特開 2024-16631 安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法及び測定装置

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024016631

(43)【公開日】2024-02-07

(54)【発明の名称】安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法及び測定装置

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/72 20060101AFI20240131BHJP

【ＦＩ】

G01N33/72 A

【審査請求】未請求

【請求項の数】6

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2022118897

(22)【出願日】2022-07-26

(71)【出願人】

【識別番号】000141897

【氏名又は名称】アークレイ株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110001519

【氏名又は名称】弁理士法人太陽国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】大沼 直嗣

(72)【発明者】

【氏名】松田 友亨

【テーマコード（参考）】

2G045

【Ｆターム（参考）】

2G045DA48

2G045FB20

2G045JA02

(57)【要約】

【課題】安定型ヘモグロビンＡ１ｃの高値化が生じている検体において、より真値に近い安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値を測定できる測定方法を提供する。
【解決手段】陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法による安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法であって、前記分離分析法により測定対象の血液検体から分析信号を得る工程、分析信号から安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークのピーク値であるＣ値と、安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークとヘモグロビンＡ０ピークとの間に現れる特定ピークのピーク値であるＸ値とを決定する工程、及び、あらかじめ決定された演算式にＣ値とＸ値を当て嵌めてＣ値を低値化したＣ′値を得ることにより、Ｃ値を補正する工程、を含み、前記演算式は、前記分離分析法により安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の血液検体から得られたＣ値とＸ値との間の相関関係に基づいて決定されている。
【選択図】図１０

【特許請求の範囲】

【請求項1】

陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法による安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法であって、
前記分離分析法により測定対象の血液検体から分析信号を得る工程、
前記分析信号から安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークのピーク値であるＣ値と、前記安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークとヘモグロビンＡ０ピークとの間に現れる特定ピークのピーク値であるＸ値とを決定する工程、及び、
あらかじめ決定された演算式に前記Ｃ値と前記Ｘ値を当て嵌めて前記Ｃ値を低値化したＣ′値を得ることにより、前記Ｃ値を補正する工程、
を含み、
前記演算式は、前記分離分析法により安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の血液検体から得られたＣ値とＸ値との間の相関関係に基づいて決定されている、
安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法。

【請求項2】

前記演算式が、
Ｙ＝Ａ＊Ｘ
及び、
Ｃ′＝Ｃ－Ｙ
で表される式（式中、Ａは、安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の複数の血液検体から得られた前記Ｘ値と、安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の複数の血液検体から得られた前記Ｃ値との間の回帰直線の傾きであり、Ｘは、測定対象の血液検体から得られた前記Ｘ値であり、Ｃは、測定対象の血液検体から得られた前記Ｃ値である）を含む、請求項１に記載の安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法。

【請求項3】

前記演算式が、
Ｒ_１＝ａ＊Ｘ＋ｂ
及び
Ｃ′＝Ｃ－Ｃ＊Ｒ_１
で表される式（式中、ａは、安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の複数の血液検体から得られた前記Ｘ値と、安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の複数の血液検体から得られた前記Ｃ値の経時変動率との間の回帰直線の傾きであり、ｂは、該回帰直線の切片であり、Ｘは、測定対象の血液検体から得られた前記Ｘ値であり、Ｃは、測定対象の血液検体から得られた前記Ｃ値である）を含む、請求項１に記載の安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法。

【請求項4】

前記安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークのピークトップ検出時間を０、及び、前記ヘモグロビンＡ０ピークのピークトップ検出時間を１としたとき、検出時間０．１以上０．６５未満に現れるピークを前記特定ピークとする、請求項１から請求項３までのいずれか１項に記載の安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法。

【請求項5】

前記補正を行う工程が、前記Ｘ値が閾値を超えた場合に実行される、請求項１から請求項３までのいずれか１項に記載の安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法。

