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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024180631
(43)【公開日】2024-12-26
(54)【発明の名称】プラズマサイトイド樹状細胞活性化用組成物
(51)【国際特許分類】
A23L 33/19 20160101AFI20241219BHJP
A23G 3/44 20060101ALI20241219BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241219BHJP
A61K 38/40 20060101ALI20241219BHJP
A61P 37/04 20060101ALI20241219BHJP
A61P 37/02 20060101ALI20241219BHJP
【ＦＩ】
A23L33/19
A23G3/44
A61P43/00 107
A61K38/40
A61P37/04
A61P37/02
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2024182135
(22)【出願日】2024-10-17
(62)【分割の表示】P 2022581181の分割
【原出願日】2021-10-29
(31)【優先権主張番号】P 2021019169
(32)【優先日】2021-02-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(71)【出願人】
【識別番号】000006127
【氏名又は名称】森永乳業株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】110002860
【氏名又は名称】弁理士法人秀和特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】宮川 桃子
(72)【発明者】
【氏名】久保 周太郎
(72)【発明者】
【氏名】多田 明日翔
(72)【発明者】
【氏名】織田 浩嗣
(57)【要約】
【課題】プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＤＣ）を活性化させることにより、免疫機能を維持、改善、又は強化することができる組成物を提供することを課題とする。
【解決手段】ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を、ｐＤＣ活性化用組成物に有効成分として含有させる。ここでｐＤＣの活性化は、単核細胞中のｐＤＣ数の割合、ｐＤＣ中のＣＤ８６陽性細胞数の割合、ｐＤＣにおけるＣＤ８６発現量、及びｐＤＣにおけるＨＬＡ－ＤＲ発現量からなる群から選択される一種又は二種以上の増加を含み得る。前記組成物は、飲食品や医薬品の態様として摂取することができる。
【選択図】なし
【解決手段】ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を、ｐＤＣ活性化用組成物に有効成分として含有させる。ここでｐＤＣの活性化は、単核細胞中のｐＤＣ数の割合、ｐＤＣ中のＣＤ８６陽性細胞数の割合、ｐＤＣにおけるＣＤ８６発現量、及びｐＤＣにおけるＨＬＡ－ＤＲ発現量からなる群から選択される一種又は二種以上の増加を含み得る。前記組成物は、飲食品や医薬品の態様として摂取することができる。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を含有する、プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＤＣ）活性化用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を有効成分として含有する、プラズマサイトイド樹状細胞活性化用組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
樹状細胞は、自然免疫系および獲得免疫系を高度に制御する免疫細胞である。樹状細胞の一種であるプラズマサイトイド樹状細胞（形質細胞様樹状細胞、plasmacytoid dendritic cell、以降「ｐＤＣ」とも記す）は、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）７およびＴＬＲ９
を発現しており、ＴＬＲ－７やＴＬＲ－９でウイルス由来のＲＮＡやＤＮＡを認識し、ウイルスに対して増殖阻害活性を示す大量のＩ型インターフェロン（ＩＦＮ）を産生する。また、ｐＤＣは抗原提示細胞としても働き、特定のＴ細胞を活性化する。
を発現しており、ＴＬＲ－７やＴＬＲ－９でウイルス由来のＲＮＡやＤＮＡを認識し、ウイルスに対して増殖阻害活性を示す大量のＩ型インターフェロン（ＩＦＮ）を産生する。また、ｐＤＣは抗原提示細胞としても働き、特定のＴ細胞を活性化する。
【0003】
従来、免疫機能を増強させたりウイルス防御活性を高めたりすることへの関心は高く、ＩＦＮを産生させる成分が研究されてきた。例えば、特許文献１には乳酸菌がｐＤＣを活性化してＩＦＮ産生を誘導し得ることが開示されている。
【0004】
また、乳タンパク質の一つであるラクトフェリン（以下、「ＬＦ」とも記す）についても、ＩＦＮ産生との関係について報告されている。
非特許文献１には、１日１ｇのＬＦの摂取によってｐＤＣのＩＦＮ－α産生能が上昇する傾向があることが報告されている。非特許文献２には、リポソーム化ＬＦを２７０ｍｇ／日摂取したことにより健常成人男性のＩＦＮ－α産生能が前後比較で有意に上昇することが報告されている。また、抗原提示細胞として働くｐＤＣは、その活性化の際には共刺激分子であるＣＤ８６等を細胞表面に発現するところ、非特許文献３には、腸溶性ＬＦを３００ｍｇ／日摂取したことにより健常高齢者においてＣＤ８６を発現する細胞が有意に増加することが報告されている。
しかしながら、ＣＤ８６は骨髄系樹状細胞、マクロファージ、単球など、抗原提示細胞一般に広く発現しており、末梢血単核球中に０．２～０．５％しか存在しないマイナーポピュレーションであるｐＤＣに関しては、ラクトフェリンが、ｐＤＣを増加させたり、ｐＤＣの細胞表面マーカーであるＣＤ８６の発現を促進したりすることは知られていない（非特許文献４）。
非特許文献１には、１日１ｇのＬＦの摂取によってｐＤＣのＩＦＮ－α産生能が上昇する傾向があることが報告されている。非特許文献２には、リポソーム化ＬＦを２７０ｍｇ／日摂取したことにより健常成人男性のＩＦＮ－α産生能が前後比較で有意に上昇することが報告されている。また、抗原提示細胞として働くｐＤＣは、その活性化の際には共刺激分子であるＣＤ８６等を細胞表面に発現するところ、非特許文献３には、腸溶性ＬＦを３００ｍｇ／日摂取したことにより健常高齢者においてＣＤ８６を発現する細胞が有意に増加することが報告されている。
しかしながら、ＣＤ８６は骨髄系樹状細胞、マクロファージ、単球など、抗原提示細胞一般に広く発現しており、末梢血単核球中に０．２～０．５％しか存在しないマイナーポピュレーションであるｐＤＣに関しては、ラクトフェリンが、ｐＤＣを増加させたり、ｐＤＣの細胞表面マーカーであるＣＤ８６の発現を促進したりすることは知られていない（非特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【特許文献1】特開２０１７－２０１９８４号公報
【非特許文献】
【0006】
【非特許文献1】M. v. Splunter et al., Front. Immunol., 2018;9:2677.
