特開 2024-164365 コロニー計数システム

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024164365

(43)【公開日】2024-11-27

(54)【発明の名称】コロニー計数システム

(51)【国際特許分類】

   C12M 1/34 20060101AFI20241120BHJP

【ＦＩ】

C12M1/34 D

【審査請求】未請求

【請求項の数】7

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2023079784

(22)【出願日】2023-05-15

(71)【出願人】

【識別番号】000003193

【氏名又は名称】ＴＯＰＰＡＮホールディングス株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100105957

【弁理士】

【氏名又は名称】恩田 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100068755

【弁理士】

【氏名又は名称】恩田 博宣

(72)【発明者】

【氏名】平田 尚哉

(72)【発明者】

【氏名】三橋 則登

【テーマコード（参考）】

4B029

【Ｆターム（参考）】

4B029AA07

4B029BB02

4B029FA09

4B029FA11

4B029GA01

4B029GB06

(57)【要約】

【課題】コロニーを正確に計数することが可能なコロニー計数システムを提供する。
【解決手段】シャーレＳが載置される計数ステージ２と、計数ステージ２に載置されたシャーレＳのなかの微生物のコロニーを撮像する撮像部３と、撮像部３が撮像した画像のなかの領域である計数領域内のコロニーを計数する計数部１１Ａを有する制御装置１０と、を備え、撮像部３が撮像した画像において、計数ステージ２が計数領域の外側に位置するように、計数ステージ２が配置されている。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

シャーレを支持する支持部と、
前記支持部に支持された前記シャーレのなかの微生物のコロニーを撮像する撮像部と、
前記撮像部が撮像した画像の計数領域における前記コロニーを計数する計数部と、を備え、
前記支持部は、前記画像において前記計数領域の外側に位置するように配置される
ことを特徴とするコロニー計数システム。

【請求項2】

前記支持部は、貫通孔を備える計数ステージであり、
前記計数ステージには、前記貫通孔と重なるように前記シャーレが載置され、
前記画像において、前記計数領域が前記貫通孔の内側に位置する
ことを特徴とする請求項１に記載のコロニー計数システム。

【請求項3】

前記貫通孔は、前記シャーレの下方に位置し、前記画像において前記計数領域を囲う第１部分と、前記第１部分と前記計数ステージの縁部とを繋ぎ、前記シャーレを搬送する搬送部が通過可能な第２部分と、を備える
ことを特徴とする請求項２に記載のコロニー計数システム。

【請求項4】

前記第１部分は、前記シャーレにおいて前記計数ステージと接する面の直径よりも小さい直径を有する円形状を有し、
前記貫通孔は、前記第１部分の直径よりも狭い幅で前記第１部分と前記第２部分とが接続される
ことを特徴とする請求項３に記載のコロニー計数システム。

【請求項5】

前記第１部分の直径は、３０ｍｍ以上１５０ｍｍ以下である
ことを特徴とする請求項３または４に記載のコロニー計数システム。

【請求項6】

前記支持部は、前記画像において前記計数領域の外側に位置するように、互いに離間して配置される複数の支持体である
ことを特徴とする請求項１に記載のコロニー計数システム。

【請求項7】

各支持体は、前記シャーレを支持する支持面と、前記支持面上での前記シャーレの移動を規制する保持部と、を備える
ことを特徴とする請求項６に記載のコロニー計数システム。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、コロニー計数システムに関する。

【背景技術】

【0002】

物品の表面における細菌に対する抗菌性の試験方法の一例として、ＪＩＳ Ｚ ２８０１に規定される抗菌加工を施した製品の表面における細菌に対する抗菌性試験方法が知られている（非特許文献１を参照）。抗菌性の試験では、シャーレ中の培地にて検体を所定時間培養した後に、シャーレ内に形成された細菌のコロニーを計数する方法が採用されている。コロニーを計数する技術の一例として、シャーレ内に形成されたコロニーを撮像することによって得られた画像から、コロニーを計数する技術が知られている（例えば、特許文献１）。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0003】

【特許文献1】特開２０００－２７０８４０号公報

【非特許文献】

【0004】

【非特許文献1】ＪＩＳ Ｚ ２８０１：２０１２「抗菌加工製品－抗菌性試験方法・抗菌効果」

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

例えば、特許文献１に記載されるコロニー計数装置では、透明なシャーレが平坦なステージ上に載置された状態でコロニーの撮像が行われる。このようなステージでは、シャーレをステージに載置する際にステージ上に異物が存在すると、ステージとシャーレとの間に異物が挟み込まれる場合がある。ステージとシャーレとの間に異物が挟み込まれた状態では、コロニーを撮像した画像中に異物が写り込むことで、コロニーを正確に計数できない場合がある。

【課題を解決するための手段】

【0006】

上記課題を解決するためのコロニー計数システムは、シャーレを支持する支持部と、前記支持部に支持された前記シャーレのなかの微生物のコロニーを撮像する撮像部と、前記撮像部が撮像した画像の計数領域における前記コロニーを計数する計数部と、を備え、前記支持部は、前記画像において前記計数領域の外側に位置するように配置される。

【0007】

上記構成によれば、計数領域の外側にシャーレを支持する支持部を配置することで、計数領域内には支持部が写らない状態となる。これにより、計数領域内において支持部上の異物が写り込むことを防止できる。したがって、計数領域に写り込んだ異物によってコロニーの正確な計数が妨げられることを防止できる。結果として、支持部上の異物の有無の確認作業や異物の除去作業をせずとも、正確にコロニーの計数を行うことができる。

