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特開2024-178482化合物、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤及び医薬組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024178482
(43)【公開日】2024-12-25
(54)【発明の名称】化合物、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤及び医薬組成物
(51)【国際特許分類】
C07D 409/14 20060101AFI20241218BHJP
C07D 413/14 20060101ALI20241218BHJP
A61K 31/422 20060101ALI20241218BHJP
A61K 31/4184 20060101ALI20241218BHJP
A61P 9/12 20060101ALI20241218BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20241218BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20241218BHJP
A61P 27/06 20060101ALI20241218BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20241218BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20241218BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20241218BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241218BHJP
A61K 9/70 20060101ALI20241218BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20241218BHJP
【ＦＩ】
C07D409/14
C07D413/14 CSP
A61K31/422
A61K31/4184
A61P9/12
A61P9/00
A61P13/12
A61P27/06
A61P25/28
A61P1/16
A61P29/00
A61P35/00
A61K9/70 401
A61K9/08
【審査請求】未請求
【請求項の数】11
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2021185368
(22)【出願日】2021-11-15
(71)【出願人】
【識別番号】519305627
【氏名又は名称】株式会社アークメディスン
(74)【代理人】
【識別番号】100079108
【弁理士】
【氏名又は名称】稲葉 良幸
(74)【代理人】
【識別番号】100109346
【弁理士】
【氏名又は名称】大貫 敏史
(74)【代理人】
【識別番号】100117189
【弁理士】
【氏名又は名称】江口 昭彦
(74)【代理人】
【識別番号】100134120
【弁理士】
【氏名又は名称】内藤 和彦
(74)【代理人】
【識別番号】100152331
【弁理士】
【氏名又は名称】山田 拓
(74)【代理人】
【識別番号】100168893
【弁理士】
【氏名又は名称】岩崎 正路
(72)【発明者】
【氏名】田中 圭悟
【テーマコード（参考）】
4C063
4C076
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C063AA03
4C063BB07
4C063CC92
4C063DD26
4C063EE01
4C076AA11
4C076AA72
4C076BB11
4C076BB24
4C076CC01
4C076CC04
4C076CC10
4C076CC11
4C076CC17
4C076CC27
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086CA04
4C086GA04
4C086GA07
4C086GA09
4C086MA01
4C086MA04
4C086MA58
4C086MA63
4C086MA66
4C086NA14
4C086ZA02
4C086ZA16
4C086ZA33
4C086ZA36
4C086ZA42
4C086ZA75
4C086ZA81
4C086ZB11
4C086ZB26
4C086ZC42
(57)【要約】 （修正有）
【課題】ＡＴ１受容体拮抗作用を有する化合物等の提供。
【解決手段】下記式（１）：
［式中、Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、ｎは、０～２の整数であり、Ａｒはイソキサゾール誘導体又はピラジン誘導体］
で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【選択図】なし
【解決手段】下記式（１）：
［式中、Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、ｎは、０～２の整数であり、Ａｒはイソキサゾール誘導体又はピラジン誘導体］
で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記式（１）：
［式中、
Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、
Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、
ｎは、０～２の整数であり、
Ａｒは、下記式（Ａｒ１）又は（Ａｒ２）：
（式中、
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル又はハロゲンであり、
Ｒ5は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アルコキシ又はハロアルコキシであり、
ｍは、０～３の整数である）
である］
で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【化1】
Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、
Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、
ｎは、０～２の整数であり、
Ａｒは、下記式（Ａｒ１）又は（Ａｒ２）：
【化2】
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル又はハロゲンであり、
Ｒ5は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アルコキシ又はハロアルコキシであり、
ｍは、０～３の整数である）
である］
で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【請求項2】
Ｒ1が、アルコキシアルキルである、請求項１に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【請求項3】
ｎが、０である、請求項１又は２に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【請求項4】
Ａｒが、式（Ａｒ１）である、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【請求項5】
Ｒ3及びＲ4が、それぞれ独立して、アルキル又はハロゲンである、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【請求項6】
下記化合物：
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【化3-1】
【化3-2】
【請求項7】
請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤。
【請求項8】
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、請求項７に記載のアンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤。
【請求項9】
請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、医薬組成物。
【請求項10】
高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんを予防又は治療するための、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項11】
注射剤、貼付剤、又は点眼剤である、請求項９又は１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、化合物、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤及び医薬組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
アンジオテンシンＩＩに対する受容体としては、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体（ＡＴ１受容体）及びアンジオテンシンＩＩタイプ２受容体（ＡＴ２受容体）があり、ＡＴ１受容体が関連（介在）する疾患として様々なものが報告されている。
【0003】
ＡＴ１受容体関連疾患としては、例えば、高血圧症（特許文献１）、心疾患（例えば、心肥大、急性心不全、うっ血性心不全を含む慢性心不全、拡張不全、心筋症、狭心症、心筋炎、心房細動、不整脈、頻脈、及び心筋梗塞）（非特許文献１及び２）、心筋梗塞後の心不全進行（非特許文献３）、腎疾患（例えば、腎炎、糸球体腎炎、糸球体硬化症、腎不全、血栓性微小血管症、透析の合併症、及び放射線照射による腎症を含む臓器障害）（非特許文献４及び５）、インターベンション（例えば、経皮的冠動脈形成術、ステント留置、冠動脈内視鏡、血管内超音波、及び冠注血栓溶解療法）後の血管肥厚、閉塞及び臓器障害（非特許文献６）、眼疾患（例えば、緑内障、及び高眼圧症）（非特許文献７及び８）、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病）（非特許文献９）、中枢神経障害（例えば、脳出血及び脳梗塞等の障害、並びにその後遺症及び合併症）（非特許文献１０）、認知症（例えば、脳血管性認知症）（非特許文献１１）、肝臓疾患（例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患）（非特許文献１２及び１３）、好酸球性食道炎（非特許文献１４）、骨疾患（例えば、変形性膝関節炎）（非特許文献１５）、皮膚疾患（例えば、表皮水疱症）（非特許文献１６）、全身疾患（例えば、マルファン症候群）（非特許文献１７）、並びにがん（非特許文献１８）が報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】国際公開第２００５／８０３８４号公報