【請求項6】

安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の血液検体を陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法に供して、安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークのピーク値であるＣ値と、前記安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークとヘモグロビンＡ０ピークとの間に現れる特定ピークのピーク値であるＸ値との間の相関関係に基づいてあらかじめ決定された演算式を記憶する記憶装置、
陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法に測定対象の血液検体を供して、分析信号を得る分析装置、
前記分析信号から安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークのピーク値であるＣ値と、安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークとヘモグロビンＡ０ピークとの間に現れる特定ピークのピーク値であるＸ値とを得る第１演算装置、並びに、
前記Ｃ値及び前記Ｘ値を前記演算式に当て嵌めて前記Ｃ値を低値化したＣ′値を演算する第２演算装置、
を含んでなる、安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定装置。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、血液検体中の安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法及び測定装置に関する。

【背景技術】

【0002】

血液試料中のヘモグロビンについては、複数のヘモグロビン種があり、正常ヘモグロビン（ヘモグロビンＡ）の他、異常ヘモグロビンとも称される複数種の変異ヘモグロビン（ヘモグロビンＣ、ヘモグロビンＤ、ヘモグロビンＥ、ヘモグロビンＳ等）が存在する。ヘモグロビンの測定には、電気泳動（特許文献１）及び液体クロマトグラフィー（特許文献２）が用いられる。

【0003】

陽イオン交換クロマトグラフィーによって異常ヘモグロビンであるヘモグロビンＥを含む血液試料を測定した場合、安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークとヘモグロビンＡ０ピークとの間にヘモグロビンＥピークが検出される。血液試料がヘモグロビンＥを含有する場合、安定型ヘモグロビンＡ１ｃピーク（ピーク面積）が減少し、その結果、安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が、正確な安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値よりも低値を示すことが報告されている。したがって、正確な安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値を得るために、ヘモグロビンＡ１ｃ値を高くする補正が行われる（特許文献３及び４）。

【0004】

また、異常ヘモグロビンであるヘモグロビンＣ、ヘモグロビンＤ又はヘモグロビンＳを含む血液試料を測定した場合も同様に、正確な安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値を得るために補正が行われる（特許文献５）。すなわち、特許文献５記載の技術では、このような異常ヘモグロビンが含まれる検体のヘモグロビンＡ１ｃ値を測定する際、これら異常ヘモグロビン成分の一部が、ヘモグロビンＡの非糖化成分であるヘモグロビンＡ０と同時に又はその後に溶出するため、異常ヘモグロビンに対応する顕著なピークを安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値の計算から除外しても、安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値は低値を示してしまうという現象に対して、異常ヘモグロビンの面積値に基づき、ヘモグロビンＡ１ｃ値を高くするように補正が行われる。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】特開２０１９－０７８５９９号公報

【特許文献2】特開平９－２６４８８９号公報

【特許文献3】特開２０１２－２１５４７０号公報

【特許文献4】特開２０１６－１８３８７１号公報

【特許文献5】特開２０１７－２０３６７７号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

従来の測定装置を利用して、安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の試料を測定した場合に、真値としてのその安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値よりも実測値が高くなるという現象がしばしば確認される。本発明者らによる検証の結果、陽イオン交換を原理とする分離分析法において経時劣化した検体を用いると、安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定値が高値化するという現象が特定された。

【0007】

本開示の実施態様は、たとえば検体が経時劣化のような変質を被っている場合のように、安定型ヘモグロビンＡ１ｃの高値化が生じている検体に対して、その高値化の影響を安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定値から減じることにより、できるだけ除去してより真値に近い安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値を測定できる測定方法を提供するものである。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本開示の一態様は、陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法による安定型ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法であって、前記分離分析法により測定対象の血液検体から分析信号を得る工程、分析信号から安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークのピーク値であるＣ値と、安定型ヘモグロビンＡ１ｃピークとヘモグロビンＡ０ピークとの間に現れる特定ピークのピーク値であるＸ値とを決定する工程、及び、あらかじめ決定された演算式にＣ値とＸ値を当て嵌めてＣ値を低値化したＣ′値を得ることにより、Ｃ値を補正する工程、を含み、前記演算式は、前記分離分析法により安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値が既知の血液検体から得られたＣ値とＸ値との間の相関関係に基づいて決定されている。