【0008】

上記コロニー計数システムにおいて、前記支持部は、貫通孔を備える計数ステージであり、前記計数ステージには、前記貫通孔と重なるように前記シャーレが載置され、前記画像において、前記計数領域が前記貫通孔の内側に位置する構成としてもよい。上記構成によれば、計数ステージが貫通孔を備え、かつ、貫通孔の内側の計数領域においてコロニーを計数することで、計数領域内には計数ステージが写らない状態となるため、計数領域内において計数ステージ上の異物が写り込むことを防止できる。

【0009】

上記コロニー計数システムにおいて、前記貫通孔は、前記シャーレの下方に位置し、前記画像において前記計数領域を囲う第１部分と、前記第１部分と前記計数ステージの縁部とを繋ぎ、前記シャーレを搬送する搬送部が通過可能な第２部分と、を備える構成としてもよい。上記構成によれば、シャーレを上下に挟み込んだ状態で搬送する搬送部を用いて計数ステージにシャーレを載置する場合であっても、計数ステージに設けられた第２部分によって、搬送部と計数ステージとが干渉することを防ぐことができる。

【0010】

上記コロニー計数システムにおいて、前記第１部分は、前記シャーレにおいて前記計数ステージと接する面の直径よりも小さい直径を有する円形状を有し、前記貫通孔は、前記第１部分の直径よりも狭い幅で前記第１部分と前記第２部分とが接続される構成としてもよい。上記構成によれば、第１部分と第２部分との接続部分からシャーレが脱落することを防止できる。

【0011】

上記コロニー計数システムにおいて、前記第１部分の直径は、３０ｍｍ以上１５０ｍｍ以下であってもよい。上記構成によれば、微生物の培養に用いられるシャーレを計数ステージ上に好適に載置でき、また、シャーレに形成されたコロニーの計数を好適に行うことができる。

【0012】

上記コロニー計数システムにおいて、前記支持部は、前記画像において前記計数領域の外側に位置するように、互いに離間して配置される複数の支持体であってもよい。計数領域の外側に位置する複数の支持体でシャーレを支持する構成によっても、計数領域内において支持部上の異物が写り込むことを防止できる。

【0013】

上記コロニー計数システムにおいて、各支持体は、前記シャーレを支持する支持面と、前記支持面上での前記シャーレの移動を規制する保持部と、を備える構成としてもよい。上記構成によれば、シャーレが複数の支持体から脱落することを防止できる。

【発明の効果】

【0014】

本開示のコロニー計数システムによれば、コロニーを正確に計数できる。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1】図１は、第１実施形態のコロニー計数システムの模式図である。

【図2】図２は、第１実施形態の計数ステージの斜視図である。

【図3】図３は、図２のIII-III線に沿う計数ステージ及びシャーレの断面図である。

【図4】図４は、第１実施形態の計数ステージ及びシャーレの上面図である。

【図5】図５は、搬送部によってシャーレが搬送された状態の第１実施形態のコロニー計数システムの斜視図である。

【図6】図６は、第２実施形態のコロニー計数システムが備える複数の支持体及びシャーレの斜視図である。

【図7】図７は、第２実施形態の複数の支持体及びシャーレの上面図である。

【図8】図８は、参考例及び比較例のコロニー計数システムの斜視図である。

【図9】図９は、実施例１、参考例１、及び、比較例１の評価結果を表すグラフである。

【図10】図１０は、実施例２、参考例２、及び、比較例２の評価結果を表すグラフである。

【図11】図１１は、実施例３、参考例３、及び、比較例３の評価結果を表すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0016】

［第１実施形態のコロニー計数システム］
コロニー計数システムの第１実施形態について図１～図５を参照して説明する。
図１に示すように、第１実施形態のコロニー計数システム１は、一例として、ＪＩＳ Ｚ ２８０１：２０１２に規定される抗菌性試験方法において、シャーレＳ内に形成された細菌のコロニーの計数のために用いられる。シャーレＳのなかには、例えば、寒天培地で培養された細菌等の微生物のコロニーが形成されている。

【0017】

第１実施形態のコロニー計数システム１は、計数ステージ２と、撮像部３と、照明部４と、筐体５と、制御装置１０と、を備える。計数ステージ２、撮像部３、及び、照明部４は、筐体５の内部に収容される。

【0018】

計数ステージ２は、シャーレＳを支持する支持部の一例である。計数ステージ２は、一例として、透明な板状部材である。計数ステージ２は、上方に面する載置面２Ｓを備える。載置面２Ｓには、シャーレＳが載置される。シャーレＳは、円形の透明な下皿Ｓ１及び蓋Ｓ２を備える。蓋Ｓ２は、下皿Ｓ１よりも径が大きく、かつ、下皿Ｓ１よりも浅い上皿である。

【0019】

抗菌性試験方法等の菌類培養時には、蓋Ｓ２が下皿Ｓ１の下方に位置するようにシャーレＳを倒置した状態で培養が行われることがある。そのため、図１では、一例として、シャーレＳが倒置された培養時の状態から反転動作等を行わずに、蓋Ｓ２が下皿Ｓ１の下方に位置する状態を維持したまま、シャーレＳを計数ステージ２に載置した状態を図示している。したがって、計数ステージ２の載置面２ＳにはシャーレＳの蓋Ｓ２が接している。