【非特許文献2】A. Ishikado et al., Biofactors. 2004;21:69-72.
【非特許文献3】H. Kawakami et al., Int. Dairy J. 2015;47:79-85.
【非特許文献4】Henriquez J. E. et al., J Acquir Immune Defic Syndr. 2017;75:588-596.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
本発明は、ｐＤＣを活性化させることにより、免疫機能を維持、改善、又は強化することができる組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、ヒト末梢血から回収した単核細胞をＬＦ存在下で培養すると、ｐＤＣが増加し、またＣＤ８６陽性細胞も増加することを見出し、本発明を完成するに至った。
【0009】
すなわち、本発明の第一の態様は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を含有する、プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＤＣ）活性化用組成物である。
前記活性化は、単核細胞中のｐＤＣ数の割合、ｐＤＣ中のＣＤ８６陽性細胞数の割合、ｐＤＣにおけるＣＤ８６発現量、及びｐＤＣにおけるＨＬＡ－ＤＲ発現量からなる群から選択される一種又は二種以上の増加であってよい。
本発明の第二の態様は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を含有する、ｐＤＣ増加用組成物である。
本発明の第三の態様は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を含有する、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現促進用組成物である。
これら本発明の組成物は、免疫機能を維持、改善、又は強化するために好ましく用いられる。また、これら本発明の組成物は、飲食品又は医薬品の形態であってよい。
前記活性化は、単核細胞中のｐＤＣ数の割合、ｐＤＣ中のＣＤ８６陽性細胞数の割合、ｐＤＣにおけるＣＤ８６発現量、及びｐＤＣにおけるＨＬＡ－ＤＲ発現量からなる群から選択される一種又は二種以上の増加であってよい。
本発明の第二の態様は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を含有する、ｐＤＣ増加用組成物である。
本発明の第三の態様は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を含有する、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現促進用組成物である。
これら本発明の組成物は、免疫機能を維持、改善、又は強化するために好ましく用いられる。また、これら本発明の組成物は、飲食品又は医薬品の形態であってよい。
【発明の効果】
【0010】
本発明によれば、ｐＤＣを活性化させることにより、免疫機能を維持、改善、又は強化することができる。
【発明を実施するための形態】
【0011】
次に、本発明を詳細に説明する。ただし、本発明は以下の実施形態に限定されず、本発明の範囲内で自由に変更することができるものである。
【0012】
本発明の組成物は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を有効成分として含有する。
【0013】
ラクトフェリンは、哺乳動物、例えば、ヒツジ、ヤギ、ブタ、マウス、水牛、ラクダ、ヤク、ウマ、ロバ、ラマ、ウシ又はヒトの乳、涙、唾液、血液等に含まれる鉄結合性の糖タンパク質である。
本発明におけるラクトフェリンは、いずれの哺乳動物に由来するものであってもよく、特に限定されないが、含有量や入手容易性の点から、例えば、ウシ、ヒト等の乳由来のラクトフェリンが好ましい。前記乳としては、初乳、移行乳、常乳、末期乳のいずれでもよい。
また、本発明におけるラクトフェリンは、前記乳の処理物である脱脂乳、ホエイ等から常法（例えば、イオンクロマトグラフィー等）によって分離されたラクトフェリン、遺伝子操作によって微生物、動物細胞、トランスジェニック動物等から産生された組換えラクトフェリン、合成ラクトフェリン、又はそれらの混合物でもよい。また、ラクトフェリンは、非グリコシル化又はグリコシル化されたものでもよい。このようなラクトフェリンとして、工業的規模で製造されている市販のラクトフェリン（例えば、森永乳業社製等）を使用することができる。
本発明におけるラクトフェリンは、いずれの哺乳動物に由来するものであってもよく、特に限定されないが、含有量や入手容易性の点から、例えば、ウシ、ヒト等の乳由来のラクトフェリンが好ましい。前記乳としては、初乳、移行乳、常乳、末期乳のいずれでもよい。
また、本発明におけるラクトフェリンは、前記乳の処理物である脱脂乳、ホエイ等から常法（例えば、イオンクロマトグラフィー等）によって分離されたラクトフェリン、遺伝子操作によって微生物、動物細胞、トランスジェニック動物等から産生された組換えラクトフェリン、合成ラクトフェリン、又はそれらの混合物でもよい。また、ラクトフェリンは、非グリコシル化又はグリコシル化されたものでもよい。このようなラクトフェリンとして、工業的規模で製造されている市販のラクトフェリン（例えば、森永乳業社製等）を使用することができる。
【0014】
本発明におけるラクトフェリン中の金属含有量は特に限定されず、ラクトフェリンを塩酸やクエン酸等により脱鉄したアポ型ラクトフェリン；該アポ型ラクトフェリンを、鉄、銅、亜鉛、マンガン等の金属でキレートさせて得られる飽和度１００％以上の状態の金属飽和型ラクトフェリン；及び１００％未満の各種飽和度で金属が結合している状態の金属部分飽和型ラクトフェリンからなる群から選ばれる、いずれか１種又は２種以上の混合物を用いることができる。
【0015】
ここで、本技術に用いられるラクトフェリンの調製（乳等の原料からのラクトフェリンの分離、精製）方法の一例を以下に示すが、これに限定されるものではない。
ウシ由来の乳原料を陽イオン交換カラムに通液し、この通過液を回収し、適宜この通過液を繰り返しカラムに通液する。このカラムに脱イオン水を通液し、食塩水を通液し、この陽イオン交換カラムに吸着した塩基性タンパク質の溶出液を得る。この溶出液からタンパク質を回収し、適宜洗浄し、脱イオン水にて溶解し、この溶解液を限外ろ過膜にてろ過する。さらに、脱塩処理、凍結乾燥することで、粉末状のラクトフェリンが得られる。
ウシ由来の乳原料を陽イオン交換カラムに通液し、この通過液を回収し、適宜この通過液を繰り返しカラムに通液する。このカラムに脱イオン水を通液し、食塩水を通液し、この陽イオン交換カラムに吸着した塩基性タンパク質の溶出液を得る。この溶出液からタンパク質を回収し、適宜洗浄し、脱イオン水にて溶解し、この溶解液を限外ろ過膜にてろ過する。さらに、脱塩処理、凍結乾燥することで、粉末状のラクトフェリンが得られる。
【0016】
