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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024162526
(43)【公開日】2024-11-21
(54)【発明の名称】産生促進剤、化粧料組成物、及び化粧料の製造方法
(51)【国際特許分類】
A61K 8/68 20060101AFI20241114BHJP
A61K 8/02 20060101ALI20241114BHJP
A61Q 19/00 20060101ALI20241114BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241114BHJP
A61P 17/00 20060101ALI20241114BHJP
A61K 31/164 20060101ALI20241114BHJP
A61K 9/10 20060101ALI20241114BHJP
A61K 47/44 20170101ALI20241114BHJP
【ＦＩ】
A61K8/68
A61K8/02
A61Q19/00
A61P43/00 111
A61P17/00
A61K31/164
A61K9/10
A61K47/44
【審査請求】未請求
【請求項の数】14
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2023078104
(22)【出願日】2023-05-10
(71)【出願人】
【識別番号】000004628
【氏名又は名称】株式会社日本触媒
(74)【代理人】
【識別番号】100088155
【弁理士】
【氏名又は名称】長谷川 芳樹
(74)【代理人】
【識別番号】100128381
【弁理士】
【氏名又は名称】清水 義憲
(74)【代理人】
【識別番号】100162352
【弁理士】
【氏名又は名称】酒巻 順一郎
(74)【代理人】
【識別番号】100226023
【弁理士】
【氏名又は名称】杉浦 崇仁
(72)【発明者】
【氏名】堀川 洋
【テーマコード（参考）】
4C076
4C083
4C206
【Ｆターム（参考）】
4C076AA22
4C076BB31
4C076CC18
4C076EE23
4C076EE23F
4C076FF11
4C083AC431
4C083AC432
4C083AC641
4C083AC642
4C083CC01
4C083CC02
4C083CC03
4C083CC04
4C083DD23
4C083DD27
4C083DD39
4C083EE12
4C083EE13
4C206AA01
4C206AA02
4C206GA03
4C206GA04
4C206GA25
4C206MA01
4C206MA02
4C206MA03
4C206MA04
4C206MA05
4C206MA43
4C206MA83
4C206NA14
4C206ZA89
4C206ZC19
4C206ZC41
(57)【要約】
【課題】
特に皮膚に対して有用な機能を有する産生促進剤を提供すること。
【解決手段】
ヒアルロン酸合成酵素の産生促進剤であり、セラミド類の粒子を含む、水性分散体。
【選択図】なし
特に皮膚に対して有用な機能を有する産生促進剤を提供すること。
【解決手段】
ヒアルロン酸合成酵素の産生促進剤であり、セラミド類の粒子を含む、水性分散体。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
セラミド類の粒子を含む、ヒアルロン酸合成酵素の産生促進剤。
【請求項2】
表皮組織に適用し、前記表皮組織におけるヒアルロン酸合成酵素の産生を促進するための、請求項１に記載の産生促進剤。
【請求項3】
セラミド類の粒子を含む、ＭＫＩ６７の産生促進剤。
【請求項4】
表皮組織に適用し、前記表皮組織におけるＭＫＩ６７の産生を促進するための、請求項３に記載の産生促進剤。
【請求項5】
セラミド類の粒子を含む、繊維芽細胞増殖因子の産生促進剤。
【請求項6】
表皮組織に適用し、前記表皮組織における繊維芽細胞増殖因子の産生を促進するための、請求項５に記載の産生促進剤。
【請求項7】
前記繊維芽細胞増殖因子が、繊維芽細胞増殖因子１及び繊維芽細胞増殖因子２の少なくとも一方である、請求項５に記載の産生促進剤。
【請求項8】
前記粒子がヒト型セラミドを含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の産生促進剤。
【請求項9】
前記粒子がセラミド１、セラミド２及びセラミド３のうち１種のみ又は２種のみを含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の産生促進剤。
【請求項10】
前記粒子が２００ｎｍ以下の平均粒子径を有する、請求項１～７のいずれか一項に記載の産生促進剤。
【請求項11】
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤を更に含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の産生促進剤。
【請求項12】
水性分散体である請求項１～７のいずれか一項に記載の産生促進剤。
【請求項13】
請求項１～７のいずれか一項に記載の産生促進剤を含む、化粧料組成物。
【請求項14】
請求項１～７のいずれか一項に記載の産生促進剤を他の原料に配合する工程を含む、化粧料の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本開示は、産生促進剤、化粧料組成物、及び化粧料の製造方法に関する。
【背景技術】
【0002】
セラミド類は、ヒトの角質層にも含まれており、皮膚内部からの水分の蒸散を抑制するとともに、自身が水分を保持することで皮膚の柔軟性やなめらかな外観を保つ機能を確保するために重要な役割を果たすことが知られている。そのため、セラミド類を配合した各種配合物が知られている（特許文献１～３及び非特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0003】
【特許文献1】特開２０１４－１１４２３５号公報
【特許文献2】特開２０１２－４１５１８号公報
【特許文献3】特開２０２２－８０６９４号公報
【非特許文献】
【0004】
【非特許文献1】Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 2022, Vol. 86, No. 9,1240-1246
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
ここで、例えば、特許文献１、２等に記載されるように、セラミド類は、Ｉ型コラーゲンの産生促進作用を通じてしわ、たるみ等の皮膚の老化症状を予防又は改善することができることが知られているものの、本発明者が鋭意検討したところによれば、セラミド類の水性分散体にはＩ型コラーゲンの産生促進作用以外にも、有用な機能を有していることが判明した。また、非特許文献１では、水とＤＭＳＯと混合溶媒にセラミドを溶解した溶液の生理的な作用について評価が行われているものの、水性分散体に関する記載はない。
【0006】
