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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024165960
(43)【公開日】2024-11-28
(54)【発明の名称】急性痛の治療剤
(51)【国際特許分類】
A61K 31/675 20060101AFI20241121BHJP
A61P 29/02 20060101ALI20241121BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241121BHJP
A61K 31/485 20060101ALI20241121BHJP
A61K 31/4166 20060101ALI20241121BHJP
A61P 25/04 20060101ALI20241121BHJP
【ＦＩ】
A61K31/675
A61P29/02
A61P43/00 121
A61K31/485
A61K31/4166
A61P25/04
【審査請求】未請求
【請求項の数】19
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2023082581
(22)【出願日】2023-05-18
(71)【出願人】
【識別番号】509349141
【氏名又は名称】京都府公立大学法人
(71)【出願人】
【識別番号】504237832
【氏名又は名称】ノーベルファーマ株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】100175075
【弁理士】
【氏名又は名称】田中 康子
(72)【発明者】
【氏名】天谷 文昌
(72)【発明者】
【氏名】山北 俊介
(72)【発明者】
【氏名】新井 沙織
(72)【発明者】
【氏名】喜多田 好
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC38
4C086CB23
4C086DA38
4C086MA01
4C086MA02
4C086MA04
4C086MA16
4C086MA52
4C086MA63
4C086MA66
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZA08
4C086ZC75
(57)【要約】 （修正有）
【課題】術後痛等の急性痛の治療剤を提供する。
【解決手段】フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸およびエトトインからなる群から選ばれるヒダントイン化合物を有効成分として含有する、注射剤、経口剤または経皮吸収製剤等の形態の急性痛治療剤。モルヒネ等のオピオイドの投与と併用されることが好ましい。
【選択図】なし
【解決手段】フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸およびエトトインからなる群から選ばれるヒダントイン化合物を有効成分として含有する、注射剤、経口剤または経皮吸収製剤等の形態の急性痛治療剤。モルヒネ等のオピオイドの投与と併用されることが好ましい。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物を有効成分として含む、急性痛の治療剤。
【請求項2】
前記有効成分が、フェニトインまたはホスフェニトインである請求項１に記載の治療剤。
【請求項3】
前記有効成分が、ホスフェニトインである請求項１に記載の治療剤。
【請求項4】
急性痛が術後痛である請求項１に記載の治療剤。
【請求項5】
オピオイドの投与と併用される、請求項１に記載の治療剤。
【請求項6】
オピオイドがモルヒネである、請求項５に記載の治療剤。
【請求項7】
フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物、及び薬学的に許容される担体を含む急性痛治療用の医薬組成物。
【請求項8】
注射剤、経口剤または経皮吸収製剤である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項9】
注射剤である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項10】
前記有効成分が、フェニトインまたはホスフェニトインである請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記有効成分が、ホスフェニトインである請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項12】
急性痛が術後痛である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項13】
オピオイドの投与と併用される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項14】
オピオイドがモルヒネである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項15】
オピオイドの投与と同時に投与される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項16】
オピオイドがモルヒネである、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項17】
ヒダントイン系化合物がホスフェニトインであり、オピオイドがモルヒネである、請求項１４又は請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項18】
ヒダントイン系化合物とモルヒネとの重量比が、１０００：１～１：１０００の範囲内である、請求項１４又は請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項19】
ホスフェニトインとモルヒネとの重量比が、１００：１～１００：２０の範囲内である、請求項１８に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、てんかんの治療薬として使用されている化合物の新規な用途に関する。詳細には、本発明は、フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物を有効成分として用いる急性痛の治療薬に関する。
【背景技術】
【0002】
急性痛は、急性疼痛と同義で用いられ、通常は組織損傷に対する反応として生じ、末梢の痛覚受容器とそれに対応するＡδおよびＣ線維で構成される感覚神経線維（侵害受容器）が活性化することによって発生する（ＭＳＤマニュアル）。
【0003】
侵害受容性疼痛には体性痛と内臓痛がある。体性神経の痛覚受容器は、皮膚、皮下組織、筋膜、その他の結合組織、骨膜、骨内膜、および関節包に存在する。これらの受容器が刺激されると、通常は限局的な鋭痛または鈍痛が生じるが、皮膚または皮下組織が障害された場合は灼熱感が生じることもまれではない。内臓神経の痛覚受容器は、ほとんどの内臓とその周囲の結合組織に存在する。管腔臓器の閉塞による内臓痛は、局在が不明瞭で痙攣痛様の深部痛であり、遠隔部位の皮膚に関連痛を伴うことがある。内臓の被膜またはその他の深部結合組織の損傷による内臓痛は、より局在のはっきりした鋭痛となることがある。
【0004】
現在、急性痛用の薬剤としては、疼痛が軽度であれば一般的な鎮痛薬（ＮＳＡＩＤｓ、選択的ＣＯＸ－２阻害薬、アセトアミノフェンなど）が主に使用されている。重度の疼痛にはオピオイドが使用される。
【0005】
特に、外科手術後の術後急性痛の管理は予後改善のために重要であり、異なる作用機序の薬物や、神経ブロックの併用で、痛みと副作用を軽減した方法が図られている。現在の周術期管理において、オピオイド（モルヒネなど）が術中術後の鎮痛管理に用いられており、手術後も強い疼痛を予防するため、麻酔覚醒後も必要なオピオイドが継続投与されている。しかしながら、オピオイドは呼吸抑制、嘔気、便秘、さらには耐性や依存、耽溺のリスクなど、さまざまな副作用を併発する問題点がある。
【0006】
また、胸部外科手術後の急性疼痛にプレガバリン、カルバマゼピン、リドカインなどの投与が行われることもある。