【0020】

載置面２Ｓには、案内部６が配置される。案内部６は、シャーレＳを載置面２Ｓ上の所定の位置に案内する。一例として、案内部６は、Ｖ字状または円弧状の押し当て面６Ｓを備える。載置面２Ｓ上のシャーレＳが押し当て面６Ｓに押し当てられると、押し当て面６ＳがシャーレＳを載置面２Ｓ上の所定の位置に案内する。押し当て面６Ｓは、所定の位置に配置されるシャーレＳの外周面のなかの２つの部分に当接してもよい。

【0021】

撮像部３は、計数ステージ２の上方に配置される。撮像部３は、一例として、画像データを生成するカメラである。撮像部３は、シャーレＳに形成されたコロニーを撮像する。撮像部３は、例えば、シャーレＳの上方から、シャーレＳの全体を含む画像データであって、コロニーの数を識別可能な画像データを生成する。

【0022】

照明部４は、一例として、計数ステージ２の下方において、計数ステージ２と離間して配置される。照明部４は、面光源でもよい。照明部４は、計数ステージ２に載置されたシャーレＳを下方から照らす。なお、照明部４は、計数ステージ２に載置されたシャーレＳを下方から照らす構成に代えて、もしくは、当該構成に加えて、計数ステージ２に載置されたシャーレＳを上方から照らしてもよい。

【0023】

筐体５は、計数ステージ２、撮像部３、及び、照明部４を支持する支持構造の一例である。筐体５は、計数ステージ２にシャーレＳを搬入可能、かつ、計数ステージ２からシャーレＳを搬出可能な開口を備える。筐体５は、任意の形状を採用することができる。なお、コロニー計数システム１は、筐体５に代わる支持構造として、計数ステージ２、撮像部３、及び、照明部４を支持する支持フレームを備えてもよい。

【0024】

制御装置１０は、一例として、筐体５の外部から有線または無線で筐体５内の撮像部３及び照明部４に接続される。なお、制御装置１０は、筐体５と一体に構成されてもよい。制御装置１０は、制御部１１と、記憶部１２と、表示部１３と、操作部１４と、通信部１５とを備える。

【0025】

制御部１１は、コロニー計数システム１が備える撮像部３及び照明部４、並びに、制御装置１０が備える各部の動作を制御する。制御部１１は、例えば、ＣＰＵやＭＰＵ等、ソフトウェアによって各種の処理を実行するプロセッサを含む。記憶部１２は、一時メモリと、不揮発性メモリとを備える。一時メモリは、制御装置１０が処理するデータを一時的に記憶する。一時メモリは、一例として、ＲＡＭである。不揮発性メモリは、例えばフラッシュメモリ、ＨＤＤ、またはＳＳＤである。不揮発性メモリには、シャーレＳに形成されたコロニーを計数するためのコロニー計数プログラムが記憶されている。

【0026】

表示部１３は、各種情報を表示するディスプレイである。操作部１４は、作業者が制御装置１０を操作するための入力デバイスである。制御装置１０は、一例として、表示部１３及び操作部１４が一体となったタッチパネルを備えてもよい。通信部１５は、有線または無線通信を介して筐体５に収容された撮像部３及び照明部４との通信を担う。

【0027】

制御部１１は、コロニー計数プログラムを実行することで計数部１１Ａとして機能する。計数部１１Ａは、撮像部３が生成した画像データから、シャーレＳに形成されたコロニーを計数する処理を実行する。

【0028】

［計数ステージ］
図２に示すように、計数ステージ２は、計数ステージ２の厚さ方向に貫通する貫通孔２Ｈを備える。貫通孔２Ｈは、第１部分２Ｈ１と、第２部分２Ｈ２とを備える。第１部分２Ｈ１は、計数ステージ２の略中央に位置する。第１部分２Ｈ１は、一例として円形状を有する。第１部分２Ｈ１は、所定の直径Ｄ１を有する。第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１は、一例として、３０ｍｍ以上１５０ｍｍ以下である。

【0029】

第２部分２Ｈ２は、第１部分２Ｈ１と計数ステージ２の縁部２Ｅとを繋ぐ。縁部２Ｅは、計数ステージ２において、筐体５が有する開口の側に位置する。第２部分２Ｈ２は、一例として矩形状を有する。貫通孔２Ｈでは、第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１よりも狭い幅Ｗで第１部分２Ｈ１と第２部分２Ｈ２とが接続される（Ｄ１＞Ｗ）。第２部分２Ｈ２は、一例として、第１部分２Ｈ１と接続される部分から計数ステージ２の縁部２Ｅまで一定の幅Ｗを有する長方形状もしくは正方形状を有する。なお、幅Ｗは、第２部分２Ｈ２が第１部分２Ｈ１から計数ステージ２の縁部２Ｅまで延びる方向と直交する方向の大きさである。

【0030】

図３に示すように、シャーレＳは、第１部分２Ｈ１がシャーレＳの下方に位置するように、すなわち、シャーレＳが第１部分２Ｈ１に重なるように計数ステージ２に配置される。シャーレＳの下皿Ｓ１は、収容面Ｓ１Ｓを備える。収容面Ｓ１Ｓは、下皿Ｓ１の側壁に囲われる内底面である。収容面Ｓ１Ｓには、コロニーが形成された培地Ｍが配置されている。培地Ｍは、一例として、寒天培地である。