本開示は、上述の事情に鑑みてなされたものであり、特に皮膚に対して有用な機能を有する産生促進剤を提供することを目的とする。また、本開示は、そのような産生促進剤を含む化粧料組成物、及び化粧料の製造方法を提供することも目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0007】
本開示は、以下の実施形態を含む。
［１］
セラミド類の粒子を含む、ヒアルロン酸合成酵素の産生促進剤。
［２］
表皮組織に適用し、前記表皮組織におけるヒアルロン酸合成酵素の産生を促進するための、［１］の産生促進剤。
［３］
セラミド類の粒子を含む、ＭＫＩ６７の産生促進剤。
［４］
表皮組織に適用し、前記表皮組織におけるＭＫＩ６７の産生を促進するための、［３］の産生促進剤。
［５］
セラミド類の粒子を含む、繊維芽細胞増殖因子の産生促進剤。
［６］
表皮組織に適用し、前記表皮組織における繊維芽細胞増殖因子の産生を促進するための、［５］の産生促進剤。
［７］
前記繊維芽細胞増殖因子が、繊維芽細胞増殖因子１及び繊維芽細胞増殖因子２の少なくとも一方である、［５］又は［６］の産生促進剤。
［８］
前記粒子がヒト型セラミドを含む、［１］～［７］のいずれか一つの産生促進剤。
［９］
前記粒子がセラミド１、セラミド２及びセラミド３のうち１種のみ又は２種のみを含む、［１］～［８］のいずれか一つの産生促進剤。
［１０］
前記粒子が２００ｎｍ以下の平均粒子径を有する、［１］～［９］のいずれか一つの産生促進剤。
［１１］
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤を更に含む、［１］～［１０］のいずれか一つの産生促進剤。
［１２］
水性分散体である［１］～［１１］のいずれか一つの産生促進剤。
［１３］
［１］～［１２］のいずれか一つの産生促進剤を含む、化粧料組成物。
［１４］
［１］～［１２］のいずれか一つの産生促進剤を他の原料に配合する工程を含む、化粧料の製造方法。
［１］
セラミド類の粒子を含む、ヒアルロン酸合成酵素の産生促進剤。
［２］
表皮組織に適用し、前記表皮組織におけるヒアルロン酸合成酵素の産生を促進するための、［１］の産生促進剤。
［３］
セラミド類の粒子を含む、ＭＫＩ６７の産生促進剤。
［４］
表皮組織に適用し、前記表皮組織におけるＭＫＩ６７の産生を促進するための、［３］の産生促進剤。
［５］
セラミド類の粒子を含む、繊維芽細胞増殖因子の産生促進剤。
［６］
表皮組織に適用し、前記表皮組織における繊維芽細胞増殖因子の産生を促進するための、［５］の産生促進剤。
［７］
前記繊維芽細胞増殖因子が、繊維芽細胞増殖因子１及び繊維芽細胞増殖因子２の少なくとも一方である、［５］又は［６］の産生促進剤。
［８］
前記粒子がヒト型セラミドを含む、［１］～［７］のいずれか一つの産生促進剤。
［９］
前記粒子がセラミド１、セラミド２及びセラミド３のうち１種のみ又は２種のみを含む、［１］～［８］のいずれか一つの産生促進剤。
［１０］
前記粒子が２００ｎｍ以下の平均粒子径を有する、［１］～［９］のいずれか一つの産生促進剤。
［１１］
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤を更に含む、［１］～［１０］のいずれか一つの産生促進剤。
［１２］
水性分散体である［１］～［１１］のいずれか一つの産生促進剤。
［１３］
［１］～［１２］のいずれか一つの産生促進剤を含む、化粧料組成物。
［１４］
［１］～［１２］のいずれか一つの産生促進剤を他の原料に配合する工程を含む、化粧料の製造方法。
【発明の効果】
【0008】
本開示によれば、特に皮膚に対して有用な機能を有する産生促進剤を提供することができる。また、本開示によれば、そのような産生促進剤を含む化粧料組成物、及び化粧料の製造方法を提供することもできる。
【発明を実施するための形態】
【0009】
本実施形態に係る産生促進剤は、セラミド類の粒子を含み、以下の（１）～（３）の少なくとも一つに使用できるものである。
（１）ヒアルロン酸合成酵素（ＨＡＳ）の産生促進剤
（２）ＭＫＩ６７の産生促進剤
（３）繊維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）の産生促進剤
（１）の産生促進剤は、ヒアルロン酸の合成が促進されるため、皮膚の保湿機能が向上される。（２）の産生促進剤は、ＭＫＩ６７が細胞増殖の指標であり、細胞増殖が活発に行われるため、皮膚のターンオーバーが促進される。（３）の産生促進剤は、繊維芽細胞の増殖を促進することで、しわ、たるみ等の予防又は改善をすることができる。産生促進剤は、対象の因子の産生促進を促すことに加え、産生促進を阻害する化合物の生成を抑制する可能性（産生促進を阻害するタンパク質の生成を抑制している可能性）も考えられる。
（１）ヒアルロン酸合成酵素（ＨＡＳ）の産生促進剤
（２）ＭＫＩ６７の産生促進剤
（３）繊維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）の産生促進剤
（１）の産生促進剤は、ヒアルロン酸の合成が促進されるため、皮膚の保湿機能が向上される。（２）の産生促進剤は、ＭＫＩ６７が細胞増殖の指標であり、細胞増殖が活発に行われるため、皮膚のターンオーバーが促進される。（３）の産生促進剤は、繊維芽細胞の増殖を促進することで、しわ、たるみ等の予防又は改善をすることができる。産生促進剤は、対象の因子の産生促進を促すことに加え、産生促進を阻害する化合物の生成を抑制する可能性（産生促進を阻害するタンパク質の生成を抑制している可能性）も考えられる。
【0010】
（１）～（３）の産生促進剤は、表皮組織に適用して使用してよい。すなわち、（１）～（３）の産生促進剤は、表皮組織に適用して表皮組織におけるヒアルロン酸合成酵素、ＭＫＩ６７、又は繊維芽細胞増殖因子の産生を促進するためのものであってよい。
【0011】
（１）の産生促進剤が対象とするヒアルロン酸合成酵素は、ヒアルロン酸合成酵素３（ＨＡＳ３）であってよい。
【0012】
（３）の産生促進剤が対象とする繊維芽細胞増殖因子は、繊維芽細胞増殖因子１（ＦＧＦ１）であってよく、繊維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２）であってよく、それらの両方であってもよい。
【0013】
＜セラミド類の粒子＞
本実施形態の産生促進剤は、セラミド類の粒子を含む。セラミド類として、セラミド、セラミドの誘導体、及びセラミドの類似体等が挙げられる。セラミドは、スフィンゴシンのアミノ基と脂肪酸のカルボキシル基とがアミド結合した構造を有する化合物である。セラミドの誘導体としては、糖修飾セラミド等が挙げられる。また、セラミド類自体としては、フィトスフィンゴシンのアミノ基と脂肪酸のカルボキシル基とがアミド結合した構造を有する化合物及びその誘導体が挙げられる。
本実施形態の産生促進剤は、セラミド類の粒子を含む。セラミド類として、セラミド、セラミドの誘導体、及びセラミドの類似体等が挙げられる。セラミドは、スフィンゴシンのアミノ基と脂肪酸のカルボキシル基とがアミド結合した構造を有する化合物である。セラミドの誘導体としては、糖修飾セラミド等が挙げられる。また、セラミド類自体としては、フィトスフィンゴシンのアミノ基と脂肪酸のカルボキシル基とがアミド結合した構造を有する化合物及びその誘導体が挙げられる。
【0014】
