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特開2024-25634試料の検査方法、婦人科癌及びその前癌病変の検査キット及び医薬
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024025634
(43)【公開日】2024-02-26
(54)【発明の名称】試料の検査方法、婦人科癌及びその前癌病変の検査キット及び医薬
(51)【国際特許分類】
G01N 33/50 20060101AFI20240216BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240216BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20240216BHJP
【ＦＩ】
G01N33/50 D
A61P35/00
A61K45/00
【審査請求】未請求
【請求項の数】11
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2023025389
(22)【出願日】2023-02-21
(31)【優先権主張番号】P 2022128403
(32)【優先日】2022-08-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(71)【出願人】
【識別番号】899000057
【氏名又は名称】学校法人日本大学
(71)【出願人】
【識別番号】598121341
【氏名又は名称】慶應義塾
(74)【代理人】
【識別番号】100161207
【弁理士】
【氏名又は名称】西澤 和純
(74)【代理人】
【識別番号】100175824
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 淳一
(74)【代理人】
【識別番号】100126882
【弁理士】
【氏名又は名称】五十嵐 光永
(72)【発明者】
【氏名】加藤 侑希
(72)【発明者】
【氏名】川名 敬
(72)【発明者】
【氏名】久保 亜紀子
【テーマコード（参考）】
2G045
4C084
【Ｆターム（参考）】
2G045AA26
2G045CA25
2G045DA02
4C084AA17
4C084NA05
4C084ZB261
(57)【要約】
【課題】婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の有無の評価、婦人科癌患者の予後の評価、又は、婦人科癌の悪性度の評価に適用可能な、簡便かつ精度が高い試料の検査方法、前記検査方法に使用可能な検査キット、及び前記検査方法により検出された対象に投与される婦人科癌を治療又は予防するための医薬を提供する。
【解決手段】対象由来の試料中の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ）と、工程（Ａ）で得られた遊離脂肪酸の濃度に基づいて、前記対象が婦人科癌を有する可能性を評価する工程（Ｂ）と、を含む、試料の検査方法を採用する。
【選択図】なし
【解決手段】対象由来の試料中の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ）と、工程（Ａ）で得られた遊離脂肪酸の濃度に基づいて、前記対象が婦人科癌を有する可能性を評価する工程（Ｂ）と、を含む、試料の検査方法を採用する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ１）と、
前記工程（Ａ１）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性を評価する工程（Ｂ１）と、を含み、
前記工程（Ｂ１）において、下記（ｉ１）、（ｉｉ１）及び（ｉｉｉ１）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ１）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い；
（ｉｉｉ１）オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比が、所定の閾値と比較して、低い。
前記工程（Ａ１）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性を評価する工程（Ｂ１）と、を含み、
前記工程（Ｂ１）において、下記（ｉ１）、（ｉｉ１）及び（ｉｉｉ１）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ１）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い；
（ｉｉｉ１）オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比が、所定の閾値と比較して、低い。
【請求項2】
婦人科癌を有する対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ２）と、
前記工程（Ａ２）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が予後不良となる可能性を評価する工程（Ｂ２）と、を含み、
前記工程（Ｂ２）において、下記（ｉ２）及び（ｉｉ２）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が予後不良となる可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ２）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ２）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
前記工程（Ａ２）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が予後不良となる可能性を評価する工程（Ｂ２）と、を含み、
前記工程（Ｂ２）において、下記（ｉ２）及び（ｉｉ２）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が予後不良となる可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ２）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ２）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【請求項3】
婦人科癌を有する対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ３）と、
前記工程（Ａ３）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が有する婦人科癌が、悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかを評価する工程（Ｂ３）と、を含み、
前記工程（Ｂ３）において、下記（ｉ３）及び（ｉｉ３）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記婦人科癌は悪性腫瘍である可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ３）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ３）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
前記工程（Ａ３）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が有する婦人科癌が、悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかを評価する工程（Ｂ３）と、を含み、
前記工程（Ｂ３）において、下記（ｉ３）及び（ｉｉ３）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記婦人科癌は悪性腫瘍である可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ３）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ３）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【請求項4】
前記工程（Ｂ１）により婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと判定された前記対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかについて、前記工程（Ａ１）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて評価する工程（Ｃ１）を更に含み、
前記工程（Ｃ１）において、下記（Ｃｉ）に該当する場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと評価する、請求項１に記載の試料の検査方法；
（Ｃｉ）ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
前記工程（Ｃ１）において、下記（Ｃｉ）に該当する場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと評価する、請求項１に記載の試料の検査方法；
（Ｃｉ）ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【請求項5】
前記婦人科癌が、卵巣癌、子宮体癌、及び子宮頸癌からなる群より選択される少なくとも１種を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の試料の検査方法。
【請求項6】
前記婦人科癌が、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩの婦人科悪性腫瘍である、請求項１に記載の試料の検査方法。
【請求項7】
前記工程（Ａ１）がパルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程であり、
前記工程（Ｂ１）の（ｉ１）における遊離脂肪酸がパルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種であり、（ｉｉ１）における遊離脂肪酸がバクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項６に記載の試料の検査方法。
前記工程（Ｂ１）の（ｉ１）における遊離脂肪酸がパルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種であり、（ｉｉ１）における遊離脂肪酸がバクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項６に記載の試料の検査方法。
【請求項8】
前記試料が血液試料である、請求項１～４のいずれか一項に記載の試料の検査方法。
【請求項9】
パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含み、
下記（ａ）～（ｄ）からなる群より選択される少なくとも１つの目的に使用される、婦人科癌及びその前癌病変の検査キット；
（ａ）対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性の評価；
（ｂ）婦人科癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価；
（ｃ）対象が有する婦人科癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価；
（ｄ）婦人科癌及び婦人科癌前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかの評価。
下記（ａ）～（ｄ）からなる群より選択される少なくとも１つの目的に使用される、婦人科癌及びその前癌病変の検査キット；
（ａ）対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性の評価；
（ｂ）婦人科癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価；
（ｃ）対象が有する婦人科癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価；
（ｄ）婦人科癌及び婦人科癌前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかの評価。
【請求項10】
請求項１～４のいずれか一項に記載の試料の検査方法に用いられる、請求項９に記載の婦人科癌の検査キット。
【請求項11】
請求項１に記載の検査方法により婦人科癌を有すると評価された対象に投与される、婦人科癌を治療又は予防するための医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、試料の検査方法、婦人科癌及びその前癌病変の検査キット及び医薬に関する。
【背景技術】
【0002】
卵巣癌は、腹腔内で発生する腫瘍であるため症状を呈しにくく、また、生体検査により病理学的に診断することができないため、早期発見が極めて困難である。また、子宮体癌および子宮頸癌等のその他の婦人科癌も、早期診断が可能な血清腫瘍マーカーは確立されておらず、現在では、不正出血等により偶然に発見される例が少なくない。
【0003】
卵巣癌腫瘍マーカーとして、例えば、ＣＡ１２５が知られている（例えば、特許文献１を参照）。しかしながら、ＣＡ１２５の血中濃度は、早期卵巣癌、粘液性卵巣癌、卵巣明細胞癌では必ずしも高くないため、これらの癌は陽性判定されない場合がある。また、ＣＡ１２５の血中濃度は、良性疾患及び炎症性疾患においても高くなることがあるため、ＣＡ１２５の血中濃度による判定は偽陽性率が高い。そのため、ＣＡ１２５は、卵巣癌の腫瘍マーカーとしては不十分である。
【0004】
近年では、癌の診断手法として、末梢血液中の特定のエクソソーム又はマイクロＲＮＡを検出する方法が提案されている（例えば、非特許文献１を参照）。しかしながら、生体試料からエクソソーム及びマイクロＲＮＡを分析する際には、超遠心及びアフィニティー分離等の操作が必要である。そのため、これらを腫瘍マーカーとして用いる検査は煩雑であり、時間を要する。また、一定数の偽陽性が存在するという課題もあり、実用化には至っていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【特許文献1】特許第６５３８８８７号公報
【非特許文献】
【0006】
【非特許文献1】Yu Zhang et al., Emerging Functions and Clinical Applications of Exosomal ncRNAs in Ovarian Cancer. Front. Oncol., 05 November 2021, https://doi.org/10.3389/fonc.2021.765458
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
上記のように、従来の癌のスクリーニング方法は、簡便さ、及び精度の点で課題がある。そのため、簡便な方法で、精度よく婦人科癌を早期に検出可能な方法が求められている。
【0008】
そこで、本発明は、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の有無の評価、婦人科癌患者の予後の評価、又は、婦人科癌の悪性度の評価に適用可能な、簡便かつ精度が高い試料の検査方法、前記検査方法に使用可能な検査キット、及び前記検査方法により検出された対象に投与される婦人科癌を治療又は予防するための医薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0009】
本発明は、以下の態様を含む。
［１］対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ１）と、
前記工程（Ａ１）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性を評価する工程（Ｂ１）と、を含み、
前記工程（Ｂ１）において、下記（ｉ１）、（ｉｉ１）及び（ｉｉｉ１）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ１）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い；
（ｉｉｉ１）オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比が、所定の閾値と比較して、低い。
［１］対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ１）と、
前記工程（Ａ１）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性を評価する工程（Ｂ１）と、を含み、
前記工程（Ｂ１）において、下記（ｉ１）、（ｉｉ１）及び（ｉｉｉ１）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ１）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い；
（ｉｉｉ１）オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比が、所定の閾値と比較して、低い。
【0010】
［２］婦人科癌を有する対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ２）と、
前記工程（Ａ２）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が予後不良となる可能性を評価する工程（Ｂ２）と、を含み、
前記工程（Ｂ２）において、下記（ｉ２）及び（ｉｉ２）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が予後不良となる可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ２）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ２）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
前記工程（Ａ２）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が予後不良となる可能性を評価する工程（Ｂ２）と、を含み、
前記工程（Ｂ２）において、下記（ｉ２）及び（ｉｉ２）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が予後不良となる可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ２）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ２）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0011】
［３］婦人科癌を有する対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程（Ａ３）と、
前記工程（Ａ３）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が有する婦人科癌が、悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかを評価する工程（Ｂ３）と、を含み、
前記工程（Ｂ３）において、下記（ｉ３）及び（ｉｉ３）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記婦人科癌は悪性腫瘍である可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ３）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ３）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
前記工程（Ａ３）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記対象が有する婦人科癌が、悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかを評価する工程（Ｂ３）と、を含み、
前記工程（Ｂ３）において、下記（ｉ３）及び（ｉｉ３）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記婦人科癌は悪性腫瘍である可能性が高いと評価する、試料の検査方法；
（ｉ３）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ３）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0012】
［４］前記工程（Ｂ１）により婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと判定された前記対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかについて、前記工程（Ａ１）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて評価する工程（Ｃ１）を更に含み、
前記工程（Ｃ１）において、下記（Ｃｉ）に該当する場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと評価する、［１］に記載の試料の検査方法；
（Ｃｉ）ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
前記工程（Ｃ１）において、下記（Ｃｉ）に該当する場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと評価する、［１］に記載の試料の検査方法；
（Ｃｉ）ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0013】
［５］前記婦人科癌が、卵巣癌、子宮体癌、及び子宮頸癌からなる群より選択される少なくとも１種を含む、［１］～［４］のいずれかに記載の試料の検査方法。
［６］前記婦人科癌が、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの婦人科悪性腫瘍である、［１］に記載の試料の検査方法。
［７］前記工程（Ａ１）がパルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程であり、
前記工程（Ｂ１）の（ｉ１）における遊離脂肪酸がパルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種であり、（ｉｉ１）における遊離脂肪酸がバクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸からなる群より選択される少なくとも１種である、［６］に記載の試料の検査方法。
［８］前記試料が血液試料である、［１］～［４］のいずれかに記載の試料の検査方法。
［６］前記婦人科癌が、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの婦人科悪性腫瘍である、［１］に記載の試料の検査方法。
［７］前記工程（Ａ１）がパルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程であり、
前記工程（Ｂ１）の（ｉ１）における遊離脂肪酸がパルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種であり、（ｉｉ１）における遊離脂肪酸がバクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸からなる群より選択される少なくとも１種である、［６］に記載の試料の検査方法。
［８］前記試料が血液試料である、［１］～［４］のいずれかに記載の試料の検査方法。
【0014】
［９］ パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含み、
下記（ａ）～（ｄ）からなる群より選択される少なくとも１つの目的に使用される、婦人科癌及びその前癌病変の検査キット；
（ａ）対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性の評価；
（ｂ）婦人科癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価；
（ｃ）対象が有する婦人科癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価；
（ｄ）婦人科癌及び婦人科癌前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかの評価。
［１０］［１］～［４］のいずれかに記載の試料の検査方法に用いられる、［９］に記載の婦人科癌の検査キット。
下記（ａ）～（ｄ）からなる群より選択される少なくとも１つの目的に使用される、婦人科癌及びその前癌病変の検査キット；
（ａ）対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性の評価；
（ｂ）婦人科癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価；
（ｃ）対象が有する婦人科癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価；
（ｄ）婦人科癌及び婦人科癌前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかの評価。
［１０］［１］～［４］のいずれかに記載の試料の検査方法に用いられる、［９］に記載の婦人科癌の検査キット。