【0007】
近年、フェニトイン、ホスフェニトイン等のヒダントイン系化合物を、急性帯状疱疹痛の治療剤として用いる技術が開発されている（特許文献１）。
【0008】
しかしながら、特許文献１においては、急性痛、特に術後急性痛への適用については具体的に記載されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0009】
【特許文献1】国際公開２０２０／０５４８７２号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0010】
本発明は、急性痛、特に術後急性痛の新たな治療薬を提供することを目的とする。
【0011】
更に、本発明は、急性痛、特に術後急性痛の治療方法を提供することを目的とする。
【0012】
また、本発明は、周術期のオピオイド使用量を減量することのできる鎮痛薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0013】
すなわち本発明では、以下の項［１］～［１９］を提供する。
［項１］ フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物を有効成分として含む、急性痛の治療剤。
［項１］ フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物を有効成分として含む、急性痛の治療剤。
【0014】
［項２］ 前記有効成分が、フェニトインまたはホスフェニトインである項１に記載の治療剤。
【0015】
［項３］ 前記有効成分が、ホスフェニトインである項１に記載の治療剤。
【0016】
［項４］ 急性痛が術後痛である項１に記載の治療剤。
【0017】
［項５］ オピオイドの投与と併用される、項１に記載の治療剤。
【0018】
［項６］ オピオイドがモルヒネである、項５に記載の治療剤。
【0019】
［項７］ フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物、及び薬学的に許容される担体を含む急性痛治療用の医薬組成物。
【0020】
［項８］ 注射剤、経口剤または経皮吸収製剤である、項７に記載の医薬組成物。
【0021】
［項９］ 注射剤である、項７に記載の医薬組成物。
【0022】
［項１０］ 前記有効成分が、フェニトインまたはホスフェニトインである項７に記載の医薬組成物。
【0023】
［項１１］ 前記有効成分が、ホスフェニトインである項７に記載の医薬組成物。
【0024】
［項１２］ 急性痛が術後痛である、項７に記載の医薬組成物。
【0025】
［項１３］ オピオイドの投与と併用される、項７に記載の医薬組成物。
【0026】
［項１４］ オピオイドがモルヒネである、項１３に記載の医薬組成物。
【0027】
［項１５］ オピオイドの投与と同時に投与される、項７に記載の医薬組成物。
【0028】
［項１６］ オピオイドがモルヒネである、項１５に記載の医薬組成物。
【0029】
［項１７］ ヒダントイン系化合物がホスフェニトインであり、オピオイドがモルヒネである、項１４又は項１６に記載の医薬組成物。
【0030】
［項１８］ ヒダントイン系化合物とモルヒネとの重量比が、１０００：１～１：１０００の範囲内である、項１４又は項１６に記載の医薬組成物。
【0031】
［項１９］ ホスフェニトインとモルヒネとの重量比が、１００：１～１００：２０の範囲内である、項１８に記載の医薬組成物。
【0032】
更に、本発明では、以下を提供する。
［項２０］ 治療が必要な患者に、フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物を投与することを含む、急性痛の治療方法。
［項２０］ 治療が必要な患者に、フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物を投与することを含む、急性痛の治療方法。
【0033】
［項２１］ 治療が必要な患者に、フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物及びオピオイドを投与することを含む、急性痛の治療方法。
【0034】
［項２２］ 治療が必要な患者に、フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物及びオピオイドを同時に投与することを含む、急性痛の治療方法。
【0035】
［項２３］ 治療が必要な患者に、ホスフェニトイン及びモルヒネを投与することを含む、急性痛の治療方法。
【0036】
［項２４］ 治療が必要な患者に、ホスフェニトイン及びモルヒネを同時に投与することを含む、急性痛の治療方法。
【発明の効果】
【0037】
本発明により、幅広い患者に適応可能な、急性痛、特に、術後急性痛の治療薬を提供することが可能となる。
【0038】
更に、ヒダントイン系化合物とオピオイドとを併用して使用することにより、周術期のオピオイド使用量を減量することが可能となる。
【発明を実施するための形態】
【0039】
以下、本発明について詳細に説明する。
【0040】
本発明において、急性痛とは、急性疼痛と同義で用いられ、通常は組織損傷に対する反応として生じ、末梢の痛覚受容器とそれに対応するＡδおよびＣ線維で構成される感覚神経線維（侵害受容器）が活性化することによって発生する（ＭＳＤマニュアル）。
【0041】
本発明において、術後急性痛とは、手術後に、神経組織が損傷することや、損傷部位で炎症反応が起こることによる痛みのことをいい、急性痛の1つである。
【0042】
本発明において、投与対象（患者）は、温血動物であり、ヒトまたは非ヒト哺乳動物である。一実施形態では、投与対象はヒトである。
【0043】
有効成分
本発明の治療剤で用いる有効成分は、フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物である。フェニトインは、日本薬局方に収載されており、例えばアレビアチンの販売名で住友ファーマ株式会社から又はヒダントールの販売名で第一三共株式会社から販売されており、ホスフェニトインは、ホストインの販売名でノーベルファーマ株式会社から販売されている。そして、ホスフェニトインは、フェニトインのプロドラッグである。そして、エトトインは、アクセノンの販売名で住友ファーマ株式会社から販売されている。一方、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸は現在市販されてはいないが、てんかんの治療薬として古くから公知の化合物である。なかでも、フェニトイン、ホスフェニトインが好ましく、特にホスフェニトインが推奨される。
本発明の治療剤で用いる有効成分は、フェニトイン、ホスフェニトイン、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸及びエトトインよりなる群から選択されるヒダントイン系化合物である。フェニトインは、日本薬局方に収載されており、例えばアレビアチンの販売名で住友ファーマ株式会社から又はヒダントールの販売名で第一三共株式会社から販売されており、ホスフェニトインは、ホストインの販売名でノーベルファーマ株式会社から販売されている。そして、ホスフェニトインは、フェニトインのプロドラッグである。そして、エトトインは、アクセノンの販売名で住友ファーマ株式会社から販売されている。一方、メフェニトイン、ニルバノール、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸は現在市販されてはいないが、てんかんの治療薬として古くから公知の化合物である。なかでも、フェニトイン、ホスフェニトインが好ましく、特にホスフェニトインが推奨される。
【0044】
特に、ホスフェニトインは、生体内でアルカリホスファターゼにより活性代謝物であるフェニトインに加水分解されフェニトインとして作用するものであり、フェニトインの有する副作用が軽減されており、好ましく使用される。
【0045】
これらの有効成分は、単独で使用可能であり、又は、複数を組み合わせて使用することも可能である。
【0046】
有効成分の光学異性体