セラミド類は、天然由来のものであっても、合成品であってもよい。天然由来のセラミド類としては、動物由来のもの、小麦、米、米ぬか、大豆、黍、ホウレンソウ等の植物より抽出したもの、などが挙げられる。
【0015】
粒子に含まれるセラミド類は、ヒト型セラミドであってもよい。ヒト型セラミドは、ヒト皮膚の主に角層に含まれるセラミドであり、セラミド１～７が挙げられる。老化や光老化により角層中に含まれるセラミド量が低下することから、角層中にセラミド量を増加させることで保湿機能や皮膚バリア機能を向上させることができるため、粒子は、セラミド１～７の７種類のセラミドのうち１種のみを含んでいてもよく、２種以上を含んでいてもよく、セラミド１、セラミド２及びセラミド３のうち１種のみ又は２種のみを含んでいてよい。本実施形態の水性分散体は、特にヒト皮膚角層中で最も多く含まれているセラミド２を含むと好ましく、セラミド２のみを含んでいるとより好ましい。
【0016】
セラミド類の粒子は、セラミド類以外の成分を含んでいてもよい。セラミド類の粒子におけるセラミド類の含有量は、セラミド類の粒子の総量に対して７０質量％以上であると好ましく、８０質量％以上であるとより好ましい。また、セラミド類の粒子におけるセラミド類の含有量の上限は、特に制限されず、セラミド類の粒子の総量に対して実質的に１００質量％であってもよいが、９５質量％であってもよい。
【0017】
セラミド類の粒子は、保存安定性を高める観点から、２００ｎｍ以下の平均粒子径を有していてよく、１７０ｎｍ以下であってよく、１６０ｎｍ以下であってよい。上記セラミド類の粒子の平均粒子径の下限は、特に制限はないが、保存安定性の観点から、セラミド類の粒子の平均粒子径は、１ｎｍ以上であってよく、５ｎｍ以上であってよい。粒子の平均粒子径は、動的光散乱法により測定することができ、具体的な装置としては、ＺｅｔａｓｉｚｅｒＮａｎｏ（Ｍａｌｖｅｒｎ社製）等を挙げることができる。粒子の平均粒子径は、個数基準での累積粒度分布における累積５０％となる粒子径（ｄ５０）であってよい。また、同様に動的光散乱法により、粒子のセラミド類の多分散指数も測定することができる。
【0018】
本実施形態のセラミド類の粒子は、水性分散体に含まれていてよい。すなわち、本実施形態の産生促進剤は、セラミドの粒子と、連続相である水性媒体を含む。
【0019】
本実施形態の産生促進剤は、水性分散体を４℃で１年間保管した場合、保管後のセラミド類の粒子の平均粒子径の変化率が２５％以内であり、多分散指数の変化率が３０％以内であるとの条件、及び当該化粧料用水性分散体における炭素数１０～３０の脂肪酸又はその塩の含有量が１質量％以下であるとの条件の少なくとも一方を満たしてもよい。
このような水性分散体は、化粧料に配合した際に、化粧料に配合される各種添加剤との相性も良く、様々な化粧料処方において凝集物の発生を抑制することができ、広いｐＨ、温度等の範囲でも、凝集物の発生が抑制できる。そのため、本実施形態の化粧料用水性分散体は、保存安定性に優れ、配合性、水性分散体の外観等にも優れる。また、本実施形態の水性分散体は、皮膚透過性に優れる傾向にある。
このような水性分散体は、化粧料に配合した際に、化粧料に配合される各種添加剤との相性も良く、様々な化粧料処方において凝集物の発生を抑制することができ、広いｐＨ、温度等の範囲でも、凝集物の発生が抑制できる。そのため、本実施形態の化粧料用水性分散体は、保存安定性に優れ、配合性、水性分散体の外観等にも優れる。また、本実施形態の水性分散体は、皮膚透過性に優れる傾向にある。
【0020】
本実施形態の産生促進剤は、上記のとおり、化粧料に配合される成分として優れており、化粧料用水性分散体として使用することができる。また、後述のとおり、本実施形態の水性分散体は、Ｉ型プロコラーゲンの産生を促進する作用があるため、Ｉ型プロコラーゲン産生促進剤としても使用できる。
【0021】
本実施形態の産生促進剤は、水性分散体を４℃で１年間保管した場合に、保管後の上記セラミド類の粒子の平均粒子径の変化率は２５％以内であってよく、保管後の多分散指数の変化率が３０％以内であってよい。保管条件としては、更に暗所で振動等がない場所で保管してもよい。保管後のセラミド類の粒子の平均粒子径の変化率は、保管終了時点での平均粒子径と保管開始時点の平均粒子径との差の絶対値を、保管開始時点の平均粒子径で除したものである。
【0022】
同様に保管後のセラミド類の粒子の多分散指数の変化率は、保管終了時点での多分散指数と保管開始時点での多分散指数との差の絶対値を、保管開始時点での多分散指数で除したものである。
【0023】
保管後のセラミド類の粒子の平均粒子径及び多分散指数の変化率は、いずれも百分率で表す。
【0024】
保管開始時点は、水性分散体の製造直後であってもよく、製造後の任意の時点であってもよい。保管終了時点は、保管開始から１年時点であり、１年２か月時点であってもよく、１年５か月時点であってもよい。
【0025】
保管は、水性分散体の水分の蒸散を防ぐことができる環境下で行われ、例えば、水性分散体を密閉した容器内に保管することが好ましい。
【0026】
４℃で一年間保管した後のセラミド類の粒子の平均粒子径の変化率は、２２％であると好ましい。４℃で一年間保管した後のセラミド類の粒子の多分散度の変化率は、２８％であると好ましい。
【0027】
水性分散体におけるセラミド類の粒子の多分散指数は、０．５以下であってよく、０．４以下であってもよい。
【0028】
なお、「以内」とは、０から所定の上限までの範囲を指すものとする。保管後の平均粒子径の変化率は、実質的に０％であってもよいが、０％より大きくてもよく、０．１％以上であってもよい。また、保管後の多分散指数の変化率は、実質的に０％であってもよいが、０％より大きくてもよく、０．１％以上であってもよい。
【0029】
また、上記セラミド類の粒子の個数基準での累積粒度分布における累積９０％となる粒子径（ｄ９０）は、４００ｎｍ以下であると好ましく、３５０ｎｍ以下であるとより好ましく、３００ｎｍ以下であると更に好ましい。
【0030】
また、上記セラミド類の粒子の多分散指数は、製造コストの低減の観点から、０．１以上であると好ましく、０．１５以上であるとより好ましく、０．２以上であると更に好ましい。上記セラミド類の粒子の多分散指数は、化粧品への配合性や外観向上の観点から、０．５以下であってよく、０．４以下であってよい。セラミド類の粒子の多分散指数は、上述の動的光散乱法により測定することができる。
【0031】
本実施形態のセラミド類の粒子は、脂質を適宜配合してもよい。
【0032】
脂質としては、例えば、リン脂質、炭素数１０～３０の脂肪酸又はその塩が挙げられる。
【0033】
リン脂質としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、大豆レシチン、卵黄レシチン等の天然リン脂質、天然リン脂質中の不飽和炭素鎖を水素により飽和とした水素添加大豆リン脂質、水素添加卵黄リン脂質等の水素添加リン脂質、ジオレイルホスファチジルコリン等の合成リン脂質等が挙げられる。
【0034】