【0015】
［１１］［１］に記載の検査方法により婦人科癌を有すると評価された対象に投与される、婦人科癌を治療又は予防するための医薬。
【発明の効果】
【0016】
本発明によれば、婦人科癌の有無の評価、婦人科癌患者の予後の評価、又は、婦人科癌の悪性度の評価に適用可能な、簡便かつ精度が高い試料の検査方法、前記検査方法に使用可能な検査キット、及び前記検査方法により特定された対象に投与される婦人科癌を治療又は予防するための医薬を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【0017】
【図1A】実験例１における、正常卵巣組織（Ｎｏｒｍａｌ ｔｉｓｓｕｅ）及び卵巣癌組織（ＯＶ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅ）での脂肪酸代謝酵素の発現量の解析結果を、ヒートマップにより示した図である。
【図1B】実験例１における、正常卵巣組織（ＮＴ）及び卵巣癌組織（Ｔｕ）でのＦＡＳＮ及びＳＣＤ１の発現量の解析結果を示すグラフである。
【図1C】実験例１における、正常卵巣組織（ＮＴ）及び卵巣癌組織（Ｔｕ）でのＥＬＯＶＬ１、ＥＬＯＶＬ２、ＥＬＯＶＬ３、ＥＬＯＶＬ４、ＥＬＯＶＬ５、ＥＬＯＶＬ６及びＦＡＤＳ１の発現量の解析結果を示すグラフである。
【図1D】実験例１における、正常卵巣組織（ＮＴ）及び卵巣癌組織（Ｔｕ）でのＡＣＡＣＡ及びＦＡＤＳ２の発現量の解析結果を示すグラフである。
【0018】
【図2A】実験例２における、女性の健常者（Ｈｅａｌｔｈｙ ｄｏｎｏｒ）及び卵巣癌患者（ＯＶ ｃａ ｐａｔｉｅｎｔｓ）の血清中の遊離脂肪酸濃度の解析結果を、ヒートマップにより示した図である。
【図2B】実験例２における、女性の健常者（ＨＤ）及び卵巣癌患者（ＯＶ）の血清中のパルミトレイン酸、パルミチン酸、γ－リノレン酸、ステアリドン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸及びステアリン酸の濃度の解析結果を示すグラフである。
【図2C】実験例２における、女性の健常者（ＨＤ）及び卵巣癌患者（ＯＶ）の血清中のアラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ドコサペンタエン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸の濃度の解析結果を示すグラフである。
【図2D】実験例２における、卵巣癌患者の血清中の遊離脂肪酸濃度の解析結果を、ボルケーノプロットにより示した図である。図中、「ＯＶ ｃａ」及び「ｈｅａｌｔｈｙ」は、卵巣癌患者及び女性の健常者をそれぞれ表す。
【0019】
【図3A】実験例１における脂肪酸代謝酵素発現の変化と、実験例２における脂肪酸構成の変化の相関を表す図である。
【図3B】実験例１における脂肪酸代謝酵素発現の変化と、実験例２における脂肪酸構成の変化の相関を表す図である。
【図3C】実験例３における、卵巣腫瘍組織のＳＣＤ１遺伝子発現量と、卵巣癌患者血清中のＳＣＤ１活性に相当する脂肪酸比（生成脂肪酸／基質脂肪酸比（パルミトレイン酸／パルミチン酸比））の相関を示すグラフである。
【図3D】実験例３における、卵巣腫瘍組織のＳＣＤ１遺伝子発現量と、卵巣癌患者血清中のＳＣＤ１活性に相当する脂肪酸比（生成脂肪酸／基質脂肪酸比（オレイン酸／ステアリン酸比））の相関を示すグラフである。
【0020】
【図4A】実験例４における、女性の健常者と卵巣癌患者についての、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、パルミチン酸及びオレイン酸の血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【図4B】実験例４における、女性の健常者と卵巣癌患者についての、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸の血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【0021】
【図5A】実験例５における、女性の健常者についての、１０種の遊離脂肪酸の血清中濃度が異常値であるか否かを、閾値に基づき判定した結果を示す図である。
【図5B】実験例５における、卵巣悪性腫瘍患者についての、１０種の遊離脂肪酸の血清中濃度が異常値であるか否かを、閾値に基づき判定した結果を示す図である。
【図5C】実験例５における、女性の健常者と卵巣悪性腫瘍患者についての、ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【0022】
【図6A】実験例６における、女性の健常者（ＨＤ）、Ｓｔａｇｅ Ｉ及びＩＩの卵巣癌患者、並びにＳｔａｇｅ ＩＩＩ及びＩＶの卵巣癌患者での、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の血清中濃度の解析結果を示す図である。
【図6B】実験例６における、女性の健常者（ＨＤ）、Ｓｔａｇｅ Ｉ及びＩＩの卵巣癌患者、並びにＳｔａｇｅ ＩＩＩ及びＩＶの卵巣癌患者での、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸の血清中濃度の解析結果を示す図である。
【0023】
【図7A】実験例７における、女性の健常者と、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者についての、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【図7B】実験例７における、女性の健常者と、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者についての、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸の血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【0024】
【図8A】実験例８における、女性の健常者についての、８種の遊離脂肪酸の血清中濃度が異常値であるか否かを、閾値に基づき判定した結果を示す図である。
【図8B】実験例８における、卵巣癌患者についての、８種の遊離脂肪酸の血清中濃度が異常値であるか否かを、閾値に基づき判定した結果を示す図である。
【図8C】実験例８における、女性の健常者（ＨＤ）と早期卵巣癌患者（ＳｔａｇｅＩ、ＩＩ）についての、ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【図8D】実験例８における、早期卵巣癌患者（ＳｔａｇｅＩ、ＩＩ）の、ＦＦＡスコア及びＣＡ１２５の血中濃度の分布を示す図である。図中、「Ｃｌｅａｒ ｃｅｌｌ」及び「Ｏｔｈｅｒｓ」は、卵巣明細胞癌患者及び卵巣明細胞癌以外の組織型の卵巣癌患者をそれぞれ表す。
【0025】
【図9】実験例９における、ＦＦＡスコア ｈｉｇｈ群及びＦＦＡスコア ｌｏｗ群の無憎悪生存率（ＰＦＳ）の推移を示す図である。
【0026】
【図10A】実験例１０における、卵巣境界悪性腫瘍患者についての、１０種の遊離脂肪酸の血清中濃度が異常値であるか否かを、閾値に基づき判定した結果を示す図である。
【図10B】実験例１０における、卵巣境界悪性腫瘍患者及び卵巣癌患者（卵巣悪性腫瘍患者）についての、ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【0027】
【図11A】実験例１１における、女性の健常者、子宮体癌患者、及び子宮頸癌患者の血清中の、パルミトレイン酸、パルミチン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の濃度の解析結果を示すグラフである。
【図11B】実験例１１における、女性の健常者、子宮体癌患者、及び子宮頸癌患者の血清中の、バクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸の濃度の解析結果を示すグラフである。
【0028】
【図12A】実験例１２における、女性の健常者と、ＳｔａｇｅＩあるいはＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩの子宮頚癌患者についての、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の血清中の遊離脂肪酸濃度の解析結果、ならびに血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【図12B】実験例１２における、女性の健常者と、ＳｔａｇｅＩあるいはＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩの子宮頚癌患者についての、バクセン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサヘキサエン酸の血清中の遊離脂肪酸濃度の解析結果、ならびに血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【図12C】実験例１２における、女性の健常者と、ＳｔａｇｅＩあるいはＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩの子宮頚癌患者についての、アドレン酸及びドコサペンタエン酸の血清中の遊離脂肪酸濃度の解析結果、ならびに血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【0029】
【図13A】実験例１３における、女性の健常者と、ＳｔａｇｅＩあるいはＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩの子宮頚癌患者についての、血清中の濃度比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）の解析結果、ならびにＲＯＣ解析結果を示す図である。
【0030】
【図13B】実験例１３における、女性の健常者と、ＳｔａｇｅＩあるいはＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩの子宮頚癌患者についての、濃度比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）、ＳＣＣマーカー及びＣＥＡの血中濃度の分布を示す図である。
【0031】
【図14A】実験例１４における、女性の健常者と、子宮頚癌前癌病変患者についての、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の血清中の遊離脂肪酸濃度の解析結果、ならびに血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【図14B】実験例１４における、女性の健常者と、子宮頚癌前癌病変患者についての、アラキドン酸及びアラキジン酸の血清中の遊離脂肪酸濃度の解析結果、ならびに血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【0032】
【図15】実験例１５における、子宮頸癌前癌病変（ＣＩＮ）患者と、子宮頸癌患者についての、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸の血清中の遊離脂肪酸濃度の解析結果、ならびに血清中濃度によるＲＯＣ解析結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【0033】
［試料の検査方法（１）］
第１の態様に係る試料の検査方法は、対象が婦人科癌を有する可能性を評価するために用いることができる。前記検査方法は、下記の工程（Ａ１）及び工程（Ｂ１）を含む。
工程（Ａ１）：対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程
工程（Ｂ１）：工程（Ａ１）で得られた、遊離脂肪酸の試料中の濃度に基づいて、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性を評価する工程
第１の態様に係る試料の検査方法は、対象が婦人科癌を有する可能性を評価するために用いることができる。前記検査方法は、下記の工程（Ａ１）及び工程（Ｂ１）を含む。
工程（Ａ１）：対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程
工程（Ｂ１）：工程（Ａ１）で得られた、遊離脂肪酸の試料中の濃度に基づいて、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性を評価する工程
【0034】
検査に供される試料が由来する「対象」は、ヒトの女性である。本明細書において、婦人科癌とは、ヒトの男性は罹患せず、ヒトの女性が罹患し得る、癌を意味する。言い換えると、婦人科癌とは、女性に特異的な臓器（ヒトの男性は有さず、ヒトの女性が有する臓器）において、発生し得る癌を意味する。女性特異的な臓器としては、例えば、卵巣、子宮が挙げられる。
婦人科癌としては、例えば、卵巣癌、子宮体癌、子宮頸癌が挙げられる。本明細書において、「癌」という用語は、悪性腫瘍及び境界性悪性腫瘍を包含する。卵巣癌は、卵巣悪性腫瘍でもよく、卵巣境界悪性腫瘍でもよい。子宮体癌は、子宮体部悪性腫瘍でもよく、子宮体部境界悪性腫瘍でもよい。子宮頸癌は、子宮頸部悪性腫瘍でもよく、子宮頸部境界悪性腫瘍でもよい。本実施形態の検査方法により検出される婦人科癌は、好ましくは悪性腫瘍であり、より好ましくは卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍、または子宮頸部悪性腫瘍である。以下、婦人科癌における悪性腫瘍を「婦人科悪性腫瘍」ともいう。婦人科癌における「境界悪性腫瘍」を「婦人科境界悪性腫瘍」ともいう。
婦人科癌としては、例えば、卵巣癌、子宮体癌、子宮頸癌が挙げられる。本明細書において、「癌」という用語は、悪性腫瘍及び境界性悪性腫瘍を包含する。卵巣癌は、卵巣悪性腫瘍でもよく、卵巣境界悪性腫瘍でもよい。子宮体癌は、子宮体部悪性腫瘍でもよく、子宮体部境界悪性腫瘍でもよい。子宮頸癌は、子宮頸部悪性腫瘍でもよく、子宮頸部境界悪性腫瘍でもよい。本実施形態の検査方法により検出される婦人科癌は、好ましくは悪性腫瘍であり、より好ましくは卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍、または子宮頸部悪性腫瘍である。以下、婦人科癌における悪性腫瘍を「婦人科悪性腫瘍」ともいう。婦人科癌における「境界悪性腫瘍」を「婦人科境界悪性腫瘍」ともいう。
【0035】
本実施形態の検査方法で検出対象となる婦人科癌のステージは特に限定されない。なお、本明細書において記載する癌のステージは、ＴＮＭ分類による。本実施形態の検査方法では、早期の婦人科癌（例えば、Ｓｔａｇｅ Ｉ、ＩＩ）からステージの進んだ癌（例えば、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ、ＩＶ）まで幅広く検出することができる。検出対象の婦人科癌は、早期婦人科悪性腫瘍であってもよい。早期婦人科悪性腫瘍とは、Ｓｔａｇｅ ０、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩの婦人科悪性腫瘍を意味する。早期婦人科悪性腫瘍は、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩの悪性腫瘍が好ましい。検出対象の早期婦人科悪性腫瘍としては、早期卵巣悪性腫瘍が好ましい。検出対象の婦人科癌は、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ、Ｓｔａｇｅ ＩＶの悪性腫瘍であってもよい。本実施形態の検査方法で検出対象となる婦人科癌は、Ｓｔａｇｅ Ｉ以上の進行度を有する婦人科悪性腫瘍であってもよい。Ｓｔａｇｅ Ｉ以上の進行度を有する婦人科悪性腫瘍は、Ｓｔａｇｅ Ｉ、Ｓｔａｇｅ ＩＩ、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ、及びＳｔａｇｅ ＩＶの婦人科悪性腫瘍を包含する。
【0036】
本明細書において、「前癌病変」という用語は、正常な組織に比べて、癌が発生しやすい状態に変化した組織を意味する。すなわち、「前癌病変」は癌に進展する可能性の高い組織である。「婦人科癌の前癌病変」は、「婦人科癌」に進展する可能性の高い組織を意味する。前癌病変は、上皮内腫瘍とも呼ばれる。
【0037】
（工程（Ａ１））
工程（Ａ１）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
以下、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸を、まとめて「Ａ１群の遊離脂肪酸」ともいう。
工程（Ａ１）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
以下、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸を、まとめて「Ａ１群の遊離脂肪酸」ともいう。
【0038】
対象由来の試料としては、本発明の効果が奏される限り特に限定されず、例えば、尿、血液、唾液、汗、組織片等の生体試料が挙げられ、血液が好ましい。血液試料としては、例えば、全血、血漿、血清等が挙げられる。
【0039】
試料中の遊離脂肪酸の濃度を測定する方法は、特に限定されない。例えば、当業者に公知の方法を用いて試料中の遊離脂肪酸の濃度を測定することができる。そのような方法としては、例えば、ガスクロマトグラフィー質量分析、液体クロマトグラフィー質量分析、ガスクロマトグラフィー等が挙げられる。
【0040】
工程（Ａ１）において、測定対象の遊離脂肪酸の種類数は、Ａ１群の遊離脂肪酸から選択される１種以上であればよく、２種以上であってもよいし、３種以上であってもよいし、４種以上であってもよいし、５種以上であってもよいし、６種以上であってもよいし、７種以上であってもよいし、８種以上であってもよいし、９種以上であってもよいし、１０種以上であってもよいし、１１種以上であってもよいし、１２種以上であってもよいし、１３種以上であってもよいし、１４種以上であってもよいし、１５種であってもよい。測定対象の遊離脂肪酸は、Ａ１群の遊離脂肪酸の中から任意に選択できる。
【0041】
測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、１２種以上、１３種以上、又は１４種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、アラキドン酸及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、又は６種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種）であってもよい。
あるいは、測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、アラキドン酸及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上（例えば、２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、又は６種）であってもよい。
【0042】
検出対象が婦人科癌である場合、工程（Ａ１）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、１２種以上、１３種以上、又は１４種の遊離脂肪酸を測定することができる。検出対象が婦人科癌である場合、工程（Ａ１）では、前記１４種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0043】
検出対象であり得る婦人科癌が卵巣癌である場合、工程（Ａ１）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が卵巣癌である場合、工程（Ａ１）では、前記１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0044】
早期婦人科悪性腫瘍（例えば、Ｓｔａｇｅ Ｉ、ＩＩ）の検出感度を高めるために、工程（Ａ１）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種の遊離脂肪酸を測定することができる。早期婦人科悪性腫瘍を検出しようとする場合、工程（Ａ１）では、前記８種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。早期婦人科悪性腫瘍としては、例えば、早期卵巣悪性腫瘍が挙げられる。
【0045】
検出対象であり得る婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、工程（Ａ１）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、工程（Ａ１）では、前記１２種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0046】
検出対象であり得る婦人科癌が子宮体癌である場合、工程（Ａ１）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が子宮体癌である場合、工程（Ａ１）では、前記８種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0047】
検出対象であり得る婦人科癌が子宮頸癌である場合、工程（Ａ１）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、工程（Ａ１）では、前記１２種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0048】
婦人科癌前癌病変（例えば、子宮頸がん癌前癌病変）を含めて検出しようとする場合、工程（Ａ１）では、評価に用いる遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、アラキドン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、又は６種の遊離脂肪酸を測定することができる。
【0049】
（工程（Ｂ１））
工程（Ｂ１）では、工程（Ａ１）で得られた、遊離脂肪酸の試料中の濃度に基づいて、対象が婦人科癌を有する可能性を評価する。
工程（Ｂ１）では、工程（Ａ１）で得られた、遊離脂肪酸の試料中の濃度に基づいて、対象が婦人科癌を有する可能性を評価する。
【0050】
工程（Ｂ１）では、下記（ｉ１）及び（ｉｉ１）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価する。
【0051】
（ｉ１）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い。
（ｉｉ１）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
（ｉｉｉ１）オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比が、所定の閾値と比較して、低い。
（ｉｉ１）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
（ｉｉｉ１）オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比が、所定の閾値と比較して、低い。
【0052】
上記（ｉ１）に記載される遊離脂肪酸（パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸及びアラキドン酸）を、まとめて「Ｂ（ｉ１）群の遊離脂肪酸」ともいう。上記（ｉｉ１）に記載される遊離脂肪酸（バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸）を、まとめて「Ｂ（ｉｉ１）群の遊離脂肪酸」ともいう。
上記（ｉ１）及び（ｉｉ１）における「所定の閾値」は、遊離脂肪酸毎に設定される値である。
工程（Ａ１）で測定された遊離脂肪酸がＢ（ｉ１）群の遊離脂肪酸である場合、当該遊離脂肪酸について設定される所定の閾値と比較して、工程（Ａ１）で測定された当該遊離脂肪酸の濃度が高いと、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価される。
工程（Ａ１）で測定された遊離脂肪酸がＢ（ｉｉ１）群の遊離脂肪酸である場合、当該遊離脂肪酸について設定される所定の閾値と比較して、工程（Ａ１）で測定された当該遊離脂肪酸の濃度が低いと、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価される。
工程（Ａ１）で測定された遊離脂肪酸が２種以上である場合、それらの遊離脂肪酸をＢ（ｉ１）群の遊離脂肪酸及びＢ（ｉｉ１）群の遊離脂肪酸に分類し、各遊離脂肪酸について（ｉ１）又は（ｉｉ１）に該当するかを確認する。測定された遊離脂肪酸の種類数に対して、（ｉ１）又は（ｉｉ１）に該当する遊離脂肪酸の種類数の割合が高いほど、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性がより高いと評価することができる。
上記（ｉ１）及び（ｉｉ１）における「所定の閾値」は、遊離脂肪酸毎に設定される値である。
工程（Ａ１）で測定された遊離脂肪酸がＢ（ｉ１）群の遊離脂肪酸である場合、当該遊離脂肪酸について設定される所定の閾値と比較して、工程（Ａ１）で測定された当該遊離脂肪酸の濃度が高いと、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価される。
工程（Ａ１）で測定された遊離脂肪酸がＢ（ｉｉ１）群の遊離脂肪酸である場合、当該遊離脂肪酸について設定される所定の閾値と比較して、工程（Ａ１）で測定された当該遊離脂肪酸の濃度が低いと、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価される。
