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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024178261
(43)【公開日】2024-12-24
(54)【発明の名称】ＰＣＴＡベースの造影剤
(51)【国際特許分類】
C07D 471/08 20060101AFI20241217BHJP
A61K 49/10 20060101ALI20241217BHJP
C07F 5/00 20060101ALN20241217BHJP
【ＦＩ】
C07D471/08 CSP
A61K49/10
C07F5/00 D
【審査請求】有
【請求項の数】16
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2024160004
(22)【出願日】2024-09-17
(62)【分割の表示】P 2021506481の分割
【原出願日】2019-08-06
(31)【優先権主張番号】18187422.3
(32)【優先日】2018-08-06
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(71)【出願人】
【識別番号】504448162
【氏名又は名称】ブラッコ・イメージング・ソシエタ・ペル・アチオニ
【氏名又は名称原語表記】ＢＲＡＣＣＯ ＩＭＡＧＩＮＧ Ｓ．Ｐ．Ａ．
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100156144
【弁理士】
【氏名又は名称】落合 康
(72)【発明者】
【氏名】ロベルタ・ナポリターノ
(72)【発明者】
【氏名】ルチアーノ・ラットゥアーダ
(72)【発明者】
【氏名】ジョルト・バラニャイ
(72)【発明者】
【氏名】ニコル・グイドリン
(72)【発明者】
【氏名】ジュゼッペ・マラッツィ
(57)【要約】 （修正有）
【課題】緩和性および速度論的不活性度に関して改善された物理化学的特性を有するＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタミン酸）およびその誘導体の特定の異性体を提供する。
【解決手段】Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタミン酸）のエナンチオマーのＲＲＲ／ＳＳＳペア、該ペアの単一のエナンチオマー、その薬学的に許容される塩、それらのアミド誘導体、およびこれら化合物を少なくとも５０％含む組成物が提供される。
【選択図】なし
【解決手段】Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタミン酸）のエナンチオマーのＲＲＲ／ＳＳＳペア、該ペアの単一のエナンチオマー、その薬学的に許容される塩、それらのアミド誘導体、およびこれら化合物を少なくとも５０％含む組成物が提供される。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
以下からなる群から選択される化合物：
式Ｉａ：
を有する、エナンチオマー［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（エナンチオマーＲＲＲ）；
式Ｉｂ
を有する、エナンチオマー［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ－［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＳＳＳエナンチオマー）；および
そのようなＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーの混合物；
およびその薬学的に許容される塩。
式Ｉａ：
【化1】
式Ｉｂ
【化2】
そのようなＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーの混合物；
およびその薬学的に許容される塩。
【請求項2】
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を少なくとも５０％含む、式
で示される、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物。
【化3】
【請求項3】
請求項１に記載の化合物が、請求項１に記載のＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーの混合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項２に記載の異性体混合物。
【請求項4】
薬学的に許容される塩が、カリウム、ナトリウム、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリまたはアルカリ土類金属から選択される無機塩基のカチオン、またはエタノールアミン、ジエタノールアミン、モルホリン、グルカミン、Ｎ－メチルグルカミン、Ｎ，Ｎ－ジメチルグルカミンから選択される有機塩基のカチオン、またはリジン、アルギニンおよびオルニチンから選択されるアミノ酸のカチオンとの塩、または場合により、塩化物、臭化物またはヨウ化物などのハロ酸から選択される無機酸のアニオン、ならびに酢酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩またはシュウ酸塩などの他の適切なイオンのアニオンとの塩である、請求項１に記載の化合物または請求項２～３のいずれかに記載の異性体混合物。
【請求項5】
式（ＩＩ Ａ）
［式中、
Ｆは、式ＩＩＩａ：
で示されるＲＲＲエナンチオマー残基、
式ＩＩＩｂ：
で示される、ＳＳＳエナンチオマー残基、または
それらＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物であり；
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆのカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは場合より１～４個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は場合より１～４個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、好ましくは、１または２個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ３アルキル
である］
を有する、請求項１に記載の化合物のアミド誘導体。
【化4】
Ｆは、式ＩＩＩａ：
【化5】
式ＩＩＩｂ：
【化6】
それらＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物であり；
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆのカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは場合より１～４個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は場合より１～４個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、好ましくは、１または２個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ３アルキル
である］
を有する、請求項１に記載の化合物のアミド誘導体。
【請求項6】
式（ＩＩ Ｂ）：
［式中、
Ｆ’は：
式（ＩＩＩ）：
で示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基の異性体混合物であり、
該Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基の異性体混合物は、少なくとも５０％の、式（ＩＩＩａ）のエナンチオマー残基、式（ＩＩＩ Ｂ）のエナンチオマー残基、またはそれらの混合物を含んでなり；
－ＮＲ１Ｒ２は請求項５で定義したとおりである］
を有する、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物。
【化7】
Ｆ’は：
式（ＩＩＩ）：
【化8】
該Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基の異性体混合物は、少なくとも５０％の、式（ＩＩＩａ）のエナンチオマー残基、式（ＩＩＩ Ｂ）のエナンチオマー残基、またはそれらの混合物を含んでなり；
－ＮＲ１Ｒ２は請求項５で定義したとおりである］
を有する、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物。
【請求項7】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’が、ＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物を少なくとも５０％含む式ＩＩＩの残基の異性体混合物である、請求項６に記載の異性体混合物。
【請求項8】
式（ＩＩ Ａ）または（ＩＩ Ｂ）において、Ｒ１がＨであり、Ｒ２が１つまたは２つのヒドロキシル基で置換されたＣ１－Ｃ３アルキルである、請求項５に記載のアミド誘導体または請求項６または７に記載の異性体混合物。
【請求項9】
式（ＩＩ Ａ）または（ＩＩ Ｂ）において、Ｒ１がＨであり、Ｒ２が－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＯＨである、請求項８に記載のアミド誘導体または異性体混合物。
【請求項10】
以下からなる群から選択される、請求項５に記載のアミド誘導体：
［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＳＳＳ－ＳＳＳ）；
［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＳＳＳ－ＲＲＲ）；
［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＲＲＲ－ＲＲＲ）；
［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＲＲＲ－ＳＳＳ）；
およびそれらの混合物。
［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＳＳＳ－ＳＳＳ）；
［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＳＳＳ－ＲＲＲ）；
［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＲＲＲ－ＲＲＲ）；
［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＲＲＲ－ＳＳＳ）；
およびそれらの混合物。
【請求項11】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’がＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物を少なくとも６０％含む、請求項７～９のいずれかに記載の異性体混合物。
【請求項12】
１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合して、請求項１～４のいずれかに記載の化合物または異性体混合物、または請求項５～１０のいずれかに記載のアミド誘導体または異性体混合物を含む医薬組成物。
【請求項13】
請求項６に記載の式（ＩＩ Ｂ）のアミド誘導体の異性体混合物を含む、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項14】
式（ＩＩ Ｂ）においてＦ’が請求項７に定義されるとおりである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項15】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｒ１がＨであり、Ｒ２が－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＯＨである、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項16】
式（ＩＩ Ａ）において、Ｒ１がＨであり、Ｒ２が－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＯＨであり、ＦがＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物である、請求項５に記載のアミド誘導体。
【請求項17】
式
で示される化合物を含み、化合物の少なくとも５０％が請求項１６に記載のアミド誘導体である医薬組成物。
【化9】
【請求項18】
ＭＲＩ造影剤として使用するための、請求項１に記載の化合物の薬学的に許容される塩、または請求項２または３に記載のＲＲＲ／ＳＳＳ混合物、または請求項５に記載のアミド誘導体、または請求項６に記載の異性体混合物。
【請求項19】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’がＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物を少なくとも７０％含む、請求項７～９のいずれかに記載の異性体混合物。
【請求項20】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’がＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物を少なくとも８０％含む、請求項７～９のいずれかに記載の異性体混合物。
【請求項21】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’がＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物を少なくとも９０％含む、請求項７～９のいずれかに記載の異性体混合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明の分野
本発明は、一般に、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）の分野に関する。より具体的には、ＰＣＴＡベースの造影剤の異性体、およびこれらの異性体が豊富なＭＲＩ造影剤に関する。
本発明は、一般に、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）の分野に関する。より具体的には、ＰＣＴＡベースの造影剤の異性体、およびこれらの異性体が豊富なＭＲＩ造影剤に関する。
【背景技術】
【0002】
日常の診断業務で使用されるＭＲＩ造影剤の典型例として、遊離金属イオン（生体に対して非常に有毒であることが知られている）のin vivoでの放出を保証する高い安定度定数を特徴とするガドリニウム錯体化合物がある。
【0003】
ガドリニウムベースの造影剤の忍容性を定義する別の重要なパラメーターは、Ｇｄ（ＩＩＩ）錯体の速度論的不活性度（または速度論的安定度）であり、これは錯体の解離（即ち脱錯体化）の半減期（ｔ１／２）から推定される。
【0004】
特に、熱力学的安定性が低く、および／または排出までの保持時間が長い錯体化合物においては、起こり得る脱錯体化または金属交換反応を回避または最小化するために高い不活性度が重要となる。
【0005】
ＥＰ１９３１６７３(Guerbet)には、次式
で示されるＰＣＴＡ誘導体と、その製造のための合成経路が開示されている。
【化1】
【0006】
ＥＰ ２９８８７５６（同出願人）には、１，４，７，１０－テトラアザシクロドデカン－１，４，７，１０－四酢酸のカルシウム錯体と共に上記の誘導体を含む医薬組成物が開示されている。ＥＰ２９８８７５６によると、このカルシウム錯体は、金属交換によってフリーのランタニドイオンと強力な錯体を形成することで、ＰＣＴＡベースのガドリニウム錯体で観察される弱い熱力学的安定性を補われ、それにより造影剤の忍容性が高められている。
【0007】
さらに、ＥＰ１９３１６７３およびＥＰ２９８８７５６の両方はいずれも、ＲＲＳ、ＲＳＲおよびＲＳＳジアステレオマーから優先的に選択される、請求項に記載された化合物のエナンチオマーもしくはジアステレオマー、またはそれらの混合物を参照する。
【0008】
上記の特許のいずれにも、特定の誘導体のうち、（α３，α６，α９）－トリス（３－（（２，３－ジヒドロキシプロピル）アミノ）－３－オキソプロピル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ（９．３．１）ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－（κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９）ガドリニウムが開示されており、最近では次式
で示される、２，２’，２’’－（３，６，９－トリアザ－１（２，６）－ピリジナシクロデカファン－３，６，９－トリイル）トリス（５－（（２，３－ジヒドロキシプロピル）アミノ）－５－オキソペンタン酸）のガドリニウムキレート（CAS登録番号：９３３９８３－７５－６）として、あるいはＰ０３２７７またはガドピクレノールとして同定されている。
【化2】
【0009】
ガドピクレノールに関して、ＥＰ１９３１６７３には、緩和能が11 mM－1s－1Gd－1（水中、0.5 T、37℃）であることが記載されており、ＥＰ２９８８７５６には熱力学的平衡定数が10－14.9（log Kterm = 14.9）であることが記載されている。
【0010】
さらに、この同じ化合物について、ヒト血清中の緩和値が12.8 mM－1s－1（37℃、1.41 T）、安定度（log Kterm）が18.7、および解離半減期が約20日（pH 1.2；37℃）であると記載されている(Investigative Radiology 2019, Vol 54,（8), 475－484)。
【0011】
ＥＰ１９３１６７３に開示されたＰＣＴＡ誘導体（ガドピクレノールを含む）の調製のための前駆体は、次式
を有する、３，６，９，１５－テトラアザビシクロ－［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－トリ（α－グルタル酸）のＧｄ錯体（本明細書において「Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）」として同定される）である。特に、ガドピクレノールは、上記の化合物をイソセリノールでアミド化することにより得られる。
【化3】
【0012】
出願人が観察しているとおり、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）は、２３ ＝ ８の可能な立体異性体をもたらすグルタル酸部分（上記の構造においてアスタリスク（＊）で示される）に３つの立体中心を有する。より具体的には、上記の構造は、次のTable 1に示す４対のエナンチオマーを生じうる。
【表1】
【0013】
異性体ＲＲＲは異性体ＳＳＳの鏡像体であり、それらがエナンチオマー（またはエナンチオマーペア）と呼ばれる理由である。知られているように、エナンチオマーは同じ物理化学的特性を示し、キラルクロマトグラフィーや偏光などのキラル方法論を使用した場合にのみ区別できる。
【0014】
一方、異性体ＲＲＲは、上記の他の６つの異性体のいずれとも等価でも鏡像体でもなく、これらの他の異性体は、ＲＲＲ（またはＳＳＳ）異性体のジアステレオマーとして識別される。ジアステレオ異性体は、異なる物理化学的特性（例えば、融点、水溶性、緩和能など）を示し得る。
【0015】
ガドピクレノールに関して、その化学構造は計６つの立体中心を含んでおり、上記の前駆体のグルタル酸部分に３つと、それに結合した３つのイソセリノール部分のそれぞれに１つ存在する（下記構造式中、それぞれアスタリスク（＊）と中空の円（〇）で示す）。
【化4】
【0016】
これにより、この化合物の立体異性体の理論上の総数は２６＝６４となる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0017】
しかしながら、ＥＰ１９３１６７３とＥＰ２９８８７５６のいずれにも、記載された合成経路に従って得られた異性体混合物の組成について詳細に記載しておらず、これらの異性体の分離とキャラクタリゼーションについての教示もされておらず、ガドピクレノールの立体特異的な合成も開示されていない。
【課題を解決するための手段】
【0018】
出願人は、上記の前駆体Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）およびその誘導体（特にガドピクレノール）の特定の異性体が、とりわけ緩和性および速度論的不活性度に関して改善された物理化学的特性を有することを発見した。
【0019】
本発明の一実施形態は、以下からなる群から選択される化合物に関する：
式（Ｉａ）：
を有する、エナンチオマー［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＲＲＲエナンチオマー）；
式（Ｉｂ）：
を有する、エナンチオマー［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ－［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＳＳＳエナンチオマー）、および
そのようなＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーの混合物、およびその薬学的に許容される塩。
式（Ｉａ）：
【化5】
式（Ｉｂ）：
【化6】
そのようなＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーの混合物、およびその薬学的に許容される塩。
【0020】
本発明の別の実施形態は、少なくとも５０％の、式（Ｉａ）で示されるＲＲＲ異性体［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム、または、式（Ｉｂ）で示されるＳＳＳ異性体［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム、またはそれらの混合物、またはその薬学的に許容される塩を含んでなる、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物に関する。
【0021】
本発明の別の態様は、上記の化合物または異性体混合物の１つをアミノ基、例えば、好ましくは、セリノールまたはイソセリノールと結合させることによって得られるアミドに関する。
【0022】
本発明の一実施形態は、式（ＩＩ Ａ）：
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ａ）
［式中、
Ｆは：
式ＩＩＩａ
で示されるＲＲＲエナンチオマー残基、
式ＩＩＩｂ
で示される、ＳＳＳエナンチオマー残基、または
それらＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物であり；
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、上記構造式中、黒丸（●）で示されるＦのカルボキシル部分の開結合（open bond）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは場合より１～４個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は場合より１～４個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、好ましくは、１または２個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ３アルキル
である］
で示されるアミド誘導体に関する。
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ａ）
［式中、
Ｆは：
式ＩＩＩａ
【化7】
式ＩＩＩｂ
【化8】
それらＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物であり；