【非特許文献】
【0005】
【非特許文献1】Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｒｉｓｋ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ２００８，４，６７．
【非特許文献2】Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｐａｌｌｉａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０２１，１０，８６８４．
【非特許文献3】Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ ２００２，３６０，７５２．
【非特許文献4】Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ２００１，３４５，８６１．
【非特許文献5】Ｂｌｏｏｄ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ ２０１９，２８，３５８．
【非特許文献6】ＢＭＣ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ２０１７，１７，２７８．
【非特許文献7】Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｅｙｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２００５，８０，６２９．
【非特許文献8】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ２０００，３６，１６９．
【非特許文献9】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ２００７，１１７，３３９３．
【非特許文献10】Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ２０１２，１３，７７３９．
【非特許文献11】Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２００９，３２， ７３８．
【非特許文献12】Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ２０１８，９，２４１５５．
【非特許文献13】Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ ２０１６，４，ｅ１３０１６．
【非特許文献14】Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２０２０，１６，４２１．
【非特許文献15】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒｔｈｏｐａｅｄｉｃ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ ２０２１，２９，３０．
【非特許文献16】Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃ Ｔｈｅｒａｐｙ ２０２０，ｅ１４２７９．
【非特許文献17】Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｈｅａｒｔ Ｊｏｕｒｎａｌ ２０２０，４１，４１８１．
【非特許文献18】Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ２０１８，１５１，９６．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
本発明は、ＡＴ１受容体拮抗作用を有する化合物、又は前記化合物を含むＡＴ１受容体拮抗剤若しくは医薬組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0007】
本発明者等が鋭意検討した結果、所定の構造を有する化合物がＡＴ１受容体拮抗作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【0008】
本発明は以下の実施形態を含む。
［１］
下記式（１）：
［式中、
Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、
Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、
ｎは、０～２の整数であり、
Ａｒは、下記式（Ａｒ１）又は（Ａｒ２）：
（式中、
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル又はハロゲンであり、
Ｒ5は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アルコキシ又はハロアルコキシであり、
ｍは、０～３の整数である）
である］
で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［２］
Ｒ1が、アルコキシアルキルである、［１］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［３］
ｎが、０である、［１］又は［２］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［４］
Ａｒが、式（Ａｒ１）である、［１］～［３」のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［５］
Ｒ3及びＲ4が、それぞれ独立して、アルキル又はハロゲンである、［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［６］
下記化合物：
からなる群から選択される、［１］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［７］
［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤。
［８］
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［７］に記載のアンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤。
［９］
［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、医薬組成物。
［１０］
高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんを予防又は治療するための、［９］に記載の医薬組成物。
［１１］
注射剤、貼付剤又は点眼剤である、［９］又は［１０］に記載の医薬組成物。
［１］
下記式（１）：
【化1】
Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、
Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、
ｎは、０～２の整数であり、
Ａｒは、下記式（Ａｒ１）又は（Ａｒ２）：
【化2】
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル又はハロゲンであり、
Ｒ5は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アルコキシ又はハロアルコキシであり、
ｍは、０～３の整数である）
である］
で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［２］
Ｒ1が、アルコキシアルキルである、［１］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［３］
ｎが、０である、［１］又は［２］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［４］
Ａｒが、式（Ａｒ１）である、［１］～［３」のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［５］
Ｒ3及びＲ4が、それぞれ独立して、アルキル又はハロゲンである、［１］～［４］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［６］
下記化合物：
【化3-1】
【化3-2】
［７］
［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤。
［８］
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［７］に記載のアンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤。
［９］
［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、医薬組成物。
［１０］
高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんを予防又は治療するための、［９］に記載の医薬組成物。
［１１］
注射剤、貼付剤又は点眼剤である、［９］又は［１０］に記載の医薬組成物。
【0009】
また、本発明は以下の実施形態も含む。
［Ａ１］
アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を阻害する方法であって、その必要のある患者に有効量の［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を投与することを含む方法。
［Ａ２］
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［Ａ１］に記載の方法。
［Ａ３］
疾患を予防又は治療する方法であって、その必要のある患者に有効量の［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を投与することを含む方法。
［Ａ４］
