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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024170398
(43)【公開日】2024-12-10
(54)【発明の名称】膵がん治療のための組み合わせ治療薬
(51)【国際特許分類】
A61K 31/4523 20060101AFI20241203BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241203BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241203BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20241203BHJP
A61P 35/04 20060101ALI20241203BHJP
A61K 31/5025 20060101ALI20241203BHJP
【ＦＩ】
A61K31/4523
A61P43/00 121
A61P35/00 ZNA
A61P1/16
A61P35/04
A61K31/5025
A61P35/00
A61K31/4523 ZNA
【審査請求】有
【請求項の数】11
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2024125935
(22)【出願日】2024-08-01
(62)【分割の表示】P 2019510651の分割
【原出願日】2017-08-22
(31)【優先権主張番号】62/378,322
(32)【優先日】2016-08-23
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】509012625
【氏名又は名称】ジェネンテック， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100099623
【弁理士】
【氏名又は名称】奥山 尚一
(74)【代理人】
【識別番号】100125380
【弁理士】
【氏名又は名称】中村 綾子
(74)【代理人】
【識別番号】100142996
【弁理士】
【氏名又は名称】森本 聡二
(74)【代理人】
【識別番号】100180231
【弁理士】
【氏名又は名称】水島 亜希子
(72)【発明者】
【氏名】セトルマン，ジェフ
(72)【発明者】
【氏名】サフ，ニセビータ
(57)【要約】 （修正有）
【課題】肝臓転移の治療を必要とする対象において肝臓転移を治療するための組み合わせ医薬品を提供する。
【解決手段】組み合わせ医薬品であって、治療有効量の活性剤の組み合わせを含み、前記組み合わせが、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩とを含み、前記コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩が４５ｍｇ～７５ｍｇの量で存在し、前記ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩が３０ｍｇ～６０ｍｇの量で存在する、組み合わせ医薬品が提供される。
【選択図】図２０Ａ
【解決手段】組み合わせ医薬品であって、治療有効量の活性剤の組み合わせを含み、前記組み合わせが、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩とを含み、前記コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩が４５ｍｇ～７５ｍｇの量で存在し、前記ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩が３０ｍｇ～６０ｍｇの量で存在する、組み合わせ医薬品が提供される。
【選択図】図２０Ａ
【特許請求の範囲】
【請求項1】
膵がんの治療を必要とする対象において膵がんを治療する方法であって、治療有効量の
活性剤の組み合わせを前記対象に投与するステップを含み、前記組み合わせが、ＭＥＫ阻
害剤と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤とを含む
、方法。
活性剤の組み合わせを前記対象に投与するステップを含み、前記組み合わせが、ＭＥＫ阻
害剤と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤とを含む
、方法。
【請求項2】
前記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、ＧＤＣ－０６２３、トラメチニブ、ビニメチニブ
、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１およびＢＩ－
８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項
１に記載の方法。
、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１およびＢＩ－
８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項
１に記載の方法。
【請求項3】
前記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、およびトラメチニブ、またはそれらの薬学的に許
容される塩からなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
容される塩からなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩である、請求項３
に記載の方法。
に記載の方法。
【請求項5】
前記マルチキナーゼ剤が、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩である、請求項
１に記載の方法。
１に記載の方法。
【請求項6】
前記膵がんが内分泌がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項7】
前記膵がんが外分泌がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項8】
前記膵がんが、腺がん、腺房細胞がん、腺扁平上皮がん、粘液がん、破骨細胞様巨細胞
を伴う未分化がん、肝様腺がん、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、膵芽腫、漿液
性嚢胞腺腫、印環細胞がん、充実性偽乳頭状腫瘍、膵管がん、および未分化がんである、
請求項７に記載の方法。
を伴う未分化がん、肝様腺がん、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、膵芽腫、漿液
性嚢胞腺腫、印環細胞がん、充実性偽乳頭状腫瘍、膵管がん、および未分化がんである、
請求項７に記載の方法。
【請求項9】
前記膵がんが膵管腺がんである、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
前記組み合わせが相乗的である、請求項１に記載の方法。
【請求項11】
前記活性剤が逐次に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項12】
前記活性剤が同時に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項13】
前記ＭＥＫ阻害剤および前記マルチキナーゼ阻害剤が組み合わせ製剤として投与される
、請求項１に記載の方法。
、請求項１に記載の方法。
【請求項14】
前記ＭＥＫ阻害剤が約４５ｍｇ～約７５ｍｇの量で投与され、前記マルチキナーゼ阻害
剤が約３０ｍｇ～約６０ｍｇの量で投与される、請求項１に記載の方法。
剤が約３０ｍｇ～約６０ｍｇの量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項15】
前記量が１日１回投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項16】
前記ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブまたはその薬学的に許容される塩であり、前記マルチ
キナーゼ阻害剤がポナチニブまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の
方法。
キナーゼ阻害剤がポナチニブまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の
方法。
【請求項17】
膵がんの治療のための、ａ）ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ｂ）Ｐ
ＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学
的に許容される塩との組み合わせ。
ＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学
的に許容される塩との組み合わせ。
【請求項18】
有効量の、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、お
よびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩との組み
合わせと、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物であって、前記組成物が膵が
んの治療用である組成物。
よびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩との組み
合わせと、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物であって、前記組成物が膵が
んの治療用である組成物。
【請求項19】
前記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、ＧＤＣ－０６２３、トラメチニブ、ビニメチニブ
、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１およびＢＩ－
８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項
１８に記載の組成物。
、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１およびＢＩ－
８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項
１８に記載の組成物。
【請求項20】
前記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、およびトラメチニブ、またはそれらの薬学的に許
容される塩からなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
容される塩からなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項21】
前記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩である、請求項２
０に記載の組成物。
０に記載の組成物。
【請求項22】
前記マルチキナーゼ剤が、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩である、請求項
１８に記載の組成物。
１８に記載の組成物。
【請求項23】
コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と、ポナチニブまたはその薬学的に許容
される塩とを含む、請求項１８に記載の組成物。
される塩とを含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項24】
前記ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩が約４５ｍｇ～約７５ｍｇの量で存
在し、前記マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩が約３０ｍｇ～約６０
ｍｇの量で存在する、請求項１８に記載の組成物。
在し、前記マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩が約３０ｍｇ～約６０
ｍｇの量で存在する、請求項１８に記載の組成物。
【請求項25】
ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡ
Ｔ３を標的とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩と、容器と、添付文
書またはラベルとを含む、キット。
Ｔ３を標的とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩と、容器と、添付文
書またはラベルとを含む、キット。
【請求項26】
前記ＭＥＫ阻害剤が約１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、前記マルチ
キナーゼ阻害剤が約１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１に記
載の方法。
キナーゼ阻害剤が約１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１に記
載の方法。
【請求項27】
前記ＭＥＫ阻害剤が約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、前記マルチ
キナーゼ阻害剤が約１０ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２６
に記載の方法。
キナーゼ阻害剤が約１０ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２６
に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本明細書において記載される課題は、ＭＥＫ阻害剤とＲＴＫ、Ｓ６、およびＪＡＫ／Ｓ
ＴＡＴを標的とする多標的剤との組み合わせによる膵がんの治療に関する。
ＴＡＴを標的とする多標的剤との組み合わせによる膵がんの治療に関する。
【0002】
［ＥＦＳ－Ｗｅｂを介したテキストファイルとして提出され配列表への参照］
配列表の公式コピーは、２０１７年８月１０日に作成され、４７１バイトのサイズを有
する５０１１５９ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴという名称のファイルによってＡＳＣＩＩ形式
の配列表としてＥＦＳ－Ｗｅｂ経由で電子的に送信され、本明細書と同時に提出される。
このＡＳＣＩＩ形式の文書に含まれる配列表は、本明細書の一部であり、その全体が参照
により本明細書に組み込まれる。
配列表の公式コピーは、２０１７年８月１０日に作成され、４７１バイトのサイズを有
する５０１１５９ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴという名称のファイルによってＡＳＣＩＩ形式
の配列表としてＥＦＳ－Ｗｅｂ経由で電子的に送信され、本明細書と同時に提出される。
このＡＳＣＩＩ形式の文書に含まれる配列表は、本明細書の一部であり、その全体が参照
により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0003】
膵管腺がん（ＰＤＡＣ）は最も悪性のがんの１つであり、培養モデルで試験された膵が
ん細胞からの薬物応答の結果に基づいて数多くの治療法が研究されてきた。ＰＤＡＣ腫瘍
の大部分は、ＭＡＰＫシグナル伝達のＫＲＡＳ変異に駆動される活性化によって引き起こ
され（Ｊｏｎｅｓ Ｓ，Ｚｈａｎｇ Ｘ，Ｐａｒｓｏｎｓ ＤＷ，Ｌｉｎ ＪＣ，Ｌｅａ
ｒｙ ＲＪ，Ａｎｇｅｎｅｎｄｔ Ｐ，Ｃｏｒｅ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ
ｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒｓ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｂ
ｙ ｇｌｏｂａｌ ｇｅｎｏｍｉｃ ａｎａｌｙｓｅｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００８；３
２１（５８９７）：１８０１－６，Ｅｐｕｂ ２００８／０９／０６、Ｂｉａｎｋｉｎ
ＡＶ，Ｗａｄｄｅｌｌ Ｎ，Ｋａｓｓａｈｎ ＫＳ，Ｇｉｎｇｒａｓ ＭＣ，Ｍｕｔｈｕ
ｓｗａｍｙ ＬＢ，Ｊｏｈｎｓ ＡＬ，Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｇｅｎｏ
ｍｅｓ ｒｅｖｅａｌ ａｂｅｒｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ａｘｏｎ ｇｕｉｄａｎｃｅ
ｐａｔｈｗａｙ ｇｅｎｅｓ，Ｎａｔｕｒｅ，２０１２；４９１（７４２４）：３９９－
４０５，Ｅｐｕｂ ２０１２／１０／３０、Ｃｉｄ－Ａｒｒｅｇｕｉ Ａ，Ｊｕａｒｅｚ
Ｖ，Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｎｃ
ｒｅａｔｉｃ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇ
ａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０１５；２１（３１）：９２９７－３１６，Ｅｐｕ
ｂ ２０１５／０８／２７）、それによって、ＭＥＫがＰＤＡＣ患者における治療的介入
のための重要な候補標的として強調されている。しかしながら、前臨床および臨床研究は
、様々な補償メカニズムを介したＭＡＰＫ阻害剤に対する抵抗性が急速に発達し、それに
より阻害剤の有効性を限定し、薬物抵抗性の腫瘍の発生をもたらす可能性があるために、
ＭＡＰＫ経路阻害のみでは効力が欠如することを明らかにした。（Ｂａｉｎｅｓ ＡＴ，
Ｘｕ Ｄ，Ｄｅｒ ＣＪ，Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：ｔｈｅ ｓｅａｒｃｈ ｃｏｎｔｉｎｕｅｓ，Ｆｕｔｕｒｅ Ｍ
ｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１；３（１４）：１７８７－８０８，Ｅ
ｐｕｂ ２０１１／１０／１９、ＭｃＣｕｂｒｅｙ ＪＡ，Ｓｔｅｅｌｍａｎ ＬＳ，Ｃ
ｈａｐｐｅｌｌ ＷＨ，Ａｂｒａｍｓ ＳＬ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ ＲＡ，Ｍｏｎｔａｌｔ
ｏ Ｇ，Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ ａｎｄ ＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮ／Ａｋｔ／ｍＴ
ＯＲ ｃａｓｃａｄｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ｈｏｗ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｃａｎ
ｒｅｓｕｌｔ ｉｎ ｔｈｅｒａｐｙ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｈｏｗ ｔｏ
ｏｖｅｒｃｏｍｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ，２０１２；３（１０
）：１０６８－１１１，Ｅｐｕｂ ２０１２／１０／２３、Ｊｕｎｔｔｉｌａ ＭＲ，Ｄ
ｅｖａｓｔｈａｌｉ Ｖ，Ｃｈｅｎｇ ＪＨ，Ｃａｓｔｉｌｌｏ Ｊ，Ｍｅｔｃａｌｆｅ
Ｃ，Ｃｌｅｒｍｏｎｔ ＡＣ，Ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔ
ｉｏｎ ｏｆ ＭＥＫ ａｎｄ ＰＩ３ ｋｉｎａｓｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒ
ｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉ
ｃｓ，２０１５；１４（１）：４０－７，Ｅｐｕｂ ２０１４／１１／０８）．
ん細胞からの薬物応答の結果に基づいて数多くの治療法が研究されてきた。ＰＤＡＣ腫瘍
の大部分は、ＭＡＰＫシグナル伝達のＫＲＡＳ変異に駆動される活性化によって引き起こ
され（Ｊｏｎｅｓ Ｓ，Ｚｈａｎｇ Ｘ，Ｐａｒｓｏｎｓ ＤＷ，Ｌｉｎ ＪＣ，Ｌｅａ
ｒｙ ＲＪ，Ａｎｇｅｎｅｎｄｔ Ｐ，Ｃｏｒｅ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ
ｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒｓ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｂ
ｙ ｇｌｏｂａｌ ｇｅｎｏｍｉｃ ａｎａｌｙｓｅｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００８；３
２１（５８９７）：１８０１－６，Ｅｐｕｂ ２００８／０９／０６、Ｂｉａｎｋｉｎ
ＡＶ，Ｗａｄｄｅｌｌ Ｎ，Ｋａｓｓａｈｎ ＫＳ，Ｇｉｎｇｒａｓ ＭＣ，Ｍｕｔｈｕ
ｓｗａｍｙ ＬＢ，Ｊｏｈｎｓ ＡＬ，Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｇｅｎｏ
ｍｅｓ ｒｅｖｅａｌ ａｂｅｒｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ａｘｏｎ ｇｕｉｄａｎｃｅ
ｐａｔｈｗａｙ ｇｅｎｅｓ，Ｎａｔｕｒｅ，２０１２；４９１（７４２４）：３９９－
４０５，Ｅｐｕｂ ２０１２／１０／３０、Ｃｉｄ－Ａｒｒｅｇｕｉ Ａ，Ｊｕａｒｅｚ
Ｖ，Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｎｃ
ｒｅａｔｉｃ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇ
ａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０１５；２１（３１）：９２９７－３１６，Ｅｐｕ
ｂ ２０１５／０８／２７）、それによって、ＭＥＫがＰＤＡＣ患者における治療的介入
のための重要な候補標的として強調されている。しかしながら、前臨床および臨床研究は
、様々な補償メカニズムを介したＭＡＰＫ阻害剤に対する抵抗性が急速に発達し、それに
より阻害剤の有効性を限定し、薬物抵抗性の腫瘍の発生をもたらす可能性があるために、
ＭＡＰＫ経路阻害のみでは効力が欠如することを明らかにした。（Ｂａｉｎｅｓ ＡＴ，
Ｘｕ Ｄ，Ｄｅｒ ＣＪ，Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：ｔｈｅ ｓｅａｒｃｈ ｃｏｎｔｉｎｕｅｓ，Ｆｕｔｕｒｅ Ｍ
ｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１；３（１４）：１７８７－８０８，Ｅ
ｐｕｂ ２０１１／１０／１９、ＭｃＣｕｂｒｅｙ ＪＡ，Ｓｔｅｅｌｍａｎ ＬＳ，Ｃ
ｈａｐｐｅｌｌ ＷＨ，Ａｂｒａｍｓ ＳＬ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ ＲＡ，Ｍｏｎｔａｌｔ
ｏ Ｇ，Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ ａｎｄ ＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮ／Ａｋｔ／ｍＴ
ＯＲ ｃａｓｃａｄｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ｈｏｗ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｃａｎ
ｒｅｓｕｌｔ ｉｎ ｔｈｅｒａｐｙ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｈｏｗ ｔｏ
ｏｖｅｒｃｏｍｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ，２０１２；３（１０
）：１０６８－１１１，Ｅｐｕｂ ２０１２／１０／２３、Ｊｕｎｔｔｉｌａ ＭＲ，Ｄ
ｅｖａｓｔｈａｌｉ Ｖ，Ｃｈｅｎｇ ＪＨ，Ｃａｓｔｉｌｌｏ Ｊ，Ｍｅｔｃａｌｆｅ
Ｃ，Ｃｌｅｒｍｏｎｔ ＡＣ，Ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔ
ｉｏｎ ｏｆ ＭＥＫ ａｎｄ ＰＩ３ ｋｉｎａｓｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒ
ｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉ
ｃｓ，２０１５；１４（１）：４０－７，Ｅｐｕｂ ２０１４／１１／０８）．
【0004】
ＭＥＫ阻害剤に対する感受性および抵抗性の根底にあるメカニズムの理解を深めること
で、膵がん細胞を標的とするのに有効なＭＥＫ阻害剤と組み合わせて使用する阻害剤を特
定することができる。
で、膵がん細胞を標的とするのに有効なＭＥＫ阻害剤と組み合わせて使用する阻害剤を特
定することができる。
【発明の概要】
【0005】
一態様において、本明細書において記載される課題は、膵がんの治療を必要とする対象
において膵がんを治療する方法であって、治療有効量の活性剤の組み合わせを上記対象に
投与するステップを含み、上記組み合わせが、ＭＥＫ阻害剤と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、お
よびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤とを含む、方法に関する。
において膵がんを治療する方法であって、治療有効量の活性剤の組み合わせを上記対象に
投与するステップを含み、上記組み合わせが、ＭＥＫ阻害剤と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、お
よびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤とを含む、方法に関する。
【0006】
別の態様において、本明細書において記載される課題は、膵がんの治療のための、ａ）
ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ｂ）ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴ
ＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わ
せに関する。
ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ｂ）ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴ
ＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わ
せに関する。
【0007】
別の態様において、本明細書において記載される課題は、有効量の、ＭＥＫ阻害剤また
はその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマ
ルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせと、薬学的に許容される
賦形剤とを含む薬学的組成物であって、上記組成物が膵がんの治療用である組成物に関す
る。
はその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマ
ルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせと、薬学的に許容される
賦形剤とを含む薬学的組成物であって、上記組成物が膵がんの治療用である組成物に関す
る。
【0008】
別の態様において、本明細書において記載される課題は、膵がんの治療のための、ａ）
ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、ならびにＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳ
ＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ｂ）膵
がんの治療を示す添付文書またはラベルとを含む、膵がんの治療のためのキットに関する
。
ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、ならびにＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳ
ＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ｂ）膵
がんの治療を示す添付文書またはラベルとを含む、膵がんの治療のためのキットに関する
。
【0009】
これらおよび他の態様は以下に十分に記載される。
【図面の簡単な説明】
【0010】
【図1】２Ｄ単層培養および３Ｄスフェロイド培養におけるＫＰ４ ＰＤＡＣ細胞によるＭＥＫ阻害に対する異なる応答を示す。２Ｄおよび３Ｄ培養におけるＫＰ４がん細胞の小分子阻害剤スクリーニング。
【図2】２Ｄ単層培養および３Ｄスフェロイド培養におけるＫＰ４ ＰＤＡＣ細胞によるＭＥＫ阻害に対する異なる応答を示す。パネルＣにおいて異なる活性化をしたタンパク質の位置を暗くしたホスホキナーゼアレイの配置。
【図3】２Ｄ単層培養および３Ｄスフェロイド培養におけるＫＰ４ ＰＤＡＣ細胞によるＭＥＫ阻害に対する異なる応答を示す。２Ｄおよび３ＤにおけるＫＰ４細胞のホスホキナーゼアレイ。
【図4】２Ｄ単層培養および３Ｄスフェロイド培養におけるＫＰ４ ＰＤＡＣ細胞によるＭＥＫ阻害に対する異なる応答を示す。２Ｄまたは３Ｄで培養し、２４時間コビメチニブで処理したＫＰ４細胞のＲＴ－ＰＣＲによるタンパク質キナーゼアレイ。試料をＤＭＳＯ処理ＫＰ４ ２Ｄ対照に対して標準化した。
【図5】２Ｄ単層培養および３Ｄスフェロイド培養におけるＫＰ４ ＰＤＡＣ細胞によるＭＥＫ阻害に対する異なる応答を示す。２Ｄまたは３Ｄで培養し、２４時間コビメチニブで処理したＫＰ４細胞のルシフェラーゼレポーターアッセイ。ルシフェラーゼ活性の倍率変化に顕著な差がある転写因子は赤色で示されている。
【図6A-B】ＭＥＫ阻害がＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の活性化を誘導することを示す。（図６Ａ）ＫＰ４細胞におけるコビメチニブ処理時のＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の活性化を検証する免疫ブロット。（図６Ｂ）ウエスタンブロットによるＰＤＡＣ細胞株およびＫＰＰ－ＧＥＭＭ由来細胞株におけるコビメチニブ処理時のｐ－ＳＴＡＴ３の増加の検証。
【図7】ＭＥＫ阻害がＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の活性化を誘導することを示す。ＩＬ－６分泌レベルを、２４時間コビメチニブで処理したＰＤＡＣ細胞株の２Ｄ培養上清中で測定した。
【図8】ＭＥＫ阻害がＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の活性化を誘導することを示す。ＫＰ４およびＭＩＡ－ＰＡＣＡ２細胞の生存率に対する、コビメチニブと組み合わせたＤｏｘ誘導性ＳＴＡＴ３ノックダウンの効果を測定するＣＴＧアッセイ。
【図9】ＭＥＫ阻害がＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の活性化を誘導することを示す。Ｄｏｘ（１μｇ／ｍｌ）で７２時間処理した後のＳＴＡＴ３の効率的なノックダウンを裏付けるウエスタンブロット。
【図10】ＭＥＫ阻害がＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の活性化を誘導することを示す。マトリゲル浸潤アッセイにおいて、１０％ＦＢＳに応答した２Ｄおよび３Ｄで培養した膵がん細胞の浸潤能の定量化。
【図11】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。シグナル伝達受容体および下流の標的の活性化に対するコビメチニブと組み合わせたマルチＲＴＫ阻害剤ポナチニブの効果をウエスタンブロットによって検証した。
【図12】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。コビメチニブ＋／－ポナチニブまたはＪＡＫ阻害剤によるＳＴＡＴ３活性化および切断されたＰＡＲＰの誘導に対する効果をウエスタンブロットによって検証した。
【図13】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。２Ｄおよび３Ｄ培養においてコビメチニブ＋／－ポナチニブで前処理したＫＰ４細胞のＰａｔｈＳｃａｎ Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘウエスタンブロット分析。
【図14】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。コビメチニブ＋／－ポナチニブ／Ｓ６／ＰＤＧＦＲα阻害剤によるＳ６活性化および切断されたＰＡＲＰの誘導に対する効果をウエスタンブロットによって検証した。
【図15】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。ＫＰ４細胞の生存率に対するコビメチニブおよびルキソリチニブと組み合わせたＰＤＧＦＲ阻害剤クレノラニブの効果をＣＴＧアッセイを用いて測定した。
【図16】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。コビメチニブとポナチニブとの間の相乗作用を、ブリス分析を用いて膵がん細胞株において分析した。
【図17】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。コビメチニブとポナチニブとの間の相乗作用を、ブリス分析を用いて膵がん細胞株において分析した。
【図18】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。ＫＰ４細胞におけるコビメチニブとＳ６阻害剤ラパマイシンとの間の相乗効果のブリス分析。