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、上記構造式中、黒丸（●）で示されるＦのカルボキシル部分の開結合（open bond）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは場合より１～４個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は場合より１～４個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ６アルキル、好ましくは、１または２個のヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ３アルキル
である］
で示されるアミド誘導体に関する。
【0023】
本発明の一実施形態は、式（ＩＩ Ｂ）：
Ｆ’（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ｂ）
［式中、
Ｆ’は：
式（ＩＩＩ）
で示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基の異性体混合物であり、
該Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基の異性体混合物は、少なくとも５０％の、上記式（ＩＩＩａ）のエナンチオマー残基、上記式（ＩＩＩ Ｂ）で示されるエナンチオマー残基、またはそれらの混合物を含んでなり；
－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、上記構造式中、黒丸（●）で示されるＦ’のカルボキシル部分の開結合（open bond）に結合しており、式（ＩＩ Ａ）で示される化合物について上で定義したとおりである］
を有する、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物に関する。
Ｆ’（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ｂ）
［式中、
Ｆ’は：
式（ＩＩＩ）
【化9】
該Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基の異性体混合物は、少なくとも５０％の、上記式（ＩＩＩａ）のエナンチオマー残基、上記式（ＩＩＩ Ｂ）で示されるエナンチオマー残基、またはそれらの混合物を含んでなり；
－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、上記構造式中、黒丸（●）で示されるＦ’のカルボキシル部分の開結合（open bond）に結合しており、式（ＩＩ Ａ）で示される化合物について上で定義したとおりである］
を有する、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物に関する。
【0024】
本発明のさらなる態様は、ＭＲＩ造影剤として使用するための、特にＭＲＩ技術を使用したヒトまたは動物の体の器官または組織の画像診断に適した、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）、または好ましくはそれらのＲＲＲ／ＳＳＳ混合物、または少なくとも５０％の、これらのエナンチオマーまたはＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマー混合物のいずれかを含んでなるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物、または上記の式（ＩＩＡ）または（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体の薬学的に許容される塩に関する。
【0025】
さらなる態様は、１つ以上の生理学的に許容される担体または賦形剤と混合して、本発明の少なくとも１つの化合物または異性体混合物、または上記で定義されるその薬学的に許容される塩またはアミド誘導体を含んでなる薬学的に許容される組成物に関する。
【0026】
別の態様では、本発明は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）またはその塩のＲＲＲまたはＳＳＳ異性体の立体選択的合成に関する。
【0027】
本発明の一実施形態は、式（ＩＩ Ａ）で示されるアミド誘導体の合成方法：
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ａ）
［式中、
Ｆ、Ｒ１およびＲ２は上記のとおりであり、以下を含んでなる：
ａ）Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）錯体のＲＲＲまたはＳＳＳ異性体、またはそれらの混合物を得る；および
ｂ）ステップａ）で得た異性体または異性体混合物をそのアミド誘導体に変換する；
ならびに
以下を含む、上記の式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体の異性体混合物の調製方法：
ａ’）少なくとも５０％の、エナンチオマーＲＲＲまたはＳＳＳ、またはそれらの混合物を含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を得る；
ｂ’）ステップａ’）で得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を、それぞれのアミド誘導体の対応する異性体混合物に変換する
に関する。
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ａ）
［式中、
Ｆ、Ｒ１およびＲ２は上記のとおりであり、以下を含んでなる：
ａ）Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）錯体のＲＲＲまたはＳＳＳ異性体、またはそれらの混合物を得る；および
ｂ）ステップａ）で得た異性体または異性体混合物をそのアミド誘導体に変換する；
ならびに
以下を含む、上記の式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体の異性体混合物の調製方法：
ａ’）少なくとも５０％の、エナンチオマーＲＲＲまたはＳＳＳ、またはそれらの混合物を含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を得る；
ｂ’）ステップａ’）で得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を、それぞれのアミド誘導体の対応する異性体混合物に変換する
に関する。
【図面の簡単な説明】
【0028】
【図1】図１は、先行技術によって開示された合成手順に従って実施された実施例１から異性体混合物として回収されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＨＰＬＣクロマトグラムを示す（［ＧｄＬ］＝０．２ｍＭ、２５℃）。
【図2】実施例３から得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアＣのＨＰＬＣクロマトグラムを示す。
【図4】ＨＰＬＣクロマトグラムを示す：ａ）実施例１のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物；ｂ）エナンチオマーペアＣ（実施例３の化合物ＶＩ）；ｃ）ＲＲＲエナンチオマー（実施例５の化合物ＸＩＩ）、およびｄ）ＳＳＳエナンチオマー（実施例６の化合物ＸＶＩＩ）。
【図5】キラルＨＰＬＣクロマトグラムを示す：Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のａ）エナンチオマーペアＣ（実施例３の化合物ＶＩ）、ｂ）ＲＲＲエナンチオマー（実施例５の化合物ＸＩＩ）、およびｃ）ＳＳＳエナンチオマー（実施例６の化合物ＸＶＩＩ）。
【図6】Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリグルタル酸）とイソセリノールの反応によって得られたアミド誘導体のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。ａ）：実施例２から異性体混合物として得られたアミド誘導体（便宜上、４つの主要ピークをＡ’、Ｂ’、Ｃ’およびＤ’として示す）。ｂ）：ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とＲ－イソセリノールとの反応により得られるアミド誘導体；ｃ）：ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とＳ－イソセリノールとの反応により得られるアミド誘導体；ｄ）：ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とラセミ体のイソセリノールとの反応によって得られるアミド誘導体。
【図7】実施例７の試験を参照し、ピークＡ（◇）、Ｂ（□）、Ｃ（△）、およびＤ（〇）のＨＰＬＣ面積値の経時変化を示す（[GdL］= 0.2 mM，[HCl］= 1.0 M、25℃）。
【図8】実施例８の試験を参照し、ＨＰＬＣ面積値の経時変化を示す：異性体混合物（◇）；ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）+ Rイソセリノール（□）；RRR/SSS Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）+ Sイソセリノール（△）；RRR/SSS Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）+ラセミ体のイソセリノール（〇）の総面積。（[GdL］= 0.2 mM，[HCl］= 1.0 M、25℃）。
【図9】式｛（Ｃ（ＮＨ２）３）２［Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）（Ｃ２Ｏ４）］｝・１Ｈ２Ｏで示される、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）－シュウ酸塩のグアニジン対イオンとの三元錯体の単結晶のＸ線構造を示す（グルタル酸基の（表示された）キラル炭素原子のキラリティーＲＲＲを示す）。
【図11】ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とラセミ体のイソセリノールとのカップリング反応により得られた、炭酸アニオンとアミド化合物Ｄ’との間で形成した三元錯体から得られた単結晶のＸ線構造、および回収された結晶の統計分析を示す。
【発明を実施するための形態】
【0029】
本発明の詳細な説明
先行技術（ＥＰ１９３１６７３によって引用されたＵＳ６，４４０，９５６を参照）に開示された合成法により、異性体の混合物（本明細書では「Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）」の異性体混合物」として示される）としてＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）を得ることができ、ＨＰＬＣにていくつかのピークとして確認できる。
先行技術（ＥＰ１９３１６７３によって引用されたＵＳ６，４４０，９５６を参照）に開示された合成法により、異性体の混合物（本明細書では「Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）」の異性体混合物」として示される）としてＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）を得ることができ、ＨＰＬＣにていくつかのピークとして確認できる。
【0030】
分取ＨＰＬＣ法により、同じｍ／ｚ比（Ｇｄ（Ｈ４Ｌ）＋：７５２．１４ ｍ／ｚ）を有する４つのピークを混合物から分離できるようになった。
【0031】
分離された異性体混合物の代表的なクロマトグラムを図１に示す。ここで、各ピークは、便宜上、それぞれＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤの文字で示され、上記で示したエナンチオマーのペアの１つに合理的に起因する。より正確には、各ピークはエナンチオマーのペアに関連しており、通常の逆相ＨＰＬＣでは識別できないＭＳスペクトルの同じｍ／ｚ比で特徴付けられる。
【0032】
意外にも、ＨＰＬＣクロマトグラムのピークＣに関連するエナンチオマーペア（または、以下、互換的にエナンチオマーペアＣと称する）が、特に速度論的不活性度とＧｄを放出する傾向の低下に関して、最適な特性を示すことが見い出された。
【0033】
例えば、エナンチオマーペアＣの解離半減期（１Ｍ ＨＣｌ中）は、ピークＢに関連するエナンチオマーペアのものと比較して数十倍長く、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）異性体混合物の平均の半減期よりも１０倍以上長いことがわかった。
【0034】
さらに、ピークＣに関連するエナンチオマーペアに関連する緩和値は、同じ条件で試験したＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物について１９３１６７３Ｂ１で報告された値よりも顕著に高い。
【0035】
このエナンチオマーペアＣは、［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム、すなわち式（Ｉａ）で示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ異性体
および、その各鏡像異性体［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム、すなわち式（Ｉｂ）で示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）
を含んでなることが示された。
【化10】
【化11】
【0036】
意外にも、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の個別のエナンチオマー（ＲＲＲおよびＳＳＳ）およびＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア（または以下、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸とも称する）によって示される改善された特性は、予想外にも、そのコンジュゲーション（例えばそのアミド誘導体の形成）後も実質的に維持されている。
【0037】
例えば、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）、および同様に、その個別のＲＲＲまたはＳＳＳエナンチオマーとイソセリノールとのカップリング反応により、最終的に、ガドピクレノールと同じ分子式を有するアミド誘導体が得られる。これに関して、使用するイソセリノールの種類、それがＲまたはＳ異性体であるか、ラセミ体のイソセリノールであるかに関わらず、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーとのコンジュゲーションにより、同じ保持時間を有する（したがって通常の逆相ＨＰＬＣでは区別できない）それぞれのアミド誘導体が得られることは興味深い。
【0038】
このように、付加したイソセリノールが異なる異性体（またはより一般的にはアミン誘導体）は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）前駆体の立体化学によって本質的に決定される最終的なコンジュゲート化合物の主要な特性には影響を与えない。
【0039】
実際、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物に関してピークＣに関連するエナンチオマーペアによって示される改善された特性は、結合したイソセリノールの立体配置に関係なく、イソセリノールとのコンジュゲーション後に実質的に維持される。
【0040】
特に、イソセリノールの立体配置に関わらず、そのＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアとのカップリングにより、従来技術の合成手順で異性体混合物として得られたガドピクレノールと比較して、より大きな速度論的不活性度と緩和能を有するアミド化合物が得られる。
【0041】
本明細書において、そして特に記載しない限り、「異性体混合物」（特定の化合物に関して）という表現は、その意味に、その化合物の少なくとも２つの立体異性体を含む混合物を包含する。特に、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）に関して用いる場合、「異性体混合物」という表現は、８つのジアステレオマー（または本明細書でジアステレオ異性体とも称する）のうちの少なくとも２つが分離されていない混合物を指し、より正確には、分子内に含まれる３つの立体中心によって生じる、表１に示される４つのエナンチオマーペアを指す。一方、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体（例えばガドピクレノール）について用いる場合、「異性体混合物」という表現は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基のエナンチオマーペアのそれぞれのアミド誘導体の上記の（可能な４つの）少なくとも２つの定義されていない分離されていない混合物を指す。
【0042】
この点において、アミド誘導体のアミン基のそれぞれが１つ以上の立体中心を含み得るので、アミド誘導体の可能な立体異性体の総数は、それに応じて増加し得る。たとえば、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とイソセリノールの３つの分子（それぞれが立体中心を有する）のコンジュゲーションにより、それぞれ分子上に合計６つの立体中心が存在し、対応するアミド誘導体の可能な立体異性体の数は最大６４（３２エナンチオマーペア）になる。
【0043】
本明細書の記載と特許請求の範囲において、「Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物」または「Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物のアミド誘導体」という表現は交換可能に用いられる。
【0044】
「エナンチオマーＣ」という表現は、図１のように、ピークＣに関連するエナンチオマーのペアを指す。このエナンチオマーＣは、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアに対応する。
【0045】
「ＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア」（またはＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマー）という表現は、一般に、それらのラセミ混合物を含む、目的化合物のエナンチオマーＲＲＲとその各鏡像異性体ＳＳＳの混合物を指す。本明細書において、この表現を、典型的には、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）に関して用い、この化合物のエナンチオマーＲＲＲおよびＳＳＳの混合物（またはそのＲＲＲ／ＳＳＳ混合物）を指す。より具体的には、「Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア」（または本明細書で交換可能に用いられる「ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）」）という表現は、例えば以下に示す、［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＲＲＲエナンチオマー）および［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＳＳＳエナンチオマー）の混合物を指す。
【化12】
【0046】
「化合物Ｄ」という表現は、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とイソセリノールとのカップリング反応によって得られるアミド誘導体を指す。
【0047】
「立体選択的合成」（または本明細書で交換可能に用いられる「不斉合成」）という表現は、その意味に、キラリティーの１つ以上の新しい要素が基質分子内に形成され、不等量の立体異性体（エナンチオマーまたはジアステレオマー）を生成する化学反応（または反応シーケンス）を包含する。本明細書において、「立体選択的合成」という表現は、特に、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲおよびその各鏡像異性体ＳＳＳに関して用い、２つのエナンチオマーのいずれか一方を、少なくとも５５％、好ましくは６５％、より好ましくは７５％、そして最も好ましくは少なくとも８５％を含む錯体を得ることを可能にする合成を指す。
【0048】
本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という用語は、親化合物を、フリーの酸または塩基性基が存在する場合、そのいずれかを薬学的に許容されると慣用的に意図されている任意の塩基または酸との対応する付加塩に変換することによって適切に修飾される、本発明の化合物の誘導体を指す。
【0049】
本発明の塩を調製するために適切に使用することができる無機塩基の好ましいカチオンとしては、例えば、カリウム、ナトリウム、カルシウムまたはマグネシウムなどのアルカリまたはアルカリ土類金属のイオンが挙げられる。
【0050】
有機塩基の好ましいカチオンは、例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、モルホリン、グルカミン、Ｎ－メチルグルカミン、Ｎ，Ｎ－ジメチルグルカミンなどの一級、二級および三級アミンのものが挙げられる。
【0051】
アミノ酸の好ましいカチオン及びアニオンとしては、例えば、タウリン、グリシン、リジン、アルギニン、オルニチンまたはアスパラギン酸およびグルタミン酸のものが挙げられる。
【0052】
さらに、「部分」、「残基」という用語は、直接または任意の適切なリンカーを介して、分子の残りの部分に適切に結合またはコンジュゲートされた後、その分子の残留部分を定義することを意図するものである。
【0053】
例えば、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体（ＲＲＲまたはＳＳＳ異性体の異性体混合物、またはＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマー混合物またはエナンチオマーペアのいずれかの形態）に関して用いる場合、「残基」という用語は、対応するアミド誘導体を生じるためにアミン基に結合しているＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の部分を指す。
【0054】
特に、「Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物の残基」という用語は、以下の式（ＩＩＩ）を有する化合物を指す。
【化13】
【0055】
この残基は、例えば、上記の構造式中、黒丸（●）で示したカルボキシル部分の開結合を介して式－ＮＲ１Ｒ２で示されるアミノ残基とコンジュゲーションして、次式の対応するアミド誘導体を生じ得る。
【化14】
【0056】
同様に、「Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーの残基」という用語は、それぞれ、以下の式（ＩＩＩＡ）
および式（ＩＩＩｂ）
を有する化合物を指す。
【化15】
【化16】
【0057】
「残基」という用語は、同様に、ＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア、または一般にエナンチオマー混合物、の対応する残基に適用される。
【0058】