炭素数１０～３０の脂肪酸又はその塩としては、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸、ウンデシレン酸、トール酸、イソステアリン酸、アラキジン酸、ベヘン酸、リノール酸、αリノレン酸、γリノレン酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、エルカ酸等、及びこれらの塩が挙げられる。なお、本実施形態の水性分散体における炭素数１０～３０の脂肪酸又はその塩の含有量は、１質量％以下であってもよく、０．５質量％以下であってもよく、０．１質量％であってもよく、実質的に０質量％であってもよい（つまり、水性分散体は、炭素数１０～３０の脂肪酸又はその塩を含まなくてもよい）。
【0035】
脂質は１種類又は２種類以上含まれていても良い。
【0036】
セラミド類の粒子は、界面活性剤を含有していてもよい。界面活性剤としては、特に限定されず、一般的に化粧品で使用されるようなアニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン性界面活性剤が使用できる。
アニオン性界面活性剤としては、アルキル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキル硫酸塩、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂肪酸アミドモノエタノールアミド（ＭＥＡ）硫酸塩、アルキルメチルタウリン塩、オレフィンスルホン酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルリン酸エステル塩、脂肪酸塩、アシルアミノ酸塩、アルキル乳酸塩、アルキルイセチオン酸塩等が挙げられる。
カチオン性界面活性剤としては、塩化ラウリルトリメチルアンモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベヘニルトリメチルアンモニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、臭化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ジポリオキシエチレンオレイルメチルアンモニウム、塩化ポリオキシエチレンベヘニルリルメチレンアンモニウム、メチル硫酸ベヘニルトリメチルアンモニウム、塩化ステアリルヒドロキシプロピルトリメチルアンモニウム、塩化ジココイルジメチルアンモニウム、塩化ジアルキル（Ｃ１２－１８）ジメチルアンモニウム、塩化ジセチルジメチルアンモニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム、エチル硫酸ラノリン脂肪酸アミノプロピルジメチルアンモニウム、メチル硫酸ジココイルエチルヒドロキシエチルアンモニウム、ヤシ油アルキルプロピレングリコール（ＰＧ）ジモニウムクロリドリン酸、リノール酸アミドプロピルプロピレングリコール（ＰＧ）ジモニウムクロリドリン酸、ステアラミドプロピルメチルアミン、ジメチルステアラミン、ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）ヤシ油アルキルアミン等が挙げられる。
両性界面活性剤としては、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン等のアルキルベタイン型両性界面活性剤、ラウリン酸アミドプロピルベタイン等のアミドベタイン型両性界面活性剤、ヒドロキシアルキル（Ｃ１２－１４）ヒドロキシエチルサルコシン等のカルボイシベタイン型の両性界面活性剤、ラウリン酸アミドプロピルヒドロキシスルホベタイン等のアミドスルホベタイン型の両性界面活性剤、ココアンホジ酢酸ナトリウム等のイミダゾリニウムベタイン型の両性界面活性剤、ラウラミノプロピオン酸ナトリウム等のプロピオン酸型の両性界面活性剤、ラウリルジメチルアミンオキシド等のアミンオキシド型の両性界面活性剤、Ｎ－［３－アルキル（１２，１４）オキシ－２－ヒドロキシプロピル］－Ｌ－アルギニン塩酸塩等のアミノ酸型の界面活性剤等が挙げられる。
非イオン性界面活性剤としては、モノグリセリン脂肪酸エステル型の非イオン性界面活性剤、ポリグリセリン脂肪酸エステル型の非イオン性界面活性剤、ソルビタン及びポリオキシエチレンソルビタン型の非イオン性界面活性剤、テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビット型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤、ピロリドンカルボン酸（ＰＣＡ）イソステアリン酸ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン脂肪酸型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン脂肪酸グリセリン型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルエーテル型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンアルキルエーテル型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロックポリマー型の非イオン性界面活性剤、アルカノールアミド型の非イオン性界面活性剤、ショ糖エステル型の非イオン性界面活性剤、アルキルグリコシド型の非イオン性界面活性剤、ジステアリン酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）型の非イオン性界面活性剤等が挙げられる。本実施形態の水性分散体は、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤を含むと好ましい。当該ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤は水添されていてもよい。また、本実施形態の水性分散体は、ポリグリセリン脂肪酸エステル型の非イオン性界面活性剤を含まなくてよい。なお、水性分散体は、水以外の成分として、セラミド類及びポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤のみを含むものであってもよい。
これらは、１種又は２種以上を用いてもよい。水性分散体中の界面活性剤の量は、皮膚への刺激性及び配合性等の観点から、水性分散体の総量に対して０．０１～８０質量％であってよく、０．１～５０質量％であってよく、０．５～４０質量％であってよく、３～３０質量％であってよく、５～３５質量％であってよい。
アニオン性界面活性剤としては、アルキル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキル硫酸塩、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）脂肪酸アミドモノエタノールアミド（ＭＥＡ）硫酸塩、アルキルメチルタウリン塩、オレフィンスルホン酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルリン酸エステル塩、脂肪酸塩、アシルアミノ酸塩、アルキル乳酸塩、アルキルイセチオン酸塩等が挙げられる。