本発明の有効成分であるヒダントイン系化合物が不斉中心を含有する場合、例えばエトトインの場合、ラセミ体およびラセミ混合物、単一鏡像異性体として存在してよい。本発明は、単一種として、またはその混合物としての何れかの、化合物の全てのこのような異性体を包含するものとする。
本発明の有効成分であるヒダントイン系化合物が不斉中心を含有する場合、例えばエトトインの場合、ラセミ体およびラセミ混合物、単一鏡像異性体として存在してよい。本発明は、単一種として、またはその混合物としての何れかの、化合物の全てのこのような異性体を包含するものとする。
【0047】
有効成分の塩
本発明の有効成分であるヒダントイン系化合物は、塩の形態で使用することもできる。例えば、ホスフェニトインはリン酸基を有しており、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸は、アミノ基とカルボキシル基を有しており、それらの薬学的に許容される塩の形態も使用可能である。
本発明の有効成分であるヒダントイン系化合物は、塩の形態で使用することもできる。例えば、ホスフェニトインはリン酸基を有しており、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸は、アミノ基とカルボキシル基を有しており、それらの薬学的に許容される塩の形態も使用可能である。
【0048】
本発明において「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される非毒性塩基または酸から調製される塩を指す。本発明のヒダントイン系化合物が酸性である場合、その対応する塩は、無機塩基及び有機塩基を含む、薬学的に許容される非毒性塩基から調製することができる。例えば、そのような塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（第二及び第一）、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（第二及び第一）、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩が含まれる。なかでも、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム及びナトリウムの塩が好ましい。特に、ホスフェニトインの場合は、そのナトリウム塩、カリウム塩が好ましく、特にナトリウム塩が推奨される。
【0049】
一方、本発明の有効成分であるヒダントイン系化合物が塩基性である場合、その対応する塩は、薬学的に許容される非毒性の無機酸及び有機酸から調製することができる。そのような酸には、例えば酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコ酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ－トルエンスルホン酸などが含まれる。
【0050】
特に、アミノ（ジフェニルヒダントイン）吉草酸のように分子内に酸性基と塩基性基の両方を有する場合は、両性イオンの形態で存在することもできる。
【0051】
本明細書において、ヒダントイン系化合物への言及は薬学的に許容される塩も含むものであることは当然理解される。
【0052】
本発明で用いる有効成分の適切な投薬量レベルは、通常約０．０１～５００ｍｇ／患者体重ｋｇ／日であり、単回または複数回投与で投与することができる。適した投薬量レベルは、約０．０１～２５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～１００ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．１～５０ｍｇ／ｋｇ／日であり得る。この範囲内で、投薬量は０．０５～０．５、０．５～５または５～５０ｍｇ／ｋｇ／日であってよい。有効成分は、１日に１～４回の投与レジメで投与されてもよいし、１日に１回または２回投与されてもよい。
【0053】
しかし、任意の特定の患者に対する具体的な用量レベルおよび投薬頻度は変動し、用いる具体的な有効成分の活性、その有効成分の代謝安定性および作用の長さ、年齢、体重、全体的な健康、性別、食事、投与様式および回数、排出速度、薬剤の組み合わせ、特定の症状の重症度、および治療を受けるホストを含む、多様な要因に依存することは当業者に理解される。
【0054】
本発明の有効成分は、経口、非経口（例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内、ＩＣＶ、大槽内注射または注入、皮下注射、または移植）、吸入スプレー、鼻腔、膣、直腸、舌下、口内または局所の投与経路によって投与してよく、単独又は一緒で、各々の投与経路に適切な従来の無毒の薬学的に許容される担体を含有する適切な投薬単位製剤に処方され得る。
【0055】
医薬組成物
本発明の治療剤の有効成分は、薬学的に許容される担体と組み合わせて、医薬組成物として患者に投与される。医薬組成物としては、経口、経直腸、局所、ならびに非経口（例えば、皮下、筋肉内および静脈内）投与に適した組成物が挙げられるが、所定の症例における最も適した経路は、具体的な宿主、ならびに有効成分の投与対象の病状の性質および重症度に依存する。
本発明の治療剤の有効成分は、薬学的に許容される担体と組み合わせて、医薬組成物として患者に投与される。医薬組成物としては、経口、経直腸、局所、ならびに非経口（例えば、皮下、筋肉内および静脈内）投与に適した組成物が挙げられるが、所定の症例における最も適した経路は、具体的な宿主、ならびに有効成分の投与対象の病状の性質および重症度に依存する。
【0056】
一般に、医薬組成物は、有効成分を液体担体または微粉砕した固体担体または両方と均一にかつ均質に会合させ、その後、必要に応じて、生成物を所望の製剤に成形することによって調製される。医薬組成物中の有効成分は、疾患の過程または症状への効果を生じるために十分な量を含む。
【0057】
有効成分を含有する医薬組成物は、経口使用に適した形態、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性もしくは油性懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒、乳濁液、溶液、硬または軟カプセル、あるいはシロップもしくはエリキシル剤に製剤化される。経口使用のための組成物は、医薬組成物の製造のための当分野で公知の任意の方法に従って調製することができ、そのような組成物は、甘味剤、香味剤、着色剤および保存剤からなる群から選択される１以上の薬剤を含有することができる。錠剤は、有効成分を、錠剤の製造に適した無毒の製薬上許容される賦形剤と混合して含有する。これらの賦形剤は、不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム；造粒剤および崩壊剤、例えばトウモロコシデンプンまたはアルギン酸；結合剤、例えばデンプン、ゼラチンまたはアラビアガム；ならびに滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクであってよい。錠剤は、コーティングされていなくてもよく、又は胃腸管での崩壊および吸収を遅延させ、それによって長期にわたる持続的な作用をもたらすために既知技法によってコーティングされていてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料を用いればよい。また、それらは従来公知の方法によってコーティングして、制御放出のための浸透圧による治療錠剤を形成してもよい。また、即時放出のための経口錠剤、例えば高速溶解錠剤もしくはウエハー、急速溶解錠剤または急速溶解フィルムなどを処方することもできる。
【0058】
また、経口使用のための製剤は、有効成分が不活性の固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合されている硬ゼラチンカプセル剤、あるいは有効成分が水または油媒体、例えばピーナッツ油、流動パラフィン、またはオリーブ油と混合されている軟ゼラチンカプセル剤として提示されてもよい。
【0059】