より詳細には、まず、イオン交換体をカラムに充填し、塩酸を通液し、水洗してイオン交換体を平衡化する。続いて、４℃に冷却したｐＨ６．９の脱脂乳をカラムに通液し、透過液を回収し、再度同様にカラムに通液する。次いで、脱イオン水をカラムに通液し、食塩水を通液し、イオン交換体に吸着した塩基性タンパク質の溶出液を得る。この溶出液から回収したタンパク質を洗浄し、脱イオン水を添加して溶解し、得られた溶液を限外ろ過膜モジュールを用いて脱塩し、凍結乾燥して、粉末状ウシラクトフェリンを得る。このようにして、純度が９５質量％以上のウシラクトフェリンが得られる。
【0017】
ラクトフェリンにおいては、種、属、個体等の違いによって、１又は複数の位置での１又は複数の塩基の置換、欠失、挿入、付加、又は逆位等の遺伝子変異が当然存在し、このような変異を有する遺伝子がコードするタンパク質のアミノ酸においても変異が生じている場合がある。本発明における本技術に用いることができるラクトフェリンには、本発明の効果を損なわない限りにおいて、このような変異を含むものも含有される。
また、本発明におけるラクトフェリンには、本発明の効果を損なわない限りにおいて、熱処理、酸処理、又はアルカリ処理を行ったラクトフェリン処理物も含まれてもよい。
また、本発明におけるラクトフェリンには、本発明の効果を損なわない限りにおいて、熱処理、酸処理、又はアルカリ処理を行ったラクトフェリン処理物も含まれてもよい。
【0018】
本発明におけるラクトフェリン加水分解物は、前述のラクトフェリンを加水分解処理したものをいう。
加水分解処理としては、例えば特開２０１２－２３５７６８号公報に記載された方法が挙げられる。
具体的には、ラクトフェリン溶液を、酵素反応処理を行う前に塩酸、クエン酸、酢酸等の酸によりｐＨを２～４、好ましくは２．５～３．５、特に好ましくはｐＨ３に調整する。
ｐＨを調整したラクトフェリン溶液に、タンパク質分解酵素を所望の量で添加した後、酵素反応の温度を３５～５５℃、好ましくは４０～５０℃、より好ましくは４２～４８℃に保持して、６時間～２４時間、好ましくは１２～１８時間、攪拌しながらラクトフェリンを加水分解させる。
次いで、例えば反応溶液を８０℃に昇温して１０分間維持し、酵素を加熱失活させる。さらに、好ましくは、水酸化ナトリウム溶液等のアルカリ溶液を添加して、ｐＨを５～７、例えば６に調整する。
なお、ｐＨ調整後の反応溶液（ラクトフェリン加水分解物）は、溶液のままでもよいが、凍結乾燥等を行って粉末化することが好ましい。また、ラクトフェリン分解物は、クロマトグラフィー、又は限外濾過等により、分画したものを用いることもできる。
加水分解処理としては、例えば特開２０１２－２３５７６８号公報に記載された方法が挙げられる。
具体的には、ラクトフェリン溶液を、酵素反応処理を行う前に塩酸、クエン酸、酢酸等の酸によりｐＨを２～４、好ましくは２．５～３．５、特に好ましくはｐＨ３に調整する。
ｐＨを調整したラクトフェリン溶液に、タンパク質分解酵素を所望の量で添加した後、酵素反応の温度を３５～５５℃、好ましくは４０～５０℃、より好ましくは４２～４８℃に保持して、６時間～２４時間、好ましくは１２～１８時間、攪拌しながらラクトフェリンを加水分解させる。
次いで、例えば反応溶液を８０℃に昇温して１０分間維持し、酵素を加熱失活させる。さらに、好ましくは、水酸化ナトリウム溶液等のアルカリ溶液を添加して、ｐＨを５～７、例えば６に調整する。
なお、ｐＨ調整後の反応溶液（ラクトフェリン加水分解物）は、溶液のままでもよいが、凍結乾燥等を行って粉末化することが好ましい。また、ラクトフェリン分解物は、クロマトグラフィー、又は限外濾過等により、分画したものを用いることもできる。
【0019】
本態様の組成物において、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の組成物全体に対する含有量は、好ましくは０．００１質量％以上１００質量％未満、より好ましくは０．００５～９５質量％、さらに好ましくは０．０１～８５質量％である。
【0020】
本発明の組成物は、ｐＤＣを活性化することができる。
ここでｐＤＣの活性化には、単核細胞中のｐＤＣ数の割合の増加が含まれる。これは、任意の単位の単核細胞群全体に占めるｐＤＣの細胞数の割合が、本発明の組成物の適用前に比べて適用後に、又は本発明の組成物の適用の場合に非適用の場合に比べて、増加する
ことをいう。なお、係る割合の増加は、ｐＤＣ数の絶対的な増加によるものであってよい。言い換えると、本発明の組成物は、ｐＤＣを増加することができる。本発明の組成物によりｐＤＣ数の割合や絶対数が増加することは、ｐＤＣ前駆細胞へ本発明の組成物が働きかけてｐＤＣへの分化を促進することによると推測される。本発明の組成物の適用後のｐＤＣ細胞数は、適用前に比べて、少なくとも１．１倍であり、１．５倍以上であることが好ましく、２倍以上であることが好ましく、２．５倍以上であることが好ましく、３倍以上であることが好ましく、３．５倍以上であることが好ましく、４倍以上であることがより好ましい。上限値は、特に制限されないが、８倍以下、７倍以下、６倍以下、又は５倍以下であってよい。また、上記数値の矛盾しない組み合わせの範囲であってもよく、具体的には、１．１～８倍、１．５～８倍、２～８倍、２．５～８倍、３～８倍、３．５～８倍、又は４～８倍であって良い。
ここでｐＤＣの活性化には、単核細胞中のｐＤＣ数の割合の増加が含まれる。これは、任意の単位の単核細胞群全体に占めるｐＤＣの細胞数の割合が、本発明の組成物の適用前に比べて適用後に、又は本発明の組成物の適用の場合に非適用の場合に比べて、増加する
ことをいう。なお、係る割合の増加は、ｐＤＣ数の絶対的な増加によるものであってよい。言い換えると、本発明の組成物は、ｐＤＣを増加することができる。本発明の組成物によりｐＤＣ数の割合や絶対数が増加することは、ｐＤＣ前駆細胞へ本発明の組成物が働きかけてｐＤＣへの分化を促進することによると推測される。本発明の組成物の適用後のｐＤＣ細胞数は、適用前に比べて、少なくとも１．１倍であり、１．５倍以上であることが好ましく、２倍以上であることが好ましく、２．５倍以上であることが好ましく、３倍以上であることが好ましく、３．５倍以上であることが好ましく、４倍以上であることがより好ましい。上限値は、特に制限されないが、８倍以下、７倍以下、６倍以下、又は５倍以下であってよい。また、上記数値の矛盾しない組み合わせの範囲であってもよく、具体的には、１．１～８倍、１．５～８倍、２～８倍、２．５～８倍、３～８倍、３．５～８倍、又は４～８倍であって良い。
【0021】
また、ｐＤＣの活性化には、ｐＤＣの活性化マーカーの発現が高いことが含まれる。
前述の通りｐＤＣは抗原提示細胞としても働き、ヒトのｐＤＣは、主要組織適合抗原クラスＩＩ（ＭＨＣ－ＩＩ）である白血球型抗原遺伝子複合体（ＨＬＡ）－ＤＲ陽性細胞である。ｐＤＣはＨＬＡ－ＤＲにより外来抗原を提示することで、ＣＤ４陽性Ｔ細胞やＣＤ８陽性Ｔ細胞を活性化することができる。その際に、共刺激分子であるＣＤ８６、ＣＤ４０、ＣＤ８０、ＣＤ８３などによる共刺激シグナルがＴ細胞の活性化に必要とされる。したがって、ｐＤＣのＭＨＣ－ＩＩであるＨＬＡ－ＤＲや共刺激分子であるＣＤ８６などの発現が高いことは、ｐＤＣの抗原提示細胞としての活性が高いことを示す指標となる（T.
S. Mathan et al., Front Immunol., 2013;4:372.、Swiecki M. et al., Nat Rev Immunol., 2015;15:471-485.参照）。すなわち、ＨＬＡ－ＤＲ、ＣＤ８６、ＣＤ４０、ＣＤ８