工程（Ａ１）で測定された遊離脂肪酸が２種以上である場合、それらの遊離脂肪酸をＢ（ｉ１）群の遊離脂肪酸及びＢ（ｉｉ１）群の遊離脂肪酸に分類し、各遊離脂肪酸について（ｉ１）又は（ｉｉ１）に該当するかを確認する。測定された遊離脂肪酸の種類数に対して、（ｉ１）又は（ｉｉ１）に該当する遊離脂肪酸の種類数の割合が高いほど、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性がより高いと評価することができる。
【0053】
上記（ｉ１）及び（ｉｉ１）における各遊離脂肪酸の濃度の所定の閾値は、女性の健常者に由来する複数の試料、ならびに、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する患者に由来する複数の試料から各遊離脂肪酸の濃度を取得し、それらの各遊離脂肪酸の濃度を統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
【0054】
特定の遊離脂肪酸の濃度の所定の閾値は、例えば、その特定遊離脂肪酸についての陽性尤度比が最大となるように設定してもよい。陽性尤度比が最大となる閾値は、例えば、ＲＯＣ解析を行って設定することができる。例えば、任意の人数の婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する患者群、ならびに、女性の健常者群について、特定の遊離脂肪酸の血清濃度を測定し、それらの血清濃度を用いてＲＯＣ解析を行うことができる。
【0055】
前記工程（Ａ１）で用いた対象由来の試料が血清である場合、上記（ｉ１）及び（ｉｉ１）における各遊離脂肪酸の濃度の閾値としては、例えば、次のようなものが挙げられるが、それらに限定されない。
【0056】
パルミトレイン酸の閾値としては、２０μＥＱ／Ｌ以上４０μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、２３μＥＱ／Ｌ以上３５μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、２５μＥＱ／Ｌ以上３３μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、パルミトレイン酸の閾値の具体例としては、２９．０６μＥＱ／Ｌが挙げられる。早期卵巣悪性腫瘍を検出しようとする場合も、閾値の具体例としては前記と同様のものが挙げられる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、パルミトレイン酸の閾値の具体例としては、２９．１２μＥＱ／Ｌが挙げられる。子宮頸癌前癌病変を含めて検出しようとする場合、パルミトレイン酸の閾値の具体例としては、３６．６３μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0057】
リノール酸の閾値としては、１７０μＥＱ／Ｌ以上２００μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、１７５μＥＱ／Ｌ以上１９０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、１８０μＥＱ／Ｌ以上１８５μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、リノール酸の閾値の具体例としては、１８３．１μＥＱ／Ｌが挙げられる。早期卵巣悪性腫瘍を検出しようとする場合も、閾値の具体例としては前記と同様のものが挙げられる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、リノール酸の閾値の具体例としては、８４．６３μＥＱ／Ｌが挙げられる。子宮頸癌前癌病変を含めて検出しようとする場合、リノール酸の閾値の具体例としては、８３．３４μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0058】
α－リノレン酸の閾値としては、２０μＥＱ／Ｌ以上４０μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、２３μＥＱ／Ｌ以上３５μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、２５μＥＱ／Ｌ以上３３μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、α－リノレン酸の閾値の具体例としては、２８．６２μＥＱ／Ｌが挙げられる。早期卵巣悪性腫瘍を検出しようとする場合も、閾値の具体例としては前記と同様のものが挙げられる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、α－リノレン酸の閾値の具体例としては、１３．１３μＥＱ／Ｌが挙げられる。子宮頸癌前癌病変を含めて検出しようとする場合、α－リノレン酸の閾値の具体例としては、８．３３４μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0059】
オレイン酸の閾値としては、３００μＥＱ／Ｌ以上３５μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、３１０μＥＱ／Ｌ以上３４０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、３２０μＥＱ／Ｌ以上３３０μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、オレイン酸の閾値の具体例としては、３２６．０μＥＱ／Ｌ以下が挙げられる。早期卵巣悪性腫瘍を検出しようとする場合も、閾値の具体例としては前記と同様のものが挙げられる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、オレイン酸の閾値の具体例としては、２５１．５μＥＱ／Ｌが挙げられる。子宮頸癌前癌病変を含めて検出しようとする場合、オレイン酸の閾値の具体例としては、３３３．４μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0060】
バクセン酸の閾値としては、１．２μＥＱ／Ｌ以上２．４μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、１．５μＥＱ／Ｌ以上２．２μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、１．８μＥＱ／Ｌ以上２．０μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、バクセン酸の閾値の具体例としては、１．９２６μＥＱ／Ｌが挙げられる。早期卵巣悪性腫瘍を検出しようとする場合、バクセン酸の閾値の具体例としては、１．９３０μＥＱ／Ｌが挙げられる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、バクセン酸の閾値の具体例としては、５．６９μＥＱ／Ｌが挙げられる。子宮頸癌前癌病変を含めて検出しようとする場合、アラキドン酸の閾値の具体例としては、６．６５５μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0061】
アラキジン酸の閾値としては、１．２μＥＱ／Ｌ以上２．４μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、１．５μＥＱ／Ｌ以上２．２μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、１．８μＥＱ／Ｌ以上２．０μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、バクセン酸の閾値の具体例としては、１．９２４μＥＱ／Ｌが挙げられる。早期卵巣悪性腫瘍を検出しようとする場合、アラキジン酸の閾値の具体例としては、１．９５３μＥＱ／Ｌが挙げられる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、アラキジン酸の閾値の具体例としては、１．８７５μＥＱ／Ｌが挙げられる。子宮頸癌前癌病変を含めて検出しようとする場合、アラキジン酸の閾値の具体例としては、１．７８１μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0062】
ドコサヘキサエン酸の閾値としては、１．３μＥＱ／Ｌ以上２．３μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、１．５μＥＱ／Ｌ以上２．２μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、１．７μＥＱ／Ｌ以２．０３μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、ドコサヘキサエン酸の閾値の具体例としては、１．８４７μＥＱ／Ｌが挙げられる。早期卵巣悪性腫瘍を検出しようとする場合も、閾値の具体例としては前記と同様のものが挙げられる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、ドコサヘキサエン酸の閾値の具体例としては、２．６７０μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0063】
アドレン酸の閾値としては、０．５５μＥＱ／Ｌ以上０．８５μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、０．６０μＥＱ／Ｌ以上０．８０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、０．６５μＥＱ／Ｌ以上０．７５μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、アドレン酸の閾値の具体例としては、０．７０８５μＥＱ／Ｌが挙げられる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、アドレン酸の閾値の具体例としては、０．６６８８μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0064】
ネルボン酸の閾値としては、０．０６μＥＱ／Ｌ以上０．１１μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、０．０７μＥＱ／Ｌ以上０．１０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、０．０８μＥＱ／Ｌ以上０．０９μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、ネルボン酸の閾値の具体例としては、０．０８９１μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0065】
リグノセリン酸の閾値としては、０．３μＥＱ／Ｌ以上０．８μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、０．４μＥＱ／Ｌ以上０．７μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、０．５μＥＱ／Ｌ以上０．６μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣悪性腫瘍である場合、リグノセリン酸の閾値の具体例としては、０．５７７３μＥＱ／Ｌが挙げられる。早期卵巣悪性腫瘍を検出しようとする場合も、閾値の具体例としては前記と同様のものが挙げられる。
【0066】
ステアリン酸の濃度の閾値としては、２００μＥＱ／Ｌ以上３００μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、２２０μＥＱ／Ｌ以上２８０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、２４０μＥＱ／Ｌ以上２６０μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。ステアリン酸は、例えば、婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、好適に評価に用いることができる。
【0067】
パルミチン酸の閾値としては、３５０μＥＱ／Ｌ以上６００μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、４００μＥＱ／Ｌ以上５５０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、４３０μＥＱ／Ｌ以上５００μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が卵巣癌である場合、パルミチン酸の閾値の具体例としては、４５２．９ＥＱ／Ｌが挙げられる。パルミチン酸は、例えば、婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、好適に評価に用いることができる。
【0068】
ジホモ－γ－リノレン酸の閾値としては、０．８μＥＱ／Ｌ以上１．０μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、０．８５μＥＱ／Ｌ以上０．９５μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、０．９０μＥＱ／Ｌ以上０．９５μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が子宮頸癌である場合、ジホモ－γ－リノレン酸の閾値の具体例としては、０．９３１５μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0069】
ドコサペンタエン酸の閾値としては、０．６μＥＱ／Ｌ以上１．５μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、０．６５μＥＱ／Ｌ以上１．２μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、０．７μＥＱ／Ｌ以上１．０μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が子宮頸癌である場合、ドコサペンタエン酸の閾値の具体例としては、０．７８１４μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0070】
上記（ｉｉｉ１）における「所定の閾値」は、オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比に設定される値である。
オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比について設定される閾値と比較して、工程（Ａ１）で測定された遊離脂肪酸濃度に基づき算出された、オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比が低いと、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価される。
オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比について設定される閾値と比較して、工程（Ａ１）で測定された遊離脂肪酸濃度に基づき算出された、オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比が低いと、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価される。
【0071】
上記（ｉｉｉ１）における濃度比についての所定の閾値は、女性の健常者に由来する複数の試料、ならびに、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する患者に由来する複数の試料からその濃度比を算出し、それらの濃度比を統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
【0072】
上記（ｉｉｉ１）における濃度比についての所定の閾値は、例えば、その濃度比についての陽性尤度比が最大となるように設定してもよい。陽性尤度比が最大となる閾値は、例えば、ＲＯＣ解析を行って設定することができる。例えば、任意の人数の婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する患者群、ならびに、女性の健常者群について、その濃度比を測定し、それらの濃度比を用いてＲＯＣ解析を行うことができる。
【0073】
前記工程（Ａ１）で用いた対象由来の試料が血清である場合、オレイン酸に対するドコサペンタエン酸の濃度比についての所定の閾値としては、例えば、０．００４４３３が挙げられるが、これに限定されない。
【0074】
前記工程（Ｂ１）において、上記（ｉｉｉ１）に該当する場合、対象が子宮頸癌を有する可能性が高いと評価することが好ましい。この場合、検出し得る子宮頸癌としては、ｓｔｇｅ Ｉ以上の進行度を有する子宮頸癌であってもよい。
【0075】
婦人科癌が卵巣癌である場合、評価に用いる遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸が好ましい。前記１０種の遊離脂肪酸から評価に用いる遊離脂肪酸を選択することにより、卵巣癌の検出精度がより向上する。婦人科癌が卵巣癌である場合、例えば、工程（Ｂ１）において、以下のような評価を行ってもよい。
下記（ｉ１）－１及び（ｉｉ１）－１からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が卵巣癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－１ パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－１バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
下記（ｉ１）－１及び（ｉｉ１）－１からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が卵巣癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－１ パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－１バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0076】
早期婦人科悪性腫瘍（例えば、Ｓｔａｇｅ Ｉ、ＩＩ）の検出感度を高めるために、評価に用いる遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸であってもよい。前記８種の遊離脂肪酸から評価に用いる遊離脂肪酸を選択することにより、早期婦人科悪性腫瘍（特に、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＩＩの卵巣悪性腫瘍）の検出精度がより向上する。早期婦人科悪性腫瘍を検出しようとする場合、例えば、工程（Ｂ１）において、以下のような評価を行ってもよい。
下記（ｉ１）－２及び（ｉｉ１）－２からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象がＳｔａｇｅ Ｉ以上の進行度を有する婦人科癌（例えば、卵巣悪性腫瘍）を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－２ パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－２ バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
下記（ｉ１）－２及び（ｉｉ１）－２からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象がＳｔａｇｅ Ｉ以上の進行度を有する婦人科癌（例えば、卵巣悪性腫瘍）を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－２ パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－２ バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0077】
婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、評価に用いる遊離脂肪酸は、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸が好ましい。前記１２種の遊離脂肪酸から評価に用いる遊離脂肪酸を選択することにより、子宮体癌又は子宮頸癌の検出精度がより向上する。婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、例えば、工程（Ｂ１）において、以下のような評価を行ってもよい。
下記（ｉ１）－３及び（ｉｉ１）－３からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が卵巣癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－３ パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－３ バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
下記（ｉ１）－３及び（ｉｉ１）－３からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が卵巣癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－３ パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－３ バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0078】
婦人科癌が子宮体癌である場合、評価に用いる遊離脂肪酸は、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸が好ましい。前記８種の遊離脂肪酸から評価に用いる遊離脂肪酸を選択することにより、子宮体癌の検出精度がより向上する。婦人科癌が子宮体癌である場合、例えば、工程（Ｂ１）において、以下のような評価を行ってもよい。
下記（ｉ１）－４及び（ｉｉ１）－４からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が卵巣癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－４ パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－４ バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸及びアドレン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
下記（ｉ１）－４及び（ｉｉ１）－４からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が卵巣癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－４ パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－４ バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸及びアドレン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0079】
婦人科癌が子宮頸癌である場合、評価に用いる遊離脂肪酸は、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸が好ましい。前記１２種の遊離脂肪酸から評価に用いる遊離脂肪酸を選択することにより、子宮頸癌の検出精度がより向上する。婦人科癌が子宮頸癌である場合、例えば、工程（Ｂ１）において、以下のような評価を行ってもよい。
下記（ｉ１）－５及び（ｉｉ１）－５からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が卵巣癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－５ パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－５ バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
下記（ｉ１）－５及び（ｉｉ１）－５からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が卵巣癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－５ パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－５ バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0080】
婦人科癌前癌病変（例えば、子宮頸がん癌前癌病変）を含めて検出しようとする場合、評価に用いる遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、アラキドン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸が好ましい。検出対象が婦人科癌及びその前癌病変である場合、例えば、工程（Ｂ１）において、以下のような評価を行ってもよい。
下記（ｉ１）－６及び（ｉｉ１）－６からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が婦人科癌前癌病変及び／又は婦人科癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－６ パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－６ アラキドン酸の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