従来技術に開示された非立体選択的合成に従って得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の、同じｍ／ｚ比（Ｇｄ（Ｈ４Ｌ）＋：７５２．１４ ｍ／ｚ）を有する４つのピーク（便宜上それぞれＡ、Ｂ、ＣおよびＤとして示す）を分離することを可能にする分取ＨＰＬＣ法が必要とされた。分子内に存在する３つの立体中心（上記の分子構造中アスタリスクで示す）を考慮に入れることにより、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリグルタル酸）錯体のＨＰＬＣクロマトグラムの４つのシグナルをそれぞれ、上記Table 1に示した、グルタル酸残基の異なる光学異性体で形成した４つのエナンチオマーペアに割り当てた。
【0059】
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のラセミ混合物、特にＨＰＬＣによって分離されたそれらの４つのエナンチオマーペア、の速度論的不活性度を調べるため、酸性条件下で起こるそれらの解離反応を調べた。疑似一次速度論的条件を保証するために、大過剰のH+（[HCl］= 1.0 M）を特に利用した。
式中、Ｌはプロトン化されたＰＣＴＡ－トリグルタル酸（遊離リガンド）であり、ｙはリガンドに結合したプロトンの数である。
【数1】
式中、Ｌはプロトン化されたＰＣＴＡ－トリグルタル酸（遊離リガンド）であり、ｙはリガンドに結合したプロトンの数である。
【0060】
１Ｍ ＨＣｌ中のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）（異性体混合物）の溶液を調製し、実施例７に記載するように経時的に分析した。
【0061】
特に、Ａ、Ｂ、ＣおよびＤの各ピークの面積値を、ＨＰＬＣにより経時的に評価した。
【0062】
錯体の酸触媒の解離により、予想通り、ピークＡ、Ｂ、ＣおよびＤの積分面積が減少する一方、フリーのリガンドに対応して新しいシグナルが形成し増大した（m/z： 597.24）。しかし、興味深いことに、シグナルＡ、Ｂ、ＣおよびＤの面積の減少速度が互いに等しくないことがわかった（たとえば、ピークＡおよびＢの面積の減少は、ピークＣおよびＤの面積の減少よりも有意に速かった）。
【0063】
したがって、Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤのシグナルの積分面積値の減少を評価し、時間の関数としてプロットした。得られた結果を図７にグラフで示す（４つのピークの挙動の間に存在する観察された違いが強調されている）。
【0064】
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）錯体の異なるエナンチオマーペアの解離速度と半減期（ｔ１／２＝ｌｎ２／ｋＸ）を特徴付けるｋＸ疑似一次速度定数（ここで、ｋＸはそれぞれ＝ｋＡ、ｋＢ、ｋＣおよびｋＤ）を、実施例７で詳細に説明されているように、面積－時間データのペアをフィッティングすることにより計算した。さらに、混合物のパーセント組成を考慮することによってＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物の平均半減期の値も得た。得られた結果をＴａｂｌｅ ２に要約し、いくつかの参照造影剤（例えば、Ｇｄ－ＤＯＴＡ（ＤｏｔａｒｅｍＴＭ）およびＥｕ（ＰＣＴＡ）（３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９，－三酢酸のユーロピウム錯体）について文献で参照されている対応する値と比較する。
【0065】
これらの結果から、４つのエナンチオマーペアの解離速度が互いにかなり異なることが確認された。
【0066】
特に、ピークＣに関連するエナンチオマーペアは、意外にも、他のすべての可能な異性体の中で速度論的不活性度が最も高く、Ｇｄを放出する傾向が最も低い。
【0067】
実際、このエナンチオマーＣのペアについて測定されたｔ１／２値は、たとえばＢの約６８倍である。さらに、ピークＣに関連するエナンチオマーペアのｔ１／２値は、同じくｑ＝２であるＥｕ（ＰＣＴＡ）について測定された値より大幅に高く（たとえば、Tircso, G. et al. Inorg Chem 2006, 45（23), 9269－80を参照）、例えば最高の安定度と不活性度を有する市販の造影剤であるGd－DOTA（DotaremTM）について文献で報告されているt1/2値と完全に同等である。
【0068】
次に、この化合物が豊富化された画分を、実施例３で詳細に説明されているようにフラッシュクロマトグラフィーにより回収し、少なくとも約９０％の純度（ＨＰＬＣ面積％として、図２を参照）でピークＣに関連するエナンチオマーペアを達成した。
【0069】
意外にも、回収したエナンチオマーペアについて得られた緩和値は、ｒ１ ＝ ９．３±０．１ｍＭ－１ｓ－１であり、ＥＰ１９３１６７３Ｂ１においてＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物について（同条件下で）記録されたr1 = 7.2よりも有意に高かった。
【0070】
このエナンチオマーペアによって示される、高い緩和能とより高い不活性度（より高い忍容性をもたらす）の予想外の組み合せは特に興味深い。
【0071】
このように、ピークＣに関連するエナンチオマーの組を特定するために努力を費やした。
【0072】
特に、実施例５および６にそれぞれ記載される、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲおよびＳＳＳ異性体の立体選択的合成を設定し、通常の逆相ＨＰＬＣでのピークＣの同じＨＰＬＣ保持時間ｔｒを有する主要な化合物を伴う粗製物が得られた。関連する異性体（Ｒ）－（－）－５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボン酸を重要な中間体として使用することにより、同じＨＰＬＣ保持時間を有するＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の対応するＳＳＳ異性体も得た（図４）。
【0073】
代わりに、メチル（２Ｓ）－ブロモグルタル酸塩を使用して実施したＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の合成は、従来技術に開示されるラセミ体のメチルブロモグルタル酸塩とともに回収されたものと実質的に区別できない異性体混合物として、錯体を得ることが可能である。
【0074】
次に、ピークＣに関連するエナンチオマーペアを、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の合成されたＳＳＳおよびＲＲＲ異性体と比較することにより、特定のキラルＨＰＬＣ法（ペアの単一エナンチオマーを分離できる）で分析した。得られたクロマトグラム（図５を参照）から、ピークＣに関連する２つのエナンチオマーが、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の合成されたＲＲＲおよびＳＳＳ異性体と同じ保持時間を有することが確認された。
【0075】
さらに、結晶は、実施例１０に詳細に開示されるように、エナンチオマーペアＣとシュウ酸グアニジニウムから形成された。図９からわかるように、単結晶のＸ線回折により、分子のグルタル酸アームのキラル中心のＲＲＲ配置、結晶の各単位格子内のＲＲＲおよびＳＳＳ異性体の等モル比の存在が確認され、このペアのＲＲＲ／ＳＳＳラセミ性が確認された（図１０）。
【0076】
これらの結果はすべて一致しており、ピークＣに関連する化合物が、実際にはＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア（本明細書中で互換的に用いられる、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）からなることが立証される。
【0077】
より具体的には、上記の結果から、本発明によって同定されたピークＣに対応する化合物が、次式
で示される［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９ 式の，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（またはＲＲＲ－Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸））と、次式
で示される、その各鏡像異性体［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（またはＳＳＳ－Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸））との混合物（あるいは、該混合物は、以下の式Ｉｃ
によって表される）
を含むと定義することができた。
【化17】
【化18】
【化19】
を含むと定義することができた。
【0078】
したがって、本発明の一態様は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のエナンチオマーのＲＲＲ／ＳＳＳペア、このペアの単一のエナンチオマー、それらの混合物、それらの薬学的に許容される塩、それらのアミド誘導体、およびそれらを含む組成物である。
【0079】
特に、本発明の一実施形態は、以下からなる群から好ましくは選択される化合物に関する：個別のエナンチオマー［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＲＲＲエナンチオマー）；その各鏡像異性体、すなわち個別のエナンチオマー［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＳＳＳエナンチオマー）；ＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア；およびその薬学的に許容される塩。
【0080】
好ましい実施形態によれば、本発明は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア（あるいは本明細書では、より簡単に「ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）」と称する）に関するものであり、例えば、本発明の一実施形態による、錯体の２つの個別のＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーの混合物、それらのラセミ混合物、またはその塩を含んでなる。
【0081】
本発明の別の態様は、上記のエナンチオマーのいずれかが豊富なＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）、またはそれらの混合物に関する。
【0082】
本発明の異性体、またはエナンチオマー、またはエナンチオマーペア（特に、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）またはそのアミド誘導体を参照する場合）に関して用いられる「豊富化された」という表現は、その意味に、そのような異性体、エナンチオマー、またはエナンチオマーペアが、従来技術の非立体選択的合成手順に従って得られる混合物に通常含まれる量よりも高い量で存在している、異性体の混合物を包含する。
【0083】
そのような豊富化（Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体、またはエナンチオマーペアに関して）は、例えば、混合物における、少なくとも５０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、さらにより好ましくは少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％の量の、そのような異性体またはエナンチオマーペアに対応する。
【0084】
特に、本発明の別の態様は、（その異性体組成物に関して、すなわちＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を構成する個別の異性体の合計に対して）少なくとも５０％の上記異性体のいずれかを含む、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物（即ち、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）錯体の少なくとも５０％がＲＲＲ異性体［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム；またはＳＳＳ異性体［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム；またはそれらの混合物；またはその塩（錯体の残りの量は、他の可能な異性体の無差別な混合物によって表される）に関する。
【0085】
したがって、本発明の一実施形態は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）、またはその塩であって、これらのエナンチオマーのそれぞれのエナンチオマーＲＲＲ、またはエナンチオマーＳＳＳまたはこれらエナンチオマーのＲＲＲ／ＳＳＳ混合物は、異性体混合物の少なくとも５０％（例えば、モル単位で）を該酸または塩が構成する。
【0086】
好ましくは、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）（上記のエナンチオマーまたはそれらの混合物のいずれか１つ）の豊富化は、少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、最も好ましくは少なくとも８０％、例えば、少なくとも９０％の豊富化である。
【0087】
より好ましくは、豊富化は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアにおける豊富化である。
【0088】
好ましい実施形態では、本発明は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア、またはそのＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアを少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物、即ち、錯体の少なくとも５０％はＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアで構成されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）、に関する。
【0089】
ＲＲＲ異性体［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム、またはこの異性体が豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）は、例えば、実施例５により詳細に記載されているように、３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン（または本明細書で交換可能に使用される「ピクレン」）を（２Ｓ）－２－［（トリフルオロメチルスルホニル）オキシ］ペンタン二酸ジメチルエステルでアルキル化することを含む立体選択的合成の使用によって調製することができる。
【0090】
同様に、（２Ｒ）－２－［（トリフルオロメチルスルホニル）オキシ］ペンタン二酸ジメチルエステル（例えば、実施例６に記載）の代替使用により、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のそれぞれのＳＳＳ異性体、または子の異性体が適切に豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）を得ることができる。
【0091】
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲおよびＳＳＳ異性体の立体選択的合成は新規であり、本発明のさらなる実施形態を構成する。
【0092】
別の実施形態では、本発明は、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）分析に特に適した造影剤として使用するための、薬学的に許容される塩の形態の、上記のエナンチオマー、エナンチオマーペア、または豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）に関する。
【0093】
より具体的には、本発明のさらなる実施形態は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の個別のエナンチオマーＲＲＲ、または個別のエナンチオマーＳＳＳ、またはＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペア、またはこれら個別のエナンチオマーのいずれかが少なくとも５０％豊富化されているＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）、好ましくはＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマー混合物から選択される、特に磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）分析に適した、造影剤として使用するための化合物の薬学的に許容される塩に関する。
【0094】
薬学的に許容される塩の適切な例としては、カリウム、ナトリウム、カルシウムまたはマグネシウムなどのアルカリまたはアルカリ土類金属から選択される無機塩基のカチオン、またはエタノールアミン、ジエタノールアミン、モルホリン、グルカミン、Ｎ－メチルグルカミン、Ｎ，Ｎ－ジメチルグルカミンから選択される有機塩基のカチオン、またはリジン、アルギニン、オルニチンから選択されるアミノ酸のカチオンとの塩が挙げられる。
【0095】
別の態様によれば、本発明は、上記の化合物または異性体混合物のいずれか１つと、好ましくは式ＮＨＲ１Ｒ２で示されるアミンとのコンジュゲートに関する。
【0096】
本発明の一実施形態は、式（ＩＩ Ａ）：
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ａ）
で示される、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲエナンチオマー、ＳＳＳエナンチオマー、またはそのような２つのエナンチオマーの混合物のアミド誘導体に関する。
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ａ）
で示される、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲエナンチオマー、ＳＳＳエナンチオマー、またはそのような２つのエナンチオマーの混合物のアミド誘導体に関する。
【0097】
本発明の別の実施形態は、式（ＩＩ Ｂ）：
Ｆ’（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ｂ）
で示される、個別のエナンチオマーＲＲＲ、またはエナンチオマーＳＳＳ、またはこれらのエナンチオマーの混合物を少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物に関する。
Ｆ’（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ｂ）
で示される、個別のエナンチオマーＲＲＲ、またはエナンチオマーＳＳＳ、またはこれらのエナンチオマーの混合物を少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物に関する。
【0098】
上記の式（ＩＩ Ａ）および（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ、Ｆ’、Ｒ１およびＲ２の意味は、上で定義したとおりである。
【0099】
好ましい例としては、ＦがＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物（またはＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマー残基のペア）である上記の式（ＩＩ Ａ）で示されるアミド誘導体、またはＦ’が、ＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物を少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基の異性体混合物である、式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体が挙げられる。
【0100】
好ましい実施形態において、本発明は、Ｆ’が、それぞれ式（ＩＩＩＡ）および（ＩＩＩＢ）で示されるＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物を少なくとも５０％含む上記式ＩＩＩで示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）残基の異性体混合物である、上記式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体に関する。
【0101】
好ましくは、これらのアミド誘導体において、Ｆ’は、ＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基の混合物が少なくとも６０％豊富化されている（すなわち、少なくとも６０％含む）、より好ましくは少なくとも７０％、最も好ましくは少なくとも８０％、例えば、特に好ましくは、少なくとも９０％豊富化されている。適切な例としては、Ｒ１がＨであり、Ｒ２が１つ以上の、好ましくは１つまたは２つ、より好ましくは２つのヒドロキシル基で置換されたＣ１－Ｃ３アルキルである上記式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体が挙げられる。
【0102】
好ましい実施形態において、本発明は、Ｆ’が上記で定義された式（ＩＩＩ）の残基であり、Ｒ１がＨであり、Ｒ２が１つまたは２つのヒドロキシル基で置換されているＣ１－Ｃ３アルキルである、上記の式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体の異性体混合物に関する。より好ましくは、Ｒ２は、セリノール残基、またはさらにより好ましくは、例えば、Ｒイソセリノール、Ｓイソセリノールまたはラセミ体のイソセリノールから選択されるイソセリノール残基である。最も好ましくは、アミド化合物はラセミ体のイソセリノールを有する。
【0103】
例えば、上記の化合物の非限定的で代表的な例としては、以下のものが挙げられる：
次式：
で示される、［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（または異性体ＳＳＳ－ＳＳＳ）；
次式：
で示される、－［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ），３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（または異性体ＲＲＲ－ＲＲＲ）；
次式：
で示される、［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（または異性体ＲＲＲ－ＳＳＳ）；
次式：
で示される、［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ），３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（または異性体 ＳＳＳ－ＲＲＲ）；
または、イソセリノール部分がＲＳＲ、ＳＳＲ、ＳＲＳ、ＲＳＳ、またはＲＲＳの立体配置であるそれぞれの異性体。
次式：
【化20】
次式：
【化21】
次式：
【化22】
次式：
【化23】
または、イソセリノール部分がＲＳＲ、ＳＳＲ、ＳＲＳ、ＲＳＳ、またはＲＲＳの立体配置であるそれぞれの異性体。
【0104】
イソセリノールを有する式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミドは、ガドピクレノールと同じ分子式を有するが、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の、ＲＲＲ異性体またはＳＳＳ異性体残基、またはより好ましくはＲＲＲとＳＳＳエナンチオマー残基の混合物が少なくとも５０％豊富化された中心部分Ｆ’を含む。