【発明の効果】

【0009】

本開示の実施態様によれば、たとえば検体が経時劣化のような変質を被っている場合のように、安定型ヘモグロビンＡ１ｃの高値化が生じている検体に対して、その高値化の影響をできるだけ除去して、より真値に近い安定型ヘモグロビンＡ１ｃ値を測定できる測定方法が提供される。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1】検体１について、採血当日（Ａ）及び採血２８日後（Ｂ）のエレクトロフェログラム。

【図2】演算式の第１例を示すフローチャート。

【図3】演算式の第２例を示すフローチャート。

【図4】実施形態の測定装置のブロック図。

【図5】制御装置のブロック図。

【図6】検体１（Ａ）、検体２（Ｂ）及び検体３（Ｃ）のそれぞれについて、Ｘ値と原Ｃ値との相関関係を示すグラフ。

【図7】検体１（Ａ）、検体２（Ｂ）及び検体３（Ｃ）のそれぞれについて、Ｘ値とＣ′値との相関関係を示すグラフ。

【図8】検体１（Ａ）、検体２（Ｂ）及び検体３（Ｃ）のそれぞれについて、Ｃ値の経時的変化を示すグラフ。

【図9】検体１（Ａ）、検体２（Ｂ）及び検体３（Ｃ）のそれぞれについて、Ｃ値の０日目に対する変動率の経時的変化を示すグラフ。

【図10】Ｃ値の経時変動率とＸ値との相関関係を示すグラフ。

【図11】検体１（Ａ）、検体２（Ｂ）及び検体３（Ｃ）のそれぞれについて、Ｃ′値の経時的変化を示すグラフ。

【図12】検体１（Ａ）、検体２（Ｂ）及び検体３（Ｃ）のそれぞれについて、Ｃ′値の０日目に対する変動率の経時的変化を示すグラフ。

【発明を実施するための形態】

【0011】

以下、本開示における実施形態を、図面を参照しつつ説明する。各図において共通する符号は、特段の説明がなくとも同一の部分を指し示す。なお、本開示における「ピーク値」とは、分析信号としてのエレクトロフェログラムで認められる各ピークの高さ又は面積であり、相対値を用いることができ、絶対値を用いることもできる。この相対値は、エレクトロフェログラムの面積の全体に対する比率であってもよいし、エレクトロフェログラムに占めるヘモグロビンに関するピーク面積の全体に対する比率であってもよいし、あるいは、特定のピーク（たとえば、ヘモグロビンＡ０ピーク）の面積に対する比率であってもよい。なお、分析信号としては、エレクトロフェログラムのみならずクロマトグラムであってもよい。その場合の「ピーク値」の意義については上記と同様である。

【0012】

また、以下の記述では、ヘモグロビンＡ０を「ＨｂＡ０」、及び、安定型ヘモグロビンＡ１ｃを「ｓ－ＨｂＡ１ｃ」と標記する。さらに、ヒト由来の血液検体をキャピラリー電気泳動法に供して観察されるヘモグロビンのエレクトロフェログラムにおいて、ＨｂＡ０及びｓ－ＨｂＡ１ｃに帰せられるピークをそれぞれ「ＨｂＡ０ピーク」及び「ｓ－ＨｂＡ１ｃピーク」と称する。また、ＨｂＡ０ピーク及びｓ－ＨｂＡ１ｃピーク並びに後述する「特定ピーク」についてのピーク値をそれぞれ、「ＨｂＡ０ピーク値」、「ｓ－ＨｂＡ１ｃピーク値」及び「特定ピーク値」と称する。

【0013】

図１は、後述する実施例の血液検体のうち、検体１について、採血当日に陽イオン交換を原理とするキャピラリー電気泳動法により測定したヘモグロビンのエレクトロフェログラム（Ａ）及び採血２８日後に同様に測定したヘモグロビンのエレクトロフェログラム（Ｂ）である。図１（Ａ）及び図１（Ｂ）では、溶出時間２７秒付近のＨｂＡ０ピーク５０と、溶出時間２０秒付近のｓ－ＨｂＡ１ｃピーク６０とが観察される。