下記（ｉ１）－６及び（ｉｉ１）－６からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が婦人科癌前癌病変及び／又は婦人科癌を有する可能性が高いと評価する；
（ｉ１）－６ パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ１）－６ アラキドン酸の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0081】
工程（Ｂ１）において、上記（ｉ１）及び（ｉｉ１）からなる群より選択される一種以上に該当するかを判定する工程は、下記（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）において設定される各遊離脂肪酸のスコアの合計値（以下、「ＦＦＡスコア」という）が、所定の閾値より高い場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと判定する工程（以下、「工程（Ｂ１－１）」ともいう）であってもよい。
【0082】
（ｉ－１）遊離脂肪酸がＢ（ｉ１）群の遊離脂肪酸である場合、当該遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して高い場合に、その遊離脂肪酸のスコアとして「＋１」と設定する。当該遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して低い場合に、その遊離脂肪酸のスコアとして「０」と設定する。
（ｉｉ－１）遊離脂肪酸がＢ（ｉｉ１）群の遊離脂肪酸である場合、当該遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して低い場合に、その遊離脂肪酸のスコアとして「＋１」と設定する。当該遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して高い場合、その遊離脂肪酸のスコアとして「０」と設定する。
（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）において使用される各遊離脂肪酸についての所定の閾値としては、上記（ｉ１）及び（ｉｉ１）における所定の閾値として挙げたものと同様のものが挙げられる。（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）により設定される各遊離脂肪酸のスコアの合計値を算出し、ＦＦＡスコアとする。
（ｉｉ－１）遊離脂肪酸がＢ（ｉｉ１）群の遊離脂肪酸である場合、当該遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して低い場合に、その遊離脂肪酸のスコアとして「＋１」と設定する。当該遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して高い場合、その遊離脂肪酸のスコアとして「０」と設定する。
（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）において使用される各遊離脂肪酸についての所定の閾値としては、上記（ｉ１）及び（ｉｉ１）における所定の閾値として挙げたものと同様のものが挙げられる。（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）により設定される各遊離脂肪酸のスコアの合計値を算出し、ＦＦＡスコアとする。
【0083】
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、女性の健常者に由来する複数の試料及び婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアを統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
【0084】
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、例えば、そのＦＦＡスコアについての陽性尤度比が最大となるように設定してもよい。陽性尤度比が最大となる閾値は、例えば、ＲＯＣ解析を行って設定することができる。例えば、任意の人数の婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する患者群、ならびに、女性の健常者群について、特定の遊離脂肪酸の血清濃度を測定し、それらの血清濃度を用いてＲＯＣ解析を行うことができる。
【0085】
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数にもよるが、例えば、１以上３以下が挙げられ、１超３未満が好ましく、１超２以下がより好ましく、１超２未満が更に好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数としては、例えば、上記Ａ１群の遊離脂肪酸のうちの３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、１２種以上、１３種以上、１４種以上、１５種が挙げられる。
【0086】
婦人科癌が卵巣癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種であってもよい。婦人科癌が卵巣癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記１０種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。前記１０種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、上記と同様のものが挙げられ、例えば、１超２未満（例えば、１．５）とすることができる。
【0087】
早期婦人科悪性腫瘍（例えば、Ｓｔａｇｅ Ｉ、ＩＩ）の検出感度を高めるために、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上であってもよい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種であってもよい。早期婦人科悪性腫瘍の検出感度の観点から、ＦＦＡスコアの算出には、前記８種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。前記８種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、上記と同様のものが挙げられ、例えば、１超２未満（例えば、１．５）とすることができる。
【0088】
婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種であってもよい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数、ＦＦＡスコアの所定の閾値は、適宜、設定することができる。
【0089】
婦人科癌が子宮体癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種であってもよい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数、ＦＦＡスコアの所定の閾値は、適宜、設定することができる。
【0090】
婦人科癌が子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種であってもよい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数、ＦＦＡスコアの所定の閾値は、適宜、設定することができる。
【0091】
第１の態様にかかる検査方法において、ＦＦＡスコアを用いる場合、工程（Ａ１）及び工程（Ｂ１）の具体例としては、以下が挙げられる。
（例１）
工程（Ａ１）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
工程（Ｂ１）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸から算出されるＦＦＡスコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと判定する。
上記の１０種の遊離脂肪酸から算出されるＦＦＡスコアの閾値としては、１以上３以下が好ましく、１．２以上２．５以下がより好ましく、１．３以上２以下が更に好ましく、１．３以上１．９以下が特に好ましい。
（例１）
工程（Ａ１）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
工程（Ｂ１）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸から算出されるＦＦＡスコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと判定する。
上記の１０種の遊離脂肪酸から算出されるＦＦＡスコアの閾値としては、１以上３以下が好ましく、１．２以上２．５以下がより好ましく、１．３以上２以下が更に好ましく、１．３以上１．９以下が特に好ましい。
【0092】
（例２）
工程（Ａ１）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸及びリグノセリン酸からなる８種の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
工程（Ｂ１）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸及びリグノセリン酸からなる８種の遊離脂肪酸から算出されるＦＦＡスコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと判定する。
上記の８種の遊離脂肪酸のＦＦＡスコアの閾値としては、０．５以上２．５以下が好ましく、１以上２以下がより好ましく、１．１以上１．９以下が更に好ましい。
工程（Ａ１）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸及びリグノセリン酸からなる８種の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
工程（Ｂ１）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸及びリグノセリン酸からなる８種の遊離脂肪酸から算出されるＦＦＡスコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと判定する。
上記の８種の遊離脂肪酸のＦＦＡスコアの閾値としては、０．５以上２．５以下が好ましく、１以上２以下がより好ましく、１．１以上１．９以下が更に好ましい。
【0093】
ＦＦＡスコアを用いることにより、より精度よく、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性を評価することができる。ＦＦＡスコアを用いることにより、早期婦人科悪性腫瘍（例えば、早期卵巣悪性腫瘍）、婦人科明細胞悪性腫瘍（例えば、卵巣明細胞悪性腫瘍）、又は婦人科境界悪性腫瘍（例えば、卵巣境界悪性腫瘍）であっても、精度よく検出することができる。これらの腫瘍はＣＡ１２５等の従来の腫瘍マーカーでは偽陰性の割合が多く感度が低かった。しかし、ＦＦＡスコアを用いることにより、これらの腫瘍も感度よく検出することができる。例えば、前記早期婦人科悪性腫瘍に関し、ＦＦＡスコアを用いることにより。Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩの婦人科悪性腫瘍も感度よく検出することができる。
【0094】
工程（Ｂ１）において、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと評価された対象は、婦人科癌のうちのいずれかの癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い。そのため、対象が有する婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の種類を特定するために、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）検査、磁気共鳴画像診断（ＭＲＩ）、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）検査、超音波検査等により、さらに検査してもよい。更に、確定診断のために、病理検査（細胞診検査、組織学的検査）を行ってもよい。
【0095】
第１の態様に係る試料の検査方法は、更に下記の工程（Ｃ１）を含んでもよい。
工程（Ｃ１）：前記工程（Ｂ１）により婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと判定された前記対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかについて、前記工程（Ａ１）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて評価する
工程（Ｃ１）：前記工程（Ｂ１）により婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと判定された前記対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかについて、前記工程（Ａ１）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて評価する
【0096】
工程（Ｃ１）における対象は、前記工程（Ｂ１）により、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高いと判定された対象である。
【0097】
（工程（Ｃ１））
工程（Ｂ１）では、工程（Ａ１）で得られた、遊離脂肪酸の試料中の濃度に基づいて、対象が婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかを評価する。
工程（Ｂ１）では、工程（Ａ１）で得られた、遊離脂肪酸の試料中の濃度に基づいて、対象が婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかを評価する。
【0098】
判定対象の婦人科癌は、子宮頸癌であることが好ましい。判定対象の婦人科癌前癌病変としては、子宮頸癌前癌病変であることが好ましい。
【0099】
工程（Ｃ１）では、下記（Ｃｉ）に該当する場合に、前記対象が婦人科癌を有する可能性が高いと評価する。
（Ｃｉ）ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
（Ｃｉ）ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0100】
以下、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸を、まとめて「Ｃ１群の遊離脂肪酸」ともいう。
【0101】
工程（Ｃ１）において、判定対象の遊離脂肪酸の種類数は、Ｃ１群の遊離脂肪酸から選択される１種以上であればよく、２種以上であってもよいし、３種以上であってもよいし、４種であってもよい。判定対象の遊離脂肪酸は、Ｃ１群の遊離脂肪酸の中から任意に選択できる。
【0102】
上記（Ｃｉ）における「所定の閾値」は、遊離脂肪酸毎に設定される値である。
上記（Ｃｉ）における各遊離脂肪酸の濃度の所定の閾値は、婦人科癌を有する患者に由来する複数の試料、及び、婦人科癌前癌病変を有する患者に由来する複数の試料から各遊離脂肪酸の濃度を取得し、それらの各遊離脂肪酸の濃度を統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
上記（Ｃｉ）における各遊離脂肪酸の濃度の所定の閾値は、婦人科癌を有する患者に由来する複数の試料、及び、婦人科癌前癌病変を有する患者に由来する複数の試料から各遊離脂肪酸の濃度を取得し、それらの各遊離脂肪酸の濃度を統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
【0103】
特定の遊離脂肪酸の濃度の所定の閾値は、例えば、その特定遊離脂肪酸についての陽性尤度比が最大となるように設定してもよい。陽性尤度比が最大となる閾値は、例えば、ＲＯＣ解析を行って設定することができる。例えば、任意の人数の婦人科癌を有する患者群、及び、婦人科癌前癌病変を有する患者群について、特定の遊離脂肪酸の血清濃度を測定し、それらの血清濃度を用いてＲＯＣ解析を行うことができる。
【0104】
上記（Ｃｉ）における各遊離脂肪酸の濃度の閾値としては、例えば、次のようなものが挙げられるが、それらに限定されない。
【0105】
ジホモ－γ－リノレン酸の閾値としては、０．８０μＥＱ／Ｌ以上１．２０μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、０．９０μＥＱ／Ｌ以上１．１０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、０．９５μＥＱ／Ｌ以上１．０５μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が子宮頸癌であり、婦人科癌前癌病変が子宮頸癌前癌病変である場合、ジホモ－γ－リノレン酸の閾値の具体例としては、１．０１２μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0106】
ドコサヘキサエン酸の閾値としては、２．０μＥＱ／Ｌ以上５．０μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、２．５μＥＱ／Ｌ以上４．５μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、３．０μＥＱ／Ｌ以上４．０μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が子宮頸癌であり、婦人科癌前癌病変が子宮頸癌前癌病変である場合、ドコサヘキサエン酸の閾値の具体例としては、３．５０７μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0107】
アドレン酸の閾値としては、０．１５μＥＱ／Ｌ以上０．６０μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、０．２０μＥＱ／Ｌ以上０．５０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、０．２５μＥＱ／Ｌ以上０．４０μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が子宮頸癌であり、婦人科癌前癌病変が子宮頸癌前癌病変である場合、ドコサヘキサエン酸の閾値の具体例としては、０．３１２μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0108】
ドコサペンタエン酸の閾値としては、０．４０μＥＱ／Ｌ以上１．００μＥＱ／Ｌ以下が好ましく、０．５０μＥＱ／Ｌ以上０．９０μＥＱ／Ｌ以下がより好ましく、０．６０μＥＱ／Ｌ以上０．８０μＥＱ／Ｌ以下が更に好ましい。婦人科癌が子宮頸癌であり、婦人科癌前癌病変が子宮頸癌前癌病変である場合、ドコサペンタエン酸の閾値の具体例としては、０．７２３１μＥＱ／Ｌが挙げられる。
【0109】
工程（Ｃ１）は、ＦＦＡスコアを算出し、当該ＦＦＡスコアが、所定の閾値より高い場合に、対象が婦人科癌を有する可能性が高いと評価する工程であってもよい。ＦＦＡスコアは、上記第１の態様で説明した方法と同様の方法で算出される。すなわち、ＦＦＡスコアは、上記（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）と同様に設定される各遊離脂肪酸のスコアの合計値として算出される。
【0110】
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、婦人科癌患者に由来する複数の試料、及び、前癌病変を有する患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアを統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
【0111】
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数にもよるが、例えば、遊離脂肪酸の種類数をｎとする場合、０．２ｎ以上０．６ｎ以下、０．３ｎ以上０．６ｎ以下、又は０．４ｎ以上０．６ｎ以下等が挙げられる。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数としては、例えば、上記Ａ５群の遊離脂肪酸のうちの３種以上、４種が挙げられる。
【0112】
上記のような診断により、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有することが確認された対象については、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の治療を行うことができる。一実施形態において、本発明は、（ａ１）第１の態様に係る試料の検査法により、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象を特定する工程、（ｂ１）前記対象が、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有することを確認する工程、及び（ｃ１）婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有することが確認された前記対象に対し、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の治療を行う工程、を含む、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の治療方法を提供する。
前記工程（ａ１）では、上述のように第１の態様に係る試料の検査方法を実施して、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象を特定する。
前記工程（ｂ１）では、工程（ａ１）で特定された対象に対して、さらなる検査を実施することにより、当該対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有することを確認することができる。婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の検査としては、例えば、上記の検査が挙げられる。
前記工程（ｃ１）では、工程（ｂ１）で婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有することが確認された対象に対して、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の治療を実施することができる。婦人科癌の治療方法としては、特に限定されず、例えば、外科的治療、化学療法、及び放射線療法等が挙げられる。例えば、婦人科癌が早期婦人科癌（例えば、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩ）である場合、主な治療方法として、例えば、外科的治療を選択することができる。早期婦人科癌である場合、例えば、外科的治療等により、婦人科癌を完全に除去できれば、婦人科癌を完治させ得る。進行度が進んだ婦人科癌（例えば、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ又はＳｔａｇｅ ＩＶ）の場合、外科的治療、化学療法（抗癌剤の投与等）、及び放射線療法を組み合わせて治療を行ってもよい。例えば、外科的治療の前に化学療法及び／又は放射線療法を行い、腫瘍を退縮させてもよい。あるいは、外科的治療の後に、化学療法及び／又は放射線療法を行い、外科的治療後に残存する腫瘍を退縮させてもよい。化学療法に用いる抗癌剤としては、［医薬］の項で後述の抗癌剤が挙げられる。婦人科癌前癌病変の治療方法としては、例えば、子宮頸部円錐切除、子宮頸部レーザー蒸散術等の膣式手術を行ってもよい。
前記工程（ａ１）では、上述のように第１の態様に係る試料の検査方法を実施して、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象を特定する。
前記工程（ｂ１）では、工程（ａ１）で特定された対象に対して、さらなる検査を実施することにより、当該対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有することを確認することができる。婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の検査としては、例えば、上記の検査が挙げられる。
前記工程（ｃ１）では、工程（ｂ１）で婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有することが確認された対象に対して、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の治療を実施することができる。婦人科癌の治療方法としては、特に限定されず、例えば、外科的治療、化学療法、及び放射線療法等が挙げられる。例えば、婦人科癌が早期婦人科癌（例えば、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩ）である場合、主な治療方法として、例えば、外科的治療を選択することができる。早期婦人科癌である場合、例えば、外科的治療等により、婦人科癌を完全に除去できれば、婦人科癌を完治させ得る。進行度が進んだ婦人科癌（例えば、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ又はＳｔａｇｅ ＩＶ）の場合、外科的治療、化学療法（抗癌剤の投与等）、及び放射線療法を組み合わせて治療を行ってもよい。例えば、外科的治療の前に化学療法及び／又は放射線療法を行い、腫瘍を退縮させてもよい。あるいは、外科的治療の後に、化学療法及び／又は放射線療法を行い、外科的治療後に残存する腫瘍を退縮させてもよい。化学療法に用いる抗癌剤としては、［医薬］の項で後述の抗癌剤が挙げられる。婦人科癌前癌病変の治療方法としては、例えば、子宮頸部円錐切除、子宮頸部レーザー蒸散術等の膣式手術を行ってもよい。