【0105】
特に、使用するイソセリノールの種類（つまり、ＲまたはＳ異性体、またはラセミ体のイソセリノール）に関わらず、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアとのコンジュゲーションは、図６に示すように、保持時間が同じであるため、ＨＰＬＣでは区別できない。図６はさらに、この保持時間が、実施例２で異性体混合物として得られたガドピクレノールからＨＰＬＣによって分離されたピークＤ’と同じであることを示している。
【0106】
驚くべきことに、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の改善された特性は、結合したイソセリノールの立体配置に関係なく、イソセリノールとのコンジュゲーション後も実質的に維持される。
【0107】
特に、イソセリノールのＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とのコンジュゲーションは、同じ分子式を有するが、従来技術の合成手順で異性体混合物として得られるガドピクレノールのより大きな速度論的不活性度と緩和能を有するアミド誘導体をもたらす。
【0108】
実際に、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物から分離された４つの異なるエナンチオマーペアの速度論的不活性度を評価するために実施した同じ試験を、実施例２で得られたガドピクレノール（異性体混合物）およびＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とそれぞれｉ）Ｒ－イソセリノール、ｉｉ）Ｓ－イソセリノール；およびｉｉｉ）ラセミ体のイソセリノールとのコンジュゲーションにより得られたアミド誘導体を使用することによって繰り返した。
【0109】
得られたコンジュゲーション化合物およびガドピクレノール（異性体混合物）の平均半減期は、実施例８に詳細に記載されるように、時間の経過に伴うＨＰＬＣ総面積の減少を考慮して計算した。ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ －トリス－グルタル酸）とｉ）Ｒ－イソセリノール；ｉｉ）Ｓ－イソセリノール；ｉｉｉ）ラセミ体のイソセリノールとの反応によって得られたアミド誘導体については、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）について実施例７において実施した面積－時間データペアをフィッティングすることにより、ｋＸ疑似一次速度定数および半減期（ｔ１／２＝ｌｎ２／ｋＸ）も計算した。
【0110】
得られた結果をTable 3に要約し、いくつかの参照造影剤（例えばＧｄ－ＤＯＴＡ（ＤｏｔａｒｅｍＴＭ）およびＥｕ（ＰＣＴＡ））について文献で参照されている対応する値と比較する。
【0111】
Ｔａｂｌｅ ３の片側のデータは、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）と、Ｒ、Ｓおよびラセミ体のイソセリノールとカップリングすることによって得られた錯体の、面積値から推定されたｔ１／２値と、面積時間動態データのフィッティングによって計算されたｔ１／２値との間に存在する非常に良好な一致を示している。
【0112】
一方、Table 3のデータは、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）と、ｉ）Ｒ－イソセリノール、ｉｉ）Ｓ－イソセリノール；ｉｉｉ）ラセミ体のイソセリノールとの反応によって得られたアミド化合物のすべてのｔ１／２値はいずれもガドピクレノール（異性体混合物）の約８倍であり、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）が示す高い速度論的不活性度がイソセリノールとのカップリング後も実質的に維持されていることが確認される。
【0113】
ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）と、Ｒ、Ｓまたはラセミ体のイソセリノールとのコンジュゲーションから生じる異なる錯体化合物で得られた半減期の値の全体的な一貫性は、イソセリノールペンダントのキラリティーが最終的な錯体の速度論的不活性度に影響を及ぼさないことを示している。さらに、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とＲ、Ｓおよびラセミ体のイソセリノールとのコンジュゲーションによって得られた化合物について、ガドピクレノールについて文献で使用されているのと同じ条件下で、ｒ１緩和能を測定した。
【0114】
得られた結果をＴａｂｌｅ ５で比較する。ここでも、付加されたイソセリノールの立体配置に関係なく、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）から得られたコンジュゲーション化合物について、水中とＨＳＡ中の両方で測定されたｒ１緩和能は、ガドピクレノールについて関連する文献に報告されているものよりも高い。
【0115】
このように、アミド誘導体は、本発明のＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とイソセリノールとのコンジュゲーションによって得られ、ガドピクレノール化合物の同じ構造を有するにもかかわらず、改善された速度論的不活性度とより高い緩和能によって特徴付けられる。
【0116】
次に、実施例１０に詳細に記載されているように、ＲＲＲ／ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）とラセミ体のイソセリノールとのコンジュゲーションから生じるアミド誘導体から結晶を得た。炭酸塩アニオンとアミド誘導体との間で形成した三元錯体から得た単結晶のＸ線回折試験によって、コア分子Ｃのグルタル酸アームがＲＲＲ／ＳＳＳ配置であることが確認された。
【0117】
回収されたすべての結晶のＸ線構造と統計分析を図１１に示す。
【0118】
個別のＲＲＲまたはＳＳＳ異性体の立体選択的合成の結果、およびエナンチオマーペアＣと、そのイソセリノールとのコンジュゲートの両方で記録された（結晶）構造は、すべて互いに一致しており、図１のＨＰＬＣのピークＣに起因する化合物は、事実、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアに対応することが証明される。
【0119】
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲおよびＳＳＳ異性体の合成は、本発明のさらなる実施形態を表す。
【0120】
特に、本発明の別の実施形態は、
ａ） 次式
で示される（２Ｓ）－２－［（トリフルオロメチルスルホニル）オキシ］ペンタン二酸ジメチルエステルを得ること；および
ｂ）回収された（２Ｓ）－２－［（トリフルオロメチルスルホニル）オキシ］ペンタン二酸ジメチルエステルで、次式
で示される３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエンをアルキル化すること
を含んでなる、異性体［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＲＲＲ異性体）が豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の調製のための立体選択的製造法に関する。
ａ） 次式
【化24】
ｂ）回収された（２Ｓ）－２－［（トリフルオロメチルスルホニル）オキシ］ペンタン二酸ジメチルエステルで、次式
【化25】
を含んでなる、異性体［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５）、１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＲＲＲ異性体）が豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の調製のための立体選択的製造法に関する。
【0121】
一実施形態では、この製造法は、錯体の所望のＲＲＲ異性体が、少なくとも５５％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、最も好ましくは少なくとも８０％、例えば約８５％、豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）を得ることができる。
【0122】
同様に、この製造法のステップａ）において（２Ｒ）－２－［（トリフルオロメチルスルホニル）オキシ］ペンタン二酸ジメチルエステルを代りに使用することにより、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のそれぞれのＳＳＳ異性体、またはこの異性体が適切に豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）を得ることができる。
【0123】
さらに別の実施形態では、本発明は、好ましくは、アミド誘導体などのその誘導体の調製における中間体として使用するための、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のエナンチオマーのＲＲＲ／ＳＳＳペア、またはこのエナンチオマーペアが少なくとも５０％豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）に関する。
【0124】
本発明のさらに別の実施形態は、
ａ）Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ、またはＳＳＳ異性体、またはそれらの混合物を得ること；および
ｂ）ステップａ）で得られた異性体または異性体の混合物を所望のアミド誘導体に変換すること
を含んでなる、式（ＩＩ Ａ）
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ａ）
［式中、Ｆ、Ｒ１、およびＲ２は上記のとおりである］
で示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の合成による製造法に関する。
ａ）Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ、またはＳＳＳ異性体、またはそれらの混合物を得ること；および
ｂ）ステップａ）で得られた異性体または異性体の混合物を所望のアミド誘導体に変換すること
を含んでなる、式（ＩＩ Ａ）
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ａ）
［式中、Ｆ、Ｒ１、およびＲ２は上記のとおりである］
で示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の合成による製造法に関する。
【0125】
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲまたはＳＳＳ異性体を得る本製造法のステップａ）は、例えば、上記のとおりに、そして例えば実施例５および６に詳細に記載されるとおりに実施される。。
【0126】
一方、この製造法のステップｂ）は、例えば、上記に引用された従来技術で報告されている従来の手順に従って実施することができる。
【0127】
本発明のさらなる態様は、
ａ’）個別のエナンチオマーＲＲＲ、またはＳＳＳ、または好ましくはそれらの混合物を少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を得ること；および
ｂ’）ステップａ’）で得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を、目的のアミド誘導体の対応する異性体混合物に変換すること
を含んでなる、上記の式（ＩＩ Ｂ）
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ｂ）
［式中、Ｆ’、Ｒ１、およびＲ２は上記のとおり］
で示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物の合成調製のための製造法に関する。
ａ’）個別のエナンチオマーＲＲＲ、またはＳＳＳ、または好ましくはそれらの混合物を少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を得ること；および
ｂ’）ステップａ’）で得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を、目的のアミド誘導体の対応する異性体混合物に変換すること
を含んでなる、上記の式（ＩＩ Ｂ）
Ｆ（ＮＲ１Ｒ２）３ （ＩＩ Ｂ）
［式中、Ｆ’、Ｒ１、およびＲ２は上記のとおり］
で示されるＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物の合成調製のための製造法に関する。
【0128】
例えばＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアを少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を得る、この製造法のステップａ’は、例えば実施例３に開示されるように、既知の手順で異性体混合物として得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）を出発物質として、例えば分取ＨＰＬＣまたはフラッシュクロマトグラフィーを含むクロマトグラフィーによって得ることができる。
【0129】
一方、ステップａ’）から回収されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の豊富化された異性体混合物を目的のアミンとカップリングすることを含む本製造法のステップｂ’）は、例えば上記で引用した従来技術で報告されている従来の手順に従って実施することができる。
【0130】
例えば、ステップａ’）から回収された生成物は、例えば実施例４で詳細に記載されている合成手順を使用することにより、イソセリノールと反応させることができる。
【0131】
本発明の更なる実施形態は、造影剤として使用するための、特に磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）分析に適した、上記式（ＩＩ Ａ）または（ＩＩ Ｂ）で示されるアミドに関する。
【0132】
特に、別の実施形態では、本発明は、ヒトまたは動物の体の器官、組織または領域、また生きている哺乳類の患者（好ましくはヒトの患者）から得られた細胞、生体液および生体組織を含む生体サンプル、のＭＲＩ技術を使用することによる、インビボまたはインビトロ、エクスビボのいずれかでの画像診断に使用するための医薬製剤の調製のための、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の個別のＲＲＲまたはＳＳＳエナンチオマー、そのようなＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーの混合物、個別のＲＲＲまたはＳＳＳエナンチオマーのいずれかが５０％豊富化されたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物またはその混合物、それらの薬学的に許容される塩、式（ＩＩＡ）または（ＩＩ Ｂ）で示されるそのアミド誘導体からなる群から選択される化合物に関する。
【0133】
本発明のさらなる態様は、１つ以上の生理学的に許容される賦形剤、希釈剤または溶媒と混合して、本発明の上記の異性体化合物または異性体混合物の少なくとも１つ、または上記のような薬学的に許容される塩またはアミド誘導体を含んでなる、診断のための医薬組成物に関する。
【0134】
好ましくは、医薬組成物は、上記の式（ＩＩ Ａ）で示されるアミド誘導体
（該式（ＩＩ Ａ）においてＦは、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアの残基である）；または、
より好ましくは、上記式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体の異性体混合物
（式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアが少なくとも５０％豊富化されており、－ＮＲ１Ｒ２はイソセリノール残基である）
を含んでなる。
（該式（ＩＩ Ａ）においてＦは、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアの残基である）；または、
より好ましくは、上記式（ＩＩ Ｂ）で示されるアミド誘導体の異性体混合物
（式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’は、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアが少なくとも５０％豊富化されており、－ＮＲ１Ｒ２はイソセリノール残基である）
を含んでなる。
【0135】
好ましい実施形態では、医薬組成物は、式
で示される、イソセリノールとコンジュゲートした、式（ＩＩ Ｂ）中のＦ’が、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＲＲＲ／ＳＳＳエナンチオマーペアが少なくとも６０％、好ましくは少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０％、最も好ましくは少なくとも９０％豊富化された、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の残基である、アミド化合物を含む。
【化26】
【0136】
更なる態様では、本発明は、１つ以上の製薬上許容される賦形剤、希釈剤または溶媒と組み合わせて、有効量の、上記のような本発明の少なくとも１つの異性体化合物または異性体混合物、またはその医薬的に許容される塩、またはそのアミド誘導体を含むＭＲＩ造影媒体に関する。
【0137】
この範囲で、そして特に定めがない限り、本明細書で使用される「有効量」または「有効用量」という用語は、本発明のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）またはその薬学的に許容される塩、または 式（ＩＩ Ａ）または（ＩＩ Ｂ）で示されるそのアミド誘導体またはその医薬組成物の、その意図された診断目的：すなわち、例えば、エクスビボで細胞、生体液および 生物学的組織を含む生物学的要素を視覚化するため、または患者の体の器官、組織または領域のインビボでの画像診断を達成するのに十分な任意の量を意味する。
【0138】
特に記載しない限り、本明細書で使用される「個別の患者」または「患者」という用語は、生きているヒトまたは動物の患者、好ましくはＭＲ診断評価を受けているヒトを指す。
【0139】
投与量、剤形、投与様式、薬学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤、アジュバントなどに関する詳細は、当分野において知られている。
【0140】
本発明の好ましい化合物の非限定的な例、それらの調製手順、およびそれらの特徴付けは、その範囲を限定することなく本発明をより詳細に説明することを目的として、以下のセクションに記載される。
【0141】
実験パート
得られた化合物のＨＰＬＣキャラクタリゼーション
一般的手順
手順１：Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＨＰＬＣキャラクタリゼーション（異性体混合物および個別の／豊富化された異性体）
実施例１から異性体混合物として得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＨＰＬＣキャラクタリゼーションは、Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＩＩシステムを用いて実施された。ＨＰＬＣ測定の実験設定を以下に要約する。
分析条件
HPLCシステム クォータナリポンプ、デガッサ－、オートサンプラー、PDA検出器を
備えたHPLC（Agilent 1260 Infinity IIシステム）
固定相：Phenomenex Gemini（登録商標） 5μm C18 110Å
移動相：H2O/HCOOH 0.1％：メタノール
得られた化合物のＨＰＬＣキャラクタリゼーション
一般的手順
手順１：Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＨＰＬＣキャラクタリゼーション（異性体混合物および個別の／豊富化された異性体）
実施例１から異性体混合物として得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のＨＰＬＣキャラクタリゼーションは、Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＩＩシステムを用いて実施された。ＨＰＬＣ測定の実験設定を以下に要約する。
分析条件
HPLCシステム クォータナリポンプ、デガッサ－、オートサンプラー、PDA検出器を
備えたHPLC（Agilent 1260 Infinity IIシステム）
固定相：Phenomenex Gemini（登録商標） 5μm C18 110Å
移動相：H2O/HCOOH 0.1％：メタノール
【表2】
【0142】
手順2：ガドピクレノール（異性体混合物）およびエナンチオマーペアCとR、S、またはラセミ体イソセリノールとのカップリングによって得られた化合物のHPLCキャラクタリゼーション
実施例２から得られた異性体混合物として、またはＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のエナンチオマーペアＣとＲ、Ｓ、またはラセミ体イソセリノールとのコミュニケーションによって得られた化合物としてのガドピクレノールのＨＰＬＣキャラクタリゼーションは、Thermo Finnigan LCQ DECA XPPlusシステムを用いて行った。HPLC測定の実験設定を以下に要約する。
分析条件
HPLCシステム クォータナリポンプ、デガッサ－、オートサンプラー、PDA検出器を
備えたHPLC（LCQ Deca XP－Plus－Thermo Finnigan）
固定相：Phenomenex Gemini（登録商標） 5μm C18 110Å
移動相：H2O/TFA 0.1％：アセトニトリル/0.1%TFA
得られたHPLCクロマトグラムを図6に示す。
実施例２から得られた異性体混合物として、またはＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のエナンチオマーペアＣとＲ、Ｓ、またはラセミ体イソセリノールとのコミュニケーションによって得られた化合物としてのガドピクレノールのＨＰＬＣキャラクタリゼーションは、Thermo Finnigan LCQ DECA XPPlusシステムを用いて行った。HPLC測定の実験設定を以下に要約する。
分析条件
HPLCシステム クォータナリポンプ、デガッサ－、オートサンプラー、PDA検出器を
備えたHPLC（LCQ Deca XP－Plus－Thermo Finnigan）
固定相：Phenomenex Gemini（登録商標） 5μm C18 110Å
移動相：H2O/TFA 0.1％：アセトニトリル/0.1%TFA
【表3】
【0143】
手順３：化合物Ｃのエナンチオマーを分離するためのキラルＨＰＬＣ法
実施例３の記載のとおり調製したエナンチオマーペアＣ（化合物ＶＩ）のＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーを分離するために、特異的キラルＨＰＬＣ法を設定した。エナンチオマーの分離とキャラクタリゼーションは、Agilent 1200システムまたはWaters Alliance 2695システムを用いて実施した。HPLC測定の実験設定を以下に要約する。
分析条件
HPLCシステム クォータナリポンプ、デガッサ－、オートサンプラー、PDA検出器を
備えたHPLC
固定相：SUPELCO Astec CHIROBIOTIC 5 μm 4.6x250mm
移動相：H2O/HCOOH 0.025% : アセトニトリル
溶出: アイソクラチック2% アセトニトリル（30分間）
流速 1 mL/分
カラム温度 40℃
検出 210－270 nm.