【0031】

シャーレＳの蓋Ｓ２は、外面Ｓ２Ｓを備える。外面Ｓ２Ｓは、計数ステージ２の載置面２Ｓと接する。蓋Ｓ２の外面Ｓ２Ｓは、所定の直径Ｄ２を有する。外面Ｓ２Ｓの直径Ｄ２は、第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１よりも大きい（Ｄ２＞Ｄ１）。

【0032】

図４は、シャーレＳが載置された計数ステージ２を、計数ステージ２の載置面２Ｓと対向する視点から見た上面図である。なお、図４では、図示の便宜上、シャーレＳの下皿Ｓ１及び蓋Ｓ２の外形線を太線で示す。図４では、計数ステージ２の貫通孔２Ｈの外形線のうちシャーレＳと重なる部分を破線で示す。また、シャーレＳに形成されたコロニーＣにドットを付して示す。

【0033】

図４に示すように、シャーレＳは、貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の全体がシャーレＳの下方に位置するように、計数ステージ２に載置される。また、シャーレＳは、シャーレＳに形成されたコロニーＣの全数が貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の内側に位置するように、計数ステージ２に載置される。例えば、蓋Ｓ２の円形状の中心が貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の中心と一致するように、シャーレＳが計数ステージ２に載置される。貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１は、シャーレＳの外径である蓋Ｓ２の外面Ｓ２Ｓの直径Ｄ２よりも小さく、かつ、シャーレＳにおいてコロニーＣが形成される領域よりも大きい。

【0034】

貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１が蓋Ｓ２の外面Ｓ２Ｓの直径Ｄ２よりも小さい（Ｄ２＞Ｄ１）ため、第１部分２Ｈ１からシャーレＳが脱落することを防止している。換言すると、Ｄ２＞Ｄ１とすることで、シャーレＳが第１部分２Ｈ１に重なるようにシャーレＳを計数ステージ２に載置できる。また、貫通孔２Ｈにおいて、第１部分２Ｈ１と第２部分２Ｈ２とが接続される部分の幅Ｗが第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１よりも狭い（Ｄ１＞Ｗ）ため、第１部分２Ｈ１と第２部分２Ｈ２との接続部分からシャーレＳが脱落することを防止している。

【0035】

［第１実施形態の画像］
以下、第１実施形態において、撮像部３が生成する画像データについて、図４を参照して説明する。

【0036】

撮像部３は、計数ステージ２の載置面２Ｓと対向する位置からシャーレＳに形成されたコロニーＣを撮像する。撮像部３が撮像したコロニーＣの画像は、図４の上面図のようにコロニーＣを上方から撮像した画像である。以下では、図４に示す状態のように、コロニーＣを上方から撮像した画像を撮像部３が撮像した画像であるものとして説明する。シャーレＳ内に形成されたコロニーＣは、シャーレＳの下皿Ｓ１を介した状態で撮像される。なお、撮像部３が撮像するコロニーＣの画像は、少なくともシャーレＳに形成されたコロニーＣの全数が識別可能な状態で含まれればよく、シャーレＳの全体が含まれなくてもよく、計数ステージ２の全体が含まれなくてもよい。

【0037】

計数部１１Ａは、撮像部３が生成した画像データに画像処理を適用することで、シャーレＳの外形よりも内側に位置する計数領域ＣＡに含まれるコロニーＣを計数する。計数領域ＣＡは、画像データによって再現される画像の一部分であって、貫通孔２Ｈにおける第１部分２Ｈ１の縁の内側に位置する領域である。撮像部３が撮像した画像の計数領域ＣＡでは、計数ステージ２とシャーレＳとが重なっていない。換言すると、撮像部３が撮像した画像では、貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の内側の空間と、計数領域ＣＡとが重なっている。撮像部３が撮像した画像では、計数ステージ２が計数領域ＣＡの外側に位置するため、計数領域ＣＡ内には計数ステージ２が写らない。

【0038】

計数領域ＣＡは、一例として、図４中に二点鎖線で示す円形の領域である。計数領域ＣＡは、第１部分２Ｈ１に囲まれる。計数領域ＣＡの直径Ｄ３は、貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１と同じか、直径Ｄ１よりも小さい（Ｄ１≧Ｄ３）。例えば、計数領域ＣＡの円形状の中心は、貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の円形状の中心と一致する。

【0039】

撮像部３が撮像した画像における計数領域ＣＡの大きさは、シャーレＳに形成されたコロニーＣの全数が含まれる大きさである。例えば、計数領域ＣＡの大きさは、貫通孔２Ｈにおける第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１、シャーレＳの大きさ、及び、シャーレＳにおける培地Ｍの広がり具合に応じて予め定められていてもよい。計数領域ＣＡの大きさは、撮像部３が撮像した画像から貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の外形を抽出するとともに、抽出した第１部分２Ｈ１の外形に応じて画像ごとに設定されてもよい。

【0040】

なお、撮像部３が撮像した画像において、貫通孔２Ｈの外側に相当する計数ステージ２の載置面２Ｓに異物が存在しても、当該異物がコロニーＣの計数に影響を及ぼさない。また、仮に計数ステージ２の下方に位置する照明部４において、上面視で計数領域ＣＡと重なる位置に異物が存在しても、計数ステージ２と照明部４との距離や撮像部３の焦点距離などを調整することで、当該異物が計数領域ＣＡに写り込むことを防止できる。