０、ＣＤ８３等はｐＤＣの活性化マーカーとして評価に用いることができる。
前述の通りｐＤＣは抗原提示細胞としても働き、ヒトのｐＤＣは、主要組織適合抗原クラスＩＩ（ＭＨＣ－ＩＩ）である白血球型抗原遺伝子複合体（ＨＬＡ）－ＤＲ陽性細胞である。ｐＤＣはＨＬＡ－ＤＲにより外来抗原を提示することで、ＣＤ４陽性Ｔ細胞やＣＤ８陽性Ｔ細胞を活性化することができる。その際に、共刺激分子であるＣＤ８６、ＣＤ４０、ＣＤ８０、ＣＤ８３などによる共刺激シグナルがＴ細胞の活性化に必要とされる。したがって、ｐＤＣのＭＨＣ－ＩＩであるＨＬＡ－ＤＲや共刺激分子であるＣＤ８６などの発現が高いことは、ｐＤＣの抗原提示細胞としての活性が高いことを示す指標となる（T.
S. Mathan et al., Front Immunol., 2013;4:372.、Swiecki M. et al., Nat Rev Immunol., 2015;15:471-485.参照）。すなわち、ＨＬＡ－ＤＲ、ＣＤ８６、ＣＤ４０、ＣＤ８
０、ＣＤ８３等はｐＤＣの活性化マーカーとして評価に用いることができる。
【0022】
ｐＤＣの活性化マーカーの発現が高いことには、ｐＤＣ中のＣＤ８６陽性細胞数の割合の増加が含まれる。これは、任意の単位のｐＤＣ群全体に占めるＣＤ８６陽性細胞数の割合が、本発明の組成物の適用前に比べて適用後に、又は本発明の組成物の適用の場合に非適用の場合に比べて、増加することをいう。なお、係る割合の増加は、ＣＤ８６陽性細胞数の絶対的な増加によるものであってよい。ＣＤ８６陽性細胞はＣＤ８６を発現している細胞を指し、ｐＤＣにおいてＣＤ８６の発現はｐＤＣの活性化を表す。なお、ｐＤＣは元々ＨＬＡ－ＤＲ陽性細胞であるため、一部のｐＤＣのみが発現するＣＤ８６とは異なり、ＨＬＡ－ＤＲ陽性細胞数の割合はｐＤＣ活性化の指標とはならない（Dopheide J. F. et al., Thromb Haemost. 2012;108:1198-207.）。
また、ｐＤＣの活性化マーカーの発現が高いことには、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現量の増加が含まれる。これは、単位ｐＤＣにおいて（言い換えるとｐＤＣ１細胞当たりで）発現するＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ量が、本発明の組成物の適用前に比べて適用後に、又は本発明の組成物の適用の場合に非適用の場合に比べて、増加することをいう。言い換えると、本発明の組成物は、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現を促進することができる。
ここで、ＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲの発現は、周知の方法で定性的又は定量的に確認することができ、例えば蛍光標識化抗体を用いた免疫学的手法等により行うことができる。
また、ｐＤＣの活性化マーカーの発現が高いことには、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現量の増加が含まれる。これは、単位ｐＤＣにおいて（言い換えるとｐＤＣ１細胞当たりで）発現するＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ量が、本発明の組成物の適用前に比べて適用後に、又は本発明の組成物の適用の場合に非適用の場合に比べて、増加することをいう。言い換えると、本発明の組成物は、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現を促進することができる。
ここで、ＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲの発現は、周知の方法で定性的又は定量的に確認することができ、例えば蛍光標識化抗体を用いた免疫学的手法等により行うことができる。
【0023】
本発明の組成物はｐＤＣを活性化させることから、種々の免疫細胞の働きを活性化したり、ＩＦＮ産生を促進したりすることが見込まれるため、免疫機能を維持、改善、又は強化することが期待できる。免疫機能の維持とは正常又は良好な免疫機能が発揮されている状態を保ち機能低下することを防ぐことを含み、免疫機能の改善とは低下した免疫機能を正常な状態にすることを含む。
【0024】
本発明の組成物を投与する（摂取させる）対象は、動物であれば特に限定されないが、
通常は哺乳動物であり、ヒトが好ましい。また、対象は特に限定されないが、健康な人が好ましい。ここで健康な人とは、疾患や疾病に罹患していない人をいう。
通常は哺乳動物であり、ヒトが好ましい。また、対象は特に限定されないが、健康な人が好ましい。ここで健康な人とは、疾患や疾病に罹患していない人をいう。
【0025】
本発明の別の側面は、ｐＤＣ活性化用組成物の製造における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣ活性化における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣ活性化のために用いられる、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物である。
本発明の別の側面は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を対象に投与することを含む、ｐＤＣを活性化する方法である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣ活性化における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣ活性化のために用いられる、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物である。
本発明の別の側面は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を対象に投与することを含む、ｐＤＣを活性化する方法である。
【0026】
本発明の別の側面は、ｐＤＣ増加用組成物の製造における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣ増加における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣ増加のために用いられる、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物である。
本発明の別の側面は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を対象に投与することを含む、ｐＤＣを増加する方法である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣ増加における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣ増加のために用いられる、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物である。