得られたHPLCクロマトグラムを図5a）に示す。純粋なRRRエナンチオマー（実施例5の化合物XII、Tr．7.5分）、および純粋なSSSエナンチオマー（実施例6の化合物XVII、Tr．8.0分）のクロマトグラムとの比較を、それぞれ図5b）と5c）に示す。
実施例３の記載のとおり調製したエナンチオマーペアＣ（化合物ＶＩ）のＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマーを分離するために、特異的キラルＨＰＬＣ法を設定した。エナンチオマーの分離とキャラクタリゼーションは、Agilent 1200システムまたはWaters Alliance 2695システムを用いて実施した。HPLC測定の実験設定を以下に要約する。
分析条件
HPLCシステム クォータナリポンプ、デガッサ－、オートサンプラー、PDA検出器を
備えたHPLC
固定相：SUPELCO Astec CHIROBIOTIC 5 μm 4.6x250mm
移動相：H2O/HCOOH 0.025% : アセトニトリル
溶出: アイソクラチック2% アセトニトリル（30分間）
流速 1 mL/分
カラム温度 40℃
検出 210－270 nm.
得られたHPLCクロマトグラムを図5a）に示す。純粋なRRRエナンチオマー（実施例5の化合物XII、Tr．7.5分）、および純粋なSSSエナンチオマー（実施例6の化合物XVII、Tr．8.0分）のクロマトグラムとの比較を、それぞれ図5b）と5c）に示す。
【0144】
実施例１：Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の合成（異性体混合物）
立体異性体の無差別混合物としてのＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）は、以下の合成スキーム１に従って、上記の従来技術で報告された手順を使用することによって調製した。
立体異性体の無差別混合物としてのＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）は、以下の合成スキーム１に従って、上記の従来技術で報告された手順を使用することによって調製した。
【化27】
【0145】
ａ）化合物ＩＩの調製
ラセミ体のグルタミン酸（33.0 g、0.224 mol）と臭化ナトリウム（79.7 g、0.782 mol）を2MのHBr（225 mL）に懸濁した。懸濁液を－5℃に冷却し、内部温度を0℃未満に維持しながらNaNO2（28.0 g、0.403 mol）を2.5時間かけてゆっくりと少しずつ加えた。黄色の混合物を－5℃の温度でさらに20分間撹拌したのち、濃硫酸（29mL）を混合物に滴下した。得られた暗褐色の混合物を室温に温め、ジエチルエーテル（4x150mL）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、褐色の油（21.2 g）に濃縮し、さらに精製することなく次のステップで使用した。
この油をエタノール（240mL）に溶解し、得られた溶液を氷で冷却し、塩化チオニル（14.5mL、0.199mol）をゆっくりと加えた。わずかに黄色の溶液を室温で2日間撹拌した。次に、溶媒を真空で留去し、粗製の油をジクロロメタン（200mL）に溶解し、5％NaHCO3（4x50 mL）水溶液、水（1x50 mL）およびブライン（1x50 mL）で洗浄した。有機相を濃縮し、シリカ上で石油エーテル－酢酸エチル3：1で溶出して精製し、19.5gの純粋な生成物を得た。（収率33％）。
ラセミ体のグルタミン酸（33.0 g、0.224 mol）と臭化ナトリウム（79.7 g、0.782 mol）を2MのHBr（225 mL）に懸濁した。懸濁液を－5℃に冷却し、内部温度を0℃未満に維持しながらNaNO2（28.0 g、0.403 mol）を2.5時間かけてゆっくりと少しずつ加えた。黄色の混合物を－5℃の温度でさらに20分間撹拌したのち、濃硫酸（29mL）を混合物に滴下した。得られた暗褐色の混合物を室温に温め、ジエチルエーテル（4x150mL）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、褐色の油（21.2 g）に濃縮し、さらに精製することなく次のステップで使用した。
この油をエタノール（240mL）に溶解し、得られた溶液を氷で冷却し、塩化チオニル（14.5mL、0.199mol）をゆっくりと加えた。わずかに黄色の溶液を室温で2日間撹拌した。次に、溶媒を真空で留去し、粗製の油をジクロロメタン（200mL）に溶解し、5％NaHCO3（4x50 mL）水溶液、水（1x50 mL）およびブライン（1x50 mL）で洗浄した。有機相を濃縮し、シリカ上で石油エーテル－酢酸エチル3：1で溶出して精製し、19.5gの純粋な生成物を得た。（収率33％）。
【0146】
ｂ）化合物ＩＶの調製
アセトニトリル（40mL）中の化合物II（17.2g、0.0645mol）の溶液を、アセトニトリル（150mL）中の3,6,9,15－テトラアザビシクロ[9.3.1]ペンタデカ－1（15）,11,13－トリエン（ピクレン）化合物（III）（3.80g、0.018mol）およびK2CO3（11.2g、0.0808mol）の懸濁液に加えた。黄色の懸濁液を65℃で24時間加熱した後、塩を濾別し、有機溶液を濃縮した。オレンジ色の油をジクロロメタンに溶解し、生成物を1MのHCl（4x50mL）で抽出した。水相を合わせ、氷中で冷却し、30％NaOH水溶液でpH7～8にした。次に、生成物をジクロロメタン（4x50 mL）で抽出し、濃縮して、褐色の油（10.1 g、収率73％）を得た。この化合物をさらに精製することなく次のステップで使用した。
アセトニトリル（40mL）中の化合物II（17.2g、0.0645mol）の溶液を、アセトニトリル（150mL）中の3,6,9,15－テトラアザビシクロ[9.3.1]ペンタデカ－1（15）,11,13－トリエン（ピクレン）化合物（III）（3.80g、0.018mol）およびK2CO3（11.2g、0.0808mol）の懸濁液に加えた。黄色の懸濁液を65℃で24時間加熱した後、塩を濾別し、有機溶液を濃縮した。オレンジ色の油をジクロロメタンに溶解し、生成物を1MのHCl（4x50mL）で抽出した。水相を合わせ、氷中で冷却し、30％NaOH水溶液でpH7～8にした。次に、生成物をジクロロメタン（4x50 mL）で抽出し、濃縮して、褐色の油（10.1 g、収率73％）を得た。この化合物をさらに精製することなく次のステップで使用した。
【0147】
ｃ）化合物Ｖの調製
化合物IV（9.99 g、0.013 mol）をエタノール（40 mL）および5MのNaOH（40 mL）に溶解した。茶色の溶液を80℃で23時間加熱した。エタノールを濃縮し、溶液を氷中で冷却し、濃塩酸でpH2にした。リガンドを樹脂Amberlite XAD 1600で精製(水－アセトニトリル混合物で溶出)し、凍結乾燥後に白色固体として5.7 gを得た（収率73％）。生成物は、HPLCでいくつかのピークによって特徴づけた。
化合物IV（9.99 g、0.013 mol）をエタノール（40 mL）および5MのNaOH（40 mL）に溶解した。茶色の溶液を80℃で23時間加熱した。エタノールを濃縮し、溶液を氷中で冷却し、濃塩酸でpH2にした。リガンドを樹脂Amberlite XAD 1600で精製(水－アセトニトリル混合物で溶出)し、凍結乾燥後に白色固体として5.7 gを得た（収率73％）。生成物は、HPLCでいくつかのピークによって特徴づけた。
【0148】
ｄ）化合物ＶＩの調製
化合物Ｖ（５．２５ｇ、０．００８８ｍｏｌ）を脱イオン水（１００ｍＬ）に溶解し、溶液を２ＭのＮａＯＨ（２０ｍＬ）でｐＨ７にした。GdCl3溶液（0.0087 mol）を室温でゆっくりと加え、２ＭのNaOHでpHを7に調整し、キシレノールオレンジとの錯体形成を確認した。錯体形成が完了したら、塩と不純物を除去するために、溶液を濃縮し、樹脂Amberlite XAD1600上、水－アセトニトリル勾配で溶出して精製した。凍結乾燥後、純粋な化合物が白色固体として得られた（６．７９ｇ、収率９４％）。生成物はHPLCで特徴づけた。いくつかのピークを特徴付けられる得られたHPLCクロマトグラムを、図1に示す。
化合物Ｖ（５．２５ｇ、０．００８８ｍｏｌ）を脱イオン水（１００ｍＬ）に溶解し、溶液を２ＭのＮａＯＨ（２０ｍＬ）でｐＨ７にした。GdCl3溶液（0.0087 mol）を室温でゆっくりと加え、２ＭのNaOHでpHを7に調整し、キシレノールオレンジとの錯体形成を確認した。錯体形成が完了したら、塩と不純物を除去するために、溶液を濃縮し、樹脂Amberlite XAD1600上、水－アセトニトリル勾配で溶出して精製した。凍結乾燥後、純粋な化合物が白色固体として得られた（６．７９ｇ、収率９４％）。生成物はHPLCで特徴づけた。いくつかのピークを特徴付けられる得られたHPLCクロマトグラムを、図1に示す。
【0149】
L－グルタミン酸から得られた（S）－メチルα－ブロモグルタレートを使用することでも、図1と実質的に重ね合わせ可能なHPLCクロマトグラムを有する異性体混合物からなる化合物VIと完全に同等の化合物が得られる。
【0150】
実施例２：ガドピクレノール（異性体混合物）の合成
立体異性体の無差別混合物としてのガドピクレノールは、ＥＰ１１９３１６７３Ｂ１に開示されるように、以下の合成スキーム２に従って、実施例１から得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物をラセミ体イソセリノールとカップリングすることにより調製した。
立体異性体の無差別混合物としてのガドピクレノールは、ＥＰ１１９３１６７３Ｂ１に開示されるように、以下の合成スキーム２に従って、実施例１から得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物をラセミ体イソセリノールとカップリングすることにより調製した。
【化28】
【0151】
化合物ＶＩＩの調製
実施例１から得られた化合物ＶＩ（０．９０ｇ、０．００１１ｍｏｌ）を、濃HClでｐＨ６に調整した水中のラセミ体イソセリノール（０．４０ｇ、０．００４４ｍｏｌ）の溶液に加えた。次に、Ｎ－エチル－Ｎ’－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ・ＨＣｌ）（１．０ｇ、０．００５５ｍｏｌ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）（０．１２ｇ、０．０0088ｍｏｌ）を加え、得られた溶液を室温にてｐＨ６で24時間撹拌した。次いで、生成物を水／アセトニトリル勾配で溶出する、シリカＣ１８での分取ＨＰＬＣで精製した。純粋な化合物を含む画分を濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（0.83 g、収率78％）を得た。生成物はHPLCで特徴づけた。得られたHPLCクロマトグラムを図4aに示す。
実施例１から得られた化合物ＶＩ（０．９０ｇ、０．００１１ｍｏｌ）を、濃HClでｐＨ６に調整した水中のラセミ体イソセリノール（０．４０ｇ、０．００４４ｍｏｌ）の溶液に加えた。次に、Ｎ－エチル－Ｎ’－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ・ＨＣｌ）（１．０ｇ、０．００５５ｍｏｌ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）（０．１２ｇ、０．０0088ｍｏｌ）を加え、得られた溶液を室温にてｐＨ６で24時間撹拌した。次いで、生成物を水／アセトニトリル勾配で溶出する、シリカＣ１８での分取ＨＰＬＣで精製した。純粋な化合物を含む画分を濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（0.83 g、収率78％）を得た。生成物はHPLCで特徴づけた。得られたHPLCクロマトグラムを図4aに示す。
【0152】
実施例３：ピークＣに関連するエナンチオマーペアの単離
実施例１（ステップｄ）に記載したとおりに得られた化合物ＶＩ（１．０ｇ、０．００１３ｍｏｌ）を水（４ｍＬ）に溶解し、溶液を濃塩酸でｐＨ２～３に酸性化した。得られた溶液を、あらかじめ充填されたシリカC18（Biotage（登録商標）SNAPULTRAC18 120 g、HP－sphereC18 25μm）のカラムにロードし、脱イオン水（4 CV）次いでアセトニトリルのゆっくりとした勾配で溶出する自動フラッシュクロマトグラフィーシステムで精製した。ピークＣに関連するエナンチオマーペアの豊富化された画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（２００ｍｇ）を得た。
得られた豊富化されたエナンチオマーペアCのHPLCクロマトグラムを図2に示す。
対応するMSスペクトル（Gd（H4L）+：752.14 m/z）を図3に示す。
実施例１（ステップｄ）に記載したとおりに得られた化合物ＶＩ（１．０ｇ、０．００１３ｍｏｌ）を水（４ｍＬ）に溶解し、溶液を濃塩酸でｐＨ２～３に酸性化した。得られた溶液を、あらかじめ充填されたシリカC18（Biotage（登録商標）SNAPULTRAC18 120 g、HP－sphereC18 25μm）のカラムにロードし、脱イオン水（4 CV）次いでアセトニトリルのゆっくりとした勾配で溶出する自動フラッシュクロマトグラフィーシステムで精製した。ピークＣに関連するエナンチオマーペアの豊富化された画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（２００ｍｇ）を得た。
得られた豊富化されたエナンチオマーペアCのHPLCクロマトグラムを図2に示す。
対応するMSスペクトル（Gd（H4L）+：752.14 m/z）を図3に示す。
【0153】
実施例４：エナンチオマーペアＣとイソセリノールとのカップリング
a）エナンチオマーペアCとR－イソセリノールのカップリング
例えば実施例３のように回収した豊富化されたエナンチオマーペアC（３４ｍｇ、力価９０％、０．０４０ｍｍｏｌ）を脱イオン水（５ｍＬ）に溶解し、Ｒ－イソセリノール（１６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、ＨＣｌ １ＭでｐＨを６に調整した。次に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（３９ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温でｐＨ６にて４８時間撹拌した。溶液を濃縮し、事前に充填されたシリカC18カラム（Biotage（登録商標）SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphereC18 25μm）にロードし、自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを使用して水/アセトニトリルグラジエントで溶出した。純粋な生成物を含む画分、またはHPLCで面積が90％を超える主要ピークを示す画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（21 mg、収率54％）を得た。
得られた生成物のHPLCクロマトグラムを図6bに示す。
a）エナンチオマーペアCとR－イソセリノールのカップリング
例えば実施例３のように回収した豊富化されたエナンチオマーペアC（３４ｍｇ、力価９０％、０．０４０ｍｍｏｌ）を脱イオン水（５ｍＬ）に溶解し、Ｒ－イソセリノール（１６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、ＨＣｌ １ＭでｐＨを６に調整した。次に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（３９ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温でｐＨ６にて４８時間撹拌した。溶液を濃縮し、事前に充填されたシリカC18カラム（Biotage（登録商標）SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphereC18 25μm）にロードし、自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを使用して水/アセトニトリルグラジエントで溶出した。純粋な生成物を含む画分、またはHPLCで面積が90％を超える主要ピークを示す画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（21 mg、収率54％）を得た。
得られた生成物のHPLCクロマトグラムを図6bに示す。
【0154】
ｂ）エナンチオマーペアＣとＳ－イソセリノールのカップリング
例えば実施例３に記載のとおりに回収した豊富化されたエナンチオマーペアC（５５ｍｇ、力価９０％、０．０６６ｍｍｏｌ）を脱イオン水（５ｍＬ）に溶解し、Ｓ－イソセリノール（３４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を1MのＨＣｌで６に調整して加えた。次に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（６４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（４．５ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温でｐＨ６にて４８時間撹拌した。溶液を濃縮し、事前に充填されたシリカC18カラム（Biotage（登録商標）SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphere C18 25μm）にロードし、自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを使用して水/アセトニトリルグラジエントで溶出した。純粋な生成物を含む画分、またはHPLCで面積が90％を超える主要ピークを示す画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（52 mg、収率81％）を得た。
得られた生成物のHPLCクロマトグラムを図6cに示す。
例えば実施例３に記載のとおりに回収した豊富化されたエナンチオマーペアC（５５ｍｇ、力価９０％、０．０６６ｍｍｏｌ）を脱イオン水（５ｍＬ）に溶解し、Ｓ－イソセリノール（３４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を1MのＨＣｌで６に調整して加えた。次に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（６４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（４．５ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温でｐＨ６にて４８時間撹拌した。溶液を濃縮し、事前に充填されたシリカC18カラム（Biotage（登録商標）SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphere C18 25μm）にロードし、自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを使用して水/アセトニトリルグラジエントで溶出した。純粋な生成物を含む画分、またはHPLCで面積が90％を超える主要ピークを示す画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（52 mg、収率81％）を得た。
得られた生成物のHPLCクロマトグラムを図6cに示す。
【0155】
ｃ）エナンチオマーペアＣとラセミ体イソセリノールのカップリング