【0041】

［シャーレの載置方法］
図５に示すように、シャーレＳが計数ステージ２に載置されるとき、搬送部２０が用いられてもよい。搬送部２０は、シャーレＳの保持と、保持したシャーレＳの移動と、保持したシャーレＳの回転（上下反転）と、を行う。搬送部２０は、制御装置１０によって制御されてもよいし、制御装置１０以外の他の装置によって制御されてもよい。

【0042】

搬送部２０は、把持部２１と、移動部２２とを備える。把持部２１は、シャーレＳの保持と、当該保持の解除とを切り換え可能な構成を有する。把持部２１は、一例として、シャーレＳの下皿Ｓ１と蓋Ｓ２とを上下に挟み込むロボットフィンガーである。移動部２２は、把持部２１を移動及び回転させる。移動部２２は、一例として、把持部２１を三次元方向に移動させ、かつ、把持部２１を上下方向に反転させるロボットアームである。シャーレＳにコロニーＣを形成するための菌類の培養時には、搬送部２０を用いてシャーレＳの反転動作を行うことができる。

【0043】

把持部２１は、貫通孔２Ｈの第２部分２Ｈ２を通過可能に構成されている。換言すると、貫通孔２Ｈの第２部分２Ｈ２の幅Ｗは、把持部２１の幅よりも大きい。これにより、搬送部２０がシャーレＳの下皿Ｓ１と蓋Ｓ２とを挟持する把持部２１を備える場合でも、計数ステージ２と把持部２１とを干渉させずにシャーレＳを計数ステージ２に載置できる。

【0044】

［第１実施形態の作用］
シャーレＳを支持する支持部の一例である計数ステージ２が貫通孔２Ｈを備えるとともに、計数部１１Ａが貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の内側に位置する計数領域ＣＡ内のコロニーＣを計数する。これにより、コロニーＣの計数が行われる計数領域ＣＡの外側に計数ステージ２が位置するため、計数領域ＣＡには計数ステージ２が写らない状態となる。これにより、計数領域ＣＡ内に計数ステージ２上の異物が写り込むことを防いでいる。

【0045】

［第１実施形態の効果］
上記第１実施形態によれば、以下に列挙する効果を得ることができる。
（１－１）計数ステージ２が計数領域ＣＡの外側に位置することで、計数ステージ２上の異物がコロニーＣとして誤認識されるなど、計数ステージ２上の異物によってコロニーＣの正確な計数が妨げられることを防止できる。したがって、計数ステージ２上の異物の有無の確認作業や異物の除去作業をせずとも、正確にコロニーＣの計数を行うことができる。また、計数領域ＣＡ内に貫通孔２Ｈの境界が写り込むことを防止できる。

【0046】

（１－２）貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１が、シャーレＳにおいて計数ステージ２と接する面である蓋Ｓ２の外面Ｓ２Ｓの直径Ｄ２よりも小さいことで、第１部分２Ｈ１からシャーレＳが脱落することを防止できる。

【0047】

（１－３）貫通孔２Ｈが第２部分２Ｈ２を備えることで、シャーレＳを上下に挟み込んだ状態で搬送する搬送部２０を用いて計数ステージ２にシャーレＳを載置する場合であっても、計数ステージ２と搬送部２０とが干渉することを防止できる。

【0048】

（１－４）貫通孔２Ｈにおいて、第１部分２Ｈ１と第２部分２Ｈ２とが第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１よりも狭い幅Ｗで接続されることで、第１部分２Ｈ１と第２部分２Ｈ２との接続部分からシャーレＳが脱落することを防止できる。

【0049】

（１－５）第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１がＤ２＞Ｄ１≧Ｄ３を満たし、かつ、直径Ｄ１を３０ｍｍ以上１５０ｍｍ以下の範囲内とすることで、微生物の培養に用いられるシャーレＳを計数ステージ２上に好適に載置でき、また、コロニーＣを好適に計数できる。

【0050】

［第１実施形態の変更例］
なお、上記第１実施形態は、以下のように変更して実施することができる。また、各変更例は、技術的に矛盾しない範囲で組み合わせることができる。

【0051】

・第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１は、シャーレＳにおいて計数ステージ２と接する面である蓋Ｓ２の外面Ｓ２Ｓの直径Ｄ２よりも小さく、かつ、計数領域ＣＡが第１部分２Ｈ１の内側に位置する大きさであればよい。したがって、第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１は、３０ｍｍ未満でもよいし、１５０ｍｍ超でもよい。

【0052】

・貫通孔２Ｈにおいて、第１部分２Ｈ１と第２部分２Ｈ２とが第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１よりも狭い幅Ｗで接続される構成を例示した。これに限定されず、例えば、第１部分２Ｈ１と第２部分２Ｈ２とが直径Ｄ１と同じ幅Ｗ（Ｗ＝Ｄ１）で接続されてもよい。また、第２部分２Ｈ２が一定の幅Ｗを有する構成を例示したが、これに代えて、第２部分２Ｈ２は、第１部分２Ｈ１と接続される部分で幅Ｗを有するとともに、計数ステージ２の縁部２Ｅに近づくにつれて幅が大きくなるような台形状を有してもよい。また、第２部分２Ｈ２の形状は、上記の例に限定されず、例えば、搬送部２０が備える把持部２１の形状に応じて適宜決定されてもよい。