水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合した有効成分を含有する。そのような賦形剤は、沈殿防止剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシ－プロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル－ピロリドン、トラガカントガムおよびアラビアガムであり；分散剤または湿潤剤は、天然に存在するリン脂質、例えばレシチン、または、アルキレン酸化物と脂肪酸の縮合生成物、例えばステアリン酸ポリオキシエチレン、または、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、または、エチレンオキシドと、脂肪酸及びヘキシトールに由来する部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレエートなど、またはエチレンオキシドと、脂肪酸及びヘキシトール無水物由来の部分エステルとの縮合生成物、例えばポリエチレンソルビタンモノオレエートであってよい。また、水性懸濁液は、防腐剤、例えばエチルまたはｎ－プロピル、ｐ－ヒドロキシベンゾエート、着色剤、香味剤、および甘味剤、例えばスクロースまたはサッカリンを含有してもよい。
【0060】
油性懸濁液は、有効成分を、植物油、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油またはココナッツ油に、または流動パラフィンなどの鉱油に懸濁することによって処方することができる。油性懸濁液は、増粘剤、例えば蜜ろう、固形パラフィンまたはセチルアルコールを含むことができる。上記に示したものなどの甘味剤および香味剤を添加し、美味な経口調製物を得ることができる。これらの組成物は、アスコルビン酸のような抗酸化剤を添加することにより保存することができる。
【0061】
水の添加による水性懸濁液の調製に適した分散性粉末および顆粒は、有効成分を、分散剤または湿潤剤、沈殿防止剤および１以上の防腐剤と混合して提供する。適した分散剤または湿潤剤および沈殿防止剤は、すでに上に述べたものによって例示される。さらなる賦形剤、例えば甘味料、香味料および着色剤も存在してよい。
【0062】
また、本発明の医薬組成物は、水中油型乳濁液の形態で存在することができる。油性相は、植物油、例えばオリーブ油またはラッカセイ油、または鉱油、例えば流動パラフィン、あるいはこれらの混合物であってよい。適した乳化剤は、天然に存在するガム、例えばアラビアガムまたはトラガカントガム、天然に存在するリン脂質、例えばダイズ、レシチン、ならびに脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来するエステルまたは部分エステル、例えばソルビタンモノオレエート、ならびに前記部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートである。また、これらの乳濁液は甘味料および香味剤を含有してもよい。
【0063】
シロップ剤およびエリキシル剤は、甘味剤、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはスクロースとともに処方することができる。また、そのような製剤は、粘滑剤、防腐剤および香味料および着色剤を含有してもよい。
【0064】
本発明の医薬組成物は、滅菌した注射可能な水性または油性懸濁液の形態であってよい。この懸濁液は、上記の分散剤または湿潤剤および沈殿防止剤を用いて、既知技術によって処方することができる。また、滅菌注射用製剤は、無毒の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射溶液または懸濁液としてもよい。許容されるビヒクル又は溶媒には、水、リンゲル液および等張食塩水溶液が挙げられる。更に、油性の懸濁液用のビヒクル又は溶媒として、滅菌不揮発油、例えば、合成モノマーもしくはジグリセリドを含む任意の無刺激性の不揮発油が挙げられる。
【0065】
また、本発明の医薬組成物は、薬物の直腸投与用の坐剤の形態で投与することもできる。これらの組成物は、薬物を、常温で固体であるが直腸温度で液体であり、そのために直腸で溶融して薬物を放出する適切な非刺激性賦形剤と混合することにより調製することができる。そのような材料は、カカオバターおよびポリエチレングリコールである。
【0066】
経皮吸収のような局所投与には、本発明の有効成分を含有するクリーム、軟膏、ゼリー、溶液または懸濁液等が用いられる。同様に、経皮パッチも局所投与に使用される。
【0067】
上記形態の中でも、本発明の医薬組成物は、注射剤、経口剤または経皮吸収製剤が好ましい。
【0068】
更には、本発明の治療剤は急性痛治療に用いられるので、医薬組成物としては、投与後に直ちに血中濃度が上がり効果を発揮できるよう、注射用、特に静脈注射用の製剤が好ましい。
【0069】
他の薬剤との併用（併用療法）
本発明の医薬組成物は、その効果を高めるために他の薬剤と併用することができる。そのような他の薬剤は、それに関して一般的に使用される経路及び量で、本発明の医薬組成物と同時に又は逐次的に投与することができる。本発明の医薬組成物は、一般に、当該症状に対する１以上の他の薬剤を既に摂取している患者に対して投与することができる。また、本発明の医薬組成物は、１以上の急性痛治療薬で既に治療されている患者に対して、その患者の痛みが治療に適切に応答していない場合にも投与される。
本発明の医薬組成物は、その効果を高めるために他の薬剤と併用することができる。そのような他の薬剤は、それに関して一般的に使用される経路及び量で、本発明の医薬組成物と同時に又は逐次的に投与することができる。本発明の医薬組成物は、一般に、当該症状に対する１以上の他の薬剤を既に摂取している患者に対して投与することができる。また、本発明の医薬組成物は、１以上の急性痛治療薬で既に治療されている患者に対して、その患者の痛みが治療に適切に応答していない場合にも投与される。
【0070】
併用療法は、さらに、本発明の医薬組成物と１以上の他の薬剤が重複する異なるスケジュールで投与される療法も包含する。１以上の他の薬剤と組み合わせて使用する場合、本発明の医薬組成物及び該他の薬剤をそれぞれが単独で使用される場合よりも低い用量で使用することができることも意図されている。従って、本発明の医薬組成物は、本発明の医薬組成物に加えて１以上の他の薬剤を含む医薬組成物をも包含することができる。
【0071】
そのような他の薬剤としては、オピオイド類；カルシウムチャンネル拮抗薬；ＮＭＤＡ受容体作用薬；ＮＭＤＡ受容体拮抗薬；ＣＯＸ－２選択的阻害薬；ＮＳＡＩＤ（非ステロイド性抗炎症薬）；及び、鎮痛薬が挙げられる。
【0072】
特に、オピオイド類、例えば、リン酸コデイン、モルヒネ、オキシコドン、フェンタニル、レミフェンタニル、メペリジン、トラマドール、ブプレノルフィン、ペンタゾシン等が好ましく、なかでも、モルヒネ、フェンタニル等が好ましい。
【0073】
本発明は、さらに、急性痛を治療する方法も提供し、ここで、該方法は、そのような治療を必要とする患者に、その症状を治療するのに有効な特定量の本発明の医薬組成物及び特定量の他の薬剤を投与し、それによって、それらが一緒になって効果的な緩和をもたらすことを含む。
【0074】
本発明の医薬組成物におけるヒダントイン系化合物と他の薬剤の重量比は、変えることができ、そして、各成分の有効用量に依存する。一般的には、それぞれの有効な用量が使用される。従って、例えば、本発明のヒダントイン系化合物がオピオイド類と組み合わされる場合、本発明のヒダントイン系化合物とオピオイド類の重量比は、オピオイド類がモルヒネである場合、約１０００：１～約１：１０００の範囲内であり、好ましくは、約２００：１～約１：２００の範囲内である。特に、ホスフェニトインとモルヒネとの重量比が、１００：１～１００：２０の範囲内が推奨される。
【0075】
本発明のヒダントイン系化合物と他の別の薬剤との組み合わせも、一般に、前述の範囲内であるが、いずれの場合にも、各有効成分の有効な用量を使用すべきである。
【実施例0076】
以下に具体的な実施形態を挙げて本発明を説明するが、本発明はその実施形態に限定されるものではなく、それらにおける様々な変更及び改変が当業者によって、添付の特許請求の範囲に規定される本発明の範囲または趣旨から逸脱することなく実行され得ることが理解される。