カチオン性界面活性剤としては、塩化ラウリルトリメチルアンモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベヘニルトリメチルアンモニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、臭化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ジポリオキシエチレンオレイルメチルアンモニウム、塩化ポリオキシエチレンベヘニルリルメチレンアンモニウム、メチル硫酸ベヘニルトリメチルアンモニウム、塩化ステアリルヒドロキシプロピルトリメチルアンモニウム、塩化ジココイルジメチルアンモニウム、塩化ジアルキル（Ｃ１２－１８）ジメチルアンモニウム、塩化ジセチルジメチルアンモニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム、エチル硫酸ラノリン脂肪酸アミノプロピルジメチルアンモニウム、メチル硫酸ジココイルエチルヒドロキシエチルアンモニウム、ヤシ油アルキルプロピレングリコール（ＰＧ）ジモニウムクロリドリン酸、リノール酸アミドプロピルプロピレングリコール（ＰＧ）ジモニウムクロリドリン酸、ステアラミドプロピルメチルアミン、ジメチルステアラミン、ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）ヤシ油アルキルアミン等が挙げられる。
両性界面活性剤としては、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン等のアルキルベタイン型両性界面活性剤、ラウリン酸アミドプロピルベタイン等のアミドベタイン型両性界面活性剤、ヒドロキシアルキル（Ｃ１２－１４）ヒドロキシエチルサルコシン等のカルボイシベタイン型の両性界面活性剤、ラウリン酸アミドプロピルヒドロキシスルホベタイン等のアミドスルホベタイン型の両性界面活性剤、ココアンホジ酢酸ナトリウム等のイミダゾリニウムベタイン型の両性界面活性剤、ラウラミノプロピオン酸ナトリウム等のプロピオン酸型の両性界面活性剤、ラウリルジメチルアミンオキシド等のアミンオキシド型の両性界面活性剤、Ｎ－［３－アルキル（１２，１４）オキシ－２－ヒドロキシプロピル］－Ｌ－アルギニン塩酸塩等のアミノ酸型の界面活性剤等が挙げられる。
非イオン性界面活性剤としては、モノグリセリン脂肪酸エステル型の非イオン性界面活性剤、ポリグリセリン脂肪酸エステル型の非イオン性界面活性剤、ソルビタン及びポリオキシエチレンソルビタン型の非イオン性界面活性剤、テトラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビット型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤、ピロリドンカルボン酸（ＰＣＡ）イソステアリン酸ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン脂肪酸型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン脂肪酸グリセリン型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルエーテル型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンアルキルエーテル型の非イオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンブロックポリマー型の非イオン性界面活性剤、アルカノールアミド型の非イオン性界面活性剤、ショ糖エステル型の非イオン性界面活性剤、アルキルグリコシド型の非イオン性界面活性剤、ジステアリン酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）型の非イオン性界面活性剤等が挙げられる。本実施形態の水性分散体は、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤を含むと好ましい。当該ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤は水添されていてもよい。また、本実施形態の水性分散体は、ポリグリセリン脂肪酸エステル型の非イオン性界面活性剤を含まなくてよい。なお、水性分散体は、水以外の成分として、セラミド類及びポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤のみを含むものであってもよい。
これらは、１種又は２種以上を用いてもよい。水性分散体中の界面活性剤の量は、皮膚への刺激性及び配合性等の観点から、水性分散体の総量に対して０．０１～８０質量％であってよく、０．１～５０質量％であってよく、０．５～４０質量％であってよく、３～３０質量％であってよく、５～３５質量％であってよい。
【0037】
セラミド類の粒子がポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤を含む場合、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤の含有量は、０．０１～８０質量％であってよく、０．１～５０質量％であってよく、０．５～４０質量％であってよく、３～３０質量％であってよく、５～３５質量％であってよい。ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤の含有量は、水性分散体の総量に対するポリオキシエチレン硬化ヒマシ油型の非イオン性界面活性剤の配合量であってもよい。
【0038】
セラミド類の粒子を含む水性分散体におけるセラミド類の含有量は、配合性等の観点から、水性分散体の総量に対して０．０１～５０質量％であると好ましく、０．０５～３０質量％であるとより好ましく、０．１～１０質量％であると更に好ましい。水性分散体におけるセラミド類の含有量は、５質量％以下であってよく、３質量％以下であってよく、０．００１～２質量％であってよく、０．００５～１質量％であってよく、０．０１～０．５質量％であってもよい。
【0039】
上記セラミド類の粒子におけるセラミド２の含有量の下限は、特に制限されないが、皮膚の保湿機能や皮膚バリア性を向上させる観点から、セラミド類の粒子の総量に対して、７０質量％であると好ましく、８０質量％であるとより好ましい。上記セラミド類の粒子におけるセラミド２の含有量の上限は、特に制限されないが、セラミド類の粒子がセラミド２からなるものであってもよく、セラミド類の粒子が、９９．５質量％以下のセラミドを含んでいてもよい。
【0040】
水性分散体は、上記セラミド類の粒子と共に、連続相である水性媒体を含む。水性媒体としては、水自体であってもよいが、水と共に有機溶媒、添加剤等の他の成分等を含んでいてもよい。添加剤としては、酸化防止剤や防腐剤等を含んでいてもよい。酸化防止剤としては、例えばアスコルビン酸等が挙げられる。防腐剤としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル、１，２ヘキサンジオール、クエン酸、フェノキシエタノール等が挙げられる。
【0041】