例えば実施例3に記載の通りに回収した豊富化されたエナンチオマーペアC（５４ｍｇ、力価９０％、０．０６５ｍｍｏｌ）を脱イオン水（５ｍＬ）に溶解し、ラセミ体イソセリノール（２７ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を1MのＨＣｌでｐＨ６に調整して加えた。次に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（６２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（４．３ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温でｐＨ６にて２４時間撹拌した。溶液を濃縮し、事前に充填されたシリカC18カラム（Biotage（登録商標）SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphere C18 25μm）にロードし、自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを使用して水/アセトニトリルグラジエントで溶出した。純粋な生成物を含む画分、またはHPLCで面積が90％を超える主要ピークを示す画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（60 mg、収率95％）を得た。
得られた生成物のHPLCクロマトグラムを図6dに示す。
例えば実施例3に記載の通りに回収した豊富化されたエナンチオマーペアC（５４ｍｇ、力価９０％、０．０６５ｍｍｏｌ）を脱イオン水（５ｍＬ）に溶解し、ラセミ体イソセリノール（２７ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を1MのＨＣｌでｐＨ６に調整して加えた。次に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（６２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ（４．３ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温でｐＨ６にて２４時間撹拌した。溶液を濃縮し、事前に充填されたシリカC18カラム（Biotage（登録商標）SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphere C18 25μm）にロードし、自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを使用して水/アセトニトリルグラジエントで溶出した。純粋な生成物を含む画分、またはHPLCで面積が90％を超える主要ピークを示す画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥して、白色の固体（60 mg、収率95％）を得た。
得られた生成物のHPLCクロマトグラムを図6dに示す。
【0156】
実施例５：ＲＲＲ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）（化合物ＸＩＩ）の立体選択的合成
RRR豊富化Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）酸は、以下のステップを含んでなる合成スキーム3に従って調製した。
RRR豊富化Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）酸は、以下のステップを含んでなる合成スキーム3に従って調製した。
【化29】
【0157】
ａ）化合物ＶＩＩＩの調製
調製は、Tetrahedron 2009、65、4671－4680で報告されているように実行した。
具体的には、無水メタノール（20mL）中の（S）－（+）－5－オキソテトラヒドロフラン－2－カルボン酸（2.48g、0.019mol）（市販）の溶液に37％HCl水溶液（50μL）を加えた。溶液をN2雰囲気下で24時間還流した。氷中で冷却した後、ＮａＨCO3を加え、懸濁液を濾過し、濃縮し、ヘキサン／酢酸エチル１：１を用いてシリカゲル上で精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせて濃縮し、無色の油（2.97 g、収率89％）を得た。
調製は、Tetrahedron 2009、65、4671－4680で報告されているように実行した。
具体的には、無水メタノール（20mL）中の（S）－（+）－5－オキソテトラヒドロフラン－2－カルボン酸（2.48g、0.019mol）（市販）の溶液に37％HCl水溶液（50μL）を加えた。溶液をN2雰囲気下で24時間還流した。氷中で冷却した後、ＮａＨCO3を加え、懸濁液を濾過し、濃縮し、ヘキサン／酢酸エチル１：１を用いてシリカゲル上で精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせて濃縮し、無色の油（2.97 g、収率89％）を得た。
【0158】
ｂ）化合物ＩＸおよびＸの調製
ステップａ）で得られた化合物ＶＩＩＩ（４４５ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（０．８７ｍＬ、６．３１ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を－40℃に冷却した後、（トリフルオロメタンスルホン酸）トリフルオロメタンスルホン酸無水物（0.49mL、2.91mmol）をゆっくりと加えた。暗色の溶液を－40℃で1時間撹拌した後、無水ジクロロメタン（3mL）およびトリエチルアミン（1mL、7.56mmol）中の化合物III（104mg、0.506mmol）の溶液を加え、溶液をゆっくりと室温に戻し、室温で一晩撹拌した。次に、有機溶液を２ＭのＨＣｌ（４×１０ｍＬ）で洗浄し、水相を再びジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせて真空中で濃縮し、400mgの褐色の油を得て、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。
ステップａ）で得られた化合物ＶＩＩＩ（４４５ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（０．８７ｍＬ、６．３１ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を－40℃に冷却した後、（トリフルオロメタンスルホン酸）トリフルオロメタンスルホン酸無水物（0.49mL、2.91mmol）をゆっくりと加えた。暗色の溶液を－40℃で1時間撹拌した後、無水ジクロロメタン（3mL）およびトリエチルアミン（1mL、7.56mmol）中の化合物III（104mg、0.506mmol）の溶液を加え、溶液をゆっくりと室温に戻し、室温で一晩撹拌した。次に、有機溶液を２ＭのＨＣｌ（４×１０ｍＬ）で洗浄し、水相を再びジクロロメタン（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせて真空中で濃縮し、400mgの褐色の油を得て、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。
【0159】
ｃ）化合物ＸＩの調製
化合物Ｘ（４００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）をメタノール（２．５ｍＬ）および5MのＮａＯＨ（２．５ｍＬ）に溶解した。完全な加水分解を確実にするために、茶色の溶液を80℃で22時間加熱した。メタノールを濃縮し、溶液を濃HClでpH 1にし、シリカC18プレパックカラム（Biotage（登録商標） SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphere C18 25μm）を備えた自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを用い脱イオン水/アセトニトリルの勾配で溶出して精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥した（64 mg、収率18％）。HPLCは主要ピークを示した。
化合物Ｘ（４００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）をメタノール（２．５ｍＬ）および5MのＮａＯＨ（２．５ｍＬ）に溶解した。完全な加水分解を確実にするために、茶色の溶液を80℃で22時間加熱した。メタノールを濃縮し、溶液を濃HClでpH 1にし、シリカC18プレパックカラム（Biotage（登録商標） SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphere C18 25μm）を備えた自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを用い脱イオン水/アセトニトリルの勾配で溶出して精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥した（64 mg、収率18％）。HPLCは主要ピークを示した。
【0160】
ｄ）化合物ＸＩＩ
化合物XI（32 mg、0.054 mmol）を脱イオン水（4 mL）に溶解し、1MのNaOHでpHを7に調整した。GdCl3・6H2O（20 mg、0.054 mmol）を加え、0.1MのNaOHでpHを7に調整した。透明な溶液を室温で一晩撹拌し、錯体形成の終了をキシレノールオレンジおよびHPLCによってチェックした。粗生成物のＨＰＬＣは、主要ピークとして所望のＲＲＲ異性体を示した：面積％で約８０％。混合物を濃HClでpH2にし、シリカC18プレパックカラム（Biotage（登録商標） SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphere C18 25μm）を備えた自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを用い、脱イオン水/アセトニトリルグラジエントで溶出して精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥した（36 mg、収率90％）。
例えば、実施例２の手順を使用することにより、回収した化合物とイソセリノールとの反応により、対応するＲＲＲアミド誘導体を得ることができる。
化合物XI（32 mg、0.054 mmol）を脱イオン水（4 mL）に溶解し、1MのNaOHでpHを7に調整した。GdCl3・6H2O（20 mg、0.054 mmol）を加え、0.1MのNaOHでpHを7に調整した。透明な溶液を室温で一晩撹拌し、錯体形成の終了をキシレノールオレンジおよびHPLCによってチェックした。粗生成物のＨＰＬＣは、主要ピークとして所望のＲＲＲ異性体を示した：面積％で約８０％。混合物を濃HClでpH2にし、シリカC18プレパックカラム（Biotage（登録商標） SNAP ULTRA C18 12 g、HP－sphere C18 25μm）を備えた自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを用い、脱イオン水/アセトニトリルグラジエントで溶出して精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥した（36 mg、収率90％）。
例えば、実施例２の手順を使用することにより、回収した化合物とイソセリノールとの反応により、対応するＲＲＲアミド誘導体を得ることができる。
【0161】
実施例６：ＳＳＳ Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）（化合物ＸＶＩＩ）の立体選択的合成
SSS豊富化Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）酸は、以下のステップを含んでなる合成スキーム4に従って同様に調製した。
SSS豊富化Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）酸は、以下のステップを含んでなる合成スキーム4に従って同様に調製した。
【化30】
【0162】
ａ）化合物ＸＩＩＩの調製
無水メタノール（45mL）中の（R）－（－）－5－オキソテトラヒドロフラン－2－カルボン酸（5.0g、0.038mol）（市販）の溶液に37％HCl水溶液（100μL）を加えた。溶液をN2雰囲気下で24時間還流した。氷中で冷却した後、ＮａＨCO3を加え、懸濁液を濾過し、濃縮し、シリカゲル上でヘキサン／酢酸エチル１：１で精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせて濃縮し、無色の油（6.7g、収率99％）を得た。
無水メタノール（45mL）中の（R）－（－）－5－オキソテトラヒドロフラン－2－カルボン酸（5.0g、0.038mol）（市販）の溶液に37％HCl水溶液（100μL）を加えた。溶液をN2雰囲気下で24時間還流した。氷中で冷却した後、ＮａＨCO3を加え、懸濁液を濾過し、濃縮し、シリカゲル上でヘキサン／酢酸エチル１：１で精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせて濃縮し、無色の油（6.7g、収率99％）を得た。
【0163】
ｂ）化合物ＸＩＶおよびＸＶの調製
化合物ＸＩＩＩ（４７０ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、トリメチルアミン（０．９３ｍＬ、６．６７ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を－40℃に冷却した後、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（0.50 mL、3.07 mmol）をゆっくりと滴下した。暗色の溶液を－４０℃で１時間撹拌した後、化合物ＩＩＩ（１４０ｍｇ、０．６７９ｍｍｏｌ）およびトリメチルアミン（０．９３ｍＬ、６．６７ｍｍｏｌ）を加え、溶液をゆっくりと一晩室温にした。次に、有機溶液を水（３×５ｍＬ）および２ＭのＨＣｌ（４×５ｍＬ）で洗浄した。水相を再びジクロロメタン（3x10mL）で抽出した。有機相を合わせて真空中で濃縮し、350mgの褐色の油を得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。
化合物ＸＩＩＩ（４７０ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、トリメチルアミン（０．９３ｍＬ、６．６７ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を－40℃に冷却した後、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（0.50 mL、3.07 mmol）をゆっくりと滴下した。暗色の溶液を－４０℃で１時間撹拌した後、化合物ＩＩＩ（１４０ｍｇ、０．６７９ｍｍｏｌ）およびトリメチルアミン（０．９３ｍＬ、６．６７ｍｍｏｌ）を加え、溶液をゆっくりと一晩室温にした。次に、有機溶液を水（３×５ｍＬ）および２ＭのＨＣｌ（４×５ｍＬ）で洗浄した。水相を再びジクロロメタン（3x10mL）で抽出した。有機相を合わせて真空中で濃縮し、350mgの褐色の油を得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。
【0164】
ｃ）化合物ＸＶＩの調製
化合物XV（350 mg、0.514 mmol）をメタノール（4.5 mL）および5MのNaOH（4.5 mL）に溶解した。得られた褐色の溶液を80℃で16時間加熱して、完全に加水分解した。メタノールを濃縮し、溶液を濃HClでpH 2にし、シリカC18プレパックカラム（Biotage（登録商標） SNAP ULTRA C18 12 g、HP－SPHERE C18 25μm）を備えた自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを用い、水/アセトニトリルの勾配で溶出して精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥した（52 mg、収率17％）。HPLCは主要ピークを示した。
化合物XV（350 mg、0.514 mmol）をメタノール（4.5 mL）および5MのNaOH（4.5 mL）に溶解した。得られた褐色の溶液を80℃で16時間加熱して、完全に加水分解した。メタノールを濃縮し、溶液を濃HClでpH 2にし、シリカC18プレパックカラム（Biotage（登録商標） SNAP ULTRA C18 12 g、HP－SPHERE C18 25μm）を備えた自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを用い、水/アセトニトリルの勾配で溶出して精製した。純粋な生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥した（52 mg、収率17％）。HPLCは主要ピークを示した。
【0165】
ｄ）化合物ＸＶＩＩの調製
化合物XVI（34 mg、0.057 mmol）を脱イオン水（5 mL）に溶解し、1MのHClでpHを7に調整した。GdCl3・6H2O（20 mg、0.0538 mmol）を加え、0.1 MのNaOHでpHを7に調整した。溶液を室温で一晩撹拌し、錯体形成の終了をキシレノールオレンジおよびHPLCによってチェックした。粗生成物のＨＰＬＣは、主要ピークとして所望のＳＳＳ異性体を示した：面積％で約８５％。溶液を濃HClでpH2.5にし、シリカC18プレパックカラム（Biotage（登録商標） SNAP ULTRA C18 12 g、HP－SPHERE C18 25μm）を備えた自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを用い、水/アセトニトリル勾配で溶出して精製した。純粋な生成物SSSを含む画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥した（39 mg、収率87％）。
化合物XVI（34 mg、0.057 mmol）を脱イオン水（5 mL）に溶解し、1MのHClでpHを7に調整した。GdCl3・6H2O（20 mg、0.0538 mmol）を加え、0.1 MのNaOHでpHを7に調整した。溶液を室温で一晩撹拌し、錯体形成の終了をキシレノールオレンジおよびHPLCによってチェックした。粗生成物のＨＰＬＣは、主要ピークとして所望のＳＳＳ異性体を示した：面積％で約８５％。溶液を濃HClでpH2.5にし、シリカC18プレパックカラム（Biotage（登録商標） SNAP ULTRA C18 12 g、HP－SPHERE C18 25μm）を備えた自動フラッシュクロマトグラフィーシステムを用い、水/アセトニトリル勾配で溶出して精製した。純粋な生成物SSSを含む画分を合わせ、濃縮し、凍結乾燥した（39 mg、収率87％）。
【0166】
実施例７：１．０Ｍ ＨＣｌ溶液（２５℃）中のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）（異性体混合物）の解離反応の速度論的試験
Gd（III）錯体の速度論的不活性度は、0.1～1.0M HClで測定された解離速度、または溶液中でZn（II）とCu（II）またはEu（III）イオンで生じる金属交換反応の速度のいずれかによって特徴づけられる。ただし、マクロ環配位子で形成したランタニド（III）錯体の解離は非常に遅く、一般にZn2+やCu2+などの内因的金属イオンの関与なしにプロトン支援の経路を介して進行する。
錯体Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）の速度論的不活性度を、1.0M HCl溶液中で起こる解離反応の速度によって特徴づけた。錯体（実施例１の異性体混合物）（０．３ｍｇ）を２．０ｍＬの１．０Ｍ ＨＣｌ溶液に溶解し、２５℃に保たれた溶液の発生を経時的にＨＰＬＣによって追跡した。HPLC測定は、分析手順1を使用して、Agilent 1260 InfinityIIシステムで実行した。
Gd（III）錯体の速度論的不活性度は、0.1～1.0M HClで測定された解離速度、または溶液中でZn（II）とCu（II）またはEu（III）イオンで生じる金属交換反応の速度のいずれかによって特徴づけられる。ただし、マクロ環配位子で形成したランタニド（III）錯体の解離は非常に遅く、一般にZn2+やCu2+などの内因的金属イオンの関与なしにプロトン支援の経路を介して進行する。
錯体Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）の速度論的不活性度を、1.0M HCl溶液中で起こる解離反応の速度によって特徴づけた。錯体（実施例１の異性体混合物）（０．３ｍｇ）を２．０ｍＬの１．０Ｍ ＨＣｌ溶液に溶解し、２５℃に保たれた溶液の発生を経時的にＨＰＬＣによって追跡した。HPLC測定は、分析手順1を使用して、Agilent 1260 InfinityIIシステムで実行した。