本発明の別の側面は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を対象に投与することを含む、ｐＤＣを増加する方法である。
【0027】
本発明の別の側面は、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現促進用組成物の製造における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現促進における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現促進のために用いられる、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物である。
本発明の別の側面は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を対象に投与することを含む、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲを発現促進する方法である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現促進における、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の使用である。
本発明の別の側面は、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲ発現促進のために用いられる、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物である。
本発明の別の側面は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を対象に投与することを含む、ｐＤＣにおけるＣＤ８６及び／又はＨＬＡ－ＤＲを発現促進する方法である。
【0028】
なお、「ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を対象に投与すること」は、「ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を対象に摂取させること」と同義であってよい。摂取は、自発的なもの（自由摂取）であってもよく、強制的なもの（強制摂取）であってもよい。すなわち、投与工程は、具体的には、例えば、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を飲食品や飼料に配合して対象に供給し、以て対象にラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を自由摂取させる工程であってもよい。
【0029】
本発明の組成物の摂取（投与）時期や摂取（投与）期間は、特に限定されず、投与対象の状態に応じて適宜選択することができる。
【0030】
本発明の組成物は、それ自体を飲食品や医薬品等の形態としてもよいし、添加物として飲食品や医薬品等に含有させる形態としてもよい。
本発明の組成物の摂取（投与）経路は、経口又は非経口のいずれでもよいが、通常は経口である。また、非経口摂取（投与）としては、経皮、静注、直腸投与、吸入等が挙げられる。
本発明の組成物の摂取（投与）経路は、経口又は非経口のいずれでもよいが、通常は経口である。また、非経口摂取（投与）としては、経皮、静注、直腸投与、吸入等が挙げられる。
【0031】
本発明の組成物を経口摂取（投与）するときの含有量としては、前述した組成物全体における含有量としてもよいし、適宜希釈等してもよい。例えば、経口摂取（投与）時のラ
クトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の組成物全体に対する含有量は、好ましくは０．００１～１００質量％、より好ましくは０．００５～９５質量％、さらに好ましくは０．０１～８５質量％である。
これらは、通常、経口組成物として流通するときの含有量の範囲であってよい。
クトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の組成物全体に対する含有量は、好ましくは０．００１～１００質量％、より好ましくは０．００５～９５質量％、さらに好ましくは０．０１～８５質量％である。
これらは、通常、経口組成物として流通するときの含有量の範囲であってよい。
【0032】
本発明の組成物の摂取（投与）量は、摂取（投与）対象の年齢（月齢）、性別、状態、その他の条件等により適宜選択される。
本発明の組成物の摂取（投与）量は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の摂取量として、例えば、好ましくは０．０１～１０００ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは０．1～５００ｍｇ／ｋｇ／日、さらに好ましくは１～３００ｍｇ／ｋｇ／日の範
囲となる量を目安とするのがよい。
なお、摂取（投与）の量や期間にかかわらず、本発明の組成物は１日１回又は複数回に分けて投与することができる。
本発明の組成物の摂取（投与）量は、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の摂取量として、例えば、好ましくは０．０１～１０００ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは０．1～５００ｍｇ／ｋｇ／日、さらに好ましくは１～３００ｍｇ／ｋｇ／日の範
囲となる量を目安とするのがよい。
なお、摂取（投与）の量や期間にかかわらず、本発明の組成物は１日１回又は複数回に分けて投与することができる。
【0033】
本発明の組成物を経口摂取される組成物とする場合は、飲食品の態様とすることが好ましい。
飲食品としては、本発明の効果を損なわず、経口摂取できるものであれば形態や性状は特に制限されず、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を含有させること以外は、通常飲食品に用いられる原料を用いて通常の方法によって製造することができる。
飲食品としては、本発明の効果を損なわず、経口摂取できるものであれば形態や性状は特に制限されず、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物を含有させること以外は、通常飲食品に用いられる原料を用いて通常の方法によって製造することができる。
【0034】