本実施形態のセラミド類の粒子を含む水性分散体は、マイクロ流体デバイス等により、セラミド類を含む原料を水性媒体に分散させることにより製造することができる。セラミド類を含む原料としては、セラミド類自体であってもよいが、天然由来のセラミド類としては、牛脳より抽出したもの、小麦、米、米ぬか、大豆、黍、ホウレンソウ等の植物より抽出したものなどの天然由来の抽出物であってもよい。例えば、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．１１７，２８６～２９１（２０１７）記載の方法や、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．６３，１２８～１３３（２００６）記載のマイクロ流体デバイスを用いた水性分散体の調製方法が利用できる。
【0042】
本実施形態の水性分散体は所望に応じて、セラミド類の粒子以外の粒子（「その他の粒子」という）を適宜含んでいても良い。その他の粒子は１種または２種以上含んでいても良く、そのような粒子としては、例えば平均粒子径が５０ｎｍ以下のビタミンＥの粒子、平均粒子径が２００ｎｍ以下の金粒子、及び平均粒子径が２００ｎｍ以下のクルクミノイドの粒子が挙げられる。上記ビタミンＥの粒子はビタミンＥ以外の成分を含んでいてもよく、ビタミンＥの粒子の総量に対してビタミンＥを７０質量％以上含有することが好ましい。上記金の粒子は金以外の成分を含んでいてもよく、金の粒子の総量に対して金を７０質量％以上含有することが好ましい。上記クルクミノイドの粒子はクルクミノイド以外の成分を含んでいてもよく、クルクミノイドの粒子の総量に対してクルクミノイドを７０質量％以上含有することが好ましい。
【0043】
＜化粧料組成物＞
本実施形態の産生促進剤は、通常化粧料に配合される成分（化粧料用添加剤）を配合することにより、化粧料組成物とすることができる。化粧料組成物における、上記セラミド類の粒子の含有量は、化粧料組成物におけるセラミド類の粒子の保存安定性をより高める観点から、好ましくは０．００１質量％以上、より好ましくは０．０１質量％以上、さらに好ましくは０．０５質量％以上である。また、化粧料としての性能を確保する観点から、好ましくは５０質量％以下である。各種成分としては、以下に説明するものが挙げられる。
本実施形態の産生促進剤は、通常化粧料に配合される成分（化粧料用添加剤）を配合することにより、化粧料組成物とすることができる。化粧料組成物における、上記セラミド類の粒子の含有量は、化粧料組成物におけるセラミド類の粒子の保存安定性をより高める観点から、好ましくは０．００１質量％以上、より好ましくは０．０１質量％以上、さらに好ましくは０．０５質量％以上である。また、化粧料としての性能を確保する観点から、好ましくは５０質量％以下である。各種成分としては、以下に説明するものが挙げられる。
【0044】
上記化粧料用添加剤としては、例えば、油性成分、粉体成分、油ゲル化剤、水性成分、水溶性高分子、紫外線吸収剤、酸化防止剤、美容成分、防腐剤などが挙げられ、これらの添加剤は、各種の効果を付与するために適宜配合することができる。
【0045】
油性成分としては、動物油、植物油、合成油等の起源及び、固形、半固形油、液体油、揮発性油等の性状を問わず、炭化水素類、油脂類、ロウ類、エステル油類、硬化油類、脂肪酸類、高級アルコール類、シリコーン油類、ラノリン誘導体類、油性ゲル化剤類等が挙げられる。具体的には、パラフィンワックス、セレシンワックス、マイクロクリスタリンワックス、モンタンワックス、フィッシャートロプシュワックス、流動パラフィン、スクワラン、ワセリン等の炭化水素類、モクロウ、ミンク油、オリーブ油、アボカド油、ヒマシ油、マカデミアンナッツ油等の油脂類、ミツロウ、カルナウバワックス、キャンデリラワックス、ゲイロウ等のロウ類、ロジン酸ペンタエリスリットエステル、ホホバ油、トリ２－エチルヘキサン酸グリセリル、イソノナン酸イソトリデシル、２－エチルヘキサン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、トリオクタン酸グリセリル、ジイソステアリン酸ポリグリセリル、トリイソステアリン酸グリセリル、トリイソステアリン酸ジグリセリル、トリイソステアリン酸ポリグリセリル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジエチルヘキサン酸ネオペンチルグリコール等のエステル類、オレイン酸、イソステアリン酸、ステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ベヘニン酸等の脂肪酸類、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ラウリルアルコール、ベヘニルアルコール、オレイルアルコール等の高級アルコール類、メチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、トリメチルシロキケイ酸、架橋型ポリエーテル変性メチルポリシロキサン、メタクリル変性メチルポリシロキサン、オレイル変性メチルポリシロキサン、ポリビニルピロリドン変性メチルポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン等のシリコーン油類、ラノリン、酢酸ラノリン、ラノリン脂肪酸イソプロピル、ラノリンアルコール等のラノリン誘導体類、イソステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸カルシウム、１２－ヒドロキシステアリン酸等の油性ゲル化剤類等が挙げられ、これらの１種又は２種以上用いることができる。これらの中でもトリ２－エチルヘキサン酸グリセリル、イソノナン酸イソノニル、ジエチルヘキサン酸ネオペンチルグリコール等の低分子量エステル油が、伸び広がりや付着性の観点から好ましい。
【0046】
粉体成分としては、球状、板状、針状等の形状、煙霧状、微粒子、顔料級等の粒子径、多孔質、無孔質等の粒子構造等により特に限定されず、無機粉体類、光輝性粉体類、有機粉体類、色素粉体類、金属粉体類、複合粉体類等が挙げられる。具体的には、酸化チタン、酸化亜鉛、酸化セリウム、硫酸バリウム等の白色無機顔料、酸化鉄、カーボンブラック、酸化クロム、水酸化クロム、紺青、群青等の有色無機顔料、タルク、白雲母、金雲母、紅雲母、黒雲母、合成雲母、絹雲母（セリサイト）、合成セリサイト、カオリン、炭化珪素、ベントナイト、スメクタイト、酸化アルミニウム、酸化マグネシウム、酸化ジルコニウム、酸化アンチモン、珪ソウ土、ケイ酸アルミニウム、メタケイ酸アルミニウムマグネシウム、ケイ酸カルシウム、ケイ酸バリウム、ケイ酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、ヒドロキシアパタイト、窒化ホウ素、シリカ等の白色体質粉体、二酸化チタン被覆雲母、二酸化チタン被覆オキシ塩化ビスマス、酸化鉄被覆雲母チタン、酸化鉄雲母、紺青処理雲母チタン、カルミン処理雲母チタン、オキシ塩化ビスマス、魚鱗箔等の光輝性粉体、ポリアミド系樹脂、ポリエチレン系樹脂、ポリアクリル系樹脂、ポリエステル系樹脂、フッ素系樹脂、セルロース系樹脂、ポリスチレン系樹脂、スチレン－アクリル共重合体等のコポリマー樹脂、ポリプロピレン系樹脂、シリコーン樹脂、ウレタン樹脂等の有機高分子樹脂粉体、ステアリン酸亜鉛、Ｎ－アシルリジン等の有機低分子性粉体、澱粉、シルク粉末、セルロース粉末等の天然有機粉体、赤色２０１号、赤色２０２号、赤色２０５号、赤色２２６号、赤色２２８号、橙色２０３号、橙色２０４号、青色４０４号、黄色４０１号等の有機顔料粉体、赤色３号、赤色１０４号、赤色１０６号、橙色２０５号、黄色４号、黄色５号、緑色３号、青色１号等のジルコニウム、バリウム又はアルミニウムレーキ等の有機顔料粉体あるいは更にアルミニウム粉、金粉、銀粉等の金属粉体、微粒子酸化チタン被覆雲母チタン、微粒子酸化亜鉛被覆雲母チタン、硫酸バリウム被覆雲母チタン、酸化チタン二酸化珪素、酸化亜鉛二酸化珪素等の複合粉体、ポリエチレンテレフタレート・アルミニウム・エポキシ積層末、ポリエチレンテレフタレート・ポリオレフィン積層フィルム末、ポリエチレンテレフタレート・ポリメチルメタクリレート積層フィルム末のラメ剤、タール色素、天然色素等が挙げられ、これら粉体はその１種又は２種以上を用いることができ、更に複合化したものを用いても良い。