【0014】

そして、図１（Ｂ）では、ｓ－ＨｂＡ１ｃピーク６０とＨｂＡ０ピーク５０との間の溶出時間２２．５秒付近に、図１（Ａ）には認められないピークが出現する。このピークを「特定ピーク７０」と称する。特定ピーク７０が現れる理由は不明であるが、特定ピーク７０は、たとえば、採血当日から日数を経過して経時劣化を被った血液検体のような、変質した血液検体において現れる場合がある。特定ピーク７０は、ｓ－ＨｂＡ１ｃピーク６０のピークトップ検出時間を０とし、また、ＨｂＡ０ピーク５０のピークトップ検出時間を１としたときに、検出時間０を上回り１未満、望ましくは０．０１以上０．８未満、より望ましくは０．１以上０．６５未満、さらに望ましくは０．２以上０．５未満（図１（Ｂ）では０．４１）に現れるピークである。

【0015】

後述の実施例で示すように、陽イオン交換を原理とするキャピラリー電気泳動法で、様々な日数を保管した血液検体のヘモグロビンを測定すると、ｓ－ＨｂＡ１ｃピーク値と特定ピーク値との間には正の相関が認められる。

【0016】

以上より、本実施形態のｓ－ＨｂＡ１ｃの測定方法は、陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法によるものであって、前記分離分析法により測定対象の血液検体から分析信号を得る工程、分析信号からｓ－ＨｂＡ１ｃピークのピーク値であるＣ値と、ｓ－ＨｂＡ１ｃとＨｂＡ０ピークとの間に現れる特定ピークのピーク値であるＸ値とを決定する工程、及び、あらかじめ決定された演算式にＣ値とＸ値を当て嵌めてＣ値を低値化したＣ′値を得ることにより、Ｃ値を補正する工程、を含む。そして、この演算式は、前記分離分析法によりｓ－ＨｂＡ１ｃ値が既知の血液検体から得られたＣ値とＸ値との間の相関関係に基づいて決定されている。

【0017】

演算式は、たとえば、ｓ－ＨｂＡ１ｃ値が既知の複数の血液検体から得られたＣ値とＸ値との間の回帰直線の傾きであるＡ値を、測定対象の血液検体から得られたＸ値に乗じた値であるＹ値を得る演算段階、及び、Ｙ値を測定対象の血液検体から得られたＣ値から減じてＣ′値を得る演算段階を含むものとしてもよい。なお、複数の血液検体の各々についてＣ値とＸ値との間の回帰直線を求め、それらの傾きの平均値をＡ値としてもよい。

【0018】

すなわち、ｓ－ＨｂＡ１ｃ値が既知の複数の血液検体の各々についてＣ値とＸ値とを測定して、複数のＣ値と対応する複数のＸ値との間の回帰直線の傾きとして上記Ａ値をあらかじめ求めておく。そして、測定対象の血液検体について、前記した分離分析法により分析信号を得て、Ｃ値とＸ値とを測定する。このＣ値とＸ値とは、たとえば、図２のフローチャートで表される演算式に適用される。

【0019】

具体的には、Ｓ１０に示す段階において、下記式（１）に示すように、測定対象の血液検体で測定されたＸ値にＡ値が乗ぜられた値がＹ値となる。

【0020】

Ｙ＝Ａ＊Ｘ ・・・（１）

【0021】

このＹ値は、Ｘ値に応じてＣ値が真値に対して底上げされた分に相当する値と考えられるので、次に、Ｓ１５に示す段階において、下記式（２）に示すように、測定対象の血液検体で測定されたＣ値からＹ値が減じられた値であるＣ′値が得られることで、Ｃ値が低値化される。

【0022】

Ｃ′＝Ｃ－Ｙ ・・・（２）

【0023】

なお、上記式（１）で求められるＹ値は、Ｃ値が真値に対して底上げされた分を過大に見積もっていたり、逆に過小に見積もっている場合がある。そのような場合には、上記式（１）のＡ値を修正したり、Ｘ値を修正したり、若しくはＡ値とＸ値との積に任意の値を加減したり、又はこれらのうちの２つ以上を併用したりすることで、Ｙ値を適正な値に修正することとしてもよい。