【0077】
実験内容
（１）急性痛に対する鎮痛効果
切開モデルに対するホスフェニトイン群（３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、各６匹）、モルヒネ群（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、各６匹）、ビヒクル群（６匹）における機械刺激及び熱刺激に対する応答を行動解析により評価する。
（２）急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果
急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果切開モデルに対するホスフェニトイン（鎮痛効果の生じない用量）＋モルヒネ群（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、各６匹）及びモルヒネ単独群（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、各６匹）における機械刺激及び熱刺激に対する応答を行動解析により、モルヒネの鎮痛効果の増強効果をモルヒネ単独群と比較評価する。
（３）急性痛時のｐＥＲＫ１／２発現抑制効果
切開モデルに対するホスフェニトイン群（３０ｍｇ／ｋｇ、６匹）、モルヒネ群（３ｍｇ／ｋｇ、６匹）、もしくはビヒクル群（６匹）におけるｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ １／２（ｐＥＲＫ１／２）の発現抑制（薬剤単独）を免疫組織化学法（６匹／群×３群）およびウェスタンブロッティング（６匹／群×３群）によりそれぞれ評価する。
（１）急性痛に対する鎮痛効果
切開モデルに対するホスフェニトイン群（３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、各６匹）、モルヒネ群（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、各６匹）、ビヒクル群（６匹）における機械刺激及び熱刺激に対する応答を行動解析により評価する。
（２）急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果
急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果切開モデルに対するホスフェニトイン（鎮痛効果の生じない用量）＋モルヒネ群（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、各６匹）及びモルヒネ単独群（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、各６匹）における機械刺激及び熱刺激に対する応答を行動解析により、モルヒネの鎮痛効果の増強効果をモルヒネ単独群と比較評価する。
（３）急性痛時のｐＥＲＫ１／２発現抑制効果
切開モデルに対するホスフェニトイン群（３０ｍｇ／ｋｇ、６匹）、モルヒネ群（３ｍｇ／ｋｇ、６匹）、もしくはビヒクル群（６匹）におけるｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ １／２（ｐＥＲＫ１／２）の発現抑制（薬剤単独）を免疫組織化学法（６匹／群×３群）およびウェスタンブロッティング（６匹／群×３群）によりそれぞれ評価する。
【0078】
実験スケジュール
（１）急性痛に対する鎮痛効果
モデル作成２４時間後にホスフェニトインまたはモルヒネを腹腔内投与した。
行動解析は術前、術後２４時間（薬剤投与前、２４ｈ）、薬剤投与後１時間（２５ｈ）、薬剤投与後４時間（２８ｈ）、薬剤投与後２４時間（４８ｈ）に評価した。なお、行動解析前にチャンバー内で実験動物を十分に順応させたあと、行動解析を実施した。
（２）急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果
モデル作成２４時間後にホスフェニトインおよびモルヒネを腹腔内投与した。
（１）と同様に、行動解析は術前、術後２４時間（薬剤投与前、２４ｈ）、薬剤投与後１時間（２５ｈ）、薬剤投与後４時間（２８ｈ）、薬剤投与後２４時間（４８ｈ）に評価した。
（３）急性痛時のｐＥＲＫ１／２発現抑制効果
モデル作成１時間前にホスフェニトインまたはモルヒネを腹腔内投与した。
術後１０分時点で術側の第５腰髄後根神経節を採取し、ｐＥＲＫ１／２の発現を評価した。
（１）急性痛に対する鎮痛効果
モデル作成２４時間後にホスフェニトインまたはモルヒネを腹腔内投与した。
行動解析は術前、術後２４時間（薬剤投与前、２４ｈ）、薬剤投与後１時間（２５ｈ）、薬剤投与後４時間（２８ｈ）、薬剤投与後２４時間（４８ｈ）に評価した。なお、行動解析前にチャンバー内で実験動物を十分に順応させたあと、行動解析を実施した。
【化1】
モデル作成２４時間後にホスフェニトインおよびモルヒネを腹腔内投与した。
（１）と同様に、行動解析は術前、術後２４時間（薬剤投与前、２４ｈ）、薬剤投与後１時間（２５ｈ）、薬剤投与後４時間（２８ｈ）、薬剤投与後２４時間（４８ｈ）に評価した。
（３）急性痛時のｐＥＲＫ１／２発現抑制効果
モデル作成１時間前にホスフェニトインまたはモルヒネを腹腔内投与した。
術後１０分時点で術側の第５腰髄後根神経節を採取し、ｐＥＲＫ１／２の発現を評価した。
【0079】
使用薬剤及び試薬
使用薬剤及び試薬は以下のものを使用した。
・ホスフェニトインナトリウム：
ホスフェニトインナトリウムとして７５０ｍｇ／１０ｍＬ（ノーベルファーマ株式会社、ロット番号：ＮＰ０６２２３１）
・モルヒネ塩酸塩注射液：
モルヒネ塩酸塩水和物として１０ｍｇ／ｍＬを含有（第一三共株式会社、ロット番号：ＥＴＡ０１３５）
・イソフルラン吸入麻酔液「ファイザー」：
イソフルラン１ｍＬ／ｍＬ（マイランＥＰＤ合同会社、ロット番号：２２９ＫＡＲ）
使用薬剤及び試薬は以下のものを使用した。
・ホスフェニトインナトリウム：
ホスフェニトインナトリウムとして７５０ｍｇ／１０ｍＬ（ノーベルファーマ株式会社、ロット番号：ＮＰ０６２２３１）
・モルヒネ塩酸塩注射液：
モルヒネ塩酸塩水和物として１０ｍｇ／ｍＬを含有（第一三共株式会社、ロット番号：ＥＴＡ０１３５）
・イソフルラン吸入麻酔液「ファイザー」：
イソフルラン１ｍＬ／ｍＬ（マイランＥＰＤ合同会社、ロット番号：２２９ＫＡＲ）
【0080】
免疫組織化学法
・一次抗体
・二次抗体
・免疫組織学関連試薬
・免疫組織学関連機器・消耗品
・顕微鏡関連機器・消耗品
・一次抗体
・二次抗体
・免疫組織学関連試薬
・免疫組織学関連機器・消耗品
・顕微鏡関連機器・消耗品
【0081】
ウェスタンブロッティング
・一次抗体
・二次抗体
・ウェスタンブロッティング関連試薬
・ウェスタンブロッティング関連機器・消耗品
・一次抗体
・二次抗体
・ウェスタンブロッティング関連試薬
・ウェスタンブロッティング関連機器・消耗品
【0082】
実験動物
実験には、Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ ラット（週齢１２ｗ，ｍａｌｅ，２００－２５０ｇ，ｈｏｕｓｅｄ ｉｎ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ３ ｐｅｒ ｃａｇｅ ｕｎｄｅｒ ａ １２ｈ ｌｉｇｈｔ－ｄａｒｋ ｃｙｃｌｅ）を用いた。
実験には、Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ ラット（週齢１２ｗ，ｍａｌｅ，２００－２５０ｇ，ｈｏｕｓｅｄ ｉｎ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ３ ｐｅｒ ｃａｇｅ ｕｎｄｅｒ ａ １２ｈ ｌｉｇｈｔ－ｄａｒｋ ｃｙｃｌｅ）を用いた。
【0083】
術後痛モデルの作成
イソフルランによる全身麻酔下に、すべてのラットに対して、左後肢の皮膚、筋膜、足底筋に１ｃｍの縦切開を行い、皮膚は５－０ナイロン縫合糸で閉創し、術後痛モデルを作成した。
イソフルランによる全身麻酔下に、すべてのラットに対して、左後肢の皮膚、筋膜、足底筋に１ｃｍの縦切開を行い、皮膚は５－０ナイロン縫合糸で閉創し、術後痛モデルを作成した。