【0167】
大過剰のH+（[HCl］= 1.0 M）の存在は、疑似一次速度論的条件を保証する。
式中、Lはプロトン化されたPCTA－トリグルタル酸（遊離リガンド）であり、yはリガンドに結合したプロトンの数である。
【数2】
【0168】
Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）のHPLCクロマトグラムは、MSスペクトルで同じm/z比（Gd（H4L）+：752.14 m/z）を有する4つのシグナル（A、B、C、およびD）の存在で特徴付けられる。これらのピークのそれぞれは、Ｔａｂｌｅ 1に示した、分子の3つのグルタル酸アーム上の3つの立体中心によって生じた４対のエナンチオマーの1つに合理的に起因する。1.0M HClの存在下でのこの錯体のHPLCクロマトグラムは 時間経過とともに変化し、特に、異なるピークでは同じようにではないがピークA、B、CおよびDの面積は減少する一方、非錯体化ジアステレオ異性体に対応する新しいシグナルが形成され、時間経過とともに増大する。ピークの積分面積の減少の違いは、異なるピークに関連するエナンチオマーペアの異なる解離速度によって解釈できる。
【0169】
[H+]が過剰に存在する場合、Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）のエナンチオマーペアの解離反応は疑似一次製造法として扱うことができ、反応速度は次の式２で表すことができる（ここで、kA、kB、kC、およびkDは、面積と時間のデータペアをフィッティングすることによって計算される疑似1次速度定数であり，[A]t、[B]t、[C]t、および[D]tは、時間tにおけるA、B、C、およびD化合物の総濃度である）。
A、B、C、およびDのシグナルの面積値の減少を評価し、時間経過に対してプロットした。時間の関数としてのA、B、C、およびDシグナルの面積値を図7に示す。
【数3】
【0170】
時間tでの面積値は、次の式で表すことができる。
（式中、At、A0、およびAeは、それぞれ、時間t、反応開始時、反応終了時での面積値である）。Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）錯体の異なるエナンチオマーペアの解離速度を特徴づけるkX疑似一次速度定数（kX = kA、kB、kCおよびkD）は、図7の面積－時間データペアを上記の式3でフィッティングすることによって計算した。このようにkX速度定数と半減期（t1/2 = ln2/kX）が得られ、混合物のパーセント組成を考慮することによりGd（PCTA－トリス－グルタル酸）の異性体混合物の平均半減期値が得られる。して計算される。得られた値を次のＴａｂｌｅ 2に示し、いくつかの参照造影剤（Gd－DOTAまたはDOTAREMＴＭ）について文献で参照されている対応する値と比較する。
Ｔａｂｌｅ ２の結果は、ピークCに関連するエナンチオマーのペアの酸触媒による解離を特徴づけるkX速度定数が、ピークA、B、およびDに関連するGd（PCTA－トリス－グルタル酸）錯体の立体異性体の速度定数よりも大幅に小さいことを明確に示している。Ｔａｂｌｅ 2に示されている半減期値（t1/2）の比較は、ピークC（Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）に関連するエナンチオマーペアのt1/2値が、ピークA、B、およびDに関連付けられた値のt1/2値よりもそれぞれ約28、68、および8倍高くなっていることを示している。さらに、Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）のエナンチオマーペアCのt1/2値は、Gd（DOTA）のt1/2値よりもいくらか高くなっている（1.0 M HCl中でt1/2 = 23時間）。
【数4】
【表4】
【0171】
実施例８：ガドピクレノール（実施例２の異性体混合物）、およびエナンチオマーペアＣをそれぞれＲ、Ｓ、およびラセミ体イソセリノールとカップリングすることによって得られる錯体化合物の１．０Ｍ ＨＣｌ溶液（２５℃）中での解離反応の速度論的試験
すべての錯体の速度論的不活性度を、1.0 MHCl溶液中で起こる解離反応の速度によって特徴づけた。各バッチについて、錯体（0.4 mg）を2.0mLの1.0M HCl溶液に溶解し、25℃での解離反応をHPLCで経時的に追跡した。分析手順2に従って、Thermo Finnigan LCQ DECA XPPlusシステムを使用してHPLC測定を実行した。
すべての錯体の速度論的不活性度を、1.0 MHCl溶液中で起こる解離反応の速度によって特徴づけた。各バッチについて、錯体（0.4 mg）を2.0mLの1.0M HCl溶液に溶解し、25℃での解離反応をHPLCで経時的に追跡した。分析手順2に従って、Thermo Finnigan LCQ DECA XPPlusシステムを使用してHPLC測定を実行した。
【0172】
実施例２から異性体混合物として回収されたガドピクレノールのＨＰＬＣクロマトグラムは、同じＭＳおよびＵＶ－Ｖｉｓスペクトルを有する４つの主要ピーク（便宜上、Ａ’、Ｂ’、Ｃ’およびＤ’として示される）の存在によって特徴づけられる。ただし、エナンチオマーペアCをイソセリノールとカップリングして得られた錯体化合物のHPLCクロマトグラムには、R、Sイソセリノール、ラセミ体イソセリノールのいずれであっても、シグナルは1つしかなかった（図6）。観察されたように、イソセリノールペンダントのキラリティーは結合させたジアステレオ異性体の保持時間に影響しない、ガドピクレノール（異性体混合物）のHPLCクロマトグラムに4つのシグナルが存在することは、グルタル酸残基の立体中心で形成された4つのエナンチオマーペア：1）RRR－SSS（シグナルD’）、2）RSR - SRS、3）RRS - SSR、4）RSS -SRRの存在によって解釈できる。
【0173】
上記のすべての錯体の速度論的不活性度に関する情報を得るため、疑似一次条件の発生を確実にするために、大過剰のH+（[HCl］= 1.0 M）の存在下でそれらの解離反応を調べた。反応の進行を経時的にＨＰＬＣによってチェックし、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）異性体について上記の実施例７に記載したように、時間の関数として錯体のピークの面積値をプロットした。
【0174】
予想通り、Ａ’、B’、C’およびD’の積分値は時間経過とともに減少するが、フリーのリガンドのピークは増大する。HPLCクロマトグラムの面積値はガドピクレノール（異性体混合物）の濃度に正比例するため、ガドピクレノール（異性体混合物）の解離反応の半減期は、面積値の合計の半分から推定できる。ガドピクレノール（異性体混合物）の半減期は、25℃およびpH 0（1.0 M HCl）で5.2時間であることが分かった。エナンチオマーペアCをR、Sおよびラセミ－イソセリノールとカップリングすることによって得られた錯体の半減期も、HPLCクロマトグラムの面積値の半分から計算した。エナンチオマーペアCをR、Sおよびラセミ－イソセリノールとカップリングすることによって得られた錯体の半減期は、25℃およびpH 0（1.0 M HCl）で41、43、および44時間であることが分かった。エナンチオマーペアCをR、Sおよびラセミ－イソセリノールとカップリングすることによって得られる錯体の解離反応の速度を特徴づける疑似一次速度定数（kx）は、面積－時間速度論データを上記のように式3
（式中、At、A0、およびAeは、それぞれ、時間t、反応開始時、反応終了時での面積値であり、kXはエナンチオマーペアCをR、Sおよびラセミ－イソセリノールとカップリングすることによって得られる錯体の酸触媒による解離反応を特徴づける疑似一次速度定数(半減期: t1/2, t1/2=ln2/kX)である）を用いてフィッティングすることにより計算できる。速度論データのフィッティングによって得られたkxおよびt1/2値を、以下のＴａｂｌｅ に要約し、いくつかの参照造影剤について文献に引用されている対応する値と比較した。
【数5】
【0175】
エナンチオマーペアCをR、Sおよびラセミ－イソセリノールとカップリングすることによって得られた錯体の面積値から推定し、面積－時間速度論データのフィッティングによって計算したt1/2値の比較は非常によく一致している。Ｔａｂｌｅ 3に示されているt1/2値は、エナンチオマーペアC異性体をR、S、およびラセミ体イソセリノールとカップリングすることによって得られたD’異性体の解離半減期が、ガドピクレノール（異性体混合物）で測定されたものとほぼ同じであり、8倍長いことを明確に示している、このことから、RRR－SSS Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）のより高い動的不活性度が、イソセリノールとのカップリング後でも実質的に維持されていることが確認される。さらに、エナンチオマーペアCをR、S、およびラセミ体イソセリノールとカップリングすることによって得られた錯体のt1/2値は、イソセリノールペンダントのキラリティーが最終の錯体の動的不活性度に影響を与えないことも示している。
【表5】
【0176】
実施例例９：緩和特性
本発明のＰＣＴＡベースの錯体化合物の緩和測定特性は、異なる磁場強度、すなわち、０．４７および１．４１Ｔで、３７℃にて、異なる媒体（水およびヒト血漿）中で測定し、同じ条件で、類似の配位ケージを有するGd－錯体について測定された緩和値と比較した。
本発明のＰＣＴＡベースの錯体化合物の緩和測定特性は、異なる磁場強度、すなわち、０．４７および１．４１Ｔで、３７℃にて、異なる媒体（水およびヒト血漿）中で測定し、同じ条件で、類似の配位ケージを有するGd－錯体について測定された緩和値と比較した。
【0177】
材料
装置
縦方向の水プロトン緩和率（R1 = 1/T1）は、20MHzのプロトンラーモア周波数で動作するMinispec MQ－20分光計（Bruker Biospin、ドイツ）を使用して0.47Tで測定した。1.41 TでのMR実験は、60MHzのプロトンラーモア周波数で動作するMinispec MQ－60分光計（Bruker Biospin、ドイツ）を使用して実行した。
方法
サンプル前処理
すべての試験品は、供給されたまま使用し、必要な量の常磁性キレート錯体を秤量し、選択された培地（水またはヒト血漿）で希釈することにより、5または10 mMの開始溶液を得た。
緩和能測定
各媒体について5つの異なる濃度サンプル（0.1、0.25、0.5、0.75、および1 mM）を、5または10mMの開始溶液をさらに希釈することによって調製した。
緩和度の測定
緩和度の測定は、分光計のサンプルホルダーに接続された恒温槽によって一定に保たれた37℃のプリセット温度サンプルで0.47Tおよび1.41Tにて実行した。5つのサンプル溶液は、外部恒温槽で37℃に予熱された後、温度が安定するように内部槽内に10分間放置した。縦緩和時間T1は、標準的な反転回復シーケンスを使用して測定した。ここで、反転時間（TI）は、15ステップで10msからT1の少なくとも5倍まで変化させた。統計分析（T1測定のための単指数フィッティング、縦緩和能の評価のための線形フィッティング）はMathematica（登録商標）（Wolfram、USA）によって実行した。推定されたパラメータの誤差は、フィッティング手順によって評価した。
装置
縦方向の水プロトン緩和率（R1 = 1/T1）は、20MHzのプロトンラーモア周波数で動作するMinispec MQ－20分光計（Bruker Biospin、ドイツ）を使用して0.47Tで測定した。1.41 TでのMR実験は、60MHzのプロトンラーモア周波数で動作するMinispec MQ－60分光計（Bruker Biospin、ドイツ）を使用して実行した。
方法
サンプル前処理
すべての試験品は、供給されたまま使用し、必要な量の常磁性キレート錯体を秤量し、選択された培地（水またはヒト血漿）で希釈することにより、5または10 mMの開始溶液を得た。
緩和能測定
各媒体について5つの異なる濃度サンプル（0.1、0.25、0.5、0.75、および1 mM）を、5または10mMの開始溶液をさらに希釈することによって調製した。
緩和度の測定
緩和度の測定は、分光計のサンプルホルダーに接続された恒温槽によって一定に保たれた37℃のプリセット温度サンプルで0.47Tおよび1.41Tにて実行した。5つのサンプル溶液は、外部恒温槽で37℃に予熱された後、温度が安定するように内部槽内に10分間放置した。縦緩和時間T1は、標準的な反転回復シーケンスを使用して測定した。ここで、反転時間（TI）は、15ステップで10msからT1の少なくとも5倍まで変化させた。統計分析（T1測定のための単指数フィッティング、縦緩和能の評価のための線形フィッティング）はMathematica（登録商標）（Wolfram、USA）によって実行した。推定されたパラメータの誤差は、フィッティング手順によって評価した。
【0178】
結果
以下のTable 4は、Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）（異性体混合物）についてEP 1931673 B1で報告されたの緩和値r1値と、ＲＲＲ／ＳＳＳ Gd（ PCTA－トリス－グルタル酸）の精製された画分について同じ条件下で得られた対応する緩和値r1値を示す。
以下のTable 4は、Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）（異性体混合物）についてEP 1931673 B1で報告されたの緩和値r1値と、ＲＲＲ／ＳＳＳ Gd（ PCTA－トリス－グルタル酸）の精製された画分について同じ条件下で得られた対応する緩和値r1値を示す。
【表6】
【0179】
以下のTable 5は、ＲＲＲ／ＳＳＳ Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）とイソセリノールのコミュニケーションによって得られたアミド誘導体について、H2OとHSA中の両方で37℃にて測定された緩和度値r1を、コンジュゲーションに使用されたセリノールの立体化学と共に、ガドピクレノール（異性体混合物）について従来技術で引用された対応する値と比較した。
【表7】
【0180】
一方で得られた結果は、対応する異性体混合物に対するＲＲＲ／ＳＳＳ Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）について測定されたより高い緩和能が、それぞれのコンジュゲート誘導体について実質的に維持されていることを示している。他方、これらの結果は、イソセリノール部分の立体化学が、主にグルタル酸アームの立体化学に関連する最終化合物の主要な特性に影響を及ぼさないという事実と一致している。
【0181】
実施例１０：Ｘ線回折
エナンチオマーペアC
結晶の調製
Ｘ線回折試験に適した式{(C(NH2)3)2[Gd(H3L)(C2O4)]}・5H2Oで示される単結晶（式中、Gd（H3L）はトリスプロトン化ＲＲＲ／ＳＳＳ Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）である）を、実施例３から回収されたＲＲＲ／ＳＳＳに富む化合物Ｃの水溶液から水のゆっくりとした蒸発によって成長させた。結晶化を促進するために、Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）錯体の2つの内部球水分子をシュウ酸塩アニオンに置き換え、関連するグアニジニウム塩を水から結晶化した。出発溶液は、49.6 mgの（C（NH2）3）2（C2O4）（2.5.0×10－4mol）を実施例3から回収した豊富化された化合物Cの水溶液（1.0 mL；0.0483 M GdH3L水溶液5.0×10－5mol）に溶解して調製した。固体のH2C2O4を段階的に添加することにより、pHを3.3に調整した。
エナンチオマーペアC
結晶の調製
Ｘ線回折試験に適した式{(C(NH2)3)2[Gd(H3L)(C2O4)]}・5H2Oで示される単結晶（式中、Gd（H3L）はトリスプロトン化ＲＲＲ／ＳＳＳ Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）である）を、実施例３から回収されたＲＲＲ／ＳＳＳに富む化合物Ｃの水溶液から水のゆっくりとした蒸発によって成長させた。結晶化を促進するために、Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）錯体の2つの内部球水分子をシュウ酸塩アニオンに置き換え、関連するグアニジニウム塩を水から結晶化した。出発溶液は、49.6 mgの（C（NH2）3）2（C2O4）（2.5.0×10－4mol）を実施例3から回収した豊富化された化合物Cの水溶液（1.0 mL；0.0483 M GdH3L水溶液5.0×10－5mol）に溶解して調製した。固体のH2C2O4を段階的に添加することにより、pHを3.3に調整した。
【0182】
結晶を単離し、Elettra Synchrotron, Trieste（Italy)のX線回折ビームライン（XRD1）で、例えばLausi A. et al., The European Physical Journal Plus, 2015, 130, 1－8に開示されている手順により、少なくとも5つの結晶からXRDデータを収集した。具体的に、回収した結晶をNHVオイル(Jena Bioscience, Jena, Germany)に浸し、液体窒素で凍結し、カプトンループ(MiTeGen, Ithaca, USA)を使用してゴニオメーターヘッドに取り付けた。異なる結晶形状が利用可能であるとき、それらすべてを試験した。完全なデータセットは、回転結晶法により100 K（Oxford Cryostream 700－Oxford Cryosystems Ltd.、Oxford、United Kingdomから供給される窒素ストリーム）で回収した。Pilatus 2Mハイブリッドピクセルエリア検出器（DECトリス Ltd.、Baden－Daettwil、Switzerland）で、0.700Åの単色波長を使用してデータを取得した。
【0183】
結果
構造は、SHELXT直接法に実装された双対空間アルゴリズムによって解明した（Sheldrick G.M.（2015). “SHELXT －Integrated space－group and crystal－structure determination”, Acta Crystallographica Section A, 71, 3－8）。フーリエ解析とリファインメントは、F2に基づくフルマトリックス最小二乗法によって実行した。異方性熱運動のリファインメントをすべての原子に使用した。水素原子はヒドロキシル基について、等方性Ufactors = 1.2・UeqまたはUfactors = 1.5・Ueqで計算された位置に含まれていた（Ueqは、結合した非水素原子の等価等方性熱係数である）。溶媒水分子の水素原子は、フーリエ差マップの電子密度ピークで明確に位置を特定できなかったため、リファインされたモデルには含まれていない。
本質的な結晶およびリファインメントデータを、以下の表に示す。
{（C（NH2）3）2 [Gd（H3L）（C2O4）]}・5H2O錯体と形成された結晶の単位格子のX線構造をそれぞれ図9と図10に示す。
図10は、各単位格子に2RRR + 2SSS錯体が含まれていることを示している。これは、各結晶に異性体SSSとRRRが等モル（50－50％）の比率で含まれていることを意味する。
構造は、SHELXT直接法に実装された双対空間アルゴリズムによって解明した（Sheldrick G.M.（2015). “SHELXT －Integrated space－group and crystal－structure determination”, Acta Crystallographica Section A, 71, 3－8）。フーリエ解析とリファインメントは、F2に基づくフルマトリックス最小二乗法によって実行した。異方性熱運動のリファインメントをすべての原子に使用した。水素原子はヒドロキシル基について、等方性Ufactors = 1.2・UeqまたはUfactors = 1.5・Ueqで計算された位置に含まれていた（Ueqは、結合した非水素原子の等価等方性熱係数である）。溶媒水分子の水素原子は、フーリエ差マップの電子密度ピークで明確に位置を特定できなかったため、リファインされたモデルには含まれていない。
本質的な結晶およびリファインメントデータを、以下の表に示す。
【表8】