尚、これら粉体成分は、フッ素系化合物、シリコーン系化合物、金属石鹸、レシチン、水素添加レシチン、コラーゲン、炭化水素、高級脂肪酸、高級アルコール、エステル、ワックスクワランス、ロウ、界面活性剤等の１種又は２種以上を用いて表面処理を施してあっても良い。
【0047】
油ゲル化剤としては、デキストリン脂肪酸エステル、蔗糖脂肪酸エステル、デンプン脂肪酸エステル、ヒドロキシステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、疎水性煙霧状シリカ、有機変性ベントナイト等が挙げられ、これらは１種又は２種以上を用いてもよい。
【0048】
水性成分としては、水及び水に可溶な成分であれば何れでもよく、水の他に、例えば、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリエチレングリコール等のグリコール類、グリセリン、ジグリセリン、ポリグリセリン等のグリセロール類、アロエベラ、ウイッチヘーゼル、ハマメリス、キュウリ、レモン、ラベンダー、ローズ等の植物抽出液等が挙げられる。
【0049】
水溶性高分子としては、グアーガム、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸、アラビアガム、アルギン酸ナトリウム、カラギーナン、ムコ多糖、コラーゲン、エラスチン、ケラチン等の天然系のもの、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース等の半合成系のもの、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸ナトリウム等の合成系のものを挙げることができる。
【0050】
紫外線吸収剤としては、例えばベンゾフェノン系、ＰＡＢＡ系、ケイ皮酸系、サリチル酸系、４－ｔｅｒｔ－ブチル－４’－メトキシジベンゾイルメタン、オキシベンゾン等が挙げられる。
【0051】
酸化防止剤としては、例えば、トコフェロール等のビタミンＥ、アスコルビン酸等が挙げられる。
【0052】
美容成分としては、例えばビタミン類、タンパク質、消炎剤、生薬等が挙げられる。
【0053】
防腐剤としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル、フェノキシエタノール等が挙げられる。
【0054】
また、上記以外の各種成分としては、例えば、保湿剤、皮膜形成剤、褪色防止剤、消泡剤、香料、パーフルオロポリエーテル、パーフルオロデカリン、パーフルオロオクタンなどのフッ素系油剤；多価アルコール、糖類、アミノ酸、各種ポリマー、エタノール、増粘剤、ｐＨ調整剤、血行促進剤、冷感剤、殺菌剤、皮膚賦活剤なども、本開示の効果を損なわない範囲内で配合可能である。
【0055】
また本実施形態の化粧料組成物は、その剤形や製品形態が特に限定されるものではなく、油中水型、水中油型、水分散型、プレス状、固形剤、パウダーなどの剤形とすることができ、また製品形態（化粧料）としては、洗顔フォーム・クリーム、クレンジング、マッサージクリーム、パック、化粧水、乳液、クリーム、美容液、化粧下地、日焼け止めなどの皮膚用化粧料、ファンデーション、水白粉、アイシャドウ、アイライナー、マスカラ、アイブロウ、コンシーラー、口紅、リップクリーム等の仕上げ用化粧料、ヘアミスト、シャンプー、リンス、トリートメント、ヘアトニック、ヘアクリーム、ポマード、チック、液体整髪料、セットローション、ヘアスプレー、染毛料等の頭髪用化粧料、パウダースプレー、ロールオン等の制汗剤などを例示することができる。この中でも、ファンデーション、フェースパウダーなど固形状製剤等が本開示の効果が発揮されやすい化粧料である。
【0056】
上記化粧料組成物、又は化粧料を製造する方法としては、特に限定されず、本実施形態水性分散体を、化粧料を作製するための他の原料（化粧料用添加剤等）に配合する工程を含むものであればよい。
【実施例0057】
［実施例１］
＜セラミド類の粒子を含有する水性分散体の調製＞
公知のマイクロ流体デバイスを用いた水性分散体の調製方法により、セラミド２（商品名：セラミドＴＩＣ－００１、高砂香料工業社製）を、界面活性剤を含む水溶液に分散させて、セラミド２の粒子を含む透明な水性分散体を得た。得られた水性分散体について動的光散乱測定装置（商品名：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ、Ｍａｌｖｅｒｎ社製）を用いてセラミド２の粒子の平均粒子径（個数基準）を測定したところ、１５３．８ｎｍであり、多分散指数は０．３８３であった。なお、動的光散乱法による測定は、分散媒体の屈折率＝１．３３、試料の屈折率＝１．４６、試料の粘度（ｃＰ）＝０．８９の実験条件で行った。なお、上記水性分散体の各成分の配合量は、仕込み量で、０．１３質量％のセラミド２、１８質量％のＰＥＧ－８０水添ヒマシ油（非イオン性界面活性剤）、及び残部の水である。
＜セラミド類の粒子を含有する水性分散体の調製＞
公知のマイクロ流体デバイスを用いた水性分散体の調製方法により、セラミド２（商品名：セラミドＴＩＣ－００１、高砂香料工業社製）を、界面活性剤を含む水溶液に分散させて、セラミド２の粒子を含む透明な水性分散体を得た。得られた水性分散体について動的光散乱測定装置（商品名：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ、Ｍａｌｖｅｒｎ社製）を用いてセラミド２の粒子の平均粒子径（個数基準）を測定したところ、１５３．８ｎｍであり、多分散指数は０．３８３であった。なお、動的光散乱法による測定は、分散媒体の屈折率＝１．３３、試料の屈折率＝１．４６、試料の粘度（ｃＰ）＝０．８９の実験条件で行った。なお、上記水性分散体の各成分の配合量は、仕込み量で、０．１３質量％のセラミド２、１８質量％のＰＥＧ－８０水添ヒマシ油（非イオン性界面活性剤）、及び残部の水である。
【0058】
＜三次元皮膚モデルを用いた機能評価＞