【0084】
評価の測定
（１）行動解析
機械刺激としてｖｏｎ Ｆｒｅｙ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ（Ｍｕｒｏｍａｃｈｉ Ｋｉｋａｉ）、熱刺激としてｒａｄｉａｎｔ ｈｅａｔ ｔｅｓｔ （Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ）を用い、それぞれに対する応答を行動解析により評価した。
（２）免疫組織化学法
組織を灌流、固定、スクロース置換した後、凍結させクライオスタットで切片を切り出し、切片をブロッキング後、一次抗体・二次抗体でインキュベートした。切片はデジタルカメラ付き蛍光顕微鏡を用いて可視化し（図７）、画像はＩｍａｇｅ－Ｊにより解析した。ｐＥＲＫ１／２およびＤＡＰＩ陽性ニューロン数を数え、その割合を計算した。
（３）ウェスタンブロッティング
採取したＤＲＧをプロテアーゼ／ホスファターゼ阻害剤を含むバッファーでホモジネートし、各サンプルのタンパク質濃度を測定し、均一化した。ＳＤＳ－ＰＡＧＥで分離した後、ＰＶＤＦメンブレンに転写、メンブレンはブロッキング後、一次抗体・二次抗体でインキュベートした。Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔを用いて可視化し、Ｉｍａｇｅ－Ｊを使用してｂａｎｄのシグナル測定・解析を行った。
（１）行動解析
機械刺激としてｖｏｎ Ｆｒｅｙ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ（Ｍｕｒｏｍａｃｈｉ Ｋｉｋａｉ）、熱刺激としてｒａｄｉａｎｔ ｈｅａｔ ｔｅｓｔ （Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ）を用い、それぞれに対する応答を行動解析により評価した。
（２）免疫組織化学法
組織を灌流、固定、スクロース置換した後、凍結させクライオスタットで切片を切り出し、切片をブロッキング後、一次抗体・二次抗体でインキュベートした。切片はデジタルカメラ付き蛍光顕微鏡を用いて可視化し（図７）、画像はＩｍａｇｅ－Ｊにより解析した。ｐＥＲＫ１／２およびＤＡＰＩ陽性ニューロン数を数え、その割合を計算した。
（３）ウェスタンブロッティング
採取したＤＲＧをプロテアーゼ／ホスファターゼ阻害剤を含むバッファーでホモジネートし、各サンプルのタンパク質濃度を測定し、均一化した。ＳＤＳ－ＰＡＧＥで分離した後、ＰＶＤＦメンブレンに転写、メンブレンはブロッキング後、一次抗体・二次抗体でインキュベートした。Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔを用いて可視化し、Ｉｍａｇｅ－Ｊを使用してｂａｎｄのシグナル測定・解析を行った。
【0085】
薬物投与
全身投与する方法として、腹腔内投与を用いた。投与量は参考文献１及び３を基に決定した。いずれの投与も１回の投与総量を１ｍＬとなるように生理食塩水で希釈した。
全身投与する方法として、腹腔内投与を用いた。投与量は参考文献１及び３を基に決定した。いずれの投与も１回の投与総量を１ｍＬとなるように生理食塩水で希釈した。
【0086】
データ解析
統計解析は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア等を用い、データの形式に従って適切な方法を用いて実施した。ｐ＜０．０５を統計学的に有意であるとみなした。
統計解析は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア等を用い、データの形式に従って適切な方法を用いて実施した。ｐ＜０．０５を統計学的に有意であるとみなした。
【0087】
結果
（１）急性痛に対する鎮痛効果
＜機械刺激：ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ＞
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（いずれもｐ＜０．０１）に高かった。
・モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｍ１）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０１、ｐ＜０．０５）に高かった。
・モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ０．３）の投与後１時間（２５ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０５）に高かった。
・ホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（いずれもｐ＜０．０１）に高かった。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１）に高かった。
・ホスフェニトイン３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３）の鎮痛効果はいずれの時点においてもビヒクル群に比べて有意な差は認められなかった。
（１）急性痛に対する鎮痛効果
＜機械刺激：ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ＞
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（いずれもｐ＜０．０１）に高かった。
・モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｍ１）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０１、ｐ＜０．０５）に高かった。
・モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ０．３）の投与後１時間（２５ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０５）に高かった。
・ホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（いずれもｐ＜０．０１）に高かった。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１）に高かった。
・ホスフェニトイン３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３）の鎮痛効果はいずれの時点においてもビヒクル群に比べて有意な差は認められなかった。
【0088】
急性痛に対する鎮痛効果（機械刺激）の結果を図１に示す。
【0089】
＜熱刺激：ｔｈｅｒｍａｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ＞
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（いずれもｐ＜０．０１）に高かった。
・モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｍ１）の投与後１時間（２５ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０１）に高かった。
・モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ０．３）の鎮痛効果はいずれの時点においてもビヒクル群に比べて有意な差は認められなかった。
・ホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）の投与後１時間（２５ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０１）に高かった。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０）及びホスフェニトイン３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３）の鎮痛効果はいずれの時点においてもビヒクル群に比べて有意な差は認められなかった。