飲食品としては、液状、ペースト状、ゲル状固体、粉末等の形態を問わず、例えば、錠菓；流動食（経管摂取用栄養食）；パン、マカロニ、スパゲッティ、めん類、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等の小麦粉製品；即席めん、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰め、電子レンジ食品、即席スープ・シチュー、即席みそ汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズ・ドライ食品、その他の即席食品等の即席食品類；農産缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物、煮豆類、農産乾物類、シリアル（穀物加工品）等の農産加工品；水産缶詰め、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、つくだ煮類等の水産加工品；畜産缶詰め・ペースト類、畜肉ハム・ソーセージ等の畜産加工品；加工乳、乳飲料、ヨーグルト（発酵乳）類、乳酸菌飲料類、チーズ、アイスクリーム類、クリーム、その他の乳製品等の乳・乳製品；バター、マーガリン類、植物油等の油脂類；しょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類等の基礎調味料；調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類、その他の複合調味料等の複合調味料・食品類；素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済冷凍食品等の冷凍食品；キャラメル、キャンディー、チューインガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、米菓子、豆菓子、デザート菓子、ゼリー、その他の菓子などの菓子類；炭酸飲料、天然果汁、果汁飲料、果汁入り清涼飲料、果肉飲料、果粒入り果実飲料、野菜系飲料、豆乳、豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料、その他の嗜好飲料等の嗜好飲料類、ベビーフード、ふりかけ、お茶漬けのり等のその他の市販食品等；サプリメント、調製乳（粉乳、液状乳等を含む）等の栄養組成物；経腸栄養食；機能性食品（特定保健用食品、栄養機能食品）等が挙げられる。
【0035】
なお、飲食品としてサプリメントの形態とする場合は、腸溶性コーティング等により腸溶処理されてもよい、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の固形製剤；溶液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤等の液剤；等に製剤化することができる。かかる製剤化に際しては、後述する医薬品の製剤化に係る成分、担体、及び方法の説明に準ずることができる。
【0036】
また、飲食品の一態様として飼料とすることもできる。飼料としては、ペットフード、家畜飼料、養魚飼料等が挙げられる。
飼料の形態としては特に制限されず、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の他に例えば、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦、マイロ等の穀類；大豆油粕、ナタネ油粕、ヤシ油粕、アマニ油粕等の植物性油粕類；フスマ、麦糠、米糠、脱脂米糠等の糠類；コーングルテンミール、コーンジャムミール等の製造粕類；魚粉、脱脂粉乳、ホエイ、イエローグリース、タロー等の動物性飼料類；トルラ酵母、ビール酵母等の酵母類；第三リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の鉱物質飼料；油脂類；単体アミノ酸；糖類等を含有するものであってよい。
飼料の形態としては特に制限されず、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の他に例えば、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦、マイロ等の穀類；大豆油粕、ナタネ油粕、ヤシ油粕、アマニ油粕等の植物性油粕類；フスマ、麦糠、米糠、脱脂米糠等の糠類；コーングルテンミール、コーンジャムミール等の製造粕類；魚粉、脱脂粉乳、ホエイ、イエローグリース、タロー等の動物性飼料類；トルラ酵母、ビール酵母等の酵母類；第三リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の鉱物質飼料；油脂類；単体アミノ酸；糖類等を含有するものであってよい。
【0037】
本発明の組成物が飲食品（飼料を含む）の態様である場合、免疫機能の維持等の用途が表示された飲食品として提供・販売されることが可能である。また、本明細書に係るラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物は、これら飲食品等の製造のために使用可能である。
【0038】
かかる「表示」行為には、需要者に対して前記用途を知らしめるための全ての行為が含まれ、前記用途を想起・類推させうるような表現であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、全て本発明における「表示」行為に該当する。
また、「表示」は、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により行われることが好ましい。具体的には、飲食品に係る商品又は商品の包装に前記用途を記載したものを譲渡し、引き渡し、譲渡若しくは引き渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が挙げられる。
また、「表示」は、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により行われることが好ましい。具体的には、飲食品に係る商品又は商品の包装に前記用途を記載したものを譲渡し、引き渡し、譲渡若しくは引き渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が挙げられる。
【0039】
一方、表示内容としては、行政等によって認可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示等）であることが好ましい。また、そのような表示内容を、包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等へ付することが好ましい。
【0040】
また、「表示」には、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、医薬用部外品等としての表示も挙げられる。この中でも特に、消費者庁によって認可される表示、例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、若しくは機能性表示食品に係る制度、又はこれらに類似する制度にて認可される表示等が挙げられる。具体的には、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク減少表示、科学的根拠に基づいた機能性の表示等を挙げることができ、より具体的には、健康増進法に規定する特別用途表示の許可等に関する内閣府令（平成二十一年八月三十一日内閣府令第五十七号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）及びこれに類する表示が典型的な例である。