【図19】コビメチニブと組み合わせたＳ６およびＳＴＡＴ３の阻害が膵がん細胞の死滅を増大させることを示す。ＫＰ４細胞におけるコビメチニブとＧＤＣ－０９８０との間の相乗効果のブリス分析。
【図20A-B】ＰＤＧＦＲα／Ｓ６／ＳＴＡＴ３およびＭＥＫの阻害が腫瘍増殖を阻害し、血清ＰＤＧＦαを減少させることを示す（図２０Ａ）。ＫＰ４異種移植モデルの腫瘍成長曲線（平均±ＳＥＭ）コビメチニブ（５ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＱＤ）および／またはポナチニブ（３０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＱＤ）で２４時間ごとに処理した（各コホートについてｎ＝１０）、（図２０Ｂ）（図２０Ａ）におけるように処理されたＫＰＰ異種移植モデルの腫瘍増殖曲線（平均±ＳＥＭ）。
【図21】ＰＤＧＦＲα／Ｓ６／ＳＴＡＴ３およびＭＥＫの阻害が腫瘍増殖を阻害し、血清ＰＤＧＦαを減少させることを示す。ＫＰ４異種移植からの代表的な腫瘍切片を、ｐ－ＳＴＡＴ３、ｐ－Ｅｒｋ、および切断カスパーゼ３をＩＨＣによって検出するために染色、または、ＩＦによって検出するためにｐ－ＳＴＡＴ３およびＦ４／８０またはｐ－ＰＤＧＦＲαに対する抗体で共染色した。スケールバー：ＩＨＣスライドについては２０μｍ、ＩＦスライドについては５０μｍ。
【図22】ＰＤＧＦＲα／Ｓ６／ＳＴＡＴ３およびＭＥＫの阻害が腫瘍増殖を阻害し、血清ＰＤＧＦαを減少させることを示す。ＫＰ４異種移植腫瘍のコビメチニブ／ポナチニブ治療時のＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の活性化を検証する免疫ブロット。
【図23】ＰＤＧＦＲα／Ｓ６／ＳＴＡＴ３およびＭＥＫの阻害が腫瘍増殖を阻害し、血清ＰＤＧＦαを減少させることを示す。ＫＰ４異種移植マウスの血漿試料の増殖因子およびサイトカインに対するＬｕｍｉｎｅｘアッセイ。
【図24】ＰＤＡＣ患者試料由来の膵腫瘍および転移におけるｐ－Ｅｒｋおよびｐ－ＳＴＡＴ３の分析を示す。８２のＰＤＡＣ患者由来の原発性腫瘍および転移における悪性腫瘍の種々のステージのｐ－Ｅｒｋおよびｐ－ＳＴＡＴ３陽性試料の分布。
【図25】ＰＤＡＣ患者試料由来の膵腫瘍および転移におけるｐ－Ｅｒｋおよびｐ－ＳＴＡＴ３の分析を示す。ＰＤＡＣ患者試料におけるｐ－Ｅｒｋおよびｐ－ＳＴＡＴ３を染色した代表的な原発性腫瘍および肝臓の切片。スケールバー：２０μｍ。
【図26】ＰＤＡＣ患者試料由来の膵腫瘍および転移におけるｐ－Ｅｒｋおよびｐ－ＳＴＡＴ３の分析を示す。ＰＤＡＣ患者腫瘍試料におけるＰＤＧＦＲおよびＩＬ－６Ｒの発現のマイクロアレイ分析。
【図27A-B】微小転移巣の組織病理学的特徴を有するＫＰ４由来の３Ｄスフェロイドは、小分子阻害剤に対して異なる感受性を示すことを示す。ＫＰ４細胞を、１０％正常ＦＢＳ（２Ｄ培養用）または１０％予め熱湯加熱されているＦＢＳ（３Ｄ培養用）を含むＲＰＭＩ培地で３日間培養し、Ｋｉ６７、ｐ－ＳＴＡＴ３、および切断カスパーゼ－３について、２Ｄ細胞ペレットまたは３Ｄスフェロイドに対してＩＨＣを実施した。
【図28】微小転移巣の病理組織学的特徴を有するＫＰ４由来の３Ｄスフェロイドが小分子阻害剤に対して異なる感受性を示すことを示す。１０％予め熱湯加熱されているＦＢＳを用いて形成されたスフェロイドは他の従来の３Ｄ培養法で見られるのと同様の薬物感受性プロファイルを示す。
【図29】微小転移巣の病理組織学的特徴を有するＫＰ４由来の３Ｄスフェロイドが小分子阻害剤に対して異なる感受性を示すことを示す。異なる３Ｄ培養法から形成されたスフェロイドの細胞生存率アッセイおよびコロニー数アッセイ。
【図30】コビメチニブ／ポナチニブの共処理が腫瘍増殖を阻害し、腫瘍関連マクロファージの浸潤を減少させることを示す。ＩＨＣによってｐ－Ｅｒｋとｐ－ＳＴＡＴ３抗体で調べられるか、または免疫蛍光によって抗ｐ－ＳＴＡＴ３と抗Ｆ４／８０の共染色されたＫＰＰ異種移植由来の代表的な腫瘍切片。スケールバー：ＩＨＣスライドについては２０μｍ、ＩＦスライドについては５０μｍ。
【図31A-B】コビメチニブ／ポナチニブの共処理が腫瘍増殖を阻害し、腫瘍関連マクロファージ浸潤を減少させることを示す。ＫＰ４およびＫＰＰ異種移植モデルにおけるコビメチニブ＋／－ポナチニブ投与マウスの体重変化。
【図32】コビメチニブ／ポナチニブの共処理が腫瘍増殖を阻害し、腫瘍関連マクロファージ浸潤を減少させることを示す。ＫＰ４異種移植マウスの血漿試料の増殖因子のＬｕｍｉｎｅｘアッセイ。
【図33】コビメチニブ／ポナチニブ共処理が腫瘍増殖を阻害し、腫瘍関連マクロファージ浸潤を減少させることを示す。ＫＰＰ異種移植腫瘍のコビメチニブ／ポナチニブ治療時のＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の活性化を検証する免疫ブロット。
【0011】
図６～２３のデータは平均値±ＳＥＭとして表される。＊Ｐ＜０．０５、スチューデン
トのｔ検定。
トのｔ検定。
【発明を実施するための形態】
【0012】
膵管腺がん（ＰＤＡＣ）は最も致命的な人間の病気の一つであり、利用可能な薬物治療
にはほとんど難治性のままである。ほとんどの膵がんにおいて、ＫＲＡＳに駆動されるＭ
ＥＫ経路が変異により活性化されており、治療法の重要な標的である。しかしながら、既
知の発がん性推進因子の不十分な標的化および補償性フィードバックループの活性化、な
らびに転移の拡大を防げないことが、この疾患の予後不良の一因となる。
にはほとんど難治性のままである。ほとんどの膵がんにおいて、ＫＲＡＳに駆動されるＭ
ＥＫ経路が変異により活性化されており、治療法の重要な標的である。しかしながら、既
知の発がん性推進因子の不十分な標的化および補償性フィードバックループの活性化、な
らびに転移の拡大を防げないことが、この疾患の予後不良の一因となる。
【0013】
膜貫通受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）の活性化は、結果的に細胞運命の調節をもた
らす多数の生化学的カスケードを誘発する。この活性化は、細胞外環境中の分子、主に増
殖因子、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）タンパク質、および隣接細胞の表面に存在する接
着分子によって調節される。これらのシグナルに対する細胞の応答は、分子が細胞の表面
に存在する特定の受容体に結合するときに起きる。多くの成長因子（ＧＦ）は、受容体型
チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーの膜貫通糖タンパク質に結合し、それらを活性化
する。
らす多数の生化学的カスケードを誘発する。この活性化は、細胞外環境中の分子、主に増
殖因子、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）タンパク質、および隣接細胞の表面に存在する接
着分子によって調節される。これらのシグナルに対する細胞の応答は、分子が細胞の表面
に存在する特定の受容体に結合するときに起きる。多くの成長因子（ＧＦ）は、受容体型
チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーの膜貫通糖タンパク質に結合し、それらを活性化
する。
【0014】
ＲＴＫは、細胞外リガンド結合ドメイン、単一の膜貫通ドメイン、およびチロシンキナ
ーゼドメイン、ならびにいくつかの調節性チロシンを含む細胞内の構成要素を含む。ＲＴ
Ｋは細胞質ＳＴＡＴファミリー転写因子をリン酸化し活性化することができる。これらの
活性化されたＳＴＡＴは核に移行する。核内に入ると、ＳＴＡＴは細胞増殖に関与する遺
伝子の転写を高める。
ーゼドメイン、ならびにいくつかの調節性チロシンを含む細胞内の構成要素を含む。ＲＴ
Ｋは細胞質ＳＴＡＴファミリー転写因子をリン酸化し活性化することができる。これらの
活性化されたＳＴＡＴは核に移行する。核内に入ると、ＳＴＡＴは細胞増殖に関与する遺
伝子の転写を高める。
【0015】
血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）は、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）ファミ
リーのメンバーのための細胞表面チロシンキナーゼ受容体である。ＰＤＧＦＲαおよびＰ
ＤＧＦＲβのアイソフォームは、細胞増殖、細胞分化、細胞増殖および発生を調節する因
子である。結合すると、２つのアイソフォームが二量体化してキナーゼ活性およびＰＤＧ
ＦＲのリン酸化を活性化する。増殖因子受容体のチロシンリン酸化部位はキナーゼの活性
レベルを制御し、そして多くの場合、同様にキナーゼの基質でもある下流のシグナル伝達
のための結合部位である。Ｓ６リボソームタンパク質などの下流のシグナル伝達分子を含
むこのシグナル伝達カスケードは、がんを含む多くの疾患に関与している。
リーのメンバーのための細胞表面チロシンキナーゼ受容体である。ＰＤＧＦＲαおよびＰ
ＤＧＦＲβのアイソフォームは、細胞増殖、細胞分化、細胞増殖および発生を調節する因
子である。結合すると、２つのアイソフォームが二量体化してキナーゼ活性およびＰＤＧ
ＦＲのリン酸化を活性化する。増殖因子受容体のチロシンリン酸化部位はキナーゼの活性
レベルを制御し、そして多くの場合、同様にキナーゼの基質でもある下流のシグナル伝達
のための結合部位である。Ｓ６リボソームタンパク質などの下流のシグナル伝達分子を含
むこのシグナル伝達カスケードは、がんを含む多くの疾患に関与している。
【0016】
本明細書において記載されるように、二次元単層培養システムおよび三次元スフェロイ
ド培養システムを使用することで、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩とＰＤ
ＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とする多標的剤またはその薬学的に許容される
塩とによる併用治療が、単層およびスフェロイドの両方において膵がん細胞を標的化する
のに有効であったことが見出された。理論に拘束されるものではないが、この組み合わせ
は、がん細胞におけるＳＴＡＴ３およびＳ６の媒介する補償性フィードバックループの活
性化も防止しながら、ＰＤＧＦＲαおよびＭＥＫキナーゼを介したシグナル伝達を効果的
に遮断することができる。さらに、本明細書中に記述されるように、異種移植モデルを用
いて、ＭＥＫ阻害剤とポナチニブとの共処理は、腫瘍退縮を引き起こし、同時に膵腫瘍微
小環境において腫瘍関連マクロファージを標的とすることによって、ＰＤＡＣ腫瘍進行を
促進する骨髄集団を阻害し、それによって、二重のメカニズムを介して腫瘍退縮を促進す
る。ＰＤＡＣ患者試料は、腫瘍におけるＳＴＡＴ３活性化および肝臓転移におけるＥｒｋ
活性化の増大を明らかにし、ＳＴＡＴ３およびＥｒｋがそれぞれＰＤＡＣ腫瘍および肝臓
転移における重要な推進因子であることを示唆している。本明細書において記載されてい
るように、これらの結果は膵がんの効果的な治療のための併用薬物治療戦略を示している
。さらに、単独で投与したときの活性剤は、膵がんに対して有効性を示さない可能性があ
る。
ド培養システムを使用することで、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩とＰＤ
ＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とする多標的剤またはその薬学的に許容される
塩とによる併用治療が、単層およびスフェロイドの両方において膵がん細胞を標的化する
のに有効であったことが見出された。理論に拘束されるものではないが、この組み合わせ
は、がん細胞におけるＳＴＡＴ３およびＳ６の媒介する補償性フィードバックループの活
性化も防止しながら、ＰＤＧＦＲαおよびＭＥＫキナーゼを介したシグナル伝達を効果的
に遮断することができる。さらに、本明細書中に記述されるように、異種移植モデルを用
いて、ＭＥＫ阻害剤とポナチニブとの共処理は、腫瘍退縮を引き起こし、同時に膵腫瘍微
小環境において腫瘍関連マクロファージを標的とすることによって、ＰＤＡＣ腫瘍進行を
促進する骨髄集団を阻害し、それによって、二重のメカニズムを介して腫瘍退縮を促進す
る。ＰＤＡＣ患者試料は、腫瘍におけるＳＴＡＴ３活性化および肝臓転移におけるＥｒｋ
活性化の増大を明らかにし、ＳＴＡＴ３およびＥｒｋがそれぞれＰＤＡＣ腫瘍および肝臓
転移における重要な推進因子であることを示唆している。本明細書において記載されてい
るように、これらの結果は膵がんの効果的な治療のための併用薬物治療戦略を示している
。さらに、単独で投与したときの活性剤は、膵がんに対して有効性を示さない可能性があ
る。
【0017】
ＰＤＧＦＲβ、ＭＥＫ、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３として同定された生存経路は、様々な
がんモデルにおいて腫瘍形成および転移に関与すると報告されており（Ｌｅｓｉｎａ Ｍ
，Ｋｕｒｋｏｗｓｋｉ ＭＵ，Ｌｕｄｅｓ Ｋ，Ｒｏｓｅ－Ｊｏｈｎ Ｓ，Ｔｒｅｉｂｅ
ｒ Ｍ，Ｋｌｏｐｐｅｌ Ｇ，Ｓｔａｔ３／Ｓｏｃｓ３ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｂｙ
ＩＬ－６ ｔｒａｎｓｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｎｅｏｐｌａｓｉａ
ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ，Ｃａ
ｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２０１１；１９（４）：４５６－６９，Ｅｐｕｂ ２０１１／０４
／１３、Ｙｅｎ ＴＷ，Ａａｒｄａｌ ＮＰ，Ｂｒｏｎｎｅｒ ＭＰ，Ｔｈｏｒｎｉｎｇ
ＤＲ，Ｓａｖａｒｄ ＣＥ，Ｌｅｅ ＳＰ，Ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ａｒｅ
ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｓｍｏｐｌａｓｔｉｃ ｒｅａｃｔｉｏ
ｎ ｓｕｒｒｏｕｎｄｉｎｇ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ
ｓ，Ｓｕｒｇｅｒｙ，２００２；１３１（２）：１２９－３４，Ｅｐｕｂ ２００２／０
２／２１、Ｗｅｉｓｓｍｕｅｌｌｅｒ Ｓ，Ｍａｎｃｈａｄｏ Ｅ，Ｓａｂｏｒｏｗｓｋ
ｉ Ｍ，Ｍｏｒｒｉｓ ＪＰｔ，Ｗａｇｅｎｂｌａｓｔ Ｅ，Ｄａｖｉｓ ＣＡ，ｅｔ
ａｌ．Ｍｕｔａｎｔ ｐ５３ ｄｒｉｖｅｓ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｍ
ｅｔａｓｔａｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｃｅｌｌ－ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ ＰＤＧＦ ｒ
ｅｃｅｐｔｏｒ ｂｅｔａ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，Ｃｅｌｌ，２０１４；１５７（２）：
３８２－９４，Ｅｐｕｂ ２０１４／０４／１５、Ｃｏｒｃｏｒａｎ ＲＢ，Ｒｏｔｈｅ
ｎｂｅｒｇ ＳＭ，Ｈａｔａ ＡＮ，Ｆａｂｅｒ ＡＣ，Ｐｉｒｉｓ Ａ，Ｎａｚａｒｉ
ａｎ ＲＭ，ＴＯＲＣ１ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｅｄｉｃｔｓ ｒｅｓｐｏｎｓ
ｉｖｅｎｅｓｓ ｔｏ ＲＡＦ ａｎｄ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ＢＲＡ
Ｆ－ｍｕｔａｎｔ ｍｅｌａｎｏｍａ，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１３；５（１９６）：１９６ｒａ９８，Ｅｐｕｂ ２０１３／０
８／０２、Ｃｏｒｃｏｒａｎ ＲＢ，Ｃｈｅｎｇ ＫＡ，Ｈａｔａ ＡＮ，Ｆａｂｅｒ
ＡＣ，Ｅｂｉ Ｈ，Ｃｏｆｆｅｅ ＥＭ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌｅｔｈａｌ ｉｎｔｅ
ｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ＢＣＬ－ＸＬ ａｎｄ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂ
ｉｔｉｏｎ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｕｍｏｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｓ ｉｎ ＫＲＡＳ
ｍｕｔａｎｔ ｃａｎｃｅｒ ｍｏｄｅｌｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２０１３；２
３（１）：１２１－８，Ｅｐｕｂ ２０１２／１２／１９、Ｄｅｎｇ Ｊ，Ｌｉｕ Ｙ，
Ｌｅｅ Ｈ，Ｈｅｒｒｍａｎｎ Ａ，Ｚｈａｎｇ Ｗ，Ｚｈａｎｇ Ｃ，Ｓ１ＰＲ１－Ｓ
ＴＡＴ３ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｉｓ ｃｒｕｃｉａｌ ｆｏｒ ｍｙｅｌｏｉｄ ｃｅ
ｌｌ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ａｔ ｆｕｔｕｒｅ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｓｉｔ
ｅｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２０１２；２１（５）：６４２－５４，Ｅｐｕｂ ２０
１２／０５／２６、Ｃｏｒｃｏｒａｎ ＲＢ，Ｃｏｎｔｉｎｏ Ｇ，Ｄｅｓｈｐａｎｄｅ
Ｖ，Ｔｚａｔｓｏｓ Ａ，Ｃｏｎｒａｄ Ｃ，Ｂｅｎｅｓ ＣＨ，ＳＴＡＴ３ ｐｌａ
ｙｓ ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ＫＲＡＳ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｐａｎｃｒ
ｅａｔｉｃ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１１
；７１（１４）：５０２０－９，Ｅｐｕｂ ２０１１／０５／１９）、原発性膵腫瘍にお
けるＭＥＫ阻害は、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を介した代替のシグナル伝達
経路の活性化を誘発し、これが単剤ＭＥＫ阻害に対する抵抗性に寄与することが今や見出
されている。特に、個別には細胞生存率に影響を示さなかった個々の剤が、組み合わせた
ときに２Ｄおよび３Ｄ培養の両方において細胞増殖を阻害することが示されている。した
がって、ＭＥＫ阻害と組み合わせたＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３活性化の阻害
は、膵腫瘍におけるＭＥＫ阻害剤コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩に対する
抵抗性の誘導を妨げた。一実施形態において、マルチＲＴＫおよびＪＡＫ２阻害剤ポナチ
ニブまたはその薬学的に許容される塩をコビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と
組み合わせて治療することは、上述のように、現在診療所で探索されている薬物治療計画
に対して一般的に難治性である膵腫瘍の標的化に非常に有効である。
がんモデルにおいて腫瘍形成および転移に関与すると報告されており（Ｌｅｓｉｎａ Ｍ
，Ｋｕｒｋｏｗｓｋｉ ＭＵ，Ｌｕｄｅｓ Ｋ，Ｒｏｓｅ－Ｊｏｈｎ Ｓ，Ｔｒｅｉｂｅ
ｒ Ｍ，Ｋｌｏｐｐｅｌ Ｇ，Ｓｔａｔ３／Ｓｏｃｓ３ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｂｙ
ＩＬ－６ ｔｒａｎｓｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｎｅｏｐｌａｓｉａ
ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ，Ｃａ
ｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２０１１；１９（４）：４５６－６９，Ｅｐｕｂ ２０１１／０４
／１３、Ｙｅｎ ＴＷ，Ａａｒｄａｌ ＮＰ，Ｂｒｏｎｎｅｒ ＭＰ，Ｔｈｏｒｎｉｎｇ
ＤＲ，Ｓａｖａｒｄ ＣＥ，Ｌｅｅ ＳＰ，Ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ａｒｅ
ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｓｍｏｐｌａｓｔｉｃ ｒｅａｃｔｉｏ
ｎ ｓｕｒｒｏｕｎｄｉｎｇ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ
ｓ，Ｓｕｒｇｅｒｙ，２００２；１３１（２）：１２９－３４，Ｅｐｕｂ ２００２／０
２／２１、Ｗｅｉｓｓｍｕｅｌｌｅｒ Ｓ，Ｍａｎｃｈａｄｏ Ｅ，Ｓａｂｏｒｏｗｓｋ
ｉ Ｍ，Ｍｏｒｒｉｓ ＪＰｔ，Ｗａｇｅｎｂｌａｓｔ Ｅ，Ｄａｖｉｓ ＣＡ，ｅｔ
ａｌ．Ｍｕｔａｎｔ ｐ５３ ｄｒｉｖｅｓ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｍ
ｅｔａｓｔａｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｃｅｌｌ－ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ ＰＤＧＦ ｒ
ｅｃｅｐｔｏｒ ｂｅｔａ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，Ｃｅｌｌ，２０１４；１５７（２）：
３８２－９４，Ｅｐｕｂ ２０１４／０４／１５、Ｃｏｒｃｏｒａｎ ＲＢ，Ｒｏｔｈｅ
ｎｂｅｒｇ ＳＭ，Ｈａｔａ ＡＮ，Ｆａｂｅｒ ＡＣ，Ｐｉｒｉｓ Ａ，Ｎａｚａｒｉ
ａｎ ＲＭ，ＴＯＲＣ１ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｅｄｉｃｔｓ ｒｅｓｐｏｎｓ
ｉｖｅｎｅｓｓ ｔｏ ＲＡＦ ａｎｄ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ＢＲＡ
Ｆ－ｍｕｔａｎｔ ｍｅｌａｎｏｍａ，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１３；５（１９６）：１９６ｒａ９８，Ｅｐｕｂ ２０１３／０
８／０２、Ｃｏｒｃｏｒａｎ ＲＢ，Ｃｈｅｎｇ ＫＡ，Ｈａｔａ ＡＮ，Ｆａｂｅｒ
ＡＣ，Ｅｂｉ Ｈ，Ｃｏｆｆｅｅ ＥＭ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌｅｔｈａｌ ｉｎｔｅ
ｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ＢＣＬ－ＸＬ ａｎｄ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂ
ｉｔｉｏｎ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｕｍｏｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｓ ｉｎ ＫＲＡＳ
ｍｕｔａｎｔ ｃａｎｃｅｒ ｍｏｄｅｌｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２０１３；２
３（１）：１２１－８，Ｅｐｕｂ ２０１２／１２／１９、Ｄｅｎｇ Ｊ，Ｌｉｕ Ｙ，
Ｌｅｅ Ｈ，Ｈｅｒｒｍａｎｎ Ａ，Ｚｈａｎｇ Ｗ，Ｚｈａｎｇ Ｃ，Ｓ１ＰＲ１－Ｓ
ＴＡＴ３ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｉｓ ｃｒｕｃｉａｌ ｆｏｒ ｍｙｅｌｏｉｄ ｃｅ
ｌｌ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ａｔ ｆｕｔｕｒｅ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｓｉｔ
ｅｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２０１２；２１（５）：６４２－５４，Ｅｐｕｂ ２０
１２／０５／２６、Ｃｏｒｃｏｒａｎ ＲＢ，Ｃｏｎｔｉｎｏ Ｇ，Ｄｅｓｈｐａｎｄｅ
Ｖ，Ｔｚａｔｓｏｓ Ａ，Ｃｏｎｒａｄ Ｃ，Ｂｅｎｅｓ ＣＨ，ＳＴＡＴ３ ｐｌａ
ｙｓ ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ＫＲＡＳ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｐａｎｃｒ
ｅａｔｉｃ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１１
；７１（１４）：５０２０－９，Ｅｐｕｂ ２０１１／０５／１９）、原発性膵腫瘍にお
けるＭＥＫ阻害は、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を介した代替のシグナル伝達
経路の活性化を誘発し、これが単剤ＭＥＫ阻害に対する抵抗性に寄与することが今や見出
されている。特に、個別には細胞生存率に影響を示さなかった個々の剤が、組み合わせた
ときに２Ｄおよび３Ｄ培養の両方において細胞増殖を阻害することが示されている。した
がって、ＭＥＫ阻害と組み合わせたＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３活性化の阻害
は、膵腫瘍におけるＭＥＫ阻害剤コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩に対する
抵抗性の誘導を妨げた。一実施形態において、マルチＲＴＫおよびＪＡＫ２阻害剤ポナチ
ニブまたはその薬学的に許容される塩をコビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と
組み合わせて治療することは、上述のように、現在診療所で探索されている薬物治療計画
に対して一般的に難治性である膵腫瘍の標的化に非常に有効である。
【0018】
膵管腺がん（ＰＤＡＣ）は、攻撃的な腫瘍増殖、転移、免疫抑制、および薬剤耐性に寄
与する様々な間質要素の顕著な関与と関連している。（Ｃｉｄ－Ａｒｒｅｇｕｉ Ａ，ｅ
ｔ ａｌ．，（２０１５）、Ｈｉｄａｌｇｏ Ｍ．Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ
，Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１
０；３６２（１７）：１６０５－１７，Ｅｐｕｂ ２０１０／０４／３０、Ｋｏｒｃ Ｍ
．Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｓｔｒｏｍａ ｐｒｏ
ｄｕｃｔｉｏｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｕｒｇｅｒｙ，２００７
；１９４（４ Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ８４－６，Ｅｐｕｂ ２００７／１２／０６、Ｉｎｍａ
ｎ ＫＳ，Ｆｒａｎｃｉｓ ＡＡ，Ｍｕｒｒａｙ ＮＲ．Ｃｏｍｐｌｅｘ ｒｏｌｅ ｆ
ｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐ
ｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ，Ｗｏｒｌｄ Ｊｏ
ｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０１４；２０（３２）：１１
１６０－８１，Ｅｐｕｂ ２０１４／０８／３０、Ｗｏｒｍａｎｎ ＳＭ，Ｄｉａｋｏｐ
ｏｕｌｏｓ ＫＮ，Ｌｅｓｉｎａ Ｍ，Ａｌｇｕｌ Ｈ，Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｎｅｔ
ｗｏｒｋ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎ
ｄ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２０１４；３３（２３）：２９５６－
６７，Ｅｐｕｂ ２０１３／０７／１６、Ｍｏｓｅｓ ＡＧ，Ｍａｉｎｇａｙ Ｊ，Ｓａ
ｎｇｓｔｅｒ Ｋ，Ｆｅａｒｏｎ ＫＣ，Ｒｏｓｓ ＪＡ，Ｐｒｏ－ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｂｙ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ
ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｄ
ｖａｎｃｅｄ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ：ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｔｏ
ａｃｕｔｅ ｐｈａｓｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ，Ｏｎｃｏｌ
ｏｇｙ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２００９；２１（４）：１０９１－５，Ｅｐｕｂ ２００９／
０３／１７、Ｔｊｏｍｓｌａｎｄ Ｖ，Ｎｉｋｌａｓｓｏｎ Ｌ，Ｓａｎｄｓｔｒｏｍ
Ｐ，Ｂｏｒｃｈ Ｋ，Ｄｒｕｉｄ Ｈ，Ｂｒａｔｔｈａｌｌ Ｃ，Ｔｈｅ ｄｅｓｍｏｐ
ｌａｓｔｉｃ ｓｔｒｏｍａ ｐｌａｙｓ ａｎ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ
ｔｈｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｆｉ
ｌｔｒａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ａｄｅｎｏ
ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＆ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ，２０１１；２０１１：２１２８１０，Ｅｐｕｂ ２０１１／１２／２３、Ｓ
ｉｌｖｅｓｔｒｉｓ Ｎ，Ｇｎｏｎｉ Ａ，Ｂｒｕｎｅｔｔｉ ＡＥ，Ｖｉｎｃｅｎｔｉ
Ｌ，Ｓａｎｔｉｎｉ Ｄ，Ｔｏｎｉｎｉ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ｔａｒｇｅｔ ｔｈｅｒａ
ｐｉｅｓ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄ
ｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１４；２１（８）：９４８－６５，Ｅｐｕｂ
２０１３／０９／０３、Ｖａｃｃａｒｏ Ｖ，Ｓｐｅｒｄｕｔｉ Ｉ，Ｖａｒｉ Ｓ，Ｂ
ｒｉａ Ｅ，Ｍｅｌｉｓｉ Ｄ，Ｇａｒｕｆｉ Ｃ，Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｐａｎｃｒ
ｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ：Ｉｓ ｔｈｅｒｅ ａ ｌｉｇｈｔ ａｔ ｔｈｅ ｅｎｄ
ｏｆ ｔｈｅ ｔｕｎｎｅｌ？ Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅ
ｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０１５；２１（１６）：４７８８－８０１．Ｅｐｕｂ ２０１５
／０５／０７、Ｔｕｖｅｓｏｎ ＤＡ，Ｎｅｏｐｔｏｌｅｍｏｓ ＪＰ，Ｕｎｄｅｒｓｔ
ａｎｄｉｎｇ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ：ａ
ｃａｌｌ ｆｏｒ ｎｅｗ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，Ｃｅｌｌ，２
０１２；１４８（１－２）：２１－３，Ｅｐｕｂ ２０１２／０１／２４）。腫瘍関連マ
クロファージは、膵腫瘍に浸潤し、患者の予後不良と相関する最も一般的な間質細胞型の
一つである。（Ｖｏｎｄｅｒｈｅｉｄｅ ＲＨ，Ｂａｙｎｅ ＬＪ，Ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｏｒｙ ｎｅｔｗｏｒｋｓ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅ ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ ｏｆ
ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１３；２５（２）：２００－５，Ｅｐｕｂ ２０１３／０２
／２１、Ｄｉ Ｃａｒｏ Ｇ，Ｃｏｒｔｅｓｅ Ｎ，Ｃａｓｔｉｎｏ ＧＦ，Ｇｒｉｚｚ
ｉ Ｆ，Ｇａｖａｚｚｉ Ｆ，Ｒｉｄｏｌｆｉ Ｃ，Ｄｕａｌ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｕｍｏｕｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐ
ｈａｇｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ
ｔｒｅａｔｅｄ ｏｒ ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，
Ｇｕｔ，２０１５．Ｅｐｕｂ ２０１５／０７／１５、Ｃｈｅｎ ＳＪ，Ｚｈａｎｇ Ｑ
Ｂ，Ｚｅｎｇ ＬＪ，Ｌｉａｎ ＧＤ，Ｌｉ ＪＪ，Ｑｉａｎ ＣＣ，Ｄｉｓｔｒｉｂｕ
ｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｕｍｏｕｒ
－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｄｕ
ｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａ ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ａｎａｌ
ｙｓｉｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｎｃｏｌ．２０１５；２２（１）：ｅ１１－
９，Ｅｐｕｂ ２０１５／０２／１７）。最近の研究はさらに、腫瘍の進行および転移に
おけるＴＡＭの重要な役割を示唆している。（Ｎｏｙ Ｒ，Ｐｏｌｌａｒｄ ＪＷ．Ｔｕ
ｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ：ｆｒｏｍ ｍｅｃｈａｎｉｓ
ｍｓ ｔｏ ｔｈｅｒａｐｙ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２０１４；４１（１）：４９－６１，
Ｅｐｕｂ ２０１４／０７／１９、Ｍｅｌｅｒｏ Ｉ，Ｇａｕｄｅｒｎａｃｋ Ｇ，Ｇｅ
ｒｒｉｔｓｅｎ Ｗ，Ｈｕｂｅｒ Ｃ，Ｐａｒｍｉａｎｉ Ｇ，Ｓｃｈｏｌｌ Ｓ，Ｔｈ
ｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｖａｃｃｉｎｅｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ：ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅ
ｗ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃｌｉｎ
ｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２０１４；１１（９）：５０９－２４，Ｅｐｕｂ ２０１
４／０７／０９、Ｄｒａｋｅ ＣＧ．Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａ
ｐｙ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，Ａｎｎａｌｓ ｏｆ ｏｎｃｏｌｏｇｙ：ｏｆｆｉｃｉａ
ｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｍｅ
ｄｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ／ ＥＳＭＯ，２０１２；２３ Ｓｕｐｐｌ ８：ｖｉ
ｉｉ４１－６，Ｅｐｕｂ ２０１２／０８／２９、Ｗｅｄｅｎ Ｓ，Ｋｌｅｍｐ Ｍ，Ｇ
ｌａｄｈａｕｇ ＩＰ，Ｍｏｌｌｅｒ Ｍ，Ｅｒｉｋｓｅｎ ＪＡ，Ｇａｕｄｅｒｎａｃ
ｋ Ｇ，Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ
ｒｅｓｅｃｔｅｄ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｖａ
ｃｃｉｎａｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ ｍｕｔａｎｔ Ｋ－ｒａｓ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ，Ｊｏｕｒｎａｌ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｏｎａｌ ｄｕ Ｃａｎｃｅｒ，２０１１；１２８（５）：１１２０－８，Ｅｐｕｂ ２
０１０／０５／１８、Ｂｒｏｎｔｅ Ｖ，Ｍｕｒｒａｙ ＰＪ．Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉ
ｎｇ ｌｏｃａｌ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｎ ｄｉｓｅａｓ
ｅ：ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｔｏ ｔｒｅａ
ｔ ｃａｎｃｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５；２１（２）：１１７－
９，Ｅｐｕｂ ２０１５／０２／０６）。本願発明者らの発見は、ＭＥＫ阻害に応答した
ＰＤＡＣにおける腫瘍細胞とＴＡＭの両方におけるＳＴＡＴ３シグナル伝達軸の役割を暗
示する。本願発明者らの結果はさらに、ＭＥＫ阻害剤、例えばコビメチニブ／ＰＤＧＦＲ
α、Ｓ６と、ＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤、例えばポナチニブとの共処
理は、原発性腫瘍内の骨髄細胞とがん細胞の両方を標的とすることができ、細胞死滅と腫
瘍退縮の増大を引き起こすことを示唆する。
与する様々な間質要素の顕著な関与と関連している。（Ｃｉｄ－Ａｒｒｅｇｕｉ Ａ，ｅ
ｔ ａｌ．，（２０１５）、Ｈｉｄａｌｇｏ Ｍ．Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ
，Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１
０；３６２（１７）：１６０５－１７，Ｅｐｕｂ ２０１０／０４／３０、Ｋｏｒｃ Ｍ
．Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｓｔｒｏｍａ ｐｒｏ
ｄｕｃｔｉｏｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｕｒｇｅｒｙ，２００７
；１９４（４ Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ８４－６，Ｅｐｕｂ ２００７／１２／０６、Ｉｎｍａ
ｎ ＫＳ，Ｆｒａｎｃｉｓ ＡＡ，Ｍｕｒｒａｙ ＮＲ．Ｃｏｍｐｌｅｘ ｒｏｌｅ ｆ
ｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐ
ｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ，Ｗｏｒｌｄ Ｊｏ
ｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０１４；２０（３２）：１１
１６０－８１，Ｅｐｕｂ ２０１４／０８／３０、Ｗｏｒｍａｎｎ ＳＭ，Ｄｉａｋｏｐ
ｏｕｌｏｓ ＫＮ，Ｌｅｓｉｎａ Ｍ，Ａｌｇｕｌ Ｈ，Ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｎｅｔ
ｗｏｒｋ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎ
ｄ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２０１４；３３（２３）：２９５６－
６７，Ｅｐｕｂ ２０１３／０７／１６、Ｍｏｓｅｓ ＡＧ，Ｍａｉｎｇａｙ Ｊ，Ｓａ
ｎｇｓｔｅｒ Ｋ，Ｆｅａｒｏｎ ＫＣ，Ｒｏｓｓ ＪＡ，Ｐｒｏ－ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｂｙ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ
ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｄ
ｖａｎｃｅｄ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ：ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｔｏ
ａｃｕｔｅ ｐｈａｓｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ，Ｏｎｃｏｌ
ｏｇｙ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２００９；２１（４）：１０９１－５，Ｅｐｕｂ ２００９／
０３／１７、Ｔｊｏｍｓｌａｎｄ Ｖ，Ｎｉｋｌａｓｓｏｎ Ｌ，Ｓａｎｄｓｔｒｏｍ
Ｐ，Ｂｏｒｃｈ Ｋ，Ｄｒｕｉｄ Ｈ，Ｂｒａｔｔｈａｌｌ Ｃ，Ｔｈｅ ｄｅｓｍｏｐ
ｌａｓｔｉｃ ｓｔｒｏｍａ ｐｌａｙｓ ａｎ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ
ｔｈｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｆｉ
ｌｔｒａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ａｄｅｎｏ
ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＆ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ，２０１１；２０１１：２１２８１０，Ｅｐｕｂ ２０１１／１２／２３、Ｓ
ｉｌｖｅｓｔｒｉｓ Ｎ，Ｇｎｏｎｉ Ａ，Ｂｒｕｎｅｔｔｉ ＡＥ，Ｖｉｎｃｅｎｔｉ
Ｌ，Ｓａｎｔｉｎｉ Ｄ，Ｔｏｎｉｎｉ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ｔａｒｇｅｔ ｔｈｅｒａ
ｐｉｅｓ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄ
ｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１４；２１（８）：９４８－６５，Ｅｐｕｂ
２０１３／０９／０３、Ｖａｃｃａｒｏ Ｖ，Ｓｐｅｒｄｕｔｉ Ｉ，Ｖａｒｉ Ｓ，Ｂ
ｒｉａ Ｅ，Ｍｅｌｉｓｉ Ｄ，Ｇａｒｕｆｉ Ｃ，Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｐａｎｃｒ
ｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ：Ｉｓ ｔｈｅｒｅ ａ ｌｉｇｈｔ ａｔ ｔｈｅ ｅｎｄ
ｏｆ ｔｈｅ ｔｕｎｎｅｌ？ Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅ
ｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０１５；２１（１６）：４７８８－８０１．Ｅｐｕｂ ２０１５
／０５／０７、Ｔｕｖｅｓｏｎ ＤＡ，Ｎｅｏｐｔｏｌｅｍｏｓ ＪＰ，Ｕｎｄｅｒｓｔ
ａｎｄｉｎｇ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ：ａ
ｃａｌｌ ｆｏｒ ｎｅｗ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，Ｃｅｌｌ，２
０１２；１４８（１－２）：２１－３，Ｅｐｕｂ ２０１２／０１／２４）。腫瘍関連マ
クロファージは、膵腫瘍に浸潤し、患者の予後不良と相関する最も一般的な間質細胞型の
一つである。（Ｖｏｎｄｅｒｈｅｉｄｅ ＲＨ，Ｂａｙｎｅ ＬＪ，Ｉｎｆｌａｍｍａｔ
ｏｒｙ ｎｅｔｗｏｒｋｓ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅ ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ ｏｆ
ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２０１３；２５（２）：２００－５，Ｅｐｕｂ ２０１３／０２
／２１、Ｄｉ Ｃａｒｏ Ｇ，Ｃｏｒｔｅｓｅ Ｎ，Ｃａｓｔｉｎｏ ＧＦ，Ｇｒｉｚｚ
ｉ Ｆ，Ｇａｖａｚｚｉ Ｆ，Ｒｉｄｏｌｆｉ Ｃ，Ｄｕａｌ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｕｍｏｕｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐ
ｈａｇｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ
ｔｒｅａｔｅｄ ｏｒ ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，
Ｇｕｔ，２０１５．Ｅｐｕｂ ２０１５／０７／１５、Ｃｈｅｎ ＳＪ，Ｚｈａｎｇ Ｑ
Ｂ，Ｚｅｎｇ ＬＪ，Ｌｉａｎ ＧＤ，Ｌｉ ＪＪ，Ｑｉａｎ ＣＣ，Ｄｉｓｔｒｉｂｕ
ｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｕｍｏｕｒ
－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｄｕ
ｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａ ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ａｎａｌ
ｙｓｉｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｎｃｏｌ．２０１５；２２（１）：ｅ１１－
９，Ｅｐｕｂ ２０１５／０２／１７）。最近の研究はさらに、腫瘍の進行および転移に
おけるＴＡＭの重要な役割を示唆している。（Ｎｏｙ Ｒ，Ｐｏｌｌａｒｄ ＪＷ．Ｔｕ
ｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ：ｆｒｏｍ ｍｅｃｈａｎｉｓ
ｍｓ ｔｏ ｔｈｅｒａｐｙ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２０１４；４１（１）：４９－６１，
Ｅｐｕｂ ２０１４／０７／１９、Ｍｅｌｅｒｏ Ｉ，Ｇａｕｄｅｒｎａｃｋ Ｇ，Ｇｅ
ｒｒｉｔｓｅｎ Ｗ，Ｈｕｂｅｒ Ｃ，Ｐａｒｍｉａｎｉ Ｇ，Ｓｃｈｏｌｌ Ｓ，Ｔｈ
ｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｖａｃｃｉｎｅｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ：ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅ
ｗ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃｌｉｎ
ｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２０１４；１１（９）：５０９－２４，Ｅｐｕｂ ２０１
４／０７／０９、Ｄｒａｋｅ ＣＧ．Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａ
ｐｙ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，Ａｎｎａｌｓ ｏｆ ｏｎｃｏｌｏｇｙ：ｏｆｆｉｃｉａ
ｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｍｅ
ｄｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ／ ＥＳＭＯ，２０１２；２３ Ｓｕｐｐｌ ８：ｖｉ
ｉｉ４１－６，Ｅｐｕｂ ２０１２／０８／２９、Ｗｅｄｅｎ Ｓ，Ｋｌｅｍｐ Ｍ，Ｇ
ｌａｄｈａｕｇ ＩＰ，Ｍｏｌｌｅｒ Ｍ，Ｅｒｉｋｓｅｎ ＪＡ，Ｇａｕｄｅｒｎａｃ
ｋ Ｇ，Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ
ｒｅｓｅｃｔｅｄ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｖａ
ｃｃｉｎａｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ ｍｕｔａｎｔ Ｋ－ｒａｓ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ，Ｊｏｕｒｎａｌ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｏｎａｌ ｄｕ Ｃａｎｃｅｒ，２０１１；１２８（５）：１１２０－８，Ｅｐｕｂ ２
０１０／０５／１８、Ｂｒｏｎｔｅ Ｖ，Ｍｕｒｒａｙ ＰＪ．Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉ
ｎｇ ｌｏｃａｌ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｎ ｄｉｓｅａｓ
ｅ：ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｔｏ ｔｒｅａ
ｔ ｃａｎｃｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５；２１（２）：１１７－
９，Ｅｐｕｂ ２０１５／０２／０６）。本願発明者らの発見は、ＭＥＫ阻害に応答した
ＰＤＡＣにおける腫瘍細胞とＴＡＭの両方におけるＳＴＡＴ３シグナル伝達軸の役割を暗
示する。本願発明者らの結果はさらに、ＭＥＫ阻害剤、例えばコビメチニブ／ＰＤＧＦＲ
α、Ｓ６と、ＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤、例えばポナチニブとの共処
理は、原発性腫瘍内の骨髄細胞とがん細胞の両方を標的とすることができ、細胞死滅と腫
瘍退縮の増大を引き起こすことを示唆する。
【0019】
本明細書において開示される課題は、これ以降、より十分に説明される。しかしながら
、本明細書において記述される本開示の課題の多くの修正形態および他の実施形態は、本
開示の課題が関係する当業者には先行する説明に提示された教示の利益を享受して思い浮
かぶであろう。したがって、本開示の課題は開示された特定の実施形態に限定されるべき
ではなく、修正および他の実施形態は添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図され
ることを理解されたい。換言すると、本明細書において記載される課題は、すべての代替
形態、修正形態、および均等物を包含する。組み込まれた文献、特許、および類似の資料
の１つ以上が、定義された用語、用語の使用法、記載された技術などを含むがこれらに限
定されない本出願と異なるかまたは矛盾する場合、この出願が優先する。別途定義されな
い限り、本明細書において使用される技術用語および科学用語は、当業者によって一般に
理解されるのと同一の意味を有する。本明細書において言及される全ての刊行物、特許出
願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体が本明細書の一部をなすものとす
る。
、本明細書において記述される本開示の課題の多くの修正形態および他の実施形態は、本
開示の課題が関係する当業者には先行する説明に提示された教示の利益を享受して思い浮
かぶであろう。したがって、本開示の課題は開示された特定の実施形態に限定されるべき
ではなく、修正および他の実施形態は添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図され
ることを理解されたい。換言すると、本明細書において記載される課題は、すべての代替
形態、修正形態、および均等物を包含する。組み込まれた文献、特許、および類似の資料
の１つ以上が、定義された用語、用語の使用法、記載された技術などを含むがこれらに限
定されない本出願と異なるかまたは矛盾する場合、この出願が優先する。別途定義されな
い限り、本明細書において使用される技術用語および科学用語は、当業者によって一般に
理解されるのと同一の意味を有する。本明細書において言及される全ての刊行物、特許出
願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体が本明細書の一部をなすものとす
る。
【0020】
Ｉ．定義
用語「膵がん」は、膵臓に由来する新生物を指す。膵がんには、外分泌がんおよび内分
泌がんが含まれる。ほとんどの膵がんは外分泌腫瘍である。膵内分泌腫瘍は島細胞腫瘍と
も呼ばれる。残念なことに、現在では、膵がんの予後は、早期に発見されたときでさえ不
良である。本明細書において記載される方法で治療することができる膵がんには、外分泌
膵がんおよび内分泌膵がんが含まれるがこれらに限定されない。外分泌性膵がんとしては
、腺がん、腺房細胞がん、腺扁平上皮がん、粘液がん、破骨細胞様巨細胞を伴う未分化が
ん、肝様腺がん、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、膵芽腫、漿液性嚢胞腺腫、印
環細胞がん、充実性偽乳頭状腫瘍、膵管がん、ならびに未分化がんが含まれるがこれらに
限定されない。いくつかの実施形態において、膵外分泌がんは膵管がんである。膵内分泌
がんには、インスリノーマおよびグルカゴノーマが含まれるがこれらに限定されない。
用語「膵がん」は、膵臓に由来する新生物を指す。膵がんには、外分泌がんおよび内分
泌がんが含まれる。ほとんどの膵がんは外分泌腫瘍である。膵内分泌腫瘍は島細胞腫瘍と
も呼ばれる。残念なことに、現在では、膵がんの予後は、早期に発見されたときでさえ不
良である。本明細書において記載される方法で治療することができる膵がんには、外分泌
膵がんおよび内分泌膵がんが含まれるがこれらに限定されない。外分泌性膵がんとしては
、腺がん、腺房細胞がん、腺扁平上皮がん、粘液がん、破骨細胞様巨細胞を伴う未分化が
ん、肝様腺がん、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、膵芽腫、漿液性嚢胞腺腫、印
環細胞がん、充実性偽乳頭状腫瘍、膵管がん、ならびに未分化がんが含まれるがこれらに
限定されない。いくつかの実施形態において、膵外分泌がんは膵管がんである。膵内分泌
がんには、インスリノーマおよびグルカゴノーマが含まれるがこれらに限定されない。
【0021】
いくつかの実施形態において、膵がんは、早期膵がん、非転移性膵がん、原発性膵がん
、切除膵がん、進行性膵がん、局所進行性膵がん、転移性膵がん、切除不能膵がん、寛解
中の膵がん、再発性膵がん、補助療法中の膵がん、または術前補助療法中の膵がんのいず
れかである。いくつかの実施形態において、膵がんは局所進行膵がん、切除不能膵がん、
または転移性膵管がんである。いくつかの実施形態において、膵がんはゲムシタビンに基
づく治療に抵抗性である。いくつかの実施形態において、膵がんはゲムシタビンに基づく
治療に難治性である。
、切除膵がん、進行性膵がん、局所進行性膵がん、転移性膵がん、切除不能膵がん、寛解
中の膵がん、再発性膵がん、補助療法中の膵がん、または術前補助療法中の膵がんのいず
れかである。いくつかの実施形態において、膵がんは局所進行膵がん、切除不能膵がん、
または転移性膵管がんである。いくつかの実施形態において、膵がんはゲムシタビンに基
づく治療に抵抗性である。いくつかの実施形態において、膵がんはゲムシタビンに基づく
治療に難治性である。
【0022】
本明細書において記載される方法は、以下の目的のうちの任意の１つ以上に使用するこ
とができる：膵がんの１つ以上の病状の緩和、膵がんの進行の遅延、膵がんの腫瘍サイズ
の縮小、膵がんの間質の破壊（破壊など）、膵臓の腫瘍増殖の阻害、全生存期間の延長、
無病生存期間の延長、膵がん疾患進行までの期間の延長、膵がん腫瘍転移の予防または遅
延、既存の膵がん腫瘍転移の減少（根絶など）、既存の膵がん腫瘍転移の発生または負担
の軽減、膵がんの再発防止、および／または膵がん患者の臨床的利益の改善。
とができる：膵がんの１つ以上の病状の緩和、膵がんの進行の遅延、膵がんの腫瘍サイズ
の縮小、膵がんの間質の破壊（破壊など）、膵臓の腫瘍増殖の阻害、全生存期間の延長、
無病生存期間の延長、膵がん疾患進行までの期間の延長、膵がん腫瘍転移の予防または遅
延、既存の膵がん腫瘍転移の減少（根絶など）、既存の膵がん腫瘍転移の発生または負担
の軽減、膵がんの再発防止、および／または膵がん患者の臨床的利益の改善。
【0023】
本明細書において記載される膵がん治療方法は、原発性腫瘍および転移性腫瘍を含む、
膵がんの増殖、発生または拡大を阻害、緩徐化、または回復させるために、治療有効量の
ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ
３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはそれらの薬学的に許容される塩との組み合わ
せを、治療を必要とする対象（ヒトまたは動物）に投与するステップを含む。そのような
投与は、投与された活性剤のうちの１つによって阻害される１つ以上のキナーゼおよび／
または生存経路によって媒介される疾患の治療または予防のための方法を構成する。本明
細書において開示される化合物の「投与」または「投与するステップ」は、本明細書にお
いて記載される任意の適切な製剤または投与経路を用いた、活性剤、またはそのプロドラ
ッグもしくは他の薬学的に許容される誘導体の受容者への送達を包含する。ＭＥＫ阻害剤
およびマルチキナーゼ阻害剤は、どちらの順序でも、連続的に、逐次的に、または両方の
組み合わせで投与することができる。
膵がんの増殖、発生または拡大を阻害、緩徐化、または回復させるために、治療有効量の
ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ
３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはそれらの薬学的に許容される塩との組み合わ
せを、治療を必要とする対象（ヒトまたは動物）に投与するステップを含む。そのような
投与は、投与された活性剤のうちの１つによって阻害される１つ以上のキナーゼおよび／
または生存経路によって媒介される疾患の治療または予防のための方法を構成する。本明
細書において開示される化合物の「投与」または「投与するステップ」は、本明細書にお
いて記載される任意の適切な製剤または投与経路を用いた、活性剤、またはそのプロドラ
ッグもしくは他の薬学的に許容される誘導体の受容者への送達を包含する。ＭＥＫ阻害剤
およびマルチキナーゼ阻害剤は、どちらの順序でも、連続的に、逐次的に、または両方の
組み合わせで投与することができる。
【0024】
用語「対象」は、霊長類（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、
ウサギ、ラット、マウスなどを含むがこれらに限定されない哺乳動物などの動物を指す。
ある特定の実施形態において、対象はヒトである。
ウサギ、ラット、マウスなどを含むがこれらに限定されない哺乳動物などの動物を指す。
ある特定の実施形態において、対象はヒトである。
【0025】
用語「予防」または「予防的」は、組み合わせが投与されなかった場合に予想されるで
あろう疾患または状態の病状が継続的に非存在であることを指す。
あろう疾患または状態の病状が継続的に非存在であることを指す。
【0026】
本明細書において使用されるとき、用語「相乗的」は、２つ以上の単剤の相加効果より
も効果的な治療上の組み合わせを指す。ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的と
するマルチキナーゼ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との間の相乗的相互作用の決定は、本明細書に
おいて記載されるアッセイから得られる結果に基づくことができる。例えば、本明細書に
開示されているインビボまたはインビトロ方法。これらのアッセイの結果は、組み合わせ
指数を得るために、ＣｈｏｕとＴａｌａｌａｙの組み合わせ方法およびＣａｌｃｕＳｙｎ
ソフトウェアによる用量効果分析を用いて分析することができる（Ｃｈｏｕ ａｎｄ Ｔ
ａｌａｌａｙ，１９８４，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ Ｒｅｇｕｌ．２２：２７－５５）。提
供された組み合わせは、１つ以上のアッセイシステムにおいて評価することができ、デー
タは、抗がん剤間の相乗作用、相加作用、および拮抗作用を定量化するための標準プログ
ラムを利用して分析することができる。例示的なプログラムは、ＣｈｏｕおよびＴａｌａ
ｌａｙによって、Ｎｅｗ Ａｖｅｎｕｅｓ ｉｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｃａｎ
ｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８７，Ｃｈａ
ｐｔｅｒ ２に記載されている。０．８未満の組み合わせ指数値は相乗作用を示し、１．
２を超える値は拮抗作用を示し、０．８～１．２の値は相加効果を示す。組み合わせ治療
薬は、「相乗効果」を提供し、「相乗的」、すなわち、共に使用される活性剤が化合物を
別個に使用することから生じる効果の合計よりも大きいときに達成される効果を立証する
ことができる。相乗効果は、活性剤が以下のときに達成され得る：（１）組み合わせた単
位投与製剤で同時に共製剤化され、投与または送達される、（２）別個の製剤として、交
互にまたは並行して送達される、または（３）他の投与計画による。交互療法で送達され
るとき、化合物が逐次的に投与または送達されるとき、例えば別個の注射器中の異なる注
射によって相乗効果が達成され得る。一般に、交互療法の間、有効用量の各々の活性剤は
逐次的に、すなわち連続的に投与されるが、組み合わせ治療薬においては、有効量の２つ
以上の活性剤が共に投与される。併用効果は、ブリス独立性モデルと最高単剤（ＨＳＡ）
モデルの両方を用いて評価することができる（Ｌｅｈａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３：８０（２００７））。ブリススコアは単
剤からの増強の程度を定量化し、そして正のブリススコア（０より大きい）は単純な相加
性より大きいことを示唆する。２５０を超える累積陽性ブリススコアは、試験した濃度範
囲内で観察された強い相乗効果とみなされる。ＨＳＡスコア（０より大きい）は、対応す
る濃度での単剤の応答の最大値より大きい併用効果を示唆する。
も効果的な治療上の組み合わせを指す。ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的と
するマルチキナーゼ阻害剤とＭＥＫ阻害剤との間の相乗的相互作用の決定は、本明細書に
おいて記載されるアッセイから得られる結果に基づくことができる。例えば、本明細書に
開示されているインビボまたはインビトロ方法。これらのアッセイの結果は、組み合わせ
指数を得るために、ＣｈｏｕとＴａｌａｌａｙの組み合わせ方法およびＣａｌｃｕＳｙｎ
ソフトウェアによる用量効果分析を用いて分析することができる（Ｃｈｏｕ ａｎｄ Ｔ
ａｌａｌａｙ，１９８４，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ Ｒｅｇｕｌ．２２：２７－５５）。提
供された組み合わせは、１つ以上のアッセイシステムにおいて評価することができ、デー
タは、抗がん剤間の相乗作用、相加作用、および拮抗作用を定量化するための標準プログ
ラムを利用して分析することができる。例示的なプログラムは、ＣｈｏｕおよびＴａｌａ
ｌａｙによって、Ｎｅｗ Ａｖｅｎｕｅｓ ｉｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｃａｎ
ｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８７，Ｃｈａ
ｐｔｅｒ ２に記載されている。０．８未満の組み合わせ指数値は相乗作用を示し、１．
２を超える値は拮抗作用を示し、０．８～１．２の値は相加効果を示す。組み合わせ治療
薬は、「相乗効果」を提供し、「相乗的」、すなわち、共に使用される活性剤が化合物を
別個に使用することから生じる効果の合計よりも大きいときに達成される効果を立証する
ことができる。相乗効果は、活性剤が以下のときに達成され得る：（１）組み合わせた単
位投与製剤で同時に共製剤化され、投与または送達される、（２）別個の製剤として、交
互にまたは並行して送達される、または（３）他の投与計画による。交互療法で送達され
るとき、化合物が逐次的に投与または送達されるとき、例えば別個の注射器中の異なる注
射によって相乗効果が達成され得る。一般に、交互療法の間、有効用量の各々の活性剤は
逐次的に、すなわち連続的に投与されるが、組み合わせ治療薬においては、有効量の２つ
以上の活性剤が共に投与される。併用効果は、ブリス独立性モデルと最高単剤（ＨＳＡ）
モデルの両方を用いて評価することができる（Ｌｅｈａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３：８０（２００７））。ブリススコアは単
剤からの増強の程度を定量化し、そして正のブリススコア（０より大きい）は単純な相加
性より大きいことを示唆する。２５０を超える累積陽性ブリススコアは、試験した濃度範
囲内で観察された強い相乗効果とみなされる。ＨＳＡスコア（０より大きい）は、対応す
る濃度での単剤の応答の最大値より大きい併用効果を示唆する。
【0027】
「スフェロイド」は、生物学的細胞が３つの次元の全てにおいて増殖するかまたはそれ
らの周囲と相互作用する人工的環境における三次元（３Ｄ）細胞培養として当該分野で知
られている細胞培養をいう。ペトリ皿などの２Ｄ環境とは異なり、３Ｄ細胞培養では、イ
ンビボでの増殖方法と同様に、インビトロで全ての方向での細胞の増殖を可能にする。人
工環境は、特定の栄養素や細胞の増殖を可能にするその他の因子を提供する培地を含む。
本明細書において記載される培地は、迅速な細胞培養のための環境を提供する。「急速な
」という用語は、比較培地における同一の細胞増殖に必要な期間より短い期間を指す。
らの周囲と相互作用する人工的環境における三次元（３Ｄ）細胞培養として当該分野で知
られている細胞培養をいう。ペトリ皿などの２Ｄ環境とは異なり、３Ｄ細胞培養では、イ
ンビボでの増殖方法と同様に、インビトロで全ての方向での細胞の増殖を可能にする。人
工環境は、特定の栄養素や細胞の増殖を可能にするその他の因子を提供する培地を含む。
本明細書において記載される培地は、迅速な細胞培養のための環境を提供する。「急速な
」という用語は、比較培地における同一の細胞増殖に必要な期間より短い期間を指す。
【0028】
用語「接触する」または「接触すること」は、活性剤が標的に結合し、その活性を阻害
し、減少させる、または低減することができるように、標的である酵素または生存経路に
対して活性剤を十分接近させていることを意味する。
し、減少させる、または低減することができるように、標的である酵素または生存経路に
対して活性剤を十分接近させていることを意味する。
【0029】
本明細書において使用されるとき、用語「哺乳動物」は、ヒトおよび全ての他の哺乳動
物をいう。本明細書において使用されるとき、用語「哺乳動物」は「対象」または「患者
」を含み、そして温血動物を指す。モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウマ、ヤ
ギ、ウシ、ヒツジ、動物園の動物、家畜、霊長類、およびヒトはすべて、この用語の意味
の範囲内の動物の例であると理解される。
物をいう。本明細書において使用されるとき、用語「哺乳動物」は「対象」または「患者
」を含み、そして温血動物を指す。モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウマ、ヤ
ギ、ウシ、ヒツジ、動物園の動物、家畜、霊長類、およびヒトはすべて、この用語の意味