【0024】

演算式は、上記とは別に、たとえば、ｓ－ＨｂＡ１ｃ値が既知の血液検体から得られたＣ値の経時変動率とＸ値との間の相関関係に、測定対象の血液検体から得られたＸ値を当て嵌めてＣ値の変動率であるＲ_１値を得る演算段階、及び、測定対象の血液検体から得られたＣ値にＲ_１値を乗じて得られた値を、Ｃ値から減じてＣ′値を得る演算段階を含むものとしてもよい。

【0025】

すなわち、ｓ－ＨｂＡ１ｃ値が既知の複数の血液検体の各々についてＣ値とＸ値とを測定しておく。このとき、同一の血液検体について、採血当日から所定日数保管後までの各々についてＣ値とＸ値とが測定される。そして、採血当日のＣ値に対し、所定日数保管後のＣ値が変動する割合である経時変動率と、これに対応する複数のＸ値との間の相関関係、たとえば回帰直線をあらかじめ求めておく。ここで、経時変動率がｙ、Ｘ値がｘとすると、この回帰直線は下記式（３）のようになる。

【0026】

ｙ＝ａｘ＋ｂ ・・・（３）

【0027】

ここで、上記式（３）中のａは回帰直線の傾きであり、ｂは回帰直線の切片である。そして、前記した分離分析法により分析信号を得て、測定対象の血液検体についてＣ値とＸ値とを測定する。このＣ値とＸ値とは、図３のフローチャートで表される演算式に適用される。

【0028】

具体的には、Ｓ２０に示す段階において、下記式（４）に示すように、上記式（３）のｘにＸ値を代入して得られるｙがＲ_１値となる。

【0029】

Ｒ_１＝ａ＊Ｘ＋ｂ ・・・（４）

【0030】

このＲ_１値は、Ｘ値に対応するＣ値の経時変動率である。次に、Ｓ２５に示す段階において、下記式（５）に示すように、測定対象の血液検体で測定されたＣ値にこのＲ_１値を乗じた値が、Ｃ値から減じられることで、Ｃ値が低値化される。

【0031】

Ｃ′＝Ｃ－Ｃ＊Ｒ_１ ・・・（５）

【0032】

なお、上記式（４）で求められるＲ_１値は、上記式（５）で行う補正においてＣ値を過大に低値化したり、逆に低値化が過小である場合がある。そのような場合には、上記式（４）のａの値を修正したり、ｂの値を修正したり、若しくはＸ値を修正したり、又はこれらのうちの２つ以上を併用したりすることで、Ｒ_１値を適正な値に修正することとしてもよい。

【0033】

演算式は、前記分離分析法によりｓ－ＨｂＡ１ｃ値が既知の血液検体から得られたＣ値とＸ値との間の相関関係に基づいて決定されている相関テーブルを含んでいてもよい。たとえば、測定対象の血液検体で測定されたＸ値とＣ値とから、相関テーブルを用いて底上げされた分に相当する値又は割合を求め、その値をＣ値から減じることでＣ′値を求めてもよい。あるいは、測定対象の血液検体で測定されたＸ値とＣ値とから、相関テーブルを用いて上記式（１）のＹ値を求め、Ｃ値からＹ値を減じることでＣ′値を求めてもよい。あるいは、測定対象の血液検体で測定されたＸ値とＣ値とから、相関テーブルに基づいて上記式（４）のＲ_１値を求め、Ｃ値にＲ_１値を乗じた値をＣ値から減じることでＣ′値を求めてもよい。

【0034】

ここで、特定ピークは、ｓ－ＨｂＡ１ｃピークのピークトップ検出時間を０、及び、ＨｂＡ０ピークのピークトップ検出時間を１としたとき、検出時間０を上回り１未満、望ましくは０．０１以上０．８未満、より望ましくは０．１以上０．６５未満、さらに望ましくは０．２以上０．５未満に現れるピークとすることが望ましい。