【0113】
以上説明した第１の態様に係る試料の検査方法によれば、対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性を、簡便に、高特異性かつ高感度で、判定することが可能である。
ＣＡ１２５をマーカーとして用いる診断は、早期卵巣悪性腫瘍、卵巣明細胞悪性腫瘍の検出感度が低い。第１の態様に係る検査方法は、対象が早期卵巣悪性腫瘍又は卵巣明細胞悪性腫瘍を有する場合であっても、高特異性かつ高感度で検出することが可能である。
ＣＡ１２５をマーカーとして用いる診断は、早期卵巣悪性腫瘍、卵巣明細胞悪性腫瘍の検出感度が低い。第１の態様に係る検査方法は、対象が早期卵巣悪性腫瘍又は卵巣明細胞悪性腫瘍を有する場合であっても、高特異性かつ高感度で検出することが可能である。
【0114】
進行した婦人科癌は、治療を行っても、再発する可能性が高く、予後不良である場合が多い。一方、婦人科癌を、進行する前の早期段階で検出した場合、例えば、腫瘍を切除する等の治療により、婦人科癌を完治させることが可能である。あるいは、予後を改善することができる。第１の態様に係る試料の検査方法によれば、早期婦人科癌を検出することが可能となるため、治療により婦人科癌を完治する確率を高めることが可能となる。
【0115】
子宮頸癌は転移しているリスクがあるため、準広汎/広汎子宮全摘やリンパ節郭清といった、侵襲性の高い外科的治療もしくは放射線照射による治療などが行われる。そのため、罹患ピークである３０－４０代の若年者においては、妊孕能が絶たれる場合がある。一方、子宮頸癌前癌病変は、浸潤を伴わない上皮内に限局した腫瘍であることから、転移の可能性がない。そのため、子宮頸部円錐切除、子宮頸部レーザー蒸散術といった侵襲性の低い治療が行われ、妊孕性も温存される。従って、子宮頸癌前癌病変を検出することは、対象にとって大きなメリットとなる。
【0116】
工程（Ｂ１）は、前記（ｉ１）及び（ｉｉ１）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象に由来する試料を特定する工程であってもよい。
【0117】
工程（Ｃ１）は、前記（Ｃｉ）に該当する場合に、前記婦人科癌を有する可能性が高い対象に由来する試料を特定する工程であってもよい。
【0118】
［試料の検査方法（２）］
第２の態様に係る試料の検査方法は、婦人科癌を有する対象が、予後不良となる可能性を評価する方法である。前記検査方法は、工程（Ａ２）及び工程（Ｂ２）を含む。
工程（Ａ２）：対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程
工程（Ｂ２）：工程（Ａ２）で得られた、遊離脂肪酸の試料中の濃度に基づいて、予後不良となる可能性を評価する工程
第２の態様に係る試料の検査方法は、婦人科癌を有する対象が、予後不良となる可能性を評価する方法である。前記検査方法は、工程（Ａ２）及び工程（Ｂ２）を含む。
工程（Ａ２）：対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程
工程（Ｂ２）：工程（Ａ２）で得られた、遊離脂肪酸の試料中の濃度に基づいて、予後不良となる可能性を評価する工程
【0119】
第２の態様に係る試料の検査方法では、検査に供される試料が由来する対象は、婦人科癌を有する、ヒトの女性である。例えば、対象は、婦人科癌を有すると予め診断されたヒトの女性である。対象は、婦人科癌の治療の開始前でもよく、婦人科癌の治療中であってもよく、過去に婦人科癌の治療を受けていてもよい。あるいは、上記第１の態様に係る検査方法により、婦人科癌を有すると判定された対象であってもよい。
前記婦人科癌としては、第１の態様において上述した癌が挙げられる。前記婦人科癌としては、婦人科悪性腫瘍が好ましく、卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍及び子宮頸部悪性腫瘍からなる群より選択される１種以上がより好ましく、卵巣悪性腫瘍が更に好ましい。
前記婦人科癌としては、第１の態様において上述した癌が挙げられる。前記婦人科癌としては、婦人科悪性腫瘍が好ましく、卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍及び子宮頸部悪性腫瘍からなる群より選択される１種以上がより好ましく、卵巣悪性腫瘍が更に好ましい。
【0120】
パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸を、まとめて「Ａ２群の遊離脂肪酸」ともいう。
【0121】
工程（Ａ２）は、婦人科癌を有する対象由来の試料を用いること以外は、第１の態様における工程（Ａ１）と同様に行うことができる。
【0122】
工程（Ａ２）において、測定対象の遊離脂肪酸の種類数は、Ａ２群の遊離脂肪酸から選択される１種以上であればよく、２種以上であってもよいし、３種以上であってもよいし、４種以上であってもよいし、５種以上であってもよいし、６種以上であってもよいし、７種以上であってもよいし、８種以上であってもよいし、９種以上であってもよいし、１０種以上であってもよいし、１１種以上であってもよいし、１２種以上であってもよいし、１３種以上であってもよいし、１４種であってもよい。測定対象の遊離脂肪酸は、Ａ２群の遊離脂肪酸の中から任意に選択できる。
【0123】
婦人科癌が卵巣癌である場合、工程（Ａ２）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が卵巣癌である場合、工程（Ａ２）では、前記１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0124】
婦人科癌が早期婦人科悪性腫瘍（例えば、Ｓｔａｇｅ Ｉ、ＩＩ）である場合、工程（Ａ２）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種の遊離脂肪酸を測定することができる。早期婦人科悪性腫瘍を検出しようとする場合、工程（Ａ２）では、前記８種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。早期婦人科悪性腫瘍としては、例えば、早期卵巣悪性腫瘍が挙げられる。
【0125】
婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、工程（Ａ２）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、工程（Ａ２）では、前記１２種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0126】
婦人科癌が子宮体癌である場合、工程（Ａ２）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が子宮体癌である場合、工程（Ａ２）では、前記８種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0127】
婦人科癌が子宮頸癌である場合、工程（Ａ２）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種の遊離脂肪酸を測定することができる。検出対象が子宮頸癌である場合、工程（Ａ２）では、前記１２種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0128】
工程（Ｂ２）では、下記（ｉ２）及び（ｉｉ２）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象が予後不良となる可能性が高いと評価する。
（ｉ２）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ２）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
（ｉ２）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ２）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0129】
上記（ｉ２）及び（ｉｉ２）における「所定の閾値」は、遊離脂肪酸毎に設定される値である。各遊離脂肪酸の濃度の所定の閾値は、予後良好であった婦人科患者に由来する複数の試料、及び、予後不良であった婦人科癌患者に由来する複数の試料から各遊離脂肪酸の濃度を取得し、それらの各遊離脂肪酸の濃度を統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
【0130】
工程（Ｂ２）は、ＦＦＡスコアを算出し、当該ＦＦＡスコアが、所定の閾値より高い場合に、対象が婦人科癌の予後不良となる可能性が高いと評価する工程であってもよい。ＦＦＡスコアは、上記第１の態様で説明した方法と同様の方法で算出される。すなわち、ＦＦＡスコアは、上記（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）と同様に設定される各遊離脂肪酸のスコアの合計値として算出される。
【0131】
工程（Ｂ２）において、上記（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）と同様に設定される所定の閾値は、上記のように取得されたものでもよく、第１の態様に係る検査方法と同じ閾値を使用してもよい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、予後良好であった婦人科癌患者に由来する複数の試料、及び、予後不良であった婦人科癌患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアを統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。あるいは、婦人科癌患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアの中央値をＦＦＡスコアの閾値として用いてもよい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、予後良好であった婦人科癌患者に由来する複数の試料、及び、予後不良であった婦人科癌患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアを統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。あるいは、婦人科癌患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアの中央値をＦＦＡスコアの閾値として用いてもよい。
【0132】
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数にもよるが、例えば、遊離脂肪酸の種類数をｎとする場合、０．４ｎ以上０．８ｎ以下、０．５ｎ以上０．７ｎ以下、又は０．５ｎ以上０．６ｎ以下等が挙げられる。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数としては、例えば、上記Ａ２群の遊離脂肪酸のうちの３種以上、４種以上、５種以上、６以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種以上が挙げられる。「０．４ｎ」は、０．４に種類数ｎを乗じた値を意味する。他の数値についても同様である。例えば、遊離脂肪酸の種類数が５種である場合、「０．４ｎ以上０．８ｎ以下」とは「２以上４以下」を意味する。
【0133】
婦人科癌が卵巣癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種であってもよい。婦人科癌が卵巣癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記１０種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。前記１０種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、例えば、４超６未満が挙げられる。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。前記１０種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、例えば、４超６未満が挙げられる。
【0134】
婦人科癌が早期婦人科悪性腫瘍である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種であってもよい。早期婦人科悪性腫瘍を検出しようとする場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記８種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。前記８種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、例えば、３超５未満が挙げられる。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。前記８種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、例えば、３超５未満が挙げられる。
【0135】
婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種であってもよい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数、ＦＦＡスコアの所定の閾値は、適宜、設定することができる。婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記１２種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。
【0136】
婦人科癌が子宮体癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種であってもよい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数、ＦＦＡスコアの所定の閾値は、適宜、設定することができる。婦人科癌が子宮体癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記８種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。
【0137】
婦人科癌が子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種であってもよい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数、ＦＦＡスコアの所定の閾値は、適宜、設定することができる。婦人科癌が子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記１０種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、工程（Ｂ２）において上述した、ＦＦＡについての所定の閾値と同様のものが挙げられる。
【0138】
第２の態様にかかる検査方法において、ＦＦＡスコアを用いる場合、工程（Ａ２）及び工程（Ｂ２）の具体例としては、以下が挙げられる。
工程（Ａ２）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
工程（Ｂ２）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸のＦＦＡスコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が予後不良となる可能性が高いと評価する。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、予後良好であった婦人科癌患者に由来する１０種の遊離脂肪酸、及び、予後不良であった婦人科癌患者に由来する１０種の遊離脂肪酸についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアを統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。あるいは、婦人科癌患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアの中央値をＦＦＡスコアの閾値として用いてもよい。
工程（Ａ２）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
工程（Ｂ２）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸のＦＦＡスコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が予後不良となる可能性が高いと評価する。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、予後良好であった婦人科癌患者に由来する１０種の遊離脂肪酸、及び、予後不良であった婦人科癌患者に由来する１０種の遊離脂肪酸についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアを統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。あるいは、婦人科癌患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアの中央値をＦＦＡスコアの閾値として用いてもよい。
【0139】
以上説明した第２の態様に係る試料の検査方法によれば、対象が予後不良となるか否かを予測することが可能である。そのため、この検査結果を参照して、適切な治療計画を立てやすくなる。また、治療後の再発を予測しやすくなる。スコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が予後不良となる可能性が高いと評価する。
【0140】
例えば、予後不良となる可能性が高いと評価された対象に対しては、治療方法の変更等の措置を取ってもよい。一実施形態において、本発明は、（ａ２）第２の態様に係る試料の検査法により、予後不良となる可能性が高い対象を特定する工程、及び（ｂ２）前記対象に対する婦人科癌の治療方法を変更する工程、を含む、婦人科癌の治療方法を提供する。
前記工程（ａ２）では、上述のように第２の態様に係る試料の検査方法を実施して、予後不良となる可能性が高い対象を特定する。
前記工程（ｂ２）では、工程（ａ２）で特定された対象において、婦人科癌の治療方法を再検討し、婦人科癌の治療方法を変更することができる。工程（ａ２）で特定された対象は、それまでの治療を継続しても、予後不良となる可能性が高い。そのため、治療方法を再検討し、治療方法を変更することで予後を改善する可能性を探ることができる。治療方法の変更としては、例えば、抗癌剤の種類の変更等が挙げられる。
前記工程（ａ２）では、上述のように第２の態様に係る試料の検査方法を実施して、予後不良となる可能性が高い対象を特定する。
前記工程（ｂ２）では、工程（ａ２）で特定された対象において、婦人科癌の治療方法を再検討し、婦人科癌の治療方法を変更することができる。工程（ａ２）で特定された対象は、それまでの治療を継続しても、予後不良となる可能性が高い。そのため、治療方法を再検討し、治療方法を変更することで予後を改善する可能性を探ることができる。治療方法の変更としては、例えば、抗癌剤の種類の変更等が挙げられる。
【0141】
工程（Ｂ２）は、前記（ｉ２）及び（ｉｉ２）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、予後不良となる可能性が高い対象に由来する試料を特定する工程であってもよい。
【0142】
［試料の検査方法（３）］
第３の態様に係る試料の検査方法は、対象が有する婦人科癌が、婦人科悪性腫瘍であるか、あるいは、婦人科境界悪性腫瘍であるかを評価する方法である。前記検査方法は、工程（Ａ３）及び工程（Ｂ３）を含む。
工程（Ａ３）：パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程
工程（Ｂ３）：工程（Ａ３）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記婦人科癌が、悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかを評価する工程
第３の態様に係る試料の検査方法は、対象が有する婦人科癌が、婦人科悪性腫瘍であるか、あるいは、婦人科境界悪性腫瘍であるかを評価する方法である。前記検査方法は、工程（Ａ３）及び工程（Ｂ３）を含む。
工程（Ａ３）：パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸の濃度を測定する工程
工程（Ｂ３）：工程（Ａ３）で得られた、前記遊離脂肪酸の前記試料中の濃度に基づいて、前記婦人科癌が、悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかを評価する工程
【0143】
第３の態様に係る試料の検査方法では、検査に供される試料が由来する対象は、婦人科癌を有する、ヒトの女性である。対象が有する婦人科癌としては、第１の態様において上述したものが挙げられる。例えば、対象は、婦人科癌を有すると予め診断されたヒトの女性である。あるいは、上記第１の態様に係る検査方法により、婦人科癌を有すると判定された対象であってもよい。
【0144】
婦人科悪性腫瘍としては、卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍及び子宮頸部悪性腫瘍からなる群より選択される少なくとも１種であることが好ましく、卵巣悪性腫瘍がより好ましい。婦人科境界悪性腫瘍としては、卵巣境界悪性腫瘍、子宮体部境界悪性腫瘍及び子宮頸部境界悪性腫瘍からなる群より選択される少なくとも１種であることが好ましく、卵巣境界悪性腫瘍が好ましい。
第３の態様に係る検査方法における評価は、例えば、対象が有する卵巣癌が、卵巣悪性腫瘍であるか、卵巣境界悪性腫瘍であるかを評価することであってもよい。対象が有する子宮体癌が、子宮体部悪性腫瘍であるか、子宮体部境界悪性腫瘍であるかを評価することであってもよい。対象が有する子宮頸癌が、子宮頸部悪性腫瘍であるか、子宮頸部境界悪性腫瘍であるかを評価することであってもよい。
第３の態様に係る検査方法における評価は、例えば、対象が有する卵巣癌が、卵巣悪性腫瘍であるか、卵巣境界悪性腫瘍であるかを評価することであってもよい。対象が有する子宮体癌が、子宮体部悪性腫瘍であるか、子宮体部境界悪性腫瘍であるかを評価することであってもよい。対象が有する子宮頸癌が、子宮頸部悪性腫瘍であるか、子宮頸部境界悪性腫瘍であるかを評価することであってもよい。
【0145】
パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸を、まとめて「Ａ３群の遊離脂肪酸」ともいう。
【0146】
工程（Ａ３）は、婦人科癌を有する対象由来の試料を用いること以外は、第１の態様における工程（Ａ１）と同様に行うことができる。
【0147】
工程（Ａ３）において、測定対象の遊離脂肪酸の種類数は、Ａ３群の遊離脂肪酸から選択される１種以上であればよく、２種以上であってもよいし、３種以上であってもよいし、４種以上であってもよいし、５種以上であってもよいし、６種以上であってもよいし、７種以上であってもよいし、８種以上であってもよいし、９種以上であってもよいし、１０種以上であってもよいし、１１種以上であってもよいし、１２種以上であってもよいし、１３種以上であってもよいし、１４種であってもよい。測定対象の遊離脂肪酸は、Ａ３群の遊離脂肪酸の中から任意に選択できる。
【0148】
婦人科癌が卵巣癌である場合、工程（Ａ３）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が卵巣癌である場合、工程（Ａ３）では、前記１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0149】
婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、工程（Ａ３）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、工程（Ａ３）では、前記１２種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0150】
婦人科癌が子宮体癌である場合、工程（Ａ３）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種の遊離脂肪酸を測定することができる。婦人科癌が子宮体癌である場合、工程（Ａ３）では、前記８種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0151】
婦人科癌が子宮頸癌である場合、工程（Ａ３）では、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定対象としてもよい。前記遊離脂肪酸のうちの２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種の遊離脂肪酸を測定することができる。検出対象が子宮頸癌である場合、工程（Ａ３）では、前記１２種の遊離脂肪酸の濃度を測定することが好ましい。
【0152】
工程（Ｂ３）では、下記（ｉ３）及び（ｉｉ３）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、前記対象の有する婦人科癌が、悪性腫瘍である可能性が高いと評価する。
（ｉ３）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ３）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