{（C（NH2）3）2 [Gd（H3L）（C2O4）]}・5H2O錯体と形成された結晶の単位格子のX線構造をそれぞれ図9と図10に示す。
図10は、各単位格子に2RRR + 2SSS錯体が含まれていることを示している。これは、各結晶に異性体SSSとRRRが等モル（50－50％）の比率で含まれていることを意味する。
【0184】
ラセミ体イソセリノールとのアミド誘導体
X線回折試験に適した式[GdC35H54N7O15][CH6N3]2[CO3]・18H2O（GdL）（GdLはラセミ体イソセリノールのコンジュゲーションしたＲＲＲ／ＳＳＳ Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）である）の単結晶を、実施例４ｃ）から回収されたラセミ体イソセリノールとのＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の水溶液中で成長させた。結晶化を促進するために、最終錯体の2つの内部球水分子を炭酸アニオンに置き換え、関連するグアニジニウム塩を4℃でエタノールとジエチルエーテルをゆっくりと拡散させることにより水から結晶化させた。具体的には、1.0モル当量（97mgのGdL錯体と9mgの炭酸グアニジン{C（NH2）3}2CO3）を1 mLのH2O、pH = 10.5に溶解し、EtOHとEt2Oの混合物をゆっくりと拡散させた。
X線回折試験に適した式[GdC35H54N7O15][CH6N3]2[CO3]・18H2O（GdL）（GdLはラセミ体イソセリノールのコンジュゲーションしたＲＲＲ／ＳＳＳ Gd（PCTA－トリス－グルタル酸）である）の単結晶を、実施例４ｃ）から回収されたラセミ体イソセリノールとのＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の水溶液中で成長させた。結晶化を促進するために、最終錯体の2つの内部球水分子を炭酸アニオンに置き換え、関連するグアニジニウム塩を4℃でエタノールとジエチルエーテルをゆっくりと拡散させることにより水から結晶化させた。具体的には、1.0モル当量（97mgのGdL錯体と9mgの炭酸グアニジン{C（NH2）3}2CO3）を1 mLのH2O、pH = 10.5に溶解し、EtOHとEt2Oの混合物をゆっくりと拡散させた。
【0185】
15個の単結晶を単離し、Elettra Synchrotron, Trieste（Italy)のX線回折ビームライン（XRD1）で、例えばLausi A. et al., The European Physical Journal Plus, 2015, 130, 1－8に開示された手順で、7個の結晶のXRDデータ収集を実行した。具体的には、回収した結晶をNHVオイル(Jena Bioscience, Jena, Germany)に浸し、液体窒素で凍結し、(MiTeGen, Ithaca, USA)を使用してゴニオメーターヘッドに取り付けた。異なる結晶形状が利用可能であるとき、それらすべてを試験した。完全なデータセットは、回転結晶法により100 K（Oxford Cryostream 700－Oxford Cryosystems Ltd.、Oxford、United Kingdomから供給される窒素ストリーム）で回収した。Pilatus 2Mハイブリッドピクセルエリア検出器（DECトリス Ltd.、Baden－Daettwil、Switzerland）で、0.700Åの単色波長を使用してデータを取得した。
【0186】
構造は直接法で解明した。フーリエ解析とリファインメントは、F2に基づくフルマトリックス最小二乗法によって実行した。異方性熱運動のリファインメントはすべての原子に使用した。水素原子は、メチル基とヒドロキシル基の等方性Ufactors = 1.2・UeqまたはUfactors = 1.5・Ueqで計算された位置に含まれていた（Ueqは結合した非水素原子の等価等方性熱係数である）。溶媒水分子の水素原子は、フーリエ差マップの電子密度ピークで明確に位置を特定できなかったため、リファインされたモデルには含まれていない。
Table 7.GdLデータセットの結晶学的データと立体中心の立体配置
結晶系三方晶
空間群R－3
単位格子a = 53.395（8）Å
b = 53.395（8）Å
c = 12.959（3）Å
α = 90°
β = 90°
γ = 120°
体積（Å3）31997（11）
最終Rインデックス[I>2σ（I）］a R1 = 0.0554、wR２ = 0.1496
ASUの立体中心の立体配置
C7 R C28A R-54（1）％占有率 C28B S-45（1）％占有率
C14 R C31A R－62（1）％占有率 C31B S－38（1）％占有率
C21 R C34A R－50（1）％占有率C34B S－50（1）％占有率
a R1 =Σ|| Fo | - | Fc || /Σ| Fo |、wR２ = {Σ[w（Fo2 - Fc2）2］/Σ[w（Fo2）2]}１／２
用いた手順と詳細については、たとえば、Lausi A., Polentarutti M., Onesti S., Plaisier J. R., Busetto E., Bais G., Barba L., Cassetta A., Campi G., Lamba D., Pifferi A., Mande S. C., Sarma D. D., Sharma S. M., Paolucci G., The European Physical Journal Plus, 2015, 130, 1－8を参照。
D’－CO3 2－錯体のX線構造と回収された結晶の統計分析を図11に示す。
Table 7.GdLデータセットの結晶学的データと立体中心の立体配置
結晶系三方晶
空間群R－3
単位格子a = 53.395（8）Å
b = 53.395（8）Å
c = 12.959（3）Å
α = 90°
β = 90°
γ = 120°
体積（Å3）31997（11）
最終Rインデックス[I>2σ（I）］a R1 = 0.0554、wR２ = 0.1496
ASUの立体中心の立体配置
C7 R C28A R-54（1）％占有率 C28B S-45（1）％占有率
C14 R C31A R－62（1）％占有率 C31B S－38（1）％占有率
C21 R C34A R－50（1）％占有率C34B S－50（1）％占有率
a R1 =Σ|| Fo | - | Fc || /Σ| Fo |、wR２ = {Σ[w（Fo2 - Fc2）2］/Σ[w（Fo2）2]}１／２
用いた手順と詳細については、たとえば、Lausi A., Polentarutti M., Onesti S., Plaisier J. R., Busetto E., Bais G., Barba L., Cassetta A., Campi G., Lamba D., Pifferi A., Mande S. C., Sarma D. D., Sharma S. M., Paolucci G., The European Physical Journal Plus, 2015, 130, 1－8を参照。
D’－CO3 2－錯体のX線構造と回収された結晶の統計分析を図11に示す。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【手続補正書】
【提出日】2024-10-17
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（ＩＩ Ｂ）：
で示される、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物の製造方法であって、該異性体混合物は、
（１）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩａ）
で示されるＲＲＲエナンチオマー残基であり、
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、
（２）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩ ｂ）
で示されるＳＳＳエナンチオマー残基であり、
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、または
（３）前記（１）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体と前記（２）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の混合物を少なくとも５０％含み、
該製造方法が、
ａ’）［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＲＲＲエナンチオマー）、［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ－［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＳＳＳエナンチオマー）、またはそれらの混合物を、少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を得ること；および
ｂ’）ステップａ’）で得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を、それぞれのアミド誘導体の対応する異性体混合物に変換すること
を含んでなる、製造方法。
【化1】
（１）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩａ）
【化2】
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、
（２）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩ ｂ）
【化3】
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、または
（３）前記（１）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体と前記（２）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の混合物を少なくとも５０％含み、
該製造方法が、
ａ’）［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＲＲＲエナンチオマー）、［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス（２－カルボキシエチル）－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ－［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（ＳＳＳエナンチオマー）、またはそれらの混合物を、少なくとも５０％含むＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を得ること；および
ｂ’）ステップａ’）で得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物を、それぞれのアミド誘導体の対応する異性体混合物に変換すること
を含んでなる、製造方法。
【請求項2】
Ｒ１がＨであり、Ｒ２が１つまたは２つのヒドロキシル基で置換されたＣ１－Ｃ３アルキルである、請求項１に記載の製造方法。
【請求項3】
Ｒ２がセリノール残基またはイソセリノールである、請求項１または２に記載の製造方法。
【請求項4】
Ｒ２がＲイソセリノール、Ｓイソセリノールまたはラセミ体のイソセリノールから選択される、請求項１～３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項5】
ステップａ’）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）の異性体混合物が、異性体混合物として得られたＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）を出発物質として、クロマトグラフィーによって得られる、請求項１～４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項6】
ステップａ’）から回収された生成物をイソセリノールと反応させる、請求項１～５のいずれかに記載の製造方法。
【請求項7】
式（ＩＩ Ｂ）：
で示される、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物の、造影剤としての使用であって、
該異性体混合物が、
（１）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩａ）
で示されるＲＲＲエナンチオマー残基であり、
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、
（２）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩ ｂ）
で示されるＳＳＳエナンチオマー残基であり、
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、または
（３）前記（１）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体と前記（２）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の混合物を少なくとも５０％含む、
使用。
【化4】
該異性体混合物が、
（１）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩａ）
【化5】
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、
（２）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩ ｂ）
【化6】
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、または
（３）前記（１）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体と前記（２）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の混合物を少なくとも５０％含む、
使用。
【請求項8】
造影剤が磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）分析のためのものである、請求項７に記載の使用。
【請求項9】
式（ＩＩ Ｂ）：
で示される、Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の異性体混合物の、ＭＲＩ技術を使用することによるヒトまたは動物の体の器官、組織または領域のインビボでの画像診断に使用するための医薬製剤の調製のための使用であって、
該異性体混合物が、
（１）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩａ）
で示されるＲＲＲエナンチオマー残基であり、
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、
（２）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩ ｂ）
で示されるＳＳＳエナンチオマー残基であり、
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、または
（３）前記（１）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体と前記（２）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の混合物を少なくとも５０％含む、
使用。
【化7】
該異性体混合物が、
（１）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩａ）
【化8】
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、
（２）式（ＩＩ Ｂ）において、
Ｆ’が式（ＩＩＩ ｂ）
【化9】
３つの－ＮＲ１Ｒ２基はそれぞれ、Ｆ’のカルボキシル部分の開結合（●）に結合しており；
Ｒ１はＨまたは１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は１～４個のヒドロキシル基で置換されているか置換されていないＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｇｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体を少なくとも５０％含む、または
（３）前記（１）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体と前記（２）のＧｄ（ＰＣＴＡ－トリス－グルタル酸）のアミド誘導体の混合物を少なくとも５０％含む、
使用。
【請求項10】
Ｒ１がＨであり、Ｒ２が１つまたは２つのヒドロキシル基で置換されたＣ１－Ｃ３アルキルである、請求項９に記載の使用。
【請求項11】
Ｒ１がＨであり、Ｒ２が－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＯＨである、請求項９に記載の使用。
【請求項12】
異性体混合物が、以下からなる群から選択されるアミド誘導体：
［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＳＳＳ－ＳＳＳ）；
［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＳＳＳ－ＲＲＲ）；
［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＲＲＲ－ＲＲＲ）；
［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＲＲＲ－ＳＳＳ）；
またはそれらの混合物
を少なくとも５０％含んでなる、請求項９に記載の使用。
［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＳＳＳ－ＳＳＳ）；
［（αＳ，α’Ｓ，α’’Ｓ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＳＳＳ－ＲＲＲ）；
［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｒ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＲＲＲ－ＲＲＲ）；
［（αＲ，α’Ｒ，α’’Ｒ）－α，α’，α’’－トリス［３－［（２（Ｓ）、３－ジヒドロキシプロピル）アミノ］－オキソプロピル］－３，６，９，１５－テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ－１（１５），１１，１３－トリエン－３，６，９－トリアセタト（３－）－κＮ３，κＮ６，κＮ９，κＮ１５，κＯ３，κＯ６，κＯ９］－ガドリニウム（異性体ＲＲＲ－ＳＳＳ）；
またはそれらの混合物
を少なくとも５０％含んでなる、請求項９に記載の使用。
【請求項13】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’がＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基を少なくとも６０％含む、請求項９に記載の使用。
【請求項14】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’がＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基を少なくとも７０％含む、請求項９～１３のいずれかに記載の使用。
【請求項15】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’がＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基を少なくとも８０％含む、請求項９～１３のいずれかに記載の使用。
【請求項16】
式（ＩＩ Ｂ）において、Ｆ’がＲＲＲおよびＳＳＳエナンチオマー残基を少なくとも９０％含む、請求項９～１３のいずれかに記載の使用。