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（いずれもｐ＜０．０１）に高かった。
・モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｍ１）の投与後１時間（２５ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０１）に高かった。
・モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ０．３）の鎮痛効果はいずれの時点においてもビヒクル群に比べて有意な差は認められなかった。
・ホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）の投与後１時間（２５ｈ）の鎮痛効果はビヒクル群に比べて有意（ｐ＜０．０１）に高かった。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０）及びホスフェニトイン３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３）の鎮痛効果はいずれの時点においてもビヒクル群に比べて有意な差は認められなかった。
【0090】
急性痛に対する鎮痛効果（熱刺激）の結果を図２に示す。
【0091】
（２）急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果
＜機械刺激：ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ＞
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ０．３）及びホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ１）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）比べいずれも有意（いずれもｐ＜０．０１）に低かった（図３）。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ１）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｍ１）に比べいずれも有意（いずれもｐ＜０．０５）に高く、鎮痛増強効果が認められた（図４－Ａ）。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ０．３）の投与後４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ０．３）に比べ有意（ｐ＜０．０１）に高く、鎮痛増強効果が認められた（図４－Ｂ）。
＜機械刺激：ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ＞
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ０．３）及びホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ１）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）比べいずれも有意（いずれもｐ＜０．０１）に低かった（図３）。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ１）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｍ１）に比べいずれも有意（いずれもｐ＜０．０５）に高く、鎮痛増強効果が認められた（図４－Ａ）。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ０．３）の投与後４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ０．３）に比べ有意（ｐ＜０．０１）に高く、鎮痛増強効果が認められた（図４－Ｂ）。
【0092】
＜熱刺激：ｔｈｅｒｍａｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ＞
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ０．３）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）に比べいずれも有意（ｐ＜０．０１、ｐ＜０．０５）に低かった（図５）。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ１）の投与後４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｍ１）に比べ有意（ｐ＜０．０５）に高く、鎮痛増強効果が認められた（図６－Ａ）。
・ ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ０．３）の投与後４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ０．３）に比べ有意（ｐ＜０．０５）に高く、鎮痛増強効果が認められた（図６－Ｂ）。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ０．３）の投与後１時間（２５ｈ）及び４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）に比べいずれも有意（ｐ＜０．０１、ｐ＜０．０５）に低かった（図５）。
・ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ１）の投与後４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ１ｍｇ／ｋｇ（Ｍ１）に比べ有意（ｐ＜０．０５）に高く、鎮痛増強効果が認められた（図６－Ａ）。
・ ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇ＋モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｆ１０＋Ｍ０．３）の投与後４時間（２８ｈ）の鎮痛効果は、モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ０．３）に比べ有意（ｐ＜０．０５）に高く、鎮痛増強効果が認められた（図６－Ｂ）。
【0093】
（３）急性痛時のｐＥＲＫ１／２発現抑制効果
＜免疫組織化学法＞
・ビヒクル群と比較してホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）は、全体の陽性ニューロン数の割合において有意（ｐ＜０．０１）な低下が認められた（図８）。
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）の全体の陽性ニューロン数の割合は、ビヒクル群と同程度であった（図８）。
・ビヒクル群と比較してホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）は、ｐＥＲＫ＋／３ＰＧＤＨ＋の比率において有意（ｐ＜０．０１）な低下が認められた（図９）。
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）のｐＥＲＫ＋／３ＰＧＤＨ＋の比率は、ビヒクル群と同程度であった（図９）。
＜免疫組織化学法＞
・ビヒクル群と比較してホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）は、全体の陽性ニューロン数の割合において有意（ｐ＜０．０１）な低下が認められた（図８）。
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）の全体の陽性ニューロン数の割合は、ビヒクル群と同程度であった（図８）。
・ビヒクル群と比較してホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）は、ｐＥＲＫ＋／３ＰＧＤＨ＋の比率において有意（ｐ＜０．０１）な低下が認められた（図９）。