（ｉ３）パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸及びパルミチン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、高い；
（ｉｉ３）バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される少なくとも１種の遊離脂肪酸の前記試料中の濃度が、所定の閾値と比較して、低い。
【0153】
上記（ｉ３）及び（ｉｉ３）における「所定の閾値」は、遊離脂肪酸毎に設定される値である。各遊離脂肪酸の濃度の所定の閾値は、婦人科悪性腫瘍を有する患者に由来する複数の試料、及び、婦人科境界悪性腫瘍を有する患者に由来する複数の試料から各遊離脂肪酸の濃度を取得し、それらの各遊離脂肪酸の濃度を統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
【0154】
工程（Ｂ３）は、ＦＦＡスコアを算出し、当該ＦＦＡスコアが、所定の閾値より高い場合に、対象の有する婦人科癌は悪性腫瘍である可能性が高いと評価する工程であってもよい。ＦＦＡスコアは、上記第１の態様で説明した方法と同様の方法で算出される。すなわち、ＦＦＡスコアは、上記（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）と同様に設定される各遊離脂肪酸のスコアの合計値として算出される。
【0155】
工程（Ｂ３）において、上記（ｉ－１）及び（ｉｉ－１）と同様に設定される所定の閾値は、上記のように取得されたものでもよく、第１の態様に係る検査方法と同じ閾値を使用してもよい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、婦人科悪性腫瘍を有する患者に由来する複数の試料、及び、婦人科境界悪性腫瘍を有する患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアを統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、婦人科悪性腫瘍を有する患者に由来する複数の試料、及び、婦人科境界悪性腫瘍を有する患者に由来する複数の試料についてＦＦＡスコアを算出し、それらのＦＦＡスコアを統計処理して得られたカットオフ値であってもよい。
【0156】
ＦＦＡスコアについての所定の閾値は、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数にもよるが、例えば、遊離脂肪酸の種類数をｎとする場合、０．２ｎ以上０．６ｎ以下、０．３ｎ以上０．６ｎ以下、又は０．４ｎ以上０．６ｎ以下等が挙げられる。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸の種類数としては、例えば、上記Ａ３群の遊離脂肪酸のうちの３種以上、４種以上、５種以上、６以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種以上が挙げられる。
【0157】
婦人科癌が卵巣癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種であってもよい。婦人科癌が卵巣癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記１０種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。前記１０種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、例えば、４超６未満が挙げられる。
【0158】
婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種であってもよい。婦人科癌が子宮体癌又は子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記１２種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。前記１２種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、上記と同様のものが挙げられる。
【0159】
婦人科癌が子宮体癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種であってもよい。婦人科癌が子宮体癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記８種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。前記８種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、上記と同様のものが挙げられる。
【0160】
婦人科癌が子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸としては、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上が好ましい。ＦＦＡスコアの算出に用いる遊離脂肪酸は、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種であってもよい。婦人科癌が子宮頸癌である場合、ＦＦＡスコアの算出には、前記１２種の遊離脂肪酸を用いることが好ましい。前記１２種の遊離脂肪酸を用いる場合、ＦＦＡスコアの所定の閾値としては、上記と同様のものが挙げられる。
【0161】
第３の態様にかかる検査方法おいて、ＦＦＡスコアを用いる場合、工程（Ａ３）及び工程（Ｂ３）の具体例としては、以下が挙げられる。
工程（Ａ３）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
工程（Ｂ３）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸のＦＦＡスコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が有する婦人科癌は悪性腫瘍である可能性が高いと判定する。
この場合、合計スコアの閾値としては、４以上６以下が好ましく、４．５以上５以下がより好ましい。
工程（Ａ３）では、対象由来の試料における、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸の濃度を測定する。
工程（Ｂ３）では、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる１０種の遊離脂肪酸のＦＦＡスコアが所定の閾値より高い場合に、前記対象が有する婦人科癌は悪性腫瘍である可能性が高いと判定する。
この場合、合計スコアの閾値としては、４以上６以下が好ましく、４．５以上５以下がより好ましい。
【0162】
以上説明した第３の態様に係る試料の検査方法によれば、対象が有する婦人科癌が、婦人科悪性腫瘍であるか、あるいは、婦人科境界悪性腫瘍であるかを評価することが可能である。
境界悪性腫瘍は、悪性腫瘍と良性腫瘍との中間的な性質を有する腫瘍である。卵巣境界悪性腫瘍は、悪性腫瘍のように血行性、リンパ行性転移することがないため、悪性腫瘍ほど予後は悪くない。即ち、卵巣境界悪性腫瘍は、稀に腹腔内に病変が拡がることがあるものの、転移はないという臨床的特徴を有する。また、境界悪性腫瘍と悪性腫瘍では、一般に腫瘍の増殖スピードが異なる。悪性腫瘍は急速に増大し、播種、転移することから可及的速やかな手術療法が求められる。一方、境界悪性腫瘍は腫瘍増殖が緩徐であり、緊急的な手術の必要は乏しい。
上述のような特徴の違いから、治療前（診断時）に、境界悪性腫瘍か悪性腫瘍かを非侵襲的に血液検査によって識別することは、治療方針（手術までの待機時間、手術術式、手術侵襲度など）の決定に極めて有用である。
現在は、手術中の病理診断により、いずれの腫瘍であるかを識別しているが、第３の態様に係る試料の検査方法により、術前に非侵襲的に、対象の有する婦人科癌が、境界悪性腫瘍であるか、悪性腫瘍であるかを評価することができる。
境界悪性腫瘍は、悪性腫瘍と良性腫瘍との中間的な性質を有する腫瘍である。卵巣境界悪性腫瘍は、悪性腫瘍のように血行性、リンパ行性転移することがないため、悪性腫瘍ほど予後は悪くない。即ち、卵巣境界悪性腫瘍は、稀に腹腔内に病変が拡がることがあるものの、転移はないという臨床的特徴を有する。また、境界悪性腫瘍と悪性腫瘍では、一般に腫瘍の増殖スピードが異なる。悪性腫瘍は急速に増大し、播種、転移することから可及的速やかな手術療法が求められる。一方、境界悪性腫瘍は腫瘍増殖が緩徐であり、緊急的な手術の必要は乏しい。
上述のような特徴の違いから、治療前（診断時）に、境界悪性腫瘍か悪性腫瘍かを非侵襲的に血液検査によって識別することは、治療方針（手術までの待機時間、手術術式、手術侵襲度など）の決定に極めて有用である。
現在は、手術中の病理診断により、いずれの腫瘍であるかを識別しているが、第３の態様に係る試料の検査方法により、術前に非侵襲的に、対象の有する婦人科癌が、境界悪性腫瘍であるか、悪性腫瘍であるかを評価することができる。
【0163】
一実施形態において、本発明は、（ａ３）第３の態様に係る試料の検査法により、婦人科境界性悪性腫瘍を有する可能性が高い対象又は婦人科悪性腫瘍を有する可能性が高い対象を特定する工程、及び（ｂ３）婦人科境界性悪性腫瘍を有する可能性が高い対象に対して婦人科境界性悪性腫瘍の治療を行い、婦人科悪性腫瘍を有する可能性が高い対象に対して婦人科悪性腫瘍の治療を行う工程、を含む、婦人科癌の治療方法を提供する。
前記工程（ａ３）では、上述のように第３の態様に係る試料の検査方法を実施して、婦人科境界性悪性腫瘍を有する可能性が高い対象又は婦人科悪性腫瘍を有する可能性が高い対象を特定する。
前記工程（ｂ３）では、工程（ａ３）で特定された対象において、当該対象が婦人科境界悪性腫瘍を有する可能性が高い場合には、婦人科境界悪性腫瘍の治療を行う。婦人科境界悪性腫瘍の治療としては、外科的治療が挙げられ、腹腔内臓器（すなわち、子宮、卵巣、卵管及び大網）摘出が好ましく、腹腔内臓器のみの摘出が更に好ましい。
また、当該対象が婦人科悪性腫瘍を有する可能性が高い場合には、婦人科悪性腫瘍の治療を行う。婦人科悪性腫瘍の治療としては、外科的治療が挙げられ、腹腔内臓器の摘出、及びリンパ節郭清術が好ましい。
前記工程（ａ３）では、上述のように第３の態様に係る試料の検査方法を実施して、婦人科境界性悪性腫瘍を有する可能性が高い対象又は婦人科悪性腫瘍を有する可能性が高い対象を特定する。
前記工程（ｂ３）では、工程（ａ３）で特定された対象において、当該対象が婦人科境界悪性腫瘍を有する可能性が高い場合には、婦人科境界悪性腫瘍の治療を行う。婦人科境界悪性腫瘍の治療としては、外科的治療が挙げられ、腹腔内臓器（すなわち、子宮、卵巣、卵管及び大網）摘出が好ましく、腹腔内臓器のみの摘出が更に好ましい。
また、当該対象が婦人科悪性腫瘍を有する可能性が高い場合には、婦人科悪性腫瘍の治療を行う。婦人科悪性腫瘍の治療としては、外科的治療が挙げられ、腹腔内臓器の摘出、及びリンパ節郭清術が好ましい。
【0164】
工程（Ｂ３）は、前記（ｉ３）及び（ｉｉ３）からなる群より選択される少なくとも１つに該当する場合に、婦人科癌が悪性腫瘍である可能性が高い対象に由来する試料を特定する工程であってもよい。
【0165】
［キット］
第４の態様に係る婦人科癌及びその前癌病変の検査キットは、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含む。
本態様に係るキットは、下記（ａ）～（ｄ）からなる群より選択される少なくとも１つの目的に使用される。
（ａ）対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性の評価；
（ｂ）婦人科癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価；
（ｃ）対象が有する婦人科癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価；
（ｄ）婦人科癌及び婦人科癌前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかの評価。
第４の態様に係る婦人科癌及びその前癌病変の検査キットは、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含む。
本態様に係るキットは、下記（ａ）～（ｄ）からなる群より選択される少なくとも１つの目的に使用される。
（ａ）対象が婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性の評価；
（ｂ）婦人科癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価；
（ｃ）対象が有する婦人科癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価；
（ｄ）婦人科癌及び婦人科癌前癌病変からなる群より選択される一種以上を有する可能性が高い対象が、婦人科癌及び婦人科癌前癌病変のいずれを有するかの評価。
【0166】
上記（ａ）における対象は、ヒトの女性である。対象が有し得る婦人科癌としては、第１の態様において上述したものが挙げられる。対象が有し得る婦人科癌としては、婦人科悪性腫瘍が好ましい。婦人科悪性腫瘍としては、卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍及び子宮頸部悪性腫瘍からなる群より選択される１種以上が好ましく、卵巣悪性腫瘍がより好ましい。婦人科境界悪性腫瘍としては、卵巣境界悪性腫瘍、子宮体部境界悪性腫瘍及び子宮頸部境界悪性腫瘍からなる群より選択される１種以上が好ましく、卵巣境界悪性腫瘍がより好ましい。
対象が有し得る婦人科癌前癌病変としては、第１の態様において上述したものが挙げられる。
対象が有し得る婦人科癌前癌病変としては、第１の態様において上述したものが挙げられる。
【0167】
上記（ｂ）における対象は、婦人科癌を有する、ヒトの女性である。前記婦人科癌としては、第１の態様において上述した癌が挙げられる。前記婦人科癌としては、婦人科悪性腫瘍が好ましく、卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍及び子宮頸部悪性腫瘍からなる群より選択される１種以上がより好ましく、卵巣悪性腫瘍が更に好ましい。
【0168】
上記（ｃ）における対象は、婦人科癌を有する、ヒトの女性である。前記婦人科癌としては、第１の態様において上述した癌が挙げられる。婦人科悪性腫瘍としては、卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍及び子宮頸部悪性腫瘍からなる群より選択される少なくとも１種であることが好ましく、卵巣悪性腫瘍がより好ましい。婦人科境界悪性腫瘍としては、卵巣境界悪性腫瘍、子宮体部境界悪性腫瘍及び子宮頸部境界悪性腫瘍からなる群より選択される少なくとも１種であることが好ましく、卵巣境界悪性腫瘍が好ましい。
本態様に係るキットは、上記した第１～第３の態様に係る検査方法に好適に用いられる。
本態様に係るキットは、上記した第１～第３の態様に係る検査方法に好適に用いられる。
【0169】
遊離脂肪酸を測定するための試薬は、対象由来の試料中の遊離脂肪酸濃度の測定に用いられる試薬である。前記試薬は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸（Ａ１群の遊離脂肪酸）のいずれか１種の遊離脂肪酸に特異的に結合する試薬であってもよい。例えば、遊離脂肪酸を測定するための試薬は、特定の遊離脂肪酸に特異的に結合する抗体、又はアプタマー等であってもよい。
【0170】
試料中の遊離脂肪酸を、ガスクロマトグラフィー質量分析、液体クロマトグラフィー質量分析、ガスクロマトグラフィー等の分析機器を用いて測定する場合、遊離脂肪酸の濃度を測定するための試薬としては、上記のいずれかの遊離脂肪酸の標準試料が挙げられる。標準試料は、前記のような分析機器による遊離脂肪酸の測定において、検量線を作成するために用いられる。試料中の遊離脂肪酸の濃度は、標準試料により作成された検量線に基づいて、算出することができる。
遊離脂肪酸の標準試料は、上記遊離脂肪酸の精製品であってもよい。特定の遊離脂肪酸の標準試料における当該特定遊離脂肪酸の純度は、例えば、９６質量％以上、９７質量％以上、９８質量％以上、又は９９質量％以上である。
遊離脂肪酸の標準試料は、上記遊離脂肪酸の精製品であってもよい。特定の遊離脂肪酸の標準試料における当該特定遊離脂肪酸の純度は、例えば、９６質量％以上、９７質量％以上、９８質量％以上、又は９９質量％以上である。
【0171】
本実施形態にかかる検査キットは、上記Ａ１群の遊離脂肪酸のいずれか１種以上を測定するための試薬を含んでいればよく、上記Ａ１群の遊離脂肪酸のいずれか２種以上、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、１２種以上、１３種以上、１４種以上を測定するための試薬を含んでいてもよい。本実施形態にかかる検査キットが含み得る前記試薬の測定対象である脂肪酸は、Ａ１群の遊離脂肪酸の中から任意に選択できる。あるいは、本実施形態にかかる検査キットは、上記Ａ１群の遊離脂肪酸の１５種全てを測定するための試薬を含んでいてもよい。
【0172】
本実施形態に係るキットが、婦人科癌の検査キットである場合、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、１２種以上、１４種以上、又は１４種を測定するための試薬を含むことができる。
【0173】
本実施形態に係るキットが、卵巣癌の検査キットである場合、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種を測定するための試薬を含むことができる。
【0174】
本実施形態に係るキットが、早期婦人科癌（例えば、Ｓｔａｇｅ Ｉ、Ｓｔａｇｅ ＩＩ）も検出対象とする場合、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種を測定するための試薬を含むことができる。
【0175】
本実施形態に係るキットが、子宮体癌又は子宮頸癌の検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種を測定するための試薬を含むことができる。
【0176】
本実施形態に係るキットが、子宮体癌の検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種を測定するための試薬を含むことができる。
【0177】
本実施形態に係るキットが、子宮頚癌の検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種を測定するための試薬を含むことができる。
【0178】
本実施形態に係るキットが、上記（ｂ）の評価に用いられる検査キットである場合、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、１２種以上、１３種以上、又は１４種を測定するための試薬を含むことができる。
【0179】
本実施形態に係るキットが、卵巣癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価検査キットである場合、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種を測定するための試薬を含むことができる。
【0180】
本実施形態に係るキットが、子宮体癌又は子宮頸癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種を測定するための試薬を含むことができる。
【0181】
本実施形態に係るキットが、子宮体癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種を測定するための試薬を含むことができる。
【0182】
本実施形態に係るキットが、子宮頸癌を有する対象が予後不良となる可能性の評価検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種を測定するための試薬を含むことができる。
【0183】
本実施形態に係るキットが、上記（ｃ）の評価に用いられる検査キットである場合、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、１２種以上、１３種以上、又は１４種を測定するための試薬を含むことができる。
【0184】
本実施形態に係るキットが、対象が有する卵巣癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価可能性の評価検査キットである場合、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、又は１０種を測定するための試薬を含むことができる。
【0185】
本実施形態に係るキットが、対象が有する子宮体癌又は子宮頚癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価可能性の評価検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種を測定するための試薬を含むことができる。
【0186】
本実施形態に係るキットが、対象が有する子宮体癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価可能性の評価検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、及びアラキジン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、又は８種を測定するための試薬を含むことができる。
【0187】
本実施形態に係るキットが、対象が有する子宮頸癌が悪性腫瘍であるか、あるいは、境界悪性腫瘍であるかの評価可能性の評価検査キットである場合、パルミチン酸、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１１種以上、又は１２種を測定するための試薬を含むことができる。
【0188】
本実施形態に係るキットが、上記（ｄ）の評価に用いられる検査キットである場合、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される１種以上の遊離脂肪酸を測定するための試薬を含むことが好ましい。本実施形態にかかるキットは、前記遊離脂肪酸の２種以上、３種以上、又は４種を測定するための試薬を含むことができる。
【0189】
試料中の遊離脂肪酸を、ガスクロマトグラフィー質量分析、液体クロマトグラフィー質量分析、ガスクロマトグラフィー等の分析機器を用いて測定する場合、本実施形態に係るキットは、内部標準物質を含んでもよい。内部標準物質は、対象由来の試料に添加して用いられる。対象由来の試料に添加された内部標準物質の添加量と、試料おける内部標準物質の測定値に対する遊離脂肪酸の測定値の比から、試料中の遊離脂肪酸の濃度を算出することができる。
内部標準物質は、対象由来の試料に含まれていない物質を用いることができる。例えば、ヒトの体内に存在しないことが知られている遊離脂肪酸を内部標準物質として用いることができる。内部標準物質は、対象由来の試料から遊離脂肪酸を抽出する際に用いる溶媒に対して、測定対象の遊離脂肪酸と同程度の抽出率を有するものが好ましい。そのような内部標準物質としては、例えば、マルガリン酸等が挙げられる。
内部標準物質は、対象由来の試料に含まれていない物質を用いることができる。例えば、ヒトの体内に存在しないことが知られている遊離脂肪酸を内部標準物質として用いることができる。内部標準物質は、対象由来の試料から遊離脂肪酸を抽出する際に用いる溶媒に対して、測定対象の遊離脂肪酸と同程度の抽出率を有するものが好ましい。そのような内部標準物質としては、例えば、マルガリン酸等が挙げられる。
【0190】
本実施形態にかかるキットを用いることにより、対象由来の試料における、上述の遊離脂肪酸の濃度を簡便に測定することが可能となる。これにより、第１～第３の態様に係る検査方法の評価結果を簡便に得ることが可能である。
【0191】
［医薬］
本態様にかかる医薬は、第１の態様にかかる検査方法により婦人科癌を有すると評価された対象に投与される、婦人科癌を治療又は予防するための医薬である。
本態様にかかる医薬は、第１の態様にかかる検査方法により婦人科癌を有すると評価された対象に投与される、婦人科癌を治療又は予防するための医薬である。
【0192】
前記婦人科癌としては、第１の態様において上述した癌が挙げられる。前記婦人科癌はとしては、婦人科悪性腫瘍が好ましく、卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍及び子宮頸部悪性腫瘍からなる群より選択される悪性腫瘍がより好ましく、卵巣悪性腫瘍が更に好ましい。
【0193】
本態様にかかる医薬は、婦人科癌に有効なものであれば、特に限定されない。婦人科癌用の医薬としては、例えば、婦人科癌の治療に用いられる公知の抗癌剤が挙げられる。そのような抗癌剤としては、例えば、カルボプラチン、シスプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、イリノテカン、ドキシル、トポテカン、ゲムシタビン、エトポシド、トラベクテディン、アブラキサン、タモキシフェン、イホスファミド、５－ＦＵ、ドキソルビシン等が挙げられる。あるいは、本実施形態にかかる医薬は、抗体医薬であってもよく、例えば、公知の抗体医薬が挙げられる。抗体医薬が含有し得る抗体としては、ベバシズマブ等の抗ＶＥＧＦ抗体等が挙げられる。
【0194】
本態様にかかる医薬は、製剤化のために一般的に利用される種々の物質、例えば、賦形剤、安定化剤、その他の医薬的に許容可能な成分、又は他の医薬活性成分等を含んでもよい。
【0195】
本態様にかかる医薬は、経口投与であってもよく、非経口投与であってもよい。本実施形態にかかる医薬は、投与経路に応じて、種々の製剤形態、例えば、固形製剤、液状製剤等をとり得る。例えば、内服用固形剤若しくは内服用液剤等の経口製剤、又は注射剤若しくは点滴剤等の非経口製剤とすることができる。非経口製剤に用いることができる担体としては、例えば、生理食塩水や、ブドウ糖又はＤ－ソルビトール等を含む等張液といった水性担体が挙げられる。