の範囲内の動物の例であると理解される。
【0030】
本明細書において使用されるとき、「それを必要とする哺乳動物」は、治療されること
が意図される特定の状態、例えば膵がんまたは特定の型の膵がんに罹患していると診断さ
れた対象である。
が意図される特定の状態、例えば膵がんまたは特定の型の膵がんに罹患していると診断さ
れた対象である。
【0031】
用語「治療する」および「治療」は、治療的治療と予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ
またはｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）手段の両方を指し、その目的は、がんの発症または拡
大などの望ましくない生理学的変化または障害を予防または減速（軽減）することである
。本開示の目的のために、有益なまたは望ましい臨床結果には、病状の緩和、疾患の程度
の減少、疾患の状態の安定化（すなわち悪化しない）、疾患の進行の遅延または緩徐化、
病態の寛解または好転、および検出可能か検出不能かにかかわらず緩解（部分的または全
体的）が含まれるがこれらに限定されない。「治療」はまた、治療を受けない場合に予想
される生存期間と比較して延長された生存期間を意味することもできる。治療の必要のあ
るものは、状態もしくは障害をすでに有するもの、および状態もしくは障害を有する傾向
にあるもの、または状態もしくは障害を予防すべきものを含む。
またはｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）手段の両方を指し、その目的は、がんの発症または拡
大などの望ましくない生理学的変化または障害を予防または減速（軽減）することである
。本開示の目的のために、有益なまたは望ましい臨床結果には、病状の緩和、疾患の程度
の減少、疾患の状態の安定化（すなわち悪化しない）、疾患の進行の遅延または緩徐化、
病態の寛解または好転、および検出可能か検出不能かにかかわらず緩解（部分的または全
体的）が含まれるがこれらに限定されない。「治療」はまた、治療を受けない場合に予想
される生存期間と比較して延長された生存期間を意味することもできる。治療の必要のあ
るものは、状態もしくは障害をすでに有するもの、および状態もしくは障害を有する傾向
にあるもの、または状態もしくは障害を予防すべきものを含む。
【0032】
本明細書における用語「阻害剤」の使用は、標的酵素の活性を阻害する分子を意味する
ことを意味する。本明細書において「阻害する」とは、阻害剤の非存在下でのその酵素の
活性と比較して、標的酵素の活性を減少させることを意味する。いくつかの実施形態にお
いて、用語「阻害する」は、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０
％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０
％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％の、ＭＥＫ活
性の低下またはがん細胞の特定の生存経路の低下を意味する。他の実施形態において、阻
害は、約５％～約２５％、約２５％～約５０％、約５０％～約７５％、または約７５％～
１００％の活性の減少を意味する。いくつかの実施形態において、阻害は、約９５％～１
００％の活性の低下、例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００
％の活性の低下を意味する。そのような減少は、当業者によって認識され得るであろう、
インビトロキナーゼアッセイを含む様々な技術を使用して測定できる。
ことを意味する。本明細書において「阻害する」とは、阻害剤の非存在下でのその酵素の
活性と比較して、標的酵素の活性を減少させることを意味する。いくつかの実施形態にお
いて、用語「阻害する」は、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０
％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０
％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％の、ＭＥＫ活
性の低下またはがん細胞の特定の生存経路の低下を意味する。他の実施形態において、阻
害は、約５％～約２５％、約２５％～約５０％、約５０％～約７５％、または約７５％～
１００％の活性の減少を意味する。いくつかの実施形態において、阻害は、約９５％～１
００％の活性の低下、例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００
％の活性の低下を意味する。そのような減少は、当業者によって認識され得るであろう、
インビトロキナーゼアッセイを含む様々な技術を使用して測定できる。
【0033】
本明細書中で使用されるとき、「ＭＥＫ阻害剤」は、ＭＥＫ（ＭＥＫ１および／または
ＭＥＫ２）の１つ以上の生物活性を低減する、阻害する、またはそうでなければ減退させ
る分子である。活性は、適切な対照と比較して、例えば少なくとも約５％、１０％、１５
％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５
％、７０％、７５％、８０％、８５％、９５％または１００％の減少を含む統計的に有意
な量のＭＥＫの活性を減少し得る。
ＭＥＫ２）の１つ以上の生物活性を低減する、阻害する、またはそうでなければ減退させ
る分子である。活性は、適切な対照と比較して、例えば少なくとも約５％、１０％、１５
％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５
％、７０％、７５％、８０％、８５％、９５％または１００％の減少を含む統計的に有意
な量のＭＥＫの活性を減少し得る。
【0034】
本明細書中で使用されるとき、「マルチキナーゼ阻害剤」は、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、お
よびＳＴＡＴ３の生物活性を低減する、阻害する、またはそうでなければ減退させる分子
である。好適なマルチキナーゼ阻害剤は、これら３つの標的の各々に対して活性を示し、
そしてさらなる標的に対して活性を有し得る。例えば、実施形態において、マルチキナー
ゼ阻害剤は、膵腫瘍に関連する腫瘍関連マクロファージにさらに作用する。ＭＥＫ阻害剤
と組み合わせたときにこれらの標的の各々に作用するマルチキナーゼ阻害剤の能力は、膵
がんに対して優れた有効性を提供する。活性は、適切な対照と比較して、例えば少なくと
も約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％
、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９５％または１００％の
減少を含む統計的に有意な量の標的の活性を減少し得る。
よびＳＴＡＴ３の生物活性を低減する、阻害する、またはそうでなければ減退させる分子
である。好適なマルチキナーゼ阻害剤は、これら３つの標的の各々に対して活性を示し、
そしてさらなる標的に対して活性を有し得る。例えば、実施形態において、マルチキナー
ゼ阻害剤は、膵腫瘍に関連する腫瘍関連マクロファージにさらに作用する。ＭＥＫ阻害剤
と組み合わせたときにこれらの標的の各々に作用するマルチキナーゼ阻害剤の能力は、膵
がんに対して優れた有効性を提供する。活性は、適切な対照と比較して、例えば少なくと
も約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％
、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９５％または１００％の
減少を含む統計的に有意な量の標的の活性を減少し得る。
【0035】
本開示の化合物は特異的な阻害剤であってもなくてもよい。「特異的な阻害剤」とは、
関連のない標的の活性よりも規定された標的の活性を減少させる、阻害する、またはそう
でなければ減退させる剤を意図する。例えば、ＭＥＫ特異的アンタゴニストは、ＭＥＫの
少なくとも１つの生物活性を、任意の他のタンパク質（例えば、他のセリン／スレオニン
キナーゼ）に対するアンタゴニストの阻害効果より顕著に大きい量で減少させる。いくつ
かの実施形態において、標的に対するアンタゴニストのＩＣ５０は、非標的に対するアン
タゴニストのＩＣ５０の約９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、
２０％、１０％、５％、１％、０．１％、０．０１％、０．００１％、またはそれ以下で
ある。特異的ＭＥＫ阻害剤は、ＭＥＫの１つ以上のファミリーメンバーの生物活性を、任
意の他のタンパク質（例えば、他のセリン／スレオニンキナーゼ）に対するアンタゴニス
トの阻害効果より顕著に大きい量で減少させる。これらの実施形態のいくつかにおいて、
ＲＡＦに対するＭＥＫ阻害剤のＩＣ５０は、他のセリン／スレオニンキナーゼ、他のＭＥ
Ｋファミリーメンバーまたは他の型のキナーゼ（例えば、チロシンキナーゼ）に対するＭ
ＥＫ阻害剤のＩＣ５０の約９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、
２０％、１０％、０．１％、０．０１％、０．００１％、またはそれ以下である。
関連のない標的の活性よりも規定された標的の活性を減少させる、阻害する、またはそう
でなければ減退させる剤を意図する。例えば、ＭＥＫ特異的アンタゴニストは、ＭＥＫの
少なくとも１つの生物活性を、任意の他のタンパク質（例えば、他のセリン／スレオニン
キナーゼ）に対するアンタゴニストの阻害効果より顕著に大きい量で減少させる。いくつ
かの実施形態において、標的に対するアンタゴニストのＩＣ５０は、非標的に対するアン
タゴニストのＩＣ５０の約９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、
２０％、１０％、５％、１％、０．１％、０．０１％、０．００１％、またはそれ以下で
ある。特異的ＭＥＫ阻害剤は、ＭＥＫの１つ以上のファミリーメンバーの生物活性を、任
意の他のタンパク質（例えば、他のセリン／スレオニンキナーゼ）に対するアンタゴニス
トの阻害効果より顕著に大きい量で減少させる。これらの実施形態のいくつかにおいて、
ＲＡＦに対するＭＥＫ阻害剤のＩＣ５０は、他のセリン／スレオニンキナーゼ、他のＭＥ
Ｋファミリーメンバーまたは他の型のキナーゼ（例えば、チロシンキナーゼ）に対するＭ
ＥＫ阻害剤のＩＣ５０の約９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、
２０％、１０％、０．１％、０．０１％、０．００１％、またはそれ以下である。
【0036】
用語「標的」または「標的とする」は、特定のＭＥＫ酵素または生存経路に関連する特
定の酵素に対して特異的に作用する活性剤の能力を指す。酵素を標的とする活性剤の能力
は、本明細書において記載されるように日常的な実験を通して、または他の公知の方法を
使用して決定され得る。
定の酵素に対して特異的に作用する活性剤の能力を指す。酵素を標的とする活性剤の能力
は、本明細書において記載されるように日常的な実験を通して、または他の公知の方法を
使用して決定され得る。
【0037】
本明細書において使用されるとき、「生存経路」とは、がん細胞の生存および増殖を促
進し、そして活性剤に対して抵抗性になる適応性の機構または能力を指す。本明細書にお
いて使用されるとき、生存経路は、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３に関連してい
る。
進し、そして活性剤に対して抵抗性になる適応性の機構または能力を指す。本明細書にお
いて使用されるとき、生存経路は、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３に関連してい
る。
【0038】
語句「治療有効量」は、（ｉ）膵がんを治療または予防する、（ｉｉ）膵がんの１つ以
上の病状を軽減、寛解、または解消する、または（ｉｉｉ）膵がんの１つ以上の病状の発
症を予防または遅延する活性剤の量を意味する。治療上有効量の薬物はがん細胞の数を減
らすことができ、腫瘍サイズを低減し、末梢臓器へのがん細胞浸潤を阻害し（すなわち、
ある程度緩徐化し、そして好ましくは停止させる）、腫瘍転移を阻害する（すなわち、あ
る程度緩徐化し、そして好ましくは停止させる）、腫瘍増殖をある程度阻害し、および／
またはがんに関連する病状のうちの１つ以上をある程度軽減する。薬物が増殖を妨げおよ
び／または既存のがん細胞を殺し得る限りにおいて、それは細胞増殖抑制性および／また
は細胞傷害性であり得る。がん治療の場合、有効性は、例えば、疾患進行までの時間（Ｔ
ＴＰ）を評価することおよび／または奏効率（ＲＲ）を決定することによって測定するこ
とができる。
上の病状を軽減、寛解、または解消する、または（ｉｉｉ）膵がんの１つ以上の病状の発
症を予防または遅延する活性剤の量を意味する。治療上有効量の薬物はがん細胞の数を減
らすことができ、腫瘍サイズを低減し、末梢臓器へのがん細胞浸潤を阻害し（すなわち、
ある程度緩徐化し、そして好ましくは停止させる）、腫瘍転移を阻害する（すなわち、あ
る程度緩徐化し、そして好ましくは停止させる）、腫瘍増殖をある程度阻害し、および／
またはがんに関連する病状のうちの１つ以上をある程度軽減する。薬物が増殖を妨げおよ
び／または既存のがん細胞を殺し得る限りにおいて、それは細胞増殖抑制性および／また
は細胞傷害性であり得る。がん治療の場合、有効性は、例えば、疾患進行までの時間（Ｔ
ＴＰ）を評価することおよび／または奏効率（ＲＲ）を決定することによって測定するこ
とができる。
【0039】
用語「薬学的に許容される塩」は、生物学的にまたは他の点で望ましくないものではな
い塩を意味する。薬学的に許容される塩は、酸付加塩と塩基付加塩の両方を含む。語句「
薬学的に許容される」は、物質または組成物が、製剤を構成する他の成分および／または
それを用いて治療される哺乳動物と化学的および／または毒物学的に適合性でなければな
らないことを示す。本明細書で使用されるとき、語句「薬学的に許容される塩」は、分子
の薬学的に許容される有機塩または無機塩を指す。例示的な塩としては、硫酸塩、クエン
酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、
酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、
オレイン酸塩、タン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸
塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、サッ
カリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホ
ン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、およびパモエート（すなわ
ち１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート））塩が含まれるが
これらに限定されない。薬学的に許容される塩は、酢酸イオン、コハク酸イオンまたは他
の対イオンなどの別の分子を包含し得る。対イオンは、親化合物上の電荷を安定化させる
任意の有機または無機部分であり得る。さらに、薬学的に許容される塩はその構造中に１
を超える荷電原子を有していてもよい。複数の荷電原子が薬学的に許容される塩の一部で
ある場合は、複数の対イオンを有する可能性がある。それ故、薬学的に許容される塩は、
１つ以上の荷電原子および／または１つ以上の対イオンを有することができる。例として
は、コビメチニブおよびポナチニブＨＣｌのフマル酸塩またはヘミフマル酸塩が含まれる
がこれらに限定されない。
い塩を意味する。薬学的に許容される塩は、酸付加塩と塩基付加塩の両方を含む。語句「
薬学的に許容される」は、物質または組成物が、製剤を構成する他の成分および／または
それを用いて治療される哺乳動物と化学的および／または毒物学的に適合性でなければな
らないことを示す。本明細書で使用されるとき、語句「薬学的に許容される塩」は、分子
の薬学的に許容される有機塩または無機塩を指す。例示的な塩としては、硫酸塩、クエン
酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、
酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、
オレイン酸塩、タン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸
塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、サッ
カリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホ
ン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、およびパモエート（すなわ
ち１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート））塩が含まれるが
これらに限定されない。薬学的に許容される塩は、酢酸イオン、コハク酸イオンまたは他
の対イオンなどの別の分子を包含し得る。対イオンは、親化合物上の電荷を安定化させる
任意の有機または無機部分であり得る。さらに、薬学的に許容される塩はその構造中に１
を超える荷電原子を有していてもよい。複数の荷電原子が薬学的に許容される塩の一部で
ある場合は、複数の対イオンを有する可能性がある。それ故、薬学的に許容される塩は、
１つ以上の荷電原子および／または１つ以上の対イオンを有することができる。例として
は、コビメチニブおよびポナチニブＨＣｌのフマル酸塩またはヘミフマル酸塩が含まれる
がこれらに限定されない。
【0040】
必要に応じて追加の定義を以下に提供する。
【0041】
ＩＩ．インビボ方法
ＭＥＫ阻害剤とＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻
害剤との本開示の組み合わせは、膵がんの治療に有用である。
ＭＥＫ阻害剤とＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻
害剤との本開示の組み合わせは、膵がんの治療に有用である。
【0042】
実施形態において、膵がんの治療を必要とする対象において膵がんを治療する方法であ
って、治療有効量の活性剤の組み合わせを上記対象に投与するステップを含み、上記組み
合わせが、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およ
びＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩とを含む、
方法が本明細書において開示される。この実施形態は、腫瘍関連マクロファージの増殖を
阻害することをさらに含み得る。
って、治療有効量の活性剤の組み合わせを上記対象に投与するステップを含み、上記組み
合わせが、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およ
びＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩とを含む、
方法が本明細書において開示される。この実施形態は、腫瘍関連マクロファージの増殖を
阻害することをさらに含み得る。
【0043】
使用され得るＭＥＫ阻害剤の例としては、コビメチニブ、ＧＤＣ－０６２３、トラメチ
ニブ、ビニメチニブ、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５
９０１およびＢＩ－８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩が含まれる。一
実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はコビメチニブまたはその薬学的に許容される塩である
。コビメチニブは以下の構造を有する。
ニブ、ビニメチニブ、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５
９０１およびＢＩ－８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩が含まれる。一
実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はコビメチニブまたはその薬学的に許容される塩である
。コビメチニブは以下の構造を有する。
【化1】
【0044】
コビメチニブはＣｏｔｅｌｌｉｃ（登録商標）として販売されており、そしてヘミフマ
ル酸塩として市販の製剤中に見出される。
ル酸塩として市販の製剤中に見出される。
【0045】
ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とする有用なマルチキナーゼ剤はポナチ
ニブである。ポナチニブは以下の構造を有する。
ニブである。ポナチニブは以下の構造を有する。
【化2】
【0046】
ポナチニブは、Ｉｃｌｕｓｉｇ（登録商標）として販売されており、塩酸塩として市販
の製剤中に見出される。
の製剤中に見出される。
【0047】
膵がんには、内分泌がんおよび外分泌がんが含まれる。実施形態において、膵がんは、
腺がん、腺房細胞がん、腺扁平上皮がん、粘液がん、破骨細胞様巨細胞を伴う未分化がん
、肝様腺がん、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、膵芽腫、漿液性嚢胞腺腫、印環
細胞がん、充実性偽乳頭状腫瘍、膵管がん、ならびに未分化がんからなる群から選択され
る。一実施形態において、膵がんは膵管腺がんである。
腺がん、腺房細胞がん、腺扁平上皮がん、粘液がん、破骨細胞様巨細胞を伴う未分化がん
、肝様腺がん、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、膵芽腫、漿液性嚢胞腺腫、印環
細胞がん、充実性偽乳頭状腫瘍、膵管がん、ならびに未分化がんからなる群から選択され
る。一実施形態において、膵がんは膵管腺がんである。
【0048】
実施形態において、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、
Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容され
る塩とは相乗的である。すなわち、組み合わせは、両方の剤の相加効果よりも高いレベル
の有効性を提供する。実施形態において、一方または両方の活性剤単独では、膵がんに対
して所望の有効性を示さない。コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩とポナチニ
ブまたはその薬学的に許容される塩の例では、どちらの剤単独でも膵がんに対して有効で
あるとは知られていない。
Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容され
る塩とは相乗的である。すなわち、組み合わせは、両方の剤の相加効果よりも高いレベル
の有効性を提供する。実施形態において、一方または両方の活性剤単独では、膵がんに対
して所望の有効性を示さない。コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩とポナチニ
ブまたはその薬学的に許容される塩の例では、どちらの剤単独でも膵がんに対して有効で
あるとは知られていない。
【0049】
実施形態において、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と上記マルチキナー
ゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩は、組み合わせ製剤として投与される。実施形
態において、組み合わせ治療薬は、同時または逐次投与計画として投与することができる
。逐次的に投与するとき、組み合わせは２回以上の投与で投与することができる。混合投
与は、別々の製剤または単一の薬学的製剤を使用する共投与、および両方の（または全て
の）活性剤がその生物活性を同時に発揮する期間が好ましくは存在するいずれかの順序で
の連続投与を含む。
ゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩は、組み合わせ製剤として投与される。実施形
態において、組み合わせ治療薬は、同時または逐次投与計画として投与することができる
。逐次的に投与するとき、組み合わせは２回以上の投与で投与することができる。混合投
与は、別々の製剤または単一の薬学的製剤を使用する共投与、および両方の（または全て
の）活性剤がその生物活性を同時に発揮する期間が好ましくは存在するいずれかの順序で
の連続投与を含む。
【0050】
膵がんを治療する方法は、１つ以上の標的酵素または生存経路の活性を減少させる、阻
害する、またはそうでなければ減退させる。膵腫瘍に関連する腫瘍関連マクロファージも
また標的とされ得る。インビトロキナーゼアッセイ、リン酸化標的に特異的な抗体による
免疫ブロット、または活性の下流の生物学的効果の測定を含む、ＭＥＫ活性またはＰＤＧ
ＦＲα、Ｓ６、ＳＴＡＴ３および腫瘍関連マクロファージ活性化のレベルを測定するため
の当技術分野において公知の任意の方法を使用して、組み合わせの活性を決定できる。
害する、またはそうでなければ減退させる。膵腫瘍に関連する腫瘍関連マクロファージも
また標的とされ得る。インビトロキナーゼアッセイ、リン酸化標的に特異的な抗体による
免疫ブロット、または活性の下流の生物学的効果の測定を含む、ＭＥＫ活性またはＰＤＧ
ＦＲα、Ｓ６、ＳＴＡＴ３および腫瘍関連マクロファージ活性化のレベルを測定するため
の当技術分野において公知の任意の方法を使用して、組み合わせの活性を決定できる。
【0051】
膵がんは初期段階でも後期段階でもよく、また転移していることもある。本明細書にお
いて記載される組み合わせは、転移したがんを含む任意のステージのがんを治療するため
に使用することができる。
いて記載される組み合わせは、転移したがんを含む任意のステージのがんを治療するため
に使用することができる。
【0052】
有効量のＭＥＫ阻害剤とＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキ
ナーゼ阻害剤との組み合わせによる対象の治療は、単一治療を含むことができ、または一
連の治療を含むことができる。
ナーゼ阻害剤との組み合わせによる対象の治療は、単一治療を含むことができ、または一
連の治療を含むことができる。
【0053】
活性剤の有用な量は本明細書のいずこかの場所に記載されている通りである。特定の実
施形態において、ＭＥＫ阻害剤は約５ｍｇ～約１００ｍｇ、または約４５ｍｇ～約７５ｍ
ｇの量で投与され、そしてマルチキナーゼ阻害剤は約５ｍｇ～約１００ｍｇ、または約３
０ｍｇ～約６０ｍｇの量で投与される。実施形態において、ＭＥＫ阻害剤は約６０ｍｇの
量で投与され、そしてマルチキナーゼ阻害剤は約４５ｍｇの量で投与される。実施形態に
おいて、組み合わせ治療薬の投与は１日１回の経口投与である。実施形態において、ＭＥ
Ｋ阻害剤がコビメチニブまたはその薬学的に許容される塩であり、マルチキナーゼ阻害剤
がポナチニブまたはその薬学的に許容される塩であることが好ましい。いくつかの実施形
態において、各々の活性剤は、約０．００１μｇ／ｋｇ～約１０００ｍｇ／ｋｇの用量で
対象に投与され、これには、約０．００１μｇ／ｋｇ、０．０１μｇ／ｋｇ、０．０５μ
ｇ／ｋｇ、０．１μｇ／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、２５
μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、２５０μｇ／ｋｇ、５００μｇ／ｋｇ
、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、４
０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、および２００ｍｇ／ｋｇが含まれる
が、これらに限定されない。投与されるべき組み合わせ組成物中に存在する各々の活性剤
の量は、約１ｍｇ～約１０００ｍｇ、または約５ｍｇ～約１００ｍｇ、または約１０ｍｇ
～約８０ｍｇ、または約４５ｍｇ～約７５ｍｇ、または約３０ｍｇ～約６０ｍｇであり得
る。活性化合物の適切な用量は、当業者または獣医師の知識の範囲内のいくつかの要素に
依存することが理解される。活性剤の用量は、例えば、対象の年齢、体重、全体的な健康
状態、性別、および対象の食事、投与時間、投与経路、排泄率、および任意の薬物の組み
合わせに依存して変動するであろう。治療に使用される有効な用量は、特定の治療の過程
にわたって増加または減少し得ることも理解されよう。投与量の変化は、診断アッセイの
結果から生じ、そして明らかになり得る。
施形態において、ＭＥＫ阻害剤は約５ｍｇ～約１００ｍｇ、または約４５ｍｇ～約７５ｍ
ｇの量で投与され、そしてマルチキナーゼ阻害剤は約５ｍｇ～約１００ｍｇ、または約３
０ｍｇ～約６０ｍｇの量で投与される。実施形態において、ＭＥＫ阻害剤は約６０ｍｇの
量で投与され、そしてマルチキナーゼ阻害剤は約４５ｍｇの量で投与される。実施形態に
おいて、組み合わせ治療薬の投与は１日１回の経口投与である。実施形態において、ＭＥ
Ｋ阻害剤がコビメチニブまたはその薬学的に許容される塩であり、マルチキナーゼ阻害剤
がポナチニブまたはその薬学的に許容される塩であることが好ましい。いくつかの実施形
態において、各々の活性剤は、約０．００１μｇ／ｋｇ～約１０００ｍｇ／ｋｇの用量で
対象に投与され、これには、約０．００１μｇ／ｋｇ、０．０１μｇ／ｋｇ、０．０５μ
ｇ／ｋｇ、０．１μｇ／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、２５
μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、２５０μｇ／ｋｇ、５００μｇ／ｋｇ
、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、４
０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、および２００ｍｇ／ｋｇが含まれる
が、これらに限定されない。投与されるべき組み合わせ組成物中に存在する各々の活性剤
の量は、約１ｍｇ～約１０００ｍｇ、または約５ｍｇ～約１００ｍｇ、または約１０ｍｇ
～約８０ｍｇ、または約４５ｍｇ～約７５ｍｇ、または約３０ｍｇ～約６０ｍｇであり得
る。活性化合物の適切な用量は、当業者または獣医師の知識の範囲内のいくつかの要素に
依存することが理解される。活性剤の用量は、例えば、対象の年齢、体重、全体的な健康
状態、性別、および対象の食事、投与時間、投与経路、排泄率、および任意の薬物の組み
合わせに依存して変動するであろう。治療に使用される有効な用量は、特定の治療の過程
にわたって増加または減少し得ることも理解されよう。投与量の変化は、診断アッセイの
結果から生じ、そして明らかになり得る。
【0054】
いくつかの実施形態において、膵がんの治療を必要とする対象において膵がんを治療す
るための方法であって、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα
、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容さ
れる塩との組み合わせを対象に投与するステップを含み、追加の両方を適用することをさ
らに含む方法が本明細書において記載される。追加の療法は、放射線療法、外科手術（例
えば、腫瘍切除術および乳房切除術）、化学療法、遺伝子療法、ＤＮＡ療法、ウイルス療
法、ＲＮＡ療法、免疫療法、骨髄移植、ナノ療法、モノクローナル抗体療法、またはこれ
らの組み合わせであり得る。追加の療法は、補助療法または術前補助療法の形態であり得
る。いくつかの実施形態において、追加の療法は抗転移薬の投与である。いくつかの実施
形態において、追加の療法は副作用制限剤（例えば、抗悪心剤などの治療の副作用の発生
および／または重篤度を軽減することを意図した剤）の投与である。いくつかの実施形態
において、追加の療法は放射線療法である。いくつかの実施形態において、追加の治療は
外科手術である。いくつかの実施形態において、追加の療法は放射線療法と外科手術の組
み合わせである。いくつかの実施形態において、追加の療法はガンマ線照射である。
るための方法であって、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα
、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容さ
れる塩との組み合わせを対象に投与するステップを含み、追加の両方を適用することをさ
らに含む方法が本明細書において記載される。追加の療法は、放射線療法、外科手術（例
えば、腫瘍切除術および乳房切除術）、化学療法、遺伝子療法、ＤＮＡ療法、ウイルス療
法、ＲＮＡ療法、免疫療法、骨髄移植、ナノ療法、モノクローナル抗体療法、またはこれ
らの組み合わせであり得る。追加の療法は、補助療法または術前補助療法の形態であり得
る。いくつかの実施形態において、追加の療法は抗転移薬の投与である。いくつかの実施
形態において、追加の療法は副作用制限剤（例えば、抗悪心剤などの治療の副作用の発生
および／または重篤度を軽減することを意図した剤）の投与である。いくつかの実施形態
において、追加の療法は放射線療法である。いくつかの実施形態において、追加の治療は
外科手術である。いくつかの実施形態において、追加の療法は放射線療法と外科手術の組
み合わせである。いくつかの実施形態において、追加の療法はガンマ線照射である。
【0055】
いくつかの実施形態において、治療は、治療の中止後に対象において持続的応答をもた
らす。「持続的応答」とは、治療中止後の腫瘍増殖の低減に対する持続的効果を指す。例
えば、腫瘍サイズは、投与段階の開始時のサイズと比較して同じで維持されるかまたはよ
り小さくあり得る。いくつかの実施形態において、持続的応答は、治療期間と少なくとも
同一の期間、治療期間の少なくとも１．５倍、２．０倍、２．５倍、または３．０倍の長
さを有する。
らす。「持続的応答」とは、治療中止後の腫瘍増殖の低減に対する持続的効果を指す。例
えば、腫瘍サイズは、投与段階の開始時のサイズと比較して同じで維持されるかまたはよ
り小さくあり得る。いくつかの実施形態において、持続的応答は、治療期間と少なくとも
同一の期間、治療期間の少なくとも１．５倍、２．０倍、２．５倍、または３．０倍の長
さを有する。
【0056】
本明細書において開示される治療方法は、部分的または完全な応答をもたらし得る。本