【0053】

・貫通孔２Ｈは、少なくとも計数領域ＣＡを囲む第１部分２Ｈ１を備えていればよく、第２部分２Ｈ２が省略されてもよい。この場合、把持部２１がシャーレＳの側壁（例えば蓋Ｓ２の側壁）を保持する構成とすれば、計数ステージ２と搬送部２０との干渉を避けつつ計数ステージ２にシャーレＳを載置できる。また、作業者が計数ステージ２にシャーレＳを載置してもよい。

【0054】

・貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１は、シャーレＳを第１部分２Ｈ１と重なるように載置したときに、シャーレＳを安定して支持でき、かつ、計数領域ＣＡが第１部分２Ｈ１の内側に位置する形状であればよい。第１部分２Ｈ１の形状は、円形状に限定されず、例えば多角形状でもよいし、不定形状でもよい。

【0055】

・案内部６は、上述の構成に限定されず、シャーレＳを計数ステージ２の載置面２Ｓ上の適切な位置に案内できる構成であればよい。また、例えば、搬送部２０によってシャーレＳを載置面２Ｓ上の適切な位置に案内できるのであれば、案内部６を省略してもよい。

【0056】

・計数ステージ２の下方に照明部４を配置する構成に代えて、もしくは、当該構成に加えて、計数ステージ２の側方や上方に照明部４を配置してもよい。
・シャーレＳの蓋Ｓ２が下方に位置する状態で計数ステージ２に載置される構成、すなわち、蓋Ｓ２の外面Ｓ２Ｓが計数ステージ２と接する構成を例示した。これに限定されず、シャーレＳの下皿Ｓ１が下方に位置する状態で計数ステージ２に載置されてもよい。この場合、シャーレＳにおいて計数ステージ２と接する面は、下皿Ｓ１の収容面Ｓ１Ｓと反対の外面である。したがって、この場合の第１部分２Ｈ１の直径Ｄ１は、下皿Ｓ１の収容面Ｓ１Ｓと反対の外面の直径よりも小さければよい。なお、この場合、蓋Ｓ２が外されていてもよい。

【0057】

［第２実施形態のコロニー計数システム］
コロニー計数システムの第２実施形態について図６及び図７を参照して説明する。
図６に示すように、第２実施形態のコロニー計数システム３１は、計数ステージ２を割愛し、かつ、複数の支持体３２を備える。複数の支持体３２は、シャーレＳを支持する支持部の一例である。なお、第２実施形態のコロニー計数システム３１は、計数ステージ２を割愛し、かつ複数の支持体３２を備える点を除き、第１実施形態のコロニー計数システム１と同様の構成を備える。また、図６では、複数の支持体３２とシャーレＳとを図示するが、他の構成についての図示を省略している。

【0058】

各支持体３２は、支持片３３と、保持部３４とを備える。支持片３３は、一例として、上下方向に延びる円柱状を有するが、多角柱状等の任意の形状を採用できる。支持片３３は、シャーレＳを支持する支持面３３Ｓを備える。保持部３４は、一例として、支持面３３Ｓから上方に向かって突き出る突起である。

【0059】

複数の支持体３２は、各支持体３２の支持面３３ＳにシャーレＳの縁が載置されるように、シャーレＳの外径に応じて互いに離間して配置される。複数の支持体３２には、シャーレＳの蓋Ｓ２が下方に位置する状態、すなわち蓋Ｓ２の外面Ｓ２Ｓが支持面３３Ｓと接する状態でシャーレＳが載置されている。

【0060】

保持部３４は、複数の支持体３２に支持されたシャーレＳの外周面（例えば、蓋Ｓ２が備える側壁）に当接する、もしくは、シャーレＳの外周面からわずかに離間して配置される。保持部３４は、複数の支持体３２の支持面３３Ｓに支持されたシャーレＳの支持面３３Ｓ上での水平方向の移動を規制する。これにより、保持部３４は、シャーレＳが各支持体３２の支持面３３Ｓから脱落しないようにシャーレＳを保持する。

【0061】

図７は、シャーレＳが載置された複数の支持体３２を上方から見た上面図である。なお、図７では、図示の便宜上、シャーレＳの下皿Ｓ１及び蓋Ｓ２の外形線を太線で示す。７また、シャーレＳに形成されたコロニーＣにドットを付して示す。

【0062】

図７に示すように、複数の支持体３２は、各支持体３２の支持面３３Ｓと、シャーレＳの縁とが上面視で重なるように、互いに離間して配置される。各支持体３２の保持部３４は、上面視で複数の支持体３２に支持されたシャーレＳよりも外側に位置する。

【0063】

なお、隣り合う２つの支持体３２同士の間隔について、複数の支持体３２は、少なくとも１か所以上の間隔が、搬送部２０の把持部２１が通過可能な大きさで配置されることが好ましい。この場合、シャーレＳを複数の支持体３２に載置する際に、第１実施形態と同様に搬送部２０を用いることができる。