前記疾患が、高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんである、［Ａ３］に記載の方法。
［Ａ１］
アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を阻害する方法であって、その必要のある患者に有効量の［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を投与することを含む方法。
［Ａ２］
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［Ａ１］に記載の方法。
［Ａ３］
疾患を予防又は治療する方法であって、その必要のある患者に有効量の［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩を投与することを含む方法。
［Ａ４］
前記疾患が、高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんである、［Ａ３］に記載の方法。
【0010】
［Ｂ１］
アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体の阻害に使用するための、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［Ｂ２］
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［Ｂ１］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［Ｂ３］
疾患の予防又は治療に使用するための、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［Ｂ４］
前記疾患が、高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんである、［Ｂ３］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体の阻害に使用するための、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［Ｂ２］
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［Ｂ１］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［Ｂ３］
疾患の予防又は治療に使用するための、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
［Ｂ４］
前記疾患が、高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんである、［Ｂ３］に記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩。
【0011】
［Ｃ１］
アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を阻害するための、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩の使用。
［Ｃ２］
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［Ｃ１］に記載の使用。
［Ｃ３］
疾患を予防又は治療するための、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩の使用。
［Ｃ４］
前記疾患が、高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんである、［Ｃ３］に記載の使用。
アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を阻害するための、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩の使用。
［Ｃ２］
エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［Ｃ１］に記載の使用。
［Ｃ３］
疾患を予防又は治療するための、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩の使用。
［Ｃ４］
前記疾患が、高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんである、［Ｃ３］に記載の使用。
【0012】
［Ｄ１］
アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤の製造における、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩の使用。
［Ｄ２］
前記アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤が、エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［Ｄ１］に記載の使用。
［Ｄ３］
疾患を予防又は治療するための医薬組成物の製造における、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩の使用。
［Ｄ４］
前記疾患が、高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんである、［Ｄ３］に記載の使用。
アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤の製造における、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩の使用。
［Ｄ２］
前記アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤が、エンドセリンＡ受容体を対照として、アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体を選択的に阻害する、［Ｄ１］に記載の使用。
［Ｄ３］
疾患を予防又は治療するための医薬組成物の製造における、［１］～［６］のいずれかに記載の化合物又はその医薬上許容可能な塩の使用。
［Ｄ４］
前記疾患が、高血圧症、心疾患、心筋梗塞後の心不全進行、腎疾患、インターベンション後の血管肥厚、インターベンション後の閉塞、インターベンション後の臓器障害、緑内障、高眼圧症、アルツハイマー病、中枢神経障害、認知症、肝臓疾患、好酸球性食道炎、変形性膝関節炎、表皮水疱症、マルファン症候群、又はがんである、［Ｄ３］に記載の使用。
【発明の効果】
【0013】
本発明によれば、ＡＴ１受容体拮抗作用を有する化合物、又は前記化合物を含むＡＴ１受容体拮抗剤若しくは医薬組成物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【0014】
以下、本発明の実施形態について具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではなく、その要旨を逸脱しない範囲で様々な変形が可能である。
【0015】
＜化合物＞
本発明の一実施形態は、下記式（１）：
［式中、
Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、
Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、
ｎは、０～２の整数であり、
Ａｒは、下記式（Ａｒ１）又は（Ａｒ２）：
（式中、
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル又はハロゲンであり、
Ｒ5は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アルコキシ又はハロアルコキシであり、
ｍは、０～３の整数である）
である］
で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩に関する。
本発明の一実施形態は、下記式（１）：
【化4】
Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、
Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、
ｎは、０～２の整数であり、
Ａｒは、下記式（Ａｒ１）又は（Ａｒ２）：
【化5】
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル又はハロゲンであり、
Ｒ5は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アルコキシ又はハロアルコキシであり、
ｍは、０～３の整数である）
である］
で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩に関する。
【0016】
式（１）との関係において、アルキル（アルコキシアルキル及びハロアルキルにおけるアルキルを含む。）は、直鎖状であってもよいし、分岐状であってもよい。
式（１）との関係において、アルコキシ（アルコキシアルキル及びハロアルコキシにおけるアルコキシを含む。）に含まれるアルキル部分は、直鎖状であってもよいし、分岐状であってもよい。
式（１）との関係において、アルコキシ（アルコキシアルキル及びハロアルコキシにおけるアルコキシを含む。）に含まれるアルキル部分は、直鎖状であってもよいし、分岐状であってもよい。
【0017】
式（１）において、Ｒ1は、水素、アルキル、アルコキシ又はアルコキシアルキルであり、好ましくはアルコキシアルキルである。
【0018】
Ｒ1のアルキルは、好ましくは炭素数１～６のアルキルであり、より好ましくは炭素数１～３のアルキルである。
Ｒ1のアルコキシは、好ましくは炭素数１～６のアルコキシであり、より好ましくは炭素数１～３のアルコキシであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルコキシである。
Ｒ1のアルコキシアルキルにおけるアルコキシは、好ましくは炭素数１～６のアルコキシであり、より好ましくは炭素数１～３のアルコキシであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルコキシである。
Ｒ1のアルコキシアルキルにおけるアルキルは、好ましくは炭素数１～６のアルキルであり、より好ましくは炭素数１～３のアルキルであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルキルであり、特に好ましくはメチルである。