明細書中で使用されるとき、「完全寛解」または「ＣＲ」とは、全ての標的病変の消失を
さし、「部分寛解」または「ＰＲ」は、標的病変の最長直径の合計（ＳＬＤ）の、ベース
ラインＳＬＤを基準として、少なくとも３０％の減少を指し、「安定した疾患」または「
ＳＤ」は、治療開始以来の最小のＳＬＤを基準にして、ＰＲに適格とするのに十分な標的
病変の縮小もＰＤに適格とするのに十分な増加も示さないことを指す。本明細書で使用さ
れるとき、「全奏効率」（ＯＲＲ）は、完全寛解（ＣＲ）率と部分寛解（ＰＲ）率の合計
を指す。
明細書中で使用されるとき、「完全寛解」または「ＣＲ」とは、全ての標的病変の消失を
さし、「部分寛解」または「ＰＲ」は、標的病変の最長直径の合計（ＳＬＤ）の、ベース
ラインＳＬＤを基準として、少なくとも３０％の減少を指し、「安定した疾患」または「
ＳＤ」は、治療開始以来の最小のＳＬＤを基準にして、ＰＲに適格とするのに十分な標的
病変の縮小もＰＤに適格とするのに十分な増加も示さないことを指す。本明細書で使用さ
れるとき、「全奏効率」（ＯＲＲ）は、完全寛解（ＣＲ）率と部分寛解（ＰＲ）率の合計
を指す。
【0057】
本明細書において開示される治療方法は、組み合わせ治療薬を投与された対象の無増悪
生存期間および全生存期間の増加をもたらし得る。本明細書において使用されるとき、「
無増悪生存期間」（ＰＦＳ）は、治療中の疾患（例えば、がん）が悪化しない、治療中お
よび治療後の期間の長さを指す。無増悪生存期間には、患者が完全寛解または部分寛解を
経験した時間の長さ、および患者が安定した疾患を経験した時間の長さが含まれうる。
生存期間および全生存期間の増加をもたらし得る。本明細書において使用されるとき、「
無増悪生存期間」（ＰＦＳ）は、治療中の疾患（例えば、がん）が悪化しない、治療中お
よび治療後の期間の長さを指す。無増悪生存期間には、患者が完全寛解または部分寛解を
経験した時間の長さ、および患者が安定した疾患を経験した時間の長さが含まれうる。
【0058】
本明細書において使用されるとき、「全生存期間」とは、特定の期間の経過後に生存し
ている可能性が高い群にある対象の割合をいう。
ている可能性が高い群にある対象の割合をいう。
【0059】
いくつかの実施形態において、組み合わせを投与される対象は、飼育動物（例えば、ウ
シ、ヒツジ、ネコ、イヌ、およびウマ）、霊長類（例えば、ヒトおよびサルなどの非ヒト
霊長類）、ウサギ、およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳動物であ
る。いくつかの実施形態において、治療される対象はヒトである。
シ、ヒツジ、ネコ、イヌ、およびウマ）、霊長類（例えば、ヒトおよびサルなどの非ヒト
霊長類）、ウサギ、およびげっ歯類（例えば、マウスおよびラット）などの哺乳動物であ
る。いくつかの実施形態において、治療される対象はヒトである。
【0060】
膵がんの治療を必要とする対象は、がんの病状を示す人、がんと診断されたもの、膵が
んから寛解している対象、またはがんを発症するリスクが高い対象（例えば、遺伝的素因
、ある特定の食事または環境への曝露）であり得る。
んから寛解している対象、またはがんを発症するリスクが高い対象（例えば、遺伝的素因
、ある特定の食事または環境への曝露）であり得る。
【0061】
本明細書において記載される多くの組み合わせは相乗的であると決定されるであろう。
【0062】
本明細書において記載されるインビトロ方法は、培養のための培地に添加する前に熱湯
加熱された血清を含む培地中で細胞を培養することを含む、スフェロイド細胞培養を調製
する方法を使用する。培地は３－Ｄスフェロイドを迅速に培養するように改変され得るこ
とが見出された。改変培地は、培養される細胞と接触させる前にウシ胎仔血清（ＦＢＳ）
を熱湯加熱することによって調製される。実施形態において、ＦＢＳは９５～１００℃で
１０分間熱湯加熱されており、その時点で血清の色は黄色に変わる。次いで、熱湯加熱し
たＦＢＳを８０００×ｇで２０分間遠心分離し、０．２２μｍのフィルター孔径を有する
滅菌Ｃｏｒｎｉｎｇ真空フィルターユニットを通してろ過する。有用な培地は、約５％～
約２０％（ｖ／ｖ）のウシ胎仔血清を含む。スフェロイド培養用の培地は、２ｍＭのＬ－
グルタミン、１００単位ｍｌ－１のペニシリンおよびストレプトマイシンを補充したＲＰ
ＭＩ培地に１０％（ｖ／ｖ）の熱湯加熱ＦＢＳを添加することによって調製する。スフェ
ロイド培地は使用前に新たに調製する必要がある。熱湯加熱ＦＢＳは４℃で２～３ヶ月保
存できる。単層培養用の培地は、２ｍＭのＬ－グルタミン、１００単位ｍｌ－１のペニシ
リンおよびストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ培地に１０％（ｖ／ｖ）の正常ＦＢＳ
を添加することによって調製する。遊走アッセイ用の培地は、２ｍＭのＬ－グルタミン、
１００単位ｍｌ－１のペニシリンおよびストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ培地に２
０％（ｖ／ｖ）の正常ＦＢＳを添加することによって調製する。
加熱された血清を含む培地中で細胞を培養することを含む、スフェロイド細胞培養を調製
する方法を使用する。培地は３－Ｄスフェロイドを迅速に培養するように改変され得るこ
とが見出された。改変培地は、培養される細胞と接触させる前にウシ胎仔血清（ＦＢＳ）
を熱湯加熱することによって調製される。実施形態において、ＦＢＳは９５～１００℃で
１０分間熱湯加熱されており、その時点で血清の色は黄色に変わる。次いで、熱湯加熱し
たＦＢＳを８０００×ｇで２０分間遠心分離し、０．２２μｍのフィルター孔径を有する
滅菌Ｃｏｒｎｉｎｇ真空フィルターユニットを通してろ過する。有用な培地は、約５％～
約２０％（ｖ／ｖ）のウシ胎仔血清を含む。スフェロイド培養用の培地は、２ｍＭのＬ－
グルタミン、１００単位ｍｌ－１のペニシリンおよびストレプトマイシンを補充したＲＰ
ＭＩ培地に１０％（ｖ／ｖ）の熱湯加熱ＦＢＳを添加することによって調製する。スフェ
ロイド培地は使用前に新たに調製する必要がある。熱湯加熱ＦＢＳは４℃で２～３ヶ月保
存できる。単層培養用の培地は、２ｍＭのＬ－グルタミン、１００単位ｍｌ－１のペニシ
リンおよびストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ培地に１０％（ｖ／ｖ）の正常ＦＢＳ
を添加することによって調製する。遊走アッセイ用の培地は、２ｍＭのＬ－グルタミン、
１００単位ｍｌ－１のペニシリンおよびストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ培地に２
０％（ｖ／ｖ）の正常ＦＢＳを添加することによって調製する。
【0063】
ＩＩＩ．組み合わせ薬学的組成物
実施形態において、本明細書において記載される課題は、膵がんの予防的治療または治
療的治療のためのａ）ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ｂ）ＰＤＧＦＲ
α、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容
される塩との組み合わせに関する。
実施形態において、本明細書において記載される課題は、膵がんの予防的治療または治
療的治療のためのａ）ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ｂ）ＰＤＧＦＲ
α、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容
される塩との組み合わせに関する。
【0064】
実施形態において、本明細書において記載される課題は、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学
的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナー
ゼ剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせの有効量、薬学的に許容される賦形
剤を含む薬学的組成物に関する。特定の実施形態において、薬学的組成物は膵がんの治療
用である。
的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナー
ゼ剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせの有効量、薬学的に許容される賦形
剤を含む薬学的組成物に関する。特定の実施形態において、薬学的組成物は膵がんの治療
用である。
【0065】
実施形態において、組成物は、コビメチニブ、ＧＤＣ－０６２３、トラメチニブ、ビニ
メチニブ、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１およ
びＢＩ－８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される
ＭＥＫ阻害剤を含む。一実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はコビメチニブまたはその薬学
的に許容される塩である。特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はヘミフマル酸コビメ
チニブである。
メチニブ、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１およ
びＢＩ－８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される
ＭＥＫ阻害剤を含む。一実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はコビメチニブまたはその薬学
的に許容される塩である。特定の実施形態において、ＭＥＫ阻害剤はヘミフマル酸コビメ
チニブである。
【0066】
実施形態において、マルチキナーゼ剤は、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩
である。一実施形態において、マルチキナーゼ阻害剤は塩酸ポナチニブである。
である。一実施形態において、マルチキナーゼ阻害剤は塩酸ポナチニブである。
【0067】
実施形態において、組成物は、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と、ポナ
チニブまたはその薬学的に許容される塩とを含む。実施形態において、組成物はヘミフマ
ル酸コビメチニブと塩酸ポナチニブとを含む。
チニブまたはその薬学的に許容される塩とを含む。実施形態において、組成物はヘミフマ
ル酸コビメチニブと塩酸ポナチニブとを含む。
【0068】
組み合わせ中に存在する各々の活性剤の量は、約１ｍｇ～約１０００ｍｇ、または約５
ｍｇ～約１００ｍｇ、または約１０ｍｇ～約８０ｍｇ、または約４５ｍｇ～約７５ｍｇ、
または約３０ｍｇ～約６０ｍｇであり得る。実施形態において、ＭＥＫ阻害剤は約４５ｍ
ｇ～約７５ｍｇの量で存在し、上記マルチキナーゼ阻害剤は約３０ｍｇ～約６０ｍｇの量
で存在する。
ｍｇ～約１００ｍｇ、または約１０ｍｇ～約８０ｍｇ、または約４５ｍｇ～約７５ｍｇ、
または約３０ｍｇ～約６０ｍｇであり得る。実施形態において、ＭＥＫ阻害剤は約４５ｍ
ｇ～約７５ｍｇの量で存在し、上記マルチキナーゼ阻害剤は約３０ｍｇ～約６０ｍｇの量
で存在する。
【0069】
組み合わせ治療薬は、「相乗効果」を提供し、「相乗的である」こと、すなわち、活性
剤が一緒に使用されたときに達成される効果が、これらの活性剤を別個に使用することか
ら生じる効果の合計よりも大きいことを示し得る。相乗効果は、活性剤が以下のときに達
成され得る：（１）組み合わせた単位投与製剤で同時に共製剤化され、投与または送達さ
れる、（２）別個の製剤として、交互にまたは並行して送達される、または（３）他の投
与計画による。交互療法で送達されるとき、活性剤が逐次的に投与または送達されるとき
、例えば別個の注射器中の異なる注射、別個の丸剤もしくはカプセル剤、または別個の注
入によって相乗効果が達成され得る。一般に、交互療法の間、有効用量の各々の活性剤は
逐次的に、すなわち連続的に投与されるが、組み合わせ治療薬においては、有効量の２つ
以上の活性剤が共に投与される。
剤が一緒に使用されたときに達成される効果が、これらの活性剤を別個に使用することか
ら生じる効果の合計よりも大きいことを示し得る。相乗効果は、活性剤が以下のときに達
成され得る：（１）組み合わせた単位投与製剤で同時に共製剤化され、投与または送達さ
れる、（２）別個の製剤として、交互にまたは並行して送達される、または（３）他の投
与計画による。交互療法で送達されるとき、活性剤が逐次的に投与または送達されるとき
、例えば別個の注射器中の異なる注射、別個の丸剤もしくはカプセル剤、または別個の注
入によって相乗効果が達成され得る。一般に、交互療法の間、有効用量の各々の活性剤は
逐次的に、すなわち連続的に投与されるが、組み合わせ治療薬においては、有効量の２つ
以上の活性剤が共に投与される。
【0070】
ＭＥＫ阻害剤および／またはマルチキナーゼ阻害剤は、本明細書において各々が活性剤
とも呼ばれ、標準的な薬務に従って薬学的組成物として製剤化することができる。例示的
なマルチキナーゼ阻害剤、ポナチニブは、１５ｍｇ、３０ｍｇ、および４５ｍｇの強度で
経口投与用の錠剤として入手可能である。例示的なＭＥＫ阻害剤、コビメチニブは、経口
投与用の錠剤として２０ｍｇの強度で入手可能である。しかしながら、この態様によれば
、ＭＥＫ阻害剤もしくはマルチキナーゼ阻害剤またはその両方を、担体または希釈剤など
の薬学的に許容される賦形剤と共に含む他の薬学的組成物が提供される。
とも呼ばれ、標準的な薬務に従って薬学的組成物として製剤化することができる。例示的
なマルチキナーゼ阻害剤、ポナチニブは、１５ｍｇ、３０ｍｇ、および４５ｍｇの強度で
経口投与用の錠剤として入手可能である。例示的なＭＥＫ阻害剤、コビメチニブは、経口
投与用の錠剤として２０ｍｇの強度で入手可能である。しかしながら、この態様によれば
、ＭＥＫ阻害剤もしくはマルチキナーゼ阻害剤またはその両方を、担体または希釈剤など
の薬学的に許容される賦形剤と共に含む他の薬学的組成物が提供される。
【0071】
典型的な製剤は、活性剤と１種以上の賦形剤を混合することによって調製される。適切
な賦形剤は当業者に周知であり、炭水化物、ワックス、水溶性および／または膨潤性ポリ
マー、親水性または疎水性物質、ゼラチン、油、溶媒、水などの物質が含まれる。使用さ
れる特定の賦形剤は、活性剤が適用されている手段および目的に依存するであろう。溶媒
は一般に、哺乳動物に投与するのに安全であると当業者によって認識されている溶媒（Ｇ
ＲＡＳ）に基づいて選択される。一般に、安全な溶媒は、水のような無毒の水性溶媒およ
び水に可溶性または混和性の他の無毒の溶媒である。好適な水性溶媒には、水、エタノー
ル、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ３
００）など、およびそれらの混合物が含まれる。製剤はまた、１種以上の緩衝剤、安定化
剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、抗酸化剤、不透明剤、滑剤
、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、香味剤、および活性剤の洗練された体裁を提供す
るか、または医薬製品（すなわち、医薬）の製造を補助するための他の既知の添加剤をも
含み得る。
な賦形剤は当業者に周知であり、炭水化物、ワックス、水溶性および／または膨潤性ポリ
マー、親水性または疎水性物質、ゼラチン、油、溶媒、水などの物質が含まれる。使用さ
れる特定の賦形剤は、活性剤が適用されている手段および目的に依存するであろう。溶媒
は一般に、哺乳動物に投与するのに安全であると当業者によって認識されている溶媒（Ｇ
ＲＡＳ）に基づいて選択される。一般に、安全な溶媒は、水のような無毒の水性溶媒およ
び水に可溶性または混和性の他の無毒の溶媒である。好適な水性溶媒には、水、エタノー
ル、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ３
００）など、およびそれらの混合物が含まれる。製剤はまた、１種以上の緩衝剤、安定化
剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、抗酸化剤、不透明剤、滑剤
、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、香味剤、および活性剤の洗練された体裁を提供す
るか、または医薬製品（すなわち、医薬）の製造を補助するための他の既知の添加剤をも
含み得る。
【0072】
製剤は、従来の溶解および混合手順を用いて調製することができる。例えば、バルク原
薬（すなわち、活性剤または活性剤の安定化形態（例えば、シクロデキストリン誘導体ま
たは他の既知の錯化剤との複合体））を、上述の１種以上の賦形剤の存在下で好適な溶媒
に溶解する。活性剤は、典型的には、薬物の容易に制御可能な投与量を提供し、そして処
方された投与計画に対する患者の服薬順守を可能にするために医薬剤形に製剤化される。
薬（すなわち、活性剤または活性剤の安定化形態（例えば、シクロデキストリン誘導体ま
たは他の既知の錯化剤との複合体））を、上述の１種以上の賦形剤の存在下で好適な溶媒
に溶解する。活性剤は、典型的には、薬物の容易に制御可能な投与量を提供し、そして処
方された投与計画に対する患者の服薬順守を可能にするために医薬剤形に製剤化される。
【0073】
適用のための薬学的組成物（または製剤）は、薬物を投与するために使用される方法に
応じて様々な方法で包装することができる。一般に、流通用物品は、適切な形態で医薬製
剤を中に入れた容器を含む。好適な容器は当業者には周知であり、ボトル（プラスチック
およびガラス）、サシェ、アンプル、プラスチック袋、金属製シリンダーなどの物質が含
まれる。容器はまた、包装内容物への不注意な接近を防止するための不正開封防止の組み
合わせ資材を含んでもよい。さらに、容器の上に容器の内容物を記載するラベルが貼られ
ている。ラベルには適切な警告も含まれる場合がある。一実施形態において、容器はブリ
スターパックである。
応じて様々な方法で包装することができる。一般に、流通用物品は、適切な形態で医薬製
剤を中に入れた容器を含む。好適な容器は当業者には周知であり、ボトル（プラスチック
およびガラス）、サシェ、アンプル、プラスチック袋、金属製シリンダーなどの物質が含
まれる。容器はまた、包装内容物への不注意な接近を防止するための不正開封防止の組み
合わせ資材を含んでもよい。さらに、容器の上に容器の内容物を記載するラベルが貼られ
ている。ラベルには適切な警告も含まれる場合がある。一実施形態において、容器はブリ
スターパックである。
【0074】
医薬製剤は、様々な投与経路および投与型のために調製することができる。例えば、所
望の程度の純度を有する活性剤を任意選択的に薬学的に許容される賦形剤と、凍結乾燥製
剤、粉砕粉末、または水溶液で混合することができる（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａ
ｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９８０）１６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏ
ｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）
。製剤化は、周囲温度で適切なｐＨで所望の純度で、生理学的に許容可能な担体、すなわ
ち使用される投与量および濃度で受容者に対して無毒である担体と混合することによって
実施され得る。製剤のｐＨは、主に特定の用途および化合物の濃度に依存するが、約３～
約８の範囲であり得る。ｐＨ５の酢酸緩衝液中での製剤化は好適な実施形態である。
望の程度の純度を有する活性剤を任意選択的に薬学的に許容される賦形剤と、凍結乾燥製
剤、粉砕粉末、または水溶液で混合することができる（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａ
ｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９８０）１６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏ
ｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）
。製剤化は、周囲温度で適切なｐＨで所望の純度で、生理学的に許容可能な担体、すなわ
ち使用される投与量および濃度で受容者に対して無毒である担体と混合することによって
実施され得る。製剤のｐＨは、主に特定の用途および化合物の濃度に依存するが、約３～
約８の範囲であり得る。ｐＨ５の酢酸緩衝液中での製剤化は好適な実施形態である。
【0075】
活性剤は滅菌であり得る。特に、インビボ投与に使用される製剤は滅菌される必要があ
る。そのような滅菌は、滅菌ろ過膜を通してろ過することによって容易に達成される。
る。そのような滅菌は、滅菌ろ過膜を通してろ過することによって容易に達成される。
【0076】
活性剤は通常、固体組成物、凍結乾燥製剤または水溶液として保存することができる。
【0077】
活性剤を含む薬学的組成物は、様式、すなわち量、濃度、スケジュール、治療単位、ビ
ヒクルおよび投与経路で、優れた医療行為と一致する形で製剤化、投与および投与するこ
とができる。これに関連して考慮すべき要素は、治療される特定の傷害、治療される特定
の哺乳動物、個別の患者の臨床状態、傷害の原因、剤の送達部位、投与方法、投与計画、
および医療従事者に知られている他の要素を含む。投与される化合物の「治療有効量」は
そのような考慮事項によって左右されるであろう。許容可能な賦形剤は、使用される用量
および濃度において、レシピエントに対して非毒性でありリン酸、クエン酸、および他の
有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（塩化オ
クタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウ
ム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル、またはベンジルアルコール；メチルまた
はプロピルパラベン等のアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサ
ノール；３－ペンタノール；およびｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリ
ペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニ
ルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン
、アルギニン、リジン等のアミノ酸；単糖類、二糖類、およびグルコース、マンノース、
またはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；スクロース、マンニ
トール、トレハロースまたはソルビトール等の糖類；ナトリウム等の塩形成対イオン；金
属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）；および／またはポリソルベート（例えば、Ｔ
ＷＥＥＮ（商標））、ポロキサマー（たとえば、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標））もしくは
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含み得る。活性剤はま
た、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって、例えば、それ
ぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン－マイクロカプセルおよびポリ（メチル
メタクリレート）マイクロカプセルによって調製されたマイクロカプセル中に、コロイド
状ドラッグデリバリーシステム（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイ
クロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）中に、またはマクロエマルション中に
、捕捉され得る。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉ
ｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓに開示されている。
ヒクルおよび投与経路で、優れた医療行為と一致する形で製剤化、投与および投与するこ
とができる。これに関連して考慮すべき要素は、治療される特定の傷害、治療される特定
の哺乳動物、個別の患者の臨床状態、傷害の原因、剤の送達部位、投与方法、投与計画、
および医療従事者に知られている他の要素を含む。投与される化合物の「治療有効量」は
そのような考慮事項によって左右されるであろう。許容可能な賦形剤は、使用される用量
および濃度において、レシピエントに対して非毒性でありリン酸、クエン酸、および他の
有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（塩化オ
クタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウ
ム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル、またはベンジルアルコール；メチルまた
はプロピルパラベン等のアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサ
ノール；３－ペンタノール；およびｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリ
ペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニ
ルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン
、アルギニン、リジン等のアミノ酸；単糖類、二糖類、およびグルコース、マンノース、
またはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；スクロース、マンニ
トール、トレハロースまたはソルビトール等の糖類；ナトリウム等の塩形成対イオン；金
属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）；および／またはポリソルベート（例えば、Ｔ
ＷＥＥＮ（商標））、ポロキサマー（たとえば、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標））もしくは
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含み得る。活性剤はま
た、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって、例えば、それ
ぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン－マイクロカプセルおよびポリ（メチル
メタクリレート）マイクロカプセルによって調製されたマイクロカプセル中に、コロイド
状ドラッグデリバリーシステム（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイ
クロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）中に、またはマクロエマルション中に
、捕捉され得る。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉ
ｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓに開示されている。
【0078】
活性剤の徐放性製剤を調製することができる。徐放性製剤の適切な例には、活性剤を含
む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが含まれ、マトリックスは、成形品の形態、
例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの例として
は、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート
）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（ＵＳ３７７３９１９）、Ｌ－グ
ルタミン酸およびγ－エチル－Ｌ－グルタメートのコポリマー、非分解性エチレン－酢酸
ビニル、乳酸－グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドからなる注射用ミクロス
フェアなどの分解性乳酸－グリコール酸コポリマー（ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）
）ならびにポリ－Ｄ－（－）－３－ヒドロキシ酪酸が含まれる。
む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが含まれ、マトリックスは、成形品の形態、
例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの例として
は、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート
）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（ＵＳ３７７３９１９）、Ｌ－グ
ルタミン酸およびγ－エチル－Ｌ－グルタメートのコポリマー、非分解性エチレン－酢酸
ビニル、乳酸－グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドからなる注射用ミクロス
フェアなどの分解性乳酸－グリコール酸コポリマー（ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）
）ならびにポリ－Ｄ－（－）－３－ヒドロキシ酪酸が含まれる。
【0079】
製剤は、本明細書において詳述される投与経路に適したものを含む。製剤は、単位剤形
で都合よく提供されてもよく、薬学の分野で周知の方法のいずれかによって調製されても
よい。技術および製剤は一般にＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓに見られる。そのような方法は、活性剤を１種以上の副成分を構成す
る担体と会合させる工程を含む。一般に、製剤は、活性剤を液体担体もしくは微粉化した
固体担体または両方と均一かつ密接に会合させ、次いで必要ならば生成物を成形すること
により製造される。
で都合よく提供されてもよく、薬学の分野で周知の方法のいずれかによって調製されても
よい。技術および製剤は一般にＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓに見られる。そのような方法は、活性剤を１種以上の副成分を構成す
る担体と会合させる工程を含む。一般に、製剤は、活性剤を液体担体もしくは微粉化した
固体担体または両方と均一かつ密接に会合させ、次いで必要ならば生成物を成形すること
により製造される。
【0080】
経口投与に適した活性剤の製剤は、各々が所定量の活性剤を含む丸剤、カプセル剤、カ
シェ剤または錠剤などの個別の単位として調製することができる。
シェ剤または錠剤などの個別の単位として調製することができる。
【0081】
圧縮錠剤は、任意選択的に結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、保存剤、界面活性剤または
分散剤と混合された粉末または顆粒のような自由流動形態の活性剤を適切な機械で圧縮す
ることによって調製され得る。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末活性剤の混
合物を適切な機械で成形することによって製造することができる。錠剤は、任意選択的に
被覆または刻み目を入れることができ、任意選択的にそれからの活性剤の徐放または制御
放出を提供するように製剤化される。
分散剤と混合された粉末または顆粒のような自由流動形態の活性剤を適切な機械で圧縮す
ることによって調製され得る。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末活性剤の混
合物を適切な機械で成形することによって製造することができる。錠剤は、任意選択的に
被覆または刻み目を入れることができ、任意選択的にそれからの活性剤の徐放または制御
放出を提供するように製剤化される。
【0082】
錠剤、トローチ剤、ロゼンジ、水性または油性懸濁液、分散性粉末または顆粒、エマル
ション、硬または軟カプセル、例えばゼラチンカプセル、シロップまたはエリキシルは経
口使用のために調製され得る。経口使用を目的とした活性剤の製剤は、薬学的組成物の製
造のための当該技術分野において既知の任意の方法に従って調製することができ、そのよ
うな組成物は、口当たりの良い製剤を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤および保
存剤を含む１つ以上の剤を含み得る。錠剤の製造に適した薬学的に許容される無毒の賦形
剤と混合した活性剤を含む錠剤は許容される。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウ
ムまたは炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなどの
不活性希釈剤、トウモロコシデンプン、またはアルギン酸などの造粒剤および崩壊剤、デ
ンプン、ゼラチン、またはアカシアなどの結合剤、およびステアリン酸マグネシウム、ス
テアリン酸、タルクなどの滑剤であり得る。錠剤は被覆されていなくてもよく、または胃
腸管内での崩壊および吸収を遅らせ、それによって長期間にわたって持続作用をもたらす
ためのマイクロカプセル化を含む既知の技術によって被覆されていてもよい。例えば、グ
リセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレートのような時間遅延物質を単独
でまたはワックスと共に用いてもよい。
ション、硬または軟カプセル、例えばゼラチンカプセル、シロップまたはエリキシルは経
口使用のために調製され得る。経口使用を目的とした活性剤の製剤は、薬学的組成物の製
造のための当該技術分野において既知の任意の方法に従って調製することができ、そのよ