【0035】

たとえば、図１（Ｂ）において、ｓ－ＨｂＡ１ｃピーク６０のピークトップ検出時間である溶出時間２０秒の時点を０とし、また、ＨｂＡ０ピーク５０のピークトップ検出時間である溶出時間２６．６秒の時点を１としたとき、特定ピーク７０のピークトップ検出時間である溶出時間２２．７秒の時点は０．４１となる。

【0036】

Ｃ値の高値化は、特定ピークが現れる際に見られる現象である。すなわち、特定ピークのピーク値であるＸ値の高値化に伴って、Ｃ値は底上げされて高値化する。なお、特定ピークが現れる理由は不明であるが、特定ピークは、たとえば、採血当日から日数を経過して経時劣化を被った血液検体のような、変質した血液検体において現れる場合がある。したがって、劣化していない血液検体に対して不必要にＣ値の補正を行わないという観点から、補正を行うか否かについてＸ値の閾値を設けてもよい。そして、Ｘ値が閾値（たとえば、全ヘモグロビンに対して５％）を超えた場合に、上記の演算式を用いたＣ値の補正を行ってもよい。

【0037】

本実施形態のｓ－ＨｂＡ１ｃの測定装置１０は、図４に示すように、ｓ－ＨｂＡ１ｃ値が既知の血液検体を陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法に供して、ｓ－ＨｂＡ１ｃピークのピーク値であるＣ値と、ｓ－ＨｂＡ１ｃピークとＨｂＡ０ピークとの間に現れる特定ピークのピーク値であるＸ値との間の相関関係に基づいてあらかじめ決定された演算式を記憶する記憶装置１５０、陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法に測定対象の血液検体を供して、分析信号を得る分析装置２０、分析信号からｓ－ＨｂＡ１ｃピークのピーク値であるＣ値と、ｓ－ＨｂＡ１ｃピークとＨｂＡ０ピークとの間に現れる特定ピークのピーク値であるＸ値とを得る第１演算装置１６０、並びに、Ｃ値及びＸ値を演算式に当て嵌めてＣ値を低値化したＣ′値を演算する第２演算装置１７０、を含んでなる。

【0038】

分析装置２０は、陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析を行う装置であり、たとえば、キャピラリー電気泳動装置又は液体クロマトグラフィー装置がこの分析装置２０に充てられる。分析装置２０は、ヘモグロビンを陽イオン交換により各成分に分離し、各成分に対応する信号データをたとえばエレクトロフェログラム（キャピラリー電気泳動装置の場合）又はクロマトグラム（液体クロマトグラフィー装置の場合）で出力する。

【0039】

制御装置１００は、記憶装置１５０と、第１演算装置１６０と、第２演算装置１７０とを有し、分析装置２０を制御するとともに、分析装置２０から出力された信号データに基づき、各種の演算を行う。

【0040】

制御装置１００は、図５のハードウェア構成に示すように、ＣＰＵ（Ｃｅｎｔｒａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｕｎｉｔ）１１０、ＲＯＭ（Ｒｅａｄ Ｏｎｌｙ Ｍｅｍｏｒｙ）１２０、ＲＡＭ（Ｒａｎｄｏｍ Ａｃｃｅｓｓ Ｍｅｍｏｒｙ）１３０及び記憶装置１５０を有する。各構成は、バス１９０を介して相互に通信可能に接続されている。

【0041】

ＣＰＵ１１０は、中央演算処理ユニットであり、各種プログラムを実行したり、各部を制御したりする。すなわち、ＣＰＵ１１０は、ＲＯＭ１２０又は記憶装置１５０からプログラムを読み出し、ＲＡＭ１３０を作業領域としてプログラムを実行する。ＣＰＵ１１０は、ＲＯＭ１２０又は記憶装置１５０に記録されているプログラムに従って、分析装置２０の制御を行う。