【0064】

［第２実施形態の画像］
以下、第２実施形態において、撮像部３が生成する画像データについて、図７を参照して説明する。

【0065】

図７に示すように、第２実施形態のコロニー計数システム３１においても第１実施形態と同様に、撮像部３は、複数の支持体３２に支持されたシャーレＳの上方からシャーレＳに形成されたコロニーＣを撮像する。以下では、図７に示す状態のように、コロニーＣを上方から撮像した画像を撮像部３が撮像した画像であるものとして説明する。なお、撮像部３が撮像するコロニーＣの画像は、少なくともシャーレＳに形成されたコロニーＣの全数が識別可能な状態で含まれればよく、シャーレＳの全体が含まれなくてもよく、複数の支持体３２の全体が含まれなくてもよい。

【0066】

第２実施形態のコロニー計数システム３１においても第１実施形態と同様に、計数部１１Ａは、撮像部３が撮像した画像において、シャーレＳの外形よりも内側に位置する計数領域ＣＡに含まれるコロニーＣを計数する。計数領域ＣＡは、一例として、図７中に二点鎖線で示す円形の領域である。例えば、計数領域ＣＡの円形状の中心は、シャーレＳの円形状の中心と一致する。

【0067】

撮像部３が撮像した画像において、複数の支持体３２は、計数領域ＣＡの外側に位置する。撮像部３が撮像した画像の計数領域ＣＡでは、支持体３２とシャーレＳとが重なっていない。したがって、撮像部３が撮像した画像の計数領域ＣＡ内では、支持体３２が写り込まない。このため、支持体３２の支持面３３Ｓ上の異物が計数領域ＣＡ内に写り込むことが防止される。

【0068】

第２実施形態において、撮像部３が撮像した画像における計数領域ＣＡの大きさは、シャーレＳに形成されたコロニーＣの全数が含まれる大きさである。例えば、計数領域ＣＡの大きさは、複数の支持体３２の大きさ、シャーレＳの大きさ、及び、シャーレＳにおける培地Ｍの広がり具合に応じて予め定められていてもよい。計数領域ＣＡの大きさは、撮像部３が撮像した画像から複数の支持体３２の外形を抽出するとともに、抽出した複数の支持体３２の外形に外接する任意の形状（例えば円形状）を計数領域ＣＡとして設定してもよい。

【0069】

［第２実施形態の作用］
計数領域ＣＡの外側にシャーレＳを支持する支持体３２を配置することで、計数領域ＣＡでは支持体３２が写らない。これにより、計数領域ＣＡ内において支持体３２上の異物が写り込むことを防止できる。

【0070】

［第２実施形態の効果］
上記第２実施形態によれば、以下に列挙する効果を得ることができる。
（２－１）計数領域ＣＡの外側にシャーレＳを支持する支持部の一例である複数の支持体３２を配置することで、計数領域ＣＡでは支持体３２が写らない状態となるため、計数領域ＣＡ内に支持体３２上の異物が写り込むことを防止できる。結果として、支持体３２上の異物がコロニーＣとして誤認識されるなど、支持体３２上の異物によってコロニーＣの正確な計数が妨げられることを防止できる。したがって、支持体３２上の異物の有無の確認作業や異物の除去作業をせずとも、正確にコロニーＣの計数を行うことができる。

【0071】

（２－２）支持体３２が保持部３４を備えることで、複数の支持体３２に支持されたシャーレＳが、支持体３２から脱落することを防止できる。
（２－３）搬送部２０の把持部２１が通過可能な間隔で複数の支持体３２を配置することで、搬送部２０を用いて複数の支持体３２にシャーレＳを載置する場合であっても、複数の支持体３２と搬送部２０とが干渉することを防止できる。

【0072】

［第２実施形態の変更例］
なお、上記第２実施形態は、以下のように変更して実施することができる。また、各変更例は、技術的に矛盾しない範囲で組み合わせることができる。

【0073】

・保持部３４の形態は、支持面３３Ｓから突き出る突起に限定されず、例えば、支持面３３Ｓの摩擦力を高めるゴムシートなどでもよい。複数の支持体３２の一部にのみ保持部３４が設けられてもよいし、複数の支持体３２の何れにも保持部３４が設けられなくてもよい。

【0074】

・シャーレＳは、シャーレＳの下皿Ｓ１が下方に位置する状態で計数ステージ２に載置されてもよい。この場合、蓋Ｓ２が外されていてもよい。
・図６及び図７では、３つの支持体３２によってシャーレＳを支持する構成を例示したが、複数の支持部によって支持体３２の数は２つでもよいし、４つ以上でもよい。支持体３２の支持面３３ＳによってシャーレＳを安定して支持できればよい。

【0075】

［第１実施形態及び第２実施形態の変更例］
上記第１実施形態及び第２実施形態は、以下のように変更して実施することができる。また、以下に示す各変更例や上述した各実施形態の変更例は、技術的に矛盾しない範囲で組み合わせることができる。

【0076】

・計数領域ＣＡの形状は、円形状に限定されず、例えば多角形状でもよいし、不定形状でもよい。
・コロニー計数システム１は、ＪＩＳ Ｚ ２８０１：２０１２に規定される抗菌性試験方法以外にも、シャーレＳに形成されたコロニーＣを計数する他の試験や評価においても適用可能である。

【0077】

［実施例］
以下、図８～図１１を参照して、実施例、参考例、及び、比較例について説明する。なお、以下の実施例は、上記実施形態の効果を説明するための一例である。

【0078】

［実施例１］
実施例１では、第１実施形態のように、計数ステージ２を備えるコロニー計数システム１を用いてシャーレＳに形成されたコロニーＣの計数を行った。実施例１では、計数ステージ２として、第１部分２Ｈ１と第２部分２Ｈ２とを備えるものを使用した。実施例１では、菌の希釈倍率が１０倍の検体を寒天培地に混合させた状態で培養を行うことでシャーレＳにコロニーＣを形成させた。実施例１では、試料数ｎ＝３とした。