うな組成物は、口当たりの良い製剤を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤および保
存剤を含む１つ以上の剤を含み得る。錠剤の製造に適した薬学的に許容される無毒の賦形
剤と混合した活性剤を含む錠剤は許容される。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウ
ムまたは炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなどの
不活性希釈剤、トウモロコシデンプン、またはアルギン酸などの造粒剤および崩壊剤、デ
ンプン、ゼラチン、またはアカシアなどの結合剤、およびステアリン酸マグネシウム、ス
テアリン酸、タルクなどの滑剤であり得る。錠剤は被覆されていなくてもよく、または胃
腸管内での崩壊および吸収を遅らせ、それによって長期間にわたって持続作用をもたらす
ためのマイクロカプセル化を含む既知の技術によって被覆されていてもよい。例えば、グ
リセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレートのような時間遅延物質を単独
でまたはワックスと共に用いてもよい。
【0083】
活性剤の水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合した剤を含む。このよ
うな賦形剤には、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスカルメロース、ポビド
ン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、
ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアガムなどの懸濁剤、および天然
ホスファチド（例えばレシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば
、ポリオキシエチレンステアレート）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮
合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと脂肪酸
および無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物（例、ポリオキシエ
チレンソルビタンモノオレエート）などの分散剤または湿潤剤が含まれる。水性懸濁液は
、エチルｐ－ヒドロキシ安息香酸またはｎ－プロピルｐ－ヒドロキシ安息香酸などの１種
以上の保存剤、１種以上の着色剤、１種以上の香味剤、およびスクロースまたはサッカリ
ンなどの１種以上の甘味剤も含み得る。
うな賦形剤には、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスカルメロース、ポビド
ン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、
ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアガムなどの懸濁剤、および天然
ホスファチド（例えばレシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば
、ポリオキシエチレンステアレート）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮
合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと脂肪酸
および無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物（例、ポリオキシエ
チレンソルビタンモノオレエート）などの分散剤または湿潤剤が含まれる。水性懸濁液は
、エチルｐ－ヒドロキシ安息香酸またはｎ－プロピルｐ－ヒドロキシ安息香酸などの１種
以上の保存剤、１種以上の着色剤、１種以上の香味剤、およびスクロースまたはサッカリ
ンなどの１種以上の甘味剤も含み得る。
【0084】
活性剤の薬学的組成物は、滅菌注射用水性または油性懸濁液などの滅菌注射用製剤の形
態であり得る。この懸濁液は、上述の適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して
既知の技術に従って製剤化することができる。滅菌注射用製剤は、１，３－ブタンジオー
ルなどの非毒性の非経口として許容可能な希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液または懸
濁液であってもよい。滅菌注射用製剤はまた、凍結乾燥粉末として調製され得る。使用さ
れ得る許容可能なビヒクルおよび溶媒は、水、リンガー液および生理食塩液である。加え
て、滅菌の不揮発性油が、溶媒または懸濁媒体として慣習的に使用され得る。この目的の
ために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激性不揮発性油が使用
され得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸も同様に注射剤の調製に使用することができ
る。
態であり得る。この懸濁液は、上述の適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して
既知の技術に従って製剤化することができる。滅菌注射用製剤は、１，３－ブタンジオー
ルなどの非毒性の非経口として許容可能な希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液または懸
濁液であってもよい。滅菌注射用製剤はまた、凍結乾燥粉末として調製され得る。使用さ
れ得る許容可能なビヒクルおよび溶媒は、水、リンガー液および生理食塩液である。加え
て、滅菌の不揮発性油が、溶媒または懸濁媒体として慣習的に使用され得る。この目的の
ために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激性不揮発性油が使用
され得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸も同様に注射剤の調製に使用することができ
る。
【0085】
単一剤形を製造するために担体物質と組み合わせることができる活性剤の量は、治療を
受ける宿主および特定の投与方法に応じて変動し得る。例えば、ヒトへの経口投与を意図
した徐放性製剤は、全組成物の約５から約９５％（重量：重量）まで変動し得る適切かつ
都合のよい量の担体物質と配合した約１から１０００ｍｇの活性剤を含み得る。薬学的組
成物は、投与用に容易に測定可能な量を提供するように調製することができる。例えば、
静脈内注入を目的とする水溶液は、約３０ｍＬ／時の速度で好適な容量の注入が起こり得
るように、溶液１ミリリットルあたり約３～５００μｇの活性剤を含み得る。
受ける宿主および特定の投与方法に応じて変動し得る。例えば、ヒトへの経口投与を意図
した徐放性製剤は、全組成物の約５から約９５％（重量：重量）まで変動し得る適切かつ
都合のよい量の担体物質と配合した約１から１０００ｍｇの活性剤を含み得る。薬学的組
成物は、投与用に容易に測定可能な量を提供するように調製することができる。例えば、
静脈内注入を目的とする水溶液は、約３０ｍＬ／時の速度で好適な容量の注入が起こり得
るように、溶液１ミリリットルあたり約３～５００μｇの活性剤を含み得る。
【0086】
非経口投与に適した製剤には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および製剤を意図する受容者
の血液と等張にする溶質を含み得る水性および非水性の滅菌注射溶液、ならびに懸濁剤お
よび増粘剤を含み得る水性および非水性の滅菌懸濁液を含む。
の血液と等張にする溶質を含み得る水性および非水性の滅菌注射溶液、ならびに懸濁剤お
よび増粘剤を含み得る水性および非水性の滅菌懸濁液を含む。
【0087】
直腸投与用の製剤は、例えばココアバターまたはサリチル酸塩を含む適切な基剤を有す
る坐剤として提供され得る。
る坐剤として提供され得る。
【0088】
肺内投与または経鼻投与に適した製剤は、例えば、０．１～５００ミクロンの範囲の粒
径（０．５、１、３０ミクロン、３５ミクロンなどのミクロン単位で増大する０．１ミク
ロン～５００ミクロンの範囲の粒径を含む）を有し、これは、肺胞嚢に到達するように、
鼻腔からの急速吸入または口からの吸入によって投与される。好適な製剤は、活性剤の水
溶液または油性溶液を含む。エアロゾルまたは乾燥粉末投与に適した製剤は、従来の方法
に従って調製することができ、そして以下に記載されるような治療または予防障害におい
てこれまでに使用されている化合物などの他の治療薬と共に送達することができる。
径（０．５、１、３０ミクロン、３５ミクロンなどのミクロン単位で増大する０．１ミク
ロン～５００ミクロンの範囲の粒径を含む）を有し、これは、肺胞嚢に到達するように、
鼻腔からの急速吸入または口からの吸入によって投与される。好適な製剤は、活性剤の水
溶液または油性溶液を含む。エアロゾルまたは乾燥粉末投与に適した製剤は、従来の方法
に従って調製することができ、そして以下に記載されるような治療または予防障害におい
てこれまでに使用されている化合物などの他の治療薬と共に送達することができる。
【0089】
膣内投与に適した製剤は、活性剤に加えて当該技術分野において適切であることが知ら
れているような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム
またはスプレー製剤として提供されてもよい。
れているような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム
またはスプレー製剤として提供されてもよい。
【0090】
製剤は、単位用量または複数用量の容器、例えば密封アンプルおよびバイアルに包装す
ることができ、そして使用直前に、注射のために、滅菌液体担体、例えば、水の添加のみ
を必要とする凍結乾燥（凍結乾燥）状態で保存することができる。即席の注射溶液および
懸濁液は、前述の種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製される。好ましい単位投与製
剤は、本明細書において上述されるような１日用量もしくは単位１日サブ用量、またはそ
の適切な部分の活性剤を含むものである。
ることができ、そして使用直前に、注射のために、滅菌液体担体、例えば、水の添加のみ
を必要とする凍結乾燥（凍結乾燥）状態で保存することができる。即席の注射溶液および
懸濁液は、前述の種類の滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製される。好ましい単位投与製
剤は、本明細書において上述されるような１日用量もしくは単位１日サブ用量、またはそ
の適切な部分の活性剤を含むものである。
【0091】
本課題は、獣医用担体と共に上述で定義された少なくとも１つの活性剤を含む獣医学的
組成物をさらに提供する。獣医用担体は、組成物を投与する目的に有用な物質であり、そ
して獣医学の技術分野において他の点では不活性であるか許容され、そして活性剤と適合
性である固体、液体、または気体物質であり得る。これらの獣医学的組成物は、非経口的
に、経口的に、または他の任意の所望の経路によって投与され得る。
組成物をさらに提供する。獣医用担体は、組成物を投与する目的に有用な物質であり、そ
して獣医学の技術分野において他の点では不活性であるか許容され、そして活性剤と適合
性である固体、液体、または気体物質であり得る。これらの獣医学的組成物は、非経口的
に、経口的に、または他の任意の所望の経路によって投与され得る。
【0092】
ＩＶ．製造品
別の態様において、本明細書に記載されているのは、製造品、例えば、膵がんの治療に
有用な物質を含む「キット」である。キットは、膵がんの治療のための、ＭＥＫ阻害剤ま
たはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とする
マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせを含む容器を含む
。キットは、容器上または容器に付随するラベルまたは添付文書をさらに含み得る。用語
「添付文書」は、そのような治療用製品の使用に関する適応症、使用法、投与量、投与、
禁忌および／または警告についての情報を含む、治療用製品の市販パッケージに通常含ま
れる指示を指すために使用される。適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注
射器、ブリスターパックなどが含まれる。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な
材料から形成することができる。容器は、状態を治療するのに有効な、ＭＥＫ阻害剤また
はその薬学的に許容される塩とマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と
の組み合わせを保持し、そして滅菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、皮下注
射針によって貫通可能なストッパーを有する静脈内溶液バッグまたはバイアルであり得る
）。ラベルまたは添付文書は、組成物が膵がんの治療に使用されることを示している。あ
るいは、またはさらに、製品は、注射用静菌液（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リ
ンガー溶液、およびデキストロース溶液等の薬学的に許容される緩衝液を含む第２の容器
をさらに含み得る。それはさらに、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、および注射器
を含む、商業的および使用者の観点から望ましい他の物質を含み得る。
別の態様において、本明細書に記載されているのは、製造品、例えば、膵がんの治療に
有用な物質を含む「キット」である。キットは、膵がんの治療のための、ＭＥＫ阻害剤ま
たはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とする
マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせを含む容器を含む
。キットは、容器上または容器に付随するラベルまたは添付文書をさらに含み得る。用語
「添付文書」は、そのような治療用製品の使用に関する適応症、使用法、投与量、投与、
禁忌および／または警告についての情報を含む、治療用製品の市販パッケージに通常含ま
れる指示を指すために使用される。適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注
射器、ブリスターパックなどが含まれる。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な
材料から形成することができる。容器は、状態を治療するのに有効な、ＭＥＫ阻害剤また
はその薬学的に許容される塩とマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と
の組み合わせを保持し、そして滅菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、皮下注
射針によって貫通可能なストッパーを有する静脈内溶液バッグまたはバイアルであり得る
）。ラベルまたは添付文書は、組成物が膵がんの治療に使用されることを示している。あ
るいは、またはさらに、製品は、注射用静菌液（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リ
ンガー溶液、およびデキストロース溶液等の薬学的に許容される緩衝液を含む第２の容器
をさらに含み得る。それはさらに、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、および注射器
を含む、商業的および使用者の観点から望ましい他の物質を含み得る。
【0093】
キットは、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩、および別々に製剤化されて
いる場合はマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩製剤の投与のための指
示書をさらに含み得る。例えば、キットが、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される
塩を含む第１の組成物、およびマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を
含む第２の医薬製剤を含む場合、キットは、治療を必要とする患者への第１および第２の
薬学的組成物の同時、逐次、または別個の投与のための指示書をさらに含み得る。
いる場合はマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩製剤の投与のための指
示書をさらに含み得る。例えば、キットが、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される
塩を含む第１の組成物、およびマルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩を
含む第２の医薬製剤を含む場合、キットは、治療を必要とする患者への第１および第２の
薬学的組成物の同時、逐次、または別個の投与のための指示書をさらに含み得る。
【0094】
別の実施形態において、キットは、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩とマ
ルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせの固体経口形態の送
達に適している。そのようなキットは、好ましくは複数の単位投与量を含む。そのような
キットは、それらの意図された使用の順序で並べられた投与量を有するカードを含み得る
。そのようなキットの例は「ブリスターパック」である。ブリスターパックは包装業界で
は周知され、医薬単位剤形の包装に広く使用されている。必要に応じて、例えば数字、文
字、もしくは他のマーキングの形で、または投与量を投与することができる治療スケジュ
ールの日を指定するカレンダー挿入物による、記憶補助を提供することができる。
ルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせの固体経口形態の送
達に適している。そのようなキットは、好ましくは複数の単位投与量を含む。そのような
キットは、それらの意図された使用の順序で並べられた投与量を有するカードを含み得る
。そのようなキットの例は「ブリスターパック」である。ブリスターパックは包装業界で
は周知され、医薬単位剤形の包装に広く使用されている。必要に応じて、例えば数字、文
字、もしくは他のマーキングの形で、または投与量を投与することができる治療スケジュ
ールの日を指定するカレンダー挿入物による、記憶補助を提供することができる。
【0095】
一実施形態によれば、キットは、（ａ）ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩
を含む第１の容器と、任意選択的に（ｂ）マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容
される塩製剤を含む第２の容器とを含み得る。あるいは、またはさらに、キットは、注射
用静菌液（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液、およびデキストロース溶
液等の薬学的に許容される緩衝液を含む第３の容器をさらに含み得る。それはさらに、他
の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、および注射器を含む、商業的および使用者の観点か
ら望ましい他の物質を含み得る。
を含む第１の容器と、任意選択的に（ｂ）マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容
される塩製剤を含む第２の容器とを含み得る。あるいは、またはさらに、キットは、注射
用静菌液（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液、およびデキストロース溶
液等の薬学的に許容される緩衝液を含む第３の容器をさらに含み得る。それはさらに、他
の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、および注射器を含む、商業的および使用者の観点か
ら望ましい他の物質を含み得る。
【0096】
キットがＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩とマルチキナーゼ阻害剤または
その薬学的に許容される塩との組成物を含む他の特定の実施形態において、キットは、個
別のボトルまたは、個別に分けられたホイルパケットなどの別個の組成物を含む容器を含
み得るが、別個の組成物が単一の分割されていない容器内に収容されていてもよい。典型
的には、キットは別個の成分の投与のための指示書を含む。キット形態は、別個の成分が
好ましくは異なる剤形（例えば、経口と非経口）で投与されるとき、異なる投与間隔で投
与されるとき、または組み合わせの個別の成分の用量設定が処方医によって望まれるとき
に特に有利である。
その薬学的に許容される塩との組成物を含む他の特定の実施形態において、キットは、個
別のボトルまたは、個別に分けられたホイルパケットなどの別個の組成物を含む容器を含
み得るが、別個の組成物が単一の分割されていない容器内に収容されていてもよい。典型
的には、キットは別個の成分の投与のための指示書を含む。キット形態は、別個の成分が
好ましくは異なる剤形（例えば、経口と非経口）で投与されるとき、異なる投与間隔で投
与されるとき、または組み合わせの個別の成分の用量設定が処方医によって望まれるとき
に特に有利である。
【0097】
さらに別の実施形態において、本明細書において記載される課題は、予め熱湯加熱され
ている血清、すなわち培地での使用前に一定時間熱湯加熱されている血清を使用する培地
に関する。この培地は、熱湯加熱されていない正常血清を使用する培地と比較して、スフ
ェロイドの迅速な形成をもたらす。実施形態において、細胞を培養するための培地は約１
０％の熱湯加熱されたウシ胎仔血清を含み、上記血清は培地に添加する前に９５～１００
℃で１０分間熱湯加熱されている。
ている血清、すなわち培地での使用前に一定時間熱湯加熱されている血清を使用する培地
に関する。この培地は、熱湯加熱されていない正常血清を使用する培地と比較して、スフ
ェロイドの迅速な形成をもたらす。実施形態において、細胞を培養するための培地は約１
０％の熱湯加熱されたウシ胎仔血清を含み、上記血清は培地に添加する前に９５～１００
℃で１０分間熱湯加熱されている。
【0098】
本明細書において記載される課題は、以下の特定の実施形態を含む。
【0099】
１．膵がんの治療を必要とする対象において膵がんを治療する方法であって、有効量の
活性剤の組み合わせを上記対象に投与するステップを含み、上記組み合わせが、ＭＥＫ阻
害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的
とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩とを含む、方法。
活性剤の組み合わせを上記対象に投与するステップを含み、上記組み合わせが、ＭＥＫ阻
害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的
とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩とを含む、方法。
【0100】
２．上記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、ＧＤＣ－０６２３、トラメチニブ、ビニメチ
ニブ、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１およびＢ
Ｉ－８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、実
施形態１に記載の方法。
ニブ、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１およびＢ
Ｉ－８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、実
施形態１に記載の方法。
【0101】
３．上記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、およびトラメチニブ、またはそれらの薬学的
に許容される塩からなる群から選択される、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
に許容される塩からなる群から選択される、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0102】
４．上記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩である、上述
のいずれかの実施形態に記載の方法。
のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0103】
５．上記マルチキナーゼ剤が、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩である、上
述のいずれかの実施形態に記載の方法。
述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0104】
６．上記膵がんが内分泌がんである、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0105】
７．上記膵がんが外分泌がんである、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0106】
８．上記膵がんが、腺がん、腺房細胞がん、腺扁平上皮がん、粘液がん、破骨細胞様巨
細胞を伴う未分化がん、肝様腺がん、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、膵芽腫、
漿液性嚢胞腺腫、印環細胞がん、充実性偽乳頭状腫瘍、膵管がん、および未分化がんであ
る、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
細胞を伴う未分化がん、肝様腺がん、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、膵芽腫、
漿液性嚢胞腺腫、印環細胞がん、充実性偽乳頭状腫瘍、膵管がん、および未分化がんであ
る、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0107】
９．上記膵がんが膵管腺がんである、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0108】
１０．上記組み合わせが相乗的である、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0109】
１１．上記活性剤が逐次に投与される、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0110】
１２．上記活性剤が同時に投与される、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0111】
１３．上記ＭＥＫ阻害剤および上記マルチキナーゼ阻害剤が組み合わせ製剤として投与
される、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
される、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0112】
１４．上記ＭＥＫ阻害剤が約４５ｍｇ～約７５ｍｇの量で投与され、上記マルチキナー
ゼ阻害剤が約３０ｍｇ～約６０ｍｇの量で投与される、上述のいずれかの実施形態に記載
の方法。
ゼ阻害剤が約３０ｍｇ～約６０ｍｇの量で投与される、上述のいずれかの実施形態に記載
の方法。
【0113】
１５．上記量が１日１回投与される、上述のいずれかの実施形態に記載の方法。
【0114】
１６．上記ＭＥＫ阻害剤がコビメチニブ、またはヘミフマル酸コビメチニブなどのその
薬学的に許容される塩であり、上記マルチキナーゼ阻害剤がポナチニブ、またはポナチニ
ブＨＣｌなどのその薬学的に許容される塩である、上述のいずれかの実施形態に記載の方
法。
薬学的に許容される塩であり、上記マルチキナーゼ阻害剤がポナチニブ、またはポナチニ
ブＨＣｌなどのその薬学的に許容される塩である、上述のいずれかの実施形態に記載の方
法。
【0115】
１７．膵がんの予防的治療または治療的治療のためのａ）ＭＥＫ阻害剤またはその薬学
的に許容される塩と、ｂ）ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキ
ナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせ。
的に許容される塩と、ｂ）ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキ
ナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩との組み合わせ。
【0116】
１８．有効量の、ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ
６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩と
の組み合わせと、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物であって、上記組成物
が膵がんの治療用である、組成物。
６、およびＳＴＡＴ３を標的とするマルチキナーゼ剤またはその薬学的に許容される塩と
の組み合わせと、薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物であって、上記組成物
が膵がんの治療用である、組成物。
【0117】
１９．上記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、ＧＤＣ－０６２３、トラメチニブ、ビニメ
チニブ、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１および
ＢＩ－８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、
上述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
チニブ、セルメチニブ、ピマセルチニブ、レファメチニブ、ＰＤ－０３２５９０１および
ＢＩ－８４７３２５、またはそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、
上述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
【0118】
２０．上記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブ、およびトラメチニブ、またはそれらの薬学
的に許容される塩からなる群から選択される、上述のいずれかの実施形態に記載の組成物
。
的に許容される塩からなる群から選択される、上述のいずれかの実施形態に記載の組成物
。
【0119】
２１．上記ＭＥＫ阻害剤が、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩である、上
述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
【0120】
２２．上記マルチキナーゼ剤が、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩である、
上述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
上述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
【0121】
２３．コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と、ポナチニブまたはその薬学的
に許容される塩とを含む、上述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
に許容される塩とを含む、上述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
【0122】
２４．上記ＭＥＫ阻害剤またはその薬学的に許容される塩が約４５ｍｇ～約７５ｍｇの
量で存在し、上記マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩が約３０ｍｇ～
約６０ｍｇの量で存在する、上述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
量で存在し、上記マルチキナーゼ阻害剤またはその薬学的に許容される塩が約３０ｍｇ～
約６０ｍｇの量で存在する、上述のいずれかの実施形態に記載の組成物。
【0123】
２５．ＭＥＫ阻害剤またはその製薬上許容される塩と、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳ
ＴＡＴ３を標的とする、マルチキナーゼ剤またはその製薬上許容される塩と、容器と、添
付文書またはラベルとを含むキット。
ＴＡＴ３を標的とする、マルチキナーゼ剤またはその製薬上許容される塩と、容器と、添
付文書またはラベルとを含むキット。
【0124】
次の例は、例示のために提供されるものであり、限定のためのものではない。
【実施例0125】
＜物質および方法＞
細胞株と試薬：
ＤＳＭＺ由来のＰＡ－ＴＵ－８９８８Ｔ細胞、およびＪＣＲＢ由来のＳＵＩＴ－２細胞
を除いて、全ての細胞株はＡＴＣＣ由来であった。全ての細胞株は、細胞株の同一性を確
認するためにＳＮＰおよびＳＴＲ分析を日常的に実施するＧｅｎｅｎｔｅｃｈ細胞株コア
施設に保管された。全ての細胞株を、１０％のＦＢＳ、２ｍＭのＬ－グルタミン、１００
単位ｍｌ－１のペニシリンおよびストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ培地（Ｇｉｂｃ