【0042】

ＲＯＭ１２０は、各種プログラム及び各種データを格納する。ＲＡＭ１３０は、作業領域として一時的にプログラム又はデータを記憶する。記憶装置１５０は、ＨＤＤ（Ｈａｒｄ Ｄｉｓｋ Ｄｒｉｖｅ）、ＳＳＤ（Ｓｏｌｉｄ Ｓｔａｔｅ Ｄｒｉｖｅ）又はフラッシュメモリによるストレージとして構成され、オペレーティングシステムを含む各種プログラム、及び各種データを格納する。本実施形態では、ＲＯＭ１２０又は記憶装置１５０には、制御や演算に関するプログラムや各種データが格納されている。この各種データには、上述した演算式も含まれる。

【0043】

制御装置１００は、上記ハードウェア構成のうちＣＰＵ１１０が、前記したプログラムを実行して、まず第１演算装置１６０として、分析装置２０からの分析信号から、Ｃ値とＸ値とを得る。そして、第２演算装置１７０として、Ｃ値及びＸ値を、記憶装置１５０に記憶されている演算式に当て嵌めて、Ｃ値を低値化したＣ′値を演算する。

【0044】

なお、上記ＣＰＵ１１０がプログラムを読み出して実行するｓ－ＨｂＡ１ｃの測定処理は、ＣＰＵ１１０以外の各種のプロセッサが実行してもよい。この場合のプロセッサとしては、ＦＰＧＡ（Ｆｉｅｌｄ－Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ Ｇａｔｅ Ａｒｒａｙ）等の製造後に回路構成を変更可能なＰＬＤ（Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ Ｌｏｇｉｃ Ｄｅｖｉｃｅ）及びＡＳＩＣ（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ｃｉｒｃｕｉｔ）等の特定の処理を実行させるために専用に設計された回路構成を有するプロセッサである専用電気回路等が例示される。また、ｓ－ＨｂＡ１ｃの測定処理を、これらの各種のプロセッサのうちの１つで実行してもよいし、同種又は異種の２つ以上のプロセッサの組み合わせ（たとえば、複数のＦＰＧＡ又はＣＰＵとＦＰＧＡとの組み合わせ等）で実行してもよい。また、これらの各種のプロセッサのハードウェア的な構造は、より具体的には、半導体素子等の回路素子を組み合わせた電気回路である。

【実施例0045】

（１）測定データ
３名の被験者についてそれぞれ、抗凝固剤を含んだ９種類の採血管（下記表１参照）へ静脈血を採取し、全血検体を得た（検体１、検体２及び検体３）。採取当日内に、この検体をキャピラリー電気泳動装置（Ｔｈｅ Ｌａｂ ００１、アークレイ）を用いて、０日目のＣ値及びＸ値を二重測定した。その後、－２０℃条件下に検体を保管し、保管から１日後、３日後、７日後、１４日後及び２８日後の各ポイントでそれぞれＣ値及びＸ値を二重測定した。

【0046】

【表1】

【0047】

（２）第１補正方法
図６は、検体１（Ａ）、検体２（Ｂ）及び検体３（Ｃ）のそれぞれについて、９種類の採血管で６つの検査ポイントごとに２回の測定を行った、計１０８組のデータを、横軸をＸ値、縦軸をＣ値の測定生値（原Ｃ値、単位は‰）としてグラフにプロットしたものである。各グラフ中の破線はＸ値と原Ｃ値との回帰直線である。回帰直線の傾きは、検体１で０．３８２、検体２で０．３４８、検体３で０．３３９であった。また、回帰直線の相関係数は、検体１で０．７４４、検体２で０．７１５、検体３で０．６３７でいずれも正の相関が見られた。

【0048】

そして、上記の傾きの平均値である０．３５６を、図２におけるＡとして、図６の測定対象の血液検体から得られたＸ値に乗じてＹ値を得て、同じ血液検体から得られたＣ値からこのＹ値を減じて低値化して補正したＣ′値を、Ｘ値と対応させて図６と同様にグラフにプロットしたのが図７である。各グラフ中の破線はＸ値とＣ′値との回帰直線である。回帰直線の傾きは、検体１で－０．０７２、検体２で－０．１０３、検体３で－０．１０６であった。また、回帰直線の相関係数は、検体１で－０．２００、検体２で－０．２７６、検体３で－０．２５２であった。