Ｒ1のアルコキシは、好ましくは炭素数１～６のアルコキシであり、より好ましくは炭素数１～３のアルコキシであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルコキシである。
Ｒ1のアルコキシアルキルにおけるアルコキシは、好ましくは炭素数１～６のアルコキシであり、より好ましくは炭素数１～３のアルコキシであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルコキシである。
Ｒ1のアルコキシアルキルにおけるアルキルは、好ましくは炭素数１～６のアルキルであり、より好ましくは炭素数１～３のアルキルであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルキルであり、特に好ましくはメチルである。
【0019】
式（１）において、Ｒ2は、それぞれ独立して、アルキルであり、好ましくは炭素数１～６のアルキルであり、より好ましくは炭素数１～３のアルキルであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルキルであり、特に好ましくはメチルである。
【0020】
式（１）において、ｎは、０～２の整数であり、好ましくは０又は１であり、より好ましくは０である。
【0021】
式（１）において、Ａｒは、式（Ａｒ１）又は式（Ａｒ２）であり、好ましくは式（Ａｒ１）である
【0022】
式（１）において、Ｒ3は、アルキル、ハロアルキル又はハロゲンであり、好ましくはアルキル又はハロゲンである。
【0023】
Ｒ3のアルキル（ハロアルキルにおけるアルキルを含む。）は、好ましくは炭素数１～６のアルキルであり、より好ましくは炭素数１～３のアルキルであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルキルであり、特に好ましくはメチルである。
Ｒ3のハロゲン、及びハロアルキルにおけるハロは、好ましくはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素であり、より好ましくは塩素である。
Ｒ3のハロゲン、及びハロアルキルにおけるハロは、好ましくはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素であり、より好ましくは塩素である。
【0024】
式（１）において、Ｒ4は、アルキル、ハロアルキル又はハロゲンであり、好ましくはアルキル又はハロゲンであり、より好ましくはアルキルである。
【0025】
Ｒ4のアルキル（ハロアルキルにおけるアルキルを含む。）は、好ましくは炭素数１～６のアルキルであり、より好ましくは炭素数１～３のアルキルであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルキルであり、特に好ましくはメチルである。
Ｒ4のハロゲン、及びハロアルキルにおけるハロは、好ましくはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素であり、より好ましくは塩素である。
Ｒ4のハロゲン、及びハロアルキルにおけるハロは、好ましくはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素であり、より好ましくは塩素である。
【0026】
式（１）において、Ｒ5は、それぞれ独立して、アルキル、ハロアルキル、ハロゲン、アルコキシ又はハロアルコキシであり、好ましくはアルキル又はアルコキシである。
【0027】
Ｒ5のアルキル（ハロアルキルにおけるアルキルを含む。）は、好ましくは炭素数１～６のアルキルであり、より好ましくは炭素数１～３のアルキルであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルキルであり、特に好ましくはメチルである。
Ｒ5のハロゲン、並びにハロアルキル及びハロアルコキシにおけるハロは、好ましくはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素であり、より好ましくは塩素である。
Ｒ5のアルコキシ（ハロアルコキシにおけるアルコキシを含む。）は、好ましくは炭素数１～６のアルコキシであり、より好ましくは炭素数１～３のアルコキシであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルコキシであり、特に好ましくはメトキシである。
Ｒ5のハロゲン、並びにハロアルキル及びハロアルコキシにおけるハロは、好ましくはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素であり、より好ましくは塩素である。
Ｒ5のアルコキシ（ハロアルコキシにおけるアルコキシを含む。）は、好ましくは炭素数１～６のアルコキシであり、より好ましくは炭素数１～３のアルコキシであり、更に好ましくは炭素数１又は２のアルコキシであり、特に好ましくはメトキシである。
【0028】
式（１）において、ｍは、０～３の整数であり、好ましくは１又は２であり、より好ましくは２である。
【0029】
式（１）で表される化合物は、特に限定するものではないが、下記の化合物であることが好ましい。
【化6-1】
【化6-2】
【0030】
式（１）で表される化合物の医薬上許容可能な塩は、医薬として使用可能なものであれば特に限定されないが、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、臭化水素酸塩等の無機酸塩；フマル酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、パルミチン酸塩等の有機酸塩；ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アルミニウム塩、アンモニウム塩等の無機塩基塩；ジエチルアミン塩、ジエタノールアミン塩、メグルミン塩、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン塩等の有機塩基塩を挙げることができる。
【0031】
式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩は、水和物等の溶媒和物を形成していてもよい。本明細書において、溶媒和物は、式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩に包含されるものとする。
【0032】
式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩に立体異性体（例えば、エナンチオマー及びジアステレオマー）が存在する場合、個々の立体異性体及びこれらの混合物（例えば、ラセミ体）は、式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩に包含されるものとする。
【0033】
＜アンジオテンシンＩＩタイプ１受容体拮抗剤＞
本発明の一実施形態は、式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、ＡＴ１受容体拮抗剤に関する。本実施形態のＡＴ１受容体拮抗剤は、好ましくは、エンドセリンＡ受容体（ＥＴＡ受容体）を対照として、ＡＴ１受容体を選択的に阻害することができる。ＡＴ１受容体を選択的に阻害することによって、ＥＴＡ受容体の阻害による副作用（例えば催奇形性）のリスクを低減することができる。
本発明の一実施形態は、式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、ＡＴ１受容体拮抗剤に関する。本実施形態のＡＴ１受容体拮抗剤は、好ましくは、エンドセリンＡ受容体（ＥＴＡ受容体）を対照として、ＡＴ１受容体を選択的に阻害することができる。ＡＴ１受容体を選択的に阻害することによって、ＥＴＡ受容体の阻害による副作用（例えば催奇形性）のリスクを低減することができる。
【0034】
具体的には、ＥＴＡ受容体阻害濃度（ＩＣ50）／ＡＴ１受容体阻害濃度（ＩＣ50）が、１００以上であることが好ましく、２００以上であることがより好ましく、５００以上であることが更に好ましく、１，０００以上であることが特に好ましい。ＥＴＡ受容体阻害濃度（ＩＣ50）／ＡＴ１受容体阻害濃度（ＩＣ50）の上限は特に限定されないが、例えば、１０，０００、８，０００、６，０００、４，０００等としてもよい。ＥＴＡ受容体阻害濃度、及びＡＴ１受容体阻害濃度は、実施例に記載の方法により測定することができる。
【0035】
本実施形態のＡＴ１受容体拮抗剤のＡＴ１受容体阻害濃度（ＩＣ50）は、１．０ｎＭ以下であることが好ましく、０．５ｎＭ以下であることがより好ましく、０．２ｎＭ以下であることが更に好ましく、０．１ｎＭ以下であることが特に好ましい。ＡＴ１受容体阻害濃度（ＩＣ50）の下限は特に限定されないが、例えば、０．００２５ｎＭ、０．００５ｎＭ、０．０１ｎＭ、０．０２ｎＭ等としてもよい。
【0036】
本実施形態のＡＴ１受容体拮抗剤のＥＴＡ受容体阻害濃度（ＩＣ50）は、１０ｎＭ以上であることが好ましく、２０ｎＭ以上であることがより好ましく、５０ｎＭ以上であることが更に好ましく、１００ｎＭ以上であることが特に好ましい。ＥＴＡ受容体阻害濃度（ＩＣ50）の上限は特に限定されないが、例えば、１，０００ｎＭ、８００ｎＭ、６００ｎＭ、４００ｎＭ等としてもよい。
【0037】
本実施形態のＡＴ１受容体拮抗剤を使用することにより、ＡＴ１受容体が関連（介在）する疾患を治療及び／又は予防することができる。このような疾患としては、下記＜医薬組成物＞の欄に記載した疾患を挙げることができる。
【0038】
本実施形態のＡＴ１受容体拮抗剤及び後述の医薬組成物の投与対象は、好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはヒト、サル、ネコ、ブタ、ウマ、ウシ、マウス、ラット、モルモット、イヌ及びウサギであり、更に好ましくはヒトである。
【0039】
＜医薬組成物＞
本発明の一実施形態は、式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、医薬組成物に関する。
本発明の一実施形態は、式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩を含む、医薬組成物に関する。
【0040】
本実施形態の医薬組成物が予防対象又は治療対象とする疾患としては、例えば以下のものが挙げられる。
高血圧症；
心疾患（例えば、心肥大、急性心不全、うっ血性心不全を含む慢性心不全、拡張不全、心筋症、狭心症、心筋炎、心房細動、不整脈、頻脈、及び心筋梗塞）；
心筋梗塞後の心不全進行；
腎疾患（例えば、腎炎、糸球体腎炎、糸球体硬化症、腎不全、血栓性微小血管症、透析の合併症、及び放射線照射による腎症を含む臓器障害）；
インターベンション（例えば、経皮的冠動脈形成術、ステント留置、冠動脈内視鏡、血管内超音波、及び冠注血栓溶解療法）後の血管肥厚、閉塞及び臓器障害；