ｏ）中で日常的に培養した。ラパマイシンおよびポナチニブはＳｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍか
ら、クレノラニブはＡｒｏｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手し、そしてコビ
メチニブ、ＧＤＣ－０９４１、およびＧＤＣ－０９８０はＧｅｎｅｎｔｅｃｈで合成され
た。ヒトホスホキナーゼアレイキットはＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ（ＡＲＹ００３Ｂ）から
、Ｃｉｇｎａｌ－４５－ＰａｔｈｗａｙレポーターアッセイはＱｉａｇｅｎ（ＣＣＡ－９
０１Ｌ）から、ヒトチロシンキナーゼＲＴ２ Ｐｒｏｆｉｌｅｒ ＰＣＲアレイはＱｉａ
ｇｅｎ（ＰＡＨＳ－１６１Ｚ）から、ＭＤＳＣ単離キットはＭｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔ
ｅｃから入手した。これらのキットを用いた全てのアッセイは製造業者の指示に従って実
施した。
細胞株と試薬：
ＤＳＭＺ由来のＰＡ－ＴＵ－８９８８Ｔ細胞、およびＪＣＲＢ由来のＳＵＩＴ－２細胞
を除いて、全ての細胞株はＡＴＣＣ由来であった。全ての細胞株は、細胞株の同一性を確
認するためにＳＮＰおよびＳＴＲ分析を日常的に実施するＧｅｎｅｎｔｅｃｈ細胞株コア
施設に保管された。全ての細胞株を、１０％のＦＢＳ、２ｍＭのＬ－グルタミン、１００
単位ｍｌ－１のペニシリンおよびストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ培地（Ｇｉｂｃ
ｏ）中で日常的に培養した。ラパマイシンおよびポナチニブはＳｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍか
ら、クレノラニブはＡｒｏｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手し、そしてコビ
メチニブ、ＧＤＣ－０９４１、およびＧＤＣ－０９８０はＧｅｎｅｎｔｅｃｈで合成され
た。ヒトホスホキナーゼアレイキットはＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ（ＡＲＹ００３Ｂ）から
、Ｃｉｇｎａｌ－４５－ＰａｔｈｗａｙレポーターアッセイはＱｉａｇｅｎ（ＣＣＡ－９
０１Ｌ）から、ヒトチロシンキナーゼＲＴ２ Ｐｒｏｆｉｌｅｒ ＰＣＲアレイはＱｉａ
ｇｅｎ（ＰＡＨＳ－１６１Ｚ）から、ＭＤＳＣ単離キットはＭｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔ
ｅｃから入手した。これらのキットを用いた全てのアッセイは製造業者の指示に従って実
施した。
【0126】
ウエスタンブロッティングおよび細胞生存率アッセイ：
細胞を１０ｃｍディッシュに播種し、１μＭの小分子阻害剤で２４時間処理した。細胞
溶解物を、プロテアーゼインヒビターカクテル（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）
を含むＲＩＰＡ溶解バッファー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中で調製し、Ｓ
ＤＳ－ＰＡＧＥを実施し、タンパク質をニトロセルロース膜に転写した。イムノブロッテ
ィングは標準的な方法を用いて実施した。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを用いてタンパク質
バンドを定量した。一次抗体：ｐ－Ｅｒｋ、ｐ－ＳＴＡＴ３、ｐ－Ｓ６、全Ｓ６、ｐ－Ｐ
ＤＧＦＲα、ｐ－ＰＤＧＦＲβ、ｐ－ＲＳＫ３、切断ＰＡＲＰ、Ｂｃｌ－ｘＬ、Ｍｃｌ、
サバイビン、Ｒａｂ１１、ｐ－Ａｋｔ、β－アクチン、ＧＡＰＤＨ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎ
ａｌｉｎｇ）、全ＳＴＡＴ３、全ＰＤＧＦＲα（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈ
ｎｏｌｏｇｙ）、ｐ－ＥｐｈＡ７（Ｇｅｎｅ Ｔｅｘ）、およびｐ－ＥｐｈＡ２／３、Ｅ
ｐｈＡ２／５（ＭｙＢｉｏｓｃｏｕｒｃｅ）。
細胞を１０ｃｍディッシュに播種し、１μＭの小分子阻害剤で２４時間処理した。細胞
溶解物を、プロテアーゼインヒビターカクテル（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）
を含むＲＩＰＡ溶解バッファー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中で調製し、Ｓ
ＤＳ－ＰＡＧＥを実施し、タンパク質をニトロセルロース膜に転写した。イムノブロッテ
ィングは標準的な方法を用いて実施した。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを用いてタンパク質
バンドを定量した。一次抗体：ｐ－Ｅｒｋ、ｐ－ＳＴＡＴ３、ｐ－Ｓ６、全Ｓ６、ｐ－Ｐ
ＤＧＦＲα、ｐ－ＰＤＧＦＲβ、ｐ－ＲＳＫ３、切断ＰＡＲＰ、Ｂｃｌ－ｘＬ、Ｍｃｌ、
サバイビン、Ｒａｂ１１、ｐ－Ａｋｔ、β－アクチン、ＧＡＰＤＨ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎ
ａｌｉｎｇ）、全ＳＴＡＴ３、全ＰＤＧＦＲα（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈ
ｎｏｌｏｇｙ）、ｐ－ＥｐｈＡ７（Ｇｅｎｅ Ｔｅｘ）、およびｐ－ＥｐｈＡ２／３、Ｅ
ｐｈＡ２／５（ＭｙＢｉｏｓｃｏｕｒｃｅ）。
【0127】
細胞生存率アッセイは、細胞を様々な薬理学的阻害剤の用量滴定（０．００１～１０μ
Ｍ）または固定用量（１μＭ）で７２時間処理し、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ（Ｐｒｏ
ｍｅｇａ）を用いて生存率を測定することによって実施した。ブリススコアは、以前に記
載されたように計算された。（Ｂｏｒｉｓｙ ＡＡ，Ｅｌｌｉｏｔｔ ＰＪ，Ｈｕｒｓｔ
ＮＷ，Ｌｅｅ ＭＳ，Ｌｅｈａｒ Ｊ，Ｐｒｉｃｅ ＥＲ，Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｄ
ｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｍｕｌｔｉｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，
Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓ
ｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ，
２００３；１００（１３）：７９７７－８２，Ｅｐｕｂ ２００３／０６／１２）。
Ｍ）または固定用量（１μＭ）で７２時間処理し、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ（Ｐｒｏ
ｍｅｇａ）を用いて生存率を測定することによって実施した。ブリススコアは、以前に記
載されたように計算された。（Ｂｏｒｉｓｙ ＡＡ，Ｅｌｌｉｏｔｔ ＰＪ，Ｈｕｒｓｔ
ＮＷ，Ｌｅｅ ＭＳ，Ｌｅｈａｒ Ｊ，Ｐｒｉｃｅ ＥＲ，Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｄ
ｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｍｕｌｔｉｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，
Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓ
ｃｉｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ，
２００３；１００（１３）：７９７７－８２，Ｅｐｕｂ ２００３／０６／１２）。
【0128】
レンチウイルス感染：
ｓｈＳＴＡＴ３に対するレンチウイルス粒子は、以前に記載されたように生成された。
（Ｍｏｆｆａｔ Ｊ，Ｇｒｕｅｎｅｂｅｒｇ ＤＡ，Ｙａｎｇ Ｘ，Ｋｉｍ ＳＹ，Ｋｌ
ｏｅｐｆｅｒ ＡＭ，Ｈｉｎｋｌｅ Ｇ，Ａ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ ＲＮＡｉ ｌｉｂ
ｒａｒｙ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ａｎｄ ｍｏｕｓｅ ｇｅｎｅｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｔ
ｏ ａｎ ａｒｒａｙｅｄ ｖｉｒａｌ ｈｉｇｈ－ｃｏｎｔｅｎｔ ｓｃｒｅｅｎ，Ｃ
ｅｌｌ，２００６；１２４（６）：１２８３－９８．Ｅｐｕｂ ２００６／０３／２８）
。Ｄｏｘ誘導システムにおけるｓｈＳＴＡＴ３はＬａｋｅＰｈａｒｍａ Ｉｎｃ．から入
手した。ｓｈＳＴＡＴ３に使用した標的配列はＡＡＴＣＴＴＡＧＣＡＧＧＡＡＧＧＴＧＣ
ＣＴであった。ＫＰ４およびＭＩＡ－ＰＡＣＡ２細胞を最適化された力価のレンチウイル
スで形質導入し、そして１μｇ／ｍｌのピューロマイシンを用いて選択した。
ｓｈＳＴＡＴ３に対するレンチウイルス粒子は、以前に記載されたように生成された。
（Ｍｏｆｆａｔ Ｊ，Ｇｒｕｅｎｅｂｅｒｇ ＤＡ，Ｙａｎｇ Ｘ，Ｋｉｍ ＳＹ，Ｋｌ
ｏｅｐｆｅｒ ＡＭ，Ｈｉｎｋｌｅ Ｇ，Ａ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ ＲＮＡｉ ｌｉｂ
ｒａｒｙ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ａｎｄ ｍｏｕｓｅ ｇｅｎｅｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｔ
ｏ ａｎ ａｒｒａｙｅｄ ｖｉｒａｌ ｈｉｇｈ－ｃｏｎｔｅｎｔ ｓｃｒｅｅｎ，Ｃ
ｅｌｌ，２００６；１２４（６）：１２８３－９８．Ｅｐｕｂ ２００６／０３／２８）
。Ｄｏｘ誘導システムにおけるｓｈＳＴＡＴ３はＬａｋｅＰｈａｒｍａ Ｉｎｃ．から入
手した。ｓｈＳＴＡＴ３に使用した標的配列はＡＡＴＣＴＴＡＧＣＡＧＧＡＡＧＧＴＧＣ
ＣＴであった。ＫＰ４およびＭＩＡ－ＰＡＣＡ２細胞を最適化された力価のレンチウイル
スで形質導入し、そして１μｇ／ｍｌのピューロマイシンを用いて選択した。
【0129】
ルミネックスアッセイおよびＥＬＩＳＡ：
７２時間培養したがん細胞からの培養上清または動物実験からの終点で採取した血漿試
料についてのＬｕｍｉｎｅｘアッセイを、製造者の取扱説明書に従ってマルチプレックス
キット（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用して実施した。ＰＤＧＦαのＥＬＩＳＡは、Ｒ＆Ｄ Ｓ
ｙｓｔｅｍｓからのキットを使用して実施した。
７２時間培養したがん細胞からの培養上清または動物実験からの終点で採取した血漿試
料についてのＬｕｍｉｎｅｘアッセイを、製造者の取扱説明書に従ってマルチプレックス
キット（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用して実施した。ＰＤＧＦαのＥＬＩＳＡは、Ｒ＆Ｄ Ｓ
ｙｓｔｅｍｓからのキットを使用して実施した。
【0130】
浸潤アッセイ：
２％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ中の細胞をＢＤ ＢｉｏＣｏａｔ Ｍａｔｒｉｇｅｌ浸潤チ
ャンバー（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の倒立インサートに播種した。下部チャンバ
ーを化学誘引物質としての１０％ＦＢＳを添加したＲＰＭＩで満たし、１８時間のインキ
ュベーション後に下部チャンバーに侵入した細胞数をＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ５（Ｍｏ
ｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて測定した。
２％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ中の細胞をＢＤ ＢｉｏＣｏａｔ Ｍａｔｒｉｇｅｌ浸潤チ
ャンバー（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の倒立インサートに播種した。下部チャンバ
ーを化学誘引物質としての１０％ＦＢＳを添加したＲＰＭＩで満たし、１８時間のインキ
ュベーション後に下部チャンバーに侵入した細胞数をＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ５（Ｍｏ
ｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて測定した。
【0131】
動物実験：
全ての動物実験は、国立衛生研究所の実験動物の管理と使用に関する指針に従って実施
された。全ての投与計画は、異種移植において十分に許容された。２つの異種移植モデル
を使用した：ヒトＰＤＡＣ由来細胞株ＫＰ４、および、ＫＰＰ－ＧＥＭＭマウスから単離
された腫瘍由来の細胞。５×１０６個の細胞を、いかなるマトリゲルも使用せずに免疫不
全マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右側腹部に皮下
移植した。腫瘍が約２００ｍｍ３に到達した後に、マウスを無作為化し、ビヒクル（ＭＣ
Ｔ＋２５ｍＭのクエン酸緩衝液、ｐＨ２．７５）、コビメチニブ（５ｍｇ／ｋｇ）＋／－
ポナチニブ（３０ｍｇ／ｋｇ）を、ＰＯ、ＱＤで処理した。示された間隔でＵｌｔｒａ－
Ｃａｌ ＩＶキャリパーを用いて腫瘍容積を測定した。同一の動物からの腫瘍容積の繰り
返し測定を経時的に適切に分析するために、混合モデリングアプローチを使用した。（Ｊ
ｏｓｅ Ｐｉｎｈｅｉｒｏ ＤＢ，Ｓａｉｋａｔ ＤｅｂＲｏｙ，Ｄｅｅｐａｙａｎ Ｓ
ａｒｋａｒ，Ｒ Ｃｏｒｅ ｔｅａｍ．Ｌｉｎｅａｒ ａｎｄ Ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｍ
ｉｘｅｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｍｏｄｅｌｓ．Ｐａｃｋａｇｅ ’ｎｌｍｅ’２００８）。
このアプローチは、反復測定と、試験終了前の動物の処理に関連しない全ての死亡による
中程度の脱落との両方に対処する。各々の用量レベルにおけるｌｏｇ２腫瘍容積の時間経
過に非線形プロファイルを適合させるために、三次回帰スプラインを使用した。よって、
これらの非線形プロファイルは、混合モデル内の用量に関連していた。ビヒクルのパーセ
ンテージとしての腫瘍増殖阻害（％ＴＧＩ）は、以下の式を用いて、ビヒクルに対する１
日当たりのそれぞれの用量群についてのフィット曲線下面積（ＡＵＣ）のパーセンテージ
として計算した。
％ＴＧＩ＝１００×（１－ＡＵＣ用量／ＡＵＣビヒクル）
全ての動物実験は、国立衛生研究所の実験動物の管理と使用に関する指針に従って実施
された。全ての投与計画は、異種移植において十分に許容された。２つの異種移植モデル
を使用した：ヒトＰＤＡＣ由来細胞株ＫＰ４、および、ＫＰＰ－ＧＥＭＭマウスから単離
された腫瘍由来の細胞。５×１０６個の細胞を、いかなるマトリゲルも使用せずに免疫不
全マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右側腹部に皮下
移植した。腫瘍が約２００ｍｍ３に到達した後に、マウスを無作為化し、ビヒクル（ＭＣ
Ｔ＋２５ｍＭのクエン酸緩衝液、ｐＨ２．７５）、コビメチニブ（５ｍｇ／ｋｇ）＋／－
ポナチニブ（３０ｍｇ／ｋｇ）を、ＰＯ、ＱＤで処理した。示された間隔でＵｌｔｒａ－
Ｃａｌ ＩＶキャリパーを用いて腫瘍容積を測定した。同一の動物からの腫瘍容積の繰り
返し測定を経時的に適切に分析するために、混合モデリングアプローチを使用した。（Ｊ
ｏｓｅ Ｐｉｎｈｅｉｒｏ ＤＢ，Ｓａｉｋａｔ ＤｅｂＲｏｙ，Ｄｅｅｐａｙａｎ Ｓ
ａｒｋａｒ，Ｒ Ｃｏｒｅ ｔｅａｍ．Ｌｉｎｅａｒ ａｎｄ Ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｍ
ｉｘｅｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｍｏｄｅｌｓ．Ｐａｃｋａｇｅ ’ｎｌｍｅ’２００８）。
このアプローチは、反復測定と、試験終了前の動物の処理に関連しない全ての死亡による
中程度の脱落との両方に対処する。各々の用量レベルにおけるｌｏｇ２腫瘍容積の時間経
過に非線形プロファイルを適合させるために、三次回帰スプラインを使用した。よって、
これらの非線形プロファイルは、混合モデル内の用量に関連していた。ビヒクルのパーセ
ンテージとしての腫瘍増殖阻害（％ＴＧＩ）は、以下の式を用いて、ビヒクルに対する１
日当たりのそれぞれの用量群についてのフィット曲線下面積（ＡＵＣ）のパーセンテージ
として計算した。
％ＴＧＩ＝１００×（１－ＡＵＣ用量／ＡＵＣビヒクル）
【0132】
％ＴＧＩの不確定区間（ＵＩ）を決定するために、適合曲線および適合共分散行列を使
用して、％ＴＧＩの分布に対する近似として無作為標本を生成した。無作為標本は、近似
混合モデルの１，０００回の模擬実現で構成され、各実現について％ＴＧＩが再計算され
た。報告されたＵＩは、当てはめられたモデルを考えると、９５％の時間の％ＴＧＩの再
計算値がこの領域に入るであろう値であった。模擬分布の２．５パーセンタイルと９７．
５パーセンタイルが、上部ＵＩと下部ＵＩとして使用された。＞６０％の腫瘍増殖阻害が
有意とみなされた。（Ｗｏｎｇ Ｈ，Ｃｈｏｏ ＥＦ，Ａｌｉｃｋｅ Ｂ，Ｄｉｎｇ Ｘ
，Ｌａ Ｈ，ＭｃＮａｍａｒａ Ｅ，Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔ
ａｒｇｅｔｅｄ ａｎｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ａｇｅｎｔｓ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｓ
ｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｕｍｏｒ ｍｏｄｅｌｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ
ｃｌｉｎｉｃａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａ
ｒｃｈ：ａｎ ｏｆｆｉｃｉａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１２；１８（
１４）：３８４６－５５．Ｅｐｕｂ ２０１２／０６／０１）。
用して、％ＴＧＩの分布に対する近似として無作為標本を生成した。無作為標本は、近似
混合モデルの１，０００回の模擬実現で構成され、各実現について％ＴＧＩが再計算され
た。報告されたＵＩは、当てはめられたモデルを考えると、９５％の時間の％ＴＧＩの再
計算値がこの領域に入るであろう値であった。模擬分布の２．５パーセンタイルと９７．
５パーセンタイルが、上部ＵＩと下部ＵＩとして使用された。＞６０％の腫瘍増殖阻害が
有意とみなされた。（Ｗｏｎｇ Ｈ，Ｃｈｏｏ ＥＦ，Ａｌｉｃｋｅ Ｂ，Ｄｉｎｇ Ｘ
，Ｌａ Ｈ，ＭｃＮａｍａｒａ Ｅ，Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔ
ａｒｇｅｔｅｄ ａｎｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ａｇｅｎｔｓ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｓ
ｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｕｍｏｒ ｍｏｄｅｌｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ
ｃｌｉｎｉｃａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａ
ｒｃｈ：ａｎ ｏｆｆｉｃｉａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１２；１８（
１４）：３８４６－５５．Ｅｐｕｂ ２０１２／０６／０１）。
【0133】
プロットは、Ｒバージョン２．８．１（Ｒ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｃｏｒｅ Ｔｅ
ａｍ ２００８；Ｒ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｃｏｍ
ｐｕｔｉｎｇ；Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ）およびＥｘｃｅｌバージョン１２．０．
１（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を使用して実行および生成した。デ
ータはＲ、バージョン２．８．１を用いて分析され、混合モデルはｎｌｍｅパッケージ、
バージョン３．１－８９（４１）を用いてＲ内で適合した。
ａｍ ２００８；Ｒ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｃｏｍ
ｐｕｔｉｎｇ；Ｖｉｅｎｎａ，Ａｕｓｔｒｉａ）およびＥｘｃｅｌバージョン１２．０．
１（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を使用して実行および生成した。デ
ータはＲ、バージョン２．８．１を用いて分析され、混合モデルはｎｌｍｅパッケージ、
バージョン３．１－８９（４１）を用いてＲ内で適合した。
【0134】
免疫組織化学および免疫蛍光：
免疫組織化学および免疫蛍光は、ホルマリン固定パラフィン包埋の、細胞ペレット、全
組織切片、およびＴＭＡブロック（ＵＳ Ｂｉｏｍａｘ、Ｉｎｃ．）から切り出した４μ
ｍ厚の切片上で実施した。スライドを脱パラフィン化し、抗原賦活化を、Ｔａｒｇｅｔ
Ｒｅｔｒｉｅｖａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｄａｋｏ）を用いてＰＴ Ｍｏｄｕｌｅ（Ｔｈ
ｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で実施した。内因性ペルオキシダーゼ活性を３％Ｈ２
Ｏ２で遮断し、３％ＢＳＡを内在性免疫グロブリンの遮断に使用した。ｐ－Ｅｒｋおよび
ｐ－ＳＴＡＴ３に対する一次抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を１μｇ／ｍｌで、
ｐ － ＰＤＧＦＲα（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を０．４μｇ／ｍｌで、Ｆ４／
８０（Ｓｅｒｏｔｅｃ）を１０μｇ／ｍｌで、Ｇｒ－１（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）
を１μｇ／ｍｌで、切断カスパーゼ３（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を０．６μｇ／
ｍｌで、およびＣＤ８α（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）を５μｇ／ｍｌで使用した。抗体結合は
、ＩＨＣ染色について、Ｖｅｃｓｔａｔｉｎ ＡＢＣ Ｅｌｉｔｅホースラディッシュペ
ルオキシダーゼ（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）またはＰｏｗｅｒＶｉｓｉ
ｏｎポリ－ＨＲＰ（Ｌｅｉｃａ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）および金属強化３，３’－ジア
ミノベンジジン（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用し、免疫蛍光染色について、ＴＳＡキット（Ｌｉ
ｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）と共にＰｏｗｅｒＶｉｓｉｏｎポリ－ＨＲＰ（Ｌｅｉ
ｃａ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して検出した。ＩＨＣスライドの対比染色は、Ｍａ
ｙｅｒのヘマトキシリン（Ｒｏｗｌｅｙ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて実施した。
免疫組織化学および免疫蛍光は、ホルマリン固定パラフィン包埋の、細胞ペレット、全
組織切片、およびＴＭＡブロック（ＵＳ Ｂｉｏｍａｘ、Ｉｎｃ．）から切り出した４μ
ｍ厚の切片上で実施した。スライドを脱パラフィン化し、抗原賦活化を、Ｔａｒｇｅｔ
Ｒｅｔｒｉｅｖａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｄａｋｏ）を用いてＰＴ Ｍｏｄｕｌｅ（Ｔｈ
ｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で実施した。内因性ペルオキシダーゼ活性を３％Ｈ２
Ｏ２で遮断し、３％ＢＳＡを内在性免疫グロブリンの遮断に使用した。ｐ－Ｅｒｋおよび
ｐ－ＳＴＡＴ３に対する一次抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を１μｇ／ｍｌで、
ｐ － ＰＤＧＦＲα（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を０．４μｇ／ｍｌで、Ｆ４／
８０（Ｓｅｒｏｔｅｃ）を１０μｇ／ｍｌで、Ｇｒ－１（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）
を１μｇ／ｍｌで、切断カスパーゼ３（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を０．６μｇ／
ｍｌで、およびＣＤ８α（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）を５μｇ／ｍｌで使用した。抗体結合は
、ＩＨＣ染色について、Ｖｅｃｓｔａｔｉｎ ＡＢＣ Ｅｌｉｔｅホースラディッシュペ
ルオキシダーゼ（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）またはＰｏｗｅｒＶｉｓｉ
ｏｎポリ－ＨＲＰ（Ｌｅｉｃａ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）および金属強化３，３’－ジア
ミノベンジジン（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用し、免疫蛍光染色について、ＴＳＡキット（Ｌｉ
ｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）と共にＰｏｗｅｒＶｉｓｉｏｎポリ－ＨＲＰ（Ｌｅｉ
ｃａ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して検出した。ＩＨＣスライドの対比染色は、Ｍａ
ｙｅｒのヘマトキシリン（Ｒｏｗｌｅｙ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて実施した。
【0135】
組織学：
全スライド画像を、Ｎａｎｏｚｏｏｍｅｒ ＸＲ自動スライドスキャニングプラットフ
ォーム（Ｈａｍａｍａｔｓｕ，Ｈａｍａｍａｔｓｕ Ｃｉｔｙ，Ｓｈｉｚｕｏｋａ Ｐｒ
ｅｆ．，Ｊａｐａｎ）を用いて、最終倍率２００倍で取得した。
全スライド画像を、Ｎａｎｏｚｏｏｍｅｒ ＸＲ自動スライドスキャニングプラットフ
ォーム（Ｈａｍａｍａｔｓｕ，Ｈａｍａｍａｔｓｕ Ｃｉｔｙ，Ｓｈｉｚｕｏｋａ Ｐｒ
ｅｆ．，Ｊａｐａｎ）を用いて、最終倍率２００倍で取得した。
【0136】
マイクロアレイおよびＲＮＡ配列決定分析：
正常およびＰＤＡＣのヒト組織における遺伝子発現は、Ｇｅｎｅ ＬｏｇｉｃのＡｆｆ
ｙｍｅｔｒｉｘ ＨＧＵ１３３Ｐアレイを用いて測定した。遺伝子発現データをロバスト
マルチチップ平均（ＲＭＡ）法によって標準化した。発現プローブセット２０３１３１＿
ａｔをヒトＰＤＧＦＲαに、２０２２７３＿ａｔをヒトＰＤＧＦＲβに、２０５９４５＿
ａｔをヒトＩＬ６－Ｒに、および２０４１７１＿ａｔをＰＲＳ６ＫＢ１に使用した。
正常およびＰＤＡＣのヒト組織における遺伝子発現は、Ｇｅｎｅ ＬｏｇｉｃのＡｆｆ
ｙｍｅｔｒｉｘ ＨＧＵ１３３Ｐアレイを用いて測定した。遺伝子発現データをロバスト
マルチチップ平均（ＲＭＡ）法によって標準化した。発現プローブセット２０３１３１＿
ａｔをヒトＰＤＧＦＲαに、２０２２７３＿ａｔをヒトＰＤＧＦＲβに、２０５９４５＿
ａｔをヒトＩＬ６－Ｒに、および２０４１７１＿ａｔをＰＲＳ６ＫＢ１に使用した。
【0137】
統計学的分析
全てのデータは、平均±平均の標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ）として表される。スチューデン
トｔ検定（両側）を使用して、２つの群を比較し、ＰｒｉｓｍまたはＥｘｃｅｌを使用し
てＰ値を計算した。Ｐ＜０．０５を有意とみなした。生存曲線は、カプラン－マイヤー法
を用いてプロットした。
全てのデータは、平均±平均の標準誤差（Ｓ．Ｅ．Ｍ）として表される。スチューデン
トｔ検定（両側）を使用して、２つの群を比較し、ＰｒｉｓｍまたはＥｘｃｅｌを使用し
てＰ値を計算した。Ｐ＜０．０５を有意とみなした。生存曲線は、カプラン－マイヤー法
を用いてプロットした。
【0138】
＜実施例１：膵がん細胞スフェロイド培養におけるＭＥＫ阻害に対する感受性＞
二次元（２Ｄ）および三次元（３Ｄ）培養で培養した膵がん細胞が様々ながん治療薬に
どのように応答するかを比較するために、本願発明者らはＫＲＡＳ変異型ＰＤＡＣがん細
胞株ＫＰ４を２０３のがんの適切な標的の小分子阻害剤および既知の化学療法薬のパネル
で処理した（表１）。
二次元（２Ｄ）および三次元（３Ｄ）培養で培養した膵がん細胞が様々ながん治療薬に
どのように応答するかを比較するために、本願発明者らはＫＲＡＳ変異型ＰＤＡＣがん細
胞株ＫＰ４を２０３のがんの適切な標的の小分子阻害剤および既知の化学療法薬のパネル
で処理した（表１）。
【表1-1】
【表1-2】
【表1-3】
【表1-4】
【表1-5】
【0139】
３Ｄ培養に関して、本明細書に記載されるのは、比較的迅速な「ハイスループット」分
析を促進するための方法である。培地に添加する前に９５～１００℃で１０分間予め熱湯
加熱した１０％のウシ胎仔血清を含む培地中でがん細胞を培養すると、一貫して３Ｄ「ス
フェロイド」が急速に形成されることが観察された。この方法を用いて形成されたスフェ
ロイドは、外周層におけるＫｉ６７染色の優勢な局在化、および７２時間までの切断カス
パーゼ－３によって示されるアポトーシスを伴う壊死／アポトーシス中心を有する、低レ
ベルの増殖を含む、以前に記載されたスフェロイドの全ての典型的な特徴を示した（図２
７）。それらの薬物感受性パターンもまた以前に記載されたスフェロイドと同様であった
（図２８および２９）。
析を促進するための方法である。培地に添加する前に９５～１００℃で１０分間予め熱湯
加熱した１０％のウシ胎仔血清を含む培地中でがん細胞を培養すると、一貫して３Ｄ「ス
フェロイド」が急速に形成されることが観察された。この方法を用いて形成されたスフェ
ロイドは、外周層におけるＫｉ６７染色の優勢な局在化、および７２時間までの切断カス
パーゼ－３によって示されるアポトーシスを伴う壊死／アポトーシス中心を有する、低レ
ベルの増殖を含む、以前に記載されたスフェロイドの全ての典型的な特徴を示した（図２
７）。それらの薬物感受性パターンもまた以前に記載されたスフェロイドと同様であった
（図２８および２９）。
【0140】
２０３の化合物のパネルを用いた２Ｄおよび３Ｄ培養条件におけるＫＰ４細胞の処理は
、いくつかの剤に対する異なる感受性を明らかにした（図１）。３Ｄ培養は一般に薬物治
療に対してより耐性があり、ＫＰ４スフェロイドは、ほとんどが化学療法剤からなるパネ
ルからの１８の阻害剤のサブセットに対して２Ｄ培養物よりも実際に有意に抵抗性が高か
った（図１）。意外なことに、本願発明者らはまた、２Ｄ培養より３Ｄ培養に有効であっ
た１１の阻害剤を同定した（図１）。これらの１１の阻害剤は、複数のシグナル伝達経路
を標的とする活性が報告されている様々な分子から構成されていた。これらの阻害剤のう
ち４つ（コビメチニブ、ＧＤＣ－０６２３、ＡＺＤ６２４４、ＰＤ９０１）はＭＥＫ経路
を標的とし、３つはＰＩ３Ｋ経路を標的とし（ＧＤＣ－０９４１、ＧＤＣ－０９８０、Ｇ
３８３９０）、そして１つはＭＥＴ経路を標的とする（Ｇ４５２０３）。
、いくつかの剤に対する異なる感受性を明らかにした（図１）。３Ｄ培養は一般に薬物治
療に対してより耐性があり、ＫＰ４スフェロイドは、ほとんどが化学療法剤からなるパネ
ルからの１８の阻害剤のサブセットに対して２Ｄ培養物よりも実際に有意に抵抗性が高か
った（図１）。意外なことに、本願発明者らはまた、２Ｄ培養より３Ｄ培養に有効であっ
た１１の阻害剤を同定した（図１）。これらの１１の阻害剤は、複数のシグナル伝達経路
を標的とする活性が報告されている様々な分子から構成されていた。これらの阻害剤のう
ち４つ（コビメチニブ、ＧＤＣ－０６２３、ＡＺＤ６２４４、ＰＤ９０１）はＭＥＫ経路
を標的とし、３つはＰＩ３Ｋ経路を標的とし（ＧＤＣ－０９４１、ＧＤＣ－０９８０、Ｇ
３８３９０）、そして１つはＭＥＴ経路を標的とする（Ｇ４５２０３）。
【0141】
＜実施例２：膵がん細胞における２Ｄ培養対３Ｄ培養における異なる調節がなされる複数
のシグナル伝達経路＞
２Ｄ対３Ｄにおける膵がん細胞の観察された異なる処理の感受性に潜在的に寄与するシ
グナル伝達経路を同定するために、本願発明者らは、２Ｄおよび３Ｄ条件下でのＫＰ４細
胞において、ホスホキナーゼアレイ、遺伝子発現アレイ、およびルシフェラーゼ発現レポ
ーターアッセイを実施し、そしてシグナル伝達タンパク質の発現レベルの変化を比較した
。ホスホキナーゼアレイは、２Ｄで培養したＫＰ４細胞と比較したＫＰ４スフェロイドに
おいて、ｐ３８、ＥＲＫ、ＥＧＦＲ、ＭＳＫ、Ａｋｔ、ＴＯＲ、ＣＲＥＢ、ＨＳＰ－２７
、ＳＴＡＴ２、ＳＴＡＴ５α、Ｈｃｋ、Ｃｈｋ－２、ｃ－Ｊｕｎ、ＲＳＫ１／２／３、ｅ
ＮＯＳ、ｐ２７およびＰＬＣ－γ１を含むいくつかのシグナル伝達タンパク質のチロシン
リン酸化の増加を示し、３Ｄ条件におけるシグナル伝達経路の実質的な「再配線」を示唆
している（図２および３）。ＫＰ４単層培養において、ＭＥＫ阻害は、ＥＲＫ、ＲＳＫ、
およびＰＬＣ－γ１リン酸化を下方制御し、そしてＳＴＡＴファミリータンパク質および
Ａｋｔの活性化を増加させた（図３）。対照的に、ＫＰ４スフェロイドは、ＭＥＫ阻害時