【0196】
本態様にかかる医薬の投与量は、対象の年齢、体重、適応される疾患、症状等によっても異なるが、例えば、１回の投与量として、体重あたり当り約０．１μｇから１ｍｇ／ｋｇとすることができる。投与間隔は、特に限定さないが、例えば、１日から数カ月に１回とすることができる。
【0197】
［他の態様］
一態様において、本開示は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の有無を評価するためのバイオマーカーを提供する。
一態様において、本開示は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される、婦人科癌患者の予後を予測するためのバイオマーカーを提供する。
一態様において、本開示は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される、婦人科悪性腫瘍と婦人科境界悪性腫瘍を分類するためのバイオマーカーを提供する。
一態様において、本開示は、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される、婦人科癌及びその前癌病変を分類するためのバイオマーカーを提供する。
一態様において、本開示は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサペンタエン酸及びアラキドン酸からなる群より選択される、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の有無を評価するためのバイオマーカーを提供する。
一態様において、本開示は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される、婦人科癌患者の予後を予測するためのバイオマーカーを提供する。
一態様において、本開示は、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、パルミチン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸、ステアリン酸、ジホモ－γ－リノレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される、婦人科悪性腫瘍と婦人科境界悪性腫瘍を分類するためのバイオマーカーを提供する。
一態様において、本開示は、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸及びドコサペンタエン酸からなる群より選択される、婦人科癌及びその前癌病変を分類するためのバイオマーカーを提供する。
【実施例0198】
以下、実施例により本発明を説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。実施例において、卵巣癌、子宮体癌、子宮頸癌は、それぞれ、卵巣悪性腫瘍、子宮体部悪性腫瘍、子宮頸部悪性腫瘍を意味する。
【0199】
［実験例１］
（脂肪酸代謝酵素の発現解析）
正常卵巣組織及び卵巣癌組織における、脂肪酸代謝酵素の発現量を、ＲＴ－ＰＣＲにより解析した。
（脂肪酸代謝酵素の発現解析）
正常卵巣組織及び卵巣癌組織における、脂肪酸代謝酵素の発現量を、ＲＴ－ＰＣＲにより解析した。
【0200】
正常卵巣組織９例は、婦人科悪性腫瘍の手術時に、治療目的（転移等の予防）で採取し、卵巣癌組織３２例は、卵巣悪性腫瘍の手術時に採取した。各々の正常卵巣組織及び卵巣癌組織を、破砕機で粉砕後、ＲＮｅａｓｙ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用いて、ｔｏｔａｌ ＲＮＡを抽出した。
【0201】
ＲｅｖｅｒＴｒａ Ａｃｅ ｑＰＣＲ ＲＴ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ ｗｉｔｈ ｇＤＮＡ Ｒｅｍｏｖｅｒ（ＴＯＹＯＢＯ社製）を用いてｃＤＮＡ合成を行った。具体的には、まず、１μｇ相当のｔｏｔａｌ ＲＮＡとＲＮａｓｅ ｆｒｅｅ ｄｉｓｔｉｌｌｅｄ ｗａｔｅｒとを１２μＬとなるように混合し、６５℃で５分間インキュベートし、ＲＮＡの変性を行った。続いて、氷上にて、４×ＤＮ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ及びｇＤＮＡ Ｒｅｍｏｖｅｒを４μＬ添加し、３７℃で５分間反応することで、ゲノムＤＮＡの除去を行った。続いて、さらに、５×ＲＴ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ ＩＩ ４μＬを混合し、逆転写反応（３７℃ １５分、５０℃ ５分、９８℃ ５分）を行い、ｃＤＮＡを合成した。
【0202】
上記で作製したｃＤＮＡをテンプレートとして、ＴＨＵＮＤＥＲＢＩＲＤ Ｐｒｏｂｅ ｑＰＣＲ Ｍｉｘ（ＴＯＹＯＢＯ社製）を用いてｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲを行った。
ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲは、２－ΔＣｔプロトコールにしたがって行った。すなわち、ターゲット遺伝子とｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ ３－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （ＧＡＰＤＨ）のＣｔ値の差をΔＣｔ値とし、相対定量値は２－ΔＣｔで算出した。それぞれの測定はｔｒｉｐｌｉｃａｔｅで行った。
ターゲット遺伝子は、ｈｕｍａｎ ａｃｅｔｙｌ－ＣｏＡ ｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ １（ＡＣＡＣＡ）、ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｓｙｎｔｈａｓｅ（ＦＡＳＮ）、ｓｔｅａｒｏｙｌ－ＣｏＡ ｄｅｓａｔｕｒａｓｅ １（ＳＣＤ１）、ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｄｅｓａｔｕｒａｓｅ １（ＦＡＤＳ１）、ＦＡＤＳ２、ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｅｒｙ ｌｏｎｇ ｃｈａｉｎ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ １（ＥＬＯＶＬ１）、ＥＬＯＶＬ２、ＥＬＯＶＬ３、ＥＬＯＶＬ４、ＥＬＯＶＬ５、及びＥＬＯＶＬ６であった。
ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲは、２－ΔＣｔプロトコールにしたがって行った。すなわち、ターゲット遺伝子とｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ ３－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （ＧＡＰＤＨ）のＣｔ値の差をΔＣｔ値とし、相対定量値は２－ΔＣｔで算出した。それぞれの測定はｔｒｉｐｌｉｃａｔｅで行った。
ターゲット遺伝子は、ｈｕｍａｎ ａｃｅｔｙｌ－ＣｏＡ ｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ １（ＡＣＡＣＡ）、ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｓｙｎｔｈａｓｅ（ＦＡＳＮ）、ｓｔｅａｒｏｙｌ－ＣｏＡ ｄｅｓａｔｕｒａｓｅ １（ＳＣＤ１）、ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｄｅｓａｔｕｒａｓｅ １（ＦＡＤＳ１）、ＦＡＤＳ２、ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｅｒｙ ｌｏｎｇ ｃｈａｉｎ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ １（ＥＬＯＶＬ１）、ＥＬＯＶＬ２、ＥＬＯＶＬ３、ＥＬＯＶＬ４、ＥＬＯＶＬ５、及びＥＬＯＶＬ６であった。
【0203】
結果を図１Ａ～図１Ｄに示す。図１Ａは、正常卵巣組織及び卵巣癌組織における遊離脂肪酸代謝酵素の発現量を、ヒートマップにより示した図である。ヒートマップは、ＭｅｔａｂｏＡｎａｌｙｓｔ ５．０ソフトウェアを用いて作製した。
【0204】
図１Ｂ～Ｄは、正常卵巣組織及び卵巣癌組織における、各脂肪酸代謝酵素の発現量を示すグラフである。正常卵巣組織および卵巣癌組織の２群間の比較は、ｔ検定によって行い、ｐ＜０．０５を有意差ありとした。「＊」、「＊＊」、「＊＊＊」、「＊＊＊＊」は、それぞれ、ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１、ｐ＜０．００１、及び、ｐ＜０．０００１を示す。
【0205】
図１Ｂに示す結果より、ＦＡＳＮ及びＳＣＤ１は、正常卵巣組織よりも卵巣癌組織において発現量が高いことが確認された。図１Ｃに示す結果より、ＥＬＯＶＬ１、ＥＬＯＶＬ２、ＥＬＯＶＬ３、ＥＬＯＶＬ４、ＥＬＯＶＬ５、ＥＬＯＶＬ６及びＦＡＤＳ１は、正常卵巣組織よりも卵巣癌組織において発現量が低いことが確認された。図１Ｄに示す結果より、ＡＣＡＣＡ及びＦＡＤＳ２は、正常卵巣組織と卵巣癌組織とで発現量が同程度であることが確認された。以上の結果より、正常卵巣組織と卵巣癌組織とでは、脂肪酸代謝酵素の発現量が異なることが確認された。
【0206】
［実験例２］
（卵巣癌患者血清中の遊離脂肪酸濃度）
女性の健常者及び卵巣癌患者の血清における、遊離脂肪酸の量をガスクロマトグラフィー質量分析（ＧＣ－ＭＳ）で解析した。
（卵巣癌患者血清中の遊離脂肪酸濃度）
女性の健常者及び卵巣癌患者の血清における、遊離脂肪酸の量をガスクロマトグラフィー質量分析（ＧＣ－ＭＳ）で解析した。
【0207】
２７人の健常な成人女性および４０人の卵巣癌患者（Ｓｔａｇｅ Ｉ及びＳｔａｇｅ ＩＩ患者２９人、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ及びＳｔａｇｅ ＩＶ患者１１人）から採血を行い、血清サンプルを得た。
【0208】
まず、血清中の遊離脂肪酸測定用の標準試料を用いて検量線を作成した。標準試料としては、Ｓａｔｕｒａｔｅｄ ａｎｄ ｍｏｎｏｓａｔｕｒａｔｅｄ Ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ＬＣ－ＭＳ ｍｉｘｔｕｒｅ（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社製、＃１７９４２）、Ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄ ＬＣ－ＭＳ Ｍｉｘｔｕｒｅ（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社製、＃１７９４１）、サピエン酸（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社製、＃９００１８４５）、バクセン酸（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社製、＃２００２３）、及び、内部標準物質としてマルガリン酸（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社製、ナカライテスク）を用いた。
【0209】
まず、健常者血清及び卵巣癌患者血清２０μＬを、内部標準物質として１００ｎｇのマルガリン酸を含む３００μＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で希釈した。続いて、試料の全量を珪藻土カラム（商品名「ＳＬＥ＋４００」、Ｂｉｏｔａｇｅ社）にアプライし、１．８ｍＬのジクロロメタンで溶出した。
続いて、溶出物を窒素気流下で乾固し、得られた乾燥物を５μＬのピリジンに溶解させた。これに３０μＬのＢＳＴＦＡ：ＴＭＣＳ（９９：１，ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ ＴＳ－３８８３１）を加えて混和し、ＯＨ基を全てトリメチルシリル化した。
続いて、溶出物を窒素気流下で乾固し、得られた乾燥物を５μＬのピリジンに溶解させた。これに３０μＬのＢＳＴＦＡ：ＴＭＣＳ（９９：１，ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ ＴＳ－３８８３１）を加えて混和し、ＯＨ基を全てトリメチルシリル化した。
【0210】
続いて、誘導体化された試料２μＬをＧＣ－ＭＳにインジェクションし、分析、解析した。定量値は、内部標準物質とそれぞれの遊離脂肪酸のピーク面積比を、あらかじめ作成しておいた検量線と比較して求めた。
【0211】
ＧＣ－ＭＳの分析条件は、以下の通りであった。キャピラリーカラムとして、ＲＴｘ－５ＭＳ（長さ３０メートル、内径０．２５ｍｍ、膜厚０．２５μｍ、Ｒｅｓｔｅｋ社製）を用いた。オーブン温度は、１５０℃で１分間保持し、２０℃／分で２５０℃まで昇温し、５℃／分で２８０℃まで昇温し、２８０℃で３分間保持し、２０℃／分で３３０℃まで昇温し、３３０℃で１分間保持した。キャリアガスとしてＨｅを用いた。線速度は、４２．０ｃｍ／秒に設定した。イオン源温度、インターフェース温度、気化室温度は、それぞれ、２００℃、２８０℃、２５０℃に設定した。
【0212】
測定対象の遊離脂肪酸は、パルミトレイン酸、パルミチン酸、γ－リノレン酸、ステアリドン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ドコサペンタエン酸、ネルボン酸、リグノセリン酸の１８種であった。
【0213】
測定結果を図２Ａ～図２Ｄに示す。図２Ａは、健常者血清および卵巣癌患者血清中の上記各種遊離脂肪酸量の平均値をヒートマップで示した図である。ヒートマップは、ＭｅｔａｂｏＡｎａｌｙｓｔ ５．０ソフトウェアを用いて作製した。
【0214】
図２Ｂ～図２Ｃは、健常者血清および卵巣癌患者血清中の各種遊離脂肪酸の個体別の数値を示すグラフである。２群間の比較は、ｔ検定によって行い、ｐ＜０．０５を有意差ありとした。「＊」、「＊＊」、「＊＊＊」、「＊＊＊＊」は、それぞれ、ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１、ｐ＜０．００１、及び、ｐ＜０．０００１を示す。
【0215】
図２Ｄは、各遊離脂肪酸の測定結果をボルケーノプロットで示した図である。図２Ｄ中、「Ｕｐ」は、健常者血清よりも卵巣癌患者血清において、濃度が有意に高かった遊離脂肪酸である。「Ｄｏｗｎ」は、健常者血清よりも卵巣癌患者血清において、濃度が有意に低かった遊離脂肪酸である。「ｎｏｎ－ｓｉｇ」は、健常者血清と卵巣癌患者血清とで、濃度に有意な差が確認されなかった遊離脂肪酸である。横軸は、健常者血清における各遊離脂肪酸の濃度の平均値に対する、卵巣癌患者血清における各遊離脂肪酸の濃度の平均値の比を表す。縦軸は、健常者血清における各遊離脂肪酸の濃度と、卵巣癌患者血清における各遊離脂肪酸の濃度とが差がないとした場合のＰ値を表す。
【0216】
図２Ａ～Ｃに示す結果から、パルミトレイン酸、パルミチン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の濃度は、健常者血清よりも、卵巣癌患者血清において、高いことが確認された。反対に、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸の濃度は、健常者血清よりも、卵巣癌患者血清において、低いことが確認された。
【0217】
健常者血清と卵巣癌患者血清とで有意差があった遊離脂肪酸を表１にまとめた。表１中、濃度差の列における「高い」の記載は、その遊離脂肪酸が、健常者血清よりも卵巣癌患者血清において、濃度が有意に高かったことを意味する。表１中、濃度差の列における「低い」の記載は、その遊離脂肪酸が、健常者血清よりも卵巣癌患者血清において、濃度が有意に低かったことを意味する。
【0218】
【表1】
【0219】
［実験例３］
（脂肪酸代謝酵素発現量と遊離脂肪酸濃度の相関解析）
組織における脂肪酸代謝酵素の発現量と血清における遊離脂肪酸濃度の相関を解析した。
（脂肪酸代謝酵素発現量と遊離脂肪酸濃度の相関解析）
組織における脂肪酸代謝酵素の発現量と血清における遊離脂肪酸濃度の相関を解析した。
【0220】
図３Ａ～３Ｂは、図１Ｂ～Ｄで示した組織における脂肪酸代謝酵素発現の変化と、図２Ｂ～Ｃで示した血清における遊離脂肪酸構成の変化の相関を表す図である。「ＨＩＧＨ」は、図１Ｂ～Ｄにおいて、正常卵巣組織よりも卵巣癌組織で発現が有意に高かった代謝酵素である。「ＬＯＷ」は、図１Ｂ～Ｄにおいて、正常卵巣組織よりも卵巣癌組織で発現が有意に低かった代謝酵素である。「ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ」は、図１Ｂ～Ｄにおいて、正常卵巣組織と卵巣癌組織とで発現に有意な差が確認できなかった代謝酵素である。
【0221】
２０名の卵巣癌患者から、卵巣癌組織と血清サンプルを同時期にペアで採取した。このペアサンプルにおける、ＳＣＤ１の卵巣癌組織における発現量と、ＳＣＤ１の基質である遊離脂肪酸、及び、ＳＣＤ１の作用により生じる遊離脂肪酸の量比との相関関係を解析した。
【0222】
ＳＣＤ１は、基質であるパルミチン酸に作用して、パルミトレイン酸を生成する。また、ＳＣＤ１は、ステアリン酸に作用して、オレイン酸を生成する。
【0223】
図３Ｃは、卵巣癌組織における、ＳＣＤ１遺伝子発現量と、卵巣癌患者血清中のＳＣＤ１活性に相当する遊離脂肪酸比（生成遊離脂肪酸／基質遊離脂肪酸比（パルミトレイン酸／パルミチン酸比））の相関を示すグラフである。図３Ｄは、卵巣癌組織における、ＳＣＤ１遺伝子発現量と、卵巣癌患者血清中のＳＣＤ１活性に相当する遊離脂肪酸比（生成遊離脂肪酸／基質遊離脂肪酸比（オレイン酸／ステアリン酸比））の相関を示すグラフである。相関解析は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖｅｒｓｉｏｎ ９．０を用いて、Ｐｅａｒｓｏｎの相関検定によって行い、ｒ値と、ｐ値を算出した。
図３Ａ～３Ｄに示す結果から、組織における脂肪酸代謝酵素の発現変化と、血清における遊離脂肪酸の濃度変化は連動していることが示された。
図３Ａ～３Ｄに示す結果から、組織における脂肪酸代謝酵素の発現変化と、血清における遊離脂肪酸の濃度変化は連動していることが示された。
【0224】
［実験例４］
（遊離脂肪酸濃度によるＲＯＣ解析 卵巣癌患者の検出）
実験例２において、女性の健常者と卵巣癌患者の血清中濃度で有意差が確認された１１種類の遊離脂肪酸を指標として、Ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ解析（ＲＯＣ解析）を行った。
（遊離脂肪酸濃度によるＲＯＣ解析 卵巣癌患者の検出）
実験例２において、女性の健常者と卵巣癌患者の血清中濃度で有意差が確認された１１種類の遊離脂肪酸を指標として、Ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ解析（ＲＯＣ解析）を行った。
【0225】
各遊離脂肪酸の濃度を用いて、健常者と卵巣癌患者においてＲＯＣ解析を行った。図４Ａに、パルミトレイン酸、パルミチン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の濃度を用いたＲＯＣ解析の結果を示す。図４Ｂに、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸の濃度を用いたＲＯＣ解析の結果を示す。図４Ａ～Ｂ中、ＡＵＣ及びＣＩは、それぞれ、Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ、及びＣｏｎｆｉｄｅｎｃｅ Ｉｎｔｅｒｖａｌを意味する。
【0226】
これら１１種類の内、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、オレイン酸、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、ネルボン酸及びリグノセリン酸の１０種の遊離脂肪酸の濃度に基づき、検査の対象が、健常者であるか、あるいは、卵巣癌患者であるかを区別し得ることが明らかになった。
【0227】
［実験例５］
（ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析 卵巣癌患者の検出）
実験例４のＲＯＣ解析の結果が良好であった１０種の遊離脂肪酸について、実験例４におけるＲＯＣ解析の陽性尤度比が最大となるように、閾値を設定した。各遊離脂肪酸の閾値は、パルミトレイン酸は２９．０６μＥＱ／Ｌ、オレイン酸は３２６．０μＥＱ／Ｌ、リノール酸は１８３．１μＥＱ／Ｌ、α－リノレン酸は２８．６２μＥＱ／Ｌ、バクセン酸は１．９２６μＥＱ／Ｌ、アラキジン酸は１．９２４μＥＱ／Ｌ、アドレン酸は０．７０８５μＥＱ／Ｌ、ドコサヘキサエン酸は１．８４７μＥＱ／Ｌ、リグノセリン酸は０．５７７３μＥＱ／Ｌ、ネルボン酸は０．０８９１μＥＱ／Ｌであった。
（ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析 卵巣癌患者の検出）
実験例４のＲＯＣ解析の結果が良好であった１０種の遊離脂肪酸について、実験例４におけるＲＯＣ解析の陽性尤度比が最大となるように、閾値を設定した。各遊離脂肪酸の閾値は、パルミトレイン酸は２９．０６μＥＱ／Ｌ、オレイン酸は３２６．０μＥＱ／Ｌ、リノール酸は１８３．１μＥＱ／Ｌ、α－リノレン酸は２８．６２μＥＱ／Ｌ、バクセン酸は１．９２６μＥＱ／Ｌ、アラキジン酸は１．９２４μＥＱ／Ｌ、アドレン酸は０．７０８５μＥＱ／Ｌ、ドコサヘキサエン酸は１．８４７μＥＱ／Ｌ、リグノセリン酸は０．５７７３μＥＱ／Ｌ、ネルボン酸は０．０８９１μＥＱ／Ｌであった。
【0228】
実験例２で解析した被験者について、上記で設定した１０種の各遊離脂肪酸の閾値に基づいて、各遊離脂肪酸の血清濃度が異常値であるか否かを判定した。健常者における結果を図５Ａに示す。卵巣癌患者における結果を図５Ｂに示す。図５Ａ～５Ｂ中、「１」はパルミトレイン酸、「２」はオレイン酸、「３」はリノール酸、「４」はα－リノレン酸、「５」はバクセン酸、「６」はアラキジン酸、「７」はアドレン酸、「８」はドコサヘキサエン酸、「９」はリグノセリン酸、「１０」はネルボン酸を示す。「１」～「４」の遊離脂肪酸については、測定濃度が閾値より高い場合には、その濃度は異常値であると判定して黒丸で示し、測定濃度が閾値より低い場合には、その濃度は正常値であると判定して白丸で示した。「５」～「１０」の遊離脂肪酸については、測定濃度が閾値より低い場合には、その濃度は異常値であると判定して黒丸で示し、測定濃度が閾値より高い場合には、その濃度は正常値であると判定して白丸で示した。
【0229】
図５Ａ～５Ｂに示す判定結果から、各被験者における黒丸の個数を、各被験者のＦＦＡスコアとして算出した。このＦＦＡスコアを用いて、女性の健常者と卵巣癌患者について、ＲＯＣ解析を行った。ＲＯＣ解析の結果を図５Ｃに示す。ＲＯＣ解析の結果、ＡＵＣ値は、０．９９６３であった。ＣＩ値は、０．９８８０－１．０００であった。ｐ値は、Ｐ＜０．０００１であった。この結果から、このＦＦＡスコアを用いることにより、高感度で卵巣癌患者を検出できることが確認された。
【0230】
［実験例６］
（早期卵巣癌患者血清中の遊離脂肪酸濃度）
女性の健常者２７名、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩの卵巣癌患者２９名、ならびに、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ又はＳｔａｇｅ ＩＶの卵巣癌患者１１名について、実験例４においてＲＯＣ解析の結果が良好であった１０種類の遊離脂肪酸の血清中濃度を比較した。
（早期卵巣癌患者血清中の遊離脂肪酸濃度）
女性の健常者２７名、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩの卵巣癌患者２９名、ならびに、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ又はＳｔａｇｅ ＩＶの卵巣癌患者１１名について、実験例４においてＲＯＣ解析の結果が良好であった１０種類の遊離脂肪酸の血清中濃度を比較した。
【0231】
３群間の比較の結果を図６Ａ及び図６Ｂに示す。図中、「ＨＤ」は、女性の健常者を意味する。３群間の比較は、ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡおよびＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｔｅｓｔｓによって行い、ｐ＜０．０５を有意差ありとした。「＊」、「＊＊」、「＊＊＊」、及び、「＊＊＊＊」は、それぞれ、ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１、ｐ＜０．００１、及び、ｐ＜０．０００１を示す。
【0232】
図６Ａに示す結果から、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の４種類の遊離脂肪酸の濃度は、健常者血清よりも、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者の血清において、有意に高いことが確認された。
図６Ｂに示す結果から、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸の４種類の遊離脂肪酸の濃度は、健常者血清よりも、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者の血清において、有意に低いことが確認された。
上記８種類の遊離脂肪酸の血清中濃度は、健常者と、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
なお、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ又はＳｔａｇｅ ＩＶの卵巣患者では、α－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸の血清中濃度は、健常者との間で有意差が確認できなかった。