眼疾患（例えば、緑内障、及び高眼圧症）；
神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病）；
中枢神経障害（例えば、脳出血及び脳梗塞等の障害、並びにその後遺症及び合併症）；
認知症（例えば、脳血管性認知症）；
肝臓疾患（例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患）；
好酸球性食道炎；
骨疾患（例えば、変形性膝関節炎）；
皮膚疾患（例えば、表皮水疱症）；
全身疾患（例えば、マルファン症候群）；並びに
がん。
高血圧症；
心疾患（例えば、心肥大、急性心不全、うっ血性心不全を含む慢性心不全、拡張不全、心筋症、狭心症、心筋炎、心房細動、不整脈、頻脈、及び心筋梗塞）；
心筋梗塞後の心不全進行；
腎疾患（例えば、腎炎、糸球体腎炎、糸球体硬化症、腎不全、血栓性微小血管症、透析の合併症、及び放射線照射による腎症を含む臓器障害）；
インターベンション（例えば、経皮的冠動脈形成術、ステント留置、冠動脈内視鏡、血管内超音波、及び冠注血栓溶解療法）後の血管肥厚、閉塞及び臓器障害；
眼疾患（例えば、緑内障、及び高眼圧症）；
神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病）；
中枢神経障害（例えば、脳出血及び脳梗塞等の障害、並びにその後遺症及び合併症）；
認知症（例えば、脳血管性認知症）；
肝臓疾患（例えば、非アルコール性脂肪性肝疾患）；
好酸球性食道炎；
骨疾患（例えば、変形性膝関節炎）；
皮膚疾患（例えば、表皮水疱症）；
全身疾患（例えば、マルファン症候群）；並びに
がん。
【0041】
本実施形態の医薬組成物は、経口的又は非経口的に投与することができる。経口投与用の剤形としては、例えば、錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、シロップ剤、乳剤、及び懸濁剤が挙げられる。非経口投与用の剤形としては、例えば、注射剤、注入剤、点滴剤、点眼剤、貼付剤及び坐剤が挙げられる。特に限定するものではないが、本実施形態の医薬組成物は注射剤であることが好ましい。注射剤とすることにより、緊急度が高い疾患に好適に使用することができる。緊急度が高い疾患としては、例えば、脳出血や心筋梗塞等の臓器障害を伴う急性の高血圧症が挙げられる
【0042】
本実施形態の医薬組成物を注射剤とする場合、注射剤は、式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩に加えて、第２の有効成分を含んでいてもよい。第２の有効成分としては、例えば、式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩以外の、ＡＴ１受容体拮抗作用を有する化合物が挙げられ、具体的にはロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン、テルミサルタン、オルメサルタン，イルベサルタン、アジルサルタン等が挙げられる。
【0043】
本実施形態の医薬組成物は、必要に応じて、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、甘味剤、界面活性剤、懸濁化剤、乳化剤、着色剤、保存剤、芳香剤、矯味剤、安定剤、粘稠剤等を含んでいてもよい。
【0044】
本実施形態の医薬組成物の投与量は、患者の状態や体重、化合物の種類、疾患の種類、投与経路等によって異なり、適切な量を医師が決定することができる。
【0045】
＜化合物の製造方法＞
式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩は、公知の方法を適宜利用して合成することができる。合成方法の一例として、下記のスキームＡを挙げることができる。
式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩は、公知の方法を適宜利用して合成することができる。合成方法の一例として、下記のスキームＡを挙げることができる。
【化7】
【0046】
スキームＡにおいて、Ｒ1～Ｒ4及びｎは上記のとおりであり、Ｘ1～Ｘ3はハロゲンであり、Ｐｒｏは保護基である。
【0047】
スキームＡにおいて、化合物（Ａ１）を還元剤（例えば、ジメチルスルフィドボラン）と反応させて化合物（Ａ２）を得て（工程Ａ１）、化合物（Ａ２）をハロゲン化剤（例えば、四臭化炭素）と反応させて化合物（Ａ３）を得る（工程Ａ２）。化合物（Ａ４）を金属水素化物（例えば水素化ナトリウム）を反応させた後、化合物（Ａ３）と反応させて化合物（Ａ５）を得て（工程Ａ３）、化合物（Ａ５）をビス(ピナコラト)ジボロンと反応させて化合物（Ａ６）を得る（工程Ａ４）。
【0048】
化合物（Ａ７）をジアゾ化した後、二酸化硫黄と反応させて化合物（Ａ８）を得る（工程Ａ５）。化合物（Ａ８）を化合物（Ａ９）と反応させて化合物（Ａ１０）を得て（工程Ａ６）、化合物（Ａ１０）のアミノ基を保護基（例えば、メトキシメチル基）で保護して化合物（Ａ１１）を得る（工程Ａ７）。
【0049】
化合物（Ａ６）と化合物（Ａ１１）とを反応させて化合物（Ａ１２）を得て（工程Ａ８）、化合物（Ａ１２）を脱保護して化合物（Ａ１３）を得る（工程Ａ９）。
【0050】
式（１）で表される化合物又はその医薬上許容可能な塩の合成方法は、上記スキームＡに限定されるものではなく、最終化合物の構造に応じて、適切な合成ルート及び反応条件を当業者が適宜設定することができる。
【実施例0051】
以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれに限定されるものではない。
【0052】
［製造例１－１］
メチル ４－ブロモ－３－（メトキシメチル）ベンゾアート
メチル ４－ブロモ－３－（ブロモメチル）ベンゾアート（３．５０ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）、メタノール（２８ｍＬ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（７ｍＬ）の混合物に、ナトリウムメトキシド（１．２３ｇ、２２．８ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、室温で１６時間攪拌した。反応混合物に氷冷水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（１．５０ｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 258.9 [M+1]+
メチル ４－ブロモ－３－（メトキシメチル）ベンゾアート
【化8】
ESI-MS: m/z 258.9 [M+1]+
【0053】
［製造例１－２］
４－ブロモ－３－（メトキシメチル）安息香酸
メチル ４－ブロモ－３－（メトキシメチル）ベンゾアート（２．００ｇ、７．７５ｍｍｏｌ）及びメタノール（２０．０ｍＬ）の混合物に、２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（５．００ｍＬ、１０．０ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温で２時間攪拌した。反応混合物を減圧下溶媒留去し、残渣を２ｍｏｌ／Ｌ塩酸で中和した。析出物を濾取し、標記化合物（１．５０ｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 242.89 [M-1]-
４－ブロモ－３－（メトキシメチル）安息香酸
【化9】
ESI-MS: m/z 242.89 [M-1]-
【0054】
［製造例１－３］
（４－ブロモ－３－（メトキシメチル）フェニル）メタノール
４－ブロモ－３－（メトキシメチル）安息香酸（１．５０g、６．１４ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（２０ｍＬ）の混合物にジメチルスルフィドボラン（０．５８ｍＬ、９．２２ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、反応混合物を８０℃で１６時間攪拌した。反応混合物を室温とし、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（１．３０ｇ）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.52 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.16 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 3.47 (s, 3H).
（４－ブロモ－３－（メトキシメチル）フェニル）メタノール
【化10】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.52 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.16 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 3.47 (s, 3H).
【0055】
［製造例１－４］
１－ブロモ－４－（ブロモメチル）－２－（メトキシメチル）ベンゼン
（４－ブロモ－３－（メトキシメチル）フェニル）メタノール（１．３０ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（２．９６ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１５ｍＬ）の混合物に四臭化炭素（１．８７ｇ、８．５１ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、室温で４時間攪拌した。反応混合物に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（１．３０ｇ）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.51-7.49 (m, 2H), 7.18 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 3.49 (s, 3H).
１－ブロモ－４－（ブロモメチル）－２－（メトキシメチル）ベンゼン
【化11】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.51-7.49 (m, 2H), 7.18 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 3.49 (s, 3H).