かかる表示としては、例えば、「ｐＤＣ(プラズマサイトイド樹状細胞)に働きかけ」、「免疫細胞ｐＤＣに働きかける」、「免疫細胞ｐＤＣを活性化する」「免疫細胞ｐＤＣを増やす」、「健康な人の免疫機能の維持に役立つ」、「免疫機能を高める」、「免疫機能をサポート」、「健康な人の免疫機能の維持をサポート」、「ｐＤＣ (プラズマサイトイド樹状細胞)に働きかけ、健康な人の免疫機能の維持に役立つ」等と表示することが挙げ
られる。
かかる表示としては、例えば、「ｐＤＣ(プラズマサイトイド樹状細胞)に働きかけ」、「免疫細胞ｐＤＣに働きかける」、「免疫細胞ｐＤＣを活性化する」「免疫細胞ｐＤＣを増やす」、「健康な人の免疫機能の維持に役立つ」、「免疫機能を高める」、「免疫機能をサポート」、「健康な人の免疫機能の維持をサポート」、「ｐＤＣ (プラズマサイトイド樹状細胞)に働きかけ、健康な人の免疫機能の維持に役立つ」等と表示することが挙げ
られる。
【0041】
本発明の組成物は、医薬品の態様とすることもできる。
医薬品の投与経路は、経口又は非経口のいずれでもよいが経口が好ましい。また、非経口摂取（投与）としては、経皮、静注、直腸投与、吸入等が挙げられる。
医薬品の形態としては、投与方法に応じて、適宜所望の剤形に製剤化することができる。例えば、経口投与の場合、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の固形製剤；溶液剤、シ
ロップ剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等に製剤化することができる。また、腸溶性コーティング等により、腸溶剤とすることもできる。非経口投与の場合、座剤、軟膏剤、注射剤等に製剤化することができる。
製剤化に際しては、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の他に、通常製剤化に用いられている賦形剤、ｐＨ調整剤、着色剤、矯味剤等の成分を用いることができる。また、他の薬効成分や、公知の又は将来的に見出されるｐＤＣ活性化作用を有する成分等を併用することも可能である。
加えて、製剤化は剤形に応じて適宜公知の方法により実施できる。製剤化に際しては、適宜、通常製剤化に用いる担体を配合して製剤化してもよい。かかる担体としては、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
医薬品の投与経路は、経口又は非経口のいずれでもよいが経口が好ましい。また、非経口摂取（投与）としては、経皮、静注、直腸投与、吸入等が挙げられる。
医薬品の形態としては、投与方法に応じて、適宜所望の剤形に製剤化することができる。例えば、経口投与の場合、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の固形製剤；溶液剤、シ
ロップ剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等に製剤化することができる。また、腸溶性コーティング等により、腸溶剤とすることもできる。非経口投与の場合、座剤、軟膏剤、注射剤等に製剤化することができる。
製剤化に際しては、ラクトフェリン及び／又はラクトフェリン加水分解物の他に、通常製剤化に用いられている賦形剤、ｐＨ調整剤、着色剤、矯味剤等の成分を用いることができる。また、他の薬効成分や、公知の又は将来的に見出されるｐＤＣ活性化作用を有する成分等を併用することも可能である。
加えて、製剤化は剤形に応じて適宜公知の方法により実施できる。製剤化に際しては、適宜、通常製剤化に用いる担体を配合して製剤化してもよい。かかる担体としては、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
【0042】
賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット等の糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α－デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン誘導体；結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等の珪酸塩誘導体；リン酸カルシウム等のリン酸塩誘導体；炭酸カルシウム等の炭酸塩誘導体；硫酸カルシウム等の硫酸塩誘導体等が挙げられる。
【0043】
結合剤としては、例えば、上記賦形剤の他、ゼラチン；ポリビニルピロリドン；マクロゴール等が挙げられる。
【0044】
崩壊剤としては、例えば、上記賦形剤の他、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等の化学修飾されたデンプン又はセルロース誘導体等が挙げられる。
【0045】
滑沢剤としては、例えば、タルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ピーガム、ゲイロウ等のワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸等のカルボン酸類；安息香酸ナトリウム等のカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウム等の硫酸塩類；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム等のラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物等の珪酸類；デンプン誘導体等が挙げられる。
【0046】
安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類；塩化ベンザルコニウム；無水酢酸；ソルビン酸等が挙げられる。
【0047】
矯味矯臭剤としては、例えば、甘味料、酸味料、香料等が挙げられる。
なお、経口投与用の液剤の場合に使用する担体としては、水等の溶剤等が挙げられる。
なお、経口投与用の液剤の場合に使用する担体としては、水等の溶剤等が挙げられる。
【0048】
本発明の医薬品を摂取するタイミングは、例えば食前、食後、食間、就寝前など特に限定されない。
【実施例0049】
以下に実施例を用いて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【0050】
［実施例１］
協力者（ｎ＝３）から採取したヒト末梢血から単核細胞（ＰＢＭＣ）を回収した。ラク
トフェリン（森永乳業株式会社製ＭＬＦ－２）(１００～２００μｇ/ｍＬ)を添加又は非
添加（対照群）した、５％ヒト血清、Glutamax、１％ Penicillin Streptomycinを加えたＲＰＭＩ１６４０培地を用いて、１．０×１０６ｃｅｌｌｓ/ｍＬで、３７℃、５％ＣＯ
２条件下で培養した。培養開始２４時間後に細胞を回収し、フローサイトメーターを用いて、ＰＢＭＣの各免疫細胞の細胞表面マーカーＣＤ８６の発現を評価した。なお、ＣＤ８６の発現（陽性）は、ｐＤＣの活性化を表す。
結果を表１に示す。いずれの試料においても、ラクトフェリン存在下で培養した場合に、計測した全細胞数におけるｐＤＣ数の割合も、ｐＤＣ中のＣＤ８６陽性細胞数の割合も増加したことが認められた。また、ｐＤＣ１細胞当たりのＣＤ８６発現量も増加したことが認められた。
