに対し、大豆由来タンパク質と特定の他成分とを含有する実施例４～６においては、その相対値は２．６７～３．４２であった。各比較例と実施例は添加した被験物質の合計量が変わらないにも関わらず、各比較例のコントロールの吸収量に対する増加（及び減少）量を合計したものよりも実施例の増加量はいずれも高くなり、アミノ酸吸収量が顕著に増加することがわかる。一方、タンパク質と、アミノ酸吸収促進作用が知られているビタミンＤとを含有した比較例１２のアミノ酸吸収量の増加量１．２６と比べて、各実施例はより優れたアミノ酸吸収促進作用を示すことがわかる。以上より、本発明の経口組成物は、優れたアミノ酸吸収促進作用を有することから、アミノ酸吸収促進による筋肉増強効果や筋力維持効果を有するものであることがわかる。すなわち、本発明の経口組成物はアミノ酸吸収促進用経口組成物、筋肉増強用経口組成物や筋力維持用経口組成物として有用である。
【0063】
３．官能試験
本発明の組成物を用いて呈味改善作用を確認した。
［被験物質］
被験物質として、試験１と同じもののほか、下記も使用した。
・エンドウ豆タンパク質：市販されている粉末状エンドウタンパク質を用いた。
・乳清由来タンパク質：市販されている粉末状ホエイタンパク質を用いた。
・カゼインタンパク質：市販されている粉末状乳由来のカゼインタンパク質を用いた。
・卵白由来タンパク質：市販されている卵白を酵素分解して得られる粉末状卵白由来タンパク質を用いた。
・デキストリン：味に影響を与えない物質である市販されているデキストリンを用いた。
本発明の組成物を用いて呈味改善作用を確認した。
［被験物質］
被験物質として、試験１と同じもののほか、下記も使用した。
・エンドウ豆タンパク質：市販されている粉末状エンドウタンパク質を用いた。
・乳清由来タンパク質：市販されている粉末状ホエイタンパク質を用いた。
・カゼインタンパク質：市販されている粉末状乳由来のカゼインタンパク質を用いた。
・卵白由来タンパク質：市販されている卵白を酵素分解して得られる粉末状卵白由来タンパク質を用いた。
・デキストリン：味に影響を与えない物質である市販されているデキストリンを用いた。
【0064】
表３に記載の配合比に従って粉末試料１０ｇを、水１００ｍｌと混合して各サンプルを得た。これらのサンプルについて、タンパク質特有の風味の有無を評価した。官能評価は日常的にプロテイン飲料を摂取しており、かつ、官能評価経験を有するパネラーにより行った。評価結果は表３に示した。
【0065】
つぎに、表４に記載の配合比に従って粉末試料１０ｇを、水１００ｍｌと混合して各サンプルを得た。これらのサンプルについて、各タンパク質単独の場合と比較して、タンパク質特有の風味について下記を基準にして評価した。官能評価は日常的にプロテイン飲料を摂取しており、かつ、官能評価経験を有するパネラーにより行った。評価結果は表４に示した。
＜タンパク質特有の臭い＞
◎：イオウのような臭みがなく、標準品よりかなりおいしく感じられる。
○：イオウのような臭みが少なく、標準品よりおいしく感じられる。
△：標準品と同程度である。
×：標準品以下である。
＜タンパク質特有の臭い＞
◎：イオウのような臭みがなく、標準品よりかなりおいしく感じられる。
○：イオウのような臭みが少なく、標準品よりおいしく感じられる。
△：標準品と同程度である。
×：標準品以下である。
【0066】
【表3】
【0067】
【表4】
【0068】
表３に示す通り、その由来によらずタンパク質には共通する特有の風味があることがわかる。そして、表４に示す通り、タンパク質から大豆由来タンパク質を選択し、本発明の植物素材と組み合わせることでタンパク質に共通する特有の風味を改善できるかを評価したところ、いずれもその呈味が改善されており、嗜好性に優れることがわかる。
【0069】
下記表５に記載の組成に従って、粉末剤を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とブラッククミンを配合することから、１日１回、１回あたり20ｇを水に懸濁して摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0070】
【表5】
【0071】
下記表６に記載の組成に従って、粉末剤を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とブラッククミンを配合することから、１日１回、１回あたり20ｇを水に懸濁して摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0072】
【表6】
【0073】
下記表７に記載の組成に従って、プロテインバーを製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とブラッククミンを配合することから、１日１回、１回あたり４０ｇを摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0074】
【表7】
【0075】
下記表８に記載の組成に従って、液体飲料を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とブラッククミンを配合することから、１日１回、１回あたり３５０ｍｌを摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0076】
【表8】
【0077】
下記表９に記載の組成に従って、顆粒剤を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とパフィアを配合することから、１日１回、１回あたり２０ｇを水に懸濁して摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0078】
【表9】
【0079】
下記表１０に記載の組成に従って、粉末剤を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とパフィアを配合することから、１日１回、１回あたり20ｇを水に懸濁して摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0080】
【表10】
【0081】
下記表１１に記載の組成に従って、プロテインバーを製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とパフィアを配合することから、１日１回、１回あたり４０ｇを摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0082】
【表11】
【0083】
下記表１２に記載の組成に従って、液体飲料を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とパフィアを配合することから、１日１回、１回あたり３５０ｍｌを摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0084】
【表12】
【0085】
下記表１３に記載の組成に従って、顆粒剤を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とエゾウコギを配合することから、１日１回、１回あたり２０ｇを水に懸濁して摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0086】
【表13】
【0087】
下記表１４に記載の組成に従って、粉末剤を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とエゾウコギを配合することから、１日１回、１回あたり２０ｇを水に懸濁して摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0088】
【表14】
【0089】
下記表１５に記載の組成に従って、プロテインバーを製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とエゾウコギを配合することから、１日１回、１回あたり４０ｇを摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0090】
【表15】
【0091】
下記表１６に記載の組成に従って、液体飲料を製造した。下記製造例にて得られた経口組成物は、タンパク質とエゾウコギを配合することから、１日１回、１回あたり３５０ｍｌを摂取することで、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上の本発明の優れた効果を享受でき、また嗜好性にも優れるものであった。
【0092】
【表16】
【産業上の利用可能性】
【0093】
本発明の組成物は、筋肉量維持及び/又は増加や筋力維持及び/又は向上に、優れた効果を有することから、産業上の有用性は高い。