【0056】
［製造例１－５］
３－（４－ブロモ－３－（メトキシメチル）ベンジル）－２－ブチル－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン
２－ブチル－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン（１．１９ｇ、６．１２ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（２０ｍＬ）の混合物に、６０％水素化ナトリウム（５４４ｍｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、同温で３０分間攪拌した。反応混合物に１－ブロモ－４－（ブロモメチル）－２－（メトキシメチル）ベンゼン（１．２ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、同温で２時間攪拌した。反応混合物に氷冷水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（１．２０ｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 407.30 [M+1]+
３－（４－ブロモ－３－（メトキシメチル）ベンジル）－２－ブチル－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン
【化12】
ESI-MS: m/z 407.30 [M+1]+
【0057】
［製造例１－６］
２－ブチル－３－（３－（メトキシメチル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン
アルゴン雰囲気下、３－（４－ブロモ－３－（メトキシメチル）ベンジル）－２－ブチル－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン（０．５０ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）、ビス(ピナコラト)ジボロン（０．４６９ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（０．２４１ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）及び１，４－ジオキサン（１０．０ｍＬ）の混合物に、［１，１'－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロリド ジクロロメタン付加物（０．０５０ｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１００℃で１６時間攪拌した。反応混合物を室温とし、セライトを用いて濾過し、濾液を減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（１．１０ｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 455.43 [M+1]+
２－ブチル－３－（３－（メトキシメチル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン
【化13】
ESI-MS: m/z 455.43 [M+1]+
【0058】
［製造例１－７］
２－ブロモチオフェン－３－アミン塩酸塩
ｔｅｒｔ－ブチル （２－ブロモチオフェン－３－イル）カルバマート（５．１０ｇ、１８．３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（６０．０ｍＬ）の混合物に４．０ｍｏｌ／Ｌ塩化水素・１，４－ジオキサン溶液（１０．０ｍＬ）を０℃で加え、反応混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物を減圧下溶媒留去し、残渣をジエチルエーテルで洗浄し、標記化合物（３．５０ｇ）を粗体として得た。得られた粗体は、これ以上の精製をすることなく次の反応に用いた。
２－ブロモチオフェン－３－アミン塩酸塩
【化14】
【0059】
［製造例１－８］
２－ブロモチオフェン－３－スルホニル クロリド
２－ブロモチオフェン－３－アミン塩酸塩の粗体（２．００ｇ、９．３８ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン、及び濃塩酸（３ｍＬ）の混合物に、少量の水で溶かした亜硝酸ナトリウム（０．６４ｇ、９．３８ｍｍｏｌ）を－１０℃でゆっくり加え、同温で５分間攪拌した。反応混合物を、塩化銅（Ｉ）（０．２７ｇ、２．８１ｍｍｏｌ）、酢酸（２．３０ｍＬ）及び水（１０．０ｍＬ）に二酸化硫黄を充填させた０℃の混合物に加え３０分間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（０．７０ｇ）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.39 (d, 1H, J = 5.6 Hz), 7.04 (d, 1H, J = 5.6 Hz).
２－ブロモチオフェン－３－スルホニル クロリド
【化15】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.39 (d, 1H, J = 5.6 Hz), 7.04 (d, 1H, J = 5.6 Hz).
【0060】
［製造例１－９］
２－ブロモ－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド
４，５－ジメチルイソオキサゾール-3-アミン（０．１９４ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）とピリジン（５．０ｍＬ）との混合物に、４－ジメチルアミノピリジン（１４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及び２－ブロモチオフェン－３－スルホニル クロリド（０．３ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、反応混合物を５５℃で１６時間攪拌した。反応混合物に氷冷水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を２ｍｏｌ／Ｌ塩酸、及び飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒留去し、標記化合物を粗体として得た。得られた粗体はこれ以上の精製をすることなく、次の反応に用いた。
ESI-MS: m/z 338.89 [M+3]+
２－ブロモ－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド
【化16】
ESI-MS: m/z 338.89 [M+3]+
【0061】
［製造例１－１０］
２－ブロモ－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミド
２－ブロモ－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド（０．２７ｇ、０．８０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（５．０ｍＬ）の混合物に、６０％水素化ナトリウム（８０ｍｇ、８．９０ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、同温で３０分間攪拌した。反応混合物にクロロメチルメチルエーテル（０．１２ｍL、１。６０ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、室温で３時間攪拌した。反応混合物に氷冷水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（０．１７ｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 382.94 [M+3]+
２－ブロモ－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミド
【化17】
ESI-MS: m/z 382.94 [M+3]+
【0062】
［製造例１－１１］
２－（４－（（２－ブチル－４－オキソ－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－３－イル）メチル）－２－（メトキシメチル）フェニル）－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミド
アルゴン雰囲気下、２－ブロモ－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミド（１００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、２－ブチル－３－（３－（メトキシメチル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン（１１９ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２．０ｍＬ）及び炭酸カリウム（１４５ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の混合物に、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（９ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌを加え、反応混合物を１００℃で６時間攪拌した。反応混合物を室温とし、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（８０ｍｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 629.34 [M+1]+
２－（４－（（２－ブチル－４－オキソ－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－３－イル）メチル）－２－（メトキシメチル）フェニル）－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミド
【化18】
ESI-MS: m/z 629.34 [M+1]+
【0063】
［実施例１］
２－（４－（（２－ブチル－４－オキソ－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－３－イル）メチル）－２－（メトキシメチル）フェニル）－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド
２－（４－（（２－ブチル－４－オキソ－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－３－イル）メチル）－２－（メトキシメチル）フェニル）－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミド（８０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）及びメタノール（１．００ｍＬ）の混合物に６ｍｏｌ／Ｌ塩酸（０．５０ｍＬ）を室温で加え、反応混合物を７０℃で１６時間攪拌した。反応混合物を室温とし、減圧下溶媒留去した。残渣に酢酸エチルを加え、水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣を高速液体クロマトグラフィー（Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８ （１９×２５０）１０μｍ、０．１％トリフルオロ酢酸水溶液／アセトニトリル）により精製し、標記化合物（１２ｍｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 585.25 [M+1]+