ヒト皮膚全層モデルであるＴ－ｓｋｉｎ（ニコダームリサーチ社製）を用いてセラミド類水性分散体の生理機能評価を実施した。６－ｗｅｌｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｐｌａｔｅ（ＧＲＥＩＮＥＲ ＢＩＯ－ＯＮＥ社製）にＴ－ｓｋｉｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｕｍ（ニコダームリサーチ社製）を２ｍＬ／ｗｅｌｌで添加した。Ｔ－ｓｋｉｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｕｍを添加した６－ｗｅｌｌ Ｍｕｌｔｉｗｅｌｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｐｌａｔｅにニコダームリサーチ社から納品されたＴ－ｓｋｉｎを移し、３７℃、５体積％ＣＯ２の条件下で２４時間培養した。２４時間培養後、Ｔ－ｓｋｉｎの表皮上に、１．１３ｍＬ／ｗｅｌｌ（Ｔ－ｓｋｉｎの表面積１ｃｍ２に対して、１ｍＬ）となるように、リン酸緩衝液（Ｄ－ＰＢＳ（－）、富士フイルム和光純薬株式会社製）、並びに上述のセラミド類水性分散体をそれぞれ添加し、３７℃、５体積％ＣＯ２の条件下で８時間培養した。培養終了後Ｔ－ｓｋｉｎを回収し、ピンセットを用いてＴ－ｓｋｉｎの表皮、真皮、フィルム層をそれぞれ剥離した。表皮部分のみをＲＮＡｌａｔｅｒ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社）を用いてＲＮＡの安定化処理を行った後、ｍｉＲＮｅａｓｙｍｉｎｉ ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ社）を用いてＱｉａｇｅｎ社推奨の方法でｔｏｔａｌ ＲＮＡ を抽出した。超微量分光光度計ＮａｎｏＤｒｏｐ Ｏｎｅ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社）及びバイオアナライザ（Ａｇｉｌｅｎｔ社）を用いて、ＲＮＡ濃度、純度（２６０／２８０、２６０／２３０）、ＲＮＡの分解度の指標であるＲＩＮ値を測定し、２６０／２８０及び２６０／２８０が１．７以上、ＲＩＮ値が７以上であることを確認後、各ｔｏｔａｌ ＲＮＡからＲｅｖｅｒＴｒａ Ａｃｅ（登録商標）ｑＰＣＲ ＲＴ ＭａｓｔｅｒＭｉｘ（ＴＯＹＯＢＯ）を使用してｃＤＮＡ合成を行った。ｃＤＮＡ合成の条件はＴＯＹＯＢＯ開示の推奨プロトコルに従って実施した。ＱＩＡｃｕｉｔｙ Ｏｎｅ（Ｑｉａｇｅｎ社）及びＱＩＡｃｕｉｔｙ ｐｒｏｂｅ ＰＣＲ ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ社）を用いてＱｉａｇｅｎ社推奨のプロトコルに従って定量ＰＣＲを実施した。なお定量ＰＣＲでは以下のＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社から購入したＴａｇｍａｎ ｐｒｏｂｅを使用し、ｄｕｐｌｉｃａｔｅで実験を実施した。
・ＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド－３－リン酸デヒドロゲナーゼ）（Ｈｓ９９９９９９０５ ｍ１）
・ＨＡＳ３（Ｈｓ００１９３４３６ ｍ１）
・ＭＫＩ６７（Ｈｓ０４２６０３９６ ｇ１）
・ＦＧＦ１（Ｈｓ０１０９２７３８ ｍ１）
・ＦＧＦ２（Ｈｓ００２６６６４５ ｍ１）
ＧＡＰＤＨを内在性コントロールとして使用して以下式に従って各遺伝子のコピー数の補正を行った後、リン酸緩衝液添加区を１とした場合のセラミド類水性分散体の各遺伝子発現量の相対値を算出した。結果を表１に示す。
ヒト皮膚全層モデルであるＴ－ｓｋｉｎ（ニコダームリサーチ社製）を用いてセラミド類水性分散体の生理機能評価を実施した。６－ｗｅｌｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｐｌａｔｅ（ＧＲＥＩＮＥＲ ＢＩＯ－ＯＮＥ社製）にＴ－ｓｋｉｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｕｍ（ニコダームリサーチ社製）を２ｍＬ／ｗｅｌｌで添加した。Ｔ－ｓｋｉｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｕｍを添加した６－ｗｅｌｌ Ｍｕｌｔｉｗｅｌｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｐｌａｔｅにニコダームリサーチ社から納品されたＴ－ｓｋｉｎを移し、３７℃、５体積％ＣＯ２の条件下で２４時間培養した。２４時間培養後、Ｔ－ｓｋｉｎの表皮上に、１．１３ｍＬ／ｗｅｌｌ（Ｔ－ｓｋｉｎの表面積１ｃｍ２に対して、１ｍＬ）となるように、リン酸緩衝液（Ｄ－ＰＢＳ（－）、富士フイルム和光純薬株式会社製）、並びに上述のセラミド類水性分散体をそれぞれ添加し、３７℃、５体積％ＣＯ２の条件下で８時間培養した。培養終了後Ｔ－ｓｋｉｎを回収し、ピンセットを用いてＴ－ｓｋｉｎの表皮、真皮、フィルム層をそれぞれ剥離した。表皮部分のみをＲＮＡｌａｔｅｒ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社）を用いてＲＮＡの安定化処理を行った後、ｍｉＲＮｅａｓｙｍｉｎｉ ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ社）を用いてＱｉａｇｅｎ社推奨の方法でｔｏｔａｌ ＲＮＡ を抽出した。超微量分光光度計ＮａｎｏＤｒｏｐ Ｏｎｅ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社）及びバイオアナライザ（Ａｇｉｌｅｎｔ社）を用いて、ＲＮＡ濃度、純度（２６０／２８０、２６０／２３０）、ＲＮＡの分解度の指標であるＲＩＮ値を測定し、２６０／２８０及び２６０／２８０が１．７以上、ＲＩＮ値が７以上であることを確認後、各ｔｏｔａｌ ＲＮＡからＲｅｖｅｒＴｒａ Ａｃｅ（登録商標）ｑＰＣＲ ＲＴ ＭａｓｔｅｒＭｉｘ（ＴＯＹＯＢＯ）を使用してｃＤＮＡ合成を行った。ｃＤＮＡ合成の条件はＴＯＹＯＢＯ開示の推奨プロトコルに従って実施した。ＱＩＡｃｕｉｔｙ Ｏｎｅ（Ｑｉａｇｅｎ社）及びＱＩＡｃｕｉｔｙ ｐｒｏｂｅ ＰＣＲ ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ社）を用いてＱｉａｇｅｎ社推奨のプロトコルに従って定量ＰＣＲを実施した。なお定量ＰＣＲでは以下のＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社から購入したＴａｇｍａｎ ｐｒｏｂｅを使用し、ｄｕｐｌｉｃａｔｅで実験を実施した。
・ＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド－３－リン酸デヒドロゲナーゼ）（Ｈｓ９９９９９９０５ ｍ１）
・ＨＡＳ３（Ｈｓ００１９３４３６ ｍ１）
・ＭＫＩ６７（Ｈｓ０４２６０３９６ ｇ１）
・ＦＧＦ１（Ｈｓ０１０９２７３８ ｍ１）
・ＦＧＦ２（Ｈｓ００２６６６４５ ｍ１）
ＧＡＰＤＨを内在性コントロールとして使用して以下式に従って各遺伝子のコピー数の補正を行った後、リン酸緩衝液添加区を１とした場合のセラミド類水性分散体の各遺伝子発現量の相対値を算出した。結果を表１に示す。
【0059】
【表1】
【0060】
上記結果からセラミド類水性分散体には、ヒアルロン酸合成酵素（ＨＡＳ３）の遺伝子発現量が向上していることから皮膚の保湿向上効果、増殖細胞マーカーであるＭＫＩ６７の遺伝子発現量が向上していることから表皮のターンオーバー促進、及び線維芽細胞増殖因子であるＦＧＦ１及びＦＧＦ２の遺伝子発現量が促進していることから真皮線維芽細胞の増殖が促進によるシワ改善効果が期待されることがわかった。