【0079】

培養後には、搬送部２０を用いてシャーレＳを培養器から計数ステージ２に搬送した。搬送部２０には、ロボットアーム（Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｒｏｂｏｔｓ社製、製品名：ＵＲ１０ｅ）と、ロボットハンド（Ｒｏｂｏｔｉｑ社製、製品名：Ｈａｎｄ－Ｅ）と、ロボットフィンガーとを組み合わせた装置を用いた。実施例１では、搬送部２０によってシャーレＳの下皿Ｓ１と蓋Ｓ２とを上下に挟持した状態で、案内部６を用いてシャーレＳの中心が貫通孔２Ｈの第１部分２Ｈ１の中心と重なるように、シャーレＳを計数ステージ２に載置した。

【0080】

［実施例２］
実施例２では、菌の希釈倍率が１００倍の検体を用いた点を除き、実施例１と同様にコロニーＣの計数を行った。

【0081】

［実施例３］
実施例３では、菌の希釈倍率が１０００倍の検体を用いた点を除き、実施例１と同様にコロニーＣの計数を行った。

【0082】

［参考例１］
図８に示すように、参考例１では、貫通孔２Ｈが設けられていない板状のステージ４２を備えるコロニー計数システム４１を用いてシャーレＳに形成されたコロニーＣの計数を行った。参考例１では、シャーレＳをステージ４２に載置する前に予めステージ４２上の異物を除去したうえで、シャーレＳをステージ４２に載置した。参考例１では、実施例１同様の条件（菌の希釈倍率：１０倍）で培養を行うことでシャーレＳにコロニーＣを形成させた。培養後には、作業者がシャーレＳを培養器からステージ４２に搬送した。参考例１では、試料数ｎ＝３とした。

【0083】

［参考例２］
参考例２では、菌の希釈倍率が１００倍の検体を用いた点を除き、参考例１と同様にコロニーＣの計数を行った。

【0084】

［参考例３］
参考例３では、菌の希釈倍率が１０００倍の検体を用いた点を除き、参考例１と同様にコロニーＣの計数を行った。

【0085】

［比較例１］
比較例１では、シャーレＳをステージ４２に載置する前に予めステージ４２上に意図的に異物を付着させた状態としたうえでシャーレＳをステージ４２に載置した点を除き、参考例１と同様にコロニーＣの計数を行った。ステージ４２上に付着させた異物の直径（メジアン径Ｄ５０）は、０．５ｍｍ以上１．０ｍｍ以下とした。ステージ４２上には、計数領域ＣＡに数十個の異物が付着するように異物を付着させた。

【0086】

［比較例２］
比較例２では、菌の希釈倍率が１００倍の検体を用いた点を除き、比較例１と同様にコロニーＣの計数を行った。

【0087】

［比較例３］
比較例３では、菌の希釈倍率が１０００倍の検体を用いた点を除き、比較例１と同様にコロニーＣの計数を行った。

【0088】

［評価］
菌の希釈倍率が１０倍の検体を培養した際のコロニーＣを計数した実施例１、参考例１、比較例１の結果を図９に示す。菌の希釈倍率が１００倍の検体を培養した際のコロニーＣを計数した実施例２、参考例２、比較例２の結果を図１０に示す。菌の希釈倍率が１０００倍の検体を培養した際のコロニーＣを計数した実施例３、参考例３、比較例３の結果を図１１に示す。なお、図９～図１１に示す計数結果は、試料数ｎ＝３での平均値を用いている。

【0089】

図９に示すように、実施例１および参考例１では、何れも計数結果が１９３０個程度であった。これに対して、比較例１では計数結果が１９５０個程度であることから、比較例１ではステージ４２上に付着した異物がコロニーＣとして誤検出されていた。

【0090】

図１０に示すように、実施例２および参考例２では、何れも計数結果が２５０個程度であった。これに対して、比較例２では計数結果が２７０個程度であることから、比較例２ではステージ４２上に付着した異物がコロニーＣとして誤検出されていた。

【0091】

図１１に示すように、実施例３および参考例３では、何れも計数結果が３５個程度であった。これに対して、比較例３では計数結果が６５個程度であることから、比較例３ではステージ４２上に付着した異物がコロニーＣとして誤検出されていた。

【0092】

以上より、貫通孔２Ｈを設けることで計数ステージ２上の異物の有無の確認作業や異物の除去作業をせずとも、コロニーＣの正確な計数ができることが確認された。また、貫通孔２Ｈが第２部分２Ｈ２を備えることで、計数ステージ２と搬送部２０との干渉を防止できることが確認された。

【符号の説明】

【0093】

Ｃ…コロニー
ＣＡ…計数領域
Ｄ１，Ｄ２，Ｄ３…直径
Ｓ…シャーレ
Ｗ…幅
１，３１，４１…コロニー計数システム
２…計数ステージ
２Ｅ…縁部
２Ｈ…貫通孔
２Ｈ１…第１部分
２Ｈ２…第２部分
３…撮像部
１０…制御装置
１１Ａ…計数部
２０…搬送部
３２…支持体
３３Ｓ…支持面
３４…保持部

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】