２－（４－（（２－ブチル－４－オキソ－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－３－イル）メチル）－２－（メトキシメチル）フェニル）－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド
【化19】
ESI-MS: m/z 585.25 [M+1]+
【0064】
［製造例２－１］
４－ブロモ－３－（エトキシメチル）安息香酸
メチル ４－ブロモ－３－（ブロモメチル）ベンゾアート（１．０ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）、エタノール（８ｍＬ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）の混合物に、ナトリウムエトキシド（４４６ｍｇ、６．５５ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、室温で４時間攪拌した。反応混合物に氷冷水及び１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（０．３０ｇ）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.18 (bs, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.75-7.73 (m, 2H), 4.52 (s, 2H), 3.60 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
４－ブロモ－３－（エトキシメチル）安息香酸
【化20】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.18 (bs, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.75-7.73 (m, 2H), 4.52 (s, 2H), 3.60 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)
【0065】
［製造例２－２］
（４－ブロモ－３－（エトキシメチル）フェニル）メタノール
４－ブロモ－３－（エトキシメチル）安息香酸（０．３０ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）及びＴＨＦ（５ｍＬ）の混合物にジメチルスルフィドボラン（０．２２ｍＬ、２．３２ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、反応混合物を８０℃で６時間攪拌した。反応混合物を室温とし、メタノールを加え、減圧下溶媒留去した。残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（０，２５ｇ）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.52-7.46 (m, 2H), 7.15 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 3.66-3.61 (m, 2H), 1.29 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
（４－ブロモ－３－（エトキシメチル）フェニル）メタノール
【化21】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.52-7.46 (m, 2H), 7.15 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 3.66-3.61 (m, 2H), 1.29 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
【0066】
［製造例２－３］
１－ブロモ－４－（ブロモメチル）－２－（エトキシメチル）ベンゼン
（４－ブロモ－３－（エトキシメチル）フェニル）メタノール（０．２０ｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（４２５ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（４ｍＬ）の混合物に四臭化炭素（５３８ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、室温で２時間攪拌した。反応混合物に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（１６０ｍｇ）を得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.51-7.49 (m, 2H), 7.18 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 3.66-3.61 (m, 2H), 1.30-1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
１－ブロモ－４－（ブロモメチル）－２－（エトキシメチル）ベンゼン
【化22】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.51-7.49 (m, 2H), 7.18 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 3.66-3.61 (m, 2H), 1.30-1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
【0067】
［製造例２－４］
３－（４－ブロモ－３－（エトキシメチル）ベンジル）－２－ブチル－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン
２－ブチル－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン（１５２ｍｇ、０．７８３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（３ｍＬ）の混合物に、６０％水素化ナトリウム（３８ｍｇ、０．７８３ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、同温で３０分間攪拌した。反応混合物に１－ブロモ－４－（ブロモメチル）－２－（エトキシメチル）ベンゼン（１６０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（２ｍＬ）の混合物をゆっくり加え、同温で２時間攪拌した。反応混合物に氷冷水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（０．１ｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 423.13 [M+3]+
３－（４－ブロモ－３－（エトキシメチル）ベンジル）－２－ブチル－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン
【化23】
ESI-MS: m/z 423.13 [M+3]+
【0068】
［製造例２－５］
２－ブチル－３－（３－（エトキシメチル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン
アルゴン雰囲気下、３－（４－ブロモ－３－（エトキシメチル）ベンジル）－２－ブチル－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン（０．２６ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）、ビス(ピナコラト)ジボロン（２３６ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（１２２ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）及び１，４－ジオキサン（５ｍＬ）の混合物に、［１，１'－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロリド ジクロロメタン付加物（２５ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１００℃で１６時間攪拌した。反応混合物を室温とし、セライトを用いて濾過し、濾液を減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（１２０ｍｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 469.42 [M+1]+
２－ブチル－３－（３－（エトキシメチル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン
【化24】
ESI-MS: m/z 469.42 [M+1]+
【0069】
［製造例２－６］
２－ブロモ－Ｎ－（４－クロロ－５－メチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド
４－クロロ－５－メチルイソオキサゾール－３－アミン（０．６４ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）とピリジン（８．０ｍＬ）との混合物に、４－ジメチルアミノピリジン（７５ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）及び２－ブロモチオフェン－３－スルホニルクロリド（０．５２ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、反応混合物を５５℃で１６時間攪拌した。反応混合物に氷冷水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を２ｍｏｌ／Ｌ塩酸、及び飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒留去し、標記化合物（０．５０ｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 358.97 [M+3]+
２－ブロモ－Ｎ－（４－クロロ－５－メチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド
【化25】
ESI-MS: m/z 358.97 [M+3]+
【0070】
［製造例２－７］
２－ブロモ－Ｎ－（４－クロロ－５－メチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミド
２－ブロモ－Ｎ－（４，５－ジメチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド（０．５０ｇ、１．４０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（５．０ｍＬ）の混合物に、６０％水素化ナトリウム（１６８ｍｇ、３．５１ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加え、同温で３０分間攪拌した。反応混合物にクロロメチルメチルエーテル（０．２１ｍL、２．８１ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、室温で３時間攪拌した。反応混合物に氷冷水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、標記化合物（０．３０ｇ）を粗体として得た。得られた粗体は、これ以上の精製をすることなく次の反応に用いた。
２－ブロモ－Ｎ－（４－クロロ－５－メチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミド
【化26】
【0071】
［実施例２］
２－（４－（（２－ブチル－４－オキソ－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－３－イル）メチル）－２－（エトキシメチル）フェニル）－Ｎ－（４－クロロ－５－メチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド
アルゴン雰囲気下、２－ブロモ－Ｎ－（４－クロロ－５－メチルイソオキサゾール－３－イル）－Ｎ－（メトキシメチル）チオフェン－３－スルホンアミドの粗体（２５０ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）、２－ブチル－３－（３－（エトキシメチル）－４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－４－オン（２５０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）及び炭酸カリウム（０．１５０ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）の混合物に、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（２０ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１００℃で６時間攪拌した。反応混合物を室温とし、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）及び高速液体クロマトグラフィー（Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８ （１９×２５０）１０μｍ、０．１％トリフルオロ酢酸水溶液／アセトニトリル）により精製し、標記化合物（２７ｍｇ）を得た。
ESI-MS: m/z 619.26 [M+1]+
２－（４－（（２－ブチル－４－オキソ－１，３－ジアザスピロ［４．４］ノナ－１－エン－３－イル）メチル）－２－（エトキシメチル）フェニル）－Ｎ－（４－クロロ－５－メチルイソオキサゾール－３－イル）チオフェン－３－スルホンアミド
【化27】
ESI-MS: m/z 619.26 [M+1]+
【0072】
［試験例１：アンジオテンシンＩＩ ｔｙｐｅ１受容体阻害作用］
アンジオテンシンＩＩ ｔｙｐｅ１受容体の阻害作用を以下の方法で検討した。
ヒトＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ ｔｙｐｅ １受容体（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｕｍｂｅｒ ＮＰ＿０００６７６．１）を強制発現させたＣＨＯ－Ｋ１－ｍｔ ａｅｑｕｏｒｉｎ－Ｇα１６細胞を抗生剤無添加の培地で１８時間培養した後、ＰＢＳ－ＥＤＴＡ（５ｍＭ ＥＤＴＡ）で処理し、遠心分離後（２分、４０５×ｇ、室温）、アッセイバッファー（ＤＭＥＭ／ＨＡＭ'ｓ Ｆ１２ ｗｉｔｈ ＨＥＰＥＳ＋０．１％ ＢＳＡ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｆｒｅｅ）に懸濁させた。
１×１０6個／ｍＬの細胞を終濃度５μＭのＣｏｅｌｅｎｔｅｒａｚｉｎ ｈ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）存在下４時間以上室温でインキュベートし、Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩによるアゴニスト反応を確認し、ＥＣ８０に相当するＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ濃度を求めた。
続いて９６穴プレートに１００００個／ｗｅｌｌのＣｏｅｌｅｎｔｅｒａｚｉｎ ｈ処置した細胞懸濁液を５０μＬと被験物質（終濃度０．５％ＤＭＳＯ）を含むアッセイバッファー５０μＬ添加し、１５分後に終濃度がＥＣ８０濃度になるようにＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ溶液を１００μＬ添加し、ＦＤＳＳ６０００（浜松ホトニクス）にて受容体活性を発光量で測定した。ＩＣ５０値はＸＬｆｉｔ（ＩＤＢＳ）を用いて算出した。
アンジオテンシンＩＩ ｔｙｐｅ１受容体の阻害作用を以下の方法で検討した。
ヒトＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ ｔｙｐｅ １受容体（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｕｍｂｅｒ ＮＰ＿０００６７６．１）を強制発現させたＣＨＯ－Ｋ１－ｍｔ ａｅｑｕｏｒｉｎ－Ｇα１６細胞を抗生剤無添加の培地で１８時間培養した後、ＰＢＳ－ＥＤＴＡ（５ｍＭ ＥＤＴＡ）で処理し、遠心分離後（２分、４０５×ｇ、室温）、アッセイバッファー（ＤＭＥＭ／ＨＡＭ'ｓ Ｆ１２ ｗｉｔｈ ＨＥＰＥＳ＋０．１％ ＢＳＡ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｆｒｅｅ）に懸濁させた。
１×１０6個／ｍＬの細胞を終濃度５μＭのＣｏｅｌｅｎｔｅｒａｚｉｎ ｈ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）存在下４時間以上室温でインキュベートし、Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩによるアゴニスト反応を確認し、ＥＣ８０に相当するＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ濃度を求めた。
続いて９６穴プレートに１００００個／ｗｅｌｌのＣｏｅｌｅｎｔｅｒａｚｉｎ ｈ処置した細胞懸濁液を５０μＬと被験物質（終濃度０．５％ＤＭＳＯ）を含むアッセイバッファー５０μＬ添加し、１５分後に終濃度がＥＣ８０濃度になるようにＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ＩＩ溶液を１００μＬ添加し、ＦＤＳＳ６０００（浜松ホトニクス）にて受容体活性を発光量で測定した。ＩＣ５０値はＸＬｆｉｔ（ＩＤＢＳ）を用いて算出した。
【0073】
ＩＣ５０値が１．０ｎＭ以下、又は１．０ｎＭで５０％以上の阻害作用を示した場合「Ａ」、ＩＣ５０値が１００ｎＭより大きい、又は１００ｎＭで５０％より小さい阻害作用を示した場合「Ｃ」、「Ａ」と「Ｃ」の間のものを「Ｂ」とした。結果を表１に示す。
【表1】
【0074】
［試験例２：エンドセリンＡ受容体阻害作用］
エンドセリンＡ受容体の阻害作用を以下の方法で検討した。
ヒトＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎ Ａ受容体（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｕｍｂｅｒ ＮＰ＿００１９４８．１）を強制発現させたＣＨＯ－Ｋ１－ｍｔ ａｅｑｕｏｒｉｎ細胞を抗生剤無添加の培地で１８時間培養した後、ＰＢＳ－ＥＤＴＡ（５ｍＭ ＥＤＴＡ）で処理し、遠心分離後（２分、４０５×ｇ、室温）、アッセイバッファー（ＤＭＥＭ／ＨＡＭ‘ｓ Ｆ１２ ｗｉｔｈ ＨＥＰＥＳ＋０．１％ ＢＳＡ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｆｒｅｅ）に懸濁させた。
１×１０6個／ｍＬの細胞を終濃度５μＭのＣｏｅｌｅｎｔｅｒａｚｉｎ ｈ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）存在下４時間室温でインキュベートし、Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎによるアゴニスト反応を確認し、ＥＣ８０に相当するＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎ濃度を求めた。
続いて９６穴プレートに１００００個／ｗｅｌｌのＣｏｅｌｅｎｔｅｒａｚｉｎ ｈ処置した細胞懸濁液を５０μＬと被験物質（終濃度０．５％ＤＭＳＯ）を含むアッセイバッファー５０μＬ添加し、１５分後に終濃度がＥＣ８０濃度になるようにＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎを添加し、ＦＤＳＳ６０００（浜松ホトニクス）にて受容体活性を発光量で測定した。ＩＣ５０値はＸＬｆｉｔ（ＩＤＢＳ）を用いて算出した。
エンドセリンＡ受容体の阻害作用を以下の方法で検討した。
ヒトＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎ Ａ受容体（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｕｍｂｅｒ ＮＰ＿００１９４８．１）を強制発現させたＣＨＯ－Ｋ１－ｍｔ ａｅｑｕｏｒｉｎ細胞を抗生剤無添加の培地で１８時間培養した後、ＰＢＳ－ＥＤＴＡ（５ｍＭ ＥＤＴＡ）で処理し、遠心分離後（２分、４０５×ｇ、室温）、アッセイバッファー（ＤＭＥＭ／ＨＡＭ‘ｓ Ｆ１２ ｗｉｔｈ ＨＥＰＥＳ＋０．１％ ＢＳＡ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｆｒｅｅ）に懸濁させた。
１×１０6個／ｍＬの細胞を終濃度５μＭのＣｏｅｌｅｎｔｅｒａｚｉｎ ｈ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）存在下４時間室温でインキュベートし、Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎによるアゴニスト反応を確認し、ＥＣ８０に相当するＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎ濃度を求めた。
続いて９６穴プレートに１００００個／ｗｅｌｌのＣｏｅｌｅｎｔｅｒａｚｉｎ ｈ処置した細胞懸濁液を５０μＬと被験物質（終濃度０．５％ＤＭＳＯ）を含むアッセイバッファー５０μＬ添加し、１５分後に終濃度がＥＣ８０濃度になるようにＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎを添加し、ＦＤＳＳ６０００（浜松ホトニクス）にて受容体活性を発光量で測定した。ＩＣ５０値はＸＬｆｉｔ（ＩＤＢＳ）を用いて算出した。
【0075】
ＩＣ５０値が１．０ｎＭ以下、又は１．０ｎＭで５０％以上の阻害作用を示した場合「Ａ」、ＩＣ５０値が１００ｎＭより大きい、又は１００ｎＭで５０％より小さい阻害作用を示した場合「Ｃ」、「Ａ」と「Ｃ」の間のものを「Ｂ」とした。結果を表２に示す。
【表2】