図６Ｂに示す結果から、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸の４種類の遊離脂肪酸の濃度は、健常者血清よりも、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者の血清において、有意に低いことが確認された。
上記８種類の遊離脂肪酸の血清中濃度は、健常者と、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
なお、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ又はＳｔａｇｅ ＩＶの卵巣患者では、α－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸の血清中濃度は、健常者との間で有意差が確認できなかった。
【0233】
［実験例７］
（遊離脂肪酸濃度によるＲＯＣ解析 早期卵巣癌患者の検出）
実験例６において、女性の健常者とＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者の血清中濃度で有意差が確認された８種類の遊離脂肪酸の血清中濃度を指標として、Ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ解析（ＲＯＣ解析）を行った。
（遊離脂肪酸濃度によるＲＯＣ解析 早期卵巣癌患者の検出）
実験例６において、女性の健常者とＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者の血清中濃度で有意差が確認された８種類の遊離脂肪酸の血清中濃度を指標として、Ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ解析（ＲＯＣ解析）を行った。
【0234】
各遊離脂肪酸の濃度を用いて、健常者とＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者においてＲＯＣ解析を行った。図７Ａに、パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の濃度を用いたＲＯＣ解析の結果を示す。図７Ｂに、バクセン酸、アラキジン酸、ドコサヘキサエン酸、及びリグノセリン酸の濃度を用いたＲＯＣ解析の結果を示す。図７Ａ～Ｂ中、ＡＵＣ及びＣＩは、それぞれ、Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ、及びＣｏｎｆｉｄｅｎｃｅ Ｉｎｔｅｒｖａｌを意味する。
【0235】
これら８種の遊離脂肪酸の濃度に基づき、検査の対象が、健常者であるか、あるいは、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者であるかを区別し得ることが明らかになった。
【0236】
［実験例８］
（ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析 早期卵巣癌患者の検出）
実験例７でＲＯＣ解析した８種の遊離脂肪酸について、実験例７におけるＲＯＣ解析の陽性尤度比が最大となるように、閾値を設定した。各遊離脂肪酸の閾値は、パルミトレイン酸は２９．０６μＥＱ／Ｌ、オレイン酸は３２６．０μＥＱ／Ｌ、リノール酸は１８３．１μＥＱ／Ｌ、α－リノレン酸は２８．６２μＥＱ／Ｌ、バクセン酸は１．９３０μＥＱ／Ｌ、アラキジン酸は１．９５３μＥＱ／Ｌ、ドコサヘキサエン酸は１．８４７μＥＱ／Ｌ、リグノセリン酸は０．５７７３μＥＱ／Ｌであった。
（ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析 早期卵巣癌患者の検出）
実験例７でＲＯＣ解析した８種の遊離脂肪酸について、実験例７におけるＲＯＣ解析の陽性尤度比が最大となるように、閾値を設定した。各遊離脂肪酸の閾値は、パルミトレイン酸は２９．０６μＥＱ／Ｌ、オレイン酸は３２６．０μＥＱ／Ｌ、リノール酸は１８３．１μＥＱ／Ｌ、α－リノレン酸は２８．６２μＥＱ／Ｌ、バクセン酸は１．９３０μＥＱ／Ｌ、アラキジン酸は１．９５３μＥＱ／Ｌ、ドコサヘキサエン酸は１．８４７μＥＱ／Ｌ、リグノセリン酸は０．５７７３μＥＱ／Ｌであった。
【0237】
実験例６で解析した被験者について、上記で設定した８種の各遊離脂肪酸の閾値に基づいて、各遊離脂肪酸の血清濃度が異常値であるか否かを判定した。健常者における結果を図８Ａに示す。Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩの卵巣癌患者における結果を図８Ｂに示す。図８Ａ～Ｂ中、「１」はパルミトレイン酸、「２」はオレイン酸、「３」はリノール酸、「４」はα－リノレン酸、「５」はバクセン酸、「６」はアラキジン酸、「７」はドコサヘキサエン酸、「８」はリグノセリン酸を示す。「１」～「４」の遊離脂肪酸については、測定濃度が閾値より高い場合には、その濃度は異常値であると判定して黒丸で示し、測定濃度が閾値より低い場合には、その濃度は正常値であると判定して白丸で示した。「５」～「８」の遊離脂肪酸については、測定濃度が閾値より低い場合には、その濃度は異常値であると判定して黒丸で示し、測定濃度が閾値より高い場合には、その濃度は正常値であると判定して白丸で示した。
【0238】
図８Ａ～８Ｂに示す判定結果から、各被験者における黒丸の個数を、各被験者のＦＦＡスコアとして算出した。このＦＦＡスコアを用いて、女性の健常者、並びに、ＳｔａｇｅＩ及びＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者について、ＲＯＣ解析を行った。結果を図８Ｃに示す。ＲＯＣ解析の結果、ＡＵＣ値は、０．９９５５であった。９５％ ＣＩ値は、０．９８４９－１．０００であった。ｐ値は、Ｐ＜０．０００１であった。この結果から、このＦＦＡスコアを用いることにより、高感度で、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者を検出できることが確認された。
【0239】
図８ＣにおけるＲＯＣ解析の陽性尤度比が最大となるように、ＦＦＡスコアの閾値を設定した。ＦＦＡスコアの閾値は１．５であった。
【0240】
上記のＦＦＡスコアの閾値を用いて、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＩＩの卵巣癌について、ＦＦＡスコアによる検出感度を、ＣＡ１２５の血中濃度による検出感度と比較した。図８Ｄに、Ｓｔａｇｅ Ｉ又はＳｔａｇｅ ＩＩの卵巣癌患者におけるＦＦＡスコア（左図）、及びＣＡ１２５の血中濃度（右図）を示す。図８Ｄ中、「×」は明細胞型の卵巣癌を示し、「●」は明細胞癌型以外の卵巣癌を示す。
【0241】
図８Ｄの解析結果より、ＦＦＡスコアの閾値を１．５とすると、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者の検出感度は１００％であった。ＣＡ１２５の血中濃度の閾値を実臨床で用いられている３５Ｕ／ｍＬとすると、ＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者の検出感度は７６％であった。これらの結果から、８種の遊離脂肪酸値から算出されるＦＦＡスコアを用いることにより、ＣＡ１２５の血中濃度を用いて検査するよりも、高感度でＳｔａｇｅＩ又はＳｔａｇｅＩＩの卵巣癌患者を検出できることが確認された。さらに、ＦＦＡスコアは、ＣＡ１２５では検出の難しい組織型である明細胞型の卵巣癌も高感度に検出できることが確認された。
【0242】
［実験例９］
（卵巣癌患者の予後予測）
（卵巣癌患者の予後予測）
【0243】
実験例５で解析対象とした４０名の卵巣癌患者について、実験例５で算出したＦＦＡスコアから、これらの卵巣癌患者のＦＦＡスコアの中央値を算出した。次に、前記４０名の卵巣癌患者について、ＦＦＡスコアが前記中央値よりも高い患者を“ＦＦＡスコア ｈｉｇｈ”の群に分別し、ＦＦＡスコアが前記中央値以下である患者を“ＦＦＡスコア ｌｏｗ”の群に分別した。なお、実験例５でＦＦＡスコアの算出に用いた血清サンプルは、治療開始前の採血によるものである。ＦＦＡスコア ｈｉｇｈ群の患者及びＦＦＡスコア ｌｏｗ群の患者について、それぞれ予後を追跡し、各患者群における無憎悪生存率の推移を調べた。結果を図９に示す。図９中、Ｘ軸は治療開始からの日数であり、Ｙ軸は無増悪生存率である。有意差検定には、Ｌｏｇ－ｒａｎｋ検定を用いた。
【0244】
ＦＦＡスコアを指標として、卵巣癌患者の治療予後を予測できることが確認された。
【0245】
［実験例１０］
（ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析 卵巣境界悪性腫瘍の検出）
卵巣境界悪性腫瘍患者７名から採血を行い、血清サンプルを得た。次いで、実験例２と同様の方法で、ＧＣ－ＭＳにより各遊離脂肪酸の血清中濃度を測定した。測定対象の遊離脂肪酸は、実験例５で解析した１０種の遊離脂肪酸とした。次いで、実験例５と同様の方法で、各卵巣境界悪性腫瘍患者のＦＦＡスコアを算出した。
（ＦＦＡスコアによるＲＯＣ解析 卵巣境界悪性腫瘍の検出）
卵巣境界悪性腫瘍患者７名から採血を行い、血清サンプルを得た。次いで、実験例２と同様の方法で、ＧＣ－ＭＳにより各遊離脂肪酸の血清中濃度を測定した。測定対象の遊離脂肪酸は、実験例５で解析した１０種の遊離脂肪酸とした。次いで、実験例５と同様の方法で、各卵巣境界悪性腫瘍患者のＦＦＡスコアを算出した。
【0246】
。ＦＦＡスコアの算出に用いた各遊離脂肪酸の閾値は、実験例５において設定した閾値と同一とした。すなわち、パルミトレイン酸は２９．０６μＥＱ／Ｌ、オレイン酸は３２６．０μＥＱ／Ｌ、リノール酸は１８３．１μＥＱ／Ｌ、α－リノレン酸は２８．６２μＥＱ／Ｌ、バクセン酸は１．９２６μＥＱ／Ｌ、アラキジン酸は１．９２４μＥＱ／Ｌ、アドレン酸は０．７０８５μＥＱ／Ｌ、ドコサヘキサエン酸は１．８４７μＥＱ／Ｌ、リグノセリン酸は０．５７７３μＥＱ／Ｌ、ネルボン酸は０．０８９１μＥＱ／Ｌであった。
【0247】
図１０Ａは、境界悪性腫瘍患者について、上記の閾値に基づいて、各遊離脂肪酸の血清中濃度が異常値であるか否かを判定した結果を示す。
【0248】
図１０Ａの結果から算出された卵巣境界悪性腫瘍患者のＦＦＡスコアと、図５Ｂの結果から算出された卵巣癌患者（卵巣悪性腫瘍患者）のＦＦＡスコアとを用いて、ＲＯＣ解析を行った。結果を図１０Ｂに示す。ＲＯＣ解析の結果、ＡＵＣ値は、０．８９４６であった。９５％ ＣＩ値は、０．８００３－１．０００であった。ｐ値は、Ｐ＜０．０００１であった。この結果から、ＦＦＡスコアを用いることにより、高感度で、卵巣境界悪性腫瘍患者と、卵巣癌患者（卵巣悪性腫瘍患者）とを区別できることが確認された。
【0249】
［実験例１１］
（子宮体癌及び子宮頸癌についての解析）
２７名の健常な成人女性、６６名の子宮体癌患者及び４５名の子宮頸癌患者から採血を行い、血清サンプルを得た。次いで、実験例２と同様の方法で、ＧＣ－ＭＳにより各遊離脂肪酸の血清中濃度を測定した。
（子宮体癌及び子宮頸癌についての解析）
２７名の健常な成人女性、６６名の子宮体癌患者及び４５名の子宮頸癌患者から採血を行い、血清サンプルを得た。次いで、実験例２と同様の方法で、ＧＣ－ＭＳにより各遊離脂肪酸の血清中濃度を測定した。
【0250】
測定結果を図１１Ａ～Ｂに示す。３群間の比較は、ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡおよびＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｔｅｓｔｓによって行い、ｐ＜０．０５を有意差ありとした。「＊＊」及び、「＊＊＊＊」は、それぞれ、ｐ＜０．０１及び、ｐ＜０．０００１を示す。
【0251】
パルミトレイン酸、パルミチン酸、リノール酸、α－リノレン酸及びオレイン酸の濃度は、健常者血清よりも、子宮体癌及び子宮頸癌の患者血清において、高いことが確認された。バクセン酸、アラキジン酸及びステアリン酸の濃度は、健常者血清よりも、子宮体癌患者及び子宮頸癌患者の血清において、低いことが確認された。これらの結果から、これらの遊離脂肪酸の血清中濃度を指標として、検査の対象が、健常者であるか、あるいは、子宮体癌患者又は子宮頸癌患者であるかを区別し得ることが明らかになった。
【0252】
［実験例１２］
（早期子宮頸癌患者血清中の遊離脂肪酸濃度）
２７名の健常な成人女性、２９名のＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者、および、２３名のＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩ子宮頸癌患者から採血を行い、血清サンプルを得た。次いで、実験例２と同様の方法で、ＧＣ－ＭＳにより各遊離脂肪酸の血清中濃度を測定した。
（早期子宮頸癌患者血清中の遊離脂肪酸濃度）
２７名の健常な成人女性、２９名のＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者、および、２３名のＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩ子宮頸癌患者から採血を行い、血清サンプルを得た。次いで、実験例２と同様の方法で、ＧＣ－ＭＳにより各遊離脂肪酸の血清中濃度を測定した。
【0253】
測定結果を図１２Ａ～Ｃに示す。３群間の比較は、３群間の比較は、ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡおよびＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｔｅｓｔｓによって行い、ｐ＜０．０５を有意差ありとした。「＊」、「＊＊」、「＊＊＊」、及び、「＊＊＊＊」は、それぞれ、ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１、ｐ＜０．００１、及び、ｐ＜０．０００１を示す。
【0254】
パルミトレイン酸、リノール酸、α－リノレン酸、および、オレイン酸の濃度は、健常者血清よりも、ＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者あるいはＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩ子宮頸癌患者の血清において、有意に高いことが確認された。一方、バクセン酸、アラキジン酸、ジホモ－γ－リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、及び、ドコサペンタエン酸の濃度は、健常者血清よりも、ＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者あるいはＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩ子宮頸癌患者の血清の血清において、有意に低いことが確認された。
これらの遊離脂肪酸の血清中濃度は、健常者と、ＳｔａｇｅＩ、ＳｔａｇｅＩＩ又はＳｔａｇｅＩＩＩの子宮頸癌患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
これらの遊離脂肪酸の血清中濃度は、健常者と、ＳｔａｇｅＩ、ＳｔａｇｅＩＩ又はＳｔａｇｅＩＩＩの子宮頸癌患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
【0255】
更に、各遊離脂肪酸の濃度の閾値を表２に示す値に設定し、ＲＯＣ解析により、各遊離脂肪酸の濃度を用いて、健常者とＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者においてＲＯＣ解析を行った。結果を図１２Ａ～Ｃに示す。いずれの遊離脂肪酸もＡＵＣが０．７以上であった。これらの遊離脂肪酸の血清中濃度を指標として、検査の対象が、健常者であるか、ＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者であるかを区別し得ることが明らかになった。
【0256】
【表2】
【0257】
［実験例１３］
（早期子宮頸癌患者血清中の遊離脂肪酸濃度比の解析）
１０種の遊離脂肪酸の濃度比を指標として、検査の対象が、健常者であるか、子宮頸癌患者であるかを区別し得るか否かを検証した。
（早期子宮頸癌患者血清中の遊離脂肪酸濃度比の解析）
１０種の遊離脂肪酸の濃度比を指標として、検査の対象が、健常者であるか、子宮頸癌患者であるかを区別し得るか否かを検証した。
【0258】
実験例１２の血清サンプルについて、ドコサペンタエン酸とオレイン酸の比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）を算出した。算出結果を図１３Ａに示す。３群間の比較は、ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡおよびＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｔｅｓｔｓによって行い、ｐ＜０．０５を有意差ありとした。「＊」、「＊＊」、「＊＊＊」、及び、「＊＊＊＊」は、それぞれ、ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１、ｐ＜０．００１、及び、ｐ＜０．０００１を示す。
【0259】
比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）は、健常者血清よりも、ＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者あるいはＳｔａｇｅＩＩ又はＩＩＩ子宮頸癌患者の血清の血清において、優位に低いことが確認された。
比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）は、健常者と、ＳｔａｇｅＩ、ＳｔａｇｅＩＩ又はＳｔａｇｅＩＩＩの子宮頸癌患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）は、健常者と、ＳｔａｇｅＩ、ＳｔａｇｅＩＩ又はＳｔａｇｅＩＩＩの子宮頸癌患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
【0260】
更に、比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）の閾値を表２に示す値に設定し、ＲＯＣ解析により、比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）を用いて、健常者とＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者においてＲＯＣ解析を行った。結果を図１３Ａに示す。ＲＯＣ解析結果は、ＡＵＣ＝０．９８１，Ｐ＜０．０００１であった。すなわち、ドコサペンタエン酸又はオレイン酸のいずれかひとつを指標とするよりも、比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）を指標とすることにより、より高い精度で、検査の対象が、健常者であるか、ＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者であるかを区別し得ることが確認された。
【0261】
次いで、実験例１２で検査対象とした２９名のＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者について、比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）による検出感度を算出し、既存の診断マーカーによる検出癌度と比較した。結果を図１３Ｂに示す。
【0262】
比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）の閾値を０．００４４３３とすると、ＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者の検出感度は９３．１％であった。ＳＣＣの血中濃度の閾値を実臨床で用いられている１．５ｎｇ／ｍＬとすると、ＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者の検出感度は６８．２％であった。ＣＥＡの血中濃度の閾値を実臨床で用いられている５．０ｎｇ／ｍＬとすると、ＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者の検出感度は４．２％であった。
【0263】
これらの結果から、比（ドコサペンタエン酸／オレイン酸）を用いることにより、既存の診断マーカーであるＳＣＣ又はＣＥＡの血中濃度を用いて検査するよりも、高感度でＳｔａｇｅＩ子宮頸癌患者を検出できることが確認された。
【0264】
［実験例１４］
（子宮頸癌前癌病変の患者についての解析）
２７名の健常な成人女性、および、１７名の子宮頸癌前癌病変（子宮頸部異形成：ＣＩＮ）患者から採血を行い、血清サンプルを得た。次いで、実験例２と同様の方法で、ＧＣ－ＭＳにより各遊離脂肪酸の血清中濃度を測定した。
（子宮頸癌前癌病変の患者についての解析）
２７名の健常な成人女性、および、１７名の子宮頸癌前癌病変（子宮頸部異形成：ＣＩＮ）患者から採血を行い、血清サンプルを得た。次いで、実験例２と同様の方法で、ＧＣ－ＭＳにより各遊離脂肪酸の血清中濃度を測定した。
【0265】
測定結果を図１４Ａ～Ｂに示す。３群間の比較は、ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡおよびＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｔｅｓｔｓによって行い、ｐ＜０．０５を有意差ありとした。「＊」、「＊＊」、「＊＊＊」、及び、「＊＊＊＊」は、それぞれ、ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１、ｐ＜０．００１、及び、ｐ＜０．０００１を示す。
【0266】
パルミトレイン酸、リノール酸、α―リノレン酸、オレイン酸、および、アラキドン酸の濃度は、健常者血清よりも、ＣＩＮ患者の血清において、有意に高いことが確認された。一方、アラキジン酸の濃度は、健常者血清よりも、ＣＩＮ患者の血清において、有意に低いことが確認された。
これらの遊離脂肪酸の血清中濃度は、健常者と、ＣＩＮ患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
これらの遊離脂肪酸の血清中濃度は、健常者と、ＣＩＮ患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
【0267】
更に、各遊離脂肪酸の濃度の閾値を表３に示す値に設定し、ＲＯＣ解析により、各遊離脂肪酸の濃度を用いて、健常者とＣＩＮ患者においてＲＯＣ解析を行った。結果を図１４Ａ～Ｂに示す。いずれの遊離脂肪酸もＡＵＣが０．７以上であった。これらの遊離脂肪酸の血清中濃度を指標として、検査の対象が、健常者であるか、ＣＩＮ患者であるかを区別し得ることが明らかになった。
【0268】
【表3】
【0269】
［実験例１５］
（ＣＩＮ患者と子宮頸癌患者についての解析）
実験例１４において採取した、１７名のＣＩＮ患者の血清、及び、実験例１２において採取した、５２名の子宮頸癌患者の血清サンプルについて、検査の対象が、ＣＩＮ患者であるか、子宮頸癌患者であるかを区別し得るか否かを検証した。
（ＣＩＮ患者と子宮頸癌患者についての解析）
実験例１４において採取した、１７名のＣＩＮ患者の血清、及び、実験例１２において採取した、５２名の子宮頸癌患者の血清サンプルについて、検査の対象が、ＣＩＮ患者であるか、子宮頸癌患者であるかを区別し得るか否かを検証した。
【0270】
解析結果を図１５に示す。３群間の比較は、３群間の比較は、ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡおよびＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｔｅｓｔｓによって行い、ｐ＜０．０５を有意差ありとした。「＊＊＊」、及び、「＊＊＊＊」は、それぞれ、ｐ＜０．００１、及び、ｐ＜０．０００１を示す。
【0271】
ジホモーγ―リノレン酸、ドコサヘキサエン酸、アドレン酸、及び、ドコサペンタエン酸の濃度は、ＣＩＮ患者の血清よりも、子宮頸癌患者の血清において、有意に低いことが確認された。
これらの遊離脂肪酸の血清中濃度は、ＣＩＮ患者と、子宮頸癌患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
これらの遊離脂肪酸の血清中濃度は、ＣＩＮ患者と、子宮頸癌患者とを区別する指標となり得ることが確認された。
【0272】
更に、各遊離脂肪酸の濃度の閾値を表４に示す値に設定し、ＲＯＣ解析により、各遊離脂肪酸の濃度を用いて、ＣＩＮ患者と子宮頸癌患者においてＲＯＣ解析を行った。結果を図１５に示す。いずれの遊離脂肪酸もＡＵＣが０．７以上であった。これらの遊離脂肪酸の血清中濃度を指標として、検査の対象が、ＣＩＮ患者であるか、子宮頸癌患者であるかを区別し得ることが明らかになった。
【0273】
【表4】
【産業上の利用可能性】
【0274】
本発明によれば、婦人科癌及びその前癌病変からなる群より選択される一種以上の検出、婦人科癌の予後の予測、及び、婦人科悪性腫瘍と婦人科境界悪性腫瘍とを分類するための、簡便かつ精度が高い検査方法、前記検査方法により婦人科癌を有すると判定された対象を治療するための医薬、ならびに、キットを提供することができる。本発明は、婦人科癌又はその前癌病変の早期診断に有用である。
【図1A】
【図1B】
【図1C】
【図1D】
【図2A】
【図2B】
【図2C】
【図2D】
【図3A】
【図3B】
【図3C】
【図3D】
【図4A】
【図4B】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【図6A】
【図6B】
【図7A】
【図7B】
【図8A】
【図8B】
【図8C】
【図8D】
【図9】
【図10A】
【図10B】
【図11A】
【図11B】
【図12A】
【図12B】
【図12C】
【図13A】
【図13B】
【図14A】
【図14B】
【図15】