にＥＲＫ、ＲＳＫ、およびＰＬＣ－γ１に加えてＡｋｔおよびＳＴＡＴファミリータンパ
ク質の活性化の低下を示した。ＭＥＫ阻害は、ＫＰ４スフェロイドにおいてｃ－Ｊｕｎの
活性化のみを誘導した。
のシグナル伝達経路＞
２Ｄ対３Ｄにおける膵がん細胞の観察された異なる処理の感受性に潜在的に寄与するシ
グナル伝達経路を同定するために、本願発明者らは、２Ｄおよび３Ｄ条件下でのＫＰ４細
胞において、ホスホキナーゼアレイ、遺伝子発現アレイ、およびルシフェラーゼ発現レポ
ーターアッセイを実施し、そしてシグナル伝達タンパク質の発現レベルの変化を比較した
。ホスホキナーゼアレイは、２Ｄで培養したＫＰ４細胞と比較したＫＰ４スフェロイドに
おいて、ｐ３８、ＥＲＫ、ＥＧＦＲ、ＭＳＫ、Ａｋｔ、ＴＯＲ、ＣＲＥＢ、ＨＳＰ－２７
、ＳＴＡＴ２、ＳＴＡＴ５α、Ｈｃｋ、Ｃｈｋ－２、ｃ－Ｊｕｎ、ＲＳＫ１／２／３、ｅ
ＮＯＳ、ｐ２７およびＰＬＣ－γ１を含むいくつかのシグナル伝達タンパク質のチロシン
リン酸化の増加を示し、３Ｄ条件におけるシグナル伝達経路の実質的な「再配線」を示唆
している（図２および３）。ＫＰ４単層培養において、ＭＥＫ阻害は、ＥＲＫ、ＲＳＫ、
およびＰＬＣ－γ１リン酸化を下方制御し、そしてＳＴＡＴファミリータンパク質および
Ａｋｔの活性化を増加させた（図３）。対照的に、ＫＰ４スフェロイドは、ＭＥＫ阻害時
にＥＲＫ、ＲＳＫ、およびＰＬＣ－γ１に加えてＡｋｔおよびＳＴＡＴファミリータンパ
ク質の活性化の低下を示した。ＭＥＫ阻害は、ＫＰ４スフェロイドにおいてｃ－Ｊｕｎの
活性化のみを誘導した。
【0142】
ＫＰ４単層培養およびスフェロイド培養におけるプロテインキナーゼに対応するｍＲＮ
Ａの発現のｑＲＴ－ＰＣＲ分析は、いくつかのＲＴＫについて、特に、ＦＧＦＲ３、ＥＰ
ＨＡ１、ＥＰＨＢ６、およびＩＮＳＲについて、ＫＰ４スフェロイドにおける発現の上昇
を実証した（図４）。ＭＥＫ阻害は、ＫＰ４単層とスフェロイドの両方においてこれらの
ＲＴＫの大部分の下方制御を引き起こした。しかしながら、ＰＤＧＦＲαおよびＰＤＧＦ
Ｒβの発現は、コビメチニブ処理時にＫＰ４単層培養において有意に上方制御された。対
照的に、ＥＰＨＡ１およびＥＰＨＢ１の発現は、ＭＥＫ阻害時にＫＰ４スフェロイドにお
いて選択的に上昇した（図４）。まとめると、これらの知見は、標準的な２Ｄ条件で見ら
れるものと比較して観察された薬物処理に対する異なる感受性に寄与し得るＰＤＡＣ由来
細胞についての３Ｄ培養条件に特異的な薬物応答プロファイルを明らかにする。
Ａの発現のｑＲＴ－ＰＣＲ分析は、いくつかのＲＴＫについて、特に、ＦＧＦＲ３、ＥＰ
ＨＡ１、ＥＰＨＢ６、およびＩＮＳＲについて、ＫＰ４スフェロイドにおける発現の上昇
を実証した（図４）。ＭＥＫ阻害は、ＫＰ４単層とスフェロイドの両方においてこれらの
ＲＴＫの大部分の下方制御を引き起こした。しかしながら、ＰＤＧＦＲαおよびＰＤＧＦ
Ｒβの発現は、コビメチニブ処理時にＫＰ４単層培養において有意に上方制御された。対
照的に、ＥＰＨＡ１およびＥＰＨＢ１の発現は、ＭＥＫ阻害時にＫＰ４スフェロイドにお
いて選択的に上昇した（図４）。まとめると、これらの知見は、標準的な２Ｄ条件で見ら
れるものと比較して観察された薬物処理に対する異なる感受性に寄与し得るＰＤＡＣ由来
細胞についての３Ｄ培養条件に特異的な薬物応答プロファイルを明らかにする。
【0143】
大きなパネルのルシフェラーゼレポーターアッセイを用いたコビメチニブ処理時の転写
因子経路活性化の変化のさらなる評価は、ＫＰ４単層培養物がＳＴＡＴ３、ｃ－Ｍｙｃ、
ＧＲＥ、ＫＬＦ４、ＩＳＲＥ、およびＧＡＳの転写因子の活性化の増大を示すことを明ら
かにした（図５）。対照的に、ＫＰ４スフェロイドは、これらの転写因子の同様のレベル
の活性化を示さなかった。これらの結果は、単層対スフェロイド条件におけるＭＥＫ経路
阻害に応答して代替的な生存促進シグナル伝達経路の活性化に寄与する可能性がある複数
の転写因子の異なる調節を意味する。
因子経路活性化の変化のさらなる評価は、ＫＰ４単層培養物がＳＴＡＴ３、ｃ－Ｍｙｃ、
ＧＲＥ、ＫＬＦ４、ＩＳＲＥ、およびＧＡＳの転写因子の活性化の増大を示すことを明ら
かにした（図５）。対照的に、ＫＰ４スフェロイドは、これらの転写因子の同様のレベル
の活性化を示さなかった。これらの結果は、単層対スフェロイド条件におけるＭＥＫ経路
阻害に応答して代替的な生存促進シグナル伝達経路の活性化に寄与する可能性がある複数
の転写因子の異なる調節を意味する。
【0144】
ホスホキナーゼアレイおよび遺伝子発現アレイの結果を、ＫＰ４細胞のコビメチニブ処
理時のｐ－ＰＤＧＦＲα、ｐ－ＳＴＡＴ３、ｐ－Ｅｒｋ、ｐ－Ｓ６、およびｐ－ＲＳＫに
ついてのウエスタンブロットによって検証し、ｐ－ＰＤＧＦＲα、ｐ－ＳＴＡＴ３、およ
びｐ－Ｓ６の活性化レベルの増加が観察された（図６Ａ）。増加したｐ－ＳＴＡＴ３はま
た、複数のＰＤＡＣヒトがん細胞株においてコビメチニブ処理時に再現可能に検出された
（図６Ｂ）。重要なことに、ＳＴＡＴ３活性化を促進することができるＩＬ－６リガンド
の分泌の増加もまた、複数のＰＤＡＣ細胞株において観察された（図７）。ＳＴＡＴ３活
性化の要件と一致して、ＫＰ４およびＭＩＡ－ＰＡＣＡ２細胞におけるＳＴＡＴ３のＲＮ
Ａｉノックダウンは、コビメチニブ処理時に細胞死を誘導した（図８および９）。さらに
、複数のＰＤＡＣ細胞株およびＫＰＰ－ＧＥＭＭ腫瘍由来細胞株を用いたインビトロ細胞
浸潤アッセイは、ＭＥＫ阻害時のがん細胞の浸潤能力の低下を実証した（図１０）。これ
らの結果は、単剤としてのＭＥＫ阻害は原発性腫瘍退縮を引き起こすのに十分ではないが
、それががん細胞の浸潤能を阻害し得ることを示唆している。まとめると、これらの結果
は、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３によって媒介されるシグナル伝達経路が、膵
がん細胞におけるＭＥＫ阻害時にがん細胞の生存を可能にし得ることを示唆している。
理時のｐ－ＰＤＧＦＲα、ｐ－ＳＴＡＴ３、ｐ－Ｅｒｋ、ｐ－Ｓ６、およびｐ－ＲＳＫに
ついてのウエスタンブロットによって検証し、ｐ－ＰＤＧＦＲα、ｐ－ＳＴＡＴ３、およ
びｐ－Ｓ６の活性化レベルの増加が観察された（図６Ａ）。増加したｐ－ＳＴＡＴ３はま
た、複数のＰＤＡＣヒトがん細胞株においてコビメチニブ処理時に再現可能に検出された
（図６Ｂ）。重要なことに、ＳＴＡＴ３活性化を促進することができるＩＬ－６リガンド
の分泌の増加もまた、複数のＰＤＡＣ細胞株において観察された（図７）。ＳＴＡＴ３活
性化の要件と一致して、ＫＰ４およびＭＩＡ－ＰＡＣＡ２細胞におけるＳＴＡＴ３のＲＮ
Ａｉノックダウンは、コビメチニブ処理時に細胞死を誘導した（図８および９）。さらに
、複数のＰＤＡＣ細胞株およびＫＰＰ－ＧＥＭＭ腫瘍由来細胞株を用いたインビトロ細胞
浸潤アッセイは、ＭＥＫ阻害時のがん細胞の浸潤能力の低下を実証した（図１０）。これ
らの結果は、単剤としてのＭＥＫ阻害は原発性腫瘍退縮を引き起こすのに十分ではないが
、それががん細胞の浸潤能を阻害し得ることを示唆している。まとめると、これらの結果
は、ＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３によって媒介されるシグナル伝達経路が、膵
がん細胞におけるＭＥＫ阻害時にがん細胞の生存を可能にし得ることを示唆している。
【0145】
＜実施例３：ＭＥＫ阻害を伴うＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の阻害は、ＰＤＡ
Ｃ細胞のアポトーシスを効果的に促進する＞
以前の研究は、ＭＥＫ阻害が複数のＲＴＫの上方制御および活性化ならびに「バイパス
」生存メカニズムとしてのＩＬ６／ＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路をもたらし得ることを報告して
いる（Ｄｕｎｃａｎ ＪＳ，Ｗｈｉｔｔｌｅ ＭＣ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ｋ，Ａｂｅｌｌ
ＡＮ，Ｍｉｄｌａｎｄ ＡＡ，Ｚａｗｉｓｔｏｗｓｋｉ ＪＳ，Ｄｙｎａｍｉｃ ｒｅ
ｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｋｉｎｏｍｅ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ
ｔａｒｇｅｔｅｄ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ｔｒｉｐｌｅ－ｎｅｇａｔ
ｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ，Ｃｅｌｌ，２０１２；１４９（２）：３０７－２
１．Ｅｐｕｂ ２０１２／０４／１７、Ｌｅｅ ＨＪ，Ｚｈｕａｎｇ Ｇ，Ｃａｏ Ｙ，
Ｄｕ Ｐ，Ｋｉｍ ＨＪ，Ｓｅｔｔｌｅｍａｎ Ｊ，Ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
ｖｉａ ｆｅｅｄｂａｃｋ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔａｔ３ ｉｎ ｏｎｃｏ
ｇｅｎｅ－ａｄｄｉｃｔｅｄ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２
０１４；２６（２）：２０７－２１，Ｅｐｕｂ ２０１４／０７／３０、Ｄａｉ Ｂ，Ｍ
ｅｎｇ Ｊ，Ｐｅｙｔｏｎ Ｍ，Ｇｉｒａｒｄ Ｌ，Ｂｏｒｎｍａｎｎ ＷＧ，Ｊｉ Ｌ
，ＳＴＡＴ３ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂｉ
ｔｏｒ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｉｃｒｏＲＮＡ ｍｉＲ－１７，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａ
ｒｃｈ，２０１１；７１（１０）：３６５８－６８，Ｅｐｕｂ ２０１１／０３／３０）
。しかしながら、膵がんは関与していなかった。Ｓ６とＪＡＫ２／ＳＴＡＴ３カスケード
の両方を単独でまたはコビメチニブと組み合わせて標的とするマルチＲＴＫ阻害剤ポナチ
ニブの有効性を腫瘍細胞増殖アッセイで試験した。コビメチニブ治療はＰＤＡＣ細胞株に
おいてＳＴＡＴ３およびＳ６の活性化を促進し（図６Ａ）、コビメチニブ／ポナチニブに
よる組み合わせ処理は、２Ｄおよび３Ｄ培養物において、ＰＤＧＦＲα、ＳＴＡＴ３、Ｓ
６、ＥＲＫ１／２、Ａｋｔの活性化を阻害し、生存促進タンパク質Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｍｃｌ
－１、サバイビンの発現を減少させ、切断されたＰＡＲＰレベルを増加させた（図１１、
１２および１３）。ポナチニブはＰＤＡＣ細胞における下流のシグナル伝達経路を潜在的
に調節することができるエフリン受容体のキナーゼ活性を阻害することが以前に報告され
ているが、ＰＤＡＣモデルにおいて、コビメチニブ／ポナチニブの組み合わせ処理はエフ
リン受容体（ＥｐｈＡ２／３、ＥｐｈＡ２／５、およびＥｐｈＡ７）の活性に影響を及ぼ
さなかった（図１１）。
Ｃ細胞のアポトーシスを効果的に促進する＞
以前の研究は、ＭＥＫ阻害が複数のＲＴＫの上方制御および活性化ならびに「バイパス
」生存メカニズムとしてのＩＬ６／ＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路をもたらし得ることを報告して
いる（Ｄｕｎｃａｎ ＪＳ，Ｗｈｉｔｔｌｅ ＭＣ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ｋ，Ａｂｅｌｌ
ＡＮ，Ｍｉｄｌａｎｄ ＡＡ，Ｚａｗｉｓｔｏｗｓｋｉ ＪＳ，Ｄｙｎａｍｉｃ ｒｅ
ｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｋｉｎｏｍｅ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ
ｔａｒｇｅｔｅｄ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ｔｒｉｐｌｅ－ｎｅｇａｔ
ｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ，Ｃｅｌｌ，２０１２；１４９（２）：３０７－２
１．Ｅｐｕｂ ２０１２／０４／１７、Ｌｅｅ ＨＪ，Ｚｈｕａｎｇ Ｇ，Ｃａｏ Ｙ，
Ｄｕ Ｐ，Ｋｉｍ ＨＪ，Ｓｅｔｔｌｅｍａｎ Ｊ，Ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
ｖｉａ ｆｅｅｄｂａｃｋ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔａｔ３ ｉｎ ｏｎｃｏ
ｇｅｎｅ－ａｄｄｉｃｔｅｄ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ，２
０１４；２６（２）：２０７－２１，Ｅｐｕｂ ２０１４／０７／３０、Ｄａｉ Ｂ，Ｍ
ｅｎｇ Ｊ，Ｐｅｙｔｏｎ Ｍ，Ｇｉｒａｒｄ Ｌ，Ｂｏｒｎｍａｎｎ ＷＧ，Ｊｉ Ｌ
，ＳＴＡＴ３ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂｉ
ｔｏｒ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｉｃｒｏＲＮＡ ｍｉＲ－１７，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａ
ｒｃｈ，２０１１；７１（１０）：３６５８－６８，Ｅｐｕｂ ２０１１／０３／３０）
。しかしながら、膵がんは関与していなかった。Ｓ６とＪＡＫ２／ＳＴＡＴ３カスケード
の両方を単独でまたはコビメチニブと組み合わせて標的とするマルチＲＴＫ阻害剤ポナチ
ニブの有効性を腫瘍細胞増殖アッセイで試験した。コビメチニブ治療はＰＤＡＣ細胞株に
おいてＳＴＡＴ３およびＳ６の活性化を促進し（図６Ａ）、コビメチニブ／ポナチニブに
よる組み合わせ処理は、２Ｄおよび３Ｄ培養物において、ＰＤＧＦＲα、ＳＴＡＴ３、Ｓ
６、ＥＲＫ１／２、Ａｋｔの活性化を阻害し、生存促進タンパク質Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｍｃｌ
－１、サバイビンの発現を減少させ、切断されたＰＡＲＰレベルを増加させた（図１１、
１２および１３）。ポナチニブはＰＤＡＣ細胞における下流のシグナル伝達経路を潜在的
に調節することができるエフリン受容体のキナーゼ活性を阻害することが以前に報告され
ているが、ＰＤＡＣモデルにおいて、コビメチニブ／ポナチニブの組み合わせ処理はエフ
リン受容体（ＥｐｈＡ２／３、ＥｐｈＡ２／５、およびＥｐｈＡ７）の活性に影響を及ぼ
さなかった（図１１）。
【0146】
ポナチニブは、Ｓ６およびＪＡＫ２／ＳＴＡＴ３シグナル伝達のみならず、ＦＧＦＲ、
ＶＥＧＦＲ、エフリン受容体に加え、ＰＤＧＦＲαを阻害するので、本願発明者らはコビ
メチニブと組み合わせて他のＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＪＡＫ２阻害剤の効果を調べる
ことによりポナチニブの選択的活性をさらに調べた。ＥＧＦＲ阻害剤エルロチニブまたは
ＰＤＧＦＲ阻害剤の効果とは対照的に、コビメチニブおよびＳ６阻害剤、ラパマイシン、
またはＧＤＣ－０９８０との組み合わせ処理によるＳ６活性化の下方制御は、ＫＰ４細胞
における細胞死を促進した（図１４、１８、および１９）。ＰＤＧＦＲα阻害剤、クレノ
ラニブ、ＪＡＫ２阻害剤、ルキソリチニブ、およびコビメチニブによる三重の組み合わせ
処理後のＰＤＧＦＲαおよびＳＴＡＴ３活性化の同時下方制御もまた、ＫＰ４細胞増殖を
阻害し、そして顕著な細胞死を引き起こした（図１５）。しかしながら、本願発明者らは
、ＲＴＫ、Ｓ６、およびＪＡＫ／ＳＴＡＴを同時標的化し、そしてＰＤＡＣ細胞の増殖を
効果的に阻害するコビメチニブ／ポナチニブ処理による最も強い相乗作用を観察した（図
１１、１２、１３、１４、１６、および１７）。コビメチニブおよび／またはポナチニブ
によるＰＤＡＣ細胞株の処理は、単剤としての細胞生存率に影響を及ぼさなかったが、２
Ｄと３Ｄ培養の両方において組み合わせて細胞増殖を阻害するのに相乗的であり、ＰＤＡ
Ｃに対する潜在的に有効な治療戦略としてのコビメチニブ／ポナチニブの組み合わせを明
らかにした（図１２、１６および１７）。
ＶＥＧＦＲ、エフリン受容体に加え、ＰＤＧＦＲαを阻害するので、本願発明者らはコビ
メチニブと組み合わせて他のＰＤＧＦＲα、Ｓ６、およびＪＡＫ２阻害剤の効果を調べる
ことによりポナチニブの選択的活性をさらに調べた。ＥＧＦＲ阻害剤エルロチニブまたは
ＰＤＧＦＲ阻害剤の効果とは対照的に、コビメチニブおよびＳ６阻害剤、ラパマイシン、
またはＧＤＣ－０９８０との組み合わせ処理によるＳ６活性化の下方制御は、ＫＰ４細胞
における細胞死を促進した（図１４、１８、および１９）。ＰＤＧＦＲα阻害剤、クレノ
ラニブ、ＪＡＫ２阻害剤、ルキソリチニブ、およびコビメチニブによる三重の組み合わせ
処理後のＰＤＧＦＲαおよびＳＴＡＴ３活性化の同時下方制御もまた、ＫＰ４細胞増殖を
阻害し、そして顕著な細胞死を引き起こした（図１５）。しかしながら、本願発明者らは
、ＲＴＫ、Ｓ６、およびＪＡＫ／ＳＴＡＴを同時標的化し、そしてＰＤＡＣ細胞の増殖を
効果的に阻害するコビメチニブ／ポナチニブ処理による最も強い相乗作用を観察した（図
１１、１２、１３、１４、１６、および１７）。コビメチニブおよび／またはポナチニブ
によるＰＤＡＣ細胞株の処理は、単剤としての細胞生存率に影響を及ぼさなかったが、２
Ｄと３Ｄ培養の両方において組み合わせて細胞増殖を阻害するのに相乗的であり、ＰＤＡ
Ｃに対する潜在的に有効な治療戦略としてのコビメチニブ／ポナチニブの組み合わせを明
らかにした（図１２、１６および１７）。
【0147】
＜実施例４：コビメチニブ／ポナチニブ共処理はマウスモデルにおいて腫瘍退縮を誘導す
る＞
インビボでのコビメチニブ／ポナチニブの組み合わせの有効性を試験するために、本願
発明者らはＫＰ４およびＫＰＰ－ＧＥＭＭ由来腫瘍細胞を用いて異種移植試験を実施した
。コビメチニブとポナチニブはどちらもＫＰ４異種移植において単剤としては無効であっ
たが、コビメチニブとポナチニブとの共処理は、腫瘍増殖の顕著な阻害および、切断され
たカスパーゼ３の増加を伴う細胞死の増加を引き起こした（図２０（ＫＰ４細胞）、２１
および２２）。ＫＰＰ－ＧＥＭＭ由来細胞株異種移植腫瘍でも同様の結果が得られたが、
本発明者らは、主に腫瘍退縮とは対照的に、腫瘍増殖の著しい遅延を観察した（図２０（
ＫＰＰ細胞））。コビメチニブ／ポナチニブ組み合わせ処理はまた、ＫＰ４異種移植にお
いて１０３％ＴＧＩ（％腫瘍増殖阻害）およびＫＰＰ異種移植において７１％ＴＧＩをも
たらした（表２）。コビメチニブ／ポナチニブの組み合わせ処理は、ＫＰ４異種移植試験
においてマウスでのいくらかの連結した体重減少を引き起こしたが、ＫＰＰ－ＧＥＭＭ由
来異種移植試験においては引き起こさなかった。ＫＰ４異種移植試験では、２０％を超え
る体重減少のために２匹のマウスを試験の初期に離脱させなければならなかった。しかし
ながら、組み合わせ処理の過程の間、残りのマウスにおいて許容可能な閾値を超える顕著
な体重減少は観察されなかった（図３１Ａ）。移植された腫瘍の病理組織学的分析、ＩＨ
Ｃ染色、およびイムノブロッティングは、コビメチニブ治療時のｐ－ＰＤＧＦＲα、ｐ－
ＳＴＡＴ３、およびｐＳ６の予想される誘導を確認し、これはコビメチニブとポナチニブ
との共処理に続いて顕著に下方制御された（図２１、２２、３０、および３３）。顕著に
高いＰＤＧＦα、ＰＤＧＦβの血清レベル、およびＩＬ－６の増加したレベルもまた、コ
ビメチニブ処理マウスにおいて観察された（図２３）。コビメチニブ／ポナチニブの共処
理は血清ＰＤＧＦαおよびＰＤＧＦβレベルを減少させたがＶＥＧＦまたはＦＧＦレベル
は減少させず、ＰＤＡＣがんモデルにおけるポナチニブによるＰＤＧＦＲα経路の特異的
関連性を強調した（図２３および３２）。
る＞
インビボでのコビメチニブ／ポナチニブの組み合わせの有効性を試験するために、本願
発明者らはＫＰ４およびＫＰＰ－ＧＥＭＭ由来腫瘍細胞を用いて異種移植試験を実施した
。コビメチニブとポナチニブはどちらもＫＰ４異種移植において単剤としては無効であっ
たが、コビメチニブとポナチニブとの共処理は、腫瘍増殖の顕著な阻害および、切断され
たカスパーゼ３の増加を伴う細胞死の増加を引き起こした（図２０（ＫＰ４細胞）、２１
および２２）。ＫＰＰ－ＧＥＭＭ由来細胞株異種移植腫瘍でも同様の結果が得られたが、
本発明者らは、主に腫瘍退縮とは対照的に、腫瘍増殖の著しい遅延を観察した（図２０（
ＫＰＰ細胞））。コビメチニブ／ポナチニブ組み合わせ処理はまた、ＫＰ４異種移植にお
いて１０３％ＴＧＩ（％腫瘍増殖阻害）およびＫＰＰ異種移植において７１％ＴＧＩをも
たらした（表２）。コビメチニブ／ポナチニブの組み合わせ処理は、ＫＰ４異種移植試験
においてマウスでのいくらかの連結した体重減少を引き起こしたが、ＫＰＰ－ＧＥＭＭ由
来異種移植試験においては引き起こさなかった。ＫＰ４異種移植試験では、２０％を超え
る体重減少のために２匹のマウスを試験の初期に離脱させなければならなかった。しかし
ながら、組み合わせ処理の過程の間、残りのマウスにおいて許容可能な閾値を超える顕著
な体重減少は観察されなかった（図３１Ａ）。移植された腫瘍の病理組織学的分析、ＩＨ
Ｃ染色、およびイムノブロッティングは、コビメチニブ治療時のｐ－ＰＤＧＦＲα、ｐ－
ＳＴＡＴ３、およびｐＳ６の予想される誘導を確認し、これはコビメチニブとポナチニブ
との共処理に続いて顕著に下方制御された（図２１、２２、３０、および３３）。顕著に
高いＰＤＧＦα、ＰＤＧＦβの血清レベル、およびＩＬ－６の増加したレベルもまた、コ
ビメチニブ処理マウスにおいて観察された（図２３）。コビメチニブ／ポナチニブの共処
理は血清ＰＤＧＦαおよびＰＤＧＦβレベルを減少させたがＶＥＧＦまたはＦＧＦレベル
は減少させず、ＰＤＡＣがんモデルにおけるポナチニブによるＰＤＧＦＲα経路の特異的
関連性を強調した（図２３および３２）。
【0148】
ＰＤＡＣ腫瘍内の骨髄細胞区画の分析は、Ｆ４／８０＋腫瘍関連マクロファージ（ＴＡ
Ｍ）が最も優勢な骨髄性集団であることを明らかにした（図２１）。コビメチニブ／ポナ
チニブ共処理は、腫瘍中のＴＡＭの数を顕著に減少させ、マクロファージ阻害因子ＧＣＳ
Ｆの血清レベルを誘導し、そしてマクロファージ活性化因子ＧＭ－ＣＳＦおよびＭＣＳＦ
のレベルを減少させた（図２２および２３）。これらの知見は、コビメチニブ／ポナチニ
ブの共処理が、下流のＭＥＫ、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の生存経路に加えてＰＤＧＦＲα
経路を標的とすることによって腫瘍細胞と骨髄細胞の両方の集団を無効化するのに有効で
あることを示す。さらに、この知見は、この組み合わせ処理が腫瘍の退縮を促進しうるこ
とを示唆している。
Ｍ）が最も優勢な骨髄性集団であることを明らかにした（図２１）。コビメチニブ／ポナ
チニブ共処理は、腫瘍中のＴＡＭの数を顕著に減少させ、マクロファージ阻害因子ＧＣＳ
Ｆの血清レベルを誘導し、そしてマクロファージ活性化因子ＧＭ－ＣＳＦおよびＭＣＳＦ
のレベルを減少させた（図２２および２３）。これらの知見は、コビメチニブ／ポナチニ
ブの共処理が、下流のＭＥＫ、Ｓ６、およびＳＴＡＴ３の生存経路に加えてＰＤＧＦＲα
経路を標的とすることによって腫瘍細胞と骨髄細胞の両方の集団を無効化するのに有効で
あることを示す。さらに、この知見は、この組み合わせ処理が腫瘍の退縮を促進しうるこ
とを示唆している。
【表2】
【0149】
＜実施例５：ＰＤＡＣ患者の肝転移におけるＥｒｋおよびＳＴＡＴ３の異なる活性化＞
これらの知見の潜在的な臨床的関連性を調べるために、本願発明者らはｐ－Ｅｒｋおよ
びｐ－ＳＴＡＴ３について７６のヒトＰＤＡＣ組織サンプルおよび４つの肝転移のＩＨＣ
分析を実施した。Ｅｒｋは、主にステージＩおよびＩＩの悪性腫瘍を有する患者において
、１３％のＰＤＡＣ組織試料（１０／７６）において活性化され、ＳＴＡＴ３活性化は、
２６％の試料（２０／７６）において観察され、６．５％の試料（５／７６）は、主にス
テージＩの悪性腫瘍において、活性化された、ＥｒｋとＳＴＡＴ３の両方を示した（図２
４および２５）。さらに、肝臓転移の５０％がＥｒｋ活性化を示し（２／４）、そしてＳ
ＴＡＴ３活性化が２５％のサンプルにおいて見られた（１／４）（図２４および２５）。
さらに、遺伝子発現分析は、ヒト患者由来のＰＤＡＣ腫瘍が、正常組織と比較して、増加
したレベルのＲＴＫ ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、およびＩＬ６－Ｒを発現することを
さらに明らかにした（図２６、表３）。
これらの知見の潜在的な臨床的関連性を調べるために、本願発明者らはｐ－Ｅｒｋおよ
びｐ－ＳＴＡＴ３について７６のヒトＰＤＡＣ組織サンプルおよび４つの肝転移のＩＨＣ
分析を実施した。Ｅｒｋは、主にステージＩおよびＩＩの悪性腫瘍を有する患者において
、１３％のＰＤＡＣ組織試料（１０／７６）において活性化され、ＳＴＡＴ３活性化は、
２６％の試料（２０／７６）において観察され、６．５％の試料（５／７６）は、主にス
テージＩの悪性腫瘍において、活性化された、ＥｒｋとＳＴＡＴ３の両方を示した（図２
４および２５）。さらに、肝臓転移の５０％がＥｒｋ活性化を示し（２／４）、そしてＳ
ＴＡＴ３活性化が２５％のサンプルにおいて見られた（１／４）（図２４および２５）。
さらに、遺伝子発現分析は、ヒト患者由来のＰＤＡＣ腫瘍が、正常組織と比較して、増加
したレベルのＲＴＫ ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、およびＩＬ６－Ｒを発現することを
さらに明らかにした（図２６、表３）。
【表3-1】
【表3-2】
【表3-3】
【表3-4】
【表3-5】
【0150】
表３のデータは、ＰＤＡＣ腫瘍がＰＤＧＦＲ、ＩＬ－６、およびＳＴＡＴ３シグナル伝
達によって駆動され得ること、およびこれらの経路がＭＥＫ経路阻害に対する応答を制限
し得ることを示唆する。これらの知見はまた、ＭＥＫ経路が、ヒト膵がん患者における転
移時にＳＴＡＴ３媒介生存カスケードに切り替わらない肝臓転移における腫瘍細胞の生存
において重要な役割を果たし得ることを示す。
達によって駆動され得ること、およびこれらの経路がＭＥＫ経路阻害に対する応答を制限
し得ることを示唆する。これらの知見はまた、ＭＥＫ経路が、ヒト膵がん患者における転
移時にＳＴＡＴ３媒介生存カスケードに切り替わらない肝臓転移における腫瘍細胞の生存
において重要な役割を果たし得ることを示す。
【0151】
本明細書で使用される全ての技術的および科学的用語は同一の意味を有する。使用され
る数字（例えば、量、温度等）に関して正確さを確実にするための努力がなされてきたが
、いくつかの実験誤差および偏差が考慮されるべきである。
る数字（例えば、量、温度等）に関して正確さを確実にするための努力がなされてきたが
、いくつかの実験誤差および偏差が考慮されるべきである。
【0152】
本明細書および特許請求の範囲を通して、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む
（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、および「含んでいる」という用語は、文脈上他に必要とされ
る場合を除き、非排他的な意味で使用される。本明細書において記載される実施形態は、
「からなる」および／または「から本質的になる」実施形態を含むことが理解される。
（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、および「含んでいる」という用語は、文脈上他に必要とされ
る場合を除き、非排他的な意味で使用される。本明細書において記載される実施形態は、
「からなる」および／または「から本質的になる」実施形態を含むことが理解される。
【0153】
本明細書において使用されるとき、値について言及するときの「約」という用語は、い
くつかの実施形態において±５０％、いくつかの実施形態において±２０％、いくつかの
実施形態において±１０％、いくつかの実施形態において±５％、いくつかの実施形態に
おいて特定の量から±１％、いくつかの実施形態において±０．５％、およびいくつかの
実施形態において±０．１％の、特定の量からの変動を包含することを意味し、そのよう
な変動は開示された方法を実施するため、または開示された組成物を使用するために適切
であるためである。
くつかの実施形態において±５０％、いくつかの実施形態において±２０％、いくつかの
実施形態において±１０％、いくつかの実施形態において±５％、いくつかの実施形態に
おいて特定の量から±１％、いくつかの実施形態において±０．５％、およびいくつかの
実施形態において±０．１％の、特定の量からの変動を包含することを意味し、そのよう
な変動は開示された方法を実施するため、または開示された組成物を使用するために適切
であるためである。
【0154】
ある範囲の値が提供されるとき、文脈が他を明確に指示しない限り、その範囲の上限と
下限との間、および、その述べられた範囲内の他の述べられた値または中間の値における
、各々の中間の値は、その下限の単位の１０分の１まで包含される。独立してより小さな
範囲に含まれ得るこれらの小さい範囲の上限および下限はまた、述べられた範囲内の任意
の具体的に除外された限定を有することを条件として、包含される。述べられる範囲が限
界の一方または両方を含む場合、それらの含まれた限界のいずれかまたは両方を除外する
範囲もまた含まれる。
下限との間、および、その述べられた範囲内の他の述べられた値または中間の値における
、各々の中間の値は、その下限の単位の１０分の１まで包含される。独立してより小さな
範囲に含まれ得るこれらの小さい範囲の上限および下限はまた、述べられた範囲内の任意
の具体的に除外された限定を有することを条件として、包含される。述べられる範囲が限
界の一方または両方を含む場合、それらの含まれた限界のいずれかまたは両方を除外する
範囲もまた含まれる。
【0155】
本明細書に記載されている多くの修正および他の実施形態は、前述の説明および関連す
る図面に提示されている教示の恩恵を受けて、この課題が関係する当業者には思い浮かぶ
であろう。したがって、課題は開示された特定の実施形態に限定されるべきではなく、修
正および他の実施形態は添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図されることを理解
されたい。本明細書では特定の用語が使用されているが、それらは一般的かつ説明的な意
味でのみ使用されており、限定を目的としていない。
る図面に提示されている教示の恩恵を受けて、この課題が関係する当業者には思い浮かぶ
であろう。したがって、課題は開示された特定の実施形態に限定されるべきではなく、修
正および他の実施形態は添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図されることを理解
されたい。本明細書では特定の用語が使用されているが、それらは一般的かつ説明的な意
味でのみ使用されており、限定を目的としていない。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6A】
【図6B】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20A】
【図20B】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27A】
【図27B】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31A】
【図31B】
【図32】
【図33】
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2024-09-02
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
肝臓転移の治療を必要とする対象において肝臓転移を治療するための組み合わせ医薬品であって、治療有効量の活性剤の組み合わせを含み、前記組み合わせが、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩とを含み、前記コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩が４５ｍｇ～７５ｍｇの量で存在し、前記ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩が３０ｍｇ～６０ｍｇの量で存在する、組み合わせ医薬品。
【請求項2】
前記肝臓転移の少なくとも１つが、Ｅｒｋ活性化、ＳＴＡＴ３活性化、またはＥｒｋおよびＳＴＡＴ３両方の活性化を示すがん細胞を含む、請求項１に記載の組み合わせ医薬品。
【請求項3】
前記組み合わせが相乗的である、請求項１に記載の組み合わせ医薬品。
【請求項4】
コビメチニブおよびポナチニブが逐次に投与される、請求項１に記載の組み合わせ医薬品。
【請求項5】
コビメチニブおよびポナチニブが同時に投与される、請求項１に記載の組み合わせ医薬品。
【請求項6】
コビメチニブおよびポナチニブが組み合わせ製剤として投与される、請求項１に記載の組み合わせ医薬品。
【請求項7】
前記量が１日１回投与される、請求項１に記載の組み合わせ医薬品。
【請求項8】
肝臓転移を治療するための組み合わせであって、ａ）コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と、ｂ）ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩とを含む、組み合わせ。
【請求項9】
有効量の、コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩と、ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される賦形剤とを含み、前記コビメチニブまたはその薬学的に許容される塩が４５ｍｇ～７５ｍｇの量で存在し、前記ポナチニブまたはその薬学的に許容される塩が３０ｍｇ～６０ｍｇの量で存在する、肝臓転移の治療のための薬学的組成物。
【請求項10】
前記コビメチニブが１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、前記ポナチニブが１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１に記載の組み合わせ医薬品。
【請求項11】
前記コビメチニブが１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、前記ポナチニブが１０ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１０に記載の組み合わせ医薬品。
【外国語明細書】