【0049】

検体１～検体３のそれぞれの補正前及び補正後の各データを測定生値から国際標準化値に変換した上で、平均値、標準偏差及び変動係数を下記表２に示す。

【0050】

【表2】

【0051】

上記表２より、原Ｃ値からＣ′値への補正によって、データのばらつきは平準化され、検体の保管によって生ずるＸ値の高値化に伴うＣ値の高値化が抑制されることが分かった。

【0052】

（３）第２補正方法
図８は、上記第１補正方法と同じ検体１（Ａ）、検体２（Ｂ）及び検体３（Ｃ）のそれぞれについての同じ測定データについて、各測定ポイントの二重測定で得られた値の平均値を、横軸を保管日数、縦軸をＣ値の測定生値から国際標準化値（単位は％）に変換した値として、採血管ごとにプロットしたグラフである。また、図９は、図８の各Ｃ値から、０日目のＣ値に対する変動率（経時変動率、単位は％）を算出してこれを縦軸として、保管日数を横軸としてプロットしたものである。ここで、経時変動率（Ｒ_２）は、０日目のＣ値をＣ_０、ｎ日目のＣ値をＣ_ｎとすると、下記式（６）にて算出される値である。

【0053】

Ｒ_２＝（Ｃ_ｎ－Ｃ_０）／Ｃ_０＊１００ ・・・（６）

【0054】

いずれの検体も、採血管の相違にかかわらず、保管日数が経過するにつれてＣ値（図８）が上昇し、それに伴いＣ値の経時変動率（図９）も上昇していく傾向が明らかであった。

【0055】

図１０は、各測定ポイントについて、Ｃ値の経時変動率とＸ値と組み合わせをグラフにプロットして、これらの相関関係を示した散布図である。この散布図から、Ｘ値とＣ値の変動率とは正の相関関係にあることが見て取れる。また、図中の破線は回帰直線を示し、経時変動率をｙ、Ｘ値をｘとすると、下記式（７）で表される。なお、この回帰直線の相関係数（ｒ）は０．７８２であった。

【0056】

ｙ＝０．６３２３ｘ－１．４１４３ ・・・（７）

【0057】

そして、測定対象の血液検体から得られたＸ値をｘとして上記式（７）に当て嵌めて得られたｙの値をＲ_１値とし、このＲ_１値をＣ値に乗じた値を、Ｃ値から減じて低値化して補正したＣ′値を、図８と同様に保管日数を横軸としてプロットしたものが図１１である。また、図１２は、図１１の各Ｃ′値から、０日目のＣ′値に対する経時変動率を算出してこれを縦軸として、保管日数を横軸としてプロットしたものである。

【0058】

いずれの検体も、採血管の相違にかかわらず、保管日数が経過してもＣ′値（図１１）の上昇は図８に比べて抑えられ、Ｃ′値の経時変動率（図１２）も平準化していた。

【0059】

検体１～検体３のそれぞれの補正前及び補正後の各データの平均、標準偏差及び変動係数を下記表３に示す。

【0060】

【表3】

【0061】

上記表３から、補正前に対して補正後では変動係数が小さくなっているため、各測定値の精度が向上したことが分かる。

【産業上の利用可能性】

【0062】

本発明は、陽イオン交換を原理とするヘモグロビンの分離分析法を用いた血液検体中の安定型ＨｂＡ１ｃの測定に利用可能である。

【符号の説明】

【0063】

１０ 測定装置
２０ 分析装置
５０ ＨｂＡ０ピーク
６０ ｓ－ＨｂＡ１ｃピーク
７０ 特定ピーク
１００ 制御装置
１１０ ＣＰＵ
１２０ ＲＯＭ
１３０ ＲＡＭ
１５０ 記憶装置
１６０ 第１演算装置
１７０ 第２演算装置
１９０ バス

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】