協力者（ｎ＝３）から採取したヒト末梢血から単核細胞（ＰＢＭＣ）を回収した。ラク
トフェリン（森永乳業株式会社製ＭＬＦ－２）(１００～２００μｇ/ｍＬ)を添加又は非
添加（対照群）した、５％ヒト血清、Glutamax、１％ Penicillin Streptomycinを加えたＲＰＭＩ１６４０培地を用いて、１．０×１０６ｃｅｌｌｓ/ｍＬで、３７℃、５％ＣＯ
２条件下で培養した。培養開始２４時間後に細胞を回収し、フローサイトメーターを用いて、ＰＢＭＣの各免疫細胞の細胞表面マーカーＣＤ８６の発現を評価した。なお、ＣＤ８６の発現（陽性）は、ｐＤＣの活性化を表す。
結果を表１に示す。いずれの試料においても、ラクトフェリン存在下で培養した場合に、計測した全細胞数におけるｐＤＣ数の割合も、ｐＤＣ中のＣＤ８６陽性細胞数の割合も増加したことが認められた。また、ｐＤＣ１細胞当たりのＣＤ８６発現量も増加したことが認められた。
【0051】
【表1】
【0052】
［実施例２］
協力者（ｎ＝２）から採取したヒト末梢血から単核細胞（ＰＢＭＣ）を回収した。ラクトフェリン（森永乳業株式会社製ＭＬＦ－２）(１００μｇ/ｍＬ)を添加又は非添加（対
照群）した、５％ヒト血清、ｓｓＲＮＡ（５μg/ｍＬ）、Glutamax、１％ Penicillin Streptomycinを加えたＲＰＭＩ１６４０培地を用いて、５．０×１０５ｃｅｌｌｓ/ｍＬで
、３７℃、５％ＣＯ２条件下で培養した。培養開始２４時間後に細胞を回収し、フローサイトメーターを用いて、ＰＢＭＣの各免疫細胞の細胞表面マーカーＣＤ８６とＨＬＡ－ＤＲの発現を評価した。なお、ＣＤ８６とＨＬＡ－ＤＲの発現はそれぞれ、ｐＤＣの活性化を表す。
結果を表２に示す。ラクトフェリン存在下で培養した場合に、ｐＤＣ１細胞当たりのＣＤ８６とＨＬＡ－ＤＲ発現量も増加したことが認められた。
協力者（ｎ＝２）から採取したヒト末梢血から単核細胞（ＰＢＭＣ）を回収した。ラクトフェリン（森永乳業株式会社製ＭＬＦ－２）(１００μｇ/ｍＬ)を添加又は非添加（対
照群）した、５％ヒト血清、ｓｓＲＮＡ（５μg/ｍＬ）、Glutamax、１％ Penicillin Streptomycinを加えたＲＰＭＩ１６４０培地を用いて、５．０×１０５ｃｅｌｌｓ/ｍＬで
、３７℃、５％ＣＯ２条件下で培養した。培養開始２４時間後に細胞を回収し、フローサイトメーターを用いて、ＰＢＭＣの各免疫細胞の細胞表面マーカーＣＤ８６とＨＬＡ－ＤＲの発現を評価した。なお、ＣＤ８６とＨＬＡ－ＤＲの発現はそれぞれ、ｐＤＣの活性化を表す。
結果を表２に示す。ラクトフェリン存在下で培養した場合に、ｐＤＣ１細胞当たりのＣＤ８６とＨＬＡ－ＤＲ発現量も増加したことが認められた。
【0053】
【表2】
【0054】
［製造例１］
本発明の組成物の一実施態様として、ラクトフェリンを含有する発酵乳の製造法を下記に示す。
まず、乳原料、ラクトフェリン（ミライ社製）、及びその他の成分等を、必要に応じて水を添加して混合溶解して調乳液を調製する。ラクトフェリンは、調乳液１００ｇ中の含有量が１００ｍｇになるように添加する。
次に、当該調乳液を、常法により、均質化処理、および加熱殺菌処理をする。加熱殺菌された殺菌調乳液に乳酸菌スターターを添加（接種）し、所定の発酵温度に保持して発酵させ、発酵物を得る。発酵によりカードが形成される。乳酸菌スターターとしては、例えば、ラクトバチルス・ブルガリクス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、ラクトコッカス・ラクチス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）等のヨーグルト製造に通常用いられている乳酸菌を用いることができる。
ｐＨが目標の値に達したら、形成されたカードを撹拌により破砕し、１０℃以下に冷却して、ラクトフェリン含有発酵乳を得る。
ｐＤＣはヒトの腸管にも存在することから、上記ラクトフェリン含有発酵乳を摂取することで、プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＤＣ）活性化、ｐＤＣ増加、及び／又はｐＤＣにおけるＣＤ８６やＨＬＡ－ＤＲの発現促進効果が期待される。
本発明の組成物の一実施態様として、ラクトフェリンを含有する発酵乳の製造法を下記に示す。
まず、乳原料、ラクトフェリン（ミライ社製）、及びその他の成分等を、必要に応じて水を添加して混合溶解して調乳液を調製する。ラクトフェリンは、調乳液１００ｇ中の含有量が１００ｍｇになるように添加する。
次に、当該調乳液を、常法により、均質化処理、および加熱殺菌処理をする。加熱殺菌された殺菌調乳液に乳酸菌スターターを添加（接種）し、所定の発酵温度に保持して発酵させ、発酵物を得る。発酵によりカードが形成される。乳酸菌スターターとしては、例えば、ラクトバチルス・ブルガリクス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、ラクトコッカス・ラクチス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）等のヨーグルト製造に通常用いられている乳酸菌を用いることができる。
ｐＨが目標の値に達したら、形成されたカードを撹拌により破砕し、１０℃以下に冷却して、ラクトフェリン含有発酵乳を得る。
ｐＤＣはヒトの腸管にも存在することから、上記ラクトフェリン含有発酵乳を摂取することで、プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＤＣ）活性化、ｐＤＣ増加、及び／又はｐＤＣにおけるＣＤ８６やＨＬＡ－ＤＲの発現促進効果が期待される。
【0055】
［製造例２］
本発明の組成物の一実施態様として、ラクトフェリンを含有する錠菓の製造法を下記に示す。
以下の組成の原料を混合し、常法により打錠して１ｇ当たりラクトフェリンを３００ｍｇ含有する錠剤を得る。
ウシラクトフェリン（ミライ社製） ３０．０（質量％）
ソルビトール（東和化成工業社製） １８．０
コーンスターチ（加藤化学社製） １３．０
還元麦芽糖（東和化成工業社製） ３６．８
グリセリン脂肪酸エステル（理研ビタミン社製） １．８
フレーバー（長谷川香料社製） ０．４
当該ラクトフェリン含有錠菓を摂取することで、プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＤＣ）活性化、ｐＤＣ増加、及び／又はｐＤＣにおけるＣＤ８６やＨＬＡ－ＤＲ発現促進効果
が期待される。
本発明の組成物の一実施態様として、ラクトフェリンを含有する錠菓の製造法を下記に示す。
以下の組成の原料を混合し、常法により打錠して１ｇ当たりラクトフェリンを３００ｍｇ含有する錠剤を得る。
ウシラクトフェリン（ミライ社製） ３０．０（質量％）
ソルビトール（東和化成工業社製） １８．０
コーンスターチ（加藤化学社製） １３．０
還元麦芽糖（東和化成工業社製） ３６．８
グリセリン脂肪酸エステル（理研ビタミン社製） １．８
フレーバー（長谷川香料社製） ０．４
当該ラクトフェリン含有錠菓を摂取することで、プラズマサイトイド樹状細胞（ｐＤＣ）活性化、ｐＤＣ増加、及び／又はｐＤＣにおけるＣＤ８６やＨＬＡ－ＤＲ発現促進効果
が期待される。