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）のｐＥＲＫ＋／３ＰＧＤＨ＋の比率は、ビヒクル群と同程度であった（図９）。
【0094】
＜ウェスタンブロッティング＞
・Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔによるバンド画像を示す（図１０左図）。
・ビヒクル群と比較してホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）は、ｐＥＲＫ／ＧＡＰＤＨの比率において、有意（ｐ＜０．０５）な低下が認められた（図１０右図）。
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）のｐＥＲＫ＋／３ＰＧＤＨ＋のｐＥＲＫ／ＧＡＰＤＨの比率は、ビヒクル群と同程度であった（図１０右図）。
・Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔによるバンド画像を示す（図１０左図）。
・ビヒクル群と比較してホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇ（Ｆ３０）は、ｐＥＲＫ／ＧＡＰＤＨの比率において、有意（ｐ＜０．０５）な低下が認められた（図１０右図）。
・モルヒネ３ｍｇ／ｋｇ（Ｍ３）のｐＥＲＫ＋／３ＰＧＤＨ＋のｐＥＲＫ／ＧＡＰＤＨの比率は、ビヒクル群と同程度であった（図１０右図）。
【0095】
上記の試験により、ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与はモルヒネ１ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与とほぼ同等の鎮痛効果を認めた。
【0096】
モルヒネは、激しい疼痛時における鎮痛・鎮静に効能効果を有し、このときの用法用量は成人において１回５－１０ｍｇの皮下投与である。本試験ではモルヒネ１ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与した。投与経路は異なるものの、体重換算としてヒト成人（体重５０ｋｇとして）においてモルヒネ５０ｍｇの単回投与と同等の強い鎮痛効果が得られている。
【0097】
さらに、ホスフェニトイン１０ｍｇ／ｋｇをモルヒネ１ｍｇ／ｋｇならびに０．３ｍｇ／ｋｇと併用することにより、モルヒネ１ｍｇ／ｋｇおよび０．３ｍｇ／ｋｇの単独投与に比べ鎮痛効果の増強が認められた。
【0098】
足底切開刺激は一次知覚神経を活性化し、神経感作によって急性痛の増悪や術後痛の慢性化を引き起こす。一次知覚神経活性化の指標としてリン酸化ＥＲＫ（ｐＥＲＫ）を用いてホスフェニトインの神経感作抑制効果をモルヒネと比較した。ｐＥＲＫの発現は術後痛モデルの一次知覚神経において、ニューロン、グリアともに有意な上昇を認めた。ホスフェニトイン３０ｍｇ／ｋｇの投与によりｐＥＲＫの発現は有意に抑制されたが、モルヒネ３ｍｇ／ｋｇでは抑制されなかった。このことから、モルヒネは神経感作を抑制しないが、ホスフェニトインは効果的に抑制することが示され、ホスフェニトインはすぐれた作用機序により疼痛の抑制をもたらすことが明らかである。
【0099】
これらの結果より、術後痛患者に対し、ホスフェニトインは単独で優れた鎮痛効果を発揮する可能性が示されただけでなく、オピオイドと併用することでその使用量を減少させる効果が期待できる。
【0100】
本試験においてはホスフェニトインやモルヒネを腹腔内投与している。一般的に腹腔内投与では血中濃度の上昇が静脈内投与よりも緩徐であり、最高血中濃度が低くなることが見込まれる。このため、静脈内投与では同様の用量を用いてもより強い効果が生じる可能性がある。
【0101】
【0102】
【表2】
【0103】
【表3】
【0104】
【表4】
【0105】
【表5】
【0106】
【表6】
【0107】
【表7】
【0108】
【表8】
【0109】
【表9】
【0110】
【表10】
【0111】
【表11】
【0112】
参考文献
1)Takasaki I, et al. Fosphenytoin alleviates herpes simplex virus infection-induced provoked and spontaneous pain-like behaviors in mice. Biol Pharm Bull. 2022;45(3):360-363.
2)Yamakita S, et al. Synergistic activation of ERK1/2 between A-fiber neurons and glial cells in the DRG contributes to pain hypersensitivity after tissue injury. Mol Pain. 2018;14:174480691876750.
3)Sanna MD, et al. Regionally selective activation of ERK and JNK in morphine paradoxical hyperalgesia: a step toward improving opioid pain therapy. Neuropharmacology. 2014;86:67-77.
1)Takasaki I, et al. Fosphenytoin alleviates herpes simplex virus infection-induced provoked and spontaneous pain-like behaviors in mice. Biol Pharm Bull. 2022;45(3):360-363.
2)Yamakita S, et al. Synergistic activation of ERK1/2 between A-fiber neurons and glial cells in the DRG contributes to pain hypersensitivity after tissue injury. Mol Pain. 2018;14:174480691876750.
3)Sanna MD, et al. Regionally selective activation of ERK and JNK in morphine paradoxical hyperalgesia: a step toward improving opioid pain therapy. Neuropharmacology. 2014;86:67-77.
【産業上の利用可能性】
【0113】
本発明の治療薬は、急性痛、特に、術後急性痛の治療薬となり得、幅広い患者に適応可能となる。
【図面の簡単な説明】
【0114】
【図1】機械刺激での急性痛に対する鎮痛効果を示す。
【図2】熱刺激での急性痛に対する鎮痛効果を示す。
【図3】機械刺激での急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果を示す。
【図4】機械刺激での急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果を示す。（Ａ）は、モルヒネ１ｍｇ／ｋｇであり、（Ｂ）は、モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇである。
【図5】熱刺激での急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果を示す。
【図6】熱刺激での急性痛に対するモルヒネ鎮痛増強効果を示す。（Ａ）は、モルヒネ１ｍｇ／ｋｇであり、（Ｂ）は、モルヒネ０．３ｍｇ／ｋｇである。
【図7】デジタルカメラ付き蛍光顕微鏡を用いた画像である。
【図8】全体の陽性ニューロン数の割合を示す。
【図9】ｐＥＲＫ陽性／３ＰＧＤＨ陽性の比率を示す。
【図10】Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔによるｂａｎｄ画像（左図）及びｐＥＲＫ／ＧＡＰＤＨの比率（右図）を示す。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
